特許 7550755 向上された嗜好性を有する多価不飽和脂肪酸含有食品成分及びそれを製造する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-09-05

(45)【発行日】2024-09-13

(54)【発明の名称】向上された嗜好性を有する多価不飽和脂肪酸含有食品成分及びそれを製造する方法

(51)【国際特許分類】

   A23K 20/158 20160101AFI20240906BHJP

   C11C 3/00 20060101ALI20240906BHJP

   A23D 9/00 20060101ALI20240906BHJP

   A23D 9/02 20060101ALI20240906BHJP

   A23K 10/22 20160101ALI20240906BHJP

   A23K 10/16 20160101ALI20240906BHJP

   A23K 50/40 20160101ALI20240906BHJP

【ＦＩ】

A23K20/158

C11C3/00

A23D9/00 516

A23D9/02

A23K10/22

A23K10/16

A23K50/40

【請求項の数】 8

(21)【出願番号】P 2021528445

(86)(22)【出願日】2019-12-13

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-01-28

(86)【国際出願番号】 US2019066265

(87)【国際公開番号】W WO2020123965

(87)【国際公開日】2020-06-18

【審査請求日】2022-11-30

(31)【優先権主張番号】62/779,660

(32)【優先日】2018-12-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】503220392

【氏名又は名称】ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ．

【氏名又は名称原語表記】ＤＳＭ ＩＰ ＡＳＳＥＴＳ Ｂ．Ｖ．

【住所又は居所原語表記】Ｈｅｔ Ｏｖｅｒｌｏｏｎ １， ＮＬ－６４１１ ＴＥ Ｈｅｅｒｌｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ

(73)【特許権者】

【識別番号】519414848

【氏名又は名称】エボニック オペレーションズ ゲーエムベーハー

【氏名又は名称原語表記】Ｅｖｏｎｉｋ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ ＧｍｂＨ

【住所又は居所原語表記】Ｒｅｌｌｉｎｇｈａｕｓｅｒ Ｓｔｒａｓｓｅ １－１１， ４５１２８ Ｅｓｓｅｎ， Ｇｅｒｍａｎｙ

(74)【代理人】

【識別番号】100107456

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 成人

(74)【代理人】

【識別番号】100128381

【弁理士】

【氏名又は名称】清水 義憲

(74)【代理人】

【識別番号】100162352

【弁理士】

【氏名又は名称】酒巻 順一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100123995

【弁理士】

【氏名又は名称】野田 雅一

(72)【発明者】

【氏名】マクギリブレイ， タニヤ フランシス

(72)【発明者】

【氏名】メイ， ジェニファー イヴォンヌ

(72)【発明者】

【氏名】ステファンスキー， マイケル エル．

(72)【発明者】

【氏名】タバイエーネジャド， ナスリン

(72)【発明者】

【氏名】ウィルソン， ジョナサン， ウェスリー

(72)【発明者】

【氏名】カスナー， ステファニー ラヌー

【審査官】星野 浩一

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１８／１５６５９６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２００２－５４０２２１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００９－５０００２２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開平０８－３０２３８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００８－５４１７６５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１５－０３７３９３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００５－２７８６５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第０１／０４１５８２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】HARLES F. LIN, THOMAS C.-Y. HSIEH, JANE B. CROWTHER, ANTHONY P. BIMBO，Efficiency of Removing Volatiles from Menhaden Oils by Refining, Bleaching, and Deodorization，JOURNAL OF FOOD SCIENCE ，第５５巻第６号，1990年，第１６６９－１６７２頁，https://ift.onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1111/j.1365-2621.1990.tb03596.x

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ２３Ｋ ２０／１５８

Ｃ１１Ｃ ３／００

Ａ２３Ｄ ９／００

Ａ２３Ｄ ９／０２

Ａ２３Ｋ １０／２２

Ａ２３Ｋ １０／１６

Ａ２３Ｋ ５０／４０

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

コンパニオンアニマルに対する多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の嗜好性を向上させるための方法であって、
ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；
ｂ）ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムすることと、ＳＰＥを使用して精製することとの両方を行うステップと；
ｃ）ステップｂ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱臭するステップと
を含み、ステップａ）で出発された前記粗製油の重量を１００％として計算されるステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の収率は、８５％以上であり、前記嗜好性は、動物食物嗜好性試験によって測定され、ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも１０％ポイント高く、
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油に含まれる１つ又は複数のメイラード反応化合物の総量が、ステップａ）で出発された前記粗製油に含まれる前記メイラード反応化合物の総量よりも低下しており、
前記メイラード反応化合物が、トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドールからなる群から選択される、方法。

【請求項2】

前記脱臭ステップｃ）は、ＶＴＡ脱臭装置を使用することによって実施される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用して連続条件で実施される、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の収率を、同じ油であるが、精製、漂白、脱ろう及び脱臭された対照油（ＲＢＷＤ油）よりも増加させる方法であって、
ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；
ｂ）ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムすることと、ＳＰＥを使用することによって精製することとの両方を行うステップと；
ｃ）ステップｂ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱臭するステップと
を含み、ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の収率は、前記ＲＢＷＤ油の収率よりも５％ポイント超高く、
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の前記収率及び前記ＲＢＷＤ油の前記収率は、それぞれステップａ）で出発された前記粗製ＰＵＦＡ油の重量を１００％として計算され、
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油に含まれる１つ又は複数のメイラード反応化合物の総量が、ステップａ）で出発された前記粗製油に含まれる前記メイラード反応化合物の総量よりも低下しており、
前記メイラード反応化合物が、トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドールからなる群から選択される、方法。

【請求項6】

前記脱臭ステップｃ）は、ＶＴＡ脱臭装置を使用することによって実施される、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される、請求項５に記載の方法。

【請求項8】

前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用して連続条件で実施される、請求項７に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【発明の詳細な説明】

【0001】

［発明の分野］
[0001]本発明は、多価不飽和脂肪酸を含有する一方、改善された嗜好性のペットフード及びヒト用食品に関する。本発明は、上記の食品成分を製造する方法に関する。

【0002】

［発明の背景］
[0002]動物用食品のメーカーには、栄養価が高く、嗜好性が高く、製造コストが低いという３つの基準を満たす食品を製造するというビジネス上のインセンティブがある。

【0003】

[0003]ω－３脂肪酸などの多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）の栄養価は、当技術分野で周知である。ＰＵＦＡは、細胞膜に存在することにより細胞生理学に影響を与え、生物学的に活性な化合物の遺伝子発現の生成を調節し、生合成基質として機能する、生物学的に重要な分子である。例えば、ドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）は、動物の脳内脂質のおよそ１５％～２０％及び網膜内脂質のおよそ３０％～６０％を占めている。ω－３脂肪酸は、陸上の動物が新たに合成することができないため、栄養源から得なければならない。

【0004】

[0004]多価不飽和脂肪酸は、微細藻類及び真菌などの微生物によって合成される。魚は、このような微生物を食べることにより、多価不飽和脂肪酸を取得する。商業的には、多価不飽和脂肪酸は、魚からの抽出により且つ発酵及び抽出を通した微細藻類又は真菌からの収穫により得られる。化学反応を通した抽出工程を促進するために、ＰＵＦＡ油の抽出工程では多くの化学物質が使用される。このような反応では、揮発性副産物が発生する。抽出工程では、脂質酸化産物及びメイラード反応産物などの多くの揮発性副産物が生成する。

【0005】

[0005]ＰＵＦＡ油が最初に魚又は微細藻類から抽出され、さらなる精製なしにそのまま使用される場合、粗製油と称される。粗製油は、不快な臭い及び味を有し、したがってヒト及び動物に受け入れられず、拒絶されることすらある。

【0006】

[0006]ヒト並びに猫及び犬などのコンパニオンアニマルのための食品を設計する場合、大量の栄養を供給することが重要な目標である。しかし、食物が口に合わないと判断したためにヒト又は動物が食物を食べることを拒否した場合、そのような食物は、前記ヒト又は動物にとって価値がないであろう。また、その食品は、市場がないため、作り手にとっても価値がない。したがって、口当たりが良いＰＵＦＡ含有食品成分を製造する強い動機がある。

【0007】

[0007]粗製油は、ヒトが消費できるようにする前に精製する必要がある。一般的に、精製工程は、精製、漂白、脱ろう及び脱臭のステップを伴う。精製は、遊離脂肪酸、リン脂質、油溶性物質、微量金属及び水溶性分子の除去を伴う。漂白は、顔料、二次酸化生成物、微量金属、ビタミン、環境汚染物質及び他の極性成分を除去する。脱ろうは、低温で油中に出現する沈殿物を除去する工程に与えられた名称である。脱臭は、揮発性構成要素、二次酸化生成物、遊離脂肪酸、モノ－及びジグリセリド、アルデヒド、ケトン、塩素化炭化水素、顔料及び残留性有機汚染物質の除去を指す。上記の工程は、４つのステップの頭文字をとってＲＢＷＤ工程とも称される。

【0008】

[0008]それに伴う機器、エネルギー、労力及び時間のコストのために、精製、漂白、脱ろう、脱臭の４つの全ステップをＲＢＷＤ工程で実行することは、コストがかかる。さらに、完全なＲＢＷＤ工程を実行した場合、５５％～６０％ものＰＵＦＡ油が失われ得る。したがって、粗製ＰＵＦＡ油の不快な臭気及び味は、完全なＲＢＷＤ工程によって除去され得るが、このような油を製造するコストは、高くなる。したがって、それは、ヒトが消費するための精製ＰＵＦＡ油を製造するためにのみ一般的に実行される。これは、口当たりが良く、栄養的にかなりの量のＰＵＦＡを含有するペットフードを製造及び販売することを経済的に困難にする。

