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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-09-12
(45)【発行日】2024-09-24
(54)【発明の名称】新規ＰＬＫ１分解誘導化合物
(51)【国際特許分類】
C07D 487/04 20060101AFI20240913BHJP
A61K 31/551 20060101ALI20240913BHJP
C07D 487/10 20060101ALI20240913BHJP
C07D 487/14 20060101ALI20240913BHJP
C07D 519/00 20060101ALI20240913BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240913BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240913BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240913BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20240913BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20240913BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20240913BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20240913BHJP
A61P 25/08 20060101ALI20240913BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20240913BHJP
A61P 21/02 20060101ALI20240913BHJP
【ＦＩ】
C07D487/04 151
A61K31/551
C07D487/10
C07D487/14 CSP
C07D519/00 311
A61P43/00 111
A61P35/00
A61P25/00
A61P35/02
A61P25/28
A61P25/16
A61P43/00 105
A61P25/14
A61P25/08
A61P9/10
A61P21/02
【請求項の数】
13
(21)【出願番号】P 2023514149
(86)(22)【出願日】2022-08-10
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2023-09-26
(86)【国際出願番号】 KR2022011961
(87)【国際公開番号】W WO2023018236
(87)【国際公開日】2023-02-16
【審査請求日】2023-02-28
(31)【優先権主張番号】10-2021-0105358
(32)【優先日】2021-08-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0106488
(32)【優先日】2021-08-12
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0117389
(32)【優先日】2021-09-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2021-0126757
(32)【優先日】2021-09-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0008456
(32)【優先日】2022-01-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0020996
(32)【優先日】2022-02-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0054880
(32)【優先日】2022-05-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(31)【優先権主張番号】10-2022-0075838
(32)【優先日】2022-06-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
(73)【特許権者】
【識別番号】522000784
【氏名又は名称】オップテラ インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110001508
【氏名又は名称】弁理士法人 津国
(72)【発明者】
【氏名】リュ，スーヒー
(72)【発明者】
【氏名】ミン，インスク
(72)【発明者】
【氏名】リ，ハンキョ
(72)【発明者】
【氏名】キム，ソンフン
(72)【発明者】
【氏名】リュ，ヒェグク
(72)【発明者】
【氏名】カン，クムヤン
(72)【発明者】
【氏名】キム，サンヨン
(72)【発明者】
【氏名】チュン，ソヒョン
(72)【発明者】
【氏名】リ，ジョンキョ
(72)【発明者】
【氏名】リ，ギッブム
【審査官】伊佐地 公美
(56)【参考文献】
【文献】中国特許出願公開第１０９８７９８７７（ＣＮ，Ａ）
【文献】中国特許出願公開第１０６５４３１８５（ＣＮ，Ａ）
【文献】特表２０１０－５２１５１４（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００９－５４２６１３（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０２１／０５３４９５（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０２１／０６１８９４（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｐ
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
以下の式Ｉで表される化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩：【化1】
であって、
前記式Ｉにおいて、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
【化2】
ＰＴＭは、以下の式２で表される部分であり；
【化3】
Ｌｉｎｋｅｒは、ＵＬＭとＰＴＭを化学的に結合する基であり；
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、ＣＨ２、ＣＨ、またはＮであり；
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニルまたは５～６員ヘテロアリールであり｛ここで、前記フェニルまたは５～６員ヘテロアリール環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｙは、ＣＲ７またはＮであり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり、またはＲ１と結合してＮ原子と共に５～６員環を形成するものであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、もしくは－ハロであり、またはＲ３およびＲ４は、互いに結合して、３～６員環を形成するものであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロであり；
Ｌｉｎｋｅｒは、－Ｌ Ｕ －Ｌ １ －Ｌ ２ －Ｌ ３ －Ｌ Ｐ －であり；
ここでＬ Ｕ は、－（ＣＨ ２ ）ｘ－、－（ＣＨ ２ ）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ ２ ）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、または何でもない（ｎｕｌｌ）であり｛ここで、Ｌ Ｕ は、ＵＬＭに結合され［このとき、前記Ｌ Ｕ が何でもない（ｎｕｌｌ）の場合、Ｌ １ がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ １ は、ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）であり
｛ここで、前記Ｌ １ が何でもない（ｎｕｌｌ）の場合、Ｌ Ｕ とＬ ２ が直接結合され、
前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、
前記ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ １－４ アルキル、－Ｃ １－４ ハロアルキル、－Ｃ １－４ アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ ２ は、－（ＣＨ ２ ）ｙ １ －、－（ＣＤ ２ ）ｙ １ －、－（ＣＨ ２ ）ｙ ２ －Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ ２ ）ｙ ３ －、－（ＣＨ ２ ）ｙ ２ －ＮＨ－（ＣＨ ２ ）ｙ ３ －または－（ＣＨ ２ ）ｙ ２ －Ｎ（Ｃ １－４ アルキル）－（ＣＨ ２ ）ｙ ３ －であり｛ここで、前記ｙ １ ～ｙ ３ は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ ３ は、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり
｛ここで、前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、
前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ １－４ アルキル、－Ｃ １－４ ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
Ｌ Ｐ は、－（ＣＨ ２ ）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ ２ ）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である
｛ここで、前記Ｌ ｐ の－Ｃ（＝Ｏ）－が、ＰＴＭと結合され、および、ｐは、０、１、または２である｝；
化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項2】
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；【化4】
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、ＣＨ２、ＣＨ、またはＮであり；
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリル環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項3】
ＵＬＭは、【化5】
であり;そして
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項4】
ＵＬＭは、【化6】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである、請求項３に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項5】
ＰＴＭは、【化7】
Ｙは、ＣＨ、ＣＦ、またはＮであり；そして
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項6】
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、または何でもない（ｎｕｌｌ）であり｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと結合され［このとき、前記ＬＵが何でもない（ｎｕｌｌ）の場合、Ｌ１がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０または１である｝；Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）であり｛ここで、Ｌ１が何でもない（ｎｕｌｌ）の場合、ＬＵとＬ２が直接結合され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子は、ＬＵまたはＵＬＭに直接結合され、および、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキルであり｛ここで、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記Ｌｐの－Ｃ（＝Ｏ）－がＰＴＭと結合され、および、ｐは０または１である｝、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【請求項7】
前記式Ｉで表される化合物が、以下の化合物からなる群から選択されるものである、請求項１に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩：【表1】
【表2】
【表3】
【表4】
【表5】
【表6】
【表7】
【表8】
【表9】
【表10】
。
【請求項8】
請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体、またはそれらの薬学的に許容される塩を含む医薬組成物。
【請求項9】
請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩を含むＰＬＫ１関連疾患の予防または治療用医薬組成物。
【請求項10】
前記ＰＬＫ１関連疾患は、癌、良性腫瘍および神経疾患からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記癌または良性腫瘍は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、皮膚癌、皮膚または眼内黒色腫、直腸癌、肛門周囲腺癌、食道癌、小腸癌、内分泌腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、慢性または急性白血病、リンパ球リンパ腫、肝細胞癌、胃腸癌、胃癌、膵臓癌、膠芽腫、頸部癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝腫瘍、乳癌、結腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、頭頸部癌、脳癌、骨肉腫、バレット食道、結腸腺腫およびポリープ、乳腺繊維腺腫および嚢胞、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、モノクローナルリンパ球増加症、固形腫瘍、血液癌、骨癌、大細胞型リンパ腫、副腎皮質腫瘍、Ｔ細胞性リンパ腫／白血病、神経内分泌癌、胆管癌、神経芽腫、膠芽腫、並びに神経膠腫からなる群から選択される１種以上である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記神経疾患は、中枢神経系疾患、退行性神経疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、老人性認知症、てんかん、ルー・ゲーリック、脳卒中、および脳または脊髄損傷による神経損傷と軸索変性関連疾患の中から選択された１種以上である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項13】
ＰＬＫ１関連疾患の治療または予防に使用するための薬剤の製造に使用するための、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物、その製造方法、並びにその用途に関する。本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を介して異常な細胞などに特異的に作用することができ、様々な疾患の治療に有用に使用することができる。
【背景技術】
【0002】
Ｐｏｌｏ－ｌｉｋｅ ｋｉｎａｓｅ １（ＰＬＫ１）は、セリン／スレオニンキナーゼであって、細胞成長および分裂中にＧ２／Ｍ期への移行に関与するとして知られている。ＰＬＫ１は、Ｓ ｐｈａｓｅからＧ２／Ｍ期にかけてパルス状で発現し、活性化し、有糸分裂が終了すると急速に分解する。
【0003】
ＰＬＫ１は、大腸癌、肺癌、膀胱癌、黒色腫などの様々な癌腫で過剰発現する様相を呈しており、ＰＬＫ１が過剰発現している癌細胞は、様々な種類の抗癌剤に対して抵抗性を示す傾向がある。このように、数々の癌腫において、ＰＬＫ１依存性が明らかになったので、ボラセルチブ（ｖｏｌａｓｅｒｔｉｂ；ＢＩ６７２７とも呼ばれている）などのＰＬＫ１阻害剤化合物を開発する試みがなされてきた。
【0004】
しかし、従来のＰＬＫ１阻害剤は、臨床的に安全性が確保された濃度でＰＬＫ１活性を十分に阻害することができず、癌細胞の細胞周期が一時的に遅延されたとしても、結局のところ一部の癌細胞において細胞周期が再開され、十分な臨床的効果を得られなかった問題がある（非特許文献１など）。実際、ベーリンガーインゲルハイム、ＧＳＫ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）などの多数の製薬会社が低分子化合物ベースのＰＬＫ１阻害剤の開発を試みたが、ほとんどは臨床試験の工程で失敗したり中断したりして、今日至るまで 商業的に利用可能なＰＬＫ１阻害剤は皆無の状態である。このことは、癌細胞のＰＬＫ１活性を抑制することによって抗癌効果を引き出すことを目的とした新薬の開発において、低分子化合物阻害剤のようにＰＬＫ１の活性部位に結合して酵素活性を抑制する方法の薬理学的メカニズムが、十分に効果的ではないことを示している。
【0005】
近来、体内で標的タンパク質のタンパク質分解（ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ）を誘導することができる低分子化合物ベースのプラットフォーム技術として、ＰＲＯＴＡＣ（Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｈｉｍｅｒａ）が提示されている。ＰＲＯＴＡＣとは、疾患関連の標的タンパク質に結合されるリガンド分子とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって結合されている二官能性化合物である。理論的には、ＰＲＯＴＡＣ化合物は、疾患関連の標的タンパク質をＥ３ユビキチンリガーゼの近くに位置させることで、標的タンパク質の分解を誘導することができる。このように従来の阻害剤とは異なる新たなメカニズムに基づいて、多くのＰＲＯＴＡＣ化合物が癌、炎症性疾患などの治療剤として開発されており、様々な拡張性をもって研究されている（例えば、ＡＤＣ（抗体－薬物コンジュゲート）のペイロード）。しかし、全ての範囲の結合部分またはリンカーにおいてＰＲＯＴＡＣが活性を示すわけではなく、実際にＰＲＯＴＡＣが所望のレベルの効能を示すためには、各結合部分とリンカーが適切に結合された構造を有する必要があることが数々の研究を通じて知られている（特許文献１）。特に、ＣＲＢＮ（セレブロン）Ｅ３リガーゼを標的とする部分の場合、その結合部分の種類またはそれに結合される化合物の構造に応じてＣＲＢＮのネオ基質（ｎｅｏ－ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）（ＧＳＰＴ１、ＩＫＺＦ１／３など）を分解するか、それに伴うオフターゲット毒性を示す恐れがある。したがって、ＰＲＯＴＡＣ薬物を開発する時に予期せぬ毒性を示さないように、適切な結合部分を選定し、全化合物の構造を最適化することが重要である。
【0006】
ＰＬＫ１を標的タンパク質とするＰＲＯＴＡＣ化合物の場合、特許文献２において、ボラセルチブ誘導体化合物とＥ３ユビキチンリガーゼＣＲＢＮ結合部分が化学リンカーによって結合されている二官能性化合物が一部開示されている。しかし、前記先行文献には、いくつかの制限された形態のＰＲＯＴＡＣ化合物の合成例が記載されているが、一般的に標的タンパク質部分、Ｅ３ユビキチンリガーゼ結合部分などの選択によってＰＲＯＴＡＣの標的分解活性および選択性は、著しく変化し得る（非特許文献２など）。
【0007】
また、前記文献に記載されたＰＲＯＴＡＣ化合物は、ＰＬＫ１およびＢＲＤ４を同時に分解することに発明の特徴がある化合物であって、ＰＬＫ１以外の他のＰＬＫファミリータンパク質およびＢＲＤ４などの様々なタンパク質分解も誘導するため、医薬品の開発時、オフターゲット毒性による副作用を引き起こす問題がある。特にＢＲＤ４活性を強く抑制すると、薬理学的効果とともに血液毒性や胃腸毒性などのオンターゲット毒性（ｏｎ ｔａｒｇｅｔ ｔｏｘｉｃｉｔｙ）が必然的に伴うということが既に知られていることを鑑みると、前記文献に記載されたＰＲＯＴＡＣ化合物がＢＲＤ４を効果的に分解すればするほど、臨床的副作用が大きくなると予想される（非特許文献３など）。
【0008】
さらに、前記文献の発明者によって公開された文献（非特許文献４）によれば、前記ＰＬＫ１とＢＲＤ４を同時に分解するＰＲＯＴＡＣ化合物は、細胞レベルでのＢＲＤ４分解能がＰＬＫ１分解能よりもはるかに強く、細胞周期がほぼＧ１ Ｐｈａｓｅに止まるなど、従来のＰＬＫ１阻害剤が薬理学的効果を発揮する方法とは無関係に、実際にはＢＲＤ４阻害剤としてのみ作用することが確認することができる。
【0009】
したがって、副作用（例えば、オフターゲット毒性）が存在しないか、またはそれを最小限に抑える効果的なＰＬＫ１分解誘導化合物に対する未充足ニーズがある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0010】
【文献】米国特許出願公開第２０２０／０３２５１３０号明細書
【文献】中国特許出願公開第１０６５４３１８５号明細書
【非特許文献】
【0011】
【文献】Ｇｈｅｇｈｉａｎｉ ｅｔ ａｌ．，ＣＥＬＬ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１７
【文献】Ｂｕｒｓｌｅｍ ａｎｄ Ｃｒｅｗｓ，２０１７
【文献】Ｂｏｌｄｅｎ ｅｔ ａｌ．，ＣＥＬＬ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１４
【文献】Ｍｕ ｅｔ ａｌ．，ＢＢＲＣ，２０１９
【文献】Ｍｕ ｅｔ ａｌ．，ＢＢＲＣ，２０２０，５２１（４）：８３３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0012】
本発明の目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の製造方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の用途を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の製造方法を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、新規ＰＬＫ１分解誘導化合物の用途を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0013】
前記目的を達成するために、本発明者等は、Ｅ３ユビキチンリガーゼ結合部分、標的結合部分、リンカーの適切な構造的組み合わせおよび最適化によってＰＬＫ１が過剰発現し
ている異常細胞に特異的に作用し、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導し、副作用を最小限に抑える新規ＰＲＯＴＡＣ化合物を発掘することによって本発明を完成した。
ている異常細胞に特異的に作用し、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導し、副作用を最小限に抑える新規ＰＲＯＴＡＣ化合物を発掘することによって本発明を完成した。
【0014】
ＰＬＫ１選択的分解誘導化合物
本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導する新規化合物を提供する。具体的には、本発明は、ＰＬＫ１結合部分とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって結合された二官能性化合物を提供する。
本発明は、ＰＬＫ１の効果的な分解を誘導する新規化合物を提供する。具体的には、本発明は、ＰＬＫ１結合部分とＥ３ユビキチンリガーゼ結合部分が化学リンカーによって結合された二官能性化合物を提供する。
【0015】
本発明の一実施形態は、以下の式Ｉで表される化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩：
【0016】
【化1】
【0017】
であって、
前記式Ｉにおいて、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
前記式Ｉにおいて、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
【0018】
【化2】
【0019】
ＰＴＭは、以下の式２で表される部分であり；
【0020】
【化3】
【0021】
Ｌｉｎｋｅｒは、ＵＬＭとＰＴＭを化学的に結合する基であり；
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、ＣＨ２、ＣＨ、またはＮであり；
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニルまたは５～６員ヘテロアリールであり｛ここで、前記フェニルまたは５～６員ヘテロアリール環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｙは、ＣＲ７またはＮであり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり、またはＲ１と結合してＮ原子と共に５～６員環を形成するものであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、もしくは－ハロであり、またはＲ３およびＲ４は、互いに結合して、３～６員環を形成するものであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである、
化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、ＣＨ２、ＣＨ、またはＮであり；
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニルまたは５～６員ヘテロアリールであり｛ここで、前記フェニルまたは５～６員ヘテロアリール環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｙは、ＣＲ７またはＮであり；
Ｒ１は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ２は、－Ｈまたは－Ｃ１－４アルキルであり、またはＲ１と結合してＮ原子と共に５～６員環を形成するものであり；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、－Ｈ、－Ｃ１－４アルキル、もしくは－ハロであり、またはＲ３およびＲ４は、互いに結合して、３～６員環を形成するものであり；
Ｒ５は、－Ｃ１－４アルキルであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、－Ｃ１－４アミノアルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロであり；
Ｒ７は、－Ｈまたは－ハロである、
化合物、その立体異性体またはそれらの薬学的に許容される塩。
【0022】
本発明の一実施形態において、
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
ＵＬＭは、以下の式１で表される部分であり；
【0023】
【化4】
【0024】
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、ＣＨ２、ＣＨ、またはＮであり；
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリル環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
環Ｕは、前記Ｘ１またはＸ２に結合されるフェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリルであり｛ここで、前記フェニル、ピリジニル、ピリミジニル、またはピラゾリル環の１つ以上のＨは、ＲＵで置換されてもよい｝；
ＲＵは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
【0025】
本発明の一実施形態において、
ＵＬＭは、
ＵＬＭは、
【0026】
【化5】
【0027】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
【0028】
本発明の一実施形態において、
ＵＬＭは、
ＵＬＭは、
【0029】
【化6】
【0030】
ＲＵ１およびＲＵ２は、それぞれ独立して、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
【0031】
一実施形態において、
ＰＴＭは、
ＰＴＭは、
【0032】
【化7】
【0033】
Ｙは、ＣＨ、ＣＦ、またはＮであり；
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
Ｒ６は、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、または－ハロである。
【0034】
本発明の一実施形態において、
Ｌｉｎｋｅｒは、－ＬＵ－Ｌ１－Ｌ２－Ｌ３－ＬＰ－であり；
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（
＝Ｏ）－、フェニル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭに結合され［このとき、前記ＬＵが、何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ１は、ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接結合され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＤ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ３は、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接結合され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記Ｌｐの－Ｃ（＝Ｏ）－がＰＴＭと結合され、および、ｐは、０、１、または２である｝。
Ｌｉｎｋｅｒは、－ＬＵ－Ｌ１－Ｌ２－Ｌ３－ＬＰ－であり；
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－ＮＨ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（
＝Ｏ）－、フェニル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭに結合され［このとき、前記ＬＵが、何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０、１、２、３、または４である｝；
Ｌ１は、ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接結合され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、－Ｃ１－４アルコキシ、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＤ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、または６である｝；
Ｌ３は、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接結合され、前記ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－Ｃ１－４ハロアルキル、または－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記Ｌｐの－Ｃ（＝Ｏ）－がＰＴＭと結合され、および、ｐは、０、１、または２である｝。
【0035】
本発明の一実施形態において、
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、または、何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと結合され［このとき、前記ＬＵが何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０または１である｝；
Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接結合され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子は、ＬＵまたはＵＬＭに直接結合され、および、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキル、４～１２員ヘテロシクロアルキル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接結合され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記Ｌｐの－Ｃ（＝Ｏ）－がＰＴＭと結合され、ｐは、０または１である｝。
ＬＵは、－（ＣＨ２）ｘ－、－（ＣＨ２）ｘ－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、フェニル、または、何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、ＬＵは、ＵＬＭと結合され［このとき、前記ＬＵが何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ１がＵＬＭに直接結合される］、および、前記ｘは、０または１である｝；
Ｌ１は、４～１２員ヘテロシクロアルキルまたは何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ１が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、ＬＵとＬ２が直接結合され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、前記Ｎ原子は、ＬＵまたはＵＬＭに直接結合され、および、前記４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－Ｃ１－４アルキル、－ＯＨ、－ハロ、または＝Ｏで置換されてもよい｝；
Ｌ２は、－（ＣＨ２）ｙ１－、－（ＣＨ２）ｙ２－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２）ｙ３－、－（ＣＨ２）ｙ２－ＮＨ－（ＣＨ２）ｙ３－、または－（ＣＨ２）ｙ２－Ｎ（Ｃ１－４アルキル）－（ＣＨ２）ｙ３－であり｛ここで、前記ｙ１～ｙ３は、それぞれ独立して、０、１、２、または３である｝；
Ｌ３は、４～６員シクロアルキル、４～１２員ヘテロシクロアルキル、または何でもない（ｎｕｌｌ）｛ここで、前記Ｌ３が何でもないの場合（ｎｕｌｌ）、Ｌ２とＬｐが直接結合され、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、単環式、架橋（ｂｒｉｄｇｅｄ）二重環式、またはスパイロ（ｓｐｉｒｏ）環式であり、前記４～１２員ヘテロシクロアルキルは、環内に１つ以上のＮ原子を含み、および、前記４～６員シクロアルキルまたは４～１２員ヘテロシクロアルキル環の１つ以上のＨは、－ハロで置換されてもよい｝；
ＬＰは、－（ＣＨ２）ｐ－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－である｛ここで、前記Ｌｐの－Ｃ（＝Ｏ）－がＰＴＭと結合され、ｐは、０または１である｝。
【0036】
本発明の具体的な実施形態によれば、式Ｉで表される化合物は、以下の化合物１～５９からなる群から選択される化合物である。
【0037】
本発明において薬学的に許容される塩とは、患者に対して比較的毒性がなく、無害な有効作用を有する濃度であり、この塩に起因する副作用が、式Ｉで表される化合物の有益な効力を低下させない任意の有機酸または無機酸付加塩を意味する。例えば、薬学的に許容される塩は、無機酸としては、塩酸、リン酸、硫酸、または硝酸などであってもよく、有機酸としては、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、シュウ酸、安息香酸、酒石酸、フマル酸、マンデル酸、プロピオン酸、クエン酸、乳酸、グリコール酸、グルコン酸、ガラクツロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、グルクロン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、カーボン酸、バニリン酸またはヨウ化水素酸であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0038】
ＰＬＫ１の選択的分解誘導化合物の使用
本発明の一実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むＰＬＫ１分解誘導用組成物である。式Ｉは、前記で定義した通りである。
本発明の一実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むＰＬＫ１分解誘導用組成物である。式Ｉは、前記で定義した通りである。
【0039】
本発明の実験例において、本発明の化合物は、ＰＬＫ１タンパク質分解を効果的に誘導することが確認された。
【0040】
本発明のＰＬＫ１分解誘導ＰＲＯＴＡＣ化合物は、作用機序の観点から標的タンパク質であるＰＬＫ１を根本的に分解することができるので、ＰＬＫ１の単純な活性を阻害する従来のＰＬＫ１低分子阻害剤と比べても優れたＰＬＫ１阻害効果を達成する。
【0041】
したがって、本発明の式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含む組成物は、ＰＬＫ１の選択的分解に有用に用いられることができる。
【0042】
本発明の一実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩を含むＰＬＫ１関連疾患の予防または治療用医薬組成物である。本発明のもう一つの実施形態は、このような組成物を投与し、ＰＬＫ１関連の疾患を予防または治療する方法である。式Ｉは、前記で定義した通りである。
【0043】
本発明におけるＰＬＫ１関連疾患とは、ＰＬＫ１の分解誘導または活性阻害から治療、軽減、遅延、阻害または予防することができる任意の疾患または病態を意味する。一実施形態において、ＰＬＫ１関連疾患は、癌（悪性腫瘍）、良性腫瘍、神経疾患、またはその他の過剰な細胞分裂により引き起こされる遺伝的または非遺伝的疾患であってもよい。
【0044】
前記癌は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効果を示すことができるすべての癌を含み、固形癌または血液癌であってもよい。例えば、前記癌は、扁平上皮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腹膜癌、皮膚癌、皮膚または眼内黒色腫、直腸癌、肛門周囲腺癌、食道癌、小腸癌、内分泌腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、慢性または急性白血病、リンパ球リンパ腫、肝細胞癌、胃腸癌、胃癌、膵臓癌、膠芽腫、頸部癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝腫瘍、乳癌、結腸癌、大腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、頭頸部癌、脳癌、骨肉腫、固形腫瘍、血液癌、骨癌、大細胞型リンパ腫、副腎皮質腫瘍、Ｔ細胞性リンパ腫／白血病、神経内分泌癌、神経内分泌腫瘍、胆管癌、神経芽腫、膠芽腫、神経膠腫などからなる群から選択される１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。前記癌は、原発性癌だけでなく、転移性癌も含む。
【0045】
前記良性腫瘍は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効果を奏することができるすべての良性腫瘍、いわゆる癌の前工程の良性腫瘍を含み、固形腫瘍または血液腫瘍であってもよい。例えば、前記腫瘍は、バレット食道、結腸腺腫およびポリープ、乳腺繊維腺腫および嚢胞、意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、モノクロー
ナルリンパ球増加症などからなる群から選択される１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。
ナルリンパ球増加症などからなる群から選択される１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0046】
前記神経疾患は、ＰＬＫ１の活性の阻害により予防または治療効果を奏することができる全ての神経疾患を含み、具体的には中枢神経系疾患、退行性神経疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン病、老人性認知症、てんかん、ルー・ゲーリック、脳卒中、および脳または脊髄損傷による神経損傷と軸索変性関連疾患の中から選択された１種以上であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【0047】
本発明の医薬組成物は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩に加えて、同一または類似の薬効を示す有効成分を１種以上をさらに含むことができる。
【0048】
本発明の一実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩をヒトを含む哺乳類に投与することによりＰＬＫ１タンパク質を分解する方法である。
【0049】
本発明のもう一つの実施形態は、式Ｉで表される化合物またはその薬学的に許容される塩をｉｎ ｖｉｔｒｏで試料に投与することにより、ＰＬＫ１タンパク質を分解する方法である。前記サンプルは、細胞、細胞培養物、ヒトを含む哺乳動物の体液または組織であってもよいが、これらに限定されるものではない。
【発明の効果】
【0050】
本発明の化合物は、ＰＬＫ１分解を誘導する効果を奏する。したがって、本発明の化合物は、ＰＬＫ１関連疾患の予防または治療に有効に用いられることができる。
【図面の簡単な説明】
【0051】
【発明を実施するための形態】
【0052】
特に断りがない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学用語は、本開示が属する技術分野における当業者によって一般的に理解される用語と同じ意味を有する。本明細書にて使用される用語は、特定の実施形態を説明するためのものであり、本開示を限定しようとする意図ではない。
【0053】
本発明は、次の表に示す化合物１～５９の合成方法を提供する。
【0054】
【表1】
【0055】
【表2】
【0056】
【表3】
【0057】
【表4】
【0058】
【表5】
【0059】
【表6】
【0060】
【表7】
【0061】
【表8】
【0062】
【表9】
【0063】
【表10】
【実施例】
【0064】
本発明の化合物を、以下の方法により精製し、構造を分析した。
【0065】
分析機器
ＬＣＭＳ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ－２０２０、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６１１０Ａ、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ１９５６Ａ
ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ ＩＩ ＬＣ、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６４１０Ｂ
ＮＭＲ：ＢＲＵＫＥＲ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ／４００ＭＨｚ
ＳＦＣ：ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＬＣ－３０ＡＤｓｆ，Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０
ＬＣＭＳ：Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ－２０２０、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６１１０Ａ、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ１９５６Ａ
ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ ＩＩ ＬＣ、Ａｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６４１０Ｂ
ＮＭＲ：ＢＲＵＫＥＲ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ／４００ＭＨｚ
ＳＦＣ：ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＬＣ－３０ＡＤｓｆ，Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０
【0066】
ＬＣＭＳ分析
ＬＣＭＳデータは、ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化；Ｅｌｅｃｔｒｏｎ ＳｐｒａｙＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ）装置を備えられたＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ－２０２０またはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６１１０ＡまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ１９５６Ａで記録した。水中の０．０３７５％ＴＦＡ（溶媒Ａ）およびアセトニトリル中の０．０１８７５％ＴＦＡ（溶媒Ｂ）または水中の０．０２５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ（溶媒Ａ）とアセトニトリル（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムとしては、Ｋｉｎｅｔｅｘ（登録商標） ＥＶＯ Ｃ１８（２．１×３０ｍｍ、５μｍ）またはＨＡＬＯ Ｃ１８（３．０×３０ｍｍ、２．７μｍ）を用いた。
ＬＣＭＳデータは、ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化；Ｅｌｅｃｔｒｏｎ ＳｐｒａｙＩｏｎｉｚａｔｉｏｎ）装置を備えられたＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣＭＳ－２０２０またはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６１１０ＡまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ１９５６Ａで記録した。水中の０．０３７５％ＴＦＡ（溶媒Ａ）およびアセトニトリル中の０．０１８７５％ＴＦＡ（溶媒Ｂ）または水中の０．０２５％ＮＨ３・Ｈ２Ｏ（溶媒Ａ）とアセトニトリル（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムとしては、Ｋｉｎｅｔｅｘ（登録商標） ＥＶＯ Ｃ１８（２．１×３０ｍｍ、５μｍ）またはＨＡＬＯ Ｃ１８（３．０×３０ｍｍ、２．７μｍ）を用いた。
【0067】
ＨＰＬＣ分析
ＨＰＬＣ分析では、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ ＩＩ ＬＣまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６４１０Ｂを用いた。水中の０．０３７５％ＴＦＡ（溶媒Ａ）とアセトニトリル中の０．０１８７５％ＴＦＡ（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムは、Ｚｏｂｒａｘ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８（４．６×１５０ｍｍ、３．５μｍ）またはＹＭＣ ＯＤＳ Ａ（４．６×１５０ｍｍ、３μｍ）を用いた。
ＨＰＬＣ分析では、Ａｇｉｌｅｎｔ １２６０ ＩＩ ＬＣまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２００／Ｇ６４１０Ｂを用いた。水中の０．０３７５％ＴＦＡ（溶媒Ａ）とアセトニトリル中の０．０１８７５％ＴＦＡ（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムは、Ｚｏｂｒａｘ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８（４．６×１５０ｍｍ、３．５μｍ）またはＹＭＣ ＯＤＳ Ａ（４．６×１５０ｍｍ、３μｍ）を用いた。
【0068】
ＮＭＲ分析
１ＨＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ ４００ＭＨｚ／５ｍｍ Ｐｒｏｂｅ（ＢＢＯ）で記録した。
１ＨＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ ＩＩＩ ４００ＭＨｚ／５ｍｍ Ｐｒｏｂｅ（ＢＢＯ）で記録した。
【0069】
ＳＦＣ分析
ＳＦＣ分析では、ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＬＣ－３０ＡＤｓｆまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２６０を用いた。ＣＯ２（溶媒Ａ）とＩＰＡ＋アセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）またはＣＯ２（溶媒Ａ）とメタノール＋アセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）またはアセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ａ）とエタノール中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムは、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＡＤ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＡＳ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＯＪ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＩＡ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＯＤ（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＩＣ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）または（Ｓ、Ｓ）Ｗｈｅｌｋ－Ｏ１（１００×４．６ｍｍ、３．５μｍ）を用いた。
ＳＦＣ分析では、ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＬＣ－３０ＡＤｓｆまたはＡｇｉｌｅｎｔ １２６０を用いた。ＣＯ２（溶媒Ａ）とＩＰＡ＋アセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）またはＣＯ２（溶媒Ａ）とメタノール＋アセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）またはアセトニトリル中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ａ）とエタノール中の０．０５％ＤＥＡ（溶媒Ｂ）を移動相として用いた。カラムは、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＡＤ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＡＳ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＯＪ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＩＡ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＯＤ（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）またはＣｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標） ＩＣ－３（５０×４．６ｍｍ、３μｍ）または（Ｓ、Ｓ）Ｗｈｅｌｋ－Ｏ１（１００×４．６ｍｍ、３．５μｍ）を用いた。
【0070】
実施例１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェノキシ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１）の合成
【0071】
【化8】
【0072】
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１．１ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．２９ｇ、３．３９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．６９ｇ、１３．０５ｍｍｏｌ、２．２７ｍＬ）を加え、２５℃で１５分間撹拌した後、３－（３－（４－（４－（アミノピペリジン－１－イル）－４－オキソブトキシ）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．３９ｇ、３．３９ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４７％）が確認された。さらなるワークアップおよび精製のために、反応混合物を他のバッチ（５０ｍｇスケール）と合わせた。反応混合物にＣＨ３ＣＯＯＨを加え、ｐＨ＜７に調整した。生成された混合物を逆相ＨＰＬＣ（０．１％ＦＡ条件、３３０ｇフラッシュカラム；Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０～４０μｍ；１２０Ａ；５～６０％、３０分；６０～１００％、２０分＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、１０分）で精製した後、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェノキシ）ブタノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（７３０．５ｍｇ、９２８．１４μｍｏｌ、３５．５６％収率、９８．７％純度）を黄白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７７．３。
【0073】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２－６．７３（ｍ、２Ｈ）、４．８８（ｔｄ，Ｊ＝６．８，１３．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．４０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．１０－３．８７（ｍ、９Ｈ）、３．８１（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１１．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．３０（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．１３（ｂｒ ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．７１－２．６０（ｍ、２Ｈ）、２．４９
－２．４２（ｍ、３Ｈ）、２．２７－２．１５（ｍ、１Ｈ）、２．０６－２．００（ｍ、１Ｈ）、１．９９－１．９１（ｍ、２Ｈ）、１．８４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１６．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．５１－１．３４（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
－２．４２（ｍ、３Ｈ）、２．２７－２．１５（ｍ、１Ｈ）、２．０６－２．００（ｍ、１Ｈ）、１．９９－１．９１（ｍ、２Ｈ）、１．８４（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１６．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．５１－１．３４（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0074】
実施例２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２）の合成
【0075】
【化9】
【0076】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（５ｇ、１３．５０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５．００ｇ、１２．８８ｍｍｏｌ）およびＫ３Ｐ
Ｏ４（８．６０ｇ、４０．５１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４９４．０８ｍｇ、６７５．２４μｍｏｌ）を窒素気体下２５℃で加えた。反応混合物を脱気し、窒素気体で３回パージした後、１００℃まで昇温し、１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝０～８％、１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．５ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ、８７．２５％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５２．４。
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（５ｇ、１３．５０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５．００ｇ、１２．８８ｍｍｏｌ）およびＫ３Ｐ
Ｏ４（８．６０ｇ、４０．５１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４９４．０８ｍｇ、６７５．２４μｍｏｌ）を窒素気体下２５℃で加えた。反応混合物を脱気し、窒素気体で３回パージした後、１００℃まで昇温し、１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝０～８％、１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．５ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ、８７．２５％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５２．４。
【0077】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
エタノール（６００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．５ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２ｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。生成された混合物を濾過した。濾過ケーキをジオキサン（４００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．８ｇ、１０．１８ｍｍｏｌ、８６．３６％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７３．９。
エタノール（６００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６．５ｇ、１１．７８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２ｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。生成された混合物を濾過した。濾過ケーキをジオキサン（４００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．８ｇ、１０．１８ｍｍｏｌ、８６．３６％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７３．９。
【0078】
工程３．３－（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ジオキサン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．８ｇ、１０．１８ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５０ｍＬ）溶液を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応完了が確認された。生成された混合物を濃縮し、３－（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３．５ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７４．３。
ジオキサン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．８ｇ、１０．１８ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５０ｍＬ）溶液を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応完了が確認された。生成された混合物を濃縮し、３－（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３．５ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７４．３。
【0079】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の３－（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３．５ｇ、１０．１１ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５．８８ｇ、２０．２２ｍｍｏｌ）の混合物にＤＩＰＥＡ（６．５３ｇ、５０．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（１５１．５２ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル／石油エーテル（６０ｍＬ、３：１）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．３ｇ、５．５０ｍｍｏｌ、５４．４５％収率、８８％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２８．４
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の３－（４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３．５ｇ、１０．１１ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－クロロプロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５．８８ｇ、２０．２２ｍｍｏｌ）の混合物にＤＩＰＥＡ（６．５３ｇ、５０．５４ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（１５１．５２ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル／石油エーテル（６０ｍＬ、３：１）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３．３ｇ、５．５０ｍｍｏｌ、５４．４５％収率、８８％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２８．４
【0080】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７
．０５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．０１－６．７９（ｍ、４Ｈ）、４．３２－４．１７（ｍ、１Ｈ）、３．８４－３．６９（ｍ、２Ｈ）、３．５３－３．４４（ｍ、２Ｈ）、３．１７－３．０２（ｍ、６Ｈ）、２．７０－２．５６（ｍ、７Ｈ）、２．２２－２．０６（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．７９－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）、１．２８－１．２０（ｍ、２Ｈ）。
．０５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．０１－６．７９（ｍ、４Ｈ）、４．３２－４．１７（ｍ、１Ｈ）、３．８４－３．６９（ｍ、２Ｈ）、３．５３－３．４４（ｍ、２Ｈ）、３．１７－３．０２（ｍ、６Ｈ）、２．７０－２．５６（ｍ、７Ｈ）、２．２２－２．０６（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．７９－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）、１．２８－１．２０（ｍ、２Ｈ）。
【0081】
工程５．３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２．３ｇ、４．３６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）溶液を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより残っている微量の出発物質および所望の質量のピークが確認された。生成された混合物を濃縮し、３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２．２ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２８．４
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２．３ｇ、４．３６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）溶液を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより残っている微量の出発物質および所望の質量のピークが確認された。生成された混合物を濃縮し、３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２．２ｇ、粗製、２ＨＣｌ塩）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２８．４
【0082】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３３６．８１ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１９．８０ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）の混合物にＨＡＴＵ（３９５．０８ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された混合物を塩水（２０ｍＬ）に注ぎ、エタノール（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠（６０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（４７．９ｍｇ、５６．９０μｍｏｌ、７．１２％収率、９８．７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３１．５
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３３６．８１ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１９．８０ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）の混合物にＨＡＴＵ（３９５．０８ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された混合物を塩水（２０ｍＬ）に注ぎ、エタノール（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠（６０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～６０％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（４７．９ｍｇ、５６．９０μｍｏｌ、７．１２％収率、９８．７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３１．５
【0083】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．８９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、４．８８（ｔｄ，Ｊ＝６．７，１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１２－３．９４（ｍ、４Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｄｄ，Ｊ＝４．９，１
１．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０５（ｍ、５Ｈ）、２．６９－２．６４（ｍ、１Ｈ）、２．５１－２．４７（ｍ、９Ｈ）、２．４７－２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０７（ｍ、１Ｈ）、２．０４－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．９１－１．７７（ｍ、２Ｈ）、１．５５－１．３３（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
１．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．０５（ｍ、５Ｈ）、２．６９－２．６４（ｍ、１Ｈ）、２．５１－２．４７（ｍ、９Ｈ）、２．４７－２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０７（ｍ、１Ｈ）、２．０４－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．９１－１．７７（ｍ、２Ｈ）、１．５５－１．３３（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0084】
実施例３．Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物３）の合成
【0085】
【化10】
【0086】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４００ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）、４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３２８．８６ｍｇ、７９９．２６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１９．８０ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）の混合物にＨＡＴＵ（３９５．０８ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。反応混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物を塩水（２０ｍＬ）に注いだ。生成された混合物をエタノール（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２４％～５７％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、Ｎ－（１－（３－（４－（４－（２，６－ジオキ
ソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（６４．５ｍｇ、７７．３１μｍｏｌ、９．６７％収率、９８．１％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．５
ソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（６４．５ｍｇ、７７．３１μｍｏｌ、９．６７％収率、９８．１％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．５
【0087】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．１２（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、４．８４（ｔｄ，Ｊ＝６．９，１３．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１２－３．９５（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１０．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．４６（ｓ、２Ｈ）、３．１６（ｓ、３Ｈ）、３．１５－３．０５（ｍ、５Ｈ）、２．６９－２．６０（ｍ、３Ｈ）、２．５９－２．５４（ｍ、７Ｈ）、２．４７－２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．１９－２．０７（ｍ、１Ｈ）、２．０２－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９１－１．７７（ｍ、２Ｈ）、１．５３－１．３４（ｍ、２Ｈ）、１．１７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）、０．９５－０．９０（ｍ、２Ｈ）、０．７１－０．６５（ｍ、２Ｈ）。
【0088】
実施例４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４）の合成
【0089】
【化11】
【0090】
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．１７ｇ、３．０８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．２３ｇ、９．
４９ｍｍｏｌ、１．６５ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１５分間撹拌した後、３－（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．３ｇ、２．８０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７１％）が確認された。生成された混合物にＣＨ３ＣＯＯＨを加え、ｐＨ＜７に調整し、逆相ＨＰＬＣ（０．１％ＦＡ条件、３３０ｇフラッシュカラム；Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０－４０μｍ；１２０Ａ；０～５０％３０分；５０～１００％２０分＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～５７％、１０分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（６５８．７ｍｇ、７８３．２２μｍｏｌ、３３．００％収率、９８．８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３１．３。
４９ｍｍｏｌ、１．６５ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１５分間撹拌した後、３－（３－（４－（３－（４－アミノピペリジン－１－イル）－３－オキソプロピル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．３ｇ、２．８０ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７１％）が確認された。生成された混合物にＣＨ３ＣＯＯＨを加え、ｐＨ＜７に調整し、逆相ＨＰＬＣ（０．１％ＦＡ条件、３３０ｇフラッシュカラム；Ｗｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０－４０μｍ；１２０Ａ；０～５０％３０分；５０～１００％２０分＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～５７％、１０分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（６５８．７ｍｇ、７８３．２２μｍｏｌ、３３．００％収率、９８．８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３１．３。
【0091】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５９－７．４３（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８－６．７３（ｍ、２Ｈ）、６．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．９７－４．７８（ｍ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１２－３．８８（ｍ、７Ｈ）、３．７５（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１１．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．２０－３．０６（ｍ、５Ｈ）、２．６８－２．５３（ｍ、１０Ｈ）、２．４４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．２６－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０７－１．９５（ｍ、１Ｈ）、１．９３－１．７６（ｍ、２Ｈ）、１．５５－１．３３（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0092】
実施例５．Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物５）の合成
【0093】
【化12】
【0094】
工程１．１－（アミノメチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（２）の合成
エタノール（２５０ｍＬ）およびＮＨ３・Ｈ２Ｏ（２５ｍＬ）中の１－シアノシクロプロパンカルボン酸エチル（２５ｇ、１７９．６６ｍｍｏｌ、２３．１５ｍＬ）溶液に窒素気体下Ｒａｎｅｙ－Ｎｉ（２３．０９ｇ、２６９．４９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で出発物質が完全に消費され、新規なスポットが１つ確認された。反応混合物をエタノール（６００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、１－（アミノメチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（１８．９ｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４４．１
エタノール（２５０ｍＬ）およびＮＨ３・Ｈ２Ｏ（２５ｍＬ）中の１－シアノシクロプロパンカルボン酸エチル（２５ｇ、１７９．６６ｍｍｏｌ、２３．１５ｍＬ）溶液に窒素気体下Ｒａｎｅｙ－Ｎｉ（２３．０９ｇ、２６９．４９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で出発物質が完全に消費され、新規なスポットが１つ確認された。反応混合物をエタノール（６００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、１－（アミノメチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（１８．９ｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４４．１
【0095】
工程２．１－（（イソプロピルアミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（３）の合成
ＤＣＭ（３００ｍＬ）中の１－（アミノメチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（１８．９ｇ、１３２．００ｍｍｏｌ）およびアセトン（２８．７０ｇ、４９４．１６ｍｍｏｌ、３６．３３ｍＬ）、酢酸（１３．０６ｇ、２１７．４８ｍｍ、１２．４４ｍＬ）溶液に２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６２．８３ｇ、２９６．４５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液にＨＣｌ（１２Ｎ）を加え、濃縮し、１－（（イソプロピルアミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．１ｇ、２７．５１ｍｍｏｌ、２０．８４％収率、ＨＣｌ塩）を黄色の油状
として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８６．１
ＤＣＭ（３００ｍＬ）中の１－（アミノメチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（１８．９ｇ、１３２．００ｍｍｏｌ）およびアセトン（２８．７０ｇ、４９４．１６ｍｍｏｌ、３６．３３ｍＬ）、酢酸（１３．０６ｇ、２１７．４８ｍｍ、１２．４４ｍＬ）溶液に２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６２．８３ｇ、２９６．４５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液にＨＣｌ（１２Ｎ）を加え、濃縮し、１－（（イソプロピルアミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．１ｇ、２７．５１ｍｍｏｌ、２０．８４％収率、ＨＣｌ塩）を黄色の油状
として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８６．１
【0096】
工程３．１－（（（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）（イソプロピル）アミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（４）の合成
ＭＴＢＥ（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３０ｍＬ）中に１－（（イソプロピルアミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．１ｇ、２７．５１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃での炭酸カリウム（１５．２１ｇ、１１０．０５ｍｍｏｌ）および２，４－ジクロロ－５－ニトロ－ピリミジン（６．４０ｇ、３３．０１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、１－（（（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）（イソプロピル）アミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．６ｇ、粗製）を黄色の油状として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４３．１
ＭＴＢＥ（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３０ｍＬ）中に１－（（イソプロピルアミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．１ｇ、２７．５１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃での炭酸カリウム（１５．２１ｇ、１１０．０５ｍｍｏｌ）および２，４－ジクロロ－５－ニトロ－ピリミジン（６．４０ｇ、３３．０１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１６０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、１－（（（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）（イソプロピル）アミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．６ｇ、粗製）を黄色の油状として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４３．１
【0097】
工程４．２’－クロロ－９’－イソプロピル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（５）の合成
酢酸（６０ｍＬ）中の１－（（（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）（イソプロピル）アミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．６ｇ、１９．２５ｍｍｏｌ）溶液中に２０℃でＦｅ（４．３０ｇ、７７．０２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を６０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９７％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、２’－クロロ－９’－イソプロピル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（５．２ｇ、粗製）を黄色の油状として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６７．１
酢酸（６０ｍＬ）中の１－（（（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）（イソプロピル）アミノ）メチル）シクロプロパン－１－カルボン酸エチル（６．６ｇ、１９．２５ｍｍｏｌ）溶液中に２０℃でＦｅ（４．３０ｇ、７７．０２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を６０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９７％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をＨ２Ｏ（１２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、２’－クロロ－９’－イソプロピル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（５．２ｇ、粗製）を黄色の油状として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６７．１
【0098】
工程５．２’－クロロ－９’－イソプロピル－５’－メチル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（６）の合成
ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の２’－クロロ－９’－イソプロピル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（５．２ｇ、１９．５０ｍｍｏｌ）溶液に２０℃で炭酸カリウム（８．０８ｇ、５８．４９ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（４．１５ｇ、２９．２４ｍｍｏｌ、１．８２ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１８０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１８０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２’－クロロ－９’－イソプロピル－５’－メチル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（３．８ｇ、１２．７２ｍｍｏｌ、６５．２６％収率、９４％純度）をオレンジ色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８１．４
ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の２’－クロロ－９’－イソプロピル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（５．２ｇ、１９．５０ｍｍｏｌ）溶液に２０℃で炭酸カリウム（８．０８ｇ、５８．４９ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（４．１５ｇ、２９．２４ｍｍｏｌ、１．８２ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１８０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１８０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２’－クロロ－９’－イソプロピル－５’－メチル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（３．８ｇ、１２．７２ｍｍｏｌ、６５．２６％収率、９４％純度）をオレンジ色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２８１．４
【0099】
工程６．４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７）の合成
エタノール（１８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の２’－クロロ－９’－イソプロピル－５’－メチル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（１．８ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）および４－アミノ－３－メトキシ－安息香酸（１．２９ｇ、７．６９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ（１２Ｍ、１．１８ｍＬ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、１２％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（３５％）が確認された。反応混合物を２５℃でＤＭＦ／エタノール／酢酸エチル（２ｍＬ／１０ｍＬ／１０ｍＬ）混合溶媒で３０分間粉砕した後、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥し、４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１．７ｇ、４．１３ｍｍｏｌ、６４．４４％収率）を黄白の色固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２．３
エタノール（１８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の２’－クロロ－９’－イソプロピル－５’－メチル－８’，９’－ジヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－６’（５’Ｈ）－オン（１．８ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）および４－アミノ－３－メトキシ－安息香酸（１．２９ｇ、７．６９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ（１２Ｍ、１．１８ｍＬ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、１２％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（３５％）が確認された。反応混合物を２５℃でＤＭＦ／エタノール／酢酸エチル（２ｍＬ／１０ｍＬ／１０ｍＬ）混合溶媒で３０分間粉砕した後、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥し、４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１．７ｇ、４．１３ｍｍｏｌ、６４．４４％収率）を黄白の色固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１２．３
【0100】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝９．６８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．１９－８．０９（ｍ、２Ｈ）、７．６４（ｄｄ，Ｊ＝１．３，８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．５７（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．７５（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．６４（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、３．１５（ｓ、３Ｈ）、１．１８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）、１．０７－１．０１（ｍ、２Ｈ）、０．８０（ｂｒ ｓ、２Ｈ）
【0101】
工程７．Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物５）の合成
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７００ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７１１．５７ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４３９．７６ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５９２．６７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌した後、ＤＭＦ（６ｍＬ）中の３－［３－［４－［３－（４－アミノ－１－ピペリジル）－３－オキソ－プロピル］ピペラジン－１－イル］フェニル］ピペリジン－２，６－ジオン（１．０３ｇ、２．２１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４３９．７６ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５９２．６７μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃でさらに１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６８％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×５）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物Ａを得た。水相を真空濃縮し、化合物Ｂを得た。化合物Ａを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、化合物Ｅ（６２０ｍｇ）および生成物Ｆ（４２０ｍｇ）を得た。化合物Ｂを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）に再精製し、凍結乾燥し、化合物Ｄ（１５８ｍｇ）を得た。化合物Ｄ（１５８ｍｇ）と化合物Ｅ（６２０ｍｇ）を合わせて、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロ
プロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（３６２．９ｍｇ、４４１．５９μｍｏｌ、２５．９６％収率、９９．９％純度）を白色の固形物として得た。化合物Ｆ（４２０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（１３６ｍｇ、１６２．３４μｍｏｌ、９．５４％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．２
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７００ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７１１．５７ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４３９．７６ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５９２．６７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌した後、ＤＭＦ（６ｍＬ）中の３－［３－［４－［３－（４－アミノ－１－ピペリジル）－３－オキソ－プロピル］ピペラジン－１－イル］フェニル］ピペリジン－２，６－ジオン（１．０３ｇ、２．２１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４３９．７６ｍｇ、３．４０ｍｍｏｌ、５９２．６７μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃でさらに１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６８％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×５）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して化合物Ａを得た。水相を真空濃縮し、化合物Ｂを得た。化合物Ａを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、化合物Ｅ（６２０ｍｇ）および生成物Ｆ（４２０ｍｇ）を得た。化合物Ｂを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）に再精製し、凍結乾燥し、化合物Ｄ（１５８ｍｇ）を得た。化合物Ｄ（１５８ｍｇ）と化合物Ｅ（６２０ｍｇ）を合わせて、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロ
プロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（３６２．９ｍｇ、４４１．５９μｍｏｌ、２５．９６％収率、９９．９％純度）を白色の固形物として得た。化合物Ｆ（４２０ｍｇ）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、Ｎ－（１－（３－（４－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）プロパノイル）ピペリジン－４－イル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（１３６ｍｇ、１６２．３４μｍｏｌ、９．５４％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．２
【0102】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．１１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．１５（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５－６．７６（ｍ、２Ｈ）、６．６１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．８４（ｓｐｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１１－３．９０（ｍ、５Ｈ）、３．７５（ｄｄ，Ｊ＝４．９，１１．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．４６（ｓ、２Ｈ）、３．２０－３．０７（ｍ、８Ｈ）、２．７３－２．５３（ｍ、１０Ｈ）、２．４８－２．４２（ｍ、１Ｈ）、２．２５－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０６－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９３－１．７７（ｍ、２Ｈ）、１．５６－１．３１（ｍ、２Ｈ）、１．１７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）、０．９５－０．８９（ｍ、２Ｈ）、０．７２－０．６５（ｍ、２Ｈ）。
【0103】
実施例６：Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物６）の合成
【0104】
【化13】
【0105】
工程１．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（３－ブロモフェニル）ピリジン（３）の合成
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（７．５ｇ、１７．９７ｍｍｏｌ）および１－ブロモ－３－ヨード－ベンゼン（４．０７ｇ、１４．３８ｍｍｏｌ、１．８３ｍＬ）溶液に窒素気体下２０℃でＰｄ（ＰＰｈ３）４（１．０４ｇ、８９８．６３μｍｏｌ）および炭酸カリウム（７．４５ｇ、５３．９２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３０％）が確認された。反応混合物をワークアップのために他のバッチ（０．５ｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物をＨ２Ｏ（１４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１４０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（３－ブロモフェニル）ピリジン（３．９ｇ、８．２９ｍｍｏｌ、４７．１２％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（７．５ｇ、１７．９７ｍｍｏｌ）および１－ブロモ－３－ヨード－ベンゼン（４．０７ｇ、１４．３８ｍｍｏｌ、１．８３ｍＬ）溶液に窒素気体下２０℃でＰｄ（ＰＰｈ３）４（１．０４ｇ、８９８．６３μｍｏｌ）および炭酸カリウム（７．４５ｇ、５３．９２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３０％）が確認された。反応混合物をワークアップのために他のバッチ（０．５ｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物をＨ２Ｏ（１４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１４０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（３－ブロモフェニル）ピリジン（３．９ｇ、８．２９ｍｍｏｌ、４７．１２％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
【0106】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（ベンジル（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３Ａ）の合成
メタノール（１６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－オキソエチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１０ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ）およびＮ－メチル－１－フェニル－メタンアミン（５．３３ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ、５．６８ｍＬ）溶液に２０℃で酢酸（２．６４ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ、２．５２ｍＬ）を加えた。反応混合物を２０℃で３０分間撹拌した。そして２０℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（８．２９ｇ、１３１．９８ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（ベンジル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１９．１ｇ、１４．５７ｍｍｏｌ、３３．１２％収率、９５％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３
メタノール（１６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－オキソエチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１０ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ）およびＮ－メチル－１－フェニル－メタンアミン（５．３３ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ、５．６８ｍＬ）溶液に２０℃で酢酸（２．６４ｇ、４３．９９ｍｍｏｌ、２．５２ｍＬ）を加えた。反応混合物を２０℃で３０分間撹拌した。そして２０℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（８．２９ｇ、１３１．９８ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（ベンジル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１９．１ｇ、１４．５７ｍｍｏｌ、３３．１２％収率、９５％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３
【0107】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メチルアミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（４Ａ）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（ベンジル（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１９ｇ、５７．１５ｍｍｏｌ）溶液に窒素気体下Ｐｄ／Ｃ（２ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２ｇ、２０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下６０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５６％）が確認された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メチルアミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４３．５
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（ベンジル（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１９ｇ、５７．１５ｍｍｏｌ）溶液に窒素気体下Ｐｄ／Ｃ（２ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２ｇ、２０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下６０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５６％）が確認された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（３００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メチルアミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４３．５
【0108】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（（３－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）シクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（６Ａ）の合成
メタノール（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メチルアミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、５６．５３ｍｍｏｌ）およびベンジルＮ－（３－オキソシクロブチル）カルバメート（６．２０ｇ、２８．２６ｍｍｏｌ）溶液に２０℃で酢酸（３．３９ｇ、５６．５３ｍｍｏｌ、３．２３ｍＬ）を加え、反応混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（１０．６６ｇ、１６９．５８ｍｍｏｌ）を２０℃で滴下し、反応混合物を２０℃でさらに１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４２％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（４００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１０％酢酸エチル：メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（（３－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）シクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．９ｇ、１６．４９ｍｍｏｌ、２９．１７％収率、９３％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
メタノール（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（メチルアミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（１３．７ｇ、５６．５３ｍｍｏｌ）およびベンジルＮ－（３－オキソシクロブチル）カルバメート（６．２０ｇ、２８．２６ｍｍｏｌ）溶液に２０℃で酢酸（３．３９ｇ、５６．５３ｍｍｏｌ、３．２３ｍＬ）を加え、反応混合物を２０℃で３０分間攪拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（１０．６６ｇ、１６９．５８ｍｍｏｌ）を２０℃で滴下し、反応混合物を２０℃でさらに１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４２％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（４００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１０％酢酸エチル：メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（（３－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）シクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．９ｇ、１６．４９ｍｍｏｌ、２９．１７％収率、９３％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．２
【0109】
工程５．ベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４）の合成
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（（３－（（（ベンジルオキシ）
カルボニル）アミノ）シクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．９ｇ、１７．７３ｍｍｏｌ）２０℃でＴＦＡ（１２．１３ｇ、１０６．３８ｍｍｏｌ、７．８８ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物に０℃でＤＩＰＥＡを加え、ｐＨ＝７に調整した。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（６．１３ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４６．２
ＤＣＭ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－（（３－（（（ベンジルオキシ）
カルボニル）アミノ）シクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（７．９ｇ、１７．７３ｍｍｏｌ）２０℃でＴＦＡ（１２．１３ｇ、１０６．３８ｍｍｏｌ、７．８８ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物に０℃でＤＩＰＥＡを加え、ｐＨ＝７に調整した。反応混合物を真空濃縮し、ベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（６．１３ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４６．２
【0110】
工程６．ベンジル（３－（（２－（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（５）の合成
トルエン（６０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（３－ブロモフェニル）ピリジン（３．９ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）およびベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（３．６２ｇ、１０．４９ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１６０．０３ｍｇ、１７４．８０μｍｏｌ）およびＲｕＰｈｏｓ（４０７．７４ｍｇ、８７４．００μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（８．５４ｇ、２６．２２ｍｍｏｌ）をＮ２気体 下２０℃で加え、生成された混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（７％）が確認され、ベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（３．０２ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１６０．０７ｍｇ、１７４．８０μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（４０７．８４ｍｇ、８７４．００μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５．７０ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素気体下１００℃で１６時間さらに撹拌した。ＬＣＭＳにより２４％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（７％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３５％～６５％、１０分）で精製した。溶出液のｐＨを炭酸水素ナトリウムで～７に調整し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）を抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ベンジル（３－（（２－（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４４１ｍｇ、５７６．９２μｍｏｌ、５０．５７％収率、９３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７１１．３
トルエン（６０ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（３－ブロモフェニル）ピリジン（３．９ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）およびベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（３．６２ｇ、１０．４９ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１６０．０３ｍｇ、１７４．８０μｍｏｌ）およびＲｕＰｈｏｓ（４０７．７４ｍｇ、８７４．００μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（８．５４ｇ、２６．２２ｍｍｏｌ）をＮ２気体 下２０℃で加え、生成された混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（７％）が確認され、ベンジル（３－（メチル（２－（ピペリジン－４－イル）エチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（３．０２ｇ、８．７４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１６０．０７ｍｇ、１７４．８０μｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（４０７．８４ｍｇ、８７４．００μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５．７０ｇ、１７．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素気体下１００℃で１６時間さらに撹拌した。ＬＣＭＳにより２４％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（７％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３５％～６５％、１０分）で精製した。溶出液のｐＨを炭酸水素ナトリウムで～７に調整し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）を抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ベンジル（３－（（２－（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４４１ｍｇ、５７６．９２μｍｏｌ、５０．５７％収率、９３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７１１．３
【0111】
工程７．３－（３－（４－（２－（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５ｍＬ）中のベンジル（３－（（２－（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４４１ｍｇ、６２０．３４μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（１２０ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認され、反応混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。生成された混合物をエタノール（３０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、３－（３－（４－（２－（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１６２ｍｇ、４０６．４８μｍｏｌ、６５．５３％収率）を無色の油状物と
して得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９９．３
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５ｍＬ）中のベンジル（３－（（２－（１－（３－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４４１ｍｇ、６２０．３４μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（１２０ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認され、反応混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。生成された混合物をエタノール（３０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、３－（３－（４－（２－（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１６２ｍｇ、４０６．４８μｍｏｌ、６５．５３％収率）を無色の油状物と
して得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９９．３
【0112】
工程８．Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物６）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１３０ｍｇ、３１５．９５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１３２．１５ｍｇ、３４７．５５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．５０ｍｇ、９４７．８６μｍｏｌ、１６５．１０μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（３－（４－（２－（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５１．１０ｍｇ、３７９．１４μｍｏｌ）溶液を加え、反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４５％）が確認された。生成された混合物をＨ２Ｏ（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。濾液をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１０％、ＤＣＭ／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム）：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、８分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７３．１ｍｇ、９１．６５μｍｏｌ、２９．０１％収率、９９．３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７９２．４
