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特許7531918致死的な放射線への曝露に関連する症状の治療における使用のためのイミダゾリルエタンアミドペンタン二酸

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-08-02

(45)【発行日】2024-08-13

(54)【発明の名称】致死的な放射線への曝露に関連する症状の治療における使用のためのイミダゾリルエタンアミドペンタン二酸

(51)【国際特許分類】

A61K 31/4172 20060101AFI20240805BHJP

A61K 38/19 20060101ALI20240805BHJP

A61P 7/00 20060101ALI20240805BHJP

A61P 43/00 20060101ALI20240805BHJP

A61P 15/08 20060101ALI20240805BHJP

【ＦＩ】

A61K31/4172

A61K38/19

A61P7/00

A61P43/00 121

A61P15/08

【請求項の数】 19

(21)【出願番号】P 2021540931

(86)(22)【出願日】2019-09-25

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-01-11

(86)【国際出願番号】 EP2019075853

(87)【国際公開番号】W WO2020064832

(87)【国際公開日】2020-04-02

【審査請求日】2022-09-23

(31)【優先権主張番号】18196490.9

(32)【優先日】2018-09-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(31)【優先権主張番号】19164201.6

(32)【優先日】2019-03-20

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】521121695

【氏名又は名称】ミエロセラピューティクスゲーエムベーハー

(74)【代理人】

【識別番号】100149032

【弁理士】

【氏名又は名称】森本敏明

(72)【発明者】

【氏名】プレムス，ダーク

【審査官】伊藤幸司

(56)【参考文献】

【文献】特表２００５－５３２２６９（ＪＰ，Ａ）

【文献】Database Medline on STN, AN 2013983770, DN PubMed ID: 24032227, Voprosy onkologii, (2013) Vol. 59, No. 4, pp. 498, 500-4.

【文献】Database Biosis on STN, AN 2010:376663, DN PREV201000376663, Eksperimental'naya i Klinicheskaya Farmakologiya, (JAN 2010) Vol. 73, No.1, pp. 20-22.

【文献】Database Medline on STN, AN 2013765741, DN PubMed ID: 23814834, Voprosy onkologii, (2013) Vol. 59, No. 1, pp. 99, 101-4.

【文献】Database Medline on STN, AN 2013765760, DN PubMed ID: 23814853, Voprosy onkologii, (2013) Vol. 59, No. 2, pp. 71-4, 76-7.

【文献】International Journal of General Medicine，2012年，５，pp.105-115

【文献】European Journal of Cancer，2011年，47(1)，pp.8-32

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸を含む医薬組成物であって、
イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量が、放射線暴露後２４時間～１２０時間に投与される、前記医薬組成物。

【請求項2】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量が、放射線暴露後２４時間～７２時間に投与される、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量が、放射線暴露後２４時間～４８時間に投与される、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項4】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸が、０．４ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量でヒト患者に投与される、請求項１～３のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項5】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸が、０．５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ～３．７５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量で、２～１６歳の患者に投与される、請求項１に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項6】

放射線用量が、
－０．２Ｇｙ～３５Ｇｙ間の全身放射線照射、
－０．２Ｇｙ～４．０Ｇｙ間の毎日の全身放射線照射
－２０Ｇｙ～８０Ｇｙ間の局所放射線照射、又は
－１．８Ｇｙ～３０Ｇｙ間の毎日の局所放射線照射である、請求項１～５のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項7】

放射線用量が、２～１６歳の患者（小児放射線療法）において、
－１．５Ｇｙ～３０Ｇｙの毎日の局所放射線照射である、
請求項１～６のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項8】

放射線が、急性放射線症候群（ＡＲＳ）又は急性放射線暴露の遅延効果（ＤＥＡＲＥ）に関連する症状を引き起こすのに十分な急性致死量又は致死に近い量として受け取られる、請求項１～７のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項9】

放射線誘発損傷が、放射線療法によって、放射性同位元素汚染によって、慢性的な低線量宇宙放射線によって、又は核兵器の放射線によって引き起こされる、請求項１～８のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項10】

放射線誘発損傷が、癌治療における放射線療法によって引き起こされる、請求項１～９のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項11】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸が、経口、腹腔内及び静脈内投与される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項12】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸が、少なくとも３日間毎日投与される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項13】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸が、放射線照射後少なくとも３日間毎日投与される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項14】

放射線誘発損傷が、電離放射線によって引き起こされる、請求項１～１３のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項15】

治療法が、外部ビーム放射線療法を含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項16】

外部ビーム放射線療法が、強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）、画像誘導放射線療法（ＩＧＲＴ）、トモセラピー、定位放射線手術、定位体放射線療法、光子ビーム、電子ビーム、及び陽子又は中性子療法からなる群から選択される、請求項１５に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項17】

放射線療法が、
ａ．内部放射線療法又は近接照射療法、又は
ｂ．全身放射線療法
を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項18】

イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸がＧ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦと組み合わせて投与される、請求項１～１７のいずれか一項に記載の放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための医薬組成物。

【請求項19】

放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための配合剤であって、前記配合剤は、
－イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸及び
－Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦを含む、前記配合剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、放射線誘発損傷の治療又は予防のためのイミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

人間及び動物は、放射線によって誘発される損傷の影響を非常に受けやすく、細胞、組織、臓器、及び全身の損傷を引き起こす。核爆発又は災害シナリオなどの偶発的な放射線暴露において、多くの犠牲者が様々な程度で急性放射線症候群（ＡＲＳ）に苦しむことになる。放射線災害現場での目下の目的は、癌の放射線治療とはかなり異なる。このような災害シナリオにおいて、初期の取り組みは、被害者をトリアージし、個々の状態に応じてその後の詳細な医療を受けることができるように、できるだけ多くの被災者に延命できる治療を提供する必要がある。放射線災害管理のもう１つの側面は、放射線災害後の長期にわたる時点で、命を救う薬や治療法を利用できるようにする必要がある。この要件は、犠牲者に命を救う薬／治療が施されることができるように、医療スタッフ、薬／治療、及び機器を災害現場に動員するために必要な時間に起因する。ＦＤＡは、放射線暴露後２４時間以内に投与された場合に有効な医療対策を要求している。

【0003】

災害による偶発的な放射線暴露に加えて、細胞、組織、臓器、及び全身への放射線誘発損傷は、癌などの疾患の治療過程での放射線暴露の結果である可能性がある。癌患者の４０％以上が、病気の管理中に放射線療法を必要とする。放射線療法はかなりの数の癌患者の生存率を改善するが、急性放射線毒性（臨床放射線療法の過程中又はその直後に現れる）及び後期毒性（放射線療法の完了後数ヶ月から数年に発生）の両方が、治療に成功したがん患者の全体的な結果を損なう。

