特許 7523909 抗炎症剤および免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアによる組み合わせ処置に関連する方法および組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-07-19

(45)【発行日】2024-07-29

(54)【発明の名称】抗炎症剤および免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアによる組み合わせ処置に関連する方法および組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/44 20060101AFI20240722BHJP

   A61K 31/436 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 31/165 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 31/192 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 31/445 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 9/51 20060101ALI20240722BHJP

   A61K 47/60 20170101ALI20240722BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20240722BHJP

   A61K 47/10 20170101ALI20240722BHJP

   A61P 19/06 20060101ALI20240722BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240722BHJP

【ＦＩ】

A61K38/44

A61K31/436

A61K31/165

A61K31/192

A61K31/445

A61K31/573

A61K9/51

A61K47/60

A61K47/34

A61K47/10

A61P19/06

A61P43/00 121

【請求項の数】 14

(21)【出願番号】P 2019549532

(86)(22)【出願日】2018-03-11

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2020-04-09

(86)【国際出願番号】 US2018021897

(87)【国際公開番号】W WO2018169811

(87)【国際公開日】2018-09-20

【審査請求日】2021-03-03

(31)【優先権主張番号】62/470,250

(32)【優先日】2017-03-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】511254321

【氏名又は名称】セレクタ バイオサイエンシーズ インコーポレーテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＥＬＥＣＴＡ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ，ＩＮＣ．

【住所又は居所原語表記】６５ Ｇｒｏｖｅ Ｓｔｒｅｅｔ，Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ，ＭＡ ０２４７２，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ

(74)【代理人】

【識別番号】110003971

【氏名又は名称】弁理士法人葛和国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ジョンストン，ロイド

【審査官】春田 由香

(56)【参考文献】

【文献】Kishimoto, T. K. et al.，Improving the efficacy and safety of biologic drugs with tolerogenic nanoparticles，Nature Nanotechnology，2016年，Vol.11, No.10，p.890-899，doi:10.1038/nnano.2016.135

【文献】谷口 敦夫，Pegloticaseによる難治性痛風の治療，高尿酸血症と痛風，2014年，第22巻, 第2号，p.147-152

【文献】中島 亜矢子，高尿酸血症・痛風の検査・診断・治療 治療 薬物治療 痛風発作治療薬，日本臨床，2016年，第74巻, 増刊号9，p.221-224

【文献】室井 延之，痛風発作に用いる薬剤はどんなものがあるの?，Nutrition Care，2016年，第9巻, 第10号，p.934-935

【文献】藤森 新，痛風発作の治療 わが国のガイドラインと他国のガイドラインとの違い，高尿酸血症と痛風，2016年，第24巻, 第1号，p.30-34

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３８／００－３８／５８

Ａ６１Ｋ ４５／００－４５／０８

Ａ６１Ｋ ３１／００－３１／８０

Ａ６１Ｋ ９／００－ ９／７２

Ａ６１Ｋ ４７／００－４７／６９

ＰｕｂＭｅｄ

医中誌ＷＥＢ

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

(ｉ) 上昇した血清尿酸レベルおよび/または望ましくない尿酸沈着;および/または
(ii) 高尿酸血症;および/または
(iii)痛風または痛風に関連する状態
の処置を、これを必要とする対象においてする方法における使用のための、免疫抑制剤を含むポリマー性合成ナノキャリアを含む組成物であって、
方法が、前記対象に、
１)該組成物と、２)ペガドリカーゼを含む組成物とを併用投与すること
を含み;および、さらに、
３)抗炎症性治療剤を含む組成物を投与すること
を含み、
ここで、抗炎症性治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含むポリマー性合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物と併用して投与され、
ここで、ポリマー性合成ナノキャリアが、PLAおよびPLA-PEGを含み、
ここで、免疫抑制剤が、ラパマイシンであり、ならびに
ここで、抗炎症性治療剤が、コルヒチンまたはイブプロフェンである、前記組成物。

【請求項2】

請求項1に記載の使用のための組成物であって、抗炎症性治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物の前に投与される、前記組成物。

【請求項3】

請求項1または2に記載の使用のための組成物であって、抗炎症性治療剤が、前に、少なくとも1回、任意に一週間前に投与される、前記組成物。

【請求項4】

請求項1～3のいずれか一項に記載の使用のための組成物であって、対象に、輸注反応治療剤を含む1つ以上の組成物を投与することをさらに含み、
任意にここで、輸注反応治療剤を含む1つ以上の組成物が、抗ヒスタミン剤および/または副腎皮質ステロイドを含み、例えば、抗ヒスタミン剤が、フェキソフェナジンであり、および/または副腎皮質ステロイドが、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、またはデキサメタゾンである、前記組成物。

【請求項5】

請求項4に記載の使用のための組成物であって、輸注反応治療剤を含む1つ以上の組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物よりも前に、少なくとも1回、投与され、任意にここで、
(ａ)輸注反応治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物の前に、少なくとも2回、投与され;および/または
(ｂ)輸注反応治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物の24時間以内に投与される、前記組成物。

【請求項6】

対象が、
(ａ)ヒトであり;および/または
(ｂ)急性痛風;痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない慢性痛風;特発性痛風;慢性難治性痛風などの難治性痛風;続発性痛風;不特定痛風;心血管の状態、腎臓の状態、肺の状態、神経の状態、眼の状態、皮膚科学的状態または肝臓の状態に関連する痛風を有するか;または、痛風発作または痛風フレアを既に有した、
請求項1～5のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項7】

１)、２)、および３)の組成物の投与が繰り返され、任意に、
(ａ)１)、２)、および３)の組成物の投与が、毎月繰り返され;および/または
(ｂ)各繰り返し投与の抗炎症性治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物の対応する繰り返し投与の時間に対して相対的に、請求項2または3において定義されるとおりに与えられ;および/または
(ｃ)各繰り返し投与の抗炎症性治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびペガドリカーゼを含む組成物の対応する繰り返し投与の時間に対して相対的に、請求項5において定義されるとおりに与えられる、
請求項1～6のいずれか一項に記載の使用のための組成物。

【請求項8】

(ｉ) 上昇した血清尿酸レベルおよび/または望ましくない尿酸沈着;および/または
(ii) 高尿酸血症;および/または
(iii)痛風または痛風に関連する状態
を処置するための組成物であって、組成物が、
１)免疫抑制剤を含むポリマー性合成ナノキャリアを含む組成物、および
２)ペガドリカーゼを含む組成物を含み;およびさらに
３)抗炎症性治療剤を含む組成物
を含み、
ここで、ポリマー性合成ナノキャリアが、PLAおよびPLA-PEGを含み、
ここで、免疫抑制剤が、ラパマイシンであり、ならびに
ここで、抗炎症性治療剤が、コルヒチンまたはイブプロフェンである、前記組成物。

【請求項9】

対象が、
(ａ)ヒトであり;および/または
(ｂ)急性痛風;痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない慢性痛風;特発性痛風;慢性難治性痛風などの難治性痛風;続発性痛風;不特定痛風;心血管の状態、腎臓の状態、肺の状態、神経の状態、眼の状態、皮膚科学的状態または肝臓の状態に関連する痛風を有するか;または、痛風発作または痛風フレアを既に有した、
請求項8に記載の組成物。

【請求項10】

輸注反応治療剤を含む1つ以上の組成物をさらに含み、
任意に、輸注反応治療剤を含む1つ以上の組成物が、抗ヒスタミン剤および/または副腎皮質ステロイドを含み、
例えば、抗ヒスタミン剤が、フェキソフェナジンであり、および/または副腎皮質ステロイドが、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、またはデキサメタゾンである、
請求項1～9のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項11】

免疫抑制剤がさらに、(ａ)ラパログ、例えばテムシロリムス(CCI-779)、デフォロリムス、エベロリムス(RAD001)、リダフォロリムス(AP-23573)、もしくはゾタロリムス(ABT-578)を含み;および/または
免疫抑制剤が、(ｂ)合成ナノキャリア中に被包される、
請求項1～10のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項12】

(ａ)ポリマー性合成ナノキャリアがさらに、PLG、PLGA、またはポリカプロラクトンを含み;および/または
(ｂ)ポリマー性合成ナノキャリアが、PEGをさらに含み、任意にPEGが、PLG、PLGA、またはポリカプロラクトンに抱合しており、例えば、ポリマー性合成ナノキャリアがさらに、PLG、PLGA、またはポリカプロラクトン、およびPLG、PLGA、またはポリカプロラクトンに抱合しているPEGを含む、
請求項1～11のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項13】

合成ナノキャリアの動的光散乱を用いて得られた粒子サイズ分布の平均値が、
(ａ)120、150、200、または250nmより大きな直径であり;および/または
(ｂ)500、450、400、350、300、250、または200nmより小さい、
請求項1～12のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項14】

合成ナノキャリアの免疫抑制剤の充填量が、7～12重量％または8～12重量％であり、任意に
(ａ)7～10重量％または8～10重量％であり;または
(ｂ)7重量％、8重量％、9重量％、10重量％、11重量％、または12重量％である、
請求項1～13のいずれか一項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本願は、2017年3月11日に出願された米国仮出願62/470,250の35 U.S.C.§119下における優先権の利益を主張し、当該仮出願の各々の全内容は、本明細書において参考として援用される。

【背景技術】

【0002】

発明の分野
本明細書において提供されるのは、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、およびウリカーゼを含む組成物、および抗炎症性治療剤を含む組成物に関連する、方法およびキットなどの組成物である。また本明細書において提供されるのは、ウリカーゼを用いる投与または処置を必要とする対象の処置のための方法および組成物である。

【発明の概要】

【0003】

発明の要旨
一側面において、それを必要とする対象に、１）免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物と２）ウリカーゼを含む組成物とを併用して（concomitantly）投与することを含み；およびさらに、３）抗炎症性治療剤を含む組成物を投与することを含み、ここで、抗炎症性治療剤を含む組成物が、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物と併用投与される、方法が提供される。

【0004】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、およびウリカーゼを含む組成物の前に投与される。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤は、少なくとも１回、前に投与される。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤は、１週間前に投与される。

【0005】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤は、ＮＳＡＩＤである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤は、コルヒチンまたはイブプロフェンである。

【0006】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、方法は、対象に、輸注反応治療剤を含む１つ以上の組成物を投与することをさらに含む。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、方法は、少なくとも２つの輸注反応治療剤の投与を含む。

【0007】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤は、抗ヒスタミン剤および／または副腎皮質ステロイドを含む。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、抗ヒスタミン剤は、フェキソフェナジンである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、副腎皮質ステロイドは、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロンまたはデキサメタゾンである。

【0008】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物と併用投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物よりも前に、少なくとも１回、投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の前に、少なくとも２回、投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の２４時間以内に投与される。

【0009】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ウリカーゼは、ペグ化ウリカーゼである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ペグ化ウリカーゼは、ペグシチカーゼ（すなわち、ペガドリカーゼ（pegadricase））またはペグロチカーゼである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤は、ｍＴＯＲ阻害剤である。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ｍＴＯＲ阻害剤は、ラパログである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ラパログは、ラパマイシンである。

【0010】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、対象は、ヒトである。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、対象は、上昇した血清尿酸レベルおよび／または望ましくない尿酸沈着を有する対象である。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、対象は、高尿酸血症を有する。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、対象は、痛風または痛風に関連する状態を有する。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、対象は、急性痛風；痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない慢性痛風；特発性痛風；慢性難治性痛風などの難治性痛風；続発性痛風；不特定痛風；心血管の状態、腎臓の状態、肺の状態、神経の状態、眼の状態、皮膚科学的状態または肝臓の状態に関連する痛風を有するか；または、痛風発作または痛風フレアを既に有している。

【0011】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤は、合成ナノキャリア中に被包される。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、合成ナノキャリアは、ポリマー性合成ナノキャリアである。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ポリマー性合成ナノキャリアは、疎水性ポリエステルを含む。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、疎水性ポリエステルは、ＰＬＡ、ＰＬＧ、ＰＬＧＡまたはポリカプロラクトンを含む。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ポリマー性合成ナノキャリアは、ＰＥＧをさらに含む。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ＰＥＧは、ＰＬＡ、ＰＬＧ、ＰＬＧＡまたはポリカプロラクトンに抱合している。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ポリマー性合成ナノキャリアは、ＰＬＡ、ＰＬＧ、ＰＬＧＡまたはポリカプロラクトン、およびＰＬＡ、ＰＬＧ、ＰＬＧＡまたはポリカプロラクトンに抱合しているＰＥＧを含む。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、ポリマー性合成ナノキャリアは、ＰＬＡおよびＰＬＡ－ＰＥＧを含む。

【0012】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、合成ナノキャリアの動的光散乱を用いて得られた粒子サイズ分布の平均値は、１２０ｎｍより大きな直径である。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、１２０ｎｍより大きい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、２００ｎｍより大きい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、２５０ｎｍより大きい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、５００ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、４５０ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、４００ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、３５０ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、３００ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、２５０ｎｍより小さい。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、直径は、２００ｎｍより小さい。

【0013】

本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、合成ナノキャリアの免疫抑制剤の充填量（load）は、７～１２重量％または８～１２重量％である。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、合成ナノキャリアの免疫抑制剤の充填量は、７～１０重量％または８～１０重量％である。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの一態様において、合成ナノキャリアの免疫抑制剤の充填量は、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１１重量％、または１２重量％である。

【0014】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、組成物のセットのうちのいずれか１つの投与は、繰り返される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、組成物の繰り返し投与は、毎月繰り返される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、各繰り返し投与の抗炎症性治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の対応する繰り返し投与の時間に対して相対的に、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つにおけるもののように投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、各繰り返し投与の輸注反応治療剤を含む組成物は、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の対応する繰り返し投与の時間に対して相対的に、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つにおけるもののように投与される。

【0015】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの用量および／または頻度および／またはタイミングに従う。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、ウリカーゼを含む組成物、および抗炎症性治療剤を含む組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの用量および／または頻度および／またはタイミングに従う。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、ウリカーゼを含む組成物、抗炎症性治療剤を含む組成物、および輸注反応治療剤を含む１つ以上の組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの用量および／または頻度および／またはタイミングに従う。それぞれの用量および／または頻度および／またはタイミングのうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つのために、それぞれの組成物について、用いることができる。

【0016】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供されるレジメンのうちのいずれか１つに従う。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、ウリカーゼを含む組成物、および抗炎症性治療剤を含む組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供されるレジメンのうちのいずれか１つに従う。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、ウリカーゼを含む組成物、抗炎症性治療剤を含む組成物、および輸注反応治療剤を含む１つ以上の組成物の投与は、それぞれ、本明細書において提供されるレジメンのうちのいずれか１つに従う。それぞれのレジメンのうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つのために、それぞれの組成物について、用いることができる。

【0017】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の投与は、本明細書において提供される投与の様式のうちのいずれか１つに従って投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、ウリカーゼを含む組成物の投与は、本明細書において提供される投与の様式のうちのいずれか１つに従って投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、抗炎症性治療剤を含む組成物の投与は、本明細書において提供される投与の様式のうちのいずれか１つに従って投与される。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの一態様において、輸注反応治療剤を含む組成物の投与は、本明細書において提供される投与の様式のうちのいずれか１つに従って投与される。

【0018】

一側面において、１）免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、および２）ウリカーゼを含む組成物を含み；およびさらに、３）抗炎症性治療剤を含む組成物を投与すること、を含む組成物が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0019】

【図1】図１は、ＤＥＣＴを用いて可視化された痛風結節／尿酸沈着を示す画像である。

【図2】図２は、ＳＥＬ－２１２の成分の図示である。

【図3】図３は、第１ａ相臨床治験の５つのコホートにおける、ペグシチカーゼの単回の静脈内注入の後の、平均血清尿酸（ｓＵＡ）レベルのグラフである。

【図4】図４は、第１ｂ相臨床治験における第１ａ相臨床治験のコホート＃３およびコホート＃９、コホート＃４、およびコホート＃６における各々の対象についての血清尿酸レベルおよびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを示す図面である。

【0020】

【図5】図５は、第１ａ相臨床からのコホート＃３、ならびに第１ｂ相臨床治験からのコホート＃９、コホート＃１、コホート＃２、コホート＃３、コホート＃４、コホート＃５およびコホート＃６からの、血清尿酸レベルを示すグラフである。

【図6】図６は、左から右へ、２つの複製のKystexxa（登録商標）治験からのデータを示し、中央は、ＳＶＰ－ラパマイシン単独に対してペグシチカーゼ単独（コホート＃９）、および次いでラパマイシン単独に対してコホート＃６（ＳＥＬ－２１２コホート）のデータである。

【図7】図７は、単独での、またはラパマイシン（ＳＶＰ－ラパマイシン）（０．１または０．３ｍｇ／ｋｇ）を含む合成ナノキャリアと組み合わせた、ペグシチカーゼで処置された対象の血清尿酸レベルを示す図面である。

【図8】図８は、第２相臨床治験についての用量を示す。

【発明を実施するための形態】

【0021】

発明の詳細な説明
Ａ．概略
抗薬物抗体（ＡＤＡ）は、可溶性の治療用タンパク質による処置による合併症、例えば効力の低下の可能性となり得る。加えて、痛風に関連する状態を有する対象の処置の場合に、効力が増大される場合に、痛風フレアが増加し得る。驚くべきことに、抗炎症性治療剤を、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物およびウリカーゼを含む組成物と共に投与することにより、より良好な処置の効力ならびに痛風フレアの軽減をもたらし得ることを見出した。この予期されない結果は、表４において示すような他の治療よりも、著しく優れている。特に、フレアの頻度ならびに経時的な平均ｓＵＡ（血清尿酸）レベルの曲線下面積の組み合わせ評価を行った。ＳＥＬ－２１２の研究薬および抗炎症処置により改善された効力および軽減された痛風フレアの両方の知見は、驚くべきものであった。

【0022】

Ｂ．定義
「投与すること」または「投与」または「投与する」とは、対象において薬理学的結果が存在するように、対象に材料を与えることを意味する。これは、直接投与であっても、または間接投与、例えば、別の対象（別の医師もしくは対象自身を含む）を、投与を行うように、誘導もしくは指示をすることによるものなどのであってもよい。

【0023】

「有効量」とは、対象への投与のための組成物または用量に関して、対象において１つ以上の所望される応答をもたらす、組成物または用量の量を指す。いくつかの態様において、有効量とは、薬力学的に有効な量である。したがって、いくつかの態様において、有効量とは、本明細書において提供される組成物または用量の、任意の量であって、本明細書において提供されるような所望される治療効果および／または免疫応答のうちの１つ以上を提供するものである。この量は、in vitroまたはin vivoでの目的のためのものであってよい。in vivoでの目的のために、量は、医師が、それを必要とする対象のための臨床的利益を有し得ると考えるであろうものであってよい。本明細書において提供されるような、ラベル用量を含む組成物または用量のうちのいずれか１つは、有効量におけるものであってよい。

【0024】

有効量は、望ましくない応答のレベルを低下させることを含んでもよいが、いくつかの態様において、それは、望ましくない応答を完全に予防することを含む。有効量はまた、望ましくない応答の発生を遅延させることを含んでもよい。有効である量とはまた、所望される治療上のエンドポイントまたは所望される治療結果をもたらす量であってもよい。他の態様において、有効量は、治療上のエンドポイントまたは結果などの、所望される応答のレベルを増強することを含んでもよい。有効量は、好ましくは、本明細書において提供される対象のうちのいずれか１つにおいて、効力の改善と組み合わせて、治療結果またはエンドポイント、および／または処置に対するＡＤＡの減少もしく除去、および／または痛風フレアの頻度の低下をもたらす。前述のうちのいずれかの達成は、慣用的な方法によりモニタリングすることができる。

【0025】

有効量は、無論、処置されている特定の対象；状態、疾患または障害の重篤度；年齢、身体的条件、サイズおよび体重を含む個々の患者のパラメーター；処置の期間；併用治療（ある場合は）の性質；投与の具体的な経路、および健康管理者の知識および専門知識の範囲内における同様の要因に依存するであろう。これらの要因は、当業者に周知であり、慣用的な実験のみを用いて取り組むことができる。一般に、最大用量、すなわち、健全な医学的判断に従う最も高い安全な用量を用いることが好ましい。当業者は、患者が、医学的理由、心理学的理由のために、または実質的にあらゆる他の理由のために、より低い用量または耐用可能な用量を主張する場合があることを理解するであろう。

【0026】

本発明の組成物のうちのいずれか１つにおける、または本発明の方法のうちのいずれか１つにおいて用いられる、構成成分の用量とは、組成物における構成成分の量、投与された対象により受け取られるそれぞれの構成成分の実際の量、またはラベル上に現われる量（本明細書においてラベル用量としても言及される）を指し得る。用量は、所望される量の構成成分を提供する合成ナノキャリアの数に基づいて投与することができる。

【0027】

「抗ヒスタミン剤」とは、ヒスタミンの効果を遮断する剤を指す。
「結合する（attach）」または「結合している（attached）」または「カップリングする（couple）」または「カップリングしている（coupled）」（および類似のもの）は、１つの実体（例えば部分）を別のものに化学的に会合させることを意味する。いくつかの態様において、結合は、共有結合性のものであり、これは、結合が、２つの実体の間の共有結合の存在に関して起こることを意味する。非共有結合性の態様において、非共有結合は、電荷相互作用、アフィニティー相互作用、金属配位、物理的吸着、ホスト－ゲスト相互作用、疎水性相互作用、ＴＴスタッキング相互作用、水素結合相互作用、ファンデルワールス相互作用、磁性相互作用、静電相互作用、双極子－双極子相互作用、および／またはそれらの組み合わせを含むがこれらに限定されない、非共有結合性の相互作用により媒介される。態様において、被包（encapsulation）は、結合の一形態である。
「平均」とは、本明細書において用いられる場合、別段に記されない限り、算術平均を指す。

【0028】

「併用して（concomitantly）」とは、時間的に相関する、好ましくは生理学的または免疫学的応答の調節をもたらすために十分に時間的に相関する様式において、２つ以上の材料／剤を対象に投与することを意味し、さらにより好ましくは、２つ以上の材料／剤は、組み合わせて投与される。態様において、併用投与は、特定された期間内における、好ましくは１か月以内、より好ましくは１週間以内、なおより好ましくは１日以内、およびさらにより好ましくは１時間以内における、２つ以上の材料／剤の投与を包含し得る。態様において、２つ以上の材料／剤は、連続的に投与される。態様において、材料／剤は、繰り返して併用して投与され得る；すなわち、１回より多くの機会における併用投与である。

【0029】

「用量」とは、所与の時間にわたる対象への投与のための、薬理学的に活性な材料の特定の量を指す。別段に特定されない限り、ペグ化ウリカーゼを含む組成物について列挙される用量は、ウリカーゼの重量を指す（すなわち、ＰＥＧまたはペグ化ウリカーゼを含む組成物の任意の他の構成成分の重量を除いたタンパク質）。また、別段に特定されない限り、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物について列挙された用量は、免疫抑制剤の重量を指す（すなわち、合成ナノキャリア材料または合成ナノキャリア組成物の他の構成成分のうちのいずれかの重量を除く）。投与のための用量に言及する場合、本明細書において提供される方法、組成物またはキットのうちのいずれか１つの一態様において、本明細書において提供される用量のうちのいずれか１つは、ラベル上に現われるとおりの用量／ラベル用量である。