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１３０ｍｇ、３１５．９５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１３２．１５ｍｇ、３４７．５５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．５０ｍｇ、９４７．８６μｍｏｌ、１６５．１０μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間攪拌し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（３－（４－（２－（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）エチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５１．１０ｍｇ、３７９．１４μｍｏｌ）溶液を加え、反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４５％）が確認された。生成された混合物をＨ２Ｏ（２５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。濾液をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１０％、ＤＣＭ／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム）：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、８分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７３．１ｍｇ、９１．６５μｍｏｌ、２９．０１％収率、９９．３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７９２．４
【0113】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．１３（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７－６．７３（ｍ、２Ｈ）、６．５７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．８９－４．７８（ｍ、１Ｈ）、４．２１－４．０８（ｍ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７４（ｄｄ，Ｊ＝５．０，１１．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．４６（ｓ、２Ｈ）、３．１６（ｓ、３Ｈ）、２．６６－２．５６（ｍ、４Ｈ）、２．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝４．２Ｈｚ、３Ｈ）、２．２７－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０９－１．９６（ｍ、４Ｈ）、１．９２－１．８１（ｍ、２Ｈ）、１．７４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．５１－１．３２（ｍ、３Ｈ）、１．２９－１．２０（ｍ、２Ｈ）、１．１６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）、０．９５－０．８８（ｍ、２Ｈ）、０．７２－０．６４（ｍ、２Ｈ）。
【0114】
実施例７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（化合物７）の合成
【0115】
【化14】
【0116】
工程１．１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
トルエン（５０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（５ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．３５ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、２．３１ｍＬ）およびＣｓ２ＣＯ３（１６．２４ｇ、４９．８５ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（７６０．８３ｍｇ、８３０．８６μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（９６１．５０ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２気体下に９０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ、１０．９４％収率）
を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３０．３。
トルエン（５０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（５ｇ、１６．６２ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．３５ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、２．３１ｍＬ）およびＣｓ２ＣＯ３（１６．２４ｇ、４９．８５ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（７６０．８３ｍｇ、８３０．８６μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（９６１．５０ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＮ２気体下に９０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ、１０．９４％収率）
を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３０．３。
【0117】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（５）の合成
ジオキサン（１２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２．４ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．５２ｇ、３．６３ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１．１６ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１３２．９６ｍｇ、１８１．７１μｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、反応混合物を９０℃まで昇温し、９０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６６０ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６４．５０％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．３。
ジオキサン（１２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２．４ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６００ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．５２ｇ、３．６３ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１．１６ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１３２．９６ｍｇ、１８１．７１μｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、反応混合物を９０℃まで昇温し、９０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６６０ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６４．５０％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．３。
【0118】
工程３．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（４５０ｍｇ、８３２．３７μｍｏｌ）溶液にＬｉＢＨ４（３７ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。０℃で塩化アンモニウム（１０ｍＬ）を加え、反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４００ｍｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．３。
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（４５０ｍｇ、８３２．３７μｍｏｌ）溶液にＬｉＢＨ４（３７ｍｇ、１．７０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。０℃で塩化アンモニウム（１０ｍＬ）を加え、反応混合物をクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４００ｍｇ、粗製）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．３。
【0119】
工程４．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４００ｍｇ、８０２．２７μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（４０ｍｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．２。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（４００ｍｇ、８０２．２７μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（４０ｍｇ、１０％純度）の混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．２。
【0120】
工程５．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６２４．３０μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３９７．１９ｍｇ、９３６．４５μｍｏｌ、２８９．９２μＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１
９８ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．４。
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、６２４．３０μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３９７．１９ｍｇ、９３６．４５μｍｏｌ、２８９．９２μＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１
９８ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．４。
【0121】
工程６．ベンジル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（１０）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中のベンジル（（１ｒ、４ｒ）－４－（メチルアミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（１００ｍｇ、３３４．６６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１０６．５４ｍｇ、３３４．６６μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（４１．１８ｍｇ、５０２．００μｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（３５５ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２４％）が確認された。炭酸水素ナトリウム（５ｍＬ）を加え、混合物をクエンチし、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）で再精製した。溶出液を凍結乾燥し、ベンジル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（１４０ｍｇ、２２２．３６μｍｏｌ、６６．４４％収率、９７％純度、ＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６５．６。
ＤＣＥ（２ｍＬ）中のベンジル（（１ｒ、４ｒ）－４－（メチルアミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（１００ｍｇ、３３４．６６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１０６．５４ｍｇ、３３４．６６μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（４１．１８ｍｇ、５０２．００μｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（３５５ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２４％）が確認された。炭酸水素ナトリウム（５ｍＬ）を加え、混合物をクエンチし、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１５ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～２０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）で再精製した。溶出液を凍結乾燥し、ベンジル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（１４０ｍｇ、２２２．３６μｍｏｌ、６６．４４％収率、９７％純度、ＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６５．６。
【0122】
工程７．３－（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１１）の合成
ＴＦＡ（１ｍＬ）中のベンジル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（７０ｍｇ、１１４．６２μｍｏｌ、ＦＡ）の混合物を５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３１．５。
ＴＦＡ（１ｍＬ）中のベンジル（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（７０ｍｇ、１１４．６２μｍｏｌ、ＦＡ）の混合物を５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３１．５。
【0123】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（化合物７）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４６．４３ｍｇ、１１０．１８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６２．８４ｍｇ、１６５．２６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７１．２０ｍｇ、５５０．８８μｍｏｌ、９μＬ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した。３－（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１１０．１８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、混合物を１５℃で２
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４４％～７４％、８分）を再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（３４．９ｍｇ、４１．０１μｍｏｌ、３７．２２％、収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３４．８。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４６．４３ｍｇ、１１０．１８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６２．８４ｍｇ、１６５．２６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７１．２０ｍｇ、５５０．８８μｍｏｌ、９μＬ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した。３－（４－（４－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１１０．１８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、混合物を１５℃で２
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４４％～７４％、８分）を再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（３４．９ｍｇ、４１．０１μｍｏｌ、３７．２２％、収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３４．８。
【0124】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．０６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．０５－６．９０（ｍ、３Ｈ）、４．９４－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．１１－３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８５－３．６８（ｍ、２Ｈ）、３．４１－３．３５（ｍ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．６９－２．５８（ｍ、４Ｈ）、２．３５－２．２６（ｍ、３Ｈ）、２．２５－２．１２（ｍ、４Ｈ）、２．０４－１．９５（ｍ、１Ｈ）、１．９４－１．８７（ｍ、２Ｈ）、１．８５－１．７３（ｍ、４Ｈ）、１．５８－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．４３－１．３２（ｍ、４Ｈ）、１．２９－１．１７（ｍ、８Ｈ）。
【0125】
実施例８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（化合物８）の合成
【0126】
【化15】
【0127】
工程１．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２）の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．５ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９９２．９７ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により出発物質が完全に消費されたことが確認され、新規なスポットが検出された。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．４
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．５ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９９２．９７ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により出発物質が完全に消費されたことが確認され、新規なスポットが検出された。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．４
【0128】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（４）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．５ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）カルバメート（３３６．５９ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（１１３．１８ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１０７．７９μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（９９８．６５ｍｇ、４．７１ｍｍｏ
ｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１９％）が確認された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．７ｇ、１．００ｍｍｏｌ、６３．８４％収率、７４％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．２
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（０．５ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）カルバメート（３３６．５９ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（１１３．１８ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１０７．７９μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（９９８．６５ｍｇ、４．７１ｍｍｏ
ｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１９％）が確認された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．７ｇ、１．００ｍｍｏｌ、６３．８４％収率、７４％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．２
【0129】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（５）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（１８８．４９ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ、１７２．９２μＬ、３７％純度）溶液に酢酸（６９．７４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、６６．４２μＬ）および水素化シアノホウ素ナトリウム（２１８．９４ｍｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９５％）が検出された。反応混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．５ｇ、９４２．２０μｍｏｌ、８１．１３％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３１．４
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．６ｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびホルムアルデヒド（１８８．４９ｍｇ、２．３２ｍｍｏｌ、１７２．９２μＬ、３７％純度）溶液に酢酸（６９．７４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、６６．４２μＬ）および水素化シアノホウ素ナトリウム（２１８．９４ｍｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９５％）が検出された。反応混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．５ｇ、９４２．２０μｍｏｌ、８１．１３％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３１．４
【0130】
工程４．３－（４－（４－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（６）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．２ｇ、３７６．８８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピーク（１００％）が検出された。混合物を濃縮し、３－（４－（４－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（２００ｍｇ、３７０．４１μｍｏｌ、９８．２８％収率、３ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３１．２。
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．２ｇ、３７６．８８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピーク（１００％）が検出された。混合物を濃縮し、３－（４－（４－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（２００ｍｇ、３７０．４１μｍｏｌ、９８．２８％収率、３ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３１．２。
【0131】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（化合物８）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（０．２ｇ、３７０．４１μｍｏｌ、３ＨＣｌ）およ
び４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５６．０９ｍｇ、３７０．４１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１６９．０１ｍｇ、４４４．４９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２８７．２４ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ、３８７．１１μＬ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。生成された混合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、１０分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１６％～４６％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（５５．８ｍｇ、６４．９０μｍｏｌ、１７．５２％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３４．６。
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（０．２ｇ、３７０．４１μｍｏｌ、３ＨＣｌ）およ
び４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５６．０９ｍｇ、３７０．４１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１６９．０１ｍｇ、４４４．４９μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２８７．２４ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ、３８７．１１μＬ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。生成された混合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、１０分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１６％～４６％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（５５．８ｍｇ、６４．９０μｍｏｌ、１７．５２％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３４．６。
【0132】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２９（ｍ、１Ｈ）、８．２２－８．２１（ｍ、１Ｈ）、７．９９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．４８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２－６．９３（ｍ、３Ｈ）、４．９３－４．８５（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、４Ｈ）、３．７９（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１１．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．３３（ｓ、５Ｈ）、２．６９－２．５９（ｍ、４Ｈ）、２．３０－２．２６（ｍ、３Ｈ）、２．２３－２．１４（ｍ、４Ｈ）、２．０４－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．８７－１．７９（ｍ、６Ｈ）、１．６０－１．４６（ｍ、５Ｈ）、１．３２－１．２４（ｍ、８Ｈ）。
【0133】
実施例９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物９）の合成
【0134】
【化16】
【0135】
工程１．４－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（３）の合成
トルエン（５００ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（２５ｇ、８３．０９ｍｍｏｌ）、ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１８．３０ｇ、８３．０９ｍｍｏｌ、１６．０５ｍＬ）およびｔ－ＢｕＯＮａ（２Ｍ、１２４．６３ｍＬ）の混合物にＰｄ２（ｄｂａ）３（３．８０ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（４．８１ｇ、８．３１ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、８０℃まで昇温し、Ｎ２気体下で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼンが消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝０～７％、１００ｍＬ／分）で精製し、４－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２７ｇ、６８．６６ｍｍｏｌ、８２．６４％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９４．３
トルエン（５００ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（２５ｇ、８３．０９ｍｍｏｌ）、ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１８．３０ｇ、８３．０９ｍｍｏｌ、１６．０５ｍＬ）およびｔ－ＢｕＯＮａ（２Ｍ、１２４．６３ｍＬ）の混合物にＰｄ２（ｄｂａ）３（３．８０ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（４．８１ｇ、８．３１ｍｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、８０℃まで昇温し、Ｎ２気体下で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１）により４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼンが消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝０～７％、１００ｍＬ／分）で精製し、４－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２７ｇ、６８．６６ｍｍｏｌ、８２．６４％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９４．３
【0136】
工程２．４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（５）の合成
Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ）およびジオキサン（３００ｍＬ）中の４－（４－ブロモ－２－フル
オロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１５ｇ、３８．１４ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３９．７９ｇ、９５．３６ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（１１．２３ｇ、１１４．４３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２．７９ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２保護下で１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２６％）が確認された。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１１ｇ、１７．８６ｍｍｏｌ、収率４６．８２％、純度９８％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０４．２
Ｈ２Ｏ（６０ｍＬ）およびジオキサン（３００ｍＬ）中の４－（４－ブロモ－２－フル
オロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１５ｇ、３８．１４ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３９．７９ｇ、９５．３６ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（１１．２３ｇ、１１４．４３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２．７９ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２保護下で１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２６％）が確認された。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１１ｇ、１７．８６ｍｍｏｌ、収率４６．８２％、純度９８％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０４．２
【0137】
工程３．３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）中の４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１１ｇ、１８．２２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１．１ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１．１ｇ、２０％純度）をＮ２の保護下で２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下で４５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７１％）が確認された。生成された混合物を濾過し、ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄し、濾液を濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５．７ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）中の４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１１ｇ、１８．２２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（１．１ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１．１ｇ、２０％純度）をＮ２の保護下で２５℃で加えた。生成された混合物を脱気し、Ｈ２で３回パージした後、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下で４５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７１％）が確認された。生成された混合物を濾過し、ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄し、濾液を濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５．７ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１
【0138】
工程４．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（８）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ）および（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（４．１１ｇ、９．２７ｍｍｏｌ、０．９ｅｑ、２ＨＣｌ塩）溶液に、ＮａＩ（１５４．３６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６．６５ｇ、５１．４９ｍｍｏｌ、８．９７ｍＬ）を加え、反応混合物を５０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５４ｎｍ下で５６％）が確認された。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル－メタノール／酢酸エチル／ＮＨ４ＯＨ＝１／５／０．００５勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（２ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、２１．１０％収率、６８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２６．５
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ）および（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（４．１１ｇ、９．２７ｍｍｏｌ、０．９ｅｑ、２ＨＣｌ塩）溶液に、ＮａＩ（１５４．３６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６．６５ｇ、５１．４９ｍｍｏｌ、８．９７ｍＬ）を加え、反応混合物を５０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５４ｎｍ下で５６％）が確認された。混合物を濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル－メタノール／酢酸エチル／ＮＨ４ＯＨ＝１／５／０．００５勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（２ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、２１．１０％収率、６８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２６．５
【0139】
工程５．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１００ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２．０ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％純度）、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（０．２ｇ、２０％純度）およびＨＣｌ（１Ｍ、３．２０ｍＬ）をＮ２気体下で加え、生成された混合物を
脱気し、Ｈ２で３回パージした後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０～５５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）が確認された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮乾燥し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．９ｇ、粗製、４ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１００ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２．０ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．２ｇ、１０％純度）、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（０．２ｇ、２０％純度）およびＨＣｌ（１Ｍ、３．２０ｍＬ）をＮ２気体下で加え、生成された混合物を
脱気し、Ｈ２で３回パージした後、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０～５５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）が確認された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮乾燥し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．９ｇ、粗製、４ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４６．３
【0140】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物９）の合成
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．８０ｇ、３．０４ｍｍｏｌ、４ＨＣｌ塩）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１．１５ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．３９ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．３６ｇ、１８．２６ｍｍｏｌ、３．１８ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６１％）が確認された。反応混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（１．２ｇ、１．１８ｍｍｏｌ、３８．９０％収率、９８％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４９．４。
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．８０ｇ、３．０４ｍｍｏｌ、４ＨＣｌ塩）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１．１５ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．３９ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．３６ｇ、１８．２６ｍｍｏｌ、３．１８ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６１％）が確認された。反応混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（１．２ｇ、１．１８ｍｍｏｌ、３８．９０％収率、９８％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４９．４。
【0141】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．３６－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．０７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５６－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０７－６．９２（ｍ、３Ｈ）、４．９３－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８１（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．７５（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝１．７、４．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．０６－２．９５（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、２．７１－２．５６（ｍ、８Ｈ）、２．４７－２．４３（ｍ、２Ｈ）、２．３１－２．１２（ｍ、５Ｈ）、２．０５－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９４－１ ．８８（ｍ、２Ｈ）、１．８３－１．７６（ｍ、２Ｈ）、１．４３－１．３２（ｍ、４Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．８、６Ｈ）。
【0142】
実施例１０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）
エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物１０）の合成
エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物１０）の合成
【0143】
【化17】
【0144】
工程１．４－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（３）の合成
ジオキサン（１５０ｍＬ）中の５－ブロモ－１，３－ジフルオロ－２－ヨードベンゼン（１０ｇ、３１．３６ｍｍｏｌ）およびピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（７．２５ｇ、３２．９３ｍｍｏｌ、６．３６ｍＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２０．４３ｇ、６２．７２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（５７４．３３ｍｇ、６２７．１９μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（５４４．３５ｍｇ、９４０．７８μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が確認された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、４－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（６．２ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ、４５．１９％、収率、純度９４％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１．１。
ジオキサン（１５０ｍＬ）中の５－ブロモ－１，３－ジフルオロ－２－ヨードベンゼン（１０ｇ、３１．３６ｍｍｏｌ）およびピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（７．２５ｇ、３２．９３ｍｍｏｌ、６．３６ｍＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２０．４３ｇ、６２．７２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（５７４．３３ｍｇ、６２７．１９μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（５４４．３５ｍｇ、９４０．７８μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が確認された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、４－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（６．２ｇ、１４．１７ｍｍｏｌ、４５．１９％、収率、純度９４％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１．１。
【0145】
工程２．４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（５）の合成
ジオキサン（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１５ｍＬ）中の４－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（３．５ｇ、８．５１ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３．９１ｇ、９．３６ｍｍｏｌ）溶液に炭酸カリウム（３．５３ｇ、２５．５３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（１９６．７０ｍｇ、１７０．２２μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認された。生成された混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２．６５ｇ、３．９２ｍｍｏｌ、収率４６．０８％、純度９２％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２２．３
ジオキサン（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１５ｍＬ）中の４－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（３．５ｇ、８．５１ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３．９１ｇ、９．３６ｍｍｏｌ）溶液に炭酸カリウム（３．５３ｇ、２５．５３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（１９６．７０ｍｇ、１７０．２２μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認された。生成された混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２．６５ｇ、３．９２ｍｍｏｌ、収率４６．０８％、純度９２％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２２．３
【0146】
工程３．３－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）中の４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２．６５ｇ、４．２６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（１２Ｍ、３５８．６５μＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．１５ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（０．１５ｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加え、混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、懸濁液をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０℃で３４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応が進まないことが確認された。ＤＭＦ（１０ｍＬ）を加え、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応が進まないことが確認された。さらにＤＭＦ（４０ｍＬ）を加え、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピーク（９４％）が確認された。生成された混合物をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＴＨＦ（３０ｍＬ）、ＤＭＦ（１００ｍＬ）およびメタノール（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、３－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１０．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）中の４－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（２．６５ｇ、４．２６ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（１２Ｍ、３５８．６５μＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．１５ｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（０．１５ｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加え、混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、懸濁液をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０℃で３４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応が進まないことが確認された。ＤＭＦ（１０ｍＬ）を加え、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応が進まないことが確認された。さらにＤＭＦ（４０ｍＬ）を加え、Ｈ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピーク（９４％）が確認された。生成された混合物をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＴＨＦ（３０ｍＬ）、ＤＭＦ（１００ｍＬ）およびメタノール（２００ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮し、３－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１０．２
【0147】
工程４．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（８）の合成
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．１ｇ、３．１８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＩ（２３．８４ｍｇ、１５９．０６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．０８ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ、２．８ｍＬ）および（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（トランス）（１．２７ｇ、２．８６ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を加え、混合物を５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（２－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．２５ｇ、１．６５ｍｍｏｌ、５１．８８％
収率、８５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４４．２
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．１ｇ、３．１８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にＮａＩ（２３．８４ｍｇ、１５９．０６μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２．０８ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ、２．８ｍＬ）および（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（トランス）（１．２７ｇ、２．８６ｍｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）を加え、混合物を５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（２－２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．２５ｇ、１．６５ｍｍｏｌ、５１．８８％
収率、８５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４４．２
【0148】
工程５．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ））－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．０５ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（１Ｍ、１．６３ｍＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１００ｍｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加えて、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージし、生成された混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９１％）が確認された。混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＴＨＦ（３０ｍＬ）、ＤＭＦ（１００ｍＬ）およびＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（８３０ｍｇ、粗製、３ＨＣｌ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．３
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ））－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１．０５ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）およびＨＣｌ（１Ｍ、１．６３ｍＬ）溶液にＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１００ｍｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加えて、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージし、生成された混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で５０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下５０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９１％）が確認された。混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＴＨＦ（３０ｍＬ）、ＤＭＦ（１００ｍＬ）およびＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（８３０ｍｇ、粗製、３ＨＣｌ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．３
【0149】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物１０）の合成
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４７０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５０８．９０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３４８．７４ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、４７０．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７８０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ、３ＨＣｌ）およびＤＩＰＥＡ（６９７．４６ｍｇ、５．４０ｍｍｏｌ、９３９．９８μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌する。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（３４６．７ｍｇ、３８３．９１μｍｏｌ、３４．４２％収率、９６％純度）を白色の固形物として得
た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６７．５
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４７０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５０８．９０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３４８．７４ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、４７０．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７８０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ、３ＨＣｌ）およびＤＩＰＥＡ（６９７．４６ｍｇ、５．４０ｍｍｏｌ、９３９．９８μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌する。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（３４６．７ｍｇ、３８３．９１μｍｏｌ、３４．４２％収率、９６％純度）を白色の固形物として得
た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６７．５
【0150】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄｄ、Ｊ＝２．９、８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．０６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９９－６．９０（ｍ、２Ｈ）、４．９２－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｄｄ、Ｊ＝４．７、１２．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．７９－３．６６（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．１３－３．０６（ｍ、４Ｈ）、２．６６－２．５３（ｍ、８Ｈ）、２．４４－２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．２９－２．１６（ｍ、５Ｈ）、２．０３－１．９５（ｍ、１Ｈ）、１．９３－１．８６（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．７３（ｍ、２Ｈ）、１．４２－１．３１（ｍ、４Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0151】
実施例１１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノイル）ピペラジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１１）の合成
【0152】
【化18】
【0153】
工程１．メチル３－（１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（２）の合成
トルエン（１０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（７５０ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）、メチル３－（ピペリジン－４－イル）プロパノエート（４９１．８１ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．４４ｇ、７．４８ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１１４．１２ｍｇ、１２４．６３μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（１４４．２３ｍｇ、２４９．２６μｍｏｌ）を２５℃で加えた。混合物をＮ２下９０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認された。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、メチル３－（１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（２５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４４．０
トルエン（１０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ－１－ヨードベンゼン（７５０ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）、メチル３－（ピペリジン－４－イル）プロパノエート（４９１．８１ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．４４ｇ、７．４８ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１１４．１２ｍｇ、１２４．６３μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（１４４．２３ｍｇ、２４９．２６μｍｏｌ）を２５℃で加えた。混合物をＮ２下９０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認された。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、メチル３－（１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（２５０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４４．０
【0154】
工程２．メチル３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル
）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（３）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３３３．３９ｍｇ、７９８．９１μｍｏｌ）、メチル３－（１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（２５０ｍｇ、７２６．２８μｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（４６２．５０ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５３．１４ｍｇ、７２．６３μｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物をＮ２で３回パージし脱気し、９０℃まで昇温した後、１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３４％）が確認された。生成された混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、メチル３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（１５０ｍｇ、２６２．３３μｍｏｌ、３６．１２％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．６
）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（３）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３３３．３９ｍｇ、７９８．９１μｍｏｌ）、メチル３－（１－（４－ブロモ－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（２５０ｍｇ、７２６．２８μｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（４６２．５０ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）の混合物にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５３．１４ｍｇ、７２．６３μｍｏｌ）を２５℃で加えた。生成された混合物をＮ２で３回パージし脱気し、９０℃まで昇温した後、１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３４％）が確認された。生成された混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、メチル３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（１５０ｍｇ、２６２．３３μｍｏｌ、３６．１２％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．６
【0155】
工程３．３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（４）の合成
ＴＨＦ（２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中のメチル３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（１５０ｍｇ、２７０．４４μｍｏｌ）およびＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３４．０５ｍｇ、８１１．３２μｍｏｌ）の混合物を５０℃で５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝３に調整した後、混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（１５０ｍｇ、２６０．８１μｍｏｌ、９６．４４％収率、９４％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．３
ＴＨＦ（２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中のメチル３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノエート（１５０ｍｇ、２７０．４４μｍｏｌ）およびＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３４．０５ｍｇ、８１１．３２μｍｏｌ）の混合物を５０℃で５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝３に調整した後、混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（１５０ｍｇ、２６０．８１μｍｏｌ、９６．４４％収率、９４％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．３
【0156】
工程４．３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（５）の合成
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（１４６ｍｇ、２７０．０６μｍｏｌ）溶液にＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５０ｍｇ、２０％純度）を加えた。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下３０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過し、濾液を濃縮し、３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジーン－４－イル）プロパン酸（９７ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６３．１
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の３－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（１４６ｍｇ、２７０．０６μｍｏｌ）溶液にＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５０ｍｇ、２０％純度）を加えた。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下３０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過し、濾液を濃縮し、３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジーン－４－イル）プロパン酸（９７ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６３．１
【0157】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノイル）ピペラジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（６０ｍｇ、１６５．５７μ
ｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９４．４３ｍｇ、２４８．３６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．１９ｍｇ、４９６．７１μｍｏｌ、８６．５１μＬ）を加えた。混合物を２５℃で１０分間撹拌した。混合物に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（８４．９０ｍｇ、１５６．９３μｍｏｌ、ＨＣｌ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミドが完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠５０ｍＬ／分）で精製し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、８分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノイル）ピペラジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５７ｍｇ、６５．１３μｍｏｌ、３９．３４％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４９．１
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパン酸（６０ｍｇ、１６５．５７μ
ｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９４．４３ｍｇ、２４８．３６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．１９ｍｇ、４９６．７１μｍｏｌ、８６．５１μＬ）を加えた。混合物を２５℃で１０分間撹拌した。混合物に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミド（８４．９０ｍｇ、１５６．９３μｍｏｌ、ＨＣｌ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（ピペラジン－１－イル）ベンズアミドが完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠５０ｍＬ／分）で精製し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３６％～６６％、８分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（３－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）プロパノイル）ピペラジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５７ｍｇ、６５．１３μｍｏｌ、３９．３４％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４９．１
【0158】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、９．４３（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．４８－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．０５－６．９０（ｍ、３Ｈ）、４．９５－４．８０（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｄｄ、Ｊ＝４．９、１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４－３．５０（ｍ、４Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．３２－３．３０（ｍ、２Ｈ）、２．９７－２．８１（ｍ、４Ｈ）、２．６９－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．３９（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．２７－２．１２（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．７８（ｄ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６－１．４６（ｍ、２Ｈ）、１．４５－１．２６（ｍ、４Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【0159】
実施例１２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１２）の合成
【0160】
【化19】
【0161】
工程１．ベンジル（１－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２）の合成
ジオキサン（１２ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（４－ブロモ－３－フルオロ－フェニル）ピリジン（６００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にベンジルＮ－［１－（アゼチジン－３－イルメチル）－４－ピペリジル］カルバメート（２．４３ｇ、５．８１ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．５３ｇ、７．７５ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（６２．８５ｍｇ、６４．６１μｍｏｌ）Ｎ２下２０℃で加え、Ｎ２下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（１－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．３ｇ、粗製）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６８７．２
ジオキサン（１２ｍＬ）中の２，６－ジベンジルオキシ－３－（４－ブロモ－３－フルオロ－フェニル）ピリジン（６００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）溶液にベンジルＮ－［１－（アゼチジン－３－イルメチル）－４－ピペリジル］カルバメート（２．４３ｇ、５．８１ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．５３ｇ、７．７５ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（６２．８５ｍｇ、６４．６１μｍｏｌ）Ｎ２下２０℃で加え、Ｎ２下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（１－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１．３ｇ、粗製）をオレンジ色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６８７．２
【0162】
工程２．３－（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）および酢酸（１ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．７ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．３ｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を酢酸エチル：ＴＨＦ＝１：１（３０ｍＬ）で希釈し、濾過し、濾液を真
空濃縮し、３－（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６４８ｍｇ、粗製）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７５．４
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）および酢酸（１ｍＬ）中のベンジル（１－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（０．７ｇ、１．０２ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（０．３ｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を酢酸エチル：ＴＨＦ＝１：１（３０ｍＬ）で希釈し、濾過し、濾液を真
空濃縮し、３－（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６４８ｍｇ、粗製）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７５．４
【0163】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１２）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９９．２５ｍｇ、２６１．０４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１．３４ｍｇ、４７４．６１μｍｏｌ、８２．６７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２６６．５８ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．６８ｍｇ、９４９．２２μｍｏｌ、１６５．３４μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝２０：１）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６８％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３ｍｇ、２８．６８μｍｏｌ、１２．０９％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７８．２
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１００ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（９９．２５ｍｇ、２６１．０４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１．３４ｍｇ、４７４．６１μｍｏｌ、８２．６７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（３ｍＬ）中の３－（４－（３－（（４－アミノピペリジン－１－イル）メチル）アゼチジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２６６．５８ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２２．６８ｍｇ、９４９．２２μｍｏｌ、１６５．３４μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５６％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝２０：１）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～６８％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）アゼチジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３ｍｇ、２８．６８μｍｏｌ、１２．０９％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７８．２
【0164】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．０９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９６－６．８２（ｍ、２Ｈ）、６．４９（ｔ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９７（ｍ、４Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８３－３．６９（ｍ、２Ｈ）、３．５４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、２．９６－２．８０（ｍ、３Ｈ）、２．６５－２．５５（ｍ、３Ｈ）、２．４５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、２．１６（ｄｑ、Ｊ＝３．４、１２．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．０８－１．９４（ｍ、３Ｈ）、１．７７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．６４－１．５１（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0165】
実施例１３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１３）の合成
【0166】
【化20】
【0167】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１０Ｃ）の合成
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３ｇ、７．１２ｍｍｏｌ）溶液に２５℃でＥＤＣＩ（２．１０ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９００．００ｍｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４．４５ｇ、３４．４５ｍｍｏｌ、６．００ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．９０ｇ、７．９１ｍｍｏｌ）を加えた。生成された混合物をＮ２気体下
で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．６ｇ、５．５９ｍｍｏｌ、７８．５６％収率）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４４．２。
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３ｇ、７．１２ｍｍｏｌ）溶液に２５℃でＥＤＣＩ（２．１０ｇ、１０．９５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９００．００ｍｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４．４５ｇ、３４．４５ｍｍｏｌ、６．００ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．９０ｇ、７．９１ｍｍｏｌ）を加えた。生成された混合物をＮ２気体下
で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．６ｇ、５．５９ｍｍｏｌ、７８．５６％収率）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４４．２。
【0168】
工程２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１０）の合成
ジオキサン（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．６ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６０ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．２。
ジオキサン（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．６ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、６０ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．２。
【0169】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝９．９８（ｓ、１Ｈ）、９．３０－９．１２（ｍ、２Ｈ）、８．９６－８．８１（ｍ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、８．４４（ｓ、１Ｈ）、８．０１－７．９２（ｍ、１Ｈ）、７．７４－７．６４（ｍ、１Ｈ）、７．６４－７．５７（ｍ、１Ｈ）、５．００－４．８６（ｍ、１Ｈ）、４．４７－４．３８（ｍ、１Ｈ）、４．３５－４．２３（ｍ、２Ｈ）、３．９８－３．９１（ｍ、３Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．０１－２．８７（ｍ、４Ｈ）、２．２８－２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．０４－１．９６（ｍ、２Ｈ）、１．８４－１．７４（ｍ、４Ｈ）、１．３３－１．２１（ｍ、６Ｈ）。
【0170】
工程３．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１）の合成
ジオキサン（５００ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（２０ｇ、５４．０２ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（２０．５８ｇ、８１．０３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４．４１ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（７．５８ｇ、１０８．０４ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，
４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（２６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２。
ジオキサン（５００ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（２０ｇ、５４．０２ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（２０．５８ｇ、８１．０３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４．４１ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（７．５８ｇ、１０８．０４ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，
４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（２６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２。
【0171】
工程４．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２）の合成
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（８ｇ、１９．１７ｍｍｏｌ）、１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼン（４．８ｇ、１５．９５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１．６ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（８．０ｇ、５７．８８ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、Ｎ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物を濾過した。濾液をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、２つのバッチの生成物を得た。
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（８ｇ、１９．１７ｍｍｏｌ）、１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼン（４．８ｇ、１５．９５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１．６ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（８．０ｇ、５７．８８ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、Ｎ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物を濾過した。濾液をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、２つのバッチの生成物を得た。
【0172】
バッチ１：明るい黄色の油状物の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２．４ｇ、５．１７ｍｍｏｌ、２６．９６％収率）。
バッチ２：明るい黄色の油状物の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．２ｇ、９．０５ｍｍｏｌ、収率４７．１８％）。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６５．１。
バッチ２：明るい黄色の油状物の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．２ｇ、９．０５ｍｍｏｌ、収率４７．１８％）。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６５．１。
【0173】
工程５．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（６）の合成
トルエン（１５０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．２ｇ、９．０５ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．８２ｇ、２４．３１ｍｍｏｌ、３．７５ｍＬ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．６０ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（８００ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（９ｇ、２７．６２ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、Ｎ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２～２０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．７ｇ、４．９９ｍｍｏｌ、５５．２１％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．１
トルエン（１５０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．２ｇ、９．０５ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．８２ｇ、２４．３１ｍｍｏｌ、３．７５ｍＬ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．６０ｇ、１．７５ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ（８００ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（９ｇ、２７．６２ｍｍｏｌ）溶液をＮ２気体で３回脱気し、パージした後、Ｎ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２～２０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．７ｇ、４．９９ｍｍｏｌ、５５．２１％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．１
【0174】
工程６．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（７）の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＬＡＨ（３６０ｍｇ、９．４９ｍｍｏｌ）の混合物にＴＨＦ（４０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．５０ｇ、６．４７ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加えた後、混合物をＮ２気体下２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をＨ２Ｏ（４ｍＬ）および水酸化ナトリウム溶液（１５％、６ｍＬ）で０℃でクエンチした後、硫酸ナトリウム（３０ｇ）を加えた後、懸濁液を濾過し、濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキ
シ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３．０ｇ、粗製）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．２。
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＬＡＨ（３６０ｍｇ、９．４９ｍｍｏｌ）の混合物にＴＨＦ（４０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．５０ｇ、６．４７ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加えた後、混合物をＮ２気体下２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をＨ２Ｏ（４ｍＬ）および水酸化ナトリウム溶液（１５％、６ｍＬ）で０℃でクエンチした後、硫酸ナトリウム（３０ｇ）を加えた後、懸濁液を濾過し、濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキ
シ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３．０ｇ、粗製）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９９．２。
【0175】
工程７．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下ＨＯＡｃ（３１５．００ｍｇ、５．２５ｍｍｏｌ、３００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（８００ｍｇ、６．０２ｍｍｏｌ、１０％純度）を加えた後、混合物をＨ２気体で数回脱気し、パージした後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９ｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．１。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下ＨＯＡｃ（３１５．００ｍｇ、５．２５ｍｍｏｌ、３００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（８００ｍｇ、６．０２ｍｍｏｌ、１０％純度）を加えた後、混合物をＨ２気体で数回脱気し、パージした後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９ｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２１．１。
【0176】
工程８．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（９）の合成
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９０ｇ、５．９３ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３．８０ｇ、８．９６ｍｍｏｌ、２．７７ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。生成された混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１．８０ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．１
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９０ｇ、５．９３ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３．８０ｇ、８．９６ｍｍｏｌ、２．７７ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。生成された混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１．８０ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．１
【0177】
工程９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１３）の合成
ＤＣＥ（１００ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２．６ｇ、４．４８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１．８０ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（５００ｍｇ、６．１０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで２５℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（５．０ｇ、２３．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、０℃で飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ～９に調整した後、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、５０ｍＬ／分）により精製した。溶出液を２０℃でＭＴＢＥおよびＣＨ３ＣＮで１時間４回粉砕した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミ
ド（５０１．９ｍｇ、５７８．４７μｍｏｌ、１２．９１％収率、９７．５％純度）を白色の固形物として得た。母液を減圧濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ
Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、１０分；カラム温度：３０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（６９４ｍｇ、８１２．１８μｍｏｌ、１８．１２％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４６．４
ＤＣＥ（１００ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２．６ｇ、４．４８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１．８０ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（５００ｍｇ、６．１０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで２５℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（５．０ｇ、２３．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４１％）が検出された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、０℃で飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ～９に調整した後、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、５０ｍＬ／分）により精製した。溶出液を２０℃でＭＴＢＥおよびＣＨ３ＣＮで１時間４回粉砕した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミ
ド（５０１．９ｍｇ、５７８．４７μｍｏｌ、１２．９１％収率、９７．５％純度）を白色の固形物として得た。母液を減圧濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ
Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、１０分；カラム温度：３０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（６９４ｍｇ、８１２．１８μｍｏｌ、１８．１２％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４６．４
【0178】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４９－８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．０３－６．９０（ｍ、３Ｈ）、４．９３－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４８－４．３２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８３－３．７３（ｍ、１Ｈ）、３．３７－３．３２（ｍ、５Ｈ）、２．６９－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．４７－２．４３（ｍ、１Ｈ）、２．３５－２．１０（ｍ、９Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７３（ｍ、４Ｈ）、１．６５－１．４９（ｍ、５Ｈ）、１．２８－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
実施例１４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（化合物１４）の合成
実施例１４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（化合物１４）の合成
【0179】
【化21】
【0180】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ安息香酸（１ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５４６．９９ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．０４ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８８２．４３ｍｇ、６．８３ｍｍｏｌ、１．１９ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌する。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７９％）が検出され、混合物にＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、２．２４ｍｍｏｌ、９８．６１％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６２．６
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ安息香酸（１ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５４６．９９ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１．０４ｇ、２．７３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８８２．４３ｍｇ、６．８３ｍｍｏｌ、１．１９ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌する。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７９％）が検出され、混合物にＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、２．２４ｍｍｏｌ、９８．６１％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６６２．６
【0181】
工程２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６
，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１００％）が検出され、混合物を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１．３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、９５．８９％収率、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６２．２
，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１．５ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１００％）が検出され、混合物を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１．３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、９５．８９％収率、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６２．２
【0182】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（化合物１４）の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１．３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（６９１．９８ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（２６７．４８ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで２０℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．３０ｇ、１０．８７ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２９％）が検出され、混合物にＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、０．７５ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＭＦ（５ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）で粉砕し、Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（２０３ｍｇ、２２５．５７μｍｏｌ、１０．３８％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。母液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０ｕｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（２７１．３ｍｇ、３０１．４７μｍｏｌ、１３．８７％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋
Ｈ）＋＝８６４．５。
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１．３ｇ、２．１７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（６９１．９８ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（２６７．４８ｍｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで２０℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．３０ｇ、１０．８７ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２９％）が検出され、混合物にＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、０．７５ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＭＦ（５ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）で粉砕し、Ｎ－（３－（（２－（１－（３－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－４－（（９’－イソプロピル－５’－メチル－６’－オキソ－５’，６’，８’，９’－テトラヒドロスピロ［シクロプロパン－１，７’－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン］－２’－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（２０３ｍｇ、２２５．５７μｍｏｌ、１０．３８％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。母液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０ｕｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メトキシベンズアミド（２７１．３ｍｇ、３０１．４７μｍｏｌ、１３．８７％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋
Ｈ）＋＝８６４．５。
【0183】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．３１－８．２４（ｍ、２Ｈ）、８．２１（ｄｄ、Ｊ＝３．３、７．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３－６．９２（ｍ、３Ｈ）、４．９７－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４４－４．３１（ｍ、１Ｈ）、４．０６（ｔ、Ｊ＝１３．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３３（ｓ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、２．６８－２．５８（ｍ、３Ｈ）、２．４９－２．４３（ｍ、１Ｈ）、２．３２－２．０９（ｍ、９Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８２－１．７４（ｍ、４Ｈ）、１．６２－１．４９（ｍ、５Ｈ）、１．２８－１．１９（ｍ、８Ｈ）。
【0184】
実施例１５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１５）の合成
【0185】
【化22】
【0186】
工程１．（１－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２）の合成
ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）中の（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３．４ｇ、１４．０３ｍｍｏｌ）の混合物にｔｅｒｔ－ブチル亜硝酸塩（２．２５ｇ、２１．８６ｍｍｏｌ、２．６ｍＬ）を０℃で加えた後、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、ＣｕＢｒ２（２．７ｇ、１２．０９ｍｍｏｌ、５６６．０４μＬ）を０℃で加え、混合物をＮ２気体下２５℃で３．５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈した後、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）を０℃で加えた後、０℃で水相に飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整した。合わせた水相を酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した後、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）を精製し、（１－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（９００ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ、２０．９５％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０６
ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）中の（１－（４－アミノ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３．４ｇ、１４．０３ｍｍｏｌ）の混合物にｔｅｒｔ－ブチル亜硝酸塩（２．２５ｇ、２１．８６ｍｍｏｌ、２．６ｍＬ）を０℃で加えた後、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、ＣｕＢｒ２（２．７ｇ、１２．０９ｍｍｏｌ、５６６．０４μＬ）を０℃で加え、混合物をＮ２気体下２５℃で３．５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（８０ｍＬ）で希釈した後、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）を０℃で加えた後、０℃で水相に飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整した。合わせた水相を酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した後、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）を精製し、（１－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（９００ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ、２０．９５％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０６
【0187】
工程２．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（３）の合成
