特許 7461499 オクタヒドロピラジノジアザナフチリジンジオン化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-03-26

(45)【発行日】2024-04-03

(54)【発明の名称】オクタヒドロピラジノジアザナフチリジンジオン化合物

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/22 20060101AFI20240327BHJP

   C07D 498/22 20060101ALI20240327BHJP

   A61K 31/551 20060101ALI20240327BHJP

   A61K 31/553 20060101ALI20240327BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240327BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240327BHJP

【ＦＩ】

C07D471/22 CSP

C07D498/22

A61K31/551

A61K31/553

A61P35/00

A61P43/00 105

【請求項の数】 18

(21)【出願番号】P 2022560364

(86)(22)【出願日】2021-04-06

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-11

(86)【国際出願番号】 CN2021085733

(87)【国際公開番号】W WO2021197499

(87)【国際公開日】2021-10-07

【審査請求日】2022-10-03

(31)【優先権主張番号】202010260612.X

(32)【優先日】2020-04-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】202010568775.4

(32)【優先日】2020-06-19

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】202011616152.6

(32)【優先日】2020-12-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】516304780

【氏名又は名称】メッドシャイン ディスカバリー インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100123582

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 真二

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100138210

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 達則

(74)【代理人】

【識別番号】100197169

【弁理士】

【氏名又は名称】柴田 潤二

(72)【発明者】

【氏名】シューホイ チェン

(72)【発明者】

【氏名】ケビン エックス チェン

(72)【発明者】

【氏名】チョウ カイ

(72)【発明者】

【氏名】チアン ウェン

(72)【発明者】

【氏名】フー クオピン

(72)【発明者】

【氏名】チエン リー

【審査官】土橋 敬介

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１９／２１３５１６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１９／１１０７５１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０２０／０３５０３１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０２０／２３９１２３（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（ＩＩＩ）又は式（ＩＩＩ－１）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。

【化1】

（ここで、
ｍは０、１及び２から選択され、
ｎは０、１、２、３及び４から選択され、
ＸはＮＨ及びＯから選択され、
ＹはＣＨ及びＮから選択され、
ＺはＣＨ及びＮから選択され、
Ｒ_１はそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２及びＣ_１～３アルキルであり、前記Ｃ_１～３アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ａによって置換され、
Ｒ_２は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～３アルキルから選択され、前記Ｃ_１～３アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｂによって置換され、
Ｒ_３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～６アルキルから選択され、前記Ｃ_１～６アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｃによって置換され、
Ｒ_４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～６アルキルから選択され、前記Ｃ_１～６アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｃによって置換され、
Ｒ_５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択され、
Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃは、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される。

【請求項2】

前記式（ＩＩＩ）で表される化合物は式（ＩＩ）の構造を有する、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【化2】

（ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｘ、Ｙ、ｍ及びｎは請求項１に定義される通りである。）

【請求項3】

Ｒ_１はそれぞれ独立してＦ、Ｃｌ、ＮＨ_２及びＯＨから選択される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項4】

Ｒ_２はＣＨ_３から選択され、前記ＣＨ_３は任意に１、２又は３個Ｒ_ｂによって置換される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項5】

Ｒ_２はＣＦ_３から選択される、請求項４に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項6】

Ｒ_３はＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３及び

【化3】

から選択される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項7】

Ｒ_４はＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３及び

【化4】

から選択される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項8】

Ｒ_５はＨ及びＦから選択される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項9】

前記式（ＩＩＩ）で表される化合物の構造単位

【化5】

は

【化6】

から選択される、請求項１又は２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項10】

前記式（ＩＩＩ）で表される化合物の構造単位

【化7】

は

【化8】

から選択される、請求項９に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項11】

前記式（ＩＩＩ）で表される化合物の構造単位

【化9】

は

【化10】

から選択され、前記式（ＩＩＩ－１）で表される構造単位

【化11】

は

【化12】

から選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項12】

前記式（ＩＩ）で表される化合物の構造単位

【化13】

は

【化14】

から選択される、請求項２に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【請求項13】

前記式（ＩＩＩ）で表される化合物又は前記式（ＩＩ）で表される化合物は下記式から選択される、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【化15】

（ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は請求項１又は２に定義の通りである。）

【請求項14】

下記式から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩。

【化16】

【請求項15】

下記式から選択される、請求項１４に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。

【化17】

【請求項16】

有効成分として治療有効量の請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。

【請求項17】

ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ突然変異タンパク質阻害剤の製造における、請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩又は請求項１６に記載の医薬組成物の使用。

【請求項18】

ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ関連がんの治療のための薬物の製造における、請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩又は請求項１６に記載の医薬組成物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は以下の優先権を主張する。
ＣＮ２０２０１０２６０６１２．Ｘ、出願日は２０２０年０４月０３日であり、
ＣＮ２０２０１０５６８７７５．４、出願日は２０２０年０６月１９日であり、
ＣＮ２０２０１１６１６１５２．６、出願日は２０２０年１２月３０日である。

【0002】

技術分野
本発明は、新規オクタヒドロピラジノジアザナフチリジンジオン化合物に関し、特に式（ＩＩＩ）で表される化合物及びその薬学的に許容される塩に関する。

【背景技術】

【0003】

最初のＲＡＳ癌遺伝子はラットの肉腫（ｒａｔ ｓａｒｃｏｍａ）から発見され、それが名前の由来となった。ＲＡＳタンパク質は、ＲＡＳ遺伝子発現の産物であり、密接に関連した１８９アミノ酸からなる単量体グロブリンを指し、分子量が２１Ｋｄａである。それはグアニントリヌクレオチドリン酸（ＧＴＰ）又はグアニンジヌクレオチドリン酸（ＧＤＰ）に結合できる。ＲＡＳタンパク質の活性状態は、細胞の増殖、分化、細胞骨格、タンパク質の輸送及び分泌に影響を及ぼし、その活性はＧＴＰ又はＧＤＰへの結合によって調節される。ＲＡＳタンパク質がＧＤＰに結合すると、休眠状態、即ち「不活性」状態になるが、特定の上流の細胞増殖因子によって刺激されると、ＲＡＳタンパク質が誘導されてＧＤＰを交換し、ＧＴＰに結合することが「活性化」状態と呼ばれる。ＧＴＰと結合したＲＡＳタンパク質は、下流のタンパク質を活性化し、シグナル伝達を行うことができる。ＲＡＳタンパク質自身は弱いＧＴＰ加水分解活性を持ち、ＧＴＰをＧＤＰに加水分解することができる。このようにして、活性化状態から不活性化状態への遷移を実現することができる。この加水分解プロセスでは、ＧＡＰ（ＧＴＰａｓｅ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ、ＧＴＰ加水分解酵素活性化タンパク質）も必要である。ＲＡＳタンパク質と相互作用し、ＧＴＰをＧＤＰに加水分解する能力を大幅に促進することができる。ＲＡＳタンパク質の変異は、ＧＡＰとの相互作用に影響を与え、ＧＴＰをＧＤＰに加水分解する能力にも影響を与え、常に活性状態にする。活性化されたＲＡＳタンパク質は、下流のタンパク質成長シグナルを出し続け、最終的に細胞の継続的な成長と分化につながり、最終的に腫瘍を生成する。ＲＡＳ遺伝子ファミリーには多くのメンバーがあり、その中でさまざまながんに密接に関連するサブファミリーには、主にＫｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）、ハーヴェイラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＨＲＡＳ）、及び神経芽細胞腫ラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）が含まれる。ヒト腫瘍の約３０％が何らかの変異ＲＡＳ遺伝子を保有していることが判明しており、その中でＫＲＡＳ変異が最も重要であり、全ＲＡＳ変異の８６％を占めている。ＫＲＡＳ変異の場合、最も一般的な変異はグリシン１２（Ｇ１２）、グリシン１３（Ｇ１３）、及びグルタミン６１（Ｑ６１）残基で発生し、そのうちＧ１２変異が８３％を占めている。
Ｇ１２Ｃ変異は、より一般的なＫＲＡＳ遺伝子変異の１つであり、グリシン１２からシステインへの変異を指す。ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ変異は肺がんで最も多く、文献に報告されているデータによると、ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ変異は全肺がん患者の約１０％を占めている。

【発明の概要】

【0004】

本発明は、式（ＩＩＩ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩を提供し、

【化1】

ここで、
ｍは０、１及び２から選択される。
ｎは０、１、２、３及び４から選択される。
Ｘは、ＮＨ及びＯから選択される。
ＹはＣＨ及びＮから選択される。
ＺはＣＨ及びＮから選択される。
Ｒ_１はそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２及びＣ_１～３アルキルであり、前記Ｃ_１～３アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ａによって置換される。
Ｒ_２は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～３アルキルから選択され、前記Ｃ_１～３アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｂによって置換される。
Ｒ_３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～６アルキルから選択され、前記Ｃ_１～６アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｃによって置換される。
Ｒ_４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＣ_１～６アルキルから選択され、前記Ｃ_１～６アルキルは、任意に１、２又は３個のＲ_ｃによって置換される。
Ｒ_５は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される。
Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃは、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される。

【0005】

本発明のいくつかの実施形態において、上記化合物は式（ＩＩ）の構造を有する。

【化2】

Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｘ、Ｙ、ｍ及びｎは、本発明で定義される通りである。

【0006】

本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒ_１は、それぞれ独立してＦ、Ｃｌ、ＮＨ_２及びＯＨから選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0007】

本発明のいくつかの実施形態において、上記Ｒ_２はＣＨ_３から選択され、前記ＣＨ_３は、任意に１、２又は３個のＲ_ｂによって置換され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0008】

本発明のいくつかの態様において、上記Ｒ_２はＣＦ_３から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0009】

本発明のいくつかの態様において、上記Ｒ_３はＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３及び

【化3】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0010】

本発明のいくつかの態様において、上記Ｒ_４はＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＨ_３及び

【化4】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0011】

本発明のいくつかの態様において、上記Ｒ_５はＨ及びＦから選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0012】

本発明のいくつかの態様において、上記構造単位

【化5-1】

は

【化5-2】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0013】

本発明のいくつかの態様において、上記構造単位

【化6-1】

は

【化6-2】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0014】

本発明のいくつかの態様において、上記構造単位

【化7-1】

は

【化7-2】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0015】

本発明のいくつかの態様において、上記構造単位

【化8-1】

は

【化8-2】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0016】

本発明のいくつかの態様において、上記構造単位

【化9-1】

は

【化9-2】

から選択され、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0017】

本発明のいくつかの態様において、上記化合物は

【化10】

から選択され、ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は本発明で定義される通りである。

【0018】

本発明のいくつかの態様において、上記化合物又はその薬学的に許容される塩であって、ここで、
化合物は

【化11】

から選択され、
ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は本発明で定義される通りである。
本発明は、下式の化合物又はその薬学的に許容される塩を提供し、