【0004】

現在、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）など、癌で使用される放射線治療から細胞や組織を保護できる薬剤がある。偶発的又は意図的な放射線暴露に関して、全身放射線照射後のマウスの生存率及びＮＨＰの増加を示したＦＤＡによって承認された３つの医学的対策がある。ただし、３つの薬剤はすべて皮下注射で投与されるため、大量の死傷者が発生した場合は不便になり得る。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

上記の技術分野の状況に基づいて、本発明の目的は、ヒト対象における放射線誘発損傷を治療又は予防するための手段及び方法を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0006】

この目的は、本明細書の独立請求項の主題によって達成される。

【図面の簡単な説明】

【0007】

【図1】未治療群、媒体群、及び５．８Ｇｙの放射線照射前に予防的処置を受けた３つの群におけるカプラン・マイヤー生存者関数。

【図2】未治療群、媒体群、及び５．８Ｇｙの放射線照射後に治療的処置を受けた２つの群におけるカプラン・マイヤー生存者関数。

【図3】未治療群、媒体群、及び６Ｇｙの放射線照射後の治療的処置を受けた単一群におけるカプラン・マイヤー生存者関数。

【図4A】（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の姿勢についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図4B】（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の姿勢についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図4C】（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の姿勢についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図5A】（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の毛皮についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図5B】（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の毛皮についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図5C】（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の毛皮についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図6A】（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の行動についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図6B】（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の行動についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図6C】（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１））；２）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、３、９、１５、２１、及び３０日目（ＡＭ）の行動についての段階的カテゴリーの（ＡＲＳスコアの一部）動物の割合。

【図7A】（Ａ）：群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）の経時的な体重の放射線照射効果（ベースライン重量に対する経時的な体重の変化）。

【図7B】（Ｂ）：３日目から３０日目の群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の経時的な体重の処置効果（対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較した経時的な体重の変化。

【図7C】（Ｃ）：未治療群（Ｕ；１）、媒体群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及びＭｙｅｌｏ００１治療群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の個々の動物（青）の０日目３０日目までの経時的に測定された体重プロファイル。各治療群におけるＬＯＷＥＳＳ平滑化平均体重が示されている（赤）。

【図8A】白血球数。（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、７、１４、及び３０日目の白血球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図8B】白血球数。（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の０、７、１４、及び３０日目の白血球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図8C】白血球数。（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、７、１４、及び３０日目の白血球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図9A】絶対好中球数。（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、７、１４、及び３０日目のＡＮＣ（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図9B】絶対好中球数。（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の０、７、１４、及び３０日目のＡＮＣ（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図9C】絶対好中球数。（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、７、１４、及び３０日目のＡＮＣ（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図10A】絶対リンパ球数。（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、７、１４、及び３０日目の絶対リンパ球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図10B】絶対リンパ球数。（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の０、７、１４、及び３０日目の絶対リンパ球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図10C】絶対リンパ球数。（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、７、１４、及び３０日目の絶対リンパ球数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図11A】絶対血小板数。（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、７、１４、及び３０日目の絶対血小板数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図11B】絶対血小板数。（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の０、７、１４、及び３０日目の絶対血小板数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図11C】絶対血小板数。（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、７、１４、及び３０日目の絶対血小板数（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図12A】ヘモグロビン。（Ａ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の０、７、１４、及び３０日目のヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図12B】ヘモグロビン。（Ｂ）：群１（Ｕ；１）、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の０、７、１４、及び３０日目のヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図12C】ヘモグロビン。（Ｃ）：群１（Ｕ；１）、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の０、７、１４、及び３０日目のヘモグロビン（ｇ／ｄＬ）（箱ひげ図：中央値、２５％－７５％、隣接する値の下限／上限、外側の値）。

【図13A】精巣。（Ａ）：群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による精巣変性の重症度の割合。

【図13B】精巣。（Ｂ）：群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）、及び７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による精巣変性の重症度の割合。

【図13C】精巣。（Ｃ）：群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による精巣変性の重症度の割合。

【図14A】骨髄細胞性。（Ａ）：群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による骨髄細胞性減少の割合。

【図14B】骨髄細胞性。（Ｂ）：群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）、及び７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による骨髄細胞性減少の割合。

【図14C】骨髄細胞性。（Ｃ）：群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）及び９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の４つのカテゴリー（最小、軽度、中程度、及び顕著）による骨髄細胞性減少の割合。

【発明を実施するための形態】

【0008】

用語と定義
本明細書の文脈におけるイミダゾリルエタンアミドペンタン二酸という用語は、５－｛［２－（１Ｈ－イミダゾール－４－イル）エチル］アミノ｝－５－オキソ－ペンタン酸（ＣＡＳ番号２１９６９４－６３－０）に関連する。Ｍｙｅｌｏ００１という用語は、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の同義語である。

【0009】

本明細書の文脈における用語Ｇ－ＣＳＦは、顆粒球コロニー刺激因子に関する。

【0010】

本明細書の文脈における用語ＧＭ－ＣＳＦは、顆粒球－マクロファージコロニー刺激因子に関する。

【0011】

本明細書の文脈におけるｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦという用語は、ｐｅｇ化Ｇ－ＣＳＦ又はＧＭ－ＣＳＦに関連する。ｐｅｇ化は、ポリエチレングリコールによる修飾に関する。

【0012】

本明細書の文脈における用語ｌｉｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦは、グリシン、Ｎ－アセチルノイラミン酸及びＮ－アセチルガラクトサミンからなる炭水化物リンカーを介して単一のメトキシＰＥＧ分子と共有連結された顆粒球コロニー刺激因子に関する。

【0013】

本明細書で使用される場合、任意の疾患又は障害（例えば、癌）を治療する又は治療という用語は、一実施形態において、疾患又は障害を改善すること（例えば、疾患の発症又はその臨床症状の少なくとも１つを遅らせるか、阻止するか、又は減らす）を指す。別の実施形態において、「治療する」又は「治療」は、患者によって識別できない可能性があるものを含む、少なくとも１つの物理的パラメータを軽減又は改善することを指す。さらに別の実施形態において、「治療する」又は「治療」は、物理的（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的（例えば、物理的パラメータの安定化）、又はその両方のいずれかで、疾患又は障害を調節することを指す。治療はまた、病気、障害又は損傷の引き金となる事象の後の適用を指す。疾患の治療及び／又は予防を評価するための方法は、以下に具体的に記載されていない限り、当技術分野で一般に知られている。

