特許 7550982 大麻フラボノイドの調製方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-09-05

(45)【発行日】2024-09-13

(54)【発明の名称】大麻フラボノイドの調製方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 311/30 20060101AFI20240906BHJP

   C07C 69/738 20060101ALI20240906BHJP

【ＦＩ】

C07D311/30

C07C69/738 Z

【請求項の数】 12

(21)【出願番号】P 2023528391

(86)(22)【出願日】2021-01-21

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-11-22

(86)【国際出願番号】 CN2021073145

(87)【国際公開番号】W WO2022099931

(87)【国際公開日】2022-05-19

【審査請求日】2023-05-12

(31)【優先権主張番号】202011262162.4

(32)【優先日】2020-11-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】520013755

【氏名又は名称】徳義制薬有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＤＥＹＩ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｒｏｏｍ ９１６， Ｆｌｏｏｒ ９， Ｕｎｉｔ ２， Ｂｕｉｌｄｉｎｇ １－２， Ｈｏｎｇｓｈｅｎｇｄａ Ｙｕｅｘｉｎｇ Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ Ｃｅｎｔｅｒ， Ｘｉｓｈａｎ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｋｕｎｍｉｎｇ， Ｙｕｎｎａｎ ６５０１００ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】羅軍禄

(72)【発明者】

【氏名】牟洪涛

(72)【発明者】

【氏名】杜業松

(72)【発明者】

【氏名】譚▲しん▼

(72)【発明者】

【氏名】王曙賓

(72)【発明者】

【氏名】張平平

(72)【発明者】

【氏名】藍藍

【審査官】土橋 敬介

(56)【参考文献】

【文献】中国特許出願公開第１０７６８６４７２（ＣＮ，Ａ）

【文献】中国特許出願公開第１０９３６９５９１（ＣＮ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１７／０２７１３６（ＷＯ，Ａ２）

【文献】特表２０１１－５１８１７４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ

Ｃ０７Ｃ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップ（１）と、
１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールとをＣアルキル化反応させて、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得るステップ（２）と、
４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールとを高温で縮合して、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを生成するステップ（３）と、を含み、
カンフラビンＡの構造式が

であり、
カンフラビンＣの構造式が

であることを特徴とする大麻フラボノイドの調製方法。

【請求項2】

前記ステップ（１）は４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとを反応させるステップを含み、前記反応は無酸素環境で行われ、前記反応はアルカリ性条件下で行われ、前記反応系には溶媒がさらに含まれており、前記溶媒はトルエン及び／又はベンゼンから選択されることを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項3】

前記ステップ（１）の無酸素環境は不活性ガスで保護した反応環境であり、
前記アルカリは無機アルカリであり、
前記無機アルカリと４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとの質量モル比が５０～１０００ｇ／ｍｏｌであり、
前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとのモル比が１：３～３：１であり、
前記反応温度は８０～１３０℃であり、
前記反応時間は２～１２ｈであり、
前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンは炭酸ジエチルに滴下されることを特徴とする請求項２に記載の調製方法。

【請求項4】

前記ステップ（１）は、不活性ガスの保護下で、反応容器にＮａＨとトルエンを加え、撹拌して、さらに、炭酸ジエチルを加え、加熱して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとトルエンとの混合液を滴下し、撹拌して反応させ、その後、反応液に対して後処理を行い、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップを含み、
前記後処理はクエンチステップを含み、
前記クエンチは、反応容器に酸を加えて混合液のｐＨ＝４．０～７．０に調整することを含み、
前記酸は無機酸であって、酢酸の無機酸純品又はその水溶液から選択される１種又は複数種の混合物であることを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項5】

前記ステップ（２）は１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールとをＣアルキル化反応させるステップを含み、前記反応は無酸素環境で行われ、前記反応系には溶媒がさらに含まれており、前記溶媒は、アセトニトリル及び／又はエチルエーテルから選択されることを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項6】

前記ステップ（２）における無酸素環境は不活性ガスで保護した反応環境であり、前記不活性ガスは窒素ガスであり、
前記１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールとのモル比が１：３～３：１であり、
前記反応温度は０～２５℃であり、
前記反応時間は８～２４ｈであり、
前記反応においては、また三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液が滴下されることを特徴とする請求項５に記載の調製方法。

