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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-01-12
(45)【発行日】2024-01-22
(54)【発明の名称】縮合環インダゾール系化合物
(51)【国際特許分類】
C07D 401/14 20060101AFI20240115BHJP
A61K 31/416 20060101ALI20240115BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20240115BHJP
A61K 31/497 20060101ALI20240115BHJP
A61K 31/506 20060101ALI20240115BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240115BHJP
C07D 403/14 20060101ALI20240115BHJP
C07D 491/044 20060101ALI20240115BHJP
C07D 403/12 20060101ALI20240115BHJP
【ＦＩ】
C07D401/14
A61K31/416
A61K31/4439
A61K31/497
A61K31/506
A61P35/00
C07D403/14
C07D491/044
C07D403/12 CSP
【請求項の数】
11
(21)【出願番号】P 2022580881
(86)(22)【出願日】2021-06-28
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2023-07-24
(86)【国際出願番号】 CN2021102808
(87)【国際公開番号】W WO2022001971
(87)【国際公開日】2022-01-06
【審査請求日】2022-12-27
(31)【優先権主張番号】202010599468.2
(32)【優先日】2020-06-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202110023776.5
(32)【優先日】2021-01-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202110179812.7
(32)【優先日】2021-02-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202110666162.9
(32)【優先日】2021-06-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(73)【特許権者】
【識別番号】516304780
【氏名又は名称】メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(72)【発明者】
【氏名】アン コー
(72)【発明者】
【氏名】カオ ナー
(72)【発明者】
【氏名】フー クオピン
(72)【発明者】
【氏名】リー チエン
(72)【発明者】
【氏名】チェン シューホイ
(72)【発明者】
【氏名】スン トーホン
【審査官】藤代 亮
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１９－５３７５７０（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１９／００２４４１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１８－５３７４０６（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０２０－５０２０６０（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１９／１４４１３２（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ ４０３／１２
Ａ６１Ｋ ３１／４１６
Ａ６１Ｋ ３１／４４３９
Ａ６１Ｋ ３１／４９７
Ａ６１Ｋ ３１／５０６
Ａ６１Ｐ ３５／００
Ｃ０７Ｄ ４０１／１４
Ｃ０７Ｄ ４０３／１４
Ｃ０７Ｄ ４９１／０４４
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（ＩＩ）の化合物又はその薬学に許容される塩。【化1】
ｎは、１又は２であり、
Ｘは、Ｎ及びＣＲ３から選択され、
Ｙは、－Ｏ－及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｌは、－Ｏ－、－Ｎ（ＣＨ３）－及び－ＮＨ－から選択され、
環Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルから選択され、前記フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
Ｒ１は、ＣＮ及びＦから選択され、
Ｒ２は、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルから選択され、前記Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒ３は、Ｄ、Ｆ及びＨから選択され、
Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、Ｃ１－４アルキル、
【化2】
Ｒｂは、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ及びＯＣＨ３から選択される。）
【請求項2】
前記環Ａは、【化3】
【化4】
【請求項3】
前記Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＣＮ、ＯＣＨ３及びＣＨ３から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学に許容される塩。
【請求項4】
前記環Ａは、【化5】
【請求項5】
前記Ｒ２は、Ｃ１－３アルキル及びＣ１－３アルコキシから選択され、前記Ｃ１－３アルキル及びＣ１－３アルコキシは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換される、請求項１に記載の化合物又はその薬学に許容される塩。
【請求項6】
前記Ｒ２は、【化6】
【請求項7】
前記化合物が下記の式から選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学に許容される塩。【化7】
【請求項8】
下記の式で表される化合物又はその薬学に許容される塩。【化8-1】
【化8-2】
【請求項9】
前記化合物が下記の式から選択される、請求項８に記載の化合物又はその薬学に許容される塩。【化9】
【請求項10】
乳癌を治療するための医薬の製造における、請求項１～９のいずれかの一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項11】
前記乳癌はエストロゲン受容体陽性乳癌である、請求項１０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は以下の優先権を主張する。
ＣＮ２０２０１０５９９４６８．２、出願日は２０２０年０６月２８日であり、
ＣＮ２０２１１００２３７７６．５、出願日は２０２１年０１月０８日であり、
ＣＮ２０２１１０１７９８１２．７、出願日は２０２１年０２月０７日であり、
ＣＮ２０２１１０６６６１６２．９、出願日は２０２１年０６月１６日である。
ＣＮ２０２０１０５９９４６８．２、出願日は２０２０年０６月２８日であり、
ＣＮ２０２１１００２３７７６．５、出願日は２０２１年０１月０８日であり、
ＣＮ２０２１１０１７９８１２．７、出願日は２０２１年０２月０７日であり、
ＣＮ２０２１１０６６６１６２．９、出願日は２０２１年０６月１６日である。
【0002】
本発明は、新規な縮合環インダゾール系化合物、その製造方法及び関連する疾患を治療するための医薬の製造における使用に関する。
【背景技術】
【0003】
ＷＨＯの統計によれば、乳癌は世界で２番目に発病率の高い癌であり、また女性の中で最も発病率の高い癌である。長年の研究の結果により、乳癌の発症におけるエストロゲン－エストロゲン受容体シグナル伝達経路の役割が特定され、エストロゲン受容体（ＥＲ）は、乳癌の最も重要なバイオマーカーに発展した。エストロゲン受容体の発現を判別指標として使用して、乳癌はエストロゲン受容体陽性乳癌とエストロゲン受容体陰性乳癌に分けられ、その中で、エストロゲン受容体陽性乳癌は、乳癌患者総数の７０％以上を占めている。
【0004】
乳癌細胞のエストロゲン－エストロゲン受容体シグナル伝達経路を標的とする内分泌療法（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ、ＥＴ）は、その危害性が最も小さく、有意な治療効果を有しているため、エストロゲン受容体陽性乳癌の治療のための第一選択となっている。第一選択内分泌療法は、主にアロマターゼ阻害剤（Ａｒｏｍａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ、ＡＩ）である。アロマターゼ阻害剤レトロゾールは、エストロゲン受容体陽性乳癌の治療において良好な効果を示しているが、２種類の薬物の使用により、アロマターゼ阻害剤に対するエストロゲン受容体陽性乳癌の耐性の問題もますます有意になっている。多くの研究によると、エストロゲン受容体はアロマターゼ阻害剤に対して主にＹ５３７Ｘ変異で相応する変異を生成できるため、変異したエストロゲン受容体がエストロゲンの非存在下で自身が興奮したコンフォメーションを維持することができ、引き続き受容体機能を発揮して乳癌細胞の増殖を促進する。唯一に市販されている選択的エストロゲン受容体ダウンレギュレーターとしてのフルベストラント（Ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）は、ホルモン療法に抵抗性の乳癌の治療において良好な効果を示している。しかし、フルベストラントは、ＡＩ耐性のＥＲ変異乳癌の治療において多くの問題を抱えている。まず、その薬物動態特性が低いため、フルベストラントはゼロに近い経口バイオアベイラビリティを示し、同時に、フルベストラントはまた、比較的に高い血中クリアランスを有している。以上の２つの原因により、当該医薬は筋肉内注射のみで投与される。しかし、その強い親油性構造のために、筋肉内注射で投与されたフルベストラントは組織分布においても深刻な問題があり、その臨床症状は、フルベストラントで治療された乳癌患者の約５０％のみ臨床反応を示している。また、薬物動態特性が低いため、現在承認されているフルベストラントの投与量は、組織濃度においてＥＲ、特に変異体ＥＲを完全に分解することができず、ＡＩ耐性のＥＲ変異乳癌に対して当該治療方法は最適ではない。従って、より優れた薬物動態特性を備え、且つＥＲ変異型乳癌を標的とする医薬の開発は、依然として満たされていない医療ニーズである。
【化1】
【0005】
ＷＯ２０１８／０７７６３０Ａ１では、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａが現在、ＥＲ陽性乳癌の治療のための新世代の非共有結合型エストロゲン受容体アンタゴニストＡＺＤ－９８３３を開発中であり、当該分子によるＥＲ陽性ＨＥＲ２陰性乳癌の治療のための臨床第ＩＩ相試験が進行中であることが報告された。ＷＯ２０１９／２４５９７４Ａ１及びＷＯ２０２０／０４９１５０Ａ１ではそれぞれ、ＧｅｎｅｔｅｃｈとＳａｎｏｆｉが現在新世代の非共有結合型エストロゲン受容体アンタゴニストを開発中であり、ＧＤＣ－９５４５及びＳＡＲ４３９８５９はいずれも現在第Ｉ相臨床試験にあることを報告した。
【発明の概要】
【0006】
本発明は式（ＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
ただし、
ｎは、１又は２であり、
Ｘは、Ｎ及びＣＲ３から選択され、
Ｙは、－Ｏ－及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｌは、－Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ３）－及び－ＮＨ－から選択され、
環Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルから選択され、前記フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
Ｒ１は、ＣＮ及びＦから選択され、
Ｒ２は、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルから選択され、前記Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒ３は、Ｄ、Ｆ及びＨから選択され、
Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、Ｃ１－４アルキル、
から選択され、
Ｒｂは、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ及びＯＣＨ３から選択される。
【化2】
ｎは、１又は２であり、
Ｘは、Ｎ及びＣＲ３から選択され、
Ｙは、－Ｏ－及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｌは、－Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ３）－及び－ＮＨ－から選択され、
環Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルから選択され、前記フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
Ｒ１は、ＣＮ及びＦから選択され、
Ｒ２は、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルから選択され、前記Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルコキシ及びＣ３－６シクロアルキルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒ３は、Ｄ、Ｆ及びＨから選択され、
Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＮ、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、Ｃ１－４アルキル、
【化3】
Ｒｂは、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ及びＯＣＨ３から選択される。
【0007】
本発明の一部の形態において、上記環Ａは、
から選択され、前記
は、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【化4】
【化5】
【0008】
本発明の一部の形態において、上記Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＣＮ、ＯＣＨ３及びＣＨ３から選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【0009】
本発明の一部の形態において、上記環Ａは、
から選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【化6】
【0010】
本発明の一部の形態において、上記Ｒ２は、Ｃ１－３アルキル及びＣ１－３アルコキシから選択され、前記Ｃ１－３アルキル及びＣ１－３アルコキシは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【0011】
本発明の一部の形態において、上記Ｒ２は、
から選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【化7】
【発明を実施するための形態】
【0012】
本発明の一部の形態において、上記化合物は、下記の式から選択され、
ただし、Ｙ、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒａ及び環Ａは本発明で定義された通りである。
【化8】
【0013】
本発明の一部の形態において、上記化合物は、下記の式から選択される。
【化9】
【0014】
本発明は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
ただし、
Ｘは、Ｎ及びＣＲ３から選択され、
Ｙは、－Ｏ－及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｌは、－Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ３）－及び－ＮＨ－から選択され、
環Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルから選択され、前記フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
Ｒ１は、ＣＮ及びＦから選択され、
Ｒ２は、Ｃ１－６アルキル及びＣ３－６シクロアルキルから選択され、前記Ｃ１－６アルキル及びＣ３－６シクロアルキルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒ３は、Ｄ、Ｆ及びＨから選択され、
Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、Ｃ１－４アルキル、
から選択され、
Ｒｂは、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ及びＯＣＨ３から選択される。
【化10】
Ｘは、Ｎ及びＣＲ３から選択され、
Ｙは、－Ｏ－及び－ＣＨ２－から選択され、
Ｌは、－Ｏ－、－ＮＨ（ＣＨ３）－及び－ＮＨ－から選択され、
環Ａは、フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルから選択され、前記フェニル、ピリジル、ピラジニル及びピリミジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、
Ｒ１は、ＣＮ及びＦから選択され、
Ｒ２は、Ｃ１－６アルキル及びＣ３－６シクロアルキルから選択され、前記Ｃ１－６アルキル及びＣ３－６シクロアルキルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、
Ｒ３は、Ｄ、Ｆ及びＨから選択され、
Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ３、Ｃ１－４アルキル、
【化11】
Ｒｂは、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ及びＯＣＨ３から選択される。
【0015】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、環Ａは、フェニル及びピリジルから選択され、前記フェニル及びピリジルは、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、他の変量は本発明で定義された通りである。
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、環Ａは、
から選択され、前記
は、それぞれ独立して任意選択で１、２又は３つのＲａにより置換され、他の変量は本発明で定義された通りである。
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、環Ａは、
【化12】
【化13】
【0016】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、Ｒａは、それぞれ独立してＨ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＯＣＨ３及びＣＨ３から選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【0017】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、環Ａは、フェニル及びピリジルから選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【0018】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ２は、Ｃ１－３アルキルから選択され、前記Ｃ１－３アルキルは、任意選択で１、２又は３つのＲｂにより置換され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【0019】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、Ｒ２は、
から選択され、他の変量は本発明で定義された通りである。
【化14】
【0020】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、化合物は、下記の式から選択され、
ただし、Ｙ、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒａ及び環Ａは本発明で定義された通りである。
【化15】
【0021】
本発明の一部の形態において、上記式（Ｉ）の化合物において、化合物は、下記の式から選択され、
ただし、Ｙ、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒａ及び環Ａは本発明で定義された通りである。
【化16】
【0022】
本発明の一部の形態は、更に上記の変量を任意に組み合わせることにより形成される。
【0023】
本発明はまた、下記の式の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【化17-1】
【化17-2】
【0024】
本発明の一部の形態において、上記化合物は、下記の式から選択される。
【化18】
【0025】
本発明はまた、下記の式の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
【化19】
【0026】
本発明の一部の形態において、上記薬学的に許容される塩は、下記の式から選択される。
【化20】
【0027】
本発明の一部の形態において、上記薬学的に許容される塩は、ギ酸塩から選択される。
【0028】
本発明はまた、乳癌を治療するための医薬の製造における、上記化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【0029】
本発明の一部の形態において、前記乳癌はエストロゲン受容体陽性乳癌である。
【0030】
技術効果
本発明の化合物は、体外でＥＲαに対して有意な分解効果を有し、ＭＣＦ－７細胞に対して有意な抗増殖活性を有し、良好な薬物動態特性及び有意な体内外有効性を有し、優れた乳癌、特にＥＲ変異型乳癌の医薬となることが期待されている。
本発明の化合物は、体外でＥＲαに対して有意な分解効果を有し、ＭＣＦ－７細胞に対して有意な抗増殖活性を有し、良好な薬物動態特性及び有意な体内外有効性を有し、優れた乳癌、特にＥＲ変異型乳癌の医薬となることが期待されている。
【0031】
定義及び説明
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。一つの特定の用語又は連語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。一つの特定の用語又は連語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。
【0032】
本明細書で用いられる「薬学的許容される塩」は、それらの化合物、材料、組成物及び／又は剤形に対するもので、これらは信頼できる医学判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織との接触に適し、毒性、刺激性、アレルギー反応又はほかの問題又は合併症があまりなく、合理的な利益／リスク比に合う。
【0033】
用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩で、本発明で発見された特定の置換基を有する化合物と比較的に無毒の酸又は塩基とで製造される。本発明の化合物に比較的に酸性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は適切な不活性溶媒において十分な量の塩基でこれらの化合物と接触することで塩基付加塩を得ることができる。薬学的許容される塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミン又はマグネシウム塩あるいは類似の塩を含む。本発明で化合物に比較的塩基性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は、適切な不活性溶媒において十分な量の酸でこれらの化合物と接触することで酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の実例は、無機酸塩及び有機酸塩、さらにアミノ酸（例えばアルギニンなど）の塩、及びグルクロン酸のような有機酸の塩を含み、上記無機酸は、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素イオン、リン酸、リン酸一水素イオン、リン酸二水素イオン、硫酸、硫酸水素イオン、ヨウ化水素酸、亜リン酸などを含み、上記有機酸は、例えば酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸やメタンスルホン酸などの類似の酸を含む。本発明の一部の特定的の化合物は、塩基性及び酸性の官能基を含有するため、任意の塩基付加塩又は酸付加塩に転換することができる。
【0034】
本発明の薬学的許容される塩は、酸基又は塩基性基を含む母体化合物から通常の方法で合成することができる。通常の場合、このような塩の製造方法は、水又は有機溶媒あるいは両者の混合物において、遊離酸又は塩基の形態のこれらの化合物を化学量論量の適切な塩基又は酸と反応させて製造する。
【0035】
