特許 7454880 ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-03-14

(45)【発行日】2024-03-25

(54)【発明の名称】ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/86 20060101AFI20240315BHJP

   A61K 8/02 20060101ALI20240315BHJP

   A61K 31/77 20060101ALI20240315BHJP

   A61K 9/16 20060101ALI20240315BHJP

   A61Q 11/00 20060101ALI20240315BHJP

   A61P 1/02 20060101ALI20240315BHJP

【ＦＩ】

A61K8/86

A61K8/02

A61K31/77

A61K9/16

A61Q11/00

A61P1/02

【請求項の数】 15

(21)【出願番号】P 2022527814

(86)(22)【出願日】2022-03-21

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-30

(86)【国際出願番号】 KR2022003921

(87)【国際公開番号】W WO2022203316

(87)【国際公開日】2022-09-29

【審査請求日】2022-05-13

(31)【優先権主張番号】17/208,075

(32)【優先日】2021-03-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】522185173

【氏名又は名称】ソンバイオ・インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＵＮＢＩＯ，ＩＮＣ．

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100150500

【弁理士】

【氏名又は名称】森本 靖

(74)【代理人】

【識別番号】100176474

【弁理士】

【氏名又は名称】秋山 信彦

(74)【代理人】

【識別番号】100136696

【弁理士】

【氏名又は名称】時岡 恭平

(72)【発明者】

【氏名】ノ，カン

(72)【発明者】

【氏名】アン，ミンジョン

(72)【発明者】

【氏名】ソン，ビョンヒ

(72)【発明者】

【氏名】ファン，ソング

(72)【発明者】

【氏名】キム，ドンファ

【審査官】阪▲崎▼ 裕美

(56)【参考文献】

【文献】韓国公開特許第２０１４－００７２７７５（ＫＲ，Ａ）

【文献】特表２００６－５１６５８６（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０００－５０２３８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】韓国登録特許第１０－１７９１３９９（ＫＲ，Ｂ１）

【文献】米国特許第０５４９６５５８（ＵＳ，Ａ）

【文献】特表２０１８－５１１６２２（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許出願公開第２００８／０１２４４００（ＵＳ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ８／００～８／９９

Ａ６１Ｑ １／００～９０／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

有効成分として下記化学式１のポリエチレングリコール誘導体、酸度調節剤及び香味剤を含み、
前記ポリエチレングリコール誘導体は、分子量が８，０００～１５，０００Ｄａであり、
顆粒剤形を有することを特徴とする、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【化1】

化学式１

【請求項2】

前記顆粒は、２００～１５００μｍの粒子サイズを有するものであることを特徴とする、請求項１に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【請求項3】

前記組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成されるものであることを特徴とする、請求項１に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【請求項4】

前記酸度調節剤は、組成物１００重量部に対して１～１０重量部で含まれるものであることを特徴とする、請求項１に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【請求項5】

前記組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成するとき、ｐＨ７～８を示すものであることを特徴とする、請求項３に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【請求項6】

前記溶液は、０．００１～０．０１Ｐａｓの粘度を示すものであることを特徴とする、請求項３に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物。

【請求項7】

請求項１に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物をこれを必要とする対象体に適用することを含むことを特徴とする、口腔乾燥症の緩和方法。

【請求項8】

前記適用は、溶液形態で再構成された口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を投与して濯ぎ出すことを含むことを特徴とする、請求項７に記載の口腔乾燥症の緩和方法。

【請求項9】

前記適用は、１日１回～３回行われることを特徴とする、請求項７に記載の口腔乾燥症の緩和方法。

【請求項10】

分子量が８，０００～１５，０００Ｄａである下記化学式１のポリエチレングリコール誘導体粉末を製造する段階；
前記ポリエチレングリコール誘導体粉末に酸度調節剤及び香味剤を混合した後に気密容器に移して高温で液化させる段階；
前記液化が完了すると、気密容器を低温に移して固形化する段階；及び
前記固形化が完了すると、粉砕して顆粒を製造する段階；を含むことを特徴とする、 請求項１に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造方法。

【化2】

化学式１

【請求項11】

ｐＨ７～８になるように酸度調節剤を添加する段階を含むことを特徴とする、請求項１０に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造方法。

【請求項12】

前記液化させる段階は、５０～７０℃で１時間の間行われることを特徴とする、請求項１０に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造方法。

【請求項13】

前記固形化する段階は、
常温で１時間の間 １次硬質化する段階；及び
－２０℃で２次硬質化する段階を含むことを特徴とする、請求項１０に記載の口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造方法。

【請求項14】

１回使用量の水１５～３０ｍｌを計測し得る容器及び１回使用量の請求項１に記載の顆粒剤形１～１．５ｇの口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物が包装されたパッケージを含むことを特徴とする、口腔乾燥症緩和用製品。

【請求項15】

１回使用量の水は２０ｍｌであり、１回使用量の口腔リンス組成物は１ｇであることを特徴とする、請求項１４に記載の口腔乾燥症緩和用製品。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

口腔乾燥症（ｘｅｒｏｓｔｏｍｉａ）は、様々な原因により唾液の分泌量が減少して口腔粘膜が乾燥化する疾患である。唾液は、口腔の主要機能を円滑に維持して口腔粘膜を保護する重要な役目をするので、唾液分泌量が減少して口腔乾燥症が生じれば非常に深刻な障害が起こるが、主に咀嚼機能と言語機能の異常を訴えるようになり、ひどい口臭と虫歯が発生し、程度によって口腔粘膜の灼熱感又は口腔粘膜の潰瘍などによりひどい苦痛を経験するようになる。

