▶ ユニバーシティ オブ ポーツマス ハイヤー エデュケーション コーポレーションの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-09-30
(45)【発行日】2024-10-08
(54)【発明の名称】方法
(51)【国際特許分類】
G01N 33/50 20060101AFI20241001BHJP
G01N 33/68 20060101ALI20241001BHJP
G01N 33/493 20060101ALI20241001BHJP
C07K 14/54 20060101ALI20241001BHJP
C12Q 1/06 20060101ALI20241001BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20241001BHJP
A61P 13/10 20060101ALI20241001BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/4025 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/216 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/137 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/4725 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/46 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/453 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/445 20060101ALI20241001BHJP
A61K 31/222 20060101ALI20241001BHJP
【ＦＩ】
G01N33/50 Z
G01N33/68
G01N33/493 Z
C07K14/54
C12Q1/06
A61K45/00
A61P13/10
A61P43/00 111
A61K31/4025
A61K31/216
A61K31/137
A61K31/4725
A61K31/46
A61K31/453
A61K31/445
A61K31/222
【請求項の数】
11
(21)【出願番号】P 2021544745
(86)(22)【出願日】2020-01-28
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2022-03-18
(86)【国際出願番号】 GB2020050194
(87)【国際公開番号】W WO2020157485
(87)【国際公開日】2020-08-06
【審査請求日】2023-01-25
(31)【優先権主張番号】1901186.5
(32)【優先日】2019-01-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(73)【特許権者】
【識別番号】521338536
【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ ポーツマス ハイヤー エデュケーション コーポレーション
(74)【代理人】
【識別番号】110002860
【氏名又は名称】弁理士法人秀和特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ヤング，ジョン
(72)【発明者】
【氏名】フィロウズマンド，セピノード
【審査官】三木 隆
(56)【参考文献】
【文献】米国特許出願公開第２０１０／０１６６７３９（ＵＳ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１７／０７３２２６（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１９／１５８９３７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１４－５００５０４（ＪＰ，Ａ）
【文献】Sepinoud Firouzmand，New participant stratification and combination of urinary biomarkers and confounders could improve diagnostic accuracy for overactive bladder，Scientific Reports，2020年02月20日，Vol.10，Page.Article number: 308
【文献】Yoon Seok Suh，Potential Biomarkers for Diagnosis of Overactive Bladder Patients: Urinary Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Adenosine Triphosphate，Int Neurourol J，2017年09月12日，Vol.21 No.3，Page.171-177
【文献】Jon F. Pennycuff，Current Concepts in Urinary Biomarkers for Overactive Bladder: What Is the Evidence?，Curr Bladder Dysfunct Rep，2017年06月20日，Vol.12，Page.260-267
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｇ０１Ｎ ３３／５０
Ｇ０１Ｎ ３３／６８
Ｇ０１Ｎ ３３／４９３
Ｃ０７Ｋ １４／５４
Ｃ１２Ｑ １／０６
Ａ６１Ｋ ４５／００
Ａ６１Ｐ １３／１０
Ａ６１Ｐ ４３／００
Ａ６１Ｋ ３１／４０２５
Ａ６１Ｋ ３１／２１６
Ａ６１Ｋ ３１／１３７
Ａ６１Ｋ ３１／４７２５
Ａ６１Ｋ ３１／４６
Ａ６１Ｋ ３１／４５３
Ａ６１Ｋ ３１／４４５
Ａ６１Ｋ ３１／２２２
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
過活動膀胱障害（ＯＡＢ）を診断するための指標を提供する方法であって、対象から採取された尿試料中のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、およびインターロイキン５（ＩＬ－５）のうちの１または複数の濃度を測定すること；
前記濃度を、前記尿試料中のクレアチニン（Ｃｒ）濃度に対して正規化すること；
前記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること（ｒａｎｇｅ ｓｔａｎｄａｒｄｉｓｉｎｇ）：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＮＯ／Ｃｒは２００００モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＩＬ－５／Ｃｒは１００ｐｇｘｍｌ －１ ／ｍｇｘｄｌ －１ ；
を含み、
ＯＡＢを有している可能性（ｐＯＡＢ）は、
ｐＯＡＢ＝１／（１＋ｅ－ｘ ）
であり、Ｘは下記のうちの１または複数であり：
（ａ）（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ
－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；
ｐＯＡＢが閾値を超えていることは、当該対象がＯＡＢを有している、または発症している可能性が高いことを示しており、ｐＯＡＢが閾値未満であることは、当該対象がＯＡＢを有していないことを示す、
方法。
【請求項2】
前記ｐＯＡＢ閾値が０．５である、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、ＩＬ－５、またはＣｒのいずれかの濃度が、抗体ベースのプラットフォーム、またはＲＮＡアプタマーベースのプラットフォーム、またはこれらの組み合わせを用いて測定される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
抗ムスカリン薬またはβ３アドレナリン受容体作動薬を含む医薬組成物であって、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法を用いて診断された患者においてＯＡＢを治療するための、医薬組成物。
【請求項5】
前記抗ムスカリン薬がダリフェナシン、オキシブチニン、トルテロジン、ソリフェナシン、トロスピウム、フラボキサート、プロピベリン、またはフェソテロジンのうちの１または複数から選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記β３アドレナリン受容体作動薬がミラベグロンである、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項7】
