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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-03-25
(45)【発行日】2024-04-02
(54)【発明の名称】αシヌクレイン凝集体結合剤及びイメージング方法
(51)【国際特許分類】
A61K 51/04 20060101AFI20240326BHJP
A61K 49/00 20060101ALI20240326BHJP
G01N 33/15 20060101ALI20240326BHJP
C07D 405/06 20060101ALN20240326BHJP
C07D 417/06 20060101ALN20240326BHJP
【ＦＩ】
A61K51/04 200
A61K49/00
G01N33/15 Z
C07D405/06 CSP
C07D417/06
【請求項の数】
16
(21)【出願番号】P 2021501753
(86)(22)【出願日】2020-01-24
(86)【国際出願番号】 JP2020002607
(87)【国際公開番号】W WO2020174963
(87)【国際公開日】2020-09-03
【審査請求日】2022-09-22
(31)【優先権主張番号】P 2019034997
(32)【優先日】2019-02-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成３０年度、国立研究開発法人日本医療研究開発機構、「革新的技術による脳機能ネットワークの全容解明プロジェクト事業」「脳老化病態カスケードのトランスレータブルなイメージングとメカニズム制御の研究開発」、令和元年度、国立研究開発法人日本医療研究開発機構、「革新的技術による脳機能ネットワークの全容解明プロジェクト事業」「神経変性疾患のタンパク凝集・伝播病態と回路障害の分子イメージング研究」、委託研究開発、産業技術力強化法第１７条の適用を受ける特許出願
(73)【特許権者】
【識別番号】301032942
【氏名又は名称】国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構
(74)【代理人】
【識別番号】110000338
【氏名又は名称】弁理士法人 ＨＡＲＡＫＥＮＺＯ ＷＯＲＬＤ ＰＡＴＥＮＴ ＆ ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ
(72)【発明者】
【氏名】樋口 真人
(72)【発明者】
【氏名】小野 麻衣子
(72)【発明者】
【氏名】須原 哲也
(72)【発明者】
【氏名】張 明栄
【審査官】高橋 樹理
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１４／０９７４７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】KOGA, S. et al.，Fluorescence and Autoradiographic Evaluation of Tau PET Ligand PBB3 to α-Synuclein Pathology，Movement Disorders，2017年，Vol.32, No.6，pp.884-892
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物：【化1】
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
【化2】
を含有する、αシヌクレイン凝集体結合剤。
【請求項2】
環Ｂが、式（ｉ）である、請求項１記載の結合剤。
【請求項3】
前記式（Ｉ）で表される化合物が下記の群から選択される、請求項１記載の結合剤。【化3】
【化4】
【請求項4】
前記式（Ｉ）で表される化合物が１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である、請求項１～３のいずれか一項記載の結合剤。
【請求項5】
請求項１～３のいずれか一項記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物。
【請求項6】
請求項４記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物。
【請求項7】
請求項１～４のいずれか一項記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬。
【請求項8】
請求項１～４のいずれか一項記載の結合剤と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一種と、を含む、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患とタウタンパク質凝集体が関連する疾患とを分類するための診断キット。
【請求項9】
請求項１～３のいずれか一項記載の結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、前記脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含む、脳内αシヌクレイン凝集体の光学イメージング方法。
【請求項10】
請求項４記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含む、脳内αシヌクレイン凝集体の放射イメージング方法。
【請求項11】
脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法であって、前記被験体への候補物質の投与前後における、請求項９又は請求項１０記載のイメージング方法によって検出される光又は放射線の量及び／又は分布の差異に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有する方法。
【請求項12】
請求項４記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含み、前記検出した放射線の量及び／又は分布に基づいて、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法。
【請求項13】
請求項４記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する第１の工程と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された前記被験体の脳から発せられる放射線を検出する第２の工程と、を含み、
前記第１の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、前記第２の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、に基づいて、αシヌクレイン凝集体とタウタンパク質凝集体との分類及び蓄積を判定する方法。
【請求項14】
下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物：【化5】
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
【化6】
を含有する、αシヌクレイン凝集阻害剤。
【請求項15】
環Ｂが、式（ｉ）である、請求項１４記載のαシヌクレイン凝集阻害剤。
【請求項16】
前記式（Ｉ）で表される化合物が下記の群から選択される、請求項１４記載のαシヌクレイン凝集阻害剤。【化7】
【化8】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、αシヌクレイン凝集体結合剤、αシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物、αシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬、脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット、光学イメージング方法、放射イメージング方法、脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法、αシヌクレイン凝集阻害剤、及び、新規化合物に関する。
【背景技術】
【0002】
αシヌクレイン凝集体は、パーキンソン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）の中核病理を形成し、神経変性と密接な因果関係を有すると考えられている。こうした疾患の確定診断は、剖検脳の病理解析でαシヌクレイン凝集体の存在を指標として行われるため、生前に診断を確定することはできない。しかしながら、生体脳でαシヌクレイン凝集体を可視化できれば、早期からこれら疾患の診断に関する確定的な情報（確定診断）に近い情報を得ることが可能になる。また、疾患モデル動物の生体脳でαシヌクレイン凝集体を可視化できれば、経時的なイメージング等により、αシヌクレイン凝集体を標的とする治療又は予防薬の候補物質の薬効評価にも役立ちうる。
【0003】
従来生体脳でαシヌクレインに結合することが示されているＰＥＴ（ポジトロン断層撮影法）プローブとして、［１１Ｃ］ＢＦ－２２７がある。しかしながら［１１Ｃ］ＢＦ－２２７は、αシヌクレイン凝集体への結合親和性が十分ではなく、これらの疾患のうち、ＭＳＡ患者の一部でαシヌクレイン病変が検出できるにとどまっている。また、［１１Ｃ］ＢＦ－２２７は、非特異的な脳内集積という問題や、アミロイドβ凝集体へ結合するためαシヌクレイン凝集体への結合選択性が低いという問題がある。
【0004】
ところで、発明者らは、脳内に蓄積したタウタンパク質をイメージング（画像化）するための新規化合物を開発した（特許文献１参照）。特許文献１に記載の化合物は、脳内に蓄積したタウタンパク質をイメージングできるため、特許文献１の技術は、タウタンパク質の蓄積により生じる疾患、例えばアルツハイマー病（ＡＤ）の治療や予防等に役立つ。しかし、特許文献１にはαシヌクレイン凝集体への結合について記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【文献】国際公開第２０１４／０９７４７４号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
本発明者らは、特許文献１記載の化合物のうち、（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール（ＰＢＢ３）が、αシヌクレイン凝集体にもある程度の親和性で結合しうることを見出した。
【0007】
しかしながら、ＰＢＢ３は、タウ凝集体への結合選択性と比べて、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が低いため、αシヌクレイン凝集体プローブとしては適合性が低い。そのため、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いαシヌクレイン凝集体結合剤が望まれる。
【0008】
また、αシヌクレイン凝集体を検出して診断等するだけでなく、αシヌクレインの凝集自体を阻害（抑制）することができれば、αシヌクレイン凝集体に由来する疾患を予防又は治療することができる。このため、αシヌクレインの凝集を阻害できるαシヌクレイン凝集阻害剤が望まれる。
【0009】
本発明は、上記の状況に鑑みてなされたものであり、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いαシヌクレイン凝集体結合剤、このαシヌクレイン凝集体結合剤を用いたイメージング方法、αシヌクレイン凝集体結合剤に用いることができる新規化合物、及びαシヌクレイン凝集阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0010】
本発明者らは、特許文献１に記載された化合物のうち、ブテニニル構造とベンゾチアゾール構造又はベンゾフラン構造とを有する下記式（Ｉ）で表される化合物がαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いことを見出し、さらに検討を重ねて、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のものを提供する。
【0011】
［１］ 下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物：
（式（Ｉ）中、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ベンゼン環又はピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ハロヒドロキシアルコキシ、及びアミノアルキルからなる群から選択される。）
を含有する、αシヌクレイン凝集体結合剤。
【化1】
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ベンゼン環又はピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
【化2】
を含有する、αシヌクレイン凝集体結合剤。
【0012】
［２］ 環Ａが、ピリジン環である、［１］記載の結合剤。
【0013】
［３］ 環Ｂが、式（ｉ）である、［１］又は［２］記載の結合剤。
【0014】
［４］ 前記式（Ｉ）で表される化合物が下記の群から選択される、［１］記載の結合剤：
【化3】
【化4】
【0015】
［５］ 前記式（Ｉ）で表される化合物が１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である、［１］～［４］のいずれか記載の結合剤。
【0016】
［６］ ［１］～［４］のいずれか記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物。
【0017】
［７］ ［５］記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物。
【0018】
［８］ ［１］～［５］のいずれか記載の結合剤を含む、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬。
【0019】
［９］ ［１］～［５］のいずれか記載の結合剤と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一種と、を含む、脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット。
【0020】
［１０］ ［１］～［４］のいずれか記載の結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、前記脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含む、脳内αシヌクレイン凝集体の光学イメージング方法。
【0021】
［１１］ ［５］記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含む、脳内αシヌクレイン凝集体の放射イメージング方法。
【0022】
［１２］ 脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法であって、
前記被験体への候補物質の投与前後における、［１０］又は［１１］記載のイメージング方法によって検出される光又は放射線の量及び／又は分布の差異に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有する方法。
前記被験体への候補物質の投与前後における、［１０］又は［１１］記載のイメージング方法によって検出される光又は放射線の量及び／又は分布の差異に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有する方法。
【0023】
［１３］ ［５］記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含み、前記検出した放射線の量及び／又は分布に基づいて、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法。
【0024】
［１４］ ［５］記載の結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する第１の工程と、
２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された前記被験体の脳から発せられる放射線を検出する第２の工程と、を含み、
前記第１の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、前記第２の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、に基づいて、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法。
２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された前記被験体の脳から発せられる放射線を検出する第２の工程と、を含み、
前記第１の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、前記第２の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、に基づいて、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法。
【0025】
［１５］ 下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物：
（式（Ｉ）中、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ベンゼン環又はピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、ハロヒドロキシアルコキシ、及びアミノアルキルからなる群から選択される。）
を含有する、αシヌクレイン凝集阻害剤。
【化5】
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ベンゼン環又はピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
【化6】
を含有する、αシヌクレイン凝集阻害剤。
【0026】
［１６］ 環Ａが、ピリジン環である、［１５］記載のαシヌクレイン凝集阻害剤。
【0027】
［１７］ 環Ｂが、式（ｉ）である、［１５］又は［１６］記載のαシヌクレイン凝集阻害剤。
【0028】
［１８］ 前記式（Ｉ）で表される化合物が下記の群から選択される、［１５］記載のαシヌクレイン凝集阻害剤：
【化7】
【化8】
【0029】
［１９］ 下記式で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物。
【化9】
【0030】
［２０］ 下記式で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物。
（式中、＊印の原子の少なくとも一方はその原子の放射性同位体である。）
【化10】
【0031】
［２１］ 下記式で表される、［１９］で表される化合物を合成するための中間体。
【化11】
【0032】
［２２］ 下記式で表される、［２０］で表される化合物を合成するための中間体。
【化12】
【化13】
【発明の効果】
【0033】
本発明によれば、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いαシヌクレイン凝集体結合剤を提供することができる。