【0009】

[0009]したがって、栄養価が高く、嗜好性が高く、同時に低コストで製造されるＰＵＦＡ油に対する必要性がある。

【0010】

[0010]歴史的に、低コストでありながら、適度な嗜好性を有するＰＵＦＡ含有食品成分を製造するために行われた努力は、嗜好性向上剤の作成に重点を置いてきた。例えば、米国特許出願公開第１２／４４２，８２８号明細書は、ペットフードの食感及び風味を改善することができると主張された藻類バイオミールベースの嗜好性向上剤を開示している。米国特許出願公開第１５／０３８５４５号明細書は、食品に適切な脂肪源及び食用剤を含めることにより、嗜好性向上剤を調製する方法を開示している。しかし、別個の嗜好性向上剤を作り、それを食品にブレンドすることは、高価であることが証明されている。さらに、嗜好性向上剤は、基礎となるペットフードの栄養価又は他の特性に悪影響を及ぼすか又はそれを損なうことがある。したがって、この問題を解決するための新しいアプローチを見出すことに対する必要性がなおもある。本発明の目標は、嗜好性が高いが、製造コストが低いＰＵＦＡ油を製造する方法を見出すことである。

【0011】

［発明の概要］
[0011]本発明は、コンパニオンアニマルに対して多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の嗜好性を向上させるための方法であって、ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；ｂ）任意選択的に、ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムするか、若しくはそれを、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はそれを脱ガムすることと、ＳＰＥを使用することによって精製することとの両方を行うステップと；ｃ）ステップｂ）からのＰＵＦＡ油を脱臭するステップとを含み、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ステップａ）で出発された粗製油の量の８５％以上であり、前記嗜好性は、動物食物嗜好性試験によって測定され、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された粗製油よりも少なくとも１０％ポイント高い、方法を対象とする。

【0012】

[0012]一実施形態では、ＰＵＦＡ油の収率は、ステップａ）で出発された粗製油の９０％以上である。一実施形態では、上記の動物食物嗜好試験は、２ボウル試験である。他の実施形態では、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された粗製油よりも少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０又は少なくとも４５％ポイント高い。

【0013】

[0013]いくつかの実施形態では、ステップｃ）の脱臭は、ＶＴＡ脱臭装置又はＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される。

【0014】

[0014]いくつかの実施形態では、ＰＵＦＡ油は、魚、微生物又は植物に由来する。一実施形態では、微生物は、藻類である。別の実施形態では、藻類は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オーランチオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）又はスラウストキトリウム属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）である。

【0015】

[0015]いくつかの実施形態では、ＰＵＦＡ油は、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ＡＲＡ及びＤＰＡの１つ又は複数の化合物を含む。

【0016】

[0016]本発明は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油であって、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１０ｐｐｂ未満の１つ又は複数のメイラード反応化合物と、１．５ｐｐｂを超える１つ又は複数の脂質酸化生成物とを含む多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油も対象とする。

【0017】

[0017]いくつかの実施形態では、ＰＵＦＡ油は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１ｐｐｂ未満、０．５ｐｐｂ未満又は０．３ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物を含む。

【0018】

[0018]一実施形態では、前記ＰＵＦＡ油中のメイラード反応化合物の量は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、検出不能である。

【0019】

[0019]一実施形態では、メイラード反応化合物は、トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドールからなる群から選択される。別の実施形態では、脂質酸化生成物は、１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール及び２，６－ノナジエナールからなる群から選択される。

【0020】

[0020]本発明は、コンパニオンアニマルのための食品組成物であって、上記の方法によって製造されるＰＵＦＡ油を含む食品組成物も対象とする。本発明は、コンパニオンアニマルのための食品組成物であって、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１０ｐｐｂ未満の１つ又は複数のメイラード反応化合物と、１．５ｐｐｂ超える１つ又は複数の脂質酸化生成物とを含むＰＵＦＡ油とを含む食品組成物も対象とする。

【0021】

[0021]いくつかの実施形態では、上記のコンパニオンアニマルは、犬又は猫である。

【0022】

[0022]いくつかの実施形態では、上記の食品組成物は、ドッグフード、キャットフード、犬用おやつ又は猫用おやつである。一実施形態では、食品組成物は、栄養補給剤である。

【0023】

[0023]本発明は、ヒトが消費するための食品組成物であって、上記の方法によって製造されるＰＵＦＡ油を含む食品組成物も対象とする。本発明は、ヒトが消費するための食品組成物であって、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１０ｐｐｂ未満の１つ又は複数のメイラード反応化合物と、１．５ｐｐｂ超える１つ又は複数の脂質酸化生成物とを含むＰＵＦＡ油を含む食品組成物も対象とする。

【0024】

[0024]本発明は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の収率を、同じ油であるが、精製、漂白、脱ろう及び脱臭された対照油（ＲＢＷＤ油）よりも増加させる方法であって、ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；ｂ）任意選択的に、ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムするか、若しくはステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムすることと、ＳＰＥを使用することによって精製することとの両方を行うステップと；ｃ）ステップｂ）からのＰＵＦＡ油を脱臭するステップとを含み、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ＲＢＷＤ油の収率よりも５％ポイント超高い、方法をさらに対象とする。

【0025】

[0025]いくつかの実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ＲＢＷＤ油の収率よりも１０％ポイント又は２０％ポイント超高い。

【0026】

[0026]いくつかの実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油とＲＢＷＤ油との嗜好性スコア間の差は、共通の対照サンプル油が使用される動物食物嗜好性試験において１０％未満である。別の実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油は、共通の対照サンプル油が使用される動物嗜好性試験においてＲＢＷＤ油よりも高い嗜好性スコアを有する。一実施形態では、動物食物嗜好試験は、２ボウル試験である。

【0027】

[0027]一実施形態では、脱臭ステップｃ）は、ＶＴＡ脱臭装置又はＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される。

【0028】

[0028]いくつかの実施形態では、ＰＵＦＡ油は、魚、微生物又は植物に由来する。一実施形態では、微生物は、藻類である。別の実施形態では、藻類は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オーランチオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）又はスラウストキトリウム属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）である。

【0029】

[0029]いくつかの実施形態では、ＰＵＦＡ油は、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ＡＲＡ及びＤＰＡの１つ又は複数の化合物を含む。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】脱臭藻類油及び未脱臭藻類油の香りスコア並びに同じ油の口当たりスコアが示される、藻類ＰＵＦＡ油サンプルのヒト官能結果を示すグラフである。

【0031】

［発明の詳細な説明］
[0031]本発明の特徴及び利点は、以下の詳細な説明を読むことにより、当業者によってより容易に理解され得る。明確にするために、別個の実施形態に関連して上及び下に記載されている本発明の特定の特徴も、それらの部分組み合わせを形成するように組み合わされ得るものと理解されたい。

【0032】

[0032]本明細書で具体例として同定される実施形態は、例示を意図するものであり、限定するものではない。

【0033】

[0033]本発明の目的は、ペット及び／又はヒトの消費のための、口当たりが良く、同時に最小限の処理を必要とし、したがって低コストで製造され得るＰＵＦＡ油を提供することである。

【0034】

[0034]本発明の別の目的は、従来の精製、漂白、脱ろう及び脱臭の加工ステップを用いた方法よりも効率的に、口当たりが良いＰＵＦＡ油を製造する方法を開発することである。

【0035】

[0035]本発明の別の目的は、ペットに対する異臭及び異味の主な原因である化合物の群又は個々の化合物を同定することであり、それらを粗製ＰＵＦＡ油から除去すると、ＰＵＦＡ油の嗜好性が大幅に改善される。

【0036】

[0036]上記の目的は、本発明により達成される。

【0037】

[0037]粗製微生物ＰＵＦＡ油及び粗製魚油は、多価不飽和脂肪酸、特にＤＨＡ及びＥＰＡなどのω－３多価不飽和脂肪酸が豊富である。ω－３多価不飽和脂肪酸、特にＤＨＡ及びＥＰＡは、動物にとって不可欠な栄養素であることが広く認識されている。ヒト及びペットなどの哺乳類は、体内でω－３多価不飽和脂肪酸を合成できないため、外部供給源から得なくてはならない。しかし、未加工の粗製微生物ＰＵＦＡ油及び粗製魚油は、強い不快な臭い及び味を有し、ヒト及びペットの消費に適したものにするためにこれを除去しなければならない。従来、精製工程は、複雑であり、精製、漂白、脱ろう及び脱臭をはじめとする少なくとも４つのステップを伴うため、非常にコストがかかり、収率が低くなる。そのため、価格競争力を維持しながら、十分なＰＵＦＡを含有するペットフードを製造することは、経済的に困難である。その結果、ＰＵＦＡなどの有益な栄養素が豊富な食餌を摂取できるペットは、ほとんどいない。

【0038】

[0038]驚くべきことに、本発明において、精製、漂白、脱ろう及び脱臭の４つの油加工ステップのうち、脱臭は、コンパニオンアニマルに対するＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させるのに最も効果的なステップであることが見出された。さらに、脱ガムステップ又は精製ステップのいずれかを追加することにより、油製造における収率を大きく損なうことなく、ＰＵＦＡ油の嗜好性がさらに向上されることが見出された。したがって、口当たりが良いＰＵＦＡ油は、粗製ＰＵＦＡ油を脱臭ステップ及び任意選択的に追加の脱ガムステップ若しくは追加の精製ステップ又はその両方で処理することにより、低コストで製造され得る。

