特許 7495390 ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍を治療するための医薬組成物及び治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-05-27

(45)【発行日】2024-06-04

(54)【発明の名称】ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍を治療するための医薬組成物及び治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/519 20060101AFI20240528BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240528BHJP

【ＦＩ】

A61K31/519

A61P35/00 ZNA

【請求項の数】 9

(21)【出願番号】P 2021502074

(86)(22)【出願日】2020-02-19

(86)【国際出願番号】 JP2020006464

(87)【国際公開番号】W WO2020171113

(87)【国際公開日】2020-08-27

【審査請求日】2023-02-03

(31)【優先権主張番号】PCT/JP2019/006265

(32)【優先日】2019-02-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】000207827

【氏名又は名称】大鵬薬品工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】弁理士法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】平井 洋

(72)【発明者】

【氏名】三浦 晃敬

【審査官】長部 喜幸

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１３／１０８８０９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１５／００８８４４（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１５／００８８３９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】SINGH, Devendra et al.，Transforming Fusions of FGFR and TACC Genes in Human Glioblastoma，Science，2012年09月07日，Vol. 337, Issue 6099，pp. 1231-1235，DOI: 10.1126/science.1220834

【文献】PATANI, Harshnira et al.，Landscape of activating cancer mutations in FGFR kinases and their differential responses to inhibit，Oncotarget，2016年03月16日，Vol. 7, No. 17，pp. 24252-24268，DOI: 10.18632/oncotarget.8132

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３１／５１９

Ａ６１Ｐ ３５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする、以下の(i)～(iv)
(i) ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンが他のアミノ酸で置換された変異、
(ii) ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが他のアミノ酸で置換された変異、
(iii) ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが他のアミノ酸で置換された変異、
(iv) ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子、
からなる群から選ばれる少なくとも１種を有するＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍患者を治療するための医薬組成物。

【請求項2】

前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンがリジン又はアスパラギン酸に置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、請求項１記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、又はメチオニンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、請求項１記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが、プロリンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、請求項１記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記脳腫瘍患者が、Ｎ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ、Ｋ６５６Ｍ、Ｒ６６１Ｐ、ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質及びＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子からなる群から選択される少なくとも１種を有するＦＧＦＲ１変異を有する、請求項１記載の医薬組成物。

【請求項6】

脳腫瘍が膠芽腫、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫、神経節細胞腫、神経節膠腫、退形成性神経節膠腫、ロゼット形成性グリア神経細胞腫瘍、上衣腫、髄芽腫、脳幹神経膠腫、頭蓋咽頭腫、下垂体前葉腫瘍、褐色細胞腫、脊索腫、海綿芽細胞腫、頭頚部がん、脈絡叢乳糖腫、脈絡叢癌、乏突起神経膠腫、又は退形成性乏突起神経膠腫である、請求項１～５のいずれか１項記載の医薬組成物。

【請求項7】

（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が前記脳腫瘍患者に連日投与されることを特徴とする請求項１～６のいずれか１項記載の医薬組成物。

【請求項8】

（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が前記脳腫瘍患者に間歇投与されることを特徴とする請求項１～６のいずれか１項記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記投与が以下の(i)～(v)のいずれかの投与スケジュールで投与される、請求項８記載の医薬組成物。
(i) １週間で１サイクルの投与スケジュールであって、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おきに２回以上投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
(ii)１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おき（ある投与日と次の投与日との間隔が１～３日）に４～７回投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
(iii) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第４日目、第８日目及び第１１日目に投与される、投与スケジュール；
(iv) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第７日目、第９日目、第１１日目及び第１３日目に投与される、投与スケジュール；
(v) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第８日目、第１０日目及び第１２日目に投与される、投与スケジュール。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍を治療するための医薬組成物及び治療方法に関する。

