特許 7546104 ５－ヘテロアリール－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン誘導体からなる医薬

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-08-28

(45)【発行日】2024-09-05

(54)【発明の名称】５－ヘテロアリール－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン誘導体からなる医薬

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/497 20060101AFI20240829BHJP

   A61K 9/127 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 31/7068 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 47/24 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 47/28 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 47/32 20060101ALI20240829BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20240829BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240829BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20240829BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240829BHJP

   C07D 413/14 20060101ALI20240829BHJP

   C07D 401/14 20060101ALN20240829BHJP

【ＦＩ】

A61K31/497

A61K9/127

A61K31/506

A61K31/5377

A61K31/7068

A61K39/395 T

A61K45/00

A61K47/24

A61K47/28

A61K47/32

A61K47/34

A61P35/00

A61P35/02

A61P43/00 111

A61P43/00 121

C07D413/14

C07D401/14

【請求項の数】 35

(21)【出願番号】P 2023087014

(22)【出願日】2023-05-26

(65)【公開番号】P2023174607

(43)【公開日】2023-12-07

【審査請求日】2024-02-29

(31)【優先権主張番号】P 2022087171

(32)【優先日】2022-05-27

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000002912

【氏名又は名称】住友ファーマ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100136629

【弁理士】

【氏名又は名称】鎌田 光宜

(74)【代理人】

【識別番号】100080791

【弁理士】

【氏名又は名称】高島 一

(74)【代理人】

【識別番号】100118371

【弁理士】

【氏名又は名称】▲駒▼谷 剛志

(72)【発明者】

【氏名】上岡 正児

(72)【発明者】

【氏名】坂 仁志

(72)【発明者】

【氏名】松岡 誠

(72)【発明者】

【氏名】広瀬 亘

(72)【発明者】

【氏名】島田 尚明

(72)【発明者】

【氏名】林 健人

(72)【発明者】

【氏名】楳原 宏紀

【審査官】新留 素子

(56)【参考文献】

【文献】特許第７０８２２５６（ＪＰ，Ｂ２）

【文献】特表２０１２－５１２２４９（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１９－５０９９９０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１８－５２８１７２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１７－５０８７８７（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

Ｃ０７Ｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

以下の化合物から選択される化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル、
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル、又は
５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－２－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。

【請求項2】

以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、請求項１に記載の医薬：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。

【請求項3】

以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、請求項１に記載の医薬：
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。

【請求項4】

以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、請求項１に記載の医薬：
５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－２－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。

【請求項5】

請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬を有効成分として含有する医薬組成物。

【請求項6】

請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬を内封したリポソームを含有する医薬組成物。

【請求項7】

請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬であって、該医薬はそれを内封したリポソームに含まれる医薬。

【請求項8】

前記リポソームが、リン脂質をさらに含む、請求項６に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記リポソームが、
（１）請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬、及び
（２）リン脂質、
を含む、請求項６に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記リン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、大豆レシチン、卵黄レシチン、水素添加卵黄レシチン、及び水素添加大豆レシチンからなる群より選択される一種又はそれらの二種以上の組み合わせ物である、請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記リポソームが、さらにステロール類を含む、請求項６に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記ステロール類が、コレステロールである、請求項１１に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記リポソームが、さらにポリマー修飾脂質を含む、請求項６に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記ポリマー修飾脂質のポリマー部分が、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メトキシポリエチレングリコール、メトキシポリプロピレングリコール、メトキシポリビニルアルコール、メトキシポリビニルピロリドン、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、エトキシポリビニルアルコール、エトキシポリビニルピロリドン、プロポキシポリエチレングリコール、プロポキシポリプロピレングリコール、プロポキシポリビニルアルコール、又はプロポキシポリビニルピロリドンである、請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項15】

ポリマー修飾脂質の脂質部分が、ホスファチジルエタノールアミン又はジアシルグリセロールである、請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記リポソームが、さらに、無機酸、無機酸塩、有機酸、有機酸塩、糖類、緩衝剤、酸化防止剤、及びポリマー類からなる群から選択される添加物を含む、請求項６に記載の医薬組成物。

【請求項17】

請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬を有効成分として含有する、癌の治療剤及び／又は予防剤。

【請求項18】

前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、請求項１７に記載の治療剤及び／又は予防剤。

【請求項19】

前記癌が、頭頚部がん、扁平上皮がん、非小細胞肺がん、肛門がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、又は子宮体がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、請求項１７に記載の治療剤及び／又は予防剤。

【請求項20】

癌の治療及び／又は予防に使用するための、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬。

【請求項21】

前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、請求項２０に記載の医薬。

【請求項22】

併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬であって、当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上である、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬。

【請求項23】

併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬であって、当該併用薬物が、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビン、シタラビン、塩酸ドキソルビシン、ゲムシタビン、メソトレキセート、ペメトレキセド、エトポシド、イリノテカン、トポテカン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、電離放射線、ベバシズマブ、リポソーム化ドキソルビシン、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、トラベクテジン、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、アテゾリズマブ、ラロトレクチニブ、エントレクチニブ、ナブパクリタキセル、エルロチニブ、リポソーム化イリノテカン、ロイコボリン、セツキシマブ、エリブリン、イホスファミド、ダカルバジンからなる群から選択される少なくとも１種以上である、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬。

【請求項24】

併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、（ａ）請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬であって、（ｂ）当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上であり、
（１）（ａ）が（ｂ）と同時に投与される、
（２）（ａ）が (ｂ)の投与後に投与される、又は
（３）（ｂ）が (ａ)の投与後に投与されること、を特徴とする、
請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬。

【請求項25】

前記併用薬物（ｂ）が、化学療法剤又は免疫療法剤である、
請求項２４に記載の医薬。

【請求項26】

前記併用薬物（ｂ）が、ゲムシタビンである、
請求項２４に記載の医薬。

【請求項27】

前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）ゲムシタビンと同時に投与される請求項２６に記載の医薬。

【請求項28】

前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）ゲムシタビンの投与後約２４～４８時間以内に投与される請求項２６に記載の医薬。

【請求項29】

前記（ｂ）ゲムシタビンが、前記（ａ）医薬の投与後約２４～４８時間以内に投与される請求項２６に記載の医薬。

【請求項30】

前記併用薬物（ｂ）が、抗ＰＤ－１抗体である、
請求項２４に記載の医薬。

【請求項31】

前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体と同時に投与される請求項３０に記載の医薬。

【請求項32】

前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体が、前記（ａ）医薬の投与後約７２～９６時間以内に投与される、請求項３０に記載の医薬。

【請求項33】

前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体の投与後約７２～９６時間以内に投与される請求項３０に記載の医薬。

【請求項34】

併用薬物と組み合わせてなる、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬を含む医薬組成物であって、当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上である、医薬組成物。

【請求項35】

併用薬物と組み合わせてなる、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬を含む医薬組成物であって、当該併用薬物が、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビン、シタラビン、塩酸ドキソルビシン、ゲムシタビン、メソトレキセート、ペメトレキセド、エトポシド、イリノテカン、トポテカン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、電離放射線、ベバシズマブ、リポソーム化ドキソルビシン、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、トラベクテジン、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、アテゾリズマブ、ラロトレクチニブ、エントレクチニブ、ナブパクリタキセル、エルロチニブ、リポソーム化イリノテカン、ロイコボリン、セツキシマブ、エリブリン、イホスファミド、ダカルバジンからなる群から選択される少なくとも１種以上である、医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ Ｋｉｎａｓｅ １（ＣＨＫ１）を阻害し、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）複製、染色体分離又は細胞分裂における不具合を特徴とする癌を治療又は予防する医薬として有用な５－ヘテロアリール－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン誘導体及びその製薬学的に許容される塩、これらを含有する医薬組成物、並びにこれらを含有するリポソーム、又はこれら組成物若しくはリポソームを含有するＣＨＫ１が関与する病態の治療剤若しくは予防剤に関する。

【背景技術】

【0002】

ＣＨＫ１は、細胞周期におけるＤＮＡ損傷のチェックポイントシグナル伝達経路において、ＡＴＲの下流にあるセリン／トレオニンタンパク質キナーゼである。哺乳類細胞では、ＣＨＫ１は電離放射線などにより引き起こされるＤＮＡ損傷、又はがん細胞などにおける過剰な細胞増殖やゲノム不安定性に起因するＤＮＡ複製ストレスに応答して、ＡＴＲ依存的にリン酸化される（非特許文献１～５）。ＣＨＫ１を活性化するこのリン酸化により、ＣＨＫ１はＣＤＣ２５Ａをリン酸化し、ＣＤＣ２５ＡによるサイクリンＥ／ＣＤＫ２の脱リン酸化が阻害され、Ｓ期からの進行が停止する。また、ＣＨＫ１は、ＣＤＣ２５Ｃをリン酸化して、ＣＤＣ２５ＣによるサイクリンＢ／ＣＤＫ１の脱リン酸化を阻害し、Ｇ２Ｍ期からの進行を停止させる。いずれの場合も、ＣＤＫ活性の制御が細胞周期の停止を誘導して、ＤＮＡ損傷存在下での細胞分裂を妨げることで、ＤＮＡ損傷の修復を促す。ＣＨＫ１阻害は、がん細胞において、細胞周期におけるＤＮＡ損傷のチェックポイント機能を抑制することで、ＤＮＡ損傷存在下においてＤＮＡ修復不全や制御不能なＤＮＡ合成などを引き起こし、その結果、ＤＮＡ断片化、ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｃａｔａｓｔｒｏｐｈｅ、及び細胞死を誘導する（特許文献１～２）。

【0003】

ＣＨＫ１の種々の阻害剤（特許文献１～３）が報告されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【文献】国際公開第２０１０／０７７７５８号

【文献】国際公開第２０１２／０６４５４８号

【文献】国際公開第２０１７／１３２９２８号

【非特許文献】

【0005】

【文献】Dai Y and Grant S, Clin Cancer Res, 16(2):376-383 (2010)

【文献】Benada J and Macurek L, Biomolecules, 5:1912-1937 (2015)

【文献】King C, Mol Cancer Ther, 14(9):2004-2013 (2015)

【文献】Dent P, Expert Opinion on Investigational drugs, 28(12):1095-1100 (2019)

【文献】Evangelisti G. et al, Expert Opinion on Investigational Drugs, 29(8):779-792 (2020)

【文献】David H. et al. J Clin Oncol, 34:1764-1771 (2016)

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0006】

本開示は、ＣＨＫ１阻害に基づく抗がん作用を発揮する化合物を提供する。好ましくは、ＣＨＫ１阻害活性を抑制する化合物濃度とｈＥＲＧ電流を抑制する化合物濃度に乖離幅を有する化合物、肝毒性等の重篤な副作用を引き起こすＭＢＩに基づくＣＹＰ阻害を示さない化合物、ＣＨＫ１阻害活性を抑制する化合物濃度と血球系細胞への毒性を引き起こす化合物濃度に乖離幅を有する化合物、及び／又は、リポソームに内封され、リポソームから徐放的に放出される化合物を提供する。すなわち、副作用を低減しつつ治療効果の高い抗腫瘍剤を提供する。

【0007】

本発明者らは、鋭意検討した結果、下記式（１）で表される化合物又はその製薬学的に許容される塩（以下、「本開示の化合物」と称することもある。）が、ＣＨＫ１に対して強い阻害作用を有することにより、優れた抗腫瘍作用を示すことを見出し、本開示を完成させるに至った。

【0008】

すなわち、本開示は、以下の通りである。

【0009】

〔項１〕

【化7】

［式中、
Ｒ^１は、水素原子、置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、又は置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリールを表し、
Ｒ^２は、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、カルボキシル、スルホン酸、リン酸、－ＯＲ^３、－ＳＲ^３、－ＣＯＲ^４、－ＣＯ_２Ｒ^４、－ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、－ＳＯ_２Ｒ^４、－ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、－ＯＣＯＲ^４、－ＯＣＯ_２Ｒ^４、－ＯＣＯＮＲ^５Ｒ^６、－ＮＲ^５Ｒ^６、－ＮＲ^７ＣＯＲ^４、－ＮＲ^７ＣＯ_２Ｒ^４、－ＮＲ^７ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、－ＮＲ^７ＳＯ_２Ｒ^４、－ＮＲ^７ＳＯ_２ＮＲ^５Ｒ^６、置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_２－６アルケニル、置換されていてもよいＣ_２－６アルキニル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、又は置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリールを表し、
Ｒ^３は、水素原子又はＣ_１－６アルキルを表し、
Ｒ^４は、Ｃ_１－６アルキルを表し、
Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、水素原子、又はＣ_１－６アルキルを表し、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^５及びＲ^６が共にＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよく、
Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８は、複数ある場合はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、ニトロ、カルボキシル、スルホン酸、リン酸、－ＯＲ^９、－ＳＲ^９、－ＣＯＲ^１０、－ＣＯ_２Ｒ^１０、－ＣＯＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＳＯ_２Ｒ^１０、－ＳＯ_２ＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＯＣＯＲ^１０、－ＯＣＯ_２Ｒ^１０、－ＯＣＯＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＮＲ^１３ＣＯＲ^１０、－ＮＲ^１３ＣＯ_２Ｒ^１０、－ＮＲ^１３ＣＯＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＮＲ^１３ＳＯ_２Ｒ^１０、－ＮＲ^１３ＳＯ_２ＮＲ^１１Ｒ^１２、置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_２－６アルケニル、置換されていてもよいＣ_２－６アルキニル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、又は置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリールを表し、
Ｒ^９は、水素原子又はＣ_１－６アルキルを表し、
Ｒ^１０は、Ｃ_１－６アルキルを表し、
Ｒ^１１、Ｒ^１２及びＲ^１３は、それぞれ独立して、水素原子又はＣ_１－６アルキルを表し、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１１及びＲ^１２が共にＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよく、
Ｌは、単結合又は置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンを表し、
Ｖは、単結合、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキレン又は置換されていてもよい３～１０員の二価飽和複素環基を表し、
Ｗは、単結合又は置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンを表し、
Ｑは、水素原子又はＮＨＲ^１４を表し、
Ｒ^１４は、水素原子、置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、又は置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基を表す］で表される、
化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２〕
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^８、Ｒ^１４、Ｌ、Ｖ、及びＷにおける置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_２－６アルケニル、置換されていてもよいＣ_２－６アルキニル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリール、置換されていてもよいＣ_１－６アルキレン、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキレン、又は置換されていてもよい３～１０員の二価飽和複素環基が、それぞれ独立して
（１）ハロゲン原子、
（２）水酸基、
（３）Ｃ_６－１０アリール、
（４）５～１２員のヘテロアリール、
（５）Ｃ_１－６アルキル、
（６）Ｃ_２－６アルケニル、
（７）Ｃ_２－６アルキニル、
（８）Ｃ_１－６アルコキシ、
（９）Ｃ_１－６アルキルチオ
（１０）Ｃ_３－１０シクロアルキル、
（１１）３～１０員の飽和複素環基、
（１２）カルボキシル、
（１３）－ＣＯＲ^１５、
（１４）－ＣＯ_２Ｒ^１５、
（１５）－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１６）－ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１７）－ＮＲ^１８ＣＯＲ^１５、
（１８）－ＮＲ^１８ＣＯ_２Ｒ^１５、
（１９）－ＮＲ^１８ＳＯ_２Ｒ^１５、
（２０）－ＮＲ^１８ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（２１）－ＮＲ^１８ＳＯ_２ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（２２）－ＳＯ_２Ｒ^１５、
（２３）－ＳＯ_２ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（２４）－ＯＣＯＲ^１５、
（２５）－ＯＣＯ_２Ｒ^１５、
（２６）－ＯＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（２７）スルホン酸、
（２８）リン酸、
（２９）シアノ、及び
（３０）ニトロ
からなる群から選択される同一又は異なる１～５個の置換基で置換されていてもよく、
ここにおいて、前記（３）Ｃ_６－１０アリール、（４）５～１２員のヘテロアリール、（５）Ｃ_１－６アルキル、（６）Ｃ_２－６アルケニル、（７）Ｃ_２－６アルキニル、（８）Ｃ_１－６アルコキシ、（９）Ｃ_１－６アルキルチオ、（９）Ｃ_３－１０シクロアルキル及び（１０）３～１０員の飽和複素環基に示す基が、
（ａ）ハロゲン原子、
（ｂ）水酸基、
（ｃ）Ｃ_６－１０アリール、
（ｄ）５～１２員のヘテロアリール、
（ｅ）Ｃ_１－６アルキル、
（ｆ）Ｃ_２－６アルケニル、
（ｇ）Ｃ_２－６アルキニル、
（ｈ）Ｃ_１－６アルコキシ、
（ｉ）Ｃ_３－１０シクロアルキル、
（ｊ）３～１０員の飽和複素環基、
（ｋ）カルボキシル、
（ｌ）－ＣＯＲ^１５、
（ｍ）－ＣＯ_２Ｒ^１５、
（ｎ）－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（ｏ）－ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（ｐ）－ＮＲ^１８ＣＯＲ^１５、
（ｑ）－ＮＲ^１８ＳＯ_２Ｒ^１５、
（ｒ）－ＳＯ_２Ｒ^１５、
（ｓ）－ＳＯ_２ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（ｔ）スルホン酸、
（ｕ）リン酸、
（ｖ）シアノ、及び
（ｗ）ニトロ
からなる群から選択される同一又は異なる１～５個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ^１５が、複数ある場合はそれぞれ独立して、Ｃ_１－６アルキルであり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、それぞれ独立して、水素原子又はＣ_１－６アルキルであり、Ｒ^１６又はＲ^１７が複数ある場合は、Ｒ^１６又はＲ^１７のそれぞれは同一でも異なってもよく、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１６及びＲ^１７が共にＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよく、
Ｒ^１８が、水素原子又はＣ_１－６アルキルである、
項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３〕
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^８、Ｒ^１４、Ｌ、Ｖ、及びＷにおける置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_２－６アルケニル、置換されていてもよいＣ_２－６アルキニル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリール、置換されていてもよいＣ_１－６アルキレン、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキレン、又は置換されていてもよい３～１０員の二価飽和複素環基が、それぞれ独立して
（１）ハロゲン原子、
（２）水酸基、
（３）Ｃ_６－１０アリール、
（４）５～１２員のヘテロアリール、
（５）ハロゲン原子、及び水酸基からなる群から選択される１～３の置換基で置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、
（６）Ｃ_２－６アルケニル、
（７）Ｃ_２－６アルキニル、
（８）Ｃ_１－６アルコキシ、
（９）Ｃ_３－１０シクロアルキル、
（１０）３～１０員の飽和複素環基、
（１１）カルボキシル、
（１２）－ＣＯＲ^１５、
（１３）－ＣＯ_２Ｒ^１５、
（１４）－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１５）－ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１６）－ＳＯ_２Ｒ^１５、
（１７）－ＳＯ_２ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１８）スルホン酸、
（１９）リン酸、
（２０）シアノ、及び
（２１）ニトロ
からなる群から選択される同一又は異なる１～５個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ^１５が、複数ある場合はそれぞれ独立して、Ｃ_１－６アルキルであり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、それぞれ独立して、水素原子又はＣ_１－６アルキルを表し、Ｒ^１６又はＲ^１７が複数ある場合は、Ｒ^１６又はＲ^１７のそれぞれは同一でも異なってもよく、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１６及びＲ^１７が共にＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよい、
項１～２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４〕
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^８、Ｌ、Ｖ、及びＷにおける置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、置換されていてもよいＣ_２－６アルケニル、置換されていてもよいＣ_２－６アルキニル、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル、置換されていてもよい３～１０員の飽和複素環基、置換されていてもよいＣ_６－１０アリール、置換されていてもよい５～１２員のヘテロアリール、置換されていてもよいＣ_１－６アルキレン、置換されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキレン、又は置換されていてもよい３～１０員の二価飽和複素環基が、それぞれ独立して
（１）ハロゲン原子、
（２）水酸基、
（３）フェニル、
（４）５～６員のヘテロアリール、
（５）ハロゲン原子、及び水酸基からなる群から選択される１～３の置換基で置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、
（６）Ｃ_１－６アルコキシ、
（７）Ｃ_３－７シクロアルキル、
（８）３～７員の飽和複素環基、
（９）－ＣＯＲ^１５、
（１０）－ＣＯ_２Ｒ^１５、
（１１）－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１２）－ＮＲ^１６Ｒ^１７、
（１３）－ＳＯ_２Ｒ^１５、
（１４）－ＳＯ_２ＮＲ^１６Ｒ^１７、及び
（１５）シアノ
からなる群から選択される同一又は異なる１～５個の置換基で置換されていてもよく、
Ｒ^１５が、複数ある場合はそれぞれ独立して、Ｃ_１－６アルキルであり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、それぞれ独立して、水素原子又はＣ_１－６アルキルであり、Ｒ^１６又はＲ^１７が複数ある場合は、Ｒ^１６又はＲ^１７のそれぞれは同一でも異なってもよく、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１６及びＲ^１７が共にＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよい、
項１～３のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５〕
Ｒ^１が、水素原子、又は１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルである、
項１～４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６〕
Ｒ^１が、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基、又はエチル基である、
項１～４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７〕
Ｒ^１が、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基である、
項１～４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項８〕
Ｒ^１が、メチル基である、
項１～４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項９〕
Ｒ^２が、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、－ＯＲ^３、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又は３～１０員の飽和複素環基である、
項１～８のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１０〕
Ｒ^２が、ハロゲン原子、シアノ、又は１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルである、
項１～８のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１１〕
Ｒ^２が、シアノである、
項１～８のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１２〕
Ｒ^８が、複数ある場合はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、－ＯＲ^９、－ＣＯ_２Ｒ^１０、－ＣＯＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＮＲ^１１Ｒ^１２、－ＮＲ^１３ＣＯＲ^１０、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、水酸基、フェニル、５～６員のヘテロアリール、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_３－７シクロアルキル、３～７員の飽和複素環基、－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキルは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、水酸基、フェニル、５～６員のヘテロアリール、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_３－７シクロアルキル、３～７員の飽和複素環基、－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、水酸基、フェニル、５～６員のヘテロアリール、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_３－７シクロアルキル、３～７員の飽和複素環基、－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、フェニル（該フェニルは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、水酸基、フェニル、５～６員のヘテロアリール、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_３－７シクロアルキル、３～７員の飽和複素環基、－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、水酸基、フェニル、５～６員のヘテロアリール、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６アルコキシ、Ｃ_３－７シクロアルキル、３～７員の飽和複素環基、－ＣＯＮＲ^１６Ｒ^１７、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１３〕
Ｒ^８が、複数ある場合はそれぞれ独立して、
水素原子、
ハロゲン原子
－ＯＲ^９、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
Ｃ_３－７シクロアルキル（該シクロアルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
３～７員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
フェニル（該フェニルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１４〕
Ｒ^８が、複数ある場合はそれぞれ独立して、
水素原子、
フッ素原子、
塩素原子、
臭素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は
５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１５〕
Ｌが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、項１～１４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１６〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１５のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１７〕
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１８〕
Ｒ^１４が、
水素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～１７のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項１９〕
Ｒ^１が、
１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ^２が、
ハロゲン原子、
シアノ、又は
１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルであり、
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子であり、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、複数ある場合はそれぞれ独立して、
水素原子、
フッ素原子、
塩素原子、
臭素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は
５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）であり
Ｌが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｑが、水素原子、又はＮＨＲ^１４であり、
Ｒ^１４が、
水素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、それぞれ独立して、水素原子、又はＣ_１－６アルキルであり、Ｒ^１６又はＲ^１７が複数ある場合は、Ｒ^１６又はＲ^１７のそれぞれは同一でも異なってもよく、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１６及びＲ^１７がともにＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよい、
項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２０〕
式（１）が、下記式（２）：

【化8】

［式中、
Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８は、複数ある場合はそれぞれ独立して、
水素原子、
フッ素原子、
塩素原子、
臭素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は
５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｌは、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｖは、
単結合、
Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｗは、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｑは、水素原子、又はＮＨＲ^１４を表し、
Ｒ^１４は、
水素原子、
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、
Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｒ^１６及びＲ^１７は、それぞれ独立して、水素原子、又はＣ_１－６アルキルを表し、Ｒ^１６又はＲ^１７が複数ある場合は、Ｒ^１６又はＲ^１７のそれぞれは同一でも異なってもよく、ここにおいて、同一の窒素原子と結合するＲ^１６及びＲ^１７がともにＣ_１－６アルキルのとき、これらはそれぞれが結合する窒素原子と一緒になって、３～８員の含窒素飽和複素環を形成していてもよい］で表される、
項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２１〕
Ｘ、Ｙ及びＺのうちの１つまたは２つは、窒素原子を表す、項１～２０のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２２〕
Ｘが、窒素原子であり、
Ｙ及びＺが、ＣＲ^８である、
項１～２１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２３〕
Ｙが、窒素原子であり、
Ｘ及びＺが、ＣＲ^８である、
項１～２１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２４〕
Ｚが、窒素原子であり、
Ｘ及びＹが、ＣＲ^８である、
項１～２１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２５〕
Ｒ^８は、複数ある場合はそれぞれ独立して、
水素原子、
フッ素原子、
塩素原子、
臭素原子、又は
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、及びＣ_１－３アルコキシからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２６〕
Ｒ^８が、複数ある場合はそれぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルである、
項１～２４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２７〕
Ｌが、単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２８〕
Ｌが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項２９〕
Ｌが、
単結合、又は
１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンである、
項１～２６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３０〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３１〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３２〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、及び１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～２９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３３〕
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～３２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３４〕
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－３アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～３２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３５〕
Ｗが、
単結合、又は
１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンである、
項１～３２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３６〕
Ｒ^１４が、
水素原子、又は
Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～３５のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３７〕
Ｒ^１４が、
水素原子、又は
Ｃ_１－３アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項１～３５のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３８〕
Ｑが、
水素原子、
ＮＨ_２、又は
ＮＨＭｅである、
項１～３７のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項３９〕
式（１）が、下記式（３）：

【化9】

［式中、
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂは、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルを表し、
Ｌは、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンを表し、
Ｖは、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｗは、
単結合、又は
１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンを表し、
Ｑは、水素原子又はＮＨ_２である］で表される
項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４０〕
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂが、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子又は塩素原子である、
項３９に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４１〕
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂが、それぞれ独立して、水素原子、又は塩素原子である、
項３９に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４２〕
Ｌが、Ｃ_１－３アルキレンである、
項３９～４１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４３〕
Ｖが、単結合である、
項３９～４２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４４〕
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレンである、
項３９～４２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４５〕
Ｗが、単結合である、
項３９～４４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４６〕
Ｗが、Ｃ_１－３アルキレンである、
項３６～４４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４７〕
Ｑが、ＮＨ_２である、
項３６～４６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４８〕
式（１）が、下記式（４）：

