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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-12-14
(45)【発行日】2023-12-22
(54)【発明の名称】抗ＴＡＵ抗体及び使用方法
(51)【国際特許分類】
C12N 15/13 20060101AFI20231215BHJP
C07K 16/18 20060101ALI20231215BHJP
C12N 1/15 20060101ALI20231215BHJP
C12N 1/19 20060101ALI20231215BHJP
C12N 1/21 20060101ALI20231215BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20231215BHJP
C12P 21/08 20060101ALI20231215BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20231215BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20231215BHJP
G01N 33/53 20060101ALI20231215BHJP
【ＦＩ】
C12N15/13 ZNA
C07K16/18
C12N1/15
C12N1/19
C12N1/21
C12N5/10
C12P21/08
A61K39/395 N
A61P25/28
G01N33/53 D
【請求項の数】
19
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2020186282
(22)【出願日】2020-11-09
(62)【分割の表示】P 2017562681の分割
【原出願日】2016-06-02
(65)【公開番号】P2021048845
(43)【公開日】2021-04-01
【審査請求日】2020-12-08
(31)【優先権主張番号】62/171,693
(32)【優先日】2015-06-05
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】509012625
【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド
(73)【特許権者】
【識別番号】513022966
【氏名又は名称】エーシー イミューン エス．エー．
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】アドルフソン， オスカル
(72)【発明者】
【氏名】アヤロン， ガイ
(72)【発明者】
【氏名】ディ カラ， ダニエル マリー
(72)【発明者】
【氏名】ホッツェル， イシドロ
【審査官】大久保 元浩
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１４－５２３７４２（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１４／２００９２１（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ１２Ｎ １５／００－１５／９０
Ｃ０７Ｋ
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
ヒトＴａｕに結合する単離モノクローナル抗体であって、ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｂ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３
を含む、単離抗体。
【請求項2】
抗体が、ａ）配列番号１４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）に記載のＶＨ及び（ｂ）に記載のＶＬ；
ｄ）配列番号１６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｆ）（ｄ）に記載のＶＨ及び（ｅ）に記載のＶＬ
を含む、請求項１に記載の単離抗体。
【請求項3】
抗体が、ａ）配列番号１４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）に記載のＶＨ及び（ｂ）に記載のＶＬ；
ｄ）配列番号１６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｆ）（ｄ）に記載のＶＨ及び（ｅ）に記載のＶＬ
を含む、請求項１に記載の単離抗体。
【請求項4】
モノクローナル抗体である、請求項１から３のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項5】
ヒト化抗体またはキメラ抗体である、請求項１から４のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項6】
ＩｇＧ１抗体またはＩｇＧ４抗体である、請求項１から５のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項7】
ＩｇＧ４抗体である、請求項６に記載の単離抗体。
【請求項8】
Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含む、請求項７に記載の単離抗体。
【請求項9】
Ｓ２２８Ｐ変異を含む、請求項７または請求項８に記載の単離抗体。
【請求項10】
抗体断片である、請求項１から５のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項11】
成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～４２内のエピトープに結合する、請求項１から１０のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項12】
完全長ヒトＴａｕに５ｎＭ未満のＫ
Ｄ
で結合する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の単離抗体。
【請求項13】
請求項１から１２のいずれか一項に記載の抗体をコードする、単離核酸。
【請求項14】
請求項１３に記載の核酸を含む、宿主細胞。
【請求項15】
抗体の産生に好適な条件下で、請求項１４に記載の宿主細胞を培養することを含む、抗体の産生方法。
【請求項16】
請求項１から１２のいずれか一項に記載の単離抗体と、第２の治療剤と、を含む、免疫複合体。
【請求項17】
請求項１から１２のいずれか一項に記載の単離抗体と、検出可能な標識と、を含む、標識された抗体。
【請求項18】
神経原線維変化、好中球糸、または変性神経突起のインビトロ検出方法であって、試料を請求項１から１２のいずれか一項に記載の抗体と接触させることを含む、方法。
【請求項19】
前記試料が、脳試料、脳脊髄液試料、または血液試料である、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年６月５日に出願された米国仮出願第６２／１７１，６９３号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１５年６月５日に出願された米国仮出願第６２／１７１，６９３号の優先権の利益を主張するものであり、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
本発明は、抗Ｔａｕ抗体及びその使用方法に関する。
【背景技術】
【0003】
神経原線維変化及び神経絨毛糸（ＮＴ）は、アルツハイマー病（ＡＤ）の主要な神経病理学的特徴である。ＮＴは、リン酸化を含む翻訳後修飾を受けた微小管関連Ｔａｕタンパク質から構成され、高リン酸化Ｔａｕコンフォマーの凝集によって発達する。ＡＤは、多くの神経変性タウオパチーと、特に特定の種類の前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）とこの病理を共有する。Ｔａｕタンパク質は、ＡＤ及び関連する神経変性タウオパチーにおける認知崩御における主要な役者であるようである。
【0004】
Ｔａｕタンパク質を標的とする治療アプローチはほとんどなく、主にＴａｕのリン酸化を病理学的レベルまで増加させると考えられるキナーゼの阻害剤、及び高リン酸化Ｔａｕタンパク質の細胞質凝集を遮断する化合物を含む。これらのアプローチは、特異性及び有効性についての様々な欠点に悩まされる。神経変性障害を引き起こすことが知られる、または推定される、病理学的タンパク質コンフォマーを標的とする追加の治療剤に対する必要性が存在する。
【発明の概要】
【0005】
本開示は、抗Ｔａｕ抗体及びその使用方法を提供する。
【0006】
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である。いくつかの実施形態において、抗体は、ヒトＴａｕに結合する抗体断片である。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕは、配列番号２の配列を含む。
【0007】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｂ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；ならびに配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｄ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｅ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｆ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｇ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｂ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；ならびに配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｄ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｅ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｆ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｇ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0008】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３
ｆ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
ａ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３
ｆ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0009】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0010】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１０、２０、２８０、２９０、及び３４０から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１、２１、２８１、２９１、及び３４１から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号７０、３００、及び４５２～４５９から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号７１、３０１、及び４６０～４６７から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号２１０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号２１１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬを含む。
ａ）配列番号１０、２０、２８０、２９０、及び３４０から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１、２１、２８１、２９１、及び３４１から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号７０、３００、及び４５２～４５９から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号７１、３０１、及び４６０～４６７から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号２１０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号２１１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬを含む。
【0011】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１０、２０、２８０、２９０、及び３４０から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１、２１、２８１、２９１、及び３４１から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号７０、３００、及び４５２～４５９から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号７１、３０１、及び４６０～４６７から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号２１０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号２１１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬを含む。
ａ）配列番号１０、２０、２８０、２９０、及び３４０から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１、２１、２８１、２９１、及び３４１から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号７０、３００、及び４５２～４５９から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号７１、３０１、及び４６０～４６７から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号２１０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号２１１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬを含む。
【0012】
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0013】
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0014】
いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号３４８もしくは配列番号６０２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【0015】
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号３４８または配列番号６０２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号３４８のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６０２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号３４８または配列番号６０２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号３４８のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、配列番号６０２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、抗体が提供される。
【0016】
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、２８～４４、３７～５１、１００～１１４、１０９～１２３、１１８～１３２、１５４～１６８、１７２～１７７、２１７～２３１、または３９７～４１１内のエピトープに結合する、抗体が提供される。
【0017】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｂ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｃ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｄ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｅ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｆ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｇ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｈ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｉ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｊ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｋ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｌ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；ならびに配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｍ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｎ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｏ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｐ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｑ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｒ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｓ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｂ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｃ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｄ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｅ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｆ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｇ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｈ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｉ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｊ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｋ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｌ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；ならびに配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｍ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｎ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｏ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｐ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｑ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；
ｒ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；または
ｓ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0018】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｇ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｈ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｉ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｊ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｋ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｌ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｍ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｎ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｏ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｐ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｑ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｒ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｓ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｇ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｈ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｉ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｊ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｋ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｌ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｍ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｎ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｏ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｐ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｑ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｒ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｓ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0019】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｈ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｉ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｊ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｋ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｌ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｍ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｎ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｏ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｐ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｑ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｒ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｓ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｂ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｃ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｄ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｅ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｆ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｇ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｈ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｉ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｊ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｋ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｌ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；ならびに配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｍ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｎ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｏ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｐ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｑ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；
ｒ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３；または
ｓ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３；配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0020】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１１０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号１３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号１４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号１４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号１５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号１５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号１６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号１６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号２５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号２５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号２７０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号２７１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬ；
ｖ）配列番号１００と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｗ）配列番号１０１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｘ）（ｖ）にあるようなＶＨ及び（ｗ）にあるようなＶＬ；
ｙ）配列番号１７０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｚ）配列番号１７１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ａａ）（ｙ）にあるようなＶＨ及び（ｚ）にあるようなＶＬ；
ｂｂ）配列番号１９０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｃｃ）配列番号１９１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｄｄ）（ｂｂ）にあるようなＶＨ及び（ｃｃ）にあるようなＶＬ；
ｅｅ）配列番号２４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｆｆ）配列番号２４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｇｇ）（ｅｅ）にあるようなＶＨ及び（ｆｆ）にあるようなＶＬ；
ｈｈ）配列番号８０、３１０、３２０、３３０、及び４４６～４５１から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｉｉ）配列番号８１、３１１、３２１、３３１、及び４４２～４４５から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｊｊ）（ｈｈ）にあるようなＶＨ及び（ｉｉ）にあるようなＶＬ；
ｋｋ）配列番号９０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｌｌ）配列番号９１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｍｍ）（ｋｋ）にあるようなＶＨ及び（ｌｌ）にあるようなＶＬ；
ｎｎ）配列番号１２０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｏｏ）配列番号１２１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｐｐ）（ｎｎ）にあるようなＶＨ及び（ｏｏ）にあるようなＶＬ；
ｑｑ）配列番号１８０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｒｒ）配列番号１８１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｓｓ）（ｑｑ）にあるようなＶＨ及び（ｒｒ）にあるようなＶＬ；
ｔｔ）配列番号２００と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｕｕ）配列番号２０１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｖｖ）（ｔｔ）にあるようなＶＨ及び（ｕｕ）にあるようなＶＬ；
ｗｗ）配列番号２２０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｘｘ）配列番号２２１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｙｙ）（ｗｗ）にあるようなＶＨ及び（ｘｘ）にあるようなＶＬ；
ｚｚ）配列番号２３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ａａａ）配列番号２３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｂｂｂ）（ｚｚ）にあるようなＶＨ及び（ａａａ）にあるようなＶＬ；
ｃｃｃ）配列番号２６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｄｄｄ）配列番号２６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｅｅｅ）（ｃｃｃ）にあるようなＶＨ及び（ｄｄｄ）にあるようなＶＬを含む。
ａ）配列番号１１０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号１３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号１４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号１４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号１５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号１５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号１６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号１６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号２５０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号２５１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号２７０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号２７１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬ；
ｖ）配列番号１００と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｗ）配列番号１０１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｘ）（ｖ）にあるようなＶＨ及び（ｗ）にあるようなＶＬ；
ｙ）配列番号１７０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｚ）配列番号１７１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ａａ）（ｙ）にあるようなＶＨ及び（ｚ）にあるようなＶＬ；
ｂｂ）配列番号１９０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｃｃ）配列番号１９１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｄｄ）（ｂｂ）にあるようなＶＨ及び（ｃｃ）にあるようなＶＬ；
ｅｅ）配列番号２４０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｆｆ）配列番号２４１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｇｇ）（ｅｅ）にあるようなＶＨ及び（ｆｆ）にあるようなＶＬ；
ｈｈ）配列番号８０、３１０、３２０、３３０、及び４４６～４５１から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｉｉ）配列番号８１、３１１、３２１、３３１、及び４４２～４４５から選択される配列と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｊｊ）（ｈｈ）にあるようなＶＨ及び（ｉｉ）にあるようなＶＬ；
ｋｋ）配列番号９０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｌｌ）配列番号９１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｍｍ）（ｋｋ）にあるようなＶＨ及び（ｌｌ）にあるようなＶＬ；
ｎｎ）配列番号１２０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｏｏ）配列番号１２１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｐｐ）（ｎｎ）にあるようなＶＨ及び（ｏｏ）にあるようなＶＬ；
ｑｑ）配列番号１８０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｒｒ）配列番号１８１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｓｓ）（ｑｑ）にあるようなＶＨ及び（ｒｒ）にあるようなＶＬ；
ｔｔ）配列番号２００と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｕｕ）配列番号２０１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｖｖ）（ｔｔ）にあるようなＶＨ及び（ｕｕ）にあるようなＶＬ；
ｗｗ）配列番号２２０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｘｘ）配列番号２２１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｙｙ）（ｗｗ）にあるようなＶＨ及び（ｘｘ）にあるようなＶＬ；
ｚｚ）配列番号２３０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ａａａ）配列番号２３１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｂｂｂ）（ｚｚ）にあるようなＶＨ及び（ａａａ）にあるようなＶＬ；
ｃｃｃ）配列番号２６０と少なくとも９５％同一の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｄｄｄ）配列番号２６１と少なくとも９５％同一の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｅｅｅ）（ｃｃｃ）にあるようなＶＨ及び（ｄｄｄ）にあるようなＶＬを含む。
【0021】
いくつかの実施形態において、抗体は、
ａ）配列番号１１０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号１３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号１４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号１４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号１５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号１５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号１６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号１６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号２５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号２５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号２７０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号２７１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬ
ｖ）配列番号１００の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｗ）配列番号１０１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｘ）（ｖ）にあるようなＶＨ及び（ｗ）にあるようなＶＬ；
ｙ）配列番号１７０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｚ）配列番号１７１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ａａ）（ｙ）にあるようなＶＨ及び（ｚ）にあるようなＶＬ；
ｂｂ）配列番号１９０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｃｃ）配列番号１９１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｄｄ）（ｂｂ）にあるようなＶＨ及び（ｃｃ）にあるようなＶＬ；
ｅｅ）配列番号２４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｆｆ）配列番号２４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｇｇ）（ｅｅ）にあるようなＶＨ及び（ｆｆ）にあるようなＶＬ；
ｈｈ）配列番号８０、３１０、３２０、３３０、及び４４６～４５１から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｉｉ）配列番号８１、３１１、３２１、３３１、及び４４２～４４５から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｊｊ）（ｈｈ）にあるようなＶＨ及び（ｉｉ）にあるようなＶＬ；
ｋｋ）配列番号９０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｌｌ）配列番号９１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｍｍ）（ｋｋ）にあるようなＶＨ及び（ｌｌ）にあるようなＶＬ；
ｎｎ）配列番号１２０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｏｏ）配列番号１２１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｐｐ）（ｎｎ）にあるようなＶＨ及び（ｏｏ）にあるようなＶＬ；
ｑｑ）配列番号１８０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｒｒ）配列番号１８１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｓｓ）（ｑｑ）にあるようなＶＨ及び（ｒｒ）にあるようなＶＬ；
ｔｔ）配列番号２００の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｕｕ）配列番号２０１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｖｖ）（ｔｔ）にあるようなＶＨ及び（ｕｕ）にあるようなＶＬ；
ｗｗ）配列番号２２０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｘｘ）配列番号２２１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｙｙ）（ｗｗ）にあるようなＶＨ及び（ｘｘ）にあるようなＶＬ；
ｚｚ）配列番号２３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ａａａ）配列番号２３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｂｂｂ）（ｚｚ）にあるようなＶＨ及び（ａａａ）にあるようなＶＬ；
ｃｃｃ）配列番号２６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｄｄｄ）配列番号２６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｅｅｅ）（ｃｃｃ）にあるようなＶＨ及び（ｄｄｄ）にあるようなＶＬを含む。
ａ）配列番号１１０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｂ）配列番号１１１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｃ）（ａ）にあるようなＶＨ及び（ｂ）にあるようなＶＬ；
ｄ）配列番号１３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｅ）配列番号１３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｆ）（ｄ）にあるようなＶＨ及び（ｅ）にあるようなＶＬ；
ｇ）配列番号１４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｈ）配列番号１４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｉ）（ｇ）にあるようなＶＨ及び（ｈ）にあるようなＶＬ；
ｊ）配列番号１５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｋ）配列番号１５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｌ）（ｊ）にあるようなＶＨ及び（ｋ）にあるようなＶＬ；
ｍ）配列番号１６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｎ）配列番号１６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｏ）（ｍ）にあるようなＶＨ及び（ｎ）にあるようなＶＬ；
ｐ）配列番号２５０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｑ）配列番号２５１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｒ）（ｐ）にあるようなＶＨ及び（ｑ）にあるようなＶＬ；
ｓ）配列番号２７０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｔ）配列番号２７１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｕ）（ｓ）にあるようなＶＨ及び（ｔ）にあるようなＶＬ
ｖ）配列番号１００の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｗ）配列番号１０１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｘ）（ｖ）にあるようなＶＨ及び（ｗ）にあるようなＶＬ；
ｙ）配列番号１７０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｚ）配列番号１７１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ａａ）（ｙ）にあるようなＶＨ及び（ｚ）にあるようなＶＬ；
ｂｂ）配列番号１９０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｃｃ）配列番号１９１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｄｄ）（ｂｂ）にあるようなＶＨ及び（ｃｃ）にあるようなＶＬ；
ｅｅ）配列番号２４０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｆｆ）配列番号２４１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｇｇ）（ｅｅ）にあるようなＶＨ及び（ｆｆ）にあるようなＶＬ；