ジオキサン（２５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中の（１－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８００ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．３１ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標） Ａ Ｐｄ Ｇ２（３００ｍｇ、４４８．６８μｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１．６６ｇ、７．８４ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２気体で３回パージした後、混合物をＮ２気体下５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた後、混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を塩水９０ｍＬ（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．１ｇ、２．１３ｍｍｏｌ、８１．４９％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．２
ジオキサン（２５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５ｍＬ）中の（１－（４－ブロモ－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８００ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．３１ｇ、３．１４ｍｍｏｌ）、ＣａｔａＣＸｉｕｍ（登録商標） Ａ Ｐｄ Ｇ２（３００ｍｇ、４４８．６８μｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（１．６６ｇ、７．８４ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２気体で３回パージした後、混合物をＮ２気体下５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた後、混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機相を塩水９０ｍＬ（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、８０ｍＬ／分）で精製し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．１ｇ、２．１３ｍｍｏｌ、８１．４９％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．２
【0188】
工程３．３－（３，５－ジフルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．１ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）溶液にＣＨ３ＣＯＯＨ（１００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ、９５．２４μＬ）およびＰｄ／Ｃ（４００ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認され、出発物質のピークがないことが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（３，５－ジフルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５６０ｍｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３９．１
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．１ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）溶液にＣＨ３ＣＯＯＨ（１００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ、９５．２４μＬ）およびＰｄ／Ｃ（４００ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認され、出発物質のピークがないことが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（３，５－ジフルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５６０ｍｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３９．１
【0189】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．２８－１０．１５（ｍ、１Ｈ
）、６．９９－６．８３（ｍ、２Ｈ）、３．８９－３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．３５－３．２６（ｍ、２Ｈ）、３．２０－３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．０４－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．６９－２．５７（ｍ、１Ｈ）、２．２９－２．１７（ｍ、１Ｈ）、２．０６－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．７６－１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．５３－１．４４（ｍ、１Ｈ）、１．３０－１．２０（ｍ、３Ｈ）。
）、６．９９－６．８３（ｍ、２Ｈ）、３．８９－３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．３５－３．２６（ｍ、２Ｈ）、３．２０－３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．０４－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．６９－２．５７（ｍ、１Ｈ）、２．２９－２．１７（ｍ、１Ｈ）、２．０６－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．７６－１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．５３－１．４４（ｍ、１Ｈ）、１．３０－１．２０（ｍ、３Ｈ）。
【0190】
工程４．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（６）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３，５－ジフルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５９１．１１μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３８０ｍｇ、８９５．９３μｍｏｌ、２７７．３７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１８０ｍｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３７．１
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３，５－ジフルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５９１．１１μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３８０ｍｇ、８９５．９３μｍｏｌ、２７７．３７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１８０ｍｇ、粗製）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３７．１
【0191】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１５）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、３７９．２７μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１６０ｍｇ、４７５．７２μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（６０ｍｇ、７３１．４４μｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４６０ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、飽和炭酸水素ナトリウム（ａｑ、１５ｍＬ）を水相に加え、ｐＨ＝９に調整し、合わせた水相を酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した後、合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～５３％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＭＦ（２ｍＬ）で希釈し、ＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ）でｐＨ＝７～８に調整した。次いで混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、９分；カラム温度：３０℃）に再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（３７．４ｍｇ、４０．６９μｍｏｌ、１０．７３％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６４．４
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、３７９．２７μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１６０ｍｇ、４７５．７２μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（６０ｍｇ、７３１．４４μｍｏｌ）を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４６０ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、飽和炭酸水素ナトリウム（ａｑ、１５ｍＬ）を水相に加え、ｐＨ＝９に調整し、合わせた水相を酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で抽出した後、合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～５３％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＭＦ（２ｍＬ）で希釈し、ＤＩＰＥＡ（０．１５ｍＬ）でｐＨ＝７～８に調整した。次いで混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、９分；カラム温度：３０℃）に再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（３７．４ｍｇ、４０．６９μｍｏｌ、１０．７３％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６４．４
【0192】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８５（ｓ、１Ｈ）、８．４７
－８．３６（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．０１－６．８４（ｍ、２Ｈ）、４．９６－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３１（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８８－３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．１０（ｍ、２Ｈ）、３．０５－２．９６（ｍ、２Ｈ）、２．７１－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．３５－２．２２（ｍ、４Ｈ）、２．２１－２．０７（ｍ、５Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．７７－１．６９（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５２（ｍ、５Ｈ）、１．２９－１．２３（ｍ、６Ｈ）、１．２２－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
－８．３６（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．０１－６．８４（ｍ、２Ｈ）、４．９６－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３１（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８８－３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．１８－３．１０（ｍ、２Ｈ）、３．０５－２．９６（ｍ、２Ｈ）、２．７１－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．３５－２．２２（ｍ、４Ｈ）、２．２１－２．０７（ｍ、５Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．７７－１．６９（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５２（ｍ、５Ｈ）、１．２９－１．２３（ｍ、６Ｈ）、１．２２－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
【0193】
実施例１６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１６）の合成
【0194】
【化23】
【0195】
工程１．（３，３－ジフルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（２）の合成
Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）中の（３，３－ジフルオロ－４－ピペリジル）メタノール（４ｇ、２１．３２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および亜硝酸ナトリウム（２．９４ｇ、４２．６４ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（３．２０ｇ、５３．３０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。生成された溶液を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応溶液を固形物の炭酸水素ナトリウムで中和した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、（３，３－ジフルオロ－１－ニトロソピペリジン－４
－イル）メタノール（３．８ｇ、２０．６７ｍｍｏｌ、９６．９６％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８１．２
Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）中の（３，３－ジフルオロ－４－ピペリジル）メタノール（４ｇ、２１．３２ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および亜硝酸ナトリウム（２．９４ｇ、４２．６４ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（３．２０ｇ、５３．３０ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。生成された溶液を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応溶液を固形物の炭酸水素ナトリウムで中和した。反応混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、（３，３－ジフルオロ－１－ニトロソピペリジン－４
－イル）メタノール（３．８ｇ、２０．６７ｍｍｏｌ、９６．９６％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８１．２
【0196】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル（３，３－ジフルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ＴＨＦ（４０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４０ｍＬ）中の（３，３－ジフルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（３．８ｇ、２１．０９ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（１１．２８ｇ、２１０．９３ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（６．２１ｇ、９５．００ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過した。濾液に水酸化ナトリウム（４．２２ｇ、１０５．４７ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（１１．５１ｇ、５２．７３ｍｍｏｌ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過した。濾液を酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル（２０ｍＬ）で粉砕し、生成物６ｇを白色の固形物として得た。１ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～５０％、１００ｍＬ／分）でさらに精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（３，３－ジフルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。残りの５ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物は保存した。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２１１．４
ＴＨＦ（４０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４０ｍＬ）中の（３，３－ジフルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（３．８ｇ、２１．０９ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（１１．２８ｇ、２１０．９３ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（６．２１ｇ、９５．００ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過した。濾液に水酸化ナトリウム（４．２２ｇ、１０５．４７ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（１１．５１ｇ、５２．７３ｍｍｏｌ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過した。濾液を酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル（２０ｍＬ）で粉砕し、生成物６ｇを白色の固形物として得た。１ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇシリカゲルカラム、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～５０％、１００ｍＬ／分）でさらに精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（３，３－ジフルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。残りの５ｇの粗（ｃｒｕｄｅ）生成物は保存した。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２１１．４
【0197】
工程３．（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（４）の合成
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３，３－ジフルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）およびＴｏｓＣｌ（２．１５ｇ、１１．２７ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（２．２８ｇ、２２．５３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（９１．７６ｍｇ、７５１．０８μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇシリカゲルクロマトグラフィー、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～３０％、６０ｍＬ／分）で精製し、（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（７００ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）＋＝４４３．１
ＤＣＭ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３，３－ジフルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２ｇ、７．５１ｍｍｏｌ）およびＴｏｓＣｌ（２．１５ｇ、１１．２７ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（２．２８ｇ、２２．５３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（９１．７６ｍｇ、７５１．０８μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇシリカゲルクロマトグラフィー、酢酸エチル／石油エーテル＝１０～３０％、６０ｍＬ／分）で精製し、（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（７００ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｎａ）＋＝４４３．１
【0198】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－ピペラジン－１－イル－フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（４００．８３ｍｇ、９５３．２９μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（６９１．４３ｍｇ、５．３５ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（３２．０８ｍｇ、２１４．００μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された混合物を７０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認された。反応溶液を７０℃でさらに１３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチ
ル（１０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＴＬＣ（純粋な酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（７０ｍｇ、１２５．８４μｍｏｌ、１１．７６％収率、９７％純度）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．３
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－ピペラジン－１－イル－フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３５０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（４００．８３ｍｇ、９５３．２９μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（６９１．４３ｍｇ、５．３５ｍｍｏｌ）およびＮａＩ（３２．０８ｍｇ、２１４．００μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された混合物を７０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が残っていることと、所望の質量のピークが確認された。反応溶液を７０℃でさらに１３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチ
ル（１０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＴＬＣ（純粋な酢酸エチル、Ｒｆ＝０．４）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（７０ｍｇ、１２５．８４μｍｏｌ、１１．７６％収率、９７％純度）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．３
【0199】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝７．９９（ｓ、１Ｈ）、６．９６－６．８７（ｍ、３Ｈ）、６．１２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝５．２、９．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３８－３．２０（ｍ、２Ｈ）、３．１８－３．０１（ｍ、６Ｈ）、２．７８－２．６２（ｍ、５Ｈ）、２．５９－２．４７（ｍ、２Ｈ）、２．４７－２．３７（ｍ、１Ｈ）、２．３２－２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．７１－１．５７（ｍ、２Ｈ）、１．４６（ｓ、９Ｈ）
【0200】
工程５．３－（４－（４－（（１－アミノ－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、９２．６６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１０．５７ｍｇ、９２．６６μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された溶液を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．３
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（５０ｍｇ、９２．６６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１０．５７ｍｇ、９２．６６μｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された溶液を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．３
【0201】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１６）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３７．８８ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６９．７０ｍｇ、５３９．３１μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３７．５９ｍｇ、９８．８７μｍｏｌ）溶液に３－（４－（４－（（１－アミノ－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２ ６－ジオン（６０ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を水（１０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分）でさらに精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．８ｍｇ、１４．７３μｍｏｌ、１６．３９％収率
、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３７．８８ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６９．７０ｍｇ、５３９．３１μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３７．５９ｍｇ、９８．８７μｍｏｌ）溶液に３－（４－（４－（（１－アミノ－３，３－ジフルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２ ６－ジオン（６０ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を水（１０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分）でさらに精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－３，３－ジフルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．８ｍｇ、１４．７３μｍｏｌ、１６．３９％収率
、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２
【0202】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝８．４８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．７０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．２６－７．２０（ｍ、１Ｈ）、６．９５－６．８８（ｍ、３Ｈ）、４．９８（ｔｄ、Ｊ＝６．４、１３．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．８８（ｔ、Ｊ＝１３．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝５．２、９．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．６８－３．５４（ｍ、１Ｈ）、３．５１－３．３５（ｍ、５Ｈ）、３．３２－３．２４（ｍ、１Ｈ）、３．１７－３．０７（ｍ、４Ｈ）、２．８３－２．７２（ｍ、４Ｈ）、２．７２－２．６６（ｍ、１Ｈ）、２．６２－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．５３－２．４５（ｍ、１Ｈ）、２．３０－２．１８（ｍ、２Ｈ）、２．１５－２．０３（ｍ、２Ｈ）、１．７５－１．７０（ｍ、１Ｈ）、１．３３（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【0203】
実施例１７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１７）の合成
【0204】
【化24】
【0205】
工程１．３－（４－（４－（２－（１－アミノ－４，４－ジフルオロピロリジン－２－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７Ａ）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、２０３．８６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．６７８ｇ、５．９４３ｍｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された溶液を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された溶液を濃縮し、３－（４－（４－（２－（１－アミノ－４，４－ジフルオロピロリジン－２－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を
黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．３
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、２０３．８６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．６７８ｇ、５．９４３ｍｍｏｌ）を２０℃で加えた。生成された溶液を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。生成された溶液を濃縮し、３－（４－（４－（２－（１－アミノ－４，４－ジフルオロピロリジン－２－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を
黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４０．３
【0206】
工程２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１７）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（３７．８８ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３９．４０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５４．６８ｍｇ、１４３．８２μｍｏｌ）溶液に３－（４－（４－（２－（１－アミノ－４，４－ジフルオロピロリジン－２－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、１７９．７７μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を水（１０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）でさらに精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．５ｍｇ、１４．４３μｍｏｌ、８．０３％収率、９７．３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－［（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－８Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ］－３－メトキシ－安息香酸（３７．８８ｍｇ、８９．８９μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３９．４０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５４．６８ｍｇ、１４３．８２μｍｏｌ）溶液に３－（４－（４－（２－（１－アミノ－４，４－ジフルオロピロリジン－２－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、１７９．７７μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）を２０℃で加えた。生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。反応溶液を水（１０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）でさらに精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（２－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）－４，４－ジフルオロピロリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２．５ｍｇ、１４．４３μｍｏｌ、８．０３％収率、９７．３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４３．２
【0207】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝８．４９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．４１（ｓ、１Ｈ）、７．２１－７．２４（ｍ、２Ｈ）、６．９６－６．８９（ｍ、３Ｈ）、５．０２－４．９３（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．８８（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．８３－３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝５．４、９．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．６６－３．６０（ｍ、１Ｈ）、３．５８－３．４７（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．２０－３．０８（ｍ、５Ｈ）、２．８１－２．６５（ｍ、７Ｈ）、２．６０－２．５０（ｍ、２Ｈ）、２．３１－２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．０５－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．９０－１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．３３（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【0208】
実施例１８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１８）の合成
【0209】
【化25】
【0210】
工程１．（４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（２）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３ｇ、１２．８６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０．００ｍＬ）を２５℃で加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３０％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（２．１ｇ、１２．３８ｍｍｏｌ、９６．２７％収率、１００％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１３４．２
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３ｇ、１２．８６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０．００ｍＬ）を２５℃で加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３０％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（２．１ｇ、１２．３８ｍｍｏｌ、９６．２７％収率、１００％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１３４．２
【0211】
工程２．（４－フルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（３）の合成
Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中の（４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（２．１ｇ、１２．３８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に亜硝酸ナトリウム（１．２８ｇ、１８．５７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。その後、酢酸（１．４９ｇ、２４．７６ｍｍｏｌ、１．４２ｍＬ）を０℃で滴下した。反応混合物を２５℃までゆっくりと昇温させ、２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を固形物炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル
／メタノール（１０／１、１５０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、（４－フルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（２ｇ、粗製）を黄色の固形物として得、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１６３．３
Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中の（４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（２．１ｇ、１２．３８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に亜硝酸ナトリウム（１．２８ｇ、１８．５７ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。その後、酢酸（１．４９ｇ、２４．７６ｍｍｏｌ、１．４２ｍＬ）を０℃で滴下した。反応混合物を２５℃までゆっくりと昇温させ、２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を固形物炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル
／メタノール（１０／１、１５０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、（４－フルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（２ｇ、粗製）を黄色の固形物として得、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１６３．３
【0212】
工程３．（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（４）の合成
メタノール（２０ｍＬ）中の（４－フルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（２ｇ、１２．３３ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（３．２３ｇ、４９．３３ｍｍｏｌ）を加え、酢酸（２．９６ｇ、４９．３３ｍｍｏｌ、２．８２ｍＬ）を０℃で滴下した。反応混合物をゆっくりと昇温させ、２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６６％）が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＴＨＦ（１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（５．６ｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４９．２
メタノール（２０ｍＬ）中の（４－フルオロ－１－ニトロソピペリジン－４－イル）メタノール（２ｇ、１２．３３ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（３．２３ｇ、４９．３３ｍｍｏｌ）を加え、酢酸（２．９６ｇ、４９．３３ｍｍｏｌ、２．８２ｍＬ）を０℃で滴下した。反応混合物をゆっくりと昇温させ、２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６６％）が確認された。反応混合物をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＴＨＦ（１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮し、（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（５．６ｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４９．２
【0213】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（５）の合成
Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（５．６ｇ、３７．７９ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（１６．５０ｇ、７５．５８ｍｍｏｌ、１７．３６ｍＬ）および水酸化ナトリウム（６．０５ｇ、１５１．１７ｍｍｏｌ）混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（２９％）が確認された。反応混合物を濾過し、酢酸エチル（３０ｍＬ×６）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１（５０ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過した。濾過ケーキを集め、真空乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメートを白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１９３．１
Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）中の（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メタノール（５．６ｇ、３７．７９ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（１６．５０ｇ、７５．５８ｍｍｏｌ、１７．３６ｍＬ）および水酸化ナトリウム（６．０５ｇ、１５１．１７ｍｍｏｌ）混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（２９％）が確認された。反応混合物を濾過し、酢酸エチル（３０ｍＬ×６）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１（５０ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過した。濾過ケーキを集め、真空乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメートを白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１９３．１
【0214】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＤＭＳＯ（１２５．８７ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ、１２５．８７μＬ）溶液にＤＣＭ（５ｍＬ）中のオキサリルクロリド（１３２．９１ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、９１．６６μＬ）溶液を－６５℃で滴下した。混合物を－６５℃で１０分間撹拌した。その後、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．２ｇ、８０５．５０μｍｏｌ）溶液を－６５℃で滴下した。混合物を－６５℃で２０分間撹拌し、ＴＥＡ（４０７．５４ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、５６０．５７μＬ）を－６５℃で滴下し、生成された混合物を２０℃までゆっくりと昇温させ、２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、粗製）を無色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４７．３
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＤＭＳＯ（１２５．８７ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ、１２５．８７μＬ）溶液にＤＣＭ（５ｍＬ）中のオキサリルクロリド（１３２．９１ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、９１．６６μＬ）溶液を－６５℃で滴下した。混合物を－６５℃で１０分間撹拌した。その後、ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．２ｇ、８０５．５０μｍｏｌ）溶液を－６５℃で滴下した。混合物を－６５℃で２０分間撹拌し、ＴＥＡ（４０７．５４ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、５６０．５７μＬ）を－６５℃で滴下し、生成された混合物を２０℃までゆっくりと昇温させ、２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１８０ｍｇ、粗製）を無色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４７．３
【0215】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１６９．０８ｍｇ、６８６．５３μｍｏｌ）、３－（３－
フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１０．３１ｍｇ、１７１．６３μｍｏｌ、９．８２μＬ）を加え、混合物を２５℃で３０分間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（４３．１４ｍｇ、６８６．５３μｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃でさらに１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２２．２
メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－フルオロ－４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１６９．０８ｍｇ、６８６．５３μｍｏｌ）、３－（３－
フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１０．３１ｍｇ、１７１．６３μｍｏｌ、９．８２μＬ）を加え、混合物を２５℃で３０分間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（４３．１４ｍｇ、６８６．５３μｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃でさらに１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２２．２
【0216】
工程７．３－（４－（４－（（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、２１０．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１２ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２２．２
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）カルバメート（１１０ｍｇ、２１０．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１２ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２２．２
【0217】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１８）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９５ｍｇ、２２５．４４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０２．８６ｍｇ、２７０．５３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８７．４１ｍｇ、６７６．３２μｍｏｌ、１１７．８０μＬ）を加えた。混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、３－（４－（４－（（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１０８．６５ｍｇ、２０２．９０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（～６３％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル
）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３．９ｍｇ、２８．３９μｍｏｌ、１２．６０％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２５．５
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９５ｍｇ、２２５．４４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１０２．８６ｍｇ、２７０．５３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（８７．４１ｍｇ、６７６．３２μｍｏｌ、１１７．８０μＬ）を加えた。混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、３－（４－（４－（（１－アミノ－４－フルオロピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１０８．６５ｍｇ、２０２．９０μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（～６３％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３９％～６９％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル
）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－４－フルオロピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３．９ｍｇ、２８．３９μｍｏｌ、１２．６０％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２５．５
【0218】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、９．３３（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄｄ、Ｊ＝３．０、８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４９－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．０７－６．９３（ｍ、３Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０５－２．８６（ｍ、８Ｈ）、２．８５－２．５０（ｍ、８Ｈ）、２．２７－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．７１（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）。
【0219】
実施例１９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１９）の合成
【0220】
【化26】
【0221】
工程１．１－（４－ブロモフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
トルエン（５０ｍＬ）中の１－ブロモ－４－ヨード－ベンゼン（５ｇ、１７．６７ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．５０ｇ、１５．９１ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（８０９．２１ｍｇ、８８３．６９μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（６１３．５８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１７．２８ｇ、５３．０２ｍｍｏｌ）をＮ２気体下で加えた。混合物をＮ２気体下９０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．７ｇ、３．２７ｍｍｏｌ、１８．４９％収率、６０％純度）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．３
トルエン（５０ｍＬ）中の１－ブロモ－４－ヨード－ベンゼン（５ｇ、１７．６７ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．５０ｇ、１５．９１ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（８０９．２１ｍｇ、８８３．６９μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（６１３．５８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１７．２８ｇ、５３．０２ｍｍｏｌ）をＮ２気体下で加えた。混合物をＮ２気体下９０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．７ｇ、３．２７ｍｍｏｌ、１８．４９％収率、６０％純度）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１２．３
【0222】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（５）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中の１－（４－ブロモフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．２０ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＡｃ（９４３．０７ｍｇ、９．６１ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２３４．３７ｍｇ、３２０．３１μｍｏｌ）をＮ２気体下で加えた。混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２８０ｍｇ、４８２．１７μｍｏｌ、１５．０５％収率、９０％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２３．５
ジオキサン（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中の１－（４－ブロモフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１ｇ、３．２０ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１．２０ｇ、２．８８ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＡｃ（９４３．０７ｍｇ、９．６１ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２３４．３７ｍｇ、３２０．３１μｍｏｌ）をＮ２気体下で加えた。混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２８０ｍｇ、４８２．１７μｍｏｌ、１５．０５％収率、９０％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２３．５
【0223】
工程３．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（３ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（１４．５２ｍｇ、３８２．６８μｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（３ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（０．１ｇ、１９１．３４μｍｏｌ）溶液をＮ２気体下０℃で滴下した。反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をさらなるワークアップのために他のバッチ（０．１８ｇスケール）と合わせた。合わせた混合物にＨ２Ｏ（０．４ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウムａｑ．（０．４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．２ｍＬ）を加えてクエンチし、懸濁液をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ、５２０．１９μｍｏｌ、９３．９６％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．５
ＴＨＦ（３ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（１４．５２ｍｇ、３８２．６８μｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（３ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（０．１ｇ、１９１．３４μｍｏｌ）溶液をＮ２気体下０℃で滴下した。反応混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をさらなるワークアップのために他のバッチ（０．１８ｇスケール）と合わせた。合わせた混合物にＨ２Ｏ（０．４ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウムａｑ．（０．４ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．２ｍＬ）を加えてクエンチし、懸濁液をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈した後、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ、５２０．１９μｍｏｌ、９３．９６％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８１．５
【0224】
工程４．３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ、５２０．１９μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（５５．３６ｍｇ、５２．０２μｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。反応混合物を脱気し、Ｈ２気体で３回パージし、Ｈ２気体（１５Ｐ
ｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（２５０ｍｇ、５２０．１９μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（５５．３６ｍｇ、５２．０２μｍｏｌ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。反応混合物を脱気し、Ｈ２気体で３回パージし、Ｈ２気体（１５Ｐ
ｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．２
【0225】
工程５．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３３０．７２μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（２１０．４１ｍｇ、４９６．０９μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
ＤＣＭ（１ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３３０．７２μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（２１０．４１ｍｇ、４９６．０９μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
【0226】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物１９）の合成
メタノール（１ｍＬ）中の１－［４－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）フェニル］ピペリジン－４－カルバルデヒド（５０ｍｇ、１６６．４７μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７７．２５ｍｇ、１３３．１８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（２０．４８ｍｇ、２４９．７１μｍｏｌ）加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（５２．３１ｍｇ、８３２．３６μｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をさらなるワークアップのために他のバッチ（５０ｍｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、８分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１７．８ｍｇ、２０．２１μｍｏｌ、１２．１４％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２８．８
メタノール（１ｍＬ）中の１－［４－（２，６－ジオキソ－３－ピペリジル）フェニル］ピペリジン－４－カルバルデヒド（５０ｍｇ、１６６．４７μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７７．２５ｍｇ、１３３．１８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（２０．４８ｍｇ、２４９．７１μｍｏｌ）加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（５２．３１ｍｇ、８３２．３６μｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をさらなるワークアップのために他のバッチ（５０ｍｇスケール）と合わせた。合わせた反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、８分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１７．８ｍｇ、２０．２１μｍｏｌ、１２．１４％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２８．８
【0227】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７６（ｂｒ ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．４２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．０２（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、４．８８（ｔｄ、Ｊ＝６．９、１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．４５－４．３４（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｄｄ、Ｊ＝５．０、１０．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．６５－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．４５－２．４１
（ｍ、１Ｈ）、２．３１－２．０６（ｍ、９Ｈ）、２．０５－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６８－１．４９（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）、１．２１－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
（ｍ、１Ｈ）、２．３１－２．０６（ｍ、９Ｈ）、２．０５－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６８－１．４９（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）、１．２１－１．１１（ｍ、２Ｈ）。
【0228】
実施例２０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メチルベンズアミド（化合物２０）の合成
【0229】
【化27】
【0230】
工程１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル安息香酸（２）の合成
エタノール（８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３２ｍＬ）中の２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）の混合物にＨＣｌ（１２Ｍ、６０２．００μＬ）および４－アミノ－３－メチル安息香酸（５２０．００ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、エタノールを除去し、濾過した。濾過ケーキを真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル安息香酸（６２０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０６．３。
エタノール（８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３２ｍＬ）中の２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）の混合物にＨＣｌ（１２Ｍ、６０２．００μＬ）および４－アミノ－３－メチル安息香酸（５２０．００ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、エタノールを除去し、濾過した。濾過ケーキを真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル安息香酸（６２０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０６．３。
【0231】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ
［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル安息香酸（２００ｍｇ、４９３．３４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２８１．３８ｍｇ、７４０．０１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９１．２８ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、２５７．７９μＬ）を加えた後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１３０．４３ｍｇ、５４２．６８μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２３０ｍｇ、３５９．０８μｍｏｌ、７２．７８％収率、９８％純度）をオレンジ色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２８．７
［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル安息香酸（２００ｍｇ、４９３．３４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２８１．３８ｍｇ、７４０．０１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９１．２８ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、２５７．７９μＬ）を加えた後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１３０．４３ｍｇ、５４２．６８μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量が確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２３０ｍｇ、３５９．０８μｍｏｌ、７２．７８％収率、９８％純度）をオレンジ色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２８．７
【0232】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（４）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１００ｍｇ、１５９．３１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２８．３
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１００ｍｇ、１５９．３１μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２８．３
【0233】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メチルベンズアミド（化合物２０）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１００ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＡｃＯＮａ（１４．５４ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（６７．７２ｍｇ、２１２．７４μｍｏｌ）および酢酸（１０．６５ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ、１０．１４μＬ）を加え、３０分間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（５６．３６ｍｇ、２６５．９２μｍｏｌ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１７時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の
ピークが確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、９分）でさらに精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メチルベンズアミド（５．２ｍｇ、６．１６μｍｏｌ、３．４７％収率、９８．３％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３０．４
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１００ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＡｃＯＮａ（１４．５４ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（６７．７２ｍｇ、２１２．７４μｍｏｌ）および酢酸（１０．６５ｍｇ、１７７．２８μｍｏｌ、１０．１４μＬ）を加え、３０分間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（５６．３６ｍｇ、２６５．９２μｍｏｌ）を加えた。生成された混合物を２０℃で１７時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の
ピークが確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、９分）でさらに精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メチルベンズアミド（５．２ｍｇ、６．１６μｍｏｌ、３．４７％収率、９８．３％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３０．４
【0234】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．５２（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｄ、Ｊ＝７．５８Ｈｚ、１Ｈ）、８．１６（ｄ、Ｊ＝０．８６Ｈｚ、１Ｈ）、７．７７－７．８３（ｍ、１Ｈ）、７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝８．３１Ｈｚ、１Ｈ）、６．９１－７．０６（ｍ、３Ｈ）、４．６８－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．３４－４．４７（ｍ、１Ｈ）、３．９９（ｔ、Ｊ＝１３．５７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝１１．９２、４．５８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３３－３．３１（ｍ、５Ｈ）、２．５９－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．３２－２．３４（ｍ、１Ｈ）、２．３３－２．３１（ｍ、４Ｈ）、２．２０－２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．１０－２．１９（ｍ、５Ｈ）、２．０２－１．９８（ｍ、１Ｈ）、１．７４－１．８４（ｍ、４Ｈ）、１．５０－１．６５（ｍ、５Ｈ）、１．２１－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．１６（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、６Ｈ）。
【0235】
実施例２１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド（化合物２１）の合成
【0236】
【化28】
【0237】
工程１．４－アミノ－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（２）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の１－ブロモ－２－フルオロ－５－メチル－４－ニトロベンゼン（１．５ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４６９．００ｍｇ、６４０．９６μｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．９５ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ、２．６８ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２で３回脱気した後、ＣＯでバブリングした。反応混合物をＣＯ（５０Ｐｓｉ）下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１５ｍＬ／分）により精製し、４－アミノ－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（３００ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ、２４．２７％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８４．１。
メタノール（１０ｍＬ）中の１－ブロモ－２－フルオロ－５－メチル－４－ニトロベンゼン（１．５ｇ、６．４１ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４６９．００ｍｇ、６４０．９６μｍｏｌ）およびＴＥＡ（１．９５ｇ、１９．２３ｍｍｏｌ、２．６８ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２で３回脱気した後、ＣＯでバブリングした。反応混合物をＣＯ（５０Ｐｓｉ）下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１５ｍＬ／分）により精製し、４－アミノ－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（３００ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ、２４．２７％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１８４．１。
【0238】
工程２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４－アミノ－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（３００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）溶液に２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（４７６．０９ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（９３４．５８ｍｇ、４．９１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間
撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸塩メチル（１９０ｍｇ、３９５．２８μｍｏｌ、２４．１４％収率、９１％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３８．４。
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４－アミノ－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（３００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）溶液に２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（４７６．０９ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（９３４．５８ｍｇ、４．９１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１６時間
撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸塩メチル（１９０ｍｇ、３９５．２８μｍｏｌ、２４．１４％収率、９１％純度）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３８．４。
【0239】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸（４）の合成
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍＬ）およびメタノール（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（１９０ｍｇ、４３４．３７μｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（２Ｍ、１．５２ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を真空濃縮し、有機溶媒を除去した後、１Ｎ ＨＣｌを加え、ｐＨ＝１～２に調整した。生成された混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２４．４。
Ｈ２Ｏ（３ｍＬ）、ＴＨＦ（３ｍＬ）およびメタノール（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸メチル（１９０ｍｇ、４３４．３７μｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（２Ｍ、１．５２ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を真空濃縮し、有機溶媒を除去した後、１Ｎ ＨＣｌを加え、ｐＨ＝１～２に調整した。生成された混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２４．４。
【0240】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸（１５０ｍｇ、３４８．５７μｍｏｌ、Ｌｉ）溶液にＨＡＴＵ（１９８．８１ｍｇ、５２２．８６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１３５．１５ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１８２．１４μＬ）を加えた後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９２．１５ｍｇ、３８３．４３μｍｏｌ）を加えた。混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２５ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２４０ｍｇ、３３４．５１μｍｏｌ、９５．９７％収率、９０％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４６．７。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル安息香酸（１５０ｍｇ、３４８．５７μｍｏｌ、Ｌｉ）溶液にＨＡＴＵ（１９８．８１ｍｇ、５２２．８６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１３５．１５ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、１８２．１４μＬ）を加えた後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９２．１５ｍｇ、３８３．４３μｍｏｌ）を加えた。混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２５ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２４０ｍｇ、３３４．５１μｍｏｌ、９５．９７％収率、９０％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４６．７。
【0241】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン
－２－イル）ベンズアミド（６）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２４０ｍｇ、３７１．６８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４６．３。
－２－イル）ベンズアミド（６）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２４０ｍｇ、３７１．６８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４６．３。
【0242】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド（化合物２１）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、３７７．９７μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３７．２１ｍｇ、４５３．５６μｍｏｌ）を加え、２０℃で３０分間撹拌した。その後、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１４４．３９ｍｇ、４５３．５６μｍｏｌ）、酢酸（１１．３５ｍｇ、１８８．９８μｍｏｌ、１０．８１μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１２０．１６ｍｇ、５６６．９５μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１５．５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、９分）でさらに精製し、凍結乾燥し、所望の生成物である４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド（２４．３ｍｇ、２７．００μｍｏｌ、７．１４％収率、９４．２％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．４。
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－２－フルオロ－５－メチル－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２２０ｍｇ、３７７．９７μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３７．２１ｍｇ、４５３．５６μｍｏｌ）を加え、２０℃で３０分間撹拌した。その後、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１４４．３９ｍｇ、４５３．５６μｍｏｌ）、酢酸（１１．３５ｍｇ、１８８．９８μｍｏｌ、１０．８１μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１２０．１６ｍｇ、５６６．９５μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１５．５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～９８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、９分）でさらに精製し、凍結乾燥し、所望の生成物である４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－２－フルオロ－５－メチルベンズアミド（２４．３ｍｇ、２７．００μｍｏｌ、７．１４％収率、９４．２％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．４。
【0243】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．５４（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄｄ、Ｊ＝７．３４、２．５７Ｈｚ、１Ｈ）、８．２１（ｓ、１Ｈ）、７．８１－７．８９（ｍ、１Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝８．３１Ｈｚ、１Ｈ）、６．９２－７．０４（ｍ、３Ｈ）、４．８５（ｄｔ、Ｊ＝１３．２４、６．６５Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１－４．４１（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．５７Ｈｚ、２Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝１１．８０、４．７１Ｈｚ、１Ｈ）、３．３０－３．３３（ｍ、５Ｈ）、２．５４－２．７１（ｍ、４Ｈ）、２．３２－２．３５（ｍ、１Ｈ）、２．２６－２．２９（ｍ、４Ｈ）、２．２１－２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．１０－２．１８（ｍ、５
Ｈ）、１．９５－２．０２（ｍ、１Ｈ）、１．７３－１．８１（ｍ、４Ｈ）、１．４９－１．６４（ｍ、５Ｈ）、１．２３－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、６Ｈ）。
Ｈ）、１．９５－２．０２（ｍ、１Ｈ）、１．７３－１．８１（ｍ、４Ｈ）、１．４９－１．６４（ｍ、５Ｈ）、１．２３－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、６Ｈ）。
【0244】
実施例２２．５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－４－メトキシピコリンアミド（化合物２２）の合成
【0245】
【化29】
【0246】
工程１．７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－２－（（４－メトキシベンジル）アミノ）－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（２）の合成
ｔ－ＢｕＯＨ（２０ｍＬ）中の２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（２ｇ、６．８８ｍｍｏｌ）溶液に（４－メトキシフェニル）メタンアミン（９４３．７９ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ、８９０．３７μＬ）、ＤＩＰＥＡ（１．７８ｇ、１３．７６ｍｍｏｌ、２．４０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を１５℃でＭＴＢＥ：酢酸エチル＝１：１（１０ｍＬ）で１０分間粉砕し、７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－２－（（４－メトキシベンジル）アミノ）－
５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ、７０．５５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９２．０。
ｔ－ＢｕＯＨ（２０ｍＬ）中の２－クロロ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（２ｇ、６．８８ｍｍｏｌ）溶液に（４－メトキシフェニル）メタンアミン（９４３．７９ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ、８９０．３７μＬ）、ＤＩＰＥＡ（１．７８ｇ、１３．７６ｍｍｏｌ、２．４０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を１５℃でＭＴＢＥ：酢酸エチル＝１：１（１０ｍＬ）で１０分間粉砕し、７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－２－（（４－メトキシベンジル）アミノ）－
５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ、７０．５５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３９２．０。
【0247】
工程２．２－アミノ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（３）の合成
ＴＦＡ（１０ｍＬ）中の７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－２－（（４－メトキシベンジル）アミノ）－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ×２）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。残渣を減圧濃縮した後、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、２－アミノ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１ｇ、３．６５ｍｍｏｌ、７５．５６％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７２．０。
ＴＦＡ（１０ｍＬ）中の７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－２－（（４－メトキシベンジル）アミノ）－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ×２）で洗浄し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。残渣を減圧濃縮した後、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、２－アミノ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（１ｇ、３．６５ｍｍｏｌ、７５．５６％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７２．０。
【0248】
工程３．メチル５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリナート（５）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２－アミノ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（５００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）およびメチル５－ブロモ－４－メトキシピコリナート（４５３．５４ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１６８．７９ｍｇ、１８４．３２μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（１０６．６５ｍｇ、１８４．３２μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．８０ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物をＮ２で３回脱気し、パージした後、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。残渣を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、メチル５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリナート（６３０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、７４．４０％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３７．１。
ジオキサン（１０ｍＬ）中の２－アミノ－７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－５，７，８，９－テトラヒドロ－６Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－６－オン（５００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）およびメチル５－ブロモ－４－メトキシピコリナート（４５３．５４ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ２（ｄｂａ）３（１６８．７９ｍｇ、１８４．３２μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（１０６．６５ｍｇ、１８４．３２μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１．８０ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物をＮ２で３回脱気し、パージした後、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。残渣を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、メチル５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリナート（６３０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、７４．４０％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４３７．１。
【0249】
工程４．５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリン酸（６）の合成
ＴＨＦ（２ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）中のメチル５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ）－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリナート（２００ｍｇ、４５８．２８μｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（２Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物にＨＣｌ（１２Ｍ）を用いてｐＨ＝２に調整し、７０℃で真空濃縮し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，
７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリン酸（１９０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３．２。
ＴＨＦ（２ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）中のメチル５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ）－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリナート（２００ｍｇ、４５８．２８μｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（２Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物にＨＣｌ（１２Ｍ）を用いてｐＨ＝２に調整し、７０℃で真空濃縮し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，
７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリン酸（１９０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２３．２。
【0250】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリンアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリン酸（１９０ｍｇ、４４９．８３μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２５６．５６ｍｇ、６７４．７４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２９０．６８ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ、３９１．７６μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。次いでｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１０８．１１ｍｇ、４４９．８３μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリンアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２８０ｍｇ、３５６．１３μｍｏｌ、７９．１７％収率、８２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４５．４。
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリン酸（１９０ｍｇ、４４９．８３μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（２５６．５６ｍｇ、６７４．７４μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２９０．６８ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ、３９１．７６μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。次いでｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１０８．１１ｍｇ、４４９．８３μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリンアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２８０ｍｇ、３５６．１３μｍｏｌ、７９．１７％収率、８２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４５．４。
【0251】
工程６．５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピコリンアミド（９）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリンアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１５０ｍｇ、２３２．６６μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピコリンアミド（１３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．３。
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシピコリンアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１５０ｍｇ、２３２．６６μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を真空濃縮し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピコリンアミド（１３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．３。
【0252】
工程７．５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－４－メトキシピコリンアミド（化合物２２）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］
ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピコリンアミド（１３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８５．４７ｍｇ、２６８．４８μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（２７．５３ｍｇ、３３５．６０μｍｏｌ）溶液を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで２５℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２３７．３２ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：４３％～７８％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－４－メトキシピコリンアミド（４３．４ｍｇ、５０．２２μｍｏｌ、２２．４５％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．５。
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］
ジアゼピン－２－イル）アミノ）－４－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピコリンアミド（１３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８５．４７ｍｇ、２６８．４８μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（２７．５３ｍｇ、３３５．６０μｍｏｌ）溶液を加えた。混合物を２５℃で１時間撹拌した。次いで２５℃で混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２３７．３２ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：４３％～７８％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、５－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－４－メトキシピコリンアミド（４３．４ｍｇ、５０．２２μｍｏｌ、２２．４５％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．５。
【0253】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、９．１２（ｓ、１Ｈ）、８．７６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３－８．１７（ｍ、２Ｈ）、７．６４（ｓ、１Ｈ）、７．０５－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．８８－４．７４（ｍ、１Ｈ）、４．４９－４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９３（ｍ、５Ｈ）、３．８４－３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．３１－３．２９（ｍ、２Ｈ）、２．７１－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．４９－２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．３７－２．２５（ｍ、２Ｈ）、２．２４－２．１７（ｍ、２Ｈ）、２．１６－２．０８（ｍ、４Ｈ）、２．０４－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．９５－１．８７（ｍ、２Ｈ）、１．８２－１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．３０－１．１４（ｍ、８Ｈ）。
【0254】
実施例２３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２３）の合成
【0255】
【化30】
【0256】
工程１．７－ベンジル２－（ｔｅｒｔ－ブチル）２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２，７－ジカルボキシレート（２）の合成
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１０ｇ、４４．１９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で炭酸ナトリウム（１４．０５ｇ、１３２．５６ｍｍｏｌ）およびＣｂｚＣｌ（９．０５ｇ、５３．０２ｍｍｏｌ、７．５４ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４０％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１７．１ｇ、４０．３３ｍｍｏｌ、９１．２６％収率、８５％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６１．４
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１０ｇ、４４．１９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で炭酸ナトリウム（１４．０５ｇ、１３２．５６ｍｍｏｌ）およびＣｂｚＣｌ（９．０５ｇ、５３．０２ｍｍｏｌ、７．５４ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４０％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１７．１ｇ、４０．３３ｍｍｏｌ、９１．２６％収率、８５％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６１．４
【0257】
工程２．ベンジル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の７－ベンジル２－（ｔｅｒｔ－ブチル）２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２，７－ジカルボキシレート（１０ｇ、２３．５８ｍｍｏｌ、８５％純度）溶液に２０℃でＴＦＡ（１３．４４ｇ、１１７．９１ｍｍｏｌ、８．７３ｍＬ）を加え、生成された混合物を１３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることが確認され、所望の質量のピーク（７１％）が検出された。反応混合物を真空中で濃縮し、ベンジル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６１．１
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の７－ベンジル２－（ｔｅｒｔ－ブチル）２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２，７－ジカルボキシレート（１０ｇ、２３．５８ｍｍｏｌ、８５％純度）溶液に２０℃でＴＦＡ（１３．４４ｇ、１１７．９１ｍｍｏｌ、８．７３ｍＬ）を加え、生成された混合物を１３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質が残っていることが確認され、所望の質量のピーク（７１％）が検出された。反応混合物を真空中で濃縮し、ベンジル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６１．１
【0258】
工程３．ベンジル２－ニトロソ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（４）の合成
Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）中のベンジル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、３４．１９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で亜硝酸ナトリウム（７．０８ｇ、１０２．５６ｍｍｏｌ）に次いで、酢酸（８．２１ｇ、１３６．７５ｍｍｏｌ、７．８２ｍＬ）を滴下し、生成された混合物を２０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７５％）が検出された。この反応混合物に０℃で飽和炭酸水素ナトリウム（８０ｍＬ）を加え、ｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、ベンジル２－ニトロソ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９．４ｇ、粗製）を黄色の油状物として得る。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９０．４
Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）中のベンジル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、３４．１９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で亜硝酸ナトリウム（７．０８ｇ、１０２．５６ｍｍｏｌ）に次いで、酢酸（８．２１ｇ、１３６．７５ｍｍｏｌ、７．８２ｍＬ）を滴下し、生成された混合物を２０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７５％）が検出された。この反応混合物に０℃で飽和炭酸水素ナトリウム（８０ｍＬ）を加え、ｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、ベンジル２－ニトロソ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９．４ｇ、粗製）を黄色の油状物として得る。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９０．４
【0259】
工程４．ベンジル２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５）の合成
ＴＨＦ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のベンジル２－ニトロソ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９．４ｇ、３２．４９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で塩化アンモニウム（６．９５ｇ、１２９．９６ｍｍｏｌ）に次いでＺｎ（８．５０ｇ、１２９．９６ｍｍｏｌ）を滴下し、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物をＴＨＦ（４００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、ベンジル２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７６．４
ＴＨＦ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のベンジル２－ニトロソ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９．４ｇ、３２．４９ｍｍｏｌ）溶液に０℃で塩化アンモニウム（６．９５ｇ、１２９．９６ｍｍｏｌ）に次いでＺｎ（８．５０ｇ、１２９．９６ｍｍｏｌ）を滴下し、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物をＴＨＦ（４００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、ベンジル２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７６．４
【0260】
工程５．ベンジル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６）の合成
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のベンジル２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、３２．３２ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でのＴＥＡ（９．８１ｇ、９６．９７ｍｍｏｌ、１３．５０ｍＬ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（１０．５８ｇ、４８．４８ｍｍｏｌ、１１．１４ｍＬ）を加え、生成された混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより８％の出発物質および所望の質量のピーク（４７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ベンジル２－アミノ－２，７－ジアジャスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６．４ｇ、１７．０５ｍｍｏｌ、５２．７４％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７６．４
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のベンジル２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（８．９ｇ、３２．３２ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でのＴＥＡ（９．８１ｇ、９６．９７ｍｍｏｌ、１３．５０ｍＬ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（１０．５８ｇ、４８．４８ｍｍｏｌ、１１．１４ｍＬ）を加え、生成された混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより８％の出発物質および所望の質量のピーク（４７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ベンジル２－アミノ－２，７－ジアジャスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６．４ｇ、１７．０５ｍｍｏｌ、５２．７４％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７６．４
【0261】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）および酢酸（５ｍＬ）中のベンジル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．４ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液をＨ２で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２．８ｇ、粗製、ＨＯＡＣ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４２．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）および酢酸（５ｍＬ）中のベンジル２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３．４ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液をＨ２で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２．８ｇ、粗製、ＨＯＡＣ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４２．２
【0262】