【化12】

から選択される。

【0019】

本発明のいくつかの態様において、上記化合物又はその薬学的に許容される塩は、

【化13】

から選択される。

【0020】

また、本発明のいくつかの態様が上記変数の任意の組み合わせによって得られる。

【0021】

本発明は有効成分として治療有効量の本発明に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。

【0022】

本発明は、ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ突然変異タンパク質阻害剤の製造における、上記化合物又はその薬学的に許容される塩又は上記組成物の使用を提供する。

【0023】

本発明は、癌治療のための薬物の製造における、上記化合物又はその薬学的に許容される塩又は上記組成物の使用を提供する。

【発明を実施するための形態】

【0024】

定義と説明
別段の指定がない限り、本明細書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を有することを意図している。特定の用語又は語句は、特定の定義なしに不確定又は不明確であると見なされるべきではないが、通常の意味で理解されるべきである。本明細書に商品名が現れる場合、それは対応する商品又はその有効成分を指すことを意図している。ここで、使用される「薬学的に許容される」という用語は、化合物、材料、組成物及び／又は剤形について信頼的な医学的判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに適しており、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又はその他の問題や合併症なしに、妥当な利益／リスク比に見合ったことである。

【0025】

用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩を指し、本発明によって発見された特定の置換基を有する化合物及び比較的非毒性の酸又は塩基から製造される。本発明の化合物が比較的酸性の官能基を含む場合、このような化合物の中性形態を純粋な溶液又は適切な不活性溶媒中で十分な量の塩基と接触させることによって塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミン又はマグネシウム塩又は類似の塩が含まれる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能基を含む場合、このような化合物の中性形態を純粋な溶液又は適切な不活性溶媒中で十分な量の酸と接触させることによって酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例には、無機酸塩が含まれ、前記無機酸は例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、重炭酸イオン、リン酸、リン酸一水素イオン、リン酸二水素イオン、硫酸、硫酸水素イオン、ヨウ化水素酸、亜リン酸などを含み、及び有機酸塩が含まれ、前記有機酸は例えば、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸及びメタンスルホン酸等の類似酸を含み、また、アミノ酸（アルギニンなど）の塩、及びグルクロン酸などの有機酸の塩も含まれる。本発明のある特定の化合物は、塩基性及び酸性官能基を含むため、塩基付加塩又は酸付加塩のいずれにも変換することができる。

【0026】

本発明の薬学的に許容される塩は、酸根又は塩基を含む親化合物から通常の化学的方法によって合成することができる。一般に、このような塩は、水又は有機溶媒又はその両方の混合物中で遊離酸又は塩基の形態のこれらの化合物を、化学量論的に適切な塩基又は酸と反応させることにより製造される。

【0027】

塩の形態に加えて、本発明で提供される化合物はプロドラッグの形態でも存在する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で容易に化学的に変化して、本発明の化合物に変換される。さらに、インビボ環境で化学的又は生化学的方法によりプロドラッグを本発明の化合物に変換することができる。

【0028】

本発明のある化合物は、非溶媒和形態及び溶媒和形態で存在し得、水和物形態を含む。一般に、溶媒和形態及び非溶媒和形態は同等であり、両者とも本発明の範囲内に含まれる。

【0029】

本発明の化合物は、特定の幾何又は立体異性体形態で存在することができる。本発明に想定されるこのような全ての化合物には、シス及びトランス異性体、（－）－及び（＋）－エナンチオマー、（Ｒ）－及び（Ｓ）－エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、及びそのラセミ混合物及び他の混合物、例えばエナンチオマー又はジアステレオマーが濃縮された混合物が含まれ、これらの混合物はすべて本発明の範囲内である。追加の非対称炭素原子が、アルキルなどの置換基に存在してもよい。すべてのそのような異性体、及びそれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。

【0030】

特に明記しない限り、用語「エナンチオマー」又は「光学異性体」とは、互いの鏡像である立体異性体を指す。

【0031】

特に明記しない限り、用語「シス－トランス異性体」又は「幾何異性体」は、二重結合又は環炭素原子の単結合のために自由に回転できないことに起因する。

【0032】

特に明記しない限り、用語「ジアステレオマー」とは、分子が２つ以上のキラル中心を有し、分子間が非鏡像関係にある立体異性体を指す。

【0033】

特に明記しない限り、「（Ｄ）」又は「（＋）」は右旋性を示し、「（Ｌ）」又は「（－）」は左旋性を示し、「（ＤＬ）」又は「（±）」はラセミ体を示す。

【0034】

特に明記しない限り、楔形の実線結合

【化14】

と楔形の破線結合

【化15】

で立体中心の絶対配置を示し、直線の実線結合

【化16】

と直線の破線結合

【化17】

で立体中心の相対配置を示し、波線

【化18】

で楔形の実線結合

【化19】

又は楔形の破線結合

【化20】

を示し、又は波線

【化21】

で直線の実線結合

【化22】

及び直線の破線結合

【化23】

を示す。

【0035】

本発明の化合物は、特定に存在することができる。特に明記しない限り、用語「互変異性体」又は「互変異性型」とは、室温では、異なる官能基の異性体は動的平衡状態にあり、すぐに相互変換することができることを指す。互変異性体が可能であれば（例えば溶液中）、互変異性体の化学平衡が達成されることができる。例えば、プロトン互変異性体（ｐｒｏｔｏｎ ｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトン移動互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃ ｔａｕｔｏｍｅｒ）とも呼ばれる）は、ケト－エノール異性化及びイミン－エナミン異性化などのプロトン移動による相互変換が含まれる。原子価異性体（ｖａｌｅｎｃｅ ｔａｕｔｏｍｅｒ）は一部の結合形成電子の再配列による相互変換を含む。ケト－エノール互変異性化の具体例としては、ペンタン－２，４－ジオンと４－ヒドロキシペント－３－エン－２－オンという２つの互変異性体間の相互変換が挙げられる。

【0036】

特に明記しない限り、用語「１つの異性体に富む」「異性体に富む」「１つのエナンチオマーに富む」又は「エナンチオマーに富む」とは、その中の一つの異性体又はエナンチオマーの含有量が１００％未満であり、異性体又はエナンチオマーの含有量が６０％以上であり、又は７０％以上であり、又は８０％以上であり、又は９０％以上であり、又は９５％以上であり、又は９６％以上であり、又は９７％以上であり、又は９８％以上であり、又は９９％以上であり、又は９９．５％以上であり、又は９９．６％以上であり、又は９９．７％以上であり、又は９９．８％以上であり、又は９９．９％以上であることを指す。

【0037】

特に明記しない限り、用語「異性体過剰」又は「エナンチオマー過剰」とは、２つの異性体又は２つのエナンチオマーの相対パーセンテージの間の差を指す。たとえば、一つの異性体又はエナンチオマーの含有量は９０％であり、もう一つの異性体又はエナンチオマーの含有量は１０％である場合、異性体又はエナンチオマー過剰（ｅｅ値）が８０％である。

【0038】

光学活性な（Ｒ）－及び（Ｓ）－異性体、ならびにＤ及びＬ異性体は、キラル合成又はキラル試薬又は他の従来技術によって製造することができる。本発明の化合物の１つのエナンチオマーが所望される場合、不斉合成又はキラル補助剤を用いた誘導体化によって製造することができ、得られたジアステレオマーの混合物が分離され、補助基が切断されて、純粋な所望のエナンチオマーが得られる。又は、分子が塩基性官能基（アミノ基など）又は酸性官能基（カルボキシル基など）を含む場合、適切な光学活性な酸又は塩基とジアステレオマー塩を形成し、その後、当技術分野で知られている従来の方法によってジアステレオ異性体が分割され、純粋なエナンチオマーが回収される。さらに、エナンチオマー及びジアステレオマーの分離は、通常、クロマトグラフィーの使用によって完成され、前記クロマトグラフィーはキラル固定相を使用し、オプションで化学誘導体化と組み合わせる（例えば、アミンからカーバメートが形成される）。本発明の化合物は、化合物を構成する原子の１つ又は複数において、非天然な割合の原子同位体を含んでもよい。例えば、トリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）又はＣ－１４（^１４Ｃ）などの放射性同位元素で化合物を標識することができる。また例えば、重水素化薬物は、水素を重水素で置換することによって形成することができ、重水素と炭素によって形成される結合は、通常の水素と炭素によって形成される結合よりも強力であり、重水素化されていない薬物と比較して、重水素化薬物は毒性の副作用の軽減、薬の安定性の向上、効能の向上、薬物の生物学的半減期の延長などの利点がある。放射性であろうとなかろうと、本発明の化合物の同位体組成のすべての変換は、本発明の範囲内に含まれる。「任意」又は「任意に」は、その後に記述されたこと又は状況が発生する可能性はあるが発生する必要はないこと、及びその記述には、そのこと又は状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを指す。

【0039】

用語「置換される」とは、特定の原子の原子価が正常であり、置換された化合物が安定である限り、特定の原子上の任意の１つ又は複数の水素原子が、重水素及び水素バリアントを含む置換基によって置き換えられることを指す。置換基がケトン（すなわち＝Ｏ）である場合、２個の水素原子が置換されていることを意味する。酸素置換は、芳香族基では発生しない。用語「任意に選択されて置換される」とは、置換されていてもいなくてもよいことを意味し、別段の指定がない限り、置換基の種類及び数は、化学的に達成可能な基準で任意であり得る。

【0040】

任意の変数（例えばＲ）が化合物の組成又は構造に一回以上出現する場合、それぞれの場合の定義は独立している。したがって、例えば、一つの基が０～２個のＲで置換されている場合、前記基は任意に２個までのＲで置換されていてもよく、それぞれの場合のＲには独立した選択肢がある。さらに、置換基及び／又はその変異体の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。

【0041】

連結基の数が０の場合、例えば－（ＣＲＲ）_０－は、連結基が単結合であることを意味する。
変数の１つが単結合から選択されている場合、それに接続されている２つの基が直接接続されていることを意味し、たとえば、Ａ－Ｌ－ＺのＬが単結合を表す場合、その構造は実際にはＡ－Ｚであることを意味する。

【0042】

置換基が空である場合、その置換基が存在しないことを意味し、例えばＡ－ＸのＸが空である場合、その構造が実際にはＡであることを意味する。列挙された置換基が、どの原子を介して置換基に結合しているかを示していない場合、そのような置換基は、その原子のいずれかを介して結合することができ、例えば、置換基としてのピリジル基は、ピリジン環上の任意の炭素原子を介して置換基に結合することができる。

【0043】

列挙された結合基が結合の方向を示していない場合、結合の方向は任意であり、例えば、

【化24】

において連結基Ｌは、－Ｍ－Ｗ－であり、この場合、－Ｍ－Ｗ－は左から右への読み順と同じ方向にリングＡとリングＢを接続して

【化25】

を形成してもよく、左から右へ読む順と逆向きにリングＡとリングＢを接続して

【化26】

を形成してもよい。前記連結基、置換基及び／又はそれらの変異体の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。