【0039】

[0039]嗜好性の変化は、動物食物嗜好性試験によって測定される。本発明で使用される動物食物嗜好性試験は、２ボウル試験である。２ボウル試験（又はペア刺激若しくは対比試験）では、同時に提示された２つの食品が、定義された期間内にどの程度食べられたかが比較される。これは、犬及び猫の嗜好性評価研究の専門家パネルで使用される一般的な試験である。本発明では、それぞれ異なるＰＵＦＡ油を含有する２つのペットフードサンプルが互いに比較される。第１の食品は、対照ＰＵＦＡ油を含有する。第２の食品は、試験ＰＵＦＡ油を含有する。対照ＰＵＦＡ油は、粗製油又は加工油のいずれかの任意のＰＵＦＡ油サンプルであり得る。本発明で一般的に使用される対照ＰＵＦＡ油は、精製、漂白及び脱臭のステップによって処理されている市販の魚油である。別の実施形態では、対照ＰＵＦＡ油は、精製、漂白、脱ろう及び脱臭のステップによって処理されている市販の魚油である。一実施形態では、試験ＰＵＦＡ油は、その嗜好性が対照ＰＵＦＡ油に対して測定されるサンプルＰＵＦＡ油である。このような試験ＰＵＦＡ油は、未加工の粗製藻類油であっても、脱ガム、短行程蒸発、精製、漂白、脱ろう及び脱臭などの１つ又は複数のステップで処理された藻類油であり得る。

【0040】

[0040]試験ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアが５０％を上回る場合、２ボウル試験で対にされた他のＰＵＦＡ油よりも嗜好性が改善されていると見なされる。これは、試験ＰＵＦＡ油が、５０％を超える確率で、実験動物によって対照ＰＵＦＡ油よりも好まれることを意味する。２ボウル試験及びそのスコア方法については、本出願の実施例２に詳述される。２ボウル試験は、動物食物嗜好性試験の一種であり、動物による餌の好みの定量的測定を提供する。比較されている２つのサンプルの嗜好性スコアの合計は、常に１００％である。例えば、試験ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアが５６％である場合、他のＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、４４％である。

【0041】

[0041]複数の異なる試験ＰＵＦＡ油を同一のＰＵＦＡ油（この場合には対照ＰＵＦＡ油又は単に対照油と称される）に対して測定すると、試験ＰＵＦＡ油サンプル間の相対的な好みが観察され得る。例えば、ＰＵＦＡ油サンプルＡ、Ｂ及びＣを試験した場合の嗜好性スコアがそれぞれ５６％、６４％及び７４％であり、全て対照に対するものである場合、サンプルＣは、３つのサンプルの中で最も口当たりが良いと結論付けられ得る。この場合、対照油の同一性は、無関係になる。この方法は、本発明において、嗜好性の改善に対する異なる加工ステップの効果を評価するために使用される。

【0042】

[0042]第１の試験ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアが第２の試験ＰＵＦＡ油より２０％ポイント以上高い場合、第１の試験ＰＵＦＡの嗜好性は、第２の試験ＰＵＦＡ油よりも有意に改善されていると見なされる。例えば、精製、漂白及び脱ろうされた試験ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアが４６％であり、精製、漂白、脱ろう及び脱臭された別の試験ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアが７４％である場合、嗜好性スコアの増加分が３８％であることから、試験ＰＵＦＡ油の嗜好性は、追加の臭気化ステップによって有意に改善されたと見なされる。

【0043】

[0043]ＰＵＦＡ油の収率は、工程開始時の量に対する、１つ又は複数の加工ステップ後に残るＰＵＦＡ油の百分率として定義される。各加工ステップでは、除去するように設計された不純物と共にいくらかの量の油が除去されるため、一般的に、精製工程に加工ステップが追加されると、ＰＵＦＡ油の収率が低下すると予想される。

【0044】

[0044]本発明において、脱臭ステップが、精製、漂白、脱ろうステップのいずれか又は３つのステップの組み合わせよりも、コンパニオンアニマルに対するＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させるのにはるかに効果的であることは、驚くべきことである。脱ガムステップ又は精製ステップのいずれか又は両方のステップを加えることにより、これらの加工ステップ後に粗製油の９０％以上の高収率が達成されることは、さらに驚くべきことである。得られた油は、粗製油の嗜好性スコアよりも少なくとも４５％ポイント嗜好性が向上している。加工油及び粗製油の嗜好性スコアの測定には、共通の対照油サンプルが使用される。

【0045】

[0045]一実施形態では、本発明は、コンパニオンアニマルに対して多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の嗜好性を向上させるための方法であって、ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；ｂ）任意選択的に、ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油をｌ若しくは精製するか、又はそれを脱ガムすることと、精製することとの両方を行うステップと；ｃ）ステップｂ）からのＰＵＦＡ油を脱臭するステップとを含み、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ステップａ）で出発された粗製油の量の８５％以上であり、前記嗜好性は、動物食物嗜好性試験によって測定され、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油よりも少なくとも１０％ポイント以上高い、方法を対象とする。別の実施形態では、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油の量を、ステップａ）で出発された粗製油の量と比較した場合、ＰＵＦＡ油の収率は、８０％以上、８１％以上、８２％以上、８３％以上、８４％以上、８５％以上、８６％以上、８７％以上、８８％以上、８９％以上、９０％以上、９１％以上、９２％以上、９３％以上、９４％以上又は９５％以上である。別の実施形態では、ステップｃ）後に入手されたＰＵＦＡ油の量を、ステップａ）で出発された粗製油の量と比較した場合、ＰＵＦＡ油の収率は、８５％～９９％、８５％～９５％、８７％～９３％、９０％～９５％及び９２％～９５％である。

【0046】

[0046]別の実施形態では、上記の収率レベルでのＰＵＦＡ油の嗜好性スコアの増加は、加工前の粗製油の嗜好性スコアよりも少なくとも１０％ポイント高い、少なくとも１５％ポイント高い、少なくとも２５％ポイント高い、少なくとも３０％ポイント高い、少なくとも３５％ポイント高い、少なくとも４０％ポイント高い、少なくとも４５％ポイント高い、少なくとも５０％ポイント高い、少なくとも５５％ポイント高い、少なくとも６０％ポイント高い又は少なくとも６５％ポイント高い。別の実施形態では、上記の収率レベルでのＰＵＦＡ油の嗜好性スコアの増加は、加工前の粗製油の嗜好性スコアよりも２０％～６５％、３０％～６５％、４０％～６５％、２０％～６５％、３０％～５０％、４０％～５０％、３０％～６０％、４０％～６０％、２０％～３０％、１０％～２０％又は３０％～４０％ポイント高い。

【0047】

[0047]また、本発明において、従来の精製、漂白及び脱ろうのステップ（ＲＢＷＤ油）を、脱臭ステップを残したまま、脱ガムステップ又は短行程蒸発ステップのいずれか又は両方のステップによって置き換えることで、得られる油の収率がＲＢＤＷ油よりも２０％ポイント超高くなることも驚くべきことである。得られた油は、ＲＢＷＤ油の嗜好性スコアよりも少なくとも１０％ポイント嗜好性が向上している。脱臭油及びＲＢＷＤ油の嗜好性スコアの測定には、共通の対照油サンプルが使用される。

【0048】

[0048]一実施形態では、本発明は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の収率を、同じ油であるが、精製、漂白、脱ろう及び脱臭された対照油（ＲＢＷＤ油）よりも増加させる方法であって、ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；ｂ）任意選択的に、前記ＰＵＦＡ油を脱ガム若しくは精製するか、又はそれを脱ガムすることと、精製することとの両方を行うステップと；ｃ）ステップｂ）からのＰＵＦＡ油を脱臭するステップとを含み、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ＲＢＷＤ油の収率よりも３０％ポイント超高い、方法を対象とする。ＲＢＷＤ油の収率は、ステップａ）の粗製油が精製、漂白、脱ろう及び脱臭によって加工された後に残った油の量と、ステップａ）の粗製油の量とのパーセンテージ比として計算される。他の実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油の収率は、ＲＢＷＤ油の収率よりも２５％ポイント超高く、２０％ポイント超高く、１９％ポイント超高く、１８％ポイント超高く、１５％ポイント超高く、１３％ポイント超高く、又は１０％ポイント超高く、５％ポイント超高い。一実施形態では、ステップｃ）後の上記油と対照油との嗜好性スコアは、同じである。一実施形態では、上記油と対照油との嗜好性スコアの差は、１０％以下である。別の実施形態では、嗜好性スコアの差は、９％以下、８％以下、７％以下、６％以下、５％以下、４％以下、３％以下、２％以下又は１％以下である。別の実施形態では、嗜好性スコアの差は、１％～１０％、２％～１０％、３％～１０％、４％～１０％、５％～１０％、６％～１０％、７％～１０％及び４％～７％である。別の実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油は、共通の対照サンプル油が使用される動物嗜好性試験においてＲＢＷＤ油よりも高い嗜好性スコアを有する。別の実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油は、共通の対照サンプル油が使用される動物嗜好性試験においてＲＢＷＤ油よりも１～１０、５～１０又は７～１０％ポイント高い嗜好性スコアを有する。別の実施形態では、ステップｃ）後のＰＵＦＡ油は、ＲＢＷＤ油よりも１％～１０％、２％～１０％、３％～１０％、４％～１０％、５％～１０％、６％～１０％、７％～１０％、４％～７％高い嗜好性スコアを有する。

【0049】

[0049]一実施形態では、上記の目的は、前記油を脱臭装置で処理するステップを含む、ＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させる方法によって達成される。好ましい実施形態では、脱臭装置は、ＶＴＡ脱臭装置である。別の好ましい実施形態では、脱臭装置は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置である。別の実施形態では、上記の方法は、脱ガムステップ及び／又は短行程蒸発ステップをさらに含む。なおも別の好ましい実施形態では、方法は、精製、漂白又は脱ろうのステップのいずれも含まず、したがって加工中のＰＵＦＡ油の収率を著しく向上させ、製造コストを削減させる。脱ガムステップ及びＳＰＥステップでは、油の収率損失は、ほとんどない。精製、漂白及び脱ろうのステップは、著しい収率損失をもたらす。