ｈｈ）配列番号８０、３１０、３２０、３３０、及び４４６～４５１から選択される配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｉｉ）配列番号８１、３１１、３２１、３３１、及び４４２～４４５から選択される配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｊｊ）（ｈｈ）にあるようなＶＨ及び（ｉｉ）にあるようなＶＬ；
ｋｋ）配列番号９０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｌｌ）配列番号９１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｍｍ）（ｋｋ）にあるようなＶＨ及び（ｌｌ）にあるようなＶＬ；
ｎｎ）配列番号１２０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｏｏ）配列番号１２１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｐｐ）（ｎｎ）にあるようなＶＨ及び（ｏｏ）にあるようなＶＬ；
ｑｑ）配列番号１８０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｒｒ）配列番号１８１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｓｓ）（ｑｑ）にあるようなＶＨ及び（ｒｒ）にあるようなＶＬ；
ｔｔ）配列番号２００の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｕｕ）配列番号２０１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｖｖ）（ｔｔ）にあるようなＶＨ及び（ｕｕ）にあるようなＶＬ；
ｗｗ）配列番号２２０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｘｘ）配列番号２２１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｙｙ）（ｗｗ）にあるようなＶＨ及び（ｘｘ）にあるようなＶＬ；
ｚｚ）配列番号２３０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ａａａ）配列番号２３１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
ｂｂｂ）（ｚｚ）にあるようなＶＨ及び（ａａａ）にあるようなＶＬ；
ｃｃｃ）配列番号２６０の配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；
ｄｄｄ）配列番号２６１の配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または
ｅｅｅ）（ｃｃｃ）にあるようなＶＨ及び（ｄｄｄ）にあるようなＶＬを含む。
【0022】
本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ４抗体であってもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、ＩｇＧ４抗体であってもよい。いくつかのそのような実施形態において、抗体は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含む。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ変異を含んでもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含んでもよい。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含むＩｇＧ４抗体であってもよい。いくつかの実施形態において、抗体は、抗体断片である。本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、抗体は、Ｓ２２８Ｐ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及びＴ２５６Ｅ変異を含み、重鎖定常領域のＣ末端リジン（ｄｅｓ－Ｋ）を欠くＩｇＧ４抗体であってもよい。重鎖定常領域のＣ末端リジンは、Ｃ末端リジンがコードされないように、例えば、抗体の精製中に、または抗体をコードする核酸の組み換え操作によって、除去されてもよい。
【0023】
いくつかの実施形態において、ヒトＴａｕに結合する単離抗体であって、モノマーＴａｕ、リン酸化Ｔａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びオリゴマーＴａｕのそれぞれに、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、または５０ｎＭ未満のＫＤで結合する、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、カニクイザルＴａｕ（配列番号４）に結合する。
【0024】
いくつかの実施形態において、単離核酸であって、本明細書に記載される抗体をコードする、単離核酸が提供される。いくつかの実施形態において、宿主細胞であって、本明細書に記載される抗体をコードする単離核酸を含む、宿主細胞が提供される。いくつかの実施形態において、抗体の産生に好適な条件下で、宿主細胞を培養することを含む、抗体の産生方法が提供される。
【0025】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体と、治療剤とを含む、免疫複合体が提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体と、検出可能な標識とを含む、標識された抗体が提供される。
【0026】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物が提供される。
【0027】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を、Ｔａｕタンパク質関連疾患を有する個体に投与することを含む、Ｔａｕタンパク質関連疾患の治療方法が提供される。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症（ｆｒｏｎｔｏｔｅｔｅｍｐｏｒａｌ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病（Ｈａｌｌｅｖｏｒｄｅｎ－Ｓｐａｔｚ ｄｉｓｅａｓｅ）、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症（Ｐａｌｌｉｄｏ－ｐｏｎｔｏ－ｎｉｇｒａｌ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。
【0028】
いくつかの実施形態において、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加方法、または記憶喪失の減速方法であって、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を投与することを含む、方法が提供される。
【0029】
いくつかの実施形態において、個体におけるＴａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減方法であって、本明細書に記載される抗体、または本明細書に記載される抗体を含む薬学的組成物を投与すること含む、方法が提供される。
【0030】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、医薬品として使用するために提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体におけるタウオパチーの治療に使用するために提供される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症ク病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。
【0031】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速に使用するために提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される単離抗体は、個体におけるＴａｕタンパク質、リン酸化Ｔａｕタンパク質、非リン酸化Ｔａｕタンパク質、または高リン酸化Ｔａｕタンパク質のレベルの低減に使用するために提供される。
【0032】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体の使用は、個体におけるＴａｕタンパク質関連疾患の治療のための医薬品を製造するために提供される。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患は、タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、神経変性タウオパチーである。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーから選択される。いくつかの実施形態において、タウオパチーは、アルツハイマー病または進行性核上性麻痺である。
【0033】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗体の使用は、個体における認知記憶容量の保持もしくは増加、または記憶喪失の減速のための医薬品を製造するために提供される。
【0034】
いくつかの実施形態において、神経原線維変化、好中球糸、または変性神経突起の検出方法であって、試料を本明細書に記載される抗体と接触させることを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態において、試料は、脳試料、脳脊髄液試料、または血液試料である。
【0035】
本明細書に記載される実施形態のいずれにおいても、方法または使用は、少なくとも１つの追加の療法と組み合わせて本明細書に記載される抗体を投与することを含んでもよい。追加の療法の非限定的な例としては、神経薬、コルチコステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、及び他の治療剤が挙げられる。そのような他の治療剤としては、他の抗Ｔａｕ抗体、アミロイド－ベータに対する抗体、ベータ－セクレターゼ１に対する抗体（「ＢＡＣＥ１」）、及びベータ－セクレターゼ１の阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【図面の簡単な説明】
【0036】
【図1A】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図1B】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図1C】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図1D】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図1E】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図1F】高リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に対する抗体の結合を、ＥＬＩＳＡを使用して非リン酸化Ｔａｕと比較した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図2A】オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図2B】オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図2C】オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図2D】オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図2E】オリゴマーＴａｕに対する抗体の結合を、オリゴ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用して評価した。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図3】試験された３つのｐａｎＴａｕ抗体は、ウェスタンブロット（ＷＢ）アッセイを使用すると、アルツハイマー病（ＡＤ）及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。ＡＤ及び対照脳ライセートからのタンパク質抽出物、ならびに組み換えヒトＴａｕの６つのアイソフォームをＳＤＳ－ＰＡＧＥ上で泳動させ、膜を３つのｐａｎＴａｕ抗体（３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３）でブロットした。ＡＤ試料を有するレーンをＡＤ１８、ＡＤ２４、及びＡＤ２７として標識し、対照試料を有するレーンをＣ２５及びＣ２１として標識する。組み換えヒトＴａｕの６つのアイソフォームを泳動させたレーンをｈＴａｕラダーとして標識する。
【図4A】ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図4B】ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図4C】ＰａｎＴａｕ抗体は、Ｔａｕ捕捉ＥＬＩＳＡを使用すると、ＡＤ及び適合対照ドナーからの脳ライセート中で可溶性Ｔａｕに対する結合を示す。３つのｐａｎＴａｕ抗体、３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３について、データを示す。結果を、平均値±標準偏差、Ｎ＝２で、光学濃度（Ｏ．Ｄ．）で表す。
【図5】Ｆａｂ（左パネル）として及びＩｇＧ（右パネル）として、Ｂｉａｃｏｒｅチップ表面に共有結合的にカップリングされたヒトＴａｕモノマーに結合する３７Ｄ３－Ｈ９を示す、センサグラム。１：１の結合モデルが適用されており、上重ねとして示されている。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。
【図6】３．１、６．３、１２．５、２５、２５、５０及び１００ｎＭのヒトＴａｕモノマーに対する、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５試料（ｔ＝０（左パネル）及びｔ＝２週間（右パネル））の結合を示す、上重ねセンサグラム。１：１の結合モデルが適用されており、この図においても示されている。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。
【図7】個々での（左パネルはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５を示し、中間パネルはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄを示す）、かつ１：１の比率で混合した（右パネル）、モノマーＴａｕに対するｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄの結合。ｘ軸は、時間（単位＝秒）を示す。ｙ軸は、共鳴単位（ＲＵ）を示す。
【図8】安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。
【図8A】安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。
【図8B】安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。
【図8C】安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。
【図8D】安定性の改善の潜在性についてスクリーニングした、９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形の親和性、安定性指数及び配列。明瞭さのため、各実験の開始時、中間時及び終了時に泳動させた、応力をかけていない対照抗体（ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１）について得られる値を、表の両方のセクションにおいて示す。
【図9】軽鎖の残基２８～３３（ＮＧＮＴＹＦモチーフ）の位置、及び残基２８及び３３の相対位置を示す、３７Ｄ３－Ｈ９ Ｆｖ領域の構造モデル。残基３３がｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８において変異したことに留意されたい。Ａ４～Ｌｅｕは、不安定なＡｓｎ－２８残基の近くにはない。点線は、残基Ａｓｎ－２８と残基Ｔｙｒ－３２との間の水素結合を示す。ＭＯＥソフトウェアパッケージ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ）を使用して生成された図。
【図10】単回の１０ｍｇ／ｋｇ静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体３７Ｄ３－Ｈ９の薬物動態を示す。
【図11】１ｍｇ／ｋｇの用量の単回静脈内ボーラス注入後の、カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態を示す。
【図12A】Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１～１５、１０～２４、１９～３３、２８～４２、３７～５１、及び４６～６０に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合を示す。
【図12B】Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１０～４４、１０～２４、２～２４、２～３４、及び完全長Ｔａｕに対する抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａの結合を示す。
【図12C】Ｔａｕ断片に対する特定の抗Ｔａｕ抗体の結合。Ｔａｕ断片１０～４４、１０～２４、２～２４、２～３４、及び完全長Ｔａｕに対する抗体ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１の結合を示す。
【図13A】ニューロン－ミクログリア共培養物中でのＴａｕ毒性に対するエフェクター機能の影響。様々な抗体及びオリゴマーＴａｕと接触させた、共培養物中のＭＡＰ２断片化パーセント。
【図13B】ニューロン－ミクログリア共培養物中でのＴａｕ毒性に対するエフェクター機能の影響。様々な抗体及びオリゴマーＴａｕと接触させた、ニューロン（上部パネル）及びニューロン－ミクログリア共培養物（下部パネル）の画像。
【図14】抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａまたは抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２を投与したマウスの海馬内のｐＴａｕ２１２／２１４レベル。
【図15】ヒトＴａｕ配列とカニクイザルＴａｕ配列との比較。抗体３７Ｄ３－Ｈ９のエピトープを示す。
【図16】単回の１０ｍｇ／ｋｇの静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体９４Ｂ２－Ｃ１の薬物動態を示す。
【図17】単回の１０ｍｇ／ｋｇの静脈内または腹腔内注射後の、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体１２５Ｂ１１－Ｈ３の薬物動態を示す。
【図18】ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ３９、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ４０、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ４１のカッパ１軽鎖可変領域の整列を示す。
【図19A】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける血漿抗体濃度（Ａ）を示す。
【図19B】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおけるＣＳＦ抗体濃度（Ｂ）を示す。
【図20】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける血漿総Ｔａｕ濃度及び血漿抗体濃度を示す。
【図21A】５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。
【図21B】５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。
【図21C】５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。
【図21D】５０ｍｇ／ｋｇのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ（Ａ）及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ（Ｂ）の単回静脈内注射の２日後及び１０日後の、カニクイザル脳の様々な領域における抗体濃度、脳内の平均抗体濃度（Ｃ）、脳：血漿抗体濃度％（Ｄ）を示す。
【図22A】対数スケールでプロットした、５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。
【図22B】直線スケールでプロットした、５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。
【図23A】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの海馬における抗体の濃度を示す。
【図23B】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの小脳における抗体の濃度を示す。
【図23C】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの前頭皮質における抗体の濃度を示す。
【図23D】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルのＣＳＦにおける抗体の濃度を示す。
【図23E】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の様々な時点での、カニクイザルの血漿における抗体の濃度を示す。
【図24A】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける経時的な血漿総Ｔａｕ濃度の平均を示す。
【図24B】５０ｍｇ／ｋｇの示される抗体の単回静脈内注射後の、カニクイザルにおける経時的な個々の血漿総Ｔａｕ濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【0037】
Ｉ．定義
本明細書の目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」は、以下に定義される、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは、アミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態において、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。いくつかの実施形態において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークの配列は、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
本明細書の目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」は、以下に定義される、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同一のアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは、アミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態において、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。いくつかの実施形態において、ＶＬアクセプターヒトフレームワークの配列は、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
【0038】
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合相互作用の合計の強度を指す。別途示されない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子Ｘの、そのパートナーＹに対する親和性は一般に、解離定数（ＫＤ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載される方法を含む当該技術分野において既知である一般的な方法によって測定され得る。結合親和性を測定するための具体的な例証的かつ例示的実施形態が、以下に記載される。
【0039】
「親和性成熟」抗体とは、変化を持たない親抗体と比較して、１つ以上の超可変領域（ＨＶＲ）内で１つ以上のそのような変化を有し、そのような変化によって抗原に対する抗体の親和性を改善する、抗体を指す。
【0040】
「抗Ｔａｕ抗体」及び「Ｔａｕに結合する抗体」という用語は、抗体がＴａｕを標的とする際に診断剤及び／または治療剤として有用になるように十分な親和性でＴａｕに結合することができる抗体を指す。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体が非関連非Ｔａｕタンパク質に結合する程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される、抗体のＴａｕへの結合の約１０％未満である。特定の実施形態において、Ｔａｕに結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。特定の実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、異なる種由来のＴａｕ間で保存されるＴａｕのエピトープに結合する。本明細書で使用される場合、「抗Ｔａｕ抗体」及び「Ｔａｕに結合する抗体」という用語は、別段具体的に示されない限り、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、及び／またはリン酸化Ｔａｕに結合する抗体を指す。いくつかのそのような実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、体外に５０倍以下だけ異なる親和性などの同等の親和性で、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する抗体は、「ｐａｎ－Ｔａｕ抗体」と呼ばれる。
【0041】
「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、それらが所望される抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むが、これらに限定されない、様々な抗体構造を包含する。
【0042】
「抗体断片」とは、無傷抗体が結合する抗原に結合する、無傷抗体の一部分を含む無傷抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２；ダイアボディ；線状抗体；一本鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）；及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるが、これらに限定されない。
【0043】
基準抗体としての「同一のエピトープに結合する抗体」は、競合アッセイにおいて、基準抗体がその抗原に結合するのを５０％以上遮断する抗体、及び逆に、競合アッセイにおいて、抗体がその抗原に結合するのを５０％以上遮断する基準抗体を指す。例示的な競合アッセイが本明細書に提供される。
【0044】
「キメラ」抗体という用語は、重鎖及び／または軽鎖の一部分が特定の源または種に由来する一方で、重鎖及び／または軽鎖の残りの部分が異なる源または種に由来する抗体を指す。
【0045】
抗体の「クラス」とは、その重鎖が持つ定常ドメインまたは定常領域の種類を指す。抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に更に分けることができる。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインはそれぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【0046】
本明細書で使用される場合、「細胞傷害性薬剤」という用語は、細胞機能を阻害もしくは阻止する、かつ／または細胞死もしくは破壊を引き起こす物質を指す。細胞傷害性薬剤としては、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体）；化学療法剤もしくは化学療法薬（例えば、メトトレキサート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシンまたは他の挿入剤）；成長阻害剤；核酸分解酵素などの酵素及びそれらの断片；抗生物質；細菌、真菌、植物または動物起源の小分子毒素または酵素活性毒素（それらの断片及び／もしくは変異形を含む）などの毒素；ならびに下に記載される様々な抗腫瘍剤または抗癌剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【0047】
「エフェクター機能」とは、抗体のアイソタイプにより異なる抗体のＦｃ領域に起因する生物学的活性を指す。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）、食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方制御、ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。
【0048】
ある薬剤、例えば、ある薬学的製剤の「有効量」は、必要な投薬量で一定期間にわたる、所望される治療的または予防的結果を達成するために有効な量を指す。
【0049】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、定常領域の少なくとも一部分を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するように使用される。この用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異形Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端に及ぶ。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在する場合もあれば、しない場合もある。別段本明細書で指定されない限り、Ｆｃ領域または定常領域中のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ． Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，１９９１に記載されている、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付け方式に従う。
【0050】
「フレームワーク」または「ＦＲ」は、超可変領域（ＨＶＲ）残基以外の可変ドメイン残基を指す。可変ドメインのＦＲは一般に、４つのＦＲドメイン：ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、及びＦＲ４からなる。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は一般に、ＶＨ（またはＶＬ）において以下の配列：ＦＲ１－Ｈ１（Ｌ１）－ＦＲ２－Ｈ２（Ｌ２）－ＦＲ３－Ｈ３（Ｌ３）－ＦＲ４で出現する。
【0051】
「完全長抗体」、「無傷抗体」、及び「全抗体」という用語は、本明細書において、天然抗体構造と実質的に同様の構造を有するか、または本明細書に定義されるＦｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指すように互換的に使用される。
【0052】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は互換的に使用され、外因性核酸が中に導入されている細胞を指し、そのような細胞の子孫を含む。宿主細胞は、「形質転換体」及び「形質転換細胞」を含み、これらは、初代形質転換細胞及び継代の数に関わらずそれに由来する子孫を含む。子孫は、親細胞と核酸含有量の点で完全に同一ではないが、変異を含み得る。元来形質転換された細胞についてスクリーニングまたは選択されたものと同一の機能または生物学的活性を有する変異子孫が、本明細書に含まれる。
【0053】
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞によって産生された、またはヒト抗体レパートリーを利用する非ヒト源に由来する抗体のアミノ酸配列、あるいは他のヒト抗体コード配列に対応するアミノ酸配列を持つものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。
【0054】
「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、抗体の抗原への結合に関与する抗体の重鎖または軽鎖のドメインを指す。天然抗体の重鎖及び軽鎖（それぞれ、ＶＨ及びＶＬ）の可変ドメインは一般に、各ドメインが４つの保存フレームワーク領域（ＦＲ）及び３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む同様の構造を有する。（例えば、Ｋｉｎｄｔ ｅｔ ａｌ．Ｋｕｂｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈ ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，ｐａｇｅ９１（２００７）を参照されたい。）単一のＶＨドメインまたはＶＬドメインは、抗原結合特異性を付与するのに十分であり得る。更に、抗原に結合する抗体のＶＨドメインまたはＶＬドメインを使用して、特定の抗原に結合する抗体を単離して、それぞれ相補的ＶＬドメインまたはＶＨドメインのライブラリをスクリーニングすることができる。例えば、Ｐｏｒｔｏｌａｎｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５０：８８０－８８７（１９９３）、Ｃｌａｒｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４－６２８（１９９１）を参照されたい。
【0055】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからである。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ９１－３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ ＭＤ（１９９１），ｖｏｌｓ．１－３にあるようなサブグループである。いくつかの実施形態において、ＶＬについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）にあるようなサブグループカッパＩである。いくつかの実施形態において、ＶＨについて、サブグループは、Ｋａｂａｔら（上記）にあるようなサブグループＩＩＩである。
【0056】
「ヒト化」抗体とは、非ヒトＨＶＲ由来のアミノ酸残基及びヒトＦＲ由来のアミノ酸残基を含む、キメラ抗体を指す。特定の実施形態において、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、そのＨＶＲ（例えば、ＣＤＲ）の全てまたは実質的に全てが非ヒト抗体のものに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト抗体のものに対応する。ヒト化抗体は任意で、ヒト抗体に由来する抗体定常領域の少なくとも一部分を含んでもよい。抗体、例えば非ヒト抗体の「ヒト化形態」とは、ヒト化を受けた抗体を指す。
【0057】
本明細書で使用される場合、「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、配列中で超可変（「相補性決定領域」もしくは「ＣＤＲ」）であり、かつ／または構造的に定義されたループ（「超可変ループ」）を形成し、かつ／または抗原接触残基（「抗原接触体」）を含有する、抗体可変ドメインの領域のそれぞれを指す。一般に、抗体は６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）にあり、３つがＶＬ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）にある。本明細書の例示的なＨＶＲとしては、
（ａ）アミノ酸残基２６～３２（Ｌ１）、５０～５２（Ｌ２）、９１～９６（Ｌ３）、２６～３２（Ｈ１）、５３～５５（Ｈ２）、及び９６～１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４～３４（Ｌ１）、５０～５６（Ｌ２）、８９～９７（Ｌ３）、３１～３５ｂ（Ｈ１）、５０～６５（Ｈ２）、及び９５～１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ～３６（Ｌ１）、４６～５５（Ｌ２）、８９～９６（Ｌ３）、３０～３５ｂ（Ｈ１）、４７～５８（Ｈ２）、及び９３～１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触体（ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６））；ならびに
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６～５６（Ｌ２）、４７～５６（Ｌ２）、４８～５６（Ｌ２）、４９～５６（Ｌ２）、２６～３５（Ｈ１）、２６～３５ｂ（Ｈ１）、４９～６５（Ｈ２）、９３～１０２（Ｈ３）、及び９４～１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／または（ｃ）の組み合わせが挙げられる。
（ａ）アミノ酸残基２６～３２（Ｌ１）、５０～５２（Ｌ２）、９１～９６（Ｌ３）、２６～３２（Ｈ１）、５３～５５（Ｈ２）、及び９６～１０１（Ｈ３）で生じる超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４～３４（Ｌ１）、５０～５６（Ｌ２）、８９～９７（Ｌ３）、３１～３５ｂ（Ｈ１）、５０～６５（Ｈ２）、及び９５～１０２（Ｈ３）で生じるＣＤＲ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ～３６（Ｌ１）、４６～５５（Ｌ２）、８９～９６（Ｌ３）、３０～３５ｂ（Ｈ１）、４７～５８（Ｈ２）、及び９３～１０１（Ｈ３）で生じる抗原接触体（ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６））；ならびに
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６～５６（Ｌ２）、４７～５６（Ｌ２）、４８～５６（Ｌ２）、４９～５６（Ｌ２）、２６～３５（Ｈ１）、２６～３５ｂ（Ｈ１）、４９～６５（Ｈ２）、９３～１０２（Ｈ３）、及び９４～１０２（Ｈ３）を含む、（ａ）、（ｂ）、及び／または（ｃ）の組み合わせが挙げられる。
【0058】
別段示されない限り、可変ドメイン（例えば、ＦＲ残基）内のＨＶＲ残基及び他の残基は、本明細書においてＫａｂａｔら（上記）に従って番号付けされる。
【0059】
「免疫複合体」は、細胞傷害性薬剤を含むが、これに限定されない、１つ以上の異種性分子（複数可）に複合体化される抗体である。
【0060】
「個体」または「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物としては、家畜（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、及びウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及びサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）が挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、個体または対象は、ヒトである。
【0061】
「単離」抗体は、その自然環境の構成成分から分離されているものである。いくつかの実施形態において、抗体は、例えば、電気泳動法（例えば、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、キャピラリー電気泳動）、またはクロマトグラフ法（例えば、イオン交換または逆相ＨＰＬＣ）によって決定される、９５％または９９％を超える純度まで精製される。抗体純度の評価のための方法の概説については、例えば、Ｆｌａｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ８４８：７９－８７（２００７）を参照されたい。
【0062】
「単離」核酸とは、その自然環境の構成成分から分離された核酸分子を指す。単離核酸は、通常は核酸分子を含有する細胞内に含有される核酸分子を含むが、その核酸分子が染色体外に、またはその天然染色体位置とは異なる染色体位置に存在する。
【0063】
「抗Ｔａｕ抗体をコードする単離核酸」とは、抗体重鎖及び軽鎖（またはそれらの断片）をコードする１つ以上の核酸分子を指し、単一のベクターまたは別個のベクター内のそのような核酸分子（複数可）を含み、そのような核酸分子（複数可）は、宿主細胞内の１つ以上の位置に存在する。
【0064】
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、同一である、かつ／または同一のエピトープに結合するが、例えば、天然に存在する変異を含有する、またはモノクローナル抗体調製物の産生中に生じる、想定される変異形抗体を除いて、そのような変異形は一般に少量で存在する。異なる決定基（エピトープ）に対して指向される異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向される。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体の特徴を示しており、いかなる特定の方法による抗体の産生も必要とするものとして解釈されるものではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組み換えＤＮＡ法、ファージ提示法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法を含むが、これらに限定されない、様々な技法によって作製することができ、モノクローナル抗体を作製するためのそのような方法及び他の例示的な方法が、本明細書に記載されている。
【0065】
「裸の抗体」とは、異種性部分（例えば、細胞傷害性部分）または放射標識に複合体化されていない抗体を指す。裸の抗体は、薬学的製剤中に存在してもよい。
【0066】
「天然抗体」は、様々な構造を有する、天然に存在する免役グロブリン分子を指す。例えば、天然ＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合されている２つの同一の軽鎖及び２つの同一の重鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端まで、各重鎖は、可変重ドメインまたは重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）と、その後に３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３）とを有する。同様に、Ｎ末端からＣ末端まで、各軽鎖は、可変軽ドメインまたは軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）と、その後に定常軽（ＣＬ）ドメインとを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの型うちの１つに割り当てられ得る。
【0067】
「添付文書」という用語は、そのような治療製品の適応症、使用法、投薬量、投与、併用療法、禁忌症についての情報、及び／またはその使用に関する警告を含有する、治療製品のパッケージに通例含まれる指示書を指すように使用される。
【0068】
基準ポリペプチド配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列を整列させ、かつ必要に応じてギャップを導入して、最大の配列同一性パーセントを達成した後の、配列同一性の一部としていかなる保存的置換も考慮しない、基準ポリペプチド配列内のアミノ酸残基と同一の候補配列内のアミノ酸残基のパーセンテージと定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定するための整列は、当該技術分野の技術範囲内の様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェア、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の完全長にわたる最大整列を達成するのに必要な任意のアルゴリズムを含む、配列の整列に適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本明細書における目的のために、アミノ酸配列同一性％値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ－２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ－２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって執筆され、ソースコードは、ユーザ文書とともに米国著作権局（Ｕ．Ｓ．Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ Ｏｆｆｉｃｅ）、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ．，２０５５９に提出されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下に登録されている。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に入手可能であるか、またはソースコードからコンパイルすることができる。ＡＬＩＧＮ－２プログラムは、デジタルＵＮＩＸ Ｖ４．０Ｄを含むＵＮＩＸオペレーティングシステムで使用するためには、コンパイルされるべきである。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ－２プログラムによって設定されており、変動しない。
【0069】
ＡＬＩＧＮ－２がアミノ酸配列比較に用いられる状況において、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対する所与のアミノ酸配列Ａのアミノ酸配列同一性％（あるいは、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対するある特定のアミノ酸配列同一性％を有するか、または含む所与のアミノ酸配列Ａと表現され得る）は、以下のように計算される。
１００×画分Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、配列整列プログラムＡＬＩＧＮ－２によって、そのプログラムのＡ及びＢの整列において完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂ中のアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、Ｂに対するＡのアミノ酸配列同一性％は、Ａに対するＢのアミノ酸配列同一性％と等しくはならないことが理解されるだろう。別段具体的に述べられない限り、本明細書で使用される全てのアミノ酸配列同一性％値は、直前の段落に記載されるようにＡＬＩＧＮ－２コンピュータプログラムを使用して得られる。
１００×画分Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、配列整列プログラムＡＬＩＧＮ－２によって、そのプログラムのＡ及びＢの整列において完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂ中のアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、Ｂに対するＡのアミノ酸配列同一性％は、Ａに対するＢのアミノ酸配列同一性％と等しくはならないことが理解されるだろう。別段具体的に述べられない限り、本明細書で使用される全てのアミノ酸配列同一性％値は、直前の段落に記載されるようにＡＬＩＧＮ－２コンピュータプログラムを使用して得られる。
【0070】
「薬学的製剤」という用語は、調製物の中に含有される活性成分の生物学的活性が有効になるような形態であり、かつ製剤が投与される対象にとって許容できないほど有毒である追加の構成成分を何ら含有しない調製物を指す。
