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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-10-18
(45)【発行日】2024-10-28
(54)【発明の名称】たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、および香味吸引器
(51)【国際特許分類】
A24B 15/24 20060101AFI20241021BHJP
A24B 15/20 20060101ALI20241021BHJP
A24B 15/16 20200101ALI20241021BHJP
【ＦＩ】
A24B15/24
A24B15/20
A24B15/16
【請求項の数】
9
(21)【出願番号】P 2023523726
(86)(22)【出願日】2021-05-24
(86)【国際出願番号】 JP2021019623
(87)【国際公開番号】W WO2022249242
(87)【国際公開日】2022-12-01
【審査請求日】2023-07-19
(73)【特許権者】
【識別番号】000004569
【氏名又は名称】日本たばこ産業株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】110003708
【氏名又は名称】弁理士法人鈴榮特許綜合事務所
(72)【発明者】
【氏名】長瀬 亮祐
【審査官】芝井 隆
(56)【参考文献】
【文献】欧州特許出願公開第０２６０７８８０（ＥＰ，Ａ１）
【文献】特表２０１５－５０５２４７（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２０１７－０７７２４６（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１８－５１６０６９（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ２４Ｂ １／００ － １５／４２
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、前記有用成分溶出液から前記有用成分溶出液に含まれる微生物を除去することと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
【請求項2】
前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる請求項１に記載の方法。
【請求項5】
前記無機多孔質体が、珪藻土またはゼオライトである請求項１～４の何れか１項に記載の方法。
【請求項6】
請求項１～５の何れか１項に記載の方法により得られるたばこ香味液。
【請求項7】
請求項６に記載のたばこ香味液を含む香味吸引器。
【請求項8】
請求項１～５の何れか１項に記載の方法により得られるたばこ香味液と、請求項１～５の何れか１項に記載の方法において前記たばこ上清を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物。
【請求項9】
請求項８に記載のたばこ添加物を含む香味吸引器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、たばこ香味液の製造方法、たばこ香味液、および香味吸引器に関する。
【背景技術】
【0002】
乾燥済みのたばこ植物の葉は、シガレットや加熱式たばこなどの香味吸引器の香味源として使用され、葉たばこと呼ばれる。葉たばこには種々の香味成分が含まれている。葉たばこは、そのまま香味吸引器の香味源として使用してもよいし、葉たばこからたばこ香味成分を抽出し、得られたたばこ抽出液を香味吸引器の香味源として使用してもよい。たばこ抽出液は、酵母等の微生物を含むため、香味吸引器の香味源として使用する場合には微生物を除去することが望ましい。
【0003】
また、たばこ抽出液を酵母等の微生物と反応させて、たばこ抽出液に含まれる香味成分を増加させることが知られている（例えば、特許文献１）。この場合も、反応後のたばこ抽出液を香味吸引器の香味源として使用する場合には微生物を除去することが望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【文献】米国特許第４８９５１７５号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明は、たばこ香味を損なうことなく、たばこ抽出液から酵母等の微生物を簡便な方法で除去する技術を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0006】
１つの側面によれば、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、たばこ抽出液から微生物を除去することを含む、たばこ香味液の製造方法が提供される。
【0007】
別の側面によれば、前述の方法により得られるたばこ香味液が提供される。
【0008】
更に別の側面によれば、前述のたばこ香味液を含む香味吸引器が提供される。
【発明の効果】
【0009】
本発明によれば、たばこ香味を損なうことなく、たばこ抽出液から酵母等の微生物を簡便な方法で除去する技術が提供される。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【発明を実施するための形態】
【0011】
以下、本発明を詳細に説明するが、以下の説明は、本発明を説明することを目的とし、本発明を限定することを意図しない。
【0012】
＜１．たばこ香味液の製造方法＞
たばこ香味液の製造方法は、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、たばこ抽出液から微生物を除去することを含む。
たばこ香味液の製造方法は、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、たばこ抽出液から微生物を除去することを含む。
【0013】
この方法では、たばこ抽出液に含まれる微生物が除去されるため、得られるたばこ香味液は、たばこ抽出液と比べて、低減した量の微生物を有する。本明細書において、「微生物」は、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理する直前にたばこ抽出液に含まれる任意の微生物を指し、細菌や真菌を包含する。
【0014】
第１実施形態において、たばこ抽出液は、たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出することにより得られるたばこ上清である。第１実施形態に係る方法は、以下の＜１－１．第１実施形態＞の欄で詳細に説明する。
【0015】
第２実施形態において、たばこ抽出液は、以下の（ａ）～（ｃ）の工程を含む方法により得られる有用成分溶出液である：
（ａ）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ること、
（ｂ）酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ること、および
（ｃ）前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ること。第２実施形態に係る方法は、以下の＜１－２．第２実施形態＞の欄で詳細に説明する。
（ａ）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ること、
（ｂ）酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ること、および
（ｃ）前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ること。第２実施形態に係る方法は、以下の＜１－２．第２実施形態＞の欄で詳細に説明する。
【0016】
＜１－１．第１実施形態＞
第１実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
（Ｓ４）前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーのたばこ上清を得ることと
を含む。
第１実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
（Ｓ４）前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーのたばこ上清を得ることと
を含む。
【0017】
第１実施形態に係る方法を図１に示す。第１実施形態に係る方法を、図１を参照しながら（Ｓ１）および（Ｓ４）の工程順に説明する。第１実施形態に係る方法により得られる「微生物フリーのたばこ上清」を「たばこ香味液」として使用することができる。
【0018】
［抽出工程（Ｓ１）］
抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ上清が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図１参照）。
抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ上清が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図１参照）。
【0019】
たばこ材料は、燃焼型または加熱型の香味吸引器などのたばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻を使用することができる。「たばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻」とは、農家での乾燥工程、その後の原料工場での１年ないし数年の長期熟成工程、およびその後の製造工場でのブレンドおよび裁刻など種々の加工処理を経て、たばこ製品に配合される準備が整ったたばこ刻を指す。
【0020】
たばこ刻は、葉たばこの裁刻物である。たばこ刻は、除骨葉の刻、中骨の刻、再生たばこ（すなわち、工場の作業工程で生じる葉屑、刻み屑、中骨屑、細粉などを再使用可能な形状に加工したたばこ材料）の刻、またはこれらの混合物のいずれであってもよい。たばこ刻は、抽出効率を高めるために粉砕し、得られた粉砕物を抽出のために使用してもよい。
【0021】
たばこ刻は、任意の品種のものを使用することができ、たとえば黄色種、バーレー種、オリエント種などのものを使用することができる。たばこ刻は、単一品種のものを使用してもよいし、異なる品種の混合物を使用してもよい。
【0022】
水性溶媒としては、水または含水エタノールを使用することができる。含水エタノールとしては、例えば、エタノールと水との体積比１：１の混合物を使用することができる。水性溶媒は、一般的には水であり、好ましくは室温（例えば、約２０℃）～７０℃の水である。水性溶媒は、例えば、たばこ材料に対して５００～５０００質量％の量で使用することができる。
【0023】
抽出は、例えば、たばこ材料を４０～６０℃の温水中で３０～１８０分間浸漬するか、あるいは、たばこ材料を４０～６０℃の温水中で３０～１８０分間振盪（例えば２００ｒｐｍ）することにより行うことができる。
【0024】
また、抽出は、複数回の抽出操作を繰り返すことにより行ってもよい。具体的には、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出し、その後、得られたたばこ残渣を新たな水性溶媒に入れて２回目の抽出操作を行い、更に必要に応じて、新たな水性溶媒での抽出操作を繰り返すことにより、抽出を行ってもよい。
【0025】
抽出により、たばこ残渣とたばこ上清との混合物が得られる。たばこ上清は、たばこ材料に含まれる水溶性成分を含有する。「たばこ材料に含まれる水溶性成分」として、例えば、酵母などの微生物の栄養源となる成分（例えば、糖類、アミノ酸、タンパク質、栄養塩類）や、たばこ香味に寄与する成分（例えば、有機酸、葉面樹脂、テルペノイド、ポリフェノール類）などが挙げられる。
【0026】
