特許 7555739 安定化剤を含有する糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物、糖化タンパク質測定試薬、糖化タンパク質の測定方法、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法、及び糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-09-13

(45)【発行日】2024-09-25

(54)【発明の名称】安定化剤を含有する糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物、糖化タンパク質測定試薬、糖化タンパク質の測定方法、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法、及び糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法

(51)【国際特許分類】

   C12N 9/96 20060101AFI20240917BHJP

   C12Q 1/26 20060101ALI20240917BHJP

   C12Q 1/37 20060101ALI20240917BHJP

   C12Q 1/28 20060101ALI20240917BHJP

   C12N 9/50 20060101ALI20240917BHJP

【ＦＩ】

C12N9/96

C12Q1/26

C12Q1/37

C12Q1/28

C12N9/50

【請求項の数】 18

(21)【出願番号】P 2020113305

(22)【出願日】2020-06-30

(65)【公開番号】P2021007389

(43)【公開日】2021-01-28

【審査請求日】2023-03-10

(31)【優先権主張番号】P 2019122875

(32)【優先日】2019-07-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】303046299

【氏名又は名称】旭化成ファーマ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100079108

【弁理士】

【氏名又は名称】稲葉 良幸

(74)【代理人】

【識別番号】100109346

【弁理士】

【氏名又は名称】大貫 敏史

(74)【代理人】

【識別番号】100117189

【弁理士】

【氏名又は名称】江口 昭彦

(74)【代理人】

【識別番号】100134120

【弁理士】

【氏名又は名称】内藤 和彦

(72)【発明者】

【氏名】今野 翔太

【審査官】伊達 利奈

(56)【参考文献】

【文献】特開２００４－０４９０６３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００５－２７８６２６（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１４－１５０７７２（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１８／０２１５３０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２００６／０７９３４６（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ１２Ｑ １／００

Ｃ１２Ｎ ９／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

ＰｕｂＭｅｄ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、
糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と、
を備える糖化タンパク質測定試薬であって、
前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、
（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、
（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む、
糖化タンパク質測定試薬。

【請求項2】

液状である、請求項１に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項3】

（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、が、予め混合されている、請求項１又は２に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項4】

前記安定化剤が、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、及び３－カルボキシフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つをさらに含む、請求項１から３のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項5】

プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（１）式を満たす、請求項４に記載の糖化タンパク質測定試薬。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (1)

【請求項6】

キレート剤をさらに含む、請求項１から５のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項7】

前記キレート剤が、クエン酸又はその塩である、請求項６に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項8】

前記キレート剤が、ナトリウム塩である、請求項６又は７に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項9】

前記フェロシアン化物が、フェロシアン化カリウムである、請求項１から８のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項10】

２℃以上１０℃以下で保存される、請求項１から９のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項11】

２℃以上１０℃以下で少なくとも１か月間保存可能である、請求項１から１０のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項12】

前記糖化タンパク質が糖化アルブミンである、請求項１から１１のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【請求項13】

検体にトリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有部分組成物とを接触させることと、
検体中に存在する糖化タンパク質に依存する発色を検出することと、
を含み、
トリンダー試薬含有部分組成物が、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含み、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含み、
検体に前記トリンダー試薬含有部分組成物を接触せしめ、次いで、前記検体と前記トリンダー試薬含有部分組成物の混合液に前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を接触せしめる、
糖化タンパク質の測定方法。

【請求項14】

前記トリンダー試薬含有部分組成物及び前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を添加された検体に対して、糖化アルブミンの濃度に依存する吸光度を測定する、請求項１３に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【請求項15】

検体にトリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有部分組成物とを接触させることと、
検体中に存在する糖化タンパク質に依存する発色を検出することと、
を含み、
トリンダー試薬含有部分組成物が、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含み、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含み、
前記検体に前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を接触させる前に、前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物の（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、が、予め混合され保存されている、
糖化タンパク質の測定方法。

【請求項16】

検体に前記トリンダー試薬含有部分組成物を接触せしめ、次いで、前記検体と前記トリンダー試薬含有部分組成物の混合液に前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を接触せしめる、請求項１５に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【請求項17】

糖化タンパク質測定試薬の安定化方法であって、
前記糖化タンパク質測定試薬が、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、
糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と、
を備え、
前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物に、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、を含有せしめること、
を含む、糖化タンパク質測定試薬の安定化方法。

【請求項18】

糖化タンパク質測定試薬の保存方法であって、
前記糖化タンパク質測定試薬が、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、
糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と、
を備え、
（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む、前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を調製することと、
前記４－アミノアンチピリン含有部分組成物を保存することと、
を含む、糖化タンパク質測定試薬の保存方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は検査薬に関し、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物、糖化タンパク質測定試薬、糖化タンパク質の測定方法、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法、及び糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法に関する。

【背景技術】

【0002】

糖尿病の診断及び管理を行う上で、糖化タンパク質の測定は重要であり、過去約１から２ヶ月の平均血糖値を反映する糖化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ等）、過去約２週間の平均血糖値を反映する糖化アルブミン（ＧＡ）、及び血清中の糖化タンパク質の総称であるフルクトサミン（ＦＲＡ）等が日常的に測定されている。

【0003】

精度が高く、安価で、簡便に糖化タンパク質を測定する方法として、酵素法が挙げられる。例えば特許文献１、２は、糖化タンパク質にプロテアーゼを作用させ、生じた糖化アミノ酸又は糖化ペプチドに作用するケトアミンオキシダーゼを用いて過酸化水素を発生させ、さらにペルオキシダーゼ、トリンダー試薬、４－アミノアンチピリンを用いて比色定量することで血清中の糖化タンパク質を測定できることを記載している。特許文献３は、糖化タンパク質にプロテアーゼを作用させ、生じた糖化アミノ酸又は糖化ペプチドに作用するケトアミンオキシダーゼを用いた際の酸素の消費量を発色反応又は酸素電極で測定することで血清中の糖化タンパク質を測定できることを記載している。特許文献４、５は、具体的に、糖化ヘモグロビンや糖化アルブミンにプロテアーゼを作用させ、生じた糖化アミノ酸又は糖化ペプチドに作用するケトアミンオキシダーゼを用いて過酸化水素を発生させ、さらにペルオキシダーゼ、トリンダー試薬、及び４－アミノアンチピリンを用いて比色定量することで糖化ヘモグロビンや糖化アルブミンを測定できることを記載している。

【0004】

現在、酵素法の測定試薬としては液状品が主流となっており、さらに、保存安定性を考慮して、試薬成分を２つの液状保存用部分組成物に分けた２試薬系が主流となっている。２つの液状保存用部分組成物は、それぞれ、第１試薬、第２試薬と呼ばれることがある。糖化タンパク質測定試薬においては、プロテアーゼによるケトアミンオキシダーゼの分解を防ぐためにケトアミンオキシダーゼとプロテアーゼを別々の液状保存用部分組成物に含有させ、保存中の自然発色を防ぐためにトリンダー試薬と４－アミノアンチピリンを別々の液状保存用部分組成物に含有させるのが好ましい。しかしながら２試薬系でもなお保存安定性が不十分であることから、保存安定性を向上させるための種々の技術が提供されている。

【0005】

例えば、特許文献５は、糖アルコール、スクロース、水溶性マグネシウム塩、水溶性カルシウム塩、硫安、アミノ酸、又はザルコシンを測定試薬に含有させることでケトアミンオキシダーゼの安定性を向上させ、測定試薬の保存安定性を改善できることを記載している。また、特許文献５は、ジメチルスルホキシド、アルコール、水溶性カルシウム塩、食塩、第四級アンモニウム塩、又は第四級アンモニウム塩型陽イオン界面活性剤を測定試薬に含有させることでプロテアーゼの安定性を向上させ、測定試薬の安定性を改善できることを記載している。特許文献６は、ポリアミノカルボン酸系のキレート試薬と、アンモニウム塩、オキシカルボン酸系のキレート試薬、糖アルコール類、アミノ酸類より選ばれる１種以上の試薬と、を共存させることで、フルクトシルペプチドオキシダーゼを含む液状の測定試薬の保存安定性を改善できることを記載している。特許文献７は、キレート剤を測定試薬に含有させることでケトアミンオキシダーゼ及びアスコルビン酸オキシダーゼの安定性を向上させ、測定試薬の保存安定性を改善できることを記載している。特許文献８は、緩衝剤や４－アミノアンチピリンの濃度を上げることで、測定試薬の保存安定性を改善できることを記載している。

【0006】

また、測定試薬に関する言及はないものの、特許文献９は、プロテアーゼ阻害剤としてホウ酸、ボロン酸、フェニルボロン酸を含有することで液体洗剤中のプロテアーゼの貯蔵安定性を改善できると記載している。特許文献１０は、油中水エマルジョン中の酵素としてのプロテアーゼを安定化させるために、ポリオールが有効であることを記載している。特許文献１１、１２は、液体洗剤組成物中のペプチドアルデヒド、カルシウムイオン、ホウ素組成物、ポリオール、及び塩酸ベンズアミジンが、プロテアーゼの安定化剤として用いられることができると記載している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【文献】特開平６－４６８４６号公報

【文献】特開平５－１９２１９３号公報

【文献】特開平２－１９５９００号公報

【文献】国際公開第１９９７／１３８７２号

【文献】国際公開第２００２／０６１１１９号

【文献】特開２００６－３２５５４７号公報

【文献】特開２００４－１２９５３１号公報

【文献】特開２００５－２９８６３２号公報

【文献】国際公開第１９９６／０４１８５９号

【文献】国際公開第１９９５／０２８０９２号

【文献】国際公開第９８／１３４６２号

【文献】国際公開第９８／１３４５９号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

上述したように、従来、測定試薬やプロテアーゼの様々な安定化方法が提案されているが、４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含む試薬を十分に安定化させる方法はない。そこで、本発明は、４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含みながら安定な糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物、糖化タンパク質測定試薬、糖化タンパク質の測定方法、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法、及び糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法を提供することを課題の一部とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

