特許 7571930 標的特異的なＣＲＩＳＰＲバリアント

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-10-15

(45)【発行日】2024-10-23

(54)【発明の名称】標的特異的なＣＲＩＳＰＲバリアント

(51)【国際特許分類】

   C12N 9/16 20060101AFI20241016BHJP

   C12N 15/31 20060101ALI20241016BHJP

   C12N 15/55 20060101ALI20241016BHJP

   C12N 15/09 20060101ALI20241016BHJP

【ＦＩ】

C12N9/16 Z

C12N15/31 ZNA

C12N15/55

C12N15/09 110

【請求項の数】 16

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2022181946

(22)【出願日】2022-11-14

(62)【分割の表示】P 2020500033の分割

【原出願日】2018-07-06

(65)【公開番号】P2023025045

(43)【公開日】2023-02-21

【審査請求日】2022-12-13

(31)【優先権主張番号】62/529,601

(32)【優先日】2017-07-07

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/608,722

(32)【優先日】2017-12-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】516355531

【氏名又は名称】ツールゲン インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＴＯＯＬＧＥＮ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】110000877

【氏名又は名称】弁理士法人ＲＹＵＫＡ国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】キム、ヤン－フーン

(72)【発明者】

【氏名】ジュン、ミン ヒ

(72)【発明者】

【氏名】リー、ジューンスン

(72)【発明者】

【氏名】シン、ウンジ

(72)【発明者】

【氏名】リー、カン イン

(72)【発明者】

【氏名】キム、ソクジョン

(72)【発明者】

【氏名】リー、ジョンジューン

【審査官】坂崎 恵美子

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１７／０４０３４８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１５／０８９２７７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０２０－５３０２７９（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ１２Ｎ １５／００－１５／９０

Ｃ１２Ｎ ９／００－９／９９

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＳｐＣａｓ９（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９）バリアントであって、
前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの少なくとも１つの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
それぞれの置換は、
Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９Ｓ、Ｉ６０１Ｎ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ、Ｄ９６５Ｙ、およびＤ１１２７Ｅ
からなる群から独立して選択され、
前記ＳｐＣａｓ９バリアントはエンドヌクレアーゼ活性を有し、
前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、野生型のＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位における高い標的特異性を有し、または、オフターゲット部位における低い標的特異性を有し、
前記ＳｐＣａｓ９バリアントの前記アミノ酸配列は、配列番号１１のアミノ酸配列を有さない、ＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項2】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの少なくとも２つの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
それぞれの置換は、
Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９Ｓ、Ｉ６０１Ｎ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ、Ｄ９６５Ｙ、Ｆ１０３８Ｙ、Ｔ１１０２Ｐ、およびＤ１１２７Ｅ
からなる群から独立して選択される、
請求項１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項3】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
前記置換は、
Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ、Ｄ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙ、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ、Ｉ６０１Ｎ／Ｄ９６５Ｙ、Ｆ５３９Ｓ／Ｋ８９０Ｎ、およびＭ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ
からなる群から選択される１つである、
請求項２に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項4】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの少なくとも３つの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
それぞれの置換は、
Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９Ｓ、Ｉ６０１Ｎ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ、Ｄ９６５Ｙ、Ｆ１０３８Ｙ、Ｔ１１０２Ｐ、およびＤ１１２７Ｅ
からなる群から独立して選択される、
請求項１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項5】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
前記置換はＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙである、
請求項４に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項6】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの少なくとも４つの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
それぞれの置換は、
Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９Ｓ、Ｉ６０１Ｎ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ、Ｄ９６５Ｙ、Ｆ１０３８Ｙ、Ｔ１１０２Ｐ、およびＤ１１２７Ｅ
からなる群から独立して選択される、
請求項１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項7】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
前記置換は、
Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙ
からなる群から選択される１つである、
請求項６に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項8】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの少なくとも７つの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
それぞれの置換は、
Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９Ｓ、Ｉ６０１Ｎ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ、Ｄ９６５Ｙ、Ｆ１０３８Ｙ、Ｔ１１０２Ｐ、およびＤ１１２７Ｅ
からなる群から独立して選択される、
請求項１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項9】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントは、配列番号１のポリペプチドの置換で構成されるアミノ酸配列を含み、
前記置換はＡ２０３Ｄ／Ｎ２７７Ｈ／Ｇ３６６Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ／Ｔ１１０２Ｐ／Ｄ１１２７Ｅである、
請求項８に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項10】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントが、
単離及び精製用のタグ、
デアミナーゼ、及び
メチラーゼ活性、デメチラーゼ活性、転写活性化活性、転写抑制活性、転写放出因子活性、ヒストン修飾活性、ＲＮＡ切断活性、または核酸結合活性を有する、活性ドメイン
からなる群から選択される１つ以上の機能ドメインをさらに含む、
請求項１から９のいずれか一項に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項11】

前記機能ドメインが、レポータータンパク質、ＮＬＳ（核局在化配列もしくはシグナル）、およびＮＥＳ（核外移行配列もしくはシグナル）から選択される１つである、請求項１０に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。

【請求項12】

遺伝子改変用組成物であって、
請求項１から９のいずれか一項に記載のＳｐＣａｓ９（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９）バリアント、又は前記ＳｐＣａｓ９バリアントをコードする核酸と、
ガイドＲＮＡまたは前記ガイドＲＮＡをコードする核酸と
を含み、
前記ガイドＲＮＡは、前記ＳｐＣａｓ９バリアントとともに複合体を形成し、対象遺伝子を標的とすることができる、組成物。

【請求項13】

前記ＳｐＣａｓ９バリアントをコードする前記核酸および前記ガイドＲＮＡをコードする前記核酸が、１または複数のベクターに含まれている、請求項１２に記載の組成物。

【請求項14】

前記ベクターが、プラスミドまたはウイルスベクターである、請求項１３に記載の組成物。

【請求項15】

前記ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、ワクシニアウイルスベクター、ポックスウイルスベクターおよび単純ヘルペスウイルスベクターから選択される１つ以上のベクターである、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物が、前記ガイドＲＮＡと前記ＳｐＣａｓ９バリアントとの複合体であるリボ核タンパク質（ＲＮＰ）を含む、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系に関する。より具体的には、本発明は、標的特異性が向上した、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素、ならびにＣＲＩＳＰＲ酵素を含む、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系を使用したゲノムおよび／またはエピゲノムの操作または修飾、ゲノム標的化、ゲノム編集ならびにインビトロ診断などの使用に関する。

【背景技術】

【0002】

ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系は、標的遺伝子または核酸と相補的な配列を有するガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）と、標的遺伝子または核酸を切断できるヌクレアーゼであるＣＲＩＳＰＲ酵素とで構成され、ｇＲＮＡとＲＩＳＰＲ酵素とはＣＲＩＳＰＲ複合体を形成し、標的遺伝子または核酸は、形成されたＣＲＩＳＰＲ複合体により切断または修飾される。

【0003】

しかしながら、標的遺伝子または核酸を修飾する効果と同様に、望ましくない非標的遺伝子または核酸の修飾はまだ解決されていない。非標的遺伝子または核酸は、ｇＲＮＡと部分的に相補的な配列を有する遺伝子部位であり、ｇＲＮＡとともに部分的に相補的な結合を形成でき、ＣＲＩＳＰＲ複合体は、部分的な相補的結合により、修飾されていない非標的遺伝子または核酸である、対応する遺伝子部位を切断または修飾できる。

【0004】

したがって、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系を使用して標的遺伝子または核酸を特異的に修飾する効率を高めるために、または非標的遺伝子もしくは核酸の修飾を引き起こす可能性がある遺伝子結合などの問題を解決するために、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系の標的特異性を高めることが重要である。ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系の標的特異性を高めるために、少量の非標的遺伝子候補を含むｇＲＮＡの選択、ならびにＣＲＩＳＰＲ酵素の活性および／または特異性の調節に関するさまざまな研究が試みられてきた。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0005】

（非特許文献０００１）Ｋｉｍ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ １２，２３７－２４３，２３１ ｐ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ２４３（２０１５）

【0006】

（非特許文献０００２）Ｔｓａｉ，Ｓ．Ｑ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３３，１８７－１９７（２０１５）

【0007】

（非特許文献０００３）Ｋｉｍ，Ｓ．，Ｋｉｍ，Ｄ．，Ｃｈｏ，Ｓ．Ｗ．，Ｋｉｍ，Ｊ．＆ Ｋｉｍ，Ｊ．Ｓ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ ２４，１０１２－１０１９（２０１４）

【0008】

（非特許文献０００４）Ｃｈｏ，Ｓ．Ｗ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ ２４，１３２－１４１（２０１４）

【0009】

（非特許文献０００５）Ｍａｌｉ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３１，８３３－８３８（２０１３）

【0010】

（非特許文献０００６）Ｒａｎ，Ｆ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ １５４，１３８０－１３８９（２０１３）

【0011】

（非特許文献０００７）Ｆｕ，Ｙ．，Ｓａｎｄｅｒ，Ｊ．Ｄ．，Ｒｅｙｏｎ，Ｄ．，Ｃａｓｃｉｏ，Ｖ．Ｍ．＆ Ｊｏｕｎｇ，Ｊ．Ｋ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３２，２７９－２８４（２０１４）

【0012】

（非特許文献０００８）Ｎｉｓｈｉｍａｓｕ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ １５６，９３５－９４９（２０１４）

【0013】

（非特許文献０００９）Ｋｌｅｉｎｓｔｉｖｅｒ，Ｂ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ５２９，４９０－４９５（２０１６）

【0014】

（非特許文献００１０）Ｓｌａｙｍａｋｅｒ，Ｉ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３５１，８４－８８（２０１６）

【0015】

（非特許文献００１１）Ｃｈｅｎ，Ｊ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ（２０１７）

【0016】

（非特許文献００１２）Ｋｌｅｉｎｓｔｉｖｅｒ，Ｂ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３３，１２９３－１２９８（２０１５）

【0017】

（非特許文献００１３）Ｋｌｅｉｎｓｔｉｖｅｒ，Ｂ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ５２３，４８１－４８５（２０１５）

【0018】

（非特許文献００１４）Ｃｈｅｎ，Ｚ．＆ Ｚｈａｏ，Ｈ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ ３３，ｅ１５４（２００５）

【0019】

（非特許文献００１５）Ｈｓｕ，Ｐ．Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３１，８２７－８３２（２０１３）

【0020】

（非特許文献００１６）ＭｃＫｅｎｚｉｅ，Ｇ．Ｊ．＆ Ｃｒａｉｇ，Ｎ．Ｌ．ＢＭＣ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ６，３９（２００６）

【0021】

（非特許文献００１７）Ｋｕｌｃｓａｒ，Ｐ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌ １８，１９０（２０１７）

【0022】

（非特許文献００１８）Ｚｈａｎｇ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌ １８，１９１（２０１７）

【0023】

（非特許文献００１９）Ｋｏｍｏｒ，Ａ．Ｃ．，Ｋｉｍ，Ｙ．Ｂ．，Ｐａｃｋｅｒ，Ｍ．Ｓ．，Ｚｕｒｉｓ，Ｊ．Ａ．＆ Ｌｉｕ，Ｄ．Ｒ．Ｎａｔｕｒｅ ５３３，４２０－４２４（２０１６）

【0024】

（非特許文献００２０）Ｋｉｍ，Ｄ．，Ｋｉｍ，Ｓ．，Ｐａｒｋ，Ｊ．＆ Ｋｉｍ，Ｊ．Ｓ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ ２６，４０６－４１５（２０１６）

【0025】

（非特許文献００２１）Ｇｅｉｓｓｍａｎｎ，Ｑ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８，ｅ５４０７２

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0026】

一態様では、本発明は、標的特異性が向上した、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素を提供することに関する。

【課題を解決するための手段】

【0027】

この課題を解決するために、本発明は、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素に関する。より具体的には、本発明は、標的遺伝子または核酸に対する標的特異性が向上したＣａｓ９、および同様のＣａｓ９を使用したＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系に関する。

【0028】

本発明は、特定の目的のために人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素を提供する。

【0029】

一態様では、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、人為的操作を含む、標的特異性が向上したＳｐＣａｓ９バリアント（変異体）であってもよく、人為的操作は、野性型ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９（野性型ＳｐＣａｓ９）の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸の人為的操作（修飾）を含んでいてもよい。

【0030】

野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域は、ｇＲＮＡと相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分、標的配列と相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分、ｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖と相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分、およびｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖のＰＡＭ（プロトスペーサー隣接モチーフ）の遠位端と相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分からなる群から選択される１つ以上の部分であってもよい。

【0031】

ここで、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖のＰＡＭの遠位端は、ＰＡＭの位置から離れているｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖の末端で６～１０塩基対であってもよい。

【0032】

ここで、ＰＡＭは５'－ＮＧＧ－３'であってもよい。

【0033】

野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域は、核酸を切断する機能を果たす野性型ＳｐＣａｓ９の部分であってもよい。

【0034】

野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域は、核酸を切断する機能を果たす野性型ＳｐＣａｓ９の部分であってもよい。

【0035】

野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域は、標的遺伝子または核酸中のＰＡＭ配列を認識またはＰＡＭ配列と相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分、およびｇＲＮＡのヌクレオチド配列の部分と相互作用する野性型ＳｐＣａｓ９の部分からなる群から選択される１つ以上の部分であってもよい。

【0036】

野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣローブに位置する領域、野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣドメイン全体、および野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣドメインの部分からなる群から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0037】

野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメイン全体、野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメインの部分、および野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域を含む部分からなる群から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0038】

ここで、ＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域は、ＲｕｖＣドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域であってもよい。

【0039】

野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメイン全体、野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメインの部分、および野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメインの金属依存性核酸切断領域を含む部分からなる群から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0040】

ここで、ＨＮＨドメインの前記金属依存性核酸切断領域は、ＨＮＨドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域であってもよい。

【0041】

野性型ＳｐＣａｓ９の前記第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、野性型ＳｐＣａｓ９のＰＩドメイン全体、および野性型ＳｐＣａｓ９のＰＩドメインの部分からなる群から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0042】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列で構成される領域１－１、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列で構成される領域１－２、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列で構成される領域１－３、および野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列で構成される領域１－４からなる群から選択される１つ以上の領域を含んでいてもよい。

【0043】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７を含んでいてもよい。

【0044】

ここで、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列で構成される領域２－１、前記野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列で構成される領域２－２、および前記野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列で構成される領域２－３からなる群から選択される１つ以上の領域を含んでいてもよい。

【0045】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９を含んでいてもよい。

【0046】

ここで、第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７７５番目の位置のリシン（Ｋ７７５）から９００番目の位置のロイシン（Ｌ９００）までのアミノ酸配列で構成される領域３－１を含んでいてもよい。

【0047】

第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８を含んでいてもよい。

【0048】

ここで、第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０９９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ１０９９）から１１３９番目の位置のバリン（Ｖ１１３９）までのアミノ酸配列で構成される領域４－１を含んでいてもよい。

【0049】

第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８を含んでいてもよい。

【0050】

例示的な実施形態では、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0051】

例示的な実施形態では、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0052】

人為的操作は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の前記アミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0053】

人為的操作は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0054】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸よりも小さい官能基を有するアミノ酸であってもよい。

【0055】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の前記アミノ酸よりも大きい官能基を有するアミノ酸であってもよい。

【0056】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸よりも高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であってもよい。

【0057】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸よりも低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であってもよい。

【0058】

一態様では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の人為的操作を含む、特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアントであってもよい。

【0059】

人為的操作は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることまたは異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0060】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸よりも大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸であってもよい。

【0061】

ここで、異なるアミノ酸は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸よりも高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であってもよい。

【0062】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９の人為的操作を含んでいてもよい。

【0063】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３の人為的操作を含んでいてもよい。

【0064】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０の人為的操作を含んでいてもよい。

【0065】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９／Ｍ７６３（Ｆ５３９およびＭ７６３）、Ｆ５３９／Ｋ８９０またはＭ７６３／Ｋ８９０の人為的操作を含んでいてもよい。

【0066】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０の人為的操作を含んでいてもよい。

【0067】

一態様では、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲは、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントを含む融合タンパク質であってもよい。

【0068】

融合タンパク質は、１つ以上の機能ドメインを含んでいてもよい。

【0069】

ここで、機能ドメインは、メチラーゼ活性、デメチラーゼ活性、転写活性化活性、転写抑制活性、転写放出因子活性、ヒストン修飾活性、ＲＮＡ切断活性または核酸結合活性を有するドメイン、（ペプチドを含む）タンパク質の単離および精製用タグ、レポーター遺伝子、ＮＬＳ（核局在化配列もしくはシグナル）、ＮＥＳ（核外移行配列もしくはシグナル）、およびデアミナーゼ活性を有するドメインからなる群から選択される１つ以上のドメインであってもよい。

【0070】

一態様では、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＳｐＣａｓ９バリアント、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントおよび／または融合タンパク質をコードする核酸の形態であってもよい。

【0071】

一態様では、核酸はベクターに含まれていてもよい。

【0072】

一態様では、ＳｐＣａｓ９バリアント、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントおよび／もしくは融合タンパク質をコードする核酸；ならび／またはベクターを細胞に導入してもよい。

【0073】

一態様では、ｇＲＮＡと、ＳｐＣａｓ９バリアント、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントおよび／または融合タンパク質とを使用して、細胞のゲノムを人為的に操作してもよい。

【0074】

ｇＲＮＡは、細胞のゲノム中に存在する標的遺伝子の標的配列と相補的に結合するヌクレオチド配列を含む核酸であってもよい。

【発明の効果】

【0075】

本発明によれば、人為的に操作されたＣＲＩＳＰＲ酵素を使用して、標的特異性が向上したＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系を、ゲノムおよび／もしくはエピゲノムの操作または修飾、ゲノム標的化、ゲノム編集ならびにインビトロ診断に使用できる。

【図面の簡単な説明】

【0076】

【図1】ＳｐＣａｓ９の第１領域バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル（挿入および欠失）頻度（％）を示すグラフである。

【0077】

【図2】ＳｐＣａｓ９の第１領域バリアントによる標的遺伝子（ＥＭＸ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0078】

【図3】ＳｐＣａｓ９の第１領域バリアントによる標的遺伝子（ＶＥＧＦＡ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0079】

【図4】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【図5】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0080】

【図6】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＥＭＸ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【図7】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＥＭＸ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0081】

【図8】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＶＥＧＦＡ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0082】

【図9】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０３遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0083】

【図10】ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０４遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0084】

【図11】ＳｐＣａｓ９の第３領域バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0085】

【図12】ＳｐＣａｓ９の第４領域バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0086】

【図13】ＳｐＣａｓ９の第４領域バリアントによる標的遺伝子（ＥＭＸ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0087】

【図14】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0088】

【図15】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＥＭＸ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0089】

【図16】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＶＥＧＦＡ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0090】

【図17】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０３遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0091】

【図18】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０４遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0092】

【図19】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0093】

【図20】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＶＥＧＦＡ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0094】

【図21】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０３遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0095】

【図22】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＨＢＢ０４遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【0096】

【図23】ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントによる標的遺伝子（ＤＭＤ遺伝子）の操作効果を表す、インデル頻度（％）を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0097】

別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により従来理解されている意味と同じ意味を有する。本明細書に記載されているものと類似または同一の方法および材料を本発明の実施または試験に使用できるが、適切な方法および材料を以下に記載する。本明細書で言及されるすべての出版物、特許出願、特許および他の参考文献は、参照によりその全体が組み込まれる。さらに、材料、方法および例は単なる例示であり、限定することを意図したものではない。