抽出の後、たばこ残渣とたばこ上清とは分離され、たばこ上清は、たばこ香味液を得るための原料として使用される。一方、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液（この実施形態では、「微生物フリーのたばこ上清」）と混合し、得られた混合物を適宜加工して、たばこ充填材を作製するために使用することができる。例えば、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液と混合し、得られた混合物からシートたばこなどのたばこ成形体を作製するために使用してもよい。あるいは、たばこ残渣は、最終的に得られたたばこ香味液と混合し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製するために使用してもよい。
【0027】
［処理工程（Ｓ４）］
処理工程（Ｓ４）では、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、たばこ上清から微生物を除去する。これにより、たばこ香味液として、微生物フリーのたばこ上清を得る。
処理工程（Ｓ４）では、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、たばこ上清から微生物を除去する。これにより、たばこ香味液として、微生物フリーのたばこ上清を得る。
【0028】
無機多孔質体は、例えば、珪藻土またはゼオライトである。珪藻土は、珪藻の殻の化石からなる堆積物であり、二酸化ケイ素を主成分として含む。ゼオライトは、ミクロ多孔性の結晶性含水アルミノケイ酸塩であり、天然ゼオライトであってもよいし、合成ゼオライトであってもよい。
【0029】
処理工程（Ｓ４）で除去される微生物は、たばこ上清に含まれる微生物であり、例えば、酵母、カビ、微細藻類などが挙げられる。後述の実施例１で、たばこ香味液の清澄性が実証されていることから、処理工程（Ｓ４）では、たばこ上清に含まれるあらゆる微生物が除去できるとともに、微生物以外の微粒子、例えば１μｍ以上のサイズの微粒子も除去できると考えられる。
【0030】
たばこ香味液中の微生物は、代謝によりたばこ香味液の組成を変化させ、品質劣化の原因になるため、たばこ香味液は微生物を含まないことが好ましい。また、たばこ香味液を電子たばこ（すなわち、たばこ香味液をヒータにより加熱して蒸発・気化させてユーザに吸引させる喫煙具）に適用する場合、たばこ香味液中の微生物は、ヒータの焦げの原因になるため、たばこ香味液は微生物を含まないことが好ましい。
【0031】
処理工程（Ｓ４）は、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料に通すことにより行ってもよいし、たばこ上清に、無機多孔質体を含んだ材料を添加し、その後、無機多孔質体を含んだ材料をたばこ上清から除去することにより行ってもよい。
【0032】
好ましい態様において、処理工程（Ｓ４）は、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行うことができる。無機多孔質体を含んだ層は、例えば、珪藻土を含んだ層またはゼオライトを含んだ層である。「無機多孔質体を含んだ層」は、無機多孔質体のみからなる層であってもよいし、主成分としての無機多孔質体と追加成分としての添加剤とを含んだ層であってもよい。添加剤として、例えば、成形助剤、バインダーなどが挙げられる。
【0033】
一つの態様において、「無機多孔質体を含んだ層」は、無機多孔質体を含んだ成形体から構成されていてもよい。すなわち、処理工程（Ｓ４）は、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われてもよい。無機多孔質体を含んだ成形体は、例えば、珪藻土を含んだ成形体またはゼオライトを含んだ成形体である。「無機多孔質体を含んだ成形体」は、無機多孔質体のみからなる成形体であってもよいし、主成分としての無機多孔質体と追加成分としての添加剤とを含んだ成形体であってもよい。添加剤として、例えば、成形助剤、バインダーなどが挙げられる。より具体的には、「無機多孔質体を含んだ成形体」は、無機多孔質体を含んだ焼成成形体であってもよいし、無機多孔質体を含んだ粒子の圧縮成形体であってもよい。
【0034】
珪藻土を含んだ成形体は、例えば、セライト（登録商標）（ジーエルサイエンス株式会社）、スープラディスク（日本ポール株式会社）を使用することができる。
【0035】
あるいは、別の態様において、「無機多孔質体を含んだ層」は、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体から構成されていてもよい。すなわち、処理工程（Ｓ４）は、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われてもよい。無機多孔質体を含んだ粒子は、例えば、珪藻土を含んだ粒子またはゼオライトを含んだ粒子である。「無機多孔質体を含んだ粒子」は、無機多孔質体のみからなる粒子であってもよいし、主成分としての無機多孔質体と追加成分としての添加剤とを含んだ粒子であってもよい。添加剤として、例えば、成形助剤、バインダーなどが挙げられる。
【0036】
「無機多孔質体を含んだ粒子」は、例えば＜４００μｍの粒度、一般的には１０～４００μｍの粒度、好ましくは＜１００μｍの粒度、より好ましくは１０～１００μｍの粒度、更に好ましくは１０～８０μｍの粒度、更に好ましくは３０～７５μｍの粒度を有する。＜Ｘμｍの粒度とは、粒径がＸμｍよりも小さいことを表す。すなわち、＜Ｘμｍの粒度とは、Ｘμｍの目開きのふるいを通過した粒子の粒度を指す。また、Ｙ～Ｚμｍの粒度とは、粒径がＹμｍ以上、Ｚμｍよりも小さいことを表す。すなわち、Ｙ～Ｚμｍの粒度とは、Ｚμｍの目開きのふるいを通過したが、Ｙμｍの目開きのふるいを通過しなかった粒子の粒度を指す。本明細書において、粒度は、ふるい分け粒度測定法（ＪＩＳ Ｚ ８８１５：１９９４）により測定された値を指す。
【0037】
珪藻土を含んだ粒子は、例えば、K-soluteの商品名で市販される珪藻土の粉砕品（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を使用することができる。ゼオライトを含んだ粒子は、例えば、合成ゼオライト粉末（粒度：＜７５μｍ）（富士フィルム和光純薬株式会社）を使用することができる。
【0038】
より好ましい態様において、処理工程（Ｓ４）は、たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体を充填したカラムに通すことにより行うことができる。「無機多孔質体を含んだ粒子」は、上記で説明したとおりであり、例えば、珪藻土を含んだ粒子またはゼオライトを含んだ粒子である。カラムは、例えば、内径１１～１００ｍｍおよび長さ１００～１０００ｍｍのサイズを有するカラムを使用することができる。たばこ上清は、例えば、重力落下によりカラムに通すことができる。
【0039】
＜１－２．第２実施形態＞
第２実施形態では、たばこ上清を酵母と反応させて、たばこ上清に含まれる香味成分を増加させた後に、香味成分が増加したたばこ上清から微生物を除去する。すなわち、第２実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
（Ｓ２）酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
（Ｓ３）前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
（Ｓ４）前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーの有用成分溶出液を得ることと
を含む。
第２実施形態では、たばこ上清を酵母と反応させて、たばこ上清に含まれる香味成分を増加させた後に、香味成分が増加したたばこ上清から微生物を除去する。すなわち、第２実施形態によれば、たばこ香味液の製造方法は、
（Ｓ１）たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
（Ｓ２）酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
（Ｓ３）前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
（Ｓ４）前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーの有用成分溶出液を得ることと
を含む。
【0040】
第２実施形態に係る方法を図２に示す。第２実施形態に係る方法を、図２を参照しながら（Ｓ１）、（Ｓ２）、（Ｓ３）および（Ｓ４）の工程順に説明する。以下の説明では、第１実施形態に係る方法と重複する部分についての説明は省略し、第１実施形態に係る方法と異なる部分を中心に説明する。第２実施形態に係る方法により得られた「微生物フリーの有用成分溶出液」を「たばこ香味液」として使用することができる。
【0041】
［抽出工程（Ｓ１）］
抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ上清が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図２参照）。抽出工程（Ｓ１）は、第１実施形態の方法で説明した抽出工程（Ｓ１）と同様に実施することができる。
抽出工程（Ｓ１）では、たばこ材料からたばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得る。抽出工程（Ｓ１）では、たばこ上清が得られるのと同時にたばこ残渣も得られる（図２参照）。抽出工程（Ｓ１）は、第１実施形態の方法で説明した抽出工程（Ｓ１）と同様に実施することができる。
【0042】
［培養工程（Ｓ２）］
培養工程（Ｓ２）では、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ上清中で酵母を培養して、酵母含有培養液を得る（図２参照）。
培養工程（Ｓ２）では、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ上清中で酵母を培養して、酵母含有培養液を得る（図２参照）。
【0043】
酵母は、たばこ上清中で培養した際に有用成分を生産することができれば、任意の種類の酵母を使用することができる。
【0044】
本明細書において、「有用成分」は、最終的に得られるたばこ香味液にとって有用な成分を指す。有用成分は、例えば、たばこ香味液の香味に寄与する成分（以下、香味寄与成分という）であってもよいし、たばこ香味液を着色する成分（以下、着色成分という）であってもよいし、たばこ香味液の腐敗や発酵を防ぐ成分（以下、防腐成分という）であってもよい。
【0045】
有用成分は、好ましくは香味寄与成分である。「香味寄与成分」は、香味を放出する香味成分であってもよいし、香味吸引器で加熱または燃焼されたときに香味成分に変換される前駆体であってもよい。
【0046】
香味寄与成分としては、例えば、カロテノイド、脂肪酸、中性脂肪（すなわち、脂肪酸のグリセリンエステル）、酢酸エステル、脂肪酸エステル、有機酸、高級アルコール（例えば、炭素数８～２２のアルコール）などが挙げられる。着色成分としては、例えば、カロテノイドが挙げられる。防腐成分としては、例えば、乳酸、脂肪酸配糖体、安息香酸などが挙げられる。
【0047】
したがって、上述の有用成分を生産することが知られている酵母を、本発明の方法で使用することができる。
【0048】
カロテノイドを生産する酵母としては、Rhodotorula属の酵母、例えばRhodotorula alborubescens、Rhodotorula araucariae、Rhodotorula babjevae、Rhodotorula dairenensis、Rhodotorula diobovata、Rhodotorula evergladensis、Rhodotorula glutinis、Rhodotorula graminis、Rhodotorula kratochvilovae、Rhodotorula mucilaginosa、Rhodotorula ngohengohe、Rhodotorula pacifica、Rhodotorula paludigena、Rhodotorula sinensis、Rhodotorula sphaerocarpa、Rhodotorula taiwanensis、Rhodotorula toruloides；Xanthophyllomyces属の酵母、例えばXanthophyllomyces australis、Xanthophyllomyces rhodozyma、Xanthophyllomyces tasmanicaが挙げられる。