ＯＡＢの進行をモニターするための指標を提供する方法であって、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法に従って第１ＰＯＡＢ値および第２ＰＯＡＢ値を測定することを含み、
前記第１ＰＯＡＢ値および前記第２ＰＯＡＢ値は、ＯＡＢを有している対象またはＯＡＢを有していることが疑われる対象から採取された第１尿試料および第２尿試料から得られる、
方法。
【請求項8】
前記第１尿試料および前記第２尿試料が少なくとも２週間の間隔をおいて採取される、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
以下のための各命令を実行するよう構成された処理手段／プロセッサを含むコンピュータシステム：アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、およびインターロイキン５（ＩＬ－５）のうちの１または複数の測定濃度、並びにクレアチニン（Ｃｒ）の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
前記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＮＯ／Ｃｒは２００００モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＩＬ－５／Ｃｒは１００ｐｇｘｍｌ －１ ／ｍｇｘｄｌ －１ ；
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３
）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／（１＋ｅ－ｘ ）により、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
【請求項10】
プロセッサ／処理手段によって実行された場合に、前記プロセッサ／処理手段に以下を行わせる命令を含むコンピュータプログラム：アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、およびインターロイキン５（ＩＬ－５）のうちの１または複数の測定濃度、並びにクレアチニン（Ｃｒ）の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
前記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＮＯ／Ｃｒは２００００モル／ｍｇｘｄｌ －１ ；ＩＬ－５／Ｃｒは１００ｐｇｘｍｌ －１ ／ｍｇｘｄｌ －１ ；並びに
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１
．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／（１＋ｅ－ｘ ）により、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
【請求項11】
請求項１０に記載のコンピュータプログラムを含むコンピュータ可読媒体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、過活動膀胱障害（ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ ｂｌａｄｄｅｒ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）（ＯＡＢ）の診断方法に関し、さらに、治療方法および疾患進行をモニターする方法に関する。また、コンピュータシステムおよびプログラムが提供される。
【背景技術】
【0002】
過活動膀胱（ＯＡＢ）は、尿意切迫、頻度増加、夜間多尿、さらに場合によっては切迫性尿失禁（ｕｒｇｅｎｃｙ ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ）を特徴とする症状症候群である。ＯＡＢはおよそ５人に１人の成人が罹患しており、有病率は年齢に伴い増加する。尿路症状（ｕｒｉｎａｒｙ ｓｙｍｐｔｏｍ）の性質は患者の身体的および精神的な健康、社会的、性的、および職業的な生活に大きな影響を与える。経済的負担の推定には幅があるが、ＵＳデータに関する最近のメタアナリシスでは、患者１人当たりの年間コストは直接費で６５６～８６０ＵＳＤ、間接費で１１，０００ＵＳＤ超であることが報告され；後者は転倒・骨折、共存症、および労働生産性の悪化によるものであった。これらの経済的推定は、２０１８年の世界の年間コストが３．２兆ユーロになるという予測と合致している。
【0003】
ＯＡＢの特徴である排尿症状は、ＬＵＴの感染症や代謝性疾患、その他の尿路系疾患でも呈するため、診断ではまずこれらの疾患を除外することが重要となる。そのため、診断ガイドラインでは、患者の病歴、身体検査、尿検査が組み合わされ、患者の症状を点数化するための排尿の日誌や質問票が義務付けまたは推奨される。質問票に基づいたＯＡＢ診断には主観性および鈍感性の問題がある。不快さのスコアや程度が陽性診断とＯＡＢ治療に必要であることについてコンセンサスが得られていない。
【0004】
「切迫性尿失禁を伴う、または伴わないＯＡＢは排尿筋過活動と推定される」という主張があるが［Ａｂｒａｍｓら、２０１７年］、これを支持しないエビデンスが存在する。ＯＡＢ症状を呈する８４３名の女性（平均年齢５５歳、範囲２２～７３歳）を対象とした研究では、５４％にしか排尿筋不安定が見られず、また、排尿筋過活動（ＤＯ）を呈する１６４１名の女性では、２８％にしかＯＡＢ症状が見られなかった［Ｄｉｇｅｓｕら、２００３］。別の研究［ＨａｓｈｉｍおよびＡｂｒａｍｓ］では、尿意切迫（ｕｒｇｅｎｃｙ）および切迫性尿失禁を呈する男性の１０％と女性の４２％が、尿流動態検査で判明したＤＯを示さず、尿失禁を伴わないＯＡＢを呈する男性の３１％と女性の５６％がＤＯを示さなかった。
【0005】
ＯＡＢ診断とは、尿意切迫、頻度、夜間多尿、尿失禁の有無を組み合わせて診断するものであり、ＯＡＢの陽性診断はもちろん、ＯＡＢを除外するための判別手段もないため、不快とはいえそれほど重度ではない尿路症状を示す症状の発現初期段階では特に、患者が誤って分類される恐れがある。すなわち、非侵襲的、高感度、且つＯＡＢに特異的な診断ツールがアンメットニーズとして存在する。ＯＡＢ治療は健康関連の生活の質の向上に大きな効果があることが確認されているが、ＯＡＢと診断された人の約７６％が未治療のままであることが示されている。しかし、医療行為の頻度は、年齢やＯＡＢに関連する共存症の存在によって増加する。高齢者集団における多剤療法の臨床的意義や、ＯＡＢ治療の早期中止の重要な要因の一つが多剤療法であることを考慮すると、ＯＡＢ発症のリスクがある集団を特定することで、早期に定期的なモニタリングが可能となり、早期の分類と治療が可能となる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0006】
【文献】Abrams P, Chapple CR, Junemann KP, Sharpe S. Urinary urgency: a review of its assessment as the key symptom of the overactive bladder syndrome. World J Urol. 2012 Jun;30(3):385-92.
【文献】Abrams P, Cardozo L, Wagg A, Wein A. (Eds) Incontinence 6th Edition (2017). ICI-ICS. International Continence Society, Bristol UK, ISBN: 978-0956960733.
【文献】Digesu GA, Khullar V, Cardozo L, Salvatore S. Overactive bladder symptoms: do we need urodynamics? Neurourology and Urodynamics. 2003;22:105-8.
【文献】Hashim H, Abrams P. Is the bladder a reliable witness for predicting detrusor overactivity? The Journal of Urology. 2006;175:191-4.
【文献】Irwin DE, Kopp ZS, Agatep B, Milsom I, Abrams P. Worldwide prevalence estimates of lower urinary tract symptoms, overactive bladder, urinary incontinence and bladder outlet obstruction. BJU Int. 2011;108:1132-8.
