▶ コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガナイゼーションの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-09-25
(45)【発行日】2024-10-03
(54)【発明の名称】生物活性物質及び／またはその前駆体の保護
(51)【国際特許分類】
A23L 33/10 20160101AFI20240926BHJP
A23K 10/16 20160101ALI20240926BHJP
A23K 10/30 20160101ALI20240926BHJP
A23K 20/158 20160101ALI20240926BHJP
A23L 5/00 20160101ALI20240926BHJP
A61K 8/11 20060101ALI20240926BHJP
A61K 8/92 20060101ALI20240926BHJP
A61K 8/9789 20170101ALI20240926BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20240926BHJP
A61K 31/202 20060101ALI20240926BHJP
A61P 3/12 20060101ALI20240926BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20240926BHJP
【ＦＩ】
A23L33/10
A23K10/16
A23K10/30
A23K20/158
A23L5/00 C
A61K8/11
A61K8/92
A61K8/9789
A61K9/48
A61K31/202
A61P3/12
A61Q19/00
【請求項の数】
10
(21)【出願番号】P 2020542112
(86)(22)【出願日】2019-02-01
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2021-05-13
(86)【国際出願番号】 AU2019050079
(87)【国際公開番号】W WO2019148250
(87)【国際公開日】2019-08-08
【審査請求日】2022-02-01
(31)【優先権主張番号】2018900326
(32)【優先日】2018-02-02
(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】317002869
【氏名又は名称】コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガナイゼーション
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100092624
【弁理士】
【氏名又は名称】鶴田 準一
(74)【代理人】
【識別番号】100114018
【弁理士】
【氏名又は名称】南山 知広
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100108903
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 和広
(72)【発明者】
【氏名】マリー アン オーガスティン
(72)【発明者】
【氏名】ラズ サングワンシー
【審査官】吉岡 沙織
(56)【参考文献】
【文献】米国特許出願公開第２００６／０２８６２０５（ＵＳ，Ａ１）
【文献】中国特許出願公開第１０３３３０２０７（ＣＮ，Ａ）
【文献】国際公開第２００６／０５９７０７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特開平１０－０４２８１９（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ２３Ｌ
Ａ２３Ｋ
Ａ６１Ｋ
Ｂ０１Ｊ
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を生成する方法であって、ｉ）単一種の生物のバイオマスからタンパク質及び炭水化物を含む水性混合物を得ることと、
ｉｉ）前記水性混合物に油を添加することと、
ｉｉｉ）前記生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む乳濁液または懸濁液を形成することと、
ｉｖ）前記乳濁液または懸濁液から捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を形成することと、を含み、
前記バイオマスが、Ｂｒａｓｓｉｃａである、前記方法。
【請求項2】
前記Ｂｒａｓｓｉｃａが、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記粉末が、以下の特徴：ａ）８０℃及び５バールの初期酸素圧で測定されたときに、１０～３００時間の誘導期間を有する；
ｂ）５重量％～５０重量％の油を含む；
ｃ）１０重量％～４０重量％の油を含む；及び
ｄ）前記粉末を形成する前の乳濁液または懸濁液の油含有量が、１重量％～１０重量である、
のうち１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記水性混合物が、単一種の生物からの少なくとも１つのさらなるバイオマスからのタンパク質及び炭水化物をさらに含み、及び／又は前記バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが、
ａ）１：１～１：１０．５のタンパク質対炭水化物の比率；
ｂ）１：４．５～４：１のタンパク質対炭水化物の比率；
ｃ）１：２．５～２：１のタンパク質対炭水化物の比率；
ｄ）前記生物活性物質として、イソチオシアネート；及び
ｅ）前記生物活性前駆体として、グルコシノレート及び／またはグルコラファニン、
のうちの１つ以上を含む、
請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項5】
前記生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、ａ）前記バイオマスの成分；
ｂ）ステップｉｉ）の前記油またはその成分；
ｃ）前記油がステップｉｉ）で前記水性混合物に添加される前に前記油に添加された成分；
ｄ）ステップｉｉ）の前または間に前記油に注入された成分；
ｅ）前記さらなるバイオマスの成分；
ｆ）前記方法のステップｉ）、ｉｉ）、及びｉｉｉ）で添加された成分；
ｇ）前記生物活性物質が、前記バイオマスの成分及びステップｉｉ）の前記油またはその成分である；
ｈ）前記生物活性物質が、ステップｉ）、ｉｉ）、またはｉｉｉ）で、またはその後に形成される；
ｉ）酸素、温度、ｐＨ、湿気、及び光のうちの１つ以上による分解に対して感受性がある；
ｊ）植物栄養素；
ｋ）脂肪酸、イソチオシアネート、ケルセチン、アリシン、アホエン、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、トコフェロール、トコトリエノール、ビタミンＫ、ベータカロチン、リコピン、ルテイン、ゼアキサンチン、スチグマステロール、ベータシトステロール、カンペステロール、抗酸化剤、コエンザイムＱ１０、アスタキサンチン、カンナビノイド、カンナビジオール、及びポリフェノールのうちの１つ以上から選択される；
ｌ）前記生物活性物質が脂肪酸であり、前記脂肪酸が、オメガ－３、オメガ－６、またはオメガ－９脂肪酸である；
ｍ）前記生物活性物質がオメガ－３脂肪酸であり、前記オメガ－３脂肪酸が、α－リノレン酸（ＡＬＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）のうちの１つ以上である、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項6】
ａ）前記バイオマスを前処理すること、ここで、前処理が、
ｉ）加熱、
ｉｉ）浸軟、
ｉｉｉ）マイクロ波処理、
ｉｖ）低周波音波（超音波）への曝露、
ｖ）パルス電界処理、
ｖｉ）静的高圧、
ｖｉｉ）押出成形、
ｖｉｉｉ）酵素処理、
ｉｘ）発酵、
ｘ）抽出または分離プロセス、及び
ｘｉ）乾燥
のうちの１つ以上を含む；及び／又は
ｂ）前記乳濁液または懸濁液を後処理して微生物活性を減少させること、
ここで、前記後処理が、
ｉ）加熱、
ｉｉ）マイクロ波処理、
ｉｉｉ）ＵＶ処理、及び
ｉｖ）高圧処理のうちの１つ以上を含む、
をさらに含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項7】
前記油が、以下の特徴：ａ）１つ以上の脂肪酸を含む；
ｂ）魚油、オキアミ油、海産油、キャノーラ油、ヒマワリ油、アボカド油、大豆油、ボラージ油、マツヨイグサ油、ベニバナ油、亜麻仁油、オリーブ油、カボチャ種子油、麻実油、小麦胚芽油、パーム油、パームオレイン、パーム核油、ココナッツ油、中鎖トリグリセリド、及びブドウ種子油のうちの１つ以上から選択される；及び
ｃ）魚油または海産油であり、前記魚油または海産油が、マグロ油、ニシン油、サバ油、イワシ油、タラ肝油、メンハーデン油、サメ油、藻類油、イカ油、及びイカ肝油のうちの１つ以上から選択される；
のうち１つ以上を有する、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項8】
前記粉末の形成が、噴霧乾燥、凍結乾燥、リフラクタンスウィンドウ乾燥、またはドラム乾燥を含み、及び／又は前記捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、３～２４か月間、分解に耐性がある、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記Ｂｒａｓｓｉｃａが、ブロッコリー（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒｉｅｔｙ ｉｔａｌｉｃａ）である、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項10】
前記Ｂｒａｓｓｉｃａが、カリフラワー（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｖａｒｉｅｔｙ ｂｏｔｒｙｔｉｓ）である、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、バイオマスから乳濁液または懸濁液を生成する方法に関する。本発明はまた、粉末またはそれから生成される製品の生成に関する。本発明はまた、本明細書に記載されるような方法によって生成される乳濁液または懸濁液に関する。本発明はまた、本明細書に記載されるような方法によって生成される粉末またはそれから生成される製品に関する。
【背景技術】
【0002】
酸素感受性脂肪酸や油などの生物活性物質は、食品、サプリメント、及び／または化粧品に望ましい原料である。しかしながら、多くの油及び生物活性分子は、様々な環境（酸素、熱、ｐＨ、または酵素など）に曝露されたときに酸化反応及び分解反応を起こしやすいため、これらの原料は、摂取または使用の前に分解する可能性があるか、摂取または使用に好適な形で保存することができないか、または摂取後に、体内の所望の部位に到達しない。酸素感受性油には、オメガ－３、オメガ－６、またはオメガ－９脂肪酸などの多価不飽和脂肪酸を含有するものが含まれる。不安定な生物活性原料には、水溶性（高ｐＨで不安定なポリフェノールなど）または油溶性（酸素に感受性があるカロチンなど）または油もしくは水に難溶性（レスベラトロール、クルクミンなど）である成分が含まれる。５８。
【0003】
封入は、親油性かつ親水性の生物活性物質の保護及び送達のために使用されているが、送達及び送達に最適な封入システムの選択には依然として課題がある（Ａｕｇｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ，２０１５；ＭｃＣｌｅｍｅｎｔｓ，２０１５）。オメガ－３油の健康促進特性に起因して、これらの油は非常に酸化されやすいため、これらの油の安定化に大きな関心が寄せられている（Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ ａｎｄ Ａｕｇｕｓｔｉｎ，２００６；Ｄｒｕｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉｎｏ，２００７）。
【0004】
酸素感受性油及び生物活性物質を封入する方法は、知られているが、これらの方法では、精製タンパク質または実質的に精製されたタンパク質（単離乳清タンパク質、単離大豆タンパク質、またはカゼイン及び炭水化物など）が必要とされ、多くの製品にとって経済的ではない。
【0005】
精製タンパク質及び精製炭水化物は、生物活性物質の送達のための封入マトリックスとして、単独でまたは組み合わせて使用され得る（Ａｕｇｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｈｅｍａｒ，２００９；Ａｄｉｔｙａ ｅｔ ａｌ．，２０１７）。例えば、デンプンは、封入のための壁材料として一般的に使用されており（Ｈｏｙｏｓ－Ｌｅｙｖａ ｅｔ ａｌ．，２０１８）、タンパク質は、封入に役立つ多くの望ましい機能特性があるため、送達に有用であることが見出されている（Ｓｕｂｉｒａｄｅ ａｎｄ Ｃｈｅｎ，２００８；Ｌｉｖｎｅｙ，２０１０）。ＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）マイクロ封入技術は、精製タンパク質（好ましくは、カゼイン）及び精製炭水化物を使用して油用の封入剤を生成する。加熱されたタンパク質－炭水化物混成物（ＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）マイクロ封入技術）は、対応するタンパク質及び炭水化物の物理的混成物よりも優れていることが見出された（ＷＯ ０１／７４１７５；Ａｕｇｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２００６）。そのようなプロセスで使用される精製タンパク質及び精製炭水化物は、無色で風味がないように選択され、それらの単離に関与する精製ステップに起因して費用がかかる可能性がある。
【0006】
したがって、保存、処理中に、及び胃腸管内で分解しやすい、脂肪酸及び油などの酸素感受性生物活性物質を含む製品を生成するための新規の製剤及びプロセスが必要である。
【発明の概要】
【0007】
本発明者らは、単一の供給源から得られたタンパク質及び炭水化物を含む、乳濁液、懸濁液、または粉末を生成する方法を開発した。
【0008】
一態様では、本発明は、乳濁液または懸濁液を生成する方法であって、
ｉ）単一種の生物のバイオマスからタンパク質及び炭水化物を含む水性混合物を得ることと、
ｉｉ）任意選択的に、水性混合物に油を添加することと、
ｉｉｉ）生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む乳濁液または懸濁液を形成することと、を含む、方法を提供する。
ｉ）単一種の生物のバイオマスからタンパク質及び炭水化物を含む水性混合物を得ることと、
ｉｉ）任意選択的に、水性混合物に油を添加することと、
ｉｉｉ）生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む乳濁液または懸濁液を形成することと、を含む、方法を提供する。
【0009】
一実施形態では、水性混合物は、水性懸濁液である。
【0010】
一態様では、本発明は、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を生成する方法であって、
ｉ）単一種の生物のバイオマスからタンパク質及び炭水化物を含む水性混合物を得ることと、
ｉｉ）水性混合物に油を添加することと、
ｉｉｉ）生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む乳濁液または懸濁液を形成することと、
ｉｖ）乳濁液または懸濁液から捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を形成することと、を含む、方法を提供する。
ｉ）単一種の生物のバイオマスからタンパク質及び炭水化物を含む水性混合物を得ることと、
ｉｉ）水性混合物に油を添加することと、
ｉｉｉ）生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む乳濁液または懸濁液を形成することと、
ｉｖ）乳濁液または懸濁液から捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を形成することと、を含む、方法を提供する。
【0011】
一実施形態では、本発明は、本明細書に記載されるような方法であって、生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、
ｉ）バイオマスの成分、
ｉｉ）ステップｉｉ）の油またはその成分、
ｉｉｉ）油がステップｉｉ）で水性混合物に添加される前に油に添加された成分、
ｉｖ）ステップｉｉ）の前または間に油に注入された成分、
ｖ）さらなるバイオマスの成分、ならびに
ｖｉ）方法のステップｉ）、ｉｉ）、及びｉｉｉ）で添加された成分、のうちの１つ以上である、方法を提供する。
ｉ）バイオマスの成分、
ｉｉ）ステップｉｉ）の油またはその成分、
ｉｉｉ）油がステップｉｉ）で水性混合物に添加される前に油に添加された成分、
ｉｖ）ステップｉｉ）の前または間に油に注入された成分、
ｖ）さらなるバイオマスの成分、ならびに
ｖｉ）方法のステップｉ）、ｉｉ）、及びｉｉｉ）で添加された成分、のうちの１つ以上である、方法を提供する。
【0012】
一実施形態では、生物活性物質は、ｉ）及びｉｉ）である。
【0013】
一実施形態では、生物活性前駆体は、ｉ）である。
【0014】
一実施形態では、生物活性物質は、ステップｉ）で、もしくはその後に、またはステップｉｉ）で形成される。
【0015】
一態様では、本発明は、単一種の生物のバイオマスからのタンパク質及び炭水化物を含む、マトリックスを提供する。
【0016】
一態様では、本発明は、マトリックス中に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体であって、単一種の生物からのバイオマスのタンパク質及び炭水化物を含み、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、捕捉または封入の前の生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較されたときに、酸素分解に耐性がある、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を提供する。
【0017】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成される乳濁液または懸濁液を提供する。
【0018】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成される乳濁液または懸濁液を提供する。
【0019】
一態様では、本発明は、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含み、単一種の生物からのタンパク質及び炭水化物を含む、粉末を提供する。
【0020】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成された粉末を提供する。
【0021】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成された乳濁液または懸濁液、本明細書に記載されるようなマトリックス、本明細書に記載されるようなマトリックス中に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体、あるいは本明細書に記載されるような乳濁液または懸濁液、を含む、製品を提供する。
【0022】
一態様では、本発明は、本明細書に記載の方法によって生成された粉末、または本明細書に記載の粉末を含む、製品を提供する。
【0023】
本発明者らはまた、驚くべきことに、脂質系組成物がイソチオシアネート（スルフォラファンなど）及び／またはイソチオシアネート前駆体（グルコシノレートなど）の安定性を改善することも発見した。したがって、さらなる態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体、脂質、ならびに医薬品賦形剤及び／または化粧品賦形剤を含む、医薬品組成物または化粧品組成物を提供する。
【0024】
一態様では、本発明は、イソチオシアネートまたはイソチオシアネート前駆体を含む乳濁液を生成する方法であって、
水、脂質、及びイソチオシアネートまたはイソチオシアネート前駆体を含む混合物を提供し、それにより乳濁液を形成することを含む、方法を提供する。
水、脂質、及びイソチオシアネートまたはイソチオシアネート前駆体を含む混合物を提供し、それにより乳濁液を形成することを含む、方法を提供する。
【0025】
一態様では、本発明は、水、脂質、ならびにイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む乳濁液を提供する。
【0026】
一態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む粉末を調製する方法であって、本明細書に記載されるような乳濁液を調製することと、乳濁液を乾燥条件に供し、それにより水を除去して粉末を形成することと、を含む、方法を提供する。
【0027】
一態様では、本発明は、医薬品組成物または化粧品組成物を調製する方法であって、本明細書に記載されるような乳濁液を調製すること、または本明細書に記載されるような粉末を調製することと、乳濁液または乾燥組成物を医薬品組成物または化粧品組成物に変換することと、を含む、方法を提供する。
【0028】
一態様では、本発明は、状態の治療または予防の方法であって、有効量の本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末の投与を、それを必要とする対象に行うことを含む、方法を提供する。
【0029】
一態様では、本発明は、状態の治療または予防に使用するための、本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末を提供する。
【0030】
一態様では、本発明は、対象の状態を治療または予防する方法であって、有効量の本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末を、対象に投与することを含む、方法を提供する。
【0031】
一態様では、本発明は、状態の処置のための医薬品の製造における、本明細書に記載されるような乳濁液または本明細書に記載されるような粉末の使用を提供する。
【0032】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法または使用であって、がん、糖尿病、心血管、自閉症、骨粗しょう症、神経保護疾患、炎症、酸化ストレス、及び腸の健康状態から選択される、方法または使用を提供する。
【0033】
本明細書におけるいかなる実施形態も、別段の具体的な記載がない限り、任意の他の実施形態にも準用すると見なされることとする。例えば、当業者であれば理解することになるように、本発明の上記の方法についての生物活性物質及び／または生物活性前駆体の例は、本発明の乳濁液、懸濁液、粉末、及び製品に等しく適用される。
【0034】
本発明は、本明細書に記載の具体的な実施形態によって範囲を制限されることはなく、それらの実施形態は、例示の目的のみを意図している。本明細書に記載されるように、機能的に同等の製品、組成物及び方法は明らかに本発明の範囲内である。
【0035】
本明細書全体を通じて、特段明記されない限り、または文脈上、特に必要とされていない限り、単一のステップ、物質の組成、ステップの群または物質の組成の群への言及は、これらのステップ、物質の組成、ステップの群、または物質の組成の群の１つ及び複数（すなわち、１つ以上）を包含すると解釈されるものとする。
【0036】
本発明は、これ以降、次の非限定的な実施例を用いて、及び添付の図を参照して記載される。
【図面の簡単な説明】
【0037】
【図1】乳濁液の作成後、Ａ）０分の時点及びＢ）１２０分の時点での油及び水の分散と比較した、タンパク質及び炭水化物を含有するブロッコリーを封入剤として使用した水中油型乳濁液の物理的安定性を示している。この図はまた、封入剤として使用する前に、流動性混合物（７．４６％ＴＳ）が達成されるまで十分な量の水を添加する、凍結乾燥ブロッコリー粉末を使用した水相懸濁液の調製を示している。Ａ）１４．２９％の総固形分（ＴＳ）を示し、Ｂ）１０．６４％ＴＳを示し、Ｃ）８．４８％ＴＳを示し、Ｄ）７．４６％ＴＳを示す。
【図2】封入剤として使用する前に、流動性混合物が達成されるまで必要量の水を添加することによる、生ブロッコリーを使用した水相懸濁液の調製を示している。Ａ）７．６６％ＴＳ、Ｂ）６．８７％ＴＳ、Ｃ）６．２３％ＴＳ、及びＤ）４．９９％ＴＳ。
【図3】Ａ）調整後の、Ｂ）一晩保存後の、及びＣ）凍結乾燥後の、オメガ－３油を含有する乳濁液を示している。封入剤としてブロッコリーを使用するＦ１及びＦ２、封入剤として加熱カゼイン炭水化物を使用するＣ１、ならびに乳化剤としてＴｗｅｅｎを使用するＣ２。
【図4】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した試料［図３Ａからの乳濁液（９．５％ＴＳ、４．８％の油）］の酸素の誘導期間（ＩＰ）／取り込み量を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。試験した試料は、８３ｇの乳濁液（試料中に４ｇのマトリックス固形分及び４ｇの油）であった。ＩＰ（ｈ）は、酸素消費量に大きな変化がある場合、乳化剤としてＴｗｅｅｎを用い、封入剤として加熱カゼイン炭水化物を用いた試料についてのみ観察される。封入剤としてブロッコリーを使用した試料は、試験が停止されたときに、最大２０時間まで特有のＩＰを有しない。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。未精製マグロ油についてのＯｘｉｐｒｅｓ（図６を参照）は、９時間である。
【図5】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した試料［図３Ｃからの凍結乾燥粉末（５０％のマグロ油）］の酸素のＩＰ／取り込み量を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。試験した試料は、８ｇの粉末（試料中に４ｇのマトリックス固形分及び４ｇの油）であった。封入剤としてブロッコリーを使用した試料は、試験が停止されたときに、最大４３時間まで特有のＩＰを有しない。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。Ｏｘｉｐｒｅｓデータ（図６を参照）の未精製マグロ油についてのＩＰは、９時間である。
【図6】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験したマグロ油、キャノーラ油、及び高ＤＨＡキャノーラ油の酸素のＩＰ／取り込み量を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。各油について、明確なＩＰが観察されている。
【図7】酸素取り込みに対する様々な量の野菜マトリックスの影響を示すブロッコリーマトリックス（油なし）でのＯｘｉｐｒｅｓ試験。
【図8】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（１２．５％のマグロ油またはキャノーラ油）のＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、５．７％であった。試験した試料は、２０ｇの粉末（１７．５ｇのマトリックス及び２．５ｇの油）であった。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【図9】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（２５％のマグロ油またはＤＨＡキャノーラ油）のＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、６．６％であった。試験した試料は、１０ｇの粉末（７．５ｇのマトリックス及び２．５ｇの油）であった。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。