そして、このαシヌクレイン凝集体結合剤を用いた、イメージング方法を提供することができる。
また、αシヌクレイン凝集体結合剤やその他の用途に用いることができる新規化合物を提供することができる。
また、αシヌクレインの凝集を阻害することができる。
そして、このαシヌクレイン凝集体結合剤を用いた、イメージング方法を提供することができる。
また、αシヌクレイン凝集体結合剤やその他の用途に用いることができる新規化合物を提供することができる。
また、αシヌクレインの凝集を阻害することができる。
【図面の簡単な説明】
【0034】
【図1A】ＤＬＢ患者脳及びＡＤ患者脳の蛍光顕微鏡測定結果を示す図である。
【図1B】ＤＬＢ患者脳及びＡＤ患者脳の蛍光顕微鏡測定結果を示す図である。
【図2】病変領域および病変非形成領域の蛍光輝度の定量結果を示す図である。
【図3】αシヌクレイン線維接種マウスの蛍光顕微鏡測定結果を示す図である。
【図4】αシヌクレイン線維溶液注入６週間以降のモデルマウスの二光子レーザースキャニング蛍光顕微鏡検査結果を示す図である。
【図5】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図6】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図7】αシヌクレイン線維接種マウスの蛍光顕微鏡検査結果を示す図である。
【図8】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図9】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図10】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図11】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図12】ＰＥＴイメージング結果を示す図である。
【図13】αシヌクレイン凝集阻害効果を示す図である。
【図14】αシヌクレイン凝集阻害効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0035】
＜定義＞
用語「アルキル」とは、脂肪族飽和炭化水素の水素原子１個が失われて生じる１価の基を意味する。アルキルは、例えば、１～１５個の炭素原子、典型的には、１～１０個、１～８個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１～２個、又は２～６個の炭素原子を有する。アルキルは、直鎖、分枝状、又は環状であってもよい。アルキルの例を挙げると、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、２－メチル－１－プロピル、２－メチル－２－プロピル、２－メチル－１－ブチル、３－メチル－１－ブチル、２－メチル－３－ブチル、２，２－ジメチル－１－プロピル、２－メチル－１－ペンチル、３－メチル－１－ペンチル、４－メチル－１－ペンチル、２－メチル－２－ペンチル、３－メチル－２－ペンチル、４－メチル－２－ペンチル、２，２－ジメチル－１－ブチル、３，３－ジメチル－１－ブチル、２－エチル－１－ブチル、ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びヘキシルなどがある。アルキルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
用語「アルキル」とは、脂肪族飽和炭化水素の水素原子１個が失われて生じる１価の基を意味する。アルキルは、例えば、１～１５個の炭素原子、典型的には、１～１０個、１～８個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１～２個、又は２～６個の炭素原子を有する。アルキルは、直鎖、分枝状、又は環状であってもよい。アルキルの例を挙げると、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、２－メチル－１－プロピル、２－メチル－２－プロピル、２－メチル－１－ブチル、３－メチル－１－ブチル、２－メチル－３－ブチル、２，２－ジメチル－１－プロピル、２－メチル－１－ペンチル、３－メチル－１－ペンチル、４－メチル－１－ペンチル、２－メチル－２－ペンチル、３－メチル－２－ペンチル、４－メチル－２－ペンチル、２，２－ジメチル－１－ブチル、３，３－ジメチル－１－ブチル、２－エチル－１－ブチル、ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びヘキシルなどがある。アルキルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0036】
本明細書において、１～１５個、１～１０個、１～８個、１～６個、１～５個、１～４個、１～３個、１～２個、２～８個、２～６個、２～４個、３～８個、３～６個、４～８個、４～６個等の炭素原子を、それぞれ、Ｃ１－１５、Ｃ１－１０、Ｃ１－８、Ｃ１－６、Ｃ１－５、Ｃ１－４、Ｃ１－３、Ｃ１－２、Ｃ２－８、Ｃ２－６、Ｃ２－４、Ｃ３－８、Ｃ３－６、Ｃ４－８、及びＣ４－６等とも示す。
【0037】
用語「シクロアルキル」とは、炭素環を形成する脂肪族飽和炭化水素の水素原子１個が失われて生じる１価の基を意味する。シクロアルキルは、例えば、３～１０個の炭素原子、典型的には、３～８個、３～６個、３～５個、３～４個、４～５個、４～６個、又は４～８個の炭素原子を有する。シクロアルキルの例を挙げると、限定されないが、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、及びシクロオクタンなどがある。シクロアルキルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0038】
用語「アルケニル」とは、少なくとも１つの二重結合を持つ脂肪族不飽和炭化水素基を意味する。アルケニルは、例えば、２～１５個の炭素原子、典型的には、２～１０個、２～８個、２～６個、２～５個、２～４個、２～３個、３～６個、３～８個、４～６個、４～７個、又は４～８個の炭素原子を有する。アルケニルは、直鎖若しくは分枝状であってもよい。アルケニルの例を挙げると、限定されないが、具体的には、ビニル（－ＣＨ＝ＣＨ２）、アリル（－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、－ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）、－ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２、－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ（ＣＨ３）、－Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）＝ＣＨ２、１，３－ブタジエニル（－ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ＝ＣＨ２）、及びヘプタ－１，６－ジエン－４－イル（－ＣＨ２－（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）２）などがある。アルケニルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0039】
用語「アルキニル」とは、少なくとも１つの三重結合を持つ脂肪族不飽和炭化水素基を意味する。アルキニルは、例えば、２～１５個の炭素原子、典型的には、２～１０個、２～８個、２～６個、２～５個、２～４個、２～３個、３～６個、４～６個、４～７個、又は４～８個の炭素原子を有する。アルキニルは、直鎖若しくは分枝状であってもよい。アルキニルの例を挙げると、限定されないが、エチニル（－Ｃ≡ＣＨ）、－Ｃ≡ＣＨ（ＣＨ３）、－Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ、－ＣＨ２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ３）、及び－ＣＨ２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）などがある。アルキニルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0040】
用語「アシル」とは、－ＣＯ－Ｒで表される基を意味する。ここで、Ｒは、例えば、アルキル、アルケニル、又はアルキニルなどである。アシルの例を挙げると、限定されないが、アセチル（－ＣＯＣＨ３）、エチルカルボニル、プロピルカルボニル、ペンチルカルボニル、シクロヘキシルカルボニル、オクチルカルボニル、２－エチルヘキシルカルボニル、ドデシルカルボニル、フェニルカルボニル、ベンジルカルボニル、ナフチルカルボニル、及びピリジルカルボニルなどがある。アシルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0041】
用語「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は、－ＯＨを意味する。
【0042】
用語「ヒドロキシアルキル」は、ヒドロキシ基（－ＯＨ）で置換されたアルキル基を意味する。ヒドロキシアルキルの例を挙げると、限定されないが、ヒドロキシメチル（－ＣＨ２ＯＨ）、２－ヒドロキシエチル（－ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、１－ヒドロキシエチル（－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３）、３－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）、２－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３）、及び１－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ３）などがある。ヒドロキシアルキルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0043】
用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、フルオロ（－Ｆ）、クロロ（－Ｃｌ）、ブロモ（－Ｂｒ）、及びヨード（－Ｉ）を意味する。
【0044】
用語「アルコキシ」は、酸素原子を介して他の基に結合しているアルキル（すなわち、－Ｏ－アルキル）を意味する。アルコキシの例を挙げると、限定されないが、メトキシ（－Ｏ－メチル）、エトキシ（－Ｏ－エチル）、プロポキシ（－Ｏ－プロピル）、－Ｏ－イソプロピル、－Ｏ－２－メチル－１－プロピル、－Ｏ－２－メチル－２－プロピル、－Ｏ－２－メチル－１－ブチル、－Ｏ－３－メチル－１－ブチル、－Ｏ－２－メチル－３－ブチル、－Ｏ－２，２－ジメチル－１－プロピル、－Ｏ－２－メチル－１－ペンチル、３－Ｏ－メチル－１－ペンチル、－Ｏ－４－メチル－１－ペンチル、－Ｏ－２－メチル－２－ペンチル、－Ｏ－３－メチル－２－ペンチル、－Ｏ－４－メチル－２－ペンチル、－Ｏ－２，２－ジメチル－１－ブチル、－Ｏ－３，３－ジメチル－１－ブチル、－Ｏ－２－エチル－１－ブチル、－Ｏ－ブチル、－Ｏ－イソブチル、－Ｏ－ｔ－ブチル、－Ｏ－ペンチル、－Ｏ－イソペンチル、－Ｏ－ネオペンチル、及び－Ｏ－ヘキシルがある。アルコキシは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0045】
用語「ハロアルキル」とは、少なくとも１つのハロゲンで置換されたアルキルを意味する。ハロアルキルには、フルオロアルキル、クロロアルキル、ブロモアルキル、及びヨードアルキルがある。ハロアルキルの例を挙げると、限定されないが、フルオロメチル、クロロメチル、ブロモメチル、ヨードメチル、フルオロエチル、クロロエチル、ブロモエチル、ヨードエチル、フルオロプロピル、クロロプロピル、ブロモプロピル、ヨードプロピル、フルオロブチル、クロロブチル、ブロモブチル、ヨードブチル、フルオロペンチル、クロロペンチル、ブロモペンチル、ヨードペンチル、フルオロヘキシル、クロロヘキシル、ブロモヘキシル、ヨードヘキシル、フルオロヘプチル、クロロヘプチル、ブロモヘプチル、ヨードヘプチル、フルオロオクチル、クロロオクチル、ブロモオクチル、及びヨードオクチルなどがある。ハロアルキルは、さらに適当な置換基によって置換されてもよい。
【0046】
用語「ハロアルコキシ」とは、少なくとも１つのハロゲンで置換されたアルコキシ（すなわち、－Ｏ－ハロアルキル）を意味する。ハロアルコキシには、フルオロアルコキシ、クロロアルコキシ、ブロモアルコキシ、及びヨードアルコキシがある。
【0047】
用語「ハロヒドロキシアルコキシ」とは、ヒドロキシ基で置換されたハロアルコキシを意味する。ハロヒドロキシアルコキシには、フルオロヒドロキシアルコキシ、クロロヒドロキシアルコキシ、ブロモヒドロキシアルコキシ、及びヨードヒドロキシアルコキシがある。ハロヒドロキシアルコキシの例を挙げると、－Ｏ－ＣＨ（Ｆ）（ＯＨ）、－Ｏ－ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）（ＯＨ）、－Ｏ－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（Ｆ）（ＯＨ）、－Ｏ－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２－ＣＨ２（Ｆ）、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）、－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）及び－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ（Ｆ）（ＯＨ）などがある。
【0048】
用語「ニトロ」とは、－ＮＯ２を意味する。
【0049】
用語「アミノ」とは、－ＮＨ２を意味する。
【0050】
用語「アミノアルキル」とは、アミノ基で置換されたアルキル基を意味する。アミノアルキルの例を挙げると、限定されないが、アミノメチル、アミノエチル、アミノプロピル、アミノイソプロピル、アミノブチル、アミノペンチル、アミノヘキシル、及びアミノオクチルなどがある。
【0051】
用語「置換基」とは、ある化学構造式において、導入される１以上の原子又は原子団を意味する。置換基の例を挙げると、例えば、Ｃ１－８アルキル（メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉｓｏ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｉｓｏ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、又はｎ－ヘキシル若しくはその異性体など）、Ｃ２－８アルケニル（ビニル、アリル、－ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）、－ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２、－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ（ＣＨ３）、及び－Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）＝ＣＨ２など）、Ｃ２－８アルキニル（エチニル、－Ｃ≡ＣＨ（ＣＨ３）、－Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）、－ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ、－ＣＨ２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ３）、及び－ＣＨ２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）など）、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、ハロアルキル、シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、又はシクロへキシルなど）、アミノ、ニトロ、アシル（アセチルなど）（－ＣＯＣＨ３）、カルボキシル（－ＣＯＯＨ）、エステル（－ＣＯＯＲｘ、ここでＲｘはＣ１－６アルキルなどである）、アミド（－ＣＯＮＲｙＲｚ、ここでＲｙ及びＲｚは独立にＨ又はＣ１－６アルキルなどである）、チオール（－ＳＨ）、スルホン酸（－ＳＯ３Ｈ）、ニトリル（－ＣＮ）、芳香族環（アリール、フェニル、ベンゾイル、又はナフタレニルなど）、複素環（ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ピロリル、フラニル、チオフェニル、ピペリジニル、オキサニル、又はピリジニルなど）などがある。
【0052】
用語「医薬として許容し得る塩」とは、哺乳動物、特にヒトに対して有害でない塩を指す。医薬として許容し得る塩は、無機酸若しくは無機塩基、又は有機酸若しくは有機塩基を含む、無毒性の酸又は塩基を用いて形成することができる。医薬として許容し得る塩の例を挙げると、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び亜鉛などから形成される金属塩、又はリジン、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ－メチルグルカミン）及びプロカインなどから形成される有機塩などがある。また、医薬として許容し得る塩は、酸付加塩及び塩基付加塩を包含する。
【0053】
用語「医薬として許容し得る担体」とは、生理食塩水溶液、液体若しくは固体の充填剤、希釈剤、溶媒、又は封入材料などの医薬として許容し得る材料、組成物、又はビヒクルを意味する。医薬として許容し得る担体の例を挙げると、水、食塩水、生理食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、等張性デキストロース注射液、無菌水注射液、デキストロース、及び乳酸リンゲル注射液などがある。
【0054】
用語「有効量」とは、目的の効果を得ることができる、化合物又は組成物の量をいう。例えば、一部の実施態様において、有効量は、αシヌクレイン凝集体等の脳内に蓄積する物質の光学イメージングや放射イメージングが可能な、化合物又は組成物の量をいう。
【0055】
用語「溶媒和物」とは、化合物に対する１つ又は複数の溶媒分子の会合により形成される含溶媒化合物を意味する。溶媒和物は、例えば、一溶媒和物、二溶媒和物、三溶媒和物、及び四溶媒和物を含む。また、溶媒和物は、水和物を含む。
【0056】
用語「水和物」とは、非共有結合性分子間力によって拘束された化学量論的又は非化学量論的量の水をさらに含む化合物又はその塩を意味する。水和物は、例えば、一水和物、二水和物、三水和物、及び四水和物などを含む。
【0057】
用語「治療」とは、疾患又は状態の進行、重症度及び／又は持続期間を低減すること又は寛解することを意味する。
【0058】
用語「予防」とは、所定の疾患又は状態を獲得する又は進行させる危険の低減、或いは、所定の疾患又は条件の１つ又は複数の症状の再発、開始、又は進行の低減又は抑制を意味する。
【0059】
＜αシヌクレイン凝集体結合剤＞
本発明のαシヌクレイン凝集体結合剤（以下、結合剤とも記載する）は、下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含有する。
