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特許7502564２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミド誘導体及びその医薬としての使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-06-10
(45)【発行日】2024-06-18
(54)【発明の名称】２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミド誘導体及びその医薬としての使用
(51)【国際特許分類】
C07D 333/38 20060101AFI20240611BHJP
A61K 31/381 20060101ALI20240611BHJP
A61P 25/22 20060101ALI20240611BHJP
A61P 25/24 20060101ALI20240611BHJP
【ＦＩ】
C07D333/38 CSP
A61K31/381
A61P25/22
A61P25/24
【請求項の数】
14
(21)【出願番号】P 2023526966
(86)(22)【出願日】2021-11-04
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2023-11-10
(86)【国際出願番号】 EP2021080572
(87)【国際公開番号】W WO2022096542
(87)【国際公開日】2022-05-12
【審査請求日】2023-05-02
(31)【優先権主張番号】20206286.5
(32)【優先日】2020-11-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】503385923
【氏名又は名称】ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング
(74)【代理人】
【識別番号】100094569
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 伸一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100103610
【弁理士】
【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦
(74)【代理人】
【識別番号】100109070
【弁理士】
【氏名又は名称】須田 洋之
(74)【代理人】
【識別番号】100119013
【弁理士】
【氏名又は名称】山崎 一夫
(74)【代理人】
【識別番号】100123777
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 さつき
(74)【代理人】
【識別番号】100111796
【弁理士】
【氏名又は名称】服部 博信
(74)【代理人】
【識別番号】100123766
【弁理士】
【氏名又は名称】松田 七重
(74)【代理人】
【識別番号】100183379
【弁理士】
【氏名又は名称】藤代 昌彦
(72)【発明者】
【氏名】ミューラー シュテファン ゲオルク
(72)【発明者】
【氏名】アラーズ ケリー
(72)【発明者】
【氏名】クリンダー クラウス
(72)【発明者】
【氏名】ミューラー－ヴィエラ ウルスラ
(72)【発明者】
【氏名】プリープケ ヘニング
(72)【発明者】
【氏名】パウチュ アレクサンダー
【審査官】阿久津 江梨子
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１８／１３５６５９（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第９８／０２２４３２（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２００７－５３７１７９（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００７－５３７１８１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００７－５３７１８０（ＪＰ，Ａ）
【文献】中国特許出願公開第１０１８４３６１８（ＣＮ，Ａ）
【文献】米国特許出願公開第２０１５／１９６５３３（ＵＳ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
Ａ６１Ｐ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式Ａの化合物【化1】
Ｒ1はクロロ、ブロモを表し、
Ｒ2は水素、フルオロを表し、
Ｒ3はクロロ、ブロモを表す）。
【請求項2】
下記からなる群から選択される化合物である、請求項１に記載の化合物。【表1】
【請求項3】
下記の構造を有する請求項１又は２に記載の化合物。【表2】
【請求項4】
下記の構造を有する請求項１又は２に記載の化合物。【表3】
【請求項5】
下記の構造を有する請求項１又は２に記載の化合物。【表4】
【請求項6】
下記の構造を有する請求項１又は２に記載の化合物。【表5】
【請求項7】
下記の構造を有する請求項１又は２に記載の化合物。【表6】
【請求項8】
請求項１～７の何れか１項に記載の化合物の塩。
【請求項9】
請求項１～８の何れか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項10】
双極性障害Ｉ型、うつ病、軽躁病、躁病及び混合型；双極性障害ＩＩ型;うつ病性障害;付随する不安性の苦痛、混合性の特徴、メランコリアの特徴、非定型の特徴、気分に一致する精神病性の特徴、気分に一致しない精神病性の特徴、カタトニアを伴うか又は伴わない大うつ病性障害の治療及び／又は予防における使用のための、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記うつ病性障害が、単一のうつ病エピソード又は再発性大うつ病性障害、軽度のうつ病性障害、産後に発症するうつ病性障害、精神病症状を伴ううつ病性障害からなる群から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項12】
別の抗うつ薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、請求項９～１１の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項13】
行動療法に加えて投与されることを特徴とする、請求項９～１２の何れか１項に記載の医薬組成物。
【請求項14】
請求項１～８の何れか１項に記載の化合物を、薬学的に許容される補助剤、希釈剤及び／又は担体と混合して含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、一般式Ａの新規２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミド、
【化1】
【0002】
その調製方法、それを含む医薬組成物、及び治療、特にインドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ１（ＩＤＯ１）酵素の阻害が有益である状態の治療又は予防におけるそれらの使用に関する。一般式Ａによる本発明の化合物は、ＩＤＯ１阻害剤である。
【背景技術】
【0003】
過去２０年間にわたる広範な研究により、ＩＤＯ１酵素活性が、大うつ病性障害、統合失調症、ハンチントン病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、慢性疼痛、及び肥満を含む多数の神経学的及び精神医学的障害の症状を引き起こす役割を果たす可能性が示されている。
ＩＤＯ１の阻害は、これまで主に腫瘍学の適応症に適用されてきた。これらの研究に利用される化合物は、主に非脳浸透性化合物であり、神経学的又は精神医学的治療への使用からは除外されている。これらの状態において、ＩＤＯ１は脳の免疫細胞、主にミクログリア及び浸潤性マクロファージで発現が増加している。キヌレニン経路のトリプトファン代謝物（キノリン酸、キヌレン酸など）に生じる変化は、脳機能に影響を与える。この理由により、これら疾患を治療するための標的とされるＩＤＯ１酵素は脳にある。
ＩＤＯ１の阻害は、これまで主に腫瘍学の適応症に適用されてきた。これらの研究に利用される化合物は、主に非脳浸透性化合物であり、神経学的又は精神医学的治療への使用からは除外されている。これらの状態において、ＩＤＯ１は脳の免疫細胞、主にミクログリア及び浸潤性マクロファージで発現が増加している。キヌレニン経路のトリプトファン代謝物（キノリン酸、キヌレン酸など）に生じる変化は、脳機能に影響を与える。この理由により、これら疾患を治療するための標的とされるＩＤＯ１酵素は脳にある。
【0004】
本明細書に開示する化合物は、中枢神経系疾患に使用するために開発されたものであり、したがって良好な透過性、低／ゼロ排出性、低クリアランス性、及び１日１回の治療に適した薬物動態特性を示す。中枢神経系疾患には、精神神経障害及び神経行動障害、神経変性疾患、頭部外傷又は脳血管イベント後のＩＤＯ１活性の増加による有害な結果が含まれる場合がある。当該化合物は、そのような神経学的適応症における補助療法としての使用に適しており、薬物間相互作用の可能性が最小限に抑えられた代謝プロファイルを示す。
ＩＤＯ１活性は、炎症状態でのアップレギュレーションにより、多くの身体障害の症状を引き起こす役割を果たすことも知られている。ＩＤＯ１阻害は、結核及びヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、並びに髄膜炎などの細菌及びウイルスの感染後に有益な効果をもたらす可能性がある。これらの化合物は、中枢神経系の作用に最適化されており、ＨＩＶの認知的及び感情的影響、又は髄膜炎の長期的な神経学的影響など、これらの障害における中枢及び末梢の両方の症状の治療に適している。網膜の炎症は、糖尿病性網膜症及び地図状萎縮などの網膜疾患で観察され、結果としてＩＤＯ１が増加し、組織の変性につながると考えられている。肥満などの代謝障害は、炎症及びＩＤＯ１の増加と関連しており、阻害が有益であることを示唆している。
ＩＤＯ１活性は、炎症状態でのアップレギュレーションにより、多くの身体障害の症状を引き起こす役割を果たすことも知られている。ＩＤＯ１阻害は、結核及びヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、並びに髄膜炎などの細菌及びウイルスの感染後に有益な効果をもたらす可能性がある。これらの化合物は、中枢神経系の作用に最適化されており、ＨＩＶの認知的及び感情的影響、又は髄膜炎の長期的な神経学的影響など、これらの障害における中枢及び末梢の両方の症状の治療に適している。網膜の炎症は、糖尿病性網膜症及び地図状萎縮などの網膜疾患で観察され、結果としてＩＤＯ１が増加し、組織の変性につながると考えられている。肥満などの代謝障害は、炎症及びＩＤＯ１の増加と関連しており、阻害が有益であることを示唆している。
【0005】
国際公開第２００６／０３４８２２号は、抗血栓剤として有用なヒト第Ｘａ因子の阻害剤である式（Ｉ）の化合物を開示している。
【化2】
【発明の概要】
【0006】
本発明の化合物は、それらが
ｉ）５エチニル－チオフェン部分の代わりに５－クロロ－チオフェン又は５－ブロモ－チオフェン部分を含むこと、及び
ｉｉ）複素環部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むことにおいて、
国際公開第２００６／０３４８２２号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
ｉ）５エチニル－チオフェン部分の代わりに５－クロロ－チオフェン又は５－ブロモ－チオフェン部分を含むこと、及び
ｉｉ）複素環部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むことにおいて、
国際公開第２００６／０３４８２２号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
【0007】
式（Ｉ）は、具体例として、５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（国際公開第２００６／０３４８２２号、第９１頁第７～８行、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝－アミド）を包含し、これは、式（Ｉ）内の追加のトリフルオロメチル部分を示す。
実施例の５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（国際公開第２００６／０３４８２２号、第９１頁第７～８行、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝－アミド）
実施例の５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（国際公開第２００６／０３４８２２号、第９１頁第７～８行、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝－アミド）
【0008】
【化3】
【0009】
国際公開第２００６／０３４８２２号実施例の５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（第９１頁第７～８行）、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝－アミド）はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出率を示す。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
本発明の化合物は、それらが
ｉ）５－エチニル－チオフェン部分の代わりに、５－クロロ－チオフェン又は５－ブロモ－チオフェン部分を含むこと、及び
ｉｉ）複素環部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むことにおいて、
国際公開第２００６／０３４８２２号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
本発明の化合物は、それらが
ｉ）５－エチニル－チオフェン部分の代わりに、５－クロロ－チオフェン又は５－ブロモ－チオフェン部分を含むこと、及び
ｉｉ）複素環部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むことにおいて、
国際公開第２００６／０３４８２２号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
【0010】
この構造上の相違は、予想外にも、ＩＤＯ１阻害においてヒト第Ｘａ因子酵素を凌駕する選択性増大をもたらし、またＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイにおける排出比の低下をもたらすのに対して、国際公開第２００６／０３４８２２号の５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（第９１頁第７～８行、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝－アミド）は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出比を示す（表３ａ）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
【0011】
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１であることが見出された。
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
【0012】
国際公開第２００７／００３５３６号は、抗血栓剤として有用なヒト第Ｘａ因子阻害剤である式（Ｉ）の化合物を開示している。
式（Ｉ）は、一般式Ａ内の高度に異なる単環式芳香族部分とは対照的に、式（Ｉ）内の複素二環式部分Ｄを示す特定の実施例４、６、及び１５９を包含する。
【化4】
【0013】
実施例４（第６６頁）
実施例６（第６８頁）
実施例１５９（第１３７頁）
【化5】
【化6】
【化7】
【0014】
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
本発明の化合物は、複素二環式部分Ｄの代わりに１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含む点で、国際公開第２００７／００３５３６号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
本発明の化合物は、複素二環式部分Ｄの代わりに１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含む点で、国際公開第２００７／００３５３６号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
【0015】
この構造上の相違により、予想外にも、ヒト肝細胞の代謝安定性が向上し、ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイではインビトロでの排出がなくなり、実施例３及び４ではインビボでの排出がなくなるのに対して、国際公開第２００７／００３５３６号の実施例４、６及び１５９では、ヒト肝細胞における低い代謝安定性及び／又は高いインビトロ排出比を示し（表３ｂ）、加えて高いインビボ排出（表７）を示す。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
【0016】
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
【0017】
国際公開第９８／２２４３２号は、抗アンドロゲン作用を有する式（Ｉ）の化合物が、前立腺癌、前立腺肥大症、除精、多毛症、禿頭症、ざ瘡、及び脂漏症の予防剤又は治療剤として有用であることを開示している。
【化8】
【0018】
式（Ｉ）は、基Ｚ内にチオフェン部分構造を示す実施例５３及び８６を包含している（表１）。
【表1】
【0019】
国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６は、抗アンドロゲン活性を有し、ヒト肝細胞において非常に低い代謝安定性を示す。
ヒトアンドロゲン受容体の阻害は、性欲減退、勃起不全、疲労、骨粗鬆症及び誘発される骨格合併症、ほてり、身体組成の変化、動脈硬化、糖尿病の新たな発症、認知機能の低下、並びに心血管疾患の罹患率及び死亡率の増加などの潜在的に深刻な副作用と関連している(doi: 10.1016/j.eururo.2008.10.008)。
ヒトアンドロゲン受容体の阻害は、性欲減退、勃起不全、疲労、骨粗鬆症及び誘発される骨格合併症、ほてり、身体組成の変化、動脈硬化、糖尿病の新たな発症、認知機能の低下、並びに心血管疾患の罹患率及び死亡率の増加などの潜在的に深刻な副作用と関連している(doi: 10.1016/j.eururo.2008.10.008)。
【0020】
本発明の化合物は、国際公開第９８／２２４３２号の式（Ｉ）により一般的に包含される。本発明の化合物は、それらが
ｉ）４シアノ－３－トリフルオロメチル－フェニル基の代わりに１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むこと、及び
ｉｉ）非置換チオフェン又は２－メチル－チオフェン部分の代わりに、２－クロロ－チオフェン又は２－ブロモ－チオフェン部分を含むこと
