特許 7522845 ヌクレオチド系化合物のコロナウイルス感染症の治療での使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-07-17

(45)【発行日】2024-07-25

(54)【発明の名称】ヌクレオチド系化合物のコロナウイルス感染症の治療での使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7068 20060101AFI20240718BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 9/28 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20240718BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20240718BHJP

   C12N 15/09 20060101ALN20240718BHJP

【ＦＩ】

A61K31/7068

A61P31/14

A61K9/28

A61K9/48

A61K9/10

A61K9/14

A61K9/08

C12N15/09 Z ZNA

【請求項の数】 6

(21)【出願番号】P 2022551819

(86)(22)【出願日】2021-02-20

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-20

(86)【国際出願番号】 CN2021077010

(87)【国際公開番号】W WO2021169861

(87)【国際公開日】2021-09-02

【審査請求日】2022-08-26

(31)【優先権主張番号】202010125799.2

(32)【優先日】2020-02-27

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】521425261

【氏名又は名称】河南真実生物科技有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】100166729

【弁理士】

【氏名又は名称】武田 幸子

(72)【発明者】

【氏名】常 俊標

(72)【発明者】

【氏名】杜 錦発

(72)【発明者】

【氏名】蒋 建東

(72)【発明者】

【氏名】李 玉環

【審査官】六笠 紀子

(56)【参考文献】

【文献】米国特許出願公開第２００４／０２５９９３４（ＵＳ，Ａ１）

【文献】bioRxiv，2020年01月，p.1-8 ，doi: https://doi.org/10.1101/2020.01.30.927574

【文献】Signal Transduction and Targeted Therapy，2020年10月， 5(1)，236, page 1-2

【文献】Advanced Science，2020年08月，7(19)，2001435，page.1-10

【文献】medRxiv，2020年11月，page.1-24，doi: https://doi.org/10.1101/2020.11.16.20232884

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３１／３３－３３／４４

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＣＯＶＩＤ－１９感染によって引き起こされるコロナウイルス感染症の予防又は治療薬を製造するための、式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【化1】

式（Ｉ）中、
Ｒ^１は、Ｈ、Ｒ ^５－ＣＯ－、又は

【化2】

であり（ただし、Ａｒは、フェニル基、又はナフチル基である。）、
Ｒ^２は、アジド基であり、
Ｒ^３は、Ｈ、又はＲ－ＣＯ－であり、ただし、Ｒは、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基であり、
Ｒ^４は、Ｈであり、
Ｂは、式（ＩＩ）で示され、

【化3】

（なお、式（ＩＩ）中、Ｘ_１は、－ＮＨ_２であり、Ｙは、ＣＨである。）
Ｚは、Ｆであり、
Ｒ^５は、Ｈ、及びＣ_１－Ｃ_６アルキル基から選択されたものである。

【請求項2】

式（Ｉ）で示される化合物は、下記の化合物のいずれかである、請求項１に記載の式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【化4】

【化5】

【請求項3】

式（Ｉ）化合物の薬学的に許容される塩は、式（Ｉ）化合物と下記の酸とで形成された塩を含み、前記酸は、塩酸、臭化水素酸、スルファミン酸、硫酸、リン酸、硝酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、グリコール酸、マロン酸、安息香酸、乳酸、グルコン酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マンデル酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、カンファースルホン酸、パルミチン酸アスコルビル、サリチル酸、スルホサリチル酸、２－ヒドロキシ－３－ナフトエ酸、フタル酸、リジン、アルギニン、グルタミン酸、グリシン、セリン、トレオニン、アラニン、イソロイシン、又はロイシンである、請求項１又は２に記載の式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項4】

前記コロナウイルス感染症は、ヒト又は他の動物に感染して引き起こされる疾患を含み、特にヒトコロナウイルスがヒトに感染して引き起こされる疾患である、請求項１～３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項5】

治療薬の剤形は、即時放出剤形、徐放剤形、又は放出制御剤形である、請求項１～３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項6】

治療薬の剤形は、錠剤、ハードカプセル剤、ソフトカプセル剤、水性もしくは油性懸濁剤、粒剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、注射液、又は粉末注射剤である、請求項１～３のいずれか１項に記載の式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ヌクレオチド系化合物の新たな抗ウイルス使用に関する。