【背景技術】

【0002】

線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ；ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）は幅広い組織で発現が見られ細胞の増殖分化を司る増殖因子の一つである。ＦＧＦの生理学的活性は、特異的な細胞表面受容体である線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ；ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）によって媒介される。ＦＧＦＲは、受容体型のタンパク質チロシンキナーゼファミリーに属し、細胞外リガンド結合ドメイン、１回膜貫通ドメイン及び細胞内チロシンキナーゼドメインから構成されており、これまでに４種類のＦＧＦＲが同定されている（ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３及びＦＧＦＲ４）。ＦＧＦＲは、ＦＧＦの結合によって二量体を形成し、リン酸化により活性化される。受容体の活性化は、下流の特定のシグナル伝達分子の動員及び活性化を誘導し、生理機能を発現する。

【0003】

ＦＧＦ／ＦＧＦＲシグナル伝達の異常は、ヒトの各種癌との関連性について報告がある。ヒトの癌におけるＦＧＦ／ＦＧＦＲシグナルの異常な活性化は、ＦＧＦＲの過剰発現及び／又は遺伝子増幅、遺伝子変異、染色体の転座、挿入及び逆位、遺伝子融合、リガンドであるＦＧＦの過剰産生によるオートクリン又はパラクリン機構等に起因するとされている（非特許文献１、２、３）。

【0004】

脳腫瘍においては、ＦＧＦＲ１のＮ５４６Ｋ、Ｋ６５６Ｅ，Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ又はＫ６５６Ｍなどの１アミノ酸置換突然変異やＴＡＣＣ１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ａｃｉｄｉｃ ｃｏｉｌｅｄ－ｃｏｉｌ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ １）融合体が報告されており、このような遺伝子変異が癌化の原動力（driving force）となっている可能性が示唆されている（非特許文献４、５）。

【0005】

ＦＧＦＲ阻害効果を有する二置換ベンゼンアルキニル化合物が報告されており（特許文献１）、これらの化合物が特定のＦＧＦＲ２変異を持つ癌に有効であること（特許文献２）、投与スケジュールとして間歇投与が有用であり得ること（特許文献３）も報告されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【文献】国際公開ＷＯ２０１３／１０８８０９パンフレット

【文献】国際公開ＷＯ２０１５／００８８４４パンフレット

【文献】国際公開ＷＯ２０１５／００８８３９パンフレット

【非特許文献】

【0007】

【文献】Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．，２４，３６６４－３６７１（２００６）

【文献】Ｍｏｌ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，３（１２），６５５－６６７（２００５）

【文献】Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，７０（５），２０８５－２０９４（２０１０）

【文献】Ｎａｔ． Ｇｅｎｅｔ．，４５（８），９２７－９３２（２０１３）

【文献】Ｓｃｉｅｎｃｅ．，３３７（６０９９），１２３１－１２３５（２０１２）

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明は、ＦＧＦＲ１変異を有する脳腫瘍を治療するための医薬組成物及び当該医薬組成物を用いた治療方法を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者は、前記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オンが、変異を有するＦＧＦＲ１のリン酸化を阻害し、ＦＧＦＲ１変異を有する脳腫瘍に対して優れた抗腫瘍効果を有することを見出した。