【化10】

［式中、
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃは、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルを表し、
Ｌは、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｖは、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１～３個の水酸基及びフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｗは、
単結合、又は
１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンを表し、
Ｑは、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである］で表される
項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項４９〕
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、水素原子である、
項４８に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５０〕
Ｌが、
単結合、又は
１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンである、
項４８又は４９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５１〕
Ｌが、１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－４アルキレンである、
項４８又は４９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５２〕
Ｌが、単結合である、
項４８又は４９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５３〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項４８～５２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５４〕
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－３アルキレンである、
項４８～５３のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５５〕
Ｗが、単結合である、
項４８～５３のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５６〕
Ｗが、Ｃ_１－３アルキレンである、
項４８～５３のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５７〕
Ｑが、水素原子である、
項４８～５６のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５８〕
Ｑが、ＮＨ_２である、
項４８～５６のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項５９〕
Ｑが、ＮＨＭｅである、
項４８～５６のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６０〕
式（１）が、下記式（５）：

【化11】

［式中、
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｃは、それぞれ独立して、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルを表し、
Ｌは、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－6アルキレンを表し、
Ｖは、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｗは、
単結合、又は
１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンを表し、
Ｑは、水素原子、又はＮＨ_２である］で表される
項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６１〕
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｃが、水素原子である、
項６０に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６２〕
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－6アルキレンである、
項６０又は６１のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６３〕
Ｖが、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、水酸基、及び１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項６０～６２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６４〕
Ｖが、単結合である、
項６０～６２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６５〕
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレンである、
項６０～６２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６６〕
Ｖが、３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）である、
項６０～６２のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６７〕
Ｗが、
単結合、又は
Ｃ_１－３アルキレンである、
項６０～６６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６８〕
Ｗが、単結合である、
項６０～６６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項６９〕
Ｗが、Ｃ_１－３アルキレンである、
項６０～６６のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７０〕
Ｑが、水素原子である、
項６０～６９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７１〕
Ｑが、ＮＨ_２である、
項６０～６９のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７２〕
式（１）が、下記式（６）：

【化12】

［式中、
Ｒ^８ａは、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルを表し、
Ｌは、
単結合、又は
Ｃ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｖは、
単結合、
Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は
３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基及び１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）を表し、
Ｗは、
単結合、又は
１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンを表し、
Ｑは、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである］で表される
項１に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７３〕
Ｒ^８ａが、水素原子である、
項７２に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７４〕
Ｌが、Ｃ_１－４アルキレンである、
項７２又は７３のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７５〕
Ｖが、
単結合、又は
Ｃ_３－７シクロアルキレンである、
項７２～７４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７６〕
Ｖが、単結合である、
項７２～７４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７７〕
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレンである、
項７２～７４のいずれか一項に記載の化合物、又はその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７８〕
Ｗが、
単結合、又は、
Ｃ_１－３アルキレンである、
項７２～７７のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項７９〕
Ｗが、単結合である、
項７２～７７のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項８０〕
Ｗが、Ｃ_１－３アルキレンである、
項７２～７７のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項８１〕
Ｑが、ＮＨ_２である、
項７２～８０のいずれか一項に記載の化合物、またはその製薬学的に許容される塩を含有する医薬。
〔項８２〕
以下の化合物から選択される、化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、項１に記載の医薬：５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１）、
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－６－クロロ－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２）、
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３）、
５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－２－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例４）、
５－［（５－｛３－［（３－フルオロアゼチジン－３－イル）メトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例５）、
５－［（５－｛２－メトキシ－４－［（３－メチルアゼチジン－３－イル）メトキシ］ピリジン－３－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例６）、
５－［（５－｛４－［（３－ヒドロキシアゼチジン－３－イル）メトキシ］－２－メトキシピリジン－３－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例７）、
５－｛［５－（４－｛［３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－３－イル］メトキシ｝－２－メトキシピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例８）、
５－［（５－｛３－［（３Ｒ）－３－アミノブトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例９）、
５－［（５－｛３－［（３Ｓ）－３－アミノブトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１０）、
５－｛［５－（３－｛［１－（アミノメチル）シクロプロピル］メトキシ｝－５－メトキシピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１１）、
５－［（５－｛３－メトキシ－５－［（モルホリン－２－イル）メトキシ］ピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１２）、
５－［（５－｛３－メトキシ－５－［（モルホリン－２－イル）メトキシ］ピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１３）、
５－［（５－｛３－［（２Ｓ）－３－アミノ－２－ヒドロキシプロポキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１４）、
Ｎ－｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝－５－クロロピラジン－２－アミン（実施例１５）、
Ｎ－｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝－５－（トリフルオロメチル）ピラジン－２－アミン（実施例１６）、
５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－６－メトキシピリミジン－５－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１７）、５－（｛５－［３－（アゼチジン－３－イル）メトキシ－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１８）、
５－｛［５－（３－｛［（１Ｒ，３Ｓ）－３－アミノシクロヘキシル］オキシ｝－５－メトキシピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１９）、
（Ｓ）－５－［（５－｛３－［（３－フルオロピロリジン－３－イル）メトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２０）、
（Ｓ）－５－［（５－｛３－メトキシ－［５－（ピロリジン－３－イル）メトキシ］ピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２１）、
（Ｒ）－５－［（５－｛３－［（３－フルオロピロリジン－３－イル）メトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２２）、
５－｛［５－（４－｛［１－（アミノメチル）シクロプロピル］メトキシ｝－６－メトキシピリミジン－－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２３）、
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－（フルオロメトキシ）ピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２４）、
５－［（５－｛３－メトキシ－５－［（３－メチルアゼチジン－３－イル）メトキシ］ピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２５）、
５－｛［５－（３－｛［３－（ジフルオロメチル）アゼチジン－３－イル］メトキシ｝－５－メトキシピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２６）、
５－［（５－｛３－［（２Ｓ）－３－アミノ－２－メチルプロポキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２７）、
５－［（５－｛３－［（２Ｒ）－３－アミノ－２－メチルプロポキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２８）、
５－［（５－｛３－［（２Ｓ）－３－アミノ－２－フルオロプロポキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例２９）、
５－［（５－｛３－［（２Ｒ）－３－アミノ－２－フルオロプロポキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３０）、
５－［（５－｛３－メトキシ－５－［３－（メチルアミノ）プロポキシ］ピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３１）、
５－｛［５－（３－｛［（１Ｒ，３Ｒ）－３－アミノシクロペンチル］オキシ｝－５－メトキシピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３２）、
５－［（５－｛３－［（１Ｒ）－１－（アゼチジン－３－イル）エトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３３）、
５－［（５－｛３－［（１Ｒ）－１－（３－ヒドロキシアゼチジン－３－イル）エトキシ］－５－メトキシピリジン－４－イル｝－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）アミノ］ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３４）、
５－｛［５－（３－メトキシ－５－｛［（１Ｒ，３Ｒ）－３－（メチルアミノ）シクロペンチル］オキシ｝ピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３５）、
５－｛［５－（３－｛［（１Ｒ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｓ）－４－アミノビシクロ［３．１．０］ヘキサン－２－イル］オキシ｝－５－メトキシピリジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３６）、
５－｛［５－（２－｛［１－（アミノメチル）シクロプロピル］メトキシ｝－４－メトキシピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３７）、
５－｛［５－（４－｛［１－（アミノメチル）シクロプロピル］メトキシ｝－２－メトキシピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル］アミノ｝ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３８）。
〔項８３〕
以下の化合物から選択される、化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、項１に記載の医薬：５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１）、
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３）、
５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－２－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例４）。
〔項８４〕
以下の化合物から選択される、化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、項１に記載の医薬：５－（｛５－［４－（３－アミノプロポキシ）－２－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例４）。
〔項８５〕
以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、項１に記載の医薬：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例１）。
〔項８６〕
以下の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する、項１に記載の医薬：
５－（｛５－［３－（３－アミノプロポキシ）－５－メトキシピリジン－４－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル（実施例３）。
〔項８７〕
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬を有効成分として含有する医薬組成物。
〔項８８〕
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、プレキサセルチブ、又はその製薬学的に許容される塩を内封したリポソームを含有する医薬組成物。
〔項８９〕
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬を内封したリポソームを含有する医薬組成物。
〔項９０〕
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬であって、該医薬はそれを内封したリポソームに含まれる医薬。
〔項９１〕
前記リポソームが、リン脂質をさらに含む、項８８又は８９に記載の医薬組成物又は項９０に記載の医薬。
〔項９２〕
前記リポソームが、
（１）項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、及び
（２）リン脂質、
を含む、項８８～９１のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９３〕
前記リン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、大豆レシチン、卵黄レシチン、水素添加卵黄レシチン、及び水素添加大豆レシチンからなる群より選択される一種又はそれらの二種以上の組み合わせ物である、項９１又は９２に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９４〕
前記リポソームが、さらにステロール類を含む、項８８～９３のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９５〕
前記ステロール類が、コレステロールである、項９４に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９６〕
前記リポソームが、さらにポリマー修飾脂質を含む、項８８～９５のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９７〕
前記ポリマー修飾脂質のポリマー部分が、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メトキシポリエチレングリコール、メトキシポリプロピレングリコール、メトキシポリビニルアルコール、メトキシポリビニルピロリドン、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、エトキシポリビニルアルコール、エトキシポリビニルピロリドン、プロポキシポリエチレングリコール、プロポキシポリプロピレングリコール、プロポキシポリビニルアルコール、又はプロポキシポリビニルピロリドンである、項９６に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９８〕
ポリマー修飾脂質の脂質部分が、ホスファチジルエタノールアミン又はジアシルグリセロールである、項９６又は９７に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項９９〕
前記ポリマー修飾脂質が、ポリマー部分としてポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メトキシポリエチレングリコール、メトキシポリプロピレングリコール、メトキシポリビニルアルコール、メトキシポリビニルピロリドン、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、エトキシポリビニルアルコール、エトキシポリビニルピロリドン、プロポキシポリエチレングリコール、プロポキシポリプロピレングリコール、プロポキシポリビニルアルコール、又はプロポキシポリビニルピロリドンを含み、脂質部分としてホスファチジルエタノールアミン又はジアシルグリセロールを含む、項９６又は９７に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項１００〕
前記リポソームが、
（１）項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、
（２）４０～７０モル％のリン脂質、
（３）３０～５０モル％のコレステロール、及び
（４）１～１０モル％のポリマー修飾脂質、
を含む、項８９～９１のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項１０１〕
前記リポソームが、さらに、無機酸、無機酸塩、有機酸、有機酸塩、糖類、緩衝剤、酸化防止剤、及びポリマー類からなる群から選択される添加物を含む、項８９～１００のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬。
〔項１０２〕
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬を有効成分として含有する、癌の治療剤及び／又は予防剤。
〔項１０３〕
前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、項１０２に記載の治療剤及び／又は予防剤。
〔項１０４〕
前記癌が、頭頚部がん、扁平上皮がん、非小細胞肺がん、肛門がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、又は子宮体がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、項１０２に記載の治療剤及び／又は予防剤。
〔項１０５〕
治療及び／又は予防が必要な患者に、治療及び／又は予防上の有効量の項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、或いは項８７～１０１に記載の医薬組成物又は医薬、或いは項１０２～１０４に記載の治療剤及び／又は予防剤を投与することを含む、癌の治療及び／又は予防するための方法。
〔項１０６〕
前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、項１０５に記載の治療及び／又は予防するための方法。
〔項１０７〕
癌の治療剤及び／又は予防剤を製造するための、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、或いは項８７～１０１に記載の医薬組成物又は医薬、或いは項１０２～１０４に記載の治療剤及び／又は予防剤の使用。
〔項１０８〕
前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、或いは医薬組成物、或いは治療剤及び／又は予防剤の使用。
〔項１０９〕
癌の治療及び／又は予防に使用するための、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、或いは項８７～１０１に記載の医薬組成物又は医薬、或いは項１０２～１０４に記載の治療剤及び／又は予防剤。
〔項１１０〕
前記癌が、扁平上皮がん、メラノーマ、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、頭頸部扁平上皮癌、食道がん、甲状腺がん、肺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、ＭＳＩ－ｈｉｇｈ大腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、白金製剤抵抗性卵巣がん、ＰＡＲＰ阻害剤抵抗性卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がんからなる群から選択される少なくとも一種の癌である、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬、或いは医薬組成物、或いは治療剤及び／又は予防剤。
〔項１１１〕
併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬であって、当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上である、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬。
〔項１１２〕
併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬であって、当該併用薬物が、５－ＦＵ系薬剤、シタラビン、塩酸ドキソルビシン、ゲムシタビン、メソトレキセート、ペメトレキセド、エトポシド、イリノテカン、トポテカン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、電離放射線、ベバシズマブ、リポソーム化ドキソルビシン、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、トラベクテジン、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、アテゾリズマブ、ラロトレクチニブ、エントレクチニブ、ナブパクリタキセル、エルロチニブ、リポソーム化イリノテカン、ロイコボリン、セツキシマブ、エリブリン、イホスファミド、ダカルバジンからなる群から選択される少なくとも１種以上である、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬。
〔項１１３〕
併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬であって、当該併用薬物が、５－ＦＵ系薬剤、イリノテカン、ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、電離放射線、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブからなる群から選択される少なくとも１種以上である、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬。
〔項１１４〕
併用薬物又はその製薬学的に許容される塩と併用して、がんを治療するための、（ａ）項１～８６のいずれか一項に記載の医薬であって、（ｂ）当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上であり、
（１）（ａ）が（ｂ）と同時に投与される、
（２）（ａ）が (ｂ)の投与後に投与される、又は
（３）（ｂ）が (ａ)の投与後に投与されること、を特徴とする、
項１～８６のいずれか一項に記載の医薬。
〔項１１５〕
前記併用薬物（ｂ）が、化学療法剤又は免疫療法剤である、
項１１４に記載の医薬。
〔項１１６〕
前記併用薬物（ｂ）が、ゲムシタビンである、
項１１４又は１１５に記載の医薬。
〔項１１７〕
前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）ゲムシタビンと同時に投与される項１１６に記載の医薬。
〔項１１８〕
前記（ａ）医薬が、前記（ｂ）ゲムシタビンの投与後約２４～４８時間以内に投与される項１１６に記載の医薬。
〔項１１９〕
前記（ｂ）ゲムシタビンが、前記（ａ）化合物、又はその製薬学的に許容される塩、或いはリポソームの投与後約２４～４８時間以内に投与される項１１６に記載の医薬。
〔項１２０〕
前記併用薬物（ｂ）が、抗ＰＤ－１抗体である、
項１１４又は１１５に記載の医薬。
〔項１２１〕
前記（ａ）化合物、又はその製薬学的に許容される塩、或いはリポソームが、前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体と同時に投与される項１２０に記載の医薬。
〔項１２２〕
前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体が、前記（ａ）化合物、又はその製薬学的に許容される塩、或いはリポソームの投与後約７２～９６時間以内に投与される、項１２０に記載の医薬。
〔項１２３〕
前記（ａ）化合物、又はその製薬学的に許容される塩、或いはリポソームが、前記（ｂ）抗ＰＤ－１抗体の投与後約７２～９６時間以内に投与される項１１６に記載の医薬。
〔項１２４〕
併用薬物と組み合わせてなる、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬を含む医薬組成物、或いは項８７～１０１のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬であって、当該併用薬物が、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤ならびに細胞増殖因子およびその受容体作用を阻害する薬剤からなる群から選択される少なくとも１種以上である、医薬組成物。
〔項１２５〕
併用薬物と組み合わせてなる、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬医薬を含む医薬組成物、或いは項８７～１０１のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬であって、当該併用薬物が、５－ＦＵ系薬剤、シタラビン、塩酸ドキソルビシン、ゲムシタビン、メソトレキセート、ペメトレキセド、エトポシド、イリノテカン、トポテカン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、電離放射線、ベバシズマブ、リポソーム化ドキソルビシン、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、トラベクテジン、パゾパニブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、アテゾリズマブ、ラロトレクチニブ、エントレクチニブ、ナブパクリタキセル、エルロチニブ、リポソーム化イリノテカン、ロイコボリン、セツキシマブ、エリブリン、イホスファミド、ダカルバジンからなる群から選択される少なくとも１種以上である、医薬組成物。
〔項１２６〕
併用薬物と組み合わせてなる、項１～８６のいずれか一項に記載の医薬を含む医薬組成物、或いは項８７～１０１のいずれか一項に記載の医薬組成物又は医薬であって、当該併用薬物が、５－ＦＵ系薬剤、イリノテカン、ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、電離放射線、ルカパリブ、オラパリブ、ニラパリブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブからなる群から選択される少なくとも１種以上である、医薬組成物。
〔項１２７〕
Ｘ線粉末回折において、７．２°±０．２°、及び８．８°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態Ｉの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩。
〔項１２８〕
Ｘ線粉末回折において、７．２°±０．２°、８．８°±０．２°、９．８°±０．２°、１０．２°±０．２°、１０．７°±０．２°、１６．７°±０．２°、１８．５°±０．２°、２６．２°±０．２°、及び２７．０°±０．２°および２６．４°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態Ｉの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩。
〔項１２９〕
Ｘ線粉末回折において、６．８°±０．２°、及び１３．０°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩。
〔項１３０〕
Ｘ線粉末回折において、６．８°±０．２°、７．５°±０．２°、１１．７°±０．２°、１１．９°±０．２°、１３．０°±０．２°、１６．４°±０．２°、１９．３°±０．２°、２０．４°±０．２°、２２．７°±０．２°、及び２４．３°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩。
〔項１３１〕
Ｘ線粉末回折において、６．０°±０．２°、及び１７．０°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩。
〔項１３２〕
Ｘ線粉末回折において、６．０°±０．２°、９．０°±０．２°、１２．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．２°±０．２°、１７．０°±０．２°、２２．８°±０．２°、及び２６．３°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩。
〔項１３３〕
Ｘ線粉末回折において、９．３°±０．２°、及び１０．２°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＶの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３４〕
Ｘ線粉末回折において、９．３°±０．２°、１０．２°±０．２°、１０．７°±０．２°、１３．６°±０．２°、１６．７°±０．２°、１７．１°±０．２°、１７．８°±０．２°、１８．６°±０．２°、２６．１°±０．２°及び２６．４°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＩＶの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３５〕
Ｘ線粉末回折において、７．９°±０．２°、及び８．７°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態Ｖの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３６〕
Ｘ線粉末回折において、７．９°±０．２°、８．７°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１５．９°±０．２°、１７．６°±０．２°、１９．９°±０．２°、２１．９°±０．２°、２２．８°±０．２°、及び２６．６°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態Ｖの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３７〕
Ｘ線粉末回折において、５．３°±０．２°、及び５．７°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＶＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３８〕
Ｘ線粉末回折において、５．３°±０．２°、５．７°±０．２°、７．０°±０．２°、７．３°±０．２°、７．８°±０．２°、８．４°±０．２°、９．３°±０．２°、１０．５°±０．２°、１１．５°±０．２°、及び１４．１°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＶＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル。
〔項１３９〕
Ｘ線粉末回折において、８．２°±０．２°、及び２７．０°±０．２°に回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＶＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩。
〔項１４０〕
Ｘ線粉末回折において、７．０°±０．２°、８．２°±０．２°、９．７°±０．２°、１１．５°±０．２°、１４．０°±０．２°、１４．６°±０．２°、１６．３°±０．２°、１８．０°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．２°±０．２°、２１．５°±０．２°、２４．１°±０．２°、及び２７．０°±０．２°から選択される４つ以上の回折角（２θ°）ピークを有する、形態ＶＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩。

【発明の効果】

【0010】

本開示により、５－ヘテロアリール－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含むＣＨＫ１阻害剤が提供される。本開示の化合物は、優れたＣＨＫ１阻害活性と高い安全性とを併せ持つ。リポソームに内封され、リポソームから徐放的に放出されることで、持続的にがんに作用し、強力な抗腫瘍効果を示す。本開示の化合物は、ＣＨＫ１が関与する疾患に対する治療薬として有用であり、具体的には、膵がん、卵巣がん、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、又は軟部肉腫等の患者に適用可能である。

【0011】

本開示は、卵巣がん患者に対するＰｈａｓｅ２試験において薬理作用を示されているものの中でも、５－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－３－アミン誘導体であるプレキサセルチブ（Ｐｒｅｘａｓｅｒｔｉｂ）に比べ、非臨床試験より推察される７２時間の持続的な曝露による薬効の最大化は達成されなかったのに対して、本開示の化合物またはその塩は、これをさらに改善し得ることが明らかになった。また単回投与では、高い最高血中濃度に起因する副作用が生じるプレキサセルチブに比べ、本開示の化合物または塩はこのような副作用はなかった。三日間の連続投与では、長時間における薬物曝露に由来する副作用が見られたのに対して本開示の化合物または塩ではこのような副作用は見られなかった（非特許文献３、非特許文献６）。加えて本願発明者らは、プレキサセルチブが、肝毒性のリスクを有することを新たに見出し、本願発明の化合物は、当該肝毒性のリスクが低減されている。以上から、本開示の化合物は、優れたＣＨＫ１阻害活性と高い安全性とを併せ持つ。

【0012】

特に、式（３）で表される、特定の位置に窒素原子を有するピリジン環を有する化合物は、高い抗腫瘍活性と、安全性を併せ持つとともに、同時に優れた薬物動態を有する特徴を有する。

【0013】

特に、式（３）に含まれる、実施例１の化合物はプレキサセルチブと比較し、高いCHK1阻害活性を示し、強力な細胞増殖抑制効果を有するとともに、高い安全性を併せ持つ特徴を有する。さらに実施例１の化合物は、良好な薬物動態を示すとともに、リポソームに効率よく封入される特徴を有する。実施例１の化合物のリポソーム製剤は、優れた抗腫瘍効果を有することともに、高い安全性を有し、既存の抗がん剤と併用することにより、さらに格別な抗腫瘍効果を発揮する。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】実施例３９の化合物の形態Ｉの粉末Ｘ線回折パターンを示す。横軸は回折角２θ（°）、縦軸はカウント数を示す（以下、図２～図６について同様である）。

【図2】実施例４０の化合物の形態ＩＩの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図3】実施例４１の化合物の形態ＩＩＩの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図4】実施例４２の化合物の形態ＩＶの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図5】実施例４３の化合物の形態Ｖの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図6】実施例４４の化合物の形態ＶＩの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図6A】実施例４５の化合物の形態ＶＩＩの粉末Ｘ線回折パターンを示す。

【図7】図７は、試験例１１の試験Ａ、プレキサセルチブの溶液製剤又はリポソーム製剤についてのＥＳ－２担がんマウスを用いた腫瘍ＰＤ応答作用を示す図である。ＰＤ応答は、ウエスタンブロッティングによりγＨ２ＡＸおよびＴｕｂｕｌｉｎの発現量を検出し、各バンド強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアによって定量化し、γＨ２ＡＸの発現量をＴｕｂｕｌｉｎの発現量によって相対値を算出することにより評価した。縦軸はγＨ２ＡＸの相対値を示す。

【図8】図８は、試験例１１の試験Ｂ、プレキサセルチブの溶液製剤又は実施例１のリポソーム製剤についてのＥＳ－２担がんマウスを用いた腫瘍ＰＤ応答作用を示す図である。ＰＤ応答は、ウエスタンブロッティングによりγＨ２ＡＸおよびＴｕｂｕｌｉｎの発現量を検出し、各バンド強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアによって定量化し、γＨ２ＡＸの発現量をＴｕｂｕｌｉｎの発現量によって相対値を算出することにより評価した。縦軸はγＨ２ＡＸの相対値を示す。

【図9】図９は、試験例１１の試験Ｃ、実施例１のリポソーム製剤についてのＥＳ－２担がんマウスを用いた腫瘍ＰＤ応答作用を示す図である。ＰＤ応答は、ウエスタンブロッティングによりγＨ２ＡＸおよびＴｕｂｕｌｉｎの発現量を検出し、各バンド強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアによって定量化し、γＨ２ＡＸの発現量をＴｕｂｕｌｉｎの発現量によって相対値を算出することにより評価した。縦軸はγＨ２ＡＸの相対値を示す。

【発明を実施するための形態】

【0015】

以下、本開示につき、さらに詳しく説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語及び科学技術用語は、本開示の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。

【0016】

本明細書における用語について、以下に説明する。

【0017】

本明細書において、「置換されていてもよい」で定義される基における置換基の数は、置換可能であれば特に制限はない。また、特に指示した場合を除き、各々の基の説明はその基が他の基の一部分又は置換基である場合にも該当する。

【0018】

「ハロゲン原子」とは、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子等が挙げられる。好ましくはフッ素原子、又は塩素原子である。

【0019】

「Ｃ_１－６アルキル」とは、炭素原子数が１～６のアルキルを意味し、「Ｃ_６アルキル」とは、炭素原子数が６のアルキルを意味する。他の数字の場合も同様である。

【0020】

「Ｃ_１－６アルキル」とは、炭素原子数が１～６の直鎖状又は分枝鎖状の飽和炭化水素基を意味する。Ｃ_１－６アルキルとして、好ましくは「Ｃ_１－４アルキル」が挙げられ、より好ましくは「Ｃ_１－３アルキル」が挙げられる。「Ｃ_１－３アルキル」の具体例としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、１－メチルエチル等が挙げられる。「Ｃ_１－４アルキル」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－３アルキル」の具体例として挙げたものに加え、ブチル、１，１－ジメチルエチル、１－メチルプロピル、２－メチルプロピル等が挙げられる。「Ｃ_１－６アルキル」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－４アルキル」の具体例として挙げたものに加え、ペンチル、１，１－ジメチルプロピル、１，２－ジメチルプロピル、１－メチルブチル、２－メチルブチル、４－メチルペンチル、３－メチルペンチル、２－メチルペンチル、１－メチルペンチル、ヘキシル等が挙げられる。

【0021】

「Ｃ_２－６アルケニル」とは、炭素原子数２～６個を有し、１～３個の二重結合を含む直鎖状又は分枝鎖状の不飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ_２－６アルケニル」として好ましくは、「Ｃ_２－４アルケニル」が挙げられる。「Ｃ_２－４アルケニル」の具体例として、例えば、ビニル、プロペニル、メチルプロペニル、ブテニル等が挙げられる。「Ｃ_２－６アルケニル」の具体例として、例えば、前記「Ｃ_２－４アルケニル」の具体例として挙げたものに加え、ペンテニル、ヘキセニル等が挙げられる。

【0022】

「Ｃ_２－６アルキニル」とは、炭素原子数２～６個を有し、三重結合を１個含む直鎖状又は分枝鎖状の不飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ_２－６アルキニル」として、好ましくは「Ｃ_２－４アルキニル」が挙げられる。「Ｃ_２－４アルキニル」の具体例としては、例えば、プロピニル、メチルプロピニル、ブチニル等が挙げられる。「Ｃ_２－６アルキニル」の具体例として、例えば、前記「Ｃ_２－４アルキニル」の具体例として挙げたものに加え、メチルブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等が挙げられる。

