▶ ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-12-18
(45)【発行日】2023-12-26
(54)【発明の名称】アミラーゼを含む自動食器洗浄用洗剤組成物
(51)【国際特許分類】
C11D 3/386 20060101AFI20231219BHJP
C11D 1/02 20060101ALI20231219BHJP
C12N 9/26 20060101ALI20231219BHJP
C12N 15/10 20060101ALI20231219BHJP
【ＦＩ】
C11D3/386
C11D1/02
C12N9/26 A ZNA
C12N15/10 200Z
【請求項の数】
20
(21)【出願番号】P 2022523386
(86)(22)【出願日】2020-10-15
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2022-12-22
(86)【国際出願番号】 US2020070673
(87)【国際公開番号】W WO2021081548
(87)【国際公開日】2021-04-29
【審査請求日】2022-04-20
(31)【優先権主張番号】62/925,252
(32)【優先日】2019-10-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(73)【特許権者】
【識別番号】590005058
【氏名又は名称】ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー
【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＰＲＯＣＴＥＲ ＆ ＧＡＭＢＬＥ ＣＯＭＰＡＮＹ
【住所又は居所原語表記】Ｏｎｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｐｌａｚａ， Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ， ＯＨ ４５２０２，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ
(74)【代理人】
【識別番号】100110423
【弁理士】
【氏名又は名称】曾我 道治
(74)【代理人】
【識別番号】100111648
【弁理士】
【氏名又は名称】梶並 順
(74)【代理人】
【識別番号】100122437
【弁理士】
【氏名又は名称】大宅 一宏
(74)【代理人】
【識別番号】100209495
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 さおり
(72)【発明者】
【氏名】ジャクソン、ミシェル
(72)【発明者】
【氏名】ベル－ルージーヴィチ、カタルジナ
(72)【発明者】
【氏名】ブハティ、マナシ
(72)【発明者】
【氏名】チャン、ホン・キット
(72)【発明者】
【氏名】ラッシラ、ジョナサン
(72)【発明者】
【氏名】ポール、ブライアン・ジェイムズ
(72)【発明者】
【氏名】レイマー、サンドラ・ダブリュー
(72)【発明者】
【氏名】トラン、パトリシア
【審査官】長部 喜幸
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１３／０６３４６０（ＷＯ，Ａ２）
【文献】特表２０１９－５０５２０４（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１５／１８９３７１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１５／０４４４４８（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１０／１１５０２１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第１９９６／０２３８７３（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１１／０７６８９７（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ１１Ｄ ３／３８６
Ｃ１１Ｄ １／０２
Ｃ１２Ｎ ９／２６
Ｃ１２Ｎ １５／１０
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
変異体α－アミラーゼを含む自動食器洗浄組成物であって、前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、ｉ）９１位の負電荷残基への置換、及び残基４０、１００、及び２２９から選択されるアミノ酸残基の１つ以上の変異、
ｉｉ）１７２位の変異、及び２８８位若しくは３２４位の変異、並びに／又は
ｉｉｉ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択されるアミノ酸置換を含み、
前記変異体α－アミラーゼが、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｔ１８３、及びＧ１８４に相当する少なくとも２つの残基の欠失を更に含む、
自動食器洗浄組成物。
【請求項2】
９１位の負電荷残基への前記置換が、Ｘ９１Ｒである、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
選択肢ｉ）が適用され、前記変異体α－アミラーゼが、Ｘ４０Ｎ、及びＸ１００Ｆからなる群から選択される１つ以上の変異を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項4】
選択肢ｉ）が適用され、前記変異体α－アミラーゼが、Ｔ４０Ｎ、及びＹ１００Ｆからなる群から選択される１つ以上の変異を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、Ｑ１７２Ｎの変異を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、１７２位の変異及び２８８位の変異を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項7】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、１１６位及び２８１位の変異を更に含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、１１６位のアルギニン及び２８１位のセリンを含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項9】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、２４４位の変異を更に含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、２４４位のグルタミンを含む、請求項９に記載の組成物。
【請求項11】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を参照して、Ｒ１８１及びＧ１８２又は残基Ｔ１８３及びＧ１８４に相当する残基のペアワイズ欠失を含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項12】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を使用して、（ｉ）
（ａ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１６９Ｈ－Ｘ１８３Ｍ－Ｘ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８８Ｄ－Ｘ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１００Ｆ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｎ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２６３Ｙ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｘ４０Ｄ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換と、
（ｉｉ）
１８１及び１８２、並びに
１８３及び１８４、に相当する残基からなる群から選択される残基のペアワイズ欠失と、を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項13】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１の番号を使用して、（ｉ）
（ａ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１６９Ｈ－Ｔ１８３Ｍ－Ｈ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｓ２８８Ｄ－Ｓ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｆ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｙ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｓ９１Ｒ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｈ２８１Ｓ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｔ４０Ｄ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｈ２８１Ｓ－Ｉ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換の組み合わせと、
（ｉｉ）
Ｒ１８１及びＧ１８２からなる残基のペアワイズ欠失と、を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項14】
前記変異体α－アミラーゼが、全ての場合において配列番号１の番号を使用して、（ａ）４０位のＮ及び９１位のＲ、
（ｂ）１００位のＦ、
（ｃ）２８１位のＳ、２４４位のＱ、及び１１６位のＲ、並びに
１８１位及び１８２位のペアワイズ欠失を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項15】
前記変異体α－アミラーゼが、配列番号１、配列番号２、配列番号３、又は配列番号４のアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有する、請求項１～１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項16】
プロテアーゼを更に含み、前記プロテアーゼが、配列番号５のアミノ酸配列又は配列番号６のアミノ酸配列と、少なくとも８０％の同一性を有し、前記プロテアーゼが、少なくとも１つのアミノ酸置換であって、配列番号６の番号を使用して、
（ｉ）Ｘ０３９Ｅ、Ｘ０７４Ｄ、Ｘ０９９Ｒ、Ｘ１２６Ａ、Ｘ１２７Ｅ、及びＸ１２８Ｇからなる群から選択される少なくとも３つのアミノ酸置換と組み合わせた、Ｘ１９８Ｇ／Ａ／Ｋ／Ｌ／Ｑ／Ｒ／Ｔ／Ｖ／Ｓ／Ｌ、Ｘ２０７Ｑ、Ｘ２１１Ｑ／Ｎ、及びＸ２１２Ｑ、又は
（ｉｉ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｎ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２０７Ｑ、又は
（ｉｉｉ）Ｘ２４２Ｄ及びＸ２５６Ｅから選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を更に含む、（ｉ）及び（ｉｉ）の前記プロテアーゼのうちのいずれか、又は
（ｉｖ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２５６Ｅ、からなる群から選択される、少なくとも１つのアミノ酸置換からなる群から選択される、アミノ酸置換を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項17】
プロテアーゼを更に含み、前記プロテアーゼが、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％の同一性を有し、前記プロテアーゼが、Ｓ３Ｖ、Ｓ９Ｒ、Ａ１３Ｖ、Ａ１５Ｔ、Ｇ２０＊、Ｌ２１Ｆ、Ｉ３５Ｖ、Ｎ６０Ｄ、Ｖ６６Ａ、Ｎ７４Ｄ、Ｓ８５Ｎ／Ｒ、Ｓ９７ＳＥ、Ｓ９７ＡＤ、Ｓ９７Ｄ／Ｇ、Ｓ９９Ｇ／Ｍ／Ｄ／Ｅ、Ｓ１０１Ａ、Ｖ１０２Ｅ／Ｉ、Ｇ１１６Ｖ／Ｒ、Ｓ１２６Ｆ／Ｌ、Ｐ１２７Ｑ、Ｓ１２８Ａ、Ｓ１５４Ｄ、Ｇ１５７Ｓ、Ｙ１６１Ａ、Ｒ１６４Ｓ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２００Ｃ／Ｅ／Ｉ／Ｋ／Ｔ／Ｖ／Ｗ／Ｌ、Ｙ２０３Ｗ、Ｎ２１２Ｄ、Ｍ２１６Ｓ／Ｆ、Ａ２２２Ｖ、Ｑ２３９Ｒ／Ｆ、Ｔ２４９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ、及びＬ２５６Ｅ、Ｎ、Ｑ、Ｄ、からなる群から選択される、１つ以上、又は２つ以上、又は３つ以上のアミノ酸置換を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項18】
前記組成物の１０重量％～５０重量％の有機錯化剤系を含み、任意に、漂白剤系が、前記組成物の１０重量％超の漂白剤及び漂白活性化剤及び／又は漂白触媒を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項19】
漂白触媒を含み、前記漂白触媒が、１，４，７－トリメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ－ＴＡＣＮ）、１，２，４，７－テトラメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ／Ｍｅ－ＴＡＣＮ）、及びそれらの混合物からなる群から選択されるマンガン漂白触媒である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項20】
汚れた食器を食器洗浄機において洗浄する方法であって、ｉ）前記汚れた食器を提供する工程と、
ｉｉ）少なくとも４０℃の温度で１５分間を超えて続く主洗浄サイクルを有する長時間の高温プログラムを使用する工程と、
ｉｉｉ）請求項１～１９のいずれか一項に記載の洗浄組成物で前記食器を処理する工程と、
ｉｖ）任意に、前記食器をすすぐ工程と、を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、洗剤の分野に属する。具体的には、本発明は、新しいアミラーゼを含む自動食器洗浄用洗剤組成物に関する。組成物は、従来のアミラーゼを含む組成物に対して改善された洗浄を提供する。
【背景技術】
【0002】
自動食器洗浄の性能を改善する要望が恒久的に存在する。アミラーゼは、自動食器洗浄用組成物における重要な成分である。自動食器洗浄用のアミラーゼを設計する場合、いくつかの基準を満たす必要がある。使用前に洗剤マトリックス中で安定的あるべきであり、洗浄中に安定的であるべきであり、洗浄中に高度に活性であり、かつ迅速に作用するべきである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0003】
本発明の目的は、より良好な洗浄を提供し、かつ長時間の高温サイクル及び短時間のサイクルの両方でより良好に機能する、より安定した自動食器洗浄用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0004】
本発明の第１の態様によると、自動食器洗浄組成物が提供される。組成物は、特定のアミラーゼを含む。組成物は、食器がひどく汚れている場合でも、高温サイクル（洗浄温度は４０℃超、好ましくは４５℃超）、長時間サイクル（主洗浄は、１５分超）、及び短時間サイクル（主洗浄の継続は１５分未満、好ましくは１２分未満、及び特に１０分未満）において改善された性能を提示する。
【0005】
本発明の自動食器洗浄組成物は、変異体α－アミラーゼを含み、変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、
ｉ）９１位の変異、及び残基６、７、４０、９６、９８、１００、２２９、２３０、２３１、２６２、２６３、２８５、２８６、２８７、２８８、３２２、３２３、３２４、３２５、３６２、３６３、及び３６４として規定される、α－アミラーゼＴＩＭバレル構造の基部におけるアミノ酸残基の１つ以上の変異、並びに／又は
ｉｉ）１７２位の変異、及び２８８位若しくは３２４位の変異、並びに／又は
ｉｉｉ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択されるアミノ酸置換をむ。
ｉ）９１位の変異、及び残基６、７、４０、９６、９８、１００、２２９、２３０、２３１、２６２、２６３、２８５、２８６、２８７、２８８、３２２、３２３、３２４、３２５、３６２、３６３、及び３６４として規定される、α－アミラーゼＴＩＭバレル構造の基部におけるアミノ酸残基の１つ以上の変異、並びに／又は
ｉｉ）１７２位の変異、及び２８８位若しくは３２４位の変異、並びに／又は
ｉｉｉ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択されるアミノ酸置換をむ。
【0006】
１．本発明の組成物のα－アミラーゼ変異体は、配列番号１の番号を参照して、９１位の変異、及び／又は残基６、７、４０、９６、９８、１００、２２９、２３０、２３１、２６２、２６３、２８５、２８６、２８７、２８８、３２２、３２３、３２４、３２５、３６２、３６３、及び３６４として規定される、α－アミラーゼＴＩＭバレル構造の基部におけるアミノ酸残基の変異を含む。
２．好ましくは、９１位の変異は、自然に存在する残基の正電荷残基への置換である。
３．好ましくは、９１位の変異は、自然に存在する残基のアルギニンへの置換である（すなわち、Ｘ９１Ｒ）。
４．好ましくは、α－アミラーゼＴＩＭバレル構造の基部における少なくとも１つの変異が、Ｘ４０Ｎ、Ｘ４０Ｄ、Ｘ１００Ｆ、Ｘ１００Ｌ、Ｘ２６３Ｙ、Ｘ２８８Ｄ、Ｘ２８８Ｋ、Ｘ２８８Ｑ、Ｘ３２４Ｒ、Ｘ３２４Ｎ、Ｘ３２４Ｍ、Ｘ３６４Ｌ、及びＸ３６４Ｍからなる群から選択され、より好ましくはＴ４０Ｎ、Ｔ４０Ｄ、Ｙ１００Ｆ、Ｙ１００Ｌ、Ｆ２６３Ｙ、Ｓ２８８Ｄ、Ｓ２８８Ｋ、Ｓ２８８Ｑ、Ｉ３２４Ｒ、Ｉ３２４Ｎ、Ｉ３２４Ｍ、Ｙ３６４Ｌ、及びＹ３６４Ｍからなる群から選択される、段落１～３のいずれかの変異体α－アミラーゼ。
５．好ましくは、α－アミラーゼ変異体は、９１位にアルギニンと、自然発生のα－アミラーゼ中に存在しない、４０位のＮ若しくはＤ、１００位のＦ若しくはＬ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、Ｋ、若しくはＱ、３２４位のＲ、Ｎ、若しくはＭ、又は３６４位のＬ若しくはＭの特徴のうちの少なくとも１つと、を含む。