【文献】Lughezzani G, Saita A, Lazzeri M et al (in press). Comparison of the Diagnostic Accuracy of Micro-ultrasound and Magnetic Resonance Imaging/Ultrasound Fusion Targeted Biopsies for the Diagnosis of Clinically Significant Prostate Cancer. Eur Urol. (in press).
【文献】Valenberg FJPV, Hiar AM, Wallace E, et al. Prospective Validation of an mRNA-based Urine Test for Surveillance of Patients with Bladder Cancer. Eur Urol. (in press).
【発明の概要】
【0007】
本発明者らは、新規アルゴリズムを用いた解析により、対象が過活動膀胱障害（ＯＡＢ）を有しているかどうかの可能性を判定することが可能な、バイオマーカーと交絡因子（年齢、性別など）の組み合わせを特定した。実際、この新規アルゴリズムは、ＯＡＢを除外することにおいて特に目覚ましい精度を示した。すなわち、上記アルゴリズムを用いることで、ＯＡＢを除外することができ、それにより、不必要または不適当な治療を減らす、または回避することができる。本発明の特別な利点は、上記の各バイオマーカーが非侵襲的に取得可能であることであり、これにより、患者経験を向上させ、診断の実施に伴うコストを大きく低減することができる。
【0008】
したがって、第一の態様において、本発明は、過活動膀胱障害（ＯＡＢ）を診断する方法であって、
対象から採取された試料中のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、およびインターロイキン５（ＩＬ－５）のうちの１または複数の濃度を測定すること；
前記濃度を、前記試料中のクレアチニン（Ｃｒ）濃度に対して正規化すること；
前記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；
を含み、
ＯＡＢを有している可能性（ｐＯＡＢ）は、
ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘ
であり、Ｘは下記のうちの１または複数であり：
（ａ）（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０
３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；
ｐＯＡＢが閾値を超えている場合、当該対象がＯＡＢを有している、または発症している可能性が高いことを示しており、ｐＯＡＢが閾値未満である場合、当該対象がＯＡＢを有していないことを示す、
方法を提供する。
対象から採取された試料中のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、およびインターロイキン５（ＩＬ－５）のうちの１または複数の濃度を測定すること；
前記濃度を、前記試料中のクレアチニン（Ｃｒ）濃度に対して正規化すること；
前記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；
を含み、
ＯＡＢを有している可能性（ｐＯＡＢ）は、
ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘ
であり、Ｘは下記のうちの１または複数であり：
（ａ）（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０
３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；
ｐＯＡＢが閾値を超えている場合、当該対象がＯＡＢを有している、または発症している可能性が高いことを示しており、ｐＯＡＢが閾値未満である場合、当該対象がＯＡＢを有していないことを示す、
方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【0009】
【図1】図１は、参加者選別のフローダイアグラムを示す。ＩＣＩＱ－ＯＡＢ＝尿失禁質問票に関する国際協議－過活動膀胱（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ－ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ ｂｌａｄｄｅｒ）
【図2】図２は、適格参加者のＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿路症状スコアおよび尿路症状の不快度スコア（ｂｏｔｈｅｒｓｏｍｅ ｓｃｏｒｅ）の度数分布を示す。（Ａ～Ｅ）適格参加者のＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿路症状スコアの度数分布（ｎ＝９５）。 （Ｆ～Ｊ）適格参加者のＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿路症状＋不快度スコアの度数分布（ｎ＝８１）。１４人の参加者は症状に関連した不快度に関する質問の１つまたはいくつかが空白のままだった。ＩＣＩＱ－ＯＡＢ＝尿失禁質問票に関する国際協議－過活動膀胱（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ － ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ ｂｌａｄｄｅｒ）
【図3】図３は、候補バイオマーカーの尿中濃度と参加者の合計ＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿路症状スコアとの間の相関を示す。Ｃｒ＝クレアチニン、全ての尿中バイオマーカー値は尿中クレアチニン濃度に対して正規化された；灰色の円＝ＯＡＢ症状クラスターからの参加者；黒色の円＝ＯＡＢ症状クラスターからの参加者；ｒ＝スピアマンｒ；ｐ＝ｐ値；＊＊＝０．０１≦ｐ≧０．００１の有意なｐ値；Ｙ軸の数値形式＝ｌｏｇ。
【発明を実施するための形態】
【0010】
本発明の診断方法で用いられる交絡因子として、年齢および／または性別などの対象の特徴が挙げられる。性別は上記アルゴリズムへの入力用にコード化され、１が女性であり、０が男性である。
【0011】
各バイオマーカー濃度を、バイオマーカー標準化に一般的に用いられる尿中クレアチニン濃度の濃度に対して正規化する。クレアチニンは、骨格筋組織のクレアチニンリン酸代謝の分解生成物であり、腎臓により血液から濾過され、尿中に排泄される。健全な腎機能を有する個体の場合、クレアチニン排泄は通常一定の速度で起こる。
【0012】
本発明の好ましい実施形態では、各独立変数は、任意の１人の対象において測定可能な最高可能数値（ｈｉｇｈｅｓｔ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｎｕｍｂｅｒ）に対して範囲標準化され（ｒａｎｇｅ ｓｔａｎｄａｒｄｉｓｅｄ）（いくつかのバイオマーカーにおいては、考慮された値ははるかに高いものもあった）、すなわち、年齢は１２０歳に対して範囲標準化され；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１に対して範囲標準化され；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１に対して範囲標準化され；ＮＯ／Ｃｒは２００００に対して範囲標準化され；ＩＬ－５／Ｃｒは１００に対して範囲標準化される。これにより、任意の測定値を、本発明のアルゴリズムで用いられる同じ値に対して範囲標準化することができる。
【0013】
本発明の診断方法のアルゴリズム（ａ）～（ｆ）によって、ＯＡＢの臨床的に信頼できる診断精度が得られることが示された。また、上記アルゴリズムを用いることで、陰性診断を実施、すなわち、ＯＡＢを除外または排除することもでき、特に高い陰性適中率（８９～９２％）を有することが示されたことから、上記アルゴリズムがＯＡＢの除外に特に適していることが示された。関連バイオマーカーの尿中レベルを測定し、アルゴリズム（ａ）～（ｆ）のうちの１または複数に値を入力することで、医療従事者は、排尿筋過活動（ＤＯ）の尿流動態検査による観察という現行の侵襲的手段と比較して、疾患発症のかなりより早い段階で、より高い精度で、対象がＯＡＢを有する可能性を予測することができる。重要なこととして、本発明の診断方法によって、医療従事者は、ＯＡＢと症状が重複しているが病因の異なる疾患を有する患者において、高い精度で非侵襲的にＯＡＢを除外することが可能となる。
【0014】