本発明の化合物は、化合物を構成する一つまた複数の原子には、非天然の原子同位元素が含まれてもよい。例えば三重水素（Ｄ、３Ｈ）、ヨウ素－１２５（１２５Ｉ）又はＣ－１４（１４Ｃ）のような放射性同位元素で化合物を標識することができる。又、例えば重水素を水素に置換して重水素化薬物を形成することができ、重水素と炭素で形成された結合は、通常の水素と炭素で形成された結合よりも強く、重水素化されていない薬物と比較して、重水素化された薬物には、毒性の副作用が軽減され、薬物の安定性が増し、治療効果が向上され、薬物の生物学的半減期が延ばされるという利点がある。本発明の化合物の同位体組成の変換は、放射性であるかいやかに関わらず、本発明の範囲に含まれる。
【0036】
「任意」また「任意に」は後記の事項又は状況によって可能であるが必ずしも現れるわけではなく、かつ当該記述はそれに記載される事項又は状況が生じる場合によってその事項又は状況が乗じない場合を含むことを意味する。
【0037】
用語「置換された」は特定の原子における任意の一つ又は複数の水素原子が置換基で置換されたことで、特定の原子価状態が正常でかつ置換後の化合物が安定していれば、置換基は重水素及び水素の変形体を含んでもよい。置換基がケト基（即ち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されたことを意味する。ケト基置換は、芳香族基で生じない。用語「任意に置換される」は、置換されてもよく、置換されなくてもよく、別途に定義しない限り、置換基の種類と数は化学的に安定して実現できれば任意である。
【0038】
変量（例えばＲ）のいずれかが化合物の組成又は構造に１回以上現れた場合、その定義はいずれの場合においても独立である。そのため、例えば、一つの基が０～２個のＲで置換された場合、上記基は任意に２個以下のＲで置換され、かついずれの場合においてもＲは独立して選択肢を有する。また、置換基及び／又はその変形体の組み合わせは、このような組み合わせであれば安定した化合物になる場合のみ許容される。
【0039】
特に明記しない限り、ある基が一つ以上の結合可能な部位を有する場合、当該基の任意の一つ以上の部位は、化学結合によって他の基に結合することができる。当該化学結合の結合方式が非局在であり、且つ結合可能な部位にＨ原子が存在する場合、化学結合を結合すると、当該部位のＨ原子の個数は、結合された化学結合の個数に応じて相応の価数の基に減少する。前記部位が他の基と結合する化学結合は、
で表すことができる。例えば、－ＯＣＨ３の直線実線結合は、該基の酸素原子を介して他の基に結合されていることを意味する。
中の直線の破線結合は、当該基内の窒素原子の両端が他の基に結合されていることを意味する。
中の波線は、当該フェニル基の１と２位置の炭素原子を介して他の基に結合されていることを意味する。
は、当該ピペリジニル基の任意の結合可能な部位が１つの化学結合によって他の基に結合できることを意味し、少なくとも
の四つの結合形態を含み、Ｈ原子が－Ｎ－に描かれていても、
には
この結合形態の基が含まれるが、１つの化学結合が接続されると、その部位のＨは１つ減少して対応する一価ピペリジンになる。
【化21】
【化22】
【化23】
【化24】
【化25】
【化26】
【化27】
【0040】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－６アルキル」は直鎖又は分枝鎖の１～６個の炭素原子から構成された飽和炭化水素を表す。前記Ｃ１～３アルキルにはＣ１－５、Ｃ１－４、Ｃ１－３、Ｃ１－２、Ｃ２－６、Ｃ２－４、Ｃ６とＣ５アルキルなどが含まれ、それは１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）及び多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１－６アルキルの実例は、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル、ｔ－ブチルを含む）、ペンチル（ｎ－ペンチル、イソペンチル及びネオペンチルを含む）などを含むが、これらに限定されない。
【0041】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－４アルキル」は直鎖又は分枝鎖の１～４個の炭素原子で構成された飽和炭化水素基を表す。前記Ｃ１－４アルキルにはＣ１－２、Ｃ１－３とＣ２－３アルキルなどが含まれ、それは１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）及び多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１－４アルキルの実例は、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル、ｔ－ブチルを含む）などを含むが、これらに限定されない。
【0042】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－３アルキル」は直鎖又は分枝鎖の１～３個の炭素原子で構成された飽和炭化水素を表す。前記Ｃ１－３アルキルにはＣ１－２とＣ２－３アルキルなどが含まれ、それは１価（例えばメチル）、２価（例えばメチレン）及び多価（例えばメチン）であってもよい。Ｃ１－３アルキルの実例は、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）を含むが、これらに限定されない。
【0043】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－６アルコキシ」は一つの酸素原子を介して分子の残り部分に連結した１～６個の炭素原子を含むアルキルを表す。上記Ｃ１－６アルコキシには、Ｃ１－４、Ｃ１－３、Ｃ１－２、Ｃ２－６、Ｃ２－４、Ｃ６、Ｃ５、Ｃ４及びＣ３アルコキシなどが含まれる。Ｃ１－６アルキルの実例はメトキシ、エトキシ、プロポキシ（ｎ－プロポキシおよびイソプロポキシを含む）、ブトキシ（ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｓ－ブトキシおよびｔ－ブトキシ基を含む）、ペンチルオキシ（ｎ－ペンチルオキシ、イソペンチルオキシおよびネオペンチルオキシを含む）、ヘキシルオキシなどを含むが、これらに限定されない。
【0044】
別途に定義しない限り、用語「Ｃ１－３アルコキシ」は酸素原子を介して分子の残り部分に連結した１～３個の炭素原子を含むアルキルを表す。前記Ｃ１－３アルコキシには、Ｃ１－２、Ｃ２－３、Ｃ３及びＣ２アルコキシなどが含まれる。Ｃ１－３アルコキシの実例はメトキシ、エトキシ、プロポキシ（ｎ―プロポキシ又はイソプロポキシを含む）などを含むが、これらに限定されない。
【0045】
別途に定義しない限り、「Ｃ３－６シクロアルキル」は３～６個の炭素原子から構成された飽和炭化水素基であり、それは単環式及び二環式環系を表し、上記Ｃ３－６シクロアルキルにはＣ３－５、Ｃ４－５又はＣ５－６シクロアルキルなどが含まれ、それは一価、二価又は多価であってもよい。Ｃ３－６シクロアルキルの実例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含むが、これらに限定されない。
【0046】
本発明の化合物のギ酸塩を飽和炭酸ナトリウム溶液に加え、ｐＨ＞９に調節し、高速液体クロマトグラフィー（中性、炭酸水素アンモニウム系）によリ分離して、化合物の遊離塩基を得た。
【0047】
本発明の化合物は当業者に熟知の様々な合成方法によって製造することができ、以下に挙げられた具体的な実施形態、他の化学合成方法と合わせた実施形態及び当業者に熟知の同等の代替方法を含み、好適な実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。
【0048】
本発明の化合物は、当業者に周知の従来の方法によって確認することができ、本発明が化合物の絶対配置に関する場合、絶対配置は、当業者の従来の技術的手段によって確認することができる。例えば、単結晶Ｘ線回折（ＳＸＲＤ）であり、培養された単結晶はＢｒｕｋｅｒ Ｄ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計によって収集され、光源はＣｕＫα放射線であり、走査方法：φ／ω走査であり、関連データを収集した後、更に直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）により結晶構造解析により、絶対配置を確認することができる。
【0049】
本発明に使用されたすべての溶媒は市販品から得ることができる。
【表1】
【0050】
化合物は手動又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトによって名付けられ、市販化合物はメーカーのカタログの名称がされた。
【実施例】
【0051】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明の不利な制限を意味するものではない。本発明は本明細書で詳細に説明されており、その特定の実施形態も開示されており、当業者にとって、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本発明の特定の実施形態において様々な変更及び修正を行うことができることは明らかである。
【0052】
本発明の化合物を製造するために、各反応工程における反応ステップのステップが異なっていてもよく、それらも本発明の範囲に属することは、当業者に知られているはずである。
【化28】
【0053】
ステップＡ：１－１１（１．５ｇ、４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（３．０８ｇ、２７ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で０．５時間撹拌し、減圧濃縮して１－１２を得た。
【0054】
ステップＢ：１－１２（１．４ｇ、３．６ｍｍｏｌ）、１－フルオロ－３－ヨードロパン（７４３．８６ｍｇ、３．９６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍｌ）に溶解させ、炭酸カリウム（１．２４ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を４０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（５０ｍｌ）及び酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて分離し、分離した水相を６０ｍｌの酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。ｐ－ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ（規格：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［ｎ－ヘキサン－エタノール（１％のアンモニア水）］；溶出勾配：１％～３０％、８分）で精製して化合物１－１３を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ７．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．７９ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５０ （ｓ， １Ｈ）， ４．３９ （ｓ， １Ｈ）， ３．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ６．１， ８．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９９ - ２．８８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５３ - ２．５０ （ｍ， ２Ｈ）， １．７５ － １．５４ （ｍ， ２Ｈ）， １．２６ （ｓ， １２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３３６．５ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【化29】
【0055】
ステップＡ：２－１３（１７．８６ｇ、１０３．２５ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１５０ｍｌ）溶液に炭酸セシウム（５０．４６ｇ、１５４．８８ｍｍｏｌ）及び２－１４（３８ｇ、１３４．２３ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を１００℃で１６時間撹拌した。反応溶液に水（５００ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得、分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８（規格：２５０ｍｍ×７０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：３５％～６５％、２５分）で精製して２－１５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３２８．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋
【0056】
ステップＢ：２－１５（２００ｍｇ、５９５．７７μｍｏｌ）、ヘキサメチルジスタンナン（２６０ｍｇ、７９３．５９μｍｏｌ）、塩化リチウム（３０．３１ｍｇ、７１４．９２μｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６８．８４ｍｇ、５９．５８μｍｏｌ）のトルエン（３ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で、９０℃で３時間撹拌して２－１０（反応溶液は処理せず、直接に次の反応に使用した）を得た。
【化30】
【0057】
ステップＡ：３－１４（２９ｇ、１３２．８７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５５．０９ｇ、３９８．６２ｍｍｏｌ）、１，２－ジブロモエタン（１２４．８１ｇ、６６４．３７ｍｍｏｌ）及びアセトニトリル（３００ｍｌ）の混合溶液を６５℃で１２時間撹拌して反応させた後、濾過し、得られた濾液を減圧濃縮して溶媒のアセトニトリルを除去した。残留物に飽和炭酸水素ナトリウム（１５０ｍｌ）を加え、酢酸エチル（２００ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水（１５０ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）で精製して化合物３－１５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３２６．８ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0058】
ステップＢ：３－１５（２５ｇ、７６．８８ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２３．０５ｇ、１５３．７５ｍｍｏｌ）及びアセトン（２５０ｍｌ）の混合溶液を２５℃で１８時間撹拌して反応させた後濾過し、得られた濾液を減圧濃縮して溶媒のアセトンを除去した。残留物に水（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物３－４を得た。
【0059】
化合物３－４：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．０４ （ｓ， １Ｈ）， ７．２２ － ７．１７ （ｍ， １Ｈ）， ７．１５ － ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ６．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ７．５８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．６９， ９．４１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３ － ４．２１ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０３ － ３．８９ （ｍ， １Ｈ）， ３．７４ － ３．５６ （ｍ， １Ｈ）， ３．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６１ － ２．３６ （ｍ， １Ｈ）， ２．１７ － １．９２ （ｍ， ２Ｈ）， １．８１ － １．５８ （ｍ， ３Ｈ）。
【化31】
【0060】
ステップＡ：３－１６（１．１８ｇ、４．９６ｍｍｏｌ）及び３－１７（１．７１ｇ、９．９２ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（１２ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１．９２ｇ、１４．８８ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を１３０℃で１２時間撹拌した。反応溶液に水（２００ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を水（１００ｍｌ×２）及び飽和食塩水（１００ｍｌ）で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝８／１～２／１）で精製して３－１８を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３２９．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0061】
ステップＢ：３－１８（４００ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、ヘキサメチルジスタンナン（４７７．７２ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（１５４．５４ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１４０．４１ｍｇ、１２１．５１μｍｏｌ）のトルエン（４ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で９０℃で３時間撹拌して３－１１（反応溶液は処理せず、直接に次の反応に使用した）を得た。
【化32】
【0062】
ステップＡ：４－９（５００ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）、３－１７（４８９．１７ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６６８．１７ｍｇ、５．１７ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（１０ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で９０℃で１２時間撹拌した。反応溶液に水（３０ｍｌ）及び酢酸エチル（３０ｍｌ）を加えた。分離した後得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して４－１０を得た。
【0063】
ステップＢ：４－１０（２００ｍｇ、６０７．５５μｍｏｌ）、ヘキサメチルジスタンナン（６７０ｍｇ、２．０５９ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（７７．２７ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７０．２１ｍｇ、６０．７５μｍｏｌ）のトルエン（３ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で、９０℃で３時間撹拌して４－６（反応溶液は処理せず、直接に次の反応に使用した）を得た。
【化33】
【0064】
ステップＡ：７－４（４．４９ｍｇ、２３．２３ｍｍｏｌ）、３－１７（２．００ｇ、１１．６１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．８１ｇ、３４．８４ｍｍｏｌ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９－ジメチルキサンテン（２．６９ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２．１３ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）のトルエン（６０ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で１００℃で１８時間撹拌した。得られた反応溶液を室温に冷却させた後水（５０ｍｌ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。逆相カラムクロマトグラフィーで精製して化合物７－５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６０１．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0065】
ステップＢ：７－５（３００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、ヘキサメチルジスタンナン（５１８ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（１３３．９８ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１２１．７５ｍｇ、１０５．３６μｍｏｌ）のトルエン（６ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で９０℃で２４時間撹拌して７－１（反応溶液は処理せず、直接に次の反応に使用した）を得た。
【化34】
【0066】
ステップＡ：９－５（９．８ｇ、５３．５５ｍｍｏｌ）、３－１７（１８．４５ｇ、１０７．１０ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（１００ｍｌ）溶液にヨウ化銅（Ｉ）（２．０４ｇ、１０．７１ｍｍｏｌ）、ＤＬ－プロリン（２．４７ｇ、２１．４２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２２．２０ｇ、１６０．６２ｍｍｏｌ）を加えた。反応を窒素ガスの保護下で１２０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１００／１～１／１）で精製して化合物９－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：２１９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0067】
ステップＢ：９－６（２．５ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）溶液にＮ－ブロモスクシンイミド（１．９５ｇ、１０．９４ｍｍｏｌ）を加えた。反応を窒素ガスの保護下で、２０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に亜硫酸ナトリウム（３０ｍｌ）を加えてクエンチングさせ、酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１００／１～１／１）で精製して化合物９－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３５３．２１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【化35】
【0068】
ステップＡ：１０－４（１．２０ｇ、９．８３ｍｍｏｌ）及び３－１７（１．６９ｇ、９．８３ｍｍｏｌ）のＮ－メチルピロリドン（１０ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３．８１ｇ、２９．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液をマイクロ波で１２０℃に加熱し、１時間撹拌した。反応溶液に水（２０ｍｌ）を加え、酢酸エチル（２０ｍｌ×２）で抽出した。有機相を飽和食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１０－５を得た。
【0069】
ステップＢ：１０－５（２．５ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液にＮ－ブロモスクシンイミド（１．６２ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応を窒素ガスの保護下で、５～１５℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（４０ｍｌ）を加え、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（３０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～２／１）で精製して化合物１０－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：２９６．９／２９８．６ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【化36】
【0070】
ステップＡ：３－１６（３．０ｇ、１２．６１ｍｍｏｌ）及び１１－５（２．３５ｇ、１２．６１ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（１０ｍｌ）溶液にトリエチルアミン（３．８３ｇ、３７．８３ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を１３０℃で１６時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（３００ｍｌ×１）で抽出した。有機相を飽和食塩水（１００ｍｌ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８、規格：２５０ｍｍ×７０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：３５％～６５％、２０分）で精製して化合物１１－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２８７／２８９ ［Ｍ－５５］＋。
【0071】
