特許 7490739 試料調製装置の制御方法、試料調製装置の制御装置、試料調製システム及び試料調製方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-05-17

(45)【発行日】2024-05-27

(54)【発明の名称】試料調製装置の制御方法、試料調製装置の制御装置、試料調製システム及び試料調製方法

(51)【国際特許分類】

   G01N 15/1409 20240101AFI20240520BHJP

   G01N 15/14 20240101ALI20240520BHJP

   G01N 33/543 20060101ALI20240520BHJP

   G01N 33/53 20060101ALI20240520BHJP

【ＦＩ】

G01N15/1409 100

G01N15/14 C

G01N33/543 597

G01N33/53 K

【請求項の数】 9

(21)【出願番号】P 2022188730

(22)【出願日】2022-11-25

(62)【分割の表示】P 2021159468の分割

【原出願日】2017-05-31

(65)【公開番号】P2023011024

(43)【公開日】2023-01-20

【審査請求日】2022-12-22

(73)【特許権者】

【識別番号】390014960

【氏名又は名称】シスメックス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】弁理士法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】長井 孝明

(72)【発明者】

【氏名】小国 振一郎

(72)【発明者】

【氏名】辻 智悠

【審査官】山口 剛

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２００９／１２２９９９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特開２０１６－２０６１８４（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１６－２１７８８８（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｇ０１Ｎ １５／００ － １５／１４９２

Ｇ０１Ｎ ３５／００ － ３５／１０

Ｇ０１Ｎ ３７／００

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

検体容器から取得した一部の検体中の本測定の対象粒子の濃度を調整可能であり、前記一部の検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置の制御方法であって、
前記検体容器から取得した他の一部の検体中の、前記本測定の対象粒子と同種の粒子であるプレ測定の対象粒子の濃度情報を取得する工程と、
前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を読み出す工程と、
前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記一部の検体中の前記本測定の対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、を含み、
前記測定試料の調製に関する情報は、抗原の種類を示す測定項目に応じた情報であり、
前記複数種類の粒子検出試薬は、第１の検出試薬と第２の検出試薬と、を含み、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長である第１の蛍光物質を含み、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長と異なる第２の波長である第２の蛍光物質を含み、
前記本測定の対象粒子は細胞であり、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第１の抗原に結合する第１の抗体を更に含み、前記第１の蛍光物質は、前記第１の抗体を標識しており、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第２の抗原に結合する第２の抗体を更に含み、前記第２の蛍光物質は、前記第２の抗体を標識している、
試料調製装置の制御方法。

【請求項2】

前記測定試料の調製に関する情報に応じて、前記一部の検体と、前記複数種類の粒子検出試薬と、を混合して前記測定試料を調製するよう前記試料調製装置を制御する工程をさらに含む、請求項１に記載の試料調製装置の制御方法。

【請求項3】

前記測定試料を調製するよう前記試料調製装置を制御する工程は、濃度が調整された前記一部の検体と、前記複数種類の粒子検出試薬と、を混合するよう、前記試料調製装置を制御する工程を含む、請求項２に記載の試料調製装置の制御方法。

【請求項4】

前記測定試料の調製に関する情報は、検体量の情報を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の試料調製装置の制御方法。

【請求項5】

前記プレ測定の対象粒子は白血球である、請求項１から４のいずれか一項に記載の試料調製装置の制御方法。

【請求項6】

検体容器から取得した一部の検体中の本測定の対象粒子の濃度を調整可能であり、前記一部の検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置の制御装置であって、
プロセッサと、
記憶部と、を備え、
前記プロセッサは、
前記検体容器から取得した他の一部の検体中の、前記本測定の対象粒子と同種の粒子であるプレ測定の対象粒子の濃度情報を取得する工程と、
前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を前記記憶部から読み出す工程と、
前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記一部の検体中の前記本測定の対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、を実行するように構成されており、
前記測定試料の調製に関する情報は、抗原の種類を示す測定項目に応じた情報であり、
前記複数種類の粒子検出試薬は、第１の検出試薬と第２の検出試薬と、を含み、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長である第１の蛍光物質を含み、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長と異なる第２の波長である第２の蛍光物質を含み、
前記本測定の対象粒子は細胞であり、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第１の抗原に結合する第１の抗体を更に含み、前記第１の蛍光物質は、前記第１の抗体を標識しており、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第２の抗原に結合する第２の抗体を更に含み、前記第２の蛍光物質は、前記第２の抗体を標識している、
試料調製装置の制御装置。

【請求項7】

検体容器から取得した粒子を含む一部の検体を測定して前記一部の検体中のプレ測定の対象粒子を検出する測定装置と、
前記検体容器から取得した他の一部の検体中の、前記プレ測定の対象粒子と同種の粒子である本測定の対象粒子の濃度を調整可能であり、前記他の一部の検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置と、
プロセッサと記憶部とを備える制御装置と、を備え、
前記制御装置のプロセッサは、
前記一部の検体中の前記プレ測定の対象粒子の濃度情報を取得する工程と、
前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を前記記憶部から読み出す工程と、
前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記他の一部の検体中の前記本測定の対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、
を実行するように構成されており、
前記測定試料の調製に関する情報は、抗原の種類を示す測定項目に応じた情報であり、
前記複数種類の粒子検出試薬は、第１の検出試薬と第２の検出試薬と、を含み、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長である第１の蛍光物質を含み、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長と異なる第２の波長である第２の蛍光物質を含み、
前記本測定の対象粒子は細胞であり、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第１の抗原に結合する第１の抗体を更に含み、前記第１の蛍光物質は、前記第１の抗体を標識しており、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第２の抗原に結合する第２の抗体を更に含み、前記第２の蛍光物質は、前記第２の抗体を標識している、
試料調製システム。

【請求項8】

前記測定装置は、
フローセルと、
前記フローセルを通過する前記一部の検体に第１の波長の光を照射する第１の光源と、
前記フローセルを通過する前記一部の検体に前記第１の波長と異なる第２の波長の光を照射する第２の光源と、を備える、請求項７に記載の試料調製システム。

【請求項9】

検体容器から取得した一部の検体中のプレ測定の対象粒子の濃度情報を取得する工程と、
測定試料の調製のために前記検体容器から取得した他の一部の検体と混合される、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報と、前記濃度情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記他の一部の検体中の、前記プレ測定の対象粒子と同種の粒子である本測定の対象粒子の濃度を調整する工程と、を含み、
前記測定試料の調製に関する情報は、抗原の種類を示す測定項目に応じた情報であり、
前記複数種類の粒子検出試薬は、第１の検出試薬と第２の検出試薬と、を含み、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長である第１の蛍光物質を含み、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、励起波長が第１の波長と異なる第２の波長である第２の蛍光物質を含み、
前記本測定の対象粒子は細胞であり、
前記第１の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第１の抗原に結合する第１の抗体を更に含み、前記第１の蛍光物質は、前記第１の抗体を標識しており、
前記第２の検出試薬に含まれる前記粒子標識物質は、細胞表面又は細胞内の第２の抗原に結合する第２の抗体を更に含み、前記第２の蛍光物質は、前記第２の抗体を標識している、
試料調製方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、試料調製装置、及び試料調製方法に関する。

【背景技術】

【0002】

特許文献１には、液体試料に含有された粒子成分の濃度を測定する濃度測定手段と、試料をフィルターの濾過作用によって濃縮する濃縮ユニットを備えた試料処理装置が開示されている。また、特許文献２には、生体由来検体に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出する際に、生体由来検体に含まれる上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成し、前記濃度情報に基づいて、試料調製部に供給する生体由来検体の量を制御する試料調製装置が記載されている。

【0003】

特許文献１に記載の試料処理装置は、フローサイトメータなどの粒子分析装置において、粒子の濃度が低い場合に、測定結果の再現性（確率誤差）が高くなることを改善することを目的として、試料中の細胞を濃縮することを提案している。また、特許文献２に記載の試料調製装置は、上皮細胞が染色液で適切に染色されるよう、プレ測定で得られた生体由来検体中の上皮細胞の濃度に基づいて、染色液と混合される生体由来検体の量を調製することが提案されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【文献】特開平７－３０１５８６号公報

【文献】国際公開第２００９／１２２９９９号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

特許文献１に記載の試料処理装置及び特許文献２に記載の試料調製装置は、いずれもエチジウムブロマイド、アクリジンオレンジ、ヨウ化プロピディウム等の色素を用いた単染色で細胞核を染色し、染色された細胞を光学式検出方法によって検出することを前提としている。

【0006】

一方で、現在、フローサイトメトリー検査において、１つの疾患を診断するために、１回の検査依頼で測定される抗原の種類は、１検体あたり１０から３０種に上る。このため、フローサイトメトリー検査は、１回の解析で数種から十数種の抗原を同時に測定するマルチカラーフローサイトメトリーが主流となっている。また、検査を依頼された全ての抗原を検出するためには、１検体につき、１解析あたり数種の抗体を使用したマルチカラーフローサイトメトリー解析を複数回行う必要がある。さらに、１つの細胞に存在するそれぞれの抗原の存在量は抗原ごとに異なる。標的とする抗原を精度よく検出するためには、抗原ごとに適した量の蛍光標識抗体を使用する必要がある。また、造血幹細胞等の幹細胞は、生体中にその存在比率自体が低いため、確実に検出するためには、解析する検体量そのものを増やさなければならない。

【0007】

現在、検体と検出試薬との混合割合の決定、必要な検体量の決定は、検査者が何らかの形で検体中の粒子濃度の情報を得た上で行っている。また、決定された内容に基づく測定試料の調製も全て検査者の手によって行われている。このような現状から、精度のよいフローサイトメトリー検査は現在膨大な労力を必要としている。

【0008】

本発明は、測定試料の調製を効率よく行うとともに、検体中の測定対象粒子を精度よく
分析することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明の第１の態様は、試料調製装置の制御方法に関する。本態様に係る試料調製装置の制御方法は、検体容器から取得した検体中の測定対象粒子の濃度を調整可能であり、検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置の制御方法であって、前記検体中の前記測定対象粒子の濃度情報を取得する工程と、前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を読み出す工程と、前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記検体中の前記測定対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、を含む。