【0098】

本明細書に開示される開示の一態様は、ＣＲＩＳＰＲ酵素に関する。

【0099】

「ＣＲＩＳＰＲ酵素」は、クラスター化された規則的に間隔が空いた短い回文反復配列の繰り返し（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連タンパク質（Ｃａｓ）系の主要なタンパク質成分であり、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）と複合体を形成し、それによってＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系を形成する。

【0100】

「ｇＲＮＡ」とは、標的遺伝子または核酸に関して、ＣＲＩＳＰＲ複合体、すなわちｇＲＮＡ－ＣＲＩＳＰＲ酵素複合体を特異的に標的とすることができるＲＮＡを指す。ｇＲＮＡは、標的配列に特異的なＲＮＡであり、これはＣＲＩＳＰＲ酵素に結合し、ＣＲＩＳＰＲ酵素を標的遺伝子または核酸に導くことができる。ここで、「標的配列」とは、標的遺伝子または核酸中に存在するヌクレオチド配列であり、具体的には、標的遺伝子または核酸中の標的領域の部分的なヌクレオチド配列である。本明細書で使用される「標的領域」は、標的遺伝子または核酸中のガイド核酸エディタータンパク質により修飾され得る部位である。

【0101】

ｇＲＮＡは、複数のドメインを含んでいてもよい。各ドメインにより、三次元構造またはｇＲＮＡの活性型の鎖内または鎖間の相互作用が起こり得る。

【0102】

ｇＲＮＡは、一本鎖ｇＲＮＡ（単一ＲＮＡ分子、単一ｇＲＮＡ、ｓｇＲＮＡ）または二本鎖ｇＲＮＡ（複数の、一般的には２つの別個のＲＮＡ分子を含む）と呼ばれることもある。

【0103】

例示的な一実施形態では、一本鎖ｇＲＮＡは、ガイドドメイン、すなわち、標的遺伝子または核酸とともに相補的な結合を形成することができるガイド配列を含むドメイン；第１の相補的ドメイン；リンカードメイン；第１の相補的ドメイン配列に対する相補的配列を有し、第１の相補的ドメイン配列とともに形成し得る第２の相補的ドメイン；近位ドメイン；および任意に５'から３'方向の尾部ドメインを含んでいてもよい。

【0104】

別の実施形態では、二本鎖ｇＲＮＡは、ガイドドメイン、すなわち、標的遺伝子または核酸とともに相補的な結合を形成することができるガイド配列を含むドメイン、および第１の相補的ドメインを含む第１鎖；ならびに；第１の相補的ドメイン配列に対する相補的配列を有し、第１の相補的ドメイン配列とともに形成し得る第２の相補的ドメイン、近位ドメイン、および任意に５'から３'方向の尾部ドメインを含む第２鎖を含んでいてもよい。

【0105】

ここで、第１鎖はｃｒＲＮＡと呼ばれることもあり、第２鎖はｔｒａｃｒＲＮＡと呼ばれることもある。ｃｒＲＮＡは、ガイドドメインおよび第１の相補的ドメインを含んでいてもよく、ｔｒａｃｒＲＮＡは、第２の相補的ドメイン、近位ドメインおよび任意に尾部ドメインを含んでいてもよい。

【0106】

さらに別の実施形態では、一本鎖ｇＲＮＡは、ガイドドメイン、すなわち、標的遺伝子または核酸とともに相補的な結合を形成することができるガイド配列を含むドメイン；第１の相補的ドメイン；および第１の相補的ドメイン配列に対する相補的配列を有し、第１の相補的ドメイン配列とともに形成し得る５'から３'方向の第２の相補的ドメインを含んでいてもよい。

【0107】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする配列を有する核酸またはポリペプチド（またはタンパク質）であり、代表的には、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素またはＶ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が広く使用されている。

【0108】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0109】

ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素はＣａｓ９であってもよい。

【0110】

ここで、Ｃａｓ９は、さまざまな微生物、たとえば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｎｏｃａｒｄｉｏｐｓｉｓ ｄａｓｓｏｎｖｉｌｌｅｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｐｒｉｓｔｉｎａｅｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ、Ｓｔｒｅｐｔｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ、ＡｌｉｃｙｃｌｏｂａｃＨｌｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｅｌｅｎｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ、Ｅｘｉｇｕｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｉｂｉｒｉｃｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ、Ｍｉｃｒｏｓｃｉｌｌａ ｍａｒｉｎａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｌｅｓ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐｏｌａｒｏｍｏｎａｓ ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｉｖｏｒａｎｓ、Ｐｏｌａｒｏｍｏｎａｓ ｓｐ．、Ｃｒｏｃｏｓｐｈａｅｒａ ｗａｔｓｏｎｉｉ、Ｃｙａｎｏｔｈｅｃｅ ｓｐ．、Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．、Ａｃｅｔｏｈａｌｏｂｉｕｍ ａｒａｂａｔｉｃｕｍ、Ａｍｍｏｎｉｆｅｘ ｄｅｇｅｎｓｉｉ、Ｃａｌｄｉｃｅｌｕｌｏｓｉｒｕｐｔｏｒ ｂｅｓｃｉｉ、Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ｄｅｓｕｌｆｏｒｕｄｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｆｉｎｅｇｏｌｄｉａ ｍａｇｎａ、Ｎａｔｒａｎａｅｒｏｂｉｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｐｅｌｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃｕｍ、Ａｃｉｄｉｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｄｕｓ、Ａｃｉｄｉｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ、Ａｌｌｏｃｈｒｏｍａｔｉｕｍ ｖｉｎｏｓｕｍ、Ｍａｒｉｎｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．、Ｎｉｔｒｏｓｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎｉｔｒｏｓｏｃｏｃｃｕｓ ｗａｔｓｏｎｉ、Ｐｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ ｈａｌｏｐｌａｎｋｔｉｓ、Ｋｔｅｄｏｎｏｂａｃｔｅｒ ｒａｃｅｍｉｆｅｒ、Ｍｅｔｈａｎｏｈａｌｏｂｉｕｍ ｅｖｅｓｔｉｇａｔｕｍ、Ａｎａｂａｅｎａ ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ、Ｎｏｄｕｌａｒｉａ ｓｐｕｍｉｇｅｎａ、Ｎｏｓｔｏｃ ｓｐ．、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｍａｘｉｍａ、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ）、Ａｒｔｈｒｏｓｐｉｒａ ｓｐ．）、Ｌｙｎｇｂｙａ ｓｐ．、Ｍｉｃｒｏｃｏｌｅｕｓ ｃｈｔｈｏｎｏｐｌａｓｔｅｓ、Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ ｓｐ．、Ｐｅｔｒｏｔｏｇａ ｍｏｂｉｌｉｓ、Ｔｈｅｒｍｏｓｉｐｈｏ ａｆｒｉｃａｎｕｓおよびＡｃａｒｙｏｃｈｌｏｒｉｓ ｍａｒｉｎａなどに由来し得る。

【0111】

ここで、Ｃａｓ９は、天然に存在する微生物から単離され得るか、または組換え法または合成法により非自然的に産生され得る。

【0112】

ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素の結晶構造は、２種類以上の自然微生物ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素分子の研究（Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３４３（６１７６）：１２４７９９７，２０１４）ならびにｇＲＮＡと複合させたストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９（ＳｐＣａｓ９）の研究（Ｎｉｓｈｉｍａｓｕ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１５６：９３５－９４９，２０１４；およびＡｎｄｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２０１４，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎａｔｕｒｅ１３５７９）に従って決定されていた。

【0113】

ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素は、２つのローブ、すなわち、認識（ＲＥＣ）ローブとヌクレアーゼ（ＮＵＣ）ローブとを含み、各ローブはいくつかのドメインを含む。

【0114】

ＲＥＣローブは、アルギニンリッチなブリッジヘリックス（ＢＨ）ドメイン、ＲＥＣ１ドメイン、およびＲＥＣ２ドメインを含む。

【0115】

ここで、ＢＨドメインは、アルギニンリッチな長いα－ヘリックスの領域であり、ＲＥＣ１ドメインとＲＥＣ２ドメインとは、ｇＲＮＡに形成された二本鎖、たとえば、一本鎖ｇＲＮＡ、二本鎖ｇＲＮＡまたはｔｒａｃｒＲＮＡを認識するのに重要な役割を果たす。

【0116】

ＮＵＣローブは、ＲｕｖＣドメイン、ＨＮＨドメインおよびＰＡＭ相互作用（ＰＩ）ドメインを含む。ここで、ＲｕｖＣドメインは、ＲｕｖＣ様ドメインを包含し、ＨＮＨドメインは、ＨＮＨ様ドメインを包含する。

【0117】

ここで、ＲｕｖＣドメインは、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素を有する自然界に存在する微生物ファミリーのメンバーと構造的類似性を共有し、一本鎖、たとえば、標的遺伝子または核酸の非相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡとともに相補的な結合を形成しない鎖を切断する。ＲｕｖＣドメインは、当該技術分野ではＲｕｖＣ Ｉドメイン、ＲｕｖＣ ＩＩドメインまたはＲｕｖＣ ＩＩＩドメインを指すこともあり、一般的にはＲｕｖＣ Ｉ、ＲｕｖＣ ＩＩまたはＲｕｖＣ ＩＩＩと呼ばれる。

【0118】

ＨＮＨドメインは、ＨＮＨエンドヌクレアーゼと構造的類似性を共有し、一本鎖、たとえば、標的核酸分子の相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡとともに相補的な結合を形成する鎖を切断する。ＨＮＨドメインは、ＲｕｖＣ ＩＩモチーフとＲｕｖＣ ＩＩＩモチーフとの間に位置している。

【0119】

ＰＩドメインは、標的遺伝子または核酸中の特異的ヌクレオチド配列、すなわち、プロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）を認識するか、またはＰＡＭと相互作用する。ここで、ＰＡＭは、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素の起源に応じて異なり得る。たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素がＳｐＣａｓ９である場合、ＰＡＭは５'－ＮＧＧ－３'であってもよく、ＣＲＩＳＰＲ酵素がストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）Ｃａｓ９（ＳｔＣａｓ９）である場合、ＰＡＭは５'－ＮＮＡＧＡＡＷ－３'（Ｗ＝ＡまたはＴ）であってもよく、ＣＲＩＳＰＲ酵素がスタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）Ｃａｓ９（ＳａＣａｓ９）である場合、ＰＡＭは５'－ＮＮＧＲＲ－３'（Ｒ＝ＡまたはＧ）であってもよく、ＣＲＩＳＰＲ酵素がナイセリア・メニンギティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）Ｃａｓ９（ＮｍＣａｓ９）である場合、ＰＡＭは５'－ＮＮＮＮＧＡＴＴ－３'であってもよく、ＣＲＩＳＰＲ酵素がカンピロバクター・ジェジュニ（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ）Ｃａｓ９（ＣｊＣａｓ９）である場合、ＰＡＭは５'－ＮＮＮＶＲＹＡＣ－３'（Ｖ＝Ｇ、ＣまたはＡ、Ｒ＝ＡまたはＧ、Ｙ＝ＣまたはＴ）であってもよく、ここで、Ｎは、Ａ、Ｔ、ＧもしくはＣ；またはＡ、Ｕ、ＧもしくはＣであってもよい。一般的には、ＰＡＭは上記酵素の起源に応じて決定されると理解されているが、上記起源に由来する酵素の変異体に関する研究の進展に応じて、ＰＡＭは異なり得る。

【0120】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、標的遺伝子または核酸の二本鎖を切断する機能を有するヌクレアーゼまたは制限酵素であってもよい。

【0121】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0122】

「完全に活性」とは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能と同じ機能を有することを指し、そのような状態のＣＲＩＳＰＲ酵素は、完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素と呼ばれる。ここで、「野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能」とは、ＤＮＡの二本鎖を切断する機能、すなわち、ＤＮＡの二本鎖のうちの第１鎖を切断する第１機能およびＤＮＡの二本鎖のうちの第２鎖を切断する第２機能を有する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の状態を指す。

【0123】

完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＤＮＡの二本鎖を切断する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0124】

完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＤＮＡの二本鎖を切断する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素を修飾または操作することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0125】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列の１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換するか、または１つ以上のアミノ酸を除去することにより形成される酵素であってもよい。

【0126】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列に１つ以上のアミノ酸を付加することにより産生される酵素であってもよい。ここで、付加されたアミノ酸は、野性型酵素のＮ末端もしくはＣ末端、またはそのアミノ酸配列中に位置してもよい。

【0127】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して機能が向上した、完全に活性な酵素であってもよい。

【0128】

たとえば、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の特異的に修飾または改変された形態、すなわちＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、切断すべき二本鎖ＤＮＡに結合しない状態またはそれとは一定の距離を保って二本鎖ＤＮＡを切断し得る。この場合、修飾または改変された形態は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して機能的活性が向上した、完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0129】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して機能が低下した、完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0130】

たとえば、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の特異的に修飾または改変された形態、すなわちＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、切断すべき二本鎖ＤＮＡから一定の距離まで近づいている状態または切断すべきＤＮＡへの特異的結合を形成している状態で二本鎖ＤＮＡを切断し得る。ここで、特異的結合は、たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントの特定部位のアミノ酸と切断部位のＤＮＡヌクレオチド配列との間の結合であってもよい。この場合、修飾または改変された形態は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して機能的活性が低下した、完全に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0131】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、不完全または部分的に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0132】

「不完全または部分的に活性」とは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能、すなわち、ＤＮＡの二本鎖のうちの第１鎖を切断する第１機能およびＤＮＡの二本鎖のうちの第２鎖を切断する第２機能から選択される１つを有する状態を意味する。そのような状態のＣＲＩＳＰＲ酵素は、不完全または部分的に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素と呼ばれる。さらに、不完全または部分的に活性なＣＲＩＳＰＲ酵素はニッカーゼと呼ばれることもある。

【0133】

「ニッカーゼ」という用語は、標的遺伝子または核酸の二本鎖のうちの一方の鎖のみを切断するように改変または修飾されたＣＲＩＳＰＲ酵素を指し、ニッカーゼは、一本鎖、たとえば、標的遺伝子または核酸のｇＲＮＡに非相補的または相補的である鎖を切断するヌクレアーゼ活性を有する。したがって、二本鎖を切断するには、２つのニッカーゼのヌクレアーゼ活性が必要である。

【0134】

ニッカーゼは、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＲｕｖＣドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有し得る。すなわち、ニッカーゼは、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＨＮＨドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を含み得ず、この目的のために、ＨＮＨドメインを操作または修飾してもよい。

【0135】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素がＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素である場合、ニッカーゼは、修飾されたＨＮＨドメインを含むＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0136】

たとえば、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ニッカーゼは、野性型ＳｐＣａｓ９のアミノ酸配列の８４０位でのヒスチジンからアラニンへの変異により、ＨＮＨドメインのヌクレアーゼ活性が不活性化されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生されるニッカーゼ、すなわち、ＳｐＣａｓ９バリアントは、ＲｕｖＣドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の非相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡと相補的に結合しない鎖が切断され得る。

【0137】

別の例では、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＣｊＣａｓ９である場合、ニッカーゼは、野性型ＣｊＣａｓ９のアミノ酸配列の５５９位でのヒスチジンからアラニンへの変異により、ＨＮＨドメインのヌクレアーゼ活性が不活性化されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生されるニッカーゼ、すなわち、ＣｊＣａｓ９バリアントは、ＲｕｖＣドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の非相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡと相補的に結合しない鎖が切断され得る。

【0138】

さらに、ニッカーゼは、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＨＮＨドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有し得る。すなわち、ニッカーゼは、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＲｕｖＣドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を含み得ず、この目的のために、ＲｕｖＣドメインを操作または修飾してもよい。

【0139】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素がＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素である場合、ニッカーゼは、修飾されたＲｕｖＣドメインを含むＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0140】

たとえば、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ニッカーゼは、野性型ＳｐＣａｓ９のアミノ酸配列の１０位でのアスパラギン酸からアラニンへの変異により、ＲｕｖＣドメインのヌクレアーゼ活性が不活性化されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生されるニッカーゼ、すなわち、ＳｐＣａｓ９バリアントは、ＨＮＨドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡと相補的に結合している鎖が切断され得る。

【0141】

別の例では、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＣｊＣａｓ９である場合、ニッカーゼは、野性型ＣｊＣａｓ９のアミノ酸配列の８位でのアスパラギン酸からアラニンへの変異により、ＲｕｖＣドメインのヌクレアーゼ活性が不活性化されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生されるニッカーゼ、すなわち、ＣｊＣａｓ９バリアントは、ＨＮＨドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の相補鎖、すなわち、ｇＲＮＡと相補的に結合している鎖が切断され得る。

【0142】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0143】

「不活性」とは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能、すなわち、二本鎖ＤＮＡのうちの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡのうちの第２鎖を切断する第２機能の両方を失っている状態を意味し得る。そのような状態のＣＲＩＳＰＲ酵素は、不活性ＣＲＩＳＰＲ酵素と呼ばれる。

【0144】

不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のヌクレアーゼ活性を有するドメイン内の変異により、ヌクレアーゼ不活性を有し得る。

【0145】

不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメイン内の変異により、ヌクレアーゼ不活性を有し得る。すなわち、不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインによって引き起こされるヌクレアーゼ活性を含み得ず、この目的のために、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインを操作または修飾してもよい。

【0146】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素がＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素である場合、不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、修飾されたＲｕｖＣドメインおよび修飾されたＨＮＨドメインを含むＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0147】

たとえば、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＳｐＣａｓ９のアミノ酸配列の１０位のアスパラギン酸と８４０位のヒスチジンとの両方のアラニン変異により、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインの不活性化されたヌクレアーゼ活性を有するＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生される不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素、すなわち、ＳｐＣａｓ９バリアントは、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインの不活性化されたヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の二本鎖のいずれも切断され得ない。

【0148】

別の例では、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ酵素が野性型ＣｊＣａｓ９である場合、不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣｊＣａｓ９のアミノ酸配列の８位のアスパラギン酸と５５９位のヒスチジンとの両方のアラニン変異により、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインの不活性化されたヌクレアーゼ活性を有するＣｊＣａｓ９バリアントであってもよい。それによって産生される不活性なＣＲＩＳＰＲ酵素、すなわち、ＳｐＣａｓ９バリアントは、ＲｕｖＣドメインおよびＨＮＨドメインの不活性化されたヌクレアーゼ活性を有しているため、標的遺伝子または核酸の二本鎖のいずれも切断され得ない。

【0149】

ＣＲＩＳＰＲ酵素は、ヘリカーゼ活性、すなわち、上記のヌクレアーゼ活性に加えて、二本鎖核酸のらせん構造をほどく機能を有し得る。

【0150】

さらに、ＣＲＩＳＰＲ酵素は、完全に活性な、不完全なもしくは部分的に活性な、または不活性なヘリカーゼ活性を有するように修飾されてもよい。

【0151】

本明細書の開示の例示的な実施形態によれば、ＣＲＩＳＰＲ酵素は、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素であってもよい。

【0152】

「人為的に改変された（人為的に修飾または操作された）」という用語は、天然に存在する状態ではなく、人為的な修飾により形成された状態を意味する。ここで、人為的修飾は、ＣＲＩＳＰＲ酵素および／またはそのタンパク質をコードする核酸で起こり得る。さらに、人為的修飾は、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする核酸からタンパク質を産生するプロセス、すなわち、転写、転写後修飾、翻訳および翻訳後修飾を含むプロセス全体で起こる実行可能な人為的操作であるすべての修飾を含む。これ以降、非自然の人為的に改変または修飾されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、人為的なＣＲＩＳＰＲ酵素またはＣＲＩＳＰＲ酵素バリアント（ＣＲＩＳＰＲ酵素変異体）と互換的に使用され得る。