において、国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６（最も近い類似体を表す）とは構造的に異なる。
ｉ）４シアノ－３－トリフルオロメチル－フェニル基の代わりに１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含むこと、及び
ｉｉ）非置換チオフェン又は２－メチル－チオフェン部分の代わりに、２－クロロ－チオフェン又は２－ブロモ－チオフェン部分を含むこと
において、国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６（最も近い類似体を表す）とは構造的に異なる。
【0021】
この構造上の相違は、予想外にも、強力なＩＤＯ１阻害及びヒトアンドロゲン受容体に対する選択性増大をもたらすのに対して、国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６は弱いＩＤＯ１阻害を示し、ヒトアンドロゲン受容体に対する選択性はまったく示さないか、又は不十分である。加えて、本発明の化合物は、ヒト肝細胞において代謝的に安定であることが見出されている（表３ｃ）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
【0022】
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒトアンドロゲン受容体に対する増大した選択性、及びヒト肝細胞における代謝安定性により、本発明の化合物は、ＣＮＳ起源の疾患及び状態の治療のためにインビボで有効であり、また性欲減退、勃起不全、疲労、骨粗鬆症及び誘発される骨格合併症、ほてり、体組成の変化、動脈硬化、糖尿病の新たな発症、認知機能低下、並びに心血管疾患の罹患率及び死亡率の増加などの望ましくない効果と有効性との間に許容可能な窓を有すると思われる。
したがって、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
したがって、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
【0023】
国際公開第２００５／１１１０２９号は、抗血栓剤として有用なヒト第Ｘａ因子阻害剤である式（Ｉ）の化合物を開示している。
【化9】
【0024】
式（Ｉ）は、複素環式アミド部分Ａを示す特定の実施例８及び２８を包含する（表２）。
【表2】
【0025】
国際公開第２００５／１１１０２９号の実施例８及び２８は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出を示す。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
【0026】
本発明の化合物は、複素環式アミド部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含む点で、国際公開第２００５／１１１０２９号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
この構造上の相違により、予想外にも、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性及びＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイにおける低い排出比をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０２９号の実施例８及び２８はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出比を示す（表４）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
この構造上の相違により、予想外にも、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性及びＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイにおける低い排出比をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０２９号の実施例８及び２８はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出比を示す（表４）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
【0027】
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結果として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
結果として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
【0028】
国際公開第２００５／１１１０１３号は、抗血栓剤として有用なヒト第Ｘａ因子の阻害剤である式（Ｉ）の化合物を開示している。
式（Ｉ）は、式（Ｉ）内の複素環部分Ａを示す特定の実施例２２を包含する。
実施例２２（１５４頁）
【化10】
【化11】
【0029】
国際公開第２００５／１１１０１３号の実施例２２は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、ヒト肝細胞において中程度の代謝安定性を示す。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
【0030】
本発明の化合物は、飽和複素環部分Ａで置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含む点で、国際公開第２００５／１１１０１３号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
この構造上の相違は、予想外にも、強力なＩＤＯ１阻害、並びにヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びヒト肝細胞における代謝安定性の増大をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０１３号の実施例２２は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、ヒト肝細胞における中程度の代謝安定性を示す（表５）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
この構造上の相違は、予想外にも、強力なＩＤＯ１阻害、並びにヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びヒト肝細胞における代謝安定性の増大をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０１３号の実施例２２は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、ヒト肝細胞における中程度の代謝安定性を示す（表５）。
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
【0031】
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びヒト肝細胞における代謝安定性の増大により、本発明の化合物は、ＣＮＳ起源の疾患及び状態の治療のためにインビボで有効であり、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
【0032】
国際公開第２００５／１１１０１４号は、抗血栓剤として有用なヒト第Ｘａ因子阻害剤である式（Ｉ）の化合物を開示している。
式（Ｉ）は、式（Ｉ）内にアミド部分を示す特定の実施例４を包含する。
実施例４（１３７頁）
【化12】
【化13】
【0033】
国際公開第２００５／１１１０１４号の実施例４は、ヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出を示す。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
ヒト第Ｘａ因子酵素の阻害は、長期出血などの望ましくない重篤な副作用と関連している。現在利用可能な第Ｘａ因子阻害薬（リバロキサバン及びアピキサバンなど）は、心房細動における深部静脈血栓症、肺塞栓、及び血栓を予防するための抗血栓薬として使用されている。効果を迅速に反転させるために、解毒剤（アンデキサネットアルファ）が開発されている。第Ｘａ因子阻害剤の追加の用途には、神経変性などの中枢神経系の適応症が含まれる可能性がある。
【0034】
本発明の化合物は、アミド部分でパラ置換されたフェニル環の代わりに、１個又は２個のハロゲンで置換されたフェニル環を含む点で、国際公開第２００５／１１１０１４号の式（Ｉ）とは構造的に異なる。
この構造上の相違は、予想外にも、ＩＤＯ１阻害においてヒト第Ｘａ因子酵素を凌駕する選択性増大をもたらし、またＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイにおける低い排出比をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０１４号の実施例４はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出を示す（表６）。
この構造上の相違は、予想外にも、ＩＤＯ１阻害においてヒト第Ｘａ因子酵素を凌駕する選択性増大をもたらし、またＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞アッセイにおける低い排出比をもたらすのに対して、国際公開第２００５／１１１０１４号の実施例４はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、高い排出を示す（表６）。
【0035】
したがって、目的とする技術的課題は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤を提供することである。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１であることが見出された。
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
上記で述べた第Ｘａ因子酵素阻害剤は何れも、本発明の化合物、又は本明細書に記載のＩＤＯ１の阻害剤としてのその有利な特性を教示又は示唆していない。
さらに、本発明の化合物は、ヒト肝細胞において代謝的に安定している（代謝安定性については表３ｂ、３ｃ及び５を参照のこと）。したがって、本発明の化合物は、好ましいインビボクリアランス、したがってヒトにおいて所望の作用持続時間を有すると思われる。
本発明に従って、本明細書に開示する化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１であることが見出された。
それらのＩＤＯ１の強力な阻害、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する増大した選択性、及びインビトロ排出の低さにより、本発明の化合物は、脳を標的とする有効な薬物に必要とされる好ましい脳浸透性を示し、また有効性と長期出血などの望ましくない重篤な副作用との間に許容可能な窓を有すると思われる。
結論として、本発明の化合物は、ヒトでの使用についてより実行可能なはずである。
上記で述べた第Ｘａ因子酵素阻害剤は何れも、本発明の化合物、又は本明細書に記載のＩＤＯ１の阻害剤としてのその有利な特性を教示又は示唆していない。
さらに、本発明の化合物は、ヒト肝細胞において代謝的に安定している（代謝安定性については表３ｂ、３ｃ及び５を参照のこと）。したがって、本発明の化合物は、好ましいインビボクリアランス、したがってヒトにおいて所望の作用持続時間を有すると思われる。
【0036】
ヒト肝細胞における安定性とは、好ましい薬物動態特性を備えた薬物の選択及び／又は設計の文脈において、生体内変化に対する化合物の感受性を指す。多くの薬物の代謝の一次側は肝臓である。ヒト肝細胞は、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）と第ＩＩ相代謝のための追加の酵素（ホスファターゼ及びスルファターゼなど）を含んでいるため、インビトロでの薬物代謝を研究するためのモデルシステムを表している。肝細胞における安定性の増強は、バイオアベイラビリティの向上及び十分な半減期などの幾つかの利点と関連しており、患者への投与回数を減らし、頻度を減らすことができる。したがって、肝細胞における安定性の増強は、薬物として使用される化合物にとっての好ましい特徴である。
さらに、本発明の化合物は、良好な膜透過性及び低ないし中程度のインビトロ排出を示す（ＭＤＣＫアッセイＭＤＲ１（Ｐ－ｇｐ）については表４及び６を参照のこと）。したがって、本発明の化合物は、有効なＣＮＳ薬剤に必要とされる好ましい脳浸透性を示すと思われる。
さらに、本発明の化合物は、良好な膜透過性及び低ないし中程度のインビトロ排出を示す（ＭＤＣＫアッセイＭＤＲ１（Ｐ－ｇｐ）については表４及び６を参照のこと）。したがって、本発明の化合物は、有効なＣＮＳ薬剤に必要とされる好ましい脳浸透性を示すと思われる。
【0037】
ＭＤＣＫアッセイは、化合物が血液脳関門を通過する可能性に関する情報を提供する。透過性フィルター支持体上で成長した分極化した集密なＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞単層の透過性測定が、インビトロ吸収モデルとして使用される。ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞単層を横切る当該化合物の見かけの透過計数（ＰＥ）が、頂点から基底へ（ＡＢ）及び基底から頂点へ（ＢＡ）の輸送方向で測定される（ｐH７．４，３７℃）。ＡＢ透過性（ＰＥＡＢ）は血液から脳への薬物吸収を表し、またＢＡ透過性（ＰＥＢＡ）は、受動的透過性、並びに排出及び取り込み輸送体（主に過剰発現したヒトＭＤＲ１によりＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞で発現する）により媒介される能動輸送メカニズムの両方を介した、脳から血液への薬物排出を表す。両輸送方向における同一又は類似の透過性は受動的透過を示し、ベクトル透過性は追加の能動的輸送メカニズムを示す。ＰＥＡＢよりも高いＰＥＢＡ（ＰＥＢＡ／ＰＥＡＢ＞３）は、ＭＤＲ１により媒介される能動的排出の関与を示し、十分な脳への曝露を達成する目標を損なう可能性がある。したがって、このアッセイは、インビボ試験に適用可能な化合物をさらに選択するための貴重なサポートを提供する。血液脳関門での排出によって制限されない高い透過性は、主にＣＮＳで作用する薬物に使用される予定の化合物にとって好ましい特徴である。結論として、血液脳関門において高い透過性を確保するには、ＭＤＲ１輸送体での排出を最小限に抑える（排出＜３）ことが非常に好ましい。
【0038】
本発明の化合物は、ラット又はマウスでの経口適用後における血漿及び脳への曝露に示されるように、インビボでの好ましい薬物動態特性を示す。脳に侵入する投与された薬物の量を推定するために、脳対血漿の比率が代理パラメータとして使用される。排出輸送体（Ｐ－ｇｐなど）は血液脳関門に位置するため、基質として作用する化合物は脳から能動的に輸送される。これらの排出輸送体は筋肉組織には発現しないため、筋肉組織と脳組織の間の化合物の相対分布比は、ラット又はマウスのインビボ排出の指標として使用できる。インビボでの排出が検出されない場合（ラット／マウスにおいて）、及びインビトロでの排出（ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１（Ｐ－ｇｐ））が存在しない場合、患者の脳への曝露が予想される［表７のインビトロ排出データ（ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１アッセイ）及びインビボ排出データ（経口適用後のラット／マウスにおける組織分布）の比較を参照のこと］。
【0039】
本発明は、式Ａの新規な２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミド、又はその塩、特に薬学的に許容されるその塩を提供する。
【化14】
【0040】
（式中、
Ｒ1はクロロ、ブロモを表し、
Ｒ2は水素、フルオロを表し、
Ｒ3はクロロ、ブロモを表す）
本発明は、式Ａの新規な２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミドを提供し、これは予想外にも強力なＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の別の態様は、強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、ヒトアンドロゲン受容体に対して適切な選択性を有する強力なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
Ｒ1はクロロ、ブロモを表し、
Ｒ2は水素、フルオロを表し、
Ｒ3はクロロ、ブロモを表す）
本発明は、式Ａの新規な２－［（チオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（フェニル）－２－メチルプロパンアミドを提供し、これは予想外にも強力なＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の別の態様は、強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、ヒトアンドロゲン受容体に対して適切な選択性を有する強力なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
【0041】
本発明の別の態様は、ヒト第Ｘａ因子酵素に対して適切な選択性を有する強力なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、適切な膜透過性及び低いインビトロ排出を有する強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、ヒト肝細胞において高い代謝安定性を有する強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、適切な膜透過性及び低いインビトロ排出を有する強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、ヒト肝細胞において高い代謝安定性を有する強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
【0042】
本発明の別の態様は、適切な膜透過性、低いインビトロ排出、及びヒト肝細胞における高い代謝安定性を有する強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、強力で、選択的で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、任意に１つ以上の不活性担体及び／又は希釈剤と一緒に、式Ａによる少なくとも１つの化合物を含有する医薬組成物に言及する。
本発明のさらなる態様は、ＩＤＯ１阻害に関連する障害の予防及び／又は治療に使用するための、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、本発明の化合物の製造方法に言及する。