特許文献１に記載された化合物のうち、ブタジエン結合ではなくブテニニル結合を有
し且つベンゾチアゾール構造又はベンゾフラン構造を有する化合物である、下記式（Ｉ）で表される化合物は、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体よりもαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いことが確認された。また、同様に、下記式（Ｉ）で表される化合物の医薬として許容し得る塩や、下記式（Ｉ）で表される化合物の溶媒和物も、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体よりもαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い。
また、下記式（Ｉ）で表される化合物は、蛍光を発する。また、下記式（Ｉ）で表される化合物のうち、１個又はそれ以上の原子を該原子の放射性同位体とすることができる。
したがって、本発明の結合剤は、脳内に蓄積したαシヌクレイン凝集体の光学イメージングや放射イメージングのための分子プローブとして用いることができる。
また、下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、及びその溶媒和物は、上述のとおりαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いため、詳しくは後述するが、αシヌクレインの凝集を阻害することができる。
なお、αシヌクレインは、正常な脳でもニューロンのシナプス等に局在するタンパク質であり、αシヌクレインが凝集したものがαシヌクレイン凝集体である。
本発明のαシヌクレイン凝集体結合剤（以下、結合剤とも記載する）は、下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含有する。
特許文献１に記載された化合物のうち、ブタジエン結合ではなくブテニニル結合を有
し且つベンゾチアゾール構造又はベンゾフラン構造を有する化合物である、下記式（Ｉ）で表される化合物は、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体よりもαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いことが確認された。また、同様に、下記式（Ｉ）で表される化合物の医薬として許容し得る塩や、下記式（Ｉ）で表される化合物の溶媒和物も、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体よりもαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い。
また、下記式（Ｉ）で表される化合物は、蛍光を発する。また、下記式（Ｉ）で表される化合物のうち、１個又はそれ以上の原子を該原子の放射性同位体とすることができる。
したがって、本発明の結合剤は、脳内に蓄積したαシヌクレイン凝集体の光学イメージングや放射イメージングのための分子プローブとして用いることができる。
また、下記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、及びその溶媒和物は、上述のとおりαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高いため、詳しくは後述するが、αシヌクレインの凝集を阻害することができる。
なお、αシヌクレインは、正常な脳でもニューロンのシナプス等に局在するタンパク質であり、αシヌクレインが凝集したものがαシヌクレイン凝集体である。
【0060】
【化14】
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、アシル、及びヒドロキシアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は、水素又はハロゲンであり；
環Ａは、ベンゼン環又はピリジン環であり；
環Ｂは、下記式（ｉ）又は式（ｉｉ）であり：
【化15】
【0061】
一実施態様において、環Ｂは、式（ｉ）である。また他の実施態様において、環Ｂは、式（ｉｉ）である。
【0062】
環Ｂが、式（ｉ）である場合、Ｒ４及びＲ５は、式（ｉ）のベンゾチアゾール環の置換可能な位置に存在することができる。好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ、式（ｉ）のベンゾチアゾール環の６位及び５位に存在する。環Ｂが、式（ｉｉ）である場合、Ｒ４及びＲ５は、式（ｉｉ）のベンゾフラン環の置換可能な位置に存在することができる。好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ、式（ｉｉ）のベンゾフラン環の５位及び６位に存在する。
【0063】
一実施態様において、環Ａは、ピリジン環である。他の実施態様において、環Ａは、ベンゼン環である。好ましくは、環Ａは、式（Ｉ）の構造式の向きにおいて、下記構造式で表されるピリジン環である。
【化16】
【0064】
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれも水素である。
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素又はアルキル、特にＣ１－８アルキル、好ましくはメチルである。他の実施態様において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、アルキル、特にＣ１－６アルキル、好ましくはメチルである。さらに他の実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれもアルキルであり、いずれもＣ１－６アルキルであることが好ましく、いずれもメチルであることがより好ましい。
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素又はアルキル、特にＣ１－８アルキル、好ましくはメチルである。他の実施態様において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、アルキル、特にＣ１－６アルキル、好ましくはメチルである。さらに他の実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれもアルキルであり、いずれもＣ１－６アルキルであることが好ましく、いずれもメチルであることがより好ましい。
【0065】
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素又はアルケニル、特に、Ｃ２－８アルケニル、好ましくは、アリル（－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）又はヘプタ－１，６－ジエン－４－イル（－ＣＨ２－（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）２）である。他の実施態様において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、アルケニル、特に、Ｃ２－８アルケニル、好ましくは、アリル（－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）又はヘプタ－１，６－ジエン－４－イル（－ＣＨ２－（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）２）である。さらに他の実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれもアルケニルであり、いずれもＣ２－８アルケニルであることが好ましく、いずれもアリル（－ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）又はヘプタ－１，６－ジエン－４－イル（－ＣＨ２－（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）２）であることがより好ましい。
【0066】
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素又はアシル、特に、Ｃ１－８アシル、好ましくは、アセチル（－ＣＯＣＨ３）である。他の実施態様において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、アシル、特に、Ｃ１－８アシル、好ましくは、アセチル（－ＣＯＣＨ３）である。さらに他の実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれもアシルであり、いずれもＣ１－８アシルであることが好ましく、いずれもアセチル（－ＣＯＣＨ３）であることがより好ましい。
【0067】
一実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に、水素又はヒドロキシアルキル、特に、ヒドロキシＣ１－８アルキル、好ましくは、ヒドロキシプロピル、より好ましくは３－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）である。他の実施態様において、Ｒ１は、水素であり、Ｒ２は、ヒドロキシアルキル、特に、ヒドロキシＣ１－８アルキル、好ましくは、ヒドロキシプロピル、より好ましくは３－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）である。さらに他の実施態様において、Ｒ１及びＲ２は、いずれもヒドロキシアルキルであり、いずれもヒドロキシＣ１－８アルキルであることが好ましく、いずれもヒドロキシプロピルであることがより好ましく、いずれも３－ヒドロキシプロピル（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）であることがさらに好ましい。
【0068】
一実施態様において、Ｒ３は、水素である。他の実施態様において、Ｒ３は、ハロゲン、すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩである。好ましくは、Ｒ３は、Ｆである。好ましくは、Ｒ３は、１８Ｆである。Ｒ３は、式（Ｉ）の構造式の向きにおいて、下記に示す位置に存在することが好ましい。
【化17】
【0069】
好ましくは、環ＡとＲ３との関係は、式（Ｉ）の構造式の向きにおいて、以下である。
【化18】
【0070】
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれも水素である。
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はヒドロキシである。他の実施態様において、Ｒ４は、ヒドロキシであり、Ｒ５は、水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５は、ヒドロキシである。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもヒドロキシである。
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はヒドロキシである。他の実施態様において、Ｒ４は、ヒドロキシであり、Ｒ５は、水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５は、ヒドロキシである。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもヒドロキシである。
【0071】
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はアルコキシ、特にメトキシである。他の実施態様において、Ｒ４は、アルコキシ、特にメトキシであり、Ｒ５は水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５は、アルコキシ、特にメトキシである。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもアルコキシであり、いずれもメトキシであることが好ましい。
【0072】
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はハロアルコキシ、特にフルオロアルコキシ、クロロアルコキシ、ブロモアルコキシ、又はヨードアルコキシである。他の実施態様において、Ｒ４は、ハロアルコキシ、特に、フルオロアルコキシ、クロロアルコキシ、ブロモアルコキシ、又はヨードアルコキシであり、Ｒ５は水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５はハロアルコキシ、特に、フルオロアルコキシ、クロロアルコキシ、ブロモアルコキシ、又はヨードアルコキシである。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもハロアルコキシであり、特にいずれもフルオロアルコキシ、クロロアルコキシ、ブロモアルコキシ、又はヨードアルコキシである。一実施態様において、フルオロアルコキシは、放射性同位体を含む。
【0073】
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はハロヒドロキシアルコキシ、特にフルオロヒドロキシアルコキシ、好ましくは、フルオロヒドロキシＣ１－３アルコキシ、より好ましくは、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）若しくは－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）である。他の実施態様において、Ｒ４は、ハロヒドロキシアルコキシ、特にフルオロヒドロキシアルコキシ、好ましくは、フルオロヒドロキシＣ１－３アルコキシ、より好ましくは、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）、又は－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）であり、Ｒ５は水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５はハロヒドロキシアルコキシ、特にフルオロヒドロキシアルコキシ、好ましくは、フルオロヒドロキシＣ１－３アルコキシ、より好ましくは、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）、又は－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）である。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもハロヒドロキシアルコキシであり、いずれもフルオロヒドロキシアルコキシであることが好ましく、いずれもフルオロヒドロキシＣ１－３アルコキシであることがより好ましく、いずれも－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（Ｆ）、又は－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）であることがさらに好ましい。一実施態様において、フルオロヒドロキシアルコキシは、放射性同位体を含む。好ましくは、当該フルオロヒドロキシアルコキシは、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（１８Ｆ）、又は－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－１８Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）である。
【0074】
一実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立に、水素又はアミノアルキル、特にアミノメチル若しくはアミノエチルである。他の実施態様において、Ｒ４は、アミノアルキル、特にアミノメチル又はアミノエチルであり、Ｒ５は、水素である。また他の実施態様において、Ｒ４は、水素であり、Ｒ５は、アミノアルキル、特にアミノメチル又はアミノエチルである。さらに他の実施態様において、Ｒ４及びＲ５は、いずれもアミノアルキルであり、いずれもアミノメチル又はアミノエチルであることが好ましい。
【0075】
一実施態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、下記式(II)により表される化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はそれぞれ式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５と同様である。）
【化19】
【0076】
一実施態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、下記式(III)により表される化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はそれぞれ式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５と同様である。）
【化20】
【0077】
一実施態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、下記式(IV)により表される化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はそれぞれ式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５と同様である。）
【化21】
【0078】
一実施態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、下記式(V)により表される化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５はそれぞれ式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５と同様である。）
【化22】
【0079】
一実施態様において、式（Ｉ）～（Ｖ）の化合物中、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である。放射性同位体は、１５Ｏ、１３Ｎ、１１Ｃ、及び１８Ｆなどからなる群から選択されるが、特に限定されない。好ましくは、放射性同位体は、１１Ｃ又は１９Ｆである。このうち、１１Ｃの半減期が約２０分であり、１８Ｆの半減期が約１１０分であることを考慮すれば、１８Ｆで標識した化合物の方が商業的利用価値が高いものと考えられる。したがって、最も好ましくは、放射性同位体は、１８Ｆである。
【0080】
好ましくは、Ｒ１～Ｒ５のいずれか１つ以上が、放射性同位体を含む基である。さらに好ましくは、Ｒ１及び／又はＲ２が、放射性同位体を含む基、例えば、１１Ｃを含む基（１１ＣＨ３を含めた［１１Ｃ］アルキルなど）である。より好ましくは、Ｒ３が、放射性同位体を含む基、例えば、－１８Ｆである。より好ましくは、Ｒ４及び／又はＲ５が放射性同位体を含む基、例えば、１１Ｃを含む基（－Ｏ１１ＣＨ３を含めた［１１Ｃ］アルコキシなど）、又は１８Ｆを含む基（－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－ＣＨ２（１８Ｆ）及び－Ｏ－ＣＨ（ＣＨ２－１８Ｆ）（ＣＨ２ＯＨ）を含めた［１８Ｆ］フルオロヒドロキシアルコキシなど）である。ここで、［１１Ｃ］アルキルは、アルキルを構成する炭素原子のうちの１つ以上の炭素原子が、１１Ｃであることを意味する。［１１Ｃ］アルコキシは、アルコキシを構成する炭素原子のうちの１つ以上の炭素原子が、１１Ｃであることを意味する。［１８Ｆ］フルオロヒドロキシアルコキシは、ヒドロキシアルコキシに１８Ｆが結合した基を意味する。
