特許 7531508 ベンゾチオフェン化合物、その調製方法およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-08-01

(45)【発行日】2024-08-09

(54)【発明の名称】ベンゾチオフェン化合物、その調製方法およびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 333/70 20060101AFI20240802BHJP

   C07D 409/14 20060101ALI20240802BHJP

   A61K 31/381 20060101ALI20240802BHJP

   A61K 31/4155 20060101ALI20240802BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240802BHJP

【ＦＩ】

C07D333/70 CSP

C07D409/14

A61K31/381

A61K31/4155

A61P35/00

【請求項の数】 45

(21)【出願番号】P 2021551542

(86)(22)【出願日】2020-04-20

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-07-05

(86)【国際出願番号】 CN2020085525

(87)【国際公開番号】W WO2020221038

(87)【国際公開日】2020-11-05

【審査請求日】2023-03-20

(31)【優先権主張番号】201910359616.0

(32)【優先日】2019-04-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】517273308

【氏名又は名称】シチュアン ケルン－バイオテック バイオファーマシューティカル カンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100107456

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 成人

(74)【代理人】

【識別番号】100162352

【弁理士】

【氏名又は名称】酒巻 順一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100123995

【弁理士】

【氏名又は名称】野田 雅一

(72)【発明者】

【氏名】リュー， ジンミン

(72)【発明者】

【氏名】レン， ユン

(72)【発明者】

【氏名】ティエン， チアン

(72)【発明者】

【氏名】ソン， ホンメイ

(72)【発明者】

【氏名】シュエ， トントン

(72)【発明者】

【氏名】ワン， ジンイー

【審査官】早川 裕之

(56)【参考文献】

【文献】特表２０２１－５２０３４５（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１８／０６７４２３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１９／０２７８５７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１９／０６９２７５（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ ３１／

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【化1】

［式中、Ｘ^１およびＸ^３は同一または異なり、それぞれ共有結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－からなる群から独立して選択され、
Ｘ^２は、Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６アルキレン－Ｘ^４およびＣ_１－６アルキレン－Ｘ^４－Ｃ_１－６アルキレンからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキルおよび３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｘ^４は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－および－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－からなる群から選択され、
Ｌ^１は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^８）_２）_ｐ－からなる群から選択され、
Ｌ^２は、共有結合および－Ｃ（Ｏ）－からなる群から選択され、
Ｌ^３は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^９）_２）_ｑ－からなる群から選択され、
Ａ^１は、Ｈ、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から選択され、前記Ｃ_３－６シクロアルキル、３－６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^１およびＲ^４は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、およびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で任意に置換されており、
Ｒ^２およびＲ^３は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３－６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_１－６ハロアルコキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＣＯ_２Ｒ^ａおよび－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^６は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、任意に１以上のＲ^Ｃで置換されており、
Ｒ^Ｃはそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシは、それぞれ任意にシアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^７は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、３～１０員ヘテロシクリル、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^８はそれぞれ、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３－６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５－１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から選択される１以上に置換基で置換されており、または異なる炭素原子上の２つのＲ^８は、それらの間の炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、または同一の炭素原子上の２つのＲ^８は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^９は、それぞれＨ、ハロゲン、シアノ、ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、または２つのＲ^９は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－１０シクロアルキル、または３～１０員ヘテロシクリルを形成し、または任意のＲ^９およびＲ^５は、それらの間の原子と一緒になって３～１０員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、それぞれＨ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、およびＣ_１－６アルコキシは、それぞれ任意にヒドロキシ、ハロゲンおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、またはＲ^ａおよびＲ^ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって３～７員ヘテロシクリルを形成し、
ｍおよびｎは、それぞれ０、１、２および３からなる群から独立して選択され、
ｐおよびｑは、それぞれ１、２および３からなる群から独立して選択される。］

【請求項2】

Ｘ^１およびＸ^３が同一または異なり、それぞれ共有結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－、－Ｎ（Ｃ_１－６ハロアルキル）－、－Ｎ（Ｃ_３－６シクロアルキル）－および－Ｎ（Ｃ_１－６アルコキシ）－からなる群から独立して選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項3】

Ｘ^１およびＸ^３が同一であり、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－および－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－からなる群から選択される、請求項２に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項4】

Ｘ ^１およびＸ^３が同一であり、－Ｏ－および－Ｓ－からなる群から選択される、請求項３に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項5】

Ｘ ^１およびＸ^３がいずれも－Ｏ－である、請求項４に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項6】

Ｘ^２が、Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_２－４アルケニレン、Ｃ_２－４アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_１－４アルキレン－Ｘ^４およびＣ_１－４アルキレン－Ｘ^４－Ｃ_１－４アルキレンからなる群から選択され、前記Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_２－４アルケニレン、Ｃ_２－４アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキルおよび３～６員ヘテロシクリルが、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキル、およびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項7】

Ｘ ^２が、任意にヒドロキシおよびＣ_１－４アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されているＣ_１－４アルキレンである、請求項６に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項8】

Ｘ ^２が非置換Ｃ_１－４アルキレンである、請求項７に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項9】

Ｘ ^２がプロピレンである、請求項８に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項10】

Ｌ^１が－（Ｃ（Ｒ^８）_２）_ｐ－である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項11】

Ｌ ^１が、－（ＣＨ_２）_ｐ－または－（Ｃ（Ｃ_１－６アルキル）_２）_ｐ－である、請求項１０に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項12】

Ｌ ^１が－（ＣＨ_２）_２－である、請求項１１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項13】

Ｌ^２が－Ｃ（Ｏ）－である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項14】

Ｌ^３が－（Ｃ（Ｒ^９）_２）_ｑ－である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項15】

Ｌ ^３が、－（ＣＨ_２）_ｑ－または－（Ｃ（Ｃ_１－６アルキル）_２）_ｑ－である、請求項１４に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項16】

Ｌ ^３が－ＣＨ_２、－（ＣＨ_２）_２－または－（ＣＨ_２）_３－である、請求項１５に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項17】

Ａ^１が－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項18】

Ａ ^１が、－Ｃ（Ｏ）－ＯＨおよび－Ｃ（Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から選択される、請求項１７に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項19】

Ａ ^１が、－Ｃ（Ｏ）－ＯＨおよび－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－（ＣＨ_２ＣＨ_３）からなる群から選択される、請求項１８に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項20】

Ｒ^１およびＲ^４が同一または異なり、それぞれＨ、ハロゲン、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項21】

Ｒ ^１および／またはＲ^４がＨであり、請求項２０に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項22】

Ｒ ^１およびＲ^４がいずれもＨである、請求項２１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項23】

Ｒ^２およびＲ^３が同一または異なり、それぞれＨ、ハロゲンおよび－ＯＲ^ａからなる群から独立して選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項24】

Ｒ ^２およびＲ^３が同一または異なり、それぞれ－ＯＨおよび－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から独立して選択され、前記－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）中のＣ_１－６アルキルが、任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている、請求項２３に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項25】

Ｒ ^２およびＲ^３が同一または異なり、それぞれメトキシ、２－ヒドロキシ－２－メチルプロポキシおよび３－ヒドロキシ－３－メチルブトキシからなる群から独立して選択される、請求項２４に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項26】

Ｒ^５が、Ｈ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項27】

Ｒ ^５がＣ_１－６アルキルである、請求項２６に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項28】

Ｒ ^５がメチルである、請求項２７に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項29】

Ｒ^６が、５～６員ヘテロアリール、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、前記５～６員ヘテロアリールは、任意に１つ以上のＣ_１～６アルキルで置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項30】

Ｒ ^６が、ピラゾリル、－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）、－Ｃ（Ｏ）_２Ｈおよび－Ｃ（Ｏ）_２－（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から選択され、前記ピラゾリルが、任意に１つ以上のＣ_１－６アルキルで置換されている、請求項２９に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項31】

Ｒ ^６が、Ｎ－メチルピラゾリル、メトキシ、－Ｃ（Ｏ）_２Ｈおよび－Ｃ（Ｏ）_２－（ＣＨ_２ＣＨ_３）からなる群から選択される、請求項３０に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項32】

ｍおよびｎが、それぞれ０および１からなる群から独立して選択される、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項33】

ｍおよびｎがいずれも１である、請求項３２に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項34】

式（ＩＩ）の構造を有する、請求項１～３３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【化2】

［式中、Ｘ ^２ 、Ｘ ^４ 、Ｌ ^１ 、Ｌ ^２ 、Ｌ ^３ 、Ａ ^１ 、Ｒ ^２ 、Ｒ ^３ 、Ｒ ^５ 、Ｒ ^６ 、Ｒ ^７ 、Ｒ ^８ 、Ｒ ^９ 、Ｒ ^ａ 、Ｒ ^ｂ 、Ｒ ^Ｃ 、ｍ、ｎ、ｐおよびｑは、請求項１に定義されるとおりである。］

【請求項35】

式（ＩＩＩ）の構造を有する、請求項３４に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【化3】

［式中、Ｘ ^２ 、Ｘ ^４ 、Ｌ ^３ 、Ｒ ^２ 、Ｒ ^３ 、Ｒ ^５ 、Ｒ ^６ 、Ｒ ^７ 、Ｒ ^９ 、Ｒ ^ａ 、Ｒ ^ｂ 、Ｒ ^Ｃ 、ｍ、ｎおよびｑは、請求項１に定義されるとおりである。］

【請求項36】

式（ＩＩＩ－１）の構造を有する、請求項３５に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【化4】

［式中、Ｘ ^２ 、Ｘ ^４ 、Ｌ ^３ 、Ｒ ^２ 、Ｒ ^３ 、Ｒ ^５ 、Ｒ ^６ 、Ｒ ^７ 、Ｒ ^９ 、Ｒ ^ａ 、Ｒ ^ｂ 、Ｒ ^Ｃ 、ｍ、ｎおよびｑは、請求項１に定義されるとおりである。］

【請求項37】

式（ＩＶ）の構造を有する、請求項３５に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【化5】

［式中、Ｘ ^２ 、Ｘ ^４ 、Ｒ ^２ 、Ｒ ^３ 、Ｒ ^５ 、Ｒ ^６ 、Ｒ ^７ 、Ｒ ^ａ 、Ｒ ^ｂ 、Ｒ ^Ｃ 、ｍ、ｎおよびｑは、請求項１に定義されるとおりである。］

【請求項38】

前記化合物が、

【化6】

【化7】

からなる群から選択される構造を有する、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物。

【請求項39】

予防的または治療的に有効な量の、請求項１～３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物と、１種以上の薬学的に許容され得る担体と、を含む医薬組成物。

【請求項40】

請求項１～３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物、あるいは請求項３９に記載の医薬組成物を含む、キット。

【請求項41】

ＳＴＩＮＧ介在性疾患を予防または治療するための医薬の製造における、請求項１～３８のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、溶媒和物、Ｎ－オキシド、もしくは同位体標識化合物、あるいは請求項３９に記載の医薬組成物の使用。

【請求項42】

前記医薬が、経口、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内、筋肉内または経皮経路を介して投与されるためのものである、請求項４１に記載の使用。

【請求項43】

前記ＳＴＩＮＧ介在性疾患が腫瘍である、請求項４１に記載の使用。

【請求項44】

以下の工程を含む、請求項３５に記載の化合物を調製する方法。

【化8】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは、請求項３５に定義されるとおりであり、
Ｒ^ａは、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルは、それぞれ任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
ＬＧは脱離基を表し、脱離基としては、ハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホニルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。］

【請求項45】

以下の工程を含む、請求項３６に記載の化合物を調製する方法。

【化9】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは、請求項３６に定義されるとおりであり、
Ｒ^ａは、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルは、それぞれ任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されている。］

【発明の詳細な説明】

【発明の詳細な説明】

【0001】

［発明の分野］
本発明は、ベンゾチオフェン化合物、それを含む医薬組成物およびキット、その調製方法、ならびにＳＴＩＮＧ介在性疾患を処置するための医薬の製造におけるその使用に関する。

【0002】

［発明の背景］
ＴＭＥＭ１７３、ＭＰＹＳ、ＭＩＴＡまたはＥＲＩＳとも呼ばれるＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）は、免疫応答における重要なシグナル伝達分子である。ＳＴＩＮＧがリガンド（例えば、細菌に由来する環状ジヌクレオチド（ＣＤＮ）など）によって刺激され、活性化されると、ＳＴＩＮＧはＩＲＦ３およびＮＦ－κＢシグナル伝達経路をアップレギュレートするであろう。具体的には、活性化されたＳＴＩＮＧは、細胞質にＴＡＮＫ結合キナーゼ（ＴＢＫ１）を漸増し、ＴＢＫ１によるＩＲＦ３のリン酸化を媒介し、インターフェロンおよび他のサイトカインを生成する。インターフェロンは、免疫機能の調節、ワクチン効果の増強、ウイルスに対する作用、腫瘍細胞の増殖の阻害、腫瘍細胞のアポトーシスの誘導などを含む、複数の機能を有する一連の活性タンパク質である（Ｎａｔｕｒｅ，２００８，４５５，６７４－６７８、Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，２０１２，５，ｒａ２０）。さらに、ＳＴＩＮＧタンパク質は、腫瘍免疫、自己免疫性炎症、オートファジーなどの様々な病理学的および生理学的プロセスにも関与する。ＳＴＩＮＧ媒介性のＩ型インターフェロンシグナル伝達経路は、腫瘍特異的Ｔ細胞の活性化および腫瘍浸潤リンパ球の浸潤のための重要なステップである。肝細胞癌、胃癌および結腸直腸癌などの多くの腫瘍組織におけるＳＴＩＮＧの発現が低いと、腫瘍免疫寛容および／または免疫回避が起こるようになる。多くの研究により、ＳＴＩＮＧアゴニストが有意な抗腫瘍活性を有することが示されている。例えば、マウスモデルにおいて、ＳＴＩＮＧアゴニスト（ＡＤＵ－Ｓ１００）は、二次接種腫瘍および移植腫瘍の成長を阻害し、腫瘍に対する免疫寛容を長時間逆転させ、腫瘍の再発を阻害し得る。

