特許7447013１，２－ナフトキノン誘導体化合物を含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-03-01
(45)【発行日】2024-03-11
(54)【発明の名称】１，２－ナフトキノン誘導体化合物を含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/4184 20060101AFI20240304BHJP
A61K 31/4188 20060101ALI20240304BHJP
A61K 31/437 20060101ALI20240304BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20240304BHJP
A61K 31/496 20060101ALI20240304BHJP
A61K 31/5377 20060101ALI20240304BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240304BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20240304BHJP
【ＦＩ】
A61K31/4184
A61K31/4188
A61K31/437
A61K31/4439
A61K31/496
A61K31/5377
A61P35/00
A61P35/02
【請求項の数】
8
(21)【出願番号】P 2020555342
(86)(22)【出願日】2019-04-04
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2021-09-02
(86)【国際出願番号】 KR2019004002
(87)【国際公開番号】W WO2019198977
(87)【国際公開日】2019-10-17
【審査請求日】2022-03-04
(31)【優先権主張番号】10-2018-0040913
(32)【優先日】2018-04-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2018-0040884
(32)【優先日】2018-04-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2018-0040895
(32)【優先日】2018-04-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(73)【特許権者】
【識別番号】515088902
【氏名又は名称】ユンジン ファーム．カンパニー、リミテッド
【住所又は居所原語表記】１３，Ｏｌｙｍｐｉｃ－ｒｏ ３５ｄａ－ｇｉｌ，Ｓｏｎｇｐａ－ｇｕ，Ｓｅｏｕｌ ０５５１０ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
(74)【代理人】
【識別番号】100077012
【弁理士】
【氏名又は名称】岩谷 龍
(72)【発明者】
【氏名】クォン，キリャン
(72)【発明者】
【氏名】ホ，ジュンヨン
(72)【発明者】
【氏名】ション，ミンホ
(72)【発明者】
【氏名】ハン，ジョンス
(72)【発明者】
【氏名】ユ，ミンジョン
【審査官】春日 淳一
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１７－５０２９７６（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１６－５１６７７５（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１８／００５２７９（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ，Ａ６１Ｐ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記化学式１で表される１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物：［化学式１］
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＮＯ２、－ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＣＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＮＲ’１（Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２）、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’１、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＣＮ、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’１、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＳＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＣＳＮＲ’１Ｒ’２、またはＲ１およびＲ２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造、またはＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、この時、前記Ｒ’１およびＲ’２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、またはＣ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”１Ｒ” ２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ”１Ｒ”２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０ヘテロアリールまたはＮＲ”１Ｒ”２であり、前記Ｒ”１およびＲ”２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキル、またはＲ”１およびＲ”２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造をなすことができ；
Ｒ３は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、または－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３ であり、Ｒ’３は水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、または－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３であり、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、または－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）であり、Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、または－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）であり、Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルである、
Ｑ１とＱ２は、それぞれ独立して、ＣＯ、またはＣＯＲ６であり、
Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２がＣＯである時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし、
Ｑ１がＣＯＲ６であり、Ｑ２がＣＯＲ６である時、Ｑ１とＱ２は二重結合をなし、
前記Ｒ６は、水素、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’７、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’７、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ３Ｒ’７、－ＰＯ３Ｒ’７、－ＣＳＮＲ’７Ｒ’８、前記Ｒ’７およびＲ’８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”４Ｒ”５）ｍ’－Ｃ４－Ｃ１０アリールであり、前記Ｒ”４およびＲ”５は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルであり；
Ｑ１が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造であり、Ｑ２がＣＯであるか、または、Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造である時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし；
ｍとｍ’は、それぞれ独立して、１乃至４の整数であり；
ヘテロ原子はＮ、ＯおよびＳから選択された一つ以上であり；
Ｘ１乃至Ｘ４は、それぞれ独立して、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ５はＮであり、Ｘ６はＣであり、Ｘ７はＮであり；
前記化学式で
前記置換は、ヒドロキシ、ハロゲン元素、Ｃ１－Ｃ１０アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケニル、Ｃ２－Ｃ１０アルキニル、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、およびＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールからなる群より選択された１種以上の置換基で置換されることを意味する。
【請求項2】
下記で表された化合物のうちの一つであることを特徴とする、１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項3】
前記化合物は、下記で表された化合物９８であることを特徴とする、請求項２に記載の１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項4】