上記課題を解決するために本発明者は鋭意研究を行った結果、４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含む試薬に、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つを添加すると、試薬が安定することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明としては以下のものが挙げられる。

【0010】

［１］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物であって、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0011】

［２］液状である、［１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0012】

［３］（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、が、予め混合されている、［１］又は［２］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0013】

［４］包装されている、［１］から［３］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0014】

［５］安定化剤がプロピレングリコールである、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0015】

［６］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0016】

［７］プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（１）式を満たす、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (1)

【0017】

［８］安定化剤がプロピレングリコールであり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0018】

［９］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0019】

［１０］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0020】

［１１］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0021】

［１２］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が６０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0022】

［１３］安定化剤がトリメチレングリコールであり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0023】

［１４］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0024】

［１５］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0025】

［１６］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0026】

［１７］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が７０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0027】

［１８］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸であり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0028】

［１９］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0029】

［２０］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0030】

［２１］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0031】

［２２］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0032】

［２３］安定化剤が３－カルボキシフェニルボロン酸であり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0033】

［２４］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0034】

［２５］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0035】

［２６］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0036】

［２７］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0037】

［２８］安定化剤が３－カルバモイルフェニルボロン酸であり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0038】

［２９］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0039】

［３０］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0040】

［３１］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0041】

［３２］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が２ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0042】

［３３］安定化剤が３－アセトアミドフェニルボロン酸であり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0043】

［３４］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［３３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0044】

［３５］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［３３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0045】

［３６］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［３３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0046】

［３７］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［３３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0047】

［３８］安定化剤が３－アミノフェニルボロン酸であり、当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１］から［４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0048】

［３９］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［３８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0049】

［４０］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［３８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0050】

［４１］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［３８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0051】

［４２］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［３８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0052】

［４３］キレート剤をさらに含む、［１］から［４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0053】

［４４］キレート剤が、クエン酸及びその塩、リンゴ酸及びその塩、ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩、シュウ酸及びその塩、ニトリロ三酢酸及びその塩、並びにＮ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩からなる群より選択される少なくとも１種である、［４３］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0054】

［４５］キレート剤が、クエン酸又はその塩である、［４３］又は［４４］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0055】

［４６］キレート剤が、ナトリウム塩である、［４３］から［４５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0056】

［４７］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤がプロピレングリコールである、［４３］から［４６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0057】

［４８］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［４３］から［４６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0058】

［４９］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［４３］から［４８］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0059】

［５０］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上である、［４９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0060】

［５１］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０μｍｏｌ／Ｌ以上である、［４９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0061】

［５２］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［４９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0062】

［５３］当該４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［４９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0063】

［５４］フェロシアン化物が、フェロシアン化カリウムである、［１］から［５３］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0064】

［５５］プロテアーゼがエンドペプチダーゼである、［１］から［５４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0065】

［５６］プロテアーゼがセリンエンドペプチダーゼである、［１］から［５４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0066】

［５７］プロテアーゼがＢａｃｉｌｌｕｓ由来又はＴｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ由来である、［１］から［５４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0067】

［５８］糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含まない、［１］から［５７］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0068】

［５９］２℃以上１０℃以下で保存される、［１］から［５８］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0069】

［６０］２℃以上１０℃以下で少なくとも１か月間保存可能である、［１］から［５９］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0070】

［６１］糖化タンパク質が糖化アルブミンである、［１］から［６０］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物。

【0071】

［６２］［１］から［６１］のいずれかに記載の４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と、を備える糖化タンパク質測定試薬。

【0072】

［６３］４－アミノアンチピリンとトリンダー試薬とが組み合わされることにより、糖化タンパク質が存在する際に発色反応が生じ、発色反応に対応する吸光度から算出される濃度が０．１ｇ／ｄＬ以上７．５ｇ／ｄＬ以下の糖化タンパク質の検出に使用可能である、［６２］に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0073】

［６４］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して９２％以上１００％以下である、［６２］又は［６３］に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0074】

［６５］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８８％以上１００％以下である、［６２］又は［６３］に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0075】

［６６］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８７％以上１００％以下である、［６２］又は［６３］に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0076】

［６７］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して７８％以上１００％以下である、［６２］又は［６３］に記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0077】

［６８］トリンダー試薬含有部分組成物が液状である、［６２］から［６７］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0078】

［６９］トリンダー試薬含有部分組成物において、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬が予め混合されている、［６２］から［６８］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0079】

［７０］トリンダー試薬含有部分組成物が包装されている、［６２］から［６９］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0080】

［７１］トリンダー試薬がＮ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン２ナトリウムである、［６２］から［７０］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0081】

［７２］糖化タンパク質が糖化アルブミンである、［６２］から［７１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬。

【0082】

［７３］検体にトリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有部分組成物とを接触させることと、
検体中に存在する糖化タンパク質に依存する発色を検出することと、
を含み、
トリンダー試薬含有部分組成物が、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含み、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む、 糖化タンパク質の測定方法。

【0083】

［７４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が液状である、［７３］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0084】

［７５］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃以上１０℃以下で少なくとも１か月間保存した後に実施される、［７３］又は［７４］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0085】

［７６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物において、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、が、予め混合されている、［７３］から［７５］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0086】

［７７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が包装されている、［７３］から［７６］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0087】

［７８］安定化剤がプロピレングリコールである、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0088】

［７９］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0089】

［８０］プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（２）式を満たす、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (2)

【0090】

［８１］安定化剤がプロピレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0091】

［８２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0092】

［８３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0093】

［８４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0094】

［８５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が６０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0095】

［８６］安定化剤がトリメチレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0096】

［８７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0097】

［８８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［８６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0098】

［８９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0099】

［９０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が７０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［８６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0100】

［９１］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0101】

［９２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［９１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0102】

［９３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［９１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0103】

［９４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［９１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0104】

［９５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［９１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0105】

［９６］安定化剤が３－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0106】

［９７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［９６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0107】

［９８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［９６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0108】

［９９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［９６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0109】

［１００］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［９６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0110】

［１０１］安定化剤が３－カルバモイルフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0111】

［１０２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１０１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0112】

［１０３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１０１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0113】

［１０４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１０１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0114】

［１０５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が２ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１０１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0115】

［１０６］安定化剤が３－アセトアミドフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0116】

［１０７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１０６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0117】

［１０８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１０６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0118】

［１０９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１０６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0119】

［１１０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１０６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0120】

［１１１］安定化剤が３－アミノフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［７３］から［７７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0121】

［１１２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１１１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0122】

［１１３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１１１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0123】

［１１４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１１１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0124】

［１１５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１１１］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0125】

［１１６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物がキレート剤をさらに含む、［７３］から［１１５］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0126】

［１１７］キレート剤が、クエン酸及びその塩、リンゴ酸及びその塩、ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩、シュウ酸及びその塩、ニトリロ三酢酸及びその塩、並びにＮ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩からなる群から選択される少なくとも１種である、［１１６］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0127】

［１１８］キレート剤が、クエン酸又はその塩である、［１１６］又は［１１７］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0128】

［１１９］キレート剤が、ナトリウム塩である、［１１６］から［１１８］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0129】

［１２０］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤がプロピレングリコールである、［１１６］から［１１９］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0130】

［１２１］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［１１６］から［１１９］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0131】

［１２２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１１６］から［１２１］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0132】

［１２３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上である、［１２２］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0133】

［１２４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０μｍｏｌ／Ｌ以上である、［１２２］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0134】

［１２５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１２２］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0135】

［１２６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１２２］に記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0136】

［１２７］フェロシアン化物が、フェロシアン化カリウムである、［７３］から［１２６］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0137】

［１２８］プロテアーゼがエンドペプチダーゼである、［７３］から［１２７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0138】

［１２９］プロテアーゼがセリンエンドペプチダーゼである、［７３］から［１２７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0139】

［１３０］プロテアーゼがＢａｃｉｌｌｕｓ由来又はＴｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ由来である、［７３］から［１２７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0140】

［１３１］濃度が０．１ｇ／ｄＬ以上７．５ｇ／ｄＬ以下の糖化タンパク質を検出可能である、［７３］から［１３０］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0141】

［１３２］トリンダー試薬含有部分組成物及び４－アミノアンチピリン含有部分組成物を添加された検体に対して、糖化タンパク質の濃度に依存する吸光度を測定する、［７３］から［１３１］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0142】

［１３３］４－アミノアンチピリンとトリンダー試薬とが組み合わされることにより、糖化タンパク質が存在する際に発色反応が生じ、発色反応に対応する吸光度から算出される濃度が０．１ｇ／ｄＬ以上７．５ｇ／ｄＬ以下の糖化タンパク質を検出可能である、［７３］から［１３２］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0143】

［１３４］検体にトリンダー試薬含有部分組成物を接触せしめ、次いで、検体とトリンダー試薬含有部分組成物の混合液に４－アミノアンチピリン含有部分組成物を接触せしめる、［７３］から［１３３］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0144】

［１３５］トリンダー試薬含有部分組成物において、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬が予め混合されている、［７３］から［１３４］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0145】

［１３６］トリンダー試薬含有部分組成物が液状である、［７３］から［１３５］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0146】

［１３７］トリンダー試薬含有部分組成物が包装されている、［７３］から［１３６］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0147】

［１３８］トリンダー試薬がＮ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン２ナトリウムである、［７３］から［１３７］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0148】

［１３９］糖化タンパク質が糖化アルブミンである、［７３］から［１３８］のいずれかに記載の糖化タンパク質の測定方法。

【0149】

［１４０］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法であって、
糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼと、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤と、を含有せしめること、
を含む、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0150】

［１４１］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が液状である、［１４０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0151】