【0049】
脂肪酸を生産する酵母としては、Yarrowia属の酵母、例えばYarrowia alimentaria、Yarrowia bubula、Yarrowia deformans、Yarrowia divulgata、Yarrowia galli、Yarrowia hollandica、Yarrowia keelungensis、Yarrowia lipolytica、Yarrowia osloensis、Yarrowia parophoni、Yarrowia phangngaensis、Yarrowia porcina、Yarrowia yakushimensis；Lipomyces属の酵母、例えばLipomyces anomalus、Lipomyces arxii、Lipomyces chichibuensis、Lipomyces doorenjongii、Lipomyces japonicus、Lipomyces kockii、Lipomyces kononenkoae、Lipomyces lipofer、Lipomyces mesembrius、Lipomyces okinawensis、Lipomyces oligophaga、Lipomyces orientalis、Lipomyces smithiae、Lipomyces spencermartinsiae、Lipomyces starkeyiが挙げられる。
【0050】
酢酸エステル、脂肪酸エステル、または高級アルコールを生産する酵母としては、Saccharomyces属の酵母、例えばSaccharomyces cerevisiae、Saccharomyces paradoxus、Saccharomyces bayanus、Saccharomyces uvarum、Saccharomyces arboricola；Cyberlindnera属の酵母、例えばCyberlindnera jadinii、Cyberlindnera saturnus、Cyberlindnera fabianii、Cyberlindnera suaveolens、Cyberlindnera americana、Cyberlindnera xylosilytyca；Wickerhamomyces属の酵母、例えばWickerhamomyces anomalus、Wickerhamomyces ciferri、Wickerhamomyces canadensisが挙げられる。
【0051】
１種類の酵母がたばこ上清中で培養されてもよいし、２種類以上の酵母がたばこ上清中で培養されてもよい。また、酵母は、有用成分の生産量を増加するように遺伝的に改変された遺伝子組換え酵母であってもよい。
【0052】
酵母の培養条件は、特に限定されず、使用する酵母の生育および有用成分の生産に適した条件を適宜選択することができる。培養に先立って、酵母は、たばこ上清に、例えば１０～１０8細胞／ｍＬの濃度で添加することができる。培養は、例えば１０～４０℃で、例えば５～１６８時間にわたって行うことができる。
【0053】
たばこ上清は、酵母の栄養源となる成分や有用成分の原料となる成分が含まれており、酵母の生育および有用成分の生産に適した環境を提供することができる。このため、たばこ上清に追加の成分を添加する必要はない。ただし、本発明の方法は、たばこ上清に追加の成分を添加することを除外しない。
【0054】
酵母をたばこ上清中で培養した後に得られる、酵母とたばこ上清との混合物を、本明細書では「酵母含有培養液」と呼ぶ。酵母含有培養液は、「培養前の酵母とたばこ上清の混合物」と比べると、酵母が生産した有用成分の量が増加している。また、酵母含有培養液は、「培養前の酵母とたばこ上清の混合物」と比べると、酵母が生育や有用成分の生産のために消費した物質の量が減少している。
【0055】
［溶出工程（Ｓ３）］
溶出工程（Ｓ３）では、培養工程（Ｓ２）で得られた酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させる。これにより、有用成分溶出液を得る（図２参照）。
溶出工程（Ｓ３）では、培養工程（Ｓ２）で得られた酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させる。これにより、有用成分溶出液を得る（図２参照）。
【0056】
本明細書では、溶出工程を終えた後に得られる、酵母と溶出溶媒とを含有する混合物を「有用成分溶出液」と呼ぶ。
【0057】
溶出溶媒としては、有機溶媒を含む溶出溶媒を使用することができる。溶出溶媒は、有機溶媒それ自体であってもよいし、有機溶媒と水との混合物であってもよい。溶出溶媒は、好ましくは、水と混和性を有する有機溶媒を含む溶出溶媒であり、より好ましくは、水と混和性を有するアルコールを含む溶出溶媒である。すなわち、好ましい溶出溶媒は、水と混和性を有するアルコール、またはその含水アルコールである。
【0058】
溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有する有機溶媒であり、より好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有するアルコールである。溶出溶媒に含まれる有機溶媒の例として、エタノール、イソプロパノール、メタノール、またはブタノールが挙げられる。溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、より好ましくは、エタノールまたはイソプロパノールであり、最も好ましくはエタノールである。すなわち、最も好ましい溶出溶媒は、エタノールまたは含水エタノールである。
【0059】
ＳＰ値は、Hildebrand溶解度パラメータの値を指す。溶媒のＳＰ値が高いほど、水との混和性が高いことを表す。ＳＰ値は、種々の溶媒で公知であり、例えば、エタノールのＳＰ値は１２．７、イソプロパノールのＳＰ値は１１．５、メタノールのＳＰ値は１４．５、ブタノールのＳＰ値は１１．４である。
【0060】
溶出溶媒に含まれる有機溶媒は、１種類が使用されてもよいし、２種類以上が混合されて使用されてもよい。
【0061】
溶出溶媒は、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中の有機溶媒の濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９５体積％、より好ましくは６０～９５体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。有機溶媒の濃度は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。本明細書において、「酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液（mixed solution）」の用語は、酵母含有培養液の液体部分（すなわち、培養後のたばこ上清）と溶出溶媒との混合液を指し、酵母を含まない。
【0062】
また、溶出溶媒は、酵母含有培養液に対して、例えば１００～９００体積％の量で添加することができる。溶出溶媒の添加量は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
【0063】
例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分として脂肪酸を溶出させたい場合、エタノールは、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中のエタノールの濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９０体積％、より好ましくは６０～９０体積％、更に好ましくは６０～８０体積％、最も好ましくは７０体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。
【0064】
例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分としてカロテノイドを溶出させたい場合、エタノールは、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合液中のエタノールの濃度が、例えば５０体積％以上、好ましくは５０～９０体積％、より好ましくは６０～９０体積％、更に好ましくは７０～９０体積％、更に好ましくは８０～９０体積％、最も好ましくは９０体積％になる量で、酵母含有培養液に添加することができる。
【0065】
溶出工程（Ｓ３）では、酵母含有培養液と溶出溶媒とを混合した後、得られた混合物に含有される酵母から、酵母の菌体内に含まれる有用成分を、混合物の液体部分に溶出させる。溶出は、酵母含有培養液と溶出溶媒との混合物を、必要であれば加熱しながら、所定期間にわたって撹拌することにより行うことができる。
【0066】
溶出は、有用成分の溶出効率の観点で、混合物を撹拌しながら行うことが好ましいが、混合物を静置しながら行ってもよい。混合物を撹拌する場合、撹拌速度は、例えば６０～３００ｒｐｍとすることができる。
【0067】
また、加熱により有用成分の溶出が促進される場合、溶出は、加熱しながら行ってもよいし、加熱による溶出の促進効果がみられない場合、溶出は、加熱することなく室温（例えば１５～２５℃）で行ってもよい。
【0068】
溶出温度および溶出時間は、有用成分の溶出効率を考えて適宜調整することができる。
【0069】
例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分として脂肪酸を溶出させたい場合、溶出は、混合物を室温（例えば１５～２５℃）で５～６０分間にわたって撹拌することにより行うことができる。
【0070】
例えば、溶出溶媒としてエタノールまたは含水エタノールを使用し、有用成分としてカロテノイドを溶出させたい場合、溶出は、混合物を８０～９５℃に加熱しながら、１５～６０分間にわたって撹拌することにより行うことができる。
【0071】
［処理工程（Ｓ４）］
処理工程（Ｓ４）では、溶出工程（Ｓ３）で得られた有用成分溶出液を、珪藻土を含んだ材料で処理して、有用成分溶出液から微生物を除去する。これにより、たばこ香味液として、微生物フリーの有用成分溶出液を得る。処理工程（Ｓ４）は、第１実施形態の方法で説明した処理工程（Ｓ４）と同様に実施することができる。
処理工程（Ｓ４）では、溶出工程（Ｓ３）で得られた有用成分溶出液を、珪藻土を含んだ材料で処理して、有用成分溶出液から微生物を除去する。これにより、たばこ香味液として、微生物フリーの有用成分溶出液を得る。処理工程（Ｓ４）は、第１実施形態の方法で説明した処理工程（Ｓ４）と同様に実施することができる。
【0072】
処理工程（Ｓ４）で除去される微生物は、培養工程（Ｓ２）で使用された酵母およびたばこ上清に含まれる微生物である。たばこ上清に含まれる微生物としては、例えば、酵母、カビ、微細藻類などが挙げられる。後述の実施例３で、たばこ香味液の清澄性が実証されていることから、処理工程（Ｓ４）では、培養工程（Ｓ２）で使用された酵母およびたばこ上清に含まれるあらゆる微生物が除去できるとともに、微生物以外の微粒子、例えば１μｍ以上のサイズの微粒子も除去できると考えられる。
【0073】
第２実施形態に係る方法は、「微生物フリーの有用成分溶出液」を得た後、「微生物フリーの有用成分溶出液」から有機溶媒を除去することを更に含んでいてもよい。有機溶媒の除去は、減圧濃縮、常圧濃縮、噴霧乾燥などの一般的な方法により行うことができる。
【0074】
＜１－３．効果＞
本発明の方法によれば、たばこ香味を損なうことなく、たばこ抽出液（第１実施形態では「たばこ上清」、第２実施形態では「有用成分溶出液」）から酵母等の微生物を簡便な方法で除去することができる。これにより、たばこ香味を損なうことなく、微生物量の低減したたばこ香味液（第１実施形態では「微生物フリーのたばこ上清」、第２実施形態では「微生物フリーの有用成分溶出液」）を簡便な方法で製造することができる。
本発明の方法によれば、たばこ香味を損なうことなく、たばこ抽出液（第１実施形態では「たばこ上清」、第２実施形態では「有用成分溶出液」）から酵母等の微生物を簡便な方法で除去することができる。これにより、たばこ香味を損なうことなく、微生物量の低減したたばこ香味液（第１実施形態では「微生物フリーのたばこ上清」、第２実施形態では「微生物フリーの有用成分溶出液」）を簡便な方法で製造することができる。