【0050】

[0050]理論により拘束されることなく、脱臭装置は、メイラード反応化合物を除去し、したがってＰＵＦＡ油の異臭及び異味を除去し、その嗜好性を向上させるのに役立つという仮説が立てられる。また、脱ガムは、後続の脱臭ステップで脱臭装置を詰まらせることもあるリン脂質及び他の化合物などの物質をＰＵＦＡ油から除去するという仮説も立てられる。また、短行程蒸発（ＳＰＥ）ステップは、ＰＵＦＡ油から遊離脂肪酸を除去し、得られたＰＵＦＡ油の酸化が回避されるという仮説も立てられる。本発明において、脱ガム及び精製のステップは、これらのステップの適用が加工される粗製油の品質に依存するため、任意である。出発粗製ＰＵＦＡ油に遊離脂肪酸がほとんど含まれていない場合、精製ステップが省かれ得る。同様に、出発粗製油がリン脂質又は他の不純物をほとんど含まず、したがって油が脱臭装置を詰まらせる可能性が低い場合、脱ガムステップも省かれ得る。

【0051】

[0051]藻類又は魚のいずれかの供給源からＰＵＦＡ油を抽出する工程中に生じる揮発物は、一般的に異臭及び臭気を引き起こすことが知られていた。異臭をもたらす揮発物の例としては、これらに限定されるものではないが、１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール、２，６－ノナジエナールなどの脂質酸化生成物と、トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、エチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドールなどのメイラード反応化合物とが挙げられる。驚くべきことに、本発明において、脂質酸化生成物ではなく、メイラード反応生成物の除去は、ＰＵＦＡ油の嗜好性を著しく向上させ得ることが見出された。脱臭装置は、粗製ＰＵＦＡ油からメイラード反応生成物を除去するのに非常に効果的であり、したがってこれらの油の嗜好性を向上させることが見出されている。

【0052】

[0052]一実施形態では、粗製ＰＵＦＡ油が処理されて、全ての又は実質的に全てのメイラード反応化合物が除去され、得られた油は、粗製ＰＵＦＡ油よりも有意に高い嗜好性スコアを有する。一実施形態では、上記のメイラード反応化合物は、以下のリストに絞り込まれた：トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドール。本発明において、粗製藻類油又は粗製魚油からの上記の７つの化合物の除去は、コンパニオンアニマルに対するこのような油の嗜好性を著しく増加させ得ることが見出されている。さらに、本発明において、ＰＵＦＡ油中の脂質酸化生成物のレベルは、油の嗜好性に有意に影響を及ぼさないことが見出されている。脂質酸化生成物の例としては、これらに限定されるものではないが、１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール及び２，６－ノナジエナールが挙げられる。

【0053】

[0053]一実施形態では、ＰＵＦＡ油の嗜好性は、メイラード反応化合物を粗製ＰＵＦＡ油から検出不可能なレベルまで除去することによって著しく改善される。一実施形態では、メイラード反応化合物及び脂質酸化生成物を検出するための方法は、ＳＰＭＥ－ＧＣＭＳ分析方法である。別の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、ＰＵＦＡ油中のメイラード反応化合物のレベルを１０ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物に低減することによって著しく改善される。別の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、ＰＵＦＡ油中のメイラード反応化合物のレベルを１０ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物に低減することによって著しく改善される一方、ＰＵＦＡ油中の脂質酸化生成物は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１．５ｐｐｂを超えるレベルである。別の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルを１ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物に低減することによって著しく改善される。別の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルを０．５ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物に低減することによって著しく改善される。別の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルを０．３ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物に低減することによって著しく改善される。他の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルを５００ｐｐｂ未満、２００ｐｐｂ未満、１００ｐｐｂ未満、５０ｐｐｂ未満、２０ｐｐｂ未満、５ｐｐｂ未満、２ｐｐｂ未満、０．２ｐｐｂ未満、０．１ｐｐｂ未満に低減することによって著しく改善される。他の実施形態では、ヒト及びペットに対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルを５００～０．１ｐｐｂ、２００～０．１、１００～０．１、５０～０．１、１０～０．１、２～０．１、１～０．１、２０～１、１０～１に低減することによって著しく改善される。

【0054】

[0054]本出願で言及されるメイラード反応化合物及び脂質酸化生成物のレベルの数値（ｐｐｂ単位）は、個々のメイラード反応化合物及び脂質酸化生成物のレベルとして特に言及されない限り、ＰＵＦＡ油中で検出されたメイラード反応化合物及び脂質酸化生成物の総量である。

【0055】

[0055]別の実施形態では、ヒト及びペット動物に対するＰＵＦＡ油の嗜好性は、ＰＵＦＡ油のメイラード反応化合物のレベルを１０ｐｐｂ未満に低減することによって著しく改善される一方、ＰＵＦＡ油は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１．５ｐｐｂを超える１つ又は複数の脂質酸化生成物を含む。一実施形態では、脂質酸化生成物は、１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール及び２，６－ノナジエナールからなる群から選択される。他の実施形態では、ＰＵＦＡ油中の脂質酸化生成物は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１ｐｐｂ超、２ｐｐｂ超、３ｐｐｂ超、４ｐｐｂ超又は５ｐｐｂ超、２０ｐｐｂ超、５０ｐｐｂ超又は１００ｐｐｂ超のレベルである。他の実施形態では、ＰＵＦＡ油中の脂質酸化生成物は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１００～１ｐｐｂ、５０～１ｐｐｂ、２０～１ｐｐｂ及び１５～１ｐｐｂのレベルである。他の実施形態では、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルは、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、５００ｐｐｂ未満、２００ｐｐｂ未満、１００ｐｐｂ未満、５０ｐｐｂ未満、２０ｐｐｂ未満、５ｐｐｂ未満、２ｐｐｂ未満、０．２ｐｐｂ未満、０．１ｐｐｂ未満である。

【0056】

[0056]別の実施形態では、ＰＵＦＡ油の嗜好性は、粗製ＰＵＦＡ油から、メイラード反応化合物を低レベル又は検出不可能なレベルまで除去するだけでなく、全て又は実質的に全ての遊離脂肪酸も除去することによって著しく改善される。別の実施形態では、ＰＵＦＡ油の嗜好性は、粗製ＰＵＦＡ油から、メイラード反応化合物を低レベル又は検出不可能なレベルまで除去するだけでなく、全ての又は実質的に全てのリン脂質とカチオンも除去することによって著しく改善される。別の実施形態では、粗製油が処理されて、メイラード反応化合物、遊離脂肪酸、リン脂質及びカチオンの全て又は実質的に全てが除去される。一実施形態では、ＰＵＦＡ油から遊離脂肪酸が油の０．１重量％未満のレベルまで除去される。いくつかの実施形態では、粗製油中のメイラード反応化合物のレベルは、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、５００ｐｐｂ未満、２００ｐｐｂ未満、１００ｐｐｂ未満、５０ｐｐｂ未満、２０ｐｐｂ未満、５ｐｐｂ未満、２ｐｐｂ未満、０．２ｐｐｂ未満、０．１ｐｐｂ未満である。一実施形態では、ＰＵＦＡ油から遊離脂肪酸が油の１重量％～０．０１重量％のレベルまで除去される。別の実施形態では、ＰＵＦＡ油から遊離脂肪酸が油の０．０１重量％未満のレベルまで除去される。一実施形態では、ＰＵＦＡ油からリン脂質が油の０．１重量％未満のレベルまで除去される。一実施形態では、ＰＵＦＡ油からリン脂質が油の１重量％～０．０１重量％のレベルまで除去される。別の実施形態では、ＰＵＦＡ油からリン脂質が油の０．０１重量％未満のレベルまで除去される。一実施形態では、ＰＵＦＡ油からカチオンが油の０．１重量％未満のレベルまで除去される。別の実施形態では、ＰＵＦＡ油からカチオンが油の０．０１重量％未満のレベルまで除去される。一実施形態では、ＰＵＦＡ油からカチオンが油の１重量％～０．０１重量％のレベルまで除去される。

【0057】

[0057]ＰＵＦＡ油が脱臭装置によって処理される、ＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させるための方法も本明細書で開示される。一実施形態では、脱臭装置は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置である。別の実施形態では、脱臭装置は、ＶＴＡ脱臭装置である。さらに別の実施形態では、脱臭装置は、メイラード反応化合物を効果的に除去し得る任意のタイプの装置であり得る。なおも別の実施形態では、脱臭装置は、以下を含むメイラード反応化合物のリストを効果的に除去し得る任意のタイプの装置であり得る：トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドール。ＰＵＦＡ油が短行程蒸発器によって処理される、ＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させるための方法も本明細書で開示される。ＰＵＦＡ油が脱ガム工程によって処理される、ＰＵＦＡ油の嗜好性を向上させるための方法もさらに本明細書で開示される。

【0058】

[0058]一般的に、ＰＵＦＡ含有ペットフードは、ペットフードの成分をＰＵＦＡ油又はＰＵＦＡ粉末と混合することによって製造される。同様に、ヒトが消費するためのＰＵＦＡ含有食品は、ヒト用食品成分をＰＵＦＡ油又はＰＵＦＡ粉末と混合することによって製造される。本発明は、ペットフードの成分を上記の脱臭ＰＵＦＡ油と混合することにより、嗜好性が向上されたペットフードを提供する。本発明は、ヒト用食品の成分を上記の脱臭ＰＵＦＡ油と混合することにより、嗜好性が向上されたヒト用食品も提供する。本発明は、ヒト栄養補給剤の成分を上記の脱臭ＰＵＦＡ油と混合することにより、嗜好性が向上されたヒト栄養補給剤組成物も提供する。

