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▶ バイオフロント セラピューティクス （ベイジン） カンパニー リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-01-23
(45)【発行日】2024-01-31
(54)【発明の名称】二官能性化合物及び使用方法
(51)【国際特許分類】
C07D 209/48 20060101AFI20240124BHJP
A61K 31/4035 20060101ALI20240124BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240124BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240124BHJP
C07D 493/04 20060101ALI20240124BHJP
【ＦＩ】
C07D209/48 CSP
A61K31/4035
A61P11/00
A61P35/00
C07D493/04 101D
【請求項の数】
7
(21)【出願番号】P 2023507296
(86)(22)【出願日】2021-07-30
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2023-07-26
(86)【国際出願番号】 CN2021109492
(87)【国際公開番号】W WO2022022669
(87)【国際公開日】2022-02-03
【審査請求日】2023-03-03
(31)【優先権主張番号】63/058,512
(32)【優先日】2020-07-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
【早期審査対象出願】
(73)【特許権者】
【識別番号】523033626
【氏名又は名称】バイオフロント セラピューティクス （ベイジン） カンパニー リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＢＩＯＦＲＯＮＴ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ （ＢＥＩＪＩＮＧ） ＣＯ．， ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】Ｂｕｉｌｄｉｎｇ １６， Ｂｅｉｌｕｎ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐａｒｋ ９ Ｎｏｒｔｈ Ｙｏｎｇｔｅｎｇ Ｒｏａｄ， Ｈａｉｄｉａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００９４， Ｃｈｉｎａ
(74)【代理人】
【識別番号】110002262
【氏名又は名称】ＴＲＹ国際弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】ファン ツェン
(72)【発明者】
【氏名】マ テンウェイ
【審査官】土橋 敬介
(56)【参考文献】
【文献】特表２０２１－５３３１５２（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１８－５３５２５９（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００１－５０４４５７（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１２／０８３１５３（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（ＩＩ）で表される化合物であって、
Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ ３ ） ２ －ＣＨ ２ －ＯＮＯ ２ 、－Ｃ（ＣＨ ３ ）－（ＣＨ ２ －ＯＮＯ ２ ） ２ 、－（ＣＨ ２ ） ２ －ＯＮＯ ２ 、－ＣＨ－（ＣＨ ２ －ＯＮＯ ２ ） ２ 、－（ＣＨ ２ ） ２ －ＣＨ－（ＣＨ ２ －ＯＮＯ ２ ） ２ 、－（ＣＨ ２ ） ２ －ＣＨ（ＯＮＯ ２ ）－ＣＨ ２ －ＯＮＯ ２ 、又は
【請求項2】
前記化合物は、
【請求項3】
前記化合物は、
【請求項4】
前記化合物は、
【請求項5】
請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む組成物。
【請求項6】
対象におけるホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）関連疾患を治療又は予防するための請求項５に記載の組成物。
【請求項7】
急性肺損傷（ＡＬＩ）又は急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療又は予防するための請求項５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
＜関連出願の相互参照＞
本出願は、２０２０年７月３０日に出願された米国仮出願第６３／０５８，５１２号に対する優先権を主張し、その内容全体を参照により本明細書に組み込む。
本出願は、２０２０年７月３０日に出願された米国仮出願第６３／０５８，５１２号に対する優先権を主張し、その内容全体を参照により本明細書に組み込む。
【0002】
本開示は、一般に、二官能性化合物及び使用方法に関し、特に、一酸化窒素（ＮＯ）を放出し、ホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）の活性を阻害することができる化合物、及び該化合物を使用して疾患又は障害を治療する方法に関する。
【背景技術】
【0003】
急性肺損傷（ＡＬＩ）及び急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、それらの罹患率と死亡率が高いため、臨床的に重要な疾患である。ＡＲＤＳは、急速に進行する肺水腫、低下した肺コンプライアンス、及び低酸素血症を特徴とする呼吸不全の一般的な原因である。ＡＲＤＳは、ウイルス性及び細菌性肺炎、神経原性水腫、ウイルス性又は細菌性敗血症（例えば、腹膜、尿路、又は軟部組織からの感染源による）、膵炎、移植後の移植片機能不全などを含む、感染、損傷、又は外傷によって引き起こされることがよくある。さらに、ＡＲＤＳは、重症インフルエンザ、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス１（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１）、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２など、重度のウイルス感染を繰り返すことによる主な死亡原因の１つである。重度のコロナウイルス病２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）を患う患者は、特に糖尿病、慢性腎臓病、心臓病、及び／又はその他の障害を含む微小血管障害を患う高齢者の間で死亡率が高い。ＡＲＤＳの治療又は予防のための既存の治療法の有効性は限られている。したがって、ＡＲＤＳを治療するためのより効果的な治療組成物及び方法を開発することが望ましい。
【発明の概要】
【0004】
本開示の一態様によれば、式（Ｉ）：Ｌ１－Ｘ－Ｌ２（Ｉ）で表される化合物が提供される。該化合物は、対象に投与されると、一酸化窒素（ＮＯ）を放出し、ホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）の活性を阻害するように構成することができる。Ｌ１は、ＮＯ放出剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。Ｌ２は、ＰＤＥ阻害剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。－Ｘ－は、共有結合、非共有結合、又はＬ１とＬ２を連結するビラジカルであってもよい。
【0005】
幾つかの実施形態では、Ｌ２は、アプレミラストから誘導することができる。
【0006】
【0007】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ３）２－ＣＨ２－ＯＮＯ２であってもよい。
【0008】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ３）－（ＣＨ２－ＯＮＯ２）２であってもよい。
【0009】
本開示の別の態様によれば、式（ＩＩ）で表される化合物が提供される。－Ｘ－は、共有結合、非共有結合、又はビラジカルであってもよい。Ｌ１は、一酸化窒素（ＮＯ）放出剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。
【0010】
幾つかの実施形態では、Ｘは、Ｏ、Ｃ、Ｎ、Ｓ、又はＰを含んでもよい。
【0011】
幾つかの実施形態では、Ｘは、０～１０個の原子を含んでもよい。
【0012】
幾つかの実施形態では、－Ｘ－は、エステル結合、アミド結合、スルホンアミド結合、スルファ－ト結合、ホスホルアミド結合、ホスファ－ト結合、ケトン結合、又はアリ－レン基を含んでもよい。
【0013】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、１つ又は複数の－ＯＮＯ２基を含んでもよい。
【0014】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ３）２－ＣＨ２－ＯＮＯ２であってもよい。
【0015】
【0016】
【0017】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ３）－（ＣＨ２－ＯＮＯ２）２であってもよい。
【0018】
【0019】
【0020】
幾つかの実施形態では、ＮＯ放出剤は、ニトログリセリン（ＧＴＮ）、二硝酸イソソルビド（ＩＳＤＮ）、又は四硝酸ペンタエリスリト－ル（ＰＥＴＮ）であってもよい。
【0021】
幾つかの実施形態では、化合物は、対象に投与されると、ＮＯを放出し、ホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）の活性を阻害するように構成することができる。
【0022】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥは、ＰＤＥ４を含んでもよい。
【0023】
本開示の別の態様によれば、上記のいずれかの化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む組成物が提供される。
【0024】
幾つかの実施形態では、組成物は、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、ミセル、液体、懸濁液、クリ－ム、フォ－ム、ゲル、ロ－ション、ペ－スト、又は軟膏として調剤することができる。
【0025】
幾つかの実施形態では、組成物は、経口投与、注射投与、又は局所投与のうちの少なくとも１つを介して対象に投与することができる。
【0026】
本開示の更なる態様によれば、対象におけるホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）関連疾患を治療又は予防するための上記のいずれかの化合物の用途が提供される。
【0027】
本開示の更なる態様によれば、対象における癌を治療又は予防するための上記のいずれかの化合物の用途が提供される。
【0028】
本開示の更なる態様によれば、急性肺損傷（ＡＬＩ）又は急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療又は予防するための上記のいずれかの化合物の用途が提供される。
【0029】
幾つかの実施形態では、化合物が対象に投与された後、化合物は、局部組織においてＮＯを放出し、ホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）の活性を阻害することができる。
【0030】
幾つかの実施形態では、化合物はさらに、調整可能な一酸化窒素放出特性を使用して、血管系又は血管系空間近くへのＰＤＥ４阻害剤の送達を調節するように構成されている。
【0031】
本開示のまた別の態様によれば、対象における急性肺損傷（ＡＬＩ）又は急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療又は予防するため方法が提供される。この方法は、薬学的に有効な量の上記のいずれかの化合物を対象に投与することを含んでもよい。
【0032】
本開示のまた別の態様によれば、対象におけるホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）関連疾患を治療又は予防する方法が提供される。この方法は、薬学的に有効な量の上記のいずれかの化合物を対象に投与することを含んでもよい。
【0033】
本開示のまた別の態様によれば、対象におけるホスホジエステラ－ゼ－４（ＰＤＥ４）関連疾患を治療又は予防する方法が提供される。この方法は、薬学的に有効な量の上記のいずれかの化合物を対象に投与することを含んでもよい。
【0034】
幾つかの実施形態では、薬学的に有効な量の化合物を対象に投与することは、化合物を対象に０．０１～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。