【0044】

特に明記しない限り、用語「Ｃ_１～６アルキル」は、直鎖又は分枝鎖の１～６個の炭素原子からなる飽和炭化水素基を表すために使用される。前記Ｃ_１～６アルキル基には、Ｃ_１～５、Ｃ_１～４、Ｃ_１～３、Ｃ_１～２、Ｃ_２～６、Ｃ_２～４、Ｃ_６及びＣ_５アルキル基などが含まれ、それは一価（例えばメチル）、二価（例えばメチレン）又は多価（例えばメテニル）であり得る。Ｃ_１～６アルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル及びｔ－ブチルを含む）、ペンチル（ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルを含む）、ヘキシルなどが含まれるが、これらに限定されない。

【0045】

特に明記しない限り、用語「Ｃ_１～３アルキル」は、直鎖又は分枝鎖の１～３個の炭素原子からなる飽和炭化水素基を表すために使用される。前記Ｃ_１～３アルキル基には、Ｃ_１～２及びＣ_２～３アルキル基等が含まれ、それは一価（例えばメチル）、二価（例えばメチレン）又は多価（例えばメテニル）であり得る。Ｃ_１～３アルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピル及びイソプロピルを含む）などが含まれるが、これらに限定されない。

【0046】

特に明記しない限り、Ｃ_{ｎ～ｎ＋ｍ}又はＣ_ｎ～Ｃ_ｎ＋ｍは炭素数ｎ～ｎ＋ｍのいずれかを含み、例えばＣ_１～１２はＣ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１、及びＣ_１２を含み、また、ｎ～ｎ＋ｍの範囲のいずれかを含む、例えばＣ_１～１２はＣ_１～３、Ｃ_１～６、Ｃ_１～９、Ｃ_３～６、Ｃ_３～９、Ｃ_３～１２、Ｃ_６～９、Ｃ_６～１２、及びＣ_９～１２などを含む。同様に、ｎ員～ｎ＋ｍ員は、環上の原子数がｎ～ｎ＋ｍであることを示し、例えば、３～１２員環は、３員環、４員環、５員環、６員環、７員環、８員環、９員環、１０員環、１１員環、及び１２員環を含み、ｎ～ｎ＋ｍの範囲のいずれかを含み、例えば３～１２員環は３～６員環、３～９員環、５～６員環、５～７員環、６～７員環、６～８員環、及び６～１０員環などを含む。

【0047】

用語「脱離基」とは、置換反応（例えば、親和性置換反応）によって別の官能基又は原子によって置換され得る官能基又は原子を指す。例えば、代表的な離脱基には、トリフルオロメタンスルホン酸塩（Ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、塩素、臭素、ヨウ素、メタンスルホン酸塩（ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、トシル酸塩（ｔｏｓｙｌａｔｅ）、ｐ－ブロモベンゼンスルホネート、ｐ－トルエンスルホネート等のスルホネート基、アセトキシ、トリフルオロアセトキシなどのアシルオキシ基が含まれる。

【0048】

用語「保護基」には、「アミノ保護基」「ヒドロキシ保護基」又は「エチルメルカプタン保護基」が含まれるが、これらに限定されない。用語「アミノ保護基」とは、アミノ窒素位置での副反応を防止するのに適した保護基を指す。代表的なアミノ保護基には、ホルミル基；アシル基、例えばアルカノイル（アセチル、トリクロロアセチル、トリフルオロアセチルなど）；アルコキシカルボニル、例えばｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）；アリールメトキシカルボニル、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）及び９－フルオレンメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）；アリールメチル基、例えばベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）、１，１－ジ－（４’－メトキシフェニル）メチル；シリル基、例えばトリメチルシリル（ＴＭＳ）及びｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）などが含まれるが、これらに限定されない。用語「ヒドロキシ保護基」とは、ヒドロキシル副反応を防止するのに適した保護基を指す。代表的なヒドロキシル保護基には、アルキル基、例えばメチル、エチル、ｔｅｒｔ－ブチル基；アシル基、例えばアルカノイル（アセチルなど）；アリールメチル基、例えばベンジル（Ｂｎ）、ｐ－メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９－フルオレニルメチル（Ｆｍ）及びジフェニルメチル（ジフェニルメチル、ＤＰＭ）；シリル基、例えばトリメチルシリル（ＴＭＳ）及びｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）などが含まれるが、これらに限定されない。

【0049】

本発明の化合物は、当業者に周知の常法により構造を確認することができ、本発明が化合物の絶対配置に関するものである場合には、その絶対配置は当業者に慣用技術的手段により確認することができる。たとえば、単結晶Ｘ線回折法（ＳＸＲＤ）では、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計を使用して、培養した単結晶の回折強度データを収集し、光源はＣｕＫα放射線であり、走査モードはφ／ω走査であり、関連データを収集した後、さらに直接法（Ｓｈｅｌｘｓ９７）を採用し、結晶構造を解析して絶対配置を確認することができる。

【0050】

本発明の化合物は、以下に列挙する具体的な実施形態、それは他の化学合成法と組み合わせて形成される実施形態、及び当業者に周知の同等の代替方法を含む、当業者に周知の様々な合成方法によって製造することができる。好ましい実施形態には、本発明の実施形態が含まれるが、これらに限定されない。

【0051】

本発明で使用される溶媒は市販されているものである。

【0052】

化合物は、当技術分野における従来の命名法に従って、又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを使用して命名され、市販の化合物はサプライヤーのカタログを採用して命名された。

【0053】

技術効果
本発明の化合物は、優れたＫＲＡＳ Ｇ１２Ｃ突然変異タンパク質阻害剤である。

【図面の簡単な説明】

【0054】

【図1】図１及び図２は、投与後のヒト由来結腸癌ＣＯ－０４－００７０腫瘍組織におけるＥＲＫ及びｐ－ＥＲＫのタンパク質の発現を示している。

【図2】（同上。）

【実施例】

【0055】

具体的な実施方式

【0056】

以下の実施例により本発明を詳細に説明するが、これは本発明の不利な限定を意味するものではない。本発明の化合物は、以下に列挙する具体的な実施形態、他の化学合成法と組み合わせて形成される実施形態、及び当業者に周知の同等の代替方法を含む、当業者に周知の様々な合成方法によって製造することができる。好ましい実施形態には、本発明の実施形態が含まれるが、これらに限定されない。本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、本発明の特定の実施形態に対して様々な変更及び修正を行うことができることは、当業者には明らかである。

【0057】

実施例１

【0058】

【化27-1】

【化27-2】

【0059】

１－３の合成：窒素ガスの保護下、化合物１－１（１４．８２ｇ、４６．７１ｍｍｏｌ）と化合物１－２（１０ｇ、４６．７１ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ－アミルアルコール（１００ｍＬ）溶液にＢｒｅｔｔＰｈｏｓ－Ｐｄ－Ｇ３（２．９６ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（３０．４４ｇ、９３．４１ｍｍｏｌ）を一度に加え、１０５℃で１６時間攪拌した。反応溶液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル１０：１～５：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物１－３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４５１ （Ｍ＋１）。

【0060】

１－４の合成：窒素ガスの保護下、０℃で化合物１－３（１２．４ｇ、２７．５３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１２０ｍＬ）溶液にＮ-ブロモスクシンイミド（４．９０ｇ、２７．５３ｍｍｏｌ）をバッチで添加し、０℃で０．５時間攪拌した。反応溶液を飽和亜硫酸ナトリウム溶液（３０ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ、１回）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を（石油エーテル：酢酸エチル１０：１（ｖ／ｖ）、５０ｍＬ）でスラリー化し、化合物１－４を得た。

【0061】

１－６の合成：窒素ガスの保護下、化合物１－４（２．９０ｇ、５．４８ｍｍｏｌ）と化合物１－５（７８４．３７ｍｇ、６．０３ｍｍｏｌ）のトルエン（４０ｍＬ）の混合溶媒に、クロロ［（トリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン）－２－（２－アミノビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（５６１．５０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジシクロヘキシルメチルアミン（１．１８ｇ、６．０３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１００℃で１６時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル５：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物１－６を得た。

【0062】

１－７の合成：窒素ガスの保護下、化合物１－６（８ｇ、１５．０３ｍｍｏｌ）を塩酸水溶液（１２ｍｏｌ／Ｌ、１５０ｍＬ）に加えた。反応物を１００℃で１６時間撹拌した。反応終了後、炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝４に調整し、ジクロロメタン（１５０ｍＬ、２回）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１９（Ｍ＋１）。

【0063】

１－８の合成：０℃で、化合物１－７（５ｇ、９．６４ｍｍｏｌ）を酢酸（３０ｍＬ）と発煙硝酸（３．０４ｇ、４８．２２ｍｍｏｌ）の混合溶液に加え、続いて亜硝酸ナトリウム（３．３３ｇ、４８．２２ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で０．５時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和食塩水（５０ｍＬ、３回）で洗浄し、得られた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝１０に調整し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１－８を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５６４（Ｍ＋１）。

【0064】

１－９の合成：窒素ガスの保護下、室温で化合物１－８（５．０２ｇ、８．９１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１２ｍＬ）溶液にオキシ塩化リン（４．１４ｍＬ、４４．５５ｍｍｏｌ）を加え、７０℃で１５分間攪拌した。反応溶液を濃縮し、アセトニトリル（１２ｍＬ）に溶解し、再度濃縮し、オイルポンプで１５分間減圧乾燥させ、酢酸エチル（１５０ｍＬ）に溶解し、冷水（０～１０℃、５０ｍＬ×３）で洗浄し、飽和食塩水（５０ｍＬ）、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗化合物１－９を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５８２．０（Ｍ＋１）。

【0065】

１－１１の合成：窒素ガスの保護下、化合物１－９（４．００ｇ、６．８７ｍｍｏｌ）及び１－１０（４．７５ｇ、２０．６２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（６０ｍＬ）に４Ａモレキュラーシーブ（１０ｇ）を加え、反応物を室温で１４時間撹拌した。ＴＬＣは、反応が完了したことを示した。反応溶液を濃縮し、酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、有機相を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル３：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物１－１１を得た。

【0066】

１－１２の合成：窒素ガスの保護下、化合物１－１１（２．０ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（０．７９ｇ、５．１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応溶液を１３０℃で３０分間攪拌した。ＬＣＭＳは、反応が完了したことを示した。反応溶液を酢酸エチル（３５０ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ×３）及び飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル３：１～１：１（ｖ／ｖ））で単離し、化合物１～１２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２９．２６（Ｍ＋１）。

【0067】

１－１３の合成：化合物１－１２（１．４ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）をエタノール（３０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）の混合溶液に加え、次に塩化アンモニウム（１．０３ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）と鉄粉（１．０７ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、８０℃で２時間撹拌した。反応溶液をろ過し、ろ液を水（２０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（５０ｍＬ、１回）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ、１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮して化合物１～１３を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６９９．２（Ｍ＋１）。

【0068】

１－１４の合成：化合物１－１３（０．７１６ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ｍＬ）とアセトニトリル（５ｍＬ）に溶解し、０～５℃に冷却し、1，3-ジクロロ-5，5-ジメチルヒダントイン（０．２３２ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、２５分間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和亜硫酸水素ナトリウム（５０ｍＬ×２）及び飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル１：１～０：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物１－１４を得た。

