特許 7584400 チオシクロへプチン誘導体およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-11-07

(45)【発行日】2024-11-15

(54)【発明の名称】チオシクロへプチン誘導体およびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 337/04 20060101AFI20241108BHJP

   C07D 409/12 20060101ALI20241108BHJP

【ＦＩ】

C07D337/04 CSP

C07D409/12

【請求項の数】 7

(21)【出願番号】P 2021500928

(86)(22)【出願日】2019-07-12

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2021-11-18

(86)【国際出願番号】 NL2019050438

(87)【国際公開番号】W WO2020013696

(87)【国際公開日】2020-01-16

【審査請求日】2022-07-08

(31)【優先権主張番号】18183537.2

(32)【優先日】2018-07-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】513057382

【氏名又は名称】クリスタル・デリバリー・ビー・ブイ

(74)【代理人】

【識別番号】100095407

【弁理士】

【氏名又は名称】木村 満

(74)【代理人】

【識別番号】100132883

【弁理士】

【氏名又は名称】森川 泰司

(74)【代理人】

【識別番号】100148633

【弁理士】

【氏名又は名称】桜田 圭

(74)【代理人】

【識別番号】100147924

【弁理士】

【氏名又は名称】美恵 英樹

(72)【発明者】

【氏名】ヴェーテリングス、ヨセヒュス ヨハンネス

(72)【発明者】

【氏名】レイケン、クリスティアンネ ヨハンナ フェルディナント

【審査官】谷尾 忍

(56)【参考文献】

【文献】米国特許出願公開第２００９／００６８７３８（ＵＳ，Ａ１）

【文献】特表２０１６－５１５０９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許出願公開第２０１８／０２０１５９３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】GABRIELA DE ALMEIDA; ET AL，THIACYCLOALKYNES FOR COPPER-FREE CLICK CHEMISTRY，ANGEWANDTE CHEMIE INTERNATIONAL EDITION，2012年03月05日，VOL:51, NR:10，PAGE(S):2443 - 2447，http://dx.doi.org/10.1002/anie.201106325

【文献】Organic Letters，2017年，19(5)，p.1096-1099

【文献】Journal of Organometallic Chemistry，1999年，584(1)，p.1-10

【文献】LI,L. et al.，Development and applications of the copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAC) as a bioorthogonal reaction，Molecules，2016年，Vol.21, No.10，p.1393/1-1393/22

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ ３３７／０４

Ａ６１Ｋ ４７／５４

Ａ６１Ｋ ９／１６

Ａ６１Ｋ ４７／２２

Ｃ０７Ｄ ４０９／１２

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（ＩＩ）で表される化合物。

【化1】

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４はメチル基であり、
Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^１０は水素である。

【請求項2】

請求項１に記載の化合物の、Ｎ原子、または、Ｓ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子が、任意のリンカー（Ｌ）を介して官能基（Ｑ）に結合して形成され、式（ＩＩＩ）で表される化合物。
（式ＩＩ）－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）
（式ＩＩ）は、請求項１に記載された式（ＩＩ）であり、
Ｌは、存在しないか、または、Ｓ（Ｏ _２ ）フェニル、コハク酸リンカー、ジアミノＰＥＧスペーサー、アミノ－ＰＥＧ－ヒドロキシルスペーサー、メチレンフェニルおよびＣ（Ｏ）ＮＨＣ _２ Ｈ _４ ＳＳＣ _２ Ｈ _４ ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ _３ Ｈ _６ から選択され、
ＱはＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル、ベンジルアミン、アミン、ヒドロキシル、３－メトキシカルボニル、３－ヒドロキシカルボニル、４－メトキシカルボニル、ＣＯＯＨ、および（（２，５－ジオキソピロリジン－１－イル)オキシ)カルボニルから選択される。

【請求項3】

前記請求項１に記載の化合物のＮ原子が、前記任意のリンカー（Ｌ）を介して前記官能基（Ｑ）に結合して形成される、請求項２に記載の化合物。

【請求項4】

請求項１に記載の式（ＩＩ）の化合物の調製方法であって、
ａ．ビスヒドラゾン（２）をイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）に変換するステップと、

【化2】

ｂ．得られたイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）を単離するステップと、
を含む、方法。

【請求項5】

前記変換は、ビスヒドラゾン（２）が酸化剤と反応して硫黄官能基をスルホンイミノ官能基に酸化する酸化反応を含み、
前記変換はさらに、ビスヒドラゾン（２）が酸化剤と反応してヒドラゾン官能基をアルキン官能基に酸化する酸化反応を含む、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記酸化反応が２段階反応であり、前記酸化反応は、１つの酸化剤とのワンポット反応である、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記酸化剤はヨードベンゼンジアセテートである、請求項６に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、新規のチオシクロヘプチン誘導体、特にチアシクロアルキンスルホイミン誘導体およびそれらの合成に関する。本発明はまた、リンカー、薬物および薬物送達システム、タンパク質、造影剤、色素、発色団、リガンドなどを含むものなどの様々なカップリング反応における新規チオシクロヘプチン誘導体の使用に関する。本発明はさらに、銅を含まないクリック反応における新規チオシクロヘプチンの使用に関する。本発明はさらに、ナノ粒子、タンパク質、ヒドロゲル、リポソーム、抗体薬物複合体、薬物ポリマー複合体などのような標的化および／または標識送達システムなどの多種多様なシステムの生成における新規チオシクロヘプチン誘導体の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

生体直交化学は、生体分子と生理学的プロセスの調査に使用される。生体直交化学は、他の、より従来型の研究ツールまたは医療が利用できない場合、または、不十分な場合に使用される。通常、プロトコルは、細胞または生体内の標的生体分子を生体直交官能基で標識することから始まる。補足的な機能を備えたプローブ分子がシステムに提供され、双直交化学反応により、プローブが対象のターゲットに特異的に送達される。例えば、より簡単な精製のような、速度論的最適化と歩留まり最適化を可能にすることにより、この有用な手法のさらなる開発における重要な要素と見なされている。過去において、アジドとシクロオクチンのひずみ促進環化付加反応は、耐用性の高い生体直交反応として見出された。アジドとシクロオクチンのひずみ促進環過付加反応は、Ｃｕフリー（または銅フリー）クリックケミストリーとも呼ばれ、１９７０年代のクレブス（Krebs）とキムリング（Ｋｉｍｌｉｎｇ）の古典的な研究から示唆された。彼らは、高温でのみアジドとの１，３－双極子付加環化を受ける非活性化線状アルキンとは対照的に、シクロオクチンは室温で同じ基質と容易に反応することを観察した。シクロオクチンの反応性の上昇は、アルキンの結合角の変形に起因する環のひずみに起因していた。

【0003】

アルメイダ（Ａｌｍｅｉｄａ）らは、長年にわたって開発されてきた、生体直交カップリング反応で使用されているシクロオクチンのグループについて説明している。アルメイダは、シクロオクチン活性に対する環内の硫黄の影響を調査し、いくつかのチオシクロアルキンを合成した。付加環化反応における３，３，６，６－テトラメチルチアシクロヘプチン（ＴＭＴＨ）の反応性は、従前のシクロオクチン化合物よりも速いことが見いだされた。キング（King）らは、臭化ベンジルで硫黄原子を誘導体化した場合にのみ、ＴＭＴＨの妥当な安定性を説明した（非特許文献１）。さらに、ＴＭＴＨの他の誘導体を合成することは困難であり、硫黄をさらに誘導体化することは困難であることがわかった。ドマーホルト（Dommerholt）らは、ＴＭＴＨの安定性が低く、純粋な形で分離できないことを示している（非特許文献２）。リ（Li）らは、ＴＭＴＨがこれまでに報告された最速のＳＰＡＡＣであることを示した（特許文献３）が、生体直交反応への応用を妨げるラベルを付けることができなかった。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0004】

【文献】Chem Commun 2102、48、9308

【文献】NATURE COMMUNICATIONS 2014, 5, 5378, Top Curr Chem (Z) 2016, 374:16

【文献】Molecules、2016、21、1393

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

アジド、ニトロン、その他の銅フリークリック反応で使用するための１，３双極子との、１，３双極子付加環化反応において、少なくとも同様の反応性を持つ、銅フリークリック反応におけるＴＭＴＨの利点を用いた、新規で、容易に入手でき、反応性がある化合物がさらに必要である。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明者らは、硫黄含有シクロアルキン、特にチオシクロヘプチンの新規なクラスを発見した。本発明のシクロアルキンは、有線の様々な目的に使用することができる新しいクラスの化合物を形成し、その１つは、それらが銅フリークリックケミストリーにおいて反応性であるということである。

【0007】

第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物に関する。

【化1】

ｎとｍは独立して、０、１、または２であり、ｎ＋ｍは２であり、
ＸはＯまたはＮＲ^９であり、
ＹはＮＲ^１０であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基であり、
前記Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳは更に、独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基と結合し、
前記アルキル基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロアリール基）および（ヘテロ）アリールアルキル基は、独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から選択される１またはそれ以上の置換基により置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルキルオキシ基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、ここでＲ^１１は独立して、Ｃ^１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルコキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基であり、
前記Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳは更に、独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、C_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基と結合し、
前記アルキル基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基および（ヘテロ）アリールアルキル基は独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から独立して選択される１またはそれ以上の置換基により置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、ここでＲ^１１は、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から独立して選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記Ｒ^１とＲ^７、Ｒ^１とＲ^８、Ｒ^２とＲ^７、Ｒ^２とＲ^８、Ｒ^３とＲ^５、Ｒ^３とＲ^６、Ｒ^４とＲ^５、および／またはＲ^４とＲ^６は任意で、独立して、シクロアルキル－、シクロ（ヘテロ）アリール－、シクロアルキル（ヘテロ）アリール、－シクロ（ヘテロ）アリールアルキル系のような縮合環系を形成し、
前記縮合系のアルキル基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子によって中断され、
前記縮合系の、前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基、（ヘテロ）アリールアルキル基は、独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から独立して選択される１またはそれ以上の置換基で置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は、任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、
Ｒ^１１はＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から独立して選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
Ｒ^９、Ｒ^１０は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ≡ＣＲ^１２、－［Ｃ（Ｒ^１２）２Ｃ（Ｒ^１２）２Ｏ］ｑ－Ｒ^１２（ｑは１から２００の範囲）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、―ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、－Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、－Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル(ヘテロ)アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0008】

第２の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物を調製するための方法に関する。この方法は、以下のステップを含む。
ａ．ビスヒドラゾン（２）をイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）に変換する。
ｂ．得られたイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）を単離する。

【0009】

第３の態様では、本発明は、式（Ｉ）の化合物の、Ｘおよび／もしくはＹならびに／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子は、独立して、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する化合物に関する。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）
連結基（Ｌ）は、存在しないか、または、直鎖状または分枝状の、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルキニレン基、Ｃ_３～Ｃ_２４シクロアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルケニレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルキニレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリーレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルケニレン基、Ｃ_９～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキニレン基から選択され、
前記アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、シクロアルキレン基、シクロアルケニレン基、シクロアルキニレン基、アルキル（ヘテロ）アリーレン基、（ヘテロ）アリールアルキレン基、（ヘテロ）アリールアルケニレン基および（ヘテロ）アリールアルキニレン基は任意で、独立してＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルケニル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルキニル基、Ｃ_８～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソおよびシリル基からなる群から選択される1またはそれ以上の置換基で置換され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉで表され、Ｒ^１１は上記の通り定義され、
官能基Ｑは、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、―Ｃ≡ＣＲ^１２、―［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］_ｑＲ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、－ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、―Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、―Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、―Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0010】

さらなる態様において、本発明は、本発明の式（Ｉ）の化合物であって、原子Ｘ、Ｙの位置および／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子の位置で、好ましくはＹの位置で、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する化合物を含む化合物を提供する。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）
ここで、ＬおよびＱは上記のように定義されたとおりである。

【0011】

さらなる態様において、本発明は、式（Ｉ）または（ＩＩＩ）の化合物を、１，３－双極子または１，３（ヘテロ）ジエンを含む化合物とカップリングするための方法に関する。好ましくは、ここで１，３―双極子または１，３（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、アジド含有化合物、ニトロンを含む化合物またはニトリルオキシドを含む化合物であり、好ましくはアジド含有化合物である。本発明の化合物とアジドとのカップリングは、典型的にはトリアゾールをもたらす。１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および／または担体を含む。

【0012】

さらなる態様において、本発明は、本明細書で定義される式（ＩＩＩ）の化合物を含む化合物に関し、ここで、官能基Ｑは、目的の分子、好ましくは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体からなる群から選択される目的の分子と反応する。

【0013】

さらなる態様において、本発明は、ナノ粒子、タンパク質、ヒドロゲル、リポソーム、抗体薬物複合体、薬物ポリマー複合体などのような標的化および／または標識された送達システムなどの多種多様なシステムの調製方法に関する。ここで、式（Ｉ）または（ＩＩＩ）の（官能化された）化合物はアジドに結合している。

【0014】

さらなる態様において、本発明は、目的の２つの分子をカップリングするための方法における式（Ｉ）または（ＩＩＩ）の化合物の使用に関し、より具体的には、銅フリークリック反応を使用して、ナノ粒子、タンパク質、ヒドロゲル、リポソーム、抗体薬物複合体、薬物ポリマー複合体などの標的化および／または標識化された送達システムを薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の内の１またはそれ以上にカップリングする。

【0015】

他の態様は、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の群から選択される、ナノ粒子および活性化合物、を含む構築物の調製方法を含み、ここで、ナノ粒子と活性化合物とのカップリングは、式（Ｉ）または（ＩＩＩ）の化合物とアジド含有化合物とのカップリングにより、トリアゾール化合物を形成するカップリングを含む。

【0016】

さらなる態様において、本発明は、目的の２つの分子をカップリングするための方法における本発明の化合物の使用に関し、ここで任意で分子は、独立して、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の中から任意選択される。好ましくは、目的の分子の１つは、本発明によるシクロアルキンを含み、他の目的の分子は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエン、好ましくはアジド、ニトロン含有またはニトリルオキシド、より好ましくはアジド含有化合物である。１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および／または担体を含む。

【0017】

さらなる態様において、本発明は、アルキン基が、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物に結合している、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物に関する。ここで、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド含有化合物であり、より好ましくは、アジド含有化合物であり、好ましくは、アジド－アルキンカップリングは、トリアゾール化合物の形成をする。１，３－双極子または１，３（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および／または担体を含む。

【0018】

さらなる態様において、本発明は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物に結合された、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物を含む化合物に関する。ここで、式（Ｉ）のチオシクロヘプチンのアルキン基は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物に結合している。ここで、好ましくは、１，３－双極子または１，３（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド含有化合物、より好ましくはアジド含有化合物である。そして、アジド－アルキンカップリングは、好ましくは、トリアゾール化合物の形成をもたらす。１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および／または担体を含む。

【0019】

さらなる態様において、本発明は、生体直交性の、任意で銅フリーの、クリック反応における本発明による化合物の使用に関する。好ましくは、本発明の化合物は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエン、好ましくはアジド、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド、より好ましくはアジド含有化合物に結合される。１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および／または担体を含む。

【0020】

さらなる態様において、本発明は、銅フリークリック反応を使用した、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の内の１つ以上とナノ粒子とのカップリングの方法における、本発明の化合物の使用に関する。好ましくは、ナノ粒子は、本発明のシクロアルキン化合物を含むと共に、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、または担体は、１，３－双極子または１，３（ヘテロ）ジエン、好ましくはアジド、ニトロン含有またはニトリルオキシド、より好ましくはアジドを含む。あるいは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、または担体は、本発明のシクロアルキン化合物を含み、ナノ粒子は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエン、好ましくはアジド、ニトロン含有またはニトリルオキシド、より好ましくはアジドを含む。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】ビスヒドラゾン２分析データ ＧＣＭＳ：アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）６８９０Ｎ／カラム：ＲＸｉ－５ＭＳ ２０ｍ，内径（ＩＤ）１８０μｍ，ｄｆ０．１８μｍ．平均速度５０ｃｍ／ｓ／キャリアガス：Ｈｅ．初期温度：１００℃／初期時間（Ｉｎｉｔｉａｌ ｔｉｍｅ）：１．５ｍｉｎ／溶媒遅延（Ｓｏｌｖｅｎｔ ｄｅｌａｙ）：１．３ｍｉｎ 昇温速度（Ｒａｔｅ）７５℃／ｍｉｎ、最終温度（Ｆｉｎａｌ ｔｅｍｐ）：２５０℃、最終時間（Ｆｉｎａｌ ｔｉｍｅ）：４．５ｍｉｎ、スプリット比（Ｓｐｌｉｔ ｒａｔｉｏ）２０：１／インジェクター温度（Ｉｎｊｅｃｔｏｒ ｔｅｍｐ）：２５０℃、注入量（Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ）：１μｌ．検出：ＭＳＤ（ＥＩ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ）／検出温度（Ｄｅｔ．Ｔｅｍｐ）：２８０℃／質量範囲（Ｍａｓｓ ｒａｎｇｅ）：５０～５５０．検出器：ＦＩＤ／検出器温度（Ｄｅｔｅｃｔｏｒ ｔｅｍｐ）：３００℃．

