特許 7462789 ＩＤＨ１阻害剤耐性対象の治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-03-28

(45)【発行日】2024-04-05

(54)【発明の名称】ＩＤＨ１阻害剤耐性対象の治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/5365 20060101AFI20240329BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240329BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240329BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240329BHJP

【ＦＩ】

A61K31/5365

A61P35/00

A61P35/02

A61P43/00 111

【請求項の数】 15

(21)【出願番号】P 2022557868

(86)(22)【出願日】2021-03-22

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-08

(86)【国際出願番号】 US2021023452

(87)【国際公開番号】W WO2021194953

(87)【国際公開日】2021-09-30

【審査請求日】2022-12-28

(31)【優先権主張番号】62/993,135

(32)【優先日】2020-03-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/024,761

(32)【優先日】2020-05-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/151,905

(32)【優先日】2021-02-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(74)【代理人】

【識別番号】100150500

【弁理士】

【氏名又は名称】森本 靖

(74)【代理人】

【識別番号】100176474

【弁理士】

【氏名又は名称】秋山 信彦

(72)【発明者】

【氏名】ブルックス，ネイサン アーサー

(72)【発明者】

【氏名】ギルモア，レイモンド

【審査官】松浦 安紀子

(56)【参考文献】

【文献】特表２０２０－５０２１５７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１９－５１７５７９（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３１／００ ～ ３３／４４

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ、Ｒ１３２Ｃ、またはＲ１３２Ｌ変異および１つ以上の二次ＩＤＨ１変異があるヒト対象における癌の治療に使用するための、下記の式

【化1】

［式中、
Ｒ^１は－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、
Ｒ^２は－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり、
ＸはＮまたはＣＨである］
の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む、薬学的組成物であって、前記１つ以上の二次ＩＤＨ１変異がＲ１１９Ｐ、Ｇ１３１Ａ、Ｄ２７９Ｎ、Ｓ２８０Ｆ、Ｇ２８９Ｄ、またはＨ３１５Ｄのうちの１つ以上である、薬学的組成物。

【請求項2】

ＸがＮである、請求項１に記載の薬学的組成物。

【請求項3】

Ｒ^１が－ＣＨ_２－シクロプロピルである、請求項１または２に記載の薬学的組成物。

【請求項4】

Ｒ^２が－ＣＨ_２ＣＨ_３である、請求項１～３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。

【請求項5】

前記化合物が、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、
またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の薬学的組成物。

【請求項6】

前記化合物が、

【化2】

またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の薬学的組成物。

【請求項7】

前記化合物が、

【化3】

である、請求項６に記載の薬学的組成物。

【請求項8】

前記癌が固形腫瘍癌である、請求項１～７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。

【請求項9】

前記固形腫瘍癌が、胆管癌、頭頸部癌、軟骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、膵臓癌、星状細胞腫、乏突起膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱癌、結腸直腸癌、肺癌、または鼻副鼻腔未分化癌である、請求項８に記載の薬学的組成物。

【請求項10】

前記固形腫瘍癌が胆管癌である、請求項９に記載の薬学的組成物。

【請求項11】

前記癌が血液悪性腫瘍である、請求項１～７のいずれか１項に記載の薬学的組成物。

【請求項12】

前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症、または慢性骨髄性白血病である、請求項１１に記載の薬学的組成物。

【請求項13】

前記血液悪性腫瘍が急性骨髄性白血病である、請求項１２に記載の薬学的組成物。

【請求項14】

前記対象が、下記の式

【化4】

［式中、
Ｒ^１は－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、
Ｒ^２は－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり、
ＸはＮまたはＣＨである］
の化合物またはその薬学的に許容される塩、
以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤で治療されていた対象である、請求項１～１３のいずれか１項に記載の薬学的組成物。

【請求項15】

前記対象がイボシデニブで治療されていた対象である、請求項１４に記載の薬学的組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、本明細書に開示される変異体イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１（ＩＤＨ１）阻害剤による対象に対する癌の治療に関する。

【背景技術】

【0002】

ＩＤＨ１は、イソクエン酸塩のα－ケトグルタル酸（α－ＫＧ）への変換を触媒し、ニコチンアミド・アデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰ^＋）をＮＡＤＰＨに還元する酵素である（Ｍｅｇｉａｓ－Ｖｅｒｉｃａｔ Ｊら、Ｂｌｏｏｄ Ｌｙｍｐｈ．Ｃａｎｃｅｒ：Ｔａｒｇｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０１９；９：１９－３２）。