【背景技術】

【0002】

コロナウイルス（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ、ＣｏＶ）は、ウイルスエンベロープを有するフォワード一本鎖ＲＮＡウイルスであり、人類、他の哺乳動物及び鳥類で広く伝播し、呼吸道、腸管、肝臓及び神経系などの疾患を招くことがある。現在、７種類のＣｏＶが人類の疾患を引き起こすと知られているが、そのうち、ＣｏＶ－２２９Ｅ、－ＯＣ４３、－ＮＬ６３及び－ＨＫＵ１の４種類が群衆で流行し、通常、一般的な風邪の症状を招く。一方、他のＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ及び新型コロナウイルス（２０１９－ｎＣｏＶ、又は称ＣＯＶＩＤ－１９）の３種類はいずれも、発症期間が短く、伝染性が強く、及び致死率が高いといった重大な危険性を帯びている。したがって、直接抗ウイルス薬を速やかに開発し、新型コロナウイルス感染を治療する必要が差し迫った。

【発明の概要】

【0003】

化合物１は、エイズ治療薬としてＩＩ期臨床治験を終え、安全性が良好である。

【0004】

【化1】

【0005】

発明者は、新型コロナウイルスが感染したＭＲＣ－５細胞内で、化合物１のインビトロ抗ウイルス活性を測定した。その結果、化合物１は微弱な新型コロナウイルスの抑制活性しか有しないことが分かった（ＥＣ_５０が２５μＭ）。

【0006】

しかし、発明者は、式（１）化合物をそのまま研究性臨床試験に用いたところ、驚くことに、対照となる通常の治療と比較して、式（１）化合物で新型コロナウイルス肺炎の患者を治療した場合、ウイルス核酸検査での陰性化率、陰性化までの治療期間、治癒し退院するまでの時間のいずれにおいても明らかな優位性を示すことを見出した。発明者の見解では、化合物１が明確なウイルス抑制作用を示さなかったのは、インビトロで効果的にリン酸エステル化することができなかったことに関係している。

【0007】

このことに鑑み、本発明は、一の局面で、コロナウイルス感染症の予防又は治療薬を製造するための、式（Ｉ）で示される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、別の局面で、本発明は、治療又は予防有効用量の式（Ｉ）化合物又はその薬学的に許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、コロナウイルス感染症の予防又は治療法を提供する。

【0008】

式（Ｉ）の構造式は、下記のとおりである。

【0009】

【化2】

【0010】

式（Ｉ）中、
Ｒ^１は、ＯＲ^１基がインビボで代謝してヒドロキシキル基を放出し、或いはＯ－リン酸基を形成することができるいかなる基であり、ＯＲ^１は好ましくは、エステル基であり、Ｒ^１は好ましくは、Ｈ、Ｒ^５－ＣＯ－、又は

【0011】

【化3】

【0012】

であり、そのうち、Ａｒは、フェニル及び置換フェニル基、ナフチル基及び置換ナフチル基であり、前記置換基は、Ｃ_１－６アルキル基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｎ_３、ＯＨ、ＮＨ_２、ＯＲ^５、ＮＨＲ^５から選択されたものであり、
Ｒ^２は、Ｈ、アジド基、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、メチル基、エチル基）、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基（例えば、メトキシ基、エトキシ基）、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基（例えば、エチニル基）、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基（例えば、エチレン基）、ハロゲン化Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、２－クロロエチル基、２－フルオロエチル基、トリフルオロエチル基）から選択されたものであり、
Ｒ^３は、Ｈ、置換されてもよいＲ－ＣＯ－、置換されてもよいＲ－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－、及び置換されてもよいＲＮＨ－ＣＯ－、そのうち、Ｒから選択されるＣ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イソアミル基など）から選択されたものであり、そのうち、置換基は、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基、ハロゲン原子（例えば、Ｆ、Ｃｌ）、ＣＮ、Ｎ_３、及びＯＲ^５から選択されたものである。

【0013】

Ｒ^４は、Ｈ、ＯＨ、ハロゲン原子（例えば、Ｆ）、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、メチル基、エチル基）、Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ基（例えば、メトキシ基、エトキシ基）から選択されたものであり、
Ｂは、下記から選択されたものであり