【0023】

「Ｃ_１－６アルコキシ」とは「Ｃ_１－６アルキルオキシ」のことであり、「Ｃ_１－６アルキル」部分は、前記「Ｃ_１－６アルキル」と同義である。「Ｃ_１－６アルコキシ」としては、好ましくは「Ｃ_１－４アルコキシ」が挙げられ、より好ましくは「Ｃ_１－３アルコキシ」が挙げられる。「Ｃ_１－３アルコキシ」の具体例としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、１－メチルエトキシ等が挙げられる。「Ｃ_１－４アルコキシ」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－３アルコキシ」の具体例として挙げたものに加え、ブトキシ、１，１－ジメチルエトキシ、１－メチルプロポキシ、２－メチルプロポキシ等が挙げられる。「Ｃ_１－６アルコキシ」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－４アルコキシ」の具体例として挙げたものに加え、ペンチロキシ、１，１－ジメチルプロポキシ、１，２－ジメチルプロポキシ、１－メチルブトキシ、２－メチルブトキシ、４－メチルペンチロキシ、３－メチルペンチロキシ、２-メチルペンチロキシ、１－メチルペンチロキシ、ヘキシロキシ等が挙げられる。

【0024】

「Ｃ_１－６アルキルチオ」の「Ｃ_１－６アルキル」部分は、前記「Ｃ_１－６アルキル」と同義である。「Ｃ_１－６アルキルチオ」としては、好ましくは「Ｃ_１－４アルキルチオ」が挙げられ、より好ましくは「Ｃ_１－３アルキルチオ」が挙げられる。「Ｃ_１－３アルキルチオ」の具体例としては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、１－メチルエチルチオ等が挙げられる。「Ｃ_１－４アルキルチオ」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－３アルキルチオ」の具体例として挙げたものに加え、ブチルチオ、１，１－ジメチルエチルチオ、１－メチルプロピルチオ、２－メチルプロピルチオ等が挙げられる。「Ｃ_１－６アルキルチオ」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－４アルキルチオ」の具体例として挙げたものに加え、ペンチルチオ、１，１－ジメチルプロピルチオ、１，２－ジメチルプロピルチオ、１－メチルブチルチオ、２－メチルブチルチオ、４－メチルペンチルチオ、３－メチルペンチルチオ、２-メチルペンチルチオ、１－メチルペンチルチオ、ヘキシルチオ等が挙げられる。

【0025】

「Ｃ_１－６アルキレン」とは、炭素原子数１～６個を有し、直鎖状又は分枝鎖状の２価の飽和炭化水素基を意味する。「Ｃ_１－６アルキレン」として、好ましくは「Ｃ_１－４アルキレン」が挙げられ、より好ましくは「Ｃ_１－３アルキレン」が挙げられる。「Ｃ_１－３アルキレン」の具体例としては、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、トリメチレン等が挙げられる。「Ｃ_１－４アルキレン」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－３アルキレン」の具体例として挙げたものに加え、ブチレン、１，１－ジメチルエチレン、１，２－ジメチルエチレン、１－メチルトリメチレン、２－メチルトリメチレン等が挙げられる。「Ｃ_１－６アルキレン」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_１－４アルキレン」の具体例として挙げたものに加え、ペンチレン、１，１－ジメチルトリメチレン、１，２－ジメチルトリメチレン、１－メチルブチレン、２－メチルブチレン、１－メチルペンチレン、２－メチルペンチレン、３－メチルペンチレン、ヘキシレン等が挙げられる。

【0026】

「Ｃ_３－１０シクロアルキル」とは、炭素原子数３～１０の環状の飽和炭化水素基を意味し、一部不飽和結合を有するもの及び架橋された構造のものも含まれる。「Ｃ_３－１０シクロアルキル」として、好ましくは「Ｃ_３－７シクロアルキル」が挙げられる。「Ｃ_３－７シクロアルキル」の具体例としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等が挙げられる。「Ｃ_３－１０シクロアルキル」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_３－７シクロアルキル」の具体例として挙げたものに加え、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、アダマンチル等が挙げられる。

【0027】

また、「Ｃ_３－１０シクロアルキル」には、前記Ｃ_３－１０シクロアルキルと芳香族炭化水素環とが縮環した二環式のものも包含される。当該縮環した化合物の具体例としては、例えば、下記で表される構造等が挙げられる。

【化13】

【0028】

上記架橋された構造の具体例としては、例えば、下記で表される構造等が挙げられる。

【化14】

【0029】

「Ｃ_３－１０シクロアルキレン」とは、炭素原子数３～１０の環状の２価の飽和炭化水素基を意味し、一部不飽和結合を有するもの及び架橋された構造のものも含まれる。「Ｃ_３－１０シクロアルキレン」として、好ましくは「Ｃ_３－７シクロアルキレン」が挙げられる。「Ｃ_３－７シクロアルキレン」の具体例としては、例えば、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、シクロヘキシレン、シクロヘプチレン等が挙げられる。「Ｃ_３－１０シクロアルキル」の具体例としては、例えば、前記「Ｃ_３－７シクロアルキル」の具体例として挙げたものに加え、シクロオクチレン、シクロノニレン、シクロデシレン、アダマンチレン等が挙げられる。

【0030】

上記架橋された構造の具体例としては、例えば、下記で表される構造等が挙げられる。

【化15】

【0031】

「３～１０員の飽和炭素環」とは、炭素原子数３～１０の環状の飽和炭化水素を意味する。「３～１０員の飽和炭素環」として、好ましくは「４～６員の飽和炭素環」が挙げられる。「４～６員の飽和炭素環」の具体例としては、例えば、シクロブタン環、シクロペンタン環、シクロヘキサン環等が挙げられる。「３～１０員の飽和炭素環」の具体例としては、例えば、前記「４～６員の飽和炭素環」の具体例として挙げたものに加え、シクロプロパン環、シクロヘプタン環、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカン等が挙げられる。

【0032】

「３～１０員の飽和複素環基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から独立して選択される１～２個の原子と、２～９個の炭素原子とで構成される１価の飽和複素環基を意味し、一部不飽和結合を有するもの及び架橋された構造のものも含まれる。環を構成する原子は、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－のように酸化されたものを含んでもよい。「３～１０員の飽和複素環基」として、好ましくは、「４～７員の単環式の飽和複素環基」が挙げられる。「４～７員の単環式の飽和複素環基」の具体例としては、例えば、オキセタニル、アゼチジニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジオキソチオモルホリニル、ヘキサメチレンイミニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、オキソイミダゾリジニル、ジオキソイミダゾリジニル、オキソオキサゾリジニル、ジオキソオキサゾリジニル、ジオキソチアゾリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、等が挙げられる。「３～１０員の飽和複素環基」としては、例えば、前記「４～７員の単環式の飽和複素環基」の具体例として挙げたものに加え、オキシラニル、アジリジニル等が挙げられる。
また、「３～１０員の飽和複素環基」には、前記３～１０員の飽和複素環基と６員の芳香族炭化水素環又は６員の芳香族複素環とが縮合環を形成した二環式のものも含まれる。縮合環を形成している６員の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環等が挙げられる。縮合環を形成している６員の芳香族複素環としては、ピリジン、ピリミジン、ピリダジン等が挙げられる。縮合環を形成している二環式の「３～１０員の飽和複素環基」の具体例としては、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソインドリル、ジヒドロプリニル、ジヒドロチアゾロピリミジニル、ジヒドロベンゾジオキサニル、イソインドリル、インダゾリル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロナフチリジニル等が挙げられる。

【0033】

「３～８員の含窒素飽和複素環」とは、１個の窒素原子と２～７個の炭素原子とで構成される飽和複素環を意味する。「３～８員の含窒素飽和複素環」として、好ましくは「４～６員の含窒素飽和複素環」が挙げられる。「４～６員の含窒素飽和複素環」の具体例としては、例えば、アゼチジン環、ピロリジン環、ピペリジン環等が挙げられる。「３～８員の含窒素飽和複素環」の具体例としては、例えば、前記「４～６員の含窒素飽和複素環」の具体例として挙げたものに加え、アジリジン環、アゼパン環、アゾカン環等が挙げられる。

【0034】

「３～１０員の二価飽和複素環基」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から独立して選択される１～２個の原子と、２～９個の炭素原子とで構成される２価の飽和複素環基を意味し、一部不飽和結合を有するもの及び架橋された構造のものも含まれる。環を構成する原子は、－Ｃ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－のように酸化されたものを含んでもよい。「３～１０員の飽和複素環基」として、好ましくは、「４～７員の単環式の飽和複素環基」が挙げられる。「４～７員の単環式の飽和複素環基」の具体例としては、例えば、オキセタニレン、アゼチジニレン、テトラヒドロフリレン、ピロリジニレン、イミダゾリジニレン、ピペリジニレン、モルホリニレン、チオモルホリニレン、ジオキソチオモルホリニレン、ヘキサメチレンイミニレン、オキサゾリジニレン、チアゾリジニレン、オキソイミダゾリジニレン、ジオキソイミダゾリジニレン、オキソオキサゾリジニレン、ジオキソオキサゾリジニレン、ジオキソチアゾリジニレン、テトラヒドロフラニレン、テトラヒドロピラニレン等が挙げられる。「３～１０員の飽和複素環基」としては、例えば、前記「４～７員の単環式の飽和複素環基」の具体例として挙げたものに加え、オキシラニレン、アジリジニレン等が挙げられる。

【0035】

また、「３～１０員の飽和複素環基」には、前記３～１０員の飽和複素環基と６員の芳香族炭化水素環又は６員の芳香族複素環とが縮合環を形成した二環式のものも含まれる。縮合環を形成している６員の芳香族炭化水素環としては、ベンゼン環等が挙げられる。縮合環を形成している６員の芳香族複素環としては、ピリジン、ピリミジン、ピリダジン等が挙げられる。縮合環を形成している二環式の「３～１０員の飽和複素環基」の具体例としては、ジヒドロインドリレン、ジヒドロイソインドリレン、ジヒドロプリニレン、ジヒドロチアゾロピリミジニレン、ジヒドロベンゾジオキサニレン、イソインドリレン、インダゾリレン、テトラヒドロキノリニレン、テトラヒドロイソキノリニレン、テトラヒドロナフチリジニレン等が挙げられる。

【0036】

「Ｃ_６－１０アリール」は、炭素原子数が６～１０の芳香族炭化水素環基を意味する。「Ｃ_６－１０アリール」の具体例としては、例えば、フェニル、１－ナフチル、２－ナフチル等が挙げられる。好ましくは、フェニルが挙げられる。
また、「Ｃ_６－１０アリール」には、前記Ｃ_６－１０アリールとＣ_４－６シクロアルキル又は５～６員の飽和複素環とが縮合環を形成した二環式のものも含まれる。縮合環を形成している二環式の「Ｃ_６－１０アリール」の具体例としては、例えば、下記で表される基等が挙げられる。

【化16】

【0037】

「芳香族炭化水素環」とは、上記「Ｃ_６－１０アリール」の環部分を意味する。

【0038】

「５～１２員のヘテロアリール」とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群から独立して選択される１～４個の原子を含む、単環式の５～７員の芳香族複素環の環状基、又は二環式の８～１２員の芳香族複素環の環状基を意味する。好ましくは、「５～７員の単環式のヘテロアリール」である。より好ましくは、ピリジル、ピリミジニル、キノリル、又はイソキノリルである。さらに好ましくは、ピリジルである。「５～７員の単環式のヘテロアリール」の具体例としては、例えば、ピリジル、ピリダジニル、イソチアゾリル、ピロリル、フリル、チエニル、チアゾリル、イミダゾリル、ピリミジニル、チアジアゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピラジニル、トリアジニル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル等が挙げられる。「５～１２員のヘテロアリール」の具体例としては、前記「５～７員の単環式のヘテロアリール」の具体例として挙げたものに加え、インドリル、インダゾリル、クロメニル、キノリル、イソキノリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル等が挙げられる。

【0039】

「芳香族複素環」とは、上記「５～１２員のヘテロアリール」の環部分を意味する。

【0040】

「がん」および「腫瘍」は、本開示においては同義で、共に悪性腫瘍を意味し、癌、肉腫及び血液悪性腫瘍を包含する。「がん」または「腫瘍」の具体例としては、例えば、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、真性多血症、悪性リンパ腫、形質細胞腫瘍、多発性骨髄腫、脳腫瘍、頭頸部がん、食道がん、甲状腺がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫・胸腺がん、乳がん、胃がん、胆のう・胆管がん、肝がん、肝細胞がん、膵がん、結腸がん、直腸がん、肛門がん、消化管間質腫瘍、絨毛上皮がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、膀胱がん、尿路上皮がん、腎がん、腎細胞がん、前立腺がん、睾丸腫瘍、精巣胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、ウイルムス腫瘍、悪性黒色腫、神経芽細胞腫、骨肉種、ユーイング肉腫、軟骨肉腫、軟部肉腫、又は皮膚がん等が挙げられる。

【0041】

プレキサセルチブとは、下記の構造を有する化合物である。

【化17】

【0042】

式（１）、（２）、（３）、（４）又は（５）で表される本開示の化合物において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^８ａ、Ｒ^８ｂ，Ｒ^８ｃ、Ｒ^９、Ｒ^１０、Ｒ^１１、Ｒ^１２、Ｒ^１３、Ｒ^１４、Ｒ^１５、Ｒ^１６，Ｒ^１７、Ｒ^１８、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ、Ｗ，Ｑ及びＹの好ましいものは以下のとおりであるが、本開示の技術的範囲は下記に挙げる化合物の範囲に限定されるものではない。

【0043】

Ｒ^１の好ましい態様としては、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１のより好ましい態様としては、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基、又はエチル基が挙げられる。
Ｒ^１のさらに好ましい態様としては、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基が挙げられる。
Ｒ^１のさらにより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0044】

Ｒ^２の好ましい態様としては、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、－ＯＲ^３、１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又は３～１０員の飽和複素環基が挙げられる。
Ｒ^２のより好ましい態様としては、水素原子、ハロゲン原子、シアノ又は１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^２のさらに好ましい態様としては、ハロゲン原子、シアノ又は１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^２のさらにより好ましい態様としては、シアノが挙げられる。

【0045】

Ｒ^３の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^３のより好ましい態様としては、Ｃ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^３のさらに好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^３のさらにより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0046】

Ｒ^４の好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^４のより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0047】

Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７のより好ましい態様としては、Ｃ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７のさらに好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^５、Ｒ^６及びＲ^７のさらにより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0048】

Ｒ^８の好ましい態様としては、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｒ^８のより好ましい態様としては、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｒ^８のさらに好ましい態様としては、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^８のさらにより好ましい態様としては、水素原子、又は塩素原子が挙げられる。

【0049】

Ｒ^８ａ、Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃの好ましい態様としては、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子が挙げられる。
Ｒ^８ａ、Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃのより好ましい態様としては、水素原子、塩素原子が挙げられる。
Ｒ^８ａ、Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃのさらに好ましい態様としては、水素原子が挙げられる。

【0050】

Ｒ^９の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^９のより好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^９のさらに好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0051】

Ｒ^１０の好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^１０のさらに好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0052】

Ｒ^１１、Ｒ^１２及びＲ^１３の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１１、Ｒ^１２及びＲ^１３のより好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^１１、Ｒ^１２及びＲ^１３のさらに好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0053】

Ｒ^１４の好ましい態様としては、水素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｒ^１４のより好ましい態様としては、水素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｒ^１４のさらに好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－３アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｒ^１４のさらにより好ましい態様としては、水素原子、又はメチル基が挙げられる。

【0054】

Ｒ^１５の好ましい態様としては、Ｃ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１５のより好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^１５のさらに好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0055】

Ｒ^１６及びＲ^１７の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１６及びＲ^１７のより好ましい態様としては、Ｃ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１６及びＲ^１７のさらに好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^１６及びＲ^１７のさらにより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0056】

Ｒ^１８の好ましい態様としては、水素原子、又はＣ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１８のより好ましい態様としては、Ｃ_１－６アルキルが挙げられる。
Ｒ^１８のさらに好ましい態様としては、Ｃ_１－３アルキルが挙げられる。
Ｒ^１８のさらにより好ましい態様としては、メチル基が挙げられる。

【0057】

Ｘ、Ｙ及びＺの好ましい態様としては、ＣＲ^８、又は窒素原子が挙げられる。本開示において、本開示の化合物または製薬学的に許容される塩についていう場合、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではない。
Ｘ、Ｙ及びＺの別の好ましい態様としては、Ｘ、Ｙ及びＺのうちの１つまたは２つが、窒素原子を表すことが挙げられる。
Ｘ、Ｙ及びＺの別の好ましい態様としては、ＸがＣＲ^８、Ｙ及びＺが窒素原子が挙げられる。
Ｘ、Ｙ及びＺのさらに別の好ましい態様としては、ＹがＣＲ^８、Ｘ及びＺが窒素原子が挙げられる。
Ｘ、Ｙ及びＺのさらに異なる好ましい態様としては、ＺがＣＲ^８、Ｘ及びＹが窒素原子が挙げられる。

【0058】

Ｌの好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｌのより好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｌのさらに好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子及び水酸基からなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｌのさらにより好ましい態様としては、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンが挙げられる。

【0059】

Ｖの好ましい態様としては、単結合、Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｖのより好ましい態様としては、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｖのさらに好ましい態様としては、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基及び１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基及び１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｖのさらにより好ましい態様としては、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該３～７員の飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。

【0060】

Ｗの好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｗのより好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－３アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｗのさらに好ましい態様としては、単結合、又はＣ_１－３アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子及び水酸基からなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）が挙げられる。
Ｗのさらにより好ましい態様としては、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンが挙げられる。

【0061】

Ｑの好ましい態様としては、水素原子、又はＮＨＲ^１４が挙げられる。
Ｑのより好ましい態様としては、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅが挙げられる。
Ｑのさらに好ましい態様としては、水素原子、又はＮＨ_２が挙げられる。
Ｑのさらにより好ましい態様としては、水素原子が挙げられる。
Ｑの別のさらにより好ましい態様としては、ＮＨ_２が挙げられる。

【0062】

式（１）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ａ）が挙げられる。
（Ａ）
Ｒ^１が、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基、又はエチル基であり、
Ｒ^２が、水素原子、ハロゲン原子、シアノ、－ＯＲ^３、１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又は３～１０員の飽和複素環基であり、
Ｒ^３が、水素原子、又はＣ_１－６アルキルであり、
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は５～６員のヘテロアリール（該ヘテロアリールは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｌが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｑが、水素原子、又はＮＨＲ^１４であり、
Ｒ^１４が、水素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、水素原子、又はＣ_１－６アルキルである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0063】

式（１）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｂ）が挙げられる。
（Ｂ）
Ｒ^１が、１～３個のフッ素原子で置換されていてもよいメチル基であり、
Ｒ^２が、ハロゲン原子、シアノ、又は１～３個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキルであり、
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルであり、
Ｌが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｑが、水素原子、又はＮＨＲ^１４であり、
Ｒ^１４が、水素原子、Ｃ_１－６アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、Ｃ_３－１０シクロアルキル（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、水素原子、又はＣ_１－６アルキルである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0064】

式（１）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｃ）が挙げられる。
（Ｃ）
Ｒ^１が、メチル基、フルオロメチル基であり、
Ｒ^２が、塩素原子、シアノ、トリフルオロメチル基であり、
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルであり、
Ｌが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－１０シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～１０員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、Ｃ_１－３アルコキシ、－ＮＲ^１６Ｒ^１７、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～３個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｑが、水素原子、又はＮＨＲ^１４であり、
Ｒ^１４が、水素原子、又はＣ_１－３アルキル（該アルキルは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｒ^１６及びＲ^１７が、水素原子、又はＣ_１－６アルキルである、化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0065】

式（１）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｄ）が挙げられる。
（Ｄ）
Ｒ^１が、メチル基であり、
Ｒ^２が、シアノであり、
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はＣ_１－３アルキルであり、
Ｌが、単結合、又はＣ_１－６アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、水酸基、１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキル、及びシアノからなる群から選択される同一又は異なる１～２個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又はＣ_１－３アルキレン（該アルキレンは、フッ素原子、水酸基、及びシアノからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｑが、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0066】

式（１）又は（２）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｅ）が挙げられる。
（Ｅ）
Ｘ、Ｙ及びＺが、それぞれ独立して、ＣＲ^８又は窒素原子を表し、ここにおいて、Ｘ、Ｙ及びＺは同時にＣＲ^８ではなく、
Ｒ^８が、水素原子、又は塩素原子であり、
Ｌが、単結合、又は１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－６アルキレンであり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１～２個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0067】

式（３）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｆ）が挙げられる。
（Ｆ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂが、それぞれ独立して、水素原子、又は塩素原子であり、
Ｌが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、水素原子又はＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0068】

式（３）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｇ）が挙げられる。
（Ｇ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂが、それぞれ独立して、水素原子、又は塩素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合であり、
Ｗが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0069】

式（３）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｈ）が挙げられる。
（Ｈ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレンであり、
Ｗが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0070】

式（４）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｉ）が挙げられる。
（Ｉ）
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、水素原子であり、
Ｌが、単結合、又は１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１～３個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、水素原子、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0071】

式（４）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｊ）が挙げられる。
（Ｊ）
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１～３個の水酸基及びフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合であり、
Ｑが、水素原子である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0072】

式（４）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｋ）が挙げられる。
（Ｋ）
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0073】

式（４）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｌ）が挙げられる。
（Ｌ）
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、単結合であり、
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合であり、
Ｑが、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0074】

式（４）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｍ）が挙げられる。
（Ｍ）
Ｒ^８ｂ及びＲ^８ｃが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基又はフッ素原子で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合であり、
Ｗが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２、又はＮＨＭｅである、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0075】

式（５）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｎ）が挙げられる。
（Ｎ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｃが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合、Ｃ_３－７シクロアルキレン（該シクロアルキレンは、水酸基、及びＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）、又は３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、フッ素原子、シアノ、水酸基、及び１～２個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、水素原子、又はＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0076】

式（５）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｏ）が挙げられる。
（Ｏ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｃは、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、３～７員の二価飽和複素環基（該飽和複素環基は、水酸基、及び１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキルからなる群から選択される１個の置換基で置換されていてもよい）であり、
Ｗが、単結合であり、
Ｑが、水素原子である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0077】

式（５）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｐ）が挙げられる。
（Ｐ）
Ｒ^８ａ及びＲ^８ｃは、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合であり、
Ｗが、単結合、又は１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0078】

式（５）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｑ）が挙げられる。
（Ｑ）
Ｒ^８ａが、それぞれ独立して、水素原子であり、
Ｌが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、Ｃ_３－７シクロアルキレンであり、
Ｗが、１個の水酸基で置換されていてもよいＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0079】

式（６）で表される化合物の１つの態様としては、以下の（Ｒ）が挙げられる。
（Ｒ）
Ｒ^８ａが、水素原子であり、
Ｌが、Ｃ_１－３アルキレンであり、
Ｖが、単結合、又はＣ_３－７シクロアルキレンであり、
Ｗが、単結合、又はＣ_１－３アルキレンであり、
Ｑが、ＮＨ_２である、
化合物又はその製薬学的に許容される塩。

【0080】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも７．２°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｉ）が挙げられる。

【0081】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも８．８°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｉ）が挙げられる。

【0082】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも７．２°±０．２°、及び８．８°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｉ）が挙げられる。

【0083】

本発明のさらなる態様としては、形態Ｉの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、７．２°±０．２°、８．８°±０．２°、９．８°±０．２°、１０．２°±０．２°、１０．７°±０．２°、１６．７°±０．２°、１８．５°±０．２°、２６．２°±０．２°、及び２７．０°±０．２°および２６．４°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0084】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩であって、２θで表して、少なくとも６．８°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩ）が挙げられる。

【0085】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩であって、２θで表して、少なくとも１３．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩ）が挙げられる。

【0086】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩であって、２θで表して、少なくとも６．８°±０．２°、及び１３．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩ）が挙げられる。

【0087】

本発明のさらなる態様としては、形態ＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩であって、２θで表して、６．８°±０．２°、７．５°±０．２°、１１．７°±０．２°、１１．９°±０．２°、１３．０°±０．２°、１６．４°±０．２°、１９．３°±０．２°、２０．４°±０．２°、２２．７°±０．２°、及び２４．３°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0088】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩であって、２θで表して、少なくとも６．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩＩ）が挙げられる。

【0089】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルのトシル酸塩であって、２θで表して、少なくとも１７．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩＩ）が挙げられる。

【0090】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩であって、２θで表して、少なくとも６．０°±０．２°、及び１７．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＩＩ）が挙げられる。

【0091】

本発明のさらなる態様としては、形態ＩＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩であって、２θで表して、６．０°±０．２°、９．０°±０．２°、１２．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．２°±０．２°、１７．０°±０．２°、２２．８°±０．２°、及び２６．３°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0092】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも９．３°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＶ）が挙げられる。

【0093】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも１０．２°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＶ）が挙げられる。

【0094】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも９．３°±０．２°、及び１０．２°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＩＶ）が挙げられる。

【0095】

本発明のさらなる態様としては、形態ＩＶの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、９．３°±０．２°、１０．２°±０．２°、１０．７°±０．２°、１３．６°±０．２°、１６．７°±０．２°、１７．１°±０．２°、１７．８°±０．２°、１８．６°±０．２°、２６．１°±０．２°及び２６．４°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0096】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも７．９°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｖ）が挙げられる。

【0097】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも８．７°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｖ）が挙げられる。

【0098】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも７．９°±０．２°、及び８．７°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態Ｖ）が挙げられる。

【0099】

本発明のさらなる態様としては、形態Ｖの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、７．９°±０．２°、８．７°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１５．９°±０．２°、１７．６°±０．２°、１９．９°±０．２°、２１．９°±０．２°、２２．８°±０．２°、及び２６．６°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0100】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも５．３°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩ）が挙げられる。

【0101】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも５．７°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩ）が挙げられる。

【0102】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、少なくとも５．３°±０．２°、及び５．７°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩ）が挙げられる。

【0103】

本発明のさらなる態様としては、形態ＶＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリルであって、２θで表して、５．３°±０．２°、５．７°±０．２°、７．０°±０．２°、７．３°±０．２°、７．８°±０．２°、８．４°±０．２°、９．３°±０．２°、１０．５°±０．２°、１１．５°±０．２°、及び１４．１°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１０個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0104】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも８．２°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩＩ）が挙げられる。

【0105】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも２７．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩＩ）が挙げられる。

【0106】

本発明のさらなる態様としては、５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、少なくとも８．２°±０．２°、及び２７．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有する結晶形態（形態ＶＩＩ）が挙げられる。

【0107】

本発明のさらなる態様としては、形態ＶＩＩの結晶形態の５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩であって、２θで表して、７．０°±０．２°、８．２°±０．２°、９．７°±０．２°、１１．５°±０．２°、１４．０°±０．２°、１４．６°±０．２°、１６．３°±０．２°、１８．０°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．２°±０．２°、２１．５°±０．２°、２４．１°±０．２°及び２７．０°±０．２°に特徴的なピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを有するものが挙げられる。これら１３個のピークから選択される４つまたは５つを有することで、当該結晶は特定される。

【0108】

本開示の化合物を投与する場合、その使用量は、症状、年齢、投与方法等によって異なるが、例えば、静脈内注射の場合には、成人に対して、１日当たり、下限として、０．０１ｍｇ（好ましくは０．１ｍｇ）、上限として、１０００ｍｇ（好ましくは１００ｍｇ）を、１回または数回に分けて、症状に応じて投与することにより効果が期待される。その投与スケジュールとしては、例えば単回投与、１日１回３日間連日投与、又は１日２回１週間連続投与、等を挙げることができる。さらに上記記載の各投与方法を、約１日間～約６０日間の間隔をあけて繰り返すこともできる。

