特許 7579570 術後治療用ＩＮ ＳＩＴＵ噴霧生体応答性免疫療法ゲル

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-10-30

(45)【発行日】2024-11-08

(54)【発明の名称】術後治療用ＩＮ ＳＩＴＵ噴霧生体応答性免疫療法ゲル

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20241031BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20241031BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20241031BHJP

   A61K 9/06 20060101ALI20241031BHJP

   A61K 47/42 20170101ALI20241031BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241031BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20241031BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20241031BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 D

A61K39/395 U

A61K9/14

A61K9/12

A61K9/06

A61K47/42

A61P35/00

A61P37/02

A61P43/00 111

A61P35/04

A61K45/00

【請求項の数】 28

(21)【出願番号】P 2020573146

(86)(22)【出願日】2019-06-28

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2021-11-04

(86)【国際出願番号】 US2019039951

(87)【国際公開番号】W WO2020006493

(87)【国際公開日】2020-01-02

【審査請求日】2022-06-27

(31)【優先権主張番号】62/692,526

(32)【優先日】2018-06-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】508290987

【氏名又は名称】ノース・キャロライナ・ステイト・ユニヴァーシティ

(74)【代理人】

【識別番号】100099623

【弁理士】

【氏名又は名称】奥山 尚一

(74)【代理人】

【氏名又は名称】松島 鉄男

(74)【代理人】

【識別番号】100125380

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 綾子

(74)【代理人】

【識別番号】100142996

【弁理士】

【氏名又は名称】森本 聡二

(74)【代理人】

【識別番号】100166268

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 祐

(74)【代理人】

【識別番号】100170379

【弁理士】

【氏名又は名称】徳本 浩一

(74)【代理人】

【識別番号】100180231

【弁理士】

【氏名又は名称】水島 亜希子

(74)【代理人】

【氏名又は名称】有原 幸一

(72)【発明者】

【氏名】グゥー，ヂェン

(72)【発明者】

【氏名】チェン，チィェン

【審査官】濱田 光浩

(56)【参考文献】

【文献】特表２０１５－５０８０７２（ＪＰ，Ａ）

【文献】Tomoya Yata et al.，DNA nanotechnology-based composite-type gold nanoparticle-immunostimulatory DNA hydrogel for tumor photothermal immunotherapy，Biomaterials，2017年09月09日，doi: 10.1016/j.biomaterials.2017.09.014.

【文献】組織接着剤，一般社団法人日本血液製剤協会website，2017年，http://www.ketsukyo.or.jp/plasma/fibrin-paste/fib_03.html

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｋ ９／００

Ａ６１Ｋ ４７／４２

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスであって、前記第１の成分がフィブリノゲンを含み、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触したときに起こり、少なくとも１つの前記成分が、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、ＣａＣＯ _３ と、抗ＣＤ４７抗体とを含み、前記第２の成分がトロンビンを含む、免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項2】

少なくとも１つの第２のナノ粒子をさらに含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項3】

前記第１の成分が、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子を含む、請求項１または２に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項4】

前記第１の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤をさらに含む、請求項３に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項5】

前記第２の成分が、前記第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項３に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項6】

前記第２の成分が、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項7】

前記第２の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤をさらに含む、請求項６に記載の免疫療法の生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項8】

前記第１の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項６に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項9】

前記第２の成分が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項10】

前記第１の成分が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項11】

前記マトリックスの投与の１４０時間後に３０％未満の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が放出される、請求項１～１０のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項12】

請求項１～１１のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックスであって、癌腫瘍の外科的切除の部位での転移を阻害する方法であって、前記切除部位に、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含む方法における使用のための免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。

【請求項13】

癌腫瘍の外科的切除の部位での転移を阻害する方法に用いるための医薬の調製における免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの使用であって、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが、第１の成分および第２の成分を含み、前記第１の成分がフィブリノゲンを含み、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触したときに起こり、前記成分の少なくとも１つが、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、ＣａＣＯ _３ と、抗ＣＤ４７抗体とを含み、前記第２の成分がトロンビンを含む、使用。

【請求項14】

前記第１の成分および第２の成分が、別々に対象に送達される、請求項１３に記載の使用。

【請求項15】

前記第１の成分が、前記第２の成分の前に対象の腫瘍の部位に送達される、請求項１３または１４に記載の使用。

【請求項16】

前記第１の成分が、前記第２の成分の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間前に投与される、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の使用。

【請求項17】

前記第１の成分が、前記第２の成分の後に対象の腫瘍の部位に送達される、請求項１３または１４に記載の使用。

【請求項18】

前記第１の成分が、前記第２の成分の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間後に投与される、請求項１３、１４、または１７のいずれか１項に記載の使用。

【請求項19】

前記第１および第２の成分が、同時に（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｌｙ）投与される、請求項１３に記載の使用。

【請求項20】

前記第１および第２の成分が、同時に（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与される、請求項１３に記載の使用。

【請求項21】

前記第１および第２の成分が、対象への投与前に一緒に混合される、請求項２０に記載の使用。

【請求項22】

前記第１および第２の成分のうちの少なくとも１つが、腫瘍の除去の前に切除部位に投与される、請求項１３～２１のいずれか１項に記載の使用。

【請求項23】

前記方法が、その後、前記第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することをさらに含む、請求項１３～２２のいずれか１項に記載の使用

【請求項24】

前記方法が、追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤の投与をさらに含む、請求項１３～２３のいずれに記載の使用。

【請求項25】

前記追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックス中で投与される、請求項２４に記載の使用。

【請求項26】

前記追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスとは別に投与される、請求項２４に記載の使用。

【請求項27】

腫瘍に対する自然または適応免疫応答を前記腫瘍の切除後に増加させるための医薬の調製における免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの使用であって、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが、第１の成分および第２の成分を含み、前記第１の成分がフィブリノゲンを含み、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触した場合に起こり、前記成分の少なくとも１つが、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、ＣａＣＯ _３ と、抗ＣＤ４７抗体とを含み、前記第２の成分がトロンビンを含む、使用。

【請求項28】

前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの投与が、対象において抗腫瘍応答を増加させ、全身的に腫瘍増殖を遅らせる、請求項１３～２７のいずれか１項に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【背景技術】

【0001】

Ｉ．背景技術
手術用技術が継続的に改善されているにもかかわらず、腫瘍切除後の残存微小腫瘍および／または循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）は、依然として難題である。外傷によって誘発された周術期の炎症は、腫瘍の再発、局所的な残存腫瘍の再発の加速、ならびに腫瘍の浸潤および転移の促進のリスクが高いことも実証されている。しかしながら、全身化学療法および放射線療法などの確立された治療法に依存する現在のアプローチは、高い毒性プロファイルをもたし得る。必要なことは、毒性の発生を回避しながら腫瘍の浸潤および転移を減らす、新しいアプローチである。

【発明の概要】

【0002】

ＩＩ．概要
免疫療法生体応答性ゲルマトリックスに関連する方法および組成物、ならびに腫瘍増殖を治療、予防、および／または阻害するための、その使用方法が開示される。

【0003】

一態様では、第１の成分（例えば、フィブリニンなどのＨ＋スカベンジャー）および第２の成分（例えば、トロンビンなど）を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが本明書に開示される。ここで、マトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つ（すなわち、第１の成分および／または第２の成分）は、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。

【0004】

抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が抗ＣＤ４７抗体である、前述のいずれかの態様の免疫療法生体応答性ゲルマトリックスも本明細書に開示される。

【0005】

一態様では、前述のいずれかの態様の免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが本明細書に開示され、ここで免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、少なくとも１つの第２のナノ粒子および／または少なくとも１つの第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。

【0006】

癌腫瘍の外科的切除部位での腫瘍増殖および／または転移を治療、低減、阻害、および／または予防する方法も本明細書に開示され、方法は、第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを対象の切除部位に投与することを含む。ここでマトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つ（すなわち、第１の成分および／または第２の成分）は、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。したがって、一態様では、癌腫瘍の外科的切除部位での腫瘍の増殖および／または転移を治療、阻害、および／または予防する方法であって、前述のいずれかの態様の免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを対象の切除部位に投与することを含む方法が本明細書に開示される。

【0007】

一態様では、前述のいずれかの態様の、腫瘍増殖および／または転移を治療、低減、阻害、および／または予防する方法が本明細書に開示され、ここで、第１および第２の成分は、対象への送達の前に混合されるか（それにより、投与前にマトリックスを形成する）、成分が対象へ投与される際に同時に投与および混合されるか、または対象に別々に送達される（例えば、同時または連続投与など）。

【0008】

腫瘍の切除後に腫瘍に対する自然または適応免疫応答を増加させる方法も本明細書に開示され、方法は、腫瘍を有する対象に第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含む。ここで、マトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つ（すなわち、第１の成分および／または第２の成分）は、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。

【0009】

添付図面は、本明細書の一部に組み込まれ、本明細書の一部を構成し、いくつかの実施形態を図示し、明細書と共に、本開示の組成物および方法を説明する。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1A-1J】図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ、１Ｅ、１Ｆ、１Ｇ、１Ｈ、１Ｉ、および１Ｊは、ｉｎ ｓｉｔｕで形成された免疫療法フィブリンゲルの概略図および特性を示す。図１Ａは、迅速な噴霧後にｉｎ ｓｉｔｕで形成されたａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを含む免疫療法生体応答性フィブリンゲルが、手術後の腫瘍の再発および転移を効果的に阻害することを示す概略図である。フィブリンにカプセル化されたａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰは、手術創部位および残存ＴＭＥにおいてＨ＋を除去、続いてａＣＤ４７を放出することができ、それによってＴＡＭのＭ１様表現型への分極など、免疫を支援する切除後環境を誘発し、癌細胞に発現する「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルを遮断してマクロファージによる癌細胞の食作用を増加させ、Ｔ細胞による抗腫瘍反応を開始する。図１Ｂは、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰのＴＥＭ画像を示す（スケールバー：１００ｎｍ）。実験は３回繰り返した。図１Ｃは、カルシウム（緑）、酸素（赤）、およびガドリニウム標識されたａＣＤ４７（緑）を示す、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰの走査型ＴＥＭ（ＳＴＥＭ）画像を示す。実験は３回繰り返した。図１Ｄは、ＤＬＳによって測定されたａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰの平均流体力学的サイズを示す。図１Ｅおよび図１Ｆは、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを充填されたフィブリンゲルの代表的なＣｒｙｏ－ＳＥＭ画像を示す。スケールバーは１μｍである。図１Ｇは、フィブリノゲンがＦＩＴＣで標識され、ＣａＣＯ３ＮＰがＣｙ５．５で標識され、ａＣＤ４７がローダミン結合抗ラットＩｇＧ抗体で染色されたフィブリンの凍結切片の代表的な蛍光画像を示す。スケールバーは１０μｍである。図１Ｈは、異なるｐＨ値の溶液中のフィブリンからのａＣＤ４７の累積放出プロファイルを示す。図１Ｉは、異なる抗体の送達から６日後のａＣＤ４７－Ｃｙ５．５のｉｎ ｖｉｖｏ放出プロファイルを示す蛍光ＩＶＩＳイメージングを示す。実験は３回繰り返した。図１Ｊは、ａＣＤ４７－Ｃｙ５．５のｉｎ ｖｉｖｏ保持プロファイル（リリースプロファイルとも呼ばれる）の定量化を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５

【図2A-2C】図２Ａ、２Ｂ、および２Ｃは、２５ｍｍアルミニウムクロスハッチ平行プレートを備えたＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ＡＲ－２０００応力制御レオメータを使用して測定した、２５℃でゲル化する前および後のフィブリノゲンの動的レオロジー挙動を表す。全ての実験は、プレート間に５００μｍの間隙を有する線形粘弾性方式で行われ、少なくとも３回の測定が行われた。図２Ａは、溶液のような特性を示す、ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリノゲンサンプルの弾性（Ｇ’）および粘性（Ｇ’’）率の周波数スペクトルを示す。

【図2B】ゲルのような挙動を示すＩｇＧ＠ＣａＣＯ３＠フィブリンサンプルの弾性（Ｇ’）および粘性（Ｇ’’）率の周波数スペクトルを示す。図２Ｃは、ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３を含むフィブリノゲンとトロンビンとの混合物の時間関数としてのＧ’およびＧ’’の展開を示し、超高速のゾル－ゲル転移を示している。ＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）は、この研究で使用されたａＣＤ４７を示す。

【図3A-3B】図３Ａおよび３Ｂは、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰのＴＥＭ画像および放出プロファイルを示す。図３Ａは、異なるｐＨ値（７．４および６．５）のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に、異なる時間浸漬した後のａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰの代表的なＴＥＭ画像を示す（スケールバー：１００ｎｍ）。実験は３回繰り返した。図３Ｂは、異なるｐＨ値（６．５、６．８、および７．４）のＰＢＳに分散したａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰの経時的なＤＬＳ測定サイズ変化を示す。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍとして表示される（ｎ＝３）。

【図4】異なるｐＨ値（６．５、６．８、および７．４）のＰＢＳに分散したＣａＣＯ３ＮＰからのａＣＤ４７の経時的なＤＬＳ測定サイズ変化を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝３）。

【図5】ＣａＣＯ３ＮＰを含むリン酸緩衝液（ＰＢ）のｐＨ値の経時変化を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝３）。

【図6】異なる日数でのａＣＤ４７－Ｃｙ５．５のｉｎｖｉｖｏ放出プロファイルを示す蛍光ＩＶＩＳイメージングを示す。

【図7A-7I】図７Ａ、７Ｂ、７Ｃ、７Ｄ、７Ｅ、７Ｆ、７Ｇ、７Ｈ、および７Ｉは、免疫抑制ＴＭＥを軽減するためのＣａＣＯ３＠フィブリンの取り込みを示す。種々の治療の５日後のマウスからＢ１６Ｆ１０腫瘍を分析のために収集した。図７Ａおよび図７Ｂは、Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ４５＋細胞におけるＭ２－マクロファージ（ＣＤ２０６ｈｉ）およびＭ１－マクロファージ（ＣＤ８０ ｈｉ）の代表的なフローサイトメトリー分析画像、ならびに対応する定量化を示す。図７Ｃは、種々の腫瘍におけるＩＬ１０およびＩＬ１２ｐ７０の分泌レベルを示す。図７Ｄは、ＣＤ４５＋細胞の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す。図７Ｅは、ＣＤ４５＋細胞でゲーティングするＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ＋Ｇｒ－１＋）の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す。図７Ｆは、ＣＤ３＋細胞でゲーティングするＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔ細胞の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す。図７Ｇは、ウエスタンブロッティングによって分析されたＢ１６Ｆ１０腫瘍におけるＨＩＦ１－αタンパク質の発現レベルを示す。図７Ｈは、ＣａＣＯ３＠フィブリン治療前後の全身ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αレベルを示す。図７Ｉは、ＣＤ３＋細胞でゲーティングするＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の代表的なフローサイトメトリー分析（左）、および対応する定量化（右）を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す。統計的有意性は、テューキーの事後検定（７ｂ、７ｃ、７ｄ－７７ｆ、ｉ）またはウェルチのｔ検定（７ｈ）を使用した一元配置分散分析によって計算した。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１

【図8】図７Ｇのトリミングされていないウエスタンブロットを示す。図７Ｇに使用されているレーンは、赤い長方形で示される。

【図9A-9B】図９Ａおよび図９Ｂは、ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後の、ＤＣおよび腫瘍細胞のＰＤ－Ｌ１発現および腫瘍浸潤リンパ球のＰＤ－１発現（９Ａ）、ならびにＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－１平均強度の対応する定量化（９Ｂ）を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝４）。統計的有意性は、テューキーの事後検定を使用した一元配置分散分析によって計算した。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００５

【図10A-10F】図１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、１０Ｄ、１０Ｅ、および１０Ｆは、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの食作用を増加させ、ｉｎ ｖｉｖｏで抗腫瘍免疫応答を発揮するためのＣＤ４７遮断を示す。図１０Ａは、Ｂ１６Ｆ１０癌細胞がＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＤｅｅｐＲｅｄ（赤）で標識され、ＢＭＤＭがＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ（緑）で標識された、食作用アッセイの代表的な共焦点画像を示す（スケールバー、１００μｍ）。図１０Ｂは、ＢＭＤＭによる癌細胞の食作用の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す（ｎ＝３）。貪食された癌細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＧｒｅｅｎポジティブＢＭＤＭまたはＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＤｅｅｐＲｅｄ癌細胞におけるダブルポジティブＢＭＤＭのパーセンテージとして定量化した。図１０Ｃおよび図１０Ｄは、ＣＤ４５＋細胞でゲーティングするＬｙ６ＣｈｉＬｙ６Ｇ－マクロファージおよびＣＤ１１ｃ＋ＣＤ１１ｂ－ＤＣの代表的なフローサイトメトリー分析画像、ならびに対応する定量化を示す。図１０Ｅおよび図１０Ｆは、ＣＤ１１ｃ＋細胞でゲーティングするＣＤ８０＋ＣＤ８６＋ＤＣおよびＣＤ１０３＋ＤＣの代表的なフローサイトメトリー分析画像、ならびに対応する定量化を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝４）。統計的有意性は、テューキーの事後検定を使用した一元配置分散分析によって計算した。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１

【図11A】Ｂ１６Ｆ１０および４Ｔ１を含む癌細胞がＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＤｅｅｐＲｅｄで標識され、ＢＭＤＭがＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎで標識された食作用アッセイの代表的な共焦点画像を示す（スケールバー、１００μｍ）。

【図11B】ＢＭＤＭによる癌細胞（Ｂ１６Ｆ１０および４Ｔ１）の食作用の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す（ｎ＝３）。貪食された癌細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＧｒｅｅｎポジティブＢＭＤＭまたはＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＤｅｅｐＲｅｄ癌細胞におけるダブルポジティブＢＭＤＭのパーセンテージとして定量化した。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝３）。統計的有意性は、テューキーの事後検定を使用した一元配置分散分析によって計算した。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００５

【図12】ＣＤ４５＋細胞でゲーティングするＬｙ６Ｇ＋Ｌｙ６Ｃｄｉｍ好中球のパーセンテージを示す。

【図13A-13E】図１３Ａ、１３Ｂ、および１３Ｃは、手術後のＢ１６Ｆ１０腫瘍の再発を軽減するためのａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンを示す。図１３Ａは、原発腫瘍の除去後のＢ１６Ｆ１０腫瘍のｉｎ ｖｉｖｏ生物発光イメージングを示す。治療グループごとに４匹の代表的なマウスを示す。図１３Ｂおよび図１３Ｃは、種々のグループにおける個々の、および平均の腫瘍成長動態を示す。成長曲線は、対応するグループの１匹目のマウスの死によって停止した。統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて二元配置分散分析によって計算された。図１３Ｄは、表示された種々の治療後のマウスの腫瘍サイズに対応する生存率を示す。ｔａｔｉｓｔｉｃａｌ有意性は、ログラング（マンテル・コックス）検定によって計算した。図１３Ｅは、種々のグループのマウスの体重変化を示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝６～８）。統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて二元配置分散分析によって計算された。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１