【0014】

【化4】

【0015】

式中、Ｘ_１は、－ＯＨ、－ＮＨ_２、Ｒ^５ＣＯＮＨ－、Ｒ^５ＣＯＯ－、Ｒ^５Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ－から選択されたものであり、
Ｘ_２は、－ＯＨ、－ＳＨ、－ＮＨ_２、Ｒ^５ＣＯＯ－、Ｒ^５ＣＯＳ－、Ｒ^５ＣＯＮＨ_２－、Ｒ^５Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ－から選択されたものであり、
Ｘ_３は、Ｈ、Ｆ、－ＯＨ、及び－ＮＨ_２から選択されたものであり、
Ｙは、ＣＨ、及びＮから選択されたものであり、
Ｚは、Ｈ、－ＯＨ、又はＦであり、
Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基）、Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル基（例えば、エチニル基）、Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル基（例えば、エチレン基）、ハロゲン化Ｃ_１－Ｃ_６アルキル基（例えば、２－クロロエチル基、２－フルオロエチル基、トリフルオロエチル基）、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_１－６アルコキシ基、ＣＮ、Ｎ_３、ＯＨ、ＮＨ_２、ハロゲン原子（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）で置換されてもよいフェニル基、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_１－６アルコキシ基、ＣＮ、Ｎ_３、ＯＨ、ＮＨ_２、ハロゲン原子（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）で置換されてもよいナフチル基から選択されたものである。

【0016】

好ましくは、下記の化合物又はその薬学的に許容される塩である。

【0017】

【化5A】

【化5B】

【0018】

式（Ｉ）化合物の薬学的に許容される塩は、例えば、式（Ｉ）化合物と下記の酸とで形成された塩を含むが、これらに限定されず、前記酸は、塩酸、臭化水素酸、スルファミン酸、硫酸、リン酸、硝酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、グリコール酸、マロン酸、安息香酸、乳酸、グルコン酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マンデル酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、カンファースルホン酸、パルミチン酸アスコルビル、サリチル酸、スルホサリチル酸、２－ヒドロキシ－３－ナフトエ酸、フタル酸、リジン、アルギニン、グルタミン酸、グリシン、セリン、トレオニン、アラニン、イソロイシン、ロイシンなどである。

【0019】

式（Ｉ）化合物は、市販ルートで入手し、或いは周知の方法で製造することができる。

【0020】

本明細書において、コロナウイルス感染症は、コロナウイルス科のウイルス感染で引き起こされる疾患であり、ヒト又は他の動物に感染して引き起こされる疾患を含む。特に人コロナウイルスがヒトに感染して引き起こされる疾患であり、ＣｏＶ－２２９Ｅ、－ＯＣ４３、－ＮＬ６３、－ＨＫＵ１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、及び新型コロナウイルス（２０１９－ｎＣｏＶ、又はＣＯＶＩＤ－１９とも呼ばれる）の感染で引き起こされる疾患を含むが、これらに限定されない。

【0021】

式（Ｉ）化合物のコロナウイルス感染症の治療及び予防のための有効用量は、当業者が本明細書に記載の情報をもとに特定することができる。例えば、成年者の使用量は、１～５００ｍｇ／日であってもよく、１～５０ｍｇ／日であってもよく、１～２０ｍｇ／日であってもよく、１～１０ｍｇ／日であってもよく、５ｍｇ／日であってもよい。一回又は複数回に分けて投与することができる。

【0022】

投与方法は、経口投与又は非経口投与用であってもよい。即時放出剤形であってもよく、徐放剤形、放出制御剤形であってもよい。具体的な剤形は、当業界の様々な通常の剤形であってもよい。例えば、経口投与製剤としては、錠剤、ハードカプセル剤又はソフトカプセル剤、水性又は油性懸濁剤、粒剤、乳剤、シロップ剤、又はエリキシル剤などが挙げられる。注射剤としては、注射液、粉末注射剤などが挙げられる。

【発明を実施するための形態】

【0023】

以下、発明を実施するための形態によって本発明について更に説明する。ここで述べられた発明を実施するための形態は本発明を例示的に説明するものに過ぎず、本発明を制限するものではない、と理解すべきである。

【0024】

試験例１．アズブディン（Ａｚｖｕｄｉｎｅ）アミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６の抗新型コロナウイルス活性試験
（一）実験材料と試薬
１．細胞系：Ｈｕｈ ７細胞、本実験室で保存
２．ウイルス株：２０１９－ｎＣｏＶ（ＣＯＶＩＤ－１９）
３．実験薬：アズブディンアミンホスフェートプロドラッグ（ＣＬ－２３６）
４．陽性対照薬：レムデシビル
５．試薬：ＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ）、ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ）、ペニシリン－ストレプトマイシン溶液、パンクレアチン、ＭＴＴ（Ａｍｒｅｓｃｏ）など
６．キット：ＱＩＡａｍｐ ｖｉｒａｌ ＲＮＡｍｉｎｉ ｋｉｔ（５２９０６、Ｑｉａｇｅｎ）、Ｏｎｅ Ｓｔｅｐ ＴＢ Ｇｒｅｅｎ ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＰＬＵＳ ＲＴ－ＰＣＲ Ｋｉｔ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）（ＲＲ０９６Ａ ＴａＫａＲａ）
７．消耗品：細胞培養プレート、９６穴ＥＬＩＳＡプレートなど
８．計器：多機能マイクロプレートリーダー、ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓ蛍光定量ＰＣＲ装置、二酸化炭素インキュベーターなど