【0035】
幾つかの実施形態では、薬学的に有効な量の化合物を対象に投与することは、化合物を対象に１～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。
【0036】
幾つかの実施形態では、薬学的に有効な量の化合物を対象に投与することは、化合物を対象に５～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。
【0037】
幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、７２０ｎＭ未満の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を示すことができる。
【0038】
幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、２００ｎＭ未満の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を示すことができる。
【0039】
幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ｃを阻害のために、２．３μＭ未満の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を示すことができる。
【0040】
幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ｃを阻害のために、０．７μＭ未満の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を示すことができる。
【0041】
幾つかの実施形態では、化合物が対象に投与された後、対象における血漿硝酸エステルのレベルが上昇する可能性がある。
【0042】
追加の特徴は、一部は以下の説明に記載され、一部は以下及び添付の図面を検討することで当業者に明らかになり、あるいは、実施例の製造又は操作によって学習することができる。本開示の特徴は、以下に論じる詳細な例に記載される方法論、手段、及び組み合わせのさまざまな態様を実践又は使用することによって実現し達成することができる。
【図面の簡単な説明】
【0043】
本開示は、例示的な実施形態に関してさらに説明される。これらの例示的な実施形態について、図面を参照して詳細に説明する。図面は縮尺通りではないことに留意されたい。これらの実施形態は、非限定的な例示的な実施形態であり、図面のいくつかの図を通して、同様の参照番号は同様の構造を表す。
【図1A】本開示の幾つかの実施形態による、ＮＯを放出することができる例示的な有機硝酸エステルの構造式を示す図である。
【図1B】本開示の幾つかの実施形態による、ＮＯを放出することができる例示的な有機硝酸エステルの構造式を示す図である。
【図1C】本開示の幾つかの実施形態による、有機硝酸エステルの一部又は全部である官能基を含むＬ１の例示的な構造式を示す図である。
【図1D】本開示の幾つかの実施形態による、例示的なＮＯ放出剤によるＮＯの放出を示す図である。
【図2】本開示の幾つかの実施形態による例示的なＰＤＥ４阻害剤及びＰＤＥ３阻害剤の構造式を示す図である。
【図3】本開示の幾つかの実施形態による新規なＮＯ放出ＰＤＥ４阻害剤の幾つかの例示的な式を示す図である。
【図4】本開示の幾つかの実施形態による幾つかの例示的な新規なＮＯ放出ＰＤＥ４阻害剤を示す図である。
【図5】本開示の幾つかの実施形態による化合物－１を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【図6】本開示の幾つかの実施形態による化合物－２を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【図7】本開示の幾つかの実施形態による化合物－３を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【図8】本開示の幾つかの実施形態による化合物－４を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【図9】本開示の幾つかの実施形態による化合物－５を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【図10】本開示の幾つかの実施形態に従ってマウスに化合物－１を投薬した後に産生された化合物－６の血中レベルを示す分析図である。
【図11】本開示の幾つかの実施形態に従って、マウスに化合物を投薬してから１時間後の血漿中の硝酸エステルレベルを示す分析図である。
【発明を実施するための形態】
【0044】
以下の説明は、当業者が本開示を製造及び使用できるようにするために提示され、特定の応用及びその要件のコンテキストで提供される。開示された実施形態に対する様々な修正は、当業者には容易に明らかであり、本明細書で定義された一般原則は、本開示の精神及び範囲から逸脱することなく、他の実施形態及び用途に適用することができる。したがって、本開示は、示された実施形態に限定されず、特許請求の範囲と一致する最も広い範囲が与えられるべきである。
【0045】
本明細書で使用される用語は、特定の例示的な実施形態のみを説明するためのものであり、限定することを意図するものではない。本明細書で使用される場合、「一（ａ）」、「一（ａｎ）」及び「前記（ｔｈｅ）」という単数形は、文脈がそうではないと明確に示さない限り、複数形も含むことが意図されてもよい。「備える」及び／又は「備えている」、又は「含む」及び／又は「含んでいる）」という用語は、本明細書で使用される場合、述べられた特徴、整数、ステップ、操作、要素、及び／又は構成要素の存在を明示するが、１つ又は複数の他の特徴、整数、ステップ、操作、要素、構成要素、及び／又はこれらのグル－プの存在又は追加を排除しないことがさらに理解される。
【0046】
本開示のこれら及び他の特徴及び特性、並びに、操作の方法及び構造の関連要素の機能、部品の組み合わせ、及び製造の経済性は、すべて本明細書の一部を形成する添付の図面を参照して以下の説明を考慮すると、より明らかになるであろう。しかしながら、図面は、例示及び説明のみを目的としており、本開示の範囲を限定することを意図していないことを明確に理解されたい。図面は縮尺通りではないことを理解されたい。
【0047】
本明細書で使用される「約」という用語及び参照数値に関するその文法的等価物及びその文法的等価物は、その値からプラス又はマイナス１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％の値の範囲など、その値からプラス又はマイナス１０％の値の範囲を含むことができる。例えば、「約１０」という量は、９から１１までの量を含む。
【0048】
本開示の一態様によれば、１つ又は複数の化合物が提供される。代表的な化合物は、対象に投与されると、一酸化窒素（ＮＯ）を放出し、ホスホジエステラ－ゼ（ＰＤＥ）の活性を阻害するように構成することができる。幾つかの実施形態では、対象はヒトである。幾つかの実施形態では、対象は非ヒト動物である。幾つかの実施形態では、対象は雄性である。幾つかの実施形態では、対象は雌性である。幾つかの実施形態では、対象は、疾患又は病的状態を患っている。
【0049】
幾つかの実施形態では、化合物は、式（Ｉ）で表することができる。
Ｌ１－Ｘ－Ｌ２ （Ｉ）
Ｌ１－Ｘ－Ｌ２ （Ｉ）
【0050】
Ｌ１は、ＮＯ放出剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。Ｌ２は、ＰＤＥ阻害剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。－Ｘ－は、結合、又はＬ１とＬ２を連結するビラジカルであってもよい。ここで議論されるように、「ＮＯ放出剤」は、制御又は非制御の方法でＮＯを放出することができる薬剤を指す。「ＰＤＥ阻害剤」は、ＰＤＥ活性を阻害することができる分子又は薬剤を指す。Ｌ１は、化合物が生物活性化を介してＮＯを放出できるようにする可能性がある。Ｌ２は、化合物がＰＤＥの活性を阻害できるようにする可能性がある。幾つかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、－Ｘ－を介して連結することができる。例えば、－Ｘ－は、共有結合又は非共有結合であってもよい。非共有結合は、イオン結合、金属結合、水素結合、疎水性相互作用など、又はそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。別の例として、－Ｘ－は、Ｌ１とＬ２を連結するビラジカルであってもよい。ビラジカルは、分岐又は非分岐、飽和又は不飽和、置換又は未置換の炭化水素基（Ｃ１－５０鎖など）であってもよい。幾つかの実施形態では、炭化水素基が置換されている場合、炭化水素基は、Ｎ、Ｐ、Ｓ、Ｏなど、又はそれらの任意の組み合わせなどの１つ又は複数のヘテロ原子によって置換することができる。例えば、置換の炭化水素基は、ヘテロ鎖基（例えば、－ＮＨ３、－ＣＯＯＨ又は－ＯＨ）又は複素環基（例えば、フェノ－ル基、アニリノ基）によって置換することができる。幾つかの実施形態では、－Ｘ－は、芳香族部分、縮合芳香族部分、糖、オリゴ糖、エチレングリコ－ル、ポリエチレングリコ－ル、ペプチド結合などであってもよい。
【0051】
一酸化窒素（ＮＯ）は、血流及び血行動態の主要な内因性調節因子の１つである。例えば、ＮＯは、血管拡張を促進し、毛細管血流及び低酸素状態での酸素供給を改善することができる。ＮＯはまた、血管系損傷を保護し、血管損傷の修復を助ける可能性がある。ＮＯはまた、ウイルス又は細菌感染を阻害する。しかしながら、体内でのＮＯの半減期が短く（わずか数ミリ秒）、ウイルスや細菌の感染を治療したり、血管系損傷関連の疾患を修復したりするための外因性ＮＯの使用が大幅に制限される。また、吸入されたＮＯは、組織への浸透が乏しいため、ＡＲＤＳに対する有効性が限られている。吸入された高用量のＮＯは、活性酸素種（ＲＯＳ）と反応し、有毒な活性窒素種（ＲＮＳ）代謝産物を形成し、血管系損傷と過度の炎症を引き起こす。
【0052】
Ｌ１は、ＮＯ放出剤の一部又は全部である官能基を含むため、本発明で開示されている例示的な化合物は、生体内活性化（又は代謝活性化）を介して局部組織においてＮＯを連続的に放出することができる。例えば、化合物は、デヒドロゲナ－ゼ、グルタチオンＳ－トランスフェラ－ゼ（ＧＳＴ）、Ｐ４５０などの１つ又は複数のレダクタ－ゼの還元作用により、ＮＯを放出することができる。
【0053】
幾つかの実施形態では、ＮＯ放出剤は、有機硝酸エステルであってもよい。有機硝酸エステルは、ＮＯのプロドラッグである。Ｌ１（有機硝酸エステルの一部又は全部である官能基を含むもの）を含む化合物は、生体内活性化を介してＮＯを連続的に放出することができる。放出されたＮＯは、近くの組織に浸透することができる。有機硝酸エステルは、アルコ－ル基の硝酸エステルを指す。一般的に使用される有機硝酸エステルは、三硝酸グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｙｌ ｔｒｉｎｉｔｒａｔｅ、ＧＴＮ）、二硝酸グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｙｌ ｄｉｎｉｔｒａｔｅ、ＧＤＮ）、一硝酸グリセリン（ｇｌｙｃｅｒｙｌ ｍｏｎｏｎｉｔｒａｔｅ、ＧＭＮ）、四硝酸ペンタエリスリト－ル（ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ｔｅｔｒａｎｉｔｒａｔｅ、ＰＥＴＮ）、三硝酸ペンタエリスリト－ル（ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ｔｒｉｎｉｔｒａｔｅ、ＰＥＴｒｉＮ）、二硝酸ペンタエリスリト－ル（ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ｄｉｎｉｔｒａｔｅ、ＰＥＤＮ）、一硝酸ペンタエリスリト－ル（ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ｍｏｎｏｎｉｔｒａｔｅ、ＰＥＭＮ）、二硝酸イソソルビド（ｉｓｏｓｏｒｂｉｄｅ ｄｉｎｉｔｒａｔｅ、ＩＳＤＮ）、一硝酸イソソルビド（ｉｓｏｓｏｒｂｉｄｅ ｍｏｎｏｎｉｔｒａｔｅ、ＩＳＭＮ）、ニコランジル（Ｎｉｃｏｒａｎｄｉｌ）、硝酸プロパチル（ｐｒｏｐａｔｙｌｎｉｔｒａｔｅ）、シニトロジル（Ｓｉｎｉｔｒｏｄｉｌ）、テニトラミン（ｔｅｎｉｔｒａｍｉｎｅ）、トロ－ルニトラ－ト（ｔｒｏｌｎｉｔｒａｔｅ）、などを含む。図１Ａ～１Ｂは、本開示の幾つかの実施形態による、ＮＯを放出することができる例示的な有機硝酸エステルの構造式を示す図である。例えば、ＧＤＮは、ＧＤＮ（１、３）、ＧＤＮ（１、２）などの構造異性体、及び図１Ａに示すような立体異性体を含んでもよい。ＧＭＮはまた、幾つかの立体異性体を含んでもよい。別の例として、図１Ｂに示すように、ＰＥＴｒｉＮ、ＰＥＤＮ、及びＰＥＭＮはそれぞれ構造異性体を含んでもよい。Ｌ１はまた、有機硝酸エステルの構造異性体又は立体異性体の一部又は全部である官能基を含んでもよい。
