特許 7550768 抗体－薬物コンジュゲート用のグリコシド含有ペプチドリンカー

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-09-05

(45)【発行日】2024-09-13

(54)【発明の名称】抗体－薬物コンジュゲート用のグリコシド含有ペプチドリンカー

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20240906BHJP

   C07K 16/00 20060101ALI20240906BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240906BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240906BHJP

【ＦＩ】

C07K19/00

C07K16/00

A61K39/395 M

A61P35/00

【請求項の数】 12

(21)【出願番号】P 2021542159

(86)(22)【出願日】2020-01-22

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-03-16

(86)【国際出願番号】 US2020014658

(87)【国際公開番号】W WO2020154437

(87)【国際公開日】2020-07-30

【審査請求日】2023-01-20

(31)【優先権主張番号】62/795,875

(32)【優先日】2019-01-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】518369833

【氏名又は名称】アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100202267

【弁理士】

【氏名又は名称】森山 正浩

(74)【代理人】

【識別番号】100182132

【弁理士】

【氏名又は名称】河野 隆

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】ラブカ，デイビッド

(72)【発明者】

【氏名】リウ，ジュンジエ

(72)【発明者】

【氏名】オグンコヤ，アヨデレ

(72)【発明者】

【氏名】クディルカ，アルヴィダス・ローマス

【審査官】鳥居 敬司

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１８／２３４６３６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１７－５０１１２８（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｋ １６／００－１６／４６

Ｃ０７Ｋ １９／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗体、
薬物、ならびに
前記抗体を前記薬物に連結し、かつ第１の切断可能な部分および前記第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を含む切断可能なリンカー
を含む、コンジュゲートであって、
第１の切断可能な部分はペプチドを含み、第２の切断可能な部分はグリコシドを含み、
前記コンジュゲートが、式（Ｉ）：

【化1】

のコンジュゲートであり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^１は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、および置換されたアルキニルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは２～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、
Ｗ^１は前記薬物であり、かつ
Ｗ^２は前記抗体であり、
Ｒ^７は前記第２の切断可能な部分を含む、
コンジュゲート。

【請求項2】

（ｉ）ｋが２であり、かつ
前記コンジュゲートが、式（Ｉｄ）：

【化5】

［式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は前記第２の切断可能な部分を含み、
前記第２の切断可能な部分が、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。］
のコンジュゲートであるか；
（ii）前記コンジュゲートが、式（Ｉｅ）：

【化6】

のコンジュゲートである、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項3】

抗体を薬物に連結するための切断可能なリンカーを含む、化合物であって、前記切断可能なリンカーが、第１の切断可能な部分および前記第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分
を含む、化合物であって、
第１の切断可能な部分はペプチドを含み、第２の切断可能な部分はグリコシドを含み、
前記化合物が、式（ＩＩ）：

【化12】

の化合物であり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは２～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、かつ
Ｗ^１は薬物であり、
Ｒ^７は前記第２の切断可能な部分を含む、
化合物。

【請求項4】

（ｉ）ｋが２であり、かつ
前記化合物が、式（ＩＩｄ）：

【化16】

［式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は前記第２の切断可能な部分を含み、
前記第２の切断可能な部分が、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。］
の化合物であるか；
（ｉｉ） 前記化合物が、式（ＩＩｅ）：

【化17】

の化合物である、請求項３に記載の化合物。

【請求項5】

Ｌ^１が、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－
を含み、式中、
ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（
Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（Ｃ
Ｈ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（
Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される、
請求項１または２に記載のコンジュゲートまたは請求項３または４に記載の化合物。

【請求項6】

Ｌ^２が、
－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－
を含み、式中、
ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（Ｃ
Ｈ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（
Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される、
請求項１、２または５に記載のコンジュゲートまたは請求項３～５のいずれか１項に記載の化合物。

【請求項7】

Ｔ^１が、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルおよび置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルから選
択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、およびＴ^４が、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、かつ
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４が、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、
（ＰＥＧ）_ｎが

【化20】

であり、ｎが１～３０の整数であり、
ＥＤＡが、以下の構造：

【化21】

を有するエチレンジアミン部分であり、ｙが１～６の整数であり、かつｒが０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）が

【化22】

であり、
各Ｒ^１２およびＲ^１５が、水素、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択され、任意の２個の隣接するＲ^１２基が環状連結されてピペラジニル環を形成していてもよく、かつ
Ｒ^１３が、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから選択される、
請求項６に記載のコンジュゲートまたは請求項６に記載の化合物。

【請求項8】

（ｉ）Ｔ^１が（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１が－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が４ＡＰであり、かつＶ^２が共有結合であり、
Ｔ^３が（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３が－ＣＯ－であり、かつ
ｄが０であるか；
（ｉｉ）Ｔ^１が（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１が－ＣＯ－であり、
Ｔ^２が４ＡＰであり、かつＶ^２が共有結合であり、
Ｔ^３が（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３が－ＣＯＮＨ－であり、かつ
Ｔ^４がアリールまたは置換されたアリールであり、かつＶ^４が－ＣＯ－であるか；または
（ｉｉｉ）Ｔ^５が共有結合であり、かつＶ^５が－ＣＯ－であり、かつ
ｆ、ｇおよびｈが０である、
請求項５から７のいずれか１項に記載のコンジュゲートまたは請求項５から７のいずれか１項に記載の化合物。

【請求項9】

前記薬物が、アウリスタチン、メイタンシン、およびデュオカルマイシンから選択される、請求項１、２および５～８のいずれか１項に記載のコンジュゲートまたは請求項３～８のいずれか１項に記載の化合物。

【請求項10】

請求項１、２および５～８のいずれか１項に記載のコンジュゲート、および
薬学的に許容される賦形剤
を含む、医薬組成物。

【請求項11】

治療において使用するための請求項１、２および５～８のいずれか１項に記載のコンジュゲート。

【請求項12】

請求項１、２および５～８のいずれか１項に記載のコンジュゲートを含む、対象においてがんを治療する方法に使用するための医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１月２３日に出願された米国仮出願第６２／７９５，８７５号の利益を主張し、該仮出願の開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

序論
タンパク質－小分子治療用コンジュゲートの分野は大きく進歩しており、将来的により多くを提供するという見込みと共に多数の臨床的に有益な薬物を提供している。タンパク質コンジュゲート治療学は、例えば、特異性、機能の多重性、およびより小さい副作用を結果としてもたらす相対的に低いオフターゲット活性に起因して、いくつかの利点を提供することができる。タンパク質の化学修飾は、それらをより強力、安定、または多手法的とすることによりこれらの利点を拡張し得る。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

本開示は、抗体を薬物に連結し、かつ第１の切断可能な部分および第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を有する切断可能なリンカーを含む、抗体－薬物コンジュゲート構造物を提供する。本開示はまた、そのようなコンジュゲートの製造方法の他に、その使用方法を包含する。

【0004】

本開示の態様は、抗体、薬物、ならびに抗体を薬物に連結し、かつ第１の切断可能な部分および第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を有する切断可能なリンカーを含む、コンジュゲートを含む。

【0005】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分である。

【0006】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分である。

【0007】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は第１の酵素的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は第２の酵素的に切断可能な部分である。例えば、第１の酵素的に切断可能な部分は第１のペプチドを含むことができ、かつ第２の酵素的に切断可能な部分は第２のペプチドを含むことができる。一部の場合には、第１の酵素的に切断可能な部分はペプチドを含み、かつ第２の酵素的に切断可能な部分はグリコシドを含む。

【0008】

一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉ）：

【化1】

【0009】

のコンジュゲートであり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^１は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、および置換されたアルキニルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは１～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、
Ｗ^１は薬物であり、かつ
Ｗ^２は抗体であり、
Ｌ^１、Ｒ^６またはＲ^７のうちの１つは第２の切断可能な部分を含む。

【0010】

一部の実施形態では、ｋは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉａ）：

【化2】

【0011】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’またはＲ^６’’のうちの１つは第２の切断可能な部分を含み、かつＲ^６’およびＲ^６’’のうちの他方は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。

【0012】

一部の実施形態では、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。

【0013】

一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｂ）：

【化3】

【0014】

のコンジュゲートである。

【0015】

一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｃ）：

【化4】

【0016】

のコンジュゲートである。 一部の実施形態では、ｋは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉｄ）：

【化5】

【0017】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は第２の切断可能な部分を含む。

【0018】

一部の実施形態では、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。

【0019】

一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｅ）：

【化6】

【0020】

のコンジュゲートである。

【0021】

一部の実施形態では、ｋは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉｆ）：

【化7】

【0022】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^８は第２の切断可能な部分を含む。

【0023】

一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉｇ）：

【化8】

【0024】

のコンジュゲートである。

【0025】

一部の実施形態では、Ｌ^１は、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－
を含み、式中、
ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0026】

一部の実施形態では、Ｌ^２は、
－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－
を含み、式中、
ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0027】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルおよび置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、およびＴ^４は、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、かつ
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、
（ＰＥＧ）_ｎは

【化9】

【0028】

であり、ｎは１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化10】

【0029】

を有するエチレンジアミン部分であり、ｙは１～６の整数であり、かつｒは０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）は

【化11】

【0030】

であり、
各Ｒ^１２およびＲ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択され、任意の２個の隣接するＲ^１２基は環状連結されてピペラジニル環を形成していてもよく、かつ
Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから選択される。

【0031】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－であり、
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合であり、
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯ－であり、かつ
ｄは０である。

【0032】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－であり、
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合であり、
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯＮＨ－であり、かつ
Ｔ^４はアリールまたは置換されたアリールであり、かつＶ^４は－ＣＯ－である。

【0033】

一部の実施形態では、
Ｔ^５は共有結合であり、かつＶ^５は－ＣＯ－であり、かつ
ｆ、ｇおよびｈは０である。

【0034】

一部の実施形態では、薬物は、アウリスタチン、メイタンシン、およびデュオカルマイシンから選択される。

【0035】

本開示の態様は、抗体を薬物に連結するための切断可能なリンカーを含む化合物であって、切断可能なリンカーが、第１の切断可能な部分および第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を含む、化合物を含む。

【0036】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分である。

【0037】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分である。

【0038】

一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は第１の酵素的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は第２の酵素的に切断可能な部分である。例えば、第１の酵素的に切断可能な部分は第１のペプチドであることができ、かつ第２の酵素的に切断可能な部分は第２のペプチドであることができる。一部の場合には、第１の酵素的に切断可能な部分はペプチドを含み、かつ第２の酵素的に切断可能な部分はグリコシドを含む。

【0039】

一部の実施形態では、化合物は、式（ＩＩ）：

【化12】

【0040】

の化合物であり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは１～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、かつ
Ｗ^１は薬物であり、
Ｌ^１、Ｒ^６またはＲ^７のうちの１つは第２の切断可能な部分を含む。

【0041】

一部の実施形態では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩａ）：

【化13】

【0042】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’またはＲ^６’’のうちの１つは第２の切断可能な部分を含み、かつＲ^６’およびＲ^６’’のうちの他方は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。

【0043】

一部の実施形態では、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。

【0044】

一部の実施形態では、化合物は、式（ＩＩｂ）：

【化14】

【0045】

の化合物である。

【0046】

一部の実施形態では、化合物は、式（ＩＩｃ）：

【化15】

【0047】

の化合物である。

【0048】

一部の実施形態では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩｄ）：

【化16】

【0049】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は第２の切断可能な部分を含む。

【0050】

一部の実施形態では、第２の切断可能な部分は、グリコシドを含む酵素的に切断可能な部分である。

【0051】

一部の実施形態では、化合物は、式（ＩＩｅ）：

【化17】

【0052】

の化合物である。

【0053】

一部の実施形態では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩｆ）：

【化18】

【0054】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^８は第２の切断可能な部分を含む。

【0055】

一部の実施形態では、化合物は、式（ＩＩｇ）：

【化19】

【0056】

の化合物である。

【0057】

一部の実施形態では、Ｌ^１は、
－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－
を含み、式中、
ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0058】

一部の実施形態では、Ｌ^２は、
－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－
を含み、式中、
ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、
Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８は、共有結合、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、ジスルフィド、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、ＥＤＡはエチレンジアミン部分であり、ＰＥＧはポリエチレングリコールであり、かつＡＡはアミノ酸残基であり、各ｗは１～２０の整数であり、各ｎは１～３０の整数であり、各ｐは１～２０の整数であり、かつ各ｍは１～１２の整数であり、
Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｑは１～６の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0059】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルおよび置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３、およびＴ^４は、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｍ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ヒドラジン、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、かつ
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－、および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からなる群からそれぞれ独立して選択され、
（ＰＥＧ）_ｎは

【化20】

【0060】

であり、ｎは１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化21】

【0061】

を有するエチレンジアミン部分であり、ｙは１～６の整数であり、かつｒは０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）は

【化22】

【0062】

であり、
各Ｒ^１２およびＲ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択され、任意の２個の隣接するＲ^１２基は環状連結されてピペラジニル環を形成していてもよく、かつ
Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから選択される。

【0063】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－であり、
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合であり、
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯ－であり、かつ
ｄは０である。

【0064】

一部の実施形態では、
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－であり、
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合であり、
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯＮＨ－であり、かつ
Ｔ^４はアリールまたは置換されたアリールであり、かつＶ^４は－ＣＯ－である。

【0065】

一部の実施形態では、
Ｔ^５は共有結合であり、かつＶ^５は－ＣＯ－であり、かつ
ｆ、ｇおよびｈは０である。

【0066】

一部の実施形態では、薬物は、アウリスタチン、メイタンシン、およびデュオカルマイシンから選択される。

【0067】

本開示の態様は、本開示のコンジュゲート、および薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物を含む。

【0068】

本開示の態様は、対象に有効量の本開示のコンジュゲートを投与することを含む、方法を含む。

【0069】

本開示の態様は、対象においてがんを治療する方法であって、対象に治療有効量の本開示のコンジュゲートを含む医薬組成物を投与することを含み、投与することが対象においてがんを治療するために有効である、方法を含む。

【図面の簡単な説明】

【0070】

【図1A】図１Ａは、本開示の実施形態による、ＭＭＡＥ構築物を含有する抗体－薬物コンジュゲートの経時的な血清安定性のグラフを示す。

【図1B】図１Ｂは、本開示の実施形態による、デュオカルマイシン構築物６６を含有する抗体－薬物コンジュゲートの経時的な血清安定性のグラフを示す。

【図2A】図２Ａは、本開示の実施形態による、ＮＣＩ－Ｎ８７細胞系に対するＭＭＡＥ構築物を含有する抗体－薬物コンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性のグラフを示す。

【図2B】図２Ｂは、本開示の実施形態による、ＪｅＫｏ－１細胞系に対するデュオカルマイシン構築物６６を含有する抗体－薬物コンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性のグラフを示す。

【図3】図３は、本開示の実施形態による、マウスにおけるＪｅＫｏ－１異種移植片に対する抗ＣＤ７９ｂ １３抗体－薬物コンジュゲートおよび抗ＣＤ７９ｂ ４８抗体－薬物コンジュゲートのｉｎ ｖｉｖｏ有効性のグラフを示す。

【発明を実施するための形態】

【0071】

定義
以下の用語は、他に指し示されなければ以下の意味を有する。任意の定義されない用語は、当該技術分野において認識されるそれらの意味を有する。

【0072】

「アルキル」は、１～１０個の炭素原子、例えば、１～６個の炭素原子、または１～５、または１～４、もしくは１～３個の炭素原子を有する一価飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、直鎖状および分岐鎖状ヒドロカルビル基、例えば、メチル（ＣＨ_３－）、エチル（ＣＨ_３ＣＨ_２－）、ｎ－プロピル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソプロピル（（ＣＨ_３）_２ＣＨ－）、ｎ－ブチル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、イソブチル（（ＣＨ_３）_２ＣＨＣＨ_２－）、ｓｅｃ－ブチル（（ＣＨ_３）（ＣＨ_３ＣＨ_２）ＣＨ－）、ｔ－ブチル（（ＣＨ_３）_３Ｃ－）、ｎ－ペンチル（ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、およびネオペンチル（（ＣＨ_３）_３ＣＣＨ_２－）を含む。

【0073】

「置換されたアルキル」という用語は、本明細書において定義されるようなアルキル基であって、アルキル鎖（Ｃ_１炭素原子を除く）中の１または複数の炭素原子が、ヘテロ原子、例えば、－Ｏ－、－Ｎ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）_ｎ－（ｎは０～２である）、－ＮＲ－（Ｒは水素またはアルキルである）で置き換えられていてもよく、かつアルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリール、および－ＮＲ^ａＲ^ｂからなる群から選択される１～５個の置換基を有し、Ｒ^’およびＲ^’’が、同じまたは異なってよく、かつ水素、置換されていてもよいアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環から選択されるものを指す。

【0074】

「アルキレン」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれかである好ましくは１～６個、より好ましくは１～３個の炭素原子を有し、－Ｏ－、－ＮＲ^１０－、－ＮＲ^１０Ｃ（Ｏ）－、および－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０－などから選択される１または複数の基を差し挟まれていてもよい、二価脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、メチレン（－ＣＨ_２－）、エチレン（－ＣＨ_２ＣＨ_２－）、ｎ－プロピレン（－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、ｉｓｏ－プロピレン（－ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＣＨ_２－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）－）、（－Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－）、および（－ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２－）などを含む。

【0075】

「置換されたアルキレン」は、以下の「置換された」の定義において炭素について記載されるような置換基で置き換えられた１～３個の水素を有するアルキレン基を指す。

【0076】

「アルカン」という用語は、本明細書において定義されるようなアルキル基およびアルキレン基を指す。

【0077】

「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」および「アルキルアミノアルキニル」という用語は、基Ｒ’ＮＨＲ’’－（式中、Ｒ’は、本明細書において定義されるようなアルキル基であり、Ｒ’’は、本明細書において定義されるようなアルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基である）を指す。

【0078】

「アルカリル」または「アラルキル」という用語は、基－アルキレン－アリールおよび－置換されたアルキレン－アリールであって、アルキレン、置換されたアルキレンおよびアリールが本明細書において定義されるものを指す。

【0079】

「アルコキシ」は、基－Ｏ－アルキルであって、アルキルが本明細書において定義される通りであるものを指す。アルコキシとしては、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、およびｎ－ペントキシなどが挙げられる。「アルコキシ」という用語はまた、基アルケニル－Ｏ－、シクロアルキル－Ｏ－、シクロアルケニル－Ｏ－、およびアルキニル－Ｏ－であって、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、およびアルキニルが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0080】

「置換されたアルコキシ」という用語は、基：置換されたアルキル－Ｏ－、置換されたアルケニル－Ｏ－、置換されたシクロアルキル－Ｏ－、置換されたシクロアルケニル－Ｏ－、および置換されたアルキニル－Ｏ－であって、置換されたアルキル、置換されたアルケニル、置換されたシクロアルキル、置換されたシクロアルケニルおよび置換されたアルキニルが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0081】

「アルコキシアミノ」という用語は、基－ＮＨ－アルコキシであって、アルコキシが本明細書において定義されるものを指す。

【0082】

「ハロアルコキシ」という用語は、基アルキル－Ｏ－であって、アルキル基上の１または複数の水素原子がハロ基で置換されたものを指し、例として、トリフルオロメトキシなどの基が挙げられる。

【0083】

「ハロアルキル」という用語は、上記のような置換されたアルキル基であって、アルキル基上の１または複数の水素原子がハロ基で置換されたものを指す。そのような基の例としては、非限定的に、フルオロアルキル基、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、およびトリフルオロエチルなどが挙げられる。

【0084】

「アルキルアルコキシ」という用語は、基－アルキレン－Ｏ－アルキル、アルキレン－Ｏ－置換されたアルキル、置換されたアルキレン－Ｏ－アルキル、および置換されたアルキレン－Ｏ－置換されたアルキルであって、アルキル、置換されたアルキル、アルキレンおよび置換されたアルキレンが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0085】

「アルキルチオアルコキシ」という用語は、基－アルキレン－Ｓ－アルキル、アルキレン－Ｓ－置換されたアルキル、置換されたアルキレン－Ｓ－アルキルおよび置換されたアルキレン－Ｓ－置換されたアルキルであって、アルキル、置換されたアルキル、アルキレンおよび置換されたアルキレンが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0086】

「アルケニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～４個の炭素原子を有し、かつ少なくとも１個、好ましくは１～２個の二重結合不飽和部位を有する、直鎖または分岐状ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、ビ－ビニル、アリル、およびブタ－３－エン－１－イルを含む。シスおよびトランス異性体またはこれらの異性体の混合物はこの用語に含まれる。

【0087】

「置換されたアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリールおよび－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する本明細書において定義されるようなアルケニル基を指す。

【0088】

「アルキニル」は、２～６個の炭素原子、好ましくは２～３個の炭素原子を有し、かつ少なくとも１個、好ましくは１～２個の三重結合不飽和部位を有する、直鎖状または分岐鎖状一価ヒドロカルビル基を指す。そのようなアルキニル基の例としては、アセチレニル（－Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（－ＣＨ_２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。

【0089】

「置換されたアルキニル」という用語は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリール、および－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有する本明細書において定義されるようなアルキニル基を指す。

【0090】

「アルキニルオキシ」は、基－Ｏ－アルキニルであって、アルキニルが本明細書において定義される通りであるものを指す。アルキニルオキシとしては、例として、エチニルオキシ、およびプロピニルオキシなどが挙げられる。

【0091】

「アシル」は、基Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、アルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換されたアルキル－Ｃ（Ｏ）－、アルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換されたアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アルキニル－Ｃ（Ｏ）－、置換されたアルキニル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、置換されたシクロアルキル－Ｃ（Ｏ）－、シクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、置換されたシクロアルケニル－Ｃ（Ｏ）－、アリール－Ｃ（Ｏ）－、置換されたアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、置換されたヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）－、ヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－、および置換されたヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）－であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。例えば、アシルとしては、「アセチル」基ＣＨ_３Ｃ（Ｏ）－が挙げられる。

【0092】

「アシルアミノ」は、基－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたアルキル、ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたシクロアルキル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたシクロアルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたアルケニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アルキニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたアルキニル、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）アリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたアリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換されたヘテロアリール、－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）複素環、および－ＮＲ^２０Ｃ（Ｏ）置換された複素環であって、Ｒ^２０が水素またはアルキルであり、かつアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0093】

「アミノカルボニル」または「アミノアシル」という用語は、基－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^２１Ｒ^２２であって、Ｒ^２１およびＲ^２２が、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環からなる群から独立して選択され、かつＲ^２１およびＲ^２２が、それらに結合した窒素と共に連結して複素環式または置換された複素環式基を形成していてもよく、かつアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0094】

「アミノカルボニルアミノ」は、基－ＮＲ^２１Ｃ（Ｏ）ＮＲ^２２Ｒ^２３であって、Ｒ^２１、Ｒ^２２、およびＲ^２３が、水素、アルキル、アリールもしくはシクロアルキルから独立して選択され、または２つのＲ基が連結されてヘテロシクリル基を形成しているものを指す。

【0095】

「アルコキシカルボニルアミノ」という用語は、基－ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲであって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであり、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0096】

「アシルオキシ」という用語は、基アルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換されたアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、シクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、置換されたシクロアルキル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、アリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、ヘテロアリール－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、およびヘテロシクリル－Ｃ（Ｏ）Ｏ－であって、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルが本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0097】

「アミノスルホニル」は、基－ＳＯ_２ＮＲ^２１Ｒ^２２であって、Ｒ^２１およびＲ^２２が、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、置換された複素環からなる群から独立して選択され、Ｒ^２１およびＲ^２２が、それらに結合した窒素と共に連結して複素環式または置換された複素環式基を形成していてもよく、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環のおよび置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0098】

「スルホニルアミノ」は、基－ＮＲ^２１ＳＯ_２Ｒ^２２であって、Ｒ^２１およびＲ^２２が、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環からなる群から独立して選択され、かつＲ^２１およびＲ^２２が、それらに結合した原子と共に連結して複素環式または置換された複素環式基を形成していてもよく、かつアルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0099】

「アリール」または「Ａｒ」は、単一の環（例えば、フェニル基中に存在する場合）または複数の縮合環を有する環系（そのような芳香環系の例としては、ナフチル、アントリルおよびインダニルが挙げられる）を有する６～１８個の炭素原子の一価芳香族炭素環基であって、該縮合環が芳香族であってもよいし、またはそうでなくてもよく、但し、結合点が芳香環の原子を通じたものを指す。この用語は、例として、フェニルおよびナフチルを含む。アリール置換基の定義により他に制約されなければ、そのようなアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたアルキル、置換されたアルコキシ、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたシクロアルキル、置換されたシクロアルケニル、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリル、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリールおよびトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基で置換されていてもよい。

【0100】

「アリールオキシ」は、基－Ｏ－アリールであって、アリールが、例として、フェノキシ、およびナフトキシなど、そしてまた本明細書において定義されるような置換されていてもよいアリール基を含む、本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0101】

「アミノ」は基－ＮＨ_２を指す。

【0102】

「置換されたアミノ」という用語は、基－ＮＲＲであって、各Ｒが、水素、アルキル、置換されたアルキル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルからなる群から独立して選択され、但し、少なくとも１個のＲが水素ではないものを指す。

【0103】

「アジド」という用語は基－Ｎ_３を指す。

【0104】

「カルボキシル」、「カルボキシ」または「カルボキシレート」は－ＣＯ_２Ｈまたはその塩を指す。

【0105】

「カルボキシルエステル」もしくは「カルボキシエステル」または「カルボキシアルキル」もしくは「カルボキシルアルキル」という用語は、基－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルキニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたシクロアルキル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたシクロアルケニル、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたヘテロアリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－複素環、および－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換された複素環であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0106】

「（カルボキシルエステル）オキシ」または「カルボネート」は、基－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアルキニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－アリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたシクロアルキル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたシクロアルケニル、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換されたヘテロアリール、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－複素環、および－Ｏ－Ｃ（Ｏ）Ｏ－置換された複素環であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0107】

「シアノ」または「ニトリル」は基－ＣＮを指す。

【0108】

「シクロアルキル」は、単一または縮合、架橋、およびスピロ環系を含む複数の環式環を有する３～１０個の炭素原子の環式アルキル基を指す。好適なシクロアルキル基の例としては、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロオクチルなどが挙げられる。そのようなシクロアルキル基としては、例として、単一環構造、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロオクチルなど、または複数環構造、例えば、アダマンタニルなどが挙げられる。

【0109】

「置換されたシクロアルキル」という用語は、アルキル、置換されたアルキル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリールおよび－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有するシクロアルキル基を指す。

【0110】

「シクロアルケニル」は、単一または複数の環を有し、かつ少なくとも１個の二重結合、好ましくは１～２個の二重結合を有する、３～１０個の炭素原子の非芳香族環式アルキル基を指す。

【0111】

「置換されたシクロアルケニル」という用語は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリールおよび－ＳＯ_２－ヘテロアリールから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基を有するシクロアルケニル基を指す。

【0112】

「シクロアルキニル」は、単一または複数の環を有し、かつ少なくとも１個の三重結合を有する、５～１０個の炭素原子の非芳香族シクロアルキル基を指す。

【0113】

「シクロアルコキシ」は－Ｏ－シクロアルキルを指す。

【0114】

「シクロアルケニルオキシ」は－Ｏ－シクロアルケニルを指す。

【0115】

「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。

【0116】

「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は基－ＯＨを指す。

【0117】

「ヘテロアリール」は、環内の１～１５個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、ならびに酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される１～１０個のヘテロ原子の芳香族基を指す。そのようなヘテロアリール基は、単一の環（例えば、ピリジニル、イミダゾリルもしくはフリル）または環系中の複数の縮合環（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾフラン、ベンゾイミダゾリルもしくはベンゾチエニルなどの基における場合）を有することができ、環系内の少なくとも１つの環は芳香族である。原子価の要求を満たすために、そのようなヘテロアリール環中の任意のヘテロ原子は、Ｈまたは置換基、例えば、本明細書に記載されるようなアルキル基もしくは他の置換基に結合していてもよく、またはそうでなくてもよい。ある特定の実施形態では、ヘテロアリール基の（１または複数の）窒素および／または硫黄環原子は、酸化されてＮ－オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、またはスルホニル部分を提供してもよい。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、およびフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義により他に制約されなければ、そのようなヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたアルキル、置換されたアルコキシ、置換されたアルケニル、置換されたアルキニル、置換されたシクロアルキル、置換されたシクロアルケニル、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリル、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリールおよび－ＳＯ_２－ヘテロアリール、およびトリハロメチルから選択される１～５個の置換基、または１～３個の置換基で置換されていてもよい。

【0118】

「ヘテロアラルキル」という用語は、基－アルキレン－ヘテロアリールであって、アルキレンおよびヘテロアリールが本明細書において定義されるものを指す。この用語は、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、およびインドリルメチルなどを含む。

【0119】

「ヘテロアリールオキシ」は－Ｏ－ヘテロアリールを指す。

【0120】

「複素環」（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）、「複素環」（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）、「ヘテロシクロアルキル」、および「ヘテロシクリル」は、単一の環、または縮合架橋およびスピロ環系を含む、複数の縮合環を有し、かつ１～１０個のヘテロ原子を含む、３～２０個の環原子を有する、飽和または不飽和基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、または酸素から選択され、縮合環系中の場合、環の１または複数は、シクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであることができ、但し、結合点は非芳香環を通じたものである。ある特定の実施形態では、複素環式基の（１または複数の）窒素および／または硫黄原子は、酸化されてＮ－オキシド、－Ｓ（Ｏ）－、または－ＳＯ_２－部分を提供してもよい。原子価の要求を満たすために、そのようなヘテロ環式環中の任意のヘテロ原子は、１または複数のＨ、または１もしくは複数の置換基、例えば、本明細書に記載されるようなアルキル基もしくは他の置換基に結合していてもよく、またはそうでなくてもよい。

【0121】

複素環およびヘテロアリールの例としては、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソオキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７－テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも称される）、１，１－ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、およびテトラヒドロフラニルなどが挙げられるがこれらに限定されない。

【0122】

複素環式置換基の定義により他に制約されなければ、そのような複素環式基は、アルコキシ、置換されたアルコキシ、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換されたアミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリル、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、－ＳＯ－アルキル、－ＳＯ－置換されたアルキル、－ＳＯ－アリール、－ＳＯ－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリール、および縮合複素環から選択される１～５、または１～３個の置換基で置換されていてもよい。