［１４２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物を包装することをさらに含む、［１４０］又は［１４１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0152】

［１４３］安定化剤がプロピレングリコールである、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0153】

［１４４］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0154】

［１４５］プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（３）式を満たす、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (3)

【0155】

［１４６］安定化剤がプロピレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0156】

［１４７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１４６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0157】

［１４８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１４６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0158】

［１４９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0159】

［１５０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が６０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0160】

［１５１］安定化剤がトリメチレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0161】

［１５２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１５１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0162】

［１５３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１５１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0163】

［１５４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１５１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0164】

［１５５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が７０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１５１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0165】

［１５６］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0166】

［１５７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0167】

［１５８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0168】

［１５９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0169】

［１６０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0170】

［１６１］安定化剤が３－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0171】

［１６２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１６１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0172】

［１６３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１６１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0173】

［１６４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１６１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0174】

［１６５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１６１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0175】

［１６６］安定化剤が３－カルバモイルフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0176】

［１６７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１６６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0177】

［１６８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１６６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0178】

［１６９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１６６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0179】

［１７０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が２ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１６６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0180】

［１７１］安定化剤が３－アセトアミドフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0181】

［１７２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１７１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0182】

［１７３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１７１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0183】

［１７４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１７１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0184】

［１７５］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１７１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0185】

［１７６］安定化剤が３－アミノフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１４０］から［１４２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0186】

［１７７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１７６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0187】

［１７８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［１７６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0188】

［１７９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１７６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0189】

［１８０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［１７６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0190】

［１８１］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物にキレート剤をさらに含有せしめる、［１４０］から［１８０］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0191】

［１８２］キレート剤が、クエン酸及びその塩、リンゴ酸及びその塩、ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩、シュウ酸及びその塩、ニトリロ三酢酸及びその塩、並びにＮ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩からなる群から選択される少なくとも１種である、［１８１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0192】

［１８３］キレート剤が、クエン酸又はその塩である、［１８１］又は［１８２］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0193】

［１８４］キレート剤が、ナトリウム塩である、［１８１］から［１８３］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0194】

［１８５］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤がプロピレングリコールである、［１８１］から［１８４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0195】

［１８６］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［１８１］から［１８４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0196】

［１８７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１８１］から［１８６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0197】

［１８８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上である、［１８７］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0198】

［１８９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０μｍｏｌ／Ｌ以上である、［１８７］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0199】

［１９０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１８７］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0200】

［１９１］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［１８７］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0201】

［１９２］フェロシアン化物が、フェロシアン化カリウムである、［１４０］から［１９１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0202】

［１９３］プロテアーゼがエンドペプチダーゼである、［１４０］から［１９２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0203】

［１９４］プロテアーゼがセリンエンドペプチダーゼである、［１４０］から［１９２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0204】

［１９５］プロテアーゼがＢａｃｉｌｌｕｓ由来又はＴｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ由来である、［１４０］から［１９２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0205】

［１９６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物に、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含有せしめない、［１４０］から［１９５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0206】

［１９７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が２℃以上１０℃以下で保存される、［１４０］から［１９６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0207】

［１９８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が２℃以上１０℃以下で少なくとも１か月間保存可能である、［１４０］から［１９７］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0208】

［１９９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用可能である、［１４０］から［１９８］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0209】

［２００］４－アミノアンチピリンとトリンダー試薬とが組み合わされることにより、糖化タンパク質が存在する際に発色反応が生じ、発色反応に対応する吸光度から算出される濃度が０．１ｇ／ｄＬ以上７．５ｇ／ｄＬ以下の糖化タンパク質の検出に、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物が使用可能である［１９９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0210】

［２０１］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して９２％以上１００％以下である、［１９９］又は［２００］に記載の糖化タンパク質測定試薬の安定化方法。

【0211】

［２０２］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８８％以上１００％以下である、［１９９］又は［２００］に記載の糖化タンパク質測定試薬の安定化方法。

【0212】

［２０３］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８７％以上１００％以下である、［１９９］又は［２００］に記載の糖化タンパク質測定試薬の安定化方法。

【0213】

［２０４］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して７８％以上１００％以下である、［１９９］又は［２００］に記載の糖化タンパク質測定試薬の安定化方法。

【0214】

［２０５］トリンダー試薬含有部分組成物が液状である、［１９９］から［２０４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0215】

［２０６］トリンダー試薬含有部分組成物が包装されている、［１９９］から［２０５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0216】

［２０７］トリンダー試薬がＮ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン２ナトリウムである、［１９９］から［２０６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0217】

［２０８］糖化タンパク質が糖化アルブミンである、［１４０］から［２０７］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法。

【0218】

［２０９］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法であって、
（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を調製することと、
４－アミノアンチピリン含有部分組成物を保存することと、
を含む、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0219】

［２１０］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物が液状である、［２０９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0220】

［２１１］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を包装して保存する、［２０９］又は［２１０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0221】

［２１２］安定化剤がプロピレングリコールである、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0222】

［２１３］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0223】

［２１４］プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（４）式を満たす、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (4)

【0224】

［２１５］安定化剤がプロピレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0225】

［２１６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２１５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0226】

［２１７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が３５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２１５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0227】

［２１８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２１５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0228】

［２１９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度が６０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２１５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0229】

［２２０］安定化剤がトリメチレングリコールであり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0230】

［２２１］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２２０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0231】

［２２２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が４５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２２０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0232】

［２２３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２２０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0233】

［２２４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度が７０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２２０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0234】

［２２５］安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0235】

［２２６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２２５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0236】

［２２７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２２５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0237】

［２２８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２２５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0238】

［２２９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２２５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0239】

［２３０］安定化剤が３－カルボキシフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0240】

［２３１］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0241】

［２３２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が０．５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0242】

［２３３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0243】

［２３４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0244】

［２３５］安定化剤が３－カルバモイルフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0245】

［２３６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0246】

［２３７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２３５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0247】

［２３８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0248】

［２３９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度が２ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２３５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0249】

［２４０］安定化剤が３－アセトアミドフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0250】

［２４１］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２４０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0251】

［２４２］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２４０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0252】

［２４３］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２４０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0253】

［２４４］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２４０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0254】

［２４５］安定化剤が３－アミノフェニルボロン酸であり、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２０９］から［２１１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0255】

［２４６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２４５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0256】

［２４７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である、［２４５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0257】

［２４８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２４５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0258】

［２４９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度が５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である、［２４５］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0259】

［２５０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物がキレート剤をさらに含む、［２０９］から［２４９］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0260】

［２５１］キレート剤が、クエン酸及びその塩、リンゴ酸及びその塩、ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩、シュウ酸及びその塩、ニトリロ三酢酸及びその塩、並びにＮ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩からなる群から選択される少なくとも１種である、［２５０］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0261】

［２５２］キレート剤が、クエン酸又はその塩である、［２５０］又は［２５１］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0262】

［２５３］キレート剤が、ナトリウム塩である、［２５０］から［２５２］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0263】

［２５４］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤がプロピレングリコールである、［２５０］又は［２５１］に記載の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0264】

［２５５］キレート剤がクエン酸ナトリウムであり、安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である、［２５０］又は［２５１］に記載の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0265】

［２５６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［２５０］から［２５５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法の保存方法。

【0266】

［２５７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が５μｍｏｌ／Ｌ以上である、［２５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0267】

［２５８］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０μｍｏｌ／Ｌ以上である、［２５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0268】

［２５９］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［２５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0269】

［２６０］４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるキレート剤の濃度が１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下である、［２５６］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0270】

［２６１］フェロシアン化物が、フェロシアン化カリウムである、［２０９］から［２６０］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0271】

［２６２］プロテアーゼがエンドペプチダーゼである、［２０９］から［２６１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0272】

［２６３］プロテアーゼがセリンエンドペプチダーゼである、［２０９］から［２６１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0273】

［２６４］プロテアーゼがＢａｃｉｌｌｕｓ由来又はＴｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ由来である、［２０９］から［２６１］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0274】

［２６５］糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含有せしめない、［２０９］から［２６４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0275】

［２６６］４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃以上１０℃以下で保存する、［２０９］から［２６５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0276】

［２６７］４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃以上１０℃以下で少なくとも１か月間保存する、［２０９］から［２６６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0277】

［２６８］保存された４－アミノアンチピリン含有部分組成物が、糖化アミノ酸オキシダーゼ、ペルオキシダーゼ、及びトリンダー試薬を含むトリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用可能である、［２０９］から［２６７］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0278】

［２６９］４－アミノアンチピリンとトリンダー試薬とが組み合わされることにより、糖化タンパク質が存在する際に発色反応が生じ、発色反応に対応する吸光度から算出される濃度が０．１ｇ／ｄＬ以上７．５ｇ／ｄＬ以下の糖化タンパク質の検出に、保存された４－アミノアンチピリン含有部分組成物が使用可能である、［２６８］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0279】

［２７０］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して９２％以上１００％以下である、［２６８］又は［２６９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0280】

［２７１］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８８％以上１００％以下である、［２６８］又は［２６９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0281】

［２７２］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で６か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して８７％以上１００％以下である、［２６８］又は［２６９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0282】

［２７３］液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を１０℃で１２か月間保存した後、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度残存率が、液状の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を２℃で１か月間保存した場合と比較して７８％以上１００％以下である、［２６８］又は［２６９］に記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0283】

［２７４］トリンダー試薬含有部分組成物が液状である、［２６８］から［２７３］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0284】

［２７５］トリンダー試薬含有部分組成物が包装されている、［２６８］から［２７４］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0285】

［２７６］トリンダー試薬がＮ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン，２ナトリウムである、［２６８］から［２７５］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【0286】

［２７７］糖化タンパク質が糖化アルブミンである、［２０９］から［２７６］のいずれかに記載の糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法。

