特許 7478858 複素環系化合物の結晶形及びその製造方法と使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-04-24

(45)【発行日】2024-05-07

(54)【発明の名称】複素環系化合物の結晶形及びその製造方法と使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/04 20060101AFI20240425BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 1/02 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 11/08 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 11/14 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 13/00 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 13/10 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 17/02 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 25/06 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20240425BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240425BHJP

   C07D 413/06 20060101ALI20240425BHJP

【ＦＩ】

C07D471/04 108K

A61K31/5377

A61P1/02

A61P11/00

A61P11/06

A61P11/08

A61P11/14

A61P13/00

A61P13/10

A61P15/00

A61P17/02

A61P25/04

A61P25/06

A61P29/00

A61P43/00 105

A61P43/00 111

C07D413/06

C07D471/04 CSP

【請求項の数】 14

(21)【出願番号】P 2022581651

(86)(22)【出願日】2021-06-24

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-07-27

(86)【国際出願番号】 CN2021102068

(87)【国際公開番号】W WO2022001820

(87)【国際公開日】2022-01-06

【審査請求日】2022-12-28

(31)【優先権主張番号】202010610052.6

(32)【優先日】2020-06-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】520317136

【氏名又は名称】武漢朗来科技発展有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】110001519

【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ワン、リャン

(72)【発明者】

【氏名】ロウ、チュン

(72)【発明者】

【氏名】ホン、ホアユン

(72)【発明者】

【氏名】クオ、シアオタン

(72)【発明者】

【氏名】チエン、リナ

(72)【発明者】

【氏名】チャン、イーハン

(72)【発明者】

【氏名】チェン、ヨンカイ

(72)【発明者】

【氏名】ワン、チャオトン

【審査官】柳本 航佑

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０２０／１３５７７１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０２２／２５８０５９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０２２／２６８２１８（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ ４７１／００－４７１／２２

Ｃ０７Ｄ ４１３／００－４１３／１４

Ａ６１Ｋ ３１／５３７７

Ａ６１Ｐ １／０２

Ａ６１Ｐ １１／００

Ａ６１Ｐ １１／０６

Ａ６１Ｐ １１／０８

Ａ６１Ｐ １１／１４

Ａ６１Ｐ １３／００

Ａ６１Ｐ １３／１０

Ａ６１Ｐ １５／００

Ａ６１Ｐ １７／０２

Ａ６１Ｐ ２５／０４

Ａ６１Ｐ ２５／０６

Ａ６１Ｐ ２９／００

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

結晶Ｉ、結晶ＩＩ、結晶ＩＩＩ、結晶ＩＶ、結晶Ｖ、結晶ＶＩ、結晶ＶＩＩ、結晶ＶＩＩＩ及び結晶ＩＸから選択される式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶であって、

【化1】

ここで、式Ａで表される化合物の水和物の結晶ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°及び２２．８０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の結晶Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°及び１８．４４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の結晶Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８°±０．２０°及び２２．１３°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＭＴＢＥ溶媒和物の結晶ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°及び２０．８７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の水和物の結晶ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の水和物の結晶ＶＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６２°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５９°±０．０２°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のエチレングリコール溶媒和物の結晶ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°及び２１．６６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＴＨＦ溶媒和物の結晶ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°及び２１．４９°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＤＭＳＯ溶媒和物の結晶ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°及び２５．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶。

【請求項2】

前記結晶ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°、２２．８０°±０．２０°、１３．７５°±０．２０°、１４．４６°±０．２０°及び２０．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°、１８．４４°±０．２０°、１６．２６°±０．２０°、１６．８９°±０．２０°及び１７．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８±０．２０°、２２．１３°±０．２０°、１３．５３°±０．２０°、１４．２５±０．２０°、２５．１８°±０．２０°及び２６．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°、２０．８７°±０．２０°、１６．１７°±０．２０°、１６．９３°±０．２０°、１７．５５°±０．２０°及び２１．２０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５６°±０．２０°、１３．４８°±０．２０°、１７．３９°±０．２０°、２１．０４°±０．２０°及び２３．６３°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＶＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６２°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５９°±０．０２°、１３．４６°±０．２０°、１７．４１°±０．２０°、２６．５１°±０．０２°、２５．６２°±０．０２°及び２５．２４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°、２１．６６°±０．２０°、２１．０７°±０．２０°及び２４．８２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、式Ａで表される化合物のＴＨＦ溶媒和物の結晶ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°、２１．４９°±０．２０°、２０．９９°±０．２０°、２４．９４°±０．２０°及び２５．３１°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°、２５．０７°±０．２０°、１３．５７°±０．２０°、１７．１８°±０．２０°、２０．９４°±０．２０°及び２５．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、請求項１に記載の化合物Ａ又はその溶媒和物の結晶。

【請求項3】

前記結晶ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°、２２．８０°±０．２０°、１３．７５°±０．２０°、１４．４６°±０．２０°、２０．８６°±０．２０°、２１．０８°±０．２０°、２３．７５°±０．２０°及び２４．０５°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１００℃の区間における重量減少勾配は１．５％であり、
及び／又は、前記結晶ＩＩＩの示差走査熱量スペクトルにおいて、最初の吸熱ピークは０．４個の水の除去であり、
及び／又は、前記結晶Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°、１８．４４°±０．２０°、１６．２６°±０．２０°、１６．８９°±０．２０°、１７．８６°±０．２０°、２２．３５°±０．２０°、２３．５６°±０．２０°、２４．７４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶Ｖの示差走査熱量スペクトルにおいて、１６６℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは７０±２Ｊ／ｇであり、
及び／又は、前記結晶Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８°±０．２０°、２２．１３°±０．２０°、１３．５３°±０．２０°、１４．２５°±０．２０°、２５．１８°±０．２０°、２６．０７°±０．２０°、２２．３２°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２３．４２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶Ｉの示差走査熱量スペクトルにおいて、１５２℃で吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは４４±２Ｊ／ｇであり、
及び／又は、前記結晶ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°、２０．８７°±０．２０°、１６．１７°±０．２０°、１６．９３°±０．２０°、１７．５５°±０．２０°、２１．２０°±０．２０°、２２．６０°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２４．４０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、１００～１６０℃の温度区間で３．５％の重量損失があり、１６０～２００℃の温度区間で２．９％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５６°±０．２０°、１３．４８°±０．２０°、１７．３９°±０．２０°、２１．０４°±０．２０°、２３．６３°±０．２０°、１４．３９°±０．２０°、２５．６０°±０．２０°及び２６．５２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～６０℃の温度区間で１．２％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°、２１．６６°±０．２０°、２１．０７°±０．２０°、２４．８２°±０．２０°、１３．６１°±０．２０°、２３．２２°±０．２０°及び２４．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＶＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１２０℃の区間で２５．７％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°、２１．４９°±０．２０°、２０．９９°±０．２０°、２４．９４°±０．２０°、２５．３１°±０．２０°、１７．１４°±０．２０°、２１．７２°±０．２０°及び２３．００°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＶＩＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１６０℃の温度区間で５．７％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°、２５．０７°±０．２０°、１３．５７°±０．２０°、１７．１８°±０．２０°、２０．９４°±０．２０°、２５．５７°±０．２０°、２１．３７°±０．２０°及び２３．１２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶ＩＸの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１６０℃の温度区間で１８．２３％の重量損失があることを特徴とする、請求項２に記載のＡで表される化合物又はその溶媒和物の結晶。

【請求項4】

スキーム一、スキーム二又はスキーム三であることを特徴とする、物質Ａの結晶ＩＩＩの製造方法であって、
前記スキーム一は、式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、物質Ａの結晶ＩＩＩを得るステップを含み、前記溶媒は水又はアルコール系溶媒であり、
前記スキーム二は、式Ａで表される化合物と溶媒との溶液に貧溶媒を加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶ＩＩＩを得るステップを含み、前記溶媒はアルコール系、フラン系又はＤＭＳＯのうちの一つ又は複数であり、前記貧溶媒は水であり、
前記スキーム三は、式Ａで表される化合物と溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶ＩＩＩを得るステップを含み、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯであり、
物質Ａの前記結晶ＩＩＩは、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物Ａの水和物の結晶ＩＩＩである、
ことを特徴とする、物質Ａの結晶ＩＩＩの製造方法。

【請求項5】

前記スキーム一において、前記溶媒は水又はメタノールであり、
及び／又は、前記スキーム一において、前記結晶を析出させる温度は２０～５０℃であり、
及び／又は、前記スキーム一において、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキーム二において、前記溶媒は、メタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数であり、
及び／又は、前記スキーム三において、前記溶媒と水との体積比は３：１～１：１であり、
及び／又は、前記スキーム三において、前記ＤＭＳＯと水との体積比は１：１～１：４であり、
及び／又は、前記スキーム一を採用する場合、化合物Ａの非晶質試料を溶媒と混合し、懸濁液を結晶化させるステップを含み、前記溶媒は水又はメタノールであり、攪拌温度は２０～５０℃であり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキーム二を採用する場合、化合物Ａを溶媒と混合し、貧溶媒に滴下するステップを含み、前記溶媒はメタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数であり、前記貧溶媒は水であり、前記溶媒と水との体積比は３：１～１：１であり、
及び／又は、前記スキーム三を採用する場合、化合物Ａと溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させるステップを含み、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯであり、前記ＤＭＳＯと水との体積比は１：１～１：４であることを特徴とする、請求項４に記載の製造方法。

【請求項6】

前記スキーム一において、前記結晶を析出させる温度は４０℃又は５０℃であり、
及び／又は、前記スキーム一を採用する場合、化合物Ａの非晶質試料を溶媒と混合し、懸濁液を結晶化させるステップを含み、前記溶媒は水又はメタノールであり、前記攪拌温度は４０℃であり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬである、請求項５に記載の製造方法。

【請求項7】

請求項４～６のいずれか一項に記載の製造方法により製造され、
物質Ａの前記結晶ＩＩＩは、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物Ａの水和物の結晶ＩＩＩであることを特徴とする、物質Ａの結晶ＩＩＩ。

【請求項8】

スキームＡ又はスキームＢである製造方法であって、
前記スキームＡは２０～５０℃で式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物Ａの結晶Ｖを得るステップを含み、前記溶媒は水又はアセトニトリルであり、
スキームＢは式Ａで表される化合物と溶媒の溶液中の溶媒を揮発させ、化合物Ａの結晶Ｖを得るステップを含み、前記溶媒はメタノールであることを特徴とする、式Ａで表される化合物の結晶Ｖの製造方法。

【請求項9】

スキームＡにおいて、前記化合物Ａの非晶質と前記溶媒との質量体積比は、３．０ｍｇ／ｍＬ又は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、スキームＡにおける結晶化の温度は５０℃であり、
及び／又は、スキームＢにおける結晶を析出させる温度は５０℃であり、
及び／又は、前記スキームＡを採用する場合、２０～５０℃で化合物Ａの非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物の結晶Ｖを得るステップを含み、前記結晶化の温度は５０℃であり、前記溶媒は水又はアセトニトリルであり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬ又は３．０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキームＢを採用する場合、化合物Ａと溶媒の溶液中の溶媒を揮発させて結晶を析出させ、化合物Ａの結晶Ｖを得るステップを含み、前記溶媒はメタノールであり、前記結晶を析出させる温度は５０℃であることを特徴とする、請求項８に記載の製造方法。

【請求項10】

請求項１～３のいずれか一項に記載の式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶及び／又は請求項７に記載の物質Ａの結晶ＩＩＩ、及び医薬補助材料を含む、医薬組成物。

【請求項11】

Ｐ２Ｘ３受容体アンタゴニスト又は薬物の製造における、請求項１～３のいずれか一項に記載の式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶、請求項７に記載の物質Ａの結晶ＩＩＩの使用であって、前記薬物は、動物の少なくとも部分的にＰ２Ｘ３によって媒介される又は活性関連疾患の防護、処理、治療、又は軽減に使用される薬物である、あるいは、前記薬物は、疼痛、泌尿器疾患又は呼吸器疾患の治療に使用される薬物である、使用。

【請求項12】

前記疾患は、疼痛、泌尿器疾患又は呼吸器系疾患を含む、請求項１１に記載の使用。

【請求項13】

前記疼痛は、炎症性疼痛、手術疼痛、内臓痛、歯痛、月経前疼痛、中枢性疼痛、火傷による疼痛、片頭痛、又は群発頭痛を含み、前記泌尿器疾患は、尿失禁、膀胱過活動、排尿障害、膀胱炎を含み、前記呼吸器系疾患は、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気管支けいれん、又は慢性咳を含む呼吸障害を含むことを特徴とする、請求項１２に記載の使用。

【請求項14】

前記医薬組成物を投与することにより、治療に伴う味覚障害の副作用を低減することを特徴とする、請求項１０に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は出願日が２０２０年６月２９日である中国特許出願２０２０１０６１００５２６の優先権を主張する。本出願は上記の中国特許出願の全文を引用する。

【0002】

本発明は、医薬化学の分野に属し、具体的には、複素環系化合物の結晶形及びその製造方法と使用に関する。

【背景技術】

【0003】

ＡＴＰ受容体は、分子構造、伝達機序、及び薬理学的特性に基づいて、Ｐ２Ｙ－及びＰ２Ｘ－プリン受容体の２つの主要なファミリーに分類される。Ｐ２Ｘ－プリン受容体はＡＴＰ感受性陽イオンチャネルのファミリーであり、いくつかのサブタイプをクローニングし、それはＰ２Ｘ１、Ｐ２Ｘ２、Ｐ２Ｘ３、Ｐ２Ｘ４、Ｐ２Ｘ５、及びＰ２Ｘ７の６つの同族受容体と、Ｐ２Ｘ２／３、Ｐ２Ｘ４／６、Ｐ２Ｘ１／５の３つの同族受容体を含む。研究によると、Ｐ２Ｘ３受容体が下部尿路や気道などの「中空内臓」の一次求心性神経線維で特異的に発現することが分かった。

【0004】

咳は呼吸器疾患の主な症状であり、呼吸器クリニック患者の７０％～８０％に咳症状がある。ＣＯＰＤ、ＩＰＦなどの有病率の増加に伴い、咳がほとんどの呼吸器疾患の主な症状となり、需要も高まっている。体の防御性神経反射として、咳は呼吸器分泌物や有害因子の除去に有益であるが、頻繁で激しい咳は患者の仕事、生活、社会活動に深刻な影響を与える。