【0010】

すなわち本発明は、次の〔１〕～〔２３〕を包含する。

【0011】

〔１〕
（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍患者を治療するための医薬組成物。
〔２〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１〕記載の医薬組成物。
〔３〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンがリジン又はアスパラギン酸に置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、〔２〕記載の医薬組成物。
〔４〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１〕記載の医薬組成物。
〔５〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、又はメチオニンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、〔４〕記載の医薬組成物。
〔６〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１〕記載の医薬組成物。
〔７〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが、プロリンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、〔６〕記載の医薬組成物。
〔８〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子を有する、〔１〕記載の医薬組成物。
〔９〕
前記脳腫瘍患者が、Ｎ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ、Ｋ６５６Ｍ及びＲ６６１Ｐからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸変異、又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質若しくはＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子を有するＦＧＦＲ１変異を有する、〔１〕記載の医薬組成物。
〔１０〕
脳腫瘍が膠芽腫、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫、神経節細胞腫、神経節膠腫、退形成性神経節膠腫、ロゼット形成性グリア神経細胞腫瘍、上衣腫、髄芽腫、脳幹神経膠腫、頭蓋咽頭腫、下垂体前葉腫瘍、褐色細胞腫、脊索腫、海綿芽細胞腫、頭頚部がん、脈絡叢乳糖腫、脈絡叢癌、乏突起神経膠腫、又は退形成性乏突起神経膠腫である、〔１〕記載の医薬組成物。
〔１１〕
（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩の有効量を、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍患者に投与する工程を含む、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍の治療方法。
〔１２〕
脳腫瘍の患者由来の試料中から、ＦＧＦＲ１タンパク質又はＦＧＦＲ１遺伝子の変異を検出する工程、ＦＧＦＲ１タンパク質又はＦＧＦＲ１遺伝子の変異が検出された患者に（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与する工程を含む、〔１１〕に記載の方法。
〔１３〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１１〕記載の方法。
〔１４〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の５４６番目のアスパラギンが、リジン又はアスパラギン酸で置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、〔１３〕記載の方法。
〔１５〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１１〕記載の方法。
〔１６〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンが、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、又はメチオニンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有する、〔１５〕記載の方法。
〔１７〕
ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍が、ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが他のアミノ酸で置換された変異を有する、〔１１〕記載の方法。
〔１８〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１の６６１番目のアルギニンが、プロリンに置換されたＦＧＦＲ１変異を有するＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍である、〔１７〕記載の方法。
〔１９〕
前記脳腫瘍患者が、ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子を有する、〔１１〕記載の方法。
〔２０〕
前記脳腫瘍患者が、Ｎ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ、Ｋ６５６Ｍ及びＲ６６１Ｐからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸変異、又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質若しくはＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子を有するＦＧＦＲ１変異を有する、〔１１〕記載の方法。
〔２１〕
脳腫瘍が膠芽腫、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫、神経節細胞腫、神経節膠腫、退形成性神経節膠腫、ロゼット形成性グリア神経細胞腫瘍、上衣腫、髄芽腫、脳幹神経膠腫、頭蓋咽頭腫、下垂体前葉腫瘍、褐色細胞腫、脊索腫、海綿芽細胞腫、頭頚部がん、脈絡叢乳糖腫、脈絡叢癌、乏突起神経膠腫、又は退形成性乏突起神経膠腫である、〔１１〕記載の方法。
〔２２〕
前記投与が連日投与又は間歇投与である、〔１１〕記載の方法。
〔２３〕
前記投与が以下の(i)～(v)のいずれかの投与スケジュールで投与される、〔１１〕記載の方法。
(i) １週間で１サイクルの投与スケジュールであって、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おきに２回以上投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
(ii)１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おき（ある投与日と次の投与日との間隔が１～３日）に４～７回投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
(iii) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第４日目、第８日目及び第１１日目に投与される、投与スケジュール；
(iv) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第７日目、第９日目、第１１日目及び第１３日目に投与される、投与スケジュール；
(v) １４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第８日目、第１０日目及び第１２日目に投与される、投与スケジュール。

【0012】

本発明は、以下の態様にも関する。
・ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の治療のための、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩。
・ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の治療のための、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩の使用。
・ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の医薬組成物を製造するための、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩の使用。

【発明の効果】

【0013】

本発明によれば、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍に対し、優れた抗腫瘍効果を奏する腫瘍治療を行うことが可能である。

【発明を実施するための形態】

【0014】

本発明は、（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン又はその薬学的に許容される塩を有効成分とする、ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍患者を治療するための医薬組成物、及び当該医薬組成物を用いたＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍の治療方法に関する。

【0015】

（Ｓ）－１－（３－（４－アミノ－３－（（３，５－ジメトキシフェニル）エチニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）プロパ－２－エン－１－オン（以下、「化合物１」と称す）は、下記の構造を有する二置換ベンゼンアルキニル化合物であり、特に限定するものではないが、例えば国際公開ＷＯ２０１３／１０８８０９号に記載の製造方法に基づき合成することができる。

【0016】

【化1】

【0017】

本発明において、化合物１はそのまま、又は薬学的に許容される塩の形態で使用することができる。化合物１の薬学的に許容される塩としては、特に限定するものではないが、例えば塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、臭化水素酸等の無機酸との付加塩、酢酸、シュウ酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸等の有機酸との付加塩、カリウム、ナトリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、アンモニウム塩、エチルアミン塩、アルギニン塩等の有機塩基との塩等が挙げられる。