上記アルゴリズムの結果はｐＯＡＢの値である。ｐＯＡＢを閾値と比較し、ｐＯＡＢが閾値を超えている場合、当該対象がＯＡＢを有している、または発症している可能性が高いことを示しており、ｐＯＡＢが閾値未満である場合、当該対象がＯＡＢを有していないことを示している。通常、閾値はＯＡＢを有していない個体の適切な集団から求められる。この適切な集団は、例えば、食事、生活様式、年齢、性別、民族的背景、または正常なマーカーレベルに影響し得る任意の他の特徴に基づいて定めることができる。閾値が分かれば、測定されたｐＯＡＢ値を比較することができる。
【0015】
本発明の実施形態において、ｐＯＡＢ閾値は０．５である。あるいは、感度または特異度またはその両方を最大にするため、ｐＯＡＢ閾値は最適化してもよい。例えば、感度および特異度（ｓｐｅｃｉｆｙ）が最大となるための最適なｐＯＡＢ閾値は、以下の通りとなり得る：Ｘが（ａ）の場合は０．５１；Ｘが（ｂ）の場合は０．４６；Ｘが（ｃ）の場合は０．４６；Ｘが（ｄ）の場合は０．５６；Ｘが（ｅ）の場合は０．５６；あるいは、Ｘが（ｆ）の場合は０．５１。これは、この検査が最大限の高い感度と特異性を同時に示すことを意味する。しかし、感度が検査を指示または実行する医療従事者にとって最も重要な要素である場合、より高い感度を示す他の閾値を考慮することもできるが、結果として得られる特異度は低いものとなるだろう。同様に、他の閾値を用いて特異度を最大にす
ることはできるが、結果として得られる感度は低いものとなるだろう。感度が最大となるｐＯＡＢ閾値は以下の通りであり得る：Ｘが（ａ）の場合０．３９；Ｘが（ｂ）の場合０．４１；Ｘが（ｃ）の場合０．３８；Ｘが（ｄ）の場合０．３５；Ｘが（ｅ）の場合０．３４；あるいは、Ｘが（ｆ）の場合０．４０。特異度が最大となるｐＯＡＢ閾値は以下の通りであり得る：Ｘが（ａ）の場合０．８０；Ｘが（ｂ）の場合０．８７；Ｘが（ｃ）の場合０．８０；Ｘが（ｄ）の場合０．８１；Ｘが（ｅ）の場合０．８１；あるいは、Ｘが（ｆ）の場合０．８０。
ることはできるが、結果として得られる感度は低いものとなるだろう。感度が最大となるｐＯＡＢ閾値は以下の通りであり得る：Ｘが（ａ）の場合０．３９；Ｘが（ｂ）の場合０．４１；Ｘが（ｃ）の場合０．３８；Ｘが（ｄ）の場合０．３５；Ｘが（ｅ）の場合０．３４；あるいは、Ｘが（ｆ）の場合０．４０。特異度が最大となるｐＯＡＢ閾値は以下の通りであり得る：Ｘが（ａ）の場合０．８０；Ｘが（ｂ）の場合０．８７；Ｘが（ｃ）の場合０．８０；Ｘが（ｄ）の場合０．８１；Ｘが（ｅ）の場合０．８１；あるいは、Ｘが（ｆ）の場合０．８０。
【0016】
本発明の好ましい実施形態では、試料は尿試料である。従って、試料は非侵襲的に採取することができる。これにより、特に評価が繰り返し必要となる、侵襲的な尿流動態検査に基づいた従来の診断方法と比較して、患者経験を大きく向上させることができる。本発明の方法は、尿流動態評価に要する特殊な装置（ｓｐｅｃｉａｌｉｓｔ ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ）や熟練した操作者を必要としないことにより、ＯＡＢ診断実施に伴うコストを大きく削減することもできる。非侵襲的に採取された試料を用いることにより、本発明の診断方法は、虚弱者や高齢者などの、現行の診断方法が適切ではない患者群におけるＯＡＢの診断も可能にする。
【0017】
対象は通常は哺乳動物であり、好ましくはヒトである。本発明の実施形態では、対象は小児の対象であっても老年の対象であってもよい。
【0018】
バイオマーカーはタンパク質、核酸、または生体分子とすることができる。各バイオマーカーの濃度は、抗体ベースのプラットフォームもしくはＲＮＡアプタマーベースのプラットフォームまたはこれらの組み合わせなどのインビトロ診断プラットフォームを用いて測定することができる。
【0019】
本発明の診断方法は、ＯＡＢを有していると診断された対象に治療薬を投与することをさらに含んでもよい。したがって、本発明は、ＯＡＢを治療する方法であって、本明細書に記載の方法を用いて患者におけるＯＡＢを診断することと、上記患者に治療薬を投与すること、を含む方法、を提供する。上述の通り、本発明の診断方法は非侵襲的である（従って、他の侵襲的手法と比較して、患者にとって受け入れられやすく、より安価となる可能性がある）ため、ＯＡＢのより早期の診断が可能となる。ＯＡＢのより遅い段階では症状が部分的にしか回復可能でなくなると思われるため、これにより、診断後のＯＡＢを治療する際の成績を向上させることができる。
【0020】
ＯＡＢを治療するための治療薬は当該技術分野において公知のものであり、抗ムスカリン薬およびβ３アドレナリン受容体作動薬が挙げられる。抗ムスカリン薬は、ダリフェナシン、オキシブチニン、トルテロジン、ソリフェナシン、トロスピウム、フラボキサート、プロピベリン、またはフェソテロジンのうちの１または複数から選択することができる。β３アドレナリン受容体作動薬はミラベグロンとすることができる。
【0021】
さらなる態様において、本発明は、ＯＡＢの進行をモニターする方法であって、本明細書に記載の診断方法に従って第１ｐＯＡＢ値および第２ｐＯＡＢ値を測定することを含み、上記第１ｐＯＡＢ値および上記第２ｐＯＡＢ値はＯＡＢを有している対象またはＯＡＢを有していることが疑われる対象から採取された第１試料および第２試料から得られる、方法を提供する。疾患の進行をモニターすることでも、ＯＡＢ治療の有効性をモニターすることができ、例えば、段階特異的な治療応答をモニターすることができる。
【0022】
上記の第１試料および第２試料は、少なくとも２週間の間隔をおいて採取されたものとすることができる。
【0023】
本発明の本態様においては、第１ｐＯＡＢ値および／または第２ｐＯＡＢ値を、同じ対象をより早い時期に検査し、ＯＡＢが進行している場合および／またはＯＡＢの治療が成功している場合に観察される可能性の高いｐＯＡＢ値を断定する（ｐｒｅｄｉｃａｔｉｎｇ）ことで確立された予測ｐＯＡＢ値と比較してもよい。この予測は、単なる、ｐＯＡＢ値における増加または減少であってもよいし、あるいは、起こり得る変化を定量化することが可能であってもよい。
【0024】
本発明はさらに、以下のための各命令を実行するよう構成された処理手段／プロセッサを含むコンピュータシステムを提供する：
アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、インターロイキン５（ＩＬ－５）、およびクレアチニン（Ｃｒ）のうちの１または複数の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
上記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘにより、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、インターロイキン５（ＩＬ－５）、およびクレアチニン（Ｃｒ）のうちの１または複数の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
上記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘにより、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
【0025】
本発明はさらに、プロセッサ／処理手段によって実行された場合に、前記プロセッサ／処理手段に以下を行わせる命令を含むコンピュータプログラムを提供する：
アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、インターロイキン５（ＩＬ－５）、およびクレアチニン（Ｃｒ）のうちの１または複数の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
上記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；並びに
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘにより、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、アセチルコリン（ＡＣｈ）、一酸化窒素（ＮＯ）、インターロイキン５（ＩＬ－５）、およびクレアチニン（Ｃｒ）のうちの１または複数の測定濃度を受け取ること；
ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、およびＩＬ－５の濃度をＣｒの濃度に対して正規化すること；
上記正規化濃度および対象の年齢を、下記の値に対して範囲標準化すること：年齢は１２０歳；ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１；ＡＣｈ／Ｃｒは０．１；ＮＯは２００００；ＩＬ－５／Ｃｒは１００；並びに
下記式のうちの１または複数に従ってＸを算出すること：
（ａ）Ｘ＝（－２．６８８±１．０５０）＋５．４７２±２．０９８×対象の年齢＋１．３５６±０．５５９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－７．９９８±４０．２７３）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］；
