特許 7596323 ダクチノマイシン組成物並びに骨髄異形成症候群及び急性骨髄性白血病の治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-11-29

(45)【発行日】2024-12-09

(54)【発明の名称】ダクチノマイシン組成物並びに骨髄異形成症候群及び急性骨髄性白血病の治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/12 20060101AFI20241202BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 19/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20241202BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20241202BHJP

   A61K 9/51 20060101ALI20241202BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20241202BHJP

【ＦＩ】

A61K38/12

A61K45/00

A61P35/00

A61P35/02

A61P19/00

A61P25/00

A61P1/00

A61P43/00 121

A61K9/14

A61K9/51

A61K47/34

【請求項の数】 19

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2022025700

(22)【出願日】2022-02-22

(62)【分割の表示】P 2019535217の分割

【原出願日】2017-09-13

(65)【公開番号】P2022066256

(43)【公開日】2022-04-28

【審査請求日】2022-03-23

(31)【優先権主張番号】62/394,104

(32)【優先日】2016-09-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/444,330

(32)【優先日】2017-01-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/500,459

(32)【優先日】2017-05-02

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】523384654

【氏名又は名称】ティツィアナ・ライフ・サイエンシズ・ピーエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】クンワル・シャイルバーイ

【審査官】濱田 光浩

(56)【参考文献】

【文献】特開昭６３－１２２６２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１３－５０３１１３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００６－５０３８７１（ＪＰ，Ａ）

【文献】New England Journal of Medicine，2015年，Vol. 373, No. 12，p. 1180-1182

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３８／１２

Ａ６１Ｐ ３５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＰＬＡ－ｍＰＥＧを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む医薬組成物であって、ナノ粒子の平均サイズが約１００ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物。

【請求項2】

ＰＬＡ－ｍＰＥＧが約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧを含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量が約２５，０００Ｄａ～約３５，０００Ｄａである、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項4】

ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量が約３０，０００Ｄａである、請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む医薬組成物であって、ナノ粒子の平均サイズが約１００ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物。

【請求項6】

ＰＬＧＡが約４０：６０～約６０：４０の乳酸：グリコール酸のモル比を有する、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

ＰＬＧＡが約５０：５０の乳酸：グリコール酸のモル比を有する、請求項６に記載の組成物。

【請求項8】

ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧが約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧを含む、請求項５～７のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項9】

ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量が約１７，０００Ｄａ～約２７，０００Ｄａである、請求項５～８のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項10】

ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量が約２２，０００Ｄａである、請求項９に記載の組成物。

【請求項11】

約５重量％～約１５重量％のダクチノマイシンを含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物は全身的に、静脈内に、注入により、又は経口的に、対象に投与される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項13】

前記組成物は、１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回、対象に投与され、場合により、投与期間の間に、１週間、２週間、３週間、又は４週間の休薬期間が含まれる、請求項１～１２のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物は対象に投与され、対象が、粘膜炎を発症しているか又は発症するリスクがあり、場合により
ｉ．前記対象が、粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて同時に治療されている；または
ｉｉ．前記対象が、粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて、前記組成物の投与前に前処置されている、
請求項１～１３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項15】

ダクチノマイシンの治療有効量が約０．０５～約２．０ｍｇ・分／Ｌの対象のＡＵＣ_∞をもたらす、請求項１～１４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項16】

ダクチノマイシンの治療有効量が約１ｎｇ／ｍＬ～約２０ｎｇ／ｍＬの対象のＣ_ｍａｘをもたらす、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項17】

対象に投与すると、ダクチノマイシンの約７０％～約８０％が、３日後にナノ粒子から放出される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項18】

対象における骨髄障害の治療において使用するための、請求項１～１７のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項19】

対象における骨髄異形成症候群の治療において使用するための、請求項１～１８のいずれか一項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本出願は、２０１６年９月１３日に出願された米国仮出願第６２／３９４，１０４号、２０１７年１月９日に出願された米国仮出願第６２／４４４，３３０号、及び２０１７年５月２日に出願された米国仮出願第６２／５００，４５９号の利益及び優先権を主張するものであり、これらの出願それぞれの内容はその全体が参照により本明細書に援用される。

【0002】

本開示は、骨髄異形成症候群又は癌を持つ患者を、遺伝子検査、診断、及び治療することに関する分子生物学の分野を対象とする。

【背景技術】

【0003】

ＮＰＭ１－変異型の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、成人においてＡＭＬの３分の１のケースを占める特有の白血病である。

【0004】

骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、骨髄中の赤血球、白血球、血小板に影響を与える種々の骨髄障害の一群を包含するものである。前駆幹細胞が成熟できずに骨髄に蓄積するか、又は短い寿命を有することがあり、その結果、循環血液中の成熟血球が通常よりも少なくなることになる。ＭＤＳの罹患率は、人口１０万人当たりおよそ４人～５人であり、６０歳を超えると１０万人当たり２０人～５０人に増加する。ＭＤＳは、罹患した場合のおよそ３０％において急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に進行する。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0005】

【文献】Ｈｉｌｌ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．（２０１４）５３：７４１－７５１

【文献】Ｗａｌｓｈ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｂｒ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ（２０１６）８１：９８９－９９８

【文献】Ｆａｌｉｎｉ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．“Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ ｎｕｃｌｅｏ－ｐｈｏｓｍｉｎ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ａ ｎｏｒｍａｌ ｋａｒｙｏ－ｔｙｐｅ”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２００５；３５２：２５４－２６６

【文献】Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｎｅｔｗｏｒｋ．“Ｇｅｎｏｍｉｃ ａｎｄ ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃ ｌａｎｄｓｃａｐｅｓ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｄｅ ｎｏｖｏ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ“Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１３；３６８：２０５９－２０７４

【文献】Ｆａｌｉｎｉ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．“Ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ｍｕｔａｔｅｄ ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ （ＮＰＭ１）：ａｎｙ ｈｏｐｅ ｆｏｒ ａ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｙ？”Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖ．２０１１；２５：２４７－２５４

【文献】「Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ ｖ３．０（ＣＴＣＡＥ）」、発行日２００６年８月９日

【文献】Ｏｓａｔｈａｎｏｎｄｈ，Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ １９７５；３６：８６３－８６６

【文献】Ｂｕｒｇｅｒ Ｋ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１０；２８５：１２４１６－１２４２５

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

ＮＰＭ１－変異型ＡＭＬを含めたＭＤＳ及びＡＭＬの効果的な治療には、長年検討されているが未だ対処されていないニーズがある。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＡ－ｍＰＥＧを含み、該ナノ粒子の平均サイズが約１００ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物を提供する。