本発明の別の態様は、強力で、選択的で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤としての、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、任意に１つ以上の不活性担体及び／又は希釈剤と一緒に、式Ａによる少なくとも１つの化合物を含有する医薬組成物に言及する。
本発明のさらなる態様は、ＩＤＯ１阻害に関連する障害の予防及び／又は治療に使用するための、式Ａによる化合物に言及する。
本発明の別の態様は、本発明の化合物の製造方法に言及する。
【発明を実施するための形態】
【0043】
調製
以下のスキームは、例として、一般式Ａによる化合物及び対応する中間体化合物を製造する方法を一般的に説明するものである。略語による置換基は、スキームの文脈内で他に定義されていない限り、上記で定義された通りであってよい。
スキームＩ：方法Ａ
以下のスキームは、例として、一般式Ａによる化合物及び対応する中間体化合物を製造する方法を一般的に説明するものである。略語による置換基は、スキームの文脈内で他に定義されていない限り、上記で定義された通りであってよい。
スキームＩ：方法Ａ
【0044】
【化15】
【0045】
ＰＧＡがアルキル又はアリールエステルを形成する適切な保護基である市販の化合物（Ｉ）（ＰＧＡは、メチル、エチル、ｎ－ブチル、フェニル、ｐ－ニトロフェニルからなる群から選択される）から出発して、化合物（ＩＩＩ）は、活性化された化合物（ＩＩ）（Ｇは塩素、臭素、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム又はＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム）などのハロゲン又はウロニウム部分を表す）を、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン又はトルエンなどの溶媒中において、－５０℃～１２０℃の範囲の温度で、トリエチルアミン、Ｎ－エチル－ジイソプロピルアミン、又はＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下で反応させることにより得ることができる。
【0046】
化合物（ＩＩＩ）の加水分解は、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの無機塩基を用い、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、又は水などの溶媒又は溶媒混合物中において、－２０℃～１００℃の範囲の温度で行われる。化合物（ＶＩ）を得るためには、化合物（Ｖ）と反応させる前に、トリエチルアミン、Ｎ－エチル－ジイソプロピルアミン又はＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下に、－５０℃から１２０℃の範囲の温度で、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート又はＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム－ヘキサフルオロホスフェートなどの試薬を用いて化合物（ＩＶ）を活性化させることが必要である。
スキーム２：方法Ｂ
スキーム２：方法Ｂ
【0047】
【化16】
【0048】
化合物（ＶＩＩＩ）を得るためには、化合物（Ｖ）を添加する前に、トリエチルアミン、Ｎ－エチル－ジイソプロピルアミン、Ｎ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下に、－５０℃～１２０℃の範囲の温度で、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン又はトルエンなどの溶媒中で、テトラフルオロボロン酸Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム又はＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム－ヘキサフルオロホスフェートのような試薬を用いて、ＰＧＢがカルバメートを形成する適切な保護基である市販の化合物（ＶＩＩ）の活性化（ＰＧＢは、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル又は９－フルオレニルメトキシカルボニルからなる群から選択される）が必要とされる。ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン又は水などの溶媒中において、０℃～１００℃の範囲の温度で、塩化水素、臭化水素、酢酸又はトリフルオロ酢酸などの酸、又はトリエチルアミン、Ｎ－エチル－ジイソプロピルアミン又はＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基による保護基の除去により、化合物（ＩＸ）が形成される。
【0049】
テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン又はトルエンなどの溶媒中において、－５０℃～１２０℃の範囲の温度で、トリエチルアミン、Ｎ－エチル－ジイソプロピルアミン又はＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下で、化合物（ＩＸ）と活性化された化合物（ＩＩ）（Ｇは塩素、臭素、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム又はＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム）などのハロゲン又はウロニウム部分を表す）と反応させることが、化合物（ＶＩ）を得るには必要である。
【0050】
スキーム１及び２において、すべての置換基Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は一般式Ａについて定義された意味を有し、略語ＰＧＡ及びＰＧＢは保護基の意味を有し、略語Ｇは活性化基の意味を有し、それを直接参照する本発明のすべての実施形態、具体的には請求項で定義された意味を有する。
【0051】
一般的定義
本明細書で具体的に定義されていない用語には、開示及び文脈に照らして当業者が付与する意味が与えられるべきである。
本発明の化合物が化学名及び式の形で示されている場合、矛盾がある場合には式が優先するものとする。
アスタリスクは、部分式において使用され、コア分子に接続されている結合、又は定義されているように結合した置換基に接続されて結合を示す。
本明細書で使用される「置換された」との用語は、指定された原子の実行可能な原子価数を超えず、置換によって安定な化合物がもたらされるという条件で、指定された原子上の任意の１個又は複数の水素が、示された群から選択されたもので置き換えられることを意味する。
本明細書で具体的に定義されていない用語には、開示及び文脈に照らして当業者が付与する意味が与えられるべきである。
本発明の化合物が化学名及び式の形で示されている場合、矛盾がある場合には式が優先するものとする。
アスタリスクは、部分式において使用され、コア分子に接続されている結合、又は定義されているように結合した置換基に接続されて結合を示す。
本明細書で使用される「置換された」との用語は、指定された原子の実行可能な原子価数を超えず、置換によって安定な化合物がもたらされるという条件で、指定された原子上の任意の１個又は複数の水素が、示された群から選択されたもので置き換えられることを意味する。
【0052】
立体化学
特に示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲全体を通して、所与の化学式又は化学名は、回転異性体及び互変異性体、並びに異なる割合の混合物、又はそのような異性体が存在する上記形態の何れかの混合物、並びに塩（その薬学的に許容される塩を含む）を包含するものとする。
特に示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲全体を通して、所与の化学式又は化学名は、回転異性体及び互変異性体、並びに異なる割合の混合物、又はそのような異性体が存在する上記形態の何れかの混合物、並びに塩（その薬学的に許容される塩を含む）を包含するものとする。
【0053】
塩
「薬学的に許容される」との語句は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、若しくは他の問題を伴わずに使用するのに適した、又は合併症、及び合理的な利益／リスク比に見合った化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指すために本明細書で使用される。
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」とは、親化合物が酸若しくは塩基と塩又は複合体を形成する、開示された化合物の誘導体を指す。
塩基性部分を含む親化合物と共に薬学的に許容される塩を形成する酸の例には、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ゲンチジン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、４－メチル－ベンゼンスルホン酸、リン酸、サリチル酸、コハク酸、硫酸又は酒石酸などの無機物又は有機酸が含まれる。
酸性部分を含む親化合物と共に薬学的に許容される塩を形成する陽イオン及び塩基の例には、Ｎａ+、Ｋ+、Ｃａ2+、Ｍｇ2+、ＮＨ4 +、Ｌ－アルギニン、２，２’－イミノビスエタノール、Ｌ－リジン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン又はトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンが含まれる。
「薬学的に許容される」との語句は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、若しくは他の問題を伴わずに使用するのに適した、又は合併症、及び合理的な利益／リスク比に見合った化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指すために本明細書で使用される。
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」とは、親化合物が酸若しくは塩基と塩又は複合体を形成する、開示された化合物の誘導体を指す。
塩基性部分を含む親化合物と共に薬学的に許容される塩を形成する酸の例には、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ゲンチジン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、４－メチル－ベンゼンスルホン酸、リン酸、サリチル酸、コハク酸、硫酸又は酒石酸などの無機物又は有機酸が含まれる。
酸性部分を含む親化合物と共に薬学的に許容される塩を形成する陽イオン及び塩基の例には、Ｎａ+、Ｋ+、Ｃａ2+、Ｍｇ2+、ＮＨ4 +、Ｌ－アルギニン、２，２’－イミノビスエタノール、Ｌ－リジン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン又はトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンが含まれる。
【0054】
本発明の薬学的に許容される塩は、塩基性又は酸性部分を含む親化合物から、従来の化学的方法によって合成することができる。一般に、このような塩は、これらの化合物の遊離の酸又は塩基形態を、水中又はジエチルエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、若しくはアセトニトリル、又はそれらの混合物などの有機希釈剤中において、十分な量の適切な塩基又は酸と反応させることにより調製することができる。例えば、本発明の化合物を精製又は単離するのに有用な、上記以外の酸の塩（例えば、トリフルオロ酢酸塩）もまた、本発明の一部を構成する。
【0055】
生物学的アッセイ及びデータ
略語一覧
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ｃＤＮＡ 相補型ＤＮＡ
ＣＳＦ 脳脊髄液
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＨＥＰＥＳ ２－（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル）
－エタンスルホン酸
ＩＦＮ インターフェロン
Ｋ3ＥＤＴＡ １，２－ジアミノエタン－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－四酢酸
三カリウム塩
ＬＰＳ リポ多糖
ＭＤＣＫ マディン・ダービー（Madin-Darby）犬の腎臓
ＭＤＲ１ 多剤耐性タンパク質１
Ｐ－ｇｐ ｐ－糖タンパク質
％ＱＨ 肝臓血流の％
ｒｐｍ 回転／分
ｒｔ 室温
Ｕ 単位
ＷＢＡ 全血アッセイ
略語一覧
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ｃＤＮＡ 相補型ＤＮＡ
ＣＳＦ 脳脊髄液
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＨＥＰＥＳ ２－（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル）
－エタンスルホン酸
ＩＦＮ インターフェロン
Ｋ3ＥＤＴＡ １，２－ジアミノエタン－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－四酢酸
三カリウム塩
ＬＰＳ リポ多糖
ＭＤＣＫ マディン・ダービー（Madin-Darby）犬の腎臓
ＭＤＲ１ 多剤耐性タンパク質１
Ｐ－ｇｐ ｐ－糖タンパク質
％ＱＨ 肝臓血流の％
ｒｐｍ 回転／分
ｒｔ 室温
Ｕ 単位
ＷＢＡ 全血アッセイ
【0056】
アッセイＡ～Ｆで提供されるデータは、個々のアッセイ結果（ＩＣ50値、％ＱＨ及び排出比）の算術平均であり、標準偏差があり、Ｎは対応するアッセイで利用可能なデータ点の数である。
化合物の生物学的活性は、次の方法で決定される。
化合物の生物学的活性は、次の方法で決定される。
【0057】
アッセイＡ：ＩＤＯ１効力のインビトロ試験
インビトロ薬理活性の測定
このアッセイでは、ＬＰＳ及びＩＦＮ－ガンマで刺激されたヒト全血における阻害剤用量応答におけるキヌレニン（Ｌ－トリプトファンの酵素異化産物）の減少を評価する。キヌレニンが、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを介してＤ４－キヌレニン（内部標準）に対して定量化される。このアッセイは、ヒトモデルにおいて、化合物の特定のＩＣ５０及びＩＣ９０値を決定するために使用される。
インビトロ薬理活性の測定
このアッセイでは、ＬＰＳ及びＩＦＮ－ガンマで刺激されたヒト全血における阻害剤用量応答におけるキヌレニン（Ｌ－トリプトファンの酵素異化産物）の減少を評価する。キヌレニンが、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを介してＤ４－キヌレニン（内部標準）に対して定量化される。このアッセイは、ヒトモデルにおいて、化合物の特定のＩＣ５０及びＩＣ９０値を決定するために使用される。
【0058】
材料及び試薬：
・抗凝固剤Ｌｉ－ヘパリンを含む採血シリンジ（SARSTEDT Monovette、LH9mL、オレンジ色コード）で採取した健康なドナーからのヒト全血、
・９６ウェルプレート（THERMO FISHER Abgene Storage Plate 96ウェル0.8mL、カタログ番号AB0765)
・エアポア（AirPore）テープ（QIAGEN社)
・グルタマックス（GlutaMAX）サプリメントを含むＲＰＭＩ１６４０(GIBCO、カタログ番号61870010)
・ＲＰＭＩに溶解した大腸菌（E.coli）由来のリポ多糖類、滅菌濾過済み（SIGMA ALDRICH、カタログ番号L3129-25MG、E.coli 0127:B8、ロット番号016M4187V）
・ＤＰＢＳ中０．１％組換えヒト血清アルブミン（SIGMA ALDRICH、カタログ番号A6608-100MG、ロット番号SLBQ1282V）に溶解した組換えヒトインターフェロンガンマ（TEBU-BIOを経由したPEPROTECH、カタログ番号167300-02-B、ロット番号121527）
・アセトニトリル、ＨＰＬＣ用クロマソルブ（CHROMASOLV）（SIGMA ALDRICH、カタログ番号34851-2.5L)
・Ｌ－キヌレニンＤ４（BUCHEM BV）、ＤＭＳＯ中の５ｍＭ
・ＤＭＳＯ
・酢酸、分析用の１００％水フリー（MERCK、カタログ番号34885-2.5L）
・メタノール、ＨＰＬＣ用クロマソルブ（CHROMASOLV）（SIGMA-ALDRICH、カタログ番号1.00063.2500)
・抗凝固剤Ｌｉ－ヘパリンを含む採血シリンジ（SARSTEDT Monovette、LH9mL、オレンジ色コード）で採取した健康なドナーからのヒト全血、
・９６ウェルプレート（THERMO FISHER Abgene Storage Plate 96ウェル0.8mL、カタログ番号AB0765)
・エアポア（AirPore）テープ（QIAGEN社)
・グルタマックス（GlutaMAX）サプリメントを含むＲＰＭＩ１６４０(GIBCO、カタログ番号61870010)
・ＲＰＭＩに溶解した大腸菌（E.coli）由来のリポ多糖類、滅菌濾過済み（SIGMA ALDRICH、カタログ番号L3129-25MG、E.coli 0127:B8、ロット番号016M4187V）
・ＤＰＢＳ中０．１％組換えヒト血清アルブミン（SIGMA ALDRICH、カタログ番号A6608-100MG、ロット番号SLBQ1282V）に溶解した組換えヒトインターフェロンガンマ（TEBU-BIOを経由したPEPROTECH、カタログ番号167300-02-B、ロット番号121527）
・アセトニトリル、ＨＰＬＣ用クロマソルブ（CHROMASOLV）（SIGMA ALDRICH、カタログ番号34851-2.5L)
・Ｌ－キヌレニンＤ４（BUCHEM BV）、ＤＭＳＯ中の５ｍＭ
・ＤＭＳＯ
・酢酸、分析用の１００％水フリー（MERCK、カタログ番号34885-2.5L）
・メタノール、ＨＰＬＣ用クロマソルブ（CHROMASOLV）（SIGMA-ALDRICH、カタログ番号1.00063.2500)
【0059】
手順：
ＩＦＮ－ガンマ及びＬＰＳをＲＰＭＩ培地で希釈して、８倍濃縮の目的のアッセイ濃度にした。
ＩＦＮ－ガンマ ２５ｎｇ／ｍＬ×８ ２００ｎｇ／ｍＬ
ＬＰＳ ５００ｎｇ／ｍＬ×８ ４μｇ／ｍＬ
ＬＰＳは少なくとも１０分間超音波処理し、使用直前に掻き混ぜた。
ピペッティングにより、ＩＦＮ－ガンマを穏やかに上下に混合した。
両方の希釈液を１：１の比率で混合することにより刺激剤混合物が調製され、これは各刺激剤の４倍の所望の最終濃度を生じた。
半対数連続希釈の化合物希釈液を、１００％ＤＭＳＯ中の４ｍＭ～４μＭの範囲で調製した。これらの希釈液を、ＲＰＭＩ培地でさらに１：１００に希釈した。
ＩＦＮ－ガンマ及びＬＰＳをＲＰＭＩ培地で希釈して、８倍濃縮の目的のアッセイ濃度にした。
ＩＦＮ－ガンマ ２５ｎｇ／ｍＬ×８ ２００ｎｇ／ｍＬ
ＬＰＳ ５００ｎｇ／ｍＬ×８ ４μｇ／ｍＬ
ＬＰＳは少なくとも１０分間超音波処理し、使用直前に掻き混ぜた。
ピペッティングにより、ＩＦＮ－ガンマを穏やかに上下に混合した。
両方の希釈液を１：１の比率で混合することにより刺激剤混合物が調製され、これは各刺激剤の４倍の所望の最終濃度を生じた。
半対数連続希釈の化合物希釈液を、１００％ＤＭＳＯ中の４ｍＭ～４μＭの範囲で調製した。これらの希釈液を、ＲＰＭＩ培地でさらに１：１００に希釈した。
【0060】