【図2】ビスヒドラゾン２分析データ ブルカー－バイオスピン社製；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間（Ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ Ｄｅｌａｙ）：１ｓ。溶媒ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．７４１１Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図3】［実施例２の化合物］ＴＭＴＨＳＩ分析データ カラム：ウォーターズＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流速：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：９５％アセトニトリル＋５％ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．線形勾配：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポスト時間：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０－３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）

【図4】［実施例２の化合物３］ＴＭＴＨＳＩ分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９７．５６０３Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図5】［実施例２の化合物３］ＴＭＴＨＳＩ分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇｐｇ３０．待ち時間：８ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度～３００．５６５８Ｋ．スキャン数：１０２４．周波数：１００．６２２８２９３２８８０６ＭＨｚ．核：１３Ｃ．

【図6】［実施例２の化合物３］ＴＭＴＨＳＩ分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｊモード（ｊｍｏｄ）．待ち時間：８ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～３０１．３１７２Ｋ．スキャン数：１０２４．周波数１００．６２２８２９８０２８ＭＨｚ．核：１３Ｃ．

【図7】［実施例３の化合物４］ＴＭＴＨＳＩ―Ｓｕｃ―ＮＨＳの分析データ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８ （３０×２．１ｍｍ，３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃．溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液．溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０－３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～４００ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲ｍａｓ：１００～１０００）．検出：ＥＬＳＤ（オルテック（Ａｌｌｔｅｃｈ）３３００）：ガス流量１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃．

【図8】［実施例３の化合物４］ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ―ＮＨＳの分析データ．ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ：パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．２０４３Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図9】［実施例３の化合物４］ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ－ＮＨＢｎの分析データ カラム：ウォーターズＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００)．

【図10】［実施例３の化合物４］ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ－ＮＨＢｎの分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ：パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．５２６４Ｋ．スキャン数：６４．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図11】［実施例５の化合物６］ＰｏＣ ＴＭＴＨＳＩの分析データ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：９５％アセトニトリル＋５％１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ， ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０－３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ （質量範囲１００～１０００）．

【図12】［実施例５の化合物６］ＰｏＣ ＴＭＴＨＳＩの分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９７．６６７７Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図13】［実施例６の化合物９］ＰｏＣ ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ－ＮＨＢｎの分析データ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ，３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃．溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液．溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～４００ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲：１００～１０００）．検出：ＥＬＳＤ（オルテック３３００）：ガス流量 １．５ｍｌ／ｍｉｎ．ガス温度：４０℃．

【図14】［実施例６の化合物９］ＰｏＣ ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ－ＮＨＢｎの分析データ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図15】［実施例６の化合物９］ＰｏＣ ＴＭＴＨＳＩ－Ｓｕｃ－ＮＨＢｎの分析データ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ：パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図16】［実施例８の化合物８］ＴＭＴＨＳＩ―ＨＥＲ２の分析データ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％Ａ，ｔ＝３．５ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：２ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図17A】ＴＭＴＨＳＩとＢＣＮ―ＯＨの反応速度の比較。ＴＭＴＨＳＩ（上の曲線）はＢＣＮ―ＯＨ（下の曲線）よりも大幅に高速である。

【図17B】ＴＭＴＨＳＩの測定値の拡大。

【図18】［実施例１１の化合物１１］Ｎ^１－（２―（２―（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－Ｎ^４－（３，３，６，６－テトラメチル―１－オキシド―４，５－ジデヒドロ―２，３，６，７－テトラヒドロ―１λ^６―チエパン―１－イリデン）スクシンアミドのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝３．５ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ，ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００－１０００）．

【図19】［実施例１１の化合物１１］Ｎ^１－（２―（２―（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）―Ｎ^４－（３，３，６，６－テトラメチル―１－オキシド―４，５－ジデヒドロ―２，３，６，７－テトラヒドロ―１λ^６―チエパン―１－イリデン）スクシンアミドのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３温度：～２９８．９５５７Ｋ．スキャン数：１６．周波数４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図20】［実施例１２の化合物１２］２，５－ジオキソピロリジン―１－イル（３，３，６，６－テトラメチル―１－オキシド―４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメートのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図21】［実施例１２の化合物１２］２，５－ジオキソピロリジン―１－イル（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメートのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．８４８４Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図22】［実施例１４の化合物１４］１－（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０－３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０－３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００－１０００）．

【図23】［実施例１４の化合物１４］１－（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨパルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９９．７０７１Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図24】［実施例１５の化合物１５］：３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸メチルのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００－１０００）．

【図25】［実施例１５の化合物１５］３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸メチルのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ３．温度：～２９９．８１４５Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図26】［実施例１６の化合物１６］３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０ｘ２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図27】［実施例１６の化合物１６］３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～３００．１３６５Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図28】［実施例１７の化合物１７］３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ―１λ^６－チエピン１－オキシドのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図29】［実施例１７の化合物１７］３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ―１λ^６－チエピン１－オキシドのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～３００．１３６５Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図30】［実施例１８の化合物１８］４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン－２－イル）メチル）安息香酸メチルのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）.

【図31】［実施例１８の化合物１８］４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン－２－イル）メチル）安息香酸メチルのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９９．９２１８K．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図32】［実施例１９の化合物１９］４－（（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）メチル）安息香酸メチルのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１.３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図33】［実施例１９の化合物１９］４－（（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７―テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）メチル）安息香酸メチルのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９９.９２１８Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図34】［実施例１３の化合物１３］２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アセトアミドのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ， ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図35】［実施例１３の化合物１３］２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アセトアミド ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９９．１８４５Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図36】［実施例２０の化合物２１］ｔｅｒｔ－ブチル（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）カルバメートのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図37】［実施例２０の化合物２１］ｔｅｒｔ－ブチル（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）カルバメートのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９５．７３５５Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図38】［実施例２１の化合物２２］２，２－ジメチル－４，１３－ジオキソ－３―オキサ―８，９－ジチア―５,１２－ジアザヘキサデカン―１６－酸のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ，３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃．溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液．溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～４００ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲：１００～１０００）．検出：ＥＬＳＤ（オルテック（Ａｌｌｔｅｃｈ）３３００）：ガス流量１.５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃．

【図39】［実施例２１の化合物２２］２，２－ジメチル－４，１３－ジオキソ－３―オキサ―８，９－ジチア―５,１２－ジアザヘキサデカン―１６－酸のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９５．６２８２Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図40】［実施例２２の化合物］２３］４－（（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）－４－オキソブタン酸トリフルオロ酢酸塩のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＭｅＯＤ．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図41】［実施例２３の化合物２４］４－オキソ―４－（（２―（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタン酸のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図42】［実施例２３の化合物２４］４－オキソ―４－（（２―（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタン酸のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ核：１Ｈ．

【図43】［実施例２４の化合物２５］２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエートのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（３０×２．１ｍｍ，３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃．溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液．溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ １ｓ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～４００ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲：１００～１０００）．検出：ＥＬＳＤ(オルテック３３００）：ガス流量１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃．

【図44】［実施例２４の化合物２５］２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエートのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＣＤＣｌ_３．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：１６．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図45】［実施例２９の化合物３０］（Ｓ）－１５－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）－２，２－ジメチル－４，１２－ジオキソ－３，８－ジオキサ－５，１１－ジアザヘキサデカン―１６－酸のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図46】［実施例２９の化合物３０］（Ｓ）－１５－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）－２，２－ジメチル－４，１２－ジオキソ－３，８－ジオキサ－５，１１－ジアザヘキサデカン―１６－酸のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＤＭＳＯ－ｄ_６．温度：～２９５．７３５５Ｋ．スキャン数：６４．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図47】：［実施例３０の化合物３１］Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン―６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－アミノエトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミンのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＤＭＳＯ－ｄ_６．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：６４．周波数：４００.１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図48】［実施例３１の化合物３２］Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミンのＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図49】［実施例３１の化合物３２］Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミンのＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＤＭＳＯ－ｄ_６．温度：～２９８．０９７Ｋ．スキャン数：１２８．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図50】［実施例３３化合物３４］１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：１ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：２５℃．溶離液Ａ：アセトニトリル．溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝１．６ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝３ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：１．３ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～３２０ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲１００～１０００）．

【図51】［実施例３３の化合物３４］１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＤＭＳＯ－ｄ_６．温度：～２９７．８６Ｋ．スキャン数：１２８．周波数：４００．２３２４７１５８４０８ＭＨｚ．核：１Ｈ．

【図52】［実施例３４の化合物３５］１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素－Ｃｙ７付加物ギ酸塩のＬＣＭＳ、Ｍａｓｓデータ カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８（５０×２．１ｍｍ ３．５μ）．流量：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；カラム温度：３５℃．溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液．溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．Ｌｉｎ．グラジエント：ｔ＝０ｍｉｎ ５％ Ａ，ｔ＝３．５ｍｉｎ ９８％ Ａ，ｔ＝６ｍｉｎ ９８％ Ａ．ポストタイム：２ｍｉｎ．検出：ＤＡＤ（２２０～３２０ｎｍ，２１０および２２０ｎｍ）．検出：ＰＤＡ（２１０～８００ｎｍ）．検出：ＭＳＤ ＥＳＩ ｐｏｓ／ｎｅｇ（質量範囲：１００～１０００）．検出：ＥＬＳＤ（オルテック３３００）：ガス流量１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃．

【図53】［実施例３４の化合物３５］１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素－Ｃｙ７付加物ギ酸塩のＮＭＲデータ ブルカーバイオスピンＧｍｂＨ；パルスシーケンス法：ｚｇ３０．待ち時間：１ｓ．溶媒：ＭｅＯＤ．温度：～２９６．１６４９Ｋ．スキャン数：６４．周波数：４００．１３２４７０９６６５４３ＭＨｚ核：１Ｈ．

【図54】本発明により生成された１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（ＴＭＴＨＳＩ）誘導体の概要。

【図55】反応速度定数値ｋｔを決定するためのＴＭＴＨＳＩとベンジルアジドの反応速度。

【図56】Ａ）ｓｉＲＮＡＰＬＫ１オリゴヌクレオチドリファレンス、Ｂ）アミノ修飾ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１のＴＭＴＨＳＩ官能化ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１オリゴヌクレオチド（実施例２５、化合物２６）への完全な変換、Ｃ）ＣＰＰ１－のｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１コンジュゲート（実施例２６、化合物２７）を生じる、アジド官能化ＣＰＰ１ペプチドとの反応における、ＴＭＴＨＳＩ官能化ｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドの完全な変換、Ｄ）Ｌ７－ＣＰＰ１－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１コンジュゲート（実施例２７、化合物２８）を生じる、アミン－ＣＰＰ１－ｓｉＲＮＡコンジュゲートとの反応における酸不安定性リンカーＮＨＳエステルの完全な変換、を示すＵＰＬＣクロマトグラム。

【発明を実施するための形態】

【0022】

［定義］
この明細書および特許請求の範囲およびその活用形で使用される「含む」という動詞は、その単語に続く項目が含まれるが、特に言及されていない項目が除外されないことを意味する非限定的な意味で使用される。さらに、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」による要素への言及は、文脈が要素の１つだけが存在することを明確に要求しない限り、要素が複数存在する可能性を排除するものではない。したがって、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は通常「少なくとも1つ」を意味する。

【0023】

本明細書および特許請求の範囲に開示される化合物は、チオシクロヘプチン化合物、すなわち、硫黄および三重結合の組み合わせが環構造に存在するシクロヘプチン化合物として記載され得る。シクロヘプチン部分の三重結合は、硫黄に対して、３つの可能な位置のいずれかに位置する可能性がある（「ＩＵＰＡＣ有機化学命名法」、規則３１．２による番号付け）。この明細書および特許請求の範囲における任意のシクロヘプチン化合物の説明は、シクロヘプチン部分の３つの個々の位置異性体すべてを含むことを意味する。

【0024】

この明細書および特許請求の範囲に開示される化合物は、１つまたは複数の不斉中心を含み得て、そして異なるジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーの化合物が存在し得る。この明細書および特許請求の範囲における任意の化合物の説明には、特に明記しない限り、すべてのジアステレオマー、およびそれらの混合物が含まれることを意味する。さらに、この明細書および特許請求の範囲における任意の化合物の説明は、特に明記しない限り、個々のエナンチオマー、ならびにラセミ体またはその他のエナンチオマーの任意の混合物の両方を含むことを意味する。化合物の構造が特定のエナンチオマーとして描かれている場合、本出願の発明はその特定のエナンチオマーに限定されないことが理解されるべきである。

【0025】

化合物は、さまざまな互変異性体の形態で発生する可能性がある。本発明による化合物は、特に明記しない限り、すべての互変異性形態を含むことを意味する。

【0026】

この明細書および特許請求の範囲に開示される化合物は、エキソおよびエンド位置異性体としてさらに存在し得る。特に明記しない限り、明細書および特許請求の範囲における任意の化合物の説明は、化合物の個々のエキソおよび個々のエンド位置異性体の両方、ならびにそれらの混合物を含むことを意味する。

【0027】

さらに、この明細書および特許請求の範囲に開示されている化合物は、シスおよびトランス異性体として存在し得る。特に明記しない限り、本明細書および特許請求の範囲における任意の化合物の説明は、化合物の個々のシスおよび個々のトランス異性体の両方、ならびにそれらの混合物を含むことを意味する。一例として、化合物の構造がシス異性体として示されている場合、対応するトランス異性体またはシスおよびトランス異性体の混合物は、本出願の本発明から除外されないことを理解するべきである。

【0028】

非置換アルキル基は、一般式Ｃ_ｎＨ_２ｎ+１を有し、鎖状または分枝状であり得る。非置換アルキル基も環状部分を含み得るため、付随する一般式Ｃ_ｎＨ_２ｎ－１を有する。必要に応じて、アルキル基は、この文書でさらに指定されている１つまたは複数の置換基で置換されている。適切なアルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、２－プロピル、ｔ－ブチル、１－ヘキシル、１－ドデシルなどが含まれるが、これらに限定されない。

【0029】

非置換アルケニル基は、一般式Ｃ_ｎＨ_２ｎ－１を有し、鎖状または分枝状であり得る。適切なアルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、ペンテニル、デセニル、オクタデセニル、およびエイコセニルなどが含まれるが、これらに限定されない。非置換アルケニル基はまた、環状部分を含み、付随する一般式Ｃ_ｎＨ_２ｎ－３を有し得る。

【0030】

非置換アルケンの一般式はＣ_ｎＨ_２ｎであるが、非置換アルキンの一般式はＣ_ｎＨ_２ｎ－２である。

【0031】

アリール基は少なくとも６個の炭素原子を含み、単環式、二環式および多環式構造を含み得る。アリール基は、必要に応じてさらに、この文書において指定される１つ以上の置換基で置換され得る。アリール基としては、例えば、フェニル、ナフチル、アントラシルなどの基が含まれる。

【0032】

アリールアルキル基およびアルキルアリール基は、少なくとも７個の炭素原子を含み、単環式および二環式構造を含み得る。必要に応じて、アリール基は、この文書でさらに指定される１つまたは複数の置換基で置換され得る。アリールアルキル基は、例えば、ベンジル等である。アルキルアリール基は、例えば、４－ｔ－ブチルフェニル等である。

【0033】

アリール基が（ヘテロ）アリール基として示される場合、その表記は、アリール基およびヘテロアリール基を含むことを意味する。同様に、アルキル（ヘテロ）アリール基は、アルキルアリール基およびアルキルヘテロアリール基を含むことを意味し、（ヘテロ）アリールアルキルは、アリールアルキル基およびヘテロアリールアルキル基を含むことを意味する。