【図14A-14F】図１４Ａ、１４Ｂ、１４Ｃ、１４Ｄ、１４Ｅ、および１４Ｆは、強力な抗腫瘍免疫応答を引き起こすａＣＤ４７ ＠ ＣａＣＯ３ ＠フィブリンを示す。種々の治療の５日後のマウスから、分析用にＢ１６Ｆ１０腫瘍を採取した。図１４Ａは、Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ４５＋細胞におけるＭ２－マクロファージ（ＣＤ２０６ｈｉ）およびＭ１－マクロファージ（ＣＤ８０ｈｉ）の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、ならびに対応する定量化（右）を示す。図１４Ｂは、種々のグループにおける腫瘍内のＴ細胞浸潤の代表的なフローサイトメトリー分析（左）、および対応する定量化結果（右）を示す。図１４Ｃおよび図１４Ｄは、種々の治療時の腫瘍内のＣＤ８＋細胞、およびＣＤ４＋Ｔ細胞の絶対パーセンテージを示す。図１４Ｅは、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＦ４／８０＋マクロファージの浸潤を示す腫瘍の代表的な免疫蛍光画像を示す。スケールバーは５０μｍである。図１４Ｆは、種々の治療の５日後にマウスから単離された血清中のサイトカインレベルを示す。エラーバーはｓ．ｅ．ｍを表す（ｎ＝４）。Ｇ１：未治療、Ｇ２：フィブリン、Ｇ３：ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３＠フィブリン、Ｇ４：ａＣＤ４７＠フィブリン、Ｇ５：ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて二元配置分散分析によって計算された。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１

【図15A-15B】ＣＤ４５＋細胞におけるＦ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋マクロファージの代表的なフローサイトメトリー分析画像（１５Ａ）、および対応する定量化（１５Ｂ）示す。

【図15C-15D】ＣＤ４５＋細胞におけるＭ２－マクロファージ（ＣＤ２０６ｈｉ）（１５Ｃ）、およびＭ１－マクロファージ（ＣＤ８０ ｈｉ）（１５Ｄ）のパーセンテージを示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す（ｎ＝４）。統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて二元配置分散分析によって計算された。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００５

【図16A】種々の治療後の、ＣＤ３＋細胞でゲーティングするＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔ細胞の代表的なフローサイトメトリー分析画像を示す。

【図16B】種々の治療後の、ＣＤ３＋細胞でゲーティングするＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔ細胞の対応する定量化を示す。

【図17A-17B】ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、およびＦ４／８０＋マクロファージの浸潤を示す腫瘍の代表的な免疫蛍光画像を示す。スケールバーは５０μｍである。

【図18A-18G】図１８Ａ、１８Ｂ、１８Ｃ、１８Ｄ、１８Ｅ、１８Ｆ、および１８Ｇは、全身性抗腫瘍免疫応答を誘発するａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンの局所治療を示す。図１８Ａは、不完全切除および転移のマウスモデルにおけるａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン療法を説明する概略図を示す。右側の腫瘍をａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療用の「原発腫瘍」として指定し、左側の腫瘍を治療なしの「遠隔腫瘍」として指定した。図１８Ｂは、局所的なａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療に応答したＢ１６Ｆ１０腫瘍のｉｎ ｖｉｖｏ生物発光イメージングを示す。図１８Ｃは、未治療および治療済みのマウス（ｎ＝８）における左右の腫瘍の成長曲線を示す。図１８Ｄは、２２日目の代表的なマウスの写真を示す。赤い矢印は、腫瘍を示す。図１８Ｅは、Ｆ４／８０＋ＣＤ１１ｂ＋ＣＤ４５＋細胞におけるＭ１－マクロファージ（ＣＤ８０ｈｉ）の代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す（ｎ＝４）。図１８Ｆは、ＣＤ１１ｃ＋細胞におけるＣＤ１０３＋ＤＣの代表的なフローサイトメトリー分析画像（左）、および対応する定量化（右）を示す（ｎ＝４）。図１８Ｇは、種々のグループにおける腫瘍内のＴ細胞浸潤の代表的なフローサイトメトリー分析（左）、およびＣＤ８＋Ｔ細胞のパーセンテージ（右）を示す（ｎ＝４）。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す。統計的有意性は、テューキーの事後検定を使用した一元配置分散分析によって計算した。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１

【図19】未治療処理および治療済みマウスの左右の腫瘍におけるＣＤ４＋細胞のパーセンテージ示す。エラーバーは、平均値の標準誤差（ｓ．ｅ．ｍ．）を表す。統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて一元配置分散分析によって計算された。Ｐ値：＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００５

【図20A-20D】図２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃ、および２０Ｄは、併用免疫療法による腫瘍再発および遠隔腫瘍の抑制を示す。図２０Ａは、種々の治療後の、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍のｉｎ ｖｉｖｏ生物発光イメージングを示す。実験は３回繰り返した。図２０Ｂおよび図２０Ｃは、種々のグループにおける個々の、および平均の腫瘍成長動態を示す。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍとして表示される（ｎ＝６）。対応するグループの１匹目のマウスの安楽死の時点で、成長曲線を中断した。図２０Ｃは、種々のグループのマウスの体重変化を示す。データは、平均±ｓ．ｅ．ｍとして表示される（ｎ＝６）。統計的有意性は、テューキー事後検定を用いて一元配置分散分析によって計算された。Ｐ 値：＊ Ｐ ＜０．０５

【発明を実施するための形態】

【0011】

ＩＶ．詳細な説明
本化合物、組成物、物品、機器および／または方法が開示および記載される前に、それらは、別段の明示がない限り、特定の合成法もしくは特定の組換えバイオテクノロジー法に限定されないか、または別段の明示がない限り、特定の試薬に限定されず、したがって、当然のことながら変化し得るものとして理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
Ａ．定義

【0012】

明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明確に示されない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「医薬担体」への言及は、２つ以上のそのような担体の混合物などを含む。

【0013】

本明細書では、範囲は、「約」を用いた一方の特定の値から、および／または「約」を用いた他方の特定の値までを表すことができる。そのような範囲が表される場合、別の実施形態は、一方の特定の値から、および／または他方の特定の値までを含む。同様に、先行詞「約」を使用することによって、値が近似値として表される場合、特定の値により別の実施形態が生じることが理解されるであろう。さらに、各範囲の端点は、他の端点と関連している場合も、他の端点とは独立している場合でも、有意であることが理解されるであろう。また、本明細書に開示される多くの値があり、各値はまた、その値自体に加えて、「約」を用いたその特定の値としても本明細書に開示されていることが理解される。例えば、「１０」という値が開示されていれば、「約１０」も開示されている。また、当業者によって適切に理解されるように、ある値が開示されている場合、その値「より少ないかまたは等しい（その値以下）」、その値「より多いかまたは等しい（その値以上）」および値間の可能な範囲も開示されていることが理解される。例えば、「１０」という値が開示されている場合、「１０より少ないかまたは等しい（１０以下）」だけでなく「１０より多いかまたは等しい（１０以上）」も開示されている。本出願全体を通じて、データは多くの異なる形式で提供されており、このデータは終点および始点、ならびにデータ点の任意の組み合わせに対する範囲を表していることも理解される。例えば、特定のデータ点「１０」と特定のデータ点１５が開示されていれば、１０と１５より多い（超）、より多いかまたは等しい（以上）、より少ない（未満）、より少ないかまたは等しい（以下）、および１０と１５に等しいことのほかに、１０と１５の間も考慮されていることが理解される。また、２つの特定の単位間の各単位も開示されていることも理解される。例えば、「１０および１５」が開示されていれば、１１、１２、１３および１４も開示されている。

【0014】

対象への「投与」には、薬剤を対象に導入または送達する任意の経路が含まれる。投与は、経口、局所、静脈内、皮下、経皮的（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、経皮吸収（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）、筋肉内、関節内、非経口、細動脈内、皮内、心室内、頭蓋内、腹腔内、病巣内、鼻腔内、直腸、膣、吸入による、移植されたリザーバー（ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）を介して、非経口（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、関節滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、腹腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内注射または注射技法）などを含む、任意の適切な経路によって行うことができる。本明細書で使用される「併用投与」、「組み合わせでの投与」、「同時投与」または「同時に投与された」とは、同じ時点で、または本質的に互いに直後に化合物が投与されることを意味する。後者の場合、２つの化合物は、同じ時点で化合物を投与した場合に達成される結果と観察された結果が、区別がつかないほど十分に近い時点で投与される。「全身投与」とは、例えば、循環系またはリンパ系への入口を通じて、対象の身体の広範な領域（例えば、身体の５０％超）に薬剤を導入または送達する経路を介して、薬剤を対象に導入または送達することを指す。これに対して、「局所投与」とは、投与点の領域または投与点に直接隣接した領域に薬剤を導入または送達し、治療的に有意な量で薬剤を全身的には導入しない経路を介して、薬剤を対象に導入または送達することを指す。例えば、局所的に投与された薬剤は、投与点の局所的近傍では容易に検出可能であるが、対象の身体の遠位部分では検出できないか、または無視できる量で検出可能である。投与には、自己投与と他者による投与が含まれる。

【0015】

「生体適合性」とは、一般的にレシピエントに対して無毒であり、かつ対象に重大な悪影響を引き起こさない材料およびその任意の代謝産物または分解産物を一般的に指す。

【0016】

「～を含む」とは、組成物、方法などが、列挙された要素を含むが、他の要素を排除するものではないことを意図している。組成物および方法を定義するために使用される場合の「～から本質的になる」とは、列挙された要素を含むが、その組み合わせにとって本質的に重要ないかなる要素も排除することを意味するものとする。したがって、本明細書で定義される要素から本質的になる組成物は、単離および精製方法からの微量の汚染物質ならびに薬学的に許容される担体、例えば、リン酸緩衝生理食塩水、保存剤などを排除しない。「～からなる」とは、他の成分の微量を超える元素および本発明の組成物を投与するための実質的な方法ステップを排除することを意味するものとする。これらの各移行句によって定義される実施形態は、本発明の範囲内である。

【0017】

「対照」とは、比較目的で実験に使用される代替的な対象またはサンプルである。対照は、「陽性」または「陰性」であり得る。

【0018】

「制御放出」または「持続放出」とは、ｉｎ ｖｉｖｏで所望の薬物動態プロファイルを達成するために、所定の剤形から制御された方法で薬剤を放出することを指す。「制御放出」薬剤送達の一態様は、薬剤放出の所望の動態を確立するために、製剤および／または剤形を操作する能力である。

【0019】

薬剤の「有効量」とは、所望の効果を提供するために十分な薬剤の量を指す。「有効」である薬剤の量は、対象の年齢および全身状態、特定の薬剤または複数種の薬剤などの多くの要因に応じて、対象毎に異なるであろう。したがって、定量化された「有効量」を特定することは必ずしも可能ではない。しかしながら、いかなる対象の場合であっても、適切な「有効量」は、日常的な実験を用いて、当業者によって決定されることができる。また、本明細書で使用される場合、特に別途明記されていない限り、薬剤の「有効量」は、治療有効量と予防有効量の両方をカバーする量を指すことができる。治療効果を達成するために必要な薬剤の「有効量」は、対象の年齢、性別および体重などの要因によって異なる場合がある。投与レジメンは、最適な治療反応を提供するように調整することができる。例えば、数回に分けた用量を毎日投与してもよいし、または治療状況の緊急性によって示されるように用量を比例的に減らしてもよい。

【0020】

「薬学的に許容される」成分とは、生物学的にまたは他の点で望ましくないものではない成分を指すことができ、すなわち、その成分は、重大な望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、またはそれが含まれる製剤の他のいずれの成分とも有害な形で相互作用することなく、本明細書に記載されているように、本発明の医薬製剤に組み込まれ、対象に投与され得る。ヒトへの投与に関連して使用される場合、この用語は、一般的に、成分が毒性試験および製造試験の要求される基準を満たしていること、または成分が米国食品医薬品局により作成された非活性成分ガイドに掲載されていることを含意する。

【0021】

「薬学的に許容される担体」（「担体」と呼ばれることもある）とは、一般的に安全かつ無毒である医薬組成物もしくは治療用組成物を調製するのに有用な担体または賦形剤を意味し、獣医学的用途および／またはヒト医薬用途もしくは治療用途に許容される担体を含む。「担体」または「薬学的に許容される担体」という用語は、リン酸緩衝生理食塩水、水、エマルジョン（油／水エマルジョンもしくは水／油エマルジョンなど）および／または様々な種類の湿潤剤を含み得るが、これらに限定されない。本明細書で使用されるように、「担体」という用語は、任意の賦形剤、希釈剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、脂質、安定剤、または医薬製剤で使用するために当該技術分野で周知であり、本明細書でさらに説明されるような他の材料を包含するが、これらに限定されない。

【0022】

「薬理学的に活性な」誘導体または類似体のように、「薬理学的に活性な」（または単に「活性な」）とは、親化合物と同じ種類の薬理活性を有し、ほぼ同等の程度である誘導体または類似体（例えば、塩、エステル、アミド、コンジュゲート、代謝産物、異性体、断片など）を指すことができる。

【0023】

「治療薬」とは、有益な生物学的効果を有する任意の組成物を指す。有益な生物学的効果には、治療効果、例えば、障害または他の望ましくない生理学的状態の治療、および予防効果、例えば、障害または他の望ましくない生理学的状態（例えば、非免疫原性癌）の予防の両方が含まれる。これらの用語はまた、塩、エステル、アミド、前駆薬剤（ｐｒｏａｇｅｎｔ）、活性代謝産物、異性体、断片、類似体などを含むがこれらに限定されない、本明細書に具体的に挙げられている有益な薬剤の薬学的に許容される、薬理学的に活性な誘導体も包含する。「治療薬」という用語が使用される場合、または特定の薬剤が具体的に特定されている場合、その用語は、その薬剤自体のほかに、薬学的に許容される、薬理学的に活性な塩、エステル、アミド、前駆薬剤、コンジュゲート、活性代謝産物、異性体、断片、類似体なども含むことを理解されたい。

【0024】

「ポリマー」とは、天然または合成の比較的高分子量の有機化合物を指し、その構造は繰り返しの小単位であるモノマーで表すことができる。ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレン、ゴム、セルロースが挙げられる。合成ポリマーは、典型的には、モノマーの付加重合または縮合重合によって形成される。「コポリマー」という用語は、２種以上の異なる繰り返し単位（モノマー残基）から形成されたポリマーを指す。限定としてではなく例示的に、コポリマーは、交互コポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマーまたはグラフトコポリマーであり得る。特定の態様ではまた、ブロックコポリマーの様々なブロックセグメントは、それ自体がコポリマーを含み得ることも企図される。「ポリマー」という用語は、天然ポリマー、合成ポリマー、ホモポリマー、ヘテロポリマーまたはコポリマー、付加ポリマーなどを含むがこれらに限定されないあらゆる形態のポリマーを包含する。

【0025】

組成物（例えば、薬剤を含む組成物）の「治療有効量」または「治療有効用量」とは、所望の治療結果を達成するために有効である量を指す。いくつかの実施形態では、所望の治療結果は、Ｉ型糖尿病の抑制である。いくつかの実施形態では、所望の治療結果は、肥満の抑制である。所定の治療薬の治療有効量は、典型的には、治療下の障害または疾患の種類および重症度、ならびに対象の年齢、性別および体重などの要因に関連して異なるであろう。この用語はまた、疼痛緩和などの所望の治療効果を促進するために有効な治療薬の量または治療薬の送達速度（例えば、経時的な量）を指すこともできる。正確な所望の治療効果は、治療されるべき状態、対象の耐性、投与されるべき薬剤および／または薬剤製剤（例えば、治療薬の効力、製剤中の薬剤の濃度など）、ならびに当業者によって理解される様々な他の要因に応じて異なるであろう。いくつかの例では、所望の生物学的または医学的な反応は、数日、数週間または数年の期間にわたって組成物の複数の用量を対象に投与した後に達成される。

【0026】

本明細書および添付の特許請求の範囲では、以下の意味を有するように定義されるいくつかの用語に言及する。

【0027】

「場合に応じた」または「場合に応じて」とは、続けて記載されるイベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合があり、この記載には、当該イベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを意味する。

【0028】

本出願全体を通じて、様々な刊行物が参照されている。本出願が属する技術分野の水準をより完全に記述するために、これらの刊行物の開示内容の全体は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。開示された参考文献はまた、その参考文献が依拠している文中で論じられている、その中に含まれる材料について、引用することにより個別かつ具体的に本明細書の一部をなすものとする。
Ｂ．組成物

【0029】

開示された組成物を調製するために使用される成分のほかに、本明細書に開示される方法の中で使用される組成物自体も開示されている。これらおよび他の材料は本明細書に開示されており、これらの材料の組み合わせ、サブセット、相互作用、グループなどが開示されている場合、これらの化合物の、各様々な個々かつ集合的な組み合わせおよび並べ替えへの具体的な言及は、明示的に開示されていないことがあるが、それぞれが本明細書で具体的に企図され、記載されていることが理解される。例えば、化学療法剤と遮断阻害剤を含む特定のヒドロゲルマトリックスが開示および論述されており、化学療法剤と閉塞阻害剤を含むヒドロゲルマトリックスを含む多数の分子に対して為し得る多数の修飾が論述されている場合、具体的に反対の記載がなければ、具体的に想定されているのは、化学療法剤と閉塞阻害剤を含むヒドロゲルマトリックスおよび可能である修飾のそれぞれのおよび全ての組み合わせおよび並べ替えである。したがって、分子Ａ、ＢおよびＣのクラスのほかに、分子Ｄ、ＥおよびＦのクラスも開示され、組み合わせ分子の例であるＡ－Ｄが開示されている場合、それぞれが個別に記載されていないときであっても、それぞれが個別かつ集合的に企図された意味の組み合わせＡ－Ｅ、Ａ－Ｆ、Ｂ－Ｄ、Ｂ－Ｅ、Ｂ－Ｆ、Ｃ－Ｄ、Ｃ－ＥおよびＣ－Ｆが開示されているものとみなされる。同様に、これらの任意のサブセットまたは組み合わせも開示されている。したがって、例えば、Ａ－Ｅ、Ｂ－ＦおよびＣ－Ｅのサブグループが、開示されているものとみなされる。この考え方は、開示された組成物を作製および使用する方法における工程を含むがこれらに限定されない、本出願の全ての態様に適用される。したがって、実行可能な様々な追加の工程が存在する場合、これらの追加の工程のそれぞれは、開示された方法の任意の特定の実施形態または実施形態の組み合わせにより実行可能であることが理解される。

【0030】

癌免疫療法の最近の成功は、それが癌の再発を防ぐために利用できることを示唆している。一態様では、第１の成分（例えば、フィブリニンなどのＨ＋スカベンジャー）および第２の成分（例えば、トロンビンなど）を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが本明書に開示される。ここで、マトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つ（すなわち、第１の成分および／または第２の成分）は、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、例えば、抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤などの、少なくとも１つの治療薬カーゴを含む。一態様では、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、例えば、デキストラン、ＣａＣＯ３、キトサン、ヒアルロン酸などのｐＨ応答性材料、ならびにそのポリマー、例えば、デキストランモノマーのポリマー（例えば、ｍ－デキストランモノマーのポリマー）を含み得る。

