特許 7542589 高濃度のタンパク質ベース治療薬を含有する医薬組成物における安定化化合物としてのアミノ酸の使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-08-22

(45)【発行日】2024-08-30

(54)【発明の名称】高濃度のタンパク質ベース治療薬を含有する医薬組成物における安定化化合物としてのアミノ酸の使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 9/08 20060101AFI20240823BHJP

   A61K 9/19 20060101ALI20240823BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20240823BHJP

   A61K 38/22 20060101ALI20240823BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240823BHJP

   A61K 47/18 20170101ALI20240823BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20240823BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20240823BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240823BHJP

【ＦＩ】

A61K9/08

A61K9/19

A61K38/17

A61K38/22

A61K39/395 M

A61K39/395 A

A61K47/18

A61K47/36

A61K47/26

A61P43/00 111

【請求項の数】 18

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2022187483

(22)【出願日】2022-11-24

(62)【分割の表示】P 2018553413の分割

【原出願日】2017-04-11

(65)【公開番号】P2023018090

(43)【公開日】2023-02-07

【審査請求日】2022-11-24

(31)【優先権主張番号】62/321,895

(32)【優先日】2016-04-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】504333972

【氏名又は名称】メディミューン，エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100138911

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻井 陽子

(74)【代理人】

【識別番号】100165892

【弁理士】

【氏名又は名称】坂田 啓司

(72)【発明者】

【氏名】サジャル・マヌバイ・パテル

(72)【発明者】

【氏名】スレシュクマール・バナラム・チョウダリー

【審査官】新熊 忠信

(56)【参考文献】

【文献】特表２００９－５２５９８６（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２００７／０７４８８０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特開平０９－０２５２４１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１３－５１０８９３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１５－５３６９３４（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１６／０３４６４８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１０－５１３５２２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１５－５２７４０２（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許出願公開第２０１４／０１８６３７３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】特表２０１４－５１４３４６（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１２－５０２００４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ９／００－ ９／７２

Ａ６１Ｋ ４７／００－４７／６９

Ａ６１Ｋ ３８／００－３８／５８

Ａ６１Ｋ ３９／００－３９／４４

Ａ６１Ｋ ４５／００－４５／０８

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

タンパク質生体分子を活性薬剤又は活性成分として含有する医薬組成物であって、
（Ａ）（１）水性担体；
（２）タンパク質生体分子；
（３）緩衝液；および
（４）約１％（ｗ／ｖ）～約６％（ｗ／ｖ）の総濃度で、
アルギニン若しくはその塩およびアラニン若しくはその塩を含む安定化化合物、又は
アルギニン若しくはその塩およびアラニン若しくはその塩を含み、さらにグリシン、リシン又はプロリン、若しくはそれらの塩、又はそれらの混合物を含む安定化化合物；
或いは
（Ｂ）（Ａ）の凍結乾燥物
を含み、
前記組成物が、デキストラン、ショ糖、又はトレハロース二水和物を欠き、
前記組成物が、ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）をさらに含み、
前記緩衝液が、ヒスチジンを含み、及び
前記アラニン又はその塩（ｗ／ｖ％）の前記アルギニン又はその塩（ｗ／ｖ％）に対する比が、２：１である、医薬組成物。

【請求項2】

前記組成物が、約１０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬのタンパク質生体分子を含有する、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記組成物が、５０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ又は２００ｍｇ／ｍＬのタンパク質生体分子を含有する、請求項２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記タンパク質生体分子が、抗体又は抗体ベース免疫療法薬、酵素、又はホルモン／因子である、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記タンパク質生体分子が、ホルモン／因子であり、前記ホルモン／因子が、表２のホルモン／因子から選択される、請求項４に記載の医薬組成物：

【表2】

。

【請求項6】

前記組成物が、少なくとも２種のタンパク質生体分子を含有する、請求項１～５のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

前記アラニンが、約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、又は約４．０％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項8】

前記アルギニンが、約１．２５％（ｗ／ｖ）、約１．７５％（ｗ／ｖ）、又は約２．０％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、請求項１～７のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記安定化化合物が、グリシン又はその塩をさらに含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記グリシンが、約２．５％（ｗ／ｖ）～約５．５％（ｗ／ｖ）の濃度、好ましくは約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、約４．０％（ｗ／ｖ）又は約５．５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、請求項９に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記医薬組成物のｐＨが、約３～約１１、約４～約９、約５～約８、約５～約７．５、好ましくは６．０又は７．４である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記緩衝液が、約５ｍＭ～約５０ｍＭ、約２０ｍＭ～約３０ｍＭ、又は約２３ｍＭ～約２７ｍＭの範囲内で存在し、好ましくは前記緩衝液が、２５ｍＭで存在する、請求項１～１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記緩衝液が、ヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）が、０．００５～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度、好ましくは０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、請求項１～１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記医薬組成物が前記凍結乾燥物である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記組成物が、ｐＨ６．０で、１００ｍｇ／ｍＬのタンパク質生体分子、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、４％アラニン、２％アルギニン、０．０２％ ＰＳ－８０を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項17】

請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬組成物を収容しているアンプル、バイアル、カートリッジ、注射器又は小袋。

【請求項18】

医薬における使用のための、請求項１～１６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、高濃度の１種以上のタンパク質生体分子を含有する改善された医薬組成物に関する。特に、本発明は、安定化化合物として１種以上のアミノ酸分子、特にアルギニン、アラニン、グリシン、リシン又はプロリン、又はそれらの誘導体及び塩、又はそれらの混合物を含有するそのような医薬組成物に関する。そのような安定化化合物の含有により、タンパク質生体分子の長期安定性を改善及び／又は維持する一方で再構成時間が短縮されて、医薬組成物による疾病又は病状の処置、管理、回復及び／又は予防が促進される。本発明は、特に、糖安定化剤を欠いた、又は実質的に欠いたそのような医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

タンパク質ベース治療薬（例えば、ホルモン、酵素、サイトカイン、ワクチン、免疫療法薬等）は、ヒト疾病の管理及び処置に益々重要となっている。２０１４年に関しては、６０種を超えるそのような治療薬が販売を認可されており、約１４０種の追加の薬物が臨床試験下にあり、５００種を超える治療ペプチドが前臨床開発の様々な段階にある（Ｆｏｓｇｅｒａｕ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｓｔａｔｕｓ Ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，”Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ ２０（１）：１２２－１２８；Ｋａｓｐａｒ，Ａ．Ａ．ｅｔ ａｌ．（２０１３）“Ｆｕｔｕｒｅ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ Ｆｏｒ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，”Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ １８：８０７－８１７）。

【0003】

それらの治療薬の使用に対する１つの障害は、それらの貯蔵において度々遭遇する物理的不安定性である（米国特許第８，６１７，５７６号明細書；ＰＣＴ国際公開第２０１４／１００１４３号パンフレット及び同第２０１５／０６１５８４号パンフレット；Ｂａｌｃａｏ，Ｖ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｔｉｔｉｅｓ：Ｓｔａｔｅ－Ｏｆ－Ｔｈｅ－Ａｒｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．（Ｅｐｕｂ．）：ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ａｄｄｒ．２０１４．１０．００５；ｐｐ．１－１７；Ｍａｄｄｕｘ，Ｎ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｍｕｌｔｉｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ａｎｄ Ｖａｃｃｉｎｅｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００：４１７１－４１９７；Ｗａｎｇ，Ｗ．（１９９９）“Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ，Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１８５：１２９－１８８；Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｖａｃｃｉｎｅ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ：Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｉｚａｔｉｏｎ，Ａｎｄ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｉｍｐａｃｔ，”Ｖａｃｃｉｎｅ ２９：７１２２－７１２４；Ｋｕｍｒｕ，Ｏ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｉｎ Ｔｈｅ Ｃｏｌｄ Ｃｈａｉｎ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，Ａｎａｌｙｓｉｓ Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，”Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ４２：２３７－２５９）。そのような不安定性は、複数の態様を含む場合がある。タンパク質ベース治療薬は、例えば操作上の不安定性、例えば加工操作（例えば滅菌、凍結乾燥、凍結貯蔵等）を乗り切る能力の欠如等を経験する場合がある。加えて又は代替的に、タンパク質は、所望の２次構造又は３次構造が貯蔵により損失又は変更されるように、熱力学的不安定性を経験する場合がある。更なる及び特に複雑な問題は、サブユニットが解離して製品の不活性化をもたらす、多量体タンパク質サブユニットを含む治療薬の安定化に存在する。動力学的不安定性は、インビトロの非天然条件下での構造の不可逆的変化に抵抗する、タンパク質の能力の目安である。タンパク質の凝集及び封入体の形成は、不安定性の最も一般的な現れであると考えられ、製品開発の複数の段階において潜在的に遭遇する（Ｗａｎｇ、Ｗ．（２００５）“Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｉｔｓ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｉｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．２８９：１－３０；Ｗａｎｇ，Ｗ．（１９９９）“Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ，Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｌｉｑｕｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１８５：１２９－１８８；Ａｒａｋａｗａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）“Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ｓｈｏｒｔ－Ｔｅｒｍ Ａｎｄ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｓｔａｂｉｌｉｔｉｅｓ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．１０：１－２８；Ａｒａｋａｗａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．（２００１）“Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ｓｈｏｒｔ－Ｔｅｒｍ Ａｎｄ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｓｔａｂｉｌｉｔｉｅｓ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．４６：３０７－３２６）。そのような不安定性の問題は、治療の有効性だけでなく、レシピエント患者に対するその免疫原性にも影響を及ぼし得る。それ故、タンパク質の不安定性は、タンパク質ベース治療薬の使用の妨げとなる主な欠点の１つである（Ｂａｌｃａｏ，Ｖ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｔｉｔｉｅｓ：Ｓｔａｔｅ－Ｏｆ－Ｔｈｅ－Ａｒｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．（Ｅｐｕｂ．）：ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ａｄｄｒ．２０１４．１０．００５；ｐｐ．１－１７）。