【0109】

本開示の化合物は、非経口投与又は経口投与により投与しうるが、好ましくは非経口的方法、より好ましくは静脈内注射により投与される。また、本開示の化合物は、医薬的に許容されるキャリア、例えばリポソームとして製剤化し投与されることが好ましい。

【0110】

本開示の化合物を内封するリポソームは、少なくとも１種以上のリン脂質を含む。リン脂質としては、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリンなどが挙げられる。

【0111】

リン脂質における脂肪酸残基は特に限定されないが、例えば、炭素数１４～１８の飽和または不飽和の脂肪酸残基が挙げられ、具体的には、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸等の脂肪酸由来のアシル基が挙げられる。また、卵黄レシチン、大豆レシチン等の天然物由来のリン脂質、およびその不飽和脂肪酸残基に水素添加した水素添加卵黄レシチン、水素添加大豆レシチン（水素添加大豆リン脂質、または水素添加大豆ホスファチジルコリンともいう）等を用いることもできる。

【0112】

リポソーム膜成分全体に対するリン脂質の配合量（モル分率）は特に限定されないが、好ましくは３０～８０％が挙げられ、より好ましくは４０～７０％が挙げられる。

【0113】

本開示の化合物を内封するリポソームは、ステロール類を含むことができる。ステロール類としては、コレステロール、β－シトステロ－ル、スチグマステロ－ル，カンペステロ－ル、ブラシカステロ－ル、エルゴステロ－ル、及びフコステロ－ル等が挙げられる。ステロール類として、好ましくはコレステロールが挙げられる。リポソーム膜成分全体に対するステロール類の配合量（モル分率）は特に限定されないが、好ましくは０～６０％が挙げられ、より好ましくは１０～５０％が挙げられ、さらに好ましくは３０～５０％が挙げられる。

【0114】

本開示の化合物を内封するリポソームは、ｉｎ ｖｉｖｏにおける滞留性を向上させるために、ポリマー修飾脂質を含むことができる。リポソーム膜成分全体に対するポリマー修飾脂質の配合量（モル分率）は特に限定されないが、好ましくは０～２０％が挙げられ、より好ましくは１～１０％が挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分としては、好ましくは親水性ポリマーが挙げられ、より好ましくは脂質と結合していないポリマーの末端がアルコキシ化されている親水性ポリマーが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分としては、具体的には、特に限定されないが、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メトキシポリエチレングリコール、メトキシポリプロピレングリコール、メトキシポリビニルアルコール、メトキシポリビニルピロリドン、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、エトキシポリビニルアルコール、エトキシポリビニルピロリドン、プロポキシポリエチレングリコール、プロポキシポリプロピレングリコール、プロポキシポリビニルアルコール、及びプロポキシポリビニルピロリドンが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分として、好ましくはポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、メトキシポリプロピレングリコール、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、プロポキシポリエチレングリコール、及びプロポキシポリプロピレングリコールが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分として、より好ましくはポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、エトキシポリエチレングリコール、エトキシポリプロピレングリコール、及びプロポキシポリエチレングリコールが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分として、更により好ましくはポリエチレングリコール、及びメトキシポリエチレングリコールが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分として、最も好ましくはメトキシポリエチレングリコールが挙げられる。ポリマー修飾脂質のポリマー部分の分子量は特に限定されないが、例えば、１００～１００００ダルトンが挙げられ、好ましくは１０００～７０００ダルトンが挙げられ、より好ましくは１５００～５０００ダルトンが挙げられ、最も好ましくは１５００～３０００ダルトンが挙げられる。

【0115】

ポリマー修飾脂質の脂質部分としては、具体的には特に限定されないが、例えば、ホスファチジルエタノールアミン、及びジアシルグリセロールが挙げられる。ポリマー修飾脂質の脂質部分として好ましくは、炭素数１４～１８の飽和または不飽和の脂肪酸残基を有するホスファチジルエタノールアミン、及び炭素数１４～１８の飽和または不飽和の脂肪酸残基を有するジアシルグリセロールが挙げられ、より好ましくは炭素数１４～１８の飽和脂肪酸残基を有するホスファチジルエタノールアミン、及び炭素数１４～１８の飽和脂肪酸残基を有するジアシルグリセロールが挙げられ、更に好ましくは、パルミトイル基またはステアロイル基を有するホスファチジルエタノールアミン、及びパルミトイル基またはステアロイル基を有するジアシルグリセロールが挙げられる。ポリマー修飾脂質の脂質部分として最も好ましくは、ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンが挙げられる。

【0116】

本開示の化合物を内封するリポソームは、医薬的に許容される添加物を含むことができる。添加物として、例えば、無機酸、無機酸塩、有機酸、有機酸塩、糖類、緩衝剤、抗酸化剤、及びポリマー類が挙げられる。

【0117】

無機酸としては、例えば、リン酸、塩酸、及び硫酸が挙げられる。

【0118】

無機酸塩としては、例えば、リン酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、硫酸アンモニウム、及び硫酸マグネシウムが挙げられる。

【0119】

有機酸としては、例えば、クエン酸、酢酸、コハク酸、及び酒石酸が挙げられる。

【0120】

有機酸塩としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、コハク酸二ナトリウム、及び酒石酸ナトリウムが挙げられる。

【0121】

糖類としては、例えば、グルコース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、及びトレハロースが挙げられる。

【0122】

緩衝剤としては、例えば、Ｌ－アルギニン、Ｌ－ヒスチジン、トロメタモール（トリスヒドロキシメチルアミノメタン、Ｔｒｉｓ）及びそれらの塩が挙げられる。

【0123】

抗酸化剤としては、例えば、亜硫酸ナトリウム、Ｌ－システイン、チオグリコール酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、及びトコフェロールが挙げられる。

【0124】

ポリマー類としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、及びカルボキシメチルセルロースナトリウムが挙げられる。

【0125】

以下に、式（１）で表される本開示の化合物の製造方法について、例を挙げて説明するが、本開示の化合物の製造法は、これらに限定されるものではない。下記の製造法で用いられる化合物は、反応に支障を来たさない限り、塩を形成していてもよい。

【0126】

本開示の化合物は、公知化合物を出発原料として、例えば以下の製造法Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｏ、Ｐ、Ｑ及びＲの方法、若しくはそれらに準じた方法又は当業者に周知の合成方法を適宜組み合わせて製造することができる。式（ａ２）以外の本開示の化合物も、これらに準じた方法又は当業者に周知の合成方法を適宜組み合わせて製造することができる。

【0127】

製造法Ａ
式（ａ２）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化18】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0128】

［工程１］
化合物（ａ２）は、下記の製造法により得られる化合物（ａ１）の保護基Ｐ^１を除去することにより製造することができる。本工程は、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載されている方法等に準じて行うことができる。

【0129】

製造法Ｂ
式（ａ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化19】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味し、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられ、Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0130】

化合物（ｂ３）は、市販品として入手可能である。

【0131】

［工程１］
化合物（ｂ２）は、下記の製造法により得られる化合物（ｂ１）の保護基Ｐ^２を除去することにより製造することができる。本工程は、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載されている方法等に準じて行うことができる。

【0132】

［工程２］
化合物（ａ１）は、適当な溶媒中、光延試薬の存在下、化合物（ｂ２）と化合物（ｂ３）との光延反応により製造することができる。

【0133】

光延試薬としては、例えば、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、アゾジカルボン酸イソプロピル（ＤＩＡＤ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトライソプロピルアゾジカルボキサミド（ＴＩＰＡ）、１，１’－（アゾジカルボニル）ジピぺリジン（ＡＤＤＰ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルアゾジカルボキサミド（ＴＭＡＤ）およびトリフェニルホスフィン、トリブチルホスフィン等が挙げられ、シアノメチレントリメチルホスホラン（ＣＭＭＰ）、シアノメチレントリブチルホスホラン（ＣＭＢＰ）も用いることが可能である。

【0134】

溶媒中としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はそれらの混合溶媒等が挙げられる。溶媒として、好ましくはトルエン、ベンゼン、ＴＨＦ、１，４－ジオキサンおよびこれらの混合溶媒等が挙げられる。

【0135】

反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは１２時間～２４時間である。

【0136】

反応温度は、通常、０℃～１００℃であり、好ましくは０℃～５０℃である。

【0137】

製造法Ｃ
式（ｂ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化20】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0138】

［工程１］
化合物（ｃ２）は、化合物（ｃ１）を、適当な酸存在下又は非存在下で、適当な溶媒中、ヒドラジン一水和物と反応させることにより製造することができる。

【0139】

酸としては、酢酸、プロピオン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、塩酸、硫酸、カンファスルホン酸等が挙げられる。酸として、好ましくは酢酸、ｐ－トルエンスルホン酸等が挙げられる。

【0140】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のアルコール系溶媒；又はそれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは１，４－ジオキサン、トルエン、エタノール等が挙げられる。

【0141】

反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは１２時間～２４時間である。

【0142】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは５０℃～１００℃である。

【0143】

［工程２］
化合物（ｂ１）は、化合物（ｃ２）を、適当な塩基存在下で、適当な溶媒中、５－クロロピラジン誘導体と反応させることにより製造することができる。化合物（ｂ１）は、化合物（ｃ２）を、適当なパラジウム触媒、配位子及び塩基存在下で、適当な溶媒中、５－クロロピラジン誘導体と反応させることによっても製造することができる。

【0144】

塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮ）、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ－エチルモルホリン等の有機塩基類、又は炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。塩基として、好ましくはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－エチルモルホリン、炭酸カリウム、炭酸セシウム等が挙げられる。

【0145】

パラジウム触媒としては、例えば、塩化パラジウム、酢酸パラジウム等の塩、トリス（ジベンジリデンアセトン）二パラジウム（０）クロロホルム付加物等の０価パラジウム錯体等が挙げられる。

【0146】

配位子としては、例えば、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（キサントホス）、２，２’－ビス（ジフェニルホスフィノ）－１，１’－ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）、２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，６’－ジメトキシビフェニル（ＳＰｈｏｓ）、２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ）等のホスフィン配位子等が挙げられる。配位子として、好ましくは４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（キサントホス）が挙げられる。

【0147】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、トルエン、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。

【0148】

反応時間は、通常、５分～４８時間であり、好ましくは１時間～６時間である。

【0149】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは５０℃～１００℃である。

【0150】

製造法Ｄ
式（ｃ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【0151】

【化21】

［式中、Ｒ^１、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0152】

［工程１］
化合物（ｃ１）は、化合物（ｄ１）を、適当な塩基存在下で、適当な溶媒中、アセトニトリルと反応させることにより製造することができる。

【0153】

塩基としては、無機塩基が使用可能である。無機塩基としては、水素化ナトリウム等の水素化物、フッ化カリウム等のハロゲン化アルカリ、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム等の炭酸アルカリ、ナトリウムエトキシド、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド等のアルカリアルコキシド、ｎ－ブチルリチウム、メチルリチウム、イソプロピルマグネシウムブロミド等のアルカリ金属が挙げられる。塩基として、好ましくはナトリウムエトキシド、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド、ｎ－ブチルリチウム等が挙げられる。

【0154】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のアルコール系溶媒；又はそれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフラン、トルエン等が挙げられる。

【0155】

反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは１２時間～２４時間である。
反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは５０℃～１００℃である。

【0156】

製造法Ｅ
式（ｂ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化22】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0157】

［工程１］
化合物（ｅ２）は、化合物（ｅ１）を、適当な塩基存在下で、適当な溶媒中、二硫化炭素とヨードメタンと反応させることにより製造することができる。

【0158】

塩基としては、無機塩基が使用可能である。無機塩基としては、水素化ナトリウム等の水素化物、フッ化カリウム等のハロゲン化アルカリ、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の水酸化アルカリ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム等の炭酸アルカリ、ナトリウムエトキシド、ナトリウムtert-ブトキシド、カリウムtert-ブトキシド等のアルカリアルコキシド、ｎ－ブチルリチウム、メチルリチウム、イソプロピルマグネシウムブロミド等のアルカリ金属が挙げられる。塩基として、好ましくは水素化ナトリウム、カリウムtert-ブトキシド等が挙げられる。

【0159】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のアルコール系溶媒；又はそれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフラン、トルエン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0160】

反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは３０分～２時間である。

【0161】

反応温度は、通常、－７８℃～２００℃であり、好ましくは０℃～２５℃である。

【0162】

［工程２］
化合物（ｅ３）は、化合物（ｅ２）を、適当な塩基存在下で、適当な溶媒中、５－アミノピラジン誘導体と反応させることにより製造することができる。

【0163】

塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮ）、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、ピリジン、ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ－エチルモルホリン等の有機塩基類、又は炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。塩基として、好ましくはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等が挙げられる。

【0164】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフラン、トルエン、ジメチルスルホキシド等が挙げられる。

【0165】

反応時間は、通常、５分～４８時間であり、好ましくは２時間～８時間である。

【0166】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは５０℃～１００℃である。

【0167】

［工程３］
化合物（ｂ１）は、化合物（ｅ３）を、適当な酸存在下又は非存在下で、適当な溶媒中、ヒドラジン一水和物と反応させることにより製造することができる。

【0168】

酸としては、酢酸、プロピオン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、塩酸、硫酸、カンファスルホン酸等が挙げられる。酸として、好ましくは酢酸が挙げられる。

【0169】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のアルコール系溶媒；又はそれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは１，４－ジオキサン、エタノール等が挙げられる。

【0170】

反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは１２時間～２４時間である。

【0171】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは５０℃～１００℃である。

【0172】

製造法Ｆ
式（ｃ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化23】

［式中、Ｒ^１、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0173】

［工程１］
化合物（ｆ１）は、化合物（ｅ１）を、適当な溶媒中、ジメチルホルムアミドジメチルアセタールと反応させることにより製造することができる。

【0174】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0175】

反応時間は、通常、５分～４８時間であり、好ましくは２４時間～４８時間である。

【0176】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは６０℃～１２０℃である。

【0177】

［工程２］
化合物（ｆ２）は、化合物（ｆ１）を、適当な溶媒中、ヒドロキシアミン塩酸塩と反応させることにより製造することができる。

【0178】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のアルコール系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはエタノール、イソプロピルアルコール等が挙げられる。

【0179】

反応時間は、通常、５分～４８時間であり、好ましくは６時間～１２時間である。

【0180】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは４０℃～８０℃である。

【0181】

［工程３］
化合物（ｃ１）は、化合物（ｆ２）を、適当な溶媒中、塩基と反応させることにより製造することができる。

【0182】

塩基としては、例えば、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。塩基として、好ましくは水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等が挙げられる。

【0183】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、アニソール、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；水、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール等のプロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは水、エタノールの混合溶媒等が挙げられる。

【0184】

反応時間は、通常、５分～４８時間であり、好ましくは１時間～６時間である。

【0185】

反応温度は、通常、０℃～２００℃であり、好ましくは２０℃～５０℃である。

【0186】

製造法Ｇ
式（ａ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化24】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基をを意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0187】

［工程１］
化合物（ｇ２）は、製造法Ｃの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、下記の製造法により得られる化合物（ｇ１）より製造することができる。

【0188】

［工程２］
化合物（ａ１）は、製造法Ｃの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｇ２）より製造することができる。

【0189】

製造法Ｈ
式（ａ１）で表される化合物は、例えば、次の方法によって製造することができる。

【化25】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基をを意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0190】

［工程１］
化合物（ｈ２）は、製造法Ｅの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、下記の製造法により得られる化合物（ｈ１）より製造することができる。

【0191】

［工程２］
化合物（ｈ３）は、製造法Ｅの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｈ２）より製造することができる。
［工程３］
化合物（ａ１）は、製造法Ｅの工程３に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｈ３）より製造することができる。

【0192】

製造法Ｉ
式（ｇ１）で表される化合物は、例えば、次の方法によって製造することができる。

【化26】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基をを意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0193】

［工程１］
化合物（ｉ１）は、製造法Ｆの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、下記の製造法により得られる化合物（ｈ１）より製造することができる。

【0194】

［工程２］
化合物（ｉ２）は、製造法Ｆの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｉ１）より製造することができる。

【0195】

［工程３］
化合物（ｇ１）は、製造法Ｆの工程３に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｉ２）より製造することができる。

【0196】

製造法Ｊ
式（ｇ１）で表される化合物は、例えば、次の方法によっても製造することができる。

【化27】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基をを意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0197】

［工程１］
化合物（ｇ１）は、製造法Ｄの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、下記の製造法により得られる化合物（ｊ１）より製造することができる。

【0198】

製造法Ｋ
式（ｄ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化28】

［式中、Ｒ^１、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基をを意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0199】

化合物（ｋ１）は、市販品として入手可能である。

【0200】

［工程１］
化合物（ｄ１）は、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載されている方法により、化合物（ｋ１）より製造することができる。

【0201】

製造法Ｌ
式（ｅ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化29】

［式中、Ｒ^１、Ｘ、Ｙ及びＺは項１の記載と同義であり、Ｐ^２はフェノールの保護基を意味する。Ｐ^２としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のフェノールの保護基等が挙げられる。］

【0202】

化合物（ｌ１）は、市販品として入手可能である。

【0203】

［工程１］
化合物（ｅ１）は、製造法Ｋの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｌ１）より製造することができる。

【0204】

製造法Ｍ
式（ｊ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化30】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0205】

化合物（ｋ１）及び化合物（ｂ３）は、市販品として入手可能である。

【0206】

［工程１］
化合物（ｊ１）は、製造法Ｂの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｋ１）と化合物（ｂ３）より製造することができる。

【0207】

製造法Ｎ
式（ｊ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化31】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味し、ＬＧは脱離基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。
ＬＧとしては、例えば、ハロゲン、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホン酸オキシ、トリフルオロメタンスルホン酸オキシ等が挙げられる。］

【0208】

化合物（ｋ１）及び化合物（ｎ１）は、市販品として入手可能である。

【0209】

［工程１］
化合物（ｊ１）は、化合物（ｋ１）と化合物（ｎ１）を、適当な塩基の存在下又は非存在下、適当な溶媒中で反応させることにより製造することができる。

【0210】

塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、１．５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮ）、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）等の有機塩基類、又は炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。塩基として、好ましくはトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム等が挙げられる。

【0211】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、メタノール、エタノール、２－プロパノール（イソプロピルアルコール）、ｔｅｒｔ－ブタノール等のアルコール系溶媒；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、アニソール、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは２－プロパノール、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0212】

反応温度は、通常、－８０℃～加熱還流下であり、好ましくは２５℃～９０℃である。

【0213】

反応時間は、通常、３０分～４８時間であり、好ましくは６～１２時間である。

【0214】

製造法Ｏ
式（ｈ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化32】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。］

【0215】

化合物（ｌ１）及び化合物（ｂ３）は、市販品として入手可能である。

【0216】

［工程１］
化合物（ｈ１）は、製造法Ｂの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｌ１）と化合物（ｂ３）より製造することができる。

【0217】

製造法Ｐ
式（ｈ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化33】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味し、ＬＧは脱離基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。
ＬＧとしては、例えば、ハロゲン、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホン酸オキシ、トリフルオロメタンスルホン酸オキシ等が挙げられる。］

【0218】

化合物（ｌ１）及び化合物（ｎ１）は、市販品として入手可能である。

【0219】

［工程１］
化合物（ｈ１）は、製造法Ｂの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｌ１）と化合物（ｎ１）より製造することができる。

【0220】

製造法Ｑ
式（ｈ１）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化34】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味し、ＬＧは脱離基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。
ＬＧとしては、例えば、ハロゲン、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホン酸オキシ、トリフルオロメタンスルホン酸オキシ等が挙げられる。］

【0221】

化合物（ｑ１）、化合物（ｑ２）及び化合物（ｂ３）は、市販品として入手可能である。

【0222】

［工程１］
化合物（ｑ３）は、製造法Ｎの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｑ１）と化合物（ｑ２）より製造することができる。

【0223】

［工程２］
化合物（ｑ４）は、化合物（ｑ３）とアセトアルデヒドを、適当な塩基の存在下、適当な溶媒中で反応させることにより製造することができる。

【0224】

塩基としては、例えば、ｎ－ブチルリチウム、ｓｅｃ－ブチルリチウム、ｔｅｒｔ－ブチルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムテトラメチルピペリジド、リチウムヘキサメチルジシラジド、ナトリウムヘキサメチルジシラジド、カリウムヘキサメチルジシラジド、イソプロピルマグネシウムクロリド－塩化リチウム錯体等が挙げられる。

【0225】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、アニソール、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；塩化メチレン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフランが挙げられる。

【0226】

反応温度は、通常、－８０℃～加熱還流下であり、好ましくは－８０℃～２５℃である。

【0227】

反応時間は、通常、３０分～４８時間であり、好ましくは６～１２時間である。

【0228】

［工程３］
化合物（ｑ５）は、化合物（ｑ４）と適当な酸化剤を、適当な塩基の存在下または非存在下、適当な溶媒中で反応させることにより製造することができる。

【0229】

酸化剤としては、例えば、二酸化マンガン、Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ試薬、ジメチルスルホキシド－塩化オキサリル、ジメチルスルホキシド－トリフルオロ酢酸無水物、三酸化硫黄－ピリジン錯体、２，２，６，６－テトラメチルピペリジン－１－オキシラジカル－次亜塩素酸ナトリウム等が挙げられる。
塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、１．５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮ）、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）等の有機塩基類、又は炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。

【0230】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、塩化メチレン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、アニソール、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは塩化メチレン、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0231】

反応温度は、通常、－８０℃～加熱還流下であり、好ましくは－８０℃～２５℃である。
反応時間は、通常、３０分～４８時間であり、好ましくは６～１２時間である。

【0232】

［工程４］
化合物（ｈ１）は、製造法Ｂの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｑ５）と化合物（ｂ３）より製造することができる。

【0233】

製造法Ｒ
式（ｉ２）で表される本開示の化合物は、例えば、次の方法により製造することができる。

【化35】

［式中、Ｒ^１、Ｒ^１４、Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｌ、Ｖ及びＷは項１の記載と同義であり、Ｐ^１はアミノの保護基を意味し、ＬＧは脱離基を意味する。Ｐ^１としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）に記載のアミノの保護基等が挙げられる。
ＬＧとしては、例えば、ハロゲン、メタンスルホニルオキシ、ｐ－トルエンスルホン酸オキシ、トリフルオロメタンスルホン酸オキシ等が挙げられる。］

【0234】

化合物（ｌ１）及び化合物（ｂ３）は、市販品として入手可能である。

【0235】

［工程１］
化合物（ｒ１）は、製造法Ｆの工程１に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｌ１）より製造することができる。

【0236】

［工程２］
化合物（ｒ２）は、製造法Ｆの工程２に記載の方法又はそれに準じた方法により、化合物（ｒ１）より製造することができる。

【0237】

［工程３］
化合物（ｒ３）は、化合物（ｒ２）と適当なハロゲン化剤またはスルホニル化剤を、適当な塩基の存在下または非存在下、適当な溶媒中または無溶媒で反応させることにより製造することができる。

【0238】

ハロゲン化剤またはスルホニル化剤としては、例えば、塩化チオニル、オキシ塩化リン、塩化オキザリル、三臭化リン、塩化メタンスルホニル、Ｎ－フェニルビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）、トリフルオロメタンスルホン酸無水物等が挙げられる。

【0239】

塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、１．５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（ＤＢＮ）、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（ＤＢＵ）、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）等の有機塩基類、又は炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。

【0240】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、塩化メチレン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、アニソール、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくは塩化メチレン、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0241】

反応温度は、通常、－８０℃～加熱還流下であり、好ましくは０℃～加熱還流下である。

【0242】

反応時間は、通常、３０分～４８時間であり、好ましくは３０分～１２時間である。

【0243】

［工程４］
化合物（ｉ２）は、適当な塩基の存在下、化合物（ｒ３）と化合物（ｂ３）を、適当な溶媒中で、適当なパラジウム源と配位子が触媒する反応により製造することができる。

【0244】

塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ピコリン、Ｎ－メチルモルホリン（ＮＭＭ）等の有機塩基類、又は炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の無機塩基類が挙げられる。塩基として、好ましくはジイソプロピルエチルアミン、炭酸セシウム等が挙げられる。

【0245】

パラジウム源として、塩化パラジウム、酢酸パラジウム等の塩、トリス（ジベンジリデンアセトン）二パラジウム（０）クロロホルム付加物等の０価パラジウム錯体が挙げられる。
配位子として、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（キサントホス）、２，２’－ビス（ジフェニルホスフィノ）－１，１’－ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）、２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，６’－ジメトキシビフェニル（ＳＰｈｏｓ）、２－ジシクロヘキシルホスフィノ－２’，４’，６’－トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ）等のホスフィン配位子が挙げられる。配位子として、好ましくは４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（キサントホス）
が挙げられる。

【0246】

溶媒としては、本工程の反応条件下で反応しない溶媒であれば、特に限定されないが、例えば、塩化メチレン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、メチルシクロペンチルエーテル、１，４－ジオキサン等のエーテル系溶媒；ベンゼン、トルエン、クロロベンゼン、アニソール、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；酢酸エチル、酢酸メチル等のエステル系溶媒；アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチル－２－ピロリジノン、１，３－ジメチル－２－イミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド等の非プロトン系溶媒；又はこれらの混合物が挙げられる。溶媒として、好ましくはテトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、トルエン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等が挙げられる。

【0247】

反応温度は、通常、０℃～加熱還流下であり、好ましくは５０℃～加熱還流下である。反応時間は、通常、５分～７２時間であり、好ましくは２～１２時間である。

【0248】

上記で説明した製造法において、出発原料又は中間体の製造法を記載しなかったものは、市販品として入手可能であるか、又は市販化合物から当業者に公知の方法若しくはそれらに準じた方法によって合成することができる。

【0249】

上記で説明した製造法の各反応において、具体的に保護基の使用を明示した場合以外でも、必要に応じて保護基を用いることができる。例えば、反応点以外の何れかの官能基が説明した反応条件下で変化する、又は説明した方法を実施するのに保護基が無い状態では不適切な場合、反応点以外を必要に応じて保護し、反応終了後又は一連の反応を行った後に脱保護することにより目的化合物を得ることができる。

【0250】

保護基としては、例えば、Protective Groups in Organic Synthesis（Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著、John Wiley & Sons, Inc.発行、1999年）等に記載されている保護基等を用いることができる。アミノの保護基の具体例としては、例えば、ベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、アセチル、ベンジル等が挙げられる。また、水酸基の保護基の具体例としては、例えば、トリメチルシリル、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル等のトリアルキルシリル、アセチル、ベンジル等が挙げられる。

【0251】

保護基の導入及び脱離は、有機合成化学で常用される方法（例えば、前述のProtective Groups in Organic Synthesis参照）又はそれらに準じた方法で行うことができる。

【0252】

本明細書中では、保護基、縮合剤等は、この技術分野において慣用されているＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ（生化学命名委員会）による略号で表わすこともある。なお、本明細書中で用いる化合物名は、必ずしもＩＵＰＡＣ命名法に従うものではない。

