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特許7541751フローサイトメータ用フローセルおよびフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-08-21
(45)【発行日】2024-08-29
(54)【発明の名称】フローサイトメータ用フローセルおよびフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法
(51)【国際特許分類】
G01N 15/14 20240101AFI20240822BHJP
G01N 37/00 20060101ALI20240822BHJP
G01N 21/05 20060101ALI20240822BHJP
【ＦＩ】
G01N15/14 Z
G01N37/00 101
G01N21/05
【請求項の数】
10
(21)【出願番号】P 2021572784
(86)(22)【出願日】2021-01-21
(86)【国際出願番号】 JP2021002017
(87)【国際公開番号】W WO2021149759
(87)【国際公開日】2021-07-29
【審査請求日】2023-10-18
(31)【優先権主張番号】P 2020008711
(32)【優先日】2020-01-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(73)【特許権者】
【識別番号】517110494
【氏名又は名称】シンクサイト株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100165179
【弁理士】
【氏名又は名称】田▲崎▼ 聡
(74)【代理人】
【識別番号】100188558
【弁理士】
【氏名又は名称】飯田 雅人
(74)【代理人】
【識別番号】100140774
【弁理士】
【氏名又は名称】大浪 一徳
(74)【代理人】
【識別番号】100175824
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100194250
【弁理士】
【氏名又は名称】福原 直志
(72)【発明者】
【氏名】河村 踊子
(72)【発明者】
【氏名】中川 啓史
(72)【発明者】
【氏名】戸田 圭亮
【審査官】前田 敏行
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１５／０５３３９３（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特開２００５－１９９１６４（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２０１８－２０５０４７（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２０１８－１４１６８９（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｇ０１Ｎ １５／１４
Ｇ０１Ｎ ３７／００
Ｇ０１Ｎ ２１／０５
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
サンプルを含むサンプル流体が流れるサンプル流路と、前記サンプル流路における前記サンプル流体の流通方向の上流端に連通し、前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給するサンプル流体供給部と、
を備え、
前記サンプル流体供給部は、
前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給する複数のサンプル用開口部と、
チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部を洗浄する洗浄液を供給する洗浄液供給用開口部と、
チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部から前記洗浄液を排出する洗浄液排出用開口部と、
を有することを特徴とするフローサイトメータ用フローセル。
【請求項2】
複数の前記サンプル用開口部は、前記サンプル流体を供給する順に並んで配置されることを特徴とする請求項１に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項3】
複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を最も後に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液供給用開口部よりも、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部に流れる前記洗浄液の下流側に配置されることを特徴とする請求項１または請求項２に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項4】
前記サンプル流体を最も後に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液供給用開口部でもあることを特徴とする請求項１または請求項２に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項5】
複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を最も先に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液排出用開口部よりも、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部に流れる前記洗浄液の上流側に配置されることを特徴とする請求項１から４のいずれか一項に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項6】
前記サンプル流体を最も先に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液排出用開口部でもあることを特徴とする請求項１から４のいずれか一項に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項7】
複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を後に供給する前記サンプル用開口部ほど前記洗浄液の上流側に配置される請求項１から請求項６のいずれか１項に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項8】
前記サンプル流体供給部は、両端に前記洗浄液供給用開口部と前記洗浄液排出用開口部とを有する洗浄流路を備え、複数の前記サンプル用開口部は、前記洗浄流路に設けられていることを特徴とする請求項１から請求項７のいずれか１項に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項9】
前記サンプル流体供給部は、複数の前記サンプル用開口部と前記サンプル流路における前記サンプル流体の流通方向の前記上流端とを連通させる連通路を備え、前記連通路は、前記サンプル流路よりも太いことを特徴とする請求項１から請求項８のいずれか１項に記載のフローサイトメータ用フローセル。
【請求項10】
請求項１から請求項９のいずか１項に記載のフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法であって、複数の前記サンプル用開口部のうち一の前記サンプル用開口部から前記サンプル流路に前記サンプル流体を流通させるサンプル流通工程と、
前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部まで前記洗浄液を流通させる洗浄工程と、を備えることを特徴とするフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、フローサイトメータ用フローセルおよびフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法に関する。
本願は、２０２０年１月２２日に日本に出願された特願２０２０－００８７１１号について優先権を主張し、その内容をここに援用する。
本願は、２０２０年１月２２日に日本に出願された特願２０２０－００８７１１号について優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【背景技術】
【0002】
フローサイトメータの流路系に用いられるフローセルが知られている（例えば特許文献１）。
特許文献１に記載のフローセルは、サンプル流体とシース流体とが流れる流路と、サンプル流体を流路に導入するサンプル流路と、シース流体を流路に導入する少なくとも１本のシース流路と、を備えている。サンプル流路の流通方向の上流端には、サンプル流体が供給されるサンプル流体供給部が形成されている。
特許文献１に記載のフローセルは、サンプル流体とシース流体とが流れる流路と、サンプル流体を流路に導入するサンプル流路と、シース流体を流路に導入する少なくとも１本のシース流路と、を備えている。サンプル流路の流通方向の上流端には、サンプル流体が供給されるサンプル流体供給部が形成されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【文献】特開２０１９－７８９３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
フローセルに複数種のサンプルを流通させる場合、先に流通させたサンプルが残留すると、後に流通させるサンプルが先に流通させたサンプルと混流し、目的とするサンプルの測定および分取結果に影響が出るおそれがある。
例えば、事前に学習用のサンプルを測定して教師情報を生成し、生成された教師情報を元に予測モデルを作成して目的サンプルの判別を行うフローサイトメータが開発されている。こうした機械学習を用いたフローサイトメータにおいて、生成される教師情報の精度は、学習用のサンプルの純度の影響を受ける。さらに、生成された教師情報に基づいて行われる目的細胞測定の精度は、測定用のサンプルの純度に依存する。よって、機器調整用微粒子や学習用のサンプル、分取用のサンプル等が１つのフローセルに連続して流通される場合、使用されるフローセルは、複数のサンプルの混流を防止することが求められている。
このため、各サンプルを流通させる前に、チューブ、サンプル流路およびサンプル流体供給部を十分に洗浄する必要がある。チューブ、サンプル流路およびサンプル流体供給部の洗浄は、洗浄液を流通させて行われるが、このように洗浄液を流通させて洗浄しても、サンプルが特にチューブとサンプル流体供給部に残留することがある。このため、新しいサンプルをサンプル流体供給部からサンプル流路に流通させて測定を行うと、複数のサンプル流体が混流し、正確な測定および分取結果が得られないおそれがあった。したがって、複数のサンプル流体をフローセルに流通させつつ、それら複数種のサンプルの混流を防止するという点で改善の余地がある。
例えば、事前に学習用のサンプルを測定して教師情報を生成し、生成された教師情報を元に予測モデルを作成して目的サンプルの判別を行うフローサイトメータが開発されている。こうした機械学習を用いたフローサイトメータにおいて、生成される教師情報の精度は、学習用のサンプルの純度の影響を受ける。さらに、生成された教師情報に基づいて行われる目的細胞測定の精度は、測定用のサンプルの純度に依存する。よって、機器調整用微粒子や学習用のサンプル、分取用のサンプル等が１つのフローセルに連続して流通される場合、使用されるフローセルは、複数のサンプルの混流を防止することが求められている。
このため、各サンプルを流通させる前に、チューブ、サンプル流路およびサンプル流体供給部を十分に洗浄する必要がある。チューブ、サンプル流路およびサンプル流体供給部の洗浄は、洗浄液を流通させて行われるが、このように洗浄液を流通させて洗浄しても、サンプルが特にチューブとサンプル流体供給部に残留することがある。このため、新しいサンプルをサンプル流体供給部からサンプル流路に流通させて測定を行うと、複数のサンプル流体が混流し、正確な測定および分取結果が得られないおそれがあった。したがって、複数のサンプル流体をフローセルに流通させつつ、それら複数種のサンプルの混流を防止するという点で改善の余地がある。
【0005】
本発明は、複数のサンプルを連続してフローサイトメータに流通して測定する際に、複数のサンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルを提供することを目的とする。本発明は、複数サンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0006】
上記の課題を達成するために、本発明の一態様に係るフローサイトメータ用フローセルは、以下の構成を採用する。
［１］本発明の一態様に係るフローサイトメータ用フローセルは、サンプルを含むサンプル流体が流れるサンプル流路と、前記サンプル流路における前記サンプル流体の流通方向の上流端に連通し、前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給するサンプル流体供給部と、を備え、前記サンプル流体供給部は、前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給する複数のサンプル用開口部と、チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部を洗浄する洗浄液を供給する洗浄液供給用開口部と、チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部から前記洗浄液を排出する洗浄液排出用開口部と、を有する。
［１］本発明の一態様に係るフローサイトメータ用フローセルは、サンプルを含むサンプル流体が流れるサンプル流路と、前記サンプル流路における前記サンプル流体の流通方向の上流端に連通し、前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給するサンプル流体供給部と、を備え、前記サンプル流体供給部は、前記サンプル流路に前記サンプル流体を供給する複数のサンプル用開口部と、チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部を洗浄する洗浄液を供給する洗浄液供給用開口部と、チューブが接続可能とされ、前記サンプル流体供給部から前記洗浄液を排出する洗浄液排出用開口部と、を有する。
【0007】
［２］上記構成［１］において、複数の前記サンプル用開口部は、前記サンプル流体を供給する順に並んで配置されてもよい。
【0008】
［３］上記構成［１］または［２］において、複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を最も後に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液供給用開口部よりも、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部に流れる前記洗浄液の下流側に配置されてもよい。
【0009】
［４］上記構成［１］または［２］において、前記サンプル流体を最も後に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液供給用開口部でもよい。
【0010】
［５］上記構成［１］～［４］のいずれかにおいて、複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を最も先に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液排出用開口部よりも、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部に流れる前記洗浄液の上流側に配置されてもよい。
【0011】
［６］上記構成［１］～［４］のいずれかにおいて、前記サンプル流体を最も先に供給する前記サンプル用開口部は、前記洗浄液排出用開口部でもよい。
【0012】