【0031】

治療薬カーゴは、抗体、小分子、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド類似物、ポリマー、または核酸を含み得ることが理解され、本明細書で企図される。例えば、治療薬カーゴは、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、またはＣＴＬＡ－４阻害剤（例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブなど）；免疫調節剤、例えば、任意の抗体、サイトカイン、ケモカイン、核酸、または小分子などを含み得、これらは、限定されないが、ＮＫ細胞、ＮＫ Ｔ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、肥満細胞を含む免疫細胞の活性、産生、増殖、または成熟を阻害または促進する。一態様では、免疫調節剤は、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１β、ＩＬ－２ ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、抗ＣＤ３抗体抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗４－１ＢＢ抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ２７抗体、抗ＬＡＧ３抗体、および／または抗－ＣＤ４７抗体、および／または１つ以上の化学治療剤であり得る。開示されたヒドロゲルマトリックスで使用できる化学治療剤は、Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ、Ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ，Ａｂｉｔｒｅｘａｔｅ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ａｂｒａｘａｎｅ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、ＡＢＶＤ、ＡＢＶＥ、ＡＢＶＥ－ＰＣ、ＡＣ、ＡＣ－Ｔ、Ａｄｃｅｔｒｉｓ（Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ Ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＡＤＥ、Ａｄｏ－Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ Ｅｍｔａｎｓｉｎｅ、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｆａｔｉｎｉｂ Ｄｉｍａｌｅａｔｅ、Ａｆｉｎｉｔｏｒ（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）、Ａｋｙｎｚｅｏ（Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ ａｎｄ Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｄａｒａ（Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）、Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ、Ａｌｅｃｅｎｓａ（Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ）、Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ、Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ、Ａｌｉｍｔａ（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、Ａｌｉｑｏｐａ（Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｋｅｒａｎ ｆｏｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｋｅｒａｎ Ｔａｂｌｅｔｓ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ）、Ａｌｏｘｉ（Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）
、Ａｌｕｎｂｒｉｇ（Ｂｒｉｇａｔｉｎｉｂ）、Ａｍｂｏｃｈｌｏｒｉｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ａｍｂｏｃｌｏｒｉｎ Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ、Ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ Ａｃｉｄ、Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ、Ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ、Ａｒｅｄｉａ（Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、Ａｒｉｍｉｄｅｘ（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）、Ａｒｏｍａｓｉｎ（Ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）、Ａｒｒａｎｏｎ（Ｎｅｌａｒａｂｉｎｅ）、Ａｒｓｅｎｉｃ Ｔｒｉｏｘｉｄｅ、Ａｒｚｅｒｒａ（Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ）、Ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ、Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ、Ａｖａｓｔｉｎ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、Ａｖｅｌｕｍａｂ、Ａｘｉｔｉｎｉｂ、Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ、Ｂａｖｅｎｃｉｏ（Ａｖｅｌｕｍａｂ）、ＢＥＡＣＯＰＰ、Ｂｅｃｅｎｕｍ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）
、Ｂｅｌｅｏｄａｑ（Ｂｅｌｉｎｏｓｔａｔ）、Ｂｅｌｉｎｏｓｔａｔ、Ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＢＥＰ、Ｂｅｓｐｏｎｓａ（Ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ、Ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ、Ｂｅｘｘａｒ（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ）、Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ、ＢｉＣＮＵ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）、Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ、Ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ、Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（Ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ）、Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ、Ｂｏｓｕｌｉｆ（Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ、Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ Ｖｅｄｏｔｉｎ、Ｂｒｉｇａｔｉｎｉｂ、ＢｕＭｅｌ、Ｂｕｓｕｌｆａｎ、Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）、Ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ、Ｃａｂｏｍｅｔｙｘ（Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ）、Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ、ＣＡＦ、Ｃａｍｐａｔｈ（Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ
）、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ、ＣＡＰＯＸ、Ｃａｒａｃ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ、ＣＡＲＢＯＰＬＡＴＩＮ－ＴＡＸＯＬ、Ｃａｒｆｉｌｚｏｍｉｂ、Ｃａｒｍｕｂｒｉｓ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）、Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ、Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ、Ｃａｓｏｄｅｘ（Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）、ＣＥＭ、Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ、Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｃｅｒｖａｒｉｘ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ、ＣＥＶ、Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ、ＣＨＬＯＲＡＭＢＵＣＩＬ－ＰＲＥＤＮＩＳＯＮＥ、ＣＨＯＰ、Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ、Ｃｌａｆｅｎ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）
、Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ、Ｃｌｏｆａｒｅｘ（Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）、Ｃｌｏｌａｒ（Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）、ＣＭＦ、Ｃｏｂｉｍｅｔｉｎｉｂ、Ｃｏｍｅｔｒｉｑ（Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ）、Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＣＯＰＤＡＣ、ＣＯＰＰ、ＣＯＰＰ－ＡＢＶ、Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、Ｃｏｔｅｌｌｉｃ（Ｃｏｂｉｍｅｔｉｎｉｂ）、Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ、ＣＶＰ、Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ、Ｃｙｆｏｓ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、Ｃｙｒａｍｚａ（Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ）、Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ、Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｃｙｔｏｓａｒ－Ｕ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、Ｃｙｔｏｘａｎ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ、Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ、Ｄａｃｏｇｅｎ（Ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ
、Ｄａｒａｔｕｍｕｍａｂ、Ｄａｒｚａｌｅｘ（Ｄａｒａｔｕｍｕｍａｂ）、Ｄａｓａｔｉｎｉｂ、Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ、Ｄｅｆｉｂｒｏｔｉｄｅ Ｓｏｄｉｕｍ、Ｄｅｆｉｔｅｌｉｏ（Ｄｅｆｉｂｒｏｔｉｄｅ Ｓｏｄｉｕｍ）、Ｄｅｇａｒｅｌｉｘ、Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ Ｄｉｆｔｉｔｏｘ、Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ、ＤｅｐｏＣｙｔ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ、Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ、Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ、Ｄｏｘｉｌ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｄｏｘ－ＳＬ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、ＤＴＩＣ－Ｄｏｍｅ（Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ）、Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ、Ｅｆｕｄｅｘ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｅｌｉｔｅｋ（Ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ）、Ｅｌｌｅｎｃｅ（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｌｏｔｕｚｕｍａｂ、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、Ｅｌｔｒｏｍｂｏｐａｇ Ｏｌａｍｉｎｅ、Ｅｍｅｎｄ（Ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ）、Ｅｍｐｌｉｃｉｔｉ（Ｅｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、Ｅｎａｓｉｄｅｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＥＰＯＣＨ、Ｅｒｂｉｔｕｘ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、Ｅｒｉｂｕｌｉｎ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｒｉｖｅｄｇｅ（Ｖｉｓｍｏｄｅｇｉｂ）、Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｅｒｗｉｎａｚｅ（Ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）、Ｅｔｈｙｏｌ（Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）
、Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ、Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｅｖａｃｅｔ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ、Ｅｖｉｓｔａ、（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｖｏｍｅｌａ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ、５－ＦＵ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、５－ＦＵ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｆａｒｅｓｔｏｎ（Ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）、Ｆａｒｙｄａｋ（Ｐａｎｏｂｉｎｏｓｔａｔ）、Ｆａｓｌｏｄｅｘ（Ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、ＦＥＣ、Ｆｅｍａｒａ（Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）、Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ、Ｆｌｕｄａｒａ（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ、Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｆｏｌｅｘ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｆｏｌｅｘ ＰＦＳ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＩＲＩ－ＢＥＶＡＣＩＺＵＭＡＢ、ＦＯＬＦＩＲＩ－ＣＥＴＵＸＩＭＡＢ、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ＦＯＬＦＯＸ
、Ｆｏｌｏｔｙｎ（Ｐｒａｌａｔｒｅｘａｔｅ）、ＦＵ－ＬＶ、Ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ
、Ｇａｒｄａｓｉｌ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｇａｒｄａｓｉｌ ９（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｇａｚｙｖａ（Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ）、Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ、Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＣＩＳＰＬＡＴＩＮ、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＯＸＡＬＩＰＬＡＴＩＮ、Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ、Ｇｅｍｚａｒ（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｇｉｌｏｔｒｉｆ（Ａｆａｔｉｎｉｂ Ｄｉｍａｌｅａｔｅ）、Ｇｌｅｅｖｅｃ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｇｌｉａｄｅｌ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ）、Ｇｌｉａｄｅｌ ｗａｆｅｒ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ）、Ｇｌｕｃａｒｐｉｄａｓｅ、Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｈａｌａｖｅｎ（Ｅｒｉｂｕｌｉｎ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｈｅｍａｎｇｅｏｌ（Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、ＨＰＶ Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、ＨＰＶ Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、ＨＰＶ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、Ｈｙｃａｍｔｉｎ（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｈｙｄｒｅａ（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ）、Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ、Ｈｙｐｅｒ－ＣＶＡＤ、Ｉｂｒａｎｃｅ（Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ）、Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ Ｔｉｕｘｅｔａｎ、Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ、ＩＣＥ、Ｉｃｌｕｓｉｇ（Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｉｄａｍｙｃｉｎ（Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ、Ｉｄｈｉｆａ（Ｅｎａｓｉｄｅｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｉｆｅｘ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ、Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｕｍ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ＩＬ－２（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｉｍａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｉｍｂｒｕｖｉｃａ（Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ）、Ｉｍｆｉｎｚｉ（Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ）、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ、Ｉｍｌｙｇｉｃ（Ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ Ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ）、Ｉｎｌｙｔａ（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）、Ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ、Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｉｎｔｒｏｎ Ａ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ、Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ、Ｉｒｅｓｓａ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｉｓｔｏｄａｘ（Ｒｏｍｉｄｅｐｓｉｎ）、Ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ、Ｉｘａｚｏｍｉｂ Ｃｉｔｒａｔｅ、Ｉｘｅｍｐｒａ（Ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ）、Ｊａｋａｆｉ（Ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ＪＥＢ、Ｊｅｖｔａｎａ（Ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ）、Ｋａｄｃｙｌａ（Ａｄｏ－Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ Ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）、Ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｋｅｐｉｖａｎｃｅ（Ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ
）、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、Ｋｉｓｑａｌｉ（Ｒｉｂｏｃｉｃｌｉｂ）、Ｋｙｍｒｉａｈ（Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ）、Ｋｙｐｒｏｌｉｓ（Ｃａｒｆｉｌｚｏｍｉｂ）、Ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｌａｐａｔｉｎｉｂ Ｄｉｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｌａｒｔｒｕｖｏ（Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ）、Ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｌｅｎｖａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｌｅｎｖｉｍａ（Ｌｅｎｖａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ、Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ Ｃａｌｃｉｕｍ、Ｌｅｕｋｅｒａｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）、Ｌｅｖｕｌａｎ（Ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ Ａｃｉｄ）、Ｌｉｎｆｏｌｉｚｉｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、ＬｉｐｏＤｏｘ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｌｏｍｕｓｔｉｎｅ、Ｌｏｎｓｕｒｆ（Ｔｒｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ ａｎｄ Ｔｉｐｉｒａｃｉｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ Ｄｅｐｏｔ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ Ｄｅｐｏｔ－Ｐｅｄ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｙｎｐａｒｚａ（Ｏｌａｐａｒｉｂ）、Ｍａｒｑｉｂｏ（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｍａｔｕｌａｎｅ（Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｍｅｋｉｎｉｓｔ（Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ）、Ｍｅｌｐｈａｌａｎ、Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ、Ｍｅｓｎａ、Ｍｅｓｎｅｘ（Ｍｅｓｎａ）、Ｍｅｔｈａｚｏｌａｓｔｏｎｅ（Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ、Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ ＬＰＦ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｅｔｈｙｌｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ、Ｍｅｘａｔｅ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｅｘａｔｅ－ＡＱ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ、Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ、Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｉｔｏｚｙｔｒｅｘ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ）、ＭＯＰＰ、Ｍｏｚｏｂｉｌ（Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ）、Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（ＭｉｔｏｍｙｃｉｎＣ）、Ｍｙｌｅｒａｎ（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）、Ｍｙｌｏｓａｒ（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、Ｍｙｌｏｔａｒｇ（Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ Ｔａｒｔｒａｔｅ）、Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂ、Ｎｅｌａｒａｂｉｎｅ、Ｎｅｏｓａｒ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ Ｍａｌｅａｔｅ、Ｎｅｒｌｙｎｘ（Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ Ｍａｌｅａｔｅ）、Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ ａｎｄ Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｎｅｕｌａｓｔａ（Ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｎｅｘａｖａｒ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ）、Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）、Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ、Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｎｉｎｌａｒｏ（Ｉｘａｚｏｍｉｂ Ｃｉｔｒａｔｅ）、Ｎｉｒａｐａｒｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ Ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ、Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ、Ｎｏｌｖａｄｅｘ（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ Ｃｉｔｒａｔｅ）、Ｎｐｌａｔｅ（Ｒｏｍｉｐｌｏｓｔｉｍ）、Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ、Ｏｄｏｍｚｏ（Ｓｏｎｉｄｅｇｉｂ）、ＯＥＰＡ、Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ、ＯＦＦ、Ｏｌａｐａｒｉｂ、Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ、Ｏｍａｃｅｔａｘｉｎｅ Ｍｅｐｅｓｕｃｃｉｎａｔｅ、Ｏｎｃａｓｐａｒ（Ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）、Ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ
、Ｏｎｉｖｙｄｅ（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｏｎｔａｋ（Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ Ｄｉｆｔｉｔｏｘ）、Ｏｐｄｉｖｏ（Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ）、ＯＰＰＡ、Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ、Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ、Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ、Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、ＰＡＤ、Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ、Ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ、Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ、Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ、Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、Ｐａｎｏｂｉｎｏｓｔａｔ、Ｐａｒａｐｌａｔ（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、Ｐａｚｏｐａｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＰＣＶ、ＰＥＢ、Ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ、Ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ、Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ、ＰＥＧ－Ｉｎｔｒｏｎ（Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ
、Ｐｅｒｊｅｔａ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、Ｐｌａｔｉｎｏｌ－ＡＱ（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ、Ｐｏｍａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｐｏｍａｌｙｓｔ（Ｐｏｍａｌｉｄｏｍｉｄｅ
）、Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｏｒｔｒａｚｚａ（Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂ）、Ｐｒａｌａｔｒｅｘａｔｅ、Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ、Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｐｒｏｌｉａ（Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）、Ｐｒｏｍａｃｔａ（Ｅｌｔｒｏｍｂｏｐａｇ Ｏｌａｍｉｎｅ）、Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ（Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ－Ｔ）、Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ）、Ｐｕｒｉｘａｎ（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ）、Ｒａｄｉｕｍ ２２３ Ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ、Ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ、Ｒ－ＣＨＯＰ、Ｒ－ＣＶＰ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｒｅｌｉｓｔｏｒ（Ｍｅｔｈｙｌｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、Ｒ－ＥＰＯＣＨ、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（Ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｒｉｂｏｃｉｃｌｉｂ、Ｒ－ＩＣＥ、Ｒｉｔｕｘａｎ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、Ｒｉｔｕｘａｎ Ｈｙｃｅｌａ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ａｎｄ Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ Ｈｕｍａｎ）、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ａｎｄ、Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ Ｈｕｍａｎ、、Ｒｏｌａｐｉｔａｎｔ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒｏｍｉｄｅｐｓｉｎ、Ｒｏｍｉｐｌｏｓｔｉｍ、Ｒｕｂｉｄｏｍｙｃｉｎ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｒｕｂｒａｃａ（Ｒｕｃａｐａｒｉｂ Ｃａｍｓｙｌａｔｅ）、Ｒｕｃａｐａｒｉｂ Ｃａｍｓｙｌａｔｅ、Ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｒｙｄａｐｔ（Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ）、Ｓｃｌｅｒｏｓｏｌ Ｉｎｔｒａｐｌｅｕｒａｌ Ａｅｒｏｓｏｌ（Ｔａｌｃ）、Ｓｉｌｔｕｘｉｍａｂ、Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ－Ｔ、Ｓｏｍａｔｕｌｉｎｅ Ｄｅｐｏｔ（Ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｓｏｎｉｄｅｇｉｂ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｓｐｒｙｃｅｌ（Ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、ＳＴＡＮＦＯＲＤ Ｖ、Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｔａｌｃ Ｐｏｗｄｅｒ（Ｔａｌｃ）、Ｓｔｅｒｉｔａｌｃ（Ｔａｌｃ）、Ｓｔｉｖａｒｇａ（Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ）、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ Ｍａｌａｔｅ、Ｓｕｔｅｎｔ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ Ｍａｌａｔｅ）、Ｓｙｌａｔｒｏｎ（Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｓｙｌｖａｎｔ（Ｓｉｌｔｕｘｉｍａｂ）、Ｓｙｎｒｉｂｏ（Ｏｍａｃｅｔａｘｉｎｅ Ｍｅｐｅｓｕｃｃｉｎａｔｅ）、Ｔａｂｌｏｉｄ（Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ）、ＴＡＣ、Ｔａｆｉｎｌａｒ（Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ）、Ｔａｇｒｉｓｓｏ（Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ）、Ｔａｌｃ、Ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ Ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ、Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ Ｃｉｔｒａｔｅ、Ｔａｒａｂｉｎｅ ＰＦＳ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、Ｔａｒｃｅｖａ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（Ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ）、Ｔａｓｉｇｎａ（Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ）、Ｔａｘｏｌ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ、（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ）、Ｔｅｍｏｄａｒ（Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ、Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ、Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｔｈａｌｏｍｉｄ（Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ、Ｔｈｉｏｔｅｐａ、Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ、Ｔｏｌａｋ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ、Ｔｏｒｉｓｅｌ（Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ）、Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ、Ｔｏｔｅｃｔ（Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ＴＰＦ、Ｔｒａｂｅｃｔｅｄｉｎ、Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ、Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ、Ｔｒｅａｎｄａ（Ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｔｒｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ ａｎｄ Ｔｉｐｉｒａｃｉｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｔｒｉｓｅｎｏｘ（Ａｒｓｅｎｉｃ Ｔｒｉｏｘｉｄｅ）、Ｔｙｋｅｒｂ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ Ｄｉｔｏｓｙｌａｔｅ）、Ｕｎｉｔｕｘｉｎ（Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、Ｕｒｉｄｉｎｅ Ｔｒｉａｃｅｔａｔｅ、ＶＡＣ、Ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ、ＶＡＭＰ、Ｖａｒｕｂｉ（Ｒｏｌａｐｉｔａｎｔ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、ＶｅＩＰ、Ｖｅｌｂａｎ（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｅｌｃａｄｅ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）、Ｖｅｌｓａｒ（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ、Ｖｅｎｃｌｅｘｔａ（Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘ）、Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘ、Ｖｅｒｚｅｎｉｏ（Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ）、Ｖｉａｄｕｒ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｖｉｄａｚａ（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ、Ｖｉｎｃａｓａｒ ＰＦＳ（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ、Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ Ｔａｒｔｒａｔｅ、ＶＩＰ、Ｖｉｓｍｏｄｅｇｉｂ、Ｖｉｓｔｏｇａｒｄ（Ｕｒｉｄｉｎｅ Ｔｒｉａｃｅｔａｔｅ）、Ｖｏｒａｘａｚｅ（Ｇｌｕｃａｒｐｉｄａｓｅ）、Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ、Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｖｙｘｅｏｓ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｗｅｌｌｃｏｖｏｒｉｎ（Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ Ｃａｌｃｉｕｍ）、Ｘａｌｋｏｒｉ（Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ）、Ｘｅｌｏｄａ（Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、ＸＥＬＩＲＩ、ＸＥＬＯＸ、Ｘｇｅｖａ（Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）、Ｘｏｆｉｇｏ（Ｒａｄｉｕｍ ２２３ Ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｘｔａｎｄｉ（Ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ）、Ｙｅｒｖｏｙ（Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、Ｙｏｎｄｅｌｉｓ（Ｔｒａｂｅｃｔｅｄｉｎ）、Ｚａｌｔｒａｐ（Ｚｉｖ－Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ
）、Ｚａｒｘｉｏ（Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｚｅｊｕｌａ（Ｎｉｒａｐａｒｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ Ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ）、Ｚｅｌｂｏｒａｆ（Ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ
）、Ｚｅｖａｌｉｎ（Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ Ｔｉｕｘｅｔａｎ）、Ｚｉｎｅｃａｒｄ（Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｚｉｖ－Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ、Ｚｏｆｒａｎ（Ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｚｏｌａｄｅｘ（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ
、Ｚｏｌｉｎｚａ（Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ）、Ｚｏｍｅｔａ（Ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ）、Ｚｙｄｅｌｉｇ（Ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ）、Ｚｙｋａｄｉａ（Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ）、および／またはＺｙｔｉｇａ（Ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ）を含むが、これらには限定されない当技術分野で知られている任意の抗癌剤を含むことができる。