【0030】

「被包する（encapsulate）」とは、物質の少なくとも一部を合成ナノキャリア中に封入（enclose）することを意味する。いくつかの態様において、物質は、合成ナノキャリア中に完全に封入される。他の態様において、被包される物質のうちのほとんどまたは全ては、合成ナノキャリアにとって外部の局所環境に暴露されない。他の態様において、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％または５％（重量／重量）以下が、局所環境に暴露される。被包は、物質のうちのほとんどまたは全てを合成ナノキャリアの表面上に配置して、当該物質を合成ナノキャリアにとって外部の局所環境に暴露させたままでおく吸収とは異なる。本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つの態様において、免疫抑制剤は、合成ナノキャリア中に被包される。

【0031】

「上昇した血清尿酸レベル」とは、対象の血清中の尿酸の任意のレベルであって、望ましくない結果をもたらし得るか、または医師により上昇したとみなされるであろうものを指す。一態様において、本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つの対象は、≧５ｍｇ／ｄＬ、≧６ｍｇ／ｄＬ、または≧７ｍｇ／ｄＬの血清尿酸レベルを有していてもよい。かかる対象は、高尿酸血症の（hyperuremic）対象であってもよい。対象が上昇した血中尿酸レベルを有するか否かは、医師により決定され得、いくつかの態様においては、対象は、上昇した血清尿酸レベルを有するものとして同定したか、またはそのように同定するであろうものである。

【0032】

「痛風」は、一般に、組織および関節における尿酸の結晶の沈着、および／または臨床に関連性がある上昇した血清尿酸レベルなどの、尿酸の集積と関連する障害または状態を指す。尿酸の蓄積は、尿酸の過剰産生または尿酸の排出の低下に起因してもよい。痛風は、無兆候性から、重篤かつ有痛性の炎症状態までの範囲であり得る。「痛風に関連する状態」とは、対象における任意の状態であって、炎症および免疫応答を含む痛風の局所および／または全身効果を経験するもの、および当該状態が痛風により引き起こされるかまたは増悪される、または当該状態が痛風を引き起こし得るかまたはこれを増悪し得るものを指す。痛風フレアは、痛風の症状の「発作」または増悪であって、任意の時間に起こり得る。痛風フレアは、尿酸低下治療の投与の後で起こる痛風フレアを含み得る。

【0033】

「疎水性ポリエステル」とは、１つ以上のポリエステルポリマーまたはその単位を含み、疎水性の特徴を有する、任意のポリマーを指す。ポリエステルポリマーとして、これらに限定されないが、ＰＬＡ、ＰＬＧＡ、ＰＬＧおよびポリカプロラクトンが挙げられる。「疎水性」とは、水への水素結合に実質的に関与しない材料を指す。かかる材料は、一般に非極性であるか、本来非極性であるか、または電荷において中性である。合成ナノキャリアは、疎水性ポリエステルまたはその単位から完全になっていてもよい。いくつかの態様においては、しかし、合成ナノキャリアは、疎水性ポリエステルまたはその単位を、他のポリマーまたはその単位と組み合わせて含む。これらの他のポリマーまたはその単位は、疎水性であってよいが、必ずしもそうでなくともよい。いくつかの好ましい態様において、合成ナノキャリアが、疎水性ポリエステルに加えて１つ以上の他のポリマーまたはその単位を含む場合、他のポリマーまたはその単位と疎水性ポリエステルとのマトリックスは、全体として疎水性である。本発明において用いることができ、疎水性ポリエステルを含む合成ナノキャリアの例は、米国公開番号2016/0128986およびUS 2016/0128987において見出すことができ、かかる合成ナノキャリアおよびかかる合成ナノキャリアの開示は、本明細書において参考として援用される。

【0034】

「免疫抑制剤」とは、本明細書において用いられる場合、本明細書においてまた「免疫抑制効果」としても言及される、抗原に対して特異的な免疫寛容原性の免疫応答を引き起こすことができる化合物を意味する。免疫抑制効果とは、一般に、抗原提示細胞（ＡＰＣ）による、望ましくない免疫応答を軽減、阻害または予防する、または特定の抗原に対する調節性免疫応答などの所望される免疫応答を促進する、サイトカインまたは他の因子の産生または発現を指す。ＡＰＣが、このＡＰＣにより提示される抗原を認識する免疫細胞に対して免疫抑制性機能を獲得する場合（免疫抑制効果の下において）、免疫抑制効果は、提示された抗原に対して特異的であると言われる。免疫抑制剤の例として、ホスファチジルイノシトール－３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）関連キナーゼ（ＰＩＫＫ）のファミリーに属するセリン－スレオニン特異的タンパク質キナーゼであるｍＴＯＲを阻害する薬物のクラスである「ｍＴＯＲ阻害剤」が挙げられる。ｍＴＯＲ阻害剤として、これらに限定されないが、ラパマイシンなどのラパログ、ならびにｍＴＯＲＣ１／ｍＴＯＲＣ２二重阻害剤などのＡＴＰ競合的ｍＴＯＲキナーゼ阻害剤が挙げられる。

【0035】

本明細書において提供される方法、組成物またはキットのうちのいずれか１つの態様において、本明細書において提供される免疫抑制剤は、合成ナノキャリアに結合している。好ましい態様において、免疫抑制剤は、合成ナノキャリアの構造を構成する材料に加えられる要素である。例えば、合成ナノキャリアが１つ以上のポリマーから構成される一態様において、免疫抑制剤は、１つ以上のポリマーに加えられ、これに結合している化合物である。合成ナノキャリアの材料がまた免疫抑制効果をもたらすものなどの態様において、免疫抑制剤は、合成ナノキャリアの材料に加えて存在する要素であって、免疫抑制効果をもたらすものである。

【0036】

「輸注反応治療剤」は、輸注反応を軽減または予防することにおいて有益であり得る治療剤である。かかる治療剤の例として、副腎皮質ステロイドなどの抗炎症剤が挙げられる。

【0037】

「充填量」とは、合成ナノキャリアを含む組成物中に含まれる場合、例えばそれにカップリングされる場合、全合成ナノキャリア中の当該材料の全乾燥処方重量（重量／重量）に基づく、組成物中の免疫抑制剤の量である。一般に、かかる充填量は、合成ナノキャリアの集合全体の平均として計算される。一態様において、合成ナノキャリア全体の平均の充填量は、０．１％～１５％である。別の態様において、充填量は、０．１％～１０％である。さらなる態様において、充填量は、１％～１５％である。さらにさらなる態様において、充填量は、５％～１５％である。なおさらなる態様において、充填量は、７％～１２％である。なおさらなる態様において、充填量は、８％～１２％である。なお別の態様において、充填量は、７％～１０％である。なお別の態様において、充填量は、８％～１０％である。さらにさらなる態様において、充填量は、合成ナノキャリアの集合全体の平均で、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、または１５％である。本明細書において提供される方法、組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて、ラパマイシンなどの免疫抑制剤の充填量は、本明細書において提供される充填量のうちのいずれか１つであってよい。

【0038】

懸濁液中のナノキャリアのラパマイシン（または他の免疫抑制剤）充填量は、試験物のＨＰＬＣ分析により決定されるナノキャリアのラパマイシン含有量を、ナノキャリアの質量により除算することにより、計算することができる。総ポリマー含有量は、乾燥ナノキャリア質量の重量測定による収率により、またはナノキャリア溶液の総有機物含有量の決定と、その後の薬局方の方法により測定し、ＰＶＡ含有量について補正する。

【0039】

「合成ナノキャリアの最大寸法」とは、合成ナノキャリアの任意の軸に沿って測定されるナノキャリアの最大の寸法を意味する。「合成ナノキャリアの最小寸法」とは、合成ナノキャリアの任意の軸に沿って測定される合成ナノキャリアの最小の寸法を意味する。例えば、球体の合成ナノキャリアについては、合成ナノキャリアの最大および最小寸法は、実質的に同一であり、その直径のサイズであろう。同様に、立方体状の合成ナノキャリアについて、合成ナノキャリアの最小寸法は、その高さ、幅または長さのうちの最小のものであり、一方、合成ナノキャリアの最大寸法は、その高さ、幅または長さのうちの最大のものであろう。一態様において、試料中の合成ナノキャリアの合計数に基づいて、試料中の合成ナノキャリアのうちの少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の最小寸法が、１００ｎｍに等しいかまたはこれより大きい。一態様において、試料中の合成ナノキャリアの合計数に基づいて、試料中の合成ナノキャリアのうちの少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の最大寸法が、５μｍに等しいかまたはこれより小さい。好ましくは、試料中の合成ナノキャリアの合計数に基づいて、試料中の合成ナノキャリアのうちの少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の最小寸法が、１１０ｎｍより大きく、より好ましくは１２０ｎｍより大きく、より好ましくは１３０ｎｍより大きく、より好ましくは１５０ｎｍよりなお大きい。合成ナノキャリアの最大寸法と最小寸法とのアスペクト比は、態様に依存して変化し得る。例えば、合成ナノキャリアの最大寸法の最小寸法に対するアスペクト比は、１：１～１，０００，０００：１、好ましくは１：１～１００，０００：１、より好ましくは１：１～１０，０００：１、より好ましくは１：１～１０００：１、なおより好ましくは１：１～１００：１、さらにより好ましくは１：１～１０：１で変化し得る。

【0040】

好ましくは、試料中の合成ナノキャリアの合計数に基づいて、試料中の合成ナノキャリアのうちの少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の最大寸法は、３μｍに等しいかまたはこれより小さく、より好ましくは２μｍに等しいかまたはこれより小さく、より好ましくは１μｍに等しいかまたはこれより小さく、より好ましくは８００ｎｍに等しいかまたはこれより小さく、より好ましくは６００ｎｍに等しいかまたはこれより小さく、より好ましくはなお５００ｎｍに等しいかまたはこれより小さい。好ましい態様において、試料中の合成ナノキャリアの合計数に基づいて、試料中の合成ナノキャリアのうちの少なくとも７５％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％の最小寸法は、１００ｎｍと等しいかまたはこれより大きく、より好ましくは１２０ｎｍと等しいかまたはこれより大きく、より好ましくは１３０ｎｍと等しいかまたはこれより大きく、より好ましくは１４０ｎｍと等しいかまたはこれより大きく、より好ましくは１５０ｎｍとなお等しいかまたはこれより大きい。合成ナノキャリアの寸法（例えば有効直径）の測定値は、いくつかの態様において、液体（通常は水性）の媒質中に合成ナノキャリアを懸濁し、動的光散乱（ＤＬＳ）を用いる（例えばBrookhaven ZetaPALS装置を用いる）ことにより得ることができる。例えば、合成ナノキャリアの懸濁液を、水性バッファーから精製水中に希釈して、約０．０１～０．５ｍｇ／ｍＬの最終的な合成ナノキャリア懸濁液濃度を達成することができる。希釈された懸濁液は、ＤＬＳ分析のための好適なキュベットの内部で直接調製しても、これに移してもよい。キュベットを、次いで、ＤＬＳ中に置き、制御された温度に平衡化させ、次いで、媒質の粘性および試料の屈折率についての適切なインプットに基づいて、安定かつ再現可能な分布を得るために十分な時間にわたりスキャンすることができる。有効直径、または分布の平均を、次いで報告する。高アスペクト比、または非球形の、合成ナノキャリアの有効サイズを決定することは、より正確な測定値を得るために、電子顕微鏡などの増加的な技術を必要とし得る。合成ナノキャリアの「寸法」または「サイズ」または「直径」は、例えば動的光散乱を用いて得られる、粒子サイズ分布の平均を意味する。

【0041】

「ペグ化ウリカーゼ」とは、１つ以上のＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）またはポリ（オキシエチレン））分子（すなわち、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）またはポリ（オキシエチレン）ポリマーまたはその単位）に結合している、任意のウリカーゼを指す。好ましくはいくつかの態様において、１つ以上のＰＥＧ分子は、ポリ（エチレングリコール)分子である。用語「ペグ化されている」または「ペグ化」とは、それぞれ、ウリカーゼの抱合された形態または抱合の作用を指す。かかる修飾されたウリカーゼは、ペグ化ウリカーゼと称される。ペグ化ウリカーゼとして、これらに限定されないが、ペグシチカーゼ（すなわち、ペガドリカーゼ）およびペグロチカーゼ（KRYSTEXXA（登録商標））が挙げられる。

【0042】

「薬学的に受入可能な賦形剤」または「薬学的に受入可能なキャリア」は、組成物を処方するために薬理学的に活性な材料と一緒に用いられる、薬理学的に不活性な材料を意味する。薬学的に受入可能な賦形剤は、当該分野において公知の多様な材料を含み、これは、多糖（例えばグルコース、ラクトースなど）、抗菌剤などの保存剤、再構成補助剤、着色剤、食塩水（例えばリン酸緩衝化食塩水）、およびバッファーを含むが、これらに限定されない。本明細書において提供される組成物のうちのいずれか１つは、薬学的に受入可能な賦形剤またはキャリアを含んでもよい。

【0043】

「ラパログ」とは、ラパマイシン（シロリムス）の（アナログ）に構造的に関連するラパマイシンおよび分子を指し、好ましくは疎水性である。ラパログの例として、限定することなく、テムシロリムス（CCI-779）、デフォロリムス、エベロリムス（RAD001）、リダフォロリムス（AP-23573）、ゾタロリムス（ABT-578）が挙げられる。ラパログのさらなる例は、例えば、WO公開WO 1998/002441および米国特許第8,455,510号において見出すことができ、かかるラパログの開示は、その全体において本明細書において参考として援用される。本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて、免疫抑制剤は、ラパログであってよい。

【0044】

「対象」は、ヒトおよび霊長類などの温血哺乳動物；鳥類；ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマおよびブタなどの飼育された家庭または農場の動物；マウス、ラットおよびモルモットなどの研究動物；魚類；爬虫類；動物園および野生の動物などを含む動物を意味する。本明細書において提供される方法、組成物およびキットのいずれか１つにおいて、対象は、ヒトである。本明細書において提供される方法、組成物およびキットのいずれか１つにおいて、対象は、本明細書において提供される対象のうちのいずれか１つ、例えば、それを必要とするもの、例えばウリカーゼによる処置を必要とするものである。

【0045】

「合成ナノキャリア」は、天然において見出されない分散した物体であって、サイズが５マイクロンより小さいかまたはこれと等しい少なくとも１つの寸法を有するものを意味する。合成ナノキャリアは、多様な異なる形状であってよく、これは、球体状、立方状、錐体状、長方形状、円柱状、環状体状などを含むが、これらに限定されない。合成ナノキャリアは、１つ以上の表面を含む。

【0046】

合成ナノキャリアは、これらに限定されないが、１つまたは複数の脂質ベースのナノ粒子（本明細書においてまた、脂質ナノ粒子、すなわち、それらの構造を構成する材料のうちの大部分が脂質であるナノ粒子としても言及される）、ポリマー性ナノ粒子、金属ナノ粒子、界面活性剤ベースのエマルジョン、デンドリマー、バッキーボール、ナノワイヤ、ウイルス様粒子（すなわち、ウイルスの構造タンパク質から主に構成されるが、感染性ではないか、低い感染性を有する粒子）、ペプチドまたはタンパク質ベースの粒子（本明細書においてまた、タンパク質粒子、すなわち、それらの構造を構成する材料のうちの大部分がペプチドまたはタンパク質である粒子としても言及される）（アルブミンナノ粒子など）、および／または脂質－ポリマーナノ粒子などのナノ材料の組み合わせを用いて開発されるナノ粒子であってよい。合成ナノキャリアは、球状、立方体状、錐体状、長方形、円柱状、環状体状などを含むがこれらに限定されない、多様な異なる形状であってよい。合成ナノキャリアの例として、以下が挙げられる：（１）Grefらに対する米国特許5,543,158において開示される生分解性ナノ粒子、（２）Saltzmanらに対する公開された米国特許出願20060002852のポリマー性ナノ粒子、（３）DeSimoneらに対する公開された米国特許出願20090028910のリソグラフィーにより構築されたナノ粒子、（４）von Andrianらに対するWO 2009/051837の開示、（５）Penadesらに対する公開された米国特許出願2008/0145441において開示されるナノ粒子、（６）P. Paolicelli et al.,「Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles」Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010)において開示されるナノ沈殿された（nanoprecipitated）ナノ粒子、および（７）Lookら、「Nanogel-based delivery of mycophenolic acid ameliorates systemic lupus erythematosus in mice」J. Clinical Investigation 123(4):1741-1749 (2013)のもの。

【0047】

合成ナノキャリアは、約１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい、好ましくは１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい最小寸法を有していてもよく、補体を活性化するヒドロキシル基を有する表面を含まないか、あるいは、補体を活性化するヒドロキシル基ではない部分から本質的になる表面を含む。一態様において、約１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい、好ましくは１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい最小寸法を有する合成ナノキャリアは、補体を実質的に活性化する表面を含まないか、あるいは、補体を実質的に活性化しない部分から本質的になる表面を含む。より好ましい態様において、約１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい、好ましくは１００ｎｍと等しいかまたはこれより小さい最小寸法を有する、本発明による合成ナノキャリアは、補体を活性化する表面を含まないか、あるいは、補体を活性化しない部分から本質的になる表面を含む。態様において、合成ナノキャリアは、ウイルス様粒子を除外する。態様において、合成ナノキャリアは、１：１、１：１．２、１：１．５、１：２、１：３、１：５、１：７より大きい、または１：１０より大きいアスペクト比を有していてもよい。

【0048】

「処置すること」とは、対象が投与に起因する利益を有し得るという予測を伴う、１つ以上の治療剤の投与を指す。処置することはまた、本明細書において提供されるような状態の予防をもたらし得、したがって、処置することは、予防的処置を含む。予防的に用いられる場合、対象は、医師が、状態の発生または本明細書において提供されるような他の望ましくない応答の可能性が存在することを予測するものである。いくつかの態様において、痛風フレアを有すると予測される対象は、医師が、痛風フレアが起こるであろう可能性が存在すると考えるものである。処置することは、直接的であっても、または、別の医師もしくは対象自身を含む別の対象を、対象を処置するように誘導もしくは指示することによるもののように、間接的であってもよい。

【0049】

「重量％」または「重量による％」とは、１つの重量の別の重量に対する比を１００倍したものを指す。例えば、重量による％は、１つの構成成分の重量の別のものに対する比を１００倍したもの、または１つの構成成分の重量の、１つより多くの構成成分の全重量に対する比を１００倍したものであってよい。一般に、重量％は、組成物または懸濁液中の合成ナノキャリアの集合全体の平均、または合成ナノキャリア全体の平均として測定される。

【0050】

Ｃ．方法及び関連する組成物
本明細書において他の場所で言及されるとおり、本明細書において提供される組成物および方法は、血清尿酸レベルを低下させることにおいて、ならびに痛風フレアの頻度を低下させることにおいて、現在利用可能な処置よりも、実質的により効果的であることが示された。

【0051】

ウリカーゼおよびペグ化ウリカーゼ
本明細書において記載される方法および組成物およびキットは、ウリカーゼを含む組成物を含む。ウリカーゼは、一般に、尿酸の可溶性であり排出され得るアラントインへの転換を触媒すると考えられる。ウリカーゼは、一般には、ヒトおよび特定の霊長類を除く全ての哺乳動物にとって内因性の酵素である。ウリカーゼ酵素をコードする遺伝子は、哺乳動物および微生物のソースを含む当該分野における任意のソースから、ならびに組み換えおよび合成技術により、得ることができる。当業者には明らかであろうが、ソースから遺伝子を得て、標準的な方法を用いて組み換えにより（または遺伝子導入により）別の生物において発現および産生させることができる。Erlich, H A（編）（1989）PCR Technology. Principles and Applications for DNA Amplification. New York: Stockton Press；Sambrook, Jら（1989）Molecular Cloning. A Laboratory Manual、第２版、Cold Spring Harbor, N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Pressを参照。例えば、米国特許第5,700,674号は、E. coli細胞におけるウリカーゼの組み換え産生を記載する。いくつかの態様において、酵素は、E. coliの発酵により産生される。

【0052】

いくつかの態様において、ウリカーゼをコードする遺伝子、またはその一部は、哺乳動物、例えばブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ヒヒ、サル、マウス、ウサギ、または飼育動物から得られる。いくつかの態様において、ウリカーゼをコードする遺伝子、またはその一部は、細菌または真菌（酵母を含む）などの微生物から得られる。いくつかの態様において、ウリカーゼをコードする遺伝子は、ストレプトマイセス属の種、バチルス属の種に属する細菌、またはE. coliなど細菌のソースから得られる。いくつかの態様において、ウリカーゼをコードする遺伝子は、真菌（酵母を含む）ソース、例えばカンジダ属（例えばCandida utilis）、アルスロバクター属（例えばArthrobacter globiformis）、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属、エメリセラ属、アスペルギルス属（例えばAspergillus flavus）およびアカパンカビ属の種から得られる。いくつかの態様において、ウリカーゼは、Candida utilisに由来する。いくつかの態様において、ウリカーゼは、ペグシチカーゼのものである（米国特許第6,913,915号において記載される3SBio、およびかかるウリカーゼおよびその記載は、本明細書において参考として援用される）。いくつかの態様において、ウリカーゼは、Aspergillus flavusに由来する。いくつかの態様において、ウリカーゼは、ラスブリカーゼ（ELITEK（登録商標）；FASTURTEC（登録商標）、Sanofi Genzyme製）である。

【0053】

いくつかの態様において、ウリカーゼは、ウリカーゼをコードする遺伝子の一部が異なるソースから得られるキメラウリカーゼである。例えば、キメラウリカーゼをコードする遺伝子の一部を、１種類の生物から得て、キメラウリカーゼをコードする遺伝子の１つ以上の他の部分を、別の生物から得てもよい。いくつかの態様において、キメラウリカーゼをコードする遺伝子の一部をブタから得て、キメラウリカーゼをコードする遺伝子の別の部分を、ヒヒから得る。いくつかの態様において、キメラウリカーゼは、ペグロチカーゼ／KRYSTEXXA（登録商標）のものである。

【0054】

本発明の範囲内であるのは、バリアントウリカーゼであり、これは、１つ以上の変異（置換、挿入、欠失）を含んでもよい。変異は、ウリカーゼタンパク質をコードするヌクレオチド配列において行われ得、これは、アミノ酸変異をもたらすものであっても、もたらさないものであってもよい。一般的に、変異は、例えば、タンパク質の産生、タンパク質またはタンパク質をコードするｍＲＮＡの代謝回転／半減期を増強し、ウリカーゼの酵素活性を調節する（増強するかまたは低下させる）ために、行うことができる。

【0055】

他の態様において、ウリカーゼをコードする遺伝子は、ショウジョウバエまたはC. elegansなどの植物または無脊椎動物のソースから得られる。

【0056】

本明細書において記載されるウリカーゼタンパク質のいずれかは、ペグ化されていてもよい。ウリカーゼは、例えばPark et al, Anticancer Res., 1:373-376 (1981)；およびZaplipsky and Lee, Polyethylene Glycol Chemistry: Biotechnical and Biomedical Applications, J. M. Harris, ed., Plenum Press, New York, Chapter 21 (1992)により記載されるような当該分野において公知の方法を用いて、生分解性の連結基を介してＰＥＧに共有結合していてもよい。ＰＥＧをウリカーゼに共有結合により結合させるために用いられる連結基は、任意の生分解性の連結基であってよい。生分解性の連結基とは、非毒性の連結基であって、in vitroまたはin vivoで、有害効果を引き起こすことなく利用することができるものを意味する。あるいは、ＰＥＧは、ウリカーゼに直接的に、例えばウリカーゼのリジン残基に直接的に、抱合させてもよい。