【0003】

現在、開示されているＳＴＩＮＧアゴニストは、主に環状ジヌクレオチドアナログ構造を有する化合物である。例えば、ＭＩＷ８１５（ＡＤＵ－Ｓ１００）は第１相臨床試験に入っている。

【化1】

【0004】

さらに、いくつかの研究機関により、非環状ジヌクレオチド構造を有するＳＴＩＮＧアゴニストが続々と開示されている。国際公開第２０１８０６７４２３号は、細胞増殖に関連する疾患（癌など）を処置するためのＳＴＩＮＧアゴニストとしての一連のベンゾチオフェン化合物を開示している。国際公開第２０１８２３４８０５号、国際公開第２０１８２３４８０７号および国際公開第２０１８２３４８０８号はまた、様々な疾患（癌を含む）の処置のためにヒトＳＴＩＮＧタンパク質を調節または活性化することができる、一連の複素環式化合物を開示している。

【0005】

したがって、ＳＴＩＮＧアゴニストは、医薬品産業における薬物としての良好な応用が見込まれる。腫瘍に対するより良好な治療効果を達成し、市場の需要をより良好に満たすために、新規かつ有効なＳＴＩＮＧアゴニストを開発することが急務である。

【0006】

［発明の概要］
本発明の一態様は、ＳＴＩＮＧシグナル伝達経路に対して強いアゴニスト作用を有し、その結果腫瘍に対するより良好な治療効果を有する、一連のベンゾチオフェン化合物を提供する。本発明化合物はまた、良好な物理化学的特性（例えば、溶解性、物理的および／または化学的安定性）および良好な安全性などの様々な優れた特性を有する。

【0007】

前記化合物は、式Ｉの化合物、その薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグである。

【化2】

［式中、Ｘ^１およびＸ^３は同一または異なり、それぞれ共有結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－からなる群から独立して選択され、
Ｘ^２は、Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６アルキレン－Ｘ^４およびＣ_１－６アルキレン－Ｘ^４－Ｃ_１－６アルキレンからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキルおよび３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｘ^４は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－および－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－からなる群から選択され、
Ｌ^１は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^８）_２）_ｐ－からなる群から選択され、
Ｌ^２は、共有結合および－Ｃ（Ｏ）－からなる群から選択され、
Ｌ^３は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^９）_２）_ｑ－からなる群から選択され、
Ａ^１は、Ｈ、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から選択され、前記Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^１およびＲ^４は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、およびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で任意に置換されており、
Ｒ^２およびＲ^３は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_１－６ハロアルコキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＣＯ_２Ｒ^ａおよび－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^６は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、任意に１以上のＲ^ｃで置換されており、
Ｒ^ｃはそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシは、それぞれ任意にシアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^７は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、３～１０員ヘテロシクリル、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^８はそれぞれ、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５－１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、または異なる炭素原子上の２つのＲ^８は、それらの間の炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、または同一の炭素原子上の２つのＲ^８は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^９は、それぞれＨ、ハロゲン、シアノ、ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、または２つのＲ^９は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－１０シクロアルキル、または３～１０員ヘテロシクリルを形成し、または任意のＲ^９およびＲ^５は、それらの間の原子と一緒になって３～１０員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、それぞれＨ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、およびＣ_１－６アルコキシは、それぞれ任意にヒドロキシ、ハロゲンおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、またはＲ^ａおよびＲ^ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって３～７員ヘテロシクリルを形成し、
ｍおよびｎは、それぞれ０、１、２および３からなる群から独立して選択され、
ｐおよびｑは、それぞれ１、２および３からなる群から独立して選択される。］

【0008】

本発明の別の態様は、予防的または治療的に有効な量の本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグと、１種以上の薬学的に許容され得る担体と、を含む医薬組成物を提供する。

【0009】

本発明の別の態様は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物を含むキットを提供する。

【0010】

本発明の別の態様は、ＳＴＩＮＧシグナル伝達経路を活性化するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグの使用を提供する。

【0011】

本発明の別の態様は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患を予防または処置するための、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物の使用を提供する。

【0012】

本発明の別の態様は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患を予防または処置するための医薬の調製における本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物の使用を提供する。

【0013】

本発明の別の態様は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患の予防または処置のための方法であって、予防的または治療的に有効な量の本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物を、予防または処置を必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。

【0014】

本発明の別の態様は、本発明の化合物を調製する方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】図１は、化合物１および６を使用したヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【図2】図２は、化合物２を使用したヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【図3】図３は、化合物３を使用したヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【図4】図４は、化合物４を使用したヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【図5】図５は、化合物８を使用したヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである

【図6】図６は、化合物２を使用したマウスＲａｗ２６４．７細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【図7】図７は、化合物４、６および８を使用したマウスＲａｗ２６４．７細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のウエスタンブロッティングの実験結果を示すグラフである。

【0016】

［発明の詳細な説明］
定義
以下で他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有することが意図される。本明細書で使用される技術への言及は、当業者には明らかであろうそれらの技術の変形または同等の技術の置換を含む、当技術分野で一般的に理解されている技術を指すことを意図している。以下の用語の大部分は当業者によって容易に理解されると考えられるが、本発明をよりよく説明するために以下の定義が提示される。

【0017】

「含める」、「含む」、「有する」、「含有する」、または「関与する」という用語、ならびに本明細書で使用される他の変形は、包括的または変更可能であり、列挙されていない要素または方法ステップを除外しない。

【0018】

本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、直鎖または分岐の飽和脂肪族炭化水素残基を指す。例えば、本明細書で使用される場合、「Ｃ_１－６アルキル」という用語は、任意にハロゲンなどの１個以上（例えば、１～３個）の適切な置換基で置換されている、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチルまたはｎ－ヘキシルなどの１～６個の炭素原子を含む直鎖または分岐アルキル基を指す。

【0019】

本明細書で使用される場合、「アルキレン」という用語は、直鎖または分枝鎖の二価アルキルを指す。

【0020】

本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」という用語は、任意に１個以上（例えば、１～３個）の適切な置換基で置換された、飽和または部分不飽和、非芳香族、単環式または多環式（例えば二環式）炭化水素環（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルまたはシクロノニルなどの単環式炭化水素環、またはスピロ、縮合または架橋環系（例えば、ビシクロ［１．１．１］ペンチル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［５．２．０］ノニル、デカヒドロナフチルなど）を含む二環式炭化水素環）を指す。例えば、「Ｃ_３－６シクロアルキル」という用語は、任意にメチル置換シクロプロピルなどの１個以上（例えば、１～３個）の適切な置換基で置換された、３～６個の環形成炭素原子を含む飽和または部分不飽和、非芳香族、単環式または多環式（例えば二環式）炭化水素環（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）を指す。

【0021】

本明細書で使用される場合、「アルコキシ」という用語は、Ｃ_１－８アルコキシ、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_１－４アルコキシまたはＣ_１－３アルコキシなどのアルキル基（前記で定義したとおり）の任意の適切な位置に酸素原子を挿入することによって得られる基を意味する。Ｃ_１－６アルコキシ基の代表的な例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、イソブトキシ、ｔ－ブトキシ、ペントキシ、ヘキシルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されず、アルコキシ基は、任意に１個以上（例えば、１～３個）の同一または異なる置換基で置換されている。

【0022】

本明細書で使用される場合、「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を含むと定義される。

【0023】

本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」という用語は、１個以上（例えば、１～３個）の同一または異なるハロゲン原子で置換されたアルキルを指す。例えば、「Ｃ_１－６ハロアルキル」という用語は、－ＣＦ_３、－Ｃ_２Ｆ_５、－ＣＨＦ_２、－ＣＨ_２Ｆ、－ＣＨ_２ＣＦ_３、－ＣＨ_２Ｃｌまたは－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＦ_３などの１～６個の炭素原子を有するハロアルキルを指す。

【0024】

本明細書で使用される場合、「ヘテロシクリル」という用語は、例えば３～１０員ヘテロシクリル、３～７員ヘテロシクリル、３～６員ヘテロシクリル、５～６員ヘテロシクリルなどの、環内に２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子と、Ｎ、ＯおよびＳ（Ｏ）_ｐ（式中、ｐは０、１または２である）からなる群から独立して選択される１個以上（例えば、１、２、３または４個）のヘテロ原子とを有する飽和または部分的に不飽和の単環式または多環式基を指す。ヘテロシクリルの代表的な例としては、オキシラニル、アジリジニル(azetidinyl)、アゼチジニル(oxetanyl)、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、ピロリジノニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ジチアニル(dithianyl)、チオモルホリニル、ピペラジニル、トリチアニル(trithianyl)などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0025】

本明細書で使用される場合、「アリール」または「芳香環」という用語は、共役π電子系を有する全炭素単環式または縮合多環式芳香族基を指す。例えば、「Ｃ_６－１０アリール」または「Ｃ_６－１０芳香族環」という用語は、６～１０個の炭素原子を含む芳香族基、例えばフェニル（環）またはナフチル（環）を指す。アリール基は、任意に１個以上（例えば、１～３個）の適切な置換基（例えば、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、－ＮＯ_２、Ｃ_１－６アルキルなど）で置換されている。

【0026】

本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香環」という用語は、例えば５、６、８、９、１０、１１、１２、１３または１４個の環原子を有する、特に１または２または３または４または５または６または９または１０個の炭素原子と、Ｎ、ＯおよびＳからなる群から選択される少なくとも１個のヘテロ原子とを有する、単環式、二環式または三環式芳香環系を指し、いずれの場合もベンゾ縮合していてもよい。例えば、ヘテロアリール環またはヘテロ芳香環は、チエニル（環）、フリル（環）、ピロリル（環）、オキサゾリル（環）、チアゾリル（環）、イミダゾリル（環）、ピラゾリル（環）、イソキサゾリル（環）、イソチアゾリル（環）、オキサジアゾリル（環）、トリアゾリル（環）、チアジアゾリル（環）、およびそれらのベンゾ誘導体、ピリジル（環）、ピリダジニル（環）、ピリミジニル（環）、ピラジニル（環）、トリアジニル（環）およびそれらのベンゾ誘導体からなる群から選択することができる。

【0027】

「置換された」という用語は、既存の状況下での指定された原子の通常の原子価を超えず、置換が安定な化合物をもたらすことを条件として、指定された原子上の１個以上（例えば、１、２、３、または４個）の水素が、示された群からの選択で置き換えられることを意味する。置換基および／または変数の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。

【0028】

置換基が「任意に・・・で置換されている」と記載されている場合、その置換基は、（１）置換されなくてもよいし、（２）置換されてもよい。置換基の炭素が置換基のリストの１以上で任意に置換されていると記載されている場合、炭素上の１個以上の水素（存在する限り）は、別々におよび／または一緒に独立して選択された任意の置換基で置換されてもよく、されなくてもよい。置換基の窒素が置換基のリストの１以上任意に置換されていると記載されている場合、窒素上の１個以上の水素（存在する限り）は、それぞれ独立して選択された任意の置換基で置換されてもよく、されなくてもよい。

【0029】

置換基が群から「独立して選択される」と記載されている場合、各置換基は他と無関係に選択される。したがって、各置換基は、他の置換基と同一であっても異なっていてもよい。

【0030】

本明細書で使用される場合、「１以上」という用語は、合理的な１以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０）を意味する。