６．好ましくは、段落１～５のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、表面露出残基１６７、１６９、１７１、１７２、及び１７６を含むループ内の残基に変異を更に含み、より好ましくは、Ｘ１６７Ｆ、Ｘ１６９Ｈ、Ｘ１７１Ｙ、Ｘ１７２Ｒ、Ｘ１７２Ｎ、及びＸ１７６Ｓからなる群から、より好ましくは、Ｗ１６７Ｆ、Ｑ１６９Ｈ、Ｒ１７１Ｙ、Ｑ１７２Ｒ、Ｑ１７２Ｎ、及びＲ１７６Ｓからなる群からものである。
７．好ましくは、段落１～６のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１６７位のＦ、１６９位のＨ、１７１位のＹ、１７２位のＲ若しくはＮ、又は１７６位のＳを更に含む。
８．好ましくは、変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１７２位の変異及び２８８位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１７２位のアルギニン又はアスパラギン及び２８８位のアスパラギン酸を含む。
９．好ましくは、段落１～８のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１１６位及び／又は２８１位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１１６位のアルギニン又は２８１位のセリンを更に含む。
１０．好ましくは、段落１～９のいずれかのいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１９０位及び／又は２４４位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１９０位のプロリン及び／又は２４４位のアラニン、グルタミン酸、若しくはグルタミンを更に含む。
１１．好ましくは、段落１～１０のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を使用して、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｔ１８３、及びＧ１８４に相当する少なくとも２つの残基の欠失、より好ましくは、Ｒ１８１及びＧ１８２又は残基Ｔ１８３及びＧ１８４に相当する残基のペアワイズ欠失を更に含む。
１２．好ましくは、変異体α－アミラーゼであって、配列番号１の番号を使用して、
（ｉ）
（ａ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１６９Ｈ－Ｘ１８３Ｍ－Ｘ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８８Ｄ－Ｘ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１００Ｆ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｎ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２６３Ｙ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｘ４０Ｄ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｘ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換と、
（ｉｉ）
１８１及び１８２、並びに
１８３及び１８４、に相当する残基からなる群から選択される残基のペアワイズ欠失と、を含む、変異体α－アミラーゼ、が提供される。
１３．好ましくは、段落１２の変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を使用して、
（ｉ）
（ａ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１６９Ｈ－Ｔ１８３Ｍ－Ｈ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｓ２８８Ｄ－Ｓ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｆ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｙ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｓ９１Ｒ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｈ２８１Ｓ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｔ４０Ｄ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｈ２８１Ｓ－Ｉ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換と、
（ｉｉ）
Ｒ１８１及びＧ１８２、並びに
Ｔ１８３及びＧ１８４、からなる群から選択される残基のペアワイズ欠失と、を含む。
１４．好ましくは、変異体α－アミラーゼは、全ての場合において配列番号１の番号を使用して、（ａ）４０位のＤ若しくはＮ及び／又は９１位のＲ、並びに、（ｂ）１００位のＦ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、３２４位のＭ、Ｎ、若しくはＲ、及び／又は３６４位のＬのうちの３つ以上の特徴を、任意に（ｃ）１６９位のＨ、１８３Ｍ位のＭ、２８１位のＮ若しくはＳ、１７２位のＮ若しくはＲ、１９０位のＰ、２４４位のＥ、Ｑ、若しくはＲ、４７４位のＲ、１１６位のＲと組み合わせて、任意に１８１位及び１８２位又は１８３位及び１８４位のペアワイズ欠失と組み合わせて含む。
１５．好ましくは、段落１～１４のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、又は配列番号４のアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有する。
２．好ましくは、９１位の変異は、自然に存在する残基の正電荷残基への置換である。
３．好ましくは、９１位の変異は、自然に存在する残基のアルギニンへの置換である（すなわち、Ｘ９１Ｒ）。
４．好ましくは、α－アミラーゼＴＩＭバレル構造の基部における少なくとも１つの変異が、Ｘ４０Ｎ、Ｘ４０Ｄ、Ｘ１００Ｆ、Ｘ１００Ｌ、Ｘ２６３Ｙ、Ｘ２８８Ｄ、Ｘ２８８Ｋ、Ｘ２８８Ｑ、Ｘ３２４Ｒ、Ｘ３２４Ｎ、Ｘ３２４Ｍ、Ｘ３６４Ｌ、及びＸ３６４Ｍからなる群から選択され、より好ましくはＴ４０Ｎ、Ｔ４０Ｄ、Ｙ１００Ｆ、Ｙ１００Ｌ、Ｆ２６３Ｙ、Ｓ２８８Ｄ、Ｓ２８８Ｋ、Ｓ２８８Ｑ、Ｉ３２４Ｒ、Ｉ３２４Ｎ、Ｉ３２４Ｍ、Ｙ３６４Ｌ、及びＹ３６４Ｍからなる群から選択される、段落１～３のいずれかの変異体α－アミラーゼ。
５．好ましくは、α－アミラーゼ変異体は、９１位にアルギニンと、自然発生のα－アミラーゼ中に存在しない、４０位のＮ若しくはＤ、１００位のＦ若しくはＬ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、Ｋ、若しくはＱ、３２４位のＲ、Ｎ、若しくはＭ、又は３６４位のＬ若しくはＭの特徴のうちの少なくとも１つと、を含む。
６．好ましくは、段落１～５のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、表面露出残基１６７、１６９、１７１、１７２、及び１７６を含むループ内の残基に変異を更に含み、より好ましくは、Ｘ１６７Ｆ、Ｘ１６９Ｈ、Ｘ１７１Ｙ、Ｘ１７２Ｒ、Ｘ１７２Ｎ、及びＸ１７６Ｓからなる群から、より好ましくは、Ｗ１６７Ｆ、Ｑ１６９Ｈ、Ｒ１７１Ｙ、Ｑ１７２Ｒ、Ｑ１７２Ｎ、及びＲ１７６Ｓからなる群からものである。
７．好ましくは、段落１～６のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１６７位のＦ、１６９位のＨ、１７１位のＹ、１７２位のＲ若しくはＮ、又は１７６位のＳを更に含む。
８．好ましくは、変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１７２位の変異及び２８８位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１７２位のアルギニン又はアスパラギン及び２８８位のアスパラギン酸を含む。
９．好ましくは、段落１～８のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１１６位及び／又は２８１位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１１６位のアルギニン又は２８１位のセリンを更に含む。
１０．好ましくは、段落１～９のいずれかのいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を参照して、１９０位及び／又は２４４位の変異、より好ましくは、配列番号１の番号を参照して、１９０位のプロリン及び／又は２４４位のアラニン、グルタミン酸、若しくはグルタミンを更に含む。
１１．好ましくは、段落１～１０のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を使用して、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｔ１８３、及びＧ１８４に相当する少なくとも２つの残基の欠失、より好ましくは、Ｒ１８１及びＧ１８２又は残基Ｔ１８３及びＧ１８４に相当する残基のペアワイズ欠失を更に含む。
１２．好ましくは、変異体α－アミラーゼであって、配列番号１の番号を使用して、
（ｉ）
（ａ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１６９Ｈ－Ｘ１８３Ｍ－Ｘ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８８Ｄ－Ｘ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｅ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１００Ｆ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１７２Ｎ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｘ４０Ｎ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ２４４Ｑ－Ｘ２６３Ｙ－Ｘ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｘ４０Ｄ－Ｘ９１Ｒ－Ｘ１７２Ｒ－Ｘ１９０Ｐ－Ｘ２８１Ｓ－Ｘ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｘ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換と、
（ｉｉ）
１８１及び１８２、並びに
１８３及び１８４、に相当する残基からなる群から選択される残基のペアワイズ欠失と、を含む、変異体α－アミラーゼ、が提供される。
１３．好ましくは、段落１２の変異体α－アミラーゼは、配列番号１の番号を使用して、
（ｉ）
（ａ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１６９Ｈ－Ｔ１８３Ｍ－Ｈ２８１Ｎ、
（ｂ）Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｃ）Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｓ２８８Ｄ－Ｓ４７４Ｒ、
（ｄ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｍ、
（ｅ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｆ２６３Ｙ、
（ｆ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｙ３６４Ｌ、
（ｇ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｒ、
（ｈ）Ｓ９１Ｒ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｅ－Ｈ２８１Ｓ－Ｓ２８８Ｄ、
（ｉ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｊ）Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ、
（ｋ）Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｎ、
（ｌ）Ｔ４０Ｄ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｅ１９０Ｐ－Ｈ２８１Ｓ－Ｉ３２４Ｒ、及び
（ｍ）Ｙ３６４Ｌ、からなる群から選択される置換と、
（ｉｉ）
Ｒ１８１及びＧ１８２、並びに
Ｔ１８３及びＧ１８４、からなる群から選択される残基のペアワイズ欠失と、を含む。
１４．好ましくは、変異体α－アミラーゼは、全ての場合において配列番号１の番号を使用して、（ａ）４０位のＤ若しくはＮ及び／又は９１位のＲ、並びに、（ｂ）１００位のＦ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、３２４位のＭ、Ｎ、若しくはＲ、及び／又は３６４位のＬのうちの３つ以上の特徴を、任意に（ｃ）１６９位のＨ、１８３Ｍ位のＭ、２８１位のＮ若しくはＳ、１７２位のＮ若しくはＲ、１９０位のＰ、２４４位のＥ、Ｑ、若しくはＲ、４７４位のＲ、１１６位のＲと組み合わせて、任意に１８１位及び１８２位又は１８３位及び１８４位のペアワイズ欠失と組み合わせて含む。
１５．好ましくは、段落１～１４のいずれかの変異体α－アミラーゼは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、又は配列番号４のアミノ酸配列に対して、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有する。
【0007】
好ましくは、本発明の組成物は、プロテアーゼを更に含む。プロテアーゼは、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％、及び特に少なくとも９９％の同一性を有し、プロテアーゼは、１つ以上、又は２つ以上、又は３つ以上の、
Ｓ３Ｖ、Ｓ９Ｒ、Ａ１３Ｖ、Ａ１５Ｔ、Ｇ２０＊、Ｌ２１Ｆ、Ｉ３５Ｖ、Ｎ６０Ｄ、Ｖ６６Ａ、Ｎ７４Ｄ、Ｓ８５Ｎ／Ｒ、Ｓ９７ＳＥ、Ｓ９７ＡＤ、Ｓ９７Ｄ／Ｇ、Ｓ９９Ｇ／Ｍ／Ｄ／Ｅ、Ｓ１０１Ａ、Ｖ１０２Ｅ／Ｉ、Ｇ１１６Ｖ／Ｒ、Ｓ１２６Ｆ／Ｌ、Ｐ１２７Ｑ、Ｓ１２８Ａ、Ｓ１５４Ｄ、Ｇ１５７Ｓ、Ｙ１６１Ａ、Ｒ１６４Ｓ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２００Ｃ／Ｅ／Ｉ／Ｋ／Ｔ／Ｖ／Ｗ／Ｌ、Ｙ２０３Ｗ、Ｎ２１２Ｄ、Ｍ２１６Ｓ／Ｆ、Ａ２２２Ｖ、Ｑ２３９Ｒ／Ｆ、Ｔ２４９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ及びＬ２５６Ｅ、Ｎ、Ｑ、Ｄからなる群から選択されるアミノ酸置換を含む。
Ｓ３Ｖ、Ｓ９Ｒ、Ａ１３Ｖ、Ａ１５Ｔ、Ｇ２０＊、Ｌ２１Ｆ、Ｉ３５Ｖ、Ｎ６０Ｄ、Ｖ６６Ａ、Ｎ７４Ｄ、Ｓ８５Ｎ／Ｒ、Ｓ９７ＳＥ、Ｓ９７ＡＤ、Ｓ９７Ｄ／Ｇ、Ｓ９９Ｇ／Ｍ／Ｄ／Ｅ、Ｓ１０１Ａ、Ｖ１０２Ｅ／Ｉ、Ｇ１１６Ｖ／Ｒ、Ｓ１２６Ｆ／Ｌ、Ｐ１２７Ｑ、Ｓ１２８Ａ、Ｓ１５４Ｄ、Ｇ１５７Ｓ、Ｙ１６１Ａ、Ｒ１６４Ｓ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２００Ｃ／Ｅ／Ｉ／Ｋ／Ｔ／Ｖ／Ｗ／Ｌ、Ｙ２０３Ｗ、Ｎ２１２Ｄ、Ｍ２１６Ｓ／Ｆ、Ａ２２２Ｖ、Ｑ２３９Ｒ／Ｆ、Ｔ２４９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ及びＬ２５６Ｅ、Ｎ、Ｑ、Ｄからなる群から選択されるアミノ酸置換を含む。
【0008】
好ましくは、本発明の組成物は、プロテアーゼを更に含み、プロテアーゼは、配列番号５のアミノ酸配列又は配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、及び特に少なくとも９６％の同一性を有し、プロテアーゼは、少なくとも１つのアミノ酸置換であって、配列番号６の番号を使用して、
（ｉ）Ｘ０３９Ｅ、Ｘ０７４Ｄ、Ｘ０９９Ｒ、Ｘ１２６Ａ、Ｘ１２７Ｅ、及びＸ１２８Ｇからなる群から選択される少なくとも１つ、２つ、若しくは３つのアミノ酸置換と組み合わせた、Ｘ１９８Ｇ／Ａ／Ｋ／Ｌ／Ｑ／Ｒ／Ｔ／Ｖ／Ｓ／Ｌ、Ｘ２０７Ｑ、Ｘ２１１Ｑ／Ｎ、及びＸ２１２Ｑからなる群から選択される少なくとも１つ若しくは２つのアミノ酸置換、又は
（ｉｉ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｎ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２０７Ｑ、又は
（ｉｉｉ）Ｘ２４２Ｄ及びＸ２５６Ｅから選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を更に含む、（ｉ）及び（ｉｉ）のプロテアーゼのうちのいずれか、又は
（ｉｖ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２５６Ｅ、からなる群から選択される、少なくとも１つのアミノ酸置換を、含む。
（ｉ）Ｘ０３９Ｅ、Ｘ０７４Ｄ、Ｘ０９９Ｒ、Ｘ１２６Ａ、Ｘ１２７Ｅ、及びＸ１２８Ｇからなる群から選択される少なくとも１つ、２つ、若しくは３つのアミノ酸置換と組み合わせた、Ｘ１９８Ｇ／Ａ／Ｋ／Ｌ／Ｑ／Ｒ／Ｔ／Ｖ／Ｓ／Ｌ、Ｘ２０７Ｑ、Ｘ２１１Ｑ／Ｎ、及びＸ２１２Ｑからなる群から選択される少なくとも１つ若しくは２つのアミノ酸置換、又は
（ｉｉ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１１６Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｎ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２１１Ｑ、
Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２０７Ｑ、又は
（ｉｉｉ）Ｘ２４２Ｄ及びＸ２５６Ｅから選択される少なくとも１つのアミノ酸置換を更に含む、（ｉ）及び（ｉｉ）のプロテアーゼのうちのいずれか、又は
（ｉｖ）Ｘ０３９Ｅ－Ｘ０７４Ｄ－Ｘ０９９Ｒ－Ｘ１２６Ａ－Ｘ１２７Ｅ－Ｘ１２８Ｇ－Ｘ２５６Ｅ、からなる群から選択される、少なくとも１つのアミノ酸置換を、含む。
【0009】
本発明の第２の態様によると、高温の長時間サイクルにおける自動食器洗浄の方法が提供される。
【0010】
本発明の第１の態様の開示は、変更すべきところは変更して、本発明の第２の態様に適用される。
【発明を実施するための形態】
【0011】
本発明は、自動食器洗浄組成物を包含する。組成物は、新しいアミラーゼを含む。組成物は、広範囲の食器洗浄プログラム下で良好な洗浄を提供する。
【0012】