【0004】

タンパク質ベース治療薬の安定化は、そのような薬剤の構造及び機能性を保存することを必要とし、そのような薬剤とそれらの薬剤の（微小）環境との間の熱力学的平衡を確立することにより達成されている（Ｂａｌｃａｏ，Ｖ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ａｎｄ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｔｉｔｉｅｓ：Ｓｔａｔｅ－Ｏｆ－Ｔｈｅ－Ａｒｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．（Ｅｐｕｂ．）：ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ａｄｄｒ．２０１４．１０．００５；ｐｐ．１－１７）。タンパク質ベース治療薬を安定化する１つの手法は、追加の共有（例えば、ジスルフィド）結合を含むようにタンパク質を改変して、所望の構造に関連したエンタルピーを増大させることを含む。代替的に、タンパク質は追加の極性基を含むように修飾されて、溶媒和水分子とのその水素結合を増大させてもよい（Ｍｏｚｈａｅｖ，Ｖ．Ｖ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ Ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ Ｇｕｉｄｅ Ｔｏ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ Ｔｏ Ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．４：３８７－４１９；Ｉｙｅｒ，Ｐ．Ｖ．ｅｔ ａｌ．（２００８）“Ｅｎｚｙｍｅ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ａｎｄ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ－Ａｑｕｅｏｕｓ Ａｎｄ Ｎｏｎ－Ａｑｕｅｏｕｓ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，”Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．４３：１０１９－１０３２）。

【0005】

タンパク質ベース治療薬を安定化する第２の手法は、例えば水を凍結させ、又は特定の溶質を添加し、又は医薬組成物を凍結乾燥することにより、タンパク質の微小環境中に存在する水の化学的活性を低減することを含む（例えば、Ｃａｓｔｒｏｎｕｏｖｏ，Ｇ．（１９９１）“Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ｉｎ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ．Ｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ Ｓｔｕｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｔｈｅｒｍｏｄｙｎａｍｉｃ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，”Ｔｈｅｒｍｏｃｈｉｍ．Ａｃｔａ １９３：３６３－３９０参照）。

【0006】

使用される溶質は、低分子量イオン（例えば塩、緩衝剤）から中間サイズの溶質（例えばアミノ酸、糖）、さらにより高い分子量の化合物（例えばポリマー、タンパク質）に及ぶ（Ｋａｍｅｒｚｅｌｌ，Ｔ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ Ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．６３：１１１８－１１５９）。

【0007】

例えば、そのような溶質には、ブデソニド、デキストランＤＭＳＯグリセロール、ブドウ糖、インスリン、乳糖、麦芽糖、マンニトール、ＰＥＧ、ピロキシカム、ＰＬＧＡ、ＰＶＡソルビトール、ショ糖、トレハロース及び尿素が含まれる（Ｏｈｔａｋｅ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ：Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｕｓｅ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００（６）：２０２０－２０５３；Ｗｉｌｌａｒｔ，Ｊ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．（２００８）“Ｓｏｌｉｄ Ｓｔａｔｅ Ａｍｏｒｐｈｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，”Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．５（６）：９０５－９２０；Ｋｕｍｒｕ，Ｏ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｉｎ Ｔｈｅ Ｃｏｌｄ Ｃｈａｉｎ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，Ａｎａｌｙｓｉｓ Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，”Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ４２：２３７－２５９；Ｓｏｍｅｒｏ，Ｇ．Ｎ．（１９９５）“Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ａｎｄ Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，”Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５７：４３－６８；Ｓａｓａｈａｒａ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．（２００３）“Ｅｆｆｅｃｔ Ｏｆ Ｄｅｘｔｒａｎ Ｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ａｎｄ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ａｔｔｒｉｂｕｔｅｄ Ｔｏ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｒｏｗｄｉｎｇ，”Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３２６：１２２７－１２３７；Ｊａｉｎ，Ｎ．Ｋ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｂａｓｅｄ Ｖｉｒｕｓ－Ｌｉｋｅ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｖａｃｃｉｎｅｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．（Ｅｐｕｂ．）ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ａｄｄｒ．２０１４．１０．０２３；ｐｐ．１－１４；Ｋｉｓｓｍａｎｎ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｈ１Ｎ１ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｖｉｒｕｓ－Ｌｉｋｅ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ Ｐａｔｈｗａｙｓ Ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００：６３４－６４５；Ｋａｍｅｒｚｅｌｌ，Ｔ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ Ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．６３：１１１８－１１５９）。

【0008】

ショ糖及びトレハロース二水和物等の糖は、一般に、例えば２～８℃での貯蔵のために、凍結乾燥される治療的タンパク質製剤中で凍結乾燥保護剤（ｌｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）及び凍結保護剤として使用されて、製剤の安定性を改善する（米国特許第８，６１７，５７６号明細書及び同第８，７５４，１９５号明細書）。特にトレハロースは、安定化剤として広く使用されており；多様な研究用途に使用され、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）及びＡＤＶＡＴＥ（登録商標）を含む数種の市販の治療薬中に含まれている（Ｏｈｔａｋｅ、Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）「Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ：Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｕｓｅ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，」Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００（６）：２０２０－２０５３）。