【0071】
「薬学的に許容される担体」とは、対象にとって無毒である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体としては、緩衝液、賦形剤、安定剤、または保存剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【0072】
本明細書で使用される場合、「Ｔａｕ」という用語は、別段示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）ならびに齧歯類（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む任意の脊椎動物源由来の任意の天然Ｔａｕタンパク質を指す。この用語は、「完全長」未処理のＴａｕ、ならびに細胞内の処理から生じるＴａｕの任意の形態を包含する。この用語はまた、Ｔａｕの天然に存在する変異形、例えば、スプライス変異形または対立遺伝子変異形も包含する。
【0073】
本明細書で使用される場合、「ｐＴａｕ」という用語は、セリン、スレオニンまたはチロシン残基が、共有結合したリン酸基の添加によって、タンパク質キナーゼによりリン酸化される、Ｔａｕを指す。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン残基上またはスレオニン残基上でリン酸化される。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン４０９位及び／またはセリン４０４位上でリン酸化される。いくつかの実施形態において、ｐＴａｕは、セリン４０９位上でリン酸化される。
【0074】
本明細書で使用される場合、「可溶性Ｔａｕ」または「可溶性Ｔａｕタンパク質」という用語は、完全に可溶化したＴａｕタンパク質／ペプチドモノマー、またはＴａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、またはＴａｕペプチド／タンパク質モノマーの他の誘導体と、Ｔａｕタンパク質オリゴマーとの両方からなるタンパク質を指す。「可溶性Ｔａｕ」は、神経原線維変化（ＮＦＴ）を具体的に除外する。
【0075】
本明細書で使用される場合、「不溶性Ｔａｕ」という用語は、Ｔａｕペプチドもしくはタンパク質、Ｔａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、または水性培地中インビトロ及び哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には脳内）インビボの両方において不溶性であるオリゴマーもしくはポリマー構造を形成するＴａｕペプチド／タンパク質の他の誘導体の、複数の凝集したモノマーを指すが、特に、それぞれ、哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には脳内）で不溶性である、Ｔａｕまたは修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、あるいはそれらの誘導体の、複数の凝集したモノマーを指す。「不溶性Ｔａｕ」は特に、神経原線維変化（ＮＦＴ）を含む。
【0076】
本明細書で使用される場合、「モノマーＴａｕ」または「Ｔａｕモノマー」という用語は、水性培地中に凝集した複合体を有しない、完全に可溶化したＴａｕタンパク質を指す。
【0077】
本明細書で使用される場合、「凝集したＴａｕ」、「オリゴマーＴａｕ」及び「Ｔａｕオリゴマー」という用語は、Ｔａｕペプチドもしくはタンパク質、またはＴａｕ様ペプチド／タンパク質、または修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、または水性培地中インビトロ及び哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には脳内）インビボの両方において不溶性または可溶性であるオリゴマーもしくはポリマー構造を形成するＴａｕペプチド／タンパク質の他の誘導体の、複数の凝集したモノマーを指すが、特に、それぞれ、哺乳動物もしくはヒト体内（より具体的には脳内）で不溶性または可溶性である、Ｔａｕまたは修飾もしくは切断されたＴａｕペプチド／タンパク質、あるいはそれらの誘導体の、複数の凝集したモノマーを指す。
【0078】
「ｐＴａｕ ＰＨＦ」、「ＰＨＦ」、及び「対らせん状細線維」という用語は、本明細書で同義に使用され、電子顕微鏡上で可視である１６０ｎｍの周期性でらせん内へと巻きつけられた線維の対を指す。幅は、１０～２２ｎｍの間で変動する。ＰＨＦは、アルツハイマー病（ＡＤ）の神経原線維変化及び神経絨毛糸における主構造である。ＰＨＦはまた、老人斑に関連する変性神経突起の全てではないがいくつかにも見られることがある。ＰＨＦの主要構成成分は、微小管関連タンパク質ｔａｕの高リン酸化形態である。ＰＨＦは一部には、ジスルフィド結合された逆平行高リン酸化Ｔａｕタンパク質から構成され得る。ＰＨＦ Ｔａｕは、そのＣ末端の２０個のアミノ酸残基が切断され得る。ＰＨＦ形成の根底にある機序は不明であるが、Ｔａｕの高リン酸化は、それを微小管から開放し、ニューロン内でＰＨＦが形成され得るＴａｕの可溶性プールを増加させ得る。
【0079】
本明細書で使用される場合、「治療」（及び「治療する」または「治療すること」などのその文法上の変化形）とは、治療されている個体の自然経過を変更することを目的とした臨床介入を指し、予防のために、または臨床病理過程中に実行され得る。治療の望ましい効果としては、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的病理学的帰結の縮小、転移の予防、疾患進行速度の減少、病状の回復または寛解、及び緩解または予後の改善が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して、疾患の発症を遅延させるか、または疾患の進行を減速させる。
【0080】
本明細書で使用される場合、「初期アルツハイマー病」または「初期ＡＤ」という用語（例えば、「初期ＡＤを有すると診断された患者」または「初期ＡＤを患う患者」）は、記憶欠損などのＡＤによる軽度の認知障害を有する患者、及びＡＤバイオマーカーを有する患者、例えば、アミロイド陽性患者を含む。
【0081】
本明細書で使用される場合、「軽度のアルツハイマー病」または「軽度のＡＤ」という用語（例えば、「軽度のＡＤを有すると診断された患者」）は、２０～２６のＭＭＳＥスコアを特徴とするＡＤの段階を指す。
【0082】
本明細書で使用される場合、「軽度～中程度のアルツハイマー病」または「軽度～中程度のＡＤ」という用語（例えば、「軽度のＡＤを有すると診断された患者」）は、軽度及び中程度の両方のＡＤを包含し、１８～２６のＭＭＳＥスコアを特徴とする。
【0083】
本明細書で使用される場合、「中程度のアルツハイマー病」または「中程度のＡＤ」という用語（例えば、「中程度のＡＤを有すると診断された患者」）は、１８～１９のＭＭＳＥスコアを特徴とするＡＤの段階を指す。
【0084】
「ＭＭＳＥ」という用語は、１～３０の間のスコアを提供する簡易知能評価スケールを指す。Ｆｏｌｓｔｅｉｎ，ｅｔ ａｌ．，１９７５，Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．Ｒｅｓ．１２：１８９－９８を参照されたい。２６以下のスコアは一般に、欠損を示すと見なされる。ＭＭＳＥ上の数的スコアがより低ければ低いほど、より低いスコアを有する別の個体に対する試験患者の欠損または障害はより大きい。ＭＭＳＥスコアの増加は患者の病態の改善を示し得る一方で、ＭＭＳＥスコアの減少は患者の病態の悪化を意味し得る。
【0085】
本明細書で使用される場合、「ベクター」という用語は、それが結合している別の核酸を増殖させることができる核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、及び中に導入される宿主細胞のゲノム内に組み込まれたベクターを含む。特定のベクターは、それらが作動可能に結合している核酸の発現を指向することができる。そのようなベクターは、本明細書で「発現ベクター」と呼ばれる。
【0086】
ＩＩ．組成物及び方法
Ｔａｕに結合する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕに結合するは、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕアミノ酸２～２４内のエピトープに結合し、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープ、及び配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合し、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。
Ｔａｕに結合する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕに結合するは、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸２～２４内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、Ｔａｕアミノ酸２～２４内のエピトープに結合し、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、抗体は、配列ＡＥＰＲＱＥＦＥＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号２）を有するか、またはそれからなる、ヒトＴａｕのエピトープ、及び配列ＡＥＰＲＱＥＦＤＶＭＥＤＨＡＧＴＹＧＬＧＤＲＫ（配列番号４）を有するか、またはそれからなる、カニクイザルＴａｕのエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、成熟ヒトＴａｕのアミノ酸１９～３３、１９～４２、３７～５１、１００～１１４、１１８～１３２、または１７２～１７７内のエピトープに結合し、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕに結合する。
【0087】
本発明の抗体は、例えば、神経変性疾患の診断または治療に有用である。
【0088】
Ａ．例示的な抗Ｔａｕ抗体
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0089】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0090】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0091】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0092】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0093】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0094】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0095】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0096】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0097】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0098】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0099】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0100】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0101】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0102】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0103】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0104】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0105】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0106】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0107】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0108】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0109】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0110】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0111】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0112】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0113】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0114】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0115】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0116】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0117】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0118】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0119】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0120】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0121】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0122】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのＨＶＲを含む。
【0123】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２配列番号、ならびに（ｃ）配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、ならびに（ｃ）配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0124】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。
【0125】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、ならびに（ｃ）配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、ならびに（ｃ）配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0126】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、ならびに（ｃ）配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、ならびに（ｃ）配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0127】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0128】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0129】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0130】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0131】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0132】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0133】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0134】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0135】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0136】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0137】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0138】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0139】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0140】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0141】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0142】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0143】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９２アミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0144】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0145】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0146】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0147】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0148】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0149】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0150】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0151】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0152】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0153】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0154】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0155】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0156】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0157】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0158】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0159】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0160】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0161】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｃ）配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0162】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0163】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0164】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0165】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0166】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0167】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0168】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２及び（ｃ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0169】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0170】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0171】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0172】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0173】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0174】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0175】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0176】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0177】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0178】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0179】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0180】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0181】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0182】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0183】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0184】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0185】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0186】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0187】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0188】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0189】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0190】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0191】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0192】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３から選択される、少なくとも１つ、２つ、または３つのＨＶＲを含む。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号３３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号３３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0193】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２、２２、２８２、２９２、及び３４２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３、２３、２８３、２９３、及び３４３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１４、２４、２８４、２９４、及び３４４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１５、２５、２８５、２９５、３４５、及び４６８～５５６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１６、２６、２８６、２９６、及び３４６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号１７、２７、２８７、２９７、及び３４７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0194】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0195】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２及び３０２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３及び３０３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号７４及び３０４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号７５及び３０５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７６及び３０６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号７７及び３０７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0196】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２、３１２、３２２、及び３３２から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３、３１３、３２３、及び３３３から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号８４、３１４、３２４、及び３３４から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号８５、３１５、３２５、及び３３５から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号８６、３１６、３２６、及び３３６から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、ならびに（ｆ）配列番号８７、３１７、３２７、及び３３７から選択されるアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0197】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0198】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0199】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0200】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0201】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0202】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0203】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0204】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0205】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0206】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0207】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0208】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0209】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0210】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0211】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0212】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0213】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号１９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号１９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号１９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号１９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号１９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0214】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0215】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0216】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0217】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0218】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0219】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0220】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0221】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0222】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0223】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0224】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0225】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0226】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３２７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0227】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、（ａ）配列番号３３２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号３３３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、（ｃ）配列番号３３４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３、（ｄ）配列番号３３５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｅ）配列番号３３６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｆ）配列番号３３７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。
【0228】
上記の実施形態のいずれにおいても、抗Ｔａｕ抗体は、ヒト化されている。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、上記の実施形態のいずれかにあるようにＨＶＲを含み、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークを更に含む。
【0229】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、または３４０のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。特定の実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＨ配列は、基準配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに結合する能力を保持する。特定の実施形態において、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、または３４０内で置換、挿入及び／または欠失されている。特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域内で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意で、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、または３４０内のＶＨ配列を、その配列の翻訳後修飾を含めて含む。特定の一実施形態において、ＶＨは、（ａ）配列番号１２、２２、３２、４２、５２、６２、７２、８２、９２、１０２、１１２、１２２、１３２、１４２、１５２、１６２、１７２、１８２、１９２、２０２、２１２、２２２、２３２、２４２、２５２、２６２、２７２、２８２、２９２、３０２、３１２、３２２、３３２、または３４２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１、（ｂ）配列番号１３、２３、３３、４３、５３、６３、７３、８３、９３、１００、１１３、１２３、１３３、１４３、１５３、１６３、１７３、１８３、１９３、２０３、２１３、２２３、２３３、２４３、２５３、２６３、２７３、２８３、２９３、３０３、３１３、３２３、３３３、または３４３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２、及び（ｃ）配列番号１４、２４、３４、４４、５４、６４、７４、８４、９４、１０４、１１４、１２４、１３４、１４４、１５４、１６４、１７４、１８４、１９４、２０４、２１４、２２４、２３４、２４４、２５４、２６４、２７４、２８４、２９４、３０４、３１４、３２４、３３４、または３４４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【0230】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、１８１、１９１、２０１、２１１、２２１、２３１、２４１、２５１、２６１、２７１、２８１、２９１、３０１、３１１、３２１、３３１、または３４１のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含む。特定の実施形態において、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の同一性を有するＶＬ配列は、基準配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、または欠失を含有するが、その配列を含む抗Ｔａｕ抗体は、Ｔａｕに結合する能力を保持する。特定の実施形態において、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、１８１、１９１、２０１、２１１、２２１、２３１、２４１、２５１、２６１、２７１、２８１、２９１、３０１、３１１、３２１、３３１、または３４１内で置換、挿入及び／または欠失されている。特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲの外側の領域内で（すなわち、ＦＲ内で）生じる。任意で、抗Ｔａｕ抗体は、配列番号１１、２１、３１、４１、５１、６１、７１、８１、９１、１０１、１１１、１２１、１３１、１４１、１５１、１６１、１７１、１８１、１９１、２０１、２１１、２２１、２３１、２４１、２５１、２６１、２７１、２８１、２９１、３０１、３１１、３２１、３３１、または３４１内のＶＬ配列を、その配列の翻訳後修飾を含めて含む。特定の一実施形態において、ＶＬは、（ａ）配列番号１５、２５、３５、４５、５５、６５、７５、８５、９５、１０５、１１５、１２５、１３５、１４５、１５５、１６５、１７５、１８５、１９５、２０５、２１５、２２５、２３５、２４５、２５５、２６５、２７５、２８５、２９５、３０５、３１５、３２５、３３５、または３４５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１、（ｂ）配列番号１６、２６、３６、４６、５６、６６、７６、８６、９６、１０６、１１６、１２６、１３６、１４６、１５６、１６６、１７６、１８６、１９６、２０６、２１６、２２６、２３６、２４６、２６６、２６６、２７６、２８６、２９６、３０６、３１６、３２６、３３６、または３４６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２、及び（ｃ）配列番号１７、２７、３７、４７、５７、６７、７７、８７、９７、１０７、１１７、１２７、１３７、１４７、１５７、１６７、１７７、１８７、１９７、２０７、２１７、２２７、２３７、２４７、２６７、２７７、２７７、２８７、２９７、３０７、３１７、３２７、３３７、または３４７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３から選択される、１つ、２つまたは３つのＨＶＲを含む。
【0231】
別の態様において、抗Ｔａｕ抗体であって、上記に提供される実施形態のいずれかにあるようなＶＨ、及び上記に提供される実施形態のいずれかにあるようなＶＬを含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号２８０及び配列番号２８１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号２９０及び配列番号２９１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号３００及び配列番号３０１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号３１０及び配列番号３１１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号３２０及び配列番号３２１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、それぞれ配列番号３３０及び配列番号３３１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。いくつかの実施形態において、抗体は、抗体は、それぞれ配列番号３４０及び配列番号３４１内のＶＨ及びＶＬ配列を、それらの配列の翻訳後修飾を含めて含む。
【0232】
いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体であって、配列番号３４８または配列番号６０２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗体が提供される。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体であって、配列番号３４８または配列番号６０２のアミノ酸配列からなる重鎖、及び配列番号３４９のアミノ酸配列からなる軽鎖を含む、抗体が提供される。
【0233】
更なる一態様において、本発明は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体と同一のエピトープに結合する抗体を提供する。例えば、特定の実施形態において、９４Ｂ２－Ｃ１、１２５Ｂ１１－Ｈ３、３７Ｄ３－Ｈ９、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４から選択される抗体と同一のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸２～２４からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２４からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２０からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸１０～２４からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸７～２１からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸８～２２からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、配列番号２のアミノ酸１１～２５からなるＴａｕの断片内のエピトープに結合する抗体が提供される。特定の実施形態において、以下のＴａｕ断片、２～２４、７～２４、７～２０、１０～２４、７～２１、８～２２、及び１１～２５のうちの１つ以上または全てに結合する抗体が提供される。いくつかの実施形態において、配列番号５９３の配列を有するペプチドには結合するが、配列番号５９６または配列番号５９７の配列を有するペプチドには結合しない抗体が提供される。
【0234】
本発明の更なる一態様において、上記の実施形態のいずれかに従う抗Ｔａｕ抗体は、キメラ、ヒト化またはヒト抗体を含む、モノクローナル抗体である。一実施形態において、抗Ｔａｕ抗体は、抗体断片、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、またはＦ（ａｂ’）２断片である。別の実施形態において、抗体は、完全長抗体、例えば、無傷ＩｇＧ１もしくはＩｇＧ４抗体、または本明細書において定義される他の抗体クラスもしくはアイソタイプである。
【0235】
更なる一態様において、上記の実施形態のいずれかに従う抗Ｔａｕ抗体は、以下の節１～７に記載される特徴のいずれかを、単独または組み合わせで組み込み得る。
【0236】
１．抗体親和性
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０－８Ｍ以下、例えば、１０－８Ｍ～１０－１３Ｍ、例えば、１０－９Ｍ～１０－１３Ｍ）の解離定数（ＫＤ）を有する。
【0237】
いくつかの実施形態において、ＫＤは、放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。いくつかの実施形態において、ＲＩＡは、目的とされる抗体のＦａｂバージョン及びその抗原で実行される。例えば、抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、非標識抗原の一連の滴定の存在下で、Ｆａｂを最小濃度の（１２５Ｉ）標識抗原と平衡化し、その後、抗Ｆａｂ抗体でコーティングされたプレートで結合した抗原を捕捉することによって、測定される（例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５－８８１（１９９９）を参照されたい）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、その後、室温（約２３℃）でＰＢＳ中２重量体積％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンで２～５時間遮断する。非吸着性プレート（Ｎｕｎｃ番号２６９６２０）中、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［１２５Ｉ］－抗原を、目的とされるＦａｂの段階希釈液と混合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：４５９３－４５９９（１９９７）における抗ＶＥＧＦ抗体Ｆａｂ－１２の評価と一貫する）。その後、目的とされるＦａｂを一晩インキュベートするが、インキュベーションをより長い期間（例えば、約６５時間）続けて、平衡への到達を確実にすることができる。その後、室温でのインキュベーション（例えば、１時間）のために混合物を捕捉プレートに移す。その後、溶液を除去し、プレートをＰＢＳ中０．１％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ－２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μＬ／ウェルのシンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ－２０（商標）、Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートをＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマ計数器（Ｐａｃｋａｒｄ）上で１０分間計数する。２０％以下の最大結合をもたらす各Ｆａｂの濃度を、競合結合アッセイに使用するために選択する。
【0238】
別の実施形態に従うと、ＫＤは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）－２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）－３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用するアッセイを、約１０の共鳴単位（ＲＵ）で、固定化された抗原ＣＭ５チップで２５℃で実行する。いくつかの実施形態において、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）を、供給業者の指示書に従って、Ｎ－エチル－Ｎ’－（３－ジメチルアミノプロピル）－カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）で活性化する。抗原を、１０ｍＭの酢酸ナトリウム（ｐＨ４．８）で５μｇ／ｍＬ（約０．２μＭ）になるまで希釈した後に、５μＬ／分の流量で注入して、約１０共鳴単位（ＲＵ）のカップリングしたタンパク質を得る。抗原の注入後、１Ｍのエタノールアミンを注入して、未反応基を遮断する。動態測定のために、Ｆａｂの２倍段階希釈液（０．７８ｎＭ～５００ｎＭ）を、２５℃の０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ－２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳ中約２５μＬ／分の流量で注入する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を、単純な１対１のラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン３．２）を使用して、会合センサグラムと解離センサグラムとを同時にフィットさせることによって計算する。平衡解離定数（ＫＤ）を、比率ｋｏｆｆ／ｋｏｎとして計算する。例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５－８８１（１９９９）を参照されたい。上記表面プラズモン共鳴アッセイによるオン速度が１０６Ｍ－１ｓ－１を超える場合、オン速度は、ストップトフローを備えた分光光度計（Ａｖｉｖ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを有する８０００シリーズＳＬＭ－ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定される、増加する抗原濃度の存在下で、２５℃で、ＰＢＳ中２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）（ｐＨ７．２）の蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ、発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域通過）の増加または減少を測定する蛍光消光技法を使用することによって決定することができる。