【0034】

ヘテロアリール基は、酸素、リン、窒素および硫黄からなる群から選択される１から４個のヘテロ原子を含む。

【0035】

［化合物］
アルメイダのチオシクロヘプチン化合物を出発点として、本発明者らは、銅フリークリック反応に使用できる改良された化合物を見つけることに着手した。ＴＭＴＨ自体は、固有の不安定性のために、実際の使用には適していないことがわかった（ドマーホルト．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ５、記事番号：５３７８（２０１４））。直接アルキル化によるＴＭＴＨ環構造の硫黄の誘導体化は、キングらにより報告されている（Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ.、２０１２、９３０８－９３０９）。環の張力は、アルキン結合の反応性を妨げるほど、限界を超えて引っ張られてはならないことが、キングによって、すでに観察が行われており、その他の誘導体化は、単純ではないことが説明されている。さらに、誘導体化は、水性条件下での反応に適した化合物（高い反応性）を提供し、その後の用途での生物学的媒体に耐えて適切な生体直交試薬を生成する必要がある。

【0036】

本発明者らは、驚くべきことに、硫黄での他の誘導体化が可能であることを発見した。得られた化合物は、付加環化反応における高い反応性と良好な相対的安定性を兼ね備えている。本発明のスルホンイミン（＞Ｓ（＝Ｏ）（＝ＮＨ））および／またはスルホンジイミン（＞Ｓ（＝ＮＲ）２）は、生体直交標識または結合剤（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔｓ）として使用することができる新しいクラスの化合物である。本発明のスルホンイミンおよび／またはスルホンジイミンは、既知の化学を使用して他の官能基およびリンカーで容易に誘導体化することができ、例えば、生体直交標識、画像化、または標的分子の表面修飾などの修飾のためにさらに官能化することができる。本発明の化合物は、多種多様な生物活性化合物および／または薬物送達システムに結合することができる。

【0037】

キングら（Ｃｈｅｍ.Ｃｏｍｍ.、２０１２、９３０８～９３０９）により公開された、ＴＭＴＨおよびＴＭＴＨ誘導体は、安定性が低く、それ自体をさらなる合成に使用することはできなかった（リ（Ｌｉ）、Molecules、２０１６、２１、１３９３、クレブス、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ.、１９７０、７６１～７６４）。しかしながら、本発明によるＴＭＴＨＳＩ化合物および誘導体は、合成および単離することができ、塩基性および酸性精製の両方に対して安定であり、したがって、さらなる合成に使用することができる。本発明によるＴＭＴＨＳＩおよびＴＭＴＨＳＩ誘導体は、実施例に示されているように、１年以上にわたって貯蔵寿命が延長されることが証明されている。ＴＭＴＨＳＩおよびＴＭＴＨＳＩ誘導体は、酸性／中性／塩基性の水性環境でアジドと反応させることができ、有機溶媒との組み合わせで反応させることができる。

【0038】

したがって、第１の態様では、本発明は、以下の式（Ｉ）化合物に関する。

【化2】

ここで、
ｎとｍは独立して、０、１、または２であり、ｎ＋ｍは２である。
ＸはＯまたはＮＲ^９、ＹはＮＲ^１０であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は独立して、水素，ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ)、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択され、
ここで、
Ｏ、Ｎ、Ｐ、およびＳはさらに独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基に結合し、
アルキル基は、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる基から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって任意に中断され、
ここで、アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基および（ヘテロ）アリールアルキル基は、独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から選択される１またはそれ以上の置換基で置換され、
ここで、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、Ｐ、およびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって中断され、
シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、Ｒ^１１は独立して、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる基から選択され、
アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって中断される。

【0039】

Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、ＣＬ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択され、
Ｏ、Ｎ、Ｐ、およびＳは独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～_Ｃ１２シクロアルキルにさらに結合しており、アルキル基は任意に、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される1またはそれ以上のヘテロ原子によって中断され、
アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基および（ヘテロ）アリールアルキル基は独立して、任意に、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる基から独立して選択される１またはそれ以上の置換基により置換され、
ここで、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、Ｐ、およびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって中断されており、
ここで、シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、Ｒ^１１は独立して、Ｃ１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から選択され、ここで、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基、およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、P、およびＳからなる基から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって中断されている。

【0040】

Ｒ^１とＲ^７、Ｒ^１とＲ^８、Ｒ^２とＲ^７、Ｒ^２とＲ^８、Ｒ^３とＲ^５、Ｒ^３とＲ^６、Ｒ^４とＲ^５、および／またはＲ^４とＲ^６は任意で、独立して、シクロアルキル－、シクロ（ヘテロ）アリール－、シクロアルキル（ヘテロ）アリール、－シクロ（ヘテロ）アリールアルキルのような縮合環系を形成し、
縮合系のアルキル基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子によって中断され、
縮合系の、アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基、（ヘテロ）アリールアルキル基は独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から選択される１またはそれ以上の基で置換され、
アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、
アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は、任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、
Ｒ^１１はＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から選択され、
アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断される。

【0041】

Ｒ^９、Ｒ^１０は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２,－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ≡ＣＲ^１２、－［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］ｑ－Ｒ^１２（ｑは１から２００の範囲）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、―ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、－Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、－Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0042】

好ましい実施形態では、整数ｎおよびｍは両方とも１であり、化合物は式（ＩＩ）のものである。

【化3】

Ｒ^１～Ｒ^８、Ｘ、Ｙは、本明細書の他所で定義されているとおりである。好ましくは、アルキンは硫黄（１位）に対して４～５位に位置する。得られたチオシクロヘプチンは、硫黄とアルキン結合を通る対称軸を持つ対称化合物である。シス－トランス異性とキラル（Ｅ／Ｚ）の両方を含む既知のＢＣＮ化合物と比較すると、現在のＴＭＴＨＳＩ化合物はＥ／Ｚ異性のみを発現するが、さらに同一のままである。クリック反応試薬として本発明の対称チオシクロヘプチンを使用すると、物理化学的または生物学的に変化する挙動を示す可能性のある異性体化合物の混合物の発生が回避される。

【0043】

好ましい実施形態では、ＸはＯである。得られるスルホンイミドは、良好な安定性で正常に調製され、実施例に示されるように正常に誘導体化された。

【0044】

好ましい実施形態では、Ｒ^１０はＨであるか、またはアルコール、アミン、エステル、Ｃ１－４アルキル、カルボン酸、トリフルオロアセチルおよびＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルからなる基から選択される官能基を含む。

【0045】

好ましい態様においては、Ｒ^１０はＨである。結果として生じるＳ（＝Ｏ）ＮＨ官能基は、安定しており、ＮＨ位には、さらなる誘導体化のために良好な反応性を有する。

【0046】

好ましい実施形態においては、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は独立して、Ｈ、ハロゲン（Ｆ、ＣＬ、Ｂｒ、Ｉ）およびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、好ましくはメチル若しくはエチル、または、Ｒ^１とＲ^２および／またはＲ^３とＲ^４は、Ｃ_３～Ｃ_６－シクロアルキル、好ましくはシクロプロピルを形成する。さらに好ましい実施形態において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は独立して、Ｃ_１～Ｃ_４アルキル、好ましくはメチルまたはエチルからなる群から選択される。

【0047】

さらに好ましい実施形態では、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は同一であると共に、Ｈ、ハロゲンおよびＣ_１－Ｃ_４アルキルからなる群から選択されるか、または、Ｒ^１とＲ^２およびＲ^３とＲ^４が、Ｃ_３～Ｃ_６－シクロアルキル、好ましくはシクロプロピルを形成する。さらに好ましい実施形態では、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は同一であると共に、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、好ましくはメチルまたはエチル（好ましくはメチル）であるか、または、Ｒ^１とＲ^２およびＲ^３とＲ^４はシクロプロピルを形成する。さらに好ましい実施形態においては、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は同一であると共に、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、好ましくはメチルまたはエチル、最も好ましくはメチルである。

【0048】

一実施形態においては、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、Ｈ、ハロゲン（Ｆ、ＣＬ、Ｂｒ、Ｉ）またはＣ_１～Ｃ_２４アルキルであり、好ましくは、独立してＨまたは低級アルキル、すなわち、Ｃ１～Ｃ４アルキル、すなわち、メチル、エチル、プロピルイソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ－ブチルである。特に好ましい実施形態においては、Ｒ^１～Ｒ^４は同じ低級アルキルである。より好ましい実施形態では、Ｒ^１～Ｒ^４はすべてメチルである。

【0049】

好ましい実施形態においては、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、Ｈ、ハロゲン（Ｆ、ＣＬ、Ｂｒ、Ｉ）およびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択される。より好ましくは、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は同一であり、Ｈ、ハロゲン（Ｆ、ＣＬ、Ｂｒ、Ｉ）およびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、好ましくはメチルまたはエチルである。より好ましくは、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は同一であると共に、ＨおよびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、好ましくはメチルまたはエチルである。一実施形態では、Ｒ^５～Ｒ^８はすべてＨである。

【0050】

特に好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシドである。

【化4】

【0051】

［合成］
別の態様では、本発明は、本発明の化合物の合成、特に、式（Ｉ）の化合物を調製するための方法に関係し、この方法は、以下のステップを含む。
ａ．ビスヒドラゾン（２）をイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）に変換する。
ｂ．得られたイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）を単離する。

【0052】

合成は、部分的に、アルメイダらによるＴＭＴＨの合成に基づいており、ＴＭＴＨ合成の中間生成物としてチオパンジオン１を使用し、本発明においては、次いで、ビスヒドラゾン２からスルホンイミド３への一段階変換がなされる。

【化5】

ジケトン１とビスヒドラゾン２の合成は、文献［Ａｌｍｅｉｄａ ｅｔ ａｌ］に詳しく説明されている。この合成は、ジケトン１のビスヒドラゾン２への変換から始まる。反応は１またはそれ以上のヒドラジンの存在下で、好ましくは、硫酸ヒドラジンおよび／またはヒドラジン一水和物、好ましくは加圧下で行われる。

【0053】

得られたビスヒドラジン２は、２段階の酸化反応によって、目的化合物３に変換される。変換の１つのステップは、ビスヒドラゾン（２）が酸化剤と反応して硫黄（＞Ｓ）官能基をスルホンイミノ（＞Ｓ（＝Ｏ）（＝ＮＲ）官能基に酸化する酸化反応（付加）を含む。もう１つの変換のステップは、ビスヒドラゾン（２）を酸化剤と反応させて、（ビス）ヒドラジン（＞Ｃ＝ＮＮＨ_２）_２官能基をアルキン（－Ｃ≡Ｃ－）官能基に酸化する酸化反応（除去）である。好ましい実施形態においては、この２段階反応は、好ましくは、同じ酸化剤、好ましくはヨードベンゼンジアセテートを用いて、１段階合成で実施される。

【化6】

【0054】

［リンカーと官能基の結合］
本発明のさらなる態様において、リンカーおよび／または官能基が、本発明の官能化されたチオシクロヘプチンに結合される。したがって、さらなる態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物の、Ｘおよび／もしくはＹならびに／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子は、独立して、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する化合物に関する。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）

【0055】

連結基（Ｌ）は、存在しないか、または、直鎖状または分枝状の、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルキニレン基、Ｃ_３～Ｃ_２４シクロアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルケニレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルキニレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリーレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルケニレン基、Ｃ_９～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキニレン基から選択され、
前記アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、シクロアルキレン基、シクロアルケニレン基、シクロアルキニレン基、アルキル（ヘテロ）アリーレン基、（ヘテロ）アリールアルキレン基、（ヘテロ）アリールアルケニレン基および（ヘテロ）アリールアルキニレン基は任意で、独立してＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルケニル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルキニル基、Ｃ_８～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソおよびシリル基からなる群から選択される１またはそれ以上の置換基で置換され、 前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉで表され、Ｒ^１１は上記の通り定義される。

【0056】

官能基Ｑは、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、―Ｃ≡ＣＲ^１２、―［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］_ｑＲ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、－ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、―Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、―Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、―Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。好ましくは、Ｒ^１２は水素またはＣ_１～Ｃ_６アルキルである。

【0057】

任意の連結基（Ｌ）と官能基（Ｑ）が、Ｓ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の原子の１つに結合している場合、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７またはＲ^８の１つが、官能基（Ｑ）に接続された任意の連結基（Ｌ）で置換される。任意の連結基（Ｌ）と官能基（Ｑ）がそれぞれ、ＸまたはＹに結合されている場合、Ｒ^９またはＲ^１０が、官能基（Ｑ）に結合された任意の連結基（Ｌ）で置換される。

【0058】

好ましくは、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）が、ＸまたはＹの１つ、好ましくはＹ、および／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の原子の１つに結合する。より好ましくは、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）が、ＸまたはＹのうちの１つ、好ましくはＹに結合する。

【0059】

一実施形態においては、本発明の式（Ｉ）の化合物であって、原子Ｘ、Ｙ、好ましくはＹ原子、の位置および／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子の位置で、好ましくはＹの位置で、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する化合物を含む化合物を提供する。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）
ここで、連結基（Ｌ）は存在しないか、または、直鎖状または分枝状の、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルキニレン基、Ｃ_３～Ｃ_２４シクロアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルケニレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルキニレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリーレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルケニレン基、Ｃ_９～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキニレン基から選択され、
アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、シクロアルキレン基、シクロアルケニレン基、シクロアルキニレン基、アルキル（ヘテロ）アリーレン基、（ヘテロ）アリールアルキレン基、（ヘテロ）アリールアルケニレン基および（ヘテロ）アリールアルキニレン基は任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルケニル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルキニル基、Ｃ_８～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソおよびシリル基、からなる群から独立して選択される1つ以上の置換基で置換され、シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉで表され、Ｒ^１１は上記の通り定義される。

【0060】

ここで官能基Ｑは、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、―Ｃ≡ＣＲ^１２、―［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］_ｑＲ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、－ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、―Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、―Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、―Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0061】

多種多様なリンカーを使用することができ、リンカーの選択は、例えば、本質的に本明細書の他所に開示されるような最終用途に関連して、他の基準に基づくことができる。

【0062】

好ましい実施形態では、Ｌは存在しないか、または［Ｃ（Ｒ^１２）２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］ｑ－Ｒ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、－Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）２ＸＲ^１２、－Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２およびＮ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２から選択され、Ｘは酸素または硫黄であり、Ｒ^１２は他所で定義されているとおりである。

【0063】

さらに好ましい実施形態では、Ｌは存在しないか、または、１～２５原子、好ましくは１～１５原子の長さを有する鎖であり、このましくは、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ－、－Ｓ－Ｓ－、Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－およびフェニレンからなる群から独立して選択される１つ以上、好ましくは１～６の部分を含み、これにより、前記鎖の長さは、原子の最も長い線形鎖内の原子の数によって決定される。前記最長の線状鎖はさらに、Ｏ、Ｎ、ＳおよびＰなどの１またはそれ以上のヘテロ原子を含んでもよい。好ましくは、それは１つ以上のＯ原子をさらに含む。好ましい実施形態では、Ｌは独立して、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ－、－Ｓ－Ｓ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－およびフェニレンからなる群から選択される１、２、３、４または５の部分を含む。さらに、１～２５原子、好ましくは１～１５原子の長さの前記鎖は分岐していない、すなわち鎖は、任意に、直鎖に含まれない－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、Ｃ（Ｏ）Ｏ－部分（１または複数）のヘテロ原子を除いて、線形であることが好ましい。

【0064】

一実施形態では、Ｑは－ＯＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、－Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、ここで、Ｒ^１２は、本明細書の他所で定義されている通りである。

【0065】

好ましい実施形態において、Ｑは、アルコール、アミン、チオール、カルボン酸エステル、カルボン酸または活性化エステル、ケトン、アルデヒド、ニトリル、マレイミド、アルケン、アルキン、ヘテロ芳香族（ｈｅｔｅｒｏａｒｏｍａｔｅ）、脱離基およびホスホロアミダイトを含む。特に好ましい実施形態では、Ｑは、アルコール、アミン、カルボン酸エステル、カルボン酸、またはＮ－ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルである。

【0066】

一実施形態では、リンカーＬおよび／または官能基Ｑのカップリングは、チオシクロヘプチンの官能化された硫黄、すなわち、分子のＳ（＝Ｘ）（＝Ｙ）部分のＸおよび／またはＹにある。カップリングは官能基との結合であり、任意でリンカーを介して行われる。官能基Ｑは、目的の任意の分子にリンクする。

【0067】

特定の実施形態において、Ｑは薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上に連結される。このようなカップリングの化学は十分に開発されており、当業者は適切なカップリング化学的性質を選択して、Ｑを目的の分子に結合させることができる。

【0068】

［クリック反応］
本発明の化合物のアルキン基は反応性があり、例えば付加環化型反応を使用して官能化することができる。実施形態では、アルキン基は、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物と反応させることができる。特定の実施形態において、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物、またはニトリルオキシド含有化合物である。最も好ましいのは、アジド含有化合物である。実施形態では、アジド含有化合物は、銅フリークリック反応を使用して結合することができる。カップリングにより、トリアゾール型の構造が得られる。