【0003】

ＩＤＨ１のネオモルフィック（デノボ）変異は、例えばＩＤＨ１アミノ酸残基Ｒ１３２において、固形腫瘍および血液悪性腫瘍を含むいくつかのタイプの癌における腫瘍形成に寄与する（Ｂａｄｕｒ ＭＧら、Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ ２０１８；２５：１６８０）。ＩＤＨ１変異体は、細胞分化を阻害する高レベルの２－ヒドロキシグルタル酸（２－ＨＧ）をもたらすことがあり、変異体ＩＤＨ１の阻害因子は、細胞分化を促進する２－ＨＧレベルを低下させる可能性がある(Ｍｏｌｅｎａａｒ ＲＪら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２０１８；３７：１９４９－１９６０)。

【0004】

例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、変異遺伝子の多様なスペクトルと、時間と共に、そして治療の選択圧下で、動的に進化する前白血病および白血病クローンを含むマルチクローナルゲノム構造によって特徴付けられている（Ｂｌｏｏｍｆｉｅｌｄ ＣＤら、Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖｓ．２０１８：３２：４１６－４２５）。

【0005】

シタラビンとアントラサイクリン(「７＋３」)による導入化学療法は、新たにＡＭＬと診断された対象にとっての４０年を超える標準治療である。近年、ＡＭＬを治療するために、ミドスタウリン、エナシデニブ、ＣＰＸ－３５１、ゲムツズマブ・オゾガマイシン（ＢＬｏｏｍｆｉｅｌｄ ＣＤら、Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖｓ．２０１８；３２：４１６－４２５）、およびイボシデニブ（Ｍｅｇｉａｓ－Ｖｅｒｉｃａｔ Ｊら，Ｂｌｏｏｄ Ｌｙｍｐｈ．Ｃａｎｃｅｒ：Ｔａｒｇｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０１９；９：１９－３２）の５つの治療薬が米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認されている。

【0006】

ＡＭＬの成人の約６０％から７０％は、適切な導入療法の後に完全寛解（ＣＲ）状態の獲得を期待でき、ＡＭＬの成人の２５％超（ＣＲを獲得した人の約４５％）は３年以上の生存を期待でき、治癒することもある。

【0007】

しかし、ＩＤＨ１耐性変異はＡＭＬ対象の７～１４％で観察され、関連する高い２－ＨＧレベルは、エピジェネティックな高メチル化表現型と分化のブロックをもたらし、白血病を発症する可能性がある（Ｍｅｇｉａｓ－Ｖｅｒｉｃａｔ Ｊら、Ｂｌｏｏｄ Ｌｙｍｐｈ．Ｃａｎｃｅｒ：Ｔａｒｇｅｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ２０１９；９：１９－３）。さらに、ＦＬＴ３キナーゼの変異は、ＡＭＬ対象の約３分の１で観察されている（Ｌｅｅ ＨＪら、Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ２０１８；９：９２４－９３６）。

【0008】

本明細書で定義されるいわゆる「二次」ＩＤＨ１変異は、変異体ＩＤＨ１阻害剤による治療後の再発に寄与し得る。例えば、現在までに、６つのイボシデニブ治療後二次ＩＤＨ１変異、Ｒ１１９Ｐ、Ｇ１３１Ａ、Ｄ２７９Ｎ、Ｓ２８０Ｆ、Ｇ２８９Ｄ、Ｈ３１５Ｄが報告されている（Ｃｈｏｅ Ｓ．ら、「分子機構媒介はＩＤＨ１変異体の再発または難治性の急性骨髄性白血病の対象における続くイボシデニブ単剤療法を関連付ける」、６１^ｓｔ Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｈｅｍａｔｏｌ．（ＡＳＨ）年次総会ポスター、２０１９年１２月７～１０日、米国フロリダ州オーランド；Ｃｈｏｅ Ｓ．ら、Ｂｌｏｏｄ Ａｄｖ． ２０２０；４（９）：１８９４－１９０５）。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

したがって、特に最初の変異体ＩＤＨ１阻害剤療法後に二次的なＩＤＨ１変異が発生した対象に対しては、代替変異体ＩＤＨ１関連癌療法の必要性が残る。

【0010】

アロステリック結合ポケット内の単一のシステイン（Ｃｙｓ２６９）を修飾し、酵素を迅速に不活性化し、α－ＫＧレベルに影響を与えることなく２－ＨＧ産生を選択的に阻害する変異体ＩＤＨ１の共有結合阻害剤である「化合物Ａ」として本明細書で定義される化合物を含む、ある変異体ＩＤＨ１阻害剤が国際公開第２０１８／１１１７０７号Ａ１に開示されている（国際公開第１８／１１１７０７ Ａ１）。

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明は、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異および１以上の二次的ＩＤＨ１変異を有するヒトの癌対象に、式Ｉで示される化合物、

【化1】

Ｉ
式中、
Ｒ^１は、ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピル、
Ｒ^２は－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３、
ＸはＮまたはＣＨであり、
またはその薬学的に許容される塩、の治療上有効量を投与することを含む、癌を治療する方法を提供する。