【0031】

本明細書で使用される場合、指定されない限り、置換基の結合点は、置換基の任意の適切な位置からのものであり得る。

【0032】

置換基への結合が環内の２個の原子を連結する結合を横切って示されている場合、そのような置換基は、置換可能なその環内の環形成原子のいずれかに結合していてもよい。

【0033】

本発明はまた、１個以上の原子が同じ原子番号を有するが、自然界で優勢である原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられていることを除いて、本発明のものと同一である全ての薬学的に許容される同位体標識化合物を含む。本発明の化合物に含めるのに適した同位体の例としては、^２Ｈ（Ｄ）および^３Ｈ（Ｔ）などの水素、^１１Ｃ、^１３Ｃ、および^１４Ｃなどの炭素、^３７Ｃｌなどの塩素、^１８Ｆなどのフッ素、^１２３Ｉおよび^１２５Ｉなどのヨウ素、^１３Ｎおよび^１５Ｎなどの窒素、^１５Ｏ、^１７Ｏ、および^１８Ｏなどの酸素、^３２Ｐなどのリン、ならびに^３５Ｓなどのイオウの同位体が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の特定の同位体標識化合物、例えば放射性同位体を組み込んだ化合物は、薬物および／または基質組織分布研究（例えば、アッセイ）に有用である。放射性同位体トリチウム、すなわち^３Ｈ、および炭素－１４、すなわち^１４Ｃは、導入の容易さおよび検出手段が容易であるとの観点から、この目的に特に有用である。^１１Ｃ、^１８Ｆ、^１５Ｏおよび^１３Ｎなどの陽電子放出同位体による置換は、基質受容体占有率を調べるための陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用であり得る。本発明の同位体標識化合物は、一般に、先に使用された非標識試薬に代え、適切な同位体標識試薬を使用することによって、添付のスキームおよび／または実施例、ならびに調製物に記載されているものと同様の方法によって調製することができる。本発明による薬学的に許容され得る溶媒和物としては、結晶化溶媒が同位体置換されてもよいもの、例えば、Ｄ_２Ｏ、アセトン－ｄ_６またはＤＭＳＯ－ｄ_６が挙げられる。

【0034】

「立体異性体」という用語は、少なくとも１個の不斉中心の存在により形成される異性体を指す。１個以上（例えば、１、２、３または４個）の不斉中心を有する化合物については、ラセミ混合物、単一エナンチオマー、ジアステレオマー混合物および個々のジアステレオマーを形成し得る。特定の分子はまた、幾何異性体（シス／トランス）を有し得る。同様に、本発明の化合物は、急速平衡で異なる構造を有する２個以上の形態（互変異性体と呼ばれることもある）の混合物として存在し得る。互変異性体の代表例としては、ケトン－エノール互変異性体、フェノール－ケトン互変異性体、ニトロソ－オキシム互変異性体、イミン－エナミン互変異性体などが挙げられる。本出願は、任意の割合（例えば、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％）の全ての異性体またはそれらの混合物を網羅することが理解される。

【0035】

本発明は、本発明の化合物の全ての可能な結晶形態または多形を、単一の多形として、または任意の比の２種以上の多形の混合物として含む。

【0036】

本発明の特定の化合物は、遊離形態で、または適切な場合には薬学的に許容される誘導体の形態で治療に使用し得ることも理解されるべきである。本発明において、薬学的に許容され得る誘導体としては、それを必要とする患者に投与した後に本発明の化合物またはその代謝産物もしくは残基を直接的または間接的に提供することができる薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、代謝産物またはプロドラッグが挙げられるが、これらに限定されない。したがって、本明細書で言及される「本発明の化合物」は、前記のような化合物の種々の誘導体形態も包含することを意味する。

【0037】

本発明の化合物の薬学的に許容され得る塩は、酸付加塩および塩基付加塩を含む。適切な酸付加塩は、薬学的に許容され得る塩を形成する酸から形成される。適切な塩基付加塩は、薬学的に許容され得る塩を形成する塩基から形成される。適切な塩に関する総説については、ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈによる「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ（薬学的塩のハンドブック：特性、選択、および使用）」（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ、２００２）を参照されたい。本発明の化合物の薬学的に許容され得る塩を調製するための方法は、当業者に公知である。

【0038】

本発明の化合物は溶媒和物（好ましくは水和物）として存在することができ、本発明の化合物は、化合物の結晶格子の構造要素として極性溶媒、特に例えば水、メタノールまたはエタノールを含む。極性溶媒、特に水の量は、化学量論比または非化学量論比で存在し得る。

【0039】

当業者によって理解され得るように、窒素は酸化物への酸化に利用可能な孤立電子対を必要とするので、全ての窒素含有複素環がＮ－オキシドを形成できるわけではない。当業者は、Ｎ－オキシドを形成し得る窒素含有複素環を認識するであろう。当業者はまた、第三級アミンがＮ－オキシドを形成し得ることを認識するであろう。複素環のＮ－オキシドおよび第三級アミンを調製するための合成方法は当業者に周知であり、これらには、過酢酸およびｍ－クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）などのペルオキシ酸、過酸化水素、ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシドなどのアルキルヒドロペルオキシド、過ホウ酸ナトリウム、およびジメチルジオキシランなどのジオキシランによる複素環および第三アミンの酸化が挙げられるが、これらに限定されない。Ｎ－オキシドを調製するためのこれらの方法は、文献に広く記載され、概説されており、例えば、Ｔ．Ｌ．Ｇｉｌｃｈｒｉｓｔ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｖｏｌ．７，ｐｐ ７４８－７５０、Ａ．Ｒ．ＫａｔｒｉｔｚｋｙおよびＡ．Ｊ．Ｂｏｕｌｔｏｎ，Ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、ならびにＧ．Ｗ．Ｈ．ＣｈｅｅｓｅｍａｎおよびＥ．Ｓ．Ｇ．Ｗｅｒｓｔｉｕｋ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２２，ｐｐ ３９０－３９２，Ａ．Ｒ．ＫａｔｒｉｔｚｋｙおよびＡ．Ｊ．Ｂｏｕｌｔｏｎ，編集．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓを参照されたい。

【0040】

本発明の化合物の代謝産物、すなわち本発明の化合物を投与することによりインビボで生成される物質も本発明の範囲に含まれる。そのような生成物は、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、酵素分解などから生じ得る。したがって、本発明は、本発明の化合物を哺乳動物とその代謝産物をもたらすのに十分な期間接触させることを含む方法によって産生される化合物を含む、本発明の化合物の代謝産物を包含する。

【0041】

また、本発明の化合物のプロドラッグも本発明の範囲内であり、本発明の化合物の特定の誘導体は、それ自体薬理活性をほとんどまたは全く有さないものもあるが、体内または身体に投与されると、例えば加水分解的開裂によって所望の活性を有する本発明の化合物に変換することができる。一般的に、そのようなプロドラッグは、インビボで所望の治療活性を有する化合物に容易に変換される化合物の機能性誘導体である。プロドラッグの使用に関するさらなる情報は、「Ｐｒｏ－ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｖｏｌ．１４，ＡＣＳ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．Ｓｔｅｌｌａ）、ならびに「Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９８７（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）に見出すことができる。本発明によるプロドラッグは、例えば、本発明の化合物中に存在する適切な官能基を、例えば、Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５年）による「Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」に記載されるような「プロ部分」として当業者に公知の特定の部分で置き換えることによって製造することができる。

【0042】

本発明はさらに、保護基を有する本発明の化合物を包含する。本発明の化合物を調製するためのプロセスのいずれかの間に、関連する分子のいずれかの感受性基または反応性基を保護することが必要および／または望ましい場合があり、それにより、本発明の化合物の化学的に保護された形態が得られる。これは、従来の保護基、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，編集、Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，１９７３およびＴ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９１（これらは参照によって本明細書中に組み込まれる）に開示されている、従来の保護基により達成される。保護基は、当技術分野で公知の方法を使用して、好都合な後の段階で除去することができる。

【0043】

「約」という用語は、指定された値の±１０％以内、好ましくは±５％以内、より好ましくは±２％以内の範囲を指す。

【0044】

化合物
本発明の１つの目的は、式（Ｉ）の化合物、その薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグを提供することである。

【化3】

［式中、Ｘ^１およびＸ^３は同一または異なり、それぞれ共有結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－からなる群から独立して選択され、
Ｘ^２は、Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６アルキレン－Ｘ^４およびＣ_１－６アルキレン－Ｘ^４－Ｃ_１－６アルキレンからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキレン、Ｃ_２－６アルケニレン、Ｃ_２－６アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキルおよび３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｘ^４は、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^ａ－、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａ－および－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａ－からなる群から選択され、
Ｌ^１は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^８）_２）_ｐ－からなる群から選択され、
Ｌ^２は、共有結合および－Ｃ（Ｏ）－からなる群から選択され、
Ｌ^３は、共有結合および－（Ｃ（Ｒ^９）_２）_ｑ－からなる群から選択され、
Ａ^１は、Ｈ、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｓ（Ｏ）_２－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から選択され、前記Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^１およびＲ^４は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、および３～６員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、およびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で任意に置換されており、
Ｒ^２およびＲ^３は同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^ａ、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＮＲ^ａ－Ｃ（Ｏ）－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群からそれぞれ独立して選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意に、ハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_１－６ハロアルコキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－ＣＯ_２Ｒ^ａおよび－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ａからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^６は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、３～１０員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、任意に１以上のＲ^ｃで置換されており、
Ｒ^ｃはそれぞれ、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシおよびＣ_１－６ハロアルコキシは、それぞれ任意にシアノ、－ＯＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^７は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルからなる群から選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキルおよび３～１０員ヘテロシクリルは、それぞれ任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、３～１０員ヘテロシクリル、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｃ（Ｏ）_２－Ｒ^ａ、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＳＯ_２Ｒ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｒ^８はそれぞれ、Ｈ、ハロゲン、シアノ、－ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５－１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、または異なる炭素原子上の２つのＲ^８は、それらの間の炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、または同一の炭素原子上の２つのＲ^８は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－６シクロアルキルまたは３～６員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^９は、それぞれＨ、ハロゲン、シアノ、ＯＲ^ａ、－ＳＲ^ａ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリールおよび５～１０員ヘテロアリールからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_２－６アルケニル、Ｃ_２－６アルキニル、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、および５～１０員ヘテロアリールは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_６－１０アリール、５～１０員ヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシおよび－ＯＲ^ａからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、または２つのＲ^９は、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３－１０シクロアルキル、または３～１０員ヘテロシクリルを形成し、または任意のＲ^９およびＲ^５は、それらの間の原子と一緒になって３～１０員ヘテロシクリルを形成し、
Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、それぞれＨ、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択され、前記Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、およびＣ_１－６アルコキシは、それぞれ任意にヒドロキシ、ハロゲンおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、またはＲ^ａおよびＲ^ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって３～７員ヘテロシクリルを形成し、
ｍおよびｎは、それぞれ０、１、２および３からなる群から独立して選択され、
ｐおよびｑは、それぞれ１、２および３からなる群から独立して選択される。］

【0045】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^ａおよびＲ^ｂは、それぞれＨおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択され、Ｃ_１－６アルキルは、任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている。

【0046】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｘ^１およびＸ^３は、同一または異なり、それぞれ共有結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－、－Ｎ（Ｃ_１－６ハロアルキル）－、－Ｎ（Ｃ_３－６シクロアルキル）－および－Ｎ（Ｃ_１－６アルコキシ）－からなる群から独立して選択される。好ましい実施形態では、Ｘ^１およびＸ^３は同一であり、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＨ－および－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－からなる群から選択される。より好ましい実施形態では、Ｘ^１およびＸ^３は同一であり、－Ｏ－および－Ｓ－からなる群から選択される。特に好ましい実施形態では、Ｘ^１およびＸ^３はいずれも－Ｏ－である。

【0047】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｘ^２は、Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_２－４アルケニレン、Ｃ_２－４アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキル、３～６員ヘテロシクリル、Ｃ_１－４アルキレン－Ｘ^４－およびＣ_１－４アルキレン－Ｘ^４－Ｃ_１－４アルキレンからなる群から選択され、Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_２－４アルケニレン、Ｃ_２－４アルキニレン、Ｃ_３－６シクロアルキルおよび３～６員ヘテロシクリルは、任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている。好ましい実施形態では、Ｘ^２は、Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_２－４アルケニレン、Ｃ_１－４アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－４アルキレン、Ｃ_１－４アルキレン－Ｓ－Ｃ_１－４アルキレンおよびＣ_１－４アルキレン－ＮＲ^ａ－Ｃ_１－４アルキレンからなる群から選択され、Ｃ_１－４アルキレンおよびＣ_２－４アルケニレンは、任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている。より好ましい実施形態では、Ｘ^２は、任意にヒドロキシおよびＣ_１－４アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されているＣ_１－４アルキレンである。より好ましい実施形態では、Ｘ^２は非置換Ｃ_１－４アルキレンである。特に好ましい実施形態では、Ｘ^２はプロピレンである。

【0048】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^８は、それぞれＨおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される。好ましい実施形態では、Ｒ^８はＨである。

【0049】

本発明のいくつかの実施形態によれば、ｐは２である。

【0050】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｌ^１は、－（Ｃ（Ｒ^８）_２）_ｐ－である。好ましい実施形態では、Ｌ^１は、－（ＣＨ_２）_ｐ－または－（Ｃ（Ｃ_１－６アルキル）_２）_ｐ－である。特に好ましい実施形態では、Ｌ^１は－（ＣＨ_２）_２－である。

【0051】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｌ^２は、－Ｃ（Ｏ）－である。

【0052】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^９は、それぞれＨおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される。好ましい実施形態では、Ｒ^９はＨである。