【0014】

当業者は、具体的に言及された任意の薬物が、前記薬物の薬学的に許容される塩として存在し得ることを認識する。製薬上許容される塩は、イオン化された薬物及び反対に帯電した対イオンを含む。薬学的に許容されるアニオン性塩形態の非限定的な例は、酢酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、酒石酸塩、臭化物、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エンボネート、エストレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデレート、メシル酸塩、臭化メチル、硫酸メチル、ムケート、ナプシレート、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、サリチル酸塩、ジサリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、トリエチオダイド及び吉草酸塩を含む。薬学的に許容されるカチオン性塩形態の非限定的な例は、アルミニウム、ベンザチン、カルシウム、エチレンジアミン、リジン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン及び亜鉛を含む。

【0015】

剤形は、経鼻、口腔、直腸、経皮又は経口投与などの経腸投与用であるか、又は吸入形態又は坐剤であり得る。あるいは、皮下、静脈内、肝内又は筋肉内注射形態などの非経口投与が使用され得る。任意に、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤が存在し得る。

【0016】

本発明の詳細な説明
本発明の第１の態様は、放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のためのイミダゾリルエタンアミドペンタン二酸に関する。

【0017】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、０．４ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量でヒト患者に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、１．２ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量でヒト患者に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、４ｍｇ／ｋｇ～１２ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量でヒト患者に投与される。

【0018】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、２～１６歳の患者に、０．５ｍｇ／ｋｇ～３．７５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量で投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、２～１６歳の患者に、１．２５ｍｇ／ｋｇ～３．２５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量で投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、２～１６歳の患者に、１日２回、１．２５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．の用量で投与される。

【0019】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露前１時間～１２０時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露前１時間～１２０時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露前１時間～７２時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露前６時間～４８時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露前１２時間～２４時間に投与される。

【0020】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後２４時間～１２０時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後２４時間～７２時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後２４時間～４８時間に投与される。

【0021】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後６時間～７２時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後８時間～４８時間に投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸の最初の用量は、放射線暴露後１２時間～２４時間に投与される。

【0022】

特定の実施形態において、放射線用量は、０．２Ｇｙ～３５Ｇｙ間の全身放射線照射である。特定の実施形態において、放射線用量は、０．２Ｇｙ～１３．５Ｇｙ間の全身放射線照射である。

【0023】

特定の実施形態において、放射線用量は、０．２Ｇｙ～４．０Ｇｙ間の毎日の全身放射線照射である。

【0024】

特定の実施形態において、放射線用量は、２０Ｇｙ～８０Ｇｙの局所放射線照射である。

【0025】

特定の実施形態において、放射線用量は、１．８Ｇｙ～３０Ｇｙ間の毎日の局所放射線照射である。特定の実施形態において、放射線用量は、１．８Ｇｙ～２．０Ｇｙ間の毎日の局所放射線照射である。

【0026】

特定の実施形態において、放射線用量は、２～１７歳、特に２～１６歳、より特に３～１６歳（小児放射線療法）の患者における１．５Ｇｙ～３０Ｇｙ間の毎日の局所放射線照射である。特定の実施形態において、放射線用量は、２～１７歳、特に２～１６歳、より特に３～１６歳（小児放射線療法）の患者における１．５～１．８Ｇｙ間の毎日の局所放射線照射である。

【0027】

特定の実施形態において、放射線は、急性放射線症候群（ＡＲＳ）に関連する症状を発生させるのに十分な急性致死量又は致死に近い量として受け取られる。特定の実施形態において、放射線は、複数の臓器系に影響を与える無数の慢性疾患を含む、急性放射線曝露の遅延効果（ＤＥＡＲＥ）を生成する。

【0028】

特定の実施形態において、放射線誘発損傷は、放射線療法によって、放射性同位元素汚染（例えば、原子炉の偶発的な漏出）によって、慢性的な低線量宇宙放射線によって、又は核兵器の放射線によって引き起こされる。特定の実施形態において、放射線誘発損傷は、癌治療における放射線療法によって引き起こされる。

【0029】

特定の実施形態において、放射線療法は、Ｘ線、ガンマ線又は中性子線を含む。特定の実施形態において、放射線療法は、その放出源として、Ｃｏ６０、１３７Ｃｓ、ヨウ素１３１、ルテチウム１７７、イットリウム９０、ラジウム２２３、ストロンチウム８９、サマリウム（１５３Ｓｍ）、又はレキシドロナムを使用する。

【0030】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、経口、腹腔内、そして静脈内、特に経口投与される。

【0031】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、少なくとも３日間毎日投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、５～１０日間毎日投与される。

【0032】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露後少なくとも３日間、毎日投与される。特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、放射線暴露後５日～１０日間毎日投与される。

【0033】

特定の実施形態において、放射線誘発損傷は、電離放射線によって引き起こされる。特定の実施形態において、放射線誘発損傷は、光子放射線によって引き起こされる。

【0034】

特定の実施形態において、治療法は、外部ビーム放射線療法を含み、特に外部ビーム放射線療法は、強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）、画像誘導放射線療法（ＩＧＲＴ）、トモセラピー、定位放射線手術、定位放射線療法、光子ビーム、電子ビーム、及び陽子又は中性子療法からなる群から選択される。

【0035】

特定の実施形態において、放射線療法は、内部放射線療法を含む。特定の実施形態において、放射線療法は近接照射療法を含む。特定の実施形態において、放射線療法は、全身放射線療法を含む。特定の実施形態において、放射線療法は、治療上の偶発的な放射線の過剰曝露（例えば、医原性の過剰投与又は操作事故）を含む。

【0036】

特定の実施形態において、イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸は、Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｌｉｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦと組み合わせて投与される。特定の実施形態において、Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｌｉｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦは、２μｇ／ｋｇｂ．ｗ．／日～３０μｇ／ｋｇｂ．ｗ．／日の用量で投与される。特定の実施形態において、Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｌｉｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦは、２．８μｇ／ｋｇｂ．ｗ．／日～１０μｇ／ｋｇｂ．ｗ．／日の用量で投与される。