【0153】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の修飾された機能、すなわち、二本鎖ＤＮＡのうちの第１鎖を切断する第１機能および／または二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能を有するＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0154】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうちの第１機能が失われた形態であってもよい。

【0155】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうちの第１機能が向上した形態であってもよい。

【0156】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうちの第２機能が失われた形態であってもよい。

【0157】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうちの第２機能が向上した形態であってもよい。

【0158】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のすべての機能、すなわち、第１機能および第２機能が失われた形態であってもよい。

【0159】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のすべての機能、すなわち第１機能および第２機能が向上した形態であってもよい。

【0160】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうち、第１機能が失われ、第２機能が向上した形態であってもよい。

【0161】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の機能のうち、第１機能が向上し、第２機能が失われた形態であってもよい。

【0162】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、ｇＲＮＡとの相互作用によりｇＲＮＡ－ＣＲＩＳＰＲ酵素複合体を形成し得る。

【0163】

ここで、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のｇＲＮＡと相互作用する機能が修飾されたＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0164】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して、ｇＲＮＡとの相互作用が低下した形態であってもよい。

【0165】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素と比較して、ｇＲＮＡとの相互作用が増加した形態であってもよい。

【0166】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能を有する一方、ｇＲＮＡとの相互作用が低下した形態であってもよい。

【0167】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能を有する一方、ｇＲＮＡとの相互作用が増加した形態であってもよい。

【0168】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２機能を有する一方、ｇＲＮＡとの相互作用が低下した形態であってもよい。

【0169】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２機能を有する一方、ｇＲＮＡとの相互作用が増加した形態であってもよい。

【0170】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能および第２機能を有せず、さらにｇＲＮＡとの相互作用が低下した形態であってもよい。

【0171】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能および第２機能を有さない一方、ｇＲＮＡとの相互作用が増加した形態であってもよい。

【0172】

ここで、さまざまなｇＲＮＡ－ＣＲＩＳＰＲ酵素複合体は、ｇＲＮＡとＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントとの間の相互作用強度に応じて形成され、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントによる標的配列へのアクセスまたは切断の機能に違いを有し得る。

【0173】

たとえば、ｇＲＮＡとの相互作用が低下したＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントにより形成されるｇＲＮＡ－ＣＲＩＳＰＲ酵素複合体が、ｇＲＮＡに完全に相補的に結合する標的配列に非常に接近または局在化した場合のみ、標的配列の二本鎖または一本鎖は切断され得る。

【0174】

本明細書に開示される人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸を修飾することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0175】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列から少なくとも１つのアミノ酸が除去された形態であってもよい。

【0176】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の正に荷電したアミノ酸から１つ以上のアミノ酸が除去された形態であってもよい。

【0177】

別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の負に荷電したアミノ酸から１つ以上のアミノ酸が除去された形態であってもよい。

【0178】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の非荷電アミノ酸（または荷電していないアミノ酸）から１つ以上のアミノ酸が除去された形態であってもよい。

【0179】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸から１つ以上のアミノ酸が除去された形態であってもよい。

【0180】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列から選択される少なくとも１つのアミノ酸が異なるアミノ酸で置換された形態であってもよい。

【0181】

ここで、異なるアミノ酸、すなわち、置換するアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンから選択される１つのアミノ酸であってもよい。

【0182】

ここで、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンをそれ自体として使用してもよいし、メチル化、アセチル化およびリン酸化を含むその化学修飾形態として使用してもよい。

【0183】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の正に荷電したアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換された形態であってもよい。ここで、異なるアミノ酸は、選択された１つ以上のアミノ酸の立体異性体、他の正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0184】

別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の負に荷電したアミノ酸のうちの１つ以上のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換された形態であってもよい。ここで、異なるアミノ酸は、選択された１つ以上のアミノ酸の立体異性体、正に荷電したアミノ酸、他の負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0185】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の荷電していないアミノ酸のうちの１つ以上のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換された形態であってもよい。ここで、異なるアミノ酸は、選択された１つ以上のアミノ酸、他の荷電していないアミノ酸、正に荷電したアミノ酸、および負に荷電したアミノ酸の立体異性体から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0186】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸のうちの１つ以上のアミノ酸が異なるアミノ酸で置換された形態であってもよい。ここで、異なるアミノ酸は、選択された１つ以上のアミノ酸の立体異性体、正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸であってもよい。

【0187】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列から少なくとも１つのアミノ酸が置換または除去された形態であってもよい。

【0188】

本明細書に開示される人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列に少なくとも１つのアミノ酸を付加することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0189】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列と比較して、少なくとも１つのアミノ酸が付加された形態であってもよい。

【0190】

あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、少なくとも１つの機能ドメインが野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のアミノ酸配列に付加された形態であってもよい。

【0191】

ここで、機能ドメインは、１つ以上のアミノ酸で構成されていてもよく、ペプチドまたはポリペプチドであってもよい。

【0192】

ここで、機能ドメインは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の本来の機能に加えて、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能などの追加の機能を有するドメインであってもよい。

【0193】

あるいは、機能ドメインは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の本来の機能と同様の、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能などの機能を有するドメインであってもよい。

【0194】

一例では、機能ドメインは、メチラーゼ活性、デメチラーゼ活性、転写活性化活性、転写抑制活性、転写放出因子活性、ヒストン修飾活性、ＲＮＡ切断活性または核酸結合活性を有するドメインであってもよい。

【0195】

別の例では、機能ドメインは、（ペプチドを含む）タンパク質の単離および精製用のタグまたはレポーター遺伝子であってもよい。ここで、タグは、ヒスチジン（Ｈｉｓ）タグ、Ｖ５タグ、ＦＬＡＧタグ、インフルエンザ血球凝集素（ＨＡ）タグ、Ｍｙｃタグ、ＶＳＶ－Ｇタグ、チオレドキシン（Ｔｒｘ）タグなどを含み、レポーター遺伝子は、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、ルシフェラーゼ、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ＨｃＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、シアン蛍光タンパク質（ＣＦＰ）、黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）および青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ）を含む自家蛍光タンパク質を含むが、本発明はこれらに限定されない。

【0196】

さらに別の例では、機能ドメインはデアミナーゼであってもよい。

【0197】

たとえば、不完全または部分的なＣＲＩＳＰＲ酵素は、機能ドメインとしてシチジンデアミナーゼをさらに含んでいてもよい。あるいは、不完全または部分的なＣＲＩＳＰＲ酵素は、機能ドメインとしてアデニンデアミナーゼをさらに含んでいてもよい。

【0198】

さらに別の例では、機能ドメインは、核局在化配列もしくはシグナル（ＮＬＳ）または核外移行配列もしくはシグナル（ＮＥＳ）であってもよい。

【0199】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素は１つ以上のＮＬＳを含んでいてもよい。ここで、１つ以上のＮＬＳが、ＣＲＩＳＰＲ酵素のＮ末端またはその近傍に；ＣＲＩＳＰＲ酵素のＣ末端またはその近傍に；またはその組合せに含まれていてもよい。ＮＬＳは、ＮＬＳに由来する以下のＮＬＳ配列、アミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号１２）を有するＳＶ４０ウイルスラージＴ抗原のＮＬＳ；ヌクレオプラスミンからのＮＬＳ（たとえば、配列ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号１３）を有するヌクレオプラスミン双節型ＮＬＳ）；アミノ酸配列ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号１４）またはＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号１５）を有するｃ－ｍｙｃ ＮＬＳ；配列ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号１６）を有するｈＲＮＰＡ１ Ｍ９ ＮＬＳ；インポーチン－αからのＩＢＢドメインの配列ＲＭＲＩＺＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ（配列番号１７）；筋腫Ｔタンパク質の配列ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号１８）およびＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号１９）；ヒトＰ５３の配列ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号２０）；マウスｃ－ａｂｌ ＩＶの配列ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号２１）；インフルエンザウイルスＮＳ１の配列ＤＲＬＲＲ（配列番号２２）および配列ＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号２３）；Ｄ型肝炎ウイルス抗原の配列ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号２４）；マウスＭｘ１タンパク質の配列ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号２５）；ヒトポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼの配列ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号２６）；またはヒトグルココルチコイドのステロイドホルモン受容体の配列ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲＫＴＫＫ（配列番号２７）であってもよいが、本発明はこれらに限定されない。

【0200】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の特定の領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸を修飾することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0201】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の特定の領域に１つ以上のアミノ酸を付加することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0202】

ここで、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の特定の領域は、第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0203】

第１領域は、ｇＲＮＡと相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0204】

第１領域は、標的配列と相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0205】

第１領域は、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖と相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0206】

第１領域は、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖のＰＡＭの遠位端と相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0207】

ここで、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖のＰＡＭの遠位端とは、ＰＡＭの位置から離れているｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖の末端で６～１０塩基対を意味し得、これは、ｇＲＮＡの６～１０塩基の配列およびそれと相補的に結合する標的配列の６～１０塩基の配列である。

【0208】

第１領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＲＥＣローブに位置する領域であってもよい。

【0209】

第１領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＲＥＣドメインの全体または部分であってもよい。

【0210】

第２領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能または第２機能を有する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0211】

第２領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0212】

第２領域は、ＣＲＩＳＰＲ酵素の野性型ＲｕｖＣドメインの全体または部分であってもよい。

【0213】

第２領域は、ＣＲＩＳＰＲ酵素の野性型ＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域を含むＲｕｖＣドメインの部分であってもよい。

【0214】

ここで、ＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域とは、ＲｕｖＣドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域を意味し得る。

【0215】

金属依存性核酸切断領域は、金属と相互作用する部分と、標的位置で核酸間の結合を切断できる部分とで構成されていてもよい。

【0216】

第３領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１機能または第２機能を有する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0217】

第３領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0218】

第３領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＨＮＨドメインの全体または部分であってもよい。

【0219】

第３領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＨＮＨドメインの金属依存性核酸切断領域を含むＨＮＨドメインの部分であってもよい。

【0220】

ここで、ＨＮＨドメインの金属依存性核酸切断領域とは、ＨＮＨドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域を意味し得る。

【0221】

第４領域は、標的遺伝子または核酸中の特定のヌクレオチド配列、すなわちプロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）を認識できる野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0222】

第４領域は、標的遺伝子または核酸中の特定のヌクレオチド配列、すなわちＰＡＭと相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0223】

第４領域は、ｇＲＮＡのヌクレオチド配列の部分と相互作用する野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の部分であってもよい。

【0224】

第４領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0225】

第４領域は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素のＰＩドメインの全体または部分であってもよい。

【0226】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸を修飾することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0227】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0228】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0229】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第３領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0230】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第４領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0231】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域および第２領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0232】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域および第３領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0233】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0234】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域および第３領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0235】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0236】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第３領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも２つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0237】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第２領域および第３領域のアミノ酸配列の少なくとも３つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0238】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第２領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも３つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0239】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも３つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0240】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも３つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0241】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列の少なくとも４つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、４つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0242】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントは、１つ以上の領域から選択される少なくとも１つのアミノ酸の修飾を含んでいてもよい。

【0243】

ここで、修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0244】

ここで、修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0245】

一例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸の立体異性体であってもよい。

【0246】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置するＬ－グルタミンをＤ－グルタミンで置換することであってもよい。

【0247】

別の例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸よりも低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であってもよい。

【0248】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域に位置するフェニルアラニン（ハイドロパシー指数：２．８）を、より低いハイドロパシー指数（－０．４）を有するグリシンで置換することであってもよい。

【0249】

さらに別の例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸よりも高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であってもよい。

【0250】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置するセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）を、より高いハイドロパシー指数（３．８）を有するロイシンで置換することであってもよい。

【0251】

一例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸の官能基よりも小さい官能基を有するアミノ酸であってもよい。

【0252】

たとえば、修飾、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第３領域に位置するバリンを、バリンよりも小さい官能基を有するアラニンで置換することであってもよい。

【0253】

別の例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸の官能基よりも大きい官能基を有するアミノ酸であってもよい。

【0254】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域に位置するグリシンを、グリシンの官能基よりも大きい官能基を有するヒスチジンで置換することであってもよい。

【0255】

一例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸の疎水性よりも高い疎水性を有するアミノ酸であってもよい。

【0256】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置するアスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）をトレオニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－０．７）で置換することであってもよい。

【0257】

別の例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸の疎水性よりも低い疎水性を有するアミノ酸であってもよい。

【0258】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第４領域に位置するシステイン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．５）をプロリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－１．６）で置換することであってもよい。

【0259】

一例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸よりも大きいアミノ酸であってもよい。

【0260】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第３領域に位置するリシン（分子量（ｍ．ｗ．）：１４６．１８９）をトリプトファン（ｍ．ｗ．：２０４．２２８）で置換することであってもよい。

【0261】

別の例では、異なるアミノ酸は、選択されたアミノ酸よりも小さいアミノ酸であってもよい。

【0262】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域に位置するフェニルアラニン（分子量（ｍ．ｗ．：１６５．１９２）をグルタミン酸（ｍ．ｗ．：１４７．１３１）で置換することであってもよい。

【0263】

修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を同数の他のアミノ酸で置換することであってもよい。

【0264】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置する１つのアラニンを１つのグリシンで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置する１つのアルギニンと第４領域に位置する１つのヒスチジンとを、それぞれ１つのロイシン（第１領域）と１つのセリン（第４領域）とで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域に位置する１つのアルギニンおよび１つのバリンならびに第３領域に位置する１つのロイシンを、それぞれ１つのフェニルアラニン、すなわち合計３つのフェニルアラニンで置換することであってもよい。

【0265】

修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を、異なる数の他のアミノ酸で置換することであってもよい。

【0266】

たとえば、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第２領域に位置する１つのロイシンを、システイン－アラニン－アラニン、すなわち合計３つのアミノ酸で置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置する１つのヒスチジンと、第３領域に位置するアラニン－グルタミンの２つの隣接アミノ酸とを、それぞれメチオニン－バリン（第１領域）とプロリン（第３領域）とで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域に位置する１つのグルタミン酸、第２領域に位置するアラニン－ロイシン－ヒスチジンの３つの隣接アミノ酸および第３領域に位置するトリプトファン－セリンの２つの隣接アミノ酸を、それぞれアラニン（第１領域）、メチオニン－プロリン（第２領域）およびシステイン－アラニン－トレオニン－バリン（第３領域）で置換することであってもよい。

【0267】

人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に少なくとも１つのアミノ酸を付加することにより形成されるＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントであってもよい。

【0268】

ここで、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0269】

一例では、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に、正電荷を有する１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0270】

たとえば、付加は、第１領域に位置する選択された１つのアラニンのＣ末端に１つのアルギニンを付加することであってもよい。あるいは、付加は、第３領域に位置する選択されたグルタミン酸のＮ末端にヒスチジン－リシンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。

【0271】

別の例では、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に、負電荷を有する１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0272】

たとえば、付加は、第２領域に位置する選択された１つのトレオニンのＮ末端に１つのアスパラギン酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、第４領域に位置する選択されたヒスチジンのＣ末端にグルタミン酸－アスパラギン酸－グルタミン酸の３つのアミノ酸を付加することであってもよい。

【0273】

さらに別の例では、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に、電荷を有しない１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0274】

たとえば、付加は、第２領域に位置する選択された１つのシステインのＣ末端にセリン－バリンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、第３領域に位置する選択されたリシンのＮ末端にグリシン－プロリン－グルタミン－フェニルアラニン－ロイシンの５つのアミノ酸を付加することであってもよい。

【0275】

別の例では、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に、正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸、および荷電していないアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0276】

たとえば、付加は、第１領域に位置する選択された１つのアルギニンのＣ末端にヒスチジン－アルギニン－グリシン－セリン－アラニン－グルタミン酸の６つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、第４領域に位置する選択された１つのグリシンのＮ末端にリシン－リシン－アラニン－フェニルアラニン－グルタミン－トレオニン－メチオニン－システイン－アスパラギン酸－セリンの１０のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0277】

付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の機能ドメインを付加することであってもよい。

【0278】

ここで、機能ドメインは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の本来の機能に加えて、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能である追加の機能を有するドメインであってもよい。

【0279】

あるいは、機能ドメインは、野性型ＣＲＩＳＰＲ酵素の本来の機能と同様の、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能などの機能を有するドメインであってもよい。

【0280】

一例では、機能ドメインは、メチラーゼ活性、デメチラーゼ活性、転写活性化活性、転写抑制活性、転写放出因子活性、ヒストン修飾活性、ＲＮＡ切断活性または核酸結合活性を有するドメインであってもよい。

【0281】

別の例では、機能ドメインは、（ペプチドを含む）タンパク質の単離および精製用のタグまたはレポーター遺伝子であってもよい。ここで、タグは、ヒスチジン（Ｈｉｓ）タグ、Ｖ５タグ、ＦＬＡＧタグ、インフルエンザ血球凝集素（ＨＡ）タグ、Ｍｙｃタグ、ＶＳＶ－Ｇタグ、チオレドキシン（Ｔｒｘ）タグなどを含み、レポーター遺伝子は、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、ルシフェラーゼ、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ＨｃＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、シアン蛍光タンパク質（ＣＦＰ）、黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）および青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ）を含む自家蛍光タンパク質を含むが、本発明はこれらに限定されない。

【0282】

さらに別の例では、機能ドメインはデアミナーゼであってもよい。ここで、デアミナーゼはアデニンデアミナーゼおよび／またはシチジンデアミナーゼであってもよい。

【0283】

さらに別の例では、機能ドメインは、核局在化配列もしくはシグナル（ＮＬＳ）または核外移行配列もしくはシグナル（ＮＥＳ）であってもよい。

【0284】

本明細書に開示される本開示の例示的な一実施形態では、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素は、人為的に改変されたＣａｓ９であってもよい。

【0285】

人為的に改変されたＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９の特定の領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸を修飾することにより形成されるＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0286】

人為的に改変されたＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９の特定の領域に少なくとも１つのアミノ酸を付加することにより形成されるＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0287】

ここで、野性型Ｃａｓ９の特定の領域は、第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域であってもよい。

【0288】

第１領域は、ｇＲＮＡと相互作用する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0289】

第１領域は、標的配列と相互作用する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0290】

第１領域は、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖と相互作用する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0291】

第１領域は、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖のＰＡＭの遠位端と相互作用する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0292】

ここで、ｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖のＰＡＭの遠位端とは、ＰＡＭの位置から離れているｇＲＮＡ標的配列ヘテロ二本鎖の末端で６～１０塩基対を意味し得、これは、ｇＲＮＡの６～１０塩基の配列およびそれと相補的に結合する標的配列の６～１０塩基の配列である。

【0293】

第１領域は、野性型Ｃａｓ９のＲＥＣローブに位置する領域であってもよい。

【0294】

第１領域は、野性型Ｃａｓ９のＲＥＣドメインの全体または部分であってもよい。

【0295】

第１領域は、野性型Ｃａｓ９のＲＥＣドメインのＣ末端の３００のアミノ酸からなる領域であってもよい。

【0296】

第１領域は、野性型Ｃａｓ９のＲＥＣドメインのＮ末端の２２０のアミノ酸でからなる領域であってもよい。

【0297】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９（配列番号１）である場合、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の９４番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ９４）から７１７番目の位置のグリシン（Ｇ７１７）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0298】