（ｂ）Ｘ＝（－２．１４１±０．９６６）＋４．５０６±１．９０２×対象の年齢＋１．０３４±０．５１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－５２９４．０６３±９０７５．４５６）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｃ）Ｘ＝（－２．８２５±１．０７２）＋５．９６４±２．１６７×対象の年齢＋１．３１２±０．５６２×性別（女性＝１、男性＝０）＋１７．７９０±５８．７６２×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－９１８０．８２１±１２７００．０５７）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］；
（ｄ）Ｘ＝（－２．９９３±１．１９７）＋５．５８０±２．３０９×対象の年齢＋１．７２４±０．７１９×性別（女性＝１、男性＝０）＋６３．５７１±７３．４４４×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１０９０８．５２３±１３６０６．７５２）×［ＡＣｈ／Ｃｒ］＋（－５６６．９９１±６３６．５８９）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；
（ｅ）Ｘ＝（－３．０９０±１．２００）＋５．３９３±２．２５６×対象の年齢＋１．７９７±０．７１７×性別（女性＝１、男性＝０）＋３４．７６７±５６．３３１×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－５６２．７４３±６２９．３１６）×［ＡＴＰ／Ｃｒ］；または
（ｆ）Ｘ＝（－２．６５０±１．０６７）＋５．５１６±２．１２０×対象の年齢＋１．３８９±０．５８３×性別（女性＝１、男性＝０）＋（－４．０６０±４５．２３８）×［ＩＬ－５／Ｃｒ］＋（－１．４５６±６．８３３）×［ＮＯ／Ｃｒ］；並びに
Ｘを用いて、式ｐＯＡＢ＝１／１＋ｅ－ｘにより、対象がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出すること。
【0026】
本発明はさらに、本明細書に記載のコンピュータプログラムを含むコンピュータ可読媒体を提供する。通常、前記機械可読媒体は非一時的な媒体または記憶媒体であり、特に非一時的な記憶媒体である。
【0027】
以上から、本発明を用いることで、非侵襲的に採取された試料を利用して迅速かつ容易にＯＡＢが診断および／またはモニターされる、ポイントオブケアの診断検査が実現できる。
【0028】
以下、本発明を、図面を参照しながら、単なる例示として詳細に説明する。
【実施例】
【0029】
材料および方法
参加者の募集
本研究およびそのすべての手順は、バークシャー南中央部国立研究倫理局（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｓｅｒｖｉｃｅ）（ＮＲＥＳ）委員会（ＲＥＣ参照：１３／ＳＣ／０５０１）の承認を得た。ポーツマス大学（ＵｏＰ）のスタッフと学生、およびワイト島のＴｈｅ Ｂｒｉａｒｓ Ｇｒｅｅｎｓｌｅｅｖｅｓ Ｈｏｍｅｓ
Ｔｒｕｓｔ、Ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｅｄｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｗｏｍｅｎ’ｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ、Ｐｏｒｔｓｍｏｕｔｈ ａｎｄ Ｐｏｒｔｓｍｏｕｔｈ Ｐｅｎｓｉｏｎｅｒｓ’ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎの住民から、ボランティア抽出によって合計１１３名のボランティア参加者を募集した。参加者には、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ－ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ ｂｌａｄｄｅｒ）質問票への全記入と、新鮮な中間尿試料の提供を求めた。収集したサンプルとデータは、ＩＤコードシステムにより匿名化した。
参加者の募集
本研究およびそのすべての手順は、バークシャー南中央部国立研究倫理局（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｅｔｈｉｃｓ Ｓｅｒｖｉｃｅ）（ＮＲＥＳ）委員会（ＲＥＣ参照：１３／ＳＣ／０５０１）の承認を得た。ポーツマス大学（ＵｏＰ）のスタッフと学生、およびワイト島のＴｈｅ Ｂｒｉａｒｓ Ｇｒｅｅｎｓｌｅｅｖｅｓ Ｈｏｍｅｓ
Ｔｒｕｓｔ、Ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｅｄｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｗｏｍｅｎ’ｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ、Ｐｏｒｔｓｍｏｕｔｈ ａｎｄ Ｐｏｒｔｓｍｏｕｔｈ Ｐｅｎｓｉｏｎｅｒｓ’ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎの住民から、ボランティア抽出によって合計１１３名のボランティア参加者を募集した。参加者には、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｓｕｌｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ－ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ ｂｌａｄｄｅｒ）質問票への全記入と、新鮮な中間尿試料の提供を求めた。収集したサンプルとデータは、ＩＤコードシステムにより匿名化した。
【0030】
参加基準
１８歳以上、且つ研究への参加にインフォームドコンセントを与えることができる男性または女性。
１８歳以上、且つ研究への参加にインフォームドコンセントを与えることができる男性または女性。
【0031】
除外基準
以下の男性または女性参加者：１８歳以下；インフォームドコンセントを与えることができない；神経疾患（脳卒中、ＭＳ、パーキンソン病、脊髄損傷）と診断された；子宮がん、子宮頸がん、膣がん、または尿道がんの病歴を有する；シクロホスファミド使用歴またはいずれかの種類の化学物質性膀胱炎の病歴；良性または悪性の膀胱腫瘍の病歴；ボツリヌス毒素注射、神経調節、または膀胱拡大術を受けたことがある。
以下の男性または女性参加者：１８歳以下；インフォームドコンセントを与えることができない；神経疾患（脳卒中、ＭＳ、パーキンソン病、脊髄損傷）と診断された；子宮がん、子宮頸がん、膣がん、または尿道がんの病歴を有する；シクロホスファミド使用歴またはいずれかの種類の化学物質性膀胱炎の病歴；良性または悪性の膀胱腫瘍の病歴；ボツリヌス毒素注射、神経調節、または膀胱拡大術を受けたことがある。
【0032】
尿病理検査
採取した尿試料のごく一部に対して、顕微鏡検査、色素生産ＵＴＩ培地検査、および尿試験紙を用いた尿検査を含む病理検査を直ちに実施した。検査が陽性の場合、試料は「不健康」とみなし、研究から除外した。残った尿試料を遠心（４０００ｒｐｍ、１０分、４℃）にかけて、細胞ペレットと上清とに分離し、別々に－８０℃で保存した。
採取した尿試料のごく一部に対して、顕微鏡検査、色素生産ＵＴＩ培地検査、および尿試験紙を用いた尿検査を含む病理検査を直ちに実施した。検査が陽性の場合、試料は「不健康」とみなし、研究から除外した。残った尿試料を遠心（４０００ｒｐｍ、１０分、４℃）にかけて、細胞ペレットと上清とに分離し、別々に－８０℃で保存した。
【0033】
バイオマーカーアッセイ
候補バイオマーカーの尿中（無細胞）濃度は、ＥＮＬＩＴＥＮ（登録商標）ＡＴＰ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ Ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＦＦ２０００、プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ）、英国）；Ａｍｐｌｅｘ（登録商標）Ｒｅｄ Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ／Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ａｓｓａｙ（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（商標）、モレキュラープローブス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）（商標）、Ａ１２２１７、英国）；Ｓｉｅｖｅｒｓ Ｎｉｔｒｉｃ Ｏｘｉｄｅ Ａｎａｌｙｓｅｒ（ＮＯＡ（商標）２８０ｉ、アナリティクス社（Ａｎａｌｙｔｉｘ）、英国）；ＢＤ ＯｐｔＥＩＡ（商標）ｈｕｍａｎ ＭＣＰ－１ ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）（５５９０１７、ＢＤバイオサイエンス社（ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、英国）；Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ｈｕｍａｎ ＩＬ－５ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄシステムズ社（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）（登録商標）、Ｄ５０００Ｂ、英国）、およびＯｐｔＥＩＡ（商標）Ｈｕｍａｎ ＩＬ－５ ＥＬＩＳＡ Ｓｅｔ（５５５２０２、ＢＤバイオサイエンス社、英国）を製造業者の取扱説明書に従って用いて測定した。