【0009】

アミノ酸ヒスチジン、アルギニン、グルタメート、グリシン、プロリン、リシン及びメチオニンは、タンパク質を安定化する天然化合物として言及されている。ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）及びゼラチンは、タンパク質安定剤として言及されている（米国特許第８，６１７，５７６号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０１１８２４９号明細書；Ｋａｍｅｒｚｅｌｌ，Ｔ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ Ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．６３：１１１８－１１５９；Ｋｕｍｒｕ，Ｏ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１４）“Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｉｎ Ｔｈｅ Ｃｏｌｄ Ｃｈａｉｎ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，Ａｎａｌｙｓｉｓ Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，”Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ４２：２３７－２５９；Ａｒａｋａｗａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．（２００７）“Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ Ｂｙ Ａｒｇｉｎｉｎｅ：Ａ Ｐｒｏｐｏｓｅｄ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ Ｏｆ Ｔｈｅ Ａｒｇｉｎｉｎｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ，”Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．１２７：１－８；Ａｒａｋａｗａ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．（２００７）“Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｏｆ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ Ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，”Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ ３３：５８７－６０５；Ｃｈｅｎ，Ｂ．（２００３）“Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ Ｏｆ Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ Ｏｎ Ｔｈｅ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｏｆ Ａ Ｆｕｌｌｙ Ｈｕｍａｎ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ａｑｕｅｏｕｓ Ａｎｄ Ｓｏｌｉｄ Ｆｏｒｍｓ，”Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２０：１９５２－１９６０；Ｔｉａｎ，Ｆ．ｅｔ ａｌ．（２００７）“Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｉｎ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．３３５：２０－３１；Ｗａｄｅ，Ａ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９８）“Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ Ｏｆ Ｌ－Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ，”Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９：３０８－３１５；Ｙａｔｅｓ，Ｚ．ｅｔ ａｌ．（２０１０）“Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ Ｒｅｓｉｄｕｅ Ｍｅｄｉａｔｅｓ Ｒａｄｉｃａｌ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｈｉｎｇｅ Ｃｌｅａｖａｇｅ Ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｉｇｇ１，”Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８５：１８６６２－１８６７１；Ｌａｎｇｅ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（２００９）“Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ Ｂｙ Ｌ－Ａｒｇｉｎｉｎｅ，”Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１０：４０８－４１４；Ｎａｋａｋｉｄｏ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２００９）“Ｔｏ Ｂｅ Ｅｘｃｌｕｄｅｄ Ｏｒ Ｔｏ Ｂｉｎｄ，Ｔｈａｔ Ｉｓ Ｔｈｅ Ｑｕｅｓｔｉｏｎ：Ａｒｇｉｎｉｎｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ Ｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１０：４１５－４２０；Ｓｈｕｋｌａ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（２０１０）“Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ Ｏｆ Ａｒｇｉｎｉｎｅ Ｗｉｔｈ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ａｎｄ Ｔｈｅ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ Ｂｙ Ｗｈｉｃｈ Ｉｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｓ Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，”Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｂ １１４：１３４２６－１３４３８；Ｐｙｎｅ，Ａ．ｅｔ ａｌ．（２００１）“Ｐｈａｓｅ Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｓ Ｏｆ Ｇｌｙｃｉｎｅ Ｉｎ Ｆｒｏｚｅｎ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ａｎｄ Ｄｕｒｉｎｇ Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ，”Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１８：１４４８－１４５４；Ｌａｍ，Ｘ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９７）“Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ Ｆｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ Ｏｆ Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ Ｉｎ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＨＥＲ２，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８６：１２５０－１２５５；Ｍａｅｄｅｒ，Ｗ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｌｏｃａｌ Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ Ａｎｄ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ Ｕｐ Ｔｏ ２４ Ｍｏｎｔｈｓ Ｏｆ Ａ Ｎｅｗ ２０％ Ｐｒｏｌｉｎｅ－Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｆｏｒ Ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，”Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ３９：４３－４９；Ｋａｄｏｙａ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１０）“Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ Ｗｉｔｈ Ｇｌａｓｓ－Ｆｏｒｍｉｎｇ Ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｓｕｇａｒ Ａｌｃｏｈｏｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．３８９：１０７－１１３；Ｇｏｌｏｖａｎｏｖ，Ａ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．（２００４）“Ａ Ｓｉｍｐｌｅ Ｍｅｔｈｏｄ Ｆｏｒ Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ Ａｎｄ Ｌｏｎｇ－Ｔｅｒｍ Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２６：８９３３－８９３９）。

【0010】

一般に、１：１又は１：２（ｗ／ｗ）のタンパク質対安定剤化合物の比が、比較的低いタンパク質濃度（＜５０ｍｇ／ｍＬ）において最適な安定性を達成するのに用いられている。しかしながら、比較的高いタンパク質濃度（≧５０ｍｇ／ｍＬ）の場合、１：１又は１：２（ｗ／ｗ）範囲のタンパク質対安定剤化合物の比は、あまり望ましくない。例えば、そのような高い糖濃度は高い粘度をもたらす場合があり、このことは充填完了操作及び薬物送達中に困難を課し、凍結乾燥製剤の再構成時間の増大を必要とし得る。更に、再構成された製剤は、特に、比較的高いタンパク質濃度を達成するために部分的再構成が望ましい場合、所望の浸透圧の範囲から高く外れる高い浸透圧を示す場合がある。最後に、１：１又は１：２（ｗ／ｗ）の範囲のタンパク質対安定剤化合物の比を有する高濃度タンパク質製剤は、遥かに低い温度で、受け入れ難く長い凍結乾燥加工時間を必要とする熱特性を示す場合がある。

【0011】

そのようなタンパク質ベース治療薬を再構成する必要性は、それらの使用に第２の障害を課す。再構成時間に影響を与える因子は、未だによく理解されていない（Ｂｅｅｃｈ，Ｋ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．（２０１５）“Ｉｎｓｉｇｈｔｓ Ｉｎｔｏ Ｔｈｅ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｃｏｏｌｉｎｇ Ｐｒｏｆｉｌｅ Ｏｎ Ｔｈｅ Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ Ｔｉｍｅｓ Ｏｆ Ａｍｏｒｐｈｏｕｓ Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．９６：２４７－２５４）。従来の組成物を完全に再構成するのに必要な時間は、かなりのものであり得（例えば、２０～４０分間以上）、完全に再構成されていない製品は、レシピエント患者に有害であり得る。加えて、再構成の手順は製品によって異なる場合があり、このことは投与過程に更なる複雑さを加え得る。例えば、完全に再構成するために、製品は、希釈剤を添加した後、既定の間隔でかき混ぜる必要があり得、又はそのままで放置される必要があり得る（Ｂｅｅｃｈ，Ｋ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．（２０１５）“Ｉｎｓｉｇｈｔｓ Ｉｎｔｏ Ｔｈｅ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｃｏｏｌｉｎｇ Ｐｒｏｆｉｌｅ Ｏｎ Ｔｈｅ Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ Ｔｉｍｅｓ Ｏｆ Ａｍｏｒｐｈｏｕｓ Ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．９６：２４７－２５４）。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0012】

従って、そのような多くの進歩にも関わらず、医薬組成物が凍結乾燥／凍結保存形態の両方で、再構成後に、改善された粘度及び再構成時間、並びに向上された安定性を示すように、特に糖安定化剤を含有しないタンパク質ベース医薬組成物の安定化に好適な製剤が依然として必要とされている。本発明は、この目標及び他の目標に向けられている。

【課題を解決するための手段】

【0013】

本発明は、高濃度の１種以上のタンパク質生体分子を含有する改善された医薬組成物に関する。特に、本発明は、安定化化合物として１種以上のアミノ酸分子、特にアルギニン、アラニン、グリシン、リシン又はプロリン、又はそれらの誘導体及び塩、又はそれらの混合物を含有する、そのような医薬組成物に関する。そのような安定化化合物の含有により、タンパク質生体分子の長期安定性を改善及び／又は維持する一方で再構成時間が短縮されて、医薬組成物による疾病又は病状の処置、管理、回復及び／又は予防が促進される。本発明は、特に、糖安定化剤を欠いた、又は実質的に欠いたそのような医薬組成物に関する。

【0014】

詳細には、本発明は、活性薬剤又は活性成分としてのタンパク質生体分子を含有する医薬組成物に関し、組成物は：
（Ａ）（１）水性担体；
（２）タンパク質生体分子；
（３）緩衝液；
（４）アルギニン、アラニン、グリシン、リシン又はプロリン、又はそれらの誘導体若しくは塩、又はそれらの混合物からなる群から選択される安定化化合物（約１％（ｗ／ｖ）～約６％（ｗ／ｖ）の総濃度で）；
又は
（Ｂ）（Ａ）の凍結乾燥物
を含む。

【0015】

本発明は更に、組成物が実質的に糖安定化化合物を欠いている、上記の医薬組成物の実施形態に関する。

【0016】

本発明は更に、組成物が約１０ｍｇ／ｍＬ～約２００ｍｇ／ｍＬのタンパク質生体分子を含有し、組成物が５０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ又は２００ｍｇ／ｍＬのタンパク質生体分子を含有する、上記のいずれかの医薬組成物の実施形態に関する。

【0017】

本発明は更に、タンパク質生体分子が抗体若しくは抗体ベース免疫療法薬、酵素、又はホルモン／因子である、上記の全部の医薬組成物の実施形態に関する。

【0018】

本発明は更に、タンパク質生体分子が抗体又は抗体ベース免疫療法薬であり、抗体が表１の抗体から選択される、上記の医薬組成物の実施形態に関する。

【0019】

本発明は更に、タンパク質生体分子がホルモン／因子であり、ホルモン／因子が表２のホルモン／因子から選択される、上記の医薬組成物の実施形態に関する。

【0020】

本発明は更に、組成物が少なくとも２種のタンパク質生体分子を含有する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0021】

本発明は更に、安定化化合物がアルギニン又はその誘導体若しくは塩であり、アルギニンが約２．０％（ｗ／ｖ）～約５．０％（ｗ／ｖ）の濃度、好ましくは２．０％（ｗ／ｖ）の濃度、３．５％（ｗ／ｖ）の濃度又は５．５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0022】