【0037】

本発明の第２の態様は、放射線誘発損傷の治療又は予防における使用のための配合剤に関する。配合剤は、
イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸及び
Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ｌｉｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ、ｐｅｇ－Ｇ－ＣＳＦ又はｐｅｇ－ＧＭ－ＣＳＦを含む。
例えば、投薬計画又は医学的症状などの単一の分離可能な特徴の代替物が本明細書に「実施形態」として提示される場合はいつでも、そのような代替物は自由に組み合わされて、本明細書に開示される本発明の別個の実施形態を形成し得ることが理解されるべきである。したがって、投薬計画の代替の実施形態のいずれかは、本明細書に記載の医学的症状の代替の実施形態のいずれかと組み合わされ得る。

【0038】

本発明は、以下の実施例及び図によってさらに説明され、そこから、さらなる実施形態及び利点を引き出すことができる。これらの例は、本発明を説明することを意図し、その範囲を限定することを意図していない。

【実施例】

【0039】

材料及び方法
プロトコル及び研究の実行
この研究は、プロトコル及びＳＮＢＬＵＳＡ（現在はＡｌｔａｓｃｉｅｎｃｅｓ）の標準操作手順（ＳＯＰ）に準拠している。データの品質又は整合性に影響を与えた偏差及び事象は、該当するレポートセクションでさらに説明されている。

【0040】

照射の最初の日は０日目として指定され、その後の日数は連続して番号が付けられた。照射前の研究日数は連続して番号が付けられ、順応の最終日は－１日目として指定された。

【0041】

放射線及び線量測定
以前に報告された研究（ウィリアムズら２０１０、プレットら２０１２、チュアら２０１４、シンら２０１５）に基づいて、ＬＤ２５及びＬＤ５０を調査するためにマウスモデルが開発された。全身放射線照射及び選択された線量は、原子力事故後の人間への放射線暴露の可能性を模倣した並進インビボモデルとして機能する。

【0042】

放射線
ソース／モデルＸ線／ＲａｄＳｏｕｒｃｅＲＳ－２０００
目標線量率１．３３１Ｇｙ／分
実際の線量率は、照射前後に測定され、１．３２２～１．３６７Ｇｙ／分の範囲であった。
エネルギー２５ｍＡで１６０ｋＶ（円形ＲＡＤ＋を備えたＲＳ－２０００チャンバーの床）
メーカーＲａｄＳｏｕｒｃｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｉｎｃ．（ジョージア州スワニー）
銅フィルターサイズ０．３ｍｍＣｕ
イオンチャンバーＲａｄＣａｌ２０８６イオンチャンバー線量計
構成チャンバーの床の棚の高さ；チャンバーフロアの中央にあるリードＲＡＤ＋シールド；床の銅メッシュ；ターンテーブル又は追加の円形銅メッシュは取り付けられていない。

【0043】

線量計算線量（Ｇｙ）＝線量率（Ｇｙ／分）＊時間（分）

【0044】

物質
テスト項目
同定Ｍｙｅｌｏ００１（イミダゾリルエタンアミドペンタン二酸；ＩＥＰＡ）
サプライヤースポンサー
メーカーＥＲＲＥＧＩＥＲＲＥＳ．ｐ．Ａ．
ヴィアフランチェスコバラッカ、１９
２４０６０サンパオロダルゴン（ＢＧ）イタリア
ロット／バッチＣＡＳＮ．２１９６９４－６３－０、バッチＡ１７００１７
説明白色又はほぼ白色の無臭の結晶性粉末
純度９９．６％
再テスト日２０２０年１０月
保管条件２～８℃

【0045】

ポジティブ対照項目
同定Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（登録商標）（フィルグラスチム；顆粒球コロニー刺激因子；Ｇ－ＣＳＦ）
サプライヤーＳＮＢＬＵＳＡ
メーカーアムジェン
ロット／バッチ１０６５５２６
説明無色透明の液体
濃度３００μｇ／ｍＬ
有効期限２０１８年４月３０日
保管条件２～８℃
媒体（ネガティブコントロール）
同定０．５％ヒドロキシプロピルメチルセルロース水溶液（ＨＰＭＣ）
メーカーシグマ
ロット／バッチＭＫＣＢ１７１５Ｖ
説明白い粉末
有効期限２０２３年３月１６日
保管条件２～８℃

【0046】

動物
ＳＮＢＬＵＳＡ、Ｌｔｄ（以下、ＳＮＢＬＵＳＡ）は、実験動物ケア評価認証協会（ＡＡＡＬＡＣ）の認定を受けており、実験動物福祉事務所（ＯＬＡＷ）が発行する動物福祉保証を有しており、米国農務省（ＵＳＤＡ）に登録されており、かつ動物実験動物の人道的ケアと使用に関する適用法と規制のＳＮＢＬＵＳＡの遵守に責任を負う、施設内動物ケア及び使用委員会（ＩＡＣＵＣ）を有している。

【0047】

動物（Ｃ５７ＢＬ／６マウス）は、ジャクソン研究所（メイン州バーハーバーの施設）から提供された。動物は、研究の割り当ての前にストックとしてＳＮＢＬＵＳＡ（エベレット、ワシントン州の施設）で維持され、研究で使用する前に獣医スタッフによって健康についてスクリーニングされた。２０５匹の動物が処置群に割り当てられた。

【0048】

投薬
Ｍｙｅｌｏ００１の経口投与は、原子力又はその他の放射線事故を助長するものであり、この研究のために選択された。放射線照射前３日に投与される用量は５０ｍｇ／ｋｇが選択された。人間の等価用量は、相対成長計算に基づいて４ｍｇ／ｋｇと推定される。

【0049】

表１：投薬

【表1】

ＮＡ＝該当なし。Ｃｏｎｃ．＝濃度；ＯＧ＝経口胃；ＩＰ＝腹腔内；
ＳＣ＝皮下；ＳＩＤ＝１日１回；ＬＤ＝致死量
ｘ＝投与された用量の合計回数（１２時間間隔±１時間）；
総投与量（ｍＬ）は、最新の体重に基づいて計算される。
ｂ＝０日目の剖検
ｃ＝７日目の剖検
ｄ＝１４日目の剖検
ｅ＝３０日目の剖検

【0050】

表２：群の命名法及び略語

【表2】

【0051】

ＡＲＳスコアリング
この研究の主な結果は死亡率であり、副次的な結果は血液学（末梢及び骨髄）の変化であった。エンドポイントは、動物研究のエンドポイントが臨床的利益（一般に、生存率の向上又は主要な病的状態の予防）に明確に関連することを示す動物規則の要件に従うように選択された。副次的エンドポイントは、疾患又は状態の理解及び治療効果の特徴づけに潜在的に貢献するように選択された。