【0005】

Ｐ２Ｘ３アンタゴニストは明確に咳の適応症に対して開発されたものはあまり多くなく、現在急速に進行しているプロジェクトはロシュのＡＦ－２１９プロジェクトであり、新たに完了された第ＩＩ相臨床試験で難治性の咳に対してより良い治療効果を有していたが、味覚障害は深刻である。

【0006】

現在、慢性咳嗽を含む多くの疾患を治療するためのＰ２Ｘ３阻害経路の薬物は市販されていない。従って、Ｐ２Ｘ３の活性を阻害できる新しい化合物の開発は、疾患の治療に積極的な意味を持つ。

【0007】

特許出願ＣＮ２０１９１１３７９２９３．８は、以下に示されるＰ２Ｘ３アンタゴニストに関し、高いＰ２Ｘ３アンタゴニスト活性を有し、より良い選択性を有し、毒性が低く、代謝安定性が高く、味覚への影響が少ない。医薬品開発の見通しは良好である。しかし、上記化合物の結晶形については言及していない。

【0008】

【化1】

【0009】

化合物には一般に結晶多形現象があり、一般的な薬物は２つ以上の異なる結晶性物質状態が存在する可能性がある。結晶多形化合物の存在形態と量は予測不可能であり、同じ薬物の異なる結晶形態には、溶解度、融点、密度、安定性などの面で大きな違いがあり、薬物の温度、均一性、バイオアベイラビリティ、有効性及び安全性に様々な程度で影響を与える。従って、新薬の研究開発の過程において化合物の結晶多形スクリーニングを全面的に行う必要であり、薬物製剤の開発に適した結晶形を選択することは臨床的に大きな意義がある。

【発明の概要】

【0010】

本発明は、複素環系化合物の結晶形及びその製造方法と使用を提供する。本発明の結晶形は、良好な安定性を有し、薬物の最適化及び開発に重要な価値を有する。

【0011】

本発明は、式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形を提供し：

【化2】

それは、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸから選択される。

【0012】

本発明は、粉末Ｘ線回折スペクトル（ＸＲＰＤ）が２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°及び２２．８０°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物の結晶形ＩＩＩを提供する。

【0013】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤはまた１３．７５°±０．２０°、１４．４６°±０．２０°及び２０．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、２１．０８°±０．２０°、２３．７５°±０．２０°及び２４．０５°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0014】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは基本的に図１に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩの熱重量分析スペクトル（ＴＧＡ）において、室温（ＲＴ）～１００℃の区間における重量減少勾配は１．５％であり、前記「％」は重量百分率である。前記結晶形ＩＩＩの示差走査熱量スペクトル（ＤＳＣ）において、最初の吸熱ピークは０．４の水の除去であり、２番目の吸熱ピークは試料の脱水後の溶融吸熱ピークに起因し、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図２に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩは脱水後、周囲湿度下で速やかに吸湿して再び結晶形ＩＩＩになり、加熱して脱水する前後のＸＲＰＤスペクトルは、好ましくは、図３に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩの動的水分吸着スペクトル（ＤＶＳ）は、試料が所定の吸湿性を有し、広い湿度範囲で水分含有量がほとんど変化しないことを示し、そのＤＶＳスペクトルは好ましくは、図４に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルにおいて、ＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤに有意な変化はなく、そのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルは、好ましくは、図５に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩの偏光顕微鏡スペクトル（ＰＬＭ）において、結晶形は約２μｍの不規則な結晶であり、凝集は２０～５０μｍであり、そのＰＬＭ図は、好ましくは、基本的に図６に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0015】

本発明は、ＸＲＰＤが２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°及び１８．４４°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物の結晶形Ｖを提供する。

【0016】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形Ｖの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルはまた１６．２６°±０．２０°、１６．８９°±０．２０°及び１７．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、２２．３５°±０．２０°、２３．５６°±０．２０°、２４．７４°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0017】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形Ｖの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは基本的に図７に示された通りである。前記結晶形ＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～２３０℃の温度区間に重量損失はない。前記結晶形ＶのＤＳＣスペクトルにおいて、１６６℃±２℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは７０±２Ｊ／ｇであり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図８に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品が無水結晶であることが分かる。前記結晶形ＶのＤＶＳスペクトルは、試料がある程度の吸湿性（０．７％、８０％ＲＨ）を有することを示し、そのＤＶＳスペクトルは好ましくは、図９に示された通りである。前記結晶形ＶのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルにおいて、ＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤに有意な変化はなく、そのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルは、好ましくは、図１０に示された通りである。前記結晶形ＶのＰＬＭにおいて、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭ図は、好ましくは、基本的に図１１に示された通りである。前記結晶形Ｖの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0018】

本発明は、ＸＲＰＤスペクトルが２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８°±０．２０°及び２２．１３°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物の結晶形Ｉを提供する。

【0019】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１３．５３°±０．２０°、１４．２５°±０．２０°、２５．１８°±０．２０°及び２６．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、２２．３２°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２３．４２°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0020】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形Ｉの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルが基本的に図１２に示された通りである。前記結晶形ＩのＤＳＣスペクトルにおいて、１５２℃±２℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは４４±２Ｊ／ｇである。前記結晶形ＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～２３０℃の温度区間に重量損失はない。そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、基本的に図１３に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品が無水結晶であることが分かる。前記結晶形ＩのＤＶＳスペクトルは図１４に示される通りであり、相対湿度が４０％を超えると、結晶形Ｉの重量が急激に増加する。相対湿度が４０％まで下がると、吸収されたすべての水分が放出される。前記結晶形Ｉの吸湿後のＸＲＰＤスペクトルにおいて、結晶形Ｉが高湿度環境下で吸湿して結晶転移をし、水和物結晶形ＩＶに転換され、それを３０℃の真空乾燥箱に入れて乾燥させた後、再び初期結晶形Ｉに転換し、その吸湿前後のＸＲＰＤスペクトルは、好ましくは、基本的に図１５に示された通りである。ＤＶＳ試験結果（図１４）と合わせて、環境相対湿度が４０％を超えると、結晶形Ｉが急速に吸湿して水和物に転換し、相対湿度が５０％未満である時、吸着した水が急速に脱離して結晶形Ｉに転換することが分かる。即ち、結晶形ＩとＩＶとの間の相互転移は可逆的である。前記結晶形Ｉは吸湿性（６．８％、８０％ＲＨ）を示し、前記結晶形ＩはＤＶＳ試験後も結晶形が変化せず、そのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤスペクトルは、好ましくは、図１６に示された通りである。前記結晶形ＩのＰＬＭにおいて、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭは、好ましくは、基本的に図１７に示された通りである。前記結晶形Ｉの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0021】

本発明は、ＸＲＰＤスペクトルが２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°及び２０．８７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物のＭＴＢＥ溶媒和物の結晶形ＩＩを提供する。

【0022】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤはまた１６．１７°±０．２０°、１６．９３°±０．２０°、１７．５５°±０．２０°及び２１．２０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、２２．６０°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２４．４０°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0023】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤは基本的に図１８に示された通りである。前記結晶形ＩＩの核磁気共鳴水素スペクトル（ＨＮＭＲ）において、化学シフトは１．１１及び３．０８にＭＴＢＥの残留シグナルを有し、その残留ＭＴＢＥのＨＮＭＲスペクトルは図１９に示された通りである。前記結晶形ＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、１００～１６０℃の温度区間で３．５％の重量損失があり、１６０～２００℃の温度区間で２．９％の重量損失がある。前記結晶形ＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、隣接する２つの吸熱ピークがあり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図２０に示された通りである。図１９に示される残留ＭＴＢＥ水素スペクトルから、当該製品がＭＴＢＥ溶媒和物であることが分かる。前記結晶形ＩＩのＰＬＭにおいて、結晶形は約２μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭは、好ましくは、基本的に図２１に示された通りである。

【0024】

本発明は、ＸＲＰＤスペクトルが２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５６°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物の水和物の結晶形ＩＶを提供する。

【0025】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＶの２θ角で表されるＸＲＰＤはまた１３．４８°±０．２０°、１７．３９°±０．２０°、２１．０４°±０．２０°及び２３．６３°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、１４．３９°±０．２０°、２５．６０°±０．２０°及び２６．５２°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0026】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＶの２θ角で表されるＸＲＰＤは基本的に図２２に示された通りである。前記結晶形ＩＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～６０℃の温度区間で１．２％の重量損失がある。前記結晶形ＩＶのＤＳＣスペクトルにおいて、２つの吸熱ピークピークがあり、最初の広い吸熱ピークは脱水によるものと推定され、後の吸熱ピークは溶融ピークであり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図２３に示された通りである。前記結晶形ＩＶは高湿度環境下でのみ安定であり、脱水後、周囲湿度下で速やかに吸湿して再び結晶形Ｉになり、加熱して脱水する前後のＸＲＰＤスペクトルは、好ましくは、図２４に示された通りである。前記結晶形ＩＶのＰＬＭにおいて、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭ図は、好ましくは、基本的に図２５に示された通りである。前記結晶形ＩＶの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0027】

本発明は、粉末Ｘ線回折スペクトルが２θ値が８．６２°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５９°±０．０２°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物の水和物の結晶形ＶＩを提供する。

【0028】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩの２θ角で表されるＸＲＰＤはまた１３．４６°±０．２０°、１７．４１°±０．２０°、２６．５１°±０．０２°、２５．６２°±０．０２°及び２５．２４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、２３．６４°±０．２０°、２１．００°±０．２０°及び２７．８５°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0029】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩの２θ角で表されるＸＲＰＤは基本的に図２６に示された通りである。前記結晶形ＶＩのＸＲＰＤスペクトルのオーバーレイにおいて、当該結晶形試料は、周囲湿度（３５％ＲＨ）下に数分間置かれた後、結晶形Ｉに転移する。そのＸＲＰＤスペクトルのオーバーレイは図２７に示された通りである。これは、結晶形ＶＩが非常に不安定な水和物である可能性があることを示唆している。前記結晶形ＶＩの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0030】

本発明は、粉末Ｘ線回折スペクトルが２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°及び２１．６６°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物のエチレングリコール溶媒和物の結晶形ＶＩＩを提供する。

【0031】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩＩのＸＲＰＤはさらに下記の２θ値：２１．０７°±０．２０°、２４．８２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、また、１３．６１°±０．２０°、２３．２２°±０．２０°及び２４．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0032】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤは基本的に図２８に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフトδは３．３９及び４．４４においてエチレングリコール溶媒の残留を示し、その残留エチレングリコールの^１ＨＮＭＲスペクトルは、好ましくは、図２９に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１２０℃の区間で２５．７％の重量損失がある。前記結晶形ＶＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、２つの広い吸熱ピークがあり、最初の吸熱ピークは脱溶媒によるものと推定され、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図３０に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品がエチレングリコールの溶媒和物であることが分かる。前記結晶形ＶＩＩの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0033】

本発明は、粉末Ｘ線回折スペクトルが２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°及び２１．４９°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物のＴＨＦ溶媒和物の結晶形ＶＩＩＩを提供する。

【0034】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルはさらに２０．９９°±０．２０°、２４．９４°±０．２０°及び２５．３１°±０．２０°において特徴的なピークを有し、さらに、１７．１４°±０．２０°、２１．７２°±０．２０°及び２３．００°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0035】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＶＩＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルは基本的に図３１に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１６０℃の温度区間で５．７％の重量損失がある。前記結晶形ＶＩＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、一つのみの吸熱ピークがあり、試料の脱溶媒後の溶融ピークである。従って、結晶形ＶＩＩＩはＴＨＦを含む溶媒和物であり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図３２に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフトδは１．７６及び３．６０においてＴＨＦ溶媒の残留を示し、その^１ＨＮＭＲスペクトルは、好ましくは、図３３に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩは不安定であり、脱溶媒（４０℃で３時間真空乾燥させる）後結晶形が変換して、結晶形Ｉに転移し、その乾燥前後のＸＲＰＤスペクトルは、好ましくは、図３４に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0036】

本発明は、ＸＲＰＤスペクトルが２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°及び２５．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物のＤＭＳＯ溶媒和物の結晶形ＩＸを提供する。

【0037】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＸの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルはさらに１３．５７°±０．２０°、１７．１８°±０．２０°、２０．９４°±０．２０°及び２５．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、また、２１．３７°±０．２０°及び２３．１２°±０．２０°において特徴的なピークを有する。

【0038】

本発明のいくつかの好ましい実施形態において、前記結晶形ＩＸの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは基本的に図３５に示された通りである。前記結晶形ＩＸのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１６０℃の温度区間で１８．２３％の重量損失があり、ＤＳＣスペクトルにはＴＧＡ重量損失に対応する吸熱ピークがあり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、好ましくは、図３６に示された通りである。前記結晶形ＩＸの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフトδは２．６８においてＤＭＳＯ溶媒の残留を示し、その残留ＤＭＳＯの^１ＨＮＭＲスペクトルは、好ましくは、図６０に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品がＤＭＳＯ溶媒和物であることが分かる。前記結晶形ＩＸの純度は、一般に９０％以上であり、好ましくは９５％以上である。

【0039】

本発明において、前記ＸＲＰＤに用いられる放射線はＫα線である。

【0040】

本発明において、前記粉末Ｘ線回折に用いられるターゲットのタイプは、Ｃｕターゲットである。

【0041】

本発明はさらに、スキーム一、スキーム二又はスキーム三である物質Ａの結晶形ＩＩＩの製造方法を提供する。

【0042】

スキーム一は下記のステップを含む：式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得、前記溶媒は水又はアルコール系溶媒である。

【0043】

スキーム二は下記のステップを含む：式Ａで表される化合物と溶媒との溶液に貧溶媒を加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得、前記溶媒はアルコール、フラン系又はＤＭＳＯのうちの一つ又は複数であり、前記貧溶媒は水である。

【0044】

スキーム三は下記のステップを含む：化合物Ａと溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯである。

【0045】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム一を採用する場合、前記溶媒は好ましくは、水又はメタノールである。

【0046】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム一を採用する場合、前記結晶の析出温度は２０～５０℃であり、好ましくは４０℃又は５０℃である。