【0239】
２．抗体断片
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに以下に記載される他の断片が挙げられるが、これらに限定されない。特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）を参照されたい。ｓｃＦｖ断片の概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたく、また、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、増加したインビボ半減期を有する、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体断片である。抗体断片としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに以下に記載される他の断片が挙げられるが、これらに限定されない。特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）を参照されたい。ｓｃＦｖ断片の概説については、例えば、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたく、また、ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、増加したインビボ半減期を有する、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
【0240】
ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４－６４４８（１９９３）を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディもまた、Ｈｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９－１３４（２００３）に記載される。
【0241】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分、または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部分を含む、抗体断片である。特定の実施形態において、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ、例えば、米国特許第６，２４８，５１６Ｂ１号を参照されたい）。
【0242】
抗体断片は、本明細書に記載されるように、無傷抗体のタンパク質消化及び組み換え宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ）による産生を含むが、これらに限定されない様々な技法によって作製することができる。
【0243】
３．キメラ抗体及びヒト抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、キメラ抗体である。キメラ抗体が、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４））に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えば、サルに由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる一例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のクラスまたはサブクラスから変化した「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、それらの抗原結合断片を含む。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、キメラ抗体である。キメラ抗体が、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４））に記載されている。一例において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えば、サルに由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる一例において、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のクラスまたはサブクラスから変化した「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、それらの抗原結合断片を含む。
【0244】
特定の実施形態において、キメラ抗体は、ヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、ヒトに対する免疫原性を低減する一方で、親非ヒト抗体の特異性及び親和性は保持するようにヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、１つ以上の可変ドメインを含み、そのＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはそれらの部分）は非ヒト抗体に由来し、そのＦＲ（またはそれらの部分）はヒト抗体配列に由来する。任意で、ヒト化抗体はまた、ヒト定常領域の少なくとも一部分も含むであろう。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体内のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元または改善するように、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【0245】
ヒト化抗体及びそれらの作製方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）で概説され、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３－３２９（１９８８）、Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． ＵＳＡ８６：１００２９－１００３３（１９８９）、米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号、Ｋａｓｈｍｉｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：２５－３４（２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）移植を記載）、Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９－４９８（１９９１）（「リサーフェイシング」を記載）、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：４３－６０（２００５）（「ＦＲシャフリング」を記載）、ならびにＯｓｂｏｕｒｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ３６：６１－６８（２００５）及びＫｌｉｍｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２－２６０（２０００）（ＦＲシャフリングへの「誘導選択」アプローチを記載）に更に記載される。
【0246】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域としては、「ベストフィット」法を使用して選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）及びＰｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３））、ヒト成熟（体細胞変異した）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞株フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８））、ならびにＦＲライブラリのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１－２２６１８（１９９６））が挙げられるが、これらに限定されない。
【0247】
４．ヒト抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において既知である様々な技法を使用して産生することができる。ヒト抗体は一般に、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０－４５９（２００８）に記載される。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野において既知である様々な技法を使用して産生することができる。ヒト抗体は一般に、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０－４５９（２００８）に記載される。
【0248】
ヒト抗体は、抗原投与に応答して、無傷ヒト抗体またはヒト可変領域を有する無傷抗体を産生するように修飾されているトランスジェニック動物に免疫原を投与することによって調製することができる。そのような動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置換するか、または染色体外に存在するか、もしくは動物の染色体にランダムに統合されるヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部分を含有する。そのようなトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７－１１２５（２００５）を参照されたい。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を記載する米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号、ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を記載する米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ－Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を記載する米国特許第７，０４１，８７０号、ならびにＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）を記載する米国特許出願公開第ＵＳ２００７／００６１９００号もまた、参照されたい。そのような動物によって生成された無傷抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることによって更に修飾され得る。
【0249】
ヒト抗体はまた、ハイブリドーマに基づく方法によって作製することもできる。ヒトモノクローナル抗体を産生するためのヒト骨髄腫及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が、記載されている（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１－６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）、及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照されたい）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されるヒト抗体もまた、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）に記載される。追加の方法としては、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を記載）及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５－２６８（２００６）（ヒト－ヒトハイブリドーマを記載）に記載されるものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）もまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７－９３７（２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５－９１（２００５）に記載されている。
【0250】
ヒト抗体はまた、ヒト由来のファージ提示ライブラリから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによって生成することもできる。その後、そのような可変ドメイン配列は、所望されるヒト定常ドメインと組み合わされ得る。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技法を、以下に記載する。
【0251】
５．ライブラリ由来抗体
本発明の抗体は、所望される活性（複数可）を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることにより単離することができる。例えば、ファージ提示ライブラリを生成し、所望される結合特性を持つ抗体についてそのようなライブラリをスクリーニングするための様々な方法が、当該技術分野において既知である。そのような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ１７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）に概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２－５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）に更に記載される。
本発明の抗体は、所望される活性（複数可）を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることにより単離することができる。例えば、ファージ提示ライブラリを生成し、所望される結合特性を持つ抗体についてそのようなライブラリをスクリーニングするための様々な方法が、当該技術分野において既知である。そのような方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ１７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）に概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２－５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）、Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）に更に記載される。
【0252】
特定のファージ提示法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別個にクローニングされ、ファージライブラリ中でランダムに組み換えられ、それはその後、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３－４５５（１９９４）に記載されるように、抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは、典型的には、抗体断片を一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして提示する。免疫化源由来のライブラリは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく、免疫原に高親和性抗体を提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５－７３４（１９９３）によって記載されるように、ナイーブレパートリーは、クローニングされて（例えば、ヒトから）、いかなる免疫化もなく、幅広い非自己抗原及びまた自己抗原に対する抗体の単一源を提供することができる。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）によって記載されるように、ナイーブライブラリはまた、幹細胞から再配列されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含有するＰＣＲプライマーを使用して高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、かつインビトロで再配列を達成することによって、合成的に作製することもできる。ヒト抗体ファージライブラリを記載している特許公開としては、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【0253】
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書においてヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
【0254】
６．多重特異性抗体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方はアミロイドベータに対するものである。特定の実施形態において、二重特異性抗体は、Ｔａｕの２つの異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体はまた、Ｔａｕを発現する細胞に細胞傷害性薬剤を局所化させるために使用することができる。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製され得る。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。特定の実施形態において、結合特異性の一方はＴａｕに対するものであり、他方はアミロイドベータに対するものである。特定の実施形態において、二重特異性抗体は、Ｔａｕの２つの異なるエピトープに結合することができる。二重特異性抗体はまた、Ｔａｕを発現する細胞に細胞傷害性薬剤を局所化させるために使用することができる。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製され得る。
【0255】
多重特異性抗体を作製するための技法としては、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖－軽鎖対の組み換え同時発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ３０５：５３７（１９８３））、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５（１９９１）を参照されたい）、ならびに「ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂ－ｉｎ－ｈｏｌｅ）」操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、静電的ステアリング効果を操作して抗体Ｆｃ－ヘテロ二量体分子を作製すること（ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１）、２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号、及びＢｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照されたい）、ロイシンジッパーを使用して二重特異性抗体を産生すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７－１５５３（１９９２）を参照されたい）、「ダイアボディ」技術を使用して二重特異性抗体断片を作製すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４－６４４８（１９９３））、ならびに一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照されたい）、ならびに例えば、Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）に記載される三重特異性抗体を調製することによっても作製することができる。
【0256】
「オクトパス抗体」を含む、３つ以上の機能抗原結合部位を有する操作された抗体もまた、本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照されたい）。
【0257】
本明細書における抗体または断片はまた、Ｔａｕ及び別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む、「二重作用（Ｄｕａｌ Ａｃｔｉｎｇ）ＦＡｂ」または「ＤＡＦ」も含む（例えば、ＵＳ２００８／００６９８２０を参照されたい）。
【0258】
７．抗体変異形
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体のアミノ酸配列変異形が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することが望ましくあり得る。抗体のアミノ酸配列変異形は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な修飾を導入することによって、またはペプチド合成によって調製することができる。そのような修飾としては、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそこへの挿入、及び／またはその置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを行って、最終構築物に到達することができるが、但し、最終構築物が所望される特性、例えば、抗原結合を持つことを条件とする。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体のアミノ酸配列変異形が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することが望ましくあり得る。抗体のアミノ酸配列変異形は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な修飾を導入することによって、またはペプチド合成によって調製することができる。そのような修飾としては、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそこへの挿入、及び／またはその置換が挙げられる。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせを行って、最終構築物に到達することができるが、但し、最終構築物が所望される特性、例えば、抗原結合を持つことを条件とする。
【0259】
ａ）置換、挿入、及び欠失変異形
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異形が提供される。置換型変異誘発の目的とされる部位としては、ＨＶＲ及びＦＲが挙げられる。保存的置換は、表１において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、アミノ酸側鎖クラスに関連して以下に更に記載される通りである。アミノ酸置換が目的とされる抗体に導入され、産生物が所望される活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善についてスクリーニングされ得る。
表１
アミノ酸は、一般的な側鎖特性に従ってグループ化され得る。
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異形が提供される。置換型変異誘発の目的とされる部位としては、ＨＶＲ及びＦＲが挙げられる。保存的置換は、表１において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、アミノ酸側鎖クラスに関連して以下に更に記載される通りである。アミノ酸置換が目的とされる抗体に導入され、産生物が所望される活性、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の減少、またはＡＤＣＣもしくはＣＤＣの改善についてスクリーニングされ得る。
表１
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【0260】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーと別のクラスのメンバーとの交換を伴う。
【0261】
ある種類の置換型変異形は、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上の超可変領域残基を置換することを伴う。一般に、更なる研究のために選択される結果として生じる変異形（複数可）は、親抗体と比較した特定の生物学的特性（例えば、親和性の増加、免疫原性の低減）の修正（例えば、改善）を有し、かつ／または実質的に保持された親抗体の特定の生物学的特性を有する。例示的な置換型変異形は、例えば、本明細書に記載されるものなどのファージ提示に基づく親和性成熟技法を使用して、好都合に生成され得る親和性成熟抗体である。簡潔には、１つ以上のＨＶＲ残基が変異され、変異形抗体がファージ上に提示され、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【0262】
変化（例えば、置換）がＨＶＲに行われて、例えば、抗体親和性を改善することができる。そのような変化は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照されたい）、及び／または抗原に接触する残基に行われてもよく、結果として生じる変異形ＶＨまたはＶＬが、結合親和性について試験される。二次ライブラリを構築し、そこから再選択することによる親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ１７８：１－３７に記載されている（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））。親和性成熟のいくつかの実施形態において、多様性が、様々な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャフリング、またはオリゴヌクレオチド指向変異誘発）のいずれかによって、成熟させるために選択された可変遺伝子に導入される。その後、二次ライブラリが作製される。その後、このライブラリがスクリーニングされて、所望される親和性を有する任意の抗体変異形が特定される。多様性を導入する別の方法は、数個のＨＶＲ残基（例えば、一度に４～６個の残基）がランダム化されるＨＶＲ指向アプローチを伴う。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発またはモデル化を使用して、特異的に特定され得る。特に、ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３が標的とされることが多い。
【0263】
特定の実施形態において、置換、挿入、または欠失は、そのような変化が抗原に結合する抗体の能力を実質的に低減しない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じ得る。例えば、結合親和性を実質的に低減しない保存的変化（例えば、本明細書に提供される保存的置換）がＨＶＲで行われ得る。そのような変化は、例えば、ＨＶＲ内の抗原接触残基の外側であってもよい。上記に提供される変異形ＶＨ配列及びＶＬ配列の特定の実施形態において、各ＨＶＲは、変化しないか、または１つ以下、２つ以下もしくは３つ以下のアミノ酸置換を含有するかのいずれかである。
【0264】
変異誘発のために標的とされ得る抗体の残基または領域の特定に有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５によって記載される「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。この方法において、残基または標的残基群（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕなどの荷電残基）が特定され、中性または負荷電アミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置換されて、抗体と抗原との相互作用に影響が及ぼされたかが決定される。更なる置換が、最初の置換に対する機能感受性を示すアミノ酸位置に導入され得る。あるいは、または加えて、抗体と抗原との間の接触点を特定するための抗原－抗体複合体の結晶構造。そのような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的とされ得るか、または排除され得る。変異形がスクリーニングされて、それらが所望される特性を含有するかを決定することができる。
【0265】
アミノ酸配列挿入は、長さが１残基から１００以上の残基の範囲を含有するポリペプチドの範囲であるアミノ末端及び／またはカルボキシル末端の融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入を含む。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入変異形としては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴのための）またはポリペプチドへの抗体のＮ末端もしくはＣ末端の融合が挙げられ、これは抗体の血清半減期を増加させる。
【0266】
ｂ）グリコシル化変異形
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変化する。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作製または除去されるようにアミノ酸配列を変化させることによって好都合に達成され得る。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変化する。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位が作製または除去されるようにアミノ酸配列を変化させることによって好都合に達成され得る。
【0267】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が変化し得る。哺乳動物細胞によって産生される天然抗体は、典型的には、一般にＮ結合によってＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に結合される分岐状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ１５：２６－３２（１９９７）を参照されたい。オリゴ糖としては、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースを挙げることができる。いくつかの実施形態において、特定の特性が改善された抗体変異形を作製するために、本発明の抗体内のオリゴ糖の修飾が行われ得る。
【0268】
いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域に（直接的または間接的に）結合されたフコースを欠く炭水化物構造を有する抗体変異形が提供される。例えば、そのような抗体内のフコースの量は、１％～８０％、１％～６５％、５％～６５％または２０％～４０％であり得る。フコースの量は、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析法によって測定される、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッド及び高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７での糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域内の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７はまた、抗体内のわずかな配列変異のため、２９７位から約±３アミノ酸上流または下流に、すなわち、２９４位と３００位との間に位置し得る。そのようなフコシル化変異形は、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許公開第ＵＳ２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）、同第ＵＳ２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照されたい。「脱フコース化」または「フコース欠損」抗体変異形に関する公開の例としては、ＵＳ２００３／０１５７１０８、ＷＯ２０００／６１７３９、ＷＯ２００１／２９２４６、ＵＳ２００３／０１１５６１４、ＵＳ２００２／０１６４３２８、ＵＳ２００４／００９３６２１、ＵＳ２００４／０１３２１４０、ＵＳ２００４／０１１０７０４、ＵＳ２００４／０１１０２８２、ＵＳ２００４／０１０９８６５、ＷＯ２００３／０８５１１９、ＷＯ２００３／０８４５７０、ＷＯ２００５／０３５５８６、ＷＯ２００５／０３５７７８、ＷＯ２００５／０５３７４２、ＷＯ２００２／０３１１４０、Ｏｋａｚａｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９－１２４９（２００４）、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生することができる細胞株の例としては、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ ｅｔ ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３－５４５（１９８６）；米国特許出願第ＵＳ２００３／０１５７１０８Ａ１号、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ；及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１、Ａｄａｍｓら、特に実施例１１）、ならびにアルファ－１，６－フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（例えば、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）、Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０－６８８（２００６）、及びＷＯ２００３／０８５１０７）が挙げられる。
【0269】
例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分される、二分されたオリゴ糖を有する抗体変異形が更に提供される。そのような抗体変異形は、低減されたフコシル化及び／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。そのような抗体変異体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ－Ｍａｉｒｅｔ ｅｔ ａｌ．）、米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．）、及びＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａ ｅｔ ａｌ．）に記載される。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体変異形もまた、提供される。そのような抗体変異形は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。そのような抗体変異体は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ．）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）、及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載される。
【0270】
ｃ）Ｆｃ領域変異形
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入され、それにより、Ｆｃ領域変異形が生成され得る。Ｆｃ領域変異形は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含み得る。
特定の実施形態において、１つ以上のアミノ酸修飾が本明細書に提供される抗体のＦｃ領域に導入され、それにより、Ｆｃ領域変異形が生成され得る。Ｆｃ領域変異形は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含み得る。
【0271】
特定の実施形態において、本発明は、全てではないが、いくつかのエフェクター機能を持つことにより、インビボでの抗体の半減期が重要であるが、特定のエフェクター機能（補体及びＡＤＣＣなど）が不要または有害である用途に望ましい候補となる抗体変異形を企図する。インビトロ及び／またはインビボ細胞傷害性アッセイを行って、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを行って、抗体がＦｃγＲ結合を欠く（故にＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確実にすることができる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞がＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－４９２（１９９１）の４６４頁の表３にまとめられている。目的とされる分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：７０５９－７０６３（１９８６）を参照されたい）及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：１４９９－１５０２（１９８５）、５，８２１，３３７（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１－１３６１（１９８７）を参照されたい）に記載される。あるいは、非放射性アッセイ方法が用いられてもよい（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ、及びＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照されたい）。そのようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、または加えて、目的とされる分子のＡＤＣＣ活性は、インビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６５２－６５６（１９９８）に開示されるものなどの動物モデルにおいて評価することができる。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、抗体がＣ１ｑに結合することができず、故にＣＤＣ活性を欠くことを確認することもできる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイが実行されてもよい（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０１：１０４５－１０５２（２００３）、及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ Ｍ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ１０３：２７３８－２７４３（２００４）を参照されたい）。ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期決定もまた、当該技術分野において既知である方法を使用して実行することができる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９－１７６９（２００６）を参照されたい）。
【0272】
低減したエフェクター機能を有する抗体は、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９のうちの１つ以上の置換を有するものを含む（米国特許第６，７３７，０５６号）。そのようなＦｃ変異体は、アラニンへの残基２６５及び２９７の置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ変異体を含む、アミノ酸２６５位、２６９位、２７０位、２９７位及び３２７位のうちの２つ以上において置換を有するＦｃ変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【0273】
ＦｃＲへの結合が改善または縮小された特定の抗体変異形が記載されている。（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照されたい。）
【0274】
特定の実施形態において、抗体変異形は、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、及び／または３３４位（残基のＥＵ番号付け）での置換を有するＦｃ領域を含む。
【0275】
いくつかの実施形態において、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８－４１８４（２０００）に記載されるように、変化は、変化した（すなわち、改善または縮小した）Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存症細胞傷害性（ＣＤＣ）をもたらすＦｃ領域において行われる。
【0276】
母体ＩｇＧの胎児への移入に関与する、半減期が増加し、かつ新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合が改善された抗体（Ｇｕｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ． １１７：５８７（１９７６）及びＫｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））が、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎら）に記載される。それらの抗体は、Ｆｃ領域のＦｃＲｎへの結合を改善する１つ以上の置換を有するＦｃ領域をそこに含む。そのようなＦｃ変異形は、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４または４３４のうちの１つ以上における置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものを含む（米国特許第７，３７１，８２６号）。
【0277】
Ｆｃ領域変異形の他の例に関して、Ｄｕｎｃａｎ＆Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ３２２：７３８－４０（１９８８）、米国特許第５，６４８，２６０号、米国特許第５，６２４，８２１号、及びＷＯ９４／２９３５１も参照されたい。
【0278】
ｄ）システイン操作された抗体変異形
特定の実施形態において、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン操作された抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ」を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、置換残基は、抗体の接触可能部位において生じる。これらの残基をシステインで置換することによって、反応性のチオール基がそれにより抗体の接触可能部位に位置付けられ、それを使用して、薬物部分またはリンカー－薬物部分などの他の部分に抗体を複合体化して、本明細書で更に記載される免疫複合体を作製することができる。特定の実施形態において、以下の残基のいずれか１つ以上が、システインで置換され得る：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）、及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システイン操作された抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されるように生成され得る。
特定の実施形態において、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン操作された抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ」を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、置換残基は、抗体の接触可能部位において生じる。これらの残基をシステインで置換することによって、反応性のチオール基がそれにより抗体の接触可能部位に位置付けられ、それを使用して、薬物部分またはリンカー－薬物部分などの他の部分に抗体を複合体化して、本明細書で更に記載される免疫複合体を作製することができる。特定の実施形態において、以下の残基のいずれか１つ以上が、システインで置換され得る：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）、及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システイン操作された抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号に記載されるように生成され得る。
【0279】
ｅ）抗体誘導体
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、当該技術分野において既知であり、かつ容易に入手可能な、追加の非タンパク質性部分を含有するように更に修飾され得る。抗体の誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーを含むが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐状または非分岐状であり得る。抗体に結合したポリマーの数は異なり得、２つ以上のポリマーが結合している場合、それらは、同一の分子または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、改善される抗体の特定の特性または機能、抗体の誘導体が定義される条件下で療法において使用されるかどうかなどを含むが、これらに限定されない考慮に基づいて決定することができる。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗体は、当該技術分野において既知であり、かつ容易に入手可能な、追加の非タンパク質性部分を含有するように更に修飾され得る。抗体の誘導体化に好適な部分としては、水溶性ポリマーを含むが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐状または非分岐状であり得る。抗体に結合したポリマーの数は異なり得、２つ以上のポリマーが結合している場合、それらは、同一の分子または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、改善される抗体の特定の特性または機能、抗体の誘導体が定義される条件下で療法において使用されるかどうかなどを含むが、これらに限定されない考慮に基づいて決定することができる。
【0280】
別の実施形態において、放射線への曝露によって選択的に加熱され得る、抗体と非タンパク質性部分との複合体が提供される。いくつかの実施形態において、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ１０２：１１６００－１１６０５（２００５））。放射線は、任意の波長のものであってもよく、通常の細胞を傷つけないが、非タンパク質性部分を、抗体－非タンパク質性部分に近位の細胞を死滅させる温度まで加熱する波長を含むが、これらに限定されない。
【0281】
Ｂ．組み換え方法及び組成物
抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載される組み換え方法及び組成物を使用して産生され得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体をコードする単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／または抗体のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／または重鎖）をコードし得る。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。そのような一実施形態において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１のベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２のベクターを含む（例えば、それらで形質転換されている）。いくつかの実施形態において、宿主細胞は、真核生物のもの、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体を作製する方法であって、上記に提供される抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、その抗体の発現に好適な条件下で培養することと、任意で、抗体を宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収することとを含む、方法が提供される。
抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載される組み換え方法及び組成物を使用して産生され得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体をコードする単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／または抗体のＶＨを含むアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／または重鎖）をコードし得る。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。更なる一実施形態において、そのような核酸を含む宿主細胞が提供される。そのような一実施形態において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター、または（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第１のベクター、及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第２のベクターを含む（例えば、それらで形質転換されている）。いくつかの実施形態において、宿主細胞は、真核生物のもの、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ系細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体を作製する方法であって、上記に提供される抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、その抗体の発現に好適な条件下で培養することと、任意で、抗体を宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収することとを含む、方法が提供される。
【0282】
抗Ｔａｕ抗体の組み換え産生のために、例えば、上記のものなどの、抗体をコードする核酸が単離され、宿主細胞内での更なるクローニング及び／または発現のために、１つ以上のベクター中に挿入される。そのような核酸は、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、配列決定され得る。
【0283】
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現のための好適な宿主細胞は、本明細書に記載される原核細胞または真核細胞を含む。例えば、抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合に、細菌内で産生され得る。細菌内での抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、同第５，７８９，１９９号、及び同第５，８４０，５２３号を参照されたい。（Ｅ．ｃｏｌｉ中での抗体断片の発現を記載する、Ｃｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４もまた参照されたい。）発現後、抗体は、可溶性画分中で細菌細胞ペーストから単離されてもよく、更に精製されてもよい。
【0284】
原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物は、抗体をコードするベクターに好適なクローニングまたは発現宿主であり、グリコシル化経路が「ヒト化」されており、部分的または完全なヒトグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす、真菌及び酵母株を含む。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９－１４１４（２００４）、及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０－２１５（２００６）を参照されたい。
【0285】
グリコシル化抗体の発現に好適な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）にも由来する。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。昆虫細胞と併せて、特にヨトウガ細胞のトランスフェクションのために使用され得る、多数のバキュロウイルス株が特定されている。
【0286】
植物細胞培養物もまた、宿主として利用することができる。例えば、米国特許第５，９５９，１７７号、同第６，０４０，４９８号、同第６，４２０，５４８号、同第７，１２５，９７８号、及び同第６，４１７，４２９号（トランスジェニック植物において抗体を産生するためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ（商標）技術を記載）を参照されたい。
【0287】
脊椎動物細胞もまた、宿主として使用することができる。例えば、懸濁液中で成長するように適合される哺乳動物細胞株が、有用である場合がある。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ－７）によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株、ヒト胚性腎臓株（例えば、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載される２９３または２９３細胞）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）、マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０）に記載されるＴＭ４細胞）、サル腎臓細胞（ＣＶ１）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）、ヒト子宮頚部癌細胞（ＨＥＬＡ）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ３Ａ）、ヒト肺細胞（Ｗ１３８）、ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）、マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）、例えば、Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２）に記載されるＴＲＩ細胞、ＭＲＣ５細胞、及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４２１６（１９８０））、ならびにＹ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株が挙げられる。抗体産生に好適な特定の哺乳動物宿主細胞株の概説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ ａｎｄ Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５－２６８（２００３）を参照されたい。
【0288】
Ｃ．アッセイ
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体は、それらの物理的／化学的特性及び／または生物学的活性について、当該技術分野において既知である様々なアッセイによって、特定され、スクリーニングされ、または特性評価されてもよい。
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体は、それらの物理的／化学的特性及び／または生物学的活性について、当該技術分野において既知である様々なアッセイによって、特定され、スクリーニングされ、または特性評価されてもよい。
【0289】
１．結合アッセイ及び他のアッセイ
一態様において、本発明の抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロットなどの既知の方法によってその抗原結合活性について試験される。
一態様において、本発明の抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロットなどの既知の方法によってその抗原結合活性について試験される。
【0290】
別の態様において、競合アッセイを使用して、Ｔａｕへの結合について本明細書に記載される抗体と競合する抗体を特定することができる。特定の実施形態において、そのような競合抗体は、９４Ｂ２－Ｃ１、１２５Ｂ１１－Ｈ３、３７Ｄ３－Ｈ９、またはｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４によって結合される、同一のエピトープ（例えば、線状または立体構造エピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）“Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）に提供される。
【0291】
一例示的な競合アッセイにおいて、固定化されたＴａｕ（モノマーＴａｕなど）は、Ｔａｕに結合する第１の標識された抗体（例えば、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４などの本明細書に記載される任意の抗体）と、第１の抗体とＴａｕへの結合について競合するその能力について試験される第２の非標識抗体とを含む溶液中で、インキュベートされる。第２の抗体は、ハイブリドーマ上清中に存在してもよい。対照として、固定化されたＴａｕを、第１の標識された抗体を含むが第２の非標識抗体を含まない溶液中でインキュベートする。第１の抗体のＴａｕへの結合を許容する条件下でのインキュベーションの後、過剰な未結合抗体を除去し、固定化されたＴａｕに関連する標識の量を測定する。固定化されたＴａｕに関連する標識の量が、対照試料と比較して試験試料中で実質的に低減される場合、それは、第２の抗体がＴａｕへの結合について第１の抗体と競合していることを示す。Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）を参照されたい。
【0292】
２．活性アッセイ
一態様において、生物学的活性を有するその抗Ｔａｕ（例えば、ｐａｎ－Ｔａｕ）抗体を特定するためのアッセイが提供される。生物学的活性としては、例えば、複数の形態のＴａｕ（例えば、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕ）へのそのような抗体の結合、ならびにＴａｕタンパク質（例えば、脳内、例えば、脳皮質及び／または海馬内の、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減を挙げることができる。インビボ及び／またはインビトロでそのような生物学的活性を有する抗体もまた、提供される。
一態様において、生物学的活性を有するその抗Ｔａｕ（例えば、ｐａｎ－Ｔａｕ）抗体を特定するためのアッセイが提供される。生物学的活性としては、例えば、複数の形態のＴａｕ（例えば、モノマーＴａｕ、オリゴマーＴａｕ、非リン酸化Ｔａｕ、及びリン酸化Ｔａｕ）へのそのような抗体の結合、ならびにＴａｕタンパク質（例えば、脳内、例えば、脳皮質及び／または海馬内の、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減を挙げることができる。インビボ及び／またはインビトロでそのような生物学的活性を有する抗体もまた、提供される。
【0293】
特定の実施形態において、本発明の抗体は、そのような生物学的活性について試験される。例えば、Ｔａｕトランスジェニックマウス（例えば、Ｐ３０１Ｌ）などのタウオパチーの動物モデルを使用して、脳切片への、例えば、トランスジェニックマウスの脳内の神経原線維変化への、抗Ｔａｕ抗体の結合を検出することができる。更に、Ｔａｕトランスジェニックマウス（例えば、Ｐ３０１Ｌ）などのタウオパチーの動物モデルを抗Ｔａｕ抗体で治療することができ、当該技術分野において既知である実験的技法を使用して、そのような治療が、マウス脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内の）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルを低減するかどうかを評価することができる。
【0294】
Ｄ．免疫複合体
本発明はまた、１つ以上の他の治療剤または放射性同位体に複合体化される本明細書の抗Ｔａｕ抗体を含む免疫複合体も提供する。
本発明はまた、１つ以上の他の治療剤または放射性同位体に複合体化される本明細書の抗Ｔａｕ抗体を含む免疫複合体も提供する。
【0295】
別の実施形態において、免疫複合体は、放射性原子に複合体化されて放射性複合体を形成する、本明細書に記載される抗体を含む。様々な放射性同位体が、放射性複合体の産生のために利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２及びＬｕの放射性同位体が挙げられる。放射性複合体が検出に使用される場合、それは、シンチグラフィー研究のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍもしくはＩ１２３、または再びヨード－１２３、ヨード－１３１、インジウム－１１１、フッ素－１９、炭素－１３、窒素－１５、酸素－１７、ガドリニウム、マンガンもしくは鉄などの核磁気共鳴（ＮＭＲ）撮像法（磁気共鳴撮像法、ｍｒｉとしても知られる）のためのスピン標識を含み得る。
【0296】
抗体の複合体は、Ｎ－サクシニミジル－３－（２－ピリジルジチオ）プロピオン酸塩（ＳＰＤＰ）、サクシニミジル－４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボン酸塩（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（アジプイミド酸ジメチルＨＣｌなど）、活性エステル（スベリン酸ジサクシニミジルなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビス－アジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなど）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネートなど）、及びビス－活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼンなど）などの様々な二官能性タンパク質カップリング剤を使用して作製することができる。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３８：１０９８（１９８７）に記載されるように調製することができる。炭素－１４－標識化１－イソチオシアナトベンジル－３－メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体に複合体化するための一例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。リンカーは、細胞内での細胞傷害性薬物の放出を容易にする「切断可能リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５２：１２７－１３１（１９９２）、米国特許第５，２０８，０２０号）が使用されてもよい。
【0297】
本明細書の免疫複合体またはＡＤＣは、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ－ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ－ＥＭＣＳ、スルホ－ＧＭＢＳ、スルホ－ＫＭＵＳ、スルホ－ＭＢＳ、スルホ－ＳＩＡＢ、スルホ－ＳＭＣＣ、及びスルホ－ＳＭＰＢ、ならびに（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）市販されているＳＶＳＢ（サクシニミジル－（４－ビニルスルホン）安息香酸塩）を含むが、これらに限定されない架橋剤試薬で調製されるそのような複合体を明示的に企図するが、これらに限定されない。
【0298】
Ｅ．診断及び検出のための方法及び組成物
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれも、生体試料中のＴａｕの存在の検出に有用である。本明細書で使用される場合、「検出すること」という用語は、定量的または定性的検出を包含する。特定の実施形態において、生体試料は、脳脊髄液、脳細胞もしくは脳組織（例えば、脳皮質もしくは海馬）、または血液などの細胞もしくは組織を含む。いくつかの実施形態において、生体試料は、脳脊髄液である。
特定の実施形態において、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれも、生体試料中のＴａｕの存在の検出に有用である。本明細書で使用される場合、「検出すること」という用語は、定量的または定性的検出を包含する。特定の実施形態において、生体試料は、脳脊髄液、脳細胞もしくは脳組織（例えば、脳皮質もしくは海馬）、または血液などの細胞もしくは組織を含む。いくつかの実施形態において、生体試料は、脳脊髄液である。
【0299】
いくつかの実施形態において、診断または検出方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。更なる一態様において、生体試料中のＴａｕの存在の検出方法が提供される。特定の実施形態において、本方法は、Ｔａｕへの抗Ｔａｕ抗体の結合を許容する条件下で、生体試料を本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体と接触させることと、複合体が抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間で形成されるかどうかを検出することとを含む。そのような方法は、インビトロ方法またはインビボ方法であり得る。更に、試験生体試料中で抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間に形成される複合体は、対照生体試料（例えば、健康な対象（複数可）由来の生体試料）中で形成される複合体と比較され得る。試験生体試料中で抗Ｔａｕ抗体とＴａｕとの間に形成される複合体の量はまた、定量化され、対照生体試料（例えば、健康な対象（複数可）由来の生体試料）中で形成される複合体の量と、または健康な対象において形成されることが知られる複合体の平均量と比較され得る。
【0300】
いくつかの実施形態において、例えば、Ｔａｕが患者の選択のためのバイオマーカーである場合、抗Ｔａｕ抗体を使用して、抗Ｔａｕ抗体での療法に適格な対象を選択する。例えば、いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ（例えば、ｐａｎ－Ｔａｕ）抗体を使用して、対象がＴａｕタンパク質疾患もしくは障害を有するかどうか、または対象がＴａｕタンパク質疾患もしくは障害の高いリスクにある（素因がある）かどうかを検出する。
【0301】
本発明の抗体を使用して診断され得る例示的な疾患または障害としては、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害、及び神経原線維変化もしくは神経絨毛糸によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患もしくは障害が挙げられる。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して診断され得る疾患または障害としては、推理力、状況判断力、認知記憶、学習、及び／または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕタンパク質関連疾患または障害が挙げられる。特に、本発明の抗体を使用して診断され得る疾患または障害としては、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーが挙げられる。本発明の抗体を使用して診断され得る例示的な疾患または障害としては、アルツハイマー病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明の抗体を使用して診断され得る障害は、アルツハイマー病（ＡＤ）である。
【0302】
特定の実施形態において、標識された抗Ｔａｕ抗体が提供される。標識としては、直接検出される標識または部分（蛍光標識、発色団標識、電子密度の高い標識、化学発光標識、及び放射性標識など）、ならびに間接的に、例えば、酵素反応または分子相互作用により検出される酵素またはリガンドなどの部分が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な標識としては、放射性同位体３２Ｐ、１４Ｃ、１２５Ｉ、３Ｈ、及び１３１Ｉ、希土類キレートまたはフルオレセイン及びその誘導体などのフルオロフォア、ローダミン及びその誘導体、ダンシル、ウンベリフェロン、ルセリフェラーゼ（ｌｕｃｅｒｉｆｅｒａｓｅ）、例えば、ホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ（米国特許第４，７３７，４５６号）、ルシフェリン、２，３－ジヒドロフタラジンジオン、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、β－ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖質オキシダーゼ、例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、及びグルコース－６－リン酸塩デヒドロゲナーゼ、過酸化水素を用いて色素前駆体を酸化させる酵素、例えばＨＲＰ、ラクトペルオキシダーゼ、またはマイクロペルオキシダーゼとカップリングされたウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼなどの複素環式オキシダーゼ、ビオチン／アビジン、スピン標識、バクテリオファージ標識、ならびに安定した遊離ラジカルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【0303】
Ｆ．薬学的製剤
本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体の薬学的製剤は、所望される程度の純度を有するそのような抗体と、１つ以上の任意の薬学的に許容される担体、希釈剤、及び／または賦形剤とを混合すること（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））によって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製される。薬学的に許容される担体、希釈剤、及び賦形剤は一般に、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、それらには、無菌水、緩衝剤（リン酸、クエン酸、及び他の有機酸など）；アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤；保存剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール；ブチルもしくはベンジルアルコール；メチルもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）、ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ－２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの介在性（ｉｎｓｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）薬物分散剤を更に含む。ｒＨｕＰＨ２０を含む特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許公開第２００５／０２６０１８６号及び同第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチナーゼなどの１つ以上の追加のグリコサミノグリカナーゼと組み合わされる。
本明細書に記載される抗Ｔａｕ抗体の薬学的製剤は、所望される程度の純度を有するそのような抗体と、１つ以上の任意の薬学的に許容される担体、希釈剤、及び／または賦形剤とを混合すること（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））によって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製される。薬学的に許容される担体、希釈剤、及び賦形剤は一般に、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して無毒であり、それらには、無菌水、緩衝剤（リン酸、クエン酸、及び他の有機酸など）；アスコルビン酸及びメチオニンを含む酸化防止剤；保存剤（塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール；ブチルもしくはベンジルアルコール；メチルもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）、ならびに／またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における例示的な薬学的に許容される担体は、可溶性の中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（登録商標）、Ｂａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）などのヒト可溶性ＰＨ－２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質などの介在性（ｉｎｓｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ）薬物分散剤を更に含む。ｒＨｕＰＨ２０を含む特定の例示的なｓＨＡＳＥＧＰ及び使用方法は、米国特許公開第２００５／０２６０１８６号及び同第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様において、ｓＨＡＳＥＧＰは、コンドロイチナーゼなどの１つ以上の追加のグリコサミノグリカナーゼと組み合わされる。
【0304】
例示的な凍結乾燥抗体製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性抗体製剤は、米国特許第６，１７１，５８６号及びＷＯ２００６／０４４９０８に記載されるものを含み、後者の製剤は、ヒスチジン－アセテート緩衝液を含む。
【0305】
本明細書の製剤はまた、治療されている特定の適応症の必要に応じて、２つ以上の活性成分、好ましくは相互に悪影響を及ぼさない相補的活性を有する成分を含有してもよい。そのような活性成分は、好適には、意図される目的に有効な量で、組み合わせで存在する。
【0306】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技法または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン－マイクロカプセル、及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中に、またはマクロエマルジョン中に封入され得る。そのような技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
【0307】
徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、これらのマトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。
【0308】
インビボ投与に使用される製剤は一般に、無菌のものである。無菌性は、例えば、無菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成することができる。
【0309】
Ｇ．治療方法及び組成物
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体または免疫複合体のいずれも、治療方法において使用することができる。
本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体または免疫複合体のいずれも、治療方法において使用することができる。
【0310】
一態様において、医薬品として使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。更なる態様において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。いくつかの実施形態において、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。特定の実施形態において、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。抗Ｔａｕ抗体で治療され得る治療され得る例示的なＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーが非限定的に挙げられる。いくつかの実施形態において、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が本明細書に開示される。いくつかの実施形態において、中程度のＡＤ、軽度～中程度のＡＤ、軽度のＡＤ、初期ＡＤ、または前駆ＡＤの治療に使用するための抗Ｔａｕ抗体が本明細書に提供される。更に、抗Ｔａｕ抗体で治療され得るＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、推理力、状況判断力、認知記憶、学習、及び／または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化される疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、治療方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体が提供される。特定の実施形態において、本発明は、上記のＴａｕ関連疾患または障害のいずれか１つを有する個体の治療方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供し、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。
【0311】
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、２０～３０の間、２０～２６の間、２４～３０の間、２１～２６の間、２２～２６の間、２２～２８の間、２３～２６の間、２４～２６の間、または２５～２６の間のＭＭＳＥスコアを有する個体を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、患者は、２２～２６の間のＭＭＳＥスコアを有する。本明細書で使用される場合、２つの数字間のＭＭＳＥスコアは、その範囲の両端の数字を含む。例えば、２２～２６の間のＭＭＳＥスコアは、２２及び２６のＭＭＳＥスコアを含む。
【0312】
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、『ｔａｕ陽性』である個体、例えば、Ｔａｕタンパク質関連障害に典型的である脳ｔａｕ沈着物を有する患者、例えば、陽性のＴａｕ ＰＥＴスキャンを有する患者を治療するために使用される。
【0313】
更なる実施形態において、本発明は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。例えば、そのような低減は、脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）で生じ得る。いくつかの実施形態において、本発明は、リン酸化Ｔａｕのレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、不溶性Ｔａｕ（例えば、不溶性リン酸化Ｔａｕ）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、高リン酸化Ｔａｕのレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、脳組織内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）の対らせん状細線維（例えば、高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。特定の実施形態において、本発明は、個体における脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減方法であって、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む、方法に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、哺乳動物、好ましくはヒトである。
【0314】
いくつかの実施形態において、本発明は、例えば、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／または海馬内）のＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの調節に使用するための抗Ｔａｕ抗体を提供する。
【0315】
更なる一態様において、本発明は、医薬品の製造または調製における抗Ｔａｕ抗体の使用を提供する。いくつかの実施形態において、医薬品は、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療のためのものである。Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害は、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害であり得る。特定の実施形態において、医薬品は、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療のためのものである。特定の実施形態において、医薬品は、アルツハイマー病（ＡＤ）、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーからなる群から選択される疾患または障害の治療のためのものである。いくつかの実施形態において、医薬品は、ＡＤの治療のためのものである。特定の実施形態において、医薬品は、推理力、状況判断力、認知記憶、学習、または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕ関連疾患または障害の治療のためのものである。更なる一実施形態において、医薬品は、上記に列挙される疾患（例えば、ＡＤなどのタウオパチー）の治療方法であって、そのような疾患を有する個体に有効量の医薬品を投与することを含む、方法に使用するためのものである。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。
【0316】
更なる一実施形態において、医薬品は、Ｔａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性非リン酸化Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、不溶性非リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減のためのものである。例えば、Ｔａｕタンパク質のそのような低減は、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／もしくは海馬内）または脳脊髄液中で観察され得る。いくつかの実施形態において、医薬品は、対らせん状細線維のレベルの低減のためのものである。更なる一実施形態において、医薬品は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減方法であって、有効量の医薬品を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む、方法に使用するためのものである。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、哺乳動物、好ましくはヒトである。
【0317】
更なる一態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の治療方法を提供する。本明細書に提供される方法に従って治療され得るＴａｕタンパク質関連疾患または障害としては、神経原線維変化または神経絨毛糸の形成によって引き起こされるか、またはそれに関連付けられる疾患または障害が挙げられる。特定の実施形態において、本発明は、神経変性タウオパチーなどのタウオパチーの治療方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、アルツハイマー病、クロイツフェルト・ヤコブ病、パンチドランカー、ダウン症候群、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、封入体筋炎、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、外傷性脳損傷、グアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン症認知症症候群、神経原線維変化を伴う非グアム運動ニューロン疾患、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、前頭側頭型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソン症候群を伴う前頭側頭型認知症、ハラーホルデン・スパッツ病、多系統萎縮症、ニーマン・ピック病Ｃ型、淡蒼球－橋脳－黒質変性症、ピック病、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化型認知症、脳炎後パーキンソン症、及び筋強直性ジストロフィーからなる群から選択される疾患または障害の治療方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、アルツハイマー病（ＡＤ）の治療方法を提供する。特定の実施形態において、本発明は、推理力、状況判断力、認知記憶、学習、または空間進路決定を含む、認知機能の障害または喪失において顕在化されるＴａｕ関連疾患または障害の治療方法を提供する。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を、上記の疾患または障害を有する個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、例えば以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を、本明細書に記載される疾患のうちの１つを有する個体に投与することを含む。そのような一実施形態において、本方法は、以下に記載されるような、有効量の少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含む。上記の実施形態のいずれに従う「個体」も、ヒトであり得る。
【0318】
更なる一態様において、本発明は、個体におけるＴａｕタンパク質（例えば、総Ｔａｕ、総可溶性Ｔａｕ、可溶性リン酸化Ｔａｕ、総不溶性Ｔａｕ、不溶性リン酸化Ｔａｕ、高リン酸化Ｔａｕ、または高リン酸化Ｔａｕを含有する対らせん状細線維）のレベルの低減方法を提供する。例えば、Ｔａｕタンパク質のレベルのそのような低減は、個体の脳内（例えば、脳皮質及び／もしくは海馬）または脳脊髄液中で観察され得る。いくつかの実施形態において、本発明は、対らせん状細線維のレベルの低減方法を提供する。いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の抗Ｔａｕ抗体を個体に投与して、Ｔａｕタンパク質のレベルを低減させることを含む。いくつかの実施形態において、「個体」はヒトである。
【0319】
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の１つ以上の症状の緩和方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の１つ以上の症状を緩和するための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の症状の数または１つ以上の症状の重症度の低減方法、あるいはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の症状の数または１つ以上の症状の重症度を低減するための、抗Ｔａｕ抗体または抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、認知障害である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、学習及び／または記憶障害である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、長期記憶喪失である。特定の一実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、認知症である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、錯乱、易刺激性、攻撃性、気分変動、または言語障害である。いくつかの実施形態において、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の症状は、推理力、状況判断力、認知記憶、及び／または学習などの１つ以上の認知機能の障害または喪失である。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
【0320】
特定の態様において、本発明は、認知記憶容量の保持もしくは増加方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害に関連付けられる記憶喪失の減速方法、あるいは認知記憶容量の保持もしくは増加、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）に関連付けられる記憶喪失の減速のための、抗Ｔａｕ抗体または抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、記憶喪失または記憶容量の減少の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
【0321】
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の進行速度の減少方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の進行速度の減少のための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
【0322】
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の発症の予防方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の発症を予防するための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害のリスクにある）個体に投与することを含む。
【0323】
いくつかの態様において、本発明は、Ｔａｕタンパク質関連疾患もしくは障害の発症の遅延方法、またはＴａｕタンパク質関連疾患もしくは障害（本明細書に記載される疾患もしくは障害のいずれか、例えば、ＡＤなど）の発症を遅延させるための、抗Ｔａｕ抗体もしくは抗Ｔａｕ抗体を含む医薬品を提供する。本明細書に提供される方法は、ある量（例えば、治療有効量）の抗Ｔａｕ抗体を、（例えば、Ｔａｕタンパク質関連疾患または障害の１つ以上の症状を提示する）個体に投与することを含む。
【0324】
更なる一態様において、本発明は、例えば、上記の治療方法のいずれかに使用するための、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかを含む、薬学的製剤を提供する。いくつかの実施形態において、薬学的製剤は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかと、薬学的に許容される担体とを含む。別の実施形態において、薬学的製剤は、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体のいずれかと、例えば、以下に記載される少なくとも１つの追加の治療剤とを含む。
【0325】
本発明の抗体は、療法において、単独で、または他の薬剤と組み合わせて使用することができる。例えば、本発明の抗体は、少なくとも１つの追加の治療剤と同時投与されてもよい。
【0326】
例えば、本発明に従う組成物は、例えば、タウオパチー及び／またはアミロイドーシスの薬物療法、アミロイド及びアミロイド様タンパク質（アルツハイマー病に関与するアミロイドβタンパク質など）に関連する疾患及び障害の群において使用される既知の化合物などの生物活性物質または化合物などの追加の治療剤を含む、他の組成物と組み合わせて投与されてもよい。
【0327】
一般に、他の生物活性化合物は、ニューロン－伝達エンハンサー、心理療法薬、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、カルシウムチャネル遮断剤、生体アミン、ベンゾジアゼピン精神安定剤、アセチルコリン合成、貯蔵もしくは放出エンハンサー、アセチルコリンシナプス後受容体アゴニスト、モノアミン酸化酵素ＡもしくはＢ阻害剤、Ｎ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸グルタミン酸受容体アンタゴニスト、非ステロイド性抗炎症薬、酸化防止剤、セロトニン受容体アンタゴニスト、または他の治療剤を含み得る。特に、生物活性剤化合物は、酸化ストレスに対する化合物、抗アポトーシス性化合物、金属キレート剤、ＤＮＡ修復の阻害剤（ピレンゼピン及び代謝物など）、３－アミノ－１－プロパンスルホン酸（３ＡＰＳ）、１，３－プロパンジスルホン酸（１，３ＰＤＳ）、セクレターゼ活性化剤、ベータ－及びガンマ－セクレターゼ阻害剤、Ｔａｕタンパク質、抗Ｔａｕ抗体（ＷＯ２０１２０４９５７０、ＷＯ２０１４０２８７７７、ＷＯ２０１４１６５２７１、ＷＯ２０１４１００６００、ＷＯ２０１５２００８０６、ＵＳ８９８０２７０、及びＵＳ８９８０２７１に開示される抗体を含むが、これらに限定されない）、神経伝達物質、ベータ－シートブレーカー、抗炎症性分子、「非定型抗精神病薬」（例えば、クロザピン、ジプラシドン、リスペリドン、アリピプラゾールもしくはオランザピンなど）、またはコリンエステラーゼ阻害剤（ＣｈＥＩ）（タクリン、リバスチグミン、ドネペジル、及び／もしくはガランタミンなど）、ならびに他の薬物及び栄養素補助剤（例えば、ビタミンＢ１２、システイン、アセチルコリンの前駆体、レシチン、コリン、イチョウ、アシエチル（ａｃｙｅｔｙｌ）－Ｌ－カルニチン、イデベノン、プロペントフィリン、もしくはキサンチン誘導体など）、ならびに本発明に従う結合ペプチド（抗体、特にモノクローナル抗体及びそれらの活性断片を含む）、ならびに任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤から選択される少なくとも１つの化合物と、疾患の治療の指示書とを含み得る。
【0328】
いくつかの実施形態において、本発明の抗体は、神経薬と組み合わせて投与されてもよい。そのような神経薬としては、ベータセクレターゼ、プレセニリン、アミロイド前駆体タンパク質またはその部分、アミロイドベータペプチドまたはそれらのオリゴマーもしくは原線維、細胞死受容体６（ＤＲ６）、最終糖化産物の受容体（ＲＡＧＥ）、パーキン、及びハンチンチン；ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（すなわち、メマンチン）、モノアミン枯渇剤（すなわち、テトラベナジン）；メシル酸エルゴロイド；抗コリン抗パーキンソン症候群剤（すなわち、プロシクリジン、ジフェンヒドラミン、トリヘキシルフェニジル、ベンズトロピン、ビペリデン及びトリヘキシフェニジル）；ドパミン系抗パーキンソン症候群剤（すなわち、エンタカポン、セレギリン、プラミペキソール、ブロモクリプチン、ロチゴチン、セレギリン、ロピニロール、ラサギリン、アポモルヒネ、カルビドパ、レボドパ、ペルゴリド、トルカポン及びアマンタジン）；テトラベナジン；抗炎症剤（非ステロイド性抗炎症薬（すなわち、インドメチシン（ｉｎｄｏｍｅｔｈｉｃｉｎ）及び上記に列挙される他の化合物）を含むが、これらに限定されない）；ホルモン（すなわち、エストロゲン、プロゲステロン及びリュープロリド）；ビタミン（すなわち、葉酸及びニコチンアミド）；ディメボリン（ｄｉｍｅｂｏｌｉｎ）；ホモタウリン（すなわち、３－アミノプロパンスルホン酸、３ＡＰＳ）；セロトニン受容体活性調節剤（すなわち、キサリプロデン）；インターフェロン、ならびにグルココルチコイドまたはコルチコステロイドから選択される標的に特異的に結合する、抗体または他の結合分子（小分子、ペプチド、アプタマー、もしくは他のタンパク質結合剤を含むが、これらに限定されない）が挙げられるが、これらに限定されない。「コルチコステロイド」という用語は、フルチカゾン（プロピオン酸フルチカゾン（ＦＰ）を含む）、ベクロメタゾン、ブデソニド、シクレソニド、モメタゾン、フルニソリド、ベータメサゾン及びトリアムシノロンを含むが、これらに限定されない。「吸入可能コルチコステロイド」とは、吸入による送達に好適なコルチコステロイドを意味する。例示的な吸入可能コルチコステロイドは、フルチカゾン、プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデノシド、フロ酸モメタゾン、シクレソニド、フルニソリド、及びトリアムシノロンアセトニドである。