【0253】

上記で説明した製造方法における中間体又は目的化合物は、その官能基を適宜変換すること（例えば、必要に応じて官能基の保護、脱保護を行い、アミノ、水酸基、カルボニル、ハロゲン等を足がかりに種々の変換をおこなうこと）によって、本開示に含まれる別の化合物へ導く事もできる。官能基の変換は、通常行われる一般的方法（例えば、Comprehensive Organic Transformations，R．C．Larock，John Wiley & Sons Inc．（1999）等を参照）によって行うことができる。

【0254】

上記で説明した製造方法における中間体及び目的化合物は、有機合成化学で常用される精製方法（例えば、中和、濾過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶、各種クロマトグラフィー等）により単離精製することができる。また、中間体においては、特に精製することなく次の反応に用いることも可能である。

【0255】

「製薬学的に許容される塩」としては、酸付加塩及び塩基付加塩が挙げられる。例えば、酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、又はクエン酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐａｒａ－トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩等の有機酸塩が挙げられる。また、塩基付加塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩、アルミニウム塩等の無機塩基塩、又はトリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６－ルチジン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン］、ｔｅｒｔ－ブチルアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ－ジベンジルエチルアミン等の有機塩基塩が挙げられる。さらに、「製薬学的に許容される塩」としては、アルギニン、リジン、オルニチン、アスパラギン酸、又はグルタミン酸等の塩基性アミノ酸又は酸性アミノ酸とのアミノ酸塩も挙げられる。

【0256】

出発原料及び中間体の好適な塩並びに医薬品原料として許容しうる塩は、慣用の無毒性塩である。これらとしては、例えば、有機酸塩（例えば酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、蟻酸塩、トルエンスルホン酸塩等）及び無機酸塩（例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩等）のような酸付加塩、アミノ酸（例えばアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸等）との塩、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウム塩、マグネシウム塩等）等の金属塩、アンモニウム塩、有機塩基塩（例えばトリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ピリジン塩、ピコリン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン塩等）等の他、当業者が適宜選択することができる。

【0257】

本開示において、式（１）～（５）で表される化合物のいずれか１つ又は２つ以上の^１Ｈを^２Ｈ（Ｄ）に変換した重水素変換体も、式（１）～（５）で表される化合物に包含される。

【0258】

本開示には、式（１）～（５）で表される化合物又はその製薬学的に許容される塩が含まれる。また、本開示の化合物は、水和物及び／又は各種溶媒との溶媒和物（エタノール和物等）の形で存在することもあるので、これらの水和物及び／又は溶媒和物も本開示の化合物に含まれる。

【0259】

さらに、本開示の化合物には、光学活性中心に基づく光学異性体、分子内回転の束縛により生じた軸性又は面性キラリティーに基づくアトロプ異性体、その他の立体異性体、互変異性体、幾何異性体等の存在可能な全ての異性体、及びあらゆる様態の結晶形のもの、さらにこれらの混合物も含まれる。

【0260】

特に、光学異性体やアトロプ異性体は、ラセミ体として、又は光学活性の出発原料や中間体が用いられた場合には光学活性体として、それぞれ得ることができる。また、必要であれば、前記製造法の適切な段階で、対応する原料、中間体又は最終品のラセミ体を、光学活性カラムを用いた方法、分別結晶化法等の公知の分離方法によって、物理的に又は化学的にそれらの光学対掌体に分割することができる。これらの分割方法としては、例えば、ラセミ体を光学活性分割剤と反応させ、２種のジアステレオマーを合成し、物理的性質が異なることを利用し、分別結晶化等の方法によって分割するジアステレオマー法等が挙げられる。

【0261】

本開示の化合物の製薬学的に許容される塩を取得したいときは、式（１）～（５）で表される化合物が製薬学的に許容される塩の形で得られる場合には、そのまま精製すればよく、また、遊離の形で得られる場合には、適当な有機溶媒に溶解又は懸濁させ、酸又は塩基を加えて通常の方法により塩を形成させればよい。

【0262】

本開示の化合物を内封するリポソームは、例えば、下記の方法により製造することができる。

【0263】

［工程１］
リン脂質、コレステロール等の膜構成成分をクロロホルム等の有機溶媒に溶解し、フラスコ内で有機溶媒を留去することによりフラスコ内壁に脂質混合物の薄膜を形成させる。上記の代わりに、ｔ－ブチルアルコール等に溶解後、凍結乾燥することで凍結乾燥物として脂質混合物を得ることでもよい。また、リン脂質、コレステロール等の膜構成成分を有機溶媒に溶解後、瞬間真空乾燥装置ＣＲＵＸ（ホソカワミクロン株式会社製）を用いて粉末化した脂質混合物を得ることもでき、Ｐｒｅｓｏｍｅ（登録商標）の名称で日本精化株式会社から入手することができる。

【0264】

［工程２］
工程１で得られた脂質混合物に硫酸アンモニウム水溶液等の内水相溶液を加え、分散することにより、粗リポソーム分散液を得る。

【0265】

［工程３］
エクストルーダーを用いて、工程２で得られた粗リポソーム分散液をフィルターに通過させることにより、所望の粒子径にする。又は、工程２で得られた粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザーを用いて高圧でノズルから吐出させることにより所望の粒子径にする。リポソームの粒子径は特に限定されないが、例えば、１０ｎｍ～２００ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ～１５０ｎｍ、より好ましくは４０ｎｍ～１４０ｎｍ、さらに好ましくは５０～１２０ｎｍ、最も好ましくは６０～１００ｎｍである。リポソームの粒子径は、動的光散乱法により測定される平均値であり、例えば、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて測定することができる。

【0266】

［工程４］
工程３で得られたリポソーム液を、ゲルろ過、透析、タンジェンシャルフローフィルトレーション又は超遠心等により外水相を置換する。

【0267】

［工程５］
工程４で得られた外水相を置換したリポソーム液を、内封したい化合物とともにインキュベーションすることにより、化合物をリポソームに内封する。

【0268】

［工程６］
得た化合物を内封したリポソームを、ゲルろ過、透析、タンジェンシャルフローフィルトレーション又は超遠心等を行うことにより、内封されていない化合物を除去する。なお、工程５で所望の内封率が得られた場合には、工程６を省略することができる。

【0269】

本開示の化合物は、その効果の増強を目的として、他の薬物と併用して用いることができる。具体的には、本開示の化合物は、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤または細胞増殖因子ならびにその受容体作用を阻害する薬剤等の薬物と併用して用いることができる。以下、本開示の化合物と併用し得る薬物を併用薬物と略記する。

【0270】

本開示の化合物は単剤として使用しても優れた抗癌作用を示すが、さらに前記併用薬物の一つまたは幾つかと併用（多剤併用）することによって、その効果をより一層増強または患者のＱＯＬを改善させることができる。

【0271】

「ホルモン療法剤」としては、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、クロロトリアニセン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、ジエノゲスト、アソプリスニル、アリルエストレノール、ゲストリノン、ノメゲストール、タデナン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキシフェン、レボルメロキシフェン、抗エストロゲン（例えば、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン等）、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、ＬＨ－ＲＨ誘導体（ＬＨ－ＲＨアゴニスト（例えば、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリンなど）、ＬＨ－ＲＨアンタゴニスト）、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、アロマターゼ阻害薬（例えば、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタンなど）、抗アンドロゲン（例えば、フルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ビカルタミド、ニルタミドなど）、副腎皮質ホルモン系薬剤（例えば、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロンなど）、アンドロゲン合成阻害薬（例えば、アビラテロンなど）、レチノイド、及びレチノイドの代謝を遅らせる薬剤（例えば、リアロゾールなど）などが挙げられる。

【0272】

「化学療法剤」としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗癌性抗生物質、植物由来抗癌剤、分子標的治療剤、免疫調節剤、その他の化学療法剤などが用いられる。代表的な例を次に記載する。

【0273】

「アルキル化剤」としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード－Ｎ－オキシド、クロラムブチル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾジン、ピポブロマン、エトグルシド、カルボプラチン、シスプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシン、トラベクテジン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。

【0274】

「代謝拮抗剤」としては、例えば、メルカプトプリン、６－メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、ペメトレキセド、エオシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５－ＦＵ系薬剤（例えば、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビンなど）、アミノプテリン、ネルザラビン、ロイコポリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルパミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチン、ベンダムスチン、及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。

【0275】

「抗癌性抗生物質」としては、例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ネオカルチノスタチン、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシン、エリブリン、及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。

【0276】

「植物由来抗癌剤」としては、例えば、エトポシド、リン酸エトポシド、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、ＤＪ－９２７、ビノレルビン、イリノテカン、トポテカン、及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。

【0277】

「分子標的治療剤」としては、例えば、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、ダサチニブ、スニチニブ、ニロチニブ、ラパチニブ、パゾパニブ、ルキソリチニブ、クリゾチニブ、ベムラフェニブ、バンデタニブ、ポナチニブ、カボザンチニブ、トファシチニブ、レゴラフェニブ、ボスチニブ、アキシチニブ、ダブラフェニブ、トラメチニブ、ニンテダニブ、イデラリシブ、セリチニブ、レンバチニブ、パルボシクリブ、アレクチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、リボシクリブ、アベマシクリブ、ブリガチニブ、ネラチニブ、コパンリシブ、コビメチニブ、イブルチニブ、アカラブルチニブ、エンコラフェニブ、ビニメチニブ、バリシチニブ、フォスタマチニブ、ロルラチニブ、エルダフィチニブ、エントレクチニブ、ダコミチニブ、シロリムス、エベロリムス、テムシロリムス、オラパリブ、ルカパリブ、ニラパリブ、ベネトクラックス、アザシチジン、デシタビン、ボリノスタット、パノビノスタット、ロミデプシン、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、ラロトレクチニブ及びイキサゾミブなどが挙げられる。

【0278】

「免疫調節剤」としては、例えば、レナリドミド及びポマリドミドなどが挙げられる。

【0279】

「その他の化学療法剤」としては、例えば、ソブゾキサンなどが挙げられる。

【0280】

「免疫療法剤（ＢＲＭ）」としては、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポイエチン、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾール、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、Ｔｏｌｌ－ｌｉｋｅ Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ作動薬（例えば、ＴＬＲ７作動薬、ＴＬＲ８作動薬、ＴＬＲ９作動薬など）が挙げられる。

【0281】

細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤における細胞増殖因子としては、細胞増殖を促進する物質であれば、どのようなものでもよく、通常、分子量が２０，０００以下のペプチドで、受容体との結合により低濃度で作用が発揮される因子があげられる。具体的には、ＥＧＦ（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例えば、ＴＧＦａｌｐｈａなど）、インスリンまたはそれと実質的に同一の活性を有する物質（例えば、インスリン、ＩＧＦ（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）－１、ＩＧＦ－２など）、ＦＧＦ（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）またはそれと実質的に同一のアッセイを有する物質（例えば、酸性ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、ＫＧＫ（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＦＧＦ－１０など）、及び、その他の細胞増殖因子（例えば、ＣＳＦ（ｃｏｌｏｎｙ ｓｔｉｍｕｋａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）、ＥＰＯ（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ）、ＩＬ－２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２）、ＮＧＦ（ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＰＤＧＦ（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＴＧＦ－ｂｅｔａ（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂｅｔａ）、ＨＧＦ（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、へレグリン、アンジオポエチンなど）が挙げられる。

【0282】

本開示の化合物、及び併用薬物の投与期間は限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。また、本開示の化合物と併用薬物の合剤としてもよい。併用薬物の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、本開示の化合物と併用薬物の配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状、組み合わせなどにより適宜選択することができる。例えば投与対象がヒトである場合、本開示の化合物１重量部に対し、併用薬物を０．０１～１００重量部用いればよい。また、その副作用抑制の目的として、制吐剤、睡眠導入剤、抗痙攣薬などの薬剤（併用薬物）と組み合わせて用いることができる。

【0283】

本明細書において「又は」は、文章中に列挙されている事項の「少なくとも１つ以上」を採用できるときに使用される。「もしくは」も同様である。本明細書において「２つの値の範囲内」として明記した場合、その範囲には２つの値自体も含む。

【0284】

本明細書において引用された、科学文献、特許、特許出願などの参考文献は、その全体が、各々具体的に記載されたのと同じ程度に本明細書において参考として援用される。

【0285】

以上、本開示を、理解の容易のために好ましい実施形態を示して説明してきた。以下に、実施例に基づいて本開示を説明するが、上述の説明および以下の実施例は、例示の目的のみに提供され、本開示を限定する目的で提供したのではない。従って、本発明の範囲は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、特許請求の範囲によってのみ限定される。

【実施例】

【0286】

以下に本開示を、参考例、実施例及び試験例により、さらに具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

【0287】

本明細書において、以下の略語を使用することがある。
Ｔｓ：ｐ－トルエンスルホニル
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
Ｍｅ：メチル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル
Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ試薬：デス-マーチンペルヨージナン（１，１，１－トリアセト
キシ－１，１－ジヒドロ－１，２－ベンゾヨードキソール－３－（１Ｈ）－オン）

【0288】

化合物同定に用いたＮＭＲ（Nuclear Magnetic Resonance）データは、日本電子株式会社のＪＮＭ－ＥＣＳ４００型 核磁気共鳴装置（４００ＭＨｚ）により取得した。
ＮＭＲに用いられる記号としては、ｓは一重線、ｄは二重線、ｄｄは二重線の二重線、ｔは三重線、ｔｄは三重線の二重線、ｑは四重線、ｍは多重線、ｂｒは幅広い、ｂｒｓは幅広い一重線、ｂｒｍは幅広い多重線及びＪは結合定数を意味する。

【0289】

化合物同定に用いたＬＣ／ＭＳ（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）分析条件は以下の通りである。観察された質量分析の値［ＭＳ（ｍ／ｚ）］の中で、モノアイソトピック質量（主同位体のみからなる精密質量）に対応する値を［Ｍ＋Ｈ］^＋、［Ｍ－Ｈ］^－あるいは［Ｍ＋２Ｈ］^２＋等で示し、保持時間をＲｔ（分）で示す。

【0290】

測定条件Ａ
検出機器：ＡＣＱＵＩＴＹ（登録商標）ＳＱ ｄｅｔｅｃｔｏｒ（Ｗａｔｅｒｓ社）
ＨＰＬＣ：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標）ｓｙｓｔｅｍ
Ｃｏｌｕｍｎ：Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ Ｃ１８（１．７μｍ，２．１ｍｍ×３０ｍｍ）
Ｓｏｌｖｅｎｔ：Ａ液：０．０６％ギ酸／Ｈ_２Ｏ，Ｂ液：０．０６％ギ酸／ＭｅＣＮ
Ｇｒａｄｉｅｎｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ：０．０－１．３ｍｉｎ Ｌｉｎｅａｒ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｆｒｏｍ Ｂ ２％ ｔｏ ９６％
Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
ＵＶ：２２０ｎｍ ａｎｄ ２５４ｎｍ
Ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：４０℃

【0291】

測定条件Ｂ
検出機器：ＡＰＣＩ ６１２０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＬＣ／ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）
ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ １２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ（登録商標）ｓｙｓｔｅｍ
Ｃｏｌｕｍｎ：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（登録商標）ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ－Ｃ１８（１．８μｍ，２．１ｍｍ×５０ｍｍ）
Ｓｏｌｖｅｎｔ：Ａ液：０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ，Ｂ液：ＭｅＣＮ
Ｇｒａｄｉｅｎｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ：０．０－５．０ｍｉｎ Ｌｉｎｅａｒ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｆｒｏｍ Ｂ ５％ ｔｏ ９０％
Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：０．６ｍＬ／ｍｉｎ
ＵＶ：２１０ｎｍ， ２５４ｎｍ， ａｎｄ ２８０ｎｍ
Ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：４０℃

【0292】

測定条件Ｃ
検出機器：Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ－２０２０
Ｃｏｌｕｍｎ：Ｌ－ｃｏｌｕｍｎ－２ ＯＤＳ（４．６ｍｍ×３５ｍｍ）
Ｇｒａｄｉｅｎｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ：ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ／ＨＣＯ_２Ｈ＝１０／９０／０．１→１００／０／０．１（０－２ｍｉｎ）、１００／０／０．１（２－４ｍｉｎ）
Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：２ｍＬ／ｍｉｎ
Ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：４０℃

【0293】

参考例１：
ｔｅｒｔ－ブチル ３－｛［（４－アセチル－５－メトキシピリジン－３－イル）オキシ］メチル｝－３－フルオロアゼチジン－１－カルボキシレート

【化36】

【0294】

ｔｅｒｔ－ブチル ３－｛［（４－アセチル－５－メトキシピリジン－３－イル）オキシ］メチル｝－３－フルオロアゼチジン－１－カルボキシレート（参考例１）の製造
１－（３－ヒドロキシ－５－メトキシ－４－ピリジニル）エタノン（１．００ｇ）のＴＨＦ（５０．０ｍＬ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル ３－フルオロ－３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１．８５ｇ）、トリフェニルホスフィン（３．１５ｇ）を室温で加え、０℃に冷却した。アゾジカルボン酸ジイソプロピル（２．５ｍＬ）を加え、０℃で１２時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、参考例１（７２０ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３５５．２／Ｒｔ（分）０．８８６（測定条件Ａ）

【0295】

参考例２：
ｔｅｒｔ－ブチル ３－｛［（３－アセチル－２－メトキシピリジン－４－イル）オキシ］メチル｝－３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート

【化37】

【0296】

ａ）ｔｅｒｔ－ブチル ３－（ヒドロキシメチル）－３－｛［（４－メチルベンゼン－１－スルホニル）オキシ］メチル｝アゼチジン－１－カルボキシレートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル ３，３－ビス（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（１．５０ｇ）の塩化メチレン（２０．０ｍＬ）溶液に、ピリジン（５．６０ｍＬ）、トリメチルアミン塩酸塩（０．１３ｇ）、ｐａｒａ－トルエンスルホニルクロリド（１．４５ｇ）を０℃で加え、室温で１２時間攪拌した。飽和食塩水を反応液に加えクエンチした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去することで、表題化合物（２．３０ｇ）を得た。得られた残渣は、精製を行わず、次の反応に用いた。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３７２．１／Ｒｔ（分）０．９２８（測定条件Ａ）

【0297】

ｂ）ｔｅｒｔ－ブチル ３－｛［（３－アセチル－２－メトキシピリジン－４－イル）オキシ］メチル｝－３－（ヒドロキシメチル）アゼチジン－１－カルボキシレート（参考例２）の製造
ｔｅｒｔ－ブチル ３－（ヒドロキシメチル）－３－｛［（４－メチルベンゼン－１－スルホニル）オキシ］メチル｝アゼチジン－１－カルボキシレート（２．３０ｇ）のＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液に１－（４－ヒドロキシ－２－メトキシ－３－ピリジニル）エタノン（１．００ｇ）、炭酸セシウム（７．８０ｇ）を加え、室温で１２時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、参考例２（１．０１ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３６７．３／Ｒｔ（分）０．７９６（測定条件Ａ）

【0298】

参考例３：
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート

【化38】

【0299】

ａ）ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－アセチル－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメートの製造
１－（２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）エタノン（２．００ｇ）のＤＭＦ（４０．０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（７．８０ｇ）、３－（Ｂｏｃ－アミノ）プロピルブロミド（４．２７ｇ）を０℃で加え、室温で１２時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（２．２５ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３２５．２／Ｒｔ（分）０．９５９（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl₃) δ: 8.06 (1H, d, J = 6.0 Hz), 6.55 (1H, d, J = 6.0 Hz), 4.97 (1H, brs), 4.40 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.86 (3H, s), 3.27-3.24 (2H, m), 2.49 (3H, s), 1.96-1.90 (2H, m), 1.44 (9H, s).

【0300】

ｂ）ｔｅｒｔ－ブチル ［３－（｛３－［（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）プロピ－２－エンイル］－４－メトキシピリジン－２－イル｝オキシ）プロピル］カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－アセチル－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメート（２．２５ｇ）のＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１０．０ｍＬ）を加え、１１５℃で２４時間攪拌した。放冷後、反応液の溶媒を減圧留去することで、表題化合物（４．３０ｇ）を粗生成物として得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３８０．３／Ｒｔ（分）０．７２２（測定条件Ａ）

【0301】

ｃ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル ［３－（｛３－［（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）プロピ－２－エンイル］－４－メトキシピリジン－２－イル｝オキシ）プロピル］カルバメート（４．３０ｇ）のエタノール（３０．０ｍＬ）溶液にヒドロキシアミン塩酸塩（５．４９ｇ）を加え、６５℃で２時間攪拌した。放冷後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチした。得られた水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（１．６３ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３５０．２／Ｒｔ（分）０．７２２（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl₃) δ: 8.32 (1H, d, J = 1.6 Hz), 8.12 (1H, d, J = 6.0 Hz), 6.64 (1H, d, J = 6.0 Hz), 6.59 (1H, d, J = 1.6 Hz), 4.87 (1H, brs), 4.45 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.92 (3H, s), 3.28-3.24 (2H, m), 1.99-1.93 (2H, m), 1.44 (9H, s).

【0302】

ｄ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（シアノアセチル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（１．６３ｇ）のエタノール（２０．０ｍＬ）と水（５．００ｍＬ）との混合溶液に水酸化カリウム（０．２９ｇ）を加え、室温で５時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣を飽和食塩水に加えクエンチした。得られた水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（１．５０ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３５０．２／Ｒｔ（分）０．８７２（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl₃) δ: 8.14 (1H, d, J = 6.0 Hz), 6.59 (1H, d, J = 6.0 Hz), 4.94 (1H, brs), 4.44 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.92 (3H, s), 3.29-3.23 (2H, m), 1.99-1.93 (2H, m), 1.43 (9H, s).

【0303】

ｅ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（参考例３）の製造
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（シアノアセチル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（１．９９ｇ）のエタノール（２０．０ｍＬ）溶液に酢酸（３．２８ｍＬ）、ヒドラジン一水和物（２．７８ｍＬ）を０℃で加え、９０℃で２４時間攪拌した。放冷後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチした。得られた水溶液をクロロホルムで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）により精製することで、参考例３（１．６０ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３６４．０／Ｒｔ（分）０．６８４（測定条件Ａ）
1H-NMR (DMSO-D6) δ: 11.61-10.91 (1H, brs), 8.01 (1H, d, J = 12.0 Hz), 6.93-6.89 (1H, m), 6.84 (1H, d, J = 6.0 Hz), 5.93 (1H, brs), 4.50 (1H, brs), 4.32 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.89 (3H, s), 3.09-3.04 (2H, m), 1.86-1.79 (2H, m), 1.37 (9H, s).

【0304】

参考例４：
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－６－クロロ－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート

【化39】

【0305】

ａ）１－｛６－クロロ－４－メトキシ－２－［（４－メトキシフェニル）メトキシ］ピリジン－３－イル｝エタン－１－オールの製造
２－クロロ－４－メトキシ－６－［（４－メトキシベンジル）オキシ］ピリジン（１０．０ｇ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液を－７８℃に冷却した。２．８ｍｏｌ／Ｌのｎ－ブチルリチウム（１５．３ｍＬ）を加え、－７８℃で３時間攪拌した。アセトアミド（６．３０ｍＬ）を加え、－７８℃で６時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（４．２５ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３２４．２／Ｒｔ（分）１．１１８（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl₃) δ: 7.36 (2H, d, J = 8.8 Hz), 6.89 (2H, d, J = 8.8 Hz), 6.55 (1H, s), 5.32 (2H, s), 5.16-5.11 (1H, m), 3.85 (3H, s), 3.80 (3H, s), 3.30 (1H, s), 1.41 (3H, d, J = 6.8 Hz).
13C-NMR (CDCl₃) δ: 165.2, 159.6, 147.6, 130.1, 128.6, 114.1, 112.6, 101.8, 68.7, 62.9, 56.3, 55.4, 23.1.

【0306】

ｂ）１－｛６－クロロ－４－メトキシ－２－［（４－メトキシフェニル）メトキシ］ピリジン－３－イル｝エタン－１－オンの製造
１－｛６－クロロ－４－メトキシ－２－［（４－メトキシフェニル）メトキシ］ピリジン－３－イル｝エタン－１－オール（３．１５ｇ）の塩化メチレン（１００ｍＬ）溶液にＤｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ試薬（６．１９ｇ）を加え、室温で１２時間攪拌した。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチした。得られた水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（２．５０ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３２２．２／Ｒｔ（分）１．０８１（測定条件Ａ）

【0307】

ｃ）１－（６－クロロ－２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）エタン－１－オンの製造
１－｛６－クロロ－４－メトキシ－２－［（４－メトキシフェニル）メトキシ］ピリジン－３－イル｝エタン－１－オン（２．５０ｇ）の塩化メチレン（３０．０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（６．００ｍＬ）を加え、室温で２時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をアミンシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）にて精製し表題化合物（２．００ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ２０２．１／Ｒｔ（分）０．７７３（測定条件Ａ）

【0308】

ｄ）ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－アセチル－６－クロロ－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメートの製造
１－（６－クロロ－２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）エタン－１－オン（３．００ｇ）のＤＭＦ（５０．０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（９．７０ｇ）、３－（Ｂｏｃ－アミノ）プロピルブロミド（５．６３ｇ）を０℃で加え、室温で１２時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（１．０１ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３５９．３／Ｒｔ（分）１．１２３（測定条件Ａ）

【0309】

ｅ）ｔｅｒｔ－ブチル ［３－（｛６－クロロ－３－［（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）プロピ－２－エンイル］－４－メトキシピリジン－２－イル｝オキシ）プロピル］カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－アセチル－６－クロロ－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメート（８４０ｍｇ）のＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（３．００ｍＬ）を加え、１１５℃で２４時間攪拌した。放冷後、反応液の溶媒を減圧留去することで、表題化合物（０．９７ｇ）を粗生成物として得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４１４．４／Ｒｔ（分）０．９４４（測定条件Ａ）

【0310】

ｆ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［６－クロロ－４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル ［３－（｛６－クロロ－３－［（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）プロピ－２－エンイル］－４－メトキシピリジン－２－イル｝オキシ）プロピル］カルバメート（０．９７ｇ）のエタノール（３０．０ｍＬ）溶液にヒドロキシアミン塩酸塩（１．７０ｇ）を加え、６５℃で２時間攪拌した。放冷後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチした。得られた水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（６７７ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３８４．３／Ｒｔ（分）１．１３２（測定条件Ａ）

【0311】

ｇ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［６－クロロ－３－（シアノアセチル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメートの製造
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［６－クロロ－４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（６７７ｍｇ）のエタノール（２０．０ｍＬ）と水（５．００ｍＬ）との混合溶液に水酸化カリウム（１００ｍｇ）を加え、室温で２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣を飽和食塩水に加えクエンチした。得られた水溶液を酢酸エチルで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（４７０ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３８４．３／Ｒｔ（分）１．０６４（測定条件Ａ）

【0312】

ｈ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－６－クロロ－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（参考例４）の製造
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［６－クロロ－３－（シアノアセチル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（４７０ｍｇ）のエタノール（２０．０ｍＬ）溶液に酢酸（０．７１ｍＬ）、ヒドラジン一水和物（０．７７ｍＬ）を０℃で加え、９０℃で２４時間攪拌した。放冷後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加えクエンチした。得られた水溶液をクロロホルムで２回抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）により精製することで、参考例４（３５０ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３９８．３／Ｒｔ（分）０．９１１（測定条件Ａ）

【0313】

参考例５：
１－（４－ヒドロキシ－６－メトキシピリミジン－５－イル）エタン－１－オン

【化40】

【0314】

ａ）１－（４－ヒドロキシ－６－メトキシピリミジン－５－イル）エタン－１－オンの製造
１－（４，６－ジメトキシピリミジン－５－イル）エタン－１－オン（２．００ｇ）のジクロロメタン（３０．０ｍＬ）溶液に三臭化ホウ素のジクロロメタン溶液（１．０ｍｏｌ／Ｌ，５４．９ｍＬ）を－６０℃で加え、－５０℃以下で３時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えてクエンチした後、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム）により精製することで、表題化合物（２２０ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ １６９．１／Ｒｔ（分）０．３６７（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl₃) δ: 14.31 (1H, brs), 8.36 (1H, s), 4.10 (3H, s), 2.65
(3H, s).