【0032】

自然免疫の重要な構成要素であるマクロファージは、表面に特定の「自己シグナル」タンパク質がなくても異物を貪食し、それらをＴリンパ球（Ｔ細胞）に提示することができる。しかしながら、巧妙な癌細胞は、マクロファージによる食作用を回避するために、ＣＤ４７とも呼ばれるインテグリン関連タンパク質（ＩＡＰ）の、抗食作用性「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルをアップレギュレートする。ＣＤ４７とそのリガンド、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、好中球に発現するシグナル調節タンパク質－α（ＳＩＲＰα）との相互作用を遮断すると、これらの食細胞が活性化し、癌細胞の食作用を促進する。第１相臨床試験における多額の投資および著しい進歩にもかかわらず、従来のＣＤ４７封鎖戦略にはまだ多くの制限がある。抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）は、通常これらの適用を制限する。これらの重篤な副作用を回避するための努力が、ＣＤ４７を介した免疫療法の分野において強く要求されている。一態様では、第１の成分（例えば、フィブリニンなどのＨ＋スカベンジャー）および第２の成分（例えば、トロンビンなど）を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスが本明細書に開示される。ここで、マトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触したときに起こり、少なくとも１つの成分（すなわち、第１の成分および／または第２の成分）は、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含み、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤は、抗ＣＤ４７抗体を含む。

【0033】

上記のように、開示された免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤の持続放出のために設計されたナノ粒子を含む。免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの、どの成分（すなわち、第１または第２の成分）がナノ粒子を含むかの選択は、医学的効果よりも製造および貯蔵の懸念に関わる決定であることが理解され、本明細書で企図される。したがって、第１の成分、第２の成分のいずれか、または両方の成分がナノ粒子を含むことができることが理解される。

【0034】

一態様では、本明細書に開示される免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、複数のナノ粒子を含むことができる。例えば、免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、または１０種のナノ粒子を含むことができる。したがって、一態様では、生体応答性ゲルマトリックスは、少なくとも１つの第１、第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、および／または第１０のナノ粒子を含むことができる。第１および任意の後続のナノ粒子は、第１の成分、第２の成分、または両方の成分に含まれ得ることがさらに理解され、本明細書で企図される。一態様では、第１のナノ粒子および後続の任意のナノ粒子（例えば、第２のナノ粒子）は、同じ成分に含まれる。別の態様では、第１のナノ粒子および後続の任意のナノ粒子（例えば、第２のナノ粒子）は、異なる成分に含まれる。例えば、第１の成分が第１のナノ粒子を含み、第２の成分が少なくとも１つの第２のナノ粒子を含む生体応答性ゲルマトリックスが本明細書に開示される。また、第１の成分が少なくとも１つの第１のナノ粒子、および少なくとも１つの第２のナノ粒子を含む生体応答性ゲルマトリックスが、本明細書に開示される。一態様では、第２の成分が少なくとも１つの第１のナノ粒子、および少なくとも１つの第２のナノ粒子を含む生体応答性ゲルマトリックスが、本明細書に開示される。さらに、第２の成分が第１のナノ粒子を含み、第１の成分が少なくとも１つの後続のナノ粒子（例えば、第２のナノ粒子）を含む生体応答性ゲルマトリックスも開示される。

【0035】

生体応答性ゲルマトリックスの成分は、複数のタイプの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含み得ることがさらに理解され、本明細書で企図される。一態様では、ナノ粒子は、複数のタイプの抗癌剤、閉塞阻害剤、または免疫調節剤、および前記抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含むことができる。例えば、ナノ粒子は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０の抗癌剤、遮断阻害剤、免疫調節剤の任意の組み合わせを含むことができる。生体応答性ゲルマトリックスは１つ以上のナノ粒子を含むことができるので、各ナノ粒子は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤の任意の組み合わせを含み得ることが理解され、本明細書で企図される。さらに、第１および／または第２の成分のナノ粒子のいずれかに含まれる１つ以上の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤に加えて、免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、追加の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤も含み得ることが理解され、本明細書で企図される。ナノ粒子内に含まれる任意の追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤は、任意の第１の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が第１のナノ粒子内または任意の第１のナノ粒子の外部のいずれかに提供される成分と同じか、または異なる成分に含まれ得ることも理解され、本明細書で企図される。

【0036】

これらの機能を促進するために、生体応答性ヒドロゲルをポリマーとして設計することができる。「ポリマー」とは、天然または合成の比較的高分子量の有機化合物を指し、その構造は繰り返しの小単位であるモノマーで表すことができる。ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレン、ゴム、セルロースが挙げられる。合成ポリマーは、典型的には、モノマーの付加重合または縮合重合によって形成される。「コポリマー」という用語は、２種以上の異なる繰り返し単位（モノマー残基）から形成されたポリマーを指す。限定としてではなく例示的に、コポリマーは、交互コポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマーまたはグラフトコポリマーであり得る。特定の態様ではまた、ブロックコポリマーの様々なブロックセグメントは、それ自体がコポリマーを含み得ることも企図される。「ポリマー」という用語は、天然ポリマー、合成ポリマー、ホモポリマー、ヘテロポリマーまたはコポリマー、付加ポリマーなどを含むがこれらに限定されないあらゆる形態のポリマーを包含する。一態様では、ゲルマトリックスは、コポリマー、ブロックコポリマー、ジブロックコポリマー、および／またはトリブロックコポリマーを含むことができる。

【0037】

本明細書に開示されるトリブロックコポリマーは、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（ビニルピロリドン－コ－ビニルアセテート）、ポリメタクリレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリカプロラクタム、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ（乳酸－グリコール）酸、乳酸－グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどのセルロース誘導体などのコアポリマーを含む。一態様では、コアポリマーは、ポリペプチドブロックの側面に位置することができる。

【0038】

本明細書に開示される免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、治療薬を効率的に輸送するための局所的な薬物送達デポーとして機能するだけでなく、治療の有効性を促進するために腫瘍内微小環境を調節する。例えば、第１の成分中のＨ＋スカベンジャー（例えば、フィブリニンなど）は、微小環境のｐＨを上げ、活性酸素種を変更し、Ｔ細胞をＴＨ１またはＴＨ２型に調節し、マクロファージをＭ１型に調節することができる。例えば、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）におけるｐＨの調節は、ナノ粒子に含まれるか、さもなければ免疫療法生体応答性ゲルマトリックス内に含まれる任意の抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤の放出速度に影響を及ぼし得る。本明細書に示されるように、腫瘍微小環境のｐＨが６．５である場合、抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤の５０％が２４時間までに放出され、約８０％が１４０時間までに放出される。しかしながら、ＴＭＥのｐＨをｐＨ７．４に上げ、したがって血液のｐＨをより厳密に反映することにより、抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤の１４０時間での放出が約２０％、大幅に延長されることが示された。一態様では、本明細書で開示されるのは、８０、７５、７０、６５、６０、５５、５０、４９、４８、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、または１０％未満の抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤が１４０時間で放出された、本明細書に開示される生体応答性ゲルマトリックスのいずれかである。一態様では、１０～５０％の抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤が１４０時間で放出され、好ましくは、２０～４０％の抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤が１４０時間で放出された。放出速度はまた、その逆、すなわち、保持率（ある時点で保持される量）によって本明細書で言及され得ることが理解され、本明細書で企図される。したがって、一態様では、本明細書に開示されるのは、少なくとも２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０％の抗癌剤、遮断阻害剤、および／または免疫療法剤が１４０時間保持される、本明細書に開示される生体応答性ゲルマトリックスのいずれかである。

【0039】

抗体
（１）抗体全般
「抗体」という用語は、本明細書において、広義に使用され、ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の両方を含む。インタクトな免疫グロブリン分子に加えて、用語「抗体」には、これらの免疫グロブリン分子の断片またはポリマー、および、免疫グロブリン分子またはその断片のヒトまたはヒト化バージョンもまた含まれる。抗体は、その所望の活性に関して、本明細書に記載されているｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを用いて、または類似の方法によって検査することができ、その後、そのｉｎ ｖｉｖｏ治療および／または予防活性が、既知の臨床的検査方法に従って検査される。ヒト免疫グロブリンの５つの主要なクラス、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ－１、ＩｇＧ－２、ＩｇＧ－３およびＩｇＧ－４；ＩｇＡ－１およびＩｇＡ－２にさらに分けられ得る。当業者は、マウスに対する同等のクラスを認識するであろう。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。

【0040】

本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を表す、すなわち、抗体分子の小さな部分集団中に存在し得る天然に存在する可能性がある変異を除いて、集団内の各抗体が同一である。本明細書におけるモノクローナル抗体は、具体的には、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一もしくは相同であるが、鎖の残りは、別の種に由来するまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一もしくは相同である「キメラ」抗体、ならびに所望の拮抗活性を示す限り、このような抗体の断片を含む。

【0041】

開示されているモノクローナル抗体は、モノクローナル抗体を産生するあらゆる手法を用いて作製することができる。例えば、開示されているモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって記載されているものなど、ハイブリドーマ法を用いて調製することができる。ハイブリドーマ法では、免疫化剤に特異的に結合する抗体を産生する、または産生することができるリンパ球を誘発するために、通例、マウスまたはその他の適切な宿主動物が免疫化剤で免疫化されるあるいは、リンパ球は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫化され得る。

【0042】

モノクローナル抗体は、組換えＤＮＡ法によっても作製され得る。開示されたモノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、慣用の手法を用いて（例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離し、配列決定することができる。抗体または活性な抗体断片のライブラリーは、例えば、Ｂｕｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．の米国特許第５，８０４，４４０号およびＢａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．の米国特許第６，０９６，４４１号に記載されているような、ファージディスプレイ技術を用いて、生成し、スクリーニングすることもできる。

【0043】

Ｉｎ ｖｉｔｒｏ法も、一価抗体を調製するのに適している。抗体の断片、特にＦａｂ断片を作製するための抗体の消化は、本分野において既知の慣例技術を用いて達成することができる。例えば、消化は、パパインを用いて実施することができる。パパイン消化の例は、１９９４年１２月２２日に公開された国際公開第９４／２９３４８号および米国特許第４，３４２，５６６号に記載されている。抗体のパパイン消化は、典型的には、各々が単一の抗原結合部位を有する、Ｆａｂ断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片、および残りのＦｃ断片を成分する。ペプシン処理により、２つの抗原結合部位を有し、抗原をなおも架橋することができる断片が生じる。

【0044】

本明細書において使用される「抗体またはその断片」という用語は、二重もしくは多重抗原特異性またはエピトープ特異性を有するキメラ抗体およびハイブリッド抗体ならびにハイブリッド断片を含む、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｓｃＦｖなどの断片を包含する。このように、特異的な抗原を結合する能力を保持する抗体の断片が提供される。このような抗体および断片は、本分野において既知の技術によって作製することができ、実施例に記載されている方法に従って、抗体を生成し、抗体を特異性および活性についてスクリーニングするための一般的な方法で、特異性および活性に関してスクリーニングすることができる（Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，（１９８８）を参照）。

【0045】

抗体断片および抗原結合タンパク質（一本鎖抗体）のコンジュゲートも、「抗体またはその断片」という意味に含まれる。

【0046】

抗体または抗体断片の活性が修飾されていない抗体または抗体断片と比較して、著しく変化されまたは損なわれていなければ、断片は、他の配列に付着されているか否かを問わず、特定の領域または特異的なアミノ酸残基の挿入、欠失、置換またはその他の選択された修飾も含むことができる。これらの修飾は、ジスルフィド結合が可能であるアミノ酸の除去／付加、その生体寿命の延長、その分泌特性の変更など、いくつかの追加の特性を与えることができる。いずれの事例でも、抗体または抗体断片は、そのコグネイト抗原への特異的結合など、生理活性特性を保有しなければならない。抗体または抗体断片の機能的なまたは活性な領域は、タンパク質の特異的領域の変異誘発に続く、発現したポリペプチドの発現および検査によって特定され得る。このような方法は当業者にとって自明であり、抗体または抗体断片をコードする核酸の部位特異的変異誘発を含むことができる。（Ｚｏｌｌｅｒ、Ｍ．Ｊ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：３４８－３５４、１９９２）

【0047】

本明細書において使用される、「抗体」または「抗体（複数）」という用語は、ヒト抗体および／またはヒト化抗体も指すことができる。多くの非ヒト抗体（例えば、マウス、ラットまたはウサギに由来するもの）は、ヒトでは本来抗原性であり、このため、ヒトに投与された場合、望ましくない免疫応答が生じ得る。したがって、方法中でのヒト抗体またはヒト化抗体の使用は、ヒトに投与された抗体が望ましくない免疫応答を惹起する可能性を減らす役割を果たす。

【0048】

（２）ヒト抗体
開示されているヒト抗体は、任意の技術を用いて調製することができる。開示されているヒト抗体は、トランスジェニック動物から取得することもできる。例えば、免疫化に応答して、ヒト抗体の完全なレパートリーを産生することができるトランスジェニック変異マウスが記載されている（例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１－２５５（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，７：３３（１９９３）を参照）。具体的には、これらのキメラおよび生殖系列変異体マウス中の抗体重鎖連結領域（Ｊ（Ｈ））遺伝子のホモ接合型欠失は、内在性抗体産生の完全な阻害をもたらし、ヒト生殖系列抗体遺伝子アレイをこのような生殖系列変異体マウス中に首尾よく移植すると、抗原チャレンジに際してヒト抗体の産生をもたらす。所望の活性を有する抗体は、本明細書において記載されているように、Ｅｎｖ－ＣＤ４－共受容体複合体を用いて選択される。

【0049】

（３）ヒト化抗体
抗体ヒト化技術は、一般に、抗体分子の１種以上のポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ配列を操作するための組換えＤＮＡ技術の使用を伴う。したがって、非ヒト抗体（またはその断片）のヒト化形態は、ヒト（レシピエント）抗体のフレームワーク中に組み込まれた非ヒト（ドナー）抗体由来の抗原結合部位の一部を含有するキメラ抗体または抗体鎖（または、ｓＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２もしくは抗体のその他の抗原結合部分などのそれらの断片）である。

【0050】

ヒト化抗体を生成するために、レシピエント（ヒト）抗体分子の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望の抗原結合特性（例えば、標的抗原に対するあるレベルの特異性および親和性）を有することが知られているドナー（非ヒト）抗体分子の１つ以上のＣＤＲからの残基によって置き換えられる。いくつかの事例では、ヒト抗体のＦｖフレームワーク（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基によって置換されている。ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にも、移入されるＣＤＲまたはフレームワーク配列中にも見出されない残基も含有し得る。一般に、ヒト化抗体は、非ヒトである供給源からヒト化抗体中に導入された１種以上のアミノ酸残基を有する。実際には、ヒト化抗体は、典型的には、いくつかのＣＤＲ残基が、および場合によりいくつかのＦＲ残基がげっ歯類抗体中の類似の部位からの残基によって置換されているヒト抗体である。ヒト化抗体は、一般に、典型的にはヒト抗体のものである抗体定常領域（ｆｃ）の少なくとも一部を含有する（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６，Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８），およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３－５９６（１９９２））。

【0051】

非ヒト抗体をヒト化するための方法は、本分野において周知である。例えば、ヒト化抗体は、Ｗｉｎｔｅｒおよび共同研究者の方法に従って（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６），Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８））、げっ歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列をヒト抗体の対応する配列で置換することによって生成することができる。ヒト化抗体を作製するために使用することができる方法は、米国特許第４，８１６，５６７号（Ｃａｂｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，）、米国特許第５，５６５，３３２号（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，）、米国特許第５，７２１，３６７号（Ｋａｙ ｅｔ ａｌ．）、米国特許第５，８３７，２４３号（Ｄｅｏ ｅｔ ａｌ．）、米国特許第５，９３９，５９８号（ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ ｅｔ ａｌ．）、米国特許第６，１３０，３６４号（Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．）および米国特許第６，１８０，３７７号（Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．）にも記載されている。

【0052】

（４）抗体の投与
抗体の投与は、本明細書に開示されているように行うことができる。抗体送達のための核酸アプローチも存在する。患者または対象自身の細胞が核酸を取り込み、コードされている抗体または抗体断片を産生および分泌するように、広く中和する抗体および抗体断片を、抗体または抗体断片をコードする核酸調製物（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）として患者または対象に投与することもできる。核酸の送達は、例えば、本明細書に開示されているようなあらゆる手段によることができる。

【0053】

医薬担体／医薬生成物の送達
上記のように、組成物は、薬学的に許容される担体中でｉｎ ｖｉｖｏ投与することもできる。「薬学的に許容される」とは、生物学的にまたは他の点で望ましくないものではない材料を意味し、すなわち、その材料は、いかなる望ましくない生物学的作用も引き起こすことなく、またはそれが含まれる医薬組成物の他のいずれの成分とも有害な形で相互作用することなく、核酸またはベクターと共に対象に投与され得る。担体は、当業者に周知であるとおり、当然のことながら、活性成分のいかなる分解も最小限に抑え、対象におけるいかなる有害な副作用も最小限に抑えるように選択されるであろう。

【0054】

組成物は、経口投与、非経口投与（例えば、静脈内投与）、筋肉内注射、腹腔内注射、経皮投与、体外投与などで投与することができ、局所鼻腔内投与または吸入剤による投与を含む。本明細書で使用されるように、「局所鼻腔内投与」は、鼻孔の一方または両方を通じた鼻および鼻腔内への組成物の送達を意味し、噴霧機構もしくは液滴機構による、または核酸もしくはベクターのエアロゾル化を介した送達を含むことができる。吸入剤による組成物の投与は、噴霧機構または液滴機構による送達を介した鼻または口を通じたものであり得る。挿管を介して呼吸器系の任意の領域（例えば、肺）に直接送達することもできる。必要とされる組成物の正確な量は、対象の種、年齢、体重および全身状態、治療下のアレルギー性障害の重症度、使用される特定の核酸またはベクター、その投与形式などに応じて、対象毎に異なるであろう。したがって、全ての組成物に対して正確な量を特定することは不可能である。しかしながら、適切な量は、本明細書の教示があれば、通例の実験のみを用いて、当業者によって決定されることができる。