【0057】

ウリカーゼは、ウリカーゼタンパク質の多くの異なるアミノ酸残基においてペグ化することができる。多数のＰＥＧ分子および／またはＰＥＧが抱合する残基が、ウリカーゼの活性に影響を及ぼし得る。いくつかの態様において、ペグ化ウリカーゼは、少なくとも１つのＰＥＧ分子を含む。いくつかの態様において、ペグ化ウリカーゼは、ウリカーゼタンパク質１つあたり平均で少なくとも２、３、４、５、６、７，８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３，３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４５、５０個、またはそれより多くのＰＥＧ分子を含む。いくつかの態様において、ペグ化ウリカーゼは、ウリカーゼタンパク質１つあたり約２０～２５個のＰＥＧ分子を含む。

【0058】

平均で、ＰＥＧは、５ｋＤａ～１００ｋＤａの分子量を有する。用いられるＰＥＧの分子量（サイズ）ならびにウリカーゼをペグ化するために用いられるＰＥＧ分子の数は、いずれも変化し得る。いくつかの態様において、ＰＥＧの平均分子量は、５ｋＤａ～１００ｋＤａ、５ｋＤａ～７５ｋＤａ、５ｋＤａ～５０ｋＤａ、５ｋＤａ～３０ｋＤａ、５ｋＤａ～２０ｋＤａ、５ｋＤａ～１０ｋＤａ、１０ｋＤａ～７５ｋＤａ、１０ｋＤａ～５０ｋＤａ、１０ｋＤａ～３０ｋＤａ、５ｋＤａ～３０ｋＤａ、１５ｋＤａ～５０ｋＤａ、１５ｋＤａ～３０ｋＤａ、１５ｋＤａ～２５ｋＤａ、２０ｋＤａ～７５ｋＤａ、３０ｋＤａ～８０ｋＤａ、３０ｋＤａ～７０ｋＤａ、または３０ｋＤａ～５０ｋＤａである。いくつかの態様において、ＰＥＧの分子量は、約５ｋＤａ、６ｋＤａ、７ｋＤａ、８ｋＤａ、９ｋＤａ、１０ｋＤａ、１１ｋＤａ、１２ｋＤａ、１３ｋＤａ、１４ｋＤａ、１５ｋＤａ、１６ｋＤａ、１７ｋＤａ、１８ｋＤａ、１９ｋＤａ、２０ｋＤａ、２１ｋＤａ、２２ｋＤａ、２３ｋＤａ、２４ｋＤａ、２５ｋＤａ、３０ｋＤａ、３５ｋＤａ、４０ｋＤａ、４５ｋＤａ、５０ｋＤａ、５５ｋＤａ、６０ｋＤａ、６５ｋＤａ、７０ｋＤａ、７５ｋＤａ、８０ｋＤａ、８５ｋＤａ、９０ｋＤａ、９５ｋＤａ、または１００ｋＤａである。一般的に、ＰＥＧは、当該ＰＥＧの分子量に基づいて言及される。例えば、ＰＥＧ－２０とは、２０ｋＤａの分子量のＰＥＧ分子を指し、ＰＥＧ－５とは、５ｋＤａの分子量のＰＥＧ分子を指す。いくつかの態様において、ウリカーゼは、２０ｋＤａの分子量を有するＰＥＧ分子（ＰＥＧ－２０）によりペグ化される。

【0059】

ペグ化ウリカーゼとして、限定することなく、ペグシチカーゼ（すなわち、ペガドリカーゼ）（3Sbioから市販されており、米国特許第6,913,915号において記載され、かかるペグ化ウリカーゼおよびその記載は、本明細書において参考として援用される）およびペグロチカーゼ／KRYSTEXXA（登録商標）（Horizon Pharmaceuticals）が挙げられる。

【0060】

好ましくは、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、ペグ化ウリカーゼは、ペグシチカーゼ（すなわち、ペガドリカーゼ）、複数の２０ｋＤａの分子量のポリ（エチレングリコール）分子に抱合した組み換えウリカーゼである。ペグシチカーゼのウリカーゼ構成成分は、酵母Candida utilisからクローニングして、E. coliにおいて産生のために発現させることができる。

【0061】

ペグ化ウリカーゼを含むウリカーゼの尿酸触媒活性は、当該分野において公知であるか、または本明細書において別段に提供されるような方法を用いて、評価することができる。

【0062】

合成ナノキャリア
多様な合成ナノキャリアを用いることができる。いくつかの態様において、合成ナノキャリアは、球体または球状体である。いくつかの態様において、合成ナノキャリアは、扁平または扁平な形状である。いくつかの態様において、合成ナノキャリアは、立方体または立方状である。いくつかの態様において、合成ナノキャリアは、楕円または長円である。いくつかの態様において、合成ナノキャリアは、円柱、円錐または錐体である。

【0063】

いくつかの態様において、サイズまたは形状に関して比較的均一であり、したがって各々の合成ナノキャリアが類似の特性を有する、合成ナノキャリアの集合を用いることが望ましい。例えば、合成ナノキャリアの総数に基づいて、合成ナノキャリアのうちの少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％が、合成ナノキャリアの平均直径または平均寸法の５％、１０％、または２０％に該当する最小寸法または最大寸法を有していてもよい。

【0064】

合成ナノキャリアは、固体または中空であってよく、１つ以上の層を含んでもよい。いくつかの態様において、各々の層は、他の層と比較して固有の組成および固有の特性を有する。一例のみを挙げると、合成ナノキャリアは、コア／シェル構造を有していてもよく、ここで、コアが１つの層であり（例えばポリマー性のコア）、シェルが第２層である（例えば脂質二重層または単層）。合成ナノキャリアは、複数の異なる層を含んでもよい。

【0065】

好ましい態様において、合成ナノキャリアは、本明細書において提供されるようなポリマーを含む。ポリマーは、天然または非天然（合成）ポリマーであってもよい。ポリマーは、２つ以上のモノマーを含むホモポリマーまたはコポリマーであってよい。配列に関して、コポリマーは、ランダム、ブロックであっても、ランダム配列とブロック配列との組み合わせを含んでもよい。典型的には、本発明によるポリマーは、有機ポリマーである。

【0066】

本明細書において提供されるような合成ナノキャリアは、好ましくは、疎水性ポリエステルを含む。かかるポリエステルとして、以下が挙げられる：本明細書において集合的に「ＰＬＧＡ」として言及される乳酸およびグリコール酸の単位を含むコポリマー、例えばポリ（乳酸－コ－グリコール酸）およびポリ（ラクチド－コ－グリコリド）；ならびに本明細書において「ＰＧＡ」として言及されるグリコール酸単位を含むホモポリマー、および本明細書において集合的に「ＰＬＡ」として言及される乳酸単位を含むホモポリマー、例えばポリ－Ｌ－乳酸、ポリ－Ｄ－乳酸、ポリ－Ｄ，Ｌ－乳酸、ポリ－Ｌ－ラクチド、ポリ－Ｄ－ラクチドおよびポリ－Ｄ，Ｌ－ラクチド。いくつかの態様において、例示的なポリエステルとして、例えば、ポリヒドロキシ酸；ＰＥＧコポリマー、ならびにラクチドとグリコリドとのコポリマー（例えば、ＰＬＡ－ＰＥＧコポリマー、ＰＧＡ－ＰＥＧコポリマー、ＰＬＧＡ－ＰＥＧコポリマー、およびこれらの誘導体が挙げられる。いくつかの態様において、ポリエステルとして、例えば、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（カプロラクトン）－ＰＥＧコポリマー、ポリ（Ｌ－ラクチド－コ－Ｌ－リジン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４－ヒドロキシ－Ｌ－プロリンエステル）、ポリ［α－（４－アミノブチル）－Ｌ－グリコール酸］、およびこれらの誘導体。

【0067】

いくつかの態様において、ポリエステルは、ＰＬＧＡであってよい。ＬＧＡは、乳酸とグリコール酸との生体適合性かつ生分解性のコポリマーであり、ＰＬＧＡの多様な形態が、乳酸：グリコール酸の比により特徴づけられる。乳酸は、Ｌ－乳酸、Ｄ－乳酸、またはＤ，Ｌ－乳酸であってよい。ＰＬＧＡの分解速度は、乳酸：グリコール酸比を改変することにより調整することができる。いくつかの態様において、本発明により用いられるべきＰＬＧＡは、約８５：１５、約７５：２５、約６０：４０、約５０：５０、約４０：６０、約２５：７５、または約１５：８５の乳酸：グリコール酸比により特徴づけられる。

【0068】

合成ナノキャリアは、これもまた疎水性である１つ以上の非ポリエステルポリマーまたはその単位、および／または疎水性ではないポリマーまたはその単位を含んでもよい。いくつかの態様において、合成ナノキャリア全体が、疎水性ポリエステルを含むことが好ましく、いくつかの態様においては、それはそれ自体が疎水性である。

【0069】

合成ナノキャリアは、非メトキシ末端のプルプロニックポリマー、またはその単位である、１つ以上のポリマーを含んでもよい。「非メトキシ末端ポリマー」とは、メトキシ以外の部分で終了する少なくとも１つの末端を有するポリマーを意味する。いくつかの態様において、ポリマーは、メトキシ以外の部分で終了する少なくとも２つの末端を有する。他の態様において、ポリマーは、メトキシで終了する末端を有しない。「非メトキシ末端のプルプロニックポリマー」とは、両方の末端にメトキシを有する直鎖状プルプロニックポリマー以外のポリマーを意味する。

【0070】

合成ナノキャリアは、いくつかの態様において、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリアミド、ポリエーテル、ポリオレフィン、ポリアクリレート、ポリカーボネート、ポリスチレン、シリコーン、フルオロポリマー、またはその単位を含んでもよい。本明細書において提供される合成ナノキャリアにおいて含まれ得るポリマーのさらなる例として、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリエーテル、またはその単位が挙げられる。他の態様において、合成ナノキャリアのポリマーは、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはその単位を含んでもよい。

【0071】

いくつかの態様において、合成ナノキャリアが、生分解性であるポリマーを含むことが好ましい。したがって、かかる態様において、合成ナノキャリアのポリマーは、ポリエーテル、例えばポリ（エチレングリコール）またはポリプロピレングリコールまたはその単位を含んでもよい。加えて、ポリマーは、ポリマーが生分解性となるように、ポリエーテルのブロックコポリマーおよび生分解性ポリマーを含んでもよい。他の態様において、ポリマーは、ポリエーテルまたはその単位、例えばポリ（エチレングリコール）またはポリプロピレングリコールまたはその単位を、それのみでは含まない。

【0072】

いくつかの態様において、本発明によるポリマーは、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により21 C.F.R.§177.2600下においてヒトにおける使用のために承認されているポリマーを含む。

【0073】

合成ナノキャリアにおける使用のために好適なポリマーの他の例として、これらに限定されないが、ポリエチレン、ポリカーボネート（例えばポリ（１，３－ジオキサン－２オン））、ポリ無水物（例えばポリ（セバシン酸無水物））、ポリプロピルフマレート（polypropylfumerate）、ポリアミド（例えばポリカプロラクタム）、ポリアセタール、ポリエーテル、ポリエステル（例えばポリラクチド、ポリグリコリド、ポリラクチド－コ－グリコリド、ポリカプロラクトン、ポリヒドロキシ酸（例えばポリ（β－ヒドロキシアルカノエート）））、ポリ（オルトエステル）、ポリシアノアクリレート、ポリビニルアルコール、ポリウレタン、ポリホスファゼン、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ポリウレア、ポリスチレン、およびポリアミン、ポリリジン、ポリリジン－ＰＥＧコポリマー、およびポリ（エチレンイミン）、ポリ（エチレンイミン）－ＰＥＧコポリマーが挙げられる。

【0074】

合成ナノキャリアにおいて含めることができるポリマーのなお他の例として、アクリル性ポリマー、例えば、アクリル酸とメタクリル酸とのコポリマー、メチルメタクリレートコポリマー、エトキシエチルメタクリレート、シアノエチルメタクリレート、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、メタクリル酸アルキルアミドコポリマー、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（メタクリル酸無水物）、メチルメタクリレート、ポリメタクリレート、ポリ（メチルメタクリレート）コポリマー、ポリアクリルアミド、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、グリシジルメタクリレートコポリマー、ポリシアノアクリレート、前述のポリマーのうちの１つ以上を含む組み合わせが挙げられる。

【0075】

いくつかの態様において、合成ナノキャリアのポリマーは、会合してポリマー性マトリックスを形成する。広範なポリマーおよびそれらからポリマー性マトリックスを形成させるための方法は、従来から公知である。いくつかの態様において、疎水性ポリエステルを含む合成ナノキャリアは、合成ナノキャリア中に疎水性を有する。

【0076】

いくつかの態様において、ポリマーは、１つ以上の部分および／または官能基により修飾されていてもよい。多様な部分または官能基を、本発明により用いることができる。いくつかの態様において、ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）により、炭水化物により、および／または多糖から誘導されるアクリル製ポリアセタールにより修飾することができる（Papisov, 2001, ACS Symposium Series, 786:301）。ある態様は、Grefらへの米国特許第5543158号またはVon AndrianらによるWO公開WO2009/051837の一般的教示を用いてなすことができる。

【0077】

いくつかの態様において、ポリマーは、脂質または脂肪酸基により修飾してもよい。いくつかの態様において、脂肪酸基は、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、またはリグノセリン酸のうちの１つ以上であってよい。いくつかの態様において、脂肪酸基は、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、アルファ－リノール酸、ガンマ－リノール酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、またはエルカ酸のうちの１つ以上であってよい。

【0078】

いくつかの態様において、ポリマーは、直鎖状または分枝状ポリマーであってよい。いくつかの態様において、ポリマーは、デンドリマーであってよい。いくつかの態様において、ポリマーは、互いに実質的に架橋されていてもよい。いくつかの態様において、ポリマーは、実質的に架橋を含まなくともよい。いくつかの態様において、ポリマーは、架橋ステップを経験することなく、本発明により用いることができる。さらに、合成ナノキャリアは、前述のポリマーのうちのいずれかと他のポリマーとのブロックコポリマー、グラフトコポリマー、ブレンド、混合物、および付加体（adduct）を含んでもよいことが、理解されるべきである。当業者は、本明細書において列記されるポリマーは、包括的なものではなく、所望される基準を満たすことを前提として本発明により使用することができるポリマーの例示的なリストを表すものであることを、認識するであろう。

【0079】

これらのおよび他のポリマーの特性ならびにそれらを調製するための方法は、は、当該分野において周知である（例えば、米国特許6,123,727；5,804,178；5,770,417；5,736,372；5,716,404；6,095,148；5,837,752；5,902,599；5,696,175；5,514,378；5,512,600；5,399,665；5,019,379；5,010,167；4,806,621；4,638,045；および4,946,929；Wang et al., 2001, J. Am. Chem. Soc., 123:9480；Lim et al., 2001, J. Am. Chem. Soc., 123:2460；Langer, 2000, Acc. Chem. Res., 33:94；Langer, 1999, J. Control. Release, 62:7；およびUhrich et al., 1999, Chem. Rev., 99:3181を参照）。より一般的には、特定の好適なポリマーを合成するための多様な方法は、Concise Encyclopedia of Polymer Science and Polymeric Amines and Ammonium Salts、Goethals編、Pergamon Press、1980年；Principles of Polymerization、Odian著、John Wiley & Sons、第４版、2004年；Contemporary Polymer Chemistry、Allcockら著、Prentice-Hall、1981年；Deming et al., 1997, Nature, 390:386において；ならびに、米国特許6,506,577、6,632,922、6,686,446および6,818,732において記載される。

【0080】

合成ナノキャリアは、当該分野において公知の多様な方法を用いて調製することができる。例えば、合成ナノキャリアは、ナノ沈殿、流体チャネルを用いるフローフォーカス（flow focusing）、スプレー乾燥、単一および二重のエマルジョン溶媒蒸発、溶媒抽出、相分離、粉砕（milling）（凍結粉砕を含む）、超臨界流体（例えば超臨界二酸化炭素）処理、マイクロエマルジョンの手法、微細加工、ナノ加工、犠牲層、単純および複雑なコアセルベーション、ならびに当業者に周知の他の方法などの方法により形成させることができる。あるいは、または加えて、単分散の半導体、伝導性、磁性、有機性および他のナノ材料のための水性および有機性の溶媒合成は記載されている（Pellegrino et al., 2005, Small, 1:48；Murray et al., 2000, Ann. Rev. Mat. Sci., 30:545；およびTrindade et al., 2001, Chem. Mat., 13:3843）。さらなる方法は、文献において記載されている（例えば、Doubrow編、「Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy」、CRC Press, Boca Raton, 1992；Mathiowitz et al., 1987, J. Control. Release, 5:13；Mathiowitz et al., 1987, Reactive Polymers, 6:275；およびMathiowitz et al., 1988, J. Appl. Polymer Sci., 35:755；米国特許5578325および6007845；P. Paolicelliら、「Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles」Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010)を参照）。

【0081】

免疫抑制剤は、望ましい場合、以下を含むがこれらに限定されない多様な方法を用いて、合成ナノキャリア中にカプセル化することができる：C. Astete et al.,「Synthesis and characterization of PLGA nanoparticles」J. Biomater. Sci. Polymer Edn, Vol. 17, No. 3, pp. 247-289 (2006)；K. Avgoustakis「Pegylated Poly(Lactide) and Poly(Lactide-Co-Glycolide) Nanoparticles：Preparation, Properties and Possible Applications in Drug Delivery」Current Drug Delivery 1:321-333 (2004)；C. Reis et al.,「Nanoカプセル化I. Methods for preparation of drug-loaded polymeric nanoparticles」Nanomedicine 2:8- 21 (2006)；P. Paolicelli et al.,「Surface-modified PLGA-based Nanoparticles that can Efficiently Associate and Deliver Virus-like Particles」Nanomedicine. 5(6):843-853 (2010)。材料を合成ナノキャリア中にカプセル化するために好適な他の方法もまた用いることができ、これは、限定されないが、Ungerに対して２００３年１０月１４日に発行された米国特許6,632,671において開示される方法を含む。

【0082】

ある態様において、合成ナノキャリアは、ナノ沈殿のプロセスまたはスプレー乾燥により調製される。合成ナノキャリアを調製することにおいて用いられる条件は、所望されるサイズまたは特性（例えば、疎水性、親水性、外部の形態学、「粘着性（stickiness）」、形状など）の粒子を得るために、改変してもよい。合成ナノキャリアを調製する方法および用いられる条件（例えば、溶媒、温度、濃度、気流速度など）は、合成ナノキャリアおよび／またはキャリアマトリックスの組成物中に含まれるべき材料に依存し得る。

【0083】

上の方法のいずれかにより調製された合成ナノキャリアが、所望される範囲の外のサイズ範囲を有する場合、かかる合成ナノキャリアを、例えば篩を使用して、サイズ調整することができる。

【0084】

好ましくは、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、合成ナノキャリアは、ＰＬＡおよびＰＬＡ－ＰＥＧからなる合成ナノキャリアを含むものである。ＰＬＡは、３０年を超えて商業的に使用されており、多数の承認された製品における処方構成成分である、より広いポリ（乳酸コグリコール酸）、またはＰＬＧＡの生分解性ポリマーのファミリーの一部である。ポリエチレングリコール、またはＰＥＧは、臨床治験において広く研究されており、また多くの承認された生物製剤における処方構成成分である。

【0085】

例として、ラパマイシンを含む合成ナノキャリアは、以下の方法のうちの１つにより生成されるかまたは得られるものであってよい：
１）０．４１ｄＬ／ｇの固有粘度を有するＰＬＡを、Evonik Industries（Rellinghauser Strasse 1－11 45128 Essen, Germany）から、製品コードResomer Select 100 DL 4Aとして購入する。メチルエーテル末端を有する約５，０００ＤａのＰＥＧブロックおよび０．５０ＤＬ／ｇの全体的な固有粘度を有するＰＬＡ－ＰＥＧ－ＯＭｅブロックコポリマーは、Evonik Industries（Rellinghauser Strasse 1－11 45128 Essen, Germany）から、製品コードResomer Select 100 DL mPEG 5000（１５ｗｔ％のＰＥＧ）として購入する。ラパマイシンは、Concord Biotech Limited（1482-1486 Trasad Road, Dholka 382225, Ahmedabad India）から、製品コードSIROLIMUSとして購入する。EMPROVE（登録商標）ポリビニルアルコール4-88、ＵＳＰ（８５～８９％加水分解されている、３．４～４．６ｍＰａ・ｓ）は、MilliporeSigma（EMD Millipore, 290 Concord Road Billerica, Massachusetts 01821）から、製品コード1.41350として購入する。ダルベッコリン酸緩衝化食塩水１×（ＤＰＢＳ）は、Lonza（Muenchensteinerstrasse 38, CH-4002 Basel, Switzerland）から、製品コード17-512Qとして購入する。ソルビタンモノパルミテートは、Croda International（300-A Columbus Circle, Edison, NJ 08837）から、製品コードSPAN 40として購入する。溶液は、以下のとおり調製する。溶液１は、ＰＬＡを１５０ｍｇ／ｍＬで、ＰＬＡ－ＰＥＧ－Ｏｍｅを５０ｍｇ／ｍＬで、ジクロロメタン中で溶解することにより調製する。溶液２は、ラパマイシンを１００ｍｇ／ｍＬでジクロロメタン中で溶解することにより調製する。溶液３は、SPAN 40を５０ｍｇ／ｍＬでジクロロメタン中で溶解することにより調製する。溶液４は、ＰＶＡを７５ｍｇ／ｍＬで１００ｍＭのリン酸バッファー（ｐＨ８）中で溶解することにより調製する。Ｏ／Ｗエマルジョンは、溶液１（０．５０ｍＬ）、溶液２（０．１２ｍＬ）、溶液３（０．１０ｍＬ）、およびジクロロメタン（０．２８ｍＬ）を、厚壁ガラス圧力管中に加えることにより調製する。組み合わせた有機相溶液を、次いで繰り返しピペッティングすることにより混合する。この混合物に、溶液４（３ｍＬ）を添加する。圧力管を、次いでボルテックスで１０秒間混合する。次に、粗エマルジョンを、Branson Digital Sonifier 250を用いて、１／８”テーパードチップにより、３０％の振幅で１分間にわたり超音波処理によりホモジェナイズし、圧力管を氷水槽中に浸漬する。エマルジョンを、次いでＤＰＢＳ（３０ｍＬ）を含む５０ｍＬビーカーに加える。これを室温で２時間にわたり撹拌して、ジクロロメタンを蒸発させ、ナノキャリアを形成させる。ナノキャリア懸濁液を遠心管に移して、７５，６００×ｇで、４℃で５０分間にわたり遠心分離し、上清を取り除き、０．２５％ｗ／ｖのＰＶＡを含むＤＰＢＳ中でペレットを再懸濁することにより、ナノキャリアの一部を洗浄する。洗浄の手順を繰り返し、ペレットを０．２５％ｗ／ｖのＰＶＡを含むＤＰＢＳ中で再懸濁して、ポリマーに基づいて１０ｍｇ／ｍＬの名目上の濃度を有するナノキャリア懸濁液を達成する。ナノキャリア懸濁液を、次いでMilliporeSigma製の０．２２μｍのＰＥＳメンブレンシリンジフィルター（EMD Millipore, 290 Concord Rd. Billerica MA, 製品コードSLGP033RB）を用いてろ過する。ろ過したナノキャリア懸濁液を、－２０℃で貯蔵する。