【0069】

本発明の化合物は、官能化硫黄位置およびアルキン官能基に反応性部位を有する二重官能性化合物である。両方の官能化は独立して、１つは任意のリンカー（Ｌ）と官能基（Ｑ）を介して、もう1つはクリックケミストリーを介して官能化できる。官能化は独立して、薬物（小分子、遺伝物質など）、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体との結合であり得る。

【0070】

したがって、一実施形態では、官能基Ｑは、任意でリンカーＬを介して、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体の１またはそれ以上に結合される。

【0071】

別の実施形態において、アルキンは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体のうちの１つまたはそれ以上に結合することができる。アルキンのカップリングは、好ましくは、アルキンと、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物との反応を介して行われる。特定の実施形態において、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド含有化合物、より好ましくはアジド含有化合物である。

【0072】

したがって、本発明の化合物は、１，３双極子／１，３－（ヘテロ）ジエン／チアシクロヘプチン誘導体／（リンカー）／官能基を介して、目的の２つの分子／官能基の組み合わせを作成するのに適している。概略的に、本発明のチアシクロヘプチンの適用のこの一般的な原理は、以下の表に示されている。

【0073】

【表1】

【0074】

使用されるリンカーは、生分解性であり得る、すなわち、最初は安定しているが、時間とともに、または生理学的状況などの特定の状況下で、切断可能となり得る。

【0075】

特定の実施形態においては、ナノ粒子が任意のリンカー／１，３－双極子または１，３ヘテロジエン／チオシクロヘプチン／任意のリンカーを介して、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体から選択された目的の官能基／分子に結合される組み合わせが、好ましい。ナノ粒子自体は、薬物、抗体、タンパク質、ペプチドを含んでもよい。ナノ粒子を本発明のチオシクロヘプチン誘導体にカップリングするために好ましい１，３－双極子または１，３－ヘテロジエンはアジド（Ｎ_３）である。

【0076】

［ナノ粒子］
ドラッグデリバリーシステムは、製薬科学でますます使用されている。精巧な一連の誘導体化を通じて、薬剤を送達、標的化、監視し、有効性と有効性を高めて患者に提供することができる。ナノ粒子、タンパク質、ヒドロゲル、リポソーム、抗体薬物複合体、薬物ポリマー複合体などのこれらの薬物送達システムの使用は、製薬科学で急速に発展している。

【0077】

製薬科学は、これらのシステムを使用して、薬物の毒性と副作用を軽減し、送達を改善し、有効性のモニタリングに役立つイメージングリガンドを追加している。

【0078】

通常、直径＜１００ｎｍのナノ粒子は、さまざまな材料から製造されており、インビトロ（ｉｎｖｉｔｒｏ）およびインビボ（ｉｎｖｉｖｏ）の両方の診断、栄養補助食品、および改良された生体適合性材料の製造など、医療での用途が期待されている。ナノ粒子は、特定の目的に合わせてカスタマイズでき、さまざまな材料が利用できる。ほとんどの薬学的に興味深いナノ粒子は、さまざまな形態であり得る（バイオ）ポリマー材料の基礎となっている。原料は、リン脂質、脂質、乳酸、デキストラン、キトサンなどの生物学的起源のものである場合もあれば、さまざまな（共重合）ポリマーのようなより「化学的」特性を持っている場合もある。これらのナノ粒子は、通常、活性成分（薬物、リガンド、イメージングリガンドなど）を接続、カップリング、（共有）結合することによって官能化される。これらのナノ粒子の多くの官能化は、本発明のチオシクロヘプチン誘導体を使用する銅フリークリックケミストリーなどの様々な有線化学によって達成することができる。

【0079】

特定の実施形態では、ナノ粒子は、好ましくは感熱性ブロック共重合体からの自己組織化ポリマーミセルである。特に、部分的にメタクリル化されたオリゴラクテート単位を有するＰＥＧ－ｂ－ポリ（Ｎ－ヒドロキシアルキルメタクリルアミド－オリゴラクテート）に基づく共重合体が好ましい、しかし、他の（メタ）アクリルアミドエステルを使用して感熱性ブロック、例えば、ＨＰＭＡｍ（ヒドロキシプロピルメタクリルアミド）およびＨＥＭＡｍ（ヒドロキシエチルメタクリルアミド）のエステルおよび必要に応じて（オリゴ）乳酸エステル、および、Ｎ（メタ）アクリロイルアミノ酸エステル、を構築することもできる。また、好ましい感熱性ブロック共重合体は、ＨＰＭＡｍ－乳酸ポリマーなどの誘導体化および非誘導体化メタクリレート基によって修飾、つまり、リンカー部分の組み込みを含むこの変更され得る、官能基を含むモノマーから誘導される。

【0080】

使用できる他のタイプの官能性感熱性（コ）ポリマーは、疎水的に修飾されたポリ（Ｎ－ヒドロキシアルキル）（メタ）アクリルアミド、反応性官能基を含むモノマー（例えば、酸性アクリルアミドおよびＮ－アクリロキシスクシンイミド）などの他の部分とのＮ－イソプロピルアクリルアミド（ＮＩＰＡＡｍ）の共重合体組成物、または、ポリ（アルキル）２-オキサザリンなどの類似の共重合体などである。さらに好ましい感熱基は、ＮＩＰＡＡｍおよび／またはアルキル－２－オキサキソリンに基づくことができ、これらのモノマーは、（メタ）アクリルアミドまたはヒドロキシル、カルボキシル、アミンまたはスクシンイミド基を含む（メタ）アクリレートなどの反応性官能基を含むモノマーと反応することができる。

【0081】

適切な感熱性ポリマーは、米国特許第７，４２５，５８１号明細書および欧州出願公開第１ ７７６ ４００号公報に記載されている。さらに、国際公開２０１０／０３３０２２号明細書および国際公開２０１３／００２６３６号明細書に記載されている。

【0082】

国際公開ＷＯ２０１２／０３９６０２号明細書には、そのようなポリマーを使用している薬物－ポリマーマトリックス粒子が記載されている。さらに、こく再公開２０１２／０３９６０２号明細書には、これらの既知のポリマーマトリックス粒子で使用することができる生分解性リンカー分子が記載されている。

【0083】

一般的には、上で概説したような感熱性ブロック共重合体に基づくナノ粒子は、アジドアルキン銅フリーカップリングを使用して、本発明の化合物に連結することができる。その例は国際公開２０１７／０８６７９４号明細書に記載されている。

【0084】

したがって、本発明の特定の実施形態では、本発明のチオシクロヘプチン誘導体がアジド含有ナノ粒子に結合されているナノ粒子が調製される。特定の実施形態では、ナノ粒子は、好ましくは感熱性ブロック共重合体からの自己組織化ポリマーミセルである。

【0085】

本発明は任意で、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および担体から独立して選択される、目的の２個の分子をカップリングするためのカップリング方法における、本発明のチオシクロヘプチン誘導体の使用に関する。本発明はさらに、生体直交反応、任意で銅フリークリック反応、における本発明のチオシクロヘプチン誘導体の使用、および、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および担体の内の１またはそれ以上との銅フリークリック反応を使用した、ナノ粒子のカップリングの方法の使用に関する。本発明のアルキン含有化合物とアジドとの間のクリックケミストリーは、特に生分解性ナノ粒子および複合／封入薬剤の調製におけるクリックケミストリーにおいて使用される従来のアルキンと比較して速いため、アジド含有感熱性ポリマーと本発明の化合物とのカップリングは有利である。

【0086】

本発明の特徴は、明快さと簡潔な説明の目的で、同じまたは別個の態様または実施形態の一部として本明細書に記載される。本発明の範囲は、同じまたは別個の実施形態の一部として本明細書に記載される特徴のすべてまたはいくつかの組み合わせを有する実施形態を含み得ることが当業者によって理解されるであろう。

【0087】

本発明は、以下の非限定的な実施例により詳細に説明される。

【0088】

［実施例］
図５４は、生成された本発明の１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（ＴＭＴＨＳＩ）誘導体の概要を示す。その合成は以下の実施例に記載されている。

【0089】

ＴＭＴＨＳＩのコア構造（実施例２）は、さまざまな方法で機能化できる。

【0090】

実施例２、Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ、コアＴＭＴＨＳＩ構造、Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0091】

実施例３、Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎは、実施例２にＬ＝コハク酸リンカー（ｓｕｃｃｉｎｉｃ ｌｉｎｋｅｒ）、Ｑ＝活性化ＮＨＳエステルを追加する。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0092】

実施例５は、実施例３のＮＨＳエステルを、ベンジルアミンとの反応で置換する。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0093】

実施例８（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例３のＮＨＳエステルを、ＨＥＲ２ペプチドとの反応で置換する。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0094】

実施例１１（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例３のＮＨＳエステルをジアミノＰＥＧスペーサー（＝Ｌ）との反応で置換する。Ｑはアミンである。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0095】

実施例１２（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）

【化7】

Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0096】

実施例１３（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ－トリフルオロアセトアミド、Ｌ＝リンカーなし、Ｑ＝官能性なし）。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素。この化合物は、α－硫黄置換を目的とする。

【0097】

実施例１４（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例１２のＮＨＳエステルをアミノ－ＰＥＧ－ヒドロキシルスペーサー（＝Ｌ）との反応で置換する。Ｑはヒドロキシル、Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0098】

実施例１５（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例２にＬ＝－Ｓ（Ｏ_２）フェニル、Ｑ＝３－メトキシカルボニルが結合したものである。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0099】

実施例１６（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例２にＬ＝－Ｓ（Ｏ_２）フェニル、Q＝３－ヒドロキシカルボニルが結合したものである。Ｒ１～Ｒ４＝メチル、Ｒ５～Ｒ８＝水素

【0100】

実施例１７（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ－メチル）、Ｌ＝リンカーなし。Ｑ＝官能性なし。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素。この化合物は、α－硫黄置換を目的とする。

【0101】

実施例１８（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ－メチル）、Ｌ＝リンカーなし。Ｑ＝官能性なし。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝１つの水素を、Ｌ＝メチレンフェニル、Ｑ＝４－メトキシカルボニルに置換する。この化合物は、ＴＭＴＨＳＩのα－硫黄置換変異体である。

【0102】

実施例１９（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）、実施例２にＬ＝メチレンフェニル、Ｑ＝４－メトキシカルボニルが結合したものである。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0103】

実施例２３（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例１２のＮＨＳ部分がシスタミンに基づくアミンリンカーによって置換されたものある。Ｌ＝－Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_２Ｈ_４ＳＳＣ_２Ｈ_４ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ_３Ｈ_６、Ｑ＝ＣＯＯＨ、

【化8】

Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0104】

実施例２４（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例２３をＮＨＳエステル活性化したものである。Ｌ＝－Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ_２Ｈ_４ＳＳＣ_２Ｈ_４ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ_３Ｈ_６－、Ｑ＝（（２，５－ジオキソピロリジン-1-イル）オキシ）カルボニル、Ｃ（Ｏ）ＯＳｕ。

【化9】

Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0105】

実施例２５（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例２４のＮＨＳエステルを、アミノ－Ｃ６官能化ｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドと反応させて置換する。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0106】

実施例３１（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例１２のＮＨＳエステルを、アミノＰＥＧ官能化葉酸と反応させて置換する。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0107】

実施例３３（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例１２のＮＨＳエステルをジアミノＰＥＧスペーサー（＝Ｌ）と反応させて置換する。Ｑはアミンである。Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0108】

実施例３４（Ｘ＝Ｏ、Ｙ＝Ｎ）は、実施例３３を、Ｃｙ７ＮＨＳラベルと反応させる。Ｌ＝ジアミノＰＥＧスペーサー、Ｒ^１～Ｒ^４＝メチル、Ｒ^５～Ｒ^８＝水素

【0109】

以下の実施例で調製されたおよび／または図５４に示された構成に加えて、Ｒ^１～Ｒ^８、Ｌおよび／またはＱについてさらなる変数を有し、当技術分野で知られている反応を使用して、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子または担体などのさらなる目的分子にカップリングするさらなる誘導体を、当業者は、提供することができる。

【0110】

［実施例１：（３，３，６，６－テトラメチルチエパン－４，５ジイリデン）ビス（ヒドラジン）の合成］

【化10】

ガラス製オートクレーブ（３００ｍｌ）に３，３，６，６－テトラメチルチエパン－４,５－ジオン（６．１７ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）、エタノール（２．４ｍｌ）およびエチレングリコール（６０ｍｌ）を入れた。撹拌した混合物に、硫酸ヒドラジン（１６．０３ｇ、１２３ｍｍｏｌ、４当量）およびヒドラジン一水和物（３ｍｌ、６１．６ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。オートクレーブを閉じ、１４０℃のオイルバスで２０時間加熱した。

【0111】

室温まで冷却した後、混合物を水（５００ｍｌ）とジエチルエーテル（２００ｍｌ）との間で分配し、綿片で濾過しながら分液漏斗に移して、いくらかの白い固体残渣を除去した（残渣は水にゆっくりと溶解するため、おそらく硫酸ヒドラジンである）。相を分離し、水相をジエチルエーテル（２×１００ｍｌ）で抽出した。合わせたエーテル相を水（２×７５ｍｌ）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、５．７５ｇの粗生成物を、濃い黄色の油分として得た。

【0112】

残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ４０ｇ；ヘプタン中３０％ＥｔＯＡｃ）で精製した。生成物画分を合わせて、減圧下で濃縮した。残渣をジエチルエーテルと共蒸発させて、０．９ｇ（１２％）の生成物をオフホワイトの固体として得た。
ＧＣ／ＭＳ（方法Ａ）ｔ_Ｒ ４．４７ｍｉｎ，Ｍ＋＝２２８．
＊^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ５．２４（ｓ，４Ｈ)，２．５４(ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），１．３４（ｓ，６Ｈ），１．２１（ｓ，６Ｈ）．

【0113】

［実施例２：１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（ＴＭＴＨＳＩ）の合成］

【化11】

８ｍｌのスクリューキャップバイアルに、（３，３，６，６－テトラメチルチエパン－４，５－ジイリデン）ビス（ヒドラジン）（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニウム（２７０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ、８当量）をメタノール（０．４ｍｌ）中に入れて懸濁させた。混合物を氷／水で冷却した。ヨードベンゼンジアセテート（４９４ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、３．５当量）の、ＭｅＯＨ（０．４ｍｌ）とジクロロメタン（０．６ｍｌ）の混合物溶液を滴下して加えて、発熱およびガス形成を制御した（反応は、添加される各液滴でガスの発生を示した）。添加が完了した後、混合物を室温で１時間撹拌した。

【0114】

混合物をジクロロメタン（２ｍｌ）で希釈し、ブライン（１ｍｌ）で急冷した。有機層をピペットで除去し、相分離器に通した。有機相を相分離器に通し、前の抽出物と組み合わせるたびに、水性残渣をジクロロメタンで抽出（×２）した。有機抽出物を減圧下で濃縮し、生成物が揮発性である可能性があるため蒸発を注意深く監視して、４２７ｍｇの粗生成物を黄色の油分として得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス（Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ）、ＸＳｅｌｅｃｔ；１０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製した。生成物画分を合わせ、ジクロロメタンで抽出（３×）し、各有機抽出物を相分離器に通し、減圧下で濃縮した。残渣を、ヘプタンおよびジエチルエーテルと共蒸発させて、３３ｍｇ（３７％）の結晶性残渣を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．６２８ｍｉｎ，純度９８．１％，質量検出［Ｍ＋Ｈ］^＋ ２００．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ)δ３．２６（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），２．７６（ｓ，１Ｈ），１．４６（ｓ６Ｈ），１．３０（ｓ，６Ｈ）．

【0115】

ＴＭＴＨＳＩは、保管中に安定していることが証明された。化合物３を、大気圧下で明所および暗所の両方で粉末として保存した。^１Ｈ－ＮＭＲ ｅｎ ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）によって、化合物が１０か月の保存後も劣化していないことを証明された。

【0116】

［実施例３：リンカーへのカップリング ２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）ブタノエートの合成］

【化12】

ジイソプロピルエチルアミン（２６６μｌ、１．５２ｍｍｏｌ、２当量）を、ジクロロメタン（５ｍｌ）中の１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（１５２ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）と無水コハク酸（１１４ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、１．５当量）の混合物に加え、得られた混合物を室温で２０時間撹拌した。

【0117】

反応混合物を減圧下で濃縮し、ジクロロメタンに再溶解し、再び減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン（５ｍｌ）に再溶解し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（２２０ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ、２．５当量）を加えた。混合物を５分間撹拌し、次にＮ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩（３６６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ、２．５当量）のジクロロメタン（０．５ｍｌ）懸濁液を、ピペットを介して加えた。得られた溶液を室温で４時間撹拌した。

