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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-08-23
(45)【発行日】2024-09-02
(54)【発明の名称】肺高血圧症の治療のための併用療法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/505 20060101AFI20240826BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20240826BHJP
A61K 9/72 20060101ALI20240826BHJP
A61K 31/497 20060101ALI20240826BHJP
A61K 31/4985 20060101ALI20240826BHJP
A61P 9/12 20060101ALI20240826BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240826BHJP
【ＦＩ】
A61K31/505
A61K9/14
A61K9/72
A61K31/497 ZNA
A61K31/4985
A61P9/12
A61P43/00 111
A61P43/00 121
【請求項の数】
12
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022128291
(22)【出願日】2022-08-10
(62)【分割の表示】P 2019523817の分割
【原出願日】2017-10-27
(65)【公開番号】P2022169636
(43)【公開日】2022-11-09
【審査請求日】2022-08-29
(31)【優先権主張番号】62/413,788
(32)【優先日】2016-10-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(73)【特許権者】
【識別番号】515189759
【氏名又は名称】プルモキネ、インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ジスマン、ローレンス エス．
【審査官】新留 素子
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１５／０５４５７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１６－５０６４１８（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１４－５０６８７０（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００８－５１０８３０（ＪＰ，Ａ）
【文献】Int Heart J，2015年，Vol.56，pp.245-248
【文献】Ann. N. Y. Acad. Sci.，2015年，Vol.1358，pp.68-81
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ
Ａ６１Ｐ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
症状を治療するための医薬組成物であって、（ａ）治療有効量のチロシンキナーゼ阻害剤、ここで該チロシンキナーゼ阻害剤が、以下の式のもの
【化1】
またはその薬学的に許容される塩である、
（ｂ）治療有効量のホスホジエステラーゼ５型（ＰＤＥＶ）阻害剤、ここで前記ホスホジエステラーゼ５型（ＰＤＥＶ）阻害剤はタダラフィルまたはその薬学的に許容される塩である、および
（ｃ）治療有効量のエンドセリン受容体拮抗薬、ここで該エンドセリン受容体拮抗薬がアンブリセンタンまたはその薬学的に許容される塩である、
を含み、
該症状が肺動脈高血圧症である、上記医薬組成物。
【請求項2】
対象がヒトである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項3】
前記チロシンキナーゼ阻害剤の投与が吸入によるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項4】
前記チロシンキナーゼ阻害剤の投与が吸入器によるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記チロシンキナーゼ阻害剤の投与がネブライザーによるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記チロシンキナーゼ阻害剤の投与がアトマイザーによるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記ＰＤＥＶ阻害剤およびエンドセリン受容体拮抗薬の投与が経口投与である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記チロシンキナーゼ阻害剤の前記治療有効量が、１日当たり約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記ＰＤＥＶ阻害剤の前記治療有効量が、１日当たり約２０ｍｇ～約４０ｍｇである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記エンドセリン受容体拮抗薬の前記治療有効量が、１日当たり約５ｍｇ～約１０ｍｇである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が乾燥粉末として製剤化される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記タダラフィルまたはその薬学的に許容される塩およびアンブリセンタンまたはその薬学的に許容される塩が経口投与される、請求項１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる２０１６年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／４１３，７８８号明細書の利益を主張する。
本出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる２０１６年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／４１３，７８８号明細書の利益を主張する。
【0002】
政府の権利に関する記述
本発明は、米国国立保健研究所によるＲ４４ＨＬ１０２９４６の下に政府の支援を受けて行われた。政府は本発明に対して一定の権利を有する。
本発明は、米国国立保健研究所によるＲ４４ＨＬ１０２９４６の下に政府の支援を受けて行われた。政府は本発明に対して一定の権利を有する。
【背景技術】
【0003】
肺高血圧症（ＰＨ）は、高い併存疾患罹患率および死亡率をもたらす肺血管系のまれな障害である。この疾患の病状は、無秩序な血管形成の叢状病変と、異常な新生内膜細胞増殖とを含み、これらは肺細動脈を通る血流を妨げる。キナーゼは、細胞の増殖に重要な役割を果たしており、ＰＨの根底にある病状に対処するために使用することができる。キナーゼ阻害剤を使用してＰＨを治療することができる。
【0004】
参照による援用
本出願で引用された各特許、刊行物および非特許文献は、それぞれが個々に参照により組み込まれているかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本出願で引用された各特許、刊行物および非特許文献は、それぞれが個々に参照により組み込まれているかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【0005】
いくつかの実施形態では、本発明は、症状を治療する方法を提供し、該方法は、治療有効量のチロシンキナーゼ阻害剤、治療有効量のホスホジエステラーゼ５型（ＰＤＥＶ）阻害剤および治療有効量のエンドセリン受容体拮抗薬をそれを必要とする対象に投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【0006】
【図1】ＰＤＧＦＲαα、ＰＤＧＦＲαβおよびＰＤＧＦＲββのＰＤＧＦＲ経路を示す。
【0007】
【図2】化合物１およびイマチニブを用いてまたは用いずに、様々な濃度のＰＤＧＦＢによって処理したヒト肺線維芽細胞内のリン酸化ＰＤＧＦＲβのＥＬＩＳＡから得られた結果を示す。
【0008】
【図3】ラットの吸入後の肺、動脈および静脈の化合物１の平均濃度を比較する。
【0009】
【図4】動脈および静脈の化合物１の平均濃度の経時的な変化を示す。
【0010】
【図5】化合物１による治療後に、肺高血圧症のラットから得られた肺溶解物からのｐＰＤＧＦＲβおよびＰＤＧＦＲβのウエスタンブロット分析を示す。
【0011】
【図6】ＡＡＶ－ＰＤＧＦＢ ＳＵ５４１６低酸素症モデルにおけるＰＤＧＦＢの肺遺伝子発現の増加を示す。
【0012】
【図7】右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）の％低下に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の併用療法の効果を示す。
【0013】
【図8】右室肥大（ＲＶ／（ＬＶ＋ＩＶＳ））に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の併用療法の効果を示す。
【0014】
【図9】肺細動脈の内腔領域と中膜領域とを比較したヘマトキシリンおよびエオシン染色された肺切片を示し、内腔／中膜比に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を示す。
【0015】
【図10】内腔／中膜比に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を比較する。
【0016】
【図11】ＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）のリン酸化に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を示す。
【0017】
【図12】ＰＤＧＦＲα（Ｙ７５１）のリン酸化に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を示す。
【0018】
【図13】アクチン対照とともに、総ＰＤＧＦＲβと対比したリン酸化ＰＤＧＦＲβのウエスタンブロット分析におけるタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を示す。
【0019】
【図14】タダラフィル、アンブリセンタンおよび吸入化合物１を用いて治療した群では、ビヒクルのみの群ならびにタダラフィルおよびアンブリセンタン群と比較してＭＹＰＴのリン酸化が減少したことを示すウエスタンブロットを示す。
【0020】
【図15】ビヒクルのみ；タダラフィルおよびアンブリセンタン；化合物１；ならびにタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いて治療した群のＭＹＰＴのリン酸化に対する効果を示す。
【0021】
【図16】治療群の総ＳＴＡＴ３（ｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３）と比較してＳＴＡＴ３のリン酸化の減少を示すウエスタンブロットを示す。
【0022】
【図17】総ＳＴＡＴ３（ｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３）と比較した、ビヒクルのみ；タダラフィルおよびアンブリセンタン；化合物１；ならびにタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いて治療した群のＳＴＡＴ３のリン酸化に対する効果を示す。
【0023】
【図18】一回換気量に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤治療および併用治療の効果を示す。
【0024】
【図19】呼吸頻度に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤治療および併用治療の効果を示す。
【0025】
【図20】分時換気量に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤治療および併用治療の効果を示す。
【0026】
【図21】気道抵抗に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤治療および併用治療の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【0027】
肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）としても知られている肺高血圧症（ＰＨ）は、肺、および心臓の右側の動脈に影響を及ぼす慢性疾患である。治療しないでおくと、ＰＡＨは心不全に至る可能性がある。したがって、ＰＡＨは高い併存疾患罹患率および死亡率をもたらす障害である。世界保健機関は、基礎関連疾患に基づいて、ＰＡＨ、左心疾患によるＰＨ、肺疾患および／または低酸素症によるＰＨ、慢性血栓塞栓性ＰＨ（ＣＴＥＰＨ）、および他の多因子機序によるＰＨの５つの群にＰＨを分類している。
【0028】
ＰＡＨの病状には、叢状病変と呼ばれる肺動脈のリモデリングから生じる複雑な血管形成と、異常な新生内膜細胞増殖とが含まれ、これらは肺細動脈を通る血流を妨げる。キナーゼは細胞の増殖に重要な役割を果たしており、ＰＡＨの根底にある病状に対処することを標的とし得る。
【0029】
ＰＡＨは、家族性形態および素因的遺伝的異常、例えば、骨形成因子２型受容体の遺伝子変異、エンドグリン、アクチビン様受容体キナーゼ１（ＡＬＫ１）、ｍｏｔｈｅｒｓ ａｇａｉｎｓｔ ｄｅｃａｐｅｎｔａｐｌｅｇｉｃ ９（ＳＭＡＤ９）および関連経路、自己免疫障害（例えば、全身性硬化症および強皮症）、先天性心疾患、門脈圧亢進症を伴う肝疾患、ならびにＨＩＶ感染症を含むいくつかの病因と関連し得る。ＰＡＨは、平均肺動脈圧≧２５ｍｍＨｇ、および肺毛細血管楔入圧または左室収縮終末期圧≦１５ｍｍＨｇを示すことがある。
【0030】
血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）経路を介したシグナル伝達は、ＰＡＨの発症および進行を促進する可能性がある。ＰＤＧＦ受容体（ＰＤＧＦＲ）は、２つの主要なアイソフォーム、αおよびβを有する。ＰＤＧＦＲのαおよびβアイソフォームは、ホモ二量体（すなわちＰＤＧＦＲααおよびＰＤＧＦＲββ）およびヘテロ二量体（すなわちＰＤＧＦＲαβ）を形成することができる。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦＲααはＰＤＧＦＲαと略され、ＰＤＧＦＲββはＰＤＧＦＲβと略される。異なるＰＤＧＦＲアイソフォームを介するシグナル伝達は、異なるシグナル伝達経路を活性化することができる。
【0031】
ＰＤＧＦＲに結合するリガンドは、ＰＤＧＦＡおよびＰＤＧＦＢなどの一本鎖タンパク質であり、これらもホモ二量体およびヘテロ二量体を形成することができる。ＰＤＧＦＲαに結合するリガンドはＰＤＧＦＡＡであり、ＰＤＧＦＡＢおよびＰＤＧＦＢＢにも少量結合する。ＰＤＧＦＢＢは、ＰＤＧＦＲβに結合する一次リガンドである。
【0032】
ＰＤＧＦＲを介したシグナル伝達はＰＡＨに重要な役割を果たしており、ＰＡＨではＰＤＧＦ経路が活性化されている。図１は、ＰＤＧＦＲαα、ＰＤＧＦＲαβおよびＰＤＧＦＲββのＰＤＧＦＲ経路を示し、ＰＤＧＦＲβ受容体がＡＫＴ、ＥＲＫまたはＳＴＡＴ３経路を活性化して、カルシウム流入および血管形成を促進することができることを示す。ＰＤＧＦＲαホモ二量体はＰＬＣγおよびＰＩ３Ｋ経路を活性化し、カルシウム流入のみを刺激する。ＰＤＧＦＲαβヘテロ二量体はＥＲＫおよびＳＴＡＴ３経路を活性化し、ＮＰκβおよびインターロイキン－６（ＩＬ－６）活性を刺激する。ＰＤＧＦシグナル伝達はまた、Ｅ２Ｆ４、Ｊｕｎ、ＥＳＲ１、ＥＳＴ１、ＥＴＳ１、ＳＭＡＤ１、ＳＰ１、ＳＴＡＴ１、ＭＹＣ、ＨＩＦＡ、ＬＥＦ１、ＣＥＢＰＢおよびＦＯＳを含む転写因子を増加させる。略語：Ａ、ＰＤＧＦＡ；Ｂ、ＰＤＧＦＢ；αα、ＰＤＧＦＲαホモ二量体；αβ、ＰＤＧＦＲαβヘテロ二量体；ββ、ＰＤＧＦＲβホモ二量体；ＰＬＣγ、ホスホリパーゼＣγ；ＰＩ３Ｋ、ホスホイノシチド３キナーゼ；ＥＲＫ、細胞外関連キナーゼ（ｐ３８ＭＡＰキナーゼとしても知られる）；ＡＫＴ、プロテインキナーゼＢ；ＳＴＡＴ３、シグナル伝達兼転写活性化因子３。
【0033】
イマチニブは強力なＰＤＧＦ阻害剤であり、ＰＤＧＦＲαアイソフォームよりもＰＤＧＦＲβアイソフォームに対して効力が低い。イマチニブは、ＰＤＧＦを阻害することにより右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）を低下させ、ＰＡＨのラットモノクロタリンモデルの生存率を改善する。イマチニブはまた、ＰＡＨが進行した患者の心肺血行動態を改善する。しかし、イマチニブの経口投与は重大な副作用をもたらし、進行したＰＡＨの治療および予防には使用されない。
【化1】
【0034】
肺血管床は、血管作動因子の起源および標的である。肺血管恒常性のための最も重要な血管作動因子の中には、一酸化窒素（ＮＯ）およびナトリウム利尿ペプチドファミリー（例えば、心房、脳およびＣ型ナトリウム利尿ペプチド）を含む細胞内セカンドメッセンジャーとして環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）を利用する因子がある。ＰＤＥＶは、肺内の動脈壁平滑筋に存在する。ＰＤＥＶ阻害剤は、血管を裏打ちしている平滑筋細胞内のサイクリックＧＭＰに対するｃＧＭＰ特異的ＰＤＥＶの分解作用を遮断する。ＰＤＥＶ阻害剤の例には、シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標））、タダラフィル（Ｃｉａｌｉｓ（登録商標））およびバルデナフィル（Ｌｅｖｉｔｒａ（登録商標））が挙げられる。
【化2】
【0035】
可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）は、ＮＯシグナル伝達経路における酵素である。ＮＯがｓＧＣの補欠ヘム基に結合すると、ｓＧＣは、血管拡張を促進し、かつ平滑筋増殖、白血球動員、血小板凝集および血管リモデリングを阻害するｃＧＭＰの合成を触媒する。ｓＧＣ刺激物質はｓＧＣを直接刺激し、ｃＧＭＰ産生を増加させる。ｓＧＣ刺激物質の非限定的な例には、ＹＣ－１、ＢＡＹ ４１－２２７２、ＢＡＹ ４１－８５４３、リオシグアト（Ａｄｅｍｐａｓ（登録商標）；ＢＡＹ ６３－２５２１）、ＣＦＭ－１５７１、ＢＡＹ ６０－４５５２、ベリシグアト（ＢＡＹ １０２１１８９）およびＡ－３５０６１９が挙げられる。
【化3】
【0036】
ＥＴ受容体拮抗薬は、ＥＴ受容体を遮断する薬物である。ＥＴ受容体拮抗薬の３つのクラスは以下の通りである。１）ＥＴ Ａ受容体のみに作用する選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬、２）ＥＴ ＡおよびＥＴ Ｂ受容体に作用する二重拮抗薬ならびに３）ＥＴ Ｂ受容体のみに作用する選択的ＥＴＢ受容体拮抗薬。選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬の例には、シタキセンタン、アンブリセンタン、アトラセンタン、ＢＱ－１２３およびジボテンタンが挙げられる。二重拮抗薬の例には、ボセンタン（Ｔｒａｃｌｅｅｒ（登録商標））、マシテンタン（Ｏｐｓｕｍｉｔ（登録商標））およびテゾセンタンが挙げられる。選択的ＥＴＢ受容体拮抗薬の例には、ＢＱ－７８８およびＡ１９２６２１が挙げられる。
【化4】
【0037】
本開示は、ＰＤＥＶ阻害剤、ＥＴ受容体拮抗薬および／またはｓＧＣのレジメンに吸入ＰＤＧＦＲ阻害剤を加えることの臨床効果を記載する。
【0038】
本発明の化合物
開示された発明は、プロテインキナーゼ阻害剤の治療用製剤ならびに肺および血管の症状を治療する方法を記載する。本発明の化合物は、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβの１つ以上の下流標的のリン酸化を調節することができ、ここで下流標的とは、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβ活性化の結果としてリン酸化される任意の基質である。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβの下流標的は、ＡＫＴ、ＰＤＧＦＲ、ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ１またはＥＲＫ２である。
開示された発明は、プロテインキナーゼ阻害剤の治療用製剤ならびに肺および血管の症状を治療する方法を記載する。本発明の化合物は、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβの１つ以上の下流標的のリン酸化を調節することができ、ここで下流標的とは、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβ活性化の結果としてリン酸化される任意の基質である。いくつかの実施形態では、ＰＤＧＦＲαまたはＰＤＧＦＲβの下流標的は、ＡＫＴ、ＰＤＧＦＲ、ＳＴＡＴ３、ＥＲＫ１またはＥＲＫ２である。
【0039】
いくつかの実施形態では、本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式の化合物
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・Ｗは、ＮＲ１、Ｏ、Ｓまたは結合手であり、
・各ＸおよびＹは、独立してＣＲ２またはＮであり、
・各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であるか、一緒になってカルボニルを形成し、
・各Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立してＣＲ２またはＮであり、