【0008】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧ（例えば２５重量％）を含む。

【0009】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約１５重量％のｍＰＥＧ～約３５重量％のｍＰＥＧ（例えば２５重量％）を含む。

【0010】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量は約２５，０００Ｄａ～約３５，０００Ｄａである。

【0011】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量は約３０，０００Ｄａである。

【0012】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＡ－ｍＰＥＧを含み、該ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量が約２５，０００Ｄａ～約３５，０００Ｄａである、組成物を提供する。

【0013】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧの分子量は約３０，０００Ｄａである。

【0014】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧ（例えば２５重量％）を含む。

【0015】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約１５重量％のｍＰＥＧ～約３５重量％のｍＰＥＧ（例えば２５重量％）を含む。

【0016】

一実施形態では、ナノ粒子の平均サイズは約１００ｎｍ～約２００ｎｍである。

【0017】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧを含み、該ナノ粒子の平均サイズが約１００ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物を提供する。

【0018】

一実施形態では、ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比は約４０：６０～約６０：４０である。

【0019】

一実施形態では、ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比は約５０：５０である。

【0020】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧは約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧ（例えば３５重量％）を含む。

【0021】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約２５重量％のｍＰＥＧ～約４５重量％のｍＰＥＧ（例えば３５重量％）を含む。

【0022】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量は約１７，０００Ｄａ～約２７，０００Ｄａである。

【0023】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量は約２２，０００Ｄａである。

【0024】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧを含み、該ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量が約１７，０００Ｄａ～約２７，０００Ｄａである、組成物を提供する。

【0025】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧの分子量は約２２，０００Ｄａである。

【0026】

一実施形態では、ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比は約４０：６０～約６０：４０である。

【0027】

一実施形態では、ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比は約５０：５０である。

【0028】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧは約５重量％のｍＰＥＧ～約５０重量％のｍＰＥＧ（例えば３５重量％）を含む。

【0029】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧは約２５重量％のｍＰＥＧ～約４５重量％のｍＰＥＧ（例えば３５重量％）を含む。

【0030】

一実施形態では、ナノ粒子の平均サイズは約１００ｎｍ～約２００ｎｍである。

【0031】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）を含み、該ナノ粒子の平均サイズが約１００ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物を提供する。

【0032】

一実施形態では、ＰＬＡはエステル終端されている。

【0033】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は約１０，０００Ｄａ～約１８，０００Ｄａである。

【0034】

一実施形態では、ＰＬＡは酸終端されている。

【0035】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は約１８，０００Ｄａ～約２４，０００Ｄａである。

【0036】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）を含み、該ＰＬＡの分子量が約１０，０００Ｄａ～約１８，０００Ｄａである、組成物を提供する。

【0037】

一実施形態では、ＰＬＡはエステル終端されている。

【0038】

一実施形態では、ナノ粒子の平均サイズは約１００ｎｍ～約２００ｎｍである。

【0039】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）を含み、該ＰＬＡの分子量が約１８，０００Ｄａ～約２４，０００Ｄａである、組成物を提供する。

【0040】

一実施形態では、ＰＬＡは酸終端されている。

【0041】

一実施形態では、ナノ粒子の平均サイズは約１００ｎｍ～約２００ｎｍである。

【0042】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、界面活性剤をさらに含む、組成物を提供する。

【0043】

一実施形態では、界面活性剤は、各ナノ粒子の約０．１重量％～約５重量％を構成する。

【0044】

一実施形態では、界面活性剤はポリビニルアルコールである。

【0045】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、該ナノ粒子の平均サイズが、約１００ｎｍ、１０１ｎｍ、１０２ｎｍ、１０３ｎｍ、１０４ｎｍ、１０５ｎｍ、１０６ｎｍ、１０７ｎｍ、１０８ｎｍ、１０９ｎｍ、１１０ｎｍ、１１１ｎｍ、１１２ｎｍ、１１３ｎｍ、１１４ｎｍ、１１５ｎｍ、１１６ｎｍ、１１７ｎｍ、１１８ｎｍ、１１９ｎｍ、１２０ｎｍ、１２１ｎｍ、１２２ｎｍ、１２３ｎｍ、１２４ｎｍ、１２５ｎｍ、１２６ｎｍ、１２７ｎｍ、１２８ｎｍ、１２９ｎｍ、１３０ｎｍ、１３１ｎｍ、１３２ｎｍ、１３３ｎｍ、１３４ｎｍ、１３５ｎｍ、１３６ｎｍ、１３７ｎｍ、１３８ｎｍ、１３９ｎｍ、１４０ｎｍ、１４１ｎｍ、１４２ｎｍ、１４３ｎｍ、１４４ｎｍ、１４５ｎｍ、１４６ｎｍ、１４７ｎｍ、１４８ｎｍ、１４９ｎｍ、１５０ｎｍ、１５１ｎｍ、１５２ｎｍ、１５３ｎｍ、１５４ｎｍ、１５５ｎｍ、１５６ｎｍ、１５７ｎｍ、１５８ｎｍ、１５９ｎｍ、１６０ｎｍ、１６１ｎｍ、１６２ｎｍ、１６３ｎｍ、１６４ｎｍ、１６５ｎｍ、１６６ｎｍ、１６７ｎｍ、１６８ｎｍ、１６９ｎｍ、１７０ｎｍ、１７１ｎｍ、１７２ｎｍ、１７３ｎｍ、１７４ｎｍ、１７５ｎｍ、１７６ｎｍ、１７７ｎｍ、１７８ｎｍ、１７９ｎｍ、１８０ｎｍ、１８１ｎｍ、１８２ｎｍ、１８３ｎｍ、１８４ｎｍ、１８５ｎｍ、１８６ｎｍ、１８７ｎｍ、１８８ｎｍ、１８９ｎｍ、１９０ｎｍ、１９１ｎｍ、１９２ｎｍ、１９３ｎｍ、１９４ｎｍ、１９５ｎｍ、１９６ｎｍ、１９７ｎｍ、１９８ｎｍ、１９９ｎｍ、又は２００ｎｍである、組成物を提供する。