「高温」サイクルとは、本明細書において、主サイクルが４０℃超、好ましくは４５℃超の温度で実行される、食器洗浄プログラムとして理解される。
【0013】
「長時間」サイクルとは、本明細書において、主サイクルが少なくとも１５分、好ましくは少なくとも２０分、及びより好ましくは少なくとも２５分の継続時間を有する、食器洗浄プログラムとして理解される。
【0014】
「短時間」サイクルとは、本明細書において、主サイクルが１５分未満、好ましくは１２分未満、好ましくは１０分未満の継続時間を有する、食器洗浄プログラムとして理解される。
【0015】
本発明のアミラーゼ
本発明の組成物は、変異体α－アミラーゼを含み、変異体α－アミラーゼは、好ましくは、基準α－アミラーゼ（配列番号１～４のα－アミラーゼ）に対して規定の同一性パーセンテージを有する。
本発明の組成物は、変異体α－アミラーゼを含み、変異体α－アミラーゼは、好ましくは、基準α－アミラーゼ（配列番号１～４のα－アミラーゼ）に対して規定の同一性パーセンテージを有する。
【0016】
本発明の組成物の変異体α－アミラーゼは、本明細書において、「本発明のアミラーゼ」と称されることがある。配列番号１～４のいずれかを有するアミラーゼは、本明細書において、「基準アミラーゼ」又は「親アミラーゼ」と称されることがある。
【0017】
２つのアミノ酸配列間又は２つのヌクレオチド配列間の関連性は、パラメータ「配列同一性」によって説明される。
【0018】
「変異体」という用語は、基準アミラーゼに対して、１つ以上の（例えば、いくつかの）位置において変異、すなわち、置換、挿入、及び／又は欠失を含むアミラーゼを意味する。置換は、ある位置を占有するアミノ酸を異なるアミノ酸で置き換えることを意味し、欠失は、ある位置を占有するアミノ酸の除去を意味し、挿入は、ある位置を占有するアミノ酸に隣接して、かつその直後に、アミノ酸を付加することを意味する。本発明の変異体は、基準プロテアーゼと少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、及び特に９６％の同一性を有する。
【0019】
本発明の組成物は、自動食器洗浄用途において高度の性能を示すマルトペンタオース／マルトヘキサオース形成α－アミラーゼのコンビナトリアル変異体を含む。変異体は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来のα－アミラーゼに最も密接に関連し、本明細書においてＡＡ２５６０と称され、国際公開第２０１８／１８４００４号においてＢｓｐＡｍｙ２４（配列番号１）として以前に特定されている。ＡＡ２５６０ α－アミラーゼの成熟アミノ酸配列を、配列番号１として以下に示す。
【0020】
【表1】
【0021】
密接に関連するマルトペンタオース／マルトヘキサオース形成α－アミラーゼは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．７０７由来のものであり、本明細書において「ＡＡ７０７」と称される。ＡＡ７０７ α－の成熟アミノ酸配列を、配列番号２として以下に示す。
【0022】
【表2】
【0023】
別の密接に関連するマルトペンタオース／マルトヘキサオース形成α－アミラーゼは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来のものであり、ＡＡ５６０と称される。ＡＡ５６０の成熟アミノ酸配列を、配列番号３として以下に示す。
【0024】
【表3】
【0025】
アミノ酸配列同一性に基づいて、別の想定されるマルトペンタオース／マルトヘキサオース形成α－アミラーゼは、別のＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来のものであり、本明細書においてＡＡＩ１０と称される。ＡＡＩ１０ α－アミラーゼの成熟アミノ酸配列を、配列番号４として以下に示す。
【0026】
【表4】
【0027】
アミノ酸配列同一性を表１に要約する。ＡＡ７０７、ＡＡ５６０、及びＡＡＩ１０は全て、ＡＡ２５６０に対して８０％超のアミノ酸を有する。
【0028】
【表5】
【0029】
本発明の変異体の１つの特徴は、９１位の変異及び／又はα－アミラーゼＴＩＭバレル構造の底部における少なくとも１つの変異である。バレル底部残基は、ゼロより大きい溶媒アクセス可能表面積を有し、活性部位とは反対側のバレルの側面で、及び各鎖のＮ末端を含有する側面で、コアβバレル構造内にあるか、又はそれに隣接している。溶媒アクセス可能表面積は、ＭＯＥ ２０１８．０１（Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ）を使用して、デフォルトパラメータを使用して、並びにデフォルトパラメータ及びｐｄｂからの１ＢＬＩ構造を使用してＭＯＥ ２０１８．０１で構築されたＡＡ２５６０の相同性モデルに基づいて、計算された。関連残基は、配列番号１の番号を参照して、６、７、４０、９６、９８、１００、２２９、２３０、２３１、２６２、２６３、２８５、２８６、２８７、２８８、３２２、３２３、３２４、３２５、３６２、３６３、及び３６４位にある。ＴＩＭバレル構造の基部の残基ラインは、α－アミラーゼ及び他の多くの酵素の主要な構造的特徴を表す。残基９１における例示的な変異は、極性残基から電荷残基、具体的にはアルギニンなどの正電荷残基への置換であり（すなわち、Ｘ９１Ｒ）、ＡＡ２５６０の場合は特定の置換Ｓ９１Ｒである。
【0030】
バレル底部残基における例示的な変異は、Ｘ４０Ｎ、Ｘ４０Ｄ Ｘ１００Ｆ、Ｘ１００Ｌ、Ｘ２６３Ｙ、Ｘ２８８Ｄ、Ｘ２８８Ｋ、Ｘ２８８Ｑ、Ｘ３２４Ｒ、Ｘ３２４Ｎ、Ｘ３２４Ｍ、Ｘ３６４Ｌ、及びＸ３６４Ｍを含むがこれらに限定されない置換であり、「Ｘ」は、野生型親α－アミラーゼにおける既存のアミノ酸残基である。ＡＡ２５６０を基準とした特定の変異は、Ｔ４０Ｎ、Ｔ４０Ｄ、Ｙ１００Ｆ、Ｙ１００Ｌ、Ｆ２６３Ｙ、Ｓ２８８Ｄ、Ｓ２８８Ｋ、Ｓ２８８Ｑ、Ｉ３２４Ｒ、Ｉ３２４Ｎ、Ｉ３２４Ｍ、Ｙ３６４Ｌ、及びＹ３６４Ｍである。
【0031】
異なる説明では、変異体は、４０位のＮ若しくはＤ、１００位のＦ若しくはＬ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、Ｋ、若しくはＱ、３２４位のＲ、Ｎ、若しくはＭ、又は３６４位のＬ若しくはＭを含む、１つ、２つ、３つ以上の特徴を有する。
【0032】
９１位の変異及びバレル底部の変異は、組み合わせて優れた性能上の利点をもたらすが、各変異のみが、利益を生じさせるように思われ、本変異体のいくつかは、１つの位置／構造のみに変異を有する。
【0033】
変異体は、配列番号１の番号を参照して、表面露出残基１６７、１６９、１７１、１７２、及び１７６を含むループ内の変異を更に特徴とし得る。例示的な変異には、置換、Ｘ１６７Ｆ、Ｘ１６９Ｈ、Ｘ１７１Ｙ、Ｘ１７２Ｒ、Ｘ１７２Ｎ及びＸ１７６Ｓ、並びに具体的には、Ｗ１６７Ｆ、Ｑ１６９Ｈ、Ｒ１７１Ｙ、Ｑ１７２Ｒ、Ｑ１７２Ｎ、及びＲ１７６Ｓが含まれるが、これらに限定されない。異なる説明では、変異体は、配列番号１の番号を参照して、１６７位のＦ、１６９位のＨ、１７１位のＹ、１７２位のＲ若しくはＮ、及び／又は１７６位のＳを含む置換を特徴とする。
【0034】
変異体は、１１６位及び２８１位における変異を更に特徴とし得、これは溶解性に影響を与えると考えられる。これらの位置での例示的な変異は、置換Ｘ１１６Ｒ及びＸ２８１Ｓ、具体的には置換Ｗ１１６Ｒ及びＨ２８１Ｓである。
【0035】
変異体は、配列番号１の番号を参照して、１９０位及び／又は２４４位における安定化変異を更に特徴とし得る。そのような変異は、十分に分類されており、洗浄、穀物処理、及び織物加工の両方に使用される現在市販のα－アミラーゼに含まれる。これらの残基における例示的な変異は、置換Ｘ１９０Ｐ及びＸ２４４Ａ、Ｅ、又はＱ、具体的にはＥ１９０Ｐ、Ｓ２４４Ａ、Ｓ２４４Ｅ、及びＳ２４４Ｑである。２７５位及び２７９位の変異もまた、１９０位の変異と組み合わせて対象となる。
【0036】
変異体は、配列番号１の番号を参照して、１位、７位、１１８位、１９５位、２０２位、２０６位、３２１位、２４５位、及び４５９位の変異を更に特徴とし得、これらは、現在の市販のα－アミラーゼに含まれるか、又はそのような用途に提案されている。
【0037】
変異体は、配列番号１の番号を使用して、Ｒ１８１、Ｇ１８２、Ｔ１８３、及びＧ１８４に対応するカルシウム結合ループに隣接するＸ１Ｇ／Ｓ１Ｘ２Ｇ２モチーフにおいて欠失を更に含み得る。いくつかの実施形態では、変異体α－アミラーゼは、Ｒ１８１及びＧ１８２、又はＴ１８３及びＧ１８４に対応するアミノ酸残基の隣接するペアワイズ欠失を含む。Ｒ１８１及びＧ１８２に対応するアミノ酸残基における欠失は、「ΔＲＧ」と称され得、１８３位の残基に対応するアミノ酸残基（通常はＴ、Ｄ、又はＨ）及びＧ１８４の欠失は、必要に応じて「ΔＴＧ」、「ΔＤＧ」、「ΔＨＧ」などと称され得る。両方のペアワイズ欠失は、α－アミラーゼにおいて同じ効果を生じさせるように思われる。
【0038】
変異体は、（ｉ）例えば、Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｍｉｓ（すなわち、ＢＬＡ及びＬＡＴ）、Ｂ．ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ（すなわち、ＢＳＧ）、及びＢ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｉｆａｃｉｅｎｓ（すなわち、Ｐ００６９２、ＢＡＣＡＭ、及びＢＡＡ）由来の周知であるＢａｃｉｌｌｕｓ α－アミラーゼのうちのいずれか、若しくはそのハイブリッド、（ｉｉ）炭水化物活性酵素データベース（ＣＡＺｙ）族１３ α－アミラーゼとして分類される任意のα－アミラーゼ、又は（ｉｉｉ）記述用語、「Ｔｅｒｍａｍｙｌ様」によって従来から称されている任意のアミラーゼ、に対して、同様の折り畳み及び／又は６０％以上のアミノ酸配列同一性を有する他のα－アミラーゼに使用するための、前述の変異を更に含み得る。例示的なα－アミラーゼには、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＳＧ－１、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．７０７由来のもの、並びにＡ７－７、ＳＰ７２２、ＤＳＭ９０１４、及びＫＳＭ ＡＰ１３７８と称されるα－アミラーゼが含まれるが、これらに限定されない。同様に、マルトペンタオース／マルトヘキサオース生成α－アミラーゼとして説明されているか否かに関わらず、本明細書に記載の変異の組み合わせのいずれも、これらのα－アミラーゼにおいて性能上の利点を生じさせ得る。
【0039】
具体的に企図されるコンビナトリアル変異体が、配列番号１の番号を使用して以下に列挙される。上で考察したように、ΔＲ１８１－ΔＧ１８２の代わりにΔＲ１８３－ΔＴ１８４を有する同様の変異体は、詳述したものと同様に機能すると予想される。
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１６９－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｔ１８３－Ｈ２８１
Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｓ２８８
Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｓ２８８－Ｓ４７４
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｔ４０－Ｓ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｆ２６３
Ｔ４０－Ｓ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｙ３６４
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｓ９１－Ｗ１１６－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｈ２８１－Ｓ２８８
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｙ１００－Ｗ１１６－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｈ２８１
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｆ２６３－Ｈ２８１
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｈ２８１－Ｉ３２４
Ｙ３６４－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１６９－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｔ１８３－Ｈ２８１
Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｓ２８８
Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｓ２８８－Ｓ４７４
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｔ４０－Ｓ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｆ２６３
Ｔ４０－Ｓ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｙ３６４
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｓ９１－Ｗ１１６－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｈ２８１－Ｓ２８８
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｙ１００－Ｗ１１６－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｈ２８１
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４－Ｆ２６３－Ｈ２８１
Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｉ３２４
Ｔ４０－Ｓ９１－Ｑ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０－Ｈ２８１－Ｉ３２４
Ｙ３６４－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
【0040】
以前の操作されたα－アミラーゼを含む関連するα－アミラーゼでは、変異は、以下のように記載され得る。
【0041】
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１６９－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１８３－Ｘ２８１
Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２８８
Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８８－Ｘ４７４
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ４０－Ｘ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２６３
Ｘ４０－Ｘ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ３６４
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ９１－Ｘ１１６－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８１－Ｘ２８８
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１００－Ｘ１１６－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８１
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２６３－Ｘ２８１
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２８１－Ｘ３２４
Ｘ３６４Ｌ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２８８
Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８８－Ｘ４７４
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ４０－Ｘ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２６３
Ｘ４０－Ｘ９１－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ３６４
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ９１－Ｘ１１６－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８１－Ｘ２８８
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１００－Ｘ１１６－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２８１
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ２４４－Ｘ２６３－Ｘ２８１
Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ３２４
Ｘ４０－Ｘ９１－Ｘ１７２－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｘ１９０－Ｘ２８１－Ｘ３２４
Ｘ３６４Ｌ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
【0042】
そのような変異体には、（ａ）４０位のＤ若しくはＮ及び／又は９１位のＲ、並びに、（ｂ）１００位のＦ、２６３位のＹ、２８８位のＤ、３２４位のＭ、Ｎ、若しくはＲ、及び／又は３６４位のＬ、の特徴のうちの２、３、４、５、６、又はそれ以上を有し、任意に（ｃ）１６９位のＨ、１８３Ｍ位のＭ、２８１位のＮ若しくはＳ、１７２位のＮ若しくはＲ、１９０位のＰ、２４４位のＥ、Ｑ、若しくはＲ、４７４位のＲ、１１６位のＲと組み合わせて、任意に、１８１位及び１８２位又は１８３位及び１８４位のペアワイズ欠失と組み合わせて有するものが含まれる。
【0043】
試験された変異体における特定の置換を以下に列挙する。
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１６９Ｈ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｔ１８３Ｍ－Ｈ２８１Ｎ
Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｓ２８８Ｄ
Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｓ２８８Ｄ－Ｓ４７４Ｒ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｍ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｆ２６３Ｙ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｙ３６４Ｌ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｒ
Ｓ９１Ｒ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｈ２８１Ｓ－Ｓ２８８Ｄ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｎ
Ｔ４０Ｄ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｈ２８１Ｓ－Ｉ３２４Ｒ
Ｙ３６４Ｌ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１６９Ｈ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｔ１８３Ｍ－Ｈ２８１Ｎ
Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｓ２８８Ｄ
Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｓ２８８Ｄ－Ｓ４７４Ｒ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｍ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｆ２６３Ｙ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｙ３６４Ｌ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｒ
Ｓ９１Ｒ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｅ－Ｈ２８１Ｓ－Ｓ２８８Ｄ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ
Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ
Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｉ３２４Ｎ
Ｔ４０Ｄ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２－Ｅ１９０Ｐ－Ｈ２８１Ｓ－Ｉ３２４Ｒ
Ｙ３６４Ｌ－ΔＲ１８１－ΔＧ１８２
【0044】
α－アミラーゼが上記に列挙された変異を自然に有する場合（すなわち、野生型α－アミラーゼが、変異として特定された残基を既に含んでいる場合）、その特定の変異が、その分子には適用されないことが理解されるであろう。しかしながら、他に記載の変異は、その位置での自然発生残基と組み合わせて作用し得る。
【0045】
本変異体α－アミラーゼはまた、アミノ酸配列における１つ又は複数のアミノ酸の置換、欠失、又は付加、例えば、１０未満、９未満、８未満、７未満、６未満、５未満、４未満、３未満、又は更には２未満の置換、欠失、又は付加を含み得る。そのような変異体は、それらが由来したα－アミラーゼと同様の活性を有すると予想される。本変異体α－アミラーゼはまた、それらのＮ又はＣ末端に１つ又はいくつかの残基の小さな欠失及び／又は伸長を含み得る。そのような小さな変化は、本明細書で説明される発明概念を無効にする可能性が低い。
【0046】
本アミラーゼは、「前駆体」、「未成熟」、又は「完全長」（その場合、それらは、シグナル配列を含む）、又は「成熟」（その場合、それらはシグナル配列を欠いている）であり得る。ポリペプチドの成熟形態は、一般に最も有用である。特に明記しない限り、本明細書で使用されるアミノ酸残基の番号付けは、それぞれのアミラーゼポリペプチドの成熟形態を指す。
【0047】
いくつかの実施形態では、変異体α－アミラーゼは、配列番号１、２、３、又は４、好ましくは配列番号１に対して、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は更に少なくとも９９％であるが、１００％未満のアミノ酸配列同一性を有する。
【0048】
本発明の組成物におけるアミラーゼの好ましいレベルは、組成物のグラム当たり、約０．０１～約１０ｍｇ、より好ましくは約０．０２～約５ｍｇ、更により好ましくは約０．０３～約２ｍｇの活性アミラーゼを含む。
【0049】
自動食器洗浄組成物
自動食器洗浄組成物は、任意の物理的形態であり得る。組成物は、ルース粉末であっても、ゲルであっても、又は単位用量形態で提示されてもよい。好ましくは、組成物は、単位用量形態であり、単位用量形態には、圧縮錠剤及び水溶性パックが含まれる。本発明の自動食器洗浄組成物は、好ましくは、単位用量形態で提示され、固体、液体、及びゲル形態を含む任意の物理的形態であり得る。本発明の組成物は、多区画型パックの形態、より具体的には、異なる物理的形態の組成物を有する区画、例えば固体形態の組成物を含む区画と液体形態の組成物を含む別の区画とを含む多区画型パックでの提示に非常によく適している。組成物は、好ましくは、ポリビニルアルコールなどの水溶性フィルムに封入される。１００μｍ未満、好ましくは２０～９０μｍの厚さのポリビニルアルコールフィルムに包まれた単位用量形態の組成物が特に好ましい。本発明の洗剤組成物は、約８～約２５グラム、好ましくは約１０～約２０グラムの重量を有する。この重量範囲は、食器洗浄機のディスペンサーに余裕をもって収まる。この範囲は、洗剤としては少ない量に相当するものであるが、洗剤は、上記に述べたような利点の全てを提供するように配合されている。
自動食器洗浄組成物は、任意の物理的形態であり得る。組成物は、ルース粉末であっても、ゲルであっても、又は単位用量形態で提示されてもよい。好ましくは、組成物は、単位用量形態であり、単位用量形態には、圧縮錠剤及び水溶性パックが含まれる。本発明の自動食器洗浄組成物は、好ましくは、単位用量形態で提示され、固体、液体、及びゲル形態を含む任意の物理的形態であり得る。本発明の組成物は、多区画型パックの形態、より具体的には、異なる物理的形態の組成物を有する区画、例えば固体形態の組成物を含む区画と液体形態の組成物を含む別の区画とを含む多区画型パックでの提示に非常によく適している。組成物は、好ましくは、ポリビニルアルコールなどの水溶性フィルムに封入される。１００μｍ未満、好ましくは２０～９０μｍの厚さのポリビニルアルコールフィルムに包まれた単位用量形態の組成物が特に好ましい。本発明の洗剤組成物は、約８～約２５グラム、好ましくは約１０～約２０グラムの重量を有する。この重量範囲は、食器洗浄機のディスペンサーに余裕をもって収まる。この範囲は、洗剤としては少ない量に相当するものであるが、洗剤は、上記に述べたような利点の全てを提供するように配合されている。
【0050】
組成物は、好ましくは、リン酸塩を含まない。本明細書において「リン酸塩を含まない」とは、組成物が、組成物の１重量％未満、好ましくは０．１重量％未満のリン酸塩を含むものとして理解される。
【0051】
錯化剤系
本発明の目的のために、「錯化剤」とは、カルシウム、マグネシウム、鉛、銅、亜鉛、カドミウム、水銀、マンガン、鉄、アルミニウム、及び他のカチオン性多価イオンなどの多価イオンと結合して水溶性の錯体を形成することが可能な化合物のことである。錯化剤は、Ｃａ２＋に対する対数安定性定数（［ｌｏｇ Ｋ］）が少なくとも３である。安定性定数、ｌｏｇ Ｋは、温度２５℃でイオン強度０．１の溶液中で測定される。
本発明の目的のために、「錯化剤」とは、カルシウム、マグネシウム、鉛、銅、亜鉛、カドミウム、水銀、マンガン、鉄、アルミニウム、及び他のカチオン性多価イオンなどの多価イオンと結合して水溶性の錯体を形成することが可能な化合物のことである。錯化剤は、Ｃａ２＋に対する対数安定性定数（［ｌｏｇ Ｋ］）が少なくとも３である。安定性定数、ｌｏｇ Ｋは、温度２５℃でイオン強度０．１の溶液中で測定される。
【0052】
本発明の組成物は、好ましくは、組成物の１０重量％～５０重量％の錯化剤系を含む。錯化剤系は、メチルグリシン二酢酸（ＭＧＤＡ）、クエン酸、グルタミン酸－Ｎ、Ｎ－二酢酸（ＧＬＤＡ）、イミノジコハク酸（ＩＤＳ）、カルボキシメチルイヌリン、Ｌ－アスパラギン酸Ｎ、Ｎ－二酢酸四ナトリウム塩（ＡＳＤＡ）、及びそれらの混合物からなる群から選択される１つ以上の錯化剤を含む。好ましくは、錯化剤系は、組成物の少なくとも１０重量％のＭＧＤＡを含む。錯化系は、クエン酸、（ＧＬＤＡ）、（ＩＤＳ）、カルボキシメチルイヌリン、Ｌ－アスパラギン酸Ｎ、Ｎ－二酢酸四ナトリウム塩（ＡＳＤＡ）、及びそれらの混合物からなる群から選択される錯化剤を更に含み得る。好ましくは、錯化剤系は、組成物の少なくとも１０重量％のＭＧＤＡ及び組成物の少なくとも１０重量％のクエン酸を含む。本発明の目的のために、「酸」という用語は、錯化剤を指すとき、酸及びその塩を含む。
【0053】
好ましい実施形態では、組成物は、組成物の少なくとも１５重量％、より好ましくは２０重量％～４０重量％のＭＧＤＡ、より好ましくはＭＧＤＡの三ナトリウム塩を含む。この高レベルのＭＧＤＡを含む組成物は、硬水において、また長時間及び／又は高温サイクルにおいても、十分機能する。
【0054】
本発明の錯化剤系は、クエン酸を更に含み得る。
【0055】
分散剤ポリマー
分散剤ポリマーは、組成物の約０．１～約２０重量％、好ましくは０．２～約１５重量％、より好ましくは０．３～重量％の任意の好適な量で使用され得る。
分散剤ポリマーは、組成物の約０．１～約２０重量％、好ましくは０．２～約１５重量％、より好ましくは０．３～重量％の任意の好適な量で使用され得る。
【0056】
分散剤ポリマーは、自動食器洗浄プロセスにおいてカルシウム又は炭酸カルシウムを懸濁させることができる。
【0057】
分散剤ポリマーは、２５℃で、３０～２５０ｍｇのＣａ／ｇの分散剤ポリマー、好ましくは３５～２００ｍｇのＣａ／ｇの分散剤ポリマー、より好ましくは４０～１５０ｍｇのＣａ／ｇの分散剤ポリマーの範囲内で、カルシウム結合能を有する。ポリマーが本発明の意味において分散剤ポリマーであるかどうかを判定するために、以下の指示に従い、以下のカルシウム結合能の判定を行う。
【0058】
カルシウム結合能試験方法
本明細書で言及されるカルシウム結合能は、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ ＳｅｖｅｎＭｕｌｔｉ（商標）ベンチトップメータ及びＰｅｒｆｅｃｔＩＯＮ（商標）ｃｏｍｂ Ｃａ組み合わせ電極などのｐＨ／イオンメータを使用して、滴定によって判定される。結合能を測定するために、ビーカー又はターゴトメータポットに好適な加熱撹拌デバイスを２５℃に設定し、メータ付イオン電極を製造元の指示に従って較正する。電極較正の標準濃度は試験濃度をブラケティングし、２５℃で測定しなければならない。脱イオン水１Ｌに３．６７ｇのＣａＣｌ２－２Ｈ２Ｏを添加することによって、１０００ｍｇ／ｇのＣａの原液を調製し、次いで、希釈を行ってそれぞれ１００ｍｇ／ｇ、１０ｍｇ／ｇ、及び１ｍｇ／ｇ濃度のカルシウムを含む、各々１００ｍＬの３つの作用液を調製する。１００ｍｇのＣａ／ｇの作用液を、２５℃で行われる滴定中の初期濃度として使用する。各作用液のイオン強度は、２．５ｇ／ＬのＮａＣｌを各々に添加することによって調節する。１００ｍｇのＣａ／ｇの作用液１００ｍＬを加熱し、２５℃に達するまで撹拌する。カルシウムイオン濃度の初期読み取りは、イオン電極を使用して溶液が２５℃に達したときに行う。次いで、試験ポリマーをカルシウム作用液に徐々に添加し（０．０１ｇ／Ｌ間隔で）、各増分の添加後に５分間撹拌した後に測定する。滴定は、溶液が１ｍｇ／ｇのカルシウムに達したときに停止する。残りの２つのカルシウム濃度の作用液を使用して、滴定手順を繰り返す。試験ポリマーの結合能は、添加された試験ポリマーのグラム／Ｌに対して測定されたカルシウム濃度の直線勾配として計算される。
本明細書で言及されるカルシウム結合能は、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ ＳｅｖｅｎＭｕｌｔｉ（商標）ベンチトップメータ及びＰｅｒｆｅｃｔＩＯＮ（商標）ｃｏｍｂ Ｃａ組み合わせ電極などのｐＨ／イオンメータを使用して、滴定によって判定される。結合能を測定するために、ビーカー又はターゴトメータポットに好適な加熱撹拌デバイスを２５℃に設定し、メータ付イオン電極を製造元の指示に従って較正する。電極較正の標準濃度は試験濃度をブラケティングし、２５℃で測定しなければならない。脱イオン水１Ｌに３．６７ｇのＣａＣｌ２－２Ｈ２Ｏを添加することによって、１０００ｍｇ／ｇのＣａの原液を調製し、次いで、希釈を行ってそれぞれ１００ｍｇ／ｇ、１０ｍｇ／ｇ、及び１ｍｇ／ｇ濃度のカルシウムを含む、各々１００ｍＬの３つの作用液を調製する。１００ｍｇのＣａ／ｇの作用液を、２５℃で行われる滴定中の初期濃度として使用する。各作用液のイオン強度は、２．５ｇ／ＬのＮａＣｌを各々に添加することによって調節する。１００ｍｇのＣａ／ｇの作用液１００ｍＬを加熱し、２５℃に達するまで撹拌する。カルシウムイオン濃度の初期読み取りは、イオン電極を使用して溶液が２５℃に達したときに行う。次いで、試験ポリマーをカルシウム作用液に徐々に添加し（０．０１ｇ／Ｌ間隔で）、各増分の添加後に５分間撹拌した後に測定する。滴定は、溶液が１ｍｇ／ｇのカルシウムに達したときに停止する。残りの２つのカルシウム濃度の作用液を使用して、滴定手順を繰り返す。試験ポリマーの結合能は、添加された試験ポリマーのグラム／Ｌに対して測定されたカルシウム濃度の直線勾配として計算される。
【0059】
分散剤ポリマーは、好ましくは、６を超えるｐＨを有する水溶液中に溶解した場合に、負の正味電荷を有する。
【0060】
分散剤ポリマーは、より低いｐＨで負電荷を増加させ、硬水中でのその分散特性を改善するために、スルホン化カルボン酸エステル又はアミドもまた有し得る。好ましい分散剤ポリマーは、スルホン化／カルボキシル化ポリマー、すなわち、スルホン化モノマー及びカルボキシル化モノマーの両方を含むポリマーである。
【0061】
好ましくは、分散剤ポリマーは、ポリカルボン酸のスルホン化誘導体であり、２、３、４、又はそれ以上の異なるモノマー単位を含み得る。好ましいコポリマーは、以下を含有する。
【0062】
以下の一般式（ＩＩＩ）を有するカルボン酸モノマーに由来する少なくとも１つの構造単位：
【0063】
【化1】
【0064】
好ましいカルボン酸モノマーは、アクリル酸、マレイン酸、無水マレイン酸、イタコン酸、シトラコン酸、２－フェニルアクリル酸、桂皮酸、クロトン酸、フマル酸、メタクリル酸、２－エチルアクリル酸、メチレンマロン酸、又はソルビン酸のうちの１つ以上を含む。アクリル及びメタクリル酸がより好ましい。
【0065】
任意に、以下の一般式（ＩＶ）を有する少なくとも１つの非イオン性モノマーに由来する１つ以上の構造単位：
【0066】
【化2】
【0067】
好ましい非イオン性モノマーには、ブテン、イソブテン、ペンテン、２－メチルペント－１－エン、３－メチルペント－１－エン、２，４，４－トリメチルペント－１－エン、２，４，４－トリメチルペント－２－エン、シクロペンテン、メチルシクロペンテン、２－メチル－３－メチル－シクロペンテン、ヘキセン、２，３－ジメチルヘキサ－１－エン、２，４－ジメチルヘキサ－１－エン、２，５－ジメチルヘキサ－１－エン、３，５－ジメチルヘキサ－１－エン、４，４－ジメチルヘキサ－１－エン、シクロヘキセン、メチルシクロヘキセン、シクロヘプテン、１０個以上の炭素原子を有する、デカ－１－エン、ドデカ－１－エン、ヘキサデカ－１－エン、オクタデカ－１－エン及びドコサ－１－エンなどのα－オレフィンのうちの１つ以上が含まれ、好ましい芳香族モノマーは、スチレン、α－メチルスチレン、３－メチルスチレン、４－ドデシルスチレン、２－エチル－４－ベジルスチレン（bezylstyrene）、４－シクロヘキシルスチレン、４－プロピルスチロール、１－ビニルナフタレン、２－ビニルナフタレンであり、好ましいカルボン酸エステルモノマーは、メチル（メタ）アクリレート、エチル（メタ）アクリレート、プロピル（メタ）アクリレート、ｔ－ブチル（メタ）アクリレート、ペンチル（メタ）アクリレート、ヘキシル（メタ）アクリレート、２－エチルヘキシル（メタ）アクリレート、オクチル（メタ）アクリレート、ラウリル（メタ）アクリレート、ステアリル（メタ）アクリレート、及びベヘニル（メタ）アクリレートであり、好ましいアミドは、Ｎ－メチルアクリルアミド、Ｎ－エチルアクリルアミド、Ｎ－ｔ－ブチルアクリルアミド、Ｎ－２－エチルヘキシルアクリルアミド、Ｎ－オクチルアクリルアミド、Ｎ－ラウリルアクリルアミド、Ｎ－ステアリルアクリルアミド、Ｎ－ベヘニルアクリルアミドである。
【0068】
以下の一般式（Ｖ）及び（ＶＩ）を有する少なくとも１つのスルホン酸モノマーに由来する少なくとも１つの構造単位：
【0069】
【化3】
【0070】
好ましいスルホン化モノマーには、１－アクリルアミド－１－プロパンスルホン酸、２－アクリルアミド－２－プロパンスルホン酸、２－アクリルアミド－２－メチル－１－プロパンスルホン酸、２－メタクリルアミド－２－メチル－１－プロパンスルホン酸、３－メタクリルアミド－２－ヒドロキシ－プロパンスルホン酸、アリルスルホン酸、メタリルスルホン酸、アリルオキシベンゼンスルホン酸、メタリルオキシベンゼンスルホン酸、２－ヒドロキシ－３－（２－プロペニルオキシ）プロパンスルホン酸、２－メチル－２－プロペン－１－スルホン酸、スチレンスルホン酸、ビニルスルホン酸、３－スルホプロピル、３－スルホ－プロピルメタクリレート、スルホメタクリルアミド、スルホメチルメタクリルアミド、及び当該酸の混合物、又はそれらの水溶性塩のうちの１つ以上が含まれる。
【0071】
好ましくは、このポリマーは、以下のレベルのモノマー、すなわち、ポリマーの約４０～約９０重量％、好ましくは約６０～約９０重量％の１つ以上のカルボン酸モノマー、ポリマーの約５～約５０重量％、好ましくは約１０～約４０重量％の１つ以上のスルホン酸モノマー、及び任意にポリマーの約１重量％～約３０重量％、好ましくは約２～約２０重量％の１つ以上の非イオン性モノマーを含む。特に好ましいポリマーは、ポリマーの約７０重量％～約８０重量％の少なくとも１つのカルボン酸モノマー及びポリマーの約２０重量％～約３０重量％の少なくとも１つのスルホン酸モノマーを含む。
【0072】
ポリマー中、カルボン酸基又はスルホン酸基の全て又はいくつかが中和形態で存在していてよく、すなわちいくつか又は全ての酸性基中のカルボン酸基及び／又はスルホン酸基の酸性水素原子が、金属イオン、好ましくはアルカリ金属イオン、特にナトリウムイオンと置き換えられ得る。
【0073】
カルボン酸は、好ましくは（メタ）アクリル酸である。スルホン酸モノマーは、好ましくは２－アクリルアミド－２－プロパンスルホン酸（ＡＭＰＳ）である。
【0074】