前記血液癌は、急性白血病、慢性白血病および薬剤耐性慢性白血病または難治性急性白血病からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載の固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項5】
前記慢性白血病は、慢性骨髄性白血病または慢性リンパ性白血病のうちから選択されることを特徴とする、請求項４に記載の固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項6】
前記急性白血病は、急性骨髄性白血病または急性リンパ性白血病のうちから選択されることを特徴とする、請求項４に記載の固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項7】
前記固形癌は、肺癌、子宮癌、肝癌および乳癌からなる群より選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載の固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【請求項8】
前記薬学組成物は、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾル、外用剤、座剤および滅菌注射溶液からなる群より選択される１種の剤形を有することを特徴とする、請求項１または２に記載の固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願（ら）との相互引用
本出願は、２０１８年４月９日付韓国特許出願第１０－２０１８－００４０９１３号、第１０－２０１８－００４０８８４号および第１０－２０１８－００４０８９５号に基づいた優先権の利益を主張し、当該韓国特許出願の文献に開示された全ての内容は本明細書の一部として組み含まれる。
本出願は、２０１８年４月９日付韓国特許出願第１０－２０１８－００４０９１３号、第１０－２０１８－００４０８８４号および第１０－２０１８－００４０８９５号に基づいた優先権の利益を主張し、当該韓国特許出願の文献に開示された全ての内容は本明細書の一部として組み含まれる。
【0002】
本発明は、１，２－ナフトキノン誘導体化合物を含む急性白血病、慢性白血病のような血液癌、および固形癌のような癌の予防または治療用薬学組成物に関する。
【背景技術】
【0003】
身体を構成する最も小さい単位である細胞（ｃｅｌｌ）は、正常条件の場合、細胞自体の調節機能により分裂および成長し、寿命が尽きたり損傷すれば自ら死滅して全般的な数の均衡を維持する。しかし、多様な原因により細胞自体の調節機能に問題が生じると、正常に死滅しなければならない非正常細胞が過多増殖するようになり、場合によって周囲組織および臓器に侵入して種塊（塊り）を形成し、既存の構造を破壊したり変形させるが、このような状態を癌（ｃａｎｃｅｒ）と定義することができる。
【0004】
癌は人類が解決しなければならない難病の一つであって、全世界的に癌を治癒するための開発に莫大な資本が投資されており、医学技術も革新的に発展しているが、それにも拘らず、癌による死亡は持続的に増加する傾向にある。韓国統計庁の発表によれば、韓国の癌患者の場合には２０１２年基準に約２２万余名の新規癌患者が発生したと報告しており、このような数値は２００２年に発生した新規癌患者数に比べて約２倍さらに増加したものであって、毎年急速に癌患者数が増加していることが分かる。しかし、２２万余名の癌患者のうち、７万余名が癌により死亡しているため、癌治療に対する治療剤の開発が至急な実情である。
【0005】
現在、癌患者の治療法は、外科的手術、放射線治療、化学療法（４０余種の強い細胞毒性を示す抗癌物質投与）に依存している状態であるが、これら治療法も大部分は早期癌患者や特定癌のみに限定しているため、癌による死亡は依然として増加している傾向にある。
【0006】
一方、白血病は、細胞の分化程度、つまり、悪化速度により急性と慢性に分かれ、細胞の起源により骨髄性とリンパ球性に分かれて、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性リンパ球性白血病（ａｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性リンパ球性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）形態に分類する。
【0007】
急性白血病（ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ）は、骨髄異常で非正常な白血球前駆細胞または血小板前駆細胞を過多に生産する疾病であって、骨髄系の細胞が増殖すれば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ、ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、リンパ系の細胞が増殖すれば急性リンパ性白血病（ＡＬＬ、ａｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）という。異常白血球が増加して造血する場所を占拠するため、正常白血球、赤血球、血小板などが形成できなくなって感染症や出血などが簡単に起こり、治療しない場合には数ヶ月以内に死亡するようになる。最近、化学療法の発達により乳児の急性白血病生存率は顕著に向上したが、成人の場合には依然として生存率が低い。
【0008】
急性骨髄性白血病は、非リンパ球性または骨髄で作られる骨髄性白血球の幹細胞で発生した悪性腫瘍であって、造血幹細胞に遺伝子変異が生じて骨髄系前駆細胞が多くの段階で分化を中止し、未成熟な骨髄毛球が単細胞群（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ）に増殖する造血期腫瘍である。貧血、発熱、感染性増加、出血傾向などの骨髄機能障害症状を示し、脾臓肥大、リンパ節腫脹など腫瘍細胞の長期浸潤症状が現れる場合もある。
【0009】
急性リンパ性白血病は、血液および骨髄内リンパ球系統細胞で発生する血液癌であって、リンパ球系統細胞の増殖、分化、成熟および破壊過程に関与する多様な遺伝子の変異により発病すると知られている。遺伝子変異の原因は、現在明確に知られていないが、他の癌のように遺伝的素因、ウイルス、多数の発癌物質、電離放射線などが関与すると推定している。急性リンパ球性白血病で観察される症状は、他の白血病と類似に非正常白血病細胞により正常血液細胞が形成される過程が障害を受けるか、または非正常白血病細胞がリンパ節、脾臓、肝臓、脳、脊髄などの臓器に侵犯して症状が発生する。
【0010】
一方、慢性骨髄性白血病は、ヒトの９番染色体と２２番染色体の一定部門が切断された後、二つの切れが互いに位置を変えて移動した現像である転位（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ）により生じたフィラデルフィア染色体（ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ）により発病するものであって、フィラデルフィア染色体を有する造血幹細胞のクローンが非正常的に拡張しながら骨髄内に非正常な細胞が過度に増殖して生じる疾患である。成人白血病全体の約２５％を占め、３０～５０歳および老年層でよく発生するため、成人型白血病ともいうが、全ての年齢層で発病可能であり、小児や青少年でも発生する。
【0011】
フィラデルフィア染色体は、染色体転位により９番染色体のＡＢＬ遺伝子と２２番染色体のＢＣＲ遺伝子の融合が起こるようになり、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子により非正常なチロシンキナーゼ（ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）の活性を有するＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白質を生産するようになる。非正常なチロシンキナーゼ酵素の活性化は悪性細胞の非正常な増幅をもたらすようになって血液癌が発生する。
【0012】
グリーベック（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）、ｉｍａｔｉｎｉｂ）は、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白質にあるアデノシン三リン酸結合部位（ＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）－ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ）に競争的に結合して蛋白質の酵素活性を阻害する薬剤である。しかし、一部の患者でＢＣＲ－ＡＢＬ遺伝子変異により、グリーベックに耐性が生じるようになり、病気が悪化する。グリーベックの限界点と抵抗性を有する患者群が発生することに伴い、第２世代（ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ）、第３世代（ｄａｓａｔｉｎｉｂ）チロシンキナーゼ抑制剤の開発が行われているが、この薬物も完全な治療はなさらず、急性期患者での治療成功率が３０％程度増加した水準という短所がある。そのため、慢性骨髄性白血病治療のための研究が持続的に必要であるのが実情である。
【0013】
慢性リンパ球性白血病は、白血球の一種であるリンパ球が成長しながら腫瘍に変わり、それに基づいて骨髄内に過度に増殖して正常な血液細胞の生産を妨害する疾患である。正常白血球が減ると、感染が発生する危険が高くなり、赤血球が減少しながら貧血が生じ、止血作用をする血小板が減るため、止血にかかる時間も長くなる。慢性リンパ球性白血病は韓国では非常に稀であるが、米国で最もありふれて発生し、大低５０歳以後の男性に多く現れる。慢性リンパ球性白血病の発病原因はまだ明らかになっておらず、環境、職業だけでなく、ウイルスや放射線照射とも関連性がない。しかし、慢性リンパ球性白血病がある直系家族の場合、一般人に比べて慢性リンパ球性白血病や他のリンパ増殖疾患が発生する可能性が３倍以上増加し、家族歴がある場合にはそうではない場合に比べて約１０年ほど若い年齢で発生する。
【0014】