【0054】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、一般式Ｌ３－ＯＮＯ２によって表することができる。Ｌ３は、例えば、アリ－ル、ベンジル、又は第１級、第２級、若しくは第３級アルキル基であってもよい。Ｌ３は、無置換であってもよいし、１つ以上のヘテロ原子によって置換されていてもよい。また別の例として、Ｌ３は、飽和でも不飽和でもよい。Ｌ３が不飽和である場合、Ｌ３は、１つ以上の二重結合及び／又は１つ以上の三重結合を含んでもよい。単なる例として、Ｌ３は、置換されていないか、又はＮ、Ｐ、Ｓ、Ｏなどの１つ又は複数のヘテロ原子で置換されているＣ１－９９炭素鎖であってもよい。例えば、Ｌ３が置換されている場合、Ｌ３は、ヘテロ鎖基（例えば、－ＮＨ３、－ＣＯＯＨ又は－ＯＨ）又は複素環基（例えば、フェノ－ル基、アニリノ基）によって置換することができる。また別の例として、Ｌ３は分岐又は非分岐であってもよい。幾つかの実施形態では、Ｌ３は、１つ又は複数の－ＯＮＯ２基を含んでもよい。図１Ｃは、本開示の幾つかの実施形態による、有機硝酸エステルの一部又は全部である官能基を含むＬ１の例示的な構造式を示す図である。図１Ｂに示すように、Ｒ１－Ｒ１２はそれぞれ、分岐又は非分岐、飽和又は不飽和、置換又は未置換の炭化水素基であってもよい。
【0055】
図１Ｄは、本開示の幾つかの実施形態による、例示的なＮＯ放出剤によるＮＯの放出を示す図である。ＮＯ放出分子は、細胞又は組織における生体内活性化（例えば、レダクタ－ゼによる）を介して１つ又は複数のＮＯ分子を放出できる可能性がある。図１Ｄに示すように、ＧＴＮ分子は、ＮＯ分子を放出し、ＧＤＮ分子に変換することができる。ＧＤＮ分子は、ＮＯ分子を放出し、ＧＭＮ分子に変換することができる。同様に、ＩＳＤＮ分子は、ＮＯ分子を放出し、ＩＳＭＮ分子に変換することができる。図１Ｄに示すように、ＰＥＴＮ分子は、４つのＮＯ分子を徐々に放出し、ＰＥＴｒｉＮ、ＰＥＤＮ、及びＰＥＭＮに変換することができる。幾つかの実施形態では、Ｌ１は、ＮＯの放出に関連する複数の官能基を含んでもよい。化合物は、局部組織においてＮＯを連続的に放出することができる。例えば、Ｌ１は、１個の硝酸エステル基、２個の硝酸エステル基、３個の硝酸エステル基、又は４個の硝酸エステル基を含んでもよい。別の例として、Ｌ１は、５個の硝酸エステル基を含んでもよい。また別の例として、Ｌ１は、無機硝酸塩を含んでもよい。例えば、無機硝酸塩は、硝酸カリウム、硝酸ナトリウムなどの硝酸塩を含んでもよい。Ｌ１は、ニトラ－ト又は亜硝酸塩であってもよい。
【0056】
３’，５’－環状ヌクレオチドホスホエステラ－ゼ（ＰＤＥ）は、二次メッセンジャ－である環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）及び環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）を分解する。ＰＤＥは、１１個の遺伝子ファミリ－（ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３、ＰＤＥ４、ＰＤＥ５、ＰＤＥ６、ＰＤＥ７、ＰＤＥ８、ＰＤＥ９、ＰＤＥ１０、及びＰＤＥ１１）を含有する。ＰＤＥ酵素ファミリ－の各メンバ－は、ｃＡＭＰ及び／又はｃＧＭＰに対する独自の基質選択性、組織分布を有し、特定の補因子及び活性化因子によって調節される。ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３、ＰＤＥ１０及びＰＤＥ１１は、ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの両方を分解する。ＰＤＥ４、ＰＤＥ７、及びＰＤＥ８は、ｃＡＭＰを選択的に分解する。ＰＤＥ５、ＰＤＥ６及びＰＤＥ９は、ｃＧＭＰを選択的に分解する。
【0057】
幾つかの実施形態では、Ｌ２は、ＰＤＥの活性を阻害するＰＤＥ阻害剤の一部又は全部である官能基を含んでもよい。本明細書で使用される場合、酵素の「活性」という用語は、領域（例えば、細胞領域）又は組織における任意の分子（例えば、酵素）の機能的能力（例えば、触媒作用）を指す。活性は、分子の発現レベルの変化、又は分子の単位あたりの機能レベルの変化、又はその両方に影響することができる。例えば、ＰＤＥの活性は、ＰＤＥの発現を減少させること及び／又はＰＤＥの機能を妨害することによって阻害することができる。
【0058】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥファミリ－の特定のメンバ－を阻害する選択的阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥファミリ－の複数のメンバ－を阻害することができる。
【0059】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥはＰＤＥ４であってもよく、ＰＤＥ阻害剤はＰＤＥ４阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ４阻害剤は、所定の閾値よりも高い特異性を有する特異的阻害剤である。
【0060】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥはＰＤＥ３であってもよく、ＰＤＥ阻害剤はＰＤＥ３阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥはＰＤＥ５であってもよく、ＰＤＥ阻害剤はＰＤＥ５阻害剤であってもよい。
【0061】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ１阻害剤、ＰＤＥ２阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ＰＤＥ５阻害剤、ＰＤＥ６阻害剤、ＰＤＥ７阻害剤、ＰＤＥ８阻害剤、ＰＤＥ９阻害剤、ＰＤＥ１０阻害剤、ＰＤＥ１１阻害剤など、又はそれらの任意の組み合わせであってもよい。
【0062】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ３／ＰＤＥ４二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ５二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ７二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ８二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／９二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ１０二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ１１二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ１二重阻害剤であってもよい。幾つかの実施形態では、ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ４／ＰＤＥ２二重阻害剤であってもよい。
【0063】
ＰＤＥ４は、肺胞内皮及び上皮細胞、血管平滑筋細胞、マクロファ－ジ、リンパ球、好中球、好酸球など主要なｃＡＭＰ分解酵素の１つである。ＰＤＥ４阻害剤は、ｃＡＭＰを介したシグナル伝達を延長し、複数の炎症性メディエ－タ－の放出、炎症性サイトカイン、炎症細胞の肺胞への浸潤を減少させ、上皮粘液の分泌を刺激し、微生物や細胞片の除去を促進する。ＰＤＥ４阻害剤は、ＡＲＤＳモデルに有効であり、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、乾癬、及び湿疹の治療に使用される。例えば、ＰＤＥ４阻害剤は、ロフルミラスト、アプレミラスト、クリサボロ－ル（Ｃｒｉｓａｂｏｒｏｌｅ）、シロミラスト、ＣＤＰ－８４０、ＭＫ０３５９、ＭＫ０８７３、ＭＫ０９５２、イブジラスト、ＣＨＦ６００１、ロノミラスト（Ｒｏｎｏｍｉｌａｓｔ）、オグレミラスト、テトミラスト（Ｔｅｔｏｍｉｌａｓｔ）、ＧＳＫ２５６０６６、ＹＭ９７６、ＧＳ－５７５９、ＧＰＤ－１１１６、ＭＥＭ１４１４、ＲＰＬ５５４、ＡＳＰ３２５８、Ｅ６００５、ＧＷ８４２４７０Ｘ、ＯＰＡ－１５４０６、Ｌｅｏ－２９１０２、ＨＦＰ０３４、ＣＢＳ３５９６、レバミラスト（Ｒｅｖａｍｉｌａｓｔ）（ＧＲＣ４０３９）、ＮＣＳ６１３、ＦＣＰＰ０３、ＢＡＹ１９－８００４、ＣＩ－１００４、Ｌ－７９１，９４３、Ｌ－８２６，１４１、Ｔ－２５８５、ＹＭ９７６、ロリプラム、ＨＴ－０７１２、ＡＢＩ－４、ＦＣＰＲ０３、Ｅ６００５（ＲＶＴ－５０１）、ＧＷ８４２４７０Ｘ、ＯＰＡ－１５４０６、ＤＲＭ０２、ＨＦＰ０３４など、又はそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。
【0064】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥ４阻害剤は、ＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ４Ｂ、ＰＤＥ４Ｃ、又はＰＤＥ４Ｄの少なくとも１つの効能を阻害できる場合がある。
【0065】
ＰＤＥ５阻害剤は、例えば、様々な組織を供給する血管の内側を覆う平滑筋細胞において、サイクリックＧＭＰに対するＰＤＥ５の分解作用をブロックすることができる。ＰＤＥ５阻害剤は、血管収縮性のヒト及び動物の障害を治療するために血行動態調節を改善する血管拡張剤として使用することができる。シルデナフィル（バイアグラ）、タダラフィル（シアリス）、アバナフィル（ステンドラ）、及びバルデナフィル（レビトラ）などのＰＤＥ５阻害剤は、勃起障害の治療に臨床的に要されている。シルデナフィル及びタダラフィルはまた、肺高血圧症の幾つかのサブタイプの治療に適応されている一方、タダラフィルはまた、前立腺肥大の治療のために認可されている。他の例示的なＰＤＥ５阻害剤は、ミロデナフィル（ｍｉｒｏｄｅｎａｆｉｌ）、ウデナフィル、ロデナフィル（ｌｏｄｅｎａｆｉｌ）、ザプリナスト、イカリインなどを含んでもよい。
【0066】
ＰＤＥ３阻害剤は、心疾患及び末梢動脈疾患を治療するために使用することができる。ＰＤＥ３阻害剤は、例えば、ミルリノン及びシロスタゾ－ル、アムリノン、及びエノキシモンを含んでもよい。ＰＤＥ７阻害剤を含む他のＰＤＥ阻害剤は、炎症性障害を治療するために使用することができるか、又は神経保護剤として使用することができる。
【0067】
図２は、本開示の幾つかの実施形態による例示的なＰＤＥ４阻害剤及びＰＤＥ３阻害剤の構造式を示す図である。図２には、重度のＣＯＰＤを治療するために使用できるロフルミラスト、乾癬性関節炎（ＰｓＡ）を治療するために使用できるアプレミラスト、喘息及びＣＯＰＤなどの呼吸障害を治療するために使用できるシロミラスト、血液循環を改善するために使用できるペントキシフィリン、及び末梢血管疾患を治療するために使用できるシロスタゾ－ルが含まれている。
【0068】
幾つかの実施形態では、－Ｘ－は、結合又はＬ１とＬ２を連結するためのジラジカルであってもよく、化合物は、ＮＯ放出部分及びＰＤＥ阻害部分が関与する化学反応に基づいて生成することができる。例えば、化合物は、付加反応、脱離反応、置換反応、ペリ環状反応、転位反応、光化学反応、酸化還元反応など、又はそれらの任意の組み合わせに基づいて生成することができる。
【0069】
幾つかの実施形態では、化合物は、コア足場（ｃｏｒｅ ｓｃａｆｆｏｌｄ）を使用して生成することができる。幾つかの実施形態では、コア足場は、Ｌ１又はＬ２を含まない。化合物は、Ｌ１及びＬ２をコア足場にグラフトすることによって生成することができる。例えば、コア足場は、分岐又は非分岐、飽和又は不飽和、置換又は未置換の化合物であってもよい。幾つかの実施形態では、コア足場は、Ｌ１又はＬ２を含んでもよい。例えば、Ｌ２を含むＰＤＥ４阻害剤は、コア足場として使用することができる。Ｌ１は、化合物を生成するためにＰＤＥ４阻害剤にグラフトすることができる。同様に、Ｌ１を含むＮＯ放出化合物は、コア足場として使用することができる。Ｌ２は、化合物を生成するためにＮＯ放出化合物にグラフトすることができる。
【0070】
【0071】
【0072】
幾つかの実施形態では、ＮＯ放出剤は、ニトログリセリン（ＧＴＮ）、二硝酸イソソルビド（ＩＳＤＮ）、又は四硝酸ペンタエリスリト－ル（ＰＥＴＮ）である。
【0073】
幾つかの実施形態では、Ｌ１は、１つ又は複数の－ＯＮＯ２基を含んでもよい。例えば、Ｌ１は、１つ、２つ、又は３つの－ＯＮＯ２基を含んでもよい。幾つかの実施形態では、Ｌ１は、－Ｃ（ＣＨ３）２－ＣＨ２－ＯＮＯ２、－Ｃ（ＣＨ３）－（ＣＨ２－ＯＮＯ２）２などであってもよい。
【0074】
幾つかの実施形態では、Ｘは、Ｏ、Ｃ、Ｎ、Ｓ、又はＰを含んでもよい。幾つかの実施形態では、Ｘは、０～１０個の原子を含む。幾つかの実施形態では、－Ｘ－は、エステル結合、アミド結合、スルホンアミド結合、スルファ－ト結合、ホスホルアミド結合、ホスファ－ト結合、ケトン結合、又はアリ－レン基を含んでもよい。
【0075】
幾つかの実施形態では、化合物は、（Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－トであってもよく、「化合物－１」とも呼ばれ、以下の構造を有する。
【0076】
幾つかの実施形態では、化合物は、（Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－（（ニトロオキシ）メチル）プロパノア－トであってもよく、「化合物－２」とも呼ばれ、以下の構造を有する。
【0077】
幾つかの実施形態では、化合物は、（Ｓ）－３－（（２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）アミノ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－トであってもよく、「化合物－３」とも呼ばれ、以下の構造を有する。