【0052】

姿勢、毛皮、及び行動の１～４（最小、軽度、中程度、及び重度）のスコアは、スコアリングが１回だけ発生した予定された剖検の日を除いて、－３日目からＳＮＢＬＳＯＰごとに１日２回記録された。観察は、研究の過程で５人の個人によって行われた。

【0053】

０日目以降、最初のＡＲＳスコアリングは午前中に開始され、２番目のＡＲＳスコアリングは午前中のＡＲＳスコアリングの完了の４～６時間後に開始された。予定された剖検の日は、ＡＲＳスコアリングは剖検前の朝に行われた。

【0054】

ＡＲＳスコアリングＳＮＢＬＳＯＰに基づいて、３つのパラメータスコアの合計が８以上の場合、その動物は瀕死状態であると見なされ、瀕死状態の動物ＳＯＰに従って実施された予定外の剖検で安楽死させた。

【0055】

ケージサイドの死亡率チェックは、ＳＯＰごとに、－３日目以降１日２回実施された。午前及び午後のチェックは、それぞれのＡＲＳスコアリングの完了後２～３時間で開始された。個々の評価は、再採点によって明らかに瀕死の動物について、又は除去によって発見された死んだ動物についてのみ文書化された。

【0056】

体重は、順応中（－３日目を含む）に２回、照射前（０日目）に１回、その後３日ごとに評価された。動物４０１２を除いて、最終体重も収集された。

【0057】

統計分析
カプラン・マイヤー法を使用して、生存データを記述的かつグラフィカルに要約した。さらに、死亡率は処置によって表にされた。２つ以上の生存曲線の同等性は、ログランク検定でテストされた。さらに、ハザード比、ｐ値、及び９５％信頼区間（９５％ＣＩ）を推定するためにＣｏｘ回帰モデルが使用された。

【0058】

生存分析の焦点は、０日目及び３０日目の照射の間の照射関連死である。したがって、７日目と１４日目の予定された剖検又は放射線照射に関係のない死（動物２０４１、９０１２及び９０２１）は打ち切り事象と見なされた。

【0059】

すべての追加の計算について、Ｓｔａｔａ１４（ＳｔａｔａＣｏｒｐ．、４９０５ＬａｋｅｗａｙＤｒｉｖｅ、ＣｏｌｌｅｇｅＳｔａｔｉｏｎ、ＴＸ７７８４５、ＵＳＡ）が使用された。

【0060】

縦断的データは、各群の経時的な平均体重、及び応答プロファイル分析による反復測定間の共分散を考慮して分析された（フィッツマウリスら、Ｗｉｌｅｙ２００４、ｐ１０３－１４０）。分析は、同じマウスの反復体重と治療群及び時間の指標変数との間の相関を説明するために、構造化されていない共分散を伴う回帰モデルとして指定され、媒体（ｖｅｈｉｃｌｅ）処置が参照群として使用され、及び０日目が時間の参照とされた。

【0061】

応答プロファイル分析は、制限付き最尤（ＲＥＭＬ）法によって推定された次の回帰係数を提供する。
切片－０日目の参照群ＶＬ（ＰＯｘ１）；２及びＶＨ（ＰＯｘ１）；８の平均体重。
処置－０日目の治療群と媒体群の平均体重の差
時間－参照群のベースラインからの体重変化

【0062】

治療×時間－治療群及び対照群のベースラインからの変化の比較によって推定された毎日の治療効果

【0063】

すべての回帰係数について、ｐ値及び９５％信頼区間が提供される。この方法は、解釈可能な推定値を提供し、治療群がベースラインで異なる場合に有効であり、時間の経過に伴う平均体重の任意のパターン（特定の時間傾向ではなく、例えば線形曲線が想定される）及び共分散の任意のパターンを可能にする。モデルの仕様ミスによる潜在的なリスクが最小限であるため、分析には一定の堅牢性がある。

【0064】

例１：死亡率
動物の死亡率データの要約は表３～４に含まれ、カプラン・マイヤープロットは図１～３に含まれる。動物２０４１及び９０２１は３日目に安楽死させ、及び動物９０１２は４日目に安楽死させた。ＳＮＢＬでの履歴データに基づく、放射線関連症状の発症は一般に７日目より早く発生する。したがって、放射線照射効果はこれら３匹の動物の瀕死状態の原因とは見なされなかった。さらに、３匹中２匹の胸腔内の体液の肉眼的病理観察は、瀕死状態が用量投与に潜在的に関連することを示している。したがって、これらの動物は死亡率の評価とすべての生存率の計算から除外された。

【0065】

放射線照射に関連する死亡率の概要、死亡数をリスク時の時間で割ったものを表３に示す。１０％の死亡までの時間を表４に示す。媒体群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）及び８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）について、５．８及び６Ｇｙの放射線用量で１００日あたり０．６５及び１．４８の比率が観察された。予防群では、１００日あたり０．４４～１．３０の比率が見つかった。Ｇ－ＣＳＦによる治療的処置（群６）では、低放射線用量で１００日あたり０．４２の比率が観察されたが、併用処置の群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）では３０日以内に死亡は発生しなかった。群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の比率は、対応する対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）よりも低かった（１００日あたりそれぞれ０．４８対１．４８）。

【0066】

以下において、予防的処置及び治療的処置についての生存率を別々に示す。媒体群では、１０％の死亡までの時間は１７日であり、予防的処置の推定値は１３日～２１日であった。ログランク検定では、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、及び群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）の生存曲線の間に統計的に有意な差は見られなかった（ｐ＝０．３３７）。治療の効果を制御したＣｏｘ回帰によるさらなる分析では、有意な予防効果は示唆されなかった（表５）。

【0067】

Ｇ－ＣＳＦによる治療的処置の場合、１０％の死亡までの時間は１２日であり、併用処置の群Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７においては、３０日目まで死亡は観察されなかった。ログランク検定では、ＶＬ（ＰＯｘ１）；２、ＧＬ（ＳＣｘ１）；６及びＭ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７の生存曲線間に有意差は見られなかった（ｐ＝０．４６９）。治療効果を制御した追加のＣｏｘ回帰は、ＧＬ（ＳＣｘ１）；６の有意な治療効果を示唆していなかった（表６）。