本発明は更に、安定化化合物がアラニン又はその誘導体若しくは塩であり、アラニンが約２．５％（ｗ／ｖ）～約５．５％（ｗ／ｖ）の濃度、好ましくは約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、約４．０％（ｗ／ｖ）、又は約５．５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。本発明は更に、更にアルギニンが約１．２５％（ｗ／ｖ）、約１．７５％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）又は約２．７５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、そのような医薬組成物の実施形態に関する。

【0023】

本発明は更に、安定化化合物がグリシン又はその誘導体若しくは塩であり、グリシンが、約２．５％（ｗ／ｖ）～約５．５％（ｗ／ｖ）、好ましくは約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、約４．０％（ｗ／ｖ）又は約５．５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。本発明は更に、更にアルギニンが約１．２５％（ｗ／ｖ）、約１．７５％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）又は約２．７５％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、そのような医薬組成物の実施形態に関する。

【0024】

本発明は更に、組成物が少なくとも２種の安定化化合物を含有する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0025】

本発明は更に、医薬組成物のｐＨが、約３～約１１、約４～約９、約５～約８、約５～約７．５、好ましくは６．０又は７．４である、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0026】

本発明は更に、緩衝液が約５ｍＭ～約５０ｍＭ、約２０ｍＭ～約３０ｍＭ、又は約２３ｍＭ～約２７ｍＭの範囲内で存在し、好ましくは緩衝液が２５ｍＭで存在する、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0027】

本発明は更に、緩衝液がヒスチジン、ホスフェート、アセテート、シトレート、スクシネート、トリス、又はそれらの組み合わせを含み、緩衝液がヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌである、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0028】

本発明は更に、医薬組成物が更に非イオン性洗浄剤を含有し、特に非イオン性洗浄剤がポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）である、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。本発明は更に、そのようなポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）が０．００５～０．１％（ｗ／ｖ）の濃度、好ましくは０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度で存在する、そのような医薬組成物の実施形態に関する。

【0029】

本発明は更に、医薬組成物が凍結乾燥物である、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0030】

本発明は更に、安定化化合物の存在が、医薬組成物の凍結乾燥物の再構成時間を２０分未満、１５分未満、１０分未満、８分未満、５分未満、又は２分未満とする、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0031】

本発明は更に、安定化化合物の存在が、医薬組成物の安定特性を、アミノ酸安定化化合物の完全な非存在下で観察されるような安定特性に対して、４００％を超えて、２００％を超えて、１００％を超えて、５０％を超えて、又は１０％を超えて向上させる、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0032】

本発明は更に、安定化化合物の存在が、医薬組成物の安定特性を、糖安定化化合物の完全な非存在下で観察されるような安定特性に対して、５０％を超えて、２０％を超えて、１０％を超えて、５％を超えて、又は１％を超えて向上させる、上記の任意の医薬組成物の実施形態に関する。

【0033】

本発明は更に、上記の任意の医薬組成物を収容するアンプル、バイアル、カートリッジ、注射器又は小袋に関する。

【0034】

本発明は更に、上記の任意の医薬組成物を投与することによる、疾病又は疾患の処置方法に関する。

【0035】

本発明は更に、医薬における使用のための、上記の医薬組成物に関する。

【0036】

本発明は更に、再構成時間を短縮するための、医薬製剤中の１種以上の糖の代替物としての、アルギニン、アラニン、グリシン、リシン又はプロリン等の１種以上のアミノ酸の使用に関する。

【図面の簡単な説明】

【0037】

【図1】様々なアミノ酸－糖の組み合わせを有する、高濃度（１００ｍｇ／ｍＬ）の例示的なタンパク質生体分子（ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体）を含有する医薬組成物の凍結乾燥製剤の観察された再構成時間及び凝集の程度（高性能サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）により評価）を示す。凍結乾燥後のパーセント凝集体増加（左軸）は、棒グラフとして示され、再構成時間（右軸）は、ひし形として示される。

【図2】高濃度（５０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ又は１００ｍｇ／ｍＬ）のヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体を含有する医薬組成物の示される凍結乾燥製剤の再構成時間に対するタンパク質濃度及びアミノ酸賦形剤の効果を示す。ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、例示的なタンパク質生体分子として使用された。

【図3】示されるような様々な添加賦形剤を有する７５ｍｇ／ｍＬ又は１００ｍｇ／ｍＬのヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体を含有する医薬組成物の製剤に関してＨＰＳＥＣで決定した、４０℃、６０％相対湿度（図３Ａ）及び２５℃、７５％相対湿度（図３Ｂ）での経時的なパーセントモノマー純度を示す。ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は、例示的なタンパク質生体分子として使用された。

【図4】高濃度（７５ｍｇ／ｍＬ又は１００ｍｇ／ｍＬ）のヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体を含有する医薬組成物の、示されるような凍結乾燥製剤の再構成時間を示し、ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体は例示的なタンパク質生体分子として使用された。結果は、１０回の反復実験の平均である。

【図5】様々なアミノ酸賦形剤を有する、７５ｍｇ／ｍＬ又は１００ｍｇ／ｍＬの、３種の異なる例示的なタンパク質のうちの１つを用いて調製された凍結乾燥製剤の再構成時間を示す。図５Ａは、ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体に関する再構成時間を示す。図５Ｂは、Ｔｎ３－ＨＳＡ融合タンパク質に関する再構成時間を示す。図５Ｃは、ヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体に関する再構成時間を示す。

【発明を実施するための形態】

【0038】

本発明は、高濃度の１種以上のタンパク質生体分子を含有する改善された医薬組成物に関する。特に、本発明は、安定化化合物として１種以上のアミノ酸分子、特にアルギニン、アラニン、グリシン、リシン又はプロリン、又はそれらの誘導体及び塩、又はそれらの混合物を含有するそのような医薬組成物に関する。そのような安定化化合物の含有により、タンパク質生体分子の長期安定性が改善及び／又は維持する一方で再構成時間が短縮されて、医薬組成物による疾病又は病状の処置、管理、回復及び／又は予防が促進される。本発明は、特に、糖安定化剤を欠いた、又は実質的に欠いたそのような医薬組成物に関する。

【0039】

Ｉ．本発明の医薬組成物
本明細書で使用するとき、用語「医薬組成物」は、「治療的」医薬（即ち、レシピエント対象の現存する疾病又は病状を処置するために処方される医薬）又は「予防的」医薬（即ち、レシピエント対象の潜在的な又は切迫する疾病又は病状の症状を予防する又は回復させるために処方される医薬）を指すことを意図し、この医薬は、１種以上のタンパク質生体分子をその活性治療薬若しくは活性予防薬又は活性治療成分若しくは活性予防成分として含有する。本発明の医薬組成物は、組成物の活性薬剤又は活性成分としての役割を果たす１種以上のタンパク質生体分子を含有する。治療的使用のために、医薬組成物は、「治療的有効」量のタンパク質生体分子を含有及び提供し、この量は、疾病若しくは病状の進行、重篤さ、及び／若しくは持続時間を低減若しくは改善し、及び／又は、そのような疾病若しくは病状に関連した１つ以上の症状を改善する量である。予防的使用のために、医薬組成物は、「予防的有効」量のタンパク質生体分子を含有及び提供し、この量は、疾病又は病状の発生、再発、発症又は進行の予防をもたらすに十分な量である。レシピエント対象は、動物、好ましくは非霊長類（例えば、雌牛、豚、馬、猫、犬、ラット又はマウス）、又は霊長類（例えば、チンパンジー、猿、カニクイザル、及びヒト等）を含む哺乳動物、より好ましくはヒトである。

【0040】

ＩＩ．本発明の医薬組成物の安定化化合物
本発明の安定化化合物は、「凍結乾燥保護剤」であり（従って、医薬組成物のタンパク質生体分子を、凍結乾燥及び続く貯蔵中の変性から保護する役割を果たす）、及び／又は「凍結保護剤」である（従って、医薬組成物のタンパク質生体分子を、凍結を原因とする変性から保護する役割を果たす）。「安定化」化合物は、組成物の活性薬剤又は活性成分であるタンパク質生体分子の構造及び機能性を、そのような製剤の非存在下で観察されるそのような構造及び機能性の変化に対して保存する役割を果たす場合、本発明の医薬組成物のタンパク質生体分子を「安定化」又は「保護」すると言われる。安定化化合物は、組成物の凍結又はその組成物の通常の融点（Ｔ_ｍ）における融解を防止し又はその程度を低減する役割を果たすものである。