【0118】

混合物を２Ｍ ＫＨＳＯ_４水溶液で冷却し、有機相を相分離器に通した。濾液を減圧下で濃縮して、４２０ｍｇの粗混合物を泡状物として得た。

【0119】

残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ１２ｇ、５０～７５％ＥｔＯＡｃヘプタン溶液）によって精製し、生成物画分をプールし、減圧下で濃縮して、１４１ｍｇ（４６％）の生成物を白色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ_ＡＣＩＤ）ｔＲ 1.８４ｍｉｎ，純度８５％，質量検出［Ｍ＋Ｈ］^＋３９７．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ３．７９（ｄ，Ｊ＝1４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，２Ｈ），２．９７－２．９０（ｍ，２Ｈ），２．８８－２．８１（ｍ，４Ｈ），２．７９－２．７１（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

【0120】

［実施例４：リンカーへの結合。Ｎ^１－ベンジル－Ｎ^４－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６チエピン－１－イリデン）スクシンアミドの合成］

【化13】

２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）ブタノエート（１５．８ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍｌ）溶液に、ベンジルアミン（８．７１μｌ、０．０８０ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。反応混合物を室温で4時間撹拌した。次に、反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、１２ｇ；７０～１００％ＥｔＯＡｃヘプタン溶液）で精製し、生成物画分を合わせて減圧下で濃縮し、ＬＣ／ＭＳで純度約８３％の生成物１３．１ｍｇを得た。

【0121】

材料を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ、ＸＳｅｌｅｃｔ；２０－６０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製し、生成物画分をプールし、減圧下で濃縮して、６．２ｍｇ（４０％）の白い固体として表題の化合物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ２.０１mｉｎ，純度９６．８％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋３８９．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ７．３６－７．２２（ｍ，５Ｈ），６．２５（ｓ，１Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）３．６０（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５３（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），２．７３（ｄｄ，Ｊ＝６．８，６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．５２（ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．４Ｈｚ，２Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ），１．２４（ｓ，６Ｈ）．

【0122】

［実施例５：クリック反応 １－ベンジル－６－イミノ－４，４，８，８－テトラメチル－１，４，５，６，７，８－ヘキサヒドロ－６λ^４－チエピノ［４，５－ｄ］［１，２，３］トリアゾール６－オキシドの合成］

【化14】

ＬＣ／ＭＳ：
１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（５ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、ＬＣ／ＭＳバイアルに充てんし、それからＭｅＣＮ（１ｍｌ）に溶解し、ベンジルアジドを加え、反応混合物をＬＣ／ＭＳで分析した。ＬＣ／ＭＳ分析は、出発物質の完全な消失と、未反応のベンジルアジドとの混合物としての生成物の形成を示した。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）t_Ｒ １．７２８ｍｉｎ，純度６４％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３３３．

【0123】

^１Ｈ－ＮＭＲ：
１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６チエピン１－オキシド（５ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を、ＣＤＣｌ_３（０．６ｍｌ）に溶解し、それからベンジルアジドを加えた。^１Ｈ－ＮＭＲは、約１５分の反応時間後に記録された。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ７．４０－７．２９（ｍ，３Ｈ），７．０６－７．０１（ｍ，２Ｈ），５．７３（ｓ，２Ｈ），３．４５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，４Ｈ），２．６９（ｓ，１Ｈ），１．７０（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，６Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，６Ｈ）．

【0124】

出発物質の全消費、～３５ｍｏｌ％の過剰のベンジルアジドが存在する。

【0125】

［実施例６：クリック反応 Ｎ^１－ベンジル－Ｎ^４－（１－ベンジル－４，４，８，８－テトラメチル－６－オキシド－４，５，７，８－テトラヒドロ－１Ｈ－６λ^４－チエピノ［４，５ｄ］［１，２，３］トリアゾール－６－イリデン）スクシンアミドの合成］

【化15】

ＣＤＣｌ_３に溶解したＮ^１－ベンジル－Ｎ^４－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スクシンアミド（４．６ｍｇ、１２μｍｏｌ）を含むＮＭＲチューブに、ベンジルアジドのＣＤＣｌ_３溶液（１０ｖｏｌ％、１５．５μｌ、１．０５当量）を加えた。混合物を振とうし、約５分の反応時間後に^１Ｈ－ＮＭＲ分析を行った。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム―ｄ）δ７．４３－７．２７（ｍ，８Ｈ），７．０６－７．００（ｍ，２Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），５．７２（ｓ，２Ｈ），４．４２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５７（ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ，１Ｈ），２．７４－２．６７（ｍ，２Ｈ），２．４９（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）１．７０（ｓ，３Ｈ），１．６７（ｓ，３Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，３Ｈ）．

【0126】

混合物を濃縮乾固し、残渣をＬＣ／ＭＳで分析した。

【0127】

ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ＿ＢＡＳＥ）は、ターゲット質量（ｔ_Ｒ １．９４７ｍｉｎ、純度７５％、［Ｍ＋Ｈ］^＋５２２）で生成物のピークを示した。

【0128】

ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ＿ＡＣＩＤ）は、ターゲット質量（［Ｍ＋Ｈ］^＋５２２）で２つの生成物のピーク［ｒｅｓｐ．ｔ_Ｒ １．９０（５７％）および１．９４ｍｉｎ（２３％）］を示した。

【0129】

［実施例７：ＴＭＴＨＳＩ含有リンカーのＨＥＲ２－ペプチドへのカップリング ＴＭＴＨＳＩ－スクシニル－Ｆｃｙｃｌ［ＣＧＤＧＦＹＡＣ］ＹＭＤＶの調製］

【化16】

８ｍｌのスクリューキャップバイアルにＦｃｙｃｌ［ＣＧＤＧＦＹＡＣ］ＹＭＤＶ（２０ｍｇ、１３μｍｏｌ）を入れ、ＤＭＳＯ（１ｍｌ）に溶解した。２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）ブタノエート（６．５ｍｇ、１４μｍｏｌ、１．０４当量）を加え、続いてジイソプロピルエチルアミン（１３μｌ、７５μｍｏｌ、５．６当量）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス（Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ））、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、２０～６０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％ギ酸）で直接精製し、生成物画分をプールして凍結乾燥し、１６．６ｍｇ（６９％）の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＡＮ ＢＡＳＥ Ｍ１８００）ｔ_Ｒ２．５７ｍｉｎ，純度９６％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ－Ｈ］^－１７６８，［Ｍ－２Ｈ］^２－８８３.

【0130】

［分析方法］
［ＧＣ／ＭＳ分析方法］
［方法Ａ］
機器：ＧＣ：アジレント（Ａｇｉｌｅｎｔ）６８９０Ｎ，ＦＩＤ：検出温度：３００℃、および、ＭＳ：５９７３ ＭＳＤ，ＥＩ－ポジティブ，検出温度：２８０℃ 質量範囲：５０～５５０；カラム：ＲＸｉ５－ＭＳ ２０ｍ，ＩＤ １８０μｍ，ｄｆ ０．１８μｍ；平均速度：５０ｃｍ／ｓ；注入容積：１μｌ；注入器温度：２５０℃；分割比率（Ｓｐｌｉｔ ｒａｔｉｏ）：２０／１；キャアリアガス：Ｈｅ；初期温度（Ｉｎｉｔｉａｌ ｔｅｍｐ）：１００℃；初期時間（Ｉｎｉｔｉａｌ ｔｉｍｅ）：１．５ｍｉｎ；溶媒遅延（Ｓｏｌｖｅｎｔ ｄｅｌａｙ）：１．３ｍｉｎ；昇温速度）（ｒａｔｅ）：７５℃／ｍｉｎ；最終温度（Ｆｉｎａｌ ｔｅｍｐ）２５０℃；最終時間（Ｆｉｎａｌ ｔｉｍｅ）２．５ｍｉｎ．

【0131】

［ＬＣ／ＭＳ測定方法］
［ＳＣ＿ＡＣＩＤ］
装置：アジレント１２６０バイナリポンプ：Ｇ１３１２Ｂ，脱ガス装置；オートサンプラー，コルコム（ＣｏｌＣｏｍ），ＤＡＤ：アジレントＧ１３１５Ｄ，２２０～３２０ｎｍ，ＭＳＤ：アジレントＬＣ／ＭＳＤ Ｇ６１３０Ｂ ＥＳＩ，ｐｏｓ／ｎｅｇ １００～１０００，ＥＬＳＤ Ａｌｌｔｅｃｈ ３３００ ガス流量 （ｇａｓ ｆｌｏｗ）１．５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃；カラム：ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）ＸＳｅｌｅｃｔ（商標）Ｃ１８，３０×２．１ｍｍ，３．５μ，温度：３５℃，流量：１ｍＬ／ｍｉｎ，グラジエント：ｔ_０＝５％ Ａ，ｔ_{１．６ｍｉｎ}＝９８％ Ａ，ｔ_３ｍｉｎ＝９８％ Ａ，ポストタイム：１．３ｍｉｎ，溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液，溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．

【0132】

［ＳＣ ＢＡＳＥ］
装置：アジレント１２６０ バイナリポンプ：Ｇ１３１２Ｂ，脱ガス装置；オートサンプラー，コルコム，ＤＡＤ：アジレントＧ１３１５Ｃ，２２０－３２０ｎｍ，ＭＳＤ：アジレントＬＣ／ＭＳＤ Ｇ６１３０Ｂ ＥＳＩ，ｐｏｓ／ｎｅｇ １００～１０００；カラム：ウォーターズＸＳｅｌｅｃｔ（商標）ＣＳＨ Ｃ１８，３０×２．１ｍｍ，３．５μ，温度：２５℃，流量：１ｍＬ／ｍｉｎ，グラジエント：ｔ_０＝５％ Ａ，ｔ_{１．６ｍｉｎ}＝９８％ Ａ，ｔ_３ｍｉｎ＝９８％ Ａ，ポストタイム１．３ｍｉｎ，溶離液Ａ：アセトニトリル，溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液（ｐＨ=９．５）．

【0133】

［ＡＮ ＢＡＳＥ＿Ｍ１８００］
装置：アジレント１２６０バイナリポンプ：Ｇ１３１２Ｂ，脱ガス装置；オートサンプラー，コルコム（ＣｏｌＣｏｍ），ＤＡＤ：アジレントＧ１３１５Ｃ，２２０－３２０ｎｍ，ＭＳＤ：アジレントＬＣ／ＭＳＤ Ｇ６１３０Ｂ ＥＳＩ，ｐｏｓ／ｎｅｇ ８００～１８００；カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ（商標）ＣＳＨ Ｃ１８，５０×２．１ｍｍ，３．５μ，温度：２５℃，流量：０．８ｍＬ／ｍｉｎ，グラジエント：ｔ_０＝５％ Ａ，ｔ_{３．５ｍｉｎ}＝９８％ Ａ，ｔ_６ｍｉｎ＝９８％ Ａ，ポストタイム：２ｍｉｎ，溶離液Ａ：アセトニトリル，溶離液Ｂ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液(ｐＨ＝９．５）．

【0134】

［^１Ｈ－ＮＭＲ］
すべての^１Ｈ－ＮＭＲスペクトルは、溶媒としてＣＤＣｌ_３またはＤＭＳＯ－ｄ６を使用して、ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）Ａｖａｎｃｅ－４００ウルトラシールドＮＭＲ分光計で記録され、内部標準としてＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）を使用してｐｐｍで報告される。

【0135】

［実施例８：ＴＭＴＨＳＩ含有リンカーＨＥＲ２－ペプチドのアジド含有ナノ粒子（ＣｒｉＰｅｃ）へのカップリング］

【化17】

ＨＥＲ２ペプチドで標識されたコア架橋高分子ミセルは、ＨＥＲ２ペプチドを高分子ミセルシェルの表面にコンジュゲーションさせることによって生成され、ターゲティング研究に使用された。クリックケミストリーによるＨＥＲ２ペプチドコンジュゲーションを可能にするために、アジド官能化高分子ミセルは、基本的に報告されたプロトコル［フ（Ｈｕ）ら Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１５；５３：３７０－８］に従って製造された。ただし、アジド官能化ブロック共重合体の一部（７．５ｋＤａ、１０ｍｏｌ％架橋剤Ｌ２［１］で誘導体化、全ブロック共重合体の５ｗ％）を（９５ｗ％）非官能化ブロック共重合体（７．５ｋＤａ、１０ｍｏｌ％架橋剤Ｌ２［Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１５；５３：３７０-８］で誘導体化、全ブロック共重合体の９５ｗ％)の次に添加したことは上記プロトコルと異なる。これらの２つのブロック共重合体は、アジド－ＰＥＧ_５０００－ＯＨから合成された前者（アジド－ＰＥＧ_５０００）_２－ＡＢＣＰＡ開始剤が代わりに使用されたことを除いて、同じ手順に従って合成された。次に、得られたアジド官能化高分子ミセルを、１３０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭ酢酸アンモニウムｐＨ５緩衝液で精製し、緩衝液を１３０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．４緩衝液に交換し、改良型ポリエーテルスルホン（ｍＰＥＳ）１００ｋＤａモジュール（Ｓｐｅｃｔｒｕｍｌａｂｓ）を備えたタンジェンシャルフローフィルトレーション（ＴＦＦ）を使用して、約３０ｍｇ／ｍＬ高分子当量に濃縮した。次に、ＨＥＲ２ペプチドを、以下の手法を使用して、銅フリークリック化学を介して、濃縮されたアジド官能化コア架橋高分子ミセルにコンジュゲーションした。

【0136】

室温（ＲＴ）で、ＡＣＮ（８６μＬ）を２００μＬのアジド官能化修飾コア架橋高分子ミセル（０．４μｍｏｌアジド当量）に、アンバー色のＵＰＬＣバイアル内で攪拌（３００ｒｐｍ）しながら添加した。放熱した後、ＨＥＲ２ペプチド（１．０当量、０．４μｍｏｌ、８６μＬ、Ｍｅｒｃａｃｈｅｍ）を反応混合物に滴下した。コンジュゲーション反応の進行をＵＰＬＣ－ＵＶで２４時間モニターした後、反応を停止した。ＵＰＬＣに基づいて、ＨＥＲ２ペプチドの変換率は４３％であると決定された。これは、２．２％のＨＥＲ２ペプチドで標識されたコア架橋高分子ミセルに相当する。コンジュゲーション反応後、ＨＥＲ２ペプチド標識高分子ミセルをＴＦＦにより１０ｖ％エタノールに対して精製し、未反応のＨＥＲ２ペプチドを除去した。

【0137】

［実施例９：酸性ｐＨ下におけるＴＭＴＨＳＩ含有リンカーＨＥＲ２－ペプチドのアジド含有ナノ粒子（ＣｒｉＰｅｃ）へのカップリング］
クリックケミストリーによるＨＥＲ２ペプチドコンジュゲーションを可能にするために、アジド官能化高分子ミセルを、基本的に報告されたプロトコル［フ（Ｈｕ）ら Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ ２０１５；５３：３７０－８］に従って製造した。ただし、アジド官能化ブロック共重合体（７．５ｋＤａ、ブロック共重合体総量の５ｗ％を１０ｍｏｌ％架橋剤Ｌ２［１］で誘導体化）の一部を、（９５ｗ％）非官能化ブロック共重合体（７．５ｋＤａ、ブロック共重合体の総量の９５ｗ％を１０ｍｏｌ％の架橋剤Ｌ２で誘導体化［Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ.２０１５；５３：３７０－８）］の次に添加した。これらの２つのブロック共重合体を、アジド－ＰＥＧ_５０００－ＯＨから合成された前者（アジド－ＰＥＧ_５０００）_２－ＡＢＣＰＡ開始剤が代わりに使用されたことを除いて、同じ手順に従って合成した。次に、得られたアジド官能化高分子ミセルを、１３０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭ酢酸アンモニウムｐＨ５バッファーで精製し、改良型ポリエーテルスルホン（ｍＰＥＳ）１００ｋＤａモジュール（ｓｐｅｃｔｒｕｍｌａｂｓ）を備えたタンジェンシャルフローフィルトレーション（ＴＦＦ）を使用して、約６０ｍｇ／ｍＬ高分子当量に濃縮した。次に、ＨＥＲ２ペプチドを、以下の手法を使用して、銅フリークリック化学を介して、濃縮されたアジド官能化コア架橋高分子ミセルにコンジュゲーションした。