【発明の効果】

【0287】

本発明によれば、４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含みながら安定な糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物、糖化タンパク質測定試薬、糖化タンパク質の測定方法、糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の安定化方法、及び糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存方法を提供することが可能である。

【発明を実施するための形態】

【0288】

以下、本発明の好適な実施の形態（以下において、「実施形態」という。）について詳細に説明する。なお以下に示す実施形態は、この発明の技術的思想を具体化するための装置や方法を例示するものであって、この発明の技術的思想は構成部材の組み合わせ等を下記のものに特定するものではない。この発明の技術的思想は、特許請求の範囲において種々の変更を加えることができる。

【0289】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、（１）４－アミノアンチピリン、フェロシアン化物、及びプロテアーゼを含み、かつ、（２）プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸からなる群から選択される少なくとも一つの安定化剤をさらに含む。

【0290】

本開示において、試薬とは、測定対象を測定する試薬であり、例えば部分組成物の集合体である。試薬は、それのみで測定対象を検出可能である。部分組成物とは、試薬の一部を構成する組成物である。部分組成物は、それのみでは測定対象を測定することができない。

【0291】

糖化タンパク質は、例えば糖化アルブミン（ＧＡ）、糖化ヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ等）である。

【0292】

糖化アルブミン等の糖化タンパク質を測定する際、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、トリンダー試薬含有部分組成物と組み合わせて使用され得る。トリンダー試薬含有部分組成物は、糖化アミノ酸オキシダーゼ、トリンダー試薬、及びペルオキシダーゼを含み得る。実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、糖化アミノ酸オキシダーゼ、トリンダー試薬、及びペルオキシダーゼを含まないことが好ましい。

【0293】

実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物は液状であってもよく、トリンダー試薬含有部分組成物と混合されるまで保存されてもよい。トリンダー試薬含有部分組成物は液状であってもよく、実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物と混合されるまで保存されてもよい。実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物の含有物は、予め混合されていてもよい。トリンダー試薬含有部分組成物の含有物は、予め混合されていてもよい。実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物とトリンダー試薬含有部分組成物は、それぞれ、包装されてもよい。

【0294】

実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、トリンダー試薬含有部分組成物と、測定対象の検体（サンプル検体）に含まれるグルコースが結合したタンパク質（糖化タンパク質）と、を接触させると、糖化タンパク質がプロテアーゼにより糖化アミノ酸あるいは糖化ペプチドに分解される。糖化アミノ酸あるいは糖化ペプチドは、糖化アミノ酸オキシダーゼによりアミノ酸あるいはペプチドとグルコソンに分解される。また、この際、糖化アミノ酸オキシダーゼにより、水と酸素が反応して、過酸化水素が生じる。トリンダー試薬と、４－アミノアンチピリンと、は、過酸化水素及びペルオキシダーゼの存在下、酸化縮合反応し呈色する。例えばトリンダー試薬として、Ｎ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン，２ナトリウム（ＴＯＤＢ）を用いた場合、青紫色に呈色する発色反応が生じる。青紫色の呈色は、波長５４６ｎｍにおける吸光度の測定により検出される。波長５４６ｎｍにおける吸光度に基づき、検体に含まれる糖化タンパク質の濃度が定量化される。

【0295】

糖化タンパク質の濃度を測定する際、サンプル検体に最初にトリンダー試薬含有部分組成物を添加すると、サンプル検体に混在する遊離の糖化アミノ酸あるいは糖化ペプチドが消去されるので、好ましいことが知られている。実施形態に係る部分組成物の通常の使用方法においては、サンプル検体に最初にトリンダー試薬含有部分組成物を添加し、数分、例えば５分から１０分程度、サンプル検体とトリンダー試薬含有部分組成物の混合物を放置して、その後、当該混合物に実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物を添加し、発色の程度を測定することによって、糖化タンパク質が測定できる。ただし、場合によっては、サンプル検体に添加する際に、トリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有部分組成物とを同時に添加混合してもよいし、トリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有部分組成物を予め添加して直ぐに使用してもよいし、先ず４－アミノアンチピリン含有部分組成物をサンプル検体に添加し、その後、トリンダー試薬含有部分組成物を添加してもよい。

【0296】

糖化タンパク質を定量するためには、通常、糖化タンパク質濃度が既知である１つ以上の検量用物質（キャリブレーター）を測定し、キャリブレーションを行うことが多い。キャリブレーターの作成方法やキャリブレーション方法としては公知情報に基づき当業者は実施することができるが、例えば、国際公開第２００１／０９４６１８号や特開２００５－２６１３８３号公報等の記載を参考に適宜実施することができる。また、測定試薬保存中の感度低下による測定値の変動を補正するために、例えば１か月に１回等定期的にキャリブレーションを行うのが通常である。

【0297】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に含まれるプロテアーゼとしては、ヒトタンパク質由来の糖化タンパク質を分解して糖化アミノ酸又は糖化ペプチドを有効に生成するものであればよい。プロテアーゼは、例えば、エンドペプチダーゼである。エンドペプチダーゼの例としては、セリンエンドペプチダーゼが挙げられる。プロテアーゼは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、トリチラチウム（Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ）属、及びアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属等の微生物由来プロテアーゼが好ましい。バチルス属由来プロテアーゼの例としては、アルカラーゼ、ニュートラーゼ、エスペラーゼ、サビナーゼ（以上、ノボザイムズ社製）ビオプラーゼ ＯＰ、ビオプラーゼ ＳＰ－２０ＦＧ、ビオプラーゼ ３０Ｌ、ビオプラーゼ ３０Ｇ、ビオプラーゼ ＡＬ－１５ＦＧ、ビオプラーゼ ＡＰＬ－３０、プロテアーゼＣＬ－１５（以上、ナガセケムテックス社製）、プロチン ＳＤ ＰＣ－１０ＣＦ、サモアーゼ ＰＣ－１０Ｆ、プロチン ＳＤ－ＡＹ１０、プロチン ＳＤ－ＮＹ１０（以上、アマノエンザイム社製）、Ｍｕｌｔｉｆｅｃｔ ＰＲ６Ｌ、Ｏｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｌ、Ｏｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｘ、Ｏｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｅ（以上、ダニスコジャパン社製）、オリエンターゼ ２２ＢＦ、ヌクレイシン、オリエンターゼ１０ＮＬ、オリエンターゼ９０Ｎ（以上、エイチビイアイ社製）、アロアーゼ ＡＰ－１０、アロアーゼ ＮＰ－１０、アロアーゼ ＸＡ－１０（以上、ヤクルト薬品工業社製）、サブチリシン、細菌プロテイナーゼ タイプ ＸＸＩＶ、プロテアーゼ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ由来 タイプ ＶＩＩＩ、プロテアーゼ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ由来 タイプ ＩＸ、サーモリシン Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来 タイプ Ｘ、プロテアーゼ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ由来 タイプ ＸＶ、細菌プロテイナーゼ タイプ ＸＸＩＶ、プロテアーゼ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．由来 タイプ ＸＸＶＩＩ、プロテアーゼ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ由来 タイプ ＸＸＸＩ（以上、シグマ社製）、サーモリシン（富士フイルム和光純薬社製）、ディスパーゼＩ、ディスパーゼＩＩ（以上、合同酒精社製）、Ｎｅｕｔｒａｌ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ（ＴＯＹＯＢＯ ＵＳＡ社製）等が挙げられる。ストレプトマイセス属由来プロテアーゼの例としては、プロナーゼ、プロテアーゼ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ由来 タイプ ＸＩＶ（以上、シグマ社製）、Ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ（ＴＯＹＯＢＯ ＵＳＡ社製）、デナチーム ＰＭＣ ＳＯＦＴＥＲ（ナガセケムテックス社製）等が挙げられる。トリチラチウム属由来プロテアーゼの例としては、プロテイナーゼＫ（シグマ社製）等が挙げられる。アスペルギルス属由来プロテアーゼの例としては、プロテアーゼ Ｐ「アマノ」３ＳＤ、プロテアーゼ Ａ「アマノ」ＳＤ、プロテアーゼ Ｍ「アマノ」ＳＤ（以上、アマノエンザイム社製）、スミチーム ＭＰ、スミチーム ＬＰＬ－Ｇ、スミチーム ＬＰ５０Ｄ、スミチーム ＡＰ（以上、新日本化学工業社製）、オリエンターゼ ＯＰ、オリエンターゼ ＡＹ（以上、エイチビイアイ社製）、プロテアーゼ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓａｉｔｏｉ由来 タイプ ＸＩＩＩ、プロテアーゼ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｏｊａｅ由来 タイプ ＸＩＸ、プロテアーゼ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｍｅｌｌｅｕｓ由来 タイプ ＸＸＩＩＩ、プロテアーゼ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ由来（以上、シグマ社製）、デナチーム ＡＰ、デナプシン ２Ｐ（以上、ナガセケムテックス社製）、パンチダーゼ ＮＰ－２、パンチダーゼ ＭＰ、パンチダーゼ Ｐ（以上、ヤクルト薬品工業社製）等が挙げられる。これらのうち、アルカラーゼ、ビオプラーゼ ＳＰ－２０ＦＧ、プロチン ＳＤ－ＡＹ１０、Ｍｕｌｔｉｆｅｃｔ ＰＲ６Ｌ、Ｏｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｌ、アロアーゼ ＸＡ－１０、サブチリシン、プロナーゼ、プロテイナーゼＫ、ＰＲ"Ａｍａｎｏ"Ｋが好適である。

【0298】

また別の観点から実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に含まれるプロテアーゼとしては、例えば、酵素番号がＥＣ：３．４、又はＥＣ：３．４．２１のプロテアーゼが好ましい例として挙げられる。またＥＣ：３．４．２１．６２のプロテアーゼもさらに好ましい例として挙げられる。