候補バイオマーカーの尿中（無細胞）濃度は、ＥＮＬＩＴＥＮ（登録商標）ＡＴＰ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ Ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＦＦ２０００、プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ）、英国）；Ａｍｐｌｅｘ（登録商標）Ｒｅｄ Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ／Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ａｓｓａｙ（インビトロジェン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）（商標）、モレキュラープローブス（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）（商標）、Ａ１２２１７、英国）；Ｓｉｅｖｅｒｓ Ｎｉｔｒｉｃ Ｏｘｉｄｅ Ａｎａｌｙｓｅｒ（ＮＯＡ（商標）２８０ｉ、アナリティクス社（Ａｎａｌｙｔｉｘ）、英国）；ＢＤ ＯｐｔＥＩＡ（商標）ｈｕｍａｎ ＭＣＰ－１ ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）（５５９０１７、ＢＤバイオサイエンス社（ＢＤ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、英国）；Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）ｈｕｍａｎ ＩＬ－５ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄシステムズ社（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）（登録商標）、Ｄ５０００Ｂ、英国）、およびＯｐｔＥＩＡ（商標）Ｈｕｍａｎ ＩＬ－５ ＥＬＩＳＡ Ｓｅｔ（５５５２０２、ＢＤバイオサイエンス社、英国）を製造業者の取扱説明書に従って用いて測定した。
【0034】
クレアチニンアッセイ
全ての尿中バイオマーカー値は尿中クレアチニン（Ｃｒ）濃度に対して正規化した。クレアチニンは、Ｃａｙｍａｎ Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（ｕｒｉｎａｒｙ）Ｃｏｌｏｕｒｉｍｅｔｒｉｃ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（ＣＡＹ５００７０１、ケンブリッジ・バイオサイエンス社（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、英国）を製造業者の取扱説明書に従って用いて、測定した。
全ての尿中バイオマーカー値は尿中クレアチニン（Ｃｒ）濃度に対して正規化した。クレアチニンは、Ｃａｙｍａｎ Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（ｕｒｉｎａｒｙ）Ｃｏｌｏｕｒｉｍｅｔｒｉｃ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（ＣＡＹ５００７０１、ケンブリッジ・バイオサイエンス社（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、英国）を製造業者の取扱説明書に従って用いて、測定した。
【0035】
統計解析
クラスター分析
ＩＢＭ ＳＰＳＳ sｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０を用いて、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問
票から得られたデータ（データ未記載）に対して、ＴｗｏＳｔｅｐクラスター分析を実施した。各質問（症状／不快度尺度）に対する回答の分布を０～１の段階で範囲標準化した。前記ソフトウェアは、最大１５個のクラスターを自動的に識別するようにプログラムされた。ＯＡＢ患者の分類に使用できる尿特性スコアの最良の組み合わせを特定するために、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問票から得られたデータの各種側面について、クラスター分析を実
施した。これには、尿路症状スコアのみ（ｕｒｉｎａｒｙ ｓｙｍｐｔｏｍ ｓｃｏｒｅｓ ｏｎｌｙ）（ＵＳＳＯ）、尿不快度スコアのみ（ｕｒｉｎａｒｙ ｂｏｔｈｅｒｓｏｍｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｎｌｙ）（ＵＢＳＯ）、尿路症状スコア＋関連する不快度スコア（ｕｒｉｎａｒｙ ｓｙｍｐｔｏｍ ｓｃｏｒｅｓ ｐｌｕｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｔｈｅｒｓｏｍｅ ｓｃｏｒｅｓ）（ＵＳＣＰＡＢＳ）から得られたデータに基づく分類が含まれた。
クラスター分析
ＩＢＭ ＳＰＳＳ sｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０を用いて、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問
票から得られたデータ（データ未記載）に対して、ＴｗｏＳｔｅｐクラスター分析を実施した。各質問（症状／不快度尺度）に対する回答の分布を０～１の段階で範囲標準化した。前記ソフトウェアは、最大１５個のクラスターを自動的に識別するようにプログラムされた。ＯＡＢ患者の分類に使用できる尿特性スコアの最良の組み合わせを特定するために、ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問票から得られたデータの各種側面について、クラスター分析を実
施した。これには、尿路症状スコアのみ（ｕｒｉｎａｒｙ ｓｙｍｐｔｏｍ ｓｃｏｒｅｓ ｏｎｌｙ）（ＵＳＳＯ）、尿不快度スコアのみ（ｕｒｉｎａｒｙ ｂｏｔｈｅｒｓｏｍｅ ｓｃｏｒｅｓ ｏｎｌｙ）（ＵＢＳＯ）、尿路症状スコア＋関連する不快度スコア（ｕｒｉｎａｒｙ ｓｙｍｐｔｏｍ ｓｃｏｒｅｓ ｐｌｕｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｔｈｅｒｓｏｍｅ ｓｃｏｒｅｓ）（ＵＳＣＰＡＢＳ）から得られたデータに基づく分類が含まれた。
【0036】
相関分析
スピアマンの順位相関係数（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ６ソフトウェア）を用いて、候補尿中バイオマーカーと参加者の合計尿路症状スコアとの関係を評価した。さらに、相関検定（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いて、各独立変数と従属変数（アウトカム／ＯＡＢ症状）との潜在的な関係の強さを評価し、独立変数間の多重共線性を評価した（ｒ値が０．８０超の２つの独立変数は相関していると見なす）。
スピアマンの順位相関係数（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ６ソフトウェア）を用いて、候補尿中バイオマーカーと参加者の合計尿路症状スコアとの関係を評価した。さらに、相関検定（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いて、各独立変数と従属変数（アウトカム／ＯＡＢ症状）との潜在的な関係の強さを評価し、独立変数間の多重共線性を評価した（ｒ値が０．８０超の２つの独立変数は相関していると見なす）。
【0037】
バイナリロジスティック回帰