【0078】
幾つかの実施形態では、化合物は、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－トであってもよく、「化合物－４」とも呼ばれ、以下の構造を有する。
【0079】
幾つかの実施形態では、化合物は、（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）カルバマ－トであってもよく、「化合物－５」とも呼ばれ、以下の構造を有する。
【0080】
図３は、本開示の幾つかの実施形態による新規なＮＯ放出ＰＤＥ４阻害剤の幾つかの例示的な式を示す図である。幾つかの実施形態では、図３に示すＸは、Ｏ、Ｓ、又はＣＨ２などであってもよい。幾つかの実施形態では、ｎの範囲は、１～２０であってもよい。幾つかの実施形態では、図３に示すＹは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＣＨ２などであってもよい。例えば、ＸはＣＨ２であってもよく、ＹはＮであってもよい。別の例として、ＸはＣＨ２であってもよく、ＹはＯであってもよい。図３に示す化合物Ａ～Ｇは、ＮＯ放出特性及びＰＤＥ４阻害特性の両方を有する。例えば、化合物Ｄは、２つの－ＯＮＯ２基を含む。化合物Ｄ分子は、生体内活性化を介して２つのＮＯ分子を放出することができる。単なる例として、化合物Ａ～Ｇは、ウイルス又は細菌感染、血管系損傷関連の疾患、乾癬、乾癬性関節炎、又は他の免疫系関連の炎症性疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【0081】
図４は、本開示の幾つかの実施形態による幾つかの例示的な新規なＮＯ放出ＰＤＥ４阻害剤を示す図である。単なる例として、化合物Ａ及びＢは、ウイルス又は細菌感染、血管系損傷関連の疾患、乾癬、乾癬性関節炎、又は他の免疫系関連の炎症性疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【0082】
本開示の別の態様によれば、前述の化合物の用途が提供される。化合物は、幾つかのヒト疾患又は動物疾患の治療又は予防のために使用することができる。幾つかの実施形態では、本発明は、本明細書に開示されるように、又は本明細書に開示される化合物のメカニズム及び機能に関連するように、特定のヒト又は動物の疾患の治療又は予防のための医薬品の調製のための本開示の化合物の用途を目的とする。
【0083】
幾つかの実施形態では、これらの化合物は、ＰＤＥ関連疾患を治療するように構成することができる。幾つかの実施形態では、これらの化合物は、ＰＤＥ阻害剤自体（ＰＤＥを阻害できるＬ２における官能基を含む）よりも大きな治療濃度域でＰＤＥ関連疾患を治療するように構成することができる。本明細書で使用される場合、「治療濃度域」という用語は、毒性作用などの望ましくない副作用を引き起こすことなく、又は所定の毒性作用レベルよりも低い毒性作用を引き起こす、疾患を効果的に治療できる薬物投与量の範囲を指す。
【0084】
幾つかの実施形態では、ＰＤＥ関連疾患は、ＰＤＥ４関連疾患を含んでもよい。具体的には、ＰＤＥ４関連疾患は、ＰＤＥ４Ａ関連疾患、ＰＤＥ４Ｂ関連疾患、ＰＤＥ４Ｃ関連疾患、又はＰＤＥ４Ｄ関連疾患を含んでもよいが、これらに限定されない。幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、７２０ｎＭ未満の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を示すことができる。幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、２００ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、２．３μＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。幾つかの実施形態では、化合物は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、０．７μＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。
【0085】
例えば、化合物は化合物－２であってもよく、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、３２０ｎＭ未満、３１５ｎＭ未満、又は３１０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。化合物－２は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、２．５μＭ未満、２．３μＭ未満、又は２．２７５μＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。別の例として、化合物は化合物－１であってもよく、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、２００ｎＭ未満、１９０ｎＭ未満、又は１８０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。化合物－１は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、２．５μＭ未満、２．３μＭ未満、又は２．２４μＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。また別の例として、化合物は化合物－３であってもよい。化合物－３は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、２５０ｎＭ未満、２３０ｎＭ未満、又は２２０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。化合物－３は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、１．２μＭ未満又は１．１μＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。さらに別の例として、化合物は化合物－４であってもよい。化合物－４は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、７５０ｎＭ未満、７３０ｎＭ未満、又は７２０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。化合物－４は、ＰＤＥ４Ｃを阻害するために、３００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、又は１２０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。また別の例として、化合物は化合物－５であってもよい。化合物－５は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、１００ｎＭ未満、８０ｎＭ未満、又は４５ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。化合物－５は、ＰＤＥ４Ａを阻害するために、１０００ｎＭ未満、９００ｎＭ未満、又は８５０ｎＭ未満のＩＣ５０を示すことができる。
【0086】
幾つかの実施形態では、化合物は、微小循環を改善し、炎症を軽減し、免疫調節を改善し、又は内皮損傷修復を刺激するようにさらに構成することができる。
【0087】
幾つかの実施形態では、化合物は、対象における関連障害を治療するために、同時に、微小循環を改善し、炎症を軽減し、免疫調節を改善し、内皮損傷修復を刺激するように構成することができる。
【0088】
幾つかの実施形態では、化合物は、対象に投与されると、局部組織においてＮＯを放出し、ＰＤＥの活性を阻害するようにさらに構成することができる。例えば、化合物が対象に投与された後、対象における血漿硝酸エステルのレベルが上昇し得る。
【0089】
幾つかの実施形態では、化合物は、関連疾患を治療するための強化された治療濃度域のために、血管系及びサブ血管系空間へのＰＤＥ４阻害を強化するようにさらに構成することができる。
【0090】
幾つかの実施形態では、化合物は、炎症性、免疫学的、又は血管系障害を治療するようにさらに構成することができる。
【0091】
幾つかの実施形態では、化合物は、調整可能なＮＯ放出特性を所有／使用するようにさらに構成することができる。幾つかの実施形態では、調整可能なＮＯ放出特性は、血管系／血管系空間近くへのＰＤＥ４阻害剤の送達を調節するために使用することができる。化合物のＮＯ放出特性は、化合物のＬ１におけるＮＯ放出基の数を変更することによって調節することができる。例えば、化合物のＬ１におけるＮＯ放出基の数を増加させることによって、化合物は、より多くのＮＯ分子を放出することができ、従って局部組織におけるＮＯの濃度を増加できる可能性がある。追加的に又は代替的に、化合物のＬ１におけるＮＯ放出基の数を増加させることによって、化合物は、ＮＯをより長時間連続的に放出できる可能性がある。
【0092】
本開示のまた別の態様によれば、疾患又は障害を治療又は予防する方法が提供される。方法は、薬学的に有効な量の前述の化合物を対象に投与することを含んでもよい。例えば、方法は、経口投与、注射投与、局所投与など、又はそれらの任意の組み合わせを介して、組成物を対象に投与することを含んでもよい。
【0093】
本開示のさらに別の態様によれば、前記化合物を含む組成物は、疾患又は障害を治療又は予防するために調剤及び使用することができる。幾つかの実施形態では、医薬組成物は、賦形剤をさらに含んでもよい。
【0094】
幾つかの実施形態では、組成物は、薬学的に許容可能な担体をさらに含んでもよい。例えば、担体は、コ－ティング層、カプセル、マイクロカプセル、ナノカプセルなど、又はそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。担体は非毒性である必要があり、医薬組成物中の主な成分（例えば、上記の化合物）の活性に重大な影響を及ぼさない可能性があることに注意すべきである。幾つかの実施形態では、担体は、主な成分の酸化、分解又は不活性化などの幾つかの望ましくない状況に対して主な成分を保護することができる。例えば、胃内の酵素や比較的低いｐＨは、主な成分の分解又は不活性化を引き起こす可能性がある。担体は、医薬組成物中の主な成分を保護することによって、医薬組成物の有効性の維持又は向上に役立ち得る。幾つかの実施形態では、担体は、主な成分の制御放出のために使用することができる。制御放出は、徐放、持続放出、標的放出などを含んでもよいが、これらに限定されない。たとえば、担体は、ヒドロゲルカプセル、コラ－ゲン、ゼラチン、キトサン、アルギン酸塩、ポリビニルアルコ－ル、ポリエチレンオキシド、澱粉、架橋澱粉など、又はそれらの任意の組み合わせからなるマイクロカプセル又はナノカプセルを含んでもよい。幾つかの実施形態では、担体は、医薬組成物における主な成分の制御放出を促進することができる。
【0095】
幾つかの実施形態では、組成物は、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、ミセル、液体、懸濁液、クリ－ム、フォ－ム、ゲル、ロ－ション、ペ－スト、又は軟膏として製剤することができる。
【0096】
幾つかの実施形態では、組成物は、経口投与、注射投与、又は局所投与を介して対象に投与することができる。幾つかの実施形態では、注射投与は、皮下注射、筋肉内注射、静脈内注射などを含んでもよい。幾つかの実施形態では、注射投与は、腫瘍又は腫瘍に近い領域への組成物の注射を含んでもよい。幾つかの実施形態では、注射投与は、腎臓、肝臓、心臓、甲状腺又は関節への組成物の注射を含んでもよい。幾つかの実施形態では、局所投与は、皮膚癌、リンパ腫などの癌を軽減するために組成物を皮膚に塗布することを含んでもよい。幾つかの実施形態では、局所投与は、腟内投与、直腸内投与、経鼻投与、耳介投与、髄腔内投与、関節内投与、胸膜内投与など、又はそれらの任意の組み合わせを含んでもよい。幾つかの実施形態では、組成物は、異なる投与手段の組み合わせを介して対象に投与することができる。幾つかの実施形態では、方法は、１日３回、１日２回、１日１回、２日１回など、対象に組成物を投与することを含んでもよい。
【0097】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、急性肺損傷（ＡＬＩ）又は急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、ＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、他のコロナウイルス感染によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、他のウイルス感染によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、細菌感染によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、寄生虫感染症によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、真菌感染によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、外傷によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、手術によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、高地肺水腫によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、薬物誘発性損傷によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、敗血症によって引き起こされるＡＲＤＳを治療又は予防するために使用することができる。