【図10】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（５０％のマグロ油またはＤＨＡキャノーラ油）のＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５ｇの粉末（２．５ｇのマトリックス及び２．５ｇの油）であった。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【図11】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験したオメガ－３ブロッコリー乳濁液試料の酸素取り込み量を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乳濁液を、４％の水性固形分（３．８％の油及び７．７％の総固形分）及び６％の水性固形分（５．７％の油及び１１．３％の総固形分）での２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）により調製した。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。封入剤としてブロッコリーを使用する乳濁液は、最大４２時間まで特有のＩＰを有しない。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【図12】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（５０％のマグロ油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。試料を、５％及び６％の水性固形分（５．７％の油及び１１．３％の総固形分）での２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）により調製した。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。
【図13】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（５０％のマグロ油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。ブロッコリーの封入剤を、２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）に供し、そのまま（乾燥させていない「新鮮なブロッコリー」）使用するか、または「凍結乾燥したブロッコリー」の粉末から再構成した。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。
【図14】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験したオメガ－３ブロッコリー乳濁液試料の酸素取り込み量を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。ブロッコリー封入剤を、様々な処理段階で使用して、最大５％の水性固形分を作製した。乳濁液を、９．５％ＴＳ及び４．８％の油で調製した。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【図15】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ニンジン粉末（５０％のマグロ油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。使用した２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）であった。明確なＩＰはない。圧力の突然の上昇が示され、揮発性物質（ＩＰとマークされている）の放出をもたらしているため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。鋭いピークは、圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。
【図16】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験したオメガ－３油に対する封入剤として「発酵」及び「非発酵」ニンジンを使用したオメガ－３ニンジン粉末（５０％のマグロ油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）であった。圧力の突然の上昇が示され、揮発性物質（ＩＰとマークされている）の放出をもたらしているため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。鋭いピークは、圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。封入剤として非発酵ニンジンについての明確なＩＰはない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。
【図17】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３トマト粉末（５０％のマグロ油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。明確なＩＰはない。圧力の突然の上昇が示され、揮発性物質（ＩＰとマークされている）の放出をもたらしているため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。鋭いピークは、圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。使用した２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）であった。トマトについての温度－時間処理を増加させると、ＩＰが長くなる（オメガ－３油の酸化からの保護が向上する）。
【図18】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３マッシュルーム粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある明確なＩＰ（ｈ）はない。５０％の油粉末に対する封入剤としてのマッシュルームの２回の熱処理（７５℃－２分及び１００℃－３０分）を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。油の負荷量が少ない（２５％の油）と、５０％の油粉末と比較してＩＰが長くなる（オメガ－３油の酸化からの保護が向上する）。
【図19】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３カリフラワー粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。５０％の油粉末についてはＩＰが観察されたが、２５％の油粉末については明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。（７５℃－２分）及び２つの油の負荷量（５０％及び２５％の油）での封入剤としてのカリフラワーの熱処理を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。
【図20】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ケール粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。２５％の油粉末についてはＩＰが観察されたが、５０％の油粉末については明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。５０％の油粉末についての鋭いピークは、５０％のマグロ油粉末について観測された圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。（７５℃－２分）及び２つの油の負荷量（５０％及び２５％の油）での封入剤としてのケールの熱処理を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。
【図21】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３芽キャベツ粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。５０％の油粉末についてはＩＰが観察されたが、２５％の油粉末については明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。（７５℃－２分）及び２つの油の負荷量（５０％及び２５％の油）での封入剤としての芽キャベツの熱処理を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。
【図22】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３サヤエンドウ粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。５０％の油粉末についての鋭いピークは、５０％のマグロ油粉末について観測された圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。（７５℃－２分）及び２つの油の負荷量（５０％及び２５％の油）での封入剤としてのサヤエンドウの熱処理を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。
【図23】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ニンニク粉末（２５％及び５０％の油）のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。２５％の油粉末についてはＩＰが観察されたが、５０％の油粉末については明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。５０％の油粉末についての鋭いピークは、５０％のマグロ油粉末について観測された圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。（７５℃－２分）及び２つの油の負荷量（５０％及び２５％の油）での封入剤としてのニンニクの熱処理を示す結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、５０％の油粉末に対して８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）、２５％の油粉末に対して１２ｇの粉末（９ｇのマトリックス及び３ｇの油）であった。
【図24】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した、植物タンパク質（ピータンパク質、大豆タンパク質（ＳＰＩ））または乳タンパク質、カゼイン酸ナトリウムを添加した凍結乾燥オメガ－３ニンジン粉末（２５％のマグロ油）のＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。乾燥前の乳濁液の総固形分は、９．５％（２．４％の油）であった。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。試験した試料は、１０ｇの粉末（２．５ｇの油及び７．５ｇのマトリックス）であった。圧力の突然の上昇が示され、揮発性物質の放出をもたらしているため、封入剤として添加されたピータンパク質を含むニンジンを除いて、ＩＰ及び酸素取り込み率を得ることはできない。鋭いピークは、圧力の著しい増加をもたらした相互作用の証拠である。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。
【図25】未精製マグロ油のものと比較した、８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した、異なるタンパク質：炭水化物比を有する噴霧乾燥（２５％のマグロ油）オメガ－３抹茶粉末のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。抹茶粉末を、抹茶（緑茶）粉末の市販の試料から再構成した。マグロ油粉末のみ、ならびに１：３及び１：４のタンパク質対炭水化物の比率で封入された粉末についてはＩＰが観察されたが、１：２及び８：９のタンパク質対炭水化物の比率で封入された粉末については明確なＩＰがないため、ＩＰを超える酸素取り込み率を得ることはできない。８：９のタンパク質対炭水化物の比率を含む封入剤は、抹茶粉末のみのものであった。
【図26】封入剤として加熱カゼイン－炭水化物を使用した５０％のマグロ油粉末のものと比較した、８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した噴霧乾燥（５０％のマグロ油）オメガ－３ブロッコリー粉末のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。ブロッコリー封入剤を、「凍結乾燥ブロッコリー」粉末から再構成した。
【図27】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した、封入剤としてブロッコリーピューレ及び発酵ブロッコリーピューレを使用した凍結乾燥（５０％のマグロ油）オメガ－３油粉末のＩＰを示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。
【図28】４０℃で４週間保存した後、様々な野菜マトリックスに封入された凍結乾燥粉末（５０％のマグロ油）における二次脂質酸化の定量分析。野菜の封入剤（左から右へ：ブロッコリー、ニンジン、発酵ニンジン、トマト、マッシュルーム、カリフラワー、ケール、芽キャベツ、サヤエンドウ、ニンニク）。
【図29】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した、押出成形ブロッコリースナック（１０％のＨｉ－ＤＨＡマグロ油）及び錠剤化オメガ－３ブロッコリー製剤（２５％のＨｉ－ＤＨＡマグロ油）の誘導期間（ＩＰ）を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。錠剤化製剤については明確なＩＰ（ｈ）はないが、押出成形製剤については明確なＩＰが示されている。試験した試料は、押出物（３６ｇのマトリックス及び４ｇの油）については４０ｇ、錠剤形式（１６ｇの賦形剤及び４ｇの油）については１６ｇであった。
【図30】８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した凍結乾燥オメガ－３ブロッコリー粉末（５０％の油）の誘導期間（ＩＰ）を示すＯｘｉｐｒｅｓ試験結果。酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある明確なＩＰ（ｈ）はない。水相への前処理（超音波またはマイクロ波を使用）または乳化後処理（ＨＰＰまたはマイクロ波を使用）を示す結果。水相の総固形分は、５％，であり、乳濁液の総固形分は、９．５％であった。試験した試料は、８ｇの粉末（４ｇのマトリックス及び４ｇの油）であった。
【発明を実施するための形態】
【0038】
一般的技術及び定義
別段の具体的な定義がない限り、本明細書で使用される全ての専門用語及び科学用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有するとみなされることとする。
別段の具体的な定義がない限り、本明細書で使用される全ての専門用語及び科学用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有するとみなされることとする。
【0039】
「及び／または」という用語、例えば、「Ｘ及び／またはＹ」は、「Ｘ及びＹ」または「ＸまたはＹ」のいずれかを意味すると理解され、両方の意味またはいずれかの意味を明示的に含むと解釈されるべきである。
【0040】
本明細書を通じて、単語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む）」、または「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ（含む）」もしくは「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」などの変形は、既定された要素、整数またはステップ、または要素群、整数群もしくはステップ群を包含するが、いかなる他の要素、整数またはステップ、または要素群、整数群またはステップ群をも排除することを意味するものではないことが理解されよう。
【0041】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、反対の記載がない限り、指定値の＋／－１０％、より好ましくは＋／－５％、さらにより好ましくは＋／－１％を指す。
【0042】
本明細書で使用される場合、「成分」は、より大きな全体の一部または要素を指す。
【0043】
本明細書で使用される場合、「タンパク質」または「ポリペプチド」は、ペプチド結合によって一緒に連結されたアミノ酸のポリマーを含む、炭素、水素、酸素、窒素、及び通常、硫黄を含む巨大分子を指す。
【0044】
本明細書で使用される場合、「炭水化物」は、一般式Ｃｘ（Ｈ２Ｏ）ｙの分子のクラスを指す。
【0045】
本明細書で使用される場合、「酸素分解に耐性がある」という用語、または同様の語句は、脂肪酸などの生物活性物質の酸化に対する感受性を低下させることを指す。一実施形態では、酸化に対する物質の感受性は、酸素への曝露を低減するために物質を捕捉または封入することによって低減される。一実施形態では、これは、酸素隔離能力を有する分子で物質を捕捉または封入することを含む。酸化耐性の評価は、当業者に知られている任意の方法によって行うことができる。例えば、油脂の酸化耐性は、加圧下での酸素による油の酸化に基づく可能性がある。このような試験では、酸素の消費により、試験中の圧力低下が発生し、これは、酸化中の試料による酸素の取り込みに起因するものである。高圧及び高温で実行されると、酸化速度が加速される。一実施形態では、酸化耐性は、Ｏｘｉｐｒｅｓ（例えば、Ｍｉｋｒｏｌａｂ Ａａｒｈｕｓ Ａ／Ｓ ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｈｏｊｂｊｅｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を使用して評価される。一実施形態では、脂肪もしくは油を含有する乳濁液、懸濁液、及び／または粉末（例えば、多価不飽和油）は、高温及び高酸素圧に曝露される。一実施形態では、酸化耐性は、８０℃及び５バールの初期酸素圧で評価される。一実施形態では、試料の酸化安定性に関連する誘導期間（ＩＰ、ｈ）が決定される。より長いＩＰ（ｈ）は、試料が保存中の酸化により耐性がある（酸素の存在下でより安定している）ことを示している。脂質酸化を測定するための他の方法には、例えば、過酸化物価、パラアニシジン値、揮発性物質のヘッドスペース分析（例えば、オメガ－３脂肪酸の酸化による二次酸化生成物であるプロパナール及びＥＥ－２，４－ヘプタジエナールなどのアルデヒド）、及び保存試料中の個々の不飽和脂肪酸（例えば、ＥＰＡ及びＤＨＡ）の％の変化が含まれる。一実施形態では、酸化は、溶媒抽出可能な遊離脂肪に必ずしも関連しない（すなわち、遊離脂肪レベルは、粉末中の酸化に対する油のＩＰまたは感受性の指標ではない）。
【0046】
本明細書で使用される場合、「温度分解」、または類似の語句は、低温または高温への曝露に起因する生物活性物質（例えば、脂肪酸）または生物活性前駆体の分解を指す。一実施形態では、温度による分解に対する感受性は、本明細書に記載されるような乳濁液、懸濁液、または粉末を生成する方法の間に、タンパク質または炭水化物への生物活性物質または生物活性前駆体の結合によって低下される。
【0047】
本明細書で使用される場合、「湿気分解」、または類似の語句は、低湿気または高湿気への曝露に起因する生物活性物質（例えば、脂肪酸）または生物活性前駆体の分解を指す。一実施形態では、湿気による分解に対する感受性は、本明細書に記載されるような乳濁液、懸濁液、または粉末を生成する方法の間に、タンパク質または炭水化物への生物活性物質または生物活性前駆体の結合によって低下される。
【0048】
本明細書で使用される場合、「ｐＨ分解」という用語、または同様の語句は、低ｐＨまたは高ｐＨへの曝露に起因する生物活性物質（例えば、脂肪酸）または生物活性前駆体の分解を指す。一実施形態では、低ｐＨは、ｐＨ＜７である。一実施形態では、高ｐＨは、ｐＨ＞７である。一実施形態では、ｐＨによる分解に対する感受性は、本明細書に記載されるような乳濁液、懸濁液、または粉末を生成する方法の間に、タンパク質または炭水化物への生物活性物質または生物活性前駆体（例えば、植物栄養素）の結合によって低下される。
【0049】
本明細書で使用される場合、「光分解」という用語、または同様の語句は、光への曝露に起因する生物活性物質（例えば、カロチノイド）または生物活性前駆体の分解を指す。一実施形態では、光分解に対する感受性は、本明細書に記載されるような乳濁液、懸濁液、または粉末を生成する方法の間に、タンパク質または炭水化物への生物活性物質または生物活性前駆体の結合によって低下される。
【0050】
本明細書で使用される場合、「捕捉」または「捕捉された」または「捕捉すること」とは、植物栄養素などの生物活性物質または生物活性前駆体の、本明細書に記載されるような乳濁液、懸濁液、または封入剤マトリックスの１つ以上の成分への結合または分配を指す。一実施形態では、成分は、炭水化物またはタンパク質である。一実施形態では、捕捉は、酸素、温度、ｐＨ、湿気、及び光による分解のうちの１つ以上に対する生物活性物質または生物活性前駆体の耐性を増加させる。
【0051】
本明細書で使用される場合、「封入」または「封入された」とは、本発明の、または本発明の方法によって生成される乳濁液、懸濁液、もしくは封入剤マトリックス中の脂質及び脂質可溶性成分などの生物活性物質または生物活性前駆体の周りの機能バリアの形成を指す。一実施形態では、封入は、酸素、温度、ｐＨ、湿気、及び光による分解のうちの１つ以上に対する生物活性物質または生物活性前駆体の耐性を増加させる。
【0052】
本明細書で使用される場合、「生物種」は、属の細分を指す。一実施形態では、「生物種」は、それらの間で繁殖することができる個体からなる生物の群を指す。
【0053】
本明細書で使用される場合、「ポリフェノール」は、１つ超のフェノール性ヒドロキシル基を含む化合物を指す。一実施形態では、ポリフェノールは、アントシアニン、ジヒドロカルコン、フラバン－３－オール、フラバノン、フラボン、フラボノール及びイソフラボン、クルクミン、レスベラトロール、安息香酸、フェニル酢酸、ヒドロキシ桂皮酸、クマリン、ナフトキノン、キサントン、スチルベン、カルコン、タンニン、フェノール酸、ならびにカテキン（例えば、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）、及びそれらの幾何異性体ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、ガロカテキン（ＧＣ）、ガロカテキンガレート（Ｃｇ）、及びカテキン）のうちの１つ以上から選択される。
【0054】
本明細書で使用される場合、「生物活性有機硫黄含有化合物（複数可）」には、グルコシノレート、イソチオシアネート、及びアリウム化合物（例えば、アリイン、アリシン、アホエン、アリルプロピルジスルフィド、ジアリルトリスルフィド、サリルシステイン、ビニルジチイン、Ｓ－アリルメルカプトシステイン）などの硫黄含有化合物が含まれる。
【0055】
バイオマス
本発明は、少なくとも部分的に、生物の単一の（第１の）種からのタンパク質及び炭水化物を含むバイオマスから、乳濁液、懸濁液、粉末、またはそれらから生成された製品を生成するための方法に関する。したがって、タンパク質及び炭水化物は、本発明の方法で使用される前に互いに分離されていない。
本発明は、少なくとも部分的に、生物の単一の（第１の）種からのタンパク質及び炭水化物を含むバイオマスから、乳濁液、懸濁液、粉末、またはそれらから生成された製品を生成するための方法に関する。したがって、タンパク質及び炭水化物は、本発明の方法で使用される前に互いに分離されていない。
【0056】
いくつかの実施形態では、バイオマス全体を使用することができるが、他の実施形態では、バイオマスは、バイオマスの１つの以上の成分を除去するか、またはそれらの濃度を低減するように処理されている。一実施形態では、バイオマスの約５０％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約４０％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約３０％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約２０％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約１０％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約５％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスの約１％未満が、本発明の方法で使用される前に除去される。一実施形態では、バイオマスは、本発明の方法で使用される前に除去されない。
【0057】
一実施形態では、バイオマスは、水分を除去するために乾燥または濃縮される。一実施形態では、乾燥により、バイオマスの重量の約６０％～約９０％が除去される。一実施形態では、乾燥により、バイオマスの重量の約７０％～約９０％が除去される。一実施形態では、乾燥により、バイオマスの重量の約８０％～約９０％が除去される。
【0058】
一実施形態では、バイオマスは、単一種の生物のみからのタンパク質及び炭水化物を含む（さらなる生物種からのタンパク質または炭水化物は含まない）。一実施形態では、バイオマスは、１つ以上のさらなる生物種（例えば、生物の第２、第３、第４、第５などの種）からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。第１の生物種からのバイオマスと同様に、さらなる種からのタンパク質及び炭水化物は、本発明の方法で使用される前に互いに分離されていない。一実施形態では、バイオマスは、第２の生物種からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。一実施形態では、バイオマスは、第２及び第３の生物種からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。一実施形態では、バイオマスは、第２、第３、及び第４の生物種からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。
【0059】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスのタンパク質及び炭水化物から分離されていない繊維を含む。
【0060】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスのタンパク質及び炭水化物から分離されていないカテキンを含む。
【0061】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、１：１～１：１０．５のタンパク質対炭水化物の比率を有する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、約１：４．５～４：１のタンパク質対炭水化物の比率を有する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、約１：２．５～２：１のタンパク質対炭水化物の比率を有する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、約１：２．４のタンパク質対炭水化物の比率を有する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、追加的に、繊維を含む。一実施形態では、バイオマスまたはさらなるバイオマスは、表１に示されるようなタンパク質対炭水化物の比率を有する。
【0062】
一実施形態では、バイオマスまたはさらなるバイオマスは、緑茶葉粉末（抹茶）である。一実施形態では、抹茶（約２％の湿気）は、乾燥ベースで約３５．５％のタンパク質、約３９．６％の炭水化物、約５．９％の脂肪、及び約６．０％の脂肪を含む。一実施形態では、抹茶は、約１３．１％のカテキンを含む。
【0063】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスにタンパク質を添加して、約１：１～１：１０．５のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスにタンパク質を添加して、約１：４．５～４：１のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスにタンパク質を添加して、約１：２．５～２：１のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。