刺激剤並びに阻害剤の滴定曲線を用いて、アッセイプレート（３つの技術的複製、４つの生物学的複製）を調製した。すべての試薬は、１ウェル当たり６０μＬの容量及び４倍濃縮でプレーティングされる。陽性対照（刺激なし、阻害剤治療なし、基礎活性）、及び陰性対照（阻害剤治療なしの刺激、最大信号）が各プレート（６つの技術的複製）に含まれていた。全血サンプルを添加する前に、すべてのウェルに、ＲＰＭＩ培地を最終容量１２０μＬまで補充した。
【0061】
Ｌｉヘパリンで処理した４人のドナーからの全血を、採血直後（＜２時間）に受理した。各サンプルをＲＰＭＩ培地で１：２に希釈した。
１２０μＬのこの希釈血液サンプルを指定されたプレートウェルに添加し、各ウェルでは、最終容量２４０μＬ、１倍の試薬濃度、１０μＭ～０．０１μＭの間の化合物濃度範囲、及び０．２５％ＤＭＳＯが生じた。
プレートをエアポアテープ（air pore tape）で密閉し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。
インキュベーション時間の後、アッセイプレートを短時間振とうし、次いで遠心分離（１５分、２０００×ｇ、室温）して血漿を得た。
各アッセイサンプルから吸引された１００μＬの血漿を移した新しい９６ウェルプレートの各ウェルに、２００μＬのアセトニトリルをピペットで移した。当該プレートをシェーカー上に５分間、１０００ｒｐｍで置き、その後２０～６０分間－８０℃に置いてさらに沈殿させた。
１２０μＬのこの希釈血液サンプルを指定されたプレートウェルに添加し、各ウェルでは、最終容量２４０μＬ、１倍の試薬濃度、１０μＭ～０．０１μＭの間の化合物濃度範囲、及び０．２５％ＤＭＳＯが生じた。
プレートをエアポアテープ（air pore tape）で密閉し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートした。
インキュベーション時間の後、アッセイプレートを短時間振とうし、次いで遠心分離（１５分、２０００×ｇ、室温）して血漿を得た。
各アッセイサンプルから吸引された１００μＬの血漿を移した新しい９６ウェルプレートの各ウェルに、２００μＬのアセトニトリルをピペットで移した。当該プレートをシェーカー上に５分間、１０００ｒｐｍで置き、その後２０～６０分間－８０℃に置いてさらに沈殿させた。
【0062】
内部標準溶液を調製した。ＤＭＳＯ中の５ｍＭのＤ４－キヌレニンを、ＭｉｌｌｉＱ水で１：３３３３に希釈して１．５μＭ溶液にした。１００μＬの内部標準溶液を各ウェルに添加し、各ウェルのＤ４－キヌレニン最終濃度を０．３７５μＭにした。
プレートを遠心分離して、沈殿物を沈殿させた：２０分、２０００×ｇ、室温。
プレートを遠心分離して、沈殿物を沈殿させた：２０分、２０００×ｇ、室温。
【0063】
ＬＣ／ＭＳ分析の準備として、上澄みを新しい９６ウェルプレートに移した。
ＬＣパラメータ
カートリッジ（種類・ベッド量）： Ｃ１８（１２μＬ）
流量ポンプ１／２／３［ｍＬ／ｍｉｎで］： １．５／１．２５／１．２５
ＬＣ溶媒ポンプ１／２／３： 再蒸留Ｈ２Ｏ中の０．５％酢酸／メタノール中の０．５％酢酸／メタノール中の０．５％酢酸
洗浄溶媒（洗浄１／２）： Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ
ＬａｂＶｉｅｗ構成ファイル： ｉｄｏ．ｃｆｇ
吸引時間： ２５０ｍｓ
洗浄時間： ３０００ｍｓ
溶出時間： ３０００ｍｓ
平衡時間： ５００ｍｓ
シップ高さ（Sip Height）： ２ｍｍ
ＭＳパラメータ
質量分析計： ＴＳＱ Ｖａｎｔａｇｅ
イオン源： ＨＥＳＩ ＩＩ
スプレー電圧： ２５００Ｖ
キャピラリー温度： ３２５℃
シースガス圧： ３０ｐｓｉ
気化器温度： ５００℃
補助ガス圧： ４５ｐｓｉ
スキャン幅： ０．１ａｍｕ
解像度： ＳＲＭ（０．７／０．７）
分析対象物／内部標準のＭＲＭトランジション（ダルトン）
Ｌ－キヌレニン２０９．１１（マザー構造）-９４．１０
Ｄ４－キヌレニン２１３．０５（マザー構造）-１５０．１４
結果は、Ｌ－キヌレニン／Ｄ４－キヌレニンの比として与えられた。
用量応答曲線を計算し、１００％（陰性対照）と０％（陽性対照、非刺激基礎活性）の間の対照阻害パーセントとしてフィッティングさせた。
ＬＣパラメータ
カートリッジ（種類・ベッド量）： Ｃ１８（１２μＬ）
流量ポンプ１／２／３［ｍＬ／ｍｉｎで］： １．５／１．２５／１．２５
ＬＣ溶媒ポンプ１／２／３： 再蒸留Ｈ２Ｏ中の０．５％酢酸／メタノール中の０．５％酢酸／メタノール中の０．５％酢酸
洗浄溶媒（洗浄１／２）： Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ
ＬａｂＶｉｅｗ構成ファイル： ｉｄｏ．ｃｆｇ
吸引時間： ２５０ｍｓ
洗浄時間： ３０００ｍｓ
溶出時間： ３０００ｍｓ
平衡時間： ５００ｍｓ
シップ高さ（Sip Height）： ２ｍｍ
ＭＳパラメータ
質量分析計： ＴＳＱ Ｖａｎｔａｇｅ
イオン源： ＨＥＳＩ ＩＩ
スプレー電圧： ２５００Ｖ
キャピラリー温度： ３２５℃
シースガス圧： ３０ｐｓｉ
気化器温度： ５００℃
補助ガス圧： ４５ｐｓｉ
スキャン幅： ０．１ａｍｕ
解像度： ＳＲＭ（０．７／０．７）
分析対象物／内部標準のＭＲＭトランジション（ダルトン）
Ｌ－キヌレニン２０９．１１（マザー構造）-９４．１０
Ｄ４－キヌレニン２１３．０５（マザー構造）-１５０．１４
結果は、Ｌ－キヌレニン／Ｄ４－キヌレニンの比として与えられた。
用量応答曲線を計算し、１００％（陰性対照）と０％（陽性対照、非刺激基礎活性）の間の対照阻害パーセントとしてフィッティングさせた。
【0064】
アッセイＢ：アンドロゲン受容体効力のインビトロ試験：
インビトロ薬理活性の測定
ヒトアンドロゲン受容体（ＡＲ）アッセイは、インディゴバイオサイエンシズ社（Indigo Biosciences）の製品番号ＩＢ０３００１を使用して実行された。このキットで提供される細胞株は、ＡＲ刺激で誘導されるレポーター遺伝子を有している。このレポーター遺伝子は、北米のホタル（Photinus pyralis）由来の６２ｋＤタンパク質である甲虫ルシフェラーゼをコードするｃＤＮＡである。当該ルシフェラーゼは、Ｄ－ルシフェリンのモノ酸化を触媒し、オキシルシフェリン、アデノシン一リン酸、ピロリン酸、ＣＯ２、及び光子放出を生成する。反応の発光強度は、ルミノメーターを使用して定量化される。
インビトロ薬理活性の測定
ヒトアンドロゲン受容体（ＡＲ）アッセイは、インディゴバイオサイエンシズ社（Indigo Biosciences）の製品番号ＩＢ０３００１を使用して実行された。このキットで提供される細胞株は、ＡＲ刺激で誘導されるレポーター遺伝子を有している。このレポーター遺伝子は、北米のホタル（Photinus pyralis）由来の６２ｋＤタンパク質である甲虫ルシフェラーゼをコードするｃＤＮＡである。当該ルシフェラーゼは、Ｄ－ルシフェリンのモノ酸化を触媒し、オキシルシフェリン、アデノシン一リン酸、ピロリン酸、ＣＯ２、及び光子放出を生成する。反応の発光強度は、ルミノメーターを使用して定量化される。
【0065】
当該アッセイを実行するには、予熱した細胞回復培地を各チューブに加えて細胞を解凍し、３７℃のウォーターバスに入れる。２００μＬ中の３００００個の生存細胞を播種し（コラーゲンコーティングプレート）、３７℃、湿度８５％以上、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートする。培地は、化合物スクリーニング培地に置き換える。次に、細胞を１２５ｐＭ（ＥＣ８０）６ａ－Ｆｌテストステロンで攻撃し、化合物を１０μＭ～１０ｎＭまでの半対数希釈で適用する。次に、アッセイプレートを３７℃、湿度８５％以上、ＣＯ２ ５％で２２～２４時間インキュベートする。培地をルシフェラーゼ検出試薬と置き換え、発光定量化の前に５分間平衡化させる。
データ分析は、１００％（陰性対照：６ａ－Ｆｌテストステロン）と０％（陽性対照：６ａ－ＦＬテストステロンなし）の間の対照のパーセンテージを計算することから成っていた。正規化された値のフィッティングは、４パラメータのシグモイド結合曲線（Log[conc]）対シグナルで行われた。
データ分析は、１００％（陰性対照：６ａ－Ｆｌテストステロン）と０％（陽性対照：６ａ－ＦＬテストステロンなし）の間の対照のパーセンテージを計算することから成っていた。正規化された値のフィッティングは、４パラメータのシグモイド結合曲線（Log[conc]）対シグナルで行われた。
【0066】
アッセイＣ：ヒト第Ｘａ因子効力のインビトロ試験
インビトロ薬理活性の測定
ｐ－ニトロ－アニリノ基（ｐＮＡ）で標識された特定の発色基質を使用して、活性なヒト第Ｘａ因子を測定する。ペプチド基質とｐＮＡ基の間の結合が切断された後に色が変化し、これは４０５ｎｍで検出できる。切断された基質の量は、活性Ｘａの量に正比例する。
０．８ｍｇ（１００Ｕ）のヒト第Ｘａ因子（Enzyme Research Laboratories社、ＨＦＸａ１０１１）を０．４４４ｍＬのＨ２Ｏ（Millipore社）に溶解させた。これは、１９．２８μＭ又は２２５Ｕ／ｍｌの原液に相当する。アッセイ緩衝液（１００ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣＬ、ＨＣＬでｐＨ７．８に調整、０．１％ＢＳＡ及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含む）でさらに希釈した。
発色基質Ｓ２７６５（Chromogenix社、Ｓ２７６５）２５ｍｇ（１バイアル）を３．５ｍｌのＨ２Ｏ（Millipore社）に溶解し、１０ｍＭのストック溶液を作製した。
化合物をＤＭＳＯ中に溶解及び希釈させた（ここでのアッセイにおける最終希釈は１：１０であり、１％ＤＭＳＯの最終濃度を生じる）。
又は
Ｈ２Ｏ中に溶解した化合物をＨ2Ｏで希釈した。
－最終前希釈ステップは、１１％ＤＭＳＯを含むアッセイ緩衝液中で１：１０であり、結果として１０％ＤＭＳＯになった。
－アッセイの最終希釈は１：１０であり、最終濃度は１％ＤＭＳＯになる。
インビトロ薬理活性の測定
ｐ－ニトロ－アニリノ基（ｐＮＡ）で標識された特定の発色基質を使用して、活性なヒト第Ｘａ因子を測定する。ペプチド基質とｐＮＡ基の間の結合が切断された後に色が変化し、これは４０５ｎｍで検出できる。切断された基質の量は、活性Ｘａの量に正比例する。
０．８ｍｇ（１００Ｕ）のヒト第Ｘａ因子（Enzyme Research Laboratories社、ＨＦＸａ１０１１）を０．４４４ｍＬのＨ２Ｏ（Millipore社）に溶解させた。これは、１９．２８μＭ又は２２５Ｕ／ｍｌの原液に相当する。アッセイ緩衝液（１００ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣＬ、ＨＣＬでｐＨ７．８に調整、０．１％ＢＳＡ及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含む）でさらに希釈した。
発色基質Ｓ２７６５（Chromogenix社、Ｓ２７６５）２５ｍｇ（１バイアル）を３．５ｍｌのＨ２Ｏ（Millipore社）に溶解し、１０ｍＭのストック溶液を作製した。
化合物をＤＭＳＯ中に溶解及び希釈させた（ここでのアッセイにおける最終希釈は１：１０であり、１％ＤＭＳＯの最終濃度を生じる）。
又は
Ｈ２Ｏ中に溶解した化合物をＨ2Ｏで希釈した。
－最終前希釈ステップは、１１％ＤＭＳＯを含むアッセイ緩衝液中で１：１０であり、結果として１０％ＤＭＳＯになった。
－アッセイの最終希釈は１：１０であり、最終濃度は１％ＤＭＳＯになる。
【0067】
化合物は、１０μＭから０．００３ｎＭ以下の最終濃度で試験された。
５μＬのヒト第Ｘａ因子（最終濃度０．８６ｎＭ）、２μＬの化合物希釈液又はアッセイ緩衝液（１０％ＤＭＳＯを含む）、及び８μＬのアッセイ緩衝液を３８４ウェルプレートにピペットで移し（３連で）、サーモミックス（Thermomix）内において２４℃で１０分間インキュベートした。
５μＬの発色基質（最終濃度０．５ｍＭ）を添加した後に酵素－基質反応が開始され、１～２分以内にスペクトラマックス（spectramax）による動態測定が開始された。
５μＬのヒト第Ｘａ因子（最終濃度０．８６ｎＭ）、２μＬの化合物希釈液又はアッセイ緩衝液（１０％ＤＭＳＯを含む）、及び８μＬのアッセイ緩衝液を３８４ウェルプレートにピペットで移し（３連で）、サーモミックス（Thermomix）内において２４℃で１０分間インキュベートした。
５μＬの発色基質（最終濃度０．５ｍＭ）を添加した後に酵素－基質反応が開始され、１～２分以内にスペクトラマックス（spectramax）による動態測定が開始された。
【0068】
測定パラメータ:（Spectramax、モノクロメータ）
吸光度：１．ＬＭ ４０５ｎＭ
キネティック：２分ごとに１６分（９回）
陰性対照（ＮＣ）：５μｌのヒト第Ｘａ因子＋１０μｌのアッセイ緩衝液＋５μｌの基質
陽性対照（ＰＣ）：５μｌのヒト第Ｘａ因子＋２μｌのナファモスタット（市販、最終濃度：１μＭ）＋８μｌのアッセイ緩衝液＋５μＬの基質
ブランク（オプション）：１５μｌのアッセイ緩衝液＋５μｌの基質
吸光度：１．ＬＭ ４０５ｎＭ
キネティック：２分ごとに１６分（９回）
陰性対照（ＮＣ）：５μｌのヒト第Ｘａ因子＋１０μｌのアッセイ緩衝液＋５μｌの基質
陽性対照（ＰＣ）：５μｌのヒト第Ｘａ因子＋２μｌのナファモスタット（市販、最終濃度：１μＭ）＋８μｌのアッセイ緩衝液＋５μＬの基質
ブランク（オプション）：１５μｌのアッセイ緩衝液＋５μｌの基質
【0069】
ＩＣ５０、ＫＩ、及び最高濃度での％効果（比率）の計算
計算のために、１２０秒から７２０秒までのＶｍａｘ値の平均をとった。
ｘ／ｙプロットが作成された。ｘ＝ｌｏｇ（Ｍ，化合物）、ｙ＝ｖｍａｘ（ｄｒｆｕ／ｍｉｎ）
データは、曲線適合モデルを使用して分析した：ｌｏｇ（阻害剤）ｖｓ．応答…可変勾配（４つのパラメータ）
この適合の結果は、上、下、Ｌｏｇ（ＩＣ５０、Ｍ）、ヒルスロープ、及びＩＣ５０（Ｍ）であった。
計算のために、１２０秒から７２０秒までのＶｍａｘ値の平均をとった。
ｘ／ｙプロットが作成された。ｘ＝ｌｏｇ（Ｍ，化合物）、ｙ＝ｖｍａｘ（ｄｒｆｕ／ｍｉｎ）
データは、曲線適合モデルを使用して分析した：ｌｏｇ（阻害剤）ｖｓ．応答…可変勾配（４つのパラメータ）
この適合の結果は、上、下、Ｌｏｇ（ＩＣ５０、Ｍ）、ヒルスロープ、及びＩＣ５０（Ｍ）であった。
【0070】
アッセイＤ：ヒト肝細胞における代謝安定性の評価
試験化合物の代謝分解を、肝細胞懸濁液中でアッセイする。凍結保存からの回復後、ヒト肝細胞を、５％又は５０％のヒト血清を含むか、又は血清の非存在下で、３．５μｇグルカゴン／５００ｍＬ、２．５ｍｇインスリン／５００ｍＬ及び３．７５ｍｇヒドロコルチソン／５００ｍＬを添加したダルベッコ改変イーグル培地でインキュベートする。
細胞培養インキュベーター（３７℃、１０％ＣＯ２）で３０分間プレインキュベーションした後、５μｌの試験化合物溶液（８０μＭ；培地で１：２５に希釈することにより２ｍＭのＤＭＳＯストック溶液から誘導）を、３９５μｌの肝細胞懸濁液に添加して、１００万細胞／ｍＬの最終細胞密度、１μＭの最終試験化合物濃度、及び０．０５％の最終ＤＭＳＯ濃度を得る。
細胞を６時間インキュベートし（インキュベーター、オービタルシェーカー）、０、０．５、１、２、４及び６時間後にサンプル（２５μｌ）をインキュベーターから取り出す。サンプルをアセトニトリルに移し、遠心分離（５分）によってペレット化する。上清を新しい９６ディープウェルプレートに移し、窒素下で蒸発させ、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによる親化合物の減少の分析の前に再懸濁させる。
試験化合物の代謝分解を、肝細胞懸濁液中でアッセイする。凍結保存からの回復後、ヒト肝細胞を、５％又は５０％のヒト血清を含むか、又は血清の非存在下で、３．５μｇグルカゴン／５００ｍＬ、２．５ｍｇインスリン／５００ｍＬ及び３．７５ｍｇヒドロコルチソン／５００ｍＬを添加したダルベッコ改変イーグル培地でインキュベートする。
細胞培養インキュベーター（３７℃、１０％ＣＯ２）で３０分間プレインキュベーションした後、５μｌの試験化合物溶液（８０μＭ；培地で１：２５に希釈することにより２ｍＭのＤＭＳＯストック溶液から誘導）を、３９５μｌの肝細胞懸濁液に添加して、１００万細胞／ｍＬの最終細胞密度、１μＭの最終試験化合物濃度、及び０．０５％の最終ＤＭＳＯ濃度を得る。
細胞を６時間インキュベートし（インキュベーター、オービタルシェーカー）、０、０．５、１、２、４及び６時間後にサンプル（２５μｌ）をインキュベーターから取り出す。サンプルをアセトニトリルに移し、遠心分離（５分）によってペレット化する。上清を新しい９６ディープウェルプレートに移し、窒素下で蒸発させ、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによる親化合物の減少の分析の前に再懸濁させる。
【0071】
ＣＬｉｎｔは次のように計算される。
ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＝ｋ／ＣＤ×１０００／６０
ここで、
ｋ：親の減少に対する回帰直線の傾き［ｈ-1］、
ＣＤ：重要な細胞の細胞密度［１０ｅ６細胞／ｍＬ］、
計算されたインビトロ肝固有クリアランスは、固有のインビボ肝クリアランスまでスケールアップされ、肝臓モデル（十分に撹拌されたモデル）を使用して肝臓のインビボ血中クリアランス（ＣＬ）を予測するために使用される。
ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＝（ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ［μＬ／ｍｉｎ／１０ｅ６細胞］×肝細胞数［１０ｅ６細胞／ｇ肝臓］×肝臓因子［ｇ／ｋｇ体重］）／１０００
ＣＬ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＝ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］×肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］／（ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＋肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］）
結果は、肝血流のパーセンテージとして表される。
ＱＨ［％］＝ＣＬ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］／肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］
ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＝ｋ／ＣＤ×１０００／６０
ここで、
ｋ：親の減少に対する回帰直線の傾き［ｈ-1］、
ＣＤ：重要な細胞の細胞密度［１０ｅ６細胞／ｍＬ］、
計算されたインビトロ肝固有クリアランスは、固有のインビボ肝クリアランスまでスケールアップされ、肝臓モデル（十分に撹拌されたモデル）を使用して肝臓のインビボ血中クリアランス（ＣＬ）を予測するために使用される。
ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＝（ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ［μＬ／ｍｉｎ／１０ｅ６細胞］×肝細胞数［１０ｅ６細胞／ｇ肝臓］×肝臓因子［ｇ／ｋｇ体重］）／１０００
ＣＬ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＝ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］×肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］／（ＣＬ＿ＩＮＴＲＩＮＳＩＣ＿ＩＮＶＩＶＯ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］＋肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］）