好ましい市販のポリマーとしては、Ａｌｃｏ Ｃｈｅｍｉｃａｌによって供給されるＡｌｃｏｓｐｅｒｓｅ ２４０、Ａｑｕａｔｒｅａｔ ＡＲ ５４０、及びＡｑｕａｔｒｅａｔ ＭＰＳ、Ｒｏｈｍ ＆ Ｈａａｓによって供給されるＡｃｕｍｅｒ ３１００、Ａｃｕｍｅｒ ２０００、Ａｃｕｓｏｌ ５８７Ｇ、及びＡｃｕｓｏｌ ５８８Ｇ、ＢＦ Ｇｏｏｄｒｉｃｈによって供給されるＧｏｏｄｒｉｃｈ Ｋ－７９８、Ｋ－７７５、及びＫ－７９７、並びにＩＳＰ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．によって供給されるＡＣＰ１０４２が含まれる。特に好ましいポリマーは、Ｒｏｈｍ ＆ Ｈａａｓによって供給されるＡｃｕｓｏｌ ５８７Ｇ及びＡｃｕｓｏｌ ５８８Ｇである。
【0075】
好適な分散剤ポリマーには、低分子量のアニオン性カルボン酸ポリマーが含まれる。それらは、約２００，０００ｇ／モル以下、又は約７５，０００ｇ／モル以下、又は約５０，０００ｇ／モル以下、又は約３，０００ｇ／モル～約５０，０００ｇ／モル、好ましくは約５，０００ｇ／モル～約４５，０００ｇ／モルの重量平均分子量を有するホモポリマー又はコポリマーであり得る。分散剤ポリマーは、１，０００～２０，０００、特に２，０００～１０，０００、及び特に好ましくは３，０００～５，０００の平均分子量を有するポリアクリレートの低分子量ホモポリマーであってもよい。
【0076】
分散剤ポリマーは、７０，０００未満の分子量を有する、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、アクリル酸及び／又はメタクリル酸とマレイン酸のコポリマー、並びにアクリル酸及び／又はメタクリル酸とフマル酸のコポリマーであってもよい。それらの分子量は、２，０００～８０，０００、より好ましくは２０，０００～５０，０００、及び特に３０，０００～４０，０００ｇ／モルの範囲であり、（メタ）アクリレート対マレエート又はフマレートセグメントの比は、３０：１～１：２の範囲である。
【0077】
分散剤ポリマーは、３，０００～１００，０００、代替的に４，０００～２０，０００の分子量を有するアクリルアミドとアクリレートとのコポリマーであってもよく、分散剤ポリマーの５０重量％未満、代替的に２０重量％未満のアクリルアミド含有量も使用され得る。代替的に、そのような分散剤ポリマーは、４，０００～２０，０００の分子量及びポリマーの０重量％～１５重量％のアクリルアミド含有量を有してもよい。
【0078】
本明細書に好適な分散剤ポリマーには、イタコン酸ホモポリマー及びコポリマーも含まれる。
【0079】
代替的に、分散剤ポリマーは、アルコキシル化ポリアルキレンイミン、アルコキシル化ポリカルボキシレート、ポリエチレングリコール、スチレンコポリマー、セルロースサルフェートエステル、カルボキシル化ポリサッカライド、両親媒性グラフトコポリマー、及びそれらの混合物からなる群から選択され得る。
【0080】
漂白剤系
本発明の組成物は、好ましくは、高レベルの漂白剤、好ましくは過炭酸塩を、漂白活性化剤又は漂白触媒又はその両方と組み合わせて含む、漂白剤系を含む。好ましくは、漂白活性化剤は、ＴＡＥＤであり、漂白触媒は、マンガン漂白触媒である。
本発明の組成物は、好ましくは、高レベルの漂白剤、好ましくは過炭酸塩を、漂白活性化剤又は漂白触媒又はその両方と組み合わせて含む、漂白剤系を含む。好ましくは、漂白活性化剤は、ＴＡＥＤであり、漂白触媒は、マンガン漂白触媒である。
【0081】
漂白剤
本発明の組成物は、好ましくは、組成物の約１０～約２０重量％、より好ましくは約１２～約１８重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸塩を含む。
本発明の組成物は、好ましくは、組成物の約１０～約２０重量％、より好ましくは約１２～約１８重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸塩を含む。
【0082】
無機及び有機漂白剤が、本明細書における使用に好適である。無機漂白剤には、過ホウ酸塩、過炭酸塩、過リン酸塩、過硫酸塩、及び過ケイ酸塩などの過水和塩が含まれる。無機過水和塩は、通常、アルカリ金属塩である。無機過水和塩は、追加の保護なしの結晶性固体として含まれ得る。代替的に、塩はコーティングされていてもよい。好適なコーティングには、硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ケイ酸ナトリウム、及びそれらの混合物が含まれる。当該コーティングは、表面に塗布される混合物として塗布されるか、又は順次積層して塗布され得る。
【0083】
アルカリ金属過炭酸塩、特に過炭酸ナトリウムは、本明細書での使用に好ましい漂白剤である。過炭酸塩は、最も好ましくは、製品内安定性を提供するコーティングされた形態で製品に組み込まれる。
【0084】
過酸化モノ過硫酸カリウムは、本明細書で有用な別の無機過水和塩である。典型的な有機漂白剤は、有機ペルオキシ酸、特にドデカンジペルオキシ酸、テトラデカンジペルオキシ酸、及びヘキサデカンジペルオキシ酸である。モノ及びジペルアゼライン酸、モノ及びジペルブラシル酸も、本明細書において好適である。ジアシル及びテトラアシル過酸化物、例えば過酸化ジベンゾイル及び過酸化ジラウロイルは、本発明の関連において使用可能な他の有機過酸化物である。
【0085】
更なる典型的な有機漂白剤としては、ペルオキシ酸が含まれ、具体例は、アルキルペルオキシ酸及びアリールペルオキシ酸である。好ましい代表例は、（ａ）ペルオキシ安息香酸及びその環置換の誘導体、例えばアルキルペルオキシ安息香酸の他、ペルオキシ－α－ナフトエ酸及びモノペルフタル酸マグネシウム、（ｂ）脂肪族又は置換脂肪族ペルオキシ酸、例えばペルオキシラウリン酸、ペルオキシステアリン酸、ε－フタルイミドペルオキシカプロン酸［フタロイミノペルオキシヘキサン酸（ＰＡＰ）］、ｏ－カルボキシベンズアミドペルオキシカプロン酸、Ｎ－ノネニルアミドペルアジピン酸及びＮ－ノネニルアミドペルスクシネート、並びに（ｃ）脂肪族及び芳香脂肪族ペルオキシジカルボン酸、例えば１，１２－ジペルオキシカルボン酸、１，９－ジペルオキシアゼライン酸、ジペルオキシセバシン酸、ジペルオキシブラシル酸、ジペルオキシフタル酸、２－デシルジペルオキシブタン－１，４－二酸、Ｎ，Ｎ－テレフタロイルジ（６－アミノペルカプロン酸）である。
【0086】
漂白活性化剤
漂白活性化剤は、典型的には、６０℃以下の温度での洗浄の過程で漂白作用を強化する有機過酸前駆体である。本明細書での使用に好適な漂白活性化剤には、過加水分解条件下で、好ましくは１～１２個の炭素原子、特に２～１０個の炭素原子を有する脂肪族ペルオキソカルボン酸（peroxoycarboxylic acid）、及び／又は任意に置換された過安息香酸を与える化合物が含まれる。好適な物質は、炭素原子の数が指定されているＯ－アシル基及び／若しくはＮ－アシル基並び／又は任意に置換されたベンゾイル基を有する。ポリアシル化アルキレンジアミン、特にテトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、アシル化トリアジン誘導体、特に１，５－ジアセチル－２，４－ジオキソヘキサヒドロ－１，３，５－トリアジン（ＤＡＤＨＴ）、アシル化グリコールウリル、特にテトラアセチルグリコールウリル（ＴＡＧＵ）、Ｎ－アシルイミド、特にＮ－ノナノイルスクシンイミド（ＮＯＳＩ）、アシル化フェノールスルホネート、特にｎ－ノナノイル－又はイソノナノイルオキシベンゼンスルホネート（ｎ－又はイソ－ＮＯＢＳ）、デカノイルオキシ安息香酸（ＤＯＢＡ）、無水カルボン酸、特に無水フタル酸、アシル化多価アルコール、特にトリアセチン、二酢酸エチレングリコール及び２，５－ジアセトキシ－２，５－ジヒドロフラン、並びにクエン酸トリエチルアセチル（ＴＥＡＣ）も好まれる。存在する場合、本発明の組成物は、組成物の０．０１～５、好ましくは０．２～２重量％の漂白活性化剤、好ましくはＴＡＥＤを含む。
漂白活性化剤は、典型的には、６０℃以下の温度での洗浄の過程で漂白作用を強化する有機過酸前駆体である。本明細書での使用に好適な漂白活性化剤には、過加水分解条件下で、好ましくは１～１２個の炭素原子、特に２～１０個の炭素原子を有する脂肪族ペルオキソカルボン酸（peroxoycarboxylic acid）、及び／又は任意に置換された過安息香酸を与える化合物が含まれる。好適な物質は、炭素原子の数が指定されているＯ－アシル基及び／若しくはＮ－アシル基並び／又は任意に置換されたベンゾイル基を有する。ポリアシル化アルキレンジアミン、特にテトラアセチルエチレンジアミン（ＴＡＥＤ）、アシル化トリアジン誘導体、特に１，５－ジアセチル－２，４－ジオキソヘキサヒドロ－１，３，５－トリアジン（ＤＡＤＨＴ）、アシル化グリコールウリル、特にテトラアセチルグリコールウリル（ＴＡＧＵ）、Ｎ－アシルイミド、特にＮ－ノナノイルスクシンイミド（ＮＯＳＩ）、アシル化フェノールスルホネート、特にｎ－ノナノイル－又はイソノナノイルオキシベンゼンスルホネート（ｎ－又はイソ－ＮＯＢＳ）、デカノイルオキシ安息香酸（ＤＯＢＡ）、無水カルボン酸、特に無水フタル酸、アシル化多価アルコール、特にトリアセチン、二酢酸エチレングリコール及び２，５－ジアセトキシ－２，５－ジヒドロフラン、並びにクエン酸トリエチルアセチル（ＴＥＡＣ）も好まれる。存在する場合、本発明の組成物は、組成物の０．０１～５、好ましくは０．２～２重量％の漂白活性化剤、好ましくはＴＡＥＤを含む。
【0087】
漂白触媒
本明細書での組成物は、好ましくは、漂白触媒、好ましくは金属含有漂白触媒を含有する。より好ましくは、金属含有漂白触媒は、遷移金属含有漂白触媒、特にマンガン又はコバルト含有漂白触媒である。
本明細書での組成物は、好ましくは、漂白触媒、好ましくは金属含有漂白触媒を含有する。より好ましくは、金属含有漂白触媒は、遷移金属含有漂白触媒、特にマンガン又はコバルト含有漂白触媒である。
【0088】
本明細書での使用に好ましい漂白触媒には、マンガントリアザシクロノナン及び関連する錯体、Ｃｏ、Ｃｕ、Ｍｎ、及びＦｅビスピリジルアミン及び関連する錯体、並びにペンタミン酢酸コバルト（ＩＩＩ）及び関連する錯体が含まれる。本明細書での使用に特に好ましい漂白触媒は、１，４，７－トリメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ－ＴＡＣＮ）及び１，２，４，７－テトラメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ／Ｍｅ－ＴＡＣＮ）である。本明細書での使用に特に好ましい組成物には、１，４，７－トリメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ－ＴＡＣＮ）及び／又は１，２，４，７－テトラメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ／Ｍｅ－ＴＡＣＮ）が含まれる。
【0089】
好ましくは、本発明の組成物は、組成物の０．００１～０．５重量％、より好ましくは０．００２～０．０５重量％、より好ましくは０．００５～０．０７５重量％の漂白触媒を含む。好ましくは、漂白触媒は、マンガン漂白触媒である。
【0090】
無機ビルダー
本発明の組成物は、好ましくは、無機ビルダーを含む。好適な無機ビルダーは、炭酸塩、ケイ酸塩、及びそれらの混合物からなる群から選択される。炭酸ナトリウムが、本明細書での使用に特に好ましい。好ましくは、本発明の組成物は、組成物の５～６０重量％、より好ましくは１０～５０重量％、及び特に１５～４５重量％の炭酸ナトリウムを含む。
本発明の組成物は、好ましくは、無機ビルダーを含む。好適な無機ビルダーは、炭酸塩、ケイ酸塩、及びそれらの混合物からなる群から選択される。炭酸ナトリウムが、本明細書での使用に特に好ましい。好ましくは、本発明の組成物は、組成物の５～６０重量％、より好ましくは１０～５０重量％、及び特に１５～４５重量％の炭酸ナトリウムを含む。
【0091】
界面活性剤
本明細書での使用に好適な界面活性剤には、非イオン性界面活性剤が含まれ、好ましくは、組成物は、いかなる他の界面活性剤も含まない。従来的には、非イオン性界面活性剤は、表面修飾目的、特に膜形成及び斑点形成を回避し、かつ光沢を改善するためのシート化を目的として、自動食器洗浄において使用されてきた。非イオン性界面活性剤は、汚れの再付着の防止にも寄与することができることが判明している。
本明細書での使用に好適な界面活性剤には、非イオン性界面活性剤が含まれ、好ましくは、組成物は、いかなる他の界面活性剤も含まない。従来的には、非イオン性界面活性剤は、表面修飾目的、特に膜形成及び斑点形成を回避し、かつ光沢を改善するためのシート化を目的として、自動食器洗浄において使用されてきた。非イオン性界面活性剤は、汚れの再付着の防止にも寄与することができることが判明している。
【0092】
好ましくは、本発明の組成物は、非イオン性界面活性剤又は非イオン性界面活性剤系を含み、より好ましくは、非イオン性界面活性剤又は非イオン性界面活性剤系は、蒸留水中、濃度１％で測定した場合に４０～７０℃、好ましくは４５～６５℃の転相温度を有する。「非イオン性界面活性剤系」とは、本明細書において、２つ以上の非イオン性界面活性剤の混合物を意味する。非イオン性界面活性剤系が、本明細書での使用に好ましい。これらは、単一の非イオン性界面活性剤よりも、製品中で、改善された洗浄及び仕上がり特性並びに良好な安定性を有すると考えられる。
【0093】
転相温度とは、それよりも低い温度では界面活性剤又はその混合物が油膨張ミセルとして水性相中に優先的に分配され、それよりも高い温度では水膨張逆ミセルとして油性相に優先的に分配される温度である。転相温度は、混濁が生じる温度を識別することによって視覚的に判断することができる。
【0094】
非イオン性界面活性剤又は系の転相温度は、以下のように判断することができる。蒸留水中、溶液の１重量％の対応する界面活性剤又は混合物を含有する溶液を調製する。溶液を軽く撹拌した後、転相温度を分析して、プロセスが化学平衡で生じることを確実にする。転相温度は、７５ｍｍ密封ガラス試験管中に溶液を浸漬することによって熱安定性の浴内で測定する。漏れがないことを確実にするために、転相温度の測定の前後に試験管を秤量しておく。温度が事前予測した転相温度より数度下に達するまで、温度を１℃／分未満の速度で徐々に増加させる。転相温度は、濁りの最初の兆候があった時点で視覚的に判断される。
【0095】
好適な非イオン性界面活性剤には、ｉ）６～２０個の炭素原子を有するモノヒドロキシアルカノール又はアルキルフェノール（alkyphenol）と、アルコール又はアルキルフェノール１モル当たり、好ましくは少なくとも１２モル、特に好ましくは少なくとも１６モル、及び更により好ましくは少なくとも２０モルのエチレンオキシドとの反応によって調製される、エトキシル化非イオン性界面活性剤、ｉｉ）６～２０個の炭素原子並びに少なくとも１つのエトキシ基及びプロポキシ基を有するアルコールアルコキシル化界面活性剤、が含まれる。界面活性剤ｉ）とｉｉ）との混合物が、本明細書での使用に好ましい。
【0096】
他の好適な非イオン性界面活性剤は、以下の式で表されるエポキシキャップ化ポリ（オキシアルキル化）アルコールであり、
Ｒ１Ｏ［ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ］ｘ［ＣＨ２ＣＨ２Ｏ］ｙ［ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）Ｒ２］ （Ｉ）
式中、Ｒ１は、４～１８個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖の脂肪族炭化水素ラジカルであり、Ｒ２は、２～２６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖の脂肪族炭化水素ラジカルであり、ｘは、０．５～１．５、より好ましくは約１の平均値を有する整数であり、ｙは、少なくとも１５、より好ましくは少なくとも２０の値を有する整数である。
Ｒ１Ｏ［ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ］ｘ［ＣＨ２ＣＨ２Ｏ］ｙ［ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）Ｒ２］ （Ｉ）
式中、Ｒ１は、４～１８個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖の脂肪族炭化水素ラジカルであり、Ｒ２は、２～２６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖の脂肪族炭化水素ラジカルであり、ｘは、０．５～１．５、より好ましくは約１の平均値を有する整数であり、ｙは、少なくとも１５、より好ましくは少なくとも２０の値を有する整数である。
【0097】
好ましくは、式Ｉの界面活性剤は、末端エポキシド単位［ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）Ｒ２］中に少なくとも約１０個の炭素原子を有する。式Ｉの好適な界面活性剤は、本発明によると、例えば、Ｏｌｉｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによる１９９４年１０月１３日に公開された国際公開第９４／２２８００号に記載の、Ｏｌｉｎ ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎのＰＯＬＹ－ＴＥＲＧＥＮＴ（登録商標）ＳＬＦ－１８Ｂ非イオン性界面活性剤である。
【0098】
酵素
プロテアーゼ
本発明の組成物は、１つ以上のプロテアーゼを含み得る。２つ以上のプロテアーゼの混合物は、特に再付着防止剤及び／又はスルホン化ポリマーとともに使用されるとき、より広い温度、サイクル継続時間、及び／又は基質範囲にわたって洗浄の増強に貢献することができ、優れた光沢利点を提供することができる。
プロテアーゼ
本発明の組成物は、１つ以上のプロテアーゼを含み得る。２つ以上のプロテアーゼの混合物は、特に再付着防止剤及び／又はスルホン化ポリマーとともに使用されるとき、より広い温度、サイクル継続時間、及び／又は基質範囲にわたって洗浄の増強に貢献することができ、優れた光沢利点を提供することができる。
【0099】
本発明での使用に好適なプロテアーゼには、メタロプロテアーゼ及びセリンプロテアーゼが含まれ、サブチリシン（ＥＣ ３．４．２１．６２）などの中性又はアルカリ性微生物セリンプロテアーゼが含まれる。好適なプロテアーゼには、動物、植物、又は微生物起源のものが含まれる。一態様では、そのような好適なプロテアーゼは、微生物起源のものであってもよい。好適なプロテアーゼには、前述の好適なプロテアーゼの化学的又は遺伝的に修飾された変異体が含まれる。一態様では、好適なプロテアーゼは、アルカリ性微生物プロテアーゼ又は／及びトリプシン型プロテアーゼなどのセリンプロテアーゼであってよい。好適な中性又はアルカリ性プロテアーゼの例としては、以下が挙げられる。
（ａ）サブチリシン（ＥＣ ３．４．２１．６２）、特に国際公開第２００４／０６７７３７号、同第２０１５／０９１９８９号、同第２０１５／０９１９９０号、同第２０１５／０２４７３９号、同第２０１５／１４３３６０号、米国特許第６，３１２，９３６（Ｂ１）号、同第５，６７９，６３０号、同第４，７６０，０２５号、独国特許公開第１０２００６０２２２１６（Ａ１）号、同第１０２００６０２２２２４（Ａ１）号、国際公開第２０１５／０８９４４７号、同第２０１５／０８９４４１号、同第２０１６／０６６７５６号、同第２０１６／０６６７５７号、同第２０１６／０６９５５７号、同第２０１６／０６９５６３号、同第２０１６／０６９５６９号に記載されている、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｂ．ｌｅｎｔｕｓ、Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂ．ｇｉｂｓｏｎｉｉ、及びＢ．ａｋｉｂａｉｉなどのＢａｃｉｌｌｕｓに由来するもの。