【0064】
【表1】
【0065】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスに炭水化物を添加して、約１：１～１：１０．５のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスに炭水化物を添加して、約１：４．５～４：１のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスに炭水化物を添加して、約１：２．５～２：１のタンパク質対炭水化物の比率を形成する。
【0066】
一実施形態では、バイオマスは、生物全体またはその１つ以上の部分であり得る。
【0067】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、バイオマス全体（またはその一片）を新鮮な／生のまたは乾燥形態で含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、新鮮／生である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、本明細書に記載されるように前処理される。
【0068】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、バイオマスから及び／またはさらなるバイオマスからの１つ以上の成分を除去するのに好適な、本明細書に記載されるような抽出または分離プロセスの生成物である。
【0069】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、生物活性物質を含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、生物活性前駆体を含む。
【0070】
一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を、バイオマスまたはさらなるバイオマスに添加する。
【0071】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、真核生物である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、原核生物（例えば、藻類）である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、Ｐｌａｎｔａｅまたは菌界からのものである。
【0072】
材料は、関連する場合は、葉、茎、花、小花、種子、及び根のうちの１つ以上を含むが、これらに限定されない、Ｐｌａｎｔａｅまたは菌類の任意の部分であり得る。
【0073】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅである。本明細書で使用される場合、「Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ」は、一般的にカラシ、アブラナ科植物、またはキャベツ科と称される、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ科のメンバーを指す。
【0074】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅは、Ｂｒａｓｓｉｃａ属またはＣａｒｄａｍｉｎｅ属から選択される。一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｂａｌｅａｒｉｃａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｒｉｎａｔａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｅｌｏｎｇａｔｅ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｆｒｕｔｉｃｕｌｏｓａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｈｉｌａｒｉｏｎｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｊｕｎｃｅａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ（ナタネまたはキャノーラ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｒｉｎｏｓａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎｉｇｒａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｐｅｒｖｉｒｉｄｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒｕｐｅｓｔｒｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｓｅｐｔｉｃｅｐｓ、及びＢｒａｓｓｉｃａ ｔｏｕｒｎｅｆｏｒｔｉｉのうちの１つ以上から選択される。
【0075】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａである。
【0076】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ（ナタネまたはキャノーラ）である。
【0077】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｏｌｅｒａｃｅａ（野生のキャベツ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｃａｐｉｔａｔｅ（キャベツ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ亜種ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（チンゲンサイ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ亜種ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ（ハクサイ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｏｂｒａｓｓｉｃａ（ルタバガ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ変種ｒａｐａ（カブ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ａｌｂｏｇｌａｂｒａ（カイラン）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｖｉｒｉｄｉｓ（カラードグリーン）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｌｏｎｇａｔａ（ジャージーキャベツ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ａｃｅｐｈａｌａ（ハボタン）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｓａｂｅｌｌｉｃａ（ケール）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｐａｌｍｉｆｏｌｉａ（カーボロネロ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｒａｍｏｓｅ（パーペチュアルケール（ｐｅｒｐｅｔｕａｌ ｋａｌｅ））、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｍｅｄｕｌｌｏｓａ（マローキャベツ（ｍａｒｒｏｗ ｃａｂｂａｇｅ））、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｃｏｓｔａｔａ（トロンジューダケール（ｔｒｏｎｃｈｕｄａ ｋａｌｅ））、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｇｅｍｍｉｆｅｒａ（芽キャベツ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｇｏｎｇｙｌｏｄｅｓ（コールラビ）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｉｔａｌｉｃａ（ブロッコリー）、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｂｏｔｒｙｔｉｓ（カリフラワー、ロマネスコブロッコリー、ブロッコリージトルボレ（ｂｒｏｃｃｏｌｉ ｄｉ ｔｏｒｂｏｌｅ））、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｂｏｔｒｙｔｉｓ×ｉｔａｌｉｃａ（ブロッコフラワー）、及びＢｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｉｔａｌｉｃａ×ａｌｂｏｇｌａｂｒａ（スティックセニョール）のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａは、ケールである。
【0078】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｉｔａｌｉｃａ（ブロッコリー）である。
【0079】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｂｏｔｒｙｔｉｓ（カリフラワー）である。
【0080】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａは、Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ変種ｇｅｍｍｉｆｅｒａ（芽キャベツ）である。
【0081】
一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅは、Ｃａｒｄａｍｉｎｅ ｈｉｒｓｕｔａ（タネツケバナ）、Ｉｂｅｒｉｓ ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ（マガリバナ）、Ｓｉｎａｐｉｓ ａｒｖｅｎｓｉｓ（ノハラガラシ）、Ａｒｍｏｒａｃｉａ ｒｕｓｔｉｃａｎａ（西洋ワサビ）、Ｐｒｉｎｇｌｅａ ａｎｔｉｓｃｏｒｂｕｔｉｃａ（ケルゲレンキャベツ）、Ｔｈｌａｓｐｉ ａｒｖｅｎｓｅ（グンバイナズナ）、Ｒａｐｈａｎｕｓ ｒａｐｈａｎｉｓｔｒｕｍ亜種ｓａｔｉｖｕｓ（ダイコン）、Ｅｒｕｃａ ｓａｔｉｖａ（ハナダイコン）、Ａｎａｓｔａｔｉｃａ ｈｉｅｒｏｃｈｕｎｔｉｃａ（ジェリコのバラ）、Ｃｒａｍｂｅ ｍａｒｉｔｉｍａ（ハマナ）、Ｃａｋｉｌｅ ｍａｒｉｔｉｍａ（オニハマダイコン）、Ｃａｐｓｅｌｌａ ｂｕｒｓａ－ｐａｓｔｏｒｉｓ（ナズナ）、スイートアリッサム、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ（シロイヌナズナ）、Ｎａｓｔｕｒｔｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ（オランダガラシ）、Ｓｉｎａｐｉｓ ａｌｂａ（シロガラシ）、Ｅｒｏｐｈｉｌａ ｖｅｒｎａ（ウィットローグラス）、Ｒａｐｈａｎｕｓ ｒａｐｈａｎｉｓｔｒｕｍ（野ダイコン）、Ｉｓａｔｉｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉａ（ホソバタイセイ）、及びＮａｓｔｕｒｔｉｕｍ ｍｉｃｒｏｐｈｙｌｌｕｍ（ミチバタガラシ）のうちの１つ以上から選択される。
【0082】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｃａｎｎａｂｉｓである。一実施形態では、Ｃａｎｎａｂｉｓは、Ｃａｎｎａｂｉｓ ｓａｔｉｖａ（麻）である。
【0083】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、果物または野菜である。一実施形態では、果物は、単純な、集合した、及び複数の果物のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、果実または野菜は、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ科、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ科、Ａｒｅｃａｃｅａｅ科、Ｍｙｒｔａｃｅａｅ科、Ｒｏｓａｃｅａｅ科、Ｍｕｓａｃｅａｅ科、Ｅｒｉｃａｃｅａｅ科、Ｓａｘｉｆｒａｇａｃｅａｅ科、Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ科、Ｎｉｇｈｔｓｈａｄｅ科、Ｃａｐｐａｒａｃｅａｅ科、Ａｄｏｘａｃｅａｅ科、Ｖｉｔａｃｅａｅ科、Ｒｕｔａｃｅａｅ科、Ａｃｔｉｎｉｄｉａｃｅａｅ科、Ｓａｐｉｎｄａｃｅａｅ科、Ａｎａｃａｒｄｉａｃｅａｅ科、Ｍｏｒａｃｅａｅ科、Ｏｌｅａｃｅａｅ科、Ｃａｃｔａｃｅａｅ科、Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａｃｅａｅ科、Ｂｒｏｍｅｌｉａｃｅａｅ科、Ｃａｃｔａｃｅａｅ科、Ｌｙｔｈｒａｃｅａｅ科、Ｐｏｌｙｇｏｎａｃｅａｅ科、Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ科、Ｏｘａｌｉｄａｃｅａｅ科、及びＣａｅｓａｌｐｉｎｉｏｉｄｅａｅ科からのものである。
【0084】
一実施形態では、Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅは、ニンジンである。
【0085】
一実施形態では、Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅは、アスパラガスである。
【0086】
一実施形態では、Ｐｏｌｙｇｏｎａｃｅａｅは、ソバ、スイバ、及びルバーブのうちの１つ以上から選択される。
【0087】
一実施形態では、Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅは、キュウリ、カボチャ、スクワッシュ、及びズッキーニのうちの１つ以上から選択される。
【0088】
一実施形態では、果物は、リンゴ、アプリコット、アボカド、バナナ、ビルベリー、ブラックベリー、ブラックカラント、ブルーベリー、ココナッツ、スグリ、チェリー、チェリモヤ、クレメンタイン、クラウドベリー、ダムソン、ドリアン、エルダーベリー、イチジク、フェイジョア、グーズベリー、ブドウ、グレープフルーツ、グアバ、ハックルベリー、ジャックフルーツ、ジャンブル、ナツメ、キウイフルーツ、キンカン、レモン、ライム、ビワ、ライチ、マンダリン、マンゴー、メロン、カンタロープ、ハニーデュー、スイカ、ネクタリン、オレンジ、パッションフルーツ、ポポー、モモ、ナシ、プラム、プラムコット、パイナップル、ザクロ、ザボン、パープルマンゴスチン、ラズベリー、ランブータン、アカフサスグリ、サツマ、スターフルーツ、イチゴ、タンジェリン、トマト、及びアグリフルーツのうちの１つ以上から選択される。
【0089】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅである。一実施形態では、Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅは、アーティチョーク、カモミール、チコリ、タンポポ、エンダイブ、キクイモ、レタス、ロメインレタス、サフラワーバラモンジン、及びヒマワリのうちの１つ以上から選択される。
【0090】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ａｍａｒａｎｔｈａｃｅａｅ／Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃａｅである。一実施形態では、Ａｍａｒａｎｔｈａｃｅａｅ／Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃａｅは、アマランス、ビート、フダンソウ、シロザ、キノア、ホウレンソウ、及びテンサイのうちの１つ以上から選択される。
【0091】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｍａｌｖａｃｅａｅである。一実施形態では、Ｍａｌｖａｃｅａｅは、カカオ、綿、及びオクラのうちの１つ以上から選択される。
【0092】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ａｍａｒｙｌｉｄａｃｅａｅ科からのものである。一実施形態では、Ａｍａｒｙｌｉｄａｃｅａｅは、Ａｌｌｉｏｉｄｅａｅ亜科からのものである。一実施形態では、Ａｌｌｉｏｉｄｅａｅは、Ａｌｌｉｕｍ属からのものである。一実施形態では、Ａｌｌｉｕｍは、Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ（ニンニク）、Ａｌｌｉｕｍ ｃｅｐａ（タマネギ）、Ａｌｌｉｕｍ ａｍｐｅｌｏｐｒａｓｕｍ（ネギ）、Ａｌｌｉｕｍ ｓｃｈｏｅｎｏｐｒａｓｕｍ（チャイブ）、及びＡｌｌｉｕｍ ｏｓｃｈａｎｉｎｉｉ（エシャロット）のうちの１つ以上から選択される。
【0093】
一実施形態では、Ａｌｌｉｕｍは、Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ（ニンニク）である。
【0094】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｆａｂａｃｅａｅ科からのものである。一実施形態では、Ｆａｂａｃｅａｅは、大豆アルファルファ、豆、イナゴマメ、ヒヨコマメ、インゲンマメ、ヒカマ、レンズ豆、エンドウ豆、サヤエンドウ、及びピーナッツである。
【0095】
一実施形態では、Ｆａｂａｃｅａｅは、サヤエンドウである。
【0096】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、穀物である。一実施形態では、穀物は、古代の穀物である。一実施形態では、穀物は、米、トウモロコシ、小麦、ライ小麦、大麦、キビ、ソルガム、スペルト麦、オート麦、フリーカ、ブルグァ、モロコシ、エンマーコムギ、ヒトツブコムギ、テフ、エンマー、及び／またはソバのうちの１つ以上から選択される。
【0097】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ａｒｅｃａｃｅａｅ科からのものである。一実施形態では、Ａｒｅｃａｃｅａｅは、ココヤシである。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、ココナッツ核果である。
【0098】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、草である。一実施形態では、草は、Ｐｏａｃｅａｅ科からのものである。一実施形態では、草は、竹、レモングラス、サトウキビ、トウモロコシ、及びウィートグラスのうちの１つ以上から選択される。
【0099】
一実施形態では、Ｐｌａｎｔａｅは、Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ科からのものである。一実施形態では、Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓは、緑茶葉（抹茶）である。
【0100】
一実施形態では、菌類は、マッシュルームである。一実施形態では、菌類は、Ｂｏｌｅｔａｃｅａｅ科、Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｃｅａｅ科、Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｔａｃｅａｅ科、Ｃｏｒｔｉｎａｒｉａｃｅａｅ科、Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｃｅａｅ科、Ｍｅｒｉｐｉｌａｃｅａｅ科、Ｄｉｓｃｉｎａｃｅａｅ科、Ｐｌｅｕｒｏｔａｃｅａｅ科、Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｔａｃｅａｅ科、及びＴｕｂｅｒａｃｅａｅ科からのものである。
【0101】
一実施形態では、菌類は、Ｂｏｌｅｔｕｓ ｅｄｕｌｉｓ、Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌｕｓ ｃｉｂａｒｉｕｓ、Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌｕｓ ｔｕｂａｅｆｏｒｍｉｓ、Ｃｌｉｔｏｃｙｂｅ ｎｕｄａ、Ｃｏｒｔｉｎａｒｉｕｓ ｃａｐｅｒａｔｕｓ、Ｃｒａｔｅｒｅｌｌｕｓ ｃｏｒｎｕｃｏｐｉｏｉｄｅｓ、Ｇｒｉｆｏｌａ ｆｒｏｎｄｏｓａ、Ｈｅｒｉｃｉｕｍ ｅｒｉｎａｃｅｕｓ、Ｈｙｄｎｕｍ ｒｅｐａｎｄｕｍ、Ｌａｃｔａｒｉｕｓ ｄｅｌｉｃｉｏｓｕｓ、Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｃｏｎｉｃａ ｖａｒ．ｄｅｌｉｃｉｏｓａ、Ｍｏｒｃｈｅｌｌａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ ｖａｒ．ｒｏｔｕｎｄａ、Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｏｓｔｒｅａｔｕｓ、Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａ ｍａｔｓｕｔａｋｅ、Ｔｕｂｅｒ ｂｒｕｍａｌｅ、Ｔｕｂｅｒ ｉｎｄｉｃｕｍ、Ｔｕｂｅｒ ｍａｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｔｕｂｅｒ ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃｕｍ、及びＴｕｂｅｒ ａｅｓｔｉｖｕｍのうちの１つ以上から選択される。
【0102】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、動物のバイオマスまたは動物から生成された生成物ではない。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、鳥類ではない。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、骨または骨髄ではない。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、動物乳ではない。
【0103】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、牛乳、脱脂乳、または精製乳タンパク質及び炭水化物ではない。
【0104】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、化粧品の小売基準を満たさないか、またはもはや新鮮な販売には好適でないが依然として食用である、Ｐｌａｎｔａｅまたは菌類材料である。
【0105】
生物活性物質
本明細書で使用される場合、「生物活性物質」は、生物学的効果を有する物質を指す。一実施形態では、生物活性物質は、酸素（酸化）、温度、ｐＨ、湿気、及び光のうちの１つ以上による分解に感受性がある。一実施形態では、生物活性物質は、油、または油溶性物質である。
本明細書で使用される場合、「生物活性物質」は、生物学的効果を有する物質を指す。一実施形態では、生物活性物質は、酸素（酸化）、温度、ｐＨ、湿気、及び光のうちの１つ以上による分解に感受性がある。一実施形態では、生物活性物質は、油、または油溶性物質である。
【0106】
一実施形態では、生物活性物質は、脂肪酸、イソチオシアネート、ケルセチン、アリシン、アホエン、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、トコフェロール、トコトリエノール、ビタミンＫ、ベータカロチン、リコピン、ルテイン、ゼアキサンチン、スチグマステロール、ベータ－シトステロール、カンペステロール、抗酸化剤、コエンザイムＱ１０、アスタキサンチン、カンナビノイド、カンナビオジオール、及びポリフェノールのうちの１つ以上から選択される。
【0107】
一実施形態では、生物活性物質は、ケルセチン、アリシン、フェノール酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、生物活性物質は、アリシンである。一実施形態では、生物活性物質は、アホエンである。
【0108】
一実施形態では、生物活性物質は、ポリフェノールである。一実施形態では、ポリフェノールは、カテキン、フラボノール、フラバノール、アントシアナジン、レスベラトロール、及び／またはクルクミンのうちの１つ以上から選択される。さらなるポリフェノールを本明細書に記載する。
【0109】
一実施形態では、生物活性物質は、イソチオシアネートである。本明細書で使用される場合、「イソチオシアネート」は、一般構造Ｒ－Ｎ＝Ｃ＝Ｓを有する硫黄含有植物性化学物質を指し、これらは、グルコシノレートに対するミロシナーゼ活性の生成物及びその生物活性誘導体である。一実施形態では、イソチオシアネートは、スルフォラファン（１－イソチオシアナト－４－メチルスルフィニルブタン）である。一実施形態では、イソチオシアネートは、アリルイソチオシアネート（３－イソチオシアナト－１－プロペン）である。一実施形態では、イソチオシアネートは、ベンジルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、フェネチルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、３－ブテニルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、５－ビニル－１，３－オキサゾリジン－２－チオンである。一実施形態では、イソチオシアネートは、３－（メチルチオ）プロピルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、３－（メチルスルフィニル）－プロピルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、４－（メチルチオ）－ブチルイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、１－メトキシインドール－３－カルビノールイソチオシアネートである。一実施形態では、イソチオシアネートは、２－フェニルエチルイソチオシアネート（フェニルエチルイソチオシアネートまたはＰＥＩＴＣとしても知られる）である。一実施形態では、イソチオシアネートはイベリンである。
【0110】
一実施形態では、生物活性物質がイソチオシアネートである場合、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、１つ以上のイソチオシアネート生物活性誘導体（複数可）またはそれらのオリゴマーをさらに含む。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、本明細書に記載されるようなイソチオシアネートのいずれかの誘導体である。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、スルフォラファンの誘導体である。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、インドール－３－カルビノールである。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、メトキシ－インドール－３－カルビノールである。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、アスコルビゲンである。一実施形態では、イソチオシアネート生物活性誘導体は、ネオアスコルビゲンである。
【0111】
一実施形態では、生物活性物質は、バイオマスの成分である。一実施形態では、生物活性物質は、さらなるバイオマスの成分である。一実施形態では、生物活性物質は、バイオマスまたはさらなるバイオマス中に存在せず、本明細書に記載されるような水性混合物の調製の前、間、または後に添加される。一実施形態では、生物活性物質は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）の前、間、または後に添加される。一実施形態では、生物活性物質は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉｉ）の前または間に添加される。一実施形態では、生物活性物質は、ステップｉｉ）の油またはその成分である。一実施形態では、生物活性物質は、ステップｉｉ）で油が水性混合物懸濁液に添加される前に油に添加される成分である。一実施形態では、生物活性物質は、ステップｉｉ）の前または間に油に注入される成分である。一実施形態では、生物活性物質は、ステップｉ）で、もしくはステップｉ）の後、またはステップｉｉ）で形成される。