【請求項7】

前記ステップ（２）は、反応容器に硝酸銀飽和アセトニトリルを加え、次に１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールを加え、不活性ガスの保護下で、降温して、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液を滴下し、撹拌して反応させ、その後、反応液に対して後処理を行い、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得るステップを含み、
前記後処理はクエンチステップを含み、
前記クエンチは、反応容器にクエンチ溶媒を加えるステップを含み、
前記クエンチ溶媒は、氷水混合物、メチルｔ－ブチルエーテル、エチルエーテル、エチルアセテート、酢酸ブチルから選択される１種又は複数種であることを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項8】

前記ステップ（３）は４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールとを反応させるステップを含み、前記反応は無酸素環境で行われることを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項9】

前記ステップ（３）の無酸素環境は不活性ガスで保護した反応環境であり、
前記反応温度は１５０～２３０℃であり、
前記反応時間は２～８ｈであり、
前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールとのモル比が１：３～３：１であることを特徴とする請求項８に記載の調製方法。

【請求項10】

前記ステップ（３）は、不活性ガスの保護下で、反応容器に４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを加え、撹拌して加熱し、反応させて、その後、反応液に対して後処理を行い、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを得るステップを含むことを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項11】

４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップと、
反応容器に硝酸銀飽和アセトニトリルを加え、次に１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールを加え、不活性ガスの保護下で、降温して、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液を滴下し、撹拌して反応させ、その後、反応液に対して後処理を行い、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得るステップと、
不活性ガスの保護下で、反応容器に４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを加え、撹拌して加熱し、反応させて、その後、反応液に対して後処理を行い、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを得るステップと、を含むことを特徴とする請求項１に記載の調製方法。

【請求項12】

４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートの化合物の調製における使用であって、
前記化合物は、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣであり、
カンフラビンＡの構造式が

であり、
カンフラビンＣの構造式が

であることを特徴とする使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は化学合成の分野に属し、具体的には、大麻フラボノイドの調製方法、特にカンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣの調製方法に関する。

【背景技術】

【0002】

２００種類以上の大麻の生物活性化合物の中で、カンナビノイドとテルペンはずっと最も注目されているが、大麻はもう１つの重要な化合物である大麻フラボノイドを生成して、それらは上記の既知の化合物の約１０％を占め、そのうち約２０種類は大麻に存在することが知られており、これらのフラボノイドは精神活性がない。

【0003】

カンフラビンＡは１９８５年にすでに抗炎症作用があることが研究により実証されており、カンフラビンＣは２００８年に発見されたばかりである。他の鎮痛剤と比較して、カンフラビンＡ及びカンフラビンＣは患者に薬物依存性を発生させずに、中毒性を発生させるリスクがない。

【0004】

カンフラビンＡ及びカンフラビンＣのフラボン骨格及びその骨格上のゲラニルは、分子の親油性を高め、その結果、細胞からの分子の取り込み及び生体内への分子の蓄積を高め、分子と細胞との相互作用を促進し、例えば、分子が膜結合酵素及び受容体細胞シグナルの伝達経路に関与することを可能にする。

【0005】

MoreauらはFlavonoid Derivative of Cannabis Demonstrates Therapeutic Potential in Preclinical Models of Metastatic Pancreatic Cancer.([J]. Front. Oncol,2019,9:660)において、研究者がクロマトグラフィーを用いて、ジャマイカに存在する大麻(Cannabis Sativa L.)株から発見されたカンフラビンＡとカンフラビンＣ、及び他のフラボノイドを抽出したことを報告した。研究者はインビトロ実験とインビボ実験を順に行った。インビボ実験の結果、スマート放射線治療用生体材料から継続的に提供されている大麻フラボノイドを用いた場合、膵臓がん動物モデルにおいて局所腫瘍及び転移性腫瘍の進行を遅らせる治療効果が示された。重複試験でも、対照群と比較して膵臓がん動物の生存率が有意に増加したことが示された。研究の結果、カンフラビンＡ及びカンフラビンＣは、放射線増感及び腫瘍転移の治療可能性を含む膵臓がん治療において重要な治療可能性を有することが示された。これらの結果は、臨床実験の治療結果をさらに、研究して最適化するための根拠を提供した。大麻植物中のフラボノイドの含有量は１％よりはるかに少なく、平均で０．１４％未満であり、大麻中のカンフラビンＡ及びカンフラビンＣの含有量は極めて低い。そのため、これらの成分を大麻植物抽出だけで得ることは不可能である。現在、研究者は生物学的システムに基づいてこれらの活性因子を調製することに取り組んでおり、これによりカンフラビンに関する多くの機会が創出されることになる。