ステップＢ：１１－６（８００ｍｇ、２．３３ｍｍｏｌ）、ヘキサメチルジスタンナン（１．１６０ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（１１８．５７ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２６９．３５ｍｇ、２３３．０９μｍｏｌ）のトルエン（１０ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で、９０℃で３時間撹拌して１１－１（反応溶液は処理せず、直接に次の反応に使用した）を得た。
【0072】
実施例１
【化37】
【0073】
合成スキーム：
【化38】
【0074】
ステップＡ：１－１（７ｇ、５４．６２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で９－ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（０．５ｍｏｌ／Ｌ、１０９ｍｌ）を加えた。混合溶液を６０℃で３時間撹拌し、１－２のテトラヒドロフランの反応溶液を得、直接に次の反応に使用した。
【0075】
ステップＢ：ステップＡで得られた１－２のテトラヒドロフラン溶液及び１－３（１０ｇ、３５．５７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）の混合溶液に加え、更にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２．０６ｇ、１．７８ｍｍｏｌ）及びリン酸カリウム（１１．３２ｇ、５３．３５ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で７０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（５０ｍｌ）を加え、１５０ｍｌの酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１～７／１）で精製して化合物１－４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３３１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0076】
ステップＣ：１－４（１０．２ｇ、３０．８７ｍｍｏｌ）をメタノール（６０ｍｌ）に溶解させ、水酸化ナトリウム（２．４７ｇ、６１．７４ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍｌ）を加え、混合溶液を１５～２５℃で２時間撹拌した。得られた反応溶液に塩酸（１ｍｏｌ／Ｌ、８０ｍｌ）を加え、１５０ｍｌの酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１－５を得た。
【0077】
化合物１－５：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ０．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３６ － ７．２７ （ｍ， １Ｈ）， ６．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７８ － ５．６６ （ｍ， １Ｈ）， ４．０９ － ４．００ （ｍ， １Ｈ）， ３．８１ － ３．６９ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６６ － ２．５１ （ｍ， １Ｈ）， ２．３８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２１ － ２．１１ （ｍ， １Ｈ）， １．８５ － １．６２ （ｍ， ８Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３０３．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0078】
ステップＤ：１－５（９．５ｇ、３１．４２ｍｍｏｌ）をポリリン酸（２００克）に溶解させ、混合溶液を窒素ガスの保護下で１００℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液を水（１０００ｍｌ）に注ぎ、６００ｍｌの酢酸エチル（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：２０１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0079】
ステップＥ：１－６（４．５ｇ、２２．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４５ｍｌ）に溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（８５．５ｍｇ、４４９．４７μｍｏｌ）及び３，４－ジヒドロピラン（２．８４ｇ、３３．７１ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で２０～３０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）を加え、９０ｍｌのジクロロメタン（３０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～４／１）で精製して化合物１－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：２８５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0080】
ステップＦ：１－７（１ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）及び（３－ブロモ－ｎ－プロポキシ）（ｔｅｒｔ－ブチル）ジメチルシラン（１．３４ｇ、５．２８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍｌ）に溶解させ、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（５９１．９４ｍｇ、５．２８ｍｍｏｌ）及びヨウ化テトラ（ｎ－ブチル）アンモニウム（１．３０ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で７０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（２０ｍｌ）を加え、４０ｍｌの酢酸エチル（２０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１～７／１）で精製して化合物１－８を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：４５７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0081】
ステップＧ：１－８（０．１ｇ、２１８．９７μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（６ｍｌ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、カリウムビス（トリメチルシリル）アミドのテトラヒドロフラン溶液（１ｍｏｌ／Ｌ、３２８μＬ、３２８μｍｏｌ）を加えた。混合溶液を－７８℃で０．５時間撹拌した後、Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（１１７．３４ｍｇ、３２８μｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍｌ）を加え、混合溶液を２０～３０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（２０ｍｌ）を加え、４０ｍｌの酢酸エチル（２０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５／１）で精製して化合物１－９を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：５８９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0082】
ステップＨ：１－９（５０ｍｇ、８４．９３μｍｏｌ）及び１－１３（４２．７１ｍｇ、１２７．４μｍｏｌ）を１，４－ジオキサン（２ｍｌ）及び水（０．４ｍｌ）の混合溶液に溶解させ、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（１９．７６ｍｇ、２４．２０μｍｏｌ）（６．２１ｍｇ、８．４９μｍｏｌ）及び炭酸セシウム（５５．３４ｍｇ、１６９．８６μｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で５０℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液に水（２０ｍｌ）を加え、４０ｍｌの酢酸エチル（２０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／４）で精製して化合物１－１０を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：６４８．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0083】
ステップＩ：１－１０（１０ｍｇ、１５．４３μｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（１ｍｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で２５～３０℃で４時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を加え、６０ｍｌのジクロロメタン（２０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。ｐ－ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ Ｃ１８（規格：１５０ｍｍ×２５ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：１７％～３７％、１０分）で精製して化合物１のギ酸塩を得た。
【0084】
化合物１的ギ酸塩：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝１３．０７ － １２．７７ （ｍ， １Ｈ）， ８．２７ － ８．０４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９６ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７７ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．６３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８１ － ４．７３ （ｍ， １Ｈ）， ４．５１ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ２．９７ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．５３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ２．３１ － ２．１７ （ｍ， ４Ｈ）， １．９１ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７２ － １．５９ （ｍ， ４Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：４５０．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0085】
実施例２
【化39】
【0086】
合成スキーム：
【化40】
【0087】
ステップＡ：０℃で、窒素ガスの保護下で、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルアミン（７．７３ｇ、７６．４１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）溶液にｎ－ブチルリチウムのｎ－ヘキサン溶液（２．５ｍｏｌ／Ｌ、２８．２１ｍｌ）をゆっくりと滴下し、反応溶液を０℃で０．５時間撹拌した後、－７０℃に冷却させ、２－１（１０ｇ、５８．７８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）溶液をゆっくりと滴下し、滴下完了後反応溶液を－７０℃で０．５時間撹拌し、次に反応溶液に２－２（８．５３ｇ、７０．５３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液をゆっくりと滴下し、滴下完了後反応溶液を－７０℃で３時間撹拌して反応させた。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍｌ×２）及び飽和食塩水（２００ｍｌ×２）を順次に加えて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル）で精製して化合物２－３を得た。
【0088】
化合物２－３：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ５．８２ － ５．５９ （ｍ， １Ｈ）， ５．１５ （ｄ， Ｊ ＝ １．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１３ － ５．０９ （ｍ， １Ｈ）， ４．１９ （ｑ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８２ － ２．７４ （ｍ， １Ｈ）， ２．６９ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．５０ － ２．４０ （ｍ， １Ｈ）， ２．３９ － ２．３０ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０ － ２．１７ （ｍ， １Ｈ）， １．３２ － １．２７ （ｍ， ３Ｈ）．
【0089】
ステップＢ：２０℃で、窒素ガスの保護下で、２－３（３．１ｇ、１４．７５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１８ｍｌ）溶液に９－ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（０．５ｍｏｌ／Ｌ、３２．４５ｍｌ）を加え、反応溶液を６０℃で３時間撹拌した後、室温に冷却させた。反応溶液に水（１０ｍｌ）、２－４（３．５３ｇ、１１．８０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．７ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）及びリン酸カリウム（４．７ｇ、２２．１２ｍｍｏｌ）を順次に加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で、７０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に酢酸エチル（１００ｍｌ）を加えて希釈した後、飽和食塩水（２００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１００／１～０／１）で精製して化合物２－５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４３１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0090】
ステップＣ：２－５（６．７ｇ、１３．４６ｍｍｏｌ）のメタノール（７５ｍｌ）及び水（２５ｍｌ）の混合溶液に水酸化ナトリウム（２．１５ｇ、５３．８３ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して溶媒のメタノールを除去し、残留物に水（１５０ｍｌ）を加えて希釈した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ×２）で抽出し、水相に塩酸（２ｍｏｌ／Ｌ）を加えてｐＨ＝２に調節した後、酢酸エチル（８０ｍｌ×４）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物２－６を得た。
【0091】
化合物２－６：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９９ － ６．９０ （ｍ， １Ｈ）， ５．５９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ２．４， ９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０４ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２．９， １０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９７ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８２ － ２．７２ （ｍ， １Ｈ）， ２．７２ － ２．５６ （ｍ， １Ｈ）， ２．５６ － ２．４２ （ｍ， １Ｈ）， ２．２８ － ２．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０６ － １．９９ （ｍ， １Ｈ）， １．７９ － １．５８ （ｍ， ７Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４０３．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0092】
ステップＤ：２－６（２．７ｇ、６．５４ｍｍｏｌ）をポリリン酸（３０ｍｌ）に溶解させ、混合溶液を１１０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に水（３００ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（１００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍｌ×２）及び飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物２－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３０１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップＥ：２－７（２．７ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（８５５．２６ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）及び３，４－ジヒドロピラン（１．１３ｇ、１３．４９ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝４０／１～２０／１）で精製して化合物２－８を得た。
ステップＥ：２－７（２．７ｇ、８．９９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（８５５．２６ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）及び３，４－ジヒドロピラン（１．１３ｇ、１３．４９ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝４０／１～２０／１）で精製して化合物２－８を得た。
【0093】
化合物２－８：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３８ （ｔｄ， Ｊ ＝ ２．０， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．５９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ２．４， ９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０６ － ３．９５ （ｍ， １Ｈ）， ３．８１ － ３．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３６ － ３．２３ （ｍ， １Ｈ）， ３．２２ － ２．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５３ － ２．３８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３５ － ２．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１９ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０６ － ２．００ （ｍ， １Ｈ）， １．８０ － １．６５ （ｍ， ５Ｈ））。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３８５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0094】
ステップＦ：－７０℃で、窒素ガスの保護下でカリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１．０ｍｏｌ／Ｌ、７０９μＬ）のテトラヒドロフラン（５ｍｌ）溶液に２－８（２００ｍｇ、４７３．７９μｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２ｍｌ）溶液をゆっくりと滴下した。混合溶液を－７０℃で１時間撹拌した後、Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（２５３．５４ｍｇ、７０９．７０μｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍｌ）を加えてクエンチングさせ、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝３／１）で精製して化合物２－９を得た。
【0095】
化合物２－９：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．５１ － ７．３７ （ｍ， ２Ｈ）， ５．６０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ２．５， ９．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０９ － ３．９９ （ｍ， １Ｈ）， ３．８１ － ３．６８ （ｍ， １Ｈ）， ３．３７ － ３．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１７ － ２．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５５ － ２．３３ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２１ － ２．１１ （ｍ， １Ｈ）， ２．１１ － ２．０５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０５ － １．９９ （ｍ， １Ｈ）， １．７９ － １．６３ （ｍ， ３Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１７．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0096】
ステップＧ：２－９（２００ｍｇ、３８４．１７μｍｏｌ）、２－１０（２４５ｍｇ、５９４．５０μｍｏｌ）、塩化リチウム（４８．８６ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４４．３９ｍｇ、３８．４２μｍｏｌ）のトルエン（７ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で１００℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、濾液に酢酸エチル（４０ｍｌ）を加えて希釈し、飽和食塩水（５０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）で精製して化合物２－１１を得た。
【0097】
化合物２－１１： １ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．００ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．１， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８４ － ６．７７ （ｍ， １Ｈ）， ６．７６ － ６．６９ （ｍ， １Ｈ）， ５．６２ － ５．４４ （ｍ， １Ｈ）， ４．４２ － ４．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２８ － ４．１９ （ｍ， １Ｈ）， ４．１４ － ４．０９ （ｍ， １Ｈ）， ４．０１ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ １０．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．５， ９．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７５ － ３．６１ （ｍ， １Ｈ）， ３．４６ － ３．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０７ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５６ － ２．３２ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２１ － ２．０９ （ｍ， ３Ｈ）， ２．０１ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ ＝ ３．４， １３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８１ － １．６７ （ｍ， ２Ｈ）， １．６６ － １．６２ （ｍ， １Ｈ）， １．５１ － １．３９ （ｍ， ９Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６１６．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0098】