【0053】

本発明のいくつかの実施形態によれば、ｑは１、２または３である。

【0054】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｌ^３は、－Ｃ（Ｒ^９）_２）_ｑ－である。好ましい実施形態では、Ｌ^３は、－（ＣＨ_２）_ｑ－または－（Ｃ（Ｃ_１－６アルキル）_２）_ｑ－である。特に好ましい実施形態では、Ｌ^３は、－ＣＨ_２、－（ＣＨ_２）_２－または－（ＣＨ_２）_３－である。

【0055】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ａ^１は、－Ｃ（Ｏ）－ＯＲ^ａである。好ましい実施形態では、Ａ^１は、－Ｃ（Ｏ）－ＯＨおよび－Ｃ（Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から選択される。より好ましい実施形態では、Ａ^１は、－Ｃ（Ｏ）－ＯＨおよび－Ｃ（Ｏ）－Ｏ（Ｃ_１－３アルキル）からなる群から選択される。特に好ましい実施形態では、Ａ^１は、－Ｃ（Ｏ）－ＯＨおよび－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－（ＣＨ_２ＣＨ_３）からなる群から選択される。

【0056】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^１およびＲ^４は、同一または異なり、それぞれＨ、ハロゲン、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から独立して選択され、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルは、それぞれ任意にハロゲン、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、シアノ、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルコキシからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されている。好ましい実施形態では、Ｒ^１および／またはＲ^４はＨである。特に好ましい実施形態では、Ｒ^１およびＲ^４はいずれもＨである。

【0057】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^２およびＲ^３は、同一または異なり、それぞれＨ、ハロゲンおよび－ＯＲ^ａからなる群から独立して選択される。好ましい実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は同一または異なり、それぞれ－ＯＨおよび－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から独立して選択され、－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）中のＣ_１－６アルキルは、任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されている。特に好ましい実施形態ではＲ^２およびＲ^３は同一または異なり、それぞれメトキシ、２－ヒドロキシ－２－メチルプロポキシおよび３－ヒドロキシ－３－メチルブトキシからなる群から独立して選択される。

【0058】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から選択される。好ましい実施形態では、Ｒ^５はＣ_１－６アルキルである。特に好ましい実施形態では、Ｒ^５はメチルである。

【0059】

本発明のいくつかの実施形態によれば、Ｒ^６は、５～６員ヘテロアリール（例えば、５～６員窒素含有ヘテロアリール）、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、５～６員ヘテロアリールは、任意に１以上のＣ_１～６アルキルで置換されている。好ましい実施形態では、Ｒ^６は、ピラゾリル、－Ｏ（Ｃ_１－６アルキル）、－Ｃ（Ｏ）_２Ｈおよび－Ｃ（Ｏ）_２－（Ｃ_１－６アルキル）からなる群から選択され、ピラゾリルは、任意に１以上のＣ_１－６アルキルで置換されている。特に好ましい実施形態では、Ｒ^６は、Ｎ－メチルピラゾリル、メトキシ、－Ｃ（Ｏ）_２Ｈおよび－Ｃ（Ｏ）_２－（ＣＨ_２ＣＨ_３）からなる群から選択される。

【0060】

本発明のいくつかの実施形態によれば、ｍおよびｎは、それぞれ０および１からなる群から独立して選択される。好ましい実施形態では、ｍおよびｎはいずれも１である。

【0061】

本発明は、置換基の上記の好ましい定義の任意の組み合わせによって得られる式（Ｉ）の化合物を包含する。

【0062】

本発明のいくつかの実施形態によれば本発明の化合物は、式（ＩＩ）の構造を有する。

【化4】

［式中、Ａ^１、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは上記に定義されるとおりである。］

【0063】

本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の化合物は、式（ＩＩＩ）の構造を有する。

【化5】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^ａ、Ｘ^２、ｍおよびｎは上記に定義されるとおりである。］

【0064】

本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の化合物は、式（ＩＩＩ－１）の構造を有する。

【化6】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは上記に定義されるとおりである。］

【0065】

本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の化合物は、式（ＩＶ）の構造を有する。

【化7】

［式中、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^ａ、Ｘ^２、ｍ、ｎおよびｑは上記に定義されるとおりである。］

【0066】

好ましくは、式（ＩＶ）の化合物において、
Ｒ^２およびＲ^３は同一または異なり、それぞれ－ＯＲ^ａから独立して選択され、
Ｒ^５はＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ^６は、５～６ヘテロアリール、－ＯＲ^ａおよび－Ｃ（Ｏ）_２Ｒ^７からなる群から選択され、５～６員ヘテロアリールは、任意に１以上のＣ_１～６アルキルで置換されており、
Ｒ^ａは、ＨおよびＣ_１－６アルキルからなる群から選択され、Ｃ_１－６アルキルは、任意にヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており、
Ｘ^２はＣ_１－６アルキレンであり、
ｑは１、２または３であり、
ｍおよびｎはいずれも１である。

【0067】

本発明のいくつかの実施形態によれば、本発明の化合物は、

【化8】

【化9】

からなる群から選択される。

【0068】

調製方法
本発明の別の目的は、本発明の化合物を調製する方法を提供することである。例えば、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法であって、下記の工程を含む：

【化10】

【化11】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは上記に定義されるとおりであり、
Ｒ^ａは、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルからなる群から選択され、Ｃ_１－６アルキルおよびＣ_３－６シクロアルキルは、それぞれ任意にハロゲン、ヒドロキシおよびＣ_１－６アルキルからなる群から独立して選択される１以上の置換基で置換されており、
ＬＧは脱離基を表し、脱離基としては、ハロゲン原子、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホニルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。］

【0069】

工程（１）：化合物ＩＮ－１をチオグリコール酸メチルと反応させて化合物ＩＮ－２を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、アセトニトリル、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである。

【0070】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムおよび重炭酸ナトリウムから選択することができ、好ましくは炭酸カリウムである。

【0071】

反応は、適切な温度、好ましくは２５～１００℃で行われる。

【0072】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0073】

工程（２）：化合物ＩＮ－２を加水分解して化合物ＩＮ－３を得る。
反応は、適切な溶媒中で行うことが好ましい。溶媒は、水、または水と、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノールおよびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される溶媒との混合溶媒であり、好ましくはメタノールと水との混合溶媒である。

【0074】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、水酸化リチウムおよび水酸化ナトリウムからなる群から選択することができ、好ましくは水酸化ナトリウムである。

【0075】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～６０℃で行われる。

【0076】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0077】

工程（３）：化合物ＩＮ－３をジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩と反応させ、化合物ＩＮ－４を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ジクロロメタン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはジクロロメタンである。

【0078】

反応は、適切な縮合剤の存在下で行うことが好ましい。縮合剤は、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド、ＨＡＴＵ、ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートおよび１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートからなる群から選択することができ、好ましくはＨＡＴＵである。

【0079】

反応は、好ましくは有機塩基の存在下で行われる。有機塩基は、トリエチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ジイソプロピルエチルアミンからなる群から選択することができ、好ましくはジイソプロピルエチルアミンである。

【0080】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～６０℃で行われる。

【0081】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0082】

工程（４）：化合物ＩＮ－４を臭化メチルマグネシウムと反応させ、化合物ＩＮ－５を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはテトラヒドロフランである。

【0083】

反応は、適切な温度、好ましくは－１０℃～５０℃で行われる。

【0084】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0085】

工程（５）：化合物ＩＮ－５を適切な臭素化剤と反応させて、化合物ＩＮ－６を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、酢酸エチル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくは酢酸エチルである。

【0086】

臭素化剤は、Ｎ－ブロモスクシンイミド、トリメチルフェニルアンモニウムトリブロミド、ピリジニウムトリブロミドおよび臭化銅からなる群から選択することができ、好ましくは臭化銅である。

【0087】

反応は、適切な温度、好ましくは２５～１００℃で行われる。

【0088】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0089】

工程（６）：化合物ＩＮ－６をマロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチルと反応させて化合物ＩＮ－７を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはテトラヒドロフランである。

【0090】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、水素化ナトリウム、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムメトキシド、炭酸カリウムなどからなる群から選択することができ、好ましくは水素化ナトリウムである。

【0091】

反応は、適切な温度、好ましくは－１０℃～４０℃で行われる。

【0092】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0093】

工程（７）：化合物ＩＮ－７を反応させ、化合物ＩＮ－８を得る。
反応は、適切な溶媒中で行うことが好ましい。溶媒は、１，４－ジオキサン、酢酸エチル、水、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくは１，４－ジオキサンである。

【0094】

反応は、適切な酸の存在下で行うことが好ましい。酸は、塩酸、硫酸およびトリフルオロ酢酸からなる群から選択することができ、好ましくは塩酸である。

【0095】

反応は、適切な温度、好ましくは６０℃～１５０℃で行われる。

【0096】

反応は、適切な期間、例えば１２～３６時間継続する。

【0097】

工程（８）：化合物ＩＮ－８をＨＯ－Ｒ^ａとエステル化反応させ、化合物ＩＮ－９を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行う。有機溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、トルエン、アルコール溶媒（メタノールおよびエタノールなど）、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができる。Ｒ^ａがエチルである場合、反応は好ましくはエタノール中で行われる。

【0098】

反応は、適切な触媒の存在下で行うことが好ましい。触媒は、塩酸、硫酸および塩化チオニルからなる群から選択することができ、好ましくは硫酸である。

【0099】

反応は、適切な温度、好ましくは６０℃～１５０℃で行われる。

【0100】

反応は、適切な期間、例えば２～６時間継続する。

【0101】

工程（９）：化合物ＩＮ－９を脱メチル化反応に供して化合物ＩＮ－１０を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはジクロロメタンである。

【0102】

反応は、好適なルイス酸の存在下で行うことが好ましい。ルイス酸は、三臭化ホウ素、三塩化アルミニウムなどからなる群から選択することができ、好ましくは三塩化アルミニウムである。

【0103】

反応は、適切な温度、好ましくは２５～１００℃で行われる。

【0104】

反応は、適切な期間、例えば１５～３６時間継続する。

【0105】

工程（１０）：化合物ＩＮ－１０をＨＯ－Ｘ_２－ＬＧと反応させ、化合物ＩＮ－１１を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ－メチルピロリドン、テトラヒドロフラン、アセトンなど、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはアセトンである。

【0106】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水素化ナトリウム、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムメトキシドなどからなる群から選択することができ、好ましくは炭酸カリウムである。

【0107】

反応は、適切な触媒の存在下で行うことが好ましい。触媒は、ヨウ化カリウム、ヨウ化ナトリウムなどからなる群から選択することができ、好ましくはヨウ化カリウムである。

【0108】

反応は、好適な温度、好ましくは２０℃～１００℃で行われる。

【0109】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0110】

工程（１１）：化合物ＩＮ－１－１をチオグリコール酸メチルと反応させ、化合物ＩＮ－２－１を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、アセトニトリル、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドである

【0111】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムおよび重炭酸ナトリウムからなる群から選択することができ、好ましくは炭酸カリウムである。

【0112】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～１００℃で行われる。

【0113】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0114】

工程（１２）：化合物ＩＮ－２－１を加水分解し、化合物ＩＮ－３－１を得る。
反応は、適切な溶媒中で行うことが好ましい。溶媒は、水、または水と、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノールおよびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される溶媒との混合溶媒であり、好ましくはメタノールと水との混合溶媒である。

【0115】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、水酸化リチウムおよび水酸化ナトリウムからなる群から選択することができ、好ましくは水酸化ナトリウムである。

【0116】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～６０℃で行われる。

【0117】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0118】

工程（１３）：化合物ＩＮ－３－１を化合物ＩＮ－４－１と反応させ、化合物ＩＮ－５－１を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ジクロロメタン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはジクロロメタンである。

【0119】

反応は、適切な縮合剤の存在下で行うことが好ましい。縮合剤は、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド、ＨＡＴＵ、ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートおよび１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートからなる群から選択することができ、好ましくはＨＡＴＵである。

【0120】

反応は、好ましくは有機塩基の存在下で行われる。有機塩基は、トリエチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジンおよびジイソプロピルエチルアミンからなる群から選択することができ、好ましくはジイソプロピルエチルアミンである。

【0121】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～６０℃で行われる。

【0122】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0123】

工程（１４）：化合物ＩＮ－５－１を脱メチル化反応に供して化合物ＩＮ－６－１を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはジクロロメタンである。

【0124】

反応は、好適なルイス酸の存在下で行うことが好ましい。ルイス酸は、三臭化ホウ素、三塩化アルミニウムなどからなる群から選択することができ、好ましくは三塩化アルミニウムである。

【0125】

反応は、適切な温度、好ましくは２５～１００℃で行われる。

【0126】

反応は、適切な期間、例えば１５～３６時間継続する。

【0127】

工程（１５）：化合物ＩＮ－６－１を化合物ＩＮ－１１と反応させて式ＩＩＩの化合物を得る。
反応は、適切な有機溶媒中で行うことが好ましい。有機溶媒は、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ－メチルピロリドン、トルエン、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができ、好ましくはテトラヒドロフランである。