［７］上記構成［１］～［６］のいずれかにおいて、複数の前記サンプル用開口部のうち前記サンプル流体を後に供給する前記サンプル用開口部ほど前記洗浄液の上流側に配置されてもよい。
【0013】
［８］上記構成［１］から［７］のいずれかにおいて、前記サンプル流体供給部は、両端に前記洗浄液供給用開口部と前記洗浄液排出用開口部とを有する洗浄流路を備え、複数の前記サンプル用開口部は、前記洗浄流路に設けられていてもよい。
【0014】
［９］上記構成［１］～［８］のいずれかにおいて、前記サンプル流体供給部は、複数の前記サンプル用開口部と前記サンプル流路における前記サンプル流体の流通方向の前記上流端とを連通させる連通路を備え、前記連通路は、前記サンプル流路よりも太くてもよい。
【0015】
上記の課題を達成するために、本発明の他の態様に係るフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法は、以下の構成を採用する。
［１０］本発明の他の態様に係るフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法は、上記構成［１］～［９］のいずれかに記載のフローサイトメータ用フローセルを備えたフローセルの洗浄方法であって、複数の前記サンプル用開口部のうち一の前記サンプル用開口部から前記サンプル流路に前記サンプル流体を流通させるサンプル流通工程と、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部まで前記洗浄液を流通させる洗浄工程と、を備える。
［１０］本発明の他の態様に係るフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法は、上記構成［１］～［９］のいずれかに記載のフローサイトメータ用フローセルを備えたフローセルの洗浄方法であって、複数の前記サンプル用開口部のうち一の前記サンプル用開口部から前記サンプル流路に前記サンプル流体を流通させるサンプル流通工程と、前記洗浄液供給用開口部から前記洗浄液排出用開口部まで前記洗浄液を流通させる洗浄工程と、を備える。
【発明の効果】
【0017】
本発明によれば、複数のサンプルを連続してフローサイトメータに流通する際に、複数のサンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルを提供できる。本発明によれば、複数サンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【0018】
【図1】第１実施形態に係るセルソーターの斜視図である。
【図2】第１実施形態に係るセルソーターの平面図である。
【図3】第２実施形態に係るサンプル流体供給部の拡大平面図である。
【図4】第２実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部の拡大平面図である。
【図5】第３実施形態に係るサンプル流体供給部の拡大平面図である。
【図6】第３実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部の拡大平面図である。
【図7】実施例の洗浄試験に用いられたフローセルの一例におけるサンプル流体供給部の拡大概略図である。
【図8】実施例の洗浄試験に用いられたフローセルの他の例におけるサンプル流体供給部の拡大概略図である。
【発明を実施するための形態】
【0019】
以下、複数種の細胞を含むサンプルから目的細胞を分取する機能を有するフローサイトメータであるセルソーターに対して、本発明の一態様に係るフローサイトメータ用フローセルを適用した例をもとに、本発明の実施形態について説明する。
【0020】
（第１実施形態）
（セルソーター）
以下、本発明の第１実施形態に係るセルソーターについて図面を参照して説明する。
図１は、第１実施形態に係るセルソーター１の斜視図である。
図２は、第１実施形態に係るセルソーター１の平面図である。
本実施形態のセルソーター１は、複数種の細胞を含むサンプル流体Ａから目的細胞を分取する機能を有するフローサイトメータである。目的細胞は、例えば、サンプル流体Ａに含まれる細胞にレーザー光を照射して得られる散乱光や蛍光のデータを元に判別される。目的細胞の判別（分類）には機械学習を用いることができ、その場合、学習用細胞を含有させたサンプル流体Ａを用いて事前に測定を行い、得られた教師情報から判別モデルを作成し、その判別モデルを元に目的細胞の判別が行われる。
図１、図２に示すように、セルソーター１は、フローセル１０（請求項のフローサイトメータ用フローセルに相当）と、細胞情報取得装置２と、圧電素子３と、を備えている。
（セルソーター）
以下、本発明の第１実施形態に係るセルソーターについて図面を参照して説明する。
図１は、第１実施形態に係るセルソーター１の斜視図である。
図２は、第１実施形態に係るセルソーター１の平面図である。
本実施形態のセルソーター１は、複数種の細胞を含むサンプル流体Ａから目的細胞を分取する機能を有するフローサイトメータである。目的細胞は、例えば、サンプル流体Ａに含まれる細胞にレーザー光を照射して得られる散乱光や蛍光のデータを元に判別される。目的細胞の判別（分類）には機械学習を用いることができ、その場合、学習用細胞を含有させたサンプル流体Ａを用いて事前に測定を行い、得られた教師情報から判別モデルを作成し、その判別モデルを元に目的細胞の判別が行われる。
図１、図２に示すように、セルソーター１は、フローセル１０（請求項のフローサイトメータ用フローセルに相当）と、細胞情報取得装置２と、圧電素子３と、を備えている。
【0021】
（フローセル）
フローセル１０は、一方向に延びる矩形板状の部材である。フローセル１０は、例えばガラスや石英等の透明な硬質材料により形成することができる。フローセル１０を形成する材料として、ＰＤＭＳ（ＰｏｌｙＤｉＭｅｔｈｙｌＳｉｌｏｘａｎｅ）のような柔軟な高分子素材を用いることができる。また、フローセル１０には、それ以外の材料として、熱硬化性のプラスティック、ポリカーボネート、ポリ４フッ化エチレン、および、ＰＭＭＡ（ＰｏｌｙＭｅｔｈｙｌ ＭｅｔｈＡｃｒｙｌａｔｅ）を代表とするアクリル樹脂のような熱可塑性プラスティック等の「ポリマー」を用いることもできる。フローセル１０は、それらの素材を適宜組み合わせて使用できる。
フローセル１０は、例えば矩形板状の第１部材４と矩形板状の第２部材５とを張り合わせて形成されている。
第１部材４は、例えばガラス等の透明な材料によって形成されている。
第２部材５は、例えばＰＤＭＳ（ＰｏｌｙＤｉＭｅｔｈｙｌＳｉｌｏｘａｎｅ）等の透明で柔軟な樹脂材料によって形成されている。第２部材５における第１部材４側には、サンプル流路１１と、サンプル流体供給部２０と、シース流路１２と、シース液供給部１３と、変流用流体収容部１４と、分取用流路１５とが形成されている。サンプル流路１１と、サンプル流体供給部２０と、シース流路１２と、シース液供給部１３と、変流用流体収容部１４と、分取用流路１５とは、第１部材４によって覆われている。
フローセル１０は、一方向に延びる矩形板状の部材である。フローセル１０は、例えばガラスや石英等の透明な硬質材料により形成することができる。フローセル１０を形成する材料として、ＰＤＭＳ（ＰｏｌｙＤｉＭｅｔｈｙｌＳｉｌｏｘａｎｅ）のような柔軟な高分子素材を用いることができる。また、フローセル１０には、それ以外の材料として、熱硬化性のプラスティック、ポリカーボネート、ポリ４フッ化エチレン、および、ＰＭＭＡ（ＰｏｌｙＭｅｔｈｙｌ ＭｅｔｈＡｃｒｙｌａｔｅ）を代表とするアクリル樹脂のような熱可塑性プラスティック等の「ポリマー」を用いることもできる。フローセル１０は、それらの素材を適宜組み合わせて使用できる。
フローセル１０は、例えば矩形板状の第１部材４と矩形板状の第２部材５とを張り合わせて形成されている。
第１部材４は、例えばガラス等の透明な材料によって形成されている。
第２部材５は、例えばＰＤＭＳ（ＰｏｌｙＤｉＭｅｔｈｙｌＳｉｌｏｘａｎｅ）等の透明で柔軟な樹脂材料によって形成されている。第２部材５における第１部材４側には、サンプル流路１１と、サンプル流体供給部２０と、シース流路１２と、シース液供給部１３と、変流用流体収容部１４と、分取用流路１５とが形成されている。サンプル流路１１と、サンプル流体供給部２０と、シース流路１２と、シース液供給部１３と、変流用流体収容部１４と、分取用流路１５とは、第１部材４によって覆われている。
【0022】
サンプル流路１１は、フローセル１０の長手方向に延びている。サンプル流路１１には、サンプルを含むサンプル流体Ａがフローセル１０の長手方向に沿って流通する。サンプル流体Ａのサンプルには、例えば細胞やビーズ等の粒子が含まれている。サンプル流路１１の一端部はサンプル流体供給部２０と連通している。サンプル流路１１の他端部は分取用流路１５と連通している。サンプル流体Ａは、サンプル流体供給部２０から供給されてサンプル流路１１の一端部から他端部に向かって流通する。
以下、サンプル流体Ａの流通方向を流通方向Ｄ１とする。
サンプル流路１１は、流通方向Ｄ１における上流端１１ａと、流通方向Ｄ１に沿って延びる絞り流路１１ｂと、絞り流路１１ｂの下流端に設けられた合流部１１ｃと、合流部１１ｃから流通方向Ｄ１に沿って下流側に延びる整列流路１１ｄと、整列流路１１ｄの下流端に設けられた細胞分取部１１ｅと、細胞分取部１１ｅから流通方向Ｄ１に沿って下流側に延びる排出流路１１ｆと、を有している。
以下、サンプル流体Ａの流通方向を流通方向Ｄ１とする。
サンプル流路１１は、流通方向Ｄ１における上流端１１ａと、流通方向Ｄ１に沿って延びる絞り流路１１ｂと、絞り流路１１ｂの下流端に設けられた合流部１１ｃと、合流部１１ｃから流通方向Ｄ１に沿って下流側に延びる整列流路１１ｄと、整列流路１１ｄの下流端に設けられた細胞分取部１１ｅと、細胞分取部１１ｅから流通方向Ｄ１に沿って下流側に延びる排出流路１１ｆと、を有している。
【0023】
上流端１１ａには、サンプル流体Ａが供給される。
絞り流路１１ｂの下流側端部には、絞り部１１ｇが設けられている。絞り流路１１ｂにおいて、上流端１１ａから絞り部１１ｇまでの区間は流路幅が同じである。絞り部１１ｇは、下流側に向かうにつれて流路幅が狭くなっている。
合流部１１ｃは、サンプル流路１１とシース流路１２とを連通させている。
整列流路１１ｄは、サンプル流体Ａ内の細胞を流通方向Ｄ１に沿って１列に整列させる。
細胞分取部１１ｅは、整列流路１１ｄで１列に整列された細胞のうち、分取したい目的細胞を分取する。
排出流路１１ｆは、細胞分取部１１ｅを通過したサンプル流体Ａが流通する。排出流路１１ｆを通過したサンプル流体Ａは、排出流路１１ｆの下流端よりも下流側に配置された試験管（不図示）等に排出される。
絞り流路１１ｂの下流側端部には、絞り部１１ｇが設けられている。絞り流路１１ｂにおいて、上流端１１ａから絞り部１１ｇまでの区間は流路幅が同じである。絞り部１１ｇは、下流側に向かうにつれて流路幅が狭くなっている。
合流部１１ｃは、サンプル流路１１とシース流路１２とを連通させている。
整列流路１１ｄは、サンプル流体Ａ内の細胞を流通方向Ｄ１に沿って１列に整列させる。
細胞分取部１１ｅは、整列流路１１ｄで１列に整列された細胞のうち、分取したい目的細胞を分取する。
排出流路１１ｆは、細胞分取部１１ｅを通過したサンプル流体Ａが流通する。排出流路１１ｆを通過したサンプル流体Ａは、排出流路１１ｆの下流端よりも下流側に配置された試験管（不図示）等に排出される。
【0024】
サンプル流体供給部２０のサンプル流体Ａの流通方向Ｄ１の下流端は、サンプル流路１１におけるサンプル流体Ａの流通方向Ｄ１の上流端１１ａに連通している。サンプル流体供給部２０は、サンプル流路１１にサンプル流体Ａを供給する。サンプル流体供給部２０は、２個のサンプル用開口部２１と、洗浄液供給用開口部２４と、洗浄液排出用開口部２５と、２個のサンプル用開口部２１を連通させる連通路２２と、洗浄流路２６と、を備えている。
サンプル用開口部２１は、第２部材５を厚さ方向に貫通している。サンプル用開口部２１は、サンプル流路１１にサンプル流体Ａを供給する。２個のサンプル用開口部２１は、流通方向Ｄ１の上流側から下流側に向かってフローセル１０にサンプル流体Ａを供給する順に並んで配置されている。２個のサンプル用開口部２１のうち、流通方向Ｄ１における上流側に配置されたものを第１サンプル用開口部２１ａとする。２個のサンプル用開口部２１のうち、流通方向Ｄ１における下流側に配置されたものを第２サンプル用開口部２１ｂとする。第１サンプル用開口部２１ａと第２サンプル用開口部２１ｂとは、連通路２２により連通している。
第１サンプル用開口部２１ａは、図１、図２では、連通路２２の流通方向Ｄ１における上流側の端部に設けられている。
第２サンプル用開口部２１ｂは、図１、図２では、連通路２２の流通方向Ｄ１における下流側の端部に設けられている。
２個のサンプル用開口部２１のうち第１サンプル用開口部２１ａには、第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にフローセル１０にサンプル流体Ａが供給される。第１サンプル用開口部２１ａは第２サンプル用開口部２１ｂよりも連通路２２における流通方向Ｄ１の上流側に設けられている。図１では、第１サンプル用開口部２１ａは、連通路２２の端部に設けられている第２サンプル用開口部２１ｂとは反対側の連通路２２の端部に配置されている。
サンプル用開口部２１は、第２部材５を厚さ方向に貫通している。サンプル用開口部２１は、サンプル流路１１にサンプル流体Ａを供給する。２個のサンプル用開口部２１は、流通方向Ｄ１の上流側から下流側に向かってフローセル１０にサンプル流体Ａを供給する順に並んで配置されている。２個のサンプル用開口部２１のうち、流通方向Ｄ１における上流側に配置されたものを第１サンプル用開口部２１ａとする。２個のサンプル用開口部２１のうち、流通方向Ｄ１における下流側に配置されたものを第２サンプル用開口部２１ｂとする。第１サンプル用開口部２１ａと第２サンプル用開口部２１ｂとは、連通路２２により連通している。
第１サンプル用開口部２１ａは、図１、図２では、連通路２２の流通方向Ｄ１における上流側の端部に設けられている。
第２サンプル用開口部２１ｂは、図１、図２では、連通路２２の流通方向Ｄ１における下流側の端部に設けられている。
２個のサンプル用開口部２１のうち第１サンプル用開口部２１ａには、第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にフローセル１０にサンプル流体Ａが供給される。第１サンプル用開口部２１ａは第２サンプル用開口部２１ｂよりも連通路２２における流通方向Ｄ１の上流側に設けられている。図１では、第１サンプル用開口部２１ａは、連通路２２の端部に設けられている第２サンプル用開口部２１ｂとは反対側の連通路２２の端部に配置されている。
【0025】
第１サンプル用開口部２１ａには、第１チューブ２３ａ（請求項のチューブに相当）が接続されている。第２サンプル用開口部２１ｂには、第２チューブ２３ｂ（請求項のチューブに相当）が接続されている。サンプル流体Ａは、第１チューブ２３ａまたは第２チューブ２３ｂを通じてサンプル流体供給部２０に供給される。
第１サンプル用開口部２１ａは、図１、図２では、サンプル流体供給部２０を洗浄する洗浄液Ｇを排出する洗浄液排出用開口部２５を兼ねている。第２サンプル用開口部２１ｂは、図１、図２では、サンプル流体供給部２０を洗浄する洗浄液Ｇを供給する洗浄液供給用開口部２４を兼ねている。
連通路２２は、流通方向Ｄ１に沿って延びている。連通路２２は、サンプル流路１１よりも太い。連通路２２は、図１、図２では、両端に洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とを有する洗浄流路２６を兼ねている。洗浄液Ｇは、洗浄流路２６を、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する。
洗浄流路２６の洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａは、図１、図２では、サンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。
第１サンプル用開口部２１ａは、図１、図２では、サンプル流体供給部２０を洗浄する洗浄液Ｇを排出する洗浄液排出用開口部２５を兼ねている。第２サンプル用開口部２１ｂは、図１、図２では、サンプル流体供給部２０を洗浄する洗浄液Ｇを供給する洗浄液供給用開口部２４を兼ねている。