【0055】

組成物の非経口投与は、使用される場合、一般的に注射によって行われることを特徴とする。注射剤は、液体溶液もしくは懸濁液として、注射前の液体中での懸濁液の溶解に適した固体形態として、またはエマルジョンとして、慣用の形態で調製することができる。比較的最近になって改訂された非経口投与のためのアプローチは、一定の用量が維持されるように徐放または持続放出システムの使用を伴う。例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第３，６１０，７９５号を参照されたい。

【0056】

材料は、溶液、懸濁液（例えば、微粒子、リポソームまたは細胞中に組み込まれている）の状態であってもよい。これらは、抗体、受容体または受容体リガンドを介して、特定の細胞型を標的とし得る。以下の参考文献は、特定のタンパク質が腫瘍組織を標的とする本技術の使用例である（Ｓｅｎｔｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，２：４４７－４５１，（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｋ．Ｄ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６０：２７５－２８１，（１９８９）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５８：７００－７０３，（１９８８）；Ｓｅｎｔｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，４：３－９，（１９９３）；Ｂａｔｔｅｌｌｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，３５：４２１－４２５，（１９９２）；ＰｉｅｔｅｒｓｚおよびＭｃＫｅｎｚｉｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２９：５７－８０，（１９９２）；およびＲｏｆｆｌｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，４２：２０６２－２０６５，（１９９１））。ビヒクル、例えば「ステルス」および抗体がコンジュゲートされた他のリポソーム（結腸癌腫への脂質媒介性薬物標的化を含む）、細胞特異的リガンドを介したＤＮＡの受容体媒介性標的化、リンパ球誘導腫瘍標的化、およびｉｎ ｖｉｖｏでのマウス神経膠腫細胞の高特異的治療レトロウイルス標的化。以下の参考文献は、特定のタンパク質が腫瘍組織を標的とする本技術の使用例である（Ｈｕｇｈｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４９：６２１４－６２２０，（１９８９）；ならびにＬｉｔｚｉｎｇｅｒおよびＨｕａｎｇ，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，１１０４：１７９－１８７，（１９９２））。一般に、受容体は、構成性またはリガンド誘導性のいずれかで、エンドサイトーシスの経路に関与している。これらの受容体は、クラスリンで被覆されたピットに集まり、クラスリンで被覆された小胞を介して細胞内に入り、酸性化されたエンドソームを通過し、その中で受容体は選別され、次いで、細胞表面にリサイクルされるか、細胞内に貯蔵されるか、またはリソソーム中で分解されるかのいずれかである。インターナリゼーション経路は、栄養素の取り込み、活性化タンパク質の除去、高分子のクリアランス、ウイルスおよび毒素の日和見的侵入、リガンドの解離および分解、ならびに受容体レベルの調節などの様々な機能を果たす。多くの受容体は、細胞の種類、受容体の濃度、リガンドの種類、リガンドの価数、およびリガンドの濃度に応じて、１つ以上の細胞内経路をたどる。受容体媒介性エンドサイトーシスの分子・細胞機序が概説されている（ＢｒｏｗｎおよびＧｒｅｅｎｅ，ＤＮＡ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １０：６，３９９－４０９（１９９１））。

【0057】

ａ）薬学的に許容される担体
抗体を含む組成物は、薬学的に許容される担体と組み合わせて治療的に使用することができる。

【0058】

適切な担体およびそれらの製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ １９９５に記載されている。典型的には、製剤を等張性にするために、適切な量の薬学的に許容される塩が製剤中で使用される。薬学的に許容される担体の例として、生理食塩水、リンゲル溶液およびデキストロース溶液が挙げられるがこれらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは約５～約８、より好ましくは約７～約７．５である。更なる担体として、持続放出製剤、例えば、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、このマトリックスは、成形品、例えば、フィルム、リポソームまたは微粒子の形態である。ある担体が、例えば、投与される組成物の投与経路および濃度に応じて、より好ましいものであり得ることは、当業者に自明であろう。

【0059】

医薬担体は、当業者に知られている。これらは、最も典型的には、無菌水、生理食塩水および生理的ｐＨで緩衝化された溶液などの溶液を含む、ヒトへの薬物投与のための標準的な担体であろう。組成物は、筋肉内投与にまたは皮下投与することができる。他の化合物は、当業者によって使用される標準的な手順に従って投与されるであろう。

【0060】

医薬組成物は、選択された分子に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、保存剤および界面活性剤などを含み得る。医薬組成物は、抗菌剤、抗炎症剤、麻酔剤などの１種以上の活性成分も含み得る。

【0061】

医薬組成物は、局所的または全身的な治療が所望されるか否かと、治療されるべき領域に応じて、いくつかの方法で投与され得る。投与は、局所的（点眼、経膣、直腸内、経鼻を含む）、経口的、吸入により、または非経口的、例えば、点滴、皮下、腹腔内または筋肉内注射により行うことができる。開示された抗体は、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与、腔内投与、または経皮投与することができる。

【0062】

非経口投与のための調製物として、滅菌水性溶液または非水性溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体として、生理食塩水および緩衝化媒体を含む、水、アルコール性／水性溶液、エマルジョンまたは懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルとして、塩化ナトリウム溶液、デキストロースリンゲル液、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、または不揮発性油が挙げられる。静脈内ビヒクルとして、流体および栄養素補充液、電解質補充液（デキストロースリンゲル液をベースとするものなど）などが挙げられる。保存剤および他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤および不活性ガスなども存在し得る。

【0063】

局所投与用の製剤として、軟膏、ローション、クリーム、ジェル、ドロップ、坐剤、スプレー、液体および粉末が挙げられ得る。慣用の医薬担体、水性、粉末または油性の基剤、増粘剤などが必要であり得、または望ましくあり得る。

【0064】

免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの第１および第２の成分は、同時投与のために投与前に混合しても、または別々の局所投与を含む別々の投与のために別々に維持しても（例えば別々の２つの噴霧器）、または同時投与中に混合してもよい（例えば、適用中に別々の成分を混合する、または同時（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ）もしくは同時（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ）適用を可能にする単一のアプリケーター）。

【0065】

経口投与用の組成物として、粉末もしくは顆粒、水もしくは非水性媒体中の懸濁液もしくは溶液、カプセル、サシェまたは錠剤が挙げられる。増粘剤、着香剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤が望ましいことがあり得る。

【0066】

組成物のいくつかは、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸およびリン酸などの無機酸、ならびにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸およびフマル酸などの有機酸との反応によって、または水酸化ナトリウム、水酸化アルミニウム、水酸化カリウムなどの無機塩基、ならびにモノ、ジ、トリアルキルアミンおよびアリールアミンおよび置換されたエタノールアミンなどの有機塩基との反応によって形成される、薬学的に許容される酸または塩基付加塩として潜在的に投与され得る。

【0067】

ｂ）治療用途
組成物を投与するための有効用量およびスケジュールは実験により決定され得、そのような決定を行うことは当該技術分野の範疇である。組成物の投与のための用量範囲は、障害の症状が影響を受ける所望の効果を生じるのに十分大きな投与量範囲である。用量は、望ましくない交差反応、アナフィラキシー型反応などの副作用を引き起こすほど多いものであってはならない。一般的に、用量は、患者の年齢、状態、性別、疾患の程度、投与経路により、または他の薬物がレジメンに含まれているか否かで異なり、当業者によって決定されることができる。用量は、任意の禁忌の場合には、個々の医師によって調整されることができる。用量は変えることができ、１日または数日間で、毎日１回以上の用量投与で投与されることができる。所与の部類の医薬製品の適切な用量については、文献に手引きを見出すことができる。例えば、抗体の適切な用量を選択する上での手引きは、抗体の治療用途に関する文献、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｆｅｒｒｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｎｏｇｅｓ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐａｒｋ Ｒｉｄｇｅ，Ｎ．Ｊ．，（１９８５）ｃｈ．２２ ａｎｄ ｐｐ．３０３－３５７；Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｈａｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９７７）ｐｐ．３６５－３８９中に見出すことができる。単独で使用される抗体の典型的な一日用量は、上記の要因に応じて、１日当たり約１μｇ／ｋｇ～最大１００ｍｇ／ｋｇ（体重）またはそれを超える範囲であり得る。

【0068】

Ｃ．癌の治療法
一態様では、本明細書に開示される治療薬送達ビヒクルは、癌もしくは転移を治療、予防、阻害もしくは軽減するために、または外科的切除（すなわち、切除）後の再発または転移を治療、予防、阻害もしくは軽減するために対象に投与することが意図されていることが理解される。したがって、癌腫瘍の外科的切除部位での腫瘍増殖および／または転移を治療、阻害、および／または予防する方法が本明細書に開示され、方法は、第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを対象の切除部位に投与することを含む。ここでマトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つは、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。したがって、一態様では、癌腫瘍の外科的切除部位での腫瘍増殖および／または転移を治療、阻害、および／または予防する方法であって、本明細書で開示された免疫療法生体応答性ゲルマトリックスのいずれかを対象の切除部位に投与することを含む方法が、本明細書に開示される。

【0069】

本明細書に記載されるように、開示された免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、制御されない細胞増殖が起こるあらゆる疾患、例えば癌などを治療するために使用することができる。開示された組成物を使用して治療できる、代表的だが非限定的な癌のリストは、以下の通りである。白血病（これらに限定されないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含む）；リンパ腫；Ｂ細胞リンパ腫；Ｔ細胞リンパ腫；菌状息肉症；ホジキン病；限定されないが、骨髄性白血病を含む白血病；形質細胞腫；組織球腫；膀胱癌；脳癌、神経系癌、頭部および頸部癌、頭部および頸部の扁平上皮細胞癌腫、尿路上皮癌、腎臓癌、小細胞肺癌および非小細胞肺癌などの肺癌（ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ）、神経芽細胞腫、神経膠芽腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、皮膚癌、肝臓癌、黒色腫、口、喉、喉頭および肺の扁平上皮細胞癌腫；結腸癌；子宮頸癌；子宮頸癌腫；乳癌；上皮癌；腎癌、泌尿生殖器癌；肺癌（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｃａｎｃｅｒ）；食道癌腫；頭部および頸部癌腫；大腸癌；造血器癌；精巣癌；結腸および直腸の癌；前立腺癌；ＡＩＤＳ関連リンパ腫もしくは肉腫、転移性癌もしくは癌全般；または膵臓癌。

【0070】

したがって、一態様では、対象の癌（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、黒色腫、腎細胞癌、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、および／または膀胱癌を含むがこれらに限定されない）；癌（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、黒色腫、腎細胞癌、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、および／または膀胱癌を含むがこれらに限定されない）の増殖；癌（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、黒色腫、腎細胞癌、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、および／または膀胱癌含むがこれらに限定されない）の転移を治療、軽減、阻害、または予防する方法；および／または腫瘍（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、黒色腫、腎細胞癌、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、および／または膀胱癌を含むがこれらに限定されない）の外科的切除後の癌の再発、増殖または転移を治療、軽減、阻害、または予防する方法が開示され、方法は、本明細書に開示される免疫療法生体応答性ゲルを、癌を有する患者に投与することを含む。したがって、一態様では、対象の癌もしくは癌の増殖を治療、軽減、阻害、もしくは予防する方法、および／または腫瘍の外科的切除後の癌の再発、増殖もしくは転移を治療、軽減、阻害、または予防する方法であって、本明細書に開示される生体応答性ヒドロゲルマトリックス（例えば、抗ＣＤ４７抗体を含む生体応答性ヒドロゲルマトリックス）のいずれかを含む組成物を対象に投与することを含む方法が、本明細書に開示される。

【0071】

上記のように、癌の外科的切除部位での腫瘍増殖および／または転移を治療、阻害、および／または予防する、開示された方法で使用される免疫療法生体応答性ゲルマトリックスは、例えば抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤などの治療薬カーゴを含む。例えば、治療薬カーゴは、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、またはＣＴＬＡ－４阻害剤（例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピジリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブなど）；免疫調節剤、例えば、任意の抗体、サイトカイン、ケモカイン、核酸、または小分子などを含み得、これらは、限定されないが、ＮＫ細胞、ＮＫ Ｔ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、形質細胞、マクロファージ、樹状細胞、肥満細胞を含む免疫細胞の活性、産生、増殖、または成熟を阻害または促進する。一態様では、免疫調節剤は、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＴＧＦ－β、ＩＬ－１β、ＩＬ－２ ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、抗ＣＤ３抗体抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗４－１ＢＢ抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ２７抗体、抗ＬＡＧ３抗体、および／または抗ＣＤ４７抗体であり得る。