【0299】

拘束されるものではないが、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、及び３－アミノフェニルボロン酸は、プロテアーゼを安定化するものと考えられる。安定化剤は、有効濃度、溶解度、及びコスト等の観点から、好ましくは、プロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸である。

【0300】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物はジメチルスルホキシドを含まなくてもよい。

【0301】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に含まれるフェロシアン化物は、検体に含まれるビリルビンが糖化タンパク質の測定に影響を与えることを抑制する。フェロシアン化物の例としては、フェロシアンイオンを含有するいずれの化合物であってもよく、フェロシアン化カリウム（Ｆｅ（ＣＮ）₆Ｋ₄）及びフェロシアン化ナトリウム（Ｆｅ（ＣＮ）₆Ｎａ₄）などが挙げられる。

【0302】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、キレート剤をさらに含んでいてもよい。キレート剤は、糖化タンパク質測定試薬の感度の低下を抑制する。キレート剤の塩を使用すると、ｐＨ変動が抑制されるため好ましい。キレート剤の例としては、クエン酸及びその塩、リンゴ酸及びその塩、ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩、シュウ酸及びその塩、ニトリロ三酢酸及びその塩、並びにＮ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩が挙げられる。好ましいキレート剤は、例えば、クエン酸及びその塩である。

【0303】

キレート剤の塩としては、塩を形成するものであればその種類は特に限定されず、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれであってもよく、双性イオンの形態をとっていてもよい。塩基付加塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基との塩基付加塩、あるいはメチルアミン、２－アミノエタノール、アルギニン、リジン、若しくはオルニチン等の有機塩基との塩基付加塩などが含まれる。これらのうち無機塩基との塩基付加塩が好適である。なお、代表的な塩基付加塩としては、ナトリウム塩が例示される。

【0304】

キレート剤の濃度は、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を安定化するのに十分な濃度であればよく、下限としては、５μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１０μｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。また安定化の効果の程度は飽和する場合もあるので、費用等の観点から上限を決めることもでき、例えば、上限としては、１０００ｍｍｏｌ／Ｌ以下、好ましくは１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下が例示される。

【0305】

有効濃度、溶解度、及びコスト等の観点から、安定化剤とキレート剤の好ましい組み合わせは、プロピレングリコールとクエン酸ナトリウム、あるいは２－カルボキシフェニルボロン酸とクエン酸ナトリウムである。

【0306】

トリンダー試薬含有部分組成物に含まれる糖化アミノ酸オキシダーゼとしてはヒトタンパク質由来の糖化アミノ酸あるいは糖化ペプチドに有効に作用する糖化アミノ酸オキシダーゼであればよく、その例としては、ギベレラ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、アクレモニウム（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ）属、デバリオマイゼス（Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ）属、及びコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属由来の糖化アミノ酸オキシダーゼ、並びにその遺伝子組み換え型糖化アミノ酸オキシダーゼ変異体等が挙げられる。さらに具体的には、ケトアミンオキシダーゼ（ＫＡＯＤ、旭化成ファーマ社製、Ｃｌｉｎｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ、２００２年、３２４、ｐ．６１－７１に記載）、変異型ＫＡＯＤ（ＫＡＯＤ－Ｖ、旭化成ファーマ社製、特許文献１に記載）、及びＦＡＯＤ－Ｅ（キッコーマン社製）等が挙げられる。

【0307】

トリンダー試薬含有部分組成物に含まれるトリンダー試薬の例としては、具体的にはＮ－（３－スルホプロピル）アニリンナトリウム一水和物（ＨＡＬＰＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（３－スルホプロピル）－３－メチルアニリンナトリウム一水和物（ＴＯＰＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３，５－ジメトキシアニリンナトリウム一水和物（ＭＡＯＳ）、Ｎ－（３－スルホプロピル）－３，５－ジメトキシアニリンナトリウム一水和物（ＨＤＡＰＳ）、Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３，５－ジメトキシアニリンナトリウム（ＨＤＡＯＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（３－スルホプロピル）－３，５－ジメトキシアニリンナトリウム一水和物（ＤＡＰＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３，５－ジメトキシアニリンナトリウム（ＤＡＯＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（３－スルホプロピル）アニリンナトリウム（ＡＬＰＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（３－スルホプロピル）－３－メトキシアニリンナトリウム一水和物（ＡＤＰＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３－メトキシアニリンナトリウム二水和物（ＡＤＯＳ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－ｍ－トルイジン（ＴＯＯＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン二ナトリウム（ＴＯＤＢ）、及び３－ヒドロキシ－２，４，６－トリヨード安息香酸（ＨＴＩＢ）等が挙げられる。これらのうち、ＴＯＰＳ、ＡＬＰＳ、ＴＯＯＳ、及びＴＯＤＢが好適である。

【0308】

ＴＯＰＳを用いた場合の発色波長は５５０ｎｍである。ＡＬＰＳを用いた場合の発色波長は５６１ｎｍである。ＴＯＯＳを用いた場合の発色波長は５５５ｎｍである。ＴＯＤＢを用いた場合の発色波長は５５０ｎｍである。ただし、吸光度を測定する装置が測定する波長は、発色波長と厳密に一致している必要はない。例えば、波長５４６ｎｍにおける吸光度を測定する装置で、ＴＯＰＳ、ＡＬＰＳ、ＴＯＯＳ、及びＴＯＤＢのそれぞれを用いた場合の発色反応を測定することが可能である。

【0309】

なお、トリンダー試薬と４－アミノアンチピリンとを同一試薬中に含めると、自然に酸化縮合反応して保存中に呈色するため、トリンダー試薬はトリンダー試薬含有部分組成物に含有され、４－アミノアンチピリンは実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物に含有される。

【0310】

従来、測定試薬や検体などに由来する過酸化物によって非特異的な発色反応が起こり、この非特異的な発色反応による吸光度が測定精度を低下させることがある。この非特異的な発色を試薬ブランクという。これに対し、トリンダー試薬含有部分組成物に含まれるペルオキシダーゼは、トリンダー試薬と４－アミノアンチピリンの酸化縮合反応を促進するとともに、過酸化物を消去して、試薬ブランクを低減する機能を有する。ペルオキシダーゼはいずれの由来のものも使用でき、その例としては、西洋わさび由来等の植物由来のペルオキシダーゼ、及び細菌由来、カビ由来などの微生物由来のペルオキシダーゼ等が挙げられる。具体的には、Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｆｒｏｍ ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ（Ｓｉｇｍａ社製）、ペルオキシダーゼ、西洋わさび由来（和光純薬社製）、ＰＯ"ＡＭＡＮＯ"３（天野エンザイム社製）、及びＰｅｒｏｘｉｄａｓｅ（東洋紡エンザイム社製）等が挙げられる。

【0311】

実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物及びトリンダー試薬含有部分組成物のそれぞれは、溶媒として、水及び有機溶媒等をさらに含んでいてもよい。有機溶媒の例としては、アルコール系溶媒（炭素数１～１８のアルコールが挙げられ、具体的には、メタノール、ブタノール、エチレングリコール、及びグリセリン等）、ケトン系溶媒（アセトン、及びメチルエチルケトン等）、並びにエーテル系溶媒等（テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、エチレングリコールモノアルキルエーテル、及び環状エーテル等）が挙げられる。

【0312】

また、実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物及びトリンダー試薬含有部分組成物のそれぞれは、緩衝剤を含んでいてもよい。緩衝剤の例としては、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－２－アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、３－［４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル］プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ）、２－［４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、２－ヒドロキシ－３－［４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジニル］プロパンスルホン酸（ＨＥＰＰＳＯ）、Ｎ－（２－アセトアミド）－２－アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、Ｎ－（２－アセトアミド）イミノジ酢酸（ＡＤＡ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）－２－アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、ビス（２－ヒドロキシエチル）イミノトリス（ヒドロキシメチル）メタン（Ｂｉｓ－Ｔｒｉｓ）、Ｎ－シクロヘキシル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）、Ｎ－シクロヘキシル－２－ヒドロキシ－３－アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）、Ｎ－シクロヘキシル－２－アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、３－［Ｎ，Ｎ－ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ］－２－ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）、２－モルフォリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ）、３－モルフォリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、２－ヒドロキシ－３－モルフォリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、ピペラジン－１，４－ビス（２－エタンスルホン酸（ＰＩＰＥＳ）、ピペラジン－１，４－ビス（２－ヒドロキシ－３－プロパンスルホン酸）（ＰＯＰＳＯ）、Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）、２－ハイドロキシ－Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－３－アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳＯ）、Ｎ－［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］グリシン（Ｔｒｉｃｉｎｅ）、及びトリスヒドロキシメチルアミノメタン（Ｔｒｉｓ）、等を用いた緩衝剤、又はホウ酸、アンモニア、グリシン、炭酸、酢酸、リン酸、ジエタノールアミン、ｐ－フェノールスルホン酸、２－アミノ－２－メチルプロパン－１，３－ジオール、カコジル酸、マレイン酸、ベロナール及び３，３－ジメチルグルタル酸等が挙げられる。

【0313】

また、実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物及びトリンダー試薬含有部分組成物のそれぞれは、その他の添加物として防腐剤、酵素の安定化剤、界面活性剤、及びその他の酵素等をさらに含んでいてもよい。防腐剤の例としては、アジ化ナトリウム、及びプロクリン（ＰｒｏＣｌｉｎ）等が挙げられる。酵素の安定化剤としては、保存中に酵素を安定化させる安定化剤であればいずれも利用可能であるが、例えば、シクロデキストリン、スクロース、マンノース、フルクトース、ラクトース、ガラクトース及びトレハロース等の糖、ソルビトール、マンニトール等の糖アルコールが挙げられる。界面活性剤としては、陽イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、及び非イオン性界面活性剤の何れを用いてもよく、例えば非イオン性界面活性剤の例としては、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、及びポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー等が挙げられる。また、両性界面活性剤の例としては、アルキルベタイン、酢酸ベタイン、スルホベタイン、及びアルキルアミンオキサイド等が挙げられる。その他の酵素としては、例えばアスコルビン酸オキシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ、カタラーゼ等が挙げられ、これは検体中に含まれるアスコルビン酸やビリルビン、また試薬中に含まれる過酸化物が測定値に影響を与えるのを抑制するために用いられる。