【0010】

本発明の第２の態様は、試料調製装置の制御装置に関する。本態様に係る試料調製装置の制御装置は、検体容器から取得した検体中の測定対象粒子の濃度を調整可能であり、検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置の制御装置であって、プロセッサと、記憶部と、を備え、前記プロセッサは、前記検体中の前記測定対象粒子の濃度情報を取得する工程と、前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を前記記憶部から読み出す工程と、前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記検体中の前記測定対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、を実行する。

【0011】

本発明の第３の態様は、試料調製システムに関する。本態様に係る試料調製システムは、検体容器から取得した粒子を含む検体を測定して前記検体中の測定対象粒子を検出する測定装置と、前記検体容器から取得した検体中の測定対象粒子の濃度を調整可能であり、検体と、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬と、を混合して測定試料を調製する試料調製装置と、プロセッサと記憶部とを備える制御装置と、を備え、前記制御装置のプロセッサは、前記検体中の前記測定対象粒子の濃度情報を取得する工程と、前記複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報を前記記憶部から読み出す工程と、前記濃度情報と前記測定試料の調製に関する情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記検体中の前記測定対象粒子の濃度を調整するよう前記試料調製装置を制御する工程と、を実行する。
本発明の第４の態様は、試料調製方法に関する。本態様に係る試料調製方法は、検体容器から取得した検体中の前記測定対象粒子の濃度情報を取得する工程と、測定試料の調製のために前記検体と混合される、粒子標識物質を含む複数種類の粒子検出試薬の種類情報を含む測定試料の調製に関する情報と、前記濃度情報とに応じて、前記測定試料の調製に用いられる前記検体中の前記測定対象粒子の濃度を調整する工程と、を含む。

【発明の効果】

【0012】

本発明によると、検体に含まれる測定対象粒子の濃度情報と粒子検出試薬とに基づいて行われる測定試料の調製を効率化することができるうえ、検体中の測定対象粒子を精度よく分析することができる。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】試料調製装置のブロック図である。

【図2】フローサイトメータの光学系を示す概略図である。

【図3】試薬調製装置の概略構成図である。

【図4】試料調製部の断面図である。

【図5】試料調製部の部分拡大図である。

【図6】遠心分離部の平面図である。

【図7】試料調製部の一部断面図である。

【図8】試料調製部の変形例の断面図である。

【図9】解析部のブロック図である。

【図10】制御部の処理の動作手順の概略を示すフローチャートである。

【図11】制御部の処理の動作手順を示すフローチャートである。

【図12A】図１１のＳ１９の第１実施例の処理の動作手順を示すフローチャートである。

【図12B】図１１のＳ１９の第２実施例の処理の動作手順を示すフローチャートである。

【図13A】複数の細胞検出試薬の全てを１本の分注用チューブに分注して測定試料を調製する場合の測定試料の調製に関する情報の例である。

【図13B】複数の細胞検出試薬をそれぞれ異なる分注用チューブに分注して測定試料を調製する場合の測定試料の調製に関する情報の例である。

【図14】検体容器内の検体を測定して検体中の測定対象粒子を検出した測定データの一例を示す図である。

【図15】検体Ａ～Ｃについて測定試料の調製方法の一例を示す図である。

【図16】試料調製システムのブロック図である。

【発明を実施するための形態】

【0014】

以下、添付図面を参照しつつ、本発明の実施の形態を詳細に説明する。試料調製装置は、粒子を含む検体の分析に適した測定試料を調製する。また、粒子分析装置は、粒子を含む検体の分析に適した測定試料を調製し、調製された測定試料を光学的に分析することで、検体の中に含まれる粒子の計数又は粒子の種類の同定、あるいはその両方を行う。具体的には、例えば、試料調製装置及び粒子分析装置は、臍帯血や骨髄に含まれる造血幹細胞を検出するために使用される。また、試料調製装置及び粒子分析装置は、白血病細胞等の造血器腫瘍細胞や肺癌細胞等の癌細胞等の異常細胞等が検体に含まれているか否かを判断するために使用される。

【0015】

測定対象の粒子は、例えば、金属粒子やプラスチック粒子等の人工的な粒子であってもよい。また、粒子は円柱等の細胞以外の生体成分であってもよく、微生物、動物細胞及び植物細胞等の細胞であってもよい。粒子を含む検体は、粒子を含む液体（原液であっても希釈液であってもよい）である限り制限されない。粒子として好ましくは、例えば細胞培養検体又は生体由来検体である。細胞培養検体は、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏで培養された細胞を含む試料である。生体由来検体は、例えば末梢血、臍帯血、骨髄、脳脊髄液、腹水、胸水、間質液及び尿等の生体に由来する液体検体を挙げることができる。生体由来検体として好ましくは、末梢血、臍帯血又は骨髄である。

【0016】

粒子検出試薬は、１試薬あたり少なくとも１種の粒子標識物質を含む。粒子標識物質は、粒子を検出できる限り制限されない。粒子検出試薬は、好ましくは細胞検出試薬である。また、粒子標識物質は、好ましくは細胞標識物質である。粒子検出試薬は、好ましくは、核酸を標識する１以上の核酸標識物質及び蛋白質を標識する１以上の蛋白質標識物質よりなる群から選択される少なくとも一種の細胞標識物質を含む。核酸標識物質として、好ましくは、エチジウムブロマイド（ＥＢ）、アクリジンオレンジ（ＡＯ）、ヨウ化プロピディウム（ＰＩ）、７－アミノ－アクチノマイシンＤ（７－ＡＡＤ）、４’， ６－ジアミジノ－２－フェニルインドール（ＤＡＰＩ）、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２（２’－（４－エトキシフェニル）－５－（４－メチル－１－ピペラジニル）－２，５’－バイ－１Ｈ－ベンズイミダゾール三塩酸塩）、エチジウムホモダイマー－１、エチジウムホモダイマー－２、エチジウムモノアジド、トリメチレンビス［［３‐［［４‐［［（３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］メチレン］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐１‐イル］プロピル］ジメチルアミニウム］・テトラヨージド（ＴＯＴＯ－１）、４‐［（３‐メチルベンゾチアゾール‐２（３Ｈ）‐イリデン）メチル］‐１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］キノリニウム・ジヨージド（ＴＯ－ＰＲＯ－１）、Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'‐テトラメチル‐Ｎ，Ｎ'‐ビス［３‐［４‐［３‐［（３‐メチルベンゾチア
ゾール‐３‐イウム）‐２‐イル］‐２‐プロペニリデン］‐１，４‐ジヒドロキノリン‐１‐イル］プロピル］‐１，３‐プロパンジアミニウム・テトラヨージド（ＴＯＴＯ－３）、又は２‐［３‐［［１‐［３‐（トリメチルアミニオ）プロピル］‐１，４‐ジヒドロキノリン］‐４‐イリデン］‐１‐プロペニル］‐３‐メチルベンゾチアゾール‐３‐イウム・ジヨージド（ＴＯ－ＰＲＯ－３）、又は以下の構造式（ＩＶ）で示される蛍光色素等の核酸染色物質を挙げることができる。

【0017】

【化1】

【0018】

式中、Ｒ_１及びＲ_４は、水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基を有するアルキル基、エーテル基を有するアルキル基、エステル基を有するアルキル基、又は置換基を有しても良いベンジル基であり、；Ｒ_２及びＲ_３は、水素原子、ヒドロキシル基、ハロゲン、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、又はアルコキシ基であり；Ｚは硫黄原子、酸素原子、又はメチル基を有する炭素原子であり；ｎは０，１，２又は３であり；Ｘ^－はアニオンである。

【0019】

ここで、構造式（ＩＶ）中、Ｒ_１及びＲ_４のいずれか一方が炭素数６～１８のアルキル基の場合、他方は水素原子又は炭素数６未満のアルキル基であることが好ましい。炭素数が６～１８のアルキル基としては、炭素数６、８又は１０のアルキル基が好ましい。Ｒ_１及びＲ_４のベンジル基の置換基としては、炭素数１～２０のアルキル基、炭素数２～２０のアルケニル基、又は炭素数２～２０のアルキニル基が挙げられ、特にメチル基又はエチル基が好ましい。Ｒ_２及びＲ_３のアルケニル基としては、炭素数２～２０のアルケニル基が挙げられる。Ｒ_２及びＲ_３のアルコキシ基としては、炭素数１～２０のアルコキシ基が挙げられ、特にメトキシ基又はエトキシ基が好ましい。Ｘ^－におけるアニオンとしては、Ｆ^－、Ｃｌ^－、Ｂｒ^－、Ｉ^－のようなハロゲンイオン、ＣＦ_３ＳＯ_３ ^－、ＢＦ４^－などが挙げられる。

【0020】

また、核酸標識物質として、蛍光標識された核酸プローブ及び蛍光標識されたヌクレオチドを挙げることができる。蛋白質標識物質として、例えば、蛍光物質が標識されており、かつ目的とする蛋白質に結合可能な蛋白質、又は目的とする蛋白質に結合可能なビタミンを挙げることができる。目的とする蛋白質に結合する蛋白質としては、受容体に結合するリガンド、抗体、レクチン又は脂質結合蛋白質（好ましくは、リン脂質結合蛋白質）を挙げることができる。蛍光物質は、測定部２で検出できる限り制限されない。蛍光物質として好ましくは、フローサイトメトリーに使用できる物質である。

【0021】

後述する試薬調製装置１の試薬設置部３５にセットされる粒子検出試薬は、好ましくは複数の粒子標識物質に対応することが好ましい。「粒子標識物質に対応する」とは、１つの粒子検出試薬に複数の粒子標識物質を含む態様であっても、１以上の粒子標識物質を含む複数の粒子検出試薬を含む態様であってもよい。

【0022】

各粒子検出試薬又は各粒子標識物質は、適切な混合割合で、検体に含まれる粒子と混合されることが好ましい。また前記割合は、各粒子検出試薬又は各粒子標識物質で異なっていてもよい。さらに、例えば１検体に複数種の粒子が含まれている場合には、前記混合割合は、測定対象となる粒子の割合を考慮して決定される。

【0023】

なお、以下の実施形態では、測定対象の粒子を細胞として説明しているが、試料調製装置及び粒子分析装置は、細胞の分析だけに限定されるものではない。

【0024】

［試料調製装置及び粒子分析装置の構成］
図１は、本実施形態の粒子分析装置１００の概略構成を示す。本実施形態の粒子分析装置１００は、試料調製装置１と、解析部５とを備える。本実施形態の試料調製装置１は、検体のプレ測定及び測定試料の本測定を行う測定部２と、検体の濃度調整及び測定試料の調製を行う試料調製部３と、測定部２及び試料調製部３を制御する制御部４と、を備える。解析部５は、測定部２の本測定により得られる測定データの分析等を行う。