【0072】

一態様では、対象の癌を治療する開示された方法で使用される生体応答性ゲルマトリックスは、抗癌剤を含む。開示された方法で使用される抗癌剤は、Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ
、Ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ、Ａｂｉｔｒｅｘａｔｅ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ａｂｒａｘａｎｅ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、ＡＢＶＤ、ＡＢＶＥ
、ＡＢＶＥ－ＰＣ、ＡＣ、ＡＣ－Ｔ、Ａｄｃｅｔｒｉｓ（Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ Ｖｅｄｏｔｉｎ）、ＡＤＥ、Ａｄｏ－Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ Ｅｍｔａｎｓｉｎｅ、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｆａｔｉｎｉｂ Ｄｉｍａｌｅａｔｅ、Ａｆｉｎｉｔｏｒ（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）、Ａｋｙｎｚｅｏ（Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ ａｎｄ Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｄａｒａ（Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）、Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ、Ａｌｅｃｅｎｓａ（Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ）、Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ、Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ、Ａｌｉｍｔａ（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、Ａｌｉｑｏｐａ（Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｋｅｒａｎ ｆｏｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｋｅｒａｎ Ｔａｂｌｅｔｓ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ）、Ａｌｏｘｉ（Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ａｌｕｎｂｒｉｇ（Ｂｒｉｇａｔｉｎｉｂ）、Ａｍｂｏｃｈｌｏｒｉｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ａｍｂｏｃｌｏｒｉｎ Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ、Ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ Ａｃｉｄ、Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ、Ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ、Ａｒｅｄｉａ（Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ）、Ａｒｉｍｉｄｅｘ（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）、Ａｒｏｍａｓｉｎ（Ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）、Ａｒｒａｎｏｎ（Ｎｅｌａｒａｂｉｎｅ）、Ａｒｓｅｎｉｃ Ｔｒｉｏｘｉｄｅ、Ａｒｚｅｒｒａ（Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ）、Ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ、Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ、Ａｖａｓｔｉｎ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、Ａｖｅｌｕｍａｂ、Ａｘｉｔｉｎｉｂ、Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ
、Ｂａｖｅｎｃｉｏ（Ａｖｅｌｕｍａｂ）、ＢＥＡＣＯＰＰ、Ｂｅｃｅｎｕｍ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）、Ｂｅｌｅｏｄａｑ（Ｂｅｌｉｎｏｓｔａｔ）、Ｂｅｌｉｎｏｓｔａｔ、Ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＢＥＰ、Ｂｅｓｐｏｎｓａ（Ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ、Ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ、Ｂｅｘｘａｒ（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ）、Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ、ＢｉＣＮＵ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）、Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ、Ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ、Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（Ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ）、Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ、Ｂｏｓｕｌｉｆ（Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ）、Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ、Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ Ｖｅｄｏｔｉｎ、Ｂｒｉｇａｔｉｎｉｂ、ＢｕＭｅｌ、Ｂｕｓｕｌｆａｎ、Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）、Ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ、Ｃａｂｏｍｅｔｙｘ（Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ）、Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ、ＣＡＦ、Ｃａｍｐａｔｈ（Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ）、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ、ＣＡＰＯＸ、Ｃａｒａｃ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ、ＣＡＲＢＯＰＬＡＴＩＮ－ＴＡＸＯＬ、Ｃａｒｆｉｌｚｏｍｉｂ、Ｃａｒｍｕｂｒｉｓ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）
、Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ、Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ、Ｃａｓｏｄｅｘ（Ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）、ＣＥＭ、Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ、Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｃｅｒｖａｒｉｘ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ、ＣＥＶ、Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ、ＣＨＬＯＲＡＭＢＵＣＩＬ－ＰＲＥＤＮＩＳＯＮＥ、ＣＨＯＰ、Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ、Ｃｌａｆｅｎ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ、Ｃｌｏｆａｒｅｘ（Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）、Ｃｌｏｌａｒ（Ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）、ＣＭＦ、Ｃｏｂｉｍｅｔｉｎｉｂ
、Ｃｏｍｅｔｒｉｑ（Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ－Ｓ－Ｍａｌａｔｅ）、Ｃｏｐａｎｌｉｓｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＣＯＰＤＡＣ、ＣＯＰＰ、ＣＯＰＰ－ＡＢＶ、Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、Ｃｏｔｅｌｌｉｃ（Ｃｏｂｉｍｅｔｉｎｉｂ）、Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ、ＣＶＰ、Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ、Ｃｙｆｏｓ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、Ｃｙｒａｍｚａ（Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ）、Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ、Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｃｙｔｏｓａｒ－Ｕ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、Ｃｙｔｏｘａｎ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ、Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ、Ｄａｃｏｇｅｎ（Ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ、Ｄａｒａｔｕｍｕｍａｂ、Ｄａｒｚａｌｅｘ（Ｄａｒａｔｕｍｕｍａｂ）、Ｄａｓａｔｉｎｉｂ、Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ、Ｄｅｆｉｂｒｏｔｉｄｅ Ｓｏｄｉｕｍ、Ｄｅｆｉｔｅｌｉｏ（Ｄｅｆｉｂｒｏｔｉｄｅ Ｓｏｄｉｕｍ）、Ｄｅｇａｒｅｌｉｘ、Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ Ｄｉｆｔｉｔｏｘ、Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ、ＤｅｐｏＣｙｔ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ、Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ、Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ、Ｄｏｘｉｌ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｄｏｘ－ＳＬ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、ＤＴＩＣ－Ｄｏｍｅ（Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ）、Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ、Ｅｆｕｄｅｘ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｅｌｉｔｅｋ（Ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ）、Ｅｌｌｅｎｃｅ（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｌｏｔｕｚｕｍａｂ、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、Ｅｌｔｒｏｍｂｏｐａｇ Ｏｌａｍｉｎｅ、Ｅｍｅｎｄ（Ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ）、Ｅｍｐｌｉｃｉｔｉ（Ｅｌｏｔｕｚｕｍａｂ
）、Ｅｎａｓｉｄｅｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＥＰＯＣＨ、Ｅｒｂｉｔｕｘ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、Ｅｒｉｂｕｌｉｎ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｒｉｖｅｄｇｅ（Ｖｉｓｍｏｄｅｇｉｂ）、Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｅｒｗｉｎａｚｅ（Ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ Ｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）、Ｅｔｈｙｏｌ（Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）、Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ
）、Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ、Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｅｖａｃｅｔ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ、Ｅｖｉｓｔａ、（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｖｏｍｅｌａ（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ、５－ＦＵ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）、５－ＦＵ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｆａｒｅｓｔｏｎ（Ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ
）、Ｆａｒｙｄａｋ（Ｐａｎｏｂｉｎｏｓｔａｔ）、Ｆａｓｌｏｄｅｘ（Ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、ＦＥＣ、Ｆｅｍａｒａ（Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）、Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ、Ｆｌｕｄａｒａ（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｆｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ、Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｆｏｌｅｘ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ
）、Ｆｏｌｅｘ ＰＦＳ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＩＲＩ－ＢＥＶＡＣＩＺＵＭＡＢ、ＦＯＬＦＩＲＩ－ＣＥＴＵＸＩＭＡＢ、ＦＯＬＦＩＲＩＮＯＸ、ＦＯＬＦＯＸ、Ｆｏｌｏｔｙｎ（Ｐｒａｌａｔｒｅｘａｔｅ）、ＦＵ－ＬＶ、Ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ、Ｇａｒｄａｓｉｌ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｇａｒｄａｓｉｌ ９（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＨＰＶ Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ）、Ｇａｚｙｖａ（Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ）、Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ、Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ
、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＣＩＳＰＬＡＴＩＮ、ＧＥＭＣＩＴＡＢＩＮＥ－ＯＸＡＬＩＰＬＡＴＩＮ、Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ、Ｇｅｍｚａｒ（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｇｉｌｏｔｒｉｆ（Ａｆａｔｉｎｉｂ Ｄｉｍａｌｅａｔｅ）、Ｇｌｅｅｖｅｃ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｇｌｉａｄｅｌ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ）、Ｇｌｉａｄｅｌ ｗａｆｅｒ（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ Ｉｍｐｌａｎｔ）、Ｇｌｕｃａｒｐｉｄａｓｅ、Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｈａｌａｖｅｎ（Ｅｒｉｂｕｌｉｎ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｈｅｍａｎｇｅｏｌ（Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、ＨＰＶ Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、ＨＰＶ Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、ＨＰＶ Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、Ｈｙｃａｍｔｉｎ（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｈｙｄｒｅａ（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ）、Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ、Ｈｙｐｅｒ－ＣＶＡＤ、Ｉｂｒａｎｃｅ（Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ）、Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ Ｔｉｕｘｅｔａｎ、Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ、ＩＣＥ、Ｉｃｌｕｓｉｇ（Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｉｄａｍｙｃｉｎ（Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ、Ｉｄｈｉｆａ（Ｅｎａｓｉｄｅｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｉｆｅｘ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ、Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｕｍ（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ
）、ＩＬ－２（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｉｍａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｉｍｂｒｕｖｉｃａ（Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ）、Ｉｍｆｉｎｚｉ（Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ）、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ、Ｉｍｌｙｇｉｃ（Ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ Ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ）、Ｉｎｌｙｔａ（Ａｘｉｔｉｎｉｂ）、Ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ、Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ、Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｉｎｔｒｏｎ Ａ（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ、Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ、Ｉｒｅｓｓａ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｉｓｔｏｄａｘ（Ｒｏｍｉｄｅｐｓｉｎ）、Ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ、Ｉｘａｚｏｍｉｂ Ｃｉｔｒａｔｅ、Ｉｘｅｍｐｒａ（Ｉｘａｂｅｐｉｌｏｎｅ）、Ｊａｋａｆｉ（Ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ＪＥＢ、Ｊｅｖｔａｎａ（Ｃａｂａｚｉｔａｘｅｌ）、Ｋａｄｃｙｌａ（Ａｄｏ－Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ Ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）、Ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｋｅｐｉｖａｎｃｅ（Ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ）、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、Ｋｉｓｑａｌｉ（Ｒｉｂｏｃｉｃｌｉｂ）、Ｋｙｍｒｉａｈ（Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ）、Ｋｙｐｒｏｌｉｓ（Ｃａｒｆｉｌｚｏｍｉｂ）、Ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｌａｐａｔｉｎｉｂ Ｄｉｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｌａｒｔｒｕｖｏ（Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ
）、Ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｌｅｎｖａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｌｅｎｖｉｍａ（Ｌｅｎｖａｔｉｎｉｂ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ、Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ Ｃａｌｃｉｕｍ、Ｌｅｕｋｅｒａｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）、Ｌｅｖｕｌａｎ（Ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ Ａｃｉｄ）、Ｌｉｎｆｏｌｉｚｉｎ（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、ＬｉｐｏＤｏｘ（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｌｏｍｕｓｔｉｎｅ、Ｌｏｎｓｕｒｆ（Ｔｒｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ ａｎｄ Ｔｉｐｉｒａｃｉｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ Ｄｅｐｏｔ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｕｐｒｏｎ Ｄｅｐｏｔ－Ｐｅｄ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｌｙｎｐａｒｚａ（Ｏｌａｐａｒｉｂ）、Ｍａｒｑｉｂｏ（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｍａｔｕｌａｎｅ（Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ Ａｃｅｔａｔｅ、Ｍｅｋｉｎｉｓｔ（Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ）、Ｍｅｌｐｈａｌａｎ、Ｍｅｌｐｈａｌａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ、Ｍｅｓｎａ、Ｍｅｓｎｅｘ（Ｍｅｓｎａ）、Ｍｅｔｈａｚｏｌａｓｔｏｎｅ（Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ、Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ ＬＰＦ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｅｔｈｙｌｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ、Ｍｅｘａｔｅ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｅｘａｔｅ－ＡＱ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ、Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ、Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｍｉｔｏｚｙｔｒｅｘ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ）、ＭＯＰＰ、Ｍｏｚｏｂｉｌ（Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ）、Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ）、Ｍｙｌｅｒａｎ（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）、Ｍｙｌｏｓａｒ（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、Ｍｙｌｏｔａｒｇ（Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）、Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ Ｔａｒｔｒａｔｅ）、Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂ、Ｎｅｌａｒａｂｉｎｅ、Ｎｅｏｓａｒ（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ Ｍａｌｅａｔｅ、Ｎｅｒｌｙｎｘ（Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ Ｍａｌｅａｔｅ）、Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ ａｎｄ Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｎｅｕｌａｓｔａ（Ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｎｅｘａｖａｒ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ）、Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）、Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ、Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ、Ｎｉｎｌａｒｏ（Ｉｘａｚｏｍｉｂ Ｃｉｔｒａｔｅ）、Ｎｉｒａｐａｒｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ Ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ、Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ、Ｎｏｌｖａｄｅｘ（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ Ｃｉｔｒａｔｅ）、Ｎｐｌａｔｅ（Ｒｏｍｉｐｌｏｓｔｉｍ）、Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ、Ｏｄｏｍｚｏ（Ｓｏｎｉｄｅｇｉｂ）、ＯＥＰＡ、Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ、ＯＦＦ、Ｏｌａｐａｒｉｂ、Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ、Ｏｍａｃｅｔａｘｉｎｅ Ｍｅｐｅｓｕｃｃｉｎａｔｅ、Ｏｎｃａｓｐａｒ（Ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）、Ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｏｎｉｖｙｄｅ（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｏｎｔａｋ（Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ Ｄｉｆｔｉｔｏｘ）、Ｏｐｄｉｖｏ（Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ）、ＯＰＰＡ、Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ、Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ、Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ、Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ａｌｂｕｍｉｎ－ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、ＰＡＤ、Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ、Ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ、Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｎｅｔｕｐｉｔａｎｔ、Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ、Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、Ｐａｎｏｂｉｎｏｓｔａｔ、Ｐａｒａｐｌａｔ（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、Ｐａｚｏｐａｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＰＣＶ、ＰＥＢ、Ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ、Ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ、Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ、ＰＥＧ－Ｉｎｔｒｏｎ（Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ、Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ Ｄｉｓｏｄｉｕｍ、Ｐｅｒｊｅｔａ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、Ｐｌａｔｉｎｏｌ－ＡＱ（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ
）、Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ、Ｐｏｍａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｐｏｍａｌｙｓｔ（Ｐｏｍａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｏｒｔｒａｚｚａ（Ｎｅｃｉｔｕｍｕｍａｂ）、Ｐｒａｌａｔｒｅｘａｔｅ、Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ、Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、Ｐｒｏｌｉａ（Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）、Ｐｒｏｍａｃｔａ（Ｅｌｔｒｏｍｂｏｐａｇ Ｏｌａｍｉｎｅ）、Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ（Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ－Ｔ）、Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ）、Ｐｕｒｉｘａｎ（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ）、Ｒａｄｉｕｍ ２２３ Ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ、Ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ、Ｒ－ＣＨＯＰ、Ｒ－ＣＶＰ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｂｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｎｏｎａｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ（ＨＰＶ）Ｑｕａｄｒｉｖａｌｅｎｔ Ｖａｃｃｉｎｅ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ
、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｒｅｌｉｓｔｏｒ（Ｍｅｔｈｙｌｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、Ｒ－ＥＰＯＣＨ、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ（Ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、Ｒｉｂｏｃｉｃｌｉｂ、Ｒ－ＩＣＥ
、Ｒｉｔｕｘａｎ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、Ｒｉｔｕｘａｎ Ｈｙｃｅｌａ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ａｎｄ Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ Ｈｕｍａｎ）、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ ａｎｄ、Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ Ｈｕｍａｎ、、Ｒｏｌａｐｉｔａｎｔ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｒｏｍｉｄｅｐｓｉｎ、Ｒｏｍｉｐｌｏｓｔｉｍ、Ｒｕｂｉｄｏｍｙｃｉｎ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｒｕｂｒａｃａ（Ｒｕｃａｐａｒｉｂ Ｃａｍｓｙｌａｔｅ）、Ｒｕｃａｐａｒｉｂ Ｃａｍｓｙｌａｔｅ、Ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｒｙｄａｐｔ（Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ）、Ｓｃｌｅｒｏｓｏｌ Ｉｎｔｒａｐｌｅｕｒａｌ Ａｅｒｏｓｏｌ（Ｔａｌｃ）、Ｓｉｌｔｕｘｉｍａｂ、Ｓｉｐｕｌｅｕｃｅｌ－Ｔ、Ｓｏｍａｔｕｌｉｎｅ Ｄｅｐｏｔ（Ｌａｎｒｅｏｔｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｓｏｎｉｄｅｇｉｂ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｓｐｒｙｃｅｌ（Ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、ＳＴＡＮＦＯＲＤ Ｖ、Ｓｔｅｒｉｌｅ Ｔａｌｃ Ｐｏｗｄｅｒ（Ｔａｌｃ）、Ｓｔｅｒｉｔａｌｃ（Ｔａｌｃ）、Ｓｔｉｖａｒｇａ（Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ）、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ Ｍａｌａｔｅ、Ｓｕｔｅｎｔ（Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ Ｍａｌａｔｅ）、Ｓｙｌａｔｒｏｎ（Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ａｌｆａ－２ｂ）、Ｓｙｌｖａｎｔ（Ｓｉｌｔｕｘｉｍａｂ）、Ｓｙｎｒｉｂｏ（Ｏｍａｃｅｔａｘｉｎｅ Ｍｅｐｅｓｕｃｃｉｎａｔｅ）、Ｔａｂｌｏｉｄ（Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ）、ＴＡＣ、Ｔａｆｉｎｌａｒ（Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ）、Ｔａｇｒｉｓｓｏ（Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ）、Ｔａｌｃ、Ｔａｌｉｍｏｇｅｎｅ Ｌａｈｅｒｐａｒｅｐｖｅｃ、Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ Ｃｉｔｒａｔｅ、Ｔａｒａｂｉｎｅ ＰＦＳ（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ）、Ｔａｒｃｅｖａ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｔａｒｇｒｅｔｉｎ（Ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ）、Ｔａｓｉｇｎａ（Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ）、Ｔａｘｏｌ（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ、（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ
）、Ｔｅｍｏｄａｒ（Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、Ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ、Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ、Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ、Ｔｈａｌｏｍｉｄ（Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ）、Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ、Ｔｈｉｏｔｅｐａ、Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ、Ｔｏｌａｋ（Ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ－－Ｔｏｐｉｃａｌ）、Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ、Ｔｏｒｉｓｅｌ（Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ）、Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ ａｎｄ Ｉｏｄｉｎｅ Ｉ １３１ Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ、Ｔｏｔｅｃｔ（Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ＴＰＦ、Ｔｒａｂｅｃｔｅｄｉｎ、Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ、Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ、Ｔｒｅａｎｄａ（Ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｔｒｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ ａｎｄ Ｔｉｐｉｒａｃｉｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｔｒｉｓｅｎｏｘ（Ａｒｓｅｎｉｃ Ｔｒｉｏｘｉｄｅ）、Ｔｙｋｅｒｂ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ Ｄｉｔｏｓｙｌａｔｅ）、Ｕｎｉｔｕｘｉｎ（Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、Ｕｒｉｄｉｎｅ Ｔｒｉａｃｅｔａｔｅ、ＶＡＣ、Ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ、ＶＡＭＰ、Ｖａｒｕｂｉ（Ｒｏｌａｐｉｔａｎｔ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、ＶｅＩＰ、Ｖｅｌｂａｎ（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｅｌｃａｄｅ（Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）、Ｖｅｌｓａｒ（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ、Ｖｅｎｃｌｅｘｔａ（Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘ）、Ｖｅｎｅｔｏｃｌａｘ、Ｖｅｒｚｅｎｉｏ（Ａｂｅｍａｃｉｃｌｉｂ）、Ｖｉａｄｕｒ（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｖｉｄａｚａ（Ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ、Ｖｉｎｃａｓａｒ ＰＦＳ（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ、Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ、Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ Ｔａｒｔｒａｔｅ、ＶＩＰ、Ｖｉｓｍｏｄｅｇｉｂ、Ｖｉｓｔｏｇａｒｄ（Ｕｒｉｄｉｎｅ Ｔｒｉａｃｅｔａｔｅ）、Ｖｏｒａｘａｚｅ（Ｇｌｕｃａｒｐｉｄａｓｅ）、Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ、Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（Ｐａｚｏｐａｎｉｂ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｖｙｘｅｏｓ（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ａｎｄ Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ）、Ｗｅｌｌｃｏｖｏｒｉｎ（Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ Ｃａｌｃｉｕｍ）、Ｘａｌｋｏｒｉ（Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ）、Ｘｅｌｏｄａ（Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、ＸＥＬＩＲＩ、ＸＥＬＯＸ、Ｘｇｅｖａ（Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）、Ｘｏｆｉｇｏ（Ｒａｄｉｕｍ ２２３ Ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｘｔａｎｄｉ（Ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ）、Ｙｅｒｖｏｙ（Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、Ｙｏｎｄｅｌｉｓ（Ｔｒａｂｅｃｔｅｄｉｎ）、Ｚａｌｔｒａｐ（Ｚｉｖ－Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ
）、Ｚａｒｘｉｏ（Ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、Ｚｅｊｕｌａ（Ｎｉｒａｐａｒｉｂ Ｔｏｓｙｌａｔｅ Ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ）、Ｚｅｌｂｏｒａｆ（Ｖｅｍｕｒａｆｅｎｉｂ
）、Ｚｅｖａｌｉｎ（Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ Ｔｉｕｘｅｔａｎ）、Ｚｉｎｅｃａｒｄ（Ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｚｉｖ－Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ、Ｚｏｆｒａｎ（Ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、Ｚｏｌａｄｅｘ（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ Ａｃｅｔａｔｅ）、Ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ
、Ｚｏｌｉｎｚａ（Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ）、Ｚｏｍｅｔａ（Ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ）、Ｚｙｄｅｌｉｇ（Ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ）、Ｚｙｋａｄｉａ（Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ）、および／またはＺｙｔｉｇａ（Ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ）を含むがこれらには限定されない、当技術分野で知られている任意の化学治療剤を含むことができる。

【0073】

ヒドロゲルマトリックスは、腫瘍の微小環境に生体応答性を有し、例えば活性酸素種またはｐＨなどの微小環境内の因子への曝露に際し、抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を放出するように設計できることが理解され、本明細書で企図される。マトリックスは、ＴＭＥのｐＨを変更して、抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤の放出速度を調節するように設計できる。例えば、生体応答性マトリックスは、例えば、微小環境のｐＨを上昇させ、持続放出をもたらすフィブリニンなどのＨ＋スカベンジャーを含むことができる。一態様では、生体応答性ゲルマトリックスは、抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６５、７０、７５、８０、８５、または９０日間、腫瘍微小環境内に放出するように設計できることが本明細書で企図される。

【0074】

本明細書において使用される「治療する」、「治療すること」、「治療」およびこれらの文法的変形は、１種以上の、疾病もしくは症状、疾病もしくは症状の症候または疾病もしくは症状の根底に存在する原因の強度または頻度を部分的にまたは完全に抑制し、遅延し、治療し、治癒し、緩和し、和らげ、変化させ、治し、軽減し、改善し、安定化し、鎮静化し、および／または低減する意図または目的での、組成物の投与を含む。本発明による治療は、予防的に、予防的に、緩和的にまたは治療的に適用することができる。予防的治療は、発症前に（例えば、癌の明白な徴候の前に）、早期の発症中に（例えば、癌の初期の徴候および症候の際に）または癌の発症が確定した後に対象に投与される。予防的投与は、感染症の症状が現れる前の数日から数年間にわたって実施され得る。

【0075】

一態様では、癌もしくは転移を治療、予防、阻害、もしくは低減する、または外科的切除（すなわち、切除）後の再発もしくは転移を治療、予防、阻害、もしくは低減する開示された方法は、本明細書に開示されるいずれかの治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物を対象に投与することを含み、対象における特定の癌の治療に適切な任意の頻度での治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物の投与を含み得る。例えば、治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物は、少なくとも１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８時間毎に１回、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１日間毎に１回、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２か月毎に１回、患者に投与することができる。一態様では、治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物は、週に少なくとも１、２、３、４、５、６、７回投与される。

【0076】

免疫療法生体応答性ゲルマトリックス用に接触して配置される第１および第２の成分は、投与前に混合してゲルマトリックスを形成でき、同時に投与、または別々に投与して投与部位でゲルマトリックスを形成できることが理解され、本明細書で企図される。したがって、本明細書では、免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの第１および第２の成分を別々に維持し、同時にまたは連続して投与できることが企図される。例えば、第１の成分は、第２の成分投与の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分前、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間前に、対象の腫瘍の部位に投与できる。同様に、第１の成分は、第２の成分投与の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分前、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間後に、対象の腫瘍の部位に投与できる。

【0077】

腫瘍の転移または切除後の増殖の防止を、切除前に免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することによって達成することができる利益があり得ることが理解され、本明細書で企図される。したがって、一態様では、癌もしくは転移を治療、予防、阻害、もしくは低減する方法、または外科的切除（すなわち、切除）後の再発もしくは転移を治療、予防、阻害、もしくは低減する方法が本明細書に開示され、ここで第１および第２の成分のうちの少なくとも１つは、腫瘍の除去の前に切除部位に投与される。

【0078】

腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）は通常、腫瘍浸潤免疫細胞の相当な割合を占める。ＴＡＭは、多様な機能的表現型へと分化し、古典的に活性化された（Ｍ１様表現型とも呼ばれる）マクロファージ、あるいは活性化された（Ｍ２様表現型とも呼ばれる）マクロファージと表示される。Ｍ１型ＴＡＭは、抗原提示に不可欠な主要組織適合遺伝子複合体クラスＩおよびクラスＩＩ分子を過剰発現し、これは、抗腫瘍免疫において重要な役割を果たす。逆に、Ｍ２型ＴＡＭは、腫瘍形成促進活性を発揮する。進行性腫瘍は通常、様々な腫瘍決定因子、特に低ｐＨ値に応答してＭ２型ＴＡＭ活性化を実行する。Ｍ２に分極したＴＡＭの腫瘍への浸潤は、一般に腫瘍の浸潤および移動および血管新生を促進し、Ｔ細胞応答も抑制するため、通常、臨床転帰不良に関連する。したがって、特定のＴＭＥにおけるＴＡＭのＭ２分極は、癌治療における重大な予後不良因子であると思われる。

