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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-08-29
(45)【発行日】2024-09-06
(54)【発明の名称】キサンチンアミドヒドロラーゼ及びその用途
(51)【国際特許分類】
A61K 38/16 20060101AFI20240830BHJP
A61P 19/06 20060101ALI20240830BHJP
C12N 15/55 20060101ALI20240830BHJP
C12N 9/86 20060101ALI20240830BHJP
C12N 1/15 20060101ALI20240830BHJP
C12N 1/19 20060101ALI20240830BHJP
C12N 1/21 20060101ALI20240830BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20240830BHJP
A23L 33/00 20160101ALI20240830BHJP
【ＦＩ】
A61K38/16
A61P19/06
C12N15/55 ZNA
C12N9/86
C12N1/15
C12N1/19
C12N1/21
C12N5/10
A23L33/00
【請求項の数】
14
(21)【出願番号】P 2022543080
(86)(22)【出願日】2021-01-13
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2023-03-27
(86)【国際出願番号】 CN2021071501
(87)【国際公開番号】W WO2021143725
(87)【国際公開日】2021-07-22
【審査請求日】2022-09-06
(31)【優先権主張番号】202010036500.6
(32)【優先日】2020-01-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】202010036519.0
(32)【優先日】2020-01-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】505245449
【氏名又は名称】天津大学
【氏名又は名称原語表記】Ｔｉａｎ Ｊｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
【住所又は居所原語表記】９２， Ｗｅｉｊｉｎ Ｒｏａｄ， Ｎａｎｋａｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｔｉａｎｊｉｎ ３０００７２ ＣＨＩＮＡ
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】ヂャン イェン
(72)【発明者】
【氏名】リー ペイシャン
(72)【発明者】
【氏名】トン ヤン
(72)【発明者】
【氏名】フー イーリン
(72)【発明者】
【氏名】リィゥ ダーヂー
【審査官】鳥居 敬司
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１９／１８３２９２（ＷＯ，Ａ１）
【文献】allantoinase [Cytobacillus oceanisediminis 2691]，NCBI，2016年，Acc. AND39904.1，<URL;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/AND39904>
【文献】L-hydantoinase LhyD [Gottschalkia purinilytica]，NCBI，2015年，Acc. KNF07048.1，<URL;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/KNF07048>
【文献】Analytical Biochemistry，1982年，Vol.123，pp.32-40
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ１２Ｎ １５／００－１５／９０
Ｃ１２Ｎ ９／００－９／９９
Ａ６１Ｐ １９／００－１９／１０
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
尿酸の生成においてプリンを分解するための薬物組成物であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド又はその機能的変異体を含み、前記ポリペプチド又はその機能的変異体が、キサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有し、
前記機能的変異体が前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドの天然アイソザイムであり、前記天然アイソザイムが、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む、薬物組成物。
【請求項2】
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド又はその機能的変異体がキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有し、前記機能的変異体が前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドの天然アイソザイムであり、前記天然アイソザイムが、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む、
前記ポリペプチド又は前記機能的変異体の、尿酸の生成においてプリンを分解するための薬物組成物又は保健食品の製造における利用。
【請求項3】
前記ポリペプチド及び前記機能的変異体が触媒部位を有し、ペプチド鎖が巻き、畳まれていることにより前記触媒部位が空間構造的にお互いに近い状態である、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含み、前記ポリペプチド及び前記機能的変異体が結合部位を有し、ペプチド鎖が巻き、畳まれていることにより前記結合部位が、空間構造的にお互いに近い状態である、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む、請求項２に記載の薬物組成物又は保健食品の製造における利用。
【請求項4】
前記ポリペプチド及び前記機能的変異体が触媒部位を有し、ペプチド鎖が巻き、畳まれていることにより前記触媒部位が空間構造的にお互いに近い状態である、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含み、前記ポリペプチド及び前記機能的変異体が結合部位を有し、ペプチド鎖が巻き、畳まれていることにより前記結合部位が、空間構造的にお互いに近い状態である、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む、請求項１に記載の薬物組成物。
【請求項5】
前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含み、前記２価金属イオンがＺｎ２＋及び／又はＭｎ２＋である、請求項４に記載の薬物組成物。
【請求項6】
前記触媒部位と前記結合部位との距離が５オングストローム（Å）以下である、請求項４又は５に記載の薬物組成物。
【請求項7】
前記ポリペプチド又はその機能的変異体が、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｐ．、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｄｉｃｈｏｔｏｍｉｃｕｍ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｎｃｌｅｎｓｉｓ、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｙｐｈａｅ、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ａｃｉｄａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃａｌｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ．、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓ、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋｉａ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｏｒｔｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｆｕｎｄｉ、Ａｎａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｐｅｐｔｉｄｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍａｒｉｎｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ ｂａｌｔｉｃｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｅｎｓｉｓ、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ ｌｉｔｕｓｅｂｕｒｅｎｓｉｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒａｅｄｉｉ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｉｓｌａｎｄｉｃｕｓ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ａｕｓｔｒａｌｉｃｕｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｔｅｐｉｄｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉ、［Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｆｅｒｖｉｄｕｓ、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ、Ｔｈｅｒｍｏｔａｌｅａ ｍｅｔａｌｌｉｖｏｒａｎｓ、Ｏｒｎｉｔｈｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｓｏｎａｅ、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｍａｇａｄｉｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｏｒｅａｌｉｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏｅｌｙｔｉｃｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌａｎｉ、Ｔｈｅｒｍｏｈａｌｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｒｒｅｎｓｉｓ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．、Ｍａｌｅｄｉｖｉｂａｃｔｅｒ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｉ、Ｎａｔｒｏｎｉｎｃｏｌａ ｐｅｐｔｉｄｉｖｏｒａｎｓ、Ａｎａｅｒｏｖｉｒｇｕｌａ ｍｕｌｔｉｖｏｒａｎｓ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｓｐｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉｇｅｎｅｓ、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｓｐ．、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓ、Ａｎｄｒｅｅｓｅｎｉａ ａｎｇｕｓｔａ、Ｐａｌｕｄｉｆｉｌｕｍ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｅｔｈａｎｏｌｉｇｅｎｅｓ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｍｅｔａｌｌｉｒｅｄｉｇｅｎｓ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉ、Ｓｐｏｒｏｓａｒｃｉｎａ ｇｌｏｂｉｓｐｏｒａ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｏｒｅｍｌａｎｄｉｉ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｍｉｔｃｈｅｌｌｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ａｍｍｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｐｅｒｔｉｎａｘ、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓｐ．又は、Ｎａｔｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓに由来する、請求項１及び４～６のいずれかに記載の薬物組成物。
【請求項8】
尿酸の生成においてプリンを分解するための薬物組成物であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチド又はその機能的変異体をコードする、核酸分子を含み、
前記ポリペプチド又はその機能的変異体が、キサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有し、
前記機能的変異体が前記ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列からなるポリペプチドの天然アイソザイムであり、前記天然アイソザイムが、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列を含む、薬物組成物。
【請求項9】
前記核酸分子が、発現カセットに含まれている、請求項８に記載の薬物組成物。
【請求項10】
前記核酸分子が、発現ベクターに含まれている、請求項８に記載の薬物組成物。
【請求項11】
前記核酸分子又は発現ベクターが、宿主細胞に含まれている、請求項８又は請求項１０に記載の薬物組成物。
【請求項12】
前記宿主細胞が真核細胞又は原核細胞である、請求項１１に記載の薬物組成物。
【請求項13】
痛風を予防及び／又は治療するための薬物組成物であって、請求項１及び４～８、１０～１２のいずれかに記載の薬物組成物、及び薬学的に許容されるキャリア又は賦形剤を含む、薬物組成物。
【請求項14】
請求項１及び４～１３のいずれかに記載の薬物組成物の、痛風を予防及び／又は治療するための薬物の調製における利用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本願が２０２０年１月１４日にて提出した中国特願第２０２０１００３６５００．６号と第２０２０１００３６５１９．０号との優先権を主張し、その全内容を全体的に引用することによって、本願明細書の記載に組み込まれる。
本願が生物医薬分野に関し、具体的に、新しいプリン分解経路、当該経路に関与する酵素及びそれらの用途、特に痛風の治療においての応用を提供する。
本願が生物医薬分野に関し、具体的に、新しいプリン分解経路、当該経路に関与する酵素及びそれらの用途、特に痛風の治療においての応用を提供する。
【背景技術】
【0002】
プリンの吸収は主に腸で行われ、腸は無酸素環境である。痛風はプリンの代謝異常による関節炎であり、繰り返して発作する赤く、圧痛的、熱く、腫れる関節がその特徴である。一般に、痛みが速やかに発生し、１２時間以内に最大強度に達する。痛風が起こる原因は、体内尿酸レベルの上昇により、尿酸塩が関節と腎臓部位において蓄積し、尿酸がプリン代謝の産物である。
【0003】
現在、現存の痛風を治療する薬物はコルヒチン、アロプリノール、フェブキソスタット及び他の非ステロイド性抗炎症薬とグルココルチコイド等である。コルヒチンが好中球の遊走、粘着及び貪食作用等を抑制することにより、関節一部の痛み、腫れ及び炎症反応を制御できる。アロプリノールとフェブキソスタットとは、選択的キサンチンオキシダ－ゼ抑制剤であり、血尿酸塩濃度を下げることにより、痛風を治療する作用を発揮できるが、以上の薬物が大きな副作用がある。
【0004】
新しい痛風を予防、関与及び／又は治療する薬物の開発及び応用が本分野にとっては必要である。
【発明の概要】
【0005】
第一態様は、本願がポリペプチドを提供し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含み，前記機能的変異体がキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する：
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、さらに空間構造的に下記のように定義される結合部位を有する。
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位と前記結合部位との距離が５オングストローム（Å）以下である。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列の天然アイソザイムである。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその天然アイソザイムに基づいて、一個又は複数個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損を起こることにより産生される。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が触媒部位及び／又は結合部位において起こらない。
第二態様は、本願が核酸分子を提供し、第一態様に記載されるポリペプチドをコードする。
第三態様は、本願が発現キットを提供し、第二態様に記載される核酸分子を含む。
第四態様は、本願が発現ベクターを提供し、第二態様に記載される核酸分子又は第三態様に記載される発現キットを含む。
第五態様は，本願が宿主細胞を提供し、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット又は第四態様に記載される発現ベクターを含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含むポリペプチドを発現、産生でき、前記機能的変異体がキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