例示的な一実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１、配列番号２）であってもよい。

【0299】

別の例示的な実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２、配列番号３）であってもよい。

【0300】

さらに別の例示的な実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３、配列番号４）であってもよい。

【0301】

さらに別の例示的な実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４、配列番号５）であってもよい。

【0302】

例示的な一実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）から選択される２つの領域であってもよい。

【0303】

別の例示的な実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）から選択される３つの領域であってもよい。

【0304】

さらに別の例示的な実施形態では、第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）であってもよい。

【0305】

別の例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳａＣａｓ９である場合、第１領域は、野性型ＳａＣａｓ９の７５番目の位置のアスパラギン（Ｎ７５）から４２６番目の位置のリシン（Ｋ４２６）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0306】

例示的な一実施形態では、第１領域は、野性型ＳａＣａｓ９の２０７番目の位置のトレオニン（Ｔ２０７）から４２６番目の位置のリシン（Ｋ４２６）までのアミノ酸配列であってもよい。

【0307】

第２領域は、野性型Ｃａｓ９の第１機能または第２機能を有する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0308】

第２領域は、野性型Ｃａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0309】

第２領域は、野性型Ｃａｓ９のＲｕｖＣドメインの全体または部分であってもよい。

【0310】

第２領域は、野性型Ｃａｓ９の金属依存性核酸切断領域を含むＲｕｖＣドメインの部分であってもよい。

【0311】

ここで、ＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域とは、ＲｕｖＣドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域を意味し得る。

【0312】

金属依存性核酸切断領域は、金属と相互作用する部分と、標的位置で核酸間の結合を切断できる部分とで構成されていてもよい。

【0313】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から５９番目の位置のアラニン（Ａ５９）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ Ｉ領域）の全体または部分であってもよい。

【0314】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７１８番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ７１８）から７７４番目の位置のグルタミン（Ｑ７７４）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ ＩＩ領域）の全体または部分であってもよい。

【0315】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の９０９番目の位置のセリン（Ｓ９０９）から１０９８番目の位置のトレオニン（Ｔ１０９８）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ ＩＩＩ領域）の全体または部分であってもよい。

【0316】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣ Ｉ領域、ＲｕｖＣ ＩＩ領域および／またはＲｕｖＣ ＩＩＩ領域であってもよい。

【0317】

例示的な一実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１、配列番号６）であってもよい。

【0318】

別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２、配列番号７）であってもよい。

【0319】

さらに別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３、配列番号８）であってもよい。

【0320】

例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）および野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）のアミノ酸配列（領域２－２）であってもよい。

【0321】

別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）および野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0322】

さらに別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）および野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0323】

さらに別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）、野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）、および野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0324】

別の例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳａＣａｓ９である場合、第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から４１番目の位置のバリン（Ｖ４１）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ Ｉ領域）の全体または部分であってもよい。

【0325】

第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９の４３６番目の位置のイソロイシン（Ｉ４３６）から４８１番目の位置のグルタミン酸（Ｅ４８１）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ ＩＩ領域）の全体または部分であってもよい。

【0326】

第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９の６５１番目の位置のチロシン（Ｙ６５１）から７７５番目の位置のバリン（Ｖ７７５）までのアミノ酸配列（ＲｕｖＣ ＩＩＩ領域）の全体または部分であってもよい。

【0327】

第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９のＲｕｖＣ Ｉ領域、ＲｕｖＣ ＩＩ領域および／またはＲｕｖＣ ＩＩＩ領域であってもよい。

【0328】

例示的な一実施形態では、第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２５番目の位置のトレオニン（Ｔ２５）までのアミノ酸配列（領域２－１）であってもよい。

【0329】

別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９のアミノ酸配列の４７１番目の位置のプロリン（Ｐ４７１）から４８１番目の位置のグルタミン酸（Ｅ４８１）までのアミノ酸配列（領域２－２）であってもよい。

【0330】

さらに別の例示的な実施形態では、第２領域は、野性型ＳａＣａｓ９の６６７番目の位置のアスパラギン（Ｎ６６７）から７４０番目の位置のセリン（Ｓ７４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0331】

第３領域は、その第１機能または第２機能を有する野性型Ｃａｓ９の部分であってもよい。

【0332】

第３領域は、野性型Ｃａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0333】

第３領域は、野性型Ｃａｓ９のＨＮＨドメインの全体または部分であってもよい。

【0334】

第３領域は、野性型Ｃａｓ９の金属依存性核酸切断領域を含むＨＮＨドメインの全体または部分であってもよい。

【0335】

ここで、ＨＮＨドメインの金属依存性核酸切断領域とは、ＨＮＨドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸を切断できる領域を意味し得る。

【0336】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７７５番目の位置のリシン（Ｋ７７５）から９０８番目の位置のロイシン（Ｌ９０８）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0337】

例示的な一実施形態では、第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７７５番目の位置のリシン（Ｋ７７５）から９００番目の位置のロイシン（Ｌ９００）までのアミノ酸配列（領域３－１、配列番号９）であってもよい。

【0338】

別の例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳａＣａｓ９である場合、第３領域は、野性型ＳａＣａｓ９の５２１番目の位置のイソロイシン（Ｉ５２１）から６２９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ６２９）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0339】

例示的な一実施形態では、第３領域は、野性型ＳａＣａｓ９の５２３番目の位置のリシン（Ｋ５２３）から６２７番目の位置のロイシン（Ｌ６２７）までのアミノ酸配列（領域３－１）であってもよい。

【0340】

第４領域は、標的遺伝子または核酸中の特定のヌクレオチド配列、すなわちＰＡＭを認識できる野性型Ｃａｓ９の一部であってもよい。

【0341】

第４領域は、標的遺伝子または核酸中の特定のヌクレオチド配列、すなわちＰＡＭと相互作用する野性型Ｃａｓ９の一部であってもよい。

【0342】

第４領域は、ｇＲＮＡのヌクレオチド配列の一部と相互作用する野性型Ｃａｓ９の一部であってもよい。

【0343】

第４領域は、野性型Ｃａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域であってもよい。

【0344】

第４領域は、野性型Ｃａｓ９のＰＩドメインの全体または部分であってもよい。

【0345】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０９９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ１０９９）から１３６８番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ１３６８）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0346】

例示的な一実施形態では、第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０９９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ１０９９）から１１３９番目の位置のバリン（Ｖ１１３９）までのアミノ酸配列（領域４－１、配列番号１０）であってもよい。

【0347】

別の例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳａＣａｓ９である場合、第４領域は、野性型ＳａＣａｓ９の９１０番目の位置のリシン（Ｋ９１０）から１０５３番目の位置のグリシン（Ｇ１０５３）までのアミノ酸配列の全体または部分であってもよい。

【0348】

例示的な一実施形態では、第４領域は、野性型ＳａＣａｓ９の９１０番目の位置のリシン（Ｋ９１０）から９７０番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ９７０）までのアミノ酸配列（領域４－１）であってもよい。

【0349】

人為的に改変されたＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸を修飾することにより形成されるＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0350】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0351】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0352】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0353】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１の脂肪族またはアミドベースの官能基を有するアミノ酸である、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１およびＩ２８２から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0354】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0355】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２の非極性アミノ酸である、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0356】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0357】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８およびＩ６０１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0358】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３の非極性アミノ酸である、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0359】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0360】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のＮ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0361】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0362】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に位置してもよい。あるいは、選択された２つ以上のアミノ酸は、同じ領域に位置してもよい。

【0363】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0364】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0365】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域１－４のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0366】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域１－４のＬ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0367】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された３つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に位置してもよい。あるいは、選択された３つ以上のアミノ酸は、同じ領域に位置してもよい。あるいは、選択された３つ以上のアミノ酸は、それぞれ同じまたは異なる領域に位置してもよい。

【0368】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0369】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0370】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－３および領域１－４のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0371】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２、領域１－３および領域１－４のＧ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0372】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0373】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0374】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0375】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１およびＧ１２からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0376】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０およびＩ２１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0377】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0378】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＩ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0379】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0380】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0381】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0382】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＩ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0383】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された２つ以上のアミノ酸は、それぞれ領域２－１および領域２－２に位置してもよい。

【0384】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－２のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0385】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－２のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0386】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された２つ以上のアミノ酸は、それぞれ領域２－１および領域２－３に位置してもよい。

【0387】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0388】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0389】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された２つ以上のアミノ酸は、それぞれ領域２－２および領域２－３に位置してもよい。

【0390】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域２－３のＩ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0391】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域２－３のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0392】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、選択された３つ以上のアミノ酸は、それぞれ野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３に位置してもよい。

【0393】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0394】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0395】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第３領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0396】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0397】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0398】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0399】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0400】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0401】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0402】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0403】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0404】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域および第２領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0405】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第２領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0406】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0407】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１およびＩ２８２からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0408】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0409】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－２のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0410】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0411】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域２－３のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0412】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0413】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0414】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0415】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0416】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－２のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0417】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0418】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域２－３のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0419】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0420】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８およびＩ６０１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0421】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３およびの領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0422】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0423】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－２のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0424】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－２のＬ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0425】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0426】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－３のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0427】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域２－３のＬ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0428】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0429】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0430】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0431】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0432】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－２のＮ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0433】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－２のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0434】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0435】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－３のＮ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を含む形態であってもよい。

【0436】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域２－３のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0437】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第２領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0438】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0439】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0440】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第２領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0441】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第２領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0442】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0443】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0444】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0445】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域３－１のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0446】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0447】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0448】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0449】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域３－１のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0450】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＬ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0451】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0452】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域３－１のＮ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0453】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0454】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0455】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0456】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0457】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第３領域のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0458】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第３領域のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0459】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0460】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0461】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0462】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域４－１のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0463】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0464】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域４－１のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0465】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0466】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域４－１のＫ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0467】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＬ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0468】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0469】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４および領域４－１のＮ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0470】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0471】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0472】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0473】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0474】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第４領域のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0475】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第４領域のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0476】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0477】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0478】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0479】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域３－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0480】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０およびＩ２１；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0481】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0482】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域３－１のＩ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0483】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0484】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３および領域３－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0485】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３および領域３－１のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0486】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＩ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８；ならびに荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0487】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0488】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0489】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0490】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第３領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９６５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0491】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第３領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0492】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0493】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0494】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0495】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域４－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0496】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０およびＩ２１；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0497】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0498】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域４－１のＩ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0499】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３およびＡ７６４；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0500】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0501】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３および領域４－１のＤ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0502】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、非極性アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＩ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0503】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0504】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0505】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0506】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0507】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0508】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0509】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0510】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１および領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0511】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１および領域４－１のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0512】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、荷電アミノ酸、すなわち、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0513】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0514】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0515】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0516】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0517】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0518】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0519】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第３領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0520】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第３領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0521】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0522】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0523】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0524】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0525】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0526】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0527】

さらに別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0528】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0529】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0530】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0531】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第３領域および第４領域のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0532】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第３領域および第４領域のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0533】

別の例示的な実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0534】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0535】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0536】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0537】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域、第３領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0538】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域、第３領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0539】

Ｃａｓ９バリアントは、野性型Ｃａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される４つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。 ここで、４つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0540】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される４つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。ここで、４つ以上のアミノ酸がそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0541】

例示的な一実施形態では、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸が修飾された形態であってもよい。

【0542】

ここで、第１領域は、領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４であってもよい。

【0543】

ここで、第２領域は、領域２－１、領域２－２および領域２－３であってもよい。

【0544】

ここで、第３領域は領域３－１であってもよい。

【0545】

ここで、第４領域は領域４－１であってもよい。

【0546】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0547】

たとえば、ＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸の修飾を伴う形態であってもよい。

【0548】

Ｃａｓ９バリアントは、１つ以上の領域から選択される少なくとも１つのアミノ酸の修飾を含んでもよい。

【0549】

ここで、修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0550】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0551】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0552】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0553】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0554】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0555】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0556】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0557】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0558】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0559】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0560】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0561】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0562】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0563】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0564】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を欠失させることであってもよい。

【0565】

ここで、修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0566】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0567】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。

【0568】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。 たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）がＬ－リシンである場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）をＤ－リシンで置換することであってもよい。

【0569】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0570】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置にあるフェニルアラニン（Ｆ５３９、ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１、ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することであってもよい。

【0571】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0572】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の２７７番目の位置のアスパラギン（Ｎ２７７、ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するヒスチジン（ハイドロパシー指数：－３．２）で置換することであってもよい。

【0573】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0574】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0575】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５およびＨ６９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９）を、相対的に小さい官能基を有するセリンで置換することであってもよい。

【0576】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0577】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の２０３番目の位置のアラニン（Ａ２０３）を、相対的に大きい官能基を有するアスパラギン酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の３６６番目の位置のグリシン（Ｇ３６６）を、相対的に大きい官能基を有するセリンで置換することであってもよい。

【0578】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0579】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0580】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．８）および６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．５）を、それぞれ相対的にさらに低い疎水性を有するセリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－０．８）およびアスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）で置換することであってもよい。

【0581】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0582】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の２７７番目の位置のアスパラギン（Ｎ２７７、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）および６８２番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ６８２、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．８）を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するヒスチジン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．２）およびバリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．２）で置換することであってもよい。

【0583】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0584】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0585】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。

【0586】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。 たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１２番目の位置のグリシン（Ｇ１２）がＬ－グリシンである場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１２番目の位置のグリシン（Ｇ１２）をＤ－グリシンで置換することであってもよい。

【0587】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0588】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０３８番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１０３８、ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することであってもよい。

【0589】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0590】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３、ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の９６５番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ９６５、ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することであってもよい。

【0591】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0592】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0593】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３）を、相対的に小さい官能基を有するイソロイシンで置換することであってもよい。

【0594】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0595】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０３８番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１０３８）を、相対的に大きい官能基を有するチロシンで置換することであってもよい。

【0596】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0597】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に疎水性の低いアミノ酸で置換することであってもよい。

【0598】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７６１番目の位置のイソロイシン（Ｉ７６１、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．５）および１０３８番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１０３８、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．８）を、それぞれ相対的に低い疎水性を有するメチオニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）およびチロシン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－１．３）で置換することであってもよい。

【0599】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に疎水性の高いアミノ酸で置換することであってもよい。

【0600】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）および９３２番目の位置のアラニン（Ａ９３２、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．８）を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するイソロイシン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．５）およびシステイン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．５）で置換することであってもよい。

【0601】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0602】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0603】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。

【0604】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の８５３番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ８５３）がＬ－アスパラギン酸である場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８５３番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ８５３）をＤ－アスパラギン酸で置換することであってもよい。

【0605】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0606】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８６２番目の位置のリシン（Ｋ８６２、ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアルギニン（ハイドロパシー指数：－４．５）で置換することであってもよい。

【0607】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0608】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０、ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することであってもよい。

【0609】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0610】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0611】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０）を、相対的に小さい官能基を有するアスパラギンで置換することであってもよい。

【0612】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0613】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＶ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０およびＬ８９１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８６３番目の位置のアスパラギン（Ｎ８６３）を、相対的に大きい官能基を有するアルギニンで置換することであってもよい。

【0614】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0615】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0616】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７７９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ７７９、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）および８６２番目の位置のリシン（Ｋ８６２、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．９）を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するリシン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．９）およびアルギニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－４．５）で置換することであってもよい。

【0617】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0618】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８２７番目の位置のグルタミン酸（Ｅ８２７、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）および８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．９）を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するメチオニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）およびアスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）で置換することであってもよい。

【0619】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0620】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0621】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。

【0622】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を立体異性体で置換することであってもよい。 たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１１２７番目の位置にあるアスパラギン酸（Ｄ１１２７）がＬ－アスパラギン酸である場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１１２７番目の位置にあるアスパラギン酸（Ｄ１１２７）をＤ－アスパラギン酸で置換することであってもよい。

【0623】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0624】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２、ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することであってもよい。

【0625】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0626】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１１０６番目の位置のセリン（Ｓ１１０６、ハイドロパシー指数：－０．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するグリシン（ハイドロパシー指数：－０．４）で置換することであってもよい。

【0627】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0628】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0629】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２）を、相対的に小さい官能基を有するプロリンで置換することであってもよい。

【0630】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0631】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１１２７番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ１１２７）を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することであってもよい。

【0632】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0633】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸と置換することであってもよい。

【0634】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－０．７）を、相対的に低い疎水性を有するプロリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－１．６）で置換することであってもよい。

【0635】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0636】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に疎水性が低いアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の１１０８番目の位置のグルタミン酸（Ｅ１１０８、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）を、相対的に低い疎水性を有するメチオニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）で置換することであってもよい。

【0637】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0638】

修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することであってもよい。

【0639】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ立体異性体で置換することであってもよい。

【0640】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ立体異性体で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の８番目の位置のグリシン（Ｇ８）がＬ－グリシンであり、７６７番目の位置のアスパラギン（Ｎ７６７）がＬ－アスパラギンである場合、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の８番目の位置のグリシン（Ｇ８）と７６７番目の位置のアスパラギン（Ｎ７６７）とを、それぞれＤ－グリシンとＤ－アスパラギンとで置換することであってもよい。

【0641】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に小さいハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0642】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に小さいハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の２０３番目の位置のアラニン（Ａ２０３、ハイドロパシー指数：１．８）と５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、ハイドロパシー指数：２．８）とを、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）とセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）とで置換することであってもよい。

【0643】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に小さいハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１、ハイドロパシー指数：４．５）と１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２、ハイドロパシー指数：－０．７）とを、それぞれ相対的に小さいハイドロパシー指数を有するアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）とプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）とで置換することであってもよい。

【0644】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0645】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の２７７番目の位置のアスパラギン（Ｎ２７７、ハイドロパシー指数：－３．５）と８４０番目の位置のヒスチジン（Ｈ８４０、ハイドロパシー指数：－３．２）とを、それぞれ相対的に小さいハイドロパシー指数を有するヒスチジン（ハイドロパシー指数：－３．２）とアラニン（ハイドロパシー指数：１．８）とで置換することであってもよい。

【0646】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。 たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３、ハイドロパシー指数：１．９）と８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０、ハイドロパシー指数：－３．９）とを、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）とアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）とで置換することであってもよい。

【0647】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0648】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸の、それぞれ相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１０番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ１０、ハイドロパシー指数：－３．５）と８４０番目の位置のヒスチジン（Ｈ８４０、ハイドロパシー指数：－３．２）とを、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアラニン（ハイドロパシー指数：１．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に小さいハイドロパシー指数を有するセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換することであってもよい。

【0649】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３、ハイドロパシー指数：１．９）と８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０、ハイドロパシー指数：－３．９）とを、それぞれ相対的に高いハイドロパシー指数を有するアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に小さいハイドロパシー指数を有するセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換することであってもよい。

【0650】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0651】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ａ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｋ５１０、Ｙ５１５、Ｆ５３９、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｎ５８８、Ｉ６０１、Ｎ６９２、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｈ６９８、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｄ９６５、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｙ１０３９、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９）、７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３）および１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２）を、相対的に小さい官能基を有するセリン、イソロイシンおよびプロリンで置換することであってもよい。

【0652】

さらに別の例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0653】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１）、１０３８番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１０３８）および１１２７番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ１１２７）を、それぞれ相対的に大きい官能基を有するアスパラギン、チロシンおよびグルタミン酸で置換することであってもよい。

【0654】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0655】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９）、７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３）および８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０）を、それぞれ相対的に小さい官能基を有するセリン、イソロイシンおよびアスパラギンで置換し、６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１）と１０３８番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１０３８）とを、それぞれ相対的に大きい官能基を有するアスパラギンとチロシンとで置換することであってもよい。

【0656】

例示的な一実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0657】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：２．８）、６０１番目の位置のイソロイシン（Ｉ６０１、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．５）および１１０２番目の位置のトレオニン（Ｔ１１０２、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－０．７）を、それぞれ相対的に低い疎水性を有するセリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－０．８）、アスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）およびプロリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－１．６）で置換することであってもよい。