【0112】
一実施形態では、生物活性物質は、合成的に生成された生物活性物質である。一実施形態では、生物活性物質は、合成的に生成されたイソチオシアネートである。一実施形態では、生物活性物質は、合成的に生成されたスルフォラファンである。
【0113】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが、ｉ）Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅを含む場合、生物活性物質は、イソチオシアネートであり、ｉｉ）Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅを含む場合、生物活性前駆体は、グルコシノレートであり、ｉｉｉ）タマネギを含む場合、生物活性物質は、ケルセチン、アリシン、及びフェノール酸のうちの１つ以上であり、ｉｖ）ニンニクを含む場合、生物活性物質は、アリシン及びアホエンのうちの１つ以上であり、あるいはｖ）ポリフェノールを含有する果物及び／または野菜である。一実施形態では、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅは、ブロッコリーであり、イソチオシアネートは、スルフォラファンである。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスからの生物活性物質は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）またはステップｉｉｉ）で油に注入される。
【0114】
一実施形態では、生物活性物質は、植物栄養素である。本明細書で使用される場合、「植物栄養素」は、健康への好ましい影響に関連する植物由来の物質を指す。一実施形態では、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、１つ以上の植物栄養素（複数可）を含む。一実施形態では、植物栄養素は、ベタレイン、インドール、有機硫化物、フェノール、テルペン、トリテルペン、カロチノイド、クルクミノイド、フラボノイド、グルコシノレート、イソチオシアネート、ヒドロキシ桂皮酸、リグナン、脂質、スチルベン、スルフィド、トコフェロール、ルテイン、ゼアンチン、イソフラボン、フラボノイド、クメスタン、リコピン、エラグ酸、カフェオイルキナ酸、ヒドロキシ安息香酸、ヘスペレチン、フラボノール、テルペノイド、フタリド、フラボノール、アリシンケルセチン、硫化物、アントシアニン、レスベラトロール、及びアントキサンチンのうちの１つ以上から選択される。
【0115】
一実施形態では、植物栄養素は、着色された植物栄養素である。一実施形態では、着色された植物栄養素は、アントシアニン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピン、カロチノイド、及び／またはアントキサンチンのうちの１つ以上から選択される。
【0116】
一実施形態では、生物活性物質は、脂肪酸である。本明細書で使用される場合、「脂肪酸」という用語は、しばしば飽和または不飽和のいずれかの長い脂肪族尾部を有するカルボン酸（または有機酸）を指す。典型的には、脂肪酸は、長さが少なくとも４つの炭素原子（Ｃ４）または少なくとも８つの炭素原子（Ｃ８）、より好ましくは長さが少なくとも１２個の炭素の炭素－炭素結合鎖を有する。本発明の好ましい脂肪酸は、１８～２２個の炭素原子（Ｃ１８、Ｃ２０、Ｃ２２脂肪酸）、より好ましくは２０～２２個の炭素原子（Ｃ２０、Ｃ２２）、最も好ましくは２２個の炭素原子（Ｃ２２）の炭素鎖を有する。ほとんどの天然に存在する脂肪酸は、それらの生合成が２つの炭素原子を有するアセテートを含むため、偶数の炭素原子を有する。脂肪酸は、遊離状態（非エステル化）、またはトリグリセリド、ジアシルグリセリド、モノアシルグリセリド、アシル－ＣｏＡ（チオエステル）結合形態、もしくは他の結合形態の一部などのエステル化形態であり得る。脂肪酸は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、またはジホスファチジルグリセロールの形態などのリン脂質としてエステル化され得る。一実施形態では、脂肪酸は、例えば、Ｃ２０またはＣ２２多価不飽和脂肪酸のメチルまたはエチルエステルなどのメチルまたはエチル基にエステル化される。好ましい脂肪酸は、エイコサトリエン酸、ドコサペンタエン酸、もしくはドコサヘキサエン酸のメチルもしくはエチルエステル、またはエイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸の混合物、またはエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸の混合物、またはエイコサペンタエン酸及びドコサペンタエン酸の混合物である。
【0117】
一実施形態では、脂肪酸は、多価不飽和脂肪酸である。本明細書で使用される場合、「多価不飽和脂肪酸」は、その骨格に１つ超の二重結合を含む脂肪酸を指す。一実施形態では、多価不飽和脂肪酸は、オメガ－３、オメガ－６、またはオメガ－９のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、オメガ－３は、ヘキサデカトリエン酸、アルファ－リノレン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘンエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、及びテトラコサヘキサエン酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、生物活性物質（複数可）は、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、及びドコサヘキサエン酸のうちの１つ以上または全てである。一実施形態では、オメガ－６は、リノール酸、ガンマ－リノレン酸、エイコサジエン酸、ジホモ－ガンマ－リノレン酸、アラキドン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、及びテトラコサペンタエン酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、オメガ－９油は、オレイン酸、エイコセン酸、ミード酸、エルカ酸、及びネルボン酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、生物活性物質は、トリグリセリドである。
【0118】
一実施形態では、生物活性物質は、油である。
【0119】
生物活性前駆体
一実施形態では、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、生物活性前駆体を含む。一実施形態では、生物活性前駆体を、本明細書に記載されるような油に添加する。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、生物活性前駆体を含む。一実施形態では、生物活性前駆体を、本明細書に記載されるような油に添加する。
【0120】
一実施形態では、生物活性前駆体は、グルコシノレートである。本明細書で使用される場合、「グルコシノレート」は、少なくともＢｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ科に見られる二次代謝産物を指し、それらは、Ｈａｌｋｉｅｒ ａｎｄ Ｇｅｒｓｈｅｎｚｏｎ（２００６）に記載されているように、硫黄原子を介して（Ｚ）－Ｎ－ヒドロキシイミノサルフェートエステルと、アミノ酸に由来する多様なＲ基と、に連結されたβ－Ｄ－グルコピラノース残基からなる化学構造を共有する。グルコシノレートの例は、Ｈａｌｋｉｅｒ ａｎｄ Ｇｅｒｓｈｅｎｚｏｎ（２００６）及びＡｇｅｒｂｉｒｋ ａｎｄ Ｏｌｓｅｎ（２０１２）に提供されている。グルコシノレートの加水分解によって、イソチオシアネート、ニトリル、エピチオニトリル、チオシアネート、及びオキサゾリジン－２－チオンが生成され得る。多くのグルコシノレートは、害虫及び疾患に対する植物の防御機構という役割を果たしている。
【0121】
グルコシノレートは、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ中の貯蔵部位に保存される。本明細書で使用される場合、「貯蔵部位」は、グルコシノレートが存在し、ミロシナーゼが存在していないＢｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ内の部位である。
【0122】
本明細書で使用される場合、「ミロシナーゼ」は、「チオグルコシダーゼ」、「シニグラーゼ」、または「シニグリナーゼ」とも称され、チオ結合グルコースを切断し得る植物防御機構に関与する酵素のファミリー（ＥＣ３．２．１．１４７）を指す。ミロシナーゼは、グルコシノレートの加水分解を触媒し、イソチオシアネートの生成をもたらす。ミロシナーゼは、ミロシン細胞と呼ばれる特定の異型細胞の液胞中にミロシン粒として保存されることもあるが、タンパク粒または液胞中で、及び膜に結合する傾向がある細胞質酵素としても報告されている。
【0123】
一実施形態では、本明細書に記載されるような前処理は、ミロシナーゼの、イソチオシアネート生物活性物質を生成するグルコシノレートへのアクセスを改善する。本明細書で使用されるような「アクセスを改善する」または「アクセスが改善される」とは、イソチオシアネートの生成を可能にするミロシナーゼ酵素に対するグルコシノレートの利用可能性を増加させることを指す。一実施形態では、アクセスは、グルコシノレート保存部位からのグルコシノレートの放出によって改善される。一実施形態では、グルコシノレート保存部位は、機械的に破裂される（すなわち、浸軟によって）。一実施形態では、アクセスは、グルコシノレート保存部位へのミロシナーゼの進入を可能にすることによって改善される。一実施形態では、アクセスは、ミロシン細胞からのミロシナーゼの放出によって改善される。一実施形態では、約１０％～約９０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約２０％～約８０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約３０％～約７０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約４０％～約６０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約４５％～約５５％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約１０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約２０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約３０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約４０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約５０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約６０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約７０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約８０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。一実施形態では、約９０％のグルコシノレートが、グルコシノレート貯蔵部位から放出される。
【0124】
一実施形態では、グルコシノレート（複数可）は、脂肪族、インドール、または芳香族グルコシノレートのうちの１つ以上から選択される。
【0125】
一実施形態では、脂肪族グルコシノレートは、グルコラファニン（４－メチルスルフィニルブチルまたはグルコラファニン）、シニグリン（２－プロペニル）、グルコナピン（３－ブテニル）、グルコブラシカナピン（４－ペンテニル）、プロゴイトリン（２（Ｒ）－２－ヒドロキシ－３－ブテニル）、エピプロゴイトリン（２（Ｓ）－２－ヒドロキシ－３－ブテニル）、グルコナポレイフェリン（２－ヒドロキシ－４－ペンテニル）、グルコイベルビリン（３－メチルチオプロピル）、グルコエルシン（４－メチルチオブチル）、デヒドロエルシン（４－メチルチオ－３－ブテニル）、グルコイベリン（３－メチルスルフィニルプロピル）、グルコラフェニン（４－メチルスルフィニル－３－ブテニル）、グルコアリシン（５－メチルスルフィニルペンテニル）、及びグルコエリソリン（３－メチルスルホニルブチル、４－メルカプトブチル）のうち１つ以上から選択される。
【0126】
一実施形態では、インドールグルコシノレートは、グルコブラシシン（３－インドリルメチル）、４－ヒドロキシグルコブラシシン（４－ヒドロキシ－３－インドリルメチル）、４－メトキシグルコブラシシン（４－メトキシ－３－インドリルメチル）、及びネオグルコブラシシン（１－メトキシ－３－インドリルメチル）のうち１つ以上から選択される。
【0127】
一実施形態では、インドールグルコシノレートは、グルコトロぺオリン（ベンジル）及びグルコナスツルチイン（２－フェニルエチル）のうち１つ以上から選択される。
【0128】
一実施形態では、グルコシノレートは、ベンジルグルコシノレート、アリルグルコシノレート、及び４－メチルスルフィニルブチルのうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、グルコシノレートは、グルコラファニン（４－メチルスルフィニルブチル）である。一実施形態では、グルコシノレートは、グルコブラシシン（３－インドリルメチル）である。
【0129】
一実施形態では、グルコシノレートは、本明細書に記載されるような粉末を生成する方法のステップｉ）、ｉｉ）、及び／またはｉｉｉ）の前または間にイソチオシアネートに変換される。
【0130】
一実施形態では、生物活性前駆体は、バイオマスの成分である。一実施形態では、生物活性前駆体は、さらなるバイオマスの成分である。一実施形態では、生物活性前駆体は、バイオマスまたはさらなるバイオマス中に存在せず、本明細書に記載されるような水性混合物の調製の前、間、または後に添加される。一実施形態では、生物活性前駆体は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）の前、間、または後に添加される。一実施形態では、生物活性前駆体は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉｉ）の前または間に添加される。一実施形態では、生物活性前駆体は、ステップｉｉ）における油またはその成分である。一実施形態では、生物活性前駆体は、油がステップｉｉ）で水性混合物に添加される前に油に添加される成分である。一実施形態では、生物活性前駆体は、ステップｉｉ）の前または間に油に注入される成分である。
【0131】
前処理
一実施形態では、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、前処理される。本明細書で使用される場合、「前処理」または「前処理すること」または「前処理された」は、材料をより小さな成分に分解するか、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの成分を除去する（例えば、摂取に好適でない特定の成分を除去するか、または異なる用途のために特定の成分、例えば油を抽出する）か、またはバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの成分を改変するためのバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの処理を指す。一実施形態では、成分を改変することは、例えば、生物活性物質を生成すること、またはオリゴ糖もしくは多糖を生成することを含む。一実施形態では、前処理は、バイオマスまたはさらなるバイオマスにおける炭水化物対タンパク質の比率を変更しない。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、前処理される。本明細書で使用される場合、「前処理」または「前処理すること」または「前処理された」は、材料をより小さな成分に分解するか、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの成分を除去する（例えば、摂取に好適でない特定の成分を除去するか、または異なる用途のために特定の成分、例えば油を抽出する）か、またはバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの成分を改変するためのバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの処理を指す。一実施形態では、成分を改変することは、例えば、生物活性物質を生成すること、またはオリゴ糖もしくは多糖を生成することを含む。一実施形態では、前処理は、バイオマスまたはさらなるバイオマスにおける炭水化物対タンパク質の比率を変更しない。
【0132】
一実施形態では、前処理は、以下：ｉ）加熱、ｉｉ）浸軟、ｉｉｉ）マイクロ波処理、ｉｖ）低周波音波（超音波）への曝露、ｖ）パルス電界処理、ｖｉ）静的高圧、ｖｉｉ）押出成形、ｖｉｉｉ）酵素処理、ｉｘ）発酵、ｘ）抽出または分離プロセス、及びｘｉ）乾燥のうちの１つ以上を含む。
【0133】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、燃料ベースの加熱システム、電気ベースの加熱システム（すなわち、オーブンもしくはオーム加熱）、高周波加熱、高圧熱処理、レトルト中の超高温度（ＵＨＴ）処理プラント、または蒸気ベースの加熱システム（蒸気の間接もしくは直接適用）で加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、オーブン、水浴、バイオリアクター、ストーブ、ウォーターブランチャー、またはスチームブランチャーで加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、高圧熱的加熱を介して加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、オーム加熱を介して加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、高周波数加熱を介して加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、高圧熱処理を介して加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、高圧熱処理のために密封パックまたは容器中に置かれる。
【0134】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約５０℃～約１４０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約５５℃～約７０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約６０℃～約７０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約６５℃～約７０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約７０℃～約１４０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約８０℃～約１３０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約９０℃～約１２０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約１００℃～約１１０℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約２分間、約７５℃に加熱することを含む。一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約３０分間、約１００℃に加熱することを含む。一実施形態では、前処理は、上記の温度範囲の下限で長時間加熱すること、または上記の温度範囲の上限で短時間処理することを含む。
【0135】
一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを蒸すことを含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、約１００℃の温度まで蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも約３０秒間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも１分間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも２分間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも３分間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも４分間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、少なくとも５分間蒸す。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、約１００℃の温度まで３０分間蒸す。
【0136】
一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの超高温（ＵＨＴ）処理を含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、約１４０℃の温度でＵＨＴ処理する。
【0137】
一実施形態では、加熱は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスのレトルト処理を含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、約１１６℃～約１３０℃の温度でレトルト処理する。
【0138】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを浸軟することを含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを、シュレッダー、ブレンダー、コロイドミル、グラインダー、または粉砕機で浸軟する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが２ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが１ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが０．５ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが０．２５ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが０．１ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが０．０５ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスが浸軟されるため、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの少なくとも８０％は、サイズが０．０２５ｍｍ以下である。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に加熱される。いくつかの実施形態では、加熱は、生物活性前駆体の、例えば、スルフォラファン及びアホエンなどの生物活性物質への変換を促進する。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約２５℃～約８０℃の温度に加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約４０℃～約７０℃の温度に加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約５０℃～約７０℃の温度に加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約６０℃～約７０℃の温度に加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約２～５分間、約７０℃の温度に加熱される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、浸軟中に約１～約５時間、約３０℃～約８０℃の温度に加熱される。
【0139】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを加熱及び浸軟することを含む。
【0140】
当業者であれば、「マイクロ波」または「マイクロ波処理」が、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスなどの物質を、マイクロ波照射を物質に通過させることによって加熱すると理解するであろう。一実施形態では、前処理することは、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスをマイクロ波処理することを含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、家庭用マイクロ波または工業用マイクロ波で前処理される。一実施形態では、工業用マイクロ波は、連続マイクロ波システムであり、例えば、ＭＩＰ １１ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ Ｃｏｏｋｉｎｇ Ｏｖｅｒ（Ｆｅｒｒｉｔｅ Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）であるが、これに限定されない。一実施形態では、前処理することは、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスをマイクロ波処理することを含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、約０．９～約２．４５ＧＨｚでマイクロ波処理される。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、少なくとも３０秒間、または少なくとも１分間、または少なくとも２分間、または少なくとも３分間、マイクロ波処理される。一実施形態では、マイクロ波処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの温度を約７０～約８０℃、好ましくは約７６℃に上昇させる。
【0141】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを低～中周波の超音波に曝露することを含む。一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを熱超音波処理（約５０℃～約１４０℃の熱を有する低～中周波超音波）に曝露することを含む。一実施形態では、超音波は、工業規模の超音波処理装置を用いて発生される。一実施形態では、超音波処理装置は、連続式またはバッチ式の超音波処理装置である。一実施形態では、超音波処理装置は、例えば、ＵＩＰ５００ｈｄまたはＵＩＰ４０００（Ｈｉｅｌｓｃｈｅｒ、Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）であるが、これに限定されない。一実施形態では、超音波は、約２０ｋＨｚ～約６００ｋＨｚの周波数のものである。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、少なくとも３０秒間、または少なくとも１分間、または少なくとも２分間、または少なくとも３分間、または約５分間、または約６分間、または約７分間、または約７．５分間、または約８分間、音波に曝露される。