【0003】

口腔乾燥症の原因は、唾液腺無発生（ｓａｌｉｖａｒｙ ｇｌａｎｄ ａｇｅｎｅｓｉｓ）のような先天性奇形（ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ ｍａｌｆｏｒｍａｔｉｏｎ）、シェーグレン（Ｓｊｏｇｒｅｎ）症侯群や慢性移植片対宿主病（ｇｒａｆｔ－ｖｅｒｓｕｓ－ｈｏｓｔ ｄｉｓｅａｓｅ）のような自己免疫疾患（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ）、そして精神医学的異常、糖尿病、放射線治療合併症、Ｃ型ウイルス肝炎、慢性心不全症、後天性慢性欠乏症、一次胆汁性肝硬変、その他薬物服用、ストレス及び精神疾患、ひどい高熱や下痢、多量の利尿による脱水、唾液腺管が唾石や癌などにより塞いだとき、流行性耳下腺炎のような唾液腺の感染性病巣のような身体異常などが一時的又は長期的な口腔乾燥症誘発の原因となった。また、人体老化、更年期障害の原因で覚めて活動中には多くの刺激により唾液の分泌が増加するのに比べ、睡眠中には著しく唾液の分泌量が減少して睡眠中に起こる低唾液症により不便感を訴える患者の割合が２３％に達し、大部分が老人性により現われた（Ｔｈｉｅ ｅｔ ａｌ．、２００２）、

【0004】

口腔乾燥症の治療は、副交感神経刺激薬（ｐａｒａｓｙｍｐａｔｈｏｍｉｍｅｔｉｃｄｒｕｇｓ）のうちコリン性薬剤（ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ（Ｓａｌａｇｅｎ、ＭＧＩ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ）、Ｃｅｖｉｍｅｌｉｎｅ（Ｅｖｏｘａｃ）；一日３～４回食後服用、薬効持続は、２～４時間）を用いて唾液の分泌を促進させるが、身体の他の部位にも影響を及ぼして涙や鼻水の分泌を増加させるか汗の分泌が増加し得る。喘息、急性虹彩炎、挟隅角、緑内障患者には禁忌であり、心血管疾患、慢性気管支炎、慢性閉塞性疾患の場合、副作用の可能性がある。また、唾液分泌を促進させるｘｙｌｉｔｏｌ、ｌａｃｔｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ又はｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ)が含有されている砂糖無しガム、キャンデーなどが販売されている。粘液成分を含有するチューインガムが長期間の唾液分泌促進効果を持続し（Ａａｇａａｒｄ ｅｔ ａｌ．、１９９２）、粘液成分の噴霧が老人性口腔乾燥症に大きい効果があった（Ｍｏｍｍ ａｎｄ Ｇｕｔｔｅｎｂｅｒｇｅｒ、２００２）。

【0005】

従来技術としては、オイゲノール及び竹塩を含むことで口腔疾患の予防及び改善が可能な口腔リンス組成物に対して開示しており（大韓民国公開特許第１０－２０２０－００５０８０１号）、海藻抽出物を含むことで口臭を緩和し得る組成物に対して開示している（大韓民国登録特許第１０－２３１３８３０号）。

【0006】

しかし、前記従来技術は、口腔内有害菌の死滅及び口臭除去を主な目的として提示しているため、口内刺激が一部同伴されるか一時的な水分供給効果を示すので、口腔乾燥症緩和の持続性が低いため改善効果を期待しにくいという問題点がある。

【0007】

また、本発明者らによる以前研究（大韓民国登録特許第１０－１５２６２５８号）では、口腔粘膜と結合し得る口腔乾燥症の予防、治療又は改善のための組成物として多様な反応基により改質したポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む内容を開示した。これを土台で、実際の製品化のために各誘導体の効能及び安定性結果を根拠としながら人体に適用が可能であるか否かを確認して、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を完成した。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【文献】大韓民国公開特許第１０－２０２０－００５０８０１号

【文献】大韓民国登録特許第１０－２３１３８３０号

【文献】大韓民国登録特許第１０－１５２６２５８号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

上記のような背景下で、本発明者らは、ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として刺激なしに口腔粘膜の共有結合により口腔保湿持続力を増加させ得るだけでなく、携帯が簡便で且つ使用が容易な顆粒タイプの口腔保湿剤として、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を完成した。

【0010】

したがって、本発明の目的は、ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物に関する。

【課題を解決するための手段】

【0011】

前記課題を解決するための手段として、本発明は、ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を提供する。

【0012】

以下、本発明の構成を詳しく説明する。

【0013】

本発明は、ポリエチレングリコール誘導体を有効成分として含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物に関する。

【0014】

ポリエチレングリコールは、保湿効果があるとよく知られている。しかし、口腔粘膜内に塗布されている途中水や唾液により容易に洗われるので、口腔乾燥症緩和効果の持続性が低い。

【0015】

さて、本発明では、下記化学式１で示したように、ポリエチレングリコールの末端反応基を改質して口腔粘膜の上皮細胞と共有結合し得るようにすることによって、ポリエチレングリコール誘導体が口腔粘膜の上皮細胞に長時間付着されているようにして、このような問題点を解決した。

【0016】

【化1】

化学式１

【0017】

本出願人の従来研究を通じて、様々なＰＥＧ誘導体のうち口腔粘膜の上皮細胞上のアミン基と共有結合し得る反応基を有した多様なＰＥＧ誘導体が開発されたことがある。多様なＰＥＧ誘導体を用いて口腔適用に適合する製品を開発、研究する過程で、本発明者らは、そのうちハロゲン、アミン（ａｍｉｎｅ；ＮＨ２）、エポキシド（ｅｐｏｘｉｄｅ）、マレイミド（ｍａｌｅｉｍｉｄｅ）反応基は、細胞のアミン基とアミド（ａｍｉｄｅ）結合反応のための所要時間が長く、これによって、口腔内への適用時間が長い必要があるという問題点があることを見つけた。また、ＰＥＧ誘導体の反応基の合成工程上ｔｏｘｉｃａｎｔの使用及び副産物が残存し得、最終完製ＰＥＧ誘導体のｏｄｏｒ特性上化学的合成で誘発される香が残存して口腔内適用に不適合するという点も明らかにした。そして、アルデヒド（ａｌｄｅｈｙｄｅ；ＣＨＯ）反応基は、アミド（ａｍｉｄｅ）結合反応のためにｒｅｄｕｃｉｎｇ ａｇｅｎｔ(Ｓｏｄｉｕｍ ｃｙａｎｏｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）が要求され、ニトロフェニルカーボネート（ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ ｃａｒｂｏｎａｔｅ；ＮＰＣ）反応基は、ａｍｉｄｅ反応過程で有害な副産物（ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｏｌ）を発生させて口腔内適用に適合しないことを確認した。