【0041】

タンパク質生体分子に提供される「保護」は、高性能サイズ排除クロマトグラフィー（「ＨＰＳＥＣ」）を使用して評価することができ、高性能サイズ排除クロマトグラフィーは、医薬タンパク質凝集体の検出及び定量化のための業界の標準技術である（米国特許出願公開第２０１５／０００５４７５号明細書；Ｇａｂｒｉｅｌｓｏｎ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．（２００６）“Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ Ｏｆ Ａｇｇｒｅｇａｔｅ Ｌｅｖｅｌｓ Ｉｎ Ａ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ Ｂｙ Ｓｉｚｅ－Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｅｌｄ Ｆｌｏｗ Ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎ，Ａｎｄ Ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｖｅｌｏｃｉｔｙ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９６（２）：２６８－２７９；Ｌｉｕ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．（２００９）“Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｏｆ Ｒｅｄｕｃｅｄ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｓｉｚｅ Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ Ｃｏｕｐｌｅｄ Ｗｉｔｈ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，”Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｓｏｃ．Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．２０：２２５８－２２６４；Ｍａｈｌｅｒ，Ｈ．Ｃ．ｅｔ ａｌ．（２００８）“Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ：Ｐａｔｈｗａｙｓ，Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｎｄ Ａｎａｌｙｓｉｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．９８（９）：２９０９－２９３４）。そのような保護によって、タンパク質生体分子は、「低～検出不可能なレベル」の分裂（即ち、医薬組成物のサンプル中、ＨＰＳＥＣにより決定して、８０％、８５％、９０％ ９５％、９８％、又は９９％を超えるタンパク質生体分子が単一のピーク中に移動するような、及び／又は「低～検出不可能なレベル」の関連する生物学的活性の損失（即ち、医薬組成物のサンプル中、ＨＰＳＥＣにより決定して、存在する８０％、８５％、９０％ ９５％、９８％、又は９９％を超えるタンパク質生体分子がその初期の生物学的活性を示すような、及び／又は低～検出不可能なレベル」の凝集（即ち、医薬組成物のサンプル中、ＨＰＳＥＣにより決定して、５重量％以下、４重量％以下、３重量％以下、２重量％以下、１重量％以下、最も好ましくは０．５重量％以下、タンパク質の凝集のような、を示すことが可能となる。本発明の医薬組成物により提供される「長期間」安定性によって、そのような組成物を３カ月を超えて、６カ月を超えて、９カ月を超えて、１年を超えて、１８カ月を超えて、２年を超えて、又は３０カ月を超えて貯蔵することが可能となる。

【0042】

本発明の好ましい「安定化化合物」は、高濃度の１種以上のタンパク質生体分子を含有する凍結乾燥医薬組成物の、より短い再構成時間を達成する。最も好ましくは、そのような安定化化合物はアミノ酸分子であり、より好ましくは、アミノ酸：アラニン、アルギニン、グリシン、リシン及び／又はプロリン、又はそれらの誘導体及び塩、又はそれらの混合物であり、更により好ましくは、アミノ酸：アラニン、アルギニン及び／又はグリシン、又はそれらの誘導体及び塩、又はそれらの混合物である。そのようなアミノ酸分子は、好ましくはＬ－アミノ酸分子であるが、Ｄ－アミノ酸分子、又はＤ－及びＬ－アミノ酸分子の任意の組み合わせであってもよく、この組み合わせはそれらのラセミ混合物を含む。好ましくは、本発明のそのような安定化化合物の存在は、医薬組成物の凍結乾燥物の再構成時間を２０分未満、１５分未満、１０分未満、８分未満、５分未満、又は２分未満とするのに十分であり、また医薬組成物の安定特性（例えば、凍結乾燥保護又は凍結保護特性、例えば、単一投与量再構成時間、平均有効期間、設定温度（例えば、０度を下回る温度、室温又は高温）にて、指定された時間間隔で残留するパーセント活性等）を、アミノ酸安定化化合物の完全な非存在下で観察されるような安定特性に対して、４００％を超えて、２００％を超えて、１００％を超えて、５０％を超えて、又は１０％を超えて向上させるのに十分である。

【0043】

そのようなアミノ酸分子に関連した「それらの誘導体及び塩」という用語は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，２００５に開示されているもの等の任意の薬学的に許容され得る塩又はアミノ酸誘導体を示す。そのような誘導体は、置換されたアミン、アミノアルコール、アルデヒド、ラクトン、エステル、水和物等を含む。アラニンの例示的な誘導体には：２－アリル－グリシン、２－アミノ酪酸、ｃｉｓ－アミクレノマイシン、アダマンタン（ａｄａｍａｎｔｈａｎｅ）等が挙げられる。アルギニンの例示的な誘導体には：２－アミノ－３－グアニジノプロピオン酸、２－アミノ－４－グアニジノ酪酸、５－メチル－アルギニン、アルギニンメチルエステル、アルギニン－Ｏ－ｔＢｕ、カナバニン、シトルリン、ｃ－γ－ヒドロキシアルギニン、ホモアルギニン、Ｎ－トシル－アルギニン、Ｎ_ω－ニトロ－アルギニン、チオ－シトルリン等が挙げられる。リシンの例示的な誘導体には：ジアミノ酪酸、２，３－ジアミノプロパン酸、（２ｓ）－２，８－ジアミノアクタン（ｄｉａｍｉｎｏａｃｔａｎｏｉｃ）酸、オルニチン、チアリシン等が挙げられる。プロリンの例示的な誘導体には：ｔｒａｎｓ－１－アセチル－４－ヒドロキシプロリン、３，４－デヒドロプロリン、ｃｉｓ－３－ヒドロキシプロリン、ｃｉｓ－４－ヒドロキシプロリン、ｔｒａｎｓ－３－ヒドロキシプロリン、ｔｒａｎｓ－４－ヒドロキシプロリン、α－メチルプロリン、ピペコリン酸等が挙げられる。

【0044】

そのようなアミノ酸分子及びそれらの誘導体の塩には、適切な酸、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、酢酸又はｐ－トルエンスルホン酸から誘導されたもの等の、そのような分子の付加塩が挙げられる。塩酸塩が特に好ましい。

【0045】

そのような安定化化合物は、本発明の医薬組成物中で個々に又は組み合わせで使用することができる（例えば、任意の２種の安定化化合物、任意の３種の安定化化合物、任意の４種の安定化化合物、任意の５種の安定化化合物、又は５種を超えるそのような安定化化合物の任意の組み合わせ。

【0046】

上述したように、デキストラン、ショ糖、トレハロース二水和物等の糖は、凍結乾燥した治療的タンパク質製剤中の安定化化合物として典型的に使用される。本発明の非常に好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物は、糖安定化化合物を実質的に欠き（即ち、実質的に含まない）、本発明の更に非常に好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物は、糖安定化化合物を完全に欠いている（即ち、完全に含まない）。本明細書で使用するとき、本発明の医薬組成物は、そのような化合物の存在が、医薬組成物の安定特性（例えば、凍結乾燥保護性又は凍結保護性）を、そのような糖安定化化合物の完全な非存在下で観察されるような安定特性に対して、５０％を超えて、２０％を超えて、１０％を超えて、５％を超えて、又は１％を超えて向上させない場合、「糖安定化化合物を実質的に欠いている」と言われる。本明細書で使用するとき、本発明の医薬組成物は、そのような化合物の存在が検出可能ではない場合、「糖安定化化合物を完全に欠いている」と言われる。本発明の医薬組成物は、任意の糖安定化化合物を完全に欠いていることが好ましい。

【0047】

ショ糖及びトレハロース二水和物等の糖は、凍結乾燥治療的タンパク質製剤中の賦形剤として典型的に使用されて、例えば２～８℃での貯蔵のために、製剤の安定性を改善する（米国特許第８，６１７，５７６号明細書及び同第８，７５４，１９５号明細書）。特にトレハロースは安定化剤として広く使用されており；多様な研究用途に使用され、またＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、ＬＵＣＥＮＴＩＳ（登録商標）、及びＡＤＶＡＴＥ（登録商標）を含む数種の市販の治療薬に含まれている（Ｏｈｔａｋｅ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．（２０１１）“Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ：Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｕｓｅ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１００（６）：２０２０－２０５３）。