【0075】
以下に、本発明の効果を詳細に説明する。
本発明の方法は、たばこ抽出液から微生物を除去するために、無機多孔質体を含む材料で処理するだけでよく、精密濾過を行う必要がない。精密濾過は、濾過に時間を要するとともに、濾過膜の詰まりを解消するなど装置のメンテナンスに労力がかかる。本発明の方法は、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ層に通した場合も抵抗が少なく、精密濾過膜での処理と比較して明らかに簡便であり、生産効率の点で優れている。
本発明の方法は、たばこ抽出液から微生物を除去するために、無機多孔質体を含む材料で処理するだけでよく、精密濾過を行う必要がない。精密濾過は、濾過に時間を要するとともに、濾過膜の詰まりを解消するなど装置のメンテナンスに労力がかかる。本発明の方法は、たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ層に通した場合も抵抗が少なく、精密濾過膜での処理と比較して明らかに簡便であり、生産効率の点で優れている。
【0076】
また、本発明の方法は、精密濾過膜での処理と同程度に、微生物を除去することができるため、微生物の除去効率という点で優れている（後述の実施例１および３を参照）。
【0077】
また、本発明の方法は、微生物や微生物と同サイズの微粒子を除去するが、たばこ香味成分を除去しないため、本発明のたばこ香味液は、香味吸引器のたばこ香味源として優れている（後述の実施例４を参照）。
【0078】
とりわけ、第２実施形態に係る方法は、たばこ上清中で酵母を培養し、その後、酵母の菌体内に含まれる有用成分をたばこ上清に溶出させ、得られた有用成分溶出液から酵母を除去する。このため、第２実施形態に係る方法によれば、多量の有用成分を含み、かつ微生物量の低減したたばこ香味液を製造することができる。
【0079】
＜２．たばこ香味液＞
別の側面によれば、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液が提供される。
別の側面によれば、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液が提供される。
【0080】
上述のとおり、たばこ香味液は、以下の何れであってもよい：
（i）第１実施形態の方法により得られる「微生物フリーのたばこ上清」；および
（ii）第２実施形態の方法により得られる「微生物フリーの有用成分含有液」。
（i）第１実施形態の方法により得られる「微生物フリーのたばこ上清」；および
（ii）第２実施形態の方法により得られる「微生物フリーの有用成分含有液」。
【0081】
したがって、上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液は、上記２種類の生成物を具体例として包含する。
【0082】
上述のとおり、たばこ香味液は、微生物が除去されているため、微生物の代謝によりたばこ香味液の組成が変化する可能性をなくすことができ、香味吸引器の香味源として使用した際に品質安定性の観点で優れている。
【0083】
とりわけ、第２実施形態に係る方法により得られるたばこ香味液は、上述の第２実施形態に係る方法により製造されるため、多量の有用成分を含むことができる。したがって、かかるたばこ香味液を香味吸引器に組み込んだ場合、香味吸引器において有用成分の効果を顕著に発揮することができる。例えば、有用成分が香味寄与成分である場合、たばこ香味液は、多量の香味寄与成分を含むことができるため、香味吸引器などのたばこ製品に組み込んだ場合、増強した香味をユーザに提供することができる。
【0084】
上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液は、公知技術に従って、香味吸引器などのたばこ製品に組み込むことができる。以下に、たばこ香味液の使用例を説明する。
【0085】
例えば、たばこ香味液は、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加し、得られた混合物を乾燥させることにより、使用することができる。
【0086】
あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物から、シートたばこやたばこ顆粒などのたばこ成形体を作製し、たばこ成形体をたばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
【0087】
あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製し、たばこパウダーをたばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、使用することができる。
【0088】
あるいは、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣に添加し、得られた混合物を乾燥させ粉砕してたばこパウダーを作製し、たばこパウダーを水に懸濁してたばこスラリーを調製し、たばこスラリーをたばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、使用することができる。
【0089】
あるいは、たばこ香味液は、公知技術に従ってカプセル化し、得られた香料カプセルをたばこ製品のフィルタ部分に組み込むことができる。
【0090】
＜３．たばこ添加物＞
上述のとおり、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣と組み合わせて使用してもよい。したがって、別の側面によれば、
上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液と、
上述の「たばこ香味液の製造方法」においてたばこ上清を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物が提供される。
上述のとおり、たばこ香味液は、上述の抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣と組み合わせて使用してもよい。したがって、別の側面によれば、
上述の「たばこ香味液の製造方法」により製造されるたばこ香味液と、
上述の「たばこ香味液の製造方法」においてたばこ上清を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物が提供される。
【0091】
以下に、たばこ添加物の具体例を説明する。
例えば、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を乾燥させることにより得られた生成物であってもよい。この生成物は、たばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
例えば、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を乾燥させることにより得られた生成物であってもよい。この生成物は、たばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
【0092】
あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、シート形状や顆粒形状などの特定形状に成形することにより得られたたばこ成形体であってもよい。たばこ成形体は、たばこ製品のたばこ香味源として使用することができる。
【0093】
あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕することにより得られたたばこパウダーであってもよい。たばこパウダーは、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、たばこ材料の香味を増強することができる。
【0094】
あるいは、たばこ添加物は、たばこ香味液と、抽出工程（Ｓ１）で得られたたばこ残渣との混合物を、乾燥させ、パウダー状に粉砕し、得られたパウダーを水に懸濁させることにより得られたたばこスラリーであってもよい。たばこスラリーは、たばこ材料（例えば、除骨葉や葉たばこ）に添加することにより、たばこ材料の香味を増強することができる。
【0095】
たばこ添加物は、必要に応じて、バインダー、ｐＨ調整剤、防腐剤、酸化防止剤などの添加剤を含んでいてもよい。
【0096】
＜４．香味吸引器＞
上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、任意のたばこ製品に組み込むことができる。典型的な例として、上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、燃焼型香味吸引器や加熱型香味吸引器などの香味吸引器に組み込むことができる。すなわち、別の側面によれば、上述の「たばこ香味液」を含む香味吸引器または上述の「たばこ添加物」を含む香味吸引器が提供される。
上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、任意のたばこ製品に組み込むことができる。典型的な例として、上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、燃焼型香味吸引器や加熱型香味吸引器などの香味吸引器に組み込むことができる。すなわち、別の側面によれば、上述の「たばこ香味液」を含む香味吸引器または上述の「たばこ添加物」を含む香味吸引器が提供される。
【0097】
上述の「たばこ香味液」または上述の「たばこ添加物」は、たばこ製品をユーザが使用した際に、増強した香味を味わうことができれば、たばこ製品の任意の位置に組み込むことができる。
【0098】
燃焼型香味吸引器の例として、シガレット、パイプ、キセル、葉巻、またはシガリロなどが挙げられる。燃焼型香味吸引器の一例、すなわち典型的な構成のシガレットを、図３に示す。
【0099】
図３に示す燃焼型香味吸引器１は、
たばこ充填材２ａとたばこ充填材２ａの周囲を巻装するたばこ巻紙２ｂとを含むたばこロッド２と、
濾材３ａと濾材３ａの周囲に巻かれたプラグラッパー３ｂとを含むフィルタ３と、
たばこロッド２とフィルタ３とを接続するようにたばこロッド２とフィルタ３上に巻かれたチップペーパー４と
を含む。
たばこ充填材２ａとたばこ充填材２ａの周囲を巻装するたばこ巻紙２ｂとを含むたばこロッド２と、
濾材３ａと濾材３ａの周囲に巻かれたプラグラッパー３ｂとを含むフィルタ３と、
たばこロッド２とフィルタ３とを接続するようにたばこロッド２とフィルタ３上に巻かれたチップペーパー４と
を含む。
【0100】
たばこロッド２は、たばこ刻やたばこ成形体などのたばこ充填材２ａを含む。たばこロッドは、通常のシガレットと同様、例えば、５～１０ｍｍの直径および４０～８０ｍｍの長さを有することができる。
【0101】
フィルタ３は、単一の濾材３ａからなるフィルタ、いわゆるプレーンフィルタである。濾材３ａは、通常のシガレットと同様、アセテートトウなどの濾材により構成することができる。フィルタ３は、たばこロッド２とほぼ同じ直径を有し、長さは、通常のシガレットと同様、例えば１５～４０ｍｍであり得る。プラグラッパー３ｂは、１０～１００μｍの厚さであり得、その通気性の有無は問わないが、通気性を有する紙を使用するのが一般的である。
【0102】
チップペーパー４は、プラグラッパー３ｂの全体とたばこ巻紙２ｂの一部とを覆うように、接着剤で接着されている。チップペーパー４は、例えば、たばこロッドの軸方向の長さ（幅）が２０～５０ｍｍ、厚さが１０～１００μｍであり得る。通常のシガレットと同様、チップペーパー４には、通気用の小開孔（ベンチレーション孔）がシガレットの円周方向に沿って一列、複数列若しくは不規則に多数穿設されていてもよい。
【0103】
図３に示す燃焼型香味吸引器１の場合、上述の「たばこ香味液」や上述の「たばこ添加物」は、例えば、たばこ充填材２ａまたは濾材３ａに組み込むことができる。
【0104】
次に、加熱型香味吸引器の例について説明する。加熱型香味吸引器の例として、
炭素熱源の燃焼熱でたばこ充填材を加熱する炭素熱源型吸引器（例えばＷＯ２００６／０７３０６５を参照）；
たばこ充填材を含むたばこスティックと、たばこスティックを電気加熱するための加熱デバイスとを備えた電気加熱型吸引器（例えばＷＯ２０１０／１１０２２６を参照）；または