ステップＨ：２－１１（１６０ｍｇ、２５８．１５μｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を加えた。混合溶液を２５℃で４時間撹拌した後、トリフルオロ酢酸（１ｍｌ）を加え、反応溶液を２５℃で１時間撹拌を続けた。得られた反応溶液を減圧濃縮して粗生成物２－１２を得、精製せず直接に次のステップに使用した。
【0099】
ステップＩ：２－１２（５０ｍｇ、１１５．８９μｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７４．８９ｍｇ、５７９．４７μｍｏｌ）及び２－１３（３２ｍｇ、１７０．２３μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて希釈し、飽和炭酸ナトリウム（５０ｍｌ×２）及び飽和食塩水（５０ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８（規格：７５ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：３μｍ）；移動相：［水（０．０５％のアンモニア水）－アセトニトリル］；溶出勾配：３６％～６６％、７分）で精製して化合物２を得た。
【0100】
化合物２：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １２．５１ （ｓ， １Ｈ）， ７．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．５， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．９， ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７９ － ６．６８ （ｍ， ２Ｈ）， ６．４９ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１ － ３．９６ （ｍ， １Ｈ）， ３．７７ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ３．５９ － ３．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．５９ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ３．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．３６ － ２．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０６ － １．９６ （ｍ， ２Ｈ）， １．８０ － １．６０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３６ － １．１６ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４９２．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0101】
実施例３
【化41】
【0102】
合成スキーム：
【化42】
【0103】
ステップＡ：３－１（２５ｇ、１５６．０９ｍｍｏｌ）及び３－２（３９．８５ｇ、１７１．７０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２５０ｍｌ）溶液に炭酸カリウム（３２．３６ｇ、２４３．１３ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を８０℃で１６時間撹拌して反応させた後濾過し、得られた濾液を減圧濃縮して溶媒のアセトニトリルを除去し、残留物に酢酸エチル（５００ｍｌ）を加えて溶解させ、飽和食塩水（５００ｍｌ×２）を加えて洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１００／１）で精製して化合物３－３を得た。
【0104】
化合物３－３：１ＨＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ４．２７ － ４．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．６３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８１ （ｄｑ， Ｊ ＝ ７．０， １０．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３０ － １．２６ （ｍ， ６Ｈ）。１９ＦＮＭＲ （３７７ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ －６５．８４ － －６６．０９ （ｍ， ３Ｆ）。
【0105】
ステップＢ：３－３（１５ｇ、６１．９３ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３６．６９ｇ、１１２．６１ｍｍｏｌ）、３－４（２０．９６ｇ、５６．３０ｍｍｏｌ）及びアセトニトリル（２００ｍｌ）の混合溶液を８０℃で、１６時間撹拌して反応させた後濾過し、得られた濾液を減圧濃縮して溶媒のアセトニトリルを除去し、残留物に酢酸エチル（５００ｍｌ）を加えて溶解させ、飽和食塩水（５００ｍｌ×３）を加えて洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物３－５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４８７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0106】
ステップＣ：３－５（３２．７ｇ、６７．２２ｍｍｏｌ）及び塩化リチウム（８．５５ｇ、２０１．６５ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（３００ｍｌ）溶液を１４０℃で１６時間撹拌して反応させた。得られた反応溶液に酢酸エチル（５００ｍｌ）を加えて希釈し、飽和食塩水（１０００ｍｌ×４）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物３－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0107】
ステップＤ：３－６（２３．６ｇ、５６．９５ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍｌ）及び水（１００ｍｌ）の混合溶液に水酸化ナトリウム（９．１１ｇ、２２７．７９ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和炭酸ナトリウム（１５０ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍｌ×２）で抽出し、分離して得られた水相に塩酸（２ｍｏｌ／Ｌ）を加えてｐＨ＝２に調節した後酢酸エチル（２００ｍｌ×３）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水（５００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物３－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３８７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0108】
ステップＥ：３－７（２０．６ｇ、４６．１０ｍｍｏｌ）をイートン試薬（１６０ｍｌ）に溶解させ、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に水（５００ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５００ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物３－８を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２８５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0109】
ステップＦ：３－８（１７ｇ、５９．８１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（５．６９ｇ、２９．９１ｍｍｏｌ）及び３，４－ジヒドロピラン（７．５５ｇ、８９．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～１５／２）で精製して化合物３－９を得た。
【0110】
化合物３－９：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．２１ （ｓ， １Ｈ）， ７．７６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．５， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．８， ９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ２．９， ９．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７７ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １．５， ７．２， １２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１０ － ４．０１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０８ － ２．９５ （ｍ， １Ｈ）， ２．３４ － ２．２５ （ｍ， １Ｈ）， １．９７ － １．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．８０ － １．７４ （ｍ， ２Ｈ）， １．６２ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６１ － １．４６ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３６９．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0111】
ステップＧ：－７０℃で、窒素ガスの保護下でカリウムビス（トリメチルシリル）アミド（１．０ｍｏｌ／Ｌ、２２．２２ｍｌ）のテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）溶液中に３－９（６ｇ、１４．８３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液をゆっくりと滴下した。混合溶液を－７０℃で１時間撹拌した後、Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（７．９４ｇ、２２．２２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２０ｍｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和塩化アンモニウム（２００ｍｌ）を加えてクエンチングさせ、酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８（規格：２５０ｍｍ×８０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：６５％～９５％、２０分）で精製して化合物３－１０を得た。
【0112】
化合物３－１０：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ８．１７ （ｓ， １Ｈ）， ７．５４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ０．６， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．２， ９．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２ － ３．６７ （ｍ， １Ｈ）， ３．５２ （ｑ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５７ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ５．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４５ － ２．２９ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ － １．９５ （ｍ， ２Ｈ）， １．８２ － １．６７ （ｍ， １Ｈ）， １．６６ － １．５３ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５０１．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0113】
ステップＨ：３－１１（５０２ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、３－１０（５００ｍｇ、９９６．１５μｍｏｌ）、塩化リチウム（１２６．６９ｍｇ、２．９９ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１１５．１１ｍｇ、９９．６２μｍｏｌ）のトルエン（５ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で１００℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を室温に冷却させた後濾過し、濾液に酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて希釈し、飽和食塩水（５０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８（規格：１５０ｍｍ×４０ｍｍ、粒子径：１５μｍ）；移動相：［水（０．１％のトリフルオロ酢酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：４９％～７９％、１１分）で精製して化合物３－１２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６０１．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0114】
ステップＩ：３－１２（４００ｍｇ、５７７．６１μｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、１０ｍｌ）に溶解させた。反応溶液を２０℃で３時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して３－１３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップＪ：３－１３（３００ｍｇ、６６２．４６μｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４２８．０９ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ）及び２－１３（１４９．４４ｍｇ、７９４．９５μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（１００ｍｌ）を加えて希釈し、飽和食塩水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８（規格：７５ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：３μｍ）；移動相：［水（炭酸水素アンモニウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ）－アセトニトリル］；溶出勾配：２２％～５２％、８分）で精製して化合物３を得た。
ステップＪ：３－１３（３００ｍｇ、６６２．４６μｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（４２８．０９ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ）及び２－１３（１４９．４４ｍｇ、７９４．９５μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。反応溶液に酢酸エチル（１００ｍｌ）を加えて希釈し、飽和食塩水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８（規格：７５ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：３μｍ）；移動相：［水（炭酸水素アンモニウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ）－アセトニトリル］；溶出勾配：２２％～５２％、８分）で精製して化合物３を得た。
【0115】
化合物３：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １３．１０ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．０６ （ｓ， １Ｈ）， ７．９４ （ｄ， Ｊ ＝ １．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６８ （ｄ， Ｊ ＝ １．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ０．８， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８０ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５３ （ｔ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４５ － ４．３３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４２ （ｑ， Ｊ ＝ １１．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８９ － ２．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４９ － ２．４６ （ｍ， ４Ｈ）， １．７４ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0116】
実施例４
【化43】
【0117】
合成スキーム：
【化44】
【0118】
ステップＡ：２－３（１３．９７ｇ、６６．４８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８０ｍｌ）溶液に９－ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（０．５ｍｏｌ／Ｌ、１４６．２６ｍｌ）を加え、反応溶液を６０℃で３時間撹拌した後室温に冷却させた。反応溶液に水（３０ｍｌ）、テトラヒドロフラン（１５０ｍｌ）、２－４（１８．６９ｇ、６６．４８ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（２１．１７ｇ、９９．７２ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７．６８ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）を順次に加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で７０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に水（５０ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～３／１）で精製して化合物４－１を得た。
【0119】
化合物４－１：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．０４ （ｓ， １Ｈ）， ７．４５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．０， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．６， ９．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ － ４．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０９ － ４．０２ （ｍ， １Ｈ）， ３．８０ － ３．７２ （ｍ， １Ｈ）， ２．９５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７６ － ２．６６ （ｍ， １Ｈ）， ２．６５ － ２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２１ － ２．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１２ － ２．０６ （ｍ， １Ｈ）， １．８２ － １．７１ （ｍ， ５Ｈ）， １．６９ － １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．２６ － １．２２ （ｍ， ３Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１３．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0120】
ステップＢ：４－１（１９．３３ｇ、４６．８７ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍｌ）及び水（５０ｍｌ）の混合溶液に水酸化ナトリウム（７．５０ｇ、１８７．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して溶媒のメタノールを除去し、残留物に水（１５０ｍｌ）を加えて希釈した後、ジクロロメタン（１００ｍｌ×２）で抽出し、水相に塩酸（２ｍｏｌ／Ｌ）を加えてｐＨ＝２に調節した後、酢酸エチル（８０ｍｌ×４）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物４－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ３８５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0121】
ステップＣ：４－２（５．７０ｇ、１４．８３ｍｍｏｌ）をポリリン酸（６０ｍｌ）に溶解させ、混合溶液を１１０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に氷水（１０００ｍｌ）を加えて希釈し、酢酸エチル（２００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物４－３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ２８３．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0122】
ステップＤ：４－３（１２ｇ、４１．５１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２０ｍｌ）に溶解させ、３，４－ジヒドロピラン（５．３６ｇ、６３．７７ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（４．０４ｍｇ、２１．２６ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を２５℃で１６時間撹拌した。反応溶液に水（１００ｍｌ）を加えて希釈し、ジクロロメタン（１００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸ナトリウム溶液（２００ｍｌ×２）及び飽和食塩水（２００ｍｌ×１）で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１）で精製して化合物４－４を得た。
【0123】
化合物４－４：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．１８ （ｓ， １Ｈ）， ７．８１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．９， ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７３ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ － ３．９９ （ｍ， １Ｈ）， ３．８２ － ３．７１ （ｍ， １Ｈ）， ３．５４ （ｂｒ ｄｄ， Ｊ ＝ ６．２， １６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３３ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２４ － ３．１２ （ｍ， １Ｈ）， ３．１１ － ２．９８ （ｍ， １Ｈ）， ２．６２ － ２．５０ （ｍ， １Ｈ）， ２．２２ － ２．０４ （ｍ， ４Ｈ）， １．８５ － １．６３ （ｍ， ６Ｈ）。
【0124】