【0068】

６Ｇｙの高放射線用量の後、１０％の死亡までの時間は、媒体群で１６日（９５％ＣＩ１２～２９）、Ｍｙｅｌｏ００１による治療的処置で２３日（９５％ＣＩ１２～ｎ．ａ．）である。ログランク検定は、ＶＨ（ＰＯｘ１）；８及び（ｐ＝０．０６６）の生存曲線間の差について有意性に達せず、記述データはＭＨ（ＰＯｘ１）；９を支持するプラスの効果を示唆している。治療効果を制御するＣｏｘ回帰を使用したさらなる分析により、この発見が確認される。ハザード比は０．３２（ｐ＝０．０８５；９５％ＣＩ０．０９～１．１７）である（表７）。

【0069】

媒体及び対応する予防的及び治療的処置における３０日後の生存率の比率として計算された用量減少係数（ＤＲＦ）は、最大１．５の値を採用する。６Ｇｙの高放射線用量でのＭｙｅｌｏ００１による治療的処置では、最大ＤＲＦ１．５が観察された（表８）。

【0070】

例２：ＡＲＳスコア
処置された動物の姿勢のスコア分布における有意差が１５日目に観察された。群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び５ＭＬ（ＰＯｘ１）；５で観察された最も頻繁なグレード（モード）は対照群２と比較して正常であった（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）（軽度）。治療的に治療された群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）も、姿勢のスコアリングで通常のモードを示したが、対照群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）は主に（６５％）軽度として表示された。３０日目に、正常姿勢スコアの頻度が増加する傾向が、対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較して群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）で観察される（図４Ａ－Ｃ、表。１０）。

【0071】

全体として、１５日目に、Ｍｙｅｌｏ００１による予防的処置（群４、５）及びＭｙｅｌｏ００１のみとＭｙｅｌｏ００１＋Ｎｅｕｐｏｇｅｎによる治療的処置（群６、７）は、対照群と比較して正常姿勢スコアの頻度の増加をもたらした。腹腔内投与された低用量のＭｙｅｌｏ００１（群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３））による治療は、そのような変化をもたらさなかった（図５Ａ、Ｂ）。

【0072】

９日目に、Ｎｅｕｐｏｇｅｎで治療した群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）の毛皮のＡＲＳスコアは、媒体で治療した群２（２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）及びＭｙｅｌｏ００１を使用したＮｅｕｐｏｇｅｎとは対照的に、軽度のグレードのパーセンテージの増加を示した。治療群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）、毛皮は正常であった（図５Ｂ、表１１）。

【0073】

高放射線用量６Ｇｙで照射された治療群では、Ｍｙｅｌｏ００１治療群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の毛皮グレードは２１日目でほぼ正常であったが、対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）では軽度（２０％）及び中程度（２７％）のグレードが観察され得る（図５Ｃ、表１１）。

【0074】

全体として、２１日目の毛皮のスコアリングでは、媒体で処理した群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）の軽度及び中程度のモードと比較して、Ｍｙｅｌｏ００１で処理した群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）の正常グレードが最も頻繁に明らかになった。
放射線は、すべての群（群２から９）の動物の行動スコアに大きな変化を引き起こさず、統計的検定（クラスカル・ウォリス又はウィルコクソン順位和検定）では有意差は示されなかった（図６Ａ－Ｃ、表１２）。

【0075】

全体として、Ｍｙｅｌｏ００１治療群９は、群８（対照）と比較して、姿勢及び毛皮のＡＲＳスコアに有利（＝低いスコア）の傾向がある。治療的に治療された群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）は、姿勢及び毛皮のスコア分布に有意差を示した。

【0076】

例３：体重
体重の統計分析は、０、３、９、１５、２１、及び３０日目に実施された（表１３Ａ－Ｄ）。６、１２、１８、及び２４日目のデータは表示されていない。体重の変化は、予防的処置及び治療的処置のために別々に議論されている。未処理の群１（Ｕ；１）は、時間の経過とともに体重が増加した。

【0077】

予防的処置結果
予防的処置及びその後の５．８Ｇｙ照射の体重の統計結果が要約されている。切片は、ベースラインでの媒体群ＶＬ（ＰＯｘ１）；２の平均体重が２７．６ｇ（ｐ＜０．００１；９５％ＣＩ：２６．９～２８．２ｇ）であることを示唆している。この対照群の平均体重は、３日目～３０日目まで有意に減少する。媒体群のベースライン体重からの最大減少は２１日目（時間）に－３．７ｇｐ＜０．００１（－５．１～－２．２ｇ）である。媒体群（治療）と比較して、Ｍｅｌｏ００１で予防的に治療された群の平均体重が異なるという証拠はない。Ｍｙｅｌｏ００１による予防的処置は、照射による体重減少をわずかに補う傾向がある（治療×時間）。

【0078】

３日目の小さな保護効果は予防群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）で示された。例えば、媒体群の平均体重は３日目で－１．９ｇｐ＜０．００１（－１．７～－２．１ｇ）である。ＭＬ（ＰＯｘ２）；４群の平均体重は媒体群の重量を０．７ｇ上回っている（ｐ＜０．００１；９５％ＣＩ：０，４～１，０ｇ）。

【0079】

治療結果
Ｇ－ＣＳＦ（群６、（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６））による治療的処置及び併用療法が要約されている。０日目の媒体群の平均体重は２７．６ｇ（ｐ＜０．００１；９５％ＣＩ：２７．０～２８．１ｇ）である。５．８Ｇｙのレベルで照射した後、この対照群の平均体重は３日目～３０日目（時間）の間にベースラインから大幅に減少する。最大の減量は－４．３ｇ（ｐ＜０．００１；９５％ＣＩ：－５．６～－３．０ｇ）である。０日目では、媒体群ＶＬ（ＰＯｘ１）；２及びＧＬ（ＳＣｘ１）；６及びＭ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７それぞれ（治療）間に有意な体重差はない。後の時点で、治療は媒体群で観察された体重減少を補う傾向がある。Ｇ－ＣＳＦによる治療的処置（群６、ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）は、媒体（群２、ＶＬ（ＰＯｘ１））と比較して、２１日目の体重に対して３．３ｇ（ｐ＝０．０１４；９５％ＣＩ：０．７～５．９ｇ）の保護効果をもたらした。同様に、群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）のＭｙｅｌｏ００１及びＧ－ＣＳＦの両方での治療により、媒体（群２、ＶＬ（ＰＯｘ１））と比較して２１日目に体重が２．８ｇ（ｐ＝０．０２８、９５％ＣＩ：０．３～５．３ｇ）増加した。