【発明を実施するための形態】

【0012】

本発明の方法の一実施形態では、式Ｉの化合物において、ＸはＮ、またはその薬学的に許容される塩である。別の実施態様において、ＸはＮ、Ｒ^１が－ＣＨ_２－シクロプロピル、Ｒ^２が－ＣＨ_２ＣＨ_３、またはその薬学的に許容される塩である。別の実施態様において、ＸはＮ、Ｒ^１は－ＣＨ_２－シクロプロピル、Ｒ^２は－ＣＨ_２ＣＨ_３である。

【0013】

別の実施態様として、式Ｉの化合物は、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロップ－２－エノイルピペラジン－１－イルチ）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］,［１，３］オキサジン－２－オン、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、または
またはそのいずれか１つの薬学的に許容される塩である。

【0014】

別の態様において、式Ｉの化合物は、７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロップ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オンである。

【0015】

別の実施態様において、式Ｉの化合物は、

【化2】

（本明細書において「化合物Ａ」とする）、またはその薬理学的に許容される塩である。
別の実施態様において、前記化合物は化合物Ａである。

【0016】

本発明の方法の一実施形態において、前記Ｒ１３２変異はＲ１３２Ｈである。別の実施形態では、ＩＤＨ１変異はＲ１３２Ｃである。別の実施形態において、ＩＤＨ１変異はＲ１３２Ｇである。別の実施形態において、ＩＤＨ１変異はＲ１３２Ｌである。別の実施形態において、ＩＤＨ１変異はＲ１３２Ｓである。

【0017】

本発明の方法の一実施形態において、前記１以上の二次ＩＤＨ１変異は、Ｒ１１９ＰＩシステム、Ｇ１３１Ａ、Ｄ２７９Ｎ、Ｓ２８０Ｆ、Ｇ２８９ＤまたはＨ３１５Ｄのうちの１以上である。別の実施形態では、前記二次ＩＤＨ１変異は、Ｒ１１９Ｐ、Ｇ１３１Ａ、Ｄ２７９Ｎ、Ｓ２８０Ｆ、Ｇ２８９ＤまたはＨ３１５Ｄのうちの２つ以上である。

【0018】

別の実施形態では、対象はＲ１３２ ＩＤＨ１変異があると特定される。別の実施形態において、対象は組織においてＲ１３２ 変異があると特定される。

【0019】

別の実施形態において、対象は１以上の二次ＩＤＨ１変異があると特定される。

【0020】

別の実施態様において、癌は血液悪性腫瘍であり、対象は血液、骨髄、リンパ節またはリンパ液においてＲ１３２ ＩＤＨ１変異があると特定される。別の実施形態において、対象は血液細胞、骨髄細胞、または血液細胞、またはリンパ節細胞、またはリンパ液細胞においてＲ１３２ ＩＤＨ１変異があると特定される。別の実施形態において、対象は１以上の二次ＩＤＨ１変異があると特定される。

【0021】

別の実施形態において、癌は固形腫瘍癌であり、対象は固形腫瘍組織にＲ１３２ ＩＤＨ１変異があると特定される。別の実施態様において、固形腫瘍組織は胆管癌組織である。別の実施形態において、対象は、固形腫瘍組織細胞にＲ１３２ ＩＤＨ１変異があると特定される。別の実施形態において、対象は１以上の二次ＩＤＨ１変異があると特定される。

【0022】

本発明の方法の一実施形態において、癌は固形腫瘍である。別の実施形態において、固形腫瘍は、胆管癌、頭頸部癌、軟骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、膵臓癌、星状細胞腫、乏突起膠腫、神経膠腫、膠芽腫、膀胱癌、結腸直腸癌、肺癌、または鼻副鼻腔未分化癌である。別の実施形態において、肺癌は非小細胞肺癌である。別の実施形態において、固形腫瘍は胆管癌である。

【0023】

別の態様において、癌は血液悪性腫瘍である。別の態様において、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群骨髄増殖性腫瘍、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病、真性赤血球増加症、本態性血小板血症、原発性骨髄線維症または慢性骨髄性白血病である。別の態様において、血液悪性腫瘍は急性骨髄性白血病である。

【0024】

別の実施形態において、対象は式Ｉの化合物以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤で処置されていた。別の実施形態において、式Ｉの化合物以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤は、ボラシデニブ、ＢＡＹ－１４３６０３２、ＡＧＩ－５１９８、ＩＤＨ３０５、またはイボシデニブである。別の実施形態において、式Ｉの化合物以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤はイボシデニブである。別の態様において、対象は、式Ｉの化合物で治療する前に、式Ｉの化合物以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤で治療されていた。