【0025】

［測定部の構成］
測定部２は、検体をプレ測定して、検体に含まれる測定対象細胞の細胞数を検出するプレ測定部として機能する。さらに、本実施形態の測定部２は、測定試料を本測定して、解析部５による細胞分析のための測定対象細胞の特徴に関する情報を検出する本測定部としても機能する。本実施形態の測定部２は、フローサイトメータが採用されている。

【0026】

図２は、測定部２を構成するフローサイトメータの光学系を示す概略図である。フローサイトメータは、検体が通過するフローセル２０と、フローセル２０を通過する検体に光を照射する光源２１Ａ，２１Ｂと、検体中の粒子に由来する光の光学的情報を検出して電気信号に変換された検出信号を出力する受光素子２２Ａ～２２Ｆとを備えている。

【0027】

光学的情報とは、粒子から発せられる１又は２以上の光波長スペクトルに含まれる情報である。光波長スペクトルにはその光波長スペクトルに含まれる個々の光波長、光波長領域、及びそのそれぞれの光波長の光の強さ、又は光波長領域の光の強さが含まれる。

【0028】

光源２１Ａから出射された光は、コリメートレンズ２３Ａ、ダイクロイックミラー２４Ａ、集光レンズ２５Ａを経てフローセル２０に照射される。フローセル２０を通過する粒子に由来する光の前方散乱光は、集光レンズ２５Ｂにより集光され、ビームストッパー２６、ピンホール板２７Ａ、バンドパスフィルタ２８Ａを経て受光素子２２Ａに入射する。

【0029】

一方、フローセル２０を通過する粒子に由来する光の側方散乱光及び側方蛍光は、集光レンズ２５Ｃにより集光される。側方散乱光は、ダイクロイックミラー２４Ｂ～２４Ｄ、ピンホール板２７Ｂ、バンドパスフィルタ２８Ｂを経て受光素子２２Ｂに入射する。波長が５２０ｎｍ以上、５４２ｎｍ以下の側方蛍光は、ダイクロイックミラー２４Ｂ，２４Ｃを透過してダイクロイックミラー２４Ｄで反射され、ピンホール板２７Ｃ、バンドパスフィルタ２８Ｃを経て受光素子２２Ｃに入射する。また、波長が５７０ｎｍ以上、６２０ｎｍ以下の側方蛍光は、ダイクロイックミラー２４Ｂを透過してダイクロイックミラー２４Ｃで反射され、ピンホール板２７Ｄ、バンドパスフィルタ２８Ｄを経て受光素子２２Ｄに入射する。さらに波長が６７０ｎｍ以上、８００ｎｍ以下の側方蛍光は、ダイクロイックミラー２４Ｂで反射され、ダイクロイックミラー２４Ｅを透過してピンホール板２７Ｅ、バンドパスフィルタ２８Ｅを経て受光素子２２Ｅに入射する。

【0030】

光源２１Ｂから出射された光は、コリメートレンズ２３Ｂ、ダイクロイックミラー２４Ａ、集光レンズ２５Ａを経てフローセル２０に照射される。フローセル２０を通過する粒子に由来する光の側方蛍光は、集光レンズ２５Ｃにより集光される。６６２．５ｎｍ以上、６８７．５ｎｍ以下の側方蛍光はダイクロイックミラー２４Ｂで反射され、ダイクロイックミラー２４Ｅで反射された後、ピンホール板２７Ｆ、バンドパスフィルタ２８Ｆを経て受光素子２２Ｆに入射する。

【0031】

例えば、光源２１Ａには４８８ｎｍの波長のレーザダイオードが用いられ、光源２１Ｂには６４２ｎｍの波長のレーザダイオードが用いられる。フローセル２０にはシースフローセルが用いられる。前方散乱光を受光する受光素子２２Ａにはフォトダイオードが用いられ、側方散乱光を受光する受光素子２２Ｂにはアバランシェフォトダイオード（avalan
che photodiode、ＡＰＤ）が用いられ、側方蛍光を受光する受光素子２２Ｃ～２２Ｆにはフォトマルチプライアチューブ（PhotoMultiplier Tube、ＰＭＴ）が用いられる。なお、図２では、フローサイトメータが６つの受光素子２２Ａ～２２Ｆを備え、４つの受光素子２２Ｃ～２２Ｆは、検体中の粒子に結合した色素に由来し異なるピーク波長を有する４つの光の光学的情報をそれぞれ検出するものであるが、これに限定されず、３以上の受光素子を備え、３以上の受光素子のうち少なくとも２以上の受光素子は、異なるピーク波長を有する少なくとも２つの色素に由来する光の光学的情報をそれぞれ検出するものであればよい。

【0032】

また、光源は、１つであっても２つ以上であってもよい。例えば、光源の数は１～１０の整数の間で選択することができる。光源は、粒子に結合した色素に由来する光の波長領域に応じて選択される。光源が２以上である場合には、これらの光源は異なるピーク波長を有する光を発することが好ましい。光源が２以上である場合には、光源が１つである場合に比べて、精度良く複数の蛍光を分離して検出できるため好ましい。一方、２つの光源を用いた場合には、各光源からの発光タイミングをずらすことで、複数の蛍光を分離して検出できる。また、各光源からの光のピーク波長に適した色素を用いることで、複数の蛍光のそれぞれの波長領域の重複部分を減らすこともできる。光源は、粒子から検出目的の波長領域の光が発せられる限り制限されない。例えば、光源としては、ハロゲンランプ、ＬＥＤ（Ｌｉｇｈｔ ｅｍｉｔｔｉｎｇ ｄｉｏｄｅ）ランプ、気体レーザ及びレーザダイオード（半導体レーザ）よりなる群から選択される１種以上の光源を使用することができる。フォトダイオード、ダイクロイックミラー、及びバンドパスフィルタの数は、粒子に由来する光のピーク波長の数に応じて変更することができる。また、フォトダイオード、ダイクロイックミラー、及びバンドパスフィルタの種類も、粒子に由来する光のピーク波長、又は波長領域、及びその強さに応じて選択することができる。

【0033】

各受光素子２２Ａ～２２Ｆが出力する検出信号は、図示しないプリアンプにより増幅され、信号処理部６（図１に示す）に送られる。信号処理部６は、測定部２から出力される検出信号に必要な信号処理を行う信号処理回路よりなる。

【0034】

［試料調製部の構成］
試料調製部３は、図１及び図３～図７に示すように、測定試料の調製に用いられる検体中の測定対象細胞の濃度を調整するうえ、検体と複数の細胞検出試薬から選択される１又は複数の細胞検出試薬とから測定試料を調製する。なお、以下に示す試料調製部３の構成はあくまでも一例であり、試料調製部３は、以下の構成に限定されるものではない。

【0035】

試料調製部３は、検体分注部３０Ａと、試薬分注部３０Ｂと、検体容器設置部３１と、分注用チューブ設置部３２と、分注用チューブ貯蔵部３３と、ピペットチップ貯蔵部３４と、試薬設置部３５と、チューブ移送部３６と、液量検出手段３７と、遠心分離部３８と、受付部３９とを備える。なお、図３～図６において、ＸＹＺ軸は互いに直交しており、Ｘ軸は左右方向を、Ｙ軸は前後方向を、Ｚ軸は鉛直方向を、それぞれ示している。

【0036】

検体分注部３０Ａ及び試薬分注部３０Ｂは、それぞれノズル３００を備えている。ノズル３００には、例えば使い捨てのプラスチック製のピペットチップ３０１が装着される。なお、ピペットチップ３０１は必ずしも使用する必要はない。検体分注部３０Ａは、ノズル３００がピペットチップ３０１を介して検体の吸引及び吐出を行うことで、検体容器設置部３１の検体容器１０から検体を所定量吸引して、分注用チューブ１１へ検体を所定量吐出する。試薬分注部３０Ｂは、ノズル３００がピペットチップ３０１を介して液体の吸引及び吐出を行うことで、試薬設置部３５の試薬容器３５０から試薬を所定量吸引して、分注用チューブ１１へ試薬を所定量吐出する。ノズル３００により吸引された検体や試薬の分量（容積）は、各分注部３０Ａ，３０Ｂに設けられた流量センサ（図示せず）から取
得することができる。各分注部３０Ａ，３０Ｂは、それぞれノズル３００をＸＹＺ軸方向に移動させるノズル移送手段３０２を備えている。ノズル移送手段３０２は、図示しないモータの駆動によりノズル３００を移動させる。

【0037】

なお、本実施形態の検体分注部３０には、検体容器１０に収容された検体の液量を検出するための液量検出手段３７として、ノズル３００が検体容器設置部３１の検体容器１０の真上に位置した際に検体容器１０内の検体の液面を検知する液面検知センサ（図示せず）が設けられている。検体容器１０内の検体の液面を検知することで、検体容器１０に収容された検体の液量（検体量）を算出することができる。

【0038】

検体容器設置部３１には、被験者から採取された検体を収容した検体容器１０がセットされる。検体容器設置部３１には、複数の検体容器１０をセットできる。分注用チューブ設置部３２には、測定部２による測定に用いられる検体や調製試料を収容するための分注用チューブ１１がセットされる。分注用チューブ設置部３２には、複数の分注用チューブ１１をセットできる。

【0039】

検体容器設置部３１は、内部に加温装置や冷却装置等の検体温度調整手段３１０を備える。検体温度調整手段３１０により、検体容器１０に収容された検体の温度を検体に適した温度とすることができる。冷却装置は、例えば、ペルチェ素子、コンプレッサ、その他の冷却装置で構成される。加温装置は、例えば、ブロックヒータ、その他のヒータで構成される。検体容器設置部３１内の温度は、図示しない温度センサによって測定される。

【0040】

分注用チューブ貯蔵部３３には、分注用チューブ１１が複数ストックされている。分注用チューブ貯蔵部３３の分注用チューブ１１は、チューブ移送部３６によって分注用チューブ設置部３２まで運ばれてセットされる。