【0046】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、該ナノ粒子の平均サイズが、約１００ｎｍ～約１１０ｎｍ、約１０５ｎｍ～約１１５ｎｍ、約１１０ｎｍ～約１２０ｎｍ、約１１５ｎｍ～約１２５ｎｍ、約１２０ｎｍ～約１３０ｎｍ、約１２５ｎｍ～約１３５ｎｍ、約１３０ｎｍ～約１４０ｎｍ、約１３５ｎｍ～約１４５ｎｍ、約１３０ｎｍ～約１４０ｎｍ、約１３５ｎｍ～約１４５ｎｍ、約１４０ｎｍ～約１５０ｎｍ、約１４５ｎｍ～約１５５ｎｍ、約１５０ｎｍ～約１６０ｎｍ、約１５５ｎｍ～約１６５ｎｍ、約１６０ｎｍ～約１７０ｎｍ、約１６５ｎｍ～約１７５ｎｍ、約１７０ｎｍ～約１８０ｎｍ、約１７５ｎｍ～約１８５ｎｍ、約１８０ｎｍ～約１９０ｎｍ、約１８５ｎｍ～約１９５ｎｍ、又は約１９０ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物を提供する。

【0047】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、約５重量％～約１５重量％のダクチノマイシンを含む、組成物を提供する。

【0048】

本開示は、治療を必要とする対象における骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法であって、本明細書に記載の一つ又は複数のポリマーを含有する、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物のうちのいずれかの治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0049】

本開示は、治療を必要とする対象における癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の一つ又は複数のポリマーを含有する、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物のうちのいずれかの治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0050】

一実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌、及び／又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）である。

【0051】

本開示は、治療を必要とする対象における骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法であって、本明細書に記載の一つ又は複数のポリマーを含有する、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物のうちのいずれかの治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法は、少なくとも一つの追加の化学療法薬の治療有効量を投与することをさらに含み、該化学療法薬は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤と、ダクチノマイシンとのモル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１未満：１、又はその間の任意の比である、方法を提供する。

【0052】

本開示は、治療を必要とする対象における癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の一つ又は複数のポリマーを含有する、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物のうちのいずれかの治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法は、少なくとも一つの追加の化学療法薬の治療有効量を投与することをさらに含み、該化学療法薬は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤と、ダクチノマイシンとのモル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１未満：１、又はその間の任意の比である、方法を提供する。

【0053】

本明細書に記載の組成物のいずれも、対象における癌（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌、及び／又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ））の治療に使用するのに適しており、及び／又は対象におけるＭＤＳの治療に使用するのに適している。本開示の組成物のいずれも、全身的に、静脈内に、注入により、又は経口的に、対象に投与される。

【0054】

本開示の組成物のいずれも、１日１回、１週間に１回、１週間に２回、又は３週間に１回、対象に投与される。

【0055】

一部の実施形態では、本開示の組成物のいずれも、１日１回、１週間に１回、１週間に２回、又は３週間に１回、対象に投与され、該治療は、投与期間又は投与の間に、１週間、２週間、３週間、又は４週間の休薬期間をさらに含む。

【0056】

本開示の組成物のいずれも、１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回、対象に投与される。

【0057】

一部の実施形態では、本開示の組成物のいずれも、１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回、対象に投与され、該治療は、投与期間又は投与の間に、１週間、２週間、３週間、又は４週間の休薬期間をさらに含む。

【0058】

一実施形態では、本開示の方法は、対象が粘膜炎を発症しているか又は発症するリスクがある場合の方法を含む。

【0059】

本開示の方法は、対象が粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて同時に治療されている場合の方法を含む。

【0060】

本開示の方法は、対象が粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて、本明細書に記載の組成物のいずれかを投与する前に前処置されている場合の方法を含む。

【0061】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が約０．０５～約２．０ｍｇ・分／ＬのＡＵＣ_∞をもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0062】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が、約０．０５、０．１０、０．１５、０．２０、０．２５、０．３０、０．３５、０．４０、０．４５、０．５０、０．５５、０．６０、０．６５、０．７０、０．７５、０．８０、０．８５、０．９０、０．９５、１．０、１．０５、１．１０、１．１５、１．２０、１０．２５、１．３０、１．３５、１．４０、１．４５、１．５０、１．５５、１．６０、１．６５、１．７０、１．７５、１．８０、１．８５、１．９０、１．９５、又は２．０ｍｇ・分／ＬのＡＵＣ_∞をもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0063】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が約０．０５～約１．０ｍｇ・分／ＬのＡＵＣ_∞をもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0064】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が約１ｎｇ／ｍＬ～約３０ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘをもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0065】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が、約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、１５、１５．５、１６、１６．５、１７、１７．５、１８、１８．５、１９、１９．５、２０、２０．５、２１、２１．５、２２、２２．５、２３、２３．５、２４、２４．５、２５、２５．５、２６、２６．５、２７、２７．５、２８、２８．５、２９、２９．５、又は３０ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘをもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0066】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が約１ｎｇ／ｍＬ～約２０ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘをもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0067】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの治療有効量が、約１ｎｇ／ｍＬ～約５ｎｇ／ｍＬ、約５ｎｇ／ｍＬ～約１０ｎｇ／ｍＬ、約１０ｎｇ／ｍＬ～約１５ｎｇ／ｍＬ、又は約１５ｎｇ／ｍＬ～約２０ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘをもたらす場合の組成物及び方法を含む。

【0068】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約６０％～約９０％が、２日後、３日後、４日後、又は５日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0069】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、又は９０％が、２日後、３日後、４日後、又は５日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0070】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約６０％～約９０％が、３日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0071】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、又は９０％が、３日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0072】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約７０％～約８０％が、２日後、３日後、４日後、又は５日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0073】