【0048】

ＩＩＩ．本発明の医薬組成物のタンパク質生体分子
本発明の安定化化合物は、活性薬剤又は活性成分として高濃度の１種以上のタンパク質生体分子を含有する医薬組成物中での使用に特に好適である。本明細書で使用するとき、用語「高濃度」は、１０ｍｇ／ｍＬを超える、２０ｍｇ／ｍＬを超える、３０ｍｇ／ｍＬを超える、４０ｍｇ／ｍＬを超える、５０ｍｇ／ｍＬを超える、６０ｍｇ／ｍＬを超える、７０ｍｇ／ｍＬを超える、８０ｍｇ／ｍＬを超える、９０ｍｇ／ｍＬを超える、１００ｍｇ／ｍＬを超える、１２０ｍｇ／ｍＬを超える、１５０ｍｇ／ｍＬを超える、２００ｍｇ／ｍＬを超える、２５０ｍｇ／ｍＬを超える、３００ｍｇ／ｍＬを超える、３５０ｍｇ／ｍＬを超える、４００ｍｇ／ｍＬを超える、４５０ｍｇ／ｍＬを超える、又は５００ｍｇ／ｍＬを超えるタンパク質生体分子の濃度を示す。

【0049】

非限定的に、そのような医薬組成物に含まれる「タンパク質生体分子」は、単一ポリペプチド鎖タンパク質又は多ポリペプチド鎖タンパク質を含む任意の種類のタンパク質分子であり得る。本明細書で使用するとき、タンパク質生体分子という用語は、分子が任意の特定のサイズのものであることを含意するわけではなく、５未満、１０未満、２０未満 ３０未満、４０未満又は５０未満のアミノ酸残基を含むタンパク質生体分子、及び、５０を超える、１００を超える、２００を超える ３００を超える、４００を超える、又は５００を超えるアミノ酸残基を含むタンパク質生体分子を含むことが意図される。

【0050】

本発明の医薬組成物中に存在し得るタンパク質生体分子の例は、表１及び２に提供され、抗体又は抗体ベース免疫療法薬（例えば、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）のＦタンパク質のＡ抗原部位内のエピトープに指向されるパリビズマブ（ＳＹＮＡＧＩＳ（登録商標）；米国特許第８，４６０，６６３号明細書及び同第８，９８６，６８６号明細書）、アンジオポエチン－２に対して指向される抗体（米国特許第８，５０７，６５６号明細書及び同第８，８３４，８８０号明細書）；δ様タンパク質前駆体４（ＤＬＬ４）に対して指向される抗体（米国特許第８，６６３，６３６号明細書；米国特許出願公開第２０１５／０００５４７５号明細書；ＰＣＴ国際公開第２０１３／１１３８９８号パンフレット）；血小板由来増殖因子－α（ＰＤＧＲＦ－α）に対して指向される抗体（米国特許第８，６９７，６６４号明細書）；α－Ｖ－β－６インテグリン（αＶβ６）に対して指向される抗体（米国特許第８，８９４，９９８号明細書；増殖・分化因子（ＧＤＦ－８）に対して指向される抗体（米国特許第８，６９７，６６４号明細書）、ワクチンにおいて使用される酵素、ホルモン及び因子、並びに抗原タンパク質（例えば、インスリン、エリスロポエチン、成長ホルモン等）を含む。

【0051】

【表1-1】

【0052】

【表1-2】

【0053】

【表1-3】

【0054】

【表1-4】

【0055】

【表1-5】

【0056】

【表1-6】

【0057】

【表1-7】

【0058】

【表1-8】

【0059】

【表1-9】

【0060】

【表1-10】

【0061】

【表2】

【0062】

ＩＶ．本発明の医薬組成物の製剤
本発明の医薬組成物は、少なくとも当初は水性液体として典型的に処方されるであろうが、最も好ましくは、その後の凍結乾燥に好適である。そのような凍結乾燥の後の本発明の医薬組成物は、本明細書では「凍結乾燥物」と称される。

【0063】

本発明の医薬組成物の液体製剤は、好ましくは好適な無菌水性担体、高濃度（上記で定義した）のタンパク質生体分子、緩衝液、及び本発明の安定化化合物を含む。場合により、そのような本発明の医薬組成物の液体製剤は、追加の成分、例えば、薬学的に許容され得る、無毒賦形剤、緩衝液又は洗浄剤を含んでもよい。本発明の医薬組成物は、糖を欠いており、又は糖を実質的に含まない。

【0064】

本発明の医薬組成物中で使用され得る好適な無菌水性担体の例には、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、エタノール、右旋糖溶液、及び水／ポリオール溶液（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）が挙げられる。

【0065】

本発明に従って任意の好適な緩衝液を使用することができる。液体を約３～約１１、より好ましくは約４～約９、より好ましくは約５～約８、より好ましくは約５～約７．５のｐＨ範囲内に、より好ましくは５．０；５．１；５．２；５．３；５．４；５．５；５．６；５．７；５．８；５．９；６．０；６．１；６．２；６．３；６．４；６．５；６．６；６．７；６．８；６．９；７．０；７．１；７．２；７．３；７．４；７．５；７．６；７．７；７．８；７．９；又は８．０のｐＨに緩衝することが可能な緩衝液を使用することが好ましい。

【0066】

好適な緩衝液としては、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ヒスチジン、イミダゾール、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、重炭酸アンモニウム及び炭酸アンモニウムが挙げられる。

【0067】

一般に、緩衝液は、約１ｍＭ～約２Ｍ、約２ｍＭ～約１Ｍ、約１ｍＭ～約１００ｍＭ、約１０ｍＭ～約５０ｍＭ、約２０ｍＭ～約３０ｍＭ、又は約２３ｍＭ～約２７ｍＭ、最も好ましくは約５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ又は２５ｍＭのモル濃度で使用される。一実施形態では、緩衝液は、ヒスチジン／ヒスチジンＨＣｌであってもよい。ヒスチジンは、Ｌ－ヒスチジン、Ｄ－ヒスチジン、又はそれらの混合物の形態であってもよいが、Ｌ－ヒスチジンが最も好ましい。ヒスチジンはまた、水和物、又は薬学的に許容され得る塩、例えば塩酸塩（例えば、一塩酸塩又は二塩酸塩）、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩等の形態であってもよい。ヒスチジンの純度は、少なくとも９８％、好ましくは少なくとも９９％、最も好ましくは少なくとも９９．５％でなければならない。

【0068】

本発明の組成物に含まれる安定化化合物の濃度は、好ましくは約１％（重量／体積（ｗ／ｖ））～約６％（ｗ／ｖ）、より好ましくは約２％（ｗ／ｖ）～約５％（ｗ／ｖ）又は約２％（ｗ／ｖ）～約４％（ｗ／ｖ））の範囲である。２～５％（ｗ／ｖ）アルギニン、２～５．５％（ｗ／ｖ）アラニン、及び２～５．５％（ｗ／ｖ）グリシン、又はそれらの混合物を含む安定化組成物が特に好ましい。

【0069】

ポリソルベート－８０（「ＰＳ－８０」）は、本発明の好ましい非イオン性界面活性剤及び乳化剤であるが、他の好適な非イオン性界面活性剤及び乳化剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ－２０（登録商標）、Ｔｗｅｅｎ－８０（登録商標）、Ｐｏｌａｘａｍｅｒｓ、ドデシル硫酸ナトリウム等）を代替的に又は更に使用することができる。

【0070】

（１）約７５ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、約３．５％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び約０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（２）約７５ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、約５％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び約０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（３）約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、約４％アラニン（ｗ／ｖ）、約２％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び約０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（４）約１００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、約４％グリシン（ｗ／ｖ）、約２％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び約０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
を含む液体製剤が特に好ましい。

【0071】

液体製剤は、凍結乾燥されて、タンパク質生体分子を更に安定化することができる。任意の好適な凍結乾燥装置及びレジメンを使用することができるが、そのような凍結乾燥は、表３、表５又は表１１に示すように達成することが好ましい。

【0072】

特に、そのような凍結乾燥後の再構成に続いて、本発明の医薬組成物の液体製剤は、更に、鉱物油又は植物油（例えば、オリーブ油、トウモロコシ油、ピーナッツ油、綿実油、及びゴマ油）、カルボキシメチルセルロースコロイド溶液、トラガカントガム、及びオレイン酸エチル等の注射用有機エステル等の非水性担体を含むことができる。

【0073】

本発明は、有効量の本発明の液体製剤を、最初に処方されたままで又は凍結乾燥物の再構成後に、対象に投与することによる、疾病又は病状、又はそれらの１種以上の症状の処置、予防、及び回復方法を提供する。