【0041】

ピペットチップ貯蔵部３４には、ノズル３００に装着されるピペットチップ３０１が複数ストックされている。ピペットチップ貯蔵部３４には、大きさの異なるピペットチップ３０１がストックされている。ノズル３００は、大小いずれのピペットチップ３０１を装着可能であり、ノズル３００には、検体や試薬の分注量に応じた大きさのピペットチップ３０１が装着される。なお、使用済みのピペットチップ３０１は、破棄部３４０に破棄される。

【0042】

試薬設置部３５は、複数の試薬を備えた試薬庫であり、試薬設置部３５の内部には、試薬が収容された複数の試薬容器３５０がセットされる。試薬設置部３５には、それぞれ、複数の開口３５１が形成され、開口３５１の下方に試薬容器３５０がセットされている。試薬分注部３０Ｂのノズル３００を開口３５１から試薬容器３５０内に進入させることで、試薬の吸引が可能である。

【0043】

試薬設置部３５には、複数の細胞検出試薬がセットされる。各細胞検出試薬に含まれる少なくとも１種の細胞標識物質は、各細胞検出試薬間で異なっていることが好ましい。また、一度に試薬設置部３５にセットされる複数の細胞検出試薬の組み合わせは、例えば白血病の種類を特定するために必要な一群の細胞マーカを検出できる細胞標識物質群を網羅する組み合わせとすることができる。細胞検出試薬は、細胞標識物質の他、緩衝液を含んでいてもよい。また前記緩衝液は、塩化ナトリウム等の塩を含んでいてもよい。前記塩は、測定試料を調製した際に、細胞内と等張になるように添加されていることが好ましい。さらに、細胞検出試薬は、メタノール、パラフォルムアルデヒド等の細胞固定成分を含んでいてもよい。また、細胞検出試薬は、ＲＮａｓｅ等を含んでいてもよい。

【0044】

試薬設置部３５には、細胞検出試薬の他、例えば溶血剤、洗浄液、細胞膜透過剤、希釈
液、前記細胞固定成分、ＲＮａｓｅ等、測定対象細胞の分析に応じて測定試料の調製に必要な細胞検出試薬以外の試薬をセットすることができる。なお、前記希釈液は、少なくとも緩衝液を含み、必要に応じて塩化ナトリウム等の塩を含んでいてもよい。前記塩は、測定試料を調製した際に、細胞内と等張になるように添加されていてもよい。前記希釈液は、赤血球を溶血させる溶血剤を含んでいてもよい。また、前記溶血剤は、白血球等の有核細胞を溶解しないことが好ましい。溶血剤として好ましくは、界面活性剤を含む水溶液、クエン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ、リン酸緩衝液等である。界面活性剤は、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両極性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、天然界面活性剤等のいずれであってもよい。また、一つの溶血剤に複数種の界面活性剤を含んでいてもよい。より好ましくは、カチオン性界面活性剤と、有機酸とを含みｐＨが４．５～１１．０の範囲である溶血剤；ノニオン性界面活性剤と有機酸とを含み、ｐＨが４．５～１１．０の範囲である溶血剤；アニオン性界面活性剤と、天然界面活性剤とを含み、ｐＨが４．５～１１．０の範囲である溶血剤を挙げることができる。前記ｐＨの範囲は、好ましくはｐＨ６．０～８．０である。これらの溶血剤は、さらにメタノール、エタノール、フェノキシエタノール等のアルコール類、ホルムアルデヒド等の固定液、キレート剤、アジ化ナトリウム等を含んでいてもよい。より具体的な溶血剤としては、塩化アンモニウム溶血剤（ｐＨ７．３、塩化アンモニウム１．６８Ｍ、炭酸水素カリウム１００ｍＭ、ＥＤＴＡ ２Ｋ ０．８２ｍＭ）、細胞固定溶血剤（ｐＨ７．ホルムアルデヒド３、１０％、メタノール３．５％、ジエチレングリコール３０％、クエン酸１００ｍＭ）、細胞膜透過性溶血剤（ｐＨ７．３、フェノキシエタノール１％以下、サポニン１％以下、Ｎ－ラウリルサルコシンナトリウム塩１％以下、アジ化ナトリウム１％以下）を挙げることができる。また、細胞膜透過性溶血剤は、細胞内の蛋白質を検出する際に細胞膜透過剤としても使用することができる。

【0045】

試薬設置部３５に設置される各試薬容器３５０には、それぞれの試薬に関する情報を格納したバーコートやタグ等が付されている。試薬に関する情報には、試薬を特定するための識別情報（ＩＤ）が含まれる。また、試薬に関する情報には、測定項目の名称等が含まれていてもよい。試薬設置部３５はこれらのバーコード等を読み取り可能なバーコードリーダやＲＦＩＤリーダ等の受付部３９（図１に示す）を備えており、試薬容器３５０に付されたバーコード等を読み取ることで、試薬設置部３５に設置された細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬に関する情報が取得される。

【0046】

なお、試薬設置部３５には、それぞれの試薬容器３５０内の試薬の温度を所望の温度に保つため、内部に試薬温度調整手段（図示せず）を備えていてもよい。前記試薬温度調整手段は、試薬容器３５０内の試薬を冷却することができる冷却装置、及び／又は、試薬容器３５０内の試薬を加温することができる加温装置である。試薬設置部３５内の温度は、図示しない温度センサによって測定できる。

【0047】

チューブ移送部３６は、分注用チューブ１１を保持する把持具３６０と、把持具３６０をＸＹＺ軸方向に移動させる移動手段３６１とを備える。移動手段３６１は、図示しないモータの駆動により把持具３６０を移動させる。分注用チューブ設置部３２の分注用チューブ１１は、把持具３６０により保持された状態で移動することで、遠心分離部３８や測定部２まで運ばれる。

【0048】

遠心分離部３８は、検体と所定の試薬とから測定試料を調製する調製処理を行う。また、遠心分離部３８は、遠心分離により検体中の測定対象細胞の濃度を調整する濃度調整処理を行う。つまり、本実施形態では、遠心分離部３８が濃度調整部として機能している。

【0049】

遠心分離部３８は、有底筒状の槽本体３９０と、槽本体３９０の上部開口を覆う蓋体３９１と、槽本体３９０の下部に設けられた温度調整槽３９２とを備えた収容部内に設けら
れている。蓋体３９１は、ヒンジ３９３を介して槽本体３９０に取り付けられている。蓋体３９１には、上方から槽本体３９０内に進入するための第１進入口３９４が形成されている。第１進入口３９４は、各分注部３０Ａ，３０Ｂのノズル３００を槽本体３９０内に進入可能とし、ノズル３００は、第１進入口３９４を通って槽本体３９０内に進入して、槽本体３９０内の遠心分離部３８に保持された分注用チューブ１１内に検体や試薬を吐出したり、分注用チューブ１１内の液体を吸引する。

【0050】

槽本体３９０は、第１進入口３９４を開閉する開閉手段３９５を備えている。実施形態の開閉手段３９５は、第１進入口３９４を閉じるシャッター３９５ａと、シャッター３９５ａを開閉動作させる駆動部３９５ｂと、シャッター３９５ａ及び駆動部３９５ｂを連結する連結部３９５ｃとによって構成されている。駆動部３９５ｂは、例えば、ソレノイドであり、シャッター３９５ａをＹ軸方向に移動させる。図５（ａ）に示すように、第１進入口３９４がシャッター３９５ａによって閉じられていると、槽本体３９０内がほぼ密閉され、槽本体３９０内の温度変化を抑制できる。また、図５（ｂ）に示すように、シャッター３９５ａが移動して、第１進入口３９４が開いていると、第１進入口３９４からノズル３００を槽本体３９０内に進入させることができる。

【0051】

なお、図４に示すように、槽本体３９０には、後方から槽本体３９０内に進入するための第２進入口３９６が形成されている。第２進入口３９６は、チューブ移送部３６の把持具３６０を槽本体３９０内に進入可能とし、把持具３６０は、第２進入口３９６を通って槽本体３９０内に進入して、遠心分離部３８の保持部３８０に分注用チューブ１１をセットしたり、遠心分離部３８の保持部３８０から分注用チューブ１１を取り出す。シャッター３９５ａは、第１進入口３９４とともに第２進入口３９６を閉じることができるように、断面視Ｌ字状に形成されている。

【0052】

遠心分離部３８は、分注用チューブ１１を保持する複数の保持部３８０と、複数の保持部３８０が外周に取り付けられたロータ３８１とを備える。ロータ３８１の回転により、各保持部３８０に保持された分注用チューブ１１内の液体に対し遠心分離が行われる。ロータ３８１は、槽本体３９０の底部に回転自在に支持された回転軸３８２を回転中心にして回転する。回転軸３８２の下部には、第１プーリ３８３が設けられている。回転軸３８２を回転駆動するモータ３８４の回転軸３８５には第２プーリ３８６が設けられ、第１プーリ３８３及び第２プーリ３８６の間には無端ベルト３８７が巻き掛けられている。モータ３８４の回転は、第１プーリ３８３、無端ベルト３８７及び第２プーリ３８６を介して、回転軸３８２に伝達され、ロータ３８１が回転する。モータ３８４は、試料調製部８の外部に配置されている。

【0053】

温度調整槽３９２は、槽本体３９０と、槽本体３９０の底部によって仕切られている。槽本体３９０の底部には、貫通孔３９７ａ，３９７ｂが形成されており、貫通孔３９７ａ，３９７ｂによって槽本体３９０と温度調整槽３９２とが連通している。

【0054】

温度調整槽３９２内には、槽本体３９０内の雰囲気温度を調整する温度調整手段３９８が設けられている。温度調整手段３９８は、例えばペルチェ素子３９８ａを有している。また、温度調整槽３９２内には、貫通孔３９７ａ，３９７ｂを介して槽本体３９０及び温度調整槽３９２を循環する対流を生じさせる対流発生手段３９９ａ，３９９ｂが設けられている。対流発生手段３９９ａ，３９９ｂは、例えばファン等で構成される。対流発生手段３９９ａ，３９９ｂにより生じる気流によって、温度調整手段３９８から発せられた冷熱を温度調整槽３９２から槽本体３９０に送ることで、槽本体３９０内を加温して室温よりも高い温度に保持したり、槽本体３９０内を冷却して室温よりも低い温度に保持したり、槽本体３９０内を室温と同程度の一定の温度に保持することができる。槽本体３９０内には、槽本体３９０内の温度を監視するための温度センサ４００が設けられている。なお
、温度センサ４００は、温度調整槽３９２内に設けられてもよい。