【0059】

[0059]本明細書に記載のＰＵＦＡ油は、ＰＵＦＡを含む油を指す。一実施形態では、本明細書に記載のＰＵＦＡ油は、かなりの量のＰＵＦＡを含む油を指す。いくつかの実施形態では、油は、重量比で少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５％、少なくとも６０％、少なくとも７０％又は少なくとも８０％のＰＵＦＡを含む。このようなＰＵＦＡ油中のＰＵＦＡ源は、魚又は微生物のいずれかに由来し得る。いくつかの実施形態では、微生物は、藻類、細菌、真菌、酵母、原生生物である。かなりの量のＰＵＦＡが微生物に由来する場合、それは、微生物油と称される。かなりの量のＰＵＦＡが微細藻類に由来する場合、それは、微細藻類油と称される。かなりの量のＰＵＦＡが魚に由来する場合、それは、魚油と称される。

【0060】

[0060]多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、脂肪酸のメチル末端からの最初の二重結合の位置に基づいて分類され；ω－３（ｎ－３）脂肪酸は、３番目の炭素に最初の二重結合を含有し、ω－６（ｎ－６）脂肪酸は、６番目の炭素に最初の二重結合を含有する。例えば、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）は、２２個の炭素及び６個の二重結合の鎖長を有するω－３長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣ－ＰＵＦＡ）であり、多くの場合、「２２：６ｎ－３」と称される。一実施形態では、ＰＵＦＡは、ω－３脂肪酸、ω－６脂肪酸及びそれらの混合物から選択される。別の実施形態では、ＰＵＦＡは、ＬＣ－ＰＵＦＡから選択される。なおもさらなる実施形態では、ＰＵＦＡは、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、アラキドン酸酸（ＡＲＡ）、γ－リノレン酸（ＧＬＡ）、ジホモ－γ－リノレン酸（ＤＧＬＡ）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）及びそれらの混合物から選択される。別の実施形態では、ＰＵＦＡは、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ＤＰＡ、ＡＲＡ及びそれらの混合物から選択される。さらなる実施形態では、ＰＵＦＡは、ＤＨＡである。なおもさらなる実施形態では、ＰＵＦＡは、ＥＰＡである。なおもさらなる実施形態では、ＰＵＦＡは、ＡＲＡである。

【0061】

[0061]ＰＵＦＡは、遊離脂肪酸、塩、脂肪酸エステル（例えば、メチル又はエチルエステル）、モノアシルグリセロール（ＭＡＧ）、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）、トリアシルグリセロール（タグ）及び／又はリン脂質（ＰＬ）の形態であり得る。

【0062】

[0062]遊離脂肪酸は、トリアシルグリセリド主鎖から失われた又は油分子から分離した多価不飽和脂肪酸である。ＰＵＦＡ油中の遊離脂肪酸の減少は、長期的に酸化を減少させ、したがってＰＵＦＡ油の貯蔵寿命を延長することが期待される。

【0063】

[0063]粗製微生物ＰＵＦＡ油は、通常、微生物細胞から抽出される。本明細書の用法では、「細胞」は、油性微生物に由来する生体材料などの含油生体材料を指す。一実施形態では、粗製微生物油は、さらなる処理なしに微生物のバイオマスから抽出された粗製油を指す。粗製微生物油は、通常、ペットフード及びヒト用食品で使用される前に処理される。

【0064】

[0064]本明細書の用法では、「微生物細胞」又は「微生物」は、例えば、単細胞生物など、藻類、細菌、真菌、酵母、原生生物及びそれらの組み合わせなどの生物を指す。いくつかの実施形態では、微生物細胞は、真核細胞である。微生物細胞としては、これらに限定されるものではないが、黄金藻類（例えば、ストラメノパイル界の微生物）；緑藻；珪藻；渦鞭毛藻類（例えば、クリプテコジニウム・コーニイ（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）又はＣ．コーニイ（Ｃ．ｃｏｈｎｉｉ）などの クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ）属のメンバーをはじめとする渦鞭藻綱群目の微生物）；トラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）群目の微細藻類；酵母（子嚢菌類（Ａｓｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）又は担子菌類（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅｓ））；及びケカビ属（Ｍｕｃｏｒ）；これらに限定されるものではないが、モルティエラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）及びモルティエラ節のモルティエラ・シュムッケリ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｅｃｔ．ｓｃｈｍｕｃｋｅｒｉ）をはじめとするモルティエラ属（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）；及びこれらに限定されるものではないが、ピシウム・インシジオスム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｉｎｓｉｄｉｏｓｕｍ）をはじめとするピシウム属（Ｐｙｔｈｉｕｍ）の真菌が挙げられる。

【0065】

[0065]一実施形態では、微生物細胞は、モルティエラ属（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、クリプテコジニウム（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ）属又はトラウストキトリアレス（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉａｌｅｓ）群目に由来する。なおもさらなる実施形態では、微生物細胞は、クリプテコジニウム・コーニイ（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）に由来する。なおもさらなる実施形態では、微生物細胞は、クリプテコジニウム・コーニイ（Ｃｒｙｐｔｈｅｃｏｄｉｎｉｕｍ ｃｏｈｎｉｉ）、モルティエラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）、オーランチオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、スラウストキトリウム属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）及びそれらの混合物から選択される。

【0066】

[0066]粗製魚油は、通常、さらなる処理なしに魚から抽出される。一実施形態では、このような魚は、イワシ、カタクチイワシ、サバ及び／又はマグロであり得る。粗製魚油は、通常、ペットフード及びヒト用食品で使用される前に処理される。

【0067】

[0067]植物油は、通常、植物の種子から抽出される。油産生植物の例としては、キャノーラ、大豆、ヒマワリ、亜麻及びカメリナが挙げられる。いくつかの実施形態では、本発明において言及される植物は、ＰＵＦＡ油を産生するように遺伝子改変された植物である。

【0068】

[0068]本明細書の用法では、「コンパニオンアニマル」は、肉体的、感情的、行動的及び社会的ニーズが家庭内のコンパニオンとして又はヒトとの密接な日常関係において容易に満たされ得る、家畜化されるか又は飼いならされた動物を指す。コンパニオンアニマルの例は、犬、猫、モルモット、ウサギ、ラット、マウス又は馬である。これは、本出願において、「ペット」又は「ペット動物」という用語と同義的に使用される。

【0069】

[0069]本出願で使用される「処理ＰＵＦＡ油」若しくは「加工ＰＵＦＡ油」又は単に「処理油」若しくは「加工油」は、粗製ＰＵＦＡ油から加工されたＰＵＦＡ油を指す。一実施形態では、このような処理は、精製、漂白、脱ろう、脱臭、脱ガム又は短行程蒸発の１つ又は複数のステップを含む。一実施形態では、このような処理は、脱臭ステップのみを含む。

【0070】

[0070]本発明の処理ＰＵＦＡ油は、ドライペットフード又は動物用食品などのベースペットフード製品に配合され得る。本意図のペットフード組成物には、様々な湿性、油性、粉末又は粒状のフレーバー添加剤組成物が含まれる。一実施形態では、処理ＰＵＦＡ油は、製造工程の一部としてペットフードに組み込まれ得る。

【0071】

[0071]本方法では、ペットフード製品は、微生物又は魚からの処理ＰＵＦＡ油を含む。

【0072】

[0072]本発明は、本発明の微生物油のいずれかを含む、非ヒト動物又はヒトのための食品組成物を対象とする。いくつかの実施形態では、食品は、非ヒト動物又はヒト用食品のための添加剤である。いくつかの実施形態では、食品は、栄養補給剤である。いくつかの実施形態では、食品は、動物飼料である。いくつかの実施形態では、動物飼料は、ペットフードである。

【0073】

［実施例］
［実施例１］
［ＰＵＦＡ油サンプル及び加工方法］
[0073]本発明で使用した粗製藻類油は、さらなる処理なしにスキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣＰＴＡ－１０２０８のバイオマスから抽出した。このタイプの粗製藻類油の異なるバッチを製造し、本発明で使用した。

【0074】

［精製工程］
[0074]上記の粗製藻類油を後述の精製ステップの１つ又は複数で加工した。

【0075】

［精製］
[0075]この精製ステップでは、粗製藻類ＰＵＦＡ油を窒素下で５０～５５℃に加熱した。次に、約２％のリン酸を添加し、次に１５分間混合した。粗製藻類油中の粗製遊離脂肪酸（粗製ＦＦＡ）の量に基づいて、苛性／Ｈ_２Ｏ溶液を作るための５０％苛性溶液と軟水の量を以下の式を用いて計算した。リン酸の中和を補償するために、過剰な腐食性因子を増加させた。

【0076】

[0076]５０％苛性＝［（０．１４２×粗製ＦＦＡ）＋３．７］×粗製藻類ＰＵＦＡ油重量（ｋｇ）／５０

【0077】

[0077]Ｈ_２Ｏ＝０．０５×粗製藻類ＰＵＦＡ油重量（ｋｇ）

【0078】

[0078]苛性／Ｈ_２Ｏ溶液を藻類油／リン酸混合物に添加し、３０分間保持した。２．５％鹹水溶液及び２．５％Ｈ_２Ｏを添加した。その後、得られた溶液を８０～８５℃に加熱し、次に遠心分離した。得られた油を単離し、嗜好性を試験するか又は追加的なステップでさらに加工した。

【0079】

［漂白］
[0079]窒素下において、精製ステップなどの先行する加工ステップからの藻類ＰＵＦＡ油を５０～５５℃に加熱した。０．２５～１．４％のＴｒｉｓｙｌ（登録商標）（米国のＷＲ Ｇｒａｃｅ Ｃｏ．による製造）ベースの石鹸を加熱した溶液に添加し、溶液を１５分間保った。２％のＦ－７２ＦＦタイプの漂白土を真空下で添加した。油を９０～９５℃に加熱し、油が設定点に達したら６０分間保持した。保持後、残りの油を、垂直葉状濾過器（ＶＬＦ）を使用して９１～９５℃で濾過した。得られた油を単離し、嗜好性を試験するか又は追加的なステップでさらに加工した。