【0025】

本発明はまた、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異および１以上の二次ＩＤＨ１変異があるヒト対象における癌の治療において用いられる式Ｉの化合物:

【化3】

Ｉ
式中、
Ｒ^１は、－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、または－ＣＨ_２－シクロプロピルであり、
Ｒ^２は－ＣＨ_３または－ＣＨ_２ＣＨ_３であり、
ＸはＮまたはＣＨであり、
またはその薬学的に許容される塩、を提供する。

【0026】

前記式Ｉの化合物において、ＸはＮ、またはその薬学的に許容される塩であることが好ましく、Ｒ^１が－ＣＨ_２－シクロプロピル、またはその薬学的に許容される塩であることが好ましく、そしてＲ^２が－ＣＨ_２ＣＨ_３、またはその薬学的に許容される塩であることが好ましく、ＸがＮ、Ｒ^１が－ＣＨ_２－シクロプロピル、Ｒ^２が－ＣＨ_２ＣＨ_３、またはその薬学的に許容される塩であることがより好ましく、ＸがＮ、Ｒ^１が－ＣＨ_２－シクロプロピル、そしてＲ^２が－ＣＨ_２ＣＨ_３であることが最も好ましい。

【0027】

式Ｉの好ましい化合物は、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｒ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロップ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、
７－［［（１Ｓ）－１－［４－［（１Ｓ）－２－シクロプロピル－１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）エチル］フェニル］エチル］アミノ］－１－エチル－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、または
１－エチル－７－［［（１Ｓ）－１－［４－［１－（４－プロパ－２－エノイルピペラジン－１－イル）プロピル］フェニル］エチル］アミノ］－４Ｈ－ピリミド［４，５－ｄ］［１，３］オキサジン－２－オン、
またはそのいずれか１つの薬学的に許容される塩である。

【0028】

式Ｉのより好ましい化合物は、

【化4】

（化合物Ａ）、またはその薬学的に許容される塩である。

【0029】

本発明の別の実施形態において、癌は再発癌である。別の実施形態において、前記再発癌は固形腫瘍癌である。別の実施形態において、前記再発固形腫瘍癌は胆管癌である。別の態様において、前記再発癌は血液悪性腫瘍である。別の態様において、前記再発血液悪性腫瘍は再発ＡＭＬである。

【0030】

本発明の別の実施形態において、前記癌は難治性癌である。別の実施形態において、前記難治性癌は固形腫瘍癌である。別の態様において、前記難治性固形腫瘍癌は胆管癌である。別の態様において、前記難治性癌は血液悪性腫瘍である。別の態様において、前記難治性血液悪性腫瘍は難治性ＡＭＬである。

【0031】

本発明の別の実施形態において、前記癌は進行癌である。別の実施形態において、前記進行癌は進行性固形腫瘍癌である。別の実施形態において、前記進行性固形腫瘍癌は胆管癌である。別の態様において、前記進行癌は進行性血液悪性腫瘍である。別の態様において、前記進行性血液悪性腫瘍は進行性ＡＭＬである。

【0032】

別の態様において、前記ＡＭＬは急性前骨髄球性白血病である。

【0033】

上記で使用したように、および本発明の説明全体を通して、以下の用語は、特に示さない限り、以下の意味を有すると理解するものとする。

【0034】

「血液組織」とは、血液、骨髄、脾臓、リンパ節、またはリンパ液を指す。

【0035】

「固形腫瘍組織」とは、血液学的組織ではない組織を指す。固形組織の非限定的な例は、胆管組織、膵臓組織、頭部組織、頸部組織、肝組織、皮膚組織、星状細胞組織、乏突起膠状組織、神経膠組織、脳組織、膀胱組織、結腸直腸組織、肺組織、および鼻副鼻腔未分化癌である。

【0036】

「固形腫瘍癌」とは、前記癌が血液、骨髄、リンパ節またはリンパ液ではない組織に由来することを意味する。

【0037】

「血液悪性腫瘍」とは、血液、骨髄、リンパ節またはリンパ液中の癌に関するものである。

【0038】

「進行性血液悪性腫瘍」とは、リンパ節または血液または骨髄以外の他の組織に広がった悪性腫瘍を指す。

【0039】

「癌対象」とは、癌と診断された対象を意味する。

【0040】

「難治性癌」とは、治療はされたが、ヒトの癌対象が治療に反応しなかった癌を指す。

【0041】

「再発癌」とは、ヒトの癌対象が一定期間治療に反応したが、癌が再発したことを意味する。

【0042】

「進行癌」とは、リンパ節または癌の起点以外の他の組織に転移した癌を指す。例えば、進行性急性骨髄性白血病は、血液または骨髄以外の組織に広がっている急性骨髄性白血病である。