【0081】
式（Ｉ）で表される化合物の具体的な例としては、例えば以下の化合物が挙げられる。
【化23】
【化24】
【化25】
【化26】
【0082】
一実施態様において、上記具体的化合物中、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である。好ましくは、ベンゼン環又はピリジン環に結合したアミノベンジル又はアミノピリジニルにおけるアミノ基の窒素原子に結合した炭素原子が、放射性同位体１１Ｃである。好ましくは、上記具体的化合物中のＦが、放射性同位体１８Ｆである。好ましくは、ベンゾチアゾール環に結合したメトキシ基の炭素原子が、放射性同位体１１Ｃである。さらに好ましくは、上記具体的化合物の構造式中に示す＊印の原子（構造式中に＊印が２つある場合は、そのうちのいずれか１つ又は２つ）が、その原子の放射性同位体、例えば、１１Ｃ又は１８Ｆである。本明細書中において、［１１Ｃ］Ｃ０５－０４等の名称は、Ｃ０５－０４等の構造式中の＊印の原子上が１１Ｃであることを意味する。
【0083】
式（Ｉ）で表される化合物の合成方法は特に限定されないが、例えば、特許文献１に記載の合成方法を参照して製造することができる。
【0084】
なお、上記式（Ｉ）で表される化合物のうち、下記式で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物は、新規化合物である。下記式で表される化合物は、上記αシヌクレイン凝集体結合剤として有用であるが、上記αシヌクレイン凝集体結合剤以外の用途に用いることもできる。
（式中、＊印の原子の少なくとも一方はその原子の放射性同位体である。）
【化27】
【化28】
【0085】
これら新規化合物は、例えば、それぞれ下記中間体から後述する実施例に示す合成方法により合成することができる。
【化29】
【化30】
【化31】
【0086】
αシヌクレイン凝集体結合剤は、医薬として許容し得る担体を含むことができる。該医薬として許容し得る担体の例を挙げると、水、食塩水、生理食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、等張性デキストロース注射液、無菌水注射液、デキストロース、及び乳酸リンゲル注射液などがある。
【0087】
αシヌクレイン凝集体結合剤が含む式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物や、医薬として許容し得る担体の含有量は、特に制限はなく、これらは、使用される化合物の種類；投与される哺乳動物の年齢、体重、健康状態、性別及び食事内容；投与の回数、及び投与経路；治療期間；同時に使用される他の薬剤など、様々な要因により決定される。医薬として許容し得る担体の含有量は、αシヌクレイン凝集体結合剤の１～９９重量％の量とすることができる。αシヌクレイン凝集体結合剤は、式（Ｉ）で表される化合物を、例えば、対象の体重（ｋｇ）あたりの式（Ｉ）で表される化合物量が、５ｎｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、下限は５ｎｇ／ｋｇ以上、０．０１ｍｇ／ｋｇ以上、０．０５ｍｇ／ｋｇ以上や、０．１ｍｇ／ｋｇ以上、上限は５ｍｇ／ｋｇ以下、３ｍｇ／ｋｇ以下、１ｍｇ／ｋｇ以下や、２０μｇ／ｋｇ以下の量で投与できるように調製される。
【0088】
＜αシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物＞
本発明のαシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物（以下、光学イメージング用組成物とも記載する）は、上記本発明の結合剤を含む。当該光学イメージングは、インビトロ、エキソビボ、及びインビボイメージングを含む。
本発明のαシヌクレイン凝集体の光学イメージング用組成物（以下、光学イメージング用組成物とも記載する）は、上記本発明の結合剤を含む。当該光学イメージングは、インビトロ、エキソビボ、及びインビボイメージングを含む。
【0089】
光学イメージングとしては、例えば、蛍光顕微鏡測定法、多光子イメージング法、二光子イメージング法、近赤外蛍光イメージング法が挙げられる。
【0090】
光学イメージング用組成物は、医薬として許容し得る担体を含むことができる。該医薬として許容し得る担体の例を挙げると、水、食塩水、生理食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、等張性デキストロース注射液、無菌水注射液、デキストロース、及び乳酸リンゲル注射液などがある。
【0091】
光学イメージング用組成物が含む式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物や、医薬として許容し得る担体の含有量は、特に制限はなく、これらは、使用される化合物の種類；投与される哺乳動物の年齢、体重、健康状態、性別及び食事内容；投与の回数、及び投与経路；治療期間；同時に使用される他の薬剤など、様々な要因により決定される。医薬として許容し得る担体の含有量は、光学イメージング用組成物の１～９９重量％の量とすることができる。光学イメージング用組成物は、式（Ｉ）で表される化合物を、例えば、対象の体重（ｋｇ）あたりの式（Ｉ）で表される化合物量（ｍｇ）が０．０１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．０５ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇの量で投与できるように調製される。
【0092】
＜αシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物＞
本発明のαシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物（以下、放射イメージング用組成物とも記載する）は、上記本発明の結合剤を含む。当該放射イメージングは、インビトロ、エキソビボ、及びインビボイメージングを含む。
本発明のαシヌクレイン凝集体の放射イメージング用組成物（以下、放射イメージング用組成物とも記載する）は、上記本発明の結合剤を含む。当該放射イメージングは、インビトロ、エキソビボ、及びインビボイメージングを含む。
【0093】
放射イメージングとしては、例えば、ポジトロン断層撮影法（Positron Emission Tomography，ＰＥＴ）、単一光子放射断層撮影法（Single photon emission computed tomography，ＳＰＥＣＴ）、オートラジオグラフィーが挙げられる。
【0094】
放射イメージング用組成物は、医薬として許容し得る担体を含むことができる。該医薬として許容し得る担体の例を挙げると、水、食塩水、生理食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、等張性デキストロース注射液、無菌水注射液、デキストロース、及び乳酸リンゲル注射液などがある。
【0095】
放射イメージング用組成物が含む式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物や、医薬として許容し得る担体の含有量は、特に制限はなく、これらは、使用される化合物の種類；投与される哺乳動物の年齢、体重、健康状態、性別及び食事内容；投与の回数、及び投与経路；治療期間；同時に使用される他の薬剤など、様々な要因により決定される。医薬として許容し得る担体の含有量は、放射イメージング用組成物の１～９９重量％の量とすることができる。放射イメージング用組成物は、式（Ｉ）で表される化合物を、例えば、対象の体重（ｋｇ）あたりの式（Ｉ）で表される化合物量が５ｎｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは５ｎｇ～２０μｇ／ｋｇの量で投与できるように調製される。
【0096】
＜αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬＞
本発明のαシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬（以下、コンパニオン診断薬ともいう。）は、上記本発明の結合剤を含む。治療のためのコンパニオン診断薬とは、前記疾患であることが判明した場合に、治療が見込めるかどうかを判断するための診断薬である。また、予防のためのコンパニオン診断薬とは、前記疾患の前駆状態であることが判明した場合に、今後の発症を予測する、もしくは発症を抑制する予防が見込めるかどうかを判断するための診断薬である。
上記診断薬を用いて、対象から得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量に関するデータを、予め取得した上記疾患とαシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量との相関性に照会することで、対象の上記疾患に関する診断（具体的には、上記疾患の罹患有無、重篤性、発作可能性等）が可能である。
また、上記コンパニオン診断薬を用いて、対象から得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量に関するデータを、予め取得した上記疾患と脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量との相関性に照会することで、対象の上記疾患状態が把握されるので、これに基づき、上記疾患の予防／治療計画（投与する予防／治療薬の種類や組合せ、用量、用法など）を策定することができる。
本発明の一実施形態は、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防のための医薬であって、上記コンパニオン診断で得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布に関するデータに基づく投与計画で投与される医薬にも関する。
本発明のαシヌクレイン凝集体が関連する疾患の診断薬、又は前記疾患の治療又は予防のためのコンパニオン診断薬（以下、コンパニオン診断薬ともいう。）は、上記本発明の結合剤を含む。治療のためのコンパニオン診断薬とは、前記疾患であることが判明した場合に、治療が見込めるかどうかを判断するための診断薬である。また、予防のためのコンパニオン診断薬とは、前記疾患の前駆状態であることが判明した場合に、今後の発症を予測する、もしくは発症を抑制する予防が見込めるかどうかを判断するための診断薬である。
上記診断薬を用いて、対象から得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量に関するデータを、予め取得した上記疾患とαシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量との相関性に照会することで、対象の上記疾患に関する診断（具体的には、上記疾患の罹患有無、重篤性、発作可能性等）が可能である。
また、上記コンパニオン診断薬を用いて、対象から得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量に関するデータを、予め取得した上記疾患と脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布量との相関性に照会することで、対象の上記疾患状態が把握されるので、これに基づき、上記疾患の予防／治療計画（投与する予防／治療薬の種類や組合せ、用量、用法など）を策定することができる。
本発明の一実施形態は、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防のための医薬であって、上記コンパニオン診断で得られる脳内αシヌクレイン凝集体の量及び／又は分布に関するデータに基づく投与計画で投与される医薬にも関する。
【0097】
＜脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット＞
本発明の脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット（以下、診断キットともいう）は、上記本発明の結合剤と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一種と、を含む。
本発明の脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット（以下、診断キットともいう）は、上記本発明の結合剤と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一種と、を含む。
【0098】
脳内に蓄積する物質としては、αシヌクレイン凝集体、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体が挙げられる。
【0099】
脳内に蓄積する物質が関連する疾患としては、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患であるパーキンソン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）や、タウタンパク質やアミロイドβの凝集体が関連する疾患であるアルツハイマー病（ＡＤ）や前頭側頭葉変性症が挙げられる。
【0100】
本発明の結合剤はタウタンパク質やアミロイドβの凝集体よりもαシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い一方、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール及び1－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールは、αシヌクレイン凝集体よりもタウタンパク質の凝集体への結合選択性が高いことが分かった。
【0101】
本発明の診断キットは、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い前者と、タウタンパク質の凝集体への結合選択性が高い後者の両方を含むため、前者の検出結果（検出される光や放射線の量及び／又は分布）と後者の検出結果とを比較することで、イメージングされた各領域に存在する物質がどの物質なのか、具体的にはαシヌクレイン凝集体と、タウタンパク質凝集体とを分類することができ、さらに各々の存在量を定量することもできる。このため、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患、及び／又は、タウタンパク質凝集体が関連する疾患を高精度に診断することができる。例えば、αシヌクレイン凝集体への結合性と、タウタンパク質凝集体への結合性との比を、本発明の結合剤と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール等との各々について予め特定しておき、被験体での前者及び後者投与後の脳内各領域での光や放射線の量比を測定すれば、予め特定した比と測定した量比との関係から当該領域にαシヌクレイン凝集体、タウタンパク質凝集体のいずれが存在するのかを分類し、各量の定量が可能である。
【0102】
また、本発明の診断キットを、アミロイドβのイメージング剤と組み合わせた診断キットとすることもできる。本発明の診断キットとアミロイドβのイメージング剤と組み合わせた診断キットは、イメージングされた各領域に存在する物質がどの物質なのか、具体的にはαシヌクレイン凝集体と、タウタンパク質凝集体と、アミロイドβ凝集体とを分類することができ、さらに各々の存在量を定量することもできる。このため、αシヌクレイン凝集体が関連する疾患、タウタンパク質凝集体が関連する疾患、及び／又はアミロイドβが関連する疾患を高精度に診断することができる。
【0103】
本発明の一実施形態は、脳内蓄積物質が関連する疾患の治療又は予防のための医薬であって、上記診断キットで得られる脳内蓄積物質体の量及び／又は分布に関するデータに基づく投与計画で投与される医薬にも関する。
【0104】
＜光学イメージング方法＞
本発明の光学イメージング方法は、上記本発明の結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含む。
被験体に有効量の結合剤を投与すると、生体脳に移行した結合剤が、生体脳内に存在するαシヌクレイン凝集体に結合する。結合剤を励起させる第１の波長の光を、結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から照射し、脳内の結合剤から発せられる第２の波長の光（例えば蛍光）を検出することにより、αシヌクレイン凝集体の光学イメージング（画像化）をすることができる。
本発明の光学イメージング方法は、上記本発明の結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含む。
被験体に有効量の結合剤を投与すると、生体脳に移行した結合剤が、生体脳内に存在するαシヌクレイン凝集体に結合する。結合剤を励起させる第１の波長の光を、結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から照射し、脳内の結合剤から発せられる第２の波長の光（例えば蛍光）を検出することにより、αシヌクレイン凝集体の光学イメージング（画像化）をすることができる。
【0105】
被験体としては、哺乳動物が挙げられる。哺乳動物は、例えば、ヒト、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ハムスター、サル、イヌ、フェレット、又はミニブタなどを含む。
【0106】
投与方法は、特に制限されないが、例えば、経口投与や、静脈内投与又は腹腔内投与等の非経口投与がある。好ましくは、静脈内投与又は腹腔内投与である。最も好ましくは、静脈内投与である。投与量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、又は０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇであることが好ましく、最も好ましくは、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇである。
【0107】
＜放射イメージング方法＞
本発明の放射イメージング方法は、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含む。
被験体に有効量の結合剤を投与すると、生体脳に移行した結合剤が、生体脳内に存在するαシヌクレイン凝集体に結合する。脳内の結合剤から発せられる放射線を検出することにより、αシヌクレイン凝集体の放射イメージング（画像化）をすることができる。
本発明の放射イメージング方法は、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含む。
被験体に有効量の結合剤を投与すると、生体脳に移行した結合剤が、生体脳内に存在するαシヌクレイン凝集体に結合する。脳内の結合剤から発せられる放射線を検出することにより、αシヌクレイン凝集体の放射イメージング（画像化）をすることができる。
【0108】
被験体としては、哺乳動物が挙げられる。哺乳動物は、例えば、ヒト、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ハムスター、サル、イヌ、フェレット、又はミニブタなどを含む。好ましくは、哺乳動物は、ヒトである。
【0109】