【0080】

［脱ろう］
[0080]漂白ステップなどの先行する加工ステップからの藻類ＰＵＦＡ油が４５℃未満であれば、６０℃に加熱した。次に、油を１９℃又は７℃に冷却し、その温度で４時間保持した。次に、１％のＣｅｌｐｕｒｅ（登録商標）を添加し（米国のＩｍｅｒｙｓ Ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ Ｍｉｎｅｒａｌｓ Ｉｎｃ．からの濾過助剤）、油を１５分間混合した。このステップで使用されるフィルターは、メンブレンフィルタープレスである。得られた油を単離し、嗜好性を試験するか又は追加的なステップでさらに加工した。

【0081】

［脱ガム］
[0081]窒素下において、先行する加工ステップからの藻類ＰＵＦＡ油を９０～９５℃に加熱した。３％のクエン酸（５０％溶液）及び１０％のＨ_２Ｏを添加し、４時間混合した。保持時間が完了した後、油溶液をさらに４時間デカントした。脱ガム油重量の１０％の水で油を洗浄した。４時間混合し、４時間デカントする。水分が０．５％未満になるまで、５０～６０℃で真空及び窒素下で油を乾燥させる。このステップで使用されるフィルターは、メンブレンフィルタープレスである。得られた油を単離し、嗜好性を試験するか又は追加的なステップでさらに加工した。

【0082】

［短行程蒸発］
[0082]短行程蒸発又はＳＰＥは、特定タイプの精製である。これは、米国のＬＣＩ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから購入した市販の短行程蒸発器内で実施した。

【0083】

[0083]この短行程蒸発器内では、ローターケージアセンブリが内部凝縮器を囲み、適度な速度で回転する。供給物は、装置上部のノズルを通して供給され、ローターブレードを介してシェルの内面上に薄膜として広げられる。

【0084】

[0084]ケージタイプの構造及び内部凝縮器の位置により、短い蒸気流路又は「短行程」が形成される。動作圧力は、比較で０．１ｍｂａｒに設定した。加熱媒体温度は、２４０℃に設定した。流量は、１３Ｌ／時であった。

【0085】

[0085]留出物及び残留液体濃縮液は、ユニットの下部にある別個の出口から排出された。得られた油を単離し、嗜好性を試験するか又は追加的なステップでさらに加工した。

【0086】

［脱臭］
[0086]脱臭は、以下の表１に示すように、ＶＴＡ脱臭装置又はＤｅＳｍｅｔ脱臭装置内において連続条件又はバッチ条件のいずれかで実行した。

【0087】

【表1】

【0088】

[0087]ＶＴＡ脱臭装置は、独国のＶＴＡ Ｖｅｒｆａｈｒｅｎｓｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅ Ａｎｌａｇｅｎ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧによって製造された。ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置剤は、ベルギー国のＤｅｓｍｅｔ Ｂａｌｌｅｓｔｒａ Ｇｒｏｕｐによって製造された。脱臭加工は、製造が指定した条件で実行した。

【0089】

[0088]得られた油を脱臭装置から収集し、嗜好性について試験した。

【0090】

［実施例２］
［ペットフード嗜好性動物試験］
[0089]飼い犬及び飼い猫などのペットは、栄養要件が異なり、多くの味覚的要因に敏感である。ここで使用された動物食物嗜好性試験は、試験された動物によるＰＵＦＡ含有食品の好みを特定するように設計された。

【0091】

[0090]選好性試験では、動物は、同時に提示される２つの異なる食餌を選択する。これは、２ボウル試験とも称される。この２ボウル試験では、同時に提示された２つの食品が、定義された期間内にどの程度食べられたかを比較する。これは、犬及び猫の嗜好性評価研究の専門家パネルで使用される最も一般的な試験である。これは、２つの製品を比較し、消費量の違いに基づいて好みを確立する。このような試験では、２つの同一のボウルが試験動物に同時に配送され、各ボウルには、試験される２つの製品（Ａ又はＢ）の１つが含まれていた。動物は、事前に設定された期間、ボウルに自由にアクセスできる。各ボウル内の利用できる量は、エネルギー要件をカバーするのに十分すぎるほどである。給餌時間の終了時又は１つのボウルが空になったら、ボウルを回収し、再度計量して消費量を測定した。

【0092】

[0091]本発明で実施された２ボウル試験毎に合計３０匹の犬が登録された。各試験は、２日間続いた。試験では、食餌Ａと食餌Ｂとの２つの食餌を調製した。食餌Ａは、試験ＰＵＦＡ油サンプルを混合したＫｉｂｂｌｅブランドのペットフードである。食餌Ｂは、対照ＰＵＦＡ油サンプルを混合した同一のＫｉｂｂｌｅブランドのペットフードである。Ｋｉｂｂｌｅブランドのペットフードは、試験を実施する動物種に応じて、ドッグフード又はキャットフードのいずれでもあり得る。試験では、各犬又は猫の各食餌Ａ及びＢの１日の平均消費量を測定した。２日間にわたって３０匹の犬のそれぞれによって消費された食餌Ａ及び食餌Ｂの量を測定した。３０匹の犬のそれぞれについて、食餌Ａと食餌Ｂとの間の個別摂取量比を計算した。各食餌Ａ及びＢの３０の個別摂取量比の平均を計算し、２つの食餌の１つの嗜好性の優位性の指標として使用した。

【0093】

[0092]上記と同じプロトコルに従い、猫に対して同じ２ボウル試験を実施した。各食餌Ａ及びＢの個別摂取量比の平均を計算し、２つの食餌の１つの嗜好性の優位性の指標として使用した。

【0094】

［実施例３］
[0093]ＰＵＦＡ油精製工程における各ステップの影響を特定するために、実施例１に記載される精製、漂白、脱ろう及び脱臭の１つ又は複数のステップで処理された藻類油サンプルを収集した。これらの油サンプルの嗜好性は、実施例２に記載された試験プロトコルを使用して測定した。試験サンプルには、実施例１に記載された未加工の粗製藻類油並びに精製、及び／又は漂白、及び／又は脱ろうされた油が含まれる。

【0095】

[0094]市販の魚油サンプルは、ペットフード製造業者から購入され、「ＲＣ魚油」と標識した。この油は、購入前に製造によって精製、漂白及び脱臭された。

【0096】

[0095]「ＲＣ魚油」を対照油として使用し、上記の試験油サンプルと比較した。試験結果を表２に要約する。

【0097】

【表2】

【0098】

[0096]表２のデータは、例えば、粗製藻類油に対する２２．９％（対照油サンプルＲＣ魚油と比較した場合）から、精製後の２６．８％、精製及び漂白の両方後の３１．８％、精製、漂白及び脱ろう後の４６．４％への摂取量比など、未加工の粗製藻類油が精製、漂白、脱ろうされたが、依然として脱臭されていない場合、油の嗜好性の改善が漸進的であることを示す。対照油サンプルＲＣ魚油は、依然として、精製、漂白及び脱ろうの各ステップで３回加工された試験サンプルよりも試験中の犬に好まれている。しかし、脱臭の追加のステップを実行すると、油の嗜好性スコアは、４６．４％から７４％に２７．６％ポイント増加した。この増加は、精製、漂白及び脱ろうの３つのステップの全てを合わせた２３．５％ポイントよりも高い。これは、藻類ＰＵＦＡ油の嗜好性を改善する上で脱臭ステップが精製、漂白、脱ろうステップよりもはるかに効果的であることを示す。

【0099】

［実施例４］
[0097]次の実験では、各処理ステップによる収率損を調べ、処理ステップの最適な組み合わせを特定した。

【0100】

[0098]精製、漂白、脱ろう及び脱臭ステップの１つ又は複数の加工ステップを精製工程に追加した後、粗製藻類ＰＵＦＡ油の収率を調べた。さらに、他の２つの加工ステップ（脱ガムステップ及び短行程蒸発（ＳＰＥ）ステップ）を実行した後の油の収率も調べた。上記の加工油の嗜好性スコアを測定し、比較した。油加工は、実施例１に記載される方法に基づいて実施した。嗜好性試験は、対照油としてＲＣ魚油を使用して、実施例２に記載されるように実施した。実施例で使用される粗製藻類油は、実施例１に記載されているような未加工の粗製藻類油である。試験結果を表３に要約する。

【0101】

【表3】

【0102】

[0001]試験結果は、粗製藻類油の精製において、精製、漂白及び脱ろうなどの一般的な油加工ステップを使用した場合、元の粗製藻類油の最大２５．５％が工程全体を通して失われることを示した（実験番号１）。脱ろうステップなどの加工ステップの１つ又は複数を除去すると、油の収率は、改善するが、油の嗜好性は、悪化する（実験番号２）。しかし、脱臭ステップを維持したまま、精製、漂白及び脱ろうの３つのステップの全てを脱ガムステップ及び／又はＳＰＥステップで置き換えた場合、９０％を超える収率が達成される一方、ＲＢＷＤ油と同等以上の嗜好性スコアが維持された（実験番号７～１０）。驚くべきことに、脱ガム、ＳＰＥ及び脱臭された油の収率は、９２．２％（実験番号９）であり、ＲＢＷＤ油の７４．５％の収率（実験番号１）から約２４％増加していることが分かった。この油の嗜好性は、７３．２％（実験番号９）であり、ＲＢＷＤ油の６３．６％の嗜好性スコア（実験番号１）よりも９％超高い。

【0103】

［実施例５］
［ＰＵＦＡ油サンプル中の揮発物のＳＰＭＥ－ＧＣＭＳ分析］
[0002]脱臭工程によって藻類のＰＵＦＡ油サンプルから除去され、したがって嗜好性の改善を引き起こしたとされる化合物を特定し定量化するために、ヘプタン酸エチルを内標準として使用して、ＳＰＭＥ－ＧＣＭＳ分析を実施した。その結果、藻類ＰＵＦＡ油又は魚ＰＵＦＡ油の臭気に関連する特定の揮発物について、およそ１０億分の１（ｐｐｂ）の濃度が特定された。