【0018】

本発明において「ＦＧＦＲ１」とは、ヒト又は非ヒト哺乳動物のＦＧＦＲ１を含み、好ましくはヒトＦＧＦＲ１である。ヒトＦＧＦＲ１のＧｅｎｅ ＩＤは２２６０である。また、ＦＧＦＲ１タンパク質は、そのスプライシングバリアントであるアイソフォームを含み、ヒト由来のものであれば、例えば、ＧｅｎＰｅｐｔアクセッション番号ＮＰ＿０７５５９８で示されるアミノ酸配列（配列番号１）からなるポリペプチドが挙げられる。

【0019】

本発明において「ＴＡＣＣ１」とは、ヒト又は非ヒト哺乳動物のＴＡＣＣ１を含み、好ましくはヒトＴＡＣＣ１である。ヒトＴＡＣＣ１のＧｅｎｅ ＩＤは６８６７である。また、ＴＡＣＣ１タンパク質は、そのスプライシングバリアントであるアイソフォームを含み、ヒト由来のものであれば、例えば、ＧｅｎＰｅｐｔアクセッション番号ＮＰ＿００１１１６２９６で示されるアミノ酸配列（配列番号２）からなるポリペプチドが挙げられる。

【0020】

本発明において「ＦＧＦＲ１変異」とは、配列番号１で示されるアミノ酸配列において、５４６番目のアスパラギン、６５６番目のリジン及び６６１番目のアルギニンからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸が他のアミノ酸で置換されたアミノ酸配列からなるＦＧＦＲ１タンパク質若しくは当該アミノ酸配列をコードするＦＧＦＲ１遺伝子、又はＦＧＦＲ１とＴＡＣＣ１が融合したアミノ酸配列からなるＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質若しくは当該アミノ酸配列をコードするＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子を意味する。「他のアミノ酸」は、Ａｌａ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｐｒｏ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒから選ばれ、かつ、元のアミノ酸を除く１９種のアミノ酸を意味する。

【0021】

５４６番目のアスパラギンが他のアミノ酸で置換されたＦＧＦＲ１としては、リジンに置換されたＮ５４６Ｋ、又はアスパラギン酸に置換されたＮ５４６Ｄが好ましい。６５６番目のリジンが他のアミノ酸で置換されたＦＧＦＲ１としては、グルタミン酸に置換されたＫ６５６Ｅ、アスパラギン酸に置換されたＫ６５６Ｄ、アスパラギンに置換されたＫ６５６Ｎ、又はメチオニンに置換されたＫ６５６Ｍが好ましく、Ｋ６５６Ｅ、又はＫ６５６Ｄがより好ましい。６６１番目のアルギニンが他のアミノ酸で置換されたＦＧＦＲ１としては、プロリンに置換されたＲ６６１Ｐが好ましい。

【0022】

「ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質」とは、ＦＧＦＲ１タンパク質のＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のＣ末端部分とが融合しているタンパク質を意味する。「ＦＧＦＲ１タンパク質のＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のＣ末端部分とが融合しているタンパク質」とは、ＦＧＦＲ１タンパク質のキナーゼドメインを含むＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ａｃｉｄｉｃ ｃｏｉｌｅｄ－ｃｏｉｌ（ＴＡＣＣ）ドメインの一部又は全部を含むＣ末端部分とが融合しているタンパク質であり、好ましくは、ＦＧＦＲ１タンパク質のキナーゼドメインを含むＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のＴＡＣＣドメインの全部を含むＣ末端部分とが融合しているタンパク質であり、より好ましくはＦＧＦＲ１タンパク質のキナーゼドメインを含むＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のＴＡＣＣドメインの全部を含むＣ末端部分とが融合しているタンパク質であり、かつ融合点の配列としてＴＳＮＱＧＬＬＥ配列（配列番号６）を含むタンパク質であり、より好ましくは配列番号１で表されるＦＧＦＲ１の１－７６４番目のアミノ酸配列を有するタンパク質と、配列番号２で表されるＴＡＣＣ１の１６２－３９５番目のアミノ酸配列を有するタンパク質とが融合しているタンパク質である（配列番号３）。