工程７．ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２、７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（９）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（６００ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．１４ｇ、３．７７ｍｍｏｌ、ＨＯＡＣ塩）溶液に２０℃で酢酸（１１３．１８ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１０７．７９μＬ）に次いでＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１．２０ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６２２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、６０．７０％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．４
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（６００ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１．１４ｇ、３．７７ｍｍｏｌ、ＨＯＡＣ塩）溶液に２０℃で酢酸（１１３．１８ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、１０７．７９μＬ）に次いでＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１．２０ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５５％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６２２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、６０．７０％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．４
【0263】
工程８．３－（４－（４－（（２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１０）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６２２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（６５２．２５ｍｇ、５．７２ｍｍｏｌ、４２３．５４μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６３８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．４
ＤＣＭ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（６２２ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＴＦＡ（６５２．２５ｍｇ、５．７２ｍｍｏｌ、４２３．５４μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６３８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．４
【0264】
工程９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２３）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４４６．６４ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２７６．０３ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、３７２．０１μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２５．２０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液およびＤＩＰＥＡ（４１４．０５ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ、５５８．０１μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費さ
れたことが確認され、所望の質量のピーク（４４％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（４２６ｍｇ）および生成物Ｂ（２０７ｍｇ）を得た。生成物Ａを２０℃で混合溶液（１０ｍＬ、酢酸エチル：メタノール＝１０：１）で１２時間粉砕し、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド）［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２９１．１ｍｇ、３３２．３７μｍｏｌ、３１．１２％収率、９６．７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４４６．６４ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２７６．０３ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、３７２．０１μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２５．２０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液およびＤＩＰＥＡ（４１４．０５ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ、５５８．０１μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費さ
れたことが確認され、所望の質量のピーク（４４％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（４２６ｍｇ）および生成物Ｂ（２０７ｍｇ）を得た。生成物Ａを２０℃で混合溶液（１０ｍＬ、酢酸エチル：メタノール＝１０：１）で１２時間粉砕し、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド）［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２９１．１ｍｇ、３３２．３７μｍｏｌ、３１．１２％収率、９６．７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４
【0265】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、９．４８（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４５－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．０３－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．８７（ｔｄ、Ｊ＝６．７、１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｄｄ、Ｊ＝４．７、１１．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．６１－３．４５（ｍ、４Ｈ）、３．３３－３．２５（ｍ、５Ｈ）、２．６５－２．５６（ｍ、３Ｈ）、２．４５－２．３４（ｍ、１Ｈ）、２．３１－２．２２（ｍ、３Ｈ）、２．１９（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝３．６、１２．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．１３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．９９（ｔｄ、Ｊ＝４．３、８．７Ｈｚ、１Ｈ）、１．８６－１．５３（ｍ、８Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、８Ｈ）。
【0266】
実施例２４．Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシ－４－（（（Ｒ）－５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド（化合物２４）の合成
【0267】
【化31】
【0268】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（２－メトキシ－２－オキソエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２）の合成
メタノール（５０ｍＬ）およびＭｅＣＮ（５０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピロリジン－２－イル）酢酸（３ｇ、１３．０８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．８６ｇ、１４．３９ｍｍｏｌ、２．５１ｍＬ）溶液にＴＭＳＣＨＮ２（２Ｍ、１３．０８ｍＬ）を０℃で加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（２－メトキシ－２－オキソエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、７．８１ｍｍｏｌ、５９．６８％収率、９５％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝１４４．３
メタノール（５０ｍＬ）およびＭｅＣＮ（５０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－（１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピロリジン－２－イル）酢酸（３ｇ、１３．０８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．８６ｇ、１４．３９ｍｍｏｌ、２．５１ｍＬ）溶液にＴＭＳＣＨＮ２（２Ｍ、１３．０８ｍＬ）を０℃で加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（２－メトキシ－２－オキソエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、７．８１ｍｍｏｌ、５９．６８％収率、９５％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝１４４．３
【0269】
工程２．（Ｒ）－２－（ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（２－メトキシ－２－オキソエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、８．２２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（Ｒ）－２－（ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（１．５ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４４．１。
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（２－メトキシ－２－オキソエチル）ピロリジン－１－カルボキシレート（２ｇ、８．２２ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（Ｒ）－２－（ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（１．５ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１４４．１。
【0270】
工程３．（Ｒ）－２－（１－（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（５）の合成
アセトン（３０ｍＬ）中の２，４－ジクロロ－５－ニトロピリミジン（１．７８ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）および（Ｒ）－２－（ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（１．５ｇ、８．３５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に炭酸カリウム（６．９２ｇ、５０．１０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ）を加え、ｐＨ＝８に調整した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－（１－（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（２．４ｇ、７．９８ｍｍｏｌ、９５．５９％収率、１００％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０１．０
アセトン（３０ｍＬ）中の２，４－ジクロロ－５－ニトロピリミジン（１．７８ｇ、９．１８ｍｍｏｌ）および（Ｒ）－２－（ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（１．５ｇ、８．３５ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に炭酸カリウム（６．９２ｇ、５０．１０ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＨＣｌ（１Ｍ）を加え、ｐＨ＝８に調整した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－（１－（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（２．４ｇ、７．９８ｍｍｏｌ、９５．５９％収率、１００％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０１．０
【0271】
工程４．（Ｒ）－２－クロロ－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（６）の合成
ＨＯＡｃ（２０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－（１－（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（２．４ｇ、７．９８ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（２．２３ｇ、３９．９１ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を６０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－クロロ－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（１．３ｇ、５．４５ｍｍｏｌ、６９．０９％収率、９６％純度）を赤色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３９．１
ＨＯＡｃ（２０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－（１－（２－クロロ－５－ニトロピリミジン－４－イル）ピロリジン－２－イル）酢酸メチル（２．４ｇ、７．９８ｍｍｏｌ）溶液にＦｅ（２．２３ｇ、３９．９１ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を６０℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－クロロ－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（１．３ｇ、５．４５ｍｍｏｌ、６９．０９％収率、９６％純度）を赤色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３９．１
【0272】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝９．７６（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．７６（ｓ、１Ｈ）、３．９９（ｄｔ、Ｊ＝５．６、９．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．６５－３．５２（ｍ、２Ｈ）、２．８３（ｄｄ、Ｊ＝１０．１、１４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．６０（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．１８（ｔｄ、Ｊ＝５．７、１１．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．９４（ｔｄ、Ｊ＝６．１、１２．１Ｈｚ、１Ｈ）、１．８８－１．７４（ｍ、１Ｈ）、１．６７－１．５４（ｍ、１Ｈ）
【0273】
工程５．（Ｒ）－２－クロロ－５－メチル－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（７）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－クロロ－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（１．３ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）溶液に炭酸カリウム（１．５１ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（８５０．４２ｍｇ、５．９９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－クロロ－５－メチル－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（０．９５ｇ、３．６１ｍｍｏｌ、６６．２６％収率、９６％純度）を灰色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５３．３
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（Ｒ）－２－クロロ－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（１．３ｇ、５．４５ｍｍｏｌ）溶液に炭酸カリウム（１．５１ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（８５０．４２ｍｇ、５．９９ｍｍｏｌ）を加え、懸濁液を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、（Ｒ）－２－クロロ－５－メチル－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（０．９５ｇ、３．６１ｍｍｏｌ、６６．２６％収率、９６％純度）を灰色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５３．３
【0274】
工程６．（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）安息香酸（９）の合成
エタノール（２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）中の（Ｒ）－２－クロロ－５－メチル－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（０．８５ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）および４－アミノ－３－メトキシ安息香酸（７８７．１９ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ（１２Ｍ、５６０．６１μＬ）を加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、混合溶媒（酢酸エチル：アセトニトリル：エタノール：ＤＭＦ＝３０：１５：１５：５、５ｍＬ）と１０分間粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを混合溶媒（酢酸エチル：アセトニトリル：エタノール：ＤＭＦ＝３０：１５：１５：５、３ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて乾燥させ、（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）安息香酸（１．３ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、８７．７０％収率、８７％純度）を淡褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８４．４
エタノール（２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）中の（Ｒ）－２－クロロ－５－メチル－７ａ，８，９，１０－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－６（７Ｈ）－オン（０．８５ｇ、３．３６ｍｍｏｌ）および４－アミノ－３－メトキシ安息香酸（７８７．１９ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ（１２Ｍ、５６０．６１μＬ）を加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、混合溶媒（酢酸エチル：アセトニトリル：エタノール：ＤＭＦ＝３０：１５：１５：５、５ｍＬ）と１０分間粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを混合溶媒（酢酸エチル：アセトニトリル：エタノール：ＤＭＦ＝３０：１５：１５：５、３ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて乾燥させ、（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）安息香酸（１．３ｇ、２．９５ｍｍｏｌ、８７．７０％収率、８７％純度）を淡褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８４．４
【0275】
工程７．ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１１）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）安息香酸（５００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（７４３．８０ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５０５．６５ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ、６８１．４６μＬ）溶液を２０℃で２０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３４４．７８ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（７００ｍｇ、８７８．２８μｍｏｌ、６７．３５％収率、７６％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０６．６。
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）安息香酸（５００ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（７４３．８０ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５０５．６５ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ、６８１．４６μＬ）溶液を２０℃で２０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチル２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３４４．７８ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（７００ｍｇ、８７８．２８μｍｏｌ、６７．３５％収率、７６％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０６．６。
【0276】
工程８．（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１２）
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ）－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（７００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（６００ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０６．５
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－２－（３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ）－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（７００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（６００ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０６．５
【0277】
工程９．Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシ－４－（（（Ｒ）－５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド（化合物２４）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５０ｍｇ、１５７．０６μｍｏｌ）溶液に（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（８５．１４ｍｇ、１５７．０６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（１９．３３ｍｇ、２３５．６０μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１６６．４４ｍｇ、７８５．３２μｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）で精製し、Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシ－４－（（（Ｒ）－５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド（１８．３ｍｇ、２０．９２μｍｏｌ、１３．３２％収率、９５％純度、０．５ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０８．６
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（５０ｍｇ、１５７．０６μｍｏｌ）溶液に（Ｒ）－３－メトキシ－４－（（５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（８５．１４ｍｇ、１５７．０６μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（１９．３３ｍｇ、２３５．６０μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１６６．４４ｍｇ、７８５．３２μｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、１０分）で精製し、Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシ－４－（（（Ｒ）－５－メチル－６－オキソ－６，７，７ａ，８，９，１０－ヘキサヒドロ－５Ｈ－ピリミド［５，４－ｂ］ピロロ［１，２－ｄ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）ベンズアミド（１８．３ｍｇ、２０．９２μｍｏｌ、１３．３２％収率、９５％純度、０．５ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０８．６
【0278】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝８．５６（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．９３（ｓ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．４３（ｓ、１Ｈ）、７．２９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．９７－６．８６（ｍ、３Ｈ）、６．２１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．６０－４．５１（ｍ、１Ｈ）、４．０２－３．９１（ｍ、５Ｈ）、３．７４－３．６７（ｍ、２Ｈ）、３．４５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、２．８０－２．５７（ｍ、１１Ｈ）、２．５６－２．４０（ｍ、５Ｈ）、２．３０－２．２０（ｍ、３Ｈ）、２．１０（ｔｄ、Ｊ＝６．３、１２．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．９３－１．８５（ｍ、４Ｈ）、１．８０－１．７２（ｍ、４Ｈ）、１．６８－１．５７（ｍ、１Ｈ）、１．５３－１．４１（ｍ、２Ｈ）。
【0279】
実施例２５．７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４、５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（化合物２５）の合成
【0280】
【化32】
【0281】
工程１．３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（２）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（０．５ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５４１．３８ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６０．０４ｍｇ、３．５６ｍｍｏｌ、６２０．００μＬ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を塩水（８０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過した。濾過ケーキを集め、乾燥し、３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．６ｇ、粗製）を褐色の固形物として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．２
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（０．５ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５４１．３８ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４６０．０４ｍｇ、３．５６ｍｍｏｌ、６２０．００μＬ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を塩水（８０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（２０ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過した。濾過ケーキを集め、乾燥し、３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．６ｇ、粗製）を褐色の固形物として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４０．２
【0282】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾイル）オキシ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－
イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．６ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル２－ヒドロキシ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２６８．３９ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７１８．６７ｍｇ、５．５６ｍｍｏｌ、９６８．５６μＬ）混合物を８０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（１９％）が検出された。混合物を塩水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：６８％～９８％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾイル）オキシ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．１５ｇ、２３２．６６μｍｏｌ、２０．９２％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４５．５
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジン－３－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－
イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．６ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ－ブチル２－ヒドロキシ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２６８．３９ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（７１８．６７ｍｇ、５．５６ｍｍｏｌ、９６８．５６μＬ）混合物を８０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（１９％）が検出された。混合物を塩水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：６８％～９８％、１０分）で再精製し、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾイル）オキシ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．１５ｇ、２３２．６６μｍｏｌ、２０．９２％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４５．５
【0283】
工程３．７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（４）の合成
ジオキサン（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾイル）オキシ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．１５ｇ、２３２．６６μｍｏｌ）溶液に２５℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１５．００ｍＬ）を加えた。生成された混合物を３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピークが検出された。混合溶液を減圧濃縮し、７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．１５ｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．３
ジオキサン（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾイル）オキシ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．１５ｇ、２３２．６６μｍｏｌ）溶液に２５℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１５．００ｍＬ）を加えた。生成された混合物を３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピークが検出された。混合溶液を減圧濃縮し、７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（０．１５ｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．３
【0284】
工程４．７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（化合物２５）の合成
メタノール（２ｍＬ）中の７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（１４５ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（２０．４７ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ）溶液を２５℃で２０分間撹拌した。混合物に２５℃で１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１１１．２２ｍｇ、３４９．３７μｍｏｌ）および酢酸（１４．９９ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ、１４．２７μＬ）を加えた。生成された混合物を３０分間撹拌した。反応混合物に２５℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（４７．０４ｍｇ、７４８．６４μｍｏｌ）を加えた。混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳ
により出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（～４０％）が検出された。反応溶液を濃縮し、有機溶媒を除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）およびＨＣｌ（２０ｍＬ、０．２Ｍ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５７％～８７％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ
Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～４９％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（９２．１ｍｇ、１０６．９６μｍｏｌ、４２．８６％収率、９９％純度、０．１２ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４
メタノール（２ｍＬ）中の７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（１４５ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（２０．４７ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ）溶液を２５℃で２０分間撹拌した。混合物に２５℃で１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１１１．２２ｍｇ、３４９．３７μｍｏｌ）および酢酸（１４．９９ｍｇ、２４９．５５μｍｏｌ、１４．２７μＬ）を加えた。生成された混合物を３０分間撹拌した。反応混合物に２５℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（４７．０４ｍｇ、７４８．６４μｍｏｌ）を加えた。混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳ
により出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（～４０％）が検出された。反応溶液を濃縮し、有機溶媒を除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）およびＨＣｌ（２０ｍＬ、０．２Ｍ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５７％～８７％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ
Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～４９％、１０分）で精製し、凍結乾燥し、７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンゾエート（９２．１ｍｇ、１０６．９６μｍｏｌ、４２．８６％収率、９９％純度、０．１２ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４
【0285】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、８．１９（ｓ、０．１２Ｈ）、７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．６２（ｄｄ、Ｊ＝１．４、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５－６．８７（ｍ、３Ｈ）、５．１３（ｑ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．８９（ｑ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．７９（ｄｄ、Ｊ＝５．０、１１．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２－３．２３（ｍ、５Ｈ）、２．７０－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．４０－２．０７（ｍ、１０Ｈ）、２．０５－１．９５（ｍ、１Ｈ）、１．８８（ｄｄ、Ｊ＝６．８、１２．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．７７（ｄ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．６８－１．５５（ｍ、５Ｈ）、１．２９－１．１５（ｍ、８Ｈ）。
【0286】
実施例２６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－３－メチルピロリジン－３－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２６）の合成
【0287】
【化33】
【0288】
工程１．４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（２）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－エチル４－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（１ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９２１．３１μＬ）を加え、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出され、混合物を真空濃縮し、４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１７２．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－エチル４－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（１ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９２１．３１μＬ）を加え、２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出され、混合物を真空濃縮し、４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１７２．１
【0289】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中の４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（０．５ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．８６ｇ、２．４１ｍｍｏｌ、６０％純度）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．３５ｇ、７．２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（８１．０７ｍｇ、３６１．１０μｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（４４９．７０ｍｇ、７２２．２１μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出され、混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．１ｇ、１．７１ｍｍｏｌ、７０．８５％収率、８６％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．３
トルエン（２０ｍＬ）中の４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（０．５ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．８６ｇ、２．４１ｍｍｏｌ、６０％純度）溶液にＣｓ２ＣＯ３（２．３５ｇ、７．２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（８１．０７ｍｇ、３６１．１０μｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（４４９．７０ｍｇ、７２２．２１μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出され、混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．１ｇ、１．７１ｍｍｏｌ、７０．８５％収率、８６％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．３
【0290】
工程３．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（４）の合成
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．１ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＬｉＡｌＨ４（１０５．３８ｍｇ、２．７８ｍｍｏ
ｌ）を加え、混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）でクエンチした後、濾過し、硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣を真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．３
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．１ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＬｉＡｌＨ４（１０５．３８ｍｇ、２．７８ｍｍｏ
ｌ）を加え、混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）でクエンチした後、濾過し、硫酸ナトリウムで乾燥した。残渣を真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．３
【0291】
工程４．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－４－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（４ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（１ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（２．６９ｇ、１０％純度）を加え、Ｈ２で３回脱気し、パージした後、反応混合物をＨ２気体（１５ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を濾過し、濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－４－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２０ｍｇ、粗製）を灰色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（４ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（１ｇ、１．９５ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（２．６９ｇ、１０％純度）を加え、Ｈ２で３回脱気し、パージした後、反応混合物をＨ２気体（１５ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を濾過し、濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－４－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２０ｍｇ、粗製）を灰色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１
【0292】
工程５．（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（６）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－４－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５９８．１１μｍｏｌ）溶液に、ＴｏｓＣｌ（１７１．０４ｍｇ、８９７．１７μｍｏｌ）およびＴＥＡ（１８１．５７ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ、２４９．７５μＬ）に次いでＤＭＡＰ（１４．６１ｍｇ、１１９．６２μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出され、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～５１％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（６０ｍｇ、１１０．５３μｍｏｌ、１８．４８％収率、９０％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．２
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－４－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５９８．１１μｍｏｌ）溶液に、ＴｏｓＣｌ（１７１．０４ｍｇ、８９７．１７μｍｏｌ）およびＴＥＡ（１８１．５７ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ、２４９．７５μＬ）に次いでＤＭＡＰ（１４．６１ｍｇ、１１９．６２μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出され、混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）、４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～５１％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２０ｍＬ／分）で精製し、（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（６０ｍｇ、１１０．５３μｍｏｌ、１８．４８％収率、９０％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．２
【0293】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－３－メチルピロリジン－３－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２６）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（６０ｍｇ、１２２．８１μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７１．２４ｍｇ、１２２．８１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ＤＩＰＥＡ（４７．６２ｍｇ、３６８．４２μｍｏｌ、６４．１７μＬ）およびＮａＩ（３．６８ｍｇ、２４．５６μｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃
で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、１０分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－３－メチルピロリジン－３－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３ｍｇ、２４．１０μｍｏｌ、１９．６２％収率、９０．１％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－メチルピペリジン－４－イル）メチル４－メチルベンゼンスルホネート（６０ｍｇ、１２２．８１μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（７１．２４ｍｇ、１２２．８１μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、ＤＩＰＥＡ（４７．６２ｍｇ、３６８．４２μｍｏｌ、６４．１７μＬ）およびＮａＩ（３．６８ｍｇ、２４．５６μｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃
で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、１０分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－３－メチルピロリジン－３－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２３ｍｇ、２４．１０μｍｏｌ、１９．６２％収率、９０．１％純度）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
【0294】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．３５－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４８（ｍ、２Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝１．８、１５．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８４（ｄｄ、Ｊ＝１．６、８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．６３（ｔ、Ｊ＝９．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．８９（ｔｄ、Ｊ＝６．５、１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．４６－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．７３（ｄｄ、Ｊ＝４．９、１１．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．４２（ｔ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．２２－３．１７（ｍ、１Ｈ）、３．０７（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、２．７０－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．３８－２．１０（ｍ、１０Ｈ）、２．０２－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．８３－１．６９（ｍ、３Ｈ）、１．６２－１．５０（ｍ、６Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）、１．０５（ｓ、３Ｈ）。
【0295】
実施例２７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（（１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物２７）の合成
【0296】
【化34】
【0297】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（トランス）（２）の合成
ＤＭＥ（５０ｍＬ）およびエタノール（５１１ｍｇ、１１．０９ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－オキソ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（１．８ｇ、８．５２ｍｍｏｌ）および１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチル－ベンゼン（２．１６ｇ、１１．０８ｍｍｏｌ）溶液に－１０℃でｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、２１．３０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の２つの新規なスポットが検出された。反応混合物を０℃で飽和塩化アンモニウム（１００ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（トランス）（７００ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ、３６．９６％収率）およびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（シス）（６５０ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ、収率３４．３２％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２３．３。
ＤＭＥ（５０ｍＬ）およびエタノール（５１１ｍｇ、１１．０９ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル５－オキソ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（１．８ｇ、８．５２ｍｍｏｌ）および１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチル－ベンゼン（２．１６ｇ、１１．０８ｍｍｏｌ）溶液に－１０℃でｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、２１．３０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の２つの新規なスポットが検出された。反応混合物を０℃で飽和塩化アンモニウム（１００ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１８％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（トランス）（７００ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ、３６．９６％収率）およびｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（シス）（６５０ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ、収率３４．３２％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２３．３。
【0298】
工程２．（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸（トランス）（３）の合成
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（トランス）（６００ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（５３９．８５
ｍｇ、１３．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。残渣を水１０ｍＬで希釈し、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に酸性化し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸（トランス）（６３０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４２．１。
エタノール（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－シアノ－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－カルボキシレート（トランス）（６００ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ）溶液に水酸化ナトリウム（５３９．８５
ｍｇ、１３．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。残渣を水１０ｍＬで希釈し、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に酸性化し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（６０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸（トランス）（６３０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４２．１。
【0299】
工程３．２－（ｔｅｒｔ－ブチル）５－メチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２，５－ジカルボキシレート（トランス）（４）の合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸（トランス）（６３０ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）溶液にＭｅＩ（４００ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ、１７５．４４μＬ）および炭酸カリウム（５４１．２９ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されることが確認され、低極性の１つの新規なスポットが検出された。反応混合物を０℃で塩水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（ｔｅｒｔ－ブチル）５－メチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２，５－ジカルボキシレート（トランス）（５５０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ、８２．５１％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５６．１。
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸（トランス）（６３０ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）溶液にＭｅＩ（４００ｍｇ、２．８２ｍｍｏｌ、１７５．４４μＬ）および炭酸カリウム（５４１．２９ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されることが確認され、低極性の１つの新規なスポットが検出された。反応混合物を０℃で塩水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（８０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（ｔｅｒｔ－ブチル）５－メチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２，５－ジカルボキシレート（トランス）（５５０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ、８２．５１％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５６．１。
【0300】
工程４．（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（５）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中の２－（ｔｅｒｔ－ブチル）５－メチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２，５－ジカルボキシレート（トランス）（５５０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されることが確認された。混合物を真空濃縮し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（４００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１５６．１。
ジオキサン（５ｍＬ）中の２－（ｔｅｒｔ－ブチル）５－メチル（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２，５－ジカルボキシレート（トランス）（５５０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）ＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されることが確認された。混合物を真空濃縮し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（４００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１５６．１。
【0301】
工程５．（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（７）の合成
トルエン（１８ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（８９６．４１ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）および（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（３７０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．８９ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（１６１．４６ｍｇ、１９３．０６μｍｏｌ）加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２
．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（４１０ｍｇ、７６１．２２μｍｏｌ、３９．４３％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３９．２。
トルエン（１８ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（８９６．４１ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ）および（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（３７０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（１．８９ｇ、５．７９ｍｍｏｌ）、ＲｕＰｈｏｓ Ｐｄ Ｇ３（１６１．４６ｍｇ、１９３．０６μｍｏｌ）加え、混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２
．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（４１０ｍｇ、７６１．２２μｍｏｌ、３９．４３％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３９．２。
【0302】
工程６．（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メタノール（トランス）（８）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（３６０ｍｇ、６６８．３９μｍｏｌ）溶液に０℃でＬＡＨ（５０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物にＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）を加えてクエンチし、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メタノール（トランス）（３４０ｍｇ、５３９．３７μｍｏｌ、８０．７０％収率、８１％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３。
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルボン酸メチル（トランス）（３６０ｍｇ、６６８．３９μｍｏｌ）溶液に０℃でＬＡＨ（５０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物にＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）を加えてクエンチし、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メタノール（トランス）（３４０ｍｇ、５３９．３７μｍｏｌ、８０．７０％収率、８１％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３。
【0303】
工程７．３－（３－フルオロ－４－（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－（ヒドロキシメチル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中の（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メタノール（トランス）（１４０ｍｇ、２７４．１９μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１４ｍｇ、１０％純度）溶液をＨ２で３回脱気し、パージした後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－（ヒドロキシメチル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中の（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メタノール（トランス）（１４０ｍｇ、２７４．１９μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１４ｍｇ、１０％純度）溶液をＨ２で３回脱気し、パージした後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－（ヒドロキシメチル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１。
【0304】
工程８．（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルバルデヒド（トランス）（１０）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－（ヒドロキシメチル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９０ｍｇ、粗製）溶液にＤＭＰ（１３７．８２ｍｇ、３２４．９４μｍｏｌ、１００．６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の新規なスポットが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、（１Ｓ、４Ｒ、５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルバルデヒド（トランス）（９０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３１．１。
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－５－（ヒドロキシメチル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（９０ｍｇ、粗製）溶液にＤＭＰ（１３７．８２ｍｇ、３２４．９４μｍｏｌ、１００．６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の新規なスポットが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、（１Ｓ、４Ｒ、５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルバルデヒド（トランス）（９０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３１．１。
【0305】
工程９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２
－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（（１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物２７）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルバルデヒド（トランス）（９０ｍｇ、２７２．４４μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１４８．１０ｍｇ、２５５．３１μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（２２．３５ｍｇ、２７２．４４μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１７３．２２ｍｇ、８１７．３１μｍｏｌ）加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３４％）が検出された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（（１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（５７．３ｍｇ、６２．７８μｍｏｌ、２３．０４％収率、９４％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．６。
－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（（１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物２７）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の（１Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－カルバルデヒド（トランス）（９０ｍｇ、２７２．４４μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１４８．１０ｍｇ、２５５．３１μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（２２．３５ｍｇ、２７２．４４μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１７３．２２ｍｇ、８１７．３１μｍｏｌ）加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３４％）が検出された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４７％～７７％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（（１Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン－５－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（５７．３ｍｇ、６２．７８μｍｏｌ、２３．０４％収率、９４％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．６。
【0306】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７７（ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３２－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、６．９３－６．８７（ｍ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．６５－６．５９（ｔ、Ｊ＝９．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４５－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．１０－３．９９（ｍ、３Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７４－３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．６１－３．５４（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．８４－２．７７（ｍ、１Ｈ）、２．７６－２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．６５－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．４０－２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．２７－２．２２（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０５－１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．８６－１．７６（ｍ、４Ｈ）、１．６１－１．５０（ｍ、６Ｈ）、１．３１－１．１７（ｍ、８Ｈ）。
【0307】
実施例２８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２８）の合成
【0308】
【化35】
【0309】
工程１．２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（２）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－エチル２－オキソピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（２ｇ、７．３７ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で出発物質が完全に消費されることが確認され、高極性の新規なスポットが検出された。混合物を真空濃縮し、２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．２６ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１７２．１。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－エチル２－オキソピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（２ｇ、７．３７ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝３：１）で出発物質が完全に消費されることが確認され、高極性の新規なスポットが検出された。混合物を真空濃縮し、２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．２６ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝１７２．１。
【0310】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（４）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．６８ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）、２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（５００ｍｇ、粗製）およびＣｕＩ（４５８．５７ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下にＤＭＥＤＡ（２１２．２６ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ、２５９．１６μＬ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．５７ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（５００ｍｇ、９０１．５４μｍｏｌ、３７．４４％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．２。
トルエン（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．６８ｇ、３．６１ｍｍｏｌ）、２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（５００ｍｇ、粗製）およびＣｕＩ（４５８．５７ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下にＤＭＥＤＡ（２１２．２６ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ、２５９．１６μＬ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．５７ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（５００ｍｇ、９０１．５４μｍｏｌ、３７．４４％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．２。
【0311】
工程３．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－２－オン（５）合成
ＴＨＦ（８ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イ
ル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（４００ｍｇ、７２１．２３μｍｏｌ）溶液に０℃でＬｉＢＨ４（２Ｍ、７３４．５０μＬ）を滴下し、混合物を２０℃で６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量ピーク（１７％）および７６％の出発物質が検出された。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物に０℃で塩化アンモニウム（１０ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－２－オン（３００ｍｇ、５６１．８７μｍｏｌ、７７．９０％収率、９６％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．３。
ＴＨＦ（８ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イ
ル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルボン酸エチル（４００ｍｇ、７２１．２３μｍｏｌ）溶液に０℃でＬｉＢＨ４（２Ｍ、７３４．５０μＬ）を滴下し、混合物を２０℃で６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量ピーク（１７％）および７６％の出発物質が検出された。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物に０℃で塩化アンモニウム（１０ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－２－オン（３００ｍｇ、５６１．８７μｍｏｌ、７７．９０％収率、９６％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．３。
【0312】
工程４．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－オキソピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－２－オン（２００ｍｇ、３９０．１９μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％純度）溶液をＨ２で３回脱気し、パージした後、Ｈ２気体（１５Ｐｓｉ）下で２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－オキソピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－２－オン（２００ｍｇ、３９０．１９μｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％純度）溶液をＨ２で３回脱気し、パージした後、Ｈ２気体（１５Ｐｓｉ）下で２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－オキソピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．１。
【0313】
工程５．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルバルデヒド（７）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－オキソピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製）溶液にＤＭＰ（１９７．９０ｍｇ、４６６．５９μｍｏｌ、１４４．４５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、新規なスポットが検出されました。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルバルデヒド（１３０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３。
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－オキソピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１３０ｍｇ、粗製）溶液にＤＭＰ（１９７．９０ｍｇ、４６６．５９μｍｏｌ、１４４．４５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、新規なスポットが検出されました。混合物をセライトパッドで濾過した。濾液を真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルバルデヒド（１３０ｍｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３。
【0314】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２８）の合成
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルバルデヒド（１３０ｍｇ、粗製）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２１２．６５ｍｇ、３６６．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３２．０９ｍｇ、３９１．１８μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２４８．７２ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物に炭
酸水素ナトリウム（５ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］）；Ｂ％：３８％～６８％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．８ｍｇ、５８．４８μｍｏｌ、１４．９５％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．６。
ＤＣＥ（２ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－カルバルデヒド（１３０ｍｇ、粗製）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（２１２．６５ｍｇ、３６６．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３２．０９ｍｇ、３９１．１８μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２４８．７２ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物に炭
酸水素ナトリウム（５ｍＬ）を加えてクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝９：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］）；Ｂ％：３８％～６８％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－オキソピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．８ｍｇ、５８．４８μｍｏｌ、１４．９５％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．６。
【0315】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．３４－７．２８（ｍ、１Ｈ）、７．２１－７．１７（ｍ、１Ｈ）、７．１２－７．０７（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４７－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．９６－３．８７（ｍ、４Ｈ）、３．６３－３．５４（ｍ、１Ｈ）、３．５３－３．４６（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、２．７３－２．６２（ｍ、２Ｈ）、２．５７－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．３５－２．３２（ｍ、１Ｈ）、２．２９－２．１３（ｍ、８Ｈ）、２．１０－１．９７（ｍ、３Ｈ）、１．８７－１．７６（ｍ、２Ｈ）、１．６６－１．５２（ｍ、５Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0316】
実施例２９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２９）の合成
【0317】
【化36】
【0318】
工程１．２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（３）の合成
トルエン（５０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）および２－（ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（７３７．５７ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）溶液にＲｕＰｈｏｓ（４０１．９９ｍｇ、８６１．４６μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３９４．４３ｍｇ、４３０．７３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．２１ｇ、１２．９２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物をＮ２下で１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認され、混合物を濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（０．７ｇ、１．１０ｍｍｏｌ、２５．４９％収率、８７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．３
トルエン（５０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）および２－（ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（７３７．５７ｍｇ、４．３１ｍｍｏｌ）溶液にＲｕＰｈｏｓ（４０１．９９ｍｇ、８６１．４６μｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３９４．４３ｍｇ、４３０．７３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４．２１ｇ、１２．９２ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物をＮ２下で１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認され、混合物を濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（０．７ｇ、１．１０ｍｍｏｌ、２５．４９％収率、８７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５５．３
【0319】
工程２．２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エタノール（４）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＬＡＨ（１００ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（５ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（７００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）、水酸化
ナトリウム溶液（１５％、０．１ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）で０℃でクエンチした後、混合物を濾過し、濾液を濃縮し、２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エタノール（０．６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ、９２．７４％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．２
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＬＡＨ（１００ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（５ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）酢酸エチル（７００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）、水酸化
ナトリウム溶液（１５％、０．１ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）で０℃でクエンチした後、混合物を濾過し、濾液を濃縮し、２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エタノール（０．６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ、９２．７４％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．２
【0320】
工程３．３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エタノール（０．６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（７０．２９ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６６．９４μＬ）およびＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２下で加えた後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が消費されたことが確認され、混合物を濾過し、濃縮し、黒色の固形物の粗（ｃｒｕｄｅ）生成物（０．５ｇ、粗製）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物４００ｍｇをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配８０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１７９．４３μｍｏｌ、１５．３３％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エタノール（０．６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（７０．２９ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、６６．９４μＬ）およびＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％純度）をＮ２下で加えた後、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が消費されたことが確認され、混合物を濾過し、濃縮し、黒色の固形物の粗（ｃｒｕｄｅ）生成物（０．５ｇ、粗製）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物４００ｍｇをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配８０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１７９．４３μｍｏｌ、１５．３３％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．２
【0321】
工程４．２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）アセトアルデヒド（６）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１７９．４３μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１１４．１６ｍｇ、２６９．１５μｍｏｌ、８３．３３μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル：石油エーテル＝２：１）による３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）アセトアルデヒド（６０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．４
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、１７９．４３μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１１４．１６ｍｇ、２６９．１５μｍｏｌ、８３．３３μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（酢酸エチル：石油エーテル＝２：１）による３－（３－フルオロ－４－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）アセトアルデヒド（６０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．４
【0322】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物２９）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）アセトアルデヒド（５９ｍｇ、１７７．５１μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（９２．６７ｍｇ、１５９．７６μｍｏｌ、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（２１．８４ｍｇ、２６６．２７μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで混合物に２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１８８．１１ｍｇ、８８７．５７μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２４％）が確認された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し
、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１３．６ｍｇ、１４．７１μｍｏｌ、８．２９％収率、９３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４。
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）アセトアルデヒド（５９ｍｇ、１７７．５１μｍｏｌ）溶液に４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（９２．６７ｍｇ、１５９．７６μｍｏｌ、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（２１．８４ｍｇ、２６６．２７μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで混合物に２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１８８．１１ｍｇ、８８７．５７μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２４％）が確認された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し
、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１８％～４８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（２－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）エチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１３．６ｍｇ、１４．７１μｍｏｌ、８．２９％収率、９３％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４。
【0323】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．３１－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４８（ｍ、２Ｈ）、７．０６－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．９６－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４８－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１１．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．３０－３．２６（ｍ、５Ｈ）、２．７０－２．５７（ｍ、３Ｈ）、２．４８－２．４５（ｍ、１Ｈ）、２．３９－２．２８（ｍ、５Ｈ）、２．２６－２．１０（ｍ、５Ｈ）、２．０９－２．００（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７３（ｍ、４Ｈ）、１．６４－１．５３（ｍ、４Ｈ）、１．４５－１．３９（ｍ、２Ｈ）、１．３８－１．３０（ｍ、２Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0324】
実施例３０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３０）の合成
【0325】
【化37】
【0326】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
メタノール（１０ｍＬ）およびＮＨ３・Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－シアノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．５ｇ、２．００ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｒａｎｅｙ－Ｎｉ（３４２．２４ｍｇ、３．９９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＨ２で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下で２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（６９％）が検出された。反応混合物をメタノール（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５１２ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１９９．１
メタノール（１０ｍＬ）およびＮＨ３・Ｈ２Ｏ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－シアノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．５ｇ、２．００ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｒａｎｅｙ－Ｎｉ（３４２．２４ｍｇ、３．９９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＨ２で３回脱気し、パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下で２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（６９％）が検出された。反応混合物をメタノール（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５１２ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１９９．１
【0327】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（４）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５９５．５２ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５５２．０６ｍｇ、４．２７ｍｍｏｌ、７４４．０２μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５０７．０５ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（６９％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９１６ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、９７．８１％収率）をオレンジ色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６５８．３
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６００ｍｇ、１．４２ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５９５．５２ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５５２．０６ｍｇ、４．２７ｍｍｏｌ、７４４．０２μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（アミノメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５０７．０５ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（６９％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９１６ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、９７．８１％収率）をオレンジ色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６５８．３
【0328】
工程３．Ｎ－（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ）－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（５）の合成
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９１６ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７６％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、Ｎ－（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ）－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（８３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（
Ｍ＋Ｈ）＋＝５５８．４
ジオキサン（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（９１６ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１２ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７６％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、Ｎ－（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ）－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（８３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（
Ｍ＋Ｈ）＋＝５５８．４
【0329】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３０）の合成
ＤＣＥ（８ｍＬ）中のＮ－（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ）－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（２２３．９５ｍｇ、３７６．９５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＴＥＡ（４７６．７９ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ、６５５．８４μＬ）および１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１５０ｍｇ、４７１．１９μｍｏｌ）、４Ａ ＭＳ（１００ｍｇ）を加えた。その後、２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２９９．５９ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～５３％、７分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（５６．９ｍｇ、６２．８６μｍｏｌ、１３．３４％収率、９５％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
ＤＣＥ（８ｍＬ）中のＮ－（（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ）－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（２２３．９５ｍｇ、３７６．９５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＴＥＡ（４７６．７９ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ、６５５．８４μＬ）および１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１５０ｍｇ、４７１．１９μｍｏｌ）、４Ａ ＭＳ（１００ｍｇ）を加えた。その後、２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２９９．５９ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３３％～５３％、７分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～４５％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）メチル）－３－メトキシベンズアミド（５６．９ｍｇ、６２．８６μｍｏｌ、１３．３４％収率、９５％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
【0330】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．３６－８．２８（ｍ、２Ｈ）、８．２２－８．１７（ｍ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．０６－６．８８（ｍ、３Ｈ）、４．９４－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７８（ｄｄ、Ｊ＝４．８、１１．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．３２（ｓ、４Ｈ）、３．３１－３．２６（ｍ、４Ｈ）、２．６６－２．５６（ｍ、３Ｈ）、２．４８－２．４４（ｍ、１Ｈ）、２．４１－２．１１（ｍ、７Ｈ）、２．０４－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．８７－１．７１（ｍ、４Ｈ）、１．６８－１．５９（ｍ、１Ｈ）、１．５５（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、１．５２－１．４２（ｍ、４Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、８Ｈ）。
【0331】
実施例３１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３１）の合成
【0332】
【化38】
【0333】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル７－シアノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＥ（２０ｍＬ）およびエタノール（３３７．８５ｍｇ、７．３３ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－オキソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．３５ｇ、５．６４ｍｍｏｌ）および１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチル－ベンゼン（１．４３ｇ、７．３３ｍｍｏｌ）溶液に－１０℃でｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、１４．１０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．６６）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物に０℃で塩化アンモニウム（３０ｍＬ）を加えてクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－シアノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．４ｇ、５．５９ｍｍｏｌ、９９．１４％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５１．３
ＤＭＥ（２０ｍＬ）およびエタノール（３３７．８５ｍｇ、７．３３ｍｍｏｌ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－オキソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．３５ｇ、５．６４ｍｍｏｌ）および１－（イソシアノメチルスルホニル）－４－メチル－ベンゼン（１．４３ｇ、７．３３ｍｍｏｌ）溶液に－１０℃でｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ、１４．１０ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．６６）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物に０℃で塩化アンモニウム（３０ｍＬ）を加えてクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－シアノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．４ｇ、５．５９ｍｍｏｌ、９９．１４％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５１．３
【0334】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝３．６０（ｄ、Ｊ＝１４．５Ｈｚ、４Ｈ）、２．６３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、１．９７－１．６４（ｍ、９Ｈ）、１．４５（ｓ、９Ｈ）
【0335】
工程２．２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボン酸（３）の合成
エタノール（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－シアノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．４ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）溶液にＨ２Ｏ（１．５ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（９３９．４７ｍｇ、２３．４９）ｍｍｏｌ）溶液を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混
合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。残渣を水（１５ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌを加えてｐＨ＝６に酸性化した。生成された混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボン酸（１．１５ｇ、４．２７ｍｍｏｌ、７６．３５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７０．３
エタノール（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－シアノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（１．４ｇ、５．５９ｍｍｏｌ）溶液にＨ２Ｏ（１．５ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（９３９．４７ｍｇ、２３．４９）ｍｍｏｌ）溶液を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混
合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。残渣を水（１５ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌを加えてｐＨ＝６に酸性化した。生成された混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボン酸（１．１５ｇ、４．２７ｍｍｏｌ、７６．３５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７０．３