ある人がＯＡＢ症状を有する可能性を予測する際の、各候補バイオマーカーの、個々の、または組み合わせた場合の（様々な組み合わせ設定、および交絡因子（年齢、性別、採取した尿量）との、能力を、バイナリロジスティック回帰検定（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いて調べた。この場合、各変数を本研究において取得可能な最大測定値に対し標準化するのではなく、各変数を任意の１人の人間について測定できる最大可能値に対し範囲標準化した（いくつかのバイオマーカーについては、考慮された値はさらに高いものであった）。すなわち、年齢は１２０歳に対して範囲標準化し；量は尿１０００ｍｌに対して範囲標準化し；各候補バイオマーカーは以下の値に対して範囲標準化した：ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１に対して、ＡＣｈ／Ｃｒは０．１に対して、ＮＯ／Ｃｒは２００００に対して、亜硝酸塩は２００に対して、ＭＣＰ－１／Ｃｒは１００に対して、ＩＬ－５／Ｃｒは１００に対して範囲標準化した。このようにして、今後測定されるいかなる値も、本研究で使用されたのと同じ値に対し範囲標準化でき、結果、作成されたロジット式に入力することで、ＯＡＢの存在可能性を推定することができる。
ある人がＯＡＢ症状を有する可能性を予測する際の、各候補バイオマーカーの、個々の、または組み合わせた場合の（様々な組み合わせ設定、および交絡因子（年齢、性別、採取した尿量）との、能力を、バイナリロジスティック回帰検定（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いて調べた。この場合、各変数を本研究において取得可能な最大測定値に対し標準化するのではなく、各変数を任意の１人の人間について測定できる最大可能値に対し範囲標準化した（いくつかのバイオマーカーについては、考慮された値はさらに高いものであった）。すなわち、年齢は１２０歳に対して範囲標準化し；量は尿１０００ｍｌに対して範囲標準化し；各候補バイオマーカーは以下の値に対して範囲標準化した：ＡＴＰ／Ｃｒは０．０００００１に対して、ＡＣｈ／Ｃｒは０．１に対して、ＮＯ／Ｃｒは２００００に対して、亜硝酸塩は２００に対して、ＭＣＰ－１／Ｃｒは１００に対して、ＩＬ－５／Ｃｒは１００に対して範囲標準化した。このようにして、今後測定されるいかなる値も、本研究で使用されたのと同じ値に対し範囲標準化でき、結果、作成されたロジット式に入力することで、ＯＡＢの存在可能性を推定することができる。
【0038】
受信者動作特性（ＲＯＣ）分析、陽性適中率（ＰＰＶ）分析、および陰性適中率（ＮＰＶ）分析
作成されたＯＡＢ予測モデルの、ロジスティック回帰分析により生成された予測可能性（ＰＲＥ）値を用いての判別力を評価するために、ＲＯＣ曲線分析（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いた。予測モデルがＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ≧０．７）を有する場合に、臨床的に信頼できる診断力を有するものと見なした。それぞれの予測式における予測可能性（ｐＯＡＢ）の最適なカットオフ値は、ユーデン指数（Ｊ＝感度＋特異度－１）が最大となる値として決定した。各ＯＡＢ予測式のＰＰＶおよびＮＰＶは、最適なカットオフ値における感度と特異度に基づき、ＯＡＢ有病率を２０％と推定して算出した［Ｉｒｗｉｎら、２０１１］。
作成されたＯＡＢ予測モデルの、ロジスティック回帰分析により生成された予測可能性（ＰＲＥ）値を用いての判別力を評価するために、ＲＯＣ曲線分析（ＩＢＭ ＳＰＳＳ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２２．０）を用いた。予測モデルがＲＯＣ曲線下面積（ＡＵＣ≧０．７）を有する場合に、臨床的に信頼できる診断力を有するものと見なした。それぞれの予測式における予測可能性（ｐＯＡＢ）の最適なカットオフ値は、ユーデン指数（Ｊ＝感度＋特異度－１）が最大となる値として決定した。各ＯＡＢ予測式のＰＰＶおよびＮＰＶは、最適なカットオフ値における感度と特異度に基づき、ＯＡＢ有病率を２０％と推定して算出した［Ｉｒｗｉｎら、２０１１］。
【0039】
【0040】
尿ＩＣＩＱ－ＯＡＢ特性スコアの分布
適格参加者の尿ＩＣＩＱ－ＯＡＢ特性スコアの度数分布を図２に示す。尿路症状スコアまたは尿路症状スコア＋関連する不快度スコアの分布は右に裾をひいており（ｒｉｇｈｔ
－ｓｋｅｗｅｄ）、２つのグループ（ＯＡＢ症状を有する群と無症状の群）を示唆するような明らかな二峰性の分布は確認されなかった。従って、従来のトータルスコアに基づく診断は、早期のＯＡＢ診断や本研究の参加者の分類には適していないと考えられる。
適格参加者の尿ＩＣＩＱ－ＯＡＢ特性スコアの度数分布を図２に示す。尿路症状スコアまたは尿路症状スコア＋関連する不快度スコアの分布は右に裾をひいており（ｒｉｇｈｔ
－ｓｋｅｗｅｄ）、２つのグループ（ＯＡＢ症状を有する群と無症状の群）を示唆するような明らかな二峰性の分布は確認されなかった。従って、従来のトータルスコアに基づく診断は、早期のＯＡＢ診断や本研究の参加者の分類には適していないと考えられる。
【0041】
クラスター分析
自然な分類（クラスター）を特定するため、参加者のＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿スコアに対してＴｗｏＳｔｅｐクラスター分析を実施した。ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問票のデータ（データ未記載）に基づいて、２つの自然クラスターが参加者の中から特定された。９５名の適格参加者全員をＵＳＳＯに基づくクラスター分析の対象としたが、１４名の参加者が不快度に関する質問の１つまたはいくつかを空白にしていたため、８１名の参加者がＵＢＳＯまたはＵＳＣＰＡＢＳに基づく分析の対象とした。その結果、ＵＳＳＯに基づいて形成されたクラスターは、ＵＢＳＯまたはＵＳＣＰＡＢＳに基づいた分析と比較して、自然な分類を決定するより高い統計的検出力を有する。さらに、クラスター分析で、尿意切迫（重要なＯＡＢ症状［Ａｂｒａｍｓら、２０１２年］）が、ＵＳＳＯに基づいた分析における主要なクラスター予測成分であると特定された。そこで、ＵＳＳＯに基づいて形成された２つのクラスターをバイオマーカープロファイル評価用に選定した。９５人の参加者のうち、３６人の参加者と５９人の参加者を、それぞれクラスター１とクラスター２に割り当てた（表１）。特定された２つのクラスターにおける尿路症状スコアの分布を表１に示す。クラスター２の参加者は、クラスター１の参加者と比較して、尿路症状スコアが統計的に有意に高く、高齢であった（表１）。このため、さらなる分析において、クラスター１を「ＯＡＢ無症状性」、クラスター２を「ＯＡＢ症状性」とした。
自然な分類（クラスター）を特定するため、参加者のＩＣＩＱ－ＯＡＢ尿スコアに対してＴｗｏＳｔｅｐクラスター分析を実施した。ＩＣＩＱ－ＯＡＢ質問票のデータ（データ未記載）に基づいて、２つの自然クラスターが参加者の中から特定された。９５名の適格参加者全員をＵＳＳＯに基づくクラスター分析の対象としたが、１４名の参加者が不快度に関する質問の１つまたはいくつかを空白にしていたため、８１名の参加者がＵＢＳＯまたはＵＳＣＰＡＢＳに基づく分析の対象とした。その結果、ＵＳＳＯに基づいて形成されたクラスターは、ＵＢＳＯまたはＵＳＣＰＡＢＳに基づいた分析と比較して、自然な分類を決定するより高い統計的検出力を有する。さらに、クラスター分析で、尿意切迫（重要なＯＡＢ症状［Ａｂｒａｍｓら、２０１２年］）が、ＵＳＳＯに基づいた分析における主要なクラスター予測成分であると特定された。そこで、ＵＳＳＯに基づいて形成された２つのクラスターをバイオマーカープロファイル評価用に選定した。９５人の参加者のうち、３６人の参加者と５９人の参加者を、それぞれクラスター１とクラスター２に割り当てた（表１）。特定された２つのクラスターにおける尿路症状スコアの分布を表１に示す。クラスター２の参加者は、クラスター１の参加者と比較して、尿路症状スコアが統計的に有意に高く、高齢であった（表１）。このため、さらなる分析において、クラスター１を「ＯＡＢ無症状性」、クラスター２を「ＯＡＢ症状性」とした。
【0042】
【表1】
【0043】
相関分析
図３は、候補尿中バイオマーカー（ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、亜硝酸塩、ＭＣＰ－１、およびＩＬ－５）の濃度と、参加者の合計尿路症状スコアとの関係を示す。候補バイオマーカーと参加者の尿路症状スコアとの間にはポジティブな傾向が見られ、尿中ＡＴＰ濃度の場合では統計的に有意なレベルに達していた（図３）。無症状群と症状群の間で候補バイオマーカー濃度が重複していることから、ＯＡＢ発症の初期段階では、単一のバイオマーカーが診断基準として不十分であることがさらに明らかとなった（図３）。