【0047】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム一を採用する場合、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬである。

【0048】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム二を採用する場合、前記溶媒は好ましくは、メタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数である。

【0049】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム二を採用する場合、前記溶媒と水との体積比は、３：１～１：１（例えば、１：１又は３：１）である。

【0050】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム三を採用する場合、前記溶媒と水との体積比は、１：１～１：４（例えば、１：１、２：３、１：２又は１：４）である。

【0051】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム一を採用する場合、好ましくは、化合物Ａの非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させるステップを含み、前記溶媒は水又はメタノールである。前記攪拌温度は２０～５０℃であり、好ましくは４０℃である。前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬである。

【0052】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記スキーム二を採用する場合、好ましくは、化合物Ａを溶媒と混合し、次いでゆっくりと滴下する方法で貧溶媒に加えるステップを含み、前記溶媒は好ましくは、メタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数であり、前記貧溶媒は水であり、前記溶媒と水との体積比は、３：１～１：１（例えば、３：１又は１：１）である。

【0053】

前記結晶形ＩＩＩの製造方法において、前記ススキーム三を採用する場合、好ましくは、化合物Ａと溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させるステップを含み、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯであり、前記ＤＭＳＯと水との体積比は、１：１～１：４（例えば、１：１、２：３、１：２又は１：４）である。

【0054】

本発明はさらに、スキームＡ又はスキームＢである化合物Ａの結晶形Ｖの製造方法を提供する。

【0055】

スキームＡは下記のステップを含む：２０～５０℃で式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物Ａの結晶形Ｖを得、前記溶媒は水又はニトリル系溶媒である。

【0056】

スキーＢは下記のステップを含む：式Ａで表される化合物と溶媒の溶液中の溶媒を揮発させて、化合物Ａの結晶形Ｖを得、前記溶媒はアルコール系溶媒である。

【0057】

スキーＡにおいて、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は、好ましくは、３．０ｍｇ／ｍＬ又は５０ｍｇ／ｍＬである。

【0058】

スキーＡにおいて、前記溶媒は、好ましくは水又はアセトニトリルである。

【0059】

スキーＡにおいて、前記結晶化させる温度は、好ましくは５０℃である。

【0060】

スキーＢにおいて、前記溶媒は、好ましくはメタノールである。

【0061】

前記スキーＡのある形態において、下記のステップを含む：２０～５０℃で化合物Ａの非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物の結晶形Ｖを得、前記溶媒は水又はアセトニトリルであり、前記結晶化温度は、好ましくは５０℃であり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬ又は３．０ｍｇ／ｍＬである。

【0062】

前記形態Ｂのある形態において、下記のステップを含む：化合物Ａと溶媒の溶液中の溶媒を揮発させて、化合物Ａの結晶形Ｖを得、前記溶媒はメタノールであり、前記温度は５０℃である。

【0063】

本発明において、前記式Ａで表される化合物の非晶質は、特許出願ＣＮ２０１９１１３７９２９３．８の方法を参照して製造される（具体的には実施例を参照）。

【0064】

前記式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形（例えば、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸのうちの一つ又は複数）及び／又は前記物質Ａの結晶形ＩＩＩ、及び医薬補助材料を含む医薬組成物である。ここで、前記結晶形の投与量は、治療上有効な量であり得る。

【0065】

前記医薬補助材料は、医薬製造の分野で広く使用されているものであってもよい。補助材料は、主に安全的、安定的でかつ機能的な医薬組成物を提供するために使用され、被験者に投与された後の活性成分を所望の速度で溶出させる方法、又は被験者に組成物を投与した後、活性成分が効果的に吸収されることを促進する方法をさらに提供することができる。前記医薬補助材料は、不活性充填剤であってもよく、又は組成物の全体的なｐＨ値の安定化、又は組成物の活性成分の分解の防止などの特定の機能を提供することができる。前記医薬補助材料は、接着剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、充填剤、造粒剤、ゲル接着剤、崩壊剤、潤滑剤、接着防止剤、流動促進剤、湿潤剤、ゲル化剤、吸収遅延剤、溶解阻害剤、促進剤、吸着剤、緩衝剤、キレート剤、防腐剤、着色剤、香料、甘味料のうちの１つ又は複数を含むことができる。

【0066】

薬学的に許容される補助材料として使用できる物質は、イオン交換体、アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウムなどの緩衝物質、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリコン、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸エステル、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロッキングポリマー、ラノリンなどの塩又は電解質、ラクトース、グルコース及びスクロースなどの糖類、コーンスターチやポテトスターチなどのデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロースなどのセルロース及びその誘導体、ガムパウダー、モルト、ゼラチン、タルク、ココアバター及び座薬ワックスなどの補助材料、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油などの油、プロピレングリコール及びポリエチレングリコールなどのグリコール系化合物、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルなどのエステル、寒天、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張塩、リンゲル溶液、エタノール、リン酸緩衝液、及びラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムなどの他の非毒性の適切な潤滑剤、着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、調味剤及び香料、防腐剤及び酸化防止剤を含むが、これらに限定されない。

【0067】

本発明の医薬組成物は、開示された内容に応じて、当業者に公知の任意の方法を用いて製造することができる。例えば、従来の混合、溶解、造粒、乳化、粉砕、封入、包埋又は凍結乾燥工程が挙げられる。

【0068】

本発明は、Ｐ２Ｘ３阻害剤の製造における、前記式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形（例えば、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸのうちの一つ又は複数）、前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの使用を提供する。前記使用において、前記Ｐ２Ｘ３阻害剤は、哺乳動物の生体内で使用することができ、また、生体外でも使用でき、主に実験の目的で使用され、例えば、標準試料又は対照試料として比較を提供するか、又は当該技術分野の常法に従ってキットを製造して、Ｐ２Ｘ３の阻害効果の迅速に検出する。

【0069】

本発明は、薬物の製造における、前記式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形（例えば、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸのうちの一つ又は複数）、前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの使用をさらに提供し、前記薬物は、動物の少なくとも部分的にＰ２Ｘ３によって媒介される又は活性関連疾患の防護、処理、治療、又は軽減に使用される薬物であり、或いは、前記薬物は、疼痛、泌尿器疾患又は呼吸器疾患の治療に使用される薬物である。

【0070】

本発明は、動物（例えば、ヒト）の少なくとも部分的にＰ２Ｘ３によって媒介される又は活性関連疾患の防護、処理、治療、又は軽減における、前記式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形（例えば、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸのうちの一つ又は複数）、前記物質Ａの結晶形ＩＩＩ又は前記医薬組成物の使用をさらに提供する。前記疾患は、呼吸器系疾患、咳、慢性咳、特発性肺線維症、慢性肺閉塞、喘息、疼痛、尿失禁、自己免疫疾患、過活動膀胱、排尿障害、炎症、アルツハイマー病、パーキンソン病、睡眠障害、てんかん、精神疾患、関節炎、神経変性症、外傷性脳損傷、心筋梗塞、関節リウマチ、脳卒中、血栓症、アテローム性動脈硬化症、結腸症候群、炎症性腸疾患、消化管疾患、胃腸機能障害、呼吸不全、性機能障害、心血管系疾患、心不全、高血圧、尿失禁、膀胱炎、関節炎、子宮内膜症、血液疾患、筋骨格及び結合組織発達障害、全身障害疾患を含むが、これらに限定されない。

【0071】

いくつかの実施形態において、前記疾患は疼痛を含み、前記疼痛は、炎症性疼痛、手術疼痛、内臓痛、歯痛、月経前疼痛、中枢性疼痛、火傷による疼痛、片頭痛、又は群発頭痛を含むが、これらに限定されない。

【0072】

いくつかの実施形態において、前記疾患は泌尿器疾患を含み、前記泌尿器疾患は、尿失禁、過活動膀胱、排尿障害、膀胱炎を含む。

【0073】

いくつかの実施形態において、前記疾患は呼吸器疾患を含み、前記呼吸器疾患には、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気管支けいれん、又は慢性咳を含む呼吸障害が含まれるが、これに限定されない。

【0074】

本発明は、前記式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形（例えば、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸのうちの一つ又は複数）、前記物質Ａの結晶形ＩＩＩ又は前記医薬組成物の、動物（例えば、ヒト）の少なくとも部分的にＰ２Ｘ３によって媒介される又は活性関連疾患を防護、処理、治療、又は軽減する方法をさらに提供する。前記疾患は、呼吸器系疾患、咳、慢性咳、特発性肺線維症、慢性肺閉塞、喘息、疼痛、尿失禁、自己免疫疾患、過活動膀胱、排尿障害、炎症、アルツハイマー病、パーキンソン病、睡眠障害、てんかん、精神疾患、関節炎、神経変性症、外傷性脳損傷、心筋梗塞、関節リウマチ、脳卒中、血栓症、アテローム性動脈硬化症、結腸症候群、炎症性腸疾患、消化管疾患、胃腸機能障害、呼吸不全、性機能障害、心血管系疾患、心不全、高血圧、尿失禁、膀胱炎、関節炎、子宮内膜症、血液疾患、筋骨格及び結合組織発達障害、全身障害疾患を含むが、これらに限定されない。

【0075】

いくつかの実施形態において、前記疾患は疼痛を含み、前記疼痛は、炎症性疼痛、手術疼痛、内臓痛、歯痛、月経前疼痛、中枢性疼痛、火傷による疼痛、片頭痛、又は群発頭痛を含むが、これらに限定されない。

【0076】

いくつかの実施形態において、前記疾患は泌尿器疾患を含み、前記泌尿器疾患は、尿失禁、過活動膀胱、排尿障害、膀胱炎を含む。

【0077】

いくつかの実施形態において、前記疾患は呼吸器疾患を含み、前記呼吸器疾患には、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気管支けいれん、又は慢性咳を含む呼吸障害が含まれるが、これに限定されない。

【0078】

前記医薬組成物は、前記医薬組成物を投与することにより、治療に伴う味覚障害の副作用を低減させることを特徴とする。

【0079】

当本技術分野の常識に違反しない限り、前記各好ましい条件は、任意に組み合わせて、本発明の各好ましい実施例を得ることができる。

【0080】

本発明で使用される試薬及び原料は市販品として入手できる。

【0081】

本発明の積極的な進歩的効果は下記の通りである：
１．従来技術では当該複素環系化合物の結晶形を報告せず、本出願は初めて当該化合物の多くの新規結晶形を発見した。本発明は、多くの実験及びスクリーニングにより、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ又は結晶形ＩＸを初めて製造し、これを候補とした。
２．本発明により製造された結晶形の一部は、安定性が良好で、保存が容易であり、医薬品の開発や製造過程における結晶転移のリスクを回避でき、バイオアベイラビリティや薬効の変化を回避できるため、臨床使用に適した剤形に開発することができ、経済的価値が高い。
３．本発明は、結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ、結晶形ＩＸの塩又は溶媒和物の製造方法をさらに提供し、操作が簡単で再現性が高く、溶媒が残りにくく、環境にやさしく、さまざまなスケールの生産に適している。

【図面の簡単な説明】

【0082】

【図1】結晶形ＩＩＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図2】結晶形ＩＩＩのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図3】加熱して脱水する前後の結晶形ＩＩＩのＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図4】結晶形ＩＩＩのＤＶＳスペクトルである。

【図5】結晶形ＩＩＩのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図6】結晶形ＩＩＩのＰＬＭ図である。

【図7】結晶形ＶのＸＲＰＤスペクトルである。

【図8】結晶形ＶのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図9】結晶形ＶのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図10】結晶形ＶのＤＶＳスペクトルである。

【図11】結晶形ＶのＰＬＭ図である。

【図12】結晶形ＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図13】結晶形ＩのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図14】結晶形ＩのＤＶＳスペクトルである。

【図15】結晶形Ｉの吸湿後のＸＰＲＤスペクトルである。

【図16】結晶形ＩのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図17】結晶形ＩのＰＬＭ図である。

【図18】結晶形ＩＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図19】結晶形ＩＩの残留ＭＴＢＥのＨＮＭＲスペクトルである。

【図20】結晶形ＩＩのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図21】結晶形ＩＩのＰＬＭ図である。

【図22】結晶形ＩＶのＸＲＰＤ図である。

【図23】結晶形ＩＶのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図24】結晶形ＩＶの脱水前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図25】結晶形ＩＶのＰＬＭ図である。

【図26】結晶形ＶＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図27】結晶形ＶＩのＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図28】結晶形ＶＩＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図29】結晶形ＶＩＩの残留エチレングリコールのＨＮＭＲスペクトルである。

【図30】結晶形ＶＩＩのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図31】結晶形ＶＩＩＩのＸＲＰＤスペクトルである。

【図32】結晶形ＶＩＩＩのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図33】結晶形ＶＩＩＩ及び原料のＨＮＭＲスペクトルである。

【図34】結晶形ＶＩＩＩ及び乾燥前後の試料のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図35】結晶形ＩＸのＸＲＰＤスペクトルである。

【図36】結晶形ＩＸのＴＧＡ／ＤＳＣのオーバーレイである。

【図37】非晶質試料から得られた結晶形ＩＩＩのＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図38】非晶質試料から得られた結晶形ＩＩＩのＤＳＣ＆ＴＧＡのオーバーレイである。

【図39】結晶形ＩＩＩの異なる体積比の混合溶媒でスラリー化させたＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図40】２００ｍｇグレードの結晶形ＩＩＩのＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図41】２００ｍｇグレードの結晶形ＩＩＩのＰＬＭ図である。

【図42】結晶形ＩＩＩ（３ｇ）のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図43】結晶形ＩＩＩの水中で、室温でスラリー化させる前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図44】結晶形Ｉの水分活性実験結果図である。

【図45】結晶形Ｖの水分活性実験結果図である。

【図46】結晶形Ｉ、結晶形Ｖの競争スラリー化実験のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図47】結晶形ＩとＶの固体状態における安定性データ結果図である。

【図48】結晶形Ｉの安定性試験の試料のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図49】結晶形ＩＩＩの安定性試験の試料のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図50】結晶形Ｉの粉砕試験前後のＸＲＰＤオーバーレイである。