【0055】

対流発生手段３９９ａ，３９９ｂは、本実施形態では、温度調整手段３９８の近傍に位置する対流発生手段３９９ａは、その上方に位置する貫通孔３９７ａから温度調整槽３９２に流入した対流を温度調整槽３９２内で水平方向へ流すことで、温度調整手段３９８から発せられた冷熱を、温度調整手段３９８から離れた位置にある貫通孔３９７ｂへ送る。対流発生手段３９９ｂは、貫通孔３９７ｂの下方に位置し、対流発生手段３９９ａによる水平気流を上方の貫通孔３９７ｂに向かう上昇気流へと変える。これにより、温度調整手段３９８から発せられた冷熱を貫通孔３９７ｂから槽本体３９０内に効率よく送ることができる。

【0056】

本実施形態では、温度調整槽３９２の後方にダクト４０１が設けられている。ダクト４０１は、温度調整手段３９８によって生じた冷排熱又は温排熱を試料調製部８の外部へ排出するためのものである。ダクト４０１は、冷排熱又は温排熱を後方に流すファン４０２と、ファン４０２によって発生した気流をダクト４０１の外部へ排出する排気口４０３とを備えている。ダクト４０１は、外部処理部３７の下方に配置されている。

【0057】

なお、図８に示すように、温度調整槽３９２は必ずしも設ける必要はない。この場合、温度調整手段３９８は、槽本体３９０の内部、好ましくは槽本体３９０内の後側に設けられ、ダクト４０１は、槽本体３９０の後方に設けられる。また、温度調整手段３９８の近傍に対流発生手段３９９ａが槽本体３９０内に水平気流を生じさせるように配置される。

【0058】

試料調製部３には、上述した各部以外に、外部処理部６０を設けてもよい。外部処理部６０は、温度調整がなされておらず、室温で処理を行うためのものであり、本実施形態では、分注用チューブ１１内の上清を廃棄する廃棄部６００と、分注用チューブ１１内の液体を攪拌する攪拌部６０１とを備えている。廃棄部６００は、把持具３６０で保持された分注用チューブ１１を移動手段３６１によって傾けるデカントあるいは各分注部３０Ａ，３０Ｂのノズル３００による上清の吸引によって、分注用チューブ１１内の上清が廃棄される。撹拌部６０１は、例えば、把持具３６０で保持された分注用チューブ１１内の液体を振とう攪拌するボルテックスミキサーで構成される。なお、外部処理部６０は、分注用チューブ１１内の上清の廃棄及び分注用チューブ１１内の液体の撹拌以外の処理を室温で行えるように構成してもよい。

【0059】

［制御部の構成］
制御部４は、図１に示すように、プロセッサ４０と、記憶部４２に記録されている制御プログラムの読み出しやプロセッサ４０のデータ処理の作業領域に使用されるメモリ４１と、プロセッサ４０が測定部２や試料調製部３等の各部の動作制御を行うための各種制御プログラム及び各種データを記録する記憶部４２と、を含んでいる。メモリ４１は、ＲＡＭ（Ｒａｎｄｏｍ ａｃｃｅｓｓ ｍｅｍｏｒｙ）で構成される。記憶部４２は、ＲＯＭ（ｒｅａｄ ｏｎｌｙ ｍｅｍｏｒｙ）やハードディスク等で構成される。

【0060】

制御部４は、例えば、測定部２の受光素子２２Ａ～２２Ｆから出力される検出信号を信号処理部６を介して取得して、記憶部４２に記録する。

【0061】

また、制御部４は、試料調製部３の検体分注部３０Ａ及び試薬分注部３０Ｂのノズル３００及びノズル移送手段３０２の動作を制御して、ノズル３００の移動及びノズル３００による検体や試薬等の液体の吸排を行う。

【0062】

また、制御部４は、試料調製部３の検体容器設置部３１の温度調整手段３１０及び試薬設置部３５の温度調整手段（図示せず）の動作を温度センサ（図示せず）の検出信号に基
づいて制御して、検体容器設置部３１及び試薬設置部３５の温度調整を行う。

【0063】

また、制御部４は、試料調製部３のチューブ移送部３６の動作を制御して、分注用チューブ１１の移送及び保持を行う。

【0064】

また、制御部４は、試料調製部３の開閉手段３９５を制御して、進入口３９４，３９６の開閉を行う。

【0065】

また、制御部４は、試料調製部３の遠心分離部３８を制御して、遠心分離処理を行う。

【0066】

また、制御部４は、試料調製部３の温度調整手段３９８及び対流発生手段３９９ａ，３９９ｂを温度センサ４００の検出信号に基づいて制御して、遠心分離部３８の温度調整を行う。

【0067】

また、制御部４は、試料調製部３のファン４０２の動作を制御して、遠心分離部３８の冷温熱の排熱を行う。

【0068】

また、制御部４は、試料調製部３の液量検出手段３７としての液面検知センサからの検出信号を取得して、記憶部４２に記録する。

【0069】

また、制御部４は、試料調製部３の試薬設置部３５の受付部３９が読み取った各試薬（細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬）の識別情報（ＩＤ）を取得する。そして、読み取った各試薬の識別情報（ＩＤ）に基づいて、試薬設置部３５のいずれの位置にどの試薬がセットされたかを示すデータを記憶部４２に記録する。また、読み取った各細胞検出試薬の識別情報（ＩＤ）に基づいて、記憶部４２に記録されている前記識別情報（ＩＤ）に対応する各細胞検出試薬を用いて検査される検査項目に対応した測定試料の調製に関する情報を読み出し、当該測定試料の調製に関する情報に基づいて試料調製部３を制御して、検体中の測定対象粒子の濃度調整処理や測定試料の調製処理を行う。なお、測定試料の調製に関する情報は、測定検体に応じてユーザーが独自に決定して、ワークリストと呼ばれるファイルに細胞検出試薬の種類などと一緒に記録する。

【0070】

測定試料の調製の仕方は、測定項目（例えば、ＤＮＡ量を分析するか、抗原の種類は何か等）により異なり、測定項目ごとにその細胞分析に適した測定試料の調製が必要となる。測定試料の調製に関する情報には、測定対象細胞の測定項目に応じた測定試料の調製に関する情報が含まれており、この測定試料の調製に関する情報に基づいて測定試料を調製することで、測定対象細胞の分析に適した測定試料の調製が可能となる。

【0071】

測定試料の調製に関する情報には、測定可能な測定項目の情報及び検査項目の情報、細胞分析に用いる細胞検出試薬の特徴（測定項目の情報、及び抗体等に標識されている粒子標識物質の情報、抗体の交差反応性、同時に測定してもよい測定項目等を含む）、検体の種類、各細胞検出試薬を用いて細胞分析を行うために必要な細胞の数（必要細胞数）、一定の検体量あたりに含まれる測定対象細胞の割合、検体量、測定試料の調製に必要なその他の試薬の種類、各試薬の分注量、分注する試薬の順序、試薬分注時の温度、測定に必要な測定試料（分注用チューブ１１）の数、等の情報が含まれていてもよい

【0072】

また、制御部４は、通信インタフェース７を介して解析部５と接続されており、測定部２で測定した測定データや各部の処理に必要なデータを解析部５との間で送受信する。

【0073】

［解析部の構成］
解析部５は、図９に示すように、処理部５０と、入力部５１と、表示部５２とを備える
。処理部５０は、プロセッサ５４、メモリ５５、記憶部５６、入出力インタフェース５７、画像出力インタフェース５８、通信インタフェース５９とを備える。処理部５０は、汎用コンピュータで構成することができる。メモリ５５は、ＲＡＭ（Ｒａｎｄｏｍ ａｃｃｅｓｓ ｍｅｍｏｒｙ）で構成される。メモリ５５は、記憶部５６に記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、メモリ５５は、プロセッサ５４の各種データ処理の作業領域に使用される。記憶部５６は、ＲＯＭ（ｒｅａｄ ｏｎｌｙ ｍｅｍｏｒｙ）、ハードディスク等で構成される。記憶部５６は、コンピュータプログラム及びこれに用いる各種処理データを記録する。記憶部５６（例えばハードディスク）には、制御部４への動作命令の送信、測定部２で行った測定データの受信及び分析処理、及び、処理した分析結果の表示などを行う操作プログラムがインストールされている。

【0074】

入力部５１は、例えばタッチパネル、キーボード、マウス、ペンタブレット等により構成される。表示部５２は、例えばディスプレイ等により構成される。

【0075】

［制御部の動作］
図１０に示すように、制御部４は、検体容器１０から取得した検体を測定して検体中の測定対象細胞を検出するプレ測定ステップＳ１と、プレ測定ステップの測定データに基づいて検体容器１０内の検体中の測定対象細胞の濃度情報を生成する生成ステップＳ２と、測定試料の調製に用いられる粒子検出試薬の種類情報を取得して検査項目を決定する決定ステップＳ３と、生成した濃度情報と測定試料の調製に用いる細胞検出試薬の種類（測定試料の調製に関する情報）とに応じて、検体中の測定対象細胞の濃度を自動で調整する調整ステップＳ４と、検体と細胞検出試薬とから測定試料を調製する調製ステップＳ５と、測定試料の本測定を行う本測定ステップＳ６で各処理を行う。以下、詳細に説明する。

【0076】

第１実施例
図１１及び図１２Ａを用いて、制御部４の動作の第１実施例について説明する。なお、以下のフローはあくまでも一例であり、以下のフローに限定されるものではない。第１実施例は、所定の検査項目の各測定項目を測定するための測定試料の調製に必要な複数の細胞検出試薬を全て１本の分注用チューブ１１において検体と混合し、測定試料を調製する例である。

【0077】

まず、図１１のＳ１０において、制御部４は、測定試料の調製に用いる細胞検出試薬の識別情報（ＩＤ）の入力を受け付ける。測定の前に、測定試料の調製に必要な複数の細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬が試料調製部３の試薬設置部３５にセットされる。このとき、試薬設置部３５の受付部３９により、試薬容器３５０に付されたバーコード等から当該試薬容器３５０内の試薬の識別情報（ＩＤ）が取得される。制御部４は、各試薬の識別情報（ＩＤ）を受信すると、当該識別情報（ＩＤ）に基づいて、測定試料の調製に用いる粒子検出試薬の種類を決定して、Ｓ１１に進み、決定した種類の細胞検出試薬を用いて検査される検査項目に対応する各測定項目の測定試料の調製に関する情報を記憶部４２から読み出す。また、Ｓ１２において、制御部４は、読み出した測定試料の調製に関する情報を解析部５に送信する。また、試薬設置部３５のいずれの位置にどの試薬がセットされたかを示すデータを記憶部４２に記録する。