【0043】

「固形腫瘍対象」とは、固形腫瘍癌と診断された対象を意味する。一実施形態において、前記固形腫瘍癌は胆管癌である。

【0044】

「血液悪性腫瘍対象」とは、血液悪性腫瘍と診断された対象を意味する。一実施形態において、前記血液悪性腫瘍対象はＡＭＬ対象である。「ＡＭＬ対象」とは、ＡＭＬと診断された対象を意味する。ＡＭＬを診断する方法は当業者に公知であり、例えば、Ｄｏｈｎｅｒ Ｈ．ら、Ｂｌｏｏｄ ２０１７；１２９：４２４－４４７である。

【0045】

「急性骨髄性白血病」、「急性骨髄性白血病」および「急性非リンパ球性白血病」は同義語である。

【0046】

「血液悪性腫瘍（例えば、ＡＭＬ）治療に対する反応性」には、全生存、部分反応、長期にわたる安定した疾患の改善、または完全寛解を特徴とする長期生存の改善（（赤血球輸血を必要とせず、末梢好中球絶対数が１，０００細胞／μＬを超え、血小板数が１００，０００／μＬを超え、髄外疾患がないことから明らかなように）骨髄中５％未満の骨髄芽球、循環芽球の欠如、血液学的回復）を含む（Ｂｌｏｏｍｆｉｅｌｄ ＣＤら、Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖｓ.２０１８；３２：４１６－４２５）。

【0047】

「ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異」とは、例えば、対象の核酸（例えば、ＤＮＡ）で決定されるような、対象のＩＤＨ１遺伝子におけるアミノ酸残基１３２でのＩＤＨ１変異を指す。本明細書において、「ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異」は、「二次ＩＤＨ１変異」ではない。

【0048】

「二次ＩＤＨ１変異」とは、本明細書中の式Ｉの化合物以外の変異体ＩＤＨ１阻害剤で治療した後にヒト対象において、ＩＤＨ１酵素で生じるＩＤＨ１変異を指す。本発明の方法の一実施形態において、１以上の二次ＩＤＨ１変異は、ＩＤＨ１におけるＲ１１９Ｐ、Ｇ１３１Ａ、Ｄ２７９Ｎ、Ｓ２８０Ｆ、Ｇ２８９ＤまたはＨ３１５Ｄのうちの１以上である。しかしながら、将来的には他の二次ＩＤＨ１変異が報告されることもある。本明細書において、「二次ＩＤＨ１変異」は、「ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異」ではない。

【0049】

「変異体ＩＤＨ１阻害剤」とは、変異体ＩＤＨ１酵素による２－ＨＧの酵素活性および／または産生を阻害する化合物を指す。変異体ＩＤＨ１酵素活性をアッセイする方法は当業者に公知であり、例えば、国際公開第２０１８／１１１７０７ Ａ１号などである。「変異体ＩＤＨ１阻害剤」において、「変異体」とはＩＤＨ１遺伝子を指し、阻害剤ではない。

【0050】

「ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異があると特定される」とは、ヒト対象がＩＤＨ１ Ｒ１３２変異を有するかを決定するために、ヒト対象の組織または細胞からの核酸（例えばＤＮＡ）が分析されたことを意味する。一実施形態において、ヒト対象の血液細胞、骨髄細胞、リンパ節、リンパ節細胞、リンパ液またはリンパ液細胞のうちの１以上が、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異について分析されている。別の実施形態では、ヒト対象の固体組織は、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異について分析されている。

【0051】

本発明の方法において、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異があるとヒト対象を特定する当事者は、化合物を投与する当事者とは異なっていてもよい。一実施形態において、ＩＤＨ１ Ｒ１３２変異があるとヒト対象を特定する当事者は、化合物を投与する当事者とは異なる。

【0052】

「１以上の二次ＩＤＨ１変異があると特定される」とは、ヒト対象に１以上の二次ＩＤＨ１変異があるかを決定するために分析された、ヒト対象の血液細胞、骨髄細胞、リンパ節、リンパ節細胞、リンパ液またはリンパ液細胞のうちの１以上からの核酸（例えば、ＤＮＡ）が分析されたことを意味する。

【0053】

遺伝子変異を特定する分析方法は当業者に公知であり（Ｃｌａｒｋ，Ｏ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．２０１６；２２：１８３７－４２）、染色体分析（Ｇｕｌｌｅｒ ＪＬら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｄｉａｇｎ．２０１０；１２：３－１６）、蛍光ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション（Ｙｅｕｎｇ ＤＴら、Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ２０１１；４３：５６６－５７９），サンガー配列決定（Ｌｕｔｈａ，Ｒら、Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ ２０１４；９９：４６５－４７３），代謝プロファイリング（Ｍｉｙａｔａ Ｓら，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ ２０１９；９：９７８７）、ポリメラーゼ連鎖反応（Ｚｉａｉ，ＪＭ ａｎｄ ＡＪ Ｓｉｄｄｏｎ，Ａｍ．Ｊ． Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ ２０１５；１４４：５３９－５５４）、および次世代配列決定（例えば、全トランスクリプトー配列決定）（Ｌｕｔｈａ，Ｒら，Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ ２０１４；９９：４６５－４７３；Ｗａｎｇ Ｈ－Ｙら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１６；３５：８６）を含むがそれだけには限定されない。