【0336】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル７－（ヒドロキシメチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（４）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボン酸（９５０ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）溶液中のＮ２気体下０℃でＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ、７．０５ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１、Ｒｆ＝０．３２）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物に０℃で飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加えてクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（ヒドロキシメチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ、６６．６２％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５６．４
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボン酸（９５０ｍｇ、３．５３ｍｍｏｌ）溶液中のＮ２気体下０℃でＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ、７．０５ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１、Ｒｆ＝０．３２）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物に０℃で飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）を加えてクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（ヒドロキシメチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ、６６．６２％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５６．４
【0337】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル７－ホルミル－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（５）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（ヒドロキシメチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１．２０ｇ、２．８２ｍｍｏｌ、８７２．９４μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．６１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の新規なスポットが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－ホルミル－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、粗製）を赤色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．４３
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（ヒドロキシメチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（１．２０ｇ、２．８２ｍｍｏｌ、８７２．９４μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．６１）で出発物質が完全に消費されたことが確認され、低極性の新規なスポットが検出された。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル７－ホルミル－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、粗製）を赤色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．４３
【0338】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（７）の合成
ＤＣＥ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－ホルミル－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６８９．９６ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１４２．２３ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、１３５．４５μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．５１ｇ、１１．８４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（４３０ｍｇ、８１３．３８μｍｏｌ、２８．６７％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ
（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．６
ＤＣＥ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－ホルミル－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６８９．９６ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（１４２．２３ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、１３５．４５μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２．５１ｇ、１１．８４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（４３０ｍｇ、８１３．３８μｍｏｌ、２８．６７％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ
（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２９．６
【0339】
工程６．３－（４－（４－（（２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３８０ｍｇ、７１８．８０μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４３％）が検出された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３８ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．５
ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－カルボキシレート（３８０ｍｇ、７１８．８０μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４３％）が検出された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３８ｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．５
【0340】
工程７．３－（３－フルオロ－４－（４－（（２－ニトロソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
Ｈ２Ｏ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３８ｇ、８１７．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に０℃で亜硝酸ナトリウム（２２６ｍｇ、３．２８ｍｍｏｌ）に次いで酢酸（２４５．３７ｍｇ、４．０９ｍｍｏｌ、２３３．９１μＬ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２７％の所望の質量および１９％の出発物質が検出された。２０℃で亜硝酸ナトリウム（１６９．１５ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）および酢酸（２９４．００ｍｇ、４．９０ｍｍｏｌ、２８０μＬ）を加えた後、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより５２％の所望の質量と８％の出発物質が検出された。混合物を２０℃で１時間撹拌した。混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（５ｍＬ）および酢酸エチル（５ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（３ｍＬ）で洗浄し、濾過ケーキを集め、減圧乾燥し、３－（３－フルオロ－４－（４－（（２－ニトロソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．５
Ｈ２Ｏ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３８ｇ、８１７．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に０℃で亜硝酸ナトリウム（２２６ｍｇ、３．２８ｍｍｏｌ）に次いで酢酸（２４５．３７ｍｇ、４．０９ｍｍｏｌ、２３３．９１μＬ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２７％の所望の質量および１９％の出発物質が検出された。２０℃で亜硝酸ナトリウム（１６９．１５ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）および酢酸（２９４．００ｍｇ、４．９０ｍｍｏｌ、２８０μＬ）を加えた後、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより５２％の所望の質量と８％の出発物質が検出された。混合物を２０℃で１時間撹拌した。混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（５ｍＬ）および酢酸エチル（５ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（３ｍＬ）で洗浄し、濾過ケーキを集め、減圧乾燥し、３－（３－フルオロ－４－（４－（（２－ニトロソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．５
【0341】
工程８．３－（４－（４－（（２－アミノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１０）の合成
ＴＨＦ（３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（（２－ニトロソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１１ｇ、２４０．４２μｍｏｌ）溶液に塩化アンモニウム（１２８ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）を加え、０℃でＺｎ（１５０ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、混合物を２０℃で２時間３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキをＴＨＦ（２０ｍＬ）およびメタノール（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＴＨＦ（５ｍＬ）およびメタノール（５ｍＬ）で希釈した後、濾過した。濾過ケーキをメタノール（５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．２
ＴＨＦ（３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（（２－ニトロソ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１１ｇ、２４０．４２μｍｏｌ）溶液に塩化アンモニウム（１２８ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）を加え、０℃でＺｎ（１５０ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、混合物を２０℃で２時間３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキをＴＨＦ（２０ｍＬ）およびメタノール（１０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＴＨＦ（５ｍＬ）およびメタノール（５ｍＬ）で希釈した後、濾過した。濾過ケーキをメタノール（５ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（２－アミノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．２
【0342】
工程９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５０ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１６２．４２ｍｇ、４２７．１５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２３０．０３ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ、３１０．０１μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、３３８．１８μｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で再精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０ｍｇ、１０．２７μｍｏｌ、２．８９％収率、８７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．１
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５０ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１６２．４２ｍｇ、４２７．１５μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２３０．０３ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ、３１０．０１μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－２－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、３３８．１８μｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で再精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）－２－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１０ｍｇ、１０．２７μｍｏｌ、２．８９％収率、８７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．１
【0343】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８４－１０．８０（ｍ、１Ｈ）、９．４７（ｓ、１Ｈ）、８．３１－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４４－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．０５－６．９９（ｍ、１Ｈ）、６．９８－６．９４（ｍ、２Ｈ）、４．９２－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８３－３．７６（ｍ、１Ｈ）、３．５４－３．４６（ｍ、４Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．３１－３．２９（ｍ、４Ｈ）、３．０２－２．９７（ｍ、４Ｈ）、２．６５－２．５９（ｍ、１Ｈ）、２．４７－２．４３（ｍ、１Ｈ）、２．２１－２．１０（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９２（ｍ、３Ｈ）、１．７５－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．５２－１．３５（ｍ、３Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）、０．９４－０．７９（ｍ、２Ｈ）。
【0344】
実施例３２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３２）の合成
【0345】
【化39】
【0346】
工程１．１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－メチル２－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（２）の合成
メタノール（５０ｍＬ）中の２－メチルイソニコチン酸メチル（４ｇ、２６．４６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下１５℃でＰｔＯ２（６００．８８ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度））を加えた。懸濁液を真空脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下５０℃で３２時間撹拌した。次いで、Ｂｏｃ２Ｏ（８．６６ｇ、３９．６９ｍｍｏｌ、９．１２ｍＬ）およびＴＥＡ（５．３６ｇ、５２．９２ｍｍｏｌ、７．３７ｍＬ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５０％）が検出された。懸濁液を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（２００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－メチル２－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（４．２５ｇ、１６．５２ｍｍｏｌ、６２．４２％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２０２．０
メタノール（５０ｍＬ）中の２－メチルイソニコチン酸メチル（４ｇ、２６．４６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下１５℃でＰｔＯ２（６００．８８ｍｇ、２．６５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度））を加えた。懸濁液を真空脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（５０Ｐｓｉ）下５０℃で３２時間撹拌した。次いで、Ｂｏｃ２Ｏ（８．６６ｇ、３９．６９ｍｍｏｌ、９．１２ｍＬ）およびＴＥＡ（５．３６ｇ、５２．９２ｍｍｏｌ、７．３７ｍＬ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５０％）が検出された。懸濁液を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（２００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－メチル２－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（４．２５ｇ、１６．５２ｍｍｏｌ、６２．４２％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２０２．０
【0347】
工程２．２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－メチル２－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（３．５ｇ、１３．６０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認さ
れ、新規なスポットが検出された。反応混合物を真空濃縮し、２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（３．２ｇ、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１５８．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中の１－（ｔｅｒｔ－ブチル）４－メチル２－メチルピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（３．５ｇ、１３．６０ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２０ｍＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝５：１）で出発物質が完全に消費されたことが確認さ
れ、新規なスポットが検出された。反応混合物を真空濃縮し、２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（３．２ｇ、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝１５８．１
【0348】
工程３．メチル１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボキシレート（５－Ｐ１ ＆ ５－Ｐ２）の合成
ジオキサン（１００ｍＬ）中の２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（３．１ｇ、１６．０１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．４６ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１５．６５ｇ、４８．０２ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２０２．４２ｍｇ、２０８．０９μｍｏｌ）混合物を、Ｎ２気体下１００℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（４００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～７％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２００ｍＬ／分）に次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４８％～７８％、１０分）で精製し、２つのバッチを得た（ピーク１およびピーク２）。２つのバッチ溶離液をそれぞれ凍結乾燥し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（ピーク１）（３２９ｍｇ、６０８．５６μｍｏｌ、３．８０％収率）を黄色の油状物として、および１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（ピーク２）（１７５ｍｇ、３２３．７０μｍｏｌ、２．０２％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．４。
ジオキサン（１００ｍＬ）中の２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（３．１ｇ、１６．０１ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４．４６ｇ、９．６０ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１５．６５ｇ、４８．０２ｍｍｏｌ）およびＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２０２．４２ｍｇ、２０８．０９μｍｏｌ）混合物を、Ｎ２気体下１００℃で２４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（４００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４～７％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠２００ｍＬ／分）に次いで分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４８％～７８％、１０分）で精製し、２つのバッチを得た（ピーク１およびピーク２）。２つのバッチ溶離液をそれぞれ凍結乾燥し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（ピーク１）（３２９ｍｇ、６０８．５６μｍｏｌ、３．８０％収率）を黄色の油状物として、および１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（ピーク２）（１７５ｍｇ、３２３．７０μｍｏｌ、２．０２％収率）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４１．４。
【0349】
工程４．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のＬＡＨ（１０５．３１ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＴＨＦ（８ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（５００ｍｇ、９２４．８６μｍｏｌ）溶液を滴下し、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピーク（９４％）が検出された。反応混合物を２０℃でＴＨＦ（２０ｍＬ）で希釈した。反応混合物をＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．１ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）でクエンチし、懸濁液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（３７５ｍｇ）を灰色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．４。
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のＬＡＨ（１０５．３１ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＴＨＦ（８ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボン酸メチル（５００ｍｇ、９２４．８６μｍｏｌ）溶液を滴下し、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量の主要ピーク（９４％）が検出された。反応混合物を２０℃でＴＨＦ（２０ｍＬ）で希釈した。反応混合物をＨ２Ｏ（０．１ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．１ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）でクエンチし、懸濁液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（３７５ｍｇ）を灰色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１３．４。
【0350】
工程５．３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（３７５ｍｇ、７３１．５５μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を真空脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。懸濁液を濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ３ＯＨ（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（１００ｍＬ）で洗浄し、濾
液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ）を紫色のガム（ｇｕｍ）として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．３
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１５ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メタノール（３７５ｍｇ、７３１．５５μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を真空脱気し、Ｈ２で数回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。懸濁液を濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ３ＯＨ（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（１００ｍＬ）で洗浄し、濾
液を真空濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ）を紫色のガム（ｇｕｍ）として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３５．３
【0351】
工程６．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＤＭＰ（７９９．１１ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、５８３．２９μＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＤＣＭ（１０ｍＬ）で洗浄し、濾液を３０℃で真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボアルデヒド（４１０ｍｇ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）－２－メチルピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＤＭＰ（７９９．１１ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、５８３．２９μＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＤＣＭ（１０ｍＬ）で洗浄し、濾液を３０℃で真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルボアルデヒド（４１０ｍｇ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１
【0352】
工程７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３２）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（４２９．３３ｍｇ、７４０．１４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（４０４．７８ｍｇ、４．９３ｍｍｏｌ）に次いで１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルバルデヒド（４１０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（２３２．５６ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）に次いでフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（０．２ｇ、２０％純度）および生成物Ｂ（０．２ｇ、粗製）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物Ａ（０．２ｇ、２０％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｃ（２６ｍｇ、８４％純度、ＦＡ）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物Ｂ（０．２ｇ、粗製）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２４％～４４％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｄ（２８ｍｇ、８２％純度、ＴＦＡ）を得た。生成物Ｃ（２６ｍｇ、８４％純度、ＦＡ）およびＤ（２８ｍｇ、８２％純度、ＴＦＡ）を合わせ、水（１０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝７に調整し、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝８／１）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペ
リジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１８．８ｍｇ、２１．２１μｍｏｌ、３３．７７％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．６。
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（４２９．３３ｍｇ、７４０．１４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（４０４．７８ｍｇ、４．９３ｍｍｏｌ）に次いで１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペリジン－４－カルバルデヒド（４１０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（２３２．５６ｍｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）に次いでフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液３０～１００％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（０．２ｇ、２０％純度）および生成物Ｂ（０．２ｇ、粗製）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物Ａ（０．２ｇ、２０％純度）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｃ（２６ｍｇ、８４％純度、ＦＡ）を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物Ｂ（０．２ｇ、粗製）を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２４％～４４％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｄ（２８ｍｇ、８２％純度、ＴＦＡ）を得た。生成物Ｃ（２６ｍｇ、８４％純度、ＦＡ）およびＤ（２８ｍｇ、８２％純度、ＴＦＡ）を合わせ、水（１０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ＝７に調整し、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝８／１）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２－メチルピペ
リジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１８．８ｍｇ、２１．２１μｍｏｌ、３３．７７％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．６。
【0353】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８３（ｓ、１Ｈ）、８．４４－８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．３２－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２１（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５２－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．２２－７．１７（ｍ、１Ｈ）、７．０６－７．０１（ｍ、１Ｈ）、７．００－６．９６（ｍ、１Ｈ）、４．９２－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４４－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８６－３．８０（ｍ、１Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、３．０５－２．９２（ｍ、２Ｈ）、２．７０－２．６１（ｍ、１Ｈ）、２．４４－２．３６（ｍ、２Ｈ）、２．２７－１．９６（ｍ、９Ｈ）、１．８７－１．４９（ｍ、１０Ｈ）、１．２７－１．２０（ｍ、７Ｈ）、０．９９－０．８８（ｍ、１Ｈ）、０．８５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、３Ｈ）。
【0354】
実施例３３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３３）の合成
【0355】
【化40】
【0356】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ジオキサン（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－オキサ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（２．３３ｇ、１０．９３ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２．３６ｇ、１８．２２ｍｍｏｌ、３．１７ｍＬ）およびベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物
を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（８００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ、３６．４６％収率、８１％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８８．３。
ジオキサン（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－オキサ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（２．３３ｇ、１０．９３ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２．３６ｇ、１８．２２ｍｍｏｌ、３．１７ｍＬ）およびベンジル（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、３．６４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物
を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（８００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ、３６．４６％収率、８１％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８８．３。
【0357】
工程２．ベンジル（７－（（４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（７００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２．００ｍＬ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。反応混合物を濃縮し、ベンジル（７－（（４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８７．３。
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－カルボキシレート（７００ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３．０８ｇ、２７．０１ｍｍｏｌ、２．００ｍＬ）を加えた。混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。反応混合物を濃縮し、ベンジル（７－（（４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８７．３。
【0358】
工程３．ベンジル（７－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（４）の合成
トルエン（３ｍＬ）およびジオキサン（０．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（９５８．５７ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１８９．０４ｍｇ、２０６．４４μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．０２ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）およびＲｕＰｈｏｓ（１９２．６７ｍｇ、４１２．８９μｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、Ｎ２気体下１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２００ｍｇ、２５９．４３μｍｏｌ、１２．５７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７１．５
トルエン（３ｍＬ）およびジオキサン（０．５ｍＬ）中のベンジル（７－（（４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（８００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（９５８．５７ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１８９．０４ｍｇ、２０６．４４μｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（２．０２ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）およびＲｕＰｈｏｓ（１９２．６７ｍｇ、４１２．８９μｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、Ｎ２気体下１００℃で１６時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。反応混合物を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５０～７０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（７－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（２００ｍｇ、２５９．４３μｍｏｌ、１２．５７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７１．５
【0359】
工程４．３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、１８１．６０μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下ＴＦＡ（４１．４１ｍｇ、３６３．２０μｍｏｌ、２６．８９μＬ）およびＰｄ／Ｃ（１４ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２気体で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。懸濁液を
セライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮乾固し、３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１７４．６４μｍｏｌ、９６．１７％収率、ＴＦＡ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５９．３。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（７－（（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、１８１．６０μｍｏｌ）溶液にＮ２気体下ＴＦＡ（４１．４１ｍｇ、３６３．２０μｍｏｌ、２６．８９μＬ）およびＰｄ／Ｃ（１４ｍｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２気体で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。懸濁液を
セライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を濃縮乾固し、３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１７４．６４μｍｏｌ、９６．１７％収率、ＴＦＡ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５９．３。
【0360】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３３）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、１２２．２５μｍｏｌ、ＴＦＡ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５１．５２ｍｇ、１２２．２５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５５．７８ｍｇ、１４６．７０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４７．４０ｍｇ、３６６．７５μｍｏｌ、６３．８８μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３５％）が検出された。混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ
３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１４％～４４％、７分）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９ｍｇ、２１．６０μｍｏｌ、１７．６７％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．４。
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（２－アミノ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）－４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７０ｍｇ、１２２．２５μｍｏｌ、ＴＦＡ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５１．５２ｍｇ、１２２．２５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５５．７８ｍｇ、１４６．７０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４７．４０ｍｇ、３６６．７５μｍｏｌ、６３．８８μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３５％）が検出された。混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ
３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１４％～４４％、７分）で精製し、凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９ｍｇ、２１．６０μｍｏｌ、１７．６７％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６２．４。
【0361】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．３６－８．２９（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５６－７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．０６－６．８９（ｍ、３Ｈ）、４．９５－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３３（ｍ、１Ｈ）、４．１１－４．００（ｍ、３Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝３．０、１０．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．３６－３．２８（ｍ、５Ｈ）、３．１３－２．８９（ｍ、４Ｈ）、２．６８－２．５９（ｍ、１Ｈ）、２．４８－２．４１（ｍ、３Ｈ）、２．２７－２．１２（ｍ、５Ｈ）、２．０８－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．７６－１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．６４－１．５１（ｍ、６Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0362】
実施例３４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－
イル）－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３４）の合成
イル）－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３４）の合成
【0363】
【化41】
【0364】
工程１．４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロ安息香酸メチル（３）の合成
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ安息香酸メチル（３ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（５．３７ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９４１．９８ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（８．２０ｇ、３８．６２ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４５％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロ安息香酸メチル（２．５ｇ、５．４７ｍｍｏｌ、収率４２．４８％、純度９７％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．２
ジオキサン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の４－ブロモ－２－フルオロ安息香酸メチル（３ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（５．３７ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９４１．９８ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）およびＫ３ＰＯ４（８．２０ｇ、３８．６２ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４５％）が検出された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロ安息香酸メチル（２．５ｇ、５．４７ｍｍｏｌ、収率４２．４８％、純度９７％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．２
【0365】
工程２．（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）メタノール（４）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬＡＨ（４２７．９３ｍｇ、１１．２７ｍｍｏｌ）懸濁液にＴ
ＨＦ（１０ｍＬ）中の４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロ安息香酸メチル（２．５ｇ、５．６４ｍｍｏｌ）溶液を２０℃でＮ２気体下滴下し、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（９２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．４５ｍＬ）、ａｑ．水酸化ナトリウム（１５％、０．４５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．３５ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）メタノール（２．３ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１６．３
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬＡＨ（４２７．９３ｍｇ、１１．２７ｍｍｏｌ）懸濁液にＴ
ＨＦ（１０ｍＬ）中の４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロ安息香酸メチル（２．５ｇ、５．６４ｍｍｏｌ）溶液を２０℃でＮ２気体下滴下し、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（９２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．４５ｍＬ）、ａｑ．水酸化ナトリウム（１５％、０．４５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．３５ｍＬ）でクエンチした。反応混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）メタノール（２．３ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１６．３
【0366】
工程３．３－（３－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）メタノール（２．３ｇ、５．５４ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下にＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＴＨＦ（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３８．１
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中の（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）メタノール（２．３ｇ、５．５４ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下にＰｄ／Ｃ（１ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＴＨＦ（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、３－（３－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３８．１
【0367】
工程４．３－（４－（ブロモメチル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．６ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＢｒ／酢酸（２ｍＬ、３３％純度）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（ブロモメチル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７６０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３００．２
ＤＣＭ（６ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ヒドロキシメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．６ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＢｒ／酢酸（２ｍＬ、３３％純度）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（ブロモメチル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７６０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３００．２
【0368】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（９）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３００ｍｇ、５１７．１８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＴＥＡ（５２３．３３ｍｇ、５．１７ｍｍｏｌ、７１９．８５μＬ）および４Ａ ＭＳ（２００ｍｇ）、ｔｅｒｔ－ブチル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（１６５．４５ｍｇ、７７５．７７μｍｏｌ）を加えた。その後、２０℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（９７．５０ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７１％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１５％ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７
，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド）［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３５２ｍｇ、４７５．１１μｍｏｌ、９１．８７％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４１．３
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３００ｍｇ、５１７．１８μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＴＥＡ（５２３．３３ｍｇ、５．１７ｍｍｏｌ、７１９．８５μＬ）および４Ａ ＭＳ（２００ｍｇ）、ｔｅｒｔ－ブチル４－ホルミルピペリジン－１－カルボキシレート（１６５．４５ｍｇ、７７５．７７μｍｏｌ）を加えた。その後、２０℃で水素化シアノホウ素ナトリウム（９７．５０ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７１％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１５％ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７
，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド）［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３５２ｍｇ、４７５．１１μｍｏｌ、９１．８７％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４１．３
【0369】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１０）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３５２ｍｇ、４７５．１１μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９．７１ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（８７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３２２ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４１．３
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（（２－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－カルボキシレート（３５２ｍｇ、４７５．１１μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、９．７１ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（８７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３２２ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６４１．３
【0370】
工程７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３４）の合成
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の３－（４－（ブロモメチル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ）－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３２２ｍｇ、４７５．４７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（６４５．９５ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ、８７０．５５μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル０～５０％ジクロロメタン／エタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２２％～４２％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１４６．５ｍｇ、１２９．２６μｍｏｌ、７．７６％収率、９６％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の３－（４－（ブロモメチル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５００ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ）－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－（ピペリジン－４－イルメチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３２２ｍｇ、４７５．４７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に２０℃でＤＩＰＥＡ（６４５．９５ｍｇ、５．００ｍｍｏｌ、８７０．５５μＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル０～５０％ジクロロメタン／エタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２２％～４２％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１４６．５ｍｇ、１２９．２６μｍｏｌ、７．７６％収率、９６％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８６０．４
【0371】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．９１（ｓ、１Ｈ）、１０．０２－９．８４（ｍ、１Ｈ）、９．４１－９．２６（ｍ、１Ｈ）、８．５２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３０－８．２０（ｍ、１Ｈ）、８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．５８－７．５３（ｍ、１Ｈ）、７．５３－７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３９（ｍ、１Ｈ）、４．３４（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、４．０７（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．９９（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝４．８、１２．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．５２－３．３５（ｍ、４Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．２６－３．１５（ｍ、１Ｈ）、３．１０－２．７５（ｍ、６Ｈ）、２．７４－２．６５（ｍ、１Ｈ）、２．５８－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．４３－２．３４（ｍ、１Ｈ）、２．３０－２．２１（ｍ、１Ｈ）、２．２０－２．１０（ｍ、１Ｈ）、２．０５（ｔｄ、Ｊ＝４．１、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．０２－１．９１（ｍ、４Ｈ）、１．９０－１．７５（ｍ、４Ｈ）、１．４３（ｑ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0372】
実施例３５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３５）の合成
【0373】
【化42】
【0374】
工程１．１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
ジオキサン（３００ｍＬ）中の４－ブロモ－１－ヨード－２－メチルベンゼン（２５．８ｇ、８６．８９ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１３．６６ｇ、８６．８９ｍｍｏｌ、１３．３９ｍＬ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（１．７６ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．３９ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４２．４７ｇ、１３０．３３ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１）により、４－ブロモ－１－ヨード－２－メチルベンゼンが残っており、大きな極性を有する１つの主要な新規スポットが検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（５００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空で濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、溶出液を真空濃縮し、１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、６．７４ｍｍｏｌ、７．７６％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２６．０。
ジオキサン（３００ｍＬ）中の４－ブロモ－１－ヨード－２－メチルベンゼン（２５．８ｇ、８６．８９ｍｍｏｌ）、ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１３．６６ｇ、８６．８９ｍｍｏｌ、１３．３９ｍＬ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（１．７６ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．３９ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４２．４７ｇ、１３０．３３ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１）により、４－ブロモ－１－ヨード－２－メチルベンゼンが残っており、大きな極性を有する１つの主要な新規スポットが検出された。混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（５００ｍＬ）で洗浄し、濾液を真空で濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、溶出液を真空濃縮し、１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、６．７４ｍｍｏｌ、７．７６％収率）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２６．０。
【0375】
工程２．２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン（４Ｂ）の合成
ＴＨＦ（２Ｌ）中のｔ－ＢｕＯＫ（５７６．２６ｇ、５．１４ｍｏｌ）溶液に０℃でフェニルメタノール（２２２．１４ｇ、２．０５ｍｏｌ、２１３．５９ｍＬ）を滴下し、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、０℃で２，６－ジクロロピリジン（１５２ｇ、１．０３ｍｏｌ）を３０分間加えた。生成された混合物を７５℃で６５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２０％の２－（ベンジルオキシ）－６－クロロピリジンおよび６８％の所望の質量が検出された。混合物を水（１Ｌ）に注ぎ、酢酸エチル（１Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を真空濃縮し、ほとんどのＴＨＦを除去し、懸濁液を酢酸エチル（１．５Ｌ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１Ｌ×２）で洗浄した。有機相を真空濃縮した。残渣を１５℃で１０分間石油エーテル（３００ｍＬ）で粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを集めて乾燥し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン（２４３．３ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ、７８．３０％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１。
ＴＨＦ（２Ｌ）中のｔ－ＢｕＯＫ（５７６．２６ｇ、５．１４ｍｏｌ）溶液に０℃でフェニルメタノール（２２２．１４ｇ、２．０５ｍｏｌ、２１３．５９ｍＬ）を滴下し、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、０℃で２，６－ジクロロピリジン（１５２ｇ、１．０３ｍｏｌ）を３０分間加えた。生成された混合物を７５℃で６５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２０％の２－（ベンジルオキシ）－６－クロロピリジンおよび６８％の所望の質量が検出された。混合物を水（１Ｌ）に注ぎ、酢酸エチル（１Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を真空濃縮し、ほとんどのＴＨＦを除去し、懸濁液を酢酸エチル（１．５Ｌ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１Ｌ×２）で洗浄した。有機相を真空濃縮した。残渣を１５℃で１０分間石油エーテル（３００ｍＬ）で粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを集めて乾燥し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン（２４３．３ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ、７８．３０％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１。
【0376】
工程３．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（４Ｃ）の合成
アセトニトリル（１．５Ｌ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン（２３４．３ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ）溶液にＮＢＳ（１４３．１４ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量のピーク（８３％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣を酢酸エチル（１．５Ｌ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１．２Ｌ×３）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣を１５℃で１０分間石油エーテル（３００ｍＬ）で粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを集めて乾燥し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（２９５．３ｇ、７９７．５９ｍｍｏｌ、９９．１８％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７０．０、３７２．０。
アセトニトリル（１．５Ｌ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン（２３４．３ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ）溶液にＮＢＳ（１４３．１４ｇ、８０４．２１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量のピーク（８３％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣を酢酸エチル（１．５Ｌ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（１．２Ｌ×３）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣を１５℃で１０分間石油エーテル（３００ｍＬ）で粉砕し、懸濁液を濾過し、濾過ケーキを集めて乾燥し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（２９５．３ｇ、７９７．５９ｍｍｏｌ、９９．１８％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７０．０、３７２．０。
【0377】
工程４．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（４）の合成
ジオキサン（１．５Ｌ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１００ｇ、２７０．１０ｍｍｏｌ）溶液にＢＰＤ（１０２．８８ｇ、４０５．１４ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（５３．０２ｇ、５４０．１９ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（４．４１ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で３６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３８％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル
（７００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（二酸化ケイ素、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５）－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（８０．２ｇ、１９２．１９ｍｍｏｌ、７１．１５％収率）を淡緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．０。
ジオキサン（１．５Ｌ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－ブロモピリジン（１００ｇ、２７０．１０ｍｍｏｌ）溶液にＢＰＤ（１０２．８８ｇ、４０５．１４ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（５３．０２ｇ、５４０．１９ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２・ＣＨ２Ｃｌ２（４．４１ｇ、５．４０ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で３６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３８％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル
（７００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（二酸化ケイ素、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０／１）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５）－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（８０．２ｇ、１９２．１９ｍｍｏｌ、７１．１５％収率）を淡緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．０。
【0378】
工程５．２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（４Ｅ）の合成
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１５ｍＬ）中の１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼン（７ｇ、２３．２６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１０ｇ、２３．９６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下に炭酸カリウム（６．４３ｇ、４６．５３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１．７０ｇ、２．３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼンが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４３％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ほとんどのジオキサンを除去した。残渣をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（６．１４ｇ、１３．２２ｍｍｏｌ、収率５６．８４％）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．０。
ジオキサン（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１５ｍＬ）中の１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼン（７ｇ、２３．２６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（１０ｇ、２３．９６ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下に炭酸カリウム（６．４３ｇ、４６．５３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１．７０ｇ、２．３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－ブロモ－２－フルオロ－４－ヨードベンゼンが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４３％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、ほとんどのジオキサンを除去した。残渣をＨ２Ｏ（２５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（６．１４ｇ、１３．２２ｍｍｏｌ、収率５６．８４％）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６４．０。
【0379】
工程６．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（５）の合成
ジオキサン（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３．９４ｇ、９．４４ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（１．９９ｇ、２０．２３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２４６．７２ｍｇ、３３７．１９μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチルが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４０％）が検出された。混合物を他のバッチ（４６０ｍｇスケール）と合わせ、真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２、６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．９５ｇ、３．６３ｍｍｏｌ、収率５３．８８％）を明るい褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３７．３。
ジオキサン（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（２．２ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）、２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（３．９４ｇ、９．４４ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（１．９９ｇ、２０．２３ｍｍｏｌ）溶液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２４６．７２ｍｇ、３３７．１９μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－ブロモ－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチルが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（４０％）が検出された。混合物を他のバッチ（４６０ｍｇスケール）と合わせ、真空濃縮し、ほとんどの溶媒を除去した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～４％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２、６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．９５ｇ、３．６３ｍｍｏｌ、収率５３．８８％）を明るい褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５３７．３。
【0380】
工程７．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＬＡＨ（１４１．４５ｍｇ、３．７３ｍｍｏｌ）懸濁液に０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）溶液を滴下し、混合物を１５℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量のピーク（８７％）が検出された。反応混合物を２０℃でＴＨＦ（２０ｍＬ）で希釈し、生成された混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム溶液（１５％ａｑ、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）でクエンチし、懸濁液を硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８９０ｍｇ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９５．２。
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のＬＡＨ（１４１．４５ｍｇ、３．７３ｍｍｏｌ）懸濁液に０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）溶液を滴下し、混合物を１５℃で４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量のピーク（８７％）が検出された。反応混合物を２０℃でＴＨＦ（２０ｍＬ）で希釈し、生成された混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム溶液（１５％ａｑ、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）でクエンチし、懸濁液を硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８９０ｍｇ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９５．２。
【0381】
工程８．３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチルフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８９０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、純度１０％）を加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージし、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下１５℃で３２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチルフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２５ｍｇ）を緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．２。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（８９０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下でＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、純度１０％）を加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で数回パージし、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下１５℃で３２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチルフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６２５ｍｇ）を緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１７．２。
【0382】
工程９．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチルフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＤＭＰ（７３１．９４ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、５３４．２６μＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた残渣を２０℃で真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（４１０ｍｇ）を褐色の油状物として得られ、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１５．２。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メチルフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４２０ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＤＭＰ（７３１．９４ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ、５３４．２６μＬ）を加え、混合物を１５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより微量の出発物質および所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾過ケーキをＤＣＭ（２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた残渣を２０℃で真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（４１０ｍｇ）を褐色の油状物として得られ、次の反応に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１５．２。
【0383】
工程１０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３５）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３０２．６０ｍｇ、５２１．６７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（３２０．９６ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）の混合物に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４１０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（２４５．８７ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５２％）が検出された。反応混合物を他のバッチ（２００ｍｇスケール）と合わせ、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）で精製し、溶出液の２つのバッチを凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。バッチ１：粗（ｃｒｕｄｅ）生成物１をＬＣＭＳにより確認し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物１を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉ
ｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：５２％～８２％、８分）で精製し、溶出液１を得た。バッチ２：粗（ｃｒｕｄｅ）生成物２をＬＣＭＳにより確認し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物２を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）で精製し、溶出液２を得た。溶出液の２つのバッチを合わせて凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．８ｍｇ、５７．９２μｍｏｌ、収率４．４４％）を微白色の固形物として得る。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４２．１。
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３０２．６０ｍｇ、５２１．６７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）および酢酸ナトリウム（３２０．９６ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）の混合物に１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（４１０ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１５℃で３０分間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（２４５．８７ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を１５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５２％）が検出された。反応混合物を他のバッチ（２００ｍｇスケール）と合わせ、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（５０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、１０分）で精製し、溶出液の２つのバッチを凍結乾燥し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を得た。バッチ１：粗（ｃｒｕｄｅ）生成物１をＬＣＭＳにより確認し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物１を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉ
ｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：５２％～８２％、８分）で精製し、溶出液１を得た。バッチ２：粗（ｃｒｕｄｅ）生成物２をＬＣＭＳにより確認し、粗（ｃｒｕｄｅ）生成物２を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－アセトニトリル）］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）で精製し、溶出液２を得た。溶出液の２つのバッチを合わせて凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メチルフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．８ｍｇ、５７．９２μｍｏｌ、収率４．４４％）を微白色の固形物として得る。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４２．１。
【0384】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝８．４７（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、８．０１－７．９１（ｍ、１Ｈ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．４５（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３－６．９４（ｍ、３Ｈ）、６．１８（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．０５－４．９１（ｍ、１Ｈ）、４．６４－４．４８（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．９４－３．８３（ｍ、２Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝５．３、９．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．１１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．７７－２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．６７－２．５６（ｍ、３Ｈ）、２．４８－２．３１（ｍ、５Ｈ）、２．３０－２．２５（ｍ、５Ｈ）、２．２５－２．１６（ｍ、３Ｈ）、１．８３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、１．７１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、４Ｈ）、１．６７（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、１．４１－１．３０（ｍ、８Ｈ）。
【0385】
実施例３６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３６）の合成
【0386】
【化43】
【0387】
工程１．１－（４－ブロモ－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
ジオキサン（１００ｍＬ）中の４－ブロモ－１－ヨード－２－メトキシベンゼン（１０ｇ、３１．９６ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（５．０２ｇ、３１．９６ｍｍｏｌ、４．９３ｍＬ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ２（ｄｂａ）３（８７７．８８ｍｇ、９５８．６８μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（６４７．１６ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１５．６２ｇ、４７．９３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１８％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．１ｇ、９．０６ｍｍｏｌ、２８．３５％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．１，３４４．１
ジオキサン（１００ｍＬ）中の４－ブロモ－１－ヨード－２－メトキシベンゼン（１０ｇ、３１．９６ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（５．０２ｇ、３１．９６ｍｍｏｌ、４．９３ｍＬ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ２（ｄｂａ）３（８７７．８８ｍｇ、９５８．６８μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（６４７．１６ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１５．６２ｇ、４７．９３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１８％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．１ｇ、９．０６ｍｍｏｌ、２８．３５％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．１，３４４．１
【0388】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（５）の合成
ジオキサン（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．１ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（５．２９ｇ、１２．６８ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＫＯＡｃ（２．６７ｇ、２７．１７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３３１．４０ｍｇ、４５２．９２μｍｏｌ）を加え、Ｎ２下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより全ての出発物質が消費されたことが確認され、４５％の所望の質量が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリ
ジン－４－カルボン酸エチル（１．９ｇ、３．４４ｍｍｏｌ、３７．９８％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５３．３
ジオキサン（６０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３．１ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（５．２９ｇ、１２．６８ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＫＯＡｃ（２．６７ｇ、２７．１７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３３１．４０ｍｇ、４５２．９２μｍｏｌ）を加え、Ｎ２下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより全ての出発物質が消費されたことが確認され、４５％の所望の質量が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（６０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３３％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリ
ジン－４－カルボン酸エチル（１．９ｇ、３．４４ｍｍｏｌ、３７．９８％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５３．３
【0389】
工程３．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬＡＨ（２６０．９７ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ）溶液中にＮ２気体下２０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボキシレート（１．９ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）溶液を滴下し、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈した。その後、生成された混合物をＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．９ｍＬ）クエンチし、濾過した。濾液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．７ｇ、粗製）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．６
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＬＡＨ（２６０．９７ｍｇ、６．８８ｍｍｏｌ）溶液中にＮ２気体下２０℃でＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボキシレート（１．９ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）溶液を滴下し、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（二酸化ケイ素、石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により出発物質が完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポットが検出された。反応混合物をＴＨＦ（５０ｍＬ）で希釈した。その後、生成された混合物をＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１５％ａｑ、０．３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．９ｍＬ）クエンチし、濾過した。濾液を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．７ｇ、粗製）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．６
【0390】
工程４．３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．７ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（０．８ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。反応混合物をＴＨＦ（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．７ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）溶液にＮ２気体下Ｐｄ／Ｃ（０．８ｇ、１０％純度）を加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量が検出された。反応混合物をＴＨＦ（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．３
【0391】
工程５．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、９０２．５５μｍｏｌ）溶液に２０℃でＤＭＰ（５７４．２１ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、４１９．１３μＬ）を加え、生成された混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、水和物質量のピーク（７７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（３００ｍｇ、粗製）を紫色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４９．２
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３００ｍｇ、９０２．５５μｍｏｌ）溶液に２０℃でＤＭＰ（５７４．２１ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ、４１９．１３μＬ）を加え、生成された混合物を１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、水和物質量のピーク（７７％）が検出された。反応混合物を真空濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（３００ｍｇ、粗製）を紫色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４９．２
【0392】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３６）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３７９．２５ｍｇ、６５３．８０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（２０１．１３ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、
２０℃で１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２７０ｍｇ、８１７．２５μｍｏｌ）に次いで水素化シアノホウ素ナトリウム（１５４．０７ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～２０％、ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１６％～３６％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、純粋な生成物Ｂおよび不純物を含む生成物Ｃを得た。不純物を含む生成物Ｃを分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～３５％、９分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｄを得た。生成物ＢおよびＤを合わせ、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２４．１ｍｇ、２３．３１μｍｏｌ、２．８５％収率、９４％純度、ＴＦＡ）を微白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．４
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（３７９．２５ｍｇ、６５３．８０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（２０１．１３ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、
２０℃で１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２７０ｍｇ、８１７．２５μｍｏｌ）に次いで水素化シアノホウ素ナトリウム（１５４．０７ｍｇ、２．４５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピークが検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～２０％、ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１６％～３６％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、純粋な生成物Ｂおよび不純物を含む生成物Ｃを得た。不純物を含む生成物Ｃを分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１５％～３５％、９分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、生成物Ｄを得た。生成物ＢおよびＤを合わせ、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２４．１ｍｇ、２３．３１μｍｏｌ、２．８５％収率、９４％純度、ＴＦＡ）を微白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．４
【0393】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、９．０４－８．９１（ｍ、１Ｈ）、８．５１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、８．２９－８．１４（ｍ、２Ｈ）、７．５５－７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．１０－６．９７（ｍ、１Ｈ）、６．９１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、６．７９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．８９（ｔｄ、Ｊ＝６．７、１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．４７－４．４０（ｍ、１Ｈ）、４．３０－３．９５（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８３－３．７９（ｍ、４Ｈ）、３．４３（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、４Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．０６（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、３．０１－２．９２（ｍ、１Ｈ）、２．９０－２．７７（ｍ、２Ｈ）、２．６５－２．６１（ｍ、１Ｈ）、２．４４－２．３４（ｍ、２Ｈ）、２．３１－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０６－１．９４（ｍ、４Ｈ）、１．９１－１．７５（ｍ、６Ｈ）、１．５６－１．４０（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0394】
実施例３７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３７）の合成
【0395】
【化44】
【0396】
工程１．１－（４－ブロモ－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（３）の合成
トルエン（５０ｍＬ）中の１－ブロモ－４－ヨード－２－メトキシベンゼン（３ｇ、９．５９ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５１ｇ、９．５９ｍｍｏｌ、１．４８ｍＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（９．３７ｇ、２８．７６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１７５．５８ｍｇ、１９１．７４μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（１６６．４１ｍｇ、２８７．６０μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２下１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９３％）が確認された。反応混合物を濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．４ｇ、４．０９ｍｍｏｌ、収率４２．６７％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．２
トルエン（５０ｍＬ）中の１－ブロモ－４－ヨード－２－メトキシベンゼン（３ｇ、９．５９ｍｍｏｌ）およびピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５１ｇ、９．５９ｍｍｏｌ、１．４８ｍＬ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（９．３７ｇ、２８．７６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１７５．５８ｍｇ、１９１．７４μｍｏｌ）およびＸａｎｔｐｈｏｓ（１６６．４１ｍｇ、２８７．６０μｍｏｌ）を加え、混合物をＮ２下１００℃で１４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９３％）が確認された。反応混合物を濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモ－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．４ｇ、４．０９ｍｍｏｌ、収率４２．６７％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．２
【0397】
工程２．１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（５）の合成
ジオキサン（５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．４ｇ、４．０９ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（２．２２ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）溶液にＫ３ＰＯ４（２．６１ｇ、１２．２７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２９９．３３ｍｇ、４０９．０８μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を９０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）が確認され、混合物を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５ｇ、２．７１ｍｍｏｌ、６６．３５％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５３．３
ジオキサン（５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）中の１－（４－ブロモ－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．４ｇ、４．０９ｍｍｏｌ）および２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ピリジン（２．２２ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）溶液にＫ３ＰＯ４（２．６１ｇ、１２．２７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２９９．３３ｍｇ、４０９．０８μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を９０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６５％）が確認され、混合物を濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５ｇ、２．７１ｍｍｏｌ、６６．３５％収率、１００％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５３．３
【0398】
工程３．（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（６）の合成
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＬＡＨ（０．２ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９１％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム溶液（１５％、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）で０℃でクエンチした後、混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．３ｇ、２．５５ｍｍｏｌ、９３．８０％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３
ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＬＡＨ（０．２ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）懸濁液にＴＨＦ（１０ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボン酸エチル（１．５ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９１％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）、水酸化ナトリウム溶液（１５％、０．２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．６ｍＬ）で０℃でクエンチした後、混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（１．３ｇ、２．５５ｍｍｏｌ、９３．８０％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１１．３
【0399】
工程４．３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（５００ｍｇ、９７９．２０μｍｏｌ）溶液に酢酸（５８．８０ｍｇ、９７９．２０μｍｏｌ、５６．００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加え、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン）－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．４ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．２。
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（１０ｍＬ）中の（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メタノール（５００ｍｇ、９７９．２０μｍｏｌ）溶液に酢酸（５８．８０ｍｇ、９７９．２０μｍｏｌ、５６．００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加え、混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮し、３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン）－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．４ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．２。
【0400】