【図51】結晶形Ｉの圧力試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図52】結晶形ＩＩＩの粉砕試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図53】結晶形ＩＩＩの圧力試験前後のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図54】結晶形Ｉ、ＩＩＩ及びＶの溶解度データ図である。

【図55】結晶形Ｉの溶解度試験の残留固体のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図56】結晶形Ｖの溶解度試験の残留固体のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図57】結晶形ＩＩＩの溶解度試験の残留固体のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【図58】非晶質試料のＰＬＭ図である。

【図59】非晶質試料のＤＳＣ＆ＴＧＡのオーバーレイである。

【図60】結晶形ＩＸの^１ＨＮＭＲスペクトルである。

【図61】結晶形Ｖの安定性試験の試料のＸＲＰＤのオーバーレイである。

【発明を実施するための形態】

【0083】

以下、実施例の形態によってさらに本発明を説明するが、これによって本発明を前記実施例の範囲内に限定するわけではない。以下の実施例において、具体的な条件が記載されていない実験方法は、通常の方法及び条件、或いは商品の説明書に従って選ばれた。

【0084】

以下、具体的な実施例に基づいて本発明をさらに詳細に説明する。これらの実施例は、本発明の基本原理、主要な特徴及び利点を説明することを意図しており、本発明は以下の実施例によって限定されないことを理解されたい。実施例で使用される実施条件は、特定の要件に応じてさらに調整することができ、記載されていない実施条件は、通常、従来の実験における条件である。

【0085】

以下の実施例において、前記実験方法は、通常、従来の条件又は従来の試験条件に従って行われ、前記化合物は、有機合成又は市販の方法によって得ることができる。以下の実施例で用いた化合物は、市販の方法により得られ、純度は９９％に達する。

【0086】

本発明で使用される略語は、下記のように解釈される：
ＸＰＲＤ：粉末Ｘ線回折
ＴＧＡ：熱重量分析
ＤＳＣ：示差走査熱量分析
ＤＶＳ：動的水分吸脱着分析
ＰＬＭ：偏光顕微鏡分析

【0087】

そのテスト条件は次の通りである：
ＸＲＰＤ
固体は、粉末Ｘ線回折計（ブルックＤ８ ａｄｖａｎｃｅ又はＤ２ Ｐｈａｓｅ）を使用して特徴付けられる。
スキャン角度：３°（２θ）～４０°（２θ）。
ステップサイズ：０．０２°（２θ）。
スキャン速度：０．３秒／ステップ（Ｄ８）、０．２秒／ステップ（Ｄ２）。
光管電圧：４０ＫＶ（Ｄ８）、３０ＫＶ（Ｄ２）。
光管電流：４０ｍＡ（Ｄ８）、１０ｍＡ（Ｄ２）。
回転：オン。
サンプルパン：ゼロバックグラウンドサンプルパン。

【0088】

ＴＧＡ
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ熱重量分析Ｑ５００又はＤｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＧＡ ５５を用いて固体試料の熱重量分析を行う。サンプルパンを平衡化した後、試料を吊り下げワイヤーにぶら下がって、炉に持ち上げる。安定化後、試料を１０℃／分の速度で異なる終点温度に加熱する。

【0089】

ＤＳＣ
ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔの示差走査熱量計Ｑ２００及びＤｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ ２５０を用いて固体試料のＤＳＣ分析を行う。試料を計量し、数値を記録し、試料をサンプルチャンバーに置う。試料を１０℃／分の速度で２５℃から異なる終点温度に加熱する。

【0090】

ＤＶＳ
ＩＧＡｓｏｒｐ動的水吸着装置を用いて固体のＤＶＳ分析を行う。
温度：２５℃。
気流：２５０ｍＬ／分。
スキャンサイクル：２。
最小試験時間：３０分。
最大試験時間：２時間。
バランス待ち：９８％。

【0091】

ＰＬＭ
ニコンのＥｃｌｉｐｓｅ ＬＶ１００Ｎ ＰＯＬ型偏光顕微鏡を用いて試料を観察した。

【0092】

実施例１：式Ａで表される化合物の製造

【0093】

【化3】

【0094】

ステップ１ （Ｓ）－２－（（２－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）－７－クロロイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリン－４－ギ酸ｔｅｒｔ－ブチルの製造

【0095】

【化4】

【0096】

１００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｓ）－２－エチニルモルホリン－４－ギ酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．１ｇ、１．０ｅｑ、中間体１－４）、４－ブロモ－２，６－ジフルオロベンゼンホルムアルデヒド（２．７６ｇ、１．０ｅｑ、化合物１７２－１）、４－クロロピリジン－２－アミン（１．６１ｇ、１．０ｅｑ、化合物１７２－２）、ＣｕＣｌ（０．３７ｇ、０．３ｅｑ）、Ｃｕ（ＯＴｆ）_２（１．３６ｇ、０．３ｅｑ）、イソプロパノール（５０ｍＬ）を順次に加え、窒素ガスで３回置換し、８０℃の油浴で一晩加熱し、ＴＬＣで原料化合物１７２－２が消失したことを検出した。イソプロパノールをスピン乾燥し、ＥＡとアンモニア水で順次に抽出し、ＥＡ相を取り、飽和食塩水とクエン酸で順次に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、回転乾燥させ、カラムを通して中間体１７２－３のを得、白色固体であった（３．０ｇ、純度：７８％）。ＬＣ－ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４２．２。

【0097】

ステップ２ （Ｓ）－２－（（２－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）－７－クロロイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリンの製造

【0098】

【化5】

【0099】

中間体１７２－３（２．６７ｇ）をジクロロメタン（２４ｍＬ）に溶解させ、次いで塩酸ジオキサン（２４ｍＬ）を加え、室温で１．０時間攪拌し、ＬＣ－ＭＳで反応が完了したことを検出した。反応液をスピン乾燥させ、反応液に水（１５ｍＬ）とジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え、抽出後、水相を除去し、水相が弱アルカリ性（ｐＨ＝８～９）になるまで炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨを調節した。分離してジクロロメタン相を取り、水相をジクロロメタンで抽出した（１０ｍＬ×２）。ジクロロメタン相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、スピン乾燥させて中間体１７２－４を得、白色固体であった（１．７０ｇ、純度：８８．６％）。ＬＣ－ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４４２．１。

【0100】

ステップ３ （Ｓ）－２－（（２－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）－７－クロロイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリン－４－ギ酸メチルの製造

【0101】

【化6】

【0102】

中間体１７２－４（１．４ｇ、１．０ｅｑ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、トリエチルアミン（４８０ｍｇ、１．５ｅｑ）を加え、クロロ酢酸メチル（３８８ｍｇ、１．３ｅｑ）を滴下した。１．０時間の反応させた後、ＬＣ－ＭＳは生成物の形成を示した。反応後、水（１０ｍＬ）を加えて３０分間攪拌し、次に、分離してジクロロメタン相を取り、水相をジクロロメタンで抽出した（１０ｍＬ×２）。ジクロロメタン相を合わせ、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムでスピン乾燥させ、カラムを通して中間体１７２－５を得、白色固体であった（１．０１ｇ、純度：９３．０２％）。ＬＣ－ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４９９．８。

【0103】

ステップ４ （Ｓ）－２－（（２－（４－（ベンジルチオ）－２，６－ジフルオロフェニル）－７－クロロイミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリン－４－ギ酸メチルの製造

【0104】

【化7】

【0105】

中間体１７２－５（０．７３ｇ、１．０ｅｑ）をジオキサン（４ｍＬ）に溶解させ、ＢｎＳＨ（０．２４ｇ、１．３ｅｑ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（０．０４ｇ、０．０３ｅｑ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（０．０４ｇ、０．０５ｅｑ）、ＤＩＥＡ（０．６０ｇ、３．０ｅｑ）を加え、Ｎ_２で３回置換し、８０℃で一晩反応させた。ＬＣＭＳで原料が完全に消失したことをモニターした。反応液にジクロロメタン（１０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）を加え、分離してジクロロメタン相を取り、水相をジクロロメタンで抽出した（１０ｍＬ×２）。ジクロロメタン相を合わせ、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムでスピン乾燥させ、カラムを通して中間体１７２－６を得、白色固体であった（０．８２ｇ、純度：９１．５３％）。ＬＣ－ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４４．２。

【0106】

ステップ５ （Ｓ）－２－（（７－クロロ－２－（４－（クロロスルホニル）－２，６－ジフルオロフェニル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリン－４－ギ酸メチルの製造

【0107】

【化8】

【0108】

中間体１７２－６（５１０ｍｇ）を反応フラスコに加え、アセトニトリル（３ｍＬ）を加えて溶解させ、氷酢酸（２８１ｍｇ、５．０ｅｑ）を加え、氷浴下でＳＯ_２Ｃｌ_２（５０６ｍｇ、４．０ｅｑ）を滴下した。０℃で１時間反応させた。ＬＣＭＳは原料が消失し、中間体１７２－７が生成したことを示した。反応は処理せず、反応溶液をそのまま次のステップに使用した。

【0109】

ステップ６ （Ｓ）－２－（（７－クロロ－２－（２，６－ジフルオロ－４－スルファモイルフェニル）イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－３－イル）メチル）モルホリン－４－ギ酸メチルの製造

【0110】

【化9】

【0111】

０℃でアンモニア水（２ｍＬ）をアセトニトリル（１ｍＬ）で希釈して上記反応液に滴下し、室温で０．５時間反応させた。ＬＣＭＳは原料が完全に消失し、標的生成物が生成したことを示した。反応溶液を水及び酢酸エチルで２回抽出し、食塩水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで
乾燥させ、濃縮し、Ｃ１８カラム（水／アセトニトリル、ＲＲｔ＝２２．５分）で分離・精製した。非晶質状態の化合物Ａを得、白色固体であった。（１８５ｍｇ、純度：９９．７４％）。ＬＣ－ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５０１．１。

【0112】

^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ＝ ８．１１ （ｄ， Ｊ＝７．４， １Ｈ）， ７．２９ （ｄ， Ｊ＝１．６， １Ｈ）， ７．２２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１４ （ｄ， Ｊ＝６．６， ２Ｈ）， ６．６０ （ｄｄ， Ｊ＝７．４， ２．１， １Ｈ）， ３．３３ （ｄ， Ｊ＝１２．８， １Ｈ）， ３．１３ （ｄ， Ｊ＝１１．３， ２Ｈ）， ３．０７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９７ （ｄ， Ｊ＝７．８， １Ｈ）， ２．７７ － ２．６９ （ｍ， １Ｈ）， ２．６９ － ２．６１ （ｍ， １Ｈ）， ２．５３ （ｄｄ， Ｊ＝１５．５， ８．３， １Ｈ）．

【0113】

実施例２：原料の後処理
実施例１を参照して合計１１．１ｇの化合物Ａを製造し、２０ｍＬのアセトンを加え、６５℃（窒素ガスで保護）で２．０時間還流し、アセトンを直接にスピン乾燥させ、４０℃で１２時間真空乾燥させ、核磁気は約１％のアセトン残留物があることを示した。８０℃で再度１２時間真空乾燥させ、核磁気はまだアセトン残留物があることをを示した。５．３ｇを取り、再度８０℃で１２時間真空乾燥させ、核磁気はまだアセトン残留物があることをを示した。当該バッチの生成物をアセトニトリル（１６ｍＬ）に加え、８５℃（窒素ガスで保護）で２．０時間還流し、アセトニトリルを直接にスピン乾燥させ、さらに８０℃で１２時間真空乾燥させ、核磁気は溶媒の残留がなく、合格であることを示し、５．２ｇを入庫した。製品の純度は９９．２９％であり、白色の粉末状であった。

【0114】

ＰＬＭ図とＸＲＰＤの結果は、原料が１０～５０μｍの不規則な結晶であり、結晶化度が一般的であり、非晶質状態であることを示した。図３７に示されるように、ＤＳＣスペクトルは、原料が約１５０～１８０℃の間に２つの接続された吸熱ピークを有し、ピーク温度がそれぞれ６４℃±２℃及び１７３℃±２℃であり、図３８に示されるように、ＴＧＡスペクトルは、試料が２３０℃前に基本的に重量損失がないことを示した。

【0115】

実施例３：式Ａで表される化合物の非晶質の製造及び特徴付け
３．１化合物Ａを所定量のＴＨＦに溶解させ、減圧濃縮して乾燥させ、非晶質試料を得た。ＸＲＰＤ特性については、図３７を参照されたい。

【0116】

実施例４：式Ａで表される化合物の結晶形Ｉの製造及び特徴付け
４．１ ＥｔＯＨ、ＩＰＡ、ＮＢＡ、ＭＥＫ、ＡＣＮ、アセトン、ＥＡ、ＩＰＡｃ、Ｈｅｐｔの９種類の溶媒をそれぞれ選択し、室温で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は６０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形Ｉを得た。

【0117】

４．２ ＩＰＡ、ＮＢＡ、ＭＥＫ、アセトン、Ｔｏｌ、ＥＡの６種類の溶媒をそれぞれ選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は１００ｍｇ／ｍＬであり、結晶形Ｉを得た。

【0118】

４．３ ＩＰＡｃを溶媒として選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は５０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形Ｉを得た。

【0119】

４．４ メタノールとエタノール中でゆっくりと結晶を冷却させ、冷却温度は５０℃からＲＴまでであり、いずれも結晶形Ｉを得ることができた。

【0120】

４．５ テトラヒドロフランを良溶媒として試料を溶解させ、特定の濃度の試料溶液を形成し、Ｔｏｌ、Ｈｅｐｔ、水をそれぞれ貧溶媒として試料溶液にゆっくりと滴下し、体積比は過飽和度を高めるためにすべて１：１０にし、それによって固体を析出させ、結晶形Ｉを得た。