第五態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する。
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第五態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞が真核細胞又は原核細胞である。
第五態様のある実施形態において、前記真核細胞が酵母細胞である。
第五態様のある実施形態において、前記原核細胞がエシェリキア属と、乳酸桿菌属と、ビフィズス菌属と、バクテロイデス門と、ファーミキューテス門とから選ばれる。
第六態様は、本願が薬物組成物又は保健食品を提供し、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター又は第五態様に記載される宿主細胞、及び薬学的に許容されるキャリア又は賦形剤を含む。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、痛風を予防及び／又は関与及び／又は治療に用いられる。
第七態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品がプリンの分解においての用途を提供する。
第七態様のある実施形態において、前記プリンの分解が体外で起こる。
第八態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品の、痛風を予防、関与及び／又は治療する薬物の調製における用途を提供する。
第九態様は、本願は、痛風を予防、関与及び／又は治療する方法を提供し、必要のある個体に第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品を供与することを含む。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する：
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、さらに空間構造的に下記のように定義される結合部位を有する。
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位と前記結合部位との距離が５オングストローム（Å）以下である。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列の天然アイソザイムである。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその天然アイソザイムに基づいて、一個又は複数個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損を起こることにより産生される。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が触媒部位及び／又は結合部位において起こらない。
第二態様は、本願が核酸分子を提供し、第一態様に記載されるポリペプチドをコードする。
第三態様は、本願が発現キットを提供し、第二態様に記載される核酸分子を含む。
第四態様は、本願が発現ベクターを提供し、第二態様に記載される核酸分子又は第三態様に記載される発現キットを含む。
第五態様は，本願が宿主細胞を提供し、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット又は第四態様に記載される発現ベクターを含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含むポリペプチドを発現、産生でき、前記機能的変異体がキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
第五態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する。
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第五態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞が真核細胞又は原核細胞である。
第五態様のある実施形態において、前記真核細胞が酵母細胞である。
第五態様のある実施形態において、前記原核細胞がエシェリキア属と、乳酸桿菌属と、ビフィズス菌属と、バクテロイデス門と、ファーミキューテス門とから選ばれる。
第六態様は、本願が薬物組成物又は保健食品を提供し、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター又は第五態様に記載される宿主細胞、及び薬学的に許容されるキャリア又は賦形剤を含む。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、痛風を予防及び／又は関与及び／又は治療に用いられる。
第七態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品がプリンの分解においての用途を提供する。
第七態様のある実施形態において、前記プリンの分解が体外で起こる。
第八態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品の、痛風を予防、関与及び／又は治療する薬物の調製における用途を提供する。
第九態様は、本願は、痛風を予防、関与及び／又は治療する方法を提供し、必要のある個体に第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品を供与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【0006】
【図1】人体が各種プリンを分解する代謝経路及び各ステップを触媒する酵素のＥＣ番号である。
【図2】キサンチンオキシダ－ゼがキサンチンを分解して尿酸を産生する代謝反応及び複雑Ｍｏ含有接合団にかかる触媒メカニズムである。
【図3】アロプリノールがキサンチンオキシダ－ゼを抑制することにより尿酸の生成を阻止して痛風を治療するメカニズムである。
【図4】キサンチンアミドヒドロラーゼが無酸素条件でキサンチンを分解する反応式（１）及び全代謝経路である。
【図5】精製したキサンチンアミドヒドロラーゼの電気泳動結果であり、レーンＭが分子量マーカーを示し、レーンＴがキサンチンアミドヒドロラーゼを発現する細菌ライセートを示し、レーンＵがＣｏアフィニティーカラムを通過した細菌ライセートを示し、レーンＥ１、Ｅ２、Ｅ３のそれぞれがコバルトアフィニティーカラムを通過して精製、溶出した１、２と４μｇのキサンチンアミドヒドロラーゼを示す。
【図6】キサンチンアミドヒドロラーゼがキサンチンの加水分解開環を触媒する酵素活性ＬＣ－ＭＳ（液体クロマトグラフィー／質量分析）検出結果であり、Ａが酵素を添加しないネガティブコントロールのＬＣ－ＭＳ検出結果で、Ｂが実験群のＬＣ－ＭＳ検出結果である。
【図7】ＰＨＹＲＥ２サーバー（ＰＨＹＲＥ２ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｏｌｄ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｅｒ）によりコンピューターシミュレーションを行って得たキサンチンアミドヒドロラーゼ構造の活性中心の図であり、触媒部位は空間構造的にお互いに近づく四つのヒスチジン、一つカルボキシ基化のリジン、一つのアスパラギン酸、及び二つの２価金属イオン（例えば、Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）を含み、結合部位が空間構造的にお互いに近づくキサンチンと相互作用をする一つのイソロイシンと、一つのアラニンと、一つのプロリンと、一つのグリシン残基を含む。
【図8】ＵｎｉＲｅｆ５０＿Ｑ３ＡＥＡ１の全てのキサンチンアミドヒドロラーゼの進化システム樹形図である。灰色表記が各樹状分岐から菌株を選択して、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１、及びＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓを代表し、それらをコードする登録番号がそれぞれＡ０Ａ３６６Ｋ５２３と、Ａ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４と、Ａ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２と、Ｑ３ＡＥＡ１と、Ａ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１とであるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を図９において配列比較を行う。
【図9】五つ異なるの種のＢａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１）、及びＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓであり、コードする登録番号がそれぞれＡ０Ａ３６６Ｋ５２３と、Ａ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４と、Ａ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２と、Ｑ３ＡＥＡ１と、Ａ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１とであるキサンチンアミドヒドロラーゼの配列比較の結果、触媒部位が二つの２価金属（例えば、Ｚｎ２＋又はＭｎ２＋等）及びそれと配位する背景が灰色である四つのヒスチジン（Ｈ）と、一つのリジン（Ｋ）と、一つのアスパラギン酸（Ｄ）残基（実線枠）とを含み、結合部位がキサンチンと結合する背景が灰色である一つのイソロイシン（Ｉ）と、一つのアラニン（Ａ）と、一つのプロリン（Ｐ）と、一つのグリシン残基（Ｇ）とを含む。
【配列の簡単な説明】
【0007】
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ，ＣＧＭＣＣ１．２０１０により発現するキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２は、ＰＣＲ増幅に用いられるキサンチンアミドヒドロラーゼの核酸分子をコードする上流プライマーのヌクレオチド配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３は、ＰＣＲ増幅に用いられるキサンチンアミドヒドロラーゼの核酸分子をコードする下流プライマーのヌクレオチド配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５は、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｐ． ＦＢＫＬ４．０１１により発現する登録番号がＡ０Ａ３６４Ｋ３１７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６は、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ６ＳＵＹ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ ｂａｃｔｅｒｉｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｄ２ＮＳＭ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ２＿Ａ＿５７＿ＣＴ２により発現する登録番号がＥ５ＷＮＦ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｈ８－０２５９により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｒ１ＣＫ１８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０は、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｄｉｃｈｏｔｏｍｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ３Ｕ２６１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｎｃｌｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｖ８ＪＣＮ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２は、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ２ＱＶＰ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬＲ５－０９１２により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９Ｋ５Ｐ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｙｐｈａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９ＤＧＷ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａ ＤＳＭ１８０９５により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＵＨＺ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ｃｌ９５により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ６Ｃ７Ｊ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７は、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ａ３ＸＥＥ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ３８０ＸＴＴ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９は、Ａｃｉｄａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ ＤＳＭ ２７８４により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ５Ｓ５Ｐ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０は、Ｃａｌｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ． ＴＲ１３により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｐ８Ｚ９Ｔ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ． Ｐ１により発現する登録番号がＡ０Ａ２６５Ｑ２Ｂ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ３－２－２により発現する登録番号がＡ０Ａ４２９Ｙ５６６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４は、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋｉａ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ（菌株ＡＴＣＣ ７９０６／ＤＳＭ ６０４／ＢＣＲＣ １４４７５／ＣＩＰ １０４３０３／ＮＣＩＭＢ １０６７８／９ａ）により発現する登録番号がＫ０ＡＷＡ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｏｒｔｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４４３ＩＫＸ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｖ２ＺＮＢ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７は、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｆｕｎｄｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ａ２ＩＥＥ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｒ７－０３３１により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＭＤＷ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＪＡＴ－２１９４５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ０Ｘ８Ｃ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｆ３Ｓ６Ｉ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｓ１ＹＤＧ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＯＶ１９４により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ１Ｘ５２６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３は、Ａｎａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２６７ＭＪＦ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４は、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ ＤＳＭ １１００３により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＲＤＬ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｐｅｐｔｉｄｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＤＳＭ １８９７８により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ５ＫＸＨ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６は、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ８Ｑ７Ｈ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＩＨＢ Ｂ ３４１５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｂ２Ｆ３Ｚ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８は、Ｍａｒｉｎｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ ｂａｌｔｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ２ＫＭＥ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ４２９Ｘ０Ｗ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０は、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ３Ｑ６Ｔ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ（菌株ＡＴＣＣ ７９０６／ＤＳＭ ６０４／ＢＣＲＣ １４４７５／ＣＩＰ １０４３０３／ＮＣＩＭＢ １０６７８／９ａ）により発現する登録番号がＫ０Ｂ３６０であるキサンチンアミドヒドロラーゼであるアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２は、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ ｌｉｔｕｓｅｂｕｒｅｎｓｉｓ ＤＳＭ ７９７により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９Ｍ６３５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＡＴＣＣ １９２９９により発現する登録番号がＴ４Ｖ５Ｔ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒａｅｄｉｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ１ＡＴＬ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｉｓｌａｎｄｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｌ８Ｄ５Ｓ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ａｕｓｔｒａｌｉｃｕｓ ＲＣ３により発現する登録番号がＩ７ＫＴＴ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＡＴＣＣ ６３８により発現する登録番号がＴ４ＶＲＢ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８は、Ｔｅｐｉｄｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ２ＲＬＵ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９は、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｋ２ＷＪ７３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｃｔｅｒｉｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｄ０ＥＢＮ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４１７ＹＷ０８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ ２６９１により発現する登録番号がＡ０Ａ１６０ＭＢＢ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｒ７－０２７３により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＬＸＵ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐにより発現する登録番号がＭ１ＺＧＳ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４４８ＦＦ６４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｆｅｒｖｉｄｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ５ＲＵＬ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ８ＧＶＳ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＺＷＨ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ ＤＳ１により発現する登録番号がＷ７ＬＢ７２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０は、Ｔｈｅｒｍｏｔａｌｅａ ｍｅｔａｌｌｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１４０Ｌ３Ｉ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１は、Ｏｒｎｉｔｈｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＦＮＫ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２は、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ ＤＳＭ １１００３により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＬＱＥ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． Ｓ７により発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｑ２ＨＲＱ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｓｏｎａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｑ９ＱＺ３１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｌ０Ｗ６８８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６は、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｍａｇａｄｉｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ３ＥＴＡ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｏｒｅａｌｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＬＨＦ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏｅｌｙｔｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ３ＤＮ３０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌａｎｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｑ３ＱＭＲ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０は、Ｔｈｅｒｍｏｈａｌｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｒｒｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４１９Ｔ２Ｉ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ． ＲＩＴ５９２により発現する登録番号がＡ０Ａ３６９ＰＢＸ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２は、Ｍａｌｅｄｉｖｉｂａｃｔｅｒ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｔ５ＪＵＭ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＷＨＺ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｒ１ＨＳＫ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５は、Ｎａｔｒｏｎｉｎｃｏｌａ ｐｅｐｔｉｄｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ０Ｆ３Ｐ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｊ５ＹＴＵ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７は、Ａｎａｅｒｏｖｉｒｇｕｌａ ｍｕｌｔｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２３９ＦＶ０１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ（菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１）により発現する登録番号がＱ３ＡＥＡ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９は、Ｓｐｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉｇｅｎｅｓ ＤＳＭ １３１０６により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＹＳＴ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０は、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｓｐ． ＤＷ１により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＭＡ６３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ７８９４－２により発現する登録番号がＡ０Ａ２６８ＩＷＭ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８２は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＰＬＪ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８３は、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２６５Ｎ７Ｌ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＮＦＲ０１により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ０ＫＡＩ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５は、Ａｎｄｒｅｅｓｅｎｉａ ａｎｇｕｓｔａにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｓ１Ｖ３Ｑ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＤＭＢ５により発現する登録番号がＡ０Ａ１１７Ｔ０Ｐ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７は、Ｐａｌｕｄｉｆｉｌｕｍ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ２３５Ｂ９Ｘ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８は、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｅｔｈａｎｏｌｉｇｅｎｅｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ３ＮＪＷ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｍｅｔａｌｌｉｒｅｄｉｇｅｎｓ（菌株ＱＹＭＦ）により発現する登録番号がＡ６ＴＷＴ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９Ｕ６Ｚ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１は、Ｓｐｏｒｏｓａｒｃｉｎａ ｇｌｏｂｉｓｐｏｒａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ０ＧＧＨ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ３６６Ｋ５２３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＦＳＬ Ｒ５－０４９０により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｒ１ＦＦＨ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．により発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｇ２ＭＬＥ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｏｒｅｍｌａｎｄｉｉ（菌株ＯｈＩＬＡｓ）により発現する登録番号がＡ８ＭＬＡ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｍｉｔｃｈｅｌｌｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｒ３ＪＶＧ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８は、Ａｍｍｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ． ＣＦＨ ９０１１４により発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｑ１ＳＷＣ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｐｅｒｔｉｎａｘにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｌ８ＣＳＭ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓｐ． １９３３Ｐにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｚ０Ｄ７８３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＺＯＴ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２は、Ｎａｔｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ８Ｎ２Ｈ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ４０３ＷＢＵ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｒ４Ａ６Ｖ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２は、ＰＣＲ増幅に用いられるキサンチンアミドヒドロラーゼの核酸分子をコードする上流プライマーのヌクレオチド配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３は、ＰＣＲ増幅に用いられるキサンチンアミドヒドロラーゼの核酸分子をコードする下流プライマーのヌクレオチド配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５は、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｐ． ＦＢＫＬ４．