【0314】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に含まれる４－アミノアンチピリンの濃度は、生じた過酸化水素と反応するのに十分な濃度であればよく、下限としては、０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは０．１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは０．５ｍｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。また、上限としては、コストの観点から、１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下、好ましくは５０ｍｍｏｌ／Ｌ以下、さらに好ましくは１０ｍｍｏｌ／Ｌ以下が例示される。フェロシアン化物の濃度は、検体に含まれるビリルビンが糖化タンパク質の測定に与える影響を抑制するのに十分な濃度であればよく、下限としては、０．００１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、より好ましくは０．０２ｍｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。また、コストの観点から、上限としては、１０ｍｍｏｌ／Ｌ以下、好ましくは１ｍｍｏｌ／Ｌ以下、より好ましくは０．５ｍｍｏｌ／Ｌ以下が例示される。

【0315】

プロテアーゼの濃度は、適当な時間内に糖化タンパク質を分解できる濃度であればよく、下限としては、１００Ｕ／ｍＬ以上、好ましくは１ｋＵ／ｍＬ以上、より好ましくは１０ｋＵ／ｍＬ以上が例示される。また、上限としては、コストの観点から、１０００ｋＵ／ｍＬ以下、好ましくは２００ｋＵ／ｍＬ以下、より好ましくは１００ｋＵ／ｍＬ以下が例示される。

【0316】

安定化剤の濃度は、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物を安定化するのに十分な濃度であればよい。また安定化の効果の程度が飽和する場合もあるので、費用等の観点から安定化剤の濃度の上限を決めてもよい。

【0317】

安定化剤がプロピレングリコールである場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度の下限は、例えば、３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは３５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるプロピレングリコールの濃度の上限は、例えば、８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは６０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0318】

安定化剤がトリメチレングリコールである場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度の下限は、例えば、４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは４５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。また、４－アミノアンチピリン含有部分組成物におけるトリメチレングリコールの濃度の上限は、例えば、８０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは７０ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0319】

安定化剤が２－カルボキシフェニルボロン酸である場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度の下限は、例えば、０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは０．４％ｗｔ／ｖｏｌ以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物における２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度の上限は、例えば、１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0320】

安定化剤が３－カルボキシフェニルボロン酸である場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度の下限は、例えば、０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは０．５ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度の上限は、例えば、１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0321】

安定化剤が３－カルバモイルフェニルボロン酸である場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度の下限は、例えば、０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度の上限は、例えば、５ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは２ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0322】

安定化剤が３－アセトアミドフェニルボロン酸である場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度の下限は、例えば、０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度の上限は、例えば、１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0323】

安定化剤が３－アミノフェニルボロン酸である場合、４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度の下限は、例えば、０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上、好ましくは０．４ｗｔ／ｖｏｌ％以上である。４－アミノアンチピリン含有部分組成物における３－アミノフェニルボロン酸の濃度の上限は、例えば、１０ｗｔ／ｖｏｌ％以下、好ましくは５ｗｔ／ｖｏｌ％以下である。

【0324】

まとめると、安定化剤の濃度の下限の例は、以下のとおりである。
プロピレングリコール：３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上
トリメチレングリコール：４０ｗｔ／ｖｏｌ％以上
２－カルボキシフェニルボロン酸：０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上
３－カルボキシフェニルボロン酸：０．３ｗｔ／ｖｏｌ％以上
３－カルバモイルフェニルボロン酸：０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％以上
３－アセトアミドフェニルボロン酸：０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上
３－アミノフェニルボロン酸：０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上

【0325】

濃度の下限が最も低い３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度の下限を１に規格化すると、他の安定化剤の濃度の下限は、以下のとおりである。
プロピレングリコール：６００
トリメチレングリコール：８００
２－カルボキシフェニルボロン酸：４
３－カルボキシフェニルボロン酸：６
３－カルバモイルフェニルボロン酸：１
３－アセトアミドフェニルボロン酸：２
３－アミノフェニルボロン酸：４

【0326】

例えば、プロピレングリコールは、下限において、３－カルバモイルフェニルボロン酸の６００倍の濃度が必要であるので、プロピレングリコールの安定化剤として効果は、３－カルバモイルフェニルボロン酸の１／６００である。同様に、他の安定化剤の効果を、３－カルバモイルフェニルボロン酸を基準にして計算すると、以下のとおりである。
プロピレングリコール：１／６００
トリメチレングリコール：１／８００
２－カルボキシフェニルボロン酸：１／４
３－カルボキシフェニルボロン酸：１／６
３－カルバモイルフェニルボロン酸：１
３－アセトアミドフェニルボロン酸：１／２
３－アミノフェニルボロン酸：１／４

【0327】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物に、これらの安定化剤を組み合わせて添加する場合、組み合わされて添加された安定化剤の効果が、０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％の３－カルバモイルフェニルボロン酸と同等以上であればよい。ここで、プロピレングリコールの濃度をａ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、トリメチレングリコールの濃度をｂ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、２－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｃ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルボキシフェニルボロン酸の濃度をｄ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－カルバモイルフェニルボロン酸の濃度をｅ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アセトアミドフェニルボロン酸の濃度をｆ（ｗｔ／ｖｏｌ％）、３－アミノフェニルボロン酸の濃度をｇ（ｗｔ／ｖｏｌ％）として、ａからｇが下記（５）式を満たす場合、組み合わされて添加された安定化剤の効果が、０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％の３－カルバモイルフェニルボロン酸の効果と同等以上になる。ただし、組み合わされる安定化剤によっては、左辺から算出される値が０．０５未満であっても、組み合わされて添加された安定化剤の効果が、０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％の３－カルバモイルフェニルボロン酸の効果と同等以上になる場合もあり得る。
a*(1/600)+b*(1/800)+c*(1/4)+d*(1/6)+e*(1)+f*(1/2)+g*(1/4)≧0.05 (5)

【0328】

例えば、安定化剤どうしの組み合わせとしては、濃度１５ｗｔ／ｖｏｌ％以上のプロピレングリコールと、濃度０．１ｗｔ／ｖｏｌ％以上の２－カルボキシフェニルボロン酸と、の組み合わせが挙げられる。

【0329】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物がキレート剤を含む場合、クエン酸及びその塩の濃度の下限としては、１０μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１００μｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは１ｍｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。リンゴ酸及びその塩の濃度の下限としては、１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは５ｍｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは１０ｍｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。ニトリロトリス（メチルホスホン酸）及びその塩の下限としては、５μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１０μｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。シュウ酸及びその塩の濃度の下限としては、１０μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１００μｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは５００μｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。ニトリロ三酢酸及びその塩の濃度の下限としては、１０μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１００μｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは５００μｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）イミノ二酢酸及びその塩の濃度の下限としては、５μｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは１０μｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは５０μｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。

【0330】

フェロシアン化物に対するキレート剤の濃度比は、糖化タンパク質測定試薬の安定化作用を得る観点から、下限としては、０．００１以上、好ましくは０．０１以上、より好ましくは０．１以上が例示される。また、溶解性の観点から、上限としては、１００００以下、好ましくは１０００以下、より好ましくは２００以下が例示される。

【0331】

トリンダー試薬含有部分組成物に含まれる糖化アミノ酸オキシダーゼの濃度は、生じた糖化アミノ酸または糖化ペプチドと反応するのに十分な濃度であればよく、下限としては、０．１Ｕ／ｍＬ以上、好ましくは１Ｕ／ｍＬ以上、さらに好ましくは１０Ｕ／ｍＬ以上が例示される。また、コストの観点から、上限としては、１０００Ｕ／ｍＬ以下、好ましくは２００Ｕ／ｍＬ以下、さらに好ましくは１００Ｕ／ｍＬ以下が例示される。ペルオキシダーゼの濃度は、生じた過酸化水素と反応するのに十分な濃度であればよく、下限としては、０．０１Ｕ／ｍＬ以上、好ましくは０．１Ｕ／ｍＬ以上、さらに好ましくは１Ｕ／ｍＬ以上が例示される。また、コストの観点から、上限としては、５００Ｕ／ｍＬ以下、好ましくは１００Ｕ／ｍＬ以下、さらに好ましくは５０Ｕ／ｍＬ以下が例示される。トリンダー試薬の濃度は、生じた過酸化水素と反応するのに十分な濃度であればよく、下限としては、０．０１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、好ましくは０．１ｍｍｏｌ／Ｌ以上、さらに好ましくは０．５ｍｍｏｌ／Ｌ以上が例示される。また、上限としては、コストの観点から、１００ｍｍｏｌ／Ｌ以下、好ましくは１０ｍｍｏｌ／Ｌ以下、さらに好ましくは５ｍｍｏｌ／Ｌ以下が例示される。

【0332】

安定化剤を含んでいない、糖化タンパク質測定試薬用の部分組成物は、保存安定性に問題が生じ得る。これに対し、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、安定化剤を含んでいるため、長期にわたって保存安定性が良好である。そのため、長期にわたって、糖化タンパク質を正確に測定することが可能である。糖化タンパク質測定時に、例えば、糖化アルブミン等の糖化タンパク質の濃度が７．５ｇ／ｄＬ以下、好ましくは７ｇ／ｄＬ以下、さらに好ましくは６ｇ／ｄＬ以下のように低い場合、安定化剤による保存安定性の効果が顕著に表れる。測定可能な糖化アルブミン等の糖化タンパク質の濃度の下限としては、０．１ｇ／ｄＬ以上、好ましくは０．１５ｇ／ｄＬ以上、さらに好ましくは０．２ｇ／ｄＬ以上が例示される。