【0138】

室温（ＲＴ）でｐＨ５の１５０ｍＭ酢酸アンモニウム（１３０μＬ）を１５００μＬのアジド官能化修飾コア架橋高分子ミセル（０．５７μｍｏｌアジド当量）に、アンバー色のＵＰＬＣバイアル内で攪拌（３００ｒｐｍ）しながら添加した。放熱した後、ＨＥＲ２ペプチド（５．０当量、２．８５μｍｏｌ、８４２μＬ ２ｍｇ／ｍｌ ＨＥＲ２－ＴＭＴＨストック溶液）を反応混合物に滴下した。コンジュゲーション反応の進行をＵＰＬＣ－ＵＶで２４時間モニターした後、反応を停止した。ＵＰＬＣに基づいて、ＨＥＲ２ペプチドの変換率は２３％であると決定された。これは、５％のＨＥＲ２ペプチドで標識されたコア架橋高分子ミセルに相当する。コンジュゲーション反応後、ＨＥＲ２ペプチド標識高分子ミセルを、ＴＦＦにより１０ｖ％エタノールに対して精製し、未反応のＨＥＲ２ペプチドを除去した。

【0139】

［実施例１０：ＴＭＴＨＳＩとＢＣＮＯＨおよびベンジルアジド間のモデルクリック反応の反応速度の比較］
アルキン（ＴＭＴＳＨＩまたはＢＣＮ－ＯＨ）を１．３当量のベンジルアジドと反応させ、ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）を使用して反応速度を測定した。ベンジルアジドによるＴＭＴＨＳＩの変換は２２５秒後に７９％に達し、ＢＣＮ－ＯＨとの反応は約４０倍長くかかった（９３１２秒）。反応転化率（％）は、トリアゾールシグナルに基づいて計算され、反応終了時のトリアゾールシグナルの平坦域を１００％レベル＝すべてのＴＭＴＨＳＩまたはＢＣＮ－ＯＨがベンジルアジドと完全に反応したときとする。測定結果は図１７Ａに含まれている。ＴＭＴＨＳＩ（上の曲線）はＢＣＮ－ＰＨ（下の曲線）よりも大幅に高速である。ＴＭＴＨＳＩの測定の拡大したものを図１７Ｂに示す。

【0140】

［実施例１１：Ｎ^１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－Ｎ^４（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）スクシンアミドの合成］

【化18】

２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）ブタノエート（８９ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍｌ）溶液を、１，２－ビス（２－アミノエトキシ）エタン（１３１μｌ、０．９０ｍｍｏｌ、４当量）のジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に５分かけて滴下して加えた。添加が完了した後、混合物を室温で１５分間撹拌した。次に、混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（５ｍｌ）で冷却し、有機相を相分離器にピペットで移した。有機相を相分離器にピペットで移すたびに、水性残渣をジクロロメタンで抽出（２×）した。合わせた濾液を減圧下で濃縮して、４７．７ｍｇの粗生成物を得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ １０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製し、生成物画分を合わせて減圧下で約１５ｍｌに濃縮し、５０ｍｌ丸底フラスコに移して凍結乾燥し、２６ｍｇ（２７％）の生成物を白色の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ(ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．７７ｍｉｎ，純度９９％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋４３０．図１８
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ６．７３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６８（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６３（ｓ，４Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５７－３．５２（ｍ，４Ｈ），３．４５（ｑ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ），２．６９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，2Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．１６（ｂｓ，２Ｈ），１．５１（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．

【0141】

［実施例１２：２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（３，３，６，６テトラメチル－１－オキシド－４,５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメートの合成］

【化19】

８ｍｌのスクリューキャップバイアルにＮ，Ｎ’－ジスクシンイミジルカーボネート（５２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、２当量）を入れ、アセトニトリル（２ｍｌ）に溶解した。これに対して、1－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（２０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍｌ）溶液を、シリンジを使用して滴下した。混合物を室温で1時間撹拌した。混合物をジエチルエーテル（１５ｍｌ）と酢酸エチル（１５ｍｌ）の混合物で希釈し、水で冷却した。有機層を再び水で洗浄し、続いてブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して、１１７ｍｇの粗生成物を白色の固体として得た。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、４ｇ；２０～５０％ＥｔＯＡｃヘプタン溶液）で精製し、生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮して、４９ｍｇ（４３％）の生成物を白色の綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．９７ｍｉｎ，純度９５％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｎａ］^＋ ３６３，［２Ｍ＋Ｎａ］^＋ ７０３．
^１Ｈ ＮＭＲ （４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ３．９２（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，２Ｈ），３．４５（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｓ，４Ｈ），１．５２（ｓ，６Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ）．

【0142】

ＴＭＴＨＳＩは、保存中に安定していることが証明された。化合物１２を、大気圧下で明所および暗所の両方で粉末として保存した。^１Ｈ－ＮＭＲ ｅｎ ＬＣ ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）により、4か月の保存後も化合物が劣化していないことを証明した。

【0143】

［実施例１３：２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アセトアミドの合成］

【化20】

８ｍｌのスクリューキャップバイアルにＴＭＴＨＳＩ（５０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を入れ、材料をアセトニトリル（２ｍｌ）に溶解した。Ｋ_２ＣＯ_３（６９ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、２当量）を加え、続いて無水トリフルオロ酢酸（３８μｌ、０．２７ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を室温で1時間撹拌した。混合物をジエチルエーテルで希釈し、水で洗浄（２×）した。有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して、５６ｍｇの粗生成物を白色固体として得た。

【0144】

残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス Ｐｒｅｐ、ＬＵＮＡ Ｃ１８、２０～６０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、３５ｍｇ（４７％）の生成物を白色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ ２．１８ｍｉｎ，純度９９．０％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋２９６．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム―ｄ）δ３.８６（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），１．５７（ｓ，６Ｈ），１．３３（ｓ，６Ｈ）．

【0145】

【化21】

［実施例１４：１－（２－（２－ヒドロキシエトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４,５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１γ^６－チエピン－１－イリデン）尿素の合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに２－（２－アミノ－エトキシ）エタノール（２９μｌ、０．２９ミリモル、２当量）およびジイソプロピルエチルアミン（６３μｌ、０．３６ミリモル、２．５当量）を入れ、ジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解した。２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ-１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメート（４９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍｌ）懸濁液を、ピペットを介してゆっくりと加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出（３×）し、各有機相を相分離器で濾過した。合わせた有機抽出物を減圧下で濃縮して、４３ｍｇの粗生成物を得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ １０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製し、生成物の分画を合わせて凍結乾燥し、１２ｍｇ（２５％）の生成物を綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．７３ｍｉｎ，純度９４％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋３３１．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ５．４１－５．３０（ｍ，１Ｈ），３．８４－３．７５（ｍ，２Ｈ），３．７５－３．７０（ｍ，２Ｈ），３．６０－３．５３（ｍ，４Ｈ），３．４８（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．４３－３．３４（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ），１．２７（ｓ，６Ｈ）．

【0146】

【化22】

［実施例１５：３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン-1-イリデン）スルファモイル）安息香酸メチルの合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに、１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（５７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を充てんし、ジクロロメタン（１．５ｍｌ）に溶解し、ピリジン（５０μｌ、０．６２ｍｍｏｌ、２．１６当量）を加え、混合物を１５分間撹拌した。３－（クロロスルホニル）安息香酸メチル（８１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物を０．１Ｎ ＨＣｌ水溶液（１５ｍｌ）で冷却し、そしてジクロロメタンで抽出（３×）し、各有機抽出物を相分離器で濾過した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮して、１００ｍｇの粗生成物を油性残渣として得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、３０～７０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、３９ｍｇ（３４％）の生成物を白色の綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ ２．１６ｍｉｎ，純度１００％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３９８．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ８．６５－８．６１（ｍ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），８．１７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．４１（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

【0147】

【化23】

［実施例１６：３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸の合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに３－（Ｎ－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）スルファモイル）安息香酸エステル（２９ｍｇ、７３μｍｏｌ）を入れ、その原料をＴＨＦ（０．５ｍｌ）に溶解した。ＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（７ｍｇ、１６７μｍｏｌ、２．３当量）の水溶液（０．５ｍｌ）を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を分取Ｒｐ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、水中３０～７０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、２６ｍｇ（９３％）の生成物を白色の綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．７０ｍｉｎ，純度９８％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３８４．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ８．７０（ｔ，Ｊ＝１．８ｚ，１Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，２Ｈ），３．４２（ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ），１．２９（ｓ，６Ｈ）．

【0148】

【化24】

［実施例１７：３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシドの合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ６－チエピン１－オキシド（５０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を入れ、ＴＨＦ（１ｍｌ）に溶解し、溶液をＫＯｔＢｕ（ＴＨＦ中１．７Ｍ；２００μｌ、１．３５当量）で処理した。得られた懸濁液を５分間撹拌し、次いでヨードメタン（３０μｌ、０．４８ｍｍｏｌ、１．９当量）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物をジエチルエーテルで希釈し、水で冷却した。相を分離し、水相をジエチルエーテルで抽出（２×）した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、４４ｍｇの粗生成物を透明な油として得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ １０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製し、生成物画分を合わせて減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリルで希釈し、凍結乾燥して、３１．３ｍｇ（５８％）の生成物を白色の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．７９ｍｉｎ，純度９９％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋２１４．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ３.３２（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，２Ｈ），３．０７（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，２Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ），１．４３（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

【0149】

【化25】

［実施例１８：４－（（３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン－２－イル）メチル）安息香酸メチルの合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに３，３，６，６－テトラメチル－１－（メチルイミノ）－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（３１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を入れ無水ＴＨＦ（１ｍｌ）に溶解した。ＬｉＨＭＤＳ（１Ｍ ＴＨＦ溶液；１７４μｌ、０．１７ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、混合物を室温で１５分間撹拌した。次に、４－（ブロモメチル）安息香酸メチル（５０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を水中で冷却し、ジエチルエーテルで抽出（３×１０ｍｌ）した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、減圧下で濃縮して、半固体の残渣を得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラシス、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、３０～７０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、生成物の９ｍｇ（１７％）を白色の綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ ２．２０ｍｉｎ，純度９７％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３６２．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ７．９７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ），６．２５（ｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．８１－３．６９（ｍ，１Ｈ），３．０２（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８３－２．７６（ｍ，４Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ），１．３９（ｓ，３Ｈ），１．３７（ｓ，６Ｈ）．

【0150】

【化26】

［実施例１９：メチル４－（（（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）アミノ）メチル）ベンゾエートの合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに１－イミノ－３，３，６，６－テトラメチル－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－１λ^６－チエピン１－オキシド（７５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ ）を入れ、無水ＴＨＦ（１．５ｍｌ）に溶解した。ＫＯｔＢｕ（１．７Ｍ ＴＨＦ溶液；２８０μｌ、０．４７ｍｍｏｌ、１．２６当量）を加え、得られた混合物を室温で１５分間撹拌した。得られた懸濁液にメチル－４（ブロモメチル）ベンゾエート（１２９ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ、１．５当量）を加え、混合物を室温で６時間撹拌した。混合物を水で急冷し、ジエチルエーテルで抽出（３×１５ｍｌ）し、合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して、１２８ｍｇの粗生成物を半固体の残渣として得た。残渣を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＬＵＮＡ Ｃ１８、３０～７０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、２８ｍｇ（２１％）の生成物を油性残渣として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ ２．１４ｍｉｎ，純度８６％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３４８．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ７．９９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），４．３９（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），１．４５（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

【0151】

【化27】

［実施例２０：ｔｅｒｔ－ブチル（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）カルバメートの合成］
２５０ｍｌの丸底フラスコにビス－（２－アミノエチル）ジスルフィド二塩酸塩（１．４９ｇ、６．６２ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（７５ｍｌ）を入れた。トリエチルアミン（２．８９ｍｌ、２０．８ミリモル、３．１５当量）を加え、すべての固体が溶解したときに、二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（１．４５ｇ、６．６４ミリモル、１当量）を加えた。混合物を室温で約１時間撹拌した。

【0152】

１Ｍ ＮａＨ_２ＰＯ_４水溶液（５０ｍｌ）を加えて混合物を冷却し、有機溶媒を蒸発により除去した。水性残渣をジエチルエーテルで洗浄（３×３０ｍｌ）し、次に１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（～７０ｍｌ）を使用してアルカリ性にした。水性混合物をジエチルエーテルで抽出（３×６０ｍｌ）した。合わせた有機抽出物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して、０．７１ｇの無色の油を得た。水層をジクロロメタン（３×５０ｍｌ）でさらに抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、前に単離した量で濃縮して、０．７８ｇ（４６％）の生成物を透明な濃厚な油として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．８３ｍｉｎ，純度９８％，検質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ２５３．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ４．９３（ｓ，１Ｈ），３．５３～３．３９（ｍ，２Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．８４～２．７４（ｍ，４Ｈ），１．６２（ｓ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

【0153】

【化28】

［実施例２１：２，２－ジメチル－４，１３－ジオキソ－３－オキサ－８，９－ジチア－５，１２－ジアザヘキサデカン－１６－酸の合成］
２５０ｍｌの丸底フラスコにｔｅｒｔ－ブチル（２－（（２－アミノエチル）ジ－スルファネイル）エチル）カルバメート（０．７８ｇ、３．０９ｍｍｏｌ）を入れ、この原料をジクロロメタン（２５ｍｌ）に溶解した。ＤＭＡＰ（０．１１ｇ、０．９３ｍｍｏｌ、０．３当量）を加え、続いて無水コハク酸（０．３ｇ、３．０９ｍｍｏｌ、１当量）を加えた。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を１Ｎ ＫＨＳＯ_４水溶液（３０ｍｌ）で冷却し、相を分離し、有機相を１Ｎ ＫＨＳＯ_４水溶液（～３０ｍｌ）で洗浄した。合わせた水相をジクロロメタン（３０ｍｌ）で抽出し、合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して、１．０２ｇ（９４％）の粗生成物を固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＡＣＩＤ）ｔ_Ｒ １．８０ｍｉｎ，純度１００％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｎａ］^＋３７５，［ＭＨ］^－
３５１．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ１１．５７（ｂｓ，１Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），５．０７（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５９（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．５３－３．３４（ｍ，２Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．７３－２．６６（ｍ，２Ｈ），２．６４－２．４７（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

【0154】

【化29】

［実施例２２：４－（（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）－４－オキソブタン酸トリフルオロ酢酸塩の合成］
２５０ｍｌの丸底フラスコに２，２－ジメチル－４，１３－ジオキソ－３－オキサ－８，９－ジチア－５，１２－ジアザヘキサデカン－１６－酸（１．０２ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）を入れた。この原料をジクロロメタン（５ｍｌ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（３ｍｌ、３９．２ｍｍｏｌ、１３．５当量）で処理した。反応物を室温で約１時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、トルエン、ジクロロメタンおよびジエチルエーテルと共蒸発させて、１．４ｇ（１３２％）を得た。残渣を水に溶解し、ジクロロメタンで洗浄（３×）した。水層を凍結乾燥して、１．０４ｇ（９８％）の生成物を濃厚な透明な油分として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４）δ３．５１（ｄｔ，Ｊ＝８．４，６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３６－３．２３（ｍ，２Ｈ，メタノール－ｄ_４残留ピークと一致），２．９９（ｄｑ，Ｊ＝８．４，６．１，５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８６（ｄｔ，Ｊ＝８．８，６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６１（ｄｔ，Ｊ＝８．５，６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．７，６．５Ｈｚ，２Ｈ）．

【0155】

【化30】

［実施例２３：４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタン酸の合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに ２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメート（９８ ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を入れ、この原料をアセトニトリル（１ｍｌ）に懸濁／溶解した。ＤＩＰＥＡ（１１５μｌ、０．６６ ｍｍｏｌ、２．３当量）を加え、続いて、４－（（２－（（２－アミノエチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）－４－オキソブタン酸ＴＦＡ－塩（１１３ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１．０７当量）の水溶液（０．５ｍｌ）を添加し、懸濁液を形成した。過剰量のアセトニトリル（０．５ｍｌ）を加え、混合物を室温で２０時間撹拌した。

【0156】

反応混合物を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリスＰｒｅｐ、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、水中１０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）により精製した。 生成物画分を合わせて凍結乾燥し、３８ｍｇ（２８％）の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ （ＳＣ＿ＡＣＩＤ）ｔ_Ｒ １．７７ ｍｉｎ，純度９６％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋４７８．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ７．７３（ｓ，１Ｈ），６．５２（ｓ，０．２Ｈ），６．００（ｓ，０．８Ｈ），３．９１－３．７６（ｍ，２Ｈ），３．５８－３．３８（ｍ，６Ｈ），２．９２－２．７３（ｍ，４Ｈ），２．５９－２．３６（ｍ，４Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ），１．３１（ｓ，６Ｈ）．