【0658】

別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に低い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0659】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、野性型ＳｐＣａｓ９の１０番目の位置のアスパラギン酸（Ｄ１０、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．５）、７６３番目の位置のメチオニン（Ｍ７６３、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）、８４０番目の位置のヒスチジン（Ｈ８４０、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．２）および８９０番目の位置のリシン（Ｋ８９０、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．９）を、それぞれ相対的に高い疎水性を有するアラニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．８）、イソロイシン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：４．５）、アラニン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：１．８）およびアスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：－３．５）で置換することであってもよい。

【0660】

さらに別の例示的な実施形態では、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３、領域１－４、領域２－１、領域２－２、領域２－３、領域３－１および／または領域４－１領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0661】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、それぞれ相対的に低いまたは高い疎水性を有するアミノ酸で置換することであってもよい。たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の７６３番目のメチオニン（Ｍ７６３、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：１．９）と８９０番目位置のリシン（Ｋ８９０、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅの疎水性：－３．９）とを、それぞれ相対的に高い疎水性を有するイソロイシン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：４．５）とアスパラギン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：－３．５）とで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の５３９番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ５３９、Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：２．８）を、相対的に低い疎水性を有するセリン（Ｋｙｔｅ－Ｄｏｏｌｉｔｔleの疎水性：－０．８）で置換することであってもよい。

【0662】

修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を同数の他のアミノ酸で置換することであってもよい。

【0663】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域に位置する１つのイソロイシンを１つのアスパラギンで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域に位置する１つのフェニルアラニンと第３領域に位置する１つのリシンとを、それぞれ１つのセリン（第１領域）および１つのアスパラギン（第３領域）とで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域に位置する１つのメチオニンおよび１つのフェニルアラニンならびに第３領域に位置する１つのリシンを、それぞれ１つのイソロイシン、１つのチロシン（第２領域）および１つのアスパラギン（第３領域）で置換することあってもよい。

【0664】

修飾は、選択された１つ以上のアミノ酸を異なる数の他のアミノ酸で置換することであってもよい。

【0665】

たとえば、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域に位置する１つのトレオニンを、システイン－アラニン－アラニン、すなわち合計３つのアミノ酸で置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域に位置する１つのグルタミンと、第３領域に位置するグリシンセリン－セリンの２つの隣接アミノ酸とを、それぞれメチオニン－バリン（第１領域）とプロリン（第３領域）とで置換することであってもよい。あるいは、修飾は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域に位置する１つのセリン、第２領域に位置するリシン－リシン－チロシンの３つの隣接アミノ酸および第３領域に位置するセリン－イソロイシンの２つの隣接アミノ酸を、それぞれアラニン（第１領域）、メチオニン－プロリン（第２領域）およびシステイン－アラニン－トレオニン－バリン（第３領域）で置換することであってもよい。

【0666】

人為的に改変されたＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に少なくとも１つのアミノ酸が付加されたＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0667】

ここで、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0668】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在するＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0669】

例示的な一実施形態では、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の正に荷電したアミノ酸を付加することであってもよい。

【0670】

たとえば、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１に位置する選択された１つのアラニンのＣ末端に１つのアルギニンを付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２に位置する選択されたグルタミン酸のＮ末端にアルギニン－リシンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１に位置する選択されたロイシンのＮ末端にアルギニン－ヒスチジンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１に位置する選択されたロイシンのＣ末端にリシン－ヒスチジンの２つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１に位置する選択されたチロシンのＣ末端に１つのリシンを付加することであってもよい。

【0671】

別の例示的な実施形態では、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の負に荷電したアミノ酸を付加することであってもよい。

【0672】

たとえば、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２に位置する選択された１つのグリシンのＮ末端に１つのアスパラギン酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３に位置する選択されたメチオニンのＣ末端にグルタミン酸－アスパラギン酸－グルタミン酸の３つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１に位置する選択されたイソロイシンのＮ末端にグルタミン酸－グルタミン酸の２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１に位置する選択されたフェニルアラニンのＣ末端にグルタミン酸－アスパラギン酸の２つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１に位置する選択されたグルタミンのＮ末端に１つのアスパラギン酸を付加することであってもよい。

【0673】

さらに別の例示的な実施形態では、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在するＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の荷電していないアミノ酸を付加することであってもよい。

【0674】

たとえば、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１に位置する選択された１つのフェニルアラニンのＣ末端にセリン－バリンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１に位置する選択されたヒスチジンのＮ末端にグリシン－プロリン－グルタミン－フェニルアラニン－ロイシンの５つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１に位置する選択されたアスパラギンのＮ末端にアラニン－アラニンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１に位置する選択されたアスパラギン酸のＣ末端にフェニルアラニン－ロイシンの２つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２に位置する選択されたグルタミンのＮ末端に１つのセリンを付加することであってもよい。

【0675】

別の例示的な実施形態では、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に、正に荷電したアミノ酸、負に荷電したアミノ酸および荷電していないアミノ酸から選択される１つ以上のアミノ酸を付加することであってもよい。

【0676】

たとえば、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２に位置する選択された１つのアルギニンのＣ末端にヒスチジン－アルギニン－グリシン－セリン－アラニン－グルタミン酸の６つのアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１に位置する選択されたグリシンのＮ末端にリシン－リシン－アラニン－フェニルアラニン－グルタミン－トレオニン－メチオニン－システイン－アスパラギン酸－セリンの１０のアミノ酸を付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１に位置する選択されたメチオニンのＣ末端にフェニルアラニン－ヒスチジンの２つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３に位置する選択されたグルタミンのＮ末端に１つのリシンを付加することであってもよい。あるいは、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１に位置する選択されたリシンのＣ末端にアスパラギン酸－セリンの２つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２に位置する選択されたトレオニンのＮ末端にグルタミン－トレオニン－メチオニン－システイン－アスパラギン酸－リシンの６つのアミノ酸を付加し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１に位置する選択されたグルタミンのＣ末端にアルギニン－グリシンの２つのアミノ酸を付加することであってもよい

【0677】

ここで、付加は、選択された１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の機能ドメインを付加することであってもよい。

【0678】

機能ドメインは、野性型Ｃａｓ９の本来の機能に加えて、追加の機能、すなわち、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能を有するドメインであってもよい。

【0679】

あるいは、機能ドメインは、野性型Ｃａｓ９の本来の機能、すなわち、二本鎖ＤＮＡの第１鎖を切断する第１機能および／または二本鎖ＤＮＡの第２鎖を切断する第２機能と同様の機能を有するドメインであってもよい。

【0680】

機能ドメインに関連する説明は、上記と同様である。

【0681】

一例では、野性型Ｃａｓ９が野性型ＳｐＣａｓ９である場合、付加は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域に存在する１つ以上のアミノ酸のＮ末端および／またはＣ末端位置に１つ以上の機能ドメインを付加することであってもよい。

【0682】

本明細書に開示される本開示の例示的な一実施形態では、人為的に改変されたＣａｓ９は、標的特異的なＣａｓ９であってもよい。

【0683】

「標的特異的なＣａｓ９（ＴＳ－Ｃａｓ９）」とは、野性型Ｃａｓ９と比較して、標的特異性を相対的に高めるための、人為的操作により産生されたＣａｓ９バリアントを指す。

【0684】

ここで、「標的特異性」とは、Ｃａｓ９がｇＲＮＡとの相互作用によりｇＲＮＡ－Ｃａｓ９複合体を形成するにあたり、ｇＲＮＡ－Ｃａｓ９複合体が標的遺伝子または核酸、すなわちＣａｓ９を使用して操作される対象（核酸）に接近または局在化したときに、Ｃａｓ９がｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列に特異的に作用することを意味する。ここで、ｇＲＮＡとの完全に相補的な結合（１００％）の標的配列は「オンターゲット」と呼ばれ、ｇＲＮＡとの不完全な相補的な結合（１００％未満）、すなわち１つ以上の相補的でない結合を有する標的配列は「オフターゲット」と呼ばれる。

【0685】

標的特異性は、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合の程度に応じて異なり成る。

【0686】

一例では、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列がオンターゲットである場合、すなわち、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が完全な相補的結合（１００％）である場合、標的特異性は最高レベルにある。

【0687】

別の例では、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列がオフターゲットである場合、すなわち、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が１００％未満であり、それらの間に１つ以上の非相補的結合を含む場合、標的特異性は、オンターゲットの特異性よりも低く、非相補的結合の数が多いほど、標的特異性は低くなる。

【0688】

たとえば、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が完全な相補的結合（１００％）である場合、標的特異性は１００％であり、ｇＲＮＡと標的配列との間に１つの非相補的結合がある場合、すなわち、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が不完全な相補的結合（９５％）である場合、標的特異性は９５％であってもよい。さらに、ｇＲＮＡと標的配列との間に４つの非相補的結合がある場合、すなわち、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が不完全な相補的結合（８０％）である場合、標的特異性は８０％であってもよい。

【0689】

さらに別の例では、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列がオフターゲットである場合、すなわち、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合の程度が１００％未満であり、すなわち、１つ以上の非相補的結合がある場合、標的特異性は、非相補的結合の位置に応じて異なり得る。

【0690】

たとえば、ｇＲＮＡと標的配列との間に１つの非相補的結合があり、非相補的結合が標的配列に隣接するＰＡＭにより接近すると、標的特異性は、非相補的結合がＰＡＭの位置から離れている場合よりも低くなり得る。

【0691】

標的特異性は、標的配列と相補的に結合するｇＲＮＡとＣａｓ９との相互作用の程度に応じて異なり得る。

【0692】

一例では、標的配列と相補的に結合するｇＲＮＡとＣａｓ９との相互作用が低下し得る場合、ｇＲＮＡと標的配列との間の非相補的結合の数が少ないほど、標的特異性は高くなる。

【0693】

たとえば、標的配列と相補的に結合するｇＲＮＡとＣａｓ９との相互作用が低下する場合、ｇＲＮＡと標的配列との間に非相補的な結合が１つある場合の標的特異性は、ｇＲＮＡと標的配列との間に３つの非相補的な結合がある場合よりも高くなる。

【0694】

別の例では、標的配列に相補的に結合するｇＲＮＡとＣａｓ９との相互作用が低下する場合、Ｃａｓ９は、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が完全な相補的結合（１００％）の場合にのみ標的特異性を有し得る。

【0695】

たとえば、標的配列と相補的に結合するｇＲＮＡとＣａｓ９との相互作用が低下する場合、標的配列がオンターゲットである場合にのみ、Ｃａｓ９は標的特異性を有し得る。

【0696】

標的特異性は、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列とＣａｓ９との間の相互作用の程度に応じて異なり得る。

【0697】

一例では、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列とＣａｓ９との間の相互作用が低下する場合、ｇＲＮＡと標的配列との間の非相補的結合の数が少なくなるほど、標的特異性は高くなる。

【0698】

たとえば、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列とＣａｓ９との間の相互作用が低下する場合、ｇＲＮＡと標的配列との間に４つの非相補的な結合がある場合と比較して、２つの非相補的な結合がそれらの間にある場合、標的特異性は相対的に高まり得る。

【0699】

別の例では、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列とＣａｓ９との間の相互作用が低下する場合、ｇＲＮＡと標的配列との間の相補的結合が完全な相補的結合（１００％）である場合にのみ、Ｃａｓ９は標的特異性を有し得る。

【0700】

たとえば、ｇＲＮＡと相補的に結合する標的配列とＣａｓ９との間の相互作用が低下する場合、標的配列がオンターゲットである場合のみ、Ｃａｓ９は標的特異性を有し得る。

【0701】

標的特異的なＣａｓ９は、オンターゲットを操作するＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0702】

ここで、操作は、Ｃａｓ９バリアントを使用してオンターゲットのヌクレオチド配列を切断すること、または１つ以上のヌクレオチドがオンターゲットのヌクレオチド配列から欠失および／または挿入され得るようにオンターゲットのヌクレオチド配列を修飾することであってもよい。

【0703】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９の標的特異性と同じまたはそれよりも高い、オンターゲットに対する標的特異性を有するＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0704】

標的特異的なＣａｓ９は、オフターゲットを操作しないＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0705】

ここで、操作は、Ｃａｓ９バリアントを使用してオフターゲットのヌクレオチド配列を切断すること、または１つ以上のヌクレオチドがオフターゲットのヌクレオチド配列から欠失および／または挿入され得るようにオフターゲットのヌクレオチド配列を修飾することであってもよい。

【0706】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性が低下したＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0707】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性が同じであり、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0708】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９と比較して、オフターゲッに対する標的特異性が同じであり、オンターゲットに対する標的特異性がより高いＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0709】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性がより高く、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0710】

標的特異的なＣａｓ９は、野性型Ｃａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性がより低く、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0711】

本明細書に開示される本開示の例示的な一実施形態では、標的特異的なＣａｓ９は標的特異的なＳｐＣａｓ９であってもよい。

【0712】

「標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）」とは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、標的特異性を相対的に高めるための、人為的操作により産生されたＳｐＣａｓ９バリアントを指す。

【0713】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、オンターゲットを操作するＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0714】

ここで、操作は、ＳｐＣａｓ９バリアントを使用してオンターゲットのヌクレオチド配列を切断すること、または１つ以上のヌクレオチドがオンターゲットのヌクレオチド配列から欠失および／または挿入され得るようにオンターゲットのヌクレオチド配列を修飾することであってもよい。

【0715】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性が同じまたはより高いＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0716】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、オフターゲットを操作しないＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0717】

ここで、操作は、ＳｐＣａｓ９バリアントを使用してオフターゲットのヌクレオチド配列を切断すること、または１つ以上のヌクレオチドがオフターゲットのヌクレオチド配列から欠失および／または挿入され得るようにオフターゲットのヌクレオチド配列を修飾することであってもよい。

【0718】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲットに対する標的特異性が低下したＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0719】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性が同じであり、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0720】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲットに対する標的特異性が同じであり、オンターゲットに対する標的特異性がより高いＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0721】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性がより高く、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0722】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲットに対する標的特異性がより低く、オフターゲットに対する標的特異性がより低いＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0723】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域のアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸が修飾されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0724】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）であってもよい。

【0725】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）であってもよい。

【0726】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）であってもよい。

【0727】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）であってもよい。

【0728】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）から選択される２つの領域であってもよい。

【0729】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）から選択される３つの領域であってもよい。

【0730】

第１領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列（領域１－１）、３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列（領域１－２）、５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列（領域１－３）、および６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列（領域１－４）であってもよい。

【0731】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）であってもよい。

【0732】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）であってもよい。

【0733】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0734】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）および７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）であってもよい。

【0735】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）および９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）のアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0736】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）および９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0737】

第２領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列（領域２－１）、７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列（領域２－２）および９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列（領域２－３）であってもよい。

【0738】

第３領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の７７５番目の位置のリシン（Ｋ７７５）から９００番目の位置のロイシン（Ｌ９００）までのアミノ酸配列（領域３－１）であってもよい。

【0739】

第４領域は、野性型ＳｐＣａｓ９の１０９９番目のグルタミン酸（Ｅ１０９９）から１１３９番目のバリン（Ｖ１１３９）までのアミノ酸配列（領域４－１）であってもよい。

【0740】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0741】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0742】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１およびＩ２８２からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0743】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0744】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0745】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0746】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＫ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0747】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0748】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－４のＩ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0749】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0750】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－２のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１およびＬ３９３からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0751】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0752】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－３のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0753】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－４のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0754】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１および領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0755】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域１－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0756】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域１－３のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0757】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域１－４のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0758】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２および領域１－４のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0759】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0760】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３および領域１－４のＫ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0761】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２および領域１－３のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0762】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２および領域１－３のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６およびＬ６０７からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0763】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２および領域１－４のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0764】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２および領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0765】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0766】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－３および領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0767】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２、領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0768】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２、領域１－３および領域１－４のＰ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0769】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のアミノ酸配列から選択される４つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0770】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｋ５１０、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｙ５１５、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｅ５８４、Ｄ５８５、Ｆ５８７、Ｎ５８８、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｎ６９２、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｑ６９５、Ｌ６９６、Ｉ６９７およびＨ６９８からなる群から選択される４つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0771】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３；Ｎ２７７；Ｇ３６６；Ｆ５３９；またはＩ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0772】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７（Ａ２０３およびＮ２７７）；Ａ２０３／Ｇ３６６；Ａ２０３／Ｆ５３９；またはＡ２０３／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0773】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＮ２７７／Ｇ３６６；Ｎ２７７／Ｆ５３９；またはＮ２７７／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0774】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＧ３６６／Ｆ５３９；Ｇ３６６／Ｉ６０１；またはＦ５３９／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0775】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0776】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｉ６０１；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１；またはＮ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0777】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0778】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0779】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0780】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０およびＩ２１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0781】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0782】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0783】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0784】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＩ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0785】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－２のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0786】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－２のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６およびＮ７６７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0787】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0788】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0789】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域２－３のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0790】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２および領域２－３のＰ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0791】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0792】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0793】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３；Ｄ９６５；またはＦ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0794】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｄ９６５；Ｍ７６３／Ｆ１０３８；またはＤ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0795】

さらに別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0796】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0797】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0798】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0799】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0800】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0801】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0802】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0803】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２またはＤ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0804】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0805】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第２領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0806】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0807】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびにそれぞれ野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0808】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３；Ｇ３６６／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0809】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５； Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0810】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0811】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0812】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0813】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0814】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0815】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｋ８９０；Ｆ５３９／Ｋ８９０；またはＩ６０１／Ｋ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0816】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0817】

さらに別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0818】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０；またはＮ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0819】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0820】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0821】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0822】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0823】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＩ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0824】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0825】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0826】

例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＮ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0827】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ１１２７；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0828】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0829】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0830】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0831】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０；Ｋ８９０／Ｄ９６５；またはＫ８９０／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0832】

別の一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；またはＫ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0833】

さらに別の一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0834】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0835】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0836】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0837】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｔ１１０２；Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＦ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0838】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＤ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0839】

さらに別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＭ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0840】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0841】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0842】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0843】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０／Ｔ１１０２；Ｋ８９０／Ｄ１１２７；またはＫ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0844】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第３領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0845】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0846】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0847】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｍ７６３／／Ｋ８９０Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0848】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0849】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0850】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0851】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0852】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0853】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0854】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／／Ｄ９６５Ｔ１１０２；Ａ２０３／／Ｆ１０３８Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0855】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0856】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0857】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0858】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0859】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0860】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0861】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0862】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0863】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0864】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0865】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＫ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0866】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＫ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0867】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７またはＭ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0868】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域のアミノ酸配列から選択される３つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、３つ以上のアミノ酸はそれぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0869】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0870】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸；ならびに野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0871】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｍ７６３／／Ｋ８９０Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／／Ｋ８９０Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0872】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｍ７６３／／Ｋ８９０Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＩ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0873】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0874】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＦ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0875】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0876】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＧ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0877】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0878】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；Ａ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７；またはＡ２０３／Ｎ２７７／Ｇ３６６／Ｆ５３９／Ｉ６０１／Ｍ７６３／Ｋ８９０／Ｄ９６５／Ｆ１０３８／Ｔ１１０２／Ｄ１１２７を修飾することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0879】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を除去することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0880】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７；野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９；野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８；ならびに／または野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を除去することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0881】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0882】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0883】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0884】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0885】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0886】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＧ３６６（ハイドロパシー指数：－０．４）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0887】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＧ３６６（ハイドロパシー指数：－０．４）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0888】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0889】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0890】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0891】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0892】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）、Ｆ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）およびＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、それぞれ相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0893】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＧ３６６（ハイドロパシー指数：－０．４）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0894】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0895】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＮ２７７（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアラニン、システイン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0896】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＮ２７７（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばヒスチジン（ハイドロパシー指数：－３．２）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0897】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0898】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）、Ｎ２７７（ハイドロパシー指数：－３．５）、Ｇ３６６（ハイドロパシー指数：－０．４）、Ｆ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）およびＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、それぞれ相対的に低いまたは高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0899】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＮ２７７（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるヒスチジン（ハイドロパシー指数：－３．２）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＧ３６６（ハイドロパシー指数：－０．４）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0900】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0901】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0902】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0903】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0904】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0905】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３を相対的に大きい官能基を有するアミノ酸であるアスパラギン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0906】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0907】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１、領域１－２、領域１－３および／または領域１－４のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９およびＩ６０１を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0908】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３およびＮ２７７、領域１－２のＧ３６６、ならびに領域１－３のＩ６０１を、それぞれ相対的に大きい官能基を有するアミノ酸であるアスパラギン酸、ヒスチジン、セリンおよびアスパラギンで置換し、領域１－３のＦ５３９を、相対的に小さい官能基を有するセリンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0909】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0910】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３にＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することであってもよい。