ステップＥ：窒素ガスの保護下で、－７０℃でカリウムビス（トリメチルシリル）アミドのテトラヒドロフラン溶液（１．０ｍｏｌ／Ｌ、２９．３９ｍｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶解させ、４－４（７．１８ｇ、１９．５９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（７０ｍｌ）溶液をゆっくりと滴下した。混合溶液を－７０℃で１時間撹拌し、Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（１０．５０ｇ、２９．３９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）を加え、混合溶液を２０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍｌ）を加えてクエンチングさせ、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１）で精製して化合物４－５を得た。
【0125】
化合物４－５：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．１３ （ｓ， １Ｈ）， ７．５６ － ７．５１ （ｍ， １Ｈ）， ７．４６ － ７．４２ （ｍ， １Ｈ）， ５．７３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．６， ９．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１０ － ４．０４ （ｍ， １Ｈ）， ３．８１ － ３．７３ （ｍ， １Ｈ）， ３．３７ － ３．１９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１１ － ２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６２ － ２．５１ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２３ － ２．１３ （ｍ， １Ｈ）， ２．１２ － ２．０４ （ｍ， ４Ｈ）， １．８３ － １．７４ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４９９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0126】
ステップＦ：４－５（２５０．９８ｍｇ、６０７．５５μｍｏｌ）のトルエン（３ｍｌ）溶液に塩化リチウム（６４．３９ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５８．５１ｍｇ、５０．６３μｍｏｌ）及び４－６（２５２．３６ｍｇ、５０６．２９μｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で１０５℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、濾液に水（１０ｍｌ）及び酢酸エチル（１０ｍｌ）を加えて希釈した後分離した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝０／１）で精製して化合物４－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0127】
ステップＧ：４－７（１７８ｍｇ、２９７．３３μｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル（４ｍｏｌ／Ｌ、２ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を２０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して４－８の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップＨ：４－８（３０ｍｇ、３９．９２μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（２ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２０．６４ｍｇ、１５９．６９μｍｏｌ）及び２－１３（７．５０ｍｇ、３９．９２μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（炭酸水素アンモニウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ）－アセトニトリル］；溶出勾配：３７％～６７％、９分）で精製して化合物４を得た。
ステップＨ：４－８（３０ｍｇ、３９．９２μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（２ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２０．６４ｍｇ、１５９．６９μｍｏｌ）及び２－１３（７．５０ｍｇ、３９．９２μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（炭酸水素アンモニウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ）－アセトニトリル］；溶出勾配：３７％～６７％、９分）で精製して化合物４を得た。
【0128】
化合物４：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １０．７９ － ９．５９ （ｍ， １Ｈ）， ８．１８ （ｓ， １Ｈ）， ８．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２５ （ｓ， １Ｈ）， ６．８３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８４ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ １．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５９ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１０ － ３．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６６ － ３．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１２ （ｑ， Ｊ ＝ １０．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ２．４３ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１８ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８ － １．８７ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７５．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0129】
実施例５
【化45】
【0130】
合成スキーム：
【化46】
【0131】
ステップＡ：４－５（５００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）のトルエン（３ｍｌ）溶液に塩化リチウム（１２８．２８ｍｇ、３．０３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１１６．５５ｍｇ、１００．８６μｍｏｌ）及び３－１１（５０２．７４ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で１０５℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、濾液に水（１０ｍｌ）及び酢酸エチル（１０ｍｌ）を加えて希釈した後分離した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１）で精製して化合物５－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0132】
ステップＢ：５－１（３２０ｍｇ、５３４．５３μｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル（４ｍｏｌ／Ｌ、４ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を２０℃で２０時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮した後、更に塩酸／メタノール（４ｍｏｌ／Ｌ、４ｍｌ）に溶解させ、混合溶液を２０℃で２４時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して５－２の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0133】
ステップＣ：５－２（２００ｍｇ、２６６．１４μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（４ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３７．５８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）及び２－１３（５０．０３ｍｇ、１６６．１４μｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液に２－１３（４０．０２ｍｇ、２１２．９１μｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３７．５９ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＳｉＯＨ ２５０×５０、粒子径：１０μｍ）；移動相：［エタノール（０．１％のアンモニア水）－ｎ－ヘキサン］；溶出勾配：１％～４０％、１５分）で精製して化合物５を得た。
【0134】
化合物５：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １０．５９ － １０．３７ （ｍ， １Ｈ）， ８．１７ （ｓ， １Ｈ）， ７．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ０．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７４ （ｓ， １Ｈ）， ７．２２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２２ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５４ － ４．４９ （ｍ， １Ｈ）， ４．４５ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３５ （ｑ， Ｊ ＝ １１．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０ － ２．９９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．６４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４３ （ｑｕｉｎ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２１ － ２．１３ （ｍ， ２Ｈ）， １．８５ － １．７８ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７５．０ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0135】
実施例６
【化47】
【0136】
合成スキーム：
【化48】
【0137】
ステップＡ：４－５（５５４．２６ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）のトルエン（３ｍｌ）溶液に塩化リチウム（６１．７２ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１４０．２０ｍｇ、１２１．３３μｍｏｌ）及び２－１０（５００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で１００℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後、飽和フッ化カリウム水溶液（５０ｍｌ）を加え、０．５時間撹拌して濾過した。濾液を酢酸エチル（１００ｍｌ×２）で抽出した。得られた有機相を飽和食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５／１～１／２）で精製して化合物６－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９８．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0138】
ステップＢ：６－１（４００ｍｇ、６６９．２７μｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、１０ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して６－２の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４１４．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0139】
ステップＣ：６－２（２７０ｍｇ、６００．１３μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（１５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２３２．６８ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）及び２－１３（９０．２５ｍｇ、４８０．１１μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１６時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（規格：１５０ｍｍ×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．０５％のアンモニア水ｖ／ｖ）－アセトニトリル］；溶出勾配：３３％～５７％、９分）で精製して化合物６を得た。
【0140】
化合物６：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ８．３２ － ８．１３ （ｍ， １Ｈ）， ８．００ － ７．８８ （ｍ， １Ｈ）， ７．３３ － ７．２１ （ｍ， １Ｈ）， ７．０５ － ６．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ６．８３ － ６．７２ （ｍ， １Ｈ）， ４．６０ － ４．５０ （ｍ， １Ｈ）， ４．４６ － ４．３４ （ｍ， １Ｈ）， ４．２４ － ４．０７ （ｍ， １Ｈ）， ３．８９ － ３．７９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３２ － ３．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１７ － ３．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０７ － ２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７４ － ２．６２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５３ － ２．３９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２４ － ２．１１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９０ － １．７０ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７４．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0141】
実施例７
【化49】
【0142】
合成スキーム：
【化50】
【0143】
ステップＡ：４－５（２００ｍｇ、４０１．２５μｍｏｌ）、７－１（２００．５７ｍｇ、４８５．５２μｍｏｌ）、塩化リチウム（５１．０３ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（４６．３７ｍｇ、４０．１３μｍｏｌ）をトルエン（６ｍｌ）溶液に溶解させ、窒素ガスの保護下で、１００℃で１２時間撹拌した。反応溶液を冷却させた後、飽和フッ化カリウム水溶液（２０ｍｌ）を加え、室温で１時間撹拌して濾過し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）を加えて希釈した後分離した。得られた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／２）で精製して化合物７－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９９．３ ［Ｍ ＋ Ｈ］＋。
【0144】
ステップＢ：７－２（２０ｍｇ、３３．４１μｍｏｌ）の１，４－ジオキサン（１ｍｌ）溶液に塩化水素の１，４－ジオキサン（４ｍｏｌ／Ｌ、９９８．３５μＬ）溶液を加えた。混合溶液を１０～２０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して７－３の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0145】
ステップＣ：７－３（１５ｍｇ、３３．２７μｍｏｌ、塩酸塩）及び２－１３（６．２５ｍｇ、３３．２７μｍｏｌ）のアセトニトリル（２ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１７．２０ｍｇ、１３３．０７μｍｏｌ）を加え、混合溶液を１０～２０℃で２４時間撹拌した。反応溶液を濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ－ＣＮ ２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［エタノール（０．０５％のアンモニア水）－ｎ－ヘキサン］；溶出勾配：５％～４５％、１５分）で精製して化合物７を得た。
【0146】
化合物７：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ １０．５７ － ９．９６ （ｍ， １Ｈ）， ８．１４ （ｓ， １Ｈ）， ８．１２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．２０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６９ － ４．６１ （ｍ， １Ｈ）， ４．５８ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２１ （ｑｄ， Ｊ ＝ ６．３， １２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５１ （ｑ， Ｊ ＝ １１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２３ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ３．０８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７６ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４３ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２１ － ２．１５ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0147】
実施例８
【化51】
【0148】
合成スキーム：
【化52】
【0149】
ステップＡ：２－９（１０００ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）、３－１１（１２００ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（２４６．２５ｍｇ、５．８１ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２２３．７６ｍｇ、１９３．６４μｍｏｌ）をトルエン（１０ｍｌ）溶液に溶解させ、窒素ガスの保護下で、１００℃で１２時間撹拌した。反応溶液を冷却させた後フッ化カリウム水溶液（３００ｍｌ）を加え、室温で１時間撹拌して濾過し、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）を加えて希釈した後分離した。得られた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。逆相カラムクロマトグラフィーで精製して化合物８－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６１７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0150】
ステップＢ：８－１（８２４ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、１２ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して８－２の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0151】
ステップＣ：８－２（７５０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（６５７．７６ｍｇ、５．０９ｍｍｏｌ）及び２－１３（２３９．１８ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。得られた反応溶液に水（２０ｍｌ）及びジクロロメタン（２０ｍｌ×３）を加え、分離した後得られた有機相を炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍｌ×２）で洗浄した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物８－３を得た。
【0152】
ステップＤ：８－３（６５０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６ｍｌ）溶液にトリフルオロ酢酸（２ｍｌ）を加えた。反応溶液を２０℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ｍｍ×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．０５％のアンモニア水）－アセトニトリル］；溶出勾配：３８％～６８％、９分）で精製して化合物８を得た。
【0153】
化合物８：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ７．９１ （ｓ， １Ｈ）， ７．６８ （ｓ， １Ｈ）， ７．０９ － ７．０３ （ｍ， １Ｈ）， ６．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６０ － ４．５０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．４２ （ｔ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３９ － ３．２１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．０４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７７ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３９ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．８９ － １．７３ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７４．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0154】
実施例９
【化53】
【0155】
合成スキーム：
【化54】
【0156】
ステップＡ：２－９（１３００ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（９９３．４６ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）のトルエン（１５ｍｌ）溶液にトリフェニルホスフィン（４１．０５ｍｇ、１５６．４９μｍｏｌ）、カリウムフェノキシド（６８９．６０ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ）、臭化カリウム（４６５．５６ｍｇ、３．９０ｍｍｏｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（５４．９２ｍｇ、７８．２４μｍｏｌ）を加えた。窒素ガスの保護下で５０℃で２時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、ケーキをジクロロメタン（１５ｍｌ）で洗浄し、減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～０／１）で精製して化合物９－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４７７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0157】