液状のエアロゾル源をヒータにより加熱してエアロゾルを発生させ、エアロゾルとともにたばこ充填材由来の香味を吸引する液体霧化型吸引器（例えばＷＯ２０１５／０４６３８５を参照）
などが挙げられる。
炭素熱源の燃焼熱でたばこ充填材を加熱する炭素熱源型吸引器（例えばＷＯ２００６／０７３０６５を参照）；
たばこ充填材を含むたばこスティックと、たばこスティックを電気加熱するための加熱デバイスとを備えた電気加熱型吸引器（例えばＷＯ２０１０／１１０２２６を参照）；または
液状のエアロゾル源をヒータにより加熱してエアロゾルを発生させ、エアロゾルとともにたばこ充填材由来の香味を吸引する液体霧化型吸引器（例えばＷＯ２０１５／０４６３８５を参照）
などが挙げられる。
【0105】
以下に、加熱型香味吸引器の一例を、図４～６を参照して説明する。図４は、加熱型香味吸引器の一例を示す斜視図である。図５は、たばこスティックの内部構造を示す図である。図６は、エアロゾル生成装置の内部構造を示す図である。
【0106】
図４に示すとおり、加熱型香味吸引器１００は、
たばこ充填材とエアロゾル源とを含むたばこスティック１１０と、
たばこスティック１１０を着脱可能に装着するエアロゾル生成装置１２０であって、たばこスティック１１０を加熱してエアロゾル源からエアロゾルを発生させるとともに、エアロゾルの作用によりたばこ充填材から香味成分を放出させるエアロゾル生成装置１２０と
を有する。
たばこ充填材とエアロゾル源とを含むたばこスティック１１０と、
たばこスティック１１０を着脱可能に装着するエアロゾル生成装置１２０であって、たばこスティック１１０を加熱してエアロゾル源からエアロゾルを発生させるとともに、エアロゾルの作用によりたばこ充填材から香味成分を放出させるエアロゾル生成装置１２０と
を有する。
【0107】
たばこスティック１１０は、交換可能なカートリッジであり、長手方向に沿って延びる柱状形状を有する。たばこスティック１１０は、エアロゾル生成装置１２０に挿入された状態で加熱されることによってエアロゾルおよび香味成分を発生するように構成されている。
【0108】
図５に示すとおり、たばこスティック１１０は、充填物１１１と、充填物１１１を巻装する第１巻紙１１２とを含む基材部１１Ａと、基材部１１Ａとは反対側の端部を形成する吸口部１１Ｂとを有する。基材部１１Ａと吸口部１１Ｂは、第２巻紙１１３によって連結されている。
【0109】
吸口部１１Ｂは、紙管部１１４と、フィルタ部１１５と、紙管部１１４とフィルタ部１１５との間に配置された中空セグメント部１１６とを有する。紙管部１１４は、紙を円筒形に巻いて形成された紙管であり、内側は空洞である。フィルタ部１１５は、アセテートトウなどの濾材を含む。中空セグメント部１１６は、１つ又は複数の中空チャネルを有する充填層を含む。フィルタ部１１５の濾材と中空セグメント部１１６の充填層とは、プラグラッパー１１７で覆うことにより連結されている。充填層は、繊維から構成され、繊維の充填密度が高いため、吸引時は、空気やエアロゾルは中空チャンネルのみを流れることになり、充填層内はほとんど流れない。たばこスティック１１０において、フィルタ部１１５でのエアロゾル成分の濾過による減少を少なくしたいときに、フィルタ部１１５の長さを短くして中空セグメント部１１６で置き換えることはエアロゾルのデリバリー量を増大させるために有効である。
【0110】
吸口部１１Ｂは３つのセグメントから構成されているが、吸口部１１Ｂは１つ又は２つのセグメントから構成されていてもよいし、４つ又はそれ以上のセグメントから構成されていてもよい。例えば、中空セグメント部１１６を省略し、紙管部１１４とフィルタ部１１５を互いに隣接配置して吸口部１１Ｂを形成することもできる。
【0111】
たばこスティック１１０の長手方向の長さは、４０～９０ｍｍであることが好ましく、５０～７５ｍｍであることがより好ましく、５０～６０ｍｍであることがさらに好ましい。たばこスティック１１０の円周は１５～２５ｍｍであることが好ましく、１７～２４ｍｍであることがより好ましく、２０～２３ｍｍであることがさらに好ましい。また、たばこスティック１１０の長手方向において、基材部１１Ａの長さは２０ｍｍ、紙管部１１４の長さは２０ｍｍ、中空セグメント部１１６の長さは８ｍｍ、フィルタ部１１５の長さは７ｍｍであってよいが、これら個々のセグメントの長さは、製造適性、要求品質等に応じて、適宜変更できる。
【0112】
充填物１１１は、たばこ充填材とエアロゾル源とを含む。エアロゾル源は、所定温度で加熱されてエアロゾルを発生する。エアロゾル源として、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、トリアセチン、１，３－ブタンジオール、及びこれらの混合物を挙げることができる。充填物１１１中のエアロゾル源の含有量は、特に限定されず、十分な量のエアロゾルの発生と、良好な香喫味の付与の観点から、通常５質量％以上であり、好ましくは１０質量％以上であり、また、通常５０質量％以下であり、好ましくは２０質量％以下である。
【0113】
たばこ充填材は、上記で説明したとおり、例えば、たばこ刻の形態またはたばこ成形体の形態を有する。たばこ充填材は、たばこ刻の形態を有する場合、葉たばこ（すなわち熟成済たばこ葉）を、例えば０．８～１．２ｍｍの幅に刻むことにより得られたたばこ刻の形態を有していてもよい。あるいは、たばこ充填材は、シートたばこの形態を有する場合、シートたばこを、例えば０．８～１．２ｍｍの幅に刻むことにより得られた細長いシートたばこの形態を有していてもよいし、あるいは、シートたばこを刻まずにギャザー加工することにより得られた波形のシートたばこの形態を有していてもよい。
【0114】
たばこスティック１１０における充填物１１１の含有量は、基材部１１Ａが円周２２ｍｍ、長さ２０ｍｍの場合、例えば、２００～４００ｍｇであり、２５０～３２０ｍｇであることが好ましい。充填物１１１の水分含有量は、例えば、８～１８質量％であり、１０～１６質量％であることが好ましい。このような水分含有量であると、巻染みの発生を抑制し、基材部１１Ａの製造時の巻上適性を良好にする。
【0115】
第１巻紙１１２、第２巻紙１１３、およびプラグラッパー１１７は、それぞれ、シガレットで使用されるたばこ巻紙、チップペーパー、およびプラグラッパーと同じものを使用することができる。
【0116】
図５に示すたばこスティック１１０の場合、上述の「たばこ香味液」や上述の「たばこ添加物」は、例えば、充填物１１１またはフィルタ部１１５の濾材に組み込むことができる。
【0117】
図６に示すとおり、エアロゾル生成装置１２０は、たばこスティック１１０を挿入可能な挿入孔１３０を有する。すなわち、エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０を構成する内側筒部材１３２を有する。内側筒部材１３２は、例えばアルミニウムやステンレス（ＳＵＳ）のような熱伝導部材によって構成されていてよい。
【0118】
また、エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０を塞ぐ蓋部１４０を有していてよい。蓋部１４０は、挿入孔１３０を塞いだ状態と、挿入孔１３０を露出させた状態（図４参照）との間をスライド可能に構成されている。
【0119】
エアロゾル生成装置１２０は、挿入孔１３０に連通する空気流路１６０を有していてよい。空気流路１６０の一端は、挿入孔１３０に連結されており、空気流路１６０の他端は、挿入孔１３０とは別のところでエアロゾル生成装置１２０の外部（外気）に連通している。
【0120】
エアロゾル生成装置１２０は、空気流路１６０の、外気に連通する側の端部を覆う蓋部１７０を有していてよい。蓋部１７０は、空気流路１６０の、外気に連通する側の端部を覆った状態にすることもできるし、あるいは、空気流路１６０を露出させた状態にすることもできる。
【0121】
蓋部１７０は、空気流路１６０を覆った状態であっても空気流路１６０に気密に閉塞することはない。すなわち、蓋部１７０が空気流路１６０を覆った状態であっても、蓋部１７０付近を介して空気流路１６０内に外気が流入可能に構成されている。
【0122】
ユーザは、エアロゾル生成装置１２０にたばこスティック１１０を挿入した状態で、たばこスティック１１０の一端部、具体的には、図５に示される吸口部１１Ｂを咥え、吸引動作を行う。ユーザの吸引動作により、空気流路１６０に外気が流入する。空気流路１６０内に流入した空気は、挿入孔１３０内のたばこスティック１１０を通って、ユーザの口腔内に導かれる。
【0123】
エアロゾル生成装置１２０は、空気流路１６０内又は空気流路１６０を構成する壁部の外面に、温度センサを有していてよい。温度センサは、例えば、サーミスタや熱電対等であってよい。ユーザがたばこスティック１１０の吸口部１１Ｂを吸引すると、空気流路１６０内を蓋部１７０側からヒータ３０側に向かって流れる空気の影響で、空気流路１６０の内部温度又は空気流路１６０を構成する壁部の温度が低下する。温度センサは、この温度低下を測定することによってユーザの吸引動作を検知することができる。
【0124】
エアロゾル生成装置１２０は、バッテリ１０と、制御ユニット２０と、ヒータ３０と、を有する。バッテリ１０は、エアロゾル生成装置１２０で用いる電力を蓄積する。バッテリ１０は、充放電可能な二次電池であってよい。バッテリ１０は、例えばリチウムイオン電池であってよい。
【0125】
ヒータ３０は、内側筒部材１３２の周りに設けられていてよい。ヒータ３０を収容する空間と、バッテリ１０を収容する空間は、隔壁１８０によって互いに分離されていてよい。これにより、ヒータ３０により加熱された空気が、バッテリ１０を収容する空間内に流入することを抑制することができる。したがって、バッテリ１０の温度上昇を抑制することができる。
【0126】
ヒータ３０は、柱状のたばこスティック１１０の外周を加熱可能な筒形状であることが好ましい。ヒータ３０は、例えばフィルムヒータであってよい。フィルムヒータは、一対のフィルム状の基板と、一対の基板の間に挟まれた抵抗発熱体とを有していてよい。フィルム状の基板は、耐熱性及び電気絶縁性に優れた材料から作られることが好ましく、典型的には、ポリイミドから作られる。抵抗発熱体は、銅、ニッケル合金、クロム合金、ステンレス、白金ロジウム等の金属材料の１つ又は２つ以上から作られることが好ましく、例えば、ステンレス製の基材によって形成され得る。さらに、抵抗発熱体はフレキシブルプリント回路（ＦＰＣ）によって電源と接続するために接続部位及びそのリード部に銅メッキを施してもよい。
【0127】
好ましくは、熱収縮チューブが、ヒータ３０の外側に設けられていてよい。熱収縮チューブは、熱により半径方向に収縮するチューブであり、例えば熱可塑性エラストマによって構成されている。熱収縮チューブの収縮作用により、ヒータ３０が内側筒部材１３２に押し付けられる。これにより、ヒータ３０と内側筒部材１３２の密着性が高まるので、ヒータ３０からたばこスティック１１０への内側筒部材１３２を介した熱の伝導性が高まる。
【0128】
エアロゾル生成装置１２０は、ヒータ３０の半径方向の外側、好ましくは熱収縮チューブの外側に、筒状の断熱材を有していてもよい。断熱材は、ヒータ３０の熱を遮断することによって、エアロゾル生成装置１２０の筐体外面が過度な高温に達するのを防止する役割を果たし得る。断熱材は、例えば、シリカエアロゲル、カーボンエアロゲル、アルミナエアロゲル等のエアロゲルから作られることができる。断熱材としてのエアロゲルは、典型的には、断熱性能が高くかつ製造コストが比較的低いシリ力エアロゲルであってよい。ただし、断熱材は、グラスウールやロックウール等の繊維系断熱材であってもよいし、ウレタンフォームやフェノールフォームの発泡系断熱材であってもよい。或いは、断熱材は真空断熱材であってもよい。
【0129】
断熱材は、たばこスティック１１０に面する内側筒部材１３２と、断熱材の外側の外側筒部材１３４との間に設けられていてよい。外側筒部材１３４は、例えばアルミニウムやステンレス（ＳＵＳ）のような熱伝導部材によって構成されていてよい。断熱材は、密閉された空間内に設けられることが好ましい。
【0130】
制御ユニット２０は、制御基板、ＣＰＵ、及びメモリ等を含んでいてよい。また、エアロゾル生成装置１２０は、制御ユニット２０による制御の下でユーザに各種情報を報知するための通知部を有していてもよい。通知部は、例えばＬＥＤのような発光素子もしくは振動素子、又はこれらの組み合わせであってよい。