【0098】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、気管支炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、高地肺水腫、又は嚢胞性繊維症を治療又は予防するために使用することができる。
【0099】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、サイトカインスト－ムの管理を改善するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされるサイトカインスト－ムを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、ＰＤ－１又はＰＤｌ－１抗体によって引き起こされるサイトカインスト－ムを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、好中球、マクロファ－ジ、又は単球を標的とする治療用抗体によって引き起こされるサイトカインスト－ムを治療又は予防するために使用することができる。
【0100】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、脳卒中を治療又は予防するために使用することができる。
【0101】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、急性腎障害（ＡＫＩ）、慢性腎臓病、様々な種類の腎炎、又は巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、特発性ＦＳＧＳを治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、癌の薬の使用によって引き起こされるＡＫＩを治療又は予防するために使用することができる。
【0102】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、非アルコ－ル性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、原発性胆汁性胆管炎（ＰＢＣ）、肝硬変、１型糖尿病、２型糖尿病、又は糖尿病合併症を治療又は予防するために使用することができる。例えば、糖尿病合併症は、糖尿病性足病変、糖尿病性神経痛、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性ケトアシド－シス、又は他の糖尿病性血管合併症を含むが、それらに限定されない。
【0103】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、アレルギ－性反応又は炎症を治療又は予防するために使用することができる。幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、ぶどう膜炎、ドライアイ、眼アレルギ－、黄斑変性（ＡＭＤ）、又は緑内障を含む眼疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【0104】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、リュ－マチ性関節炎（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、ベ－チェット症候群、潰瘍性大腸炎、強直性脊椎炎、外陰痛、ざ瘡、扁平苔癬、結節性痒疹、円板状エリテマト－デス、又はクロ－ン病を含む末梢免疫系障害（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）を治療又は予防するために使用することができる。
【0105】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、全身性エリテマト－デス（ＳＬＥ）を含む自己免疫疾患を治療又は予防するために使用することができる。
【0106】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、アルツハイマ－病、パ－キンソン病、又は脳卒中を含む中枢神経系疾患を治療、予防、又は遅延させるために使用することができる。
【0107】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、癌を治療又は予防するために使用することができる。例えば、癌は、白血病、乳癌、非小細胞肺癌、胃癌、卵巣癌、膵臓癌、炎症性乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌、肝癌、腎臓癌、又は腹膜癌であってもよい。幾つかの実施形態では、白血病は、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性リンパ性白血病、又は慢性骨髄性白血病であってもよい。
【0108】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、多発性硬化症を治療又は予防するために使用することができる。
【0109】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、移植拒絶反応を治療又は予防するために使用することができる。
【0110】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、敗血症、高地肺水腫、喘息、又は気管支炎を治療又は予防するために使用することができる。
【0111】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、アレルギ－性鼻炎、糖尿病、糖尿病性神経障害、アレルギ－性結膜炎、糖尿病性黄斑変性症、慢性腎臓病、乾癬、アトピ－性皮膚炎、好酸球性肉芽腫、骨関節炎、大腸炎、又は膵臓炎を治療又は予防するために使用することができる。
【0112】
幾つかの実施形態では、方法は、薬学的に有効な量の本開示の化合物を対象に投与することによって、皮膚疾患を治療又は予防するために使用することができる。例えば、皮膚疾患は、乾癬、アトピ－性皮膚炎、好酸球性肉芽腫、又は乾癬を含んでもよい。
【0113】
本開示の幾つかの実施形態によれば、ＡＬＩ又はＡＲＤＳを治療又は予防する方法が提供される。方法は、薬学的に有効な量の幾つかの前述の化合物を対象に投与することを含んでもよい。例えば、方法は、経口投与、注射投与、局所投与など、又はそれらの任意の組み合わせを介して、ＡＲＤＳを治療するために１つ又は複数の化合物（例えば、複数の化合物の１つ及び薬学的に許容可能な担体を含む組成物中）を対象に投与することを含んでもよい。幾つかの実施形態では、化合物は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５である。
【0114】
本開示の幾つかの実施形態によれば、対象におけるＰＤＥ関連疾患を治療又は予防する方法が提供される。例えば、ＰＤＥ関連疾患は、ＰＤＥ４Ａ関連疾患、ＰＤＥ４Ｂ関連疾患、ＰＤＥ４Ｃ関連疾患、又はＰＤＥ４Ｄ関連疾患など、又はそれらの任意の組み合わせなどのＰＤＥ４関連疾患を含んでもよい。幾つかの実施形態では、方法は、経口投与、注射投与、局所投与など、又はそれらの任意の組み合わせを介して、ＡＲＤＳを治療するために１つ又は複数の化合物（例えば、複数の化合物の１つ及び薬学的に許容可能な担体を含む組成物中）を対象に投与することを含んでもよい。幾つかの実施形態では、化合物は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５である。
【0115】
単なる例として、ＡＬＩ、ＡＲＤＳ、又はＰＤＥ関連疾患を治療又は予防するための方法は、対象に化合物を０．０１～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。別の例として、方法は、対象に化合物を１～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。また別の例として、方法は、対象に化合物を５～５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。幾つかの実施形態では、方法は、対象に化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５、又はそれらの任意の組み合わせを、約５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇで経口投与することを含んでもよい。
【0116】
幾つかの実施形態では、ＡＬＩ又はＡＲＤＳを治療又は予防するための幾つかの前述の化合物の用途が提供される。例えば、化合物は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５の１つ又は複数を含んでもよい。
【0117】
本開示の幾つかの実施形態によれば、癌を治療又は予防するための幾つかの前述の化合物の用途が提供される。例えば、化合物は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５の１つ又は複数を含んでもよい。
【0118】
本開示の幾つかの実施形態によれば、ＰＤＥ関連疾患を治療又は予防するための幾つかの前述の化合物の用途が提供される。例えば、化合物は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、又は化合物－５の１つ又は複数を含んでもよい。
【0119】
幾つかの実施形態では、化合物を含む組成物は、疾患又は障害を治療するために、他の医薬組成物の投与の前又は後に対象に投与することができる。あるいは、組成物及び他の医薬組成物は、疾患又は障害を治療するために、対象に同時に投与することができる。
【0120】
本開示は、以下の実施例に従ってさらに説明されるが、本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【0121】
実施例
実施例１ （Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（化合物－１とも呼ばれる）の調製
化合物－１を以下のステップで調製した。図５は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－１を調製する例示的なプロセスを示す図である。
実施例１ （Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（化合物－１とも呼ばれる）の調製
化合物－１を以下のステップで調製した。図５は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－１を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【0122】
ステップ１では、メチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（図５に示す生成物２とも呼ばれる）を以下のように調製した。
【0123】
ＨＮＯ３（０．２ｍＬ）を、メチル３－ヒドロキシ－２，２－ジメチルプロパノア－ト（２ｍＬ）の無水酢酸（１０ｍＬ）溶液に連続的に加えた。反応混合物を窒素下、０℃で２時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を加え、混合物をＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍＬ×２）及び飽和塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮して生成物２（２．２ｇ、収率８４％）を淡黄色のオイルとして得た。得られた化合物についてＮＭＲ分光分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．４９（ｓ，２Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），１．４６－１．１０（ｍ，６Ｈ）。
【0124】
ステップ２では、２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパン酸（図５に示す生成物３とも呼ばれる）を以下のように調製した。
【0125】
メチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（２．２ｇ、０．０１２ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（２．５Ｍ、２０ｍＬ）を加えた。溶液を窒素下、室温で１６時間撹拌した。ＭｅＯＨを真空下で除去した。水（３０ｍＬ）を加え、５ＮのＨＣｌ水溶液でｐＨ３～４に酸性化し、ＥＡ（３０ｍＬｘ３）で抽出した。有機層を塩水で洗浄し（３０ｍＬ）、濃縮乾固させて、生成物３（２ｇ、収率８９％）を淡黄色のオイルとして得た。得られた化合物についてＮＭＲ分光分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１１．０４（ｓ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ＝１９．８Ｈｚ，２Ｈ），１．４０－１．２８（ｍ，６Ｈ）。
【0126】
ステップ３では、３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（図５に示す生成物４とも呼ばれる）を以下のように調製した。
【0127】
２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパン酸（２００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．１７ｍＬ、１．８４ｍｍｏｌ）、０．０５ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を加えた。２時間後、溶液を減圧下で濃縮し、粗生成物をＥＡ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。有機層を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、濃縮乾固させて、生成物４（２００ｍｇ、収率９０％）を淡黄色の油として得た。
【0128】
ステップ４では、（Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（化合物－１）を以下のように調製した。
【0129】
３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（１５０ｍｇ、０．８３ｎＭｏｌ）及びＴＥＡ（２５１ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（ＤＣＭ）（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ－｛２－［（１Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－メタンスルホニルエチル］－１，３－ジオキソイソインド－ル－４－イル｝－２－ヒドロキシアセトアミド（化合物－６とも呼ばれる）のＤＣＭ溶液を加えた。溶液を窒素下、室温で１時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を飽和塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝１：１）で精製して、化合物－１（９０ｍｇ、収率１７％）を淡黄色の固体として得た。得られた化合物について質量及びＮＭＲ分光分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：６４３．９［Ｍ＋Ｎａ］＋．１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ１０．０４（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｓ，１Ｈ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８５（ｓ，２Ｈ），４．７４（ｓ，２Ｈ），４．３２（ｄｄ，Ｊ＝１４．０， １０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），１．３５－１．３１（ｍ９Ｈ）。
【0130】
実施例２ （｛２－［（１Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－メタンスルホニルエチル］－１，３－ジオキソイソインド－ル－４－イル｝カルバモイル）メチル２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－［（ニトロオキシ）メチル］プロパノア－ト（化合物－２とも呼ばれる）の調製
化合物－２を以下のステップで調製した。図６は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－２を調製する例示的なプロセスを示す図である。
化合物－２を以下のステップで調製した。図６は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－２を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【0131】
ステップ１では、２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－［（ニトロオキシ）メチル］プロパン酸（図６に示す生成物２とも呼ばれる）を以下のように調製した。
【0132】
ＨＮＯ３（０．５ｍＬ）を、３－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）－２－メチルプロパン酸（２ｍＬ）の無水酢酸（２０ｍＬ）溶液に連続的に加えた。反応混合物を窒素下、室温で２時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を加え、混合物をＥＡ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２０ｍＬ×２）及び飽和塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮して化合物－２（２．９ｇ、収率５０％）を淡黄色の油として得た。得られた化合物についてＮＭＲ分光分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１３．４１（ｓ，１Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，４Ｈ），１．３２－１．２１（ｍ，３Ｈ）。
【0133】
ステップ２では、２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－［（ニトロオキシ）メチル］プロパノイルクロリドを以下のように調製した。
【0134】
２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－［（ニトロオキシ）メチル］プロパン酸（５００ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液に、塩化オキサリル（０．４３ｍＬ、３．３４ｍｍｏｌ）、０．１ｍＬのＤＭＦを加えた。２時間後、溶液を減圧下で濃縮し、粗生成物をＥＡ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。有機層を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、濃縮乾固させて、生成物４（５００ｍｇ、収率７４％）を淡黄色の油として得た。
【0135】
ステップ３では、（Ｓ）－２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノア－ト（化合物－２）を次のように調製した。
【0136】
２－メチル－３－（ニトロオキシ）－２－［（ニトロオキシ）メチル］プロパノイルクロリド（２１０ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）及びＴＥＡ（２５１ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、Ｎ－｛２－［（１Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－メタンスルホニルエチル］－１，３－ジオキソイソインド－ル－４－イル｝－２－ヒドロキシアセトアミド（５００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を窒素下、室温で１時間撹拌した。水（２０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を飽和塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝２：１）で精製して、化合物２（４００ｍｇ、収率６７％）を淡黄色の固体として得た。得られた化合物について質量及びＮＭＲ分光分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：７０４．８［Ｍ＋Ｎａ］＋．１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ１０．０７（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ＝０．５Ｈｚ，２Ｈ），４．８７（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，４Ｈ），４．３３（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０７－３．９７（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｓ，３Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【0137】
実施例３ （Ｓ）－３－（（２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）アミノ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（化合物－３とも呼ばれる）の調製
化合物－３を以下のステップで調製した。図７は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－３を調製する例示的なプロセスを示す図である。
化合物－３を以下のステップで調製した。図７は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－３を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【0138】
ステップ１では、３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－トを以下のように調製した。
【0139】
２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパン酸（３１８ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、（ＣＯＣｌ）２（２９７ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、次に濃縮して、３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（０．４ｇ、収率９９％）を白色の固体として得た。この白色の固体を次のステップで直接使用した。
【0140】
ステップ２では、メチル（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシナ－トを以下のように調製した。
【0141】
３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（０．４ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、グリシンメチル塩酸塩（２９５ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５９１ｍｇ、５．８５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し（２０ｍＬｘ３）、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝２：１）で精製して、メチル（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシナ－ト（０．３８４ｇ、収率８４％）を無色の油として得た。
【0142】
ステップ３では、（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシンを以下のように調製した。
【0143】
メチル（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシナ－ト（０．３８４ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、Ｈ２Ｏ（６ｍＬ）及びＬｉＯＨ（１５７ｍｇ、６．５６ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌した。１Ｎ ＨＣｌを使用してｐＨ＝２～３に調整し、水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＥＡ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し（２０ｍＬｘ３）、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮して、（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシン（０．４ｇ、収率９９％）を黄色の油として得た。得られた化合物について質量分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：４３９．１［２Ｍ－Ｈ］＋。