【0142】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスをパルス電界処理に曝露することを含む。パルス電界処理は、高電圧短パルスの印加を含む非熱処理技術である。パルスは、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの細胞のエレクトロポレーションを誘発する。一実施形態では、パルス電界処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約５０℃～約１４０℃の温度に加熱する。一実施形態では、パルス電界処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約７０℃～約１１０℃の温度に加熱する。一実施形態では、パルス電界処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約８０℃～約１００℃の温度に加熱する。一実施形態では、パルス電界処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約２０～約８０ｋＶの電圧パルスで処理することを含む。
【0143】
一実施形態では、前処理は、静水圧を含む。一実施形態では、静水圧は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを約１００～約６００ ＭＰａで処理することを含む。
【0144】
一実施形態では、前処理は、押出成形を含む。一実施形態では、押出成形は、通常は、オリフィスを通した物質の排出前にバレルを通して高温及び／または高圧で力をバイオマスまたは生成物に加えることを含む。一実施形態では、押出成形中に加える高温、高圧、及び機械力により、材料の機能特性が変化する。一実施形態では、押出成形プロセスは、共回転二軸押出機（ＭＰＦ １８：２５，ＡＰＶ Ｂａｋｅｒ Ｌｔｄ．，Ｐｅｔｅｒｂｏｒｏｕｇｈ，ＵＫ）またはラボスケールの共回転で相互に噛み合った二軸実験室用押出機（ＫＤＴ３０－ＩＩ，Ｊｉｎａｎ Ｋｒｅｄｉｔ Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ Ｃｏ．Ｌｔｄ．，Ｃｈｉｎａ）を使用して実施される。一実施形態では、押出成形プロセスは、メイラード反応生成物を生成する。
【0145】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマス中の１つ以上の成分を新しい成分に変換するための酵素処理を含む。例えば、酵素は、単糖をオリゴ糖または多糖に変換する。一実施形態では、酵素は、グリコシルトランスフェラーゼ、ｉｉ）グリコシダーゼ、ｉｉｉ）ペクチナーゼ、ｉｖ）エステラーゼ、ｖ）、オキシドレダクターゼ、ｖｉ）プロテアーゼ、ｖｉｉ）ペクチナーゼ、ｖｉｉｉ）ポリガラクツロナーゼ、ｉｘ）アミラーゼ、及びｘ）プルラナーゼのうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、グリコシルトランスフェラーゼは、ｉ）デキストラスクラーゼ、ｉｉ）アルテルナンスクラーゼ、及びｉｉｉ）フルクトシルトランスフェラーゼのうちの１つ以上または全てから選択される。一実施形態では、フルクトシルトランスフェラーゼは、例えば、レバンスクラーゼ及び／またはイヌロスクラーゼである。一実施形態では、オキシドレダクターゼは、マンニトールデヒドロゲナーゼである。
【0146】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを発酵させることを含む。本明細書で使用される場合、「発酵」とは、例えば、乳酸菌及び／または酢酸菌などの細菌によるバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの生化学的分解を指す。本明細書で使用される場合、「乳酸菌（ｌａｃｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ）」または「乳酸菌（ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ）」は、炭水化物発酵の主要産物として乳酸を生成する細菌である。本明細書で使用される場合、「酢酸菌（ａｃｅｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ）」または「酢酸菌（ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ）」は、炭水化物発酵の最終産物として酢酸を生成する細菌である。
【0147】
一実施形態では、乳酸菌及び／または酢酸菌は、マンニトール、オリゴ糖、及び／または多糖の生成を触媒する酵素を生成する。
【0148】
一実施形態では、乳酸菌は、Ｇｅｎｅｒａ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｐｏｒｏｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｔｅｔｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ、及び／またはＷｅｉｓｓｅｌｌａのうちの１つ以上からのものである。一実施形態では、乳酸菌は、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ、及び／またはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉのうちの１つ以上から選択される。
【0149】
Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓは、グラム陽性着生細菌（ＭｃＣｌｅｓｋｅｙ ｅｔ ａｌ．，１９４７）である。Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓはまた、食肉業界で天然の防腐剤として使用されている抗菌タンパク質バクテリオシンも生成する。一実施形態では、乳酸菌は、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓである。一実施形態では、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓは、Ｏｌｖｅｒａ ｅｔ ａｌ．（２００７）で調査された、ＡＴＣＣ ８２９３（ＮＲＲＬ Ｂ－１１１８と同等）及び／またはＮＲＲＬ Ｂ－５１２Ｆから選択される。
【0150】
一実施形態では、乳酸菌は、Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅからのものである。一実施形態では、Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅは、Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒである。
【0151】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、約８時間～約３０時間の発酵を含む。一実施形態では、発酵は、少なくとも８時間である。一実施形態では、発酵は、少なくとも１０時間である。一実施形態では、発酵は、少なくとも１５時間である。一実施形態では、発酵は、少なくとも２０時間である。一実施形態では、発酵は、少なくとも２４時間である。一実施形態では、発酵は、少なくとも３０時間である。一実施形態では、発酵は、約５～約７のｐＨである。一実施形態では、発酵は、約５．３のｐＨである。一実施形態では、ステップｉ）からの材料は、発酵の終了時に約４のｐＨである。一実施形態では、発酵の温度は、約２４℃～約３６℃である。一実施形態では、発酵の温度は、約２８℃～約３２℃である。一実施形態では、発酵の温度は、約３０℃である。
【0152】
一実施形態では、前処理は、グルコシノレート保存部位からグルコシノレートを放出する、もしくはその放出に役立つ、及び／またはミロシナーゼがバイオマス及び／またはさらなるバイオマス中のグルコシノレート保存部位に進入することを可能にする。一実施形態では、前処理は、グルコシノレートのミロシナーゼへの曝露を増加させ、ミロシナーゼがグルコシノレートをイソチオシアネートに変換することを可能にする。
【0153】
一実施形態では、前処理によって、グルコシノレートの約１０％～約９０％がイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約２０％～約８０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約３０％～約７０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約４０％～約６０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約１０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約２０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約３０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約４０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約５０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約６０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約７０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約８０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。一実施形態では、前処理によって、約９０％のグルコシノレートがイソチオシアネートに変換される。
【0154】
一実施形態では、前処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスを抽出または分離プロセスで処理して、バイオマス及び／またはさらなるバイオマス（例えば、バイオマスは、キャノーラ油が除去された、または部分的に除去されたキャノーラミールであり得る）中の１つ以上の成分の量を減少させることを含む。一実施形態では、他の成分は、他の製品を生成するのに好適であるか、あるいはバイオマス及び／またはさらなるバイオマスの非食用もしくは味の悪い成分である。
【0155】
一実施形態では、抽出または分離プロセスは、油、生物活性物質もしくは生物活性前駆体、ポリフェノール、カロチノイド、またはジュースから選択される成分をバイオマスから除去するためのものである。一実施形態では、抽出または分離プロセスは、本明細書に記載されるような方法においてバイオマスとして使用され得る、キャノーラミール、ナッツミール、大豆ミール、ココナッツミール、パーム核ミール、麻油プレスケーキ、チア油シードケーキ、または米ぬかを生成する。一実施形態では、抽出または分離プロセスは、本明細書に記載されるような方法においてバイオマスとして使用され得る、搾りかす（例えば、オリーブまたはリンゴの搾りかす）を生成する。一実施形態では、抽出または分離プロセスは、非食用成分（例えば、種子または茎）をバイオマスから除去することを含み得る。一実施形態では、抽出または分離プロセスは、粉砕、切断、製粉、遠心分離、及び／または濾過を含み得る。
【0156】
本明細書で使用される場合、「低減される」とは、抽出プロセスによる処理の前のバイオマスまたはさらなるバイオマス中よりも、抽出プロセスによる処理の後のバイオマスまたはさらなるバイオマス中の成分のレベルが低いことを意味する。
【0157】
一実施形態では、成分のレベルは、約５％～約９０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約５％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約１０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約１５％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約２０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約３０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約４０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約５０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約６０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約７０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約８０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約９０％低減される。一実施形態では、成分のレベルは、約１００％低減される。
【0158】
一実施形態では、前処理は、バイオマスを乾燥または部分的に乾燥させることを含む。一実施形態では、乾燥は、トレイ乾燥、ドラム乾燥、ローラー乾燥、流動床乾燥、衝突乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥（リュフィリゼーションまたは低温乾燥）、薄膜ベルト乾燥機、真空マイクロ波乾燥、超音波支援乾燥、押出多孔質化技術（ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ ｐｏｒｏｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、または当業者に知られている任意の他の方法を含む。一実施形態では、前処理は、バイオマスを凍結乾燥することを含む。一実施形態では、前処理は、バイオマスを加熱し、次に凍結乾燥することを含む。一実施形態では、前処理は、ドラム乾燥を含む。一実施形態では、前処理は、噴霧乾燥を含む。
【0159】
当業者であれば、前処理が、タンパク質を個別に精製すること、及びバイオマスから炭水化物を精製することを含まないことを理解するであろう。
【0160】
一実施形態では、前処理は、バイオマス中のタンパク質対炭水化物の比率を変更しない。
【0161】
水性混合物の調製
本明細書に記載されるように、本発明の方法は、タンパク質及び炭水化物を含む第１の生物種からのバイオマスから水性混合物を得ることを含む。本明細書で使用される場合、「水性混合物」は、水を含むバイオマスを含む混合物を指す。一実施形態では、水性混合物は、生物種からの少なくとも１つのさらなるバイオマス（例えば、第２、第３、第４、第５など）からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。一実施形態では、水性混合物は、均質である。一実施形態では、水性混合物は、懸濁液である。
本明細書に記載されるように、本発明の方法は、タンパク質及び炭水化物を含む第１の生物種からのバイオマスから水性混合物を得ることを含む。本明細書で使用される場合、「水性混合物」は、水を含むバイオマスを含む混合物を指す。一実施形態では、水性混合物は、生物種からの少なくとも１つのさらなるバイオマス（例えば、第２、第３、第４、第５など）からのタンパク質及び炭水化物をさらに含む。一実施形態では、水性混合物は、均質である。一実施形態では、水性混合物は、懸濁液である。
【0162】
一実施形態では、本方法は、水性混合物を形成することをさらに含む。一実施形態では、水性混合物は、約４０℃～約１００℃の温度の水をバイオマス及び任意選択的にさらなるバイオマスと組み合わせることによって形成される。一実施形態では、水性混合物は、約４０℃～約８０℃の温度の水をバイオマス及び任意選択的にさらなるバイオマスと組み合わせることによって形成される。一実施形態では、水性混合物は、約４５℃～約７０℃の温度の水をバイオマス及び任意選択的にさらなるバイオマスと組み合わせることによって形成される。一実施形態では、水性混合物は、約５５℃～約６５℃の温度の水をバイオマス及び任意選択的にさらなるバイオマスと組み合わせることによって形成される。一実施形態では、水性混合物は、約６０℃の温度の水をバイオマス及び任意選択的にさらなるバイオマスと組み合わせることによって形成される。
【0163】
一実施形態では、水性混合物は、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む。一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマス中に存在する生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）またはｉｉｉ）における油への注入に好適な形態で水性混合物中に存在する。
【0164】
一実施形態では、本方法のステップｉｉ）またはｉｉｉ）における油への注入に好適な生物活性物質及び／または生物活性前駆体を、水性混合物に添加する。
【0165】
一実施形態では、ミネラルは、水性混合物の調製前、または本明細書に記載されるような方法のステップｉ）またはｉｉ）において、バイオマスに添加される。一実施形態では、ミネラルは、亜鉛、カルシウム、マグネシウム、セレン、及びクロムのうちの１つ以上から選択される。
【0166】
脂質
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、脂質の添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「脂質」は、水には不溶であるが有機溶媒には可溶である長直鎖カルボン酸のエステルを指す。一実施形態では、脂質は、鹸化可能である。一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるような油である。一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるようなワックスである。
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、脂質の添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「脂質」は、水には不溶であるが有機溶媒には可溶である長直鎖カルボン酸のエステルを指す。一実施形態では、脂質は、鹸化可能である。一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるような油である。一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるようなワックスである。
【0167】
油
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、水性混合物への油の添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「油」は、疎水性かつ親油性であり、水と混和しない粘性液体を指す。一実施形態では、油は、酸化、温度、ｐＨ、湿気、及び光のうちの１つ以上による劣化を受けやすい。一実施形態では、油は、生物活性物質である。
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、水性混合物への油の添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「油」は、疎水性かつ親油性であり、水と混和しない粘性液体を指す。一実施形態では、油は、酸化、温度、ｐＨ、湿気、及び光のうちの１つ以上による劣化を受けやすい。一実施形態では、油は、生物活性物質である。
【0168】
一実施形態では、油は、本明細書に記載されるような脂肪酸を含む。一実施形態では、油は、本明細書に記載されるような多価不飽和脂肪酸を含む。一実施形態では、多価不飽和脂肪酸は、オメガ－３、オメガ－６、またはオメガ－９脂肪酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、オメガ－３は、ヘキサデカトリエン酸、アルファ－リノレン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘンエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、及びテトラコサヘキサエン酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、オメガ－６は、リノール酸、ガンマ－リノレン酸、エイコサジエン酸、ジホモ－ガンマ－リノレン酸、アラキドン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、及びテトラコサペンタエン酸のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、オメガ－９は、オレイン酸、エイコセン酸、ミード酸、エルカ酸、及びネルボン酸のうちの１つ以上から選択される。
【0169】
一実施形態では、油は、Ｐｌａｎｔａｅ油である。一実施形態では、油は、植物油である。一実施形態では、油は、動物油である。一実施形態では、動物油は、海産油または魚油である。
【0170】
一実施形態では、油は、魚油、オキアミ油、海産油、キャノーラ油、ヒマワリ油、アボカド油、大豆油、ボラージ油、マツヨイグサ油、ベニバナ油、亜麻仁油、オリーブ油、カボチャ種子油、麻実油、小麦胚芽油、パーム油、パームオレイン、パーム核油、ココナッツ油、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、及びブドウ種子油のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、キャノーラ油は、必要なエロンガーゼ及びデサチュラーゼをコードするトランスジェニックＢｒａｓｓｉｃａから得られ得る、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などの１つ以上の長鎖多価不飽和脂肪酸を含む（例えば、ＷＯ２０１５／０８９５８７を参照）。
【0171】
一実施形態では、魚油は、マグロ油、ニシン油、サバ油、カタクチイワシ油、イワシ油、タラ肝油、及びサメ油のうちの１つ以上から選択される。
【0172】
一実施形態では、精油は、オレガノ油、ミント油、バジル油、ローズマリー油、ティーツリー油、タイム油、ショウノウ油、カルダモン油、カンキツ油、クローブ油、及び／またはサフラン油のうちの１つ以上から選択される。
【0173】
一実施形態では、油は、乳脂肪を含む。
【0174】
一実施形態では、油は、オリーブ油である。
【0175】
一実施形態では、油は、ヒマワリ油である。
【0176】
一実施形態では、油は、キャノーラ油である。
【0177】
一実施形態では、油は、１つ以上の生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）を含む。したがって、いくつかの実施形態では、油は、生物活性担体として機能する。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、油が水性混合物に添加される前に、油に添加される。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）で油に注入される。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉｉ）で油に注入される。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、本明細書に記載されるようなバイオマス及び／またはさらなるバイオマスからのものである。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスからのものではない。
【0178】
ワックス
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、ワックスの添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「ワックス」または「ワックス類」は、長鎖飽和及び不飽和脂肪酸と長鎖アルコールとのエステルである。一実施形態では、長鎖飽和脂肪酸は、Ｃ１４～Ｃ２６である。一実施形態では、長鎖アルコールを有する不飽和脂肪酸は、Ｃ１６～Ｃ３０である。一実施形態では、ワックスは、カンデリラワックス、カルナウバワックス、ミツロウ、米ぬかワックス、サトウキビワックス、及びヒマワリワックスのうちの１つ以上から選択される。
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、ワックスの添加をさらに含む。本明細書で使用される場合、「ワックス」または「ワックス類」は、長鎖飽和及び不飽和脂肪酸と長鎖アルコールとのエステルである。一実施形態では、長鎖飽和脂肪酸は、Ｃ１４～Ｃ２６である。一実施形態では、長鎖アルコールを有する不飽和脂肪酸は、Ｃ１６～Ｃ３０である。一実施形態では、ワックスは、カンデリラワックス、カルナウバワックス、ミツロウ、米ぬかワックス、サトウキビワックス、及びヒマワリワックスのうちの１つ以上から選択される。
【0179】
乳濁液または懸濁液の調製
本明細書で使用される場合、「乳濁液」とは、１つの液体の、不溶性または不混和性である別の液体への液滴／粒子の分散を指す。一実施形態では、液滴は、水性混合物中に分散された油である。一実施形態では、乳濁液は、湿式乳濁液である。一実施形態では、乳濁液は、粉末に乾燥される。一実施形態では、乳濁液は、押出成形される。一実施形態では、乳濁液は、粉末マトリックスと共に押出成形される。
本明細書で使用される場合、「乳濁液」とは、１つの液体の、不溶性または不混和性である別の液体への液滴／粒子の分散を指す。一実施形態では、液滴は、水性混合物中に分散された油である。一実施形態では、乳濁液は、湿式乳濁液である。一実施形態では、乳濁液は、粉末に乾燥される。一実施形態では、乳濁液は、押出成形される。一実施形態では、乳濁液は、粉末マトリックスと共に押出成形される。
【0180】
一実施形態では、本明細書に記載の方法によって生成される油滴は、約０．２μｍ～約１０μｍである。一実施形態では、本明細書に記載の方法によって生成される油滴は、約１μｍ～約１０μｍである。一実施形態では、本明細書に記載の方法によって生成される油滴は、約２μｍ～約８μｍである。一実施形態では、本明細書に記載の方法によって生成される油滴は、約２μｍ～約４μｍである。
【0181】
一実施形態では、平均油滴サイズは、約０．２μｍから約１０μｍである。一実施形態では、平均油滴サイズは、約１μｍ～約１０μｍである。一実施形態では、平均油滴サイズは、約２μｍ～約８μｍである。一実施形態では、平均油滴サイズは、約２μｍから約４μｍである。
【0182】
本明細書で使用される場合、「懸濁液」とは、１つの物質の、別の物質の大部分を通した液滴／粒子の分散を指す。一実施形態では、液滴は、水性混合物中に分散された油である。
【0183】
本明細書で使用される場合、乳濁液または懸濁液の生成または形成は、分解に対する物質の曝露を低減する水性混合物中の物質の捕捉または封入を指す。一実施形態では、物質は、油である。一実施形態では、物質は、生物活性物質である。一実施形態では、生物活性物質は、脂肪酸である。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなステップｉｉ）で水性混合物に添加されるとき、油は加熱される。一実施形態では、油は、約３０℃～約８０℃に加熱される。一実施形態では、油は、約４０℃～約７０℃に加熱される。一実施形態では、油は、約４５℃～約６５℃に加熱される。一実施形態では、油は、約５０℃～約６０℃に加熱される。
一実施形態では、本明細書に記載されるようなステップｉｉ）で水性混合物に添加されるとき、油は加熱される。一実施形態では、油は、約３０℃～約８０℃に加熱される。一実施形態では、油は、約４０℃～約７０℃に加熱される。一実施形態では、油は、約４５℃～約６５℃に加熱される。一実施形態では、油は、約５０℃～約６０℃に加熱される。
【0184】
一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、水性混合物に添加される前に油に添加される。一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、水性混合物への油の添加の前、間、または後に水性混合物に添加される。
【0185】
一実施形態では、ステップｉｉｉ）に記載されるような乳濁液または懸濁液の形成は、油と水性混合物との混合を含む。一実施形態では、混合は、高剪断下での撹拌を含む。一実施形態では、混合は、小さな油滴サイズを得るための均質化を含む。一実施形態では、均質化によって生成される油滴は、直径が約０．２μｍ～約１０μｍである。一実施形態では、均質化によって生成される油滴は、直径が約１μｍ～約１０μｍである。一実施形態では、均質化によって生成される油滴は、直径が約２μｍ～約８μｍである。一実施形態では、均質化によって生成される油滴は、直径が約２μｍ～約４μｍである。一実施形態では、均質化は、均質な乳濁液を形成する。