【0006】

Barrettらは、Cannflavin A and B, prenylated flavones from Cannabis sativa L.([J]. Cellular&Molecular Life Sciences, 1986, 452-453)において、大麻のエタノール抽出物からカンフラビンＡを分離したことを報告したが、カンフラビンＡの収率は極めて低い。

【0007】

ReaらはBiosynthesis of cannflavins A and B from Cannabis sativa L.([J]. Phytochemistry, 2019, 134, 162-171)においてシノリゾビウム・メリロティの芳香族基質プレニル基転移酵素を用いてジメチルアリル二リン酸を触媒することにより、カンフラビンＡを合成することを報告した。しかし、この生合成方法はコストが高く、工業的にスケールアップしにくい。

【0008】

特許文献ＷＯ２０１７０９１８３７には、２,４,６－トリヒドロキシアセトフェノンを出発反応物とし、化学合成における公知の技術を用いて合成を行い、大麻フラボノイドの主鎖を得て、共役環化を経て三環構造を形成し、最後に、一連の酵素修飾を行ってカンフラビンＡ及びカンフラビンＣを得ることが開示されている。

【0009】

既に開示されている化学合成方法は、合成ステップが多く、多段階の反応にはシリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製が必要であり、スケールアップしにくいという欠点がある。そのため、簡便、迅速、容易にスケールアップ可能なカンフラビンＡ及びカンフラビンＣの新規合成法の開発が急務となっている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本発明は、原料が安くて入手されやすく、反応ステップが少なく、生産周期が短く、操作されやすいなどの利点がある大麻フラボノイドの調製方法を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明の目的は、

と炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、

を得るステップと、

とアルコール類化合物（Ｒ_３－ＯＨ）とを反応させて、

を得るステップと、

とを反応させて、大麻フラボノイドを得るステップと、を含み、
前記大麻フラボノイドの構造は一般式Ｉであることを特徴とする大麻フラボノイドの調製方法を提供する。

（Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、Ｒ_８、Ｒ_９は、独立して、Ｈ、Ｃ_１～１４アルキル、Ｃ_３～１４アルケニル、ヒドロキシ、Ｃ_１～５アルコキシ、カルボキシ、アミノ、ハロゲンから選択される。
Ｒ_２、Ｒ_４は、独立して、Ｈ、Ｃ_１～１４アルキル、Ｃ_３～１４アルケニル、ヒドロキシ、Ｃ_１～５アルコキシ、カルボキシ、ハロゲンから選択される。
Ｒ_３、Ｒ_１は、独立して、Ｈ、Ｃ_１～１４アルキル、Ｃ_３～１４アルケニル、Ｃ_１～５アルコキシから選択される。）

【0012】

本発明の一実施例では、Ｒ_３はゲラニルである。

【0013】

本発明の一実施例では、Ｒ_１はゲラニルである。

【0014】

本発明の一実施例では、Ｒ_２はヒドロキシである。

【0015】

本発明の一実施例では、Ｒ_４はヒドロキシである。

【0016】

本発明の一実施例では、Ｒ_７はヒドロキシである。

【0017】

本発明の一実施例では、Ｒ_６はメトキシである。

【0018】

本発明の一実施例では、Ｒ_５はＨである。

【0019】

本発明の一実施例では、Ｒ_８はＨである。

【0020】

本発明の一実施例では、Ｒ_９はＨである。

【0021】

さらに、前記調製方法は、

と炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、

を得るステップと、

とアルコール類化合物（Ｒ_３－ＯＨ）とを反応させて、

を得るステップと、

とを反応させて、大麻フラボノイドを得るステップと、を含み、
前記大麻フラボノイドの構造は一般式ＩＩである。

（Ｒ_５、Ｒ_８、Ｒ_９は、独立して、Ｈ、Ｃ_１～１４アルキル、Ｃ_３～１４アルケニル、ヒドロキシ、Ｃ_１～５アルコキシ、カルボキシ、アミノ、ハロゲンから選択され、
Ｒ_３、Ｒ_１は、独立して、Ｈ、Ｃ_１～１４アルキル、Ｃ_３～１４アルケニル、Ｃ_１～５アルコキシから選択され、
好ましくは、Ｒ_３はゲラニルであり、好ましくは、Ｒ_５はＨであり、好ましくは、Ｒ_８はＨであり、好ましくは、Ｒ_９はＨであり、好ましくは、Ｒ_１はゲラニルである。）