【0144】
ステップ４では、３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－トを以下のように調製した。
【0145】
（２，２－ジメチル－３－（ニトロオキシ）プロパノイル）グリシン（０．４ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、（ＣＯＣｌ）２（３５２ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、次に濃縮して、３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（０．５ｇ、収率９９％）を白色の油として得た。この白色の油を次のステップで直接使用した。
【0146】
ステップ５では、（Ｓ）－３－（（２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）アミノ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－トを以下のように調製した。
【0147】
３－クロロ－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（０．５ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、（Ｓ）－４－アミノ－２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）イソインドリン－１，３－ジオン（３３０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５９１ｍｇ、５．８５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し（２０ｍＬｘ３）、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝１：１）で精製して、（Ｓ）－３－（（２－（（２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）アミノ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピルニトラ－ト（１４４ｍｇ、収率１４％）を黄色の固体として得た。得られた化合物について質量分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：６２１．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0148】
実施例４ （３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（化合物－４とも呼ばれる）の調製
化合物－４を以下のステップで調製した。図８は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－４を調製する例示的なプロセスを示す図である。
化合物－４を以下のステップで調製した。図８は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－４を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【0149】
ステップ１では、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）アセタ－トの調製を以下のように調製した。
【0150】
（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－ヒドロキシヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（１ｇ、５．２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（６０％、２３０ｍｇ、５．７６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。２－ブロモ酢酸ｔｅｒｔ－ブチル（１．１２ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）を混合物に加えた。混合物をさらに室温で１６時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＥＡ（３０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２０ｍＬｘ ２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝４：１）で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）アセタ－ト（０．８ｇ、収率５０％）を淡黄色の油として得た。
【0151】
ステップ２では、２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）酢酸を以下のように調製した。
【0152】
ｔｅｒｔ－ブチル２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）アセタ－ト（０．８ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、濃縮して、２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）酢酸（０．９ｇ、収率９９％）を淡黄色の油として得た。
【0153】
ステップ３では、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－クロロ－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－トを以下のように調製した。
【0154】
２－（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）酢酸（０．９ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、（ＣＯＣｌ）２（０．４ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。濃縮して、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－クロロ－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（１．０ｇ、収率９９％）を淡黄色の油として得た。次のステップで直接使用した。
【0155】
ステップ４では、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－トの調製は、以下のように調製した。
【0156】
（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－クロロ－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（１．０ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、（Ｓ）－４－アミノ－２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）イソインドリン－１，３－ジオン（１２５ｍｇ、０．２９９ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１．３２ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し（２０ｍＬｘ３）、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（ＡＣＮ－Ｈ２Ｏ、０．１％ＦＡ）で精製して、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエトキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（２０ｍｇ、収率１０％）を白色の固体として得た。得られた化合物について質量分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：６５０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0157】
実施例５ （３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）カルバマ－ト（化合物－５）の調製
化合物－５を以下のステップで調製した。図９は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－５を調製する例示的なプロセスを示す図である。
化合物－５を以下のステップで調製した。図９は、本開示の幾つかの実施形態による化合物－５を調製する例示的なプロセスを示す図である。
【0158】
ステップ１では、ｔｅｒｔ－ブチル２－イソシアナトアセタ－トを以下のように調製した。
【0159】
ｔｅｒｔ－ブチルグリシナ－ト（３００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、トリホスゲン（２３８ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）及びＮＥｔ３（６９２ｍｇ、６．８６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１時間撹拌し、濃縮して、ｔｅｒｔ－ブチル２－イソシアナトアセタ－ト（０．４ｇ、収率９９％）を淡黄色の固体として得た。
【0160】
ステップ２では、ｔｅｒｔ－ブチル（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシナ－トを以下のように調製した。
【0161】
ｔｅｒｔ－ブチル２－イソシアナトアセタ－ト（４１１ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液に、（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－ヒドロキシヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－ト（２９１ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、ＮＥｔ３（７７０ｍｇ、７．６２ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（６２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（３０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２０ｍＬｘ２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ－（ＰＥ／ＥＡ＝１：１）で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシナ－ト（５０％（３Ｒ，３ａＳ，６Ｓ，６ａＲ）－６－ヒドロキシヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イルニトラ－トを含有する混合物０．６ｇ、収率３２％）を無色の油として得た。
【0162】
ステップ３では、（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシンを以下のように調製した。
【0163】
ｔｅｒｔ－ブチル（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシナ－ト（０．６ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、次に濃縮して、（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシン（０．７ｇ、収率９９％）を淡黄色の油として得た。得られた化合物について質量分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：５８３．１［２Ｍ－Ｈ］－。
【0164】
ステップ４では、（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－クロロ－２－オキソエチル）カルバマ－トを以下のように調製した。
【0165】