【0128】

反応は、適切なホスフィン試薬の存在下で行うことが好ましい。ホスフィン試薬は、トリ－ｎ－ブチルホスフィン、トリフェニルホスフィンなどからなる群から選択することができ、好ましくはトリフェニルホスフィンである。

【0129】

反応は、適切なアゾ試薬の存在下で行うことが好ましい。アゾ試薬は、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート、ジエチルアゾジカルボキシレート、アゾジカルボン酸ジピペリジドなどからなる群から選択することができ、好ましくはジイソプロピルアゾジカルボキシレートである。

【0130】

反応は、適切な温度、好ましくは２０℃～６０℃で行われる。

【0131】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0132】

本発明はさらに、以下の工程を含む、式（ＩＩＩ－１）の化合物を調製する方法を提供する。

【化12】

［式中、Ｌ^３、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^ａ、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｘ^２、ｍおよびｎは、式（ＩＩＩ）の化合物を調製する方法において上記に定義したとおりである。］

【0133】

反応は、適切な溶媒中で行うことが好ましい。溶媒は、水、または水と、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノールおよびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される溶媒との混合溶媒であり、好ましくはエタノールと水との混合溶媒である。

【0134】

反応は、適切な塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基は、水酸化リチウムおよび水酸化ナトリウムからなる群から選択することができ、好ましくは水酸化ナトリウムである。

【0135】

反応は、適切な温度、好ましくは２５℃～１００℃で行われる。

【0136】

反応は、適切な期間、例えば２～８時間継続する。

【0137】

医薬組成物およびキット
本発明の別の目的は、予防的または治療的に有効な量の、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグと、１種以上の薬学的に許容され得る担体と、を含有する医薬組成物を提供することである。

【0138】

本発明の別の目的は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物を含むキットを提供することである。

【0139】

本発明で使用される「薬学的に許容され得る担体」という用語は、治療剤と共に投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤、または溶媒を指し、健全な医学的判断によれば、合理的なベネフィット／リスク比を超える不当な毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題もしくは合併症を生じず、ヒトおよび／または他の動物の組織と接触させるのに適している。

【0140】

本発明の医薬組成物に使用することができる薬学的に許容され得る担体としては、水および油などの滅菌液体、例えば石油、動物、植物または合成起源のもの、例えば落花生油、大豆油、鉱油、ゴマ油などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0141】

医薬組成物は、例えば、固形製剤、半固形製剤、液体製剤または気体製剤の形態であってもよい。固形製剤は、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、坐剤等であり、液体製剤は、例えば、液剤、懸濁剤、注射剤等である。組成物はまた、リポソーム、ミクロスフェアなどの形態であってもよい。特に、医薬組成物は、経口投与に適した剤形である。

【0142】

医薬組成物が静脈内投与用である場合、水は例示的な担体である。生理食塩水ならびに水溶性デキストロースおよびグリセロール水溶液もまた、特に注射用溶液のための液体担体として使用することができる。適切な薬学的賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、マルトース、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセリル、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが挙げられる。組成物は、所望であれば、少量の湿潤剤、乳化剤またはｐＨ緩衝剤も含有できる。経口製剤は、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準的な担体を含み得る。適切な薬学的に許容され得る担体の例は、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）に記載されている。

【0143】

本発明の医薬組成物は、全身的および／または局所的に作用し得る。この目的のために、本発明の医薬組成物は適切な経路を介して投与することができ、例えば、注射（例えば、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内または筋肉内注射（注入を含む））を介して、または経皮経路を介して、または経口、頬側、鼻、経粘膜もしくは局所経路を介して、または眼科用製剤として、または吸入を介して投与することができる。

【0144】

これらの投与経路のために、本発明の医薬組成物は、適切な剤形で投与され得る。そのような剤形としては、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、ハードキャンディ、散剤、スプレー、クリーム、膏薬、坐剤、ゲル、ペースト、ローション、軟膏、水性懸濁液、注射液、エリキシル剤、シロップなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0145】

医薬組成物中の本発明の化合物の含有量または量は、約０．００１ｍｇ～約１０００ｍｇ、適切には０．０１～８００ｍｇ、好ましくは０．０５～５００ｍｇ、より好ましくは０．１～３５０ｍｇ、特に好ましくは０．５～１００ｍｇであり得る。

【0146】

いくつかの実施形態では、本発明は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグを、１種以上の薬学的に許容され得る担体と組み合わせるステップを含む、本発明の医薬組成物を調製する方法を提供する。

【0147】

治療方法および使用
本発明の別の目的は、ＳＴＩＮＧシグナル経路を活性化するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物の使用を提供することである。

【0148】

本発明の別の目的は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患を予防または治療するための本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物の使用を提供することである。

【0149】

本発明の別の目的は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患を予防または治療するための医薬の製造における、本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物の使用を提供することである。

【0150】

本発明の別の目的は、ＳＴＩＮＧ介在性疾患の予防または処置のための方法であって、予防的または治療的に有効な量の本発明の化合物、またはその薬学的に許容され得る塩、立体異性体、互変異性体、多形、溶媒和物、Ｎ－オキシド、同位体標識化合物、代謝産物もしくはプロドラッグ、または本発明の医薬組成物を、予防または処置を必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。

【0151】

本発明のいくつかの実施形態によれば、上記ＳＴＩＮＧ介在性疾患は腫瘍である。好ましくは、疾患は癌である。

【0152】

本明細書で使用される「有効な量」という用語は、所望の予防または治療効果を達成するのに十分な量、例えば、治療される疾患に関連する１以上の症状の緩和を達成する量を指す。

【0153】

用量レジメンは、最適な反応を達成するように調整することができる。例えば、薬物は、単回ボーラスで投与してもよく、または数回の小用量で時間をかけて投与してもよく、または用量は、治療の実際の要件に従って比例的に減少または増加させてもよい。用量は、軽減されるべき状態の種類および重症度に応じて変化し得、単回用量または複数回用量を含み得ることに留意されたい。任意の特定の対象について、詳細な用量レジメンは、対象の要件、および医薬組成物の投与または投与の管理を担当する熟練した医師の専門的判断に従って調整されるべきであることがさらに理解されよう。

【0154】

投与すべき本発明の化合物の量は、処置すべき対象、障害または状態の重症度、投与速度、化合物の形態および処方医師の判断に依存する。一般に、有効投与量は、約０．０００１～約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、例えば約０．０１～約１０ｍｇ／ｋｇ／日（単回投与または複数回投与）の範囲である。７０ｋｇの人の場合、有効用量は、合計で約０．００７ｍｇ／日～約３，５００ｍｇ／日、例えば合計で約０．７ｍｇ／日～約７００ｍｇ／日である。いくつかの例では、前述の範囲の下限を下回る投与量レベルは十分以上であり得るが、他の例では、有害な副作用を引き起こすことなく、さらにより多い用量を使用することができるが、このようなより多い用量は、１日を通して投与するために最初にいくつかの少量に分割される。

【0155】

特に明記しない限り、本明細書で使用される「処置する」または「処置」という用語は、そのような用語が適用される障害もしくは状態、またはそのような障害もしくは状態の１以上の症状を逆転させる、緩和する、進行を阻害する、または予防することを意味する。

【0156】

本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒトまたは非ヒト動物を含む。例示的なヒト被験体は、疾患（本明細書に記載のものなど）を有するヒト被験体（患者と呼ばれる）または正常な被験体を含む。本明細書で使用される「非ヒト動物」という用語は、非哺乳動物（例えば、鳥類、両生類、爬虫類）などの全ての脊椎動物、ならびに非ヒト霊長類、家畜および／または家畜（例えば、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタなど）などの哺乳動物を含む。

【実施例】

【0157】

本発明は、本発明の目的および技術的解決策を明らかにするために、以下の実施例を参照してさらに詳細に説明されている。これらの実施例は、本発明の例示のために提供されているにすぎず、本発明の範囲を限定することを意図するものではないことを当業者は理解すべきである。特定の条件が実施例に示されていない場合、実験は、従来の条件または製造業者によって推奨される条件に従って行われるものとする。製造業者を示さずに使用される試薬または機器は全て、市販されている従来の製品である。

【0158】

化合物の構造は、核磁気共鳴（^１Ｈ ＮＭＲ）または質量分析（ＭＳ）によって同定した。^１Ｈ ＮＭＲは、ＪＥＯＬ Ｅｃｌｉｐｓｅ ４００ ＮＭＲ分光計を用いて、溶媒として重水素化メタノール（ＣＤ_３ＯＤ）、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ_３）または六重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ－ｄ_６）を用いて、内部標準としてテトラメチルシラン（ＴＭＳ）を用いて測定し、化学シフト（δ）をｐｐｍで示した。

【0159】

ＭＳはＡｇｉｌｅｎｔ（ＥＳＩ）質量分析計（製造業者：Ａｇｉｌｅｎｔ、機種：Ａｇｉｌｅｎｔ ６１２０Ｂ）で測定した。

【0160】

調製用高速液体クロマトグラフィーのパラメータは以下のように示される。

【0161】

機器モデル：Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０、クロマトグラフィーカラム：Ｗａｔｅｒｓ ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤ（１９ｍｍ×１５０ｍｍ×５．０μｍ）、クロマトグラフィーカラム温度：２５℃、流速：２０．０ｍＬ／ｍｉｎ、検出波長：２１４ｎｍ、溶出勾配：（０分：１０％ Ａ、９０％ Ｂ、１６．０分：９０％ Ａ、１０％ Ｂ）、移動相Ａ：アセトニトリル、移動相Ｂ：０．０５％ギ酸水溶液。

【0162】

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）シリカゲルプレートとしてＭｅｒｃｋ社のアルミニウムプレート（２０×２０ｃｍ）を使用し、薄層クロマトグラフィー分離精製にはＹａｎｔａｉ社のＧＦ ２５４（１ｍｍ）を使用した。

【0163】

反応を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）またはＬＣ－ＭＳによってモニタリングした。使用される展開溶媒系は、ジクロロメタン－メタノール系、ｎ－ヘキサン－酢酸エチル系、ならびに石油エーテル－酢酸エチル系を含む。溶媒の体積比は、化合物の極性に応じて、またはトリエチルアミンを添加することによって調整した。

【0164】

マイクロ波反応は、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ＋（４００Ｗ、室温～３００℃）マイクロ波反応器を用いて行った。

【0165】

カラムクロマトグラフィーの固定相として、２００～３００メッシュのシリカゲルを通常使用した。溶離剤系は、ジクロロメタン－メタノール系および石油エーテル－酢酸エチル系を含む。溶媒の体積比は、化合物の極性に応じて、または少量のトリエチルアミンを添加することによって調整した。

【0166】

特に明記しない限り、以下の実施例における反応温度は室温（２０℃～３５℃）であった。

【0167】

本発明で使用される試薬は、Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｔｏｐｂｉｏｃｈｅｍなどから購入した。

【0168】

本発明の従来の合成方法、実施例および中間調製例では、本明細書で使用される略語は以下の意味を有する。

【表1】

【0169】

中間体調製例１：エチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ａ）およびエチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｂ）の調製

【化13】

【0170】

工程１：メチル５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルメートの調製
６－フルオロベラトルアルデヒド（１０．０ｇ、５４．３ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）に溶解し、チオグリコール酸メチル（６．９ｇ、６５．２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２２．５ｇ、１６２．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃に加熱し、１５時間反応させた。反応溶液を水（１０００ｍＬ）にゆっくり注いだ。混合物を２時間撹拌し、濾過した。得られた固体を水（５００ｍＬ）で洗浄し、真空下６０℃で乾燥させて、この工程の表題化合物を得た（１２．０ｇ、収率：８７．６％）。

【0171】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２５３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0172】

工程２：５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ギ酸の調製
メチル５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルメート（１２．０ｇ、４７．６ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）および水（２０ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（３．８ｇ、９５．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で４時間反応させた。反応溶液を４０℃で減圧濃縮し、メタノールの一部を除去した。残渣を水（５００ｍＬ）に添加した。得られた混合物を希塩酸でｐＨ＝３に調整し、濾過した。得られた固体を水（５００ｍＬ）で洗浄し、真空下６０℃で乾燥させて、表題化合物を得た（８．０ｇ、収率：７０．６％）。

【0173】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２３９．０［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0174】

工程３：Ｎ，５，６－トリメトキシ－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミドの調製
５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ギ酸（８．２ｇ、３４．４ｍｍｏｌ）およびジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（４．１ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に加えた後、ＨＡＴＵ（１３．１ｇ、３４．４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８．９ｇ、６８．８ｍｍｏｌ）を順次加えた。次いで、混合物を室温で４時間反応させた。反応溶液を水（３００ｍＬ）に注ぎ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（９．５ｇ、収率：９８．１％）。

【0175】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２８２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0176】

工程４：１－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）エタノンの調製
Ｎ，５，６－トリメトキシ－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド（１０．０ｇ、３５．６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶解した。臭化メチルマグネシウム（１０６．６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３５．６ｍＬ）溶液を０℃でゆっくり添加した。反応混合物をゆっくりと室温まで加温し、４時間反応させた。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（７．９ｇ、収率：９４．１％）。