【0069】

１－１５の合成：化合物１－１４（０．７０ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）を酢酸（７ｍＬ）及びアセトニトリル（３．５ｍＬ）に溶解し、次に０～５℃に冷却して1，3-ジクロロ-5，5-ジメチルヒダントイン（０．２１６ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を上記混合溶液を加え、３０分間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和重亜硫酸ナトリウム（５０ｍＬ×２）及び飽和炭酸水素ナトリウム（５０ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、ＨＰＬＣ（クロマトカラム： Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ ２５０×５０ｍｍ×１０ μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；アセトニトリル％：３５％～７０％、２５分間）により単離して化合物１－１５を得た。

【0070】

１－１６の合成：化合物１－１５（１３８ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶解し、０～５℃に冷却してトリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ）を加えて４０分間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（４０ｍＬ×２）及び飽和食塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１－１６を得た。

【0071】

１Ａ～１Ｄの合成：窒素ガスの保護下、化合物１－１６（１２０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（３６．３８ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及び塩化アクリロイル（１７．００、０．１８８ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３０分間撹拌した。反応溶液を水（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、化合物１の粗生成物を得た。粗生成物をＳＦＣ（カラム情報：ＲＥＧＩＳ（Ｒ，Ｒ）ＷＨＥＬＫ－Ｏ１（２５０ｍｍ×２５ｍｍ、１０μｍ）；移動相：［０．１％アンモニア水－メタノール］；メタノール％：４０％－４０％，３；５０分）によって分離して、１ａｃ（３．２０５～４．１６３分）、化合物１Ｄ（４．７分）、化合物１Ｂ（５．６２分）を得た。１ａｃを再びＳＦＣで分離し（カラム情報：（ｓ，ｓ）ＷＨＥＬＫ－Ｏ１（２５０ｍｍ×５０ｍｍ、１０μｍ）；移動相：［０．１％アンモニア水－イソプロパノール］；イソプロパノール％：６０％－６０％，５．５ｍｉｎ；９０分）、化合物１Ｃ（６．１７５分）、化合物１Ａ（７．９０５分）を得た。

【0072】

化合物１Ａ：ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．０（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．３８ （ｂｒ， １Ｈ）， ７．３１（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１７（ｓ， １Ｈ）， ６．９３ （ｍ， １Ｈ）， ６．３５ （ｄ， Ｊ＝１６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄ， Ｊ＝１０．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６２ （ｂｒ， ２Ｈ）， ４．３０－４．１４ （ｂｒ， ３Ｈ）， ３．８８ （ｂｒ， ２Ｈ）， ３．５８ － ３．４３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．４２－３．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．５０ （ｂｒ， １Ｈ）， ２．２５ （ｂｒ， ２Ｈ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ）， １．１８－１．１４ （ｍ， ６Ｈ）。

【0073】

化合物１Ｂ：ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．２（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．４８ （ｄ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３２（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１７（ｓ， １Ｈ）， ６．９３ （ｍ， １Ｈ）， ６．３２ （ｄ， Ｊ＝１６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７６ （ｄｄ， Ｊ＝１０．４， １．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５－４．９５ （ｂｒ， ２Ｈ）， ４．２５－ ４．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．８４ （ｂｒ， ２Ｈ）， ３．６０ － ３．４０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．００－３．２５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５ （ｂｒ， １Ｈ）， ２．２４ （ｂｒ， ２Ｈ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ）， １．１８－１．１４ （ｍ， ６Ｈ）。

【0074】

化合物１Ｃ：ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．０（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝８．４８ （ｄ， Ｊ＝４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３１（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４ （ｓ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ＝４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．５２ （ｂｒ， １Ｈ） ６．３６ （ｄ， Ｊ＝１６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄ， Ｊ＝１０．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５－４．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０７－４．１４ （ｍ， ３Ｈ）， ３．８５ （ｂｒ， ２Ｈ）， ３．６０ （ｂｒ， １Ｈ）， ３．４５ （ｂｒ， １Ｈ）， ２．９５－３．２０ （ｂｒ， ２Ｈ）， ２．５４ （ｍ， １Ｈ）， ２．２５ （ｂｒ， ２Ｈ）， ２．００ （ｓ， ３Ｈ） ， １．１８－１．１４ （ｍ， ６Ｈ）。

【0075】

化合物１Ｄ：ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．１（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．４８ （ｄ， Ｊ＝５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３１（ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１４ （ｓ， ２Ｈ）， ６．５０ （ｍ， １Ｈ）， ６．３６ （ｄ， Ｊ＝１８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．７５ （ｄ， Ｊ＝１１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６２－４．８０ （ｂｒ， ２Ｈ）， ４．０７－４．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５０－３．８５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２０－ ３．６０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５０ （ｂｒ， １Ｈ）， ２．２５ （ｂｒ， ２Ｈ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ）， １．１８－１．１４ （ｍ， ６Ｈ）。

【0076】

【化28】

【化29】

【0077】

同様に、ステップ１－１１の合成にキラルなピペラジン化合物１－１８を使用し、同じ合成ステップ及び方法によって化合物１－２５を得た。化合物１－２５をキラルＳＦＣによって製造して（カラム情報：（ｓ，ｓ）ＷＨＥＬＫ－Ｏ１（２５０ｍｍ×５０ｍｍ、１０μｍ）；移動相：移動相Ａは超臨界二酸化炭素、移動相Ｂは［０．１％アンモニア水－イソプロパノール］；溶出勾配：４０％－４０％）化合物１Ｄを得、次いでＨＰＬＣによって製造して（カラム情報：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ８ ２５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：移動相Ａは０．２２５％ ギ酸を含む水、移動相Ｂはアセトニトリルであり；溶出勾配：２０％－６０％ ３０ｍｉｎ）化合物１Ｄを得た。

【0078】

化合物１Ｄ：ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．２（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ＝ ８．５２ （ｄ， Ｊ＝５．０２ Ｈｚ， １ Ｈ），７．３９ （ｄ， Ｊ＝７．２ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．２３ （ｓ， １ Ｈ）， ７．０９ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， １ Ｈ）， ６．５９ （ｂｒ ｓ， １ Ｈ）， ６．４３ （ｄｄ， Ｊ＝１６．８， １．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ５．８４ （ｂｒ ｄ， Ｊ＝１０．４ Ｈｚ， １ Ｈ） ，４．９６ （ｂｒ ｓ， １ Ｈ）， ４．７３ （ｂｒ ｓ， １ Ｈ）， ４．２１ （ｂｒ ｓ， １ Ｈ）， ３．８５ － ４．０５ （ｍ， ４ Ｈ）， ３．４３ － ３．７３ （ｍ， ２ Ｈ）， ３．０４ － ３．３４ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．５８ （ｍ， １ Ｈ）， ２．３２ （ｂｒ ｓ， ２ Ｈ）， ２．０６ （ｓ， ３ Ｈ）， １．２１ （ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ３ Ｈ） １．１５ （ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ３ Ｈ）。

【0079】

ＳＦＣ：ｅｅ値は１００％で、保持時間は２．９５１分である。（カラム情報：（Ｓ，Ｓ）Ｗｈｅｌｋ－Ｏ１ １００×４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．、５．０μｍ；移動相：移動相Ａは超臨界二酸化炭素、移動相Ｂは［アセトニトリル（０．０５％ジメチルアミン含有）－イソプロパノール（Ｖ：Ｖ＝１：２）］；溶出勾配： ４０％移動相Ｂが超臨界二酸化炭素中、流速２．５ｍＬ／ｍｉｎ、検出器：ＰＤＡ、カラム温度４０℃、背圧１００Ｂａｒである。）

【0080】

実施例２

【0081】

【化30-1】

【化30-2】

【0082】

実施例３

【0083】

【化31】

【0084】

実施例４

【0085】

【化32】

【化33】

【化34】

【0086】

４－５－Ｃの合成：
０℃で化合物４－５－Ａ（５０ ｇ、 ３２０．２８ ｍｍｏｌ、 １ ｅｑ）、炭酸カリウム（５５．００ ｇ、 ３９７．９３ ｍｍｏｌ、 １．２４ ｅｑ）、及びアセトニトリル（５００ ｍＬ）の懸濁液にマロン酸メチルクロリド（５１．２０ ｇ、 ３７４．９７ ｍｍｏｌ、 ４０．００ ｍＬ、 １．１７ ｅｑ）をゆっくり滴下し、滴下後２０℃で１６時間撹拌した。反応溶液を珪藻土でろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（１００ ｍＬ×２）で洗浄し、ろ液を濃縮して得られた粗生成物を石油エーテル／酢酸エチル（Ｖ／Ｖ＝３／１； １５０ ｍＬ／５０ ｍＬ）で１６時間スラリー化し、次いでろ過し、フィルターケーキを上記のスラリー化溶剤で洗浄し（５０ ｍＬ×２）、固体を集めて乾燥させ、化合物４－５－Ｃを得た。関連する特性データは以下の通りである：ＬＣＭＳ ｍ／ｚ： ２５６．９ ［Ｍ＋１］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ９．９２ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．８４ （ｔｄ， Ｊ＝１．２， ８．４Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４９ － ７．４１ （ｍ， １Ｈ）， ７．４０ － ７．３２ （ｍ， １Ｈ）， ３．８５ （ｓ， ３Ｈ）， ３．５７ （ｓ， ２Ｈ）。

【0087】

４－５－Ｅの合成：
化合物４－５－Ｃ（６０ ｇ、 ２３４．２０ ｍｍｏｌ、 １ ｅｑ）のアセトニトリル（６００ ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（７８ ｇ、 ２３９．４０ ｍｍｏｌ、 １．０２ ｅｑ）を加えた後、反応溶液に化合物（Ｅ）－４－エトキシ－１，１，１－トリフルオロブト－３－エン－２－オン（４０．１２ ｇ， ２３８．６５ ｍｍｏｌ， ３４ ｍＬ， １．０２ ｅｑ）を滴下した。反応溶液を２０℃で１時間攪拌し、反応終了後ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチル（１００ ｍＬ×２）で洗浄し、有機相を合わせ、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物を石油エーテル／酢酸エチル（Ｖ／Ｖ＝１０／１，６００ ｍＬ／６０ ｍＬ）で１時間スラリー化した後、ろ過し、得られたフィルターケーキをこの溶媒で洗浄し（５０ ｍＬ×３）、フィルターケーキを回収し、真空乾燥させて化合物４－５－Ｅを得た。関連する特性データは以下の通りである：ＬＣＭＳ ｍ／ｚ： ３７９．０ ［Ｍ＋１］ ^＋；１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ＝ １１．４０ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６７ － ８．３１ （ｍ， １Ｈ）， ７．８１ － ７．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｄｔ， Ｊ＝５．５， ８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０１ － ６．０２ （ｍ， １Ｈ）， ３．８３ － ３．６３ （ｍ， ３Ｈ）。