【0018】

それで、本発明者らは、化学式１の－ＮＨＳ（Ｎ－Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ）反応基を有し、分枝型に改質されたポリエチレングリコール誘導体を用いると、口腔内に適用時にアミド反応速度が速く、反応の前／後に要求される試薬及び副産物がなく、口腔内に適用するとき不便感がほとんどなく、安全であることを確認して、本発明を完成した。

【0019】

本発明は、有効成分として化学式１のポリエチレングリコール誘導体、酸度調節剤及び香味剤を含み、
前記ポリエチレングリコール誘導体は、分子量８，０００～１５，０００Ｄａであり、
顆粒剤形を有する、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を提供する。

【0020】

下記実施例から確認し得るように、化学式１のポリエチレングリコール誘導体は、線形ＰＥＧ誘導体と比較して吸湿率が高いことを確認した。これは、前記ポリエチレングリコール誘導体が口腔粘膜と結合するとき水分子をより多く捕まえておくことができるので、保湿持続力を強化し得る。

【0021】

また、本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物は、吸湿及び静電気など保管安定性を改善するために顆粒剤形で製造される。

【0022】

本発明の一具体例で、前記顆粒は、２００～１５００μｍの粒子サイズを有することができる。例えば、前記顆粒は、３００～１０００μｍの粒子サイズを有することができる。製造（生産）及び１回使用量のパッケージ包装、そして、製造及び保管時の安定性のために顆粒の粒子サイズは、２００～１５００μｍが好ましい。

【0023】

本発明の顆粒剤形の組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成される。

【0024】

本発明による顆粒剤形の組成物１ｇを２０ｍｌの水に迅速に溶かして口腔内に適用すると、乾燥した口腔粘膜に前記化学式１のポリエチレングリコール誘導体が口腔粘膜と堅たく結合された水分層を形成して既存製品の一時的な水分層に比べて長時間保湿が維持される特徴がある。したがって、本発明の顆粒剤形の組成物は、口内の乾燥感を感じるとき、特に、就寝前の口腔乾燥患者、老人、一般人が１回使用量を２０ｍｌの水と混ぜた後溶液で再構成して、約３０～６０秒間口の中に含んでから吐き出す製品である。効果としては、口腔内保湿作用、虫歯予防機能、清浄効果などがある。

【0025】

本発明の組成物において、前記酸度調節剤は、組成物１００重量部に対して１～１０重量部、例えば、２重量部～８重量部、３～７重量部で含まれる。好ましくは、前記酸度調節剤は、４～６重量部で含まれる。

【0026】

一方、前記組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成するとき、前記溶液の粘度は、０．００１Ｐａｓ～０．０１Ｐａｓであってもよい。溶液の粘度は、使用者の便宜と口腔内適用、使用感などに影響を及ぼすことができるので前記範囲程度が適切である。前記粘度は、口腔に適用するとき嗜好性を改善するだけでなく、顆粒剤を直接投与したときに発生する細胞毒性及び刺激を防止することができる。また、前記組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成するとき、前記溶液の濃度は、４～５％であってもよい。

【0027】

酸度調節剤を含ませることによって、前記組成物は、使用時に水に溶かして溶液形態で再構成するとき、ｐＨ７～８を示すようにすることが好ましい。本発明者らの研究結果によると、ｐＨ７～８は、本発明によるＰＥＧ誘導体と口腔内アミンとの共有結合に有利な条件である。また、口腔乾燥症患者の唾液ｐＨは、６．４以下に低く、口腔乾燥症状と唾液ｐＨは、有意な陰の相関関係を示すので、口腔乾燥症状の緩和のための組成物のｐＨは、ｐＨ７～８が好ましい。

【0028】

香味剤としては、例えば、シトラス（Ｃｉｔｒｕｓ）、フルーツ（ｆｒｕｉｔ）、ベリー（ｂｅｒｒｙ）、バニラ（Ｖａｎｉｌｌａ）、ミント（Ｍｉｎｔ）などのように口腔内適用に適合する粉末型食品香料を用いることができ、その種類は特に制限されない。香味剤は、組成物１００重量部に対して１～１０重量部、例えば、４～１０重量部で使用可能であるが、これに制限されるものではない。

【0029】

本発明による口腔リンス組成物に含まれる上述した成分それぞれは、各国家別食品安全規範に規定された最大使用量を超過しない範囲内で本発明の口腔リンス組成物に含まれ得る。

【0030】

また、本発明は、前記口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物をこれを必要とする対象体に適用することを含む口腔乾燥症の緩和方法を提供する。

【0031】

前記適用は、溶液形態で再構成された口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を投与して濯ぎ出すことを含む。

【0032】

例えば、本発明による顆粒剤形の口腔リンス組成物１ｇを２０ｍｌの水に迅速に溶かして口腔内に適用すると、乾燥した口腔粘膜に前記化学式１のポリエチレングリコール誘導体が口腔粘膜と堅たく結合された水分層を形成して既存製品の一時的な水分層に比べて長時間保湿が維持される。したがって、口腔乾燥症を有している対象体又は患者に有用に用いられ得る。前記適用は、１日１回～３回行われ得るが、これに制限されるものではない。口内の乾燥感を感じるときに随時に適用することができ、特に、就寝前に適用することが有利である。

【0033】

また、本発明は、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を製造する方法を提供する。

【0034】

以下、本発明の製造方法の構成を詳しく説明する。

【0035】

本発明の製造方法において、分子量が８，０００～１５，０００Ｄａである化学式１のポリエチレングリコール誘導体粉末を製造する段階；前記ポリエチレングリコール誘導体粉末に酸度調節剤及び香味剤を含んだ後気密容器に移して高温で液化させる段階；前記液化が完了すると、気密容器を低温に移して固形化する段階；及び前記固形化が完了すると、粉砕して顆粒を製造する段階を含むことができる。

【0036】

本発明による化学式１のポリエチレングリコール誘導体の製造には、反応基として－ＮＨＳを用いた。これは、ＮＨＳ ｅｓｔｅｒの半減期が比較的長く、生産工程数が少ないため簡単であり、生産工程上の危険性が低いため大量生産にも適合する。