【0911】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の２－２領域のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９であってもよい。

【0912】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0913】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸、たとえばアラニン、システイン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0914】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0915】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）およびＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0916】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の２－３領域のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0917】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0918】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３７および／またはＦ１０３８を、相対的に低い官能基を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0919】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0920】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３７（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアルギニン（ハイドロパシー指数：－４．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0921】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に低いまたは高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0922】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－１、領域２－２および／または領域２－３のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）、Ｄ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）およびＦ１０３８（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いまたは高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0923】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の２－３領域のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の２－３領域のＦ１０３８（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0924】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0925】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0926】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0927】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0928】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を非荷電アミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0929】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0930】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるグルタミンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0931】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0932】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0933】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０および／またはＫ８９６を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、セリン、トレオニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0934】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸であるアスパラギン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0935】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９６を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0936】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0937】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0938】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0939】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってよもよい。

【0940】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0941】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＳ１１０６を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、システイン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0942】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＳ１１０６（ハイドロパシー指数：－０．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数であるグリシン（ハイドロパシー指数：－０．４）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってよもよい。

【0943】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0944】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２およびＳ１１３６を、相対的に低いまたは高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0945】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９のＳ１１０６（ハイドロパシー指数：－０．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するグリシン（ハイドロパシー指数：－０．４）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0946】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0947】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に小さい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0948】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に小さい官能基を有するプロリンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0949】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0950】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0951】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0952】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される２つ以上のアミノ酸を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0953】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２およびＤ１１２７を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0954】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に小さい官能基を有するプロリンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0955】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域、第２領域、第３領域および／または第４領域のアミノ酸配列から選択される２つ以上のアミノ酸を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、２つ以上のアミノ酸は、それぞれ異なる領域に存在してもよい。

【0956】

ここで、異なる領域で選択された１つ以上のアミノ酸の置換に関する説明は、上記と同じである。

【0957】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0958】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0959】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0960】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、システイン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0961】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0962】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0963】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0964】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0965】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0966】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0967】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９および／またはＩ６０１を、極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0968】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９およびＩ６０１を、それぞれ極性アミノ酸であるトレオニンおよびグルタミン酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0969】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0970】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0971】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0972】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0973】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0974】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0975】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0976】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0977】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３７および／またはＦ１０３８を、極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0978】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0979】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３７および／またはＦ１０３８を、極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0980】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0981】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0982】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0983】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0984】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３７および／またはＦ１０３８を、極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0985】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0986】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；および野性型ＳｐＣａｓ９の第４領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0987】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0988】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0989】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0990】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0991】

ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の第１領域のアミノ酸配列から選択される１つ以上のアミノ酸；野性型ＳｐＣａｓ９の第２領域のアミノ酸配列において選択される１つ以上のアミノ酸；および／または野性型ＳｐＣａｓ９の第３領域のアミノ酸配列において選択される１つ以上のアミノ酸を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0992】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0993】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９（ハイドロパシー指数：２．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるセリン（ハイドロパシー指数：－０．８）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０（ハイドロパシー指数：－３．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0994】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９および／またはＩ６０１を、極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、それぞれ非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0995】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９を、極性アミノ酸であるセリンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0996】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１を、極性アミノ酸であるグルタミン酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0997】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９とＩ６０１とを、それぞれ極性アミノ酸であるセリンとアスパラギンとで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、極性アミノ酸であるチロシンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0998】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９および／またはＩ６０１を、それぞれ極性アミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、リシン、セリン、トレオニンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【0999】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１を、極性アミノ酸であるアスパラギンで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1000】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＦ５３９とＩ６９０１とを、それぞれ極性アミノ酸であるセリンとアスパラギンとで置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1001】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）および／またはＡ７６４（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるシステイン、イソロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を、非荷電アミノ酸であるアラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1002】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３（ハイドロパシー指数：１．８）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン酸（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＦ１０３８を、非荷電アミノ酸であるアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1003】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアラニン、システイン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、リシン、プロリン、セリン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1004】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－３のＩ６０１（ハイドロパシー指数：４．５）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるアスパラギン（ハイドロパシー指数：－３．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３（ハイドロパシー指数：１．９）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるイソロイシン（ハイドロパシー指数：４．５）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－３のＤ９６５（ハイドロパシー指数：－３．５）を、相対的に高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるチロシン（ハイドロパシー指数：－１．３）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２（ハイドロパシー指数：－０．７）を、相対的に低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸であるプロリン（ハイドロパシー指数：－１．６）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1005】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３およびＮ２７７、領域１－２のＧ３６６、ならびに領域１－３のＦ５３９およびＩ６０１からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３、領域２－３のＤ９５６およびＦ１０３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を非荷電アミノ酸で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域４－１のＴ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を、相対的に小さいまたは大きい官能基を有するアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1006】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－２のＧ３６６、領域１－３のＦ５３９およびＩ６０１を、それぞれセリン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）、セリン（相対的に小さい官能基を有するアミノ酸）およびアスパラギン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）で置換し、領域２－２のＭ７６３および領域２－３のＦ１０３８を、それぞれイソロイシン（相対的に小さい官能基を有するアミノ酸）およびチロシン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）で置換し、領域３－１のＫ８９０を非荷電アスパラギンで置換し、領域４－１のＤ１１２７を、相対的に大きい官能基を有するグルタミン酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1007】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９の領域１－１のＡ２０３およびＮ２７７、１－２のＧ３６６、領域１－３のＦ５３９およびＩ６０１を、それぞれアスパラギン酸（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）、ヒスチジン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）、セリン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）、セリン（相対的に小さい官能基を有するアミノ酸）およびアスパラギン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域２－２のＭ７６３ならびに領域２－３のＤ９５６およびＦ１０３８を、それぞれイソロイシン（相対的に小さい官能基を有するアミノ酸）、チロシン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）およびチロシン（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）で置換し、野性型ＳｐＣａｓ９の領域３－１のＫ８９０を非荷電アスパラギンで置換し、領域４－１のＴ１１０２およびＤ１１２７を、それぞれプロリン（相対的に小さい官能基を有するアミノ酸）およびグルタミン酸（相対的に大きい官能基を有するアミノ酸）で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1008】

本明細書に開示されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９の例として、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３および／またはＫ８９０を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1009】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９を、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファンおよびチロシンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1010】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９をセリンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｆ５３９をセリンに置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ）のＲＥＣドメインとｇＲＮＡの標的配列および／またはＰＡＭの遠位端との間の相互作用が変化し得るＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1011】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３を、システイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択される１つのアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1012】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３をイソロイシンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｍ７６３をイソロイシンに置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｍ７６３Ｉ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｍ７６３Ｉ）のＲｕｖＣドメインと金属との間の相互作用が変化し得るＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1013】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０を、アラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1014】

たとえば、ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０をアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｋ８９０をアスパラギンで置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｋ８９０Ｎ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｋ８９０Ｎ）のＨＮＨドメインと金属との間の相互作用が変更されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1015】

別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９とＭ７６３とを、それぞれ元のアミノ酸とは異なるアミノ酸とで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1016】

ここで、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択されるアミノ酸であってもよい。

【1017】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９とＭ７６３とを、それぞれセリンとイソロイシンとで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｆ５３９とＭ７６３とが、それぞれセリンとイソロイシンとで置換されたＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ）のＲＥＣドメインとｇＲＮＡの標的配列および／またはＰＡＭの遠位端との間の相互作用ならびにＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ）のＲｕｖＣドメインと金属との間の相互作用が変更されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1018】

さらに別の例示的な実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９およびＫ８９０を、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1019】

ここで、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択されるアミノ酸であってもよい。

【1020】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９とＫ８９０とを、それぞれセリンとアスパラギンとで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｆ５３９とＫ８９０とを、それぞれセリンとアスパラギンとで置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｋ８９０Ｎ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｋ８９０Ｎ）のＲＥＣドメインとｇＲＮＡの標的配列および／またはＰＡＭの遠位端との間の相互作用ならびにＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｋ８９０Ｎ）のＨＮＨドメインと金属との間の相互作用が変更されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1021】

別の例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３およびＫ８９０を元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1022】

ここで、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸は、アラニン、アスパラギン、システイン、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンからなる群から選択されるアミノ酸であってもよい。

【1023】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３とＫ８９０とを、それぞれイソロイシンとアスパラギンとで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。ここで、Ｍ７６３とＫ８９０とを、それぞれイソロイシンとアスパラギンとで置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）のＲｕｖＣドメインと金属との間の相互作用ならびにＳｐＣａｓ９（Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）のＨＮＨドメインと金属との間の相互作用が変更されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1024】

例示的な一実施形態では、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０を、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1025】

ここで、元のアミノ酸とは異なるアミノ酸は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リシン、メチオニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンおよびバリンからなる群から選択されるアミノ酸であってもよい。

【1026】

たとえば、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０を、セリン、イソロイシンおよびアスパラギンで置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアント（配列番号１１）であってもよい。ここで、Ｆ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０を、それぞれセリン、イソロイシンおよびアスパラギンで置換することにより形成されるＴＳ－ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）のＲＥＣドメインとｇＲＮＡの標的配列および／またはＰＡＭの遠位端との間の相互作用、ならびにＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）のＲｕｖＣドメインと金属との間の相互作用、ならびにＳｐＣａｓ９（Ｆ５３９Ｓ、Ｍ７６３Ｉ、Ｋ８９０Ｎ）のＨＮＨドメインと金属との間の相互作用が変更されたＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1027】

本明細書に開示される本開示の例示的な一実施形態では、人為的に改変されたＣａｓ９は融合タンパク質であってもよい。

【1028】

融合タンパク質は、標的特異的なＣａｓ９と１つ以上の機能ドメインとを含む人為的に産生されたタンパク質であってもよい。

【1029】

標的特異的なＣａｓ９の説明は上記で提供されている。

【1030】

機能ドメインの説明は上記で提供されている。

【1031】

たとえば、融合タンパク質は、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９およびデアミナーゼを含む人為的に産生されたタンパク質であってもよい。

【1032】

ここで、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＤ１０、Ｆ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０を、それぞれ元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1033】

あるいは、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３、Ｈ８４０およびＫ８９０を、それぞれ元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1034】

あるいは、ＴＳ－ＳｐＣａｓ９は、野性型ＳｐＣａｓ９のＤ１０、Ｆ５３９、Ｍ７６３、Ｈ８４０およびＫ８９０を、それぞれ元のアミノ酸とは異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアントであってもよい。

【1035】

ここで、デアミナーゼは、アデニンデアミナーゼおよび／またはシチジンデアミナーゼであってもよい。

【1036】

ここで、融合タンパク質は、デアミナーゼがＴＳ－ＳｐＣａｓ９のＮ末端に融合された形態で人為的に産生されたタンパク質であってもよい。

【1037】

あるいは、融合タンパク質は、デアミナーゼがＴＳ－ＳｐＣａｓ９のＣ末端に融合された形態で人為的に産生されたタンパク質であってもよい。

【1038】

あるいは、融合タンパク質は、同じまたは異なるデアミナーゼが、それぞれＴＳ－ＳｐＣａｓ９のＮ末端およびＣ末端に融合された形態で人為的に産生されたタンパク質であってもよい。

【1039】

本明細書に開示されるＣＲＩＳＰＲ酵素、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアント、Ｃａｓ９、人為的に改変されたＣａｓ９、Ｃａｓ９バリアントまたは標的特異的なＣａｓ９は、ポリペプチドまたはタンパク質であってもよい。

【1040】

本明細書に開示されるＣＲＩＳＰＲ酵素、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアント、Ｃａｓ９、人為的に改変されたＣａｓ９、Ｃａｓ９バリアントまたは標的特異的なＣａｓ９は、ポリペプチドまたはタンパク質をコードするヌクレオチド配列を有する核酸であってもよい。

【1041】

ＣＲＩＳＰＲ酵素、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアント、Ｃａｓ９、人為的に改変されたＣａｓ９、Ｃａｓ９バリアント、または標的特異的なＣａｓ９は、導入される対象に対してコドン最適化されてもよい。

【1042】

「コドン最適化」という用語は、天然配列の少なくとも１つのコドンを、宿主細胞においてより高頻度または最も高頻度で使用されるコドンにより置き換える一方、天然アミノ酸配列を維持することにより核酸配列を修飾して宿主細胞内での発現を向上させるためのプロセスを指す。さまざまな種は、特定のアミノ酸の特定のコドンについて特定のバイアスを有し、コドンバイアス（生物間のコドン使用頻度の差）は、ｍＲＮＡの翻訳の効率と相関することが多く、このことは、翻訳されるコドンの特性と特定のｔＲＮＡ分子の入手可能性に依存すると考えられる。細胞内で選択されるｔＲＮＡの優位性は、一般的にペプチド合成において最も高頻度で使用されるコドンを反映している。したがって、遺伝子は、所与の生物中の最適な遺伝子発現のためにコドン最適化に基づき個別に調整され得る。

【1043】

ポリペプチドまたはタンパク質をコードするヌクレオチド配列を有する核酸は、非ベクターの形態であってもよい。

【1044】

非ベクターは、裸のＤＮＡ、ＤＮＡ複合体またはｍＲＮＡであってもよい。

【1045】

ポリペプチドまたはタンパク質をコードするヌクレオチド配列を有する核酸は、ベクターに含まれてもよい。

【1046】

ここで、ポリペプチドまたはタンパク質をコードするヌクレオチド配列を有する核酸は、１つのベクターに含まれていても、分割されていくつかのベクターに含まれていてもよい。

【1047】

ベクターはプラスミドであってもよい。

【1048】

ベクターは、ウイルスベクターでも非ウイルスベクターであってもよい。

【1049】

ベクターは、１つ以上の調節／制御コンポーネントを含んでいてもよい。

【1050】

ここで、調節／制御コンポーネントは、プロモーター、エンハンサー、イントロン、ポリアデニル化シグナル、コザックコンセンサス配列、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、スプライスアクセプターおよび／または２Ａ配列を含んでいてもよい。

【1051】

プロモーターは、ＲＮＡポリメラーゼＩＩによって認識されるプロモーターであってもよい。

【1052】

プロモーターは、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩによって認識されるプロモーターであってもよい。

【1053】

プロモーターは、誘導性プロモーターであってもよい。

【1054】

プロモーターは、対象特異的なプロモーターであってもよい。

【1055】

プロモーターは、ウイルス性または非ウイルス性プロモーターであってもよい。

【1056】

プロモーターは、制御領域（すなわち、ガイド核酸またはエディタータンパク質をコードする核酸配列）に応じて適切なプロモーターを使用してもよい。

【1057】

たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素に有用なプロモーターは、ＣＭＶ、ＥＦ－１ａ、ＥＦＳ、ＭＳＣＶ、ＰＧＫまたはＣＡＧプロモーターであってもよい。

【1058】

ベクターは、ウイルスベクターまたは組換えウイルスベクターであってもよい。

【1059】

ウイルスは、ＤＮＡウイルスまたはＲＮＡウイルスであってもよい。

【1060】

ここで、ＤＮＡウイルスは、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）ウイルスまたは一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）ウイルスであってもよい。

【1061】

ここで、ＲＮＡウイルスは、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスであってもよい。

【1062】

ウイルスは、レトロウイルス、レンチウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ワクシニアウイルス、ポックスウイルスまたは単純ヘルペスウイルスであってもよいが、本発明はこれらに限定されない。

【1063】

一般的に、ウイルスは宿主（たとえば細胞）に感染し得、それによってウイルスの遺伝情報をコードする核酸を宿主に導入するか、または遺伝情報をコードする核酸を宿主ゲノムに挿入する。そのような特徴を有するウイルスを使用して、ガイド核酸および／またはエディタータンパク質を対象に導入することができる。ウイルスを使用して導入されたガイド核酸および／またはエディタータンパク質は、対象（たとえば細胞）内で一時的に発現され得る。あるいは、ウイルスを使用して導入されたガイド核酸および／またはエディタータンパク質は、長期間にわたって（たとえば、１、２もしくは３週間、１、２、３、６もしくは９か月、１年もしくは２年、または恒久的に）対象（たとえば細胞）内で連続的に発現され得る。

【1064】

ウイルスのパッケージング容量は、ウイルスの種類に応じて、少なくとも２～５０ｋｂで異なり得る。パッケージング容量に応じて、ＣＲＩＳＰＲ酵素のみを含むウイルスベクター、またはＣＲＩＳＰＲ酵素とｇＲＮＡとを含むウイルスベクターを設計することができる。あるいは、ＣＲＩＳＰＲ酵素、ｇＲＮＡおよび追加のコンポーネントを含むウイルスベクターを設計することができる。

【1065】

一例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする核酸は、組換えレンチウイルスベクターに含まれていてもよい。

【1066】

別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする核酸は、組換えアデノウイルスベクターに含まれていてもよい。

【1067】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする核酸は、組換えＡＡＶベクターに含まれていてもよい。

【1068】

さらに別の例では、ＣＲＩＳＰＲ酵素をコードする核酸は、ハイブリッドベクター、たとえば、本明細書に開示されるウイルスのうちの１つ以上のハイブリッドベクターに含まれていてもよい。

【1069】

本明細書に開示される例示的な一実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを使用するために、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントをコードする核酸を発現させ得る。発現は様々な方法で実施できる。たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントをコードする核酸は、クローニングおよび／または発現のために原核細胞または真核細胞への形質導入用の中間ウイルスにクローニングできる。ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを産生するためのＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントをコードする核酸の保存または操作のために、中間ベクターは、通常、プラスミド、シャトルベクターまたは昆虫ベクターなどの原核生物ベクターである。さらに、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントの核酸は、植物細胞、動物細胞、好ましくは哺乳類細胞もしくはヒト細胞、真菌細胞、細菌細胞、または原生動物細胞に導入するための発現ベクターにクローニングできる。

【1070】

発現を達成するために、通常、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントをコードする配列は、転写を指示するプロモーターを含む発現ベクターにサブクローニングされる。改変されたタンパク質を発現するための細菌発現系は、たとえば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）およびサルモネラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐ．）から得ることができる。発現系のキットが市販されている。哺乳類、酵母および昆虫細胞用の真核細胞発現系が、当該技術分野で広く知られており、市販もされている。