投与方法は、特に制限されないが、例えば、経口投与や、静脈内投与又は腹腔内投与等の非経口投与がある。好ましくは、静脈内投与又は腹腔内投与である。最も好ましくは、静脈内投与である。投与量は、５ｎｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇであることが好ましく、５ｎｇ～２０μｇ／ｋｇであることがより好ましい。投与放射能量は、個体あたり３７ＭＢｑ～７．４ＧＢｑであることが好ましく、３７０ＧＢｑ～３，７００ＧＢｑであることがより好ましい。
【0110】
＜脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法＞
本発明の脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法（以下、スクリーニング方法ともいう）は、被験体への候補物質の投与前後における、上記＜光学イメージング方法＞又は上記＜放射イメージング方法＞のイメージング方法によって検出される光又は放射線の量及び／又は分布の差異に基づいて、候補物質を選抜する工程を有する。
本発明の脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患の治療又は予防薬のスクリーニング方法（以下、スクリーニング方法ともいう）は、被験体への候補物質の投与前後における、上記＜光学イメージング方法＞又は上記＜放射イメージング方法＞のイメージング方法によって検出される光又は放射線の量及び／又は分布の差異に基づいて、候補物質を選抜する工程を有する。
【0111】
脳内αシヌクレイン凝集体が関連する疾患は、上記＜脳内に蓄積する物質が関連する疾患の診断キット＞に記載されたものと同様である。
また、被験体や投与方法は、上記＜光学イメージング方法＞や＜放射イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
また、被験体や投与方法は、上記＜光学イメージング方法＞や＜放射イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
【0112】
例えば、候補物質の投与後、結合剤の蛍光等の光や放射線の量（強度）が、候補物質を投与する前のものと比較して減少している場合、候補物質が、該疾患又は症状の治療用化合物として有用であり得る。
また、検出される被験体の光又は放射線の量及び／又は分布を、他の正常な哺乳動物のものと比較し、候補化合物の投与後に投与前よりも正常な哺乳動物のものに近づく場合、該候補化合物が、該疾患又は症状の治療用化合物として有用であり得る。
また、検出される被験体の光又は放射線の量及び／又は分布を、他の正常な哺乳動物のものと比較し、候補化合物の投与後に投与前よりも正常な哺乳動物のものに近づく場合、該候補化合物が、該疾患又は症状の治療用化合物として有用であり得る。
【0113】
＜脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法＞
本発明の脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含み、該検出した光の量及び／又は分布に基づいて、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する。この方法は、光学イメージングにより、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法である。
本発明の脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する工程を含み、該検出した光の量及び／又は分布に基づいて、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する。この方法は、光学イメージングにより、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法である。
【0114】
被験体や投与方法は、上記＜光学イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
【0115】
検出される被験体の光の量及び／又は分布と、他の正常な哺乳動物のものとの差を求めることで、脳内のαシヌクレイン凝集体の蓄積を定量することや、脳内のαシヌクレイン凝集体の蓄積の有無を判定することができる。
【0116】
他の実施態様において、本発明の脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法は、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する工程を含み、該検出した放射線の量及び／又は分布に基づいて、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する。この方法は、放射イメージングにより、脳内αシヌクレイン凝集体の蓄積を定量又は判定する方法である。
【0117】
被験体や投与方法は、上記＜放射イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
【0118】
検出される被験体の光又は放射線の量及び／又は分布と、他の正常な哺乳動物のものとの差を求めることで、脳内のαシヌクレイン凝集体の蓄積を定量することや、脳内のαシヌクレイン凝集体の蓄積の有無を判定することができる。
【0119】
＜脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法＞
本発明の脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する第１の工程と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された該被験体の生体脳に脳外から第３の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第３の波長とは異なる第４の波長の光を検出する第２の工程と、を含み、第１の工程において検出した光の量及び／又は分布データと、第２の工程において検出した光の量及び／又は分布データと、に基づいて、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する。この方法は、光学イメージングにより、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法である。
本発明の脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳に脳外から第１の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第１の波長とは異なる第２の波長の光を検出する第１の工程と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された該被験体の生体脳に脳外から第３の波長の光を照射した後に、該脳から発せられる、第３の波長とは異なる第４の波長の光を検出する第２の工程と、を含み、第１の工程において検出した光の量及び／又は分布データと、第２の工程において検出した光の量及び／又は分布データと、に基づいて、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する。この方法は、光学イメージングにより、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法である。
【0120】
被験体や投与方法は、上記＜光学イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
【0121】
αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い結合剤が投与された被験体の脳から発せられる光を検出する第１の工程と、タウタンパク質凝集体への結合選択性が高い上記物質が投与された被験体の脳から発せられる光を検出する第２の工程との両方を含むため、第１の工程の検出結果（検出される光の量及び／又は分布）と第２の工程の検出結果とを比較することで、脳内に蓄積する物質がαシヌクレイン凝集体及び／又はタウタンパク質凝集体であるか否かの分類や蓄積を判定することができる。
【0122】
他の実施態様において、本発明の脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法は、１個又はそれ以上の原子が該原子の放射性同位体である式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含む上記結合剤を投与された被験体の生体脳から発せられる放射線を検出する第１の工程と、２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（（１１）Ｃ－メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール及び１－（１８）Ｆ－フルオロ－３－（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オールから選択される少なくとも一方を、第１の工程と異なる時期に投与された該被験体の脳から発せられる放射線を検出する第２の工程と、を含み、第１の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、第２の工程において検出した放射線の量及び／又は分布データと、に基づいて、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する。この方法は、放射イメージングにより、脳内に蓄積する物質の分類及び蓄積を判定する方法である。
【0123】
被験体や投与方法は、上記＜放射イメージング方法＞に記載されたものと同様である。
【0124】
αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い結合剤が投与された被験体の脳から発せられる放射線を検出する第１の工程と、タウタンパク質凝集体への結合選択性が高い上記物質が投与された被験体の脳から発せられる放射線を検出する第２の工程との両方を含むため、第１の工程の検出結果（検出される放射線の量及び／又は分布）と第２の工程の検出結果とを比較することで、脳内に蓄積する物質がαシヌクレイン凝集体及び／又はタウタンパク質凝集体であるか否かの分類や蓄積を判定することができる。
【0125】
＜αシヌクレイン凝集阻害剤＞
本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤（以下、凝集阻害剤とも記載する）は、上記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含有する。本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤が含有する式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩や、その溶媒和物は、上記＜αシヌクレイン凝集体結合剤＞における式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩やその溶媒和物と同様である。
本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤（以下、凝集阻害剤とも記載する）は、上記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、又はその溶媒和物を含有する。本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤が含有する式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩や、その溶媒和物は、上記＜αシヌクレイン凝集体結合剤＞における式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩やその溶媒和物と同様である。
【0126】
かかる本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤は、後述する実施例に示すように、αシヌクレイン凝集体の形成を抑制することができる。このため、本発明のαシヌクレイン凝集阻害剤を哺乳動物に投与すると、生体脳に移行した凝集阻害剤が生体脳内に存在するαシヌクレインの凝集を阻害し、哺乳動物のαシヌクレイン凝集体に由来する疾患、例えば、パーキンソン病、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）や、多系統萎縮症（ＭＳＡ）等のうちαシヌクレイン凝集体に由来する各疾患を、予防又は治療することができる。
【0127】
上記式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、及びその溶媒和物は、上述のとおり、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高い。
式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、及びその溶媒和物は、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高く、αシヌクレインが凝集する際にαシヌクレイン凝集体に結合することにより、αシヌクレインの凝集の進行を抑制・阻害することができると推測される。
式（Ｉ）で表される化合物、その医薬として許容し得る塩、及びその溶媒和物は、αシヌクレイン凝集体への結合選択性が高く、αシヌクレインが凝集する際にαシヌクレイン凝集体に結合することにより、αシヌクレインの凝集の進行を抑制・阻害することができると推測される。
【0128】
凝集阻害剤の投与対象である哺乳動物としては、例えば、ヒト、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ハムスター、サル、イヌ、フェレット、又はミニブタなどが挙げられる。
【0129】
凝集阻害剤の投与方法は、特に制限されないが、例えば、経口投与や、静脈内投与又は腹腔内投与等の非経口投与がある。αシヌクレイン凝集体が存在する局所（脳）への直接投与でもよい。好ましくは、静脈内投与又は腹腔内投与である。最も好ましくは、静脈内投与である。投与量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、又は０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇであることが好ましく、最も好ましくは、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇである。
【実施例】
【0130】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
以下の化合物を用いた。
以下の化合物を用いた。
【化32】
【化33】
【0131】
（ＢＦ－２２７の準備）
ＢＦ－２２７（２－（２－［２－ジメチルアミノチアゾール－５－イル］エテニル）－６－（２－［フルオロ］エトキシ）ベンゾオキサゾール）は、ナード研究所製のカタログ番号ＮＰ０３９－０である。
ＢＦ－２２７（２－（２－［２－ジメチルアミノチアゾール－５－イル］エテニル）－６－（２－［フルオロ］エトキシ）ベンゾオキサゾール）は、ナード研究所製のカタログ番号ＮＰ０３９－０である。
【0132】
（ＰＢＢ３の合成）
ＰＢＢ３（（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例３に記載された方法により合成した。
ＰＢＢ３（（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例３に記載された方法により合成した。
【0133】
（Ｃ０５－０１の合成）
Ｃ０５－０１（（（Ｅ）－２－（４－（２－フルオロ－６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例２３に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０１（（（Ｅ）－２－（４－（２－フルオロ－６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例２３に記載された方法により合成した。
【0134】
（Ｃ０５－０２の合成）
Ｃ０５－０２（（（Ｅ）－５－（４－（６－（アミノメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）ブタ－３－エン－１－イニル）－Ｎ－メチルピリジン－２－アミン）は、特許文献１の合成実施例１１に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０２（（（Ｅ）－５－（４－（６－（アミノメチル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）ブタ－３－エン－１－イニル）－Ｎ－メチルピリジン－２－アミン）は、特許文献１の合成実施例１１に記載された方法により合成した。
【0135】
（Ｃ０５－０３の合成）
Ｃ０５－０３（（（Ｅ）－２－（４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例１０に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０３（（（Ｅ）－２－（４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例１０に記載された方法により合成した。
【0136】
（Ｃ０５－０５の合成）
Ｃ０５－０５（（（Ｅ）－１－フルオロ－３－（２－（４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール）、特許文献１の合成実施例２１に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０５（（（Ｅ）－１－フルオロ－３－（２－（４－（６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イルオキシ）プロパン－２－オール）、特許文献１の合成実施例２１に記載された方法により合成した。
【0137】
（Ｃ０５－０８の合成）
Ｃ０５－０８（（（Ｅ）－２－（４－（４－（ジメチルアミノ）フェニル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例６に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０８（（（Ｅ）－２－（４－（４－（ジメチルアミノ）フェニル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例６に記載された方法により合成した。
【0138】
（Ｃ０５－０９の合成）
Ｃ０５－０９（（（Ｅ）－２－（４－（４－（メチルアミノ）フェニル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例７に記載された方法により合成した。
Ｃ０５－０９（（（Ｅ）－２－（４－（４－（メチルアミノ）フェニル）ブタ－１－エン－３－イニル）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－オール）は、特許文献１の合成実施例７に記載された方法により合成した。
【0139】
（Ｃ０６－０１の合成）
Ｃ０６－０１（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（２－フルオロ－６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾフラン－５－オールは、特許文献１の合成実施例２４に記載された方法により合成した。