白血病を治療する標準方法として、化学療法、造血幹細胞移植、放射線療法などが含まれ、化学療法の場合、通常的に２またはそれ以上の抗癌剤を併用する方法が含まれる。理想的な化学療法は、抗白血病剤が正常造血を抑制せず、また他の有害な副作用を起こさない、かつ白血病細胞だけで選択的な効果を示さなければならない。しかし、大部分の抗白血病剤は、理想的な状態にある程度近接して白血病細胞を殺すことはできるが、正常造血も抑制し、他の有害な副作用も起こすため、白血病治療に限界がある。また、薬剤耐性がある白血病細胞では抗腫瘍効果が弱く、副作用問題が発生し得るため、十分な化学療法を実施できない場合もある。
【0015】
造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ、ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）とは、過去の骨髄を活用した骨髓移植（ＢＭＴ、ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）の領域を越えて、現在は末梢血液（ＰＢ、ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ）と臍帯血（ＣＢ、ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ）内に存在する全ての形態の造血幹細胞を移植源として活用して移植することを意味する。造血幹細胞移植は、血液腫瘍患者から抗癌化学療法および放射線療法を利用して癌細胞と患者自身の造血幹細胞を除去した後、新たな造血幹細胞を移植する治療法として、初期の骨髄移植の局限された概念から抜け出して白血病に代表される白血病、再生不良性貧血、悪性リンパ腫はもちろん、不応性自己免疫疾患、固形癌など多様な領域で効果的であり、希望的な治療手段として位置付けられている。しかし、現在までは高容量化学療法治療と同種移植後に発生する移植片対宿主病などのため、合併症発生が高い治療方法である。
【0016】
したがって、効果的な癌の治療のためには、放射線療法、手術療法、化学療法などの多様な方法を利用してそれぞれの癌患者に適した治療計画を樹立して適用することが重要である。また、多様な形態の癌、例えば固形癌および血液癌の治療のための新たな療法の薬物を開発することは当業界に与えられた重要な課題である。
【0017】
一方、１，２－ナフトキノン誘導体化合物と関連した先行文献として、韓国公開特許第１０－２０１５－００８０４２３号、第１０－２０１５－００８０４２５号および第１０－２０１５－００８０４２６号には、１，２－ナフトキノン誘導体およびその製造方法が開示されているが、代謝性疾患の治療用組成物に関するものであり、本発明の構造を有する１，２－ナフトキノン誘導体化合物が固形癌と急性白血病および慢性白血病のような血液癌腫に治療効果があることに対しては開示されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0018】
【文献】韓国公開特許第１０－２０１５－００８０４２３号（１，２－ナフトキノン誘導体およびその製造方法、２０１５年０７月０９日公開）
【文献】韓国公開特許第１０－２０１５－００８０４２５号（１，２－ナフトキノン誘導体およびその製造方法、２０１５年０７月０９日公開）
【文献】韓国公開特許第１０－２０１５－００８０４２６号（１，２－ナフトキノン誘導体およびその製造方法、２０１５年０７月０９日公開）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0019】
本発明の目的は、１，２－ナフトキノン誘導体化合物を含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0020】
本発明は、下記化学式１で表される１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物に関するものである。好ましい様態において、前記血液癌は、急性白血病、慢性白血病、薬剤耐性慢性白血病または難治性急性白血病である。
【0021】
本発明は、下記化学式１で表される１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌の予防または治療用薬学組成物に関するものである。
［化学式１］
前記化学式１で、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＮＯ２、－ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＣＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＮＲ’１（Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２）、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’１、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＣＮ、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’１、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＳＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＣＳＮＲ’１Ｒ’２、またはＲ１およびＲ２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造、またはＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、この時、前記Ｒ’１およびＲ’２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、またはＣ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”１Ｒ” ２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ”１Ｒ”２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０ヘテロアリールまたはＮＲ”１Ｒ”２であり、前記Ｒ”１およびＲ”２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキル、またはＲ”１およびＲ”２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造をなすことができ；
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（ＳＯ（Ｏ）Ｒ’４）、－ＣＳＮＲ’３Ｒ’４、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａ、または化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、前記Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、または、Ｒ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｑ１とＱ２は、それぞれ独立して、ＣＯ、ＣＯＲ６、ＣＯＲ７であり、
Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２がＣＯである時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし、
Ｑ１がＣＯＲ６であり、Ｑ２がＣＯＲ７である時、Ｑ１とＱ２は二重結合をなし、
前記Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’７、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’７、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ３Ｒ’７、－ＰＯ３Ｒ’７、－ＣＳＮＲ’７Ｒ’８、またはＲ６およびＲ７は相互結合によりＣ３－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ３－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’７およびＲ’８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”４Ｒ”５）ｍ’－Ｃ４－Ｃ１０アリールであり、前記Ｒ”４およびＲ”５は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルであり；
Ｑ１が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造であり、Ｑ２がＣＯであるか、または、Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造である時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし；
ｍとｍ’は、それぞれ独立して、１乃至４の整数であり；
ヘテロ原子はＮ、ＯおよびＳから選択された一つ以上であり；
Ｘ１乃至Ｘ４は、それぞれ独立して、ＣＨまたはＮ（Ｒ”６）であり、Ｘ５はＮであり、Ｘ６はＣであり、Ｘ７はＮであり、この時、Ｒ”６は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり；
前記化学式で
は単一結合または二重結合を意味し、
は単一結合または結合が形成されなくてもよいことを意味し、
はこれを含む環状構造が芳香族（ａｒｏｍａｔｉｃ）であってもよく、芳香族ではなくてもよいことを意味し；
前記置換は、ヒドロキシ、ハロゲン元素、Ｃ１－Ｃ１０アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケニル、Ｃ２－Ｃ１０アルキニル、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、およびＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールからなる群より選択された１種以上の置換基で置換されることを意味する。
［化学式１］