工程５．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（８）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のＤＭＳＯ（４７．０１ｍｇ、６０１．７０μｍｏｌ、４７．０１μＬ）溶液にＤＣＭ（１ｍＬ）中の（ＣＯＣｌ）２（５７．２８ｍｇ、４５１．２７μｍｏｌ、３９．５０μＬ）溶液を－７０℃で滴下した。混合物を－７０℃で１０分間撹拌した。その後、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３００．８５μｍｏｌ）溶液を－７０℃で滴下した。混合物を－７０℃で２０分間撹拌した。その後、ＴＥＡ（１５２．２１ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ、２０９．３７μＬ）を－７０℃で滴下した。生成された混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認され、混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のＤＭＳＯ（４７．０１ｍｇ、６０１．７０μｍｏｌ、４７．０１μＬ）溶液にＤＣＭ（１ｍＬ）中の（ＣＯＣｌ）２（５７．２８ｍｇ、４５１．２７μｍｏｌ、３９．５０μＬ）溶液を－７０℃で滴下した。混合物を－７０℃で１０分間撹拌した。その後、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３００．８５μｍｏｌ）溶液を－７０℃で滴下した。混合物を－７０℃で２０分間撹拌した。その後、ＴＥＡ（１５２．２１ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ、２０９．３７μＬ）を－７０℃で滴下した。生成された混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１）により３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）－２－メトキシフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認され、混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド（１００ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。
【0401】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３７）の合成
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１００ｍｇ、３０２．６８μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２
－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１０５．３５ｍｇ、１８１．６１μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３７．２５ｍｇ、４５４．０３μｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１９２．４５ｍｇ、９０８．０５μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認され、混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２５．８ｍｇ、２８．２７μｍｏｌ、９．３４％収率、９２％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．５。
ＤＣＭ（３ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１００ｍｇ、３０２．６８μｍｏｌ）および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２
－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１０５．３５ｍｇ、１８１．６１μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（３７．２５ｍｇ、４５４．０３μｍｏｌ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１９２．４５ｍｇ、９０８．０５μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認され、混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－３－メトキシフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（２５．８ｍｇ、２８．２７μｍｏｌ、９．３４％収率、９２％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５８．５。
【0402】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．６８（ｓ、１Ｈ）、８．４３（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、８．３４－８．２９（ｍ、１Ｈ）、８．２４－８．２０（ｍ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５３－７．４９（ｍ、２Ｈ）、６．９１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．５３（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．４８－６．４２（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８５（ｍ、１Ｈ）、４．４６－４．３７（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８０－３．７６（ｍ、１Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．７０－３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．３３－３．３１（ｍ、３Ｈ）、２．６７－２．６０（ｍ、３Ｈ）、２．４５－２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．３２－２．２２（ｍ、３Ｈ）、２．１９－２．１３（ｍ、５Ｈ）、１．８７－１．７６（ｍ、５Ｈ）、１．６３－１．５４（ｍ、５Ｈ）、１．２６－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
【0403】
実施例３８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３８）の合成
【0404】
【化45】
【0405】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ジオキサン（５ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２５０ｍｇ、５３８．４２μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－（ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７４．６９ｍｇ、６４６．１０μｍｏｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ｈｅｐｔＣｌ（２６．１９ｍｇ、２６．９２μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５２６．２８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）をＮ２気体下２０℃で加え、生成された混合物をＮ２気体下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３２％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７５ｍｇ、２６２．３２μｍｏｌ、４８．７２％収率、９８％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６５４．３
ジオキサン（５ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（２５０ｍｇ、５３８．４２μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－（ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７４．６９ｍｇ、６４６．１０μｍｏｌ）溶液にＰｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ｈｅｐｔＣｌ（２６．１９ｍｇ、２６．９２μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５２６．２８ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）をＮ２気体下２０℃で加え、生成された混合物をＮ２気体下１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３２％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７５ｍｇ、２６２．３２μｍｏｌ、４８．７２％収率、９８％純度）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６５４．３
【0406】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（４）の合成
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７５ｍｇ、２６７．６７μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６２％）が確認された。反応混合物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（５６ｍｇ、１１７．７６μｍｏｌ、収率４３．９９％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．２
ＴＨＦ（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（１７５ｍｇ、２６７．６７μｍｏｌ）溶液にＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加えた。懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６２％）が確認された。反応混合物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（５６ｍｇ、１１７．７６μｍｏｌ、収率４３．９９％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４７６．２
【0407】
工程３．３－（４－（３－（４－アミノピペラジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（５６ｍｇ、１１７．７６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（６７．１４ｍｇ、５８８．７９μｍｏｌ、４３．５９μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７５％）が確認された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（３－（４－アミノピペラジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７６．２
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）カルバメート（５６ｍｇ、１１７．７６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（６７．１４ｍｇ、５８８．７９μｍｏｌ、４３．５９μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で２０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７５％）が確認された。反応混合物を真空濃縮し、３－（４－（３－（４－アミノピペラジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３７６．２
【0408】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３８）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４９．６３ｍｇ、１３０．５２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３０．６７ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ、４１．３３μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（１ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（４６．０１ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ、６２．００μＬ）中の３－（４－（３－（４－アミノピペラジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５８．０８ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８０％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～４７％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５６．３ｍｇ、５２．００μｍｏｌ、４３．８３％収率、９３％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７９．４
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５０ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４９．６３ｍｇ、１３０．５２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３０．６７ｍｇ、２３７．３１μｍｏｌ、４１．３３μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（１ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（４６．０１ｍｇ、３５５．９６μｍｏｌ、６２．００μＬ）中の３－（４－（３－（４－アミノピペラジン－１－イル）ピロリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５８．０８ｍｇ、１１８．６５μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８０％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～４７％、７分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５６．３ｍｇ、５２．００μｍｏｌ、４３．８３％収率、９３％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７９．４
【0409】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝９．５８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．７０（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．０７（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．９３（ｓ、１Ｈ）、７．４７－７．３６（ｍ、２Ｈ）、６．９８－６．８９（ｍ、２Ｈ）、６．８０－６．７２（ｍ、１Ｈ）、４．９６（ｔｄ、Ｊ＝６．７、１３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．００（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．９１－３．８５（ｍ、１Ｈ）、３．７９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．７０（ｄｄ、Ｊ＝５．５、１１．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．６６－３．５９（ｍ、２Ｈ）、３．５４（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、３．４２－３．１５（ｍ、１０Ｈ）、２．６９－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．４６－２．２７（ｍ、２Ｈ）、２．２４－２．０９（ｍ、２Ｈ）、１．２３（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0410】
実施例３９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３９）の合成
【0411】
【化46】
【0412】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２）の合成
メタノール（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－オキソ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）およびベンジルピペリジン－４－イルカルバメート（５８７．４２ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（１５０．５６ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ、１４３．３９μＬ）を０℃で加えた。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（４７２．６７ｍｇ、７．５２ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８０％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２２％～５２％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５６０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、４５．２１％収率、１００％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．３
メタノール（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－オキソ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（６００ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）およびベンジルピペリジン－４－イルカルバメート（５８７．４２ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（１５０．５６ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ、１４３．３９μＬ）を０℃で加えた。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（４７２．６７ｍｇ、７．５２ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（８０％）が確認された。反応混合物を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＨＣｌ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２２％～５２％、１０分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５６０ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、４５．２１％収率、１００％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５８．３
【0413】
工程２．ベンジル（１－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（３）の合成
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１６０ｍｇ、３４９．６５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４．００ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２気体下２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所
望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、ベンジル（１－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３７ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を 明るい緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５８．２
ジオキサン（６ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（１６０ｍｇ、３４９．６５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、４．００ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２気体下２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所
望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、ベンジル（１－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３７ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を 明るい緑色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５８．２
【0414】
工程３．ベンジル（１－（７－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（５）の合成
ジオキサン（８ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１８０ｍｇ、３８７．６６μｍｏｌ）、ベンジル（１－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３７ｍｇ、３８３．２３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、Ｐｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２２．５０ｍｇ、２３．１３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６７５．００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２７％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（１－（７－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、２６９．９４μｍｏｌ、６９．６３％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４１．３
ジオキサン（８ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１８０ｍｇ、３８７．６６μｍｏｌ）、ベンジル（１－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（１３７ｍｇ、３８３．２３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）、Ｐｄ－ＰＥＰＰＳＩ－ＩＨｅｐｔＣｌ（２２．５０ｍｇ、２３．１３μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（６７５．００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージした後、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２７％）が確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ＤＣＭ勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（１－（７－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（２００ｍｇ、２６９．９４μｍｏｌ、６９．６３％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７４１．３
【0415】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝７．８１（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０－７．３６（ｍ、１７Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１２－７．０３（ｍ、１Ｈ）、６．５９（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．４７（ｓ、２Ｈ）、５．４２（ｓ、２Ｈ）、５．０６（ｓ、２Ｈ）、３．６７－３．６３（ｍ、１Ｈ）、３．０４－２．９２（ｍ、４Ｈ）、２．８０－２．７４（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．７１（ｍ、６Ｈ）、１．６７－１．６２（ｍ、２Ｈ）、１．６１－１．５４（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、４Ｈ）。
【0416】
工程４．３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（７－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９４．４８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ（１Ｍ、１０５．００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。次いで混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４３ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（１－（７－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）カルバメート（７０ｍｇ、９４．４８μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ（１Ｍ、１０５．００μＬ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ、１０％純度）をＮ２気体下で加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージした。次いで混合物をＨ２気体（１５Ｐｓｉ）下２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより反応物が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４３ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
【0417】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物３９）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４０ｍｇ、９４．９２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６５ｍｇ、１７０．９５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７４．２０ｍｇ、５７４．１１μｍｏｌ、１００μＬ）および３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４３ｍｇ、９２．４７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２０℃で加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。精製のために残渣を他のバッチ（４５ｍｇスケール）と合わせた。合わせた残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分；カラム温度：３０℃）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５２．０ｍｇ、５９．０３μｍｏｌ、６２．１８％収率、９６％純度、０．３ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３２．１
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４０ｍｇ、９４．９２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６５ｍｇ、１７０．９５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７４．２０ｍｇ、５７４．１１μｍｏｌ、１００μＬ）および３－（４－（２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４３ｍｇ、９２．４７μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）を２０℃で加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。精製のために残渣を他のバッチ（４５ｍｇスケール）と合わせた。合わせた残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分；カラム温度：３０℃）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミド（５２．０ｍｇ、５９．０３μｍｏｌ、６２．１８％収率、９６％純度、０．３ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３２．１
【0418】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．１４－８．０７（ｍ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５７－７．３８（ｍ、２Ｈ）、７．０８－６．８１（ｍ、３Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８３－３．７３（ｍ、２Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、２．９８－２．９０（ｍ、２Ｈ）、２．８９－２．７６（ｍ、４Ｈ）、２．７６－２．６９（ｍ、１Ｈ）、２．６７－２．５７（ｍ、１Ｈ）、２．５４－２．５２（ｍ、１Ｈ）、２．２４－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０４－１．９１（ｍ、３Ｈ）、１．９０－１．７４（ｍ、４Ｈ）、１．７３－１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．６５－１．４２（ｍ、６Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0419】
実施例４０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４０）の合成
【0420】
【化47】
【0421】
工程１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）ベンズアミド（２）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５．３３ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５．２９ｇ、１３．９１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．９０ｇ、３７．９３ｍｍｏｌ、６．６１ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－アミン（２ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）ベンズアミド（３．６ｇ、６．２８ｍｍｏｌ、４９．６９％収率、９８％純度）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６２．３
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５．３３ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５．２９ｇ、１３．９１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（４．９０ｇ、３７．９３ｍｍｏｌ、６．６１ｍＬ）を加えた。混合物を２０℃で１０分間撹拌し、ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－アミン（２ｇ、１２．６４ｍｍｏｌ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（７２％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）ベンズアミド（３．６ｇ、６．２８ｍｍｏｌ、４９．６９％収率、９８％純度）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６２．３
【0422】
工程２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（３）の合成
２つのバッチ：ＴＨＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、３５６．１４μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ（２Ｍ、８９０．３５μＬ）を加え、生成された混合物を６０℃で１６時間撹拌した。バッチ１からＬＣＭＳにより３１％の出発物質および６１％の所望の質量ピークが検出された。バッチ２からＬＣＭＳにより１６％の出発物質および８０％の所望の質量ピークが検出された。２つのバッチを合わせ、この反応混合物に２０℃で飽和炭酸ナトリウム（１５ｍＬ）で希釈し、ｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（３４８ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１８．３
２つのバッチ：ＴＨＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）ベンズアミド（２００ｍｇ、３５６．１４μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＣｌ（２Ｍ、８９０．３５μＬ）を加え、生成された混合物を６０℃で１６時間撹拌した。バッチ１からＬＣＭＳにより３１％の出発物質および６１％の所望の質量ピークが検出された。バッチ２からＬＣＭＳにより１６％の出発物質および８０％の所望の質量ピークが検出された。２つのバッチを合わせ、この反応混合物に２０℃で飽和炭酸ナトリウム（１５ｍＬ）で希釈し、ｐＨ＝８に調整し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（３４８ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１８．３
【0423】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４０）の合成
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３２１．５５ｍｇ、８７４．１６μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に４Ａ ＭＳ（７００ｍｇ）およびＴＥＡ（６８０．４２ｍｇ、６．７２ｍｍｏｌ、９３５．９３μＬ）、および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（３４８ｍｇ、６７２．４３μｍｏｌ）を加えた。その後、２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４２７．５５ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより全ての出発物質が消費されたことが確認され、３９％の所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～４７％、７分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２７６．８ｍｇ、２４５．２４μｍｏｌ、３６．４７％収率、９４％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３３．４
ＤＣＥ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（３２１．５５ｍｇ、８７４．１６μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に４Ａ ＭＳ（７００ｍｇ）およびＴＥＡ（６８０．４２ｍｇ、６．７２ｍｍｏｌ、９３５．９３μＬ）、および４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（４－オキソピペリジン－１－イル）ベンズアミド（３４８ｍｇ、６７２．４３μｍｏｌ）を加えた。その後、２０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４２７．５５ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより全ての出発物質が消費されたことが確認され、３９％の所望の質量が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を真空濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２７％～４７％、７分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２７６．８ｍｇ、２４５．２４μｍｏｌ、３６．４７％収率、９４％純度、２ＴＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３３．４
【0424】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、１０．１３－１０．０１（ｍ、１Ｈ）、９．５３（ｓ、１Ｈ）、８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．２６－８．１８（ｍ、１Ｈ）、７．４８－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．０８－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．９１－４．８８（ｍ、１Ｈ）、４．１０（ｔ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．０６－３．９５（ｍ、４Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８４－３．７７（ｍ、１Ｈ）、３．３６－３．２３（ｍ、４Ｈ）、３．１０（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．０１（ｓ、２Ｈ）、２．９３－２．８０（ｍ、４Ｈ）、２．７０－２．６０（ｍ、１Ｈ）、２．４８－２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．２５－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０４－１．９５（ｍ、４Ｈ）、１．９１（ｓ、２Ｈ）、１．５７－１．４２（ｍ、２Ｈ）、１．２４
（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0425】
実施例４１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（化合物４１）の合成
【0426】
【化48】
【0427】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）酢酸（シス）（０．５ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）溶液にＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ、５ｍＬ）を０℃で加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）により出発物質が完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（４８０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４４．４
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）酢酸（シス）（０．５ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）溶液にＢＨ３・ＴＨＦ（１Ｍ、５ｍＬ）を０℃で加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）により出発物質が完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（４８０ｍｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２４４．４
【0428】
工程２．２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（シス）（３）
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ、４ｓ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（４８０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（７６４．８１ｍｇ、５．９２ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ）およびＴｏｓＣｌ（４５１．２７ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４８％）が確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。有機相を水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７～２２％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（
ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（シス）（４８０ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、５９．３８％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２９８．１
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ、４ｓ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（４８０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（７６４．８１ｍｇ、５．９２ｍｍｏｌ、１．０３ｍＬ）およびＴｏｓＣｌ（４５１．２７ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４８％）が確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。有機相を水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７～２２％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（
ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（シス）（４８０ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、５９．３８％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２９８．１
【0429】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（５）の合成
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（シス）（４８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（４００．６８ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ、５４０μＬ）およびＮａＩ（１５．４４ｍｇ、１０３．００μｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認された。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．２ｇ、３２９．０５μｍｏｌ、３１．９５％収率、８５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．５
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の２－（（１ｓ，４ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（シス）（４８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．３ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（４００．６８ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ、５４０μＬ）およびＮａＩ（１５．４４ｍｇ、１０３．００μｍｏｌ）を加え、混合物を６０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５３％）が確認された。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．２ｇ、３２９．０５μｍｏｌ、３１．９５％収率、８５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．５
【0430】
工程４．３－（４－（４－（２－（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（６）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．１５ｇ、２４６．７８μｍｏｌ、８５％純度）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．５
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（シス）（０．１５ｇ、２４６．７８μｍｏｌ、８５％純度）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、５ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（１１０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．５
【0431】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（化合物４１）の合成
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９０ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（９７．４５ｍｇ、２５６．２９μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（１１０ｍｇ、２４２．８３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０μＬ）溶液を加
え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６４％）が確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～５２％、７分）により精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピぺリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（５４．８ｍｇ、４８．１１μｍｏｌ、２２．５３％、収率、９２％純度、２ＴＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２０．１
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９０ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（９７．４５ｍｇ、２５６．２９μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（４４．５２ｍｇ、３４４．４７μｍｏｌ、６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（１ｓ，４ｓ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（シス）（１１０ｍｇ、２４２．８３μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（８９．０４ｍｇ、６８８．９３μｍｏｌ、１２０μＬ）溶液を加
え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６４％）が確認された。混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３２％～５２％、７分）により精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｓ，４ｓ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピぺリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（シス）（５４．８ｍｇ、４８．１１μｍｏｌ、２２．５３％、収率、９２％純度、２ＴＦＡ塩）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２０．１
【0432】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８３（ｓ、１Ｈ）、９．４７－９．４５（ｍ、１Ｈ）、８．２７－８．１４（ｍ、３Ｈ）、８．０２－７．９４（ｍ、１Ｈ）、７．５３－７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．１３－７．００（ｍ、３Ｈ）、４．９３－４．８５（ｍ、１Ｈ）、４．１２－４．０１（ｍ、３Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．８６－３．８２（ｍ、１Ｈ）、３．６２－３．５８（ｍ、２Ｈ）、３．５５－３．４９（ｍ、２Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、３．２７－３．１５（ｍ、４Ｈ）、３．０７－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．６８－２．６１（ｍ、２Ｈ）、２．２６－２．１５（ｍ、１Ｈ）、２．０３－１．９５（ｍ、１Ｈ）、１．７６－１．４７（ｍ、１１Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0433】
実施例４２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４２）の合成
【0434】
【化49】
【0435】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ジオキサン（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．５ｇ、３．２３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート；ＨＣｌ（８４８．８９ｍｇ、３．２３ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ２（ｄｂａ）３（２９５．８２ｍｇ、３２３．０５μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（３７３．８４ｍｇ、６４６．１０μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（３．１６ｇ、９．６９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２８％）が検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．７ｇ、１．１５ｍｍｏｌ、３５．５４％収率、１００％純度）を黄色の油状物と
して得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１０．４
ジオキサン（２０ｍＬ）中の２，６－ビス（ベンジルオキシ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）ピリジン（１．５ｇ、３．２３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート；ＨＣｌ（８４８．８９ｍｇ、３．２３ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下２０℃でＰｄ２（ｄｂａ）３（２９５．８２ｍｇ、３２３．０５μｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（３７３．８４ｍｇ、６４６．１０μｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（３．１６ｇ、９．６９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２８％）が検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．７ｇ、１．１５ｍｍｏｌ、３５．５４％収率、１００％純度）を黄色の油状物と
して得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６１０．４
【0436】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（４）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．７ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下でＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１０％純度）を加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮乾固し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ジオキソピぺリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、８８．１１％収率、９７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－Ｂｏｃ＋Ｈ）＋＝３３２．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ビス（ベンジルオキシ）ピリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（０．７ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）溶液にＮ２下でＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１０％純度）を加え、懸濁液を脱気し、Ｈ２で３回パージし、混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下２０～２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出された。懸濁液をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキをＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（５０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮乾固し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ジオキソピぺリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（４５０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、８８．１１％収率、９７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－Ｂｏｃ＋Ｈ）＋＝３３２．２
【0437】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ＝７．８３（ｓ、１Ｈ）、６．７９－６．７０（ｍ、２Ｈ）、６．３６（ｔ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．６９－３．５８（ｍ、４Ｈ）、３．６２－３．５６（ｍ、１Ｈ）、３．３４－３．３０（ｍ、４Ｈ）、２．７１－２．５４（ｍ、２Ｈ）、２．２３－２．０８（ｍ、２Ｈ）、１．７２－１．６７（ｍ、４Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）
【0438】
工程３．３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２５０ｍｇ、５７９．３８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を加え、生成された混合物に２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより８７％の所望の質量が検出された。混合物を濃縮乾燥し、３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３２．２
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（２５０ｍｇ、５７９．３８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を加え、生成された混合物に２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより８７％の所望の質量が検出された。混合物を濃縮乾燥し、３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２５０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３２．２
【0439】
工程４．Ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、８７６．０９μｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９０．８７ｍｇ、８９８．０６μｍｏｌ、１２５．００μＬ）を加えた。生成物を２０℃で１時間撹拌した後、混合物にＮａＢＨ（Ｏａｃ）３（２８５．５０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５２％）が検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－
１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８３．９３μｍｏｌ、４０．９６％収率、Ｎ／Ａ純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．１。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、８７６．０９μｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（９０．８７ｍｇ、８９８．０６μｍｏｌ、１２５．００μＬ）を加えた。生成物を２０℃で１時間撹拌した後、混合物にＮａＢＨ（Ｏａｃ）３（２８５．５０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を２０℃で加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５２％）が検出された。混合物を水（５０ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－
１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８３．９３μｍｏｌ、４０．９６％収率、Ｎ／Ａ純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４４．１。
【0440】
工程５．３－（４－（７－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８３．９３μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６２％）が検出された。混合物を濃縮し、３－（４－（７－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．３。
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１８３．９３μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６２％）が検出された。混合物を濃縮し、３－（４－（７－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４４．３。
【0441】
工程６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４２）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７５．５８ｍｇ、１７９．３５μｍｏｌ、１ｅｑ）溶液にＨＡＴＵ（７５．０１ｍｇ、１９７．２８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．７２ｍｇ、７１７．３９μｍｏｌ、１２４．９６μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。３－（４－（７－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９ｍｇ、２０．６４μｍｏｌ、１１．５１％収率、９２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７５．５８ｍｇ、１７９．３５μｍｏｌ、１ｅｑ）溶液にＨＡＴＵ（７５．０１ｍｇ、１９７．２８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．７２ｍｇ、７１７．３９μｍｏｌ、１２４．９６μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。３－（４－（７－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（０．１ｇ、粗製、ＴＦＡ）を加え、生成された混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが検出された。混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（２－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９ｍｇ、２０．６４μｍｏｌ、１１．５１％収率、９２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４７．４。
【0442】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７８（ｓ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４７－７．４２（ｍ、２Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝１．６、１３．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝１．７、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．５５－６．４５（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７７－３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．６５－３．６０（ｍ、４Ｈ）、３．３１－３．３０（ｍ、７Ｈ）、３．０５－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．８０－２．７１（ｍ、２Ｈ）、２．６５－２．５８（ｍ、１Ｈ）、２．４７－２．４
４（ｍ、２Ｈ）、２．３６－２．３１（ｍ、２Ｈ）、２．１９－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．７０（ｍ、４Ｈ）、１．５６－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）
４（ｍ、２Ｈ）、２．３６－２．３１（ｍ、２Ｈ）、２．１９－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．７０（ｍ、４Ｈ）、１．５６－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、６Ｈ）
【0443】
実施例４３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物４３）の合成
【0444】
【化50】
【0445】
工程１．２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（トランス）（２）の合成
ＴＨＦ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（２００ｍｇ、８２１．８９μｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（２４９．５０ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ、３４３．１９μＬ）およびＤＣＭ（２ｍＬ）中のＴｏｓＣｌ（２３５．０４ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．７２）で１５％のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメートが残っていることと、低極性の新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、２－（（１ｒ，４ｒ））－４－（（ｔ
ｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（２８０ｍｇ、７０４．３５μｍｏｌ、８５．７０％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５８．５
ＴＨＦ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメート（２００ｍｇ、８２１．８９μｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（２４９．５０ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ、３４３．１９μＬ）およびＤＣＭ（２ｍＬ）中のＴｏｓＣｌ（２３５．０４ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１、Ｒｆ＝０．７２）で１５％のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－ヒドロキシエチル）シクロヘキシル）カルバメートが残っていることと、低極性の新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、２－（（１ｒ，４ｒ））－４－（（ｔ
ｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（２８０ｍｇ、７０４．３５μｍｏｌ、８５．７０％収率）を無色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５８．５
【0446】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（トランス）（４）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（１７０ｍｇ、４２７．６４μｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２４．５８ｍｇ、４２７．６４μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１１０．５４ｍｇ、８５５．２９μｍｏｌ、１４８．９８μＬ）およびＮａＩ（３２．０５ｍｇ、２１３．８２μｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３２％の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが残っていることと、数個の新規なピークと３４％の所望の質量のピークが確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ、４Ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（６０ｍｇ、９１．７５μｍｏｌ、２１．４５％収率、７９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．３
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）シクロヘキシル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（１７０ｍｇ、４２７．６４μｍｏｌ）および３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２４．５８ｍｇ、４２７．６４μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１１０．５４ｍｇ、８５５．２９μｍｏｌ、１４８．９８μＬ）およびＮａＩ（３２．０５ｍｇ、２１３．８２μｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３２％の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが残っていることと、数個の新規なピークと３４％の所望の質量のピークが確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ、４Ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（６０ｍｇ、９１．７５μｍｏｌ、２１．４５％収率、７９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１７．３
【0447】
工程３．３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（５）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（６０ｍｇ、９１．７５μｍｏｌ、７９％純度）溶液にＴＦＡ（３６４．９８ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ、２３７．００μＬ）を加えた。混合物に２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７０％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去し、３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、９０．４７μｍｏｌ、収率９８．６１％、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．１
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメート（６０ｍｇ、９１．７５μｍｏｌ、７９％純度）溶液にＴＦＡ（３６４．９８ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ、２３７．００μＬ）を加えた。混合物に２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７０％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去し、３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、９０．４７μｍｏｌ、収率９８．６１％、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１７．１
【0448】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物４３）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３４．３１ｍｇ、８１．４２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５１．６０ｍｇ、１３５．７１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ
（３５．０８ｍｇ、２７１．４１μｍｏｌ、４７．２８μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した後、３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、９０．４７μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３４％）が確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で２５℃でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～５０％、１０分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、８分）で再精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（２０ｍｇ、２３．９０μｍｏｌ、２６．４２％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２０．３
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（３４．３１ｍｇ、８１．４２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（５１．６０ｍｇ、１３５．７１μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ
（３５．０８ｍｇ、２７１．４１μｍｏｌ、４７．２８μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した後、３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４８ｍｇ、９０．４７μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（２－（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３４％）が確認された。反応混合物を水（２０ｍＬ）で２５℃でクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）
Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３０％～５０％、１０分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４５％～７５％、８分）で再精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（２０ｍｇ、２３．９０μｍｏｌ、２６．４２％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２０．３
【0449】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、８．０４（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．５５－７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．０７－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．９０－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８４－３．７１（ｍ、２Ｈ）、３．３６（ｓ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０７－２．９３（ｍ、４Ｈ）、２．７２－２．５８（ｍ、２Ｈ）、２．４７－２．４６（ｍ、１Ｈ）、２．３９－２．３０（ｍ、３Ｈ）、２．２５－２．１３（ｍ、１Ｈ）、２．０５－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．９０－１．７４（ｍ、４Ｈ）、１．４３－１．２９（ｍ、４Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）、１．１１－０．９８（ｍ、２Ｈ）。
【0450】
実施例４４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４４）の合成
【0451】
【化51】
【0452】
工程１．１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２１０ｍｇ、６５５．５２μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３６１．４４ｍｇ、８５２．１７μｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２０８ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．０。
ＤＣＭ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２１０ｍｇ、６５５．５２μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（３６１．４４ｍｇ、８５２．１７μｍｏｌ）を０℃で加えた。混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（３－フルオロ－４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２０８ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１９．０。
【0453】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（４）の合成
ＤＣＥ（４ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２０８ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（３－アミノシクロブチル）カルバメート（１２１．６９ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（３９．２４ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ、３７．３７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６９２．４０ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３６％）が確認された。反応混合物を水（３０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～酢酸エチル／メタノール＝１０：１勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（２００ｍｇ、４０９．３４μｍｏｌ、６２．６
５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．１
ＤＣＥ（４ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（２０８ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（３－アミノシクロブチル）カルバメート（１２１．６９ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ）溶液にＨＯＡｃ（３９．２４ｍｇ、６５３．３９μｍｏｌ、３７．３７μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（６９２．４０ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）を０℃で加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒドが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３６％）が確認された。反応混合物を水（３０ｍＬ）で０℃でクエンチし、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～酢酸エチル／メタノール＝１０：１勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（２００ｍｇ、４０９．３４μｍｏｌ、６２．６
５％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４８９．１
【0454】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（５）の合成
メタノール（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、３０７．００μｍｏｌ）およびＨＣＨＯ（１２４．５７ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１１４．２８μＬ、３７％純度）溶液にＨＯＡｃ（１８．４４ｍｇ、３０７．００μｍＬ、１７．５６μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（５７．８８ｍｇ、９２１．０１μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４７％）が確認された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ、７１．９３％収率、７４％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０３．５
メタノール（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、３０７．００μｍｏｌ）およびＨＣＨＯ（１２４．５７ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、１１４．２８μＬ、３７％純度）溶液にＨＯＡｃ（１８．４４ｍｇ、３０７．００μｍＬ、１７．５６μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（５７．８８ｍｇ、９２１．０１μｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４７％）が確認された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ、７１．９３％収率、７４％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０３．５
【0455】
工程４．３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ、７４％純度）溶液にＴＦＡ（１．０７ｇ、９．３７ｍｍｏｌ、６９３．７５μＬ）を加えた。混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９４％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去し、３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１９３．６０μｍｏｌ、収率８７．６６％、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０３．２
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメート（１５０ｍｇ、２２０．８４μｍｏｌ、７４％純度）溶液にＴＦＡ（１．０７ｇ、９．３７ｍｍｏｌ、６９３．７５μＬ）を加えた。混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）カルバメートが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９４％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮し、溶媒を除去し、３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１９３．６０μｍｏｌ、収率８７．６６％、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０３．２
【0456】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４４）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７３．４２ｍｇ、１７４．２４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１１０．４２ｍｇ、２９０．４０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２５．１１ｍｇ、９６８．０６μｍｏｌ、１６８．６１μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）
（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１９３．６０μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３２％）が確認された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３ｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、９分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）で再精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－３－メトキシベンズアミド（３５ｍｇ、４２．１３μｍｏｌ、２１．７６％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０６．４
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７３．４２ｍｇ、１７４．２４μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１１０．４２ｍｇ、２９０．４０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２５．１１ｍｇ、９６８．０６μｍｏｌ、１６８．６１μＬ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。その後、３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）
（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、１９３．６０μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより３－（４－（４－（（（３－アミノシクロブチル）（メチル）アミノ）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンが完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３２％）が確認された。反応混合物を炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）で０℃でクエンチした後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：３＿Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ ７５×３０ｍｍ×３ｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、９分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）で再精製した後、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（３－（（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）（メチル）アミノ）シクロブチル）－３－メトキシベンズアミド（３５ｍｇ、４２．１３μｍｏｌ、２１．７６％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０６．４
【0457】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８０（ｓ、１Ｈ）、８．５５－８．４１（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．９３－７．８１（ｍ、１Ｈ）、７．５９－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０５－６．９１（ｍ、３Ｈ）、４．９５－４．８１（ｍ、１Ｈ）、４．４０－４．２６（ｍ、１Ｈ）、４．１３－３．９７（ｍ、２Ｈ）、３．９６－３．８９（ｍ、３Ｈ）、３．８１－３．７７（ｍ、１Ｈ）、３．３３－３．３２（ｍ、２Ｈ）、３．２９－３．２８（ｍ、６Ｈ）、２．９８－２．９１（ｍ、１Ｈ）、２．６５－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．４１－２．３９（ｍ、１Ｈ）、２．２２－２．１２（ｍ、４Ｈ）、２．１０－２．０７（ｍ、３Ｈ）、２．０５－１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．８６－１．７９（ｍ、２Ｈ）、１．６３－１．５１（ｍ、１Ｈ）、１．３３－１．１９（ｍ、８Ｈ）。
【0458】
実施例４５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４５）の合成
【0459】
【化52】
【0460】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）溶液に２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（１３６．８０ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３３．０９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１７９．３７μＬ）、ＮａＩ（５．１５ｍｇ、３４．３３μｍｏｌ）を加え、生成された混合物に２０℃で３４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（８ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒブチル（４－（２－（４－（４，（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８９．７８μｍｏｌ、８４．４２％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１８．４。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１００ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）溶液に２－（１－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）ピペリジン－４－イル）エチル４－メチルベンゼンスルホネート（１３６．８０ｍｇ、３４３．２７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１３３．０９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、１７９．３７μＬ）、ＮａＩ（５．１５ｍｇ、３４．３３μｍｏｌ）を加え、生成された混合物に２０℃で３４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４９％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（８ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を真空濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒブチル（４－（２－（４－（４，（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８９．７８μｍｏｌ、８４．４２％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１８．４。
【0461】
工程２．３－（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８９．７８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、５００．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空で濃縮し、３－（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、粗製
、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２。
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２８９．７８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（７７０．００ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ、５００．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空で濃縮し、３－（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、粗製
、ＴＦＡ）を褐色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２。
【0462】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４５）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９５．１３ｍｇ、２２５．７６μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１２８．７６ｍｇ、３３８．６４μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８７．５３ｍｇ、６７７．２７μｍｏｌ、１１７．９７μＬ）を加え、生成された混合物に２０℃で１時間撹拌した。３－（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、２２５．７６μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３５％～６５％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５６．８ｍｇ、６７．８１μｍｏｌ、３０．０４％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．４。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９５．１３ｍｇ、２２５．７６μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１２８．７６ｍｇ、３３８．６４μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（８７．５３ｍｇ、６７７．２７μｍｏｌ、１１７．９７μＬ）を加え、生成された混合物に２０℃で１時間撹拌した。３－（４－（４－（２－（１－アミノピペリジン－４－イル）エチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、２２５．７６μｍｏｌ、ＴＦＡ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、残渣を得た。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３５％～６５％、８分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（２－（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）エチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５６．８ｍｇ、６７．８１μｍｏｌ、３０．０４％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．４。
【0463】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８１（ｓ、１Ｈ）、９．２３（ｓ、１Ｈ）、８．３３－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．３９（ｍ、２Ｈ）、７．０６－６．９３（ｍ、３Ｈ）、４．９６－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８２－３．７７（ｍ、１Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０３－２．９６（ｍ、６Ｈ）、２．７５－２．６５（ｍ、７Ｈ）、２．３６－２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．２５－２．１３（ｍ、２Ｈ）、２．０４－１．９７（ｍ、１Ｈ）、１．７５－１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．４６－１．４０（ｍ、２Ｈ）、１．３４－１．２８（ｍ、３Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0464】
実施例４６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４６）の合成
【0465】
【化53】
【0466】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル１－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中の６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－カルボン酸（１ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＴＥＡ（７９９．７０ｍｇ、７．９０ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）およびＤＰＰＡ（１．６５ｇ、６．００ｍｍｏｌ、１．３ｍＬ）を加えた後、Ｎ２気体下１１０℃で１時間撹拌した後、２５℃でＢｎＯＨ（８３２．００ｍｇ、７．６９ｍｍｏｌ、８００μＬ）を加え、生成された混合物をＮ２気体下１１０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク［Ｍ－５５］が検出された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～３３％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル１－（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（１．４ｇ、３．８８ｍｍｏｌ、収率９９．１６％）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋１）＋＝３６１．０
トルエン（２０ｍＬ）中の６－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－カルボン酸（１ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＴＥＡ（７９９．７０ｍｇ、７．９０ｍｍｏｌ、１．１ｍＬ）およびＤＰＰＡ（１．６５ｇ、６．００ｍｍｏｌ、１．３ｍＬ）を加えた後、Ｎ２気体下１１０℃で１時間撹拌した後、２５℃でＢｎＯＨ（８３２．００ｍｇ、７．６９ｍｍｏｌ、８００μＬ）を加え、生成された混合物をＮ２気体下１１０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク［Ｍ－５５］が検出された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～３３％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル１－（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（１．４ｇ、３．８８ｍｍｏｌ、収率９９．１６％）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋１）＋＝３６１．０
【0467】
工程２．ベンジル（６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（３）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（６００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加えた。Ｎ２気体下２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出され、出発物質は検出されなかった。反応混合物を減圧濃縮し、ベンジル（６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（３００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６１．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル１－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－カルボキシレート（６００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加えた。Ｎ２気体下２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが検出され、出発物質は検出されなかった。反応混合物を減圧濃縮し、ベンジル（６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（３００ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６１．１
【0468】
工程３．ベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オク
タン－１－イル）カルバメート（５）の合成
ＤＣＥ（５ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１５０ｍｇ、４７１．１９μｍｏｌ）溶液にベンジル（６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（１２１．２１ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで混合物に０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４９９．３２ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１３％の所望の質量ピークが検出され、出発物質は検出されなかった。反応混合物に０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた後、水相に０℃で炭酸水素ナトリウム（ｓａｔ．ａｑ、１５ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整した後、合わせた有機相を塩水（６０ｍＬＸ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４６２．０８μｍｏｌ、９８．０７％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６３．１
タン－１－イル）カルバメート（５）の合成
ＤＣＥ（５ｍＬ）中の１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１５０ｍｇ、４７１．１９μｍｏｌ）溶液にベンジル（６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）および酢酸ナトリウム（１２１．２１ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いで混合物に０℃でＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４９９．３２ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより１３％の所望の質量ピークが検出され、出発物質は検出されなかった。反応混合物に０℃でＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた後、水相に０℃で炭酸水素ナトリウム（ｓａｔ．ａｑ、１５ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整した後、合わせた有機相を塩水（６０ｍＬＸ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～２０％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、ベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４６２．０８μｍｏｌ、９８．０７％収率）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６３．１
【0469】
工程４．３－（４－（４－（（１－アミノ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（６）の合成
ＴＦＡ（２ｍＬ）中のベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（１２０ｍｇ、２１３．２７μｍｏｌ）溶液をＮ２気体下６０℃で５時間撹拌した。ＬＣＭＳによりベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメートが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．４
ＴＦＡ（２ｍＬ）中のベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメート（１２０ｍｇ、２１３．２７μｍｏｌ）溶液をＮ２気体下６０℃で５時間撹拌した。ＬＣＭＳによりベンジル（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）カルバメートが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（３２％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（４－（（１－アミノ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．４
【0470】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４６）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１８９．８４μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＡＴＵ（１０８．２８ｍｇ、２８４．７７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１４８．４０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、２００．００μＬ）および３－（４－（４－（（１－アミノ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を加えた。混合物をＮ２気体下１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２８％の所望の質量ピークが検出された。反応混合物にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッ
シュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製した。生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分；カラム温度：３０℃）に再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．３ｍｇ、５６．２１μｍｏｌ、２９．６１％収率、９４％純度、０．２ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３２．２
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（８０ｍｇ、１８９．８４μｍｏｌ）溶液に２０℃でＨＡＴＵ（１０８．２８ｍｇ、２８４．７７μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１４８．４０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、２００．００μＬ）および３－（４－（４－（（１－アミノ－６－アザスピロ［２．５］オクタン－６－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を加えた。混合物をＮ２気体下１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２８％の所望の質量ピークが検出された。反応混合物にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッ
シュカラム、溶離液０～２５％メタノール：ジクロロメタン勾配、６０ｍＬ／分）で精製した。生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８ １５０×２５ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１２％～４２％、７分；カラム温度：３０℃）に再精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（６－（（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－６－アザスピロ［２．５］オクタン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５０．３ｍｇ、５６．２１μｍｏｌ、２９．６１％収率、９４％純度、０．２ＦＡ）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８３２．２
【0471】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８２（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３－８．１９（ｍ、２Ｈ）、８．１８－８．１７（ｍ、０．２Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５８－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０５－６．８９（ｍ、３Ｈ）、４．９２－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９６－３．９１（ｍ、３Ｈ）、３．８１－３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．４３－３．３１（ｍ、６Ｈ）、２．７３－２．５６（ｍ、６Ｈ）、２．４４－２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．２５－２．１１（ｍ、３Ｈ）、２．０３－１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．８５－１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．６８－１．５６（ｍ、１Ｈ）、１．５４－１．３２（ｍ、４Ｈ）、１．３０－１．１９（ｍ、８Ｈ）、０．７６－０．６２（ｍ、２Ｈ）
【0472】
実施例４７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４７）の合成
【0473】
【化54】
【0474】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル２－（１－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５００ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４９６．２７ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３０６．７０ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、４１３．３４μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間
撹拌した。ＤＭＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５７７．４７ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１３．４０ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ、８２６．６９μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３５％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ＬＣＭＳ ８２％純度の生成物Ａ（３６８ｍｇ、８２％純度）を得た。生成物ＡをＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解させ、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（１－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３２ｍｇ、４１．３３μｍｏｌ、３．４８％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７２８．３
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（５００ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４９６．２７ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３０６．７０ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ、４１３．３４μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間
撹拌した。ＤＭＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（１－アミノピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（５７７．４７ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６１３．４０ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ、８２６．６９μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３５％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１５ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ＬＣＭＳ ８２％純度の生成物Ａ（３６８ｍｇ、８２％純度）を得た。生成物ＡをＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解させ、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４６％～７６％、８分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル２－（１－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３２ｍｇ、４１．３３μｍｏｌ、３．４８％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７２８．３
【0475】
工程２．Ｎ－（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（４）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（１－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３１ｍｇ、４２．５９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１４．５７ｍｇ、１２７．７７μｍｏｌ、９．４６μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９３％）が確認された。反応混合物を真空で濃縮し、Ｎ－（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２８．３
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル２－（１－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）ピペリジン－４－イル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－７－カルボキシレート（３１ｍｇ、４２．５９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１４．５７ｍｇ、１２７．７７μｍｏｌ、９．４６μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９３％）が確認された。反応混合物を真空で濃縮し、Ｎ－（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２８．３
【0476】
工程３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４７）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソヘキサヒドロピリミジン－１－イル）安息香酸（２０ｍｇ、８５．３９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３５．７２ｍｇ、９３．９３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２２．０７ｍｇ、１７０．７９μｍｏｌ、２９．７５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮ－（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５５．１８ｍｇ、４２６．９７μｍｏｌ、７４．３７μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４８％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、生成物Ａを得て、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、７分）で精製し、凍結乾燥し、生成物Ｃを得た。水相を真空濃縮し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：６％～３６％、７分）で精製し、凍結乾燥し、生成物Ｄを得た。生成物Ｃおよび生成物Ｄを合わせ、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～５８％、９分）に再精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３ｍｇ、３．４５μｍｏｌ、４．０４％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．３
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソヘキサヒドロピリミジン－１－イル）安息香酸（２０ｍｇ、８５．３９μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３５．７２ｍｇ、９３．９３μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２２．０７ｍｇ、１７０．７９μｍｏｌ、２９．７５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮ－（４－（２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（７６ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５５．１８ｍｇ、４２６．９７μｍｏｌ、７４．３７μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１