ステップＢ：９－１（２００ｍｇ、５６６．２３μｍｏｌ）、９－２（２７９．９０ｍｇ、５６６．２３μｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（２２８．０５ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、［１，１－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウムジクロリドジクロロメタン（４６．２４ｍｇ、５６．６２μｍｏｌ）にエチレングリコールジメチルエーテル（３ｍｌ）及び水（１．０８ｍｌ）を加えた。窒素ガスの保護下で１２０℃にマイクロ波で加熱し、１時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、濾液に水（２０ｍｌ）及び酢酸エチル（２０ｍｌ×３）を加えて希釈した後分離した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）で精製して化合物９－３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６４１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0158】
ステップＣ：９－３（１７７ｍｇ、２７６．２７μｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、３ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して９－４の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４５７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
ステップＤ：９－４（１４０ｍｇ、２６４．４７μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３６．７２ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）及び２－１３（５９．６６ｍｇ、３１７．３６μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液にジクロロメタン（１０ｍｌ）を加え、炭酸ナトリウム（１０ｍｌ×２）で洗浄した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：１５％～４５％、１０分）で精製して化合物９を得た。
ステップＤ：９－４（１４０ｍｇ、２６４．４７μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１３６．７２ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）及び２－１３（５９．６６ｍｇ、３１７．３６μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液にジクロロメタン（１０ｍｌ）を加え、炭酸ナトリウム（１０ｍｌ×２）で洗浄した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：１５％～４５％、１０分）で精製して化合物９を得た。
【0159】
化合物９：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １２．５６ （ｓ， １Ｈ）， ８．２４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２０ （ｓ， １Ｈ）， ７．２５ － ７．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ７．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．６７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０５ （ｓｅｘｔ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２０ － ２．９２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８２ （ｔ， Ｊ ＝６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４９ － ２．４６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４５ － ２．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２０ － １．９２ （ｍ， ２Ｈ）， １．７４ － １．５９ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１７．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0160】
実施例１０
【化55】
【0161】
合成スキーム：
【化56】
【0162】
ステップＡ：２－９（３００ｍｇ、５８０．９１μｍｏｌ）のトルエン（５ｍｌ）溶液に塩化リチウム（７３．８７ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６７．１３ｍｇ、５８．０９μｍｏｌ）及び１０－１（３７１．２７ｍｇ、８４９．３５μｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で１０５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を冷却させた後、フッ化カリウム水溶液（１００ｍｌ）を加え、室温で１時間撹拌して濾過し、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）を加えて希釈した後分離した。合わせた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／２）で精製して化合物１０－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６４１．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0163】
ステップＢ：１０－２（１５２ｍｇ、２３７．２５μｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、５ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して１０－３の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４５７．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0164】
ステップＣ：１０－３（１２５ｍｇ、２３６．１３μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１２２．０７ｍｇ、９４４．５４μｍｏｌ）及び２－１３（５３．２７ｍｇ、２８３．３６μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．０５％のアンモニア水）－アセトニトリル］；溶出勾配：４０％～７０％、９分）で精製して化合物１０を得た。
【0165】
化合物１０：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ８．１１ （ｓ， １Ｈ）， ７．１８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．５， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４ （ｓ， １Ｈ）， ６．８０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４４ － ４．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８７ － ３．８１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３８ － ３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．３， ６．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４７ － ２．３８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８６ － １．７１ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0166】
実施例１１
【化57】
【0167】
合成スキーム：
【化58】
【0168】
ステップＡ：２－９（１．０９ｇ、２．１１ｍｍｏｌ）のトルエン（１０ｍｌ）溶液に塩化リチウム（１９８．４９ｍｇ、４．６８ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２７０．５４ｍｇ、２３４．１２μｍｏｌ）及び１１－１（１．０ｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で１００℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後、飽和フッ化カリウム水溶液（２００ｍｌ）を加え、０．５時間撹拌し、濾過した。濾液を酢酸エチル（１５０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１００ｍｌ×１）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５／１～１／１）で精製して化合物１１－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６３１．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0169】
ステップＢ：１１－２（１．４ｇ、２．２２ｍｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル（４ｍｏｌ／Ｌ、３０ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して１１－３の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４４７．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0170】
ステップＣ：１１－３（１．０ｇ、２．０７ｍｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（２０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（８０２．９１ｍｇ、６．２１ｍｍｏｌ）及び２－１３（３８９．２７ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１３時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ 規格：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．１％のアンモニア水）－アセトニトリル］；溶出勾配：４２％～７０％、９分）で精製して化合物１１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５０７．４ ［Ｍ＋Ｈ］＋
【0171】
ステップＤ：１１（１８０ｍｇ、３５５．３７μｍｏｌ）をＳＦＣ（分離カラム：Ｄａｉｃｅｌ ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＧ（規格：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［０．０５％のＤＥＡ、ＭｅＯＨ］；ＣＯ２％：５％～４０％、３分）で分離して１１Ａ（保持時間＝１．７１０分、ｅｅ値：９７．１％）及び１１Ｂ（保持時間＝１．８３２分、ｅｅ値：９５．１％）を得た。
【0172】
化合物１１Ａ：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ７．９６ （ｄ， Ｊ ＝ １．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７８ － ７．７３ （ｍ， １Ｈ）， ７．２４ － ７．１７ （ｍ， １Ｈ）， ６．９２ － ６．８４ （ｍ， １Ｈ）， ４．６１ － ４．５５ （ｍ， １Ｈ）， ４．５０ － ４．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４３ － ３．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１６ － ３．０５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０１ － ２．９０ （ｍ， １Ｈ）， ２．８３ － ２．６９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５１ － ２．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２３ － ２．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０４ － １．９１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１ － １．８１ （ｍ， １Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５０７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0173】
化合物１１Ｂ：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ７．９９ － ７．８９ （ｍ， １Ｈ）， ７．７９ － ７．６８ （ｍ， １Ｈ）， ７．２９ － ７．１５ （ｍ， １Ｈ）， ６．９７ － ６．８３ （ｍ， １Ｈ）， ４．６２ － ４．５２ （ｍ， １Ｈ）， ４．５０ － ４．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４３ － ３．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１６ － ３．０７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ － ２．９６ （ｍ， １Ｈ）， ２．８７ － ２．７６ （ｍ， １Ｈ）， ２．６１ （ｂｒ ｓ， ３Ｈ）， ２．６０ － ２．５３ （ｍ， １Ｈ）， ２．５０ － ２．３２ （ｍ， ３Ｈ）， ２．２２ － ２．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０５ － １．８５ （ｍ， ２Ｈ）， １．８４ － １．７２ （ｍ， １Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５０７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0174】
実施例１２
【化59】
【0175】
合成スキーム：
【化60】
【0176】
ステップＡ：１－１（４０ｇ、３１２．０９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１２０ｍｌ）に溶解させ、窒素ガスの保護下で、９－ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（０．５ｍｏｌ／Ｌ、６２４．１８ｍｌ）を加えた。混合溶液を６０℃で３時間撹拌して、１－２のテトラヒドロフランの反応溶液を得、直接に反応に使用した。上記で得られたテトラヒドロフラン溶液及び２－４（５５．８０ｇ、１８６．５３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８０ｍｌ）及び水（２００ｍｌ）の混合溶液に加え、更にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１０．７８ｇ、９．３３ｍｍｏｌ）及びリン酸カリウム（１１８．７８ｇ、５５９．５９ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で、７０℃で１２時間撹拌した。得られた反応溶液に水（５００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（６００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１０／１）で精製して化合物１２－１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３４９．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0177】
ステップＢ：１２－１（６０ｇ、１７２．２１ｍｍｏｌ）をメタノール（６００ｍｌ）に溶解させ、水酸化ナトリウム（２７．５５ｇ、６８８．８４ｍｍｏｌ）の水溶液（２００ｍｌ）を加え、混合溶液を２５℃で２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して大部分のメタノールを除去し、得られた反応溶液に水（３００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（５００ｍｌ×２）で抽出し、水相を塩酸（１ｍｏｌ／Ｌ）でｐＨ値を５～６に調節し、酢酸エチル（５００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１２－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３２１．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0178】
ステップＣ：１２－２（１０ｇ、３１．２２ｍｍｏｌ）をイートン試薬（２０ｍｌ）及びジクロロエタン（２００ｍｌ）に溶解させ、混合溶液を窒素ガスの保護下で、１１０℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液を水（３００ｍｌ）に注ぎ、ジクロロメタン（２００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１２－３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：２１９．５ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0179】
ステップＤ：１２－３（８ｇ、３６．６６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶解させ、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（３．４９ｇ、１８．３３ｍｍｏｌ）及び３，４－ジヒドロピラン（４．６３ｇ、５４．９９ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で、２５℃で１６時間撹拌した。得られた反応溶液に水溶液（３００ｍｌ）を加え、ジクロロメタン（２００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝１／０～１０／１）で精製して化合物１２－４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３０３．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0180】
ステップＥ：１２－４（２．８ｇ、９．２６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶解させ、－７０℃で、窒素ガスの保護下でカリウムビス（トリメチルシリル）アミドのテトラヒドロフラン溶液（１ｍｏｌ／Ｌ、１３．８９ｍｌ、１３．８９ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を－７０℃で、１時間撹拌した後Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（４．９６ｇ、１３．８９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（３０ｍｌ）を加え、混合溶液を１５℃に昇温させて１５時間撹拌した。得られた反応溶液に水（３０ｍｌ）を加え、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（４０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：３μｍ；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：６５％～９０％、１０分）で精製して化合物１２－５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：４３５．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0181】
ステップＦ：１２－５（２ｇ、４．６０ｍｍｏｌ）及び２－１０（４２．７１ｍｇ、１２７．４μｍｏｌ）をトルエン（２０ｍｌ）に溶解させ、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５３２．０２ｍｇ、４６０．４０μｍｏｌ）及び塩化リチウム（２３４．２２ｍｇ、５．２２ｍｍｏｌ）を加えた。混合溶液を窒素ガスの保護下で１００℃で１６時間撹拌した。水（５０ｍｌ）及び酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて分層し、酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１／１）で精製して化合物１２－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：５３４．１ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0182】
ステップＧ：１２－６（１．４ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍｌ）に溶解させ、０～１０℃で、窒素ガスの保護下で過臭化ピリジニウム（４８４．２２ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１５ｍｌ）を加えた。混合溶液を０～１０℃で２時間撹拌した。反応を飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）でクエンチングさせた。水（３０ｍｌ）及び酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて分層し、水相を酢酸エチル（３０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して化合物１２－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ：６１３．３，６１５．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0183】
ステップＨ：１２－７（２９０ｍｇ、３２６．６８μｍｏｌ、６９％の純度）、１，１０－フェナントロリン（１１．７７ｍｇ、６５．３４μｍｏｌ）、ヨウ化第一銅（１２．４４ｍｇ、６５．３４μｍｏｌ）、炭酸セシウム（２１２．８８ｍｇ、６５３．３５μｍｏｌ）を２，２－ジフルオロエタノール（０．６ｍｌ）に加えた。窒素ガスの保護下で２５℃で１７時間撹拌した。得られた反応溶液を冷却させた後濾過し、濾液に水（１０ｍｌ）及び酢酸エチル（１０ｍｌ×３）を加えて希釈した後分離した。合わせた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：石油エーテル／酢酸エチル＝１／２）で精製して化合物１２－９を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６１４．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0184】
ステップＩ：１２－９（１１６ｍｇ、１８９．０３μｍｏｌ）を塩化水素の酢酸エチル溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、４ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を３５℃で１時間撹拌した。得られた反応溶液を減圧濃縮して１２－１０の塩酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４３０．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0185】
ステップＪ：１２－１０（９６ｍｇ、１９１．１０μｍｏｌ、塩酸塩）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（９８．７９ｍｇ、７６４．３９μｍｏｌ）及び２－１３（３５．９２ｍｇ、１９１．１０μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０×２５ｍｍ、粒子径：１０μｍ）；移動相：［水（０．２２５％のギ酸）－アセトニトリル］；溶出勾配：１％～３０％、１０分）で精製して化合物１２を得た。
【0186】