結果は、肝血流のパーセンテージとして表される。
ＱＨ［％］＝ＣＬ［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］／肝血流［ｍｌ／ｍｉｎ／ｋｇ］
【0072】
肝細胞性、ヒト：１２０×１０ｅ６細胞／ｇ肝臓
肝臓因子、ヒト：２５．７ｇ／ｋｇ体重
血流、ヒト：２０．７ｍｌ／（ｍｉｎ×ｋｇ）
肝臓因子、ヒト：２５．７ｇ／ｋｇ体重
血流、ヒト：２０．７ｍｌ／（ｍｉｎ×ｋｇ）
【0073】
アッセイＥ：ＭＤＣＫアッセイＭＤＲ－１（Ｐ－ｇｐ）
化合物がＭＤＣＫ－ＭＤＲ１単層（ヒトＭＤＲ１遺伝子をトランスフェクトしたＭＤＣＫＩＩ細胞）を横切る見かけの透過係数（Ｐapp）を、頂点から基底（ＡＢ）及び基底から頂点（ＢＡ）の方向で測定する。
ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞（６×１０5細胞／ｃｍ2）をフィルターインサート（Corning、Transwell社、ポリカーボネート、孔径０．４μｍ）に播種し、９～１０日間培養する。ＤＭＳＯストック溶液（１～２０ｍＭ）に溶解した化合物を、０．２５％ＢＳＡを添加したＨＴＰ－４緩衝液（１２８．１３ｍＭのＮａＣｌ、５．３６ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＳＯ４、１．８ｍＭのＣａＣｌ２、４．１７ｍＭのＮａＨＣＯ３、１．１９ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４、０．４１ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４、１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、２０ｍＭのグルコース、ｐＨ７．４）で希釈して輸送溶液を調製すると、最終試験濃度は１μＭ又は１０μＭになり、最終ＤＭＳＯ含有量は０．５％になる。輸送溶液は、それぞれＡ－Ｂ又はＢ－Ａの透過性を測定するために、頂点又は側底ドナー側に適用される。レシーバ側には、０．２５％のＢＳＡを添加したＨＴＰ－４緩衝液が含まれている。ドナーからは実験の開始時と終了時にサンプルを収集し、レシーバ側からは２時間までのさまざまな時間間隔で、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによる濃度測定のためにサンプルを収集する。サンプリングされたレシーバ容積は、新しいレシーバ溶液に置き換える。
アッセイＥについて報告されたすべてのデータは、１０μＭの最終試験濃度で測定された。
化合物がＭＤＣＫ－ＭＤＲ１単層（ヒトＭＤＲ１遺伝子をトランスフェクトしたＭＤＣＫＩＩ細胞）を横切る見かけの透過係数（Ｐapp）を、頂点から基底（ＡＢ）及び基底から頂点（ＢＡ）の方向で測定する。
ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１細胞（６×１０5細胞／ｃｍ2）をフィルターインサート（Corning、Transwell社、ポリカーボネート、孔径０．４μｍ）に播種し、９～１０日間培養する。ＤＭＳＯストック溶液（１～２０ｍＭ）に溶解した化合物を、０．２５％ＢＳＡを添加したＨＴＰ－４緩衝液（１２８．１３ｍＭのＮａＣｌ、５．３６ｍＭのＫＣｌ、１ｍＭのＭｇＳＯ４、１．８ｍＭのＣａＣｌ２、４．１７ｍＭのＮａＨＣＯ３、１．１９ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４、０．４１ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４、１５ｍＭのＨＥＰＥＳ、２０ｍＭのグルコース、ｐＨ７．４）で希釈して輸送溶液を調製すると、最終試験濃度は１μＭ又は１０μＭになり、最終ＤＭＳＯ含有量は０．５％になる。輸送溶液は、それぞれＡ－Ｂ又はＢ－Ａの透過性を測定するために、頂点又は側底ドナー側に適用される。レシーバ側には、０．２５％のＢＳＡを添加したＨＴＰ－４緩衝液が含まれている。ドナーからは実験の開始時と終了時にサンプルを収集し、レシーバ側からは２時間までのさまざまな時間間隔で、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによる濃度測定のためにサンプルを収集する。サンプリングされたレシーバ容積は、新しいレシーバ溶液に置き換える。
アッセイＥについて報告されたすべてのデータは、１０μＭの最終試験濃度で測定された。
【0074】
アッセイＦ：化合物の経口適用後のラット／マウスにおける組織分布の測定
雄のＨａｎ・Ｗｉｓｔａｒラット又はＣ５７ＢＬ／６ＮＲｊマウスに対して、０．５％Ｎａｔｒｏｓｏｌ／０．０１５％Ｔｗｅｅｎ８０に懸濁させた調査対象化合物１０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与した。Ｋ3ＥＤＴＡ含有バイアルに、ラットの短時間イソフルラン麻酔で舌下静脈から、又は投与後０．８３、０．２５、０．５、１、２、３、４、８及び２４時間の時点で、意識のあるマウスの伏在静脈から採血した。その後、５０００ｒｐｍで５分間遠心分離して血漿を調製し、－２０℃で保存した。
雄のＨａｎ・Ｗｉｓｔａｒラット又はＣ５７ＢＬ／６ＮＲｊマウスに対して、０．５％Ｎａｔｒｏｓｏｌ／０．０１５％Ｔｗｅｅｎ８０に懸濁させた調査対象化合物１０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与した。Ｋ3ＥＤＴＡ含有バイアルに、ラットの短時間イソフルラン麻酔で舌下静脈から、又は投与後０．８３、０．２５、０．５、１、２、３、４、８及び２４時間の時点で、意識のあるマウスの伏在静脈から採血した。その後、５０００ｒｐｍで５分間遠心分離して血漿を調製し、－２０℃で保存した。
【0075】
組織及びＣＳＦは、麻酔をかけた動物からサンプリングした。大槽からＣＳＦを採取した。放血後、大腿筋サンプルを採取した。頭蓋骨と硬膜が取り除かれ、完全な脳が採取された。筋肉と脳のサンプルをプレウェイトホモジナイゼーション装置（プリセリーズ（Precellys）（登録商標））に移す前に、組織を生理食塩水で濯ぎ、水分を吸い取って乾かした。
【0076】
均質化のために、４部（ｖ／ｗ）の均質化緩衝液（３７．５％アセトニトリル、３７．５％メタノール、２５％水）を添加した。Ｐｒｅｃｅｌｌｙｓ（登録商標）エボリューションホモジナイザーで組織をホモジナイズした。ホモジネート５μＬをアセトニトリルとメタノールの１対１（ｖ／ｖ）混合物７０μＬに添加し、－１８℃で少なくとも１０分間凍結させた。
最終的なサンプル調製のために、サンプルを４０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、得られた上清のアリコート（３０μＬ）を１７０μＬのギ酸と混合してから、ＬＣ－ＭＳに注入した。検量線は、それぞれラット及びマウスの血漿でそれに応じて作成された。ベーリンガーインゲルハイムにおけるすべての動物のケア及び実験手順は、ドイツ及びヨーロッパの動物福祉法（ＥＵ指令２０１０／６３／ＥＵ）に準拠して実施され、ドイツの地方自治体であるテュービンゲン県よって承認された（参照番号３５／９１８５．８１－８／１４－００９－Ｇ）。
最終的なサンプル調製のために、サンプルを４０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、得られた上清のアリコート（３０μＬ）を１７０μＬのギ酸と混合してから、ＬＣ－ＭＳに注入した。検量線は、それぞれラット及びマウスの血漿でそれに応じて作成された。ベーリンガーインゲルハイムにおけるすべての動物のケア及び実験手順は、ドイツ及びヨーロッパの動物福祉法（ＥＵ指令２０１０／６３／ＥＵ）に準拠して実施され、ドイツの地方自治体であるテュービンゲン県よって承認された（参照番号３５／９１８５．８１－８／１４－００９－Ｇ）。
【0077】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤（ヒト第Ｘａ因子に対して選択的で、かつインビトロでの排出がない）であることが見出された。これに対して、国際公開第２００６／０３４８２２号実施例の５－エチニル－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソモルホリン－４－イル）フェニルカルバモイル］エチル｝チオフェン－２－カルボキサミド（第９１頁第７～８行、５－エチニル－チオフェン－２－カルボン酸－Ｎ－｛１－トリフルオロメチル－１－［３－メチル－４－（３－オキソ－モルホリン－４－イル）－フェニルカルバモイル］－エチル｝アミド）は強力なヒト第Ｘａ因子阻害剤であり、高い排出比を示す。これは十分な脳への曝露を達成するという目標を損なう可能性がある（表３ａを参照のこと）。
本発明の化合物について、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおける高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）及び低い排出比（アッセイＥにおける排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の化合物について、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおける高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）及び低い排出比（アッセイＥにおける排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【0078】
【表3】
【0079】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、代謝的に安定し、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤（インビトロ排出なし）であることが見出されたのに対して、国際公開第２００７／００３５３６号の実施例４、６及び１５９は、低い代謝安定性又は高いインビトロ排出比の何れかを示し、これは、十分な脳への曝露を達成するという目標を損なう可能性がある（表３ｂを参照のこと）。国際公開第２００７／００３５３６号の特定の実施例４、６及び１５９は、ラットにおけるこれら化合物の経口適用後の実質的なインビボ排出（アッセイＦ、データについては表７を参照のこと）を示す。
【0080】
本発明の化合物については、ヒト肝細胞における高い安定性（アッセイＤにおける低い％ＱＨ値）及び／又は低い排出比（アッセイＥ及びＦにおける排出＜３）が望まれる。すなわち、本発明の化合物は強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【表4】
【0081】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力なＩＤＯ１阻害剤であり、ヒトアンドロゲン受容体よりも選択的であることが見出されたが、国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６は、ヒトアンドロゲン受容体を阻害し、より弱いＩＤＯ１阻害を示し、したがって、ヒトアンドロゲン受容体に対する選択性を何ら示さず、又は当該選択性が低い（表３ｃを参照のこと）。さらに、本発明の化合物は、ヒト肝細胞アッセイにおいて増強された代謝安定性（低い％ＱＨ値）を示すのに対し、国際公開第９８／２２４３２号の実施例５３及び８６は、ヒト肝細胞において非常に低い代謝安定性を示している（表３ｃを参照のこと）。したがって、本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤であることが見出された。
本発明の化合物については、ヒトアンドロゲン受容体に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＢにおける高いＩＣ５０値を示すヒトアンドロゲン受容体の低い阻害）、並びにヒト肝細胞における高い安定性（アッセイＤにおける低い％ＱＨ値）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の化合物については、ヒトアンドロゲン受容体に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＢにおける高いＩＣ５０値を示すヒトアンドロゲン受容体の低い阻害）、並びにヒト肝細胞における高い安定性（アッセイＤにおける低い％ＱＨ値）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【0082】
【表5】
【0083】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤（ヒト第Ｘａ因子に対して選択的であり、インビトロ排出はない）であることが見出されたのに対して、国際公開第２００５／１１１０２９号の実施例８及び２８では、強力なヒト第Ｘａ因子阻害剤が高い排出比を示しており、これは十分な脳への曝露を達成するという目標を損なう可能性がある（表４を参照のこと）。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおいて低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、並びに低い排出比（アッセイＥにおける排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおいて低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、並びに低い排出比（アッセイＥにおける排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【0084】
【表6】
【0085】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤(ヒト第Ｘａ因子よりも選択的であり、ヒト肝細胞において代謝的に安定している）であることが見出されたのに対して、国際公開第２００５／１１１０１３号の実施例２２はヒト第Ｘａ因子酵素を阻害し、ヒト肝細胞において中程度の代謝安定性を示す（表５を参照のこと）。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおいて低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、及びヒト肝細胞における高い安定性（アッセイＤにおける低い％ＱＨ値）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおいて低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、及びヒト肝細胞における高い安定性（アッセイＤにおける低い％ＱＨ値）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【0086】
【表7】
【0087】
本発明の化合物は、驚くべきことに、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤（ヒト第Ｘａ因子に対して選択的であり、インビトロでの排出がない）であることが見出されたのに対して、国際公開第２００５／１１１０１４号の実施例４は、高い排出比を示す強力なヒト第Ｘａ因子阻害剤であり、これは十分な脳への曝露を達成するという目標を損なう可能性がある（表６を参照のこと）。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、並びに低い排出比（アッセイＥにおいて排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
本発明の化合物については、ヒト第Ｘａ因子酵素に対する高い選択性（すなわち、アッセイＡにおける低いＩＣ５０値を示す強力なＩＤＯ１阻害、及びアッセイＣにおいて高いＩＣ５０値を示すヒト第Ｘａ因子酵素の低い阻害）、並びに低い排出比（アッセイＥにおいて排出＜３）が望ましい。すなわち、本発明の化合物は、強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である。
【0088】
【表8】
【0089】
驚くべきことに、本発明の化合物は、ラット又はマウスへの経口適用後の血漿及び脳への曝露によって示されるように、インビボで好ましい薬物動態特性を示すことが見出された。驚くべきことに、実施例３及び４は、強力かつ選択的なＩＤＯ１阻害剤（ヒトアンドロゲン受容体及びヒト第Ｘａ因子に対して選択的）であり、代謝的に安定であり、インビトロでもインビボでも排出を示さないことが見出された（表３ａ～７）。したがって、２４時間にわたって脳内のＩＤＯ１を実質的に阻害するために必要とされる、患者の脳への曝露を予測することができる。
対照的に、国際公開第２００７／００３５３６号の特定の実施例４、６及び１５９は、ラットにおけるこれらの化合物の経口適用後に、同じアッセイ（アッセイＦ、データについては表７を参照のこと）において実質的なインビボ排出を示す。
対照的に、国際公開第２００７／００３５３６号の特定の実施例４、６及び１５９は、ラットにおけるこれらの化合物の経口適用後に、同じアッセイ（アッセイＦ、データについては表７を参照のこと）において実質的なインビボ排出を示す。
【0090】
【表9】
【0091】
本発明は、予想外に強力で、選択的で、代謝的に安定で、かつ脳に浸透するＩＤＯ１阻害剤である式Ａによる化合物を提供する。すなわち、当該化合物は、ヒトＩＤＯ１酵素に対して高い効力を示し、ヒトアンドロゲン受容体及びヒト第Ｘａ因子酵素に対して高い選択性を示し、ヒト肝細胞において高い代謝安定性を示し、インビトロでも（ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１アッセイ）、またインビボでも（ラット／マウスにおける筋肉／脳の組織分布によって示される）排出を示さない。
【0092】
患者における完全な有効性、すなわちＩＤＯ１酵素活性の＞９０％阻害は、ヒト全血アッセイで測定されたＩＤＯ１阻害のインビトロＩＣ50値に対応するトラフ血漿濃度に関連する（DOI:10.1002/jcph.855, DOI:10.1158/1078-0432.CCR-16-2272）。中枢神経系（ＣＮＳ）が関与する臨床適応症では、ＩＤＯ１阻害が治療上の利点となる疾患や状態の治療に有用であるために、トラフ血漿濃度に等しい脳内濃度を脳内で２４時間維持する必要がある。しかし、有効な化合物血漿曝露は、望ましくない副作用がないようにする必要がある。患者間のばらつきを考慮するために、より高い血漿化合物への曝露は副作用がないようにする必要がある。有効な化合物血漿曝露と、最初の副作用が発生する血漿曝露との比率は、安全域として定義される。
【0093】
安全域は、以下によって大幅に低減される。
（ｉ）効力が低いこと。有効性を達成するには高い血漿レベルが必要とされ、これは望ましくない副作用のリスクを高くする可能性があるからである。
（ｉｉ）ヒトアンドロゲン受容体又はヒト第Ｘａ因子などの標的に対する選択性が低いこと。副作用は、オフターゲット親和性によって引き起こされる可能性があるからである。
（ｉｉｉ）代謝安定性が低いこと。２４時間にわたって実質的な阻害を提供するＣＮＳレベルを確保するために、高い初期化合物血漿曝露が必要となるからである。