【1071】

核酸発現を指示するために使用されるプロモーターは、特定の用途に依存する。たとえば、典型的に強力な構成的プロモーターを使用して、融合タンパク質を発現および増殖させる。対照的に、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントが遺伝子調節のために生体に導入される場合、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントの特定の用途に応じて、構成的または誘導性プロモーターを使用してもよい。さらに、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを導入するための好ましいプロモーターは、弱いプロモーター、たとえば、ＨＳＶ ＴＫまたは同様の活性を有するプロモーターであってもよい。プロモーターはまた、転写活性化応答エレメント、たとえば、低酸素応答エレメント、Ｇａｌ４応答エレメント、ｌａｃ阻害剤応答エレメント、ならびに小分子制御系、たとえば、テトラサイクリン制御系およびＲＵ－４８６系を含んでいてもよい。

【1072】

プロモーターに加えて、発現ベクターは、通常、原核細胞または真核細胞などの宿主細胞での核酸発現に必要な追加のエレメントを含む転写ユニットまたは発現カセットを含む。したがって、典型的な発現カセットは、たとえば、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントをコードする核酸配列に作動可能に連結されたプロモーター、ならびにたとえば、転写物の効果的なポリアデニル化、転写終結、リボソーム結合部位または翻訳終結に必要なランダムシグナルを含んでいてもよい。カセットの追加のエレメントは、たとえば、エンハンサーおよびスプライスされた異種イントロンシグナルを含んでいてもよい。

【1073】

遺伝情報を細胞に伝達するための特定の発現ベクターは、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントの使用の必要性、たとえば、植物、動物、細菌、真菌、原生動物などでの発現に関して選択される。標準的な細菌発現ベクターは、プラスミド、たとえば、ｐＢＲ３２２ベースのプラスミド、ｐＳＫＦおよびｐＥＴ２３Ｄ、ならびに市販のタグ融合発現系、たとえば、ＧＳＴおよびＬａｃＺを含む。

【1074】

真核細胞ウイルスに由来する調節エレメントを含む発現ベクターは、真核生物発現ベクター、たとえば、ＳＶ４０ベクター、乳頭腫ウイルスベクター、またはエプスタインバーウイルスに由来するベクターで頻繁に使用される。他の例示的な真核生物ベクターは、ｐＭＳＧ、ｐＡＶ００９／Ａ＋、ｐＭＴＯ１０／Ａ＋、ｐＭＡＭｎｅｏ－５、バキュロウイルス、ｐＤＳＶＥ、およびＳＶ４０初期プロモーター、ＳＶ４０後期プロモーター、メタロチオネインプロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ポリヘドリンプロモーター、または真核細胞内での発現に有効であることが示されている他のプロモーターの指示下でタンパク質発現を可能にする他のベクターを含む。

【1075】

ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを発現するためのベクターは、ガイドＲＮＡの発現を誘導するためのＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩＩプロモーター、たとえば、Ｈ１、Ｕ６または７ＳＫプロモーターを含んでいてもよい。そのようなヒトプロモーターにより、プラスミドトランスフェクション後の哺乳類細胞内でのＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントの発現が可能になる。

【1076】

いくつかの発現系は、安定的にトランスフェクトされた細胞株を選択するためのマーカー、たとえば、チミジンキナーゼ、ハイグロマイシンＢホスホトランスフェラーゼ、およびジヒドロ葉酸還元酵素を有する。たとえば、昆虫細胞におけるポリヘドリンプロモーターまたは他の強力なバキュロウイルスプロモーターの指示下でｇＲＮＡをコードする配列に加えてバキュロウイルスベクターを使用する高収率発現系も適している。

【1077】

通常、発現ベクターに含まれるエレメントは、大腸菌で機能するレプリコン、組換えプラスミドを含む細菌の選択を可能にする抗生物質耐性をコードする遺伝子、および組換え配列の挿入を可能にするプラスミドの非必須領域のユニークな制限部位も含む。

【1078】

大量のタンパク質を発現する細菌、哺乳類、酵母または昆虫の細胞株は、標準的なトランスフェクション法を使用して産生され、標準的な技術を使用して精製される（たとえば、Ｃｏｌｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４：１７６１９－２２；Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．１８２（Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，ｅｄ．，１９９０）を参照）。真核細胞および原核細胞の形質転換は、標準的な手法に従って実施される（たとえば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９７７，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．１３２：３４９－３５１；Ｃｌａｒｋ－Ｃｕｒｔｉｓｓ ＆ Ｃｕｒｔｉｓｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １０１：３４７－３６２（Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ，１９８３）を参照）。

【1079】

外来ヌクレオチド配列を宿主細胞に導入するための任意の既知の手順を使用してもよい。これらの手順には、リン酸カルシウムトランスフェクション、ポリブレン、プロトプラスト融合、エレクトロポレーション、ヌクレオフェクション、リポソーム、マイクロインジェクション、裸のＤＮＡ、プラスミドベクター、ウイルスベクター、エピソームおよび組込み型ベクター、およびクローンゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、合成ＤＮＡまたは他の外来遺伝物質を宿主細胞に導入するための他の広く知られている方法が含まれる。本明細書で使用される特定の遺伝子操作手順は、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを発現できる宿主細胞に少なくとも１つの遺伝子を首尾よく導入する必要がある。

【1080】

本明細書に開示される例示的な一実施形態では、ＣＲＩＳＰＲ酵素バリアントおよび／またはＣａｓ９バリアントを発現することができるベクターと、このベクターを含む細胞とが提供され得る。

【実施例】

【1081】

以下、実施例を参照して本発明を詳細に説明する。

【1082】

実施例は、本発明をさらに詳細に説明するために提供しているに過ぎず、本発明の範囲が以下の実施例に限定されないことは当業者には明らかであろう。
例１．Ｃａｓ９バリアント
１．Ｃａｓ９バリアントライブラリー

【1083】

ＳｐＣａｓ９バリアントライブラリーを、３つの独立したプロトコルを使用して構築した。第１のライブラリーでは、Ｃａｓ９ライブラリープラスミドをＸＬ１－Ｒｅｄコンピテントセル（Ａｇｉｌｅｎｔ）に形質転換し、ベンダーのマニュアルの指示に従って培養した。第２と第３のライブラリーに関しては、Ｇｅｎｅｍｏｒｐｈ ＩＩ（Ａｇｉｌｅｎｔ）およびＤｉｖｅｒｓｉｆｙ ＰＣＲランダム変異誘発キット（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を使用して、ギブソン・アッセンブリー用に設計されたプライマーを用いた低エラー率（０～５つの突然変異／ｋｂ）の条件下で、Ｃａｓ９ライブラリープラスミド配列からのＷＴ－ＳｐＣａｓ９全体で、エラープローンＰＣＲを実施した。その後、ＰＣＲ産物をゲル精製した。精製されたランダムに突然変異誘発されたライブラリーとＣａｓ９ライブラリープラスミドの骨格とをギブソン・アッセンブリーにより組み立てた。組み立てられたライブラリーをＥｎｄｕｒａＴＭエレクトロコンピテントセル（Ｌｕｃｉｇｅｎ）に形質転換し、クロラムフェニコールＬＢプレート（１２．５μｇ／ｍＬ）で３７℃にて一晩インキュベートした。形質転換細胞を培養した後、Ｍｉｄｉプレップキット（ＮｕｃｌｅｏＢｏｎｄ Ｘｔｒａ Ｍｉｄｉ ＥＦ、Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌ）を使用して各ライブラリーを単離および精製した。得られたライブラリーは、標的特異的Ｃａｓ９スクリーニング法（国際公開第２０１７２１７７６８号）とマルチ標的システムとを使用してスクリーニングし、それによって標的特異的なＣａｓ９バリアントを選択した。
２－１．標的特異的なＣａｓ９バリアントをコードするプラスミド

【1084】

野性型ＳｐＣａｓ９（ｐ３ｓ－Ｃａｓ９ＨＣ；Ａｄｄｇｅｎｅプラスミド＃４３９４５）をコードするプラスミドを購入し、標的特異的なＳｐＣａｓ９バリアントを産生するために使用した。標的特異的なＳｐＣａｓ９バリアントの構築物は、所望の部位変異およびｐ３ｓ－Ｃａｓ９ＨＣプラスミド骨格を含む核酸配列のギブソン・アッセンブリーにより産生した。すべての構築物をサンガーシーケンシングにより確認した。
２－２．標的特異的なＣａｓ９バリアントをコードするプラスミド

【1085】

野性型ＳｐＣａｓ９（ｐ３ｓ－Ｃａｓ９ＨＣ；Ａｄｄｇｅｎｅプラスミド＃４３９４５）をコードするプラスミドを購入し、標的特異的なＳｐＣａｓ９バリアントを産生するために使用した。標的特異的なＳｐＣａｓ９バリアントを産生するために、部位特異的変異誘発キットを使用して、野性型ＳｐＣａｓ９エンコードプラスミドで部位変異を含む構築物を生成した。すべての構築物をサンガーシーケンシングにより確認した。
例２．Ｃａｓ９バリアントの標的遺伝子操作効果
［実験方法］
１．細胞培養およびトランスフェクション条件

【1086】

ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ－１１２６８）を、１０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清）および１％抗生物質を補足したＤＭＥＭ培地で維持した。Ｃａｓ９バリアントによる遺伝子操作のために、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞をトランスフェクション前にコンフルエンシーが７０～８０％になるまで４８ウェルプレートに播種した。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、Ｃａｓ９バリアント発現プラスミド（２５０ｎｇ）およびｓｇＲＮＡ発現プラスミド（２５０ｎｇ）を細胞にトランスフェクトした。トランスフェクションの７２時間後に、ＤＮｅａｓｙ Ｂｌｏｏｄ＆Ｔｉｓｓｕｅ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用してゲノムＤＮＡを単離および抽出した。
２．ゲノムＤＮＡのインビトロ切断

【1087】

ＤＮｅａｓｙ Ｂｌｏｏｄ＆Ｔｉｓｓｕｅ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して、ゲノムＤＮＡをＨＥＫ２９３Ｔ細胞から精製した。ゲノムＤＮＡ（１０μｇ）を、Ｃａｓ９またはＳｎｉｐｅｒ１タンパク質（１００ｎＭ）および４つのｓｇＲＮＡ（各７５ｎＭ）とともに、反応体積１ｍＬでバッファー（１００ｍＭ ＮａＣｌ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１００μｇ／ｍＬ ＢＳＡ、ｐＨ７．９）中３７℃で８時間インキュベートした。消化されたゲノムＤＮＡをＲＮａｓｅ Ａ（５０μｇ／ｍＬ）で処理してｓｇＲＮＡを分解し、ＤＮｅａｓｙ Ｂｌｏｏｄ＆Ｔｉｓｓｕｅ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて再度精製した。
３．全ゲノムおよびｄｉｇｅｎｏｍｅシーケンシング

【1088】

Ｃｏｖａｒｉｓシステム（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用してゲノムＤＮＡ（１μｇ）を４００～５００ｂｐの範囲に断片化し、Ｅｎｄ Ｒｅｐａｉｒ Ｍｉｘ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｃｈｅｒ）を使用して断片の両端を平滑末端化した。ライブラリーを構築するために、断片化されたＤＮＡをアダプターとライゲーションし、その後、ＭａｃｒｏｇｅｎにおいてＨｉＳｅｑ Ｘ Ｔｅｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｒ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）を使用して全ゲノムシーケンシングに供した。全ゲノムシーケンシングは、３０～４０倍のシーケンス深度で実施した。Ｄｉｇｅｎｏｍｅ １．０プログラムを使用して、ＤＮＡ切断部位を同定した。
４．標的化ディープシーケンシング

【1089】

標的部位と潜在的なオフターゲット部位とを、標的化ディープシーケンシングにより分析した。ディープシーケンシングライブラリーをＰＣＲにより産生した。ＴｒｕＳｅｑ ＨＴ Ｄｕａｌ Ｉｎｄｅｘプライマーを使用して、各サンプルにラベルを付けた。プールされたライブラリーを、ＭｉｎｉＳｅｑを使用してペアエンドシーケンシングに供した。
［実験結果］

【1090】

この例では、ＳｐＣａｓ９バリアントの標的遺伝子操作効果を確認するために、さまざまな遺伝子を標的として使用して、標的遺伝子に応じたＳｐＣａｓ９バリアントのインデル（％）効果を確認した。ここで、ＳｐＣａｓ９バリアントの効果を各領域で確認した。
１．ＳｐＣａｓ９の第１領域バリアント

【1091】

実験では、ＳｐＣａｓ９の第１領域のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９およびＩ６０１を、それぞれ異なるアミノ酸で置換することにより形成される合計５つのＳｐＣａｓ９バリアント（Ａ２０３Ｄ、Ｎ２７７Ｈ、Ｇ３６６Ｓ、Ｆ５３９ＳおよびＩ６０１Ｎ）を使用した。

【1092】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９）、標的配列とは異なる配列は小文字で示される）、すべてのＳｐＣａｓ９バリアントについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加し、オフターゲット部位でのインデル頻度は減少し、これは、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率が低かったということである（図１）。特に、Ａ２０３Ｄ、Ｆ５３９ＳおよびＩ６０１Ｎの場合、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度と類似しているが、オフターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して一定レベル未満に低下することが確認された。

【1093】

さらに、ＥＭＸ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＡＧＴＣＣＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３０）／非標的配列：ＧＡＧＴｔａＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３１）、すべてのＳｐＣａｓ９バリアントについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、インデル頻度はオンターゲット部位で増加し、オフターゲット部位で減少し、これは、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率が低かったということである（図２）。特に、Ｇ３６６Ｓの場合、オフターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度と類似しているが、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度よりも高いことが確認された。さらに、Ｆ５３９ＳおよびＩ６０１Ｎの場合、オフターゲット部位でのインデル頻度は、ほとんど示されないか、野性型ＳｐＣａｓ９の半分にまで低下していることが確認された。

【1094】

ＶＥＧＦＡ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧＣＧＴＧ（配列番号３２）／非標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧｔＧＴＧ（配列番号３３））、すべてのＳｐＣａｓ９バリアントについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加するか、または野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度と類似していた（図３）。特に、Ｆ５３９Ｓの場合、オフターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度と類似していたが、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度よりも１０％以上高かった。

【1095】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の第１領域のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９およびＩ６０１を異なるアミノ酸で置換することにより形成される合計５つのＳｐＣａｓ９バリアントが、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性が改善されていることが確認できる。
２．ＳｐＣａｓ９の第２領域バリアント

【1096】

実験では、ＳｐＣａｓ９の第２領域のＭ７６３、Ｄ９６５およびＦ１０３８を異なるアミノ酸で置換することにより形成される３つのＳｐＣａｓ９バリアント（Ｍ７６３Ｉ、Ｄ９６５ＹおよびＦ１０３８Ｙ）ならびにＳｐＣａｓ９の第２領域のＭ７６３／Ｆ１０３８とＤ９６５／Ｆ１０３８とを異なるアミノ酸で置換することにより形成される２つのＳｐＣａｓ９バリアント（Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙ）を使用した。

【1097】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９））、すべてのＳｐＣａｓ９バリアントについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加し、オフターゲット部位でのインデル頻度は減少するか、またはオフターゲット部位でのインデル頻度は、オンターゲット部位でのインデル頻度よりも低かった（図４）。特に、Ｍ７６３Ｉの場合、オフターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度と類似しているが、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度よりも高いことが確認された。さらに、Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙの場合、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９のインデル頻度よりわずかに低いが、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は、野性型ＳｐＣａｓ９の頻度よりも低いことが確認された。したがって、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、ＳｐＣａｓ９バリアントは標的特異性を有することが確認された（図５）。

【1098】

さらに、ＥＭＸ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＡＧＴＣＣＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３０）／非標的配列：ＧＡＧＴｔａＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３１））、Ｍ７６３Ｉについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに低下したが、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低かった。したがって、Ｍ７６３Ｉは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有する（図６）。さらに、Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙの場合、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、オンターゲット部位でのインデル頻度は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、同等または有意に高かった（図７）。

【1099】

ＶＥＧＦＡ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧＣＧＴＧ（配列番号３２）／非標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧｔＧＴＧ（配列番号３３））、Ｍ７６３Ｉについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は類似していたが、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、したがって、Ｍ７６３Ｉの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、これは、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率が低いということであり、したがって、Ｍ７６３Ｉは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図８）。

【1100】

ＨＢＢ０３遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３４）／非標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣｔＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３５））、Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度は半分以下に減少するが、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加またはわずかに減少することが確認された（図９）。

【1101】

ＨＢＢ０４遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３６）／非標的配列：ＣＣＡＣａＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３７））、Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加または類似することが確認された（図１０）。

【1102】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の第２領域のＭ７６３、Ｄ９６５およびＦ１０３８を異なるアミノ酸で置換することにより形成される３つのＳｐＣａｓ９バリアント（Ｍ７６３Ｉ、Ｄ９６５ＹおよびＦ１０３８Ｙ）ならびにＳｐＣａｓ９の第２領域のＭ７６３／Ｆ１０３８およびＤ９６５／Ｆ１０３８を異なるアミノ酸で置換することにより形成される２つのＳｐＣａｓ９バリアント（Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８ＹおよびＤ９６５Ｙ／Ｆ１０３８Ｙ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性が向上したことを確認できる。
３．ＳｐＣａｓ９の第３領域バリアント

【1103】

実験では、ＳｐＣａｓ９の第３領域のＫ８９０を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアント（Ｋ８９０Ｎ）を使用した。

【1104】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９））、Ｋ８９０Ｎについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は類似しているが、オフターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少することが確認された（図１１）。

【1105】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の第３領域のＫ８９０を異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアント（Ｋ８９０Ｎ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、類似またはわずかに増加した標的特異性を示すことが確認できる。
４．ＳｐＣａｓ９の第４領域バリアント

【1106】

実験では、ＳｐＣａｓ９の第４領域のＴ１１０２とＤ１１２７とを異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアント（Ｔ１１０２ＰおよびＤ１１２７Ｅ）を使用した。

【1107】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９））、Ｔ１１０２Ｐについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、Ｄ１１２７Ｅについては、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は類似しているが、オフターゲット部位でのインデル頻度は減少することが確認された（図１２）。

【1108】

さらに、ＥＭＸ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＡＧＴＣＣＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３０）／非標的配列：ＧＡＧＴｔａＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３１））、Ｔ１１０２とＤ１１２７はいずれも、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位で同様のインデル頻度を示したが、オフターゲット部位ではインデル頻度をほとんど示さなかった（図１３）。

【1109】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の第４領域のＴ１１０２とＤ１１２７とを異なるアミノ酸で置換することにより形成されるＳｐＣａｓ９バリアント（Ｔ１１０２ＰおよびＤ１１２７Ｅ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、類似またはわずかに向上した標的特異性を示すことが確認できる。
５．２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアント

【1110】

実験では、ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントを使用する。ここで、ＳｐＣａｓ９バリアントとして、第１と第２領域に変異を有するＦ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ、Ｉ６０１Ｎ／Ｄ９６５ＹおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ；第１と第３領域に変異を有するＦ５３９Ｓ／Ｋ８９０Ｎ；ならびに第２と第３領域に変異を有するＭ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎを使用した。

【1111】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９））、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８ＹおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は減少したが、オフターゲット部位でのインデル頻度は約７０～８０％減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８ＹおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図１４）。

【1112】

さらに、ＥＭＸ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＡＧＴＣＣＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３０）／非標的配列：ＧＡＧＴｔａＧＡＧＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡＡ（配列番号３１））、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少したが、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低かった。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図１５）。