・各Ｒ１およびＲ２は、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基、イミン基、アシル基、アシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【化5】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・Ｗは、ＮＲ１、Ｏ、Ｓまたは結合手であり、
・各ＸおよびＹは、独立してＣＲ２またはＮであり、
・各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であるか、一緒になってカルボニルを形成し、
・各Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立してＣＲ２またはＮであり、
・各Ｒ１およびＲ２は、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基、イミン基、アシル基、アシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【0040】
いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり、式中、Ｒ１はＨまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり、式中、Ｒ１はＨである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはメチルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨおよびエチルである。
【0041】
いくつかの実施形態では、各ＸおよびＹは、独立してＣＲ２であり、式中、Ｒ２はＨ、ハロゲン、ヒドロキシルまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各ＸおよびＹは、独立してＮである。いくつかの実施形態では、ＸはＣＲ２であり、式中、Ｒ２はＨであり、ＹはＮである。いくつかの実施形態では、ＸはＮであり、ＹはＣＲ２であり、式中、Ｒ２はＨである。
【0042】
いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、アリールまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨまたはアリールであり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨまたは置換アリールである。
【0043】
いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは置換アリールである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは置換フェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはヒドロキシル、アルキルまたはアルコキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはヒドロキシルまたはアルコキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはヒドロキシルおよびアルコキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはアルコキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはメトキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは２つのメトキシ基で置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは３，４－ジメトキシフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニルである。
【0044】
いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立してＣＲ２であり、式中、Ｒ２はＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、エーテル基、アミン基またはアミド基である。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は、独立してＣＲ２であり、式中、Ｒ２はＨまたはアミド基である。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はアミド基である）。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はＨ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールである）、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はアリールまたはヘテロアリールである）、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ヘテロアリールである）。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ピリジニルである）。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジニルである）。いくつかの実施形態では、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は２－メチルピリジン－５－イルである）。
【0045】
いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり（式中、Ｒ１はＨである）、各ＸおよびＹは独立してＮであり、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは置換アリールであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ヘテロアリールである）。いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり（式中、Ｒ１はＨである）、各ＸおよびＹは独立してＮであり、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは置換フェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はピリジニルである）。いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり（式中、Ｒ１はＨである）、各ＸおよびＹは独立してＮであり、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは２つのアルコキシ置換基を有するフェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジニルである）。いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり（式中、Ｒ１はＨである）、各ＸおよびＹは独立してＮであり、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはアルコキシ基およびヒドロキシル基で置換されたフェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジニルである）。いくつかの実施形態では、ＷはＮＲ１であり（式中、Ｒ１はＨである）、各ＸおよびＹは独立してＮであり、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはアルコキシ基およびヒドロキシル基で置換されたフェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｚ１、Ｚ３、Ｚ４およびＺ５は独立してＣＲ２であり（式中、Ｒ２はＨである）、Ｚ２はＣＲ２である（式中、Ｒ２はＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は２－メチルピリジン－５－イルである）。
【0046】
いくつかの実施形態では、本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式の化合物
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基、イミン基、アシル基またはアシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【化6】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ基、エーテル基、カルボン酸基、カルボキサルデヒド基、エステル基、アミン基、アミド基、カーボナート基、カルバマート基、チオエーテル基、チオエステル基、チオ酸基、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基、イミン基、アシル基またはアシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【0047】
いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨ、アリールまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、独立してＨまたはアリールであり、アリールは、置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはアリールであり、アリールは置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは置換アリールである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはハロゲン、ヒドロキシル、アルキルまたはアルコキシ基で置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは２つのアルコキシ基で置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは３，４－ジメトキシフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃはアルコキシ基およびヒドロキシル基で置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂはＨであり、Ｒ１ｃは３－ヒドロキシ－４－メトキシフェニルである。
【0048】
いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはメチルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはエチルである。
【0049】
いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ基、アミン基またはアミド基であり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｂ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは、独立してＨ、ヒドロキシルまたはアミド基であり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはアミド基である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり（式中、Ｒ３はＨ、ヒドロキシル、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールである）、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり（式中、Ｒ３はアリールまたはヘテロアリールである）、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ピリジニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジン－５－イルである。
【0050】
いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは置換アリールであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはアルキルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはアミド基である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは置換フェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはメチルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは置換フェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはメチルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ピリジニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは置換フェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはメチルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３はメチルピリジニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは２つのアルコキシ基で置換されたフェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはメチルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ピリジニルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ１ａおよびＲ１ｂは独立してＨであり、Ｒ１ｃは１つのアルコキシ基および１つのヒドロキシル基で置換されたフェニルであり、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは独立してＨまたはメチルであり、各Ｒ３ａ、Ｒ３ｃ、Ｒ３ｄおよびＲ３ｅは独立してＨであり、Ｒ３ｂはＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３であり、式中、Ｒ３は置換ピリジニルである。
【0051】
いくつかの実施形態では、本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式の化合物
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ基、カルボン酸基、エステル基、アミン基、アミド基、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基またはアシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ基、カルボン酸基、エステル基、アミン基またはアミド基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【化7】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられ、
式中、
・各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨ、ハロゲン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ基、カルボン酸基、エステル基、アミン基、アミド基、スルフヒドリル、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アジド、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、スルホン酸基またはアシルオキシ基であり、これらはいずれも置換または非置換であり、
・各Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルコキシ基、カルボン酸基、エステル基、アミン基またはアミド基であり、これらはいずれも置換または非置換である。
【0052】
いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはメチルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨまたはエチルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、独立してＨおよびエチルである。
【0053】
いくつかの実施形態では、各Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、独立してＨ、ハロゲン、ヒドロキシルまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ４ａ、Ｒ４ｂ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは、独立してＨまたはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ４ａ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは独立してＨであり、Ｒ４ｂはアルキルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ４ａ、Ｒ４ｃおよびＲ４ｄは独立してＨであり、Ｒ４ｂはメチルである。
【0054】
いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは、独立してＨ、ヒドロキシル、アルコキシまたはアミン基であり、これらはいずれも置換または非置換である。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ、Ｒ５ｃ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは、独立してＨ、ヒドロキシルまたはアルコキシである。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは独立してＨであり、各Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立してヒドロキシルまたはアルコキシである。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは独立してＨであり、各Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立してアルコキシである。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは独立してＨであり、各Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立してメトキシである。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは独立してＨであり、Ｒ５ｂはアルコキシであり、Ｒ５ｃはヒドロキシルである。いくつかの実施形態では、各Ｒ５ａ、Ｒ５ｄおよびＲ５ｅは独立してＨであり、Ｒ５ｂはメトキシであり、Ｒ５ｃはヒドロキシルである。
【0055】
いくつかの実施形態では、本明細書の化合物は、上記で定義された変数を有する、以下の式のもの
またはその薬学的に許容される塩である。
【化8】
またはその薬学的に許容される塩である。
【0056】
本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【化9-1】
【化9-2】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【0057】
本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【化10-1】
【化10-2】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【0058】
本明細書の化合物の非限定的な例には、以下の式
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【化11-1】
【化11-2】
またはその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【0059】
本明細書のいずれの化合物も、立体異性体、鏡像異性体、ジアステレオマー、混合物、ラセミ体、アトロプ異性体および互変異性体のいずれかまたはすべてとすることができる。
【0060】
キナーゼ阻害剤の例示としての一例は化合物１であり、化合物１は以下の式の化合物またはその薬学的に許容される塩である。
【化12】
【0061】
化学基のための任意の置換基
任意の置換基の非限定的な例には、ヒドロキシル基、スルフヒドリル基、ハロゲン、アミノ基、ニトロ基、ニトロソ基、シアノ基、アジド基、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、カルボキシル基、カルボキサルデヒド基、イミン基、アルキル基、ハロアルキル基、アルケニル基、ハロアルケニル基、アルキニル基、ハロアルキニル基、アルコキシ基、アリール基、アリールオキシ基、アラルキル基、アリールアルコキシ基、ヘテロシクリル基、アシル基、アシルオキシ基、カルバマート基、アミド基、ウレタン基およびエステル基が挙げられる。
任意の置換基の非限定的な例には、ヒドロキシル基、スルフヒドリル基、ハロゲン、アミノ基、ニトロ基、ニトロソ基、シアノ基、アジド基、スルホキシド基、スルホン基、スルホンアミド基、カルボキシル基、カルボキサルデヒド基、イミン基、アルキル基、ハロアルキル基、アルケニル基、ハロアルケニル基、アルキニル基、ハロアルキニル基、アルコキシ基、アリール基、アリールオキシ基、アラルキル基、アリールアルコキシ基、ヘテロシクリル基、アシル基、アシルオキシ基、カルバマート基、アミド基、ウレタン基およびエステル基が挙げられる。