【0022】

本発明の目的はまた、１,３,５－トリヒドロキシベンゼンと４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとを出発原料として、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを調製する方法であって、
４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップ（１）と、
１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールとをＣアルキル化反応させて、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得るステップ（２）と、
４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールとを高温で縮合して、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを生成するステップ（３）と、を含む方法を提供する。

【0023】

ステップ（２）の化学反応式は以下のとおりである。

【0024】

好ましくは、前記ステップ（２）では、反応は無酸素環境で行われ、さらに、不活性ガスは窒素ガス又はアルゴンガスであり、前記反応系には溶媒がさらに含まれており、前記溶媒はアセトニトリル及び／又はエチルエーテルであり、本発明の一実施例では、前記溶媒はアセトニトリルである。

【0025】

好ましくは、前記ステップ（２）では、１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールとのモル比が１：３～３：１、さらに、１：３、１：２、１：１、２：１、３：１、最も好ましくは、１：１である。

【0026】

好ましくは、前記ステップ（２）では、反応温度は０～２５℃、さらに、０℃、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃である。

【0027】

好ましくは、前記ステップ（２）では、反応時間は８～２４ｈ、さらに、８ｈ、１２ｈ、１６ｈ、２０ｈ、２４ｈ、最も好ましくは、１２ｈである。

【0028】

好ましくは、前記ステップ（２）では、前記反応においては、また、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液が滴下される。

【0029】

本発明の一実施例では、前記ステップ（２）は、具体的には、反応容器に硝酸銀飽和アセトニトリルを加え、次に１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールを加え、不活性ガスの保護下で、降温して、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液を滴下し、撹拌して反応させ、その後、反応液に対して後処理を行い、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得るステップを含む。

【0030】

好ましくは、前記後処理はクエンチステップを含む。

【0031】

より好ましくは、前記クエンチは、具体的には、反応容器に氷水混合物を加えるステップを含む。

【0032】

より好ましくは、前記クエンチ溶媒は、氷水混合物、メチルｔ－ブチルエーテル、エチルエーテル、エチルアセテート、酢酸ブチルから選択される１種又は複数種であり、本発明の一実施例では、前記クエンチ溶媒は氷水混合物である。

【0033】

好ましくは、前記後処理は、クエンチステップの後に抽出ステップをさらに含む。

【0034】

より好ましくは、前記抽出溶媒は、メチルｔ－ブチルエーテル、エチルエーテル、エチルアセテート、酢酸ブチルから選択される１種又は複数種であり、本発明の一実施例では、前記抽出溶媒はエチルアセテートである。

【0035】

より好ましくは、前記抽出温度は、５～４０℃、さらに好ましくは１５～２５℃、さらに、１、５℃、２０℃、２５℃である。

【0036】

本発明の一実施例では、前記抽出ステップは、具体的には、反応液に抽出溶媒を加えて、層を分離するステップと、水層に抽出溶媒を加えて抽出し、層を分離するステップと、有機層を併せて、洗浄し、層を分離し、有機層を併せるステップと、を含む。

【0037】

好ましくは、前記後処理は、抽出ステップの後に蒸留ステップを含み、より好ましくは、前記蒸留ステップは常圧蒸留と減圧蒸留のステップを含む。

【0038】

好ましくは、前記減圧蒸留は、温度２０～５０℃、真空度－０．１～－０．０５ＭＰａである。

【0039】

好ましくは、前記後処理は、蒸留ステップの後に、カラムクロマトグラフィーステップを順に含み、より好ましくは、前記カラムクロマトグラフィーステップは順相カラムクロマトグラフィーと逆相カラムクロマトグラフィーを含む。