【0123】

「ヘテロシクリルオキシ」は基－Ｏ－ヘテロシクリルを指す。

【0124】

「ヘテロシクリルチオ」という用語は基：複素環－Ｓ－を指す。

【0125】

「ヘテロシクレン」という用語は、本明細書において定義されるような複素環から形成されるジラジカル基を指す。

【0126】

「ヒドロキシアミノ」という用語は基－ＮＨＯＨを指す。

【0127】

「ニトロ」は基－ＮＯ_２を指す。

【0128】

「オキソ」は原子（＝Ｏ）を指す。

【0129】

「スルホニル」は、基－ＳＯ_２－アルキル、－ＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＳＯ_２－アルケニル、－ＳＯ_２－置換されたアルケニル、－ＳＯ_２－シクロアルキル、－ＳＯ_２－置換されたシクロアルキル、－ＳＯ_２－シクロアルケニル、－ＳＯ_２－置換されたシクロアルケニル、－ＳＯ_２－アリール、－ＳＯ_２－置換されたアリール、－ＳＯ_２－ヘテロアリール、－ＳＯ_２－置換されたヘテロアリール、－ＳＯ_２－複素環、および－ＳＯ_２－置換された複素環であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。スルホニルとしては、例として、メチル－ＳＯ_２－、フェニル－ＳＯ_２－、および４－メチルフェニル－ＳＯ_２－が挙げられる。

【0130】

「スルホニルオキシ」は、基－ＯＳＯ_２－アルキル、－ＯＳＯ_２－置換されたアルキル、－ＯＳＯ_２－アルケニル、－ＯＳＯ_２－置換されたアルケニル、－ＯＳＯ_２－シクロアルキル、－ＯＳＯ_２－置換されたシクロアルキル、－ＯＳＯ_２－シクロアルケニル、－ＯＳＯ_２－置換されたシクロアルケニル、－ＯＳＯ_２－アリール、－ＯＳＯ_２－置換されたアリール、－ＯＳＯ_２－ヘテロアリール、－ＯＳＯ_２－置換されたヘテロアリール、－ＯＳＯ_２－複素環、および－ＯＳＯ_２－置換された複素環であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0131】

「スルフェート」または「硫酸エステル」は、基－Ｏ－ＳＯ_２－ＯＨ、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－アルキル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたアルキル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－アルケニル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたアルケニル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－シクロアルキル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたシクロアルキル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－シクロアルケニル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたシクロアルケニル、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－アリール、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたアリール、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－ヘテロアリール、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換されたヘテロアリール、－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－複素環、および－Ｏ－ＳＯ_２－Ｏ－置換された複素環であって、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、シクロアルケニル、置換されたシクロアルケニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、複素環、および置換された複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0132】

「アミノカルボニルオキシ」という用語は、基－ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲであって、各Ｒが、独立して、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環であり、アルキル、置換されたアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環が本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0133】

「チオール」は基－ＳＨを指す。

【0134】

「チオキソ」または「チオケト」という用語は原子（＝Ｓ）を指す。

【0135】

「アルキルチオ」または「チオアルコキシ」という用語は、基－Ｓ－アルキルであって、アルキルが本明細書において定義される通りであるものを指す。ある特定の実施形態では、硫黄は－Ｓ（Ｏ）－に酸化されていてもよい。スルホキシドは１または複数の立体異性体として存在してもよい。

【0136】

「置換されたチオアルコキシ」という用語は基－Ｓ－置換されたアルキルを指す。

【0137】

「チオアリールオキシ」という用語は、基アリール－Ｓ－であって、アリール基が、本明細書において定義される置換されていてもよいアリール基も含む、本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0138】

「チオヘテロアリールオキシ」という用語は、基ヘテロアリール－Ｓ－であって、ヘテロアリール基が、本明細書において定義される置換されていてもよいアリール基も含む、本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0139】

「チオヘテロシクロオキシ」という用語は、基ヘテロシクリル－Ｓ－であって、ヘテロシクリル基が、本明細書において定義される置換されていてもよいヘテロシクリル基も含む、本明細書において定義される通りであるものを指す。

【0140】

本明細書における開示に加えて、「置換された」という用語は、指定された基またはラジカルを修飾するために使用される場合、指定された基またはラジカルの１または複数の水素原子が、互いに独立してそれぞれ、以下において定義されるような同じまたは異なる置換基で置き換えられていることも意味することができる。

【0141】

本明細書における個々の用語に関して開示される基に加えて、指定された基またはラジカル中の飽和炭素原子上の１または複数の水素（単一の炭素上の任意の２個の水素は、＝Ｏ、＝ＮＲ^７０、＝Ｎ－ＯＲ^７０、＝Ｎ_２または＝Ｓで置き換えることができる）を置換する置換基は、他に指定されなければ、－Ｒ^６０、ハロ、＝Ｏ、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、＝Ｎ_２、－Ｎ_３、－ＳＯ_２Ｒ^７０、－ＳＯ_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＳＯ_２ＯＲ^７０、－ＯＳＯ_２Ｒ^７０、－ＯＳＯ_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＳＯ_２ＯＲ^７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ^－）_２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｏ）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^７０ＣＯ_２Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０および－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、Ｒ^６０は、置換されていてもよいアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、各Ｒ^７０は独立して水素またはＲ^６０であり、各Ｒ^８０は独立してＲ^７０であり、または代替的に、２個のＲ^８０’は、それらが結合した窒素原子と一緒になって、Ｏ、ＮおよびＳからなる群から選択される１～４個の同じまたは異なる追加のヘテロ原子を含んでもよい５、６または７員のヘテロシクロアルキルを形成し、上記ヘテロ原子のうちのＮは－ＨまたはＣ_１－Ｃ_３アルキル置換を有してもよく、かつ各Ｍ^＋は、正味の単一の正電荷を有する対イオンである。各Ｍ^＋は、独立して、例えば、アルカリイオン、例えば、Ｋ^＋、Ｎａ^＋、Ｌｉ^＋；アンモニウムイオン、例えば、^＋Ｎ（Ｒ^６０）_４；またはアルカリ土類イオン、例えば、［Ｃａ^２＋］_０．５、［Ｍｇ^２＋］_０．５、または［Ｂａ^２＋］_０．５であってもよい（下付きの０．５は、そのような二価アルカリ土類イオンの対イオンの１つが、本発明の化合物のイオン化形態および他の典型的な対イオン、例えば、塩化物であることができ、または本明細書に開示される２個のイオン化した化合物がそのような二価アルカリ土類イオンの対イオンとして役立つことができ、または二重にイオン化した本発明の化合物がそのような二価アルカリ土類イオンの対イオンとして役立つことができることを意味する）。特有の例として、－ＮＲ^８０Ｒ^８０は、－ＮＨ_２、－ＮＨ－アルキル、Ｎ－ピロリジニル、Ｎ－ピペラジニル、４Ｎ－メチル－ピペラジン－１－イルおよびＮ－モルホリニルを含むことが意味される。

【0142】

本明細書における開示に加えて、「置換された」アルケン、アルキン、アリールおよびヘテロアリール基中の不飽和炭素原子上の水素の置換基は、他に指定されなければ、－Ｒ^６０、ハロ、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－Ｓ^－－Ｍ^＋、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＦ_３、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、－Ｎ_３、－ＳＯ_２Ｒ^７０、－ＳＯ_３ ^－Ｍ^＋、－ＳＯ_３Ｒ^７０、－ＯＳＯ_２Ｒ^７０、－ＯＳＯ_３ ^－Ｍ^＋、－ＯＳＯ_３Ｒ^７０、－ＰＯ_３ ^－２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）_２、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＣＯ_２Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＯＣＯ_２Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０ＣＯ_２ ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^７０ＣＯ_２Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０および－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、Ｒ^６０、Ｒ^７０、Ｒ^８０およびＭ^＋は以前に定義された通りであり、但し、置換されたアルケンまたはアルキンの場合、置換基は、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、および－Ｓ^－Ｍ^＋のいずれでもない。

【0143】

本明細書における個々の用語に関して開示される基に加えて、「置換された」ヘテロアルキルおよびシクロヘテロアルキル基中の窒素原子上の水素の置換基は、他に指定されなければ、－Ｒ^６０、－Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＲ^７０、－ＳＲ^７０、－Ｓ^－Ｍ^＋、－ＮＲ^８０Ｒ^８０、トリハロメチル、－ＣＦ_３、－ＣＮ、－ＮＯ、－ＮＯ_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^７０、－Ｓ（Ｏ）_２Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^７０、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^７０、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｏ^－Ｍ^＋、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^７０、－Ｐ（Ｏ）（Ｏ^－）_２（Ｍ^＋）_２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）Ｏ^－Ｍ^＋、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^７０）（ＯＲ^７０）、－Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＯＣ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）Ｒ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ^７０、－ＮＲ^７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８０Ｒ^８０、－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）Ｒ^７０および－ＮＲ^７０Ｃ（ＮＲ^７０）ＮＲ^８０Ｒ^８０であり、Ｒ^６０、Ｒ^７０、Ｒ^８０およびＭ^＋は以前に定義された通りである。

【0144】

本明細書における開示に加えて、ある特定の実施形態では、置換された基は、１、２、３、もしくは４個の置換基、１、２、もしくは３個の置換基、１もしくは２個の置換基、または１個の置換基を有する。

【0145】

上記に定義される全ての置換された基において、それら自身へのさらなる置換基を用いて置換基を定義することにより到達されるポリマー（例えば、置換されたアリール基によりさらに置換された置換されたアリール基でそれ自体が置換された置換基として置換されたアリール基を有する置換されたアリールなど）を本明細書に含めることは意図されないことが理解される。そのような場合、そのような置換の最大数は３である。例えば、本明細書において特に想定される置換されたアリール基の連続的な置換は、置換されたアリール－（置換されたアリール）－置換されたアリールに限定される。

【0146】

他に指し示されなければ、本明細書において明示的に定義されない置換基の名称は、官能基の末端部分、続いて結合点に対して隣接する官能基を命名することにより到達される。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は基（アリール）－（アルキル）－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－を指す。

【0147】

１または複数の置換基を含有する本明細書に開示される任意の基に関して、当然、そのような基は、立体的に実際的でないかつ／または合成的に実現可能でないいかなる置換または置換パターンも含有しないことが理解される。追加的に、主題化合物は、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学的な異性体を含む。

【0148】

「薬学的に許容される塩」という用語は、患者、例えば哺乳動物への投与が許容される塩（所与の投薬レジームについて許容される哺乳動物安全性を有する対イオンを有する塩）を意味する。そのような塩は、薬学的に許容される無機または有機塩基および薬学的に許容される無機または有機酸に由来することができる。「薬学的に許容される塩」は、化合物の薬学的に許容される塩を指し、塩は、当該技術分野において周知の様々な有機および無機対イオンに由来し、単に例として、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、およびテトラアルキルアンモニウムなどが挙げられ、分子が塩基性官能基を含有する場合、有機または無機酸の塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、およびシュウ酸塩などである。

【0149】

「その塩」という用語は、酸のプロトンが陽イオン、例えば、金属陽イオンまたは有機陽イオンなどにより置き換えられた場合に形成される化合物を意味する。適用可能な場合、塩は薬学的に許容される塩であるが、これは、患者への投与が意図されない中間体化合物の塩には要求されない。例として、本化合物の塩としては、化合物が無機または有機酸によりプロトン化されて陽イオンを形成し、塩の陰イオン性成分として無機または有機酸の共役塩基を有するものが挙げられる。

【0150】

「溶媒和物」は、溶質の分子またはイオンとの溶媒分子の組合せにより形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、または両方の混合物であることができる。溶媒の一部の例としては、メタノール、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水が挙げられるがこれらに限定されない。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は水和物である。

【0151】

「立体異性体」および「立体異性体」は、同じ原子接続性を有するが空間における異なる原子配置を有する化合物を指す。立体異性体としては、シス－トランス異性体、ＥおよびＺ異性体、エナンチオマー、ならびにジアステレオマーが挙げられる。

【0152】

「互変異性体」は、原子の電子的結合および／またはプロトンの位置においてのみ異なる分子の代替的な形態、例えば、エノール－ケトおよびイミン－エナミン互変異性体、または－Ｎ＝Ｃ（Ｈ）－ＮＨ－環原子配置を含有するヘテロアリール基、例えば、ピラゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾールの互変異性体形態を指す。当業者は、他の互変異性体環原子配置が可能であることを認識する。

【0153】

「またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体」という用語は、塩、溶媒和物および立体異性体の全ての順列組合せ、例えば、主題化合物の立体異性体の薬学的に許容される塩の溶媒和物を含むことが意図されると認められる。

【0154】

「薬学的有効量」および「治療有効量」は、指定される障害もしくは疾患もしくはその症状の１もしくは複数を治療するためおよび／または疾患もしくは障害の出現を予防するために十分な化合物の量を指す。腫瘍形成性増殖性障害に関して、薬学的または治療有効量は、とりわけ、腫瘍の縮小を引き起こすためまたは腫瘍の成長速度を減少させるために十分な量を含む。

【0155】

「患者」は、ヒトおよび非ヒト対象、特に哺乳動物対象を指す。

【0156】

「治療する」または「治療」という用語は、本明細書において使用される場合、患者、例えば、哺乳動物（特にヒト）において疾患または医学的状態を治療することまたはその治療を意味し、これは、（ａ）疾患もしくは医学的状態の発生を予防すること、例えば、対象の予防的処置、（ｂ）疾患もしくは医学的状態を寛解させること、例えば、患者において疾患もしくは医学的状態を排除することもしくはその退縮を引き起こすこと、（ｃ）例えば、患者において疾患もしくは医学的状態の発生を緩慢化もしくは停止させることにより、疾患もしくは医学的状態を抑制すること、または（ｄ）患者において疾患もしくは医学的状態の症状を和らげることを含む。

【0157】

「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」という用語は本明細書において交換可能に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指す。他に特に指し示されなければ、「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、遺伝学的にコードされたおよびコードされないアミノ酸、化学的または生化学的に修飾または誘導体化されたアミノ酸、ならびに修飾されたペプチド骨格を有するポリペプチドを含むことができる。該用語は融合タンパク質を含み、これには、異種アミノ酸配列を有する融合タンパク質、異種および同種リーダー配列を有する融合物、少なくとも１つのＮ末端メチオニン残基（例えば、組換え宿主細胞における製造を促すため）を含有するタンパク質、ならびに免疫学的にタグ付加されたタンパク質などが含まれるがこれらに限定されない。

【0158】

「ネイティブなアミノ酸配列」または「親アミノ酸配列」は本明細書において交換可能に使用され、改変されたアミノ酸残基を含めるための改変前のポリペプチドのアミノ酸配列を指す。

【0159】

「アミノ酸アナログ」および「非天然アミノ酸」などの用語は交換可能に使用されることがあり、天然に存在するタンパク質（例えば、ＡｌａまたはＡ、ＣｙｓまたはＣ、ＡｓｐまたはＤ、ＧｌｕまたはＥ、ＰｈｅまたはＦ、ＧｌｙまたはＧ、ＨｉｓまたはＨ、ＩｌｅまたはＩ、ＬｙｓまたはＫ、ＬｅｕまたはＬ、ＭｅｔまたはＭ、ＡｓｎまたはＮ、ＰｒｏまたはＰ、ＧｌｎまたはＱ、ＡｒｇまたはＲ、ＳｅｒまたはＳ、ＴｈｒまたはＴ、ＶａｌまたはＶ、ＴｒｐまたはＷ、ＴｙｒまたはＹ）中に一般的に見出される１または複数のアミノ酸と構造および／または全体的な形状が類似したアミノ酸様化合物を含む。アミノ酸アナログとしてはまた、修飾された側鎖または骨格を有する天然アミノ酸が挙げられる。アミノ酸アナログとしてはまた、天然に存在するＤ型と同じ立体化学を有するアミノ酸アナログの他に、Ｌ型のアミノ酸アナログが挙げられる。一部の事例では、アミノ酸アナログは、１または複数の天然アミノ酸の骨格構造、および／または側鎖構造を共有し、（１または複数の）差異は、分子中の１または複数の修飾された基である。そのような修飾は、原子（Ｎなど）による関連する原子（Ｓなど）の置換、基（メチル、もしくはヒドロキシルなど）もしくは原子（ＣｌもしくはＢｒなど）の付加、基の欠失、共有結合の置換（単結合による二重結合の置換など）、またはこれらの組合せを含んでもよいがこれらに限定されない。例えば、アミノ酸アナログは、α－ヒドロキシ酸、およびα－アミノ酸などを含んでもよい。

【0160】

「アミノ酸側鎖」または「アミノ酸の側鎖」などの用語は、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、およびアミノ酸アナログを含む、アミノ酸残基のα－炭素に取り付けられた置換基を指すために使用されることがある。アミノ酸側鎖はまた、本明細書に記載の修飾アミノ酸および／またはコンジュゲートの文脈に記載されるようなアミノ酸側鎖を含むことができる。

【0161】

「炭水化物」などの用語は、単糖、二糖、オリゴ糖、および多糖のモノマー単位および／またはポリマーを指すために使用されることがある。糖という用語は、より小さい炭水化物、例えば、単糖、二糖を指すために使用されることがある。「炭水化物誘導体」という用語は、関心対象の炭水化物の１または複数の官能基が、置換された（任意の好都合な置換基により置き換えられた）、修飾された（任意の好都合な化学を使用して別の基に変換された）または存在しない（例えば、排除されたもしくはＨにより置き換えられた）化合物を含む。様々な炭水化物および炭水化物誘導体が利用可能であり、主題化合物およびコンジュゲートにおける使用のために適合されてもよい。

【0162】

「グリコシド」または「グリコシル」という用語は、グリコシド結合を介して部分に結合した糖分子または基を指す。例えば、グリコシドが結合した部分は、本明細書に記載されるような切断可能なリンカーであることができる。グリコシド結合は、様々な種類の結合、以下に限定されないが例えば、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、またはＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシドもしくはＣ－グリコシル）を通じて、グリコシドを他の部分に連結することができる。一部の場合には、グリコシドは、例えば、化学的に媒介される加水分解または酵素的に媒介される加水分解により、それらが取り付けられた部分から切断されることができる。

【0163】

「抗体」という用語は最も広い意味において使用され、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、および多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト化抗体、単鎖抗体、キメラ抗体、および抗体断片（例えば、Ｆａｂ断片）などを含む。抗体は標的抗原に結合することができる。（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、抗体の１または複数の可変領域により形成される相補性決定領域（ＣＤＲ）により認識される、エピトープとも呼ばれる１または複数の結合部位を有することができる。

【0164】

「天然抗体」という用語は、抗体の重鎖および軽鎖が多細胞生物の免疫系により作られ、対合された抗体を指す。脾臓、リンパ節、骨髄および血清は、天然抗体を産生する組織の例である。例えば、抗原を用いて免疫化された第１の動物から単離された抗体産生細胞により産生された抗体は天然抗体である。

【0165】

「ヒト化抗体」または「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、ヒト抗体からの対応する位置のアミノ酸で置換された（例えば、フレームワーク領域、定常領域またはＣＤＲ中の）１または複数のアミノ酸を含有する非ヒト（例えば、マウスまたはウサギ）抗体を指す。一般に、ヒト化抗体は、同じ抗体の非ヒト化バージョンと比較して、ヒト宿主において低減した免疫応答を生じさせる。抗体は、当該技術分野において公知の様々な技術を使用してヒト化することができ、該技術としては、例えば、ＣＤＲグラフティング（ＥＰ ２３９，４００；ＰＣＴ国際公開第９１／０９９６７号；米国特許第５，２２５，５３９号明細書；同第５，５３０，１０１号明細書、および同第５，５８５，０８９号明細書）、ベニアリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）またはリサーフェシング（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）（ＥＰ ５９２，１０６；ＥＰ ５１９，５９６；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２８（４／５）：４８９－４９８（１９９１）；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ７（６）：８０５－８１４（１９９４）；Ｒｏｇｕｓｋａ．ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ９１：９６９－９７３（１９９４））、ならびに鎖シャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号明細書）が挙げられる。ある特定の実施形態では、フレームワーク置換は、抗原結合のために重要なフレームワーク残基を同定するためのＣＤＲおよびフレームワーク残基の相互作用のモデリング、ならびに特定の位置における普通でないフレームワーク残基を同定するための配列比較により同定される（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号明細書；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３（１９８８）を参照）。本発明における使用のために想定される抗体をヒト化する追加の方法は、米国特許第５，７５０，０７８号明細書；同第５，５０２，１６７号明細書；同第５，７０５，１５４号明細書；同第５，７７０，４０３号明細書；同第５，６９８，４１７号明細書；同第５，６９３，４９３号明細書；同第５，５５８，８６４号明細書；同第４，９３５，４９６号明細書、および同第４，８１６，５６７号明細書、ならびにＰＣＴ国際公開第９８／４５３３１号および同第９８／４５３３２号に記載されている。特定の実施形態では、対象ウサギ抗体は、米国特許出願公開第２００４００８６９７９号明細書および米国特許出願公開第２００５００３３０３１号明細書に示される方法にしたがってヒト化されてもよい。よって、上記の抗体は、当該技術分野において周知の方法を使用してヒト化されてもよい。

【0166】

「キメラ抗体」という用語は、その軽鎖および重鎖遺伝子が、異なる種に属する抗体可変および定常領域遺伝子から、典型的には遺伝子操作により、構築された抗体を指す。例えば、マウスモノクローナル抗体からの遺伝子の可変セグメントは、ヒト定常セグメント、例えば、ガンマ１およびガンマ３に連結されてもよい。治療用キメラ抗体の例は、マウス抗体からの可変または抗原結合ドメインおよびヒト抗体からの定常またはエフェクタードメインから構成されるハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種からのドメインが使用されてもよい。

【0167】

免疫グロブリンポリペプチド免疫グロブリン軽鎖または重鎖可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とも呼ばれる３つの超可変領域が差し挟まれたフレームワーク領域（ＦＲ）から構成される。フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲が定義されている（’’Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，’’Ｅ．Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，１９９１を参照）。構成要素となる軽鎖および重鎖のフレームワーク領域の組合せである抗体のフレームワーク領域は、ＣＤＲを配置および整列させるために役立つ。ＣＤＲは、抗原のエピトープへの結合の主な原因となる。

【0168】

「親Ｉｇポリペプチド」は、本明細書に記載されるようなアルデヒドタグ付加定常領域を欠いたアミノ酸配列を含むポリペプチドである。親ポリペプチドは、ネイティブ配列定常領域を含んでもよく、または既存のアミノ酸配列改変（付加、欠失および／または置換など）を有する定常領域を含んでもよい。

【0169】

本明細書において使用される場合、「単離された」という用語は、関心対象の化合物が天然に存在する環境とは異なる環境にある該化合物を記載することが意味される。「単離された」は、関心対象の化合物が実質的に富化されたかつ／または関心対象の化合物が部分的もしくは実質的に精製された試料内にある化合物を含むことが意味される。

【0170】

本明細書において使用される場合、「実質的に精製された」という用語は、その天然の環境から取り除かれ、それが天然において一緒にある他の成分の少なくとも６０％を非含有である、少なくとも７５％を非含有である、少なくとも８０％を非含有である、少なくとも８５％を非含有である、少なくとも９０％を非含有である、少なくとも９５％を非含有である、少なくとも９８％を非含有である、または９８％より多くを非含有である、化合物を指す。

【0171】

「生理学的条件」という用語は、生細胞と適合性の条件、例えば、生細胞と適合性の温度、ｐＨ、塩分などの主に水性の条件を包含することが意味される。

【0172】

「反応性パートナー」により、別の反応性パートナーと特異的に反応して反応生成物を生成する分子または分子部分が意味される。例示的な反応性パートナーとしては、スルファターゼモチーフのシステインまたはセリンおよびホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）が挙げられ、これらは、反応して、モチーフ中のシステインまたはセリンの代わりにホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）を含有する変換されたアルデヒドタグの反応生成物を形成する。他の例示的な反応性パートナーとしては、変換されたアルデヒドタグのｆＧｌｙ残基のアルデヒド（例えば、反応性アルデヒド基）、ならびにアルデヒド反応性基および関心対象の部分を含み、かつ反応して、修飾されたｆＧｌｙ残基を通じて修飾されたポリペプチドに共役した関心対象の部分を有する修飾されたアルデヒドタグ付加ポリペプチドの反応生成物を形成する、「アルデヒド反応性の反応性パートナー」が挙げられる。

【0173】

「Ｎ末端」は、遊離アミン基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基であって、非Ｎ末端アミノ酸残基中のアミン基がポリペプチドの共有結合性骨格の部分を通常形成するものを指す。

【0174】

「Ｃ末端」は、遊離カルボキシル基を有するポリペプチドの末端アミノ酸残基であって、非Ｃ末端アミノ酸残基中のカルボキシル基がポリペプチドの共有結合性骨格の部分を通常形成するものを指す。

【0175】

ポリペプチドまたはポリペプチドのアミノ酸配列に関して使用された場合の「内部部位」は、Ｎ末端でもＣ末端でもないポリペプチドの領域を意味する。

【0176】

本発明をさらに記載する前に、本発明は記載される特定の実施形態に限定されず、当然ながら変更され得ることが理解されるべきである。本明細書において使用される学術用語は、特定の実施形態を記載する目的のものに過ぎず、限定的であることは意図されないことも理解されるべきであり、本発明の範囲は添付の請求項によってのみ限定される。

【0177】

値の範囲が提供される場合、その範囲の上限および下限の間の、文脈が他に明確に規定しなければ下限の単位の１０分の１までの、各介在する値、ならびにその記載される範囲内の任意の他の記載されるまたは介在する値が本発明に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、記載される範囲内の任意の特に除外される限度を条件として、このより小さい範囲内に独立して含まれることができ、そしてまた本発明に包含される。記載される範囲が限度の１または両方を含む場合、それらの含まれる限度のいずれかまたは両方を除外する範囲もまた本発明に含まれる。

【0178】

明確性のために別々の実施形態の文脈において記載される本発明のある特定の特徴はまた、単一の実施形態において組合せで提供されてもよいことが認められる。反対に、簡潔性のために単一の実施形態の文脈において記載される本発明の様々な特徴はまた、別々にまたは任意の好適な部分的組合せで提供されてもよい。本発明に関する実施形態の全ての組合せは、それぞれおよびあらゆる組合せが、例えば、安定な化合物（すなわち、作り、単離し、特徴付け、および生物学的活性のために試験することができる化合物）である化合物である主題を包含する程度まで、そのような組合せが個々に明示的に開示されたかのように、本発明により特に包含され、本明細書に開示される。追加的に、様々な実施形態およびその要素（例えば、そのような可変要素を記載する実施形態において列記される化学基の要素）の全ての部分的組合せもまた、それぞれおよびあらゆるそのような部分的組合せが個々に明示的に本明細書に開示されたかのように、本発明により特に包含され、本明細書に開示される。

【0179】

他に定義されなければ、本明細書において使用される全ての科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似または同等の任意の方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法および材料がこれより記載される。本明細書において言及される全ての刊行物は、刊行物が参照される繋がりで方法および／または材料を開示および記載するために参照により本明細書に組み込まれる。

【0180】

本明細書および添付の請求項において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が他に明確に規定しなければ複数の指示対象を含むことが留意されなければならない。請求項は、任意の任意選択的な要素を除外するように起草されていることがあるとさらに留意される。そのため、この言明は、請求項の要素の記載との繋がりで「単独で」（ｓｏｌｅｌｙ）および「のみ」（ｏｎｌｙ）などの排他的な学術用語の使用、または「消極的」（ｎｅｇａｔｉｖｅ）限定のための先行的な基礎として役立つことが意図される。

【0181】

明確性のために別々の実施形態の文脈において記載される本発明のある特定の特徴はまた、単一の実施形態において組合せで提供されてもよいことが認められる。反対に、簡潔性のために単一の実施形態の文脈において記載される本発明の様々な特徴はまた、別々にまたは任意の好適な部分的組合せで提供されてもよい。

【0182】

本明細書において議論される刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示のためにのみ提供される。本明細書におけるいかなる記載も、本発明は、先行発明を理由としてそのような刊行物に先行する権利がないと認めるものと解釈されるべきではない。さらに、提供される刊行日は、実際の刊行日とは異なることがあり、実際の刊行日は独立して確認される必要がある場合がある。

【0183】

詳細な説明
本開示は、抗体を薬物に連結する切断可能なリンカーを含む抗体－薬物コンジュゲート構造物を提供する。切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分および第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を含む。本開示はまた、そのようなコンジュゲートの製造方法の他に、その使用方法を包含する。

【0184】

抗体－薬物コンジュゲート
本開示は、コンジュゲート、例えば、抗体－薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。「コンジュゲート」により、第１の部分（例えば、抗体）が第２の部分（例えば、薬物または活性剤）と安定的に会合していることが意味される。例えば、抗体－薬物コンジュゲートは、別の部分（例えば、抗体）と安定的に会合した薬物（例えば、メイタンシン、アウリスタチンまたはデュオカルマイシン活性剤部分）を含む。「安定的に会合した」により、部分が標準的な条件下で別の部分または構造に結合していることが意味される。ある特定の実施形態では、第１および第２の部分は、１または複数の官能基および共有結合を通じて互いに結合している。例えば、１または複数の官能基および共有結合は、本明細書に記載されるような切断可能なリンカーを含むことができる。

【0185】

ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、第２の部分に共役したポリペプチド（例えば、抗体）を含むポリペプチドコンジュゲートである。ある特定の実施形態では、ポリペプチドに共役した部分は、関心対象の任意の様々な部分、以下に限定されないが例えば、検出可能な標識、薬物、水溶性ポリマー、または膜もしくは表面へのポリペプチドの固定化のための部分であることができる。ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、ポリペプチドが抗体である薬物コンジュゲートであり、そのため抗体－薬物コンジュゲートを提供する。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドが薬物または活性剤部分に共役した薬物コンジュゲートであることができる。例えば、薬物または活性剤はメイタンシンであることができる。「メイタンシン」、「メイタンシン部分」、「メイタンシン活性剤部分」および「メイタンシノイド」は、メイタンシンおよびそのアナログおよび誘導体、ならびに薬学的に活性のメイタンシン部分および／またはその部分を指す。ポリペプチドに共役したメイタンシンは、様々なメイタンシノイド部分のいずれか、以下に限定されないが例えば、メイタンシンならびに本明細書に記載されるようなそのアナログおよび誘導体（例えば、デアシルメイタンシン（ｄｅａｃｙｌｍａｙｔａｎｓｉｎｅ））であることができる。他の事例では、薬物または活性剤は、アウリスタチン、もしくはそのアナログもしくは誘導体、または薬学的に活性のアウリスタチン部分および／もしくはその部分であることができる。ポリペプチドに共役したアウリスタチンは、様々なアウリスタチン部分のいずれか、以下に限定されないが例えば、アウリスタチンならびに本明細書に記載されるようなそのアナログおよび誘導体であることができる。他の場合には、薬物または活性剤は、デュオカルマイシン、もしくはそのアナログもしくは誘導体、または薬学的に活性のデュオカルマイシン部分および／もしくはその部分であることができる。ポリペプチドに共役したデュオカルマイシンは、様々なデュオカルマイシン部分のいずれか、以下に限定されないが例えば、デュオカルマイシンならびに本明細書に記載されるようなそのアナログおよび誘導体であることができる。