０１１により発現する登録番号がＡ０Ａ３６４Ｋ３１７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６は、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ６ＳＵＹ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ ｂａｃｔｅｒｉｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｄ２ＮＳＭ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ２＿Ａ＿５７＿ＣＴ２により発現する登録番号がＥ５ＷＮＦ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｈ８－０２５９により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｒ１ＣＫ１８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０は、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｄｉｃｈｏｔｏｍｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ３Ｕ２６１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｎｃｌｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｖ８ＪＣＮ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２は、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ２ＱＶＰ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬＲ５－０９１２により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９Ｋ５Ｐ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｙｐｈａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９ＤＧＷ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａ ＤＳＭ１８０９５により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＵＨＺ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ｃｌ９５により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ６Ｃ７Ｊ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７は、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ａ３ＸＥＥ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ３８０ＸＴＴ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９は、Ａｃｉｄａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ ＤＳＭ ２７８４により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ５Ｓ５Ｐ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０は、Ｃａｌｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ． ＴＲ１３により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｐ８Ｚ９Ｔ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ． Ｐ１により発現する登録番号がＡ０Ａ２６５Ｑ２Ｂ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ３－２－２により発現する登録番号がＡ０Ａ４２９Ｙ５６６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４は、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋｉａ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ（菌株ＡＴＣＣ ７９０６／ＤＳＭ ６０４／ＢＣＲＣ １４４７５／ＣＩＰ １０４３０３／ＮＣＩＭＢ １０６７８／９ａ）により発現する登録番号がＫ０ＡＷＡ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｏｒｔｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４４３ＩＫＸ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｖ２ＺＮＢ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７は、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｆｕｎｄｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ２Ａ２ＩＥＥ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｒ７－０３３１により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＭＤＷ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＪＡＴ－２１９４５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ０Ｘ８Ｃ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｆ３Ｓ６Ｉ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｓ１ＹＤＧ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＯＶ１９４により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ１Ｘ５２６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３は、Ａｎａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２６７ＭＪＦ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４は、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ ＤＳＭ １１００３により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＲＤＬ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｐｅｐｔｉｄｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＤＳＭ １８９７８により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ５ＫＸＨ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６は、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ８Ｑ７Ｈ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＩＨＢ Ｂ ３４１５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｂ２Ｆ３Ｚ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８は、Ｍａｒｉｎｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ ｂａｌｔｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ２ＫＭＥ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ４２９Ｘ０Ｗ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０は、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ３Ｑ６Ｔ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ（菌株ＡＴＣＣ ７９０６／ＤＳＭ ６０４／ＢＣＲＣ １４４７５／ＣＩＰ １０４３０３／ＮＣＩＭＢ １０６７８／９ａ）により発現する登録番号がＫ０Ｂ３６０であるキサンチンアミドヒドロラーゼであるアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２は、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ ｌｉｔｕｓｅｂｕｒｅｎｓｉｓ ＤＳＭ ７９７により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９Ｍ６３５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＡＴＣＣ １９２９９により発現する登録番号がＴ４Ｖ５Ｔ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒａｅｄｉｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ１ＡＴＬ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｉｓｌａｎｄｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｌ８Ｄ５Ｓ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ａｕｓｔｒａｌｉｃｕｓ ＲＣ３により発現する登録番号がＩ７ＫＴＴ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ＡＴＣＣ ６３８により発現する登録番号がＴ４ＶＲＢ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８は、Ｔｅｐｉｄｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ２ＲＬＵ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９は、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｋ２ＷＪ７３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｃｔｅｒｉｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｄ０ＥＢＮ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４１７ＹＷ０８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ ２６９１により発現する登録番号がＡ０Ａ１６０ＭＢＢ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＦＳＬ Ｒ７－０２７３により発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＬＸＵ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐにより発現する登録番号がＭ１ＺＧＳ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４４８ＦＦ６４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｆｅｒｖｉｄｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ５ＲＵＬ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｒ８ＧＶＳ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＺＷＨ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ ＤＳ１により発現する登録番号がＷ７ＬＢ７２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０は、Ｔｈｅｒｍｏｔａｌｅａ ｍｅｔａｌｌｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１４０Ｌ３Ｉ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１は、Ｏｒｎｉｔｈｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＦＮＫ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２は、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ ＤＳＭ １１００３により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＬＱＥ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． Ｓ７により発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｑ２ＨＲＱ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｓｏｎａｅにより発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｑ９ＱＺ３１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｌ０Ｗ６８８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６は、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｍａｇａｄｉｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ３ＥＴＡ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｏｒｅａｌｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０８９ＬＨＦ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８は、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏｅｌｙｔｉｃｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ３ＤＮ３０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌａｎｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｑ３ＱＭＲ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０は、Ｔｈｅｒｍｏｈａｌｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｒｒｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ４１９Ｔ２Ｉ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１は、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ． ＲＩＴ５９２により発現する登録番号がＡ０Ａ３６９ＰＢＸ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２は、Ｍａｌｅｄｉｖｉｂａｃｔｅｒ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｔ５ＪＵＭ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３は、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＷＨＺ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｒ１ＨＳＫ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７５は、Ｎａｔｒｏｎｉｎｃｏｌａ ｐｅｐｔｉｄｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ０Ｆ３Ｐ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｊ５ＹＴＵ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７は、Ａｎａｅｒｏｖｉｒｇｕｌａ ｍｕｌｔｉｖｏｒａｎｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２３９ＦＶ０１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ（菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１）により発現する登録番号がＱ３ＡＥＡ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９は、Ｓｐｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉｇｅｎｅｓ ＤＳＭ １３１０６により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ５ＹＳＴ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０は、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｓｐ． ＤＷ１により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＭＡ６３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ７８９４－２により発現する登録番号がＡ０Ａ２６８ＩＷＭ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８２は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｍ４ＰＬＪ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８３は、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ２６５Ｎ７Ｌ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＮＦＲ０１により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｉ０ＫＡＩ３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５は、Ａｎｄｒｅｅｓｅｎｉａ ａｎｇｕｓｔａにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｓ１Ｖ３Ｑ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ． ＤＭＢ５により発現する登録番号がＡ０Ａ１１７Ｔ０Ｐ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７は、Ｐａｌｕｄｉｆｉｌｕｍ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｍにより発現する登録番号がＡ０Ａ２３５Ｂ９Ｘ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８は、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｅｔｈａｎｏｌｉｇｅｎｅｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｈ３ＮＪＷ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｍｅｔａｌｌｉｒｅｄｉｇｅｎｓ（菌株ＱＹＭＦ）により発現する登録番号がＡ６ＴＷＴ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０は、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ９Ｕ６Ｚ５であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１は、Ｓｐｏｒｏｓａｒｃｉｎａ ｇｌｏｂｉｓｐｏｒａにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｍ０ＧＧＨ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ３６６Ｋ５２３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３は、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＦＳＬ Ｒ５－０４９０により発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｒ１ＦＦＨ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．