【0037】

前記化学式１のポリエチレングリコール誘導体の粉末を製造する段階で、ポリエチレングリコール誘導体は、分子量８，０００～１５，０００Ｄａが好ましい。分子量が８，０００Ｄａ未満である場合、分子量が１５，０００Ｄａを超過する場合は、吸湿率が低くなるだけでなく、生産工程中に結晶化、パウダー化工程が複雑になり、生産収率が低くなる問題点がある。

【0038】

前記ポリエチレングリコール誘導体を選定する段階で、ポリエチレングリコール誘導体は、分枝型構造が線形構造より有利である。分枝型構造の場合、吸湿率がより高く、口腔粘膜と結合する誘導体反応基の数が多いので、口腔粘膜に結合したときにより長時間多い水分を含んでしっとりした口腔を維持し得る。

【0039】

本発明の製造方法において、ｐＨ７～８に合わせて酸度調節剤を添加する段階を含むことができる。

【0040】

前記液化させる段階は、５０℃～７０℃で１時間の間行われ得る。このとき、５０℃未満であると、液化が十分に行われず、７０℃を超過すると、誘導体分子が一部分解されて効果が減少する。

【0041】

前記固形化する段階は、常温で１時間の間１次硬質化する段階；及び－２０℃（冷凍）で２次硬質化する段階を含むことができる。

【0042】

前記顆粒を製造する段階で顆粒の粒子サイズは、２００～１５００μｍであるとき保管安定性及び製品包装時の静電気減少のために好ましい。

【0043】

また、本発明は、１回使用量の水１５ｍｌ～３０ｍｌを計測し得る容器及び１回使用量１ｇ～１．５ｇの顆粒剤形の口腔乾燥症緩和用組成物が包装されたパッケージを含む口腔乾燥症緩和用製品を提供する。

【0044】

前記製品は、１回使用量が包装された顆粒剤形の口腔乾燥症緩和用組成物を１回使用量の水を計測した容器に入れて混合して溶解させた後、乾燥した口腔に適用してうがいをしてから吐き出すという指示がある指示書を含むことができる。

【発明の効果】

【0045】

本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物は、化学式１のポリエチレングリコール誘導体を有効成分として刺激なしに口腔粘膜と共有結合して口腔保湿の持続力を増加させ得るだけでなく、顆粒剤形を有することによって製造及び包装が容易であり、保管及び使用に有利である。

【図面の簡単な説明】

【0046】

図１Ａ及び図１Ｂは、本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の粉末剤形及び顆粒剤形のＮＭＲ（Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）分析結果を示す。

【0047】

図２は、本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の剤形による表面静電気の比較結果である。

【発明を実施するための形態】

【0048】

以下、本発明を下記実施例によって詳しく説明する。ただし、下記実施例は、本発明を例示するものに過ぎず、本発明の内容が下記実験によって限定されるものではない。

【0049】

実験例１．口腔内の吸湿力のためのＰＥＧ誘導体の吸湿率確認試験

【0050】

口腔内の吸湿率が高いＰＥＧ－ＯＨ構造を確認して決定するために、互いに異なる構造を有するＰＥＧ誘導体の吸湿率を試した。

【0051】

試験物質：吸湿率の試験のためのＰＥＧ誘導体として液体型（ワックス型）ＰＥＧではない分子量３，０００Ｄａ以上の乾燥粉末を用い、下のような構造の線形構造のＰＥＧ（化学式Ａ）分子量３，４００Ｄａと１０，０００Ｄａ、そして、分枝型構造の４ａｒｍ ＰＥＧ(化学式Ｂ)と６ａｒｍ ＰＥＧ（化学式Ｃ）分子量１０，０００ＤａのＰＥＧ粉末を用いて試験を進行した。

【0052】

【化2】

化学式Ａ

【0053】

【化3】

化学式Ｂ

【0054】

【化4】

化学式Ｃ

【0055】

試験物質は、ＤＡＥＣＨＡＮＧ化学から購入し、試験のために有機溶媒を用いて抽出及びパウダー化工程で粉末粒子を均一に前処理した後に試験を進行した。

【0056】

吸湿度測定方法：吸湿度は、ＰＥＧ（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）の質量当たり吸湿する水蒸気の重さで確認した。温度２５±１℃のデシケーターでＰＥＧを乾燥させて前処理した後、吸湿条件である温度２５±１℃、相対湿度６０±２％の条件で２４時間放置し、ＰＥＧ １ｇ当たりの重さ増加（ｍｇ）をそのＰＥＧの吸湿度で規定した。各ＰＥＧの吸湿率は、前記吸湿条件の放置前後の重さ差を比較して％で計算して判断した。その結果を下記表１に示した。

【0057】

【表1】

【0058】

前記結果のように、線形Ｄｉ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量３，４００Ｄａ（比較例１）が最も低い１０．１４％、１０，０００Ｄａ（比較例２）は１２．３１％であると確認され、分枝型４－ａｒｍ ＰＥＧ－ＯＨの分子量１０，０００Ｄａ（実施例１）が１５．４８％として最も高い吸湿率を示した。

【0059】

線形及び分枝型構造のＰＥＧ－ＯＨの吸湿率を確認した結果、固体粉末の線形ＰＥＧ－ＯＨは、分子量が高いほど吸湿率が高く（すなわち、分子量３，４００Ｄａ（比較例１）より１０，０００Ｄａ（比較例２）の吸湿率が高い）、同じ分子量１０，０００Ｄａを基準として線形と分枝型ＰＥＧ構造の吸湿率を比較したとき、分枝型ＰＥＧの吸湿率が高かった。特に、６－ａｒｍ ＰＥＧ－ＯＨ（比較例３）に比べて４－ａｒｍ ＰＥＧ－ＯＨ（実施例１）構造が最も高い吸湿率を示して本発明の主原料として４－ａｒｍ ＰＥＧ－ＯＨ（実施例１）を選定した。