【0104】

[0003]粗製魚ＰＵＦＡ油及び粗製藻類ＰＵＦＡ油中で一般的に検出される１０種類の揮発物の一覧を表４に記載する。１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール及び２，６－ノナジエナールなどの脂質酸化生成物は、粗製魚油中に一般的に見られ、不快な風味を引き起こす。表４のメイラード反応生成物は、水抽出された藻類油に一般的に見られ、不快な風味を引き起こす。ＰＵＦＡ油サンプル中の９個の脂質酸化生成物及びメイラード反応生成物の量を定量化するために、内標準としてヘプタン酸エチルの１１番目のサンプルを対象揮発物リストに追加した。

【0105】

【表4】

【0106】

[0004]表４の１０種類の揮発物について、粗製の又は精製された１０個の藻類ＰＵＦＡ油及び魚ＰＵＦＡ油のサンプルを分析した。１０個のＰＵＦＡ油サンプルのそれぞれを二連で試験した。各反復試験では、３ｇの油を２０ｍＬのヘッドスペースバイアルに入れ、ミグリオール中の１２３ｐｐｂの０．０５ｇのヘプタン酸エチルの内標準溶液を加えた。サンプルをボルテックス処理して徹底的に混合し、各油サンプル中の最終的な内標準濃度は、約２ｐｐｂであった。サンプル及び内標準の重量は、各反復試験について正確に記録した。２ｃｍのマニュアルＳＰＭＥ「トリプルフェーズ」ファイバー（ＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）／カルボキシン／ＤＶＢ（ジビニルベンゼン））をバイアル内で２分間の平衡化後、７５℃で３０分間露光した。使用した装置及び方法は、ＧＣＯ装置であるが、質量分析データのみを記録した。測定された揮発物を表４に列挙する。

【0107】

[0005]イオンピーク面積、記録されたサンプル及び内標準の重量及び内標準の濃度を使用して、対象の各揮発物のおよその濃度を計算した（式１を参照されたい）。これは、ヘプタン酸エチルの内標準に対する同等の応答を前提としている。したがって、これらのおよその濃度は、ヘプタン酸エチルとしてｐｐｂ（１０億分の１）で報告される。
式１：
濃度（ｐｐｂ）揮発物＝揮発物イオンピーク面積／イオンピーク面積ＩＳ^＊サンプル中のＩＳ濃度
式中、イオンピーク面積ＩＳ＝ヘプタン酸エチルの８８ｍ／ｚイオンのピーク面積であり、及び
揮発物イオンピーク面積＝各対象揮発物の選択されたイオンのピーク面積であり（表１に列挙される）、及び
サンプル中の濃度ＩＳ＝濃度ＩＳスパイク（１２３ｐｐｂ）^＊ＩＳスパイク重量／（サンプル重量＋ＩＳスパイク重量）である。

【0108】

[0006]各揮発性物質及び各サンプルのｐｐｂ（ヘプタン酸エチルとして）の平均濃度を、既知の場合には嗜好性データと共に以下の表５に示す。いくつかのピークが０．１ｐｐｂまで測定された一方、他のピークは、検出されたが、さらに低いレベルで確実に定量化できなかったため、＜０．１ｐｐｂとして報告する。検出限界（ヘプタン酸エチルとして０．０１ｐｐｂ）を下回るピークは、検出されず（ｎｄ）と標識した。

【0109】

[0007]「藻類油サンプル１粗製」サンプルは、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１０２０８から抽出された未加工の粗製藻類油を指す。

【0110】

[0008]「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ＶＴＡ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「藻類油サンプル１粗製」が精製、漂白、脱ろう及びＶＴＡ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0111】

[0009]「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｍｅｔ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「藻類油サンプル２粗製」が精製、漂白、脱ろう及びＤｅＳｍｅｔ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0112】

[0010]「藻類油サンプル１ ＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｍｅｔ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「藻類油サンプル１粗製」が漂白、脱ろう及びＤｅＳｍｅｔ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0113】

[0011]「藻類油サンプル２ ＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｍｅｔ」サンプルは、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１０２０８から抽出された未加工の粗製藻類油の第２のサンプルが漂白、脱ろう及びＤｅＳｍｅｔ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0114】

[0012]２ボウル食物嗜好性試験では、上記の５つの藻類油サンプルの対照油サンプルとしてＲＣ魚油を使用した。

【0115】

[0013]市販の魚油サンプルは、Ｏｃｅａｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｃｏｒｐ．から購入し、「魚油サンプル３」と標識した。この油を精製、漂白、脱臭した。この油は、２ボウル食物嗜好性試験の「魚油サンプル３ ＲＢＷＤ」の対照油サンプルとして使用した。

【0116】

[0014]「魚油サンプル３ ＲＢＷＤ」サンプルは、「魚油サンプル３」が精製、漂白、脱ろう及びＤｅＳｍｅｔ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0117】

[0015]「藻類油サンプル４粗製」サンプルは、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１０２０８から抽出された未加工の粗製藻類油を指す。

【0118】

[0016]「藻類油サンプル４ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｍｅｔ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「藻類油サンプル４粗製」が精製、漂白、脱ろう及びＤｅＳｍｅｔ脱臭装置によって脱臭された後に続く油を指す。

【0119】

[0017]粗製藻類油サンプル１、２及び４は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１０２０８から抽出された粗製藻類油の別々のバッチからのものである。

【0120】

[0018]表５に示すように、粗製油は、魚油と藻類油との両方について、それらの対応する脱臭油と明らかに異なる。脱臭により、それらの粗製状態と比較して全ての揮発物のおよその濃度がいくらか低下した。「藻類油サンプル１粗製」藻類油、「藻類油サンプル４粗製」藻類油で示されるような粗製藻類油は、「藻類油サンプル２ ＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」藻類油及び「藻類油サンプル４ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」藻類油などのそれらの脱臭された相当物に比べて、メイラード反応生成物の濃度がはるかにより高い。ピラジンの濃度は、濃度が数百～数千ｐｐｂ（ヘプタン酸エチルとして）に達する場合、特に高い。脱臭油では、これらのピラジンは、検出されないか又は０．３ｐｐｂ未満で検出される（ヘプタン酸エチルとして）。他のメイラード反応生成物も、粗製藻類油中で有意に高濃度（１０～１００ｐｐｂの範囲）である一方、ほとんどの脱臭油で検出されない。

【0121】

[0019]脱臭藻類油は、粗製藻類油と比較して、ほとんどの化合物ではるかにより小さいピークを示し、メイラード反応生成物の多くが脱臭後にもはや検出されなくなった。脱臭藻類油サンプル中において、ＶＴＡ脱臭を使用した場合（「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ＶＴＡ」）、Ｄｅｓｍｅｔ脱臭を使用した場合（「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」）と比較してメイラード反応生成物のピークの検出数が少なく、いくつかの脂質酸化生成物のレベルが低いなど、さらなる改善を示す。このデータに基づき、検出された目標揮性質が少なくなると、食味評価が改善（増加）する傾向がある。

【0122】

[0020]脂質酸化生成物は、粗製油と比較して、脱臭油中において低濃度で検出されたが、脂質酸化生成物の全体的な濃度範囲は、比較的低く（＜０．３ｐｐｂ～約２０ｐｐｂの範囲）、ほとんど脱臭によって完全に除去されなかった。各サンプルの上記揮発物のピーク面積は、上記の条件下で測定した。

【0123】

[0021]各揮発性物質の臭気への影響は、その濃度だけでなく、化合物ごとに異なる臭気閾値にも依存する。したがって、匂いの改善を判断するには、各化合物の相対的なピークサイズの変化及びそれが嗜好性の結果にどのように関連しているかを考慮する必要がある。このデータから、脱臭は、比較的高濃度のメイラード反応生成物を辛うじて検出可能なレベルまで１００～１０００倍減少させる劇的な効果を有し、嗜好性結果に対するより劇的な効果に対応することが観察された。脱臭サンプルは、同様のレベルの脂質酸化生成物が存在する場合さえも、メイラード反応生成物のさらなる減少は、嗜好性結果の対応する改善を実証することを示す（すなわちサンプル「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」をサンプル「藻類油サンプル１ ＲＢＷＤ ｄｅｏ ＶＴＡ」と比較して又はサンプル「藻類油サンプル１ ＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」を「藻類油サンプル２ ＢＷＤ ｄｅｏ ｄｅｓｍｅｔ」を比較して）。

【0124】

[0022]サンプル「魚油サンプル３」は、「魚油サンプル３ ＲＢＷＤ」の対照である。いずれの魚油サンプルも脱臭されており、したがってメイラード反応生成物が少ない。しかし、サンプル「魚油サンプル３ ＲＢＷＤ」は、ＶＴＡ脱臭装置を使用して脱臭したため、メイラード反応生成物の濃度がさらに低い。サンプル「魚油サンプル３ ＲＢＷＤ」は、ＶＴＡ脱臭装置を使用した場合、すでに脱臭された「魚油サンプル３」よりも嗜好性スコアが改善された。

【0125】

[0023]サンプル「藻類油サンプル４粗製」は、２ボウル試験における「藻類油サンプル４粗製」の対照である。「藻類油サンプル４粗製」は、メイラード反応生成物が多いことをもう一度示した粗製藻類油の別のバッチである。粗製藻類油は、精製、漂白、脱ろう及び脱臭の各ステップで加工された後、メイラード反応生成物が少なく、対照サンプルよりも嗜好性が向上していた。

【0126】

【表5】

【0127】

［実施例６］
［精製藻類ＰＵＦＡ油サンプルのヒト官能評価］
[0024]脱臭された又は脱臭されていない藻類ＰＵＦＡ油のヒトの知覚を識別するために、このような油の記述的知覚プロファイルを得て、測定した。