【0040】

より好ましくは、前記カラムクロマトグラフィーは順相カラムクロマトグラフィーであり、前記カラムクロマトグラフィーにおける溶出剤溶液は、石油エーテル、ｎ－ヘキサン、エチルアセテート、トルエン、トリエチルアミン、ジクロロメタン、水、メタノールから選択され、本発明の一実施例では、前記溶出剤溶液は石油エーテル（ＰＥ）とエチルアセテート（ＥＡ）であり、溶出剤の配合比がＰＥ：ＥＡ＝８：１→４：１→２：１である。

【0041】

本発明の好ましい実施例では、前記後処理は、クエンチ、抽出、蒸留、カラムクロマトグラフィーを順に含み、各ステップの具体的な操作及び条件は本発明で上記したとおりである。

【0042】

本発明の特定実施例では、前記（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールの調製方法は、以下のステップを含む。
（２－１）反応ステップ：反応容器に硝酸銀飽和アセトニトリルを加え、次に１,３,５－トリヒドロキシベンゼンとゲラニオールを加え、不活性ガスの保護下で、降温して、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液を滴下し、撹拌し、室温に昇温して、８～２４ｈ反応させる。
（２－２）制御ステップ：（２－１）の混合液に氷水混合物を加え、層を分離し、水層にエチルアセテートを加えて抽出し、層を分離し、有機層を併せ、飽和食塩水で洗浄し、層を分離し、有機層を併せ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、吸引ろ過し、ろ液を濃縮する。
（２－３）ステップ（２－２）の濃縮物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２００～３００メッシュ、ＰＥ：ＥＡ＝８：１→４：１→２：１）により分離し、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを得る。
ステップ（３）の化学反応式は以下のとおりである。

【0043】

好ましくは、前記ステップ（３）では、反応環境は無酸素環境であり、より好ましくは、前記反応環境は不活性ガスで保護した反応環境であり、本発明の一実施例では、前記反応環境は窒素ガスで保護した反応環境である。

【0044】

好ましくは、前記ステップ（３）では、反応温度は１５０～２３０℃、さらに、１６０℃、１８０℃、２００℃、２２０℃であり、本発明の一実施例では、前記反応温度は２００℃である。

【0045】

好ましくは、前記ステップ（３）では、反応時間は２～８ｈ、さらに、３ｈ、５ｈ、７ｈであり、本発明の一実施例では、前記反応時間は３ｈである。

【0046】

好ましくは、前記ステップ（３）では、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールとのモル比が１：３～３：１、さらに、１：３、１：２、１：１、１．５：１、２：１、３：１、最も好ましくは、１．５：１である。

【0047】

本発明の一実施例では、前記ステップ（３）は、具体的には、不活性ガスの保護下で、反応容器に４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを加え、撹拌して加熱し、反応させて、その後、反応液に対して後処理を行い、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣを得るステップを含む。

【0048】

好ましくは、前記後処理はカラムクロマトグラフィーステップを含み、より好ましくは、前記カラムクロマトグラフィーステップは順相カラムクロマトグラフィーと逆相カラムクロマトグラフィーを含む。

【0049】

より好ましくは、前記カラムクロマトグラフィーステップは、混合液を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーに複数かけてから、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーに複数回かけることを含む。

【0050】

より好ましくは、前記カラムクロマトグラフィーにおける溶出剤溶液は、石油エーテル、ｎ－ヘキサン、エチルアセテート、トルエン、トリエチルアミン、ジクロロメタン、水、メタノールから選択され、本発明の一実施例では、前記順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーの溶出剤溶液は石油エーテルとエチルアセテートであり、溶出剤の配合比がＰＥ：ＥＡ＝１０：１→２：１であり、前記逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーの溶出剤溶液は水とメタノールであり、溶出剤の配合比が水：メタノール＝５０：５０→１０：９０である。

【0051】

好ましくは、前記後処理は、カラムクロマトグラフィーステップの後に、再結晶ステップをさらに含み、より好ましくは、前記再結晶ステップは溶解と降温析出のステップを含む。

【0052】

より好ましくは、前記溶解溶媒は、トルエン、メタノール、アセトン、水などから選択される１種又は複数種の混合物であり、本発明の一実施例では、前記溶媒はメタノールである。