連通路２２は、流通方向Ｄ１に沿って延びている。連通路２２は、サンプル流路１１よりも太い。連通路２２は、図１、図２では、両端に洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とを有する洗浄流路２６を兼ねている。洗浄液Ｇは、洗浄流路２６を、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する。
洗浄流路２６の洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａは、図１、図２では、サンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。
【0026】
シース流路１２は、サンプル流路１１に並んで形成されている。シース流路１２は、図１、図２では、２本形成されている。２本のシース流路１２は、サンプル流路１１を挟んで対称に形成されている。シース流路１２には、シース液Ｂが流通する。シース液Ｂは、整列流路１１ｄで細胞を１列に整列させて連続的に流通させる。
シース液Ｂは、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１の上流側から下流側に向かって、サンプル流体Ａと同じ方向にシース流路１２を流通する。
２本のシース流路１２は、シース液Ｂの流通方向における上流端１２ａ同士および下流端１２ｂ同士で連通している。
２本のシース流路１２の下流端１２ｂは、サンプル流路１１の合流部１１ｃに連通している。
シース液供給部１３は、図１、図２では、２本のシース流路１２の上流端１２ａに設けられている。シース液供給部１３は、２本のシース流路１２の上流端１２ａに連通している。シース液供給部１３は、２本のシース流路１２にシース液Ｂを供給する。
シース液Ｂは、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１の上流側から下流側に向かって、サンプル流体Ａと同じ方向にシース流路１２を流通する。
２本のシース流路１２は、シース液Ｂの流通方向における上流端１２ａ同士および下流端１２ｂ同士で連通している。
２本のシース流路１２の下流端１２ｂは、サンプル流路１１の合流部１１ｃに連通している。
シース液供給部１３は、図１、図２では、２本のシース流路１２の上流端１２ａに設けられている。シース液供給部１３は、２本のシース流路１２の上流端１２ａに連通している。シース液供給部１３は、２本のシース流路１２にシース液Ｂを供給する。
【0027】
変流用流体収容部１４は、図１、図２では、サンプル流路１１を挟んで一対配置されている。変流用流体収容部１４は、サンプル流路１１を挟んで対称に形成されている。変流用流体収容部１４は、フローセル１０を構成する第１部材４の壁部４ａと、フローセル１０を構成する第２部材５の壁部５ａとの間に設けられている。変流用流体収容部１４は、サンプル流路１１の細胞分取部１１ｅに連通している。変流用流体収容部１４の内部には、変流用流体Ｅが収容されている。
変流用流体収容部１４は、本体部３０と、支持板３３と、を有している。
変流用流体収容部１４は、本体部３０と、支持板３３と、を有している。
【0028】
本体部３０は、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１に直交する方向に延びている。本体部３０は、サンプル流路１１の細胞分取部１１ｅに連通している。本体部３０は、細胞分取部１１ｅに連通する先端部３０ａと、先端部３０ａから流通方向Ｄ１に直交する方向に延びる平行部３０ｂとを有している。
先端部３０ａは、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１に直交する方向に沿って、細胞分取部１１ｅから離間するにつれて幅広となっている。平行部３０ｂは、流通方向Ｄ１に直交する方向に幅が一定のまま延びている。
チャンバー３１は、本体部３０よりも細胞分取部１１ｅから離間した位置に設けられている。チャンバー３１は、第２部材５を厚さ方向に貫通している。チャンバー３１は、平面視で円形状に形成されている。一対のチャンバー３１のうち一方のチャンバー３１には、圧電素子３によって蓋をされている。圧電素子３の中心は、チャンバー３１の中心と一致している。一対のチャンバー３１のうち他方のチャンバー３１は、例えば透明なガラス板６によって蓋をされている。一対のチャンバー３１の両方に圧電素子３が設置されていてもよい。
先端部３０ａは、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１に直交する方向に沿って、細胞分取部１１ｅから離間するにつれて幅広となっている。平行部３０ｂは、流通方向Ｄ１に直交する方向に幅が一定のまま延びている。
チャンバー３１は、本体部３０よりも細胞分取部１１ｅから離間した位置に設けられている。チャンバー３１は、第２部材５を厚さ方向に貫通している。チャンバー３１は、平面視で円形状に形成されている。一対のチャンバー３１のうち一方のチャンバー３１には、圧電素子３によって蓋をされている。圧電素子３の中心は、チャンバー３１の中心と一致している。一対のチャンバー３１のうち他方のチャンバー３１は、例えば透明なガラス板６によって蓋をされている。一対のチャンバー３１の両方に圧電素子３が設置されていてもよい。
【0029】
変流用流体排泄路３２は、チャンバー３１から流通方向Ｄ１の上流側に向かって延びている。変流用流体排泄路３２は、チャンバー３１とは反対側の端部に変流用流体排泄部（不図示）を有している。変流用流体Ｅは、変流用流体収容部１４に変流用流体Ｅを充填する際に、変流用流体排泄部から排泄される。整列流路１１ｄから供給された変流用流体Ｅは、本体部３０を流通してチャンバー３１を通過し、過剰な変流用流体Ｅは、変流用流体排泄路３２から排泄される。変流用流体Ｅは、本体部３０において、圧電素子３側からサンプル流路１１側に向かって、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１に直交するように流通する。
以下、本体部３０における、変流用流体Ｅの流通方向を流通方向Ｄ２とする。
以下、本体部３０における、変流用流体Ｅの流通方向を流通方向Ｄ２とする。
【0030】
支持板３３は、本体部３０の内部に複数設けられる。支持板３３は、変流用流体Ｅの流通方向Ｄ２に延びている。支持板３３は、第１部材４の壁部４ａと第２部材５の壁部５ａとを接続している（図１参照）。支持板３３に沿って、変流用流体Ｅが流通する複数の変流用流路３４が形成されている。
変流用流路３４は、変流用流体Ｅの流通方向Ｄ２に延びている。
変流用流路３４は、変流用流体Ｅの流通方向Ｄ２に延びている。
【0031】
分取用流路１５は、変流用流体収容部１４よりも、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１における下流側に配置されている。分取用流路１５は、サンプル流路１１の細胞分取部１１ｅに連通している。分取用流路１５は、サンプル流路１１を挟んで設けられる。分取用流路１５は、サンプル流路１１の排出流路１１ｆに沿って、流通方向Ｄ１に延びている。分取用流路１５の下流端よりも下流側には、分取された目的細胞を収集するための試験管（不図示）等が配置されている。
【0032】
（細胞情報取得装置）
細胞情報取得装置２は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄに接続されている。細胞情報取得装置２は、例えばレーザー光源（不図示）や検出器（不図示）、制御部（不図示）等を備えている。細胞情報取得装置２は、サンプル流体Ａに含まれる細胞にレーザー光を照射する。細胞情報取得装置２は、レーザー光の照射によって細胞から生じた散乱光や蛍光を検出器により検出して、例えば、細胞の形態や核、顆粒等の細胞内部構造に関する情報を取得する。細胞情報取得装置２は、取得した情報に基づき、サンプル流体Ａに含まれる複数の細胞から分取したい目的細胞を制御部で判別する。なお、本実施形態に係る細胞情報取得装置２は、機械学習によって目的の細胞の特徴を学習する機能を有しているものがより望ましいが、これに限られない。細胞情報取得装置２は、例えば、整列流路１１ｄを流通する細胞について個別に情報を取得できるものであればよい。このような細胞情報取得装置２として、ＪＳＡＮセルソーター（ベイバイオサイエンス株式会社製）等を用いることができる。
細胞情報取得装置２は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄに接続されている。細胞情報取得装置２は、例えばレーザー光源（不図示）や検出器（不図示）、制御部（不図示）等を備えている。細胞情報取得装置２は、サンプル流体Ａに含まれる細胞にレーザー光を照射する。細胞情報取得装置２は、レーザー光の照射によって細胞から生じた散乱光や蛍光を検出器により検出して、例えば、細胞の形態や核、顆粒等の細胞内部構造に関する情報を取得する。細胞情報取得装置２は、取得した情報に基づき、サンプル流体Ａに含まれる複数の細胞から分取したい目的細胞を制御部で判別する。なお、本実施形態に係る細胞情報取得装置２は、機械学習によって目的の細胞の特徴を学習する機能を有しているものがより望ましいが、これに限られない。細胞情報取得装置２は、例えば、整列流路１１ｄを流通する細胞について個別に情報を取得できるものであればよい。このような細胞情報取得装置２として、ＪＳＡＮセルソーター（ベイバイオサイエンス株式会社製）等を用いることができる。
【0033】
（圧電素子）
圧電素子３は、円柱状に形成されている。圧電素子３は、チャンバー３１の貫通孔に蓋をしている。平面視で、圧電素子３とチャンバー３１の中心は一致するよう配置されている。支持板３３の端部は、平面視でチャンバー３１の外形に沿うように設けられている。
圧電素子３は、変流用流体収容部１４の内部の液圧を変化させ、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１と交差する方向（流通方向Ｄ２）に変流用流体Ｅを流通させる。圧電素子３は、細胞情報取得装置２と電気的に接続している。圧電素子３には、細胞情報取得装置２から例えばパルス状に電圧が印加される。圧電素子３は、印加された電圧に応じて変形する。変流用流体収容部１４およびチャンバー３１内の液圧は、圧電素子の３の変形によって変化する。変流用流体Ｅは、圧電素子３による変流用流体収容部１４およびチャンバー３１内の液圧の変化によって、流通方向Ｄ２に流通される。
圧電素子３は、円柱状に形成されている。圧電素子３は、チャンバー３１の貫通孔に蓋をしている。平面視で、圧電素子３とチャンバー３１の中心は一致するよう配置されている。支持板３３の端部は、平面視でチャンバー３１の外形に沿うように設けられている。
圧電素子３は、変流用流体収容部１４の内部の液圧を変化させ、サンプル流体Ａの流通方向Ｄ１と交差する方向（流通方向Ｄ２）に変流用流体Ｅを流通させる。圧電素子３は、細胞情報取得装置２と電気的に接続している。圧電素子３には、細胞情報取得装置２から例えばパルス状に電圧が印加される。圧電素子３は、印加された電圧に応じて変形する。変流用流体収容部１４およびチャンバー３１内の液圧は、圧電素子の３の変形によって変化する。変流用流体Ｅは、圧電素子３による変流用流体収容部１４およびチャンバー３１内の液圧の変化によって、流通方向Ｄ２に流通される。
【0034】
（セルソーターの使用方法およびフローセルの洗浄方法）
以下、図１に基づいてセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の一例について説明する。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程（請求項のサンプル流通工程に相当）と、機器調整工程後の洗浄工程と、学習工程（請求項のサンプル流通工程に相当）と、学習工程後の洗浄工程と、分取工程（請求項のサンプル流通工程に相当）とを備えている。セルソーター１の使用において、複数の測定サンプルを含むサンプル流体Ａが、フローセル１０を流通する。以下のセルソーター１の使用方法では、異なった測定サンプルを流通させる際に各工程の間に洗浄工程を備える例について説明を記載するが、これに限られない。フローセル１０を流通するサンプル流体Ａに含まれるサンプル数や、サンプルの性質によっては、その後の洗浄工程を省略することができる。
また以下の記載では、上記のサンプル流体Ａには、機器調整工程で流通される標準ビーズ等の粒子を含む機器調整用サンプル流体Ａ１と、学習工程で流通される学習用サンプルを含む学習用サンプル流体Ａ２と、分取工程で流通される分取用サンプルを含む分取用サンプル流体Ａ３とが含まれている例について説明するが、これに限られない。サンプル流体Ａは、必要に応じて、分取工程の調整用のサンプルなどをさらに含むことができる。
以下、図１に基づいてセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の一例について説明する。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程（請求項のサンプル流通工程に相当）と、機器調整工程後の洗浄工程と、学習工程（請求項のサンプル流通工程に相当）と、学習工程後の洗浄工程と、分取工程（請求項のサンプル流通工程に相当）とを備えている。セルソーター１の使用において、複数の測定サンプルを含むサンプル流体Ａが、フローセル１０を流通する。以下のセルソーター１の使用方法では、異なった測定サンプルを流通させる際に各工程の間に洗浄工程を備える例について説明を記載するが、これに限られない。フローセル１０を流通するサンプル流体Ａに含まれるサンプル数や、サンプルの性質によっては、その後の洗浄工程を省略することができる。
また以下の記載では、上記のサンプル流体Ａには、機器調整工程で流通される標準ビーズ等の粒子を含む機器調整用サンプル流体Ａ１と、学習工程で流通される学習用サンプルを含む学習用サンプル流体Ａ２と、分取工程で流通される分取用サンプルを含む分取用サンプル流体Ａ３とが含まれている例について説明するが、これに限られない。サンプル流体Ａは、必要に応じて、分取工程の調整用のサンプルなどをさらに含むことができる。
【0035】
（機器調整工程）
機器調整工程では、サンプル流体供給部２０の第１サンプル用開口部２１ａから機器調整用サンプルを含む機器調整用サンプル流体Ａ１を供給する。機器調整工程は、使用するセルソーター１が測定に適した状態にあるかを確認し、必要な場合には事前に調整するための工程である。機器調整用サンプル流体Ａ１には、例えば、粒子特性が予め分かっている標準ビーズ（例えば、後述の実施例で使用されている蛍光標識されたビーズ（蛍光ビーズ））が含まれている。機器調整用サンプル流体Ａ１は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。機器調整用サンプル流体Ａ１に含まれる粒子は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。次いで、整列流路１１ｄを流通する個々の粒子に関する情報が細胞情報取得装置２により取得され、セルソーター１の動作状態を確認することができる。
機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
機器調整工程では、サンプル流体供給部２０の第１サンプル用開口部２１ａから機器調整用サンプルを含む機器調整用サンプル流体Ａ１を供給する。機器調整工程は、使用するセルソーター１が測定に適した状態にあるかを確認し、必要な場合には事前に調整するための工程である。機器調整用サンプル流体Ａ１には、例えば、粒子特性が予め分かっている標準ビーズ（例えば、後述の実施例で使用されている蛍光標識されたビーズ（蛍光ビーズ））が含まれている。機器調整用サンプル流体Ａ１は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。機器調整用サンプル流体Ａ１に含まれる粒子は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。次いで、整列流路１１ｄを流通する個々の粒子に関する情報が細胞情報取得装置２により取得され、セルソーター１の動作状態を確認することができる。
機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
【0036】
（機器調整工程後の洗浄工程）