化合物１２：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ １２．４１ （ｓ， １Ｈ）， ８．２１ （ｓ， １Ｈ）， ７．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．６， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．９， ８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．７８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３４ － ６．０３ （ｍ， ２Ｈ）， ４．５２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｔ， Ｊ ＝ ６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１ － ３．９４ （ｍ， ３Ｈ）， ３．７１ － ３．６５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９４ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５４ － ２．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３４ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１５ － ２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．７４ － １．５９ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４９０．３ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0187】
実施例１３
【化61】
【0188】
合成スキーム：
【化62】
【0189】
ステップＡ：１２－７（０．５８ｇ、６５３．３６μｍｏｌ、６９％の純度）、ヨウ化第一銅（１３．８９ｍｇ、０．０７２９４ｍｍｏｌ）、１，１０－フェナントロリン（１３．１４ｍｇ、０．０７２９４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（２３７．６４ｍｇ、０．７２９３５ｍｍｏｌ）の２，２，２－トリフルオロエタノール（２ｍｌ）溶液を窒素ガスの保護下で、２５℃で１７時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（１０ｍｌ）及び水（１０ｍｌ）で希釈した後分離し、水相を酢酸エチル（５ｍｌ×２）で抽出した。得られた有機相を飽和食塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物化合物１３－２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６３２．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0190】
ステップＢ：０～１０℃で、１３－２（０．２３ｇ、３６４．１２μｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（０．６ｍｌ／３ｍｌ）に溶解させた。混合溶液を０～１０℃で１時間撹拌し、次に２５℃で１５時間撹拌した。反応溶液を減圧濃縮した後１３－３のギ酸塩を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４４８．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0191】
ステップＣ：１３－３（０．２ｇ、３５６．２２μｍｏｌ、ギ酸塩）のアセトニトリル（５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１８４．１６ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）及び２－１３（４０．１８ｍｇ、２１３．７３μｍｏｌ）を加え、混合溶液を３５℃で１６時間撹拌した。混合物をジクロロメタン（１０ｍｌ）及び水（１０ｍｌ）で希釈した後分離し、混合物を飽和炭酸水素ナトリウムでｐＨ値を約７に調節し、水相をジクロロメタン（１０ｍｌ×２）で抽出した。得られた有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後減圧濃縮して粗生成物を得た。分取ＨＰＬＣ（分離カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ １５０ｍｍ×２５ｍｍ、粒子径：５μｍ）；移動相：［水（０．０５％のアンモニア水）－アセトニトリル］；溶出勾配：３５％～６３％、９分）で精製し、更に分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（展開剤：ジクロロメタン／メタノール＝１０／１）で精製して化合物１３を得た。
【0192】
化合物１３：１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ＝ ７．８３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．３４ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．３， ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２．６， ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３ （ｔ， Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２４ （ｑ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０ － ３．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１５ （ｂｒ ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０ － ３．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４８ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３０ － ２．２０ （ｍ， ２Ｈ）， １．９０ － １．７０ （ｍ， ２Ｈ）。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５０７．２ ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0193】
生物試験：
実験例１：体外評価
（１）ＭＣＦ－７細胞増殖阻害試験：
実験材料：
ＥＭＥＭ培地はＷｉｓｅｎｔから購入し、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａから購入し、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬。ＭＣＦ－７細胞株は、中国科学院のタイプ カルチャーコレクション委員会の細胞バンクから購入した。（Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）Ｎｉｖｏ５マルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。
実験例１：体外評価
（１）ＭＣＦ－７細胞増殖阻害試験：
実験材料：
ＥＭＥＭ培地はＷｉｓｅｎｔから購入し、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａから購入し、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬。ＭＣＦ－７細胞株は、中国科学院のタイプ カルチャーコレクション委員会の細胞バンクから購入した。（Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）Ｎｉｖｏ５マルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。
【0194】
実験方法：
ＭＣＦ－７細胞を白い３８４ウェルプレートの各ウェルに、４５μＬの細胞懸濁液あたり６００個の細胞が含まれるように播種した。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩培養した。
試験化合物をピペットで１０個の濃度に希釈し、化合物の濃度を１ｍＭ、４００μＭ、８０μＭの順で１０個の濃度１ｎＭまで希釈し、同じ条件で２つのウェルを設置した。中央プレートに４７．５μＬの培地を加え、更に対応する位置に従って、２．５μＬ／ウェルの勾配希釈化合物を中央プレートに移し、均一に混合して５μＬ／ウェルで細胞プレートに移した。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで６日間培養した。
ＭＣＦ－７細胞を白い３８４ウェルプレートの各ウェルに、４５μＬの細胞懸濁液あたり６００個の細胞が含まれるように播種した。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩培養した。
試験化合物をピペットで１０個の濃度に希釈し、化合物の濃度を１ｍＭ、４００μＭ、８０μＭの順で１０個の濃度１ｎＭまで希釈し、同じ条件で２つのウェルを設置した。中央プレートに４７．５μＬの培地を加え、更に対応する位置に従って、２．５μＬ／ウェルの勾配希釈化合物を中央プレートに移し、均一に混合して５μＬ／ウェルで細胞プレートに移した。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで６日間培養した。
【0195】
化合物は共培養してから６日間後、遠心分離して培地を除去し、Ｐｒｏｍｅｇａ ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬を２．５μＬ／ウェルで細胞プレートに加え、室温で１０分間培養して発光信号を安定させた。ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｎｉｖｏマルチマーカーアナライザーでデータを読み取った。実験では、陽性参照化合物Ｈ３Ｂ－６５４５（ＵＳ２０１６０３４７７１７Ａ１）の２μＭの読み取り値を陽性対照としてデータ計算に参与させた。
【0196】
データ分析：
式％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ＝（（ＲＦＵＣｍｐｄ－ＡＶＥＲ（ＲＦＵＮｅｇ．Ｃｔｒｌ））／（（ＡＶＥＲ（ＲＦＵＰｏｓ．Ｃｔｒｌ）－ＡＶＥＲ（ＲＦＵＮｅｇ．Ｃｔｒｌ））×１００％を使用して元のデータを阻害率に変換させ、化合物曲線は、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ５のｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅでフィッティングした。ＩＣ５０値は、当該ソフトで式Ｙ＝Ｂｏｔｔｏｍ＋（Ｔｏｐ－Ｂｏｔｔｏｍ）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＩＣ５０－Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ））によって算出された。
式％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ＝（（ＲＦＵＣｍｐｄ－ＡＶＥＲ（ＲＦＵＮｅｇ．Ｃｔｒｌ））／（（ＡＶＥＲ（ＲＦＵＰｏｓ．Ｃｔｒｌ）－ＡＶＥＲ（ＲＦＵＮｅｇ．Ｃｔｒｌ））×１００％を使用して元のデータを阻害率に変換させ、化合物曲線は、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ５のｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅでフィッティングした。ＩＣ５０値は、当該ソフトで式Ｙ＝Ｂｏｔｔｏｍ＋（Ｔｏｐ－Ｂｏｔｔｏｍ）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＩＣ５０－Ｘ）＊ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ））によって算出された。
【0197】
【表2】
【0198】
（２）ＭＣＦ－７ ＥＲα分解実験
実験材料：
フェノールレッドフリーＭＥＭ培地はＷｉｓｅｎｔ社から購入し、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａ社から購入し、Ｈｕｍａｎ Ｔｏｔａｌ ＥＲα／ＮＲ３Ａ１ ＥＬＩＳＡ試薬キットはＲ＆Ｄ社から購入した。ＭＣＦ－７細胞株は、中国科学院のタイプ カルチャーコレクション委員会の細胞バンクから購入した。（Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）Ｎｉｖｏ５マルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。
実験材料：
フェノールレッドフリーＭＥＭ培地はＷｉｓｅｎｔ社から購入し、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａ社から購入し、Ｈｕｍａｎ Ｔｏｔａｌ ＥＲα／ＮＲ３Ａ１ ＥＬＩＳＡ試薬キットはＲ＆Ｄ社から購入した。ＭＣＦ－７細胞株は、中国科学院のタイプ カルチャーコレクション委員会の細胞バンクから購入した。（Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）Ｎｉｖｏ５マルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。
【0199】
実験方法：
１日目：
ＭＣＦ－７細胞を培地（フェノールレッドフリーＭＥＭ＋５％の活性炭デキストランで処理したウシ胎児血清＋１％のペニシリン－ストレプトマイシン二重抗体溶液）で再懸濁させ、９６ウェル透明細胞培養プレートに、各ウェルに２００００個の細胞が含まれるように８０μＬを播種し、細胞培養プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩培養し、
ＥＬＩＳＡストリップを使用してプレートをコーティングし、ヒト全α－エストロゲン受容体捕捉抗体を１×ＰＢＳで、１μｇ／ｍＬの最終濃度に希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、２５℃で一晩培養した。
１日目：
ＭＣＦ－７細胞を培地（フェノールレッドフリーＭＥＭ＋５％の活性炭デキストランで処理したウシ胎児血清＋１％のペニシリン－ストレプトマイシン二重抗体溶液）で再懸濁させ、９６ウェル透明細胞培養プレートに、各ウェルに２００００個の細胞が含まれるように８０μＬを播種し、細胞培養プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩培養し、
ＥＬＩＳＡストリップを使用してプレートをコーティングし、ヒト全α－エストロゲン受容体捕捉抗体を１×ＰＢＳで、１μｇ／ｍＬの最終濃度に希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、２５℃で一晩培養した。
【0200】
２日目：
細胞投与：試験化合物をピペットで８個の濃度に希釈し、化合物の濃度を２０μＭ、４μＭの順に第８個の濃度の０．２５６ｎＭまで希釈し、同じ条件で２つのウェルを設置した。７８μＬの培地を中央プレートに加え、更に対応する位置に従って、２μＬ／ウェルの勾配希釈した化合物を中央プレートに移し、均一に混合して細胞プレートに２０μＬ／ウェルで移して、ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であり、３７℃で４時間培養し、
標準曲線溶液の製造：緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で１１０ｎｇ／ｍＬの標準曲線ストック溶液を６倍に希釈して、１８．３ｎｇ／ｍＬの濃度の溶液を得、更に緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、１Ｍの尿素を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で９１．５倍に希釈して、０．２ｎｇ／ｍＬの濃度の溶液を得、緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、１Ｍの尿素を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で８点勾配希釈して、最終濃度は２００ｐｇ／ｍＬ～１．５６ｐｇ／ｍＬであった。
ＥＬＩＳＡプレートを洗浄液（１×ＰＢＳは０．０５％のトウェインを含み）で、２７０μＬ／ウェルで、３回洗浄し、
ブロッキング溶液を３００μＬ／ウェル（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）で加え、２５℃で２時間培養し、
１×ＰＢＳを予冷し、化合物の培養が完了した後、上清を除去し、予冷した１×ＰＢＳで２５０μＬ／ウェルでプレートを洗浄し、更に３０μＬ／ウェルの細胞溶解溶液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、６Ｍの尿素、１ｍＭの活性化されたオルトバナジン酸ナトリウム、２．５ｍＭのピロリン酸ナトリウム、１×プロテアーゼ阻害剤を含み、ｐＨ７．２～７．４である）を加え、氷上で１５分間溶解させ、
ＥＬＩＳＡプレートからブロッキング溶液を除去し、洗浄し、３番目のステップを繰り返し、
細胞溶解後、細胞プレートに１５０μＬ／ウェルの緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含み、ｐＨ７．２～７．４である）を加え、細胞溶解溶液を６倍に希釈し、ピペットで均一にピペッティングし、１００μＬ／ウェルの溶液をＥＬＩＳＡプレートに取り、
同時に、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの標準曲線溶液を取り、２５℃で一晩培養し、
細胞投与：試験化合物をピペットで８個の濃度に希釈し、化合物の濃度を２０μＭ、４μＭの順に第８個の濃度の０．２５６ｎＭまで希釈し、同じ条件で２つのウェルを設置した。７８μＬの培地を中央プレートに加え、更に対応する位置に従って、２μＬ／ウェルの勾配希釈した化合物を中央プレートに移し、均一に混合して細胞プレートに２０μＬ／ウェルで移して、ＤＭＳＯの最終濃度は０．５％であり、３７℃で４時間培養し、
標準曲線溶液の製造：緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で１１０ｎｇ／ｍＬの標準曲線ストック溶液を６倍に希釈して、１８．３ｎｇ／ｍＬの濃度の溶液を得、更に緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、１Ｍの尿素を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で９１．５倍に希釈して、０．２ｎｇ／ｍＬの濃度の溶液を得、緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、１Ｍの尿素を含み、ｐＨ７．２～７．４である）で８点勾配希釈して、最終濃度は２００ｐｇ／ｍＬ～１．５６ｐｇ／ｍＬであった。
ＥＬＩＳＡプレートを洗浄液（１×ＰＢＳは０．０５％のトウェインを含み）で、２７０μＬ／ウェルで、３回洗浄し、
ブロッキング溶液を３００μＬ／ウェル（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）で加え、２５℃で２時間培養し、
１×ＰＢＳを予冷し、化合物の培養が完了した後、上清を除去し、予冷した１×ＰＢＳで２５０μＬ／ウェルでプレートを洗浄し、更に３０μＬ／ウェルの細胞溶解溶液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、６Ｍの尿素、１ｍＭの活性化されたオルトバナジン酸ナトリウム、２．５ｍＭのピロリン酸ナトリウム、１×プロテアーゼ阻害剤を含み、ｐＨ７．２～７．４である）を加え、氷上で１５分間溶解させ、
ＥＬＩＳＡプレートからブロッキング溶液を除去し、洗浄し、３番目のステップを繰り返し、
細胞溶解後、細胞プレートに１５０μＬ／ウェルの緩衝液（１×ＰＢＳは１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のＴｒｉｔｏｎ Ｘ－１００を含み、ｐＨ７．２～７．４である）を加え、細胞溶解溶液を６倍に希釈し、ピペットで均一にピペッティングし、１００μＬ／ウェルの溶液をＥＬＩＳＡプレートに取り、
同時に、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの標準曲線溶液を取り、２５℃で一晩培養し、
【0201】
３日目：
上清を除去し、洗浄液を使用して、２７０μＬ／ウェルで、３回洗浄し、
緩衝液（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）を使用して、ヒト全α－エストロゲン受容体検出抗体ストック溶液（１４．４μｇ／ｍＬ）を３６倍に希釈し、検出抗体の最終濃度は４００ｎｇ／ｍＬであり、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの溶液を取って、２５℃で２時間培養し、
２番目のステップに従ってプレートを洗浄し、
緩衝液（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）を使用して、ストレプトアビジン－ホースラディッシュを用いたペルオキシダーゼＡを２００倍に希釈し、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの溶液を取り、２５℃で２０分間培養し、
２番目のステップに従ってプレートを洗浄し、
１００μＬ／ウェルの基質溶液（１：１の試薬Ａ（３０％の過酸化水素）及び試薬Ｂ（ＴＭＢ）を混合する）溶液をＥＬＩＳＡプレートに取って、２５℃で２０分間培養し、
各ウェルに５０μＬの停止溶液を加え、プレートリーダーでＯＤ４５０吸光度を読み取った。
データ解析：標準曲線の元のデータに従って、４つのパラメーター式ｙ＝（Ａ－Ｄ）／［１＋（ｘ／Ｃ）＾Ｂ］＋ＤにおけるＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄの値を計算し、ここで、ｙは元のＯＤ４５０値であり、ｘは標準曲線上の対応するポイントの濃度である。４つのパラメータ方程式と試料の元のデータのＯＤ４５０読み取り値に従って、対応するポイントのＥＲαの濃度値を計算した。更に式（Ｓａｍｐｌｅ－Ｍｉｎ）／（Ｍａｘ－Ｍｉｎ）×１００％を使用して元のデータを抑制率に変換すると、ＩＣ５０値は、４つのパラメーターを使用したカーブフィッティングによって求めることができた（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍのｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－－Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅモードで求めることができた）。表２は、ＥＲαに対する本発明の化合物の分解効果を提供する。
上清を除去し、洗浄液を使用して、２７０μＬ／ウェルで、３回洗浄し、
緩衝液（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）を使用して、ヒト全α－エストロゲン受容体検出抗体ストック溶液（１４．４μｇ／ｍＬ）を３６倍に希釈し、検出抗体の最終濃度は４００ｎｇ／ｍＬであり、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの溶液を取って、２５℃で２時間培養し、
２番目のステップに従ってプレートを洗浄し、
緩衝液（１×ＰＢＳは１％のウシ血清アルブミンを含み）を使用して、ストレプトアビジン－ホースラディッシュを用いたペルオキシダーゼＡを２００倍に希釈し、ＥＬＩＳＡプレートに１００μＬ／ウェルの溶液を取り、２５℃で２０分間培養し、
２番目のステップに従ってプレートを洗浄し、
１００μＬ／ウェルの基質溶液（１：１の試薬Ａ（３０％の過酸化水素）及び試薬Ｂ（ＴＭＢ）を混合する）溶液をＥＬＩＳＡプレートに取って、２５℃で２０分間培養し、
各ウェルに５０μＬの停止溶液を加え、プレートリーダーでＯＤ４５０吸光度を読み取った。
データ解析：標準曲線の元のデータに従って、４つのパラメーター式ｙ＝（Ａ－Ｄ）／［１＋（ｘ／Ｃ）＾Ｂ］＋ＤにおけるＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄの値を計算し、ここで、ｙは元のＯＤ４５０値であり、ｘは標準曲線上の対応するポイントの濃度である。４つのパラメータ方程式と試料の元のデータのＯＤ４５０読み取り値に従って、対応するポイントのＥＲαの濃度値を計算した。更に式（Ｓａｍｐｌｅ－Ｍｉｎ）／（Ｍａｘ－Ｍｉｎ）×１００％を使用して元のデータを抑制率に変換すると、ＩＣ５０値は、４つのパラメーターを使用したカーブフィッティングによって求めることができた（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍのｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｖｓ．ｒｅｓｐｏｎｓｅ－－Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅモードで求めることができた）。表２は、ＥＲαに対する本発明の化合物の分解効果を提供する。
【0202】
Ｍａｘウェル：陽性対照ウェルは１００ｎＭのフルベストラントで処理した細胞のウェルを読み取った
Ｍｉｎウェル：陰性対照ウェルは０．５％のＤＭＳＯで処理した細胞のウェルを読み取った
Ｍｉｎウェル：陰性対照ウェルは０．５％のＤＭＳＯで処理した細胞のウェルを読み取った
【表3】
【0203】
結論：
本発明の化合物は、体外でＥＲαに対して有意な分解効果を有し、ＭＣＦ－７細胞に対して有意な抗増殖活性を有している。
本発明の化合物は、体外でＥＲαに対して有意な分解効果を有し、ＭＣＦ－７細胞に対して有意な抗増殖活性を有している。
【0204】
実験例２：ＤＭＰＫ特性評価
（１）シトクロムＰ４５０アイソザイムの阻害研究
実験目的：ヒト肝ミクロソームシトクロムＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４）（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）の活性に対する試験化合物の阻害効果を測定することである。