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＮＯ２、－ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＣＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＮＲ’１（Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２）、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’１、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＣＮ、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’１、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’１Ｒ’２、－ＮＲ’１（ＳＯ（Ｏ）Ｒ’２）、－ＣＳＮＲ’１Ｒ’２、またはＲ１およびＲ２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造、またはＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、この時、前記Ｒ’１およびＲ’２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、またはＣ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”１Ｒ” ２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ”１Ｒ”２）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０ヘテロアリールまたはＮＲ”１Ｒ”２であり、前記Ｒ”１およびＲ”２は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキル、またはＲ”１およびＲ”２は相互結合によりＣ４－Ｃ１０アリールの環状構造をなすことができ；
Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（ＳＯ（Ｏ）Ｒ’４）、－ＣＳＮＲ’３Ｒ’４、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａ、または化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、前記Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、または、Ｒ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｑ１とＱ２は、それぞれ独立して、ＣＯ、ＣＯＲ６、ＣＯＲ７であり、
Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２がＣＯである時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし、
Ｑ１がＣＯＲ６であり、Ｑ２がＣＯＲ７である時、Ｑ１とＱ２は二重結合をなし、
前記Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’７、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ（Ｏ）Ｒ’７、－ＳＯ（Ｏ）ＮＲ’７Ｒ’８、－ＳＯ３Ｒ’７、－ＰＯ３Ｒ’７、－ＣＳＮＲ’７Ｒ’８、またはＲ６およびＲ７は相互結合によりＣ３－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ３－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’７およびＲ’８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ”４Ｒ”５）ｍ’－Ｃ４－Ｃ１０アリールであり、前記Ｒ”４およびＲ”５は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ３アルキルであり；
Ｑ１が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造であり、Ｑ２がＣＯであるか、または、Ｑ１がＣＯであり、Ｑ２が置換または非置換のＣ３－Ｃ５ヘテロシクロアルキルの環状構造である時、Ｑ１とＱ２は単一結合をなし；
ｍとｍ’は、それぞれ独立して、１乃至４の整数であり；
ヘテロ原子はＮ、ＯおよびＳから選択された一つ以上であり；
Ｘ１乃至Ｘ４は、それぞれ独立して、ＣＨまたはＮ（Ｒ”６）であり、Ｘ５はＮであり、Ｘ６はＣであり、Ｘ７はＮであり、この時、Ｒ”６は水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり；
前記化学式で
前記置換は、ヒドロキシ、ハロゲン元素、Ｃ１－Ｃ１０アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケニル、Ｃ２－Ｃ１０アルキニル、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、およびＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールからなる群より選択された１種以上の置換基で置換されることを意味する。
【0022】
前記用語「アルキル」は、単一結合の直鎖または分枝鎖の炭化水素基をいい、例えばＣ１－１０アルキル、具体的にＣ１－６アルキル、より具体的にメチル、エチル、プロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、１－メチルプロピルなどが挙げられる。
【0023】
前記用語「アルコキシ」は、単一結合の直鎖または分枝鎖の飽和炭化水素が結合された酸素基をいい、例えばＣ１－１０アルコキシ、具体的にＣ１－６アルコキシ、より具体的にメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、１－メチルプロポキシなどが挙げられる。
【0024】
前記用語「シクロアルキル」は、環状の単一結合の飽和炭化水素基をいい、例えば炭素数によりＣ３－１０シクロアルキル、具体的にＣ３－Ｃ８シクロアルキル、より具体的にはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどがある。
【0025】
前記用語「ヘテロシクロアルキル」は、環構成原子として炭素原子以外にＮ、Ｏ、またはＳのようなヘテロ原子を一つ以上含む環状の単一結合の飽和炭化水素基をいい、環に含まれているヘテロ原子の数および種類、および炭素数により例えば、環に含まれているヘテロ原子の数および種類、および炭素数によりＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１種以上、具体的には１種乃至３種のヘテロ原子を含むＣ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、またはＣ２－Ｃ５ヘテロシクロアルキル、さらに具体的にはアジリジン、ピロリジン、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルなどがある。
【0026】
前記用語「アリール（ａｒｙｌ）」は、共有パイ電磁界を有している少なくとも一つの環を有している芳香族置換体を意味し、モノシクリックまたは融合環ポリシクリック（つまり、炭素原子の隣接した対を共有する環）グループを含む。例えば、このようなアリールは、環に含まれている炭素数により、具体的にＣ４－Ｃ１０アリール、より具体的にはＣ６－Ｃ１０アリール、さらに具体的にはフェニル、ナフチルなどがある。
【0027】
前記用語「ヘテロアリール」は、環構成原子として炭素原子以外にＮ、Ｏ、またはＳのようなヘテロ原子を一つ以上含む芳香族環化合物をいい、例えば、環に含まれているヘテロ原子の数および種類、および炭素数によりＮ、ＯおよびＳからなる群より選択される１種以上、具体的には１種乃至３種のヘテロ原子を含むＣ１－Ｃ１０ヘテロアリール、より具体的にはＣ１－Ｃ８ヘテロアリール、Ｃ２－Ｃ１０ヘテロアリール、またはＣ２－Ｃ５ヘテロアリールがある。
【0028】
前記アリールまたはヘテロアリールの例としては、フェニル、ナフチル、フラニル、ピラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾール、ピリジル、ピラジニル、ピリミジル、ピリダジニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、トリアジルなどが挙げられるが、これらだけに限定されるのではない。
【0029】
前記用語「アリールオキシ」は、芳香族置換体をなすいずれか一つの炭素と酸素と結合されたグループを意味し、例えば、フェニル基に酸素が結合されている場合、－Ｏ－Ｃ６Ｈ５、－Ｃ６Ｈ４－Ｏ－で表され得る。
【0030】
本明細書中、「置換基」は、ハロ、ヒドロキシ、シアノ基、ニトロ基、非置換または置換のアルキル基、非置換または置換のアルケニル基、非置換または置換のアルキニル基、非置換または置換のアルコキシ基、非置換または置換のアルコキシカルボニル基、非置換または置換のシクロアルキル基、非置換または置換のヘテロシクロアルキル基、非置換または置換のアリール基、非置換および置換されたヘテロアリール基からなる群より選択される１種以上、好ましくは１種乃至３種であってもよい。具体的に前記置換基は、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１－Ｃ１０アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケニル、Ｃ２－Ｃ１０アルキニル、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１－Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、およびＣ２－Ｃ１０ヘテロアリールからなる群より選択された１種以上であってもよい。
【0031】
また、本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物を含むプロドラッグは、前記化学式１でＱ１がＣＯであり、Ｑ２がＣＯである場合を除いた化合物の一種類とみる。前記プロドラッグに含まれる例として、下記化合物などがこれに該当する。
前記化学式１において、好ましくは、