一実施形態では、本開示の組成物及び方法は、ダクチノマイシンの約７０％～約８０％が、３日後にナノ粒子から放出される場合の組成物及び方法を含む。

【0074】

本開示はまた、本開示の組成物のいずれかを調製するためのプロセスであって、
（ｉ）ダクチノマイシンの有機溶媒溶液を、ポリマーの有機溶媒溶液に、ポリマー：ＡＰＩの比が１０：１の比（重量／重量）になるまで加えることと、
（ｉｉ）（ｉ）の溶液を均一になるまでボルテックスすることと、
（ｉｉｉ）９，０００～１０，０００Ｄａの分子量を有し８０％加水分解された２％（ｗ／ｗ）のポリビニルアルコールを含有した水相に、水相を高速でボルテックスしながら、（ｉｉ）の溶液を（ｉｉ）の溶液と水相の体積比が約１：７になるまで滴加して、ナノ粒子乳濁液を形成することと、
（ｉｖ）（ｉｉｉ）の乳濁液をボルテックスすることと、
（ｖ）（ｉｖ）の乳濁液を０℃で数分間超音波処理した後に、該乳濁液を２％（ｗ／ｗ）のポリビニルアルコールを含有した攪拌水相溶液に注ぎ、有機溶媒が蒸発するまで攪拌し続けることと、任意選択的に、
（ｖｉ）得られた組成物を１４，０００×ｒｐｍで約３０分間の遠心分離により精製することと、
（ｖｉｉ）（ｖｉ）の上澄み液を捨てた後に、得られたナノ粒子をｄｄＨ_２Ｏで洗浄し、１４，０００×ｒｐｍで３０分間遠心分離することと、
（ｖｉｉｉ）（ｖｉｉｉ）の生成物をｄｄＨ_２Ｏに再懸濁した後に、３５００×ｒｐｍで５分間遠心分離することと、
（ｉｘ）（ｖｉｉｉ）の上澄み液を採取して、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルタ（５０ｋＤカットオフ）により濃縮した後に、１４，０００×ｒｐｍで１０分間遠心分離して遊離ダクチノマイシンを除去することと、を含むプロセスを提供する。

【0075】

一実施形態では、本開示の組成物のいずれかを調製するためのプロセスにおいて、該組成物における遊離ダクチノマイシンの量は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの量の５重量％未満、４重量％未満、３重量％未満、２重量％未満、又は１重量％未満である。

【0076】

本開示は、ダクチノマイシン組成物、すなわち、ダクチノマイシンを含む組成物、例えば、ナノ粒子に封入された又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンを提供する。本明細書で使用される場合、ダクチノマイシンは、アクチノマイシン－Ｄ、Ａｃｔ－Ｄ、ＡｃｔＤ、又はＡｃｔ Ｄなどと互換的に称されてもよい。

【0077】

本開示は、治療を必要とする対象における癌を治療するための方法であって、本開示の組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌、又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）であり得る。特定の実施形態では、癌は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）であり得る。特定の実施形態では、ＡＭＬはＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ又は野生型ＡＭＬであり得る。特定の実施形態では、ＡＭＬはＮＰＭ１－変異型ＡＭＬであり得る。

【0078】

本開示は、治療を必要とする対象における骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法であって、本開示の組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0079】

特定の実施形態では、方法は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択される一つ又は複数の追加の化学療法薬の治療有効量を投与することをさらに含むことができる。特定の実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤にはエトポシドが含まれ得る。特定の実施形態では、白金系治療剤にはシスプラチンが含まれ得る。特定の実施形態では、アントラサイクリンには、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、又はイダルビシンが含まれ得る。特定の実施形態では、タキサンには、パクリタキセル又はドセタキセルが含まれ得る。特定の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤にはイマチニブが含まれ得る。特定の実施形態では、ヌクレオシド類似体には、シタラビン、ゲムシタビン、又はカペシタビンが含まれ得る。特定の実施形態では、ＦＬＴ３阻害剤には、Ｒｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、又はギルテリチニブが含まれ得る。特定の実施形態では、高メチル化阻害剤には、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリンが含まれ得る。

【0080】

特定の実施形態では、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、又はヌクレオシド類似体と、ダクチノマイシンとのモル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は約５：１である。特定の実施形態では、モル比は５：１である。

【0081】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本開示の組成物と、エトポシド、シトシンアラビノシド（ａｒａ－Ｃ、シタラビン）、及びオキサリプラティヌムのうちの少なくとも各一つとの治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0082】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本開示の組成物とシタラビンとの治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0083】

本開示の組成物は、抗炎症剤、抗酸化剤、又はこれらの組み合わせの治療有効量をさらに含んでもよい。本開示の方法は、抗炎症剤、抗酸化剤、又はこれらの組み合わせの治療有効量を対象に投与することをさらに含んでもよい。

【0084】

本開示の抗炎症剤には、ペントキシフィリン及び／又は非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）が含まれていてもよい。

【0085】

本開示の抗酸化剤には、ビタミンＣ、Ｎ－アセチルシステイン、アミホスチン、又はレチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）が含まれていてもよい。特定の実施形態では、本開示の抗酸化剤には、ビタミンＣ、レチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）、又はそれらの組み合わせが含まれ得る。

【0086】

特定の実施形態では、抗炎症剤には、ペントキシフィリン及び／又はＮＳＡＩＤｓが含まれ得、抗酸化剤には、ビタミンＣ、又はレチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）が含まれ得る。特定の実施形態では、抗炎症剤には、ペントキシフィリン及び／又はＮＳＡＩＤｓが含まれ得、抗酸化剤には、ビタミンＣ、レチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）、又はそれらの組み合わせが含まれ得る。

【0087】

特定の実施形態では、抗炎症剤、抗酸化剤、又はこれらの組み合わせと、ダクチノマイシンとのモル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である。

【0088】

本開示の方法は、本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物と、
（ａ）抗炎症剤、
（ｂ）抗酸化剤、及び
（ｃ）該抗炎症剤と該抗酸化剤の組み合わせのうちの少なくとも一つとの投与であって、該ダクチノマイシンと、該抗炎症剤、該抗酸化剤、又はそれらの任意の組み合わせとが同時に投与される、投与を含む。

【0089】

本開示の方法は、本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物と、
（ａ）抗炎症剤、
（ｂ）抗酸化剤、及び
（ｃ）該抗炎症剤と該抗酸化剤の組み合わせのうちの少なくとも一つとの投与であって、該ダクチノマイシンと、該抗炎症剤、該抗酸化剤、又はそれらの任意の組み合わせとが逐次的に投与される、投与を含む。

【0090】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、対象に全身的に投与されてもよい。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、静脈内に、又は注入によって投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、経口投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、錠剤又はカプセル剤の形態で投与され得る。

【0091】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、１～３０μｇ／ｋｇ／日（端点を含む）の組成物の治療有効量で投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、１０～２０μｇ／ｋｇ／日（端点を含む）又は１０～１５μｇ／ｋｇ／日（端点を含む）の組成物の治療有効量で投与され得る。