（ｂ）国際公開第８９／０６２７０号に記載されているＦｕｓａｒｉｕｍプロテアーゼ、並びに国際公開第０５／０５２１６１号及び同第０５／０５２１４６号に記載されているＣｅｌｌｕｍｏｎａｓに由来するキモトリプシンプロテアーゼを含むトリプシン（例えば、ブタ又はウシ起源）などのトリプシン型又はキモトリプシン型プロテアーゼ。
（ｃ）メタロプロテアーゼ、特に国際公開第０７／０４４９９３（Ａ２）号に記載されているＢａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓに由来するもの、国際公開第２０１４／１９４０３２号、同第２０１４／１９４０５４号、及び同第２０１４／１９４１１７号に記載されている、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ、又はＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｐ．由来のもの、国際公開第２０１５／１９３４８８号に記載されているＫｒｉｂｅｌｌａ ａｌｌｕｍｉｎｏｓａ由来のもの、並びに国際公開第２０１６／０７５０７８号に記載されているＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ及びＬｙｓｏｂａｃｔｅｒ由来のもの。
（ｄ）国際公開第９２／１７５７７号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）に記載されているＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＴＹ１４５、ＮＣＩＭＢ ４０３３９由来のサブチラーゼに対して少なくとも９０％の同一性を有するプロテアーゼ、国際公開第２０１５／０２４７３９号及び同第２０１６／０６６７５７号に記載されているこのＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ＴＹ１４５サブチラーゼの変異体を含む。
（ａ）サブチリシン（ＥＣ ３．４．２１．６２）、特に国際公開第２００４／０６７７３７号、同第２０１５／０９１９８９号、同第２０１５／０９１９９０号、同第２０１５／０２４７３９号、同第２０１５／１４３３６０号、米国特許第６，３１２，９３６（Ｂ１）号、同第５，６７９，６３０号、同第４，７６０，０２５号、独国特許公開第１０２００６０２２２１６（Ａ１）号、同第１０２００６０２２２２４（Ａ１）号、国際公開第２０１５／０８９４４７号、同第２０１５／０８９４４１号、同第２０１６／０６６７５６号、同第２０１６／０６６７５７号、同第２０１６／０６９５５７号、同第２０１６／０６９５６３号、同第２０１６／０６９５６９号に記載されている、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｂ．ｌｅｎｔｕｓ、Ｂ．ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ、Ｂ．ｇｉｂｓｏｎｉｉ、及びＢ．ａｋｉｂａｉｉなどのＢａｃｉｌｌｕｓに由来するもの。
（ｂ）国際公開第８９／０６２７０号に記載されているＦｕｓａｒｉｕｍプロテアーゼ、並びに国際公開第０５／０５２１６１号及び同第０５／０５２１４６号に記載されているＣｅｌｌｕｍｏｎａｓに由来するキモトリプシンプロテアーゼを含むトリプシン（例えば、ブタ又はウシ起源）などのトリプシン型又はキモトリプシン型プロテアーゼ。
（ｃ）メタロプロテアーゼ、特に国際公開第０７／０４４９９３（Ａ２）号に記載されているＢａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓに由来するもの、国際公開第２０１４／１９４０３２号、同第２０１４／１９４０５４号、及び同第２０１４／１９４１１７号に記載されている、Ｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｔｈｅｒｍｏａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ、又はＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｐ．由来のもの、国際公開第２０１５／１９３４８８号に記載されているＫｒｉｂｅｌｌａ ａｌｌｕｍｉｎｏｓａ由来のもの、並びに国際公開第２０１６／０７５０７８号に記載されているＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ及びＬｙｓｏｂａｃｔｅｒ由来のもの。
（ｄ）国際公開第９２／１７５７７号（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ）に記載されているＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＴＹ１４５、ＮＣＩＭＢ ４０３３９由来のサブチラーゼに対して少なくとも９０％の同一性を有するプロテアーゼ、国際公開第２０１５／０２４７３９号及び同第２０１６／０６６７５７号に記載されているこのＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ＴＹ１４５サブチラーゼの変異体を含む。
【0100】
本発明の組成物の特に好ましい追加のプロテアーゼは、配列番号６に対する以下の位置のうちの１つ以上、又は２つ以上、又は３つ以上に置換を含む、配列番号６と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％、更により好ましくは少なくとも９９％、及び特に１００％の同一性を示すプロテアーゼである。
Ｓ３Ｖ、Ｓ９Ｒ、Ａ１３Ｖ、Ａ１５Ｔ、Ｇ２０＊、Ｌ２１Ｆ、Ｉ３５Ｖ、Ｎ６０Ｄ、Ｖ６６Ａ、Ｎ７４Ｄ、Ｓ８５Ｎ／Ｒ、Ｓ９７ＳＥ、Ｓ９７ＡＤ、Ｓ９７Ｄ／Ｇ、Ｓ９９Ｇ／Ｍ／Ｄ／Ｅ、Ｓ１０１Ａ、Ｖ１０２Ｅ／Ｉ、Ｇ１１６Ｖ／Ｒ、Ｓ１２６Ｆ／Ｌ、Ｐ１２７Ｑ、Ｓ１２８Ａ、Ｓ１５４Ｄ、Ｇ１５７Ｓ、Ｙ１６１Ａ、Ｒ１６４Ｓ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２００Ｃ／Ｅ／Ｉ／Ｋ／Ｔ／Ｖ／Ｗ／Ｌ、Ｙ２０３Ｗ、Ｎ２１２Ｄ、Ｍ２１６Ｓ／Ｆ、Ａ２２２Ｖ、Ｑ２３９Ｒ／Ｆ、Ｔ２４９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ、及びＬ２５６Ｅ／Ｎ／Ｑ／Ｄ
Ｓ３Ｖ、Ｓ９Ｒ、Ａ１３Ｖ、Ａ１５Ｔ、Ｇ２０＊、Ｌ２１Ｆ、Ｉ３５Ｖ、Ｎ６０Ｄ、Ｖ６６Ａ、Ｎ７４Ｄ、Ｓ８５Ｎ／Ｒ、Ｓ９７ＳＥ、Ｓ９７ＡＤ、Ｓ９７Ｄ／Ｇ、Ｓ９９Ｇ／Ｍ／Ｄ／Ｅ、Ｓ１０１Ａ、Ｖ１０２Ｅ／Ｉ、Ｇ１１６Ｖ／Ｒ、Ｓ１２６Ｆ／Ｌ、Ｐ１２７Ｑ、Ｓ１２８Ａ、Ｓ１５４Ｄ、Ｇ１５７Ｓ、Ｙ１６１Ａ、Ｒ１６４Ｓ、Ａ１８８Ｐ、Ｖ１９９Ｉ、Ｑ２００Ｃ／Ｅ／Ｉ／Ｋ／Ｔ／Ｖ／Ｗ／Ｌ、Ｙ２０３Ｗ、Ｎ２１２Ｄ、Ｍ２１６Ｓ／Ｆ、Ａ２２２Ｖ、Ｑ２３９Ｒ／Ｆ、Ｔ２４９Ｒ、Ｎ２５５Ｄ、及びＬ２５６Ｅ／Ｎ／Ｑ／Ｄ
【0101】
好ましいプロテアーゼには、以下の変異を含む、配列番号６に対して少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するものが含まれる。
Ｓ９Ｒ＋Ａ１３Ｖ＋Ａ１５Ｔ＋ｌ３５Ｖ＋Ｎ６０Ｄ＋Ｑ２３９Ｆ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｇ２０＊＋Ｌ２１Ｆ＋Ｎ６０Ｄ＋Ｑ２３９Ｎ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｓ９７Ｇ＋Ａ２２２Ｖ＋Ｑ２３９Ｒ＋Ｎ２５５Ｄ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｎ７４Ｄ＋Ｑ２３９Ｒ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｎ２１２Ｄ＋Ｑ２３９Ｒ、又は
Ｓ９９ＳＥ、又は
Ｓ９９ＡＤ、又は
Ｎ７４Ｄ＋Ｓ８５Ｒ＋Ｇ１１６Ｒ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ、又は
Ｎ７４Ｄ＋Ｓ８５Ｒ＋Ｇ１１６Ｒ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ＋Ｓ１８２Ｄ＋Ｖ２３８Ｒ、又は
Ｇ１１６Ｖ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ、又は
Ｓ９９Ｍ＋Ｇ１１６Ｖ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ。
Ｓ９Ｒ＋Ａ１３Ｖ＋Ａ１５Ｔ＋ｌ３５Ｖ＋Ｎ６０Ｄ＋Ｑ２３９Ｆ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｇ２０＊＋Ｌ２１Ｆ＋Ｎ６０Ｄ＋Ｑ２３９Ｎ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｓ９７Ｇ＋Ａ２２２Ｖ＋Ｑ２３９Ｒ＋Ｎ２５５Ｄ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｎ７４Ｄ＋Ｑ２３９Ｒ、又は
Ｓ９Ｒ＋Ａ１５Ｔ＋Ｖ６６Ａ＋Ｎ２１２Ｄ＋Ｑ２３９Ｒ、又は
Ｓ９９ＳＥ、又は
Ｓ９９ＡＤ、又は
Ｎ７４Ｄ＋Ｓ８５Ｒ＋Ｇ１１６Ｒ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ、又は
Ｎ７４Ｄ＋Ｓ８５Ｒ＋Ｇ１１６Ｒ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ＋Ｓ１８２Ｄ＋Ｖ２３８Ｒ、又は
Ｇ１１６Ｖ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ、又は
Ｓ９９Ｍ＋Ｇ１１６Ｖ＋Ｓ１２６Ｌ＋Ｐ１２７Ｑ＋Ｓ１２８Ａ。
【0102】
特に好ましいプロテアーゼの別の組は、配列番号５に対する以下の位置のうちの１つ以上、又は２つ以上、又は３つ以上に置換を含む、配列番号５と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９８％の同一性を示すものである。
Ｓ０３９Ｅ、Ｉ４３Ｖ、Ａ４７Ｖ、Ｐ５４Ｔ、Ｔ５６Ｙ、Ｎ０７４Ｄ、Ｌ８０Ｖ、Ｎ０８５Ｒ、Ｅ０８７Ｄ、Ｓ０９９Ｒ、Ｎ１１４Ｑ、Ｍ１１７Ｉ、Ｓ１２６Ａ、Ｄ１２７Ｅ、Ｆ１２８Ｇ／Ｄ／Ｅ、Ｇ１６０Ｑ、Ｒ１７９Ｑ、Ｎ１９８Ｇ／Ａ／Ｋ／Ｌ／Ｑ／Ｒ／Ｔ／Ｖ／Ｓ／Ｌ、Ｒ２０７Ｑ、Ｍ２１１Ｑ／Ｎ／Ｌ、Ｎ２１２Ｑ／Ｓ、Ｎ２４２Ｄ、Ｎ２５３Ｐ、及びＱ２５６Ｅ。
Ｓ０３９Ｅ、Ｉ４３Ｖ、Ａ４７Ｖ、Ｐ５４Ｔ、Ｔ５６Ｙ、Ｎ０７４Ｄ、Ｌ８０Ｖ、Ｎ０８５Ｒ、Ｅ０８７Ｄ、Ｓ０９９Ｒ、Ｎ１１４Ｑ、Ｍ１１７Ｉ、Ｓ１２６Ａ、Ｄ１２７Ｅ、Ｆ１２８Ｇ／Ｄ／Ｅ、Ｇ１６０Ｑ、Ｒ１７９Ｑ、Ｎ１９８Ｇ／Ａ／Ｋ／Ｌ／Ｑ／Ｒ／Ｔ／Ｖ／Ｓ／Ｌ、Ｒ２０７Ｑ、Ｍ２１１Ｑ／Ｎ／Ｌ、Ｎ２１２Ｑ／Ｓ、Ｎ２４２Ｄ、Ｎ２５３Ｐ、及びＱ２５６Ｅ。
【0103】
好ましいプロテアーゼには、以下の組の変異のうちの１つを含む、配列番号５に対して少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％の同一性を有するものが含まれる。
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｍ２１１Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｎ２４２Ｄ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｎ０８５Ｒ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ－Ｎ２１２Ｓ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｄ－Ｄ１２７Ｓ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｇ－Ｄ１２７Ｔ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ａ－Ｆ１２８Ｃ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｅ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｖ－Ｄ１２７Ａ－Ｆ１２８Ｔ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｅ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｐ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｇ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｄ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｇ－Ｆ１２８Ｐ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｇ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２１２Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ａ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２１２Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｎ１１６Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２４２Ｄ－Ｑ２５６Ｅ
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｍ２１１Ｌ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｑ２００Ｌ－Ｎ２４２Ｄ－Ｑ２５６Ｅ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｎ０８５Ｒ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｌ－Ｎ２１２Ｓ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｄ－Ｄ１２７Ｓ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｇ－Ｄ１２７Ｔ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ａ－Ｆ１２８Ｃ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｅ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｖ－Ｄ１２７Ａ－Ｆ１２８Ｔ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｅ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ａ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｐ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｇ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｄ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ｔ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｇ－Ｆ１２８Ｐ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｄ１２７Ｇ－Ｆ１２８Ｅ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ａ３７Ｔ－Ｓ３９Ｅ－Ｉ４３Ｖ－Ａ４７Ｖ－Ｐ５４Ｔ－Ｔ５６Ｙ－Ｉ８０Ｖ－Ｎ８５Ｓ－Ｅ８７Ｄ－Ｓ９９Ｒ－Ｔ１１４Ｑ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ２４２Ｄ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２１２Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｎ１９８Ａ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２１２Ｑ、又は
Ｓ０３９Ｅ－Ｎ０７４Ｄ－Ｓ０９９Ｒ－Ｎ１１６Ｒ－Ｓ１２６Ａ－Ｄ１２７Ｅ－Ｆ１２８Ｇ－Ｍ２１１Ｑ－Ｎ２４２Ｄ－Ｑ２５６Ｅ
【0104】
１つの好ましい態様では、本発明の組成物は、１つを超えるプロテアーゼ、好ましくは、配列番号６に対して少なくとも９５％の同一性を有する１つのプロテアーゼ、及び配列番号５に対して少なくとも９５％の同一性を有する１つのプロテアーゼを含み得る。
【0105】
好適な市販の追加のプロテアーゼ酵素には、Ａｌｃａｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｐｒｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｄｕｒａｚｙｍ（登録商標）、Ｐｏｌａｒｚｙｍｅ（登録商標）、Ｋａｎｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ（登録商標）、Ｌｉｑｕａｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ Ｕｎｏ（登録商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｎｅｕｔｒａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ（登録商標）シリーズ（Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、Ｂｌａｚｅ Ｐｒｏ（登録商標）を含む）、及びＥｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）の商品名でＮｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ（Ｄｅｎｍａｒｋ）により販売されているものと、Ｍａｘａｔａｓｅ（登録商標）、Ｍａｘａｃａｌ（登録商標）、Ｍａｘａｐｅｍ（登録商標）、Ｐｒｏｐｅｒａｓｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｐｒｉｍｅ（登録商標）、Ｐｕｒａｆｅｃｔ Ｏｘ（登録商標）、ＦＮ３（登録商標）、ＦＮ４（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｕｌｔｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｅｘｔｒｅｍａｓｅ（登録商標）、及びＰｕｒａｆｅｃｔ ＯＸＰ（登録商標）の商品名でＤｕｐｏｎｔにより販売されているものと、Ｏｐｔｉｃｌｅａｎ（登録商標）及びＯｐｔｉｍａｓｅ（登録商標）の商品名でＳｏｌｖａｙ Ｅｎｚｙｍｅｓにより販売されているものと、Ｈｅｎｋｅｌ／Ｋｅｍｉｒａから入手可能なもの、すなわち、ＢＬＡＰ（配列は米国特許第５，３５２，６０４号の図２９に示され、Ｓ９９Ｄ＋Ｓ１０１ Ｒ＋Ｓ１０３Ａ＋Ｖ１０４Ｉ＋Ｇ１５９Ｓの変異を有する、本明細書において以降ＢＬＡＰと称される）、ＢＬＡＰ Ｒ（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ｖ１９９Ｍ＋Ｖ２０５Ｉ＋Ｌ２１７Ｄを有するＢＬＡＰ）、ＢＬＡＰ Ｘ（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ｖ２０５Ｉを有するＢＬＡＰ）、及びＢＬＡＰ Ｆ４９（Ｓ３Ｔ＋Ｖ４Ｉ＋Ａ１９４Ｐ＋Ｖ１９９Ｍ＋Ｖ２０５Ｉ＋Ｌ２１７Ｄを有するＢＬＡＰ）と、花王製のＫＡＰ（変異Ａ２３０Ｖ＋Ｓ２５６Ｇ＋Ｓ２５９Ｎを有するＢａｃｉｌｌｕｓ ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓのサブチリシン）と、が含まれる。