【0086】

２）０．４１ｄＬ／ｇの固有粘度を有するＰＬＡを、Evonik Industries（Rellinghauser Strasse 1－11 45128 Essen, Germany）から、製品コードResomer Select 100 DL 4Aとして購入する。メチルエーテル末端を有する約５，０００ＤａのＰＥＧブロックおよび０．５０ＤＬ／ｇの全体的な固有粘度を有するＰＬＡ－ＰＥＧ－ＯＭｅブロックコポリマーを、Evonik Industries（Rellinghauser Strasse 1－11 45128 Essen, Germany）から、製品コードResomer Select 100 DL mPEG 5000（１５ｗｔ％のＰＥＧ）として購入する。ラパマイシンは、Concord Biotech Limited（1482-1486 Trasad Road, Dholka 382225, Ahmedabad India）から、製品コードSIROLIMUSとして購入する。ソルビタンモノパルミテートは、Sigma-Aldrich（3050 Spruce St., St. Louis, MO 63103）から、製品コード388920として購入する。EMPROVE（登録商標）ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）4-88、ＵＳＰ（８５～８９％加水分解されている、３．４～４．６ｍＰａ・ｓの粘度）は、MilliporeSigma（EMD Millipore, 290 Concord Road Billerica, Massachusetts 01821）から、製品コード1.41350として購入する。ダルベッコリン酸緩衝化食塩水１×（ＤＰＢＳ）は、Lonza（Muenchensteinerstrasse 38, CH-4002 Basel, Switzerland）から、製品コード17-512Qとして購入する。溶液は、以下のとおり調製する：溶液１：ポリマー、ラパマイシン、およびソルビタンモノパルミテート混合物は、ＰＬＡを３７．５ｍｇ／ｍＬで、ＰＬＡ－ＰＥＧ－Ｏｍｅを１２．５ｍｇ／ｍＬで、ラパマイシンを８ｍｇ／ｍＬで、およびソルビタンモノパルミテートを２．５で、ジクロロメタン中で溶解することにより調製する。溶液２：ポリビニルアルコールを、５０ｍｇ／ｍＬで１００ｍＭ（ｐＨ８）のリン酸バッファー中で調製する。Ｏ／Ｗエマルジョンは、溶液１（１．０ｍＬ）と溶液２（３ｍＬ）とを、小さいガラスの圧力管中で組み合わせて、ボルテックスにより１０秒間混合することにより調製する。処方物を、次いでBranson Digital Sonifier 250を用いて、１／８”テーパードチップにより、３０％の振幅で１分間にわたり超音波処理によりホモジェナイズし、圧力管を氷水槽中に浸漬する。エマルジョンを、次いで、ＤＰＢＳ（１５ｍＬ）を含む５０ｍＬビーカーに加え、アルミニウムホイルで被覆する。第２のＯ／Ｗエマルジョンを、上と同じ材料および方法を用いて調製し、次いで同じビーカーに、フレッシュなＤＰＢＳ（１５ｍＬ）のアリコートを用いて加える。組み合わせたエマルジョンを、次いで被覆しないで室温で撹拌しながら２時間にわたり静置し、ジクロロメタンを蒸発させ、ナノキャリアを形成させる。ナノキャリア懸濁液を遠心管に移して、７５，６００×ｇで、４℃で５０分間にわたり遠心分離し、上清を取り除き、０．２５％ｗ／ｖのＰＶＡを含むＤＰＢＳ中でペレットを再懸濁することにより、ナノキャリアの一部を洗浄する。洗浄の手順を繰り返し、ペレットを０．２５％ｗ／ｖのＰＶＡを含むＤＰＢＳ中で再懸濁して、ポリマーに基づいて１０ｍｇ／ｍＬの名目上の濃度を有するナノキャリア懸濁液を達成する。ナノキャリア懸濁液を、次いでMilliporeSigma製の０．２２μｍのＰＥＳメンブレンシリンジフィルター（EMD Millipore, 290 Concord Rd. Billerica MA, 製品コードSLGP033RB）を用いてろ過する。ろ過したナノキャリア懸濁液を、－２０℃で貯蔵する。

【0087】

免疫抑制剤
本明細書において提供されるような任意の免疫抑制剤を、提供される方法または組成物のうちのいずれか１つにおいて用いることができ、これは、いくつかの態様においては、合成ナノキャリアに結合している。免疫抑制剤として、これに限定されないが、ｍＴＯＲ阻害剤が挙げられる。ｍＴＯＲ阻害剤の例として、ラパマイシンおよびラパログ（例えばCCL-779、RAD001、AP23573、C20-メタアリルラパマイシン（C20-Marap）、Ｃ１６－（Ｓ）－ブチルスルホンアミドラパマイシン（C16-BSrap）、Ｃ１６－（Ｓ）－３－メチルインドールラパマイシン（C16-iRap)（Bayle et al. Chemistry & Biology 2006, 13:99-107））、AZD8055、BEZ235（NVP-BEZ235）、クリソファン酸（クリソファノール）、デフォロリムス（MK-8669）、エベロリムス（RAD0001）、KU-0063794、PI-103、PP242、テムシロリムスおよびWYE-354（Selleck, Houston, TX, USAから入手可能）が挙げられる。

【0088】

好ましくは、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、免疫抑制剤は、ラパマイシンである。かかる態様のうちのいくつかにおいて、ラパマイシンは、好ましくは合成ナノキャリア中に被包される。ラパマイシンは、ヒトにおいて先に広範に使用されている免疫抑制剤であって、現在、１３歳以上の腎移植患者における臓器拒絶の予防のためにＦＤＡにより承認されている、ラパミューンの活性成分である。

【0089】

合成ナノキャリアにカップリングされる場合、全合成ナノキャリア中の材料の総乾燥処方重量に基づく、合成ナノキャリアにカップリングされる免疫抑制剤の量（重量／重量）は、本明細書において別の場所において記載されるとおりである。好ましくは、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、ラパマイシンまたはラパログなどの免疫抑制剤の充填量は、重量により７％～１２％または８％～１２％である。

【0090】

抗炎症性治療剤
抗炎症性治療剤（すなわち、炎症を減少させるように作用することができる任意の治療剤）。抗炎症性治療剤として、これらに限定されないが、副腎皮質ステロイドまたはコルチゾールの誘導体（ヒドロコルチゾン）が挙げられる。副腎皮質ステロイドとして、これらに限定されないが、糖質コルチコイドおよび鉱質コルチコイドが挙げられる。副腎皮質ステロイドのなお他の例として、これらに限定されないが、以下が挙げられる：天然のもの（例えば１１－デヒドロコルチコステロン（１１－オキソコルチコステロン、１７－デオキシコルチゾン）＝２１－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，１１，２０－トリオン；１１－デオキシコルチコステロン（デオキシコルトン、デスオキシコルトン；２１－ヒドロキシプロゲステロン）＝２１－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；１１－デオキシコルチゾール（コルトドキソン、コルテキソロン）＝１７α，２１－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；１１－ケトプロゲステロン（１１－オキソプロゲステロン；ケトゲスチン（Ketogestin））＝プレグン－４－エン－３，１１，２０－トリオン；１１β－ヒドロキシプレグネノロン＝３β，１１β－ジヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン；１１β－ヒドロキシプロゲステロン（２１－デオキシコルチコステロン）＝１１β－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグネノロン＝３β，１１β，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン；１７α，２１－ジヒドロキシプレグネノロン＝３β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン；１７α－ヒドロキシプレグネノロン＝３β，１７α－ジヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン；１７α－ヒドロキシプロゲステロン＝１７α－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，１１，２０－トリオン；１８－ヒドロキシ－１１－デオキシコルチコステロン＝１８，２１－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；１８－ヒドロキシコルチコステロン＝１１β，１８，２１－トリヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；１８－ヒドロキシプロゲステロン＝１８－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；２１－デオキシコルチゾール＝１１β，１７α－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；２１－デオキシコルチゾン＝１７α－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，１１，２０－トリオン；２１－ヒドロキシプレグネノロン（prebediolone）＝３β，２１－ジヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン；アルドステロン＝１１β，２１－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，１８，２０－トリオン；コルチコステロン（１７－デオキシコルチゾール）＝１１β，２１－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；コルチゾール（ヒドロコルチゾン）＝１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；コルチゾン＝１７α，２１－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，１１，２０－トリオン；プレグネノロン＝プレグン－５－エン－３β－オール－２０－オン；およびプロゲステロン＝プレグン－４－エン－３，２０－ジオン）；合成であるもの、例えば、プロゲステロン型（例えばフルゲストン（Flugestone）（フルロゲストン）＝９α－フルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；フルオロメトロン＝６α－メチル－９α－フルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；メドリゾン（ヒドロキシメチルプロゲステロン）＝６α－メチル－１１β－ヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；および酢酸プレベジオロン（Prebediolone acetate）（２１－アセトキシプレグネノロン）＝３β，２１－ジヒドロキシプレグン－５－エン－２０－オン２１－アセテート）およびプロゲステロン誘導体プロゲスチン（例えば酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、メドロゲストン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、および酢酸セゲステロン（segesterone acetate））；ヒドロコルチゾン型（例えばクロロプレドニゾロン＝６α－クロロ－１７α，２１－ジヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，１１，２０－トリオン；クロプレドノール＝６－クロロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４，６－トリエン－３，２０－ジオン；ジフルプレドナート＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン１７α－ブチレート２１－アセテート；フルドロコルチゾン＝９α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；フルオシノロン＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルペロロン＝９α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－２１－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルプレドニゾロン＝６α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；ロテプレドノール＝１１β，１７α，ジヒドロキシ－２１－オキサ－２１－クロロメチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；メチルプレドニゾロン＝６α－メチル－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；プレドニカルベート＝１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン１７α－エチルカーボネート２１－プロピオネート；プレドニゾロン＝１１β，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；プレドニゾロン＝１７α，２１－ジヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，１１，２０－トリオン；チキソコルトール＝１１β，１７α－ジヒドロキシ－２１－スルファニルプレグン－４－エン－３，２０－ジオン；およびトリアムシノロン＝９α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン）；メタゾン（methasone）型（１６－メチル化）（例えばメタゾン（Methasone）；アルクロメタゾン＝７α－クロロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；ベクロメタゾン＝９α－クロロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６β－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；ベタメタゾン＝９α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６β－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；クロベタゾール＝９α－フルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６β－メチル－２１－クロロプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；クロベタゾン＝９α－フルオロ－１６β－メチル－１７α－ヒドロキシ－２１－クロロプレグナ－１，４－ジエン－３，１１，２０－トリオン；クロコルトロン＝６α－フルオロ－９α－クロロ－１１β，２１－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；デスオキシメタゾン＝９α－フルオロ－１１β，２１－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；デキサメタゾン＝９α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；ジフロラゾン＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６β－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；ジフルコルトロン（Difluocortolone）＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，２１－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルクロロロン＝６α－フルオロ－９α，１１β－ジクロロ－１６α，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルメタゾン＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルオコルチン＝６α－フルオロ－１１β，２１－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０，２１－トリオン；フルオコルトロン＝６α－フルオロ－１１β，２１－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルプレドニデン＝９α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６－メチレンプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フルチカゾン＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６α－メチル－２１－チア－２１－フルオロメチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フロ酸フルチカゾン＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６α－メチル－２１－チア－２１－フルオロメチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン１７α－（２－フロエート）；ハロメタゾン＝２－クロロ－６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；メプレドニゾロン＝１６β－メチル－１７α，２１－ジヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，１１，２０－トリオン；モメタゾン＝９α，２１－ジクロロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；フロ酸モメタゾン＝９α，２１－ジクロロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン１７α－（２－フロエート）；パラメタゾン＝６α－フルオロ－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６α－メチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；プレドニリデン＝１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－１６－メチレンプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；リメキソロン＝１１β－ヒドロキシ－１６α，１７α，２１－ｔｒｉメチルプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン；およびウロベタゾール（ハロベタゾール）＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１７α－ジヒドロキシ－１６β－メチル－２１－クロロプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン）；アセトニドおよび関連物（例えばアムシノニド＝９α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、シクロペンタノン、２１－アセテートを加えたもの；ブデソニド＝１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、ブチルアルデヒドを加えたもの；シクレソニド＝１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、（Ｒ）－シクロヘキサンカルボキサルデヒド、２１－イソブチレートを加えたもの；デフラザコート＝１１β，２１－ジヒドロキシ－２’－メチル－５’Ｈ－プレグナ－１，４－ジエノ［１７，１６－ｄ］オキサゾール－３，２０－ジオン２１－アセテート；デソニド＝１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの；ホルモコータル（フルオロホルミロン（fluoroformylone）＝３－（２－クロロエトキシ）－９α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシ－２０－オキソプレグナ－３，５－ジエン－６－カルボキサルデヒド環式１６α，１７α－アセタールに、アセトン、２１－アセテートを加えたもの；フルクロロロンアセトニド（フルクロロニド（flucloronide））＝６α－フルオロ－９α，１１β－ジクロロ－１６α，１７α，２１－トリヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの；フルドロキシコルチド（フルランドレノリド、フルランドレノリド）＝６α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグン－４－エン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－
アセタールに、アセトンを加えたもの；フルニソリド＝６α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの；フルオシノロンアセトニド＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの；フルオシノニド＝６α，９α－ジフルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの、２１－アセテート；ハルシノニド＝９α－フルオロ－１１β，１６α，１７α－トリヒドロキシ－２１－クロロプレグン－４－エン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの；およびトリアムシノロンアセトニド＝９α－フルオロ－１１β，１６α，１７α，２１－テトラヒドロキシプレグナ－１，４－ジエン－３，２０－ジオン環式１６α，１７α－アセタールに、アセトンを加えたもの）；ならびになお他のもの（例えばコルチバゾール＝６，１６α－ジメチル－１１β，１７α，２１－トリヒドロキシ－２’－フェニル［３，２－ｃ］ピラゾロプレグナ－４，６－ジエン－２０－オン２１－アセテート；およびRU-28362＝６－メチル－１１β，１７β－ジヒドロキシ－１７α－（１－プロピニル）アンドロスタ－１，４，６－トリエン－３－オン）。

【0091】

副腎皮質ステロイド、特に糖質コルチコイドは、抗炎症および免疫抑制効果を有し、これは、痛風、痛風フレア、および／または痛風に関連する状態に関連する疼痛および炎症を含む症状を管理することにおいて有効であり得る。副腎皮質ステロイドの投与はまた、１つ以上のさらなる治療、例えばウリカーゼ補充療法に関連する過敏性反応を軽減することにおいても役立ち得る。副腎皮質ステロイドのなお他の非限定的な例として、プレドニゾロン、プレドニゾロン、メドロールおよびメチルプレドニゾロンが挙げられる。

【0092】

輸注反応治療剤
輸注反応治療剤（すなわち、輸注反応を軽減または予防することにおいて有益であり得る任意の治療剤）もまた、本明細書において提供される組成物および関連する方法において含めることができる。かかる治療剤として、抗炎症剤、例えば、本明細書において提供される抗炎症剤のうちのいずれか１つ（例えば副腎皮質ステロイド、例えばメチルプレドニゾロン、プレドニゾロンまたはデキサメタゾン）が挙げられ得る。かかる治療剤としてまた、抗ヒスタミン剤が挙げられ得る。抗ヒスタミン剤は、ヒスタミンの生理学的効果を阻害することができる剤であって、ブロムフェニラミン、カルビノキサミン、クロルフェニラミン、クレマスチン、ジフェンヒドラミン、ヒドロキシジン、トリプロリジン、セチリジン、デスロラタジン、フェキソフェナジン、レボセチリジン、ロラタジンなどを含む。

【0093】

用量
本明細書において別段に特定されない限り、ペグ化ウリカーゼを含む組成物の用量の量（重量による）、ならびに、本明細書において提供されるバイアルあたりの濃度は、それぞれ、ウリカーゼタンパク質に抱合しているＰＥＧ分子または組成物中に添加された任意の賦形剤を含まない、ウリカーゼタンパク質の量または濃度を指す。ペグ化ウリカーゼの実際の量は、かかる例において、ペグ化されたタンパク質の形態のより高い重量に起因して、用量よりも高いであろう。一例において、ペグ化ウリカーゼを含む組成物の０．４ｍｇ／ｋｇの用量は、０．４ｍｇ／ｋｇのウリカーゼタンパク質の用量を指す。

【0094】

したがって、対象への投与のためのペグ化ウリカーゼを含む組成物の用量は、本明細書において提供される用量および対象の重量に基づいて、以下の式に従って計算することができる：
（ｍｇ／ｋｇにおける用量（これはウリカーゼタンパク質のものである））×（対象の重量（ｋｇ））／（バイアル中の１ｍＬあたりの濃度（やはりこれもウリカーゼタンパク質のものである））＝投与すべき容積

【0095】

例として、ペグ化ウリカーゼは、６ｍｇ／ｍＬの濃度まで、無菌水中で再構成することができる。したがって、この例について、４ｍｇ／ｋｇの用量が、体重９０．７ｋｇ（２００ｌｂｓ）の対象に投与されるためには、６．０４８ｍＬの再構成されたペグ化ウリカーゼ組成物を対象に投与すべきである：
（０．４ｍｇ／ｋｇ）×（９０．７ｋｇ）／（６ｍｇ／ｍＬ）＝６．０４８ｍＬ

【0096】

いくつかの態様において、例えば所望される期間（例えば６０分間）にわたる対象への静脈内注入のために、ペグ化ウリカーゼを含む組成物の適切な容積を、薬学的に受入可能な賦形剤（例えば無菌食塩水）中で希釈する。

【0097】

同様に、本明細書において別段に特定されない限り、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の用量の量（重量による）、ならびに本明細書において提供されるバイアルあたりの濃度は、それぞれ、合成ナノキャリア材料または組成物中に添加された任意の賦形剤または他の構成成分を含まない、免疫抑制剤の量または濃度を指す。免疫抑制剤を含む合成ナノキャリア組成物の実際の量は、合成ナノキャリア材料および組成物中に添加された任意の賦形剤または他の構成成分の添加された重量に起因して、記載された用量よりも高いであろう。一例において、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の０．０８ｍｇ／ｋｇの用量は、０．０８ｍｇ／ｋｇの免疫抑制剤の用量を指す。

【0098】

したがって、対象への投与のための免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の用量は、対象の重量に基づいて、以下の式に従って、計算することができる：
（ｍｇ／ｋｇにおける用量（これは免疫抑制剤のものである））×（対象の重量（ｋｇ））／（バイアル中の１ｍＬあたりの濃度（やはりこれも免疫抑制剤のものである）＝投与すべき容積

【0099】

例として、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物は、２ｍｇ／ｍＬの濃度におけるものである（やはりこれも免疫抑制剤の濃度である）。したがって、この例において、０．０８ｍｇ／ｋｇの用量が、体重９０．７ｋｇ（２００ｌｂｓ）の対象に投与されるためには、３．６ｍＬの組成物を対象に投与すべきである：
（０．０８ｍｇ／ｋｇ）×（９０．７ｋｇ）／（２ｍｇ／ｍＬ）＝３．６ｍＬ

【0100】

免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアの免疫抑制剤（例えばラパマイシン）の充填量は、免疫抑制剤および合成ナノキャリアの両方に適合性の液体抽出（例えば合成ナノキャリアを含むポリマー）を用いて、合成ナノキャリアから免疫抑制剤を抽出し、抽出物を、分析物に対して特異的なＵＶ検出による逆相液体クロマトグラフィーにより分析することにより、決定することができる。免疫抑制剤充填量（合成ナノキャリアの含有量）は、クロマトグラフィーおよびナノ粒子抽出の手順に適合性の状態において調製された定量され、併せて分析された参照標準の較正標準曲線から、正確に、かつ的確に、計算することができる。

【0101】

免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の用量の量（重量による）は、免疫抑制剤用量の量（重量による）に基づいて、以下の式に従って計算することができる：
（１／免疫抑制剤の充填量）×（免疫抑制剤の量に基づいて与えられる用量）＝免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアの量として与えられる免疫抑制剤の用量

【0102】

例として、合成ナノキャリア中の免疫抑制剤の充填量は、約１０％であってよく、免疫抑制剤の０．０８ｍｇ／ｋｇの用量が所望される場合、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアの量として与えられる用量は、８ｍｇ／ｋｇである。

【0103】

ペグ化ウリカーゼ中に存在するウリカーゼタンパク質の量は、当該分野において公知の方法、例えば比色分析、ＵＶ吸収、またはアミノ酸分析を用いて決定することができる。比色分析アプローチは、市販されている標準化されたキットに依存し、これは、ブラッドフォードまたはビシンコニン酸（ＢＣＡ）アッセイについて記載されるものなどの、典型的な色素に基づく反応に梃入れするものである。ウリカーゼタンパク質の量は、好ましくは公定のソースから購入され、同じ分光光度計を用いて併せて分析された、定量されたタンパク質参照標準の較正標準曲線から正確にかつ的確に計算することができる。選択されたＵＶ吸収における読み出しの一貫性を保証するために、同じアッセイ内で、類似のまたは異なる化学的特性の既知のタンパク質の単一または複数の点の較正を行ってもよい。また、薬品の酸の加水分解から得られるアミノ酸混合物を分析してもよく、これは、一般に、的確かつ正確な定量を提供する。アミノ酸混合物は、ＵＶまたは蛍光検出のいずれかにより、クロマトグラフィー前またはクロマトグラフィー後の一級および二級アミンの誘導体化を用いて、ＨＰＬＣにより分析される。一般的なアミノ酸の市販の混合物を、同じアッセイ内で分析して、個々のアミノ酸の較正曲線を構築し、それに対して各々のアミノ酸を定量する。いくつかの態様において、ウリカーゼタンパク質の量の決定は、酵素活性を測定することにより捕捉、これは、５９５ｎｍにおけるＵＶ吸収によりモニタリングされる過剰の尿酸の減少を測定することにより行うことができる。あるいはまたは加えて、ウリカーゼの活性は、市販のキットを用いて決定することができ、これは、例えば、酵素反応生成物を標識すること、および当該酵素の既知の量を分析することにより確立した較正曲線に対してウリカーゼの応答を測定することを含んでもよい。