【0315】

参考例６：
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－アセチル－５－（フルオロメトキシ）ピリジン－３－イル］オキシ｝プロピル）カーバメート

【化41】

【0316】

ａ）３－フルオロ－５－（フルオロメトキシ）ピリジンの製造
５－フルオロピリジン－３－オール（１．００ｇ）のＤＭＦ（３０．０ｍＬ）溶液に炭酸セシウム（４．３２ｇ）、フルオロメチル ４－メチルベンゼンスルホネート（２．１７ｇ）を室温で加え、８０℃で８時間加熱攪拌した。反応液に水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（５３８ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ １４６．０／Ｒｔ（分）０．５７４（測定条件Ａ）

【0317】

ｂ）１－［３－フルオロ－５－（フロオロメトキシ）ピリジン－４－イル］エタン－１－オールの製造
Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．６８７ｍＬ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を－７８℃に冷却し、ｎ－ブチルリチウム（１．５８ｍｏＬ／Ｌ、３．０５ｍＬ）を加え０℃で１５分間攪拌した。反応液を再度－７８℃に冷却し、３－フルオロ－５－（フルオロメトキシ）ピリジン（５３８ｍｇ）を加え、１時間攪拌した後、アセトアルデヒド（０．４１９ｍＬ）を加えた。反応液を室温まで徐々に昇温し、終夜攪拌した後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（４７５ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ １９０．１／Ｒｔ（分）０．４９４（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl3) δ:8.30 (1H, d, J = 1.8 Hz),8.26 (1H, s), 5.85 (1H, dd, J = 6.7,3.1 Hz), 5.71 (1H,dd, J = 7.2, 3.2 Hz),5.31-5.22 (1H, m), 2.60 (1H, dd, J = 9.8, 1.8 Hz), 1.59(3H, d, J = 6.7 Hz).

【0318】

ｃ）１－［３－フルオロ－５－（フロオロメトキシ）ピリジン－４－イル］エタン－１－オンの製造
１－［３－フルオロ－５－（フロオロメトキシ）ピリジン－４－イル］エタン－１－オール（４７５ｍｇ）のジクロロメタン（１０．０ｍＬ）溶液を氷冷し、デス－マーチン試薬（１．６０ｇ）を加え、室温で終夜攪拌した。反応液にチオ硫酸ナトリウム水溶液及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（４０７ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ １８８．０／Ｒｔ（分）０．６１８（測定条件Ａ）

【0319】

ｄ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－アセチル－５－（フルオロメトキシ）ピリジン－３－イル］オキシ｝プロピル）カーバメートの製造
１－［３－フルオロ－５－（フロオロメトキシ）ピリジン－４－イル］エタン－１－オン（４０７ｍｇ）と炭酸セシウム（１．４２ｇ）のＤＭＦ（１０．０ｍＬ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル （３－ヒドロキシプロピル）カーバメート（７６２ｍｇ）を加え、８０℃で８時間加熱攪拌した。反応液に水を加え、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（６７ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３４３．２／Ｒｔ（分）０．８３２（測定条件Ａ）
1H-NMR (CDCl3) δ:8.22 (1H, d, J = 1.8 Hz),8.16 (1H, s), 5.68 (2H, d, J = 53.6 Hz), 4.70 (1H, brs), 4.15 (2H, t, J = 6.1Hz), 3.32-3.21 (2H, m), 2.50 (3H, s), 2.00-1.93 (2H,m), 1.41 (9H, s).

【0320】

参考例７：
ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート

【化42】

【0321】

ａ）（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）－１－（２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）プロピ－２－エン－１－オンの製造
１－（２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）エタノン（２．５０ｇ）とトルエン（６．２３ｍｌ）の混合物にｔｅｒｔ-ブトキシビス（ジメチルアミノ）メタン
（５．２１ｇ）を加え、５５℃で６時間加熱攪拌した。放冷後、トルエン（１８．６ｍｌ）を滴下し、生じた結晶を濾過で集め、トルエンで洗浄した。結晶を真空乾燥して表題化合物（２．８７ｇ）を得た。濾液を減圧濃縮し、エタノール／トルエン混合溶媒から析出させた結晶をエタノール／トルエン混合溶媒で洗浄、真空乾燥して表題化合物の２番晶（０．２０ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ２２３．１／Ｒｔ（分）１．５６４
1H-NMR (DMSO-D6)δ: 11.25 (1H, brs), 7.39 (1H, d, J = 6.7 Hz), 7.11 (1H, br s),6.21 (1H, d, J =7.9 Hz), 5.00(1H, d, J = 11.0 Hz), 3.73 (3H, s), 3.00 (3H, br s), 2.75 (3H, brs).

【0322】

ｂ）４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－オールの製造
（２Ｅ）－３－（ジメチルアミノ）－１－（２－ヒドロキシ－４－メトキシピリジン－３－イル）プロピ－２－エン－１－オン（２．５０ｇ）とエタノール（３７．５ｍｌ）の混合物にヒドロキシアミン塩酸塩（１．５６ｇ）を加え、室温で１６時間攪拌した。反応混合物に水（３７．５ｍｌ）を加え、２８．５ｇになるまで減圧濃縮した後さらに水（９．０ｍｌ）を加え、０℃で攪拌した。生じた結晶を濾過で集め、冷水で洗浄し、真空乾燥することで表題化合物（１．５３ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ １９３．１／Ｒｔ（分）０．９２８
1H-NMR(DMSO-D6) δ: 11.83 (1H, br s), 8.51 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.61 (1H, d, J=7.3Hz), 6.83 (1H, d, J = 1.8 Hz), 6.38 (1H, d, J = 7.3 Hz), 3.93 (3H, s).

【0323】

ｃ）４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル トリフルオロメタンスルホネートの製造
４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－オール（１．２３ｇ）とピリジン（６．１ｍｌ）の混合物に０℃でトリフルオロメタンスルホン酸無水物（２．１６ｇ）を滴下した。反応混合物を昇温し、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、水（１６ｍｌ）を滴下し、０℃で１．５時間攪拌した。生じた結晶を濾過で集め、水／ピリジン混合溶媒、ついで水で洗浄し、真空乾燥することで表題化合物（１．９１ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３２５．０／Ｒｔ（分）４．７８１
1H-NMR (CDCl3) δ:8.37 (1H, d, J = 1.8 Hz), 8.32 (1H, d, J = 6.1 Hz), 7.01(1H, d, J = 6.1 Hz),6,67 (1H, d, J = 1.8 Hz), 4.00 (3H, s).

【0324】

ｄ）ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメートの製造
４－メトキシ－３－（１，２－オキサゾール－５－イル）ピリジン－２－イル トリフルオロメタンスルホネート（５０ｍｇ）とｔｅｒｔ－ブチル（３－ヒドロキシプロピル）カーバメート（５４ｍｇ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（１８ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）二パラジウム（０）クロロホルム付加物（１６ｍｇ）、トルエン（１．５ｍｌ）の混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（７２ｍｇ）を加え、１００℃で４時間加熱攪拌した。反応混合物を放冷後、不溶物をセライトで濾去し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（３０ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３５０．２／Ｒｔ（分）４．６４７

【0325】

参考例８～４１：
対応する原料化合物を用いて、参考例１～７に記載の方法と同様の方法により、下記表に示す参考例８～４１の化合物を得た。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【0326】

参考例４２：
ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－｛３－［（５－シアノピラジン－２－イル）アミノ］－１Ｈ－ピラゾール－５－イル｝－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメート

【化43】

【0327】

ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（６００ｍｇ）のＤＭＳＯ（１０．０ｍＬ）溶液に４－エチルモルホリン（１．００ｍＬ）、５－クロロピラジン－２－カルボニトリル（４６１ｍｇ）を室温で加え、８０℃で１２時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物（１．０１ｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４６７．３／Ｒｔ（分）０．８８５（測定条件Ａ）
1H-NMR (DMSO-D6) δ: 12.4 (1H, s), 10.7 (1H, s), 8.61 (1H, s), 8.50 (1H, brs), 8.07 (1H, d, J = 5.2 Hz), 7.06 (1H, brs), 6.90 (1H, d, J = 6.0 Hz), 4.34 (2H, t, J = 6.4 Hz), 3.93 (3H, s), 3.14-3.08 (2H, m), 1.87-1.84 (2H, m), 1.35 (9H, s).

【0328】

参考例４３～７８：
対応する原料化合物を用いて参考例４２に記載の方法と同様の方法により、下記表に示す参考例４３～７８の化合物を得た。

【表2-1】

【表2-2】

【表2-3】

【表2-4】

【表2-5】

【表2-6】

【表2-7】

【表2-8】

【表2-9】

【表2-10】

【表2-11】

【表2-12】

【0329】

参考例７９：
ｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－｛３－［（５－クロロピラジン－２－イル）アミノ］－１Ｈ－ピラゾール－５－イル｝－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメート

【化44】

【0330】

ｔｅｒｔ－ブチル （３－｛［３－（３－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）－４－メトキシピリジン－２－イル］オキシ｝プロピル）カルバメート（６０ｍｇ）の１，４－ジオキサン（８２５μＬ）溶液に２，５－ジクロロピラジン（３２．９μＬ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）二パラジウム（０）（１５．１ｍｇ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ)－９，９－ジメチルキサンテン（１９．１ｍｇ）、炭酸セシウム（１０８ｍｇ）を室温で加え、マイクロ波照射下、１５０℃で２時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、これを濾去し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）により精製することで、表題化合物を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４７６．３／Ｒｔ（分）０．９６９（測定条件Ａ）

【0331】

実施例１：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル

【化45】

【0332】

参考例４２で得られたｔｅｒｔ－ブチル ｛３－［（３－｛３－［（５－シアノピラジン－２－イル）アミノ］－１Ｈ－ピラゾール－５－イル｝－４－メトキシピリジン－２－イル）オキシ］プロピル｝カルバメート（２００ｍｇ)の塩化メチレン（２０．０ｍL）溶液に、ＴＦＡ（２．００ｍＬ）を室温で加え、室温下１時間攪拌した。溶媒を減圧留去し、残渣をアミンシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）にて精製し実施例１（１１２ｍｇ）を得た。
ＬＣ－ＭＳ；［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３６７．２／Ｒｔ（分）０．６７１（測定条件Ａ）
1H-NMR (DMSO-D6) δ: 8.65 (1H, s), 8.50 (1H, brs), 8.06 (1H, d, J = 6.4 Hz), 7.04 (1H, brs), 6.89 (1H, d, J = 6.4 Hz), 4.41 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.92 (3H, s), 2.75 (1H, t, J = 6.8 Hz), 1.85-1.76 (2H, m).

【0333】

実施例２～３８：
対応する原料化合物を用いて、実施例１と同様の方法にて、下記表に示す実施例２～３８の化合物を得た。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【表3-4】

【表3-5】

【表3-6】

【表3-7】

【表3-8】

【表3-9】

【表3-10】

【表3-11】

【表3-12】

【表3-13】

【表3-14】

【0334】

実施例３９～４５の粉末Ｘ線回折測定は、以下に示す条件で測定した。得られた回折パターン（ＸＲＤスペクトル）を図１～図６Ａに示す。実施例３９～４１は、実施例１の化合物の各種の塩の結晶であり、実施例４２～４５は、実施例１の化合物の結晶多形である。

【0335】

結晶形の特定にあたっては、図１～図６Ａの回折図に示される各結晶の特徴的回折ピークを元に判断すればよい。

【0336】

図１～図６Ａの回折パターンから特定した主要回折ピークおよび特徴的回折ピークを、それぞれ以下に挙げる。なお、以下の実施例に記載した回折角２θ（°）における回折ピーク値は、測定機器により、もしくは測定条件等により、多少の測定誤差が生じることがある。具体的には、測定誤差は±０．２、好ましくは±０．１の範囲内であってもよい。

【0337】

粉末Ｘ線回折測定法（実施例３９－４４）：
検出機器：スペクトリス Ｐｏｗｅｒ Ｘ－ｒａｙ ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍＥｍｐｙｒｉａｎ
Ｘ線管球：ＣｕＫα（波長：１．５４オングストローム）
管電圧：４５ｋＶ
管電流：４０ｍＡ
測定範囲：４～４０度（２θ）
ステップ幅：０．０１３度
積算時間：１００秒／ステップ
粉末Ｘ線回折測定法（実施例４５）：
検出機器：Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳ Ｄ８ ＡＤＶＡＮＣＥ
Ｘ線管球：ＣｕＫα（波長：１．５４オングストローム）
管電圧：４０ｋＶ
管電流：４０ｍＡ
測定範囲：４～４０度（２θ）
ステップ幅：０．０１５度

【0338】

実施例３９ ：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩

【0339】

実施例１の化合物（３０．０ｍｇ）にメタノール（０．６ｍＬ）を加え、さらに５～１０％（W／V）塩酸－メタノール溶液（６０μL）を加えて設定温度６０℃で２時間攪拌し
た。放冷後、一終夜静置し、析出した固体をろ取し、乾燥することにより表題化合物を結晶（形態Ｉ）として得た。
［形態Ｉ］粉末Ｘ線回折パターンは図１に示す。
主要回折 ピーク：２θ（°）＝７．２、８．８、９．８、１０．２、１０．７、１６．７、１８．５、２６．２、２７．０
特徴的回折 ピーク：２θ（°）＝７．２、８．８、９．８、１０．２、１０．７

【0340】

実施例４０：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル リン酸塩

【0341】

実施例１の化合物（３０．０ｍｇ）に１３．４ｍｇ／ｍLリン酸－メタノール溶液（１２００μL）を加え、設定温度６０℃で４時間攪拌した。放冷後、一終夜静置し、析出した固体をろ取し、乾燥することにより表題化合物を結晶（形態ＩＩ）として得た。
［形態ＩＩ］粉末Ｘ線回折パターンは図２に示す。
主要回折ピーク：２θ（°）＝６．８、７．５、１１．７、１１．９、１３．０、１６．４、１９．３、２０．４、２２．７、２４．３
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝６．８、７．５、１１．７、１１．９、１３．０

【0342】

実施例４１：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル トシル酸塩

【0343】

実施例１の化合物（３０．０ｍｇ）にメタノール（０．６ｍＬ）を加え、さらに２６．０ｍｇ／ｍLトシル酸－メタノール溶液（０．６ｍL）を加え、設定温度６０℃で２時間攪拌した。放冷後、一終夜静置し、析出した固体をろ取し、乾燥することにより表題化合物を結晶（形態ＩＩＩ）として得た。
［形態ＩＩＩ］粉末Ｘ線回折パターンは図３に示す。
主要回折ピーク：２θ（°）＝６．０、９．０、１２．１、１４．４、１６．２、１７．０、２２．８、２６．３
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝６．０、９．０、１２．１、１４．４、１６．２、１７．０

【0344】

実施例４２：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル

【0345】

［形態ＩＶ］粉末Ｘ線回折パターンは図４に示す。
実施例１により、表題化合物を結晶（形態ＩＶ）として得た。
主要回折ピーク：２θ（°）＝９．３、１０．２、１０．７、１３．６、１６．７、１７．１、１７．８、１８．６、２６．１、２６．４
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝９．３、１０．２、１０．７、１６．７、２６．１、２６．４

【0346】

実施例４３：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル

【0347】

［形態Ｖ］粉末Ｘ線回折パターンは図５に示す。
実施例１の化合物（５ｍｇ）のテトラヒドロフラン／水（１０／１、０．５ｍＬ）溶液を加えて設定温度１０５℃で１時間加熱した。放冷後、密封して４日間静置した後、開封して３日間静置し、溶媒を留去した。析出した固体を表題化合物を結晶（形態Ｖ）として得た。
主要回折ピーク：２θ（°）＝７．９、８．７、１２．２、１３．１、１５．９、１７．６、１９．９、２１．９、２２．８、２６．６
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝７．９、８．７、１２．２、１３．１、１５．９、２６．６

【0348】

実施例４４：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル

【0349】

［形態ＶＩ］粉末Ｘ線回折パターンは図６に示す。
実施例１の化合物（５ｍｇ）のアセトン／水（１０／１、０．５ｍＬ）溶液を加えて設定温度１０５℃で１時間加熱した。放冷後、密封して４日間静置した後、開封して３日間静置し、溶媒を留去した。析出した固体を表題化合物を結晶（形態ＶＩ）として得た。主要回折ピーク：２θ（°）＝５．３、５．７、７．０、７．３、７．８、８．４、９．３、１０．５、１１．５、１４．１
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝５．３、５．７、７．０、７．３、８．４、９．３

【0350】

実施例４５：
５－（｛５－［２－（３－アミノプロポキシ）－４－メトキシピリジン－３－イル］－１Ｈ－ピラゾール－３－イル｝アミノ）ピラジン－２－カルボニトリル 塩酸塩

【0351】

［形態ＶＩＩ］粉末Ｘ線回折パターンは図６Ａに示す。
実施例１の化合物（３６ｍｇ）を水（６ｍＬ）溶液に懸濁させ、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を徐々に加えてｐＨ６．５に調整した。室温にて１時間静置した後、析出した表題化合物を結晶（形態ＶＩＩ）として得た。主要回折ピーク：２θ（°）＝７．０、８．２、９．７、１１．５、１４．０、１４．６、１６．３、１８．０、１９．８、２１．２、２１．５、２４．１、２７．０
特徴的回折ピーク：２θ（°）＝８．２、１４．６、２１．２、２１．５、２４．１、２７．０

【0352】

試験例
試験例１：ＣＨＫ１阻害活性試験
ＩＭＡＰ ＴＲ－ＦＲＥＴ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｅｘｐｒｅｓｓ Ｋｉｔ（Ｒ８１６０）をＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ社から入手した。ＣＨＫ１キナーゼ（０２－１１７、カルナバイオ社）、ＦＡＭ標識ＣＨＫ１ｔｉｄｅ（Ｒ７１８５、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ社）、ＡＴＰをそれぞれ終濃度４μｇ／ｍＬ、２μＭ、２０μＭとなるようにアッセイバッファーで希釈した。ＦＡＭ－ＰＫＡｔｉｄｅ（Ｒ７２５５、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ社）、ＦＡＭ－Ｐｈｏｓｐｈｏ－ＰＫＡｔｉｄｅ（Ｒ７３０４、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ社）を希釈後混和し、０から１００％のリン酸化レベルのｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｓｔａｎｄａｒｄ系列を作成した。３８４ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに０．４％ＤＭＳＯ溶液で溶解させた化合物を５μＬ添加し、ＣＨＫ１、ＣＨＫ１ｔｉｄｅ、ＡＴＰを５μＬずつ添加した化合物検討群と、ｓｔａｎｄａｒｄを２０μＬずつ添加したｓｔａｎｄａｒｄ群を作成し、３０℃で３時間キナーゼ反応させた。その後、Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｒｅａｇｅｎｔ（８０％ Ｂｕｆｆｅｒ Ａ、２０％ Ｂｕｆｆｅｒ Ｂ、１：６００ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｒｅａｇｅｎｔ、１：４００ Ｔｂ－Ｄｏｎｏｒ）を６０μＬ添加し、室温２時間で結合反応させた。ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｐａｒａｄｉｇｍ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ社）を用い、３４０ｎｍ励起時の５２０ｎｍ、４９０ｎｍの蛍光強度を取得した。ｓｔａｎｄａｒｄを用いＣＨＫ１ｔｉｄｅのリン酸化レベルを算出し、ＤＭＳＯ処理群をリン酸化レベル１００％とし、キナーゼ活性を下に示す計算式を用いて求め、キナーゼ活性が５０％を示す評価化合物の濃度に相当するＩＣ_５０値を算出した。

【0353】

キナーゼ阻害（％）＝１００－Ａ／Ｂ×１００
Ａ：評価化合物存在下におけるシグナル
Ｂ：ネガティブコントロール（ＤＭＳＯ処理群）におけるシグナル

【0354】

実施例で得られた化合物及びＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ社から購入したプレキサセルチブ（以下の試験例においても入手先は同じ）について、試験例１に示す試験を行った。各被験物質に関する試験結果のＩＣ_５０値（ｎＭ）について下表に示す。

【表4-1】

【表4-2】

【0355】

上表に表すように、実施例１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１４、１５、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２４、２６、２８、３０及び３７の化合物は、プレキサセルチブよりも強いＣＨＫ１活性の抑制効果を示した。中でも、実施例１及び８の化合物は、特に強力にＣＨＫ１活性を抑制する格別な効果を有する。

【0356】

試験例２：細胞増殖抑制実験
ＥＳ－２細胞をアメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ）より入手した。本細胞は、１０％ウシ胎児血清、１％ペニシリン／ストレプトマイシン含有ＭｃＣｏｙ’ｓ ５ａ培地にて、３７℃、５％ＣＯ_２存在下で培養した。
３８４ウェルプレートに１ウェルあたり５００個の細胞を播種して、ＤＭＳＯの終濃度が０．１％となるように評価化合物を添加し、２日間培養した。培養終了後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）３Ｄ Ｒｅａｇｅｎｔ （Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９６８Ｂ）を用いて、細胞生存率を計算した。生存率曲線より、細胞増殖の抑制率が５０％を示す評価化合物の濃度に相当するＩＣ_５０値を算出した。なお、ＥＳ－２細胞は、シスプラチン耐性を示すことが知られている。

【0357】

実施例で得られた化合物及びプレキサセルチブについて、試験例２に示す試験を行った。各被験物質の５０％細胞増殖を抑制する濃度（ＩＣ_５０値；ｎＭ）について下表に示す。なお、以下の表には、本開示の代表的な化合物の細胞増殖抑制試験の結果を、Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖの格付けをもとに列挙する（１０００ｎＭ＜Ｉ、１０００ｎＭ＞ＩＩ＞３００ｎＭ、３００ｎＭ＞ＩＩＩ＞１００ｎＭ、１００ｎＭ＞ＩＶ＞３０ｎＭ、３０ｎＭ＞Ｖ）。

【表5】

【0358】

上表に表すように、実施例１、３、４、５、６、１１、１５、１７、１９、２０、２１、２２、２３、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３５、３６、３７及び３８の化合物は、プレキサセルチブと同等の良好な細胞増殖抑制効果を示した。

【0359】

試験例３：ｈＥＲＧ電流阻害試験
培養したｈＥＲＧ（ｈｕｍａｎ Eｔｈｅｒ－ａ－ｇｏ－ｇｏ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｇｅｎｅ）遺伝子安定発現ＣＨＯ細胞株細胞に、被験物質が０．２７～１００μＭとなるように添加した。電位刺激下におけるｈＥＲＧ電流をＱｕｂｅ３８４（Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社）を用いて測定し、各被験物質が５０％ｈＥＲＧ電流を抑制する濃度（ＩＣ_５０値；μＭ）を算出した。

【0360】

実施例で得られた化合物及びプレキサセルチブについて、試験例３に示す試験を行った。また、各実施例の化合物において、試験例３で得られたｈＥＲＧのＩＣ_５０を、試験例１で得られたＣＨＫ１阻害のＩＣ_５０で割った値を、ｈＥＲＧ／ＣＨＫ１として算出した。結果について下表に示す。

【表6-1】

【表6-2】

【0361】

上表に表すように、実施例１、３、４、７～１０、１４、２４、３２及び３４の化合物は、ＣＨＫ１阻害のＩＣ_５０とｈＥＲＧのＩＣ_５０とに５００００倍以上の乖離幅を有することが示された。中でも、実施例１、３、７、８、１４及び２４の化合物は、ＣＨＫ１阻害のＩＣ_５０とｈＥＲＧのＩＣ_５０とに１０００００倍以上の乖離幅を有することが示された。
これら６化合物は、プレキサセルチブよりも１８倍以上の乖離幅を示し、高い安全性を有する異質な効果を有する。

【0362】

試験例４：ＣＹＰ３Ａ４ ＭＢＩ及び酵素不活性化クリアランス評価
チトクロームＰ４５０（以下ＣＹＰ）は薬物代謝に関わる最も重要な酵素群で、薬物動態学的な相互作用の多くはこれらＣＹＰ活性の阻害に基づく。ＣＹＰには複数の分子種が存在し、特にＣＹＰ３Ａ４はＣＹＰによる酸化反応では医薬品の代謝に関与する割合が最も大きく、また、肝臓に存在するＣＹＰのうちの大部分を占める。

【0363】

ＣＹＰ阻害様式には「可逆的阻害」と「不可逆的阻害（ｍｅｃｈａｎｉｓｍ－ｂａｓｅｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ：ＭＢＩ）」の大きく２種類があり、特にＭＢＩに基づくＣＹＰ阻害は薬物相互作用のみならず重篤な副作用（肝毒性等）を引き起こす可能性が知られている（Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｄｅｖｅｌ． ２０１０ Ｊａｎｕａｒｙ， １３（１）， ６６－７７，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｉｓｋ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ， ２００５，１（１）， ３－１３）。

【0364】

本実施例化合物及びプレキサセルチブを用いて、ＣＹＰ３Ａ４のＭＢＩ及び酵素不活性化クリアランスを評価した。

【0365】

酵素源としてヒト肝ミクロソーム、基質はミダゾラム又はテストステロンを用い、ＣＹＰ３Ａ４に対する試験化合物の阻害効果ならびに阻害様式を評価した。３７℃、３０分の代謝反応後の試験化合物添加群（４濃度）の基質由来代謝生成物と非添加群の基質由来代謝生成物をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにて測定し、その比から阻害率を計算した。また、濃度プロットからＩＣ_５０値を算出した。試験化合物にＭＢＩ作用が認められる場合、ＮＡＤＰＨ（補因子）存在下でのプレインキュベーション後に基質を添加し反応を開始することにより、ＩＣ_５０が低下することが知られていることから（Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ，２００９，３９（２），９９－１１２）、プレインキュベーションによるＩＣ_５０値の変動が２倍以上の場合、ＭＢＩ作用ありと判定した。