Ｒ３は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａ、または化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、Ｒ’３は水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３であり、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａであり、この時、Ｒ’３および’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルである化学式１で表される１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物であってもよい。
Ｒ３は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａ、または化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、Ｒ’３は水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３であり、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ４は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－Ａであり、この時、Ｒ’３およびＲ’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ２－Ｃ１０アルケン、Ｃ１－Ｃ６アルコキシ、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ８ヘテロアリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＮＲ’３Ｒ’４、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ３－Ｃ８ヘテロシクロアルキル、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－ＯＲ’３、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ（Ｏ）ＣＯＲ’３、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ’３、－ＣＯＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３Ｒ’４、－ＮＲ’３（Ｃ（Ｏ）Ｒ’４）、化学式（１）の化合物が「Ａ」である時、－ＣＨ２Ａであり、この時、Ｒ’３および’４は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１－Ｃ６アルキル、Ｃ３－Ｃ８シクロアルキル、Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリール、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ４－Ｃ１０アリールオキシ、－（ＣＲ’５Ｒ’６）ｍ－Ｃ１－Ｃ１０ヘテロアリール、－ＣＯ（Ｏ）Ｒ”３、またはＲ’３およびＲ’４は相互結合によりＣ２－Ｃ１０ヘテロシクロアルキルの環状構造、またはＣ１－Ｃ１０ヘテロアリールの環状構造をなすことができ、前記Ｒ’５およびＲ’６は、それぞれ独立して、水素またはＣ１－Ｃ３アルキルであり、前記Ｒ”３はＣ１－Ｃ６アルキルである化学式１で表される１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌または血液癌の予防または治療用薬学組成物であってもよい。
【0032】
また、前記化学式１の化合物をより具体的に例示すれば、下記のとおりである。
【0033】
また、前記化合物は、下記で表された化合物のうちの一つであることを特徴とする１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌または血液癌予防または治療用薬学組成物に関するものである。
【0034】
本発明において、前記固形癌は、胃癌、肝癌、結腸癌、乳癌、肺癌、非小細胞性肺癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頚部癌、子宮癌、卵巣癌、大腸癌、小腸癌、直膓癌、前立腺癌、食道癌、リンパ線癌、膀胱癌、胆嚢癌、腎臓癌および脳腫瘍などからなる群から選択される１種以上を含むことができ、好ましくは、前記癌は、肺癌、子宮癌、肝癌および乳癌からなる群より選択される１種以上の癌であってもよい。
【0035】
前記血液癌のうち急性白血病は、急性骨髄性白血病および急性リンパ性白血病からなる群より選択される１種以上の癌であってもよい。
【0036】
前記血液癌のうち慢性白血病は、慢性骨髄性白血病および慢性リンパ性白血病からなる群より選択される１種以上の癌であってもよい。
【0037】
また前記血液癌は、既存の抗癌剤に対する抵抗性を有する薬剤耐性または難治性白血病であってもよい。具体的に、このような薬剤耐性または難治性白血病は、急性白血病に対する治療剤であるイダルビシンまたはシタラビンに抵抗性を有する薬剤耐性難治性急性白血病であるか、または慢性白血病に対する治療剤であるイマチニブに抵抗性を有する薬剤耐性慢性白血病であってもよい。
【0038】
本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物の薬学的に許容可能な塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩、ヨード化水素酸塩、硝酸塩、ピロ硫酸塩、メタリン酸塩などの無機酸により形成された付加塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、安息香酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、グルタル酸塩、スルホン酸塩などの有機酸により形成された付加塩またはリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などの金属塩が挙げられるが、これに制限されるのではない。
【0039】
本発明による薬学組成物は、一般に使用される薬学的に許容可能な担体と共に適した形態に剤形化され得る。「薬学的に許容可能」とは、生理学的に許容され、ヒトに投与される時、通常的に胃腸障害、めまいなどのようなアレルギー反応またはこれと類似の反応を起こさない組成物をいう。また、前記組成物は、それぞれ通常の方法により散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口型剤型、外用剤、坐剤、および滅菌注射溶液の形態に剤型化して使用され得る。
【0040】
前記組成物に含まれ得る担体、賦形剤、および希釈剤としては、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アラビアゴム、アルギネート、ゼラチン、カルシウムホスフェート、カルシウムシリケート、セルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、ポリビニールピロリドン、水、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱物油を含むことができるが、これに限定されるのではない。製剤化する場合には普通使用する充填剤、安定化剤、結合剤、崩解剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を使用して調剤される。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などが含まれて、このような固形製剤は本発明の化合物に少なくとも１つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、微結晶セルロース、スクロースまたはラクトース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロースなどを混ぜて調剤される。また、単純な賦形剤の以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクのような滑沢剤も使用される。経口のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、よく使用される単純希釈剤である水、流動パラフィン以外に多様な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれてもよい。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、エチルオレートのような注射可能なエステルなどが使用され得る。坐剤の基剤としては、ウィテプソル（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴール、ツイーン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロール、ゼラチンなどが使用され得る。非経口投与用剤型に製剤化するために前記化学式１の１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容される塩を滅菌され／されるか、または防腐剤、安定化剤、水和剤または乳化促進剤、浸透圧調節のための塩および／または緩衝剤などの補助剤、およびその他の治療的に有用な物質と共に水に混合して溶液または懸濁液に製造し、これをアンプルまたはバイアル単位投与型に製造することができる。
【0041】
本発明に開示された化学式１の化合物を有効性分として含む薬学組成物は、固形癌または血液癌の予防または治療のためにネズミ、家畜、ヒトなどの哺乳動物に多様な経路で投与され得る。投与の全ての方式は予想され得るが、例えば、経口、直腸または静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜または脳血管内注射により投与され得る。投与量は、治療を受ける対象の年齢、性別、体重、治療する特定疾患または病理状態、疾患または病理状態の深刻度、投与時間、投与経路、薬物の吸収、分布および排泄率、使用される他の薬物の種類および処方者の判断などにより変わり得る。このような因子に基づいた投与量の決定は、当業者の水準内にあり、一般に投与量は０．０１ｍｇ／ｋｇ／日乃至ほぼ２０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。より好ましい投与量は、１ｍｇ／ｋｇ／日乃至５００ｍｇ／ｋｇ／日である。投与は、一日に１回投与することもでき、数回に分けて投与することができる。前記投与量は如何なる面でも本発明の範囲を限定するのではない。