【0106】
本発明のアミラーゼと組み合わせて本明細書での使用に特に好ましいのは、
（ａ）Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｕｌｔｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｅｘｔｒｅｍａｓｅ（登録商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）Ｂｌａｚｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、及びＢｌａｚｅ Ｐｒｏ（登録商標）からなる群から選択される商用プロテアーゼ、
（ｂ）上記で指定された配列番号５に対して少なくとも９５％の同一性を有するプロテアーゼ、のうちの１つ以上である。
（ａ）Ｂｌａｚｅ（登録商標）、Ｕｌｔｉｍａｓｅ（登録商標）、Ｅｖｅｒｌａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、Ｓａｖｉｎａｓｅ Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（登録商標）、Ｅｘｔｒｅｍａｓｅ（登録商標）、Ｏｖｏｚｙｍｅ（登録商標）、Ｃｏｒｏｎａｓｅ（登録商標）Ｂｌａｚｅ Ｅｖｉｔｙ（登録商標）、及びＢｌａｚｅ Ｐｒｏ（登録商標）からなる群から選択される商用プロテアーゼ、
（ｂ）上記で指定された配列番号５に対して少なくとも９５％の同一性を有するプロテアーゼ、のうちの１つ以上である。
【0107】
本発明の製品中のプロテアーゼの好ましいレベルには、組成物１ｇ当たり約０．０５～約１０ｍｇ、より好ましくは約０．５～約７ｍｇ、及び特に約１～約６ｍｇの活性プロテアーゼが含まれる。
【0108】
追加のアミラーゼ
本発明の組成物は、追加のアミラーゼを含み得る。好適な追加のアルファ－アミラーゼには、細菌又は真菌起源のものが含まれる。化学的又は遺伝的に修飾された変異体（変異体）が含まれる。好ましいアルカリ性アルファ－アミラーゼは、Ｂａｃｉｌｌｕｓの菌種、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、又は他のＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＮＣＢＩ １２２８９、ＮＣＢＩ １２５１２、ＮＣＢＩ １２５１３、ＤＳＭ ９３７５（米国特許第７，１５３，８１８号）ＤＳＭ １２３６８、ＤＳＭＺ番号１２６４９、ＫＳＭ ＡＰ１３７８（国際公開第９７／００３２４号）、ＫＳＭ Ｋ３６、又はＫＳＭ Ｋ３８（欧州特許第１，０２２，３３４号）に由来する。好ましいアミラーゼには、以下が含まれる。
（ａ）国際公開第９６／２３８７３号、同第００／６００６０号、同第０６／００２６４３号、及び同第２０１７／１９２６５７号に記載されている変異体、特に国際公開第０６／００２６４３号において配列番号１２に列挙されているＡＡ５６０酵素に対して以下の位置に１つ以上の置換を有する変異体、
２６、３０、３３、８２、３７、１０６、１１８、１２８、１３３、１４９、１５０、１６０、１７８、１８２、１８６、１９３、２０２、２１４、２３１、２４６、２５６、２５７、２５８、２６９、２７０、２７２、２８３、２９５、２９６、２９８、２９９、３０３、３０４、３０５、３１１、３１４、３１５、３１８、３１９、３３９、３４５、３６１、３７８、３８３、４１９、４２１、４３７、４４１、４４４、４４５、４４６、４４７、４５０、４６１、４７１、４８２、４８４、好ましくは、Ｄ１８３＊及びＧ１８４＊の欠失も含有するもの。
（ｂ）国際公開第０６／００２６４３号の配列番号４、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ＳＰ７２２由来の野生型酵素と少なくとも９０％の同一性を示す変異体、特に１８３及び１８４位に欠失を有する変異体、並びに参照により本明細書に組み込まれる国際公開第００／６００６０号、同第２０１１／１００４１０号、及び同第２０１３／００３６５９号に記載されている変異体。
（ｃ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．７０７（米国特許第６，０９３，５６２号の配列番号７）由来の野生型酵素と少なくとも９５％の同一性を示す変異体、特に変異Ｍ２０２、Ｍ２０８、Ｓ２５５、Ｒ１７２、及び／又はＭ２６１のうちの１つ以上を含むもの。好ましくは、当該アミラーゼは、Ｍ２０２Ｌ、Ｍ２０２Ｖ、Ｍ２０２Ｓ、Ｍ２０２Ｔ、Ｍ２０２Ｉ、Ｍ２０２Ｑ、Ｍ２０２Ｗ、Ｓ２５５Ｎ、及び／又はＲ１７２Ｑのうちの１つ以上を含む。Ｍ２０２Ｌ又はＭ２０２Ｔの変異を含むものが、特に好ましい。
（ｄ）国際公開第０９／１４９１３０号に記載されている変異体、好ましくは同第０９／１４９１３０号の配列番号１又は配列番号２、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｔｅａｒｏｐｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来の野生型酵素又はその切断版と少なくとも９０％の同一性を示すもの。
（ｅ）国際公開第２０１６／０９１６８８号の配列番号１と少なくとも８９％の同一性を示す変異体、特にＨ１８３位＋Ｇ１８４位での欠失並びに更に４０５、４２１、４２２、及び／又は４２８位に１つ以上の変異を含むもの。
（ｆ）Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｒｄｌａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ ＹＫ９由来の「ＰｃｕＡｍｙｌ α－アミラーゼ」（国際公開第２０１４／０９９５２３号の配列番号３）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示す変異体。
（ｇ）Ｃｙｔｏｐｈａｇａ ｓｐ．由来の「ＣｓｐＡｍｙ２アミラーゼ」（国際公開第２０１４／１６４７７７号）の配列番号１）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示す変異体。
（ｈ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ由来のＡｍｙＥ（国際公開第２００９／１４９２７１号の配列番号１）と少なくとも８５％の同一性を示す変異体。
（ｉ）受託番号ＡＢ０５１１０２を有するＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＫＳＭ－Ｋ３８由来の野生型アミラーゼと少なくとも９０％の同一性を示す変異体。
（ｊ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ由来のＡＡＩ１０の成熟アミノ酸配列（国際公開第２０１６／１８０７４８号の配列番号７）と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、好ましくは少なくとも９８％の同一性を示す変異体。
（ｋ）Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．アミラーゼの成熟アミノ酸配列（国際公開第２０１６／１８０７４８号の配列番号８）と少なくとも８０％の同一性を示す変異体
本発明の組成物は、追加のアミラーゼを含み得る。好適な追加のアルファ－アミラーゼには、細菌又は真菌起源のものが含まれる。化学的又は遺伝的に修飾された変異体（変異体）が含まれる。好ましいアルカリ性アルファ－アミラーゼは、Ｂａｃｉｌｌｕｓの菌種、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、又は他のＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＮＣＢＩ １２２８９、ＮＣＢＩ １２５１２、ＮＣＢＩ １２５１３、ＤＳＭ ９３７５（米国特許第７，１５３，８１８号）ＤＳＭ １２３６８、ＤＳＭＺ番号１２６４９、ＫＳＭ ＡＰ１３７８（国際公開第９７／００３２４号）、ＫＳＭ Ｋ３６、又はＫＳＭ Ｋ３８（欧州特許第１，０２２，３３４号）に由来する。好ましいアミラーゼには、以下が含まれる。
（ａ）国際公開第９６／２３８７３号、同第００／６００６０号、同第０６／００２６４３号、及び同第２０１７／１９２６５７号に記載されている変異体、特に国際公開第０６／００２６４３号において配列番号１２に列挙されているＡＡ５６０酵素に対して以下の位置に１つ以上の置換を有する変異体、
２６、３０、３３、８２、３７、１０６、１１８、１２８、１３３、１４９、１５０、１６０、１７８、１８２、１８６、１９３、２０２、２１４、２３１、２４６、２５６、２５７、２５８、２６９、２７０、２７２、２８３、２９５、２９６、２９８、２９９、３０３、３０４、３０５、３１１、３１４、３１５、３１８、３１９、３３９、３４５、３６１、３７８、３８３、４１９、４２１、４３７、４４１、４４４、４４５、４４６、４４７、４５０、４６１、４７１、４８２、４８４、好ましくは、Ｄ１８３＊及びＧ１８４＊の欠失も含有するもの。
（ｂ）国際公開第０６／００２６４３号の配列番号４、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ＳＰ７２２由来の野生型酵素と少なくとも９０％の同一性を示す変異体、特に１８３及び１８４位に欠失を有する変異体、並びに参照により本明細書に組み込まれる国際公開第００／６００６０号、同第２０１１／１００４１０号、及び同第２０１３／００３６５９号に記載されている変異体。
（ｃ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．７０７（米国特許第６，０９３，５６２号の配列番号７）由来の野生型酵素と少なくとも９５％の同一性を示す変異体、特に変異Ｍ２０２、Ｍ２０８、Ｓ２５５、Ｒ１７２、及び／又はＭ２６１のうちの１つ以上を含むもの。好ましくは、当該アミラーゼは、Ｍ２０２Ｌ、Ｍ２０２Ｖ、Ｍ２０２Ｓ、Ｍ２０２Ｔ、Ｍ２０２Ｉ、Ｍ２０２Ｑ、Ｍ２０２Ｗ、Ｓ２５５Ｎ、及び／又はＲ１７２Ｑのうちの１つ以上を含む。Ｍ２０２Ｌ又はＭ２０２Ｔの変異を含むものが、特に好ましい。
（ｄ）国際公開第０９／１４９１３０号に記載されている変異体、好ましくは同第０９／１４９１３０号の配列番号１又は配列番号２、Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｔｅａｒｏｐｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来の野生型酵素又はその切断版と少なくとも９０％の同一性を示すもの。
（ｅ）国際公開第２０１６／０９１６８８号の配列番号１と少なくとも８９％の同一性を示す変異体、特にＨ１８３位＋Ｇ１８４位での欠失並びに更に４０５、４２１、４２２、及び／又は４２８位に１つ以上の変異を含むもの。
（ｆ）Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｒｄｌａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ ＹＫ９由来の「ＰｃｕＡｍｙｌ α－アミラーゼ」（国際公開第２０１４／０９９５２３号の配列番号３）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示す変異体。
（ｇ）Ｃｙｔｏｐｈａｇａ ｓｐ．由来の「ＣｓｐＡｍｙ２アミラーゼ」（国際公開第２０１４／１６４７７７号）の配列番号１）と少なくとも６０％のアミノ酸配列同一性を示す変異体。
（ｈ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ由来のＡｍｙＥ（国際公開第２００９／１４９２７１号の配列番号１）と少なくとも８５％の同一性を示す変異体。
（ｉ）受託番号ＡＢ０５１１０２を有するＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＫＳＭ－Ｋ３８由来の野生型アミラーゼと少なくとも９０％の同一性を示す変異体。
（ｊ）Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ由来のＡＡＩ１０の成熟アミノ酸配列（国際公開第２０１６／１８０７４８号の配列番号７）と少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、好ましくは少なくとも９８％の同一性を示す変異体。
（ｋ）Ａｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．アミラーゼの成熟アミノ酸配列（国際公開第２０１６／１８０７４８号の配列番号８）と少なくとも８０％の同一性を示す変異体
【0109】
好ましくは、アミラーゼは、遺伝子操作を受けた酵素であり、漂白酸化を起こしやすいアミノ酸のうちの１つ以上が、より酸化しにくいアミノ酸で置換されている。特に、メチオニン残基が、任意の他のアミノ酸で置換されることが好ましい。特に、最も酸化しやすいメチオニンが置換されることが好ましい。好ましくは、国際公開第０６／００２６４３号の配列番号１２として列挙されているＡＡ５６０酵素において２０２に相当する位置のメチオニンが置換される。好ましくは、この位置のメチオニンは、スレオニン又はロイシン、好ましくはロイシンで置換される。
【0110】
好適な市販のアルファ－アミラーゼには、ＤＵＲＡＭＹＬ（登録商標）、ＬＩＱＵＥＺＹＭＥ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ（登録商標）、ＴＥＲＭＡＭＹＬ ＵＬＴＲＡ（登録商標）、ＮＡＴＡＬＡＳＥ（登録商標）、ＳＵＰＲＡＭＹＬ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＦＵＮＧＡＭＹＬ（登録商標）、ＡＭＰＬＩＦＹ（登録商標）、ＡＴＬＡＮＴＩＣ（登録商標）、ＩＮＴＥＮＳＡ（登録商標）及びＢＡＮ（登録商標）（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ａ／Ｓ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ）、ＫＥＭＺＹＭ（登録商標）ＡＴ ９０００ Ｂｉｏｚｙｍ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｔｒａｄｉｎｇ ＧｍｂＨ Ｗｅｈｌｉｓｔｒａｓｓｅ ２７ｂ Ａ－１２００ Ｗｉｅｎ Ａｕｓｔｒｉａ、ＲＡＰＩＤＡＳＥ（登録商標）、ＰＵＲＡＳＴＡＲ（登録商標）、ＥＮＺＹＳＩＺＥ（登録商標）、ＯＰＴＩＳＩＺＥ ＨＴ ＰＬＵＳ（登録商標）、ＰＯＷＥＲＡＳＥ（登録商標）、ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ（登録商標）シリーズ（ＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ１０００（登録商標）及びＰＲＥＦＥＲＥＮＺ Ｓ２０００（登録商標）を含む）並びにＰＵＲＡＳＴＡＲ ＯＸＡＭ（登録商標）（ＤｕＰｏｎｔ．，Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）並びにＫＡＭ（登録商標）（Ｋａｏ，１４－１０ Ｎｉｈｏｎｂａｓｈｉ Ｋａｙａｂａｃｈｏ，１－ｃｈｏｍｅ，Ｃｈｕｏ－ｋｕ Ｔｏｋｙｏ １０３－８２１０，Ｊａｐａｎ）が含まれる。一態様では、好適なアミラーゼには、ＡＴＬＡＮＴＩＣ（登録商標）、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（登録商標）、ＰＯＷＥＲＡＳＥ（登録商標）、ＩＮＴＥＮＳＡ（登録商標）、ＡＭＰＬＩＦＹ（登録商標）、及びＳＴＡＩＮＺＹＭＥ ＰＬＵＳ（登録商標）、並びにそれらの混合物が含まれる。
【0111】
好ましくは、本発明の組成物は、組成物１ｇ当たり少なくとも０．０１ｍｇ、好ましくは約０．０２～約１０、より好ましくは約０．１～約６、特に約０．２～約５ｍｇの活性アミラーゼを含む。
【0112】
本発明の組成物は、２つ以上のアミラーゼを含み得、好ましくは、第１のアミラーゼは、配列番号１の変異体であり、第２のアミラーゼは、配列番号２、３、又は４の変異体である。
【0113】
好ましくは、本発明の組成物のプロテアーゼ及び／又はアミラーゼは、粒状体の形態であり、この粒状体は、粒状体の２９重量％超の硫酸ナトリウムを含み、並びに／又は硫酸ナトリウム及び活性酵素（プロテアーゼ及び／若しくはアミラーゼ）は、３：１～１００：１、又は好ましくは４：１～３０：１、又はより好ましくは５：１～２０：１の重量比である。
【0114】
結晶成長抑制剤
結晶成長抑制剤は、炭酸カルシウム結晶に結合して、アラゴナイト及び方解石などの種の更なる成長を防止することができる材料である。
結晶成長抑制剤は、炭酸カルシウム結晶に結合して、アラゴナイト及び方解石などの種の更なる成長を防止することができる材料である。
【0115】
効果的な結晶成長抑制剤の例としては、ホスホン酸塩、ポリホスホン酸塩、イヌリン誘導体、ポリイタコン酸ホモポリマー、及び環状ポリカルボキシレートが挙げられる。
【0116】
好適な結晶成長抑制剤は、ＨＥＤＰ（１－ヒドロキシエチリデン１，１－ジホスホン酸）、カルボキシメチルイヌリン（ＣＭＩ）、トリカルバリル酸、及び環状カルボキシレートを含む群から選択され得る。本発明の目的のために、カルボキシレートという用語は、アニオン形態及びプロトン化カルボン酸形態の両方を包含する。
【0117】
環状カルボキシレートは、少なくとも２つ、好ましくは３つ、又は好ましくは少なくとも４つのカルボキシレート基を含有し、環状構造は、単環若しくは二環アルカン又は複素環のいずれかに基づく。好適な環状構造には、シクロプロパン、シクロブタン、シクロヘキサン若しくはシクロペンタン若しくはシクロヘプタン、ビシクロ－ヘプタン若しくはビシクロ－オクタン、及び／又はテトラヒドロフランが含まれる。好ましい結晶成長抑制剤の１つは、シクロペンタンテトラカルボキシレートである。