【0104】

すぐ上の式と同様に、ペグ化ウリカーゼを含む組成物の用量の量（重量による）は、ウリカーゼ用量の量（重量による）に基づいて、以下の式に従って計算することができる：
（１／（ペグ化ウリカーゼのウリカーゼの重量／ペグ化ウリカーゼの重量））×（ウリカーゼの量に基づいて与えられる用量）＝ペグ化ウリカーゼの量として与えられるペグ化ウリカーゼの用量
本明細書において提供される量は、組成物中のそれぞれの分子の集合に基づく平均量であってもよいことが、理解されるべきである。

【0105】

本明細書において提供されるようなウリカーゼ、例えばペグシチカーゼ（すなわちペガドリカーゼ）を含む組成物または方法のうちのいずれか１つのための例示的なウリカーゼの用量は、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１１ｍｇ／ｋｇ、０．１２ｍｇ／ｋｇ、０．１３ｍｇ／ｋｇ、０．１４ｍｇ／ｋｇ、０．１５ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．１７ｍｇ／ｋｇ、０．１８ｍｇ／ｋｇ、０．１９ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２１ｍｇ／ｋｇ、０．２２ｍｇ／ｋｇ、０．２３ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ、０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．２６ｍｇ／ｋｇ、０．２７ｍｇ／ｋｇ、０．２８ｍｇ／ｋｇ、０．２９ｍｇ／ｋｇ、０．３０ｍｇ／ｋｇ、０．３１ｍｇ／ｋｇ、０．３２ｍｇ／ｋｇ、０．３４ｍｇ／ｋｇ、０．３５ｍｇ／ｋｇ、０．３６ｍｇ／ｋｇ、０．３７ｍｇ／ｋｇ、０．３８ｍｇ／ｋｇ、０．３９ｍｇ／ｋｇ、０．４０ｍｇ／ｋｇ、０．４１ｍｇ／ｋｇ、０．４２ｍｇ／ｋｇ、０．４３ｍｇ／ｋｇ、０．４４ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．４６ｍｇ／ｋｇ、０．４７ｍｇ／ｋｇ、０．４８ｍｇ／ｋｇ、０．４９ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇ、０．５１ｍｇ／ｋｇ、０．５２ｍｇ／ｋｇ、０．５３ｍｇ／ｋｇ、０．５４ｍｇ／ｋｇ、０．５５ｍｇ／ｋｇ、０．５６ｍｇ／ｋｇ、０．５７ｍｇ／ｋｇ、０．５８ｍｇ／ｋｇ、０．５９ｍｇ／ｋｇ、０．６０ｍｇ／ｋｇ、０．６１ｍｇ／ｋｇ、０．６２ｍｇ／ｋｇ、０．６３ｍｇ／ｋｇ，０．６４ｍｇ／ｋｇ、０．６５ｍｇ／ｋｇ、０．６６ｍｇ／ｋｇ、０．６７ｍｇ／ｋｇ、０．６８ｍｇ／ｋｇ、０．６９ｍｇ／ｋｇ、０．７０ｍｇ／ｋｇ、０．７１ｍｇ／ｋｇ、０．７２ｍｇ／ｋｇ、０．７３ｍｇ／ｋｇ、０．７４ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、０．７６ｍｇ／ｋｇ、０．７７ｍｇ／ｋｇ、０．７８ｍｇ／ｋｇ、０．７９ｍｇ／ｋｇ、０．８０ｍｇ／ｋｇ、０．８１ｍｇ／ｋｇ、０．８２ｍｇ／ｋｇ、０．８３ｍｇ／ｋｇ、０．８４ｍｇ／ｋｇ、０．８５ｍｇ／ｋｇ、０．８６ｍｇ／ｋｇ、０．８７ｍｇ／ｋｇ、０．８８ｍｇ／ｋｇ、０．８９ｍｇ／ｋｇ、０．９０ｍｇ／ｋｇ、０．９１ｍｇ／ｋｇ、０．９２ｍｇ／ｋｇ、０．９３ｍｇ／ｋｇ、０．９４ｍｇ／ｋｇ、０．９５ｍｇ／ｋｇ、０．９６ｍｇ／ｋｇ、０．９７ｍｇ／ｋｇ、０．９８ｍｇ／ｋｇ、０．９０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．０１ｍｇ／ｋｇ、１．０２ｍｇ／ｋｇ、１．０３ｍｇ／ｋｇ、１．０４ｍｇ／ｋｇ、１．０５ｍｇ／ｋｇ、１．０６ｍｇ／ｋｇ、１．０７ｍｇ／ｋｇ、１．０８ｍｇ／ｋｇ、１．０９ｍｇ／ｋｇ、１．１０ｍｇ／ｋｇ、１．１１ｍｇ／ｋｇ、１．１２ｍｇ／ｋｇ、１．１３ｍｇ／ｋｇ、１．１４ｍｇ／ｋｇ、１．１５ｍｇ／ｋｇ、１．１６ｍｇ／ｋｇ、１．１７ｍｇ／ｋｇ、１．１８ｍｇ／ｋｇ、１．１９ｍｇ／ｋｇ、または１．２０ｍｇ／ｋｇのウリカーゼであってよい。

【0106】

本明細書において提供される免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物または方法のうちのいずれか１つのための、ラパマイシンなどの免疫抑制剤の例示的な用量は、０．０５０ｍｇ／ｋｇ、０．０５５ｍｇ／ｋｇ、０．０６０ｍｇ／ｋｇ、０．０６５ｍｇ／ｋｇ、０．０７０ｍｇ／ｋｇ、０．０７５ｍｇ／ｋｇ、０．０８０ｍｇ／ｋｇ、０．０８５ｍｇ／ｋｇ、０．０９０ｍｇ／ｋｇ、０．０９５ｍｇ／ｋｇ、０．１００ｍｇ／ｋｇ、０．１０５ｍｇ／ｋｇ、０．１１０ｍｇ／ｋｇ、０．１１５ｍｇ／ｋｇ、０．１２０ｍｇ／ｋｇ、０．１２５ｍｇ／ｋｇ、０．１３０ｍｇ／ｋｇ、０．１３５ｍｇ／ｋｇ、０．１４０ｍｇ／ｋｇ、０．１４５ｍｇ／ｋｇ、０．１５０ｍｇ／ｋｇ、０．１５５ｍｇ／ｋｇ、０．１６０ｍｇ／ｋｇ、０．１６５ｍｇ／ｋｇ、０．１７０ｍｇ／ｋｇ、０．１７５ｍｇ／ｋｇ、０．１８０ｍｇ／ｋｇ、０．１８５ｍｇ／ｋｇ、０．１９０ｍｇ／ｋｇ、０．１９５ｍｇ／ｋｇ、０．２００ｍｇ／ｋｇ、０．２０５ｍｇ／ｋｇ、０．２１０ｍｇ／ｋｇ、０．２１５ｍｇ／ｋｇ、０．２２０ｍｇ／ｋｇ、０．２２５ｍｇ／ｋｇ、０．２３０ｍｇ／ｋｇ、０．２３５ｍｇ／ｋｇ、０．２４０ｍｇ／ｋｇ、０．２４５ｍｇ／ｋｇ、０．２５０ｍｇ／ｋｇ、０．２５５ｍｇ／ｋｇ、０．２６０ｍｇ／ｋｇ、０．２６５ｍｇ／ｋｇ、０．２７０ｍｇ／ｋｇ、０．２７５ｍｇ／ｋｇ、０．２８０ｍｇ／ｋｇ、０．２８５ｍｇ／ｋｇ、０．２９０ｍｇ／ｋｇ、０．２９５ｍｇ／ｋｇ、０．３００ｍｇ／ｋｇ、０．３０５ｍｇ／ｋｇ、０．３１０ｍｇ／ｋｇ、０．３１５ｍｇ／ｋｇ、０．３２０ｍｇ／ｋｇ、０．３２５ｍｇ／ｋｇ、０．３３０ｍｇ／ｋｇ、０．３３５ｍｇ／ｋｇ、０．３４０ｍｇ／ｋｇ、０．３４５ｍｇ／ｋｇ、０．３５０ｍｇ／ｋｇ、０．３５５ｍｇ／ｋｇ、０．３６０ｍｇ／ｋｇ、０．３６５ｍｇ／ｋｇ、０．３７０ｍｇ／ｋｇ、０．３７５ｍｇ／ｋｇ、０．３８０ｍｇ／ｋｇ、０．３８５ｍｇ／ｋｇ、０．３９０ｍｇ／ｋｇ、０．３９５ｍｇ／ｋｇ、０．４００ｍｇ／ｋｇ、０．４０５ｍｇ／ｋｇ、０．４１０ｍｇ／ｋｇ、０．４１５ｍｇ／ｋｇ、０．４２０ｍｇ／ｋｇ、０．４２５ｍｇ／ｋｇ、０．４３０ｍｇ／ｋｇ、０．４３５ｍｇ／ｋｇ、０．４４０ｍｇ／ｋｇ、０．４４５ｍｇ／ｋｇ、０．４５０ｍｇ／ｋｇ、０．４５５ｍｇ／ｋｇ、０．４６０ｍｇ／ｋｇ、０．４６５ｍｇ／ｋｇ、０．４７０ｍｇ／ｋｇ、０．４７５ｍｇ／ｋｇ、０．４８０ｍｇ／ｋｇ、０．４８５ｍｇ／ｋｇ、０．４９０ｍｇ／ｋｇ、０．４９５ｍｇ／ｋｇ、０．５００ｍｇ／ｋｇの、ラパマイシンなどの免疫抑制剤であってよい。

【0107】

本明細書において提供されるようなラパマイシンなどの免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物の例示的な用量は、提供される組成物または方法のうちのいずれか１つのために、０．５５ｍｇ／ｋｇ、０．５６ｍｇ／ｋｇ、０．５７ｍｇ／ｋｇ、０．５８ｍｇ／ｋｇ、０．５９ｍｇ／ｋｇ、０．６０ｍｇ／ｋｇ、０．６１ｍｇ／ｋｇ、０．６２ｍｇ／ｋｇ、０．６３ｍｇ／ｋｇ，０．６４ｍｇ／ｋｇ、０．６５ｍｇ／ｋｇ、０．６６ｍｇ／ｋｇ、０．６７ｍｇ／ｋｇ、０．６８ｍｇ／ｋｇ、０．６９ｍｇ／ｋｇ、０．７０ｍｇ／ｋｇ、０．７１ｍｇ／ｋｇ、０．７２ｍｇ／ｋｇ、０．７３ｍｇ／ｋｇ、０．７４ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、０．７６ｍｇ／ｋｇ、０．７７ｍｇ／ｋｇ、０．７８ｍｇ／ｋｇ、０．７９ｍｇ／ｋｇ、０．８０ｍｇ／ｋｇ、０．８１ｍｇ／ｋｇ、０．８２ｍｇ／ｋｇ、０．８３ｍｇ／ｋｇ、０．８４ｍｇ／ｋｇ、０．８５ｍｇ／ｋｇ、０．８６ｍｇ／ｋｇ、０．８７ｍｇ／ｋｇ、０．８８ｍｇ／ｋｇ、０．８９ｍｇ／ｋｇ、０．９０ｍｇ／ｋｇ、０．９１ｍｇ／ｋｇ、０．９２ｍｇ／ｋｇ、０．９３ｍｇ／ｋｇ、０．９４ｍｇ／ｋｇ、０．９５ｍｇ／ｋｇ、０．９６ｍｇ／ｋｇ、０．９７ｍｇ／ｋｇ、０．９８ｍｇ／ｋｇ、０．９０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．０１ｍｇ／ｋｇ、１．０２ｍｇ／ｋｇ、１．０３ｍｇ／ｋｇ、１．０４ｍｇ／ｋｇ、１．０５ｍｇ／ｋｇ、１．０６ｍｇ／ｋｇ、１．０７ｍｇ／ｋｇ、１．０８ｍｇ／ｋｇ、１．０９ｍｇ／ｋｇ、１．１０ｍｇ／ｋｇ、１．１１ｍｇ／ｋｇ、１．１２ｍｇ／ｋｇ、１．１３ｍｇ／ｋｇ、１．１４ｍｇ／ｋｇ、１．１５ｍｇ／ｋｇ、１．１６ｍｇ／ｋｇ、１．１７ｍｇ／ｋｇ、１．１８ｍｇ／ｋｇ、１．１９ｍｇ／ｋｇ、１．２０ｍｇ／ｋｇ、１．２１ｍｇ／ｋｇ、１．２２ｍｇ／ｋｇ、１．２３ｍｇ／ｋｇ、１．２４ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．２６ｍｇ／ｋｇ、１．２７ｍｇ／ｋｇ、１．２８ｍｇ／ｋｇ、１．２９ｍｇ／ｋｇ、１．３０ｍｇ／ｋｇ、１．３１ｍｇ／ｋｇ、１．３２ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．３４ｍｇ／ｋｇ、１．３５ｍｇ／ｋｇ、１．３６ｍｇ／ｋｇ、１．３７ｍｇ／ｋｇ、１．３８ｍｇ／ｋｇ、１．３９ｍｇ／ｋｇ、１．４０ｍｇ／ｋｇ、１．４１ｍｇ／ｋｇ、１．４２ｍｇ／ｋｇ、１．４３ｍｇ／ｋｇ、１．４４ｍｇ／ｋｇ、１．４５ｍｇ／ｋｇ、１．４６ｍｇ／ｋｇ、１．４７ｍｇ／ｋｇ、１．４８ｍｇ／ｋｇ、１．４９ｍｇ／ｋｇ、１．５０ｍｇ／ｋｇ、１．５１ｍｇ／ｋｇ、１．５２ｍｇ／ｋｇ、１．５３ｍｇ／ｋｇ、１．５４ｍｇ／ｋｇ、１．５５ｍｇ／ｋｇ、１．５６ｍｇ／ｋｇ、１．５７ｍｇ／ｋｇ、１．５８ｍｇ／ｋｇ、１．５９ｍｇ／ｋｇ、１．６０ｍｇ／ｋｇ、１．６１ｍｇ／ｋｇ、１．６２ｍｇ／ｋｇ、１．６３ｍｇ／ｋｇ、１．６４ｍｇ／ｋｇ、１．６５ｍｇ／ｋｇ、１．６６ｍｇ／ｋｇ、１．６７ｍｇ／ｋｇ、１．６８ｍｇ／ｋｇ、１．６９ｍｇ／ｋｇ、１．７０ｍｇ／ｋｇ、１．７１ｍｇ／ｋｇ、１．７２ｍｇ／ｋｇ、１．７３ｍｇ／ｋｇ、１．７４ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、１．７６ｍｇ／ｋｇ、１．７７ｍｇ／ｋｇ、１．７８ｍｇ／ｋｇ、１．７９ｍｇ／ｋｇ、１．８０ｍｇ／ｋｇ、１．８１ｍｇ／ｋｇ、１．８２ｍｇ／ｋｇ、１．８３ｍｇ／ｋｇ、１．８４ｍｇ／ｋｇ、１．８５ｍｇ／ｋｇ、１．８６ｍｇ／ｋｇ、１．８７ｍｇ／ｋｇ、１．８８ｍｇ／ｋｇ、１．８９ｍｇ／ｋｇ、１．９０ｍｇ／ｋｇ、１．９１ｍｇ／ｋｇ、１．９２ｍｇ／ｋｇ、１．９３ｍｇ／ｋｇ、１．９４ｍｇ／ｋｇ、１．９５ｍｇ／ｋｇ、１．９６ｍｇ／ｋｇ、１．９７ｍｇ／ｋｇ、１．９８ｍｇ／ｋｇ、１．９９ｍｇ／ｋｇ、２．００ｍｇ／ｋｇ、２．０１ｍｇ／ｋｇ、２．０２ｍｇ／ｋｇ、２．０３ｍｇ／ｋｇ、２．０４ｍｇ／ｋｇ、２．０５ｍｇ／ｋｇ、２．０６ｍｇ／ｋｇ、２．０７ｍｇ／ｋｇ、２．０８ｍｇ／ｋｇ、２．０９ｍｇ／ｋｇ、２．１０ｍｇ／ｋｇ、２．１１ｍｇ／ｋｇ、２．１２ｍｇ／ｋｇ、２．１３ｍｇ／ｋｇ、２．１４ｍｇ／ｋｇ、２．１５ｍｇ／ｋｇ、２．１６ｍｇ／ｋｇ、２．１７ｍｇ／ｋｇ、２．１８ｍｇ／ｋｇ、２．１９ｍｇ／ｋｇ、２．２０ｍｇ／ｋｇ、２．２１ｍｇ／ｋｇ、２．２２ｍｇ／ｋｇ、２．２３ｍｇ／ｋｇ、２．２４ｍｇ／ｋｇ、２．２５ｍｇ／ｋｇ、２．２６ｍｇ／ｋｇ、２．２７ｍｇ／ｋｇ、２．２８ｍｇ／ｋｇ、２．２９ｍｇ／ｋｇ、２．３０ｍｇ／ｋｇ、２．３１ｍｇ／ｋｇ、２．３２ｍｇ／ｋｇ、２．３３ｍｇ／ｋｇ、２．３４ｍｇ／ｋｇ、２．３５ｍｇ／ｋｇ、２．３６ｍｇ／ｋｇ、２．３７ｍｇ／ｋｇ、２．３８ｍｇ／ｋｇ、２．３９ｍｇ／ｋｇ、２．４０ｍｇ／ｋｇ、２．４１ｍｇ／ｋｇ、２．４２ｍｇ／ｋｇ、２．４３ｍｇ／ｋｇ、２．４４ｍｇ／ｋｇ、２．４５ｍｇ／ｋｇ、２．４６ｍｇ／ｋｇ、２．４７ｍｇ／ｋｇ、２．４８ｍｇ／ｋｇ、２．４９ｍｇ／ｋｇ、２．５０ｍｇ／ｋｇ、２．５１ｍｇ／ｋｇ、２．５２ｍｇ／ｋｇ、２．５３ｍｇ／ｋｇ、２．５４ｍｇ／ｋｇ、２．５５ｍｇ／ｋｇ、２．５６ｍｇ／ｋｇ、２．５７ｍｇ／ｋｇ、２．５８ｍｇ／ｋｇ、２．５９ｍｇ／ｋｇ、２．６０ｍｇ／ｋｇ、２．６１ｍｇ／ｋｇ、２．６２ｍｇ／ｋｇ、２．６３ｍｇ／ｋｇ、２．６４ｍｇ／ｋｇ、２．６５ｍｇ／ｋｇ、２．６６ｍｇ／ｋｇ、２．６７ｍｇ／ｋｇ、２．６８ｍｇ／ｋｇ、２．６９ｍｇ／ｋｇ、２．７０ｍｇ／ｋｇ、２．７１ｍｇ／ｋｇ、２．７２ｍｇ／ｋｇ、２．７３ｍｇ／ｋｇ、２．７４ｍｇ／ｋｇ、２．７５ｍｇ／ｋｇ、２．７６ｍｇ／ｋｇ、２．７７ｍｇ／ｋｇ、２．７８ｍｇ／ｋｇ、２．７９ｍｇ／ｋｇ、２．８０ｍｇ／ｋｇ、２．８１ｍｇ／ｋｇ、２．８２ｍｇ／ｋｇ、２．８３ｍｇ／ｋｇ、２．８４ｍｇ／ｋｇ、２．８５ｍｇ／ｋｇ、２．８６ｍｇ／ｋｇ、２．８７ｍｇ／ｋｇ、２．８８ｍｇ／ｋｇ、２．８９ｍｇ／ｋｇ、２．９０ｍｇ／ｋｇ、２．９１ｍｇ／ｋｇ、２．９２ｍｇ／ｋｇ、２．９３ｍｇ／ｋｇ、２．９４ｍｇ／ｋｇ、２．９５ｍｇ／ｋｇ、２．９６ｍｇ／ｋｇ、２．９７ｍｇ／ｋｇ、２．９８ｍｇ／ｋｇ、２．９９ｍｇ／ｋｇ、３．００ｍｇ／ｋｇ、３．０１ｍｇ／ｋｇ、３．０２ｍｇ／ｋｇ、３．０３ｍｇ／ｋｇ、３．０４ｍｇ／ｋｇ、３．０５ｍｇ／ｋｇ、３．０６ｍｇ／ｋｇ、３．０７ｍｇ／ｋｇ、３．０８ｍｇ／ｋｇ、３．０９ｍｇ／ｋｇ、３．１０ｍｇ／ｋｇ、３．１１ｍｇ／ｋｇ、３．１２ｍｇ／ｋｇ、３．１３ｍｇ／ｋｇ、３．１４ｍｇ／ｋｇ、３．１５ｍｇ／ｋｇ、３．１６ｍｇ／ｋｇ、３．１７ｍｇ／ｋｇ、３．１８ｍｇ／ｋｇ、３．１９ｍｇ／ｋｇ、３．２０ｍｇ／ｋｇ、３．２１ｍｇ／ｋｇ、３．２２ｍｇ／ｋｇ、３．２３ｍｇ／ｋｇ、３．２４ｍｇ／ｋｇ、３．２５ｍｇ／ｋｇ、
３．２６ｍｇ／ｋｇ、３．２７ｍｇ／ｋｇ、３．２８ｍｇ／ｋｇ、３．２９ｍｇ／ｋｇ、３．３０ｍｇ／ｋｇ、３．３１ｍｇ／ｋｇ、３．３２ｍｇ／ｋｇ、３．３３ｍｇ／ｋｇ、３．３４ｍｇ／ｋｇ、３．３５ｍｇ／ｋｇ、３．３６ｍｇ／ｋｇ、３．３７ｍｇ／ｋｇ、３．３８ｍｇ／ｋｇ、３．３９ｍｇ／ｋｇ、３．４０ｍｇ／ｋｇ、３．４１ｍｇ／ｋｇ、３．４２ｍｇ／ｋｇ、３．４３ｍｇ／ｋｇ、３．４４ｍｇ／ｋｇ、３．４５ｍｇ／ｋｇ、３．４６ｍｇ／ｋｇ、３．４７ｍｇ／ｋｇ、３．４８ｍｇ／ｋｇ、３．４９ｍｇ／ｋｇ、３．５０ｍｇ／ｋｇ、３．５１ｍｇ／ｋｇ、３．５２ｍｇ／ｋｇ、３．５３ｍｇ／ｋｇ、３．５４ｍｇ／ｋｇ、３．５５ｍｇ／ｋｇ、３．５６ｍｇ／ｋｇ、３．５７ｍｇ／ｋｇ、３．５８ｍｇ／ｋｇ、３．５９ｍｇ／ｋｇ、３．６０ｍｇ／ｋｇ、３．６１ｍｇ／ｋｇ、３．６２ｍｇ／ｋｇ、３．６３ｍｇ／ｋｇ、３．６４ｍｇ／ｋｇ、３．６５ｍｇ／ｋｇ、３．６６ｍｇ／ｋｇ、３．６７ｍｇ／ｋｇ、３．６８ｍｇ／ｋｇ、３．６９ｍｇ／ｋｇ、３．７０ｍｇ／ｋｇ、３．７１ｍｇ／ｋｇ、３．７２ｍｇ／ｋｇ、３．７３ｍｇ／ｋｇ、３．７４ｍｇ／ｋｇ、３．７５ｍｇ／ｋｇ、３．７６ｍｇ／ｋｇ、３．７７ｍｇ／ｋｇ、３．７８ｍｇ／ｋｇ、３．７９ｍｇ／ｋｇ、３．８０ｍｇ／ｋｇ、３．８１ｍｇ／ｋｇ、３．８２ｍｇ／ｋｇ、３．８３ｍｇ／ｋｇ、３．８４ｍｇ／ｋｇ、３．８５ｍｇ／ｋｇ、３．８６ｍｇ／ｋｇ、３．８７ｍｇ／ｋｇ、３．８８ｍｇ／ｋｇ、３．８９ｍｇ／ｋｇ、３．９０ｍｇ／ｋｇ、３．９１ｍｇ／ｋｇ、３．９２ｍｇ／ｋｇ、３．９３ｍｇ／ｋｇ、３．９４ｍｇ／ｋｇ、３．９５ｍｇ／ｋｇ、３．９６ｍｇ／ｋｇ、３．９７ｍｇ／ｋｇ、３．９８ｍｇ／ｋｇ、３．９９ｍｇ／ｋｇ、４．００ｍｇ／ｋｇ、４．０１ｍｇ／ｋｇ、４．０２ｍｇ／ｋｇ、４．０３ｍｇ／ｋｇ、４．０４ｍｇ／ｋｇ、４．０５ｍｇ／ｋｇ、４．０６ｍｇ／ｋｇ、４．０７ｍｇ／ｋｇ、４．０８ｍｇ／ｋｇ、４．０９ｍｇ／ｋｇ、４．１０ｍｇ／ｋｇ、４．１１ｍｇ／ｋｇ、４．１２ｍｇ／ｋｇ、４．１３ｍｇ／ｋｇ、４．１４ｍｇ／ｋｇ、４．１５ｍｇ／ｋｇ、４．１６ｍｇ／ｋｇ、４．１７ｍｇ／ｋｇ、４．１８ｍｇ／ｋｇ、４．１９ｍｇ／ｋｇ、４．２０ｍｇ／ｋｇ、４．２１ｍｇ／ｋｇ、４．２２ｍｇ／ｋｇ、４．２３ｍｇ／ｋｇ、４．２４ｍｇ／ｋｇ、４．２５ｍｇ／ｋｇ、４．２６ｍｇ／ｋｇ、４．２７ｍｇ／ｋｇ、４．２８ｍｇ／ｋｇ、４．２９ｍｇ／ｋｇ、４．３０ｍｇ／ｋｇ、４．３１ｍｇ／ｋｇ、４．３２ｍｇ／ｋｇ、４．３３ｍｇ／ｋｇ、４．３４ｍｇ／ｋｇ、４．３５ｍｇ／ｋｇ、４．３６ｍｇ／ｋｇ、４．３７ｍｇ／ｋｇ、４．３８ｍｇ／ｋｇ、４．３９ｍｇ／ｋｇ、４．４０ｍｇ／ｋｇ、４．４１ｍｇ／ｋｇ、４．４２ｍｇ／ｋｇ、４．４３ｍｇ／ｋｇ、４．４４ｍｇ／ｋｇ、４．４５ｍｇ／ｋｇ、４．４６ｍｇ／ｋｇ、４．４７ｍｇ／ｋｇ、４．４８ｍｇ／ｋｇ、４．４９ｍｇ／ｋｇ、４．５０ｍｇ／ｋｇ、４．５１ｍｇ／ｋｇ、４．５２ｍｇ／ｋｇ、４．５３ｍｇ／ｋｇ、４．５４ｍｇ／ｋｇ、４．５５ｍｇ／ｋｇ、４．５６ｍｇ／ｋｇ、４．５７ｍｇ／ｋｇ、４．５８ｍｇ／ｋｇ、４．５９ｍｇ／ｋｇ、４．６０ｍｇ／ｋｇ、４．６１ｍｇ／ｋｇ、４．６２ｍｇ／ｋｇ、４．６３ｍｇ／ｋｇ、４．６４ｍｇ／ｋｇ、４．６５ｍｇ／ｋｇ、４．６６ｍｇ／ｋｇ、４．６７ｍｇ／ｋｇ、４．６８ｍｇ／ｋｇ、４．６９ｍｇ／ｋｇ、４．７０ｍｇ／ｋｇ、４．７１ｍｇ／ｋｇ、４．７２ｍｇ／ｋｇ、４．７３ｍｇ／ｋｇ、４．７４ｍｇ／ｋｇ、４．７５ｍｇ／ｋｇ、４．７６ｍｇ／ｋｇ、４．７７ｍｇ／ｋｇ、４．７８ｍｇ／ｋｇ、４．７９ｍｇ／ｋｇ、４．８０ｍｇ／ｋｇ、４．８１ｍｇ／ｋｇ、４．８２ｍｇ／ｋｇ、４．８３ｍｇ／ｋｇ、４．８４ｍｇ／ｋｇ、４．８５ｍｇ／ｋｇ、４．８６ｍｇ／ｋｇ、４．８７ｍｇ／ｋｇ、４．８８ｍｇ／ｋｇ、４．８９ｍｇ／ｋｇ、４．９０ｍｇ／ｋｇ、４．９１ｍｇ／ｋｇ、４．９２ｍｇ／ｋｇ、４．９３ｍｇ／ｋｇ、４．９４ｍｇ／ｋｇ、４．９５ｍｇ／ｋｇ、４．９６ｍｇ／ｋｇ、４．９７ｍｇ／ｋｇ、４．９８ｍｇ／ｋｇ、４．９９ｍｇ／ｋｇ、５．００ｍｇ／ｋｇ、５．０１ｍｇ／ｋｇ、５．０２ｍｇ／ｋｇ、５．０３ｍｇ／ｋｇ、５．０４ｍｇ／ｋｇ、５．０５ｍｇ／ｋｇ、５．０６ｍｇ／ｋｇ、５．０７ｍｇ／ｋｇ、５．０８ｍｇ／ｋｇ、５．０９ｍｇ／ｋｇ、５．１０ｍｇ／ｋｇ、５．１１ｍｇ／ｋｇ、５．１２ｍｇ／ｋｇ、５．１３ｍｇ／ｋｇ、５．１４ｍｇ／ｋｇ、５．１５ｍｇ／ｋｇ、５．１６ｍｇ／ｋｇ、５．１７ｍｇ／ｋｇ、５．１８ｍｇ／ｋｇ、５．１９ｍｇ／ｋｇ、５．２０ｍｇ／ｋｇ、５．２１ｍｇ／ｋｇ、５．２２ｍｇ／ｋｇ、５．２３ｍｇ／ｋｇ、５．２４ｍｇ／ｋｇ、５．２５ｍｇ／ｋｇ、５．２６ｍｇ／ｋｇ、５．２７ｍｇ／ｋｇ、５．２８ｍｇ／ｋｇ、５．２９ｍｇ／ｋｇ、５．３０ｍｇ／ｋｇ、５．３１ｍｇ／ｋｇ、５．３２ｍｇ／ｋｇ、５．３３ｍｇ／ｋｇ、５．３４ｍｇ／ｋｇ、５．３５ｍｇ／ｋｇ、５．３６ｍｇ／ｋｇ、５．３７ｍｇ／ｋｇ、５．３８ｍｇ／ｋｇ、５．３９ｍｇ／ｋｇ、５．４０ｍｇ／ｋｇ、５．４１ｍｇ／ｋｇ、５．４２ｍｇ／ｋｇ、５．４３ｍｇ／ｋｇ、５．４４ｍｇ／ｋｇ、５．４５ｍｇ／ｋｇ、５．４６ｍｇ／ｋｇ、５．４７ｍｇ／ｋｇ、５．４８ｍｇ／ｋｇ、５．４９ｍｇ／ｋｇ、５．５０ｍｇ／ｋｇ、５．５１ｍｇ／ｋｇ、５．５２ｍｇ／ｋｇ、５．５３ｍｇ／ｋｇ、５．５４ｍｇ／ｋｇ、５．５５ｍｇ／ｋｇ、５．５６ｍｇ／ｋｇ、５．５７ｍｇ／ｋｇ、５．５８ｍｇ／ｋｇ、５．５９ｍｇ／ｋｇ、５．６０ｍｇ／ｋｇ、５．６１ｍｇ／ｋｇ、５．６２ｍｇ／ｋｇ、５．６３ｍｇ／ｋｇ、５．６４ｍｇ／ｋｇ、５．６５ｍｇ／ｋｇ、５．６６ｍｇ／ｋｇ、５．６７ｍｇ／ｋｇ、５．６８ｍｇ／ｋｇ、５．６９ｍｇ／ｋｇ、５．７０ｍｇ／ｋｇ、５．７１ｍｇ／ｋｇ、５．７２ｍｇ／ｋｇ、５．７３ｍｇ／ｋｇ、５．７４ｍｇ／ｋｇ、５．７５ｍｇ／ｋｇ、５．７６ｍｇ／ｋｇ、５．７７ｍｇ／ｋｇ、５．７８ｍｇ／ｋｇ、５．７９ｍｇ／ｋｇ、５．８０ｍｇ／ｋｇ、５．８１ｍｇ／ｋｇ、５．８２ｍｇ／ｋｇ、５．８３ｍｇ／ｋｇ、５．８４ｍｇ／ｋｇ、５．８５ｍｇ／ｋｇ、５．８６ｍｇ／ｋｇ、５．８７ｍｇ／ｋｇ、５．８８ｍｇ／ｋｇ、５．８９ｍｇ／ｋｇ、５．９０ｍｇ／ｋｇ、５．９１ｍｇ／ｋｇ、５．９２ｍｇ／ｋｇ、５．９３ｍｇ／ｋｇ、５．９４ｍｇ／ｋｇ、５．９５ｍｇ／ｋｇ、５．９６ｍｇ／ｋｇ、５．９７ｍｇ／ｋｇ、５．９８ｍｇ／ｋｇ、５．９９ｍｇ／ｋｇ、６．００ｍｇ／ｋｇ、６．０１ｍｇ／ｋｇ、６．０２ｍｇ／ｋｇ、６．０３ｍｇ／ｋｇ、６．０４ｍｇ／ｋｇ、６．０５ｍｇ／ｋｇ、６．０６ｍｇ／ｋｇ、６．０７ｍｇ／ｋｇ、６．０８ｍｇ／ｋｇ、６．０９ｍｇ／ｋｇ、６．１０ｍｇ／ｋｇ、６．１１ｍｇ／ｋｇ、６．１２ｍｇ／ｋｇ、６．１３ｍｇ／ｋｇ、６．１４ｍｇ／ｋｇ、６．１５ｍｇ／ｋｇ、６．１６ｍｇ／ｋｇ、６．１７ｍｇ／ｋｇ、６．１８ｍｇ／ｋｇ、６．１９ｍｇ／ｋｇ、６．２０ｍｇ／ｋｇ、６．２１ｍｇ／ｋｇ、６．２２ｍｇ／ｋｇ、６．２３ｍｇ／ｋｇ、６．２４ｍｇ／ｋｇ、６．２５ｍｇ／ｋｇ、６．２６ｍｇ／ｋｇ、６．２７ｍｇ／ｋｇ、６．２８ｍｇ／ｋｇ、６．２９ｍｇ／ｋｇ、６．３０ｍｇ／ｋｇ、６．３１ｍｇ／ｋｇ、６．３２ｍｇ／ｋｇ、６．３３ｍｇ／ｋｇ、６．３４ｍｇ／ｋｇ、６．３５ｍｇ／ｋｇ、６．３６ｍｇ／ｋｇ、６．３７ｍｇ／ｋｇ、６．３８ｍｇ／ｋｇ、６．３９ｍｇ／ｋｇ、６．４０ｍｇ／ｋｇ、６．４１ｍｇ／ｋｇ、６．４２ｍｇ／ｋｇ、６．４３ｍｇ／ｋｇ、６．４４ｍｇ／ｋｇ、６．４５ｍｇ／ｋｇ、６．４６ｍｇ／ｋｇ、６．４７ｍｇ／ｋｇ、６．４８ｍｇ／ｋｇ、６．４９ｍｇ／ｋｇ、または６．５０ｍｇ／ｋｇであってよく、ここで、用量は、ラパマイシンなどの免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアのｍｇとして示される。