【0054】

「治療」、「治療する」、「治療している」等とは、癌の進行を遅らせる、防ぐ、または止めることを含むことを意味する。これらの用語はまた、癌が実際に排除されない場合であっても、および癌の進行自体を遅らせる、防ぐ、または止めていなくても、障害または疾患の１以上の症状を緩和、改善、減弱、排除、または軽減することを含む。

【0055】

「治療上有効量」は、被験体に対する生物学的もしくは医学的反応または所望の治療効果を惹起する、被験体に投与される化合物またはその薬学的に許容される塩の量を意味する。治療上有効量は、当業者として担当臨床医により、既知の技術を使用して類似の状況下で得られた結果を観察することによって容易に決定することができる。対象の有効量を決定する際に、担当医は、対象の体格、年齢および一般的な健康状態、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の程度や関与または重症度、個々の対象の反応、投与された特定の化合物、投与方法、投与された製剤のバイオアベイラビリティ特性、選択用法、併用薬の使用、およびその他の関連する状況を含むがこれらに限定されない要因を考慮する。

【0056】

本明細書における式Ｉの化合物は、経口、静脈内、経皮経路を含む、化合物を生物学的に利用可能にする経路によって投与される医薬組成物として任意に製剤化することができる。このような組成物は、経口投与用に製剤化されることが好ましい。このような医薬組成物およびその調製方法は、当該技術分野において周知である。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ （Ｄ．Ｂ． Ｔｒｏｙ、Ｅｄｉｔｏｒ、２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００６）を参照のこと）。

【0057】

「薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤」は、哺乳動物、例えばヒトへの生物学的活性剤の投与のために当技術分野で一般的に受け入れられている媒体である。

【0058】

当業者には、本発明の方法で投与される化合物が塩を形成することができることが理解されよう。化合物は、多数の無機酸および有機酸のいずれかと反応して、薬学的に許容される酸付加塩を形成する。このような薬学的に許容される酸付加塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら、ＨＡＮＤＢＯＯＫ ＯＦ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ ＡＮＤ ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００８）を参照のこと。

【0059】

「薬学的に許容される塩類」または「薬学的に許容される塩」は、本発明の化合物類の比較的無毒な無機および有機塩または塩類を指す（Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら、“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｖｏｌ ６６，Ｎｏ． １，Ｊａｎｕａｒｙ １９７７）。

【実施例】

【0060】

材料、方法および結果
化合物および製剤：イボシデニブおよび化合物Ａは、１００％ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）（ＳＩＧＭＡ、Ｄ２４３８）中の２０ｍＭストックとして調製され、所望の濃度を達成するために１００％ＤＭＳＯ中で順次希釈される。ＤＭＳＯ製剤は、アッセイで添加する前に細胞培養培地でさらに希釈される。

【0061】

細胞株：Ｕ－８７ＭＧ細胞（ＡＴＣＣ、ＨＴＢ－１４）を２ｍＭ ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｇｉｂｃｏ、３５０５０）、１ｍＭピルビン酸塩（Ｇｉｂｃｏ、１１３６０）、０．１ｍＭ ＮＥＡＡ（（非必須アミノ酸）Ｇｉｂｃｏ、１１１４０）および１０％透析ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（Ｇｉｂｃｏ、２６４００）を用いて、ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、１１０９５）で培養、アッセイする。Ｂａ/Ｆ３細胞（ＤＳＭＺ、ＡＣＣ３００）をＲＰＭＩ１６４０（Ｇｉｂｃｏ，２２４００）で１０％加熱不活性化ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，１００８２－１４７）および１０ｎｇ/ｍｌマウスＩＬ３（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，４０３－ＭＬ－０２５）を用いて培養およびアッセイする。

【0062】

細胞ベースの阻害アッセイ：細胞ベースのアッセイは、ＩＤＨ変異が発現しているＵ－８７ＭＧ細胞またはＢａ/Ｆ３細胞のいずれかで、２－ＨＧを測定することによって行われる。