（ｉｖ）血液脳関門（ＢＢＢ）での排出比が高いこと。ＣＮＳよりも血漿中の化合物濃度が高い化合物は、初期の血漿曝露が高いことに関与し、輸送タンパク質を介した薬物間相互作用に関連しているため、化合物の使用が制限されるからである（FDA - Clinical Drug Interaction Studies - Cytochrome P450 Enzyme- and Transporter-Mediated Drug Interactions, Guidance for industry, January 2020)。
（ｉ）効力が低いこと。有効性を達成するには高い血漿レベルが必要とされ、これは望ましくない副作用のリスクを高くする可能性があるからである。
（ｉｉ）ヒトアンドロゲン受容体又はヒト第Ｘａ因子などの標的に対する選択性が低いこと。副作用は、オフターゲット親和性によって引き起こされる可能性があるからである。
（ｉｉｉ）代謝安定性が低いこと。２４時間にわたって実質的な阻害を提供するＣＮＳレベルを確保するために、高い初期化合物血漿曝露が必要となるからである。
（ｉｖ）血液脳関門（ＢＢＢ）での排出比が高いこと。ＣＮＳよりも血漿中の化合物濃度が高い化合物は、初期の血漿曝露が高いことに関与し、輸送タンパク質を介した薬物間相互作用に関連しているため、化合物の使用が制限されるからである（FDA - Clinical Drug Interaction Studies - Cytochrome P450 Enzyme- and Transporter-Mediated Drug Interactions, Guidance for industry, January 2020)。
【0094】
したがって、
（ｉ）強力なＩＤＯ１阻害剤であり、
（ｉｉ）ヒトアンドロゲン受容体及びヒト第Ｘａ因子に対して選択的であり、
（ｉｉｉ）代謝安定性が高く、かつ
（ｉｖ）排出が少ない／存在しない、
化合物は、インビボで有効であり、ＩＤＯ１阻害が治療上の利点であるＣＮＳ起源の疾患及び状態の治療のための薬物として使用される許容可能な安全域を有すると思われる。
（ｉ）強力なＩＤＯ１阻害剤であり、
（ｉｉ）ヒトアンドロゲン受容体及びヒト第Ｘａ因子に対して選択的であり、
（ｉｉｉ）代謝安定性が高く、かつ
（ｉｖ）排出が少ない／存在しない、
化合物は、インビボで有効であり、ＩＤＯ１阻害が治療上の利点であるＣＮＳ起源の疾患及び状態の治療のための薬物として使用される許容可能な安全域を有すると思われる。
【0095】
本発明は、ＣＮＳを標的とする化合物を提供する。合理的なヒト用量（１日１回＜２５０ｍｇ）及び許容可能な安全域で、ＣＮＳにおけるＩＤＯ１酵素の実質的な阻害を達成するために、本発明の化合物は強力であり（ＩＣ５０（ＩＤＯ１）＜３００ｎＭ、ヒト全血アッセイ）、選択的であり（好ましくは選択性＞１０、より好ましくは選択性＞３０、最も好ましくはヒトアンドロゲン受容体及び／又はヒト第Ｘａ因子に対する選択性＞３０）、代謝的に安定であり（ヒト肝細胞の＜２０％ＱＨ）、またインビトロ及びインビボの両方で排出が少なく(排出＜３）、又は排出がないことが求められる。
驚くべきことに、本発明の化合物は、強力であり（ヒト全血アッセイにおいてＩＣ５０（ＩＤＯ１）＜３００ｎＭ）、選択的であり（好ましくは選択性＞１０、より好ましくは選択性＞３０、最も好ましくはヒトアンドロゲン受容体及び／又はヒト第Ｘａ因子に対する選択性＞３０)、代謝的に安定であり（ヒト肝細胞において＜２０％ＱＨ）、またインビトロ及びインビボの両方で排出が少なく（排出＜３）又は排出がないことが見出された。
驚くべきことに、本発明の化合物は、強力であり（ヒト全血アッセイにおいてＩＣ５０（ＩＤＯ１）＜３００ｎＭ）、選択的であり（好ましくは選択性＞１０、より好ましくは選択性＞３０、最も好ましくはヒトアンドロゲン受容体及び／又はヒト第Ｘａ因子に対する選択性＞３０)、代謝的に安定であり（ヒト肝細胞において＜２０％ＱＨ）、またインビトロ及びインビボの両方で排出が少なく（排出＜３）又は排出がないことが見出された。
【0096】
Ｐ－ｇｐ基質特性がないか、又は弱い化合物を選択する理由：
遊離薬物仮説によれば、非結合（遊離）薬物分子のみが、標的に結合することにより薬理効果を発揮する。ＣＮＳ作用部位への送達を必要とする治療適応症の薬物の場合、遊離脳濃度がインビボＣＮＳ活性に最も関連する薬物濃度である（doi: 10.1124/jpet.107.119560）。
ＣＮＳへの薬物の分布は、血液脳関門（ＢＢＢ）での排除のために制限されることが多い。ＢＢＢは、タイトジャンクションによって接続された単層の内皮細胞で構成されており、傍細胞透過性が低く、開窓がなく、複数の膜排出輸送体が発現していないことを特徴としており、よって循環する生体異物からＣＮＳを非常に効果的に保護する。
したがって、ＣＮＳ標的薬の望ましい薬理学的応答は、その受動拡散に依存する。つまり、化合物の物理化学的特性、及びＢＢＢでの神経保護を克服するための能動的な取り込みと排出の輸送体間の相対的なバランスに関連している。
多くの輸送体がＢＢＢにおいて同定されており、その中で、Ｐ－ｇｐ（Ｐ－糖タンパク質）は薬物が脳に入るのを防ぐゲートキーパー機能と、既に脳内皮細胞の細胞質に入った化合物を排出する押出メカニズムにより、最も重要な排出輸送体と考えられている(doi: 10.1007/s11095-007-9502-2, doi: 10.1124/jpet.107.130294, /doi.org/10.1517/17460441.3.6.677)。
遊離薬物仮説によれば、非結合（遊離）薬物分子のみが、標的に結合することにより薬理効果を発揮する。ＣＮＳ作用部位への送達を必要とする治療適応症の薬物の場合、遊離脳濃度がインビボＣＮＳ活性に最も関連する薬物濃度である（doi: 10.1124/jpet.107.119560）。
ＣＮＳへの薬物の分布は、血液脳関門（ＢＢＢ）での排除のために制限されることが多い。ＢＢＢは、タイトジャンクションによって接続された単層の内皮細胞で構成されており、傍細胞透過性が低く、開窓がなく、複数の膜排出輸送体が発現していないことを特徴としており、よって循環する生体異物からＣＮＳを非常に効果的に保護する。
したがって、ＣＮＳ標的薬の望ましい薬理学的応答は、その受動拡散に依存する。つまり、化合物の物理化学的特性、及びＢＢＢでの神経保護を克服するための能動的な取り込みと排出の輸送体間の相対的なバランスに関連している。
多くの輸送体がＢＢＢにおいて同定されており、その中で、Ｐ－ｇｐ（Ｐ－糖タンパク質）は薬物が脳に入るのを防ぐゲートキーパー機能と、既に脳内皮細胞の細胞質に入った化合物を排出する押出メカニズムにより、最も重要な排出輸送体と考えられている(doi: 10.1007/s11095-007-9502-2, doi: 10.1124/jpet.107.130294, /doi.org/10.1517/17460441.3.6.677)。
【0097】
Ｐ－ｇｐは、その幅広い基質特異性と固有の輸送活性により、脳への薬物の取り込みを制限する上で非常に重要な役割を果たしているので、ＣＮＳ標的に対して有意なＰ－ｇｐ排出輸送活性を持たない化合物を設計することが重要である。Ｐ－ｇｐ基質の特徴は、ＣＮＳ薬の治療域の縮小を意味する。排出輸送を補償して遊離脳濃度を予想レベルまで駆動するために、より高い遊離血漿濃度が必要とされるので、減少した治療域が生じる。ただし、血漿濃度が高くなると末梢毒性のリスクが高まる。これは、ＣＮＳ薬がＰ－ｇｐに対する基質親和性を持つべきでないとの戦略をサポートする（doi: 10.1124/dmd.104.001230, 10.1124/jpet.107.130294）。
さらに、例えばμアヘン受容体アゴニスト及び強力なＰ－ｇｐ基質であるロペラミドについて観察されるように、ＢＢＢとの干渉による薬物間相互作用（ＤＤＩ）が考えられる。ロペラミドは、腸の末梢μ受容体の活性化によって腸の運動性を低下させる。その高いＰ－ｇｐ排出により、脳への浸透は、臨床用量やさらに高用量において制限され、その適用は呼吸抑制などの中枢性アヘン作用とは関連していない。しかし、キニジン、すなわち強力なＰ－ｇｐ阻害剤の同時投与は、ロペラミド単独の投与後には発生しない有意な呼吸抑制をもたらした（doi: 10.1067/mcp.2000.109156）。ＢＢＢにおいてＰ－ｇｐが関与するＤＤＩのさらなる例には、ベラパミルとシクロスポリンＡ（doi: 10.1016/j.clpt.2005.01.022）、ベラパミルとタリキダル（doi: 10.1038/jcbfm.2015.19）、ベラパミルとタモキシフェン（doi: 10.1124/jpet.111.180398）、又はエトポシドとシクロスポリンＡ（doi: 10.1002/pbc.20382）の相互作用が含まれ、ＢＢＢでのＰ－ｇｐ相互作用によって引き起こされるＤＤＩがヒトにおいても可能であることを実証している（doi:10.1124/dmd.112.049577）。
さらに、例えばμアヘン受容体アゴニスト及び強力なＰ－ｇｐ基質であるロペラミドについて観察されるように、ＢＢＢとの干渉による薬物間相互作用（ＤＤＩ）が考えられる。ロペラミドは、腸の末梢μ受容体の活性化によって腸の運動性を低下させる。その高いＰ－ｇｐ排出により、脳への浸透は、臨床用量やさらに高用量において制限され、その適用は呼吸抑制などの中枢性アヘン作用とは関連していない。しかし、キニジン、すなわち強力なＰ－ｇｐ阻害剤の同時投与は、ロペラミド単独の投与後には発生しない有意な呼吸抑制をもたらした（doi: 10.1067/mcp.2000.109156）。ＢＢＢにおいてＰ－ｇｐが関与するＤＤＩのさらなる例には、ベラパミルとシクロスポリンＡ（doi: 10.1016/j.clpt.2005.01.022）、ベラパミルとタリキダル（doi: 10.1038/jcbfm.2015.19）、ベラパミルとタモキシフェン（doi: 10.1124/jpet.111.180398）、又はエトポシドとシクロスポリンＡ（doi: 10.1002/pbc.20382）の相互作用が含まれ、ＢＢＢでのＰ－ｇｐ相互作用によって引き起こされるＤＤＩがヒトにおいても可能であることを実証している（doi:10.1124/dmd.112.049577）。
【0098】
ＢＢＢの生理学的複雑さを考慮して、インビトロ前臨床スクリーニングにおいて、Ｐ－ｇｐでトラスフェクトしたメイディン・ダービー（Madin-Darby）イヌ腎臓（ＭＤＣＫ）細胞株は、Ｐ－ｇｐ排出を予測するための貴重な代用物であり、従来技術におけるインビトロシステムを表すことが示されている（doi: 10.1016/j.ejps.2017.04.016, doi: 10.1124/dmd.116.074245）。化合物のＰ－ｇｐ輸送特徴は、双方向透過性測定アプローチで試験され、排出比で表される。ＭＤＣＫ－Ｐ－ｇｐ透過性試験で観察されたインビトロ排出は、ラットのＢＢＢでのインビボ薬物排出とよく相関することが実証されている(doi: 10.3390/pharmaceutics11110595)。
ＣＮＳ薬の約９５％はＰ－ｇｐ排出比＜３であり(doi: 10.1124/jpet.102.039255、10.1080/00498250701570285)、ＣＮＳ薬の大部分がＰ－ｇｐを媒介した排出を示さない又は弱いこと、及び成功裡のＣＮＳ送達のために、化合物は良好なＰ－ｇｐ基質であってはならないことが確認された。
ＣＮＳ薬の約９５％はＰ－ｇｐ排出比＜３であり(doi: 10.1124/jpet.102.039255、10.1080/00498250701570285)、ＣＮＳ薬の大部分がＰ－ｇｐを媒介した排出を示さない又は弱いこと、及び成功裡のＣＮＳ送達のために、化合物は良好なＰ－ｇｐ基質であってはならないことが確認された。
【0099】
医薬組成物
本発明の化合物を投与するための適切な製剤は当業者に明らかであり、例えば、錠剤、丸薬、カプセル、坐剤、ロゼンジ、トローチ、溶液、シロップ、エリキシル、サシェー、注射剤、吸入剤、粉末が含まれる。薬学的に活性な化合物の含有量は、組成物全体の０．１～９５質量％、好ましくは５．０～９０質量％の範囲で変動し得る。
適切な錠剤は、例えば、本発明の化合物を既知の賦形剤、例えば不活性希釈剤、担体、崩壊剤、補助剤、界面活性剤、結合剤及び／又は潤滑剤と混合し、得られた混合物を圧縮して錠剤を形成することにより得ることができる。
本発明の化合物を投与するための適切な製剤は当業者に明らかであり、例えば、錠剤、丸薬、カプセル、坐剤、ロゼンジ、トローチ、溶液、シロップ、エリキシル、サシェー、注射剤、吸入剤、粉末が含まれる。薬学的に活性な化合物の含有量は、組成物全体の０．１～９５質量％、好ましくは５．０～９０質量％の範囲で変動し得る。
適切な錠剤は、例えば、本発明の化合物を既知の賦形剤、例えば不活性希釈剤、担体、崩壊剤、補助剤、界面活性剤、結合剤及び／又は潤滑剤と混合し、得られた混合物を圧縮して錠剤を形成することにより得ることができる。
【0100】
治療における使用／使用の方法
ＩＤＯ１阻害のヒト治療への適用は、総説にまとめられている（doi: 10.1007/s11011-018-0290-7、doi: 10.7150/jca.31727., doi: 10.1177/1178646917691938、doi: 10.1016/j.pnpbp.2017.04.035、doi: 10.2741/4363、doi: 10.3390/molecules 23010191、及び doi: 10.1007/s00018-017-2504-2）。
本発明は、ＩＤＯ１阻害が治療有用性を有する精神障害、疾患及び状態の治療に有用な化合物に関し、その適応症には（１）気分障害及び気分感情障害、（２）統合失調症スペクトラム障害、（３）不安障害を含む、神経症性障害、ストレス関連障害及び身体表現性障害、（４）心理的発達障害、（５）生理的障害及び身体的要因に関連した行動症候群、（６）物質関連障害及び中毒性障害、（７）不快及び快の感情価の症状を関連した疾患、（８）神経変性障害、（９）神経免疫障害、（１０）神経血管障害、（１１）頭部外傷、（１２）代謝障害、（１３）ウイルス感染症、（１４）細菌感染症、（１５）網膜疾患、（１６）腫瘍学の適応症が含まれる。
ＩＤＯ１阻害のヒト治療への適用は、総説にまとめられている（doi: 10.1007/s11011-018-0290-7、doi: 10.7150/jca.31727., doi: 10.1177/1178646917691938、doi: 10.1016/j.pnpbp.2017.04.035、doi: 10.2741/4363、doi: 10.3390/molecules 23010191、及び doi: 10.1007/s00018-017-2504-2）。
本発明は、ＩＤＯ１阻害が治療有用性を有する精神障害、疾患及び状態の治療に有用な化合物に関し、その適応症には（１）気分障害及び気分感情障害、（２）統合失調症スペクトラム障害、（３）不安障害を含む、神経症性障害、ストレス関連障害及び身体表現性障害、（４）心理的発達障害、（５）生理的障害及び身体的要因に関連した行動症候群、（６）物質関連障害及び中毒性障害、（７）不快及び快の感情価の症状を関連した疾患、（８）神経変性障害、（９）神経免疫障害、（１０）神経血管障害、（１１）頭部外傷、（１２）代謝障害、（１３）ウイルス感染症、（１４）細菌感染症、（１５）網膜疾患、（１６）腫瘍学の適応症が含まれる。
【0101】
その薬理効果を考慮すると、本発明の化合物は、以下からなるリストから選択される障害、疾患又は状態の治療における使用に適している：
（１）双極性障害Ｉ型、うつ病、軽躁病、躁病及び混合型；双極性障害ＩＩ型；単一のうつ病エピソード又は再発性大うつ病性障害、軽度のうつ病性障害、産後発症するうつ病性障害、精神病症状を伴ううつ病性障害などのうつ病性障害；付随する不安性の苦痛、混合性の特徴、メランコリアの特徴、非定型の特徴、気分に一致する精神病性の特徴、気分に一致しない精神病性の特徴、及びカタトニアを伴う又は伴わない大うつ病性障害を含む、気分障害及び気分感情障害の治療。
（２）統合失調症及び関連する陰性及び認知症状を伴う統合失調感情障害を含む、統合失調症スペクトル障害及び他の精神病性障害に属する気分障害の治療。
（３）不安障害、全般性不安障害、広場恐怖症を伴う又は伴わないパニック障害、特定の恐怖症、社会恐怖症、慢性不安障害；強迫性障害；外傷後ストレス障害などの重度ストレスへの反応及び適応障害：離人・現実感喪失症候群などの他の神経障害を含む、神経症性障害、ストレス関連障害及び身体表現性障害に属する障害の治療。
（４）アスペルガー症候群及びレット症候群、自閉症障害、小児自閉症及び精神遅滞及び常同運動に関連する過活動性障害を含む広汎性発達障害、運動機能の特異的発達障害、学習能力の特異的発達障害、注意欠陥／多動性障害を含む、心理的発達障害の治療。
（５）産後及び分娩後うつ病を含む、産褥に関連した精神及び行動の障害；神経性無食欲症、神経性過食症、及びその他の衝動制御障害を含む摂食障害を含む、生理学的障害及び身体的要因に関連した行動症候群の治療。
（６）アルコール、大麻、幻覚剤、覚せい剤、催眠薬、タバコによって誘導される物質使用障害である、物質関連障害及び中毒性障害の治療。
（７）快感消失、持続的な脅威と損失、自殺念慮を含む、不快及び快の感情価の症状に関連した疾患の治療。
（８）ハンチントン病又は筋萎縮性側索硬化症などの神経細胞及び／又はグリア細胞の変性が関与する疾患の治療。
（９）肥満を含む代謝の障害の治療。これには、進行中の慢性炎症を伴う代謝障害の治療、及びマイクロバイオームの活動が原因であり得る代謝障害の治療が含まれる。
（１０）ウイルス感染症の治療。これには、Ｔ細胞機能の正常化及び免疫寛容の減少を主な目的とする治療、又は感染による神経学的影響の治療が含まれる。
（１１）細菌感染症の治療。これには、Ｔ細胞機能の正常化及び免疫寛容の減少を主な目的とする治療、又は感染の神経学的影響の治療、又は結核の治療が含まれる。
（１２）網膜疾患の治療。これには、糖尿病性網膜症や加齢黄斑変性症に伴う地理的萎縮など、ＩＤＯ１の高発現による網膜変性の予防のための治療が含まれる。
（１）双極性障害Ｉ型、うつ病、軽躁病、躁病及び混合型；双極性障害ＩＩ型；単一のうつ病エピソード又は再発性大うつ病性障害、軽度のうつ病性障害、産後発症するうつ病性障害、精神病症状を伴ううつ病性障害などのうつ病性障害；付随する不安性の苦痛、混合性の特徴、メランコリアの特徴、非定型の特徴、気分に一致する精神病性の特徴、気分に一致しない精神病性の特徴、及びカタトニアを伴う又は伴わない大うつ病性障害を含む、気分障害及び気分感情障害の治療。
（２）統合失調症及び関連する陰性及び認知症状を伴う統合失調感情障害を含む、統合失調症スペクトル障害及び他の精神病性障害に属する気分障害の治療。
（３）不安障害、全般性不安障害、広場恐怖症を伴う又は伴わないパニック障害、特定の恐怖症、社会恐怖症、慢性不安障害；強迫性障害；外傷後ストレス障害などの重度ストレスへの反応及び適応障害：離人・現実感喪失症候群などの他の神経障害を含む、神経症性障害、ストレス関連障害及び身体表現性障害に属する障害の治療。
（４）アスペルガー症候群及びレット症候群、自閉症障害、小児自閉症及び精神遅滞及び常同運動に関連する過活動性障害を含む広汎性発達障害、運動機能の特異的発達障害、学習能力の特異的発達障害、注意欠陥／多動性障害を含む、心理的発達障害の治療。
（５）産後及び分娩後うつ病を含む、産褥に関連した精神及び行動の障害；神経性無食欲症、神経性過食症、及びその他の衝動制御障害を含む摂食障害を含む、生理学的障害及び身体的要因に関連した行動症候群の治療。
（６）アルコール、大麻、幻覚剤、覚せい剤、催眠薬、タバコによって誘導される物質使用障害である、物質関連障害及び中毒性障害の治療。
（７）快感消失、持続的な脅威と損失、自殺念慮を含む、不快及び快の感情価の症状に関連した疾患の治療。
（８）ハンチントン病又は筋萎縮性側索硬化症などの神経細胞及び／又はグリア細胞の変性が関与する疾患の治療。
（９）肥満を含む代謝の障害の治療。これには、進行中の慢性炎症を伴う代謝障害の治療、及びマイクロバイオームの活動が原因であり得る代謝障害の治療が含まれる。
（１０）ウイルス感染症の治療。これには、Ｔ細胞機能の正常化及び免疫寛容の減少を主な目的とする治療、又は感染による神経学的影響の治療が含まれる。
（１１）細菌感染症の治療。これには、Ｔ細胞機能の正常化及び免疫寛容の減少を主な目的とする治療、又は感染の神経学的影響の治療、又は結核の治療が含まれる。