【0333】

実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、流通に要する実用的な期間の間、安定的に保存することが可能である。例えば、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物は、少なくとも１か月間、保存可能である。実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存期間の下限としては、１日以上、１か月以上、６ヶ月以上、あるいは１年以上が例示される。また、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存期間の上限としては、７日以下、６か月以下、１年３か月以下、１年６か月以下、あるいは２年以下が例示される。実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存温度の下限としては、２℃以上、４℃以上、あるいは５℃以上が例示される。また、実施形態に係る糖化タンパク質測定試薬用の４－アミノアンチピリン含有部分組成物の保存温度の上限としては、１０℃以下、８℃以下、あるいは５℃以下が例示される。

【0334】

２℃で１か月間保存された実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、５℃で１か月間保存されたトリンダー試薬含有部分組成物とを組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度に対する、所定の温度で所定の期間保存された実施形態に係る４－アミノアンチピリン含有部分組成物と、５℃で所定の期間保存されたトリンダー試薬含有部分組成物とを組み合わせて使用した場合の糖化タンパク質の測定感度の比を、感度残存率という。

【0335】

所定の温度が２℃で所定の期間が６か月間である場合、感度残存率の下限としては、９２％以上、あるいは９３％以上が例示される。上限としては、１００％以下、９９％以下、あるいは９８％以下が例示される。

【0336】

所定の温度が２℃で所定の期間が１２か月間である場合、感度残存率の下限としては、８８％以上、あるいは８９％以上が例示される。上限としては、１００％以下、９８％以下、あるいは９６％以下が例示される。

【0337】

所定の温度が１０℃で所定の期間が６か月間である場合、感度残存率の下限としては、８７％以上、８８％以上、あるいは８９％以上が例示される。上限としては、１００％以下、９９％以下、あるいは９８％以下が例示される。

【0338】

所定の温度が１０℃で所定の期間が１２か月間である場合、感度残存率の下限としては、７８％以上、８０％以上、あるいは８２％以上が例示される。上限としては、１００％以下、９８％以下、あるいは９６％以下が例示される。

【実施例】

【0339】

次に、本発明の実施例を説明するが、本発明は以下の実施例に何ら限定されるものではないことはもちろんである。

【0340】

［４－アミノアンチピリン含有部分組成物における４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定方法］
（濃度測定用試薬の組成）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、塩酸でｐＨ７．５に調整して、濃度測定用試薬を得た。
１００ｍｍｏｌ／Ｌ トリスヒドロキシメチルアミノメタン（メルク社製）
２ｍｍｏｌ／Ｌ Ｎ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン２ナトリウム（同仁化学社製）
５Ｕ／ｍＬ ペルオキシダーゼ（アマノエンザイム社製）
０．０１７５ｖｏｌ／ｖｏｌ％ 過酸化水素（国産化学社製）

【0341】

（４－アミノアンチピリン含有部分組成物の希釈）
後述する各実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を精製水で適宜希釈した。

【0342】

（測定機器）
７１８０形日立自動分析装置（日立ハイテクフィールディング社製）
主波長を５４６ｎｍ、副波長を７００ｎｍと設定し、波長５４６ｎｍにおける吸光度をＡ₅₄₆、波長７００ｎｍにおける吸光度をＡ₇₀₀として、４－アミノアンチピリンの濃度の算出に用いる吸光度Ａ_Aを、下記（６）式で定義した。
Ａ_A＝Ａ₅₄₆－Ａ₇₀₀ （６）

【0343】

（測定手順）
３７℃にインキュベートされた濃度測定用試薬１８０μＬに適宜希釈した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物４．５μＬを添加し、３７℃で５分間反応させた後、上記（６）式で与えられる吸光度Ａ_Aを測定した。保存初日の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いた際の吸光度を１００％として、保存後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いた際の吸光度の残存率を４－アミノアンチピリン残存率として計算した。

【0344】

［プロテアーゼ活性残存率の測定方法］
（活性測定用第１試薬の組成）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、塩酸でｐＨ７．５に調整して、活性測定用第１試薬を得た。
３７．５ｍｍｏｌ／Ｌ トリスヒドロキシメチルアミノメタン（メルク社製）
６２．５ｖｏｌ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0345】

（活性測定用第２試薬の組成）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解して調整して、活性測定用第２試薬を得た。
６．６ｍｇ／ｍＬ Ｚ－Ｇｌｙ－ＯＮｐ（国産化学社製）
９０ｖｏｌ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0346】

（４－アミノアンチピリン含有部分組成物の希釈）
後述する各実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を１０ｖｏｌ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド水溶液で適宜希釈した。

【0347】

（測定機器）
７１８０形日立自動分析装置（日立ハイテクフィールディング社製）
主波長を４０５ｎｍ、副波長を６６０ｎｍと設定し、波長４０５ｎｍにおける吸光度をＡ₄₀₅、波長６６０ｎｍにおける吸光度をＡ₆₆₀として、プロテアーゼの作用で生じる基質（Ｚ－Ｇｌｙ－ＯＮｐ）の加水分解物の濃度に比例する吸光度Ａ_Sを、下記（７）式で定義した。
Ａ_S＝Ａ₄₀₅－Ａ₆₆₀ （７）

【0348】

（測定手順）
３７℃にインキュベートされた活性測定用第１試薬１８０μＬに希釈された４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物７μＬを添加し、３７℃で５分間反応させた後に、活性測定用第２試薬２０μＬを添加してさらに３７℃で５分間反応させた。活性測定用第１試薬と希釈された４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の混合溶液に活性測定用第２試薬を添加して９７秒後の吸光度から４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を添加した１５１秒後の吸光度の変化を測定した。９７秒後の吸光度をＡ_St=97、１５１秒後の吸光度をＡ_St=151として、下記（８）式より、吸光度変化Ａ_Cを算出した。
Ａ_C＝Ａ_St=151－Ａ_St=97 （８）

【0349】

保存初日の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いた際の吸光度変化を１００％として、保存後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いた際の吸光度変化の残存率をプロテアーゼ活性残存率として計算した。なお、吸光度変化を測定する時間は、吸光度が直線的に変化する時間範囲であればよく、適宜決定できる。

【0350】

［実施例１：安定化剤のスクリーニング］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
後述する濃度の安定化剤

【0351】

（実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
５０ｗｔ／ｖｏｌ％ トリメチレングリコール（和光純薬社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．８ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．１５ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－カルバモイルフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．３ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－アセトアミドフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－アミノフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0352】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）
５０ｗｔ／ｖｏｌ％ グリセロール（和光純薬社製）
５０ｗｔ／ｖｏｌ％ Ｄ（－）－ソルビトール（和光純薬社製）
１ｗｔ／ｖｏｌ％ ベンズアミジン塩酸塩（和光純薬社製）
１ｗｔ／ｖｏｌ％ ホウ酸（和光純薬社製）

【0353】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
３０℃で２週間、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を保存した。

【0354】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリン濃度残存率を測定した。結果を表１に示す。

【0355】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼの活性残存率を測定した。結果を表１に示す。

【0356】

【表1】

【0357】

３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の４－アミノアンチピリン残存率が好ましくは９０％以上、少なくとも８８％以上であり、かつプロテアーゼ活性残存率が少なくとも７０％以上あれば、冷蔵保存（２℃以上１０℃以下）における４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の長期保存安定性も良好になることが期待される。そのため、当該基準をもって、安定化剤の有効性を判断した。

【0358】

表１から明らかなように、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、２－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルボキシフェニルボロン酸、３－カルバモイルフェニルボロン酸、３－アセトアミドフェニルボロン酸、又は３－アミノフェニルボロン酸を添加した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物は、４－アミノアンチピリン残存率及びプロテアーゼ活性残存率の両方の基準を満足した。

【0359】

一方、比較例に記載した安定化剤を添加した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物では、４－アミノアンチピリン残存率及びプロテアーゼ活性残存率の一方あるいは両方が基準を満たさなかった。このことから、実施例に係る安定化剤を用いた場合に、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の長期保存安定性が良好になることが期待された。

【0360】

［実施例２：キレート剤の効果］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。また、クエン酸三ナトリウムを含有しない以外は、組成が同じ４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物も調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
１ｍｍｏｌ／Ｌ クエン酸三ナトリウム（和光純薬）
後述する濃度の安定化剤

【0361】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
５０ｗｔ／ｖｏｌ％ トリメチレングリコール（和光純薬社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．８ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．１５ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－カルバモイルフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．３ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－アセトアミドフェニルボロン酸（東京化成社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ３－アミノフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0362】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
３０℃で２週間、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を保存した。

【0363】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリン濃度残存率を測定した。結果を表２に示す。

【0364】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼ活性残存率を測定した。結果を表２に示す。

【0365】

【表2】

【0366】

表２から明らかなように、実施例１で４－アミノアンチピリン残存率とプロテアーゼ活性残存率の基準を両方とも満足した安定化剤を含有せしめた組成物に、さらにクエン酸三ナトリウムを加えることで、４－アミノアンチピリン残存率又はプロテアーゼ活性残存率が同程度か、それ以上に向上することが示された。このことから、実施例に係る安定化剤にキレート剤を組み合わせても、４－アミノアンチピリン残存率又はプロテアーゼ活性残存率は同程度か、それ以上に向上することが示された。