【0025】

（二）実験手順
１．アズブディンアミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６の細胞毒性測定
ＭＴＴ法によりアズブディンアミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６のＨｕｈ ７細胞に対する毒性を測定した。ＭＴＴは、全称が３－（４，５）－ジメチルチアヒアゾ（－ｚ－ｙ１）－３，５－ジ－フェニルテトラゾリウムロミドであり、黄色の染料である。ＭＴＴ比色法は、細胞の生存・成長を測定する方法である。その検出原理としては、生細胞ミトコンドリアにおけるコハク酸デヒドロゲナーゼは、外因性ＭＴＴを水不溶性の青紫の結晶であるホルマザン（Ｆｏｒｍａｚａｎ）に還元して細胞内で蓄積することができるが、死んだ細胞にはこの機能がない。１０％ＳＤＳ（０．０１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ溶液に溶解）は、細胞におけるホルマザンを溶解でき、多機能マイクロプレートリーダーを用いて５７０ｎｍ波長でその吸光度値を測定することによって、生細胞の数を間接的に反映できる。一定の細胞数範囲内で、形成されたＭＴＴ結晶の量は細胞数に比例する。異なるインターフェロン濃度での５７０ｎｍ波長における吸光度値を測定することによって、当該医薬品濃度での細胞の生存率を算出でき、これによって当該医薬品の５０％細胞毒性濃度（ＣＣ_５０）を算出する。

【0026】

１日前にＨｕｈ ７細胞を９６穴プレートに接種しておき、１穴あたり１×１０^４個であり（９６穴プレートの一番端っこの穴を実験穴とせず、ＰＢＳを加えて他の穴の培地の揮発を防ぐことに留意）、細胞の状態を観察した。約５０％になった時点で、アズブディンアミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６を、２％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で２倍で希釈した後、１００μＬ／穴で細胞プレートに接種し、各濃度の平行穴を６個設け、同時に対照グループ（医薬品を含まないグループ）及びブランクグループ（細胞を含まないグループ）を設けて、３７℃、５％ＣＯ_２のインキュベーターに入れて培養した。医薬品を加えた４８ｈ後、１穴あたり２５μＬ ＭＴＴ溶液（５ｍｇ／ｍＬ）を加えて、引き続き４ｈ培養した後、１穴あたり１２５μＬ １０％ＳＤＳ（０．０１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ溶液に溶解）を加えて、軽く通気して、２ｈ放置し、結晶を十分に溶解して、ブランクグループでゼロを校正し、ＯＤ５７０を測定し、下記の式で生存率を算出した。また、医薬品の５０％細胞毒性濃度（ＣＣ５０）を算出した。

【0027】

生存率（％）＝実験薬グループＯＤ５７０／対照グループＯＤ５７０×１００％

【0028】

２．アズブディンアミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６の２０１９－ｎＣｏＶ（ＣＯＶＩＤ－１９）ウイルスに対する抑制効果評価

【0029】

Ｈｕｈ ７細胞モデルで抗ウイルス活性測定を行い、各試験に平行穴を３個設け、計３回繰り返した。

【0030】

１）Ｈｕｈ ７細胞を１穴あたり５×１０^４個で２４穴細胞培養プレートに接種し、３７℃、５％ＣＯ_２の培養条件で培養し、コンフルエンスが６０％になった時点で、感染多重度ＭＯＩを０．００５として、１穴あたり２％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で希釈後の２０１９－ｎＣｏＶ（ＣＯＶＩＤ－１９）ウイルス液２００μＬをそれぞれ加えて、３７℃、５％ＣＯ_２のインキュベーターで１ｈ吸着させた後、ウイルス液を捨て、陽性対照医薬品及びアズブディンアミンホスフェートプロドラッグＣＬ－２３６を、２％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地で最大非毒性濃度から２倍で希釈し、５００μＬ／穴で細胞プレートに加えた。同時に対照グループ（医薬品を含まないグループ）を設け、感染４８ｈ後に上澄みウイルス液を収集した。

【0031】

２）ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＲＴ－ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）で収集されたウイルスをＲＮＡ定量した。