【0062】
アルキルおよびアルキレン基の非限定的な例には、直鎖、分岐および環状のアルキルおよびアルキレン基が挙げられる。アルキルまたはアルキレン基は、例えば、置換または非置換のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、Ｃ２４、Ｃ２５、Ｃ２６、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３１、Ｃ３２、Ｃ３３、Ｃ３４、Ｃ３５、Ｃ３６、Ｃ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２、Ｃ４３、Ｃ４４、Ｃ４５、Ｃ４６、Ｃ４７、Ｃ４８、Ｃ４９またはＣ５０基とすることができる。
【0063】
直鎖アルキル基の非限定的な例には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルおよびデシルが挙げられる。
【0064】
分岐アルキル基は、任意の数のアルキル基で置換された任意の直鎖アルキル基を含む。分岐アルキル基の非限定的な例には、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチルおよびｔ－ブチルが挙げられる。
【0065】
環状アルキル基の非限定的な例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチル基が挙げられる。環状アルキル基はまた、縮合、架橋およびスピロ二環系ならびに高級の縮合、架橋およびスピロ系を含む。環状アルキル基は、任意の数の直鎖、分岐または環状アルキル基で置換することができる。
【0066】
アルケニルおよびアルケニレン基の非限定的な例には、直鎖、分岐および環状アルケニル基が挙げられる。アルケニル基の単数または複数のオレフィンは、例えば、Ｅ、Ｚ、シス、トランス、末端またはエキソ－メチレンとすることができる。アルケニルまたはアルケニレン基は、例えば、置換または非置換のＣ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、Ｃ２４、Ｃ２５、Ｃ２６、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３１、Ｃ３２、Ｃ３３、Ｃ３４、Ｃ３５、Ｃ３６、Ｃ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２、Ｃ４３、Ｃ４４、Ｃ４５、Ｃ４６、Ｃ４７、Ｃ４８、Ｃ４９またはＣ５０基とすることができる。
【0067】
アルキニルまたはアルキニレン基の非限定的な例には、直鎖、分岐および環状アルキニル基が挙げられる。アルキニルまたはアルキニレン基の三重結合は、内部にあっても末端にあってもよい。アルキニルまたはアルキニレン基は、例えば、置換または非置換のＣ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３、Ｃ２４、Ｃ２５、Ｃ２６、Ｃ２７、Ｃ２８、Ｃ２９、Ｃ３０、Ｃ３１、Ｃ３２、Ｃ３３、Ｃ３４、Ｃ３５、Ｃ３６、Ｃ３７、Ｃ３８、Ｃ３９、Ｃ４０、Ｃ４１、Ｃ４２、Ｃ４３、Ｃ４４、Ｃ４５、Ｃ４６、Ｃ４７、Ｃ４８、Ｃ４９またはＣ５０基とすることができる。
【0068】
ハロアルキル基は、任意の数のハロゲン原子、例えば、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素原子で置換された任意のアルキル基とすることができる。ハロアルケニル基は、任意の数のハロゲン原子で置換された任意のアルケニル基とすることができる。ハロアルキニル基は、任意の数のハロゲン原子で置換された任意のアルキニル基とすることができる。
【0069】
アルコキシ基は、例えば、任意のアルキル、アルケニルまたはアルキニル基で置換された酸素原子とすることができる。エーテルまたはエーテル基はアルコキシ基を含む。アルコキシ基の非限定的な例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシおよびイソブトキシが挙げられる。
【0070】
アリール基は、複素環式または非複素環式とすることができる。アリール基は、単環式または多環式とすることができる。アリール基は、本明細書に記載の任意の数の置換基、例えば、ヒドロカルビル基、アルキル基、アルコキシ基およびハロゲン原子で置換することができる。アリール基の非限定的な例には、フェニル、トルイル、ナフチル、ピロリル、ピリジル、イミダゾリル、チオフェニルおよびフリルが挙げられる。
【0071】
アリールオキシ基は、例えば、任意のアリール基で置換された酸素原子、例えば、フェノキシとすることができる。
【0072】
アラルキル基は、例えば、任意のアリール基で置換された任意のアルキル基、例えば、ベンジルとすることができる。
【0073】
アリールアルコキシ基は、例えば、任意のアラルキル基で置換された酸素原子、例えば、ベンジルオキシとすることができる。
【0074】
複素環は、炭素ではない環原子、例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｐ、Ｓｉ、Ｂまたは任意の他のヘテロ原子を含有する任意の環とすることができる。複素環は、任意の数の置換基、例えば、アルキル基およびハロゲン原子で置換することができる。複素環は芳香族（ヘテロアリール）または非芳香族とすることができる。複素環の非限定的な例には、ピロール、ピロリジン、ピリジン、ピペリジン、スクシンアミド、マレイミド、モルホリン、イミダゾール、チオフェン、フラン、テトラヒドロフラン、ピランおよびテトラヒドロピランが挙げられる。
【0075】
アシル基は、例えば、ヒドロカルビル、アルキル、ヒドロカルビルオキシ、アルコキシ、アリール、アリールオキシ、アラルキル、アリールアルコキシまたは複素環で置換されたカルボニル基とすることができる。アシルの非限定的な例には、アセチル、ベンゾイル、ベンジルオキシカルボニル、フェノキシカルボニル、メトキシカルボニルおよびエトキシカルボニルが挙げられる。
【0076】
アシルオキシ基は、アシル基で置換された酸素原子とすることができる。エステルまたはエステル基はアシルオキシ基を含む。アシルオキシ基またはエステル基の非限定的な例はアセタートである。
【0077】
カルバマート基は、カルバモイル基で置換された酸素原子とすることができ、カルバモイル基の窒素原子は、非置換であるか、１つ以上のヒドロカルビル、アルキル、アリール、ヘテロシクリルまたはアラルキルで一置換または二置換される。窒素原子が二置換されている場合、２つの置換基は窒素原子と一緒になって複素環を形成することができる。
【0078】
本開示は、プロテインキナーゼ阻害剤と、肺および血管の症状を治療するための少なくとも１つの追加の薬剤とを含む治療用製剤を記載する。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１および１つの追加の薬剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびＰＤＥＶ阻害剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびタダラフィルを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびシルデナフィルを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびＥＴ受容体拮抗薬を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１と、選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬、二重拮抗薬または選択的ＥＴＢ受容体拮抗薬とを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１および選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１と、シタキセンタン、アンブリセンタン、アトラセンタン、ＢＱ－１２３またはジボテンタンとを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびシタキセンタンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびアンブリセンタンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１および二重拮抗薬を含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびマシテンタンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびｓＧＣ刺激物質を含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびリオシグアトを含む。いくつかの実施形態では、製剤は化合物１およびベリシグアトを含む。
【0079】
いくつかの実施形態では、製剤は化合物１および２つの追加の薬剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、ＰＤＥＶ阻害剤およびＥＴ受容体拮抗薬を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、タダラフィルおよびアンブリセンタンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、ＰＤＥＶ阻害剤およびｓＧＣ刺激物質を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、タダラフィルおよびリオシグアトを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、ＥＴ受容体拮抗薬およびｓＧＣ刺激物質を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、アンブリセンタンおよびリオシグアトを含む。
【0080】
いくつかの実施形態では、製剤は化合物１および３つの追加の薬剤を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、ＰＤＥＶ阻害剤、ＥＴ受容体拮抗薬およびｓＧＣ刺激物質を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、化合物１、タダラフィル、アンブリセンタンおよびリオシグアトを含む。
【0081】
薬学的に許容される塩
本開示は、本明細書に記載の任意の治療用化合物の薬学的に許容される塩の使用を提供する。薬学的に許容される塩には、例えば、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。化合物に付加されて酸付加塩を形成する酸は、有機酸または無機酸とすることができる。化合物に付加されて塩基付加塩を形成する塩基は、有機塩基または無機塩基とすることができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は金属塩である。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩はアンモニウム塩である。
本開示は、本明細書に記載の任意の治療用化合物の薬学的に許容される塩の使用を提供する。薬学的に許容される塩には、例えば、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。化合物に付加されて酸付加塩を形成する酸は、有機酸または無機酸とすることができる。化合物に付加されて塩基付加塩を形成する塩基は、有機塩基または無機塩基とすることができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は金属塩である。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩はアンモニウム塩である。
【0082】
適切な塩基から誘導される塩は、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ－（アルキル）４
＋塩を含む。金属塩は、本発明の化合物に無機塩基が付加されて生じ得る。無機塩基は、例えば、水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩、またはリン酸塩などの塩基性対イオンと対になった金属カチオンからなる。金属は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属または主族金属（ｍａｉｎ ｇｒｏｕｐ ｍｅｔａｌ）とすることができる。いくつかの実施形態では、金属は、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、セリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、カルシウム、ストロンチウム、コバルト、チタン、アルミニウム、銅、カドミウムまたは亜鉛である。いくつかの実施形態では、金属塩は、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、セシウム塩、セリウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、鉄塩、カルシウム塩、ストロンチウム塩、コバルト塩、チタン塩、アルミニウム塩、銅塩、カドミウム塩または亜鉛塩である。
【0083】
アンモニウム塩は、本発明の化合物にアンモニアまたは有機アミンが付加されて生じ得る。いくつかの実施形態では、有機アミンは、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、Ｎ－メチルモルホリン、ピペリジン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、ジベンジルアミン、ピペラジン、ピリジン、ピラゾール、ピピラゾール（ｐｉｐｙｒｒａｚｏｌｅ）、イミダゾール、ピラジンまたはピピラジン（ｐｉｐｙｒａｚｉｎｅ）である。いくつかの実施形態では、アンモニウム塩は、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、モルホリン塩、Ｎ－メチルモルホリン塩、ピペリジン塩、Ｎ－メチルピペリジン塩、Ｎ－エチルピペリジン塩、ジベンジルアミン塩、ピペラジン塩、ピリジン塩、ピラゾール塩、ピピラゾール塩、イミダゾール塩、ピラジン塩またはピピラジン塩である。
【0084】
酸付加塩は、本発明の化合物に酸が付加されて生じ得る。いくつかの実施形態では、酸は有機である。いくつかの実施形態では、酸は無機である。いくつかの実施形態では、酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、亜硝酸、硫酸、亜硫酸、リン酸、イソニコチン酸、乳酸、サリチル酸、酒石酸、アスコルビン酸、ゲンチシン酸（ｇｅｎｔｉｓｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、グルコン酸、グルクロン酸（ｇｌｕｃａｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、糖酸（ｓａｃｃａｒｉｃ ａｃｉｄ）、ギ酸、安息香酸、グルタミン酸、パントテン酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、フマル酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、シュウ酸またはマレイン酸である。いくつかの実施形態では、酸塩は、アセタート、アジパート、ベンゾアート、ベンゼンスルホナート、ブチラート、シトラート、ジグルコナート、ドデシルスルファート、ホルマート、フマラート、グリコラート、ヘミスルファート、ヘプタノアート、ヘキサノアート、ヒドロクロリド、ヒドロブロミド、ヒドロヨージド、ラクタート、マレアート、マロナート、メタンスルホナート、２－ナフタレンスルホナート、ニコチナート、ニトラート、パルモアート、ホスファート、ピクラート、ピバラート、プロピオナート、サリチラート、スクシナート、スルファート、タータラート、トシラートまたはウンデカノアートである。
【0085】
いくつかの実施形態では、塩は、塩酸塩（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｓａｌｔ）、臭化水素酸塩（ｈｙｄｒｏｂｒｏｍｉｄｅ ｓａｌｔ）、ヨウ化水素酸塩（ｈｙｄｒｏｉｏｄｉｄｅ ｓａｌｔ）、硝酸塩（ｎｉｔｒａｔｅ ｓａｌｔ）、亜硝酸塩（ｎｉｔｒｉｔｅ ｓａｌｔ）、硫酸塩（ｓｕｌｆａｔｅ ｓａｌｔ）、亜硫酸塩（ｓｕｌｆｉｔｅ ｓａｌｔ）、リン酸塩（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓａｌｔ）、イソニコチン酸塩、乳酸塩（ｌａｃｔａｔｅ ｓａｌｔ）、サリチル酸塩（ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ ｓａｌｔ）、酒石酸塩（ｔａｒｔｒａｔｅ ｓａｌｔ）、アスコルビン酸塩（ａｓｃｏｒｂａｔｅ ｓａｌｔ）、ゲンチシン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ ｓａｌｔ）、グルコン酸塩（ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、グルクロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、糖酸塩（ｓａｃｃａｒａｔｅ ｓａｌｔ）、ギ酸塩（ｆｏｒｍａｔｅ ｓａｌｔ）、安息香酸塩（ｂｅｎｚｏａｔｅ ｓａｌｔ）、グルタミン酸塩（ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｓａｌｔ）、パントテン酸塩（ｐａｎｔｏｔｈｅｎａｔｅ ｓａｌｔ）、酢酸塩（ａｃｅｔａｔｅ ｓａｌｔ）、プロピオン酸塩（ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、酪酸塩（ｂｕｔｙｒａｔｅ ｓａｌｔ）、フマル酸塩（ｆｕｍａｒａｔｅ ｓａｌｔ）、コハク酸塩（ｓｕｃｃｉｎａｔｅ ｓａｌｔ）、メタンスルホン酸（メシル酸）塩（ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ（ｍｅｓｙｌａｔｅ）ｓａｌｔ）、エタンスルホン酸塩（ｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、ベンゼンスルホン酸塩（ｂｅｎｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、ｐ－トルエンスルホン酸塩（ｐ－ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ ｓａｌｔ）、クエン酸塩（ｃｉｔｒａｔｅ ｓａｌｔ）、シュウ酸塩（ｏｘａｌａｔｅ ｓａｌｔ）またはマレイン酸塩（ｍａｌｅａｔｅ ｓａｌｔ）である。
【0086】
塩基付加塩は、本発明の化合物に塩基が付加されて生じ得る。いくつかの実施形態では、塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アルカリ液、水酸化カルシウムまたは水酸化マグネシウムである。いくつかの実施形態では、塩基は、アルカリメタケイ酸塩（ａｌｋａｌｉ ｍｅｔａｓｉｌｉｃａｔｅ）、アルカリ金属水酸化物、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、過炭酸ナトリウム、過ケイ酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｐｅｒｓｉｌｉｃａｔｅ）またはメタ重亜硫酸カリウムである。
【0087】
本発明の化合物の純度
本明細書のいずれの化合物も精製することができる。本明細書の化合物は、少なくとも１％純粋、少なくとも２％純粋、少なくとも３％純粋、少なくとも４％純粋、少なくとも５％純粋、少なくとも６％純粋、少なくとも７％純粋、少なくとも８％純粋、少なくとも９％純粋、少なくとも１０％純粋、少なくとも１１％純粋、少なくとも１２％純粋、少なくとも１３％純粋、少なくとも１４％純粋、少なくとも１５％純粋、少なくとも１６％純粋、少なくとも１７％純粋、少なくとも１８％純粋、少なくとも１９％純粋、少なくとも２０％純粋、少なくとも２１％純粋、少なくとも２２％純粋、少なくとも２３％純粋、少なくとも２４％純粋、少なくとも２５％純粋、少なくとも２６％純粋、少なくとも２７％純粋、少なくとも２８％純粋、少なくとも２９％純粋、少なくとも３０％純粋、少なくとも３１％純粋、少なくとも３２％純粋、少なくとも３３％純粋、少なくとも３４％純粋、少なくとも３５％純粋、少なくとも３６％純粋、少なくとも３７％純粋、少なくとも３８％純粋、少なくとも３９％純粋、少なくとも４０％純粋、少なくとも４１％純粋、少なくとも４２％純粋、少なくとも４３％純粋、少なくとも４４％純粋、少なくとも４５％純粋、少なくとも４６％純粋、少なくとも４７％純粋、少なくとも４８％純粋、少なくとも４９％純粋、少なくとも５０％純粋、少なくとも５１％純粋、少なくとも５２％純粋、少なくとも５３％純粋、少なくとも５４％純粋、少なくとも５５％純粋、少なくとも５６％純粋、少なくとも５７％純粋、少なくとも５８％純粋、少なくとも５９％純粋、少なくとも６０％純粋、少なくとも６１％純粋、少なくとも６２％純粋、少なくとも６３％純粋、少なくとも６４％純粋、少なくとも６５％純粋、少なくとも６６％純粋、少なくとも６７％純粋、少なくとも６８％純粋、少なくとも６９％純粋、少なくとも７０％純粋、少なくとも７１％純粋、少なくとも７２％純粋、少なくとも７３％純粋、少なくとも７４％純粋、少なくとも７５％純粋、少なくとも７６％純粋、少なくとも７７％純粋、少なくとも７８％純粋、少なくとも７９％純粋、少なくとも８０％純粋、少なくとも８１％純粋、少なくとも８２％純粋、少なくとも８３％純粋、少なくとも８４％純粋、少なくとも８５％純粋、少なくとも８６％純粋、少なくとも８７％純粋、少なくとも８８％純粋、少なくとも８９％純粋、少なくとも９０％純粋、少なくとも９１％純粋、少なくとも９２％純粋、少なくとも９３％純粋、少なくとも９４％純粋、少なくとも９５％純粋、少なくとも９６％純粋、少なくとも９７％純粋、少なくとも９８％純粋、少なくとも９９％純粋、少なくとも９９．１％純粋、少なくとも９９．２％純粋、少なくとも９９．３％純粋、少なくとも９９．４％純粋、少なくとも９９．５％純粋、少なくとも９９．６％純粋、少なくとも９９．７％純粋、少なくとも９９．８％純粋または少なくとも９９．９％純粋とすることができる。