【0108】

ペグシチカーゼ（すなわち、ペガドリカーゼ）などのウリカーゼを含む組成物について本明細書において提供される用量のうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて用いることができる。ラパマイシンなどの免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物について本明細書において提供される用量のうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて用いることができる。抗炎症性治療剤を含む組成物について本明細書において提供される用量のうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて用いることができる。輸注反応治療剤を含む組成物について本明細書において提供される用量のうちのいずれか１つを、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つにおいて用いることができる。一般に、対象に投与されるべき用量に言及する場合、当該用量は、ラベル用量である。したがって、本明細書において提供される方法または組成物のうちのいずれか１つにおいて、用量は、ラベル用量である。

【0109】

本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つのいくつかの態様において、本明細書において提供される組成物のうちのいずれかを対象に投与するための注入ラインに注入（prime）するために、さらなる容積（注入（prime）容積）を用いてもよい。

【0110】

本明細書において提供されるのは、多数の可能な投与スケジュールである。したがって、本明細書において提供される対象のうちのいずれか１つを、本明細書において提供される投与スケジュールのうちのいずれか１つに従って処置することができる。例として、本明細書において提供される対象のうちのいずれか１つを、ペグ化ウリカーゼなどのウリカーゼを含む組成物、および／またはラパマイシンなどの免疫抑制剤を含む合成ナノキャリアを含む組成物、および／または抗炎症性治療剤を含む組成物、および／または輸注反応治療剤を含む組成物で、これらの投与スケジュールのうちのいずれか１つに従って処置することができる。

【0111】

提供される処置方法のうちのいずれか１つの組成物の投与の様式は、静脈内注入などの静脈内投与によるものであってよく、これは、例えば、約１時間にわたって行うことができる。加えて、本明細書において提供される処置の方法のうちのいずれか１つはまた、ウリカーゼなどの尿酸低下治療剤または抗痛風フレア予防処置などの、さらなる治療剤の投与を含んでもよい。さらなる治療剤の投与は、本明細書において提供される適用可能な処置レジメンおよび／または投与の様式のうちのいずれか１つに従う。

【0112】

好ましくは、いくつかの態様において、ラパマイシンなどの免疫抑制剤を含む合成ナノキャリア組成物と、ペグ化ウリカーゼなどのウリカーゼを含む組成物との組み合わせによる処置は、合成ナノキャリア組成物の３回の用量を、ウリカーゼ含有組成物と併せて含み、その後に、ウリカーゼの２回の用量を、免疫抑制剤を含む合成ナノキャリア組成物などの免疫抑制剤を含む組成物の併用投与なしで、さらなる治療剤の併用投与を用いてまたはこれを用いずに、含むことができる。かかる態様において、各々の用量は、２～４週間毎に投与することができる。一態様において、本明細書において提供される対象のいずれか１つが、１か月に１回、３か月にわたり、合成ナノキャリア組成物の３回の用量をウリカーゼ含有組成物と併用して投与される方法が提供される。別の態様において、この方法は、ウリカーゼ含有組成物の２、３、４、５、６、７、８、９または１０回またはそれより多くの月毎の用量を、単独で、または免疫抑制剤を含む合成ナノキャリア組成物などの免疫抑制剤もしくはさらなる治療剤の併用投与なしで投与することをさらに含む。本明細書において提供される方法のうちのいずれか１つのいくつかの態様において、尿酸のレベルは、対象において、処置期間の前、その間、および／またはその後における１つ以上の時点において測定される。

【0113】

対象
本明細書において提供される対象は、本明細書において提供される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つに従う処置を必要としていてもよい。かかる対象として、上昇した血清尿酸レベルまたは尿酸沈着を有するものが挙げられる。かかる対象として、高尿酸血症を有するものが挙げられる。本明細書において提供されるような処置を必要とする対象を決定し得ることは、医師の技術の範囲内である。

【0114】

いくつかの態様において、提供される方法のうちのいずれか１つにおいて提供されるような処置のための対象のうちのいずれか１つは、痛風または痛風に関連する状態または本明細書において提供されるような別の状態を有する。いくつかの態様において、提供される方法のうちのいずれか１つにおいて提供されるような処置のための対象のうちのいずれか１つは、痛風フレアを既に有しているか、これを有することが予測される。

【0115】

いくつかの態様において、対象は、痛風に関連するびらん性骨疾患、痛風に関連する肝硬変もしくは脂肪性肝炎、または内臓（visceral）痛風を有するか、またはこれを有する危険性がある。
いくつかの態様において、対象は、上昇した尿酸レベル、例えば、上昇した血漿または血清尿酸レベルを有するか、またはこれを有する危険性がある。尿酸の血中レベルが生理学的な溶解度の限界を超え得る場合、尿酸は、関節を含む組織において結晶化し得、痛風および痛風に関連する状態を引き起こし得る。

【0116】

いくつかの態様において、≧５ｍｇ／ｄＬ、≧６ｍｇ／ｄＬ、または≧７ｍｇ／ｄＬの血清尿酸レベルは、本明細書において記載される方法または組成物またはキットのうちのいずれか１つによる処置のための候補であり得ることの指標である。いくつかの態様において、かかる対象は、≧６ｍｇ／ｄＬ、例えば、６．１ｍｇ／ｄＬ～１５ｍｇ／ｄＬ、６．１ｍｇ／ｄＬ～１０ｍｇ／ｄＬ、７ｍｇ／ｄＬ～１５ｍｇ／ｄＬ、７ｍｇ／ｄＬ～１０ｍｇ／ｄＬ、８ｍｇ／ｄＬ～１５ｍｇ／ｄＬ、８ｍｇ／ｄＬ～１０ｍｇ／ｄＬ、９ｍｇ／ｄＬ～１５ｍｇ／ｄＬ、９ｍｇ／ｄＬ～１０ｍｇ／ｄＬ、１０ｍｇ／ｄＬ～１５ｍｇ／ｄＬ、または１１ｍｇ／ｄＬ～１４ｍｇ／ｄＬの尿酸の血清レベルを有する。いくつかの態様において、対象は、約６．１ｍｇ／ｄＬ、６．２ｍｇ／ｄＬ、６．３ｍｇ／ｄＬ、６．４ｍｇ／ｄＬ、６．５ｍｇ／ｄＬ、６．７ｍｇ／ｄＬ、６．８ｍｇ／ｄＬ、６．９ｍｇ／ｄＬ、７．０ｍｇ／ｄＬ、７．１ｍｇ／ｄＬ、７．２ｍｇ／ｄＬ、７．３ｍｇ／ｄＬ、７．４ｍｇ／ｄＬ、７．５ｍｇ／ｄＬ，７．６ｍｇ／ｄＬ、７．７ｍｇ／ｄＬ、７．８ｍｇ／ｄＬ、７．９ｍｇ／ｄＬ、８．０ｍｇ／ｄＬ、８．１ｍｇ／ｄＬ、８．２ｍｇ／ｄＬ、８．３ｍｇ／ｄＬ、８．４ｍｇ／ｄＬ、８．５ｍｇ／ｄＬ、８．６ｍｇ／ｄＬ、８．７ｍｇ／ｄＬ、８．８ｍｇ／ｄＬ、８．９ｍｇ／ｄＬ、９．０ｍｇ／ｄＬ、９．１ｍｇ／ｄＬ、９．２ｍｇ／ｄＬ、９．３ｍｇ／ｄＬ、９．４ｍｇ／ｄＬ、９．５ｍｇ／ｄＬ、９．６ｍｇ／ｄＬ、９．７ｍｇ／ｄＬ、９．８ｍｇ／ｄＬ、９．９ｍｇ／ｄＬ、１０．０ｍｇ／ｄＬ、１０．１ｍｇ／ｄＬ、１０．２ｍｇ／ｄＬ、１０．３ｍｇ／ｄＬ、１０．４ｍｇ／ｄＬ、１０．５ｍｇ／ｄＬ、１０．６ｍｇ／ｄＬ、１０．７ｍｇ／ｄＬ、１０．８ｍｇ／ｄＬ、１０．９ｍｇ／ｄＬ、１１．０ｍｇ／ｄＬ、１１．１ｍｇ／ｄＬ、１１．２ｍｇ／ｄＬ、１１．３ｍｇ／ｄＬ、１１．４ｍｇ／ｄＬ、１１．５ｍｇ／ｄＬ、１１．６ｍｇ／ｄＬ、１１．７ｍｇ／ｄＬ、１１．８ｍｇ／ｄＬ、１１．９ｍｇ／ｄＬ、１２．０ｍｇ／ｄＬ、１２．１ｍｇ／ｄＬ、１２．２ｍｇ／ｄＬ、１２．３ｍｇ／ｄＬ、１２．４ｍｇ／ｄＬ、１２．５ｍｇ／ｄＬ、１２．６ｍｇ／ｄＬ、１２．７ｍｇ／ｄＬ、１２．８ｍｇ／ｄＬ、１２．９ｍｇ／ｄＬ、１３．０ｍｇ／ｄＬ、１３．１ｍｇ／ｄＬ、１３．２ｍｇ／ｄＬ、１３．３ｍｇ／ｄＬ、１３．４ｍｇ／ｄＬ、１３．５ｍｇ／ｄＬ、１３．６ｍｇ／ｄＬ、１３．７ｍｇ／ｄＬ、１３．８ｍｇ／ｄＬ、１３．９ｍｇ／ｄＬ、１４．０ｍｇ／ｄＬ、１４．１ｍｇ／ｄＬ、１４．２ｍｇ／ｄＬ、１４．３ｍｇ／ｄＬ、１４．４ｍｇ／ｄＬ、１４．５ｍｇ／ｄＬ、１４．６ｍｇ／ｄＬ、１４．７ｍｇ／ｄＬ、１４．８ｍｇ／ｄＬ、１４．９ｍｇ／ｄＬ、１５．０ｍｇ／ｄＬまたはそれより高い尿酸の血清レベルを有する。いくつかの態様において、対象は、５．０ｍｇ／ｄＬ、５．１ｍｇ／ｄＬ、５．２ｍｇ／ｄＬ、５．３ｍｇ／ｄＬ、５．４ｍｇ／ｄＬ、５．５ｍｇ／ｄＬ、５．６ｍｇ／ｄＬ、５．７ｍｇ／ｄＬ、５．８ｍｇ／ｄＬ、５．９ｍｇ／ｄＬ、６．０ｍｇ／ｄＬ、６．１ｍｇ／ｄＬ、６．２ｍｇ／ｄＬ、６．３ｍｇ／ｄＬ、６．４ｍｇ／ｄＬ、６．５ｍｇ／ｄＬ、６．６ｍｇ／ｄＬ、６．７ｍｇ／ｄＬ、６．８ｍｇ／ｄＬ、６．９ｍｇ／ｄＬ、または７．０ｍｇ／ｄＬの血漿または血清尿酸レベルを有する。いくつかの態様において、対象は、５．０ｍｇ／ｄＬ、５．１ｍｇ／ｄＬ、５．２ｍｇ／ｄＬ、５．３ｍｇ／ｄＬ、５．４ｍｇ／ｄＬ、５．５ｍｇ／ｄＬ、５．６ｍｇ／ｄＬ、５．７ｍｇ／ｄＬ、５．８ｍｇ／ｄＬ、５．９ｍｇ／ｄＬ、６．０ｍｇ／ｄＬ、６．１ｍｇ／ｄＬ、６．２ｍｇ／ｄＬ、６．３ｍｇ／ｄＬ、６．４ｍｇ／ｄＬ、６．５ｍｇ／ｄＬ、６．６ｍｇ／ｄＬ、６．７ｍｇ／ｄＬ、６．８ｍｇ／ｄＬ、６．９ｍｇ／ｄＬ、または７．０ｍｇ／ｄＬより高いかまたはこれに等しい血漿または血清尿酸レベルを有する。