時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４８％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、生成物Ａを得て、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：５％～３５％、７分）で精製し、凍結乾燥し、生成物Ｃを得た。水相を真空濃縮し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：６％～３６％、７分）で精製し、凍結乾燥し、生成物Ｄを得た。生成物Ｃおよび生成物Ｄを合わせ、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２８％～５８％、９分）に再精製し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（７－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－２，７－ジアザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３ｍｇ、３．４５μｍｏｌ、４．０４％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４４．３
【0477】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ＝８．４７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１０－８．００（ｍ、２Ｈ）、７．６６（ｓ、１Ｈ）、７．４８－７．３６（ｍ、４Ｈ）、７．３３（ｔ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６－７．２１（ｍ、１Ｈ）、５．０４－４．９０（ｍ、１Ｈ）、３．９７（ｓ、３Ｈ）、３．９５－３．８９（ｍ、２Ｈ）、３．８７－３．７５（ｍ、６Ｈ）、３．６８－３．５３（ｍ、２Ｈ）、３．３９－３．２６（ｍ、５Ｈ）、３．１８（ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．１１－２．９８（ｍ、１Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１０．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．９１－１．７２（ｍ、８Ｈ）、１．２９（ｓ、３Ｈ）、１．２７（ｓ、３Ｈ）
【0478】
実施例４８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（９－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４８）の合成
【0479】
【化55】
【0480】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル９－ニトロソ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（２）の合成
Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（２ｇ、７．８６ｍｍｏｌ）溶液にＮａＮＯ２（１．０８ｇ、１５．７３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後、酢酸（１．４２ｇ、２３．５９ｍｍｏｌ、１．３５ｍＬ）を０℃で滴下し、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９０％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル９－ニトロソ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．８ｇ、６．１６ｍｍｏｌ、７８．３７％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２２８．４
Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（２ｇ、７．８６ｍｍｏｌ）溶液にＮａＮＯ２（１．０８ｇ、１５．７３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後、酢酸（１．４２ｇ、２３．５９ｍｍｏｌ、１．３５ｍＬ）を０℃で滴下し、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９０％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル９－ニトロソ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．８ｇ、６．１６ｍｍｏｌ、７８．３７％収率、９７％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２２８．４
【0481】
工程２．ｔｅｒｔ－ブチル９－アミノ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（３）の合成
メタノール（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－ニトロソ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．８ｇ、６．３５ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（２．１６ｇ、３３．０３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後、酢酸（５．７２ｇ、９５．２８ｍｍｏｌ、５．４５ｍＬ）を０℃で滴下し、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより６０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（２６％）が確認され、混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６５％）が確認された。反応混合物をメタノール（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル９－アミノ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（７．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７０．３
メタノール（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－ニトロソ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．８ｇ、６．３５ｍｍｏｌ）溶液にＺｎ（２．１６ｇ、３３．０３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後、酢酸（５．７２ｇ、９５．２８ｍｍｏｌ、５．４５ｍＬ）を０℃で滴下し、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＬＣＭＳにより６０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（２６％）が確認され、混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（６５％）が確認された。反応混合物をメタノール（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル９－アミノ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（７．５ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７０．３
【0482】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル９－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－３，９－ジア
ザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４００ｍｇ、９４９．２２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３９７．０２ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２４５．３６ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、３３０．６８μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－アミノ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．２５ｇ、粗製）およびＤＩＰＥＡ（６１３．４０ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ、８２６．６９μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１２％ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（２６２ｍｇ、６６％純度）および生成物Ｂ（３５１ｍｇ、１９％純度）を得た。２
つのバッチを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、７分）で再精製して合わせ、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル９－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（６２ｍｇ、９１．２４μｍｏｌ、９．６１％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６７３．２
ザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４００ｍｇ、９４９．２２μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（３９７．０２ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２４５．３６ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、３３０．６８μＬ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－アミノ－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（１．２５ｇ、粗製）およびＤＩＰＥＡ（６１３．４０ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ、８２６．６９μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を塩水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～０～１２％ジクロロメタン／メタノール勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、生成物Ａ（２６２ｍｇ、６６％純度）および生成物Ｂ（３５１ｍｇ、１９％純度）を得た。２
つのバッチを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ
１５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４０％～７０％、７分）で再精製して合わせ、凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル９－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（６２ｍｇ、９１．２４μｍｏｌ、９．６１％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６７３．２
【0483】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）ベンズアミド（６）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（６２ｍｇ、９２．１６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３１．５２ｍｇ、２７６．４７μｍｏｌ、２０．４７μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９６％）が確認された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）ベンズアミド（７８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７３．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル９－（４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－カルボキシレート（６２ｍｇ、９２．１６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３１．５２ｍｇ、２７６．４７μｍｏｌ、２０．４７μＬ）を２０℃で加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（９６％）が確認された。反応混合物を真空濃縮し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）ベンズアミド（７８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５７３．３
【0484】
工程５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（９－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４８）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソヘキサヒドロピリミジン－１－イル）安息香酸（２３ｍｇ、９８．２０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４１．０７ｍｇ、１０８．０２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２５．３８ｍｇ、１９６．４１μｍｏｌ、３４．２１μ
Ｌ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）ベンズアミド（７４．１８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５０．７７ｍｇ、３９２．８１μｍｏｌ、６８．４２μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２４％～５４％、７分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（９－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９．７ｍｇ、２３．４７μｍｏｌ、２３．９０％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７８９．４
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソヘキサヒドロピリミジン－１－イル）安息香酸（２３ｍｇ、９８．２０μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４１．０７ｍｇ、１０８．０２μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２５．３８ｍｇ、１９６．４１μｍｏｌ、３４．２１μ
Ｌ）を加え、混合物を２０℃で１０分間撹拌した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）ベンズアミド（７４．１８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５０．７７ｍｇ、３９２．８１μｍｏｌ、６８．４２μＬ）溶液を加え、生成された混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５４％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２４％～５４％、７分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（９－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）－３，９－ジアザスピロ［５．５］ウンデカン－３－イル）－３－メトキシベンズアミド（１９．７ｍｇ、２３．４７μｍｏｌ、２３．９０％収率、９４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７８９．４
【0485】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．４２（ｓ、１Ｈ）、９．２９（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．３５（ｍ、５Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４－４．７９（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．６９－３．５４（ｍ、２Ｈ）、３．３３－３．３０（ｍ、５Ｈ）、２．９５－２．８２（ｍ、４Ｈ）、２．７２（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．７０－１．５６（ｍ、４Ｈ）、１．５６－１．４１（ｍ、４Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【0486】
実施例４９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４９）の合成
【0487】
【化56】
【0488】
工程１．３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（３）の合成
トルエン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－アミノ安息香酸塩（１ｇ、５．１７ｍｍｏｌ）およびアクリル酸（４１０．２１ｍｇ、５．６９ｍｍｏｌ、３９０．６７μＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をｎ－ヘキサン（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（１ｇ、３．７７ｍｍｏｌ、７２．８４％収率、１００％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２６６．１。
トルエン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－アミノ安息香酸塩（１ｇ、５．１７ｍｍｏｌ）およびアクリル酸（４１０．２１ｍｇ、５．６９ｍｍｏｌ、３９０．６７μＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をｎ－ヘキサン（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（１ｇ、３．７７ｍｍｏｌ、７２．８４％収率、１００％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２６６．１。
【0489】
工程２．４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（４）の合成
酢酸（１０ｍＬ）中の３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（１ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（２．２６ｇ、３７．６９ｍｍｏｌ、２．０２ｍＬ）の混合物を１２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を２０℃で１０分間ＴＨＦ／ＭＴＢＥ（ＴＨＦ：ＭＴＢＥ～１：１（１０ｍＬ））で粉砕し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（７００ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、６９．７８％収率、８８％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２３５．０。
酢酸（１０ｍＬ）中の３－（（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（１ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（２．２６ｇ、３７．６９ｍｍｏｌ、２．０２ｍＬ）の混合物を１２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を２０℃で１０分間ＴＨＦ／ＭＴＢＥ（ＴＨＦ：ＭＴＢＥ～１：１（１０ｍＬ））で粉砕し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（７００ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、６９．７８％収率、８８％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝２３５．０。
【0490】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（３００ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７３０．５６ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４９６．６５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ、６６９．３４μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いでｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（２８５．２７ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）で精製し、２０℃で１０分間ＥＡ（１０ｍＬ）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３４２．２８μｍｏｌ、２６．７２％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３４７．１。
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（３００ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７３０．５６ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（４９６．６５ｍｇ、３．８４ｍｍｏｌ、６６９．３４μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。次いでｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（２８５．２７ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル＠４０ｍＬ／分）で精製し、２０℃で１０分間ＥＡ（１０ｍＬ）で粉砕し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３４２．２８μｍｏｌ、２６．７２％収率、９５％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３４７．１。
【0491】
工程４．１－（４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（７）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３６０．３０μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、１－（４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。次いで次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．２。
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３６０．３０μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を真空濃縮し、１－（４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。次いで次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．２。
【0492】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（９）の合成
メタノール（２ｍＬ）中の１－（４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１２０ｍｇ、３５４．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１６１．７２ｍｇ、７０８．４１μｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（５８．１１ｍｇ、７０８．４１μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（６６．７８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（４，２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６２ｍｇ、２８０．１７μｍｏｌ、７９．１０％収率、８９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１５．１
メタノール（２ｍＬ）中の１－（４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１２０ｍｇ、３５４．２０μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１６１．７２ｍｇ、７０８．４１μｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（５８．１１ｍｇ、７０８．４１μｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した後、水素化シアノホウ素ナトリウム（６６．７８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ
ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル／石油エーテル～１０％メタノール／酢酸エチル勾配＠４０ｍＬ／分）で精製し、分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（４，２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６２ｍｇ、２８０．１７μｍｏｌ、７９．１０％収率、８９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１５．１
【0493】
工程６．１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－
１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１０）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、３１０．９１μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を真空濃縮し、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５．０。
１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１０）の合成
ＤＣＭ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１６０ｍｇ、３１０．９１μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１．５４ｇ、１３．５１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を真空濃縮し、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１６０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５．０。
【0494】
工程７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン）－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物４９）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６３．７８ｍｇ、１５１．３７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８６．３３ｍｇ、２２７．０５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５８．６９ｍｇ、４５４．１０μｍｏｌ、７９．１０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８０ｍｇ、１５１．３７μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］）；Ｂ％：２８％～５８％、９分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（７．０ｍｇ、８．３０μｍｏｌ、５．４８％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８１８．４。
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６３．７８ｍｇ、１５１．３７μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８６．３３ｍｇ、２２７．０５μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（５８．６９ｍｇ、４５４．１０μｍｏｌ、７９．１０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８０ｍｇ、１５１．３７μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を塩水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（二酸化ケイ素、ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で精製し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］）；Ｂ％：２８％～５８％、９分）に再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（７．０ｍｇ、８．３０μｍｏｌ、５．４８％収率、９７％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８１８．４。
【0495】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．４５（ｓ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２１（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４５－７．３６（ｍ、６Ｈ）、４．９３－４．８０（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．７０－３．５３（ｍ、２Ｈ）、３．３２－３．３１（ｍ、５Ｈ）、３．０４－２．９８（ｍ、２Ｈ）、２．７９－２．７０（ｍ、４Ｈ）、２．４２－２．３３（ｍ、４Ｈ）、２．２５－２．１５（ｍ、２Ｈ）、１．８０－１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．５９－１．４５（ｍ、１Ｈ）、１．３０－１．２０（ｍ、８Ｈ）。
【0496】
実施例５０．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン
－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５０）の合成
－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５０）の合成
【0497】
【化57】
【0498】
工程１．３－（（２－メトキシ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２）の合成
トルエン（２０ｍＬ）中の４－アミノ－３－メトキシ安息香酸メチル（１．８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ）およびアクリル酸（１．０７ｇ、１４．９０ｍｍｏｌ、１．０２ｍＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８４％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をｎ－ヘキサン（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、３－（（２－メトキシ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２．５ｇ、９．７７ｍｍｏｌ、９８．３７％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．０
トルエン（２０ｍＬ）中の４－アミノ－３－メトキシ安息香酸メチル（１．８ｇ、９．９３ｍｍｏｌ）およびアクリル酸（１．０７ｇ、１４．９０ｍｍｏｌ、１．０２ｍＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８４％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をｎ－ヘキサン（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、３－（（２－メトキシ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２．５ｇ、９．７７ｍｍｏｌ、９８．３７％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．０
【0499】
工程２．４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸メチル（３）の合成
酢酸（３０ｍＬ）中の３－（（２－メトキシ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２．５ｇ、９．８７ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（５．９３ｇ、９８．７２ｍｍｏｌ、５．２９ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６４％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３
－メトキシ安息香酸メチル（１ｇ、３．５６ｍｍｏｌ、３６．０４％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７９．０。
酢酸（３０ｍＬ）中の３－（（２－メトキシ－４－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２．５ｇ、９．８７ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（５．９３ｇ、９８．７２ｍｍｏｌ、５．２９ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６４％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＭＴＢＥ（１０ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３
－メトキシ安息香酸メチル（１ｇ、３．５６ｍｍｏｌ、３６．０４％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７９．０。
【0500】
工程３．４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸（４）の合成
トルエン（１０ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸メチル（５００ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）溶液に（Ｂｕ３Ｓｎ）２Ｏ（３．３ｇ、５．５４ｍｍｏｌ、２．８２ｍＬ）を加え、混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認された。混合物をＫＦ（２．５Ｍ、２０ｍＬ）に注ぎ、２０℃で３０分間撹拌した後、酢酸エチル（１０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル層を除去した。水相を１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸（３００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６５．０
トルエン（１０ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸メチル（５００ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）溶液に（Ｂｕ３Ｓｎ）２Ｏ（３．３ｇ、５．５４ｍｍｏｌ、２．８２ｍＬ）を加え、混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が確認された。混合物をＫＦ（２．５Ｍ、２０ｍＬ）に注ぎ、２０℃で３０分間撹拌した後、酢酸エチル（１０ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル層を除去した。水相を１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸（３００ｍｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６５．０
【0501】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸（２００ｍｇ、７５６．９１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４３１．７０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２９３．４７ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ、３９５．５２μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１４０．９７ｍｇ、７５６．９１μｍｏｌ）を加え、２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２ｍＬ）および酢酸エチル（２ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥した。固形物をＭＴＢＥ（５ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１９０ｍｇ、４０４．１９μｍｏｌ、５３．４０％収率、９２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－Ｂｏｃ＋Ｈ）＋＝３３２．９。
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシ安息香酸（２００ｍｇ、７５６．９１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（４３１．７０ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２９３．４７ｍｇ、２．２７ｍｍｏｌ、３９５．５２μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌し、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１４０．９７ｍｇ、７５６．９１μｍｏｌ）を加え、２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３３％）が確認された。反応混合物をＨ２Ｏ（２ｍＬ）および酢酸エチル（２ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキを真空乾燥した。固形物をＭＴＢＥ（５ｍＬ）で２０℃で１０分間粉砕し、固形物を集めて真空乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１９０ｍｇ、４０４．１９μｍｏｌ、５３．４０％収率、９２％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－Ｂｏｃ＋Ｈ）＋＝３３２．９。
【0502】
工程５．１－（２－メトキシ－４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（６）の合成
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１９０ｍｇ、４３９．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０９．８３μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認され、混合物を真空濃縮し、１－（２－メトキシ－４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１８０ｍｇ、粗製）を灰色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１。
ジオキサン（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１９０ｍｇ、４３９．３４μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０９．８３μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認され、混合物を真空濃縮し、１－（２－メトキシ－４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１８０ｍｇ、粗製）を灰色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１。
【0503】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
メタノール（７ｍＬ）中の１－（２－メトキシ－４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１４０ｍｇ、３７９．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（６２．２８ｍｇ、７５９．１９μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１７３．３１ｍｇ、７５９．１９μｍｏｌ）を加え、２０℃で３０分間撹拌した後、水素化シア
ノホウ素ナトリウム（３５．７８ｍｇ、５６９．３９μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×２）で抽出した。水相を炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ＝７～８に調整し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．４
メタノール（７ｍＬ）中の１－（２－メトキシ－４－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（１４０ｍｇ、３７９．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液に酢酸ナトリウム（６２．２８ｍｇ、７５９．１９μｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（１７３．３１ｍｇ、７５９．１９μｍｏｌ）を加え、２０℃で３０分間撹拌した後、水素化シア
ノホウ素ナトリウム（３５．７８ｍｇ、５６９．３９μｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５ｍＬ×２）で抽出した。水相を炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ＝７～８に調整し、酢酸エチル（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を白色の粉末として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．４
【0504】
工程７．１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４６．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１００．４９ｍｇ、８８１．３１μｍｏｌ、６５．２５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認され、混合物を真空濃縮し、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４５．２。
ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４６．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（１００．４９ｍｇ、８８１．３１μｍｏｌ、６５．２５μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認され、混合物を真空濃縮し、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８５ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４５．２。
【0505】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５０）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８１．２１ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．０１ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ、１２４．００μＬ）を加えた後、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（７９．５３ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を水（２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ
１００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２３％～４３％、７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１３．５ｍｇ、１５．８３μｍｏｌ、１１．１２％収率、９９．４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．５。
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（８１．２１ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（９２．０１ｍｇ、７１１．９２μｍｏｌ、１２４．００μＬ）を加えた後、１－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（７９．５３ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピークが確認された。混合物を水（２ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２ｍＬ×３）で抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ
１００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２３％～４３％、７分）および分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、９分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－３－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（１３．５ｍｇ、１５．８３μｍｏｌ、１１．１２％収率、９９．４％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．５。
【0506】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．３６（ｓ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ＝８．３１Ｈｚ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．４２（ｍ、２Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝７．９５Ｈｚ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝１．４７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９８（ｄｄ、Ｊ＝７．８９、１．５３Ｈｚ、１Ｈ）、４．８８（ｄｔ、Ｊ＝１３．３６、６．５９Ｈｚ、１Ｈ）、４．０４（ｔ、Ｊ＝１３．５７Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、３．６０（ｔ、Ｊ＝６．６０Ｈｚ、４Ｈ）、３．３３（ｓ、３Ｈ）、３．３１（ｓ、２Ｈ）、３．０１（ｄ、Ｊ＝１０．２７Ｈｚ、２Ｈ）、２．７５（ｔ、Ｊ＝１０．３３Ｈｚ、２Ｈ）、２．６９（ｔ、Ｊ＝６．５４Ｈｚ、２Ｈ）、２．４５－２．３２（ｍ、４Ｈ）、２．２０（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、２Ｈ）、１．７６（ｄ、Ｊ＝１１．６２Ｈｚ、２Ｈ）、１．５１（ｄ、Ｊ＝１０．３９Ｈｚ、１Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７２Ｈｚ、８Ｈ）。
【0507】
実施例５１．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５１）の合成
【0508】
【化58】
【0509】
工程１．３－（（２－メトキシ－５－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２）の合成
トルエン（４０ｍＬ）中のアクリル酸（１．７９ｇ、２４．８４ｍｍｏｌ、１．７０ｍＬ）および３－アミノ－４－メトキシ安息香酸メチル（３ｇ、１６．５６ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物の溶液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル＝８：１（３０ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。その後、懸濁液を濾過した。濾過ケーキを集めて乾燥し、３－（（２－メトキシ－５－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（３．６ｇ、１３．７９ｍｍｏｌ、８３．２８％収率、９７％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．０
トルエン（４０ｍＬ）中のアクリル酸（１．７９ｇ、２４．８４ｍｍｏｌ、１．７０ｍＬ）および３－アミノ－４－メトキシ安息香酸メチル（３ｇ、１６．５６ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物の溶液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル＝８：１（３０ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。その後、懸濁液を濾過した。濾過ケーキを集めて乾燥し、３－（（２－メトキシ－５－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（３．６ｇ、１３．７９ｍｍｏｌ、８３．２８％収率、９７％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２５４．０
【0510】
工程２．３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸メチル（３）の合成
酢酸（３０ｍＬ）中の３－（（２－メトキシ－５－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（３．６ｇ、１４．２２ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（８．５４ｇ、１４２．１５ｍｍｏｌ、７．６２ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を水（８０ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル：メタノール＝１５：１５：２（３２ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。その後、懸濁液を濾過した。濾過ケーキを集めて真空乾燥し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸塩メチル（２．８ｇ、１０．０６ｍｍｏｌ、７０．７９％収率、１００％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７９．０
酢酸（３０ｍＬ）中の３－（（２－メトキシ－５－（メトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（３．６ｇ、１４．２２ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（８．５４ｇ、１４２．１５ｍｍｏｌ、７．６２ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合物を水（８０ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を石油エーテル：酢酸エチル：メタノール＝１５：１５：２（３２ｍＬ）で粉砕し、３０分間撹拌した。その後、懸濁液を濾過した。濾過ケーキを集めて真空乾燥し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸塩メチル（２．８ｇ、１０．０６ｍｍｏｌ、７０．７９％収率、１００％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７９．０
【0511】
工程３．３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸（４）の合成
トルエン（５ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸メチル（０．５ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）および（ｎ－Ｂｕ３Ｓｎ）２Ｏ（６．５１ｇ、１０．７８ｍｍｏｌ、５．５６ｍＬ）の混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４４％）が確認された。混合物をＫＦ（２．５Ｍ、３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で洗浄した。合わせた有機相を除去した。２Ｍ ＨＣｌ水溶液で水相をｐＨ＝５に調整した後、酢酸エチル（３０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸（０．２５ｇ、９３６．６７μｍｏｌ、５２．１３％収率、９９％純度）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６５．０
トルエン（５ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸メチル（０．５ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）および（ｎ－Ｂｕ３Ｓｎ）２Ｏ（６．５１ｇ、１０．７８ｍｍｏｌ、５．５６ｍＬ）の混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（４４％）が確認された。混合物をＫＦ（２．５Ｍ、３０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で洗浄した。合わせた有機相を除去した。２Ｍ ＨＣｌ水溶液で水相をｐＨ＝５に調整した後、酢酸エチル（３０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸（０．２５ｇ、９３６．６７μｍｏｌ、５２．１３％収率、９９％純度）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６５．０
【0512】
工程４．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（５）の合成
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸（３７０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６３８．９１ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５４２．９２ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ、７３１．６９μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（３１１．８６ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５７％）が確認された。混合物を水（８０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を減圧濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマト
グラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４８０ｍｇ、９３２．３２μｍｏｌ、６６．５８％収率、８４％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３７７．１
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシ安息香酸（３７０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６３８．９１ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５４２．９２ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ、７３１．６９μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（３１１．８６ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（５７％）が確認された。混合物を水（８０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を減圧濃縮し、残渣をフラッシュシリカゲルクロマト
グラフィー（１２ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４８０ｍｇ、９３２．３２μｍｏｌ、６６．５８％収率、８４％純度）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３７７．１
【0513】
工程５．１－（２－メトキシ－５－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（６）の合成
ジオキサン（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３７０ｍｇ、８５５．５５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、１－（２－メトキシ－５－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（３１５ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１
ジオキサン（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３７０ｍｇ、８５５．５５μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、１－（２－メトキシ－５－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（３１５ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を褐色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３３３．１
【0514】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の１－（２－メトキシ－５－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（３１５ｍｇ、８５４．０９μｍｏｌ、ＨＣｌ）およびＡｃＯＮａ（１４０．１２ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）の混合物を２５℃で３０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（７７９．９１ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）および酢酸（５１．２９ｍｇ、８５４．０９μｍｏｌ、４８．８９μＬ）溶液を２５℃で加えた。混合物を２５℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（１０７．３５ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、生成された混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３％）が確認された。反応溶液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配～０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２８％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４５．４２μｍｏｌ、１７．０３％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．２
メタノール（１０ｍＬ）中の１－（２－メトキシ－５－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（３１５ｍｇ、８５４．０９μｍｏｌ、ＨＣｌ）およびＡｃＯＮａ（１４０．１２ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）の混合物を２５℃で３０分間撹拌した後、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（７７９．９１ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）および酢酸（５１．２９ｍｇ、８５４．０９μｍｏｌ、４８．８９μＬ）溶液を２５℃で加えた。混合物を２５℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（１０７．３５ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、生成された混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３％）が確認された。反応溶液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配～０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２８％、７分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４５．４２μｍｏｌ、１７．０３％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５４５．２
【0515】
工程７．１－（５－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４６．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を２５℃で加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌
した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、１－（５－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（７０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４５．１
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８０ｍｇ、１４６．８９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を２５℃で加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌
した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、１－（５－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（７０ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４５．１
【0516】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５１）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６４．９７ｍｇ、１７０．８６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５５．２０ｍｇ、４２７．１５μｍｏｌ、７４．４０μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、１－（５－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（６７．６０ｍｇ、１２１．０３μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）が確認された。混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）が確認された。混合溶液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配～０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、９分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６．９ｍｇ、４２．６５μｍｏｌ、２９．９５％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．２
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（６４．９７ｍｇ、１７０．８６μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（５５．２０ｍｇ、４２７．１５μｍｏｌ、７４．４０μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、１－（５－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）－２－メトキシフェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（６７．６０ｍｇ、１２１．０３μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、生成された混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３２％）が確認された。混合溶液を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）が確認された。混合溶液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配～０～５０％メタノール／酢酸エチル勾配＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２９％～５９％、９分）で再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）－４－メトキシベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６．９ｍｇ、４２．６５μｍｏｌ、２９．９５％収率、９８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８４８．２
【0517】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．３４（ｓ、１Ｈ）、９．２６（ｓ、１Ｈ）、８．３５－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４８－７．３１（ｍ、４Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．９５－４．８０（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．６６－３．４０（ｍ、６Ｈ）、３．３５－３．３２（ｍ、２Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．７７－２．６６（ｍ、４Ｈ）、２．３３（ｂｒ ｄｄ、Ｊ＝１．９、３．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．１９（ｂｒ ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．８１－１．６８（ｍ、２Ｈ）、１．５９－１．４３（ｍ、１Ｈ）、１．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、８Ｈ）。
【0518】
実施例５２．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５２）の合成
【0519】
【化59】
【0520】
工程１．３－（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（２）の合成
トルエン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－アミノ安息香酸（５ｇ、２５．８７ｍｍｏｌ）溶液にアクリル酸（１．８６ｇ、２５．８７ｍｍｏｌ、１．７８ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～８７％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（７ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６６．１。
トルエン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル３－アミノ安息香酸（５ｇ、２５．８７ｍｍｏｌ）溶液にアクリル酸（１．８６ｇ、２５．８７ｍｍｏｌ、１．７８ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～８７％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、３－（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（７ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６６．１。
【0521】
工程２．３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（３）の合成
ＨＯＡｃ（１５０ｍＬ）中の３－（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（７ｇ、２６．３８ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（１５．８５ｇ、２６３．８５ｍｍｏｌ、１４．１５ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～７９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（５００ｍＬ、ｖ／ｖ＝１０：１）で粉砕した。濾過ケーキを減圧乾燥し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（５．６ｇ、２３．５８ｍｍｏｌ、８９．３５％収率、９８．６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３５．１。
ＨＯＡｃ（１５０ｍＬ）中の３－（（３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）フェニル）アミノ）プロパン酸（７ｇ、２６．３８ｍｍｏｌ）溶液にＵＲＥＡ（１５．８５ｇ、２６３．８５ｍｍｏｌ、１４．１５ｍＬ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～７９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（５００ｍＬ、ｖ／ｖ＝１０：１）で粉砕した。濾過ケーキを減圧乾燥し、３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（５．６ｇ、２３．５８ｍｍｏｌ、８９．３５％収率、９８．６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３５．１。
【0522】
工程３．ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（４）の合成
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（２ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３．３１ｇ、２５．６２ｍｍｏｌ、４．４６ｍＬ）およびＨＡＴＵ（４．８７ｇ、１２．８１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物に３０分後、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１．５９ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４６％）が確認された。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％石油エーテル：酢酸エチル／エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．０６ｍｍｏｌ、２４．１５％、収率、８３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－ｔＢｕ＋Ｈ）＋＝３４７．１。
ＤＭＦ（１５ｍＬ）中の３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）安息香酸（２ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３．３１ｇ、２５．６２ｍｍｏｌ、４．４６ｍＬ）およびＨＡＴＵ（４．８７ｇ、１２．８１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物に３０分後、ｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１．５９ｇ、８．５４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４６％）が確認された。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％石油エーテル：酢酸エチル／エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．０６ｍｍｏｌ、２４．１５％、収率、８３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ－ｔＢｕ＋Ｈ）＋＝３４７．１。
【0523】
工程４．１－（３－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（５）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１５ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を濾過した。濾過ケーキを減圧乾燥し、１－（３－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（４３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．１。
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１ｇ、２．４８ｍｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１５ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を濾過した。濾過ケーキを減圧乾燥し、１－（３－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（４３０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０３．１。
【0524】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（６７８．５３ｍｇ、８．６８ｍｍｏｌ、６７８．５３μＬ）溶液にＤＣＭ（５ｍＬ）中のオキサリルクロリド（７１６．４６ｍｇ、５．６４ｍｍｏｌ、４９４．１１μＬ）を－７０℃で加えた。混合物に１０分後、ＤＣＴ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）溶液を－７０℃で加え、混合物を２０分間撹拌した。次いで混合物にＴＥＡ（２．２０ｇ、２１．７１ｍｍｏｌ、３．０２ｍＬ）を－７０℃で加えた。次いで混合物を２０℃まで昇温させ、３０分間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６４０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２９．１。
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（６７８．５３ｍｇ、８．６８ｍｍｏｌ、６７８．５３μＬ）溶液にＤＣＭ（５ｍＬ）中のオキサリルクロリド（７１６．４６ｍｇ、５．６４ｍｍｏｌ、４９４．１１μＬ）を－７０℃で加えた。混合物に１０分後、ＤＣＴ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）溶液を－７０℃で加え、混合物を２０分間撹拌した。次いで混合物にＴＥＡ（２．２０ｇ、２１．７１ｍｍｏｌ、３．０２ｍＬ）を－７０℃で加えた。次いで混合物を２０℃まで昇温させ、３０分間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝２０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、ＤＣＭ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６４０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２９．１。
【0525】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７）の合成
ＤＣＥ（２０ｍＬ）中の１－（３－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（４２７．４１ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６４０ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｃ（３３６．７１ｍｇ、５．６１ｍｍｏｌ、３２０．６８μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１．１９ｇ、５．６１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４６％）が確認された
。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ）でクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％石油エーテル：酢酸エチル／エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４１９．３４μｍｏｌ、１４．９６％収率、８３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１５．４。
ＤＣＥ（２０ｍＬ）中の１－（３－（ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（４２７．４１ｍｇ、粗製、ＨＣｌ）溶液にｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６４０ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｃ（３３６．７１ｍｇ、５．６１ｍｍｏｌ、３２０．６８μＬ）およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１．１９ｇ、５．６１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～４６％）が確認された
。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ）でクエンチした後、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～６０％石油エーテル：酢酸エチル／エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２６０ｍｇ、４１９．３４μｍｏｌ、１４．９６％収率、８３％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５１５．４。
【0526】
工程７．１－（３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（８）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２９１．４８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．６２ｇ、４０．５２ｍｍｏｌ、３．００ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を減圧濃縮し、１－（３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５．５
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１５０ｍｇ、２９１．４８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（４．６２ｇ、４０．５２ｍｍｏｌ、３．００ｍＬ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）で新規なスポットが検出されたことが確認された。混合物を減圧濃縮し、１－（３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１５．５
【0527】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン）－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５２）の合成
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５９．４６ｍｇ、３７８．４１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１７２．６６ｍｇ、４５４．１０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９５．６３ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、２６３．６５μＬ）を加えた。混合物に３０分後、１－（３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）が確認された。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～９５％石油エーテル／酢酸エチル：エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、９分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６．３ｍｇ、４３．９４μｍｏｌ、１１．６１％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８１８．３
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１５９．４６ｍｇ、３７８．４１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（１７２．６６ｍｇ、４５４．１０μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１９５．６３ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、２６３．６５μＬ）を加えた。混合物に３０分後、１－（３－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－カルボニル）フェニル）ジヒドロピリミジン－２，４（１Ｈ，３Ｈ）－ジオン（０．２ｇ、粗製、ＴＦＡ）を加え、混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（～５０％）が確認された。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、残渣を得た。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ＩＳＣＯ；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～９５％石油エーテル／酢酸エチル：エタノール（ｖ／ｖ＝１／１）勾配＠８０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：２５％～５５％、９分）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（３－（２，４－ジオキソテトラヒドロピリミジン－１（２Ｈ）－イル）ベンゾイル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（３６．３ｍｇ、４３．９４μｍｏｌ、１１．６１％収率、９９％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８１８．３
【0528】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．４２（ｓ、１Ｈ）、９．２６（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．２１（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．５０－７．３９（ｍ、４Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．９０－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｔ、Ｊ＝１３．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８３（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．６９－３．５５（ｍ、２Ｈ）、３．４７－３．３３（ｍ、４Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．００（ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．７７－２．６９（ｍ、４Ｈ）、２．４４－２．３７（ｍ、２Ｈ）、２．１９（ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．７５（ｄ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．５８－１．４６（ｍ、１Ｈ）、１．２６－１．２３（ｍ、８Ｈ）。
【0529】
実施例５３．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物５３）の合成
【0530】
【化60】
【0531】
工程１．３－（４－（ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（２）の合成
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３９９．００μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたこと
と、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１９ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩））を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６４．１
ジオキサン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１４５ｍｇ、３９９．００μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたこと
と、所望の質量のピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、３－（４－（ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１９ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩））を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２６４．１
【0532】
工程２．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（４）の合成
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の３－（４－（ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５９ｍｇ、５３０．４３μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＫＩ（１９．０８ｍｇ、１１４．９４μｍｏｌ）、（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（トランス）（２２２．６０ｍｇ、５０１．４９μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４７１．９１ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ、６３５．９９μＬ）を２５℃で加えた。混合物を５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１４％～３４％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（２４０ｍｇ、３３７．１７μｍｏｌ、６３．５６％収率、ＴＦＡ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９８．３
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の３－（４－（ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５９ｍｇ、５３０．４３μｍｏｌ、ＨＣｌ）溶液にＫＩ（１９．０８ｍｇ、１１４．９４μｍｏｌ）、（１ｒ，４ｒ）－Ｎ１，Ｎ１－ジベンジル－Ｎ４－（２－クロロエチル）－Ｎ４－メチルシクロヘキサン－１，４－ジアミン（トランス）（２２２．６０ｍｇ、５０１．４９μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（４７１．９１ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ、６３５．９９μＬ）を２５℃で加えた。混合物を５０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１４％～３４％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（２４０ｍｇ、３３７．１７μｍｏｌ、６３．５６％収率、ＴＦＡ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５９８．３
【0533】
工程３．３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（５）の合成
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１４０ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液にＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（３０ｍｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加えた。次いで混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で２０℃で４０時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１０４ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２
ＣＦ３ＣＨ２ＯＨ（８ｍＬ）中の３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１４０ｍｇ、１９６．６８μｍｏｌ、ＴＦＡ）溶液にＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ、１０％純度）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（３０ｍｇ、２０％純度）をＮ２気体下で加えた。次いで混合物をＨ２（１５Ｐｓｉ）下で２０℃で４０時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１０４ｍｇ、粗製、ＴＦＡ）を明るい黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１８．２
【0534】
工程４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（化合物５３）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９０ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（７０ｍｇ、３６５．１５μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、３７０．０３μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１４０．９８ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、１９０μＬ）
および３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１０４ｍｇ、１９５．６５μｍｏｌ、ＴＦＡ）を２５℃で加えた。混合物をＮ２気体下２５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（１０．８ｍｇ、１０．６３μｍｏｌ、４．９８％収率、９２％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．４
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（９０ｍｇ、２１３．５８μｍｏｌ）溶液にＥＤＣＩ（７０ｍｇ、３６５．１５μｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、３７０．０３μｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１４０．９８ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、１９０μＬ）
および３－（４－（４－（２－（（（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル）（メチル）アミノ）エチル）ピペラジン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（トランス）（１０４ｍｇ、１９５．６５μｍｏｌ、ＴＦＡ）を２５℃で加えた。混合物をＮ２気体下２５℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を濾過し、濾液を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｐｏｌａｒ－ＲＰ １００×２５ｍｍ×４μｍ；移動相：［水（ＴＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１９％～３９％、７分；カラム温度：３０℃）で精製し、凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（２－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピペラジン－１－イル）エチル）（メチル）アミノ）シクロヘキシル）－３－メトキシベンズアミド（トランス）（１０．８ｍｇ、１０．６３μｍｏｌ、４．９８％収率、９２％純度、ＴＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２１．４
【0535】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０４（ｓ、１Ｈ）、８．３０－８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．２５－８．１７（ｍ、３Ｈ）、７．６１－７．３９（ｍ、３Ｈ）、７．３３（ｓ、１Ｈ）、５．２６－５．１９（ｍ、１Ｈ）、４．９１－４．８５（ｍ、１Ｈ）、４．１４－４．０３（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．８６－３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．７４－２．８９（ｍ、１６Ｈ）、２．８５－２．７４（ｍ、４Ｈ）、２．７０－２．５５（ｍ、２Ｈ）、２．２１－２．１４（ｍ、１Ｈ）、２．０７－１．９５（ｍ、４Ｈ）、１．７５－１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．５０－１．３９（ｍ、２Ｈ）、１．２４（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、６Ｈ）。
【0536】
実施例５４．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５４）の合成
【0537】
【化61】
【0538】
工程１．４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２）の合成
ＤＣＭ（８０ｍＬ）中のピペリジン－４－イルメタノール（５ｇ、４３．４１ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（７．２７ｇ、７１．８５ｍｍｏｌ、１０ｍＬ）およびＤＭＡＰ（３００ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ）に次いで０℃でＴＢＤＰＳＣｌ（１８．１９ｇ、６６．１８ｍｍｏｌ、１７．００ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳによりピペリジン－４－イルメタノールが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５５％）が検出された。反応混合物に０℃で水（１００ｍＬ）を加え、クエンチした後、ＤＣＭ（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１４．５ｇ、４１．０１ｍｍｏｌ、９４．４７％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５４．２
ＤＣＭ（８０ｍＬ）中のピペリジン－４－イルメタノール（５ｇ、４３．４１ｍｍｏｌ）溶液にＴＥＡ（７．２７ｇ、７１．８５ｍｍｏｌ、１０ｍＬ）およびＤＭＡＰ（３００ｍｇ、２．４６ｍｍｏｌ）に次いで０℃でＴＢＤＰＳＣｌ（１８．１９ｇ、６６．１８ｍｍｏｌ、１７．００ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳによりピペリジン－４－イルメタノールが完全に消費されたことが確認され、所望の質量のピーク（５５％）が検出された。反応混合物に０℃で水（１００ｍＬ）を加え、クエンチした後、ＤＣＭ（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液２０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１４．５ｇ、４１．０１ｍｍｏｌ、９４．４７％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５４．２
【0539】
工程２．１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（３）の合成
ジオキサン（８０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（５ｇ、１４．１４ｍｍｏｌ）、１－ブロモ－４－ヨードベンゼン（
４．４０ｇ、１５．５６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．２５ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（８００．００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１５．００ｇ、４６．０４ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、Ｎ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（４．５ｇ、８．８５ｍｍｏｌ、６２．５７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０８．３、５１０．３
ジオキサン（８０ｍＬ）中の４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（５ｇ、１４．１４ｍｍｏｌ）、１－ブロモ－４－ヨードベンゼン（
４．４０ｇ、１５．５６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１．２５ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（８００．００ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１５．００ｇ、４６．０４ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、Ｎ２気体下８０℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４５％）が検出された。反応混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（４．５ｇ、８．８５ｍｍｏｌ、６２．５７％収率）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０８．３、５１０．３
【0540】
工程３．１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（５）の合成
ジオキサン（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２．４ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）、３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール（１．４ｇ、７．２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３６０．００ｍｇ、４９２．００μｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．１６ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、２７％の１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンおよび所望の質量のピーク（６０％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２．１ｇ、４．２４ｍｍｏｌ、収率８９．７７％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９６．４
ジオキサン（３０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６ｍＬ）中の１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２．４ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）、３－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール（１．４ｇ、７．２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（３６０．００ｍｇ、４９２．００μｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．１６ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、Ｎ２で３回パージし、混合物をＮ２気体下１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、２７％の１－（４－ブロモフェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジンおよび所望の質量のピーク（６０％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（２．１ｇ、４．２４ｍｍｏｌ、収率８９．７７％）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４９６．４
【0541】
工程４．３－（３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．２ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨ（２４０ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ、６０％純度）を加え、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６００．００ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）により１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポット（Ｒｆ＝０．２２）が検出された。反応混合物を０℃で塩化アンモニウム（ｓａｔ．ａｑ、２０ｍＬ）でクエンチし、生成された混合物を酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、１．９８ｍｍｏｌ、８１．６９％収率）を明るい黄色の固形物として得た
。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０７．１
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン（１．２ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）溶液に０℃でＮａＨ（２４０ｍｇ、６．００ｍｍｏｌ、６０％純度）を加え、混合物を０℃で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３－ブロモピペリジン－２，６－ジオン（６００．００ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）溶液を０℃で加え、生成された混合物を２０℃で３時間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１）により１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）－４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン完全に消費されたことが確認され、１つの新規なスポット（Ｒｆ＝０．２２）が検出された。反応混合物を０℃で塩化アンモニウム（ｓａｔ．ａｑ、２０ｍＬ）でクエンチし、生成された混合物を酢酸エチル（８０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～５０％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．２ｇ、１．９８ｍｍｏｌ、８１．６９％収率）を明るい黄色の固形物として得た
。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０７．１
【0542】
工程５．３－（３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（９）の合成
ＤＭＳＯ（８ｍＬ）中の３－（３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５００ｍｇ、８２３．９６μｍｏｌ）溶液に２０℃でＣｓＦ（２００．００ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ、４８．５４μＬ）を加えた後、混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１１％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５４２．８５μｍｏｌ、６５．８８％収率）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６９．０
ＤＭＳＯ（８ｍＬ）中の３－（３－（４－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジフェニルシリル）オキシ）メチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（５００ｍｇ、８２３．９６μｍｏｌ）溶液に２０℃でＣｓＦ（２００．００ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ、４８．５４μＬ）を加えた後、混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（１１％）が検出された。反応混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈した後、酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相を塩水（４０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ（登録商標）；１０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～１００％酢酸エチル：石油エーテル勾配、６０ｍＬ／分）で精製し、３－（３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（２００ｍｇ、５４２．８５μｍｏｌ、６５．８８％収率）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６９．０
【0543】
工程６．１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１０）の合成
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、４０７．１３μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（２７０．００ｍｇ、６３６．５８μｍｏｌ、１９７．０８μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４４％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド）（１４８ｍｇ、粗製）を茶色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６７．０
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の３－（３－（４－（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）フェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ピペリジン－２，６－ジオン（１５０ｍｇ、４０７．１３μｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（２７０．００ｍｇ、６３６．５８μｍｏｌ、１９７．０８μＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４４％）が検出された。反応混合物を減圧濃縮し、１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルボアルデヒド）（１４８ｍｇ、粗製）を茶色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３６７．０
【0544】
工程７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５４）の合成
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、２５８．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１４７．００ｍｇ、４０１．１９μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２４０．００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３８％）が検出された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（４ｍＬ）で希釈した後、炭酸水素ナトリウム（ｓａｔ．ａｑ、８ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整し、生成された混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分；カラム温度：３
０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２０ｍｇ、９７．８６μｍｏｌ、３７．８４％収率、９１．５％純度、２ＴＦＡ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９４．２
ＤＣＭ（８ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ－Ｎ－（７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）ベンズアミド（１５０ｍｇ、２５８．５９μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－カルバルデヒド（１４７．００ｍｇ、４０１．１９μｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２４０．００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で１５時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３８％）が検出された。反応混合物を０℃でＨ２Ｏ（４ｍＬ）で希釈した後、炭酸水素ナトリウム（ｓａｔ．ａｑ、８ｍＬ）を加え、ｐＨ＝９に調整し、生成された混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（２０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濾液を減圧濃縮した。生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１３％～４３％、７分；カラム温度：３
０℃）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１２０ｍｇ、９７．８６μｍｏｌ、３７．８４％収率、９１．５％純度、２ＴＦＡ塩）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９４．２
【0545】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ＝８．１５－８．１０（ｍ、２Ｈ）、７．８７－７．７９（ｍ、２Ｈ）、７．７７－７．６９（ｍ、１Ｈ）、７．６１－７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．３８－７．２９（ｍ、２Ｈ）、６．７２－６．６７（ｍ、１Ｈ）、５．４１－５．３１（ｍ、１Ｈ）、５．１６－５．１０（ｍ、１Ｈ）、４．６０－４．５０（ｍ、１Ｈ）、４．１６（ｔ、Ｊ＝１２．０Ｈｚ、２Ｈ）、４．０２（ｓ、３Ｈ）、３．８６－３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．６４－３．５０（ｍ、２Ｈ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．３０－３．２１（ｍ、２Ｈ）、３．１９－３．０８（ｍ、３Ｈ）、３．０４－２．９６（ｍ、１Ｈ）、２．９４－２．８１（ｍ、２Ｈ）、２．８１－２．６７（ｍ、１Ｈ）、２．５９－２．５１（ｍ、１Ｈ）、２．４７－２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．２９－２．２０（ｍ、１Ｈ）、２．１５－１．９３（ｍ、８Ｈ）、１．７４－１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．３５－１．２９（ｍ、６Ｈ）。
【0546】
約８０ｍｇの生成物をＤＭＦ（２ｍＬ）で希釈し、ＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ）でｐＨ＝７～８に調整した。その後、混合物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） Ｃ１８ １５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、１０分、カラム温度：３０℃）で再精製した。溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド）［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（７－（（１－（４－（１－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）フェニル）ピペリジン－４－イル）メチル）－７－アザスピロ［３．５］ノナン－２－イル）－３－メトキシベンズアミド（１８．２ｍｇ、１８．６９μｍｏｌ、２０．８８％収率、９１．８％純度）を明るい黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８９４．２
【0547】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．０６（ｓ、１Ｈ）、８．４６－８．３９（ｍ、１Ｈ）、８．３４－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４－７．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５３－７．４６（ｍ、２Ｈ）、６．９８－６．８９ ｍ、２Ｈ）、６．６４－６．５７（ｍ、１Ｈ）、５．４１－５．３３（ｍ、１Ｈ）、４．９３－４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．４４－４．３５（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７７－３．６７（ｍ、２Ｈ）、３．３１－３．２８（ｍ、５Ｈ）、２．８６－２．７６（ｍ、１Ｈ）、２．７１－２．６１（ｍ、４Ｈ）、２．２８－２．２１（ｍ、３Ｈ）、２．１８－２．１０（ｍ、４Ｈ）、１．８４－１．７４（ｍ、４Ｈ）、１．６６－１．５１（ｍ、５Ｈ）、１．２７－１．２２（ｍ、６Ｈ）、１．２０－１．１３（ｍ、２Ｈ）。
【0548】
実施例５５．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５５）の合成
【0549】
【化62】
【0550】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ホルミル－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２）の合成
ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．０３ｇ、２７．０７ｍｍｏｌ）、４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（４ｇ、２０．８２ｍｍｏｌ、２．８４ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（６．７３ｇ、５２．０５ｍｍｏｌ、９．０７ｍＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５％）が確認された。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１；Ｒｆ＝０．７）でほとんどの出発物質が残っていることが確認された。混合物を１２０℃でさらに１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠７０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ホルミル－２－（トリフルオロ
メチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．５ｇ、９．３８ｍｍｏｌ、４５．０３％収率、９６％純度）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３０３．１
ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．０３ｇ、２７．０７ｍｍｏｌ）、４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（４ｇ、２０．８２ｍｍｏｌ、２．８４ｍＬ）およびＤＩＰＥＡ（６．７３ｇ、５２．０５ｍｍｏｌ、９．０７ｍＬ）の混合物を１００℃で１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（２５％）が確認された。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝５：１；Ｒｆ＝０．７）でほとんどの出発物質が残っていることが確認された。混合物を１２０℃でさらに１６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（４０％）が確認された。混合物を水（１５０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（３０ｍＬ×５）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠７０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ホルミル－２－（トリフルオロ
メチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．５ｇ、９．３８ｍｍｏｌ、４５．０３％収率、９６％純度）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ－５６＋Ｈ）＋＝３０３．１
【0551】
工程２．２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（３）の合成
３－オキソブタン酸エチル（７．６３ｇ、５８．６０ｍｍｏｌ、７．４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ホルミル－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．５ｇ、９．７７ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（２４９．４９ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ、２８９．３６μＬ）を加え、混合物を２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピーク（７０％）が確認された。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０１．４
３－オキソブタン酸エチル（７．６３ｇ、５８．６０ｍｍｏｌ、７．４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－ホルミル－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３．５ｇ、９．７７ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（２４９．４９ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ、２８９．３６μＬ）を加え、混合物を２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピーク（７０％）が確認された。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～３５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（６ｇ、粗製）を黄色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０１．４
【0552】
工程３．３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）グルタル酸（４）の合成
エタノール（４０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（４．２ｇ、６．９９ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、１１．６５ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮し、エタノールを除去した。生成された混合物をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキを捨てた。濾液を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で洗浄した。水相を０℃で１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）グルタル酸（２．３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ、６８．５８％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６１．１
エタノール（４０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（４．２ｇ、６．９９ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、１１．６５ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮し、エタノールを除去した。生成された混合物をセライトパッドで濾過し、濾過ケーキを捨てた。濾液を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で洗浄した。水相を０℃で１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）グルタル酸（２．３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ、６８．５８％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６１．１
【0553】
工程４．４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（５）の合成
酢酸（２０ｍＬ）中のＵＲＥＡ（１．８０ｇ、２９．９７ｍｍｏｌ、１．６１ｍＬ）溶液に３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）グルタル酸（２．３ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２ｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８４．０
酢酸（２０ｍＬ）中のＵＲＥＡ（１．８０ｇ、２９．９７ｍｍｏｌ、１．６１ｍＬ）溶液に３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）グルタル酸（２．３ｇ、５．００ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。混合溶液を減圧濃縮し、４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２ｇ、粗製）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３８４．０
【0554】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（６）の合成
ＨＣｌ（６Ｍ、１６．５２ｍＬ）中の４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９ｇ、４
．９６ｍｍｏｌ）溶液を５０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をＴＨＦ（５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、ＴＥＡ（１２．５４ｇ、１２３．９０ｍｍｏｌ、１７．２５ｍＬ）およびＢｏｃ２Ｏ（４．３３ｇ、１９．８２ｍｍｏｌ、４．５５ｍＬ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）が確認された。混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．７ｇ、１．５９ｍｍｏｌ、収率３１．９９％）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４２．２
ＨＣｌ（６Ｍ、１６．５２ｍＬ）中の４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．９ｇ、４
．９６ｍｍｏｌ）溶液を５０℃で１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をＴＨＦ（５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈した後、ＴＥＡ（１２．５４ｇ、１２３．９０ｍｍｏｌ、１７．２５ｍＬ）およびＢｏｃ２Ｏ（４．３３ｇ、１９．８２ｍｍｏｌ、４．５５ｍＬ）を２５℃で加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）が確認された。混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（０．７ｇ、１．５９ｍｍｏｌ、収率３１．９９％）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４２．２
【0555】
工程６．４－（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（７）の合成
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２５０ｍｇ、５６６．３２μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を２５℃で加えた。反応混合物を２５℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．２
ジオキサン（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（２５０ｍｇ、５６６．３２μｍｏｌ）溶液にＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、１０ｍＬ）を２５℃で加えた。反応混合物を２５℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量の主要ピークが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、粗製、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３４２．２
【0556】
工程７．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（８）の合成
ＤＣＥ（３ｍＬ）中の４－（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、５８２．３４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２６５．８８ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液に酢酸ナトリウム（１４３．３１ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で３０分間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（３７０．２６ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、生成された混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２９％の出発物質および１０％の所望の質量のピークが確認された。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠７０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠７０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５４．１
ＤＣＥ（３ｍＬ）中の４－（４－（ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、５８２．３４μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２６５．８８ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）溶液に酢酸ナトリウム（１４３．３１ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２５℃で３０分間撹拌した。その後、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（３７０．２６ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を２５℃で加え、生成された混合物を１２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２９％の出発物質および１０％の所望の質量のピークが確認された。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＤＣＭ（５０ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠７０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠７０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１４０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５４．１
【0557】
工程８．４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２、６－ジオン（９）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メ
チル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１２５ｍｇ、２２５．７９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより１６％の出発物質の質量のピークおよび所望の質量のピーク（６９％）が確認された。生成された混合物を２５℃でさらに１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により出発物質が完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５４．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メ
チル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１２５ｍｇ、２２５．７９μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を２５℃で加えた。生成された混合物を２５℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより１６％の出発物質の質量のピークおよび所望の質量のピーク（６９％）が確認された。生成された混合物を２５℃でさらに１時間撹拌した。ＴＬＣ（ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）により出発物質が完全に消費されたことと、新規なスポットが検出されたことが確認された。反応混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２８ｍｇ、粗製、ＴＦＡ塩）を褐色の油状物として得て、次の工程に直接用いた。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４５４．３
【0558】
工程９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５５）の合成
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０ｍｇ、１６６．１１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７５．７９ｍｇ、１９９．３４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．４１ｍｇ、４９８．３４μｍｏｌ、８６．８０μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２２．５６ｍｇ、２１５．９５μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３１％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２８．５ｍｇ、３０．９３μｍｏｌ、１８．６２％収率、９３％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５７．５
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（７０ｍｇ、１６６．１１μｍｏｌ）溶液にＨＡＴＵ（７５．７９ｍｇ、１９９．３４μｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（６４．４１ｍｇ、４９８．３４μｍｏｌ、８６．８０μＬ）を加え、混合物を２５℃で１０分間撹拌した。その後、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２２．５６ｍｇ、２１５．９５μｍｏｌ、ＴＦＡ塩）を加え、混合物を２５℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（３１％）が確認された。反応混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠６０ｍＬ／分；溶離液０～５０％メタノール／酢酸エチル＠６０ｍＬ／分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４１％～７１％、８分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（２８．５ｍｇ、３０．９３μｍｏｌ、１８．６２％収率、９３％純度）を褐色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８５７．５
【0559】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１１．００－１０．７６（ｍ、１Ｈ）、９．３９－９．１６（ｍ、１Ｈ）、８．４１－８．２６（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．６９－７．５１（ｍ、３Ｈ）、７．５０－７．２８（ｍ、２Ｈ）、４．９９－４．７８（ｍ、１Ｈ）、４．１４－３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．９９－３．８２（ｍ、３Ｈ）、３．５７－３．３５（ｍ、３Ｈ）、３．２９（ｂｒ ｓ、３Ｈ）、３．０２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．８９－２．７７（ｍ、６Ｈ）、２．７４（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、２．６５（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１７．０Ｈｚ、４Ｈ）、２．２１（ｂｒ ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．８３－１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．６０－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．２４（ｂｒ ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、８Ｈ）。
【0560】
実施例５６．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－
イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５６）の合成
イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５６）の合成
【0561】
【化63】
【0562】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（９０ｍＬ）中の３，４－ジフルオロベンズアルデヒド（９ｇ、６３．３３ｍｍｏｌ、６．８７ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１２．３９ｇ、６６．５０ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１６．３７ｇ、１２６．６７ｍｍｏｌ、２２．０６ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８９％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１８．１ｇ、５８．７０ｍｍｏｌ、９２．６８％収率、１００％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０９．１。
ＤＭＳＯ（９０ｍＬ）中の３，４－ジフルオロベンズアルデヒド（９ｇ、６３．３３ｍｍｏｌ、６．８７ｍＬ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（１２．３９ｇ、６６．５０ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１６．３７ｇ、１２６．６７ｍｍｏｌ、２２．０６ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８９％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１０～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１８．１ｇ、５８．７０ｍｍｏｌ、９２．６８％収率、１００％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０９．１。
【0563】
工程２．２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（５）の合成
３－オキソブタン酸エチル（４４．６０ｇ、３４２．７０ｍｍｏｌ、４３．３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１７．６ｇ、５７．０８ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（１．４７ｇ、１７
．２１ｍｍｏｌ、１．７ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが残っていることと、所望の質量のピークが確認された。混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８３％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（１５０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１９．２ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５１．４。
３－オキソブタン酸エチル（４４．６０ｇ、３４２．７０ｍｍｏｌ、４３．３ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（１７．６ｇ、５７．０８ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（１．４７ｇ、１７
．２１ｍｍｏｌ、１．７ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳによりｔｅｒｔ－ブチル４－（２－フルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレートが残っていることと、所望の質量のピークが確認された。混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（８３％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（１５０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＭＴＢＥ（１００ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１９．２ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５５１．４。
【0564】
工程３．３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）グルタル酸（６）の合成
エタノール（９０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（９．２ｇ、１６．７１ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、２７．８５ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３８％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、水相を１Ｎ
ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分で精製し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）グルタル酸（３．０５ｇ、７．１３ｍｍｏｌ、４２．７０％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１．２。
エタノール（９０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（９．２ｇ、１６．７１ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、２７．８５ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３８％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、水相を１Ｎ
ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した後、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～１００％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分で精製し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）グルタル酸（３．０５ｇ、７．１３ｍｍｏｌ、４２．７０％収率、９６％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４１１．２。
【0565】
工程４．４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
酢酸（７２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）グルタル酸（７．１７ｇ、１７．４７ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（５．２５ｇ、８７．３５ｍｍｏｌ、４．６８ｍＬ）溶液を１２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（８５％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。ＨＣｌ（６Ｍ、２９．３３ｍＬ）を加え、生成された混合物を５０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（６９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：３３０ｇフラッシュカラムＷｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０～４０μｍ；１２０ Ａ Ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ６．００ ｇｒａｍｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ １００ｍＬ ｏｆ Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ １００ ｍＬ／分；移動相ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ勾配Ｂ％０～５％、４０分；５～９５％、２０分 Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＥＬＥＤＹＮＥ ＩＳＣＯ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ１５０）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、白色の固形物の４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの２つのバッチ（バッチ１：２．３ｇ、６．３２ｍｍｏｌ、３６．１５％収率、９０％純度、ＨＣｌ塩；バッチ２：９２０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ、１２．８５％収率、８０％純度、ＨＣｌ塩）が確認された。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１
酢酸（７２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）グルタル酸（７．１７ｇ、１７．４７ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（５．２５ｇ、８７．３５ｍｍｏｌ、４．６８ｍＬ）溶液を１２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（８５％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。ＨＣｌ（６Ｍ、２９．３３ｍＬ）を加え、生成された混合物を５０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（６９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：３３０ｇフラッシュカラムＷｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０～４０μｍ；１２０ Ａ Ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ６．００ ｇｒａｍｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ １００ｍＬ ｏｆ Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ １００ ｍＬ／分；移動相ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ勾配Ｂ％０～５％、４０分；５～９５％、２０分 Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＥＬＥＤＹＮＥ ＩＳＣＯ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ１５０）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、白色の固形物の４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの２つのバッチ（バッチ１：２．３ｇ、６．３２ｍｍｏｌ、３６．１５％収率、９０％純度、ＨＣｌ塩；バッチ２：９２０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ、１２．８５％収率、８０％純度、ＨＣｌ塩）が確認された。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９２．１
【0566】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（９）の合成
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３．６ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９．９５ｇ、２３．４５ｍｍｏｌ、７．２６ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（５９％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄し、濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（５．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２９．３
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（ヒドロキシメチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（３．６ｇ、１５．６３ｍｍｏｌ）溶液にＤＭＰ（９．９５ｇ、２３．４５ｍｍｏｌ、７．２６ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより２０％の出発物質が残っていることと、所望の質量のピーク（５９％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（６０ｍＬ）で希釈し、濾過した。濾過ケーキをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄し、濾液を減圧濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（５．８ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝２２９．３
【0567】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１０）の合成
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．５ｇ、４．５８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（３７６ｍｇ、４．５８ｍｍｏｌ）を加えた後、メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（４．７０ｇ、２０．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（８６３．３１ｍｇ、１３．７４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンのピーク（２８％）および所望の質量のピーク（２６％）が確認された。メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６．２７ｇ、２７．４６ｍｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で１．５時間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（８６２．７４ｍｇ、１３．７３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％エタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１９８．５７μｍｏｌ、４．３４％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０４．３
メタノール（１０ｍＬ）中の４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１．５ｇ、４．５８ｍｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（３７６ｍｇ、４．５８ｍｍｏｌ）を加えた後、メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（４．７０ｇ、２０．５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（８６３．３１ｍｇ、１３．７４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、４－（３－フルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンのピーク（２８％）および所望の質量のピーク（２６％）が確認された。メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（６．２７ｇ、２７．４６ｍｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で１．５時間撹拌した。水素化シアノホウ素ナトリウム（８６２．７４ｍｇ、１３．７３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～５０％エタノール／酢酸エチル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製した後、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：８％～３８％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１９８．５７μｍｏｌ、４．３４％収率）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５０４．３
【0568】
工程７．４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１７０ｍｇ、３３７．５６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７３％）および１９％の出発物質が残っていることが確認された。さらにＴＦＡ（０．１ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７４％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０４．３
ＤＣＭ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１７０ｍｇ、３３７．５６μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（０．４ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７３％）および１９％の出発物質が残っていることが確認された。さらにＴＦＡ（０．１ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が完全に消費されたことと、所望の質量のピーク（７４％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４０４．３
【0569】
工程８．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５６）の合成
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１７０ｍｇ、４０３．４２μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１８４．０７ｍｇ、４８４．１０μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１０４．２８ｍｇ、８０６．８４μｍｏｌ、１４０．５４μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、４６１．７８μｍｏｌ、２ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５２１．３９ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、７０２．６８μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、８分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５２．６ｍｇ、６４．４１μｍｏｌ、１５．９７％収率、９８．８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０７．５
ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（１７０ｍｇ、４０３．４２μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１８４．０７ｍｇ、４８４．１０μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１０４．２８ｍｇ、８０６．８４μｍｏｌ、１４０．５４μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－フルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２２０ｍｇ、４６１．７８μｍｏｌ、２ＴＦＡ）およびＤＩＰＥＡ（５２１．３９ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ、７０２．６８μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｕｎｉｓｉｌ ３－１００ Ｃ１８ Ｕｌｔｒａ １５０×５０ｍｍ×３μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１０％～４０％、７分）で精製し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：３８％～６８％、８分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（５２．６ｍｇ、６４．４１μｍｏｌ、１５．９７％収率、９８．８％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８０７．５
【0570】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７－１０．８３（ｍ、１Ｈ）、９．３１－９．２６（ｍ、１Ｈ）、８．３３－８．２８（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．４６－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．１２（ｂｒ ｄ、Ｊ＝１３．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５－６．９８（ｍ、２Ｈ）、４．９２－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０８－４．００（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．３１－３．２９（ｍ、６Ｈ）、３．０４－２．９６（ｍ、４Ｈ）、２．８１－２．７１（ｍ、４Ｈ）、２．６５－２．５６（ｍ、６Ｈ）、２．２３－２．２０（ｍ、２Ｈ）、１．７９－１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．５７－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．２６－１．２２（ｍ、８Ｈ）。
【0571】
実施例５７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５７）の合成
【0572】
【化64】
【0573】
工程１．ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（３）の合成
ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）中の３，４，５－トリフルオロベンズアルデヒド（５ｇ、３１．２３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．１１ｇ、３２．７９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１２．１１ｇ、９３．７０ｍｍｏｌ、１６．３２ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９６％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９ｇ、２７．３０ｍｍｏｌ、８７．４２％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２７．０
ＤＭＳＯ（５０ｍＬ）中の３，４，５－トリフルオロベンズアルデヒド（５ｇ、３１．２３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルピペラジン－１－カルボキシレート（６．１１ｇ、３２．７９ｍｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（１２．１１ｇ、９３．７０ｍｍｏｌ、１６．３２ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９６％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（３０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９ｇ、２７．３０ｍｍｏｌ、８７．４２％収率、９９％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ－１００＋Ｈ）＋＝２２７．０
【0574】
工程２．２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（５）の合成
３－オキソブタン酸エチル（２１．５３ｇ、１６５．４１ｍｍｏｌ、２０．９ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９ｇ、２７．５８ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（７０７．００ｍｇ、８．３０ｍｍｏｌ、８２０μＬ）を加え、混合物を２０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭ
Ｓにより所望の質量のピーク（８２％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（６０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１０．６７ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６９．３
３－オキソブタン酸エチル（２１．５３ｇ、１６５．４１ｍｍｏｌ、２０．９ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル４－（２，６－ジフルオロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボキシレート（９ｇ、２７．５８ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（７０７．００ｍｇ、８．３０ｍｍｏｌ、８２０μＬ）を加え、混合物を２０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭ
Ｓにより所望の質量のピーク（８２％）が確認された。混合物をＭＴＢＥ（６０ｍＬ）で希釈し、２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１０．６７ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５６９．３
【0575】
工程３．３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）グルタル酸（６）の合成
エタノール（５０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（５ｇ、８．７９ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、１４．６６ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７６％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した。その後、水相を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ）－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）グルタル酸（２．２ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、５８．４０％収率、１００％純度）を黄の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
エタノール（５０ｍＬ）中の２－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（５ｇ、８．７９ｍｍｏｌ）溶液にＫＯＨ（３Ｍ、１４．６６ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（７６％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した。その後、水相を酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液７０～９０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠８０ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（ｔｅｒｔ）－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）グルタル酸（２．２ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、５８．４０％収率、１００％純度）を黄の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２９．２
【0576】
工程４．４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
酢酸（２２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）グルタル酸（２．２ｇ、５．１４ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（１．５４ｇ、２５．６８ｍｍｏｌ、１．３８ｍＬ）溶液を１２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（８７％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。ＨＣｌ（６Ｍ、８．６２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（４６％）および４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（３６％）が確認された。さらにＨＣｌ（６Ｍ、８ｍＬ）を加え、混合物を５０℃でさらに６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（７５％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：１２０ｇフラッシュカラムＷｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０－４０μｍ；１２０ Ａ Ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ２．００ｇｒａｍｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ４０ｍＬ ｏｆ Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ；Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ８５ ｍＬ／分；移動相ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ勾配Ｂ％０～３０％３０分；３０～１００％２０分；Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＥＬＥＤＹＮＥ ＩＳＣＯ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ１５０）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４１０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、２２．６３％収率、９８％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１０．１
酢酸（２２ｍＬ）中の３－（４－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）グルタル酸（２．２ｇ、５．１４ｍｍｏｌ）およびＵＲＥＡ（１．５４ｇ、２５．６８ｍｍｏｌ、１．３８ｍＬ）溶液を１２０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（８７％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。ＨＣｌ（６Ｍ、８．６２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより４－（４－（４－アセチルピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（４６％）および４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（３６％）が確認された。さらにＨＣｌ（６Ｍ、８ｍＬ）を加え、混合物を５０℃でさらに６時間撹拌した。ＬＣＭＳにより、４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオンの質量ピーク（７５％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を逆相ＨＰＬＣ（カラム：１２０ｇフラッシュカラムＷｅｌｃｈ Ｕｌｔｉｍａｔｅ ＸＢ＿Ｃ１８ ２０－４０μｍ；１２０ Ａ Ｓｏｌｖｅｎｔ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ２．００ｇｒａｍｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ４０ｍＬ ｏｆ Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ；Ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ８５ ｍＬ／分；移動相ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ勾配Ｂ％０～３０％３０分；３０～１００％２０分；Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＥＬＥＤＹＮＥ ＩＳＣＯ ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）Ｒｆ１５０）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（４１０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、２２．６３％収率、９８％純度、ＨＣｌ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１０．１
【0577】
工程５．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１０）の合成
ＤＣＥ（４ｍＬ）中の４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、３４７．０５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（２８．４７ｍｇ、３４７．０５μｍｏｌ）を加えた後、ＤＣＥ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０．００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２２０．８０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（９０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２２．２
ＤＣＥ（４ｍＬ）中の４－（３，５－ジフルオロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、３４７．０５μｍｏｌ、ＨＣｌ塩）溶液に酢酸ナトリウム（２８．４７ｍｇ、３４７．０５μｍｏｌ）を加えた後、ＤＣＥ（４ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（２４０．００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）溶液を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２２０．８０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃でさらに１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液５～１５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（９０ｍｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２２．２
【0578】
工程６．４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（０．７ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７０ｍｇ、１３４．２０μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３２３．４０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ、２１０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６０％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（９０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。
ＤＣＭ（０．７ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（７０ｍｇ、１３４．２０μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３２３．４０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ、２１０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６０％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（９０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ塩）を黄色の油状物として得た。
【0579】
工程７．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（化合物５７）の合成
ＤＭＦ（０．９ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５ｍｇ、１０６．７９μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４８．７２ｍｇ、１２８．１５μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２９．６８ｍｇ、２２９．６４μｍｏｌ、４０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（０．９ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（９０．００ｍｇ、１８２．０４μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（１３８．０２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１８６．００μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で２回精製し、不純物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４３％～７３％、８分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メ
チル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（８．０ｍｇ、９．２１μｍｏｌ、８．６３％収率、９５％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２５．４
ＤＭＦ（０．９ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（４５ｍｇ、１０６．７９μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４８．７２ｍｇ、１２８．１５μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（２９．６８ｍｇ、２２９．６４μｍｏｌ、４０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（０．９ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３，５－ジフルオロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（９０．００ｍｇ、１８２．０４μｍｏｌ、２ＨＣｌ塩）およびＤＩＰＥＡ（１３８．０２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、１８６．００μＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：メタノール＝１０：１）で２回精製し、不純物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４３％～７３％、８分）に再精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メ
チル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（４－（（４－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）－２，６－ジフルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－３－メトキシベンズアミド（８．０ｍｇ、９．２１μｍｏｌ、８．６３％収率、９５％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２５．４
【0580】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．９５－１０．８６（ｍ、１Ｈ）、９．３６－９．２５（ｍ、１Ｈ）、８．３５－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２５－８．１８（ｍ、１Ｈ）、７．９２－７．８５（ｍ、１Ｈ）、７．４７－７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．１４－７．０５（ｍ、１Ｈ）、７．０５－７．０１（ｍ、１Ｈ）、４．９４－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０８－４．００（ｍ、２Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．３１－３．２９（ｍ、６Ｈ）、３．１１－３．０７（ｍ、２Ｈ）、３．０５－２．９７（ｍ、２Ｈ）、２．８１－２．７４（ｍ、４Ｈ）、２．６５－２．６１（ｍ、６Ｈ）、２．２３－２．１３（ｍ、２Ｈ）、１．８３－１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．５７－１．４７（ｍ、１Ｈ）、１．３２－１．１８（ｍ、８Ｈ）。
【0581】
実施例５８．Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物５８）の合成
【0582】
【化65】
【0583】
工程１．４－（２－クロロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（３）の合成
ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中の３－クロロ－４－フルオロベンズアルデヒド（５ｇ、３１．５３ｍｍｏｌ）およびピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（７．２９ｇ、３３．１１ｍｍｏｌ、６．４０ｍＬ）溶液にＤＩＰＥＡ（１２．２２ｇ、９４．５ｍｍｏｌ、１６．４８ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（２－クロロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（８．７９ｇ、２４．０１ｍｍｏｌ、７６．１４％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５９．１
ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中の３－クロロ－４－フルオロベンズアルデヒド（５ｇ、３１．５３ｍｍｏｌ）およびピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（７．２９ｇ、３３．１１ｍｍｏｌ、６．４０ｍＬ）溶液にＤＩＰＥＡ（１２．２２ｇ、９４．５ｍｍｏｌ、１６．４８ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。混合物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（８０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液１５～２５％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、４－（２－クロロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（８．７９ｇ、２４．０１ｍｍｏｌ、７６．１４％収率、９８％純度）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３５９．１
【0584】
工程２．２－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（５）の合成
３－オキソブタン酸エチル（１８．５４ｇ、１４２．４６ｍｍｏｌ、１８ｍＬ）中の４－（２－クロロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（８．７９ｇ、２４．５０ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（６２９．４１ｍｇ、７．３９ｍｍｏｌ、７３０μＬ）を加え、混合物を２０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２－（４－（４－（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１５．１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０１．１
３－オキソブタン酸エチル（１８．５４ｇ、１４２．４６ｍｍｏｌ、１８ｍＬ）中の４－（２－クロロ－４－ホルミルフェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（８．７９ｇ、２４．５０ｍｍｏｌ）溶液にピペリジン（６２９．４１ｍｇ、７．３９ｍｍｏｌ、７３０μＬ）を加え、混合物を２０℃で２８時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（６９％）が確認された。混合物を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１２０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液４０～６０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、２－（４－（４－（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１５．１ｇ、粗製）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝６０１．１
【0585】
工程３．３－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）グルタル酸（６）の合成
エタノール（１５０ｍＬ）中の２－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１５．１ｇ、２５．１２ｍｍｏｌ）溶液に（３Ｍ、４２ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）が確認された。混合物を濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した。水相を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液６０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）グルタル酸（４ｇ、７．５５ｍｍｏｌ、３０．０６％収率、８７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６１．２。
エタノール（１５０ｍＬ）中の２－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）－４－ヒドロキシ－４－メチル－６－オキソシクロヘキサン－１，３－ジカルボン酸ジエチル（１５．１ｇ、２５．１２ｍｍｏｌ）溶液に（３Ｍ、４２ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（３６％）が確認された。混合物を濃縮し、エタノールを除去した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で抽出し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ＝６に調整した。水相を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液６０～８０％酢酸エチル／石油エーテル勾配＠１００ｍＬ／分）で精製し、３－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）グルタル酸（４ｇ、７．５５ｍｍｏｌ、３０．０６％収率、８７％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４６１．２。
【0586】
工程４．４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（７）の合成
酢酸（１５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）グルタル酸（１．５ｇ、２．８３ｍｍｏｌ、８７％純度）およびＵＲＥＡ（８５０ｍｇ、１４．１５ｍｍｏｌ、７５８．９３μＬ）溶液を１２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９３％）が確認された
。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１．２ｇ、２．４７ｍｍｏｌ、８７．２８％収率、９１％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４１．９
酢酸（１５ｍＬ）中の３－（４－（４－（（ベンジルオキシ）カルボニル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）グルタル酸（１．５ｇ、２．８３ｍｍｏｌ、８７％純度）およびＵＲＥＡ（８５０ｍｇ、１４．１５ｍｍｏｌ、７５８．９３μＬ）溶液を１２５℃で１４時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９３％）が確認された
。混合物を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物をＨ２Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、濾過ケーキをＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。濾過ケーキを集めて減圧乾燥し、４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１．２ｇ、２．４７ｍｍｏｌ、８７．２８％収率、９１％純度）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４４１．９
【0587】
工程５．４－（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（８）の合成
ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中の４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ）溶液にＴＭＳＩ（１．９９ｇ、９．９６ｍｍｏｌ、１．３６ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が全て消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。混合物を氷水（３０ｍＬ）でクエンチし、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で抽出した。水相を凍結乾燥した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２５％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２１０ｍｇ、５９３．５６μｍｏｌ、２３．８５％収率、ＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０８．１
ＭｅＣＮ（１０ｍＬ）中の４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－カルボン酸ベンジル（１．１ｇ、２．４９ｍｍｏｌ）溶液にＴＭＳＩ（１．９９ｇ、９．９６ｍｍｏｌ、１．３６ｍＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより出発物質が全て消費されたことと、所望の質量のピーク（５０％）が確認された。混合物を氷水（３０ｍＬ）でクエンチし、ＭＴＢＥ（１０ｍＬ×３）で洗浄し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で抽出した。水相を凍結乾燥した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標） Ｌｕｎａ Ｃ１８ １５０×４０ｍｍ×１５μｍ；移動相：［水（ＦＡ）－ＡＣＮ］；Ｂ％：１％～２５％、１０分）で精製し、溶出液を凍結乾燥し、４－（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（２１０ｍｇ、５９３．５６μｍｏｌ、２３．８５％収率、ＦＡ塩）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝３０８．１
【0588】
工程６．ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（１０）の合成
メタノール（４ｍＬ）中の４－（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１９０ｍｇ、５３７．０３μｍｏｌ、ＦＡ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（３１．５０ｍｇ、５２４．５５μｍｏｌ、３０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（１０１．３３ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで洗浄し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３５３．８０μｍｏｌ、６５．８８％収率、９２％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２０．２。
メタノール（４ｍＬ）中の４－（３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）フェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１９０ｍｇ、５３７．０３μｍｏｌ、ＦＡ塩）およびｔｅｒｔ－ブチル（４－ホルミルピペリジン－１－イル）カルバメート（３６０ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）溶液に酢酸（３１．５０ｍｇ、５２４．５５μｍｏｌ、３０μＬ）を加え、混合物を２０℃で３０分間撹拌した。その後、水素化シアノホウ素ナトリウム（１０１．３３ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）を加え、生成された混合物を２０℃で２時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物を炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機相をＨ２Ｏ（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで洗浄し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５ｇ ＳｅｐａＦｌａｓｈシリカフラッシュカラム、溶離液０～１５％メタノール／酢酸エチル勾配＠５０ｍＬ／分）で精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（２００ｍｇ、３５３．８０μｍｏｌ、６５．８８％収率、９２％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝５２０．２。
【0589】
工程７．４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１１）の合成
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１９２．２８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３２３．４０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ、２１０．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９２％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ
）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２０．２
ＤＣＭ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチル（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）カルバメート（０．１ｇ、１９２．２８μｍｏｌ）溶液にＴＦＡ（３２３．４０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ、２１０．００μＬ）を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピーク（９２％）が確認された。混合物を減圧濃縮し、４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、粗製、２ＴＦＡ
）を黄色の油状物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝４２０．２
【0590】
工程８．Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（化合物５８）の合成
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（６４．９７ｍｇ、１７０．８６μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３６．８０ｍｇ、２８４．７７μｍｏｌ、４９．６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、１８５．１９μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（２２２．６０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ、０．３ｍＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、８分）により精製し、溶出液を凍結乾燥し、Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（４１．２ｍｇ、４８．０４μｍｏｌ、３３．７４％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２３．５
ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシ安息香酸（６０ｍｇ、１４２．３８μｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（６４．９７ｍｇ、１７０．８６μｍｏｌ）溶液にＤＩＰＥＡ（３６．８０ｍｇ、２８４．７７μｍｏｌ、４９．６０μＬ）を加え、混合物を２０℃で１５分間撹拌した。その後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中の４－（４－（４－（（１－アミノピペリジン－４－イル）メチル）ピペラジン－１－イル）－３－クロロフェニル）ピペリジン－２，６－ジオン（１２０ｍｇ、１８５．１９μｍｏｌ、２ＴＦＡ塩）およびＤＩＰＥＡ（２２２．６０ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ、０．３ｍＬ）溶液を加え、混合物を２０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳにより所望の質量のピークが確認された。混合物をＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液を減圧濃縮した。粗（ｃｒｕｄｅ）生成物を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ（登録商標） １５０×２５ｍｍ×５μｍ；移動相：［水（ＮＨ４ＨＣＯ３）－ＡＣＮ］；Ｂ％：４２％～７２％、８分）により精製し、溶出液を凍結乾燥し、Ｎ－（４－（（４－（２－クロロ－４－（２，６－ジオキソピペリジン－４－イル）フェニル）ピペラジン－１－イル）メチル）ピペリジン－１－イル）－４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－３－メトキシベンズアミド（４１．２ｍｇ、４８．０４μｍｏｌ、３３．７４％収率、９６％純度）を白色の固形物として得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝８２３．５
【0591】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．８７－１０．８１（ｍ、１Ｈ）、９．２７（ｓ、１Ｈ）、８．３２－８．２７（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．４７－７．４１（ｍ、２Ｈ）、７．３８－７．３６（ｍ、１Ｈ）、７．２６－７．２０（ｍ、１Ｈ）、７．１６－７．１０（ｍ、１Ｈ）、４．９６－４．８２（ｍ、１Ｈ）、４．０９－３．９８（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．４２－３．３４（ｍ、３Ｈ）、３．３０（ｓ、３Ｈ）、３．０４－２．９９（ｍ、２Ｈ）、２．９８－２．９４（ｍ、２Ｈ）、２．８４－２．７３（ｍ、４Ｈ）、２．６９－２．６３（ｍ、２Ｈ）、２．６１－２．５７（ｍ、４Ｈ）、２．２５－２．１９（ｍ、２Ｈ）、１．８１－１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．５９－１．４８（ｍ、１Ｈ）、１．２８－１．２０（ｍ、８Ｈ）。
化合物５９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミドの合成（化合物５９）
化合物５９．４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミドの合成（化合物５９）
【0592】
【化66】
【0593】
前記反応式に従って上述した実施例と同様の方法で、４－（（７，７－ジフルオロ－９－イソプロピル－５－メチル－６－オキソ－６，７，８，９－テトラヒドロ－５Ｈ－ピリミド［４，５－ｂ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）アミノ）－Ｎ－（１－（１－（４－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－２－フルオロフェニル）ピロリジン－３－イル）ピペリジン－４－イル）－３－メトキシベンズアミドを得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋＝７７８．９。
【0594】
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝１０．７９（ｓ、１Ｈ）、８．３２（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、８．１４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．５４－７．４６（ｍ、２Ｈ）、７．０１－６．８４（ｍ、２Ｈ）、６．７９－６．６７（ｍ、１Ｈ）、４．９５－４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｂｒ ｔ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．８２－３．７０（ｍ、２Ｈ）、３．５４－３．３７（ｍ、３Ｈ）、３．３１（ｓ、３Ｈ）、３．２７－３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．１０－２．８６（ｍ、３Ｈ）、２．６２－２．５５（ｍ、１Ｈ）、２．２３－２．０７（ｍ、４Ｈ）、２．０３－１．９６（ｍ、１Ｈ）、１．９０－１．７３（ｍ、３Ｈ）、１．６９－１．５２（ｍ、２Ｈ）、１．２５（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、６Ｈ）
【0595】
＜実験例＞
１．ＰＬＫ１ウェスタンブロット
（１）ＨｅＬａ細胞株の培養
ＨｅＬａ細胞株を韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１１５～Ｐ１２５に維持した。
セルカウントのために、セルカウンター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．、Ｃａｔａｌｏｇ＃ＡＭＱＡＸ１０００）および０．４％トリパンブルー（Ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ）溶液を用いた。
細胞培養のために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９５－６５；ロット番号２０８５３１８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２０９７５９３）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２０５８８５５）、１００ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１５０）、１２ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００１２）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、
ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７；ロット番号２０１９０７２３）を用い
１．ＰＬＫ１ウェスタンブロット
（１）ＨｅＬａ細胞株の培養
ＨｅＬａ細胞株を韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１１５～Ｐ１２５に維持した。
セルカウントのために、セルカウンター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．、Ｃａｔａｌｏｇ＃ＡＭＱＡＸ１０００）および０．４％トリパンブルー（Ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ）溶液を用いた。
細胞培養のために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９５－６５；ロット番号２０８５３１８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２０９７５９３）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２０５８８５５）、１００ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１５０）、１２ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００１２）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、
ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７；ロット番号２０１９０７２３）を用い
【0596】
（２）本発明の化合物の処理
１２ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に２×１０５個の細胞を播種し、細胞を培地で総体積２ｍＬにして培養した。
実施例の化合物は、ＤＭＳＯに完全に溶解させて実験に用い、チミジン（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ）は、ＤＷに完全溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。
放出（ｒｅｌｅａｓｅ）および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで３回洗浄した。完全培地（ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｅｄｉａ）を加え、ＣＯ２インキュベーターで４時間インキュベーションした。それぞれの化合物を最高濃度３μＭから最低濃度１０ポイントまで３倍に希釈した後、再び６時間インキュベーションし
１２ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に２×１０５個の細胞を播種し、細胞を培地で総体積２ｍＬにして培養した。
実施例の化合物は、ＤＭＳＯに完全に溶解させて実験に用い、チミジン（ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ）は、ＤＷに完全溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。
放出（ｒｅｌｅａｓｅ）および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで３回洗浄した。完全培地（ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｅｄｉａ）を加え、ＣＯ２インキュベーターで４時間インキュベーションした。それぞれの化合物を最高濃度３μＭから最低濃度１０ポイントまで３倍に希釈した後、再び６時間インキュベーションし
【0597】
（３）ウエスタンブロッティング
ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングの場合、１Ｘ ＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｒｏｃｋｌａｎｄ、カタログ番号ＭＢ－０３０－００５０；ロット番号３９７５１）、１００Ｘプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｑｕａｒｔｅｔｔ、カタログ番号ＰＰＩ１０１５；ロット番号ＰＣＯ５００３８４２４）、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）プロテインアッセイＢＣＡキット（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２２５；ロット番号ＵＣ２７６８７６）、アルブミンスタンダード（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２０９；ロット番号ＵＢ２６９５６１）、４～１５％Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ（登録商標） ＴＧＸ染色フリーゲル（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号４５６８０８５；ロット番号Ｌ００７０４１Ｂ）、１０Ｘ Ｔｒｉｓ／Ｇｌｙｃｉｎｅ／ＳＤＳバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７３２；ロット番号１０００００４４３７５Ｂ）；１０Ｘ ＴＢＳ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１７０６４３５；ロット番号１００００４５１４０Ｂ）、１０％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０溶液（カタログ番号１６１０７８１；ロット番号Ｌ００４１５２Ｂ）、Ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｒｏａｄ ｒａｎｇｅ（ＮＥＢ、カタログ番号Ｐ７７１９Ｓ；ロット番号１００４０３４９）、４Ｘ Ｌａｅｍｍｌｉサンプルバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７４７；ロット番号Ｌ００４１３３Ｂ）、β－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｍ３１４８；ロット番号６０－２４－２）、ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）Ｔ２０（ＴＢＳ）ブロッキングバッファー（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号３７５３６；ロット番号ＵＣ２８２５７８）、１Ｍ
アジ化ナトリウム溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号０８５９１－１ｍＬ－Ｆ；ロット番号ＢＣＢＶ４９８９）、α－Ｒａｂｂｉｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｍｓ ＩｇＧ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４６；ロット番号ＧＲ３２５２１１５－１）、α－Ｇｏａｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｒｂ ＩｇＧ（ＣＳＴ、カタログ番号７０７４Ｓ；ロット番号２８）、α－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ８２４５；ロット番号ＧＲ３２７５５４２－２）、α－Ｐｌｋ１（ＣＳＴ、カタログ番号２０８Ｇ４）、α－ＢＲＤ４（ＣＳＴ、カタログ番号１３４４０Ｓ）、ＥＣＬ（商標）Ｐｒｉｍｅ ウエスタンブロッティング試薬（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＲＰＮ２２３２；ロット番号１７００１６５５）、Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｐ７１７０；ロット番号ＳＬＢＶ４１１２）、Ｄｉｆｃｏ（登録商標）Ｓｋｉｍ ｍｉｌｋ（ＢＤ、カタログ番号２３２１００；ロット番号８３４６７９５）、ｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｒｅｇｕｌａｒ ｓｔａｃｋｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、カタログ番号ＩＢ２３００１；ロット番号２ＮＲ１１０６１９－０２）を用いた。
ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびウエスタンブロッティングの場合、１Ｘ ＲＩＰＡ溶解バッファー（Ｒｏｃｋｌａｎｄ、カタログ番号ＭＢ－０３０－００５０；ロット番号３９７５１）、１００Ｘプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｑｕａｒｔｅｔｔ、カタログ番号ＰＰＩ１０１５；ロット番号ＰＣＯ５００３８４２４）、Ｐｉｅｒｃｅ（商標）プロテインアッセイＢＣＡキット（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２２５；ロット番号ＵＣ２７６８７６）、アルブミンスタンダード（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号２３２０９；ロット番号ＵＢ２６９５６１）、４～１５％Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ（登録商標） ＴＧＸ染色フリーゲル（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号４５６８０８５；ロット番号Ｌ００７０４１Ｂ）、１０Ｘ Ｔｒｉｓ／Ｇｌｙｃｉｎｅ／ＳＤＳバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７３２；ロット番号１０００００４４３７５Ｂ）；１０Ｘ ＴＢＳ（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１７０６４３５；ロット番号１００００４５１４０Ｂ）、１０％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０溶液（カタログ番号１６１０７８１；ロット番号Ｌ００４１５２Ｂ）、Ｃｏｌｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｒｏａｄ ｒａｎｇｅ（ＮＥＢ、カタログ番号Ｐ７７１９Ｓ；ロット番号１００４０３４９）、４Ｘ Ｌａｅｍｍｌｉサンプルバッファー（Ｂｉｏ－ｒａｄ、カタログ番号１６１０７４７；ロット番号Ｌ００４１３３Ｂ）、β－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｍ３１４８；ロット番号６０－２４－２）、ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）Ｔ２０（ＴＢＳ）ブロッキングバッファー（ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号３７５３６；ロット番号ＵＣ２８２５７８）、１Ｍ
アジ化ナトリウム溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号０８５９１－１ｍＬ－Ｆ；ロット番号ＢＣＢＶ４９８９）、α－Ｒａｂｂｉｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｍｓ ＩｇＧ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ９７０４６；ロット番号ＧＲ３２５２１１５－１）、α－Ｇｏａｔ ｐＡｂ ｔｏ Ｒｂ ＩｇＧ（ＣＳＴ、カタログ番号７０７４Ｓ；ロット番号２８）、α－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ８２４５；ロット番号ＧＲ３２７５５４２－２）、α－Ｐｌｋ１（ＣＳＴ、カタログ番号２０８Ｇ４）、α－ＢＲＤ４（ＣＳＴ、カタログ番号１３４４０Ｓ）、ＥＣＬ（商標）Ｐｒｉｍｅ ウエスタンブロッティング試薬（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＲＰＮ２２３２；ロット番号１７００１６５５）、Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ溶液（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｐ７１７０；ロット番号ＳＬＢＶ４１１２）、Ｄｉｆｃｏ（登録商標）Ｓｋｉｍ ｍｉｌｋ（ＢＤ、カタログ番号２３２１００；ロット番号８３４６７９５）、ｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｒｅｇｕｌａｒ ｓｔａｃｋｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、カタログ番号ＩＢ２３００１；ロット番号２ＮＲ１１０６１９－０２）を用いた。
【0598】
細胞を回収するために、トリプシンを用いて細胞をプレートから分離した後、培地およびＰＢＳで洗浄した。具体的には、培地を吸引除去した後、１ｍＬのＰＢＳで洗浄し、ＰＢＳを吸引除去した。０．５ｍＬのＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓを３７℃、７分間処理して細胞を分離させた後、０．５ｍＬの完全培地を加えて１ｍＬの細胞培養物を回収した。その後、１ｍＬの細胞収集液を８，０００ｒｐｍで１２０秒間遠心分離し、上澄み液を除去した。０．２ｍＬのＰＢＳで洗浄した後、ＰＢＳを除去した。
【0599】
細胞溶解（ｌｙｓｉｓ）のために、溶解緩衝液（ｌｙｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ）を加え、細胞破砕片（ｄｅｂｒｉｓ）を除去し、細胞ライセート（ｌｙｓａｔｅ）を得た。具体的には、細胞にプロテアーゼ阻害剤を含有する７０μＬの１×ＲＩＰＡバッファーを処理し、氷上で３０分間インキュベーションした。その後、細胞を４℃、１５，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、細胞ライセートを得た。
【0600】
次に、ＢＣＡアッセイを用いて標準曲線を取得し、これを代入することにより溶解物中のタンパク質の質量を定量化した。混合物には２０μＬの標準溶液または試料溶液、２００μＬのＢＣＡまたはブラッドフォード溶液を用いて３７℃で３０分間インキュベートし、５６２ｎｍの吸光度で測定した。サンプルは、各ウェルあたり１５μｇになるように４×サンプルバッファーを添加して用意した。
【0601】
４～１５％ Ｍｉｎｉ－ＰＲＯＴＥＡＮ（登録商標） ＴＧＸ染色フリーゲル（１５ ｗｅｌｌ）に１２０Ｖで１００分のランニングタイムを設定し、ＳＤＳ－ＰＡＧＥを行った。ｉＢｌｏｔ（登録商標）２ ＮＣ Ｍｉｎｉ ｓｔａｃｋｓにドライブロッティングシステムのＰ０モードで転写した。Ｐｏｎｃｅａｕ Ｓ溶液を用いて染色した後、ブロッキングバッファー（Ｔｈｅｒｍｏ）で１時間ブロッキングした。０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０を含む１×ＴＢＳで洗浄した後、一次抗体として１×ＴＢＳ－Ｔ内抗Ｐｌｋ１（ＣＳＴ）抗体（１：５００）、抗－ＢＲＤ４（ＣＵＬＭシグナリング）抗体（１：１０００）または抗－ＧＡＰＤＨ（ａｂｃａｍ）抗体（１：１０，０００）と一緒に４℃で１６時間反応させた。０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０を含む１×ＴＢＳで１０分間３回洗浄した後、二次抗体として１×ＴＢＳ－Ｔ内抗－マウス抗体（ａｂｃａｍ）（１：１０，０００）または抗－ウサギ抗体（ＣＳＴ）（１：５，０００）と一緒に室温で１時間反応させた。次に、０．０５％ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０を含む１×ＴＢＳで１０分間３回洗浄した後、ＥＣＬワーキング溶液（１：１）で生成物を検出した。
【0602】
結果を分析するために、イメージアナライザー（ＧＥ）を用いて最終プロットデータを得た。その結果、本発明の全ての化合物が優れたＰＬＫ１タンパク質分解能を有することが確認された。
【0603】
２．ＰＬＫ１ルシフェラーゼ
（１）ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）細胞株の作製および培養
ＨｅＬａ細胞株にＬｇＢｉｔベクターを形質導入し、安定に発現させた細胞株を作製した。次に、細胞内に内在するＰｌｋ１遺伝子Ｃ末端の後にＨｉＢｉｔアミノ酸配列が発現されるようにｇＲＮＡとドナーを作製した後、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９を発現できるベクターと一緒に細胞内に挿入した。挿入が完了し、ノックインした細胞のみを選別した後、継代して用いた。
細胞を培養するために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９９５－０６５；ロット番号２４６７１８９）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２４２０１７３Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、１００ ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタ
ログ番号２０１５０）、９６－ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ、カタログ番号３０１９６）、ＰＢＳ ｐＨ ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
（１）ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）細胞株の作製および培養
ＨｅＬａ細胞株にＬｇＢｉｔベクターを形質導入し、安定に発現させた細胞株を作製した。次に、細胞内に内在するＰｌｋ１遺伝子Ｃ末端の後にＨｉＢｉｔアミノ酸配列が発現されるようにｇＲＮＡとドナーを作製した後、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９を発現できるベクターと一緒に細胞内に挿入した。挿入が完了し、ノックインした細胞のみを選別した後、継代して用いた。
細胞を培養するために、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１１９９５－０６５；ロット番号２４６７１８９）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２４２０１７３Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、１００ ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタログ番号２０１００）、１５０ｍｍ２の細胞培養皿（ＳＰＬ、カタ
ログ番号２０１５０）、９６－ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ、カタログ番号３０１９６）、ＰＢＳ ｐＨ ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
【0604】
（２）本発明の化合物の処理およびルシフェラーゼ解析の実験手法
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）の場合、チミジンブロック後に放出した後、化合物を処理し、その過程は以下の通りである。チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）をＤＷに完全溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。放出および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで洗浄した。ＴｒｙｐＬＥ（商標）を入れ、３７℃のＣＯ２インキュベーターで５分間インキュベーションした。完全培地を加えて、中和した細胞をセルカウンターでカウントした。９６ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に３．３×１０４個だけ培地総体積は１５０μＬとし、播種後ＣＯ２インキュベーターでインキュベーションした。
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
ＨｅＬａ ＬｇＢｉｔ（Ｐｌｋ１－ＨｉＢｉｔ ＫＩ）の場合、チミジンブロック後に放出した後、化合物を処理し、その過程は以下の通りである。チミジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｔ９２５０－５Ｇ）をＤＷに完全溶解させて実験に用いた。チミジンブロックのために、チミジン２ｍＭ処理後、２４時間インキュベーションした。放出および化学処理のために、培地を吸引した後、１×ＰＢＳで洗浄した。ＴｒｙｐＬＥ（商標）を入れ、３７℃のＣＯ２インキュベーターで５分間インキュベーションした。完全培地を加えて、中和した細胞をセルカウンターでカウントした。９６ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に３．３×１０４個だけ培地総体積は１５０μＬとし、播種後ＣＯ２インキュベーターでインキュベーションした。
【0605】
各細胞株をＣＯ２であるキュベーターで１８時間インキュベーションした後、Ｅｎｄｕｒａｚｉｎｅを総体積４％になるように各ウェルに加えた。本発明の化合物の濃度が３００ｎＭになるように、９６ウェルホワイトプレート（ＳＰＬ社）に入れた後、プレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、ＣＬＡＲＩＯｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）の波長を４７０～４８０ｎＭに設定した後、吸光度をリアルタイムで測定した。９時間経過した時点で発光値を求めた後、エクセルプログラムを使って棒グラフを表示した。
【0606】
【0607】
【表11】
【0608】
【表12】
【0609】
表２において、活性度は、各実施例の化合物処理群とＤＭＳＯ処理群の蛍光値の割合に従って表記した（＋＋＋：＜０．３、＋＋＜０．６、＋＜０．７）。
【0610】
３．Ｈ５２６細胞株における細胞生存率の分析
（１）ＮＣＩ－Ｈ５２６細胞株の培養
ＮＣＩ－Ｈ５２６（以下、Ｈ５２６）細胞株は、韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から分譲を受けた。細胞を培養するために、ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号２２４００－０８９；ロット番号２２７７０２１）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２３５１１７６Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１０７５）、１７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇ
ｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
（１）ＮＣＩ－Ｈ５２６細胞株の培養
ＮＣＩ－Ｈ５２６（以下、Ｈ５２６）細胞株は、韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から分譲を受けた。細胞を培養するために、ＲＰＭＩ １６４０（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号２２４００－０８９；ロット番号２２７７０２１）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２３５１１７６Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２３２１１１４）、７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１０７５）、１７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇ
ｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２３２３４１７）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｍａｒｉｅｎｆｅｌｄ Ｓｕｐｅｒｉｏｒ、カタログ番号０６５００１０）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０２１１２０１）を用いた。
【0611】
（２）本発明の化合物の処理および細胞生存率の分析の実験方法
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
Ｈ５２６細胞株を９６ウェル細胞培養プレートに各ウェル当たり３×１０４個になるように播種し、各ウェルの培地体積は１５０μＬになるようにした。
本発明の化合物の細胞内処理容量は、最大濃度３０００ｎＭとなるようにし、これを１／３ずつ希釈し、濃度別に処理し、最低濃度は０．４６ｎＭとなるようにした。各ウェルについて、全溶液の体積が２００μＬになるように化合物を処理した後、５日間ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号４１１１）中でインキュベートした。
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ カタログ番号Ｄ２４３８、ロット番号ＲＮＢＪ９５６６）に完全に溶解させて実験に用いた。
Ｈ５２６細胞株を９６ウェル細胞培養プレートに各ウェル当たり３×１０４個になるように播種し、各ウェルの培地体積は１５０μＬになるようにした。
本発明の化合物の細胞内処理容量は、最大濃度３０００ｎＭとなるようにし、これを１／３ずつ希釈し、濃度別に処理し、最低濃度は０．４６ｎＭとなるようにした。各ウェルについて、全溶液の体積が２００μＬになるように化合物を処理した後、５日間ＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号４１１１）中でインキュベートした。
【0612】
その後、各ウェルにＥＺ－Ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、カタログ番号ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２１０９）を２０μＬずつ処理した後、ＣＯ２インキュベーター中で４時間インキュベートした。プレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、ＣＬＡＲＩＯｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）の波長を４５０ｎＭに設定し、培養が終了した試料の吸光度を測定し、測定前にプレートリーダー内で３分間撹拌した後、測定した。最終測定値はＥｘｃｅｌファイルで整理した後、Ｐｒｉｓｍ－ＧｒａｐｈＰａｄプログラムでグラフを表示し、ＩＣ５０値を測定した。
【0613】
結果は、以下の表３の通りである。
【0614】
【表13】
【0615】
【表14】
【0616】
表３において、活性度は、Ｈ５２６細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０
値に従って表記した（Ａ：＜３０ｎＭ、Ｂ：＜５０ｎＭ、Ｃ：＜１００ｎＭ、Ｄ：＜２００ｎＭ、Ｅ：＜４００ｎＭ）。
値に従って表記した（Ａ：＜３０ｎＭ、Ｂ：＜５０ｎＭ、Ｃ：＜１００ｎＭ、Ｄ：＜２００ｎＭ、Ｅ：＜４００ｎＭ）。
【0617】
４．ＭＲＣ－５細胞株における細胞生存率の分析
（１）ＭＲＣ－５細胞株の培養
ＭＲＣ－５細胞株は、韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１５内に維持した。
細胞を培養するために、ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００２４．０１；ロット番号ＡＧ２９６９７６９８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２２３４０１８Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２２１１０９９）、１７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０１９０７２３）を用いた。
（１）ＭＲＣ－５細胞株の培養
ＭＲＣ－５細胞株は、韓国細胞株銀行（ＫＣＬＢ、ソウル、韓国）から購入した。培養細胞の継代（Ｐａｓｓａｇｅ）をＰ１５内に維持した。
細胞を培養するために、ＭＥＭ／ＥＢＳＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ、カタログ番号ＳＨ３００２４．０１；ロット番号ＡＧ２９６９７６９８）、ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１６０００－０４４；ロット番号２２３４０１８Ｐ）、ペニシリン／ストレプトマイシン（ＰＳ）（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１５１４０－１２２；ロット番号２２１１０９９）、１７５Ｔ細胞培養フラスコ（ＳＰＬ、カタログ番号７１１７５）、９６ウェル培養プレート（ＳＰＬ、カタログ番号３００９６）、ＰＢＳ ｐＨ７．４（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１００１０－０２３；ロット番号２０８５０８０）、ＴｒｙｐＬＥ（商標） Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｇｉｂｃｏ、カタログ番号１２６０５－０１０；ロット番号２０７０６３８）、カウンティング・チャンバー（血球計算盤）（Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎ、カタログ番号８１００２０４）、および０．４％トリパンブルー溶液（ＤＹＮＥＢＩＯ、カタログ番号ＣＢＴ３７１０；ロット番号２０１９０７２３）を用いた。
【0618】
（２）本発明の化合物の処理
１７５Ｔ細胞培養フラスコにて培養中のＭＲＣ－５細胞株を、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓを用いてフラスコから細胞を分離した。９６ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に６×１０３個の細胞を播種し、細胞を培地で総体積１５０μＬにして培養した。
１７５Ｔ細胞培養フラスコにて培養中のＭＲＣ－５細胞株を、ＴｒｙｐＬＥ（商標）Ｅｘｐｒｅｓｓを用いてフラスコから細胞を分離した。９６ウェルプレート（ＳＰＬ社）の各ウェル毎に６×１０３個の細胞を播種し、細胞を培地で総体積１５０μＬにして培養した。
【0619】
実施例の化合物は、ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、カタログ番号Ｄ２４３８－５０ＭＬ、ロット番号ＲＮＢＫ６３８７）に完全溶解させて実験に用い、１０μＭを最高濃度とし、１／３ずつ連続して希釈し、最低濃度が１．５２ｎＭになるように計算して処理した。各ウェルに培地と一緒に混合して処理し、体積は５０μＬになるようにし、各ウェルの総体積は２００μＬになるようにした。次に、３７℃のＣＯ２インキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号４１１１、ロット番号３００５１２７０９）にて５日間培養した。
【0620】
以下の化合物等は、比較例として使用しており、実施例の化合物と同様の方法で細胞生存率の分析を行った。
【0621】
比較例１．非特許文献５に開示された例示的な化合物例（比較化合物１）
【0622】
【化67】
【0623】
比較例２．ＢＩ２５３６（比較化合物２）
【0624】
【化68】
【0625】
比較例３．ボラセルチブ（比較化合物３）
【0626】
【化69】
【0627】
比較例４．ＴＡＫ９６０（比較化合物４）
【0628】
【化70】
【0629】
（３）細胞毒性の実験
培養が完了したプレートの各ウェルに、Ｅａｓｙ－ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、カタログ番号ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２０１２）溶液を２０μＬずつ処理した後、４時間３７℃のＣＯ２インキュベーターで培養した。９６ウェルプレートをプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）に入れ、２分間混合した後、４５０ｎＭ波長で吸光度を測定した。データはＰｒｉｓｍ（ｖｅｒ．９）プログラムを用いてグラフに変換した。
培養が完了したプレートの各ウェルに、Ｅａｓｙ－ｃｙｔｏｘ（ＤＯＧＥＮ、カタログ番号ＥＺ－３０００、ロット番号ＤＬＳ２０１２）溶液を２０μＬずつ処理した後、４時間３７℃のＣＯ２インキュベーターで培養した。９６ウェルプレートをプレートリーダー（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ、Ｃｌａｒｉｏｓｔａｒ Ｐｌｕｓ）に入れ、２分間混合した後、４５０ｎＭ波長で吸光度を測定した。データはＰｒｉｓｍ（ｖｅｒ．９）プログラムを用いてグラフに変換した。
【0630】
結果は、以下の表４および表５の通りである。
【0631】
【表15】
【0632】
表４において、活性度は、ＭＲＣ－５細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０値（ｎＭ）に従って表記した。Ｎ．Ｄ（ｎｏｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ）は、細胞毒性
が１０μＭまで示さなかったことを意味する。その結果、本発明の全ての化合物が正常細胞株よりも癌細胞株において高い水準の細胞毒性を特異的に示すことが確認された。
が１０μＭまで示さなかったことを意味する。その結果、本発明の全ての化合物が正常細胞株よりも癌細胞株において高い水準の細胞毒性を特異的に示すことが確認された。
【0633】
【表16】
【0634】
表５において、活性度は、ＭＲＣ－５細胞株に各実施例の化合物を処理した群のＩＣ５０値（ｎＭ）に従って表記した。特に公知のＰＲＯＴＡＣ化合物である比較化合物１は、本発明の実施例の化合物とは異なり、正常細胞株において高い水準の細胞毒性を示した。
【図1】
【図2】