【0023】

また、「ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子」とは、ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質を構成するアミノ酸配列をコードする遺伝子を意味する。

【0024】

ＦＧＦＲ１変異として、好ましくはＮ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ、Ｋ６５６Ｍ及びＲ６６１Ｐからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸変異を有するアミノ酸配列からなるタンパク質若しくは当該アミノ酸配列をコードする遺伝子、又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質若しくはＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子であり、より好ましくはＮ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ及びＲ６６１Ｐからなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸変異を有するアミノ酸配列からなるタンパク質若しくは当該アミノ酸配列をコードする遺伝子、又はＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合タンパク質若しくはＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合遺伝子である。

【0025】

また、あるＦＧＦＲ１アイソフォームにおける変異において、アミノ酸の欠失や挿入によって、配列番号１で示されるアミノ酸の位置とは異なる場合であっても、配列番号１で示されるアミノ酸の位置に相当する位置の変異と同様であると解される。そのため、例えば、配列番号１で表されるＦＧＦＲ１における６５６番目のリジンは、ＮＰ＿００１１６７５３８で示されるアミノ酸配列（配列番号５）からなるＦＧＦＲ１においては、６８７番目のリジンに相当する。そのため、例えば、「Ｋ６５６Ｅ」は、配列番号１で表されるＦＧＦＲ１の６５６番目のリジンがグルタミン酸に変異していることを意味するが、ＮＰ＿００１１６７５３８で示されるアミノ酸配列からなるＦＧＦＲ１においては、６８７番目のアミノ酸に相当する位置であるため、ＮＰ＿００１１６７５３８で示されるアミノ酸配列からなるＦＧＦＲ１における「Ｋ６８７Ｅ」は配列番号１で表されるＦＧＦＲ１における「Ｋ６５６Ｅ」に相当する。なお、あるＦＧＦＲ１アイソフォームのあるアミノ酸が、配列番号１で示されるアミノ酸のどの位置に相当するアミノ酸であるかどうかは、例えば、ＢＬＡＳＴのＭｕｌｔｉｐｌｅ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔにより確認することができる。

【0026】

「ＦＧＦＲ１タンパク質のキナーゼドメインを含むＮ末端部分と、ＴＡＣＣ１のＴＡＣＣドメインの全部を含むＣ末端部分とが融合しているタンパク質であり、かつ融合点の配列としてＴＳＮＱＧＬＬＥ配列を含むタンパク質」とは、ＦＧＦＲ１タンパク質のキナーゼドメインを含むＮ末端部分のＣ末端のアミノ酸配列がＴＳＮＱであるタンパク質と、ＴＡＣＣ１のＴＡＣＣドメインの全部を含むＣ末端部分のＮ末端のアミノ酸配列がＧＬＬＥであるタンパク質が融合したタンパク質である。このようなタンパク質としては、例えば、配列番号１で表されるＦＧＦＲ１の１－７６４番目のアミノ酸配列を有するタンパク質と、配列番号２で表されるＴＡＣＣ１の１６２－３９５番目のアミノ酸配列を有するタンパク質とが融合したタンパク質（配列番号３）やＧｅｎＰｅｐｔアクセッション番号ＮＰ＿０７５５９４で表されるＦＧＦＲ１の１－６７３番目のアミノ酸配列を有するタンパク質と、配列番号２で表されるＴＡＣＣ１の１６２－３９５番目のアミノ酸配列を有するタンパク質とが融合したタンパク質（配列番号４）が挙げられる。

【0027】

本発明において「ＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍」とは、ＦＧＦＲ１変異を有する脳腫瘍である。対象となる脳腫瘍は特に限定されないが、例えば、膠芽腫、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫、神経節細胞腫、神経節膠腫、退形成性神経節膠腫、ロゼット形成性グリア神経細胞腫瘍、上衣腫、髄芽腫、脳幹神経膠腫、頭蓋咽頭腫、下垂体前葉腫瘍、褐色細胞腫、脊索腫、海綿芽細胞腫、頭頚部がん、脈絡叢乳糖腫、脈絡叢癌、乏突起神経膠腫、退形成性乏突起神経膠腫などの脳腫瘍が挙げられ、好ましくは膠芽腫、毛様細胞性星細胞腫、ロゼット形成性グリア神経細胞腫瘍、上衣腫、又は脳幹神経膠腫である。これらの脳腫瘍には、原発性に限らず、再発、又は転移性も含まれる。