【0078】

例えば、図１３Ａは、検体を末梢血、検査項目を制御性Ｔ細胞とした例において、記憶部４２に記録されている測定試料の調製に関する情報の例である。図１３Ａに示されているＣＤ２５、ＣＤ３及びＣＤ４は細胞表面マーカであり、細胞検出試薬２及び３にはこれらの細胞表面マーカに結合する抗体がそれぞれ含まれている。また、当該抗体は、図１３Ａに示す蛍光物質で標識されている。ＦｏｘＰ３は核内蛋白質であり、細胞検出試薬４は、前記蛋白質に対する蛍光標識抗ＦｏｘＰ３抗体を含む。また、図１３Ａの測定試料の調製に関する情報には、各細胞検出試薬１～４を用いて細胞分析を行うために必要な細胞（
白血球）の必要細胞数、検体量、測定試料の調製に必要なその他の試薬の種類、各試薬の混合量、分注する試薬の順序、等の情報が含まれている。

【0079】

次に、制御部４は、Ｓ１３において、検体分注部３０Ａを制御し、検体容器設置部３１に設置された検体容器１０内の検体をノズル３００によりその一部を吸引して分注用チューブ１１に吐出する。検体は、分注用チューブ設置部３２にセットされた分注用チューブ１１に吐出してもよいし、チューブ移送部３６により遠心分離部３８にセットされた分注用チューブ１１に吐出してもよい。なお、必要に応じて、試薬設置部３５に設置された希釈液を試薬分注部３０Ｂのノズル３００により所定量吸引して、検体が分注された分注用チューブ１１に吐出して混合してもよい。また、制御部４は、検体容器１０内の検体の液量を、液量検出手段３７としての液面検知センサ（図示せず）からの検出信号に基づき算出する。

【0080】

次に、Ｓ１４において、制御部４は、チューブ移送部３６を制御し、検体を分注した分注用チューブ１１を測定部２まで移送する。分注用チューブ１１が測定部２の所定位置２９（図３に示す）まで移送されると、鉛直方向（Ｚ方向）に昇降動作可能な吸引部２９ａにより、分注用チューブ１１から検体が吸引され、測定部２のフローセル２０に供給される。これにより、制御部４は、Ｓ１５において、測定部２を用いてフローサイトメトリー解析による検体の測定を行い、検体中の測定対象細胞の細胞数を計数する。

【0081】

次に、Ｓ１６において、制御部４は、測定部２の測定データに基づいて、検体容器１０内の検体中の測定対象細胞の濃度情報を生成する。なお、検体中の測定対象細胞の濃度とは、単位容積当たりの検体に含まれる測定対象細胞の数のことを指す。具体的に、検体の測定のために検体分注部３０Ａのノズル３００により検体容器１０から吸引された検体量は、検体分注部３０Ａに設けられた流量センサ（図示せず）から取得可能であり、測定部２で計数された測定対象細胞の細胞数（測定データ）を吸引された検体量で割ることにより、検体中の測定対象細胞の濃度情報を生成することができる。

【0082】

なお、測定対象細胞の細胞数は、測定部２がフローサイトメータである場合には、前方散乱光の検出信号に基づいて計数することができる。また、測定部２がフローサイトメータである場合には、検体に含まれる複数種の細胞における測定対象細胞の割合を考慮して、測定対象細胞の細胞数を計数することができる。具体的には、測定部２で計数された全細胞数に、同じく測定部２で計数された測定対象細胞の割合を積算して、測定対象細胞の細胞数及び測定対象細胞の濃度を算出することができる。

【0083】

次に、Ｓ１７において、制御部４は、検査項目を決定する。検査項目の決定は、上述した受付部３９により取得した複数の細胞検出試薬の識別情報（ＩＤ）により、各細胞検出試薬の識別情報（ＩＤ）を含む検査項目を特定することで決定される。例えば、図１３Ａに示す例では、受付部３９で取得した細胞検出試薬の識別情報（ＩＤ）１～４に基づいて、検査項目Ａ（制御性Ｔ細胞）が決定されている。また、Ｓ１８において、制御部４は、決定した検査項目を解析部５に送信する。

【0084】

なお、制御部４は、Ｓ１６において生成した検体中の測定対象細胞の濃度情報を記憶部４２に記憶されている基準値と比較し、前記測定対象細胞の濃度が基準値よりも高い場合には、試薬設置部３５に設置された別の細胞検出試薬群に対応する検査項目を測定してもよい。

【0085】

例えば検体が末梢血であるとき、制御部４は、プレ測定で得られた測定対象細胞（好ましくは有核細胞）の濃度情報を、記憶部４２に記録されている前記細胞数の基準値と比較する。前記基準値は、例えば検体が末梢血である場合には、１５，０００個／μｌ程度で
ある。プレ測定で得られた有核細胞の濃度がこの値を上回る場合には、造血器腫瘍が疑われる。このため、制御部４は、プレ測定で得られた有核細胞の濃度がこの値を上回ると判断した場合には、さらに造血器腫瘍を同定するための分析項目を追加するための測定試料を調製するように、試料調製部３を制御する。造血器腫瘍を同定するための分析項目は、蛋白質であっても核酸であってもよい。

【0086】

次に、制御部４は、Ｓ１９において、全ての測定項目の測定が可能であるかを判定する。このＳ１９では、図１２ＡのＳ１９０において、まず、Ｓ１６で生成した検体中の測定対象細胞の濃度情報と、検体容器１０内の検体量とに基づいて、検体容器１０内の検体中の測定対象細胞の数（細胞の総数）を算出する。次に、制御部４は、Ｓ１９１において、算出された検体中の測定対象細胞の数が、検査項目の全ての測定項目の測定に十分な細胞数以上であるか否かを判定する。

【0087】

例えば図１３Ａの例では、制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数は例えば１×１０^４個である。ここで、図１４に示すように、検体のプレ測定の結果、検体Ａの白血球濃度が１×１０^３個／μｌであり、検体量が１ｍｌであると、検体Ａ中の測定対象細胞である白血球の数は、１×１０^６個であるので、検体Ａは全ての測定項目の測定条件を充足する。また、検体Ｂ中の測定対象細胞である白血球の数は、それぞれ１×１０^７個、１×１０^５個であるので、検体Ｂ，Ｃも全ての測定項目の測定条件を充足する。そのため、この場合には、図１２ＡのＳ１９１は「ＹＥＳ」となってＳ１９２に進み、制御部４は、全ての測定項目を測定項目に決定する。また、決定結果を記憶部４２に記録するとともに、解析部５に送信し、図１１のＳ２０に進む。

【0088】

一方で、図示は省略するが、検体中の測定対象細胞である白血球の数が１×１０^４個を下回ると、細胞検出試薬４を用いる測定項目の測定条件を充足しないことになる。この場合、図１２ＡのＳ１９１は「ＮＯ」となってＳ１９３に進み、測定項目の測定を行うのに必要な細胞数の確保ができておらず、測定項目を測定することができない通知を解析部５に送信する。

【0089】

なお、検体を追加することで、検体中の測定対象細胞の数が全ての測定項目の測定に十分な細胞数以上となる場合には、検体を遠心分離部３８により濃縮して新たな検体を混合することで、検体中の測定対象細胞の数を全ての測定項目の測定に十分な細胞数以上としてもよい。

【0090】

次に、制御部４は、図１１のＳ２０において、検体の濃度調整が必要か否かを判定する。検体の濃度調整が必要か否かは、Ｓ１６で生成した検体中の測定対象細胞の濃度情報と、測定試料の調製に用いる粒子検出試薬とに応じて判定され、検体中の測定対象細胞の濃度が所定値より大きいあるいは所定値より小さい場合には、濃度調整が必要と判定される。一方で、検体中の測定対象細胞の濃度が所定値である場合には、濃度調整が不要と判定される。当該所定値は、一定値であってもよいし、一定の範囲を有していてもよい。

【0091】

例えば図１３Ａの例では、制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数が１×１０^４個であり、検体量が１０μｌであることから、上記所定値となる検体中の測定対象細胞である白血球濃度は１×１０^３個／μｌとなる。ここで、図１４に示すように、検体のプレ測定の結果、検体Ａの白血球濃度が１×１０^３個／μｌであり、検体Ｂの白血球濃度が１×１０^４個／μｌであり、検体Ｃの白血球濃度が１×１０^２個／μｌであると、検体Ａは白血球濃度が所定値であるため、濃度調整は不要と判定される。一方で、検体Ｂは白血球濃度が所定値より大きく、検体Ｃは白血球濃度が所定値より小さいため、濃度調整が必要と判定される。

【0092】

なお、測定項目によっては、検体中の測定対象細胞の割合が低い場合もある。例えば骨髄中の造血幹細胞（測定対象細胞）がこの例である。この場合には、細胞検出試薬に含まれる一定の検体量あたり含まれる測定対象細胞の割合の情報にしたがって、検体の濃縮調製が必要であるか否か判断される。この場合の検体の濃縮調整は、後述する遠心分離で行ってもよい。また、フローサイトメータにソーティング機能が備えられている場合には、前記ソーティング機能を使用して検体の中から測定対象細胞を回収し濃縮してもよい。

【0093】

制御部４は、図１１のＳ２０において、検体の濃度調整が不要であると判定すると、Ｓ２１に進み、検体分注部３０Ａを制御して、所定の検体量の検体をノズル３００により吸引して分注用チューブ１１に吐出する。そして、制御部４は、チューブ移送部３６を制御して、検体を分注した分注用チューブ１１を試料調製部３の遠心分離部３８にセットした後、Ｓ２３において、測定試料の調製に関する情報に基づいて、試薬分注部３０Ｂを制御して、測定試料の調製のため、細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬を分注用チューブ１１に分注する。