【0131】
制御ユニット２０は、ユーザの起動要求を検知したら、バッテリ１０からヒータ３０への電力供給を開始する。ユーザの起動要求は、例えば、ユーザによる押しボタンやスライド式スイッチの操作や、ユーザの吸引動作によって為される。ユーザの起動要求は、押しボタン１５０の押下によって為されてもよい。より具体的には、ユーザの起動要求は、蓋部１４０が開いた状態での押しボタン１５０の押下によって為されてもよい。或いは、ユーザの起動要求は、ユーザの吸引動作の検知によって為されてもよい。ユーザの吸引動作は、例えば前述したような温度センサによって検知できる。
【0132】
＜５．好ましい実施形態＞
以下に、好ましい実施形態をまとめて示す。
［Ａ１］ たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、前記たばこ抽出液から微生物を除去することを含む、たばこ香味液の製造方法。
以下に、好ましい実施形態をまとめて示す。
［Ａ１］ たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、前記たばこ抽出液から微生物を除去することを含む、たばこ香味液の製造方法。
【0133】
［Ａ２］ たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーのたばこ上清を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
［Ａ３］ たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーの有用成分溶出液を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーのたばこ上清を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
［Ａ３］ たばこ材料から前記たばこ材料に含まれる水溶性成分を水性溶媒で抽出して、たばこ上清を得ることと、
酵母を前記たばこ上清中で培養して、酵母含有培養液を得ることと、
前記酵母含有培養液と、有機溶媒を含む溶出溶媒とを混合し、得られた混合物に含有される前記酵母から、前記酵母の菌体内に含まれる有用成分を、前記混合物の液体部分に溶出させて、有用成分溶出液を得ることと、
前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ材料で処理して、微生物フリーの有用成分溶出液を得ることと
を含む、たばこ香味液の製造方法。
【0134】
［Ａ４］ 前記処理が、前記たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ５］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ６］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
［Ａ５］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ６］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ層に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
【0135】
［Ａ７］ 前記処理が、前記たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ８］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ９］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
［Ａ８］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ９］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ成形体に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
【0136】
［Ａ１０］ 前記処理が、前記たばこ抽出液を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ１１］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ１２］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
［Ａ１１］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ１２］ 前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質体を含んだ粒子の集合体に通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
【0137】
［Ａ１３］ 前記処理が、前記たばこ抽出液を、無機多孔質を含んだ粒子を充填したカラムに通すことにより行われる［Ａ１］に記載の方法。
［Ａ１４］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質を含んだ粒子を充填したカラムに通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ１５］前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質を含んだ粒子を充填したカラムに通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
［Ａ１４］ 前記処理が、前記たばこ上清を、無機多孔質を含んだ粒子を充填したカラムに通すことにより行われる［Ａ２］に記載の方法。
［Ａ１５］前記処理が、前記有用成分溶出液を、無機多孔質を含んだ粒子を充填したカラムに通すことにより行われる［Ａ３］に記載の方法。
【0138】
［Ａ１６］ 前記粒子が、＜４００μｍ、一般的には１０～４００μｍ、好ましくは＜１００μｍ、より好ましくは１０～１００μｍ、更に好ましくは１０～８０μｍ、更に好ましくは３０～７５μｍの粒度を有する［Ａ１０］～［Ａ１５］の何れか１に記載の方法。
［Ａ１７］ 前記無機多孔質体が、珪藻土またはゼオライトである［Ａ１］～［Ａ１６］の何れか１に記載の方法。
［Ａ１８］ 前記無機多孔質体を含んだ粒子が、珪藻土のみからなる粒子またはゼオライトのみからなる粒子である［Ａ１０］～［Ａ１７］の何れか１に記載の方法。
［Ａ１７］ 前記無機多孔質体が、珪藻土またはゼオライトである［Ａ１］～［Ａ１６］の何れか１に記載の方法。
［Ａ１８］ 前記無機多孔質体を含んだ粒子が、珪藻土のみからなる粒子またはゼオライトのみからなる粒子である［Ａ１０］～［Ａ１７］の何れか１に記載の方法。
【0139】
［Ａ１９］ 前記たばこ材料がたばこ刻である［Ａ２］～［Ａ１８］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２０］ 前記水性溶媒が、水または含水エタノール、好ましくは水、より好ましくは２０～７０℃の水である［Ａ２］～［Ａ１９］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２１］ 前記酵母が、ロドトルラ（Rhodotorula）属の酵母、キサントフィロマイセス（Xanthophyllomyces）属の酵母、ヤロウィア（Yarrowia）属の酵母、リポマイセス（Lipomyces）属の酵母、サッカロマイセス（Saccharomyces）属の酵母、サイバーリンドネラ（Cyberlindnera）属の酵母、およびウィッカーハモマイセス（Wickerhamomyces）属の酵母からなる群より選択される少なくとも１種類の酵母である［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２０］の何れか１に記載の方法。。
［Ａ２０］ 前記水性溶媒が、水または含水エタノール、好ましくは水、より好ましくは２０～７０℃の水である［Ａ２］～［Ａ１９］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２１］ 前記酵母が、ロドトルラ（Rhodotorula）属の酵母、キサントフィロマイセス（Xanthophyllomyces）属の酵母、ヤロウィア（Yarrowia）属の酵母、リポマイセス（Lipomyces）属の酵母、サッカロマイセス（Saccharomyces）属の酵母、サイバーリンドネラ（Cyberlindnera）属の酵母、およびウィッカーハモマイセス（Wickerhamomyces）属の酵母からなる群より選択される少なくとも１種類の酵母である［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２０］の何れか１に記載の方法。。
【0140】
［Ａ２２］ 前記溶出溶媒が、有機溶媒、または有機溶媒と水との混合物である［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２１］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２３］ 前記有機溶媒が、水と混和性を有する有機溶媒、好ましくは水と混和性を有するアルコールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２４］ 前記溶出溶媒が、水と混和性を有するアルコール、またはその含水アルコールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２３］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２３］ 前記有機溶媒が、水と混和性を有する有機溶媒、好ましくは水と混和性を有するアルコールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２２］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２４］ 前記溶出溶媒が、水と混和性を有するアルコール、またはその含水アルコールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２３］の何れか１に記載の方法。
【0141】
［Ａ２５］ 前記有機溶媒が、１０～１４．５のＳＰ値を有する有機溶媒、好ましくは、１０～１４．５のＳＰ値を有するアルコール、より好ましくは、エタノール、イソプロパノール、メタノールまたはブタノール、更に好ましくは、エタノールまたはイソプロパノール、最も好ましくはエタノールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２４］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２６］ 前記溶出溶媒が、エタノールまたは含水エタノールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２５］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２７］ 前記溶出溶媒は、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合液中の前記有機溶媒の濃度が、５０体積％以上、好ましくは５０～９５体積％、より好ましくは６０～９５体積％になる量で、前記酵母含有培養液に添加される［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２６］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２６］ 前記溶出溶媒が、エタノールまたは含水エタノールである［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２５］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２７］ 前記溶出溶媒は、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合液中の前記有機溶媒の濃度が、５０体積％以上、好ましくは５０～９５体積％、より好ましくは６０～９５体積％になる量で、前記酵母含有培養液に添加される［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２６］の何れか１に記載の方法。