【0063】

ＩＤＨ１変異をコードするＤＮＡコンストラクトは、トランスフェクション（Ｐｒｏｍｅｇａ ＦｕＧＥＮＥ ＨＤ，Ｅ２３１１）またはレンチウイルス形質導入を使用してＵ－８７ＭＧ細胞に導入され、ＩＤＨ変異発現細胞株は、ブラストサイジン（５μＧ/ｍｌ）またはピューロマイシン（１μＧ/ｍｌ）を使用して選択される。Ｕ－８７ＭＧ細胞における化合物処理の場合、１ウェルあたり２０，０００～５０，０００細胞を、処理の２時間前に９６ウェル細胞培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ、３５３３７７）に播種する。細胞は、標準的な増殖培地中の化合物Ａの連続希釈法で処理される。プレートを哺乳類細胞培養インキュベーター（加湿、３７℃、５％ＣＯ_２）で１６～７２時間培養する。培養期間後、培地を吸引し、３０μＬ／ウェル溶解用緩衝液（２５ｍＭ ＴＲＩＳ－ＨＣＬ ｐＨ７．５）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ ＥＧＴＡ、１％ Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００、２Ｘ Ｈａｌｔプロテアーゼ＋ホスファターゼ阻害剤（Ｐｉｅｒｃｅ、７８４４１）（誘導体化ＬＣ－ＭＳ法用）を添加するか、ＬＣ－ＭＳ内部標準物質を含む１００μＬ８０％メタノール／２０％水（１μＭ^１３Ｃ_４α－ＫＧ／^１３Ｃ_５２－ＨＧ）を添加することによって細胞を調製する（イオンペアリングＬＣ－ＭＳ法用）。９６ウェルサンプルプレートをその後密閉し、４５０ｒｐｍで１０分間振とうした後、－２０℃に置き、ＬＣ－ＭＳ分析まで保存する。

【0064】

ＢＡ/Ｆ３細胞は、ＮＥＯＮトランスフェクションシステム（ライフテクノロジーズ、ＭＰＫ１００２５）を用いてＩＤＨ１Ｒ１３２Ｈ－ｍｙｃ、ＩＤＨ１Ｒ１３２Ｈ＿Ｓ２８０Ｆ－ｍｙｃ、またはＩＤＨ１Ｒ１３２Ｃ＿Ｓ２８０Ｆ－ｍｙｃ構成体をエンコードするＤＮＡ構成体をトランスフェクトし、ピューロマイシン（２μＧ/ｍＬ）またはブラストサイジン（１０μＧ/ｍＬ）を用いて単離する。安定的にトランスフェクトされたラインが阻害剤アッセイに使用され、１ウェルあたり１５，０００ＢＡ/Ｆ３細胞を、処理の２時間前に９６ウェル細胞培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ、３５３３７７）に播種する。細胞は標準的な増殖培地中で所望の化合物の連続希釈法で処理される。プレートを哺乳類細胞培養インキュベーター（加湿、３７℃、５％ＣＯ_２）中で所望の時間（７２または９６時間）培養する。培養期間に続いて、各ウェルから馴化培地を回収し、ＬＣ－ＭＳによる２－ＨＧ分析を行う。

【0065】

馴化培地および細胞溶解物のＬＣ－ＭＳ代謝物分析：２－ＨＧの濃度に対する阻害剤の効果は、以下に説明するように、誘導体化法またはイオンペアリング法のいずれかを使用して、細胞溶解物または馴化培地の液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）の分析によって決定される。

【0066】

誘導体化ＬＣ－ＭＳ法では、２－ＨＧとα－ＫＧをそれぞれ細胞培養培地と細胞溶解バッファーにスパイクすることにより、検量線を作成する。この方法は、ＬＣ－ＭＳによる分析の前にＯ－ベンジルヒドロキシルアミンによる誘導体化を利用する。各標準物質またはサンプル（培地または細胞抽出物）１０μＬをディープウェル９６ウェルプレートに入れ、１０μＭ ｄ５－３－ヒドロキシグルタル酸および１０μＭ ｄ６－αＫＧを含む１００μＬの内部標準液と合わせる。ピリジンバッファー（８．６％ピリジン、ｐＨ５）中１ＭＯ－ベンジルヒドロキシルアミン５０μＬおよびピリジン緩衝剤中１Ｍ Ｎ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ－エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）５０μＬを各サンプルに加える。誘導体化反応は室温で１時間進行させる。ベックマンバイオメックＦＸリキッドハンドラーを使用して、３００μＬの酢酸エチルを各サンプルに加える。プレートを密閉し、５分間ボルテックスした後、エッペンドルフ５８１０Ｒ遠心分離機で４０００ｒｐｍにて５分間遠心分離する。上層の２２０μＬを新しい９６ウェルプレートに移す。サンプルを５０℃の加熱窒素下で乾燥させ、１００μＬのメタノール／水（１:１）で戻す。１μＬの誘導体化サンプルを、島津製作所のＰｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ２０Ａ ＨＰＬＣシステムとＴｈｅｒｍｏ Ｑｕａｎｔｕｍ Ｕｌｔｒａ（商標）トリプル四重極質量分析計からなるＬＣ－ＭＳシステムに注入する。分析対象物は、０．６ｍＬ/分の流速でＷａｔｅｒ ＸＢｒｉｄｇｅ（商標）Ｃ１８カラム（２.１×５０ｍＭ、３.５μＭ）に分離される。移動相Ａは水中の０．１％ギ酸であり、移動相Ｂはメタノールである。勾配プロファイルは、０分、５％ Ｂ；２分、１００％ Ｂ；４．００分、１００％ Ｂ；４．１分、５％ Ｂ； ５．５０分、そして停止である。質量分析計は、陽イオン選択反応モニタリングモードで動作するＨＥＳＩ－ＩＩプローブを利用する。検量線は、分析物濃度ｖｓ．分析物／内部標準ピーク面積比をプロットし、Ｘｃａｌｉｂｕｒ（商標）ソフトウェアで１／濃度重み付けを使用してデータの二次適合を実行することによって作成される。未知物質の分析物濃度は、検量線から逆算する。