【0186】
一実施形態では、１つ以上の生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）は、本明細書に記載されるような方法のステップｉｉ）またはステップｉｉｉ）の前または間に油に注入される水溶液中に存在する。
【0187】
一実施形態では、本明細書に記載の方法によって乳濁液または懸濁液に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）封入法（ＷＯ０１／７４１７５）によって捕捉または封入された同じ生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも酸素分解を受けにくい。
【0188】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液の油含有量は、約１重量／体積％～約１０重量／体積％である。一実施形態では、乳濁液または懸濁液の油含有量は、約１．２重量／体積％～約９重量／体積％である。一実施形態では、乳濁液または懸濁液の油含有量は、約１．３重量／体積％～約８重量／体積％である。一実施形態では、乳濁液または懸濁液の油含有量は、約１．４重量／体積％から約７重量／体積％である。一実施形態では、乳濁液または懸濁液の油含有量は、約１．５重量／体積％～約６重量／体積％である。
【0189】
一実施形態では、油の約５重量％～約５０重量％は、乳濁液または懸濁液が乾燥した後に、バイオマスに捕捉または封入される。一実施形態では、油の約１０重量％～約５０重量％は、乳濁液または懸濁液が乾燥した後に、バイオマスに捕捉または封入される。一実施形態では、油の約２０重量％～約４０重量％は、乳濁液または懸濁液が乾燥した後に、バイオマスに捕捉または封入される。一実施形態では、乳濁液は、分散したプロバイオティクスを含む。
【0190】
後処理
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、微生物活性を低下させるために乳濁液または懸濁液を後処理することを含む。
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、微生物活性を低下させるために乳濁液または懸濁液を後処理することを含む。
【0191】
本明細書で使用される場合、「後処理」、「後処理された」、または「後処理すること」は、微生物を減少させるための本明細書に記載されるような乳濁液または懸濁液の処理を指す。
【0192】
当業者であれば、後処理が、例えば、熱処理（低温殺菌を含む）、マイクロ波処理、超音波、ＵＶ処理、高圧処理、超高温処理（ＵＨＴ）、及びレトルト処理のうちの１つ以上を含む、微生物を不活性化するか、または製品特性（例えば、安定性ならびに物理的構造）を変更する任意の方法であることを理解するであろう。
【0193】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、熱処理で後処理される。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、高圧処理で後処理される。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、後処理中に密封パッケージ内にある。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、高圧処理中に密封パッケージ内にある。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、熱処理中に密封パッケージ内にある。一実施形態では、高圧処理は、乳濁液または懸濁液を約１００～約６００ＭＰａの静水圧で処理することを含む。一実施形態では、高圧処理は、乳濁液または懸濁液を約３５０～約５５０ＭＰａの静水圧で処理することを含む。一実施形態では、高圧処理は、乳濁液または懸濁液を約３００～約４００ＭＰａの静水圧で処理することを含む。一実施形態では、高圧プロセスは、約２５℃で約１分間、または約２分間、または約３分間、または約４分間である。一実施形態では、熱処理は、微粒子を約６０℃～約８０℃の温度に加熱することを含む。一実施形態では、熱処理は、乳濁液または懸濁液を約６５℃～約７５℃の温度に加熱することを含む。一実施形態では、熱処理は、乳濁液または懸濁液をレトルト（１２０℃）下で加熱することを含む。一実施形態では、熱処理は、ＵＨＴ条件（＞１２０～１４０℃）下で乳濁液または懸濁液を加熱することを含む。
【0194】
一実施形態では、後処理は、マイクロ波処理を含む。一実施形態では、マイクロ波処理は、約７５０Ｗで約１分間、または約２分間、または約２．５分間、または約３分間の処理を含む。一実施形態では、マイクロ波処理は、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスの温度を約７０～約８０℃、好ましくは約７６℃に上昇させる。
【0195】
粉末の調製
一実施形態では、本明細書に記載されるような乳濁液または懸濁液は、部分的に乾燥または乾燥されて、含水含有量を減少させる。一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１４％に減少させることを含む。一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１３％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１２％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１０％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約８％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約６％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約４％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約３％に減少させることを含む。
一実施形態では、本明細書に記載されるような乳濁液または懸濁液は、部分的に乾燥または乾燥されて、含水含有量を減少させる。一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１４％に減少させることを含む。一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１３％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１２％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約１～約１０％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約８％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約６％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約４％に減少させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、含水量を約２～約３％に減少させることを含む。
【0196】
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、水分活性を約０．１～約０．７の低水分活性に低下させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、水分活性を約０．２～約０．６の低水分活性に低下させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、水分活性を約０．２～約０．５の低水分活性に低下させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、水分活性を約０．３～約０．４の低水分活性に低下させることを含む。一実施形態では、本方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、水分活性を約０．４の低水分活性に低下させることを含む。
【0197】
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法は、乳濁液または懸濁液を乾燥させて粉末を形成することを含む。乾燥には、例えば、噴霧乾燥、凍結乾燥（リュフィリゼーションまたは低温乾燥）、トレイ乾燥、ドラム乾燥、ローラー乾燥、流動床乾燥、衝突乾燥、リフラクタンスウィンドウ（Ｒｅｆｒａｃｔａｎｃｅ Ｗｉｎｄｏｗ）乾燥、薄膜ベルト乾燥、真空マイクロ波乾燥、超音波支援乾燥、押出多孔質化技術、または当業者に知られている任意の他の方法が含まれ得る。
【0198】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、約１０μｍ～約４０００μｍの平均乾燥粒子サイズを生成する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、約１０μｍ～約３０００μｍの平均乾燥粒子サイズを生成する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、約２０μｍ～約２０００μｍの平均乾燥粒子サイズを生成する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、約１０μｍ～約１０００μｍの平均乾燥粒子サイズを生成する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液を乾燥させて、約１０μｍ～約５００μｍの平均乾燥粒子サイズを生成する。
【0199】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液を噴霧乾燥（例えば、Ｄｒｙｔｅｃ実験室用噴霧乾燥機）によって乾燥させて、粉末を形成する。例えば、乳濁液または懸濁液は、回転噴霧器、超音波ノズル、またはツイン流体ノズルを有するＤｒｙｔｅｃ実験室用噴霧乾燥機を使用して、噴霧化の前に供給口を６０℃に加熱することによって２．０～４．０バールの噴霧圧で乾燥され、入口及び出口の空気は、それぞれ、１８０℃及び８０℃であった。一実施形態では、噴霧乾燥機は、造粒機能を有する。一実施形態では、噴霧乾燥機は、造粒乾燥機と共に装着される。
【0200】
一実施形態では、噴霧乾燥により、個々の粒子または粒子の凝集体が生成される。
【0201】
一実施形態では、噴霧乾燥により、約１０μｍ～約３０００μｍの平均乾燥粒子サイズが生成される。一実施形態では、噴霧乾燥により、約２０μｍ～約２０００μｍの平均乾燥粒子サイズが生成される。一実施形態では、噴霧乾燥により、約１０μｍ～約１０００μｍの平均乾燥粒子サイズが生成される。一実施形態では、噴霧乾燥により、約１０μｍ～約５００μｍの平均乾燥粒子サイズが生成される。
【0202】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、凍結乾燥によって乾燥されて粉末を形成する。一実施形態では、抗凍結剤が、凍結乾燥前に乳濁液または懸濁液に添加される。一実施形態では、抗凍結剤は、単糖、二糖もしくは多糖、ポリアルコール、またはそれらの誘導体である。一実施形態では、抗凍結剤は、トレハロース、スクロース、及びマンニトールのうちの１つ以上から選択される。
【0203】
一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、ドラム乾燥によって乾燥されて粉末を形成する。
【0204】
一実施形態では、粉末は、約５重量％～約５０重量％の油を含む。一実施形態では、粉末は、約１０重量％～約５０重量％の油を含む。一実施形態では、粉末は、約２０重量％～約５０重量％の油を含む。一実施形態では、粉末は、約２０重量％～約５０重量％の油を含む。一実施形態では、粉末は、約２０重量／体積％～約４０重量／体積％の油を含む。一実施形態では、粉末は、約２０重量％～約３０重量％の油を含む。
【0205】
一実施形態では、粉末は、約２０μｍ～約１２００μｍの粒子を含む。一実施形態では、粉末は、約１００μｍ～約９００μｍの粒子を含む。一実施形態では、粉末は、約４００μｍ～約７００μｍの粒子を含む。一実施形態では、粉末は、約５００μｍ～約６００μｍの粒子を含む。一実施形態では、粉末は、約１０００μｍの粒子を含む。一実施形態では、粉末を製粉して、粒子サイズをさらに減少させる。一実施形態では、製粉は、粒子サイズを約１０μｍ未満、または約８μｍ未満、または約６μｍ未満、または約４μｍ未満、または約２μｍ未満に減少させることができる。
【0206】
一実施形態では、本明細書に記載の方法によって粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）封入法（ＷＯ０１／７４１７５）によって捕捉または封入された同じ生物活性物質及び／または生物活性前駆体（例えば、油）よりも酸素分解を受けにくい。
【0207】
一実施形態では、本明細書に記載されるような方法によって粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約５００％～約４０００％高い耐性がある（表７を参照）。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約５００％～約３０００％高い耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約５００％～約２０００％高い耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約８００％～約２０００％高い耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約８００％～約１５００％高い耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、ＩＰまでの時間が比較された、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも、酸素分解に対して約９００％～約１３００％高い耐性がある。
【0208】
一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも３か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも６か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも１２か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも１８か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも２４か月間、酸素分解により耐性がある。
【0209】
一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも３か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも６か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも１２か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも１８か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、少なくとも２４か月間、湿気分解により耐性がある。
【0210】
一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、プロセス中にｐＨ分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、捕捉または封入されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較して、胃腸通過中にｐＨ分解により耐性がある。
【0211】
一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも３か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも６か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１２か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１８か月間、酸素分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも２４か月間、酸素分解により耐性がある。
【0212】
一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも３か月間、温度分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも６か月間、温度分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１２か月間、温度分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１８か月間、温度分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも２４か月間、温度分解により耐性がある。
【0213】
一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも３か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも６か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１２か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも１８か月間、湿気分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも２４か月間、湿気分解により耐性がある。
【0214】
一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも３か月間、ｐＨ分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油と比較して、少なくとも６か月間、ｐＨ分解により耐性がある。一実施形態では、粉末に封入された油は、封入されていない油よりも、胃腸通過中にｐＨ分解により耐性がある。
【0215】
製品
一態様では、本発明は、第１の生物種からのバイオマスからのタンパク質及び炭水化物を含むマトリックスを提供する。一実施形態では、マトリックスは、本明細書に記載されるような１つ以上の生物活性物質（複数可）または生物活性前駆体（複数可）を含む。一実施形態では、マトリックスは、スルフォラファンを含む。一実施形態では、マトリックスは、グルコシノレートを含む。一実施形態では、マトリックスは、グルコラファニンを含む。
一態様では、本発明は、第１の生物種からのバイオマスからのタンパク質及び炭水化物を含むマトリックスを提供する。一実施形態では、マトリックスは、本明細書に記載されるような１つ以上の生物活性物質（複数可）または生物活性前駆体（複数可）を含む。一実施形態では、マトリックスは、スルフォラファンを含む。一実施形態では、マトリックスは、グルコシノレートを含む。一実施形態では、マトリックスは、グルコラファニンを含む。
【0216】
一態様では、本発明は、油滴あるいは生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含むマトリックスであって、タンパク質及び炭水化物が、生物のさらなる種（例えば、生物の第２、第３、第４、第５などの種）からの１つ以上のさらなるバイオマスからのものである、マトリックスを提供する。
【0217】
一態様では、本発明は、マトリックス中に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体であって、第１の生物種からのバイオマスからのタンパク質及び炭水化物を含み、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、捕捉または封入の前の生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較されたときに、酸素分解により耐性がある、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を提供する。
【0218】
一実施形態では、生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、第１の生物種からのものではない。
【0219】
一態様では、本発明は、マトリックス中に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体であって、ブロッコリーからのタンパク質及び炭水化物を含み、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体が、捕捉または封入の前の生物活性物質及び／または生物活性前駆体と比較されたときに、酸素分解により耐性がある、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を提供する。
【0220】
一実施形態では、捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、脂肪酸である。一実施形態では、生物活性物質は、油である。
【0221】
一実施形態では、マトリックスは、第１の生物種からの少なくとも１つのさらなるバイオマスからのタンパク質及び炭水化物を含む。
【0222】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、ｉ）約１：１～約１：１０．５のタンパク質対炭水化物の比率、ｉｉ）約１：４．５～約４：１のタンパク質対炭水化物の比率、及びｉｉ）約１：２．５～約２：１のタンパク質対炭水化物の比率、のうちの１つ以上を含む。
【0223】
一実施形態では、バイオマス及び／またはさらなるバイオマスは、生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む。
【0224】
一実施形態では、バイオマスは、ブロッコリーである。
【0225】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成される乳濁液または懸濁液を提供する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約１０時間～約３００時間の誘導期間を有する。一実施形態では、乳濁液または懸濁液は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約１００時間～約３００時間の誘導期間を有する。
【0226】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような方法によって生成される捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体を含む粉末を提供する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約１０時間～約３００時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約５０時間～約３００時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約８０時間～約３００時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で約１００時間～約３００時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で少なくとも１０時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で少なくとも５０時間の誘導期間を有する。一実施形態では、粉末は、８０℃及び初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓを使用して測定された、８０℃で少なくとも１００時間の誘導期間を有する。
【0227】
一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約１～約１４％である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約１～約１０％である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約１０％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約８％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約７％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約６％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約５％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約４％以下である。一実施形態では、粉末の湿気含有量は、約３％以下である。
【0228】
一実施形態では、粉末は、油を含む。一実施形態では、粉末は、オメガ－３多価不飽和脂肪酸を含む。一実施形態では、粉末は、イソチオシアネート生活活性物質を含む。
【0229】
一実施形態では、粉末は、そのまま使用され得るか、または他の材料に添加されるか、もしくは他の材料と組み合されて、製品（例えば、食品または化粧品）を形成する材料である。
【0230】
一実施形態では、粉末を使用して、粉末（例えば、１つ以上の他の粉末原料と組み合わされた）、錠剤、液体、丸薬、カプセル、または押出製品を形成することができる。一実施形態では、粉末は、押出成形される。一実施形態では、粉末を圧縮して、例えば、錠剤を形成する。
【0231】
一実施形態では、粉末は、食品、食品原料、飲料原料、または化粧品原料である。
【0232】
一実施形態では、乳濁液、懸濁液、または粉末を１つ以上の他の原料と組み合わせて、製品を形成することができる。
【0233】
一実施形態では、製品は、クリーム、ゲル、錠剤、液体、丸薬、カプセル、または押出製品である。
【0234】
一実施形態では、製品は、食品、食品原料、飲料原料サプリメント、化粧品または化粧品原料である。一実施形態では、化粧品は、皮膚保湿製品（例えば、保湿剤またはフェイスマスク）である。
【0235】
一実施形態では、製品は、オメガ－３多価不飽和脂肪酸を含む。
【0236】
一実施形態では、食品は、動物飼料である。一実施形態では、動物飼料は、オメガ－３多価不飽和脂肪酸を含む。一実施形態では、オメガ－３多価不飽和脂肪酸は、α－リノレン酸（ＡＬＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、及びドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）のうちの１つ以上から選択される。一実施形態では、動物飼料は、アスタキサンチン及び／またはα－リポ酸を含む。
【0237】
一実施形態では、動物飼料は、水産養殖飼料である。
【0238】
一実施形態では、製品は、例えば、乳児用調製乳、子供用調製乳、大人用調製乳、ヨーグルト、飲料、高齢者用サプリメント、超高温処理（ＵＨＴ）飲料（例えば、牛乳）、スープ、ディップ、パスタ製品、パン、スナック、他のベーカリー製品 プロセスチーズ、及び／または動物飼料（水産養殖飼料を含む）のための食品原料である。一実施形態では、食品原料中に捕捉または封入された生物活性物質及び／または生物活性前駆体は、製品に添加された場合、封入または捕捉されていない生物活性物質及び／または生物活性前駆体よりも安定している。
【0239】
一実施形態では、製品は、化粧品または化粧品原料として、例えば、口紅、クリーム、ローション、または軟膏としての使用に好適である。
【0240】
一実施形態では、製品は、粉末サプリメントである。一実施形態では、粉末サプリメントは、水に溶解されるか、または食品、飲料、もしくは食事に添加される。
【0241】
一実施形態では、製品は、乳濁液、懸濁液、または粉末である。
【0242】
医薬組成物の調製