【0366】

ＭＢＩ作用が認められた場合は、ｋ_{ｉｎａｃｔ}（最大酵素不活性化速度定数）及びＫ_Ｉ（最大酵素不活性化速度の５０％の速度をもたらす阻害薬の濃度）を非線形最小二乗法により算出した。さらに、Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ，２０１１，３９（７），１２４７－１２５４に記載の方法に準じ、酵素不活性化クリアランスを算出した（ＣＬ_{ｉｎｔ ＝} ｋ_{ｉｎａｃｔ}／Ｋ_Ｉ（ｍｌ／ｍｉｎ／ｍｍｏｌ）×ＣＹＰ ｃｏｎｔｅｎｔｓ（ｐｍｏｌ／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎ））。

【0367】

各実施例化合物及びプレキサセルチブのＣＹＰ３Ａ４へのＭＢＩ作用の指標となるプレインキュベーションによるＩＣ_５０値の変動倍率及び酵素不活性化クリアランスを下表に示す。

【表7-1】

【表7-2】

【0368】

本願発明者らは、新たに、プレキサセルチブがＭＢＩに基づくＣＹＰ３Ａ４を阻害することで、肝毒性等の重篤な副作用を引き起こすリスクがあることを見出した。

【0369】

上表に表すように、プレキサセルチブは、ＭＢＩに基づくＣＹＰ３Ａ４の阻害を示すにもかかわらず、実施例１、２、４、６～８、１４、２９～３１、３４、３７及び３８の化合物は、ＭＢＩに基づくＣＹＰ３Ａ４の阻害を示さないことが明らかとなった。本結果は、実施例１、２、４、６～８、１４、２９～３１、３４、３７及び３８の化合物は、薬物相互作用のみならず、肝毒性等の重篤な副作用を引き起こすリスクが低減された高い安全性を有するという異質な効果を有する。なかでも、式（３）で示される化合物は、特に高い安全性を示し、異質な効果を有する。

【0370】

試験例５．ヒト骨髄細胞コロニー形成試験（血液毒性評価試験）
ヒト骨髄ＣＤ３４陽性造血幹細胞をロンザ株式会社より入手した。本凍結細胞は、Ｍｅｔｈｏｃｕｌｔ Ｅｘｐｒｅｓｓ培地と、１０％ウシ胎児血清、１％ペニシリン／ストレプトマイシン含有ＲＰＭＩ１６４０培地を９：１で混合した培地にて融解させ、６ウェルプレートに１ウェルあたり５０００個の細胞を播種して、３７℃、５％ＣＯ_２存在下で一晩培養した。ＤＭＳＯの終濃度が０．１％、１００ｎＭとなるように評価化合物を添加し、４８時間培養した。細胞を回収し、ＰＢＳで洗浄した。１２ウェルプレートに１／６量の細胞を播種して、３７℃、５％ＣＯ_２存在下で約２週間培養した。培養終了後、Ｔｈｉａｚｏｌｙｌ ｂｌｕｅ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ）を用いてコロニー形成数を計算した。

【0371】

実施例で得られた代表化合物及びプレキサセルチブについて、試験例５に示す試験を行った。結果について下表に示す。

【表8】

【0372】

上表に表すように、１００ｎＭのプレキサセルチブは、ヒト骨髄細胞コロニー形成に対して抑制効果を示すにもかかわらず、１００ｎＭの実施例１は、ヒト骨髄細胞コロニー形成に対して抑制効果を示さないことが明らかとなった。この結果より、実施例１の化合物は血液毒性について高い安全性を有する異質な効果を有する。

【0373】

試験例６．リポソーム内封試験
代表的な実施例化合物及びプレキサセルチブについて、リポソームへの内封試験を実施した。

【0374】

水素添加大豆ホスファチジルコリン（ＣＯＡＴＳＯＭＥ ＮＣ－２１Ｅ、日油株式会社製）６．４８ｇ、コレステロール（Ｓｉｇｍａ社製）２．３２ｇ及びジステアロイルホスファチジルエタノールアミン－メトキシポリエチレングリコール２０００（ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＤＳＰＥ－０２０ＣＮ、日油株式会社製）２．０６ｇを６５℃に加温したｔ－ブチルアルコール５６０ｍＬに溶解した。この溶液をドライアイス・アセトン浴により凍結させた後、減圧留去によりｔ－ブチルアルコールを除去し、脂質混合物を得た。

【0375】

上記脂質混合物に２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを添加して６５℃に加温し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）約８０ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換することで、空リポソーム液を得た。０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）を加え、総脂質濃度が７５ｍＭ（７５μｍｏｌ／ｍＬ）又は５０ｍＭ（５０μｍｏｌ／ｍＬ）となるよう調整した。なお、調製量は適宜増減した。

【0376】

被験化合物２～３ｍｇを秤取し、総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液１ｍＬを加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸又は１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ５．５～７に調整し、６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。不溶物がある場合は、１５，０００×ｇで５分間遠心して除去した。

【0377】

リポソーム内封率は次のようにして算出した。
リポソーム液１００μＬを限外ろ過フィルター（Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ、１００Ｋ、０．５ｍＬ、メルク社製）にとり、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心した。限外ろ過後のろ液中の化合物濃度をＨＰＬＣで測定し、未内封化合物濃度とした。
リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、５℃で１０分以上静置した。１５，０００×ｇで５分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定し、リポソーム液中の化合物濃度とした。
下式により内封率及び内封効率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度
内封効率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／化合物導入時濃度

【0378】

ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：３μＬ又は５μＬ

【0379】

【表9】

【0380】

プレキサセルチブ、実施例１、３、４、５、及び６は、８０％以上の高い内封効率を達成できることが確認された。なお、実施例４のリポソーム封入操作において、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ調整した際に、液粘度の著しい上昇がみられた。この粘度上昇は、大きなスケールでリポソーム製造を行う際の課題となる可能性がある。一方、実施例１、３、５、及び６では、リポソーム封入操作中に、粘度の上昇は認められなかった。従って、式（３）及び（４）で示される化合物は、特に良好なリポソーム封入操作性を示した。

【0381】

試験例６Ａ．実施例１のリポソーム内封試験
実施例１の化合物について、リポソームへの内封試験を実施した。

【0382】

Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（水素添加大豆ホスファチジルコリン、コレステロール及びジステアロイルホスファチジルエタノールアミン－メトキシポリエチレングリコール２０００からなる質量比がそれぞれ３：１：１である予備調製混合物、日本精化株式会社製）１１．０８ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを添加して６５℃に加温し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８０ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度７５ｍＭ（７５μｍｏｌ／ｍＬ）の空リポソーム液を得た。

【0383】

実施例１の化合物を秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）約０．４ｍＬ、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩酸約０．１ｍＬ、及び上記空リポソーム液１ｍＬを加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～６．５に調整し、６５℃の水浴で３０分間加温した後氷冷した。その後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。

【0384】

リポソーム内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬに４％リン酸水溶液１００μＬを加えた液につき、化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：ＭｏｎｏＳｅｌｅｃｔ ｎＰＥＣ （ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ．）
カラム温度：３０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→９５／５（１）→７０／３０（６）→７０／３０（７）→９５／５（７．０１）→９５／５（１０）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：２μＬ

【0385】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、５℃で１０分以上静置した。１５，０００×ｇで５分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ

【0386】

下式により内封率及び内封効率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度
内封効率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／化合物導入時濃度

【0387】

【表10】

【0388】

実施例１は、９０％以上の高いリポソーム内封効率を達成できることが確認された。

【0389】

試験例６Ｂ．実施例１のリポソーム内封試験
実施例１の化合物について、リポソームへの内封試験を実施した。

【0390】

Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（水素添加大豆ホスファチジルコリン、コレステロール及びジステアロイルホスファチジルエタノールアミン－メトキシポリエチレングリコール２０００からなる質量比がそれぞれ３：１：１である予備調製混合物、日本精化株式会社製）１１．０８ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを添加して６５℃に加温し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。

【0391】

実施例１の化合物１２０ｍｇを秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１８．３ｍＬ、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸０．３ｍＬ、及び上記空リポソーム液４１．７ｍＬを加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸または１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムでｐＨ６．５となるように調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は２．００ｍｇ／ｍＬ、内封率９８．０％、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）は８４ｎｍであった。

【0392】

リポソーム内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、５℃で１０分以上静置した。１５，０００×ｇで５分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ

【0393】

下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0394】

実施例１の化合物を内封したリポソームを５℃で保存し、化合物濃度、内封率、及び平均粒子径の変化を確認した。表１１に示すように、実施例１を内封したリポソームは、化合物濃度、内封率及び平均粒子径に大きな変化は認められず、保存安定性に優れていることが明らかとなった。

【0395】

【表11】

【0396】

試験例７．薬物動態試験
プレキサセルチブの溶液製剤、実施例１、３、６及びプレキサセルチブのリポソーム製剤について、マウス静脈内投与を行い、血液中における被験物質の濃度測定を行った。

【0397】

溶液製剤には、１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）又は、２０％ｓｕｌｆｏｂｕｔｙｌｅｔｈｅｒ－β－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎを含有する１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）に溶解後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過したものを使用した。

【0398】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法により被験化合物を内封したリポソームを調製し、ゲルろ過カラムＰＤ－１０（ＧＥヘルスケア社製）を用いてリポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）を加えて濃度を調整したものを使用した。

【0399】

＜投与試験＞
溶液製剤もしくはリポソーム製剤を７週齢、雌のＢＡＬＢ／ｃマウスに静脈内瞬時投与し、無麻酔下にて頚静脈より投与後７２時間まで経時的に血液を採取した。採血直後の血液に４倍量のメタノールを加えたものを遠心分離し、得られた上清中の被験化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにて定量した。

【0400】

ＬＣ－ＭＳ／ＭＳの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ：Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ システム（島津製作所）
ＭＳ／ＭＳ：４０００ ＱＴＲＡＰ（ＳＣＩＥＸ）
カラム：Ｃａｄｅｎｚａ ＣＤ－Ｃ１８，３μｍ，５０×２ｍｍ（インタクト株式会社）カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ギ酸含有水
Ｂ：０．１％ギ酸含有アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９０／１０（０）→１０／９０（２．５）→１０／９０（３．５）→９０／１０（３．６）→９０／１０（５．０）
流速：０．４ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＥＳＩ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｍｏｄｅ）
注入量：０．１～５μＬ

【0401】

試験結果を下表に示す。表中、「ｍｅａｎ」は平均を、「Ｓ．Ｄ．」は標準偏差をそれぞれ意味する。投与後０時間から投与後７２時間までの、血漿中被験化合物濃度について、表１２、１３、１４、１５及び１６に示す。

【0402】

【表12】

【0403】

【表13】

【0404】

【表14】

【0405】

【表15】

【0406】

【表16】

【0407】

実施例１、３、６及びプレキサセルチブのリポソーム製剤に関するＡＵＣについては、投与後０時間から血漿中被験化合物濃度を定量できた時点（ｔ）までについて、ＡＵＣを台形法にて算出し、表１７に示す。

【表17】

【0408】

以上の結果より、リポソーム製剤化した実施例１及び実施例３の内封リポソームを静脈内投与すると、それぞれ高い血中滞留性が確認された。本結果は、プレキサセルチブの非臨床試験で報告された薬効の最大化に重要な７２時間の持続的な曝露の達成を示した。従って、実施例１及び実施例３は、優れた薬物動態プロファイルを有し、抗がん剤として極めて有用である。式（３）で示される化合物の特徴である、ピリジン環上の窒素原子が特定の位置に存在していることが重要であることが示された。

【0409】

試験例８．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた薬効評価試験
プレキサセルチブ、プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤及び実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0410】

プレキサセルチブの溶液製剤には、プレキサセルチブを２０％ｓｕｌｆｏｂｕｔｙｌｅｔｈｅｒ－β－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎを含有する１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）に溶解後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過したものを使用した。

【0411】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法で調製した。被験化合物を秤取し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液を加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～７に調整した。又は、被験化合物に１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）及び塩酸を加えて化合物を溶解又は分散し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を加え、ｐＨ６～７に調整した。この液を６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。５℃の冷蔵庫で一晩以上静置した後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。試験例６に記載の方法により算出したリポソーム内封率は９９％以上であった。

【0412】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、溶液製剤を３０ｍｇ／ｋｇ又はリポソーム製剤を３ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回静脈投与、又は１日に２回３日連続皮下投与（１週間に合計６回投与）した。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0413】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0414】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、溶液製剤またはリポソーム製剤投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群は試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0415】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0416】

表１８に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表18】

【0417】

担がんマウスを用いた薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、いずれの投与量においても、リポソーム製剤化されたプレキサセルチブと同様に優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。これらのリポソーム製剤は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量を用いた評価試験において、溶液製剤化されたプレキサセルチブでは達成できない腫瘍退縮を達成している。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0418】

試験例９．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた好中球数の測定
４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤及び実施例１を内封したリポソーム製剤を各用量で単回静脈投与した。投与から７２時間後に血液を採取し、好中球数の測定をおこなった。本試験の比較には試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0419】

空リポソーム液を投与した対照投与群とリポソーム製剤化された実施例１及びリポソーム製剤化されたプレキサセルチブをそれぞれ投与した投与群とを比較し、以下の式で好中球の残存率を算出し、それぞれの製剤についての安全性を評価した。

【0420】

好中球の残存率（％）＝（投与群の投与７２時間後の好中球数）／（対照投与群の投与７２時間後の好中球数）×１００

【0421】

表１９に、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対する好中球の残存率を示す。

【0422】

【表19】

【0423】

リポソーム製剤化された実施例１は、リポソーム製剤化されたプレキサセルチブと同じ投与量で同等の抗腫瘍効果を示す。リポソーム製剤化されたプレキサセルチブは、最小有効量である３ｍｇ／ｋｇにおいて、好中球の残存率が１５％であり、抗腫瘍効果と血液毒性とが同時に観測されている。一方で、リポソーム製剤化された実施例１は、最小有効量である３ｍｇ／ｋｇでは、好中球の残存率が６１％であり、血液毒性の副作用が低減されている。さらに、リポソーム製剤化された実施例１は、試験例８で示したように、腫瘍退縮が観測される２０ｍｇ／ｋｇの投与量においても、リポソーム製剤化されたプレキサセルチブを７．５ｍｇ／ｋｇ投与した場合よりも、高い好中球の残存率を示している。以上より、実施例１は、プレキサセルチブよりも高い安全性と有効性を併せ持つ優れた化合物であり格別な効果を有する。また、実施例１のリポソーム製剤も、同様に、高い安全性と有効性を併せ持つ優れた化合物であり格別な効果を有する。

【0424】

試験例１０．ヒト骨髄細胞Ｍｙｅｌｏｉｄ系分化誘導試験（血液毒性評価試験）
ヒト骨髄ＣＤ３４陽性造血幹細胞をロンザ株式会社より入手した。本凍結細胞は、１％ウシ胎児血清含有ＩＭＤＭ培地にて融解させ、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｈｅｍａＴｏｘ（登録商標）Ｍｙｅｌｏｉｄ Ｍｅｄｉｕｍにて懸濁し、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１０００個の細胞を播種した。ＤＭＳＯの終濃度が０．１％、３ｎＭとなるように評価化合物を添加し、３７℃、５％ＣＯ_２存在下で７日間培養した。培養終了後、１ウェルあたり半分量の細胞懸濁液を回収し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）３Ｄ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ９６８Ｂ）を用いて発光値を測定し、以下の式で細胞生存比率を計算した。

【0425】

細胞生存比率（％）＝（評価化合物の７日後の発光測定値）／（対照群の７日後の発光測定値）×１００

【0426】

実施例で得られた代表化合物及びプレキサセルチブについて、試験例１０に示す試験を行った。結果について下表に示す。

【表20】

【0427】

上表に表すように、３ｎＭのプレキサセルチブは、ヒト骨髄細胞から分化誘導したＭｙｅｌｏｉｄ系細胞に対して抑制効果を示すにもかかわらず、３ｎＭの実施例１は、ヒト骨髄細胞から分化誘導したＭｙｅｌｏｉｄ系細胞に対して抑制効果を示さないことが明らかとなった。この結果より、プレキサセルチブと比較し、実施例１は血液毒性について高い安全性を有する化合物であり、格別かつ異質な効果を有する。

【0428】

試験例１１．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた腫瘍ＰＤ試験
プレキサセルチブ、プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤及び実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、腫瘍における薬力学的（Ｐｈａｒｍａｃｏ Ｄｙｎａｍｉｃｓ：ＰＤ）応答作用を評価した。

【0429】

プレキサセルチブの溶液製剤には、プレキサセルチブを２０％ｓｕｌｆｏｂｕｔｙｌｅｔｈｅｒ－β－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎを含有する１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）に溶解後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過したものを使用した。

【0430】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法で調製した。被験化合物を秤取し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液を加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～７に調整した。又は、被験化合物に１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）及び塩酸を加えて化合物を溶解又は分散し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を加え、ｐＨ６～７に調整した。この液を６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。５℃の冷蔵庫で一晩以上静置した後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。試験例６に記載の方法により算出したリポソーム内封率は９９％以上であった。

【0431】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、試験ごとに以下の条件で投与した：
試験Ａ：溶液製剤を３０ｍｇ／ｋｇ又はリポソーム製剤を７．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈投与した。 試験Ｂ：溶液製剤を３０ｍｇ／ｋｇ又はリポソーム製剤を７．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈投与した。 試験Ｃ：リポソーム製剤を２０ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈投与した。投与後は１日後、３日後、あるいは６日後に腫瘍を回収し、化合物投与による腫瘍のＰＤ応答を評価した。

【0432】

腫瘍におけるＰＤ応答作用はウエスタンブロッティングにより評価した。抗抗γＨ２ＡＸ抗体（０５－６３６、Ｍｅｒｃｋ社）及び抗Ｔｕｂｕｌｉｎ抗体（３８７３、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社）により検出した各バンド強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアにて算出した。

【0433】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式で各バンド強度の相対値を算出し、腫瘍におけるＰＤ応答作用を評価した。対照投与群は試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0434】

γＨ２ＡＸの強度＝｛（本開示の化合物投与群の腫瘍におけるγＨ２ＡＸのバンド強度）／（本開示の化合物投与群の腫瘍におけるＴｕｂｕｌｉｎのバンド強度）｝／｛（対照投与群の腫瘍におけるγＨ２ＡＸのバンド強度／対照投与群の腫瘍におけるＴｕｂｕｌｉｎのバンド強度）｝×１００

【0435】

図７－９に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対するγＨ２ＡＸの強度を示す。

【0436】

以上の結果より、試験例１１試験Ａで示したように、リポソーム製剤化したプレキサセルチブを投与すると、投与３日後、７．５ｍｇ／ｋｇの投与量において強いＰＤ応答作用が確認され、溶液製剤化されたプレキサセルチブでは達成できないＰＤ応答作用を達成した。試験例１１試験Ｂで示したように、リポソーム製剤化した実施例１を投与すると、投与１日後、７．５ｍｇ／ｋｇの投与量において強いＰＤ応答作用が確認され、溶液製剤化されたプレキサセルチブでは達成できないＰＤ応答作用を達成した。試験例１１試験Ｃで示したように、リポソーム製剤化した実施例１を投与すると、投与３日後および投与６日後、７．５ｍｇ／ｋｇおよび２０ｍｇ／ｋｇの投与量において強いＰＤ応答作用が確認された。これらのリポソーム製剤は、試験例７に示すように、プレキサセルチブの非臨床試験で報告された薬効の最大化に重要な７２時間の持続的な曝露の達成を示した。従って、実施例１は、優れた薬物動態的及び薬力学的プロファイルを有し、抗がん剤として極めて有用である。

【0437】

試験例１２．ＥＳ－２を細胞移植した腹膜播種担がんマウスを用いた薬効評価試験
プレキサセルチブ、プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤及び実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0438】

プレキサセルチブの溶液製剤には、プレキサセルチブを２０％ｓｕｌｆｏｂｕｔｙｌｅｔｈｅｒ－β－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎを含有する１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）に溶解後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過したものを使用した。

【0439】

プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８０ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を得た。プレキサセルチブ６０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１０ｍＬ、上記空リポソーム液２０ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。リポソーム液中のプレキサセルチブ濃度は１．９７ｍｇ／ｍＬ、内封率９８％であった。

【0440】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0441】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９０／１０（０）→７０／３０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９０／１０（４．０１）→９０／１０（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0442】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物８０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１２．２ｍＬ、上記空リポソーム液２７．８ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は１．９９ｍｇ／ｍＬ、内封率９７％であった。

【0443】

リポソーム内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬに４％リン酸水溶液１００μＬを加えた液につき、化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：ＭｏｎｏＳｅｌｅｃｔ ｎＰＥＣ （ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ．）
カラム温度：３０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→９５／５（１）→７０／３０（６）→７０／３０（７）→９５／５（７．０１）→９５／５（１０）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：２μＬ
リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0444】

５週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅを発現させた細胞株を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹腔内に移植した。移植５～１４日後にＩＶＩＳ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社）によりＥＳ－２細胞の生着を確認した後、溶液製剤を３０ｍｇ／ｋｇ又はリポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回静脈投与した。投与開始から経時的にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅによる発光を測定し、化合物投与による腫瘍の縮小作用を評価する。Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅによる発光から推測される腫瘍の大きさ、全身症状及び体重推移をもとにマウスを観察し、重篤な所見がなく健康状態を示したマウスについての生存期間を測定した。

【0445】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群の生存期間中央値を算出し、抗腫瘍効果を評価した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0446】

表２１に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した腹膜播種担がんマウス対する生存期間中央値を示す。

【表21】

【0447】

腹膜播種担がんマウスを用いた薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量において、リポソーム製剤化されたプレキサセルチブと同様に優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。これらのリポソーム製剤は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量を用いた評価試験において、溶液製剤化されたプレキサセルチブでは達成できない生存期間の延長を達成している。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0448】

試験例１３．ＥＳ－２を細胞移植した卵巣同所担がんマウスを用いた薬効評価試験
プレキサセルチブ、プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤及び実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0449】

プレキサセルチブの溶液製剤には、プレキサセルチブを２０％ｓｕｌｆｏｂｕｔｙｌｅｔｈｅｒ－β－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎを含有する１０ｍＭグリシン／５％マンニトール溶液（ｐＨ２）に溶解後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過したものを使用した。

【0450】

プレキサセルチブを内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８０ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を得た。プレキサセルチブ６０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１０ｍＬ、上記空リポソーム液２０ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。リポソーム液中のプレキサセルチブ濃度は１．９７ｍｇ／ｍＬ、内封率９８％であった。

【0451】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0452】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９０／１０（０）→７０／３０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９０／１０（４．０１）→９０／１０（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0453】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物８０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１２．２ｍＬ、上記空リポソーム液２７．８ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は１．９９ｍｇ／ｍＬ、内封率９７％であった。

【0454】

リポソーム内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬに４％リン酸水溶液１００μＬを加えた液につき、化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：ＭｏｎｏＳｅｌｅｃｔ ｎＰＥＣ （ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ．）
カラム温度：３０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→９５／５（１）→７０／３０（６）→７０／３０（７）→９５／５（７．０１）→９５／５（１０）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：２μＬ
リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0455】

５週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅを発現させた細胞株を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように右側卵巣内に移植した。移植５～１４日後にＩＶＩＳ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社）によりＥＳ－２細胞の生着を確認した後、溶液製剤を３０ｍｇ／ｋｇ又はリポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回静脈投与した。投与開始から経時的にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅによる発光を測定し、化合物投与による腫瘍の縮小作用を評価する。Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅによる発光から推測される腫瘍の大きさ、全身症状及び体重推移をもとにマウスを観察し、重篤な所見がなく健康状態を示したマウスについての生存期間を測定した。

【0456】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群の生存期間中央値を算出し、抗腫瘍効果を評価した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0457】

表２２に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した卵巣同所担がんマウス対する生存期間中央値を示す。

【表22】

【0458】

卵巣同所担がんマウスを用いた薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量において、リポソーム製剤化されたプレキサセルチブと同様に優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。これらのリポソーム製剤は、２０ｍｇ／ｋｇの投与量を用いた評価試験において、溶液製剤化されたプレキサセルチブでは達成できない生存期間の延長を達成している。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0459】

試験例１４．各種がん細胞を細胞移植した担がんマウスを用いた薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0460】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、試験例１２で用いたもの又は以下の方法で調製したものを用いた。

【0461】

Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１３８．４ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２４３７ｇを添加して、ホモジナイザー（ＣＬＥＡＲＭＩＸ、Ｍ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥ社製）で分散し、真空脱気により脱泡して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ Ｍ－１１０ ＥＨ－３０、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社製）で１４５００Ｐｓｉの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）７３ｎｍのリポソームを得た。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５８．２ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物３.０ｇを秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）５６２ｇ及び上記空リポソーム液９８０ｇを加え、ｐＨ６．５となるように調整した。４５℃で６０分間加温した後冷却した。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過した。この液をガラスバイアルに５０ｍＬずつ分注し、打栓、巻締めした。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は１．９８ｍｇ／ｍＬ、内封率９７％であった。

【0462】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0463】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→６０／４０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度
又は
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物６０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）９．１６ｍＬ、上記空リポソーム液２０．８ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は２．０８ｍｇ／ｍＬ、内封率９８％であった。

【0464】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0465】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度。

【0466】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）又はＮＯＤＳＣＩＤマウス（ＮＯＤ．ＣＢ１７－Ｐｒｋｄｃ^ｓｃｉｄ／Ｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＳＫＯＶ－３細胞（ＡＴＣＣ）又は肉腫ＳＪＣＲＨ３０細胞（ＡＴＣＣ）又は肉腫ＨＴ－１０８０細胞（ＡＴＣＣ）又は膵がんＡｓＰＣ－１細胞（ＡＴＣＣ）又は膵がんＢｘＰＣ－３細胞（ＡＴＣＣ）又は肺がんＣａｌｕ－６細胞（ＡＴＣＣ）又は卵巣がんＯＶ５３０４細胞（ＣｒｏｗｎＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社）を５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は３×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は５×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は８ｍｍ^３～２７ｍｍ^３腫瘍塊／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～２７日後に各種がん細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ又は２０ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回静脈投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。なお、ＢｘＰＣ－３細胞は、ゲムシタビン耐性を示し、ＯＶ５３０４は、ＰＡＲＰ阻害剤耐性を示すことが知られている。

【0467】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0468】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0469】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0470】

表２３に、被験化合物の各投与量、投与期間における、各種がん細胞を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）を示す。

【表23】

【0471】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、種々のがん細胞株に対して、優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0472】

試験例１４Ａ．各種がん細胞を細胞移植した担がんマウスを用いた薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0473】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）４９８．２ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液８７７２ｇを添加して、ホモジナイザー（ＣＬＥＡＲＭＩＸ、Ｍ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥ社製）で分散し、真空脱気により脱泡して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ Ｍ－１１０ ＥＨ－３０、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社製）で１４５００Ｐｓｉの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）７３ｎｍのリポソームを得た。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を注射用水に置換したのち、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン／９．４％スクロース溶液となるようにＬ－ヒスチジン及びスクロースを添加し、１ｍｏｌ/Ｌ塩酸を用いてｐＨ６．５に調整後、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５０．２ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。

【0474】

実施例１の化合物１０.０ｇを秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１３５４ｇ、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸２７ｇ、及び上記空リポソーム液３７８６ｇを加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸でｐＨ６．５となるように調整した。４５℃で６０分間加温した後冷却し、ｐＨ６．５となるように調整し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過した。この液をガラスバイアルに５０ｍＬずつ分注し、打栓、巻締めした。リポソーム液中の実施例１の化合物濃度は２．０１ｍｇ／ｍＬ、内封率は９７．５％、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）は７４ｎｍであった。