【0094】

具体的には、制御部４は、測定試料の調製に関する情報に含まれる、測定試料の調製に必要な細胞検出試薬の種類、測定試料の調製に必要な細胞検出試薬以外の試薬の種類、各試薬の分注の順序、各試薬の分注量、検体量、等に基づいて、試料調製部３による測定試料の調製（分注、希釈、洗浄等）動作を制御する。測定試料の調製の際に、制御部４は必要に応じて、遠心分離部３８を制御して遠心分離を行ったり、試薬分注部３０Ｂを制御して分注用チューブ１１内の上清を取り除いてもよい。また、測定試料の調製に関する情報に、各試薬の分注時の温度に関する情報を含ませておき、制御部４は、測定試料の調製に関する情報に含まれる各試薬の分注時の温度に関する情報に基づいて、温度調整手段３９８及び対流発生手段３９９ａ，３９９ｂを制御することにより、各試薬の分注時の遠心分離部３８の温度を調整してもよい。

【0095】

例えば図１４の検体Ａを例にして説明すると、図１５（ａ）に示すように、制御部４は、検体分注部３０Ａの制御により、プレ測定とは別の分注用チューブ１１に検体容器１０から検体Ａの一部を分注する。分注用チューブ１１に分注される検体量は、図１３Ａに示すように制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数が１×１０^４個であり、検体Ａの白血球濃度は１０^３個／μｌであるので、測定試料の調製のために検体Ａを１０μｌ、分注用チューブ１１に分注すれば、必要細胞数を充足する。

【0096】

次に、制御部４は、チューブ移送部３６を制御し、検体Ａが収容された分注用チューブ１１を試料調製部３の遠心分離部３８に移送してセットする。そして、図１３Ａに示す測定試料の調製に関する情報にしたがって、検体として末梢血を用いて制御性Ｔ細胞を分析する場合、初めに赤血球を溶血させることが好ましいため、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、試薬設置部３５にセットされた溶血剤５μｌを検体Ａが収容された分注用チューブ１１に分注する。続いて、制御部４は、図１３Ａに示す測定試料の調製に関する情報にしたがって、試薬分注部３０Ｂの制御により、試薬設置部３５にセットされた細胞検出試薬２を１０μｌ、細胞検出試薬３を５μｌ、検体が収容された分注用チューブ１１に分注する。続いて、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、細胞検出試薬２及び細胞検出試薬３と反応させた細胞を収容している分注用チューブ１１に、試薬設置部３５にセットされた細胞膜透過剤１０μｌを分注する。続いて、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、細胞膜透過剤１０μｌが混合された分注用チューブ１１に、試薬設置部３５にセットされた細胞検出試薬４を１０μｌ分注する。最後に、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、細胞検出試薬４が混合された分注用チューブ１１に、試薬設置部３５にセットされた細胞検出試薬１を５μｌ分注する。なお、細胞検出試薬１は、核染色である。

【0097】

なお、図１５（ａ）の例では、各細胞検出試薬を分注した後、細胞と抗体とを十分に反応させるため、１５分から３０分程度インキュベーションすることが好ましい。また、インキュベーション後、次の細胞検出試薬を分注する前に、細胞を洗浄してもよい。洗浄方法は、制限されないが、例えば、細胞が収容された分注用チューブ１１を遠心分離部３８により遠心分離し、上清を除去し、希釈液等を添加して細胞を再懸濁させることにより行うことができる。

【0098】

そして、制御部４は、Ｓ２４において、上記の通り調製された測定試料を収容した分注用チューブ１１を、チューブ移送部３６の制御により、測定部２まで移送する。分注用チューブ１１が測定部２の所定位置２９（図３に示す）まで移送されると、鉛直方向（Ｚ方向）に昇降動作可能な吸引部２９ａにより、分注用チューブ１１から測定試料が吸引され、測定部２のフローセル２０に供給される。これにより、制御部４は、Ｓ２５において、測定部２を用いてフローサイトメトリー法による測定試料の本測定を行う。

【0099】

一方で、Ｓ２０において、制御部４は、検体の濃度調整が必要であると判定すると、Ｓ２２に進み、検体容器１０内の検体の濃度調整を行う。具体的には、制御部４は、検体中の測定対象細胞の濃度が所定値より大きい場合には、検体の希釈を行うことで、検体中の測定対象細胞の濃度を所定値とすることができる。

【0100】

例えば、図１４の検体Ｂを例にして説明すると、図１５（ｂ）に示すように、制御部４は、検体分注部３０Ａの制御により、プレ測定とは別の分注用チューブ１１に検体容器１０から検体Ｂの一部を分注する。分注用チューブ１１に分注される検体量は、図１３Ａに示すように制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数が１×１０^４個であり、検体Ｂの白血球濃度は１×１０^４個／μｌであるので、測定試料の調製のために検体Ｂを１μｌ、分注用チューブ１１に分注すれば、必要細胞数を充足する。そして、検体Ｂの白血球濃度は所定値１×１０^３個／μｌよりも１０倍濃いため、希釈液により１０倍に希釈して検体量を１０μｌとすることで、白血球濃度を所定値とすることができる。

【0101】

また、制御部４は、検体中の測定対象細胞の濃度が所定値より小さい場合には、検体を濃縮する。検体の濃縮は、例えば遠心分離部３８の遠心分離により行うことができる。検体の濃縮を行うことで、検体中の測定対象細胞の濃度を所定値とすることができる。

【0102】

例えば、図１４の検体Ｃを例にして説明すると、図１５（ｃ）に示すように、制御部４は、検体分注部３０Ａの制御により、プレ測定とは別の分注用チューブ１１に検体容器１０から検体Ｃの一部を分注する。分注用チューブ１１に分注される検体量は、図１３Ａに示すように制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数が１×１０^４個であり、検体Ｃの白血球濃度は１×１０^２個／μｌであるので、測定試料の調製のために検体Ｂを１００μｌ、分注用チューブ１１に分注すれば、必要細胞数を充足する。そして、制御部４は、遠心分離部３８の制御により検体Ｃを遠心分離し、上清を分注用チューブ１１から試薬分注部３０Ｂの制御により吸引して取り除くとともに、希釈液を混合して検体量を１０μｌとすることで、白血球濃度を所定値とすることができる。なお、この場合、赤血球を溶血させてから濃縮することが好ましい。

【0103】

検体の濃度調整が終了すると、図１１のＳ２３に進み、測定試料の調製に関する情報に基づいて、試薬分注部３０Ｂを制御して、細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬を分注用チューブ１１に分注する等して、測定試料を調製する。そして、制御部４は、Ｓ２４において、調製された測定試料を収容した分注用チューブ１１を、チューブ移送部３６の制御により、測定部２まで移送し、Ｓ２５において、測定部２を用いてフローサイトメトリー法による測定試料の本測定を行う。

【0104】

そして、制御部４は、Ｓ２６において、測定部２からの本測定の測定データを解析部５に送信する。解析部５の処理部５０は、本測定の測定データを用いて検体を分析し、検体中の測定対象細胞に異常があるか否か等を判定する。

【0105】

第２実施例
図１１及び図１２Ｂを参照し、制御部４の動作の第２実施例について説明する。なお、以下のフローはあくまでも一例であり、以下のフローに限定されるものではない。第２実施例は、所定の検査項目の各測定項目を測定するための測定試料を異なる分注用チューブ１１で調製する例である。図１３Ｂは、第２実施例で制御部４の記憶部４２に記録されている測定試料の調製に関する情報の例である。この第２実施例では、細胞検出試薬として細胞検出試薬２～５を、それぞれ別の分注用チューブ１１で検体と混合することで、４種の測定試料（測定試料１～４）を調製する場合の動作について説明する。なお、３種以外の測定試料を調製する場合の動作も同様である。

【0106】

まず、図１１のＳ１０～Ｓ１８については、第１実施例と同様であるため、ここでは詳細な説明は省略する。

【0107】

次に、制御部は、Ｓ１９において、測定項目を決定する。このＳ１９では、図１２ＢのＳ１９０において、まず、Ｓ１６で生成した検体中の測定対象細胞の濃度情報と、検体容器１０内の検体量とに基づいて、検体容器１０内の検体中の測定対象細胞の数（細胞の総数）を算出する。次に、制御部４は、Ｓ１９１において、算出された検体中の測定対象細胞の数が、検査項目の全ての測定項目の測定に十分な細胞数以上であるか否かを判定する。この測定項目の測定に必要な細胞数は、測定試料の調製に関する情報から得られる。

【0108】

例えば図１３Ｂの例では、制御性Ｔ細胞の測定に必要な白血球数は、細胞検出試薬２を用いた測定項目では５×１０^３個であり、細胞検出試薬３を用いた測定項目では１×１０^３個であり、細胞検出試薬４を用いた測定項目では１×１０^３個であり、細胞検出試薬５を用いた測定項目では１０×１０^３個であるため、１７×１０^３個である。ここで、図１４に示すように、検体のプレ測定の結果、検体Ａの白血球濃度が１×１０^３個／μｌであり、検体量が１ｍｌであると、検体Ａ中の測定対象細胞である白血球の数は、１×１０^６個であるので、検体Ａは、全ての測定項目の測定条件を充足する。また、検体Ｂ中の測定対象細胞である白血球の数は、それぞれ１×１０^７個、１×１０^５個であるので、検体Ｂ，Ｃも全ての測定項目の測定条件を充足する。そのため、Ｓ１９１は「ＹＥＳ」となってＳ１９２に進み、制御部４は、全ての測定項目について測定項目に決定する。また、決定結果を記憶部４２に記録するとともに、解析部５に送信し、図１１のＳ２０に進む。

【0109】

一方で、図示は省略するが、検体中の測定対象細胞である白血球の数が例えば１６×１０^３個であると、全ての測定項目の測定条件を充足しないことになる。この場合、Ｓ１９１において、制御部４は、検体中の測定対象細胞の数が全ての測定項目の測定に十分な量でないと判定し、Ｓ１９３に進む。

【0110】

次に、制御部４は、Ｓ１９３において、検体中の測定対象細胞の数が、検査項目のいずれかの測定項目の測定に十分な細胞数以上であるか否かを判定する。例えば図１３Ｂの例において、検体中の測定対象細胞である白血球の数が例えば１６×１０^３個である場合、Ｓ１９３が「ＹＥＳ」であり、Ｓ１９４に進み、制御部４は、測定試料の調製に関する情報に含まれている細胞数が不足した場合に優先される測定項目の優先順位と、検体中の測定対象細胞の数とに基づいて、測定する測定項目を決定する。つまり、優先順位が高い順に、測定項目の測定条件を満たす細胞数が確保できるかどうかを判定し、測定条件を満たす細胞数が確保できる測定項目を測定項目として決定する。この測定項目を決定するための優先順位は、測定試料の調製に関する情報から得られる。