【0092】

特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、約１μｇ／ｋｇ／日、２μｇ／ｋｇ／日、３μｇ／ｋｇ／日、４μｇ／ｋｇ／日、５μｇ／ｋｇ／日、６μｇ／ｋｇ／日、７μｇ／ｋｇ／日、８μｇ／ｋｇ／日、９μｇ／ｋｇ／日、１０μｇ／ｋｇ／日、１１μｇ／ｋｇ／日、１２μｇ／ｋｇ／日、１３μｇ／ｋｇ／日、１４μｇ／ｋｇ／日、１５μｇ／ｋｇ／日、１６μｇ／ｋｇ／日、１７μｇ／ｋｇ／日、１８μｇ／ｋｇ／日、１９μｇ／ｋｇ／日、２０μｇ／ｋｇ／日、２１μｇ／ｋｇ／日、２２μｇ／ｋｇ／日、２３μｇ／ｋｇ／日、２４μｇ／ｋｇ／日、２５μｇ／ｋｇ／日、２６μｇ／ｋｇ／日、２７μｇ／ｋｇ／日、２８μｇ／ｋｇ／日、２９μｇ／ｋｇ／日、又は３０μｇ／ｋｇ／日の組成物の治療有効量で投与され得る。

【0093】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、約５μｇ／ｋｇ／日～約１５μｇ／ｋｇ／日の組成物の治療有効量で投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、５μｇ／ｋｇ／日～１５μｇ／ｋｇ／日の組成物の治療有効量で投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、約１２．５μｇ／ｋｇ／日の組成物の治療有効量で投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、１２．５μｇ／ｋｇ／日の組成物の治療有効量で投与され得る。

【0094】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、つまりナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、１日１回投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、１日２回投与され得る。

【0095】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、１週間に２回投与され得る。ある特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、１週間に１回投与され得る。ある特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、２週間に１回投与され得る。

【0096】

治療過程にわたって投与される総投与量は、投与毎に投与される量、投与頻度、及び／又は治療期間の長さに依存することになる。

【0097】

例えば、投与される組成物の量が１０μｇ／ｋｇ／日、投与頻度が１日１回、治療期間の長さが１週間である場合、総投与量は７０μｇ／ｋｇとなるであろう。

【0098】

例えば、投与される組成物の量が１０μｇ／ｋｇ／日、投与頻度が１週間に２回（例えば、１日目と４日目）、治療期間の長さが１週間である場合、その週の間に３５μｇ／ｋｇで２回供給され、総投与量は７０μｇ／ｋｇとなるであろう。

【0099】

例えば、投与される組成物の量が１０μｇ／ｋｇ／日、投与頻度が１週間に１回、治療期間の長さが１週間である場合、その週の間に７０μｇ／ｋｇで１回供給され、総投与量は７０μｇ／ｋｇとなるであろう。

【0100】

例えば、投与される組成物の量が１０μｇ／ｋｇ／日、投与頻度が２週間に１回、治療期間の長さが２週間である場合、その２週間の間に１回供給され、総投与量は１４０μｇ／ｋｇとなるであろう。

【0101】

対象に投与される総投与量の決定は、当業者の常套的なレベルの範囲内である。

【0102】

ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、少なくとも１サイクル投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、少なくとも２サイクル投与され得る。１サイクルは、本開示の一態様では、本開示の組成物を用いた連続５日の治療を含み得る。一実施形態では、１サイクルは、本開示の組成物を用いた、毎日、１週間に２回、１週間に１回、又は２週間に１回の治療を含み得る。

【0103】

特定の実施形態では、治療は、投与間及び／又は治療サイクル間に、１週間、２週間、３週間、４週間、又はそれを超える週の休薬期間をさらに含む。一実施形態では、二つの連続した治療サイクルの間の休薬期間は、少なくとも２週であり得る。一実施形態では、二つの連続した治療サイクルの間の休薬期間は、少なくとも４週であり得る。

【0104】

本開示の方法は、対象に輸血を投与する工程をさらに含んでもよい。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物と、輸血とは、同時に投与され得る。あるいは、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物と輸血とは逐次的に投与され得る。特定の実施形態では、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、輸血の前に投与され得る。例えば、ダクチノマイシンを含む組成物の投与サイクルを完了してもよく、輸血を、ダクチノマイシン療法サイクルの後、又はダクチノマイシン療法の二つのサイクル間に投与してもよい。特定の実施形態では、輸血は、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物を用いた治療の少なくとも１サイクル後に投与され得る。

【0105】

本開示の対象は、ダクチノマイシンを用いた治療の開始前又は開始後に粘膜炎を患っている場合がある。本開示の対象は、粘膜炎を発症しやすい傾向にあるか、又は発症するリスクがあり得る。対象が粘膜炎を既に発症しているか、又は発症する可能性がある特定の実施形態では、ダクチノマイシン又はダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量は、対象において粘膜炎を誘発するか又は悪化させることなく、癌（例えば、ＡＭＬ、又はＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ）を治療するのに十分な量であり得る。

【0106】

対象が粘膜炎を既に発症しているか、又は発症する可能性がある特定の実施形態では、ダクチノマイシン又はダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量は、対象において粘膜炎を誘発するか又は悪化させることなく、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するのに十分な量であり得る。

【0107】

対象が粘膜炎を発症する可能性があるか、又は粘膜炎に感受性を有する可能性がある特定の実施形態では、本開示の方法は、粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて対象に併用療法を行うことを含む。

【0108】

対象が粘膜炎を既に発症している特定の実施形態では、本開示の方法は、粘膜炎の症状に対して、一つ又は複数の抗炎症剤及び／又は抗酸化剤を用いて、本明細書に記載の組成物のいずれかを投与する前に対象に前処置を行うことを含む。

【0109】

本開示の方法によると、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、望ましい最先端の療法として、新規診断済及び／又は以前未治療のＡＭＬを患う対象に対して投与されてもよい。特定の実施形態では、対象は、強化化学療法に不適応であり得る。特定の実施形態では、対象は少なくとも５０歳であり得る。特定の実施形態では、対象は少なくとも６０歳であり得る。特定の実施形態では、対象は少なくとも７０歳であり得る。特定の実施形態では、強化化学療法に不適応である可能性のある対象として、以下に限定されないが、免疫系不全、血液障害、腸管障害、又は感染を有し得る対象が挙げられる。

【0110】

本開示の方法によると、対象は、本開示のダクチノマイシン組成物の投与前、別の癌療法には反応していなかった。特定の実施形態では、他の癌療法にはアザシチジンが含まれている。特定の実施形態では、対象に、他の癌療法の後に再発が見られ得る。特定の実施形態では、本開示のダクチノマイシン組成物のうちのいずれかを用いて治療した後に、対象に寛解が得られ得る。特定の実施形態では、寛解という用語には、形態学的寛解及び／又は分子的寛解が含まれる。