【0186】

ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、抗体および薬物がリンカーにより連結された抗体－薬物コンジュゲートである。一部の事例では、リンカーは切断可能なリンカーである。切断可能なリンカーは、１または複数の切断可能な部分を含むリンカーであり、切断可能な部分は、ある特定の条件下で解離して、切断可能なリンカーを２またはそれより多くの分離可能な部分に分離させることができる１または複数の結合を含む。例えば、切断可能な部分は、ある特定の条件下で解離または分解して、切断可能なリンカーを２またはそれより多くの部分に分離させることができる１または複数の共有結合を含んでもよい。そのため、切断可能なリンカーは、適切な条件下で切断されて、薬物の所望の標的作用部位において抗体から薬物を分離または放出させるように抗体－薬物コンジュゲート中に含まれることができる。

【0187】

一部の事例では、切断可能なリンカーは、２つの切断可能な部分、例えば、第１の切断可能な部分および第２の切断可能な部分を含む。両方の切断可能な部分の切断が薬物の所望の標的作用部位において抗体から薬物を分離または放出させるために必要とされるように切断可能な部分は構成されることができる。例えば、切断可能なリンカーの切断は、最初に２つの切断可能な部分の１つを切断し、次に２つの切断可能な部分の他方を切断することにより達成することができる。ある特定の実施形態では、切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分および第１の切断可能な部分の切断を妨害する第２の切断可能な部分を含む。「切断を妨害する」により、切断されていない第２の切断可能な部分の存在が第１の切断可能な部分の可能性を低減させまたはその切断を実質的に阻害し、そのため切断可能なリンカーの量を実質的に低減させまたはその切断を予防することが意味される。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分の酵素的および／または化学的切断を妨害することができる。第２の切断可能な部分の存在による第１の切断可能な部分の切断の妨害は次いで、抗体からの薬物の量を実質的に低減させまたはその放出を予防する。例えば、抗体からの薬物の未熟な放出は、抗体－薬物コンジュゲートが薬物の所望の標的作用部位またはその近くにあるまで実質的に低減または予防されることができる。

【0188】

一部の場合には、第２の切断可能な部分は第１の切断可能な部分の切断を妨害するので、切断可能なリンカーの切断は、最初に第２の切断可能な部分を切断し、次に第１の切断可能な部分を切断することにより達成することができる。第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分の切断に対する妨害を低減させまたは排除して、第１の切断可能な部分が切断されることを可能とすることができる。第１の切断可能な部分の切断は、上記のように切断可能なリンカーが２またはそれより多くの部分に解離または分離して抗体－薬物コンジュゲートから薬物が放出されることを結果としてもたらすことができる。一部の事例では、第１の切断可能な部分の切断は、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で実質的に起こらない。実質的により、第１の切断可能な部分の約１０％またはそれ未満の切断が、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で起こること、例えば、第１の切断可能な部分の約９％もしくはそれ未満、または約８％もしくはそれ未満、または約７％もしくはそれ未満、または約６％もしくはそれ未満、または約５％もしくはそれ未満、または約４％もしくはそれ未満、または約３％もしくはそれ未満、または約２％もしくはそれ未満、または約１％もしくはそれ未満、または約０．５％もしくはそれ未満、または約０．１％もしくはそれ未満の切断が、切断されていない第２の切断可能な部分の存在下で起こることが意味される。

【0189】

換言すれば、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分を切断から保護することができる。例えば、切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分を切断から保護して、抗体－薬物コンジュゲートが薬物の所望の標的作用部位またはその近くにあるまで抗体からの薬物の未熟な放出を実質的に低減させまたは予防することができる。そのため、第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分を露出させて（例えば、第１の切断可能な部分を脱保護して）、第１の切断可能な部分が切断されることを可能とし、これは切断可能なリンカーの切断を結果としてもたらし、これは次いで、上記のように薬物の所望の標的作用部位において抗体から薬物を分離または放出させる。ある特定の事例では、第２の切断可能な部分の切断は、第１の切断可能な部分をその後の切断に向けて露出させるが、第２の切断可能な部分の切断はそれ自体では、切断可能なリンカーの切断を結果としてもたらさない（すなわち、切断可能なリンカーを切断するために第１の切断可能な部分の切断が依然として必要とされる）。

【0190】

切断可能なリンカー中に含まれる切断可能な部分のそれぞれは、化学的に切断可能な部分または酵素的に切断可能な部分であってもよい。例えば、第１の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であることができ、かつ第２の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であることができる。他の事例では、第１の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であることができ、かつ第２の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であることができ、または第１の切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であることができ、かつ第２の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であることができる。一部の実施形態では、第１の切断可能な部分は第１の酵素的に切断可能な部分であり、かつ第２の切断可能な部分は第２の酵素的に切断可能な部分である。

【0191】

例えば、切断可能な部分は化学的に切断可能な部分であることができる。化学的に切断可能な部分としては、ある特定の化学的条件の存在下で切断されることができる切断可能な部分が挙げられる。一部の場合には、化学的に切断可能な部分は、ある特定の化学的条件の存在下で解離して、切断可能な部分を２またはそれより多くの分離可能な部分に分離させることができる１または複数の結合を含む。例えば、化学的に切断可能な部分は、化学的に切断可能な部分の加水分解に繋がり得る化学的条件、例えば、酸性条件またはアルカリ条件の存在下で切断されることができる。一部の事例では、化学的に切断可能な部分が切断される化学的条件は、所望の標的作用部位、例えば、抗体－薬物コンジュゲートから放出されるべき薬物の所望の標的作用部位において存在することができる。一部の場合には、化学的に切断可能な部分の所望の切断部位において見出される化学的条件は、他の区画中、例えば、全血、血漿または血清中に有意な量で存在しない。そのため、化学的に切断可能な部分の切断は、実質的な切断が所望の作用部位において起こる一方で、切断は他の区画において有意に起こらず、抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位に達する前にも有意に起こらないように制御されることができる。

【0192】

一部の事例では、切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であってもよい。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用を通じて上記のように２またはそれより多くの部分に分離されることができる切断可能な部分である。酵素的に切断可能な部分は、酵素の酵素作用を通じて切断されることができる任意の切断可能な部分、以下に限定されないが例えば、ペプチドおよびグリコシドなどであることができる。一部の事例では、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、所望の標的作用部位、例えば、抗体－薬物コンジュゲートから放出されるべき薬物の所望の標的作用部位において存在する。一部の場合には、酵素的に切断可能な部分を切断する酵素は、他の区画中、例えば、全血、血漿または血清中に有意な量で存在しない。そのため、酵素的に切断可能な部分の切断は、実質的な切断が所望の作用部位において起こる一方で、切断は他の区画において有意に起こらず、抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位に達する前にも有意に起こらないように制御されることができる。

【0193】

例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、がんの治療のため、例えば、がん細胞が存在する所望の作用部位へのがん治療薬の送達のために使用されることができる。一部の場合には、酵素、例えば、プロテアーゼ酵素カテプシンＢは、がん細胞において過剰発現されるがんのバイオマーカーであることができる。がんにおけるある特定の酵素の過剰発現、およびそのため局在性は、所望の作用部位（すなわち、がん（および過剰発現される酵素）の部位）において薬物を特異的に放出するために本開示の抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカー中に含まれる酵素的に切断可能な部分の文脈において使用されることができる。そのため、一部の実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、がん細胞において過剰発現される酵素により切断されることができる切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。例えば、酵素はプロテアーゼ酵素カテプシンＢであることができる。そのため、一部の事例では、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ酵素、例えば、カテプシンＢにより切断されることができる切断可能な部分（例えば、ペプチド）である。

【0194】

ある特定の実施形態では、酵素的に切断可能な部分はペプチドである。ペプチドは、切断可能なリンカーにおける使用のために好適であり、かつ酵素の酵素作用を通じて切断されることができる任意のペプチドであることができる。酵素的に切断可能な部分として使用されることができるペプチドの非限定的な例としては、例えば、Ｖａｌ－ＡｌａおよびＰｈｅ－Ｌｙｓなどが挙げられる。例えば、上記の第１の切断可能な部分（すなわち、第２の切断可能な部分により未熟な切断から保護される切断可能な部分）はペプチドを含むことができる。切断されていない第２の切断可能な部分の存在は、第１の切断可能な部分（ペプチド）をプロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）による切断から保護して、抗体－薬物コンジュゲートが薬物の所望の標的作用部位またはその近くにあるまで抗体からの薬物の未熟な放出を実質的に低減させまたは予防することができる。一部の事例では、第１の切断可能な部分を構成するペプチドのアミノ酸残基の１つは置換基を含み、置換基は第２の切断可能な部分を含む。一部の事例では、第２の切断可能な部分はグリコシドを含む。他の実施形態では、第２の切断可能な部分はペプチドを含むことができる。他の実施形態では、第１の切断可能な部分はペプチドを含み、かつ第２の切断可能な部分はペプチドを含む。

【0195】

一部の実施形態では、酵素的に切断可能な部分は糖部分、例えば、グリコシド（またはグリコシル）である。一部の場合には、グリコシドは、グリコシドを含まない切断可能なリンカーと比較して切断可能なリンカーの親水性における増加を促すことができる。グリコシドは、切断可能なリンカーにおける使用のために好適であり、かつ酵素の酵素作用を通じて切断されることができる任意のグリコシドであることができる。例えば、第２の切断可能な部分（すなわち、未熟な切断から第１の切断可能な部分を保護する切断可能な部分）はグリコシドであることができる。他の実施形態では、第１の切断可能な部分はグリコシドを含むことができる。他の実施形態では、第１の切断可能な部分はグリコシドを含み、かつ第２の切断可能な部分はグリコシドを含む。他の実施形態では、第１の切断可能な部分はペプチドを含み、かつ第２の切断可能な部分はグリコシドを含む。他の実施形態では、第１の切断可能な部分はグリコシドを含み、かつ第２の切断可能な部分はペプチドを含む。

【0196】

グリコシドは、グリコシド結合を通じて切断可能なリンカーに取り付けられる（共有結合する）ことができる。グリコシド結合は、様々な種類の結合、以下に限定されないが例えば、Ｏ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）、Ｎ－グリコシド結合（グリコシルアミン）、Ｓ－グリコシド結合（チオグリコシド）、またはＣ－グリコシド結合（Ｃ－グリコシドもしくはＣ－グリコシル）を通じて、グリコシドを切断可能なリンカーに連結することができる。一部の事例では、グリコシド結合はＯ－グリコシド結合（Ｏ－グリコシド）である。一部の場合には、グリコシドは、酵素により（例えば、グリコシド結合の酵素的に媒介された加水分解を通じて）それが取り付けられた切断可能なリンカーから切断されることができる。グリコシドは、グリコシドを切断可能なリンカーに取り付けるグリコシド結合の切断（加水分解）を実行することができる任意の好都合な酵素により切断可能なリンカーから除去または切断されることができる。グリコシドを切断可能なリンカーに取り付けるグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用することができる酵素の例はβ－グルクロニダーゼである。グリコシドを切断可能なリンカーに取り付けるグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために他の好適な酵素もまた使用することができる。一部の場合には、グリコシドを切断可能なリンカーに取り付けるグリコシド結合の切断（加水分解）を媒介するために使用される酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位またはその近くに見出される。例えば、酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位またはその近くにある細胞中に見出されるリソソーム酵素であることができる。一部の場合には、酵素は、第１の切断可能な部分の切断を媒介する酵素が見出される標的部位またはその近くに見出される酵素である。

【0197】

ある特定の実施形態では、第１の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分である。

【0198】

関心対象の部分（例えば、薬物または活性剤）は、ポリペプチド（例えば、抗体）の任意の所望の部位においてポリペプチドに共役されることができる。そのため、本開示は、例えば、ポリペプチドのＣ末端またはその近くの部位において共役した部分を有する修飾されたポリペプチドを提供する。他の例としては、ポリペプチドのＮ末端またはその近くの位置において共役した部分を有する修飾されたポリペプチドが挙げられる。例としてはまた、ポリペプチドのＣ末端およびＮ末端の間の位置（例えば、ポリペプチドの内部部位）において共役した部分を有する修飾されたポリペプチドが挙げられる。修飾されたポリペプチドが２またはそれより多くの部分に共役した、上記のものの組合せもまた可能である。

【0199】

ある特定の実施形態では、本開示のコンジュゲートは、アミノ酸残基のα炭素においてポリペプチドのアミノ酸残基に共役した薬物または活性剤を含む。換言すれば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１または複数のアミノ酸残基の側鎖が、薬物または活性剤に取り付けられる（例えば、本明細書に記載されるようなリンカーを通じて薬物または活性剤に取り付けられる）ように修飾されたポリペプチドを含む。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１または複数のアミノ酸残基のα炭素が、メイタンシンに取り付けられる（例えば、本明細書に記載されるようなリンカーを通じてメイタンシンに取り付けられる）ように修飾されたポリペプチドを含む。他の事例では、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１または複数のアミノ酸残基のα炭素が、アウリスタチンに取り付けられる（例えば、本明細書に記載されるようなリンカーを通じてアウリスタチンに取り付けられる）ように修飾されたポリペプチドを含む。他の事例では、コンジュゲートは、ポリペプチド中の１または複数のアミノ酸残基のα炭素が、デュオカルマイシンに取り付けられる（例えば、本明細書に記載されるようなリンカーを通じてデュオカルマイシンに取り付けられる）ように修飾されたポリペプチドを含む。

【0200】

本開示の実施形態は、ポリペプチドが１または複数の部分、例えば、２個の部分、３個の部分、４個の部分、５個の部分、６個の部分、７個の部分、８個の部分、９個の部分、または１０個またはそれより多くの部分に共役したコンジュゲートを含む。部分は、ポリペプチド中の１または複数の部位においてポリペプチドに共役していてもよい。例えば、１または複数の部分は、ポリペプチドの単一のアミノ酸残基に共役していてもよい。一部の場合には、１個の部分がポリペプチドのアミノ酸残基に共役している。他の実施形態では、２個の部分がポリペプチドの同じアミノ酸残基に共役していてもよい。他の実施形態では、第１の部分はポリペプチドの第１のアミノ酸残基に共役しており、かつ第２の部分はポリペプチドの第２のアミノ酸残基に共役している。例えば、ポリペプチドが第１のアミノ酸残基において第１の部分に共役しており、かつ第２のアミノ酸残基において２個の他の部分に共役している上記のものの組合せもまた可能である。他の組合せ、以下に限定されないが例えば、第１のアミノ酸残基において第１および第２の部分に共役しており、かつ第２のアミノ酸残基において第３および第４の部分に共役しているポリペプチドなどもまた可能である。

【0201】

１または複数の部分に共役したポリペプチドの１または複数のアミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸、非天然アミノ酸、またはこれらの組合せであってもよい。例えば、コンジュゲートは、ポリペプチドの天然に存在するアミノ酸残基に共役した部分を含んでもよい。他の事例では、コンジュゲートは、ポリペプチドの非天然アミノ酸残基に共役した部分を含んでもよい。１または複数の部分は、上記のような単一の天然または非天然アミノ酸残基においてポリペプチドに共役していてもよい。ポリペプチド中の１または複数の天然または非天然アミノ酸残基は、本明細書に記載されるように１または複数の部分に共役していてもよい。例えば、ポリペプチド中の２個（またはそれより多く）のアミノ酸残基（例えば、天然または非天然アミノ酸残基）のそれぞれは、ポリペプチド中の複数の部位が修飾されるように、１または２個の部分に共役していてもよい。

【0202】

本明細書に記載されるように、ポリペプチドは１または複数の部分に共役していてもよい。ある特定の実施形態では、関心対象の部分は化学的実体、例えば、薬物または検出可能な標識である。例えば、薬物（例えば、メイタンシン、アウリスタチンもしくはデュオカルマイシン）がポリペプチドに共役していてもよく、または他の実施形態では、検出可能な標識がポリペプチドに共役していてもよい。そのため、例えば、本開示の実施形態としては、以下：ポリペプチドおよび薬物のコンジュゲート；ポリペプチドおよび検出可能な標識のコンジュゲート；２またはそれより多くの薬物およびポリペプチドのコンジュゲート；ならびに２またはそれより多くの検出可能な標識およびポリペプチドのコンジュゲートなどが挙げられるがこれらに限定されない。

【0203】

ある特定の実施形態では、ポリペプチドおよび関心対象の部分は、カップリング部分を通じて共役している。例えば、ポリペプチドおよび関心対象の部分のそれぞれはカップリング部分に結合（例えば、共有結合）していてもよく、そのためポリペプチドおよび関心対象の部分（例えば、薬物、例えば、メイタンシン）をカップリング部分を通じて間接的に結合していてもよい。一部の場合には、カップリング部分は、ヒドラジニル－インドリルもしくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物、またはヒドラジニル－インドリルもしくはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物の誘導体を含む。例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を通じて関心対象の部分（例えば、メイタンシン）をポリペプチドにカップリングするための一般スキームは以下の一般反応スキームに示される。ヒドラジニル－インドリルおよびヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、本明細書においてヒドラジノ－イソ－ピクテ－スプレングラー（ＨＩＰＳ）カップリング部分およびアザ－ヒドラジノ－イソ－ピクテ－スプレングラー（ａｚａＨＩＰＳ）カップリング部分とそれぞれ称されることもある。

【化23】

【0204】

上記の反応スキームにおいて、Ｒは、ポリペプチドに共役した（例えば、本明細書に記載されるような切断可能なリンカーを通じてポリペプチドに共役した）関心対象の部分（例えば、薬物または活性剤）を含む。上記の反応スキームに示されるように、２－ホルミルグリシン残基（ｆＧｌｙ）を含むポリペプチドを、カップリング部分（例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を含むように修飾された薬物または活性剤と反応させて、カップリング部分に取り付けられたポリペプチドコンジュゲートが生成され、そのためカップリング部分を通じて薬物または活性剤はポリペプチドに取り付けられる。

【0205】

本明細書に記載されるように、部分は、様々な部分のいずれか、以下に限定されないが例えば、化学的実体、例えば、検出可能な標識、または薬物であることができる。Ｒ’およびＲ’’は、それぞれ独立して、任意の所望の置換基、以下に限定されないが例えば、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルであってもよい。Ｚは、ＣＲ^２１、ＮＲ^２２、Ｎ、ＯまたはＳであってもよく、Ｒ^２１およびＲ^２２は、上記のＲ’およびＲ’’について記載される任意の置換基からそれぞれ独立して選択される。

【0206】

本明細書に記載のコンジュゲートおよび化合物に示されるように、他のヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分もまた可能である。例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカーに取り付けられる（例えば、共有結合的に取り付けられる）ように修飾されてもよい。そのため、本開示の実施形態は、リンカーを通じて薬物または活性剤に取り付けられたヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む。ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物または活性剤にカップリングし得るリンカーの様々な実施形態は本明細書において詳細に記載される。例えば、一部の事例では、リンカーは切断可能なリンカー、例えば、本明細書に記載されるような切断可能なリンカーである。

【0207】

ある特定の実施形態では、関心対象の部分への共役前に修飾されたポリペプチドが関心対象の部分に共役していてもよい。ポリペプチドの修飾は、関心対象の部分への共役のために好適な１または複数の反応性基を含有する修飾されたポリペプチドを生成し得る。一部の場合には、ポリペプチドは、関心対象の部分（例えば、カップリング部分、例えば、上記のようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含む部分）への共役のために好適な１または複数の反応性基を提供するために１または複数のアミノ酸残基において修飾されてもよい。例えば、ポリペプチドは、反応性アルデヒド基（例えば、反応性アルデヒド）を含むように修飾されてもよい。反応性アルデヒドは、「アルデヒドタグ」または「ａｌｄ－タグ」中に含まれてもよく、「アルデヒドタグ」または「ａｌｄ－タグ」は、本明細書において使用される場合、２－ホルミルグリシン残基（本明細書において「ＦＧｌｙ」と称される）を含有するようにホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用により変換されたスルファターゼモチーフ（例えば、Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲ）に由来するアミノ酸配列を指す。ＦＧＥにより生成されたＦＧｌｙ残基は、「ホルミルグリシン」とも称されることがある。換言すれば、「アルデヒドタグ」という用語は、「変換された」スルファターゼモチーフ（すなわち、システインまたはセリン残基がＦＧＥの作用によりＦＧｌｙに変換されたスルファターゼモチーフ、例えば、Ｌ（ＦＧｌｙ）ＴＰＳＲ）を含むアミノ酸配列を指すために本明細書において使用される。変換されたスルファターゼモチーフは、「変換されていない」スルファターゼモチーフ（すなわち、システインまたはセリン残基がＦＧＥによりＦＧｌｙに変換されていないが、変換されることができるスルファターゼモチーフ、例えば、配列：Ｌ（Ｃ／Ｓ）ＴＰＳＲを有する変換されていないスルファターゼモチーフ）を含むアミノ酸配列に由来してもよい。スルファターゼモチーフに対するホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）の作用の文脈において使用される「変換」は、ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基へのスルファターゼモチーフ中のシステインまたはセリン残基の生化学的修飾（例えば、ＣｙｓをＦＧｌｙへ、またはＳｅｒをＦＧｌｙへ）を指す。アルデヒドタグおよび部位特異的なタンパク質修飾におけるその使用の追加の態様は、米国特許第７，９８５，７８３号明細書および米国特許第８，７２９，２３２号明細書に記載されており、これらのそれぞれの開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【0208】

一部の場合には、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾されたポリペプチドは、化合物（例えば、上記のような、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する化合物）とのＦＧｌｙの反応により関心対象の部分に共役していてもよい。例えば、ＦＧｌｙ含有ポリペプチドを反応性パートナー含有薬物と、ポリペプチドへの薬物の共役を提供するために好適な条件下で接触させてもよい。一部の事例では、反応性パートナー含有薬物は、上記のようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含んでもよい。例えば、薬物または活性剤は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含むように修飾されてもよい。一部の場合には、薬物または活性剤は、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに取り付けられる、例えば、リンカー、例えば、本明細書に詳細に記載されるような切断可能なリンカーを通じてヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルに共有結合的に取り付けられる。

【0209】

ある特定の実施形態では、本開示のコンジュゲートは、少なくとも１つの修飾されたアミノ酸残基を有するポリペプチド（例えば、抗体）を含む。ポリペプチドの修飾されたアミノ酸残基は、上記のようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物または活性剤にカップリングされてもよい。ある特定の実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体）の修飾されたアミノ酸残基は、上記のようにＦＧｌｙ残基に変換されたシステインまたはセリン残基に由来してもよい。ある特定の実施形態では、ＦＧｌｙ残基は、上記のようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物または活性剤に共役して、薬物または活性剤がヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を通じてポリペプチドに共役した本開示のコンジュゲートを提供する。本明細書において使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、関心対象の部分（例えば、薬物または活性剤）にカップリングされるポリペプチド（例えば、抗体）の修飾されたアミノ酸残基を指す。

【0210】

ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、本明細書に記載されるような少なくとも１つの修飾されたアミノ酸残基を含み、修飾されたアミノ酸残基は、本明細書に記載されるようなリンカー（切断可能なリンカー）に取り付けられており、リンカーは次いで、薬物または活性剤に取り付けられている。例えば、コンジュゲートは、上記のような少なくとも１つの修飾されたアミノ酸残基（ＦＧｌｙ’）を含んでもよい。一部の実施形態では、コンジュゲートは、式（Ｉ）：

【化24】

【0211】

のコンジュゲートであり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^１は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、および置換されたアルキニルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは１～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、
Ｗ^１は薬物であり、かつ
Ｗ^２は抗体であり、
Ｌ^１、Ｒ^６またはＲ^７のうちの１つは第２の切断可能な部分を含む。

【0212】

式（Ｉ）のある特定の実施形態では、ｎは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉａ）：

【化25】

【0213】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’またはＲ^６’’のうちの１つは第２の切断可能な部分を含み、かつＲ^６’およびＲ^６’’のうちの他方は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。

【0214】

例えば、コンジュゲートは、式（Ｉｂ）：

【化26】

【0215】

のコンジュゲートであることができる。

【0216】

他の事例では、コンジュゲートは、式（Ｉｃ）：

【化27】

【0217】

のコンジュゲートであることができる。

【0218】

式（Ｉ）のある特定の実施形態では、ｋは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉｄ）：

【化28】

【0219】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は第２の切断可能な部分を含む。

【0220】

例えば、コンジュゲートは、式（Ｉｅ）：

【化29】

【0221】

のコンジュゲートであることができる。

【0222】

式（Ｉ）のある特定の実施形態では、ｋは２であり、かつコンジュゲートは、式（Ｉｆ）：

【化30】

【0223】

のコンジュゲートであり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^８は第２の切断可能な部分を含む。

【0224】

例えば、コンジュゲートは、式（Ｉｇ）：

【化31】

【0225】

のコンジュゲートであることができる。

【0226】

式（Ｉ）のコンジュゲートに関する置換基は、以下においてより詳細に記載される。式（Ｉ）に対する参照は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）、（Ｉｅ）、（Ｉｆ）および（Ｉｇ）も包含することが意図される。

【0227】

ある特定の実施形態では、ＺはＣＲ^４またはＮである。ある特定の実施形態では、ＺはＣＲ^４である。ある特定の実施形態では、ＺはＮである。

【0228】

ある特定の実施形態では、Ｒ^１は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はアルキニルまたは置換されたアルキニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0229】

ある特定の実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよい。

【0230】

ある特定の実施形態では、Ｒ^２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^２は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^２はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0231】

ある特定の実施形態では、Ｒ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^３は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^３はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0232】

ある特定の実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は環状連結して５または６員のヘテロシクリルを形成していてもよい。ある特定の実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は環状連結して５または６員のヘテロシクリルを形成している。ある特定の実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は環状連結して５員のヘテロシクリルを形成している。ある特定の実施形態では、Ｒ^２およびＲ^３は環状連結して６員のヘテロシクリルを形成している。

【0233】

ある特定の実施形態では、各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0234】

各Ｒ^４についての様々な可能性は以下のようにより詳細に記載される。ある特定の実施形態では、Ｒ^４は水素である。ある特定の実施形態では、各Ｒ^４は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はＦである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はＣｌである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はＢｒである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はＩである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリール（例えば、フェニルもしくは置換されたフェニル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^４はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0235】

ある特定の実施形態では、各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、および置換されたアルキニルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^５は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はエチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はプロピル（例えば、ｎ－プロピルまたはイソプロピル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、またはｔ－ブチル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はペンチル（例えば、ｎ－ペンチルまたはネオペンチルなど）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はネオペンチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^５はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。

【0236】

ある特定の実施形態では、各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^６は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はエチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はプロピル（例えば、ｎ－プロピルまたはイソプロピル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、またはｔ－ブチル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はペンチル（例えば、ｎ－ペンチルまたはネオペンチルなど）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はネオペンチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。

【0237】

ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリール（例えば、フェニルもしくは置換されたフェニル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0238】

ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアミノ酸の側鎖を表す。例えば、Ｒ^６ ａｍｙは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、およびアミノ酸アナログを含む、アミノ酸残基のα炭素に取り付けられた置換基を表す。一部の場合には、Ｒ^６は、天然に存在するタンパク質中に見出されるアミノ酸の側鎖（例えば、ＡｌａまたはＡ、ＣｙｓまたはＣ、ＡｓｐまたはＤ、ＧｌｕまたはＥ、ＰｈｅまたはＦ、ＧｌｙまたはＧ、ＨｉｓまたはＨ、ＩｌｅまたはＩ、ＬｙｓまたはＫ、ＬｅｕまたはＬ、ＭｅｔまたはＭ、ＡｓｎまたはＮ、ＰｒｏまたはＰ、ＧｌｎまたはＱ、ＡｒｇまたはＲ、ＳｅｒまたはＳ、ＴｈｒまたはＴ、ＶａｌまたはＶ、ＴｒｐまたはＷ、ＴｙｒまたはＹの側鎖）を表す。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はバリン（Ｖａｌ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ^６はイソプロピルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はアラニン（Ａｌａ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ^６はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はフェニルアラニン（Ｐｈｅ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ^６はベンジルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^６はリジン（Ｌｙｓ）の側鎖を表し、すなわち、Ｒ^６は４－アミノ－ブチルである。

【0239】

ある特定の実施形態では、ｋは１～１０の整数である。ある特定の実施形態では、ｋは１である。ある特定の実施形態では、ｋは２である。ある特定の実施形態では、ｋは３である。ある特定の実施形態では、ｋは４である。ある特定の実施形態では、ｋは５である。ある特定の実施形態では、ｋは６である。ある特定の実施形態では、ｋは７である。ある特定の実施形態では、ｋは８である。ある特定の実施形態では、ｋは９である。ある特定の実施形態では、ｋは１０である。

【0240】

ある特定の実施形態では、Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。

【0241】

ある特定の実施形態では、Ｒ^７は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はメチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はエチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はプロピル（例えば、ｎ－プロピルまたはイソプロピル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、またはｔ－ブチル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はペンチル（例えば、ｎ－ペンチルまたはネオペンチルなど）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はネオペンチルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。

【0242】

ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアシルアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。

【0243】

ある特定の実施形態では、Ｒ^７はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリール（例えば、フェニルもしくは置換されたフェニル）である。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^７はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0244】

ある特定の実施形態では、Ｌ^１は第１のリンカーである。Ｌ^１のために好適なリンカーは以下においてより詳細に記載される。

【0245】

ある特定の実施形態では、Ｌ^２は第２のリンカーである。Ｌ^２のために好適なリンカーは以下においてより詳細に記載される。

【0246】

ある特定の実施形態では、Ｗ^１は薬物である。例えば、Ｗ^１はメイタンシノイドであることができる。メイタンシノイドのさらなる記載は本明細書の開示において見出される。一部の事例では、Ｗ^１はアウリスタチンである。アウリスタチンのさらなる記載は本明細書の開示において見出される。一部の事例では、Ｗ^１はデュオカルマイシンである。デュオカルマイシンのさらなる記載は本明細書の開示において見出される。

【0247】

ある特定の実施形態では、Ｗ^２は抗体である。主題コンジュゲートにおいて用途を有する抗体のさらなる記載は本明細書の開示において見出される。

【0248】

ある特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は１または複数のリンカーを含む。リンカーは、カップリング部分を関心対象の１もしくは複数の部分および／または１もしくは複数のポリペプチドに結合するために利用されてもよい。一部の実施形態では、リンカーは、カップリング部分をポリペプチドまたは化学的実体、例えば、薬物のいずれかに結合する。リンカーは、任意の好都合な位置において（例えば、本明細書に記載されるような）カップリング部分に結合（例えば、共有結合）していてもよい。例えば、リンカーは、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を薬物（例えば、メイタンシンまたはアウリスタチン）に取り付けてもよい。ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分は、リンカー（およびそのため薬物）をポリペプチド、例えば、抗体に共役させるために使用されてもよい。例えば、カップリング部分は、リンカー（およびそのため薬物）をポリペプチドの修飾されたアミノ酸残基、例えば、抗体のＦＧｌｙ残基に共役させるために使用されてもよい。