実験操作：まず、試験化合物（１０ｍＭ）を勾配希釈して、作業溶液（１００×最終濃度）を製造し、作業溶液の濃度はそれぞれ：５、１．５、０．５、０．１５、０．０５、０．０１５及び０．００５ｍＭであり、同時に、Ｐ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４）の各陽性阻害剤とその特定の基質混合物（５ｉｎ１）の作業溶液を準備し、－８０℃の冷蔵庫で凍結したヒト肝ミクロソームを氷上で解凍させ、ヒト肝ミクロソームが完全に溶解した後、ＰＢで希釈して、所定濃度の作業溶液（０．２５３ｍｇ／ｍＬ）を製造し、２０μＬの基質混合物を反応プレート（２０μｌのＰＢをＢｌａｎｋウェルに加える）に加え、同時に、１５８μＬのヒト肝ミクロソーム作業溶液を反応プレートに加え、使用のために反応プレートを氷上に置き、この時、各濃度の２μＬの試験化合物（Ｎ＝１）及び特異的阻害剤（Ｎ＝２）を対応するウェルに加え、阻害剤のない（試験化合物又は陽性阻害剤）群に対応する有機溶媒を加え、対照群試料とし（試験化合物対照試料は１：１のＤＭＳＯ：ＭｅＯＨであり、陽性対照試料は１：９のＤＭＳＯ：ＭｅＯＨである）、３７℃のウォーターバスで１０分間培養した後、２０μＬの補酵素因子（ＮＡＤＰＨ）溶液を反応プレートに加え、３７℃のウォーターバスで１０分間培養した後、４００μＬの冷したアセトニトリル溶液（内部標準は２００ｎｇ／ｍＬのメトトレキサート及びメトトレキサート）を加えて反応を完了させ、反応プレートをシェーカーに置いて、１０分間振とうし、４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離し、２００μＬの上清を取って１００μＬの水に加え、試料を希釈し、最後にプレートを密封し、均一に振とうし、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ検出を実行した。実験結果は表３に示された通りである。
（１）シトクロムＰ４５０アイソザイムの阻害研究
実験目的：ヒト肝ミクロソームシトクロムＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４）（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）の活性に対する試験化合物の阻害効果を測定することである。
実験操作：まず、試験化合物（１０ｍＭ）を勾配希釈して、作業溶液（１００×最終濃度）を製造し、作業溶液の濃度はそれぞれ：５、１．５、０．５、０．１５、０．０５、０．０１５及び０．００５ｍＭであり、同時に、Ｐ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２及びＣＹＰ３Ａ４）の各陽性阻害剤とその特定の基質混合物（５ｉｎ１）の作業溶液を準備し、－８０℃の冷蔵庫で凍結したヒト肝ミクロソームを氷上で解凍させ、ヒト肝ミクロソームが完全に溶解した後、ＰＢで希釈して、所定濃度の作業溶液（０．２５３ｍｇ／ｍＬ）を製造し、２０μＬの基質混合物を反応プレート（２０μｌのＰＢをＢｌａｎｋウェルに加える）に加え、同時に、１５８μＬのヒト肝ミクロソーム作業溶液を反応プレートに加え、使用のために反応プレートを氷上に置き、この時、各濃度の２μＬの試験化合物（Ｎ＝１）及び特異的阻害剤（Ｎ＝２）を対応するウェルに加え、阻害剤のない（試験化合物又は陽性阻害剤）群に対応する有機溶媒を加え、対照群試料とし（試験化合物対照試料は１：１のＤＭＳＯ：ＭｅＯＨであり、陽性対照試料は１：９のＤＭＳＯ：ＭｅＯＨである）、３７℃のウォーターバスで１０分間培養した後、２０μＬの補酵素因子（ＮＡＤＰＨ）溶液を反応プレートに加え、３７℃のウォーターバスで１０分間培養した後、４００μＬの冷したアセトニトリル溶液（内部標準は２００ｎｇ／ｍＬのメトトレキサート及びメトトレキサート）を加えて反応を完了させ、反応プレートをシェーカーに置いて、１０分間振とうし、４０００ｒｐｍで２０分間遠心分離し、２００μＬの上清を取って１００μＬの水に加え、試料を希釈し、最後にプレートを密封し、均一に振とうし、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ検出を実行した。実験結果は表３に示された通りである。
【表4】
【0205】
結論：本発明の化合物はＣＹＰ酵素を有意に阻害せず、薬物相互作用のリスクが低いことを示している。
【0206】
（２）マウスの体内薬物動態研究
実験目的：オスのＢａｌｂ／ｃマウスを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法でマウスに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。マウスにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：４匹の健康なオスＢａｌｂ／ｃマウスを体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群は２匹／群であり、ＰＯ群は２匹／群にであった。動物は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
適量の試料をそれぞれ秤量し、それぞれ１ｍｇ／ｍＬの溶液に調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１５％のＨＰ－β－ＣＤであった。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ５ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
オスＢａｌｂ／ｃマウスの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、８及び２４時間目に伏在静脈から３０μＬの血を採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の化抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、８、１２及び２４時間目に伏在静脈から３０μＬの血を採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のマウスの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。
実験結果は表４に示された通りである。
実験目的：オスのＢａｌｂ／ｃマウスを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法でマウスに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。マウスにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：４匹の健康なオスＢａｌｂ／ｃマウスを体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群は２匹／群であり、ＰＯ群は２匹／群にであった。動物は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
適量の試料をそれぞれ秤量し、それぞれ１ｍｇ／ｍＬの溶液に調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１５％のＨＰ－β－ＣＤであった。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ５ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１０ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
オスＢａｌｂ／ｃマウスの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、８及び２４時間目に伏在静脈から３０μＬの血を採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の化抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、８、１２及び２４時間目に伏在静脈から３０μＬの血を採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のマウスの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。
実験結果は表４に示された通りである。
【表5】
【0207】
結論：本発明の化合物は、マウスの体内において代謝が安定で、組織分布が大きく、経口吸収が高く、体内で良好な薬物動態特性を有している。
【0208】
（３）ラットの体内薬物動態研究
実験目的：オスの絶食したＳＤラットを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、ラットに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。ラットにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：４匹の健康なオスＳＤラットを体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群は２匹／群であり、ＰＯ群は２匹／群にであった。動物は、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
ＩＶ群：それぞれ適量の試料を秤量して、それぞれ０．５ｍｇ／ｍＬに調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１５％のＨＰ－β－ＣＤであった。
ＰＯ群：適量のＩＶ群を取って溶液に調製し、１５％のＨＰ－β－ＣＤで０．４ｍｇ／ｍＬに希釈した。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ２ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
オスＳＤラットの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、８及び２４時間目に頸静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、８、１２及び２４時間目に頸静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のラットの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。実験結果は表５に示された通りである。
結論：本発明の化合物は、ラットの体内において代謝が安定で、組織分布が大きく、経口吸収が高いため、体内で良好な薬物動態特性を有することを示している。
実験目的：オスの絶食したＳＤラットを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、ラットに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。ラットにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：４匹の健康なオスＳＤラットを体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群は２匹／群であり、ＰＯ群は２匹／群にであった。動物は、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
ＩＶ群：それぞれ適量の試料を秤量して、それぞれ０．５ｍｇ／ｍＬに調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１５％のＨＰ－β－ＣＤであった。
ＰＯ群：適量のＩＶ群を取って溶液に調製し、１５％のＨＰ－β－ＣＤで０．４ｍｇ／ｍＬに希釈した。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ２ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
オスＳＤラットの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、８及び２４時間目に頸静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、８、１２及び２４時間目に頸静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のラットの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。実験結果は表５に示された通りである。
結論：本発明の化合物は、ラットの体内において代謝が安定で、組織分布が大きく、経口吸収が高いため、体内で良好な薬物動態特性を有することを示している。
【0209】
（４）イヌの体内薬物動態研究
実験目的：禁食ビーグルを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法でビーグルに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。ビーグルにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：
健康なオスとメスビーグル各２匹を体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群の各群はオス１匹とメス１匹であり、ＰＯ群の各群はオス１匹とメス１匹であった。動物は、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
ＩＶ群：適量の試料を秤量し、それぞれ１ｍｇ／ｍＬに調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１０％のＨＰ－β－ＣＤであり、ｐＨは５．７４に調節した。
ＰＯ群：適量のＩＶ群を取って溶液に調製し、１０％のＨＰ－β－ＣＤで０．２ｍｇ／ｍＬに希釈し、ｐＨは５．８に調節した。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ２ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
ビーグルの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、６、８、１２及び２４時間目に末梢静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、６、８、１２及び２４時間目に末梢静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のビーグルの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。
実験結果は表５に示された通りである。
実験目的：禁食ビーグルを試験動物として使用し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法でビーグルに試験化合物を静脈内及び胃内投与した後、異なる時点での血漿中の薬物濃度を測定した。ビーグルにおける試験化合物の薬物動態挙動を研究し、その薬物動態特性を評価した。
実験プロトコール：
試験動物：
健康なオスとメスビーグル各２匹を体重が似ていたことにより２つの群に分け、ＩＶ群の各群はオス１匹とメス１匹であり、ＰＯ群の各群はオス１匹とメス１匹であった。動物は、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から購入した。
薬物の調製：
ＩＶ群：適量の試料を秤量し、それぞれ１ｍｇ／ｍＬに調製し、攪拌し、超音波処理して透明な状態にし、溶媒は１０％のＨＰ－β－ＣＤであり、ｐＨは５．７４に調節した。
ＰＯ群：適量のＩＶ群を取って溶液に調製し、１０％のＨＰ－β－ＣＤで０．２ｍｇ／ｍＬに希釈し、ｐＨは５．８に調節した。
投与：一晩絶食させた後、ＩＶ群は静脈内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ１ｍｇ／ｋｇであり、ＰＯ群はそれぞれ胃内投与を実行し、試験化合物の投与量はそれぞれ２ｍｇ／ｋｇであった。
実験操作：
ビーグルの静脈内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、０．０８３３、０．２５、０．５、１、２、４、６、８、１２及び２４時間目に末梢静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れた。胃内投与群にそれぞれ試験化合物を投与した後、それぞれ０．２５、０．５、１、２、４、６、８、１２及び２４時間目に末梢静脈から２００μＬを採血し、ＥＤＴＡ－Ｋ２を予め加えた市販の抗凝固チューブに入れ、その後、遠心分離（３２００ｇ、４℃、１０分間）した後血漿を採取し、血漿を予め冷却させた遠心チューブに移し、ドライアイスで急速冷凍させ、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析するまで、－６０℃又は更に低い超低温の冷蔵庫に保存した。動物は、投与４時間後に食べさせた。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法を使用して、静脈内及び胃内投与後のビーグルの血漿における試験化合物の含有量を測定した。方法の線形範囲は２．００～２０００ｎＭである。
実験結果は表５に示された通りである。
【表6】
【0210】
結論：本発明の化合物は、イヌの体内において代謝が安定で、組織分布が大きく、経口吸収が高く、体内で良好な薬物動態特性を有することを示している。
【0211】
（５）ヒト血漿タンパク結合研究
血漿タンパク質結合は、標的への結合に利用できる遊離（非結合）薬物の量を制御する重要な要因であり、従って、観察される体内薬物有効性に重要な役割を果たしている。同じ効力と暴露レベルを有している化合物と比較して、高い非結合分画（低いレベルの血漿タンパク結合）を有する化合物はより増強された有効性を示すことができる。本発明の化合物は超遠心分離法を用いてを実験された。完了後、液体クロマトグラフィーと質量分析による分析のために、血漿と緩衝液試料を製造した。化合物を最大１０種類化合物の血漿バンクに集めた。各実行には３種類の参照化合物プロプラノロール、メトプロロール、ワルファリンが使用された。各バンクでワルファリンは対照として使用され、各実行にプロプラノロールとメトプロロールは無作為で配置された。本発明の化合物は、より良い非結合分画を有し、即ちより低いレベルの血漿タンパク質結合を有し、ある程度増強された有効性を示した。
血漿タンパク質結合は、標的への結合に利用できる遊離（非結合）薬物の量を制御する重要な要因であり、従って、観察される体内薬物有効性に重要な役割を果たしている。同じ効力と暴露レベルを有している化合物と比較して、高い非結合分画（低いレベルの血漿タンパク結合）を有する化合物はより増強された有効性を示すことができる。本発明の化合物は超遠心分離法を用いてを実験された。完了後、液体クロマトグラフィーと質量分析による分析のために、血漿と緩衝液試料を製造した。化合物を最大１０種類化合物の血漿バンクに集めた。各実行には３種類の参照化合物プロプラノロール、メトプロロール、ワルファリンが使用された。各バンクでワルファリンは対照として使用され、各実行にプロプラノロールとメトプロロールは無作為で配置された。本発明の化合物は、より良い非結合分画を有し、即ちより低いレベルの血漿タンパク質結合を有し、ある程度増強された有効性を示した。
【0212】
実験例３：体内薬効評価
本実験の目的は、ＭＣＦ－７乳癌細胞異種移植ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（上海家族計画科学研究所の実験動物管理部門によって提供され、各実験群の試験動物の数は５である）モデルにおける、本発明の化合物の抗腫瘍効果を評価することである。
マウスは接種する３日前に０．３６ｍｇの６０日間徐放性エストロゲン錠を左肩に皮下接種された。細胞が対数増殖期にある場合、細胞を集めて計数し、細胞濃度を１０×１０７細胞／ｍＬに調節し、等体積のＭａｔｒｉｇｅｌを加えて均一に混合し、接種に使用した。各マウスの右肩に０．２ｍＬのＭＣＦ－７腫瘍細胞懸濁液（１０ｘ１０６）を皮下接種した。腫瘍細胞接種後９日目に、平均腫瘍体積は１６０ｍｍ３であり、体重は２２．０～２３．０ｇであり、群を分けて１日１回投与した。群分け後、週２回腫瘍体積と体重を測定し、群分け後２１日目の最後の腫瘍測定データについて腫瘍増殖率（Ｔ／Ｃ）と腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）を算出し、化合物の抗腫瘍効果は、ＴＧＩ（％）又は相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）によって評価された。ＴＧＩ（％）は、腫瘍増殖阻害率を反映する。ＴＧＩ（％）＝［（１－（特定の処理群の投与終了時の平均腫瘍体積－当該処理群の投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群の治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群の治療開始時の平均腫瘍体積）］×１００％であり、相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）＝ＴＲＴＶ／ＣＲＴＶ×１００％（ＴＲＴＶ：治療群の平均ＲＴＶ；ＣＲＴＶ：陰性対照群の平均ＲＴＶ）である。相対腫瘍体積（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｔｕｍｏｒ ｖｏｌｕｍｅ、ＲＴＶ）は、腫瘍測定の結果から計算され、計算式はＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０であり、ここで、Ｖ０は群を分けて投与する時（即ち、Ｄ０）に測定された腫瘍体積であり、Ｖｔは特定の測定時の腫瘍体積であり、ＴＲＴＶ及びＣＲＴＶは同日のデータを取った。実験結果は表６に示された通りである。
本実験の目的は、ＭＣＦ－７乳癌細胞異種移植ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス（上海家族計画科学研究所の実験動物管理部門によって提供され、各実験群の試験動物の数は５である）モデルにおける、本発明の化合物の抗腫瘍効果を評価することである。
マウスは接種する３日前に０．３６ｍｇの６０日間徐放性エストロゲン錠を左肩に皮下接種された。細胞が対数増殖期にある場合、細胞を集めて計数し、細胞濃度を１０×１０７細胞／ｍＬに調節し、等体積のＭａｔｒｉｇｅｌを加えて均一に混合し、接種に使用した。各マウスの右肩に０．２ｍＬのＭＣＦ－７腫瘍細胞懸濁液（１０ｘ１０６）を皮下接種した。腫瘍細胞接種後９日目に、平均腫瘍体積は１６０ｍｍ３であり、体重は２２．０～２３．０ｇであり、群を分けて１日１回投与した。群分け後、週２回腫瘍体積と体重を測定し、群分け後２１日目の最後の腫瘍測定データについて腫瘍増殖率（Ｔ／Ｃ）と腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）を算出し、化合物の抗腫瘍効果は、ＴＧＩ（％）又は相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）によって評価された。ＴＧＩ（％）は、腫瘍増殖阻害率を反映する。ＴＧＩ（％）＝［（１－（特定の処理群の投与終了時の平均腫瘍体積－当該処理群の投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群の治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群の治療開始時の平均腫瘍体積）］×１００％であり、相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）＝ＴＲＴＶ／ＣＲＴＶ×１００％（ＴＲＴＶ：治療群の平均ＲＴＶ；ＣＲＴＶ：陰性対照群の平均ＲＴＶ）である。相対腫瘍体積（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｔｕｍｏｒ ｖｏｌｕｍｅ、ＲＴＶ）は、腫瘍測定の結果から計算され、計算式はＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０であり、ここで、Ｖ０は群を分けて投与する時（即ち、Ｄ０）に測定された腫瘍体積であり、Ｖｔは特定の測定時の腫瘍体積であり、ＴＲＴＶ及びＣＲＴＶは同日のデータを取った。実験結果は表６に示された通りである。
【表7】
【0213】
結論：本発明の化合物は、マウス薬力学モデルにおいて優れた腫瘍抑制効果を示し、良好な臨床治療の可能性を有している。
【0214】
実験例４：幼若ラットの子宮湿重量阻害試験
本実験の目的は、生後１８～２１日齢の幼若雌ラット（Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．より提供された）において本発明の化合物の子宮発育阻害に対する効果を評価することである。本実験では、生後１８日の幼若雌ラットに２５ｍｇ／ｋｇの経口投与量の本発明の化合物を３日間連続して投与し、対照群には、０．１ｍｇ／ｋｇの経口エスチノールを３日間連続して投与し、ブランク群には対応する溶媒以外の薬物は投与しなかった。投与３日後、ラットを処刑し、ラットの子宮重量を測定して、ラット子宮の発育対する試薬の阻害効果を観察した。阻害率＝１００×［（ＶｅｈｉｃｌｅＥＥ-Ｃｐｄ）／（ＶｅｈｉｃｌｅＥＥ-Ｖｅｈｉｃｌｅ）］であり、ＶｅｈｉｃｌｅＥＥは対照群（０．１ｍｇ／ｋｇのエスチノールを経口投与）のラットの子宮湿重量であり、Ｃｐｄは投与群のラットの子宮湿重量であり、ｖｅｈｉｃｌｅはブランク群のラットの子宮湿重量である。結果は下記に示された通りである：
本実験の目的は、生後１８～２１日齢の幼若雌ラット（Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．より提供された）において本発明の化合物の子宮発育阻害に対する効果を評価することである。本実験では、生後１８日の幼若雌ラットに２５ｍｇ／ｋｇの経口投与量の本発明の化合物を３日間連続して投与し、対照群には、０．１ｍｇ／ｋｇの経口エスチノールを３日間連続して投与し、ブランク群には対応する溶媒以外の薬物は投与しなかった。投与３日後、ラットを処刑し、ラットの子宮重量を測定して、ラット子宮の発育対する試薬の阻害効果を観察した。阻害率＝１００×［（ＶｅｈｉｃｌｅＥＥ-Ｃｐｄ）／（ＶｅｈｉｃｌｅＥＥ-Ｖｅｈｉｃｌｅ）］であり、ＶｅｈｉｃｌｅＥＥは対照群（０．１ｍｇ／ｋｇのエスチノールを経口投与）のラットの子宮湿重量であり、Ｃｐｄは投与群のラットの子宮湿重量であり、ｖｅｈｉｃｌｅはブランク群のラットの子宮湿重量である。結果は下記に示された通りである：
【表8】
【0215】
結論：本発明の化合物が幼若雌ラットの子宮湿重に与える影響は、ブランク対照群と同等であり、子宮増殖の効果を示さず、臨床投与の安全性が良好であることを示し、臨床投与による子宮内膜癌のリスクを回避する。