【0121】

４．６ ＥｔＯＨを溶媒として選択し、揮発性結晶化試験を行い、結晶形Ｉを得た。

【0122】

結晶形Ｉの２θ角で表されるＸＲＰＤは図１２に示された通りである。前記結晶形ＩのＤＳＣスペクトルにおいて、１５２℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは４４±２Ｊ／ｇであった。前記結晶形ＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～２３０℃の温度区間に重量損失はなかった。そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図１３に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品が無水結晶であることが分かった。前記結晶形ＩのＤＶＳスペクトルは図１４に示された通りであり、相対湿度が４０％を超えると、結晶形Ｉの重量が急激に増加した。相対湿度が４０％に下がると、吸収された水分がすべて放出された。前記結晶形Ｉの吸湿後のＸＲＰＤスペクトルにおいて、結晶形Ｉは高湿度環境下で吸湿して結晶転移をし、水和物結晶形ＩＶに転換し、これを３０℃の真空乾燥箱に入れて乾燥させた後、再び初期結晶形Ｉに転換し、その吸湿後のＸＲＰＤスペクトルは、図１５に示された通りである。ＤＶＳ試験結果（図１４）と合わせて、環境相対湿度が４０％を超えると、結晶形Ｉが急速に吸湿して水和物に転換し、相対湿度が５０％未満では、吸着した水が急速に脱離して結晶形Ｉに転換することが分かった。即ち、結晶形ＩとＩＶとの間の相互転移は可逆的であった。前記結晶形Ｉは吸湿性（６．８％、８０％ＲＨ）を示し、前記結晶形ＩのＤＶＳ試験後も変化せず、そのＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤスペクトルは、図１６に示された通りである。前記結晶形ＩのＰＬＭ図において、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭは、図１７に示された通りである。

【0123】

実施例５：式Ａで表される化合物の結晶形ＩＩの製造及び特徴付け
５．１ ＭＴＢＥにおいて、室温で懸濁してスラリー化させ、結晶形ＩＩを得た。

【0124】

５．２ ＭＴＢＥを溶媒として選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は１００ｍｇ／ｍＬであり、結晶形ＩＩを得た。

【0125】

５．３ テトラヒドロフランを良溶媒として試料を溶解させ、特定の濃度の試料溶液を形成し、ＭＴＢＥを貧溶媒として試料溶液にゆっくりと滴下し、体積比は過飽和度を高めるために１：１０にし、それによって固体を析出させ、結晶形ＩＩを得た。

【0126】

結晶形ＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルは図１８に示された通りである。前記結晶形ＩＩの核磁気共鳴水素スペクトルにおいて、化学シフトは１．１０及び３．０８でＭＴＢＥの溶媒残留シグナルを有し、そのモル比は０．３９であり、ＨＮＭＲスペクトルは図１９に示された通りである。前記結晶形ＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、１００～１６０℃の温度区間で３．５％の重量損失があり、１６０～２００℃の温度区間で２．９％の重量損失があった。前記結晶形ＩＩのＤＳＣスペクトルには、隣接する２つの吸熱ピークがあり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図２０に示された通りである。図１９に示される残留ＭＴＢＥ水素スペクトルは約６．０％に相当し、当該製品がＭＴＢＥ溶媒和物であることが分かった。前記結晶形ＩＩのＰＬＭにおいて、結晶形は約２μｍの不規則な結晶であり、その偏光顕微鏡図は、図２１に示された通りである。

【0127】

実施例６：式Ａで表される化合物の結晶形ＩＩＩの製造及び特徴付け
６．１ 水を溶媒として選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は５０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形ＩＩＩを得た。

【0128】

６．２ 非晶質試料を４０℃の水に懸濁してスラリー化させ、結晶形ＩＩＩを得、具体的には、試料をメタノールに溶解させ、ろ過して試料溶液を得、スピン蒸発して２５０ｍｇの非晶質試料を得た。水で２０時間懸濁してスラリー化させた後、結晶形ＩＩＩを得た。ＸＲＰＤ、ＤＳＣ、ＴＧＡ特性評価試験により、純粋な結晶形ＩＩＩの製造に成功したことを確認し、その後のスケールアップ実験の種結晶とした。

【0129】

６．３ 溶媒－貧溶媒により結晶を沈殿させ、種結晶を加えて核形成を誘導する方法で結晶形ＩＩＩを製造した。具体的には、予め試料を表１に示される特定比率の混合溶媒に溶解させ、ろ過して飽和溶液を得、結晶形ＩＩＩを種結晶として上記飽和溶液に加え、その後、水を貧溶媒としてゆっくりと加えて固体を析出させ、結晶化を誘導した。ろ過により得られた固体試料に対してＸＲＰＤ試験を実行した。実験結果は表１に示されるように、結晶形ＩＩＩは上記系で不安定であり、溶媒和物又は不安定な水和物に変化した。溶解度と溶媒残留限界の観点から、ＤＭＳＯを第３種溶媒とし、溶解度は１００ｍｇ／ｍＬよりも高いため、ＤＭＳＯを選択して次の研究を行った。

【0130】

表１ 溶媒－貧溶媒沈殿結晶化実験結果

【表1】

【0131】

６．４ 上記６．３の実験結果から明らかなように、良溶媒の試料溶液に貧溶媒を加える結晶化方式では標的結晶形ＩＩＩを得ることが困難であるため、有機溶媒に溶解した試料を種結晶が分散した水溶液に滴下して化合物Ａを結晶化して製造する方法で標的結晶形を製造することを考えた。具体的な方法は、まず試料をＤＭＳＯに溶解させ、ろ過してＤＭＳＯ溶液を得、次いで種結晶が分散した水溶液にゆっくりと滴下した。析出した固体は、種結晶に誘導されて標的結晶形ＩＩＩに転移した。表２及び図１に示されるように、結晶形ＩＩＩが当該系に安定に存在することを保証するために、異なる比率のＤＭＳＯ／水混合溶媒系における結晶形ＩＩＩの安定性をそれぞれ検討して、適切な溶媒／貧溶媒の比率を確認した。実験結果は、室温で結晶形ＩＩＩは、含水率が６０％（体積パーセント）を超えるＤＭＳＯ／水混合溶媒において、結晶転移が発生せずに安定に存在できることを示した。また、含水率が６０％未満であると、結晶形ＩＩＩはＤＭＳＯの溶媒和物（結晶形ＩＸ）に転移した。

【0132】

表２ 異なる体積比の混合溶媒における結晶形ＩＩＩの安定性結果

【表2】

【0133】

目的生成物の収率の観点から、混合溶媒の比率を確定するために上記の比率における結晶形ＩＩＩの理論収率をそれぞれ計算した。表３に示されるように、ＤＭＳＯ／水１：２、１：３、１：４の場合、これら３つの比率の溶媒における結晶形ＩＩＩの溶解度がいずれも比較的小さいため、理論収率に大きな差はなく、収率はすべて９９％以上であった。

【0134】

表３ 異なる比率のＤＭＳＯ／水混合溶媒における結晶形ＩＩＩの理論収率

【表3】

【0135】

６．５ 結晶形ＩＩＩ（２００ｍｇ）の増幅
室温で、試料をＤＭＳＯに溶解させ、ろ過してＤＭＳＯ溶液を得、結晶形ＩＩＩの種結晶を分散させた水に２５μＬ／分の速度でゆっくりと滴下し、ＤＭＳＯ溶液の滴下量が増加するにつれて、固体の析出が徐々に増加した（ＤＭＳＯ／水１：２、体積比）。ＸＲＰＤで確認したところ（図２）、析出したばかりの固体試料はほぼ非晶質であり、反応時間の延長及び種結晶の誘導に伴い、室温で１６時間磁力攪拌した後、全て結晶形ＩＩＩに転移した。実験により、反応終了後、攪拌を停止して、固体はすぐに底に沈降し、上層の液体はほぼ透明であることが観察された。ＰＬＭ（図６）で観察して、得られた結晶形ＩＩＩ試料自体は約２μｍの結晶であるが、２０～５０μｍの大きな粒子で凝集しやすいため、攪拌を停止すると、凝集により固体が沈降することが分かった。従って、当該結晶形はろ過が容易であった。以上より、貧溶媒を使用して沈殿させて結晶化する方法により２００ｍｇの結晶形ＩＩＩ試料を成功に製造し、収率は９３．０％であり、^１ＨＮＭＲは残留ＤＭＳＯが０．１％ｗｔであることを示し、溶媒残留限界（＜０．５％ｗｔ）に適合した。

【0136】

６．６グラムスケール結晶形ＩＩＩのスケールアップ製造
ＤＭＳＯの体積を低下させ、反応温度を上げ、結晶転移終了後に室温に低下させ、適切にスラリー化実験を延長することは、溶媒残留を低下させ、収率を高めるのに有利である。以上の考察から、３ｇの結晶形ＩＩＩをスケールアップして製造する場合、４０℃で１：４のＤＭＳＯ／水の系を採用し、種結晶の添加量は２％ｗｔであり、ＤＭＳＯ（５Ｖ）溶液の滴下速度を２５μＬ／分に制御した。生産スケールアップをシミュレートするために、アンカーパドルを採用し、回転速度は１５０ｒｐｍであった。反応系を４０℃で２２時間懸濁してスラリー化させ、ＸＲＰＤの結果は固体が結晶形ＩＩＩに転移したことを示した。収率をさらに高めるために、反応温度を室温まで下げ、室温で懸濁してスラリー化し続け、２２時間後にろ過して固体試料を得、水にスラリー化させてＤＭＳＯ溶媒の残留を除去した。図４２に示されるように、３ｇの結晶形ＩＩＩのスケールアップ製造に成功し、収率は９６．７％であった。図４３に示されるように、０．７％のＤＭＳＯ溶媒の残留は、室温で水中でスラリー化させることによって除去でき、結晶形は変化しなかった。

【0137】

化合物の製造、溶媒使用量、溶媒残留及び製品の収率等を考慮し、最終結晶形ＩＩＩの結晶化工程温度は４０℃であり、反応系は１：４のＤＭＳＯ／水であり、溶媒体積は２５Ｖであった。以上より、結晶形ＩＩＩはグラムスケールのスケールアップ製造を行うことができ、収率は９７％に達した。

【0138】

結晶形ＩＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは図１に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～１００℃の区間における重量減少勾配は１．５％であり、前記「％」は重量百分率である。前記結晶形ＩＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、最初の吸熱ピークは０．４の水の除去であり、２番目の吸熱ピークは試料の脱水後の溶融吸熱ピークに起因し、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図２に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩは脱水後、周囲湿度下で速やかに吸湿して再び結晶形ＩＩＩになり、加熱して脱水する前後のＸＲＰＤスペクトルは、図３に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩのＤＶＳスペクトルは、試料がある程度の吸湿性を有し、広い湿度範囲で水分含有量がほとんど変化しないことを示し、そのＤＶＳスペクトルは、図４に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルにおいて、ＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤに大きな変化はなく、そのＸＰＲＤスペクトルは、図５に示された通りである。前記結晶形ＩＩＩのＰＬＭにおいて、結晶形は約２μｍの不規則な結晶であり、凝集は２０～５０μｍであり、そのＰＬＭ図は、図６に示された通りである。

【0139】

実施例７：式Ａで表される化合物の結晶形ＩＶの製造及び特徴付け
７．１ 結晶形Ｉ製品を高湿条件下で吸湿させて、結晶形ＩＶを得た。

【0140】

７．２ 結晶形Ｉ製品スラリーを５０～９５％の水／アセトン（Ｖ／Ｖ）でスラリー化させて、結晶形ＩＶを得た。

【0141】

ＩＶの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは基本的に図２２に示された通りである。前記結晶形ＩＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～６０℃の温度区間で１．２％の重量損失がある。前記結晶形ＩＶのＤＳＣスペクトルにおいて、２つの吸熱ピークピークがあり、最初の広い吸熱ピークは脱水によるものと推定され、後の吸熱ピークは溶融ピークであり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図２３に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品は水分子が約０．３４の水和物結晶形であることが分かった。前記結晶形ＩＶは高湿度環境下でのみ安定であり、脱水後、周囲湿度下で速やかに吸湿して再び結晶形Ｉになり、加熱して脱水する前後のＸＲＰＤスペクトルは、図２４に示された通りである。前記結晶形ＩＶのＰＬＭにおいて、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭ図は、図２５に示された通りである。

【0142】

実施例８：式Ａで表される化合物の結晶形Ｖの製造及び特徴付け
８．１ 水を溶媒として選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は５０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形Ｖを得た。

【0143】

８．２ ＡＣＮを溶媒として選択し、５０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は３．０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形Ｖを得た。

【0144】

８．３ ＭｅＯＨを溶媒として選択し、揮発性結晶化試験を行い、結晶形Ｖを得た。

【0145】

結晶形Ｖの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは図７に示された通りである。前記結晶形ＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～２３０℃の温度区間に重量損失はない。前記結晶形ＶのＤＳＣスペクトルにおいて、１６６℃±２℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは７０±２Ｊ／ｇであり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図８に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品が無水結晶であることが分かった。前記結晶形ＶのＤＶＳスペクトルは、試料がある程度の吸湿性（０．７％、８０％ＲＨ）を有していることを示し、そのＤＶＳスペクトルは、図９に示された通りである。前記結晶形ＶのＤＶＳ試験前後のＸＰＲＤスペクトルにおいて、ＤＶＳ試験前後のＸＲＰＤに大きな変化はなく、そのＸＰＲＤスペクトルは、図１０に示された通りである。前記結晶形ＶのＰＬＭにおいて、結晶形は約５μｍの不規則な結晶であり、そのＰＬＭ図は、図１１に示された通りである。

【0146】

実施例９：式Ａで表される化合物の結晶形ＶＩの製造及び特徴付け
９．１ 結晶形ＶＩは、６０℃で含水率１０％（体積比）の水／アセトン混合溶媒中で結晶形Ｉ又は結晶形Ｖを６０℃でスラリー化させて得られた。

【0147】

結晶形ＶＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルは図２６に示された通りである。前記結晶形ＶＩのＸＲＰＤスペクトルのオーバーレイにおいて、当該結晶形試料は、周囲湿度（３５％ＲＨ）下に数分間置かれた後、結晶形Ｉに転移した。そのＸＲＰＤスペクトルオーバーレイは図２７に示された通りである。これは、結晶形ＶＩが非常に不安定な水和物である可能性があることを示唆している。

【0148】

実施例１０：式Ａで表される化合物の結晶形ＶＩＩの製造及び特徴付け
１０．１ エチレングリコールを溶媒として選択し、９０℃で懸濁してスラリー化させ、スラリー化の濃度は３２０ｍｇ／ｍＬであり、結晶形ＶＩＩを得た。