により発現する登録番号がＡ０Ａ２Ｇ２ＭＬＥ４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５は、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｏｒｅｍｌａｎｄｉｉ（菌株ＯｈＩＬＡｓ）により発現する登録番号がＡ８ＭＬＡ７であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６は、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｍｉｔｃｈｅｌｌｅｎｓｉｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｒ３ＪＶＧ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５により発現する登録番号がＡ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８は、Ａｍｍｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ． ＣＦＨ ９０１１４により発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｑ１ＳＷＣ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９は、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｐｅｒｔｉｎａｘにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｌ８ＣＳＭ０であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓｐ． １９３３Ｐにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｚ０Ｄ７８３であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１は、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａにより発現する登録番号がＡ０Ａ４Ｔ９ＺＯＴ２であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２は、Ｎａｔｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓにより発現する登録番号がＡ０Ａ１Ｇ８Ｎ２Ｈ８であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ４０３ＷＢＵ６であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４は、堆肥メタゲノム（ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）により発現する登録番号がＡ０Ａ３Ｒ４Ａ６Ｖ９であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列を示す。
【本願に対する詳細な説明】
【0008】
図１は、人体における各種プリンの代謝経路を示し、各種プリンの代謝終産物が尿酸塩であり、尿酸塩が関節と腎臓等の部位での蓄積が痛風の原因である。図２には酸素需要型蛋白であるキサンチンオキシダ－ゼがキサンチンの分解を触媒して尿酸を産生する過程を示す。痛風を治療する薬物であるアロプリノールがキサンチンオキシダ－ゼの抑制により、尿酸の産生を抑制して、痛風を治療する（図３）。Ｇ．Ｄ．ＶＯＧＥＬＳらが（Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｕｒｉｎｅｓ ａｎｄ Ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅｓ ｂｙ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ，Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，Ｊｕｎｅ １９７６，Ｖｏｌ．４０，Ｎｏ．２，ｐ．４０３－４６８）Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍが無酸素条件でキサンチンをイミノメチルグリシンに分解できると報告した。図４がキサンチンアミドヒドロラーゼが無酸素条件でキサンチンを分解する反応式を示す。本願の発明者が無酸素条件下でのプリン分解が重大な意味を持つことに気づき、人体の腸が無酸素環境であるため、腸のプリンに対する吸收の先に、腸内でプリンを分解できることが、痛風の予防、関与、緩和及び／又は治療に対して新たな考え方である。本願の発明者が生物情報学の方法を利用して、大量な作業を行なってから、無酸素条件下でキサンチンを分解するキサンチンアミドヒドロラーゼを成功に鑑定できた。
【0009】
説明がある以外に、本願において使用される用語は当業者が一般的に理解する意味を有する。
【定義】
【0010】
説明がある以外に、それぞれ、核酸は５’から３’までの方向で左から右へ記載される。アミノ酸配列がアミノ基からカルボキシ基までの方向で左から右へ記載する。数字範囲が当該範囲を限定する数字を含む。アミノ酸は、本文において周知される三つのアルファベット符号又はＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ生物化学命名委員会により推薦する一つのアルファベット符号で表される。同様に、一般的に納得できるシングルアルファベットでヌクレオチドを表すこともできる。明細書の全体を参考して、より十分に上記のように定義される用語を定義する。
【0011】
本願の「ポリペプチド」と「蛋白」が本文において交換使用でき、アミノ酸残基のポリマー及びその変異体と、合成のと、天然的に存在する類似体を示す。したがって、これらの用語が天然的に存在するアミノ酸ポリマー及びその天然的に存在する化学誘導体、及び一個又は複数個のアミノ酸残基が合成的で非天然的に存在するアミノ酸（例えば、対応的に天然的に存在するアミノ酸の化学類似体）のアミノ酸ポリマーに適用する。そのような誘導体には、例えば、翻訳後に修飾及び分解された産物を含み、ポリペプチドフラグメントのリン酸化、グリコシル化、酸化、異性化、カルボキシル化、及び脱アミノ化変異体を含む。
【0012】
本文において使用される「酵素活性中心」という用語は、酵素分子中に基質分子と直接に結合でき、基質の化学反応を触媒する部位を示し、この部位を酵素の活性中心となる。一般に、活性中心は主に二つの機能部位で構成されると考えられている。一つ目が触媒部位で、基質の結合がここで切断され、又は新しい結合が形成されて、特定の化学変化を起こる。二つ目が結合部位で、酵素の基質がこの部位により酵素分子に結合する。機能部位は、酵素分子中に立体構造的に近い少数のアミノ酸残基或いは当該残基のある基により構成されて、一次構造では距離が遠くてもよいが、異なるペプチド鎖に位置することもあり、ペプチド鎖を巻き、畳むことにより、空間構造的にお互いに近づく。補酵素が必要とする酵素にとって補酵素分子（例えば、金属イオンＺｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）又は補酵素分子のある部分の構造も機能部位の構成部分である。
【0013】
本文において使用される「アミノ酸」という用語は、カルボン酸の炭素原子上の水素原子がアミノ基により置換された化合物を示し、アミノ酸分子にアミノ基及びカルボキシル基の二つの官能基が含まれる。天然に存在する、及び非天然に存在するアミノ酸とアミノ酸類似体と模倣体を含む。天然に存在するアミノ酸が、蛋白質生合成に使用される２０種類の（Ｌ）-アミノ酸、及び４-ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、カルボキシル化リジン、デスモシン、イソデスモシン、ホモシステイン、シトルリン、オルニチンを含む。非天然に存在するアミノ酸が、例えば（Ｄ）－アミノ酸、ノルロイシン、ノルバリン、ｐ－フルオロフェニルアラニン、エチオニン等を含み、これらが当業者に知られている。アミノ酸類似体が、天然及び非天然に存在するアミノ酸の修飾形態を含む。この修飾が、例えばアミノ酸の化学基及び部分を置換して、又はアミノ酸の誘導化を含み得る。アミノ酸模倣体が、例えば機能的に類似性質を表す有機構造を含み、前記性質が、例えばアミノ酸の電荷及び電荷空間特性である。例えば、アルギニン（Ａｒｇ又はＲ）を模倣する有機構造は、類似する分子空間に位置し、且つ天然に存在するArgアミノ酸の側鎖のｅ-アミノ基と同じ程度の移動度を有する正電荷部分を有する。模倣体は、さらにアミノ酸又はアミノ酸官能基の最適な空間及び電荷相互作用を維持するための拘束構造も含む。当業者は、どの構造が機能的に同等のアミノ酸類似体及びアミノ酸模倣体を構成するかを決定できる。
【0014】
本文において使用される「アイソザイム」という用語は、生体内において同じ反応を触媒し、分子構造が異なる酵素を示す。
【0015】
本文において使用される「核酸」という用語は、ｍＲＮＡ、ＲＮＡ、ｃＲＮＡ、ｃＤＮＡ又はＤＮＡを示し、一本鎖及び二本鎖のＤＮＡを含む。当該用語が、一般的に、少なくとも１０塩基長であるヌクレオチドのポリマー形態を指し、当該ヌクレオチドが、リボヌクレオチド、又はデオキシヌクレオチド、又はいずれのタイプのヌクレオチドの修飾形態である。
【0016】
本文において使用される「コード」という用語は、特定の核酸の文脈において使用される場合、当該核酸が当該ヌクレオチド配列から特定蛋白に翻訳することを教示する必要な情報を含むことを示す。コドンを使用してコード蛋白の情報を示す。蛋白をコードする核酸が当該核酸の翻訳領域内の非翻訳配列（例えば、イントロン）を含み得るか、又はそのような介在非翻訳配列（例えば、ｃＤＮＡにあるように）を欠き得る。
【0017】
本文において使用される特定のポリヌクレオチド又はそれによりコードされる蛋白に係る「全長配列」は、天然（非合成）内因性配列を有する核酸配列全体又はアミノ酸配列全体を示す。全長ポリヌクレオチドは、当該特定の蛋白質の全長、触媒活性形式をコードする。
【0018】
本文において使用される「単離的」という用語は、ポリペプチド、又は核酸、又はその生物学的活性部分を示し、天然に存在して環境で発見できる一般的に蛋白質又は核酸に付随又は反応する成分を基本的又は実質的に含まない。したがって、組換え技術によって単離されたポリペプチド又は核酸を産生する場合、単離されたポリペプチド又は核酸は、他の細胞材料又は培地を基本的に含まないか、或いは化学的に合成される場合、単離されたポリペプチド又は核酸は、化学前駆体又は他の化学物質を基本的に含まない。
【0019】
本文において使用される「発現ベクター」という用語は、組換え又は合成により産生された核酸構築体であり、特定の核酸が宿主細胞内で転写することを可能にする一連の特定の核酸要素を有する。
【0020】
本文において使用される「宿主細胞」という用語は、形質転換と形質導入（感染）において外来遺伝子を受ける細胞を示す。宿主細胞は、酵母細胞などの真核細胞又は大腸菌などの原核細胞であり得る。
【発明を実施するための形態】
【0021】
第一態様は、本願がポリペプチドを提供し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含み，前記機能的変異体がキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
【0022】
第一態様のある実施形態において、その空間構造的下記のように定義される触媒部位を有する。
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに二つの２価金属イオン、例えばＺｎ２＋及び／又はＭｎ２＋を含む。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、さらに空間構造的に下記のように定義される結合部位を有する。
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位と前記結合部位との距離が５オングストローム（Å）以下である。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列の天然アイソザイムである。
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに二つの２価金属イオン、例えばＺｎ２＋及び／又はＭｎ２＋を含む。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが、さらに空間構造的に下記のように定義される結合部位を有する。
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
第一態様のある実施形態において、前記触媒部位と前記結合部位との距離が５オングストローム（Å）以下である。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列の天然アイソザイムである。
【0023】
第一態様のある実施形態において、前記天然アイソザイムは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、ｃｏｍｐｏｓｔ ｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｐ．、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｔｈｅｒｍｏｆｌａｖｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｄｉｃｈｏｔｏｍｉｃｕｍ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｎｃｌｅｎｓｉｓ、Ｍａｒｉｎｉｎｅｍａ ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｙｐｈａｅ、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｐｒａｅａｃｕｔａ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ａｃｉｄａｍｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｃａｌｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ．、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓ、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋｉａ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ａｃｉｄｕｒｉｃｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｏｒｔｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｆｕｎｄｉ、Ａｎａｅｒｏｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｓｙｎｔｒｏｐｈａ ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｐｅｐｔｉｄｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ａｎｅｕｒｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｉｇｕｌａｎｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｍａｒｉｎｉｓｐｏｒｏｂａｃｔｅｒ ｂａｌｔｉｃｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｃａｌｉｆｏｒｎｉｅｎｓｉｓ、Ｒｏｍｂｏｕｔｓｉａ ｌｉｔｕｓｅｂｕｒｅｎｓｉｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒａｅｄｉｉ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｉｓｌａｎｄｉｃｕｓ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ａｕｓｔｒａｌｉｃｕｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ、Ｔｅｐｉｄｉｍｉｃｒｏｂｉｕｍ ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉ、［Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ］ｕｌｔｕｎｅｎｓｅ Ｅｓｐ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｆｅｒｖｉｄｕｓ、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃａ、Ｔｈｅｒｍｏｔａｌｅａ ｍｅｔａｌｌｉｖｏｒａｎｓ、Ｏｒｎｉｔｈｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｓｏｎａｅ、Ｔｉｎｄａｌｌｉａ ｍａｇａｄｉｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｏｒｅａｌｉｓ、Ｐａｒａｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｅｎｚｏｅｌｙｔｉｃｕｍ、 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌａｎｉ、Ｔｈｅｒｍｏｈａｌｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｒｒｅｎｓｉｓ、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．