【0157】

【化31】

［実施例２４：２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエートの合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタン酸（３８．８ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１ｍｌ）を入れた。Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（１３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１．４当量）を加えた後、ＥＤＣ（２２ｍｇ、０．１１、１．４当量）を加えた。混合物を室温で約２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、得られた白色泡を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリスＰｒｅｐ、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、２０～６０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥した。凍結乾燥した材料をジクロロメタンに溶解し、８ｍｌの茶色のガラスバイアルに移し、溶媒をＮ_２気流の下で蒸発させ、ジエチルエーテルと共蒸発させて、３５ｍｇ（７６％）の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＡＣＩＤ）ｔ_Ｒ １．８６ｍｉｎ，純度９３％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ５７５．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ６．７３（ｓ，１Ｈ），５．３２（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５３－３．４１（ｍ，４Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），２．８９～２．７６（ｍ，８Ｈ），２．６７ （ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．４７（ｓ，６Ｈ），１．２８（ｓ，６Ｈ）．

【0158】

【化32】

［実施例２５：ＴＭＴＨＳＩ－ジスルフィドＮＨＳエステルのｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドへのカップリング ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨｓｉＲＮＡＰＬＫ１の調製］
２ｍＬのＵＰＬＣバイアルにｓｉＲＮＡＰＬＫ１オリゴヌクレオチド（５ｍｇ、０．３６μｍｏｌ）を入れ、ホウ酸緩衝液（ｂｏｒａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ）ｐＨ８．４（２５０μｌ）を加えた。２０ｍＭの２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエートのＤＭＳＯストック液を調製し、５当量（９０μｌ、１．０４ｍｇ、１．８μｍｏｌ）のストック溶液を攪拌しながらｓｉＲＮＡ含有溶液に添加した。混合物を室温で撹拌し、ＵＰＬＣでモニターした。過剰の５当量２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエート（９０μｌ、１．０４ｍｇ、１．８μｍｏｌ）の添加と、さらなる攪拌の後、＞９０％のＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡＰＬＫ１への変換の反応が示された。最終粗生成物をＰＤ－１０（緩衝液をリン酸緩衝液ｐＨ７．４へ交換）とビバスピン（Ｖｉｖａｓｐｉｎ）（５０００Ｄａ 分画分子量（ＭＷＣＯ）、４０００ｇ、ｐＨ７．４リン酸緩衝液３回、最終濃縮ステップ）で精製し、過剰なＴＭＴＨＳＩ ＮＨＳ ２，５－ジオキソピロリジン－１－イル４－オキソ－４－（（２－（（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エチル）ジスルファネイル）エチル）アミノ）ブタノエートを除去した。ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１の最終溶液（１０００μｌ）を２ｍＬのＵＰＬＣバイアルに移し、＋４℃で保存した。

【0159】

【化33】

［実施例２６：アジド－ＣＰＰ１ペプチドのＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドへのカップリング ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１コンジュゲートの調製］
最初に、アジド－ＣＰＰ１ペプチド（０．４９ｍｇ、０．３５μｍｏｌ）のアセトニトリル／水（１：１容量、１００μｌ）ストック溶液を調製した。先ず、５０μｌのストック溶液（０．５当量、０．２５ｍｇ、０．１８μｍｏｌ）を、ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１（１０００μｌｐＨ７．４リン酸緩衝液中、０．３５μｍｏｌ）を含む２ｍＬのＵＰＬＣバイアルに添加した。混合物を室温で撹拌し、ＵＰＬＣでモニターした。３０分後、すべてのアジド－ＣＰＰ１ペプチドを変換し、アジドＣＰＰ１ペプチド保存溶液の残り半分を添加した（０．５当量、０．２５ｍｇ、０．１８μｍｏｌ）。さらに３０分間撹拌した後、ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡＰＬＫ１に対する反応は完全に変換された。最終粗生成物を洗浄し（５０００Ｄａ 分画分子量（ＭＷＣＯ）、４０００ｇ、ｐＨ７．４リン酸緩衝液３回、最終濃縮ステップ）、ビバスピン遠心チューブで濃縮した。ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１の最終溶液（７５０μｌ）を２ｍＬのＵＰＬＣバイアルに移した。

【0160】

【化34】

［実施例２７：酸不安定リンカー（ａｃｉｄ ｌａｂｉｌｅ ｌｉｎｋｅｒ）７のＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ｓｉＲＮＡオリゴヌクレオチドへのカップリング リンカー７－ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１ コンジュゲートの調製］
ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ＮＨ－ｓｉＲＮＡ ＰＬＫ１（７５０μｌ）の溶液をビバスピン遠心チューブに移し、緩衝液をｐＨ８．４のホウ酸緩衝液に交換（５０００Ｄａ ＭＷＣＯ、４０００ｇ、ｐＨ８．４ホウ酸緩衝液３回、最終濃縮ステップ）した。ビバスピン使用後の最終容量：１２００μｌ。ヒドラゾンＭＡリンカーＮＨＳエステル（リンカー７）の２０ｍＭ ＤＭＳＯストック溶液を調製した。撹拌しながら、ＤＭＳＯ中の５当量のヒドラゾンＭＡリンカーＮＨＳエステル保存溶液（６６μｌ、０．７３ｍｇ、１．６μｍｏｌ）を、室温でホウ酸緩衝液（１０００μｌ）中のＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ｓｉＲＮＡ（０．３２μｍｏｌ）に添加し、ＵＰＬＣでモニターした。４５分後、反応によるリンカー７－ＣＰＰ１－ＴＭＴＨＳＩ－ｓｉＲＮＡＰＬＫ1コンジュゲートへの完全な変換が示された。最終的な粗コンジュゲートをＰＤ－１０（５０００Ｄａ分画分子量（ＭＷＣＯ）、４０００ｇ、リン酸緩衝液ｐＨ７．４へバッファー交換）およびビバスピン（５０００Ｄａ分画分子量（ＭＷＣＯ）カットオフ、４０００ｇ、ｐＨ７．４リン酸緩衝液３回、最終濃縮ステップ）で精製し、過剰なヒドラゾンＭＡリンカーＮＨＳエステルを除去した。

【0161】

【化35】

［実施例２９：（Ｓ）－１５－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）－２，２－ジメチル－４，１２－ジオキソ－３，８－ジオキサ－５，１１－ジアザヘキサデカン－１６－酸（α／γ位置異性体の混合物として単離された生成物）の合成］
葉酸（１．８４ｇ、４．１７ｍｍｏｌ）を無水ジメチルスルホキシド（１５ｍｌ）中に懸濁し、溶液が形成されるまでフラスコを１００℃のサンドバスに入れた。次に、溶液を室温まで冷却し、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（５０３ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加え、続いて、Ｎ－Ｂｏｃ－２－（２－アミノ－エトキシ）－エチルアミン（８５２ｍｇ、４．１７ｍｍｏｌ）の無水ジメチルスルホキシド（３ｍｌ）溶液を加えた。混合物を１０分間撹拌し、次にＥＤＣ（８４０ｍｇ、４．３８ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加え、混合物を室温で１７時間撹拌した。

【0162】

反応混合物を分取ＲＰＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ ５～３０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で（７回に分けて）精製した。生成物画分を合わせ、減圧下で部分的に濃縮した。得られた残渣を凍結乾燥して、０．９１ｇ（３４％）の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．３７ｍｉｎ，純度１００％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ－Ｈ］^－６２６．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）δ８．６６（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｑ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６７（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．７Ｈｚ，２Ｈ），４．５２（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．８Ｈｚ，０．４Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ＝８．１，４．７ Ｈｚ，０．６Ｈ），３．４５－３．３１（ｍ，４Ｈ），３．２６－３．１３（ｍ，２Ｈ），３．１１－３．０１（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｔ，Ｊ＝７．１，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．１５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），２．０８－１．８２（ｍ，２Ｈ），１．３５ ａｎｄ １．３３（２×ｓ，ｃｏｍｂｉｎｅｄ ９Ｈ）．

【0163】

【化36】

［実施例３０：Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－アミノエトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミン（α／γ位置異性体の混合物として単離された生成物）の合成］
（Ｓ）－１５－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンズアミド）－２，２－ジメチル－４，１２－ジオキソ－３，８－ジオキサ－５，１１－ジアザヘキサデカン－１６－酸（４０３ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２ｍｌ、２６．０ｍｍｏｌ）に溶解し、得られた混合物を室温で２５分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をジクロロメタン（２×）と共蒸発させた。 残渣をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１ｍｌ）に取り、完全に溶解するまで加温し、次に室温まで放冷した。溶液をトリエチルアミンで処理（３×２００μｌ）して、オレンジ色の沈殿物を得た。混合物をアセトンで希釈し、固形物を濾過により収集した。残渣をアセトン（３回）で洗浄し、空気乾燥して、３４６ｍｇ（９７％）の生成物をオレンジ色の固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ８．６６－８．５７（ｍ，１Ｈ），８．２４（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，０．６Ｈ），８．０７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，０．４Ｈ），７．７２－７．６２（ｍ，１Ｈ），７．６２－７．５１（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｂｓ，２Ｈ），６．９１（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），４．５２－４．３８（ｍ，２Ｈ），４．３０（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，０．４Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，０．６Ｈ），３．５５（ｑ，Ｊ=６．２，５．６ Ｈｚ，３Ｈ），３．４３（ｂｓ，３Ｈ），３．３１－３．１３（ｍ，４Ｈ），２．９４（ｑ，Ｊ＝６．２，５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２１－２．１１（ｍ，２Ｈ），２．０６－１．７９（ｍ, ３Ｈ），０．９７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）．

【0164】

ＮＭＲは、４．５～２．５ｐｐｍの信号の下に非常に広いＨＯＤ信号を示す。

【0165】

【化37】

［実施例３１：Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－（３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）ウレイド）エトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミン（α／γ位置異性体の混合物として単離された生成物）の合成］
Ｎ^２－（４－（（（２－アミノ－４－オキソ－３，４－ジヒドロプテリジン－６－イル）メチル）アミノ）ベンゾイル）－Ｎ^５－（２－（２－アミノエトキシ）エチル）－Ｌ－グルタミン（９０．３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を熱ジメチルスルホキシド（１．５ｍｌ）に溶解し、室温まで放冷した。トリエチルアミン（１０７μｌ、０．７７ｍｍｏｌ、６当量）を加え、得られた混合物を、２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメート（５２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．２当量）に加えた。反応混合物を室温で４日間撹拌した。

【0166】

反応混合物を分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ ５～４０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、５１ｍｇ（５３％）の生成物を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．４５ｍｉｎ，純度９９％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋ ７５３．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）δ８．６６（ｓ，１Ｈ），８．０２～７．９０（ｍ，１Ｈ），７．７０－７．５９（ｍ，２Ｈ），６．７２－６．６１（ｍ，３Ｈ），４．５０（ｓ，２Ｈ），４．３７－４．３２（ｍ，０．４Ｈ），４．２２－４．１３（ｍ，０．６Ｈ），３．９０－３．７９（ｍ，２Ｈ），３．５９（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，４．５Ｈｚ，２Ｈ），３．４４－３．３０（ｍ，５Ｈ），３．２５－３．１４（ｍ，２Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２６（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），２．０５－１．９３（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），１．３３（ｓ，６Ｈ），１．１９（ｓ，６Ｈ）．

【0167】

［実施例３２：ＴＭＴＨＳＩ含有－リンカー葉酸のアジド含有ナノ粒子（ＣｒｉＰｅｃ）へのカップリング］

【化38】

葉酸で標識されたコア架橋高分子ミセルを、葉酸を高分子ミセルシェルの表面にコンジュゲーションさせることによって生成し、ターゲティング研究に使用した。クリックケミストリーによる葉酸コンジュゲーションを可能にするために、アジド官能化高分子ミセルは、基本的に報告されたプロトコル［フ（Ｈｕ）ら、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１５；５３：３７０－８］に従って製造された。ただし、アジド官能化ブロック共重合体（２２ｋＤａ、１０ｍｏｌ％の架橋剤Ｌ２［１］、全ブロック共重合体の５ｗ％を誘導体化）の一部を（９５ｗ％）非官能化ブロック共重合体（２２ｋＤａ、１０ｍｏｌ％架橋剤Ｌ２［Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ.２０１５；５３：３７０－８］で誘導体化、全ブロック共重合体の９５ｗ％）の次に添加した。これらの２つのブロック共重合体を、アジド－ＰＥＧ_５０００－ＯＨから合成された前者（アジド－ＰＥＧ_５０００）_２－ＡＢＣＰＡ開始剤を代わりに使用したことを除いて、同じ手順に従って合成した。次に、得られたアジド官能化高分子ミセルを、１３０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭ酢酸アンモニウムｐＨ５緩衝液で精製し、緩衝液１３０ｍＭ ＮａＣｌを含む２０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．４緩衝液に交換し、改良型ポリエーテルスルホン（ｍＰＥＳ）１００ｋＤａモジュール（ｓｐｅｃｔｒｕｍｌａｂｓ）を備えたタンジェンシャルフローフィルトレーション（ＴＦＦ）を使用して、約９６ｍｇ／ｍＬ高分子当量に濃縮した。次に、葉酸を、以下の手法を使用して、銅フリークリックケミストリーを介して、濃縮されたアジド官能化コア架橋高分子ミセルに結合した。

【0168】

室温（ＲＴ）で、ＤＭＳＯ（９３μＬ）を２００μＬのアジド官能化修飾コア架橋高分子ミセル（０．１３μｍｏｌアジド当量）に、アンバー色のＵＰＬＣバイアル内で攪拌（３００ｒｐｍ）しながら添加した。熱を放散した後、葉酸（１．０当量、０．１３μｍｏｌ、５μＬ、Ｍｅｒｃａｃｈｅｍ）を反応混合物に滴下して加えた。コンジュゲーション反応の進行をＵＰＬＣ－ＵＶで４時間モニターした後、反応を停止した。ＵＰＬＣに基づいて、葉酸の変換率は４５％であると決定された。これは、２．３％の葉酸で標識されたコア架橋高分子ミセルに相当する。

【0169】

【化39】

［実施例３３：１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４,５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ６－チエピン－１－イリデン）尿素の合成］
Ｎ_２雰囲気下で、２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエパン－１－イリデン）カルバメート（１９７ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１２．５ｍｌ）に溶解し、２，２’－（エタン－１，２－ジイルビス（オキシ））ビス（エタン－１－アミン）（０．４２ｍｌ、２．８９ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。反応物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリル／水の１：１混合物（４ｍｌ）に取り、分取ＲＰ－ＭＰＬＣ（リベラリス、ＸＳｅｌｅｃｔ １０～５０％ＭｅＣＮ水溶液、１０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３、ｐＨ＝９．５）で（２回に分けて）精製した。生成物画分を合わせて凍結乾燥し、１５６ｍｇ（７２％）の生成物を白色の綿毛状の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＳＣ ＢＡＳＥ）ｔ_Ｒ １．６７ｍｉｎ，純度９９％，検質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ＋Ｈ］^＋３７４．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）δ３．８６ （ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，２Ｈ)，３．６１（d，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，２Ｈ），３．５４－３．４６（ｍ，４Ｈ），３．４０（ｑ，Ｊ=６．０Ｈｚ，４Ｈ），３．１５－３．０４（ｍ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），１．３４（ｓ，６Ｈ），１．２１（ｓ，６Ｈ）．

【0170】

【化40】

［実施例３４：１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素－Ｃｙ７付加物ギ酸塩の合成］
８ｍｌのスクリューキャップバイアルに、Ｃｙ７－ＮＨＳエステル（９５ｍｇ、０．１３ｍｏｌ）を入れ、１－（２－（２－（２－アミノエトキシ）エトキシ）エチル）－３－（３，３，６，６－テトラメチル－１－オキシド－４，５－ジデヒドロ－２，３，６，７－テトラヒドロ－１λ^６－チエピン－１－イリデン）尿素（６６．５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、１．３７当量）のＭｅＣＮ（１．５ｍｌ）溶液を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。次に、混合物を－２０℃で一晩保存した。混合物を室温まで温め、次に分取MPLC（リベラリス Ｐｒｅｐ、ＬＵＮＡ－Ｃ１８、２０～６０％ＭｅＣＮ水溶液、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸）により、精製した。生成物画分を減圧下で濃縮し、残渣を少量のＭｅＣＮで希釈し、一晩凍結乾燥して、９５ｍｇ（７７％）の生成物を暗緑色の固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＡＮ ＡＣＩＤ ＤＡＹ ＵＶ８００）ｔ_Ｒ ３．４６ｍｉｎ， 純度８８％，質量検出（ｍａｓｓ ｆｏｕｎｄ）［Ｍ］^＋９０５， ［Ｍ＋Ｈ］^２＋４５３．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４）δ８．３７（ｓ，１Ｈ），８．０２－７．９５（ｍ，０．５Ｈ），７．７５（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，８．５Ｈｚ，１．５Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３－７．３４（ｍ，１Ｈ），７．３１－７．２０（ｍ，３Ｈ），７．１５－６．９２（ｍ，１Ｈ），６．８１－６．３４（ｍ，２Ｈ），６．２４－６．０９（ｍ，１Ｈ），４．１１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｄ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６６－３．５５（ｍ，８Ｈ），３．５５－３．４５（ｍ，５Ｈ），３．３９－３．３２（ｍ，３Ｈ），３．２９－３．２１（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，３Ｈ），２．５０～２．２８（ｍ，１Ｈ），２．２７～２．１５（ｍ，２Ｈ），２．００～１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８９～１．７４（ｍ，３Ｈ），１．７５～１．６１（ｍ，１０Ｈ），１．５９～１．５２ （ｍ，２Ｈ），１．５１～１．４２（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｓ，７Ｈ），１．３３～１．２０（ｍ，８Ｈ），１．０３（ｓ，１Ｈ）．