【発明の効果】
【0042】
本発明は、１，２－ナフトキノン誘導体化合物またはその薬学的に許容可能な塩を有効性分として含む固形癌、または急性白血病または慢性白血病のような血液癌の予防または治療用薬学組成物に関し、前記１，２－ナフトキノン誘導体化合物を固形癌、急性白血病および慢性白血病、そして薬剤耐性／難治性白血病細胞株に処理する場合、細胞を死滅する効果に優れて前記癌腫に対する予防または治療用薬学組成物に有用に使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【0043】
【図5】Ｋ５６２細胞に本発明の化合物１を濃度別に処理して、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現量をウェスタンブロットで確認した結果である。
【図6】Ａ５４９（肺癌種）およびＨｅｌａ（子宮癌種）に本発明の化合物１、１０および７２を処理して、Ａ５４９（肺癌種）およびＨｅｌａ（子宮癌種）細胞に対する細胞生存率を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0044】
以下、本発明の好ましい実施例を詳細に説明する。しかし、本発明はここで説明される実施例に限定されず、他の形態に具体化することもできる。むしろ、ここで紹介される内容が徹底かつ完全になり、当業者に本発明の思想を十分に伝達するために提供するものである。
【0045】
＜実施例１．１，２－ナフトキノン誘導体化合物の合成＞
急性白血病の治療効果を確認するために使用された本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物は、韓国特許出願第１０－２０１４－０１９３１８４号、第１０－２０１４－０１９３３０６号、第１０－２０１４－０１９３３７０号、第１０－２０１５－００４３０５０号および第１０－２０１５－００４３０６８号に開示された化合物の合成方法を参考にして化合物１乃至９８および１７５乃至１９０を合成した。また、前記過程を通じて製造した化合物のうち、化合物９８に対する物理化学的特性は下記表１のとおりである。
急性白血病の治療効果を確認するために使用された本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物は、韓国特許出願第１０－２０１４－０１９３１８４号、第１０－２０１４－０１９３３０６号、第１０－２０１４－０１９３３７０号、第１０－２０１５－００４３０５０号および第１０－２０１５－００４３０６８号に開示された化合物の合成方法を参考にして化合物１乃至９８および１７５乃至１９０を合成した。また、前記過程を通じて製造した化合物のうち、化合物９８に対する物理化学的特性は下記表１のとおりである。
【表1】
【0046】
＜実施例２．急性白血病細胞株の製造、その細胞生存率、細胞死滅または細胞壊死の測定／確認＞
実施例２－１．急性白血病細胞株の製造
急性白血病は、原因因子が非常に多様に明らかになっており、構築された細胞株も多様であり、特定のタイプの急性白血病の治療剤でなく広範囲な治療剤としての使用の可能性を確認するために、本発明では急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の５９歳男性から得た細胞株であるＫＧ１細胞で幹細胞の表現型を有する細胞だけを選んで構築したＫＧ１α細胞を利用した。急性前骨髄球性白血病（ａｃｕｔｅ ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の３６歳女性から得た細胞株であるＨＬ６０細胞および組織球性リンパ腫（ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｍａ）の３７歳男性から得た細胞株であるＵ９３７細胞を使用した。
実施例２－１．急性白血病細胞株の製造
急性白血病は、原因因子が非常に多様に明らかになっており、構築された細胞株も多様であり、特定のタイプの急性白血病の治療剤でなく広範囲な治療剤としての使用の可能性を確認するために、本発明では急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の５９歳男性から得た細胞株であるＫＧ１細胞で幹細胞の表現型を有する細胞だけを選んで構築したＫＧ１α細胞を利用した。急性前骨髄球性白血病（ａｃｕｔｅ ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の３６歳女性から得た細胞株であるＨＬ６０細胞および組織球性リンパ腫（ｈｉｓｔｉｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍｐｈｏｍａ）の３７歳男性から得た細胞株であるＵ９３７細胞を使用した。
【0047】
ＫＧ１αおよびＨＬ６０細胞は、２０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）が含まれているＩＭＤＭ培地で培養され、Ｕ９３７細胞は１０％ＦＢＳが含まれているＲＰＭＩ１６４０培地で培養された。全ての細胞は３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで培養し、２日または３日に一回ずつ継代培養して実験に使用した。
【0048】
実施例２－２．ＫＧ１α細胞での細胞生存率の測定－ＷＳＴ ａｓｓａｙ．
ＫＧ１α細胞は急性骨髄性白血病治療剤であるイダルビシンとシタラビンに抵抗性を有する細胞であって、難治性急性白血病（ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ＡＭＬ）細胞である。前記実施例２－１で培養したＫＧ１α細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、下記表２のように化合物１、１０および７２をそれぞれ０．１～３μＭ濃度に処理した後、２４時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯを使用した。２４時間後、各細胞にＷＳＴ溶液を１０μｌずつ処理し、２時間反応した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定して下記表４のようにＫＧ１α細胞の細胞生存率を確認した。
ＫＧ１α細胞は急性骨髄性白血病治療剤であるイダルビシンとシタラビンに抵抗性を有する細胞であって、難治性急性白血病（ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ＡＭＬ）細胞である。前記実施例２－１で培養したＫＧ１α細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、下記表２のように化合物１、１０および７２をそれぞれ０．１～３μＭ濃度に処理した後、２４時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯを使用した。２４時間後、各細胞にＷＳＴ溶液を１０μｌずつ処理し、２時間反応した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定して下記表４のようにＫＧ１α細胞の細胞生存率を確認した。
【0049】
【表2】
【0050】
前記表２は、ＫＧ１α細胞において、対照群に比べて本発明の化合物１、１０および７２を処理する場合の細胞生存率を示したものであり、ＩＣ５０値が０．５～１μＭと示されて急性骨髄性細胞の死滅効果に優れていることを確認することができた。
【0051】
実施例２－３．ＨＬ６０細胞またはＵ９３７細胞での細胞生存率の測定
前記実施例２－１で培養したＨＬ６０細胞またはＵ９３７細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物１を０．１、０．５および１μＭ濃度にそれぞれ処理して２４時間反応させ、この時、対照群としてはＤＭＳＯおよび０．１または１μＭ濃度のデシタビン（ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）を使用した。２４時間後、各細胞にＷＳＴ－１溶液を１０μｌずつ処理し、２時間反応した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定して、ＨＬ６０細胞に対する細胞生存率は図１Ａに示し、Ｕ９３７細胞に対する細胞生存率結果は図１Ｂに示した。
前記実施例２－１で培養したＨＬ６０細胞またはＵ９３７細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物１を０．１、０．５および１μＭ濃度にそれぞれ処理して２４時間反応させ、この時、対照群としてはＤＭＳＯおよび０．１または１μＭ濃度のデシタビン（ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）を使用した。２４時間後、各細胞にＷＳＴ－１溶液を１０μｌずつ処理し、２時間反応した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定して、ＨＬ６０細胞に対する細胞生存率は図１Ａに示し、Ｕ９３７細胞に対する細胞生存率結果は図１Ｂに示した。
【0052】
図１の結果を参照すると、本発明の化合物１をＨＬ－６０細胞またはＵ９３７細胞に処理する場合、ＨＬ－６０細胞またはＵ９３７細胞において全て濃度依存的に細胞を死滅する効果があることを確認した。しかし、陽性対照群であるデシタビンをＨＬ－６０細胞またはＵ９３７細胞に処理する場合、ＨＬ６０細胞では濃度依存的に細胞を死滅したが、Ｕ９３７細胞では細胞死滅効果が顕著に低かった。したがって、本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物が、特定のタイプの急性白血病の治療剤でなく広範囲な急性白血病の治療用組成物として有用に使用可能であることを確認することができた。
【0053】
実施例２－４．急性白血病細胞で細胞死滅または細胞壊死の確認
細胞死は代表的に、細胞死滅（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）または細胞壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）が知られているため、本発明の化合物１により誘導される急性白血病細胞の死が細胞死滅であるか、または細胞壊死によるものであるか確認するために、ＦＡＣＳ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ）およびウェスタンブロット（ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）を実施した。