セルソーター１の使用において、機器調整工程から学習工程に移行する際、フローセル１０を洗浄する必要がある。特に、機器調整用に用いられたサンプルが残留しやすいサンプル流体供給部２０を洗浄する必要がある。
機器調整工程後の洗浄工程では、第２チューブ２３ｂを通して第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４）からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、第２チューブ２３ｂ内で、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ洗浄流路２６を通じて流通する。（即ち、サンプル流体供給部２０は、機器調整用サンプル流体Ａ１がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に洗浄される。）洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０と、第１チューブ２３ａと、第２チューブ２３ｂとが、確実に洗浄される。サンプル流体供給部２０と第１チューブ２３ａとに残留していた機器調整用サンプル流体Ａ１は、除去される。
セルソーター１の使用において、機器調整工程から学習工程に移行する際、フローセル１０を洗浄する必要がある。特に、機器調整用に用いられたサンプルが残留しやすいサンプル流体供給部２０を洗浄する必要がある。
機器調整工程後の洗浄工程では、第２チューブ２３ｂを通して第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４）からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、第２チューブ２３ｂ内で、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ洗浄流路２６を通じて流通する。（即ち、サンプル流体供給部２０は、機器調整用サンプル流体Ａ１がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に洗浄される。）洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０と、第１チューブ２３ａと、第２チューブ２３ｂとが、確実に洗浄される。サンプル流体供給部２０と第１チューブ２３ａとに残留していた機器調整用サンプル流体Ａ１は、除去される。
【0037】
（学習工程）
学習工程では、まず、サンプル流体供給部２０の第１サンプル用開口部２１ａから学習用サンプルを含む学習用サンプル流体Ａ２を供給する。第１サンプル用開口部２１ａからサンプル流路１１に学習用サンプル流体Ａ２を流通させる。学習用サンプル流体Ａ２には、例えば、学習用に用いられる細胞が含まれている。学習用サンプル流体Ａ２は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。学習用サンプル流体Ａ２に含まれる細胞は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。
次いで、細胞情報取得装置２は、整列流路１１ｄを流通する個々の細胞から情報を読み取り、目的細胞を判別する基準を学習する。本実施形態のセルソーター１では、本学習工程において、正解ラベル付けされた学習用の細胞サンプルを流通させて機械学習用の訓練データを取得することができる。本実施形態に係る細胞情報取得装置２は、機械学習によって目的の細胞の特徴を学習する機能を有しているものが望ましく、その場合、取得された訓練データを用いて目的細胞を判別するモデル（基準）が機械学習により作製される。
学習用サンプル流体Ａ２の流通時、学習用サンプル流体Ａ２が供給されていない第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
学習工程では、まず、サンプル流体供給部２０の第１サンプル用開口部２１ａから学習用サンプルを含む学習用サンプル流体Ａ２を供給する。第１サンプル用開口部２１ａからサンプル流路１１に学習用サンプル流体Ａ２を流通させる。学習用サンプル流体Ａ２には、例えば、学習用に用いられる細胞が含まれている。学習用サンプル流体Ａ２は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。学習用サンプル流体Ａ２に含まれる細胞は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。
次いで、細胞情報取得装置２は、整列流路１１ｄを流通する個々の細胞から情報を読み取り、目的細胞を判別する基準を学習する。本実施形態のセルソーター１では、本学習工程において、正解ラベル付けされた学習用の細胞サンプルを流通させて機械学習用の訓練データを取得することができる。本実施形態に係る細胞情報取得装置２は、機械学習によって目的の細胞の特徴を学習する機能を有しているものが望ましく、その場合、取得された訓練データを用いて目的細胞を判別するモデル（基準）が機械学習により作製される。
学習用サンプル流体Ａ２の流通時、学習用サンプル流体Ａ２が供給されていない第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
【0038】
（学習工程後の洗浄工程）
セルソーター１の使用において、学習工程から分取工程に移行する際、フローセル１０を洗浄する必要がある。特に、学習用に用いられたサンプルが残留しやすいサンプル流体供給部２０を洗浄する必要がある。
学習工程後の洗浄工程では、第２チューブ２３ｂを通して第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４）からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、第２チューブ２３ｂ内で、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ洗浄流路２６を通じて流通する。（即ち、サンプル流体供給部２０は、学習用サンプル流体Ａ２がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に洗浄される。）洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０と、第１チューブ２３ａと、第２チューブ２３ｂとは、必要量の溶液で確実に洗浄される。洗浄液Ｇの流速は、５ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの高速にするか、０．１ｍＬ／ｍｉｎ程度の低速にするか、適宜選択可能である。サンプル流体供給部２０と第１チューブ２３ａとに残留していた学習用サンプル流体Ａ２は、除去される。
セルソーター１の使用において、学習工程から分取工程に移行する際、フローセル１０を洗浄する必要がある。特に、学習用に用いられたサンプルが残留しやすいサンプル流体供給部２０を洗浄する必要がある。
学習工程後の洗浄工程では、第２チューブ２３ｂを通して第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４）からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、第２チューブ２３ｂ内で、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ洗浄流路２６を通じて流通する。（即ち、サンプル流体供給部２０は、学習用サンプル流体Ａ２がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に洗浄される。）洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０と、第１チューブ２３ａと、第２チューブ２３ｂとは、必要量の溶液で確実に洗浄される。洗浄液Ｇの流速は、５ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの高速にするか、０．１ｍＬ／ｍｉｎ程度の低速にするか、適宜選択可能である。サンプル流体供給部２０と第１チューブ２３ａとに残留していた学習用サンプル流体Ａ２は、除去される。
【0039】
（分取工程）
分取工程では、まず、サンプル流体供給部２０の第２サンプル用開口部２１ｂから分取用サンプルを含む分取用サンプル流体Ａ３を供給する。第２サンプル用開口部２１ｂからサンプル流路１１に分取用サンプル流体Ａ３を流通させる。分取用サンプル流体Ａ３には、分取したい目的細胞を含む複数種の細胞が含まれている。分取用サンプル流体Ａ３は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。分取用サンプル流体Ａ３に含まれる複数の細胞は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。
分取用サンプル流体Ａ３の流通時、分取用サンプル流体Ａ３が供給されていない第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
複数の細胞は、細胞情報取得装置２の検出可能域を１個ずつ並んで等速で通過する。このため、細胞情報取得装置２は、複数の細胞を１個ずつ検出できる。
次いで、細胞情報取得装置２は、学習工程で学習した目的細胞の判別基準により、整列流路１１ｄを流通する多種の細胞から目的細胞を判別する。細胞情報取得装置２は、目的細胞を判別すると、例えばパルス状の電圧を圧電素子３に印加する。
分取工程では、まず、サンプル流体供給部２０の第２サンプル用開口部２１ｂから分取用サンプルを含む分取用サンプル流体Ａ３を供給する。第２サンプル用開口部２１ｂからサンプル流路１１に分取用サンプル流体Ａ３を流通させる。分取用サンプル流体Ａ３には、分取したい目的細胞を含む複数種の細胞が含まれている。分取用サンプル流体Ａ３は、サンプル流体供給部２０およびサンプル流路１１を例えば１０μＬ／ｍｉｎから３０μＬ／ｍｉｎの流速で流通する。分取用サンプル流体Ａ３に含まれる複数の細胞は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。
分取用サンプル流体Ａ３の流通時、分取用サンプル流体Ａ３が供給されていない第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
複数の細胞は、細胞情報取得装置２の検出可能域を１個ずつ並んで等速で通過する。このため、細胞情報取得装置２は、複数の細胞を１個ずつ検出できる。
次いで、細胞情報取得装置２は、学習工程で学習した目的細胞の判別基準により、整列流路１１ｄを流通する多種の細胞から目的細胞を判別する。細胞情報取得装置２は、目的細胞を判別すると、例えばパルス状の電圧を圧電素子３に印加する。
【0040】
圧電素子３は、細胞情報取得装置２からパルス状の電圧を印加されると、変形する。圧電素子３が設けられた一方の変流用流体収容部１４は、圧電素子３の変形により減圧される。変流用流体Ｅは、変流用流体収容部１４が減圧されると、流通方向Ｄ１と直交する流通方向Ｄ２に沿って流通する。
変流用流体Ｅは、細胞分取部１１ｅからチャンバー３１に向かって流通し、変流用流路３４内を通過する。変流用流体Ｅの流れは、細胞分取部１１ｅに到達した目的細胞を、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の変流用流体収容部１４側に引き込む。目的細胞は、流圧によって引き込まれて移動方向が流通方向Ｄ１から分取用流路１５に沿う方向に変化する。目的細胞は、一対の分取用流路１５のうち、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の分取用流路１５に移動する。
変流用流体Ｅは、細胞分取部１１ｅからチャンバー３１に向かって流通し、変流用流路３４内を通過する。変流用流体Ｅの流れは、細胞分取部１１ｅに到達した目的細胞を、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の変流用流体収容部１４側に引き込む。目的細胞は、流圧によって引き込まれて移動方向が流通方向Ｄ１から分取用流路１５に沿う方向に変化する。目的細胞は、一対の分取用流路１５のうち、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の分取用流路１５に移動する。
【0041】
分取用流路１５に移動した目的細胞は、分取用流路１５の下流端で採取され、例えば下流に設置された試験管内に移動する。
以上の工程により、目的細胞は分取される。
本実施形態では、圧電素子３によって、変流用流体収容部１４を減圧したが、加圧してもよい。この場合、変流用流体Ｅは、圧電素子３によって減圧した場合と逆方向に流通し、目的細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３とは反対側の分取用流路１５に移動される。
なお上記説明には記載されていないが、セルソーター１の使用において分取工程に移行する際、分取工程の調整のために機器調製用のサンプルを流通させる場合がある。その場合には、分取工程調整用サンプル（以下、Ｄｅｌａｙ調整用サンプルともいう）を含むサンプル流体Ａを事前に流し、細胞をソートするタイミングを計るための調整を行ってもよい。その後、適宜、洗浄工程を行い、前記の分取工程を実施してもよい。
以上の工程により、目的細胞は分取される。
本実施形態では、圧電素子３によって、変流用流体収容部１４を減圧したが、加圧してもよい。この場合、変流用流体Ｅは、圧電素子３によって減圧した場合と逆方向に流通し、目的細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３とは反対側の分取用流路１５に移動される。
なお上記説明には記載されていないが、セルソーター１の使用において分取工程に移行する際、分取工程の調整のために機器調製用のサンプルを流通させる場合がある。その場合には、分取工程調整用サンプル（以下、Ｄｅｌａｙ調整用サンプルともいう）を含むサンプル流体Ａを事前に流し、細胞をソートするタイミングを計るための調整を行ってもよい。その後、適宜、洗浄工程を行い、前記の分取工程を実施してもよい。
【0042】
（作用、効果）
上述の第１実施形態によれば、以下の作用および効果が得られる。
サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａ、第２サンプル用開口部２１ｂを有している。これにより、機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３をそれぞれ第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂから供給できる。したがって、フローセル１０は、サンプル流体供給部２０における混流を防止しつつ、フローセル１０に機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３を流通できる。
サンプル流体供給部２０は、洗浄液Ｇを供給する洗浄液供給用開口部２４と、サンプル流体供給部２０から洗浄液Ｇを排出する洗浄液排出用開口部２５と、を有している。これにより、サンプル流体供給部２０において、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５まで、機器調整用サンプル流体Ａ１（および学習用サンプル流体Ａ２）がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に、洗浄液Ｇを流通させることができる。したがって、サンプル流体供給部２０を洗浄できるので、フローセル１０は、サンプル流体Ａ同士（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３）の混流を防止できる。ここでのサンプル流体Ａ同士の混流には、サンプル流体Ａが、それより以前に流通させたサンプル流体Ａに包含されていたサンプルにより汚染されることが含まれる。例えば、分取用サンプル流体Ａ３が残留していた機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルにより汚染されることが含まれる。この場合、複数のサンプルが混合して流通する。