【0177】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２３７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0178】

工程５：２－ブロモ－１－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）エタノンの調製
１－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）エタノン（２．０ｇ、８．５ｍｍｏｌ）および臭化銅（５．７ｇ、２５．４ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（６０ｍＬ）に添加した。混合物を８０℃まで加熱し、８時間反応させた。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣に亜硫酸ナトリウム（１．８ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１５ｍＬ）、水（１５ｍＬ）および酢酸（８ｍＬ）を添加し、室温で２時間撹拌した。反応溶液を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（１．５ｇ、収率：６７．０％）。

【0179】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３１５．０［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0180】

工程６：ジ－ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－オキソエチル）マロネートの調製
マロン酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２３．８ｇ、１１０．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶解した。その後、６０％水素化ナトリウム（４．２ｇ、１１０．４ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり添加し、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。２－ブロモ－１－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）エタノン（１７．４ｇ、５５．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の溶液をゆっくり添加した。その後、混合物をゆっくり室温まで加温し、２時間反応させた。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液（５００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、濃縮物を調製用高速液体クロマトグラフィーを介して精製し、この工程の表題化合物を得た（２２．５ｇ、収率：９０．５％）。

【0181】

工程７：４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸の調製
ジ－ｔｅｒｔ－ブチル２－（２－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－２－オキソエチル）マロネート（８．０ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）を、塩化水素の１，４－ジオキサン溶液（８０ｍＬ、４ｍｏｌ／Ｌ）に溶解した。反応混合物を撹拌下、１２０℃で１８時間反応させた。反応溶液を水（２００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和塩化ナトリウム水溶液で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（４．７ｇ、収率：８９．９％）。

【0182】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２９５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0183】

工程８：エチル４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレートの調製
４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（４．０ｇ、１３．６ｍｍｏｌ）をエタノール（８０ｍＬ）に溶解した。室温で撹拌しながら濃硫酸（１ｍＬ）を添加した。反応混合物を８０℃に加熱し、３時間反応させた。反応溶液を水（２００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（３．９ｇ、収率：８９．０％）。

【0184】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３２３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0185】

工程９：エチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ａ）およびエチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｂ）の調製
エチル４－（５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（０．７３ｇ、２．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）に溶解した。三塩化アルミニウム（４．２ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）を氷浴中でゆっくり添加し、混合物を室温まで加熱し、２４時間撹拌した。反応溶液を水（１００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を希塩酸でｐＨ＝２に調整し、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。その濃縮物を調製用高速液体クロマトグラフィーによって精製することにより、エチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ａ：４９３ｍｇ、収率７１．４％）およびエチル４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｂ：１７０ｍｇ、収率２４．３％）を得た。

【0186】

中間体Ａ：
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３０９．１［Ｍ＋Ｈ］、
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．８７（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｓ，１Ｈ），７．２２（ｓ，１Ｈ），６．０８（ｓ，１Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．３２－３．２９（ｍ，２Ｈ），２．８０－２．７６（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，３Ｈ）．

【0187】

中間体Ｂ：
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３０９．１［Ｍ＋Ｈ］、
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．８４（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），７．２２（ｓ，１Ｈ），５．８５（ｓ，１Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，２Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．３３－３．３０（ｍ，２Ｈ），２．７９－２．７６（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，３Ｈ）．

【0188】

中間体調製例２：エチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｃ）の調製

【化14】

エチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ａ、５００．０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）をアセトン（１０ｍＬ）に溶解した。次いで、炭酸カリウム（４４７．０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）、ヨウ化カリウム（４３．０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）および３－ブロモ－１－プロパノール（３３８．０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃に加熱し、５時間反応させた。反応溶液を濃縮し、水（５０ｍＬ）に注ぎ、混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、この工程の表題化合物を得た（中間体Ｃ、４８５．０ｍｇ、収率：８１．６％）。

【0189】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0190】

中間体調製例３：エチル４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｄ）の調製

【化15】

エチル４－（６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ａ）を４－（５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソエチルブチレート（中間体Ｂ）に置き換えた以外は、中間体調製例２の合成経路を使用して表題化合物を得た（中間体Ｄ、３８０ｍｇ、収率：７９．８％）。

【0191】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３６７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0192】

中間体調製例４：エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ）およびエチル３－（Ｎ－メチル－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｆ）の調製

【化16】

【0193】

工程１：エチル３－（Ｎ－メチル－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネートの調製
５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ギ酸（５００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）およびエチル３－（メチルアミノ）プロピオネート（３８９ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）に溶解した。次いで、ＨＡＴＵ（１．６ｇ、４．２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８１４ｍｇ、６．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を６０℃に加熱した後、４時間反応させた。反応溶液を水（１００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、濃縮物を調製用高速液体クロマトグラフィーによって精製し、本工程の表題化合物を得た（４９２ｍｇ、収率：６６．８％）。

【0194】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５２．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．４７（ｓ，１Ｈ），７．２５（ｓ，１Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），４．１６（ｑ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．８８－３．８５（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｓ，３Ｈ），２．７４－２．７１（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，３Ｈ）．

【0195】

工程２：エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ）およびエチル３－（Ｎ－メチル－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｆ）の調製
エチル３－（Ｎ－メチル－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（５２０ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解した。次いで、氷浴中で三塩化アルミニウム（１．９７ｇ、１４．８０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温まで加温し、２４時間撹拌した。反応溶液を水（１００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を希塩酸でｐＨ＝２に調整し、酢酸エチル（３０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。その濃縮物を調製用高速液体クロマトグラフィーで精製し、エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ、３０５ｍｇ、収率：６１．２％）およびエチル３－（Ｎ－メチル－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｆ、１７４ｍｇ、収率：３４．９％）を得た。

【0196】

中間体Ｅ：
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３３８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋、
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：９．５５（ｓ，１Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），４．０７（ｑ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，２Ｈ），３．８５－３．８３（ｍ，３Ｈ），３．７３－３．６５（ｍ，２Ｈ），３．２１－３．１８（ｍ，３Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，３Ｈ）．

【0197】

中間体Ｆ：
ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３３８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋、
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：９．２５（ｓ，１Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），４．０７（ｑ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，２Ｈ），３．８５－３．８２（ｍ，３Ｈ），３．７３－３．６８（ｍ，２Ｈ），３．２１－３．１８（ｍ，３Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，３Ｈ）．

【0198】

実施例１：エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物１）の調製

【化17】

エチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｃ、１００ｍｇ、２７２．９μｍｏｌ）、エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ、９６ｍｇ、２７２．９μｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１４３ｍｇ、５４５．９μｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、窒素保護下でアゾジカルボン酸ジイソプロピル（１１０ｍｇ、５４５．９μｍｏｌ）を添加した。次いで、混合物を室温で１２時間撹拌した。反応溶液を４０℃にて減圧濃縮し、テトラヒドロフランを除去し、調製用高速液体クロマトグラフィーにて精製し、表題化合物を得た（９８ｍｇ、収率：５２．４％）。

【0199】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：８．２１（ｓ，１Ｈ），７．６６－７．６４（ｍ，２Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），４．２７－４．２１（ｍ，４Ｈ），４．０８－４．０３（ｍ，４Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，２Ｈ），３．３２－３．２９（ｍ，２Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，４Ｈ），２．２９－２．２６（ｍ，２Ｈ），１．２３－１．１６（ｍ，６Ｈ）．

【0200】

実施例２：４－（６－（３－（（２－（（２－カルボキシエチル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（化合物２）の調製

【化18】

エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物１、８０．０ｍｇ、１１６．６μｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）および水（５ｍＬ）に溶解した。水酸化ナトリウム（２３ｍｇ、５８３．２６μｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃まで昇温した後、３時間反応させた。室温まで冷却した後、反応溶液を水（５０ｍＬ）に注いだ。得られた混合物を希塩酸でｐＨ＝２に調整し、酢酸エチル（１５ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、濃縮物を調製用高速液体クロマトグラフィーによって精製し、表題化合物を得た（５５ｍｇ、収率：７５．１％）。

【0201】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：１２．２６（ｓ，２Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），７．６６－７．６１（ｍ，３Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），４．２７－４．２１（ｍ，４Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．２７－３．２４（ｍ，２Ｈ），３．１７（ｓ，３Ｈ），２．６１－２．５８（ｍ，４Ｈ），２．２９－２．２６（ｍ，２Ｈ）．

【0202】

実施例３：エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物３）の調製

【化19】

出発物質エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ）をエチル３－（Ｎ－メチル－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｆ）に置き換えた以外は、実施例１の合成経路を使用して表題化合物を得た（６７ｍｇ、収率：６０．４％）。

【0203】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：８．２１（ｓ，１Ｈ），７．６７－７．６２（ｍ，２Ｈ），７．５７－７．５５（ｍ，１Ｈ），７．４９－７．４２（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．０３（ｍ，８Ｈ），３．８５－３．８２（ｍ，６Ｈ），３．７７－３．７４（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），３．３１－３．２９（ｍ，２Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，４Ｈ），２．３０－２．２３（ｍ，２Ｈ），１．２８－１．２０（ｍ，６Ｈ）．

【0204】

実施例４：４－（６－（３－（（２－（（２－カルボキシエチル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（化合物４）の調製

【化20】

出発物質エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物１）をエチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物３）に置き換えた以外は、実施例２の合成経路を使用して表題化合物を得た（２９ｍｇ、収率：６８．３％）。

【0205】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：１２．２９（ｓ，２Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｓ，１Ｈ），７．４９－７．４７（ｍ，２Ｈ），４．２８－４．２５（ｍ，２Ｈ），４．２１－４．１８（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｓ，６Ｈ），３．７０－３．６５（ｍ，２Ｈ），３．２７－３．２４（ｍ，２Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．６１－２．５８（ｍ，４Ｈ），２．３３－２．２６（ｍ，２Ｈ）．

【0206】

実施例５：エチル４－（５－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物５）の調製

【化21】

出発物質エチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｃ）をエチル４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｄ）に置き換えた以外は、実施例１の合成経路を使用して表題化合物を得た（５６ｍｇ、収率：５９．３％）。

【0207】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：８．２１－８．１５（ｍ，１Ｈ），７．６６－７．６５（ｍ，１Ｈ），７．６２－７．６０（ｍ，２Ｈ），７．５６－７．４８（ｍ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），４．２７－４．２０（ｍ，４Ｈ），４．０９－４．０３（ｍ，４Ｈ），３．８６－３．８２（ｍ，６Ｈ），３．７７－３．７４（ｍ，２Ｈ），３．３０－３．２６（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，４Ｈ），２．３０－２．２７（ｍ，２Ｈ），１．２４－１．１０（ｍ，６Ｈ）．

【0208】

実施例６：４－（５－（３－（（２－（（２－カルボキシエチル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（化合物６）の調製

【化22】

出発物質エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物１）をエチル４－（５－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物５）に置き換えた以外は、実施例２の合成経路を使用して表題化合物を得た（２６ｍｇ、収率：６６．７％）。

【0209】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：１２．２８（ｓ，２Ｈ），８．２０－８．１４（ｍ，１Ｈ），７．６６－７．６０（ｍ，３Ｈ），７．５６－７．４８（ｍ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），４．２７－４．１７（ｍ，４Ｈ），３．９２－３．８０（ｍ，６Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．２７－３．２４（ｍ，２Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．６２－２．５９（ｍ，４Ｈ），２．３０－２．２７（ｍ，２Ｈ）．

【0210】

実施例７：４－（５－（３－（（２－（（２－カルボキシエチル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（化合物８）の調製

【化23】

【0211】

工程１：エチル４－（５－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレートの調製
出発物質エチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｃ）をエチル４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｄ）に置き換え、出発物質エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ）をエチル３－（Ｎ－メチル－５－ヒドロキシ－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｆ）に置き換えた以外は実施例１の合成経路を使用して表題化合物を得た（４３ｍｇ、収率：６３．６％）。

【0212】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0213】

工程２：４－（５－（３－（（２－（（２－カルボキシエチル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブタン酸（化合物８）の調製
出発物質エチル４－（６－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－６－イル）オキシ）プロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物１）をエチル４－（５－（３－（（２－（（３－エトキシ－３－オキソプロピル）（メチル）カルバモイル）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレートに置き換えた以外は、実施例２の合成経路を使用して表題化合物を得た（２６ｍｇ、収率：６７．２％）。

【0214】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：１２．２６（ｓ，２Ｈ），８．１７（ｓ，１Ｈ），７．６６－７．６０（ｍ，２Ｈ），７．５６－７．５４（ｍ，２Ｈ），７．４９－７．４７（ｍ，１Ｈ），４．２６－４．２０（ｍ，４Ｈ），３．８６－３．８４（ｍ，６Ｈ），３．７３－３．６９（ｍ，２Ｈ），３．２７－３．２４（ｍ，２Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．６１－２．５８（ｍ，４Ｈ），２．３０－２．２７（ｍ，２Ｈ）．