一態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む乳濁液を生成する方法であって、水、脂質、ならびにイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む、混合物を提供し、それにより乳濁液を形成することを含む、方法を提供する。そのような乳濁液は、医薬組成物での使用に好適である。
一態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む乳濁液を生成する方法であって、水、脂質、ならびにイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む、混合物を提供し、それにより乳濁液を形成することを含む、方法を提供する。そのような乳濁液は、医薬組成物での使用に好適である。
【0243】
一実施形態では、水ならびにイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む混合物を、脂質と混合する。一実施形態では、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含み、かつタンパク質及び／または炭水化物を含む、水性懸濁液を、脂質と混合する。一実施形態では、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を脂質と混合し、得られた組成物を水性媒体と混合する。一実施形態では、水性媒体は、タンパク質及び／または炭水化物を含む。一実施形態では、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を、水及び脂質を含む混合物と混合する。一実施形態では、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を、水及び脂質を含む混合物と混合する。一実施形態では、タンパク質または炭水化物は、同じ単一種の生物からのものである。一実施形態では、タンパク質、炭水化物、あるいはイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体は、同じ単一種の微生物からのものである。
【0244】
一実施形態では、乳濁液中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、約４～約１０℃または約－１８℃での約１か月の保存後に、脂質を欠く対応する組成物中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも２倍である。一実施形態では、乳濁液中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、約４～約１０℃または約－１８℃での約１か月の保存後に、脂質を欠く対応する組成物中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも３倍である。一実施形態では、乳濁液中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、約４～約１０℃または約－１８℃での約２か月の保存後に、脂質を欠く対応する組成物中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも２倍である。
【0245】
一態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む粉末を調製する方法であって、本明細書に記載されるような乳濁液を調製することと、乳濁液を乾燥条件に供し、それにより水を除去することと、を含む、方法を提供する。一実施形態では、乳濁液を凍結乾燥または噴霧乾燥条件に供し、それにより粉末を形成する。
【0246】
一実施形態では、粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、－１８℃での約１か月の保存後に、脂質を欠く対応する粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも１倍である。
【0247】
一実施形態では、粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、－１８℃での約１か月の保存後に、脂質を欠く対応する粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも２倍である。
【0248】
一実施形態では、粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度が、－１８℃での約２か月の保存後に、脂質を欠く対応する粉末中のイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の濃度の少なくとも２倍である。
【0249】
一態様では、本発明は、医薬品組成物または化粧品組成物を調製する方法であって、本明細書に記載されるような乳濁液を調製すること、または本明細書に記載されるような粉末を調製することと、乳濁液または乾燥組成物を医薬品組成物または化粧品組成物に変換することと、を含む、方法を提供する。
【0250】
医薬組成物
一実施形態では、本発明は、本方法によって、または本明細書に記載の乳濁液もしくは粉末から生成される医薬品組成物または化粧品組成物であって、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体、脂質、ならびに医薬品賦形剤及び／または化粧品賦形剤を含む、医薬品組成物または化粧品組成物を提供する。
一実施形態では、本発明は、本方法によって、または本明細書に記載の乳濁液もしくは粉末から生成される医薬品組成物または化粧品組成物であって、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体、脂質、ならびに医薬品賦形剤及び／または化粧品賦形剤を含む、医薬品組成物または化粧品組成物を提供する。
【0251】
一態様では、本発明は、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体、脂質、ならびに医薬品賦形剤及び／または化粧品賦形剤を含む、医薬品組成物または化粧品組成物を提供する。一実施形態では、医薬品組成物または化粧品組成物は、タンパク質及び／または炭水化物をさらに含む。
【0252】
一態様では、本発明は、水、脂質、ならびにイソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体を含む乳濁液を提供する。そのような乳濁液は、医薬品組成物及び化粧品組成物での使用に好適である。
【0253】
一実施形態では、組成物は、局所、経腸／胃腸、または非経口投与のためのものである。一実施形態では、皮膚の局所領域への適用が含まれ、経皮投与（皮膚を通した吸収を介した投与）も含まれる。一実施形態では、経腸／胃腸、例えば、経口、直腸、胃、胃腸管、口唇下、頬側、舌下が含まれる。一実施形態では、非経口、例えば、経皮、筋肉内、及び静脈内が含まれる。一実施形態では、組成物は、クリーム、軟膏、ゲル、錠剤、液体、丸薬、カプセル、粉末、または押出製品の形態である。
【0254】
一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の約１０％～約９０％が、組成物中に残る。一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の少なくとも１０％が、組成物中に残る。一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の少なくとも２０％が、組成物中に残る。一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の少なくとも３０％が、組成物中に残る。一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の少なくとも４０％が、組成物中に残る。一実施形態では、約１か月の期間の保存後に、イソチオシアネート及び／またはイソチオシアネート前駆体の少なくとも５０％が、組成物中に残る。
【0255】
一実施形態では、イソチオシアネートは、スルフォラファン、アリルイソチオシアネート、ベンジルイソチオシアネート、及びフェネチルイソチオシアネートのうちの１つ以上から選択される。
【0256】
一実施形態では、イソチオシアネート前駆体は、グルコシノレート、グルコラファニン、シニグリン、グルコトロぺオリン、及びグルコナスツルチインの１つ以上から選択される。
【0257】
一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるような油である。好ましい実施形態では、油は、キャノーラ油、オリーブ油、ヒマワリ油、魚油、または藻類油から選択される。一実施形態では、組成物は、約１０％～約９０％の油を含む。一実施形態では、組成物は、約２０％～約８０％の油を含む。一実施形態では、組成物は、約３０％～約７０％の油を含む。一実施形態では、脂質は、本明細書に記載されるようなワックスである。
【0258】
一実施形態では、乳濁液または粉末は、製剤の他の原料と適合し、そのレシピエントに過度に有害ではないという意味で薬学的または美容的に許容されるべきである１つ以上の賦形剤、担体、または添加剤と組み合わされ、これには、例えば、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの誘導体化セルロース、フィコール（ポリマー糖）、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、デキストレート（例えば、２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン及びスルホブチルエーテル－β－シクロデキストリンなどのシクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、ならびにペクチンが含まれ得る。組成物は、希釈剤、緩衝液、結合剤、崩壊剤、増粘剤、潤滑剤、防腐剤（抗酸化剤を含む）、香味剤、矯味剤、無機塩（例えば、塩化ナトリウム）、抗菌剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、甘味料、帯電防止剤、ソルビタンエステル、脂質（例えば、レシチン及び他のホスファチジルコリンなどのリン脂質、ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸及び脂肪酸エステル、ステロイド（例えば、コレステロール））、ならびにキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ、亜鉛、及び他の好適なカチオン）をさらに含み得る。組成物での使用に好適な他の医薬品賦形剤、担体、及び／または添加剤は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９．ｓｕｐ．ｔｈ ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｌｉａｍｓ，（１９９５）、及び“Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”，５２．ｓｕｐ．ｎｄ ｅｄ．，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，Ｎ．Ｊ．（１９９８）、及び“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ”，Ｔｈｉｒｄ Ｅｄ．，Ｅｄ．Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２０００に列挙されている。
【0259】
一態様では、本発明は、状態の治療または予防の方法であって、有効量の本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末の投与を、それを必要とする対象に行うことを含む、方法を提供する。一態様では、本発明は、状態の治療または予防に使用するための、本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末を提供する。一態様では、本発明は、対象の状態を処置または防止する方法であって、有効量の本明細書に記載されるような医薬組成物、乳濁液、または粉末を、対象に投与することを含む、方法を提供する。状態の処置または防止のための医薬品の製造における、本明細書に記載されるような医薬組成物の使用。状態の処置または防止のための医薬品の製造のための、本明細書に記載されるような乳濁液または本明細書に記載されるような粉末の使用。
【0260】
一態様では、本発明は、本明細書に記載されるような治療もしくは予防の方法、使用、または処置もしくは防止の方法であって、状態が、がん、糖尿病、心血管疾患、自閉症、骨粗しょう症、神経保護疾患、メタボリック症候群、炎症、酸化ストレス、及び腸の健康状態から選択される、方法を提供する。一実施形態では、腸の健康状態は、潰瘍性大腸炎、過敏性腸症候群、クローン病、小腸の異常増殖、漏出性腸、及び乳糖不耐症から選択される。一実施形態では、状態は、がんである。
【実施例】
【0261】
実施例１－物理的に安定した水中油型乳濁液を調製するための封入剤としてのブロッコリーの乳化及び物理的機能の実証
生ブロッコリーを追加の水と混成した（１：１の比率）。これに、ブロッコリー：水：油の比率が１：１：１になるように油を添加し、混合物全体をベンチトップブレンダーを使用して混成した。水中油型乳濁液は、２時間以上物理的に安定していた。ブロッコリーを含まない油水混合物を混成すると、予想通り、すぐに２相に分離した（図１Ａ～Ｂ）。
生ブロッコリーを追加の水と混成した（１：１の比率）。これに、ブロッコリー：水：油の比率が１：１：１になるように油を添加し、混合物全体をベンチトップブレンダーを使用して混成した。水中油型乳濁液は、２時間以上物理的に安定していた。ブロッコリーを含まない油水混合物を混成すると、予想通り、すぐに２相に分離した（図１Ａ～Ｂ）。
【0262】
実施例２－凍結乾燥したブロッコリー粉末を封入剤として使用した水相懸濁液の調製
凍結乾燥したブロッコリーの粉末をビーカーに入れ、オーバーヘッドミキサーを使用して混合しながら、流動性混合物が得られるまで、水（６０℃）を添加した（７．４６％の総固形分（ＴＳ））（図１Ｃ～Ｆ）。２Ｎ ＮａＯＨを使用して、混合物のｐＨを６．０１～７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。
凍結乾燥したブロッコリーの粉末をビーカーに入れ、オーバーヘッドミキサーを使用して混合しながら、流動性混合物が得られるまで、水（６０℃）を添加した（７．４６％の総固形分（ＴＳ））（図１Ｃ～Ｆ）。２Ｎ ＮａＯＨを使用して、混合物のｐＨを６．０１～７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。
【0263】
実施例３－封入剤として生ブロッコリーを使用した水相懸濁液の調製
生ブロッコリー（１０％ＴＳ）を小片に切り、最初に沸騰水を添加し、混合物を混成して、総固形分が異なるブロッコリー懸濁液を得た（図２Ａ：７．６６％（ＴＳ）、（図２Ｂ：６．８７％ＴＳ）、（図２Ｃ：６．２３％ＴＳ）、（図２Ｄ：４．９９％ＴＳ）。この最初の実験から、封入剤の調製のために４．９９％ＴＳ混合物を選択した。この混合物のｐＨを、２ＮのＮａＯＨを使用して６．２３～７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。
生ブロッコリー（１０％ＴＳ）を小片に切り、最初に沸騰水を添加し、混合物を混成して、総固形分が異なるブロッコリー懸濁液を得た（図２Ａ：７．６６％（ＴＳ）、（図２Ｂ：６．８７％ＴＳ）、（図２Ｃ：６．２３％ＴＳ）、（図２Ｄ：４．９９％ＴＳ）。この最初の実験から、封入剤の調製のために４．９９％ＴＳ混合物を選択した。この混合物のｐＨを、２ＮのＮａＯＨを使用して６．２３～７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。
【0264】
実施例４－オメガ－３油を乳濁液及び粉末形式で封入するための凍結乾燥ブロッコリー粉末の実証
実施例２に記載されている凍結乾燥ブロッコリー粉末から作製された水相懸濁液（５％ＴＳ）を封入剤として使用した。マグロ油（１：１のブロッコリー固形分：油の比率）を実施例２に記載されている水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａ Ｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、７５℃で２分間加熱したＦ１乳濁液、及び１００℃で３０分間加熱したＦ２を調製した（図３Ａ）。
実施例２に記載されている凍結乾燥ブロッコリー粉末から作製された水相懸濁液（５％ＴＳ）を封入剤として使用した。マグロ油（１：１のブロッコリー固形分：油の比率）を実施例２に記載されている水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａ Ｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、７５℃で２分間加熱したＦ１乳濁液、及び１００℃で３０分間加熱したＦ２を調製した（図３Ａ）。
【0265】
１カゼイン酸ナトリウム（ＮａＣａｓ）－１グルコース（Ｇｌｕ）－１乾燥グルコースシロップ（ＤＧＳ）溶液を使用した水相製剤を、６０℃の水で４０分間（２５％ＴＳ）調製し、ｐＨを７．５０に調整し、１００℃で３０分間熱処理し、６０℃に冷却し（対照として、Ｃ１）、Ｔｗｅｅｎ ８０（０．５ｇ）を、低分子量の乳化剤を使用した別の対照として８７ｇで６０℃の水に５分間攪拌した（Ｃ２）。
【0266】
オメガ－３水中油型乳濁液を、油をタンパク質（カゼイン酸ナトリウム）及び炭水化物（グルコース及び乾燥グルコースシロップ）Ｃ１、または低分子量の乳化剤Ｃ２と組み合わせることによって作製した（図３Ａ）。
【0267】
【0268】
実施例５－加速酸化下で試験されたオメガ－３油乳濁液及び粉末の酸化安定性
実施例４に記載されている乳濁液（Ｆ１、Ｆ２、Ｃ１、Ｃ２）及び凍結乾燥粉末（Ｆ１、Ｆ２）を、Ｏｘｉｐｒｅｓ装置（Ｍｉｋｒｏｌａｂ Ａａｒｈｕｓ Ａ／Ｓ，Ｈｏｊｂｊｅｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を使用して、初期５バールの酸素圧下、８０℃で加速酸化下で試験した。ブロッコリーマトリックス（Ｆ１及びＦ２）で作製された魚油乳濁液及び粉末は、ＣＳＩＲＯのＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）技術及びＴｗｅｅｎで作製された魚油乳濁液を使用して封入された対応する魚油乳濁液（Ｆ１及びＦ２）及び乳濁液（Ｃ１）よりもゆっくりと酸素を吸収した（図４及び５ならびに表２）。
実施例４に記載されている乳濁液（Ｆ１、Ｆ２、Ｃ１、Ｃ２）及び凍結乾燥粉末（Ｆ１、Ｆ２）を、Ｏｘｉｐｒｅｓ装置（Ｍｉｋｒｏｌａｂ Ａａｒｈｕｓ Ａ／Ｓ，Ｈｏｊｂｊｅｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を使用して、初期５バールの酸素圧下、８０℃で加速酸化下で試験した。ブロッコリーマトリックス（Ｆ１及びＦ２）で作製された魚油乳濁液及び粉末は、ＣＳＩＲＯのＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）技術及びＴｗｅｅｎで作製された魚油乳濁液を使用して封入された対応する魚油乳濁液（Ｆ１及びＦ２）及び乳濁液（Ｃ１）よりもゆっくりと酸素を吸収した（図４及び５ならびに表２）。
【0269】
【表2】
【0270】
実施例６－粉末中のオメガ－３油を安定化させるためのブロッコリー粉末の使用の実証
未精製油についてのＯｘｉｐｒｅｓデータを図６に示す。封入剤マトリックスの量が酸素取り込み量に及ぼす影響を、ブロッコリーマトリックス（油なし）に対するＯｘｉｐｒｅｓ試験で評価した。結果を図７に示す。
未精製油についてのＯｘｉｐｒｅｓデータを図６に示す。封入剤マトリックスの量が酸素取り込み量に及ぼす影響を、ブロッコリーマトリックス（油なし）に対するＯｘｉｐｒｅｓ試験で評価した。結果を図７に示す。
【0271】
ブロッコリーの頭を四分の一に切り、水（５％ＴＳ）を添加することによって浸軟し、４分間７９℃に加熱し、凍結乾燥した。凍結乾燥したブロッコリー粉末を、水（５％ＴＳ）で再構成し、封入のために使用した。油（マグロ油、ＤＨＡキャノーラ油またはキャノーラ油）を懸濁液に添加して、１２．５％、２５％、及び５０％の油粉末を得、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して１５，０００ｒｐｍで３分間均質化して、乳濁液を調製した。乳濁液（それぞれ５．７％、６．６％、及び９．５％の総固形分）を凍結乾燥し、８０℃、初期酸素圧５バールの室温でＯｘｉｐｒｅｓユニットを使用して加速酸化条件下で試験した。
【0272】
結果を図８～１０に示す。これらの試料での遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。最大３００時間まで、１２．５％及び２５％の油粉末において明確なＩＰは観察されなかった。
【0273】
実施例７－オメガ－３水中油型乳濁液の調製及び安定化のために生ブロッコリーを使用する実証
実施例３に記載されている生ブロッコリーから作製された水相懸濁液（５％＆６％ＴＳ）を封入剤として使用した。オメガ－３油（１：１のブロッコリー固形分：油の比率）を実施例３に記載されている水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、７５℃で２分間加熱したＥ１及びＥ２乳濁液、及び１００℃で３０分間加熱したＥ３及びＥ４を調製した。総固形分に対する最終的な乳濁液は、それぞれ７．７％及び１１．３％であった。
実施例３に記載されている生ブロッコリーから作製された水相懸濁液（５％＆６％ＴＳ）を封入剤として使用した。オメガ－３油（１：１のブロッコリー固形分：油の比率）を実施例３に記載されている水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、７５℃で２分間加熱したＥ１及びＥ２乳濁液、及び１００℃で３０分間加熱したＥ３及びＥ４を調製した。総固形分に対する最終的な乳濁液は、それぞれ７．７％及び１１．３％であった。
【0274】
乳濁液を、Ｏｘｉｐｒｅｓユニットを使用して、８０℃、初期酸素圧５バールの室温で、加速酸化条件下で試験した。結果を図１１及び表３に示す。加熱されたブロッコリーと加熱されていないブロッコリーの両方が、酸素の取り込みに関して同じ方法で行った。
【0275】
【表3】
【0276】
実施例８－生ブロッコリー・マグロ油凍結乾燥粉末に関するＯｘｉｐｒｅｓ結果
生ブロッコリー（５％及び６％ＴＳ）を、高速で３分間、沸騰水で混成した（温度６８．３℃を測定）。ｐＨを、７．５に調整した。半分を７５℃で２分間低温殺菌し、もう半分を１００℃で３０分間熱処理した。それらの両方を６０℃に冷却し、マグロ油を添加し、１５，０００ｒｐｍで２分間ｕｌｔｒａ－ｔｕｒｒａｘにかけた。次に、それぞれ９．５％及び１１．３％ＴＳを含有する得られた乳濁液を、凍結乾燥した。凍結乾燥ブロッコリーを使用し、封入剤としてカゼイン酸ナトリウム及び炭水化物を使用した乳濁液製剤（９．５％の総固形分）も調製し、凍結乾燥して、比較のために試験した。
生ブロッコリー（５％及び６％ＴＳ）を、高速で３分間、沸騰水で混成した（温度６８．３℃を測定）。ｐＨを、７．５に調整した。半分を７５℃で２分間低温殺菌し、もう半分を１００℃で３０分間熱処理した。それらの両方を６０℃に冷却し、マグロ油を添加し、１５，０００ｒｐｍで２分間ｕｌｔｒａ－ｔｕｒｒａｘにかけた。次に、それぞれ９．５％及び１１．３％ＴＳを含有する得られた乳濁液を、凍結乾燥した。凍結乾燥ブロッコリーを使用し、封入剤としてカゼイン酸ナトリウム及び炭水化物を使用した乳濁液製剤（９．５％の総固形分）も調製し、凍結乾燥して、比較のために試験した。
【0277】
凍結乾燥した乳濁液を、Ｏｘｉｐｒｅｓユニットを使用して、８０℃、初期酸素圧５バールの室温で試験した。結果を図１２、１３及び表４に示す。
【0278】
【表4】
【0279】
実施例９－封入剤として前処理されたブロッコリーを使用して作製されたオメガ－３ブロッコリー乳濁液試料の酸素取り込み量
様々に前処理されたブロッコリー（新鮮なブロッコリー、蒸した、蒸したブロッコリー、蒸して細断したブロッコリー、蒸したピューレ状のドラム乾燥ブロッコリー）、それに続くドラム乾燥を使用したブロッコリー乳濁液の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧で、Ｏｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
様々に前処理されたブロッコリー（新鮮なブロッコリー、蒸した、蒸したブロッコリー、蒸して細断したブロッコリー、蒸したピューレ状のドラム乾燥ブロッコリー）、それに続くドラム乾燥を使用したブロッコリー乳濁液の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧で、Ｏｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
【0280】
結果を図１４に示す。ブロッコリー封入剤を、様々な処理段階で使用して、最大５％の水性固形分を作製した。乳濁液を、９．５％ＴＳ及び４．８％の油で調製した。ＩＰ（ｈ）は、酸素取り込み量の大幅な増加（酸素圧の急激な低下）がある時点である。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【0281】
実施例１０－封入剤としてのバイオマス
生バイオマスを小片に切り、最初に沸騰水を添加し、混合物を混成して、バイオマス（５％ＴＳ）を含有する水性懸濁液を得た。この混合物のｐＨを、２Ｎ ＮａＯＨを使用して７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。オメガ－３油（１：１のバイオマス固形分：油の比率）を水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、乳濁液を調製し、これを凍結乾燥して粉末を得た（５０％の油）。
生バイオマスを小片に切り、最初に沸騰水を添加し、混合物を混成して、バイオマス（５％ＴＳ）を含有する水性懸濁液を得た。この混合物のｐＨを、２Ｎ ＮａＯＨを使用して７．５０に調整した。次に、混合物を７５℃で２分間または１００℃で３０分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。オメガ－３油（１：１のバイオマス固形分：油の比率）を水相懸濁液（６０℃）に添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、乳濁液を調製し、これを凍結乾燥して粉末を得た（５０％の油）。
【0282】
結果を表５及び図１５～２３に示す。これらの結果は、油の相対的な酸化安定性を示しており、誘導期間の長さは、加速条件下で封入剤が油に与える保護の大きさと関連している。
【0283】
【表5】
【0284】
実施例１１－封入剤としてバイオマスに添加されたタンパク質の影響
生ニンジンを小片に切り、沸騰水に加え、混成して、バイオマス（５％ＴＳ）を含有する水性懸濁液を得た。この混合物のｐＨを、２Ｎ ＮａＯＨを使用して７．５０に調整した。次に、混合物を９０℃で５分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。異なるタンパク質分散液（１０％ＴＳ）（カゼイン酸ナトリウム、大豆タンパク質分離物、エンドウ豆タンパク質）をニンジン懸濁液に添加して、１：２のタンパク質：ＣＨＯの比率を得た。ニンジン－タンパク質混合物（６０℃）にマグロ油を添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、乳濁液を調製し、これを凍結乾燥して粉末（２５％の油）を得た。
生ニンジンを小片に切り、沸騰水に加え、混成して、バイオマス（５％ＴＳ）を含有する水性懸濁液を得た。この混合物のｐＨを、２Ｎ ＮａＯＨを使用して７．５０に調整した。次に、混合物を９０℃で５分間熱処理し、次に６０℃に冷却した。異なるタンパク質分散液（１０％ＴＳ）（カゼイン酸ナトリウム、大豆タンパク質分離物、エンドウ豆タンパク質）をニンジン懸濁液に添加して、１：２のタンパク質：ＣＨＯの比率を得た。ニンジン－タンパク質混合物（６０℃）にマグロ油を添加し、１５，０００ｒｐｍで３分間、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを使用して均質化し、乳濁液を調製し、これを凍結乾燥して粉末（２５％の油）を得た。
【0285】
結果を図２４に示す。ニンジン－エンドウ豆タンパク質オメガ－３粉末のみが、明確なＩＰ（３８時間）を有した。他の全ての試料では、Ｏｘｉｐｒｅｓ試験中に圧力が突然上昇した。
【0286】
実施例１２－炭水化物を添加した場合及び添加しない場合の封入剤としての抹茶