本明細書のいずれの化合物も精製することができる。本明細書の化合物は、少なくとも１％純粋、少なくとも２％純粋、少なくとも３％純粋、少なくとも４％純粋、少なくとも５％純粋、少なくとも６％純粋、少なくとも７％純粋、少なくとも８％純粋、少なくとも９％純粋、少なくとも１０％純粋、少なくとも１１％純粋、少なくとも１２％純粋、少なくとも１３％純粋、少なくとも１４％純粋、少なくとも１５％純粋、少なくとも１６％純粋、少なくとも１７％純粋、少なくとも１８％純粋、少なくとも１９％純粋、少なくとも２０％純粋、少なくとも２１％純粋、少なくとも２２％純粋、少なくとも２３％純粋、少なくとも２４％純粋、少なくとも２５％純粋、少なくとも２６％純粋、少なくとも２７％純粋、少なくとも２８％純粋、少なくとも２９％純粋、少なくとも３０％純粋、少なくとも３１％純粋、少なくとも３２％純粋、少なくとも３３％純粋、少なくとも３４％純粋、少なくとも３５％純粋、少なくとも３６％純粋、少なくとも３７％純粋、少なくとも３８％純粋、少なくとも３９％純粋、少なくとも４０％純粋、少なくとも４１％純粋、少なくとも４２％純粋、少なくとも４３％純粋、少なくとも４４％純粋、少なくとも４５％純粋、少なくとも４６％純粋、少なくとも４７％純粋、少なくとも４８％純粋、少なくとも４９％純粋、少なくとも５０％純粋、少なくとも５１％純粋、少なくとも５２％純粋、少なくとも５３％純粋、少なくとも５４％純粋、少なくとも５５％純粋、少なくとも５６％純粋、少なくとも５７％純粋、少なくとも５８％純粋、少なくとも５９％純粋、少なくとも６０％純粋、少なくとも６１％純粋、少なくとも６２％純粋、少なくとも６３％純粋、少なくとも６４％純粋、少なくとも６５％純粋、少なくとも６６％純粋、少なくとも６７％純粋、少なくとも６８％純粋、少なくとも６９％純粋、少なくとも７０％純粋、少なくとも７１％純粋、少なくとも７２％純粋、少なくとも７３％純粋、少なくとも７４％純粋、少なくとも７５％純粋、少なくとも７６％純粋、少なくとも７７％純粋、少なくとも７８％純粋、少なくとも７９％純粋、少なくとも８０％純粋、少なくとも８１％純粋、少なくとも８２％純粋、少なくとも８３％純粋、少なくとも８４％純粋、少なくとも８５％純粋、少なくとも８６％純粋、少なくとも８７％純粋、少なくとも８８％純粋、少なくとも８９％純粋、少なくとも９０％純粋、少なくとも９１％純粋、少なくとも９２％純粋、少なくとも９３％純粋、少なくとも９４％純粋、少なくとも９５％純粋、少なくとも９６％純粋、少なくとも９７％純粋、少なくとも９８％純粋、少なくとも９９％純粋、少なくとも９９．１％純粋、少なくとも９９．２％純粋、少なくとも９９．３％純粋、少なくとも９９．４％純粋、少なくとも９９．５％純粋、少なくとも９９．６％純粋、少なくとも９９．７％純粋、少なくとも９９．８％純粋または少なくとも９９．９％純粋とすることができる。
【0088】
本発明の医薬組成物
本発明の医薬組成物は、本明細書に記載の任意の医薬化合物と、担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤および／または賦形剤などの他の化学成分との組合せとすることができる。医薬組成物は、生物への化合物の投与を容易にする。医薬組成物は、例えば、静脈内、皮下、筋肉内、経口、非経口、眼内、皮下、経皮、経鼻、膣内および局所投与を含む様々な形態および経路により、医薬組成物として治療有効量で投与することができる。
本発明の医薬組成物は、本明細書に記載の任意の医薬化合物と、担体、安定剤、希釈剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤および／または賦形剤などの他の化学成分との組合せとすることができる。医薬組成物は、生物への化合物の投与を容易にする。医薬組成物は、例えば、静脈内、皮下、筋肉内、経口、非経口、眼内、皮下、経皮、経鼻、膣内および局所投与を含む様々な形態および経路により、医薬組成物として治療有効量で投与することができる。
【0089】
医薬組成物は、局所的に、例えば、化合物を臓器に直接注射することにより、場合によりデポ製剤もしくは徐放性製剤またはインプラントとして投与することができる。医薬組成物は、速放性製剤の形態、持続放出製剤の形態または中間放出（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ ｒｅｌｅａｓｅ）製剤の形態で提供することができる。速放性形態は即時放出を提供することができる。持続放出製剤は、制御放出または持続遅延放出を提供することができる。
【0090】
経口投与の場合、活性化合物と薬学的に許容される担体または賦形剤とを組み合わせることによって、医薬組成物を製剤化することができる。そのような担体を使用して、対象による経口摂取のために、液剤、ゲル剤、シロップ剤、エリキシル剤、スラリーまたは懸濁液を製剤化することができる。経口用溶解性製剤に使用される溶媒の非限定的な例には、水、エタノール、イソプロパノール、食塩水、生理食塩水、ＤＭＳＯ、ジメチルホルムアミド、リン酸カリウム緩衝液、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、リン酸ナトリウム緩衝液、４－２－ヒドロキシエチル－１－ピペラジンエタンスルホン酸緩衝液（ＨＥＰＥＳ）、３－（Ｎ－モルホリノ）プロパンスルホン酸緩衝液（ＭＯＰＳ）、ピペラジン－Ｎ、Ｎ’－ビス（２－エタンスルホン酸）緩衝液（ＰＩＰＥＳ）および食塩クエン酸ナトリウム緩衝液（ＳＳＣ）が挙げられ得る。経口用溶解性製剤に使用される共溶媒の非限定的な例には、スクロース、尿素、クレマフォール、ＤＭＳＯおよびリン酸カリウム緩衝液が挙げられ得る。
【0091】
医薬製剤は静脈内投与用に製剤化することができる。医薬組成物は、油性または水性ビヒクル中の滅菌懸濁液、溶液またはエマルジョンとしての非経口注射に適した形態とすることができ、懸濁剤、安定剤および／または分散剤などの調合剤を含有することができる。非経口投与用の医薬製剤は、水溶性形態の活性化合物の水溶液を含む。活性化合物の懸濁液は、油性注射懸濁液として調製することができる。好適な親油性溶媒またはビヒクルには、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームが挙げられる。また、懸濁液は、化合物の溶解度を高めて高濃度溶液の調製を可能にする好適な安定剤または薬剤を含有することもできる。あるいは、活性成分は、使用前に好適なビヒクル、例えば、滅菌パイロジェンフリー水を用いて構成するための粉末形態とすることができる。
【0092】
活性化合物は局所投与することができ、溶液、懸濁液、ローション、ゲル、ペースト、薬用スティック、バーム、クリームおよび軟膏などの様々な局所投与組成物に製剤化することができる。そのような医薬組成物は、可溶化剤、安定剤、等張化促進剤、緩衝液および保存剤を含有することができる。
【0093】
化合物は、組成物の吸入用に製剤化することができる。いくつかの実施形態では、化合物は鼻腔内投与によって投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、溶液、懸濁液または乾燥粉末として投与される。
【0094】
化合物は、エアロゾルとして気道に直接投与することができる。いくつかの実施形態では、化合物は、好適な噴射剤および補助剤とともに加圧エアロゾル容器に包装される。いくつかの実施形態では、噴射剤は、プロパン、ブタンまたはイソブテンなどの炭化水素噴射剤である。いくつかの実施形態では、エアロゾル製剤は、共溶媒、安定剤、界面活性剤、酸化防止剤、潤滑剤およびｐＨ調整剤などの他の成分を含むことができる。エアロゾル製剤は、定量吸入器を用いて投与することができる。
【0095】
化合物は、肺サーファクタント製剤の形態で投与することができる。いくつかの実施形態では、肺サーファクタント製剤は、Ｉｎｆｒａｓｕｒｆ（登録商標）、Ｓｕｒｖａｎｔａ（登録商標）、Ｃｕｒｏｓｕｒｆ（登録商標）、または合成肺サーファクタント製剤、例えば、Ｅｘｏｓｕｒｆ（登録商標）および人工肺拡張化合物（ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｌｕｎｇ ｅｘｐａｎｄｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄ：ＡＬＥＣ）である。いくつかの実施形態では、サーファクタント製剤は、気道点滴を介して（すなわち、挿管後に）または気管内に投与される。
【0096】
化合物は、吸入可能な粉末として投与することができる。いくつかの実施形態では、化合物は、吸入可能な乾燥粉末として投与することができる。いくつかの実施形態では、粉末製剤は、単糖類（例えば、グルコース、アラビノース）、二糖類（例えば、ラクトース、サッカロース、マルトース）、オリゴ糖類または多糖類（例えば、デキストラン）、多価アルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール、キシリトール）、塩（例えば、塩化ナトリウム、炭酸カルシウム）またはそれらの任意の組合せなどの薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。いくつかの実施形態では、化合物は、ネブライザーまたはアトマイザーを用いて非加圧形態で投与される。
【0097】
いくつかの実施形態では、化合物１は吸入によって投与される。いくつかの実施形態では、化合物１および追加の薬剤は吸入によって投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は吸入によって投与され、追加の薬剤は強制経口投与によって投与される。
【0098】
吸入乾燥粉末として化合物１を送達すると、肺に局所送達され、全身薬物曝露が低減し、副作用が減少する。いくつかの実施形態では、全身薬物曝露が低減すると、出血、消化管の副作用、肝毒性、体液貯留もしくは浮腫、好中球減少症もしくは白血球減少症、貧血、または感染のリスクを低下させることができる。いくつかの実施形態では、全身薬物曝露が低減すると、悪心、嘔吐または下痢などの消化管の副作用のリスクを低下させることができる。
【0099】
いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、約２０重量％、約２５重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％、約７０重量％、約７５重量％、約８０重量％、約８５重量％、約９０重量％または約９５重量％の化合物１を含有することができる。いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約４０重量％、約５０重量％または約６０重量％の化合物１を含有することができる。いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、約２０重量％、約２５重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％、約７０重量％、約７５重量％、約８０重量％、約８５重量％、約９０重量％または約９５重量％のロイシンを含有することができる。いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約４０重量％、約５０重量％または約６０重量％のロイシンを含有することができる。いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約５０重量％の化合物１および約５０重量％のロイシンを含有することができる。
【0100】
いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％または約９５％の脂質ベースの界面活性剤を含有することができる。いくつかの実施形態では、吸入乾燥粉末製剤は、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホリルコリン（ＤＭＰＣ）またはリポソームを含有することができる。
【0101】
化合物１およびロイシンの噴霧乾燥粉末製剤は、吸入に適した粒径を有することができる。いくつかの実施形態では、Ｎｅｘｔ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＮＧＩ）を用いたカスケードインパクション（ｃａｓｃａｄｅ ｉｍｐａｃｔｉｏｎ）によって測定される粒子の空気動力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）は、幾何標準偏差（ＧＳＤ）１．５～３．５で１．９～３．８ミクロンの範囲内とすることができる。いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは、約１ミクロン、約１．５ミクロン、約２ミクロン、約２．５ミクロン、約３ミクロン、約３．５ミクロン、約４ミクロン、約４．５ミクロン、約５ミクロン、約５．５ミクロン、約６ミクロン、約６．５ミクロン、約７ミクロン、約７．５ミクロン、約８ミクロン、約８．５ミクロン、約９ミクロン、約９．５ミクロン、約１０ミクロン、約１１ミクロン、約１２ミクロン、約１３ミクロン、約１４ミクロン、約１５ミクロン、約１６ミクロン、約１７ミクロン、約１８ミクロン、約１９ミクロンまたは約２０ミクロンである。いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは約１ミクロンである。いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは約２ミクロン～約２．５ミクロンである。いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは約２ミクロンであり、いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは約２．５ミクロンである。いくつかの実施形態では、ＭＭＡＤは約５ミクロン未満である。
【0102】
本明細書に提供される治療方法または使用方法を実施する際には、治療すべき疾患または症状を有する対象に、医薬組成物中の本明細書に記載の治療有効量の化合物を投与する。いくつかの実施形態では、対象はヒトなどの哺乳動物である。治療有効量は、疾患の重篤度、対象の年齢および相対的健康状態、使用される化合物の効力、ならびに他の因子に応じて大きく異なり得る。
【0103】
医薬組成物は、薬学的に使用することができる製剤に活性化合物を加工するのを容易にする賦形剤および助剤を含む１つ以上の生理学的に許容される担体を用いて製剤化することができる。選択した投与経路に応じて、製剤を改質することができる。本明細書に記載の化合物を含む医薬組成物は、例えば、混合、溶解、乳化、カプセル化、封入または圧縮加工によって製造することができる。
【0104】
医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤、および遊離塩基または薬学的に許容される塩の形態として本明細書に記載の化合物を含むことができる。医薬組成物は、可溶化剤、安定剤、等張化促進剤、緩衝液および保存剤を含有することができる。
【0105】
本明細書に記載の化合物を含む組成物の調製方法は、１つ以上の不活性の薬学的に許容される賦形剤または担体とともに化合物を製剤化して、固体、半固体または液体組成物を形成することを含む。固体組成物には、例えば、粉末剤、錠剤、分散性顆粒剤、カプセル剤およびカシェ剤が挙げられる。液体組成物には、例えば、化合物が溶解された溶液、化合物を含むエマルジョン、または本明細書に開示される化合物を含むリポソーム、ミセルもしくはナノ粒子を含有する溶液が挙げられる。半固体組成物には、例えば、ゲル、懸濁液およびクリームが挙げられる。組成物は、液体溶液もしくは懸濁液、使用前に液体に溶解もしくは懸濁するのに適した固体形態、またはエマルジョンとすることができる。これらの組成物はまた、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤および他の薬学的に許容される添加剤などの少量の無毒性の補助物質を含有することができる。
【0106】
本発明に使用するのに適した剤形の非限定的な例には、液剤、粉末剤、ゲル剤、ナノ懸濁液、ナノ粒子、ミクロゲル、水性または油性懸濁液、エマルジョンおよびそれらの任意の組合せが挙げられる。
【0107】
本発明に使用するのに適した薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例には、結合剤、崩壊剤、付着防止剤（ａｎｔｉ－ａｄｈｅｒｅｎｔ）、帯電防止剤、界面活性剤、酸化防止剤、被覆剤、着色剤、可塑剤、保存剤、懸濁剤、乳化剤、抗菌剤、球形化剤（ｓｐｈｅｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）およびそれらの任意の組合せが挙げられる。
【0108】
いくつかの実施形態では、製剤は、トリプトファン、チロシン、ロイシン、トリロイシン（ｔｒｉｌｅｕｃｉｎｅ）、イソロイシンおよびフェニルアラニンからなる群から選択される疎水性アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約１０重量％、約２０重量％、約３０重量％、約４０重量％、約５０重量％、約６０重量％、約７０重量％、約８０重量％または約９０重量％の疎水性アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、本発明の製剤はロイシンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約３０重量％、約４０重量％、約５０重量％、約６０重量％、約７０重量％のロイシンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約５０重量％のロイシンを含む。いくつかの実施形態では、本発明の製剤はトリロイシンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％または約７０重量％のトリロイシンを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約５０重量％のトリロイシンを含む。
【0109】
いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約１０重量％、約１５重量％、約２０重量％、約２５重量％、約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０％重量、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％、約７０重量％、約７５重量％、約８０重量％、約８５重量％、約９０重量％または約９５重量％の脂質などの脂質生成物を含む。いくつかの実施形態では、製剤は、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＭＰＣまたはリポソームを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％または約７０重量％のＤＳＰＣを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％または約７０重量％のＤＰＰＣを含む。いくつかの実施形態では、製剤は、組成物の約３０重量％、約３５重量％、約４０重量％、約４５重量％、約５０重量％、約５５重量％、約６０重量％、約６５重量％または約７０重量％のＤＭＰＣを含む。
【0110】
本発明の組成物は、例えば、即時放出形態または制御放出製剤とすることができる。即時放出製剤は、化合物が迅速に作用することを可能にするように製剤化することができる。即時放出製剤の非限定的な例には、容易に溶解する製剤が挙げられる。制御放出製剤は、活性剤の放出速度および放出プロファイルが生理学的および時間治療的（ｃｈｒｏｎｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）要件に合致し得るように適合されているか、あるいはプログラムされた速度で活性剤を放出するように製剤化されている医薬製剤とすることができる。制御放出製剤の非限定的な例には、顆粒剤、遅延放出顆粒剤、ヒドロゲル（例えば、合成または天然起源のもの）、他のゲル化剤（例えば、ゲル形成食物繊維）、マトリックスベースの製剤（例えば、分散した少なくとも１つの活性成分を有するポリマー材料を含む製剤）、マトリックス内の顆粒、ポリマー混合物および顆粒塊が挙げられる。
【0111】
いくつかでは、制御放出製剤は遅延放出形態である。遅延放出形態は、化合物の作用を長期間遅延させるように製剤化することができる。遅延放出形態は、例えば、約４時間、約８時間、約１２時間、約１６時間または約２４時間にわたり、有効量の１つ以上の化合物の放出を遅延させるように製剤化することができる。
【0112】
制御放出製剤は徐放性形態とすることができる。徐放性形態は、例えば、化合物の作用を長期間持続するように製剤化することができる。徐放性形態は、約４時間、約８時間、約１２時間、約１６時間または約２４時間にわたり、本明細書に記載の任意の化合物の有効量を提供する（例えば、生理学的に有効な血液プロファイルを提供する）ように製剤化することができる。
【0113】
薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例は、例えば、いずれも参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ Ｅｄ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）；Ｈｏｏｖｅｒ，Ｊｏｈｎ Ｅ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １９７５；Ｌｉｂｅｒｍａｎ，Ｈ．Ａ．ａｎｄ Ｌａｃｈｍａｎ，Ｌ．，Ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｃｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８０；およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓｅｖｅｎｔｈ Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ１９９９）に見出すことができる。