【0215】

実施例８：エチル４－（６－メトキシ－５－（３－（（６－メトキシ－２－（（３－メトキシプロピル）（メチル）カルバモイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物２３）の調製

【化24】

【0216】

工程１：５，６－ジメトキシ－Ｎ－（３－メトキシプロピル）－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミドの調製
出発物質エチル３－（メチルアミノ）プロピオネートを３－メトキシ－Ｎ－メチル－１－プロピルアミンに置き換えた以外は、中間体調製例４の工程１の合成方法を用いて表題化合物を得た（８２３ｍｇ、収率：７２．６％）。

【0217】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３２４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0218】

工程２：５－ヒドロキシ－６－メトキシ－Ｎ－（３－メトキシプロピル）－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミドの調製
出発物質エチル３－（Ｎ－メチル－５，６－ジメトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネートを５，６－ジメトキシ－Ｎ－（３－メトキシプロピル）－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミドに置き換えた以外は、中間体調製例４の工程２の合成方法を用いて表題化合物を得た（１２６ｍｇ、収率：３７．５％）。

【0219】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３１０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0220】

工程３：エチル４－（６－メトキシ－５－（３－（（６－メトキシ－２－（（３－メトキシプロピル）（メチル）カルバモイル）ベンゾ［ｂ］チオフェン－５－イル）オキシ）プロポキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（化合物２３）の調製
出発物質エチル４－（６－（３－ヒドロキシプロポキシ）－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｃ）をエチル４－（５－（３－ヒドロキシプロポキシ）－６－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－イル）－４－オキソブチレート（中間体Ｄ）に置き換え、出発物質エチル３－（Ｎ－メチル－６－ヒドロキシ－５－メトキシベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミド）プロピオネート（中間体Ｅ）を５－ヒドロキシ－６－メトキシ－Ｎ－（３－メトキシプロピル）－Ｎ－メチルベンゾ［ｂ］チオフェン－２－ホルムアミドに置き換えた以外は実施例１の合成経路を使用して表題化合物を得た（３９ｍｇ、収率：５８．３％）。

【0221】

ＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）：６５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．
^１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：８．１８（ｓ，１Ｈ），７．６２－７．６１（ｍ，２Ｈ），７．５６－７．５３（ｍ，２Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），４．２４－４．１６（ｍ，４Ｈ），４．０８－４．０３（ｍ，２Ｈ），３．８７－３．８２（ｍ，６Ｈ），３．５５－３．５１（ｍ，４Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），２．６８－２．６５（ｍ，５Ｈ），２．３０－２．２７（ｍ，２Ｈ），２．０２－１．９７（ｍ，２Ｈ），１．１９－１．１６（ｍ，３Ｈ）．

【0222】

生物学的アッセイ
以下の実験例で使用される対照化合物１、ＡＤＵ－Ｓ １００（１６３８７５０－９６－５）はＭＣＥから購入し、対照化合物２、

【化25】

は従来技術の方法に従って合成した。

【0223】

実験例１．ＴＨＰ１－Ｂｌｕｅ（商標）ＩＳＧ細胞におけるＳＴＩＮＧ介在性インターフェロン（ＩＦＮ）シグナルレポーター遺伝子に対する化合物のアゴニスト作用
この実験では、ＩＦＮ調節因子（インターフェロン調節因子）によって調節されるＳＥＡＰ（分泌型胚性アルカリホスファターゼ）レポーター遺伝子の活性をＴＨＰ １－Ｂｌｕｅ（商標）ＩＳＧ細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）において検出して、細胞レベルでのＳＴＩＮＧ介在性ＩＦＮシグナル経路に対する試験対象化合物のアゴニスト作用を評価した。

【0224】

対数増殖期のＴＨＰ１－Ｂｌｕｅ（商標）ＩＳＧ細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を遠心分離し、２×１０^６細胞／ｍＬの密度になるように細胞培養液に再懸濁した。細胞懸濁液を９６ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に５０μＬ／ウェルになるように接種した。被検化合物の母液を細胞培養液で勾配希釈し、２倍作業濃度希釈溶液（対照化合物１および２を３倍勾配で希釈した：２００、６６．６７、２２．２２、７．４１、２．４７、０．８２、０．２７および０μＭ、化合物１、２、４、６、８および２３を８倍の勾配で希釈した：６０、７．５、０．９４、０．１２、０．０１５、０．００１８、０．０００２３および０μＭ、化合物３および５を１０倍の勾配で希釈した：１０、１、０．１、０．０１、０．００１、０．０００１、０．００００１および０μＭ）を得た。化合物の２倍作業濃度希釈溶液を９６ウェルプレート（２％ ＤＭＳＯを含む培養液５０μｌを陰性対照用ウェルに添加）に５０μＬ／ウェル加えた。次いで、培養プレートを細胞インキュベーターに入れ、１６時間インキュベートした。細胞をインキュベートした後、１０μＬの細胞培養上清を９６ウェルプレートに移し、ＱＵＡＮＴＩ－Ｂｌｕｅ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）溶液を９０μＬ／ウェル添加した。細胞を３７℃で３時間インキュベートした。６２０ｎｍでの吸光度（ＯＤ_{６２０ｎｍ}）をマイクロプレートリーダーで読み取った。ＥＣ_５０をＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアによるフィッティングによって計算し、実験結果を表１に示す。

【0225】

表１．ＳＴＩＮＧ介在性インターフェロン（ＩＦＮ）シグナルレポーター遺伝子に対する試験化合物のアゴニスト作用

【表2】

表中、ＥＣ_５０は、化合物の刺激によって生成されたＯＤ_{６２０ｎｍ}値がＥ_ｍａｘの半分に達したときの化合物の濃度を指す。Ｅ_ｍａｘは、化合物の刺激によって生成されたＯＤ_{６２０ｎｍ}の最大値を指す。

【0226】

結果は、化合物１、２、３、４、５、６、８および２３が、ＴＨＰ１－Ｂｌｕｅ（商標）ＩＳＧ細胞におけるＳＴＩＮＧ介在性インターフェロン（ＩＦＮ）シグナル伝達経路に対して強いアゴニスト作用を有することを示した。

【0227】

実験例２．ヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路タンパク質のリン酸化に対する化合物のアゴニスト作用
この実験では、ＳＴＩＮＧならびにその下流タンパク質ＴＢＫ１（ＴＡＮＫ結合キナーゼ１）およびＩＲＦ ３（インターフェロン調節因子３）のリン酸化レベルの変化をタンパク質ブロッティングによって検出して、細胞レベルでのＳＴＩＮＧシグナル伝達経路に対する試験化合物のアゴニスト作用を評価した。

【0228】

対数増殖期のＴＨＰ－１細胞を遠心分離し、細胞培養液に４×１０^６細胞／ｍＬの密度になるように再懸濁した。細胞懸濁液を１２ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に０．５ｍＬ／ウェルになるように接種した。被検化合物を細胞培養液で希釈して、２倍濃度の作業溶液（対照化合物１および２：６０μＭ、化合物１および３：０．６μＭ、６μＭ、および６０μＭ、化合物２、４、６および８：６μＭ、２０μＭおよび６０μＭ）にした。０．５ｍＬの化合物の希釈液を１２ウェルプレートに添加し（２％ ＤＭＳＯを含む培養液５００μｌを陰性対照用ウェルに添加）、細胞インキュベーター内で３時間インキュベートした。インキュベートした後、遠心分離により細胞を回収し、６０μＬの細胞溶解緩衝液（ＣＳＴ）で３０分間溶解し、１２，０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を回収してタンパク質濃度を測定した後、適量の５倍濃度のタンパク質ローディング緩衝液を加えた。９５℃で１０分間加熱し、タンパク質電気泳動試料を調製した。最後に、タンパク質ブロッティングを行って、対応するタンパク質のリン酸化レベルを検出した。実験結果を図１～図５に示す。タンパク質ブロッティングに使用した一次抗体は、ＳＴＩＮＧ（Ｄ２Ｐ２Ｆ）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＳＴＩＮＧ（Ｓｅｒ３６６）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＩＲＦ３（Ｓｅｒ３９６）（Ｄ６０１Ｍ）ウサギｍＡｂ、ＩＲＦ３（Ｄ８３Ｂ９）ウサギｍＡｂ、ＴＢＫ１／ＮＡＫ（Ｄ１Ｂ４）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＴＢＫ１／ＮＡＫ（Ｓｅｒ１７２）（Ｄ５２Ｃ２）ＸＰ（登録商標）ウサギｍＡｂおよびＧＡＰＤＨ（Ｄ１６Ｈ１１）ウサギｍＡｂであり、ＣＳＴから購入した、二次抗体西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）はＺｓｇｂ－ｂｉｏから購入した。

【0229】

図１～図５に示すように、化合物１、２、３、４、６および８は、ＴＨＰ－１細胞において、ＳＴＩＮＧならびにその下流タンパク質ＴＢＫ１およびＩＲＦ３のリン酸化レベルに対して強いアゴニスト作用を示す。

【0230】

実験例３．ヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路サイトカインｈＩＦＮ－βの発現に対する化合物のアゴニスト作用
この実験では、細胞レベルでのＳＴＩＮＧ経路サイトカインｈＩＦＮ－βの発現に対する試験対象化合物のアゴニスト効果を評価するために、ＳＴＩＮＧシグナル伝達経路サイトカインｈＩＦＮ－βの発現を、ＥＬＩＳＡ法によってＴＨＰ１細胞（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｏｂｉｏｅｒ）において検出した。

【0231】

対数増殖期のＴＨＰ１細胞（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｏｂｉｏｅｒ）を遠心分離し、細胞培養液に８×１０^６細胞／ｍＬの密度になるように再懸濁した。細胞懸濁液を２４ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に２５０μＬ／ウェルになるように接種した。被検化合物の母液を細胞培養液で希釈し、２倍作業濃度希釈液（対照化合物１および２を２倍の勾配で希釈した：２００、１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５、１．５６２５および０μＭ、ならびに化合物４、６および８を３倍勾配で希釈した：２００、６６．６７、２２．２２、７．４１、２．４７、０．８２、０．２７、０．０９１および０μＭ）を得た。化合物の２倍作業濃度希釈液を２４ウェルプレート（２％ ＤＭＳＯを含む培養２５０μｌを陰性対照用ウェルに添加）に２５０μＬ／ウェルになるように添加した。培養プレートを細胞培養インキュベーターに入れ、８時間インキュベートした。細胞をインキュベートした後、上清を３００ｇ×５分での遠心分離によって回収し、細胞培養上清中のｈＩＦＮ－β含有量（ｐｇ／ｍｌ）を、ＰＢＬからのＶｅｒｉＫｉｎｅ Ｈｕｍａｎ ＩＦＮ－βＥＬＩＳＡキットの操作説明書に従って検出した（ＯＤ_{４５０ｎｍ}吸光度－ｈＩＦＮ－β標準濃度標準曲線およびマイクロプレートリーダーによって読み取られたＯＤ_{４５０ｎｍ}吸光度値の変換によって得た）。ＥＣ_５０を、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアによるｌｏｇ（アゴニスト）対応答－可変勾配当てはめによって計算し、実験結果を表２に示す。

【表3】

【0232】

表中、ＥＣ_５０は、化合物の刺激によって生じたｈＩＦＮ－βの発現がＥ_ｍａｘの半分に達したときの化合物の濃度を指す。Ｅ_ｍａｘは、化合物の刺激によって生じるｈＩＦＮ－βの最も高い発現を指す。

【0233】

結果は、化合物４、６および８が、ヒトＴＨＰ－１細胞におけるＳＴＩＮＧ経路サイトカインｈＩＦＮ－βの発現に対して強いアゴニスト作用を有することを示す。

【0234】

実験例４．マウスＲａｗ２６４．７細胞におけるＳＴＩＮＧシグナル経路タンパク質のリン酸化に対する化合物のアゴニスト作用
この実験では、ＳＴＩＮＧならびにその下流タンパク質ＴＢＫ１（ＴＡＮＫ結合キナーゼ１）およびＩＲＦ ３（インターフェロン調節因子３）のリン酸化レベルの変化をタンパク質ブロッティングによって検出して、細胞レベルでのＳＴＩＮＧシグナル伝達経路に対する試験化合物のアゴニスト作用を評価した。