【0111】

例えば図１３Ｂの例で、検体中の測定対象細胞である白血球の数が例えば１６×１０^３個である場合、まず、優先順位が第１位の細胞検出試薬５を用いる測定項目について判定する。第１位の測定項目の測定に必要な細胞数は１０×１０^３個であるので、当該測定項目の測定条件は充足する。次に、優先順位が第２位の細胞検出試薬２を用いる測定項目について判定し、第２位の測定項目の測定に必要な細胞数は５×１０^３個であり、検体中の測定対象細胞である白血球の残りの数は６×１０^３個であるので、当該測定項目の測定条件は充足する。次に、優先順位が第３位の細胞検出試薬４を用いる測定項目について判定し、第３位の測定項目の測定に必要な細胞数は１×１０^３個であり、検体中の測定対象細胞である白血球の残りの数は１×１０^３個であるので、当該測定項目の測定条件は充足する。最後に、優先順位が第４位の細胞検出試薬３を用いる測定項目について判定し、第４位の測定項目の測定に必要な細胞数は１×１０^３個であり、検体中の測定対象細胞である白血球の残りの数は０個であるので、当該測定項目の測定条件は充足しない。よって、この場合、制御部４は、細胞検出試薬２，４，５を用いる測定項目について測定項目として決定する。また、決定結果を記憶部４２に記録するとともに、解析部５に送信し、図１１のＳ２０に進む。

【0112】

一方で、Ｓ１９３において、制御部４は、検体中の測定対象細胞の数が全ての測定項目について十分な量でないと判定すると、Ｓ１９５に進み、測定項目の測定を行うのに必要な細胞数の確保ができておらず、測定試料を調製することができない通知を解析部５に送信する。

【0113】

次に、制御部４は、図１１のＳ２０において、検体の濃度調整が必要か否かを判定する。この第２実施例では、例えば図１３Ｂの例に示すように、測定項目ごとに、その調製に用いられる検体中の測定対象細胞（白血球）の濃度が異なっており、細胞検出試薬２を用いた測定項目に求められる検体の白血球濃度の所定値は５×１０^２個／μｌであり、細胞検出試薬３を用いた測定項目に求められる検体の白血球濃度の所定値は１×１０^２個／μｌであり、細胞検出試薬４を用いた測定項目に求められる検体の白血球濃度の所定値は１×１０^２個／μｌであり、細胞検出試薬５を用いた測定項目に求められる検体の白血球濃度の所定値は１×１０^３個／μｌである。そのため、測定項目ごとに、Ｓ１６で生成した検体中の測定対象細胞の濃度情報に基づき濃度調整が必要かどうか判定され、検体中の測定対象細胞の濃度が上記所定値より大きいあるいは上記所定値より小さい場合には、制御部４は、濃度調整が必要と判定し、Ｓ２２に進む。なお、Ｓ２２濃度調整の方法は、第１実施例と同様であるため、ここでは詳細な説明は省略する。一方で、検体中の測定対象細胞の濃度が上記所定値である場合には、制御部４は、濃度調整が不要と判定し、Ｓ２１に進む。

【0114】

制御部４は、Ｓ２１において、検体分注部３０Ａを制御して、測定項目ごとに所定の検体量の検体をノズル３００により吸引して、それぞれの分注用チューブ１１に吐出する。そして、制御部４は、チューブ移送部３６を制御して、検体を分注した各分注用チューブ１１を試料調製部３の遠心分離部３８にセットした後、Ｓ２３において、測定試料の調製に関する情報に基づいて、試薬分注部３０Ｂを制御して、測定試料の調製のため、測定項目ごとに、細胞検出試薬及び細胞検出試薬以外の試薬を分注用チューブ１１に分注する。

【0115】

第２実施例のように、複数の細胞検出試薬を別々の分注用チューブ１１で検体と混合して測定試料を調製する場合、例えば図１３（Ｂ）の例では、制御部４は、検体分注部３０Ａの制御により、それぞれの細胞検出試薬２～５に応じた必要細胞数となるように、検体を各分注用チューブ１１に分注する。次に、制御部４は、チューブ移送部３６の制御により、検体が収容された各分注用チューブ１１を試料調製部３の遠心分離部３８に移送してセットする。続いて、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、検体を収容した各分
注用チューブ１１に、試薬設置部３５にセットされた溶血剤５μｌを分注する。また、細胞検出試薬５が分注される分注用チューブには、試薬分注部３０Ｂの制御により、溶血剤の他、試薬設置部３５にセットされた細胞透過剤１０μｌも分注する。続いて、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、検体を収容したそれぞれの分注用チューブに、試薬設置部３５に設置されたそれぞれに対応する細胞検出試薬２～５を分注する。また、制御部４は、試薬分注部３０Ｂの制御により、試薬設置部３５に設置された核染色液（細胞検出試薬１）を全ての分注用チューブに分注する。

【0116】

そして、制御部４は、Ｓ２４において、上記の通り調製された測定試料を収容した全ての分注用チューブ１１を、チューブ移送部３６の制御により、測定部２まで移送する。そして、制御部４は、Ｓ２５において、測定部２を用いてフローサイトメトリー法による測定試料の本測定を行う。

【0117】

以上の通り、上記実施形態の試料調製装置１、試料調製方法及び粒子分析装置１００によれば、検体に対してプレ測定を行い、この測定データに基づき検体中の測定対象細胞の濃度情報を生成し、生成した濃度情報と、本測定のための測定試料の調製に用いる細胞検出試薬とに応じて、検体中の測定対象粒子の濃度を調整して、試料調製部３にて測定試料の調製を行っている。そのため、細胞検出試薬に適した濃度の測定対象細胞を含む測定試料を効率よく調製することができ、検体中の測定対象細胞を精度よく分析することができる。

【0118】

また、測定試料の調製に用いる測定試料の調製に関する情報に基づいて、測定試料の調製処理の動作条件（検体量、測定試料の調製に必要な細胞検出試薬及びそれ以外の試薬の種類、各試薬の分注順序、分注量等）を制御している。よって、測定試料の調製を自動化することができる。

【0119】

［その他の変形例］
以上、粒子分析装置の一実施形態について説明したが、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない限りにおいて種々の変更が可能である。

【0120】

例えば、上記実施形態では、測定部２は、試料調製を行う前に粒子を含む検体をプレ測定して、検体に含まれる測定対象粒子を検出する機能と、測定試料を本測定して、解析部５による細胞分析のための測定対象細胞の特徴に関する情報を検出する機能とを有しているが、検体をプレ測定する機能だけを有していてもよい。この場合には、粒子分析装置１には、測定試料を本測定するためのフローサイトメータ等の本測定部（第２測定部）が、検体を測定して検体中の測定対象粒子を検出する測定部２（第１測定部）と別に備えられる。なお、前記第２測定部は、試料調製装置１内に含ませてもよいし、試料調製装置１とは別個に設けてもよい、また、この場合には、測定部２として、図２に示した構成のフローサイトメータを用いてもよいが、測定部２は、検体に含まれる測定対象粒子を検出するための信号を出力できれば足りるため、前方散乱光を取得できれば足りるので、側方散乱光や側方蛍光を取得するための受光素子がなく、前方散乱光を取得するための受光素子のみを有していればよい。さらに、測定部２は、フローサイトメータのような光学式の粒子測定に限らず、電気抵抗方式の粒子測定、沈降式の粒子測定でもよい。

【0121】

また、上記実施形態では、試料調製部３の遠心分離部３８が濃度調整部として機能しているが、濃度調整のための具体的な構成は特に限定されるものではなく、フィルター、セルソーター等を用いてもよい。

【0122】

また、上記実施形態では、試料調製部３が遠心分離部３８を備え、遠心分離部３８によ
り測定試料の調製を行っているが、測定試料の調製のための具体的な構成は特に限定されるものではなく、測定試料を自動的に調製できるものであればよい。

【0123】

また、上記実施形態では、試薬調製部３の試薬設置部３５に設けられた受付部３９により、試薬設置部３５にセットされた細胞検出試薬に関する情報に基づいて、検体の検査項目、測定項目を決定している。ただし、検体容器１０に、測定項目を特定する情報を格納したバーコードやタグ等を付すとともに、検体容器設置部３１にこれらのバーコード等を読み取り可能なバーコードリーダやＲＦＩＤリーダ等の受付部を備えさせ、検体容器１０に付されたバーコード等を読み取ることで、測定項目を特定する情報を取得してもよい。測定項目を特定する情報は、測定項目を特定できる限り限定されず、例えば、測定項目の名称、測定項目の測定に必要な試薬の識別情報や名称等であってよい。

【0124】

また、上記実施形態において、制御部４は、測定試料の調製に用いる粒子検出試薬の種類と、検体容器内の検体中の測定対象粒子の数とに基づいて、試料調製部３が調製する測定試料の数を決定してもよい。例えば、測定試料の調製に関する情報に、測定に必要な測定試料（分注用チューブ１１）の数に関する情報を含ませておき、制御部４は、測定試料の調製の際に、検体容器１０内の検体中の測定対象細胞の数と、測定試料の調製に関する情報に含まれる測定に必要な測定試料（分注用チューブ１１）の数に関する情報とに基づいて、所定数の測定試料を調製するよう、試料調製部３を制御してもよい。

【0125】

また、上記実施形態において、試料調製装置１が測定部２、試料調製部３及び制御部４を内部に一体に含んで一つの装置として構成されている。ただし、上記実施態様以外に、本発明は、図１６に示すように、測定部２、試料調製部３及び制御部４がそれ自体一つの装置として、それぞれ独立した測定装置２´、試料調製装置３´及び制御装置４´として構成され、測定装置２´及び試料調製装置３´、さらには解析装置５´が制御装置４に接続された試料調製システム１´であってもよい。なお、測定装置２´、試料調製装置３´、制御装置４´及び解析装置５´は、図１の測定部２、試料調製部３、制御部４及び解析部５と同一又は略同一の構成である。また、この場合、図１の信号処理部６は測定装置２´内に含まれ、各装置２´～５´に通信Ｉ／Ｆが含まれる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【図13A】

【図13B】

【図14】

【図15】

【図16】