【0088】

４－５－Ｆの合成：
化合物４－５－Ｅ（１２９ ｇ、 ３４１．０６ ｍｍｏｌ、 １ｅｑ）の２，２，２－トリフルオロエタノール（６５０ ｍＬ）にトリエチルアミン（５０．８９ ｇ、 ５０２．９２ ｍｍｏｌ、 ７０ ｍＬ、 １．４７ ｅｑ）を加えた。反応溶液を８０℃で１６時間反応させた。反応終了後、反応溶液を濃縮して残留物を得た。残留物に酢酸エチル５００ｍＬを加えて１時間攪拌した後、ろ過し、フィルターケーキを酢酸エチルで洗浄し（５０ｍＬ×２）、フィルターケーキを集めて真空乾燥させ、化合物４－５－Ｆを得た。関連する特性データは以下の通りである：ＬＣＭＳ ｍ／ｚ： ３４６．９ ［Ｍ＋１］ ^＋；１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ＝ ８．２５ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０７ － ７．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３７ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９９ （ｄ， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）。

【0089】

４－５－Ｋの合成：

【0090】

【化35】

【0091】

２５℃で化合物４－５－Ｆ（９０ ｇ）の酢酸イソプロピル（８１０ ｍＬ）懸濁液に４－５－Ｇ（１５．７５ ｇ、 ０．５ ｅｑ）の酢酸イソプロピル溶液（９０ ｍＬ）を加えて、清澄化した溶液を得た。結晶種（３０ ｍｇ、 ｅｅ値９１％）を加え、混合物を２５℃で１６時間攪拌し、多量の固体を析出して濾取し、母液を２Ｎ塩酸で洗浄した。４－５－Ｇを完全に除去した時、母液を濃縮して残渣を得た。次いで、残留物にアセトニトリル（５４０ ｍＬ）及び４－５－Ｈ（２９．１ ｇ， ０．８ ｅｑ．）のアセトニトリル溶液（２０ ｍＬ）を添加して、清澄化した溶液を得、５分後、固体が析出した。８０℃で固体を溶解して清澄化した溶液を得、６０～６５℃に冷却し、結晶種（６０ ｍｇ、 １００％ ｅｅ）を加え、１時間攪拌した。それを２５℃に冷却し、１６時間撹拌し、固体をろ過してキラルな純粋な４－５－Ｋ塩を得た。２Ｎの水酸化ナトリウム溶液で溶解し、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで抽出し、乾燥させ、減圧下で有機相を蒸留して４－５－Ｋを得た。ＥＥ値は９９．５％であり、保持時間は３．９７６分であり、ＳＦＣ分析方法は下記の通りである：カラムタイプ：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ－３ １５０iA４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．、 ３μｍ、移動相：Ａ：ＣＯ_２ Ｂ：エタノール（０．０５％ジエチルアミン、ｖ／ｖ）溶出勾配：Ｂを５％から４０％まで５分間上昇し、Ｂを４０％で２．５分間保持し、Ｂを５％で２．５分間保持し、流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ カラム温度：３５℃ カラム圧力：１５００ｐｓｉ。

【0092】

４－５の合成：

【化36】

【0093】

８０℃で、４－５－Ｋ（２０ ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（１６０ ｍＬ）にピリジン（１８．６２ ｇ、４．０７ ｅｑ）を加え、次に液体臭素（１８．６ ｇ、２．０１ ｅｑ）のテトラヒドロフラン溶液（４０ ｍＬ）を滴下した。混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳで生成物の形成を検出し、有機相を減圧下で蒸留して残留物を得、残留物を酢酸エチル（１２０ ｍＬ）で希釈し、ろ過し、ろ液を１Ｍ ＨＣｌ溶液（３０ ｍＬ）、水（３０ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで洗浄し、濃縮して粗生成物４－５を得、粗生成物をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（６ ｍＬ）及び石油エーテル（１２ ｍＬ）でスラリー化して中間体４－５を得た。ＬＣＭＳ ｍ／ｚ： ３８０．８ ［Ｍ＋１］ ^＋。ＥＥ値は９９．５％であり、保持時間は１．２０６分であり、ＳＦＣ分析方法は下記の通りである：カラムタイプ：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ－３、 １００×４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．、 ３μｍ。移動相： Ａ： ＣＯ_２ Ｂ： イソプロピルアルコール （０．０５％イソプロピルアミン、 ｖ／ｖ）。溶出勾配： ０．０ 分 Ａ ９５％ Ｂ ５％、 ０．５分；Ａ ９５％ Ｂ ５％、 ２．０分；Ａ ６０％ Ｂ ４０％、 ３．０分；Ａ ６０％ Ｂ ４０％、 ３．６分；Ａ ９５％ Ｂ ５％、 ４．０分，Ａ ９５％ Ｂ ５％ 流速： ３．４ｍＬ／ｍｉｎ カラム温度： ３５°Ｃ カラム圧力： １８００ｐｓｉ。

【0094】

４－３の合成：
窒素ガスの保護下、化合物４－１（２．００ｇ、１２．２０ｍｍｏｌ）と化合物４－２（８．２０ ｇ、４８．７８ｍｍｏｌ）のジオキサン（２０ｍｌ）と水（５ｍｌ）の混合溶液に、１，１－ビス（ジフェニルホスホニウム）フェロセンパラジウムクロリド（８９２．３６ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（３．３７ｇ、２４．３９ｍｍｏｌ）を一度に加え、８５℃で１２時間攪拌した。反応溶液を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ ｍＬ×２）で抽出し、後で飽和食塩水（５０ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してからシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル１：０～３：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物４－３を得た。

【0095】

４－４の合成：
化合物４－３（１．９０ｇ、１０．８４ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）溶液に溶解し、湿式炭素担持パラジウム（１９０ｍｇ、純度１０％）を溶液に加え、水素ガス（１５ Ｐｓｉ）を加えて２５℃で１２ 時間攪拌した。反応溶液を珪藻土でろ過し、濃縮して化合物４－４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １８０．２（Ｍ＋１）。

【0096】

４－６の合成：

【化37】

【0097】

窒素ガスの保護下、化合物４－４（１．３０ｇ、７．２５ｍｍｏｌ）と化合物４－５（２．７６ｇ、７．２５ｍｍｏｌ）のジオキサン（３０ｍｌ）の混合溶媒中にトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（６６４．０８ｍｇ、０．７２５ｍｍｏｌ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィン）－９，９－ジメチルキサンテン（８３９．２３ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）、及び炭酸セシウム（４．７３ ｇ、１４．５０ ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１００℃で１２時間撹拌した。反応溶液を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した後、飽和食塩水（１００ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル １０：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物４－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４８０．１（Ｍ＋１）。

【0098】

４－７の合成：

【化38】

【0099】

化合物４－６（２．５ｇ、５．２１ｍｍｏｌ）の酢酸（３０ｍＬ）溶液に、Ｎ－ブロモスクシンイミド（９２８．１１ｍｇ、５．２１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２５℃で０．５時間撹拌した。反応終了後、飽和亜硫酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ）でクエンチングし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で溶液のｐＨを８に調整し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出し、次に飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物４－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５５８．０（Ｍ＋１）。

【0100】

４－９の合成：

【化39】

【0101】

窒素ガスの保護下、化合物４－７（１．９０ ｇ、３．４０ ｍｍｏｌ）と化合物１－５（４３４．６６ ｍｇ、３．７４ ｍｍｏｌ）のトルエン（２０ ｍＬ）の混合溶媒にクロロ［（トリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン）－２－（２－アミノビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（３８４．７５ ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ－ジシクロヘキシルメチルアミン（７３１．２４ ｍｇ、３．７４ ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃で１６時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、水（１００ ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（１００ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ３：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離して濃縮し、化合物４－９を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５６２．１（Ｍ＋１）。

【0102】

４－１０の合成：

【化40】

【0103】

化合物４－９（１．３０ｇ、２．３２ｍｍｏｌ）を塩酸水溶液（１２ｍｏｌ／Ｌ、３０ｍｌ）に加えた。反応物を１１５℃で３６時間撹拌した。反応終了後、反応溶液を濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ２：１～０：１（ｖ／ｖ））で分離して濃縮し、化合物４－１０を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５４８．０（Ｍ＋１）。

【0104】

４－１１の合成：

【化41】

【0105】

０℃で、化合物４－１０（０．７ ｇ、１．２８ ｍｍｏｌ）を酢酸（１０ ｍＬ）と発煙硝酸（１．２６ ｇ、２０．００ ｍｍｏｌ）の混合溶液に加えた後、亜硝酸ナトリウム（４４１．１０ ｍｇ、６．３９ ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で０．５時間攪拌した。反応溶液を氷水（５０ｍＬ）に加えて希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、得られた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝６に調整し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物４－１１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５９３．０（Ｍ＋１）。

【0106】

４－１２の合成：

【化42】

【0107】

室温で化合物４－１１（０．７０ ｇ、１．１８ ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ ｍＬ）溶液にオキシ塩化リン（９８５．８３ ｍｇ、５．９５ ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８６３．６２ μｇ、１１．８２ μｍｏｌ）を加え、４５℃で１時間攪拌した。反応溶液を水（５０ｍＬ）に加えて希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出し、飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物４－１２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６１１．０（Ｍ＋１）。

【0108】

４－１４の合成：

【化43】

【0109】

化合物４－１２（０．６０ｇ、０．９８２ ｍｍｏｌ）及び化合物４－１３（４５２．３９ ｍｇ、１．９６ ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍｌ）に４Ａモレキュラーシーブ（１ｇ）を加え、反応物を４５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を珪藻土でろ過濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、次に飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ２：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離して濃縮し、化合物４－１４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ８０５．１（Ｍ＋１）。

【0110】

４－１５の合成：

【化44】

【0111】

化合物４－１４（０．４ ｇ、０．４９７ ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（８ｍｌ）溶液に１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（１５１．３４ ｍｇ、０．９９４ ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を１３０℃で３０分間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ×３）と飽和食塩水（２０×２ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させて化合物４－１５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７５８．２（Ｍ＋１）。

【0112】

４－１６の合成：

【化45】

【0113】

化合物４－１５（０．３５ ｇ、０．４６１ ｍｍｏｌ）をエタノール（５ ｍＬ）と水（３ ｍＬ）の混合溶液に加え、続いて塩化アンモニウム（２４７．０８ ｍｇ、４．６２ ｍｍｏｌ）と鉄粉（２５７．９５ ｍｇ、４．６２ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、８０℃で２時間攪拌した。反応溶液をろ過し、ろ液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮して化合物４－１６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２８．２（Ｍ＋１）。

【0114】

４－１７の合成：

【化46】

【0115】

化合物４－１６（０．１８ ｇ、０．２４７ ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ ｍＬ）及びＴＨＦ（５ ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却後、1，3-ジクロロ-5，5-ジメチルヒダントイン（８２．８４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、３０分間攪拌した。反応溶液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮して粗生成化合物４－１７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７９６．１（Ｍ＋１）。