【0080】

高放射線用量後に治療的処置されたマウスの体重分析が要約されている。切片は、０日目の媒体群ＶＨ（ＰＯｘ１）；８の平均体重が２７．７ｇ（ｐ＜０．００１；９５％ＣＬ：２７．０～２８．３ｇ）であることを示している。時間によって示されるように、３日目～３０日目まで、媒体群のベースライン体重から体重の有意な減少がある。最大の減量は－６．２ｇ（ｐ＜０．００１；９５％ＣＩ：－７．７～－４．７ｇ）である。６Ｇｙの放射線用量後のこの減少は、５．８Ｇｙの照射と比較してより深刻である。ベースラインの０日目では、媒体及び群ＶＨ（ＰＯｘ１）の平均体重に差は観察されていない（治療）。群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）（治療ｘ時間）の対照と比較した群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の経時的な体重変化の分析は、媒体群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較してＭｙｅｌｏ００１相対による治療的処置時の体重減少の有意な補償を示した（図７Ａ－Ｃ）。これは最大３．１ｇになる（ｐ＝０．００６；９５％ＣＩ：０．９～５．２ｇ）。

【0081】

要約すると、Ｍｙｅｌｏ００１による予防的処置は、３日目に小さな保護効果をもたらした。低用量の放射線で、Ｍｙｅｌｏ００１及びＭｙｅｌｏ００１＋Ｎｅｕｐｏｇｅｎによる治療的処置は、同じ日の媒体群２（ＶＨ（ＰＯｘ１）；２）と比較して２１日目に体重の増加をもたらした。Ｍｙｅｌｏ００１の体重に対する最も高い保護効果は、高放射線用量下の治療レジメンで観察され、対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較して群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の１５、２１、及び３０日目に正の効果を示した。

【0082】

例４：血液学及び病理学
末梢血液学（白血球、好中球、リンパ球、血小板）は、７日目及び１４日目にすべての群（未処置／非放射群（Ｕ；１）に対して）で重度に抑制され、ヘモグロビンは中程度に抑制された。白血球、リンパ球、血小板は最後の時点（３０日目）で大幅に抑制されたままであったが、好中球及びヘモグロビンは正常値に近く戻った。全体として、Ｍｙｅｌｏ００１又は陽性対照Ｇ－ＣＳＦによる予防的及び治療的処置では、顕著な違いは観察されなかった。白血球、好中球、又はリンパ球の数は、照射された群間で同等であった。１４日目に、ヘモグロビン及びヘマトクリット、赤血球は、対照群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）と比較して群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）で増加した。同様に、１４日目及び３０日目には、ヘモグロビン、赤血球、ヘマトクリット値が群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較して群９（ＭＨ：（ＰＯｘ１）；９）を支持する傾向があった（図８Ａ－Ｃ－１２Ａ－Ｃ）。

【0083】

３０日目に、対照群２（ＶＨ（ＰＯｘ１）；２）と比較して、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）でＷＢＣ及び好中球数の中央値の増加傾向が観察された。陽性対照（Ｇ－ＣＳＦ）を含め、好中球数に有意な群差は認められなかった。これは、７日と１４日の選択された時点が原因である可能性があり、部分的な回復期間にグローバルな抑制と測定の欠落、３０日目の停止を有している。

【0084】

予定外の死亡率の総病理学データには、試験項目に関連する変化は見られなかった。これらの動物では、典型的な急性放射線症候群の所見（主に脳及び精巣の複数の臓器での赤色の変色）が観察された。

【0085】

急性放射線症候群に典型的な病変、すなわち脳及び精巣で最も顕著であった臓器の赤色変色は、群６（５．８Ｇｙ、Ｎｅｕｐｏｇｅｎ、皮下、０．３４ｍｇ／ｋｇ１、２、３日目投与）を除く１４日目の剖検中にすべての群で観察され、群６では脳、精巣に赤い変色がなかったが急性放射線症候群に典型的ではない脾臓の嚢胞が観察された。

【0086】

７日目又は３０日目の剖検肉眼的病理データには、他の試験項目関連の変化は認められなかった。

【0087】

臓器重量データに試験項目関連の変化は認められなかった。

【0088】

精巣の出血、骨髄の骨髄過形成、及び骨髄の巨核球過形成の顕微鏡所見は、媒体処置動物を含めて散発的に観察され、試験項目と関連付けることができなかった。

【0089】

精巣の劣化の重症度は、１４日目で群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）と比較して、群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）で減少した（ｐ＝０．０３７）（図１３Ａ、表１４）。３０日目に、すべての群で重大度が付された。群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の動物は、最小カテゴリーで精巣の割合が高かったが、それらの変化はわずかであった（ｐ＝０．０７８）（図１３Ｂ）。同様に、群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）のＭｙｅｌｏ００１で治療された動物は、最小カテゴリー（ｐ＝０．２６４）で精巣の割合が高いことを示した（ｎ．ｓ．）（図１３Ｃ）。

【0090】

予定されていた７日目の剖検組織病理学データには、試験項目に関連する変化は見られなかった。すべての動物において胸骨及び大腿骨の両方における骨髄の細胞性の低下が顕著であった（グレード４）。精巣は正常であった（目に見える病変はない）。

【0091】

骨髄細胞性の低下は、７日目の放射された動物の１００％で大腿骨及び胸骨の「顕著」カテゴリーにあり、１４日目では回復して中程度から顕著であった。３０日目に、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）以外の動物は胸骨において著しい減少を示さず、群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）の動物の大部分は最小カテゴリーに属していた。大腿骨においては、細胞性の適度な又は著しい減少がほとんどの群で依然として存在したが、細胞性の回復がすべての群で観察された（図１４Ａ－Ｃ）。

【0092】

群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）、群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）は、骨髄細胞性の低下に有意な変化を示さなかった。群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３）のすべての動物について、骨髄細胞性は３０日目に最小カテゴリーにあり、大腿骨骨髄グレードの差は有意であった（ｐ＝０．００１）（図１４Ａ）。

【0093】

１４日目に、対照群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）は、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）と比較して、マークされたカテゴリーの動物の割合が高いことを示した（ｎｓ）。３０日目では、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）のすべての治療動物は、胸骨において最小限のカテゴリーを示し、大腿骨骨髄において顕著なカテゴリーを示さなかったが、これらの変化は重要ではなかった（図１４Ｂ）。

【0094】

対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）は、群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）と比較して、１４日目及び３０日目に中等度及び顕著のカテゴリーの動物は統計的に有意でない高い割合を示した（図１４Ｃ、表１５）。

【0095】

要約すると、予定されている１４日目及び３０日目の剖検では、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）は群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）の媒体処理対照と比較して、胸骨及び大腿骨の両方の骨髄における細胞性の低下の重症度が低いことが認められた。高放射線用量群では、群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）は、群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８））の媒体治療対照と比較して、胸骨及び大腿骨の両方の骨髄の細胞性低下の重症度が低かった。