（（（（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル）オキシ）カルボニル）グリシン（０．７ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、（ＣＯＣｌ）２（１６４ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（５０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。濃縮して、（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－クロロ－２－オキソエチル）カルバメ－ト（１．０ｇ、収率９９％）を白色の固体として得た。次のステップで直接使用した。
【0166】
ステップ５では、（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）カルバマ－トを以下のように調製した。
【0167】
（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－クロロ－２－オキソエチル）カルバマ－ト（１．０ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、（Ｓ）－４－アミノ－２－（１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）イソインドリン－１，３－ジオン（２００ｍｇ、０．４７８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１．３２ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で２時間撹拌した。水（３０ｍＬ）を加え、混合物をＤＣＭ（２０ｍＬｘ３）で抽出した。合わせた有機層を塩水（２０ｍＬｘ３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次に、得られたものを濾過して濾液を収集した。濾液を濃縮した。粗生成物をｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（ＡＣＮ－Ｈ２Ｏ、０．１％ＦＡ）で精製して、（３Ｓ，３ａＲ，６Ｒ，６ａＳ）－６－（ニトロオキシ）ヘキサヒドロフロ［３，２－ｂ］フラン－３－イル（２－（（２－（（Ｓ）－１－（３－エトキシ－４－メトキシフェニル）－２－（メチルスルホニル）エチル）－１，３－ジオキソイソインドリン－４－イル）アミノ）－２－オキソエチル）カルバマ－ト（実施例５）（８．５ｍｇ、収率１．４％）を白色の固体として得た。得られた化合物について質量分析を行ったところ、試験結果は以下の通りであった：Ｍａｓｓ（ｍ／ｚ）：６９３．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0168】
実施例６ 化合物はＰＤＥの活性を阻害する
化合物（例えば、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、化合物－５、及び化合物－６）によるＰＤＥ４（例えば、ＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ４Ｃ）活性の阻害は、提供された手順に従って、ＢＰＳ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＵＳＡ）からのＰＤＥ蛍光偏光アッセイキットを使用してモニタ－した。このアッセイは、ＦＡＭ－ｃＡＭＰからのＰＤＥによって生成された蛍光色素ＦＡＭ標識ＡＭＰの結合ビ－ズへの選択的結合に基づいている。
化合物（例えば、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、化合物－５、及び化合物－６）によるＰＤＥ４（例えば、ＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ４Ｃ）活性の阻害は、提供された手順に従って、ＢＰＳ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＵＳＡ）からのＰＤＥ蛍光偏光アッセイキットを使用してモニタ－した。このアッセイは、ＦＡＭ－ｃＡＭＰからのＰＤＥによって生成された蛍光色素ＦＡＭ標識ＡＭＰの結合ビ－ズへの選択的結合に基づいている。
【0169】
簡単に説明すると、化合物（アッセイバッファ－で希釈した異なる濃度の２．５ｕｌ）を、３８４ウェルプレ－ト中の１２．５ｕＬのＦＡＭ－ｃＡＭＰ基質（アッセイバッファ－で２００ｎＭ）と混合し、１０ｕｌのヒト組み換え体ＰＤＥ４Ａ（ＢＰＳ、カタログ番号６０３４０）又はＰＤＥ４Ｃ（ＢＰＳ、カタログ番号６０３８４）を加えた。プレ－トを室温で１時間インキュベ－トした。ＦＡＭ－ＡＭＰに対する５０ｕｌの結合剤を加えた。混合物を室温で２０分間インキュベ－トした。結合剤結合ＦＡＭ－ＡＭＰの量は、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ分光計（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）で蛍光偏光法により測定した。例示化合物の効能（ＩＣ５０値、表１）は、４パラメ－タ非線形回帰フィッティングル－チンを使用して用量－反応曲線から計算した。結果は、化合物－１、化合物－２、化合物－３、化合物－４、及び化合物－５がＰＤＥ４を効果的に阻害できることを示している。
【0170】
実施例７ 化合物は、ＴＮＦ－α及びＩＦＮ－γの産生を阻害する
末梢血単核球又は血液における、本開示によって提供される化合物による腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）及びインタ－フェロンγ（ＩＦＮ－γ）産生の阻害は、Ｃｌａｖｅａｕらのプロトコル（ＪＰＥＴ、３１０、７５２－７６０、２００４）に従うことによってモニタ－した。化合物は、ＴＮＦ－α及びＩＦＮ－γの発現を阻害することができる。
末梢血単核球又は血液における、本開示によって提供される化合物による腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）及びインタ－フェロンγ（ＩＦＮ－γ）産生の阻害は、Ｃｌａｖｅａｕらのプロトコル（ＪＰＥＴ、３１０、７５２－７６０、２００４）に従うことによってモニタ－した。化合物は、ＴＮＦ－α及びＩＦＮ－γの発現を阻害することができる。
【0171】
実施例８ 化合物は、マウスにおける急性肺損傷を阻害する
マウス（固形飼料でのＣ５７Ｂｌ６）に、１０ｍＬ／ｋｇの投与量でビヒクルとして１％メチルセルロ－スを使用して、化合物を経口投与した。３０分後、ＬＰＳ（３０ｕｇ／ｋｇ）を鼻から注入して、炎症と急性気道損傷を誘発した。血漿中のＴＮＦａレベル、及びＢＡＬＦ中の細胞浸潤は、２４時間のＬＰＳチャレンジ後にモニタ－した。化合物は、マウスの急性長期損傷を緩和することができる。
マウス（固形飼料でのＣ５７Ｂｌ６）に、１０ｍＬ／ｋｇの投与量でビヒクルとして１％メチルセルロ－スを使用して、化合物を経口投与した。３０分後、ＬＰＳ（３０ｕｇ／ｋｇ）を鼻から注入して、炎症と急性気道損傷を誘発した。血漿中のＴＮＦａレベル、及びＢＡＬＦ中の細胞浸潤は、２４時間のＬＰＳチャレンジ後にモニタ－した。化合物は、マウスの急性長期損傷を緩和することができる。
【0172】
実施例９ マウスにおける化合物－１の経口投与後の化合物－６の産生
図１０は、マウスに化合物－１を投与した後に産生された化合物－６血中レベルを示す。例示化合物－１（０．５％カルボキシメチルセルロ－ス（ＣＭＣ）／０．２５％Ｔｗｅｅｎ－８０懸濁液として水中で０．５ｍｇ／ｍＬで調剤された）を５ｍｇ／ｋｇで４匹のマウスに経口投与した。化合物－１は、経口投与後にマウスで急速に生物活性化され、すべてのマウスで一貫してＰＤＥ４阻害代謝物化合物－６を形成した。１５分で血液中に約２００ｎｇ／ｍＬの化合物－６が検出された。化合物－６の血中レベルは、１～２時間の間に約２５０ｎｇ／ｍＬでピ－クに達し、６時間で約２５ｎｇ／ｍＬまでほぼ消失した。図１０から分かるように、血液中の化合物－６のレベルの変動傾向は比較的安定している。化合物－６の血中レベルのこの動的プロファイルは、化合物－６の直接投与による予想される高いＣｍａｘに起因する副作用の軽減など、化合物－６の直接投与を超えて、化合物－６治療に反応する疾患を治療する機会を提供する。
図１０は、マウスに化合物－１を投与した後に産生された化合物－６血中レベルを示す。例示化合物－１（０．５％カルボキシメチルセルロ－ス（ＣＭＣ）／０．２５％Ｔｗｅｅｎ－８０懸濁液として水中で０．５ｍｇ／ｍＬで調剤された）を５ｍｇ／ｋｇで４匹のマウスに経口投与した。化合物－１は、経口投与後にマウスで急速に生物活性化され、すべてのマウスで一貫してＰＤＥ４阻害代謝物化合物－６を形成した。１５分で血液中に約２００ｎｇ／ｍＬの化合物－６が検出された。化合物－６の血中レベルは、１～２時間の間に約２５０ｎｇ／ｍＬでピ－クに達し、６時間で約２５ｎｇ／ｍＬまでほぼ消失した。図１０から分かるように、血液中の化合物－６のレベルの変動傾向は比較的安定している。化合物－６の血中レベルのこの動的プロファイルは、化合物－６の直接投与による予想される高いＣｍａｘに起因する副作用の軽減など、化合物－６の直接投与を超えて、化合物－６治療に反応する疾患を治療する機会を提供する。
【0173】
実施例１０ 化合物－１、化合物－２、及び化合物－４の生体内活性化からの一酸化窒素の生成
化合物－１及び化合物－２を５ｍｇ／ｍｌで、化合物－４を１ｍｇ／ｍｌで、水中１％ＣＭＣ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－８０にビヒクルとして調剤した。血漿中の総硝酸エステル及び総ニトラ－トレベルは、提供されたプロトコルに従って、一酸化窒素アッセイキット（ａｂ６５３２７、ＡｂＣａｍ）を使用して定量化した。デ－タは平均値（±ＳＥＭ、３匹のマウス／グル－プ）であった。
化合物－１及び化合物－２を５ｍｇ／ｍｌで、化合物－４を１ｍｇ／ｍｌで、水中１％ＣＭＣ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－８０にビヒクルとして調剤した。血漿中の総硝酸エステル及び総ニトラ－トレベルは、提供されたプロトコルに従って、一酸化窒素アッセイキット（ａｂ６５３２７、ＡｂＣａｍ）を使用して定量化した。デ－タは平均値（±ＳＥＭ、３匹のマウス／グル－プ）であった。
【0174】
図１１は、化合物をマウスに投与してから１時間後の血漿中の硝酸エステルレベルを示す。各化合物について、ビヒクル処置マウスよりも有意に高い血漿硝酸エステルが検出された。デ－タは、経口投与後の各化合物の急速な生体内活性化を示している。
【0175】
上記の説明は、単に例示を目的として提供されたものであり、本開示の範囲を限定することを意図していないことに留意されたい。当業者であれば、本開示の教示に基づいて、複数の変形及び修正を行うことができる。しかしながら、それらの変形及び修正は、本開示の範囲から逸脱するものではない。
【0176】
このように基本的な概念を説明したが、この詳細な開示を読んだ後、当業者には、前述の詳細な開示が単なる例として提示することを意図しており、限定するものではないことが明らかになるであろう。本明細書では明示的に述べていないが、様々な変更、改良、及び修正が可能であり、当業者に意図されている。これらの変更、改良、及び修正は、本開示によって示唆されることを意図しており、本開示の例示的な実施形態の精神及び範囲内にある。
【0177】
さらに、本開示の実施形態を説明するために特定の用語が使用されている。例えば、「１つの実施形態」、「一実施形態」及び「幾つかの実施形態」という用語は、その実施形態に関連して説明される特定の特徴、構造、又は特性が、本開示の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。従って、本明細書の様々な部分における「一実施形態」又は「１つの実施形態」又は「代替の実施形態」への２つ以上の言及は、必ずしもすべてが同じ実施形態を指しているとは限らないことが強調され、理解されるべきである。さらに、特定の特徴、構造、又は特性は、本開示の１つ又は複数の実施形態において適切に組み合わせられ得る。
【0178】
さらに、処理要素若しくはシ－ケンスの列挙された順序、又は、数字、文字、若しくはその他の指定の使用は、特許請求の範囲で指定されている場合を除き、請求されたプロセス及び方法を任意の順序に限定することを意図していない。上記の開示は、開示の様々な有用な実施形態であると現在考えられている様々な例を通して論じているが、そのような詳細は単にその目的のためのものであり、添付の特許請求の範囲は開示された実施形態に限定されず、逆に、開示された実施形態の精神及び範囲内にある変更及び同等の構成をカバ－することを意図している。例えば、上述の様々なコンポ－ネントの実装は、ハ－ドウェアデバイスで具現化することができるが、ソフトウェア－のみのソリュ－ション、例えば、既存のサ－バ－又はモバイルデバイスへのインスト－ルとしても実装することができる。
【0179】
同様に、本開示の実施形態の前述の説明において、様々な特徴が、様々な実施形態１つ又は複数の理解を助ける開示を効率化するために、単一の実施形態、図、又はその説明にグル－プ化されることがあることが理解されるべきである。ただし、この開示の方法は、特許請求された主題が各請求項で明示的に列挙されているよりも多くの特徴を必要とするという意図を反映していると解釈されるべきではない。むしろ、特許請求の主題は、単一の前述の開示された実施形態のすべての特徴より少ない特徴にある。
【図1A】
【図1B】
【図1C】
【図1D】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