【0367】

［実施例３：長期安定性の検証］
（トリンダー試薬含有部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるように精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．６に調整して、トリンダー試薬含有部分組成物を調製した。
１００ｍｍｏｌ／Ｌ Ｎ－トリス（ヒドロキシメチル）メチル－２－アミノエタンスルホン酸（同仁化学社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ アジ化ナトリウム（メルク社製）
１ｍｍｏｌ／Ｌ エチレンジアミン四酢酸ナトリウム（国産化学社製）
６ｗｔ／ｖｏｌ％ Ｄ（－）－ソルビトール（和光純薬社製）
２ｍｍｏｌ／Ｌ Ｎ，Ｎ－ビス（４－スルホブチル）－３－メチルアニリン２ナトリウム（同仁化学社製）
１０Ｕ／ｍＬ ペルオキシダーゼ（アマノエンザイム社製）
３０Ｕ／ｍＬ ケトアミンオキシダーゼ（旭化成ファーマ社製）

【0368】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。安定化剤としてプロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸を含有する４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物において、クエン酸三ナトリウムを含有する部分組成物と、クエン酸三ナトリウムを含有しない部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
１ｍｍｏｌ／Ｌ クエン酸三ナトリウム（和光純薬）
後述する濃度の安定化剤

【0369】

（実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0370】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0371】

（サンプル検体）
以下のサンプル検体を用意した。
管理血清Ｌ（旭化成ファーマ社製）
管理血清Ｈ（旭化成ファーマ社製）
健常人血清２検体

【0372】

（部分組成物の保存）
調製したトリンダー試薬含有部分組成物を５℃で１か月、６か月及び１２か月間保存した。また、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を２℃及び１０℃で１か月、６か月及び１２か月間保存した。

【0373】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、２℃及び１０℃で６か月間及び１２か月間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物における４－アミノアンチピリンの濃度残存率を測定した。結果を表３に示す。

【0374】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、２℃及び１０℃で６か月間及び１２か月間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物におけるプロテアーゼの活性残存率を測定した。結果を表３に示す。

【0375】

（糖化アルブミンの測定手順）
３７℃にインキュベートされたトリンダー試薬含有部分組成物１８０μＬにサンプル検体４．５μＬを添加し、３７℃で５分間反応させた後に、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物４５μＬを添加してさらに３７℃で５分間反応させた。トリンダー試薬含有部分組成物にサンプル検体を添加して５分後の吸光度Ａｂｓ１からトリンダー試薬含有部分組成物とサンプル検体の混合液に４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を添加して５分後の吸光度Ａｂｓ２までの吸光度変化を測定した。吸光度変化Ａ_Cは下記（９）式で与えられる。
Ａ_C＝（Ａｂｓ２）－（Ａｂｓ１）×１８０／２２５ （９）
ここで１８０とはトリンダー試薬含有部分組成物の液量を、２２５とはトリンダー試薬含有部分組成物と４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の総液量を意味する。

【0376】

サンプル検体の代わりに精製水を用いた測定時の吸光度を試薬ブランクとし、サンプル検体を用いた測定時に得られた吸光度変化Ａ_CSから試薬ブランクの変化Ａ_CBを引いて感度ΔＡｂｓを算出した。感度ΔＡｂｓは、下記（１０）式で与えられる。
ΔＡｂｓ＝Ａ_CS－Ａ_CB （１０）

【0377】

５℃で１か月間保存したトリンダー試薬含有部分組成物と２℃で１か月間保存した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いた測定した時に得られた感度ΔＡｂｓを１００％として、５℃で６か月間又は１２か月間保存したトリンダー試薬含有部分組成物と２℃又は１０℃で６か月間又は１２か月間保存した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いて測定した時に得られたΔＡｂｓの残存率（感度残存率）を算出した。結果を表４に示す。なお、感度残存率は、試薬調製直後は感度が上振れするため、感度が定常状態になる１か月間保存した試薬をコントロール群とした。

【0378】

【表3】

【0379】

【表4-1】

【表4-2】

【0380】

表３から明らかなように、プロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸を含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物において、保存中のプロテアーゼ活性の低下は見られず、かつ４－アミノアンチピリン残存率も良好であった。さらにクエン酸三ナトリウムを含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物においても、プロテアーゼ活性残存率の低下は見られず、４－アミノアンチピリン残存率が向上していた。一方、ジメチルスルホキシドを含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物においては、プロテアーゼ活性の低下は見られなかったものの、４－アミノアンチピリン残存率が顕著に低下した。

【0381】

また、表４から明らかなように、プロピレングリコールと２－カルボキシフェニルボロン酸を含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いると、良好な感度残存率が得られた。さらにクエン酸三ナトリウムを含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物においては、感度残存率は同程度あるいは向上していた。一方、ジメチルスルホキシドを含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を用いると、感度残存率は低下した。したがって、実施例１、２で示した基準を満足する安定化剤を選択することで、長期保存においても十分な４－アミノアンチピリン残存率、及びプロテアーゼ活性残存率を維持でき、さらに測定試薬としての感度安定性を良好に維持できることが示された。

【0382】

［実施例４：安定化剤の濃度］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
後述する濃度の安定化剤

【0383】

（実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％～６０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
０．２ｗｔ／ｖｏｌ％～１ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0384】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0385】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を、３０℃で２週間保存した。

【0386】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリンの濃度残存率を測定した。結果を表５に示す。

【0387】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼの活性残存率を測定した。結果を表５に示す。

【0388】

【表5】

【0389】

表５から明らかなように、３０ｗｔ／ｖｏｌ％以上のプロピレングリコール、及び０．２ｗｔ／ｖｏｌ％以上の２－カルボキシフェニルボロン酸は、４－アミノアンチピリン残存率とプロテアーゼ活性残存率の両方の基準を満足していた。

【0390】

［実施例５：添加剤の影響］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
後述する濃度の安定化剤
後述する濃度の添加物

【0391】

（実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
０．６ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0392】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0393】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた添加物）
１ｗｔ／ｖｏｌ％ α－シクロデキストリン（和光純薬社製）
１ｗｔ／ｖｏｌ％ スクロース（和光純薬社製）
０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ノニオン Ｐ－２１３（日油社製）
０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ノニオン Ｓ－１５．４（日油社製）
０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ニッコール ＰＢＣ－４４（日光ケミカルズ社製）
１００Ｕ／ｍＬ カタラーゼ（ナガセケムテックス社製）

【0394】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を３０℃で２週間保存した。

【0395】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリン濃度残存率を測定した。結果を表６に示す。

【0396】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼ活性残存率を測定した。結果を表６に示す。

【0397】

【表6】

【0398】

表６から明らかなように、安定化剤としてプロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸を含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物にさらに添加物を加えた場合も、４－アミノアンチピリン残存率とプロテアーゼ活性残存率の両方の基準を満足していた。以上より、通常の測定試薬として含有されうる糖類、界面活性剤、及び酵素等をプロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸を含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に加えても、４－アミノアンチピリン残存率とプロテアーゼ活性残存率の両方の基準が満たされることが示された。

【0399】

［実施例６：プロテアーゼの種類の影響］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
後述する濃度のプロテアーゼ
後述する濃度の安定化剤

【0400】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させたプロテアーゼ）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
１．５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロテイナーゼＫ（ナカライテスク社製）
２０ｖｏｌ／ｖｏｌ％ Ｏｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｌ（ダニスコジャパン社製）

【0401】

（実施例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％あるいは３５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）
０．０６ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0402】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0403】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を３０℃で２週間保存した。

【0404】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリン濃度残存率を測定した。結果を表７に示す。

【0405】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼ活性残存率を測定した。結果を表７に示す。

【0406】

【表7】

【0407】

糖化アルブミン用プロテアーゼとＯｐｔｉｍａｓｅ ＰＲ４０Ｌの一般名はサブチリシンである。サブチリシンはＢａｃｉｌｌｕｓ由来である。プロテイナーゼＫはＴｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ由来である。表７から明らかなように、プロピレングリコール又は２－カルボキシフェニルボロン酸を含有せしめた４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物において、プロテアーゼの種類に依らずに、４－アミノアンチピリン残存率とプロテアーゼ活性残存率の両方の基準を満足していた。

【0408】

［実施例７：安定化剤の併用］
（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の調製）
下記の試薬成分を記載の濃度になるよう精製水に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨ７．５に調整して、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を調製した。
２００ｍｍｏｌ／Ｌ ３，３－ジメチルグルタル酸（東京化成社製）
０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ＰｒｏＣｌｉｎ ３００（スペルコ社製）
５ｍｍｏｌ／Ｌ ４－アミノアンチピリン（アクテック社製）
０．１ｍｍｏｌ／Ｌ フェロシアン化カリウム（国産化学社製）
４０ｋＵ／ｍＬ 糖化アルブミン用プロテアーゼ（旭化成ファーマ社製、特許第４５６５８０７号に記載の方法に準じて得た。）
後述する濃度の安定化剤

【0409】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）；
０．２ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
１５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
７．５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１５ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
２２．５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．０５ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
２０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１５ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
１５ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１５ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；
２０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）；又は
１０ｗｔ／ｖｏｌ％ プロピレングリコール（和光純薬社製）と０．１ｗｔ／ｖｏｌ％ ２－カルボキシフェニルボロン酸（東京化成社製）

【0410】

（比較例に係る４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物に含有させた安定化剤）
３０％ ジメチルスルホキシド（ナカライテスク社製）

【0411】

（４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物の保存）
３０℃で２週間、４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物を保存した。

【0412】

（４－アミノアンチピリン濃度残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中の４－アミノアンチピリン濃度残存率を測定した。結果を表８に示す。

【0413】

（プロテアーゼ活性残存率の測定）
上記の方法で、保存初日に対する、３０℃で２週間保存した後の４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物中のプロテアーゼ活性残存率を測定した。結果を表８に示す。

【0414】

【表8】

【0415】

表８から明らかなように、（５）式による計算値で０．０５以上、組み合わせによっては０．０４以上となるようにプロピレングリコールと２－カルボキシフェニルボロン酸を混合して添加した４－アミノアンチピリン含有液状部分組成物は、４－アミノアンチピリン残存率及びプロテアーゼ活性残存率の両方の基準を満足した。