【0028】

本発明において、ＦＧＦＲ１変異は、当業者に周知の方法で検出することが可能である。例えば、ＦＧＦＲ１遺伝子の変異の検出は、サザンブロッティング法、ＰＣＲ法、ＤＮＡマイクロアレイ法、シークエンス解析法などの通常慣用の検出方法が挙げられる。また、ＦＧＦＲ１タンパク質の変異の検出は、ＦＧＦＲ１変異に特異的に結合する抗体を用いた手法（ＥＬＩＳＡ法、ウエスタンブロッティング法、免疫染色法など）、マススペクトル分析などの通常慣用の検出方法が挙げられる。ＦＧＦＲ１変異に特異的に結合する抗体は、市販品を使用すること、又は通常慣用の方法で作製することが可能である。

【0029】

本発明においてＦＧＦＲ１変異を検出するための「試料」とは、生体試料（例えば、細胞、組織、臓器、体液（血液、リンパ液等）、消化液、尿）のみならず、これらの生体試料から得られる核酸抽出物（ゲノムＤＮＡ抽出物、ｍＲＮＡ抽出物、ｍＲＮＡ抽出物から調製されたｃＤＮＡ調製物やｃＲＮＡ調製物等）やタンパク質抽出物も含む。また、前記試料は、ホルマリン固定処理、アルコール固定処理、凍結処理又はパラフィン包埋処理が施してあるものでもよい。前記生体試料としては、生体から採取したものを使用することができる。好ましくは悪性腫瘍患者由来の試料であり、より好ましくは腫瘍細胞に由来するＦＧＦＲ１変異タンパク質又は遺伝子を含み得る試料であり、より好ましくはＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍細胞を含み得る試料である。また、生体試料の採取方法は、生体試料の種類に応じて適宜選択することができる。変異ＦＧＦＲ１(タンパク質又は遺伝子)が脳腫瘍患者から検出できれば、脳腫瘍はＦＧＦＲ１変異陽性脳腫瘍と判断できる。

【0030】

本発明の医薬組成物は、化合物１又はその薬学的に許容される塩を含有する。

【0031】

化合物１又はその薬学的に許容される塩を有効成分として製剤中に含有せしめる場合、必要に応じて薬学的担体と配合し、予防又は治療目的に応じて各種の投与形態を採用可能である。投与形態として、例えば、経口剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、貼付剤等が挙げられるが、経口剤が好ましい。経口剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、シロップ剤等の形態とすることができ、特に限定するものではない。これらの投与形態は、各々当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。製剤又は医薬組成物には、投与形態によって、また必要に応じて適切な賦形剤、希釈剤、増量剤、崩壊剤等の担体を添加することができる。

【0032】

上記の各投与単位形態中に配合されるべき化合物１又はその薬学的に許容される塩の量は、これを適用すべき患者の症状により、或いはその剤形等により一定ではないが、一般に投与単位形態あたり、経口剤では０．０５～１０００ｍｇ、注射剤では０．０１～５００ｍｇ、坐剤では１～１０００ｍｇとするのが望ましい。

【0033】

また、化合物１又はその薬学的に許容される塩の１日あたりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり一概には決定できないが、通常成人（体重６０ｋｇ）１日あたり化合物１又はその薬学的に許容される塩として約１～１０００ｍｇであり、好ましくは１日あたり約１０～５００ｍｇであり、より好ましくは１日あたり約１０～３００ｍｇである。

【0034】

なお、化合物１又はその薬学的に許容される塩の１日あたりの投与量を連日投与する場合、その投与量は、例えば、１日あたり化合物１又はその薬学的に許容される塩として約１～２００ｍｇであり、好ましくは１日あたり２～１００ｍｇであり、より好ましくは１日あたり４～５０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり４～２０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり４、８、１２、１６又は２０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり２０ｍｇである。