【0128】

[0025]「１０９９粗製」は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）株ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１０２０８から抽出された未加工粗製藻類油である。これは、精製、漂白、冷却濾過及び脱臭の出発油として使用した。２ボウル嗜好性試験の対照油には、実施例３で言及された「ＲＣ魚油」を使用した。

【0129】

[0026]「１０９９精製」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」を精製した後に続くが、漂白、脱ろう又は脱臭されていない油を指す。

【0130】

[0027]「１０９９漂白」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」を漂白した後に続くが、精製、脱ろう又は脱臭されていない油を指す。

【0131】

[0028]「１０９９Ａ冷却濾過」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」を７℃でビル濾過した後に続くが、精製、漂白、脱ろう又は脱臭されていない油を指す。

【0132】

[0029]「１０９９Ｂ冷却濾過」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」を１９℃でビル濾過した後に続くが、精製、漂白、脱ろう又は脱臭されていない油を指す。

【0133】

[0030]「１０９９Ａ Ｄｅｏｄ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」をＶＴＡ脱臭装置によって脱臭し、精製、漂白及び７℃で脱ろうした後に続く油を指す。

【0134】

[0031]「１０９９Ｂ Ｄｅｏｄ」サンプルは、粗製藻類油サンプル「１０９９粗製」をＶＴＡ脱臭装置によって脱臭し、精製、漂白及び１９℃で脱ろうした後に続く油を指す。

【0135】

[0032]焦げ、生臭い複合体、青臭い複合体、肉のタンパク質、腐敗臭、化学物質／溶剤、モルト臭／穀物臭、卵の複合体、スカンク、ココア、ペンキ様の不快な臭いをはじめとする多くのヒトの感覚特性を調べて測定した。上記の５つの油サンプルのそれぞれについて、対応する嗜好性試験も実施し、「ＲＣ魚油」を参照食餌として使用した。

【0136】

[0033]実験の結果を図１に示す。

【0137】

[0034]脱臭藻類油は、最も低い不快臭の強度を示す。比較すると、未脱臭藻類油は、全て少なくとも５倍又はさらに高い強度の不快臭を示している。このような違いは、脱臭藻類油及び脱臭されていない藻類油の嗜好性スコアと逆相関する。換言すれば、脱臭油は、脱臭されていない藻類油よりも嗜好性スコアが高く、不快臭の強度が低い。脱臭されていない藻類油は、全て嗜好性スコアが低く、不快臭が強い。
本発明は、以下の態様であってもよい。
項目１
コンパニオンアニマルに対する多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の嗜好性を向上させるための方法であって、
ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；
ｂ）任意選択的に、ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムするか、若しくはそれを、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はそれを脱ガムすることと、ＳＰＥを使用して精製することとの両方を行うステップと；
ｃ）ステップｂ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱臭するステップと
を含み、ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の収率は、ステップａ）で出発された前記粗製油の量の８５％以上であり、前記嗜好性は、動物食物嗜好性試験によって測定され、ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも１０％ポイント高い、方法。
項目２
前記ＰＵＦＡ油の前記収率は、ステップａ）で出発された前記粗製油の９０％以上である、項目１に記載の方法。
項目３
前記動物食物嗜好性試験は、２ボウル試験である、項目１又は２に記載の方法。
項目４
ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の前記嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも２０％ポイント高い、項目３に記載の方法。
項目５
ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の前記嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも３０％ポイント高い、項目３に記載の方法。
項目６
ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の前記嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも４０％ポイント高い、項目３に記載の方法。
項目７
ステップｃ）後に入手された前記ＰＵＦＡ油の前記嗜好性スコアは、ステップａ）で出発された前記粗製油よりも少なくとも４５％ポイント高い、項目３に記載の方法。
項目８
前記脱臭ステップｃ）は、ＶＴＡ脱臭装置を使用することによって実施される、項目１～７のいずれか一項に記載の方法。
項目９
前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される、項目１～７のいずれか一項に記載の方法。
項目１０
前記ＰＵＦＡ油は、魚に由来する、項目１～９のいずれか一項に記載の方法。
項目１１
前記ＰＵＦＡ油は、微生物に由来する、項目１～９のいずれか一項に記載の方法。
項目１２
前記微生物は、藻類である、項目１１に記載の方法。
項目１３
前記藻類は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オーランチオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）又はスラウストキトリウム属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）である、項目１２に記載の方法。
項目１４
前記ＰＵＦＡ油は、植物に由来する、項目１～９のいずれか一項に記載の方法。
項目１５
前記ＰＵＦＡ油は、ＤＨＡ、ＥＰＡ、ＡＲＡ及びＤＰＡの１つ又は複数の化合物を含む、項目１～１４のいずれか一項に記載の方法。
項目１６
多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油であって、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１０ｐｐｂ未満の１つ又は複数のメイラード反応化合物と、１．５ｐｐｂを超える１つ又は複数の脂質酸化生成物とを含む多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油。
項目１７
ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、１ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物を含む、項目１６に記載のＰＵＦＡ油。
項目１８
ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、０．５ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物を含む、項目１７に記載のＰＵＦＡ油。
項目１９
ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、０．３ｐｐｂ未満のメイラード反応化合物を含む、項目１８に記載のＰＵＦＡ油。
項目２０
前記ＰＵＦＡ油中のメイラード反応化合物の量は、ヘプタン酸エチルとして評価されるとき、検出不能である、項目１９に記載のＰＵＦＡ油。
項目２１
前記メイラード反応化合物は、トリメチルピラジン、２－エチル－３，５－ジメチルピラジン、２－エチル－３，６－ジメチルピラジン、テトラメチルピラジン、２－ヒドロキシ－３－メチル－２－シクロペンテン－１－オン、メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサルデヒド及びインドールからなる群から選択される、項目１５～２０のいずれか一項に記載のＰＵＦＡ油。
項目２２
前記脂質酸化生成物は、１－ペンテン－３－オン、４－ヘプテナール及び２，６－ノナジエナールからなる群から選択される、項目１５～２１のいずれか一項に記載のＰＵＦＡ油。
項目２３
コンパニオンアニマルのための食品組成物であって、項目１～１５のいずれか一項に記載の方法によって製造されるＰＵＦＡ油を含む食品組成物。
項目２４
コンパニオンアニマルのための食品組成物であって、項目１６～２２のいずれか一項に記載のＰＵＦＡ油を含む食品組成物。
項目２５
前記コンパニオンアニマルは、犬である、項目２３又は２４に記載の食品組成物。
項目２６
前記コンパニオンアニマルは、猫である、項目２３又は２４に記載の食品組成物。
項目２７
ドッグフード又はキャットフードである、項目２３～２６のいずれか一項に記載の食品組成物。
項目２８
犬用おやつ又は猫用おやつである、項目２３～２６のいずれか一項に記載の食品組成物。
項目２９
栄養補給剤である、項目２３～２６のいずれか一項に記載の食品組成物。
項目３０
ヒトが消費するための食品組成物であって、項目１～１５のいずれか一項に記載の方法によって処理されるＰＵＦＡ油を含む食品組成物。
項目３１
ヒトが消費するための食品組成物であって、項目１６～２２のいずれか一項に記載のＰＵＦＡ油を含む食品組成物。
項目３２
多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）油の収率を、同じ油であるが、精製、漂白、脱ろう及び脱臭された対照油（ＲＢＷＤ油）よりも増加させる方法であって、
ａ）粗製ＰＵＦＡ油を入手するステップと；
ｂ）任意選択的に、ステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムするか、若しくはステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を、短行程蒸発器（ＳＰＥ）を使用することによって精製するか、又はステップａ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱ガムすることと、ＳＰＥを使用することによって精製することとの両方を行うステップと；
ｃ）ステップｂ）からの前記ＰＵＦＡ油を脱臭するステップと
を含み、ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の収率は、前記ＲＢＷＤ油の収率よりも５％ポイント超高い、方法。
項目３３
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の前記収率は、前記ＲＢＷＤ油の前記収率よりも１０％ポイント超高い、項目３２に記載の方法。
項目３４
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油の前記収率は、前記ＲＢＷＤ油の前記収率よりも２０％ポイント超高い、項目３２に記載の方法。
項目３５
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油と前記ＲＢＷＤ油との嗜好性スコア間の差は、共通の対照サンプル油が使用される動物食物嗜好性試験において１０％未満である、項目３２～３４のいずれか一項に記載の方法。
項目３６
ステップｃ）後の前記ＰＵＦＡ油は、共通の対照サンプル油が使用される動物嗜好性試験において前記ＲＢＷＤ油よりも高い嗜好性スコアを有する、項目３５に記載の方法。
項目３７
前記動物食物嗜好性試験は、２ボウル試験である、項目３５又は３６に記載の方法。
項目３８
前記脱臭ステップｃ）は、ＶＴＡ脱臭装置を使用することによって実施される、項目３２～３７のいずれか一項に記載の方法。
項目３９
前記脱臭ステップｃ）は、ＤｅＳｍｅｔ脱臭装置を使用することによって実施される、項目３２～３７のいずれか一項に記載の方法。
項目４０
前記ＰＵＦＡ油は、魚に由来する、項目３２～３９のいずれか一項に記載の方法。
項目４１
前記ＰＵＦＡ油は、微生物に由来する、項目３２～３９のいずれか一項に記載の方法。
項目４２
前記微生物は、藻類である、項目４１に記載の方法。
項目４３
前記藻類は、スキゾキトリウム属（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）、オーランチオキトリウム属（Ａｕｒａｎｔｉｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）又はスラウストキトリウム属（Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ）である、項目４２に記載の方法。
項目４４
前記ＰＵＦＡ油は、植物に由来する、項目３２～３９のいずれか一項に記載の方法。

【図1】