（１２）網膜疾患の治療。これには、糖尿病性網膜症や加齢黄斑変性症に伴う地理的萎縮など、ＩＤＯ１の高発現による網膜変性の予防のための治療が含まれる。
【0102】
本明細書で使用する場合、別段の記載がない限り、「治療する」、「治療」の用語は疾患、状態、又は障害と闘う目的での、ヒト対象又はヒト患者の管理及びケアを含むものとし、また症状若しくは合併症の発症を予防し、症状若しくは合併症を緩和し、又は疾患、状態若しくは障害を排除するために本発明の化合物を投与することを含む。
本明細書で使用する場合、別段の記載がない限り、「予防」の用語には、（ａ）１つ若しくは複数の症状の頻度の減少、（ｂ）１つ若しくは複数の症状の重症度の軽減、（ｃ）さらなる症状の発現の遅延若しくは回避、及び／又は（ｄ）障害若しくは状態の発症の遅延若しくは回避が含まれるものとする。
別の態様によれば、本発明は、上記状態の治療及び／又は予防に使用するための、式Ａの化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
別の態様によれば、本発明は、行動療法、ＴＭＳ（経頭蓋磁気刺激）、ＥＣＴ（電気けいれん療法）及びその他の療法に加えて、式Ａの化合物が使用されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
本明細書で使用する場合、別段の記載がない限り、「予防」の用語には、（ａ）１つ若しくは複数の症状の頻度の減少、（ｂ）１つ若しくは複数の症状の重症度の軽減、（ｃ）さらなる症状の発現の遅延若しくは回避、及び／又は（ｄ）障害若しくは状態の発症の遅延若しくは回避が含まれるものとする。
別の態様によれば、本発明は、上記状態の治療及び／又は予防に使用するための、式Ａの化合物又はその薬学的に許容される塩を提供する。
別の態様によれば、本発明は、行動療法、ＴＭＳ（経頭蓋磁気刺激）、ＥＣＴ（電気けいれん療法）及びその他の療法に加えて、式Ａの化合物が使用されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
【0103】
併用療法
本発明による化合物は、その治療が本発明の焦点である適応症の何れかの治療に関連して、当技術分野で使用されることが知られた他の治療選択肢と組み合わせることができる。
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、デュロキセチン、エスシタロプラム、ブプロピオン、ベンラファキシン、デスベンラファキシン、セルトラリン、パロキセチン、フルオキセチン、ボルチオキセチン、ミルタザピン、シタルオプラム、ビラゾドン、トラゾドン、アミトリプチリン、クロミプラミン、アゴメラチン、レボミルナシプラン、リチウム、ドキセピン、ノルトリプチリンからなるリストから選択される１つ又は複数の抗うつ薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。「抗うつ剤」の用語は、うつ病又はうつ病の症状に関連する疾患を治療するために使用できる任意の医薬品又は薬物を意味するものとする。
本発明による化合物は、その治療が本発明の焦点である適応症の何れかの治療に関連して、当技術分野で使用されることが知られた他の治療選択肢と組み合わせることができる。
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、デュロキセチン、エスシタロプラム、ブプロピオン、ベンラファキシン、デスベンラファキシン、セルトラリン、パロキセチン、フルオキセチン、ボルチオキセチン、ミルタザピン、シタルオプラム、ビラゾドン、トラゾドン、アミトリプチリン、クロミプラミン、アゴメラチン、レボミルナシプラン、リチウム、ドキセピン、ノルトリプチリンからなるリストから選択される１つ又は複数の抗うつ薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。「抗うつ剤」の用語は、うつ病又はうつ病の症状に関連する疾患を治療するために使用できる任意の医薬品又は薬物を意味するものとする。
【0104】
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、アリピプラゾール、パルミチン酸パリペリドン、ルラシドン、ケチイアピン、リスペリドン、オランザピン、パリペリドン、ブレクスピプラゾール、クロザピン、アセナピン、クロルプロマジン、ハロペリドール、カリプラジン、ジプラシドン、アミスルプリド、イロペリドン、フルフェナジン、ブロナンセリン、アリピプラゾールラウロキシルからなるリストから選択される１つ又は複数の抗精神病薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。「抗精神病薬」との用語は、精神病又は抑うつ症状に関連する疾患を治療するために使用できる任意の医薬品又は薬物を意味するものとする。
【0105】
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、リスデキサンフェタミン、メチルフェニデート、アンフェタミン、デキサンフェタミン、デクスメチルフェニデート、アルモダフィニル、モダフィニルからなるリストから選択される１つ又は複数の精神刺激薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。「精神刺激薬」との用語は、気分障害又は衝動制御障害などの疾患を治療するために使用できる任意の医薬品又は薬物を意味するものとする。
別の態様によれば、本発明は、オキシラセタム、ピラセタム、又は天然物セントジョンズワートからなるリストから選択される向知性薬による治療に加えて、式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、オキシラセタム、ピラセタム、又は天然物セントジョンズワートからなるリストから選択される向知性薬による治療に加えて、式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
【0106】
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物と１つ又は複数の抗うつ薬、抗精神病薬、精神刺激薬、向知性薬又は天然物との組み合わせが、行動療法、ＴＭＳ（経頭蓋磁気刺激）、ＥＣＴ（電気けいれん療法）及び他の療法に加えて使用されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる１つ又は複数の抗うつ薬、抗精神病薬、精神刺激薬、向知性薬又は天然物による治療に加えて投与される式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、テトラベナジン、デュテトラベナジン、及びバクロフェンなどの任意の舞踏病抑制薬による治療に加えて、式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、リルゾール、ラサギリン、及びエダバロンなどの、神経変性を遅らせるために使用される治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、任意の抗ウイルス薬又は抗菌薬による治療に加えて式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、テトラベナジン、デュテトラベナジン、及びバクロフェンなどの任意の舞踏病抑制薬による治療に加えて、式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、式Ａの化合物が、リルゾール、ラサギリン、及びエダバロンなどの、神経変性を遅らせるために使用される治療に加えて投与されることを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
別の態様によれば、本発明は、任意の抗ウイルス薬又は抗菌薬による治療に加えて式Ａの化合物を投与することを特徴とする、前述の態様の何れか１つによる式Ａの化合物を提供する。
【0107】
実験の部
略語
ａｑ． 水性
ｅｑ． 当量
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ｈ 時間
ＨＡＴＵ Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム－ヘキサフルオロホスフェート
ＨＣｌ 塩酸
Ｍｉｎ 分
ＮａＯＨ 水酸化ナトリウム
ＭｅＯＨ メタノール
ｒｔ 室温
Ｒｔ 保持時間
ＴＢＴＵ Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
略語
ａｑ． 水性
ｅｑ． 当量
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ｈ 時間
ＨＡＴＵ Ｏ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム－ヘキサフルオロホスフェート
ＨＣｌ 塩酸
Ｍｉｎ 分
ＮａＯＨ 水酸化ナトリウム
ＭｅＯＨ メタノール
ｒｔ 室温
Ｒｔ 保持時間
ＴＢＴＵ Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
【0108】
スペクトルデータにおける略語
１Ｈ－ＮＭＲ プロトン核磁気共鳴
δ 化学シフト
ｄ ダブレット
ｄｄ ダブレットのダブレット
ＤＭＳＯ－ｄ６ ヘキサ重水素ジメチルスルホキシド
Ｈ プロトン
Ｈｚ ヘルツ（＝１／秒）
Ｊ カップリング定数
ｍ 多重線
ｐｐｍ １００万分の１
ｓ シングレット
１Ｈ－ＮＭＲ プロトン核磁気共鳴
δ 化学シフト
ｄ ダブレット
ｄｄ ダブレットのダブレット
ＤＭＳＯ－ｄ６ ヘキサ重水素ジメチルスルホキシド
Ｈ プロトン
Ｈｚ ヘルツ（＝１／秒）
Ｊ カップリング定数
ｍ 多重線
ｐｐｍ １００万分の１
ｓ シングレット
【0109】
一般的な分析
すべての反応は、商用等級の試薬及び溶媒を使用して実行された。ＮＭＲスペクトルは、トップスピン３．２ｐ１６（Top-Spin 3.2 pl6）ソフトウェアを使用して、ブルカー・アドバンス装置（Bruker AVANCE IIIHD 400 MHz）を用いて記録された。
化学シフトは、δ単位で、内部参照トリメチルシランから低磁場側に１００万分の１（ppm）で与えられる。
別段の指示がない限り、すべての１Ｈ－ＮＭＲスペクトルはＤＭＳＯ－ｄ６中で測定された。
選択されたデータは、化学シフト、多重度、カップリング定数（Ｊ）、及び積分で報告される。
低分解能質量スペクトルは、アジレント（Agilent）6130四重極質量分析計（エレクトロスプレー陽イオン化）に接続されたアジレント１１００シリーズＬＣからなる液体クロマトグラフィー質量分析計（ＬＣＭＳ）を使用して得られた。
すべての反応は、商用等級の試薬及び溶媒を使用して実行された。ＮＭＲスペクトルは、トップスピン３．２ｐ１６（Top-Spin 3.2 pl6）ソフトウェアを使用して、ブルカー・アドバンス装置（Bruker AVANCE IIIHD 400 MHz）を用いて記録された。
化学シフトは、δ単位で、内部参照トリメチルシランから低磁場側に１００万分の１（ppm）で与えられる。
別段の指示がない限り、すべての１Ｈ－ＮＭＲスペクトルはＤＭＳＯ－ｄ６中で測定された。
選択されたデータは、化学シフト、多重度、カップリング定数（Ｊ）、及び積分で報告される。
低分解能質量スペクトルは、アジレント（Agilent）6130四重極質量分析計（エレクトロスプレー陽イオン化）に接続されたアジレント１１００シリーズＬＣからなる液体クロマトグラフィー質量分析計（ＬＣＭＳ）を使用して得られた。
【0110】
方法:
ＨＰＬＣ－ＭＳ法に使用される溶媒混合物について、溶媒％は、対応する溶媒の体積パーセントとして与えられる。
ＨＰＬＣ－ＭＳ法：
ＨＰＬＣ－ＭＳ法に使用される溶媒混合物について、溶媒％は、対応する溶媒の体積パーセントとして与えられる。
ＨＰＬＣ－ＭＳ法：
【表10】
【表11】
【0111】
中間体の調製：
中間体１ａ：２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸
中間体１ａ：２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸
【化17】
【0112】
２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル
室温の窒素雰囲気下で、ＴＨＦ４０ｍＬ中の５－ブロモチオフェン－２－カルボン酸１．３５ｇ（６．５１ｍｍｏｌ）に、ジイソプロピルエチルアミン３．４０ｍＬ（１９．５ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ．）及びＴＢＴＵ２．３０ｇ（７．１６ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ．）を加えた。１０分後、の２－アミノイソ酪酸メチル塩酸塩１．００ｇ（６．５１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を加え、室温で３．５時間撹拌を続けた。溶媒を蒸発させ、残留物に水及びＥｔＯＡｃを加え、有機層を分離し、５％水性ＮａＨＣＯ3溶液で洗浄し、水で２回洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させる。濾過及び溶媒の蒸発後、生成物が得られ、さらに精製することなく次の工程に使用した。
収量：１．９４ｇ（９７％）
MS: 306/308 (M+H)+ (Br)
1H-NMR (400 mHz): δ = 1.44 (s, 6H), 7.29 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 7.70 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 8.66 (s, 1H)
室温の窒素雰囲気下で、ＴＨＦ４０ｍＬ中の５－ブロモチオフェン－２－カルボン酸１．３５ｇ（６．５１ｍｍｏｌ）に、ジイソプロピルエチルアミン３．４０ｍＬ（１９．５ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ．）及びＴＢＴＵ２．３０ｇ（７．１６ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ．）を加えた。１０分後、の２－アミノイソ酪酸メチル塩酸塩１．００ｇ（６．５１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を加え、室温で３．５時間撹拌を続けた。溶媒を蒸発させ、残留物に水及びＥｔＯＡｃを加え、有機層を分離し、５％水性ＮａＨＣＯ3溶液で洗浄し、水で２回洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させる。濾過及び溶媒の蒸発後、生成物が得られ、さらに精製することなく次の工程に使用した。
収量：１．９４ｇ（９７％）
MS: 306/308 (M+H)+ (Br)
1H-NMR (400 mHz): δ = 1.44 (s, 6H), 7.29 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 7.70 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 8.66 (s, 1H)
【0113】
２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸
ＴＨＦ５０ｍＬ及び水６０ｍＬ中の２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル１．８０ｇ（５．８８ｍｍｏｌ）に、の１Ｍの水性ＬｉＯＨ溶液１１．８ｍＬを加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、約３０ｍＬに濃縮し、水で希釈し、２Ｍの水性ＨＣｌでｐＨ３～４に酸性化した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、５０℃で乾燥させて、所望の生成物を得た。
収量：１．６１ｇ（９４％）
MS: 292/294 (M+H)+ (Br)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.43 (s, 6H), 7.28 (d, 1H, J = 3.93 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 3.93 Hz), 8.50 (s, 1H), 12.25 (s, 1H)
ＴＨＦ５０ｍＬ及び水６０ｍＬ中の２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル１．８０ｇ（５．８８ｍｍｏｌ）に、の１Ｍの水性ＬｉＯＨ溶液１１．８ｍＬを加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、約３０ｍＬに濃縮し、水で希釈し、２Ｍの水性ＨＣｌでｐＨ３～４に酸性化した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、５０℃で乾燥させて、所望の生成物を得た。
収量：１．６１ｇ（９４％）
MS: 292/294 (M+H)+ (Br)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.43 (s, 6H), 7.28 (d, 1H, J = 3.93 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 3.93 Hz), 8.50 (s, 1H), 12.25 (s, 1H)
【0114】
中間体１ｂ：２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸
【化18】
【0115】
２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド１５ｍＬ中の２－アミノイソ酪酸メチル塩酸塩４．００ｇ（２６．０ｍｍｏｌ）及び５－クロロチオフェン－２－カルボン酸４．２３ｇ（２６．０ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下で、ジイソプロピルエチルアミン１３．６ｍＬ（７８．１ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ．）を加え、次いで少量ずつＨＡＴＵ１０．０ｇ（２６．３ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、水（１００ｍＬ）を加え、沈殿物を濾過し、水で洗浄し、デシケーターで乾燥させた。
収量：５．６４ｇ（８３％）
MS: 262/264 (M+H)+ (Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.44 (s, 6H), 3.58 (s, 3H), 7.19 (d, 1H, J = 4.18 Hz), 7.75 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 8.67 (s, 1H)
Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド１５ｍＬ中の２－アミノイソ酪酸メチル塩酸塩４．００ｇ（２６．０ｍｍｏｌ）及び５－クロロチオフェン－２－カルボン酸４．２３ｇ（２６．０ｍｍｏｌ）の混合物に、氷冷下で、ジイソプロピルエチルアミン１３．６ｍＬ（７８．１ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ．）を加え、次いで少量ずつＨＡＴＵ１０．０ｇ（２６．３ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、水（１００ｍＬ）を加え、沈殿物を濾過し、水で洗浄し、デシケーターで乾燥させた。