【0111】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量は、１ｎｇ／ｍＬ～３０ｎｇ／ｍＬ（端点を含む）のＣ_ｍａｘをもたらす。例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量は、約１ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ、３ｎｇ／ｍＬ、４ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、６ｎｇ／ｍＬ、７ｎｇ／ｍＬ、８ｎｇ／ｍＬ、９ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ、１１ｎｇ／ｍＬ、１２ｎｇ／ｍＬ、１３ｎｇ／ｍＬ、１４ｎｇ／ｍＬ、１５ｎｇ／ｍＬ、１６ｎｇ／ｍＬ、１７ｎｇ／ｍＬ、１８ｎｇ／ｍＬ、１９ｎｇ／ｍＬ、２０ｎｇ／ｍＬ、２１ｎｇ／ｍＬ、２２ｎｇ／ｍＬ、２３ｎｇ／ｍＬ、２４ｎｇ／ｍＬ、２５ｎｇ／ｍＬ、２６ｎｇ／ｍＬ、２７ｎｇ／ｍＬ、２８ｎｇ／ｍＬ、２９ｎｇ／ｍＬ、又は３０ｎｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘをもたらす。

【0112】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンの治療有効量は、１ｎｇ／ｍＬ～２０ｎｇ／ｍＬ（端点を含む）のＣ_ｍａｘをもたらす。

【0113】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンの治療有効量は、１０ｎｇ／ｍＬ～１５ｎｇ／ｍＬの間である。

【0114】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンの治療有効量は、約０．０５～２．０ｍｇ・分／ＬのＡＵＣ_∞をもたらす。一実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンの治療有効量は、約０．０５～約１．０ｍｇ・分／ＬのＡＵＣ_∞をもたらす。

【0115】

本開示は、ダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、該ダクチノマイシンがナノ粒子に封入され、及び／又はナノ粒子と会合しており、一つ又は複数の追加の化学療法薬の治療有効量をさらに含み、該化学療法薬が、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該化学療法薬がナノ粒子に封入されている、及び／又はナノ粒子と会合している、組成物を提供する。

【0116】

本開示は、ダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、該ダクチノマイシンがナノ粒子に封入され、及び／又はナノ粒子と会合しており、一つ又は複数の追加の化学療法薬の治療有効量をさらに含み、該化学療法薬が、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該化学療法薬がナノ粒子に封入され、及び／又はナノ粒子と会合しており、トポイソメラーゼ阻害剤にはエトポシドが含まれていてもよく、白金系治療剤にはシスプラチンが含まれていてもよく、アントラサイクリンには、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、若しくはイダルビシンが含まれていてもよく、タキサンには、パクリタキセル若しくはドセタキセルが含まれていてもよく、チロシンキナーゼ阻害剤にはイマチニブが含まれていてもよく、ヌクレオシド類似体には、シタラビン、ゲムシタビン、若しくはカペシタビンが含まれていてもよく、ＦＬＴ３阻害剤にはＲｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、若しくはギルテリチニブが含まれてもいてもよく、並びに／又は高メチル化阻害剤には、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリンが含まれていてもよい、組成物を提供する。

【0117】

本開示は、ダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、該ダクチノマイシンがナノ粒子に封入され、及び／又はナノ粒子と会合しており、化学療法薬の治療有効量をさらに含み、該化学療法薬が、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、又はヌクレオシド類似体と、ダクチノマイシンとのモル比が、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である、組成物を提供する。特定の実施形態では、モル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は約５：１である。特定の実施形態では、モル比は５：１である。

【0118】

本開示は、ダクチノマイシン及びエトポシドの治療有効量を含む組成物であって、該ダクチノマイシン及びエトポシドがナノ粒子に封入され、及び／又はナノ粒子と会合しており、エトポシドの治療有効量が５０μｇ／ｍＬ未満のＣ_ｍａｘをもたらす、組成物を提供する。特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したエトポシドの治療有効量は、１～５０μｇ／ｍＬ（端点を含む）の間にＣ_ｍａｘをもたらす。

【0119】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したエトポシドの治療有効量は、３０～４５ｍｇ／ｋｇ／日の間である。

【0120】

特定の実施形態では、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したエトポシドの治療有効量は、約５０～約６０μｇ・時／ｍＬ／時のＡＵＣ_∞をもたらす。

【0121】

本開示は、ダクチノマイシン及びエトポシドの治療有効量を含む組成物であって、該ダクチノマイシン及びエトポシドがナノ粒子に封入されており、エトポシドとダクチノマイシンのモル比が、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である、組成物を提供する。特定の実施形態では、モル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は約５：１である。特定の実施形態では、モル比は５：１である。

【0122】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌、又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）である。一実施形態では、癌は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。好ましい実施形態では、癌はＮＰＭ１－変異型ＡＭＬである。

【0123】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該組成物が１週間に１回投与される、方法を提供する。特定の実施形態では、組成物は１週間に２回投与される。特定の実施形態では、組成物は２週間に１回投与される。特定の実施形態では、組成物は１か月に１回投与される。

【0124】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該組成物が１週間に１回、１週間に２回、２週間に１回、又は１か月に１回投与され、該組成物が、１週間、２週間、３週間、４週間、又はそれを超える週の休薬期間の後に再度投与される、方法を提供する。一実施形態では、二つの連続した治療サイクルの間の休薬期間は、少なくとも２週であり得る。一実施形態では、二つの連続した治療サイクルの間の休薬期間は、少なくとも４週であり得る。

【0125】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、抗炎症剤、抗酸化剤、又はそれらの組み合わせの治療有効量を対象に投与することをさらに含む、方法を提供する。特定の実施形態では、抗炎症剤にはペントキシフィリン及び／又はＮＳＡＩＤｓが含まれる。特定の実施形態では、抗酸化剤には、ビタミンＣ、及び／又はレチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）が含まれる。特定の実施形態では、抗炎症剤には、ペントキシフィリン及び／又はＮＳＡＩＤｓが含まれ、抗酸化剤には、ビタミンＣ、又はレチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）が含まれる。

【0126】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、抗炎症剤、抗酸化剤、又はそれらの組み合わせの治療有効量を対象に投与することをさらに含み、該抗炎症剤、抗酸化剤、又はそれらの組み合わせと、ダクチノマイシンとのモル比が、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である、方法を提供する。

【0127】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、抗炎症剤、抗酸化剤、又はそれらの組み合わせの治療有効量を該対象に投与することをさらに含み、該組成物と、
（ａ）抗炎症剤、
（ｂ）抗酸化剤、及び
（ｃ）該抗炎症剤と該抗酸化剤の組み合わせ、のうちの少なくとも一つとであり、
該ダクチノマイシンと、該抗炎症剤、該抗酸化剤、又はそれらの組み合わせとが、同時に投与される、方法を提供する。