【0053】

より好ましくは、前記溶解温度は４０～１００℃、さらに好ましくは６０～１００℃であり、本発明の一実施例では、前記溶解温度は６５℃である。

【0054】

より好ましくは、前記降温析出ステップは１～３０℃に降温することを含み、本発明の一実施例では、前記降温析出ステップは１８～２２℃に降温することを含む。

【0055】

本発明の一実施例では、前記再結晶ステップは、溶媒を加えて、４０～１００℃に昇温し、固体をすべて溶解し、１～３０℃に降温し、析出させて濾過することを含む。

【0056】

好ましくは、前記後処理は、再結晶ステップの後に乾燥ステップをさらに含む。

【0057】

より好ましくは、前記乾燥ステップは真空乾燥であり、さらに好ましくは、その真空度は－０．０８～－０．０１ＭＰａである。

【0058】

より好ましくは、前記乾燥温度は４５～６５℃である。

【0059】

本発明の好ましい実施例では、前記後処理は、カラムクロマトグラフィー、再結晶、乾燥ステップを順に含み、各ステップの具体的な操作及び条件は本発明で上記したとおりである。

【0060】

本発明の特定実施例では、前記カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣの調製方法において、以下のステップを含む。
（３－１）反応ステップ：窒素ガスの保護下で、反応容器に４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートと（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールを加え、撹拌して、１５０～２３０℃に加熱し、２～８ｈ反応させる。
（３－２）室温まで降温し、混合液を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーに複数かけてから、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーに複数回かけて、生成物を乾固まで蒸発させる。
（３－３）ステップ（３－２）で得た乾固物にメタノールを加え、６５℃に昇温して、固体をすべて溶解し、１８～２２℃に降温し、固体を析出させて、濾過し、濾過ケーキをリンスする。
（３－４）ステップ（３－３）で得た濾過ケーキを５０～５５℃で真空乾燥する。

【0061】

好ましくは、前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートは、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとをアルカリ性条件下で縮合して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップによって調製される。

【0062】

ステップ（１）の化学反応式は以下のとおりである。

【0063】

好ましくは、前記ステップ（１）では、前記反応はアルカリ性条件下で行われ、より好ましくは、前記アルカリ性条件としては、反応系にはアルカリ、例えば無機アルカリが含まれており、前記無機アルカリは、水素化ナトリウムの無機アルカリ純品又はパラフィン油で被覆された水素化ナトリウムから選択される１種又は複数種の混合物であり、本発明の一実施例では、前記無機アルカリはパラフィン油で被覆された水素化ナトリウムである。

【0064】

より好ましくは、前記アルカリと４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとの質量モル比が５０～１０００ｇ／ｍｏｌ、さらに好ましくは、１００～１５０ｇ／ｍｏｌ、さらに、１００ｇ／ｍｏｌ、１１０ｇ／ｍｏｌ、１２０ｇ／ｍｏｌ、１３０ｇ／ｍｏｌ、１４０ｇ／ｍｏｌ、１５０ｇ／ｍｏｌである。

【0065】

好ましくは、前記ステップ（１）では、反応系には溶媒がさらに含まれており、前記溶媒はトルエン及び／又はベンゼンから選択され、本発明の一実施例では、前記溶媒はトルエンである。

【0066】

好ましくは、前記ステップ（１）では、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンと炭酸ジエチルとのモル比が１：３～３：１、さらに、１：３、１：２、１：１、２：１、３：１、最も好ましくは、１：２である。

【0067】

好ましくは、前記ステップ（１）では、反応環境は無酸素環境であり、より好ましくは、前記反応環境は不活性ガスで保護した反応環境であり、本発明の一実施例では、前記反応環境は窒素ガスで保護した反応環境である。

【0068】

好ましくは、前記ステップ（１）では、反応温度は８０～１３０℃、さらに、８０℃、９０℃、１００℃、１１０℃、１２０℃、１３０℃である。

【0069】

好ましくは、前記ステップ（１）では、反応時間は２～１２ｈ、さらに、４ｈ、６ｈ、８ｈ、１０ｈ、１２ｈ、最も好ましくは、４ｈである。

【0070】

好ましくは、前記ステップ（１）では、前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンは炭酸ジエチルに滴下される。

【0071】

本発明の一実施例では、前記調製方法は、具体的には、窒素ガスの保護下で、反応容器に６０％ＮａＨとトルエンを加え、撹拌して、さらに、炭酸ジエチルを加え、加熱して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとトルエンとの混合液を滴下し、撹拌して反応させ、その後、反応液に対して後処理を行い、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得るステップを含む。