【0079】

本明細書において、噴霧された生物応答性免疫療法フィブリンゲルは、手術後の腫瘍の再発および転移を抑制するように設計された。ＦＤＡ承認の材料であるフィブリンゲルは、フィブリノゲンとトロンビンとの相互作用によって形成された。抗ＣＤ４７抗体と共に事前にカプセル化されたＣａＣＯ３ナノ粒子（ＮＰ）（ａＣＤ４７ ＠ ＣａＣＯ３）を含むフィブリノゲン溶液、およびトロンビン溶液を手術後に腫瘍切除部位にすばやく噴霧し、直ちにｉｎ ｓｉｔｕで免疫療法フィブリンゲルを形成した（図１ａ）。ＣａＣＯ３ ＮＰは徐々に溶解し、その後、酸性炎症および腫瘍微小環境（ＴＭＥ）においてカプセル化されたａＣＤ４７を放出すると予想され、これは通常、ＴＡＭ分極、Ｔ細胞増殖、サイトカイン産生などの免疫細胞機能に影響を与えることで、免疫抑制の役割を果たす。ＣａＣＯ３ＮＰは、Ｍ１型ＴＡＭの活性化を促進するなど、酸性環境の悪影響を緩和できるという仮説が立てられた。

【0080】

一方、放出された抗ＣＤ４７抗体は、ＣＤ４７とＳＩＲＰαとの間の相互作用を遮断することができ、癌細胞のマクロファージ食作用およびＴ細胞への腫瘍抗原提示を増加させることにより、適応免疫応答を活性化する。結果は、臨床的に承認されたａＣＤ４７ ＠ ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリンゲルが、腫瘍の再発を効果的に防止し、手術後の転移を抑制できることを示した。

【0081】

腫瘍の切除後に腫瘍に対する自然または適応免疫応答を増加または調節する方法も本明細書に開示され、方法は、腫瘍を有する対象に第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含む。ここで、マトリックスのゲル化は、第１の成分が第２の成分と接触した場合に起こり、成分の少なくとも１つは、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、少なくとも１つの第１のナノ粒子は、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む。例えば、マクロファージがＭ１型に合致するように自然免疫応答を調節する方法であって、開示される免疫療法生体応答剤を投与することを含む方法が、本明細書に開示される。

【0082】

開示された生体応答性ゲルは、局所的に投与されたにもかかわらず、全身的効果を有し得ることが理解され、本明細書で企図される。したがって、一態様では、対象の癌を治療、軽減、阻害、および／または予防する方法について本明細書に開示される。ここで、免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの投与が、抗腫瘍応答を増加させ、対象において全身的に腫瘍増殖を遅らせる。

【0083】

一態様では、開示された方法で使用するために対象に投与される、本明細書に開示される治療薬または医薬組成物の量は、医師によって決定される特定の癌の対象の治療に適切な任意の量を含み得る。例えば、治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物の量は、約１０ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇであり得る。例えば、投与される治療薬送達ビヒクル剤または医薬組成物の量は、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、５５ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、６５ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、８５ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、９５ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇであり得る。したがって、一態様では、投与される治療薬送達ビヒクルまたは医薬組成物の用量が約１０ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇである、対象の癌を治療する方法が本明細書に開示される。

【実施例】

【0084】

Ｄ．実施例
以下の実施例は、本明細書の特許請求の範囲に記載された化合物、組成物、物品、装置および／または方法がどのように作製され評価されるかの完全な開示および記述を当業者に提供するために提示されており、純粋に例示的であることが意図されており、本開示を限定することは意図されていない。数字（例えば、量、温度など）に関して正確性を確保するための努力がなされているが、一部の誤差および偏差が考慮されるべきである。特に明記しない限り、部は、重量部であり、温度は、℃単位または周囲温度であり、圧力は、大気圧または大気圧に近い。

【0085】

実施例１
ａ）結果
（１）迅速な噴霧によるａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリンゲルの形成
ポリ（エチレングリコール）－ｂ－ポリ（グルタミン酸）（ＰＥＧ－ｂ－Ｐ（Ｇｌｕ））ブロックコポリマーを含む溶液中で、Ｃａ２＋およびＣＯ３２－の添加により、充填容量５％、およびカプセル化効率５０％のａＣＤ４７ ＠ ＣａＣＯ３ＮＰを沈殿させた。直径約１００ｎｍの単分散ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰが得られ、そのサイズは、カルボキシルおよびＣａ２＋間の相互作用を介してＰＥＧ－ｂ－Ｐ（Ｇｌｕ）によって制御され、ＰＥＧシェルを用いてさらなる凝集および集合体を排除した（図１ｂ、図１ｃ、および図１ｄ）。元素マッピング画像（図１ｃ）は、これらのＣａＣＯ３ＮＰにおけるａＣＤ４７（ガドリニウムキレート化）の均一な分布を示す。

【0086】

フィブリンゲルは、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリノゲン、またはトロンビンのいずれかを含む等量の溶液を同時に噴霧および混合することによって迅速に形成でき、これはレオロジー試験によって検証された（図２Ａ、図２Ｂ、および図２Ｃ）。ＣａＣＯ３ＮＰに関連する溶液中のＣａ２＋は、フィブリンゲルの形成を促進し得る。２つの溶液の混合により、弾性率（Ｇ’）が急速に上昇した。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリンゲルの形態は、クライオ走査型電子顕微鏡（Ｃｒｙｏ－ＳＥＭ）イメージングによって観察された（図１ｅおよび図１ｆ）。ヒドロゲル中のａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰの分布をさらに実証するために、フルオレセイン（ＦＩＴＣ）で標識されたフィブリノゲンおよびＣｙ５．５で標識されたＣａＣＯ３ＮＰをヒドロゲル形成に使用した。次に、凍結切片をローダミン結合ロバ抗ラットＩｇＧ抗体で染色して、ａＣＤ４７を追跡した。共焦点イメージングで示されるように、ＣａＣＯ３からのＣｙ５．５シグナルは均一な分布パターンを示し、これはａＣＤ４７と共局在しており、さらにａＣＤ４７のＣａＣＯ３ＮＰへのカプセル化を示す（図１ｇ）。Ｃｙ５．５標識フィブリンゲルの生分解挙動を、蛍光ｉｎ ｖｉｖｏイメージングシステムによって監視した。噴霧の３週間後、ゲルからの蛍光シグナルは検出できず、ゲルが完全に分解したことを示す。

【0087】

ＣａＣＯ３ＮＰは、酸性緩衝液中のＨ＋と反応することにより溶解し、カプセル化されたａＣＤ４７を放出することができる。一方、プロトンスカベンジャーとして機能するＣａＣＯ３ｕＮＰは、酸性溶液のｐＨ値を上昇させることもできる（図３および図４）。Ｃｙ５．５標識フィブリンゲルの生分解挙動を、蛍光ｉｎ ｖｉｖｏイメージングシステムによって監視した。噴霧の３週間後、ゲルからの蛍光シグナルは検出できず、ゲルが完全に分解したことを示す。

【0088】

ＣａＣＯ３ＮＰは、酸性緩衝液中のＨ＋と反応することにより溶解し、カプセル化されたａＣＤ４７を放出することができる（図３Ａ、図３Ｂ、および図４）。一方、ＣａＣＯ３ＮＰは、プロトンスカベンジャーとして酸性溶液のｐＨ値を上昇させた（図５）。ヒドロゲルにａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰをカプセル化すると、ａＣＤ４７が徐々に放出される（図１ｈ）。ｉｎ ｖｉｖｏでの放出挙動を評価するために、ａＣＤ４７をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に分散させ、ＣａＣＯ３ ＮＰにカプセル化するか、またはＣａＣＯ３＠フィブリンゲルにカプセル化し、腫瘍切除腔内に注入または噴霧した。Ｃｙ５．５で標識されたａＣＤ４７シグナルは、ｉｎ ｖｉｖｏイメージングシステム（ＩＶＩＳ）によって監視および定量化した（図１ｉ、図１ｊ、および図６）。切除部位において、注入された溶液中の抗体からのシグナルの８０％が検出不能になっても、ＣａＣＯ３＠フィブリンゲルから放出されるａＣＤ４７の７９％は、検出可能なままであった。ａＣＤ４７の持続放出は、残存腫瘍切片の共焦点イメージングによってさらに実証された。ここでは、抗体に関連する顕著な蛍光シグナルがＮＰのシグナルから離れて観察され、ＣａＣＯ３ＮＰの分解およびＮＰからの抗体の持続放出を示している。ゲルナノ粒子リザーバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）からの治療薬の持続放出は、遊離カーゴ（ｆｒｅｅ ｃａｒｇｏ）と比較して有利であるが、この適用に要求される放出動態をさらに最適化して、治療効果を最大化し、毒性を最小化する必要がある。

【0089】

（２）ＣａＣＯ３ＮＰおよびａＣＤ４７によって誘発される免疫応答
低酸素ＴＭＥにおける癌細胞の解糖代謝は、乳酸およびＨ＋（ｐＨ＝６．５－６．８）の生成をもたらし、腫瘍内の免疫細胞の役割および機能を調節する。さらに、局所的な酸性化（ｐＨ＝６．０－７．０）が、炎症および組織損傷部位でも見られる。残存ＴＭＥおよび炎症環境でＨ＋を排除するＣａＣＯ３の能力を考慮して、ＣａＣＯ３＠フィブリンゲル治療後に全体的な免疫効果を試験した。ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後にＭ２－ＴＡＭ（ＣＤ２０６ｈｉＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋）の著しい減少およびＭ１－ＴＡＭ（ＣＤ８０ｈｉＣＤ１１ｂ＋Ｆ４／８０＋）の増加が見られ、腫瘍を抑制するＭ１表現型へのＴＡＭの分極が促進されたことを示す（図７ａおよび図７ｂ）。このＴＡＭの分極は、ＴＭＥのサイトカインのレベル変動によってさらに確認された（図７ｃ）。観察されたマクロファージのＭ１表現型への分極は、通常Ｍ２様マクロファージ分極を好むＴＭＥの酸性の度調節に起因する可能性がある。Ｍ１様マクロファージ分極を促進する小分子と比較して、炎症を起こした腫瘍切除内におけるＣａＣＯ３のＨ＋スカベンジングは、より簡単なアプローチを提供する。フローサイトメトリーによって評価されるように、ＣａＣＯ３ＮＰの濃度とマクロファージ分極との間に相関関係が観察された。ＣａＣＯ３ ＠フィブリン治療後、骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）および制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の減少、ならびにＴＭＥでのＨＩＦ１－ａの発現の減少も観察された（図７ｄ、図７ｅ、図７ｆ、および図７ｇ；図８）。注目すべきことに、ＣａＣＯ３＠フィブリン治療は、腫瘍内の腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ、ＣＤ３＋）、特に細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ、ＣＤ３＋ＣＤ８＋）の増加（図７ｉ）、ならびにインターフェロン－γ（ＩＦＮ－γ）および血漿中の腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）の増加（図７ｈ）を引き起こした。一方、免疫細胞および癌細胞でのプログラム死－１（ＰＤ－１）およびプログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）の発現は、それぞれほとんど変化しないか、わずかに減少した（図９Ａおよび図９Ｂ）。

【0090】

ＣＤ４７遮断は、共焦点イメージングおよびフローサイトメトリーの結果に示されるように、マクロファージによる癌細胞の食作用をｉｎ ｖｉｔｒｏで増加させた（図３ａ、図３ｂ、図１１ａ、および図１１ｂ）。ａＣＤ４７をフィブリンゲルに充填し（ａＣＤ４７：マウスあたり５０μｇ）、腫瘍切除部位に噴霧すると、切除腫瘍腔内のＬｙ６ＣｈｉＬｙ６Ｇ－マクロファージの頻度の増加が観察されたが、Ｌｙ６Ｇ＋Ｌｙ６Ｃｄｉｍ好中球では観察されなかった（図３ｃ、図３ｄ、および図１２）。ＣＤ１１ｃ＋ＤＣの増加も記録され、これらの細胞は、ＣＤ８０、ＣＤ８６、およびＣＤ１０３の発現を示し、それらの成熟状態を示している（図３ｅおよび図３ｆ）。したがって、ＣＤ４７遮断は、マクロファージおよびＤＣの両方による癌細胞の食作用を増強し、自然免疫系を活性化する。

【0091】

（３）腫瘍再発抑制のためのａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン療法
手術後の残存微小腫瘍に対するａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンの治療効果を検証するために、Ｂ１６Ｆ１０マウスモデルでの不完全な腫瘍切除を設定して、手術後の腫瘍再発を模倣した。ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３、ａＣＤ４７、またはａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３（ａＣＤ４７：マウスあたり５０μｇ）を含む、ｉｎ ｓｉｔｕ形成されたフィブリンを切除部位に噴霧した。腫瘍の再発は、Ｂ１６Ｆ１０細胞からの生物発光シグナルによって監視した（図１３ａ）。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後のグループのマウスは、最小の再発腫瘍サイズを示し、このグループの８匹のマウスのうち４匹は検出可能な腫瘍を示さなかった（図１３ｂおよび図１３ｃ）。対照的に、ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３＠フィブリンまたはａＣＤ４７＠フィブリンで治療されたマウスは、腫瘍の成長が控えめに遅延し、腫瘍の再発がなかったマウスは６匹中１匹のみであった。未治療の対照グループと比較して、当たり障りのないフィブリンゲルは、ごくわずかな治療効果を示した（図１３ｂおよび図１３ｃ）。腫瘍サイズと相関するマウスの生存を監視した。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後のマウスの５０％は、６０日間の観察期間生存した。対照的に、全ての対照グループ中、２ヶ月後に生存したマウスは、２匹のみであった（図１３ｄ）。マウスの体重は、種々の治療後、明白には影響されなかった（図１３ｅ）。さらに、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療の３０日後にマウスから収集された主要臓器の組織学的分析、ならびに治療の１、７、および１４日後に実施された全血パネル試験および血清生化学アッセイは、ａＣＤ４７の局所送達が、マウスへの重大な副作用を引き起こさないことを示した。

【0092】

免疫細胞間の変化を分析するために、再発腫瘍を収集し、手術の５日後にフローサイトメトリーおよび免疫蛍光染色によって分析した。自然免疫系および適応免疫系の両方、特にマクロファージおよびＴＩＬに焦点を当てた。ＣａＣＯ３治療後のＭ１表現型ＴＡＭの分極の増加に伴い、残存腫瘍におけるマクロファージの割合が、ａＣＤ４７遮断後に増加した（図１４ａ、図１５ａ、図１５ｂ、図１５ｃ、および図１５ｄ）。同様に、ＴＩＬ（ＣＤ３＋細胞）の絶対数も、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後の残存腫瘍で増加した（図１４ｂ）。さらに、ＣＤ８＋Ｔ細胞の割合は、他の全ての対照と比較して、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療後の腫瘍で著しく増加した（図１４ｂ－図１４ｃ）。未治療またはブランクのフィブリン治療対照と比較して、ＣＤ４＋Ｔ細胞の増殖も増加する一方、制御性Ｔ細胞（ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔ細胞）の割合は減少した（図１４ｄ、図１６ａ、および図１６ｂ）。免疫蛍光染色は、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン療法後の残存腫瘍での、マクロファージおよびＣＤ８＋Ｔ細胞の著しい増加を視覚的に示した（図１４ｅ、図１７ａ、および図１７ｂ）。免疫応答の過程における重要な指標であるサイトカインの分泌は、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンによって誘発される効果的な自然免疫および適応免疫応答をさらに確認した（図１４ｆ）。

【0093】

（４）遠隔腫瘍を治療するためのａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン療法
ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンが残存腫瘍の自然免疫細胞および適応免疫細胞を活性化できることを確認した上で、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンの局所治療が全身性免疫応答を引き起こし得るかどうか調査することが求められた。転移性腫瘍を模倣するために、Ｂ１６Ｆ１０癌細胞を各マウスの原発腫瘍の反対側に接種した。次に、原発腫瘍を部分的に切除し、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰを含むフィブリンゲルを腫瘍切除部位に噴霧した（図１８ａ）。Ｂ１６Ｆ１０細胞からの生物発光シグナルに従って、ＩＶＩＳイメージングシステムで腫瘍量を監視した。局所腫瘍の再発が、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療によって効果的に抑制され、追加治療なしの反対側の遠隔腫瘍も、遅い成長速度を示すことが見出された（図１８ｂ、図１８ｃ、および図１８ｄ）。これらの結果と一致して、Ｍ１様ＴＡＭおよびＣＤ１０３＋ＤＣの数は、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンを噴霧した腫瘍で著しく増加し（図１８ｅおよび図１８ｆ）、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、治療した腫瘍および遠隔腫瘍の両方で増加した（図１８ｇおよび図１９）。遠隔腫瘍におけるＣＤ８＋Ｔ細胞の増加は、全身性抗腫瘍免疫を誘発するマクロファージおよびＤＣによる腫瘍抗原の局所的な交差提示に起因する可能性がある。免疫系の活性化は、デュアルシリンジ投与法によるａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠Ｆｉｂｒｉｎの腫瘍周囲注射によってさらに確認された。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンによる治療は、局所腫瘍および遠隔腫瘍の両方の成長を効果的に抑制した。

【0094】

噴霧ゲルで同時送達された抗ＰＤ－１（ａＰＤ１）およびａＣＤ４７の併用効果も評価した。同様に、原発腫瘍を部分的に切除し、ａＣＤ４７ ＠ ＣａＣＯ３ＮＰ（ａＣＤ４７：マウスあたり５０μｇ）、ａＰＤ１＠ ＣａＣＯ３ ＮＰ（ａＰＤ１：マウスあたり５０μｇ）またはａＣＤ４７＆ａＰＤ１ ＠ ＣａＣＯ３ＮＰ（ａＣＤ４７：マウスあたり２５μｇ、ａＰＤ１：マウスあたり２５μｇ）を含むフィブリンゲルを手術部位に噴霧した。心強いことに、生物発光イメージングならびに局所腫瘍および遠隔腫瘍の成長プロファイルに示されているように、ａＣＤ４７＆ａＰＤ１＠ＣａＣＯ３＠フィブリン治療によって、腫瘍の再発および転移の抑制における相乗効果が達成された（図２０Ａ、図２０Ｂ、および図２０Ｃ）。
ｂ）結論
結論として、腫瘍切除部位に噴霧された免疫療法フィブリンは、免疫抑制ＴＭＥを逆行させ、全身性抗腫瘍免疫応答を誘発して癌の局所再発を防ぎ、現行の転移を抑制することができる。ＣａＣＯ３ＮＰは、生体応答性方法でＨ＋を排除することにより、残存ＴＭＥおよび炎症環境に関連する酸性の腫瘍切除環境を調節し、それによって抗腫瘍免疫応答を効果的に促進することができる。この反応に加えて、ＣａＣＯ３ＮＰから放出されたａＣＤ４７は、癌細胞のアップレギュレートされた「ｄｏｎ’ｔ ｅａｔ ｍｅ」シグナルを遮断し、マクロファージによるプログラムされた癌細胞除去を可能にする。ＣＤ４７の遮断は、マクロファージおよびＤＣによる腫瘍特異的抗原の提示が促進されるため、Ｔ細胞を介した癌細胞の破壊にもつながり得る。