【0060】

分枝型４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ以外に６ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨと８ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨは、口腔内の保湿用途として用いることができるが、ＰＥＧ誘導体のための合成／製造工程及び保湿効果において４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨより優秀性を確認することができなかった。

【0061】

実験例２．口腔内の吸湿力のための４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ分子量別水分量の確認試験

【0062】

実験例１の結果によって分枝型４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ構造の吸湿率が高いということを確認し、同一構造の分子量による吸湿力を確認するために４ａｒｍ ＰＥＧ－ＯＨの１０，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａ、３０，０００Ｄａ分子量による水分量確認試験を行った。試験方法は、それぞれの分子量別４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ試験物質を吸湿条件である温度２５±１℃、相対湿度６０±２％に露出する前と４時間の間露出した後、それぞれの試験物質が含有している水分量を水分測定器（ＭＳ－７０；ＭＥＴＴＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ社、４００Ｗ ｓｔｒａｉｇｈｔ ｈａｌｏｇｅｎ ｌａｍｐ ｈｅａｔｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｗｉｔｈ ＳＲＡ ｆｉｌｔｅｒ ａｎｄ ＳＨＳ ｗｅｉｇｈｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いて分析した。すなわち、吸湿条件に露出前、後の水分量の差を用いて吸湿力を確認した。

【0063】

下表のように４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ構造の１０，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａ、３０，０００Ｄａの分子量による水分量及び吸湿水分量を測定した。４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量５，０００Ｄａ未満のＰＥＧ誘導体（例えば、２，０００Ｄａ及び５，０００Ｄａ）は、生産／合成工程で粉末化が容易ではないため本試験物質から除いた。各分子量の４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨは、ＤＡＥＣＨＡＮＧ化学から購入し、試験のために有機溶媒を用いて抽出及びパウダー化工程で粉末粒子を均一に前処理した後に試験を進行した。その結果を下記表２に示した。

【0064】

【表2】

【0065】

前記結果のように、分子量が小さいほど相対湿度６０％で４時間露出した前後の水分量の差が大きかった。すなわち、４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量が大きくなるほど吸湿力が低いことで現われた。

【0066】

すなわち、４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量１０，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａ、３０，０００Ｄａのうち１０，０００Ｄａの４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ（実施例１）が相対湿度６０％で露出した前後の水分量の差（Ａ－Ｂ）が最も大きく、多くの水分を吸収することが確認された。

【0067】

上述したように、４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量２，０００Ｄａ又は５，０００Ｄａは、ＰＥＧ誘導体のための最終粉末製造工程の難しさとそれによる生産収率が低いため除いた。ＰＥＧ誘導体化のための全体反応工程で結晶及び粉末製造工程は、化学反応過程及び濾過／濃縮後に有機溶媒を用いた結晶及び再結晶工程で生産収率に影響を与える。また、有機溶媒で不純物を除去する洗浄／再結晶過程、乾燥後の最終均一粒子の粉末化工程においても生産収率が低くなるので必須考慮事項である。実験例２の結果によって、４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨの分子量２０，０００Ｄａと３０，０００Ｄａは、分子量の増加による保湿効果が低いため口腔内保湿用途で用いることが不適切であった。

【0068】

このような理由で、本発明の口腔内保湿用途のための主成分であるＰＥＧ誘導体の合成及び製造のために４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＯＨ構造の分子量１０，０００Ｄａ（実施例１）を主原料で用いた。

【0069】

実験例３．ＰＥＧ誘導体反応基の選定

【0070】

口腔内粘膜に存在するアミン基と共有結合を形成するＰＥＧ誘導体の反応基を選定するために、ＰＥＧ誘導体の反応基による半減期及び該当反応基の合成に要求される生産工程数（ｓｔｅｐ数）を比較分析した。半減期が短いと、組成物を水に溶かす間に加水分解が速く起きるので、口腔粘膜のアミン基との共有結合が起きられない。したがって、半減期が短い反応基は、口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造に使いにくい。

【0071】

半減期の測定は、２５℃のｐＨ８バッファー条件で加水分解するＮ－ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ（ＮＨＳ）ｇｒｏｕｐのＵＶ吸光度を土台で測定した。その結果を下記表３に示した。

【0072】

【表3】

【0073】

前記結果のように、Ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｃａｒｂｏｎａｔｅ（ＳＣ）ｅｓｔｅｒ（比較例７）は、生産工程が１ｓｔｅｐとして簡単であり、半減期が比較的長いが、製造工程上ｐｈｏｓｇｅｎｅ ｇａｓを用いる危険及び環境的為害性があった。一方、本発明によるＳｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｇｌｕｔａｒａｔｅ（ＳＧ）で改質された誘導体（実施例２）の場合、口腔内に適用するときアミド反応速度が速く、反応の前／後に要求される試薬及び副産物がなく、口腔内に適用するとき不便感及び安全性に問題がない。また、他の反応基と比較したとき、実施例２の半減期が比較的長く、生産工程数が少ないため簡単であり、生産工程上の危険性が低かった。したがって、下記製造例１を通じてＳｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ Ｇｌｕｔａｒａｔｅ（ＳＧ）で改質された誘導体（化学式１）を製造して以後の実験に用いた。

【0074】

＜製造例１．化学式１のポリエチレングリコール誘導体の製造＞

【0075】

【化5】

化学式１

【0076】

反応式１

【化6】

【0077】

常温でメチレンクロリド（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）に化学式２の化合物を溶かした後、トリエチルアミン（ｔｒｉｅｔｈｙａｍｉｎｅ）を添加した。反応溶液にグルタル酸無水物（ｇｌｕｔａｒｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）を入れた後に常温で２０～２４時間撹拌する。反応溶液に１４％の塩化アンモニウム（Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）水溶液を入れて洗浄して層が分離されると下の部分の有機溶液層を収集した。水溶液層をメチレンクロリド（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）を用いて抽出した。取り合わせた有機溶液層は、硫酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ）を用いて水分を除去して溶媒を濃縮した後にジエチルエーテル（ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ）に入れて沈澱させた。沈殿物を濾過して常温で真空下で２４時間乾燥させて化学式３化合物を得た。