【0329】
いくつかの実施形態において、１つ以上の抗アミロイドベータ（抗Ａｂｅｔａ）抗体が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのような抗Ａｂｅｔａ抗体の非限定的な例としては、クレネズマブ、ソラネズマブ、バピネオズマブ、アデュカヌマブ、ガンテネルマブ、及びＢＡＮ－２４０１（Ｂｉｏｇｅｎ，Ｅｉｓａｉ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のベータ－アミロイド凝集阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。非限定的な例示的ベータ－アミロイド凝集阻害剤としては、ＥＬＮＤ－００５（ＡＺＤ－１０３またはシロ－イノシトールとも呼ばれる）、トラミプロセート、及びＰＴＩ－８０（Ｅｘｅｂｒｙｌ－１（登録商標）、ＰｒｏｔｅｏＴｅｃｈ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のＢＡＣＥ阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのようなＢＡＣＥ阻害剤の非限定的な例としては、Ｅ－２６０９（Ｂｉｏｇｅｎ，Ｅｉｓａｉ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）、ＡＺＤ３２９３（ＬＹ３３１４８１４、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ＆Ｃｏ．としても知られる）、ＭＫ－８９３１（Ｖｅｒｕｂｅｃｅｓｔａｔ）、及びＪＮＪ－５４８６１９１１（Ｊａｎｓｓｅｎ，Ｓｈｉｏｎｏｇｉ Ｐｈａｒｍａ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上のＴａｕ阻害剤が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのようなＴａｕ阻害剤の非限定的な例としては、メチルチオニニウム、ＬＭＴＸ（ロイコ－メチルチオニニウムまたはＴｒｘ－０２３７、ＴａｕＲｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｌｔｄ．としても知られる）、Ｒｅｍｂｅｒ（商標）（メチレンブルーまたは塩化メチルチオニニウム［ＭＴＣ］、Ｔｒｘ－００１４、ＴａｕＲｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｌｔｄ）、ＰＢＴ２（Ｐｒａｎａ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、及びＰＴＩ－５１－ＣＨ３（ＴａｕＰｒｏ（商標）、ＰｒｏｔｅｏＴｅｃｈ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、１つ以上の他の抗Ｔａｕ抗体が、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。そのような他の抗Ｔａｕ抗体の非限定的な例としては、ＢＭＳ－９８６１６８（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）及びＣ２Ｎ－８Ｅ１２（ＡｂｂＶｉｅ，Ｃ２Ｎ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，ＬＬＣ）が挙げられる。いくつかの実施形態において、ＮＰＴ０８８（ＮｅｕｒｏＰｈａｇｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）などの一般的なミスフォールディング阻害剤、本明細書に提供される抗Ｔａｕ抗体とともに投与されてもよい。
【0330】
いくつかの実施形態において、本発明に従う組成物は、抗体、特にモノクローナル抗体及びそれらの活性断片を含む、本発明に従うキメラ抗体またはヒト化抗体とともに、ナイアシンまたはメマンチンと、任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤とを含み得る。
【0331】
いくつかの実施形態において、本発明に従うキメラ抗体もしくはヒト化抗体、またはそれらの活性断片とともに、例えば、クロザピン、ジプラシドン、リスペリドン、アリピプラゾールもしくはオランザピンなどの、陽性及び陰性精神病症状（幻覚、妄想、思考障害（著しい思考散乱、脱線、脱線思考によって顕在化される）、ならびに奇異挙動または混乱挙動、ならびに快感消失、平坦化情動、感情鈍麻、及び引きこもりを含む）の治療のための「非定型抗精神病薬」と、任意で薬学的に許容される担体及び／または希釈剤及び／または賦形剤とを含む、組成物が提供される。
【0332】
本発明に従うキメラ抗体またはヒト化抗体に加えて、組成物中で好適に使用され得る他の化合物は、治療薬標的（３６～３９頁）、アルカンスルホン酸及びアルカノール硫酸（３９～５１頁）、コリンエステラーゼ阻害剤（５１～５６頁）、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（５６～５８頁）、エストロゲン（５８～５９頁）、非ステロイド性抗炎症薬（６０～６１頁）、酸化防止剤（６１～６２頁）、ペルオキシソーム増殖因子－活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニスト（６３～６７頁）、コレステロール低下剤（６８～７５頁）；アミロイド阻害剤（７５～７７頁）、アミロイド形成阻害剤（７７～７８頁）、金属キレート剤（７８～７９頁）、抗精神病剤及び抗鬱剤（８０～８２頁）、栄養補助剤（８３～８９頁）及び脳内で生物活性物質の利用能を増加させる化合物（８９～９３頁を参照されたい）ならびにプロドラッグ（９３及び９４頁）を含む、例えば、ＷＯ２００４／０５８２５８（特に１６及び１７頁を参照されたい）に開示されるものであり、この文書は、特に上記に示される頁に言及される化合物が、参照により本明細書に組み込まれる。
【0333】
上記に述べられるそのような併用療法は、組み合わせ投与（２つ以上の治療剤が同一または別個の製剤中に含まれる）及び別個の投与を包含し、別個の投与の場合、本発明の抗体の投与は、追加の治療剤（複数可）の投与の前、それと同時、及び／またはその後に生じ得る。いくつかの実施形態において、抗Ｔａｕ抗体の投与及び追加の治療剤の投与は、互いの約１ヶ月以内、または約１週間、２週間もしくは３週間以内、または約１、２、３、４、５、もしくは６日以内に生じる。
【0334】
本発明の抗体（及び任意の追加の治療剤）は、非経口投与、肺内投与、及び鼻腔内投与、ならびに局所治療で所望される場合、病変内投与を含む、任意の好適な手段によって投与することができる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与を含む。投薬は、任意の好適な経路によるもの、例えば、一部には、投与が短時間であるか、または慢性的であるかによって、静脈内注射または皮下注射などの注射によるものであり得る。単回投与または様々な時点にわたる複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むが、これらに限定されない、様々な投薬スケジュールが本明細書で企図される。
【0335】
本発明の抗体は、良好な医療行為と一貫する様式で、製剤化され、投薬され、かつ投与されるだろう。この文脈において考慮する要因としては、治療されている特定の障害、治療されている特定の哺乳動物、個々の患者の臨床病態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与のスケジューリング、及び医師に既知である他の要因が挙げられる。抗体は必然的にではなく任意で、問題の障害を予防または治療するために現在使用される１つ以上の薬剤とともに製剤化される。そのような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗体の量、障害または治療の種類、及び上で考察される他の要因に依存する。これらは一般に、本明細書に記載されるものと同一投薬量及び投与経路で、または本明細書に記載される投薬量の約１～９９％で、または適切であると経験的／臨床的に決定される任意の投薬量及び任意の経路で使用される。
【0336】
疾患の予防または治療について、本発明の抗体の適切な投薬量は（単独で、または１つ以上の他の追加の治療剤と組み合わせて使用される場合）、治療される疾患の種類、抗体の種類、疾患の重症度及び経過、抗体が予防目的または治療目的で投与されるかどうか、以前の療法、患者の病歴及び抗体への応答、ならびに主治医の裁量に依存するだろう。抗体は、１回で、または一連の治療にわたって患者に好適に投与される。疾患の種類及び重症度によって、例えば、１回以上の別個の投与によるものであれ、連続注入によるものであれ、約１μｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ）の抗体が、患者への投与のための初回候補投薬量であり得る。１つの典型的な１日用量は、上記に言及される要因によって、約１μｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。病態によって数日間以上にわたる反復投与について、治療は一般に、疾患症状の所望される抑制が生じるまで持続されるだろう。抗体の一例示的な投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内であるだろう。したがって、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇもしくは１０ｍｇ／ｋｇ（またはこれらの任意の組み合わせ）の１回以上の用量が、患者に投与され得る。そのような用量は、断続的に、例えば毎週または３週間毎（例えば、患者が約２～約２０回、または例えば約６回の用量の抗体を受容するように）投与されてもよい。より高い初回負荷用量、続いて１回以上のより低い用量が、投与されてもよい。しかしながら、他の投与量レジメンも有用であり得る。この療法の進行は、従来の技法及びアッセイによって容易に監視される。
【0337】
上記の製剤または治療方法のいずれも、抗Ｔａｕ抗体の代わりに、またはそれに加えて、本発明の免疫複合体を使用して実行され得ることが理解される。
【0338】
Ｈ．製造品
本発明の別の態様において、上記の障害の治療、予防及び／または診断に有用な材料を含有する製造品が提供される。製造品は、容器と、容器上のまたは容器に関連するラベルまたは添付文書とを含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、静脈注射溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、それ自体によって、または別の組成物と組み合わせて、病態の治療、予防及び／または診断に有効である組成物を保持し、無菌アクセス口を有してもよい（例えば、容器は、静脈注射溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、本発明の抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が、選定した病態を治療するために使用されることを示す。更に、製造品は、（ａ）本発明の抗体を含む組成物をその中に収容した第１の容器、及び（ｂ）更なる細胞傷害性薬剤、またはさもなければ治療剤を含む組成物をその中に収容した第２の容器を含み得る。本発明のこの実施形態の製造品は、組成物を使用して特定の病態を治療することができることを示す添付文書を更に含み得る。あるいは、または加えて、製造品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液などの薬学的に許容される緩衝液を含む、第２の（または第３の）容器を更に含み得る。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、及びシリンジを含む、商業的観点及びユーザの観点から望ましい他の材料を更に含み得る。
本発明の別の態様において、上記の障害の治療、予防及び／または診断に有用な材料を含有する製造品が提供される。製造品は、容器と、容器上のまたは容器に関連するラベルまたは添付文書とを含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、静脈注射溶液バッグなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、それ自体によって、または別の組成物と組み合わせて、病態の治療、予防及び／または診断に有効である組成物を保持し、無菌アクセス口を有してもよい（例えば、容器は、静脈注射溶液バッグまたは皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアルであり得る）。組成物中の少なくとも１つの活性薬剤は、本発明の抗体である。ラベルまたは添付文書は、組成物が、選定した病態を治療するために使用されることを示す。更に、製造品は、（ａ）本発明の抗体を含む組成物をその中に収容した第１の容器、及び（ｂ）更なる細胞傷害性薬剤、またはさもなければ治療剤を含む組成物をその中に収容した第２の容器を含み得る。本発明のこの実施形態の製造品は、組成物を使用して特定の病態を治療することができることを示す添付文書を更に含み得る。あるいは、または加えて、製造品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液及びデキストロース溶液などの薬学的に許容される緩衝液を含む、第２の（または第３の）容器を更に含み得る。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、及びシリンジを含む、商業的観点及びユーザの観点から望ましい他の材料を更に含み得る。
【0339】
上記の製造品のいずれも、抗Ｔａｕ抗体の代わりに、またはそれに加えて本発明の免疫複合体を含み得ることが理解される。
【0340】
ＩＩＩ．実施例
以下は、本発明の方法及び組成物の実施例である。上記に提供される概要を仮定して、様々な他の実施形態が実践され得ることが理解される。
以下は、本発明の方法及び組成物の実施例である。上記に提供される概要を仮定して、様々な他の実施形態が実践され得ることが理解される。
【0341】
実施例１：免疫化のためのＴａｕの生成
モノマー組み換えＴａｕの生成
組み換えヒトＴａｕ構築物、２Ｎ４Ｒアイソフォーム（アミノ酸２－４４１）をＮ末端Ｈｉｓタグに融合させて、精製及び特性評価を容易にした。例えば、図１５を参照されたい。融合構築物をｐＥＴ５２ｂベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現させた。細胞を採取し、７Ｍの塩化グアニジウムを使用して、４℃で撹拌しながら、変性条件下で一晩溶解させた。細胞細片を４０，０００ｒｐｍで１時間ペレット化した。組み換えＨｉｓタグタンパク質を、ニッケル親和性クロマトグラフィー（Ｎｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ優良親和性樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって、その後、サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって変性条件下で単離した。回収されたタンパク質を、２０ｍＭのＭＥＳ、５０ｍＭのＮａＣｌ、及び１ｍＭのＴＣＥＰ（ｐＨ６．８）へと透析することによって、塩化グアニジウムを除去した。その後、ＴＥＶプロテアーゼを使用してＨｉｓタグを除去し、その後、カチオン交換クロマトグラフィー（Ｍｏｎｏ Ｓカラム、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して最終精製して、切断されたＨｉｓタグを除去した。精製緩衝液は、エンドトキシンを除去するための０．１体積％のＴｒｉｔｏｎ ｘ－１１４（ｖ／ｖ）を含有した。精製されたタンパク質を、１ｍＭのＴＣＥＰを有するＰＢＳへと交換した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びＳＥＣ－ＭＡＬＬＳによって、純度及びモノマー状態を分析した。質量分析法によって、同一性を確認した。２８０ｎｍのＵＶ吸収によって、タンパク質濃度を決定した。最終産生物は、動態学的リムルスアメボサイトライセート（ＬＡＬ）アッセイによって決定される、エンドトキシンを含まなかった（＜０．５ＥＵ／ｍｇ）。
モノマー組み換えＴａｕの生成
組み換えヒトＴａｕ構築物、２Ｎ４Ｒアイソフォーム（アミノ酸２－４４１）をＮ末端Ｈｉｓタグに融合させて、精製及び特性評価を容易にした。例えば、図１５を参照されたい。融合構築物をｐＥＴ５２ｂベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現させた。細胞を採取し、７Ｍの塩化グアニジウムを使用して、４℃で撹拌しながら、変性条件下で一晩溶解させた。細胞細片を４０，０００ｒｐｍで１時間ペレット化した。組み換えＨｉｓタグタンパク質を、ニッケル親和性クロマトグラフィー（Ｎｉ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ優良親和性樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって、その後、サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００樹脂、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）によって変性条件下で単離した。回収されたタンパク質を、２０ｍＭのＭＥＳ、５０ｍＭのＮａＣｌ、及び１ｍＭのＴＣＥＰ（ｐＨ６．８）へと透析することによって、塩化グアニジウムを除去した。その後、ＴＥＶプロテアーゼを使用してＨｉｓタグを除去し、その後、カチオン交換クロマトグラフィー（Ｍｏｎｏ Ｓカラム、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して最終精製して、切断されたＨｉｓタグを除去した。精製緩衝液は、エンドトキシンを除去するための０．１体積％のＴｒｉｔｏｎ ｘ－１１４（ｖ／ｖ）を含有した。精製されたタンパク質を、１ｍＭのＴＣＥＰを有するＰＢＳへと交換した。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及びＳＥＣ－ＭＡＬＬＳによって、純度及びモノマー状態を分析した。質量分析法によって、同一性を確認した。２８０ｎｍのＵＶ吸収によって、タンパク質濃度を決定した。最終産生物は、動態学的リムルスアメボサイトライセート（ＬＡＬ）アッセイによって決定される、エンドトキシンを含まなかった（＜０．５ＥＵ／ｍｇ）。
【0342】
リン酸化Ｔａｕの生成
上記の方法を使用して調製したＴａｕ２－４４１構築物を使用して、リン酸化Ｔａｕを生成した。他の残基の中でも特に、セリン４０９をリン酸化する、０．５μＭのＰＫＡキナーゼ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、タンパク質構築物をリン酸化した。反応混合物を、１ｍＭのＡＴＰ、５ｍＭのＭｇＣｌ２とともに室温で７２時間インキュベートした。質量分析法によって、リン酸化を確認した。サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、キナーゼを除去した。上記のように、リン酸化タンパク質調製物の純度、モノマー状態、及びエンドトキシンレベルを実質的に分析した。
上記の方法を使用して調製したＴａｕ２－４４１構築物を使用して、リン酸化Ｔａｕを生成した。他の残基の中でも特に、セリン４０９をリン酸化する、０．５μＭのＰＫＡキナーゼ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、タンパク質構築物をリン酸化した。反応混合物を、１ｍＭのＡＴＰ、５ｍＭのＭｇＣｌ２とともに室温で７２時間インキュベートした。質量分析法によって、リン酸化を確認した。サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ７５、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、キナーゼを除去した。上記のように、リン酸化タンパク質調製物の純度、モノマー状態、及びエンドトキシンレベルを実質的に分析した。
【0343】
モノマーＴａｕのインビトロオリゴマー化
モノマーＴａｕ２－４４１構築物を使用して、オリゴマーＴａｕを生成した。まず、モノマータンパク質を、２０ｍＭのＮ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、２５ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ７．４）へと交換し、その後、タンパク質と等モル濃度で、７５μＭのアラキドン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）及び１８ｋＤａのヘパリン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、３７℃で３日間オリゴマー化した。チオフラビンＴ蛍光アッセイ、動的光散乱法（ＤＬＳ）、及び分析的サイズ排除クロマトグラフィーによって、オリゴマー化を確認した。場合によっては、オリゴマーＴａｕは、「オリゴＴａｕ」とも呼ばれる。
モノマーＴａｕ２－４４１構築物を使用して、オリゴマーＴａｕを生成した。まず、モノマータンパク質を、２０ｍＭのＮ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、２５ｍＭのＮａＣｌ（ｐＨ７．４）へと交換し、その後、タンパク質と等モル濃度で、７５μＭのアラキドン酸（Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）及び１８ｋＤａのヘパリン（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して、３７℃で３日間オリゴマー化した。チオフラビンＴ蛍光アッセイ、動的光散乱法（ＤＬＳ）、及び分析的サイズ排除クロマトグラフィーによって、オリゴマー化を確認した。場合によっては、オリゴマーＴａｕは、「オリゴＴａｕ」とも呼ばれる。
【0344】
実施例２：抗Ｔａｕ抗体の生成
方法
ハイブリドーマの生成
生後９週間のメスＣ５７ＢＬ／６ＪＯｌａＨｓｄ（Ｃ５７ＢＬ／６）及びＢＡＬＢ／ｃ ＯｌａＨｓｄ（Ｂａｌｂ／ｃ）野生型マウス（Ｈａｒｌａｎ，ＵＳＡ）を受容した。生後６及び９週間のＴａｕノックアウトマウス（Ｂ６．１２９－Ｍａｐｔｔｍ１Ｈｎｄ／Ｊ、Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＵＳＡ）を受容した。生後１２～１５週間でワクチン接種を開始した。マウスに、オリゴマー化ヒトＴａｕをワクチン接種した。ワクチン接種前に、オリゴＴａｕを、本研究において使用される２つのアジュバント（５０体積％のＲｉｂｉ Ａｄｊｕｖａｎｔ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｉｂｉ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、またはＣｐＧ一本鎖合成ＤＮＡオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ、Ｍｉｃｒｏｓｙｎｔｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）と水酸化アルミニウム（Ａｌ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）との組み合わせ）のうちの一方と混合した。Ｒｉｂｉは、スクアレン油中にモノホスホリルリピドＡ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａから単離）及び合成トレハロースジコリノミコラート（Ｔｕｂｅｒｃｌｅ ｂａｃｉｌｌｕｓのコードファクターから単離）と、０．２％のＴｗｅｅｎ－８０と、水とを含有する、２％のスクアレン水中油エマルジョンである。
方法
ハイブリドーマの生成
生後９週間のメスＣ５７ＢＬ／６ＪＯｌａＨｓｄ（Ｃ５７ＢＬ／６）及びＢＡＬＢ／ｃ ＯｌａＨｓｄ（Ｂａｌｂ／ｃ）野生型マウス（Ｈａｒｌａｎ，ＵＳＡ）を受容した。生後６及び９週間のＴａｕノックアウトマウス（Ｂ６．１２９－Ｍａｐｔｔｍ１Ｈｎｄ／Ｊ、Ｔｈｅ Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＵＳＡ）を受容した。生後１２～１５週間でワクチン接種を開始した。マウスに、オリゴマー化ヒトＴａｕをワクチン接種した。ワクチン接種前に、オリゴＴａｕを、本研究において使用される２つのアジュバント（５０体積％のＲｉｂｉ Ａｄｊｕｖａｎｔ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｉｂｉ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、またはＣｐＧ一本鎖合成ＤＮＡオリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ、Ｍｉｃｒｏｓｙｎｔｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）と水酸化アルミニウム（Ａｌ、Ｂｒｅｎｎｔａｇ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）との組み合わせ）のうちの一方と混合した。Ｒｉｂｉは、スクアレン油中にモノホスホリルリピドＡ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａから単離）及び合成トレハロースジコリノミコラート（Ｔｕｂｅｒｃｌｅ ｂａｃｉｌｌｕｓのコードファクターから単離）と、０．２％のＴｗｅｅｎ－８０と、水とを含有する、２％のスクアレン水中油エマルジョンである。
【0345】
腹腔内（ｉ．ｐ．）及び踵関節投与の組み合わせを受容したＤ及びＧ群を除いて、マウスを皮下注射（ｓ．ｃ．）によってワクチン接種した。Ｄ群のマウスには、５０μｇのオリゴＴａｕを腹腔内、及び１０μｇのオリゴＴａｕを踵関節注射として投与した。Ｇ群のマウスには、８μｇのオリゴＴａｕを腹腔内、及び２μｇのオリゴＴａｕを踵関節注射として投与した。表２を参照されたい。
ＣｐＧ及びＡｌ（ＣｐＧ／Ａｌ）をアジュバントとして含有するワクチン接種について、２００μＬの各注射は、６０μｇ（３０ｎｍｏｌ）のＣｐＧ、１ｍｇのＡｌ、及び５０μｇのオリゴＴａｕを含有した。全ての研究群について、マウスは、０、１４、３５、及び５６日目に注射した。骨髄腫融合に使用したマウス（Ｎａｎｏｔｏｏｌｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）には、アジュバントを有しない、１日３回のオリゴＴａｕのブースター注射（１回の腹腔内注射当たり５０μｇ）を追加でワクチン接種した。
表２。マウス及びワクチン接種プロトコル
ＣｐＧ及びＡｌ（ＣｐＧ／Ａｌ）をアジュバントとして含有するワクチン接種について、２００μＬの各注射は、６０μｇ（３０ｎｍｏｌ）のＣｐＧ、１ｍｇのＡｌ、及び５０μｇのオリゴＴａｕを含有した。全ての研究群について、マウスは、０、１４、３５、及び５６日目に注射した。骨髄腫融合に使用したマウス（Ｎａｎｏｔｏｏｌｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）には、アジュバントを有しない、１日３回のオリゴＴａｕのブースター注射（１回の腹腔内注射当たり５０μｇ）を追加でワクチン接種した。
表２。マウス及びワクチン接種プロトコル
【0346】
３回のブースター注射の最終注射の１日後に、マウスを失血させて屠殺し、脾細胞を骨髄腫細胞と融合させて、抗体産生ハイブリドーマを生成した。
【0347】
サブクローニングのためのハイブリドーマの選択
融合について、合計１０回の融合（１つの群は２回の融合、第２の群は４回の融合、及び第３の群は４回の融合）のためにマウスを３つの群に分け、２９９個のハイブリドーマを生成した。血清含有選択培地を使用して、生存可能なハイブリドーマを成長させ、その後、以下に記載される完全長ヒトＴａｕ及びオリゴＴａｕ結合のためのＥＬＩＳＡアッセイを使用して、最良のハイブリドーマをサブクローニングのために選択した。限界希釈の後、最終ハイブリドーマを無血清培地中で成長させ、抗体スクリーニング及び選択のために、安定したコロニーから培地を収集した。
融合について、合計１０回の融合（１つの群は２回の融合、第２の群は４回の融合、及び第３の群は４回の融合）のためにマウスを３つの群に分け、２９９個のハイブリドーマを生成した。血清含有選択培地を使用して、生存可能なハイブリドーマを成長させ、その後、以下に記載される完全長ヒトＴａｕ及びオリゴＴａｕ結合のためのＥＬＩＳＡアッセイを使用して、最良のハイブリドーマをサブクローニングのために選択した。限界希釈の後、最終ハイブリドーマを無血清培地中で成長させ、抗体スクリーニング及び選択のために、安定したコロニーから培地を収集した。
【0348】
ＥＬＩＳＡスクリーニングアッセイ
安定したハイブリドーマから無血清上清を採取した。その後、目的とされる抗体を含有する上清をＥＬＩＳＡアッセイによってスクリーニングして、抗体特性を特性評価し、更なる発達のために抗体を選択した。ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、以下、完全長ヒトＴａｕ（ｆｌＴａｕ、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）への結合、高リン酸化ｆｌＴａｕ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，ＵＳＡ）への結合、ｆｌＴａｕのオリゴマー対モノマー調製物への結合、及び特定の抗体Ｔａｕエピトープ（複数可）への結合を決定した。簡潔には、９６ウェルのＭａｘｉＳｏｒｐ ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を、表３に示される標的のうちの１つでコーティングした。
表３。ＥＬＩＳＡスクリーニングアッセイに使用した標的。
安定したハイブリドーマから無血清上清を採取した。その後、目的とされる抗体を含有する上清をＥＬＩＳＡアッセイによってスクリーニングして、抗体特性を特性評価し、更なる発達のために抗体を選択した。ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、以下、完全長ヒトＴａｕ（ｆｌＴａｕ、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）への結合、高リン酸化ｆｌＴａｕ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，ＵＳＡ）への結合、ｆｌＴａｕのオリゴマー対モノマー調製物への結合、及び特定の抗体Ｔａｕエピトープ（複数可）への結合を決定した。簡潔には、９６ウェルのＭａｘｉＳｏｒｐ ＥＬＩＳＡプレート（Ｎｕｎｃ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を、表３に示される標的のうちの１つでコーティングした。
表３。ＥＬＩＳＡスクリーニングアッセイに使用した標的。
【0349】
コーティングを、４℃のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中で一晩行った。プレートを０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳで徹底的に洗浄し、その後、３７℃で、０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ中１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）で１時間遮断した。その後、ハイブリドーマ上清中に含有された抗体を示された希釈度で添加し、３７℃で２時間インキュベートしてから、プレートを既に記載したように洗浄した。
【0350】
直接ＥＬＩＳＡのために、ＡＰ複合体化抗マウスＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を、０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ中、１／６０００の希釈度で、３７℃で２時間添加した。最終洗浄の後、プレートをｐ－ニトロフェニルリン酸二ナトリウム六水和物（ｐＮＰＰ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）ホスファターゼ基質溶液とともにインキュベートし、ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して４０５ｎｍで読み取った。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）として表す。
【0351】
オリゴＴａｕ及びモノＴａｕ捕捉ＥＬＩＳＡのために、無血清無菌ハイブリドーマ上清中に含有される抗体を、５００倍の希釈度で抗ＩｇＧコーティングしたプレート上で固定化し、その後、オリゴＴａｕまたはモノＴａｕを、ともにＡＶＩタグによる部位特異的ビオチン標識とともにインキュベートした。標的インキュベーションを５μｇ／ｍＬで開始し、その後、８倍または１６倍に希釈した。プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）のシグナル定量化のために、ストレプトアビジン－ＨＲＰ及びＡＢＴＳ基質を使用した。結果をＯ．Ｄ．として表す。
【0352】
親和性推定
無血清ハイブリドーマ上清中の非精製抗体の親和性を、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ－１００機器（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、表面プラズモン共鳴によって推定した。抗体を抗ＩｇＧバイオセンサチップ上に固定化し、ｆｌＴａｕ（ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）を標的分析物として使用した。１：１のラングミュアフィットモデルを使用して、動態分析を行った。
無血清ハイブリドーマ上清中の非精製抗体の親和性を、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ－１００機器（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、表面プラズモン共鳴によって推定した。抗体を抗ＩｇＧバイオセンサチップ上に固定化し、ｆｌＴａｕ（ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ，Ｃａｎａｄａ）を標的分析物として使用した。１：１のラングミュアフィットモデルを使用して、動態分析を行った。
【0353】
ＳＤＳ－ＰＡＧＥアッセイ及びウェスタンブロットアッセイ
ヒトの脳内での、選択したｐａｎＴａｕ抗体のＴａｕへの結合を、３人のＡＤドナー及び２人の同年齢の非ＡＤ対照ドナーに由来する脳ライセート（Ｔｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、ウェスタンブロット（ＷＢ）で試験した。ライセートを処理して、無洗剤可溶性Ｔａｕ画分を得た。処理したライセートを４～１２％のビス－トリスゲル（Ｎｏｖｅｘ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に充填し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ ＰＶＤＦ膜上に移し、それとともに試験される抗体及びＩＲＤｙｅ８００ＣＷヤギ抗マウス二次抗体（Ｌｉ－Ｃｏｒ，ＵＳＡ）でブロットした。
ヒトの脳内での、選択したｐａｎＴａｕ抗体のＴａｕへの結合を、３人のＡＤドナー及び２人の同年齢の非ＡＤ対照ドナーに由来する脳ライセート（Ｔｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）を使用して、ウェスタンブロット（ＷＢ）で試験した。ライセートを処理して、無洗剤可溶性Ｔａｕ画分を得た。処理したライセートを４～１２％のビス－トリスゲル（Ｎｏｖｅｘ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に充填し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ ＰＶＤＦ膜上に移し、それとともに試験される抗体及びＩＲＤｙｅ８００ＣＷヤギ抗マウス二次抗体（Ｌｉ－Ｃｏｒ，ＵＳＡ）でブロットした。
【0354】
ヒト脳ライセートを使用するＥＬＩＳＡアッセイ
ＡＤ及び対照脳ライセート中での、選択された抗体の非変性ヒトＴａｕへの結合を評価するために、ハイブリドーマ上清に由来する抗体、または陰性及び陽性対照抗体を、上記の９６ウェルプレート上で固定化した。その後、ＡＤ対象または同年齢対照対象に由来する可溶性ヒト脳ライセート（４００μｇ／ｍＬのタンパク質、全てＴｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍに由来）中のＴａｕを捕捉し、ポリクローナルウサギｐａｎＴａｕ抗体（ＡｂＣａｍ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）、その後、Ｆｃ－γ断片特異的抗ウサギＩｇＧ－ＡＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，ＵＳＡ）を使用して、検出を実行した。Ｔａｕノックアウトマウスに由来する脳ライセートを、陰性試料対照として使用した。プレートをｐＮＰＰ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）ホスファターゼ基質溶液とともにインキュベートし、ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して４０５ｎｍで読み取った。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）として表す。
ＡＤ及び対照脳ライセート中での、選択された抗体の非変性ヒトＴａｕへの結合を評価するために、ハイブリドーマ上清に由来する抗体、または陰性及び陽性対照抗体を、上記の９６ウェルプレート上で固定化した。その後、ＡＤ対象または同年齢対照対象に由来する可溶性ヒト脳ライセート（４００μｇ／ｍＬのタンパク質、全てＴｉｓｓｕｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍに由来）中のＴａｕを捕捉し、ポリクローナルウサギｐａｎＴａｕ抗体（ＡｂＣａｍ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）、その後、Ｆｃ－γ断片特異的抗ウサギＩｇＧ－ＡＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ，ＵＳＡ）を使用して、検出を実行した。Ｔａｕノックアウトマウスに由来する脳ライセートを、陰性試料対照として使用した。プレートをｐＮＰＰ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）ホスファターゼ基質溶液とともにインキュベートし、ＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｔｅｃａｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用して４０５ｎｍで読み取った。結果を光学濃度（Ｏ．Ｄ．）として表す。
【0355】
抗体ハイブリドーマの配列決定
可変領域遺伝子配列決定のために、ハイブリドーマ細胞ライセートをＡｎｔｉｔｏｐｅ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）に供給した。簡潔には、ＩｇＧ可変重鎖（ＶＨ）、ＩｇＭ ＶＨ、Ｉｇカッパ可変軽鎖（ＫＶＬ）及びＩｇ λ ＶＬのそれぞれの定常領域プライマーとともに、マウスシグナル配列の縮重プライマープールを使用して、ＲＴ－ＰＣＲを実行した。ＩｇＭまたはＩｇＧ特異的定常領域プライマーのいずれかとともに、ＶＨシグナル配列に特異的な６つの縮重プライマープール（ＨＡ～ＨＦ）の組を使用して、重鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。κまたはλ定常領域プライマーのいずれかとともに、８つのシグナル配列特異的縮重プライマープール（７つはκクラスター（ＫＡ～ＫＧ）のもの、１つはλクラスター（ＬＡ）のもの）の組を使用して、軽鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。成功した増幅から得られたＰＣＲ産生物を精製し、『ＴＡ』クローニングベクター（ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ、Ｐｒｏｍｅｇａ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉへと形質転換し、個体コロニーを配列決定した。抗体ＶＨ及びＶＬ領域のヌクレオチド及びアミノ酸配列を、２７個の抗体ハイブリドーマの配列によって決定した。
可変領域遺伝子配列決定のために、ハイブリドーマ細胞ライセートをＡｎｔｉｔｏｐｅ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）に供給した。簡潔には、ＩｇＧ可変重鎖（ＶＨ）、ＩｇＭ ＶＨ、Ｉｇカッパ可変軽鎖（ＫＶＬ）及びＩｇ λ ＶＬのそれぞれの定常領域プライマーとともに、マウスシグナル配列の縮重プライマープールを使用して、ＲＴ－ＰＣＲを実行した。ＩｇＭまたはＩｇＧ特異的定常領域プライマーのいずれかとともに、ＶＨシグナル配列に特異的な６つの縮重プライマープール（ＨＡ～ＨＦ）の組を使用して、重鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。κまたはλ定常領域プライマーのいずれかとともに、８つのシグナル配列特異的縮重プライマープール（７つはκクラスター（ＫＡ～ＫＧ）のもの、１つはλクラスター（ＬＡ）のもの）の組を使用して、軽鎖Ｖ領域ｍＲＮＡを増幅した。成功した増幅から得られたＰＣＲ産生物を精製し、『ＴＡ』クローニングベクター（ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ、Ｐｒｏｍｅｇａ）へとクローニングし、Ｅ．ｃｏｌｉへと形質転換し、個体コロニーを配列決定した。抗体ＶＨ及びＶＬ領域のヌクレオチド及びアミノ酸配列を、２７個の抗体ハイブリドーマの配列によって決定した。
【0356】
結果
サブクローニングのためのハイブリドーマの選択
３巡の融合のそれぞれから生成されたハイブリドーマ（１０の融合に由来する合計２９９個のハイブリドーマ）を、まずｆｌＴａｕへの結合についてアッセイし、選択されたハイブリドーマをｐＴａｕ及びオリゴマー化Ｔａｕへの結合について追加でアッセイした。この目的は、Ｔａｕ及び翻訳後修飾されたＴａｕ（リン酸化またはオリゴマーＴａｕなど）に同等に良好に結合する抗体を選択することであった。このために、ハイブリドーマ上でアッセイを実行して、最良のｐａｎＴａｕ特性を選択した。抗体結合領域及び特異的Ｔａｕエピトープを決定するために、まず異なるＴａｕ断片、その後、最長のヒトＴａｕアイソフォームの全４４１個のアミノ酸（ａａ）配列に及ぶ、１５アミノ酸長の重複Ｔａｕペプチドのライブラリを使用して、結合領域を決定した。異なる翻訳後修飾形態のＴａｕ、及びヒトに存在する６つ全ての異なるヒトＴａｕアイソフォームへの結合を最大化する目的で、Ｔａｕの所定の領域に結合する抗体の群を意図的に回避した。
サブクローニングのためのハイブリドーマの選択
３巡の融合のそれぞれから生成されたハイブリドーマ（１０の融合に由来する合計２９９個のハイブリドーマ）を、まずｆｌＴａｕへの結合についてアッセイし、選択されたハイブリドーマをｐＴａｕ及びオリゴマー化Ｔａｕへの結合について追加でアッセイした。この目的は、Ｔａｕ及び翻訳後修飾されたＴａｕ（リン酸化またはオリゴマーＴａｕなど）に同等に良好に結合する抗体を選択することであった。このために、ハイブリドーマ上でアッセイを実行して、最良のｐａｎＴａｕ特性を選択した。抗体結合領域及び特異的Ｔａｕエピトープを決定するために、まず異なるＴａｕ断片、その後、最長のヒトＴａｕアイソフォームの全４４１個のアミノ酸（ａａ）配列に及ぶ、１５アミノ酸長の重複Ｔａｕペプチドのライブラリを使用して、結合領域を決定した。異なる翻訳後修飾形態のＴａｕ、及びヒトに存在する６つ全ての異なるヒトＴａｕアイソフォームへの結合を最大化する目的で、Ｔａｕの所定の領域に結合する抗体の群を意図的に回避した。
【0357】
３連の融合は、１３３個のサブクローニング安定ハイブリドーマの生成をもたらし、それらを最良のｐａｎＴａｕ特性についてスクリーニングした。異なるスクリーニングアッセイの組み合わせを使用して、ｐａｎＴａｕ抗体に好ましい特性を有する抗体ハイブリドーマの数を狭めた。ｆｌＴａｕ及びｐＴａｕ結合を比較するために、９０個のハイブリドーマをアッセイし、２４個のハイブリドーマの結果を図１Ａ～Ｆに示す。最初のスクリーニングは、アルツハイマー病（ＡＤ）及び他のタウオパチーにおいて高密度のリン酸化されている残基を有することが知られるＴａｕの領域に結合する抗体の選択を回避するために、Ｔａｕ断片を使用して実行されたため、試験されたほとんどの抗体は、このＥＬＩＳＡによって決定されるものと同様の結合特性で、ｆｌＴａｕ及びｐＴａｕの両方に結合した。
【0358】
いくつかの実施形態において、ｐａｎＴａｕ抗体が、一方または他方に対する強い優先度なく、Ｔａｕのモノマー形態及びオリゴマー形態の両方に結合することが望ましい。捕捉ＥＬＩＳＡを設定して、抗体がｆｌＴａｕのモノマー形態及びオリゴマー形態の両方に結合したかどうかを決定した。捕捉モードで実行したＥＬＩＳＡは、予備オリゴマー化Ｔａｕのオリゴマー立体構造、及びモノＴａｕのモノマー状態を、標的がＥＬＩＳＡプレート上に固定化される直接ＥＬＩＳＡとして実行した場合よりも、良好に保存する。
【0359】
２つの形態のＴａｕの結合を、試験される９０個全ての抗体と直接比較することによって、各アッセイを実行した。いずれかのオリゴＴａｕへの好ましい結合を有することが知られる抗体、またはＴａｕの２つの形態を区別しない抗体を、各アッセイにおいて対照として使用した。１８個のハイブリドーマの結果を、図２Ａ～Ｅに示す。
【0360】
高密度の潜在的なｐＴａｕ残基（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及びＴｙｒ）を有する領域に結合する抗体が回避され得るため、エピトープのマッピングは、良好なｐａｎＴａｕ特性を有する抗体の選択にとって重要である。ヒトＴａｕの６つ全てのアイソフォームへの結合もまた、ｐａｎＴａｕ抗体の選択基準として使用した。最初に選択された抗体のｐａｎＴａｕエピトープを、それぞれが完全長のヒトＴａｕに及ぶ１５個のアミノ酸（ａａ）（６ａａ残基の重複及び９ａａのオフセットを有する）を有する、４９個のペプチドのライブラリを使用して、改善された精度で検証し、決定した。残基数は、ヒトＴａｕの最長のアイソフォーム（４４１ａａ）に基づく。１／１０の高い希釈度で非精製抗体を使用して、全てのペプチドに対する結合対非結合を検証した。既にＥＬＩＳＡによって選択した１１２個のハイブリドーマからの抗体のスクリーニングは、２０個の異なるＴａｕエピトープへの結合を示した（表４）。
表４：抗体のＴａｕエピトープ
表４：抗体のＴａｕエピトープ
【0361】
ｆｌＴａｕへの親和性測定のために、Ｂｉａｃｏｒｅ機器上でＳＰＲを使用して４６個の抗体を測定し、ＫＤを決定した。抗ＩｇＧチップ上に抗体を固定化し、ｆｌＴａｕを標的分析物として使用することによって、Ｂｉａｃｏｒｅ親和性測定を行った。３２個の抗体の結果を表５に示し、抗体はｆｌＴａｕへの親和性に基づいて順位付けした。ｆｌＴａｕへの親和性について測定された抗体のうち、２２個の抗体が２０ｎＭよりも良好な親和性を有し、そのうち１４個の抗体が５ｎＭ未満のＫＤを有し、抗体３７Ｄ３－Ｈ９が１ｎＭのＫＤ（親和性）を有した。
表５：ｆｌＴａｕへの親和性
表５：ｆｌＴａｕへの親和性
【0362】
６つ全てのヒトＴａｕのアイソフォームへの、選択された抗体の結合を検証するために、ＳＤＳ－ＰＡＧＥに６つ全てのアイソフォームを含有する組み換えＴａｕラダーを泳動させ、３つの選択されたＴａｕ抗体を使用してウェスタンブロット（ＷＢ）を行った。３つ全てのｐａｎＴａｕ抗体が、６つ全てのＴａｕアイソフォームに結合する（図３）。更に、３人のＡＤ及び２人の同年齢対照に由来する脳ホモジネートを、比較のために同時に泳動させた。予想通り、マッピングされたエピトープに基づいて、このアッセイにおいて試験された３つ全ての抗体が、６つ全てのＴａｕアイソフォームへの結合を示した。ヒトＡＤドナーと対照ドナーとの間の帯域パターンにおいて観察される差は、ＡＤ対象において存在することが予想される、より大きなリン酸化及び／またはＳＤＳ安定凝集を表し得る。
【0363】
ヒトアルツハイマー病（ＡＤ）試料及び対照試料を、非変性ＥＬＩＳＡ捕捉アッセイにおいて更に泳動させて、ヒト脳内におけるＴａｕへの結合を検証した。２人のＡＤ対象及び２人の非ＡＤ同年齢対照対象に由来する、可溶性Ｔａｕについて処理した試料ライセートを、８つの希釈度で泳動させ、３つの抗体を試験した（図４Ａ～Ｃ）。
【0364】