【0114】
投与方法
任意の順序でまたは同時に複数の治療剤を投与することができる。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、追加の治療剤と組み合わせて、追加の治療剤の前に、または追加の治療剤の後に投与される。同時投与の場合、複数の治療剤は、単一の統一された形態で、または複数の形態で、例えば複数の別個の丸剤として提供することができる。薬剤は、単一の包装または複数の包装に一緒にまたは別個に包装することができる。１つまたは全部の治療剤を複数回投与することができる。同時投与ではない場合、複数回投与の間のタイミングは、約１カ月程度まで変動させることができる。
任意の順序でまたは同時に複数の治療剤を投与することができる。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、追加の治療剤と組み合わせて、追加の治療剤の前に、または追加の治療剤の後に投与される。同時投与の場合、複数の治療剤は、単一の統一された形態で、または複数の形態で、例えば複数の別個の丸剤として提供することができる。薬剤は、単一の包装または複数の包装に一緒にまたは別個に包装することができる。１つまたは全部の治療剤を複数回投与することができる。同時投与ではない場合、複数回投与の間のタイミングは、約１カ月程度まで変動させることができる。
【0115】
いくつかの実施形態では、化合物１は第２の薬剤の前に投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は、ＰＤＥＶ阻害剤またはＥＴ受容体拮抗薬の投与前に投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は、ＰＤＥＶ阻害剤およびＥＴ受容体拮抗薬の投与前に投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は第１の薬剤の投与後に投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は、ＰＤＥＶ阻害剤またはＥＴ受容体拮抗薬の投与後に投与される。いくつかの実施形態では、化合物１は、ＰＤＥＶ阻害剤およびＥＴ受容体拮抗薬の投与後に投与される。
【0116】
本明細書に記載の治療剤は、疾患または症状の発生前、発生中または発生後に投与することができ、治療剤を含有する組成物を投与するタイミングは変化させることができる。例えば、組成物は予防薬として使用することができ、疾患または症状の発生の可能性を低下させるために、症状または疾患が発生しやすい対象に連続投与することができる。組成物は、症状の発症中、または症状の発症後できるだけ早く対象に投与することができる。治療剤の投与は、症状の発症の最初の４８時間以内、症状の発症の最初の２４時間以内、症状の発症の最初の６時間以内または症状の発症の３時間以内に開始することができる。初期投与は、本明細書に記載の任意の製剤を用いた本明細書に記載の任意の経路によるなど、現場での任意の経路を介するものとすることができる。治療剤は、疾患または症状の発症が検出されたか疑われた後に実施可能になり次第、かつ例えば、約１カ月から約３カ月までなどの疾患の治療に必要な期間にわたって投与することができる。治療期間は各対象によって異なり得る。
【0117】
本明細書に提供される医薬組成物は、他の療法、例えば、化学療法、放射線療法、外科手術、抗炎症薬および選択されたビタミンと組み合わせて投与することができる。他の薬剤は、医薬組成物の前、後、またはそれと同時に投与することができる。
【0118】
意図する投与方法に応じて、医薬組成物は、例えば、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形の錠剤、坐剤、丸剤、カプセル剤、粉末剤、液剤、懸濁剤、ローション剤、クリーム剤またはゲル剤などの固体、半固体または液体剤形の形態とすることができる。
【0119】
固体組成物の場合、無毒性の固体担体には、例えば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロースおよび炭酸マグネシウムが挙げられる。
【0120】
本開示の組成物との組合せに適した薬学的に活性な薬剤の非限定的な例には、抗感染症薬、すなわち、アミノグリコシド、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗コリン薬／鎮痙薬、抗糖尿病薬、抗高血圧薬、抗悪性腫瘍薬、心血管治療薬、中枢神経系作用薬、凝固調節剤、ホルモン、免疫薬、免疫抑制薬および点眼剤が挙げられる。
【0121】
本開示での使用に適した剤形の非限定的な例には、液剤、エリキシル剤、ナノ懸濁液、水性または油性懸濁液、滴剤、シロップ剤およびそれらの任意の組合せが挙げられる。本開示での使用に適した薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例には、造粒剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、甘味剤、滑剤、付着防止剤、帯電防止剤、界面活性剤、酸化防止剤、ガム、被覆剤、着色剤、香味剤、被覆剤、可塑剤、保存剤、懸濁剤、乳化剤、植物セルロース系材料および球形化剤ならびにそれらの任意の組合せが挙げられる。
【0122】
リポソーム技術を介して化合物を送達することができる。薬物担体としてリポソームを使用すると、化合物の治療指数を増大させることができる。リポソームは天然リン脂質から構成され、界面活性剤特性を有する混合脂質鎖を含むことができる（例えば、卵ホスファチジルエタノールアミン）。リポソーム設計では、病的な組織に付着するために表面リガンドを使用することができる。リポソームの非限定的な例には、多重層ベシクル（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ：ＭＬＶ）、小型単層ベシクル（ｓｍａｌｌ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ：ＳＵＶ）および大型単層ベシクル（ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ：ＬＵＶ）が挙げられる。リポソームの物理化学的特性を調節して、生物学的障壁を通る浸透と投与部位での保持とを最適化し、早期分解と非標的組織に対する毒性とを発現する可能性を低下させることができる。最適なリポソーム特性は投与経路に応じて決まる。大きなサイズのリポソームは局所注射時に良好な保持力を示し、小さなサイズのリポソームはパッシブターゲティングを達成するのに適している。ＰＥＧ化は、肝臓および脾臓によるリポソームの取り込みを減少させ、循環時間を増加させ、その結果、血管透過性滞留性亢進（ＥＰＲ）効果のために炎症部位での局在化が増大する。
さらに、リポソーム表面を修飾して、特異的な標的細胞にカプセル化薬物を選択的に送達することができる。ターゲティングリガンドの非限定的な例には、疾患に関連する細胞の表面に濃縮された受容体に特異的なモノクローナル抗体、ビタミン、ペプチドおよび多糖類が挙げられる。
さらに、リポソーム表面を修飾して、特異的な標的細胞にカプセル化薬物を選択的に送達することができる。ターゲティングリガンドの非限定的な例には、疾患に関連する細胞の表面に濃縮された受容体に特異的なモノクローナル抗体、ビタミン、ペプチドおよび多糖類が挙げられる。
【0123】
本発明の組成物はキットとして包装することができる。いくつかの実施形態では、キットは、組成物の投与／使用に関する取扱説明書を含む。書面による資料は、例えば、ラベルとすることができる。書面による資料は、投与の条件方法を示唆することができる。説明書は、対象および担当医師に、治療の適用から最適な臨床転帰を達成するための最良の指針を提供する。書面による資料はラベルとすることができる。いくつかの実施形態では、ラベルは、規制機関、例えば、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）、欧州医薬品庁（ＥＭＡ）または他の規制機関によって承認され得る。いくつかの実施形態では、キットは、吸入器、アトマイザーまたはネブライザーなどの吸入送達装置を含む。いくつかの実施形態では、キットは、密封ブリスターパック内に粉末の吸入用カプセルを含む。
【0124】
投与
本明細書に記載の医薬組成物は、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形とすることができる。単位剤形では、製剤は、適切な量の１つ以上の化合物を含有する単位用量に分けられる。単位投与量は、別個の量の製剤を含有する包装の形態とすることができる。非限定的な例は、バイアルまたはアンプル内の液剤である。水性懸濁液組成物は、単回投与用の再密閉できない容器に包装することができる。複数回投与用の再密閉可能な容器は、例えば保存剤と組み合わせて使用することができる。非経口注射用の製剤は、アンプルなどの単位剤形で、または保存剤を含む複数回投与用の容器で提供することができる。
本明細書に記載の医薬組成物は、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形とすることができる。単位剤形では、製剤は、適切な量の１つ以上の化合物を含有する単位用量に分けられる。単位投与量は、別個の量の製剤を含有する包装の形態とすることができる。非限定的な例は、バイアルまたはアンプル内の液剤である。水性懸濁液組成物は、単回投与用の再密閉できない容器に包装することができる。複数回投与用の再密閉可能な容器は、例えば保存剤と組み合わせて使用することができる。非経口注射用の製剤は、アンプルなどの単位剤形で、または保存剤を含む複数回投与用の容器で提供することができる。
【0125】
本明細書に記載の化合物は、組成物中に約１ｍｇ～約５００ｍｇの範囲で存在することができる。本明細書に記載の化合物は、組成物中に、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇまたは約５００ｍｇの量で存在することができる。
【0126】
いくつかの実施形態では、用量は、対象の体重で割った薬物の量、例えば、対象の体重１キログラム当たりの薬物のミリグラム数を用いて表すことができる。いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、約５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、２５０ｍｇ／ｋｇ～約２０００ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ～約８００ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ～約４００ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ～約３００ｍｇ／ｋｇまたは約１５０ｍｇ／ｋｇ～約２００ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与される。
【0127】
いくつかの実施形態では、化合物１の用量は、約２．５ｍｇ～約１００ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、化合物１の用量は、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇまたは約１００ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、化合物１の用量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇまたは約０．９ｍｇ／ｋｇとすることができる。いくつかの実施形態では、本発明は、約０．５ｍｇ／ｋｇまたは約０．６ｍｇ／ｋｇの化合物１の投与を記載する。いくつかの実施形態では、化合物１の用量は約１０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ある用量の化合物１を１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与することができる。
【0128】
いくつかの実施形態では、ＰＤＥＶ阻害剤の用量は、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇまたは約５０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ＰＤＥＶ阻害剤の用量は約２０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ＰＤＥＶ阻害剤の用量は約４０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ある用量のＰＤＥＶ阻害剤を１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与することができる。いくつかの実施形態では、２０ｍｇのＰＤＥＶ阻害剤を１日３回投与する。いくつかの実施形態では、４０ｍｇのＰＤＥＶ阻害剤を１日１回投与する。
【0129】
いくつかの実施形態では、ＥＴ拮抗薬の用量は、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇまたは約２０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ＥＴ拮抗薬の用量は約５ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ＥＴ拮抗薬の用量は約１０ｍｇとすることができる。いくつかの実施形態では、ある用量のＥＴ拮抗薬を１日１回、１日２回、１日３回または１日４回投与することができる。いくつかの実施形態では、５ｍｇのＥＴ拮抗薬を１日１回投与する。いくつかの実施形態では、１０ｍｇのＥＴ拮抗薬を１日１回投与する。いくつかの実施形態では、５ｍｇのＥＴ拮抗薬を１日２回投与する。
【0130】
いくつかの実施形態では、本発明は、約１ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇまたは約２０ｍｇ／ｋｇのＰＤＥＶ阻害剤、ＥＴ受容体拮抗薬の投与を記載する。いくつかの実施形態では、本発明は、約１０ｍｇ／ｋｇのＰＤＥＶ阻害剤の投与を記載する。いくつかの実施形態では、本発明は、約１０ｍｇ／ｋｇのＥＴ受容体拮抗薬の投与を記載する。
【0131】
薬物動態学的および薬力学的測定
薬物動態学的および薬力学的プロファイル成分を用いて、本明細書に開示されている製剤を説明することができる。いくつかの実施形態では、特定の製剤は、以下のパラメータのいずれかまたはそれらの組合せによって説明することができる。
ｉ）ｋ１０：（一次）消失速度定数
ｉｉ）ｋ１２：中央コンパートメントから末梢コンパートメントへの移行速度
ｉｉｉ）ｋ２１：末梢コンパートメントから中央コンパートメントへの移行速度
ｉｖ）ｔ１／２α：分布半減期（ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｖｅ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ）
ｖ）ｔ１／２β：排出半減期
ｖｉ）ｔ１／２ｋａ：吸収半減期
ｖｉｉ）Ｖ／Ｆ：血管外投与後の薬物の見かけの分布容積
ｖｉｉｉ）ＣＬ／Ｆ：血管外投与後の薬物の見かけの血漿クリアランス
ｉｘ）Ｖ２／Ｆ：中央コンパートメントの分布容積
ｘ）ＣＬ２／Ｆ：見かけのコンパートメント間クリアランス
ｘｉ）Ｃｍａｘ：定常状態での最高血漿中濃度
ｘｉｉ）Ｔｍａｘ：Ｃｍａｘまでの時間
ｘｉｉｉ）ＡＵＣ０－ｔ：０から最後の定量可能な濃度の時点までの血漿中濃度－時間曲線下面積
ｘｉｖ）ＡＵＣ０－ｉｎｆ：０から無限大まで外挿された血漿中濃度－時間曲線下面積
ｘｖ）ＡＵＭＣ：一次モーメント－時間曲線下総面積、または
ｘｖｉ）ＭＲＴ：平均滞留時間
薬物動態学的および薬力学的プロファイル成分を用いて、本明細書に開示されている製剤を説明することができる。いくつかの実施形態では、特定の製剤は、以下のパラメータのいずれかまたはそれらの組合せによって説明することができる。
ｉ）ｋ１０：（一次）消失速度定数
ｉｉ）ｋ１２：中央コンパートメントから末梢コンパートメントへの移行速度
ｉｉｉ）ｋ２１：末梢コンパートメントから中央コンパートメントへの移行速度
ｉｖ）ｔ１／２α：分布半減期（ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｖｅ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ）
ｖ）ｔ１／２β：排出半減期
ｖｉ）ｔ１／２ｋａ：吸収半減期
ｖｉｉ）Ｖ／Ｆ：血管外投与後の薬物の見かけの分布容積
ｖｉｉｉ）ＣＬ／Ｆ：血管外投与後の薬物の見かけの血漿クリアランス
ｉｘ）Ｖ２／Ｆ：中央コンパートメントの分布容積
ｘ）ＣＬ２／Ｆ：見かけのコンパートメント間クリアランス
ｘｉ）Ｃｍａｘ：定常状態での最高血漿中濃度
ｘｉｉ）Ｔｍａｘ：Ｃｍａｘまでの時間
ｘｉｉｉ）ＡＵＣ０－ｔ：０から最後の定量可能な濃度の時点までの血漿中濃度－時間曲線下面積
ｘｉｖ）ＡＵＣ０－ｉｎｆ：０から無限大まで外挿された血漿中濃度－時間曲線下面積
ｘｖ）ＡＵＭＣ：一次モーメント－時間曲線下総面積、または
ｘｖｉ）ＭＲＴ：平均滞留時間
【0132】
薬物動態学的および薬力学的データは様々な実験技術を用いて得ることができる。いくつかの実施形態では、血漿薬物濃度レベルは、有効な液体クロマトグラフ／質量分析－質量分析（ＬＣ／ＭＳ－ＭＳ）法を用いて決定される。いくつかの実施形態では、薬物動態学的パラメータは、標準的な非コンパートメント法を用いて決定することができる。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０－ｔおよびＡＵＣ０－ｉｎｆは、対数変換データを使用して統計的に分析される。
【0133】
特定の組成物または製剤を説明する適切な薬物動態学的および薬力学的プロファイル成分は、ヒト対象の薬物代謝の変動により変動し得る。薬物動態学的および薬力学的プロファイルは、対象群の平均パラメータの決定に基づき得る。対象群は、代表的な平均を決定するのに適した任意の妥当な数の対象、例えば、５例、１０例、１５例、２０例、２５例、３０例、３５例またはそれ以上を含む。平均は、例えば、測定された各パラメータについて全対象の測定値の平均を計算することによって決定される。本明細書に記載されるように、用量を調節して、所望のまたは有効な血液プロファイルなどの所望の薬物動態学的または薬力学的プロファイルを達成することができる。
【0134】
薬力学的パラメータは、本発明の組成物を説明するのに適した任意のパラメータであり得る。例えば、薬力学的プロファイルは、例えば約０分、約１分、約２分、約３分、約４分、約５分、約６分、約７分、約８分、約９分、約１０分、約１１分、約１２分、約１３分、約１４分、約１５分、約１６分、約１７分、約１８分、約１９分、約２０分、約２１分、約２２分、約２３分、約２４分、約２５分、約２６分、約２７分、約２８分、約２９分、約３０分、約３１分、約３２分、約３３分、約３４分、約３５分、約３６分、約３７分、約３８分、約３９分、約４０分、約４１分、約４２分、約４３分、約４４分、約４５分、約４６分、約４７分、約４８分、約４９分、約５０分、約５１分、約５２分、約５３分、約５４分、約５５分、約５６分、約５７分、約５８分、約５９分、約６０分、約０時間、約０．５時間、約１時間、約１．５時間、約２時間、約２．５時間、約３時間、約３．５時間、約４時間、約４．５時間、約５時間、約５．５時間、約６時間、約６．５時間、約７時間、約７．５時間、約８時間、約８．５時間、約９時間、約９．５時間、約１０時間、約１０．５時間、約１１時間、約１１．５時間、約１２時間、約１２．５時間、約１３時間、約１３．５時間、約１４時間、約１４．５時間、約１５時間、約１５．５時間、約１６時間、約１６．５時間、約１７時間、約１７．５時間、約１８時間、約１８．５時間、約１９時間、約１９．５時間、約２０時間、約２０．５時間、約２１時間、約２１．５時間、約２２時間、約２２．５時間、約２３時間、約２３．５時間または約２４時間の投与後の時点で得ることができる。
【0135】