【0142】
［Ａ２８］ 前記溶出が、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合物を撹拌することにより行われる［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２７］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２９］ 前記溶出が、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合物を加熱することにより行われる［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２８］の何れか１に記載の方法。
［Ａ３０］ 前記微生物フリーの有用成分溶出液から前記有機溶媒を除去することを更に含む［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２９］の何れか１に記載の方法。
［Ａ２９］ 前記溶出が、前記酵母含有培養液と前記溶出溶媒との混合物を加熱することにより行われる［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２８］の何れか１に記載の方法。
［Ａ３０］ 前記微生物フリーの有用成分溶出液から前記有機溶媒を除去することを更に含む［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ２９］の何れか１に記載の方法。
【0143】
［Ａ３１］ 前記有用成分が、香味寄与成分である［Ａ３］、［Ａ６］、［Ａ９］、［Ａ１２］、［Ａ１５］～［Ａ３０］の何れか１に記載の方法。
［Ａ３２］ 前記香味寄与成分が、カロテノイド、脂肪酸、中性脂肪（すなわち、脂肪酸のグリセリンエステル）、酢酸エステル、脂肪酸エステル、有機酸、および高級アルコール（例えば、炭素数８～２２のアルコール）からなる群より選択される少なくとも１種類の成分である［Ａ３１］に記載の方法。
［Ａ３２］ 前記香味寄与成分が、カロテノイド、脂肪酸、中性脂肪（すなわち、脂肪酸のグリセリンエステル）、酢酸エステル、脂肪酸エステル、有機酸、および高級アルコール（例えば、炭素数８～２２のアルコール）からなる群より選択される少なくとも１種類の成分である［Ａ３１］に記載の方法。
【0144】
［Ｂ１］ ［Ａ１］～［Ａ３２］の何れか１に記載の方法により得られるたばこ香味液。
［Ｂ２］ 前記たばこ香味液が、［Ａ２］に記載される微生物フリーのたばこ上清である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
［Ｂ３］ 前記たばこ香味液が、［Ａ３］に記載される微生物フリーの有用成分溶出液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
［Ｂ２］ 前記たばこ香味液が、［Ａ２］に記載される微生物フリーのたばこ上清である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
［Ｂ３］ 前記たばこ香味液が、［Ａ３］に記載される微生物フリーの有用成分溶出液である［Ｂ１］に記載のたばこ香味液。
【0145】
［Ｃ１］ ［Ａ２］～［Ａ３２］の何れか１に記載の方法により得られるたばこ香味液と、
［Ａ２］～［Ａ３２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ上清を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物。
［Ｃ２］ 前記たばこ香味液が、［Ａ２］に記載される微生物フリーのたばこ上清である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
［Ｃ３］ 前記たばこ香味液が、［Ａ３］に記載される微生物フリーの有用成分溶出液である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
［Ａ２］～［Ａ３２］の何れか１に記載の方法において前記たばこ上清を得る際に得られるたばこ残渣と
を含むたばこ添加物。
［Ｃ２］ 前記たばこ香味液が、［Ａ２］に記載される微生物フリーのたばこ上清である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
［Ｃ３］ 前記たばこ香味液が、［Ａ３］に記載される微生物フリーの有用成分溶出液である［Ｃ１］に記載のたばこ添加物。
【0146】
［Ｄ１］ ［Ｂ１］～［Ｂ３］の何れか１に記載のたばこ香味液を含む香味吸引器。
［Ｄ２］ ［Ｃ１］～［Ｃ３］の何れか１に記載のたばこ添加物を含む香味吸引器。
［Ｄ３］ 前記香味吸引器が燃焼型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
［Ｄ４］ 前記香味吸引器が加熱型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
［Ｄ２］ ［Ｃ１］～［Ｃ３］の何れか１に記載のたばこ添加物を含む香味吸引器。
［Ｄ３］ 前記香味吸引器が燃焼型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
［Ｄ４］ 前記香味吸引器が加熱型香味吸引器である［Ｄ１］または［Ｄ２］に記載の香味吸引器。
【実施例】
【0147】
［実施例１］
実施例１では、本発明の方法に従って製造されたたばこ香味液の清澄性を評価した。
実施例１では、本発明の方法に従って製造されたたばこ香味液の清澄性を評価した。
【0148】
１－１．方法
黄色種の葉たばこを粉砕し、「たばこ材料」として使用した。黄色種の葉たばこの刻（１００ｇ）を粉砕器で１００μｍ以下のサイズまで粉砕し、６０℃の水６００ｍＬを加え、振盪（２００ｒｐｍ・２時間）した。これにより、葉たばこに含まれる水溶性成分を抽出した。その後、たばこ上清とたばこ残渣を吸引濾過により分離した。濾紙としてAdvantec No.60を使用した。得られた濾液を「たばこ上清」と呼ぶ。
黄色種の葉たばこを粉砕し、「たばこ材料」として使用した。黄色種の葉たばこの刻（１００ｇ）を粉砕器で１００μｍ以下のサイズまで粉砕し、６０℃の水６００ｍＬを加え、振盪（２００ｒｐｍ・２時間）した。これにより、葉たばこに含まれる水溶性成分を抽出した。その後、たばこ上清とたばこ残渣を吸引濾過により分離した。濾紙としてAdvantec No.60を使用した。得られた濾液を「たばこ上清」と呼ぶ。
【0149】
たばこ上清に以下の処理を行い、サンプルを調製した。
サンプル１：
たばこ上清５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。カラム溶出液をサンプル１とした。
サンプル１：
たばこ上清５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。カラム溶出液をサンプル１とした。
【0150】
比較サンプル１：
たばこ上清を比較サンプル１とした。
たばこ上清を比較サンプル１とした。
【0151】
リファレンスサンプル１：
たばこ上清５ｍＬを孔径０．２μｍのフィルタで精密濾過した。得られた濾液をリファレンスサンプル１とした。
たばこ上清５ｍＬを孔径０．２μｍのフィルタで精密濾過した。得られた濾液をリファレンスサンプル１とした。
【0152】
サンプル２：
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。カラム溶出液をサンプル２とした。
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。カラム溶出液をサンプル２とした。
【0153】
比較サンプル２：
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液を比較サンプル２とした。
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液を比較サンプル２とした。
【0154】
リファレンスサンプル２：
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液５ｍＬを、孔径０．２μｍのフィルタで精密ろ過した。得られた濾液をリファレンスサンプル２とした。
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液５ｍＬを、孔径０．２μｍのフィルタで精密ろ過した。得られた濾液をリファレンスサンプル２とした。
【0155】
各サンプルについて、吸光光度計を用いて６００ｎｍの吸光度を測定することで、清澄性を評価した。サンプル１および比較サンプル１の清澄性の基準として、リファレンスサンプル１を使用した。サンプル２および比較サンプル２の清澄性の基準として、リファレンスサンプル２を使用した。
【0156】
１－２．結果
吸光度の測定結果を以下の表に示す。
吸光度の測定結果を以下の表に示す。
【0157】
【表1】
【0158】
表１に示す吸光度は、リファレンスサンプルに対する吸光度差を表す。このため、表１において、サンプルの吸光度の値が０に近いほど、リファレンスサンプルと同等の清澄性を有することを示す。
【0159】
サンプル１の清澄性は、比較サンプル１よりも優位に高かった。この結果は、たばこ上清を、珪藻土を充填したカラムに通過させたことにより、清澄性を低下させていた分子量が大きな懸濁物（たばこ上清に含まれる微生物を含む）が除去されたことを示す。
【0160】
サンプル２の清澄性は、比較サンプル２よりも優位に高かった。この結果は、たばこ上清を、珪藻土を充填したカラムに通過させたことにより、清澄性を低下させていた分子量が大きな懸濁物（たばこ上清に含まれる微生物および添加された酵母を含む）が除去されたことを示す。
【0161】
上記結果は、本発明の方法により製造されたたばこ香味液の清澄性を実証していることから、本発明の方法によれば、添加された酵母だけでなく、たばこ上清に含まれるあらゆる微生物、例えばカビや細菌なども除去できると考えられる。
【0162】
［実施例２］
実施例２では、本発明の方法に従って製造されたたばこ香味液の酵母濃度を評価した。
実施例２では、本発明の方法に従って製造されたたばこ香味液の酵母濃度を評価した。
【0163】
２－１．方法
実施例１に記載される方法に従って、たばこ上清を得た。たばこ上清に以下の処理を行い、サンプルを調製した。
実施例１に記載される方法に従って、たばこ上清を得た。たばこ上清に以下の処理を行い、サンプルを調製した。
【0164】
サンプル３Ａ：
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液をサンプル３Ａとした。
たばこ上清１００ｍＬをオートクレーブで滅菌し、滅菌されたたばこ上清にSaccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように加え、一晩振とう培養した（２８℃、２４０ｒｐｍ）。培養後に得られた酵母含有培養液をサンプル３Ａとした。
【0165】
サンプル３Ｂ：
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、ガラス粉末（粒度：６３～１０６μｍ）（アズワン株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｂとした。
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、ガラス粉末（粒度：６３～１０６μｍ）（アズワン株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｂとした。
【0166】
サンプル３Ｃ：
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜１０５μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｃとした。
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜１０５μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｃとした。