【0096】

結論
用量依存的な放射線の影響は、死亡率の主要評価項目と、体重、臨床徴候、血液学、組織病理学など、評価されたほとんどの副次評価項目パラメーターで明らかであった。

【0097】

血液学的評価には、すべての群で重度の骨髄抑制を示した７日及び１４日の選択された時点による制限があり、回復がまだ不完全であった３０日目の研究の終了までそれ以上の測定は予定されていなかった。

【0098】

５．８Ｇｙ照射（ＬＤ２５／３０）後の予防的処置は、対照群２（ＶＨ（ＰＯｘ１；２）と比較して生存曲線間に有意差をもたらさなかった。しかし、５０ｍｇ／ｋｇの用量でのＭｙｅｌｏ００１の経口投与（群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５））は、２５ｍｇ／ｋｇの２用量（群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３））の経口及び腹腔内投与と比較した場合、より高い用量減少係数（ＤＲＦ＝１．１）をもたらした（それぞれ、ＤＲＦ＝０．９及び０．７）。さらに、媒体群では、１０％の死亡までの時間は１７日であったが、群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）では２１日であった。

【0099】

Ｍｙｅｌｏ００１（群３（ＭＬ（ＩＰｘ２）；３））による予防的腹腔内治療は、媒体対照と比較して、３０日目の骨髄細胞性の低下が少なく、１４日目の精巣の変性が低下した。末梢血液学及びＡＲＳスコアへの明確な影響は観察されなかった。群４（ＭＬ（ＰＯｘ２）；４）及び群５（ＭＬ（ＰＯｘ１）；５）でのＭｙｅｌｏ００１の予防的経口投与は、１４日目の精巣変性の減少と、９日目及び１５日目の姿勢のスコア分布の顕著な違いをもたらした。両方の群で観察された姿勢の最も頻繁なグレード（モード）は、より頻繁に軽度として分類された対照群２（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）と比較して正常であった。骨髄の細胞性及び血液学は、治療によって大幅に変化することはなかった。すべての予防的処置群（群３、４、５）は、３日目の体重減少に対してわずかな保護効果を示した。

【0100】

陽性対照Ｇ－ＣＳＦ（群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６））による治療的処置後、陰性対照（ＶＬ（ＰＯｘ１）；２）と比較して生存率のわずかな違いのみが観察されたが、併用治療（群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）））では３０日以内に死亡は発生しなかった。Ｍｙｅｌｏ００１及びＧ－ＣＳＦを一緒に投与した後（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）、単独（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）と比較してＤＲＦのわずかな増加が観察された（それぞれ、ＤＲＦ＝１．２対１．１）。

【0101】

試験項目に関連する変化は、群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）及び７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）の骨髄の細胞性の低下が少ないことで構成されていた。この傾向は、１４日目及び３０日目に大腿骨及び胸骨の両方で観察され、３０日目にはより大きく回復した。

【0102】

放射線照射は、７日目及び１４日目に媒体で処置した動物において汎血球減少症をもたらした。１４日目の赤血球数（ＲＢＣ成熟細胞及び未成熟網状細胞）、ヘモグロビン（ＨＧＢ）、及びヘマトクリット（ＨＣＴ）の平均値の減少は、Ｇ－ＣＳＦのみ（群６（ＧＬ（ＳＣｘ１；６））又はＧ－ＣＳＦをＭｙｅｌｏ００１と組み合わせて投与（群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）された動物ではそれほど顕著ではなかった。両方の群においてこれらの細胞系統の平均数の増加傾向が認められたものの、陽性対照（Ｇ－ＣＳＦ）を含めＷＢ及び好中球の数に明確な群差は特定することができなかった。全体として、造血性急性放射線症候群の緩和に関するＭｙｅｌｏ００１の陽性傾向（Ｈ－ＡＲＳ）が観察された。

【0103】

精巣変性の重症度は、１４日目の媒体対照群で最も高かった。これは、この時点での治療群における何らかの保護効果を示している可能性がある。しかしながら、最終結果はすべての動物で３０日目で同じであり、精巣の変性が顕著であった。１４日目の群６（ＧＬ（ＳＣｘ１）；６）は、急性放射線症候群に典型的な精巣に肉眼的病変がなかった唯一の群であったが、特に別の試験項目を追加して同様の治療を受けた群７（Ｍ／ＧＬ（ＰＯ／ＳＣｘ１）；７）のようにそれの重要性は不明である。

【0104】

２１日目に、両方の群は、対照媒体群と比較して、体重の増加に対して有意な治療効果を示した。

【0105】

６．０Ｇｙ放射線（ＬＤ５０／３０）後の治療的処置では、群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の生存率は、対応する対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）よりも大幅に高かった（それぞれ８６％ｖｓ５６％）。群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）は、すべての治療群の中で１．５という最高の用量減少係数を示した。

【0106】

生存率の増加は、骨髄細胞性、精巣変性、並びに毛皮及び姿勢のＡＲＳスコアを含む二次パラメーターのいくつかの正の傾向によって支持された。さらに、Ｍｙｅｌｏ００１の体重に対する最も高い保護効果は、高放射線用量下の治療レジメンで観察され、対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）と比較して群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の１５、２１、及び３０日目に有意な効果を示した。

【0107】

ＷＢＣ数に関して明確な変化は観察されなかった。ただし、１４日目及び３０日目の赤血球数（ＲＢＣ成熟細胞及び未成熟網状赤血球）、ヘモグロビン（ＨＧＢ）、及びヘマトクリット値（ＨＣＴ）の平均値の減少は、Ｍｙｅｌｏ００１の治療的経口投与（群９（ＭＨ（ＭＨＰＯｘ１）；９））後はそれほど顕著ではなかった。全体として、造血性急性放射線症候群（Ｈ－ＡＲＳ）の緩和に関するＭｙｅｌｏ００１の肯定的な傾向が観察された。

【0108】

要約すると、特に６．０Ｇｙ放射線（ＬＤ５０／３０）後の治療的処置では、群９（ＭＨ（ＰＯｘ１）；９）の生存率は対応する対照群８（ＶＨ（ＰＯｘ１）；８）よりも大幅に高かった。この生存所見は、骨髄細胞性、ＡＲＳスコア、体重などの二次パラメーターにおけるいくつかの肯定的な傾向によって裏付けられた。

【0109】

表３：放射線照射関連の死亡率

【表3】