２７個のハイブリドーマ（Ａｎｔｉｔｏｐｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）について、抗体可変鎖配列を決定した。特定の重鎖及び軽鎖可変ドメインならびに超可変領域（ＨＶＲ）のタンパク質配列を、配列表に示す。
【0365】
実施例３：特性評価抗Ｔａｕ抗体
遺伝子合成、及び結果として生じるＤＮＡの、マウスＩｇＧ２ａ（重鎖）及びマウスカッパ（軽鎖）哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、抗体重鎖及び軽鎖を構築した。重鎖及び軽鎖プラスミドの一過性同時トランスフェクションによって、抗体をＣＨＯ細胞及び２９３Ｔ細胞中で発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で精製した。マウスＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用するＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００表面プラズモン共鳴機器上で、精製された組み換え抗体を、Ｔａｕモノマータンパク質への結合についてスクリーニングした。１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中に希釈したｍＩｇＧ２ａ形式の抗体を、１０μｌ／分の流量を使用して、１μｇ／ｍｌの濃度で３０もしくは４５秒間（抗体２６Ｃ１、９４Ｂ２－Ｃ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２、１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１、１２５Ｂ１１－Ｈ３、１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１）、または０．１μｇ／ｍｌの濃度で７０もしくは１５０秒間（抗体１９Ｈ６－Ｆ７、３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１及び３７Ｄ３－Ｈ９）捕捉した。３０μｌ／分の流量と、抗体２６Ｃ１及び９４Ｂ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０及び５００ｎＭ、抗体５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１及び５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０、５００及び１０００ｎＭ、抗体１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１及び１２５Ｂ１１－Ｈ３では６、１９、５６、５６、１６７及び５００ｎＭ、抗体１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１では５、１６、４９、１４８、１４８、４４４、１３３３及び４０００ｎＭ、１９Ｈ６－Ｆ７では０．４、１．６、６．３、２．５、１００及び４００ｎＭ、ならびに３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１及び３７Ｄ３－Ｈ９では０．２、０．８、４、４、２０及び１００ｎＭの濃度を使用して、ＨＢＳＰ中のＴａｕモノマーの結合を２５℃で監視した。会合及び解離時間を、それぞれ１８０～４８０秒間及び３００～６００秒間監視した。高い親和性（表６）及びＣＤＲ中のＮＸＳ／Ｔグリコシル化モチーフの不在のため、抗体３７Ｄ３－Ｈ９を更なる分析のために選択した。
表６：ヒトＴａｕモノマーへのマウス抗体のＫＤ（ｎＭ）。示されるデータは、１：１の結合モデルの結果を表す。
遺伝子合成、及び結果として生じるＤＮＡの、マウスＩｇＧ２ａ（重鎖）及びマウスカッパ（軽鎖）哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、抗体重鎖及び軽鎖を構築した。重鎖及び軽鎖プラスミドの一過性同時トランスフェクションによって、抗体をＣＨＯ細胞及び２９３Ｔ細胞中で発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）で精製した。マウスＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用するＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００表面プラズモン共鳴機器上で、精製された組み換え抗体を、Ｔａｕモノマータンパク質への結合についてスクリーニングした。１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中に希釈したｍＩｇＧ２ａ形式の抗体を、１０μｌ／分の流量を使用して、１μｇ／ｍｌの濃度で３０もしくは４５秒間（抗体２６Ｃ１、９４Ｂ２－Ｃ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１、５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２、１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１、１２５Ｂ１１－Ｈ３、１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１）、または０．１μｇ／ｍｌの濃度で７０もしくは１５０秒間（抗体１９Ｈ６－Ｆ７、３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１及び３７Ｄ３－Ｈ９）捕捉した。３０μｌ／分の流量と、抗体２６Ｃ１及び９４Ｂ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０及び５００ｎＭ、抗体５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ１及び５２Ｆ６－Ｆ１１．ｖ２では１６、３１、６３、１２５、１２５、２５０、５００及び１０００ｎＭ、抗体１１Ｅ１０－Ｂ８、５５Ｅ７－Ｆ１１及び１２５Ｂ１１－Ｈ３では６、１９、５６、５６、１６７及び５００ｎＭ、抗体１２３Ｅ９－Ａ１、３０Ｇ１－Ｂ２、６６Ｆ５－Ａ１、８９Ｆ４－Ａ１、９３Ａ８－Ｄ２及び１２６Ｆ１１－Ｇ１１では５、１６、４９、１４８、１４８、４４４、１３３３及び４０００ｎＭ、１９Ｈ６－Ｆ７では０．４、１．６、６．３、２．５、１００及び４００ｎＭ、ならびに３Ａ４－Ｈ４、５４Ｃ１－Ｈ１１及び３７Ｄ３－Ｈ９では０．２、０．８、４、４、２０及び１００ｎＭの濃度を使用して、ＨＢＳＰ中のＴａｕモノマーの結合を２５℃で監視した。会合及び解離時間を、それぞれ１８０～４８０秒間及び３００～６００秒間監視した。高い親和性（表６）及びＣＤＲ中のＮＸＳ／Ｔグリコシル化モチーフの不在のため、抗体３７Ｄ３－Ｈ９を更なる分析のために選択した。
表６：ヒトＴａｕモノマーへのマウス抗体のＫＤ（ｎＭ）。示されるデータは、１：１の結合モデルの結果を表す。
【0366】
３７Ｄ３－Ｈ９は、Ｔａｕタンパク質に結合する際の結合活性を示す。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ａｍｉｎｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｋｉｔ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、ヒトモノマーＴａｕタンパク質をＢｉａｃｏｒｅ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップに共有結合的にカップリングし、約１２８ＲＵのレベルの固定化をもたらした。それぞれ３００秒間の会合期間を有する単一サイクル動態実験形式、ならびに１、２、４、８及び１６ｎＭ（ＩｇＧ）または５、１０、２０、４０及び８０ｎＭ（Ｆａｂ）の抗体濃度を使用して、Ｆａｂ形式及びＩｇＧ形式の両方における３７Ｄ３－Ｈ９の直接結合を監視した。解離を７２００秒間（Ｆａｂ）または１４４００秒間（ＩｇＧ）監視した。解離速度の値を、１：１の結合モデルをデータにフィットさせることによって計算した。計算された解離速度は、３７Ｄ３－Ｈ９ Ｆａｂでは５．０×１０－４、及び３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧでは１．１×１０－５であり、４５倍の差異であった。図５は、Ｆａｂ（左パネル）及びＩｇＧ（右パネル）の解離速度の差異を図示し、３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧが結合活性を示すことを示す。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ａｍｉｎｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｋｉｔ（ＧＥ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、ヒトモノマーＴａｕタンパク質をＢｉａｃｏｒｅ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップに共有結合的にカップリングし、約１２８ＲＵのレベルの固定化をもたらした。それぞれ３００秒間の会合期間を有する単一サイクル動態実験形式、ならびに１、２、４、８及び１６ｎＭ（ＩｇＧ）または５、１０、２０、４０及び８０ｎＭ（Ｆａｂ）の抗体濃度を使用して、Ｆａｂ形式及びＩｇＧ形式の両方における３７Ｄ３－Ｈ９の直接結合を監視した。解離を７２００秒間（Ｆａｂ）または１４４００秒間（ＩｇＧ）監視した。解離速度の値を、１：１の結合モデルをデータにフィットさせることによって計算した。計算された解離速度は、３７Ｄ３－Ｈ９ Ｆａｂでは５．０×１０－４、及び３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧでは１．１×１０－５であり、４５倍の差異であった。図５は、Ｆａｂ（左パネル）及びＩｇＧ（右パネル）の解離速度の差異を図示し、３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧが結合活性を示すことを示す。
【0367】
実施例４：抗Ｔａｕ抗体のヒト化
抗体ＣＤＲ及び選択された可変領域フレームワーク残基を、ヒト抗体コンセンサスフレームワーク上に移植することによって、抗体３７Ｄ３－Ｈ９をヒト化した（Ｄｅｎｎｉｓ，Ｍ．Ｓ．（２０１０）．ＣＤＲ ｒｅｐａｉｒ：Ａ ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，Ｓ．Ｊ．Ｓｈｉｒｅ，Ｗ．Ｇｏｍｂｏｔｚ，Ｋ．Ｂｅｃｈｔｏｌｄ－Ｐｅｔｅｒｓ ａｎｄ Ｊ．Ａｎｄｙａ，ｅｄｓ．（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．９－２８）。コンセンサスＶＨ３、Ｖκ２及びＶκ１フレームワーク上への移植を評価した。重鎖移植片は、４９位（Ｋａｂａｔ番号付け方式）のマウス残基を含んだ。Ｖκ２移植片は、フレームワーク２位及び４位のマウス残基を含んだ。Ｖκ１移植片は、フレームワーク２位、４位及び４３位のマウス残基を含んだ。遺伝子合成、及びヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４及びカッパ鎖哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、ヒト化変異形を構築した。ＣＨＯ細胞への、重鎖及び軽鎖プラスミドの同時トランスフェクションによって、抗体を発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅで精製した。ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップ及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、ヒト化変異形をヒトＴａｕモノマーへの親和性についてスクリーニングした。抗体を２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分で１５秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量で、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中の１００、３３、１１及び３．７ｎＭのヒトＴａｕモノマーの会合及び解離を、それぞれ１８０秒間及び６００秒間監視した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表７）。
表７：モノマーヒトＴａｕのヒト化変異形の親和性スクリーニング
抗体ＣＤＲ及び選択された可変領域フレームワーク残基を、ヒト抗体コンセンサスフレームワーク上に移植することによって、抗体３７Ｄ３－Ｈ９をヒト化した（Ｄｅｎｎｉｓ，Ｍ．Ｓ．（２０１０）．ＣＤＲ ｒｅｐａｉｒ：Ａ ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｈｕｍａｎｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，Ｓ．Ｊ．Ｓｈｉｒｅ，Ｗ．Ｇｏｍｂｏｔｚ，Ｋ．Ｂｅｃｈｔｏｌｄ－Ｐｅｔｅｒｓ ａｎｄ Ｊ．Ａｎｄｙａ，ｅｄｓ．（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ），ｐｐ．９－２８）。コンセンサスＶＨ３、Ｖκ２及びＶκ１フレームワーク上への移植を評価した。重鎖移植片は、４９位（Ｋａｂａｔ番号付け方式）のマウス残基を含んだ。Ｖκ２移植片は、フレームワーク２位及び４位のマウス残基を含んだ。Ｖκ１移植片は、フレームワーク２位、４位及び４３位のマウス残基を含んだ。遺伝子合成、及びヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４及びカッパ鎖哺乳動物発現ベクターへのサブクローニングによって、ヒト化変異形を構築した。ＣＨＯ細胞への、重鎖及び軽鎖プラスミドの同時トランスフェクションによって、抗体を発現させ、親和性樹脂ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅで精製した。ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップ及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、ヒト化変異形をヒトＴａｕモノマーへの親和性についてスクリーニングした。抗体を２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分で１５秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量で、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中の１００、３３、１１及び３．７ｎＭのヒトＴａｕモノマーの会合及び解離を、それぞれ１８０秒間及び６００秒間監視した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表７）。
表７：モノマーヒトＴａｕのヒト化変異形の親和性スクリーニング
【0368】
表面プラズモン共鳴によって、追加の抗体濃度及びより長い会合／解離時間で、抗体変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ６を更に特性評価した。これらの変異形を、より広い範囲のヒトＴａｕモノマー濃度（１．２、３．７、１１．１、１１．１、３３．３、１００ｎＭ）ならびに増加した会合（３００秒間）及び解離（１２００秒間）期間で分析した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表８）。
表８：表面プラズモン共鳴による、ヒトＴａｕへの、選択された変異形の結合動態の詳細な分析
表８：表面プラズモン共鳴による、ヒトＴａｕへの、選択された変異形の結合動態の詳細な分析
【0369】
ＹＴＥ（Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ）変異を、特定のＩｇＧ４抗体に組み込んだ。Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ及びＴ２５６Ｅ（ＹＴＥ）などのＦｃ受容体新生児（ＦｃＲｎ）結合ドメイン変異が、ＦｃＲｎ結合を増加させ、したがって、抗体の半減期を増加させるために説明されている。米国公開特許出願第２００３／０１９０３１１号及びＤａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：２３５１４－２３５２４（２００６）を参照されたい。
【0370】
抗体１２５Ｂ１１－Ｈ３を、ＶＨ３及びＶκ１コンセンサスフレームワーク上にヒト化した。重鎖移植片は、７８位（Ｋａｂａｔ番号付け方式）のマウス残基を含んだ。Ｖκ１移植片は、フレームワーク４３位及び８７位のマウス残基を含んだ。１１３Ｆ５－Ｆ７の軽鎖もまた、フレームワーク４３位及び８７位の追加のマウス残基を有して、Ｖκ１フレームワーク上にヒト化した。ヒト化変異形重鎖（１２５Ｂ１１）及び軽鎖（１２５Ｂ１１及び１１３Ｆ５－Ｆ７）を、複数の組み合わせで同時トランスフェクトし、上記の９６ウェル形式で精製した。その後、ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット、Ｓｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップ及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して、ヒト化変異形をヒトＴａｕモノマーへの親和性についてスクリーニングした。抗体を２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分で１５秒間捕捉した。４０μｌ／分の流量で、ＨＢＳＰ中の０、１００及び５００ｎＭのヒトＴａｕモノマーの会合及び解離を、それぞれ１８０秒間及び３００秒間監視した。結果に、１：１の結合モデルを適用した（表９）。
表９：表面プラズモン共鳴による、１２５Ｂ１１－Ｈ３及び１１３Ｆ５－Ｆ７ヒト化変異形のスクリーニング
＊Ｔａｕモノマーへの最小結合。
ＮＴ、試験せず。
表９：表面プラズモン共鳴による、１２５Ｂ１１－Ｈ３及び１１３Ｆ５－Ｆ７ヒト化変異形のスクリーニング
ＮＴ、試験せず。
【0371】
親和性スクリーニングに基づいて、高解像度動態分析のために、変異形ｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ１７（ＨＣ３＋ＬＣ１）、ｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ２６（ＨＣ４＋ＬＣ２）及びｈｕ１２５Ｂ１１．ｖ２８（ＨＣ４＋ＬＣ４）を選択した（表１０）。抗体９４Ｂ２－Ｃ１を、ＶＨ１及びＶκ２フレームワーク上にヒト化した。重鎖移植片はまた、２８、２９、６７、６９、７１、及び７３位（Ｋａｂａｔ番号付け方式）のマウス残基も含んだ。Ｖκ２移植はまた、フレームワーク２、３６、及び４６位のマウス残基も含んだ。８つの重鎖と８つの軽鎖との組み合わせを発現させ、精製し、上記の１２５Ｂ１１について記載される表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によってスクリーニングした。ＳＰＲスクリーニングの結果を、表１１に示す。変異形ｈｕ９４Ｂ２．ｖ１０５（重鎖変異形９４Ｂ２．ＨＣ１、軽鎖変異形９４Ｂ２．ＬＣ１３）を、詳細なＳＰＲ特性評価のために選択した（表１１）。
表１０：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
表１１：表面プラズモン共鳴による、９４Ｂ２ヒト化変異形のスクリーニング
＊ｎ＝３回の反復の平均。
¶ｈｕ９４Ｂ２．ｖ１０５。
§観察されたＴａｕモノマーへの最小結合。
ＮＴ、試験せず。
表１０：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
¶ｈｕ９４Ｂ２．ｖ１０５。
§観察されたＴａｕモノマーへの最小結合。
ＮＴ、試験せず。
【0372】
実施例５：ヒト化抗Ｔａｕ抗体の安定性分析
化学的不安定性の特定
抗体試料に熱応力をかけて、産生物の保存期間にわたる安定性を模倣した。試料を、２０ｍＭのアセテート緩衝液（ｐＨ５．５）またはリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）へと緩衝液交換し、１ｍｇ／ｍｌの濃度に希釈した。１ｍｌの試料に４０℃で２週間応力をかけ、２番目を対照として－７０℃で保管した。その後、トリプシンを使用して両方の試料を消化して、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）－質量分析法（ＭＳ）分析を使用して分析され得るペプチドを作製した。試料中の各ペプチドについて、ＬＣからの保持時間、ならびに高解像度精密質量及びペプチドイオン断片化情報（アミノ酸配列情報）を、ＭＳにおいて取得した。抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）を、±１０ｐｐｍのウィンドウにおけるデータ組から目的とされるペプチド（天然及び修飾ペプチドイオン）について行い、ピークを統合して、面積を決定した。（修飾ペプチドの面積）を（修飾ペプチドの面積＋天然ペプチドの面積）で除し、１００を乗ずることによって、各試料に対する修飾の相対的パーセンテージを計算した。その後、対照（ｔ＝０）試料と応力をかけた（ｔ＝２週間）試料との間のこれらの相対的パーセンテージを比較した。示されるパーセンテージは、応力をかけた（ｔ＝２週間）値から対照（ｔ＝０）値を引いたものを表す。抗体ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の脱アミド化分析は、軽鎖ＣＤＲ－１内の配列Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０（Ｋａｂａｔ番号付け）が脱アミド化を受けやすいという観察をもたらした。脱アミド化Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０の増加は、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１では１６．５％、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５では１１％であることが見出された。
化学的不安定性の特定
抗体試料に熱応力をかけて、産生物の保存期間にわたる安定性を模倣した。試料を、２０ｍＭのアセテート緩衝液（ｐＨ５．５）またはリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）へと緩衝液交換し、１ｍｇ／ｍｌの濃度に希釈した。１ｍｌの試料に４０℃で２週間応力をかけ、２番目を対照として－７０℃で保管した。その後、トリプシンを使用して両方の試料を消化して、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）－質量分析法（ＭＳ）分析を使用して分析され得るペプチドを作製した。試料中の各ペプチドについて、ＬＣからの保持時間、ならびに高解像度精密質量及びペプチドイオン断片化情報（アミノ酸配列情報）を、ＭＳにおいて取得した。抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）を、±１０ｐｐｍのウィンドウにおけるデータ組から目的とされるペプチド（天然及び修飾ペプチドイオン）について行い、ピークを統合して、面積を決定した。（修飾ペプチドの面積）を（修飾ペプチドの面積＋天然ペプチドの面積）で除し、１００を乗ずることによって、各試料に対する修飾の相対的パーセンテージを計算した。その後、対照（ｔ＝０）試料と応力をかけた（ｔ＝２週間）試料との間のこれらの相対的パーセンテージを比較した。示されるパーセンテージは、応力をかけた（ｔ＝２週間）値から対照（ｔ＝０）値を引いたものを表す。抗体ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の脱アミド化分析は、軽鎖ＣＤＲ－１内の配列Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０（Ｋａｂａｔ番号付け）が脱アミド化を受けやすいという観察をもたらした。脱アミド化Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０の増加は、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１では１６．５％、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５では１１％であることが見出された。
【0373】
抗原に結合する抗体に対する、脱アミド化の影響
ヒトＴａｕへの親和性に対する、Ｎ２８脱アミド化の影響を評価するために、広く分離されたＮ２８脱アミド化状態を有する２つの試料を得ることが望ましかった。Ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを、リン酸緩衝食塩水（ｐＨ７．４）中１ｍｇ／ｍｌの濃度で、４０℃で２週間インキュベートした。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、Ｎ２８Ｇ２９モチーフの脱アミド化を測定した。ｔ＝２週間の応力をかけた試料は、ｔ＝０の応力をかけていない試料と比較して、４３．１％の増加脱アミド化を有した。ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用する表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）によって、応力をかけた抗体及び応力をかけていない抗体を、Ｔａｕ結合について分析した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間（ｔ０試料）または１７秒間（ｔ２試料）捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び１８００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、３．１、６．３、１２．５、２５、２５、５０及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングを含む機器初期設定を使用して、１：１の結合モデルをデータにフィットさせた。図６及び表１２に示す結果は、この実験では、応力をかけた抗体が応力をかけていない抗体よりも大きなレベルで固定化したものの、（パラメータＲｍａｘの大きさによって表される）Ｔａｕ結合シグナルの大きさは著しくより低かったことを示す。捕捉レベルの差異のＲｍａｘ値を正規化した後、応力をかけた（ｔ＝２週間）試料は、応力をかけていない試料の約半分の総Ｔａｕ結合能力を示すようであった（正規化Ｒｍａｘの５６％の低減によって示される）。計算された親和性は、変化しないようであった。つまり、この分析では、ｔ＝０の試料とｔ＝２週間の試料との間のＫＤの差異は、２％未満であった（ｔ＝０及びｔ＝２週間について、ＫＤ＝０．７ｎＭ）。この結果は、有意に低減した高親和性抗体の集団を含有するｔ＝２週間の試料と一貫する。
表１２：表９：表面プラズモン共鳴による、モノマーＴａｕへの、応力をかけた及び応力をかけていないｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５試料の相対的結合
ヒトＴａｕへの親和性に対する、Ｎ２８脱アミド化の影響を評価するために、広く分離されたＮ２８脱アミド化状態を有する２つの試料を得ることが望ましかった。Ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを、リン酸緩衝食塩水（ｐＨ７．４）中１ｍｇ／ｍｌの濃度で、４０℃で２週間インキュベートした。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、Ｎ２８Ｇ２９モチーフの脱アミド化を測定した。ｔ＝２週間の応力をかけた試料は、ｔ＝０の応力をかけていない試料と比較して、４３．１％の増加脱アミド化を有した。ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＳｅｒｉｅｓ Ｓ ＣＭ５チップを使用する表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）によって、応力をかけた抗体及び応力をかけていない抗体を、Ｔａｕ結合について分析した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間（ｔ０試料）または１７秒間（ｔ２試料）捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び１８００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、３．１、６．３、１２．５、２５、２５、５０及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングを含む機器初期設定を使用して、１：１の結合モデルをデータにフィットさせた。図６及び表１２に示す結果は、この実験では、応力をかけた抗体が応力をかけていない抗体よりも大きなレベルで固定化したものの、（パラメータＲｍａｘの大きさによって表される）Ｔａｕ結合シグナルの大きさは著しくより低かったことを示す。捕捉レベルの差異のＲｍａｘ値を正規化した後、応力をかけた（ｔ＝２週間）試料は、応力をかけていない試料の約半分の総Ｔａｕ結合能力を示すようであった（正規化Ｒｍａｘの５６％の低減によって示される）。計算された親和性は、変化しないようであった。つまり、この分析では、ｔ＝０の試料とｔ＝２週間の試料との間のＫＤの差異は、２％未満であった（ｔ＝０及びｔ＝２週間について、ＫＤ＝０．７ｎＭ）。この結果は、有意に低減した高親和性抗体の集団を含有するｔ＝２週間の試料と一貫する。
表１２：表９：表面プラズモン共鳴による、モノマーＴａｕへの、応力をかけた及び応力をかけていないｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５試料の相対的結合
【0374】
抗原に結合する抗体に対する、脱アミド化の影響及び「正規化Ｒｍａｘ」の計算
アスパラギン脱アミド化が、アスパラギン酸及びイソアスパラギン酸産生物をもたらすことが予想されることを仮定して（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ Ｒ．＆Ｋｏｌｂｅ Ｈ．Ｖ．Ｊ．（１９９４）．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔ．５，６６２，ｐ２６１－２７８）、ヒトＴａｕモノマーの親和性に対する、Ｎ２８をＤ２８（変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ）で置換する影響を分析した。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で２２秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、６．３、１２．５、２５、２５、５０、１００、２００、及び４００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。１：１の結合モデルをデータにフィットさせ、動態分析を使用して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５．３（本明細書においてｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとも呼ばれる）の親和性を計算した。１：１のフィッティングに使用されるパラメータは、「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングの機器初期設定を含んだ。結果を、図７および表１３に示す。
アスパラギン脱アミド化が、アスパラギン酸及びイソアスパラギン酸産生物をもたらすことが予想されることを仮定して（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ Ｒ．＆Ｋｏｌｂｅ Ｈ．Ｖ．Ｊ．（１９９４）．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔ．５，６６２，ｐ２６１－２７８）、ヒトＴａｕモノマーの親和性に対する、Ｎ２８をＤ２８（変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ）で置換する影響を分析した。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で２２秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、６．３、１２．５、２５、２５、５０、１００、２００、及び４００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。１：１の結合モデルをデータにフィットさせ、動態分析を使用して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５．３（本明細書においてｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとも呼ばれる）の親和性を計算した。１：１のフィッティングに使用されるパラメータは、「ＲＩ」パラメータの局所フィッティングの機器初期設定を含んだ。結果を、図７および表１３に示す。
【0375】
計算されたｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ変異形のＫＤは、同一の条件下で分析したｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の１．５×１０－９Ｍ（平均、ｎ＝４の実験内決定）と比較して、１６０×１０－９Ｍであった。したがって、Ｎ２８のＤ２８への転換は、親和性の１００倍超の低減を引き起こした。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄ変異形の比較的低い親和性、及び比較的急速な動態を仮定して、本発明者らは、Ｎ２８変異形とＤ２８変異形との混合物の動態分析は、より高い親和性集団によって支配されると、及びより低い親和性の変異形の存在は、正規化Ｒｍａｘの低減によって反映される可能性があると判断した。この判断を検証するために、抗体変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８ＤのＴａｕ結合プロファイルを、等しい量でともに混合した２つの抗体のＴａｕ結合プロファイルと比較した。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５単独と比較して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５とｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとの１：１の混合物は、正規化Ｒｍａｘの４５％の低減をもたらした（表１３）。本発明者らは、熱応力時の正規化Ｒｍａｘの変化は、応力をかけた試料中での高親和性抗体の集団の低減を示す可能性があると結論付けた。したがって、本発明者らは、正規化Ｒｍａｘの変化を使用して、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９の変異形を安定性の改善についてスクリーニングすることができると判断した。
表１３：ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の熱応力時、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５と期待される脱アミド化産生物ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとの混合時に観察される正規化Ｒｍａｘの変化
＊正規化Ｒｍａｘ＝Ｒｍａｘ（ＲＵ）／リガンドレベル（ＲＵ）。基準抗体の正規化Ｒｍａｘ＝０．３３（４つの実験内決定の平均、標準偏差＜０．０１）。
表１３：ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５の熱応力時、及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５と期待される脱アミド化産生物ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ Ｎ２８Ｄとの混合時に観察される正規化Ｒｍａｘの変化
【0376】
抗体の最適化及び選択
９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形をＢｉａｃｏｒｅによって評価して、２週間、４０℃での熱応力期間のありまたはなしでの、それらの機能的安定性を比較した。変異形は、Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０Ｔ３１モチーフのほとんどの単一変異形、Ｇ２９Ａ変異を含有する二重変異、それらを水素結合残基に機能的に置換し得るＡｓｎ－２８及びＴｙｒ－３２の二重変異、ならびに元の３７Ｄ３－Ｈ９抗体中に存在する残基または対応する生殖細胞株残基変異形のいずれかとしての残基２、４、３３、及び９３の全ての可能な並べ替えを含んだ。更に、Ａｓｎ－２８残基の親和性または安定性に影響を与えない、残基１がＡｓｐまたはＧｌｕである文脈において変異を試験した。
９０個の３７Ｄ３－Ｈ９変異形をＢｉａｃｏｒｅによって評価して、２週間、４０℃での熱応力期間のありまたはなしでの、それらの機能的安定性を比較した。変異形は、Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０Ｔ３１モチーフのほとんどの単一変異形、Ｇ２９Ａ変異を含有する二重変異、それらを水素結合残基に機能的に置換し得るＡｓｎ－２８及びＴｙｒ－３２の二重変異、ならびに元の３７Ｄ３－Ｈ９抗体中に存在する残基または対応する生殖細胞株残基変異形のいずれかとしての残基２、４、３３、及び９３の全ての可能な並べ替えを含んだ。更に、Ａｓｎ－２８残基の親和性または安定性に影響を与えない、残基１がＡｓｐまたはＧｌｕである文脈において変異を試験した。
【0377】
９６ウェル形式で、Ｅｘｐｉ２９３細胞の一過性トランスフェクションによって抗体を発現させ、５００μＬのＭＣＡ９６ヘッドを有するＴｅｃａｎ ｆｒｅｅｄｏｍ ＥＶＯ２００液体ハンドリングシステム上で自動化精製を実行した。簡潔には、２０μＬのＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ樹脂（Ｇｌｙｇｅｎ Ｃｏｒｐ＆ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）でカスタム充填された先端カラムを使用して、１ｍＬの培養物中のＩｇＧを捕捉した。１×ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄した後、ＩｇＧを１６０μＬの５０ｍＭリン酸（ｐＨ３）中に溶出させ、１２μＬの２０×ＰＢＳ（ｐＨ１１）で中和した。ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ先端カラムを０．１ＭのＮａＯＨ中で取り除き、１×ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で再生させて、最大１５回連続使用した。Ｈａｍｉｌｔｏｎ Ｓｔａｒ液体ハンドリングロボットを使用して、９６ウェル形式の精製された抗体を０．１ｍｇ／ｍｌに正規化した。「応力前」試料を約４℃で維持し、「応力後」試料をＰＣＲ機械内、４０℃で２週間インキュベートした。表面プラズモン共鳴動態実験を実行することによって、「応力前」及び「応力後」抗体調製物と変異形の機能的安定性を比較した。ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＢｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器を使用して生成された、ヒト抗体捕捉ＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、抗体を評価した。１５秒間の注入時間及び１０μｌ／分の流量を使用して、２μｇ／ｍｌまで希釈した抗体を固定化した。４０μｌ／分の流量使用時、２５℃での、０ｎＭ、２６．５ｎＭ及び２６５ｎＭでのＴａｕモノマーへの結合を、１８０秒間の会合相の間、その後、３００秒間の解離相の間監視した。複数サイクル動態形式を使用して、試料を、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（ＨＢＳＰ）中に泳動させた。ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して、データを分析し、１：１の結合モデルにフィットさせた。結果として生じる親和性（ＫＤ）値を、図８Ａ～Ｄに示す。（例えば、重要な残基の脱アミド化のために）親和性が損なわれた抗体が、ＩｇＧ捕捉レベル（「リガンドレベル」）には等しく寄与するが、測定されるＴａｕ結合にはより少ない寄与をすることが予想されるという理論的根拠、及びこれが実験的に導き出されるＲｍａｘの値に反映される理論的根拠を使用して、安定性指数もまた計算した。捕捉される各抗体の量の変化を説明するために、Ｒｍａｘを（「リガンドレベル」、つまり抗体捕捉中に固定化される応答単位によって測定される）抗体捕捉レベルについて正規化した。したがって、正規化Ｒｍａｘは、「リガンドレベル」（ｈＩｇＧ捕捉ステップ中に捕捉されたＲＵを表す評価結果、単位＝ＲＵ）によって導き出される実験的Ｒｍａｘ（単位＝ＲＵ）として計算され、安定性指数は、本明細書において、正規化Ｒｍａｘ（応力後）を正規化Ｒｍａｘ（応力前）で割ったものとして計算される。
【0378】
選択された抗体を、ＣＨＯ細胞の一過性トランスフェクションによって発現させ、精製した。その後、抗体に１ｍｇ／ｍｌで２週間応力をかけ、ＤＴＴ還元によるＲＣＭトリプシンペプチドマッピング、ＩＡＡキャッピング、及びｐＨ８．２消化を使用して、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって脱アミド化分析した。結果（表１４）は、変異形ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４が、Ｎ２８Ｇ２９Ｎ３０モチーフ上、脱アミド化に対する感受性の低減を有したことを示した。残基はＡｓｎ－２８残基のすぐ近くに位置しておらず（図９）、Ｆ３３Ｌ変異がいかにＡｓｎ－２８を安定化し得るのかが明らかではないため、ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４の脱アミド化の低減は予想外であった。
表１４：脱アミド化の応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４変異形
の安定性
表１４：脱アミド化の応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４変異形
の安定性
【0379】
実施例６：ヒト化抗Ｔａｕ抗体選択及び特性評価
抗体選択及び特性評価：ヒトＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、選択された抗体の親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．２５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３ＭのＭｇＣｌの２回連続の３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた（表１５）。
表１５：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
抗体選択及び特性評価：ヒトＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、選択された抗体の親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．２５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０μｌ／分での３ＭのＭｇＣｌの２回連続の３０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた（表１５）。
表１５：選択されたヒト化抗Ｔａｕ抗体変異形の動態データ
【0380】
抗体特性評価：ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ形式のヒトＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＦＡｂ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１８０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．１）の２回連続の６０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１６に示す。
表１６：表面プラズモン共鳴による、モノマーヒトＴａｕへのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの結合動態
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＦＡｂ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、０．５μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１８０秒間捕捉した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、ＨＢＳＰ中、０、０．４、１．２、３．７、１１、１１、３３及び１００ｎＭの濃度で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。サイクル間に、１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．１）の２回連続の６０秒間の注入を使用して、表面を再生させた。データを１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１６に示す。
表１６：表面プラズモン共鳴による、モノマーヒトＴａｕへのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの結合動態
【0381】
抗体特性評価：カニクイザルＴａｕタンパク質への結合
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間捕捉した。１．２～１００ｎＭの間の最低５つの異なる非ゼロ濃度（１つの反復濃度）で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、動態を評価した。サイクル間に、１０μｌ／分の流量で、３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の再生注入を実行した。結果を１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１７に示す。
表１７：モノマーカニクイザルＴａｕのヒト化抗Ｔａｕ抗体の親和性
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＩｇＧ捕捉キット及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、親和性を２５℃で評価した。ｈＩｇＧを、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０（泳動緩衝液、ＨＢＳＰ）中、２μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１５秒間捕捉した。１．２～１００ｎＭの間の最低５つの異なる非ゼロ濃度（１つの反復濃度）で注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。３０μｌ／分の流量、３００秒間の会合相及び６００秒間の解離相を使用して、動態を評価した。サイクル間に、１０μｌ／分の流量で、３Ｍの塩化マグネシウムの３０秒間の再生注入を実行した。結果を１：１の結合モデルにフィットさせた。動態データを表１７に示す。
表１７：モノマーカニクイザルＴａｕのヒト化抗Ｔａｕ抗体の親和性
【0382】
ヒト化抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ｆ１もまた、リン酸化Ｔａｕ（ｐＴａｕ）に結合する。
【0383】
実施例７：抗Ｔａｕ抗体の薬物動態
インビボでの抗Ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ抗体の薬物動態を評価するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（意識のあるマウス）に、１０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内（ＩＶ）または腹腔内（ＩＰ）ボーラス注入を投与した。用量後最大２８日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
インビボでの抗Ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ抗体の薬物動態を評価するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウス（意識のあるマウス）に、１０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内（ＩＶ）または腹腔内（ＩＰ）ボーラス注入を投与した。用量後最大２８日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