【0095】

ｃ）材料および方法
（１）材料、細胞株、および動物
全ての化学物質は、精製せずにＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。マウストロンビンおよびフィブリノゲンは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓから購入した。抗ＣＤ４７抗体（ａＣＤ４７）はＢｉｏｌｅｇｅｎｄ Ｉｎｃ（カタログ番号１２７５１８、クローン：ｍｉａｐ３０１）から購入した。マウス黒色腫（Ｂ１６Ｆ１０）細胞は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から購入した。Ｂ１６Ｆ１０－ｌｕｃ細胞は、ＵＮＣのＤｒ．Ｌｅａｆ Ｈｕａｎｇから入手した。細胞は、１０％ウシ胎児血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）および１００ Ｕ／ｍＬペニシリン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含むダルベッコ改変イーグル培地（Ｇｉｂｃｏ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で、３７℃の５％ＣＯ２雰囲気下でインキュベーター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）内で維持した。雌のＣ５７ＢＬ／６マウス（６～１０週）は、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂから購入した。全てのマウス実験は、ノースカロライナ大学チャペルヒル校およびノースカロライナ州立大学の動物実験委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって承認されたプロトコルに従って実施した。

【0096】

（２）ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３の調製および特性評価
ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３ＮＰは、化学沈殿によって調製した。典型的に、１００ｍＭのＣａＣｌ２を含む１ｍｌのＴｒｉｓ－ＨＣｌ緩衝液（１ｍＭ、ｐＨ７．６）を、最初に１００ｇのａＣＤ４７、合成された１０ｍｇのＰＥＧ－ｂ－Ｐ（Ｇｌｕ）ブロックコポリマー、および１０ｍＭのＮａＣＯ３を含む１ｍｌのＨＥＰＥＳ生理食塩水緩衝剤（５０ｍＭ、ｐＨ７．１、ＮａＣｌ １４０ｍＭ）と混合した。次に、混合物を４℃で一晩撹拌した。過剰のイオン、コポリマー、および抗体を、１４８００ｒｐｍで１０分間の遠心分離によって除去した。サイズ分布はＤＬＳで評価し、形態をＴＥＭ（ＪＥＯＬ ２０００ＦＸ）で測定した。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３（ａＣＤ４７はキレート化されたガドリニウム）の元素分析は、分析ＴＥＭ（Ｔｉｔａｎ）を使用して特性評価した。ＣａＣＯ３にカプセル化されたａＣＤ４７の量を、ＥＬＩＳＡ（ラットＩｇＧ ｔｏｔａｌ ＥＬＩＳＡキット、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号８８－５０４９０－２２）によって測定した。ＣａＣＯ３ＮＰの充填容量（ＬＣ）およびカプセル化効率（ＥＥ）を、式、ＬＣ＝（Ａ－Ｂ）／Ｃ、およびＥＥ＝（Ａ－Ｂ）／Ａで計算した。式中Ａは抗体の予想されるカプセル化量、Ｂは遊離の非捕捉抗体、Ｃは粒子の総重量である。

【0097】

（３）ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠Ｆｉｂｒｉｎの形成および特性評価
フィブリンゲルは、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３およびトロンビン（５ ＮＩＨ Ｕ／ｍＬ）を含む等量のフィブリノゲン（１０ｍｇ／ｍｌ）を噴霧することによって得た。ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンの形態は、Ｃｒｙｏ－ＳＥＭ（ＪＥＯＬ ７６００Ｆ ｗｉｔｈ Ｇａｔａｎ Ａｌｔｏ）によって特性評価した。フィブリンへのａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３のカプセル化は、共焦点顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ ＬＳＭ ７１０）によってさらに特性評価した。

【0098】

（４）ａＣＤ４７のｉｎ ｖｉｔｒｏ放出
ａＣＤ４７の放出挙動は、異なるｐＨ値（ｐＨ６．５および７．４）のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で、３７℃で調査した。放出されたａＣＤ４７は、Ｒａｔ ＩｇＧ ｔｏｔａｌ ＥＬＩＳＡキットで測定した。

【0099】

（５）ａＣＤ４７のｉｎ ｖｉｖｏ放出
ａＣＤ４７のｉｎ ｖｉｖｏ 放出挙動を調査するために、ＰＢＳに分散したＣｙ５．５標識遊離ａＣＤ４７またはａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３を腫瘍切除部位に注射した。さらに、ａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３およびトロンビン（５ＮＩＨ Ｕ／ｍＬ）を含む等量のフィブリノゲン溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）を、手術後の腫瘍部位に噴霧した。蛍光イメージングを、ＩＶＩＳスペクトルシステム（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）によって監視した。

【0100】

（６）Ｉｎ ｖｉｔｒｏ食作用アッセイ
骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）をＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ Ｇｒｅｅｎ（Ｃ７０２５、Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で標識し、癌細胞をＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ ＤｅｅｐＲｅｄ（Ｃ３４５６５、Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＵＳＡ）で標識した。マクロファージ（１×１０５）を、ＩｇＧまたはａＣＤ４７で事前に遮断された癌細胞（４×１０５）と無血清培地で共培養した。３７℃で２時間インキュベートした後、共焦点顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ ＬＳＭ ７１０）およびＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメトリー（Ｂｅｃｋｍａｎ）によって食作用を調査した。

【0101】

（７）Ｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍モデルおよび治療
腫瘍再発に対する治療効果を調査するために、１×１０６のｆＬｕｃ－Ｂ１６Ｆ１０をマウスの右脇腹に移植してから１０日後に、マウスをランダムに５つのグループ（ｎ＝６－８）に分け、手術後の残存微小腫瘍を模倣する約１％の残存腫瘍組織を残して、それらの腫瘍を切除した。簡単に説明すると、イソフルランを使用して誘導チャンバー内で動物を麻酔し（誘導は最大５％、維持の場合は１～３％）、ノーズコーンを介して麻酔を維持した。腫瘍領域を切り取り、無菌的に準備した。滅菌器具を使用して、腫瘍の約９９％を除去した。手術直後に、フィブリン、ＩｇＧ＠ＣａＣＯ３＠フィブリン、ａＣＤ４７＠フィブリン、およびａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンを含む、異なる形態のフィブリンゲルを同じ用量で手術台に噴霧した。Ａｕｔｏｃｌｉｐ創傷クリップシステムによって、創傷を塞いだ。

【0102】

転移性腫瘍モデルでは、１×１０６のｆＬｕｃ－Ｂ１６Ｆ１０をマウスの右脇腹に移植してから７日後に、転移性腫瘍としての２番目の腫瘍（１×１０６ ｆＬｕｃ－Ｂ１６Ｆ１０）を各マウスの左脇腹に接種した。３日後、それらの原発腫瘍を切除し、上記のように手術後の残存微小腫瘍を模倣するために約１％の残存腫瘍組織を残した。同様に、手術後にａＣＤ４７＠ＣａＣＯ３＠フィブリンを同じ用量で手術台に噴霧した。

【0103】

腫瘍のサイズをノギスで測定し、幅２×長さ×０．５の式に従って計算した。腫瘍を生物発光イメージングによっても監視した。ＤＰＢＳ（１５ｍｇ／ｍＬ）中のｄ－ルシフェリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標）Ｐｉｅｒｃｅ（商標））をマウスに腹腔内注射（１０μＬ／ｇ体重）してから１０分後、マウスをＩＶＩＳスペクトルイメージングシステム（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｌｔｄ．）によって５分間画像化した。関心領域は、Ｌｉｖｉｎｇ Ｉｍａｇｅソフトウェアを使用して、平均放射輝度（光子ｓ－１ ｃｍ－２ ｓｒ－１）として定量化した。健康障害の兆候を示したとき、または腫瘍の体積が１．５ｃｍ３を超えたとき、動物を二酸化炭素で安楽死させた。

【0104】

（８）サイトカインの検出
ＩＬ１０、ＩＬ１２ｐ７０、ＩＬ６、ＩＦＮ－γ、またはＴＮＦ－αの局所および血漿レベルは、ベンダーのプロトコル（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）に従ってＥＬＩＳＡキットで測定した。サイトカインの局所（腫瘍）濃度を検出するために、フィブリンゲルを噴霧してから５日後に腫瘍組織を収集し、冷ＰＢＳ中で均質化して単一細胞懸濁液を形成した。血漿レベルについては、種々の治療後のマウスから血清サンプルを分離し、分析のために希釈した。

【0105】

（９）フローサイトメトリー
腫瘍内の免疫細胞を調査するために、種々のグループのマウスから収集された腫瘍を小片に切断し、染色冷緩衝液中で均質化して単一細胞懸濁液を形成した。次に、消化酵素を添加せずにホモジナイザーで穏やかに加圧することにより、単一細胞懸濁液を調製した。蛍光標識抗体ＣＤ４５（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０３１０８）、ＣＤ１１ｂ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０１２０８）、ＣＤ２０６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１４１７１６）、Ｆ４／８０（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号．１２３１１６）、ＣＤ８０（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０４７２２）、Ｇｒ－１（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０８４１２）、ＣＤ３（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００２０４）、ＣＤ４（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１００４１２）、ＣＤ８（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１４０４０８）、Ｆｏｘｐ３（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２６４０４）、ＣＤ１１ｃ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１１７３１０）、ＣＤ８６（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１０５００８）、ＣＤ１０３（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２１４０６）、Ｌｙ６Ｃ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２８０１６）、およびＬｙ６Ｇ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、カタログ番号１２７６０８）を用いて、製造元の指示に従って細胞を染色した。実験で使用したこれらの抗体は、全て２００倍に希釈した。染色された細胞をＣｙｔｏＦＬＥＸフローサイトメーター（Ｂｅｃｋｍａｎ）で測定し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアパッケージ（バージョン１０．０．７；ＴｒｅｅＳｔａｒ、ＵＳＡ、２０１４）によって分析した。

【0106】

（１０）免疫蛍光染色
腫瘍をマウスから切断し、最適切断温度（ＯＣＴ）培地で急速凍結した。クリオトームを使用して腫瘍切片を切断し、次にスライドに載せた。次に、切片を一次抗体、すなわちＣＤ４（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ１８３６８５）、ＣＤ８（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ２２３７８）、およびＦ４／８０（Ａｂｃａｍ、カタログ番号ａｂ１００７９０）で４°Ｃで一晩、製造元の指示に従って染色した。蛍光標識された二次抗体、すなわちヤギ抗ラットＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号Ａ１８８６６）およびヤギ抗ウサギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号Ａ３２７３３）の添加後、スライドを、共焦点顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ ＬＳＭ ７１０）を使用して分析した。実験で使用したこれらの抗体は、全て２００倍に希釈した。

【0107】

（１１）ウエスタンブロッティング
ウエスタンブロッティングのために、ビシンコニン酸タンパク質アッセイキット（ＢＣＡ）で測定した等量のタンパク質を含む各サンプルを、等量の２×Ｌａｅｍｍｌｉ緩衝液と混合し、９５℃で５分間煮沸した。ゲル電気泳動の完了後、タンパク質をＨｙｂｏｎｄニトロセルロースメンブレンに転写した。次に、１：１０００希釈の抗ＨＩＦ１－α抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ、ｓｃ－１３５１５）、および１：５０００希釈の抗β－アクチン抗体（Ａｂｃａｍ、ａｂ８２２６）を一次抗体として使用した。これらのブロットに使用された二次抗体は、ヤギ抗マウス抗体（Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、ＮＢＰ１７５１５１）であった。

【0108】

（１２）統計分析
全ての結果は、示されるように、平均±ｓ．ｅ．ｍとして表示される。多重比較には（３つ以上のグループを比較した場合）、テューキー事後検定および一元配置／二元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）を使用した。生存率は、ログランク検定を用いて決定した。全ての統計分析は、Ｐｒｉｓｍソフトウェアパッケージ（ＰＲＩＳＭ ５．０；ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ＵＳＡ、２００７）を使用して実施した。統計的有意性の閾値は、Ｐ＜０．０５であった。

【0109】

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Ｗａｎｇ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｉｎ ｓｉｔｕ ｆｏｒｍｅｄ ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｗｉｔｈ ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｆｏｒ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．１０，ｅａａｎ３６８２（２０１８）．
Ｗａｎｇ，Ｃ．，Ｗｅｎ，Ｄ．＆Ｇｕ，Ｚ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２９，７０２－７０８（２０１７）．
Ｗａｎｇ，Ｃ．，Ｙｅ，Ｙ．，Ｈｕ，Ｑ．，Ｂｅｌｌｏｔｔｉ，Ａ．＆Ｇｕ，Ｚ．Ｔａｉｌｏｒｉｎｇ ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｔｒｅｎｄｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｏｕｔｌｏｏｋ．Ａｄｖ．Ｍａｔｅｒ．２９，１６０６０３６（２０１７）．
Ｗａｎｇ，Ｙ．－Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｎｏｔｃｈ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ ｔｈｅ Ｍ１ ｖｅｒｓｕｓ Ｍ２ ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｉｎ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７０，４８４０－４８４９（２０１０）．
Ｚｈａｏ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．Ａ Ｐｒｅｌｏａｄｅｄ Ａｍｏｒｐｈｏｕｓ Ｃａｌｃｉｕｍ Ｃａｒｂｏｎａｔｅ／Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ＠ Ｓｉｌｉｃａ Ｎａｎｏｒｅａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｐＨ‐Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ａｎ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．５４，９１９－９２２（２０１５）．
Ｚｏｕ，Ｗ．，Ｗｏｌｃｈｏｋ，Ｊ．Ｄ．＆Ｃｈｅｎ，Ｌ．ＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１）ａｎｄ ＰＤ－１ ｐａｔｈｗａｙ ｂｌｏｃｋａｄｅ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ，ａｎｄ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．８，３２８ｒｖ３２４（２０１６）．
出願時の特許請求の範囲は以下の通り。

［請求項１］
第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスであって、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触したときに起こり、少なくとも１つの前記成分が、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項２］
前記第１の成分が、Ｈ＋スカベンジャーを含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項３］
Ｈ＋スカベンジャーがフィブリニンである、請求項２に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項４］
前記第２の成分がトロンビンを含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス
［請求項５］
前記遮断阻害剤または免疫調節剤が抗ＣＤ４７抗体である、請求項１～４のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項６］
少なくとも１つの第２のナノ粒子をさらに含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項７］
前記第１の成分が少なくとも１つの第１のナノ粒子を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項８］
前記第１の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤をさらに含む、請求項７に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項９］
前記第２の成分が、前記第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項７に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１０］
請求項１～６のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１１］
前記第２の成分が、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子を含む。
［請求項１２］
前記第２の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤をさらに含む、請求項１０に記載の免疫療法の生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１３］
前記第１の成分が、第２の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項１０に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１４］
前記第２の成分が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１５］
前記第１の成分が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む、請求項１に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１６］
前記マトリックスの投与の１４０時間後に３０％未満の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が放出される、請求項１～１４のいずれか１項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックス。
［請求項１７］
癌腫瘍の外科的切除の部位での転移を阻害する方法であって、前記切除部位に、請求項１～１５のいずれか一項に記載の免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含む方法。
［請求項１８］
癌腫瘍の外科的切除の部位での転移を阻害する方法であって、前記切除部位に第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含み、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触したときに起こり、前記成分の少なくとも１つが、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む方法。
［請求項１９］
前記第１の成分および第２の成分が、別々に対象に送達される、請求項１７に記載の方法。
［請求項２０］
前記第１の成分が、前記第２の成分の前に対象の腫瘍の部位に送達される、請求項１７または１８に記載の方法。
［請求項２１］
前記第１の成分が、前記第２の成分の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間前に投与される、請求項１７～１９のいずれに記載の方法。
［請求項２２］
前記第１の成分が、前記第２の成分の後に対象の腫瘍の部位に送達される、請求項１７または１８に記載の方法。
［請求項２３］
前記第１の成分が、前記第２の成分の少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５分、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１８、２４、３６、４８、または７２時間後に投与される、請求項１７、１８、または２１のいずれか一項に記載の方法。
［請求項２４］
前記第１および第２の成分が、同時に（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｌｙ）投与される、請求項１７に記載の方法。
［請求項２５］
前記第１および第２の成分が、同時に（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与される、請求項１７に記載の方法。
［請求項２６］
前記第１および第２の成分が、前記対象への投与前に一緒に混合される、請求項２４に記載の方法。
［請求項２７］
前記第１および第２の成分のうちの少なくとも１つが、腫瘍の除去の前に切除部位に投与される、請求項１７～２５のいずれか１項に記載の方法。
［請求項２８］
その後、前記第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することをさらに含む、請求項１７～２６のいずれか一項に記載の方法
［請求項２９］
追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤の投与をさらに含む、請求項１７～２７のいずれに記載の方法。
［請求項３０］
前記追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックス中で投与される、請求項１７～２８のいずれに記載の方法。
［請求項３１］
前記追加の抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤が、前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスとは別に投与される、請求項２８に記載の方法。
［請求項３２］
腫瘍に対する自然または適応免疫応答を前記腫瘍の切除後に増加させる方法であって、腫瘍を有する対象に第１の成分および第２の成分を含む免疫療法生体応答性ゲルマトリックスを投与することを含み、前記マトリックスのゲル化が、前記第１の成分が前記第２の成分と接触した場合に起こり、前記成分の少なくとも１つが、少なくとも１つの第１のナノ粒子を含み、前記少なくとも１つの第１のナノ粒子が、少なくとも１つの抗癌剤、遮断阻害剤、または免疫調節剤を含む方法。
［請求項３３］
前記免疫療法生体応答性ゲルマトリックスの投与が、対象において抗腫瘍応答を増加させ、全身的に腫瘍増殖を遅らせる、請求項１７～３１のいずれか１項に記載の方法。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図1G】

【図1H】

【図1I】

【図1J】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3A】

【図3B】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図7E】

【図7F】

【図7G】

【図7H】

【図7I】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図10E】

【図10F】

【図11A】

【図11B】

【図12】

【図13A】

【図13B】

【図13C】

【図13D】

【図13E】

【図14A】

【図14B】

【図14C】

【図14D】

【図14E】

【図14F】

【図15A】

【図15B】

【図15C】

【図15D】

【図16A】

【図16B】

【図17A】

【図17B】

【図18A】

【図18B】

【図18C】

【図18D】

【図18E】

【図18F】

【図18G】

【図19】

【図20A】

【図20B】

【図20C】

【図20D】