【0067】

イオンペアリングＬＣ－ＭＳ法では、ＬＣ－ＭＳ内部標準物質（１μＭ ^１３Ｃ_４α－ＫＧ/^１３Ｃ_５２－ＨＧ）を含む８０％メタノール／２０％水に２－ＨＧおよびα－ＫＧをスパイクすることにより検量線を作成する。２－ＨＧおよびα－ＫＧの定量は、ＥＳＩプローブを備えたＡＢ Ｓｃｉeｘ ６５００質量分析計を使用して遂行され、負の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）モードでＵＨPＬＣシステムと連動する。ＵＨＰＬＣシステムは、Ａｇｉｌｅｎｔ １２９０バイナリポンプ、サーモスタットカラムコンパートメント（ＴＣＣ）、およびサンプラーで構成されている。細胞培養抽出物のための注入量は１μＬである。抽出物は、Ｈｙｐｅｒｃｕｒｂカラム、２.１×２０ｍｍ、５.０ｍｍジャベリンＨＴＳ（サーモサイエンティフィック、PＮ:３５００５－０２２１３５）を使用してクロマトグラフィーで分解される。移動相Ａは水/１０ｍＭトリブチルアミン/１５ｍＭ酢酸である。移動相Ｂはアセトニトリル/２０ｍＭトリブチルアミン/３０ｍＭ酢酸である。溶媒流量は１．０ｍＬ/分である。アイソクラチック条件は２６％移動相Ｂに保たれる。バルブ、サンプルループ、およびニードルを５０％アセトニトリル：５０％メタノールで２０秒間洗浄する。カラム温度は５５℃に保たれる。検量線は、１/Ｘ重み付けによる最小二乗線形回帰によって計算される。２－ＨＧおよびα－ＫＧは、標準曲線および非被分析物のピーク面積と内部標準の比率を用いて定量される。データ解析は、ＭｕｌｔｉＱｕａｎｔ ３．０（ＡＢ Ｓｃｉｅｘ）を用いて行われる。生データはエクセルスプレッドシートにエクスポートされる。

【0068】

ＩＣ_５０曲線の決定：各化合物のＩＣ_５０曲線は、ＧｒａｐｈＰａｄ／Ｐｒｉｓｍソフトウェアの４つのパラメータデータ適合解析を使用して取得する。

【0069】

基本的に上記のように実施された実験では、表１に記載の結果がＩＣ_５０によって得られる。

【0070】

【表1】

【0071】

表１の結果は、イボシデニブおよび化合物Ａの各々が、各Ｒ１３２Ｈ細胞株構成体におけるＲ１３２Ｈ変異体ＩＤＨ１の阻害に有効であることを示している。しかしながら、化合物Ａは各細胞株構成体においてＲ１３２Ｈ＿Ｓ２８０Ｆの変異体ＩＤＨ１およびＲ１３２Ｃ＿Ｓ２８０Ｆを阻害するのに有効であるが、イボシデニブはいずれかの細胞株構成体においてＲ１３２Ｈ＿Ｓ２８０Ｆの変異体ＩＤＨ１を阻害するのに有効ではなく、いずれかの細胞株構成においてＲ１３２Ｃ＿Ｓ２８０Ｆの変異体ＩＤＨ１を阻害するのにも有効ではない。

【0072】

基本的に上記のように実施された実験では、表２に記載のＩＣ５０結果が得られる。

【0073】

【表2】

【0074】

表２の結果は、化合物ＡがＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ、Ｒ１３２ＣまたはＲ１３２Ｌドライバー変異の関係においてＩＤＨ１の第二点耐性変異体を阻害するのに有効であることを示す。