【0072】

好ましくは、前記後処理は、クエンチステップを含む。

【0073】

より好ましくは、前記クエンチは、具体的には、反応容器に酸を加えて混合液のｐＨ＝４．０～７．０に調整するステップを含む。

【0074】

より好ましくは、前記酸は無機酸であって、酢酸の無機酸純品又はその水溶液から選択される１種又は複数種の混合物であり、本発明の一実施例では、前記酸は酢酸である。

【0075】

好ましくは、前記後処理は、クエンチステップの後に抽出ステップをさらに含む。

【0076】

より好ましくは、前記抽出溶媒は、メチルｔ－ブチルエーテル、エチルエーテル、エチルアセテート、酢酸ブチルから選択される１種又は複数種であり、本発明の一実施例では、前記抽出溶媒はエチルアセテートである。

【0077】

より好ましくは、前記抽出温度は５～４０℃、さらに好ましくは１５～２５℃である。

【0078】

本発明の一実施例では、前記抽出ステップは、具体的には、反応液に抽出溶媒を加えて、層を分離するステップと、水層に抽出溶媒を加えて抽出し、層を分離するステップと、有機層を併せて、洗浄し、層を分離し、有機層を併せるステップと、を含む。

【0079】

好ましくは、前記後処理は、抽出ステップの後に蒸留ステップをさらに含み、より好ましくは、前記蒸留ステップは常圧蒸留と減圧蒸留のステップを含む。

【0080】

好ましくは、前記減圧蒸留は、温度２０～５０℃、真空度－０．１～－０．０５ＭＰａである。

【0081】

好ましくは、前記後処理は、蒸留ステップの後に洗浄を順に含み、より好ましくは、前記洗浄溶媒はｎ－ヘキサン及び／又はエチルエーテルから選択され、本発明の一実施例では、前記洗浄溶媒はｎ－ヘキサンである。

【0082】

本発明の好ましい実施例では、前記後処理は、クエンチ、抽出、蒸留、洗浄を順に含み、各ステップの具体的な操作及び条件は本発明で上記したとおりである。

【0083】

本発明の特定実施例では、前記４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートの調製方法は、以下のステップを含む。
（１－１）反応ステップ：窒素ガスの保護下で、反応容器に６０％ＮａＨとトルエンを加え、撹拌して、さらに、炭酸ジエチルを加え、８０～１３０℃に加熱し、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノンとトルエンとの混合液を滴下し、撹拌して２～１２ｈ反応させる。
（１－２）制御ステップ：（１－１）の混合液に酢酸を加えてｐＨ＝４．０～７．０に調整し、次に、エチルアセテートを加え、層を分離し、水層にエチルアセテートを加えて抽出し、層を分離し、有機層を併せ、飽和塩化アンモニウム水溶液と飽和食塩水で洗浄し、層を分離し、有機層を併せ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、吸引ろ過し、ろ液を濃縮する。
（１－３）ステップ（１－２）の濃縮物をｎ－ヘキサンに加え、２～１２ｈ撹拌し、濾過して４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートを得る。

【0084】

本発明はまた、本発明の上記（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールの調製ステップを含む大麻フラボノイドの調製方法を提供する。

【0085】

本発明はまた、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートの化合物の調製における使用であって、前記化合物はカンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣである使用を提供する。

【0086】

本発明に使用される原料が安くて入手されやすく、合成プロセスが簡単であり、操作されやすく、生産周期が短く、合成コストが低く、経済的価値がある。

【発明を実施するための形態】

【0087】

なお、以下の詳細は例示的なものであり、本願をさらに、説明することを目的とする。特に断らない限り、本明細書に使用されるすべての技術的用語及び科学的用語は本願の当業者が通常理解するものと同義である。

【0088】

実施例１、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテートの合成

反応フラスコに６０％ＮａＨ（６．００ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を加え、窒素ガスの保護下で、トルエン（６０ｍＬ）とＤＥＣ（１１．８２ｇ、１００ｍｍｏｌ）を加え、撹拌して、加熱して還流した。４'－ヒドロキシ－３'－メトキシアセトフェノン（１２．８２ｇ、５０ｍｍｏｌ）のトルエン（６０ｍＬ）溶液を滴下した。滴下終了後、４時間還流した。室温まで降温し、酢酸でｐＨ値を中性に調整し、飽和塩化アンモニウム水溶液（１５０ｍＬ）を加え、水相をエチルアセテート（１００ｍＬ×３）で抽出し、有機相を併せて、飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ×２）と飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で順に洗浄した。無水硫酸ナトリウムで有機相を乾燥し、吸引ろ過し、ろ液を乾固まで濃縮し、ｎ－ヘキサン（５０ｍＬ）を加えて一晩撹拌した。濾過して、４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテート（１５．４３ｇ、９３．９％）を橙黄色の固体として得た。MS(ESI):238.9[M+H]⁺。