【0171】

［測定方法］
ＡＮ ＡＣＩＤ ＤＡＹ ＵＶ８００，
装置：アジレント １２６０ バイナリ―ポンプ：
Ｇ１３１２Ｂ，脱ガス装置；オートサンプラー、コルコム，ＤＡＤ：アジレント Ｇ１３１５Ｄ，２１０～８００ｎｍ，ＭＳＤ：アジレントＬＣ／ＭＳＤ Ｇ６１３０Ｂ ＥＳＩ，ｐｏｓ／ｎｅｇ １００～１０００，ＥＬＳＤ オルテックＡｌｌｔｅｃｈ ３３００ ガス流量 １.５ｍｌ／ｍｉｎ，ガス温度：４０℃；カラム：ウォーターズ ＸＳｅｌｅｃｔ（商標）Ｃ１８，５０ｘ２．１ｍｍ，３．５μ，温度：３５℃，流量：０．８ｍＬ／ｍｉｎ，グラジエント：ｔ_０＝５％ Ａ，t_{３．５ｍｉｎ}＝９８％ Ａ，ｔ_６ｍｉｎ＝９８％ Ａ，ポストタイム：２ｍｉｎ；溶離液Ａ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液，溶離液Ｂ：０．１％ギ酸水溶液．

【0172】

［ＭＳパラメーター］
ソース：ＥＳＩ，キャピラリー電圧：３０００Ｖ，乾燥ガス流量：１２Ｌ／ｍｉｎ，噴霧器（Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ） 圧力６０ｐｓｉｇ，乾燥ガス温度：３５０℃，フラグメント７０，ＭＳスキャン：ＭＳ範囲１００～１０００（ポジティブ／ネガティブモード），スキャン速度：０．８４ｓｅｃ／サイクル．

【0173】

［実施例３５：反応速度定数値ｋｔを決定するためのＴＭＴＨＳＩとベンジルアジドとの反応速度論］
ベンジルアジドのＢＣＮ－ＯＨおよびＴＭＴＨＳＩによる変換のｋｔ値が、質量分析によって反応を監視することによって調査された。この研究では、ＥＳＩソースを結合したＱＴＯＦ質量分析を測定方法として利用した。詳細には、アルキン（ＡＣＮ／水／酢酸（３：１：０．０１％）中のＴＭＴＳＨＩまたはＢＣＮ－ＯＨ）を１．０当量のベンジルアジドと反応させ、ＭＳを使用して反応速度を測定した。測定結果は図５５に含まれている。ベンジルアジドとの反応で測定されたＴＭＴＨＳＩのｋｔ値は０．８３Ｍ^－１ｓ^－１であり、ＢＣＮ－ＯＨ（０．１２Ｍ^－１Ｓ^－１）よりも約７倍高速である。

【0174】

［引用文献］
・A. Krebs and H. Kimling, Tetrahedron Lett., 1970, 761-764.
・de Almeida, G., Sletten, E. M., Nakamura, H., Palaniappan, K. K., Bertozzi, C. R., Angew. Chem. Int. Ed., 2012, 51, 2443-2447
・Li et al. Molecules, 2016, 21, 1393.
・Tota, A., Zenzola, M., Chawner, S. J., St John-Campbell, S., Carlucci, C. Romanazzi, G., Degennaro, L., Bull, J. A., Luisi, R., Chem. Commun., 2017,
53, 348-351.
・Hu et al. Biomaterials. 2015;53:370-8
・King et al, Chem Comm, 2012, 48, 9308-9309.
・Dommerholt et al. Nature Communications 5, Article number: 5378 (2014)
・Dommerholt et al. Top Curr Chem (Z) 2016, 374:16.

【0175】

（付記）
（付記１）
式（Ｉ）で表される化合物。

【化41】

ｎとｍは独立して、０、１、または２であり、ｎ＋ｍは２であり、
ＸはＯまたはＮＲ^９であり、
ＹはＮＲ^１０であり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基であり、
前記Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳは更に、独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基と結合し、
前記アルキル基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロアリール基）および（ヘテロ）アリールアルキル基は、独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から選択される１またはそれ以上の置換基により置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルキルオキシ基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、ここでＲ^１１は独立して、Ｃ^１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルコキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳ、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基であり、
前記Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳは更に、独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、C_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基と結合し、
前記アルキル基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基および（ヘテロ）アリールアルキル基は独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から独立して選択される１またはそれ以上の置換基により置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は、任意で置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、ここでＲ^１１は、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から独立して選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記Ｒ^１とＲ^７、Ｒ^１とＲ^８、Ｒ^２とＲ^７、Ｒ^２とＲ^８、Ｒ^３とＲ^５、Ｒ^３とＲ^６、Ｒ^４とＲ^５、および／またはＲ^４とＲ^６は任意で、独立して、シクロアルキル－、シクロ（ヘテロ）アリール－、シクロアルキル（ヘテロ）アリール、－シクロ（ヘテロ）アリールアルキル系のような縮合環系を形成し、
前記縮合系のアルキル基は、任意でＯ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子によって中断され、
前記縮合系の、前記アルキル基、（ヘテロ）アリール基、アルキル（ヘテロ）アリール基、（ヘテロ）アリールアルキル基は、独立して、任意で、Ｃ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン、アミノ基、オキソ基およびシリル基からなる群から独立して選択される１またはそれ以上の置換基で置換され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は、任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉ－で表され、
Ｒ^１１はＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_１～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基およびＣ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基からなる群から独立して選択され、
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルケニルオキシ基、アルキニルオキシ基およびシクロアルキルオキシ基は任意で、置換され、
前記アルキル基、アルコキシ基、シクロアルキル基およびシクロアルコキシ基は任意で、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳからなる群から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子により中断され、
Ｒ^９、Ｒ^１０は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ≡ＣＲ^１２、－［Ｃ（Ｒ^１２）２Ｃ（Ｒ^１２）２Ｏ］ｑ－Ｒ^１２（ｑは１から２００の範囲）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、―ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、－Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、－Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル(ヘテロ)アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0176】

（付記２）
ｎが１でｍが１であり、式（ＩＩ）表される、付記１に記載の化合物。

【化42】

Ｒ^１～Ｒ^８、Ｘ、Ｙは付記１で定義されたとおりである。

【0177】

（付記３）
Ｘは０、および／または、Ｒ^１０はＨである、付記１または２に記載の化合物。

【0178】

（付記４）
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、Ｈ、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）またはＣ_１～Ｃ_２４アルキル、好ましくは、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は独立して、ＨまたはＣ_１～Ｃ_４アルキルである、付記１から３のいずれか１つに記載の化合物。

【0179】

（付記５）
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８はメチル基であるか、または、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、はメチル基であると共にＲ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８はＨである、付記４に記載の化合物。

【0180】

（付記６）
式（Ｉ）の化合物の、Ｘおよび／もしくはＹならびに／またはＳ原子に隣接するチオシクロヘプチン環の１つの原子は、独立して、任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する、付記１から５のいずれか１つに記載の化合物。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ （ＩＩＩ）
連結基（Ｌ）は、存在しないか、または、直鎖状または分枝状の、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルケニレン基、Ｃ_２～Ｃ_２４アルキニレン基、Ｃ_３～Ｃ_２４シクロアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルケニレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４シクロアルキニレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリーレン基、Ｃ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキレン基、Ｃ_５～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルケニレン基、Ｃ_９～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキニレン基から選択され、
前記アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、シクロアルキレン基、シクロアルケニレン基、シクロアルキニレン基、アルキル（ヘテロ）アリーレン基、（ヘテロ）アリールアルキレン基、（ヘテロ）アリールアルケニレン基および（ヘテロ）アリールアルキニレン基は任意で、独立してＣ_１～Ｃ_１２アルキル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニル基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニル基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルケニル基、Ｃ_５～Ｃ_１２シクロアルキニル基、Ｃ_８～Ｃ_１２アルコキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルケニルオキシ基、Ｃ_２～Ｃ_１２アルキニルオキシ基、Ｃ_３～Ｃ_１２シクロアルキルオキシ基、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、アミノ基、オキソおよびシリル基からなる群から選択される1またはそれ以上の置換基で置換され、
前記シリル基は式（Ｒ^１１）_３Ｓｉで表され、Ｒ^１１は上記の通り定義され、
官能基Ｑは、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｒ^１２、－ＣＨ＝Ｃ（Ｒ^１２）_２、―Ｃ≡ＣＲ^１２、―［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］_ｑＲ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－Ｎ_３、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、－ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、―Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、―Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、―Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、Ｃ_１～Ｃ_２４アルキル基、Ｃ_６～Ｃ_２４（ヘテロ）アリール基、Ｃ_７～Ｃ_２４アルキル（ヘテロ）アリール基およびＣ_７～Ｃ_２４（ヘテロ）アリールアルキル基からなる群から選択される。

【0181】

（付記７）
Ｌは、存在しないか、または、［Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｃ（Ｒ^１２）_２Ｏ］_ｑ―Ｒ^１２（ｑは１から２００の範囲である）、－ＣＮ、－ＮＣＸ、－ＸＣＮ、－ＸＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、－^＋Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｃ（Ｒ^１２）_２ＸＲ^１２、―Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、―Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２、―Ｓ（Ｏ）Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－Ｓ（Ｏ）ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^１２）_２、－ＯＳ（Ｏ）Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ^１２、－ＯＳ（Ｏ）ＯＲ^１２、－ＯＳ（Ｏ）_２ＯＲ^１２、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１２）（ＯＲ^１２）、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ^１２）_２、－Ｓｉ（Ｒ^１２）_３、－ＸＣ（Ｘ）Ｒ^１２、－ＸＣ（Ｘ）ＸＲ^１２、－ＸＣ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｒ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）ＸＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｘ）Ｎ（Ｒ^１２）_２であり、
Ｘは酸素または硫黄であると共に、Ｒ^１２は付記６で定義されたとおりであり、
および／または、
Ｑは―ＯＲ^１２、－Ｎ（Ｒ^１２）_２、―⁺Ｎ（Ｒ^１２）_３、―Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、―Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１２、―ＯＣ（Ｏ）Ｒ^１２、―ＯＣ（Ｏ）ＯＲ^１２、―ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２、－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２、―Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１２および－Ｎ（Ｒ^１２）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^１２）_２からなる群から選択され、
Ｒ^１２は付記６で定義されたとおりである、
付記６に記載の化合物。

【0182】

（付記８）
前記官能基Ｑは、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体の内の１またはそれ以上と結合している、付記６または７に記載の化合物。

【0183】

（付記９）
任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合して式（ＩＩＩ）の化合物を生成する式（Ｉ）の化合物を含む付記６から８のいずれか１つに記載の化合物。
（式（Ｉ））－Ｌ－Ｑ (ＩＩＩ)
式（Ｉ）は、Ｙ原子で任意の連結基（Ｌ）および官能基（Ｑ）に結合され、
ｍとｎは両方とも1であり、
ＸはＯであり、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４は同一であり、ＨおよびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８は同一であり、ＨおよびＣ_１～Ｃ_４アルキルからなる群から選択され、
ＹはＮＲ^１０であることにより、Ｒ^１０はＬＱに置換され、
Ｌは、存在しないか、１～２５原子、好ましくは１～１５原子の長さの鎖であり、－Ｓ（Ｏ）_２－、－Ｓ－、－ＳＳ－、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－およびフェニレンからなる群から独立して選択される１またはそれ以上、好ましくは１～６の部分を含むことにより、前記鎖の長さは、原子の最長の線形鎖の内の原子の数によって決定されると共に、
Ｑは、アルコール、アミン、チオール、カルボン酸エステル、カルボン酸または活性化エステル、ケトン、アルデヒド、ニトリル、マレイミド、アルケン、アルキン、ヘテロ芳香族（ｈｅｔｅｒｏａｒｏｍａｔｅ）、脱離基およびホスホルアミダイトを含む。

【0184】

（付記１０）
前記官能基Ｑが、目的の分子、好ましくは薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および担体からなる群から選択される分子と反応されている、付記６から９のいずれか１つに記載の化合物。

【0185】

（付記１１）
１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物に結合した付記１から１０のいずれか１つに記載の化合物を含む化合物。
式（Ｉ）のチオシクロヘプチンのアルキン基は、前記１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物に結合しており、
前記１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、好ましくは、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド含有化合物、より好ましくはアジド含有化合物およびアジド－アルキンカップリングであり、
好ましくは、トリアゾール化合物の形成をもたらし、
好ましくは、前記１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子および担体のうちの1またはそれ以上を含む。

【0186】

（付記１２）
付記１から１０に記載の化合物を、１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物とカップリングする方法であって、
好ましくは、前記１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は、アジド含有化合物、ニトロン含有化合物またはニトリルオキシド含有化合物、好ましくはアジド含有化合物であり、
好ましくは、カップリングは銅フリークリック反応であり、好ましくは、前記１，３－双極子または１，３－（ヘテロ）ジエンを含む化合物は薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、担体の１またはそれ以上である、
方法。

【0187】

（付記１３）
ナノ粒子を含む構築物の調製方法であって、
ナノ粒子は、好ましくは感熱性ブロック共重合体からの自己組織化高分子ミセル、および薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の群から選択される活性化合物であり、
ナノ粒子と活性化合物とのカップリングは、好ましくはトリアゾール化合物を形成するための、アジド含有化合物との付記１から８に記載の化合物のカップリングを含み、
前記ナノ粒子は前記アジド含有化合物であり、前記活性化合物は、付記１から８に定義される化合物を含み、または前記ナノ粒子は、付記１から８に定義される化合物を含み、前記活性化合物は、前記アジド含有化合物を含む、
方法。

【0188】

（付記１４）
ＸはＯ、ＹはＮＨ、ｍとｎは両方とも１、Ｒ^１～Ｒ^４はメチル、Ｒ^５－Ｒ^８は水素である、式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
ａ．ビスヒドラゾン（２）をイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）に変換するステップと、

【化43】

ｂ．得られたイミノジデヒドロスルホンイミノ（３）を単離するステップと、
を含む、方法。

【0189】

（付記１５）
前記変換は、ビスヒドラゾン（２）が酸化剤と反応して硫黄官能基をスルホンイミノ官能基に酸化する酸化反応を含み、
好ましくは、前記変換はさらに、ビスヒドラゾン（２）が酸化剤と反応してヒドラゾン官能基をアルキン官能基に酸化する酸化反応を含む、付記１３に記載の方法。

【0190】

（付記１６）
前記酸化反応が２段階反応であり、好ましくは、前記酸化反応は、１つの酸化剤、好ましくはヨードベンゼンジアセテートとのワンポット反応である、付記１４に記載の方法。

【0191】

（付記１７）
目的の２つの分子をカップリングする方法における、付記１から９に記載の化合物の使用であって、前記分子は、ナノ粒子、タンパク質、ヒドロゲル、リポソーム、抗体薬物複合体、薬物ポリマー複合体などの標的化および／または標識化された送達システムを薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリ―エージェント、ナノ粒子、および担体の中から、任意で独立して選択される、
使用。

【0192】

（付記１８）
生体直交性の、任意で、銅フリークリック反応における、付記１から９に記載の化合物の使用。

【0193】

（付記１９）
薬物、抗体、タンパク質、ペプチド、リガンド、イメージングラベル、ターゲティングリガンド、デリバリーエージェント、ナノ粒子、および担体の中の１またはそれ以上への銅フリークリック反応を使用するナノ粒子のカップリング方法における、付記１から９に記載の化合物の使用。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17A】

【図17B】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【図51】

【図52】

【図53】

【図54】

【図55】

【図56A-D】