薬物動態学的パラメータは、化合物または製剤を説明するのに適した任意のパラメータであり得る。Ｃｍａｘは、例えば、約１μｇ／ｍＬ以上、約５μｇ／ｍＬ以上、約１０μｇ／ｍＬ以上、約１５μｇ／ｍＬ以上、約２０μｇ／ｍＬ以上、約２５μｇ／ｍＬ以上、約５０μｇ／ｍＬ以上、約７５μｇ／ｍＬ以上、約１００μｇ／ｍＬ以上、約２００μｇ／ｍＬ以上、約３００μｇ／ｍＬ以上、約４００μｇ／ｍＬ以上、約５００μｇ／ｍＬ以上、約６００μｇ／ｍＬ以上、約７００μｇ／ｍＬ以上、約８００μｇ／ｍＬ以上、約９００μｇ／ｍＬ以上、約１０００μｇ／ｍＬ以上、約１２５０μｇ／ｍＬ以上、約１５００μｇ／ｍＬ以上、約１７５０μｇ／ｍＬ以上、約２０００μｇ／ｍＬ以上、または本明細書に記載の化合物もしくは製剤の薬物動態学的プロファイルを説明するのに適した任意の他のＣｍａｘであり得る。Ｃｍａｘは、例えば、約１μｇ／ｍＬ～約５，０００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約４，５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約４，０００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約３，５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約３，０００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約２，５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約２，０００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１，５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１，０００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約９００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約８００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約７００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約６００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約４５０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約４００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約３５０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約３００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１５０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１２５μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約９０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約８０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約７０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約６０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約３０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約２０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約５μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約４，０００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約３，０００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２，０００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１，５００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１，０００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約９００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約８００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約７００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約６００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約４００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約３００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約４００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約３００μｇ／ｍＬまたは約１００μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬであり得る。
【0136】
本明細書に記載の化合物または製剤のＴｍａｘは、例えば、約０．５時間以下、約１時間以下、約１．５時間以下、約２時間以下、約２．５時間以下、約３時間以下、約３．５時間以下、約４時間以下、約４．５時間以下、約５時間以下、または本明細書に記載の化合物もしくは製剤の薬物動態学的プロファイルを説明するのに適した任意の他のＴｍａｘであり得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物または製剤のＴｍａｘは、約１分以下、約２分、約３分、約４分、約５分、約６分、約７分、約８分、約９分、約１０分、約１５分、約２０分または約２５分である。Ｔｍａｘは、例えば、約０．１時間～約２４時間、約０．１時間～約０．５時間、約０．５時間～約１時間、約１時間～約１．５時間、約１．５時間～約２時間、約２時間～約２．５時間、約２．５時間～約３時間、約３時間～約３．５時間、約３．５時間～約４時間、約４時間～約４．５時間、約４．５時間～約５時間、約５時間～約５．５時間、約５．５時間～約６時間、約６時間～約６．５時間、約６．５時間～約７時間、約７時間～約７．５時間、約７．５時間～約８時間、約８時間～約８．５時間、約８．５時間～約９時間、約９時間～約９．５時間、約９．５時間～約１０時間、約１０時間～約１０．５時間、約１０．５時間～約１１時間、約１１時間～約１１．５時間、約１１．５時間～約１２時間、約１２時間～約１２．５時間、約１２．５時間～約１３時間、約１３時間～約１３．５時間、約１３．５時間～約１４時間、約１４時間～約１４．５時間、約１４．５時間～約１５時間、約１５時間～約１５．５時間、約１５．５時間～約１６時間、約１６時間～約１６．５時間、約１６．５時間～約１７時間、約１７時間～約１７．５時間、約１７．５時間～約１８時間、約１８時間～約１８．５時間、約１８．５時間～約１９時間、約１９時間～約１９．５時間、約１９．５時間～約２０時間、約２０時間～約２０．５時間、約２０．５時間～約２１時間、約２１時間～約２１．５時間、約２１．５時間～約２２時間、約２２時間～約２２．５時間、約２２．５時間～約２３時間、約２３時間～約２３．５時間または約２３．５時間～約２４時間であり得る。
【0137】
本明細書に記載の化合物または製剤のＡＵＣ０－ｉｎｆまたはＡＵＣ０－ｔは、例えば、約１μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約５μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約２０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約３０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約４０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約２００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約２５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約３００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約３５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約４００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約４５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、以上・約６００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約７００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約８００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約９００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１２５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１７５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約２０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約２５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約３０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約３５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約４０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約５０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約６０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約７０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約８０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約９０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ以上、約１０，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、または本明細書に記載の化合物の薬物動態学的プロファイルを説明するのに適した任意の他のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）であり得る。化合物のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）は、例えば、約１μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１０，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１０μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１０μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約２５μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約２５μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約２００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約２００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約３００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約３００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約４００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約４００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約６００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約６００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約７００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約７００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約８００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約８００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約９００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約９００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１，２５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１，２５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１，７５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約１，７５０μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約２，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約２，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約２，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約２，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約３，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約３，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約３，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約３，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約４，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約４，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約４，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約４，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約５，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約５，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約５，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約５，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約６，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約６，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約６，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約６，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約７，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約７，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約７，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約７，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約８，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約８，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約８，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約８，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約９，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ、約９，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約９，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎまたは約９，５００μｇ／ｇ・ｍｉｎ～約１０，０００μｇ／ｇ・ｍｉｎであり得る。
【0138】
本明細書に記載の化合物または製剤の血漿中濃度は、例えば、約１ｎｇ／ｍＬ以上、約５ｎｇ／ｍＬ以上、約１０ｎｇ／ｍＬ以上、約１５ｎｇ／ｍＬ以上、約２０ｎｇ／ｍＬ以上、約２５ｎｇ／ｍＬ以上、約５０ｎｇ／ｍＬ以上、約７５ｎｇ／ｍＬ以上、約１００ｎｇ／ｍＬ以上、約１５０ｎｇ／ｍＬ以上、約２００ｎｇ／ｍＬ以上、約３００ｎｇ／ｍＬ以上、約４００ｎｇ／ｍＬ以上、約５００ｎｇ／ｍＬ以上、または本明細書に記載の化合物もしくは製剤の任意の他の血漿中濃度であり得る。血漿中濃度は、例えば、約１ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ～約５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ～約１０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ～約２５ｎｇ／ｍＬ、約２５ｎｇ／ｍＬ～約５０ｎｇ／ｍＬ、約５０ｎｇ／ｍＬ～約７５ｎｇ／ｍＬ、約７５ｎｇ／ｍＬ～約１００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１５０ｎｇ／ｍＬ、約１５０ｎｇ／ｍＬ～約２００ｎｇ／ｍＬ、約２００ｎｇ／ｍＬ～約２５０ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３００ｎｇ／ｍＬ、約３００ｎｇ／ｍＬ～約３５０ｎｇ／ｍＬ、約３５０ｎｇ／ｍＬ～約４００ｎｇ／ｍＬ、約４００ｎｇ／ｍＬ～約４５０ｎｇ／ｍＬまたは約４５０ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬであり得る。
【0139】
本明細書に記載の化合物または製剤の血漿中濃度は、例えば、約１μｇ／ｍＬ以上、約５μｇ／ｍＬ以上、約１０μｇ／ｍＬ以上、約１５μｇ／ｍＬ以上、約２０μｇ／ｍＬ以上、約２５μｇ／ｍＬ以上、約５０μｇ／ｍＬ以上、約７５μｇ／ｍＬ以上、約１００μｇ／ｍＬ以上、約１５０μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ以上、約３００μｇ／ｍＬ以上、約４００μｇ／ｍＬ以上、約５００μｇ／ｍＬ以上、または本明細書に記載の化合物もしくは製剤の任意の他の血漿中濃度であり得る。血漿中濃度は、例えば、約１μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ～約５μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ～約１０μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ～約２５μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ～約５０μｇ／ｍＬ、約５０μｇ／ｍＬ～約７５μｇ／ｍＬ、約７５μｇ／ｍＬ～約１００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ～約１５０μｇ／ｍＬ、約１５０μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ～約２５０μｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ～約３００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ～約３５０μｇ／ｍＬ、約３５０μｇ／ｍＬ～約４００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ～約４５０μｇ／ｍＬまたは約４５０μｇ／ｍＬ～約５００μｇ／ｍＬであり得る。
【0140】
適応症
本開示は、症状を治療するための化合物の組合せの使用を記載する。いくつかの実施形態では、症状は、肺障害、例えば、ＰＡＨ、左心疾患によるＰＨ、肺疾患によるＰＨ、肺内の凝血塊によるＰＨ、または血液および他のまれな障害から生じるＰＨである。
本開示は、症状を治療するための化合物の組合せの使用を記載する。いくつかの実施形態では、症状は、肺障害、例えば、ＰＡＨ、左心疾患によるＰＨ、肺疾患によるＰＨ、肺内の凝血塊によるＰＨ、または血液および他のまれな障害から生じるＰＨである。
【0141】
いくつかの実施形態では、本開示は、ＰＡＨを治療するための化合物の組合せの使用を記載する。いくつかの実施形態では、ＰＡＨは、原発性ＰＡＨ、特発性ＰＡＨ、遺伝性ＰＡＨ、薬物および毒素誘発性ＰＡＨ、または他の全身性疾患に関連するＰＡＨである。いくつかの実施形態では、遺伝性ＰＡＨは、ＢＭＰＲ２、ＡＬＫ１、エンドグリン、ＳＭＡＤ９、ＣＡＶ１またはＫＣＮＫ３によって引き起こされる。いくつかの実施形態では、薬物および毒素誘発性ＰＡＨは、アンフェタミン、メタンフェタミン、コカインまたはフェンフルラミン－フェンテルミンの使用によって誘発される。いくつかの実施形態では、ＰＡＨは、他の全身性疾患と関連しており、結合組織病（例えば、強皮症、全身性エリテマトーデス、混合性結合組織病および慢性関節リウマチ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、門脈圧亢進症または先天性心疾患によって引き起こされる。いくつかの実施形態では、本開示は、肺静脈閉塞症（ＰＶＯＤ）または肺毛細血管腫症（ＰＣＨ）を治療するために使用することができる。