図３は、候補尿中バイオマーカー（ＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、亜硝酸塩、ＭＣＰ－１、およびＩＬ－５）の濃度と、参加者の合計尿路症状スコアとの関係を示す。候補バイオマーカーと参加者の尿路症状スコアとの間にはポジティブな傾向が見られ、尿中ＡＴＰ濃度の場合では統計的に有意なレベルに達していた（図３）。無症状群と症状群の間で候補バイオマーカー濃度が重複していることから、ＯＡＢ発症の初期段階では、単一のバイオマーカーが診断基準として不十分であることがさらに明らかとなった（図３）。
【0044】
従属変数（アウトカム、すなわちＯＡＢ症状）と独立変数（すなわち参加者の年齢、性
別、総採尿量、並びにＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、亜硝酸塩、ＭＣＰ－１、およびＩＬ－５の尿中濃度）との間の相関関係をまとめた（データ未記載）。年齢との相関のみ統計的に有意（ｐ値＝０．００８）であったが、このことは、年齢が、ロジスティック回帰検定を行った場合、アウトカムの強力な個別予測因子となる可能性が示唆された。予測変数間に多重共線性（すなわち、ｒ値＞０．８０）は認められなかったため、全て、ロジスティック回帰分析で同時に使用するのに適しているものと見なした。
別、総採尿量、並びにＡＴＰ、ＡＣｈ、ＮＯ、亜硝酸塩、ＭＣＰ－１、およびＩＬ－５の尿中濃度）との間の相関関係をまとめた（データ未記載）。年齢との相関のみ統計的に有意（ｐ値＝０．００８）であったが、このことは、年齢が、ロジスティック回帰検定を行った場合、アウトカムの強力な個別予測因子となる可能性が示唆された。予測変数間に多重共線性（すなわち、ｒ値＞０．８０）は認められなかったため、全て、ロジスティック回帰分析で同時に使用するのに適しているものと見なした。
【0045】
ロジスティック回帰分析
候補尿中バイオマーカーと参加者の交絡因子とを組み入れることで信頼性の高いＯＡＢ予測式を作成できるかどうかを、ロジスティック回帰分析を用いて評価した。まず，各予測パラメータの能力を個別に評価した（データ未記載）。全ての個別予測パラメータの中で、年齢は、予想通り、そのヌル予測モデルよりも統計的に有意なＯＡＢ予測力を示した唯一のパラメータだった（オムニバス検定ｐ値＝０．０４１、表２）。他の予測パラメータを加えることで年齢の予測力が増加するかどうかを評価するために、候補尿中バイオマーカーや他の交絡因子を組み入れて、２０通りの組み合わせモデルを作成した（データ未記載）。作成された全ての予測モデルのうち、７つ（組み合わせ１、１０、１２、１４、１５、１７、および１８）は、関連する帰無モデルよりも統計的に有意なＯＡＢ予測力を有し、また、適合度が良好であることが示された（オムニバス検定ｐ値≦０．０５、ＨＬ検定ｐ値≧０．０５、表２）。
候補尿中バイオマーカーと参加者の交絡因子とを組み入れることで信頼性の高いＯＡＢ予測式を作成できるかどうかを、ロジスティック回帰分析を用いて評価した。まず，各予測パラメータの能力を個別に評価した（データ未記載）。全ての個別予測パラメータの中で、年齢は、予想通り、そのヌル予測モデルよりも統計的に有意なＯＡＢ予測力を示した唯一のパラメータだった（オムニバス検定ｐ値＝０．０４１、表２）。他の予測パラメータを加えることで年齢の予測力が増加するかどうかを評価するために、候補尿中バイオマーカーや他の交絡因子を組み入れて、２０通りの組み合わせモデルを作成した（データ未記載）。作成された全ての予測モデルのうち、７つ（組み合わせ１、１０、１２、１４、１５、１７、および１８）は、関連する帰無モデルよりも統計的に有意なＯＡＢ予測力を有し、また、適合度が良好であることが示された（オムニバス検定ｐ値≦０．０５、ＨＬ検定ｐ値≧０．０５、表２）。
【0046】
【表2】
【0047】
ＲＯＣ分析およびＯＡＢ予測式
統計的に有意なＯＡＢ予測能力（有意なオムニバス検定ｐ値、表２）を有する８つの予測モデルの判別能力を、ＲＯＣ分析により評価した。６つの予測モデル（すなわち、組み合わせ１０、１２、１４、１５、１７、および１８）が、臨床的に信頼できる診断力を有することが示された（表３、ＡＵＣ≧０．７、ＲＯＣプロットを図４に示す）。そこで、これら６つの組み合わせについて、ＯＡＢの可能性を予測する式を作成し（表４）、それぞれの式における関連バイオマーカーの尿中レベルを測定し、その値を式に入力することで、ある人がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出することができた。
統計的に有意なＯＡＢ予測能力（有意なオムニバス検定ｐ値、表２）を有する８つの予測モデルの判別能力を、ＲＯＣ分析により評価した。６つの予測モデル（すなわち、組み合わせ１０、１２、１４、１５、１７、および１８）が、臨床的に信頼できる診断力を有することが示された（表３、ＡＵＣ≧０．７、ＲＯＣプロットを図４に示す）。そこで、これら６つの組み合わせについて、ＯＡＢの可能性を予測する式を作成し（表４）、それぞれの式における関連バイオマーカーの尿中レベルを測定し、その値を式に入力することで、ある人がＯＡＢを有する可能性（ｐＯＡＢ）を算出することができた。
【0048】
それぞれの予測式における予測可能性（ｐＯＡＢ）の最適なカットオフ値は、ユーデン指数（Ｊ）が最大となる値として決定した（表５）。その最適カットオフ値における各予測式の感度および特異度を表５に示す。続いて、各ＯＡＢ予測式の陽性適中率（ＰＰＶ）および陰性適中率（ＮＰＶ）を、最適カットオフ値における感度と特異度に基づき、ＯＡＢ有病率を２０％と推定して算出した［Ｉｒｗｉｎら、２０１１］（表５）。ＰＰＶ（４１％）およびＮＰＶ（９０％）の両方の値を考慮して、組み合わせ１７の予測式が、他の予測式と比較して、より信頼性の高い式と見なされた（表５）。すなわち、ＩＬ－５およびＡＴＰの尿中濃度を測定し、Ｃｒに対して正規化・標準化した値を、患者の年齢および性別と共に、組み合わせ１７の予測式に入力することで、ｐＯＡＢは算出することができ、ｐＯＡＢ＞０．５６（組み合わせ１７のｐＯＡＢカットオフ、表５）である場合、患者を、ＯＡＢを有する／発症するリスクが高いと見なすことができる。ＯＡＢ有病率が２０％であることを考慮すると、実世界において、組み合わせ１７の予測式は、ＯＡＢ患者の４１％を正しく診断し、非ＯＡＢ患者の９０％を正しく除外することができる。概して、予測式は全て高いＮＰＶ値（８９～９２％）を示したが、このことは、作成された予測式が、ＯＡＢの陽性診断よりもＯＡＢ除外により適しているであろうことを意味している。しかしながら、作成された予測式は全て、ＤＯの存在に基づいてＯＡＢ患者の診断を行う現在のゴールドスタンダードな侵襲的手段と比較して、ＰＰＶ値およびＮＰＶ値がより高くなることを示した（表５、ΔＰＰＶおよびΔＮＰＶ）。
【0049】
【表3】
【0050】
【表4】
【0051】
【表5】
【0052】
結論
この分析により、早期ＯＡＢを有する参加者または有さない参加者を判別するための臨床的に信頼できる診断力を有する、６つの組み合わせが明らかになった（表２および図４）。６つ全ての組み合わせについての予測式では、ＮＰＶ値は高い（８９～９２％）が、ＰＰＶ値は比較的低くなり（３０～４１％）、これは、上記予測式がＯＡＢを除外するのに適していることを意味している。これらの組み合わせの性能は、膀胱癌［Ｖａｌｅｎｂｅｒｇら、２０１８年］や前立腺がん［Ｌｕｇｈｅｚｚａｎｉら、２０１８年］などの他の疾患用の、他の尿に基づいた検査と同様である。これは、各式の関連バイオマーカーの尿中レベルを測定し、その値を上記式に入力することで、これらの新規式が、尿流動態検査によるＤＯの確認という現在の侵襲的手段と比較して、かなりより早い発症段階でより正確に、ある人がＯＡＢを有する可能性を、医療従事者が予測可能となるであろうことを意味している（表５）。しかし、より重要なことは、これらの新規式が、ＯＡＢと症状が重複する病因が異なる疾患を有する患者において、ＯＡＢを正確且つ非侵襲的に除外できることであろう。
この分析により、早期ＯＡＢを有する参加者または有さない参加者を判別するための臨床的に信頼できる診断力を有する、６つの組み合わせが明らかになった（表２および図４）。６つ全ての組み合わせについての予測式では、ＮＰＶ値は高い（８９～９２％）が、ＰＰＶ値は比較的低くなり（３０～４１％）、これは、上記予測式がＯＡＢを除外するのに適していることを意味している。これらの組み合わせの性能は、膀胱癌［Ｖａｌｅｎｂｅｒｇら、２０１８年］や前立腺がん［Ｌｕｇｈｅｚｚａｎｉら、２０１８年］などの他の疾患用の、他の尿に基づいた検査と同様である。これは、各式の関連バイオマーカーの尿中レベルを測定し、その値を上記式に入力することで、これらの新規式が、尿流動態検査によるＤＯの確認という現在の侵襲的手段と比較して、かなりより早い発症段階でより正確に、ある人がＯＡＢを有する可能性を、医療従事者が予測可能となるであろうことを意味している（表５）。しかし、より重要なことは、これらの新規式が、ＯＡＢと症状が重複する病因が異なる疾患を有する患者において、ＯＡＢを正確且つ非侵襲的に除外できることであろう。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】