収量：５．６４ｇ（８３％）
MS: 262/264 (M+H)+ (Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.44 (s, 6H), 3.58 (s, 3H), 7.19 (d, 1H, J = 4.18 Hz), 7.75 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 8.67 (s, 1H)
【0116】
２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸
ＴＨＦ３０ｍＬ及びＭｅＯＨ１０ｍＬ中の２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル５．６３ｇ（２１．５ｍｍｏｌ）の混合物に、４Ｍ水性ＮａＯＨ溶液（２４．０ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ．）６．００ｍＬを加えた。撹拌を室温で一晩続けた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を水に溶解し、４Ｍの水性ＨＣｌ（６．０ｍＬ）で酸性化した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、デシケーター中で乾燥させた。
収量：５．２４ｇ（９８％）
MS: 248/250 (M+H)+ (Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.44 (s, 6H), 7.18 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 7.74 (d, 1H, J = 4.18 Hz), 8.51 (s, 1H), 12.25 (s, 1H)
ＴＨＦ３０ｍＬ及びＭｅＯＨ１０ｍＬ中の２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸メチル５．６３ｇ（２１．５ｍｍｏｌ）の混合物に、４Ｍ水性ＮａＯＨ溶液（２４．０ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ．）６．００ｍＬを加えた。撹拌を室温で一晩続けた。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を水に溶解し、４Ｍの水性ＨＣｌ（６．０ｍＬ）で酸性化した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、デシケーター中で乾燥させた。
収量：５．２４ｇ（９８％）
MS: 248/250 (M+H)+ (Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.44 (s, 6H), 7.18 (d, 1H, J = 4.06 Hz), 7.74 (d, 1H, J = 4.18 Hz), 8.51 (s, 1H), 12.25 (s, 1H)
【実施例】
【0117】
実施例１：２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（４－クロロ－３－フルオロフェニル）－２－メチルプロパンアミド
【化19】
【0118】
室温で、ＴＨＦ３ｍＬ中の２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸１００ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、４－クロロ－３－フルオロアニリン５０ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、及び４－メチルモルホリン１３２μＬ（１．２０ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）の混合物を調製した。次いで、プロピルホスホン酸無水物２３２μＬ（０．３９ｍｍｏｌ、１．２当量、酢酸エチル中５０％）を添加し、反応混合物を６０℃で一晩加熱する。粗反応混合物をＨＰＬＣで精製し、画分を含む生成物を合わせ、凍結乾燥した。
収量：４９ｍｇ（３４％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０６
MS: 419/421/423 (M+H)+ (Br/Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.31 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.41-7.49 (m, 2H), 7.75-7.79 (m, 2H), , 8.50 (s, 1H), 9.74 (s, 1H)
収量：４９ｍｇ（３４％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０６
MS: 419/421/423 (M+H)+ (Br/Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.31 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.41-7.49 (m, 2H), 7.75-7.79 (m, 2H), , 8.50 (s, 1H), 9.74 (s, 1H)
【0119】
実施例２：２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（４－ブロモフェニル）－２－メチルプロパンアミド
【化20】
【0120】
室温において、ＴＨＦ３ｍＬ中の２－［（５－ブロモチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸１００ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、４－ブロモアニリン５９ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、及び４－メチルモルホリン１３２μＬ（１．２０ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）の混合物を調製した。次いで、プロピルホスホン酸無水物２３２μＬ（０．３９ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．、酢酸エチル中５０％）を加え、反応混合物を６０℃で一晩加熱した。粗反応混合物をＨＰＬＣで精製し、画分を含む生成物を合わせ、凍結乾燥した。
収量：８１ｍｇ（５３％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０５
MS: 445/447/449 (M+H)+ (2 Br)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.31 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.43-7.46 (m, 2H), 7.54-7.57 (m, 2H), 7.77 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.45 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
収量：８１ｍｇ（５３％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０５
MS: 445/447/449 (M+H)+ (2 Br)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.31 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.43-7.46 (m, 2H), 7.54-7.57 (m, 2H), 7.77 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.45 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
【0121】
実施例３：２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（４－クロロ－３－フルオロフェニル）－２－メチルプロパンアミド
【化21】
【0122】
室温において、ＴＨＦ３ｍＬ中の２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸１００ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、４－クロロ－３－フルオロアニリン５９ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、及び４－メチルモルホリン１５５μＬ（１．４１ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）の混合物を調製した。次いで、プロピルホスホン酸無水物２７４μＬ（０．４６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．、酢酸エチル中５０％）を加え、反応混合物を６０℃で一晩加熱する。粗反応混合物をＨＰＬＣで精製し、画分を含む生成物を合わせ、凍結乾燥した。
収量：６２ｍｇ（４１％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０５
MS: 375/377/379 (M+H)+ (2 Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.40-7.49 (m, 2H), 7.77 (dd, 1H, J = 2.15/12.29 Hz), 7.83 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.51 (s, 1H), 9.74 (s, 1H)
収量：６２ｍｇ（４１％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０５
MS: 375/377/379 (M+H)+ (2 Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.40-7.49 (m, 2H), 7.77 (dd, 1H, J = 2.15/12.29 Hz), 7.83 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.51 (s, 1H), 9.74 (s, 1H)
【0123】
実施例４：２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（４－ブロモフェニル）－２－メチルプロパンアミド
【化22】
【0124】
室温において、ＴＨＦ３ｍＬ中の２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸１００ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、４－ブロモアニリン６９ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、及び４－メチルモルホリン１５５μＬ（１．４１ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）の混合物を調製した。次いで、のプロピルホスホン酸無水物２７４μＬ（０．４６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．、酢酸エチル中５０％）を加え、反応混合物を６０℃で一晩加熱する。粗反応混合物をＨＰＬＣで精製し、画分を含む生成物を合わせ、凍結乾燥した。
収量：７０ｍｇ（４３％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０４
MS: 401/403/405 (M+H)+ (Br/Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.54-7.58 (m, 2H), 7.82 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.46 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
収量：７０ｍｇ（４３％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０４
MS: 401/403/405 (M+H)+ (Br/Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.54-7.58 (m, 2H), 7.82 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.46 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
【0125】
実施例５：２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－Ｎ－（４－クロロフェニル）－２－メチルプロパンアミド
【化23】
【0126】
室温において、ＴＨＦ３ｍＬ中の２－［（５－クロロチオフェン－２－イル）ホルムアミド］－２－メチルプロパン酸１００ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、４－クロロアニリン５２ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、及び４－メチルモルホリン１５５μＬ（１．４１ｍｍｏｌ、３．５ｅｑ．）の混合物を調製した。次いで、プロピルホスホン酸無水物２７４μＬ（０．４６ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．、酢酸エチル中５０％）を加え、反応混合物を６０℃で一晩加熱した。粗反応混合物をＨＰＬＣで精製し、画分を含む生成物を合わせ、凍結乾燥した。
収量：９３ｍｇ（６４％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０３
MS: 357/359/361 (M+H)+ (2 Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.59-7.63 (m, 2H), 7.82 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.46 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
本発明の好ましい態様は、下記の通りである。
〔１〕式Ａの化合物
（式中、
Ｒ 1 はクロロ、ブロモを表し、
Ｒ 2 は水素、フルオロを表し、
Ｒ 3 はクロロ、ブロモを表す）。
〔２〕下記からなる群から選択される化合物である、前記〔１〕に記載の化合物。
〔３〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔４〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔５〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔６〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔７〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔８〕前記〔１〕～〔７〕の何れか１項に記載の化合物の塩。
〔９〕医薬としての使用のための前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１０〕双極性障害Ｉ型、うつ病、軽躁病、躁病及び混合型；双極性障害ＩＩ型;うつ病性障害;付随する不安性の苦痛、混合性の特徴、メランコリアの特徴、非定型の特徴、気分に一致する精神病性の特徴、気分に一致しない精神病性の特徴、カタトニアを伴うか又は伴わない大うつ病性障害の治療及び／又は予防における使用のための、前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１１〕前記うつ病性障害が、単一のうつ病エピソード又は再発性大うつ病性障害、軽度のうつ病性障害、産後に発症するうつ病性障害、精神病症状を伴ううつ病性障害からなる群から選択される、前記〔１０〕に記載の使用のための化合物。
〔１２〕別の抗うつ薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前記〔９〕～〔１１〕の何れか１項に記載の使用のための化合物。
〔１３〕行動療法に加えて投与されることを特徴とする、前記〔９〕～〔１２〕の何れか１項に記載の使用のための化合物。
〔１４〕前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物を、薬学的に許容される補助剤、希釈剤及び／又は担体と混合して含有する医薬組成物。
収量：９３ｍｇ（６４％）
ＨＰＬＣ－ＭＳ；方法：Ｚ０１１＿Ｓ０３；室温［分］：１．０３
MS: 357/359/361 (M+H)+ (2 Cl)
1H-NMR (400 mHz): δ= 1.50 (s, 6H), 7.21 (d, 1H, J = 4.06Hz), 7.30-7.34 (m, 2H), 7.59-7.63 (m, 2H), 7.82 (d, 1H, J = 4.06Hz), 8.46 (s, 1H), 9.55 (s, 1H)
本発明の好ましい態様は、下記の通りである。
〔１〕式Ａの化合物
Ｒ 1 はクロロ、ブロモを表し、
Ｒ 2 は水素、フルオロを表し、
Ｒ 3 はクロロ、ブロモを表す）。
〔２〕下記からなる群から選択される化合物である、前記〔１〕に記載の化合物。
〔４〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔５〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔６〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔７〕下記の構造を有する前記〔１〕又は〔２〕に記載の化合物。
〔８〕前記〔１〕～〔７〕の何れか１項に記載の化合物の塩。
〔９〕医薬としての使用のための前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１０〕双極性障害Ｉ型、うつ病、軽躁病、躁病及び混合型；双極性障害ＩＩ型;うつ病性障害;付随する不安性の苦痛、混合性の特徴、メランコリアの特徴、非定型の特徴、気分に一致する精神病性の特徴、気分に一致しない精神病性の特徴、カタトニアを伴うか又は伴わない大うつ病性障害の治療及び／又は予防における使用のための、前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１１〕前記うつ病性障害が、単一のうつ病エピソード又は再発性大うつ病性障害、軽度のうつ病性障害、産後に発症するうつ病性障害、精神病症状を伴ううつ病性障害からなる群から選択される、前記〔１０〕に記載の使用のための化合物。
〔１２〕別の抗うつ薬による治療に加えて投与されることを特徴とする、前記〔９〕～〔１１〕の何れか１項に記載の使用のための化合物。
〔１３〕行動療法に加えて投与されることを特徴とする、前記〔９〕～〔１２〕の何れか１項に記載の使用のための化合物。
〔１４〕前記〔１〕～〔８〕の何れか１項に記載の化合物を、薬学的に許容される補助剤、希釈剤及び／又は担体と混合して含有する医薬組成物。