【0118】
少なくとも７５％、好ましくは１００％のカルボキシレート基を素環の三次元構造の同じ側か又は「シス」位に有する環状カルボキシレートは、本明細書での使用に好ましい。
【0119】
素環の同じ側にある２つのカルボキシレート基は、直接隣接しているか、又は「オルト」位にあることが好ましい。
【0120】
好ましい結晶成長抑制剤には、ＨＥＤＰ、トリカルバリル酸、テトラヒドロフランテトラカルボン酸（ＴＨＦＴＣＡ）及びシクロペンタンテトラカルボン酸（ＣＰＴＣＡ）が含まれる。ＴＨＦＴＣＡは、好ましくは２ｃ，３ｔ，４ｔ，５ｃ配置であり、ＣＰＴＣＡは、シス，シス，シス，シス配置である。本明細書での使用に特に好ましい結晶成長抑制剤は、ＨＥＤＰである。
【0121】
部分的に脱カルボキシル化されたポリイタコン酸ホモポリマーもまた、本明細書での使用に好ましく、好ましくは脱カルボキシル化レベルは５０モル％～９０モル％の範囲である。本明細書での使用に特に好ましいポリマーは、Ｉｔａｃｏｎｉｘにより提供されるＩｔａｃｏｎｉｘ ＴＳＩ（登録商標）である。
【0122】
結晶成長抑制剤は、好ましくは、組成物の約０．０１～約１０重量％、特に約０．０２～約５重量％、特に０．０５～３重量％の量で存在する。
【0123】
金属ケア剤
金属ケア剤は、アルミニウム、ステンレス鋼、並びに銀及び銅などの非鉄金属を含む金属の曇り、腐食、又は酸化を、防止又は低減し得る。好ましくは、本発明の組成物は、製品の０．１～５重量％、より好ましくは０．２～４重量％、及び特に０．３～３重量％の金属ケア剤を含み、好ましくは、金属ケア剤はベンゾトリアゾール（ＢＴＡ）である。
金属ケア剤は、アルミニウム、ステンレス鋼、並びに銀及び銅などの非鉄金属を含む金属の曇り、腐食、又は酸化を、防止又は低減し得る。好ましくは、本発明の組成物は、製品の０．１～５重量％、より好ましくは０．２～４重量％、及び特に０．３～３重量％の金属ケア剤を含み、好ましくは、金属ケア剤はベンゾトリアゾール（ＢＴＡ）である。
【0124】
ガラスケア剤
ガラスケア剤は、食器洗浄プロセス中にガラス製品の外観を保護する。好ましくは、本発明の組成物は、組成物の０．１～５重量％、より好ましくは０．２～４重量％、及び特に０．３～３重量％の金属ケア剤を含み、好ましくは、ガラスケア剤は亜鉛含有材料、特に水亜鉛土である。他の好適なガラスケア剤は、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）である。特に好ましいＰＥＩは、ＢＡＳＦにより供給されるＬｕｐａｓｏｌ（登録商標）ＦＧである。
ガラスケア剤は、食器洗浄プロセス中にガラス製品の外観を保護する。好ましくは、本発明の組成物は、組成物の０．１～５重量％、より好ましくは０．２～４重量％、及び特に０．３～３重量％の金属ケア剤を含み、好ましくは、ガラスケア剤は亜鉛含有材料、特に水亜鉛土である。他の好適なガラスケア剤は、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）である。特に好ましいＰＥＩは、ＢＡＳＦにより供給されるＬｕｐａｓｏｌ（登録商標）ＦＧである。
【0125】
本発明の自動食器洗浄用組成物は、好ましくは、２０℃の蒸留水中１重量／体積％の水溶液中で測定した場合に、約９～約１２、より好ましくは約１０～約１１．５未満、及び特に約１０．５～約１１．５のｐＨを有する。
【0126】
本発明の自動食器洗浄用組成物は、好ましくは、２０℃の１００グラムの製品を含むＮａＯＨ中で測定した場合に、ｐＨ９．５で、約１０～約２０、より好ましくは約１２～約１８の予備アルカリ度を有する。
【0127】
本発明の好ましい自動食器洗浄用組成物は、以下を含む。
ｉ）組成物の１０～２０重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸ナトリウム、
ｉｉ）ＴＡＥＤ、
ｉｉｉ）任意であるが好ましくは組成物の５～５０重量％の無機ビルダー、好ましくは炭酸ナトリウム、
ｉｖ）任意であるが好ましくは組成物の２重量％～１０重量％の非イオン性界面活性剤、
ｖ）他の任意選択の成分としては、結晶成長抑制剤、好ましくはＨＥＤＰ、及びガラスケア剤が含まれる。
ｉ）組成物の１０～２０重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸ナトリウム、
ｉｉ）ＴＡＥＤ、
ｉｉｉ）任意であるが好ましくは組成物の５～５０重量％の無機ビルダー、好ましくは炭酸ナトリウム、
ｉｖ）任意であるが好ましくは組成物の２重量％～１０重量％の非イオン性界面活性剤、
ｖ）他の任意選択の成分としては、結晶成長抑制剤、好ましくはＨＥＤＰ、及びガラスケア剤が含まれる。
【0128】
本発明の好ましい自動食器洗浄組成物は、以下を含む。
ｉ）組成物の１０～２０重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸ナトリウム、
ｉｉ）マンガン漂白触媒、好ましくは、１，４，７－トリメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ－ＴＡＣＮ）及び１，２，４，７－テトラメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ／Ｍｅ－ＴＡＣＮ）、並びに任意にＴＡＥＤからなる群から選択される漂白触媒、
ｉｉｉ）任意ではあるが好ましくは組成物の５～５０重量％の炭酸ナトリウム、
ｉｖ）任意ではあるが好ましくは１～１０重量％のケイ酸ナトリウム、
ｖ）任意ではあるが好ましくは組成物の２～１０重量％の非イオン性界面活性剤、
ｖｉ）任意ではあるが好ましくはガラスケア剤。
ｉ）組成物の１０～２０重量％の漂白剤、好ましくは過炭酸ナトリウム、
ｉｉ）マンガン漂白触媒、好ましくは、１，４，７－トリメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ－ＴＡＣＮ）及び１，２，４，７－テトラメチル－１，４，７－トリアザシクロノナン（Ｍｅ／Ｍｅ－ＴＡＣＮ）、並びに任意にＴＡＥＤからなる群から選択される漂白触媒、
ｉｉｉ）任意ではあるが好ましくは組成物の５～５０重量％の炭酸ナトリウム、
ｉｖ）任意ではあるが好ましくは１～１０重量％のケイ酸ナトリウム、
ｖ）任意ではあるが好ましくは組成物の２～１０重量％の非イオン性界面活性剤、
ｖｉ）任意ではあるが好ましくはガラスケア剤。
【0129】
本発明の組成物のアミラーゼは、洗濯洗剤に使用することができる。
【実施例】
【0130】
実施例１．ＡＡ２５６０変異体
タンパク質発現、精製、及び定量：
ΔＲ１８１及びΔＧ１８２におけるＡＡ２５６０コンビナトリアル変異体（すなわち、ΔＲＧ）バックグラウンドを合成遺伝子として作製し、標準的な手順を使用して好適なＢａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ細胞に導入した。全ての変異を、ＤＮＡ配列決定によって確認した。細胞を、Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ宿主におけるタンパク質発現及び分泌に好適な培地中で７２時間増殖させた。分泌タンパク質を遠心分離によって採取した。フェニルセファロース６高速流量樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いた疎水性相互作用クロマトグラフィーの使用によって、精製を達成した。精製されたタンパク質を、ｐＨ８の緩衝剤、塩化カルシウム、及びプロピレングリコールとしてＨＥＰＥＳを含有する標準的な配合物緩衝液中で安定化させた。タンパク質濃度を、アミノ酸分析、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、及び２８０ｎｍでの吸光度の混合によって決定した。
タンパク質発現、精製、及び定量：
ΔＲ１８１及びΔＧ１８２におけるＡＡ２５６０コンビナトリアル変異体（すなわち、ΔＲＧ）バックグラウンドを合成遺伝子として作製し、標準的な手順を使用して好適なＢａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ細胞に導入した。全ての変異を、ＤＮＡ配列決定によって確認した。細胞を、Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ宿主におけるタンパク質発現及び分泌に好適な培地中で７２時間増殖させた。分泌タンパク質を遠心分離によって採取した。フェニルセファロース６高速流量樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いた疎水性相互作用クロマトグラフィーの使用によって、精製を達成した。精製されたタンパク質を、ｐＨ８の緩衝剤、塩化カルシウム、及びプロピレングリコールとしてＨＥＰＥＳを含有する標準的な配合物緩衝液中で安定化させた。タンパク質濃度を、アミノ酸分析、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、及び２８０ｎｍでの吸光度の混合によって決定した。
【0131】
酵素性能アッセイ：
α－アミラーゼの活性を、洗剤バックグラウンド中で白色メラミンタイルから染色されたデンプンの染みを除去することによって決定した。Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ（カタログ番号ＤＭ２７７及びＤＭ７１）から購入した、混合コーン／米着色デンプンのタイル及び食品着色剤を含む混合コーン／米デンプンのタイルをそれぞれ使用して、α－アミラーゼの洗浄活性を決定した。タイルを、水性緩衝液中の作用範囲に希釈したアミラーゼ溶液を含有する９６ウェルプレートに固定し、ＷＦＫＢ洗剤の予備作製洗剤溶液（ＷＦＫ Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ ＧｍｂＨ，Ｂｒｕｇｇｅｎ，Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ）に添加し、その結果、総体積は３００μＬになった。次いで、着色されたデンプンの染みを有する事前に画像化されたメラミンタイルを９６ウェルプレートの上部に固定し、その結果、アセンブリの撹拌は、デンプンの染みの表面上への酵素含有洗剤の飛散をもたらした。洗浄反応を２５０ｒｐｍで振とうしながら５０℃で１５分間行った。洗浄反応後、メラミンタイルを水で短時間すすぎ、乾燥させ、再び画像化した。α－アミラーゼの活性を、洗浄前及び洗浄後の画像のＲＧＢ（色）値の差として計算する。洗浄後の画像が白ければ白いほど、酵素活性が良好である。性能指数（ＰＩ）を以下のように計算する。
α－アミラーゼの活性を、洗剤バックグラウンド中で白色メラミンタイルから染色されたデンプンの染みを除去することによって決定した。Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ（カタログ番号ＤＭ２７７及びＤＭ７１）から購入した、混合コーン／米着色デンプンのタイル及び食品着色剤を含む混合コーン／米デンプンのタイルをそれぞれ使用して、α－アミラーゼの洗浄活性を決定した。タイルを、水性緩衝液中の作用範囲に希釈したアミラーゼ溶液を含有する９６ウェルプレートに固定し、ＷＦＫＢ洗剤の予備作製洗剤溶液（ＷＦＫ Ｔｅｓｔｇｅｗｅｂｅ ＧｍｂＨ，Ｂｒｕｇｇｅｎ，Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ）に添加し、その結果、総体積は３００μＬになった。次いで、着色されたデンプンの染みを有する事前に画像化されたメラミンタイルを９６ウェルプレートの上部に固定し、その結果、アセンブリの撹拌は、デンプンの染みの表面上への酵素含有洗剤の飛散をもたらした。洗浄反応を２５０ｒｐｍで振とうしながら５０℃で１５分間行った。洗浄反応後、メラミンタイルを水で短時間すすぎ、乾燥させ、再び画像化した。α－アミラーゼの活性を、洗浄前及び洗浄後の画像のＲＧＢ（色）値の差として計算する。洗浄後の画像が白ければ白いほど、酵素活性が良好である。性能指数（ＰＩ）を以下のように計算する。
【0132】
【数1】
【0133】
ΔＲＧ変異体に対するコンビナトリアル変異体の性能指数：
野生型変異体に対する性能指数に関する変異体の洗浄性能を表３に列挙する。多数の変異体を試験した。少なくとも１つの染みに対してＰＩ＞１のものについてのデータのみが示されている。ＤＭ２７７は染み１と指定され、ＤＭ７１は染み２）と指定されている。
野生型変異体に対する性能指数に関する変異体の洗浄性能を表３に列挙する。多数の変異体を試験した。少なくとも１つの染みに対してＰＩ＞１のものについてのデータのみが示されている。ＤＭ２７７は染み１と指定され、ＤＭ７１は染み２）と指定されている。
【0134】
【表6】
【0135】
表１の全ての変異体は、試験された染み及び洗浄条件のうちの１つ以上において、ＳＴＡＩＮＺＹＭＥ（登録商標）Ｐｌｕｓ １２Ｌ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）と同等であるか、又はそれより良好に機能する。
【0136】
実施例２
自動食器洗浄におけるアミラーゼ洗浄性能
表１：自動食器洗浄用（Automatic Dish Washing、ＡＤＷ）組成物
以下のＡＤＷ組成物は、酵素を含有しない。
自動食器洗浄におけるアミラーゼ洗浄性能
表１：自動食器洗浄用（Automatic Dish Washing、ＡＤＷ）組成物
以下のＡＤＷ組成物は、酵素を含有しない。
【0137】
【表7】
【0138】
【表8】
【0139】
【表9】
Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓにより供給されるＳｔａｉｎｚｙｍｅ（登録商標）Ｐｌｕｓ
アミラーゼＡは、本明細書では、１８１位～１８２位で以下の２つの欠失を有し、かつ以下の置換を含むＡＡ２５６０配列番号１と称される、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来の野生型の本発明の変異体である：Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｙ１００Ｆ－Ｗ１１６Ｒ－Ｑ１７２Ｎ－Ｓ２４４Ｑ－Ｈ２８１Ｓ。
アミラーゼＢは、本明細書では、１８１位～１８２位で以下の２つの欠失を有し、かつ以下の置換を含むＡＡ２５６０配列番号１と称される、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来の野生型の本発明の変異体である：Ｔ４０Ｎ－Ｓ９１Ｒ－Ｑ１７２Ｒ－Ｓ２４４Ｑ－Ｆ２６３Ｙ－Ｈ２８１Ｓ。
アミラーゼＣは、本明細書では、１８１位～１８２位で以下の２つの欠失を有し、かつ以下の置換を含むＡＡ２５６０配列番号１と称される、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来の野生型の本発明の変異体である：Ｙ３６４Ｌ。
【0140】
洗浄性能方法：Ｍｉｅｌｅ Ｍｏｄｅｌ ＧＳＬ２を使用した混合アミラーゼ洗浄
表１及び２に記載されるＡＤＷ組成物の自動食器洗浄（ＡＤＷ）の洗浄性能を、Ｃｅｎｔｅｒ Ｆｏｒ Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ ＢＶ．（Ｓｔｏｏｍｌｏｇｇｅｒｗｅｇ １１，３１３３ ＫＴ Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）により供給された混合デンプンタイル（ＤＭ７１、ＤＭ３７６、ＤＭ３７７、ＤＭ３７８）に対する洗浄性能によって測定し、評価した。表２に記載の１回用量の洗剤組成物１７．３２ｇ（固体及び液体を合わせた成分）及び酵素添加量を、各サイクルのディスペンサー引き出しの開口部において各自動食器洗浄機に添加した。
表１及び２に記載されるＡＤＷ組成物の自動食器洗浄（ＡＤＷ）の洗浄性能を、Ｃｅｎｔｅｒ Ｆｏｒ Ｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓ ＢＶ．（Ｓｔｏｏｍｌｏｇｇｅｒｗｅｇ １１，３１３３ ＫＴ Ｖｌａａｒｄｉｎｇｅｎ，ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）により供給された混合デンプンタイル（ＤＭ７１、ＤＭ３７６、ＤＭ３７７、ＤＭ３７８）に対する洗浄性能によって測定し、評価した。表２に記載の１回用量の洗剤組成物１７．３２ｇ（固体及び液体を合わせた成分）及び酵素添加量を、各サイクルのディスペンサー引き出しの開口部において各自動食器洗浄機に添加した。
【0141】
Ｍｉｅｌｅ自動食器洗浄機、モデルＧＳＬ２において、混合デンプンＣＦＴタイルを４５℃（保持時間８分、すすぎ５５℃）、２１ｇｐｇの水硬度で洗浄した。バラスト汚れを、表３に記載されるように、混合汚れ組成物として各処理に添加した。
【0142】
機械のドアを閉じる前に、ＣＦＴタイルを機械に添加した（各タイルの２つの内部複製）。次いで、機械を開始し、ディスペンサーの引き出しが開かれると、酵素添加量を含む洗浄組成物を、５０ｇの混合汚れポットとともに各機械に投入した。これを更に３回繰り返して、処理ごとに４つの外部複製をもたらした。
【0143】
【表10】
【0144】
含まれる４つのデンプン染みによって測定されるように４つの外部複製を行い、各試験組成物の除去性能を計算した（各処理について４つの外部複製及び２つの内部複製を含めることから８つの複製を生成した）。組成物Ａ（Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）及びＳｔａｉｎｚｙｍｅ（登録商標）Ｐｌｕｓを含有する）の洗浄性能を基準とし、これを組成物Ｂ（Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）及び本発明のアミラーゼＡを含有する）、組成物Ｃ（Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）及び本発明のアミラーゼＢを含有する）、及び組成物Ｄ（Ｅｘｃｅｌｌａｓｅ（商標）及び本発明のアミラーゼＣを含有する）と比較した。染みを、画像分析を使用して分析し、以下に提示する結果は、染み除去パーセンテージとして計算した。０＝除去なし、１００＝完全除去。すなわち、染み除去指数（Stain Removal Index、ＳＲＩ）。
【0145】
以下の表４に示す結果は、染み除去指数として表される。
【0146】
【表11】
【0147】
デンプンの洗浄は、洗浄後のＡＤＷ洗浄の尺度である。上記の結果表４から分かるように、デンプン除去は、Ｓｔａｉｎｚｙｍｅ（登録商標）Ｐｌｕｓ １２ ＧＴを含む組成物Ａに対して、本発明のアミラーゼＡを含む組成物Ｂ、本発明のアミラーゼＢを含む組成物Ｃ、及び本発明のアミラーゼＣを含む組成物Ｄについて有意に改善される。アミラーゼＢ、Ｃ、及びＤと記載される本発明の各アミラーゼが、組成物Ａに含有されるＳｔａｉｎｚｙｍｅ（登録商標）Ｐｌｕｓに対して、有意に改善されたデンプン洗浄性能を提供すると結論付けることができる。
【0148】
本明細書に開示される寸法及び値は、列挙された正確な数値に厳密に限定されるものとして理解されるべきではない。その代わりに、特に指示がない限り、そのような寸法は各々、列挙された値とその値を囲む機能的に同等な範囲との両方を意味することが意図される。例えば、「４０ｍｍ」と開示された寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することが意図される。
【配列表】