【0074】

様々な送達システムが既知であり、そのような液体組成物の投与に使用することができ、この送達システムには、非限定的に、非経口投与（例えば、皮内、筋内、腹腔内、静脈内及び皮下）、硬膜外投与、局所投与、経肺投与、及び粘膜投与（例えば、鼻腔内及び経口ミュート（ｍｕｔｅ））が挙げられる。特定の実施形態では、本発明の液体製剤は、筋肉内、静脈内、又は皮下に投与される。製剤は、任意の都合よいミュートにより、例えば注入又はボーラス注射により、上皮層又は皮膚粘膜層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸粘膜等）を介した吸収により投与することができ、また他の生物学的に活性な薬剤と共に投与することができる。投与は、全身又は局所であってもよい。加えて、例えば吸入器又は噴霧器の使用により経肺投与を用いることができる。

【0075】

本発明は、最初に処方された液体医薬組成物が、中に含まれるタンパク質生体分子の量が示されている、アンプル、バイアル、カートリッジ、注射器又は小袋等の密封容器内に包装され得ることも提供する。そのような最初に処方された液体医薬組成物は、そのようなアンプル又は小袋内にある間に凍結乾燥されることが好ましく、アンプル又は小袋は、所望の高濃度のタンパク質生体分子を含むように凍結乾燥物を再構成するために添加される担体の量を示す。

【0076】

治療的又は予防的使用に有効であろう本発明の液体製剤の量。

【0077】

製剤において使用される正確な用量は、投与経路、処置される疾病又は病状、医薬組成物の特定のタンパク質生体分子にも依存し、開業医の判断及び各対象の環境に従って決定される必要がある。例示的な用量は、３０ｍｇ／ｋｇ以下、１５ｍｇ／ｋｇ以下、５ｍｇ／ｋｇ以下、３ｍｇ／ｋｇ以下、１ｍｇ／ｋｇ以下又は０．５ｍｇ／ｋｇ以下を含む。

【実施例】

【0078】

以下の実施例は、本発明の組成物及びそれらの特性を説明する。これらの実施例は、本発明の範囲を説明することを意図し、限定を意図するものでは全くない。

【0079】

実施例１
材料及び方法
凍結乾燥 － １．１ｍＬアリコートの医薬組成物を３ｃｃガラスバイアル内に導入した。１３ｍｍの単一孔凍結乾燥ストッパーを用いてバイアルに栓をした。次いでバイアルを、表３に記載した凍結乾燥サイクルを用いて凍結乾燥した。

【0080】

【表3】

【0081】

凍結乾燥の終点は、ピラニ真空ゲージを使用して決定した（例えば、Ｐａｔｅｌ、Ｓ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２００９）“Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｎｄ Ｐｏｉｎｔ ｏｆ Ｐｒｉｍａｒｙ Ｄｒｙｉｎｇ ｉｎ Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ，”ＡＡＰＳ Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈ．１１（１）：７３－８４参照）。そのようなゲージは、乾燥チャンバ内の気体の熱伝導率の測定の原理で働く（Ｎａｉｌ、Ｓ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）“Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ Ｆｏｒ Ｉｎ－Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｗａｔｅｒ Ｉｎ Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｉｅｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，”Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔａｎｄ．７４：１３７－１５１；Ｂｉｏｌ．Ｐｒｏｄ．Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）。凍結乾燥サイクルの完了後、バイアルに真空栓をして、凍結乾燥機から取り出した。次いでバイアルの上部をＷｅｓｔ １３ｍｍアルミニウムＦｌｉｐ－Ｏｆｆオーバーシールで覆った。

【0082】

高性能サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）－ＨＰＳＥＣに先立って、ＨＰＳＥＣサンプルを１０ｍｇ／ｍＬリン酸緩衝生理食塩水中で希釈した。サンプルをＴＳＫｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷＸＬカラム上に注入し、硫酸ナトリウム及びアジ化ナトリウムを含有するリン酸緩衝液を用いて均一濃度で溶出した。溶出されたタンパク質を２８０ｎｍのＵＶ吸光度を用いて検出した。結果を、生成物モノマーピークの面積パーセントとして報告する。モノマーよりも早く溶出したピークはパーセント凝集体として記録し、モノマーの後に溶出したピークはパーセント断片／その他として記録する。

【0083】

再構成手順－使用に先立って、また一般に使用前の６時間以内に、無菌水を凍結乾燥バイアル内に注入し、次いでこれを穏やかにかき混ぜて、最小限の泡立ちで再構成を達成する。再構成には２つの再構成手順を使用した：手順Ａ－全ケーキが溶液中に完全に溶解する迄、１分間かき混ぜた後、５分間保持する方法、及び手順Ｂ－全ケーキが溶液中に完全に溶解する迄、１分間保持した後、１分間かき混ぜる方法。

【0084】

実施例２
再構成時間及び医薬組成物のタンパク質凝集に対するアミノ酸対糖比の変動の影響
医薬組成物の調製、安定性及び貯蔵に対するそのような組成物中のアミノ酸対糖濃度の比の変動の効果を検討するために、例示的なタンパク質生体分子（ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体）を含有する医薬組成物を、異なるアミノ酸を異なるアミノ酸対糖比で含む製剤中でインキュベートした。より詳細には、医薬組成物を２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｐＨ６緩衝液中、１００ｍｇ／ｍＬで、アルギニン－ＨＣｌ、リシン－ＨＣｌ、プロリン、アラニン又はグリシンを用いて、表４に示すアミノ酸対糖比で処方し、この調製物を、凍結乾燥製剤の再構成時間に対するその効果に関して評価した。

【0085】

【表4】

【0086】

製剤を表５の工程に従って凍結乾燥した。

【0087】

【表5】

【0088】

図１に、凝集及び再構成時間の結果をまとめる。リシン－ＨＣｌを含む例示的なタンパク質生体分子を含有する上述の医薬組成物の全製剤は、長い、及びいくつかの場合には、許容不可能なほど長い再構成時間を有した。アルギニン、リシン－ＨＣｌ又はプロリンを含有する医薬組成物の製剤は、工程中の凝集の増加を示さなかった。対照的に、アラニン及びグリシンを含有する医薬組成物の製剤は、工程中の凝集レベルの増加を示したが、非晶質内容物（ショ糖）の添加により、用いた比に応じて、この増加は、最小限となり又は防止された。結果は、アルギニン、リシン及びプロリンが、凝集に影響を与えることなく、ショ糖の代用となり得ることを示す。

【0089】

凍結乾燥製剤を粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）にも供して、凍結乾燥物の結晶化度を決定した。結果と再構成時間を表６に示す（分による再構成時間（ＲＣ）；ｎ＝２；ＸＲＰＤ、ｎ＝１；Ａ、非晶質；Ｍ、非晶質と結晶質との混合）。

【0090】

【表6】

【0091】

要約すれば、アルギニンを単独で含む例示的なタンパク質生体分子を含有する医薬組成物の製剤は、ショ糖のみの製剤と比較して有意に短い再構成時間を示した。アルギニン製剤に１％（ｗ／ｖ）のショ糖を加えた場合でも、再構成時間が増大した。アルギニンを有する全製剤は、ＸＲＰＤにより測定して非晶質であった。アラニン又はグリシンを含有する医薬組成物の製剤は、ショ糖の非存在下、又は１％（ｗ／ｖ）ショ糖の存在下で急速な再構成を示したが、５％（ｗ／ｖ）及びより高いショ糖濃度の添加は、再構成時間を増大させた。アラニン又はグリシン及び０～１％（ｗ／ｖ）ショ糖を含有する医薬組成物の製剤は、ＸＲＰＤにより非晶質と結晶質との生成物の混合物を示した一方、これらの製剤へのより多量のショ糖の添加は、ＸＲＰＤにより決定して、非晶質マトリクスをもたらした。リシン又はプロリンを含有する医薬組成物の製剤は再構成が困難であり、従ってより長い再構成時間を有した。しかしながら、リシン－及びプロリン－含有製剤の全部は、ＸＲＰＤにより決定して非晶質であった。これらの結果は、アルギニン、アラニン又はグリシンの存在が再構成時間を有意に短縮し得ることを示す。