【0249】

ある特定の実施形態では、リンカーは、１または複数のリンカー、例えば、第１のリンカー、Ｌ^１、および第２のリンカーＬ^２を含む。追加的に、リンカーは、本明細書に記載されるような１または複数の切断可能な部分（例えば、第１の切断可能な部分および第２の切断可能な部分）を含んでもよい。一部の場合には、リンカーは、１または複数のリンカー、例えば、第１のリンカー、Ｌ^１、および第２のリンカーＬ^２を含む。例えば、リンカーは、第１の切断可能な部分をカップリング部分（例えば、本明細書に記載されるようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）に連結する第１のリンカー（Ｌ^１）、および第１の切断可能な部分を化学的実体、例えば、本明細書に記載されるような薬物に連結する第２のリンカー（Ｌ^２）を含んでもよい。そのため、リンカーは、（例えば、本明細書に記載されるようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を通じて）第１の切断可能な部分を抗体に連結する第１のリンカー（Ｌ^１）、および第１の切断可能な部分を化学的実体、例えば、本明細書に記載されるような薬物に連結する第２のリンカー（Ｌ^２）を含んでもよい。

【0250】

例えば、上記の式（Ｉ）に示されるように、Ｌ^１は、カップリング部分を通じてＷ^２に取り付けられており、そのため、Ｗ^２は、カップリング部分を通じて第１のリンカーＬ^１に間接的に結合している。上記のように、Ｗ^２は抗体であり、そのため、Ｌ^１はカップリング部分を通じて抗体に取り付けられており、例えば、第１のリンカーＬ^１はカップリング部分を通じて（例えば、本明細書に記載されるようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を通じて）抗体に間接的に結合している。追加的に、上記の式（Ｉ）に示されるように、Ｌ^１はＬ^２に（間接的に）取り付けられており、かつＬ^２はＷ^１に取り付けられている。上記のように、Ｗ^１は薬物であり、そのため、第２のリンカーＬ^２は、第１のリンカーＬ^１およびカップリング部分（例えば、本明細書に記載されるようなヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分）を通じて薬物を抗体Ｗ^２に取り付ける。

【0251】

主題コンジュゲートおよび化合物における第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）のために任意の好都合なリンカーが利用されてもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシルアミノ、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルキルまたは置換されたアルキル基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルケニルまたは置換されたアルケニル基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルキニルまたは置換されたアルキニル基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルコキシまたは置換されたアルコキシ基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アミノまたは置換されたアミノ基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、カルボキシルまたはカルボキシルエステル基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アシルアミノ基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アルキルアミドまたは置換されたアルキルアミド基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、アリールまたは置換されたアリール基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、ヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、シクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル基を含んでもよい。ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、ヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル基を含んでもよい。

【0252】

ある特定の実施形態では、第１のリンカー（Ｌ^１）および第２のリンカー（Ｌ^２）は、それぞれ独立して、ポリマーを含んでもよい。例えば、ポリマーは、ポリアルキレングリコールおよびその誘導体を含んでもよく、ポリアルキレングリコールおよびその誘導体としては、ポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールホモポリマー、ポリプロピレングリコールホモポリマー、プロピレングリコールとのエチレングリコールのコポリマー（例えば、ホモポリマーおよびコポリマーは非置換であり、または１端においてアルキル基で置換されている）、ポリビニルアルコール、ポリビニルエチルエーテル、ポリビニルピロリドン、およびこれらの組合せなどが挙げられる。ある特定の実施形態では、ポリマーはポリアルキレングリコールである。ある特定の実施形態では、ポリマーはポリエチレングリコールである。以下においてより詳細に記載されるコンジュゲートおよび化合物に示されるように、他のリンカーもまた可能である。

【0253】

一部の実施形態では、Ｌ^１は、式－（Ｌ^１１）_ａ－（Ｌ^１２）_ｂ－（Ｌ^１３）_ｃ－（Ｌ^１４）_ｄ－により記載される第１のリンカーであり、式中、Ｌ^１１、Ｌ^１２、Ｌ^１３およびＬ^１４はそれぞれ独立して第１のリンカーサブユニットであり、かつａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は１～４である。

【0254】

ある特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は１である。ある特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は２である。ある特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は３である。ある特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は４である。ある特定の実施形態では、ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ１である。ある特定の実施形態では、ａ、ｂおよびｃはそれぞれ１であり、かつｄは０である。ある特定の実施形態では、ａおよびｂはそれぞれ１であり、かつｃおよびｄはそれぞれ０である。ある特定の実施形態では、ａは１であり、かつｂ、ｃおよびｄはそれぞれ０である。

【0255】

ある特定の実施形態では、Ｌ^１１は、（例えば、上記の式（Ｉ）に示されるような）ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１２が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１３が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１４が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。

【0256】

任意の好都合なリンカーサブユニットが第１のリンカーＬ^１において利用されてもよい。関心対象のリンカーサブユニットとしては、ポリマーの単位、例えば、ポリエチレングリコール、ポリエチレンおよびポリアクリレート、（１または複数の）アミノ酸残基、炭水化物ベースのポリマーまたは炭水化物残基およびこれらの誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、複素環式基、これらの組合せ、ならびにこれらの置換されたバージョンが挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、Ｌ^１１、Ｌ^１２、Ｌ^１３およびＬ^１４（存在する場合）のそれぞれは、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、およびジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１または複数の基を含む。

【0257】

一部の実施形態では、Ｌ^１１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１１はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0258】

一部の実施形態では、Ｌ^１２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１２はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0259】

一部の実施形態では、Ｌ^１３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１３はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0260】

一部の実施形態では、Ｌ^１４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^１４はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0261】

一部の実施形態では、Ｌ^１は、（Ｌ^１１）_ａ－（Ｌ^１２）_ｂ－（Ｌ^１３）_ｃ－（Ｌ^１４）_ｄ－を含む第１のリンカーであり、式中、
－（Ｌ^１１）_ａ－は－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－であり、
－（Ｌ^１２）_ｂ－は－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－であり、
－（Ｌ^１３）_ｃ－は－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－であり、かつ
－（Ｌ^１４）_ｄ－は－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－であり、
Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４が存在する場合、それらはテザー基であり、
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４が存在する場合、それらは共有結合または連結性官能基であり、かつ
ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は１～４である。

【0262】

上記のように、ある特定の実施形態では、Ｌ^１１は、（例えば、上記の式（Ｉ）に示されるような）ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^１は、（例えば、上記の式（Ｉ）に示されるような）ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｖ^１は第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１２が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^２が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられており、またはＶ^２が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１３が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^３が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられており、またはＶ^３が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^１４が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^４が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられており、またはＶ^４が存在する場合、それは第１の切断可能な部分に取り付けられている。

【0263】

テザー基、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４に関して、任意の好都合なテザー基が主題リンカーにおいて利用されてもよい。一部の実施形態では、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４のそれぞれは、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルから独立して選択される１または複数の基を含み、ｗは１～２０の整数であり、ｎは１～３０の整数であり、ｐは１～２０の整数であり、かつｈは１～１２の整数である。

【0264】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルまたは置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルを含む。ある特定の実施形態では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖状アルキル基である。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、アルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル、またはＣ_１～Ｃ_１０アルキル、またはＣ_１～Ｃ_６アルキル、またはＣ_１～Ｃ_３アルキルであってもよい。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルはＣ_２－アルキルである。例えば、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、アルキレンまたは置換されたアルキレン、例えば、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_１０アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_６アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_３アルキレンであってもよい。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルはＣ_２－アルキレン（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２）である。

【0265】

ある特定の実施形態では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖状の置換されたアルキル基である。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、置換されたアルキル、例えば、置換されたＣ_１～Ｃ_１２アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_１０アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_６アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_３アルキルであってもよい。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは置換されたＣ_２－アルキルである。例えば、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、置換されたアルキレン、例えば、置換されたＣ_１～Ｃ_１２アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_１０アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_６アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_３アルキレンであってもよい。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは置換されたＣ_２－アルキレンである。

【0266】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、または置換されたヘテロシクリルを含む。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）はアリールまたは置換されたアリールを含む。例えば、アリールはフェニルであることができる。一部の場合には、置換されたアリールは置換されたフェニルである。置換されたフェニルは、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される１または複数の置換基で置換されることができる。一部の事例では、置換されたアリールは置換されたフェニルであり、置換基は、本明細書に記載されるような第２の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド）を含む。

【0267】

一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリールを含む。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキルを含む。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリルを含む。一部の事例では、置換されたヘテロアリール、置換されたシクロアルキルまたは置換されたヘテロシクリル上の置換基は、本明細書に記載されるような第２の切断可能な部分（例えば、酵素的に切断可能な部分、例えば、グリコシド）を含む。

【0268】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、ＥＤＡ含有テザーを含む。ある特定の実施形態では、（ＥＤＡ）_ｗは１または複数のＥＤＡ部分を含み、例えば、ｗは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５または６）の整数である。連結されたエチレンジアミン（ＥＤＡ）部分は、１または複数の好都合な位置において任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換されたアルキル、アシル、置換されたアシル、アリールまたは置換されたアリールで置換されていてもよい。ある特定の実施形態では、ＥＤＡ部分は、構造：

【化32】

【0269】

により記載され、ｙは１～６の整数であり、または０もしくは１であり、かつ各Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、ｙは、１、２、３、４、５または６である。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつｒは０である。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつｒは１である。ある特定の実施形態では、ｙは２であり、かつｒは０である。ある特定の実施形態では、ｙは２であり、かつｒは１である。ある特定の実施形態では、各Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択される。ある特定の実施形態では、ＥＤＡの任意の２個の隣接するＲ^１２基は、環状連結されて、例えば、ピペラジニル環を形成していてもよい。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつ２個の隣接するＲ^１２基はアルキル基であり、環状連結されてピペラジニル環を形成している。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつ隣接するＲ^１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）および置換されたアルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨまたはプロピル－ＯＨ）から選択される。

【0270】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分（本明細書においてピペリジン－４－アミノ、Ｐ４Ａと称されることもある）を含む。４ＡＰ部分は、１または複数の好都合な位置において任意の好都合な置換基、例えば、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分、アシル、置換されたアシル、アリールまたは置換されたアリールで置換されていてもよい。ある特定の実施形態では、４ＡＰ部分は、構造：

【化33】

【0271】

により記載され、Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコールまたは修飾されたポリエチレングリコール）、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１２はポリエチレングリコール部分である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１２は、カルボキシ修飾されたポリエチレングリコールである。

【0272】

ある特定の実施形態では、Ｒ^１２は、構造：

【化34】

【0273】

により表され得る式：（ＰＥＧ）_ｋにより記載されるポリエチレングリコール部分を含み、ｋは１～２０、例えば、１～１８、または１～１６、または１～１４、または１～１２、または１～１０、または１～８、または１～６、または１～４、または１または２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。一部の事例では、ｋは２である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯＲから選択され、Ｒは、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１７はＣＯＯＨである。

【0274】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は（ＰＥＧ）_ｎを含み、（ＰＥＧ）_ｎは、ポリエチレングリコールまたは修飾されたポリエチレングリコール連結単位である。ある特定の実施形態では、（ＰＥＧ）_ｎは、構造：

【化35】

【0275】

により記載され、ｎは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。一部の事例では、ｎは２である。一部の事例では、ｎは３である。一部の事例では、ｎは６である。一部の事例では、ｎは１２である。

【0276】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は（ＡＡ）_ｐを含み、ＡＡはアミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用されてもよい。関心対象のアミノ酸としては、Ｌ－およびＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主要なアルファ－アミノ酸およびベータ－アラニンのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸アナログ）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸または天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられるがこれらに限定されない。ある特定の実施形態では、ｐは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。ある特定の実施形態では、ｐは１である。ある特定の実施形態では、ｐは２である。

【0277】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３および／またはＴ^４）は、式－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－により記載される部分を含み、ｈは０であり、またはｎは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２の整数である。ある特定の実施形態では、ｈは１である。ある特定の実施形態では、ｈは２である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0278】

ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリールおよび置換されたアリールから選択される。これらの実施形態では、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールは、Ｒ^１３について上記される通りである。

【0279】

連結性官能基、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４に関して、任意の好都合な連結性官能基が第１のリンカーＬ^１において利用されてもよい。関心対象の連結性官能基としては、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、およびチオホスホロアミデートなどが挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からそれぞれ独立して選択され、ｑは１～６の整数である。ある特定の実施形態では、ｑは１～６の整数（例えば、１、２、３、４、５または６）である。ある特定の実施形態では、ｑは１である。ある特定の実施形態では、ｑは２である。

【0280】

一部の実施形態では、各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0281】

各Ｒ^１５についての様々な可能性は以下のようにより詳細に記載される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５は水素である。ある特定の実施形態では、各Ｒ^１５は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0282】

ある特定の実施形態では、各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。これらの実施形態では、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルの置換基は、Ｒ^１５について上記される通りである。

【0283】

ある特定の実施形態では、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、またはエステルを含む。一部の実施形態では、テザー基はアセタール基を含む。一部の実施形態では、テザー基はジスルフィドを含む。一部の実施形態では、テザー基はヒドラジンを含む。一部の実施形態では、テザー基はエステルを含む。

【0284】

上記のように、一部の実施形態では、Ｌ^１は、－（Ｔ^１－Ｖ^１）_ａ－（Ｔ^２－Ｖ^２）_ｂ－（Ｔ^３－Ｖ^３）_ｃ－（Ｔ^４－Ｖ^４）_ｄ－を含む第１のリンカーであり、ａ、ｂ、ｃおよびｄはそれぞれ独立して０または１であり、ａ、ｂ、ｃおよびｄの和は１～４である。

【0285】

一部の実施形態では、第１のリンカーＬ^１において、
Ｔ^１は、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルおよび置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルから選択され、
Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４は、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、かつ
Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からそれぞれ独立して選択され、ｑは１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎは、

【化36】

【0286】

であり、ｎは１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化37】

【0287】

を有するエチレンジアミン部分であり、ｙは１～６の整数であり、かつｒは０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）は、

【化38】

【0288】

であり、ＡＡはアミノ酸残基であり、ｐは１～２０の整数であり、かつ
各Ｒ^１５およびＲ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択され、任意の２個の隣接するＲ^１２基は環状連結されてピペラジニル環を形成していてもよく、かつ
Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから選択される。

【0289】

ある特定の実施形態では、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４ならびにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、以下：
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－である；
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合である；
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯ－である；ならびに
Ｔ^４およびＶ^４は存在しない
から選択される。

【0290】

例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４ならびにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、以下：
Ｔ^１はＣＨ_２ＣＨ_２であり、かつＶ^１は－ＣＯ－である；
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合である；
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_２であり、かつＶ^３は－ＣＯ－である；ならびに
Ｔ^４およびＶ^４は存在しない
から選択されることができる。

【0291】

ある特定の実施形態では、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４ならびにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、以下：
Ｔ^１は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルであり、かつＶ^１は－ＣＯ－である；
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合である；
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_ｎであり、かつＶ^３は－ＣＯＮＨ－である；および
Ｔ^４はアリールまたは置換されたアリールであり、かつＶ^４は－ＣＯ－である
から選択される。

【0292】

例えば、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３およびＴ^４ならびにＶ^１、Ｖ^２、Ｖ^３およびＶ^４は、以下：
Ｔ^１はＣＨ_２ＣＨ_２であり、かつＶ^１は－ＣＯ－である；
Ｔ^２は４ＡＰであり、かつＶ^２は共有結合である；
Ｔ^３は（ＰＥＧ）_２であり、かつＶ^３は－ＣＯＮＨ－である；および
Ｔ^４はフェニルまたは置換されたフェニルであり、かつＶ^４は－ＣＯ－である
から選択されることができる。

【0293】

ある特定の実施形態では、第１のリンカーＬ^１は、以下の構造：

【化39】

【0294】

により記載される。

【0295】

ある特定の実施形態では、第１のリンカーＬ^１は、以下の構造：

【化40】

【0296】

により記載される。

【0297】

ある特定の実施形態では、第１のリンカーＬ^１は、以下の構造：

【化41】

【0298】

により記載される。

【0299】

ある特定の実施形態では、上記のリンカー構造の左手側はヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分に取り付けられており、かつ上記のリンカー構造の右手側は第１の切断可能な部分に取り付けられている。例えば、第１の切断可能な部分がペプチドを含む場合、上記のリンカー構造の右手側は、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸に取り付けられることができる。一部の事例では、上記のリンカー構造の右手側のカルボニル基は、第１の切断可能な部分を含むペプチドのアミノ酸とアミド結合を形成することができる。

【0300】

一部の実施形態では、Ｌ^２は、式－（Ｌ^２１）_ｅ－（Ｌ^２２）_ｆ－（Ｌ^２３）_ｇ－（Ｌ^２４）_ｈ－により記載される第２のリンカーであり、Ｌ^２１、Ｌ^２２、Ｌ^２３およびＬ^２４はそれぞれ独立して第２のリンカーサブユニットであり、かつｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は０～４である。

【0301】

ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は０である。これらの事例において、第２のリンカーＬ^２は存在しない。換言すれば、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和が０である場合、第２のリンカーＬ^２は共有結合である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は１である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は２である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は３である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は４である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ１である。ある特定の実施形態では、ｅ、ｆおよびｇはそれぞれ１であり、かつｈは０である。ある特定の実施形態では、ｅおよびｆはそれぞれ１であり、かつｇおよびｈはそれぞれ０である。ある特定の実施形態では、ｅは１であり、かつｆ、ｇおよびｈはそれぞれ０である。

【0302】

ある特定の実施形態では、Ｌ^２１は薬物（例えば、上記の式（Ｉ）に示されるようなＷ^１）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２２が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２３が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２４が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。

【0303】

任意の好都合なリンカーサブユニットが第２のリンカーＬ^２において利用されてもよい。関心対象のリンカーサブユニットとしては、ポリマーの単位、例えば、ポリエチレングリコール、ポリエチレンおよびポリアクリレート、（１または複数の）アミノ酸残基、炭水化物ベースのポリマーまたは炭水化物残基およびこれらの誘導体、ポリヌクレオチド、アルキル基、アリール基、複素環式基、これらの組合せ、ならびにこれらの置換されたバージョンが挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、Ｌ^２１、Ｌ^２２、Ｌ^２３およびＬ^２４（存在する場合）のそれぞれは、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、およびジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）から独立して選択される１または複数の基を含む。

【0304】

一部の実施形態では、Ｌ^２１（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２１はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0305】

一部の実施形態では、Ｌ^２２（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２２はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0306】

一部の実施形態では、Ｌ^２３（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２３はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0307】

一部の実施形態では、Ｌ^２４（存在する場合）は、ポリエチレングリコール、修飾されたポリエチレングリコール、アミノ酸残基、アルキル基、置換されたアルキル、アリール基、置換されたアリール基、またはジアミンを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４はポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４は修飾されたポリエチレングリコールを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４はアミノ酸残基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４はアルキル基または置換されたアルキルを含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４はアリール基または置換されたアリール基を含む。一部の実施形態では、Ｌ^２４はジアミン（例えば、アルキレンジアミンを含む連結基）を含む。

【0308】

一部の実施形態では、Ｌ^２は、－（Ｌ^２１）_ｅ－（Ｌ^２２）_ｆ－（Ｌ^２３）_ｇ－（Ｌ^２４）_ｈ－を含む第２のリンカーであり、
－（Ｌ^２１）_ｅ－は－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－であり、
－（Ｌ^２２）_ｆ－は－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－であり、
－（Ｌ^２３）_ｇ－は－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－であり、かつ
－（Ｌ^２４）_ｈ－は－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－であり、
Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８が存在する場合、それらはテザー基であり、
Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８が存在する場合、それらは共有結合または連結性官能基であり、かつ
ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は０～４である。

【0309】

ある特定の実施形態では、Ｌ^２１は第１の切断可能な部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^５は第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｖ^５は薬物（例えば、上記の式（Ｉ）に示されるようなＷ^１）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２２が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^６が存在する場合、それは薬物に取り付けられており、またはＶ^６が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２３が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^７が存在する場合、それは薬物に取り付けられており、またはＶ^７が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２４が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^８が存在する場合、それは薬物に取り付けられており、またはＶ^８が存在する場合、それは薬物に取り付けられている。

【0310】

テザー基、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８に関して、任意の好都合なテザー基が主題リンカーにおいて利用されてもよい。一部の実施形態では、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８のそれぞれは、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、ピペリジン－４－アミノ（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルから独立して選択される１または複数の基を含み、ｗは１～２０の整数であり、ｎは１～３０の整数であり、ｐは１～２０の整数であり、かつｈは１～１２の整数である。

【0311】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルまたは置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルを含む。ある特定の実施形態では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖状アルキル基である。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、アルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル、またはＣ_１～Ｃ_１０アルキル、またはＣ_１～Ｃ_６アルキル、またはＣ_１～Ｃ_３アルキルであってもよい。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルはＣ_２－アルキルである。例えば、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、アルキレンまたは置換されたアルキレン、例えば、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_１０アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_６アルキレン、またはＣ_１～Ｃ_３アルキレンであってもよい。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルはＣ_２－アルキレン（例えば、ＣＨ_２ＣＨ_２）である。一部の事例では、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルはＣ_１－アルキレン（例えば、ＣＨ_２）である。

【0312】

ある特定の実施形態では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、１～１２個の炭素原子、例えば、１～１０個の炭素原子、または１～８個の炭素原子、または１～６個の炭素原子、または１～５個の炭素原子、または１～４個の炭素原子、または１～３個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖状の置換されたアルキル基である。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、置換されたアルキル、例えば、置換されたＣ_１～Ｃ_１２アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_１０アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_６アルキル、または置換されたＣ_１～Ｃ_３アルキルであってもよい。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは置換されたＣ_２－アルキルである。例えば、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは、置換されたアルキレン、例えば、置換されたＣ_１～Ｃ_１２アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_１０アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_６アルキレン、または置換されたＣ_１～Ｃ_３アルキレンであってもよい。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは置換されたＣ_２－アルキレンである。一部の事例では、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキルは置換されたＣ_１－アルキレンである。

【0313】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、または置換されたヘテロシクリルを含む。一部の事例では、テザー基はアリールまたは置換されたアリールを含む。例えば、アリールはフェニルまたは置換されたフェニルであることができる。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリールを含む。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキルを含む。一部の事例では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリルを含む。

【0314】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は、エチレンジアミン（ＥＤＡ）部分、例えば、上記のようなＥＤＡ部分、例えば、構造：

【化42】

【0315】

により記載されるＥＤＡ部分を含み、
ｙは１～６の整数であり、または０もしくは１であり、かつ各Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。ある特定の実施形態では、ｙは、１、２、３、４、５または６である。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつｒは０である。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつｒは１である。ある特定の実施形態では、ｙは２であり、かつｒは０である。ある特定の実施形態では、ｙは２であり、かつｒは１である。ある特定の実施形態では、各Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリールおよび置換されたアリールから独立して選択される。ある特定の実施形態では、ＥＤＡの任意の２個の隣接するＲ^１２基は、環状連結されて、例えば、ピペラジニル環を形成していてもよい。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつ２個の隣接するＲ^１２基はアルキル基であり、環状連結されてピペラジニル環を形成している。ある特定の実施形態では、ｙは１であり、かつ隣接するＲ^１２基は、水素、アルキル（例えば、メチル）および置換されたアルキル（例えば、低級アルキル－ＯＨ、例えば、エチル－ＯＨまたはプロピル－ＯＨ）から選択される。

【0316】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は、上記のような４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）部分、例えば、構造：

【化43】

【0317】

により記載される４ＡＰ部分を含み、
Ｒ^１２は、水素、アルキル、置換されたアルキル、ポリエチレングリコール部分（例えば、ポリエチレングリコールまたは修飾されたポリエチレングリコール）、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１２はポリエチレングリコール部分である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１２は、カルボキシ修飾されたポリエチレングリコールである。

【0318】

ある特定の実施形態では、Ｒ^１２は、構造：

【化44】

【0319】

により表され得る式：（ＰＥＧ）_ｋにより記載されるポリエチレングリコール部分を含み、ｋは１～２０、例えば、１～１８、または１～１６、または１～１４、または１～１２、または１～１０、または１～８、または１～６、または１～４、または１または２、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。一部の事例では、ｋは２である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、またはＣＯＯＲから選択され、Ｒは、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１７はＣＯＯＨである。

【0320】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は、上記のようなポリエチレングリコール部分（ＰＥＧ）_ｎ、例えば、構造：

【化45】

【0321】

により記載される（ＰＥＧ）_ｎ部分を含み、
ｎは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。一部の事例では、ｎは２である。一部の事例では、ｎは３である。一部の事例では、ｎは６である。一部の事例では、ｎは１２である。

【0322】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は（ＡＡ）_ｐを含み、ＡＡはアミノ酸残基である。任意の好都合なアミノ酸が利用されてもよい。関心対象のアミノ酸としては、Ｌ－およびＤ－アミノ酸、天然に存在するアミノ酸、例えば、２０個の主要なアルファ－アミノ酸およびベータ－アラニンのいずれか、天然に存在しないアミノ酸（例えば、アミノ酸アナログ）、例えば、天然に存在しないアルファ－アミノ酸または天然に存在しないベータ－アミノ酸などが挙げられるがこれらに限定されない。ある特定の実施形態では、ｐは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０の整数である。ある特定の実施形態では、ｐは１である。ある特定の実施形態では、ｐは２である。

【0323】

ある特定の実施形態では、テザー基（例えば、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７および／またはＴ^８）は、式－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－により記載される部分を含み、ｈは０であり、またはｎは１～５０、例えば、１～４０、１～３０、１～２０、１～１２または１～６、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２の整数である。ある特定の実施形態では、ｈは１である。ある特定の実施形態では、ｈは２である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１３はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0324】

ある特定の実施形態では、Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリールおよび置換されたアリールから選択される。これらの実施形態では、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールは、Ｒ^１３について上記される通りである。

【0325】

連結性官能基、Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８に関して、任意の好都合な連結性官能基が第２のリンカーＬ^２において利用されてもよい。関心対象の連結性官能基としては、アミノ、カルボニル、アミド、オキシカルボニル、カルボキシ、スルホニル、スルホキシド、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、チオ、オキシ、ホスホ、ホスホロアミデート、およびチオホスホロアミデートなどが挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からそれぞれ独立して選択され、ｑは１～６の整数である。ある特定の実施形態では、ｑは１～６の整数（例えば、１、２、３、４、５または６）である。ある特定の実施形態では、ｑは１である。ある特定の実施形態では、ｑは２である。

【0326】

一部の実施形態では、各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0327】

各Ｒ^１５についての様々な可能性は以下のようにより詳細に記載される。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５は水素である。ある特定の実施形態では、各Ｒ^１５は水素である。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキルまたは置換されたアルキル、例えば、Ｃ_１～６アルキルもしくはＣ_１～６の置換されたアルキル、またはＣ_１～４アルキルもしくはＣ_１～４の置換されたアルキル、またはＣ_１～３アルキルもしくはＣ_１～３の置換されたアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルケニルまたは置換されたアルケニル、例えば、Ｃ_２～６アルケニルもしくはＣ_２～６の置換されたアルケニル、またはＣ_２～４アルケニルもしくはＣ_２～４の置換されたアルケニル、またはＣ_２～３アルケニルもしくはＣ_２～３の置換されたアルケニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキニルまたは置換されたアルキニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルコキシまたは置換されたアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアミノまたは置換されたアミノである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はカルボキシルまたはカルボキシルエステルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアシルまたはアシルオキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアシルアミノまたはアミノアシルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアルキルアミドまたは置換されたアルキルアミドである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はスルホニルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はチオアルコキシまたは置換されたチオアルコキシである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はアリールまたは置換されたアリール、例えば、Ｃ_５～８アリールまたはＣ_５～８の置換されたアリール、例えば、Ｃ_５アリールもしくはＣ_５の置換されたアリール、またはＣ_６アリールもしくはＣ_６の置換されたアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はヘテロアリールまたは置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５～８ヘテロアリールまたはＣ_５～８の置換されたヘテロアリール、例えば、Ｃ_５ヘテロアリールもしくはＣ_５の置換されたヘテロアリール、またはＣ_６ヘテロアリールもしくはＣ_６の置換されたヘテロアリールである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はシクロアルキルまたは置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～８シクロアルキルまたはＣ_３～８の置換されたシクロアルキル、例えば、Ｃ_３～６シクロアルキルもしくはＣ_３～６の置換されたシクロアルキル、またはＣ_３～５シクロアルキルもしくはＣ_３～５の置換されたシクロアルキルである。ある特定の実施形態では、Ｒ^１５はヘテロシクリルまたは置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～８ヘテロシクリルまたはＣ_３～８の置換されたヘテロシクリル、例えば、Ｃ_３～６ヘテロシクリルもしくはＣ_３～６の置換されたヘテロシクリル、またはＣ_３～５ヘテロシクリルもしくはＣ_３～５の置換されたヘテロシクリルである。

【0328】

ある特定の実施形態では、各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。これらの実施形態では、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルの置換基は、Ｒ^１５について上記される通りである。

【0329】

ある特定の実施形態では、テザー基は、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、またはエステルを含む。一部の実施形態では、テザー基はアセタール基を含む。一部の実施形態では、テザー基はジスルフィドを含む。一部の実施形態では、テザー基はヒドラジンを含む。一部の実施形態では、テザー基はエステルを含む。

【0330】

上記のように、一部の実施形態では、Ｌ^２は、－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－を含む第２のリンカーであり、ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は０～４である。

【0331】

一部の実施形態では、第２のリンカーＬ^２において、
Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８は、（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、置換された（Ｃ_１～Ｃ_１２）アルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、または置換されたヘテロシクリル、（ＥＤＡ）_ｗ、（ＰＥＧ）_ｎ、（ＡＡ）_ｐ、－（ＣＲ^１３ＯＨ）_ｈ－、４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）、アセタール基、ジスルフィド、ヒドラジン、およびエステルからそれぞれ独立して選択され、かつ
Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、共有結合、－ＣＯ－、－ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５（ＣＨ_２）_ｑ－、－ＮＲ^１５（Ｃ_６Ｈ_４）－、－ＣＯＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＣＯ－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（Ｏ）－、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｓ（Ｏ）－、－ＳＯ_２－、－ＳＯ_２ＮＲ^１５－、－ＮＲ^１５ＳＯ_２－および－Ｐ（Ｏ）ＯＨ－からそれぞれ独立して選択され、ｑは１～６の整数であり、
（ＰＥＧ）_ｎは、

【化46】

【0332】

であり、ｎは１～３０の整数であり、
ＥＤＡは、以下の構造：

【化47】

【0333】

を有するエチレンジアミン部分であり、ｙは１～６の整数であり、かつｒは０または１であり、
４－アミノ－ピペリジン（４ＡＰ）は、

【化48】

【0334】

であり、ＡＡはアミノ酸残基であり、ｐは１～２０の整数であり、
各Ｒ^１３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アリール、および置換されたアリールから独立して選択され、かつ
各Ｒ^１５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択される。

【0335】

ある特定の実施形態では、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８ならびにＶ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は、以下：
Ｔ^５は共有結合であり、かつＶ^５は－ＯＣ（Ｏ）－である；
Ｔ^６およびＶ^６は存在しない；
Ｔ^７およびＶ^７は存在しない；ならびに
Ｔ^８およびＶ^８は存在しない
から選択される。