【0035】

なお、化合物１又はその薬学的に許容される塩の１日あたりの投与量を間歇投与する場合、その投与量は、例えば、１日あたり化合物１又はその薬学的に許容される塩として約２～１０００ｍｇであり、好ましくは１日あたり１０～５００ｍｇであり、より好ましくは１日あたり２０～２００ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり５０～１６０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり５２、５６、６０、６４、６８、７２，７６、８０、８８、９６、１００、１０４、１０８、１１２、１１６、１２０、１２４、１２８、１３２，１３６、１４０、１４４、１４８、１５２、１５６又は１６０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり６０、８０、１００、１２０、１４０又は１６０ｍｇであり、さらに好ましくは１日あたり１００、１２０、１４０又は１６０ｍｇである。

【0036】

また、化合物１又はその薬学的に許容される塩の投与スケジュールは、連日投与、又は間歇投与が挙げられる。

【0037】

本明細書において、「連日投与」とは、例えば、２１日間連続して投与するスケジュールを１サイクルとした投与スケジュールが挙げられ、１サイクルが終了する毎に休薬期間を設けてもよい。

【0038】

本明細書において「間歇投与」とは、１週間に２回以上かつ投与間隔（ある投与日と次の投与日との間隔の日数）を１日以上空ける条件を満たす限り、特に限定されない。
例えば、１週間で１サイクルの投与スケジュールであって、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おき（ある投与日と次の投与日との間隔が１～３日）に２回以上投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、１サイクル当り１～３日おき（ある投与日と次の投与日との間隔が１～３日）に４～７回投与され、当該サイクルが１回又は２回以上繰り返して実施される、投与スケジュール；
１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第４日目、第８日目及び第１１日目に投与される、投与スケジュール；
１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第７日目、第９日目、第１１日目及び第１３日目に投与される、投与スケジュール；
１４日間で１サイクルの投与スケジュールであって、１サイクルに含まれる１４日間のうち、化合物１又はその薬学的に許容される塩が、第１日目、第３日目、第５日目、第８日目、第１０日目及び第１２日目に投与される、投与スケジュール等が挙げられる。

【0039】

本発明は、また、化合物１又はその薬学的に許容される塩の有効量を、ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の患者に投与する工程を含む、ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の治療方法を提供する。

【0040】

本発明は、また、以下の（１）及び（２）の工程を含む、ＦＧＦＲ１陽性脳腫瘍の治療方法に関する：
（１）患者由来の試料中から、ＦＧＦＲ１タンパク質又はＦＧＦＲ１遺伝子の変異を検出する工程、
（２）上記（１）の工程において、ＦＧＦＲ１タンパク質又はＦＧＦＲ１遺伝子の変異が検出された患者に、化合物１又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与する工程。

【0041】

上記の治療方法において、ＦＧＦＲ１タンパク質又はＦＧＦＲ１遺伝子の変異が検出された患者は、化合物１又はその薬学的に許容される塩の有効量を投与する化学療法が十分な治療効果を示すと予測される。ここで、「治療効果」は、腫瘍縮小効果、再発・転移抑制効果、延命効果、固形腫瘍における応答評価基準（ＲＥＣＩＳＴ Ｖｅｒｓｉｏｎ１．１）の指針などにより評価することができる。また、ＦＧＦＲ１の機能阻害の活性（例えば、ＦＧＦＲ１リン酸化を指標とした阻害活性）の程度により治療効果を推定することができる。

【実施例】

【0042】

以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。本発明は実施例により十分に説明されているが、当業者により種々の変更や修飾が可能であろうことは理解される。したがって、そのような変更や修飾が本発明の範囲を逸脱するものでない限り、それらは本発明に包含される。