Ｃ０６－０１（２－（（１Ｅ，３Ｅ）－４－（２－フルオロ－６－（メチルアミノ）ピリジン－３－イル）ブタ－１，３－ジエニル）ベンゾフラン－５－オールは、特許文献１の合成実施例２４に記載された方法により合成した。
【0140】
（Ｃ０５－０４の合成）
以下のスキームにより、Ｃ０５－０４（ＴＭ２）を合成した。
以下のスキームにより、Ｃ０５－０４（ＴＭ２）を合成した。
【化34】
【化35】
【化36】
【0141】
（Ｓｔｅｐ １）
アセトニトリル（ＭｅＣＮ）中で、化合物１（５．０１ｇ、東京化成工業製）を、亜硝酸－ｔｅｒｔ－ブチル（ｔ－ＢｕＯＮＯ）及びＣｕＢｒ２と反応させて、黄色油状物の化合物２（収量５．９４ｇ、収率８７．５％）を得た。なお、得られた化合物２は保管中に固化した。
アセトニトリル（ＭｅＣＮ）中で、化合物１（５．０１ｇ、東京化成工業製）を、亜硝酸－ｔｅｒｔ－ブチル（ｔ－ＢｕＯＮＯ）及びＣｕＢｒ２と反応させて、黄色油状物の化合物２（収量５．９４ｇ、収率８７．５％）を得た。なお、得られた化合物２は保管中に固化した。
【0142】
（Ｓｔｅｐ ２）
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物２（５．９３ｇ）を、ｎ－ブチルリチウム（ｎ－ＢｕＬｉ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とこの順に反応させて、淡黄色固体の化合物５（収量３．７８ｇ、収率８０．５％）を得た。
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物２（５．９３ｇ）を、ｎ－ブチルリチウム（ｎ－ＢｕＬｉ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とこの順に反応させて、淡黄色固体の化合物５（収量３．７８ｇ、収率８０．５％）を得た。
【0143】
（Ｓｔｅｐ ３）
ピリジン中で、化合物５（３．７８ｇ）を、マロン酸及びピペリジンと反応させて、黄土色固体の化合物６（収量３．７１ｇ、収率８０．６％）を得た。
ピリジン中で、化合物５（３．７８ｇ）を、マロン酸及びピペリジンと反応させて、黄土色固体の化合物６（収量３．７１ｇ、収率８０．６％）を得た。
【0144】
（Ｓｔｅｐ ４）
ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で、化合物６（４．００ｇ）を、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（ＤＭＰ）及び臭化テトラエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）と反応させて、黄色固体の化合物７（収量１．８５ｇ、収率４０．３％）を得た。
ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で、化合物６（４．００ｇ）を、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（ＤＭＰ）及び臭化テトラエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）と反応させて、黄色固体の化合物７（収量１．８５ｇ、収率４０．３％）を得た。
【0145】
（Ｓｔｅｐ １０）
アセトニトリル（ＭｅＣＮ）中で、化合物１４（５．００ｇ、Ｃｏｍｂｉ－Ｂｌｏｃｋｓ製）を、Ｎ－ブロモスクシンイミド（ＭＢＳ）と反応させて、淡桃色固体の化合物１５（収量６．８０ｇ、７９．８％）を得た。
アセトニトリル（ＭｅＣＮ）中で、化合物１４（５．００ｇ、Ｃｏｍｂｉ－Ｂｌｏｃｋｓ製）を、Ｎ－ブロモスクシンイミド（ＭＢＳ）と反応させて、淡桃色固体の化合物１５（収量６．８０ｇ、７９．８％）を得た。
【0146】
（Ｓｔｅｐ １１）
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物１５（６．８０ｇ）を、二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（ＤＩＢＯＣ）及びヘキサメチルジシラザンナトリウム（ＮａＨＭＤＳ）と反応させて、黄色油状物の化合物１６（収量２．４２ｇ、収率２３．３％）を得た。
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物１５（６．８０ｇ）を、二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（ＤＩＢＯＣ）及びヘキサメチルジシラザンナトリウム（ＮａＨＭＤＳ）と反応させて、黄色油状物の化合物１６（収量２．４２ｇ、収率２３．３％）を得た。
【0147】
（Ｓｔｅｐ １２）
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、化合物１６（２．７５ｇ）を、ヨウ化メチル（ＭｅＩ）及び水素化ナトリウム（ＮａＨ）と反応させて、無色油状物の化合物１７（収量２．８２ｇ、収率９７．８％）を得た。
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、化合物１６（２．７５ｇ）を、ヨウ化メチル（ＭｅＩ）及び水素化ナトリウム（ＮａＨ）と反応させて、無色油状物の化合物１７（収量２．８２ｇ、収率９７．８％）を得た。
【0148】
（Ｓｔｅｐ １３）
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）の存在下で、化合物１７（２．８１ｇ）を、トリメチルシリルアセチレンと反応させて、無色油状物の化合物１８（収量２．５０ｇ、収率８４．２％）を得た。なお、得られた化合物１８は保管中に固化した。
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）の存在下で、化合物１７（２．８１ｇ）を、トリメチルシリルアセチレンと反応させて、無色油状物の化合物１８（収量２．５０ｇ、収率８４．２％）を得た。なお、得られた化合物１８は保管中に固化した。
【0149】
（Ｓｔｅｐ １４）
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物１８（２．４９ｇ）を、フッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）と反応させて、微褐色油状物の化合物１９（収量１．８５ｇ、収率９５．７％）を得た。
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物１８（２．４９ｇ）を、フッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）と反応させて、微褐色油状物の化合物１９（収量１．８５ｇ、収率９５．７％）を得た。
【0150】
（Ｓｔｅｐ １７）
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）の存在下で、化合物７（２１３．０ｍｇ）と化合物１９（２６１．８ｍｇ）を反応させて、淡黄色固体の化合物２１（収量２５６．３ｍｇ、収率７４．０％）を得た。
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィン（ＰＰｈ３）の存在下で、化合物７（２１３．０ｍｇ）と化合物１９（２６１．８ｍｇ）を反応させて、淡黄色固体の化合物２１（収量２５６．３ｍｇ、収率７４．０％）を得た。
【0151】
（Ｓｔｅｐ １８）
化合物２１（２４５．３ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）と反応させて、黄色固体のＣ０５－０４（ＴＭ２）（収量１７４．２ｍｇ、収率９２．０％）を得た。なお、トータル収率は１５％であった。得られたＣ０５－０４の１Ｈ ＮＭＲ及びＥＳＩ ＭＳを以下に示す。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 2.79 (3H, brs), 3.84 (3H, s), 6.40 (1H, m), 6.93 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.12 (1H, m), 7.21 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.58-7.68 (3H, m), 7.87 (1H, m)
ESI MS : m/z found 340.09 (Calcd for C18H14FN3OS [M+H]+ 340.09)
化合物２１（２４５．３ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）と反応させて、黄色固体のＣ０５－０４（ＴＭ２）（収量１７４．２ｍｇ、収率９２．０％）を得た。なお、トータル収率は１５％であった。得られたＣ０５－０４の１Ｈ ＮＭＲ及びＥＳＩ ＭＳを以下に示す。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 2.79 (3H, brs), 3.84 (3H, s), 6.40 (1H, m), 6.93 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.12 (1H, m), 7.21 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.58-7.68 (3H, m), 7.87 (1H, m)
ESI MS : m/z found 340.09 (Calcd for C18H14FN3OS [M+H]+ 340.09)
【0152】
（Ｃ０６－０３の合成）
以下のスキームにより、Ｃ０６－０３（ＴＭ１）を合成した。
以下のスキームにより、Ｃ０６－０３（ＴＭ１）を合成した。
【化37】
【化38】
【0153】
（Ｓｔｅｐ ５）
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、化合物８（２４．９５ｇ、東京化成工業製）を、ブロモ酢酸エチル及びＫ２ＣＯ３と反応させて、白色固体の化合物９（収量２６．０７ｇ、収率７２．２％）を得た。
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中で、化合物８（２４．９５ｇ、東京化成工業製）を、ブロモ酢酸エチル及びＫ２ＣＯ３と反応させて、白色固体の化合物９（収量２６．０７ｇ、収率７２．２％）を得た。
【0154】
（Ｓｔｅｐ ６）
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物９（５．７２ｇ）を、Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルアミン塩酸塩及びリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＬＨＭＤＳ）と反応させて、褐色油状物の化合物１０（収量５．６８ｇ、収率９３．０％）を得た。
テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、化合物９（５．７２ｇ）を、Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルアミン塩酸塩及びリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＬＨＭＤＳ）と反応させて、褐色油状物の化合物１０（収量５．６８ｇ、収率９３．０％）を得た。
【0155】
（Ｓｔｅｐ ７）
ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）中で、化合物１０（５．６８ｇ）を、水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ）と反応させて、黄色固体の化合物１１（収量３．８０ｇ、収率８９．３％）を得た。
ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）中で、化合物１０（５．６８ｇ）を、水素化リチウムアルミニウム（ＬＡＨ）と反応させて、黄色固体の化合物１１（収量３．８０ｇ、収率８９．３％）を得た。
【0156】
（Ｓｔｅｐ ８）
ピリジン中で、化合物１１（３．６９ｇ）を、マロン酸及びピペリジンと反応させて、淡黄色固体の化合物１２（収量４．４１ｇ、収率９６．５％）を得た。
ピリジン中で、化合物１１（３．６９ｇ）を、マロン酸及びピペリジンと反応させて、淡黄色固体の化合物１２（収量４．４１ｇ、収率９６．５％）を得た。
【0157】
（Ｓｔｅｐ ９）
ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で、化合物１２（４．４０ｇ）を、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（ＤＭＰ）及び臭化テトラエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）と反応させて、淡黄色固体の化合物１３（収量４．４９ｇ、収率８７．９％）を得た。
ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で、化合物１２（４．４０ｇ）を、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（ＤＭＰ）及び臭化テトラエチルアンモニウム（ＴＥＡＢ）と反応させて、淡黄色固体の化合物１３（収量４．４９ｇ、収率８７．９％）を得た。
【0158】
（Ｓｔｅｐ １５）
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィンの存在下で、化合物１３（５９６．６ｍｇ）と化合物１９（７６５．２ｍｇ）を反応させて、淡黄色固体の化合物２０（収量３７５．５ｍｇ、収率３７．７％）を得た。
トリエチルアミン（ＴＥＡ）とテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の混合液中で、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２）、ヨウ化銅（ＣｕＩ）、トリフェニルホスフィンの存在下で、化合物１３（５９６．６ｍｇ）と化合物１９（７６５．２ｍｇ）を反応させて、淡黄色固体の化合物２０（収量３７５．５ｍｇ、収率３７．７％）を得た。
【0159】
（Ｓｔｅｐ １６）
化合物２０（３７５．５ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）と反応させて、黄色固体のＣ０６－０３（ＴＭ１）（収量１４９．５ｍｇ、収率５２．２％）を得た。なお、トータル収率は１０％であった。得られたＣ０６－０３の１Ｈ ＮＭＲ及びＥＳＩ ＭＳを以下に示す。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 2.78 (3H, brs), 3.78 (3H, s), 6.38 (1H, m), 6.51 (1H, d, J = 16.0 Hz), 6.91 (1H, m), 6.95 (1H, s), 6.98 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.14 (1H, m), 7.44-7.49 (2H, m), 7.59 (1H, m)
ESI MS : m/z found 323.12 (Calcd for C19H15FN2O2 [M+H]+ 323.12)
化合物２０（３７５．５ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）と反応させて、黄色固体のＣ０６－０３（ＴＭ１）（収量１４９．５ｍｇ、収率５２．２％）を得た。なお、トータル収率は１０％であった。得られたＣ０６－０３の１Ｈ ＮＭＲ及びＥＳＩ ＭＳを以下に示す。
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 2.78 (3H, brs), 3.78 (3H, s), 6.38 (1H, m), 6.51 (1H, d, J = 16.0 Hz), 6.91 (1H, m), 6.95 (1H, s), 6.98 (1H, d, J = 16.0 Hz), 7.14 (1H, m), 7.44-7.49 (2H, m), 7.59 (1H, m)
ESI MS : m/z found 323.12 (Calcd for C19H15FN2O2 [M+H]+ 323.12)
【0160】
（［１８Ｆ］Ｃ０５－０１の合成）
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１を合成した。
［１８Ｆ］フッ化物イオンを、Ｋ．２２２（Kryptofix 222）（７．５ｍｇ）と炭酸カリウム（２．７７ｍｇ）を含む５０％アセトニトリル溶液（０．４ｍＬ）で溶出し、反応容器に導入した後、窒素ガス気流下で加熱し、溶媒を乾固させた。その後、無水アセトニトリル（０．１ｍＬ）を加えて共沸留去し、充分に反応容器内を乾燥させた。以下の反応は遮光下で行った。特許文献１の合成実施例３８（ｐｒｅ２４）に記載された方法により合成したｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌ（Ｅ）－（５－（４－（６－（ｅｔｈｏｘｙｍｅｔｈｏｘｙ）ｂｅｎｚｏ［ｄ］ｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｂｕｔ－３－ｅｎ－１－ｙｎ－１－ｙｌ）－６－ｎｉｔｒｏｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）（ｍｅｔｈｙｌ）ｃａｒｂａｍａｔｅ（ｐｒｅ Ｃ０５－０１）（１ｍｇ）を含むＤＭＳＯ（３００μＬ）溶液を反応容器に加えた。反応混合液を、１１０℃にて１０分間加熱した。反応容器を冷却後、４Ｎ塩酸（０．５ｍＬ）を加え、１１０℃で１０分間加水分解を行った。反応容器を冷却後、１Ｎ酢酸ナトリウム（２ｍＬ）を加えて攪拌し、ＨＰＬＣ溶媒（５００μＬ）を加えた。混合液を、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ：ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８ ＵＧ ８０ １０ｍｍ×２５０ｍｍ，アセトニトリル／５０ｍＭ酢酸アンモニウム＝６／４，４ｍＬ／分）にて精製した。［１８Ｆ］Ｃ０５－０１に相当する画分を、エタノール（３００μＬ）中、２５％アスコルビン酸（１００μＬ）及びＴｗｅｅｎ８０（１００μＬ）を含むフラスコに回収し、減圧下で溶媒を留去した。残渣を、生理食塩水（２．５ｍＬ，ｐＨ７．４）に溶解し、注射溶液として、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１を得た。
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１を合成した。
【化39】
【0161】
（［１１Ｃ］Ｃ０５－０４の合成）
以下のスキームにより、［１１Ｃ］Ｃ０５－０４を合成した。