【0336】

ある特定の実施形態では、Ｔ^５、Ｔ^６、Ｔ^７およびＴ^８ならびにＶ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８は存在しない（すなわち、ｅ、ｆ、ｇ、およびｈの和は０である）。

【0337】

ある特定の実施形態では、上記のリンカー構造の左手側は第１の切断可能な部分に取り付けられており、かつ上記のリンカー構造の右手側は薬物に取り付けられている。

【0338】

上記の構造に示される任意の化学的実体、リンカーおよびカップリング部分は、主題化合物およびコンジュゲートにおける使用のために適合されてもよい。

【0339】

ヒドラジニル－インドリルおよびヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物ならびにコンジュゲートを製造する方法に関する追加の開示は、米国特許第９，３１０，３７４号明細書および米国特許第９，４９３，４１３号明細書に見出され、これらのそれぞれの開示は参照により本明細書に組み込まれる。

【0340】

コンジュゲートを製造するために有用な化合物
本開示は、本明細書に記載のコンジュゲートを製造するために有用なヒドラジニル－インドリルおよびヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物を提供する。ある特定の実施形態では、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物は、抗体および薬物の共役のために有用なカップリング部分であってもよい。例えば、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニル化合物は、抗体に結合し、かつ薬物にも結合して、抗体および薬物を間接的に結合させていてもよい。

【0341】

ある特定の実施形態では、化合物は、式（ＩＩ）：

【化49】

【0342】

の化合物であり、式中、
ＺはＣＲ^４またはＮであり、
Ｒ^２およびＲ^３は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルからそれぞれ独立して選択され、またはＲ^２およびＲ^３は環状連結されて５もしくは６員のヘテロシクリルを形成していてもよく、
各Ｒ^４は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、スルホニル、チオアルコキシ、置換されたチオアルコキシ、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^５は、水素、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
各Ｒ^６は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、
ｋは１～１０の整数であり、
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アルコキシ、置換されたアルコキシ、アミノ、置換されたアミノ、カルボキシル、カルボキシルエステル、アシル、アシルオキシ、アシルアミノ、アミノアシル、アルキルアミド、置換されたアルキルアミド、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択され、
Ｌ^１は第１のリンカーであり、
Ｌ^２は第２のリンカーであり、かつ
Ｗ^１は薬物であり、
Ｌ^１、Ｒ^６またはＲ^７のうちの１つは第２の切断可能な部分を含む。

【0343】

一部の事例では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩａ）：

【化50】

【0344】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’またはＲ^６’’のうちの１つは第２の切断可能な部分を含み、かつＲ^６’およびＲ^６’’のうちの他方は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから選択される。

【0345】

例えば、化合物は、式（ＩＩｂ）：

【化51】

【0346】

の化合物であってもよい。

【0347】

一部の事例では、化合物は、式（ＩＩｃ）：

【化52】

【0348】

の化合物であってもよい。

【0349】

ある特定の実施形態では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩｄ）：

【化53】

【0350】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^７は第２の切断可能な部分を含む。

【0351】

例えば、化合物は、式（ＩＩｅ）：

【化54】

【0352】

の化合物であってもよい。

【0353】

ある特定の実施形態では、ｋは２であり、かつ化合物は、式（ＩＩｆ）：

【化55】

【0354】

の化合物であり、式中、
Ｒ^６’およびＲ^６’’は、アルキル、置換されたアルキル、アルケニル、置換されたアルケニル、アルキニル、置換されたアルキニル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、シクロアルキル、置換されたシクロアルキル、ヘテロシクリル、および置換されたヘテロシクリルから独立して選択され、かつ
Ｒ^８は第２の切断可能な部分を含む。

【0355】

例えば、化合物は、式（ＩＩｇ）：

【化56】

【0356】

の化合物であってもよい。

【0357】

式（ＩＩ）のコンジュゲートに関する置換基は、本明細書に記載される。式（ＩＩ）に対する参照は、式（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）、（ＩＩｃ）、（ＩＩｄ）、（ＩＩｅ）、（ＩＩｆ）および（ＩＩｇ）も包含することが意図される。

【0358】

式（ＩＩ）の化合物に関して、置換基Ｚ、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｌ^１、Ｌ^２、およびＷ^１は、式（Ｉ）のコンジュゲートに関して上記される通りである。同様に、式（ＩＩ）の第１のリンカーＬ^１および第２のリンカーＬ^２に関して、Ｔ^１、Ｔ^２、Ｔ^３、Ｔ^４、Ｖ^１、Ｖ^２、Ｖ^３、およびＶ^４、およびＴ^５、Ｔ^６、Ｔ^７、Ｔ^８、Ｖ^５、Ｖ^６、Ｖ^７およびＶ^８の置換基は、式（Ｉ）のコンジュゲートに関して上記される通りである。

【0359】

ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造：

【化57】

【0360】

の化合物である。

【0361】

例えば、化合物は、以下の構造：

【化58】

【0362】

を有することができる。

【0363】

ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造：

【化59】

【0364】

の化合物である。

【0365】

例えば、化合物は、以下の構造：

【化60】

【0366】

を有することができる。

【0367】

ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造：

【化61】

【0368】

の化合物である。

【0369】

例えば、化合物は、以下の構造：

【化62】

【0370】

を有することができる。

【0371】

ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造：

【化63】

【0372】

の化合物である。

【0373】

例えば、化合物は、以下の構造：

【化64】

【0374】

を有することができる。

【0375】

ある特定の実施形態では、化合物は、以下の構造：

【化65】

【0376】

の化合物である。

【0377】

例えば、化合物は、以下の構造：

【化66】

【0378】

を有することができる。

【0379】

抗体
上述したように、主題コンジュゲートは、置換基としてＷ^２抗体を含むことができ、抗体は、２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基を含むように修飾されている。本明細書において使用される場合、アミノ酸は、それらの標準的な名称、それらの標準的な３文字略語および／またはそれらの標準的な１文字略語、例えば、アラニンまたはＡｌａまたはＡ；システインまたはＣｙｓまたはＣ；アスパラギン酸またはＡｓｐまたはＤ；グルタミン酸またはＧｌｕまたはＥ；フェニルアラニンまたはＰｈｅまたはＦ；グリシンまたはＧｌｙまたはＧ；ヒスチジンまたはＨｉｓまたはＨ；イソロイシンまたはＩｌｅまたはＩ；リジンまたはＬｙｓまたはＫ；ロイシンまたはＬｅｕまたはＬ；メチオニンまたはＭｅｔまたはＭ；アスパラギンまたはＡｓｎまたはＮ；プロリンまたはＰｒｏまたはＰ；グルタミンまたはＧｌｎまたはＱ；アルギニンまたはＡｒｇまたはＲ；セリンまたはＳｅｒまたはＳ；スレオニンまたはＴｈｒまたはＴ；バリンまたはＶａｌまたはＶ；トリプトファンまたはＴｒｐまたはＷ、およびチロシンまたはＴｙｒまたはＹにより参照されることがある。

【0380】

ある特定の実施形態では、抗体のアミノ酸配列は、ｉｎ ｖｉｖｏ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳の時点で）またはｉｎ ｖｉｔｒｏ（例えば、無細胞系においてアルデヒドタグ含有タンパク質をホルミルグリシン生成酵素（ＦＧＥ）と接触させることによる）のいずれかでＦＧＥの作用により２－ホルミルグリシン（ＦＧｌｙ）残基に変換（酸化）されることができるセリンまたはシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように改変される。そのようなスルファターゼモチーフはまた、本明細書においてＦＧＥ修飾部位と称されることがある。

【0381】

スルファターゼモチーフ
アルデヒドタグの最小のスルファターゼモチーフは通常５または６アミノ酸残基の長さ、通常６アミノ酸残基以下の長さである。Ｉｇポリペプチド中に提供されるスルファターゼモチーフは少なくとも５または６アミノ酸残基であり、例えば、５～１６、６～１６、５～１５、６～１５、５～１４、６～１４、５～１３、６～１３、５～１２、６～１２、５～１１、６～１１、５～１０、６～１０、５～９、６～９、５～８、または６～８アミノ酸残基の長さであることができ、それにより、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７または６未満のアミノ酸残基の長さのスルファターゼモチーフが定義される。

【0382】

ある特定の実施形態では、関心対象のポリペプチドとしては、ネイティブなアミノ酸配列と比べて１または複数のアミノ酸残基、例えば、２もしくはそれより多くの、または３もしくはそれより多くの、または４もしくはそれより多くの、または５もしくはそれより多くの、または６もしくはそれより多くの、または７もしくはそれより多くの、または８もしくはそれより多くの、または９もしくはそれより多くの、または１０もしくはそれより多くの、または１１もしくはそれより多くの、または１２もしくはそれより多くの、または１３もしくはそれより多くの、または１４もしくはそれより多くの、または１５もしくはそれより多くの、または１６もしくはそれより多くの、または１７もしくはそれより多くの、または１８もしくはそれより多くの、または１９もしくはそれより多くの、または２０またはそれより多くのアミノ酸残基が挿入、欠失、置換（置き換え）されて、ポリペプチド中にスルファターゼモチーフの配列を提供しているものが挙げられる。ある特定の実施形態では、ポリペプチドは、ポリペプチドのネイティブなアミノ酸配列と比べてアミノ酸配列の２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３または２未満のアミノ酸残基の改変（挿入、付加、欠失、および／または置換／置換え）を含む。ポリペプチド（例えば、抗体）のネイティブなアミノ酸配列が所望のスルファターゼモチーフの１または複数の残基を含有する場合、残基の改変の総数は、例えば、所望のスルファターゼモチーフの配列を提供するためのネイティブなアミノ酸残基に隣接するアミノ酸残基の部位特異的改変（挿入、付加、欠失、置換／置換え）により低減させることができる。ある特定の実施形態では、標的抗体のネイティブなアミノ酸配列の改変の程度は、挿入、欠失、置換（置き換え）、または付加（例えば、ＮもしくはＣ末端へ）されるアミノ酸残基の数を最小化するように最小化される。標的抗体のアミノ酸配列改変の程度の最小化は、そのような改変が抗体機能および／または構造に対して有し得る影響力を最小化することがある。

【0383】

特定の関心対象のアルデヒドタグは、少なくとも最小のスルファターゼモチーフ（「コンセンサススルファターゼモチーフ」とも称される）を含むものであるが、より長いアルデヒドタグが本開示により想定および包含され、本開示の組成物および方法において用途を有し得ることが容易に認められることに留意されるべきである。アルデヒドタグはそのため、５もしくは６残基の最小のスルファターゼモチーフを含むことができ、またはより長く、追加のアミノ酸残基によりモチーフのＮおよび／もしくはＣ末端側において隣接されることができる最小のスルファターゼモチーフを含むことができる。例えば５または６アミノ酸残基の他に、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０より多くまたはそれより多くのアミノ酸残基のより長いアミノ酸配列のアルデヒドタグが想定される。

【0384】

アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣ末端またはその近くに存在することができ、例えば、アルデヒドタグは、ネイティブな野生型Ｉｇ重鎖のＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸以内に存在することができる。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ１ドメイン内に存在することができる。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ２ドメイン内に存在することができる。アルデヒドタグは、Ｉｇ重鎖のＣＨ３ドメイン内に存在することができる。アルデヒドタグは、Ｉｇ軽鎖定常領域中、例えば、カッパ軽鎖定常領域またはラムダ軽鎖定常領域中に存在することができる。

【0385】

ある特定の実施形態では、使用されるスルファターゼモチーフは、式：
Ｘ^１Ｚ^１０Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（Ｉ’）
により記載されてもよく、式中、
Ｚ^１０はシステインまたはセリンであり（（Ｃ／Ｓ）によっても表すことができる）、
Ｚ^２０はプロリンまたはアラニンのいずれかの残基であり（（Ｐ／Ａ）によっても表すことができる）、
Ｚ^３０は塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）もしくはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、もしくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、もしくはＩであり、
Ｘ^１は存在し、または存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、ＳまたはＴ、例えば、Ｌ、Ｍ、ＳまたはＶであることができ、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１は存在し、かつ
Ｘ^２およびＸ^３は独立して任意のアミノ酸であることができるが、通常、脂肪族アミノ酸、極性非荷電性アミノ酸、または硫黄含有アミノ酸（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、ＧまたはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧである。

【0386】

抗体重鎖および／または軽鎖のアミノ酸配列は、式Ｘ^１Ｚ^１０Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０の少なくとも５アミノ酸の配列を提供するように改変されることができ、式中、
Ｚ^１０はシステインまたはセリンであり、
Ｚ^２０はプロリンまたはアラニン残基であり、
Ｚ^３０は脂肪族アミノ酸または塩基性アミノ酸であり、
Ｘ^１は存在し、または存在せず、存在する場合、任意のアミノ酸であり、但し、異種スルファターゼモチーフがポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１は存在し、
Ｘ^２およびＸ^３はそれぞれ独立して任意のアミノ酸である。

【0387】

スルファターゼモチーフは、一般に、選択されたＦＧＥ、例えば、アルデヒドタグ付加ポリペプチドが発現される宿主細胞中に存在するＦＧＥまたは無細胞ｉｎ ｖｉｔｒｏ法においてアルデヒドタグ付加ポリペプチドと接触させられるＦＧＥにより変換が可能であるように選択される。

【0388】

例えば、ＦＧＥが真核性ＦＧＥ（例えば、ヒトＦＧＥを含む、哺乳動物ＦＧＥ）である場合、スルファターゼモチーフは、式：
Ｘ^１ＣＸ^２ＰＸ^３Ｚ^３０（Ｉ’’）
のものであることができ、式中、
Ｘ^１は存在しても存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、ＳまたはＶであることができ、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１は存在し、
Ｘ^２およびＸ^３は独立して任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、Ｇ、またはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧであることができ、かつ
Ｚ^３０は塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）もしくはヒスチジン（Ｈ）、例えば、リジンであってもよい）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、もしくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、もしくはＩである。

【0389】

スルファターゼモチーフの特有の例としては、ＬＣＴＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＭＣＴＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＶＣＴＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＳＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＡＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＶＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＧＰＳＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＩＣＴＰＡＲ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＴＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＭＣＴＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＶＣＴＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＳＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＡＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＶＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＧＰＳＫ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＴＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＩＣＴＰＡＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＭＣＴＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＶＣＴＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＳＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＡＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、ＬＣＶＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）、およびＬＣＧＰＳＡ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：／／）が挙げられる。

【0390】

ＦＧｌｙ含有配列
改変された抗体重鎖および／または軽鎖へのＦＧＥの作用で、スルファターゼモチーフ中のセリンまたはシステインはＦＧｌｙに修飾される。そのため、ＦＧｌｙ含有スルファターゼモチーフは、式：
Ｘ^１（ＦＧｌｙ）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（Ｉ’’’）
のものであることができ、式中、
ＦＧｌｙはホルミルグリシン残基であり、
Ｚ^２０はプロリンまたはアラニンのいずれかの残基であり（（Ｐ／Ａ）によっても表すことができる）、
Ｚ^３０は塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）もしくはヒスチジン（Ｈ）、通常リジンであってもよい）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、もしくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、もしくはＩであり、
Ｘ^１は存在しても存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、ＳまたはＴ、例えば、Ｌ、ＭまたはＶであることができ、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１は存在し、かつ
Ｘ^２およびＸ^３は独立して任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、ＧまたはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧであることができる。

【0391】

上記のように、ＦＧｌｙ残基を含有する修飾されたポリペプチドは、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフを生成するための薬物（例えば、上記のような、ヒドラジニル－インドリルまたはヒドラジニル－ピロロ－ピリジニルカップリング部分を含有する薬物）とのＦＧｌｙの反応により薬物（例えば、メイタンシノイド）に共役していてもよい。本明細書において使用される場合、ＦＧｌｙ’という用語は、薬物、例えば、メイタンシンまたはアウリスタチンにカップリングされるスルファターゼモチーフの修飾されたアミノ酸残基を指す。そのため、ＦＧｌｙ’含有スルファターゼモチーフは、式：
Ｘ^１（ＦＧｌｙ’）Ｘ^２Ｚ^２０Ｘ^３Ｚ^３０（ＩＩ）
のものであることができ、式中、
ＦＧｌｙ’は式（Ｉ）の修飾されたアミノ酸残基であり、
Ｚ^２０はプロリンまたはアラニンのいずれかの残基であり（（Ｐ／Ａ）によっても表すことができる）、
Ｚ^３０は塩基性アミノ酸（例えば、アルギニン（Ｒ）であり、リジン（Ｋ）もしくはヒスチジン（Ｈ）、通常リジンであってもよい）、または脂肪族アミノ酸（アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、ロイシン（Ｌ）、バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、もしくはプロリン（Ｐ）、例えば、Ａ、Ｇ、Ｌ、Ｖ、もしくはＩであり、
Ｘ^１は存在しても存在しなくてもよく、存在する場合、任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｌ、Ｍ、Ｖ、ＳまたはＴ、例えば、Ｌ、ＭまたはＶであることができ、但し、スルファターゼモチーフが標的ポリペプチドのＮ末端にある場合、Ｘ^１は存在し、かつ
Ｘ^２およびＸ^３は独立して任意のアミノ酸、例えば、脂肪族アミノ酸、硫黄含有アミノ酸、または極性非荷電性アミノ酸、（すなわち、芳香族アミノ酸または荷電性アミノ酸以外）、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、Ｖ、ＧまたはＣ、例えば、Ｓ、Ｔ、Ａ、ＶまたはＧであることができる。

【0392】

修飾の部位
上述したように、抗体のアミノ酸配列は、ｉｎ ｖｉｖｏ（例えば、細胞中のアルデヒドタグ含有タンパク質の翻訳の時点で）またはｉｎ ｖｉｔｒｏ（例えば、無細胞系においてアルデヒドタグ含有タンパク質をＦＧＥと接触させることによる）のいずれかでＦＧＥの作用によりＦＧｌｙ残基に変換（酸化）されることができるセリンまたはシステイン残基を含有するスルファターゼモチーフを含むように改変される。本開示のコンジュゲートを生成するために使用される抗体は、少なくともＩｇ定常領域、例えば、Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１およびＣＨ２ドメイン；ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン；もしくはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４ドメイン）、またはＩｇ軽鎖定常領域を含む。そのようなＩｇポリペプチドは、本明細書において「標的Ｉｇポリペプチド」または「標的抗体」と称される。

【0393】

スルファターゼモチーフが導入される抗体中の部位は、任意の好都合な部位であることができる。上述したように、一部の事例では、標的ポリペプチドのネイティブなアミノ酸配列の改変の程度は、挿入、欠失、置換（置き換え）、および／または付加（例えば、ＮもしくはＣ末端へ）されるアミノ酸残基の数を最小化するように最小化される。標的抗体のアミノ酸配列改変の程度の最小化は、そのような改変が抗体機能および／または構造に対して有し得る影響力を最小化することがある。

【0394】

抗体重鎖定常領域は、任意の重鎖アイソタイプのＩｇ定常領域、天然に存在しないＩｇ重鎖定常領域（コンセンサスＩｇ重鎖定常領域を含む）を含むことができる。Ｉｇ定常領域は、アルデヒドタグを含むように改変されることができ、アルデヒドタグは、Ｉｇ定常領域の溶媒が接近可能なループ領域中またはそれに隣接して存在する。Ｉｇ定常領域は、上記のようなスルファターゼモチーフのアミノ酸配列を提供するために、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、もしくは１６アミノ酸、または１６アミノ酸より多くの挿入および／または置換により改変されることができる。

【0395】

一部の場合には、アルデヒドタグ付加抗体は、アルデヒドタグ付加Ｉｇ重鎖定常領域（例えば、少なくともＣＨ１ドメイン；少なくともＣＨ１およびＣＨ２ドメイン；ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン；またはＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＣＨ４ドメイン）を含む。アルデヒドタグ付加Ｉｇ重鎖定常領域は、ＦＧＥにより修飾されてＦＧｌｙ修飾Ｉｇポリペプチドを生成することができる少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように改変された、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４アイソタイプ重鎖の重鎖定常領域配列またはその任意のアロタイプバリアント、例えば、ヒト重鎖定常領域配列もしくはマウス重鎖定常領域配列、ハイブリッド重鎖定常領域、合成重鎖定常領域、またはコンセンサス重鎖定常領域配列などを含むことができる。Ｉｇ重鎖のアロタイプバリアントは当該技術分野において公知である。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ（２００９）ＭＡｂｓ １：４を参照。

【0396】

一部の場合には、アルデヒドタグ付加抗体はアルデヒドタグ付加Ｉｇ軽鎖定常領域を含む。アルデヒドタグ付加Ｉｇ軽鎖定常領域は、ＦＧＥにより修飾されてＦＧｌｙ修飾抗体を生成することができる少なくとも１つのスルファターゼモチーフを含むように改変された、カッパ軽鎖、ラムダ軽鎖の定常領域配列、例えば、ヒトカッパもしくはラムダ軽鎖定常領域、ハイブリッド軽鎖定常領域、合成軽鎖定常領域、またはコンセンサス軽鎖定常領域配列などを含むことができる。例示的な定常領域としては、ヒトガンマ１およびガンマ３領域が挙げられる。スルファターゼモチーフの例外と共に、修飾される定常領域は野生型アミノ酸配列を有してもよく、または野生型アミノ酸配列に対して少なくとも７０％同一（例えば、少なくとも８０％、少なくとも９０％もしくは少なくとも９５％同一）のアミノ酸配列を有してもよい。

【0397】

一部の実施形態では、スルファターゼモチーフは、Ｉｇポリペプチド重鎖のＣ末端以外の、またはそれに追加的な位置にある。上述したように、単離されたアルデヒドタグ付加抗体は、上記のようなスルファターゼモチーフを含むように改変された重鎖定常領域を含むことができ、スルファターゼモチーフは、抗体重鎖定常領域の表面に接近可能なループ領域中またはそれに隣接して存在する。

【0398】

スルファターゼモチーフは、Ｉｇ重鎖のそのような改変部位のこれらのアミノ酸配列の１または複数内またはそれに隣接して提供されることができる。例えば、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、これらの改変部位に隣接しておよびＮ末端にならびに／または隣接しておよびＣ末端にスルファターゼモチーフを提供するために、これらのアミノ酸配列の１または複数において改変（例えば、改変は、１または複数のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む）されることができる。代替的または追加的に、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、Ｉｇ重鎖改変部位の任意の２残基の間にスルファターゼモチーフを提供するために、これらのアミノ酸配列の１または複数において改変（例えば、改変は、１または複数のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む）されることができる。一部の実施形態では、Ｉｇ重鎖ポリペプチドは、２個のモチーフを含むように改変されてもよく、２個のモチーフは互いに隣接していてもよく、または１、２、３、４個もしくはそれより多く（例えば、約１～約２５個、約２５～約５０個、もしくは約５０～約１００個、もしくはより多くのアミノ酸により分離されていてもよい。代替的または追加的に、ネイティブなアミノ酸配列がスルファターゼモチーフ配列の１または複数のアミノ酸残基を提供する場合、Ｉｇ重鎖ポリペプチドアミノ酸配列の改変部位の選択されたアミノ酸残基は、改変部位においてスルファターゼモチーフを提供するように改変（例えば、改変は、１または複数のアミノ酸残基の挿入、欠失、および／または置換を含む）されることができる。

【0399】

本開示の抗体－薬物コンジュゲートにおいて使用される抗体は様々な抗原結合特異性のいずれかを有することができ、これには、例えば、がん細胞上に存在する抗原、自己免疫細胞上に存在する抗原、病原性微生物上に存在する抗原、ウイルス感染細胞（例えば、ヒト免疫不全ウイルス感染細胞）上に存在する抗原、および疾患細胞上に存在する抗原などが含まれるがこれらに限定されない。例えば、抗体コンジュゲートは、細胞の表面上に存在する抗原に結合することができる。本開示の抗体コンジュゲートは、好適な結合親和性、例えば、５×１０^－６Ｍ～１０^－７Ｍ、１０^－７Ｍ～５×１０^－７Ｍ、５×１０^－７Ｍ～１０^－８Ｍ、１０^－８Ｍ～５×１０^－８Ｍ、５×１０^－８Ｍ～１０^－９Ｍ、または１０^－９Ｍより高い結合親和性で抗原に結合することができる。

【0400】

非限定的な例として、主題抗体コンジュゲートは、がん細胞上に存在する抗原（例えば、腫瘍特異的抗原、がん細胞上に過剰発現される抗原など）に結合することができ、かつ共役した部分は、薬物、例えば、細胞傷害性化合物（例えば、細胞傷害性小分子、細胞傷害性合成ペプチドなど）であることができる。例えば、主題抗体コンジュゲートは、がん細胞上の抗原に特異的であることができ、共役した部分は薬物、例えば、細胞傷害性化合物（例えば、細胞傷害性小分子、細胞傷害性合成ペプチドなど）である。

【0401】

さらなる非限定的な例として、主題抗体コンジュゲートは、ウイルスに感染した細胞上に存在する抗原（例えば、抗原がウイルスによりコードされる場合；抗原が、ウイルスにより感染された細胞種上に発現される場合など）に結合することができ、かつ共役した部分は薬物、例えば、ウイルス融合阻害剤であることができる。例えば、主題抗体コンジュゲートは、ウイルスに感染した細胞上に存在する抗原に結合することができ、かつ共役した部分は薬物、例えば、ウイルス融合阻害剤であることができる。

【0402】

ポリペプチドへの共役用の薬物
本開示は薬物－ポリペプチドコンジュゲート（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）を提供する。抗体に共役するための反応性パートナーとして、多数の薬物が使用のために好適であり、または使用のために好適となるように改変されることができる。薬物の例としては小分子薬物およびペプチド薬物が挙げられる。

【0403】

「小分子薬物」は、本明細書において使用される場合、関心対象の薬学的活性を呈し、かつ一般に８００Ｄａもしくはそれ未満、または２０００Ｄａもしくはそれ未満の分子量の化合物、例えば、有機化合物を指すが、５ｋＤａまでの分子を包含することができ、１０ｋＤａ程度の大きさであることができる。小無機分子は、炭素原子を含有しない分子を指し、小有機分子は、少なくとも１つの炭素原子を含有する化合物を指す。

【0404】

「ペプチド薬物」は、本明細書において使用される場合、アミノ酸含有ポリマー化合物を指し、天然に存在するおよび天然に存在しないペプチド、オリゴペプチド、環状ペプチド、ポリペプチド、およびタンパク質の他に、ペプチド模倣体を包含することが意味される。ペプチド薬物は、化学合成により得られてもよく、または遺伝学的にコードされる供給源（例えば、組換え供給源）から製造されてもよい。ペプチド薬物は、様々な分子量であることができ、２００Ｄａ～１０ｋＤａまたはより大きい分子量であることができる。好適なペプチドとしては、細胞傷害性ペプチド、血管新生ペプチド、抗血管新生ペプチド、Ｂ細胞を活性化させるペプチド、Ｔ細胞を活性化させるペプチド、抗ウイルスペプチド、ウイルス融合を阻害するペプチド、１または複数のリンパ球集団の産生を増加させるペプチド、抗微小生物ペプチド、増殖因子、成長ホルモン放出因子、血管作動性ペプチド、抗炎症性ペプチド、グルコース代謝を調節するペプチド、抗血栓性ペプチド、抗侵害受容性ペプチド、血管拡張性ペプチド、血小板凝集阻害剤、および鎮痛剤などが挙げられるがこれらに限定されない。

【0405】

薬物の例としては小分子薬物、例えば、がん化学療法剤が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（またはその断片）である場合、抗体は、がん化学療法剤にその後に共役させることができる修飾されたアミノ酸を含むように本明細書に記載されるように改変されることができる。がん化学療法剤としては、がん細胞の増殖を低減させる非ペプチド性（すなわち、非タンパク質性）化合物が挙げられ、細胞傷害剤および細胞分裂抑制剤を包含する。化学療法剤の非限定的な例としては、アルキル化剤、ニトロソウレア、代謝拮抗物質、抗腫瘍性抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、およびステロイドホルモンが挙げられる。ペプチド性化合物もまた使用することができる。

【0406】

好適ながん化学療法剤としては、ドラスタチンおよびその活性アナログおよび誘導体、ならびにアウリスタチンおよびその活性アナログおよび誘導体（例えば、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、およびモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）など）が挙げられる。例えば、国際公開第９６／３３２１２号、国際公開第９６／１４８５６号、および米国特許第６，３２３，３１５号明細書を参照。例えば、ドラスタチン１０またはアウリスタチンＰＥは本開示の抗体－薬物コンジュゲートに含まれることができる。好適ながん化学療法剤としてはまた、メイタンシノイドおよびその活性アナログおよび誘導体（例えば、ＥＰ １３９１２１３、およびＬｉｕ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：８６１８－８６２３を参照）、デュオカルマイシンおよびその活性アナログおよび誘導体（例えば、合成アナログ、ＫＷ－２１８９およびＣＢ １－ＴＭ１を含む）、ならびにベンゾジアゼピンおよびその活性アナログおよび誘導体（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）が挙げられる。

【0407】

細胞増殖を低減させるように作用する剤は当該技術分野において公知であり、広く使用されている。そのような剤としては、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、およびトリアゼン、以下に限定されないが例えば、メクロレタミン、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ（商標））、メルファラン（Ｌ－サルコリシン）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル－ＣＣＮＵ）、ストレプトゾシン、クロロゾトシン、ウラシルマスタード、クロルメチン、イホスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホロアミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｎｅ）、ブスルファン、ダカルバジン、およびテモゾロミドが挙げられる。

【0408】

代謝拮抗剤としては、葉酸アナログ、ピリミジンアナログ、プリンアナログ、およびアデノシンデアミナーゼ阻害剤、以下に限定されないが例えば、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ－Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５－ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６－チオグアニン、６－メルカプトプリン（６－ＭＰ）、ペントスタチン、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、メトトレキサート、１０－プロパルギル－５，８－ジデアザ葉酸（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５，８－ジデアザテトラヒドロ葉酸（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、フルダラビンリン酸塩、ペントスタチン（ｐｅｎｔｏｓｔａｔｉｎｅ）、およびゲムシタビンが挙げられる。

【0409】

好適な天然産物およびそれらの誘導体、（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍性抗生物質、酵素、リンホカイン、およびエピポドフィロトキシン）としては、Ａｒａ－Ｃ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、デオキシコホルマイシン、ミトマイシン－Ｃ、Ｌ－アスパラギナーゼ、アザチオプリン；ブレキナル；アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシンなど；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシドなど；抗生物質、例えば、アントラサイクリン、ダウノルビシン塩酸塩（ダウノマイシン、ルビドマイシン、セルビジン）、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシンおよびモルホリノ誘導体など；フェノキシゾンビスシクロペプチド（ｐｈｅｎｏｘｉｚｏｎｅ ｂｉｓｃｙｃｌｏｐｅｐｔｉｄｅｓ）、例えば、ダクチノマイシン；塩基性糖ペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノングリコシド、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロロインドールジオン（ａｚｉｒｉｎｏｐｙｒｒｏｌｏ ｉｎｄｏｌｅｄｉｏｎｅｓ）、例えば、ミトマイシン；ならびに大環状免疫抑制剤、例えば、サイクロスポリン、ＦＫ－５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシンなどが挙げられるがこれらに限定されない。