【0043】

実施例１：インビトロにおける化合物１によるＦＧＦＲ１の１アミノ酸置換突然変異体またはＴＡＣＣ１融合体に対する阻害活性の評価

【0044】

１－１ ＦＧＦＲ１点突然変異体またはＴＡＣＣ１融合体発現ベクターの構築
ＦＧＦＲ１ベクターはＯＲＩＧＥＮＥ社より購入したＦＧＦＲ１（ＮＭ＿０２３１１０）Ｈｕｍａｎ Ｔａｇｇｅｄ ＯＲＦ Ｃｌｏｎｅ（ＦＧＦＲ１野生型（ＷＴ）発現ベクター）を用い、各変異体（Ｎ５４６Ｋ、Ｎ５４６Ｄ、Ｋ６５６Ｅ、Ｋ６５６Ｄ、Ｋ６５６Ｎ、Ｋ６５６Ｍ及びＲ６６１Ｐ）の発現用ベクターは、前記ベクターをテンプレートとして、ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ Ｍａｘ ＤＮＡ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（タカラバイオ）を用いて構築した。また、ＦＧＦＲ１－ＴＡＣＣ１融合体（配列番号３で示されるアミノ酸配列からなるタンパク質）の発現用ベクターは、前記ベクターとＯＲＩＧＥＮＥ社より購入したＴＡＣＣ１（ＮＭ＿００１１２２８２４）Ｈｕｍａｎ Ｔａｇｇｅｄ ＯＲＦ Ｃｌｏｎｅ（ＴＡＣＣ１野生型発現ベクター）をテンプレートとしてＩｎ－Ｆｕｓｉｏｎ ＨＤ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｋｉｔ（タカラバイオ）を用いて構築した。

【0045】

１－２ ＦＧＦＲ１リン酸化を指標としたＦＧＦＲ１阻害活性測定
ヒト胎児腎細胞ＨＥＫ２９３Ｔを、１０％ウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ培地にて培養し、細胞を常法により回収後、１０％ウシ胎仔血清を含むＤＭＥＭ培地に懸濁し、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ３０００ Ｒｅａｇｅｎｔ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ）を用いたリポトランスフェクション法を用いて、上記で示したＦＧＦＲ１野生型、点突然変異体またはＴＡＣＣ１融合体発現ベクターをそれぞれ細胞に導入し、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１．５×１０^４個／１００μＬで播種した。

【0046】

薬液として、Ｖｅｈｉｃｌｅ（ＤＭＳＯ）群、各希釈系列（化合物１は３０００ｎＭを最大終濃度とし、１０００、３００、１００、３０、１０、３、１、０．３ｎＭまでの９濃度の希釈系列、ＡＺＤ４５４７、ＢＧＪ３９８、ＪＮＪ４２７５６４９３は１００００ｎＭを最大終濃度とし、３０００、１０００、３００、１００、３０、１０、３、１、０．３ｎＭまでの１０濃度の希釈系列）の化合物１、ＡＺＤ４５４７、ＢＧＪ３９８（Ｃｈｅｍｉｅｔｅｋ）及びＪＮＪ４２７５６４９３（Ｓｕｎｄｉａ）を準備した。播種した細胞を３７℃、５％ ＣＯ_２で２４時間インキュベートしたのち、薬液を含む培地を１１μＬ添加し、さらに１時間インキュベートした。

【0047】

ＦＧＦＲ１の自己リン酸化能に対する機能阻害は、Ｈｕｍａｎ Ｐｈｏｓｐｈｏ－ＦＧＦ Ｒ１ ＤｕｏＳｅｔ ＩＣ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ ＳＹＳＴＥＭＳ）を用いて実施した。キットに付属の細胞溶解液にＰｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｒｏｃｈｅ）およびＰｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｒｏｃｈｅ）を添加し、それを用いて細胞を溶解し、キットのプロトコルに従い実験を実施し、各ウェルに対してプレートリーダー（ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ３８４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で比色定量を行った。薬剤添加ウェルの相対的なＦＧＦＲ１のリン酸化率は、次式に従い、コントロール群を１００％とした場合の比率として算出した。なお、実験は２連（１処理群につき２1・２ウェル）で行い、２ウェルの各データの平均値を解析に用いた。

【0048】

【数1】

【0049】

ＩＣ_５０値（５０％阻害濃度）は、コントロール群に対して５０％阻害を達成する濃度として算出した。

【0050】

ＦＧＦＲ１野生型、１アミノ酸置換突然変異体またはＴＡＣＣ１融合体を発現させた２９３Ｔ細胞株において、化合物１は下記のような阻害活性を示した（表１、２）。

【0051】

【表1】

【0052】

【表2】

【配列表】

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