したがって、フローセル１０は、複数のサンプル流体Ａ（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３）に含まれる複数のサンプル（即ち、機器調整用サンプル、学習用サンプルおよび分取用サンプル）を連続してセルソーター１に流通する際に、複数のサンプルの混流を防止できる。
上述の第１実施形態によれば、以下の作用および効果が得られる。
サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａ、第２サンプル用開口部２１ｂを有している。これにより、機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３をそれぞれ第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂから供給できる。したがって、フローセル１０は、サンプル流体供給部２０における混流を防止しつつ、フローセル１０に機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３を流通できる。
サンプル流体供給部２０は、洗浄液Ｇを供給する洗浄液供給用開口部２４と、サンプル流体供給部２０から洗浄液Ｇを排出する洗浄液排出用開口部２５と、を有している。これにより、サンプル流体供給部２０において、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５まで、機器調整用サンプル流体Ａ１（および学習用サンプル流体Ａ２）がサンプル流体供給部２０を流通した方向とは逆の方向に、洗浄液Ｇを流通させることができる。したがって、サンプル流体供給部２０を洗浄できるので、フローセル１０は、サンプル流体Ａ同士（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３）の混流を防止できる。ここでのサンプル流体Ａ同士の混流には、サンプル流体Ａが、それより以前に流通させたサンプル流体Ａに包含されていたサンプルにより汚染されることが含まれる。例えば、分取用サンプル流体Ａ３が残留していた機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルにより汚染されることが含まれる。この場合、複数のサンプルが混合して流通する。
したがって、フローセル１０は、複数のサンプル流体Ａ（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３）に含まれる複数のサンプル（即ち、機器調整用サンプル、学習用サンプルおよび分取用サンプル）を連続してセルソーター１に流通する際に、複数のサンプルの混流を防止できる。
【0043】
第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂは、学習用サンプル流体Ａ２および分取用サンプル流体Ａ３を供給する順に並んで配置されている。これにより、学習用サンプル流体Ａ２が供給された第１サンプル用開口部２１ａと、学習用サンプル流体Ａ２が供給されていない第２サンプル用開口部２１ｂと、を容易に区別できる。このため、分取用サンプル流体Ａ３を、第１サンプル用開口部２１ａとは別の第２サンプル用開口部２１ｂからサンプル流体供給部２０に確実に供給できる。したがって、学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。よって、フローセル１０は、学習用サンプルおよび分取用サンプルを連続してセルソーター１に流通する際に学習用サンプルと分取用サンプルとの混流を防止できる。
【0044】
図１では、第１サンプル用開口部２１ａは、第２サンプル用開口部２１ｂよりもサンプル流路１１の上流端１１ａの反対側に配置されている。即ち、第２サンプル用開口部２１ｂは、第１サンプル用開口部２１ａよりも洗浄液Ｇの上流側に配置されている。これにより、分取用サンプル流体Ａ３が供給されない第１サンプル用開口部２１ａと、分取用サンプル流体Ａ３が供給される第２サンプル用開口部２１ｂと、を容易に区別できる。このため学習用サンプル流体Ａ２等が供給された第１サンプル用開口部２１ａを確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３とそれ以外の機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２との混流を防止できる。よって、フローセル１０は、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
【0045】
第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄流路２６に設けられている。これにより、洗浄流路２６に洗浄液Ｇを流通させることで、洗浄液Ｇが第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂを通過するので、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂをまとめて洗浄できる。したがって、サンプル流体供給部２０を効率良く洗浄できるので、フローセル１０は、機器調整用サンプル流体Ａ１と学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を効率良く防止できる。よって、フローセル１０は、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に複数のサンプルの混流を防止できる。
【0046】
第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にサンプル流体Ａ（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２）が供給される第１サンプル用開口部２１ａは、洗浄液排出用開口部２５となる。これにより、フローセル１０は、第１サンプル用開口部２１ａに接続される第１チューブ２３ａの内部に洗浄液Ｇを流通できるので、第１チューブ２３ａ内に残留した機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２を除去できる。加えて、除去されたサンプル流体Ａ（即ち、機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２）は第１チューブ２３ａを通じてサンプル流体供給部２０の外部に排出される。除去されたサンプル流体Ａは、第１サンプル用開口部２１ａ（即ち、洗浄液排出用開口部２５）からサンプル流体供給部２０の外部に排出される際に、フローセル１０のサンプル流体供給部２０およびサンプル流体供給部２０から下流の流路を通過しない。したがって、サンプル流体供給部２０を確実に洗浄できるので、分取用サンプル流体Ａ３とそれ以外の機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２との混流を防止できる。よって、フローセル１０は、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第１サンプル用開口部２１ａを確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第１サンプル用開口部２１ａで機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、フローセル１０は、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第１サンプル用開口部２１ａの他に別途、洗浄液排出用開口部２５を設ける必要がない。このため、サンプル流体供給部２０を小型化できる。したがって、フローセル１０を小型化できる。
この構成によれば、第１サンプル用開口部２１ａを確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第１サンプル用開口部２１ａで機器調整用サンプル流体Ａ１および学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、フローセル１０は、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第１サンプル用開口部２１ａの他に別途、洗浄液排出用開口部２５を設ける必要がない。このため、サンプル流体供給部２０を小型化できる。したがって、フローセル１０を小型化できる。
【0047】
第１サンプル用開口部２１ａよりも後にサンプル流体Ａが供給される第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄液供給用開口部２４となる。これにより、第２サンプル用開口部２１ｂから洗浄液Ｇを供給できるので、サンプル流体供給部２０に機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２によって汚染されていない洗浄液Ｇを流通できる。したがって、汚染されていない洗浄液Ｇで第２サンプル用開口部２１ｂを含むサンプル流体供給部２０を洗浄できるので、分取用サンプル流体Ａ３とそれ以外の機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２との混流を防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に、フローセル１０は、分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第２サンプル用開口部２１ｂを確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第２サンプル用開口部２１ｂで機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に、フローセル１０は、分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第２サンプル用開口部２１ｂの他に別途、洗浄液供給用開口部２４を設ける必要がない。このため、サンプル流体供給部２０を小型化できる。したがって、フローセル１０を小型化できる。
この構成によれば、第２サンプル用開口部２１ｂを確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第２サンプル用開口部２１ｂで機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に、フローセル１０は、分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
この構成によれば、第２サンプル用開口部２１ｂの他に別途、洗浄液供給用開口部２４を設ける必要がない。このため、サンプル流体供給部２０を小型化できる。したがって、フローセル１０を小型化できる。
【0048】
連通路２２は、サンプル流路１１よりも太い。これにより、連通路２２の流体に対する流路抵抗を低減できるので、連通路２２を高速かつ大量の液体により洗浄できる。したがって、サンプル流体供給部２０をより確実に洗浄できるので、学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。よって、フローセル１０は、学習用サンプルおよび分取用サンプルを連続してセルソーター１に流通する際に学習用サンプルと分取用サンプルとの混流を防止できる。
【0049】
フローセル１０の洗浄方法は、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ洗浄液Ｇを流通させる洗浄工程を備えている。これにより、サンプル流体供給部２０を洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３と、機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２との混流を防止できる。即ち、分取用サンプルを流通させる前に、機器調整用サンプルと学習用サンプルとをセルソーター１に流通させる場合でも、フローセル１０は、分取用サンプルと、機器調整用サンプルあるいは学習用サンプルとの混流を防止できる。
【0050】
（第２実施形態）
以下、本発明の第２実施形態について図面を参照して説明する。
図３は、第２実施形態に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第１実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの２個の開口部（サンプル用開口部）２１を備えている。これに対して第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、４個の開口部７を備えている点で、第１実施形態と異なる。第２実施形態において、上述した第１実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
以下、本発明の第２実施形態について図面を参照して説明する。
図３は、第２実施形態に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第１実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの２個の開口部（サンプル用開口部）２１を備えている。これに対して第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、４個の開口部７を備えている点で、第１実施形態と異なる。第２実施形態において、上述した第１実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
【0051】
図３に示すように、サンプル流体供給部２０は、４個の開口部７を備えている。４個の開口部７のうち１個の開口部７は、第１サンプル用開口部２１ａである。４個の開口部７のうち１個の開口部７は、第２サンプル用開口部２１ｂである。４個の開口部７のうち１個の開口部７は、洗浄液供給用開口部２４である。４個の開口部７のうち１個の開口部７は、洗浄液排出用開口部２５である。
４個の開口部７は、サンプル流路１１の上流端１１ａ側に近い側から順に、洗浄液供給用開口部２４、第２サンプル用開口部２１ｂ、第１サンプル用開口部２１ａ、洗浄液排出用開口部２５の順で配置されている。図３に示す通り、第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にサンプル流体Ａが供給される第１サンプル用開口部２１ａは、洗浄液排出用開口部２５よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、上流側に配置されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄液供給用開口部２４よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、下流側に配置されている。
４個の開口部７は、サンプル流路１１の上流端１１ａ側に近い側から順に、洗浄液供給用開口部２４、第２サンプル用開口部２１ｂ、第１サンプル用開口部２１ａ、洗浄液排出用開口部２５の順で配置されている。図３に示す通り、第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にサンプル流体Ａが供給される第１サンプル用開口部２１ａは、洗浄液排出用開口部２５よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、上流側に配置されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄液供給用開口部２４よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、下流側に配置されている。
【0052】
（セルソーターの使用方法およびフローセルの洗浄方法）
以下、本実施形態に係るセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法のうち洗浄工程について説明する。
（洗浄工程）