【0410】

他の抗増殖性細胞傷害剤は、ナベルベン（ｎａｖｅｌｂｅｎｅ）、ＣＰＴ－１１、アナストラゾール（ａｎａｓｔｒａｚｏｌｅ）、レトロゾール、カペシタビン、レロキサフィン（ｒｅｌｏｘａｆｉｎｅ）、シクロホスファミド、イホスアミド（ｉｆｏｓａｍｉｄｅ）、およびドロロキサフィン（ｄｒｏｌｏｘａｆｉｎｅ）である。

【0411】

抗増殖活性を有する微小管作用剤もまた使用のために好適であり、アロコルヒチン（ＮＳＣ ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ ３３４１０）、ドルスタチン１０（ｄｏｌｓｔａｔｉｎ １０）（ＮＳＣ ３７６１２８）、メイタンシン（ＮＳＣ １５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ ３３２５９８）、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、Ｔａｘｏｌ（登録商標）誘導体、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ ３６１７９２）、トリチルシステリン（ｔｒｉｔｙｌ ｃｙｓｔｅｒｉｎ）、ビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩、天然および合成エポチロン、以下に限定されないが例えば、エオプチロンＡ（ｅｏｐｔｈｉｌｏｎｅ Ａ）、エポチロンＢ、ディスコデルモライド；ならびにエストラムスチン、ノコダゾールなどが挙げられるがこれらに限定されない。

【0412】

使用のために好適なホルモンモジュレーターおよびステロイド（合成アナログを含む）としては、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニゾン、デキサメタゾンなど；エストロゲンおよびプレゲスチン（ｐｒｅｇｅｓｔｉｎｓ）、例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェンなど、および副腎皮質抑制剤、例えば、アミノグルテチミド；１７α－エチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、ドロモスタノロンプロピオン酸塩、テストラクトン、メチルプレドニゾロン、メチル－テストステロン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド（ドロゲニル）、トレミフェン（フェアストン）、およびＺｏｌａｄｅｘ（登録商標）が挙げられるがこれらに限定されない。エストロゲンは増殖および分化を刺激し、したがって、エストロゲン受容体に結合する化合物は、この活性を遮断するために使用される。コルチコステロイドはＴ細胞増殖を阻害し得る。

【0413】

他の好適な化学療法剤としては、金属錯体、例えば、シスプラチン（シス－ＤＤＰ）、カルボプラチンなど；尿素、例えば、ヒドロキシ尿素、およびヒドラジン、例えば、Ｎ－メチルヒドラジン；エピドフィロトキシン（ｅｐｉｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフールなどが挙げられる。他の関心対象の抗増殖剤としては、免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デスオキシスペルグアリン（ｄｅｓｏｘｙｓｐｅｒｇｕａｌｉｎ）、アザスポリン（ａｚａｓｐｏｒｉｎｅ）、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピラン（ＳＫＦ １０５６８５）；Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）（ＺＤ １８３９、４－（３－クロロ－４－フルオロフェニルアミノ）－７－メトキシ－６－（３－（４－モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）などが挙げられる。

【0414】

タキサンは使用のために好適である。「タキサン」は、パクリタキセルの他に、任意の活性のタキサン誘導体またはプロドラッグを含む。「パクリタキセル」（本明細書において、アナログ、製剤、および誘導体、例えば、ドセタキセル、ＴＡＸＯＬ（商標）、ＴＡＸＯＴＥＲＥ（商標）（ドセタキセルの製剤）、パクリタキセルの１０－デスアセチルアナログおよびパクリタキセルの３’Ｎ－デスベンゾイル－３’Ｎ－ｔ－ブトキシカルボニルアナログなどを含むことが理解されるべきである）は、当業者に公知の技術を利用して容易に調製することができ（国際公開第９４／０７８８２号、国際公開第９４／０７８８１号、国際公開第９４／０７８８０号、国際公開第９４／０７８７６号、国際公開第９３／２３５５５号、国際公開第９３／１００７６号；米国特許第５，２９４，６３７号明細書、同第５，２８３，２５３号明細書、同第５，２７９，９４９号明細書、同第５，２７４，１３７号明細書、同第５，２０２，４４８号明細書、同第５，２００，５３４号明細書、同第５，２２９，５２９号明細書；ならびにＥＰ ５９０，２６７も参照）、または様々な商業的供給元、例えば、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａからのＴ７４０２；もしくはＴａｘｕｓ ｙａｎｎａｎｅｎｓｉｓからのＴ－１９１２）から得ることができる。

【0415】

パクリタキセルは、パクリタキセルの一般的な化学的に利用可能な形態だけではなく、アナログおよび誘導体（例えば、上述したようなＴａｘｏｔｅｒｅ（商標）ドセタキセル）ならびにパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル－ＰＥＧ、パクリタキセル－デキストラン、またはパクリタキセル－キシロース）も指すことが理解されるべきである。

【0416】

親水性誘導体、および疎水性誘導体の両方を含む、様々な既知の誘導体もまた「タキサン」という用語に含まれる。タキサン誘導体としては、国際特許出願国際公開第９９／１８１１３号に記載のガラクトースおよびマンノース誘導体、国際公開第９９／１４２０９号に記載のピペラジノ（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｏ）および他の誘導体、国際公開第９９／０９０２１号、国際公開第９８／２２４５１号、および米国特許第５，８６９，６８０号明細書に記載のタキサン誘導体、国際公開第９８／２８２８８号に記載の６－チオ誘導体、米国特許第５，８２１，２６３号明細書に記載のスルフェンアミド誘導体、ならびに米国特許第５，４１５，８６９号明細書に記載のタキソール誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。それは、パクリタキセルのプロドラッグ、以下に限定されないが例えば、国際公開第９８／５８９２７号、国際公開第９８／１３０５９号、および米国特許第５，８２４，７０１号明細書に記載されるものをさらに含む。

【0417】

使用のために好適な生物学的応答修飾剤としては、（１）チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）活性の阻害剤、（２）セリン／スレオニンキナーゼ活性の阻害剤、（３）腫瘍関連抗原アンタゴニスト、例えば、腫瘍抗原に特異的に結合する抗体、（４）アポトーシス受容体アゴニスト、（５）インターロイキン－２、（６）ＩＦＮ－α、（７）ＩＦＮ－γ、（８）コロニー刺激因子、および（９）血管新生の阻害剤が挙げられるがこれらに限定されない。

【0418】

薬物の例としては小分子薬物、例えば、がん化学療法剤が挙げられる。例えば、ポリペプチドが、腫瘍細胞に対する特異性を有する抗体（またはその断片）である場合、抗体は、がん化学療法剤、例えば、微小管作用剤にその後に共役させることができる修飾されたアミノ酸を含むように本明細書に記載されるように改変されることができる。ある特定の実施形態では、薬物は、抗増殖活性を有する微小管作用剤、例えば、メイタンシノイドである。ある特定の実施形態では、薬物はメイタンシノイドであり、メイタンシノイドは、以下の構造：

【化67】

【0419】

であり、

【化68】

【0420】

は、本明細書に記載のコンジュゲートおよび化合物中のメイタンシノイドおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。「結合点」により、

【化69】

【0421】

記号は、本明細書に記載のコンジュゲートおよび化合物中のメイタンシノイドのＮおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合を指し示すことが意味される。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ^１は、メイタンシノイド、例えば、上記の構造のメイタンシノイドであってもよく、

【化70】

【0422】

は、メイタンシノイドおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。一部の場合には、上記の構造のメイタンシノイドはデアシルメイタンシンと称されることがある。

【0423】

ある特定の実施形態では、薬物は抗有糸分裂剤、例えば、アウリスタチンまたはその活性アウリスタチンアナログもしくは誘導体（例えば、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、およびモノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）など）である。ある特定の実施形態では、薬物は、以下の構造：

【化71】

【0424】

を有するＭＭＡＥである。

【0425】

例えば、ＭＭＡＥ活性剤は、以下：

【化72】

【0426】

のように抗体－薬物コンジュゲート中に含まれることができ、

【化73】

【0427】

は、本明細書に記載のコンジュゲートおよび化合物中のアウリスタチンおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。例えば、

【化74】

【0428】

記号は、例えば、式（Ｉ）に示されるように、アウリスタチンのＮおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合を指し示す。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ^１はアウリスタチン、例えば、ＭＭＡＥであることができ、上記の構造中の

【化75】

【0429】

は、ＭＭＡＥおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。

【0430】

ある特定の実施形態では、薬物はＤＮＡアルキル化剤、例えば、デュオカルマイシンである。デュカルマイシン（ｄｕｃａｒｍｙｃｉｎ）の例としては、デュオカルマイシンＡ、デュオカルマイシンＢ１、デュオカルマイシンＢ２、デュオカルマイシンＣ１、デュオカルマイシンＣ２、デュオカルマイシンＤ、デュオカルマイシンＳＡ、およびＣＣ－１０６５が挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態では、デュオカルマイシンはデュオカルマイシンアナログ、以下に限定されないが例えば、アドゼレシン、ビゼレシン、またはカルゼレシンである。

【0431】

一部の事例では、デュオカルマイシンは、以下の構造：

【化76】

【0432】

を有する化合物である。

【0433】

例えば、デュオカルマイシン活性剤は、以下：

【化77】

【0434】

または

【化78】

【0435】

のように抗体－薬物コンジュゲート中に含まれることができ、

【化79】

【0436】

は、本明細書に記載のコンジュゲートおよび化合物中のデュカルマイシンおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。例えば、

【化80】

【0437】

記号は、例えば、式（Ｉ）に示されるように、デュオカルマイシンおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合を指し示す。例えば、式（Ｉ）において、Ｗ^１はデュオカルマイシン、例えば、上記に示されるデュカルマイシンであることができ、

【化81】

【0438】

は、デュオカルマイシンおよび第２のリンカー、Ｌ^２の間の結合点を指し示す。

【0439】

上記のように、ある特定の実施形態では、Ｌ^２は、式－（Ｌ^２１）_ｅ－（Ｌ^２２）_ｆ－（Ｌ^２３）_ｇ－（Ｌ^２４）_ｈ－により記載される第２のリンカーであり、Ｌ^２１、Ｌ^２２、Ｌ^２３およびＬ^２４はそれぞれ独立して第２のリンカーサブユニットである。ある特定の実施形態では、Ｌ^２１は第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２１が存在する場合、それはまたＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２２が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２３が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｌ^２４が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。

【0440】

上記のように、ある特定の実施形態では、第２のリンカー－（Ｌ^２１）_ｅ－（Ｌ^２２）_ｆ－（Ｌ^２３）_ｇ－（Ｌ^２４）_ｈ－は、式－（Ｔ^５－Ｖ^５）_ｅ－（Ｔ^６－Ｖ^６）_ｆ－（Ｔ^７－Ｖ^７）_ｇ－（Ｔ^８－Ｖ^８）_ｈ－により記載され、ｅ、ｆ、ｇおよびｈはそれぞれ独立して０または１であり、ｅ、ｆ、ｇおよびｈの和は０～４である。ある特定の実施形態では、上記のように、Ｌ^２１は第１の切断可能な部分に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^５は第１の切断可能な部分に取り付けられている。ある特定の実施形態では、Ｖ^５はＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、上記のように、Ｌ^２２が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^６が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられており、またはＶ^６が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、上記のように、Ｌ^２３が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^７が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられており、またはＶ^７が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。ある特定の実施形態では、上記のように、Ｌ^２４が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。そのため、ある特定の実施形態では、Ｔ^８が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられており、またはＶ^８が存在する場合、それはＷ^１（薬物）に取り付けられている。

【0441】

本開示の実施形態は、抗体が１または複数の薬物部分、例えば、２個の薬物部分、３個の薬物部分、４個の薬物部分、５個の薬物部分、６個の薬物部分、７個の薬物部分、８個の薬物部分、９個の薬物部分、または１０個またはそれより多くの薬物部分に共役したコンジュゲートを含む。薬物部分は、本明細書に記載されるように、抗体中の１または複数の部位において抗体に共役していてもよい。ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、０．１～１０、または０．５～１０、または１～１０、例えば、１～９、または１～８、または１～７、または１～６、または１～５、または１～４、または１～３、または１～２の範囲内の平均薬物対抗体比（ＤＡＲ）（モル比）を有する。ある特定の実施形態では、コンジュゲートは、１～２、例えば、１、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９または２の平均ＤＡＲを有する。ある特定の実施形態では、コンジュゲートは１～１．５の平均ＤＡＲを有する。ある特定の実施形態では、コンジュゲートは１．５～２の平均ＤＡＲを有する。平均により算術平均が意味される。

【0442】

ポリペプチドに共役される薬物は、ポリペプチドとの反応のための反応性パートナーを組み込むように修飾されてもよい。薬物がペプチド薬物である場合、反応性部分（例えば、アミノオキシまたはヒドラジドは、ペプチドのＮ末端領域、Ｎ末端、Ｃ末端領域、Ｃ末端、または内部の位置に位置することができる。例えば、方法の例は、アミノオキシ基を有するペプチド薬物を合成することを伴う。この例において、ペプチドはＢｏｃ保護された前駆体から合成される。ペプチドのアミノ基をカルボン酸基およびオキシ－Ｎ－Ｂｏｃ基を含む化合物と反応させることができる。例として、ペプチドのアミノ基を３－（２，５－ジオキソピロリジン－１－イルオキシ）プロパン酸と反応させる。カルボン酸基およびオキシ－Ｎ保護基を含む化合物の他のバリエーションは、異なる数のアルキレンリンカー中の炭素およびアルキレンリンカー上の置換基を含むことができる。ペプチドのアミノ基ならびにカルボン酸基およびオキシ－Ｎ保護基を含む化合物の間の反応は、標準的なペプチドカップリング化学を通じて起こる。使用することができるペプチドカップリング試薬の例としては、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）、ジ－ｐ－トルオイルカルボジイミド（ｄｉ－ｐ－ｔｏｌｕｏｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ）、ＢＤＰ（１－ベンゾトリアゾールジエチルホスフェート－１－シクロヘキシル－３－（２－モルホリニルエチル）カルボジイミド）、ＥＤＣ（１－（３－ジメチルアミノプロピル－３－エチル－カルボジイミドヒドロクロリド）、フッ化シアヌル、塩化シアヌル、ＴＦＦＨ（テトラメチルフルオロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスホスフェート（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ ｆｌｕｏｒｏｆｏｒｍａｍｉｄｉｎｉｕｍ ｈｅｘａｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ））、ＤＰＰＡ（ジフェニルホスホロアジデート（ｄｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒａｚｉｄａｔｅ））、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＢＴＵ（Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＢＴＵ（Ｏ－ベンゾトリアゾール－１－イル－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＴＳＴＵ（Ｏ－（Ｎ－スクシンイミジル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＨＡＴＵ（Ｎ－［（ジメチルアミノ）－１－Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５，６］－ピリジン－１－イルメチレン］－－Ｎ－メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド）、ＢＯＰ－Ｃｌ（ビス（２－オキソ－３－オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド）、ＰｙＢＯＰ（（１－Ｈ－１，２，３－ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）－トリス（ピロリジノ）ホスホニウムテトラフルオロホスフェート）、ＢｒＯＰ（ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＥＰＢＴ（３－（ジエトキシホスホリルオキシ）－１，２，３－ベンゾトリアジン－４（３Ｈ）－オン）ＰｙＢｒＯＰ（ブロモトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）が挙げられるがこれらに限定されない。非限定的な例として、ＨＯＢｔおよびＤＩＣをペプチドカップリング試薬として使用することができる。

【0443】

アミノ－オキシ官能基を露出させるための脱保護が、Ｎ保護基を含むペプチドに対して行われる。例えば、Ｎ－オキシスクシンイミド基の脱保護は、環式アミド基のための標準的な脱保護条件にしたがって起こる。脱保護条件は、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ Ｅｄ．，１９９９，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹおよびＨａｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．に見出すことができる。ある特定の脱保護条件は、ヒドラジン試薬、アミノ試薬、または水素化ホウ素ナトリウムを含む。Ｂｏｃ保護基の脱保護はＴＦＡを用いて起こることができる。脱保護のための他の試薬としては、ヒドラジン、メチルヒドラジン、フェニルヒドラジン、水素化ホウ素ナトリウム、およびメチルアミンが挙げられるがこれらに限定されない。生成物および中間体は、従来の手段、例えば、ＨＰＬＣ精製により精製することができる。

【0444】

ｐＨおよび立体障害（すなわち、関心対象の反応性パートナーとの反応に対するアミノ酸残基のアクセス可能性）などの因子は重要であり、最適な共役条件を提供するための反応条件の改変は十分に当業者の技術的範囲内であり、当該技術分野においてルーチンであることを当業者は認める。共役が、生細胞中または上に存在するポリペプチドを用いて実行される場合、生理学的に適合性であるように条件は選択される。例えば、反応が起こるために十分であるが、細胞により許容される期間内の時間（例えば、約３０分～１時間）にわたりｐＨを一時的に低下させることができる。細胞表面上のポリペプチドの修飾を実行するための生理学的条件は、細胞表面アジドを有する細胞の修飾におけるケトン－アジド反応において使用されるものに類似したものであり得る（例えば、米国特許第６，５７０，０４０号明細書を参照）。

【0445】

本明細書に開示される化合物またはコンジュゲートとの反応性パートナーとして役立つα求核基を含有する、またはそれを含有するように修飾された小分子化合物もまた、本開示のポリペプチド－薬物コンジュゲートにおいて薬物として使用するために想定される。関心対象の化合物を合成するために有用な化学合成スキームおよび条件のための一般的方法は当該技術分野において公知である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１；またはＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照）。

【0446】

製剤
本開示のコンジュゲートは、様々な異なるやり方で製剤化することができる。一般に、コンジュゲートが抗体－薬物コンジュゲートである場合、コンジュゲートは、薬物、抗体、治療されるべき状態、および使用される投与の経路と適合性の方式において製剤化される。

【0447】

一部の実施形態では、本開示の任意のコンジュゲートおよび薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。

【0448】

コンジュゲート（例えば、抗体－薬物コンジュゲート）は、任意の好適な形態、例えば、薬学的に許容される塩の形態で提供することができ、任意の好適な投与の経路、例えば、経口、外用または非経口投与のために製剤化することができる。コンジュゲートが液体注射剤（それらが静脈内にまたは直接的に組織中に投与される実施形態におけるものなど）として提供される場合、コンジュゲートは、使用準備済みの投薬形態として、または再構成可能な貯蔵安定的な粉末もしくは薬学的に許容される担体および賦形剤から構成される液体として提供されることができる。

【0449】

コンジュゲートを製剤化する方法は、容易に利用可能なものから適合させることができる。例えば、コンジュゲートは、治療有効量のコンジュゲートおよび薬学的に許容される担体（例えば、生理食塩水）を含む医薬組成物中に提供されることができる。医薬組成物は、他の添加剤（例えば、緩衝剤、安定化剤、および防腐剤など）を含んでもよい。一部の実施形態では、製剤は、哺乳動物への投与のために好適であり、例えば、ヒトへの投与のために好適なものである。

【0450】

治療方法
本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、親薬物（すなわち、抗体への共役前の薬物）の投与による治療に適する対象における状態または疾患の治療において用途を有する。

【0451】

一部の実施形態では、対象に有効量（例えば、治療有効量）の本開示の任意のコンジュゲートを投与することを含む方法が提供される。

【0452】

ある特定の態様では、対象における標的部位に薬物を送達する方法であって、対象に本開示の任意のコンジュゲートを含む医薬組成物を投与することを含み、投与することが、対象における標的部位においてコンジュゲートから治療有効量の薬物を放出させるために有効である、方法が提供される。例えば、本明細書に記載されるように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、切断可能なリンカー、例えば、第１の切断可能な部分および第２の切断可能なを含む酵素的に切断可能なリンカーまたは化学的に切断可能なリンカーを含むことができ、第２の切断可能な部分は第１の切断可能な部分の切断を妨害する。一部の事例では、切断可能なリンカーは、適切な条件下で切断されて、薬物の所望の標的作用部位において抗体から薬物を分離または放出させることができる。例えば、第１の切断可能なリンカーを切断から保護する第２の切断可能なリンカーは、第１の切断可能な部分が切断されることを可能とするために切断されてもよく、これは２またはそれより多くの部分への切断可能なリンカーの切断を結果としてもたらして、所望の作用部位において抗体－薬物コンジュゲートから薬物を放出させる。

【0453】

ある特定の実施形態では、第１の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であることができる。一部の事例では、第１の切断可能な部分の切断を促す酵素は、治療されるべき対象に投与される（すなわち、治療されるべき対象にとって外因性の）酵素である。例えば、第１の酵素は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの投与の前、同時、または後に投与されることができる。

【0454】

ある特定の実施形態では、第２の切断可能な部分は酵素的に切断可能な部分であることができる。一部の事例では、第２の切断可能な部分の切断を促す酵素は、治療されるべき対象に投与される（すなわち、治療されるべき対象にとって外因性の）酵素である。例えば、第２の酵素は、本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの投与の前、同時、または後に投与されることができる。ある特定の実施形態では、第１の酵素および第２の酵素は異なる酵素である。

【0455】

他の事例では、第１の切断可能な部分の切断を促す第１の酵素は、治療されるべき対象において存在する（すなわち、治療されるべき対象にとって内因性の）酵素である。例えば、第１の酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位において存在してもよい。抗体－薬物コンジュゲートの抗体は、所望の作用部位に特異的に標的化されてもよく（例えば、所望の作用部位において存在する抗原に特異的に結合してもよい）、所望の作用部位はまた第１の酵素の存在を含む。一部の事例では、第１の酵素は、治療されるべき対象の身体中の他の区画と比較して所望の作用部位において過剰量で存在する。例えば、第１の酵素は、治療されるべき対象の身体中の他の区画と比較して所望の作用部位において過剰発現されていてもよい。一部の事例では、第１の酵素は、特定の区画または位置における第１の酵素の局在性に起因して所望の作用部位において過剰量で存在する。例えば、第１の酵素は、所望の作用部位内の特定の構造、例えば、リソソームと関連付けられてもよい。一部の場合には、第１の酵素は、対象の身体中の他の区画と比較してリソソーム中に過剰量で存在する。一部の実施形態では、第１の酵素を含むリソソームは、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位、例えば、薬物を用いて治療されるべきがんまたは腫瘍の部位において見出される。ある特定の実施形態では、第１の酵素はプロテアーゼ、例えば、ヒトプロテアーゼ酵素（例えば、カテプシンＢ）である。

【0456】

ある特定の実施形態では、第２の切断可能な部分の切断を促す第２の酵素は、治療されるべき対象において存在する（すなわち、治療されるべき対象にとって内因性の）酵素である。例えば、第２の酵素は、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位において存在してもよい。抗体－薬物コンジュゲートの抗体は、所望の作用部位に特異的に標的化されてもよく（例えば、所望の作用部位において存在する抗原に特異的に結合してもよい）、所望の作用部位はまた第２の酵素の存在を含む。一部の事例では、第２の酵素は、治療されるべき対象の身体中の他の区画と比較して所望の作用部位において過剰量で存在する。例えば、第２の酵素は、治療されるべき対象の身体中の他の区画と比較して所望の作用部位において過剰発現されていてもよい。一部の事例では、第２の酵素は、特定の区画または位置における第２の酵素の局在性に起因して所望の作用部位において過剰量で存在する。例えば、第２の酵素は、所望の作用部位内の特定の構造、例えば、リソソームと関連付けられてもよい。一部の場合には、第２の酵素は、対象の身体中の他の区画と比較してリソソーム中に過剰量で存在する。一部の実施形態では、第２の酵素を含むリソソームは、抗体－薬物コンジュゲートの薬物の所望の作用部位、例えば、薬物を用いて治療されるべきがんまたは腫瘍の部位において見出される。ある特定の実施形態では、第２の酵素はグルクロニダーゼ、例えば、ヒトグルクロニダーゼ酵素（例えば、リソソームβ－グルクロニダーゼ）である。

【0457】

本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの第１の切断可能な部分および第２の切断可能な部分の切断のために任意の好適な酵素を使用することができる。本明細書に記載の抗体－薬物コンジュゲートの第１の切断可能な部分および第２の切断可能な部分の切断における使用のために他の酵素、以下に限定されないが例えば、他の脊椎動物（例えば、霊長動物、マウス、ラット、ネコ、ブタ、ウズラ、ヤギ、イヌなど）からの酵素もまた好適なことがある。

【0458】

ある特定の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、標準的な条件下で実質的に安定である。実質的に安定により、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーは、上記のような第１の酵素および第２の酵素の非存在下で有意な量の切断を起こさないことが意味される。例えば、上記のように、第２の切断可能な部分は、第１の切断可能な部分を切断から保護することができるため、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーは、上記のような第２の酵素の非存在下で有意な量の切断を起こさない。例えば、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーは、抗体－薬物コンジュゲートの２５％またはそれ未満、例えば、２０％もしくはそれ未満、または１５％もしくはそれ未満、または１０％もしくはそれ未満、または５％もしくはそれ未満、または４％もしくはそれ未満、または３％もしくはそれ未満、または２％もしくはそれ未満、または１％もしくはそれ未満が第１の酵素および／または第２の酵素の非存在下で切断されるように実質的に安定であってもよい。一部の場合には、抗体－薬物コンジュゲートは、抗体－薬物コンジュゲートの切断可能なリンカーが第１の酵素および／または第２の酵素の非存在下で有意な量の切断を起こさないが、第１の酵素および第２の酵素が存在する場合に切断されることができるように実質的に安定である。例えば、抗体－薬物コンジュゲートは、対象への投与後に実質的に安定であることができる。一部の場合には、抗体－薬物コンジュゲートは、対象への投与後に実質的に安定であり、次に、抗体－薬物コンジュゲートが所望の作用部位において第２の酵素の存在下にある場合に、第２の切断可能な部分は切断可能なリンカーから切断されて、第１の酵素によるその後の切断に向けて第１の切断可能な部分を露出させることができ、次いでこれは所望の作用部位において薬物を放出させる。ある特定の実施形態では、対象への投与後に抗体－薬物コンジュゲートは第１の酵素および／または第２の酵素の非存在下で延長された期間、例えば、１時間もしくはそれより長く、または２時間もしくはそれより長く、または３時間もしくはそれより長く、または４時間もしくはそれより長く、または５時間もしくはそれより長く、または６時間もしくはそれより長く、または７時間もしくはそれより長く、または８時間もしくはそれより長く、または９時間もしくはそれより長く、または１０時間もしくはそれより長く、または１５時間もしくはそれより長く、または２０時間もしくはそれより長く、または２４時間（１日）もしくはそれより長く、または２日もしくはそれより長く、または３日もしくはそれより長く、または４日もしくはそれより長く、または５日もしくはそれより長く、または６日もしくはそれより長く、または７日（１週）もしくはそれより長くにわたり安定である。ある特定の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、第１の酵素および／または第２の酵素の非存在下で延長された時間的期間にわたりある範囲のｐＨ値、例えば、２～１０、または３～９、または４～８、または５～７、または６～７の範囲のｐＨにおいて安定である。

【0459】

上記のように、本開示の抗体－薬物コンジュゲートは、親薬物の投与による治療に適する対象における状態または疾患の治療において用途を有する。「治療」により、宿主が罹患した状態と関連付けられる症状の少なくとも寛解が達成されることが意味され、寛解は、パラメーター、例えば、治療されている状態と関連付けられる症状の規模における少なくとも低減を指すために広い意味において使用される。そのため、治療はまた、病理学的状態、またはそれと関連付けられる少なくとも症状が完全に阻害され、例えば、発生を予防され、または止められ、例えば、終了され、それにより、宿主は該状態、または該状態を特徴付ける少なくとも症状をもはや患っていない状況を含む。そのため、治療は、（ｉ）予防、すなわち、臨床症状の発症のリスクの低減、例えば、臨床症状が発症しないようにすること、例えば、有害な状態への疾患進行の予防、（ｉｉ）阻害、すなわち、臨床症状の発症もしくはさらなる発症の停止、例えば、活動性疾患の軽減もしくは完全な阻害、および／または（ｉｉｉ）緩和、すなわち、臨床症状の退縮を引き起こすことを含む。

【0460】

治療されるべき対象は、療法を必要とする対象であることができ、治療されるべき対象は、親薬物を使用する治療に適した対象である。よって、様々な対象が、本明細書に開示される抗体－薬物コンジュゲートを使用する治療に適し得る。一般に、そのような対象は「哺乳動物」であり、人間は関心対象である。他の対象としては、家庭内愛玩動物（例えば、イヌおよびネコ）、家畜動物（例えば、ウシ、ブタ、ヤギ、およびウマなど）、齧歯動物（例えば、マウス、モルモット、およびラット、例えば、疾患の動物モデルにおけるもの）の他に、非ヒト霊長動物（例えば、チンパンジーおよびサル）を挙げることができる。

【0461】

投与される抗体－薬物コンジュゲートの量は、親薬物の用量および／または投薬レジメンのガイダンスに基づいて最初に決定することができる。一般に、抗体－薬物コンジュゲートは、結合した薬物の標的化された送達および／または増強した血清半減期を提供することができるため、投薬レジメンにおける用量の低減または投与の低減の少なくとも１つを提供することができる。そのため、抗体－薬物コンジュゲートは、本開示の抗体－薬物コンジュゲートへの共役前の親薬物と比べて投薬レジメンにおける用量の低減および／または投与の低減を提供することができる。

【0462】

さらには、上述したように、抗体－薬物コンジュゲートは薬物送達の化学量論の制御を提供できるので、抗体－薬物コンジュゲートの投薬量は、抗体－薬物コンジュゲート当たりを基準として提供される薬物分子の数に基づいて算出することができる。

【0463】

一部の実施形態では、複数の用量の抗体－薬物コンジュゲートが投与される。抗体－薬物コンジュゲートの投与の頻度は、様々な因子のいずれか、例えば、症状の重症度、対象の状態などに依存して変動することができる。例えば、一部の実施形態では、抗体－薬物コンジュゲートは、月１回、月２回、月３回、隔週、週１回（ｑｗｋ）、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、一日おき、１日毎（ｑｄ／ｏｄ）、１日２回（ｂｄｓ／ｂｉｄ）、または１日３回（ｔｄｓ／ｔｉｄ）などで投与される。