【1113】

ＶＥＧＦＡ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧＣＧＴＧ（配列番号３２）／非標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧｔＧＴＧ（配列番号３３））、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度は類似しているが、オンターゲット部位でのインデル頻度は有意に増加することが確認された（図１６）。

【1114】

ＨＢＢ０３遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３４）／非標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣｔＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３５））、Ｆ５３９Ｓ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は７０％以上減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図１７）。さらに、Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度はわずかに増加するが、オンターゲット部位でのインデル頻度は約３０～４０％増加し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図１７）。

【1115】

ＨＢＢ０４遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３６）／非標的配列：ＣＣＡＣａＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３７））、Ｆ５３９Ｓ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は類似または増加し、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されないことが確認された（図１８）。さらに、Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに増加し、オフターゲット部位でのインデル頻度は約３０％減少することが確認された（図１８）。

【1116】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち２つの領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアント（Ｆ５３９Ｓ／Ｋ８９０Ｎ、Ｆ５３９Ｓ／Ｆ１０３８Ｙ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ、Ｉ６０１Ｎ／Ｄ９６５Ｙ、Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性が向上したことを確認できる。
６．３つ以上の領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアント

【1117】

実験では、ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つ以上の領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントを使用した。ここで、ＳｐＣａｓ９バリアントとして、第１、第２および第３領域に変異を有するＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０Ｎ、およびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙ；ならびに第１、第２および第４領域に変異を有するＡ２０３Ｄ／Ｎ２７７Ｈ／Ｇ３６６Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ／Ｔ１１０２Ｐ／Ｄ１１２７Ｅを使用した。

【1118】

その結果、ＤＭＤ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣＴＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２８）／非標的配列：ＣＴＴＴＣＴＡＣＣＴＡＣｃＧＡＧＴＣＴＧ（配列番号２９））、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は半分以下に減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図１９）。さらに、Ａ２０３Ｄ／Ｎ２７７Ｈ／Ｇ３６６Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ／Ｔ１１０２Ｐ／Ｄ１１２７Ｅの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は約６０～７０％減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低かった。したがって、Ａ２０３Ｄ／Ｎ２７７Ｈ／Ｇ３６６Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ／Ｔ１１０２Ｐ／Ｄ１１２７Ｅは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図２３）。

【1119】

ＶＥＧＦＡ遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧＣＧＴＧ（配列番号３２）／非標的配列：ＧＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＴＧｔＧＴＧ（配列番号３３））、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は半分に減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図２０）。

【1120】

ＨＢＢ０３遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３４）／非標的配列：ＣＡＣＧＴＴＣＡＣｔＴＴＧＣＣＣＣＡＣＡ（配列番号３５））、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は減少し、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙについては、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度はわずかに減少するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は約７０％以上減少し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０ＮおよびＦ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図２１）。さらに、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０Ｎの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オフターゲット部位でのインデル頻度はわずかに増加するが、オンターゲット部位でのインデル頻度は約１０～２０％増加し、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０Ｎは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認できる（図２１）。

【1121】

ＨＢＢ０４遺伝子を標的遺伝子として使用した場合（標的配列：ＣＣＡＣＧＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３６）／非標的配列：ＣＣＡＣａＴＴＣＡＣＣＴＴＧＣＣＣＣＡＣ（配列番号３７））、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎについて、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は増加し、オフターゲット部位でのインデル頻度は有意に減少し、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０Ｎについては、オンターゲット部位でのインデル頻度は類似するが、オフターゲット部位でのインデル頻度は約１０～２０％減少することが確認された（図２２）。さらに、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８Ｙの場合、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、オンターゲット部位でのインデル頻度は約４０％減少し、オフターゲット部位でのインデル頻度はほとんど示されず、したがって、オンターゲット部位の値に基づくオフターゲット部位でのインデル頻度の比率は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、低いことが確認された。したがって、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性を有することが確認された（図２２）。

【1122】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の４つの領域のうち３つ以上の領域に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアント（Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｄ９６５Ｙ／Ｋ８９０Ｎ、Ｆ５３９Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｋ８９０Ｎ／Ｆ１０３８ＹおよびＡ２０３Ｄ／Ｎ２７７Ｈ／Ｇ３６６Ｓ／Ｍ７６３Ｉ／Ｆ１０３８Ｙ／Ｔ１１０２Ｐ／Ｄ１１２７Ｅ）は、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して、標的特異性が向上したことを確認できる。

【1123】

上記の結果から、ＳｐＣａｓ９の４つの領域から選択される１つ以上のアミノ酸に変異を有するＳｐＣａｓ９バリアントは、野性型ＳｐＣａｓ９と比較して標的特異性が向上したことが確認された。

【産業上の利用可能性】

【1124】

本発明において、人為的に改変されたＣＲＩＳＰＲ酵素を使用して標的特異性が向上したＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系は、ゲノムおよび／またはエピゲノム操作または修飾、ゲノム標的化、ゲノム編集ならびにインビトロ診断などで使用できる。
［項目１］
人為的操作を含む、標的特異性が向上したＳｐＣａｓ９バリアントであって、上記人為的操作は、野性型ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９（ＳｐＣａｓ９）の第１領域、第２領域、第３領域および第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上のアミノ酸の人為的操作を含む、ＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域が、ｇＲＮＡと相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分、標的配列と相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分、ｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖と相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分、および上記ｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖のＰＡＭ（プロトスペーサー隣接モチーフ）の遠位端と相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分からなる群から選択される１つ以上の部分である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目３］
上記ｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖の上記ＰＡＭの遠位端が、上記ＰＡＭの位置から離れている上記ｇＲＮＡ標的配列のヘテロ二本鎖の末端で６～１０塩基対である、
項目２に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目４］
上記ＰＡＭが５'－ＮＧＧ－３'である、
項目３に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目５］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第２領域および上記第３領域が、核酸を切断する機能を果たす上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目６］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第４領域が、標的遺伝子または核酸中のＰＡＭ配列を認識または標的遺伝子または核酸中のＰＡＭ配列と相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分、およびｇＲＮＡのヌクレオチド配列の部分と相互作用する上記野性型ＳｐＣａｓ９の部分からなる群から選択される１つ以上の部分である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目７］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣローブに位置する領域、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣドメイン全体、および上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲＥＣドメインの部分からなる群から選択される１つ以上の領域である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目８］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第２領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメイン全体、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメインの部分、および上記野性型ＳｐＣａｓ９のＲｕｖＣドメインの金属依存性核酸切断領域を含む部分からなる群から選択される１つ以上の領域である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目９］
上記ＲｕｖＣドメインの上記金属依存性核酸切断領域が、上記ＲｕｖＣドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域である、
項目８に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１０］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第３領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメイン全体、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメインの部分、および上記野性型ＳｐＣａｓ９のＨＮＨドメインの金属依存性核酸切断領域を含む部分からなる群から選択される１つ以上の領域である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１１］
上記ＨＮＨドメインの上記金属依存性核酸切断領域が、上記ＨＮＨドメイン内の金属と相互作用することにより標的位置で核酸間の結合を切断できる領域である、
項目１０に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１２］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第４領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＮＵＣローブに位置する領域、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＰＩドメイン全体、および上記野性型ＳｐＣａｓ９のＰＩドメインの部分からなる群から選択される１つ以上の領域である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１３］
上記第１領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の１９６番目の位置のフェニルアラニン（Ｆ１９６）から２８２番目の位置のイソロイシン（Ｉ２８２）までのアミノ酸配列で構成される領域１－１、上記野性型ＳｐＣａｓ９の３１６番目の位置のプロリン（Ｐ３１６）から３９４番目の位置のアスパラギン（Ｎ３９４）までのアミノ酸配列で構成される領域１－２、上記野性型ＳｐＣａｓ９の５１０番目の位置のリシン（Ｋ５１０）から６１２番目の位置のアスパラギン（Ｎ６１２）までのアミノ酸配列で構成される領域１－３、および上記野性型ＳｐＣａｓ９の６７８番目の位置のトレオニン（Ｔ６７８）から６９８番目の位置のヒスチジン（Ｈ６９８）までのアミノ酸配列で構成される領域１－４からなる群から選択される１つ以上の領域を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１４］
上記第１領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＮ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６およびＩ６９７を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１５］
上記第２領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の１番目の位置のメチオニン（Ｍ１）から２２番目の位置のトレオニン（Ｔ２２）までのアミノ酸配列で構成される領域２－１、上記野性型ＳｐＣａｓ９の７３１番目の位置のプロリン（Ｐ７３１）から７７０番目の位置のトレオニン（Ｔ７７０）までのアミノ酸配列で構成される領域２－２、および上記野性型ＳｐＣａｓ９の９２６番目の位置のグルタミン（Ｑ９２６）から１０４０番目の位置のセリン（Ｓ１０４０）までのアミノ酸配列で構成される領域２－３からなる群から選択される１つ以上の領域を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１６］
上記第２領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｄ１０、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｅ７６２、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｒ７６５、Ｅ７６６、Ｎ７６７、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ｙ９８１、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｈ９８５、Ｄ９８６、Ａ９８７、Ｙ９８８、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｙ１０３６、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８およびＹ１０３９を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１７］
上記第３領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の７７５番目の位置のリシン（Ｋ７７５）から９００番目の位置のロイシン（Ｌ９００）までのアミノ酸配列で構成される領域３－１を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１８］
上記第３領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＫ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｖ８３８、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｎ８５４、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｎ８６３、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ａ８８９、Ｋ８９０、Ｌ８９１、Ｒ８９５、Ｋ８９６およびＤ８９８を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目１９］
上記第４領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の１０９９番目の位置のグルタミン酸（Ｅ１０９９）から１１３９番目の位置のバリン（Ｖ１１３９）までのアミノ酸配列で構成される領域４－１を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２０］
上記第４領域が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＴ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８を含む、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２１］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＩ７、Ｇ８、Ｌ９、Ｉ１１、Ｇ１２、Ｖ１６、Ｇ１７、Ｗ１８、Ａ１９、Ｖ２０、Ｉ２１、Ｎ１９９、Ｉ２０１、Ｎ２０２、Ａ２０３、Ｇ２０５、Ｖ２０６、Ａ２０８、Ａ２１０、Ｉ２１１、Ｌ２１２、Ａ２１４、Ｌ２１６、Ｌ２２２、Ｎ２２４、Ｌ２２５、Ｉ２２６、Ａ２２７、Ｑ２２８、Ｌ２２９、Ｇ２３１、Ｎ２３５、Ｇ２３６、Ｌ２３７、Ｇ２３９、Ｎ２４０、Ｌ２４１、Ｉ２４２、Ａ２４３、Ｌ２４４、Ｌ２４６、Ｇ２４７、Ｌ２４８、Ｎ２５１、Ｎ２５５、Ｌ２５８、Ａ２５９、Ａ２６２、Ｌ２６４、Ｑ２６５、Ｌ２６６、Ｌ２７５、Ｎ２７７、Ｌ２７８、Ｌ２７９、Ａ２８０、Ｑ２８１、Ｉ２８２、Ｐ３１６、Ｌ３１７、Ａ３１９、Ｍ３２１、Ｉ３２２、Ｌ３３２、Ｌ３３４、Ｌ３３５、Ａ３３７、Ｌ３３８、Ｖ３３９、Ｌ３４３、Ｐ３４４、Ｉ３５０、Ｆ３５１、Ｆ３５２、Ｇ３５８、Ａ３６０、Ｇ３６１、Ｉ３６３、Ｇ３６５、Ｇ３６６、Ａ３６７、Ｆ３７２、Ｆ３７５、Ｉ３７６、Ｐ３７８、Ｉ３７９、Ｌ３８０、Ｍ３８３、Ｇ３８５、Ｌ３８９、Ｌ３９０、Ｖ３９１、Ｌ３９３、Ｌ５１３、Ｌ５１４、Ｆ５１８、Ｖ５２０、Ｌ５２４、Ｖ５２７、Ｖ５３０、Ｇ５３３、Ｍ５３４、Ｐ５３７、Ａ５３８、Ｆ５３９、Ｌ５４０、Ｇ５４２、Ａ５４７、Ｉ５４８、Ｖ５４９、Ｌ５５１、Ｌ５５２、Ｆ５５３、Ｖ５５９、Ｖ５６１、Ｌ５６４、Ｆ５６９、Ｉ５７２、Ｃ５７４、Ｆ５７５、Ｖ５７８、Ｉ５８０、Ｇ５８２、Ｖ５８３、Ｆ５８７、Ａ５８９、Ｌ５９１、Ｇ５９２、Ｌ５９７、Ｌ５９８、Ｉ６００、Ｉ６０１、Ｆ６０６、Ｌ６０７、Ｉ６７９、Ｌ６８０、Ｆ６８２、Ｌ６８３、Ｇ６８７、Ｆ６８８、Ａ６８９、Ｆ６９３、Ｍ６９４、Ｌ６９６、Ｉ６９７、Ｐ７３１、Ａ７３２、Ｉ７３３、Ｇ７３６、Ｉ７３７、Ｌ７３８、Ｖ７４１、Ｖ７４３、Ｖ７４４、Ｌ７４７、Ｖ７４８、Ｖ７５０、Ｍ７５１、Ｇ７５２、Ｐ７５６、Ｉ７５９、Ｖ７６０、Ｉ７６１、Ｍ７６３、Ａ７６４、Ｋ７７５、Ｒ７７８、Ｅ７７９、Ｒ７８０、Ｋ７８２、Ｒ７８３、Ｅ７８５、Ｅ７８６、Ｋ７８９、Ｅ７９０、Ｋ７９７、Ｅ７９８、Ｈ７９９、Ｅ８０２、Ｅ８０９、Ｋ８１０、Ｒ８２０、Ｄ８２１、Ｄ８２５、Ｅ８２７、Ｄ８２９、Ｒ８３２、Ｄ８３５、Ｄ８３７、Ｄ８３９、Ｈ８４０、Ｋ８４８、Ｄ８４９、Ｄ８５０、Ｄ８５３、Ｋ８５５、Ｒ８５９、Ｄ８６１、Ｋ８６２、Ｒ８６４、Ｋ８６６、Ｄ８６８、Ｅ８７３、Ｅ８７４、Ｋ８７７、Ｋ８７８、Ｋ８８０、Ｒ８８４、Ｋ８９０、Ｒ８９５、Ｋ８９６、Ｄ８９８、Ｉ９２７、Ｖ９３１、Ａ９３２、Ｉ９３４、Ｌ９３５、Ｍ９３９、Ｌ９４９、Ｉ９５０、Ｖ９５３、Ｖ９５５、Ｉ９５６、Ｌ９５８、Ｌ９６２、Ｖ９６３、Ｄ９６５、Ｆ９６６、Ｆ９７０、Ｆ９７２、Ｖ９７５、Ｉ９７８、Ａ９８４、Ａ９８７、Ｌ９８９、Ａ９９１、Ｖ９９２、Ｖ９９３、Ｇ９９４、Ａ９９６、Ｌ９９７、Ｉ９９８、Ｐ１００２、Ｌ１００４、Ｆ１００８、Ｖ１００９、Ｇ１０１１、Ｖ１０１５、Ｖ１０１８、Ｍ１０２１、Ｉ１０２２、Ａ１０２３、Ｉ１０２９、Ｇ１０３０、Ａ１０３２、Ａ１０３４、Ｆ１０３７、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２、Ｓ１１０６、Ｅ１１０８、Ｓ１１１６、Ｄ１１１７、Ｄ１１２５、Ｄ１１２７、Ｄ１１３５、Ｓ１１３６およびＴ１１３８からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２２］
上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸である、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２３］
上記人為的操作が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸を欠失させることである、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２４］
上記人為的操作が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸を異なるアミノ酸で置換することである、
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２５］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸よりも小さい官能基を有するアミノ酸である、
項目２４に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２６］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸よりも大きい官能基を有するアミノ酸である、
項目２４に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２７］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸よりも高いハイドロパシー指数を有するアミノ酸である、
項目２４に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２８］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９の上記第１領域、上記第２領域、上記第３領域および上記第４領域から選択される１つ以上の領域に存在する１つ以上の上記アミノ酸よりも低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸である、
項目２４に記載のＳｐＣａｓ９バリアント。
［項目２９］
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアントである標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアントであって、野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸の人為的操作を含む、標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３０］
上記人為的操作が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上のアミノ酸を欠失させることまたは異なるアミノ酸で置換することである、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３１］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上の上記アミノ酸よりも大きいまたは小さい官能基を有するアミノ酸である、
項目３０に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３２］
上記異なるアミノ酸が、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＡ２０３、Ｎ２７７、Ｇ３６６、Ｆ５３９、Ｉ６０１、Ｍ７６３、Ｋ８９０、Ｄ９６５、Ｆ１０３８、Ｔ１１０２およびＤ１１２７からなる群から選択される１つ以上の上記アミノ酸よりも高いまたは低いハイドロパシー指数を有するアミノ酸である、
項目３０に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３３］
上記ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントが、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９の人為的操作を含む、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３４］
上記ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントが、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＭ７６３の人為的操作を含む、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３５］
上記ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントが、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＫ８９０の人為的操作を含む、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３６］
上記ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントが、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９／Ｍ７６３（Ｆ５３９およびＭ７６３）、Ｆ５３９／Ｋ８９０またはＭ７６３／Ｋ８９０の人為的操作を含む、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３７］
上記ＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントが、上記野性型ＳｐＣａｓ９のＦ５３９、Ｍ７６３およびＫ８９０の人為的操作を含む、
項目２９に記載の標的特異的なＳｐＣａｓ９（ＴＳ－ＳｐＣａｓ９）バリアント。
［項目３８］
項目２９に記載のＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアントを含む融合タンパク質。
［項目３９］
上記融合タンパク質が１つ以上の機能的ドメインを含む、
項目３８に記載の融合タンパク質。
［項目４０］
上記機能的ドメインが、メチラーゼ活性、デメチラーゼ活性、転写活性化活性、転写抑制活性、転写放出因子活性、ヒストン修飾活性、ＲＮＡ切断活性または核酸結合活性を有するドメイン、（ペプチドを含む）タンパク質の単離および精製用タグ、レポーター遺伝子、ＮＬＳ（核局在化配列もしくはシグナル）、ＮＥＳ（核外移行配列またはシグナル）、およびデアミナーゼからなる群から選択される１つ以上のドメインである、
項目３８に記載の融合タンパク質。
［項目４１］
項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント、項目２９に記載のＴＳ－ＳｐＣａｓ９バリアント、または項目３８に記載の融合タンパク質をコードする核酸。
［項目４２］
項目４１に記載の核酸を含むベクター。
［項目４３］
項目４１に記載の核酸または項目４２に記載のベクターを含む細胞。
［項目４４］
ｇＲＮＡと、項目１に記載のＳｐＣａｓ９バリアント、項目２９に記載のＴＳ－ＳｐＣａｓ９または項目３８に記載の融合タンパク質とを使用して、細胞のゲノムを人為的に操作する方法。
［項目４５］
上記ｇＲＮＡが、上記細胞のゲノム中に存在する標的遺伝子の標的配列に相補的に結合するヌクレオチド配列を含む核酸である、
項目４４に記載の細胞のゲノムを人為的に操作する方法。

【配列表フリーテキスト】

【1125】

例示的な一実施形態による野性型ＳｐＣａｓ９のアミノ酸配列、各領域のアミノ酸配列、および標的特異的なＳｐＣａｓ９バリアントのアミノ酸配列

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【配列表】

0007571930000001.app