機器調整工程または学習工程終了後、洗浄液供給用開口部２４からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、洗浄液排出用開口部２５から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ流通する。洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０は、必要量の溶液で確実に洗浄される。
以下、本実施形態に係るセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法のうち洗浄工程について説明する。
（洗浄工程）
機器調整工程または学習工程終了後、洗浄液供給用開口部２４からサンプル流体供給部２０に洗浄液Ｇを供給する。洗浄液Ｇは、サンプル流体供給部２０に向かって加圧される。サンプル流体供給部２０に供給された洗浄液Ｇは、洗浄液排出用開口部２５から吸引される。これにより、洗浄液Ｇは、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５へ流通する。洗浄液Ｇは、例えばサンプル流体供給部２０を０．１ｍＬ／ｍｉｎから１０ｍＬ／ｍｉｎの流速で流通する。これにより、サンプル流体供給部２０は、必要量の溶液で確実に洗浄される。
【0053】
（作用、効果）
上述の第２実施形態によれば、以下の作用および効果が得られる。
第１サンプル用開口部２１ａよりも後にサンプル流体Ａが供給される第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄液供給用開口部２４よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、下流側に配置されている。これにより、洗浄液Ｇは第２サンプル用開口部２１ｂを通過するので、第２サンプル用開口部２１ｂを洗浄液Ｇにより確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第２サンプル用開口部２１ｂに残留する機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルおよび学習用サンプルとの混流を防止できる。
上述の第２実施形態によれば、以下の作用および効果が得られる。
第１サンプル用開口部２１ａよりも後にサンプル流体Ａが供給される第２サンプル用開口部２１ｂは、洗浄液供給用開口部２４よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、下流側に配置されている。これにより、洗浄液Ｇは第２サンプル用開口部２１ｂを通過するので、第２サンプル用開口部２１ｂを洗浄液Ｇにより確実に洗浄できる。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第２サンプル用開口部２１ｂに残留する機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルおよび学習用サンプルとの混流を防止できる。
【0054】
さらに、第２サンプル用開口部２１ｂよりも先にサンプル流体Ａが供給される第１サンプル用開口部２１ａは、洗浄液排出用開口部２５よりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、上流側に配置されている。これにより、洗浄液Ｇは第１サンプル用開口部２１ａを通過するので、第１サンプル用開口部２１ａを洗浄液Ｇにより確実に洗浄できる。第２サンプル用開口部２１ｂは第１サンプル用開口部２１ａよりも、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流通する洗浄液Ｇの流れにおいて、上流側に配置されている。これにより、第１サンプル用開口部２１ａを洗浄した洗浄液Ｇは、第２サンプル用開口部２１ｂを通過せずに洗浄液排出用開口部２５より排泄される。したがって、分取用サンプル流体Ａ３が第１サンプル用開口部２１ａに残留する機器調整用サンプル流体Ａ１あるいは学習用サンプル流体Ａ２と混流するのを防止できる。よって、複数のサンプルを連続してセルソーター１に流通する際に分取用サンプルとそれ以外の機器調整用サンプルおよび学習用サンプルとの混流を防止できる。
【0055】
（セルソーターの使用方法およびフローセルの洗浄方法の変形例）
以下、第２実施形態におけるセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の変形例について説明する。
図４は、第２実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
上述の第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの他に別途、洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とを有していた。これに対して、図４に示すように、４個の開口部７を全てサンプル用開口部２１としてもよい。本第２実施形態の変形例において、上述した第１実施形態または第２実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
４個のサンプル用開口部２１に、サンプル流路１１の上流端１１ａから離間している順に１番目、２番目、３番目、４番目と番号をふる。１番目のサンプル用開口部２１は、上流端１１ａから最も離間している。４番目のサンプル用開口部２１は、上流端１１ａに最も接近している。１番目から３番目のサンプル用開口部２１は、それぞれ異なる学習用サンプル流体Ａ２（それぞれ第１の学習用サンプル流体Ａ２ａ、第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂ、第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃとする）が供給される第１サンプル用開口部２１ａである（それぞれ２１ａ１、２１ａ２、２１ａ３とする）。具体的に、１番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ１）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第１の学習用サンプル流体Ａ２ａが供給される。２番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ２）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給される。３番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ３）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給される。４番目のサンプル用開口部２１は、分取用サンプル流体Ａ３が供給される第２サンプル用開口部２１ｂである。１番目から３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１、２１ａ２、２１ａ３）は、洗浄液排出用開口部２５となる。４番目のサンプル用開口部２１（第２サンプル用開口部２１ｂ）は、洗浄液供給用開口部２４となる。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程と、第１洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第１学習工程と、第２洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第２学習工程と、第３洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第３学習工程と、第４洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、分取工程とを備えている。
（機器調整工程）
機器調整工程では、１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）から機器調整用サンプル流体Ａ１を供給して流通させる。機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。機器調整用サンプル流体Ａ１には、機器調整用サンプルが含まれている。機器調整用サンプル流体Ａ１に含まれる粒子は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。次いで、整列流路１１ｄを流通する個々の粒子に関する情報が細胞情報取得装置２により取得され、セルソーター１の動作状態を確認することができる。
機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
（第１洗浄工程）
第１洗浄工程では、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給された１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
以下、第２実施形態におけるセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の変形例について説明する。
図４は、第２実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
上述の第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの他に別途、洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とを有していた。これに対して、図４に示すように、４個の開口部７を全てサンプル用開口部２１としてもよい。本第２実施形態の変形例において、上述した第１実施形態または第２実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
４個のサンプル用開口部２１に、サンプル流路１１の上流端１１ａから離間している順に１番目、２番目、３番目、４番目と番号をふる。１番目のサンプル用開口部２１は、上流端１１ａから最も離間している。４番目のサンプル用開口部２１は、上流端１１ａに最も接近している。１番目から３番目のサンプル用開口部２１は、それぞれ異なる学習用サンプル流体Ａ２（それぞれ第１の学習用サンプル流体Ａ２ａ、第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂ、第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃとする）が供給される第１サンプル用開口部２１ａである（それぞれ２１ａ１、２１ａ２、２１ａ３とする）。具体的に、１番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ１）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第１の学習用サンプル流体Ａ２ａが供給される。２番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ２）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給される。３番目の第１サンプル用開口部２１ａ（２１ａ３）には、学習用サンプル流体Ａ２のうち第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給される。４番目のサンプル用開口部２１は、分取用サンプル流体Ａ３が供給される第２サンプル用開口部２１ｂである。１番目から３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１、２１ａ２、２１ａ３）は、洗浄液排出用開口部２５となる。４番目のサンプル用開口部２１（第２サンプル用開口部２１ｂ）は、洗浄液供給用開口部２４となる。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程と、第１洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第１学習工程と、第２洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第２学習工程と、第３洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、第３学習工程と、第４洗浄工程（請求項の洗浄工程に相当）と、分取工程とを備えている。
（機器調整工程）
機器調整工程では、１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）から機器調整用サンプル流体Ａ１を供給して流通させる。機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。機器調整用サンプル流体Ａ１には、機器調整用サンプルが含まれている。機器調整用サンプル流体Ａ１に含まれる粒子は、サンプル流路１１の整列流路１１ｄで１列に整列して流通する。次いで、整列流路１１ｄを流通する個々の粒子に関する情報が細胞情報取得装置２により取得され、セルソーター１の動作状態を確認することができる。
機器調整用サンプル流体Ａ１の流通時、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。
（第１洗浄工程）
第１洗浄工程では、機器調整用サンプル流体Ａ１が供給された１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
【0056】
（第１学習工程）
第１学習工程では、１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）から第１の学習用サンプル流体Ａ２ａを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ａの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ａが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ａには、第１の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第１の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第２洗浄工程）
第２洗浄工程では、第１の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ａが供給された第１サンプル用開口部２１ａ１を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
第１学習工程では、１番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ１）から第１の学習用サンプル流体Ａ２ａを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ａの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ａが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ａには、第１の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第１の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第２洗浄工程）
第２洗浄工程では、第１の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ａが供給された第１サンプル用開口部２１ａ１を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
【0057】
（第２学習工程）
第２学習工程では、２番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ２）から第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ｂの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ｂには、第２の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第２の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第３洗浄工程）