【0078】

化学式３化合物をメチレンクロリド（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）に溶かしてＮ－ヒドロキシコハク酸イミド（Ｎ－Ｈｙｄｒｏｘｙ ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ、ＮＨＳ）とジシクロへキシルカルボジイミド（Ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ ｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ、ＤＣＣ）を添加した。反応溶液を常温で１５～２０時間撹拌した。反応後、副産物であるジシクロへキシルウレア（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌ ｕｒｅａ、ＤＣＵ）は、ガラスろ過器（ｇｌａｓｓ ｆｉｌｔｅｒ）を用いて濾過し、濾過された溶液は、溶媒を濃縮した後にジエチルエーテル（ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ）に入れて沈澱させた。沈殿物を濾過した後、５５±５℃で酢酸エチル（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）に溶かして０－５℃で１５～１７時間再結晶した。再結晶物は、濾過してジエチルエーテル（ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ）で３回洗浄した後、常温の真空下で２４時間乾燥させて重量平均分子量が１０，０００である化学式１の化合物（ｎ＝５７）を得た。

【0079】

実験例４．ｐＨ調節剤を用いた組成試験

【0080】

本発明者らの研究結果、口腔内粘膜のアミン基と化学式１のＰＥＧ－ＳＧ誘導体の反応基が共有結合を形成する条件は、ｐＨ６．０～８．０であると確認された。

【0081】

しかし、口腔の保湿のための主成分で用いられる化学式１のＰＥＧ－ＳＧ誘導体と香味剤を水に溶かしたとき、弱酸性（ｐＨ４．５）を示して、前記ｐＨ条件に適合しなかった。

【0082】

本発明の組成物を口腔内の共有結合に適合するｐＨ条件に調整するために、食品添加物として用いられる酸度調節剤（Ｓｏｄｉｕｍ ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）を添加してｐＨ６．０～８．０となるように酸度調節剤の用量を決定した。

【0083】

試験物質：下記表４のように、酸度調節剤（Ｓｏｄｉｕｍ Ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ）を製品含量（１．５ｇ）の０（ｃｏｎｔｒｏｌ）、１、５、１０％で添加して準備した。各組成当たり３個の１ｇ試料を用いてｐＨ ｔｅｓｔを行った。

【0084】

【表4】

【0085】

試験方法：準備したｓａｍｐｌｅのｐＨを正確に測定するために、ｐＨ測定器の矯正を３区間（ｐＨ４．０、７．０、１０．０標準バッファー）で行い、許容可能な媒介変数ｐＨ勾配９０～１０５％と０±３０ｍＶ（２５℃で０．５ｐＨ ｕｎｉｔｓ）を確認した。それぞれの試験物質１ｇを蒸溜水２０ｍｌに完全に溶かした後、ｐＨを確認した。その結果を下記表５に示した。

【0086】

【表5】

【0087】

前記結果のように、酸度調節剤１、５、１０％を添加したそれぞれの試料の平均ｐＨは、７．０、７．５、７．８であった。結果的に、酸度調節剤の添加量１～１０％は、共有結合ｐＨ６．０～８．０条件に適合する用量範囲であることが確認された。

【0088】

しかし、官能評価結果、酸度調節剤の添加量が１０％以上である組成物（実施例５）は、口腔内に適用するとき苦みと舌に刺激を誘発して除いた。その後の実験では、酸度調節剤の添加量が５％である組成物（実施例４）を下記製造例２によって製造して用いた。

【0089】

＜製造例２．口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造＞

【0090】

化学式１のポリエチレングリコール誘導体、酸度調節剤及び香味剤を含む口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物を多様な剤形で製造し、細胞毒性（人体安全性）、保湿効果（機能性）などの人体適用可能性及び製品化過程でのハンドリングの容易性、製品安定性などを下記実験例を通じて評価した。

【0091】

＜製造例２－１．粉末型口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造＞

【0092】

ポリエチレングリコール誘導体８９重量部、酸度調節剤として炭酸水素ナトリウム５重量部、香味剤としてミント６重量部をＶ型混合基にそれぞれ添加した後、２０～２５ｒｐｍで１５分混合して、粉末形態の完製組成物を製造した。

【0093】

＜製造例２－２．液状型口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造＞

【0094】

製造例２－１の粉末型組成物１．５ｇを３０ｍｌ水に溶かして液状型組成物を製造した。

【0095】

＜製造例２－３. 顆粒型口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の製造＞

【0096】

製造例２－１で製造された粉末型組成物が含まれた気密容器を６０℃で１時間の間液化させた。前記液化が完了すると、気密容器を常温に移して１時間の間１次硬質化した後、－２０℃で２次硬質化して固形化した。前記固形化が完了すると、３５５～１４００μｍ粒子サイズに粉砕した。

【0097】

実験例５．細胞毒性試験

【0098】

細胞毒性試験は、本発明による組成物の安全性を確認するための試験であって、培養細胞（Ｌ－９２９）で細胞毒性反応有無と程度を評価した。試験は、ＩＳＯ １０９９３に提示された各試験法によってＧＬＰ（Ｇｏｏｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ）機関で委託して行った。

【0099】

試験物質：

【0100】

下記表６のように、酸度調節剤が含まれない粉末剤形（Ａ）、酸度調節剤が含まれた粉末剤形（Ｂ、製造例２－１）、粉末剤形（Ｂ）を３０ｍｌの水に溶かした液状型（Ｃ、製造例２－２）試験物質でそれぞれの試験液を製造した。

【0101】

【表6】

【0102】

細胞毒性試験（Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｔｅｓｔ）５－１．粉末試料試験方法：抽出液（Ｅ－ＭＥＭ＋５％ＦＢＳ）に粉末試験物質と対照群を０．２ｇ／ｍｌ濃度で溶かし、２４±２時間の間溶解させて試験液を作った。細胞Ｌ－９２９の培養培地をｐｌａｔｅ ｗｅｌｌで除去し、１ｍＬの試験液、対照液培地（抽出液）に交替した後に細胞を培養した。培養するうちに、２４、４８、７２±４時間別に顕微鏡検査を行って細胞毒性に対して評価した。陽性対照群と陰性対照群も試験に用いた。