、Ｍａｌｅｄｉｖｉｂａｃｔｅｒ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｔｉｓｓｉｅｒｅｌｌａ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｉ、Ｎａｔｒｏｎｉｎｃｏｌａ ｐｅｐｔｉｄｉｖｏｒａｎｓ、Ａｎａｅｒｏｖｉｒｇｕｌａ ｍｕｌｔｉｖｏｒａｎｓ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｓｐｏｒａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｃｅｔｉｇｅｎｅｓ、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｓｐ．、Ｖｉｒｇｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓ、Ａｎｄｒｅｅｓｅｎｉａ ａｎｇｕｓｔａ、Ｐａｌｕｄｉｆｉｌｕｍ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｍ、Ｐｒｏｔｅｉｎｉｂｏｒｕｓ ｅｔｈａｎｏｌｉｇｅｎｅｓ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｍｅｔａｌｌｉｒｅｄｉｇｅｎｓ、Ｆｉｃｔｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉ、Ｓｐｏｒｏｓａｒｃｉｎａ ｇｌｏｂｉｓｐｏｒａ、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．、Ａｌｋａｌｉｐｈｉｌｕｓ ｏｒｅｍｌａｎｄｉｉ、Ｃａｌｏｒａｍａｔｏｒ ｍｉｔｃｈｅｌｌｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ａｍｍｏｎｉｐｈｉｌｕｓ ｓｐ．、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｐｅｒｔｉｎａｘ、Ｓｏｅｈｎｇｅｎｉａ ｓｐ．とＮａｔｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓから由来する。
第一態様のある具体的な実施形態において、前記天然アイソザイムがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれかにより示されるアミノ酸配列を含む。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその天然アイソザイムに基づいて、一個又は複数個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損を起こることにより産生される。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、触媒部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、結合部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、触媒部位及び結合部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記アミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の数が１～３０個であり、１～２０個が好ましい、１～１０個がさらに好ましい、得られる機能的変異体が基本的に変更のないキサンチンアミドヒドロラーゼの活性を保持する。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列とは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の差がある。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列とは、１、２、３、４、又は５個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の差がある。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが単離なポリペプチドである。
第一態様のある具体的な実施形態において、前記天然アイソザイムがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれかにより示されるアミノ酸配列を含む。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその天然アイソザイムに基づいて、一個又は複数個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損を起こることにより産生される。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、触媒部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、結合部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記挿入、置換及び／又は欠損が、触媒部位及び結合部位において起こらない。
第一態様のある実施形態において、前記アミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の数が１～３０個であり、１～２０個が好ましい、１～１０個がさらに好ましい、得られる機能的変異体が基本的に変更のないキサンチンアミドヒドロラーゼの活性を保持する。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列とは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の差がある。
第一態様のある実施形態において、前記機能的変異体とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列とは、１、２、３、４、又は５個のアミノ酸の挿入、置換及び／又は欠損の差がある。
第一態様のある実施形態において、前記ポリペプチドが単離なポリペプチドである。
【0024】
第二態様は、本願が核酸分子を提供し、第一態様に記載されるポリペプチドをコードする。
【0025】
第二態様のある実施形態において、本願の核酸分子が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれかにより示されるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と厳格条件で交雑するヌクレオチド配列を含み、又はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれかにより示されるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と特異的に交雑して、且つＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４のいずれかにより示されるポリペプチドと機能的に同様なポリペプチドをコードする核酸配列により組成する。
【0026】
当業者がＤＮＡを交雑する厳格条件を一般的に選択できる。一般的に、適切なアニーリングを行うために、より長いプローブに対してより高い温度が必要され、より短いプローブに対してより低い温度が必要とする。交雑することが、一般的に、相補鎖がその融解温度より低い環境にあるときに変性ＤＮＡが再びアニーリングする能力に依存する。プローブと交雑可能な配列との間の相同性の程度が高いほど、使用できる相対温度が高くなる。したがって、より高い相対温度は反応条件をより厳しくする傾向があり、一方、より低い温度では、厳格度はより低くなる。交雑反応の厳格条件の詳細については、Ａｕｓｕｂｅｌら，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，（１９９５）を参照できる。
【0027】
第二態様のある実施形態において、ＤＮＡ交雑に使用される厳格条件が、（１）洗浄のとき、低イオン強度と高温を使用し、例えば５０°Ｃの０．０１５Ｍ塩化ナトリウム／０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム／０．１％ドデシル硫酸ナトリウム、（２）交雑のとき、ホルムアミド等の変性剤を使用し、例えば４２°Ｃ、５０％（ｖ／ｖ）ホルムアミドに０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％Ｆｉｃｏｌｌ／０．１％ポリジエニルピロリドン／ｐＨ ６．５の５０ｍＭリン酸ナトリウムバッファー、及び７５０ｍＭ塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウムを添加する、又は（３）４２°Ｃでオーバーナイトして交雑し、交雑溶液に５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５Ｍ塩化ナトリウム、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ’ｓ溶液、超音波処理した鮭の精子ＤＮＡ（５０ｍｇ／ｍＬ）、０．１％ＳＤＳと１０％デキストラン硫酸を含み、そして０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）中、４２°Ｃで１０分間の洗浄を行って、さらにＥＤＴＡを含有する０．１×ＳＳＣで５５°Ｃで高厳格度の洗浄を行うこと含む。中等厳格条件がＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，１９８９中の記載により決定できる。中等厳格条件は、厳格度が上記より低い洗浄溶液と交雑条件（例えば、温度、イオン強度、ＳＤＳパーセンテージ）とを採用することを含む。例えば、中等厳格条件は、少なくとも約１６％ｖ／ｖから少なくとも約３０％ｖ／ｖまでのホルムアミドと、少なくとも約０．５Ｍから少なくとも約０．９Ｍまでの塩を用いて４２°Ｃで交雑して、及び少なくとも約０．１Ｍから少なくとも約０．２Ｍまでの塩を用いて５５°Ｃで洗浄することを含む。中等厳格条件は、さらに、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．５Ｍ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ ７．２）、７％ＳＤＳを用いて６５°Ｃで交雑して、及び（ｉ）２×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、又は（ｉｉ）０．５％ＢＳＡ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、４０ｍＭ ＮａＨＰＯ４（ｐＨ ７．２）、５％ＳＤＳを用いて６０～６５°Ｃで洗浄することを含む。プロフェッショナルがプローブの長さ等の要因により、温度、イオン強度等を調整できる。核酸を交雑するときの厳格度は、核酸分子の長さと相補性の程度、及び他の本分野において周知される変数による。二つのヌクレオチド配列の間の類似性又は相同性が大きいほど、これら配列を含む核酸ヘテロ接合体のＴｍが大きくなる。核酸交雑の相対的安定性（より高いＴｍに対して）が下記の順番で減少する：ＲＮＡ：ＲＮＡ、ＤＮＡ：ＲＮＡ、ＤＮＡ：ＤＮＡ。好ましく、交雑可能な核酸の最低長さが少なくとも約１２個のヌクレオチドであり、少なくとも約１６個が好ましい、少なくとも約２４個がより好ましい、少なくとも約３６個のヌクレオチドがもっとも好ましい。
【0028】
本願の核酸分子は、他のＤＮＡ配列と組み合わせることが可能であり、前記他のＤＮＡ配列、例えば、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、他の制限酵素サイト、ポリクローニングサイト、他のコーディングフラグメント等、それらの全長を著しく異ならせることができる。したがって、ほぼ任意の長さのポリヌクレオチドフラグメントを利用することが考えられる。全長は、意図する組換えＤＮＡプロトコールでの調製及び使用の容易さによって制限されることが好ましい。
【0029】
本分野内に知られる及び得られる多種の成熟した技術中のいずれか一種を利用して、ポリヌクレオチド及びその融合物を調整、操縦及び／又は発現することができる。例えば、本願のポリペプチド又はその機能的変異体をコードする核酸分子は、組換えＤＮＡ分子に用いられて、ポリペプチドが適当な宿主細胞に発現することを指導する。遺伝コードの固有の縮重性により、基本的に同じ又は機能的に同等のアミノ酸配列をコードする他のＤＮＡ配列も本願に用いられ、これらの配列が、所定のポリペプチドをクローニング及び発現することに用いられる。
【0030】
なお、本願の核酸分子は、遺伝子産物のクローニング、プロセシング、発現及び／又は活性の改変を含むことに限らず、当技術分野で周知される方法を使用して操作することができる。
【0031】
第二態様のある実施形態において、前記核酸分子は、人工合成、例えば直接な化学合成又は酵素合成により産生される。
第二態様のある実施形態において、前記核酸分子は、組換え技術により産生される。
第二態様のある実施形態において、前記核酸分子は、単離された核酸分子である。
第三態様は、本願が発現キットを提供し、第二態様に記載される核酸分子を含む。
第三態様のある具体的な実施形態において、発現キットは、翻訳を促進するように作用する５′リーダー配列をさらに含んでもよい。
第二態様のある実施形態において、前記核酸分子は、組換え技術により産生される。
第二態様のある実施形態において、前記核酸分子は、単離された核酸分子である。
第三態様は、本願が発現キットを提供し、第二態様に記載される核酸分子を含む。
第三態様のある具体的な実施形態において、発現キットは、翻訳を促進するように作用する５′リーダー配列をさらに含んでもよい。
【0032】
発現キットを調製する際に，各種ＤＮＡフラグメントを操作して、ＤＮＡ配列を適切な方向に、適切な場合には適切な読み枠を提供しえる。当該目的を達成するために、アダプター又はリンカーを使用してＤＮＡフラグメントを結合してもよく、又は便利な制限部位を提供、過剰なＤＮＡを除去、制限部位を除去などのために、他の操作を含んでもよい。当該目的のために、体外誘発、プライマー修復、制限性、アニーリング、転移（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ）及びトランスバージョン（ｔｒａｎｓｖｅｒｓｉｏｎ）などの再置換が関与し得る。
【0033】
第四態様は、本願が発現ベクターを提供し、第二態様に記載される核酸分子又は第三態様に記載される発現キットを含む。
第四態様のある実施形態において、いずれの適切な発現ベクターを本願に用いることができる。例えば、前記発現ベクターがｐＥＴ２８、ｐＥＴ１４、ＨＴ－１Ｎ－ＴＡＧ－２６９１、ｐＲＳ４１６等のキャリアのいずれか一種であってもよい。
第四態様のある実施形態において、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４中のいずれか一項により示されるポリペプチドをコードする核酸分子は、キャリアにクローニングされて、本願の前記核酸分子を含む組換えキャリアを構成する。
第四態様のある実施形態において、ポリヌクレオチドをクローニングするための発現ベクターがプラスミドキャリアである。
第四態様のある実施形態において、上記発現ベクターは、さらに、核酸分子の発現を調節する制御配列，前記核酸分子と前記制御配列とは操作可能に接続する。
第四態様のある実施形態において、いずれの適切な発現ベクターを本願に用いることができる。例えば、前記発現ベクターがｐＥＴ２８、ｐＥＴ１４、ＨＴ－１Ｎ－ＴＡＧ－２６９１、ｐＲＳ４１６等のキャリアのいずれか一種であってもよい。
第四態様のある実施形態において、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４中のいずれか一項により示されるポリペプチドをコードする核酸分子は、キャリアにクローニングされて、本願の前記核酸分子を含む組換えキャリアを構成する。
第四態様のある実施形態において、ポリヌクレオチドをクローニングするための発現ベクターがプラスミドキャリアである。
第四態様のある実施形態において、上記発現ベクターは、さらに、核酸分子の発現を調節する制御配列，前記核酸分子と前記制御配列とは操作可能に接続する。
【0034】
本文において使用される「制御配列」という用語は、それと連続するコード配列の発現を実現するためのポリヌクレオチドである。こういう制御配列の性質が宿主生物により変化する。原核生物において、こういう制御配列は、一般的に、プロモーター、リボソーム結合部位、及びターミネーターを含み、真核生物において、こういう制御配列は、一般的に、プロモーター、ターミネーター、及びある場合のエンハンサーを含む。したがって、「調節配列」という用語は、その存在が目的遺伝子の発現にとって最小限必要であるすべての配列を含み、その存在が目的遺伝子の発現にとって有利である、リーダー配列などの他の配列も含み得る。
【0035】
本文において使用される「操作可能に接続する」という用語は、係る配列は、それらを所望の方法で機能させることを可能にする関係にあることを示す。したがって、例えば、あるコード配列に「操作可能に接続する」制御配列は、前記制御配列と適合する条件下で当該コード配列の発現を実現させる。
【0036】