【0116】

４－１８の合成：

【化47】

【0117】

化合物４－１７（２００ ｍｇ、０．２５ ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３．０ ｍＬ）に溶解し、２５℃でトリフルオロ酢酸（１ ｍＬ）を加え、２０分間攪拌した。反応溶液を濃縮して粗生成物化合物４－１８を得た。

【0118】

化合物４の合成：

【化48】

【0119】

化合物４－１８（２００ ｍｇ、０．２８７ ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４ ｍＬ）と水（２ ｍＬ）の混合溶液に溶解し、上記溶液のｐＨを炭酸カリウムで８に調整し、次いで塩化アクリロイル（３８．９８ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を反応溶液に滴下し、５分間撹拌した。反応溶液を水（２０ ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮し、ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０ μｍ； 移動相：［水（０．２２５％ ギ酸）－アセトニトリル］；アセトニトリル％：４９％－６９％、１０分）で分離して化合物４を得た。
ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７５０．１（Ｍ＋１）。^１ＨＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ＝ ８．９８ （ｓ， １Ｈ）， ７．６３ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２ （ ｓ， １Ｈ）， ６．９９ － ６．７４ （ｍ， １Ｈ）， ６．２５ － ６．０７ （ｍ， ３Ｈ）， ５．８１ － ５．７２ （ｍ， １Ｈ）， ４．７１ － ４．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ４．８， ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．０２ － ３．７０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６６ － ３．４３ （ｍ， ３Ｈ）， ２．９２ － ２．７４ （ｍ， １Ｈ）， ２．１４ （ ｓ， ２Ｈ）， １．１３ － ０．８３ （ｍ， １３Ｈ）

【0120】

実施例５

【0121】

【化49】

【0122】

【化50】

【0123】

５－３の合成：窒素ガスの保護下、化合物５－１（１４ ｇ、８５．３７ ｍｍｏｌ）と化合物５－２（５２．５９ ｇ、３４１．４８ ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５０ ｍＬ）と水（３０ ｍＬ）の混合溶液に１，１－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウムジクロリド（２．５ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３５．４０ｇ、２５６．１１ｍｍｏｌ）を一度に加え、８５℃で１２時間攪拌した。反応溶液を濃縮し、水（５００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５００ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル １：０～１：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物５－３を得た。

【0124】

５－４的合成の合成：化合物５－３（５．７ ｇ、３８．７３ ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ ｍＬ）溶液に溶解し、溶液に湿式炭素担持パラジウム（５００ｍｇ、純度１０％）を加え、水素（１５Ｐｓｉ）を加え、２５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を珪藻土でろ過し、濃縮して化合物５－４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １５２．２（Ｍ＋１）。

【0125】

５－６の合成：

【化51】

【0126】

窒素ガスの保護下、化合物５－４（３．７ ｇ、２４．４７ ｍｍｏｌ）と化合物４－５（１０．２６ ｇ、２６．９２ ｍｍｏｌ）のジオキサン（３０ ｍＬ）の混合溶媒にトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（２．２４ｇ、２．４５ｍｍｏｌ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９－ジメチルキサンテン（２．８３ ｇ、４．８９ ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（１５．９５ ｇ、４８．９４ ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１００℃で１２時間撹拌した。反応溶液を水（１００ ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（１００ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ５：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離して化合物５－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４５２．１（Ｍ＋１）。

【0127】

５－７の合成：

【化52】

【0128】

化合物５－６（５．４ｇ、１１．９６ｍｍｏｌ）の酢酸（５０ｍＬ）溶液に、Ｎ－ブロモスクシンイミド（３．１９ｇ、１７．９５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を２５℃で０．５時間撹拌した。反応終了後、飽和亜硫酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）でクエンチングし、水酸化ナトリウムで溶液のｐＨを８に調整し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で抽出し、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ４：１～２：１（ｖ／ｖ））で分離して濃縮し、化合物５－７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５２９．９（Ｍ＋１）。

【0129】

５－９の合成：

【化53】

【0130】

窒素ガスの保護下、化合物５－７（１．５ ｇ、２．８３ ｍｍｏｌ）と化合物１－５（４９２．６９ ｍｇ、４．２４ ｍｍｏｌ）のトルエン（１５ ｍＬ）の混合溶媒にクロロ［（トリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスフィン）－２－（２－アミノビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）（２８９．８９ ｍｇ、０．５６５ ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジシクロヘキシルメチルアミン（６０７．８４ ｍｇ、３．１１ ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１１０℃で１６時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、水（１００ ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（１００ ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ３：１～１：１（ｖ／ｖ））で分離して濃縮し、化合物５－９を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５３４．１（Ｍ＋１）。

【0131】

５－１０の合成：

【化54】

【0132】

化合物５－９（０．５ｇ、０．９３７ｍｍｏｌ）を塩酸水溶液（１２ｍｏｌ／Ｌ、２０ｍｌ）に加えた。反応物を１１５℃で３６時間撹拌した。反応終了後、反応溶液を濃縮し、水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物５－１０を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５２０．０（Ｍ＋１）。

【0133】

５－１１の合成：

【化55】

【0134】

０℃で、化合物５－１０（０．４０ ｇ、０．７７ ｍｍｏｌ）を酢酸（５ ｍＬ）と発煙硝酸（０．９６ ｇ、１５．２３ ｍｍｏｌ）の混合溶液に加え、次に亜硝酸ナトリウム（２６５．６７ ｍｇ、３．８５ ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で０．５時間撹拌した。反応溶液を氷水（５０ｍｌ）に加えて希釈し、酢酸エチル（２０ｍｌ×２）で抽出し、飽和食塩水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、得られた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝６に調整し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物５－１１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５６５．０（Ｍ＋１）。

【0135】

５－１２の合成：

【化56】

【0136】

室温で、化合物５－１１（０．３０ ｇ、０．５３ ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ ｍＬ）溶液にオキシ塩化リン（４０７．５１ ｍｇ、２．６６ ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３８８．５２ μｇ、５．３２ μｍｏｌ）を加え、４５℃で１時間攪拌した。反応溶液を水（１０ｍＬ）に加えて希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出し、飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物５－１２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５８３．０（Ｍ＋１）。

【0137】

５－１４の合成：

【化57】

【0138】

化合物５－１２（０．２８ ｇ、０．４８ ｍｍｏｌ）と化合物４－１３（２２１．２８ ｍｇ、０．９６ ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ ｍＬ）に４Ａモレキュラーシーブ（０．５ ｇ）に加え、反応溶液を４５℃で１２時間撹拌した。反応溶液を珪藻土でろ過し、濃縮し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ２：１～０：１（ｖ／ｖ））で分離し、濃縮して化合物５－１４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７７７．１（Ｍ＋１）。

【0139】

５－１５の合成：

【化58】

【0140】

化合物５－１４（０．１５ ｇ、０．１９ ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）の溶液に、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（４４．１０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を１３０℃で３０分間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、水（１０ｍＬ×３）と飽和食塩水（１０×２ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させて化合物５－１５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７３０．２（Ｍ＋１）。

【0141】

５－１６の合成：

【化59】

【0142】

化合物５－１５（０．１１ ｇ、０．１５ ｍｍｏｌ）をエタノール（１ ｍＬ）と水（１ ｍＬ）の混合溶液に加え、次に、塩化アンモニウム（８０．６４ ｍｇ、１．５１ ｍｍｏｌ）と鉄粉（８４．１９ ｍｇ、１．５１ ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、８０℃で１２時間攪拌した。反応溶液をろ過し、ろ液を水（１０ ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮して化合物５－１６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７００．２（Ｍ＋１）。

【0143】

５－１７の合成：

【化60】

【0144】

化合物５－１６（０．１ ｇ、０．１４ ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、1，3-ジクロロ-5，5-ジメチルヒダントイン（４７．８７ ｍｇ、０．２４ ｍｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、３０分間撹拌した。反応溶液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮してから粗生成物化合物５－１７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７６８．２（Ｍ＋１）。

【0145】

５－１８の合成：

【化61】

【0146】

化合物５－１７（１４０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を２５℃で加え、２０分間攪拌した。反応溶液を濃縮し、粗生成物化合物５－１８を得た。

【0147】

化合物５の合成：

【化62】

【0148】

化合物５－１８（１２０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）と水（１ｍＬ）の混合溶液に溶解し、炭酸カリウムで上記溶液のｐＨを８に調整し、次いで、塩化アクリロイル（２４．３７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を反応溶液に滴下し、５分間撹拌した。反応溶液を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、ろ液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（カラム： Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０ μｍ；移動相：［水（０．１％トリフルオロ酢酸）－アセトニトリル］；アセトニトリル％：５０％－８０％、１０分）で単離して化合物５を得た。 ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２２．１（Ｍ＋１）。

【0149】

実施例６

【0150】

【化63】

【化64】

【0151】

６－３の合成：窒素ガスの保護下で、化合物６－１（１０ ｇ、３７．７０ ｍｍｏｌ）及び化合物５－２（２４．４６ ｇ、１５８．７９ ｍｍｏｌ）のジオキサン（８０ ｍＬ）及び水（２０ ｍＬ）の溶液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（２．９０ｇ、３．９７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１６．４６ｇ、１１９．０９ｍｍｏｌ）を一度に加え、１００℃で１２時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ０：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物６－３を得た。 ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １４７．２ （Ｍ＋１）。

【0152】

６－４の合成：窒素ガスの保護下、２０℃で、化合物６－３（５．２ ｇ、３５．５７ ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ ｍＬ）溶液にパラジウム炭素（０．５ ｇ、１７．１０ ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で水素（１５ ＰＳＩ）条件下で１０分間攪拌した。反応溶液を珪藻土でろ過し、スピン乾燥させて粗生成物６－４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： １５１．２ （Ｍ＋１）

【0153】

６－６の合成：

【化65】

【0154】

窒素ガスの保護下、化合物６－４（５ ｇ、３３．２８ ｍｍｏｌ）と化合物４－５（１２．６８ ｇ、３２．２８ ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５０ ｍＬ）の混合溶液にトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１．５２ ｇ、１．６６ ｍｍｏｌ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９－ジメチルキサンテン（１．９３ ｇ、３．３３ ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（２１．６９ ｇ、６６．５７ ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１００℃で３時間撹拌した。反応溶液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル １：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物６－６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ４５１．１ （Ｍ＋１）

【0155】

６－７の合成：

【化66】

【0156】

窒素ガスの保護下で、化合物６－６（６ｇ、１３．３２３ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、ＮＢＳ（２．３７ｇ、１３．３２ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。反応は２０℃で０．５時間行った。反応終了後、抽出し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル １：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物６－７を得た。 ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５３０．９ （Ｍ＋１）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ８．２５ （ｓ， ２Ｈ）， ８．０７ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．６６ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５．６， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５４ （ｄｔ， Ｊ ＝ １．２， ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｓ， ２Ｈ）， ２．６３ － ２．３６ （ｍ， ４Ｈ）， １．１８ － １．０４ （ｍ， ６Ｈ）。