第３洗浄工程では、第２の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給された２番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ２）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
第２学習工程では、２番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ２）から第２の学習用サンプル流体Ａ２ｂを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ｂの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ｂには、第２の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第２の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第３洗浄工程）
第３洗浄工程では、第２の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ｂが供給された２番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ２）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
【0058】
（第３学習工程）
第３学習工程では、３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ３）から第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ｃの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ｃには、第３の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第３の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第４洗浄工程）
第４洗浄工程では、第３の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給された３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ３）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
第３学習工程では、３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ３）から第３の学習用サンプル流体Ａ２ｃを供給して流通させる。学習用サンプル流体Ａ２ｃの流通時、学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給されていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。第２サンプル用開口部２１ｂは、閉口されている。学習用サンプル流体Ａ２ｃには、第３の学習用細胞が含まれている。細胞情報取得装置２は、第３の学習用細胞を測定し情報を学習する。
（第４洗浄工程）
第４洗浄工程では、第３の学習用細胞が含まれている学習用サンプル流体Ａ２ｃが供給された３番目のサンプル用開口部２１（第１サンプル用開口部２１ａ３）を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。洗浄液Ｇの流通時、洗浄液排出用開口部２５とされていない他の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
【0059】
（分取工程）
分取工程では、４番目のサンプル用開口部２１（第２サンプル用開口部２１ｂ）から分取用サンプル流体Ａ３を供給して流通させる。分取用サンプル流体Ａ３には、第１の学習用細胞と第２の学習用細胞と第３の学習用細胞とが含まれている。分取用サンプル流体Ａ３の流通時、３個の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
細胞情報取得装置２は、第１学習工程、第２学習工程および第３学習工程で学習し作成した予測モデルに基づいて、サンプル流路１１の整列流路１１ｄを通過した細胞を、第１の学習用細胞か第２の学習用細胞か第３の学習用細胞か判別する。
細胞情報取得装置２は、例えば第１の学習用細胞が目的細胞である場合、細胞を第１の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加する。圧電素子３は、変流用流体収容部１４を加圧する。これにより、細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３とは反対側の分取用流路１５に移動する。
細胞情報取得装置２は、例えば第２の学習用細胞が目的細胞でない場合、細胞を第２の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加しない。このため、細胞の流通方向は変化しないので、細胞は排出流路１１ｆを流通する。
細胞情報取得装置２は、例えば第３の学習用細胞がもう１つの目的細胞である場合、細胞を第３の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加する。圧電素子３は、変流用流体収容部１４を減圧する。これにより、細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の分取用流路１５に移動する。
以上の工程により、第１の学習用細胞と第２の学習用細胞と第３の学習用細胞とが分離され、目的とする細胞が分取される。
分取工程では、４番目のサンプル用開口部２１（第２サンプル用開口部２１ｂ）から分取用サンプル流体Ａ３を供給して流通させる。分取用サンプル流体Ａ３には、第１の学習用細胞と第２の学習用細胞と第３の学習用細胞とが含まれている。分取用サンプル流体Ａ３の流通時、３個の第１サンプル用開口部２１ａは、閉口されている。
細胞情報取得装置２は、第１学習工程、第２学習工程および第３学習工程で学習し作成した予測モデルに基づいて、サンプル流路１１の整列流路１１ｄを通過した細胞を、第１の学習用細胞か第２の学習用細胞か第３の学習用細胞か判別する。
細胞情報取得装置２は、例えば第１の学習用細胞が目的細胞である場合、細胞を第１の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加する。圧電素子３は、変流用流体収容部１４を加圧する。これにより、細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３とは反対側の分取用流路１５に移動する。
細胞情報取得装置２は、例えば第２の学習用細胞が目的細胞でない場合、細胞を第２の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加しない。このため、細胞の流通方向は変化しないので、細胞は排出流路１１ｆを流通する。
細胞情報取得装置２は、例えば第３の学習用細胞がもう１つの目的細胞である場合、細胞を第３の学習用細胞と判別すると、圧電素子３に電圧を印加する。圧電素子３は、変流用流体収容部１４を減圧する。これにより、細胞は、サンプル流路１１を挟んで圧電素子３側の分取用流路１５に移動する。
以上の工程により、第１の学習用細胞と第２の学習用細胞と第３の学習用細胞とが分離され、目的とする細胞が分取される。
【0060】
（作用、効果）
上述のセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の変形例によれば、以下の作用および効果が得られる。
４個の開口部７のうち３個の開口部７は、第１サンプル用開口部２１ａである。これにより、３個の第１サンプル用開口部２１ａからそれぞれ別の学習用サンプル流体Ａ２を供給できる。このため、複数の学習用サンプル流体Ａ２を流通できる。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程と第１洗浄工程と第１学習工程と第２洗浄工程と第２学習工程と第３洗浄工程と第３学習工程と第４洗浄工程と分取工程とを備えている。これにより、機器調整工程と第１学習工程との間、第１学習工程と第２学習工程との間、第２学習工程と第３学習工程との間および第３学習工程と分取工程との間で、それぞれサンプル流体供給部２０を洗浄できる。このため、複数の学習用サンプル流体Ａ２同士の混流および機器調整用サンプル流体Ａ１と複数の学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。
したがって、本変形例によれば、複数の学習用サンプル流体Ａ２を流通できるとともに、複数の学習用サンプル流体Ａ２同士の混流および機器調整用サンプル流体Ａ１と複数の学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。よって、機器調整用サンプルと複数の学習用サンプルと分取用サンプルとを連続してセルソーター１に流通する際に、本変形例のフローセル１０によれば、複数の学習用サンプル同士および機器調整用サンプルと複数の学習用サンプルと分取用サンプルとの混流を防止できる。
第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、４個の開口部７を有しているとしたが、開口部７の個数は、適宜選択可能である。
上述のセルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法の変形例によれば、以下の作用および効果が得られる。
４個の開口部７のうち３個の開口部７は、第１サンプル用開口部２１ａである。これにより、３個の第１サンプル用開口部２１ａからそれぞれ別の学習用サンプル流体Ａ２を供給できる。このため、複数の学習用サンプル流体Ａ２を流通できる。
セルソーター１の使用方法およびフローセル１０の洗浄方法は、機器調整工程と第１洗浄工程と第１学習工程と第２洗浄工程と第２学習工程と第３洗浄工程と第３学習工程と第４洗浄工程と分取工程とを備えている。これにより、機器調整工程と第１学習工程との間、第１学習工程と第２学習工程との間、第２学習工程と第３学習工程との間および第３学習工程と分取工程との間で、それぞれサンプル流体供給部２０を洗浄できる。このため、複数の学習用サンプル流体Ａ２同士の混流および機器調整用サンプル流体Ａ１と複数の学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。
したがって、本変形例によれば、複数の学習用サンプル流体Ａ２を流通できるとともに、複数の学習用サンプル流体Ａ２同士の混流および機器調整用サンプル流体Ａ１と複数の学習用サンプル流体Ａ２と分取用サンプル流体Ａ３との混流を防止できる。よって、機器調整用サンプルと複数の学習用サンプルと分取用サンプルとを連続してセルソーター１に流通する際に、本変形例のフローセル１０によれば、複数の学習用サンプル同士および機器調整用サンプルと複数の学習用サンプルと分取用サンプルとの混流を防止できる。
第２実施形態では、サンプル流体供給部２０は、４個の開口部７を有しているとしたが、開口部７の個数は、適宜選択可能である。
【0061】
（第３実施形態）
以下、本発明の第３実施形態について図面を参照して説明する。
図５は、第３実施形態に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第１実施形態および第２実施形態では、洗浄流路２６はその一方の端においてサンプル流路１１に連通している。例えば図１あるいは図２に記載される第１実施形態では、洗浄流路２６は洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａにおいてサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。しかしながら、図５の例では、洗浄流路２６は洗浄液Ｇの流通方向における中間部でサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している点で上述の第１実施形態の例とは異なる。第３実施形態の説明において、上述した第１実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
図５に示すように、洗浄流路２６には、洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａの位置に洗浄液供給用開口部２４が配置され、その反対側の端に洗浄液排出用開口部２５が配置されている。洗浄流路２６は、サンプル流体供給部２０を兼ねている。洗浄流路２６には、洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａの位置に第２サンプル用開口部２１ｂが配置され、その反対側の端に第１サンプル用開口部２１ａが配置されている。また、前記サンプル流体供給部２０は、連通路２２の中間部でサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。図５では、第２サンプル用開口部２１ｂが図の右側に配置され、第１サンプル用開口部２１ａが図の左側に配置されている。しかしながら、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５を兼ねる）と第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４を兼ねる）の位置が逆になってもよい。
以下、本発明の第３実施形態について図面を参照して説明する。
図５は、第３実施形態に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第１実施形態および第２実施形態では、洗浄流路２６はその一方の端においてサンプル流路１１に連通している。例えば図１あるいは図２に記載される第１実施形態では、洗浄流路２６は洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａにおいてサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。しかしながら、図５の例では、洗浄流路２６は洗浄液Ｇの流通方向における中間部でサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している点で上述の第１実施形態の例とは異なる。第３実施形態の説明において、上述した第１実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
図５に示すように、洗浄流路２６には、洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａの位置に洗浄液供給用開口部２４が配置され、その反対側の端に洗浄液排出用開口部２５が配置されている。洗浄流路２６は、サンプル流体供給部２０を兼ねている。洗浄流路２６には、洗浄液Ｇの流通方向における上流端２６ａの位置に第２サンプル用開口部２１ｂが配置され、その反対側の端に第１サンプル用開口部２１ａが配置されている。また、前記サンプル流体供給部２０は、連通路２２の中間部でサンプル流路１１の上流端１１ａに連通している。図５では、第２サンプル用開口部２１ｂが図の右側に配置され、第１サンプル用開口部２１ａが図の左側に配置されている。しかしながら、第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５を兼ねる）と第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４を兼ねる）の位置が逆になってもよい。
【0062】
（第３実施形態の変形例）
以下、第３実施形態の変形例について図面を参照して説明する。