抹茶粉末（マルトデキストリンの添加ありまたは添加なし）を水で再構成した（４５℃、１時間）。異なる製剤におけるタンパク質対炭水化物（ＣＨＯ）の比率（重量比）は、マルトデキストリンを添加した製剤について、８：９（抹茶のみ）、１：２、１：３、及び１：４であった。マグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ Ｌ４Ｒ、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ Ｍａｃｈｉｎｅｓ Ｌｔｄ．，Ｃｈｅｓｈａｍ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，ＵＫ）を使用して３分間分散させ、乳濁液を２５０／１００バールで均質化した（Ａｖｅｓｔｉｎ Ｅｍｕｌｓｉｆｌｅｘ Ｃ５，Ａｖｅｓｔｉｎ Ｉｎｃ．，Ｏｔｔａｗａ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）。乳濁液（１５％の総固形分）を噴霧乾燥して、２５％の魚油（乾燥ベース）を含有する粉末を得た。
抹茶粉末（マルトデキストリンの添加ありまたは添加なし）を水で再構成した（４５℃、１時間）。異なる製剤におけるタンパク質対炭水化物（ＣＨＯ）の比率（重量比）は、マルトデキストリンを添加した製剤について、８：９（抹茶のみ）、１：２、１：３、及び１：４であった。マグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎミキサー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ Ｌ４Ｒ、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ Ｍａｃｈｉｎｅｓ Ｌｔｄ．，Ｃｈｅｓｈａｍ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，ＵＫ）を使用して３分間分散させ、乳濁液を２５０／１００バールで均質化した（Ａｖｅｓｔｉｎ Ｅｍｕｌｓｉｆｌｅｘ Ｃ５，Ａｖｅｓｔｉｎ Ｉｎｃ．，Ｏｔｔａｗａ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）。乳濁液（１５％の総固形分）を噴霧乾燥して、２５％の魚油（乾燥ベース）を含有する粉末を得た。
【0287】
８０℃、初期５バールの酸素圧でのＯｘｉｐｒｅｓ試験を図２５に示す。１：２及び８：９のタンパク質炭水化物比を有するこれらの試料における遅い酸素取り込みは、マトリックスによる酸素の取り込みに一部起因するものである。明確なＩＰは、マグロ油のみ、ならびに１：４及び１：３のタンパク質炭水化物比を有する試料について示されている。
【0288】
実施例１３－封入剤としての「凍結乾燥ブロッコリー」粉末と「カゼイン酸ナトリウム＋炭水化物」とを比較した、噴霧乾燥オメガ－３油粉末の安定性を示すＯｘｉｐｒｅｓ結果
凍結乾燥したブロッコリー粉末を、６０℃の水で５％ＴＳに再構成して、１時間水和させた。６０℃に加熱したマグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ乳化剤を使用して、最大速度で５分間均質化した。次に、乳濁液を噴霧乾燥した。比較のために、１００℃で３０分間加熱した、加熱カゼイン酸ナトリウム－グルコース乾燥グルコース糖溶液を使用したＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）製剤を、封入剤として使用した。同じ油を添加し、６０℃、１８０／８０バールの圧力で均質化した。両方の製剤を、ツイン流体ノズル（４バールの圧力）を使用して、実験室スケールのＤｒｙｔｅｃ噴霧乾燥機で噴霧乾燥した。噴霧乾燥した粉末を、Ｏｘｉｐｒｅｓユニットを使用して、８０℃、初期酸素圧５バールの室温で試験した。
凍結乾燥したブロッコリー粉末を、６０℃の水で５％ＴＳに再構成して、１時間水和させた。６０℃に加熱したマグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ乳化剤を使用して、最大速度で５分間均質化した。次に、乳濁液を噴霧乾燥した。比較のために、１００℃で３０分間加熱した、加熱カゼイン酸ナトリウム－グルコース乾燥グルコース糖溶液を使用したＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）製剤を、封入剤として使用した。同じ油を添加し、６０℃、１８０／８０バールの圧力で均質化した。両方の製剤を、ツイン流体ノズル（４バールの圧力）を使用して、実験室スケールのＤｒｙｔｅｃ噴霧乾燥機で噴霧乾燥した。噴霧乾燥した粉末を、Ｏｘｉｐｒｅｓユニットを使用して、８０℃、初期酸素圧５バールの室温で試験した。
【0289】
Ｏｘｉｐｒｅｓ試験結果（図２６）は、封入剤として加熱したカゼイン－炭水化物を使用した５０％のマグロ油粉末の誘導期間と比較した、８０℃、初期５バールの酸素圧で試験した、噴霧乾燥（５０％のマグロ油）オメガ－３ブロッコリー粉末の誘導期間（ＩＰ）を示す。両方の試料について明確なＩＰがある。結果は、本明細書に記載されるような方法を介した封入油は、ＭｉｃｒｏＭＡＸ（登録商標）技術を使用した封入油よりも、酸素分解により耐性があることを示している。
【0290】
実施例１４－オメガ－３油ブロッコリー粉末を生成するための封入剤としての発酵ブロッコリーの使用と非発酵ブロッコリーの使用との間の比較。
ブロッコリーピューレ（７５℃、２分または１００℃、３０分で加熱）または発酵ブロッコリーピューレ（発酵前の±熱処理）を調製した（５％ＴＳ）。Ｈｉ－ＤＨＡマグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ乳化剤ミキサー（６０℃で５分間）を使用して均質化し、乳濁液を形成した。全ての製剤を凍結乾燥した。粉末を、８０℃、初期５バールの酸素圧で、Ｏｘｉｐｒｅｓで試験し、結果を図２７に示す。非発酵ブロッコリー粉末を使用した試料については明確なＩＰがあるが、発酵ブロッコリーピューレを使用した試料については明確なＩＰがない。
ブロッコリーピューレ（７５℃、２分または１００℃、３０分で加熱）または発酵ブロッコリーピューレ（発酵前の±熱処理）を調製した（５％ＴＳ）。Ｈｉ－ＤＨＡマグロ油を添加し、Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎ乳化剤ミキサー（６０℃で５分間）を使用して均質化し、乳濁液を形成した。全ての製剤を凍結乾燥した。粉末を、８０℃、初期５バールの酸素圧で、Ｏｘｉｐｒｅｓで試験し、結果を図２７に示す。非発酵ブロッコリー粉末を使用した試料については明確なＩＰがあるが、発酵ブロッコリーピューレを使用した試料については明確なＩＰがない。
【0291】
実施例１５－封入されていないマグロ油に対するマグロ油粉末中のＥＰＡ及びＤＨＡの安定性の比較
実施例５及び８から選択される粉末ならびに未精製マグロ油（封入されていない）を、軽く蓋をしたボトルに４０℃のオーブンで保存した。ガスクロマトグラフィーを使用して測定された、油及び粉末試料中の油の脂肪酸分析。最初のマグロ油のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の含有量ならびに保存試料中の含有量を、表６に示す。４０℃で１か月後の未精製油中のＥＰＡ及びＤＨＡと比較して、保存粉末中のＥＰＡ及びＤＨＡの含有量がより高いことは、酸化に対するＥＰＡ及びＤＨＡの封入剤の保護を明確に実証している。
実施例５及び８から選択される粉末ならびに未精製マグロ油（封入されていない）を、軽く蓋をしたボトルに４０℃のオーブンで保存した。ガスクロマトグラフィーを使用して測定された、油及び粉末試料中の油の脂肪酸分析。最初のマグロ油のエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の含有量ならびに保存試料中の含有量を、表６に示す。４０℃で１か月後の未精製油中のＥＰＡ及びＤＨＡと比較して、保存粉末中のＥＰＡ及びＤＨＡの含有量がより高いことは、酸化に対するＥＰＡ及びＤＨＡの封入剤の保護を明確に実証している。
【0292】
【表6】
【0293】
実施例１６－選択されるバイオマスを封入剤として使用した、オメガ－３油粉末からの二次酸化生成物のヘッドスペース分析
実施例８及び１０からの凍結乾燥オメガ－３油の粉末を、－１８℃で１４か月間保存し、これらの実施例からの選択される粉末を試料採取し、分析のために４０℃のオーブンで軽く蓋をしたボトルに４週間保存した。ＧＣ－ＭＳを使用して、ヘッドスペース二次酸化生成物の分析を実施した。
実施例８及び１０からの凍結乾燥オメガ－３油の粉末を、－１８℃で１４か月間保存し、これらの実施例からの選択される粉末を試料採取し、分析のために４０℃のオーブンで軽く蓋をしたボトルに４週間保存した。ＧＣ－ＭＳを使用して、ヘッドスペース二次酸化生成物の分析を実施した。
【0294】
結果を図２８に示す。プロパナール及びＥＥ－２，４－ヘプタジエナールの量が少ないほど、試料の酸化に対する安定性が高くなることを意味する。これらの結果から、これらの例でのオメガ－３酸化に対する最良の保護は、ブロッコリー、マッシュルーム、及び芽キャベツにおいて得られた。
【0295】
実施例１７－５０％のオメガ－３油ブロッコリー粉末を使用した、錠剤化及び押出成形製剤の酸素取り込み量
実施例４（Ｆ１）と同様に調製した凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％のＨｉ－ＤＨＡマグロ油）を使用した。押出成形された試料では、凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（２０重量％）及びトウモロコシの粉（８０重量％）を乾燥混成し、低剪断スナック押出スクリュープロファイル、６０℃、１００℃、１４０℃、１４０℃のバレル温度（粉末供給口から金型端まで）、及び金型圧力約５バールを使用して、押出機Ｅｘｔｒｕｄｅｒ（ＤＳＥ３２－ＩＩ Ｔｗｉｎｓｃｒｅｗ Ｌａｂ Ｅｘｔｒｕｄｅｒ）を通して供給した。錠剤化製剤の場合、凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０重量％）及び賦形剤としての脱脂粉乳（５０重量％）を乾燥混成し、錠剤（φ１．３ｃｍ×０．５ｃｍ）を作製した。試料の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
実施例４（Ｆ１）と同様に調製した凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％のＨｉ－ＤＨＡマグロ油）を使用した。押出成形された試料では、凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（２０重量％）及びトウモロコシの粉（８０重量％）を乾燥混成し、低剪断スナック押出スクリュープロファイル、６０℃、１００℃、１４０℃、１４０℃のバレル温度（粉末供給口から金型端まで）、及び金型圧力約５バールを使用して、押出機Ｅｘｔｒｕｄｅｒ（ＤＳＥ３２－ＩＩ Ｔｗｉｎｓｃｒｅｗ Ｌａｂ Ｅｘｔｒｕｄｅｒ）を通して供給した。錠剤化製剤の場合、凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０重量％）及び賦形剤としての脱脂粉乳（５０重量％）を乾燥混成し、錠剤（φ１．３ｃｍ×０．５ｃｍ）を作製した。試料の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
【0296】
結果を図２９に示す。試験した試料は、押出物（３６ｇのマトリックス及び４ｇの油）の場合は４０ｇ、錠剤形式（１６ｇの賦形剤及び４ｇの油）の場合は１６ｇであった。
【0297】
実施例１８－ブロッコリーバイオマスを前処理し、及び／または乳濁液を後処理することによって作製された、オメガ－３油ブロッコリー粉末の酸素取り込み量
凍結乾燥したブロッコリー粉末を封入剤として使用して、最大５％の水性固形分（５０℃、６０分で水和）を作製し、油を添加して均質化し、安定した乳濁液または懸濁液（９．５％ＴＳ及び４．８％の油）を形成した。乳濁液を凍結乾燥して、５０％の油粉末を作製した。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。この例では、バイオマス（水相）を、水浴中で７．５分間の超音波（４０ＫＨｚ／１８０Ｗ）もしくは２．５分間７６．３℃までのマイクロ波（７５０Ｗ）を使用して前処理するか、または２５℃で３分間高圧（６０００バール）で、もしくは２．５分間７６．３℃までのマイクロ波（７５０Ｗ）で均質化した後に後処理のいずれかを行った。バイオマスの前処理（５％ＴＳブロッコリー懸濁液）または乳濁液の後処理（４．８％の油及び９．５％ＴＳの乳濁液）によって調製された凍結乾燥ブロッコリー粉末の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
凍結乾燥したブロッコリー粉末を封入剤として使用して、最大５％の水性固形分（５０℃、６０分で水和）を作製し、油を添加して均質化し、安定した乳濁液または懸濁液（９．５％ＴＳ及び４．８％の油）を形成した。乳濁液を凍結乾燥して、５０％の油粉末を作製した。試験した試料には、４ｇの油及び４ｇのマトリックスが含有されていた。この例では、バイオマス（水相）を、水浴中で７．５分間の超音波（４０ＫＨｚ／１８０Ｗ）もしくは２．５分間７６．３℃までのマイクロ波（７５０Ｗ）を使用して前処理するか、または２５℃で３分間高圧（６０００バール）で、もしくは２．５分間７６．３℃までのマイクロ波（７５０Ｗ）で均質化した後に後処理のいずれかを行った。バイオマスの前処理（５％ＴＳブロッコリー懸濁液）または乳濁液の後処理（４．８％の油及び９．５％ＴＳの乳濁液）によって調製された凍結乾燥ブロッコリー粉末の酸素取り込み量を、８０℃、初期５バールの酸素圧でＯｘｉｐｒｅｓ試験によって評価した。
【0298】
結果を図３０に示す。これらの試料における遅い酸素取り込みは、ブロッコリーマトリックスによる酸素取り込みに一部起因するものである。
【0299】
実施例１９－ブロッコリーの水性懸濁液及び乳濁液のスルフォラファン含有量
新鮮なブロッコリーの小花を蒸し（芯温６０℃／５分）、室温に冷却した。水性懸濁液（５重量％のブロッコリー固形分）及び中鎖トリグリセリドを有する乳濁液（５重量％のブロッコリー固形分及び５重量％の中鎖トリグリセリド）を調製し、２５℃で４時間保持した。水性懸濁液及び乳濁液を酢酸エチルで抽出し、スルフォラファン含有量を、ＵＰＬＣを使用して測定した。
水性懸濁液中よりも乳濁液中で、スルフォラファンの含有量が１３％高かった（ブロッコリー固形分のｍｇ／ｇ乾燥重量として表現）。これは、スルフォラファンが乳濁液中でより安定していることを実証している。
新鮮なブロッコリーの小花を蒸し（芯温６０℃／５分）、室温に冷却した。水性懸濁液（５重量％のブロッコリー固形分）及び中鎖トリグリセリドを有する乳濁液（５重量％のブロッコリー固形分及び５重量％の中鎖トリグリセリド）を調製し、２５℃で４時間保持した。水性懸濁液及び乳濁液を酢酸エチルで抽出し、スルフォラファン含有量を、ＵＰＬＣを使用して測定した。
水性懸濁液中よりも乳濁液中で、スルフォラファンの含有量が１３％高かった（ブロッコリー固形分のｍｇ／ｇ乾燥重量として表現）。これは、スルフォラファンが乳濁液中でより安定していることを実証している。
【0300】
実施例２０－保存凍結乾燥ブロッコリーの水性懸濁液及び乳濁液のスルフォラファン含有量
凍結乾燥ブロッコリー粉末（油なし）及び凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％の油粉末）を、実施例６のように調製した。粉末のスルフォラファン含有量を、凍結保存（－１８℃で数か月）後に測定した。試料からスルフォラファンを抽出した後に、スルフォラファン含有量を測定した（酢酸エチル／ヘキサン混合物を使用して）。凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％の油）中のスルフォラファン含有量（ブロッコリー固形分のｍｇ／ｇ乾燥重量として表現）は、凍結乾燥ブロッコリー粉末（油なし）よりも約２倍高かった。これは、油の存在により、長期保存中にスルフォラファンが安定化したことを実証している。
凍結乾燥ブロッコリー粉末（油なし）及び凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％の油粉末）を、実施例６のように調製した。粉末のスルフォラファン含有量を、凍結保存（－１８℃で数か月）後に測定した。試料からスルフォラファンを抽出した後に、スルフォラファン含有量を測定した（酢酸エチル／ヘキサン混合物を使用して）。凍結乾燥オメガ－３油ブロッコリー粉末（５０％の油）中のスルフォラファン含有量（ブロッコリー固形分のｍｇ／ｇ乾燥重量として表現）は、凍結乾燥ブロッコリー粉末（油なし）よりも約２倍高かった。これは、油の存在により、長期保存中にスルフォラファンが安定化したことを実証している。
【0301】
実施例２１－考察
封入剤として精製タンパク質及び炭水化物を使用する代わりに、これらの実験は、バイオマス全体を封入剤として使用して、バイオマス源からタンパク質及び炭水化物を精製及び分離する必要をなくすことができることを実証した。同じバイオマス源からのタンパク質及び炭水化物を使用することで、乳濁液及び懸濁液、封入剤、粉末、ならびに捕捉及び封入された生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）を生成する費用を削減することができる。本明細書に記載されるような方法は、安定化に寄与する可能性があり、生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）のための送達媒体として機能する可能性がある、バイオマスに固有の全ての成分を利用するという追加の利点を提供する。多くのバイオマス源（例えば、植物、果物及び野菜、藻類、菌類）には、多くの栄養素（タンパク質、炭水化物、繊維）及び植物栄養素（例えば、カロチノイド、ポリフェノール、硫黄含有化合物、トコフェロール、グルコシノレートなど）も含有されており、これらはまた、良好な栄養特性及び健康促進特性も有する（Ｈｏｕｎｓｏｍｅ ｅｔ ａｌ．，２００８）。バイオマス中に存在するタンパク質、炭水化物、植物栄養素、及び他の微量成分（例えば、ビタミンＣ）の遍在的な存在により、精製された個々の成分の代わりにバイオマス全体（またはこれらの画分）を活用することができ、バイオマス中の植物栄養素は、感受性生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）の封入及び送達のために、バイオマスから精製された成分の代わりにバイオマスを使用するときに利点を呈する。加えて、本明細書に記載されているような方法は、酸化分解に対する高い保護／耐性を有する封入油を提供する。本明細書に記載されるような方法を使用して封入された未精製油及び油についてのＩＰの比較を表７に示す。
封入剤として精製タンパク質及び炭水化物を使用する代わりに、これらの実験は、バイオマス全体を封入剤として使用して、バイオマス源からタンパク質及び炭水化物を精製及び分離する必要をなくすことができることを実証した。同じバイオマス源からのタンパク質及び炭水化物を使用することで、乳濁液及び懸濁液、封入剤、粉末、ならびに捕捉及び封入された生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）を生成する費用を削減することができる。本明細書に記載されるような方法は、安定化に寄与する可能性があり、生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）のための送達媒体として機能する可能性がある、バイオマスに固有の全ての成分を利用するという追加の利点を提供する。多くのバイオマス源（例えば、植物、果物及び野菜、藻類、菌類）には、多くの栄養素（タンパク質、炭水化物、繊維）及び植物栄養素（例えば、カロチノイド、ポリフェノール、硫黄含有化合物、トコフェロール、グルコシノレートなど）も含有されており、これらはまた、良好な栄養特性及び健康促進特性も有する（Ｈｏｕｎｓｏｍｅ ｅｔ ａｌ．，２００８）。バイオマス中に存在するタンパク質、炭水化物、植物栄養素、及び他の微量成分（例えば、ビタミンＣ）の遍在的な存在により、精製された個々の成分の代わりにバイオマス全体（またはこれらの画分）を活用することができ、バイオマス中の植物栄養素は、感受性生物活性物質（複数可）及び／または生物活性前駆体（複数可）の封入及び送達のために、バイオマスから精製された成分の代わりにバイオマスを使用するときに利点を呈する。加えて、本明細書に記載されているような方法は、酸化分解に対する高い保護／耐性を有する封入油を提供する。本明細書に記載されるような方法を使用して封入された未精製油及び油についてのＩＰの比較を表７に示す。
【0302】
【表7-1】
【表7-2】
【表7-3】
【表7-4】
【表7-5】
【0303】
広範に記載されているような本発明の趣旨または範囲から逸脱することなく、特定の実施形態に示されるように、本発明に対して多くの変更及び／または改変がなされ得ることが当業者によって理解されるであろう。そのため、本発明の実施形態はあらゆる点において、例示的であり、制約的ではないとみなすべきである。
【0304】
本出願は、２０１８年２月２日に出願された、「Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｎ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｏｒ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｔｈｅｒｅｆｒｏｍ」と題された、豪州仮出願第２０１８９００３２６号の優先権を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0305】
本明細書で議論及び／または参照される全ての出版物は、その全体が本明細書に組み込まれる。
【0306】
本明細書に含まれている文書、行為、材料、デバイス、物品などのいかなる説明も、本発明の文脈を提供する目的のためだけのものである。これらの事項の一部または全ては、本出願の各請求項の優先日前に存在していた本発明に関連する分野における先行技術の基礎の一部または共通の一般的知識であったことが承認されたものとはみなさない。
【0307】
参考文献
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Ａｕｇｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ（２０１５）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６：４６３－７７．
Ｄｒｕｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｎｉｎｏ（２００９）Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０：２３７－４４．
Ｈａｌｋｉｅｒ ａｎｄ Ｇｅｒｓｈｅｎｚｏｎ（２００６）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｉｎ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ ５７：３０３－３３．
Ｈｏｕｎｓｏｍｅ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ３：Ｒ４８－６５．
Ｈｏｙｏｓ－Ｌｅｙｖａ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｆｏｏｄ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ３４：１４８－１６１．
Ｌｉｖｎｅｙ（２０１０）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ １５：７３－８３．
ＭｃＣｌｅｍｅｎｔｓ（２０１５）Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：２７－５３．
ＭｃＣｌｅｓｋｅｙ ｅｔ ａｌ．（１９４７）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ５４：６９７－７０８．
Ｏｌｖｅｒａ Ｃ１ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ａｎｔｏｎｉｅ ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ ９２：１１－２０．
Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ ａｎｄ Ａｕｇｕｓｔｉｎ（２００６）ｅｄ．Ｊ．Ｓｈｉ，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ＵＳＡ，２９７－３２７．
Ｓｕｂｉｒａｄｅ ａｎｄ Ｃｈｅｎ（２００８）ｅｄ．Ｎ．Ｇａｒｔｉ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ，２５１－２７８．
Ａｄｉｔｙａ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｄｖａｎｃｅｓ ３５：４５０－４５７．
Ａｇｅｒｂｉｒｋ ａｎｄ Ｏｌｓｅｎ（２０１２）Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｙ ７７：１６－４５．
Ａｕｇｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｈｅｍａｒ（２００９）Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ ３８：９０２－９１２．
Ａｕｇｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ７１２：Ｅ２５－Ｅ３２．
Ａｕｇｕｓｔｉｎ ａｎｄ Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ（２０１５）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６：４６３－７７．
Ｄｒｕｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｎｉｎｏ（２００９）Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０：２３７－４４．
Ｈａｌｋｉｅｒ ａｎｄ Ｇｅｒｓｈｅｎｚｏｎ（２００６）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｉｎ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｙ ５７：３０３－３３．
Ｈｏｕｎｓｏｍｅ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ３：Ｒ４８－６５．
Ｈｏｙｏｓ－Ｌｅｙｖａ ｅｔ ａｌ．（２０１８）Ｆｏｏｄ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ３４：１４８－１６１．
Ｌｉｖｎｅｙ（２０１０）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ １５：７３－８３．
ＭｃＣｌｅｍｅｎｔｓ（２０１５）Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｃｏｌｌｏｉｄ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｆａｃｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１９：２７－５３．
ＭｃＣｌｅｓｋｅｙ ｅｔ ａｌ．（１９４７）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ５４：６９７－７０８．
Ｏｌｖｅｒａ Ｃ１ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ａｎｔｏｎｉｅ ｖａｎ Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ ９２：１１－２０．
Ｓａｎｇｕａｎｓｒｉ ａｎｄ Ａｕｇｕｓｔｉｎ（２００６）ｅｄ．Ｊ．Ｓｈｉ，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，ＵＳＡ，２９７－３２７．
Ｓｕｂｉｒａｄｅ ａｎｄ Ｃｈｅｎ（２００８）ｅｄ．Ｎ．Ｇａｒｔｉ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ，２５１－２７８．
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