細胞死は代表的に、細胞死滅（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）または細胞壊死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）が知られているため、本発明の化合物１により誘導される急性白血病細胞の死が細胞死滅であるか、または細胞壊死によるものであるか確認するために、ＦＡＣＳ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ）およびウェスタンブロット（ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）を実施した。
【0054】
まず、ＦＡＣＳを実施するために、前記実施例１－２で培養したＫＧ１α細胞またはＨＬ６０細胞を６－ウェルプレートに１×１０７細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、化合物１を０、０．１、０．５、１および２μＭ濃度にそれぞれ処理して２４時間培養した後、細胞を回収して冷たいＰＢＳで洗浄した。１×１０６細胞だけを取ってＰＢＳで再浮遊した後、細胞死滅時に増加するＡｎｎｅｘｉｎ－Ｖ（緑色蛍光）と細胞壊死時に反応するＰｉ（ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅ、赤色蛍光）で染色し、ＦＡＣＳで２種類の指標の程度を数値化して、ＫＧ１α細胞に対するＦＡＣＳ結果は図２Ａに示し、ＨＬ６０細胞に対するＦＡＣＳ結果は図３Ａに示した。
【0055】
次に、ウェスタンブロットを実施するために、前記実施例２－１で培養したＫＧ１α細胞またはＨＬ６０細胞を６－ウェルプレートに１×１０７細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、化合物１を０、０．１、０．５、１および２μＭ濃度にそれぞれ処理して２４時間培養した後、細胞だけを回収した。前記過程で得られた細胞に蛋白質抽出バッファーを入れた後、３０分間アイスで反応させて細胞膜を破って遠心分離して上澄液だけを取った後、蛋白質を抽出した。抽出した蛋白質を利用してＳＤＳ－ＰＡＧＥを実施した後、Ｎｉｔｒｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｍｂｒａｎｅに移転した。以降、細胞死滅と関連した特定抗体を反応させた後、ＥＣＬバッファーを利用して当該蛋白質の量を確認し、ＫＧ１ａ細胞に対するウェスタンブロット結果は図２Ｂに示し、ＨＬ６０細胞に対するウェスタンブロット結果は図３Ｂに示した。
【0056】
図２および図３の結果を参照すると、本発明の化合物１をＵ９３７細胞またはＡ５４９細胞に処理する場合、ＫＧ１α細胞では細胞壊死により急性白血病細胞が死滅したが、ＨＬ６０細胞では細胞死滅と細胞壊死が全て発生することから、急性白血病細胞が死滅したことを確認することができた。
【0057】
＜実施例３．急性白血病モデルで単核球細胞の変化確認＞
本発明の化合物１によるＦＬＴ３－ＩＴＤ遺伝子の発現変化を確認するために、全身でＦＬＴ３－ＩＴＤを過発現したマウス（ｊａｃｋｓｏｎ ｌａｂ）を利用して、本発明の化合物１を１２０ｍｇ／ｋｇの濃度に食餌に混合して投与した実験群および溶媒だけを投与した対照群（無処理群）の動物から８週後に末梢血液と脾臓を採取した。
本発明の化合物１によるＦＬＴ３－ＩＴＤ遺伝子の発現変化を確認するために、全身でＦＬＴ３－ＩＴＤを過発現したマウス（ｊａｃｋｓｏｎ ｌａｂ）を利用して、本発明の化合物１を１２０ｍｇ／ｋｇの濃度に食餌に混合して投与した実験群および溶媒だけを投与した対照群（無処理群）の動物から８週後に末梢血液と脾臓を採取した。
【0058】
末梢血液の場合、少量の血液に冷たい１Ｘ ＰＢＳを入れて遠心分離した後、洗浄してＲＢＣ ｌｙｓｉｓバッファーを入れて常温で５分間反応して赤血球を除去した。再び冷たい１Ｘ ＰＢＳを加えた後、遠心分離して上澄液を除去したペレットに１％ ＦＢＳが含有されている１Ｘ ＰＢＳで再浮遊した。１×１０６細胞だけを取って、顆粒球（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ）に特異的に発現するＧｒ－１およびＭａｃ－１と単核球（ｍｏｎｏｃｙｔｅ）に特異的に発現するＣＤ３抗体を同時免疫染色し、抗体はアイスで１：２００の比率で２０分間反応させた後、１Ｘ ＰＢＳで洗浄した後、１％ＦＢＳが含有されている１Ｘ ＰＢＳで再浮遊し、ＦＡＣＳで定量化して図４Ａに示した。
【0059】
脾臓の場合、４０μｍ孔を有するｍｅｓｈにこねて単一細胞に分離した後、冷たい１Ｘ ＰＢＳで洗浄してＲＢＣ ｌｙｓｉｓバッファーを入れて常温で５分間反応して赤血球を除去した。再び冷たい１Ｘ ＰＢＳで洗浄した後、ペレットに１％ＦＢＳが含有されている１Ｘ ＰＢＳで再浮遊し、１×１０６細胞だけを取って顆粒球に特異的に発現するＧｒ－１およびＭａｃ－１と単核球に特異的に発現するＣＤ３抗体を同時免疫染色し、抗体はアイスで１：２００の比率で２０分間反応させた後、１Ｘ ＰＢＳで洗浄した後、１％ＦＢＳが含有されている１Ｘ ＰＢＳで再浮遊し、ＦＡＣＳで定量化して図４Ｂおよび４Ｃに示した。
【0060】
図４の結果を参照すると、本発明の化合物１をＦＬＴ３－ＩＴＤが過発現された急性骨髄性白血病マウスモデルで処理する場合、対照群（無処理群）に比べて末梢血液または脾臓で全て単核球細胞（急性白血病）の増殖を抑制する効果に優れて急性骨髄性白血病を改善させる効果があることを確認することができる。
【0061】
＜実施例４．慢性白血病細胞株の製造およびその細胞生存率の測定＞
実施例４－１．慢性白血病細胞株の製造
慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の５３歳女性から得たＫ５６２細胞は、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）が含まれているＲＰＭＩ培地を使用し、３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで培養し、２日に一回ずつ継代培養して実験に使用した。
実施例４－１．慢性白血病細胞株の製造
慢性骨髄性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）の５３歳女性から得たＫ５６２細胞は、１０％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）が含まれているＲＰＭＩ培地を使用し、３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで培養し、２日に一回ずつ継代培養して実験に使用した。
【0062】
実施例４－２．慢性白血病細胞で細胞生存率の測定－ＷＳＴ ａｓｓａｙ
前記実施例４－１で培養したＫ５６２細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、化合物１、１０、および７２および１９２を０．１～５μＭ濃度に処理した後、４時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯを使用した。培養４時間後、各細胞に１０μｌのＷＳＴ溶液を加えて２時間反応を実施した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定してＫ５６２細胞の細胞生存率を下記表３に示した。
前記実施例４－１で培養したＫ５６２細胞を９６－ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、化合物１、１０、および７２および１９２を０．１～５μＭ濃度に処理した後、４時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯを使用した。培養４時間後、各細胞に１０μｌのＷＳＴ溶液を加えて２時間反応を実施した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定してＫ５６２細胞の細胞生存率を下記表３に示した。
【0063】
【表3】
【0064】
前記表３を参照すると、Ｋ５６２細胞で、対照群に比べて本発明の化合物１、１０、および７２を処理する場合、ＩＣ５０値が１～２μＭに示されて慢性骨髄性白血病細胞の死滅効果が優れていることを確認した。
【0065】
＜実施例５．慢性骨髄性白血病細胞でのＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子に対する発現量確認＞
慢性骨髄性白血病にだけ存在するＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子は、持続的な細胞成長信号を生成および伝達して癌細胞の成長を誘導する。そこで、慢性骨髄性白血病細胞に、本発明の化合物を処理した後、ウェスタンブロット（ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）でＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現量減少有無を確認した。
慢性骨髄性白血病にだけ存在するＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子は、持続的な細胞成長信号を生成および伝達して癌細胞の成長を誘導する。そこで、慢性骨髄性白血病細胞に、本発明の化合物を処理した後、ウェスタンブロット（ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）でＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現量減少有無を確認した。
【0066】