【0157】

６－９の合成：

【化67】

【0158】

２０℃の窒素ガスの保護下で、化合物６－７（５ ｇ、９．４５ ｍｍｏｌ）及び化合物１－５（４．３９ ｇ、３７．７９ ｍｍｏｌ）をジオキサン（５０ ｍＬ）に入れ、ジシクロヘキシルメチルアミン（２．７７ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（１．６ｇ、３７．７９ｍｍｏｌ）、及びトリ－ｔｅｒｔ－ブチルホスホニウムパラジウム（７２４．１７ ｍｇ、１．４２ ｍｍｏｌ）を順次に加えた。反応は窒素ガスの保護下、１０５℃で１２時間行った。反応溶液を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、飽和食塩水（５０ｍＬ、３回）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してからシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ０：１（ｖ／ｖ））で単離して化合物６－９を得た。

【0159】

６－１０の合成：

【化68】

【0160】

窒素ガスの保護下、化合物６－９（２ｇ、３．７６ｍｍｏｌ）を塩酸水溶液（１２ｍｏｌ／Ｌ、２０ｍＬ）に加えた。反応物を１１０℃で２時間撹拌した。反応終了後、直接に減圧濃縮し、酢酸エチル（２５ｍＬ、２回）で抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物６－１０を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５１９．０（Ｍ＋１）。

【0161】

６－１１の合成：

【化69】

【0162】

０℃で、化合物６－１０（２ ｇ、３．８６ ｍｍｏｌ）を酢酸（１５ ｍＬ）と発煙硝酸（１．２２ ｇ、１９．２９ ｍｍｏｌ）の混合溶液に加え、続いて亜硝酸ナトリウム（１．３３ ｇ、１９．２９ ｍｍｏｌ）を加え、１５℃で０．５時間攪拌した。反応溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム（４０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物６－１１を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５６４．２（Ｍ＋１）

【0163】

６－１２の合成：

【化70】

【0164】

窒素ガスの保護下、室温で、化合物６－１１（１．８５ ｇ、３．２８ ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（２４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１５ｍｌ）溶液にオキシ塩化リン（２．５２ ｇ、１６．４２ ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で０．５時間攪拌した。反応終了後、抽出し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ２：１（ｖ／ｖ））で分離して化合物６－１２を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ５８２．０（Ｍ＋１）。

【0165】

６－１４の合成：

【化71】

【0166】

窒素ガスの保護で、化合物６－１２（０．５ ｇ、０．８５９ ｍｍｏｌ）及び化合物４－１３（４３５．３９ ｍｇ、１．８９ ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１５ｍｌ）に４Ａモレキュラーシーブ（２ｇ）を加え、反応物を４５℃で１２時間撹拌した。反応物を珪藻土でろ過し、酢酸エチル（２０ ｍＬ×２）と水（２０ ｍＬ）で抽出し、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ジクロロメタン：酢酸エチル ６：７：８ （ｖ／ｖ））で分離して化合物６－１４を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７７６．５（Ｍ＋１）。

【0167】

６－１５の合成：

【化72】

【0168】

窒素ガスの保護下で、化合物６－１４（３００ ｍｇ、３８６．７５ μｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（８８．３２ｍｇ、５８０．１２μｍｏｌ）を加えた。反応溶液を１３０℃で０．５時間攪拌した。ＬＣＭＳは、反応が完了したことを示した。反応溶液を酢酸エチル（２０ ｍＬ）で希釈し、水（２０ ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ０：１ （ｖ／ｖ））で分離して化合物６－１５を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２９．１（Ｍ＋１）。

【0169】

６－１６の合成：

【化73】

【0170】

化合物６－１５（０．１２ｇ、１６４．６８μｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合溶液に加え、次いで、塩化アンモニウム（４４．０４ｍｇ、８２３．４０μｍｏｌ）及び鉄粉（４５．９９ｍｇ、８２３．４０μｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、８０℃で０．５時間攪拌した。反応溶液をろ過し、スピン乾燥させ、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル ０：１（ｖ／ｖ））で分離し、化合物６－１６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６９９．２（Ｍ＋１）。

【0171】

６－１７の合成：

【化74】

【0172】

化合物６－１６（５０ｍｇ、７１．５６μｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）及び酢酸エチル（２ｍＬ）に溶解し、次に０℃に冷却し、1，3-ジクロロ-5，5-ジメチルヒダントイン（２３．９７ｍｇ、１２１．６５μｍｏｌ）を上記混合溶液に加え、１０分間撹拌した。反応溶液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、飽和重亜硫酸ナトリウム（１０ｍＬ×２）及び飽和重炭酸ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄し、濃縮して粗生成物化合物６－１７を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７６７．１（Ｍ＋１）。

【0173】

６－１８の合成：

【化75】

【0174】

化合物６－１７（５０ｍｇ、６５．１４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３．０ｍＬ）に溶解し、０～５℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ）を加え、１５℃で１５分間撹拌した。反応溶液を直接に減圧濃縮し、化合物６－１８を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ６６７．４（Ｍ＋１）。

【0175】

化合物６の合成：

【化76】

【0176】

窒素ガスの保護下で、化合物６－１８（５０ ｍｇ、６５．１４ μｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ ｍＬ）及び水（２ ｍＬ）の溶液に炭酸カリウム（２０．７１ ｍｇ、１４９．８２ μｍｏｌ）と塩化アクリロイル（８．１４ ｍｇ、８９．８９ μｍｏｌ）を加え、２５℃で３０分間攪拌した。反応溶液を水（１０ｍｌ）、酢酸エチル（５０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して、粗化合物６を得た。その粗生成物をｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ（カラム情報： Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（０．２２５％ギ酸）－アセトニトリル］；アセトニトリル％：３２％－４２％、７ 分）で分離して精製し、化合物６を得た。ＬＣＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ： ７２１．１（Ｍ＋１）。

【0177】

^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ_３） δ ＝ ８．４５ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４２ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２７ － ７．１６ （ｍ， １Ｈ）， ６．７３ － ６．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ５．８９ － ５．７８ （ｍ， １Ｈ）， ５．０７ － ４．５９ （ｍ， １Ｈ）， ４．３０ － ３．８３ （ｍ， ４Ｈ）， ３．７５ － ２．９３ （ｍ， ３Ｈ）， ２．５１ － ２．１７ （ｍ， ７Ｈ）， １．２２ － ０．８８ （ｍ， ８Ｈ）。

【0178】

実験例１：Ｈ３５８細胞増殖抑制実験

【0179】

実験材料：
ＲＰＭＩ－１６４０培地、ペニシリン／ストレプトマイシン抗生物質はＶｉｃｅｎｔｅから購入し、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａから購入した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（細胞生存率化学発光検出試薬）試薬はＰｒｏｍｅｇａから購入した。ＮＣＩ－Ｈ３５８細胞株は、中国科学院の細胞バンクから購入した。Ｎｉｖｏマルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。

【0180】

実験方法：
ＮＣＩ－Ｈ３５８細胞を白色の９６ウェルプレートに播種し、８０μＬの細胞懸濁液には１ウェルあたり４０００個のＮＣＩ－Ｈ３５８細胞が含まれた。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩インキュベートした。
テストする化合物をスプレーガンで３倍に希釈して９番目の濃度にし、即ち２ｍＭから３０４ｎＭに希釈し、ダブルウェル実験を設定した。ミドルプレートに７８μＬの培地を追加し、対応する位置に従って化合物の各ウェル２μＬをミドルプレートに移し、よく混合し、各ウェル２０μＬを細胞プレートに移した。細胞プレートに移された化合物の濃度は、１０μＭから１．５２ｎＭの範囲であった。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターに５日間置いた。別の細胞プレートを用意し、投与当日のシグナル値を最大値（下記式のＭａｘ値）として読み取り、データ解析に使用した。この細胞プレートの各ウェルに２５μＬの細胞生存率の化学発光検出試薬を加え、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定させた。マルチラベルアナライザーを使用して読み取った。

【0181】

細胞プレートにウェルあたり２５μＬの細胞生存率の化学発光検出試薬を加え、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定させた。マルチラベルアナライザーを使用して読み取った。

【0182】

データ分析：
式（試料－Ｍｉｎ）／（Ｍａｘ－Ｍｉｎ）×１００％を使用して生データを阻害率に変換すると、ＩＣ_５０の値は４つのパラメーターを使用したカーブフィッティングによって取得できる（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ中“ｌｏｇ（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ） ｖｓ． ｒｅｓｐｏｎｓｅ －－ Ｖａｒｉａｂｌｅ ｓｌｏｐｅ” モデル取得）。表１は、ＮＣＩ－Ｈ３５８細胞の増殖に対する本発明の化合物の阻害活性を提供する。

【0183】

【表1】

【0184】

結論：
本発明の化合物は、Ｈ３５８細胞の増殖に対して強力な阻害効果を有する。

【0185】

実験例２：ＭＩＡ－ＰＡＣＡ－２細胞抗増殖実験

【0186】

実験材料：
ＤＭＥＭ培地、ウシ胎児血清はＢｉｏｓｅｒａから購入し、馬の血清はＧｉｂｃｏから購入した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（細胞生存率の化学発光検出試薬）試薬はＰｒｏｍｅｇａから購入した。ＭＩＡ－ＰＡＣＡ－２細胞株は南京科佰バイオテクノロジー株式会社から購入した。ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルアナライザー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）。

【0187】

実験方法：
ＭＩＡ－ＰＡ－ＣＡ－２細胞を白い９６ウェルプレートに播種し、８０μＬの細胞懸濁液には１ウェルあたり１０００個のＭＩＡ－ＰＡ－ＣＡ－２細胞が含まれた。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターで一晩インキュベートした。
テストする化合物をスプレーガンで５倍に希釈して８番目の濃度にし、即ち２ｍＭから２６ｎＭに希釈し、ダブルウェル実験を設定した。ミドルプレートに７８μＬの培地を追加し、対応する位置に従って化合物の各ウェル２μＬをミドルプレートに移し、よく混合し、各ウェル２０μＬを細胞プレートに移した。細胞プレートに移された化合物の濃度は、１０μＭから０．１３ｎＭの範囲であった。細胞プレートを二酸化炭素インキュベーターに３日間置いた。別の細胞プレートを用意し、投与当日のシグナル値を最大値（下記式のＭａｘ値）として読み取り、データ解析に使用した。この細胞プレートの各ウェルに２５μＬの細胞生存率の化学発光検出試薬を加え、室温で１０分間インキュベートして発光シグナルを安定させた。マルチラベルアナライザーを使用して読み取った。

【0188】

データ分析：
式（試料－Ｍｉｎ）／（Ｍａｘ－Ｍｉｎ）×１００％を使用して生データを阻害率に変換すると、ＩＣ_５０の値は４つのパラメーターを使用したカーブフィッティングによって取得できる（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア“ｌｏｇ（阻害剤）／応答－－可変スコープ」”モデル取得）。表２は、ＭＩＡ－ＰＡ－ＣＡ－２細胞の増殖に対する本発明の化合物の阻害活性を提供する。