【0235】

対数増殖期のＲａｗ２６４．７細胞を遠心分離し、細胞培養液に１．６×１０^６細胞／ｍＬの密度になるように再懸濁した。細胞懸濁液を６ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に１ｍＬ／ウェルになるように接種した。被検化合物を細胞培養液で希釈して、２倍の作業溶液濃度（対照化合物１および２：６０μＭ、化合物８：０．６μＭ、６μＭ、６０μＭ、化合物２、４および６：６μＭ、２０μＭおよび６０μＭ）にした。１ｍＬの化合物の希釈溶液を６ウェルプレートに添加した（２％ ＤＭＳＯを含有する培養液１ｍＬを陰性対照ウェルに添加した）。プレートを細胞インキュベーターに入れ、３時間インキュベートした。インキュベートした後、遠心分離により細胞を回収し、６０μＬの細胞溶解緩衝液（ＣＳＴ）で３０分間溶解し、１２０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を回収してタンパク質濃度を測定した後、適量の５倍濃度のタンパク質ローディング緩衝液を加えた。９５℃で１０分間加熱し、タンパク質電気泳動試料を調製した。最後に、タンパク質ブロッティングを行って、対応するタンパク質のリン酸化レベルを検出した。実験結果を図６～図７に示す。タンパク質ブロッティングに使用した一次抗体は、ＳＴＩＮＧ（Ｄ２Ｐ２Ｆ）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＳＴＩＮＧ（Ｓｅｒ３６５）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＩＲＦ３（Ｓｅｒ３９６）（Ｄ６０１Ｍ）ウサギｍＡｂ、ＩＲＦ３（Ｄ８３Ｂ９）ウサギｍＡｂ、ＴＢＫ１／ＮＡＫ（Ｄ１Ｂ４）ウサギｍＡｂ、ホスホ－ＴＢＫ１／ＮＡＫ（Ｓｅｒ１７２）（Ｄ５２Ｃ２）ＸＰ（登録商標）ウサギｍＡｂ、ＧＡＰＤＨ（Ｄ１６Ｈ１１）ウサギｍＡｂであり、ＣＳＴから購入した。二次抗体西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）はＺｓｇｂ－ｂｉｏから購入した。

【0236】

図６～図７に示すように、化合物２、４、６および８は、Ｒａｗ２６４．７細胞において、ＳＴＩＮＧならびにその下流タンパク質ＴＢＫ１およびＩＲＦ３のリン酸化レベルに対して強いアゴニスト作用を有する。

【0237】

実験例５．マウスＲａｗ２６４．７細胞におけるＳＴＩＮＧ経路サイトカインｍＩＦＮ－βの発現に対する化合物のアゴニスト作用
この実験では、ＳＴＩＮＧ経路サイトカインｍＩＦＮ－βの発現に対する被検化合物のアゴニスト作用を細胞レベルで評価するために、ＥＬＩＳＡ法によってＲａｗ２６４．７細胞（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｏｂｉｏｅｒ）におけるＳＴＩＮＧシグナル伝達経路サイトカインｍＩＦＮ－βの発現を検出した。

【0238】

対数増殖期のＲａｗ２６４．７細胞（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｏｂｉｏｅｒ）を遠心分離し、細胞培養液に１．６×１０^６細胞／ｍＬの密度になるように再懸濁した。細胞懸濁液を２４ウェル細胞培養プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）に２５０μＬ／ウェルになるように接種した。被検化合物の母液を細胞培養液で傾斜希釈し、２倍作業濃度希釈液（対照化合物１を３倍の勾配で希釈した：２００、６６．６７、２２．２２、７．４１、２．４７、０．８２、０．２７および０μＭ、対照化合物２を２倍の勾配で希釈した：２００、１００、５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５および０μＭ、ならびに化合物４、６および８を４倍の勾配で希釈した：２００、５０、１２．５、３．１３、０．７８、０．２０、０．０４９および０μＭ）を得た。化合物の２倍作業濃度希釈液を２４ウェルプレート（２％ ＤＭＳＯを含む培養液２５０μｌを陰性対照用ウェルに添加）に２５０μＬ／ウェルになるように添加した。次いで、培養プレートを細胞インキュベーターに入れ、６時間インキュベートした。細胞をインキュベートした後、上清を３００ｇ×５分での遠心分離によって回収し、細胞培養上清中のｍＩＦＮ－β含有量（ｐｇ／ｍｌ）を、ＰＢＬからのＶｅｒｉＫｉｎｅ（商標）マウスＩＦＮβＥＬＩＳＡキットの操作説明書に従って検出した（ＯＤ_{４５０ｎｍ}吸光度－ｍＩＦＮ－β標準濃度標準曲線およびマイクロプレートリーダーによって読み取られたＯＤ_{４５０ｎｍ}吸光度値の変換によって得た）。ＥＣ_５０を、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアによるｌｏｇ（アゴニスト）対応答－可変勾配当てはめによって計算し、実験結果を表３に示す。

【表4】

【0239】

表中、ＥＣ_５０は、化合物の刺激によって生じたｍＩＦＮ－βの発現がＥ_ｍａｘの半分に達したときの化合物の濃度を指す。Ｅ_ｍａｘは、化合物の刺激によって生じたｍＩＦＮ－βの最も高い発現を指す。

【0240】

結果は、化合物４、６および８が、マウスＲａｗ２６４．７細胞におけるＳＴＩＮＧ経路サイトカインｍＩＦＮ－βの発現に対して強いアゴニスト作用を有することを示す。

【0241】

実験例６．化合物とｈＳＴＩＮＧタンパク質との間の結合親和性を検出するアッセイ
この実験では、被検化合物とｈＳＴＩＮＧタンパク質との間の結合親和性を評価するために、６×Ｈｉｓ－ｈＳＴＩＮＧタンパク質に競合的に結合するためのＣｉｓｂｉｏ製のＨｕｍａｎ ＳＴＩＮＧ結合キットにおける化合物および特異的リガンド（ｄ２－ＳＴＩＮＧ－リガンド）の能力を、Ｈｕｍａｎ ＳＴＩＮＧ結合キット（ＨＴＲＦ法）を使用して検出した。

【0242】

化合物をＨｕｍａｎ ＳＴＩＮＧ ｂｉｎｄｉｎｇ ｋｉｔ（希釈バッファー試薬）中の希釈バッファーで勾配希釈し、４倍作業濃度希釈液を得た。５μｌの希釈溶液を３８４ウェルプレートに添加して、反応系中のＤＭＳＯの最終濃度が≦２．５％になるようにした。６倍Ｈｉｓ－ｈＳＴＩＮＧタンパク質（母液中５０倍）を、Ｈｕｍａｎ ＳＴＩＮＧ結合キット（検出緩衝試薬）中の検出緩衝液で１倍に希釈した。５μｌの希釈溶液を３８４ウェルプレートの対応するウェルに添加し、タンパク質および化合物を含まないウェルを陰性対照ウェル（分）とし、タンパク質を含むが化合物を含まないウェルを陽性対照ウェル（最大）とした。ｄ２－ＳＴＩＮＧ－リガンドおよびＴｂ^３＋－抗－６×Ｈｉｓ－抗体（いずれも母液中５０倍）をＨｕｍａｎ ＳＴＩＮＧ結合キット（検出緩衝試薬）中の検出緩衝液で１倍に希釈し、混合液を１：１の割合で均一に混合した。１０μｌの混合溶液を、３８４ウェルプレートの対応するウェルに添加した。プレートを密封し、室温（２５℃）で３時間インキュベートした。ＢＭＧマイクロプレートリーダーを使用してＨＴＲＦを読み取り、以下の式に従って比を計算した：比＝シグナル_{６６５ｎｍ}／シグナル_{６２０ｎｍ}×１００００ 化合物の阻害率を以下の式に従って計算した：ＩＲ（％）＝（Ｒ_ｍａｘ－Ｒ_ｔ）／（Ｒ_ｍａｘ－Ｒ_ｍｉｎ）＊１００％、（式中、Ｒ_ｍａｘは陽性対照ウェルのＨＴＲＦ読み取り比であり、Ｒ_ｍｉｎは陰性対照ウェルのＨＴＲＦ読み取り比であり、Ｒ_ｔは対応する化合物処理ウェルのＨＴＲＦ読み取り比である）。ＩＣ_５０は、Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアによるｌｏｇ（阻害剤）対応答－可変勾配当てはめによって計算した。Ｋ_ｉは、ヒトＳＴＩＮＧ結合キットの説明書に提供されたパラメータ式（Ｋ_ｉ＝１／２＊ＩＣ_５０）に従って計算した。実験結果を表４に示す。

【表5】

【0243】

結果は、化合物４、６および８がｈＳＴＩＮＧタンパク質に対して強い結合親和性を有することを示す。

【0244】

実験例７：ＭＣ３８マウス結腸癌同種移植腫瘍モデルにおける化合物のインビボ有効性
この実験例では、各試験化合物の有効性を試験するために、化合物６または化合物８の腫瘍内注射（ｉ．ｔ．）後に、ＭＣ３８マウス結腸癌移植腫瘍モデルの腫瘍体積および腫瘍重量の変化を測定し、記録した。

【0245】

１．実験細胞株および実験動物
実験細胞株：マウス結腸癌ＭＣ３８細胞（Ｎａｎｊｉｎｇ Ｃｏｂｉｏｅｒ）を３７℃、５％ ＣＯ_２インキュベーター（培地：１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ）含有ＲＰＭＩ－１６４０（Ｈｙｃｌｏｎｅ））で培養した。日常的な消化および継代のためにトリプシン－ＥＤＴＡ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を使用した。細胞が８０％～９０％の飽和を有する指数期にあるときに、細胞を回収して計数した。

【0246】

実験動物：Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、６～８週齢、オス、体重１８～２０グラム。全てのマウスをＢｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入し、特定の病原体を含まない（ＳＰＦ）動物室で飼育した。

【0247】

２．腫瘍細胞の播種およびグループ分け
ＭＣ３８細胞を、５×１０^６細胞／ｍＬの密度になるようにリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に再懸濁した。０．１ｍＬのＰＢＳ（５×１０^５個のＭＣ３８細胞を含む）を各マウスの左右背部の肩甲骨の位置に皮下接種した。左右の腫瘍の平均体積が約１００ｍｍ^３に達したとき、マウスを左右の腫瘍の体積に従ってランダムにグループ分けした。

【0248】

３．実験方法
皮下移植した腫瘍の平均体積が約１００ｍｍ^３に達したとき、マウスを左右の腫瘍の体積に従って、各グループ８匹になるように無作為にグループ分けした 右側の腫瘍には週２回の投与頻度で合計２週間腫瘍内注射により投与し、左側の腫瘍には投与しなかった。具体的な投薬レジメンを表５に示す。投与後、左右の腫瘍体積を週２回測定し、動物が死亡しているかを毎日観察した。

【0249】

４．実験指標および統計分析
試験化合物の抗腫瘍効果を腫瘍体積阻害率ＴＧＩ_体積（％）によって評価した。腫瘍体積をノギスで測定した。腫瘍体積は、式：Ｖ＝０．５×ａ×ｂ^２に従って計算した。式中、「ａ」および「ｂ」はそれぞれ腫瘍の長径および短径を表す。腫瘍体積阻害率ＴＧＩ_体積（％）＝［（１－（投与群への投与終了時の平均腫瘍体積－投与群への投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群への投与終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群への投与開始時の平均腫瘍体積）］×１００％。投与終了時の腫瘍体積が投与開始時の腫瘍体積よりも小さい場合（すなわち、腫瘍退縮）、ＴＧＩ_体積（％）＝［１－（投与群への投与終了時の平均腫瘍体積－投与群への投与開始時の平均腫瘍体積）／投与群への投与開始時の平均腫瘍体積］×１００％。

【0250】

Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、実験終了時の腫瘍体積に基づいて統計分析を行った。２つのグループ間の比較をスチューデントのｔ検定によって分析した。Ｐ＜０．０５の場合、有意差ありとした。

【表6】

【0251】

５．試験結果
投与２週間後、各投与群の動物の体重は増加し、死亡した動物はいなかった。マウスにおける腫瘍体積および腫瘍阻害効果の試験結果については表６を参照されたい。

【0252】

実験結果は、化合物６を１０μｇの単位用量（ｉ．ｔ．週２回投与×２）で腫瘍内注射した場合、モデルの投与側の腫瘍に対して有意な腫瘍阻害効果を示し（投与後１８日目のＴＧＩは１０６．２４％（Ｐ＝０．０００７））、非投与側の腫瘍に対しても腫瘍阻害効果を有する（ＴＧＩは５１．０９％（Ｐ＝０．０５５））ことを示した。化合物８を１０μｇの単位用量（ｉ．ｔ．週２回投与×２）で腫瘍内注射した場合、モデルの投与側および非投与側の両方で腫瘍に対して有意な腫瘍阻害効果を示した。投与後１８日目において、投与側のＴＧＩは２００．００％（Ｐ＝０．０００６）であり、非投与側のＴＧＩは５８．０９％（Ｐ＝０．０２５）であった。

【表7】

【0253】

注釈：
ａ．腫瘍体積（ｍｍ^３）＝平均±標準誤差（ＳＥＭ）、ｎ＝８。
ｂ．腫瘍体積阻害率ＴＧＩ_体積（％）＝［（１－（投与群への投与終了時の平均腫瘍体積－投与群への投与開始時の平均腫瘍体積）／（溶媒対照群への投与終了時の平均腫瘍体積－溶媒対照群への投与開始時の平均腫瘍体積）］×１００％。腫瘍退縮が起こった場合（すなわち、投与終了時の腫瘍体積が、投与開始時の腫瘍体積よりも小さかった場合）、ＴＧＩ_体積（％）＝［１－（投与群への投与終了時の平均腫瘍体積－投与群への投与開始時の平均腫瘍体積）／投与群への投与開始時の平均腫瘍体積］×１００％。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】