【0117】

いくつかの態様において、対象は、高尿酸血症を有するか、またはこれを有する危険性がある。いくつかの態様において、対象は、痛風、急性痛風、急性間欠性痛風、痛風性関節炎、急性痛風性関節炎、急性痛風性関節症、急性多関節型痛風、反復性痛風性関節炎、慢性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、結節性痛風、慢性結節性痛風、慢性進行性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、慢性多関節型痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、慢性痛風性関節症（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、特発性痛風、特発性慢性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、原発性痛風、慢性原発性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、難治性痛風、例えば慢性難治性痛風、体軸性痛風性関節症、痛風発作、痛風フレア、足部痛風（すなわち、母趾の単関節性関節炎）、手痛風（すなわち、手の単関節性関節炎）、膝痛風（すなわち、膝の単関節性関節炎）、痛風性滑液包炎, 痛風性脊椎炎, 痛風性滑膜炎, 痛風性腱鞘炎, 腱および靭帯に影響を及ぼす痛風, 鉛誘導性痛風（すなわち、鉛中毒性（saturnine）痛風）、薬物誘導性痛風、腎機能低下に起因する痛風、腎臓疾患に起因する痛風、腎機能低下に起因する慢性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、腎臓疾患に起因する慢性痛風（痛風結節を伴うかまたはこれを伴わない）、痛風に関連するびらん性骨疾患、痛風に関連する脳卒中、痛風に関連する血管粥腫、痛風に関連する肝硬変または脂肪性肝炎、肝臓に関連する痛風、偶発性および反復性痛風、痛風における膵臓への傷害に関連する糖尿病、痛風により増悪した一般的な炎症性疾患、他の続発性痛風、または不特定の痛風を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0118】

いくつかの態様において、対象は、腎臓系に関連する状態、例えば、痛風に起因する尿路の結石、尿酸尿路結石症、尿酸腎結石症、尿酸腎石、痛風性腎症、急性痛風性腎症、慢性痛風性腎症、尿酸（urate）腎症、尿酸（uric acid）腎症、および痛風性間質性腎症を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0119】

いくつかの態様において、対象は、神経系に関連する状態、例えば、痛風に起因する末梢自律神経ニューロパシー、痛風性ニューロパシー、痛風性魔性ニューロパシー、痛風性絞扼性ニューロパシー、または痛風性神経炎を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0120】

いくつかの態様において、対象は、心血管系に関連する状態、例えば、代謝症候群、高血圧症、肥満、糖尿病、心筋梗塞、脳卒中、脂質異常症、高トリグリセリド血症、インスリン耐性／高血糖症、冠動脈疾患／冠動脈心疾患、痛風または高尿酸血症に関連する冠動脈の疾患または封鎖、心不全、末梢動脈疾患、脳卒中/脳血管疾患、末梢血管疾患および痛風に起因する心筋症を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0121】

いくつかの態様において、対象は、例えば、痛風性虹彩炎、痛風により引き起こされる眼における炎症性疾患、ドライアイ症候群、眼の充血（red eye）、ぶどう膜炎、眼内圧上昇（intraocular hypertension）、緑内障、および白内障を含む、眼系に関連する状態を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0122】

いくつかの態様において、対象は、例えば、外耳の痛風、痛風性皮膚炎、痛風性湿疹、痛風性脂肪織炎、および汗疹性痛風を含む、皮膚に関連する状態を有するか、またはこれを有する危険性がある。

【0123】

組成物およびキット
本明細書において提供される組成物は、以下を含んでもよい：無機または有機の緩衝化剤（例えば、リン酸、炭酸、酢酸またはクエン酸のナトリウムまたはカリウム塩）およびｐＨ調整剤（例えば、塩酸、水酸化ナトリウムまたはカリウム、クエン酸または酢酸の塩、アミノ酸およびそれらの塩）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、アルファ－トコフェロール）、界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン９－１０ノニルフェノール、デオキシコール酸ナトリウム）、溶解および／または凍結／溶解（lyo）安定化剤（例えば、スクロース、ラクトース、マンニトール、トレハロース）、浸透圧調整剤（例えば、塩または糖）、抗菌剤（例えば、安息香酸、フェノール、ゲンタマイシン）、消泡剤（例えば、ポリジメチルシロキサン）、保存剤（例えば、チメロサール、２－フェノキシエタノール、ＥＤＴＡ）、ポリマー性安定化剤および粘性調整剤（例えば、ポリビニルピロリドン、ポロキサマー４８８、カルボキシメチルセルロース）および共溶媒（例えば、グリセロール、ポリエチレングリコール、エタノール）。

【0124】

本発明による組成物は、薬学的に受入可能な賦形剤を含んでもよい。組成物は、有用な投与形態に到達するための従来の医薬の製造および配合技術を用いて製造することができる。本発明を実施することにおける使用のために好適な技術は、Handbook of Industrial Mixing：Science and Practice、Edward L. Paul, Victor、A. Atiemo-ObengおよびSuzanne M. Kresta編、2004年、John Wiley & Sons, Inc.；およびPharmaceutics：The Science of Dosage Form Design、第２版、M. E. Auten編、2001年、Churchill Livingstoneにおいて見出すことができる。一態様において、組成物は、注射のための無菌の食塩水溶液中に保存剤と一緒に懸濁される。

【0125】

本発明の組成物は、任意の好適な様式において製造すること、および本発明は、決して、本明細書において記載される方法を用いて生成され得る組成物に限定されるものではないことが、理解されるべきである。適切な製造の方法の選択は、関連する特定の要素の特性に対する注意を必要とし得る。

【0126】

いくつかの態様において、組成物は、無菌条件下において製造されるか、最初にまたは最後に無菌化される。このことは、生じる組成物が無菌かつ非感染性であることを保証し、それにより、非無菌の組成物と比較した場合に、安全性を改善する。このことは、組成物を投与されている対象が、免疫欠損を有するか、感染症を罹患しているか、および／または感染に対して感受性である場合には特に、価値ある安全性の指標を提供する。いくつかの態様において、組成物は、凍結乾燥して、処方戦略に依存して、懸濁液中で、または凍結乾燥粉末として、長期にわたり活性を失うことなく貯蔵することができる。

【0127】

本発明による投与は、多様な経路によるものであってよく、これは、静脈内経路を含むが、これに限定されない。本明細書において言及される組成物は、従来の方法を用いる投与のために、製造および調製することができる。

【0128】

本発明の組成物は、有効量、例えば本明細書において別の場所に記載される有効量において投与することができる。本明細書において提供されるような組成物の用量は、様々な量の本発明による要素を含むことができる。投与のための組成物中に存在する要素の量は、それらの性質、達成されるべき治療上の利益、および他のかかるパラメーターにより変化し得る。投与のための組成物は、本明細書において提供される頻度のうちのいずれか１つに従って投与することができる。

【0129】

本開示の別の側面は、キットに関する。いくつかの態様において、キットは、本明細書において提供される組成物のうちのいずれか１つを含む。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、キットは、１つ以上の抗炎症性治療剤および／または輸注反応治療剤を含む組成物ならびに本明細書において提供される１つ以上の合成ナノキャリア組成物を含む組成物のうちのいずれか１つを含む。キットのうちのいずれか１つは、１つ以上のウリカーゼを含む組成物をさらに含んでもよい。組成物の型の各々は、キット中で、１つの容器中にあっても、１つより多くの容器中にあってもよい。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、容器は、バイアルまたはアンプルである。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、組成物は、後の時点においてそれらを再構成することができるように、別の容器中または同じ容器中で、各々凍結乾燥形態にある。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、組成物は、後の時点でそれらを再構成することができるように、各々が別の容器中または同じ容器中にある凍結懸濁液の形態である。キットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、凍結懸濁液は、ＰＢＳをさらに含む。キットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、キットは、ＰＢＳおよび／または０．９％の塩化ナトリウム、ＵＳＰをさらに含む。

【0130】

提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、キットは、再構成、混合、投与などのための指示をさらに含む。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、指示は、本明細書において記載される方法のうちのいずれか１つの説明を含む。指示は、任意の好適な形態であってよく、例えば、印刷された挿入物またはラベルとしての形態であってよい。提供されるキットのうちのいずれか１つのいくつかの態様において、キットは、組成物をin vivoで対象に送達することができる１つ以上のシリンジまたは他のデバイスをさらに含む。

【0131】

例
例１：ＳＥＬ－２１２臨床治験結果、ヒト
第１ａ相臨床治験
ＳＥＬ－２１２についての第１ａ相臨床治験は、５つのコホートに分けられた、６ｍｇ／ｄｌよりも高くに上昇した血清尿酸レベルを有する２２人の対象における、ペグシチカーゼ単独の漸増用量試験であった。各コホートは、以下の用量レベルにおいてペグシチカーゼの単一の静脈内注入を受けた：コホート＃１については０．１ｍｇ／ｋｇ、コホート＃２については０．２ｍｇ／ｋｇ、コホート＃３については０．４ｍｇ／ｋｇ、コホート＃４については０．８ｍｇ／ｋｇ、およびコホート＃５については１．２ｍｇ／ｋｇ。投与は、最も低い用量から始め、コホート全体が安全に投与された後にのみ、次のコホートを始めた。注入後３０日間の期間の間、対象をモニタリングし、来院は、第７、１４、２１日に行い、治験の最後の来院は第３０日に行った。各患者の血液および血清を、血清尿酸、ＡＤＡ（具体的には、抗ｐｅｇ、抗ウリカーゼおよび抗ペグシチカーゼ）ならびに安全性パラメーターについて評価した。ペグシチカーゼは、重篤な有害効果を示さず、試験された５つの用量レベルにおいて良好に耐用されることが観察された。加えて、ペグシチカーゼが、用量レベルに依存して、各コホートについて、１４～３０日間にわたり、平均血清尿酸レベルを６ｍｇ／ｄｌより低くに迅速に（数時間以内に）低下させてこれを維持することが観察された。動物における前臨床研究と一致して、この第１ａ相治験において、ペグシチカーゼは、全ての対象において、ウリカーゼ特異的ＡＤＡを様々なレベルで誘導した。

【0132】

図３は、治験の開始におけるペグシチカーゼの単一の静脈内注入の後、３０日間の期間の経過の間に異なる測定間隔（第７、１４、２１および３０日）において試験された、第１ａ相臨床治験の５つのコホートの平均血清尿酸レベルを表す。

【0133】

血清尿酸レベルは、基線ならびに第７、１４、２１および３０日において測定し、ウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルは、基線ならびにペグシチカーゼの単一の静脈内注射の後第７、１４および３０日において測定した。第１ａ相臨床治験における第２１日におけるウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルは、測定しなかった。第１ａ相臨床治験からの結果に基づいて、耐用される用量でのペグシチカーゼは、３０日間の期間にわたり、阻害性のウリカーゼ特異的ＡＤＡの不在下において、６ｍｇ／ｄｌの標的より低くまでの血清尿酸の低下を達成してこれを維持することができることが観察された。

【0134】

第１ｂ相臨床治験
６ｍｇ／ｄｌより高い血清尿酸レベルを有する６３人の患者を登録した第１ｂ相臨床治験は１１のコホートに分けた。以下の漸増用量レベルにおけるＳＶＰラパマイシン単独での単一の静脈内注入を、４つのコホートに、低いものから順に投与した。各コホートは７人の患者からなり、彼らを、以下のとおり指定した：コホート＃１（０．０３ｍｇ／ｋｇ）、コホート＃３（０．１ｍｇ／ｋｇ）、コホート＃５（０．３ｍｇ／ｋｇ）およびコホート＃７（０．５ｍｇ／ｋｇ）、集合的にＳＶＰラパマイシンコホート。ＳＶＰ－ラパマイシン単独のコホートに、ＳＶＰラパマイシンの対応する用量レベルを首尾よくかつ安全に投与した後、ペグシチカーゼの固定された用量（０．４ｍｇ／ｋｇ）を組み合わせた。組み合わせを、ＳＶＰラパマイシン注入と共に、ペグシチカーゼ注入に先立って、単一の静脈内注入として連続的に共投与した。６つのコホート（コホートあたり５人の患者）について、コホート指定は以下のとおりであり、これらは、コホート＃２（ＳＶＰラパマイシン０．０３ｍｇ／ｋｇ＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ）、コホート＃４（ＳＶＰラパマイシン０．１ｍｇ／ｋｇ＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ）、コホート＃６（ＳＶＰラパマイシン０．３ｍｇ／ｋｇ＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ）、コホート＃１０（０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ＋４８時間空けて０．０３ｍｇ／ｋｇのＳＶＰラパマイシン）、コホート＃１２（ＳＶＰラパマイシン０．１５ｍｇ／ｋｇ＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ）およびコホート＃１４（ＳＶＰラパマイシン０．１ｍｇ／ｋｇ＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼ）であり、集合的にＳＥＬ－２１２コホートであった。コホート＃９において、０．４ｍｇ／ｋｇの用量レベルにおけるペグシチカーゼ単独の固定された量を、５人の患者に投与し、これは、ペグシチカーゼコホートとして言及される。かかる処置の方法もまた、提供される。注入後３０日間の期間の間、対象をモニタリングし、来院は、第７、１４、２１日に行い、治験の最後の来院は第３０日に行った。。各患者の血液および血清を、血清尿酸、ＡＤＡ（具体的には、抗ＰＥＧ、抗ウリカーゼおよび抗ペグシチカーゼ）ならびに安全性パラメーターについて評価した。第１ｂ相臨床治験の第１の目的は、ＳＶＰラパマイシンの、単独でおよびペグシチカーゼの固定された用量との組み合わせにおける安全性および耐用性を評価することであった。第二の臨床的目的は、ペグシチカーゼ単独の投与と比較した場合に、ペグシチカーゼと共投与されたＳＶＰラパマイシンが、血清尿酸レベルを低下させ、ウリカーゼ特異的ＡＤＡの形成を軽減する能力を評価することであった。

【0135】

図４は、対象が、固定された量のペグシチカーゼ単独（同じ０．４ｍｇ／ｋｇでのペグシチカーゼ）を投与される第１ａ相臨床治験からのコホート＃３の血清尿酸レベルを示す。また最初のグラフにおけるのは、第１ｂ相臨床治験のコホート＃９（ペグシチカーゼ０．４ｍｇ／ｋｇ）からのデータである。このグラフは、２つの別々の研究にわたるデータの再現性を表す。両方のコホートにおいて、血清尿酸の初期の制御（レベルが６ｍｇ／ｄＬより低くに維持されている）が存在するが、第１４日を過ぎると、個体は酵素活性が緩む(loose)。また、図４において、ＳＶＰラパマイシン単独コホートからのデータを呈示する。全ての値は、試験の３０日間全体にわたり本質的に同じであり続け、このことは、ＳＶＰラパマイシン単独が、血清尿酸レベルに対して効果を有さないことを示している。ペグシチカーゼと共投与されたＳＶＰラパマイシンの最も低い用量を投与された、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃２について、試験された５人の対象のうちの４人が、２１日間の治験を通して血清尿酸レベルを６ｍｇ／ｄｌより低くに維持したことが観察された。また、ペグシチカーゼと共投与されたＳＶＰラパマイシンの２番目に低い用量を投与された、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４における５人の対象のうちの４人が、３０日間を通して０．１ｍｇ／ｄｌ未満の血清尿酸のレベルを維持したことが観察された。コホート＃６（ＳＥＬ－２１２コホート）については、（計画された５人のうちの）４人の対象が、２１日間を通して０．１ｍｇ／ｄｌ未満の血清尿酸のレベルを維持し、（計画された５人のうちの）２人の対象が、３０日間を通して０．１ｍｇ／ｄｌ未満の血清尿酸のレベルを維持したことが観察された。比較すると、コホート＃９（ペグシチカーゼコホート）については、５人の対象のうちの４人は、第３０日までに基線の血清尿酸レベルに戻った。

【0136】

図４は、第１ａ相臨床治験のコホート＃３および第１ｂ相臨床治験のコホート＃９（ペグシチカーゼコホート）における各対象についての血清尿酸レベルおよびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを、第１ｂ相臨床治験におけるコホート＃４（ＳＥＬ－２１２コホート）における各対象についての血清尿酸レベルおよびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルとの比較のために示す。第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４との比較を目的として、第１ａ相臨床治験からのコホート＃３を、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃９と共に表す。なぜならば、これらのコホート中の対象は、ペグシチカーゼの同じ固定された用量を投与されるからである。加えて、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４を、図４において表す。なぜならば、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４における対象は、第１ｂ相臨床治験からの３０日間の観察期間のデータが利用可能であったもう一方のＳＥＬ－２１２コホートである第１ｂ相臨床治験におけるコホート＃２における対象が投与されるよりも高い用量のＳＶＰラパマイシンを投与されるからである。

【0137】

図４において表されるとおり、第１ａ相臨床治験からのコホート＃３および第１ｂ相臨床治験からのコホート＃９において、血清尿酸の基線レベルへの回復をもたらす第１４日におけるウリカーゼ特異的ＡＤＡ形成が観察された。比較すると、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４について、試験された５人の対象のうちの４人において、最少のウリカーゼ特異的ＡＤＡ形成と、３０日間を通しての対応する血清尿酸レベルの制御の維持が観察された。第１ａ相臨床治験において、第２１日におけるウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルは、測定しなかった。しかし、第１ａ相臨床治験を実施する経過において、第２１日においてウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを測定することは、第１４日と第３０日との間のかかるレベルの任意の変動をより完全に理解するために有用であろうということを学習した。結果として、第１ｂ相臨床治験については、第２１日におけるウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを測定した。

【0138】

第３０日において血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有しなかったか、または非常に低い血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有した、コホート＃４（ＳＥＬ－２１２コホート）中の対象のうちの３人について、第３０日後のさらなる血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡデータを収集した。第３７日においてこれらの対象のうちの３人全員について、３人の対象のうちの２人について第４２日または第４４日において再び、データを収集した。これらの３人の対象の各々は、適用可能である場合には、第３７日、第４２日または第４４日において、ウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有していないか、非常に低いウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有した。血清尿酸レベルは、３人の対象全員において、第３７日において、基線の下のままであった。第４２日または第４４日のデータが利用可能であった２人の対象に関して、血清尿酸レベルは、測定された最後の時点までに、基線に近づくかまたはこれを超えた。第１ｂ相臨床治験データからの観察に基づいて、ＳＥＬ－２１２は、コホート＃４中の対象の大部分において、少なくとも３０日間にわたり尿酸レベルを制御することが可能であることが見出された。

【0139】

組み合わせに基づいて、合計で８５人の対象に、第１ａ相および第１ｂ相臨床治験に関して、ＳＥＬ－２１２（ＳＶＰラパマイシンおよびペグシチカーゼ）、ＳＶＰラパマイシン単独またはペグシチカーゼ単独のいずれかを投与した。ＳＥＬ－２１２およびその構成成分であるＳＶＰラパマイシンおよびペグシチカーゼが、良好に耐用されることが、一般に観察された。いずれも第１相臨床治験において、合計で４回の重篤な有害事象、またはＳＡＥが存在した。全てのＳＡＥを完全に解決した。

【0140】

図５は、第１ａ相臨床治験のコホート＃３および第１ｂ相臨床治験のコホート＃９（ペグシチカーゼコホート）における各対象についての血清尿酸レベルおよびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを、第１ｂ相臨床治験におけるコホート＃４（ＳＥＬ－２１２コホート）およびコホート＃６（ＳＥＬ－２１２コホート）における各対象についての血清尿酸レベルおよびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルとの比較のために示す。第１ａ相臨床治験からのコホート＃３をまた、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４およびコホート＃６に対する比較を目的として、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃９と共に表す。なぜならば、これらのコホート中の対象は、ペグシチカーゼの同じ固定された用量を投与されるからである。加えて、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４を表す。なぜならば、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃４は、第１ｂ相臨床治験におけるコホート＃２における対象が投与されるよりも高い用量のＳＶＰ－ラパマイシンを投与されるからである。また含められるのは、第１ｂ相臨床治験からのコホート＃６である。なぜならば、これらの対象は、今日までに試験された最も高い（コホート＃２および＃４のいずれよりも高い）用量のＳＶＰ－ラパマイシンを投与されるからである。

【0141】

図６は、第１ｂ相臨床治験のコホート＃６におけるＳＥＬ－２１２の効力の、第１ｂ相臨床治験のコホート＃５との非対等（non-head-to-head）な比較、および、KRYSTEXXA（登録商標）の２つの複製の無作為化した二重盲検のプラセボ対照臨床治験からのデータ（2011年におけるJournal of the American Medical Associationにおいて報告されるとおり）を表す。これら２つのKRYSTEXXA（登録商標）臨床治験は、隔週で（biweekly）KRYSTEXXA（登録商標）の用量を投与された８５人の患者、KRYSTEXXA（登録商標）の１か月１回の用量を投与された８４人の患者、およびプラセボを投与された４３人の患者を含んだ。

【0142】

KRYSTEXXA（登録商標）は、隔週での用量レジメンにおける難治性痛風の処置について承認されており、一方、KRYSTEXXA（登録商標）の１か月１回の用量レジメンは、上市について承認されていない。左のグラフは、１か月１回の用量を投与されたKRYSTEXXA（登録商標）臨床治験における対象のコホートからのKrystexxa（登録商標）の最初の用量の後４週間の期間にわたるデータを表す。

【0143】

図６において白丸で示されるプラセボ対照の対象は、４週間全体にわたって、６ｍｇ／ｄｌより高い尿酸レベルを有した。KRYSTEXXA（登録商標）処置された対象であって、３か月目および６か月目において時間のうちの８０％にわたり６ｍｇ／ｄｌより低い尿酸レベルの維持により定義されるとおり、応答者となるように進んだものは、黒丸で示す。KRYSTEXXA（登録商標）処置された対象であって、３か月目および６か月目において時間のうちの８０％にわたり６ｍｇ／ｄｌより低い尿酸レベルを維持することができないことにより定義されるとおり、非応答者となるように進んだものは、黒三角で示す。１か月１回の投与のコホートにおいて、KRYSTEXXA（登録商標）処置された対象のうちの３５％のみが、応答者として分類された。４週間目においてすら、平均尿酸レベルは、対象のうちの６５％を表す非応答者において６ｍｇ／ｄｌより高く、応答者においては４ｍｇ／ｄｌより高かった。全てのKRYSTEXXA（登録商標）処置された対象のうちょの８９％が、ＡＤＡを生じた。比較すると、図６における右のグラフは、ＳＶＰ－ラパマイシン単独の単一の用量を投与された第１ｂ相臨床治験のコホート＃５、およびＳＥＬ－２１２の単一の用量を投与された第１ｂ相臨床治験のコホート＃６からのデータを表す。ＳＥＬ－２１２で処置された第１ｂ相臨床治験のコホート＃６における５人の対象は全て、３０日間を通して０．１ｍｇ／ｄｌ未満の血清尿酸のレベルを維持した。ＳＶＰ－ラパマイシン単独で処置された第１ｂ相臨床治験のコホート＃５における対象は、かかるレベルが３０日間の期間にわたり比較的一定を維持したことから、尿酸レベルの著しい低下を経験した。また示されるのは、ＳＶＰ－ラパマイシン単独の単一の用量を投与された第１ｂ相臨床治験のコホート＃５からのデータの、ペグシチカーゼ単独を投与された第１ｂ相臨床治験のコホート＃９との比較である。