【0128】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、抗炎症剤、抗酸化剤、又はそれらの組み合わせの治療有効量を該対象に投与することをさらに含み、該組成物と、
（ａ）抗炎症剤、
（ｂ）抗酸化剤、及び
（ｃ）該抗炎症剤と該抗酸化剤の組み合わせ、のうちの少なくとも一つとであり、
該ダクチノマイシンと、該抗炎症剤、該抗酸化剤、又はそれらの組み合わせとが、逐次的に投与される、方法を提供する。

【0129】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該組成物が薬学的に許容できる担体をさらに含む、方法を提供する。

【0130】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該組成物が薬学的に許容できる担体をさらに含み、該組成物が全身的に投与される、方法を提供する。特定の実施形態では、組成物は静脈内に投与される。特定の実施形態では、組成物は注入により投与される。

【0131】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該組成物が薬学的に許容できる担体をさらに含み、該組成物が経口投与される、方法を提供する。特定の実施形態では、組成物は錠剤の形態である。特定の実施形態では、組成物はカプセル剤の形態である。

【0132】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、該対象に輸血を投与することをさらに含む、方法を提供する。特定の実施形態では、組成物と輸血とは同時に投与される。特定の実施形態では、組成物と輸血とは逐次的に投与される。特定の実施形態では、組成物は輸血の前に投与される。特定の実施形態では、輸血は、組成物を用いた治療の少なくとも１サイクル後に投与される。

【0133】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該対象が粘膜炎を有する、方法を提供する。一実施形態では、治療は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択される少なくとも一つの追加の化学療法薬を用いた治療をさらに含む。

【0134】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該対象が粘膜炎を発症する場合があるか、又は粘膜炎に感受性がある、方法を提供する。一実施形態では、治療は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択される少なくとも一つの追加の化学療法薬を用いた治療をさらに含む。

【0135】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該対象が少なくとも５０歳である、方法を提供する。ある特定の実施形態では、対象は少なくとも６０歳である。ある特定の実施形態では、対象は少なくとも７０歳である。

【0136】

本開示は、治療を必要とする対象における癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該対象が、該組成物の投与前、別の癌療法には反応しなかった、方法を提供する。特定の実施形態では、他の癌療法はアザシチジンである。

【0137】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該対象には、他の癌療法の後に再発が見られていた、方法を提供する。特定の実施形態では、他の癌療法はアザシチジンである。特定の実施形態では、寛解は形態学的寛解である。特定の実施形態では、寛解は分子的寛解である。

【0138】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択される一つ又は複数の追加の化学療法薬の治療有効量を投与することをさらに含む、方法を提供する。

【0139】

特定の実施形態では、白金系治療剤にはシスプラチンが含まれる。

【0140】

特定の実施形態では、アントラサイクリンには、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、又はイダルビシンが含まれる。

【0141】

特定の実施形態では、タキサンには、パクリタキセル又はドセタキセルが含まれる。

【0142】

特定の実施形態では、ヌクレオシド類似体には、シタラビン、ゲムシタビン、又はカペシタビンが含まれる。

【0143】

特定の実施形態では、ＦＬＴ３阻害剤には、Ｒｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、又はギルテリチニブが含まれる。

【0144】

特定の実施形態では、高メチル化阻害剤には、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリンが含まれる。

【0145】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法は、少なくとも一つの追加の化学療法薬の治療有効量を投与することをさらに含み、該化学療法薬は、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤からなる群から選択され、該トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、又は高メチル化阻害剤と、ダクチノマイシンとのモル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、又はその間の任意の比である、方法を提供する。特定の実施形態では、モル比は、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、又はその間の任意の比である。特定の実施形態では、モル比は約５：１である。特定の実施形態では、モル比は５：１である。

【0146】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、本明細書に記載の任意の組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含み、該方法が、レチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）、バルプロ酸、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｐ５３安定剤、又はそれらの任意の組み合わせを対象に投与することをさらに含む、方法を提供する。

【0147】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、ダクチノマイシンを含む組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供する。

【0148】

本開示は、ＡＭＬの治療、特にＮＰＭ１－変異型ＡＭＬの治療であって、ＡＭＬの臨床症状に加えて基礎病理に対処する治療のための組成物及び方法を提供する。（Ｄｏｈｎｅｒ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１５，３７３：１１３６－１１５２）。

【0149】

本開示は、治療を必要とする対象における、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療するための方法であって、ダクチノマイシンを含む組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物の治療有効量を、該対象に投与することを含む方法を提供し、好ましい方法では、ＡＭＬはＮＰＭ１－変異型ＡＭＬである。特定の実施形態では、ＮＰＭ１－変異型ＡＭＬは、ＦＬＴ３内部タンデム重複リピートを有していない。

【0150】

本開示の方法によると、組成物の治療有効量は、１～３０μｇ／ｋｇ／日（端点を含む）又は１～２０μｇ／ｋｇ／日（端点を含む）である。低用量は、長期の間にわたって効果的である。例えば、１μｇ／ｋｇ／日の用量を、長期連日投与及び／又は維持投与に使用して、再発を防ぐことができる。高用量は、短期の間にわたって安全に使用され得る。例えば、３０μｇ／ｋｇ／日を、１日使用した後に、用量を減少させるか、又は未治療の期間、例えば、１日治療サイクル間に未治療の２週間の期間を設けることができる。あるいは、高用量を使用して、血漿レベルを最小有効閾値を超えるまで迅速に増加させるか又は急増させ、翌日も続けるか、又は低用量での未治療の期間を設けて、ダクチノマイシンの血漿濃縮を維持することができる。本開示の方法の特定の実施形態では、組成物の治療有効量は約５μｇ／ｋｇ／日～約１５μｇ／ｋｇ／日、又は５μｇ／ｋｇ／日～１５μｇ／ｋｇ／日である。あるいは、組成物の治療有効量は約１２．５μｇ／ｋｇ／日であるか、又は１２．５μｇ／ｋｇ／日である。組成物の治療有効量は、１日１回若しくは少なくとも１日１回、１週間に２回、１週間に１回、又は２週間に１回投与され得る。

【0151】

本開示の方法によると、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物は、望ましい最先端の療法として、新規診断済及び／又は以前未治療のＡＭＬを有し、強化化学療法に不適応であるか又は高齢者である（すなわち６０歳以上である）対象に対して投与されてもよい。強化化学療法に不適応であり得る対象として、以下に限定されないが、免疫系不全、血液障害、腸管障害、又は感染を有する対象が挙げられる。