【0142】
いくつかの実施形態では、ＰＨは左心疾患、例えば、左室収縮機能不全、左室拡張機能不全、心臓弁膜症、弁膜症によるものではない左心流入路および流出路閉塞、または先天性心筋症によって引き起こされた左心疾患に起因する。いくつかの実施形態では、ＰＨは、肺疾患、例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、間質性肺疾患、睡眠時呼吸障害（例えば、睡眠時無呼吸）、肺胞低換気障害、高地環境への慢性的曝露、または肺の発達異常に起因する。
【0143】
いくつかの実施形態では、ＰＨはＣＴＥＰＨである。いくつかの実施形態では、ＰＨは、詳細不明または多因子の機序を有するＰＨ、例えば、血液障害（例えば、ある種の貧血、骨髄増殖性障害または脾臓摘出）、肺病変を有する全身障害（例えば、サルコイドーシス、ランゲルハンス細胞組織球症、神経線維腫症、血管炎またはリンパ脈管筋腫症）、代謝障害（例えば、細胞代謝不全のまれな疾患、または甲状腺疾患）、または他の分類されていない疾患（例えば、慢性腎不全、肺動脈を閉塞する腫瘍、およびその他のまれな疾患）によって引き起こされるＰＨである。
【0144】
いくつかの実施形態では、治療対象の症状は、異常な右室収縮期圧（ＲＶＳＰ）、肺動脈圧、心拍出量、右室肥大または肺動脈肥大に関連する肺障害である。いくつかの実施形態では、治療対象の症状は肺癌である。いくつかの実施形態では、治療対象の症状は肺原発血管肉腫である。
【0145】
例
例１：インビボ試験
雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（体重：３００～３３０ｇ、Ｔａｃｏｎｉｃ）を用いて、化合物１単独の効果ならびにアンブリセンタンおよびタダラフィルと組み合わせた化合物１の効果を試験した。１２時間の明／暗周期で標準的なラットケージに動物を収容し、標準的なラットの固形飼料および水を自由に摂取させた。ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌｓに従って、動物を管理および使用した。
例１：インビボ試験
雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（体重：３００～３３０ｇ、Ｔａｃｏｎｉｃ）を用いて、化合物１単独の効果ならびにアンブリセンタンおよびタダラフィルと組み合わせた化合物１の効果を試験した。１２時間の明／暗周期で標準的なラットケージに動物を収容し、標準的なラットの固形飼料および水を自由に摂取させた。ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌｓに従って、動物を管理および使用した。
【0146】
例２：実験デザイン
３．１ 吸入薬物動態学的試験
雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、化合物１の乾燥粉末製剤（化合物１／ロイシン）を６０分間鼻のみに曝露して吸入させた。吸入薬物動態学的試験の平均蓄積用量は０．４ｍｇ／ｋｇであり、蓄積率は０．１と仮定された。動物間でサンプリングするのに十分な時間をとるために、ラットを交互に曝露タワーに置いた。
３．１ 吸入薬物動態学的試験
雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、化合物１の乾燥粉末製剤（化合物１／ロイシン）を６０分間鼻のみに曝露して吸入させた。吸入薬物動態学的試験の平均蓄積用量は０．４ｍｇ／ｋｇであり、蓄積率は０．１と仮定された。動物間でサンプリングするのに十分な時間をとるために、ラットを交互に曝露タワーに置いた。
【0147】
吸入投与が完了した後、ラットをイソフルランによる全身麻酔下に置き、気管切開術により挿管し、圧力制御ベンチレータに置いた。次いで、各ラットに対して胸骨切開術を実施した。指定された時点で、右室（ＲＶ）から静脈サンプルを採取し、左室（ＬＶ）から動脈サンプルを採取した。各サンプルについて、１０μＬのＥＤＴＡを含有するエッペンドルフチューブに１ｍＬの血液を入れ、静脈サンプルおよび動脈サンプルを氷上に置いた。
【0148】
ラットの左右の肺動脈、静脈および気管支をクランプした。肺葉（すなわち、右上葉（ＲＵＬ）、右中葉（ＲＭＬ）、右下葉（ＲＬＬ）、肺副葉（Ａｃｃ）、左上葉（ＬＵＬ）、左中葉（ＬＭＬ）および左下葉（ＬＬＬ））を摘出し、血液を吸い取って除去し、液体窒素中で急速冷凍した。全身麻酔下で放血によりラットを安楽死させた。ラットから得られた血液サンプルを遠心分離により分離し、エッペンドルフチューブに血漿上清を等分した。血漿サンプルおよび肺葉が抽出されアッセイされるまで、血漿サンプルおよび肺葉をマイナス８０℃で保存した。
【0149】
３．２ ＡＡＶ－ＰＤＧＦＢ ＳＵ５４１６低酸素症試験
肺吹送により雄のＳＤラットにアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）－ＰＤＧＦＢを投与して、肺にＰＤＧＦＢＢを過剰発現させた。２つの血清型のＡＡＶ（ＡＡＶ－５およびＡＡＶ６．２）を使用して、ＰＤＧＦＢＢを過剰発現したラットを作成した。サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターの制御下で、ラットＰＤＧＦＢを過剰発現させた。ＡＡＶ－５－ＰＤＧＦＢ ４．３×１０１２ゲノムコピー（ＧＣ）およびＡＡＶ－６．２－ＰＤＧＦＢ １．６×１０１１ ＧＣを各ラットに吹送した。配列番号１は、ＣＭＶプロモーターの制御下で過剰発現されたラットＰＤＧＦＢの配列を示す。
配列番号１
肺吹送により雄のＳＤラットにアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）－ＰＤＧＦＢを投与して、肺にＰＤＧＦＢＢを過剰発現させた。２つの血清型のＡＡＶ（ＡＡＶ－５およびＡＡＶ６．２）を使用して、ＰＤＧＦＢＢを過剰発現したラットを作成した。サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーターの制御下で、ラットＰＤＧＦＢを過剰発現させた。ＡＡＶ－５－ＰＤＧＦＢ ４．３×１０１２ゲノムコピー（ＧＣ）およびＡＡＶ－６．２－ＰＤＧＦＢ １．６×１０１１ ＧＣを各ラットに吹送した。配列番号１は、ＣＭＶプロモーターの制御下で過剰発現されたラットＰＤＧＦＢの配列を示す。
配列番号１
【化13-1】
【化13-2】
【0150】
４週間後、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射を用いて２０ｍｇ／ｋｇのセマクサニブ（ＳＵ５４１６）を投与し、吸気酸素分率（ＦｉＯ２）１０％で低酸素室にラットを３週間収容した。治療群を４群に分けた（表１）：１）１日１回強制経口投与によるビヒクルおよび１日２回吸入によるビヒクル（Ｖ－Ｖ）；２）１日１回強制経口投与による１０ｍｇ／ｋｇのタダラフィルおよび１０ｍｇ／ｋｇのアンブリセンタンならびに１日２回吸入によるビヒクル（ＴＡ－Ｖ）；３）１日１回強制経口投与によるビヒクルおよび１日２回吸入による０．６ｍｇ／ｋｇの化合物１（Ｖ－ＰＫ）；ならびに４）１日１回強制経口投与による１０ｍｇ／ｋｇのタダラフィルおよび１０ｍｇ／ｋｇのアンブリセンタンならびに１日２回吸入による０．６ｍｇ／ｋｇの化合物１（ＴＡ－ＰＫ）。低酸素室からラットを取り出した後、２日目から連日治療を実施し、４週間（２８日間）続けた。
【表1】
【0151】
試験終了時に、各ラットのＲＶＳＰを測定し、動物をヘパリン化した。次いで、肺の右中葉を摘出し、液体窒素に入れた。全身麻酔下でラットを放血させ、残りの肺および心臓を摘出した。肺動脈をヘパリン化食塩水で灌流し、低圧下で１０％ホルマリンを用いて固定した。心腔を解剖し、秤量し、ホルマリンで固定した。残りの肺は、気管を介して注入することによりホルマリンで固定した。ラットのＲＶＳＰを測定するために、イソフルランを用いて動物を鎮静させ、気管切開術を介して挿管し、ＴＯＰＯ（商標）圧力制御ベンチレータを用いて換気した。ピーク吸気圧は１８ｃｍ Ｈ２Ｏであり、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）は５ｃｍ Ｈ２Ｏであった。胸骨切開術を実施し、ＲＶ尖部を介してＳｃｉｓｅｎｓｅハイフィデリティー（ｈｉｇｈ－ｆｉｄｅｌｉｔｙ）カテーテルを挿入した。測定したパラメータには以下を含めた：右室収縮終末期圧（ＲＶＥＳＰ）、ＲＶ拡張終末期圧（ＲＶＥＤＰ）、ＲＶ血行動態、ＲＶ肥大、ＲＶ拡張終末期容積、ＲＶ収縮終末期容積、ＲＶ駆出分画率、ＰＤＧＦＲシグナル伝達、心拍出量および一回心仕事量。
【0152】
３．３ 吸入用の化合物１の粉末の投与
化合物１の製剤には、約５０％の化合物１および約５０％のロイシンを含有させた。化合物をエタノール／水溶液に溶解させ、混合物を噴霧乾燥して吸入に適したエアロゾル特性を有する乾燥粉末を形成した。
化合物１の製剤には、約５０％の化合物１および約５０％のロイシンを含有させた。化合物をエタノール／水溶液に溶解させ、混合物を噴霧乾燥して吸入に適したエアロゾル特性を有する乾燥粉末を形成した。
【0153】
Ｖｉｌｎｉｕｓ Ａｅｒｏｓｏｌ Ｇｅｎｅｒａｔｏｒ（ＶＡＧ）を用いて１２ポートの鼻のみの吸入チャンバーを用いて、吸入用の化合物１の粉末をラットに送達した。吸入用の化合物１の粉末をＶＡＧに充填し、流速を６０分間３Ｌ／分に設定した。１．５Ｌ／分の流速でＭｅｒｃｅｒインパクターを用いて、吸入された化合物１の量を測定した。Ｎｅｘｔ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＮＧＩ）を用いて、吸入用の化合物１の粉末のエアロゾルＭＭＡＤを決定した。
【0154】
３．４ プレチスモグラフィー
ＥｍｋａデュアルチャンバープレチスモグラフおよびＥｍｋａ ｉｏｘソフトウェアを用いてプレチスモグラフィーを行った。測定したパラメータには、呼吸頻度、一回換気量、分時換気量（ＭＶ）、最大吸気流速および最大呼気流量、ならびに気道抵抗を含めた。測定は薬物の初回投与前および試験終了時に行った。
ＥｍｋａデュアルチャンバープレチスモグラフおよびＥｍｋａ ｉｏｘソフトウェアを用いてプレチスモグラフィーを行った。測定したパラメータには、呼吸頻度、一回換気量、分時換気量（ＭＶ）、最大吸気流速および最大呼気流量、ならびに気道抵抗を含めた。測定は薬物の初回投与前および試験終了時に行った。
【0155】
３．５ 組織学および形態計測分析
全身麻酔下で、換気された動物から心臓および肺を摘出した。加圧下で主肺動脈を通してヘパリン化食塩水を注入した。定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）およびウエスタンブロット分析のために、右中葉を直ちに結紮し、液体窒素に入れた。心臓を摘出し、ＲＶ自由壁、心室中隔および左室（ＬＶ）自由壁を解剖して秤量した。加圧下で肺動脈および気管を通して緩衝ホルマリン（１０％）を注入した。８μｍに切片化したＨ＆Ｅ（ヘマトキシリンおよびエオシン）染色ホルマリン固定組織に対して形態計測分析を行った。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して、肺細動脈の中膜領域および内腔領域を測定した。ラット１匹ごとに１切片当たり少なくとも２０個の肺細動脈に対して測定を行った。内腔領域の総中膜領域に対する比（Ｌ／Ｍ）を決定した。Ｌ／Ｍ比によって総肺細動脈面積の変動を正規化した。
全身麻酔下で、換気された動物から心臓および肺を摘出した。加圧下で主肺動脈を通してヘパリン化食塩水を注入した。定量的ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）およびウエスタンブロット分析のために、右中葉を直ちに結紮し、液体窒素に入れた。心臓を摘出し、ＲＶ自由壁、心室中隔および左室（ＬＶ）自由壁を解剖して秤量した。加圧下で肺動脈および気管を通して緩衝ホルマリン（１０％）を注入した。８μｍに切片化したＨ＆Ｅ（ヘマトキシリンおよびエオシン）染色ホルマリン固定組織に対して形態計測分析を行った。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して、肺細動脈の中膜領域および内腔領域を測定した。ラット１匹ごとに１切片当たり少なくとも２０個の肺細動脈に対して測定を行った。内腔領域の総中膜領域に対する比（Ｌ／Ｍ）を決定した。Ｌ／Ｍ比によって総肺細動脈面積の変動を正規化した。
【0156】
３．６ 免疫組織化学的検査
熱誘導エピトープ賦活化を用いて抗原賦活化を行った。ＰＤＧＦＢＢ、総ＰＤＧＦＲα、総ＰＤＧＦＲβ、ｐＰＤＧＦＲαおよびｐＰＤＧＦＲβに対して、肺切片の免疫組織化学的検査を行った。ＥＸＰＯＳＥホースラディッシュペルオキシダーゼ／ジアミノベンジジン（ＨＲＰ／ＤＡＢ）キットを用いてシグナル検出を行った。
熱誘導エピトープ賦活化を用いて抗原賦活化を行った。ＰＤＧＦＢＢ、総ＰＤＧＦＲα、総ＰＤＧＦＲβ、ｐＰＤＧＦＲαおよびｐＰＤＧＦＲβに対して、肺切片の免疫組織化学的検査を行った。ＥＸＰＯＳＥホースラディッシュペルオキシダーゼ／ジアミノベンジジン（ＨＲＰ／ＤＡＢ）キットを用いてシグナル検出を行った。
【0157】
３．７ ウエスタンブロット分析
５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＥＤＴＡ、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、０．０５％ＳＤＳ、５０ｍＭ ＮａＦ、１０ｍＭ β－グリセロリン酸、ピロリン酸ナトリウム、１００μＭ Ｎａ３ＶＯ４ならびにホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害剤を含有するｐＨ７．４の溶解緩衝液中で、肺組織サンプルをホモジナイズした。溶解物を標準化し、７．５％または１２％ポリアクリルアミドゲル上で分離し、ニトロセルロース膜に転写した。ブロッキング後、以下の抗体のうちの１つを用いて膜をプローブした：抗ＰＤＧＦＲβ、抗ホスホ（Ｙ１０２１）－ＰＤＧＦＲβ、ｐＭＹＰＴ、ＭＹＰＴ、ｐＳＴＡＴ３またはＳＴＡＴ３。シェーカー上でサンプルを一晩インキュベートし、続いて、ＨＲＰとコンジュゲートした二次抗体とともに１時間インキュベートした。結合した抗体は、増強化学発光（ＥＣＬ）検出システムを用いて化学発光によって検出し、Ｌｉｃｏｒ Ｃ－Ｄｉｇｉｔ（登録商標）ブロットスキャナーを用いて濃度測定によって定量した。
５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＥＤＴＡ、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、０．０５％ＳＤＳ、５０ｍＭ ＮａＦ、１０ｍＭ β－グリセロリン酸、ピロリン酸ナトリウム、１００μＭ Ｎａ３ＶＯ４ならびにホスファターゼおよびプロテアーゼ阻害剤を含有するｐＨ７．４の溶解緩衝液中で、肺組織サンプルをホモジナイズした。溶解物を標準化し、７．５％または１２％ポリアクリルアミドゲル上で分離し、ニトロセルロース膜に転写した。ブロッキング後、以下の抗体のうちの１つを用いて膜をプローブした：抗ＰＤＧＦＲβ、抗ホスホ（Ｙ１０２１）－ＰＤＧＦＲβ、ｐＭＹＰＴ、ＭＹＰＴ、ｐＳＴＡＴ３またはＳＴＡＴ３。シェーカー上でサンプルを一晩インキュベートし、続いて、ＨＲＰとコンジュゲートした二次抗体とともに１時間インキュベートした。結合した抗体は、増強化学発光（ＥＣＬ）検出システムを用いて化学発光によって検出し、Ｌｉｃｏｒ Ｃ－Ｄｉｇｉｔ（登録商標）ブロットスキャナーを用いて濃度測定によって定量した。
【0158】
３．８ ＰＤＧＦＢ遺伝子発現
ＴＲＩｚｏｌ（商標）試薬を使用して肺組織由来のＲＮＡを単離した。Ｎａｎｏｄｒｏｐ（商標）１０００分光光度計を使用してＲＮＡ濃度を測定した。大容量ｃＤＮＡ逆転写キットを使用して、ｃＤＮＡに各サンプルの等量のＲＮＡを転写した。ＰＤＧＦＢおよび１８Ｓ用のＴａｑＭａｎ（商標）Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｍａｓｔｅｒ ＭｉｘおよびＴａｑＭａｎ（商標）プライマー／プローブを使用して、逆転写（ＲＴ）－ｑＰＣＲ反応を設定した。ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ（商標）６ Ｆｌｅｘシステムを使用して、遺伝子発現アッセイを行った。ハウスキーピング遺伝子として使用された１８Ｓの発現に対して遺伝子発現を正規化した。
ＴＲＩｚｏｌ（商標）試薬を使用して肺組織由来のＲＮＡを単離した。Ｎａｎｏｄｒｏｐ（商標）１０００分光光度計を使用してＲＮＡ濃度を測定した。大容量ｃＤＮＡ逆転写キットを使用して、ｃＤＮＡに各サンプルの等量のＲＮＡを転写した。ＰＤＧＦＢおよび１８Ｓ用のＴａｑＭａｎ（商標）Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｍａｓｔｅｒ ＭｉｘおよびＴａｑＭａｎ（商標）プライマー／プローブを使用して、逆転写（ＲＴ）－ｑＰＣＲ反応を設定した。ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ（商標）６ Ｆｌｅｘシステムを使用して、遺伝子発現アッセイを行った。ハウスキーピング遺伝子として使用された１８Ｓの発現に対して遺伝子発現を正規化した。
【0159】
３．９ 酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）
ホスホ－ＰＤＧＦ受容体β（Ｙ７５１）に特異的なＥＬＩＳＡキットを使用して、ヒト肺線維芽細胞内のＰＤＧＦＢＢ刺激ＰＤＧＦＲリン酸化に対する化合物１とイマチニブとの用量効果を比較した。
ホスホ－ＰＤＧＦ受容体β（Ｙ７５１）に特異的なＥＬＩＳＡキットを使用して、ヒト肺線維芽細胞内のＰＤＧＦＢＢ刺激ＰＤＧＦＲリン酸化に対する化合物１とイマチニブとの用量効果を比較した。
【0160】
８継代以下の継代培養で成人ヒト肺線維芽細胞（ＨＬＦａ）を維持した。５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、４ｍＭ ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）および１×抗生物質－抗真菌剤溶液を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で細胞を培養した。Ｔ－２５フラスコに細胞を播種し、約７０～８０％コンフルエントになるまで増殖させた。細胞が約７０～８０％コンフルエントになった後、細胞を約２４時間血清飢餓状態に置いた。
【0161】
化合物１またはイマチニブを用いて細胞を処理して、ＰＤＧＦＢＢによるｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ７５１）の刺激の阻害について試験した。指定された濃度の化合物１を用いて細胞を前処理し、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーター内で３０分間インキュベートした。前処理後、５０ｎｇ／ｍＬのＰＤＧＦＢＢをフラスコに加え、３７℃、５％ＣＯ２で細胞を７．５分間インキュベートした。処理後、フェニルメタンスルホニルフルオリド（ＰＭＳＦ）を含有する細胞溶解緩衝液中で細胞を溶解させた。タンパク質定量のために細胞溶解物の上清を回収し、Ｍｉｃｒｏ ＢＣＡ（商標）タンパク質アッセイキットを使用してアッセイした。次いで、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイに細胞溶解物を使用して、ｐＰＤＧＦＲα（Ｙ８４９）およびｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ７５１）の量を定量した。各条件は２連で行った。
【0162】
ＥＬＩＳＡアッセイ緩衝液でサンプルを希釈し、ｐＰＤＧＦＲ ｍＡｂ被覆マイクロウェルに移し、３７℃で２時間インキュベートした。サンプルのウェルインキュベーション後、１×ＥＬＩＳＡ洗浄緩衝液でウェルを４回洗浄した。検出抗体を各ウェルに加え、３７℃のインキュベーター内でサンプルを１時間インキュベートした。検出抗体とともにインキュベートした後、ウェルを洗浄した。ＨＲＰ結合二次抗体を各ウェルに加え、３７℃のインキュベーター内でサンプルを３０分間インキュベートした。ＨＲＰ結合二次抗体のインキュベーション後、ウェルを再度洗浄した。３，３’，５，５’－テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）基質を各ウェルに加え、３７℃のインキュベーター内で１０分間インキュベートした。ＴＭＢのインキュベーション後、ＴＭＢを含有する各ウェルに停止溶液を加えた。プレートを数秒間穏やかに振盪し、分光光度プレートリーダーおよびＧｅｎｅｓｉｓ Ｌｉｔｅソフトウェアを使用してサンプルウェルを４５０ｎｍで読み取った。
【0163】
３．１０ 統計分析
ＸＬＳＴＡＴ ２０１７．４を用いて統計分析を行った。示されたデータは、他に記載がない限り、平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。分散分析（ＡＮＯＶＡ）と、それに続くボンフェローニ補正またはスチューデント－ニューマン－コイルス（ＳＮＫ）検定とを用いて群間差を分析した。場合によっては、対照群との比較としてダネット検定を使用した。分散が正常ではない場合には、クラスカル－ウォリスノンパラメトリック分析を行い、続いて、複数の群を比較するためにＳｔｅｅｌ－Ｄｗａｓｓ－Ｃｒｉｔｃｈｌｏｗ－Ｆｌｉｇｎｅｒ手順を行った。有意性をｐ＝０．０５レベルに設定した。
ＸＬＳＴＡＴ ２０１７．４を用いて統計分析を行った。示されたデータは、他に記載がない限り、平均±平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。分散分析（ＡＮＯＶＡ）と、それに続くボンフェローニ補正またはスチューデント－ニューマン－コイルス（ＳＮＫ）検定とを用いて群間差を分析した。場合によっては、対照群との比較としてダネット検定を使用した。分散が正常ではない場合には、クラスカル－ウォリスノンパラメトリック分析を行い、続いて、複数の群を比較するためにＳｔｅｅｌ－Ｄｗａｓｓ－Ｃｒｉｔｃｈｌｏｗ－Ｆｌｉｇｎｅｒ手順を行った。有意性をｐ＝０．０５レベルに設定した。
【0164】
例３：ヒト肺線維芽細胞内のＰＤＧＦＲβのＥＬＩＳＡアッセイ