【0103】

５－２．液体試料試験方法：希釈液（２Ｘ Ｅ－ＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ）と液体試験物質を１：１で組み合わせ／希釈した液体試験液を製造した。細胞Ｌ－９２９の培養培地をｐｌａｔｅ ｗｅｌｌで除去し、１ｍＬの試験液、対照液培地（希釈液）に交替した後に細胞を培養した。培養するうちに、２４、４８、７２±４時間別に顕微鏡検査を行って細胞毒性に対して評価した。陽性対照群である塩化カドミウム（１００ｕＭ ＣｄＣｌ_２）と陰性対照群であるＥ－ＭＥＭ＋５％ＦＢＳも試験に用いた。

【0104】

細胞毒性試験の評価基準は、細胞の形態学的変化及び溶解又は分離による生存細胞の変化ていどを評価して０～４の点数で記録した。３と４点数は、細胞毒性があると判定し、１と２の点数は、細胞毒性がないと判断した。その結果を下記表７及び表８に示した。

【0105】

【表7】

【0106】

前記結果のように、各組成物及び二つの剤形で細胞毒性試験を確認した結果、比較例１３及び１４は、細胞毒性点数「４」点で記録されて強い細胞毒性を示し、実施例６は、細胞毒性点数「０」として細胞毒性を全く示さなかった。実施例６は、酸度調節剤を含み、その組成物を３０ｍｌの水に溶かして液状で細胞に適用することによって、Ｌ－９２９細胞の形態学的変化及び生存に影響を及ぼさない安全な組成物及び剤形であると確認された。

【0107】

【表8】

【0108】

前記結果のように、粉末組成物（比較例１３及び１４）は細胞毒性を示すので、唾液分泌量が少ない口腔乾燥患者に乾燥した粉末剤形を直接適用するのが適合しない。

【0109】

したがって、本発明の粉末剤形に水分を添加して液状剤形に変更した後、細胞毒性試験のための試験物質の濃度が０．２ｇ／ｍｌで０．０２５ｇ／ｍｌ（１．５ｇ／３０ｍｌｘ１／２）に減少して細胞毒性が現われなかった。また、乾燥した口腔粘膜に粉末形態の組成物を適用すれば、鋭敏な粘膜に異物感の刺激性を与えることとは異なり、粉末を液状型剤形で再構成する場合、口腔内の不足な水分を追加供給し、患者が製品を容易に口腔内に適用し得るようにして保湿効果を増加させる期待効果を示した。

【0110】

実験例６．細胞生存率による保湿効果の確認試験

【0111】

本発明の組成物をヒト上皮細胞に適用して主成分ＰＥＧ誘導体が細胞の表面に共有結合することによって保湿層が形成され、この細胞を乾燥な環境に露出させて細胞生存率を確認する試験管内テストを行った。

【0112】

試験物質：

【0113】

試験例５で細胞毒性の安全性が確認された本発明の実施例６とＣｏｌｇａｔｅ社の口腔乾燥緩和製品であるＨｙｄｒｉｓ Ｏｒａｌ Ｒｉｎｓｅ製品を試験物質で用いた。二つの試験物質は全て液体として同一剤形である。陰性対照群としては、ＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ；Ｇｉｂｃｏ）を用いた。

【0114】

【表9】

【0115】

試験方法：ヒト咽頭上皮細胞株（ｈｕｍａｎ ｐｈａｒｙｎｘ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ）を用いて本発明の組成物とＣｏｌｇａｔｅ社のＨｙｄｒｉｓ Ｏｒａｌ Ｒｉｎｓｅ及びＰＢＳ（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）を３７℃で１５分間細胞に適用して培養した後、試験物質を除去して細胞をＰＢＳで洗浄した後に２５℃、湿度３０％の乾燥した条件に露出させて細胞生存率を測定した。処理した試験物質が乾燥による細胞死滅を減少させて細胞を保護する効果を細胞生存率として確認した。陽性対照群でＰＢＳを細胞に処理し、細胞を乾燥条件に露出しない細胞の生存率を１（１００％）に設定し、試験物質処理による細胞生存率を百分率で表示した。細胞生存率は、Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ８（ＣＣＫ８；Ｄｏｊｉｎｄｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ、。Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）を用いて分析した。このキットは、水溶性テトラゾリウム塩（ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｓａｌｔ）を用いて電子運搬体がある状態でｂｉｏ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ時にオレンジ色のｆｏｒｍａｚａｎ ｄｙｅを生成して生きている細胞の数を定量化するのに用いられる。その結果を下記表１０に示した。

【0116】

【表10】

【0117】

前記結果のように、陽性対照群の細胞生存率（％）を基準として本発明の実施例６の細胞生存率ｍｅａｎ値は、７１．９％（ｍｅｄｉａｎ：８１．５％）として最も高い細胞生存率を示し、既存ＧＳＫ社のＨｙｄｒｉｓ製品は、ｍｅａｎ値が１２．０％（ｍｅｄｉａｎ：１１．５％）の比較的低い生存率を示した。

【0118】

実施例６の主成分ＰＥＧ誘導体と口腔細胞の共有結合により細胞洗浄後にも保湿成分が細胞に残って保湿コーティングの効果を維持したので、細胞を洗浄後に乾燥した環境に露出するとき、乾燥による細胞の死滅を最小化して細胞生存率を維持させたことである。すなわち、既存の保湿剤を含む組成物は、口腔内に適用後、話すか飲料／飲食物などの摂取により洗われて保湿剤としての役目に制限的であるか保湿効果が一時的であり、それによって、随時に口腔内に適用しなければならない。しかし、本発明の主成分ＰＥＧ誘導体は、細胞と共有結合して物理的刺激により洗われなくて長く保湿効果を維持することである。

【0119】

実験例７．主成分４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧ誘導体の反応基活性及び静電気試験

【0120】

一般的なＰＥＧ誘導体は、化学的反応、合成、製造工程、結晶化及び洗浄後の再結晶過程などを経て最終粉末（ｐｏｗｄｅｒ ｔｙｐｅ）形態に製造される。このような粉末形態のＰＥＧ誘導体を添加剤と混合し、定量（１ｇ）パッケージ包装のために回収した混合物を装備のホッパー（ｈｏｐｐｅｒ）に満たした後に粉末が振動板で秤（ロードセル）に供給されて重さを測定し、定量をアルミニウムパッケージに充填するようになる。しかし、製造例２－１のような粉末型製剤の場合、生産過程初期の秤量及び混合、混合物の回収過程で静電気による損失が発生し、同じ理由で回収率も低くなる問題点が発見された。