【0464】

がんの治療方法
本開示は、本開示のコンジュゲートをがんを有する個体に送達することを含む方法を提供する。方法は、癌腫、肉腫、白血病、およびリンパ腫を含む、多様ながんを治療するために有用である。がんの文脈において、「治療」という用語は、固形腫瘍の成長の低減、がん細胞の複製の阻害、全体的な腫瘍負荷の低減、およびがんと関連付けられる１または複数の症状の寛解のうちの１または複数（例えば、それぞれ）を含む。

【0465】

主題方法を使用して治療することができる癌腫としては、食道癌、肝細胞癌、基底細胞癌（皮膚がんの形態）、扁平細胞癌（様々な組織）、膀胱癌、例えば、移行細胞癌（膀胱の悪性新生物）、気管支原性癌、結腸癌、結腸直腸癌、胃癌、肺癌、例えば、肺の小細胞癌および非小細胞癌、副腎皮質癌、甲状腺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、腎細胞癌、腺管内癌または胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、精巣癌、骨原性癌腫、上皮癌、ならびに鼻咽頭癌などが挙げられるがこれらに限定されない。

【0466】

主題方法を使用して治療することができる肉腫としては、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨原性肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、および他の軟組織肉腫が挙げられるがこれらに限定されない。

【0467】

主題方法を使用して治療することができる他の固形腫瘍としては、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、および網膜芽腫が挙げられるがこれらに限定されない。

【0468】

主題方法を使用して治療することができる白血病としては、ａ）慢性骨髄増殖性症候群（複能性（ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔｉａｌ）造血幹細胞の新生物性障害）、ｂ）急性骨髄性白血病（複能性造血幹細胞または制限された系列潜在能力の造血細胞の新生物性変換、ｃ）慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ；免疫学的に未熟かつ機能的に無能な小リンパ球のクローン増殖）、例えば、Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ 前リンパ球性白血病、および有毛細胞白血病、ならびにｄ）急性リンパ芽球性白血病（リンパ芽球の蓄積により特徴付けられる）が挙げられるがこれらに限定されない。主題方法を使用して治療することができるリンパ腫としては、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）、ホジキンリンパ腫、ならびに非ホジキンＢ細胞リンパ腫などが挙げられるがこれらに限定されない。

【0469】

ある特定の態様では、対象においてがんを治療する方法であって、対象に治療有効量の本開示の任意のコンジュゲートを含む医薬組成物を投与することを含み、投与することが対象においてがんを治療するために有効である、方法が提供される。

【0470】

［実施例］
以下の実施例は、本発明の製造および使用の方法の完全な開示および説明を当業者に提供するために記載され、本発明者らが自身の発明とみなすものの範囲を限定することは意図されず、また以下の実験は行われた全てまたは唯一の実験であることを表すことも意図されない。使用される数（例えば、量、温度など）に関して正確性を確実にするための努力を行ったが、何らかの実験誤差および逸脱が考慮されるべきである。他に指し示されなければ、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度はセルシウス度であり、圧力は大気圧またはその近くである。「平均」により算術平均が意味される。標準的な略語、例えば、ｂｐ、（１または複数の）塩基対；ｋｂ、（１または複数の）キロ塩基；ｐｌ、（１または複数の）ピコリットル；ｓまたはｓｅｃ、（１または複数の）秒；ｍｉｎ、（１または複数の）分；ｈまたはｈｒ、（１または複数の）時間；ａａ、（１または複数の）アミノ酸；ｋｂ、（１または複数の）キロ塩基；ｂｐ、（１または複数の）塩基対；ｎｔ、（１または複数の）ヌクレオチド；ｉ．ｍ．、筋肉内の（筋肉内に）；ｉ．ｐ．、腹腔内の（腹腔内に）；およびｓ．ｃ．、皮下の（皮下に）などが使用されることがある。

【0471】

一般合成手順
開示される化合物を合成するために有用な一般的に公知の化学合成スキームおよび条件を提供する多くの一般的参考文献が利用可能である（例えば、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｍａｒｃｈ，Ｍａｒｃｈ’ｓ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，２００１；またはＶｏｇｅｌ，Ａ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｆｏｕｒｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｌｏｎｇｍａｎ，１９７８を参照）。

【0472】

本明細書に記載されるような化合物は、当該技術分野において公知の任意の精製プロトコール、例えば、クロマトグラフィー、例えば、ＨＰＬＣ、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーにより精製することができる。順相および逆相の他に、イオン性樹脂を含む、任意の好適な固定相を使用することができる。ある特定の実施形態では、開示される化合物は、シリカゲルおよび／またはアルミナクロマトグラフィーを介して精製される。例えば、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｍｏｄｅｒｎ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄ．Ｌ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ ａｎｄ Ｊ．Ｊ．Ｋｉｒｋｌａｎｄ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９７９；およびＴｈｉｎ Ｌａｙｅｒ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｅｄ Ｅ．Ｓｔａｈｌ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９６９を参照。

【0473】

主題化合物の任意の調製方法の間に、関係する任意の分子上の感受性または反応性基を保護することが必要かつ／または望ましいことがある。これは、標準的な文献、例えば、Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，’’Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ’’，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９７３、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，’’Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’’，Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９９、’’Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ’’；Ｖｏｌｕｍｅ ３（ｅｄｉｔｏｒｓ：Ｅ．Ｇｒｏｓｓ ａｎｄ Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ），Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８１、’’Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ’’，Ｈｏｕｂｅｎ－Ｗｅｙｌ，４^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１５／ｌ，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４、Ｈ．－Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ ａｎｄ Ｈ．Ｊｅｓｃｈｅｉｔ，’’Ａｍｉｎｏｓａｕｒｅｎ，Ｐｅｐｔｉｄｅ，Ｐｒｏｔｅｉｎｅ’’，Ｖｅｒｌａｇ Ｃｈｅｍｉｅ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ Ｂｅａｃｈ，ａｎｄ Ｂａｓｅｌ １９８２、および／またはＪｏｃｈｅｎ Ｌｅｈｍａｎｎ，’’Ｃｈｅｍｉｅ ｄｅｒ Ｋｏｈｌｅｎｈｙｄｒａｔｅ：Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｎｄ Ｄｅｒｉｖａｔｅ’’，Ｇｅｏｒｇ Ｔｈｉｅｍｅ Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ １９７４に記載されるような従来の保護基を手段として達成することができる。保護基は、当該技術分野の公知の方法を使用して好都合なその後のステージにおいて除去されてもよい。

【0474】

主題化合物は、商業的に入手可能な出発材料および／または従来の合成方法により調製される出発材料を使用して様々な異なる合成経路を介して合成することができる。本明細書に開示される化合物を合成するために使用することができる合成経路の様々な例が以下のスキームにおいて記載される。

【0475】

合成試薬は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、Ａｃｒｏｓ、または他の商業的供給元から購入し、精製なしで使用した。無水溶媒は、商業的供給元から密封ボトル中で得た。アセトブロモ－α－Ｄ－グルクロン酸メチルエステル１、ＭＭＡＥ ８、１７、４６、５７、および６２は商業的供給元から購入した。全ての反応は、他に記載されなければＮ_２下で炎乾燥されたガラス製品中で実行された。全ての場合に、溶媒は、Ｂｕｃｈｉ Ｖ－７００真空ポンプを備えたＢｕｃｈｉ Ｒｏｔｏｖａｐｏｒ Ｒ－１１４を用いて減圧により除去した。カラムクロマトグラフィーは、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ Ｐｒｉｍｅクロマトグラフを用いて行った。分取ＨＰＬＣ精製は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ ５μｍ ＥＶＯ Ｃ１８ １５０ ｘ ２１．２ｍｍカラムを備えたＷａｔｅｒｓ 分取ＨＰＬＣユニットを使用して行った。ＨＰＬＣ分析は、水および０．１％のギ酸を含有するアセトニトリルの１０～１００％の勾配を使用して室温でＭｏｄｅｌ Ｇ１３２２Ａ Ｄｅｇａｓｓｅｒ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３１１Ａ Ｑｕａｒｔｅｒｎａｒｙ Ｐｕｍｐ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３２９Ａ Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ、Ｍｏｄｅｌ Ｇ１３１４ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ １２０ ＳＢ Ｃ１８、４．６ｍｍ×５０ｍｍカラムを備えたＡｇｉｌｅｎｔ １１００ Ｓｅｒｉｅｓ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ＨＰＬＣ上で実行した。ＨＰＬＣは２５４ｎｍにおいてモニターした。

【0476】

［実施例１］
ＭＭＡＥ構築物１３の合成
モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）構築物を以下に示されるスキーム１にしたがって合成した。

【0477】

スキーム１

【化82】

【0478】

【0479】

【0480】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（５－ホルミル－２－ニトロフェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２）の調製
アセトニトリル（１００ｍＬ）中のアセトブロモ－α－Ｄ－グルコピラヌロン酸メチルエステル１（６．３ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）および３－ヒドロキシ－４－ニトロベンズアルデヒド（０．９ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の溶液にＡｇ_２Ｏ（１０．０ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を暗所中室温で６０ｈ撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９：１～１：９ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物２（２．１ｇ、８１％）をオフホワイト固体として得た。

【0481】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２１ＮＮａＯ_１３）ｍ／ｚ＝５０６．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２１ＮＮａＯ_１３）ｍ／ｚ＝５０５．７。

【0482】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－アミノ－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３）の調製
ＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）中の化合物２（４６０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ／Ｃ（１０重量％、２０ｍｇ）およびトリエチルアミン（２０μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。３回の繰返しサイクルにおいて、フラスコを次に排気し、バルーンからの水素ガスで満たした。取り付けたＨ_２バルーンを用いて反応物を室温で２４ｈ激しく撹拌した。セライトパッドを通じた濾過により触媒を除去した後、濾液を真空下で濃縮した。残留物を高真空で１ｈ乾燥させて白色固体（４２５ｍｇ、９９％）を得た。それをさらなる精製なしで次のステップのために直接的に使用した。

【0483】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２６ＮＯ_１１）ｍ／ｚ＝４５６．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２６ＮＯ_１１）ｍ／ｚ＝４５５．６
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４）の調製
ＤＣＭ（０．９ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．１ｍＬ）中のＦｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ（４００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）および粗中間体３（４２５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）の混合物にＮ－エトキシカルボニル－２－エトキシ－１，２－ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ、３９０ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１ｈ撹拌した。真空下で溶媒を除去した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９：１～１：９ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物４（０．６４ｇ、２ステップで９０％）を白色固体として得た。

【0484】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３８Ｈ_４１Ｎ_２Ｏ_１４）ｍ／ｚ＝７４９．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３８Ｈ_４１Ｎ_２Ｏ_１４）ｍ／ｚ＝７４８．７。

【0485】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（５）の調製
ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の化合物４（６４０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ／Ｃ（１０重量％、４０ｍｇ）を加えた。３回の繰返しサイクルにおいて、フラスコを次に排気し、バルーンからのＨ_２ガスで満たした。取り付けたＨ_２バルーンを用いて反応物を室温で３ｄ激しく撹拌した。セライトパッドを通じた濾過により触媒を除去した後、濾液を真空下で濃縮した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～７０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物５（３４１ｍｇ、７６％）を白色固体として得た。

【0486】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２３Ｈ_３１Ｎ_２Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝５２７．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２３Ｈ_３１Ｎ_２Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝５２６．８。

【0487】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６）の調製
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のアミン５（２５５ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ－バリン－ＯＨ（１７０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８６ｍｍｏｌ）およびＰｙＡＯＰ（２６０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。混合物をＤＣＭ（７０ｍＬ）を用いて希釈し、飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、および飽和水性ＮａＣｌ（１０ｍＬ）を用いて洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）により残留物を精製して化合物６（３３４ｍｇ、８１％）を白色固体として得た。

【0488】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４３Ｈ_５０Ｎ_３Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝８４８．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４３Ｈ_５０Ｎ_３Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝８４８．３。

【0489】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（７）の調製
ＴＨＦ（３ｍＬ）中のベンジルアルコール６（３３４ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）およびビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（２４０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２４ｈ撹拌した。溶媒を真空下で除去した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）により残留物を精製して化合物７（３２８ｍｇ、８２％）を白色固体として得た。

【0490】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５０Ｈ_５３Ｎ_４Ｏ_１９）ｍ／ｚ＝１０１３．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５０Ｈ_５３Ｎ_４Ｏ_１９）ｍ／ｚ＝１０１３．３。

【0491】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（９）の調製
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中のＰＮＰカーボネート７（１１２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびＭＭＡＥ ８（１３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（５０ｕＬ、０．２９ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（１５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２０ｈ撹拌した。混合物にＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を加えた。有機層を飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ、水、および飽和水性ＮａＣｌを用いて洗浄した。この溶液を次にＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～１０：０ｖ／ｖ）により残留物を精製して化合物９（８１ｍｇ、４６％）を白色固体として得た。

【0492】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８３Ｈ_１１５Ｎ_８Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１５９１．８；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８３Ｈ_１１５Ｎ_８Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１５９１．７。

【0493】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１０）の調製
ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＭＭＡＥ構築物９（８１ｍｇ、５１μｍｏｌ）の溶液にピペリジン（０．１ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を緩徐に加えた。反応物を室温で３０分間撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．１％のギ酸、５～１００％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物１０（６２ｍｇ、８９％）を白色固体として得た。

【0494】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６８Ｈ_１０５Ｎ_８Ｏ_２１）ｍ／ｚ＝１３６９．７；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６８Ｈ_１０５Ｎ_８Ｏ_２１）ｍ／ｚ＝１３６９．６。

【0495】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（１５Ｓ，１８Ｓ）－４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－１５－イソプロピル－１８－メチル－３，１３，１６－トリオキソ－２，７，１０－トリオキサ－４，１４，１７－トリアザノナデカンアミド）－５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１２）の調製
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＭＭＡＥ－アミン１０（３２ｍｇ、２４μｍｏｌ）およびＦｍｏｃ－ＡｚａＨＩＰＳ－ＰＮＨ酸１１（２７ｍｇ、２９μｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（１０μＬ、５７μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１１ｍｇ、２９μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。混合物をＤＣＭ（７０ｍＬ）を用いて希釈し、飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）、および飽和水性ＮａＣｌ（１０ｍＬ）を用いて洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）により残留物を精製して化合物１２（３３ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。

【0496】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２３Ｈ_１６４Ｎ_１４Ｏ_２９）ｍ／ｚ＝１１５０．６；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２３Ｈ_１６４Ｎ_１４Ｏ_２９）ｍ／ｚ＝１１５１．０。

【0497】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（５－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）－２－（（２Ｓ，５Ｓ）－１５－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）－５－イソプロピル－２－メチル－４，７－ジオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６－ジアザペンタデカンアミド）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（１３）の調製
０℃のＴＨＦ（１ｍＬ）中のＭＭＡＥ化合物１２（３３ｍｇ、１４μｍｏｌ）の溶液に水（０．２５ｍＬ）中のＬｉＯＨ（３ｍｇ）の溶液を加えた。混合物を室温で１ｈ撹拌した。酢酸（３μＬ、５３μｍｏｌ）の添加により反応物をクエンチした。有機溶媒を除去した後、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～８０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物１３（１３ｍｇ、５２％）を白色固体として得た。

【0498】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８６Ｈ_１３５Ｎ_１４Ｏ_２２）ｍ／ｚ＝１７１６．０；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８６Ｈ_１３５Ｎ_１４Ｏ_２２）ｍ／ｚ＝１７１５．９。

【0499】

ＰＮＰ中間体１６の合成
ＰＮＰ中間体を以下に示されるスキーム２にしたがって合成した。

【0500】

スキーム２

【化83】

【化84】

【0501】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（４－ホルミルフェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１４）の調製
アセトニトリル（２０ｍＬ）中のアセトブロモ－α－Ｄ－グルコピラヌロン酸メチルエステル１（１．０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）および４－ヒドロキシベンズアルデヒド（０．１５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）の混合物にＡｇ_２Ｏ（１．４ｇ、６．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を暗所中室温で２０ｈ撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物１４（０．５２ｇ、９７％）を白色固体として得た。

【0502】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２２ＮａＯ_１１）ｍ／ｚ＝４６１．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２２ＮａＯ_１１）ｍ／ｚ＝４６０．８。

【0503】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（４－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１５）の調製
０℃のクロロホルム（１．４５ｍＬ）およびｉＰｒ－ＯＨ（０．３６ｍＬ）中のアルデヒド１４（０．１７５ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液にシリカゲル（０．０４１ｇ）およびＮａＢＨ_４（０．０３２ｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温に温め、２ｈ撹拌した。酢酸（０．０５ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ）を加えて反応物をクエンチした。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、０．１：９～１：９ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物１５（０．１１３ｇ、７０％）を白色固体として得た。

【0504】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２４ＮａＯ_１１）ｍ／ｚ＝４６３．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２０Ｈ_２４ＮａＯ_１１）ｍ／ｚ＝４６２．８。

【0505】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－２－（メトキシカルボニル）－６－（４－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（１６）の調製
アルゴン下の無水ＴＨＦ（２．６ｍＬ）中のアルコール１５（０．０５ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液にビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（０．０７６ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（０．０６ｍＬ、０．３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１８ｈ撹拌した。反応混合物はＬＣＭＳにより完了を示さなかった。追加のビス（４－ニトロフェニル）カーボネート（０．０２ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．００５ｍＬ、０．０３ｍｍｏｌ）を加え、反応物をさらに２時間撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～１：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物１６（０．０６４ｇ、９３％）を白色固体として得た。

【0506】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２７Ｈ_２７ＮＮａＯ_１５）ｍ／ｚ＝６２８．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_２７Ｈ_２７ＮＮａＯ_１５）ｍ／ｚ＝６２７．７。

【0507】

ＭＭＡＥ構築物２３の合成
ＭＭＡＥ構築物を以下に示されるスキーム３にしたがって合成した。

【0508】

スキーム３

【化85】

【0509】

【0510】

【0511】

４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－フェニルプロパンアミド）－６－（トリチルアミノ）ヘキサンアミド）ベンジル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシ－５－メチル－１－オキソヘプタン－４－イル）（メチル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）（メチル）カルバメート（１８）の調製
アルゴン下のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中のＰＮＰ １７（０．０４８ｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）およびＭＭＡＥ ８（０．０５ｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）の混合物にＤＩＰＥＡ（０．０３２ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌した。反応混合物を次に逆相カラムクロマトグラフィー（ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ、１：９～１０：０ｖ／ｖ）を使用する精製のために直接的に用いて化合物１８（０．０６１ｇ、８２％）を白色固体として得た。

【0512】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_９６Ｈ_１２０Ｎ_９Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝１６０６．９；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_９６Ｈ_１２０Ｎ_９Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝１６０６．７。

【0513】

４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－フェニルプロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド）ベンジル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシ－５－メチル－１－オキソヘプタン－４－イル）（メチル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）（メチル）カルバメート（１９）の調製
ＤＣＭ（３．０ｍＬ）中のＭＭＡＥ誘導体１８（０．０６１ｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）の溶液にトリフルオロ酢酸（０．３０ｍＬ、３．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で６ｈ撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、逆相カラムクロマトグラフィー（溶出液中に０．１％のギ酸を含むＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ、１：９～１０：０ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物１９（０．０２８ｇ、５４％）を白色固体として得た。

【0514】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７７Ｈ_１０６Ｎ_９Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝１３６４．８；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７７Ｈ_１０６Ｎ_９Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝１３６３．８。

【0515】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（４－（（５Ｓ，８Ｓ）－５－ベンジル－８－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）カルバモイル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３，６，１４－トリオキソ－２，１５－ジオキサ－４，７，１３－トリアザヘキサデカン－１６－イル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２０）の調製
アルゴン下のＤＭＦ（１ｍＬ）中のアミン１９（０．０２８ｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）およびＰＮＰ糖１６（０．０１８ｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）の溶液にＨＯＡｔ（８．３ｍｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．０１４ｍＬ、０．０８０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌し、さらなる精製なしで次のステップのために直接的に使用した。

【0516】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（４－（（（（（Ｓ）－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－６－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）アミノ）－６－オキソヘキシル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２１）の調製
ＤＭＦ中の２０の溶液にピペリジン（０．０１４ｍＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１．５ｈ撹拌した。反応混合物を次に逆相カラムクロマトグラフィー（溶出液中に０．１％のトリフルオロ酢酸を含むＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ、１：９～１０：０ｖ／ｖ）を使用する精製のために直接的に用いて化合物２１（０．０２１ｇ、６５％）を白色固体として得た。

【0517】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８３Ｈ_１１８Ｎ_９Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１６０８．８；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_８３Ｈ_１１８Ｎ_９Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１６０７．６。

【0518】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（４－（（１５Ｓ，１８Ｓ）－４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１５－ベンジル－１８－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）カルバモイル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３，１３，１６，２４－テトラオキソ－２，７，１０，２５－テトラオキサ－４，１４，１７，２３－テトラアザヘキサコサン－２６－イル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（２２）の調製
アルゴン下のＤＭＦ（１ｍＬ）中のアミン２１（０．０２０ｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）および酸１１（０．０１４ｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（０．００７ｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．００９ｍＬ、０．０５２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１６ｈ撹拌した。反応混合物を次に分取ＨＰＬＣ（溶出液中に０．０５％のトリフルオロ酢酸を含むＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ、１：９～９．５：０．５ｖ／ｖ）を使用する精製のために直接的に用いて化合物２２（０．０１１ｇ、３５％）を白色固体として得た。

【0519】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１３８Ｈ_１７７Ｎ_１５Ｏ_３１）ｍ／ｚ＝１２７０．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１３８Ｈ_１７７Ｎ_１５Ｏ_３１）ｍ／ｚ＝１２６９．７。

【0520】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（４－（（９Ｓ，１２Ｓ）－１２－ベンジル－９－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）カルバモイル）－２２－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）－３，１１，１４－トリオキソ－２，１７，２０－トリオキサ－４，１０，１３－トリアザドコシル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（２３）の調製
氷上のＴＨＦ（０．５ｍＬ）中の化合物２２（０．０１１ｇ、０．００４ｍｍｏｌ）の溶液に１Ｍ ＬｉＯＨ（０．０３５ｍＬ、０．０３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を氷上で２ｈ撹拌した。追加の１Ｍ ＬｉＯＨ（０．０３５ｍＬ、０．０３５ｍｍｏｌ）を加え、氷上での撹拌を２ｈ続けた。反応混合物を次に真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（溶出液中に０．０５％のトリフルオロ酢酸を含むＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ、０：１０～７．５：２．５ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物２３（０．００５ｇ、５８％）を白色固体として得た。

【0521】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１０１Ｈ_１４９Ｎ_１５Ｏ_２４）ｍ／ｚ＝９７８．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１０１Ｈ_１４９Ｎ_１５Ｏ_２４）ｍ／ｚ＝９７７．８。

【0522】

中間体２８の合成
中間体を以下に示されるスキーム４にしたがって合成した。

【0523】

スキーム４

【化86】

【化87】

【化88】

【0524】

ｔｅｒｔ－ブチル４－オキソピペリジン－１－カルボキシレート（２５）の調製
ＣＨ_３ＣＮ（１２ｍＬ）中のピペリドン２４（４００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＩＰＥＡ（５４０μＬ、３．１ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＢｏｃ_２Ｏ（８５０ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液にＤＭＡＰ（３２ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、０．１０当量）を加えた。２ｈの撹拌後、溶液を濃縮し、ＤＣＭ中に再構成させた。溶液を０．１Ｍ ＨＣｌを用いて洗浄し、有機物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。生成物２５を淡黄色固体として得、さらなる精製なしで使用した（５１５ｍｇ、９９％）。

【0525】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１０Ｈ_１７ＮＮａＯ_３）ｍ／ｚ＝２２２．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋Ｃ_１０Ｈ_１７ＮＮａＯ_３）ｍ／ｚ＝２２３．０。

【0526】

ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２６）の調製
ＤＣＥ（１２ｍＬ）中の化合物２５（５１５ｍｇ、２．７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびアミノ－ＰＥＧ２－ｔ－ブチルエステル（７４０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液にＳＴＡＢ（１．１ｇ、５．４ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。混合物を終夜撹拌した。溶液を濃縮した後、残留物をさらなる精製なしで使用した。

【0527】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２１Ｈ_４１Ｎ_２Ｏ_６）ｍ／ｚ＝４１７．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２１Ｈ_４１Ｎ_２Ｏ_６）ｍ／ｚ＝４１７．０。

【0528】

ｔｅｒｔ－ブチル４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）（２－（２－（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボキシレート（２７）の調製
０℃のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の化合物２６（１．１ｇ、２．７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＤＩＰＥＡ（９２０μＬ、５．４ｍｍｏｌ、２．０当量）の粗混合物にＦｍｏｃＣｌ（１．４ｇ、２．０当量）を加えた。混合物を室温に温め、２ｈ撹拌した。その後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３を用いて洗浄した。有機物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～１：１ｖ／ｖ）により粗生成物を精製して透明油（１．６ｇ、３ステップで９８％）として化合物２７を得た。

【0529】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_３６Ｈ_５０Ｎ_２ＮａＯ_８）ｍ／ｚ＝６６１．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（（Ｃ_３６Ｈ_５０Ｎ_２ＮａＯ_８）ｍ／ｚ＝６６０．９。

【0530】

ｔｅｒｔ－ブチル１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－４－（ピペリジン－４－イル）－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカン－１３－オエート（２８）の調製
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の化合物２７（１．６ｇ、２．７ｍｍｏｌ）およびＴＩＰＳ（６００ｕＬ）の溶液にＴＦＡ（６ｍＬ）を加えた。１ｈの撹拌後、溶液を濃縮し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、１０～７０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。生成物２８を白色固体（８００ｍｇ、６８％）として得た。

【0531】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２７Ｈ_３５Ｎ_２Ｏ_６）ｍ／ｚ＝４８３．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２７Ｈ_３５Ｎ_２Ｏ_６）ｍ／ｚ＝４８２．９。

【0532】

中間体３０の合成
中間体を以下に示されるスキーム５にしたがって合成した。

【0533】

スキーム５

【化89】

【化90】

【0534】

３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２１－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパン酸（２９）の調製
ＤＣＭ（８ｍＬ）中のメイタンシン（１８０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０当量）およびコハク酸無水物（３３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液にＤＩＰＥＡ（９６μＬ、０．５５ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１００：０～１０：１ｖ／ｖ）により精製した。生成物２９を白色固体（１９１ｍｇ、９２％）として得た。

【0535】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３６Ｈ_４９ＣｌＮ_３Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝７５０．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３６Ｈ_４９ＣｌＮ_３Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝７４９．８。

【0536】

２，３，４，５，６－ペンタフルオロフェニル３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパノエート（３０）の調製
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の化合物２９（１６０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、１．５当量）およびペルフルオロフェノール（６０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、１．３当量）の溶液にＤＩＣ（３５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、１．３当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を濾過し、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１００：０～２４：１ｖ／ｖ）により精製した。生成物３０を白色固体（１９０ｍｇ、９７％）として得た。

【0537】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４２Ｈ_４８ＣｌＦ_５Ｎ_３Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝９１６．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４２Ｈ_４８ＣｌＦ_５Ｎ_３Ｏ_１２）ｍ／ｚ＝９１５．７。

【0538】

メイタンシン構築物３９の合成
メイタンシン構築物を以下に示されるスキーム６にしたがって合成した。

【0539】

スキーム６

【化91】

【0540】

【0541】

【0542】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３１）の調製
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中のアミン５（３４１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ－バリン－ＯＨ（１６９ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）の溶液にＤＩＰＥＡ（０．３５ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物３１（３８６ｍｇ、８２％）を白色固体として得た。

【0543】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３３Ｈ_４８Ｎ_３Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝７２６．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３３Ｈ_４８Ｎ_３Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝７２６．１。

【0544】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（４－ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（３２）の調製
ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の化合物３１（８１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）およびビス－ｐ－ニトロフェノールカーボネート（１４０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、６．０当量）の溶液にＤＩＰＥＡ（１２０μＬ、０．６７ｍｍｏｌ、６．０当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１００：０～９３：７ｖ／ｖ）により精製した。生成物３２を白色固体（１０１ｍｇ、定量的）として得た。

【0545】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_４０Ｈ_５０Ｎ_４ＮａＯ_１９）ｍ／ｚ＝９１３．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_４０Ｈ_５０Ｎ_４ＮａＯ_１９）ｍ／ｚ＝９１２．７。

【0546】

４－（１－（（（４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－３－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカン－１３－酸（３３）の調製
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の化合物３２（１４０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）および２８（１１０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液にＤＩＰＥＡ（１００μＬ、０．５９ｍｍｏｌ、３．８当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を濃縮し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５０～８０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。生成物３３を白色固体（１１０ｍｇ、５３％）として得た。

【0547】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_６１Ｈ_７９Ｎ_５ＮａＯ_２２）ｍ／ｚ＝１２５６．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_６１Ｈ_７９Ｎ_５ＮａＯ_２２）ｍ／ｚ＝１２５６．７。

【0548】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（４－（（２－（２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（３４）の調製
０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）中の化合物３３（１１０ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）の溶液に１Ｍ ＬｉＯＨ（１．４ｍＬ）を加えた。混合物を室温に温め、２ｈ撹拌した。その後、混合物を濃縮してＴＨＦを除去し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、０～４５％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製して化合物３４を白色固体（６８ｍｇ、８７％）として得た。

【0549】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３９Ｈ_６２Ｎ_５Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝８７２．４；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３９Ｈ_６２Ｎ_５Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝８７１．８。

【0550】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－｛２－［（２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－｛［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ｝－３－メチルブタンアミド］プロパンアミド］－５－｛［４－（Ｎ－｛２－［２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ］エチル｝－３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２１－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパンアミド）ピペリジン－１－カルボニルオキシ］メチル｝フェノキシ｝－３，４，５－トリヒドロキシオキサン－２－カルボン酸（３５）の調製
ＤＭＦ（０．６ｍＬ）中の化合物３４（１８ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、１．０当量）および３０（２９ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液にＤＩＰＥＡ（３０μＬ、０．１８ｍｍｏｌ、８．６当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を濃縮し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、１０～９５％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。白色固体生成物３５を化合物２９との混合物として得た（３：２の化合物２９対化合物３５、２０ｍｇ、３６％の収率）。

【0551】

計算値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_７５Ｈ_１０７ＣｌＮ_５ＮａＯ_２８）ｍ／ｚ＝１６２５．７；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｎａ］^＋（Ｃ_７５Ｈ_１０７ＣｌＮ_５ＮａＯ_２８）ｍ／ｚ＝１６２４．６。

【0552】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－｛２－［（２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド］プロパンアミド］－５－｛［４－（Ｎ－｛２－［２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ］エチル｝－３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２１－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパンアミド）ピペリジン－１－カルボニルオキシ］メチル｝フェノキシ｝－３，４，５－トリヒドロキシオキサン－２－カルボン酸（３６）の調製
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の化合物３５（１２ｍｇ、７．５μｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＤＣＭ中の１Ｍ ＳｎＣｌ_４（１００μＬ、１３当量）を加えた。２０分間の撹拌後、溶液をＣＨ_３ＣＮおよびＨ_２Ｏを用いてクエンチし、濃縮してＤＣＭを除去し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、２～６０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。生成物３６を白色固体（５ｍｇ、４４％の収率）として得た。