図２は、化合物１およびイマチニブを用いてまたは用いずに、ＰＤＧＦＢによって処理したヒト肺線維芽細胞内のリン酸化ＰＤＧＦＲβ（ｐＰＤＧＦＲβ）のＥＬＩＳＡから得られた結果を示す。化合物１は、ヒト肺線維芽細胞では、ＰＤＧＦＢに刺激されたＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害する点でイマチニブよりも約２．５倍強力であった。ＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害するための化合物１のＩＣ５０は０．１μＭであった。ＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害するためのイマチニブのＩＣ５０は０．２５μＭであった。
図２は、化合物１およびイマチニブを用いてまたは用いずに、ＰＤＧＦＢによって処理したヒト肺線維芽細胞内のリン酸化ＰＤＧＦＲβ（ｐＰＤＧＦＲβ）のＥＬＩＳＡから得られた結果を示す。化合物１は、ヒト肺線維芽細胞では、ＰＤＧＦＢに刺激されたＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害する点でイマチニブよりも約２．５倍強力であった。ＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害するための化合物１のＩＣ５０は０．１μＭであった。ＰＤＧＦＲβのリン酸化を阻害するためのイマチニブのＩＣ５０は０．２５μＭであった。
【0165】
例４：吸入化合物１の薬物動態
乾燥粉末製剤として化合物１をラットに受動吸入させた後、肺内の化合物１の濃度は、動脈および静脈の血漿中濃度の化合物１の濃度の２０～８０倍であった。化合物１の平均蓄積用量は０．４ｍｇ／ｋｇであった。ｔ＝２４０分、１４４０分ではｎ＝２、他のすべての時点ではｎ＝３。
乾燥粉末製剤として化合物１をラットに受動吸入させた後、肺内の化合物１の濃度は、動脈および静脈の血漿中濃度の化合物１の濃度の２０～８０倍であった。化合物１の平均蓄積用量は０．４ｍｇ／ｋｇであった。ｔ＝２４０分、１４４０分ではｎ＝２、他のすべての時点ではｎ＝３。
【0166】
図３は、ラットの吸入後の肺、動脈および静脈の化合物１の濃度を比較する。動脈および静脈の化合物１の濃度は、肺の化合物１の濃度よりも数倍低かった。動脈および静脈の化合物１の濃度はベースラインに近く、グラフでは目立たない。図４は、約５００分の期間にわたる動脈および静脈の化合物１の濃度を比較的小さな縮尺で示す。データは、動脈および静脈の化合物１の最大平均濃度が約１μｇ／ｍＬであったことを示している。動脈および静脈の化合物１の平均濃度は投与後急速に低下し、投与後約４００分でゼロに達した。
【0167】
ＰＫ Ｓｏｌｖｅｒ ２．０を使用して、２コンパートメント薬物動態学的モデリングを行った。結果を表２および表３に示す。肺での化合物１の終末半減期（ｔ１／２β）は、血漿中の１２５分と比較して３８５．９分であった。表２は、肺の化合物１の濃度に関する薬物動態学的パラメータを示す。表３は、静脈血漿中濃度における化合物１の濃度に関する薬物動態学的パラメータを示す。
【表2】
【表3】
【0168】
例５：ウエスタンブロット分析
Ｙ１０２１でｐＰＤＧＦＲβに特異的な抗体を用いたウエスタンブロット分析を行って、治療した動物の肺のｐＰＤＧＦＲβレベルに対する吸入化合物１の効果を決定した。吸入化合物１またはビヒクルによって動物を治療した。ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）にサンプルを供し、得られたゲルをナイロンメンブレンに転写した。
Ｙ１０２１でｐＰＤＧＦＲβに特異的な抗体を用いたウエスタンブロット分析を行って、治療した動物の肺のｐＰＤＧＦＲβレベルに対する吸入化合物１の効果を決定した。吸入化合物１またはビヒクルによって動物を治療した。ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）にサンプルを供し、得られたゲルをナイロンメンブレンに転写した。
【0169】
図５は、化合物１による治療が、総ＰＤＧＦＲβのレベルと比較して、ｐＰＤＧＦＲβの比率を減少させたことを示すサンプルのウエスタンブロットを示す。図５の上部パネルは、Ｙ１０２１でリン酸化されたｐＰＤＧＦＲβに特異的な一次抗体とともにインキュベートした後のウエスタンブロットを示す。図５の下部パネルは、総ＰＤＧＦＲβに特異的な抗体とともにインキュベーションした後のウエスタンブロットを示す。結果は、化合物１を用いて治療した動物では、ビヒクルを用いて治療した動物と比較してｐＰＤＧＦＲβレベルが減少したことを示す。
【0170】
例６：タダラフィルおよびアンブリセンタンと組み合わせた吸入化合物１の有効性
ＡＡＶ－ＰＤＧＦＢ ＳＵ５４１６低酸素症ラットモデルでは、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現が増加した。１）ビヒクルのみ、２）タダラフィル＋アンブリセンタンおよびビヒクルならびに３）ビヒクルおよび化合物１を用いた治療は、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現のレベルに有意な影響を及ぼさなかった。対照的に、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１による併用治療は、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現を約７０％増加させた。図６は、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いて治療した群では、対照群および他の治療群と比較してＰＤＧＦＲＢの肺遺伝子発現が増加したことを示す。
ＡＡＶ－ＰＤＧＦＢ ＳＵ５４１６低酸素症ラットモデルでは、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現が増加した。１）ビヒクルのみ、２）タダラフィル＋アンブリセンタンおよびビヒクルならびに３）ビヒクルおよび化合物１を用いた治療は、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現のレベルに有意な影響を及ぼさなかった。対照的に、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１による併用治療は、ＰＤＧＦＢ遺伝子発現を約７０％増加させた。図６は、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いて治療した群では、対照群および他の治療群と比較してＰＤＧＦＲＢの肺遺伝子発現が増加したことを示す。
【0171】
ＰＨのＡＡＶ－ＰＤＧＦＢ過剰発現ＳＵ５４１６低酸素症ラットモデルでは、４週間にわたって１日１回タダラフィル１０ｍｇ／ｋｇおよびアンブリセンタン１０ｍｇ／ｋｇを強制経口投与する併用治療（ＴＡ－Ｖ、ｎ＝８）を実施すると、ビヒクルのみを用いた治療（Ｖ－Ｖ、ｎ＝９）と比較してＲＶＳＰが３１％低下した。Ｖ－Ｖ群のＲＶＳＰは６２．６±４．１ｍｍＨｇであり、ＴＡ－Ｖ群のＲＳＶＰは４２．９±２．２ｍｍＨｇであった。４週間にわたって１日２回、０．６ｍｇ／ｋｇの平均用量で受動吸入により化合物１の乾燥粉末製剤を投与すると、ビヒクル治療動物と比較して右室収縮期圧が２９％低下した（ＲＶＳＰ ４４．３±１．９ｍｍＨｇ、ｎ＝１１）。４週間にわたって１日２回吸入化合物１と組み合わせて、１０ｍｇ／ｋｇのタダラフィルおよび１０ｍｇ／ｋｇのアンブリセンタンを連日強制経口投与した治療（ＴＡ－ＰＫ）では、Ｖ－Ｖ群と比較してＲＶＳＰが４７％低下した（ＲＶＳＰ ３３．２±１．２ｍｍＨｇ ＴＡ－ＰＫ ｎ＝９）（ｐ＝０．００２ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ．Ｖ－Ｖ、ｐ＝０．００６ ＴＡ－Ｖ ｖｓ．Ｖ－Ｖおよびｐ＝０．００５ Ｖ－ＰＫ ｖｓ Ｖ－Ｖ）。Ｖ－ＰＫ群のラット１匹およびＴＡ－ＰＫ群のラット３匹のＲＶＳＰは得られなかった。
【0172】
図７は、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いた治療が、対照群および他の治療群と比較して、ＲＶＳＰの最大の％低下を示したことを示す。＊ｐ＜０．０１ ｖｓ Ｖ－Ｖ、¶ｐ＜０．０１ ｖｓ ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ。表４は、ＲＶＳＰの％低下に対する治療の効果を要約する。略語：ＡＶＧ＝平均、ＳＥＭ＝平均値の標準誤差。
【表4】
【0173】
また、治療群では、ＲＶ重量をＬＶ＋心室中隔重量で割った（ＲＶ／（ＬＶ＋ＩＶＳ））比によって示されるように、右室肥大が減少した。Ｖ－Ｖ（ｎ＝９）０．５０±０．０３；ＴＡ－Ｖ（ｎ＝８）、０．３８±０．０２；Ｖ－ＰＫ（ｎ＝１１）、０．３６±０．０１；およびＴＡ－ＰＫ（ｎ＝９）、０．２８±０．０１。ＲＶ／（ＬＶ＋ＩＶＳ）比は、ビヒクル（Ｖ－Ｖ）群と比較して、ＴＡおよびＶ－ＰＫ群では２５％、ＴＡ－ＰＫ群では２７％減少した。図８は、タダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１を用いた治療が、対照群および他の治療群と比較して、右室肥大の最大の減少（ＲＶ／（ＬＶ＋ＩＶＳ））を示したことを示す。＊ｐ＜０．０１ ｖｓ Ｖ－Ｖ、¶ｐ＜０．０１ ｖｓ ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ。
【0174】
タダラフィル＋アンブリセンタン、吸入化合物１による治療と、タダラフィル＋アンブリセンタンおよび吸入化合物１の組合せとによって、肺細動脈の内腔／中膜比が改善された。Ｖ－Ｖ（ｎ＝９）０．３６±０．０５；ＴＡ－Ｖ（ｎ＝８）０．５８±０．０４；Ｖ－ＰＫ（ｎ＝１２）０．７６±０．０４；ＴＡ－ＰＫ（ｎ＝１２）、０．８３±０．０５。図９は、肺細動脈の内腔領域と中膜領域とを比較するＨ＆Ｅ染色された肺切片を示し、化合物１による治療またはタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１による治療が、対照群ならびにタダラフィルおよびアンブリセンタンのみを用いて治療した群と比較して、肺細動脈の内腔／中膜比を改善したことを示している。図１０は、内腔／中膜比に対するタダラフィル、アンブリセンタンおよび化合物１の単剤療法および併用療法の効果を比較する。データは、ＴＡ－ＰＫ群では、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ治療群と比較して内腔／中膜比が増加したことを示している。＊ｐ＜０．０００１ ｖｓ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ．Ｖ－Ｖ、およびＶ－ＰＫ ｖｓ．Ｖ－Ｖ、¶ｐ＝０．００２ ｖｓ ＴＡ－Ｖ ｖｓ Ｖ－Ｖ。
【0175】
Ｖ－ＰＫ群およびＴＡ－ＰＫ群の両群に対する免疫組織化学的試験は、吸入化合物１を用いて治療したラットの肺のリン酸化ＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）およびリン酸化ＰＤＧＦＲα（Ｙ７５１）の減少を示した。図１１は、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ群では、Ｖ－ＶおよびＴＡ－Ｖ治療群と比較してｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）が減少したことを示している。図１２は、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ群では、Ｖ－ＶおよびＴＡ－Ｖ治療群と比較してｐＰＤＧＦＲα（Ｙ７５１）が減少したことを示している。また、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ群に対するウエスタンブロット分析は、吸入化合物１を用いて治療した群のｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）の減少を示した。図１３は、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ治療群では、Ｖ－ＶおよびＴＡ－Ｖ治療群と比較して、ｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）のレベルが減少したことを示すウエスタンブロット分析を示す。図１３はまた、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ治療群では、総ＰＤＧＦＲβのレベルおよびβアクチン対照と比較して、ｐＰＤＧＦＲβ（Ｙ１０２１）のレベルが減少したことを示す。
【0176】
また、タダラフィル、アンブリセンタンおよび吸入化合物１を用いて治療した群（ＴＡ－ＰＫ、ｎ＝９）では、ビヒクルのみの群（Ｖ－Ｖ）ならびにタダラフィルおよびアンブリセンタン治療群（ＴＡ－Ｖ、ｎ＝８）と比較して、ミオシン軽鎖ホスファターゼ（ｐＭＹＰＴ）のリン酸化の減少が観察された。図１４は、タダラフィル、アンブリセンタンおよび吸入化合物１を用いて治療した群では、ビヒクルのみの群ならびにタダラフィルおよびアンブリセンタン群と比較してＭＹＰＴのリン酸化が減少したことを示すウエスタンブロットを示す。図１５は、ＴＡ－ＰＫ治療群が、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ治療群と比較してｐＭＹＰＴ／ＭＹＰ比の減少を示したことを示す。＊ｐ＝０．０２７ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ ＴＡ－Ｖ、ｐ＝０．０１６ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ Ｖ－Ｖ、クラスカルウォリス分析。
【0177】
タダラフィル、アンブリセンタンおよび吸入化合物１を用いて治療した群（ＴＡ－ＰＫ、ｎ＝９）では、ビヒクルのみの群（Ｖ－Ｖ、ｎ＝９）と比較して、ＳＴＡＴ３のリン酸化（ｐＳＴＡＴ３）の減少が観察された。図１６は、治療群のウエスタンブロット分析を示し、ＴＡ－ＰＫを用いて治療した群が、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ治療群と比較して、ｐＳＴＡＴ３の最大の減少を示したことを示している。図１７は、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ群がｐＳＴＡＴ３の同様の減少を示し、ＴＡ－ＰＫ治療群がｐＳＴＡＴ３／ＳＴＡＴ３比の最大の減少を示したことを示す。ダネット検定により＊ｐ＝０．０４。
【0178】
プレチスモグラフィー試験では、Ｖ－ＰＫおよびＴＡ－ＰＫ群の一回換気量が増加する傾向が示された。ＴＡ－ＰＫ群では、ＭＶの有意な変化を伴わず、呼吸数の有意な減少が観察された。ＴＡ－ＰＫ群では、Ｖ－Ｖ群と比較して気道抵抗の有意な減少が観察された。図１８は、ＴＡ－ＰＫを用いた治療が、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ治療群と比較して、一回換気量のわずかな増加をもたらしたことを示す。図１９は、ＴＡ－ＰＫを用いた治療が、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ群と比較して、この群の呼吸頻度（呼吸数／分）を減少させたことを示す。＊ｐ＝０．００２ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ Ｖ－Ｖ（複数の群を比較するためのボンフェローニ補正）。図２０は、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫを用いた治療が、Ｖ－Ｖ群と比較して、分時換気量のわずかな減少をもたらしたことを示す。ＴＡ－ＰＫを用いて治療した群は、Ｖ－Ｖ群と比較して、分時換気量に実質的な変化を示さなかった。図２１は、ＴＡ－ＰＫを用いた治療が、Ｖ－Ｖ、ＴＡ－ＶおよびＶ－ＰＫ治療群と比較して、気道抵抗（Ｓｒａａｗ）の減少をもたらしたことを示す。¶ｐ＝０．０４７ ＴＡ－ＰＫ ｖｓ Ｖ－Ｖ（ダネット検定）。
【0179】
実施形態
以下の非限定的な実施形態は、本発明の例示としての例を提供するが、本発明の範囲を限定しない。
以下の非限定的な実施形態は、本発明の例示としての例を提供するが、本発明の範囲を限定しない。
【0180】
実施形態１。症状を治療する方法であって、該方法が、治療有効量のチロシンキナーゼ阻害剤、治療有効量のホスホジエステラーゼ５型（ＰＤＥＶ）阻害剤および治療有効量のエンドセリン受容体拮抗薬をそれを必要とする対象に投与することを含む、上記方法。
【0181】
実施形態２。対象がヒトである、実施形態１に記載の方法。
【0182】
実施形態３。チロシンキナーゼ阻害剤が、以下の式のもの
またはその薬学的に許容される塩である、実施形態１または２に記載の方法。
【化14】
またはその薬学的に許容される塩である、実施形態１または２に記載の方法。
【0183】
実施形態４。ＰＤＥＶ阻害剤がシルデナフィルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～３のいずれか一項に記載の方法。
【0184】
実施形態５。ＰＤＥＶ阻害剤がタダラフィルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～３のいずれか一項に記載の方法。
【0185】
実施形態６。ＰＤＥＶ阻害剤がバルデナフィルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～３のいずれか一項に記載の方法。
【0186】
実施形態７。エンドセリン受容体拮抗薬が選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬である、実施形態１～６のいずれか一項に記載の方法。
【0187】
実施形態８。選択的ＥＴＡ受容体拮抗薬がアンブリセンタンまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～７のいずれか一項に記載の方法。
【0188】
実施形態９。エンドセリン受容体拮抗薬が二重拮抗薬である、実施形態１～６のいずれか一項に記載の方法。
【0189】
実施形態１０。二重拮抗薬がマシテンタンまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～６および９のいずれか一項に記載の方法。
【0190】
実施形態１１。チロシンキナーゼ阻害剤の投与が吸入によるものである、実施形態１～１０のいずれか一項に記載の方法。
【0191】
実施形態１２。チロシンキナーゼ阻害剤の投与が吸入器によるものである、実施形態１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【0192】
実施形態１３。チロシンキナーゼ阻害剤の投与がネブライザーによるものである、実施形態１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【0193】
実施形態１４。チロシンキナーゼ阻害剤の投与がアトマイザーによるものである、実施形態１～１１のいずれか一項に記載の方法。
【0194】
実施形態１５。ＰＤＥＶ阻害剤およびエンドセリン受容体拮抗薬の投与が経口投与である、実施形態１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【0195】
実施形態１６。チロシンキナーゼ阻害剤の治療有効量が、１日当たり約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇである、実施形態１～１５のいずれか一項に記載の方法。
【0196】
実施形態１７。ＰＤＥＶ阻害剤の治療有効量が、１日当たり約２０ｍｇ～約４０ｍｇである、実施形態１～１６のいずれか一項に記載の方法。
【0197】
実施形態１８。エンドセリン受容体拮抗薬の治療有効量が、１日当たり約５ｍｇ～約１０ｍｇである、実施形態１～１７のいずれか一項に記載の方法。
【0198】
実施形態１９。症状が肺障害である、実施形態１～１８のいずれか一項に記載の方法。
【0199】
実施形態２０。症状が肺高血圧症である、実施形態１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【0200】
実施形態２１。症状が肺動脈高血圧症である、実施形態１～２０のいずれか一項に記載の方法。
【0201】
実施形態２２。チロシンキナーゼ阻害剤が、吸入用の乾燥粉末として製剤化される、実施形態１～２１のいずれか一項に記載の方法。
【0202】
実施形態２３。ＰＤＥＶ阻害剤がタダラフィルまたはその薬学的に許容される塩であり、エンドセリン受容体拮抗薬がアンブリセンタンまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～３、５、７、８および１１～２２のいずれか一項に記載の方法。
【0203】
実施形態２４。チロシンキナーゼ阻害剤の治療有効量が約０．２５ｍｇ／ｋｇ／日～約０．５ｍｇ／日であり、ＰＤＥＶ阻害剤の治療有効量が約１ｍｇ／ｋｇであり、エンドセリン受容体拮抗薬の治療有効量が約１ｍｇ／ｋｇである、実施形態１～２３のいずれか一項に記載の方法。
【0204】
実施形態２５。タダラフィルまたはその薬学的に許容される塩およびアンブリセンタンまたはその薬学的に許容される塩が経口投与される、実施形態１～３、５、７、８および１１～２３のいずれか一項に記載の方法。
【0205】
実施形態２６。チロシンキナーゼ阻害剤が吸入により投与される、実施形態１～２５のいずれか一項に記載の方法。
【0206】
実施形態２７。対象に治療有効量の可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激物質を投与することをさらに含む、実施形態１～２６のいずれか一項に記載の方法。
【0207】
実施形態２８。可溶性グアニル酸シクラーゼ刺激物質がリオシグアトまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～２７のいずれか一項に記載の方法。
【0208】
実施形態２９。可溶性グアニル酸シクラーゼ阻害剤がベリシグアトまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１～２４のいずれか一項に記載の方法。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【配列表】