【0149】

１０．２ エチレングリコール中でゆっくりと結晶を冷却させ、冷却温度は５０℃からＲＴまでであり、結晶形ＶＩＩを得た。

【0150】

結晶形ＶＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤは基本的に図２８に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて化学シフトδは３．３９及び４．４４でエチレングリコール溶媒の残留を示し、その^１ＨＮＭＲスペクトルは、図２９に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１２０℃の区間で２５．７％の重量損失がある。前記結晶形ＶＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、２つの広い吸熱ピークがあり、最初の吸熱ピークは脱溶媒によるものと推定され、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図３０に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせると、当該製品がは２．７９分子のエチレングリコールを含む溶媒和物であることが分かった。実施例１１：式Ａで表される化合物の結晶形ＶＩＩＩの製造及び特徴付け

【0151】

実施例１１：式Ａで表される化合物の結晶形ＶＩＩＩの製造及び特徴付け
１１．１ 結晶形ＩＩＩを種結晶とし、４０℃で飽和５０％ＴＨＦ／水溶液に水を滴下して貧溶媒として、油状になり、室温まで温度を下げた後、スラリー化を続けて結晶形ＶＩＩＩ（ウェットケーキ）を得た。

【0152】

結晶形ＶＩＩＩの２θ角で表されるＸＲＰＤスペクトルは基本的に図３１に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１６０℃の温度区間で５．７％の重量損失がある。前記結晶形ＶＩＩＩのＤＳＣスペクトルにおいて、吸熱ピークが１つしかなく、試料の脱溶媒後の溶融ピークである。従って、結晶形ＶＩＩＩは溶媒和物であり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図３２に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフトδは１．７６及び３．６０でＴＨＦ溶媒の残留を示し、その^１ＨＮＭＲスペクトルは、図３３に示された通りである。前記結晶形ＶＩＩＩは、０．４２分子のＴＨＦを含有した。前記結晶形ＶＩＩＩは不安定であり、脱水（４０℃で３時間の真空乾燥させる）後結晶転移をし、結晶形Ｉに転移し、その加熱前後のＸＲＰＤスペクトルは、図３４に示された通りである。

【0153】

実施例１２：式Ａで表される化合物の結晶形ＩＸの製造及び特徴付け
１２．１ 結晶形ＩＸは、４０℃の５０％ＤＭＳＯ／水飽和溶液中で結晶形ＩＩＩをスラリー化させて製造された。

【0154】

前記結晶形ＩＸのＴＧＡスペクトルにおいて、ｒｔ～１６０℃の温度区間で１８．２３％の重量損失があり、前記結晶形ＩＸのＤＳＣスペクトルにおいて、ＤＳＣスペクトルにはＴＧＡ重量損失に対応する吸熱ピークがあり、そのＴＧＡ及びＤＳＣスペクトルは、図３６に示された通りである。前記結晶形ＩＸの^１ＨＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフトδは２．６８でＤＭＳＯ溶媒の残留を示し、その残留ＤＭＳＯの^１ＨＮＭＲスペクトルは、図６０に示された通りである。ＤＳＣ及びＴＧＡスペクトルを組み合わせて、当該製品がＤＭＳＯ溶媒和物であることが分かった。ＤＳＣ及びＴＧＡペクトルを組み合わせて、当該製品がＤＭＳＯ溶媒和物であることが分かった。

【0155】

実施例１３：結晶形の相互転移に関する研究
スクリーニング実験により、２種類の無水晶形（結晶形Ｉ、結晶形Ｖ）、４種類の溶媒和物（結晶形ＩＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＩＸ、結晶形ＶＩＩＩ）、及び３種類の水和物（結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形ＶＩ）を含む９種類の異なる結晶形を得た。

【0156】

１３．１ 結晶形Ｉと結晶形ＩＶとの間の転移
結晶形Ｉは、異なる結晶化方法を繰り返して得ることができるが、結晶形Ｉは吸湿性形態を示し、相対湿度が４０％ＲＨを超えると吸湿して水和物結晶形ＩＶに転移した。従って、結晶形ＩはＡＰＩの生産とスケールアップにおいて結晶転移するリスクがある。

【0157】

１３．２ 他の水和物結晶形と結晶形Ｉとの間の転移
結晶形ＩＩＩを除いて、残りの水和物は不安定であり、脱水後に結晶形Ｉに転移した。
結晶形ＩＩＩ（半水和物）は、結晶転移のリスクが低い。
結晶形ＩＶ（水和物）は、脱水後に結晶形Ｉに転移した。
結晶形ＶＩ（水和物）は非常に不安定であり、周囲湿度で急速に結晶形Ｉに転移した。

【0158】

１３．３ 無水結晶と水和物との間の転移研究
水分活性実験を実行した。結晶形ＩとＶ（いずれも無水結晶形）をそれぞれ室温及び６０℃で異なる含水率のアセトン／水混合溶媒で３日間スラリー化させ、３日後にろ過して固体試料を得、ＸＲＰＤを試験し、実験結果は表４に示された通りである。図４４及び図４５に示されるように、室温及び高温のいずれにおいても、結晶形Ｉ及びＶは、含水率５０～９０％のアセトン／水系において水和物結晶形ＩＶに転移した。含水率が１０％の場合、高温で結晶形Ｉ又はＶのいずれも、別の水和物（結晶形ＶＩ）に転移した。研究により、当該水和物は、周囲湿度（３５％ＲＨ）で非常に不安定であり、数分間置かれた後、結晶形Ｉに転移したことが分かった。室温で、結晶形Ｖは当該溶媒系中で結晶形Ｉに転移した。

【0159】

表４ 結晶形Ｉ及び結晶形Ｖの水分活性の実験結果

【表4】

【0160】

１３．４ 無水結晶形間の競合スラリー化実験
競合スラリー化実験を実行した：等量の結晶形ＩとＶを秤量して均一に混合した後、ＸＲＰＤを試験してその結果を競合スラリー化実験のＴ_０とした。混合物をそれぞれアセトン、エタノール、水でスラリー化させ、反応温度は室温及び６０℃であった。３日後、ろ過により固体試料を得、ＸＲＰＤを試験した。図４６に示されるように、有機溶媒系（アセトン又はエタノール）において、室温又は高温で得られたものは、いずれも結晶形Ｉであり、結晶形ＩとＶを水中で競合スラリー化させ、室温では溶解度が低いため、結晶転移をせず、両者の結晶形の混晶のままであったが、６０℃では結晶形Ｖに転移した。水分活性度実験の結果と組み合わせると、結晶形Ｉは有機溶媒系又は含水率の低い（≦１０％）混合溶媒中でより安定であり、結晶形Ｖは高温（６０℃）の水で安定であると推測できる。

【0161】

１３．５ 無水結晶形の間の転移
等量の結晶形Ｉと結晶形Ｖを軽く粉砕して均一に混合した後、混合物をそれぞれ６０℃オーブンと室温乾燥機（結晶形Ｉが吸湿して結晶転移することを避ける）に置き、１週間後にＸＲＰＤを試験して結晶形の相互転移の有無を研究した。図４７に示されるように、上記条件で１週間放置した後、結晶形Ｉと結晶形Ｖは互いに転移する傾向がなく、結晶形ＩとＶはいずれも固体状態で安定していることを示している。

【0162】

実施例１４：結晶形安定性の研究
結晶形Ｉ、ＩＩＩ及びＶは、他の結晶形と比較して良好な固体特性を示したため、それらの安定性試験をそれぞれ実行した。

【0163】

１４．１ 物理的及び化学的安定性研究
結晶形Ｉ、ＩＩＩ及びＶの約１０ｍｇをそれぞれ４０℃／７５％ＲＨ（オープン）及び６０℃（蓋付け）の安定性チャンバーに７日間入れ、それぞれ０日及び７日に試料の一部を取り出してＸＲＰＤ及びＨＰＬＣを試験し、それぞれ物理的及び化学的安定性を調査した。結果は表５、図４８、図４９及び６１に示されるように、上記試験条件で７日後の結晶形ＩＩＩ及び結晶形Ｖは変化せず、同時に化学純度が著しく低下しなかった。これは、結晶形ＩＩＩ及び結晶形Ｖの物理的及び化学的安定性が良好であることを示している。結晶形Ｉについては、４０℃／７５％ＲＨ（オープン）条件で吸湿して結晶転移をして、水和物結晶形ＩＶに転移した。この結果はＤＶＳ結果と一致した。６０℃で１週間放置した後、結晶形ＩのＸＲＰＤスペクトルは２２～２８°（２θ）で変化があることを示し、ＴＧＡの結果は室温から６０℃までの区間で１．５％の重量損失があることを示し、吸水による回折ピークの変化であると推測される。しかし、結晶形Ｉは化学的安定性は良好であった。

【0164】

表５ 安定性評価結果

【表5】

【0165】

１４．２ 機械的安定性試験
粉砕と打錠により、結晶形ＩとＩＩＩの機械的安定性をそれぞれ検討した。粉砕試験方法：被検試料を乳鉢でそれぞれ２分間、５分間粉砕した後でＸＲＰＤを試験し、結晶形と結晶化度の変化を観察した。圧力試験方法：試料を打錠機の金型に入れ、４０ＭＰａで１分間保持した後、取り出してＸＲＰＤ試験を実行した。

【0166】

結晶形Ｉ、結晶形ＩＩＩの粉砕（２分間及び５分間）及び打錠（４０ＭＰａ、１分間）後の安定性の結果は図５０及び図５１に示された通りであり、粉砕後の結晶形Ｉの結晶化度は著しく低下したが、結晶形は変化しなかった。結晶形ＩＩＩの場合、粉砕後の結晶形や結晶化度に有意な変化は見られなかったが（図５２）、打錠後の結晶化度の低下は有意であった（図５３）。

【0167】

実施例１５：溶解度に関する研究
結晶形Ｉ、ＩＩＩ及びＶは、他の結晶形と比較して良好な固体特性を示したため、それらに対して溶解度試験をそれぞれ行った。結晶形Ｉ、ＩＩＩ及びＶの、それぞれＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、ＦｅＳＳＩＦにおける溶解度試験温度は人体の体温３７℃をシミュレーションし、試験時間２４時間であった。

【0168】

１０ｍｇの試料を秤量し、次に２．０ｍＬの生物学的媒介緩衝液（即ち、目標濃度は５ｍｇ／ｍＬである）を加えて懸濁液を形成した。恒温水浴シェーカー（３７℃、１００ｒｐｍ）に入れ、０．５、２、及び２４時間でそれぞれ５００ｍＬをサンプリングした。ろ過後、濾液のｐＨ値及びＨＰＬＣ濃度をそれぞれ試験し、同時にろ過により得られた固体試料に対してＸＲＰＤ試験を実行した。

【0169】

ＳＧＦ、ＦａＳＳＩＦ、及びＦｅＳＳＩＦの生物学的媒介における結晶形Ｉ、ＩＩＩ、及びＶの溶解度試験の結果は表６及び図５４に示された通りである。上記の３つの結晶形は、異なる生物学的媒介における溶解度に大きな差はなく、ＳＧＦにおける溶解度はいずれも５ｍｇ／ｍＬを超えている。ＦｅＳＳＩＦにおける溶解度はＦａＳＳＩＦの約３倍であり、食品が薬物の吸収に有利である可能性があることを示している。試験中、生物学的媒介緩衝液のｐＨ値に有意な変化はなかった。

【0170】

図５５に示されるように、結晶形ＩはＦａＳＳＩＦとＦｅＳＳＩＦ緩衝液中で０．５時間置いた場合に水和物結晶形ＩＶに転移した。しかし、結晶形ＩＩＩ及びＶは試験中に結晶形が変化しなく、結果は図５６及び図５７に示された通りである。

【0171】

表６ 溶解度試験結果

【表6】

【0172】

実験例１６：薬物動態研究
ビーグル犬（普通級、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）に化合物Ａを経口胃内で１回投与し、血漿中の化合物の薬物動態を研究した。被験薬物（投与量：１００ｍｇ／ｋｇ、投与体積：５ｍＬ／ｋｇ）を胃内投与し、投与後１０分、３０分、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、２４時間及び４８時間の試料を採取し、末梢静脈穿刺を実行し、各時点で各動物から約～１．０ｍＬの全血を採取して、Ｋ_２ＥＤＴＡ採血管に血液試料を収集し、数回転倒してよく混合し、室温に置いた。そして、採血後６０分以内に全血０．２ｍＬを凍結保存用チューブで分取し、脱イオン水を１：１で加え、上下転倒させてよく混ぜてから凍結保存した。残りの試料を２～８℃で、２０００ｇで１０分間遠心分離して、血漿試料を得、各試料の溶血を記録し、検出への影響を評価し、血漿の色を観察し、採血表に記録した。（「－」は溶血なし、「＋」はピンク色の上清、「＋＋」は赤色の上清を表す）。

【0173】

血漿試料中の化合物Ａの濃度は、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法（Ｎｏｎ－ＧＬＰ）によって測定された。薬物動態パラメーターの計算は、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ＰｈｏｅｎｉｘＴＭ、バージョン８．１）又は他の類似のソフトウェアを使用して実行された。血漿薬物濃度－時間データが利用可能な場合、下記の薬物動態パラメーターが計算された：ＣＬ（クリアランス）、Ｖｓｓ（定常状態における分布容積）、Ｔ１／２（消失半減期）、Ｃｍａｘ（ピーク濃度）、Ｔｍａｘ（ピーク時間）、ＡＵＣ（血中薬物濃度－時間曲線下面積）、ＭＲＴ（平均滞留時間）。薬物動態データは、平均値、標準偏差、サンプルサイズなどの記述的統計学によって記述された。計算はＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ ２００７又は２０１０で実行された。

【0174】

１６．１ 結晶形Ｉと結晶形ＶのＰＫ特性の比較
結晶形Ｉと結晶形Ｖの比較では、同じ３匹のイヌ（オス）に、１０ｍｇ／ｋｇでｐｏ、絶食、０．５％ＣＭＣ－Ｎａ、３時間撹拌した後で投与（懸濁液）され、得られたデータは表７に示された通りである。