【0032】

収集された上澄みウイルス液をそれぞれ１４０μＬ取って、ＱＩＡａｍｐ ｖｉｒａｌ ＲＮＡｍｉｎｉ ｋｉｔの取扱説明書に従ってＲＮＡを抽出した。Ｏｎｅ Ｓｔｅｐ ＴＢ Ｇｒｅｅｎ ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＰＬＵＳ ＲＴ－ＰＣＲ Ｋｉｔ（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）を用いてｑＲＴ－ＰＣＲ測定を行い、
プライマーは、ＲＢＤ－ｑＦ１、即ち、５’－ＣＡＡＴＧＧＴＴＴＡＡＣＡＧＧＣＡＣＡＧＧ－３’であり、
ＲＢＤ－ｑＲ１は、５’－ＣＴＣＡＡＧＴＧＴＣＴＧＴＧＧＡＴＣＡＣＧ－３’である。

【0033】

反応系の合計体積は２０μＬであり、詳しくは、１０μＬ ２Ｘ Ｏｎｅ Ｓｔｅｐ ＴＢ Ｇｒｅｅｎ ＲＴ－ＰＣＲ Ｂｕｆｆｅｒ ４、１．２μＬ ＴａＫａＲａ Ｅｘ Ｔａｑ ＨＳ Ｍｉｘ、０．４μＬ ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＰＬＵＳ ＲＴａｓｅ Ｍｉｘ、ＲＢＤ－ｑＦ１及びＲＢＤ－ｑＲ１各０．８μＬ、０．４μＬ ＲＯＸ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｄｙｅ（５０Ｘ）、２μＬウイルスＲＮＡ、４．４μＬ ＲＮａｓｅ Ｆｒｅｅ ｄＨ２Ｏである。反応パラメータは、逆転写４２℃ ５ｍｉｎ、予備変性９５℃ １０ ｓであり、ＰＣＲ ４０循環は、変性９５℃ １０ｓ、アニーリング及び伸長６０℃ ３０ｓを含む。

【0034】

３）各濃度における医薬品の抑制率を算出した。

【0035】

抑制率（％）＝１－実験グループのウイルスＲＮＡコピー数／医薬品を含まないグループのウイルスＲＮＡコピー数×１００％

【0036】

また、医薬品の半数効果濃度（ＥＣ_５０）を算出し、治療指数（ＴＩ）＝５０％細胞毒性濃度（ＣＣ_５０）／半数効果濃度（ＥＣ_５０）を算出した。

【0037】

（三）実験結果の計算

【表1】

【0038】

試験例２
臨床治験によって、化合物１を新型コロナウイルス（ＣＯＶＩＤ－１９）肺炎の治療に用いた有効性及び安全性を検証した。

【0039】

核酸試薬アッセイによって感染確定した新型コロナウイルス感染の患者を２０例選択して、アズブディン（化合物１）グループ及びカレトラ対照グループに分けて、１グループあたり１０例とした。アズブディングループ治療計画：１日に５ｍｇを服用する（経口投与、５錠、１錠につき１ｍｇ）。カレトラ対照グループ治療計画：カレトラ（経口投与、２錠／日、２５０ｍｇ／錠）＋アビドール錠（経口投与２００ｍｇ／回、３回／日）＋インターフェロン（５００万Ｕ、エアロゾル吸入投与１日２回）。核酸の変化、体温の変化を測定して、各種症状について観察した。

【0040】

結果を下記の表に示した。

【表2】

【0041】

臨床治験の結果から、１０例の新型コロナウイルス感染患者のうち、アズブディングループの患者は全員核酸検査で陰性化し、そのうちの７例は８日以内で退院したことが分かった。

【0042】

上記臨床治験の結果から、化合物１で新型コロナウイルス肺炎を治療した場合、患者の核酸検査での陰性化率、陰性化までの治療期間、治癒率及び治癒期間のいくつかの指標のいずれにおいても明らかな臨床治療の優位性を示すことが分かった。

【0043】

なかでも、１例のカレトラでサポートして２０日間あまり治療しても陰性化できなかった患者は、化合物１で治療してから３日後に陰性化した。治療中では、医薬品関連の毒副作用は一切認められなかった。

【0044】

インビトロ測定系では、アズブディンは効果的にリン酸エステル化されて活性化することができなかったため、アズブディンのアミンホスフェートプロドラッグ（ＣＬ－２３６）を用いてその抗新型コロナウイルス活性を間接的に測定した。アズブディンでエイズを治療する治験において、アズブディンはヒトインビボで効果的に活性化されることが分かったから、ヒト臨床治験では、アズブディンアミンホスフェートプロドラッグではなく、アズブディンをそのまま用いて新型コロナウイルス性肺炎を治療した。

【配列表】

0007522845000001.app