【0167】
サンプル３Ｄ：
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜５０μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｄとした。
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜５０μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｄとした。
【0168】
サンプル３Ｅ：
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｅとした。
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｅとした。
【0169】
サンプル３Ｆ：
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の合成ゼオライト（粒度：＜７５μｍ）（富士フィルム和光純薬株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｆとした。
酵母含有培養液（サンプル３Ａ）５ｍＬを、粉状体の合成ゼオライト（粒度：＜７５μｍ）（富士フィルム和光純薬株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル３Ｆとした。
【0170】
サンプル４Ａ：
一方、酵母含有培養液（サンプル３Ａ）を遠心分離して遠心分離上清を得た。遠心分離上清をサンプル４Ａとした。
一方、酵母含有培養液（サンプル３Ａ）を遠心分離して遠心分離上清を得た。遠心分離上清をサンプル４Ａとした。
【0171】
サンプル４Ｂ：
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、ガラス粉末（６３～１０６μｍの粒径）（アズワン株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｂとした。
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、ガラス粉末（６３～１０６μｍの粒径）（アズワン株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｂとした。
【0172】
サンプル４Ｃ：
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜１０５μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｃとした。
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜１０５μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｃとした。
【0173】
サンプル４Ｄ：
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜５０μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｄとした。
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜５０μｍ）（IMERYS）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｄとした。
【0174】
サンプル４Ｅ：
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｅとした。
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｅとした。
【0175】
サンプル４Ｆ：
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の合成ゼオライト（粒度：＜７５μｍ）（富士フィルム和光純薬株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｆとした。
遠心分離上清（サンプル４Ａ）５ｍＬを、粉状体の合成ゼオライト（粒度：＜７５μｍ）（富士フィルム和光純薬株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させて、カラム溶出液を得た。このカラム溶出液をサンプル４Ｆとした。
【0176】
サンプル３Ａ～３Ｆ、４Ａ～４Ｆにおける酵母菌体数をコロニーカウント法により測定した。
【0177】
２－２．結果
酵母菌体数の測定結果を以下の表に示す。
酵母菌体数の測定結果を以下の表に示す。
【0178】
【表2】
【0179】
たばこ上清を珪藻土充填カラムに通過させた場合、酵母が確かに除去されていることが確認できた。珪藻土の粒度を変化させても、酵母を同様に除去することができた。また、たばこ上清をゼオライト充填カラムに通過させた場合も、酵母が確かに除去されていることが確認できた。一方、たばこ上清をガラス粉末充填カラムに通過させた場合、酵母を除去することができなかった。
【0180】
この結果は、本発明の方法に従ってたばこ上清を無機多孔質体で処理すると、添加された酵母を、検出不可能なレベルまで除去できることを示す。この結果と実施例１の結果から、本発明の方法は、添加された酵母に加えて、たばこ上清に含まれるあらゆる微生物、例えばカビや細菌なども除去できると考えられる。
【0181】
［実施例３］
実施例３では、第２実施形態に係る方法を実施した。
実施例３では、第２実施形態に係る方法を実施した。
【0182】
３－１．方法
サンプル５：
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させた。カラム溶出液をサンプル５とした。
サンプル５：
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液５ｍＬを、粉状体の珪藻土（粒度：＜３５４μｍ）（ジーエルサイエンス株式会社）を充填したカラム（内径１１ｍｍおよび長さ２５ｍｍ）に重力落下により通過させた。カラム溶出液をサンプル５とした。
【0183】
比較サンプル５：
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液を比較サンプル５とした。
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液を比較サンプル５とした。
【0184】
リファレンスサンプル５：
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液５ｍＬを、孔径０．２μｍのフィルタで精密濾過した。得られた濾液をリファレンスサンプル５とした。
第２実施形態に係る方法に従って、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）を行い、得られた有用成分溶出液５ｍＬを、孔径０．２μｍのフィルタで精密濾過した。得られた濾液をリファレンスサンプル５とした。
【0185】
以下に、抽出工程（Ｓ１）、培養工程（Ｓ２）および溶出工程（Ｓ３）の詳細を記載する。
【0186】
抽出工程（Ｓ１）
黄色種の葉たばこを粉砕し、「たばこ材料」として使用した。黄色種の葉たばこの刻（１００ｇ）を粉砕器で１００μｍ以下のサイズまで粉砕し、６０℃の水６００ｍＬを加え、振盪（２００ｒｐｍ・２時間）した。これにより、葉たばこに含まれる水溶性成分を抽出した。その後、ろ過により固液分離した。これにより、たばこ上清およびたばこ残渣を得た。
黄色種の葉たばこを粉砕し、「たばこ材料」として使用した。黄色種の葉たばこの刻（１００ｇ）を粉砕器で１００μｍ以下のサイズまで粉砕し、６０℃の水６００ｍＬを加え、振盪（２００ｒｐｍ・２時間）した。これにより、葉たばこに含まれる水溶性成分を抽出した。その後、ろ過により固液分離した。これにより、たばこ上清およびたばこ残渣を得た。
【0187】
培養工程（Ｓ２）
得られたたばこ上清３ｍＬに、Saccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように添加し、酵母をたばこ上清中で培養した。培養は、好気条件下において、２８℃で２４時間にわたって、振盪培養（２４０ｒｐｍ）により行った。培養後に得られた「酵母とたばこ上清との混合物」を「酵母含有培養液」と呼ぶ。
得られたたばこ上清３ｍＬに、Saccharomyces属の酵母（Saccharomyces cerevisiae）を１０5細胞／ｍＬの濃度になるように添加し、酵母をたばこ上清中で培養した。培養は、好気条件下において、２８℃で２４時間にわたって、振盪培養（２４０ｒｐｍ）により行った。培養後に得られた「酵母とたばこ上清との混合物」を「酵母含有培養液」と呼ぶ。
【0188】
溶出工程（Ｓ３）
培養開始から２４時間後、酵母含有培養液３ｍＬに、溶出溶媒としてエタノール７ｍＬを添加した。具体的には、エタノールは、酵母含有培養液とエタノールとの混合液中のエタノールの濃度が７０体積％になる量で添加した。
培養開始から２４時間後、酵母含有培養液３ｍＬに、溶出溶媒としてエタノール７ｍＬを添加した。具体的には、エタノールは、酵母含有培養液とエタノールとの混合液中のエタノールの濃度が７０体積％になる量で添加した。
【0189】
各サンプルについて、吸光光度計を用いて６００ｎｍの吸光度を測定することで、清澄性を評価した。サンプル５および比較サンプル５の清澄性の基準として、リファレンスサンプル５を使用した。
【0190】
３－２．結果
吸光度の測定結果を以下の表に示す。
吸光度の測定結果を以下の表に示す。
【0191】
【表3】
【0192】
表３に示す吸光度は、リファレンスサンプル５に対する吸光度差を表す。このため、表３において、サンプルの吸光度の値が０に近いほど、リファレンスサンプル５と同等の清澄性を有することを示す。
【0193】
サンプル５の清澄性は、比較サンプル５よりも優位に高かった。この結果は、第２実施形態に係る方法に従って得られた有用成分溶出液を、珪藻土を充填したカラムに通過させたことにより、清澄性を低下させていた分子量が大きな懸濁物（たばこ上清に含まれる微生物および添加された酵母を含む）が除去されたことを示す。
【0194】
［実施例４］
実施例４では、官能評価を行った。
実施例４では、官能評価を行った。
【0195】
４－１．方法
実施例１に記載されるとおり、サンプル１、比較サンプル１、リファレンスサンプル１、サンプル２、比較サンプル２、リファレンスサンプル２を調製し、たばこ香味液として使用した。各サンプル１ｍＬをプロピレングリコール１ｍＬと混合し、市販の電子シガレットを用いて霧化・吸引し、その香喫味を評価した。
実施例１に記載されるとおり、サンプル１、比較サンプル１、リファレンスサンプル１、サンプル２、比較サンプル２、リファレンスサンプル２を調製し、たばこ香味液として使用した。各サンプル１ｍＬをプロピレングリコール１ｍＬと混合し、市販の電子シガレットを用いて霧化・吸引し、その香喫味を評価した。
【0196】
４－２．結果
サンプル１と比較サンプル１との間に、香喫味の差異は検知できなかった。また、サンプル２と比較サンプル２との間に、香喫味の差異は検知できなかった。これらの結果は、たばこ上清を珪藻土カラムに通過させた場合、分子量が大きな懸濁物は除去されるが、香喫味に影響する低分子化合物は除去されず、この処理工程が、たばこ上清の香喫味に影響を及ぼさないことを示す。
サンプル１と比較サンプル１との間に、香喫味の差異は検知できなかった。また、サンプル２と比較サンプル２との間に、香喫味の差異は検知できなかった。これらの結果は、たばこ上清を珪藻土カラムに通過させた場合、分子量が大きな懸濁物は除去されるが、香喫味に影響する低分子化合物は除去されず、この処理工程が、たばこ上清の香喫味に影響を及ぼさないことを示す。
【0197】
サンプル１とリファレンスサンプル１との間に、香喫味の差異は検知できなかった。また、サンプル２とリファレンスサンプル２との間に、香喫味の差異は検知できなかった。これらの結果は、珪藻土カラムに通過させた場合と、精密ろ過を行った場合との間で、得られたたばこ香味液の香喫味に差が無いことを示す。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】