【0121】

したがって、本発明の主成分ＰＥＧ誘導体である４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧの物理的形態、すなわち、粉末剤により発生する製造工程上の静電気問題を解決するために製造例２－３の顆粒剤形で物理的形態を変化させて反応基活性変化有無及び静電気発生有無を分析した。

【0122】

試験物質：上述した実験例と同様に粉末状態のＰＥＧ誘導体である４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧと顆粒剤形の試料を準備した。

【0123】

試験方法

【0124】

静電気試験の前に、粉末形態の４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧを融解及び堅く凝固させる物理的状態変化後にもＰＥＧ誘導体の反応基活性及び安定性に問題がないことをＮＭＲ（Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）分析で確認した。図１Ａ及び図１Ｂは、本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物の粉末剤形及び顆粒剤形のＮＭＲ（Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ）分析結果として、物理的状態の変更と関係なく反応基活性及び安定性に問題がないことを確認した。

【0125】

静電気試験は、二つの剤形の主成分ＰＥＧ誘導体の表面静電気力を測定し得るｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ ｍｅｔｅｒ（ＥＹＥ－０２）を用いて測定した。粉末剤と顆粒剤の主成分ＰＥＧ誘導体を製造工程上秤量するときに用いるＰＥＴ材質である保管用パック（ビニルパック）にそれぞれ５０ｇ、１００ｇずつを入れ、表面静電気力を測定し比較した。

【0126】

図２に示したように、ＰＥＧ誘導体である４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧの物理的形態、すなわち、粉末剤と顆粒剤により発生する表面静電気力を比較確認した結果、粉末剤の表面静電気が顆粒剤に形態が変化したときに約５０％以上表面静電気が減少することを確認した。

【0127】

その結果、製造例２－３の顆粒剤形は、製造例２－１の粉末剤形とは異なり静電気によるホッパーでの損失が減少してパッケージ充填が容易になった。

【0128】

実験例８．最終完製組成物の剤形による安定性確認試験

【0129】

剤形による製品安定性を確認するための試験を次のように行った。

【0130】

試験物質：本発明の製造例２－１の粉末剤形（比較例１５）及び製造例２－３の顆粒剤形（実施例７）の口腔リンス組成物を製造し、１ｇずつアルミニウムパッケージに包装した。

【0131】

安定性試験方法：粉末及び顆粒形態の完製組成物１ｇずつをアルミニウムパッケージ（９ｃｍ×２ｃｍ）に充填して熱接着器で密封した後、２５±２℃の相対湿度、６０％±５％の恒温恒湿器チャンバーに保管した。安定性試験分析は、保管した試料０、１、２、３、４、５、６、７、８日及び１０日目に分析し、分析試料は、１０ｍｇを秤量した後にＮＭＲ ｔｕｂｅに入れてＣＤＣｌ_３ ０．６２ｍＬに溶かして１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）で分析した。分析方法は、主成分４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧ誘導体の反応基活性度、ＮＭＲ ｓｐｅｃｔｒｕｍの２．８０～２．９０ｐｐｍ（ｐａｒｔｓ ｐｅｒ Ｍｉｌｌｉｏｎ；Ｐｒｏｔｏｎ）のｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ ｇｒｏｕｐ ｐｅａｋで確認した。すなわち、４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧは、口腔粘膜と結合して保湿効果を与える主成分であるので、口腔粘膜のａｍｉｎｅ（ＮＨ２）と共有結合する４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧのｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｇｒｏｕｐ（ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌ ｇｒｏｕｐ）ａｃｔｉｖｉｔｙを１Ｈ－ＮＭＲで分析して完製組成物の安定性を確認することである。完製組成物の安定性の判断は、主成分４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧのＮＭＲ活性度値が９０％以上である場合、「ｓｔａｂｌｅ」であると判断し、未満である場合、「Ｎｏｔ ｓｔａｂｌｅ」であると判断した。その結果を下記表１１に示した。

【0132】

【表11】

【0133】

＊７日目結果で、３個の配置のうち一つの配置が基準（９０％以上）に満たすが、３配置の平均値が基準以下であるので、Ｎｏｔ ｓｔａｂｌｅであると判定する。前記結果のように、完製組成物の剤形による苛酷条件（２５±２℃、相対湿度６０％±５％）で安定性試験を確認した結果、主成分４ａｒｍ－ＰＥＧ－ＳＧ誘導体の反応基活性度が粉末形態の組成物（比較例１５）は、３日目に９２．１５％、９２．１９％、９２．２５％、顆粒形態の組成物（実施例７）は、６日目に９０．２６％、９０．２９％、９２．６８％として安定的な結果を示した。

【0134】

完製組成物の剤形が粉末形態（比較例１５）である場合、苛酷条件で３日間安定した結果と比較して、顆粒形態の完製組成物（実施例７）は、６日間安定した結果を示し、安定性が改善されたことを確認した。組成物の剤形が顆粒形態に変化されて粉末形態と比較して空気中の露出面積が減少し、露出減少による空気中水分の吸収が減少して安定性が増加したと判断できる。

【0135】

したがって、最終完製組成物の剤形を顆粒型で決定した。１回使用量の水を計測し得る容器及び１回使用量の顆粒剤形の口腔乾燥症緩和用組成物が包装されたパッケージを含む口腔乾燥症緩和用製品を最終製品として開発した。

【産業上の利用可能性】

【0136】

本発明による口腔乾燥症緩和用口腔リンス組成物は、化学式１のポリエチレングリコール誘導体を有効成分として刺激なしに口腔粘膜と共有結合して口腔保湿持続力を増加させ得るだけでなく、顆粒剤形を有することによって製造及び包装が容易になり、保管及び使用に有利である。

【図1A】

【図1B】

【図2】