【0175】

表７ 結晶形Ｉ及び結晶形ＶのＰＫ比較

【表7】

【0176】

ＡＵＣ（結晶形Ｉ）：ＡＵＣ（結晶形Ｖ）＝３００．５３％を計算した結果、結晶形Ｖの暴露レベル及び絶対バイオアベイラビリティは結晶形Ｉより小さいことが分かった。

【0177】

１６．２ 結晶形ＩＩＩの薬物動態研究
結晶形ＩＩＩの経口投与における性別の差異＆禁食かどうかの差を対比し、１００ｍｇ／ｋｇ、ｐｏ、絶食＆非絶食、０．５％ＣＭＣ－Ｎａで８時間攪拌した後で投与し、懸濁し、得られたデータは表８に示された通りである。

【0178】

表８ 結晶形ＩＩＩの薬物動態データ

【表8】

【0179】

結果：絶食条件下では、オスメス犬の血漿及び全血の薬物濃度に所定の差があり、血漿中のオスはメスより約６倍高く、全血中のオスはメスより１．９倍高かったが、非絶食条件下では、オスメス犬の血漿及び全血の薬物濃度にはいずれも有意差がなく、絶食条件下では、オスメス犬における薬物の赤血球分布に差があったが（オスメス血液：血漿＝１４５２％Ｖｓ５２１％）、非絶食条件下では、オスメス犬における薬物の赤血球分布のいずれにも有意差はなく（オスメス血液：血漿＝１１４％Ｖｓ１１６％）、オスメスにかかわらず、非絶食条件下では、血漿及び全血の薬物濃度はいずれも絶食条件下よりも高く、非絶食条件下では、血漿の薬物濃度の上昇レベルは全血より高く、メス犬の血漿の薬物濃度は絶食の有無によって最も影響を受けた。全血の薬物濃度の上昇は非絶食条件下で薬物吸収の増加による体内全体の暴露レベルの上昇による可能性があり、飲食は化合物Ａの吸収に役立つと推測できるが、血漿の薬物濃度の上昇レベルが全血より高い理由は：１、赤血球中の薬物濃度が飽和し、同様に血漿の薬物濃度が急激に増加した（可能性が最も高いと推定できる）、２、１日目の絶食投与後の薬物は赤血球中に蓄積し続け、７日間の洗浄期間は赤血球中に分布している薬物の代謝を完全にするのに十分ではないため、２回目の非絶食投与時に血漿の薬物濃度が有意に上昇した、３、１日目の絶食投与後、赤血球に影響を与え、２回目の非絶食投与時に赤血球と薬物が結合する能力を低下させ、血漿の薬物濃度の有意な上昇を招いた。

【0180】

生物学的試験
実施例Ａ インビトロ生物活性評価
本発明の化合物のアンタゴニスト特性は、ＦＬＩＰＲ（蛍光イメージングプレートリーダー）によって測定され、前記化合物は、ＨＥＫ２９３細胞（ヒト腎臓上皮細胞株、ＡＴＣＣ）において発現されるｈＰ２Ｘ３（ヒトプリンＰ２Ｘ受容体サブタイプ３、登録番号：ＮＭ＿００２５５９．４）の活性化によって誘導された細胞内カルシウム上昇の阻害剤である。

【0181】

ｈＰ２Ｘ３を安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞を、３７℃、湿度５％の細胞インキュベーターに入れ、１０％のＦＢＳ（ウシ胎児血清、Ｇｉｂｃｏ、１００９９－１４１）、１％のペニシリン－ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ、１５１４０－１２２）、及び１ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１０１３１０２７）を含むＤＭＥＭ高グルコース培地で培養した。ＦＬＩＰＲ実験の１８～２４時間前に、細胞を４００，０００細胞／ｍＬの密度で３８４ウェルに播種し（１０，０００細胞／ウェル）、細胞インキュベーターで一晩培養した。実験当日、培地を廃棄し、細胞をＦＬＩＰＲ緩衝液（３０ｍＬの緩衝液当たり０．３ｍＬのプロベネシドが含まれる（Ｔｈｅｒｍｏ、Ｐ３６４００）、０．６ｍＬの１Ｍ ＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１５６３００８０）及び２９．１ｍＬのＨＢＳＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１４０６５０５６）で洗浄した。２０μＬの０．５×カルシウム６蛍光染料（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｅｖｉｃｅｓ、Ｒ８１９０）を各ウェルに添加し、染料ローディングを３７℃で１．５時間培養した。次いで、１０μＬの試験化合物（１０ｍＭの濃度でＤＭＳＯに溶解させ、緩衝液で段階希釈）又は溶媒を各ウェルに加え、室温で３０分間平衡化させた。次いで、細胞プレートをＦＬＩＰＲに入れ、ベースライン蛍光測定（励起波長：４８５ｎｍ、発光波長：５２５～５３５ｎｍ）を実行した。その後、アゴニスト（最終濃度は２．５μＭであるＢＺ－ＡＴＰ（Ｓｉｇｍａ、Ｂ６３９６））又は溶媒（超純水）を１０μＬ／ウェルで添加し、１秒間隔で２分間蛍光値を測定し、最後に出力蛍光をカウントして分析した。

【0182】

上記の方法を用いて得られたＩＣ_５０は下記の表に示された通りである。

【0183】

表９ 上記の方法を用いたＩＣ_５０データ

【表9】

【0184】

陽性化合物１：

【化10】

【0185】

陽性化合物２：

【化11】

【0186】

実施例Ｂ インビトロＰ２Ｘ２／３受容体選択性評価
本発明におけるＰ２Ｘ２／３受容体に対する化合物の選択性は、ＦＬＩＰＲ（蛍光イメージングプレートリーダー）によって測定され、前記化合物は、ＨＥＫ２９３細胞（ヒト腎臓上皮細胞株、ＡＴＣＣ）において発現されるｈＰ２Ｘ２／３（ヒトプリン作動性Ｐ_２Ｘ受容体サブタイプ２及びサブタイプ３により形成されるヘテロ二量体受容体、Ｐ２Ｘ２の登録番号：ＮＭ＿００２５５９．４、Ｐ２Ｘ３の登録番号：ＮＭ＿００２５５９．４）の活性化によって誘導された細胞内カルシウムの増加の阻害剤であった。

【0187】

ｈＰ２Ｘ２／３を安定的に発現するＨＥＫ２９３細胞を、３７℃、湿度５％の細胞インキュベーターに入れ、１０％のＦＢＳ（ウシ胎児血清、Ｇｉｂｃｏ、１００９９－１４１）、１％のペニシリン－ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ、１５１４０－１２２）、及び１ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１０１３１０２７）を含むＤＭＥＭ高グルコース培地で培養した。ＦＬＩＰＲ実験の１８～２４時間前に、細胞を２５００００細胞／ｍＬの密度で９６ウェルに播種し（２５０００細胞／ウェル）、細胞インキュベーターで一晩培養した。実験当日、培地を廃棄し、細胞をＦＬＩＰＲ緩衝液（３０ｍＬの緩衝液当たり０．３ｍＬのプロベネシドを含む（Ｔｈｅｒｍｏ、Ｐ３６４００）、０．６ｍＬの１Ｍ ＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１５６３００８０）及び２９．１ｍＬのＨＢＳＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１４０６５０５６）で洗浄した。７５μＬの１ｍＭＦｌｕｏ－４ＡＭ蛍光染料（Ｔｈｅｒｍｏ、Ｆ１４２０２）を各ウェルに加え、染料ローディングを３７℃で１．０時間培養した。次いで、９６ウェルプレートを緩衝液で１回洗浄し、試験化合物又は溶媒を含む５０μＬの緩衝液を各ウェルに加え、室温で３０分間培養した。次いで、細胞プレートをＦＬＩＰＲに入れ、ベースライン蛍光測定（励起波長：４８５ｎｍ、発光波長：５２５～５３５ｎｍ）を実行した。その後、アゴニスト（最終濃度が５μＭであるＢＺ－ＡＴＰ（Ｓｉｇｍａ、Ｂ６３９６））又は溶媒（超純水）を５０μＬ／ウェルで加え、１秒間隔で２分間蛍光値を測定し、最後に出力蛍光をカウントして分析した。

【0188】

上記の方法を用いて得られたＩＣ_５０は下記の表に示された通りである。

【0189】

表１０ 上記の方法を用いたＩＣ_５０データ

【表10】

【0190】

実施例Ｃ 簡易クエン酸咳モデル活動試験
オスのダンキンハートレーモルモット（３００～３５０ｇ）を動物霧化ボックスに入れ、霧化ボックスのドアを閉め、同時に超音波霧化機（広東粤華）をオンにし、最大霧化量（約２ｍＬ／分）で霧化ボックスに１７．５％のクエン酸ガスを充填し、霧化を２０秒間継続し、霧化開始から時間を計り、１０分以内の動物の咳の様子を連続的に観察した。１０分観察期間中に咳を人工的に計数し、腹部のけいれん、口の開き、頭部の下垂などのモルモットの咳の姿勢、及び咳の音で咳の回数を判断し、最初の５分の咳回数、１０分の咳回数を記録し、同時にモルモットの咳潜伏期間、即ち、クエン酸の誘導開始から１回目の咳発生までの時間を記録した。

【0191】

表１１ 動物実験

【表11】

【0192】

化合物１７２は咳の回数を減らし、咳の潜伏期を長くする効果があり、陽性化合物の効果と同等であった。

【0193】

実施例Ｄ ＡＴＰ－クエン酸咳モデル活性試験
オスのダンキンハートレーモルモット（３００～４００ｇ）を全身ボリュームスキャンボックスに入れ、３～５分間に適応させた後、２分間のＡＴＰ噴霧を実行し、３分間隔で、さらに５分間のクエン酸噴霧を与え、すべての噴霧速度は約３００ｕｌ／分であった。クエン酸噴霧の開始から、１０分以内の動物の咳の回数と咳の潜伏期間を記録した。１０分間観察期間中に咳を人工的に計数し、腹部のけいれん、口の開き、頭部の下垂などのモルモットの咳姿勢、及び咳の音で咳の回数を判断し、１０分間の咳回数を記録し、同時にモルモットの咳潜伏期間を記録した。

【0194】

動物を溶媒群、デキストロメトルファン（６３ｍｇ／ｋｇ）陽性群、ＡＦ－２１９（３０ｍｇ／ｋｇ）陽性群、実施例１７２化合物（３、１０、３０ｍｇ／ｋｇ）投与群に分け、すべての化合物を経口投与し、デキストロメトルファンはＡＴＰ－クエン酸曝露の４０分前に投与され、残りの化合物はＡＴＰ－クエン酸曝露の２時間前に投与された。

【0195】

表１２ 化合物について得られたキニーネ／水の飲用比率

【表12】

【0196】

表５に示されるように、すべての化合物は処理後、溶媒群と比較して咳回数が低下する傾向があり、その中で、デキストロメトルファン陽性群と化合物１７２はいずれも咳回数を有意に低下させる効果が得られ、化合物１７２は用量依存性の抑制効果があった。化合物１７２は、陽性化合物２に比べて咳抑制効果が強った。

【0197】

実施例Ｅ インビトロ細胞毒性試験
本発明における化合物のインビトロ細胞毒性試験は、ＨｅｐＧ２細胞においてＣＣＫ－８法によって測定された。対数期のＨｅｐＧ２細胞（北納生物）を収集し、細胞懸濁液の濃度を調節し、５０，０００細胞／ウェルで９６ウェル細胞培養プレートに敷き、細胞を５％、３７℃の細胞インキュベーターに入れて一晩培養し、プレート内の細胞融合度が８０～９０％に達した後、液体を交換して各勾配の濃度の試験化合物又は溶媒（ＤＭＳＯ）を加え、５％、３７℃の細胞インキュベーターで４８時間培養した。処理終了後、プレート内の培地を捨て、ＰＢＳで２回洗浄し、ＣＣＫ－８作動液（Ｂｅｙｏｔｉｍｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）１００μＬを各ウェルに加え、３７℃、暗所で１．５時間培養し、ＯＤ_{４５０ｎｍ}における各ウェルの吸光度をマイクロプレートリーダーで検出し、各化合物のＣＣ_５０を分析して算出した。

【0198】

表１３ 各化合物のＩＣ_５０値

【表13】

【0199】

実施例Ｆ インビトロ代謝安定性試験
本発明における化合物のイントロ代謝安定性は、各種の肝ミクロソームの体温インキュベーション法を用いて測定された。肝ミクロソーム反応系（１ｍｇ／ｍＬの肝ミクロソームタンパク質、２５Ｕ／ｍＬの６－リン酸グルコース脱水素酵素、１ｍＭのＮＡＤＰ、６ｍＭのＤ－６－リン酸グルコース、５ｍＭのＭｇＣｌ_２）に、適量の試験化合物を加え、３７℃のウォーターバスで培養して反応を開始させ、各時点で１００μＬの反応溶液を取って、４００μＬの０℃に予冷した内部標準作業溶液（２００ｎｇ／ｍＬのデキサメタゾン、ジクロフェナク、トルブタミド、ラベタロールを含むアセトニトリル溶液）を含む遠心チューブに加えて、反応を停止させ、４℃、遠心機で１００００ｇで１０分間遠心分離し、上清液を取ってＬＣ－ＭＳで分析・測定して、試験体化合物の様々な肝ミクロソームにおけるインビトロ代謝半減期を得た。

【0200】

表１４ インビトロ代謝安定性試験

【表14】

【0201】

実施例Ｇ 二瓶法味覚障害試験
ＳＰＦグレードのオスＳＤラット（６～８週）を入庫直後に３日間の適応飲水訓練を行い、具体的な訓練内容は、動物を単一ケージで飼育し、各ケージに２本の水（いずれも通常の飲用水）を置き、適応訓練期間は毎日夜間では禁水処理（飲用水ボトルを撤去）し、８：３０ａｍ～５：３０ｐｍで飲用水を再投与し、このように３日間繰り返し、毎日２本の水の左右位置を交換し、適応訓練期間中の動物全体が自由に食事をすることができた。正式な実験開始の２０時間前にすべての動物用飲料水のボトルを撤去し、試験開始時まで水を禁止した。正式な実験では、すべての動物を無作為で群を分け、再給水前に試験化合物又は溶媒を投与し、投与は単回腹腔内注射で行い、投与時間は試験化合物のＴ_ｍａｘに従って決定した。次に、動物を単一のケージに入れ、２本の飲料水を与え、１本は通常の飲用水であり、もう１本は０．３ｍＭのキニーネウォーターであり、１５分以内の動物の飲用水量を観察し、キニーネ飲用水量／通常の飲用水量に基づいて統計分析を行い、陽性化合物２を味覚障害の陽性対照として使用した。