まず、前記実施例４－１で培養したＫ５６２細胞を６０mmプレートに５×１０６細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、化合物１を０．５、１、１．５、２および２．５μＭ濃度にそれぞれ処理して６時間培養した後、細胞を回収した。前記過程で得られた細胞に蛋白質抽出バッファー（ＲＩＰＡ ｂｕｆｆｅｒ）を加えて、３０分間アイスで反応させて細胞膜を破って遠心分離して上澄液を取った後、蛋白質を抽出した。抽出した蛋白質は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを利用して電気泳動を実施して展開した後、ＰＶＤＦメンブレインに移転した。以降、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子関連抗体を反応させた後、ＥＣＬバッファーを利用して当該蛋白質の量を確認し、Ｋ５６２細胞株に対するウェスタンブロット結果は図５に示した。
【0067】
図５の結果を参照すると、本発明の化合物１をＫ５６２細胞に処理する場合、慢性骨髄性白血病の発病に最も重要な役割を果たすＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現量が濃度依存的に減少したことを確認することができた。また、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現減少によって、ＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の活性（細胞成長を誘導する信号）を意味するｐｈｏｓｐｈｏ－ｂｃｒ－ａｂｌ、ｐｈｏｓｐｈｏ－ｓｔａｔ５の発現も減少したことが分かった。
【0068】
しかし、癌誘発遺伝子であるＢＣＲ－ＡＢＬ融合遺伝子の発現量は減少した反面、正常血球細胞に存在するｃ－ａｂｌ蛋白質の場合、発現量には影響を受けなかった。そこで、本発明の化合物が正常細胞で発現するｃ－ａｂｌ蛋白質には影響を与えず、慢性骨髄性白血病にだけ存在する癌誘発遺伝子であるＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白質だけを選択的に減少させる組成物であることを確認することができた。
【0069】
＜実施例６．固形癌細胞株の製造およびこの細胞生存率の測定＞
実施例６－１．固形癌細胞株の製造
固形癌の治療剤としての使用の可能性を確認するために、肺癌種（ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）の５８歳男性から得たＡ５４９細胞株、子宮癌種（ｃｅｒｖｉｘ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）の３１歳女性から得たＨｅｌａ細胞株、肝細胞癌腫（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）の１５歳男児から得たＨｅｐＧ２細胞株、乳癌種（ｂｒｅａｓｔ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）の６９歳女性から得たＭＣＦ７細胞株、そして固形癌細胞株と比較のために定常状態の肺から得たＢｅａｓ－２Ｂ細胞株を使用した。
実施例６－１．固形癌細胞株の製造
固形癌の治療剤としての使用の可能性を確認するために、肺癌種（ｌｕｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）の５８歳男性から得たＡ５４９細胞株、子宮癌種（ｃｅｒｖｉｘ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）の３１歳女性から得たＨｅｌａ細胞株、肝細胞癌腫（ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）の１５歳男児から得たＨｅｐＧ２細胞株、乳癌種（ｂｒｅａｓｔ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）の６９歳女性から得たＭＣＦ７細胞株、そして固形癌細胞株と比較のために定常状態の肺から得たＢｅａｓ－２Ｂ細胞株を使用した。
【0070】
前記Ａ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）、ＭＣＦ７（乳癌種）、およびＢｅａｓ－２Ｂ（正常肺）細胞株は、１０％ＦＢＳが含まれているＤＭＥＭ培地を使用し、３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで２日に一回ずつ継代培養して実験に使用した。
【0071】
実施例６－２．固形癌細胞で細胞生存率の測定－ＷＳＴ ａｓｓａｙ
前記実施例６－１で培養したＡ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）、ＭＣＦ７（乳癌種）およびＢｅａｓ－２Ｂ（正常肺）細胞を９６－ウェルプレートに１×１０４細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、化合物１、１０および７２を１～３０μＭ濃度に処理した後、６時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯおよびβ－ラパコン（β－ｌａｐａｃｈｏｎｅ）を使用した。培養４時間後、各細胞に１０μｌのＷＳＴ溶液を加えて２時間反応を実施した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定してＡ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）およびＭＣＦ７（乳癌種）細胞の細胞生存率を下記表４および図６に示した。
前記実施例６－１で培養したＡ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）、ＭＣＦ７（乳癌種）およびＢｅａｓ－２Ｂ（正常肺）細胞を９６－ウェルプレートに１×１０４細胞／ウェルで接種した後、細胞の安定化のために３７℃、５％ＣＯ２条件のインキュベータで１６時間以上培養した。以降、前記実施例１で合成した化合物のうち、化合物１、１０および７２を１～３０μＭ濃度に処理した後、６時間培養し、この時、対照群としてはＤＭＳＯおよびβ－ラパコン（β－ｌａｐａｃｈｏｎｅ）を使用した。培養４時間後、各細胞に１０μｌのＷＳＴ溶液を加えて２時間反応を実施した後、ｍｕｌｔｉ－ｓｃａｎ機械で４５０ｎｍで吸光度を測定してＡ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）およびＭＣＦ７（乳癌種）細胞の細胞生存率を下記表４および図６に示した。
【0072】
【表4】
【0073】
前記表４および図６を参照すると、Ａ５４９（肺癌種）、Ｈｅｌａ（子宮癌種）、ＨｅｐＧ２（肝細胞癌腫）、ＭＣＦ７（乳癌種）およびＢｅａｓ－２Ｂ（正常肺）細胞において、対照群に比べて本発明の化合物１、１０および７２を６時間処理する場合、β－ｌａｐａｃｈｏｎｅと類似の死滅効果を示して、本発明の化合物が固形癌に治療効果があることを確認することができた。
【0074】
また、前記表４には示されていないが、本発明の化合物を正常肺細胞株であるＢｅａｓ－２Ｂに処理する場合、平均的に８０％以上の細胞生存率を示したが、肺癌種であるＡ５４９に処理する場合には５０％程度の細胞生存率を示した。そこで、本発明の１，２－ナフトキノン誘導体化合物は、正常細胞には細胞毒性を示さないが、癌細胞に特異的に細胞死滅効果を示すため、多様な固形癌の治療用組成物として有用に使用可能であることを確認することができる。
【0075】
＜実施例７．毒性実験＞
本発明の化合物１を短期間に過量を摂取した時、急性的（２４時間以内）に動物体内に及ぼす毒性を調査し、致死率を決定するために本実験を行った。一般的なマウスであるＣ５７ＢＬ／６マウスを２０匹を準備し、各群別に１０匹ずつ配分した。対照群には０．１％ＳＬＳ（Ｓｏｄｉｕｍ Ｌａｕｒｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）だけを投与し、実験群は前記化合物１を１２０ｍｇ／ｋｇの濃度にそれぞれ経口投与した。投与２４時間後に、それぞれの致死率を調査した結果、対照群と前記化合物１を投与した実験群で全て生存した。
本発明の化合物１を短期間に過量を摂取した時、急性的（２４時間以内）に動物体内に及ぼす毒性を調査し、致死率を決定するために本実験を行った。一般的なマウスであるＣ５７ＢＬ／６マウスを２０匹を準備し、各群別に１０匹ずつ配分した。対照群には０．１％ＳＬＳ（Ｓｏｄｉｕｍ Ｌａｕｒｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）だけを投与し、実験群は前記化合物１を１２０ｍｇ／ｋｇの濃度にそれぞれ経口投与した。投与２４時間後に、それぞれの致死率を調査した結果、対照群と前記化合物１を投与した実験群で全て生存した。
【0076】
＜製剤例１．本発明の化合物を含む薬学的製剤の製造＞
製剤例１－１．散剤の製造
本発明の化合物１を２ｇ、乳糖１ｇを混合して気密布に充填して散剤を製造した。
製剤例１－１．散剤の製造
本発明の化合物１を２ｇ、乳糖１ｇを混合して気密布に充填して散剤を製造した。
【0077】
製剤例１－２．錠剤の製造
本発明の化合物１を１００ｍｇ、未結晶セルロース１００ｍｇ、乳糖水和物６０ｍｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常の錠剤の製造方法により打錠して錠剤を製造した。
本発明の化合物１を１００ｍｇ、未結晶セルロース１００ｍｇ、乳糖水和物６０ｍｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常の錠剤の製造方法により打錠して錠剤を製造した。
【0078】
製剤例１－３．カプセル剤の製造
本発明の化合物１を１００ｍｇ、未結晶セルロース１００ｍｇ、乳糖水和物６０ｍｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常のカプセル剤の製造方法により前記の成分を混合し、ゼラチンカプセルに充電してカプセル剤を製造した。
本発明の化合物１を１００ｍｇ、未結晶セルロース１００ｍｇ、乳糖水和物６０ｍｇ、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇを混合した後、通常のカプセル剤の製造方法により前記の成分を混合し、ゼラチンカプセルに充電してカプセル剤を製造した。
【0079】
製剤例１－４．注射剤の製造
本発明の化合物１を１０ｍｇ、注射用滅菌蒸溜水適量およびｐＨ調節剤適量を混合した後、通常の注射剤の製造方法により１アンプル当たり（２ｍｌ）前記の成分含有量で製造した。
本発明の化合物１を１０ｍｇ、注射用滅菌蒸溜水適量およびｐＨ調節剤適量を混合した後、通常の注射剤の製造方法により１アンプル当たり（２ｍｌ）前記の成分含有量で製造した。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