【0384】
マウス血漿中の投薬された抗体の濃度を、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ－ビオチン複合体、及びその後、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたストレプトアビジンを添加することによって終了した。アッセイは、１．５６～２００ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．１６μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
【0385】
図１０は、抗Ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａの薬物動態分析の結果を示す。抗Ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａは、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有し、クリアランスは６．３１ｍＬ／日／ｋｇであった。
【0386】
インビボでの抗Ｔａｕ９４Ｂ２－Ｃ１ ｍＩｇＧ２ａ及び抗ｔａｕ１２５Ｂ１１－Ｈ３ ｍＩｇＧ２ａの薬物動態を評価するために、意識のあるＣ５７ＢＬ／６マウスに、１０ｍｇ／ｋｇの用量で抗体の単回腹腔内ボーラス注入を投与した。用量後最大２８日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
【0387】
マウス血漿中の投薬された抗体の濃度及びを、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、マウス抗ｍｕＩｇＧ２ａ－ビオチン複合体、及びその後、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたストレプトアビジンを添加することによって終了した。アッセイは、０．７８～１００ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０７８μｇ／ｍＬの検出限界を有した。濃度はまた、組み換えＴａｕをコートとして使用して特異的ＥＬＩＳＡでも測定し、その後、１：１０の希釈度で開始して血漿試料を添加し、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ｍＩｇＧ２ａを添加することによって終了した。アッセイは、０．０７８～１０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０００８μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
【0388】
これらの実験の結果を図１６及び１７に示す。一般的アッセイを使用して濃度を分析した場合、抗Ｔａｕ９４Ｂ２ ｍＩｇＧ２ａは、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有したが、特異的アッセイを使用して濃度を分析した場合、より低い曝露及びより速いクリアランスを有した。図１６を参照されたい。一般的アッセイによって決定されるクリアランスは４．０６ｍＬ／日／ｋｇであり、特異的アッセイによって決定されるクリアランスは７．５３ｍＬ／日／ｋｇであった。これらの結果は、抗体が、その標的を認識するその能力を損なうインビボ変化を経時的に受ける可能性があることを示唆する。抗Ｔａｕ１２５Ｂ１１－Ｈ３ ｍＩｇＧ２ａは、どのアッセイが濃度を生成したかに関わらず、野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてアイソタイプ対照抗体と同様の曝露及びクリアランスを有した。図１７を参照されたい。一般的アッセイによって決定されるクリアランスは４．９６ｍＬ／日／ｋｇであり、特異的アッセイによって決定されるクリアランスは４．９０ｍＬ／日／ｋｇである。
【0389】
表１８は、マウスにおける抗Ｔａｕ抗体３７Ｄ３－Ｈ９、９４Ｂ２－Ｃ１、及び１２５Ｂ１１－Ｈ３の薬物動態パラメータを示す。
表１８：抗Ｔａｕ抗体の薬物動態パラメータ
表１８：抗Ｔａｕ抗体の薬物動態パラメータ
【0390】
インビボでのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の薬物動態を評価するために、カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）（意識のあるサル）に、１ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内ボーラス注入を投与した。用量後最大４９日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。
【0391】
サル血漿中の投薬された抗体の濃度及びを、ヒツジ抗ヒトＩｇＧ抗体コートを使用して一般的ＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加し、検出のために西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ヒトＩｇＧを添加することによって終了した。アッセイは、０．１５６～２０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、及び０．０２μｇ／ｍＬの検出限界を有した。この検出限界未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
【0392】
図１１は、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態分析の結果を示す。図１１において、各組のデータ点は１匹の動物を表し、線は抗体及びアッセイ群内の全ての動物の平均を表す。表１９は、カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態パラメータを示す。
表１９：カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態パラメータ
表１９：カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態パラメータ
【0393】
実施例８：抗Ｔａｕ抗体の更なるエピトープ特性評価
ビオチン標識されたＴａｕモノマー及びビオチン標識されたペプチド（ＭＡＰＴ＿１０－２４）への３７Ｄ３－Ｈ９結合の比較後、追加のビオチン標識されたペプチドへの３７Ｄ３－Ｈ９の結合もまた、評価した。Ｎｕｎｃ ｍａｘｉｓｏｒｐの９６ウェルマイクロプレートを、４℃で１２時間超、５０ｍＭの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）中２μｇ／ｍｌに希釈したＮｅｕｔｒａｖｉｄｉｎでコーティングした。その後の全てのインキュベーションは、室温で実行した。コーティング後、プレートをＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で２時間遮断し、その後、ＰＢＳ、０．０５％のポリソルベート２０で徹底的に洗浄した。その後、１μｇ／ｍｌのビオチン標識されたＴａｕペプチド（表２０）またはＡｖｉタグでビオチン標識されたＴａｕモノマーにウェルを１時間暴露し、既にあるように洗浄した。標準的固相Ｆｍｏｃ化学（例えば、Ｆｍｏｃ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ；Ｃｈａｎ，Ｗ．Ｃ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｐ．Ｄ．，Ｅｄｓ．；Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２０００を参照されたい）を使用してペプチドを合成した。９０％のＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液中、５００ｎＭから５０ｐＭまで段階希釈した抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１を、ビオチン標識されたＴａｕでコーティングされたウェルに９０分間結合させた。ウェルを既にあるように洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）遮断緩衝液（それぞれ、ウサギ抗マウスＩｇＧまたはヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ））中１／１０００に希釈したペルオキシダーゼ複合体化二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で結合した抗体を検出した。２０分後、ウェルを既にあるように洗浄し、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ２－Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（ＫＰＬ）でシグナルを発生させた。１Ｍのリン酸を添加することによって反応を停止させ、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２プレートリーダーで４５０ｎＭでの吸光度を測定した。
表２０：ペプチド配列
ビオチン標識されたＴａｕモノマー及びビオチン標識されたペプチド（ＭＡＰＴ＿１０－２４）への３７Ｄ３－Ｈ９結合の比較後、追加のビオチン標識されたペプチドへの３７Ｄ３－Ｈ９の結合もまた、評価した。Ｎｕｎｃ ｍａｘｉｓｏｒｐの９６ウェルマイクロプレートを、４℃で１２時間超、５０ｍＭの炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ９．６）中２μｇ／ｍｌに希釈したＮｅｕｔｒａｖｉｄｉｎでコーティングした。その後の全てのインキュベーションは、室温で実行した。コーティング後、プレートをＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で２時間遮断し、その後、ＰＢＳ、０．０５％のポリソルベート２０で徹底的に洗浄した。その後、１μｇ／ｍｌのビオチン標識されたＴａｕペプチド（表２０）またはＡｖｉタグでビオチン標識されたＴａｕモノマーにウェルを１時間暴露し、既にあるように洗浄した。標準的固相Ｆｍｏｃ化学（例えば、Ｆｍｏｃ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ；Ｃｈａｎ，Ｗ．Ｃ．，Ｗｈｉｔｅ，Ｐ．Ｄ．，Ｅｄｓ．；Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２０００を参照されたい）を使用してペプチドを合成した。９０％のＳｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）（ＰＢＳ）遮断緩衝液中、５００ｎＭから５０ｐＭまで段階希釈した抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１を、ビオチン標識されたＴａｕでコーティングされたウェルに９０分間結合させた。ウェルを既にあるように洗浄し、Ｓｕｐｅｒｂｌｏｃｋ（商標）遮断緩衝液（それぞれ、ウサギ抗マウスＩｇＧまたはヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ））中１／１０００に希釈したペルオキシダーゼ複合体化二次抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で結合した抗体を検出した。２０分後、ウェルを既にあるように洗浄し、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ２－Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（ＫＰＬ）でシグナルを発生させた。１Ｍのリン酸を添加することによって反応を停止させ、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ２プレートリーダーで４５０ｎＭでの吸光度を測定した。
表２０：ペプチド配列
【0394】
その実験の結果を図１２に示す。図１２Ａは、示されるペプチドへの、示される抗体のそれぞれの結合を示す。その実験において、抗体３７Ｄ３－Ｈ９及び９４Ｂ２－Ｃ１はともに断片１０～２４に強い結合を示し、抗体９４Ｂ２－Ｃ１もまた断片１～１５に強い結合を示した。抗体１９Ｆ８－Ｃ１１及び１２３Ｅ９－Ａ１は断片１９～３３に強い結合を示した一方で、抗体８９Ｆ４－Ａ１は断片２８～４２及び３７～５１に強い結合を示した。図１２Ａを参照されたい。抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１はともにＴａｕ断片２～２４及び２～３４に強い結合を示し、断片１０～２４に弱い結合を示した。図１２Ｂ及び１２Ｃを参照されたい。これらの結果は、抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｍＩｇＧ２ａ及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ５ ｈＩｇＧ１が、成熟タンパク質のアミノ酸２～２４内のＴａｕのエピトープに結合することを示唆する。
【0395】
アラニンスキャニング置換実験において、変異Ｙ１８Ａ及びＬ２０Ａは、マウス抗体３７Ｄ３－Ｈ９によるＴａｕ断片（断片２－２１）への結合を抑止することが見出され、これは、抗体がこれらのＴａｕ残基に接触することを示唆した。一連の１５アミノ酸長のオフセットペプチドを使用すると、マウス抗体３７Ｄ３－Ｈ９が、断片１０－２４と同様の断片９－２３への結合を示すことが見出され、断片７－２１、８－２２、及び１１－２５への中程度の結合もまた示された。
【0396】
実施例９：３７Ｄ３－Ｈ９ヒト化抗体の細胞に基づく特性評価
方法
一次海馬及びミクログリア培養物ならびに海馬－ミクログリア共培養物
胎生期（１６～１７日）の野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスから、解離した一次海馬ニューロンを調製した。細胞を、ＰＤＬ／ラミニンでコーティングされた８ウェルのＣｈａｍｂｅｒ Ｓｌｉｄｅ（Ｂｉｏｃｏａｔ、３５４６８８Ｃｏｒｎｉｎｇ）上に２５，０００個の細胞／ウェルでプレーティングした。細胞をプレーティングし、ＮｂＡｃｔｉｖ４（ＢｒａｉｎＢｉｔｓ）中で維持し、半分の培地を１週間に２回交換した。組み換えｔａｕ及び抗体を、１８細胞分裂で培養物に適用した。
方法
一次海馬及びミクログリア培養物ならびに海馬－ミクログリア共培養物
胎生期（１６～１７日）の野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｎマウスから、解離した一次海馬ニューロンを調製した。細胞を、ＰＤＬ／ラミニンでコーティングされた８ウェルのＣｈａｍｂｅｒ Ｓｌｉｄｅ（Ｂｉｏｃｏａｔ、３５４６８８Ｃｏｒｎｉｎｇ）上に２５，０００個の細胞／ウェルでプレーティングした。細胞をプレーティングし、ＮｂＡｃｔｉｖ４（ＢｒａｉｎＢｉｔｓ）中で維持し、半分の培地を１週間に２回交換した。組み換えｔａｕ及び抗体を、１８細胞分裂で培養物に適用した。
【0397】
ミクログリア培養物について、出生後１～２日のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウスに由来する皮質及び海馬を解離させ、２２５ｍｍ２の培養フラスコ内、ＤＭＥＭ中１０％のＦＢＳ中で１０～１２日間成長させた。培養フラスコを穏やかに振盪してミクログリア解離させ、ＤＭＥＭ中１０％のＦＢＳ中の細胞を、撮像のために、３０，０００個の細胞／ウェルでＰＤＬ／ラミニンでコーティングされた８ウェルのＣｈａｍｂｅｒ Ｓｌｉｄｅ上に、またはサイトカインアッセイのために、１００，０００個の細胞／ウェルでコーティングされていない４８ウェルプレート（３５４８、Ｃｏｒｎｉｎｇ）上にのいずれかに再プレーティングした。プレーティングの４～５時間後、細胞を無血清低グルコースＤＭＥＭに交換し、一晩維持してから、組み換えｔａｕ及び抗体で処理した。
【0398】
２２５ｍｍ２の培養フラスコから解離させたミクログリアを、８ウェルのＳｌｉｄｅ Ｃｈａｍｂｅｒ（１ウェル当たり１２，５００個のミクログリア及び２５，０００個のニューロン）中、インビトロでの培養日数が１８日の一次海馬ニューロン上に再プレーティングすることによって、海馬－ミクログリア共培養物を調製した。ミクログリアプレーティングの４時間後、共培養物を組み換えｔａｕ及び抗体で処理した。
【0399】
組み換えｔａｕ及び抗体のインビトロ処理
インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物または海馬－ミクログリア共培養物について、組み換えヒトオリゴマーｔａｕ及び抗体（１：１比率で各５００ｎＭ）または対照を、３７℃で、ニューロン培養培地（インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物：新鮮なＮｂＡｃｔｉｖ４（１：１）に由来する馴化培地）中で１時間プレインキュベートしてから、それらを細胞に添加した。細胞を、培地中、ｔａｕ抗体混合物または対照とともに７２時間（海馬培養物）または４８時間（海馬－ミクログリア共培養物）インキュベートした。細胞をＰＢＳで３回洗浄してから、固定した。
インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物または海馬－ミクログリア共培養物について、組み換えヒトオリゴマーｔａｕ及び抗体（１：１比率で各５００ｎＭ）または対照を、３７℃で、ニューロン培養培地（インビトロでの培養日数が１８日の海馬培養物：新鮮なＮｂＡｃｔｉｖ４（１：１）に由来する馴化培地）中で１時間プレインキュベートしてから、それらを細胞に添加した。細胞を、培地中、ｔａｕ抗体混合物または対照とともに７２時間（海馬培養物）または４８時間（海馬－ミクログリア共培養物）インキュベートした。細胞をＰＢＳで３回洗浄してから、固定した。
【0400】
ミクログリア培養物について、組み換えヒトオリゴマーｔａｕ及び抗体または対照を、血清の不在下、３７℃で、低グルコースＤＭＥＭ中、各１２５ｎＭ（免疫細胞化学／撮像法）または各２５０ｎＭ（サイトカインアッセイ）で１時間プレインキュベートしてから、細胞に添加した。免疫細胞化学／撮像法について、細胞をｔａｕ抗体混合物または対照とともに１０分間インキュベートし、ＰＢＳで３回洗浄してから、固定した。サイトカインアッセイについて、細胞をｔａｕ抗体混合物または対照とともに２４時間インキュベートし、各ウェルの培地をサイトカインアッセイのために収集した。
【0401】
免疫細胞化学、撮像法、及び定量化
細胞をＰＢＳ中４％のパラホルムアルデヒドで１５分間固定、ＰＢＳ中０．１％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００で１０分間透過処理した。遮断に１０％のロバ血清を使用し、細胞を、４℃、ＰＢＳ中で一次抗体とともに一晩インキュベートし、その後、ロバにおいて発達される適切な種（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に対して、Ａｌｅｘａ－フルオロフォアで標識された二次抗体とともにインキュベートした。使用した一次抗体は、抗ｔａｕ（ＤＡＫＯ）（アミノ酸１１－２４に及ぶヒトＴａｕ Ｎ末端領域に対して発達した、ウサギ抗ヒトＴａｕ）、抗ＭＡＰ２（ａｂ５３９２、Ａｂｃａｍ）、及び抗Ｉｂａ－１（ａｂ５０７６、Ａｂｃａｍ）であった。スライドをＰｒｏｌｏｎｇ Ｇｏｌｄ ＤＡＰＩ（Ｐ３６９３５、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び１番カバースリップとともにマウントした。
細胞をＰＢＳ中４％のパラホルムアルデヒドで１５分間固定、ＰＢＳ中０．１％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００で１０分間透過処理した。遮断に１０％のロバ血清を使用し、細胞を、４℃、ＰＢＳ中で一次抗体とともに一晩インキュベートし、その後、ロバにおいて発達される適切な種（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に対して、Ａｌｅｘａ－フルオロフォアで標識された二次抗体とともにインキュベートした。使用した一次抗体は、抗ｔａｕ（ＤＡＫＯ）（アミノ酸１１－２４に及ぶヒトＴａｕ Ｎ末端領域に対して発達した、ウサギ抗ヒトＴａｕ）、抗ＭＡＰ２（ａｂ５３９２、Ａｂｃａｍ）、及び抗Ｉｂａ－１（ａｂ５０７６、Ａｂｃａｍ）であった。スライドをＰｒｏｌｏｎｇ Ｇｏｌｄ ＤＡＰＩ（Ｐ３６９３５、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び１番カバースリップとともにマウントした。
【0402】
Ｚｅｎ２０１０ソフトウェア（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｉｎｃ．）を使用するＬＳＭ７８０（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｉｎｃ．）によって、共焦点蛍光撮像法を実行した。海馬培養物及び海馬－ミクログリア共培養物の撮像のために、Ｐｌａｎ Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ２０×／０．８Ｍ２７対物レンズを使用して、０．９８μｍ間隔の５つのｚスタック画像を収集した。ＭＡＰ２断片化アッセイのために、画像スタックの最大強度のｚ投射を作製し、Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）を使用して分析した。メジアンフィルタ及び最近傍逆重畳を使用して、ノイズを低減した。神経突起成長モジュール、その後、形態学的処理を使用して、神経突起及び細胞体長を分析した。１５ピクセル（６．２２５μｍ）未満の断片を、総シグナル長に対して正規化して、ＭＡＰ２断片化の基準を得た。
【0403】
α－Ｐｌａｎ Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ１００×／１．４６Ｍ２７対物レンズで、ミクログリアを撮像した。Ｉｍａｇｅ Ｊ（１．４３ｕ、６４ビット、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）で、細胞内での組み換えｔａｕの取り込みの定量化を実行した。Ｉｂａ－１シグナルを基準として使用して、細胞面積の関心領域を手作業で描いた。関心領域のｔａｕ免疫活性の面積及び統合強度を測定して、面積に対して正規化されたｔａｕ免疫活性を得た。全ての分析は、実験条件に対して盲検方式で実行した。
【0404】
結果
この実験の結果を図１３に示す。図１３Ａに示すように、完全なエフェクター機能を有する抗体は、ニューロン－ミクログリア共培養物中、Ｔａｕ毒性に対して保護されなかった。図１３Ｂは、オリゴマーＴａｕ及び抗体と接触したニューロン－ミクログリア共培養物の画像（下部パネル）を示す。エフェクター機能を欠く抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ４及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１（Ｎ２９７Ｇ）はＴａｕ毒性に対して保護されていた一方で、３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１は保護されていなかった。
この実験の結果を図１３に示す。図１３Ａに示すように、完全なエフェクター機能を有する抗体は、ニューロン－ミクログリア共培養物中、Ｔａｕ毒性に対して保護されなかった。図１３Ｂは、オリゴマーＴａｕ及び抗体と接触したニューロン－ミクログリア共培養物の画像（下部パネル）を示す。エフェクター機能を欠く抗体３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ４及びｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１（Ｎ２９７Ｇ）はＴａｕ毒性に対して保護されていた一方で、３７Ｄ３－Ｈ９ ｈＩｇＧ１は保護されていなかった。
【0405】
実施例１０：３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧ２ａまたは３７Ｄ３－Ｈ９ ＩｇＧ２ａ ＤＡＮＧを投与したＴａｕ Ｔｇマウスにおける、Ｔａｕ病理の用量依存性低減
Ｔｈｙ１プロモーター下、ヒトＴａｕ Ｐ３０１Ｌを発現するトランスジェニックマウス（Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ）を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）バックグラウンド上で維持した。Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ及び野生型のマウスの同腹仔を治療群に割り当て、１週間に１回、３０ｍｇ／ｋｇのＩｇＧ２ａ対照（抗ｇｐ１２０）、３、１０または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａ、３、１０または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２ａのいずれかを、腹腔内（ｉ．ｐ．）に投薬した。ＤＡＮＧとはＩｇＧ２ａにおけるＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ｇ変異を指し、これはエフェクター機能を抑止する。全ての抗体投薬溶液は、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ５．８）、６％のスクロース、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０中に１０ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。治療は、生後１３週間で開始した。インビボ研究のマウス群はオスであり、３つのコホートへとずらした。更に、いかなる治療も受けさせることなく、３匹のＴａｕＰ３０１Ｌ－Ｔｇマウスを生後３ヶ月で採取して、治療開始時の病理のベースラインレベルを決定した。
Ｔｈｙ１プロモーター下、ヒトＴａｕ Ｐ３０１Ｌを発現するトランスジェニックマウス（Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ）を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）バックグラウンド上で維持した。Ｔａｕ Ｐ３０１Ｌ－Ｔｇ及び野生型のマウスの同腹仔を治療群に割り当て、１週間に１回、３０ｍｇ／ｋｇのＩｇＧ２ａ対照（抗ｇｐ１２０）、３、１０または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａ、３、１０または３０ｍｇ／ｋｇの抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２ａのいずれかを、腹腔内（ｉ．ｐ．）に投薬した。ＤＡＮＧとはＩｇＧ２ａにおけるＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ｇ変異を指し、これはエフェクター機能を抑止する。全ての抗体投薬溶液は、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ５．８）、６％のスクロース、０．０２％のＴｗｅｅｎ２０中に１０ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した。治療は、生後１３週間で開始した。インビボ研究のマウス群はオスであり、３つのコホートへとずらした。更に、いかなる治療も受けさせることなく、３匹のＴａｕＰ３０１Ｌ－Ｔｇマウスを生後３ヶ月で採取して、治療開始時の病理のベースラインレベルを決定した。
【0406】
組織を採取するために、２．５％のトリブロモエタノール（２５ｇの体重当たり０．５ｍｌ）でマウスを麻酔し、ＰＢＳで経心灌流した。脳を採取し、二分した。右半球を４％のパラホルムアルデヒド中に４℃で一晩固定し、その後、リン酸緩衝食塩水に移してから、免疫組織化学的検査のために処理した。左半球を氷上で解剖分割し、その後、生化学的分析のために－８０℃で凍結させた。全てのマウスから尾クリップを取って、遺伝子型を確認した。
【0407】
ＭｕｌｔｉＢｒａｉｎ（登録商標）ブロック（ＮｅｕｒｏＳｃｉｅｎｃｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮ）を使用して、ゼラチンマトリックスに半脳を多重包埋処理し、２５μｍの厚さで冠状に切開した。各ブロック内で、遺伝子型及び治療に対して脳の位置をランダム化した。個々のマウスの半脳またはＭｕｌｔｉＢｒａｉｎ（登録商標）ブロックの浮遊切片を既に記載されるように染色（Ｌｅ Ｐｉｃｈｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ，８（４）：ｅ６２３４２）したが、Ｔｒｉｓ緩衝食塩水の代わりにＰＢＳで洗浄し、室温の代わりに４℃で一次抗体インキュベーションした。一次抗体は、ウサギ抗ｐＴａｕ２１２／２１４（自家生成、０．０１μｇ／ｍｌ）であった。高バックグラウンド染色を回避するために、サブタイプ特異的なマウス一次抗体の場合、本発明者らは、対応するサブタイプ特異的二次抗体（例えば、ビオチン標識された抗マウスＩｇＧ３、Ｂｅｔｈｙｌ Ａ９０－１１１Ｂ）を使用した。
【0408】
２００×の拡大率のスライドスキャニングシステム及び０．５μｍ／ピクセルの解像度である、Ｌｅｉｃａ ＳＣＮ４００（Ｌｅｉｃａ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ；Ｂｕｆｆａｌｏ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ）を使用して、免疫組織化学染色したスライドを撮像した。１匹の動物当たり４つの一致した海馬レベル上に、関心領域（ＲＯＩ）を手作業で描き、それらのＲＯＩ内の染色の量を、以下に記載される２つのエンドポイントを使用して自動化した様式で定量化した。全ての画像分析は、遺伝子型及び治療群に対して盲検方式で実行した。ＩＨＣ染色の定量化のための正ピクセル面積分析のために、抗体標識された脳切片のデジタル画像を既に記載されるように分析した（Ｌｅ Ｐｉｃｈｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。総正ピクセルをＲＯＩの総ピクセル面積に対して正規化することによって、染色された面積パーセントを計算した。正ピクセル面積にのみ、ランベルト・ベールの法則、吸光度＝－ｌｏｇ（伝達された光強度／入射光強度）を使用して、統合強度を計算した。
【0409】
その実験の結果を図１４に示す。抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＷＴ ＩｇＧ２ａまたは抗ｔａｕ３７Ｄ３－Ｈ９ ＤＡＮＧ ＩｇＧ２ａの投与は、海馬内でｐＴａｕ２１２／２１４の用量依存性の低減をもたらした。
【0410】
実施例１１：ヒト化３７Ｄ３－Ｈ９カッパ１変異形
カッパ１軽鎖を有するｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１に基づくヒト化抗体変異形を作製し、Ｎ２８安定性について試験した。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１で試験した３つの変異形の軽鎖可変領域の整列を、図１８に示す。３つの変異形の軽鎖可変領域は互いに異なり、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ３９は変異Ｆ３３Ｌを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４０は変異Ｇ２９Ｔを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４１は変異Ｎ３０Ｑを含有する。
カッパ１軽鎖を有するｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１に基づくヒト化抗体変異形を作製し、Ｎ２８安定性について試験した。ｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１で試験した３つの変異形の軽鎖可変領域の整列を、図１８に示す。３つの変異形の軽鎖可変領域は互いに異なり、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ３９は変異Ｆ３３Ｌを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４０は変異Ｇ２９Ｔを含有し、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ４１は変異Ｎ３０Ｑを含有する。
【0411】
抗体試料に以下のように熱応力をかけた。試料を、２０ｍＭの酢酸ヒスチジン、２４０ｍＭのスクロース、（ｐＨ５．５）へと緩衝液交換し、１ｍｇ／ｍｌの濃度に希釈した。１ｍｌの試料に４０℃で２週間応力をかけ、２番目を対照として－７０℃で保管した。その後、トリプシンを使用して両方の試料を消化して、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）－質量分析法（ＭＳ）分析を使用して分析され得るペプチドを作製した。試料中の各ペプチドについて、ＬＣからの保持時間、ならびに高解像度精密質量及びペプチドイオン断片化情報（アミノ酸配列情報）を、ＭＳにおいて取得した。抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）を、±１０ｐｐｍのウィンドウにおけるデータ組から目的とされるペプチド（天然及び修飾ペプチドイオン）について行い、ピークを統合して、面積を決定した。（修飾ペプチドの面積）を（修飾ペプチドの面積＋天然ペプチドの面積）で除し、１００を乗ずることによって、各試料に対する修飾の相対的パーセンテージを計算した。その後、対照（ｔ＝０）試料と応力をかけた（ｔ＝２週間）試料との間のこれらの相対的パーセンテージを比較した。示されるパーセンテージは、応力をかけた（ｔ＝２週間）値から対照（ｔ＝０）値を引いたものを表す。結果を表２１に示す。結果は、Ｆ３３Ｌ変異がカッパ１ヒト化軽鎖内の脱アミド化の低減に有効であることを示す。
表２１－脱アミド化への応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形の安定性
表２１－脱アミド化への応力試験におけるｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形の安定性
【0412】
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器、ＧＥ ＢｉａｃｏｒｅヒトＦＡｂ捕捉キット、及びＣＭ５ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓチップを使用して、ヒト化抗体変異形の親和性を２５℃で測定した。抗体を、ＨＢＳＰ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）中、１μｇ／ｍｌまで希釈し、１０μｌ／分の流量で１８０秒間捕捉した。単一サイクル動態方法論及び３０μｌ／分の流量を使用して、ＨＢＳＰ中、１．２、３．７、１１、３３及び１００ｎＭで注入されたヒトＴａｕモノマーの動態データを収集した。各濃度のＴａｕモノマーを３分間の間注入し、解離を１０分間監視した。サイクル間に、１０ｍＭのグリシン（ｐＨ２．１）の２回連続の１分間の注入で、表面を再生させた。ＢＩＡＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアを使用して、データを１：１の結合モデルにフィットさせた。各抗体を実験内で２回分析し、表２２のデータは平均±範囲として示す。
表２２：モノマーＴａｕへのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形の親和性
表２２：モノマーＴａｕへのｈｕ３７Ｄ３－Ｈ９．ｖ１変異形の親和性
【0413】
実施例１２：カニクイザルにおけるｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態及び薬力学
インビボでのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の薬物動態及び薬力学を評価するために、１群当たり５匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、第１相において５０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内ボーラス注入を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大３５日目までの様々な時点で、血漿及びＣＳＦ試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。最終試料収集後、第２相の開始前に動物を６３～６４日間回復させた。第２相において、第１相の１５匹の動物＋追加の３匹の動物を２つの群に分け、第１の群（ｎ＝９）に抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを投与し、第２の群（ｎ＝９）にｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体を、ともに５０ｍｇ／ｋｇで投与した。用量後２日目及び１０日目に、１群当たり４または５匹の動物の脳を採取した。
インビボでのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐ及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の薬物動態及び薬力学を評価するために、１群当たり５匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、第１相において５０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内ボーラス注入を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大３５日目までの様々な時点で、血漿及びＣＳＦ試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。最終試料収集後、第２相の開始前に動物を６３～６４日間回復させた。第２相において、第１相の１５匹の動物＋追加の３匹の動物を２つの群に分け、第１の群（ｎ＝９）に抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐを投与し、第２の群（ｎ＝９）にｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体を、ともに５０ｍｇ／ｋｇで投与した。用量後２日目及び１０日目に、１群当たり４または５匹の動物の脳を採取した。
【0414】
カニクイザル血漿、ＣＳＦ、及び脳ホモジネート（以下に記載）内のヒトＩｇＧ４抗体を、ヒツジ抗ヒトＩｇＧサル吸着抗体コートを使用してＥＬＩＳＡで測定し、その後、１：１００の希釈度で開始して血漿試料を添加、１：２０の希釈度で開始してＣＳＦ試料を添加、または１：１０の希釈度で開始してホモジネート試料を添加し、検出のためにサル吸着した西洋ワサビペルオキシダーゼに複合体化されたヤギ抗ヒトＩｇＧ抗体を添加することによって終了した。３，３’，５，５’－テトラメチルベンジジンを使用して色を発生させ、１Ｍのリン酸を使用して中和した。４５０／６２０ｎｍで試料を読み取った。アッセイは、０．１５６～２０ｎｇ／ｍＬの標準的曲線範囲、ならびに血漿では０．０２μｇ／ｍＬ、ＣＳＦでは０．００３μｇ／ｍＬ、及びホモジネートでは０．００２μｇ／ｍＬの検出限界を有する。この濃度未満の結果を、報告可能未満（ＬＴＲ）として報告した。
【0415】
薬物動態分析の結果を、図１９Ａ（血漿）及び１９Ｂ（ＣＳＦ）、ならびに表２３及び２４に示す。抗治療抗体陽性（ＡＴＡ＋）であると疑われた動物は、分析から除外した。これらのデータは、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８ＰのＦｃ領域へのＹＴＥ変異の導入が、約２倍だけ、抗体の末梢及びＣＳＦクリアランス率を減速させたことを示す。
表２３：単回静脈内ボーラス用量後の平均（±標準偏差）血漿クリアランス及びＣｍａｘ推定
表２４：単回静脈内ボーラス用量後の平均（±標準偏差）ＣＳＦ Ｃｍａｘ推定
表２３：単回静脈内ボーラス用量後の平均（±標準偏差）血漿クリアランス及びＣｍａｘ推定
【0416】
注射後２及び１０日目の抗体の脳濃度を、以下のように決定した。脳組織を秤量し、その後、ｃＯｍｐｌｅｔｅ（商標）、Ｍｉｎｉ、無ＥＤＴＡプロテアーゼ阻害剤カクテル錠剤を含有するリン酸緩衝食塩水中１％のＮＰ－４０中でホモジナイズした。その後、ホモジナイズした脳試料を４℃で１時間回転させてから、１４，０００ｒｐｍで２０分間スピンした。上記のＥＬＩＳＡによる脳抗体測定のために上清を単離させた。その実験の結果を図２１Ａ～Ｄに示す。脳内の抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの濃度、及びｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体の脳：血漿濃度の比率は、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４．Ｓ２２８Ｐよりも高い傾向にあった。
【0417】
血漿中での薬力学的応答もまた、決定した。電気化学ルミネセンス（ＥＣＬ）イムノアッセイ（Ｒｏｃｈｅ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（ＲＰＤ），Ｐｅｎｚｂｅｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、Ｋ２ＥＤＴＡ血漿中の総Ｔａｕの濃度を決定した。Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）イムノアッセイをヒトＣＳＦ中の総Ｔａｕの定量化について検証し、ヒトＴａｕとカニクイザルＴａｕとの間の類似性のために、ＣＳＦ及び血漿中のカニクイザルＴａｕの測定に許容されると見なされた。アッセイは、ヒトＴａｕ及びカニクイザルＴａｕのアミノ酸１５９－２２４（リン酸化状態とは独立して、全ての既知のアイソフォームに存在する領域）を捕捉し、検出する。アッセイの検出下限（ＬＤＬ）は、１．０１ｐｇ／ｍＬである。アッセイは、１５．０ｍｇ／ｍＬのｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを許容する。
【0418】
薬力学的分析の結果を図２０に示す。ＡＴＡ＋であると疑われた動物、及びベースライン値を欠いた別の動物を除外した後、１群当たり３匹の動物が存在した。驚くべきことに、投薬の第１日目の間に、血漿Ｔａｕレベルは、非ＹＴＥ変異形で治療した動物に対して、ＹＴＥ変異形で治療した動物において、より大きな程度まで上昇する。更に、初期時点では変異形間でＰＫは同様であるため、その結果は薬物動態応答（図２０）からは予想されていない。試料採取の期間全体にわたってＹＴＥ変異形で治療した動物では、より頑強な応答が持続される。
【0419】
実施例１３：カニクイザル脳内のｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの薬物動態及び薬力学
脳内の抗体薬物動態を評価するために、１群当たり１２匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、５０ｍｇ／ｋｇの用量でｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの単回静脈内ボーラス注入を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大４２日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。更に、最大４２日目までの様々な時点で、２匹のサルを屠殺し、抗体の脳及びＣＳＦ濃度を決定した。
脳内の抗体薬物動態を評価するために、１群当たり１２匹の意識のあるカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、５０ｍｇ／ｋｇの用量でｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの単回静脈内ボーラス注入を投与した。同様に５０ｍｇ／ｋｇの用量で、抗ｇＤ ｈＩｇＧ４を対照として使用した。用量後最大４２日目までの様々な時点で、血漿試料を収集して、抗Ｔａｕ抗体濃度を決定した。更に、最大４２日目までの様々な時点で、２匹のサルを屠殺し、抗体の脳及びＣＳＦ濃度を決定した。
【0420】
抗体濃度は、実質的に実施例１２に記載されるように決定した。
【0421】
図２２Ａ～Ｂは、対数（Ａ）及び直線（Ｂ）スケールでプロットした、用量後の様々な時点でのカニクイザル脳内の抗体の濃度を示す。表２５は、脳濃度パラメータを示す。
表２５：単回静脈内ボーラス用量後の、平均（±標準偏差）脳ＰＫパラメータ推定
ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ抗体は、抗ｇＤと比較して、終了時点で脳濃度の増加を示した。
表２５：単回静脈内ボーラス用量後の、平均（±標準偏差）脳ＰＫパラメータ推定
【0422】
海馬、小脳、及び前頭皮質を含む、脳の様々な領域内の抗体の濃度もまた決定した。図２３Ａ～Ｃ及び表２６～２８は、その分析の結果を示す。
表２６：単回静脈内ボーラス用量後の、平均海馬ＰＫパラメータ推定
表２７：単回静脈内ボーラス用量後の、平均小脳ＰＫパラメータ推定
表２８：単回静脈内ボーラス用量後の、平均前頭皮質ＰＫパラメータ推定
表２６：単回静脈内ボーラス用量後の、平均海馬ＰＫパラメータ推定
【0423】
その実験の結果は、単回静脈内注射後の、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥへの、脳の様々な領域の曝露を示す。脳内の全体的曝露は２つの群にわたって同等であったが、血漿中での観察と同様に、抗ｇＤを投薬した動物と比較して、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを投薬した動物において、終了時点で、脳内の抗体濃度の約２倍の増加が存在した。 図２３を参照されたい。これらの結果は、ＹＴＥ抗体の投薬後、脳内でのより高いトラフ（終了時）濃度の維持を示唆する。
【0424】
経時的なＣＳＦ及び血漿中での抗体の濃度もまた、決定した。図２３Ｄ（ＣＳＦ）及び２３Ｅ（血漿）ならびに以下の表２９及び３０は、その分析の結果を示す。
表２９：単回静脈内ボーラス用量後の、平均ＣＳＦ ＰＫパラメータ推定
表３０：単回静脈内ボーラス用量後の、平均血漿ＰＫパラメータ推定
表２９：単回静脈内ボーラス用量後の、平均ＣＳＦ ＰＫパラメータ推定
【0425】
再び、血漿及び脳薬物動態と同様に、抗ｇＤを投薬した動物と比較して、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥを投薬した動物において、終了時点で、ＣＳＦ及び血漿中、約２倍の抗体濃度の増加が存在した。図２３を参照されたい。
【0426】
カニクイザルから収集された血漿試料を使用して、単回静脈内５０ｍｇ／ｋｇ用量後の、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥ及び対照抗体の血漿薬力学を評価した。実施例１２において考察したＥｌｅｃｓｙｓ（登録商標）イムノアッセイを使用して、血漿Ｔａｕを定量化した。
【0427】
薬力学的分析の結果を図２４Ａ～Ｂに示す。図２４Ａは、ベースラインに対して正規化された平均総血漿Ｔａｕ濃度を示す。図２４Ｂは、本研究の個々のサルにおける、ベースラインに対して正規化された総血漿Ｔａｕ濃度を示す。実施例１２において観察された結果と同様に、抗体ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥの投与は、有意な血漿Ｔａｕレベルの増加をもたらした。いかなる特定の理論によっても拘束されることを望むものではないが、これらのデータは、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥが脳内でＴａｕに結合し、結果としてＴａｕが脳から末梢へと除去されることを示唆する。これらの結果は、ｈｕ３７Ｄ３．ｖ２８．Ａ４ ｈＩｇＧ４－Ｓ２２８Ｐ．ＹＴＥによる脳内の標的結合と一貫する。
【0428】
前述の発明が明瞭な理解のために例証及び実施例によって多少詳細に説明されているが、これらの説明及び実施例は、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本明細書に引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照によりそれらの全体が明示的に組み込まれる。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図1D】
【図1E】
【図1F】
【図2A】
【図2B】
【図2C】
【図2D】
【図2E】
【図3】
【図4A】
【図4B】
【図4C】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図8A】
【図8B】
【図8C】
【図8D】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12A】
【図12B】
【図12C】
【図13A】
【図13B】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19A】
【図19B】
【図20】
【図21A】
【図21B】
【図21C】
【図21D】
【図22A】
【図22B】
【図23A】
【図23B】
【図23C】
【図23D】
【図23E】
【図24A】
【図24B】
【配列表】