【0089】

実施例２、（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノールの合成

反応フラスコに硝酸銀飽和アセトニトリル５０ｍＬを加えて、撹拌した。１,３,５－トリヒドロキシベンゼン（３．３３ｇ、２６．４１ｍｍｏｌ）とゲラニオール（Ｇｅｒａｎｉｏｌ、４．０８ｇ、２６．４５ｍｍｏｌ）を加えた。窒素ガスの保護下で、氷水浴降温して、三フッ化ホウ素のエチルエーテル溶液（１．２３ｇ、８．８５ｍｍｏｌ）を滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌した。反応液を氷水混合物５０ｍＬに注入し、エチルアセテート（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機相を併せて、５％重炭酸ナトリウム水溶液と水（２０ｍＬ×３）で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。吸引ろ過し、ろ液を乾固まで濃縮し、得た油状物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２００～３００メッシュ、石油エーテル：エチルアセテート＝８：１→４：１→２：１）にかけて、油状物として（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノール０．６ｇを得た。MS(ESI):263.2[M+H]⁺。

【0090】

実施例３、カンフラビンＡ及び／又はカンフラビンＣの合成

反応フラスコに（Ｅ）－２－（３,７－ジメチルオクタ－２,６－ジエン－１－イル）ベンゼン－１,３,５－トリフェノール（３．８ｇ、１５,９５ｍｍｏｌ）と４'－ヒドロキシ－３'－メトキシベンゾイルエチルアセテート（２．８ｇ、１０．６７ｍｍｏｌ）を加えて、撹拌した。窒素ガスの保護下で、２００℃に加熱し、この温度で３ｈ保温した。室温まで降温し、得た生成物を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル２００～３００メッシュ、石油エーテル：エチルアセテート＝１０：１→２：１）に複数回かけてから、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー（逆相シリカゲル２００～３００メッシュ、水：メタノール＝５０：５０→１０：９０）に複数回かけて、黄色の固体としてカンフラビンＡ（Ｃａｎｎｆｌａｖｉｎ Ａ、０．３２２７ｇ）、及び黄色の固体としてカンフラビンＣ（Ｃａｎｎｆｌａｖｉｎ Ｃ、０．２０４８ｇ）を得た。
カンフラビンＡ(Cannflavin A):MS(ESI):437.0[M+H]⁺, ¹H-NMR (Acetone-d₆, 400 MHz), δ:1.56 (3H, s), 1.61 (3H, s), 1.81 (3H, s), 1.96 (2H, m), 2.04 (2H, m), 3.37 (2H, d), 4.00 (3H, s ), 5.06 (1H, t), 5.29 (1H, t), 6.62 (1H, s), 6.70 (1H, s), 7.00 (1H, d ), 7.58 (1H, dd ), 7.60 (1H, d ), 8.49 (1H, s), 9.56 (1H, s), 13.05. (1H, s).
カンフラビンＣ(Cannflavin C):MS(ESI):437.0[M+H]⁺, ¹H-NMR (Acetone-d₆, 400 MHz), δ:1.50 (3H, s), 1.52 (3H, s), 1.84 (3H, s), 1.97 (2H, m), 2.03 (2H, m), 359(2H, d), 4.01 (3H, s ), 5.04 (1H, t), 5.36 (1H, t), 6.35 (1H, s), 6.72 (1H, s), 7.03 (1H, d ), 7.63 (1H, dd ), 7.64(1H, d ), 8.54 (1H, s), 9.63 (1H, s), 12.98. (1H, s).

【0091】

以上は本願の好ましい実施例に過ぎず、本願を制限するものではなく、当業者にとっては、本願にさまざまな変更や変化を加えることができる。本願の趣旨及び原則を逸脱することなく行われるいかなる修正、同等置換や改良なども本願の特許範囲に含まれるものとする。