【0189】

【表2】

【0190】

結論：本発明の化合物は、ＭＩＡ－ＰＡ－ＣＡ－２細胞の増殖に対して良好な阻害活性を示す。

【0191】

実験例３：ｉｎ ｖｉｖｏ異種動物移植腫瘍モデルにおける抗腫瘍活性試験

【0192】

実験目的：
ヒト非小細胞肺癌Ｈ３５８を使用して、ｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍モデルにおける試験化合物単独の腫瘍抑制効果を調査した。

【0193】

実験方法：
Ｈ３５８ヒト非小細胞肺癌細胞株をメスのＢａｌｂ／ｃヌードマウスに皮下接種し、接種後６日目に、動物を腫瘍サイズ及び体重に従ってランダムにグループ化し、下記の記載のように投与した。

【0194】

溶媒対照群：グループ化の日の午後に投与を開始し、１日１回、０．１ ｍＬ／１０ｇ体重の用量で溶媒を経胃投与し（１０％ ＤＭＳＯ／６０％ ＰＥＧ４００／３０％ 脱イオン水）、２８日間連続投与した。

【0195】

投与群：グループ化の日の午後に投与を開始し、１日１回、三つのグループはそれぞれ１ ｍｇ／ｋｇ、３ ｍｇ／ｋｇ及び１０ ｍｇ／ｋｇ体重の用量で化合物１Ｄを経胃投与し（１０％ ＤＭＳＯ／６０％ ＰＥＧ４００／３０％ 脱イオン水）、２８日間連続投与した。

【0196】

実験中、マウスの体重を週２回測定し、腫瘍体積を測定した（腫瘍体積は、長さ×幅^２／２の式に従って計算）。式に従って腫瘍阻害率ＴＧＩ（％）＝［（１－投与群投与終了時の平均腫瘍体積－投与群グループ化投与時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群のグループ化投与時の平均腫瘍体積）］×１００％を計算した。

【0197】

相対腫瘍体積の計算式はＲＴＶ＝ＴＶｎ／ＴＶ１×１００％である。
ここで、ＴＶ１はグループ化投与当日の腫瘍体積であり、ＴＶｎは測定当日の腫瘍体積である。
相対腫瘍増殖率（Ｔ／Ｃ％）＝ＲＴＶｔ／ＲＴＶｃ×１００％
ここで、ＲＴＶｔは治療群の平均相対腫瘍体積であり、ＲＴＶｃは溶媒対照群の平均相対腫瘍体積である。

【0198】

実験結果：
投与２８日後、溶媒対照群の平均腫瘍体積は６６９．１６ｍｍ^３に達し、１、３及び１０ｍｇ／ｋｇの用量での化合物１Ｄの平均腫瘍体積は、それぞれ３４１．３６ｍｍ^３、１９９．４ｍｍ^３及び３７．５ｍｍ^３であり、ＴＧＩは、それぞれ５８．７８％、８４．１７％、１１３．１９％であり、Ｔ／Ｃは、それぞれ５１．３５％、２７．５９％及び５．７６％であり、溶媒対照群と比較して、腫瘍の増殖を有意に阻害することができる（Ｐ値はそれぞれ０．０６２９、０．００２９及びｐ＜０．０００１）。

【0199】

実験結論：
本発明の化合物は、良好な用量依存傾向を有し、腫瘍の増殖を有意に阻害することができ、マウスの体重は有意に減少せず、良好な耐性を有する。

【0200】

実験例４：メスＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの薬物動態研究

【0201】

本実験は、化合物１Ｄの経口投与後のメスのＢＡＬＢ／ｃヌードマウスの薬物動態研究であった。実験は３つのグループに分けられ、それぞれ１、３及び１０ｍｇ／ｋｇ化合物１Ｄで強制経胃投与された。各グループの動物を２つのバッチに分け、投与後の異なる時点で血漿と腫瘍組織のサンプルを採取した。動物血漿サンプルの各グループの収集時点は、それぞれ、０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、６、及び８時間であり、腫瘍組織サンプルの収集時点は、それぞれ１、４、及び８時間であり、投与後対応するサンプル収集時点で、血漿を収集し、腫瘍組織を剥がして秤量した。血漿は－８０℃で保存し、腫瘍組織は凍結保存チューブに詰め、急速凍結のために液体窒素で保存した。クロス収集された血漿サンプルを使用して、ＰＫパラメーターの計算のために各グループの対応する時点の平均濃度を計算した。

【0202】

実験結果：

【表3】

【0203】

【表4】

【0204】

結論：本発明の化合物は、マウスにおける中程度の代謝速度、腫瘍組織における高い薬物濃度、及び良好な薬物動態特性を有する。

【0205】

実験例５：ヒト結腸癌ＣＯ－０４－００７０皮下異種移植腫瘍モデルにおける化合物のｉｎ ｖｉｖｏ薬力学研究

【0206】

実験目的：
ヒト結腸癌ＣＯ－０４－００７０皮下異種移植腫瘍ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスモデルにおける化合物のｉｎ ｖｉｖｏ有効性を評価した。

【0207】

腫瘍組織の接種とグループ化：
ＣＯ－０４－００７０ ＦＰ７ 腫瘍ブロックの体積約３０ｍｍ^３を各動物の右背部に接種し、平均腫瘍体積が１５１ｍｍ^３に達した時点でランダムにグループ化して投与を開始した。

【0208】

【表5】

【0209】

腫瘍測定と実験指標：
腫瘍の直径は、週に２回ノギスで測定した。腫瘍体積の計算式は、Ｖ＝０．５ａ×ｂ^２であり、ａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径を表す。

【0210】

化合物の抗腫瘍効果は、ＴＧＩ（％）又は相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）によって評価された。相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）＝Ｔ_ＲＴＶ／Ｃ_ＲＴＶ×１００％（Ｔ_ＲＴＶ：治療群の平均ＲＴＶ；Ｃ_ＲＴＶ：陰性対照群の平均ＲＴＶ）。腫瘍測定の結果から計算された相対腫瘍体積（ｒｅｌａｔｉｖｅ ｔｕｍｏｒ ｖｏｌｕｍｅ、ＲＴＶ）の計算式はＲＴＶ＝Ｖ_ｔ／Ｖ_０であり、ここで、Ｖ_０はグループ化して投与時（即ちＤ０）に測定された腫瘍体積であり、Ｖｔはある一回に測定された腫瘍体積であり、Ｔ_ＲＴＶとＣ_ＲＴＶは同じ日のデータを取得した。ＴＧＩ（％）は腫瘍増殖阻害率を反映する。
ＴＧＩ（％）＝［（１－（処理群の投与終了時の平均腫瘍体積－該処理群の投与開始時の平均腫瘍体積））／（溶媒対照群の治療終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群の治療開始時の平均腫瘍体積）］×１００％である。

【0211】

実験終了後、腫瘍重量を検出し、Ｔ／Ｃ_{ｗｅｉｇｈｔ}パーセンテージを計算し、Ｔ_{ｗｅｉｇｈｔ}及びＣ_{ｗｅｉｇｈｔ}はそれぞれ投与群と溶媒対照群の腫瘍重量を表す。

【0212】

実験結果：

【表6】

【0213】

【表7】

【0214】

体重の変化：このモデルのすべての投与群で体重の有意な減少はなかった。

【0215】

結論：本発明の化合物は、腫瘍増殖を阻害する顕著な効果を有し、一定の用量依存性を示す。

【0216】

実験例６：腫瘍組織におけるＥＲＫ及びｐ－ＥＲＫのタンパク質レベルに関する実験

【0217】

本実験は免疫ブロッティングでヒト結腸癌ＣＯ－０４－００７０皮下異種移植腫瘍モデルの化合物１Ｄ（３０ｍｇ／ｋｇ）６時間投与した後の、異なる投与群の腫瘍組織におけるＥＲＫ及びｐ－ＥＲＫのタンパク質レベルを分析した。

【0218】

実験材料：
（１）試薬

【表8】

【0219】

（２）機器

【表9】

【0220】

（３）抗体

【表10】

【0221】

実験方法：
１）タンパク質の抽出と定量化
－８０℃の冷蔵庫から急速凍結した組織サンプルを取り出した。ドライアイスで、組織の一部（約５０～１００ｍｇ）を切り取り、スチールビーズを入れた２ｍＬ遠沈管に入れ、５００μＬの細胞ライセートＲＩＰＡ（新鮮なプロテアーゼ阻害剤、ホスファターゼ阻害剤１％添加済み）を加えた。Ｔｉｓｓｕｅｌｙｓｅｒ ＬＴは最高の周波数を使用して組織を５分間破壊した。組織ライセートを氷上で３０分間溶解した。４℃で１２０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上清を取り、新しい１．５ｍＬ遠心管に入れた。タンパク質の定量化は、ＢＣＡ定量化キットを使用して実行された。定量結果に従い、ローディング用のタンパク質サンプルを準備し、試料タンパク質濃度を２μｇ／μＬに統一し、ＬＤＳローディングバッファー（４倍）とサンプル還元剤（１０倍）を加え、試料を１００℃の一定温度で１０分間加熱した。ウエスタンブロッティング、又は変性試料を－８０℃の冷蔵庫に保存した。

【0222】

２）免疫ブロット
ロードされた試料を解凍した。ローディング：ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル、ウェルあたり１０μＬをロードした。電気泳動は、８０ボルトで３０分、続いて１２０ボルトで９０分である。転写フィルム：ｉＢｌｏｔ２転写キットと転写フィルム転写装置を使用し、Ｐ３プログラムを７分間実行した。メンブレンへの転写後、検出するタンパク質の分子量に合わせてメンブレンをカットした。ブロッキング：メンブレンをブロッキング溶液（１×ＴＢＳＴで調製した５％脱脂乳）で室温で１時間振とうしてブロッキングした。一次抗体のインキュベーション：適切な希釈の一次抗体（１：１０００）（１×ＴＢＳＴ中の５％脱脂乳又はウシ血清アルブミンで希釈）を加え、４℃で一晩、ゆっくりと振とうした。メンブレンを１×ＴＢＳＴで３回、室温で、一回あたり１０分間、振とうしながら洗浄した。二次抗体のインキュベーション：適切な希釈の二次抗体（１：１００００）を室温で加え、１時間ゆっくりと振とうした。メンブレンを１×ＴＢＳＴで３回、室温で、一回あたり１０分間、振とうしながら洗浄した。化学発光：ＷｅｓｔＦｅｍｔｏ超高感度化学発光キットのＨＲＰ基質を膜に添加した。化学発光は、Ｔａｎｏｎ ５２００マルチマシンで検出され、撮影された。

【0223】

３）発現の定量化
イムノブロッティングの化学発光バンドの強度の相対的な定量化は、ＩｍａｇｅＪ及びその他の関連ソフトウェアを使用して実行された。

【0224】

実験結果：図１と図２を参照する。

【0225】

図２において「＊＊」はｐ値＜０．０１両側Ｔ検定を意味する。「ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ」は正規化倍率変化である。

【0226】

結論：本発明の化合物処理群の腫瘍組織におけるｐ－ＥＲＫタンパク質の発現レベルは有意に減少した。

【図1】

【図2】