以下の合成は遮光下で行った。ヨード［１１Ｃ］メタンを、室温で（Ｅ）－６－ｆｌｕｏｒｏ－５－（４－（６－ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏ［ｄ］ｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｂｕｔ－３－ｅｎ－１－ｙｎ－１－ｙｌ）ｐｙｒｉｄｉｎｅ－２－ａｍｉｎｅ（ｐｒｅ Ｃ０５－０４－１）（１．５ｍｇ）を含むジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（３００μＬ）溶液に加えた。反応混合液を、１２０℃にて５分間加熱した。反応容器を冷却後、ＨＰＬＣ溶媒（５００μＬ）を加えた。混合液を、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｐｒｅｐ Ｔ３ １０ｍｍ×１５０ｍｍ，アセトニトリル／５０ｍＭ酢酸アンモニウム＝４／６，５ｍＬ／分）にて精製した。［１１Ｃ］Ｃ０５－０４に相当する画分を、エタノール（３００μＬ）中、２５％アスコルビン酸（１００μＬ）及びＴｗｅｅｎ８０（７５μＬ）を含むフラスコに回収し、減圧下で溶媒を留去した。残渣を、生理食塩水（３ｍＬ，ｐＨ７．４）に溶解し、注射溶液として、［１１Ｃ］Ｃ０５－０４を得た。なお、ｐｒｅ Ｃ０５－０４－１は、上記Ｃ０５－０４（ＴＭ２）の合成と類似の方法により合成した。
以下のスキームにより、［１１Ｃ］Ｃ０５－０４を合成した。
【化40】
【0162】
（［１８Ｆ］Ｃ０５－０４の合成）
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０５－０４を合成した。
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０５－０４を合成した。
【化41】
【0163】
［１８Ｆ］フッ化物イオンを、Ｋ．２２２（Kryptofix 222）（７．５ｍｇ）と炭酸カリウム（２．７７ｍｇ）を含む５０％アセトニトリル溶液（０．４ｍＬ）で溶出し、反応容器に導入した後、窒素ガス気流下で加熱し、溶媒を乾固させた。その後、無水アセトニトリル（０．１ｍＬ）を加えて共沸留去し、充分に反応容器内を乾燥させた。以下の反応は遮光下で行った。ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌ（Ｅ）－（５－（４－（６－ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏ［ｄ］ｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｂｕｔ－３－ｅｎ－１－ｙｎ－１－ｙｌ）－６－ｎｉｔｒｏｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）（ｍｅｔｈｙｌ）ｃａｒｂａｍａｔｅ（ｐｒｅ Ｃ０５－０４－２）（１．５ｍｇ）を含むＤＭＳＯ（３００μＬ）溶液を反応容器に加えた。反応混合液を、１１０℃にて１０分間加熱した。反応容器を冷却後、４Ｎ塩酸（０．３ｍＬ）を加え、１１０℃で１０分間加水分解を行った。反応容器を冷却後、２Ｎ酢酸ナトリウム（０．６ｍＬ）を加えて攪拌し、ＨＰＬＣ溶媒（５００μＬ）を加えた。混合液を、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ： Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｐｒｅｐ Ｔ３ １０ｍｍ×１５０ｍｍ，アセトニトリル／５０ｍＭ酢酸アンモニウム＝４／６，５ｍＬ／分）にて精製した。［１８Ｆ］Ｃ０５－０４に相当する画分を、エタノール（３００μＬ）中、２５％アスコルビン酸（１００μＬ）及びＴｗｅｅｎ８０（７５μＬ）を含むフラスコに回収し、減圧下で溶媒を留去した。残渣を、生理食塩水（３ｍＬ，ｐＨ７．４）に溶解し、注射溶液として、［１８Ｆ］Ｃ０５－０４を得た。なお、ｐｒｅ Ｃ０５－０４－２は、上記Ｃ０５－０４（ＴＭ２）の合成と類似の方法により合成した。
【0164】
（［１１Ｃ］Ｃ０６－０３の合成）
以下のスキームにより、［１１Ｃ］Ｃ０６－０３を合成した。
以下のスキームにより、［１１Ｃ］Ｃ０６－０３を合成した。
【化42】
【0165】
以下の合成は遮光下で行った。ヨード［１１Ｃ］メタンを、室温で（Ｅ）－６－ｆｌｕｏｒｏ－５－（４－（５－ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｂｕｔ－３－ｅｎ－１－ｙｎ－１－ｙｌ）ｐｙｒｉｄｉｎｅ－２－ａｍｉｎｅ（ｐｒｅ Ｃ０６－０３－１）（１．５ｍｇ）を含むジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（３００μＬ）溶液に加えた。反応混合液を、１２０℃にて５分間加熱した。反応容器を冷却後、ＨＰＬＣ溶媒（５００μＬ）を加えた。混合液を、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｐｒｅｐ Ｔ３ １０ｍｍ×１５０ｍｍ，アセトニトリル／５０ｍＭ酢酸アンモニウム＝４／６，５ｍＬ／分）にて精製した。［１１Ｃ］Ｃ０６－０３に相当する画分を、エタノール（３００μＬ）中、２５％アスコルビン酸（１００μＬ）及びＴｗｅｅｎ８０（７５μＬ）を含むフラスコに回収し、減圧下で溶媒を留去した。残渣を、生理食塩水（３ｍＬ，ｐＨ７．４）に溶解し、注射溶液として、［１１Ｃ］Ｃ０６－０３を得た。なお、ｐｒｅ Ｃ０６－０３－１は、上記Ｃ０６－０３（ＴＭ１）の合成と類似の方法により合成した。
【0166】
（［１８Ｆ］Ｃ０６－０３の合成）
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０６－０３を合成した。
以下のスキームにより、［１８Ｆ］Ｃ０６－０３を合成した。
【化43】
【0167】
［１８Ｆ］フッ化物イオンを、Ｋ．２２２（Kryptofix 222）（７．５ｍｇ）と炭酸カリウム（２．７７ｍｇ）を含む５０％アセトニトリル溶液（０．４ｍＬ）で溶出し、反応容器に導入した後、窒素ガス気流下で加熱し、溶媒を乾固させた。その後、無水アセトニトリル（０．１ｍＬ）を加えて共沸留去し、充分に反応容器内を乾燥させた。以下の反応は遮光下で行った。ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌ（Ｅ）－（５－（４－（５－ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ－２－ｙｌ）ｂｕｔ－３－ｅｎ－１－ｙｎ－１－ｙｌ）－６－ｎｉｔｒｏｐｙｒｉｄｉｎ－２－ｙｌ）（ｍｅｔｈｙｌ）ｃａｒｂａｍａｔｅ（ｐｒｅ Ｃ０６－０３－２）（１．５ｍｇ）を含むＤＭＳＯ（３００μＬ）溶液を反応容器に加えた。反応混合液を、１１０℃にて１０分間加熱した。反応容器を冷却後、４Ｎ塩酸（０．３ｍＬ）を加え、１１０℃で１０分間加水分解を行った。反応容器を冷却後、２Ｎ酢酸ナトリウム（０．６ｍＬ）を加えて攪拌し、ＨＰＬＣ溶媒（５００μＬ）を加えた。混合液を、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ： Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｐｒｅｐ Ｔ３ １０ｍｍ×１５０ｍｍ，アセトニトリル／５０ｍＭ酢酸アンモニウム＝４／６，５ｍＬ／分）にて精製した。［１８Ｆ］Ｃ０６－０３に相当する画分を、エタノール（３００μＬ）中、２５％アスコルビン酸（１００μＬ）及びＴｗｅｅｎ８０（７５μＬ）を含むフラスコに回収し、減圧下で溶媒を留去した。残渣を、生理食塩水（３ｍＬ，ｐＨ７．４）に溶解し、注射溶液として、［１８Ｆ］Ｃ０６－０３を得た。なお、Ｃ０６－０３－２は、上記Ｃ０６－０３（ＴＭ１）の合成と類似の方法により合成した。
【0168】
＜ヒト脳の光学イメージング＞
（解剖脳組織）
死後ヒト脳を、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）患者、及び、アルツハイマー病（ＡＤ）患者に対して行われた剖検から得た。
凍結ＤＬＢ組織をクリオスタット（ＨＭ５６０，Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ）内で２０μｍ厚にスライスした。
また、ＡＤ脳組織を１０％中性緩衝ホルマリンに固定し、パラフィンブロックに埋め込み、６μｍ厚にスライスした。
（解剖脳組織）
死後ヒト脳を、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）患者、及び、アルツハイマー病（ＡＤ）患者に対して行われた剖検から得た。
凍結ＤＬＢ組織をクリオスタット（ＨＭ５６０，Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ）内で２０μｍ厚にスライスした。
また、ＡＤ脳組織を１０％中性緩衝ホルマリンに固定し、パラフィンブロックに埋め込み、６μｍ厚にスライスした。
【0169】
（インビトロ蛍光顕微鏡測定）
ＤＬＢ患者脳扁桃体組織の後固定新鮮凍結切片、及び、脱パラフィンしたＡＤ患者脳中前頭回組織のホルマリン固定パラフィン包埋切片を使用した。３０μＭの上記各化合物と脳切片を５０％エタノール溶液中にて３０分間室温でインキュベートした。その後切片を５０％エタノール溶液で５分間、超純水で３分間、２回洗浄した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００，Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００， Ｌｅｉｃａ）を用いて切片上の病変蓄積領域の画像を取得した。蛍光画像を図１（図１Ａ及び図１Ｂ）に示す。解析ソフトウェア（Ｉｍａｇｅ Ｊ）を用いて病変領域および病変非形成領域（バックグラウンド）の蛍光輝度を定量した。結果を図２に示す。
ＤＬＢ患者脳扁桃体組織の後固定新鮮凍結切片、及び、脱パラフィンしたＡＤ患者脳中前頭回組織のホルマリン固定パラフィン包埋切片を使用した。３０μＭの上記各化合物と脳切片を５０％エタノール溶液中にて３０分間室温でインキュベートした。その後切片を５０％エタノール溶液で５分間、超純水で３分間、２回洗浄した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００，Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００， Ｌｅｉｃａ）を用いて切片上の病変蓄積領域の画像を取得した。蛍光画像を図１（図１Ａ及び図１Ｂ）に示す。解析ソフトウェア（Ｉｍａｇｅ Ｊ）を用いて病変領域および病変非形成領域（バックグラウンド）の蛍光輝度を定量した。結果を図２に示す。
【0170】
図１及び図２に示すように、上記式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０１、Ｃ０５－０２、Ｃ０５－０３、Ｃ０５－０４、Ｃ０５－０５、Ｃ０５－０８、Ｃ０５－０９及びＣ０６－０２は、ＰＢＢ３以上の強度でＤＬＢの患者脳で形成されるαシヌクレイン凝集体に結合していることが確認された。また、これら上記式（Ｉ）で表される化合物のαシヌクレイン凝集体への結合性は、ＡＤの患者脳で形成されるタウやアミロイドβの凝集体への結合よりも強いことが確認された。なお、ＭＳＡ患者脳についても、上記ＤＬＢ患者脳と同様にしてインビトロ蛍光顕微鏡測定を行ったところ、同様の結果を得た。
【0171】
また、これら上記式（Ｉ）で表される化合物は、ブタジエン結合を有する化合物であるＣ０６－０１よりも、ＡＤ患者脳で形成される凝集体に比してαシヌクレイン凝集体への選択性が高いことが確認された。なお、シヌクレイン病変のＰＥＴプローブとして報告されているＢＦ－２２７は、主としてＡＤのアミロイドβ凝集体に結合し、αシヌクレイン凝集体への結合は、上記式（Ｉ）で表される化合物に比して弱いことが確認された。
【0172】
＜マウス脳の光学イメージング＞
（αシヌクレイン線維接種マウスモデル作成）
まず、マウスαシヌクレインをリコンビナントタンパク質として大腸菌で発現させて抽出し、試験管内でインキュベートして、不溶性のαシヌクレイン凝集体を形成した。
そして、このαシヌクレイン凝集体をマウスの線条体に接種したところ、神経回路を経路としてαシヌクレインの凝集体が周囲の領域に伝播し、数か月後には大脳新皮質でαシヌクレイン病変が観察された。
なお、このαシヌクレイン凝集体のマウスの線条体への接種は、以下の方法で行った。まず、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した９週齢のＣ５７ＢＬ／６オスマウスの頭部の毛を取り除き、頭皮をイソジンで消毒後、キシロカインを塗り、頭皮に切れ込みを入れて頭蓋を露出させた。そして、Ｂｒｅｇｍａ ０．０５ｍｍ，Ｌａｔｅｒａｌ ２ｍｍの位置の頭蓋にドリルで穴を開け、ガラスピペットを用いて２ｍｍの深さ位置にαシヌクレイン線維溶液（マウスαシヌクレイン線維４ｍｇ／ｍｌ ｉｎ ｓａｌｉｎｅ）３μｌを注入した後、頭皮を戻して縫合した。
（αシヌクレイン線維接種マウスモデル作成）
まず、マウスαシヌクレインをリコンビナントタンパク質として大腸菌で発現させて抽出し、試験管内でインキュベートして、不溶性のαシヌクレイン凝集体を形成した。
そして、このαシヌクレイン凝集体をマウスの線条体に接種したところ、神経回路を経路としてαシヌクレインの凝集体が周囲の領域に伝播し、数か月後には大脳新皮質でαシヌクレイン病変が観察された。
なお、このαシヌクレイン凝集体のマウスの線条体への接種は、以下の方法で行った。まず、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した９週齢のＣ５７ＢＬ／６オスマウスの頭部の毛を取り除き、頭皮をイソジンで消毒後、キシロカインを塗り、頭皮に切れ込みを入れて頭蓋を露出させた。そして、Ｂｒｅｇｍａ ０．０５ｍｍ，Ｌａｔｅｒａｌ ２ｍｍの位置の頭蓋にドリルで穴を開け、ガラスピペットを用いて２ｍｍの深さ位置にαシヌクレイン線維溶液（マウスαシヌクレイン線維４ｍｇ／ｍｌ ｉｎ ｓａｌｉｎｅ）３μｌを注入した後、頭皮を戻して縫合した。
【0173】
（インビトロ蛍光顕微鏡測定）
このαシヌクレイン線維接種マウスの脳を摘出し、切片を作製して蛍光染色で解析した。具体的には、αシヌクレイン線維接種マウス脳切片と３０μＭの化合物を２０％エタノール溶液中にて３０分間室温でインキュベートした。その後切片を２０％エタノール溶液で５分間、超純水で３分間、２回洗浄した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて切片上のαシヌクレイン凝集体蓄積領域の画像を取得した。同一切片をリン酸緩衝液を用いて洗浄後、抗原性賦活化のためにオートクレーブで処理した。抗リン酸化αシヌクレインモノクローナル抗体（ｐＳ１２９，ａｂｃａｍ，ａｂ５９２６４）（１：１０００）による免疫組織化学染色を行い、封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて上記と同一領域の画像を取得した。結果を図３に示す。図３において、右側が抗リン酸化αシヌクレイン抗体染色、左側がＣ０５－０５蛍光染色である。
図３の結果から、リン酸化αシヌクレインからなる病変に、上記式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５が結合することが分かる。
このαシヌクレイン線維接種マウスの脳を摘出し、切片を作製して蛍光染色で解析した。具体的には、αシヌクレイン線維接種マウス脳切片と３０μＭの化合物を２０％エタノール溶液中にて３０分間室温でインキュベートした。その後切片を２０％エタノール溶液で５分間、超純水で３分間、２回洗浄した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて切片上のαシヌクレイン凝集体蓄積領域の画像を取得した。同一切片をリン酸緩衝液を用いて洗浄後、抗原性賦活化のためにオートクレーブで処理した。抗リン酸化αシヌクレインモノクローナル抗体（ｐＳ１２９，ａｂｃａｍ，ａｂ５９２６４）（１：１０００）による免疫組織化学染色を行い、封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて上記と同一領域の画像を取得した。結果を図３に示す。図３において、右側が抗リン酸化αシヌクレイン抗体染色、左側がＣ０５－０５蛍光染色である。
図３の結果から、リン酸化αシヌクレインからなる病変に、上記式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５が結合することが分かる。
【0174】
（インビボ二光子レーザースキャニング蛍光顕微鏡検査）
αシヌクレイン線維溶液注入６週間以降のモデルマウスを１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｓｅｙｌａｚ－Ｔｏｍｉｔａ法（Ｔｏｍｉｔａ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｅｒｅｂ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ ２５，８５８－６７， ２００５）に従い頭蓋窓を設置した。頭蓋窓設置から２週間以降のマウスを１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｃ０５－０５又はＰＢＢ３を０．０５％含むＤＭＳＯ／生理食塩水＝１：１溶液５０μｌを尾静脈投与した。Ｃ０５－０５投与９０分後、あるいはＰＢＢ３投与３０分後にマウスを二光子レーザー蛍光顕微鏡下に固定し、スルホローダミン１０１を５ｍＭ含む生理食塩水溶液１００μｌを腹腔内投与した後、励起波長９００ｎｍにて生体二光子蛍光イメージングを行った。Ｃ０５－０５およびＰＢＢ３に対する検出波長を５００～５５０ｎｍ、スルホローダミン１０１に対する検出波長を５７３～６４８ｎｍとした。結果を図４に示す。
図４の結果から、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５を静注すると、該化合物が生体の脳内ひいてはニューロン内に移行して、個々のαシヌクレイン病変に結合する様子が生体二光子レーザー蛍光顕微鏡で観察された。したがって、病変の密度や総数が少なく、ＰＥＴで検出困難な場合でも、生体蛍光イメージングにより病変を検出可能であると言える。一方、ＰＢＢ３を静注して観察を行っても病変は検出されず、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５の方がＰＢＢ３よりも病変検出のコントラストが高いことが確認された。
αシヌクレイン線維溶液注入６週間以降のモデルマウスを１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｓｅｙｌａｚ－Ｔｏｍｉｔａ法（Ｔｏｍｉｔａ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｅｒｅｂ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ ２５，８５８－６７， ２００５）に従い頭蓋窓を設置した。頭蓋窓設置から２週間以降のマウスを１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｃ０５－０５又はＰＢＢ３を０．０５％含むＤＭＳＯ／生理食塩水＝１：１溶液５０μｌを尾静脈投与した。Ｃ０５－０５投与９０分後、あるいはＰＢＢ３投与３０分後にマウスを二光子レーザー蛍光顕微鏡下に固定し、スルホローダミン１０１を５ｍＭ含む生理食塩水溶液１００μｌを腹腔内投与した後、励起波長９００ｎｍにて生体二光子蛍光イメージングを行った。Ｃ０５－０５およびＰＢＢ３に対する検出波長を５００～５５０ｎｍ、スルホローダミン１０１に対する検出波長を５７３～６４８ｎｍとした。結果を図４に示す。
図４の結果から、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５を静注すると、該化合物が生体の脳内ひいてはニューロン内に移行して、個々のαシヌクレイン病変に結合する様子が生体二光子レーザー蛍光顕微鏡で観察された。したがって、病変の密度や総数が少なく、ＰＥＴで検出困難な場合でも、生体蛍光イメージングにより病変を検出可能であると言える。一方、ＰＢＢ３を静注して観察を行っても病変は検出されず、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５の方がＰＢＢ３よりも病変検出のコントラストが高いことが確認された。