【0092】

実施例３
高濃度タンパク質製剤における糖対アミノ酸比の最適化
実施例２に示したデータは、アラニン及びグリシンの両方が、単独で又は少量の糖の存在下で凍結乾燥した際、結晶化する傾向を有することを示す。糖対アミノ酸の比を最適化して（アラニン又はグリシンを使用して）、許容可能な安定性と短い再構成時間を有する非晶質凍結乾燥ケーキを得るために、以下の研究を実施した。様々なアミノ酸対糖比を有するアミノ酸／ショ糖製剤を、表７に示すようにアラニン及びグリシンの両方に関して調製した。製剤を表５に示した工程に従って、また－１６℃で３００分間のアニーリングを加えて、凍結乾燥した。凍結乾燥物をＸＲＰＤに供し、次いで再構成した。再構成時間、凍結乾燥前の溶液に対するパーセント凝集体増加、及び浸透圧を測定した。

【0093】

【表7】

【0094】

表８は、再構成時間及び凍結乾燥後の凝集体の増加に対するアミノ酸対糖比の効果をまとめる。結果は、製剤中の糖の増大が凍結乾燥工程中の凝集体の形成を防止するが、再構成時間を増大させることを示す。結果は、アミノ酸対糖比を調整することによる、凝集と再構成時間との間の許容可能なバランスを決定する指針を提供する。

【0095】

【表8】

【0096】

実施例４
高濃度タンパク質／アミノ酸製剤の評価
実施例２で観察されたように、アルギニン－ＨＣｌを有する高濃度タンパク質製剤は、凍結乾燥中に非晶質のままであり、これは、アルギニン－ＨＣｌが凍結保護剤及び凍結乾燥保護剤として作用し得ることを示す。加えて、アルギニン単独のタンパク質製剤は、短縮された再構成時間を示した。これらの特性のため、例示的なタンパク質生体分子を含有する上述した医薬組成物の一連の高濃度製剤において、アルギニンをアラニン及び／又はグリシンと組み合わせて評価した。この研究では、再構成時間に対するタンパク質濃度及びアミノ酸比の影響を評価した。評価された製剤は、表９にチェックマークを用いて示される（Ｎ／Ａ、データなし）。表３に示した工程に従って製剤を凍結乾燥した。凍結乾燥物をＸＲＰＤに供し、次いで再構成した。再構成時間を測定した。

【0097】

【表9】

【0098】

様々な製剤の再構成時間を、図２に示す。これらのデータは、タンパク質濃度が再構成時間に対して影響を有したことを示す。タンパク質濃度が増大するにつれて、再構成時間が増大した。また、再構成時間の増大の程度は、製剤中に存在するアミノ酸のタイプ及び量により影響を受けた。３．５％（ｗ／ｖ）アルギニン及び５％（ｗ／ｖ）アルギニンの両方は、再構成時間に対して同様の影響を有した。

【0099】

４％グリシン（ｗ／ｖ）又は４％アラニン（ｗ／ｖ）と２％アルギニン（ｗ／ｖ）との組み合わせを含有する製剤は、１００ｍｇ凍結乾燥製剤に関して、約１０分に短縮された再構成時間を示した（即ち、溶質の他の組み合わせを使用して観察された再構成時間の約１／３～１／２）。また、再構成時間の短縮の程度は、アミノ酸比に依存した。例えば、２：１グリシン：アルギニン又はアラニン：アルギニンは、１：１グリシン：アルギニン又はアラニン：アルギニンよりも再構成時間の短縮に効果的であった。

【0100】

ＸＲＰＤ結果は、２：１グリシン：アルギニンを除いた全ての製剤が、非晶質であることを明らかにした（表１０；Ａ、非晶質；Ｍ、非晶質と結晶質との混合；Ｎ／Ａ、データなし）。

【0101】

【表10】

【0102】

表１０及び図２の結果に基づいて、以下の医薬組成物の凍結乾燥製剤を、その安定性に関して５℃、２５℃ ６０％相対湿度及び４０℃ ７５％相対湿度で評価した：
（１）７５ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、３．５％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（２）７５ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、５％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（３）１００ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、４％アラニン（ｗ／ｖ）、２％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；
（４）１００ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、４％グリシン（ｗ／ｖ）、２％アルギニン（ｗ／ｖ）、及び０．０２％ ＰＳ－８０（ｗ／ｖ）、ｐＨ６；

【0103】

凍結乾燥に先立って、１．１ｍＬの上述した４種の製剤を、３ｃｃバイアル内での無制御１ｘ凍結／解凍（Ｆ／Ｔ）に供した（－８０℃で凍結及び室温で解凍）。解凍前及び解凍後にＨＰＳＥＣを監視して、凍結／解凍サイクルの影響を研究した。凍結／解凍サイクルにおいて純度の有意な変化は観察されなかった。

【0104】

図３Ａ及び３Ｂは、各々４０℃及び２５℃での凍結乾燥物の安定性を示す。安定性は、２５℃で６カ月、及び４０℃で３カ月監視した。２５℃及び４０℃の両方での純度損失率は、ショ糖含有製剤と同様であった。４０℃での３カ月後、凍結乾燥医薬組成物製剤のサンプルをＸＲＰＤ分析に提出した。ＸＲＰＤ分析に基づき、グリシンを含有するものを除いて、全製剤が非晶質であった。グリシン含有製剤は、非晶質と結晶質との成分の混合を示し、これは初期（Ｔ－０）観察と一致する。安定性も５℃で２２カ月評価し、純度の変化は示されなかった。

【0105】

各製剤（凍結乾燥後）の１０個のバイアルを再構成し、再構成時間を測定した。結果を図４に示す。全製剤の平均再構成時間は、１５分未満であった。グリシンとアルギニンとの組み合わせを含む例示的なタンパク質生体分子を含有する医薬組成物の１００ｍｇ／ｍＬ製剤は、再構成時間の短縮において最も有効であり、次はアラニンとアルギニンとの組み合わせであった。例示的なタンパク質生体分子を含有する医薬組成物の７５ｍｇ／ｍＬ製剤に関しては、３．５％及び５％アルギニン（ｗ／ｖ）製剤の両方が許容可能な再構成時間を提供した。

【0106】

実施例５
再構成時間に対する分子タイプの影響の評価
再構成時間に対する分子タイプの影響を理解し、また任意のタンパク質生体分子に関連した本発明の普遍性を明らかにするために、代替的なタンパク質生体分子を使用して医薬組成物を調製した。詳細には、テネイシン－３－ヒト血清アルブミン（Ｔｎ３－ＨＳＡ）融合タンパク質（例えば、ＰＣＴ国際公開第２０１３／０５５７４５号パンフレット参照）、又は、上述した医薬組成物のヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体の代わりに、ヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体を使用して医薬組成物を調製した。使用した製剤は、実施例４に記した４種のリード製剤であった（下記に繰り返す）：
（１）７５ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、３．５％アルギニン、０．０２％ ＰＳ－８０、ｐＨ６；
（２）７５ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、５％アルギニン、０．０２％ ＰＳ－８０、ｐＨ６；
（３）１００ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、４％アラニン、２％アルギニン、０．０２％ ＰＳ－８０、ｐＨ６；
（４）１００ｍｇ／ｍＬ、２５ｍＭヒスチジン／ヒスチジン－ＨＣｌ、４％グリシン、２％アルギニン、０．０２％ ＰＳ－８０、ｐＨ６；

【0107】

追加の医薬組成物を示されるように処方し、表１１の工程に従って凍結乾燥した。

【0108】

【表11】

【0109】

凍結乾燥物サンプルを様々な温度での安定性評価に提出する。サンプルのパーセント凝集をＨＰＳＥＣにより評価する。凍結乾燥後、サンプルを再構成した。２つの代替的手順の１つを使用して製剤を再構成した（手順ＡはヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体で使用され、手順ＢはＴｎ３－ＨＳＡ融合タンパク質及びヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体で使用された）。ＩｇＧ１抗体の再構成時間を図５Ａに示す。Ｔｎ３－ＨＳＡ融合タンパク質の再構成時間を図５Ｂに示す。ＩｇＧ４抗体の再構成時間を図５Ｃに示す。３種の分子に関する再構成時間は、ショ糖のみの製剤と比較して有意に短く、全て１５分以下であった。

【0110】

本明細書に言及した全ての刊行物及び特許は、各々の個々の刊行物及び特許出願が、その全体が参照により組み込まれることを詳細にかつ個別に示される場合と同じ程度まで参照により本明細書に組み込まれる。本発明はその特定の実施形態に関連して記載されてきたが、更なる修正が可能であり、本願は、概して本発明の原理に従う任意の変更、使用又は適用を包含することが意図され、前述した本質的な特徴に適合し得る、本発明が属する技術の既知の又は慣習的な実践の範囲内となる本開示からのそのような逸脱を含むことが理解されるであろう。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5-1】

【図5-2】