【0553】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_７０Ｈ_１０１ＣｌＮ_８Ｏ_２６）ｍ／ｚ＝７５２．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋Ｃ_７０Ｈ_１０１ＣｌＮ_８Ｏ_２６）ｍ／ｚ＝７５２．０。

【0554】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（５－｛［４－（Ｎ－｛２－［２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ］エチル｝－３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２１－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパンアミド）ピペリジン－１－カルボニルオキシ］メチル｝－２－［（２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－（３－｛２－［２－（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝（｛１－［３－（２－｛［（｛［（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ］カルボニル｝（メチル）アミノ）（メチル）アミノ］メチル｝－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル］ピペリジン－４－イル｝）アミノ）エトキシ］エトキシ｝プロパンアミド）－３－メチルブタンアミド］プロパンアミド］フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシオキサン－２－カルボン酸（３８）の調製
ＤＭＦ（０．１５ｍＬ）中の化合物３６（５ｍｇ、３．３μｍｏｌ、１．０当量）および３７（１０ｍｇ、９．０μｍｏｌ、２．７当量）の溶液にＤＩＰＥＡ（１．５μＬ、８．７μｍｏｌ、２．６当量）を加えた。終夜の撹拌後、溶液を溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、１０～９０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。白色固体生成物３８は、加水分解された化合物３７と共に半純粋であった（６ｍｇ、８１％の収率）。

【0555】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２５Ｈ_１５９ＣｌＮ_１４Ｏ_３４）ｍ／ｚ＝１２１７．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２５Ｈ_１５９ＣｌＮ_１４Ｏ_３４）ｍ／ｚ＝１２１７．３。

【0556】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（５－｛［４－（Ｎ－｛２－［２－（２－カルボキシエトキシ）エトキシ］エチル｝－３－｛［（２Ｓ）－１－｛［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，６Ｓ，１６Ｅ，１８Ｅ，２０Ｒ，２１Ｓ）－１１－クロロ－２１－ヒドロキシ－１２，２０－ジメトキシ－２，５，９，１６－テトラメチル－８，２３－ジオキソ－４，２４－ジオキサ－９，２２－ジアザテトラシクロ［１９．３．１．１１０，１４．０３，５］ヘキサコサ－１０，１２，１４（２６），１６，１８－ペンタエン－６－イル］オキシ｝－１－オキソプロパン－２－イル］（メチル）カルバモイル｝プロパンアミド）ピペリジン－１－カルボニルオキシ］メチル｝－２－［（２Ｓ）－２－［（２Ｓ）－２－｛３－［２－（２－｛［１－（３－｛２－［（１，２－ジメチルヒドラジン－１－イル）メチル］－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル｝プロパノイル）ピペリジン－４－イル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］プロパンアミド｝－３－メチルブタンアミド］プロパンアミド］フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシオキサン－２－カルボン酸（３９）の調製
ＤＭＡ（６００μＬ）中の化合物３８（６ｍｇ、２．７μｍｏｌ）の溶液にＤＢＵ（６μＬ、４０μｍｏｌ）を加えた。１５分の撹拌後、溶液を溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、１０～９０％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製した。生成物３９を白色固体（３ｍｇ、６１％の収率）として得た。

【0557】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_９５Ｈ_１５９ＣｌＮ_１４Ｏ_３０）ｍ／ｚ＝９９５．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_９５Ｈ_１５９ＣｌＮ_１４Ｏ_３０）ｍ／ｚ＝９９５．０。

【0558】

ＭＭＡＥ構築物４８の合成
ＭＭＡＥ構築物を以下に示されるスキーム７にしたがって合成した。

【0559】

スキーム７

【化92】

【0560】

【0561】

ｔｅｒｔ－ブチル２－ヒドロキシ－４－ニトロベンゾエート（４１）の調製
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の安息香酸４０（２．０７ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）の溶液にｔｅｒｔ－ブタノール（１０ｍＬ、１０５．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．２ｇ、９．８ｍｍｏｌ）、およびＤＣＣ（２．５ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で２０ｈ撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を用いて希釈し、飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、飽和水性ＮａＨＣＯ_３（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、および飽和水性ＮａＣｌ（２０ｍＬ）を用いて洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濾過し、蒸発させた。カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）により残留物を精製して化合物４１（２．３５ｇ、８７％）を黄色油として得た。

【0562】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１１Ｈ_１４ＮＯ_５）ｍ／ｚ＝２４０．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１１Ｈ_１４ＮＯ_５）ｍ／ｚ＝２４０．５。

【0563】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－ニトロフェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４２）の調製
アセトニトリル（１０ｍＬ）中のアセトブロモ－α－Ｄ－グルコピラヌロン酸メチルエステル１（１．３２ｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびフェニルアルコール４１（４３４ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）の混合物にＡｇ_２Ｏ（１．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を暗所中室温で２ｄ撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物４２（４９５ｍｇ、４９％）をオフホワイト固体として得た。

【0564】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２４Ｈ_３０ＮＯ_１４）ｍ／ｚ＝５５６．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２４Ｈ_３０ＮＯ_１４）ｍ／ｚ＝５５６．２。

【0565】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（５－アミノ－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４３）の調製
ＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のニトロ化合物４２（４９５ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ／Ｃ（１０重量％、２００ｍｇ）を加えた。２回の繰返しサイクルにおいて、フラスコを次に排気し、バルーンからのＨ_２ガスで満たした。取り付けたＨ_２バルーンを用いて反応物を室温で３ｄ激しく撹拌した。セライトパッドを通じた濾過により触媒を除去した後、濾液を真空下で濃縮して化合物４３（４２０ｍｇ、９６％）を油として得た。粗生成物をさらなる精製なしで次のステップのために直接的に使用した。

【0566】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２４Ｈ_３２ＮＯ_１２）ｍ／ｚ＝５２６．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２４Ｈ_３２ＮＯ_１２）ｍ／ｚ＝５２６．７。

【0567】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（５－（４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカンアミド）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４４）の調製
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のフェニルアミン４３（３５ｍｇ、６６．７μｍｏｌ）の溶液に化合物１１（５７ｍｇ、６０．２μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３２μＬ、０．１８ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（２３ｍｇ、６０．５μｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～８５％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物４４（４９ｍｇ、５６％）を白色固体として得た。

【0568】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７９Ｈ_９０Ｎ_７Ｏ_２０）ｍ／ｚ＝１４５６．６；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７９Ｈ_９０Ｎ_７Ｏ_２０）ｍ／ｚ＝１４５７．３。

【0569】

４－（４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカンアミド）－２－（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－３，４，５－トリアセトキシ－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）オキシ）安息香酸（４５）の調製
０℃のＤＣＭ（０．５ｍＬ）中の化合物４４（４９ｍｇ、３３．７μｍｏｌ）の溶液にＤＣＭ（１Ｍ、０．３４ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）中のＳｎＣｌ_４を加えた。３０分間の撹拌後、Ｈ_２Ｏ（０．１ｍＬ）およびＣＨ_３ＣＮ（０．２ｍＬ）の添加により反応物をクエンチした。混合物を次に真空下で濃縮し、溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～７５％）を用いて逆相クロマトグラフィーにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物４５（４０ｍｇ、８５％）を油として得た。

【0570】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７５Ｈ_８２Ｎ_７Ｏ_２０）ｍ／ｚ＝１４００．６；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７５Ｈ_８２Ｎ_７Ｏ_２０）ｍ／ｚ＝１４００．４。

【0571】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（５－（４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカンアミド）－２－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバモイル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（４７）の調製
ＤＭＦ（７５μＬ）中のカルボン酸４５（１５ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）の溶液にＤＭＡ（５０μＬ）中のＭＭＡＥ化合物４６（１２ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６μＬ、３４．４μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５ｍｇ、１３．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物４７（５．２ｍｇ、１９％）を白色固体として得た。

【0572】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１３３Ｈ_１７５Ｎ_１７Ｏ_３１）ｍ／ｚ＝１２５３．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１３３Ｈ_１７５Ｎ_１７Ｏ_３１）ｍ／ｚ＝１２５３．６。

【0573】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバモイル）－５－（３－（２－（２－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）プロパンアミド）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（４８）の調製
０℃のＴＨＦ（０．２ｍＬ）中の化合物４７（５．２ｍｇ、２．１μｍｏｌ）の溶液にＬｉＯＨ溶液（０．１ｍＬのＨ_２Ｏ中１．０ｍｇ）を緩徐に加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で２ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～７５％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥してＭＭＡＥ構築物４８（２．５ｍｇ、６３％）を白色固体として得た。

【0574】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_９６Ｈ_１４７Ｎ_１７Ｏ_２４）ｍ／ｚ＝９６１．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_９６Ｈ_１４７Ｎ_１７Ｏ_２４）ｍ／ｚ＝９６１．１。

【0575】

ＭＭＡＥ構築物５３の合成
ＭＭＡＥ構築物を以下に示されるスキーム８にしたがって合成した。

【0576】

スキーム８

【化93】

【0577】

【0578】

ｔｅｒｔ－ブチル４－アミノ－２－ヒドロキシベンゾエート（４９）の調製
ＥｔＯＡｃ（４ｍＬ）およびＥｔＯＨ（４ｍＬ）中のニトロ化合物４１（４８５ｍｇ、２．０３ｍｏｌ）の溶液にＰｄ／Ｃ（１０重量％、２００ｍｇ）を加えた。２回の繰返しサイクルにおいて、フラスコを次に排気し、バルーンからのＨ_２ガスで満たした。取り付けたＨ_２バルーンを用いて反応物を室温で２ｄ激しく撹拌した。セライトパッドを通じた濾過により触媒を除去した後、濾液を真空下で濃縮して化合物４９（４１８ｍｇ、９８％）を油として得た。粗生成物をさらなる精製なしで次のステップのために直接的に使用した。

【0579】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１１Ｈ_１６ＮＯ_３）ｍ／ｚ＝２１０．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１１Ｈ_１６ＮＯ_３）ｍ／ｚ＝２１０．１。

【0580】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル２－（（１－（３－（４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）（２－（２－（３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３－ヒドロキシフェニル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）メチル）－１，２－ジメチルヒドラジンカルボキシレート（５０）の調製
ＴＨＦ（０．５ｍＬ）中のフェニルアミン４９（１５．７ｍｇ、７５．１μｍｏｌ）および１１（４７ｍｇ、４９．６μｍｏｌ）の溶液にＮ－エトキシカルボニル－２－エトキシ－１，２－ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ、２５ｍｇ、１０１．２μｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～８５％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物５０（１７．４ｍｇ、３１％）を白色固体として得た。

【0581】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６６Ｈ_７４Ｎ_７Ｏ_１１）ｍ／ｚ＝１１４０．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６６Ｈ_７４Ｎ_７Ｏ_１１）ｍ／ｚ＝１１４０．４。

【0582】

４－（４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカンアミド）－２－ヒドロキシ安息香酸（５１）の調製
０℃のジオキサン（０．１ｍＬ）中の化合物５０（１７．４ｍｇ、１５．３μｍｏｌ）の溶液にジオキサン中のＨＣｌ（４Ｍ、０．１ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～８５％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物５１（８．５ｍｇ、５１％）を黄色油として得た。

【0583】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６２Ｈ_６６Ｎ_７Ｏ_１１）ｍ／ｚ＝１０８４．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６２Ｈ_６６Ｎ_７Ｏ_１１）ｍ／ｚ＝１０８４．４。

【0584】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル２－（（１－（３－（４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）（２－（２－（３－（（４－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバモイル）－３－ヒドロキシフェニル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）メチル）－１，２－ジメチルヒドラジンカルボキシレート（５２）の調製
ＤＭＦ（５０μＬ）中のカルボン酸５１（１１．６ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）の溶液にＭＭＡＥ化合物４６（１２ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６μＬ、３４．４μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５ｍｇ、１３．２μｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物５２（２．８ｍｇ、１２％）を白色固体として得た。

【0585】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２０Ｈ_１５９Ｎ_１７Ｏ_２２）ｍ／ｚ＝１０９５．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２０Ｈ_１５９Ｎ_１７Ｏ_２２）ｍ／ｚ＝１０９５．６。

【0586】

４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（４－（３－（２－（２－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）プロパンアミド）－２－ヒドロキシベンズアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシ－５－メチル－１－オキソヘプタン－４－イル）（メチル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）（メチル）カルバメート（５３）の調製
０℃のＤＭＡ（０．２ｍＬ）中の化合物５２（２．８ｍｇ、１．３μｍｏｌ）の溶液にピペリジン（１．０μＬ、１０．１μｍｏｌ）を緩徐に加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で３０分間撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～７０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物５３（１．０ｍｇ、４５％）を白色固体として得た。

【0587】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_９０Ｈ_１３８Ｎ_１７Ｏ_１８）ｍ／ｚ＝１７４５．０；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_９０Ｈ_１３８Ｎ_１７Ｏ_１８）ｍ／ｚ＝１７４５．６。

【0588】

デュオカルマイシン構築物６６の合成
デュオカルマイシン構築物を以下に示されるスキーム９にしたがって合成した。

【0589】

スキーム９

【化94】

【0590】

【0591】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）－５－（ヒドロキシメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（５５）の調製
ＤＣＭ（２．０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．２ｍＬ）中のＢｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ ５４（４４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）およびフェニルアミン３（５３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物にＮ－エトキシカルボニル－２－エトキシ－１，２－ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ、１．２５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１ｈ撹拌した。溶媒を真空下で除去した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物５５（４１ｍｇ、５５％）を白色固体として得た。

【0592】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２８Ｈ_３９Ｎ_２Ｏ_１４）ｍ／ｚ＝６２７．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２８Ｈ_３９Ｎ_２Ｏ_１４）ｍ／ｚ＝６２７．１。

【0593】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）－５－（クロロメチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（５６）の調製
０℃のＴＨＦ（１．５ｍＬ）中のベンジルアルコール５５（１０８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液にＳＯＣｌ_２（２５μＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で５ｈ撹拌した。溶媒を真空下で除去した後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物５６（１０７．７ｍｇ、９７％）を油として得た。

【0594】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２８Ｈ_３８ＣｌＮ_２Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝６４５．２；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２８Ｈ_３８ＣｌＮ_２Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝６４５．２。

【0595】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（５－（（（（Ｓ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－１－（ヒドロキシメチル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）－２－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（５８）の調製
ＤＭＦ（３ｍＬ）中のフェニル５７（２４２ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の溶液にＣｓ_２ＣＯ_３（２３５ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２０分間撹拌した後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の塩化物５６（５２１ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で２０ｈ撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～１００％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物５８（３２６ｍｇ、４６％）を淡黄色油として得た。

【0596】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４６Ｈ_５８Ｎ_３Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝９２４．４；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_４６Ｈ_５８Ｎ_３Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝９２４．３。

【0597】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－アミノプロパンアミド）－５－（（（（Ｓ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－１－（ヒドロキシメチル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（５９）の調製
０℃のＴＨＦ（１ｍＬ）中の化合物５８（１６３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液にジオキサン中のＨＣｌ（４Ｍ、１ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１ｈ撹拌した。溶媒を真空下で濃縮した後、残留ジオキサンを共沸蒸留により除去した。残留物をさらなる精製なしで次のステップのために直接的に使用した。

【0598】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３６Ｈ_４２Ｎ_３Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝７２４．３；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_３６Ｈ_４２Ｎ_３Ｏ_１３）ｍ／ｚ＝７２４．３。

【0599】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（Ｓ）－１－（ヒドロキシメチル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６１）の調製
ＤＭＦ（０．１ｍＬ）中の化合物５９（５．８ｍｇ、８．０μｍｏｌ）の溶液にＦｍｏｃ－バリンペンタフルオロフェニルエステル（４．１ｍｇ、８．１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．５μＬ、２５．８μｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２４ｈ撹拌した後、溶出液としてアセトニトリル－水（０．１％のギ酸、５～１００％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物６１（５．３ｍｇ、６３％）を淡黄色油として得た。

【0600】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５６Ｈ_６１Ｎ_４Ｏ_１６）ｍ／ｚ＝１０４５．４；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５６Ｈ_６１Ｎ_４Ｏ_１６）ｍ／ｚ＝１０４５．３。

【0601】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（Ｓ）－１－（クロロメチル）－３－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６３）の調製
ＤＭＡ（０．１ｍＬ）中の化合物６１（５．３ｍｇ、５．１μｍｏｌ）および６２（２．６ｍｇ、１０．５μｍｏｌ）の溶液にＥＤＣ（５ｍｇ、３２．３μｍｏｌ）を加えた。１ｄの撹拌後、移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～８０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより残留物を精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物６３（２．９ｍｇ、４２％）を油として得た。

【0602】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６９Ｈ_７４ＣｌＮ_６Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝１２９３．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６９Ｈ_７４ＣｌＮ_６Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝１２９３．４。

【0603】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－メチルブタンアミド）プロパンアミド）－５－（（（（Ｓ）－１－（クロロメチル）－３－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６４）の調製
ＴＨＦ（０．４ｍＬ）中の化合物６３（１２ｍｇ、９．２μｍｏｌ）の溶液にＥｔ_２ＮＨ（１４．４μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２ｈ撹拌した。反応混合物を次に真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１：９～９：１ｖ／ｖ）を使用して残留物を精製して化合物６４（７．５ｍｇ、７６％）を淡黄色油として得た。

【0604】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５４Ｈ_６４ＣｌＮ_６Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝１０７１．４；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_５４Ｈ_６４ＣｌＮ_６Ｏ_１５）ｍ／ｚ＝１０７１．３。

【0605】

（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）－２－（２－（（１５Ｓ，１８Ｓ）－４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－１５－イソプロピル－１８－メチル－３，１３，１６－トリオキソ－２，７，１０－トリオキサ－４，１４，１７－トリアザノナデカンアミド）－５－（（（（Ｓ）－１－（クロロメチル）－３－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－（メトキシカルボニル）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイルトリアセテート（６５）の調製
ＤＭＦ（０．１ｍＬ）中の化合物６４（７．５ｍｇ、７．０μｍｏｌ）の溶液に化合物１１（６．６ｍｇ、７．０μｍｏｌ）、２，４，６－トリメチルピリジン（３μＬ、２２．５μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２．６ｍｇ、６．８μｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物６５（２．１ｍｇ、１５％）を白色固体として得た。

【0606】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１０９Ｈ_１２３ＣｌＮ_１２Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１００１．４；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１０９Ｈ_１２３ＣｌＮ_１２Ｏ_２３）ｍ／ｚ＝１００１．８。

【0607】

（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（５－（（（（Ｓ）－１－（クロロメチル）－３－（５－（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）－１Ｈ－インドール－２－カルボニル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］インドール－５－イル）オキシ）メチル）－２－（（２Ｓ，５Ｓ）－１５－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）－５－イソプロピル－２－メチル－４，７－ジオキソ－１０，１３－ジオキサ－３，６－ジアザペンタデカンアミド）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（６６）の調製
０℃のＴＨＦ（０．３ｍＬ）中の化合物６５（９．８ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）の溶液にＬｉＯＨ溶液（０．２５ｍＬのＨ_２Ｏ中２．５ｍｇ）を緩徐に加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で２ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物６６（３．５ｍｇ、５０％）を白色固体として得た。

【0608】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７２Ｈ_９４ＣｌＮ_１２Ｏ_１６）ｍ／ｚ＝１４１７．７；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_７２Ｈ_９４ＣｌＮ_１２Ｏ_１６）ｍ／ｚ＝１４１６．７。

【0609】

デュオカルマイシン構築物６９の合成
デュオカルマイシン構築物を以下に示されるスキーム１０にしたがって合成した。

【0610】

スキーム１０

【化95】

【0611】

【0612】

４－（４－（１－（３－（２－（（２－（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）－１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－１－（９Ｈ－フルオレン－９－イル）－３－オキソ－２，７，１０－トリオキサ－４－アザトリデカンアミド）安息香酸（６７）の調製
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中のＰｆｐエステル３７（２３ｍｇ、２０．６μｍｏｌ）および４－アミノ安息香酸（７．７ｍｇ、５６．２μｍｏｌ）の混合物にＨＯＡｔ（２ｍｇ、１４．７μｍｏｌ）および２，４，６－トリメチルピリジン（２０μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で３０分間撹拌した。溶出液としてアセトニトリル－水（０．１％のギ酸、５～１００％）を用いて粗生成物を逆相クロマトグラフィーにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、真空下で濃縮して化合物６７（１５．６ｍｇ、７１％）を淡黄色油として得た。

【0613】

計算値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６２Ｈ_６６Ｎ_７Ｏ_１０）ｍ／ｚ＝１０６８．５；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_６２Ｈ_６６Ｎ_７Ｏ_１０）ｍ／ｚ＝１０６８．５。

【0614】

（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル２－（（１－（３－（４－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）（２－（２－（３－（（４－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ，１２Ｒ）－１１－（（Ｓ）－ｓｅｃ－ブチル）－１２－（２－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－２－オキソエチル）－５，８－ジイソプロピル－４，１０－ジメチル－３，６，９－トリオキソ－２，１３－ジオキサ－４，７，１０－トリアザテトラデシル）フェニル）アミノ）－１－オキソ－５－ウレイドペンタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバモイル）フェニル）アミノ）－３－オキソプロポキシ）エトキシ）エチル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）メチル）－１，２－ジメチルヒドラジンカルボキシレート（６８）の調製
ＤＭＦ（０．０５ｍＬ）中の化合物６７（１１．４ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）の溶液に４６（１２ｍｇ、１０．７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５．７μＬ、３２．７μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５．０ｍｇ、１３．２μｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１ｈ撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～９０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物６８（３．６ｍｇ、１５％）を白色固体として得た。

【0615】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２０Ｈ_１５９Ｎ_１７Ｏ_２１）ｍ／ｚ＝１０８７．１；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_１２０Ｈ_１５９Ｎ_１７Ｏ_２１）ｍ／ｚ＝１０８７．６。

【0616】

４－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（４－（３－（２－（２－（（１－（３－（２－（（１，２－ジメチルヒドラジニル）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）アミノ）エトキシ）エトキシ）プロパンアミド）ベンズアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）－１－（（Ｓ）－２－（（１Ｒ，２Ｒ）－３－（（（１Ｓ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－１－メトキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）ピロリジン－１－イル）－３－メトキシ－５－メチル－１－オキソヘプタン－４－イル）（メチル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）（メチル）カルバメート（６９）の調製
０℃のＤＭＡ（０．２ｍＬ）中の化合物６８（３．６ｍｇ、１．６μｍｏｌ）の溶液にピペリジン（２．０μＬ、２０．２μｍｏｌ）を緩徐に加えた。結果としてもたらされた混合物を室温で２０分間撹拌した。粗生成物を移動相としてアセトニトリル－水（０．０５％のＴＦＡ、５～７０％）を使用して分取ＨＰＬＣにより精製した。所望の化合物を含有する画分をプールし、凍結乾燥して化合物６９（１．２ｍｇ、４２％）を白色固体として得た。

【0617】

計算値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_９０Ｈ_１３９Ｎ_１７Ｏ_１７）ｍ／ｚ＝８６５．０；ＥＳＩの実測値：［Ｍ＋２Ｈ］^２＋（Ｃ_９０Ｈ_１３９Ｎ_１７Ｏ_１８）ｍ／ｚ＝８６５．３。

【0618】

［実施例２］
バイオコンジュゲーション
Ｃ末端にアルデヒドタグを含有する抗体を、０．８５％のＤＭＡの存在下で５０ｍＭのクエン酸ナトリウム、ｐＨ５．５、５０ｍＭのＮａＣｌ中３７℃で７２ｈ、１５ｍｇ／ｍＬの構築物１３、２３、３９、４８、５３、６６、６９および８個の薬物：抗体同等物に共役させた（スキーム１１）。ＡＤＣを２０ｍＭのクエン酸Ｎａ、ｐＨ５．５、５０ｍＭのＮａＣｌに交換しながらタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を使用して遊離薬物を除去した。最終生成物のＤＡＲを決定するために、ＡＤＣを疎水性相互作用クロマトグラフィー（Ｔｏｓｏｈ＃１４９４７ ＴＳＫ ｇｅｌ Ｂｕｔｙｌ－ＮＰＲ ４．６ｍｍ×３５ｍｍ；移動相Ａ：２５ｍＭのＮａＰＯ_４、１．５Ｍの（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４、ｐＨ７．０および移動相Ｂ：１８．７５ｍＭのＮａＰＯ_４、ｐＨ７．０、２５％のイソプロパノール）により調べた。凝集をモニターするために、３００ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ６．８、５％のイソプロパノールの移動相と共にサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ；Ｔｏｓｏｈ＃０８５４１）を使用して試料を分析した。最終生成物は５％未満の凝集物を含有した。

【0619】

薬物対抗体比（ＤＡＲ）を表１に要約した。これらのＡＤＣをさらなる濃縮なしで以下の研究のために使用した。

【0620】

スキーム１１．ＡＤＣの合成のためのＨＩＰＳライゲーション。アルデヒド部分を有する抗体をヒドラジノ－イソ－ピクテ－スプレングラー（ＨＩＰＳ）リンカーおよびペイロードと反応させて、安定なアザカルボリン連結を有する部位特異的に共役したＡＤＣを生成させた。

【化96】

【0621】

表１．コンジュゲートの薬物対抗体比（ＤＡＲ）

【表1】

【0622】

［実施例３］
血清安定性アッセイ
ＡＤＣを４０μｇ／ｍＬにおいてラット血清にスパイクした。試料のアリコートを取り、使用まで－８０℃で貯蔵した。アリコートを指し示される時間にわたり５％のＣＯ_２下３７℃に置き、次にＥＬＩＳＡにより分析して抗ＭＭＡＥ（１３、４８、５３、６９）または抗デュオカルマイシン（６６）（全ＡＤＣ）および抗Ｆａｂ（全抗体）シグナルを評価した。新たに解凍したアリコートを共役の参照開始値として使用した。時点にわたる比較を可能にするために全てのアナライトを１つのプレート上で一緒に測定した。カゼインブロッキング緩衝液中に１：１０００で希釈したアナライトを、抗ヒトＦａｂ特異的抗体をコーティングしたプレート上に捕捉した。次に、抗ペイロード抗体、続いてＨＲＰ共役ヤギ抗マウスＦｃγ特異的抗体を用いてペイロードを検出し、ＨＲＰ共役ヤギ抗ヒトＦｃγ特異的抗体を用いて全抗体を検出した。結合したＨＲＰ共役抗体をＴＭＢ基質を用いて可視化した。比色反応をＨ_２ＳＯ_４を用いて停止させ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５プレートリーダーを使用して４５０ｎｍにおける吸光度を決定した。データ解析をＥｘｃｅｌで行った。各試料を４連で分析し、平均値を使用した。抗ペイロードシグナル対抗Ｆａｂシグナルの比を抗体共役の度合として使用した。

【0623】

抗ＨＥＲ２ １３および抗ＣＤ７９ｂ １３の両方のＡＤＣはラット血清中で非常に安定であり、３７℃で７日後にペイロードの損失を示さない（図１Ａ）。ＭＭＡＥ構築物４８ ＡＤＣは非糖構築物５３および６９ ＡＤＣより安定である（図１Ａ）。抗ＨＥＲ２ ６６および抗ＣＤ７９ｂ ６６ ＡＤＣは非常に安定である（図１Ｂ）。

【0624】

［実施例４］
ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性
５％のＣＯ_２の３７℃のインキュベーター中、１０％のウシ胎仔血清（Ｓｅｒａｄｉｇｍ）およびＧｌｕｔａｍａｘ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を補足したＲＰＭＩ－１６４０培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中でＮＣＩ－Ｎ８７およびＪｅＫｏ－１細胞系を維持した。細胞を定期的に継代して対数期増殖を確実にした。プレーティングの日に、ウェル当たり５０００個の細胞を９６ウェルプレート中の１００μＬの通常増殖培地に加え、インキュベーターに２４ｈ戻してプレーティング条件まで平衡化させた。細胞を次に、６倍の最終の所望の濃度において段階希釈した２０μＬのＡＤＣを用いて処理した。５ｄのインキュベーション後、生産者の推奨にしたがってＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して細胞生存を測定した。発光をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｍ５プレートリーダー上で読み取った。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアをデータ解析のために使用し、データ解析は、各プレート上に存在する対照に対して正規化された発光値からのＩＣ_５０の算出を含んだ。

【0625】

Ｃ末端においてＭＭＡＥ構築物１３、４８、５３、６９により修飾された抗ＨＥＲ２のｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性をＨＥＲ２陽性細胞系、ＮＣＩ－Ｎ８７を使用して評価した。図２Ａに示されるように、全てのＡＤＣは、サブナノモルのＩＣ_５０値を有する強力な用量依存的な毒性を呈した。対照的に、アイソタイプＡＤＣ（抗ＣＤ７９ｂ）は、２０ｎＭまでの濃度において最小の活性を示した。

【0626】

別の研究において、Ｃ末端においてデュオカルマイシン構築物６６により修飾された抗ＣＤ７９ｂ抗体のｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞傷害性をＣＤ７９ｂ陽性細胞系、ＪｅＫｏ－１を使用して評価した。ＡＤＣは、０．７ｎＭのＩＣ_５０値を有する強力な用量依存的な毒性を呈した（図２Ｂ）。

【0627】

［実施例５］
ｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究
全ての動物研究は動物実験委員会ガイドラインにしたがって実行され、Ｓｕｎｄｉａ（Ｓｈａｎｇｈａｉ、Ｃｈｉｎａ）において行われた。マウス抗ＭＭＡＥ抗体はＰｒｏＭａｂにより作られ、自社で検証した。ウサギ抗ＡＦ４８８抗体はＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入した。ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）共役二次抗体はＪａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ、ＰＡ）からのものであった。細胞系はＡＴＣＣおよびＤＳＭＺ細胞バンクから得、そこでそれらは形態、核型分析、およびＰＣＲベースのアプローチにより立証された。

【0628】

雄ＣＢ１７ ＳＣＩＤマウスの皮下に５０％のＭａｔｒｉｇｅｌ中の１．０×１０^６個のＪｅＫｏ－１細胞を接種した。投薬は、腫瘍が１６７ｍｍ^３の平均に達した時に開始した。動物（５マウス／群）に静脈内単回用量（３ｍｇ／ｋｇのＡＤＣまたはビヒクル単独）を与えた。動物を体重および腫瘍サイズについて週に２回モニターした。腫瘍体積は、式：

【数1】

【0629】

を使用して算出した。

【0630】

重篤な毒性は観察されなかった。ＡＤＣの単回用量は、腫瘍成長を有意に遅延させるために十分であった（図３）。

【0631】

本発明をその特有の実施形態を参照して記載してきたが、様々な変更が為されてもよく、本発明の真の精神および範囲から離れることなく均等物が置換され得ることが当業者により理解されるべきである。追加的に、目的とする本発明の精神および範囲に対して特定の状況、材料、組成物、方法、方法ステップまたはステップを適合させるために多くの改変が為されてもよい。全てのそのような改変は、本明細書に添付される請求項の範囲内であることが意図される。

【図1A】

【図1B】

【図2A】

【図2B】

【図3】