図６は、第３実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第３実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの２つのサンプル用開口部２１を備えていた。これに対して図６に示す第３実施形態の変形例では、サンプル流体供給部２０は、全てをサンプル用開口部２１とする３個の開口部７を備えている例が記載されている。以降の変形例の説明では、上述した第３実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
図６に示すように、サンプル流体供給部２０は、３個の開口部７を備えている。連通路２２は、サンプル流路１１の上流端１１ａから流通方向Ｄ１の上流側に向かって、３本延びている。３本の連通路２２は、対応する３個の開口部７と連通している。
以下、第３実施形態の変形例について図面を参照して説明する。
図６は、第３実施形態の変形例に係るサンプル流体供給部２０の拡大平面図である。
第３実施形態では、サンプル流体供給部２０は、第１サンプル用開口部２１ａおよび第２サンプル用開口部２１ｂの２つのサンプル用開口部２１を備えていた。これに対して図６に示す第３実施形態の変形例では、サンプル流体供給部２０は、全てをサンプル用開口部２１とする３個の開口部７を備えている例が記載されている。以降の変形例の説明では、上述した第３実施形態と同様の構成については、同一の符号を付して説明を省略または簡略化する。
図６に示すように、サンプル流体供給部２０は、３個の開口部７を備えている。連通路２２は、サンプル流路１１の上流端１１ａから流通方向Ｄ１の上流側に向かって、３本延びている。３本の連通路２２は、対応する３個の開口部７と連通している。
【0063】
（セルソーターの使用方法およびフローセルの洗浄方法）
上述の通り図６の説明では、３個の開口部７が全てサンプル用開口部２１として使用される例が記載されている。
この場合、まず、３個のサンプル用開口部２１について、サンプル流体Ａを供給する順番を任意に決定する。３個のサンプル用開口部２１のうち、３番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１を洗浄液供給用開口部２４とする。
次いで、３個のサンプル用開口部２１のうち、１番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１からサンプル流体Ａを供給する。
次いで、１番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。これにより、サンプル流体供給部２０のうち、サンプル流体Ａに汚染された部分が洗浄される。
３個のサンプル用開口部２１のうち、２番目、３番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１についても、同様の手順で順にサンプル流体Ａを供給し、洗浄液Ｇを流通させて洗浄する。
本変形例では、サンプル流体供給部２０は、一例として３個の開口部７を有しているとした。しかしながら、サンプル流体供給部２０に設置される開口部７の個数は、適宜選択可能である。
上述の通り図６の説明では、３個の開口部７が全てサンプル用開口部２１として使用される例が記載されている。
この場合、まず、３個のサンプル用開口部２１について、サンプル流体Ａを供給する順番を任意に決定する。３個のサンプル用開口部２１のうち、３番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１を洗浄液供給用開口部２４とする。
次いで、３個のサンプル用開口部２１のうち、１番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１からサンプル流体Ａを供給する。
次いで、１番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１を洗浄液排出用開口部２５として、洗浄液Ｇを流通させる。これにより、サンプル流体供給部２０のうち、サンプル流体Ａに汚染された部分が洗浄される。
３個のサンプル用開口部２１のうち、２番目、３番目にサンプル流体Ａを供給するサンプル用開口部２１についても、同様の手順で順にサンプル流体Ａを供給し、洗浄液Ｇを流通させて洗浄する。
本変形例では、サンプル流体供給部２０は、一例として３個の開口部７を有しているとした。しかしながら、サンプル流体供給部２０に設置される開口部７の個数は、適宜選択可能である。
【0064】
以上、本発明の好ましい実施形態を説明したが、本発明はこれら実施形態に限定されることはない。本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、構成の付加、省略、置換、およびその他の変更が可能である。本発明は前述した説明によって限定されることはなく、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される。
【0065】
その他、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、上述した実施形態における構成要素を周知の構成要素に置き換えることは適宜可能であり、また、上述した各変形例を適宜組み合わせても構わない。
【実施例】
【0066】
以下、本発明を適用した実施例について、図を参照しながら説明する。
図７は、後述するフローセル１１０における、サンプル流体供給部２０（第１サンプル用開口部２１ａ及び第２サンプル用開口部２１ｂ）の拡大概略図である。図７は、図２に示すＶＩＩで囲まれた部分を示す。図８は、後述するフローセル１２０における開口部１２１の拡大概略図である。図８に示すフローセル１２０は、図２に示すＶＩＩで囲まれた部分を変更したフローセルである。図７および図８に示す箇所以外は、図２に示すフローセル１０（セルソーター１）と同様の構成を有するため、説明を省略する。
図７は、後述するフローセル１１０における、サンプル流体供給部２０（第１サンプル用開口部２１ａ及び第２サンプル用開口部２１ｂ）の拡大概略図である。図７は、図２に示すＶＩＩで囲まれた部分を示す。図８は、後述するフローセル１２０における開口部１２１の拡大概略図である。図８に示すフローセル１２０は、図２に示すＶＩＩで囲まれた部分を変更したフローセルである。図７および図８に示す箇所以外は、図２に示すフローセル１０（セルソーター１）と同様の構成を有するため、説明を省略する。
【0067】
本発明を適用したフローセルを評価するために、洗浄試験を行った。
実施例１には、洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とが設けられた洗浄機構を有するフローセル１１０を用いた。フローセル１１０は、図７に示す通り、洗浄液供給用開口部２４が、洗浄液排出用開口部２５より、サンプル流体Ａの流れに対して下流側に配置されている構成を有していた。洗浄液供給用開口部２４と、洗浄液排出用開口部２５とは、サンプル流体供給部２０により連通していた。また、フローセル１１０は、図７に示す通り、サンプル流路１１の一端部は、サンプル流体供給部２０と連通していた。
実施例１には、洗浄液供給用開口部２４と洗浄液排出用開口部２５とが設けられた洗浄機構を有するフローセル１１０を用いた。フローセル１１０は、図７に示す通り、洗浄液供給用開口部２４が、洗浄液排出用開口部２５より、サンプル流体Ａの流れに対して下流側に配置されている構成を有していた。洗浄液供給用開口部２４と、洗浄液排出用開口部２５とは、サンプル流体供給部２０により連通していた。また、フローセル１１０は、図７に示す通り、サンプル流路１１の一端部は、サンプル流体供給部２０と連通していた。
【0068】
フローセル１１０は、図１、図２に記載のフローセル１０の例と同じく、サンプルを流し入れる第２サンプル用開口部２１ｂが、洗浄液供給用開口部２４を兼ねていた。第２サンプル用開口部２１ｂ（洗浄液供給用開口部２４）は、テストポートとして機能していた。テストポートとは、分取用サンプルを送液するためのポートであるが、本洗浄試験では、テストポートから細胞を含まないシース液を流して本発明のフローセルの洗浄効果を評価した。
また、フローセル１１０では、キャリブレーション用の蛍光ビーズと細胞（Ｄｅｌａｙ調整用サンプル及び学習用サンプル）を流し入れる第１サンプル用開口部２１ａが、洗浄液排出用開口部２５を兼ねていた。第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）は、キャリブレーションポートとして機能していた。キャリブレーションポートとは、Ｄｅｌａｙ調整用サンプル及び学習用サンプルを送液するためのポートである。
また、フローセル１１０では、キャリブレーション用の蛍光ビーズと細胞（Ｄｅｌａｙ調整用サンプル及び学習用サンプル）を流し入れる第１サンプル用開口部２１ａが、洗浄液排出用開口部２５を兼ねていた。第１サンプル用開口部２１ａ（洗浄液排出用開口部２５）は、キャリブレーションポートとして機能していた。キャリブレーションポートとは、Ｄｅｌａｙ調整用サンプル及び学習用サンプルを送液するためのポートである。
【0069】
比較例１には、洗浄機構を有しておらず、開口部１２１がキャリブレーションポート（第１サンプル用開口部２１ａ）とテストポート（第２サンプル用開口部２１ｂ）とを兼ねるフローセル１２０を用いた。そのため、図８において、第１サンプル用開口部２１ａ及び第２サンプル用開口部２１ｂは、同一の開口部１２１を示している。
【0070】
＜実施例１＞
フローセル１１０に対して、以下のサンプル流通工程Ｓ１１および洗浄工程Ｓ１２を行い、実施例１を得た。
フローセル１１０に対して、以下のサンプル流通工程Ｓ１１および洗浄工程Ｓ１２を行い、実施例１を得た。
【0071】
（サンプル流通工程（機器調整工程）：Ｓ１１）
フローセル１１０に流通させるサンプル流体として、蛍光ビーズ（Ｂａｙ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製、ＳＰＨＥＲＯ ＦＰ－１００５２－２ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｙｅｌｌｏｗ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ， １０．０－１４．０μｍ）とＲＨ３０細胞（ヒト横紋筋肉腫細胞株）を使用した。
フローセル１１０に流通させるサンプル流体として、蛍光ビーズ（Ｂａｙ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製、ＳＰＨＥＲＯ ＦＰ－１００５２－２ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｙｅｌｌｏｗ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ， １０．０－１４．０μｍ）とＲＨ３０細胞（ヒト横紋筋肉腫細胞株）を使用した。
【0072】
具体的に、フローセル１１０に対して、洗浄液排出用開口部２５から、図７における矢印Ａ方向に、キャリブレーション用の蛍光ビーズを２０万個程度流通させた。続けて、フローセル１１０に対して、洗浄液排出用開口部２５から、図７における矢印Ａ方向に、Ｄｅｌａｙ調整用サンプルおよび学習用サンプルとして、ＲＨ３０細胞を合計５０万個程度流通させた。
【0073】
（洗浄工程：Ｓ１２）
上述のサンプル流通工程の後、洗浄用のシース液（洗浄液Ｇ）２０ｍＬを、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流し（図７における矢印Ｇ方向）、サンプル流体供給部２０を洗浄した。
上述のサンプル流通工程の後、洗浄用のシース液（洗浄液Ｇ）２０ｍＬを、洗浄液供給用開口部２４から洗浄液排出用開口部２５に流し（図７における矢印Ｇ方向）、サンプル流体供給部２０を洗浄した。
【0074】
＜比較例１＞
フローセル１２０に対して、以下のサンプル流通工程Ｓ２１を行い、比較例１を得た。
フローセル１２０に対して、以下のサンプル流通工程Ｓ２１を行い、比較例１を得た。
【0075】
（サンプル流通工程（機器調整工程）：Ｓ２１）
サンプル流通工程Ｓ２１では、フローセル１２０に対して、フローセル１１０で使用したサンプル流体と同様のサンプル流体を用いた。
具体的に、フローセル１２０に対して、開口部１２１から、図８における矢印Ａ方向に、キャリブレーション用の蛍光ビーズを２０万個程度流通させた。続けて、フローセル１２０のサンプル流路１１に対して、開口部１２１から、図８における矢印Ａ方向に、Ｄｅｌａｙ調整用サンプルおよび学習用サンプルとして、ＲＨ３０細胞を合計５０万個程度流通させた。
サンプル流通工程Ｓ２１では、フローセル１２０に対して、フローセル１１０で使用したサンプル流体と同様のサンプル流体を用いた。
具体的に、フローセル１２０に対して、開口部１２１から、図８における矢印Ａ方向に、キャリブレーション用の蛍光ビーズを２０万個程度流通させた。続けて、フローセル１２０のサンプル流路１１に対して、開口部１２１から、図８における矢印Ａ方向に、Ｄｅｌａｙ調整用サンプルおよび学習用サンプルとして、ＲＨ３０細胞を合計５０万個程度流通させた。
【0076】
＜洗浄試験の評価＞
本洗浄試験では、フローセル１１０及びフローセル１２０をＪＳＡＮセルソーター（ベイバイオサイエンス株式会社製）に組み込み、残留ビーズと残留細胞の総数の検出を行った。
より具体的に、フローセル１１０に対しては、洗浄工程Ｓ１２の後に、サンプル流路１１に対して、洗浄液供給用開口部２４から細胞を含まないシース液を１ｍＬ流し、図１における整列流路１１ｄに流れてくる残留ビーズと残留細胞の総数をＪＳＡＮセルソーターで検出した。これにより、フローセル１１０内の洗浄試験の評価をした。
フローセル１２０に対しては、サンプル流通工程Ｓ２１の後に、サンプル流路１１に対して、第２サンプル用開口部２１ｂから細胞を含まないシース液を１ｍＬ流し、図１における整列流路１１ｄに流れてくる残留ビーズと残留細胞の総数をＪＳＡＮセルソーターで検出した。これにより、フローセル１２０内の洗浄試験の評価をした。
その結果、実施例１から検出された残留ビーズと残留細胞の総数は、０個であった。
一方、比較例１から検出された残留ビーズと残留細胞の総数は、２９４９３個であった。
本洗浄試験では、フローセル１１０及びフローセル１２０をＪＳＡＮセルソーター（ベイバイオサイエンス株式会社製）に組み込み、残留ビーズと残留細胞の総数の検出を行った。
より具体的に、フローセル１１０に対しては、洗浄工程Ｓ１２の後に、サンプル流路１１に対して、洗浄液供給用開口部２４から細胞を含まないシース液を１ｍＬ流し、図１における整列流路１１ｄに流れてくる残留ビーズと残留細胞の総数をＪＳＡＮセルソーターで検出した。これにより、フローセル１１０内の洗浄試験の評価をした。
フローセル１２０に対しては、サンプル流通工程Ｓ２１の後に、サンプル流路１１に対して、第２サンプル用開口部２１ｂから細胞を含まないシース液を１ｍＬ流し、図１における整列流路１１ｄに流れてくる残留ビーズと残留細胞の総数をＪＳＡＮセルソーターで検出した。これにより、フローセル１２０内の洗浄試験の評価をした。
その結果、実施例１から検出された残留ビーズと残留細胞の総数は、０個であった。
一方、比較例１から検出された残留ビーズと残留細胞の総数は、２９４９３個であった。
【0077】
上述の通り、本発明を適用したフローセル１１０およびフローセル１１０の洗浄方法によれば、サンプル流体供給部２０に残留するサンプル流体（残留ビーズおよび残留細胞）が検出されず、複数のサンプルの混流を防止できることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【0078】
本発明によれば、複数のサンプルを連続してフローサイトメータに流通する際に、複数のサンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルを提供できる。本発明によれば、複数サンプルの混流を防止できるフローサイトメータ用フローセルの洗浄方法を提供できる。
【符号の説明】
【0079】
１０…フローセル（フローサイトメータ用フローセル）、１１…サンプル流路、１１ａ…上流端、２０…サンプル流体供給部、２１…サンプル用開口部、２２…連通路、２３ａ…第１チューブ（チューブ）、２３ｂ…第２チューブ（チューブ）、２４…洗浄液供給用開口部、２５…洗浄液排出用開口部、２６…洗浄流路、Ａ…サンプル流体、Ｅ…変流用流体、Ｇ…洗浄液
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】