第四態様のある実施形態において、当業者によく知られる方法を利用して、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１とＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４～１０４中のいずれか一項により示されるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と、適切な転写／翻訳の制御素子を含む発現ベクターを構築する。これらの方法は、体外組換えＤＮＡ技術、ＤＮＡ合成技術、体内組換え技術等（Ｓａｍｂｒｏｏｏｋ，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８９）を含む。ヌクレオチド配列は、操作可能に発現ベクター中の適当なプロモーターに接続して、ｍＲＮＡの合成を指導する。これらプロモーターの代表的な実例には：大腸菌のｌａｃ又はｔｒｐプロモーター；λバクテリオファージのＰＬプロモーター；真核プロモーターには、ＣＭＶ前初期プロモーター、ＨＳＶチミジンキナーゼプロモーター、初期及び後期ＳＶ４０プロモーター、レトロウイルスのＬＴＲ、及びいくつかの他の既知の制御可能な遺伝子が原核細胞又は真核細胞又はそれらのウイルスで発現するプロモーターが含まれる。発現ベクターには、翻訳開始用のリボソーム結合部位と転写ターミネーターなども含まれる。ベクターにエンハンサー配列が挿入されると、高等真核細胞での転写が増強される。エンハンサーは、遺伝子の発現のシス作用因子であり、一般的に約１０～３００個の塩基対の長さで、遺伝子の転写を促進するためにプロモーターに作用する。実例には、複製開始点の後期側の１００～２７０の塩基対のＳＶ４０エンハンサー、複製開始点の後期側のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサー等がある。
【0037】
なお、形質転換の宿主細胞を選択するための表現型形質、例えば、抗硫酸カナマイシン、抗アンピシリン等をコードするなどの遺伝子を提供するために、発現ベクターは一個又は複数個の選択的表記遺伝子を含むことが好ましい。
【0038】
第五態様は，本願が宿主細胞を提供し、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット又は第四態様に記載される発現ベクターを含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含むポリペプチドを発現、産生でき、前記機能的変異体は、キサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
第五態様のある実施形態において、前記ポリペプチドは、在空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する：
空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第五態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記触媒部位が、さらに二つの２価金属イオン、例えば、Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋を含む。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記ポリペプチドは、空間構造的に下記のように定義される触媒部位と結合部位を有する：
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基及び二つの２価金属イオン（例えば、Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）を含み、と
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
第五態様のある実施形態において、前記宿主細胞は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列又はその機能的変異体を含むポリペプチドを発現、産生でき、前記機能的変異体は、キサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有する。
第五態様のある実施形態において、前記ポリペプチドは、在空間構造的に下記のように定義される触媒部位を有する：
空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基を含む。
第五態様のある実施形態において、前記触媒部位が、さらに２価金属イオンを含む。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記触媒部位が、さらに二つの２価金属イオン、例えば、Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋を含む。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記ポリペプチドは、空間構造的に下記のように定義される触媒部位と結合部位を有する：
前記触媒部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＨ５９と、Ｈ６１と、Ｋ１５１と、Ｈ１８６と、Ｈ２４２と、Ｄ３１６アミノ酸残基及び二つの２価金属イオン（例えば、Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）を含み、と
前記結合部位が、空間構造的にお互いに近づく、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に参照するＩ２８８と、Ａ２８９と、Ｐ３３８と、Ｇ３３９アミノ酸残基を含む。
【0039】
第五態様のある実施形態において、使用可能な宿主細胞は上記の発現ベクターを含む細胞であり、真核細胞であってもよく、例えば酵母細胞培養システムが本願のポリペプチドの発現に用いられる。前記宿主細胞は、上記の発現ベクターを含む原核細胞であってもよく、例えばエシェリキア属（例えば大腸菌）、乳酸桿菌属、ビフィズス菌属、バクテロイデス門とファーミキューテス門等から選ばれる。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記宿主細胞が酵母細胞又は大腸菌である。
第五態様のある具体的な実施形態において、本願の一種或又は複数種の酵素をコードする核酸分子は、遊離キャリアの形式で宿主細胞に存在してもよく、又は宿主細胞のゲノムへの組み込んでもよい。
第五態様のある具体的な実施形態において、前記宿主細胞が酵母細胞又は大腸菌である。
第五態様のある具体的な実施形態において、本願の一種或又は複数種の酵素をコードする核酸分子は、遊離キャリアの形式で宿主細胞に存在してもよく、又は宿主細胞のゲノムへの組み込んでもよい。
【0040】
上記のいずれの態様に係る実施形態において、前記単離された核酸は操作可能に制御配列に接続して、制御配列が、発現ベクターで形質転換された宿主細胞によって認識される。
【0041】
形質転換、形質導入、トランスフェクション、ウイルス感染、遺伝子銃又はＴｉ媒介の遺伝子導入を含む本分野に知られるいずれの技術を利用して発現ベクターを宿主細胞中に導入できる。具体的な方法は、包括リン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ－デキストラン媒介トランスフェクション、リポフェクション又はエレクトロポレーション等を含む（Ｄａｖｉｓ，Ｌ．，Ｄｉｂｎｅｒ，Ｍ．，Ｂａｔｔｅｙ，Ｉ．，Ｂａｓｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，（１９８６））。例として、宿主は大腸菌のような原核生物である場合、指数増殖期の後にコンピテント細胞を獲得して、当分野で周知するＣａＣｌ２法を用いて形質転換することができる。
【0042】
第六態様，本願が薬物組成物又は保健食品を提供し、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター又は第五態様に記載される宿主細胞、及び薬学的に許容されるキャリア又は賦形剤を含む。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、痛風を予防及び／又は関与及び／又は治療に用いられる。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、さらに、下記の一種又は複数種を含むことができる：タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱油などの潤滑剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、安息香酸、ソルビン酸、プロピオン酸カルシウムなどの防腐剤、甘味料及び/又は香味料など。
第六態様のある実施形態において、本願中の薬物組成物又は保健食品を、錠剤、丸薬、粉末、ロゼンジ、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、シロップ、座薬又はカプセルの形に製剤できる。
第六態様のある実施形態において、本願の薬物組成物又は保健食品は腸管に投与できるいずれの手段によって送達することができ、経口投与が好ましい。
第六態様のある具体的な実施形態において、第五態様に記載される宿主細胞を経口投与用の腸溶性カプセルに調製する。
第六態様のある実施形態において、治療用途の薬学的組成物は、所望の純度の薬剤をいずれの薬学的に許容される担体、賦形剤などと混合することにより、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で保存するために製剤化することができる。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、痛風を予防及び／又は関与及び／又は治療に用いられる。
第六態様のある実施形態において、前記薬物組成物又は保健食品が、さらに、下記の一種又は複数種を含むことができる：タルク、ステアリン酸マグネシウム、鉱油などの潤滑剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、安息香酸、ソルビン酸、プロピオン酸カルシウムなどの防腐剤、甘味料及び/又は香味料など。
第六態様のある実施形態において、本願中の薬物組成物又は保健食品を、錠剤、丸薬、粉末、ロゼンジ、エリキシル、懸濁液、エマルジョン、溶液、シロップ、座薬又はカプセルの形に製剤できる。
第六態様のある実施形態において、本願の薬物組成物又は保健食品は腸管に投与できるいずれの手段によって送達することができ、経口投与が好ましい。
第六態様のある具体的な実施形態において、第五態様に記載される宿主細胞を経口投与用の腸溶性カプセルに調製する。
第六態様のある実施形態において、治療用途の薬学的組成物は、所望の純度の薬剤をいずれの薬学的に許容される担体、賦形剤などと混合することにより、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で保存するために製剤化することができる。
【0043】
第七態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品がプリンの分解においての用途を提供する。
第七態様のある実施形態において、前記プリンの分解が体外で起こる。
第七態様のある実施形態において、分解プリンが無酸素の環境下、例えば腸内で行う。
第七態様のある実施形態において、前記プリンの分解が体外で起こる。
第七態様のある実施形態において、分解プリンが無酸素の環境下、例えば腸内で行う。
【0044】
第八態様は、本願は、第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品が、痛風を予防、関与及び／又は治療する薬物の調製においての用途を提供する。
【0045】
第九態様は、本願は、痛風を予防、関与及び／又は治療する方法を提供し、必要のある個体に第一態様に記載されるポリペプチド、第二態様に記載される核酸分子、第三態様に記載される発現キット、第四態様に記載される発現ベクター、第五態様に記載される宿主細胞又は第六態様に記載される薬物組成物又は保健食品を供与することを含む。
【0046】
例示性な実施形態として、キサンチンの無酸素分解において、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるキサンチンアミドヒドロラーゼは、キサンチンを４－ウレア基－５－カルボキシイミダゾールに分解することにより、ヒトの細胞によるプリンの獲得が減少し、尿酸に変換される。この経路により、腸内でキサンチンを分解して、痛風を予防、関与及び／又は治療する。
【実施例】
【0047】
下記の実施例は説明的であり、本願の実施案の範囲又は請求項の的範囲を限定することではない。
【0048】
実施例１．キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子クローニングの調製
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ（ＣＧＭＣＣ １．２０１０）のゲノムをテンプレートとして、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と３により示される上流プライマーと下流プライマーを用いてキサンチンアミドヒドロラーゼ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）をコードする核酸分子をＰＣＲ増幅して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子配列が得られる。Ｇｉｂｓｏｎの方法を用いて、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子配列をＨＴ－１Ｎ－ＴＡＧ－２６９１キャリア（Ｈｉｓ６ラベルとＴＥＶプロテアーゼ切断部位を含む）のＳｓｐＩ制限性部位に挿入して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を含む発現ベクターが得られる。
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ（ＣＧＭＣＣ １．２０１０）のゲノムをテンプレートとして、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２と３により示される上流プライマーと下流プライマーを用いてキサンチンアミドヒドロラーゼ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）をコードする核酸分子をＰＣＲ増幅して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子配列が得られる。Ｇｉｂｓｏｎの方法を用いて、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子配列をＨＴ－１Ｎ－ＴＡＧ－２６９１キャリア（Ｈｉｓ６ラベルとＴＥＶプロテアーゼ切断部位を含む）のＳｓｐＩ制限性部位に挿入して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を含む発現ベクターが得られる。
【0049】
実施例２．キサンチンアミドヒドロラーゼの組換え発現と精製
【0050】
２．１組換え発現
実施例１において構築されたキサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子１が含まれる発現ベクターを大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＢＬ２１細胞に形質転換して、５０μｇ／ｍＬ硫酸カナマイシンを含むＬＢ寒天プレート上に塗布し、３７°Ｃでオーバーナイト培養する。モノクローナルコロニーを選んで５ｍＬの硫酸カナマイシン含有ＬＢ液体培地中に３７°Ｃ、２２０ｒｐｍでオーバーナイト培養し、翌日に８００ｍＬのＬＢ培養液中に移して拡大培養する。ＯＤ６００値が０．８程度に達すると、温度を１８°Ｃに下げて、終濃度が０．３ｍＭであるＩＰＴＧを添加して、蛋白発現を誘導する。発現を誘導して１６時間後に４°Ｃで４０００Ｇの遠心を１０分かけて、菌体を回収する。菌体沈殿を３５ｍＬライセート［５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ ８．０、１ｍＭフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）、０．２ｍｇ／ｍＬリゾチーム、０．０３％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００と１μＬのＤＮａｓｅ Ｉ］で再懸濁して、－８０°Ｃで冷凍保存する。
実施例１において構築されたキサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子１が含まれる発現ベクターを大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＢＬ２１細胞に形質転換して、５０μｇ／ｍＬ硫酸カナマイシンを含むＬＢ寒天プレート上に塗布し、３７°Ｃでオーバーナイト培養する。モノクローナルコロニーを選んで５ｍＬの硫酸カナマイシン含有ＬＢ液体培地中に３７°Ｃ、２２０ｒｐｍでオーバーナイト培養し、翌日に８００ｍＬのＬＢ培養液中に移して拡大培養する。ＯＤ６００値が０．８程度に達すると、温度を１８°Ｃに下げて、終濃度が０．３ｍＭであるＩＰＴＧを添加して、蛋白発現を誘導する。発現を誘導して１６時間後に４°Ｃで４０００Ｇの遠心を１０分かけて、菌体を回収する。菌体沈殿を３５ｍＬライセート［５０ｍＭ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ、ｐＨ ８．０、１ｍＭフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）、０．２ｍｇ／ｍＬリゾチーム、０．０３％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００と１μＬのＤＮａｓｅ Ｉ］で再懸濁して、－８０°Ｃで冷凍保存する。
【0051】
２．２精製
菌体を－８０°Ｃから取り出して、２５°Ｃにおいて４０分間のウォーターバスでインキュベートして細胞を溶解する。６ｍＬの６％硫酸ストレプトマイシン水溶液を加え、穏やかに混合して、４°Ｃ、２０，０００Ｇの速度で５分間遠心する。上清を０．２２μｍのメンブレンでろ過して、バッファーＡ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ）で事前に平衡化された５ｍＬのＴＡＬＯＮコバルトカラムに結合し、１０倍カラム体積のバッファーＡでカラムを洗濯して、そして５倍カラム体積の１５０ｍＭイミダゾールを含むバッファーＢ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ、１５０ｍＭイミダゾール、５ｍＭβ－スルフヒドリル基エタノール）で目的蛋白を溶出する。溶出された蛋白溶液に７０％まで硫酸アンモニアを加えて蛋白を飽和沈殿して、１０，０００Ｇで１０分間遠心し、上清を捨て、沈殿用５ｍＬバッファーＣ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ、１０％（ｖ／ｖ）グリセロール）で再懸濁して、Ｇ２５カラムを用いて、塩を除去する。塩が除去された目的蛋白を分配して、液体窒素で急冷凍して、－８０°Ｃで冷凍保存する。分光光度計により最終的に得られるキサンチンアミドヒドロラーゼの濃度を検出する。蛋白配列により、キサンチンアミドヒドロラーゼの吸光係数が５５，８１０Ｍ－１ｃｍ－１である。１リットル毎の菌から平均約３５ｍｇの蛋白を精製できる。図５は、キサンチンアミドヒドロラーゼを発現、精製する過程を示し、ゲル電気泳動の移動速度は、実際の分子量サイズ（５５．７ｋＤａ）に対応する。