【0475】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0476】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→６０／４０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0477】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にＡ２７８０細胞（ＥＣＡＣＣ）又はＨＣＣ１８０６細胞（ＡＴＣＣ）又はＡｎ３ＣＡ細胞(ＡＴＣＣ)又はＤｅｔｒｏｉｔ５６２細胞（ＡＴＣＣ）又はＦａＤｕ細胞（ＡＴＣＣ）又はＮＣＩ－Ｈ４６０細胞（ＡＴＣＣ）を１ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は２ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は１．２ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は１ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は３ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ又は３ｘ１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～２７日後に各種がん細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を２０ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回静脈投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。なお、ＢｘＰＣ－３細胞は、ゲムシタビン耐性を示し、ＯＶ５３０４は、ＰＡＲＰ阻害剤耐性を示すことが知られている。

【0478】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0479】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0480】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0481】

表２３Ａに、被験化合物の各投与量、投与期間における、各種がん細胞を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）を示す。

【表23A】

【0482】

試験例１５．ＰＡ－１を細胞移植した担がんマウスを用いた併用薬効評価試験 実施例１を内封したリポソーム製剤及びシスプラチンを用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0483】

シスプラチン（ランダ注５０ｍｇ／１００ｍＬ、日本化薬社）を使用した。

【0484】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。

【0485】

Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１３８．４ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２４３７ｇを添加して、ホモジナイザー（ＣＬＥＡＲＭＩＸ、Ｍ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥ社製）で分散し、真空脱気により脱泡して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ Ｍ－１１０ ＥＨ－３０、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社製）で１４５００Ｐｓｉの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）７３ｎｍのリポソームを得た。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５８．２ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物３.０ｇを秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）５６２ｇ及び上記空リポソーム液９８０ｇを加え、ｐＨ６．５となるように調整した。４５℃で６０分間加温した後冷却した。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過した。この液をガラスバイアルに５０ｍＬずつ分注し、打栓、巻締めした。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は１．９８ｍｇ／ｍＬ、内封率９７％であった。

【0486】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0487】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→６０／４０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0488】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＰＡ－１細胞（ＡＴＣＣ）を５×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＰＡ－１細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を２０ｍｇ／ｋｇ又はシスプラチンを２．５ｍｇ／ｋｇ又はこれらの併用の用量で１週間に１回静脈投与、又は１週間に２回腹腔投与、又はこれらの併用投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0489】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0490】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤又はシスプラチン又は併用投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0491】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0492】

表２４に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＰＡ－１を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表24】

【0493】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、シスプラチンとの併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0494】

試験例１６．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた併用薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤及びゲムシタビンを用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0495】

ゲムシタビン（ジェムザール注射用２００ｍｇ、日本イーライリリー社）は、生理食塩水（大塚生食注、大塚製薬工場社）に溶解させたものを使用した。

【0496】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法で調製した。被験化合物を秤取し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液を加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～７に調整した。又は、被験化合物に１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）及び塩酸を加えて化合物を溶解又は分散し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を加え、ｐＨ６～７に調整した。この液を６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。５℃の冷蔵庫で一晩以上静置した後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。試験例６に記載の方法により算出したリポソーム内封率は９９％以上であった。

【0497】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ又はゲムシタビンを３０ｍｇ／ｋｇ又はこれらの併用の用量で１週間に１回静脈投与、又は１週間に２回腹腔投与、又はこれらの併用投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0498】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0499】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤又はゲムシタビン又は併用投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群は試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0500】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0501】

表２５に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表25】

【0502】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、ゲムシタビンとの併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0503】

試験例１７．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた好中球数の測定
実施例１を内封したリポソーム製剤及びゲムシタビンを用いて、好中球数の測定を行った。

【0504】

ゲムシタビン（ジェムザール注射用２００ｍｇ、日本イーライリリー社）は、生理食塩水（大塚生食注、大塚製薬工場社）に溶解させたものを使用した。

【0505】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法で調製した。被験化合物を秤取し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液を加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～７に調整した。又は、被験化合物に１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）及び塩酸を加えて化合物を溶解又は分散し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を加え、ｐＨ６～７に調整した。この液を６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。５℃の冷蔵庫で一晩以上静置した後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。試験例６に記載の方法により算出したリポソーム内封率は９９％以上であった。

【0506】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ又はゲムシタビンを３０ｍｇ／ｋｇ又はこれらの併用の用量で１週間に１回静脈投与、又は１週間に２回腹腔投与、又はこれらの併用投与をした。最終投与から９６時間後に血液を採取し、好中球数の測定をおこなった。本試験の比較には試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0507】

空リポソーム液を投与した対照投与群とリポソーム製剤化された実施例１及びゲムシタビン及び併用をそれぞれ投与した投与群とを比較し、以下の式で好中球の残存率を算出し、それぞれの製剤についての安全性を評価した。

【0508】

好中球の残存率（％）＝（投与群の投与９６時間後の好中球数）／（対照投与群の投与９６時間後の好中球数）×１００

【0509】

表２６に、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対する好中球の残存率を示す。

【0510】

【表26】

【0511】

リポソーム製剤化された実施例１は、４．５ｍｇ／ｋｇにおいて、好中球の残存率が８７％であり、試験例１７で示したように、抗腫瘍効果を示すとともに、血液毒性の副作用を示さない。さらに、リポソーム製剤化された実施例１は、試験例１７で示したように、腫瘍退縮が観測されるゲムシタビンとの併用投与において、ゲムシタビンによる血液毒性の副作用を悪化させることなく、高い好中球の残存率を示している。以上より、リポソーム製剤化された実施例１は、高い安全性と有効性を併せ持つ優れた化合物であり格別な効果を有する。

【0512】

試験例１８．ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウスを用いた併用投与順序に関する薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤及びゲムシタビンを用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0513】

ゲムシタビン（ジェムザール注射用２００ｍｇ、日本イーライリリー社）は、生理食塩水（大塚生食注、大塚製薬工場社）に溶解させたものを使用した。

【0514】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物６０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）９．１６ｍＬ、上記空リポソーム液２０．８ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は２．０８ｍｇ／ｍＬ、内封率９８％であった。

【0515】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0516】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0517】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕマウス（ＣＡｎＮ．Ｃｇ－Ｆｏｘｎ１ｎｕ／ＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）に卵巣がんＥＳ－２細胞（ＡＴＣＣ）を１×１０^６ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＳ－２細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を４．５ｍｇ／ｋｇ及びゲムシタビンを３０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈投与及び単回腹腔投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0518】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0519】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤又はゲムシタビン又は併用投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0520】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0521】

表２７に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＳ－２を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表27】

【0522】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、ゲムシタビンとの併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。試験例１８で示したように、リポソーム製剤化された実施例１及びゲムシタビンの併用による抗腫瘍効果は、ゲムシタビン投与の翌日に実施例１のリポソーム製剤投与をおこなう投与順序が最も効果が強く、次いで同時投与或いは実施例１のリポソーム製剤投与の翌日にゲムシタビン投与をおこなう投与順序が効果が強いことが示された。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0523】

試験例１９．ＭＣ３８を細胞移植した担がんマウスを用いた併用薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤及び抗ＰＤ－１抗体を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0524】

抗ＰＤ－１抗体（１１４１１６、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ社）は、ＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）で希釈したものを使用した。

【0525】

リポソーム製剤は、試験例６と同様の方法で調製した。被験化合物を秤取し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度５０ｍＭの空リポソーム液を加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ６～７に調整した。又は、被験化合物に１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／１０％スクロース溶液（ｐＨ６．５）及び塩酸を加えて化合物を溶解又は分散し、化合物濃度２ｍｇ／ｍＬとなるように総脂質濃度７５ｍＭの空リポソーム液を加え、ｐＨ６～７に調整した。この液を６５℃の水浴で１０～３０分間加温した後氷冷した。５℃の冷蔵庫で一晩以上静置した後、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。試験例６に記載の方法により算出したリポソーム内封率は９９％以上であった。

【0526】

４～７週齢のｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にマウス大腸がんＭＣ３８細胞（Ｋｅｒａｆａｓｔ社）を５×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＭＣ３８細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を１０ｍｇ／ｋｇ又は抗ＰＤ－１抗体を２００μｇ／ｈｅａｄ又はこれらの併用の用量で１週間に１回静脈投与、又は１週間に２回腹腔投与、又はこれらの併用投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0527】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0528】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤又は抗ＰＤ－１抗体又は併用投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群は試験例６と同様の方法により調製した空リポソーム液を使用した。

【0529】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0530】

表２８に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＭＣ３８を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表28】

【0531】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、リポソーム製剤化された実施例１及び抗ＰＤ－１抗体との併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。試験例１９で示したように、ＭＣ３８を細胞移植した担がんマウスは抗ＰＤ－１抗体が抗腫瘍効果を示すモデルである。本試験結果より、実施例１は、抗ＰＤ－１抗体が抗腫瘍効果を示すモデルに対して優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0532】

試験例２０．ＥＭＴ６を細胞移植した担がんマウスを用いた併用薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤及び抗ＰＤ－１抗体を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0533】

抗ＰＤ－１抗体（１１４１１６、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ社）は、ＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）で希釈したものを使用した。

【0534】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）１１．０８ｇ及び２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液２００ｍＬを混合し、ホモジナイザー（ＵＬＴＲＡ－ＴＵＲＲＡＸ、ＩＫＡ社製）で分散して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｎａｎｏ－Ｍｉｚｅｒ ＮＭ２、吉田機械興業製）で１００ＭＰａの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）８１ｎｍのリポソームを得た。透析カセット（Ｓｌｉｄｅ－Ａ－Ｌｙｚｅｒ Ｇ２ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｃａｓｓｅｔｔｅｓ ２０Ｋ ＭＷＣＯ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）を用いて、リポソーム外水相を１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）に置換し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５３．１ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。実施例１の化合物６０ｍｇ、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）９．１６ｍＬ、上記空リポソーム液２０．８ｍＬを加え、ｐＨ６．５に調整した。この液を５０℃の水浴で３０分間加温した後氷冷し、０．２２μｍメンブランフィルターにてろ過した。実施例１のリポソーム液中の化合物濃度は２．０８ｍｇ／ｍＬ、内封率９８％であった。

【0535】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。

【0536】

リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0537】

４～７週齢のＢＡＬＢ／ｃマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にマウス乳がんＥＭＴ６細胞（ＡＴＣＣ）を５×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５～１４日後にＥＭＴ６細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を１０ｍｇ／ｋｇ又は抗ＰＤ－１抗体を２００μｇ／ｈｅａｄ又はこれらの併用の用量で１週間に１回静脈投与、又は１週間に２回腹腔投与、又はこれらの併用投与をした。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0538】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0539】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤又は抗ＰＤ－１抗体又は併用投与による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0540】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0541】

表２９に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＭＴ６を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表29】

【0542】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、リポソーム製剤化された実施例１及び抗ＰＤ－１抗体との併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。試験例２０で示したように、ＥＭＴ６を細胞移植した担がんマウスは抗ＰＤ－１抗体が抗腫瘍効果を示さないモデルである。本試験結果より、実施例１は、抗ＰＤ－１抗体が抗腫瘍効果を示さないモデルに対してリポソーム製剤化された実施例１及び抗ＰＤ－１抗体との併用において優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0543】

試験例２１．ＥＭＴ６を細胞移植した担がんマウスを用いた併用投与順序に関する薬効評価試験
実施例１を内封したリポソーム製剤及び抗ＰＤ－１抗体を用いて、抗腫瘍作用を評価した。

【0544】

抗ＰＤ－１抗体（１１４１１６、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ社）は、ＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）で希釈したものを使用した。

【0545】

実施例１を内封したリポソーム製剤は、以下の通り調製した。
Ｐｒｅｓｏｍｅ ＡＣＤ－１（日本精化株式会社製）４９８．２ｇを秤取し、２５０ｍＭ硫酸アンモニウム溶液８７７２ｇを添加して、ホモジナイザー（ＣＬＥＡＲＭＩＸ、Ｍ ＴＥＣＨＮＩＱＵＥ社製）で分散し、真空脱気により脱泡して粗リポソーム分散液を得た。さらに、粗リポソーム分散液を高圧ホモジナイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ Ｍ－１１０ ＥＨ－３０、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ社製）で１４５００Ｐｓｉの圧力で分散し、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）７３ｎｍのリポソームを得た。Ｐｅｌｌｉｃｏｎカセット（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ ２ Ｍｉｎｉ ３００ｋＤ ０．１ｍ２、メルク社製）を５枚装着したＴａｎｇｅｎｔｉａｌ Ｆｌｏｗ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎシステムを用いて、リポソーム外水相を注射用水に置換したのち、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン／９．４％スクロース溶液となるようにＬ－ヒスチジン及びスクロースを添加し、１ｍｏｌ/Ｌ塩酸を用いてｐＨ６．５に調整後、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過することで、総脂質濃度５０．２ｍｇ／ｍＬの空リポソーム液を得た。

【0546】

実施例１の化合物１０.０ｇを秤取し、１０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン緩衝液／９．４％スクロース溶液（ｐＨ６．５）１３５４ｇ、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸２７ｇ、及び上記空リポソーム液３７８６ｇを加え、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸でｐＨ６．５となるように調整した。４５℃で６０分間加温した後冷却し、ｐＨ６．５となるように調整し、０．２μｍメンブランフィルターにてろ過した。この液をガラスバイアルに５０ｍＬずつ分注し、打栓、巻締めした。リポソーム液中の実施例１の化合物濃度は２．０１ｍｇ／ｍＬ、内封率は９７．５％、平均粒子径（Ｚ－ａｖｅｒａｇｅ）は７４ｎｍであった。

【0547】

リポソーム液中の化合物濃度及び内封率は次のようにして算出した。
未内封化合物濃度：リポソーム液１００μＬ、４％リン酸水溶液１００μＬ及び生理食塩水３００μＬを混合し、１００，０００×ｇで６０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
リポソーム液中の化合物濃度：リポソーム液をトリフルオロ酢酸／水／メタノール混液（０．１／２５／７５）で希釈し、４℃、１５，０００×ｇで１０分間遠心して不溶物を除去し、上清の化合物濃度をＨＰＬＣで測定した。
ＨＰＬＣの測定条件は下記の通りである。
ＨＰＬＣ条件
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８，１．７μｍ，５０ｘ２．１ｍｍ
カラム温度：４０℃
移動相：Ａ：０．１％ トリフルオロ酢酸含有水
Ｂ：アセトニトリル
Ａ／Ｂ（ｍｉｎ）：９５／５（０）→６０／４０（３）→０／１００（３．５）→０／１００（４）→９５／５（４．０１）→９５／５（５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
検出：紫外可視検出器 測定波長 ２５４ｎｍ
注入量：５μＬ
下式により内封率を算出した。
内封率（％）＝（リポソーム液中の化合物濃度－未内封化合物濃度）×１００／リポソーム液中の化合物濃度

【0548】

５週齢のＢＡＬＢ／ｃマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＣｒｌＣｒｌｊ、雌性、日本チャールス・リバー）にマウス乳がんＥＭＴ６細胞（ＡＴＣＣ）を５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅとなるように腹側部周辺に皮内移植した。移植５日後にＥＭＴ６細胞の生着を確認した後、リポソーム製剤を６ｍｇ／ｋｇ及び抗ＰＤ－１抗体を２００μｇ／ｈｅａｄの用量で１週間に１回静脈投与及び１週間に１回腹腔投与した。投与開始から経時的に腫瘍容積を測定し、化合物投与による腫瘍容積の縮小作用を評価する。腫瘍容積は電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）にて計測した腫瘍の短径、長径を用いて、次式にて算出した。

【0549】

腫瘍容積［ｍｍ^３］ ＝ ０．５×（短径［ｍｍ］）^２×長径［ｍｍ］

【0550】

溶媒のみを投与した対照投与群と、本開示の化合物投与群とを比較し、以下の式でＴ／Ｃを算出し、抗腫瘍効果を評価した。また、リポソーム製剤及び抗ＰＤ－１抗体による投与終了時の完全腫瘍退縮（ＣＲ）個体率を記載した。対照投与群には空リポソーム液を使用した。

【0551】

Ｔ／Ｃ（％）＝（本開示の化合物投与群の投与終了時の腫瘍容積－本開示の化合物投与群の投与開始時の腫瘍容積）／（対照投与群の投与終了時の腫瘍容積－対照投与群の投与開始時の腫瘍容積）×１００

【0552】

表３０に、被験化合物の各投与量、投与期間における、ＥＭＴ６を細胞移植した担がんマウス対するＴ／Ｃ（％）およびＣＲ個体率を示す。

【表30】

【0553】

担がんマウスを用いた併用薬効評価試験において、リポソーム製剤化された実施例１は、抗ＰＤ－１抗体との併用において優れた抗腫瘍効果を示すことが明らかとなった。試験例２１で示したように、リポソーム製剤化された実施例１及び抗ＰＤ－１抗体の併用による抗腫瘍効果は、同時投与が最も強く、次いで実施例１のリポソーム製剤投与の後に抗ＰＤ－１抗体投与をおこなう併用順序が強いことが示された。本試験結果より、実施例１は、優れた抗腫瘍効果を示す有望な化合物であり、格別な効果を有する。

【0554】

試験例２２．キナーゼ選択性試験
ＨｏｔＳｐｏｔ Ｆｕｌｌ Ｐａｎｅｌ Ｋｉｎａｓｅ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ（Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ社）により、プレキサセルチブ、実施例１及び実施例３の３７０の野生型キナーゼに対する選択性を評価した。

【0555】

緩衝液：２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５，１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２，２ｍＭ ＭｎＣｌ_２（必要に応じて），１ｍＭ ＥＧＴＡ，０．０２％ Ｂｒｉｊ３５，０．０２ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ，０．１ｍＭ Ｎａ_３ＶＯ_４，２ｍＭ ＤＴＴ，１％ ＤＭＳＯ
ＡＴＰ濃度：１０μＭ
反応時間：２時間
２時間でのＡＴＰ変換率：５～２０％
化合物濃度：１００ｎＭ

【0556】

表３１～表３３に、プレキサセルチブ、実施例１及び実施例３について、３７０の野生型キナーゼのうち、１００ｎＭにおいて残存活性が２５％未満であったキナーゼについて、キナーゼの名称と１００ｎＭにおける残存活性（％）を示す。

【表31】

【表32】

【表33】

【0557】

上表に表すように、実施例１及び３の化合物は、プレキサセルチブよりも高いＣＨＫ１選択性を示した。中でも、実施例１は、特に選択的にＣＨＫ１活性を阻害する格別な効果を有することから、非選択的なキナーゼ阻害による毒性の発現を回避しつつ、ＣＨＫ１阻害による優れた抗腫瘍効果を示した。

【0558】

試験例２３．ＣＨＫ１／ＣＨＫ２選択性試験
被験物質はｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＤＭＳＯ）に溶解し、さらにＤＭＳＯにて希釈して試験濃度の１００倍濃度の溶液を調製した。その溶液をさらにアッセイバッファーにて２５倍希釈して被験物質溶液とした。陽性対照物質もこれと同様にして陽性対照物質溶液を調製した。４倍濃度被験物質溶液をアッセイバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００，１ｍＭ ＤＴＴ，ｐＨ７．５）にて調製した。４倍濃度基質／ＡＴＰ／金属溶液をキットバッファー（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，０．０１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００，５ｍＭ ＤＴＴ，ｐＨ７．５）にて調製した。２倍濃度キナーゼ溶液をアッセイバッファーにて調製した。５μＬの４倍濃度被験物質溶液、５μＬの４倍濃度基質／ＡＴＰ／金属溶液および１０μＬの２倍濃度キナーゼ溶液をポリプロピレン製３８４ウェルプレートのウェル内で混合し、室温にて１時間反応させた。７０μＬのＴｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＱｕｉｃｋＳｃｏｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓｉｓｔ ＭＳＡ；Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を添加して反応を停止させた。反応溶液中の基質ペプチドとリン酸化ペプチドをＬａｂＣｈｉｐ^ＴＭ ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）にて分離、定量した。キナーゼ反応は基質ペプチドピーク高さ（Ｓ）とリン酸化ペプチドピーク高さ（Ｐ）から計算される生成物比（Ｐ／（Ｐ＋Ｓ））にて評価した。全ての反応コンポーネントを含むコントロールウェルの平均シグナルを０％ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ、バックグランドウェル（酵素非添加）の平均シグナルを１００％ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎとし、各被験物質試験ウェルの平均シグナルから阻害率を計算した。ＩＣ_５０値は被験物質濃度と阻害率によるプロットを非線形最小二乗法により４パラメータのロジスティック曲線に近似させて求めた。

【0559】

表３４に、プレキサセルチブ及び実施例１について、ＣＨＫ１及びＣＨＫ２に対するＩＣ_５０値を示す。

【表34】

【0560】

上表に表すように、実施例１の化合物は、プレキサセルチブと比較して高いＣＨＫ１選択性を示した。このことから、実施例１はＣＨＫ２阻害による毒性の発現を回避しつつ、ＣＨＫ１阻害による優れた抗腫瘍効果を示した。

【0561】

試験例１～１３の結果から、本願発明の化合物は、高いＣＨＫ１阻害活性を示し（試験例１）、高いがん細胞増殖抑制効果を示した（試験例２）。さらに、本願発明化合物は、心毒性やのリスクが低い特徴を有するとともに（試験例３）、リポソームに効率よく内封される特徴を有する（試験例６、６Ａ、６Ｂ）。

【0562】

本発明者らは、プレキサセルチブが肝毒性の懸念を有する課題を新たに見出し、特に式（３）で表される化合物（特定の位置に窒素原子を有するピリジン誘導体）は、当該課題を克服し、高い安全性を有していることを見出した（試験例４）。加えて、特に式（３）で表される化合物は、優れた薬物動態を有する（試験例７）。

【0563】

式（３）に含まれる代表化合物である実施例１の化合物は、プレキサセルチブに比べて、５倍以上高いＣＨＫ１阻害活性を有し（試験例１）、強力な細胞増殖抑制効果を示す格別な効果を有する（試験例２）。加えて、実施例１の化合物は、プレキサセルチブと比較し、極めて心毒性が低く（試験例３）。プレキサセルチブの新たな課題である肝毒性の懸念を示さず（試験例４）、血液毒性のリスクがプレキサセルチブと比較し、大幅に軽減されている異質な効果を有することを見出した（試験例５、及び試験例１０）。さらに、実施例１の化合物は、良好な薬物動態を示し（試験例７）、リポソームに効率よく封入され、良好なリポソーム封入操作性を示す（試験例６、６Ａ、６Ｂ）。

【0564】

さらに、リポソーム製剤化された実施例１の化合物は、in vitro及びin vivoにおいて優れた抗腫瘍効果を示す格別な効果を有するとともに、同時に高い安全性を有する異質な効果を有する（試験例８、試験例９、試験例１１～試験例１４）。既存の抗がん剤と、実施例１の化合物を併用することにより極めて優れた抗腫瘍効果と高い安全性を併せ持つ特徴を有する（試験例１５～試験例２１）。また、実施例１の化合物は、プレキサセルチブに比べて、選択的にＣＨＫ１を阻害する格別な効果を有することから、非選択的なキナーゼ阻害による毒性の発現を回避しつつ、ＣＨＫ１阻害による優れた抗腫瘍効果を示す（試験例２２～試験例２３）。

【0565】

以上より、実施例１の化合物は、プレキサセルチブと比較し、高い有効性を有する格別な効果を有するとともに、同時に高い安全性を示す異質な効果を併せ持つため、予測できない効果を有する。さらに、実施例１のリポソーム製剤は、優れた血中滞留性、抗腫瘍効果、高い安全性を併せ持つ優れた薬剤であり、予期せぬ効果を有する。

【0566】

本開示は、ＣＨＫ１阻害剤に関するものであり、副作用を低減しつつ治療効果の高い抗腫瘍剤に関するものである。本発明者らは鋭意検討を行った結果、式（１）で示される化合物が、ＣＨＫ１に対して強い阻害作用を有し、優れた抗腫瘍作用を見出した。なかでも、式（３）で表される特定の位置に窒素原子を有するピリジン環を有する一連の化合物が、格別かつ異質な効果を示すことを確認し、本願発明を完成させた。

【0567】

具体的には、本発明者らは、実施例１～３８に係る化合物を創製し、一連の化合物が極めて高いＣＨＫ１阻害活性を示し（試験例１）、高いがん細胞毒性を示すとともに（試験例２）。ｈＥＲＧ阻害が弱いことから高い安全性を併せ持つ異質な効果を有する（試験例３）。さらに、本願発明者らはプレキサセルチブが肝毒性の懸念を有する課題を見出し、本願発明化合物は当該課題を克服する異質な効果を見出した（試験例４）。なかでも、実施例１等に代表される「特定の置換位置に窒素原子が存在するピリジン環を有する式（３）で示される化合物」は、極めて格別かつ異質な効果を有していた。

【0568】

式（３）で代表される実施例１等の化合物は、プレキサセルチブとは異なりヒト骨髄細胞コロニー形成を抑制せず血液毒性について高い安全性を示し（試験例５）、リポソーム内封効率が極めて高く、良好なリポソーム封入操作性を示し（試験例６、６Ａ、６Ｂ）、リポソーム製剤化により高い血中滞留性を示した（試験例７）。当該リポソーム製剤は、担がんモデルにてプレキサセルチブでは達成できない腫瘍退縮効果を有するにも関わらず（試験例８）、極めて高い安全性を有する（試験例９、１０）。実施例１は、そのもので優れた薬物動態的及び薬力学的プロファイルを有し（試験例１１）、そのリポソーム製剤は、プレキサセルチブでは達成できない生存期間の延長効果を示し（試験例１２、１３）、各種がんに対して幅広く有効性を示した（試験例１４及び１４Ａ）。リポソーム製剤化された実施例１と各種抗がん剤（シスプラチン、ゲムシタビンまたはＰＤ－１抗体）とを併用したところ格別な効果を示した（試験例１５－２１）。また、実施例１の化合物は、プレキサセルチブに比べて、選択的にＣＨＫ１活性を抑制する格別な効果を有することから、非選択的なキナーゼ阻害による毒性の発現を回避しつつ、ＣＨＫ１阻害による優れた抗腫瘍効果を示す（試験例２２～２３）。

【0569】

以上のように、本開示の好ましい実施形態を用いて本開示を例示してきたが、本開示は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。本願は、日本国出願である特願２０２２－８７１７１（２０２２年５月２７日出願）に対して優先権を主張するものであり、その内容はその全体が本明細書において参考として援用される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。

【産業上の利用可能性】

【0570】

本開示の化合物は、Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ Ｋｉｎａｓｅ １（ＣＨＫ１）を強力に阻害する。これらのリポソーム製剤は、その徐放性効果により、持続的な薬物曝露を達成することで、ＣＨＫ１の阻害作用に基づく強力な抗腫瘍効果を示す。したがって、本開示の化合物及びその製薬学的に許容される塩、これらを含有する医薬組成物、並びにこれらを含有するリポソーム製剤は、ＣＨＫ１が関与する病態の治療剤若しくは予防剤として有用である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図6A】

【図7】

【図8】

【図9】