【0144】

上の比較は、第１ｂ相臨床治験のコホート＃６の結果を評価することにおいて有用であると考えられる一方で、第１ｂ相臨床治験およびKRYSTEXXA（登録商標）の臨床治験は、異なる研究者により異なる場所において実施された別個の治験であった。加えて、例えば、KRYSTEXXA（登録商標）臨床治験は、実質的な数の難治性痛風を有する患者を含む二重盲検治験であり、一方、第１ｂ相臨床治験は、盲検化していない様式において、より少数の、上昇した尿酸レベルを有する対象において、ＳＥＬ－２１２を評価したことを含む、実質的な差異が存在した。さらに、ＳＥＬ－２１２は複数用量の臨床治験においては評価されていないので、KRYSTEXXA（登録商標）の最初の注射の後４週間の期間によるＳＥＬ－２１２の効力のみを比較し得た。

【0145】

第３０日の後で、第３０日において血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有しなかったか、または非常に低い血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有したコホート＃４（ＳＥＬ－２１２コホート）中の対象のうちの３人について、さらなる血清尿酸およびウリカーゼ特異的ＡＤＡデータを収集した。第３７日においてこれらの対象のうちの３人全員について、第４２日または第４４日において３人の対象のうちの２人について再び、データを収集した。これらの３人の対象の各々は、適用可能である場合には、第３７日、第４２日または第４４日において、ウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有していないか、非常に低いウリカーゼ特異的ＡＤＡレベルを有した。血清尿酸レベルは、３人の対象全員において、第３７日において、基線の下のままであった。第４２日または第４４日のデータが利用可能であった２人の対象に関して、血清尿酸レベルは、測定された最後の時点までに、基線に近づくかまたはこれを超えた。

【0146】

例２－第２相臨床治験
ここで表されるのは、ＳＥＬ－２１２の第２相臨床治験である。本研究は、ＳＥＬ－０３７の用量と併用して投与される複数の用量のＳＥＬ－２１２からなる。ＳＥＬ－２１２は、ＳＥＬ－０３７とＳＥＬ－１１０との組み合わせである。ＳＥＬ－０３７は、ペグシチカーゼ（組み換えペグ化カンジダ尿酸オキシダーゼ）を含む。ＳＥＬ－１１０は、ラパマイシンを被包するＰＬＡ（ポリ（Ｄ，Ｌ－ラクチド））およびＰＬＡ－ＰＥＧ（ポリ（Ｄ，Ｌ-ラクチド）－ブロック－ポリ（エチレン－グリコール））を含むナノキャリアである。

【0147】

ＳＥＬ－０３７は、リン酸バッファーおよび賦形剤としてマンニトールと共に提供され得る。投与の前に、ウリカーゼタンパク質として測定される６ｍｇの凍結乾燥されたＳＥＬ－０３７を、１．１ｍｌの注射用無菌水、ＵＳＰ（米国薬局方）で再構成することができ、これは、６ｍｇ／ｍＬの濃縮溶液を形成する。十分な容積の再構成された、ウリカーゼタンパク質として測定される０．２ｍｇ／ｋｇまたは０．４ｍｇ／ｋｇにおけるＳＥＬ－０３７を、１００ｍＬの０．９％の注射用塩化ナトリウム、ＵＳＰ中で希釈し、単一の静脈内注入として、注入ポンプにより６０分間かけて投与した。

【0148】

ＳＥＬ－１１０は、ラパマイシン含有量に基づいて２ｍｇ／ｍＬのＰＢＳ中の懸濁液として提供される。ｍｇ／ｋｇ単位でのＳＥＬ－１１０の適切な量をシリンジ中に引き込み、シリンジ注入ポンプによりＩＶ注入として投与する。対象がコホート３、４、５、６、７および８の一部である場合は、ＳＥＬ－０３７の前にＳＥＬ－１１０を投与する。ＳＥＬ－１１０は、シリンジ注入ポンプにより、５５分間の期間にわたりある用量の容積を送達するために十分な単一の安定した速度で、１２５ｍＬの生理食塩水の６０分間注入と同時に送達し、次いで、６０分のマークにおいてＳＥＬ－０３７注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を開始する。

【0149】

９６人の対象を、１１の用量コホートに分割した。コホート１は、ＳＥＬ－０３７（ペグシチカーゼ単独、０．２ｍｇ／ｋｇ）を投与され、コホート２は、ＳＥＬ－０３７（ペグシチカーゼ単独、０．４ｍｇ／ｋｇ）を投与され、コホート３は、ＳＥＬ－２１２（０．０５ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．２ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート４は、ＳＥＬ－２１２（０．０５ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート５は、ＳＥＬ－２１２（０．０８ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．２ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート６は、ＳＥＬ－２１２（０．０８ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート７は、ＳＥＬ－２１２（０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．２ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート８は、ＳＥＬ－２１２（０．１ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート１０は、ＳＥＬ－２１２（０．１２５ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート１１は、ＳＥＬ－２１２（０．１５ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．２ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与され、コホート１２は、ＳＥＬ－２１２（０．１５ｍｇ／ｋｇのＳＥＬ－１１０＋０．４ｍｇ／ｋｇのペグシチカーゼと共に）を投与される。

【0150】

対象の分布
全ての登録された対象を、４つ全てのコホートについて合計が１２人の対象に達した場合に、各コホートが３人の対象を有するように、初めに４つのコホートに無作為化する。少なくとも１回の処置サイクルの完了後に、対象の経験を評価し、その後、全てのコホートに対して登録をオープンにする。将来的な登録は、全てのオープンなコホートの間で無作為化する。

【0151】

研究薬処置のための前投薬
全ての対象は、研究薬を投与される前の晩（１２ｈ±２ｈ）、および研究薬を投与される２±１時間前（すなわち、コホート１および２についてはＳＥＬ－０３７、またはコホート３～８、１０、１１および１２についてはＳＥＬ－１１０の前）に再び、１８０ｍｇのフェキソフェナジンを経口で投与された。加えて、彼らはまた、メチルプレドニゾロン４０ｍｇ（または同等の薬物、例えばプレドニゾロン５０ｍｇのＩＶまたはデキサメタゾン８ｍｇのＩＶ）を、研究薬を投与される１±０．５時間前（すなわち、コホート１および２についてはＳＥＬ－０３７、またはコホート３～８、１０、１１および１２についてはＳＥＬ－１１０の前）に静脈内投与された。このことは、研究薬の全ての処置の投与について行った（パートＡ、処置期間１～３、およびパートＢについては、処置期間４および５）。

【0152】

痛風フレアのための前投薬
全ての包含または除外の基準を満たした全ての対象に、痛風フレア予防のための前投薬を投与した。レジメンは、研究薬の最初の投与の１週間前に始まり、対象が臨床研究において登録されている限り継続した。対象に、コルヒチン１．２ｍｇを、単回投与量として投与した。次いで、彼らに、治験における彼らの参加の残り期間にわたり、コルヒチン０．６ｍｇのＱＤを続けた。コルヒチンに対する禁忌が存在した場合、対象に、イブプロフェン６００ｍｇのＴＩＤまたは同等の用量のＮＳＡＩＤを投与した。コルヒチンに対する、およびＮＳＡＩＤに対する禁忌が存在する場合、対象には、痛風フレアのための前投薬を投与しなかった。痛風フレア予防投薬は、対象が臨床研究において登録されている限り継続した。コルヒチンに対する禁忌に起因して、ＮＳＡＩＤを痛風フレア予防投薬として投与され始めた対象には、対象が研究において登録している限り、ＮＳＡＩＤを投与し続けた。

【0153】

コホート３、コホート４、コホート５、コホート６、コホート７、コホート８、コホート１０、コホート１１、およびコホート１２についての処置の期間
処置期間１－パートＡ
対象を、投与の４５日間以内にスクリーニングした。彼らが包含／除外の基準を満たし、全ての評価が受入可能であると考えられる場合、彼らに、痛風フレアの予防のための前投薬を開始するように指示した（日時および薬物、第－７日）。研究薬の最初の投与の日を、第０日と指定した。コホート３、４、５、６、７および８に割り当てられた適格な対象に、ＳＥＬ－１１０の単一のＩＶ注入を投与した（ｍｇ／ｋｇ単位の用量）。シリンジ注入ポンプにより、５５分間の期間にわたりある用量の容積を送達するために十分な単一の安定した速度で、ＳＥＬ-１１０を送達した。ＳＥＬ－１１０の投与と同時に、対象に、１２５ｍＬの生理食塩水を６０分間にわたり投与した。この後に（±３分間）、注入ポンプにより送達される、１００ｍＬの生理食塩水中に希釈されたＳＥＬ－０３７の注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を、６０分間にわたり送達した。対象は、安全性評価およびＰＫ採血のために、ＳＥＬ－１１０の注入の開始後９時間にわたり病院に滞在し続けた。対象は、処置期間１、第１、７、１４、２１日においてＰＫおよびＰＤ採血のために、および処置期間１、第７、１４、２１日において安全性および抗体採血のために、再来した。

【0154】

処置期間２－パートＡ
処置期間２、第０日の朝に、対象は、研究薬の投与のために来院した。コホート３、４、５、６、７および８に割り当てられた適格な対象に、ＳＥＬ－１１０の単一のＩＶ注入を投与した（ｍｇ／ｋｇ単位の用量）。シリンジ注入ポンプにより、５５分間の期間にわたりある用量の容積を送達するために十分な単一の安定した速度で、ＳＥＬ-１１０を送達した。ＳＥＬ－１１０の投与と同時に、対象に、１２５ｍＬの生理食塩水を６０分間にわたり投与した。この後に（±３分間）、注入ポンプにより送達される、１００ｍＬの生理食塩水中に希釈されたＳＥＬ－０３７の注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を、６０分間にわたり送達した。対象は、安全性評価およびＰＫ採血のために、ＳＥＬ－１１０の注入の開始後９時間にわたり病院に滞在し続けた。対象は、処置期間２、第１、７、１４および２１日においてＰＫおよびＰＤ採血のために、および処置期間２、第７、１４および２１日において安全性および抗体採血のために、再来した。

【0155】

処置期間３－パートＡ
処置期間３、第０日の朝に、対象は、研究薬の投与のために来院する。コホート３、４、５、６、７および８に割り当てられた適格な対象に、ＳＥＬ－１１０の単一のＩＶ注入を投与する（ｍｇ／ｋｇ単位の用量）。シリンジ注入ポンプにより、５５分間の期間にわたりある用量の容積を送達するために十分な単一の安定した速度で、ＳＥＬ-１１０を送達する。ＳＥＬ－１１０の投与と同時に、対象に、１２５ｍＬの生理食塩水を６０分間にわたり投与する。この後に（±３分間）、注入ポンプにより送達される、１００ｍＬの生理食塩水中に希釈されたＳＥＬ－０３７の注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を、６０分間にわたり送達する。対象は、安全性評価およびＰＫ採血のために、ＳＥＬ－１１０の注入の開始後９時間にわたり病院に滞在し続ける。対象は、処置期間３、第１、７、１４および２１日においてＰＫおよびＰＤ採血のために、処置期間３、第７、１４および２１日において安全性および抗体採血のために、再来する。

【0156】

処置期間４－パートＢ
処置期間４、第０日の朝に、対象は、研究薬の投与のために来院する。対象に、１００ｍＬの生理食塩水中に希釈されたＳＥＬ－０３７の単一のＩＶ注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を、６０分間にわたり注入ポンプにより投与する。対象は、安全性評価およびＰＫ採血のために、ＳＥＬ－０３７の注入の開始後９時間にわたり病院に滞在し続ける。対象は、処置期間４、第１、７、１４および２１日においてＰＫおよびＰＤ採血のために、処置期間４、第７、１４および２１日において安全性および抗体採血のために、再来する。

【0157】

処置期間５－パートＢ
処置期間５、第０日に、対象は、研究薬の投与のために来院する。対象に、１００ｍＬの生理食塩水中に希釈されたＳＥＬ－０３７の単一のＩＶ注入（コホート３、５および７については０．２ｍｇ／ｋｇ；コホート４、６および８については０．４ｍｇ／ｋｇ）を、６０分間にわたり注入ポンプにより投与する。対象は、安全性評価およびＰＫ採血のために、ＳＥＬ－０３７の注入の開始後９時間にわたり病院に滞在し続ける。対象は、処置期間５、第１、７、１４および２１日においてＰＫおよびＰＤ採血のために、処置期間５、第７、１４および２１日において安全性および抗体採血のために、再来する。

【0158】

結果
例１において記載される第１相においてペグシチカーゼを単独で投与した場合、痛風の病歴を有するもののうちの２４％（９６人の患者のうちの２３人）は、研究薬を投与された後最初の１か月において、痛風フレアの徴候を有した（表1）。対照的に、しかし、例３において記載される第２相治験においてラパマイシンを含むＰＬＡ／ＰＬＡ－ＰＥＧ合成ナノキャリアをペグシチカーゼと併用投与した場合、痛風の病歴を有する対象のうちの２２％（９０人の登録された患者のうちの２０人）が、最初の１か月において痛風フレアを報告した（表２）。

【0159】

表１．痛風の病歴を有する対象におけるフレア

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【0160】

表２．ＳＥＬ－２１２対象におけるフレア

【表2-1】

【表2-2】

【表2-3】

【表2-4】

【0161】

第２相研究を行った（例２）。本研究は、その安全性および耐用性を評価するために、ラパマイシンを含むＰＬＡ／ＰＬＡ－ＰＥＧ合成ナノキャリアの複数のＩＶ注入の、ペグシチカーゼと一緒の投与を含んだ。９６人の対象を無作為化して投与し、２７人の対象（２８％）が、コルヒチン／ＮＳＡＩＤによる痛風フレア予防薬を投与されるものとして報告した（表３）。

【0162】

表３．処置後に痛風フレアを罹患した対象

【表3-1】

【表3-2】

【0163】

上の対象におけるフレア率を、ペグシチカーゼ治験におけるフレア率と比較した。痛風フレア予防薬（コルヒチンまたはＮＳＡＩＤＳによるもの）を投与された対象のみを、ペグシチカーゼ対象の条件に合うように選択した。フレア頻度（患者１人あたり１か月あたりのフレアの数）を、フレア率を比較する基準として選択した。この基準は、治験のデータが５回の処置のサイクルをカバーしている一方で、ペグシチカーゼの治験は、長さが３５日間（Sundy et al., Pharmacokinetics and pharmacodynamics of intravenous PEGylated recombinant mammalian urate oxidase in patients with refractory gout. Arthritis and Rheumatism. Vol. 56, No. 3, March 2007, pp 1021-1028）から６か月間まで異なるという事実に基づいて選択した（John S. Sundy, MD, PhD; Herbert S. B. Baraf, MD; Robert A. Yood, MD; et al. Efficacy and Tolerability of Pegloticase for the Treatment of Chronic Gout in Patients Refractory to Conventional Treatment: Two Randomized Controlled Trials. JAMA. 2011;306(7):711-720）。患者の月毎の率を、治験の間で比較できるように選択した。

【0164】

ＳＥＬ－２１２の研究について、包含および除外の基準を満たす全ての対象に、痛風フレアを予防するために前投薬を投与した。前投薬レジメンは、研究薬の最初の投与の１週間前に開始し、臨床研究の期間にわたり継続した。対象に、コルヒチン（１．２ｍｇ）を、単回投与量として投与した。彼らに、次いで、治験における彼らの参加の残りの期間にわたり、コルヒチン（１日１回の０．６ｍｇの用量）を投与し続けた。コルヒチンに対する禁忌が存在した場合、対象がＮＳＡＩＤに対する禁忌を一般に有していない限り、対象にイブプロフェン（６００ｍｇのＴＩＤ）または同等のＮＳＡＩＤを投与した。対照がコルヒチンに対する、およびＮＳＡＩＤに対する禁忌を有する場合、前投薬は投与しなかった。痛風フレア予防投薬は、臨床研究の期間にわたり継続した。コルヒチンに対する禁忌に起因して、またはこのプロトコルの以前のバージョンの下で、ＮＳＡＩＤを痛風フレア予防投薬として投与され始めた対象には、研究の期間にわたり、ＮＳＡＩＤを投与し続けた。

【0165】

また、輸注反応を軽減するために、対象に、１８０ｍｇのフェキソフェナジン（経口）２回（研究薬を投与する前の夜（－１２ｈ±２ｈ、自己投与）および－２ｈ±１時間前）ならびに４０ｍｇのメチルプレドニゾロン（または同等の薬物、例えばプレドニゾン５０ｍｇのＩＶもしくはデキサメタゾン８ｍｇのＩＶ）を静脈内で研究薬を投与する－１ｈ±０．５時間前（すなわち、コホート１および２についてはＳＥＬ－０３７および全てのコホートのパートＢの前、またはコホート３～８、１０、１１および１２についてはＳＥＬ－１１０の前）からなる、抗ヒスタミン剤およびステロイドによる前投薬を投与した。

【0166】

コホート３および４は、ラパマイシンを含む合成ナノキャリアの同じ用量（０．０５ｍｇ／ｋｇ）を投与されているので、この分析については一緒の群にし、同様に、コホート５および６を、一緒の群にした（０．０８ｍｇ／ｋｇのラパマイシン用量を含む合成ナノキャリアによる）。コホート１～１２において、９６人の対象に、合計２３８回の処置サイクルを投与した。全ての対象が全ての処置を投与されたわけではなく、なぜならば、特定の対象は、プロトコルの変更の後で中断したからである。２９人の対象は、２３８回の処置サイクルの間に、痛風フレアを報告した。このことは、１回の処置サイクルあたり２１回のフレア；言い換えると、患者１人あたり１か月あたり０．２１回のフレア頻度に等しい。

【0167】

比較のために、第３相ペグシチカーゼ治験（John S. Sundy, MD, PhD；Herbert S. B. Baraf, MD；Robert A. Yood, MDら、Efficacy and Tolerability of Pegloticase for the Treatment of Chronic Gout in Patients Refractory to Conventional Treatment: Two Randomized Controlled Trials. JAMA. 2011;306(7):711-720）を精査して、１か月あたりのフレアの数および経時的な（２０週間までの）平均血清尿酸（ｓＵＡ）レベルの曲線下面積（ＡＵＣ）を決定した。対象に、１回目の注入の１週間前に、１日１回または２回、０．６ｍｇのコルヒチン（または非ステロイド性抗炎症薬）を投与し、これを、研究を通して継続した。研究はまた、各注入の前の、輸注関連反応（infusion related reaction：ＩＲ）に対する予防薬を含んだ。対象に、注入の前の夜、および注入の直前に再び、経口のフェキソフェナジン（６０ｍｇ）を投与し、ならびにアセトアミノフェン（１０００ｍｇ）およびＩＶのヒドロコルチゾン（２００ｍｇ）を、注入の直前に投与した。データポイントは、隔週／月毎の患者１人あたり１か月あたりのフレアを表す表２から得た。データポイントはまた、前述の参考文献の図２についてグラフデジタイザーを用いて同定した。データは、２０週間まで外挿した。経時的な（２０週間までの）平均ｓＵＡレベルのＡＵＣおよび患者１人あたり１か月あたりのフレアを、応答者および非応答者についてのｓＵＡのＡＵＣについての組み合わせた加重平均を用いて計算した。隔週群のＡＵＣは、応答者の１２．３であった；１０２．０が、２０週間まででカットした非応答者隔週群のＡＵＣであった。類似の計算を行って、月毎のデータを得た。

【0168】

プライマリーブランドの経口の尿酸低下薬であるフェブキソスタットによりさらなる比較を行うことができる。第３相の無作為化された二重盲検の多施設治験において、フェブキソスタットの安全性および効力を、５２週間にわたり研究した（Michael A. Becker, M.D., H. Ralph Schumacher, Jr., M.D., Robert L. Wortmann, M.D., Patricia A. MacDonald, B.S.N., N.P., Denise Eustace, B.A., William A. Palo, M.S., Janet Streit, M.S., and Nancy Joseph-Ridge, M.D. Febuxostat Compared with Allopurinol in Patients with Hyperuricemia and Gout. N Engl J Med 2005；353:2450-2461December 8, 2005）。この分析のための比較期間は、その研究のうちの、痛風フレア予防薬（ナプロキセンまたはコルヒチン）を投与した最初の８週間のみを含んだ。データポイントは、上の参考文献の図１についてグラフデジタイザーを用いて同定した。８０ｍｇ／日の用量において、２５５人の対象のうちの５５人は、少なくとも１回の痛風フレアのために処置を要求した。このことは、患者１人あたり１か月あたり少なくとも０．２２回のフレア、および場合によってはそれより多くのフレア頻度と等価である。１２０ｍｇ／日の用量において、２５０人の対象のうちの９０人が、少なくとも１回の痛風フレアのために処置を要求し、このことは、患者１人あたり１か月あたり０．３６回のフレア、および場合によってはそれより多くのフレア頻度と等価である。

【0169】

異なる薬物の間のフレア頻度における比較を、それらの血清尿酸（ｓＵＡ）を低下させることにおける効力と並べて概略する作表データを、表４において集める。

表４．他の尿酸低下処置と比較した患者１人あたり１か月あたりのフレア

【表4】

【0170】

ペグシチカーゼと併用投与されるラパマイシン含有ナノキャリアを投与された対象について、他の薬物の全てと比較して、フレア頻度は、明らかに低下する。この予想外の結果は、表４において示すとおり、他の治療よりも著しく優れている。このことはまた、ウリカーゼなどの尿酸低下治療に対する患者のアドヒアランスにとって利益を有する。なぜならば、アドヒアランスは、治療の開始の後でリバウンドのフレアが起こる場合に著しく低下するからである（Treatment of chronic gouty arthritis: it is not just about urate-lowering therapy. Schlesinger N - Semin. Arthritis Rheum. - October 1, 2012；42（2)；155-65）。加えて、フレアの頻度ならびに経時的な平均ｓＵＡレベルの曲線下面積の組み合わせ評価は、
改善された効力および軽減された痛風フレアの両方を示す。典型的には、ｓＵＡ除去における改善された効力は痛風フレアの増加をもたらし得ることから、この知見は驚くべきことであった。ここで、ＳＥＬ－２１２研究薬および抗炎症処置により、効力および痛風フレアの軽減の両方を達成することができる。

【0171】

本明細書において開示される特徴の全ては、任意の組み合わせにおいて組み合わせることができる。本明細書において開示される各々の特徴は、同じ、同等または類似の目的に役立つ代替的な特徴により置き換えることができる。したがって、別段に明示的に記述されない限り、開示される各々の特徴は、一般的な一連の同等または類似の特徴の単なる例である。

【0172】

上の記載から、当業者は、本発明の本質的な特徴を容易に確認することができ、その精神および範囲から逸脱することなく、本発明を多様な用途および条件に適応させるために、本発明の多様な変更および修飾を行うことができる。したがって、他の態様もまた、請求の範囲の範囲内である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】