菌体を－８０°Ｃから取り出して、２５°Ｃにおいて４０分間のウォーターバスでインキュベートして細胞を溶解する。６ｍＬの６％硫酸ストレプトマイシン水溶液を加え、穏やかに混合して、４°Ｃ、２０，０００Ｇの速度で５分間遠心する。上清を０．２２μｍのメンブレンでろ過して、バッファーＡ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ）で事前に平衡化された５ｍＬのＴＡＬＯＮコバルトカラムに結合し、１０倍カラム体積のバッファーＡでカラムを洗濯して、そして５倍カラム体積の１５０ｍＭイミダゾールを含むバッファーＢ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ、１５０ｍＭイミダゾール、５ｍＭβ－スルフヒドリル基エタノール）で目的蛋白を溶出する。溶出された蛋白溶液に７０％まで硫酸アンモニアを加えて蛋白を飽和沈殿して、１０，０００Ｇで１０分間遠心し、上清を捨て、沈殿用５ｍＬバッファーＣ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５，０．２Ｍ ＫＣｌ、１０％（ｖ／ｖ）グリセロール）で再懸濁して、Ｇ２５カラムを用いて、塩を除去する。塩が除去された目的蛋白を分配して、液体窒素で急冷凍して、－８０°Ｃで冷凍保存する。分光光度計により最終的に得られるキサンチンアミドヒドロラーゼの濃度を検出する。蛋白配列により、キサンチンアミドヒドロラーゼの吸光係数が５５，８１０Ｍ－１ｃｍ－１である。１リットル毎の菌から平均約３５ｍｇの蛋白を精製できる。図５は、キサンチンアミドヒドロラーゼを発現、精製する過程を示し、ゲル電気泳動の移動速度は、実際の分子量サイズ（５５．７ｋＤａ）に対応する。
【0052】
実施例３．キサンチンアミドヒドロラーゼの活性検出
１ｍＭキサンチン、４μＭ実施例２において得られたキサンチンアミドヒドロラーゼ、０．１ｍＭ Ｍｎ２＋、２００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５を含む１ｍＬの溶液を３０°Ｃでウォーターバス中に０．５ｈインキューベートして、システムを完全に反応させて、そして等体積のメタノール溶液を入れて均一に混和して、１４，０００Ｇで１０分間遠心をかけ、０．２２μｍのメンブレンを通じて蛋白沈殿をろ過して、実験群とする。対象群はキサンチンアミドヒドロラーゼ及び２価金属イオンが添加されない反応であり、対象群と実験群との他の実験条件が同じである（表１）。実験が無酸素のグローブボックスで行い、蛋白溶液、反応バッファー等を含むすべての溶液がグローブボックスに入る前に、Ｓｃｈｌｅｎｋ線によって酸素を除去する。
ＬＣ－ＭＳによってキサンチンアミドヒドロラーゼはキサンチンの加水分解開環を触媒することが検出され、対象群において産物ピークが検出されず、実験群において、分子量は１６９Ｄａの産物ピークが検出されて、キサンチンアミドヒドロラーゼはキサンチンを分解できると証明した（図６）。
１ｍＭキサンチン、４μＭ実施例２において得られたキサンチンアミドヒドロラーゼ、０．１ｍＭ Ｍｎ２＋、２００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ７．５を含む１ｍＬの溶液を３０°Ｃでウォーターバス中に０．５ｈインキューベートして、システムを完全に反応させて、そして等体積のメタノール溶液を入れて均一に混和して、１４，０００Ｇで１０分間遠心をかけ、０．２２μｍのメンブレンを通じて蛋白沈殿をろ過して、実験群とする。対象群はキサンチンアミドヒドロラーゼ及び２価金属イオンが添加されない反応であり、対象群と実験群との他の実験条件が同じである（表１）。実験が無酸素のグローブボックスで行い、蛋白溶液、反応バッファー等を含むすべての溶液がグローブボックスに入る前に、Ｓｃｈｌｅｎｋ線によって酸素を除去する。
ＬＣ－ＭＳによってキサンチンアミドヒドロラーゼはキサンチンの加水分解開環を触媒することが検出され、対象群において産物ピークが検出されず、実験群において、分子量は１６９Ｄａの産物ピークが検出されて、キサンチンアミドヒドロラーゼはキサンチンを分解できると証明した（図６）。
【0053】
【表1】
【0054】
実施例４．キサンチンアミドヒドロラーゼの活性中心鑑定
体外において、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列を含むポリペプチドはキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有することが証明されてから、ＰＨＹＲＥ２サーバーを利用して当該酵素に対して構造模倣を行って（図７）、四つのヒスチジン、一つのリジン、一つのアスパラギン酸及び二つの２価金属イオン（Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）を含んで構成される触媒部位が示される。さらに、コンピューターソフトウェアを用いて、模倣したキサンチンアミドヒドロラーゼに対して、基質であるキサンチンのアンカードを行った結果から、活性中心にさらに一つのイソロイシン、一つのアラニン、一つのプロリンと、一つのグリシンから空間構造的にお互いに近づいて構成された結合部位と基質であるキサンチンと相互作用をすることが示される（図７）。
体外において、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１により示されるアミノ酸配列を含むポリペプチドはキサンチンアミドヒドロラーゼ活性を有することが証明されてから、ＰＨＹＲＥ２サーバーを利用して当該酵素に対して構造模倣を行って（図７）、四つのヒスチジン、一つのリジン、一つのアスパラギン酸及び二つの２価金属イオン（Ｚｎ２＋及び／又はＭｎ２＋）を含んで構成される触媒部位が示される。さらに、コンピューターソフトウェアを用いて、模倣したキサンチンアミドヒドロラーゼに対して、基質であるキサンチンのアンカードを行った結果から、活性中心にさらに一つのイソロイシン、一つのアラニン、一つのプロリンと、一つのグリシンから空間構造的にお互いに近づいて構成された結合部位と基質であるキサンチンと相互作用をすることが示される（図７）。
【0055】
実施例５．キサンチンアミドヒドロラーゼのアイソザイム鑑定
本願の発明者が、さらにＵｎｉｐｒｏｔデータベースから、このキサンチンアミドヒドロラーゼアイソザイムＵｎｉＲｅｆ５０の配列（５０％の同一配列をカバーして、キサンチンアミドヒドロラーゼの長さの８０％を超える蛋白質配列）を見つかり、上記配列がいずれもＵｎｉＲｅｆ５０＿Ｑ３ＡＥＡ１のクラスターにあり、全部１０１種の蛋白配列を含み、この１０１種の異なる種属由来の蛋白に対して進化樹分析（図８）を行った。各進化分岐から一つの代表蛋白を選び、全部五種類の蛋白で、それぞれＢａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ（菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１）、及びＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓから由来し、それらをコードする登録番号がそれぞれＡ０Ａ３６６Ｋ５２３、Ａ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４、Ａ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２、Ｑ３ＡＥＡ１とＡ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列に対して配列アラインメントを行った。配列アラインメントの結果から、上記の触媒位点と結合位点とのアミノ酸残基が高度保守的で、すべての五つの配列が上記アミノ酸残基を含むことを示し、これらの酵素がずべてキサンチンアミドヒドロラーゼであることを証明した（図９）。表２にＵｎｉｐｒｏｔデータベースから見つかった１０１種のキサンチンアミドヒドロラーゼの登録番号、菌株由来及びアミノ酸配列号を示す。
本願の発明者が、さらにＵｎｉｐｒｏｔデータベースから、このキサンチンアミドヒドロラーゼアイソザイムＵｎｉＲｅｆ５０の配列（５０％の同一配列をカバーして、キサンチンアミドヒドロラーゼの長さの８０％を超える蛋白質配列）を見つかり、上記配列がいずれもＵｎｉＲｅｆ５０＿Ｑ３ＡＥＡ１のクラスターにあり、全部１０１種の蛋白配列を含み、この１０１種の異なる種属由来の蛋白に対して進化樹分析（図８）を行った。各進化分岐から一つの代表蛋白を選び、全部五種類の蛋白で、それぞれＢａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｕｍ ＤＳＭ ６０５、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｕｒｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃａｒｂｙｄｏｔｈｅｒｍｕｓ ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｆｏｒｍａｎｓ（菌株ＡＴＣＣ ＢＡＡ－１６１／ＤＳＭ ６００８／Ｚ－２９０１）、及びＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓから由来し、それらをコードする登録番号がそれぞれＡ０Ａ３６６Ｋ５２３、Ａ０Ａ０Ｊ８Ｇ３３４、Ａ０Ａ０Ｌ０Ｗ６９２、Ｑ３ＡＥＡ１とＡ０Ａ２Ｚ２ＫＥＨ１であるキサンチンアミドヒドロラーゼのアミノ酸配列に対して配列アラインメントを行った。配列アラインメントの結果から、上記の触媒位点と結合位点とのアミノ酸残基が高度保守的で、すべての五つの配列が上記アミノ酸残基を含むことを示し、これらの酵素がずべてキサンチンアミドヒドロラーゼであることを証明した（図９）。表２にＵｎｉｐｒｏｔデータベースから見つかった１０１種のキサンチンアミドヒドロラーゼの登録番号、菌株由来及びアミノ酸配列号を示す。
【0056】
【表2】
【0057】
実施例６．キサンチンアミドヒドロラーゼを発現する大腸菌の構築
本実施例は、キサンチンアミドヒドロラーゼ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）を発現できる大腸菌を構築した。
本実施例の重要な操作は、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を大腸菌のゲノムに組み込み、例えば、マルチコピー１６ｓＲＮＡの一つのコピー、それを安定に発現させるとともに、グアニントランスポーターとグアニンデヒドロゲナーゼを制御するプロモーターをｇａｐＡプロモーターに置換して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を持続で安定的に発現させる。
本実施例は、構成型持続で安定的に発現するプロモーターｇａｐＡを用いてグアニントランスポーター及びグアニンデヒドロゲナーゼをコードするプロモーターを置換することが好ましい。通常、元のプロモーターが環境において窒素源が不足で、グアニンの窒素を利用する必要な場合にのみ発現するが、窒素源が十分な場合、制御される遺伝子が発現しない。食物中のグアニンが本発明のキサンチンアミドヒドロラーゼにより分解されるために、グアニントランスポーターとグアニンデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子を制御するプロモーターを、常に発現できるように置換する必要があり、これにより、グアニンは、上記の工程によって改造された大腸菌細胞内に効果的に転送され、グアニンデヒドロゲナーゼ及びキサンチンアミドヒドロラーゼの一連の作用によって分解され、それによって、ヒトの腸管がグアニンを吸収して尿酸に変換することを効果的に阻止できる。
本実施例は、キサンチンアミドヒドロラーゼ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）を発現できる大腸菌を構築した。
本実施例の重要な操作は、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を大腸菌のゲノムに組み込み、例えば、マルチコピー１６ｓＲＮＡの一つのコピー、それを安定に発現させるとともに、グアニントランスポーターとグアニンデヒドロゲナーゼを制御するプロモーターをｇａｐＡプロモーターに置換して、キサンチンアミドヒドロラーゼをコードする遺伝子を持続で安定的に発現させる。
本実施例は、構成型持続で安定的に発現するプロモーターｇａｐＡを用いてグアニントランスポーター及びグアニンデヒドロゲナーゼをコードするプロモーターを置換することが好ましい。通常、元のプロモーターが環境において窒素源が不足で、グアニンの窒素を利用する必要な場合にのみ発現するが、窒素源が十分な場合、制御される遺伝子が発現しない。食物中のグアニンが本発明のキサンチンアミドヒドロラーゼにより分解されるために、グアニントランスポーターとグアニンデヒドロゲナーゼをコードする遺伝子を制御するプロモーターを、常に発現できるように置換する必要があり、これにより、グアニンは、上記の工程によって改造された大腸菌細胞内に効果的に転送され、グアニンデヒドロゲナーゼ及びキサンチンアミドヒドロラーゼの一連の作用によって分解され、それによって、ヒトの腸管がグアニンを吸収して尿酸に変換することを効果的に阻止できる。
【0058】
実施例７．キサンチンアミドヒドロラーゼを発現する大腸菌が痛風を治療することに用いられる
オキソニン酸（ｏｘｏｎｉｃ ａｃｉｄ）を用いて誘導した高尿酸ラット又はウリカーゼノックアウトトランスジェニックマウスを痛風の動物モデルとして、実施例６に調製された各種大腸菌を腸溶性カプセルに調製する。同じ給餌条件下で、各種大腸菌腸溶性カプセルが痛風ラット及びマウスの血中尿酸含有量を減少できるかをテストする。
オキソニン酸（ｏｘｏｎｉｃ ａｃｉｄ）を用いて誘導した高尿酸ラット又はウリカーゼノックアウトトランスジェニックマウスを痛風の動物モデルとして、実施例６に調製された各種大腸菌を腸溶性カプセルに調製する。同じ給餌条件下で、各種大腸菌腸溶性カプセルが痛風ラット及びマウスの血中尿酸含有量を減少できるかをテストする。
【0059】
実施例８．キサンチンアミドヒドロラーゼを発現する大腸菌が痛風を治療することに用いられる
【0060】
８．１ラット実験
ＳＤ雄性ラット（体重１２０ｇ－１５０ｇ）を選んで、各群６匹、同じ給餌条件下で、実験群、高尿酸血症群と対象群に分けられ、具体的な実験過程が以下のようである。
１．動物プレコンディショニング：≧７日間プレコンディショニング過程、普通の餌と普通の飲用水で給餌する。
２．抗生物質前処理：普通の餌で給餌し、飲用水に２ｍｇ／ｍＬストレプトマイシン＋１ｍｇ／ｍＬアンピシリンを添加して、ラットを３日間給餌した後、給水停止＞６時間後、続く胃管栄養処理をかける。
３．実験群：ラットに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、２×１０＾１０個の実施例６で調製した大腸菌を含む懸濁液２００μＬを２週間胃管栄養処理を行う。
高尿酸血症群：ラットに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、二週間続ける。
対象群：ラットに普通の餌を毎日与え、二週間続ける。
二週間給餌後、眼窩から採血して、尿酸キットで血清中の尿酸含有量を検出する。
ＳＤ雄性ラット（体重１２０ｇ－１５０ｇ）を選んで、各群６匹、同じ給餌条件下で、実験群、高尿酸血症群と対象群に分けられ、具体的な実験過程が以下のようである。
１．動物プレコンディショニング：≧７日間プレコンディショニング過程、普通の餌と普通の飲用水で給餌する。
２．抗生物質前処理：普通の餌で給餌し、飲用水に２ｍｇ／ｍＬストレプトマイシン＋１ｍｇ／ｍＬアンピシリンを添加して、ラットを３日間給餌した後、給水停止＞６時間後、続く胃管栄養処理をかける。
３．実験群：ラットに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、２×１０＾１０個の実施例６で調製した大腸菌を含む懸濁液２００μＬを２週間胃管栄養処理を行う。
高尿酸血症群：ラットに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、二週間続ける。
対象群：ラットに普通の餌を毎日与え、二週間続ける。
二週間給餌後、眼窩から採血して、尿酸キットで血清中の尿酸含有量を検出する。
【0061】
８．２マウス実験
マウスＢａｌｂ／ｃ（８週齢）を選んで、各群５匹、同じ給餌条件下で、実験群、高尿酸血症群と対象群に分けて、具体的な実験過程が以下のようである。
１．動物プレコンディショニング：≧７日間プレコンディショニング過程、普通の餌と普通の飲用水で給餌する。
２．抗生物質前処理：普通の餌で給餌し、飲用水に２ｍｇ／ｍＬストレプトマイシン＋１ｍｇ／ｍＬアンピシリンを添加してマウスを３日間給餌した後、給水停止＞６時間後、続く胃管栄養処理をかける。
３．実験群：マウスに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、胃管栄養法により２００ｍｇ／ｋｇオキシシアン酸カリウムを投与して、１×１０＾１０個の実施例６で調製した大腸菌を含む懸濁液１００μＬを２週間胃管栄養処理を行う。
高尿酸血症群：マウスに０．１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、胃管栄養法により２００ｍｇ／ｋｇオキシシアン酸カリウムを投与して、二週間続ける。
対象群：普通の餌を毎日与え、二週間続ける。
二週間給餌後、眼窩から採血して、尿酸キットで血清中の尿酸含有量を検出する。
マウスＢａｌｂ／ｃ（８週齢）を選んで、各群５匹、同じ給餌条件下で、実験群、高尿酸血症群と対象群に分けて、具体的な実験過程が以下のようである。
１．動物プレコンディショニング：≧７日間プレコンディショニング過程、普通の餌と普通の飲用水で給餌する。
２．抗生物質前処理：普通の餌で給餌し、飲用水に２ｍｇ／ｍＬストレプトマイシン＋１ｍｇ／ｍＬアンピシリンを添加してマウスを３日間給餌した後、給水停止＞６時間後、続く胃管栄養処理をかける。
３．実験群：マウスに１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、胃管栄養法により２００ｍｇ／ｋｇオキシシアン酸カリウムを投与して、１×１０＾１０個の実施例６で調製した大腸菌を含む懸濁液１００μＬを２週間胃管栄養処理を行う。
高尿酸血症群：マウスに０．１％（ｗ／ｗ）アデニンを含む餌を毎日与え、胃管栄養法により２００ｍｇ／ｋｇオキシシアン酸カリウムを投与して、二週間続ける。
対象群：普通の餌を毎日与え、二週間続ける。
二週間給餌後、眼窩から採血して、尿酸キットで血清中の尿酸含有量を検出する。
【0062】
上記が本願の各項発明の例示的実施形態について説明したが、本願の実質及び範囲から離れない限り、当業者は本願に説明された例示的実施形態に対して修正又は進化ができて、得られる変更形態も本願の範囲内に属す。
【配列表フリーテキスト】
【0063】
配列番号１～配列番号１０４：キサンチンアミドヒドロラーゼ
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【配列表】