【0202】

表１５ 動物の飲用水量試験

【表15】

【0203】

結果は、空白溶媒群と比較して、５、１０、２０ｍｇ／ｋｇの化合物１７２はいずれもラットのキニーネ／水の飲用量の比率に有意な影響がなく、化合物１７２が動物の味覚に与える影響が小さいことを示し、陽性化合物２と比較して、キニーネ／水の飲用量の比率はいずれも有意に低く、化合物１７２が味覚障害を引き起こすリスクが陽性化合物２よりはるかに優れ、安全性がより良いことを示している。
［１］
結晶形Ｉ、結晶形ＩＩ、結晶形ＩＩＩ、結晶形ＩＶ、結晶形Ｖ、結晶形ＶＩ、結晶形ＶＩＩ、結晶形ＶＩＩＩ及び結晶形ＩＸから選択される式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形であって、

【化1】

ここで、式Ａで表される化合物の水和物の結晶形ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°及び２２．８０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の結晶形Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°及び１８．４４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８°±０．２０°及び２２．１３°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＭＴＢＥ溶媒和物の結晶形ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°及び２０．８７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の水和物の結晶形ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物の水和物の結晶形ＶＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６２°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°及び２２．５９°±０．０２°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のエチレングリコール溶媒和物の結晶形ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°及び２１．６６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＴＨＦ溶媒和物の結晶形ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°及び２１．４９°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
式Ａで表される化合物のＤＭＳＯ溶媒和物の結晶形ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°及び２５．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形。
［２］
前記結晶形ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°、２２．８０°±０．２０°、１３．７５°±０．２０°、１４．４６°±０．２０°及び２０．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°、１８．４４°±０．２０°、１６．２６°±０．２０°、１６．８９°±０．２０°及び１７．８６°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８±０．２０°、２２．１３°±０．２０°、１３．５３°±０．２０°、１４．２５±０．２０°、２５．１８°±０．２０°及び２６．０７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°、２０．８７°±０．２０°、１６．１７°±０．２０°、１６．９３°±０．２０°、１７．５５°±０．２０°及び２１．２０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５６°±０．２０°、１３．４８°±０．２０°、１７．３９°±０．２０°、２１．０４°±０．２０°及び２３．６３°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＶＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６２°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５９°±０．０２°、１３．４６°±０．２０°、１７．４１°±０．２０°、２６．５１°±０．０２°、２５．６２°±０．０２°及び２５．２４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°、２１．６６°±０．２０°、２１．０７°±０．２０°及び２４．８２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、式Ａで表される化合物のＴＨＦ溶媒和物の結晶形ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°、２１．４９°±０．２０°、２０．９９°±０．２０°、２４．９４°±０．２０°及び２５．３１°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°、２５．０７°±０．２０°、１３．５７°±０．２０°、１７．１８°±０．２０°、２０．９４°±０．２０°及び２５．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有する、［１］に記載の化合物Ａ又はその溶媒和物の結晶形。
［３］
前記結晶形ＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が１２．９１°±０．２０°、１６．７７°±０．２０°、１９．２７°±０．２０°、２２．８０°±０．２０°、１３．７５°±０．２０°、１４．４６°±０．２０°、２０．８６°±０．２０°、２１．０８°±０．２０°、２３．７５°±０．２０°及び２４．０５°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１００℃の区間における重量減少勾配は１．５％であり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩの示差走査熱量スペクトルにおいて、最初の吸熱ピークは０．４個の水の除去であり、
及び／又は、前記結晶形Ｖの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３８°±０．２０°、９．１５°±０．２０°、１３．５２°±０．２０°、１８．４４°±０．２０°、１６．２６°±０．２０°、１６．８９°±０．２０°、１７．８６°±０．２０°、２２．３５°±０．２０°、２３．５６°±０．２０°、２４．７４°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形Ｖの示差走査熱量スペクトルにおいて、１６６℃に吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは７０±２Ｊ／ｇであり、
及び／又は、前記結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５６°±０．２０°、１２．４８°±０．２０°、２２．１３°±０．２０°、１３．５３°±０．２０°、１４．２５°±０．２０°、２５．１８°±０．２０°、２６．０７°±０．２０°、２２．３２°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２３．４２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形Ｉの示差走査熱量スペクトルにおいて、１５２℃で吸熱ピークを有し、融解エンタルピーは４４±２Ｊ／ｇであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．４２°±０．２０°、１２．０９°±０．２０°、１３．６８°±０．２０°、２０．８７°±０．２０°、１６．１７°±０．２０°、１６．９３°±０．２０°、１７．５５°±０．２０°、２１．２０°±０．２０°、２２．６０°±０．２０°、２３．２３°±０．２０°及び２４．４０°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、１００～１６０℃の温度区間で３．５％の重量損失があり、１６０～２００℃の温度区間で２．９％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶形ＩＶの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．６５°±０．２０°、１２．６９°±０．２０°、２２．５６°±０．２０°、１３．４８°±０．２０°、１７．３９°±０．２０°、２１．０４°±０．２０°、２３．６３°±０．２０°、１４．３９°±０．２０°、２５．６０°±０．２０°及び２６．５２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＶのＴＧＡスペクトルにおいて、ＲＴ～６０℃の温度区間で１．２％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．３６°±０．２０°、１２．１３°±０．２０°、１２．４５°±０．２０°、１６．８４°±０．２０°、２１．６６°±０．２０°、２１．０７°±０．２０°、２４．８２°±０．２０°、１３．６１°±０．２０°、２３．２２°±０．２０°及び２４．５７°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１２０℃の区間で２５．７％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩＩの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５３°±０．２０°、１２．３８°±０．２０°、１３．６６°±０．２０°、２１．４９°±０．２０°、２０．９９°±０．２０°、２４．９４°±０．２０°、２５．３１°±０．２０°、１７．１４°±０．２０°、２１．７２°±０．２０°及び２３．００°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩＩの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～１６０℃の温度区間で５．７％の重量損失があり、
及び／又は、前記結晶形ＩＸの粉末Ｘ線回折スペクトルは２θ値が８．５５°±０．２０°、１２．４３°±０．２０°、２１．７５°±０．２０°、２５．０７°±０．２０°、１３．５７°±０．２０°、１７．１８°±０．２０°、２０．９４°±０．２０°、２５．５７°±０．２０°、２１．３７°±０．２０°及び２３．１２°±０．２０°において特徴的なピークを有し、
及び／又は、前記結晶形ＩＸの熱重量分析スペクトルにおいて、室温～６０℃の温度区間で１８．２３％の重量損失があることを特徴とする、［２］に記載のＡで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形。
［４］
前記結晶形ＩＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本的に図１に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図２に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩの動的水分吸着スペクトルが図４に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩの偏光顕微鏡スペクトルが基本的に図６に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩＩは、０．４当量の水を含み、
及び／又は、前記結晶形Ｖの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本的に図７に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｖの動的水分吸着スペクトルが図９に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｖの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図８に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｖの偏光顕微鏡スペクトルが基本的に図１１に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｉの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本的に図１２に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｉの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図１３に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｉの動的水分吸着スペクトルが図１４に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形Ｉの偏光顕微鏡スペクトルが基本的に図１７に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの核磁気共鳴水素スペクトルが図１９に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本的に図１８に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの偏光顕微鏡スペクトルが基本的に図２１に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＩの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図２０に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＶの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本的に図２２に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＶの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが図２３に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＶの偏光顕微鏡スペクトルが基本的に図２５に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本に図２６に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本に図２８に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの核磁気共鳴水素スペクトルが図２９に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図３０に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩＩの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本に図３１に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩＩの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図３２に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＶＩＩＩの核磁気共鳴水素スペクトルが図３３に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＸの２θ角で表される粉末Ｘ線回折スペクトルが基本に図３５に示された通りであり、
及び／又は、前記結晶形ＩＸの熱重量分析スペクトル及び示差走査熱量スペクトルが基本的に図３６に示された通りであることを特徴とする、［３］に記載の化合物Ａ又はその溶媒和物の結晶形。
［５］
スキーム一、スキーム二又はスキーム三であることを特徴とする、物質Ａの結晶形ＩＩＩの製造方法であって、
前記スキーム１は、式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得るステップを含み、前記溶媒は水又はアルコール系溶媒でり、
前記スキーム２は式Ａで表される化合物と溶媒との溶液に貧溶媒を加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得るステップを含み、前記溶媒はアルコール系、フラン系又はＤＭＳＯのうちの一つ又は複数であり、前記貧溶媒は水であり、
前記スキーム３は式Ａで表される化合物と溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させて、物質Ａの結晶形ＩＩＩを得るステップを含み、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯである、
ことを特徴とする、物質Ａの結晶形ＩＩＩの製造方法。
［６］
前記スキーム一において、前記溶媒は水又はメタノールであり、
及び／又は、前記スキーム一において、前記結晶を析出させる温度は２０～５０℃であり、好ましくは４０℃又は５０℃であり、
及び／又は、前記スキーム一において、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキーム二において、前記溶媒は、メタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数であり、
及び／又は、前記スキーム三において、前記溶媒と水との体積比は３：１～１：１であり、
及び／又は、前記スキーム三において、前記ＤＭＳＯと水との体積比は１：１～１：４であり、
及び／又は、前記スキーム一を採用する場合、化合物Ａの非晶質試料を溶媒と混合し、懸濁液を結晶化させるステップを含み、前記溶媒は水又はメタノールであり、前記攪拌温度は２０～５０℃であり、好ましくは４０℃であり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキーム二を採用する場合、化合物Ａを溶媒と混合し、貧溶媒に滴下するステップを含み、前記溶媒はメタノール、テトラヒドロフラン又はＤＭＳＯのうちの１つ又は複数であり、前記貧溶媒は水であり、前記溶媒と水との体積比は３：１～１：１であり、
及び／又は、前記スキーム三を採用する場合、化合物Ａと溶媒との溶液を水溶液Ａに加え、結晶を析出させるステップを含み、前記水溶液Ａは前記物質Ａの結晶形ＩＩＩの種結晶と水との懸濁液であり、前記溶媒はＤＭＳＯであり、前記ＤＭＳＯと水との体積比は１：１～１：４であることを特徴とする、［５］に記載の製造方法。
［７］
［５］又は［６］に記載の製造方法により製造されるのことを特徴とする、物質Ａの結晶形ＩＩＩ。
［８］
［１］～［４］のいずれか一項に記載の化合物Ａの水和物結晶形ＩＩＩであることを特徴とする、［７］に記載の物質Ａの結晶形ＩＩＩ。
［９］
スキームＡ又はスキームＢである製造方法であって、
前記スキームＡは２０～５０℃で式Ａで表される化合物の非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物Ａの結晶形Ｖを得るステップを含み、前記溶媒は水又はニトリル系溶媒であり、前記結晶化の温度は好ましくは５０℃であり、
スキームＢは式Ａで表される化合物と溶媒の溶液中の溶媒を揮発させ、化合物Ａの結晶形Ｖを得るステップを含み、前記溶媒はアルコール系溶媒であることを特徴とする、式Ａで表される化合物の結晶形Ｖの製造方法。
［１０］
スキームＡにおいて、前記溶媒は、水又はアセトニトリルであり、
及び／又は、スキームＡにおいて、前記化合物Ａの非晶質と前記溶媒との質量体積比は、３．０ｍｇ／ｍＬ又は５０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、スキームＡにおける結晶化の温度は５０℃であり、
及び／又は、スキームＢにおいて、前記溶媒はメタノールであり、
及び／又は、スキームＢにおける結晶を析出させる温度は５０℃であり、
及び／又は、前記スキームＡを採用する場合、２０～５０℃で化合物Ａの非晶質と溶媒との懸濁液を結晶化させて、化合物の結晶形Ｖを得るステップを含み、前記結晶化の温度は５０℃であり、前記溶媒は水又はアセトニトリルであり、前記化合物Ａの非晶質と溶媒との質量体積比は５０ｍｇ／ｍＬ又は３．０ｍｇ／ｍＬであり、
及び／又は、前記スキームＢを採用する場合、化合物Ａと溶媒の溶液中の溶媒を揮発させて結晶を析出させ、化合物Ａの結晶形Ｖを得るステップを含み、前記溶媒はメタノールであり、前記結晶を析出させる温度は５０℃であることを特徴とする、［９］に記載の製造方法。
［１１］
［１］～［４］のいずれか一項に記載の式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形及び／又は［７］又は［８］に記載の物質Ａの結晶形ＩＩＩ、及び医薬補助材料を含む、医薬組成物。
［１２］
Ｐ２Ｘ３受容体アンタゴニスト又は薬物の製造における、［１］～［４］のいずれか一項に記載の式Ａで表される化合物又はその溶媒和物の結晶形、［７］又は［８］に記載の物質Ａの結晶形ＩＩＩの使用であって、前記薬物は、動物の少なくとも部分的にＰ２Ｘ３によって媒介される又は活性関連疾患の防護、処理、治療、又は軽減に使用される薬物であってもよく、あるいは、前記薬物は、疼痛、泌尿器疾患又は呼吸器疾患の治療に使用される薬物であってもよい、使用。
［１３］
前記疾患は、疼痛、泌尿器疾患又は呼吸器系疾患を含み、前記疼痛は好ましくは、炎症性疼痛、手術疼痛、内臓痛、歯痛、月経前疼痛、中枢性疼痛、火傷による疼痛、片頭痛、又は群発頭痛を含み、前記泌尿器疾患は、尿失禁、膀胱過活動、排尿障害、膀胱炎を含み、前記呼吸器系疾患は好ましくは、特発性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気管支けいれん、又は慢性咳を含む呼吸障害を含むことを特徴とする、［１２］に記載の使用。
［１４］
前記医薬組成物を投与することにより、治療に伴う味覚障害の副作用を低減することを特徴とする、［１３］に記載の医薬組成物。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【図51】

【図52】

【図53】

【図54】

【図55】

【図56】

【図57】

【図58】

【図59】

【図60】

【図61】