【0175】
＜インビボＰＥＴ（ポジトロン断層撮影法）イメージング＞
ＰＥＴスキャンは、０．８５１ｍｍ厚で（中心間）９５枚のスライス、１９．０ｃｍ体軸方向視野（ＦＯＶ）、および７．６ｃｍ断面内ＦＯＶを提供する、ｍｉｃｒｏ ＰＥＴ Ｆｏｃｕｓ ２２０動物スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）を用いて行った。スキャン前に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した。エミッションスキャンは、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１（Ｃ０５－０１をポジトロン放出核種で標識した化合物）（２４．３±０．７ ＭＢｑ）の静脈内注射直後に、９０分間、３Ｄリストモード、エネルギーウィンドウ３５０－７５０ ｋｅＶで行った。放射性化合物の注射およびスキャンは、該化合物の光ラセミ化を避けるように薄暗下で行った。全てのリストモードデータを、３Ｄサイノグラムにソートし、その後、Ｆｏｕｒｉｅｒ－ｒｅｂｉｎｉｎｇにより２Ｄサイノグラムに変換した（フレーム：１０×１，６×５，５×１０分）。放射性化合物の注射後、３０～６０分、および６０～９０分間での加算イメージを、最大事後確率推定法による再構成（ｍａｘｉｍｕｍ ａ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒｉ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）により得た。また、ダイナミックイメージを、０．５－ｍｍハニングフィルターを用いて、フィルター補正逆投影法により再構成した。関心体積（Ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（ＶＯＩ））をＭＲＩテンプレートを参照して、線条体および中脳に、ＰＭＯＤイメージ分析ソフトウェア（ＰＭＯＤ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて設定した。結果を図５及び図６に示す。
ＰＥＴスキャンは、０．８５１ｍｍ厚で（中心間）９５枚のスライス、１９．０ｃｍ体軸方向視野（ＦＯＶ）、および７．６ｃｍ断面内ＦＯＶを提供する、ｍｉｃｒｏ ＰＥＴ Ｆｏｃｕｓ ２２０動物スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）を用いて行った。スキャン前に、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した。エミッションスキャンは、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１（Ｃ０５－０１をポジトロン放出核種で標識した化合物）（２４．３±０．７ ＭＢｑ）の静脈内注射直後に、９０分間、３Ｄリストモード、エネルギーウィンドウ３５０－７５０ ｋｅＶで行った。放射性化合物の注射およびスキャンは、該化合物の光ラセミ化を避けるように薄暗下で行った。全てのリストモードデータを、３Ｄサイノグラムにソートし、その後、Ｆｏｕｒｉｅｒ－ｒｅｂｉｎｉｎｇにより２Ｄサイノグラムに変換した（フレーム：１０×１，６×５，５×１０分）。放射性化合物の注射後、３０～６０分、および６０～９０分間での加算イメージを、最大事後確率推定法による再構成（ｍａｘｉｍｕｍ ａ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒｉ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）により得た。また、ダイナミックイメージを、０．５－ｍｍハニングフィルターを用いて、フィルター補正逆投影法により再構成した。関心体積（Ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（ＶＯＩ））をＭＲＩテンプレートを参照して、線条体および中脳に、ＰＭＯＤイメージ分析ソフトウェア（ＰＭＯＤ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて設定した。結果を図５及び図６に示す。
【0176】
上記式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０１をポジトロン放出核種で標識し、正常マウスに静注してＰＥＴスキャンを実施した結果、図５及び図６に示すように、適切な脳移行性や脳からのクリアランス速度を有し、ＰＥＴで生体脳中のαシヌクレイン凝集体をイメージング（画像化）するプローブとして良好な特性を示すことが確認された。なお、図５は［１８Ｆ］Ｃ０５－０１静注後１－３０分における、正常マウス脳の冠状断２断面および正中矢状断１断面の画像で、標準脳ＭＲＩ画像に重ね合わせて表示している。また、図６は線条体および中脳における、［１８Ｆ］Ｃ０５－０１静注後の時間－放射能曲線である。
【0177】
＜マウス脳の光学イメージング＞
（エキソビボイメージング）
上記「（αシヌクレイン線維接種マウスモデル作成）」と同様にしたαシヌクレイン線維溶液注入６週間以降のモデルマウスを、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｃ０５－０５（１．６６ｍｇ／ｋｇ）、又は、ＢＦ－２２７（１．６６ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与した。
Ｃ０５－０５投与９０分後、およびＢＦ－２２７投与１２０分後に、脳を採取して凍結し、クリオスタット（ＨＭ５６０）内で２０μｍ厚の凍結切片を作成した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて切片上のαシヌクレイン凝集体蓄積領域の画像を取得した。
また、同一切片を、４％パラホルムアルデヒドを含むリン酸緩衝液に一晩浸漬し固定した。固定後の脳を流水で洗浄後、抗原性賦活化のためにオートクレーブで処理した。抗リン酸化αシヌクレインモノクローナル抗体（ｐＳ１２９， ａｂｃａｍ， ａｂ５９２６４）（１：１０００）による免疫組織化学染色を行い、封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて上記と同一領域の画像を取得した。結果を図７に示す。図７（ａ）はＣ０５－０５を投与した場合の画像であり、図７（ｂ）はＢＦ－２２７を投与した場合の画像である。
図７の結果から、αシヌクレイン線維接種マウスにＣ０５－０５を静注すると、該化合物が脳内ひいてはニューロン内に移行して、個々のαシヌクレイン病変に結合する様子がエキソビボイメージングにより観察された。一方、ＢＦ－２２７を静注して観察を行っても病変は検出されず、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５の方がＢＦ－２２７よりも病変検出のコントラストが高いことが確認された。
（エキソビボイメージング）
上記「（αシヌクレイン線維接種マウスモデル作成）」と同様にしたαシヌクレイン線維溶液注入６週間以降のモデルマウスを、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔し、Ｃ０５－０５（１．６６ｍｇ／ｋｇ）、又は、ＢＦ－２２７（１．６６ｍｇ／ｋｇ）を腹腔内投与した。
Ｃ０５－０５投与９０分後、およびＢＦ－２２７投与１２０分後に、脳を採取して凍結し、クリオスタット（ＨＭ５６０）内で２０μｍ厚の凍結切片を作成した。封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて切片上のαシヌクレイン凝集体蓄積領域の画像を取得した。
また、同一切片を、４％パラホルムアルデヒドを含むリン酸緩衝液に一晩浸漬し固定した。固定後の脳を流水で洗浄後、抗原性賦活化のためにオートクレーブで処理した。抗リン酸化αシヌクレインモノクローナル抗体（ｐＳ１２９， ａｂｃａｍ， ａｂ５９２６４）（１：１０００）による免疫組織化学染色を行い、封入剤（ＶＥＣＴＡＳＨＩＥＬＤ Ｈ－１０００）を用いて切片を封入後、蛍光顕微鏡（ＤＭ４０００）を用いて上記と同一領域の画像を取得した。結果を図７に示す。図７（ａ）はＣ０５－０５を投与した場合の画像であり、図７（ｂ）はＢＦ－２２７を投与した場合の画像である。
図７の結果から、αシヌクレイン線維接種マウスにＣ０５－０５を静注すると、該化合物が脳内ひいてはニューロン内に移行して、個々のαシヌクレイン病変に結合する様子がエキソビボイメージングにより観察された。一方、ＢＦ－２２７を静注して観察を行っても病変は検出されず、式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５の方がＢＦ－２２７よりも病変検出のコントラストが高いことが確認された。
【0178】
＜インビボＰＥＴ（ポジトロン断層撮影法）イメージング＞
ＰＥＴスキャンは、０．８５１ｍｍ厚で（中心間）９５枚のスライス、１９．０ｃｍ体軸方向視野（ＦＯＶ）、および７．６ｃｍ断面内ＦＯＶを提供する、ｍｉｃｒｏ ＰＥＴ Ｆｏｃｕｓ ２２０動物スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）を用いて行った。スキャン前に、αシヌクレイン線維接種マウスおよび生理食塩水注入マウス（対照）を、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した。エミッションスキャンは、［１８Ｆ］Ｃ０５－０５（Ｃ０５－０５をポジトロン放出核種で標識した化合物）（３０．８±０．４ＭＢｑ）の静脈内注射直後に１２０分間、３Ｄリストモード、エネルギーウィンドウ３５０－７５０ｋｅＶで行った。放射性化合物の注射およびスキャンは、該化合物の光ラセミ化を避けるように薄暗下で行った。全てのリストモードデータを、３Ｄサイノグラムにソートし、その後、Ｆｏｕｒｉｅｒ－ｒｅｂｉｎｉｎｇにより２Ｄサイノグラムに変換した（フレーム：４×１，８×２，１４×５，３×１０分）。放射性化合物の注射後、０～３０分、３０～６０分、６０～９０分、および９０～１２０分間での加算イメージを、最大事後確率推定法による再構成（ｍａｘｉｍｕｍ ａ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒｉ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）により得た。また、ダイナミックイメージを、０．５－ｍｍハニングフィルターを用いて、フィルター補正逆投影法により再構成した。関心体積（Ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（ＶＯＩ））を、ＭＲＩテンプレートを参照して、線条体および小脳に、ＰＭＯＤイメージ分析ソフトウェア（ＰＭＯＤ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて設定した。
結果を図８～１２に示す。図８（ａ）は［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後６０～９０分における、αシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスの場合の結果であり、図８（ｂ）は生理食塩水注入マウスの場合の結果であり、それぞれ上段が線条体を含む脳の冠状断面、下段が小脳を含む脳の冠状断面の画像で、標準脳ＭＲＩ画像に重ね合わせて表示している。また、図９は線条体における［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の時間－放射能曲線であり、図１０は小脳における［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の時間－放射能曲線である。図１１は［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の小脳を対照とした線条体のｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ ｕｐｔａｋｅ ｖａｌｕｅ ｒａｔｉｏ（ＳＵＶＲ）の時間推移を示す図である。図１２は９０～１２０分におけるＳＵＶＲの平均のαシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスと生理食塩水注入マウスでの比較である（ｎ＝４，＊＊ｐ＜０．００５ ｂｙ Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ－ｔｅｓｔ，ｍｅａｎ±ＳＥＭｓ）。
ＰＥＴスキャンは、０．８５１ｍｍ厚で（中心間）９５枚のスライス、１９．０ｃｍ体軸方向視野（ＦＯＶ）、および７．６ｃｍ断面内ＦＯＶを提供する、ｍｉｃｒｏ ＰＥＴ Ｆｏｃｕｓ ２２０動物スキャナー（Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）を用いて行った。スキャン前に、αシヌクレイン線維接種マウスおよび生理食塩水注入マウス（対照）を、１．５％（ｖ／ｖ）イソフルランで麻酔した。エミッションスキャンは、［１８Ｆ］Ｃ０５－０５（Ｃ０５－０５をポジトロン放出核種で標識した化合物）（３０．８±０．４ＭＢｑ）の静脈内注射直後に１２０分間、３Ｄリストモード、エネルギーウィンドウ３５０－７５０ｋｅＶで行った。放射性化合物の注射およびスキャンは、該化合物の光ラセミ化を避けるように薄暗下で行った。全てのリストモードデータを、３Ｄサイノグラムにソートし、その後、Ｆｏｕｒｉｅｒ－ｒｅｂｉｎｉｎｇにより２Ｄサイノグラムに変換した（フレーム：４×１，８×２，１４×５，３×１０分）。放射性化合物の注射後、０～３０分、３０～６０分、６０～９０分、および９０～１２０分間での加算イメージを、最大事後確率推定法による再構成（ｍａｘｉｍｕｍ ａ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒｉ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）により得た。また、ダイナミックイメージを、０．５－ｍｍハニングフィルターを用いて、フィルター補正逆投影法により再構成した。関心体積（Ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（ＶＯＩ））を、ＭＲＩテンプレートを参照して、線条体および小脳に、ＰＭＯＤイメージ分析ソフトウェア（ＰＭＯＤ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて設定した。
結果を図８～１２に示す。図８（ａ）は［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後６０～９０分における、αシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスの場合の結果であり、図８（ｂ）は生理食塩水注入マウスの場合の結果であり、それぞれ上段が線条体を含む脳の冠状断面、下段が小脳を含む脳の冠状断面の画像で、標準脳ＭＲＩ画像に重ね合わせて表示している。また、図９は線条体における［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の時間－放射能曲線であり、図１０は小脳における［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の時間－放射能曲線である。図１１は［１８Ｆ］Ｃ０５－０５静注後の小脳を対照とした線条体のｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ ｕｐｔａｋｅ ｖａｌｕｅ ｒａｔｉｏ（ＳＵＶＲ）の時間推移を示す図である。図１２は９０～１２０分におけるＳＵＶＲの平均のαシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスと生理食塩水注入マウスでの比較である（ｎ＝４，＊＊ｐ＜０．００５ ｂｙ Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ－ｔｅｓｔ，ｍｅａｎ±ＳＥＭｓ）。
【0179】
上記式（Ｉ）で表される化合物であるＣ０５－０５をポジトロン放出核種で標識し、αシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスおよび生理食塩水注入マウス（対照）に静注してＰＥＴスキャンを実施したところ、適切な脳移行性や脳からのクリアランス速度を示した。また、αシヌクレイン線維溶液注入モデルマウスでは、αシヌクレイン病変を豊富に含む線条体への［１８Ｆ］Ｃ０５－０５の明らかな集積が見られ、［１８Ｆ］Ｃ０５－０５はＰＥＴでαシヌクレイン凝集体を画像化することが確認された。
【0180】
＜式（Ｉ）で表される化合物によるαシヌクレイン凝集阻害効果＞
Ａ５３Ｔ変異型ヒトαシヌクレインをリコンビナントタンパク質として大腸菌で発現させて抽出し、試験管内でインキュベートして、αシヌクレイン凝集体シードを作成した。αシヌクレイン凝集体シード０．０２μｇに、Ｃ０５－０５（ＤＭＳＯ溶解液）を終濃度２０μＭ、又は、２００μＭで添加し、攪拌した。ＤＭＳＯのみを添加したものを対照実験とした。これらを１ｍｇ／ｍｌ濃度のＡ５３Ｔ変異型ヒトαシヌクレインモノマー液５０μＬと懸濁後、３７℃で１日振とうした。１０μＬの懸濁液を９０μＬの１％サルコシルと混合し、１００Ｋｒｐｍで２０分間超遠心し、得られた沈殿を電気泳動後、ゲルのＣＢＢ染色を行った。イメージャーを用いてゲルの画像を取得し、解析ソフトウェア（Ｉｍａｇｅ Ｊ）を用いてバンドの定量を行った。結果を図１３及び１４に示す。図１３は各条件でのサルコシル不溶性画分に含まれる不溶性αシヌクレイン凝集体（矢印）の観察結果であり、図１４は対照実験（ＤＭＳＯ）を１００％とした場合の図である。
Ａ５３Ｔ変異型ヒトαシヌクレインをリコンビナントタンパク質として大腸菌で発現させて抽出し、試験管内でインキュベートして、αシヌクレイン凝集体シードを作成した。αシヌクレイン凝集体シード０．０２μｇに、Ｃ０５－０５（ＤＭＳＯ溶解液）を終濃度２０μＭ、又は、２００μＭで添加し、攪拌した。ＤＭＳＯのみを添加したものを対照実験とした。これらを１ｍｇ／ｍｌ濃度のＡ５３Ｔ変異型ヒトαシヌクレインモノマー液５０μＬと懸濁後、３７℃で１日振とうした。１０μＬの懸濁液を９０μＬの１％サルコシルと混合し、１００Ｋｒｐｍで２０分間超遠心し、得られた沈殿を電気泳動後、ゲルのＣＢＢ染色を行った。イメージャーを用いてゲルの画像を取得し、解析ソフトウェア（Ｉｍａｇｅ Ｊ）を用いてバンドの定量を行った。結果を図１３及び１４に示す。図１３は各条件でのサルコシル不溶性画分に含まれる不溶性αシヌクレイン凝集体（矢印）の観察結果であり、図１４は対照実験（ＤＭＳＯ）を１００％とした場合の図である。
【0181】
図１４に示すように、終濃度２０μＭのＣ０５－０５をαシヌクレイン凝集体シードに添加した場合は、対照実験と比較して不溶性αシヌクレイン凝集体の形成が約２０％減少し、終濃度２００μＭのＣ０５－０５を添加した場合は、対照実験と比較して約６０％の不溶性αシヌクレイン凝集体の形成が減少したことから、Ｃ０５－０５はαシヌクレイン凝集阻害効果を有することが示された。（ＡＮＯＶＡ Ｆ（２，３）＝５１．５７，ｐ＝０．００４８，＊ｐ＜０．０５ ａｎｄ ＊＊ｐ＜０．００５ ｂｙ Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ’ｓ ｐｏｓｔ ｈｏｃ ｔｅｓｔ，ｍｅａｎ±ＳＥＭｓ）。
【図1A】
【図1B】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】