【0152】

本開示の方法によると、ダクチノマイシン組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物で治療された対象には、続いて寛解が得られてもよい。本明細書で使用する場合、寛解という用語には、形態学的寛解及び／又は分子的寛解が含まれる。

【0153】

本開示の方法のいずれかは、対象に、レチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）、バルプロ酸、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｐ５３安定剤、又はこれらの任意の組み合わせを投与することをさらに含んでもよい。

【0154】

本開示は、ダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ダクチノマイシンの治療有効量が、約１５μｇ／ｋｇ／日であるか又は１５μｇ／ｋｇ／日である、組成物を提供する。

【0155】

本開示は、治療を必要とする対象における、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療するための方法、及び／又は癌を治療するための方法であって、ダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物、例えば、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物を対象に投与することを含み、ダクチノマイシンの治療有効量が、約１５μｇ／ｋｇ／日であるか又は１５μｇ／ｋｇ／日である、方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0156】

【図1A】図１Ａ～図１Ｂは、ダクチノマイシンの経時的な全身濃度を示す各グラフである。これらのグラフのデータは、ダクチノマイシン１ｍｇ／ｍ^２（２７μｇ／ｋｇ）を投与した１６歳～５３歳の２１人の患者から取得したものである。（Ｈｉｌｌ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．（２０１４）５３：７４１－７５１；及びＷａｌｓｈ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｂｒ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ（２０１６）８１：９８９－９９８を参照）

【図1B】同上。

【図2】図２は、Ｃ_ｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）（グラフＡ）とＡＵＣ_{０－６時間}（ｍｇ／Ｌ・分）（グラフＢ）をダクチノマイシン投与量（ｍｇ／ｍ^２）の関数として示す一対のグラフである。

【図3】図３は、ＮＰＭ１－変異型細胞株ＯＣＩ／ＡＭＬ３におけるＡｃｔ－Ｄにより誘発された核小体の崩壊とアポトーシスを示す一連の写真である。ＮＰＭ１＝ヌクレオフォスミン、ＤＡＰＩ＝４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール－ＤＮＡのＡ－Ｔに富む領域に強く結合する蛍光染色剤。

【図4】図４は、患者Ｍ．Ｍ．のインビトロ又はインビボで接触したＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ腫瘍細胞へのダクチノマイシン投与によるｐ５３の活性化を示すウェスタンブロット（処置後に生検用に採取した細胞）の一連の写真である（患者は、６０歳の女性で、汎血球減少症、骨髄の広範囲の芽細胞浸潤があり、ＮＰＭ１－変異型ＡＭＬと診断、心筋梗塞の既往歴による低左室駆出率のために化学療法に不適応、最初にアザシチジンで処置したが疾患が進行したため、アクチノマイシンＤ（心毒性無のため）を用いて連続５日の２サイクルにて各１２．５μｇ／ｋｇで処置された）。

【図5】図５は、ＴｒｕＳｉｇｈｔ Ｍｙｅｌｏｉｄ Ｐａｎｅｌによるシーケンシングを示すチャートである。－変異遺伝子（＊）。患者Ｍ．Ｍ．ＮＭＰ１、ＩＤＨ２、及びＳＴＡＧ２の変異はＡｃｔ－Ｄ後に検出されていない。

【図6A】図６Ａ～図６Ｂはダクチノマイシン処置前における再発時の骨髄生検のヘマトキシリン・エオシン染色（Ｈ－Ｅ染色）を示す一連の写真である。ＰＧＭ１＝ホスホグルコムターゼ１、ＭＰＯ＝ミエロペルオキシダーゼ。

【図6B】同上。

【図7】図７は、ダクチノマイシンを１５μｇ／ｋｇで５日間投与された対象の間質性肺炎を示すコンピューター断層撮影（ＣＴ）スキャンの写真である。

【図8】図８は、ダクチノマイシン処置の１サイクル後の血液学的回復を示す一対のグラフである。

【図9A】図９Ａ～図９Ｂは、ダクチノマイシン単体を用いた処置前後の骨髄（ＢＭ）検査結果を示す一対の写真である。ＡｃｔＤで処置した後のＢＭ検査は、白血病芽細胞の浸潤の著しい減少と、部分的正常な造血回復とを示した。

【図9B】同上。

【図10】図１０は、ダクチノマイシンと低用量のシタラビン（ＬＤＡＣ）とを用いた処置による相同的回復を示す一対のグラフである。全血球計算（ＣＢＣ）ｄ＝４６、白血球４１３０／ｍｍ^３、好中球割合（Ｎ＝６６％）、ヘモグロビン（Ｈｂ）＝７．７ｇ／ｄＬ、血小板（ＰＬＴ）カウント１９２．０００／ｍｍ^３。エリスロポエチン（ＥＰＯ）投与量＝１７．８ｍＵｌ／ｍｌ（異常反応）。ダルベポエチンαで処置を開始した患者。

【図11】図１１は、白血病芽細胞のクリアランスを示す一連のフローサイトメトリープロットである。

【図12】図１２は、ダクチノマイシンとＬＤＡＣとを用いた処置（右）前後の骨髄（ＢＭ）検査結果を示す一対の写真であり、正常な３本線の造血回復が見られる完全な血液学的寛解を示している。

【図13】図１３は、ダクチノマイシンとＬＤＡＣとでの処置後の骨髄生検結果を示す一連の写真である。

【図14】図１４は、赤血球生成の回復を示す写真である。ＧｌｙＣ＝セリンヒドロキシメチルトランスフェラーゼ、細胞質型。

【図15】図１５は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ（ＰＬＡ）とを用いて調製した組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図16】図１６は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％ｍＰＥＧ）（ＰＬＡ－ｍＰＥＧ）とを用いて調製した組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図17】図１７は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ（ＰＬＡ）とを用いて調製した組成物であって、組成物が界面活性剤を含まない２００ｎｍの酢酸セルロース膜フィルタを通過した後（下の線）の、組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図18】図１８は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％ｍＰＥＧ）（ＰＬＡ－ｍＰＥＧ）とを用いて調製した組成物であって、組成物が界面活性剤を含まない２００ｎｍの酢酸セルロース膜フィルタを通過した後（上の線）の、組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図19】図１９は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓとを用いて調製した組成物であって、種々の条件で組成物の安定性を評価した後の組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。（Ｔ０_＝

【図20】図２０～図２１は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈとを用いて調製した組成物であって、種々の条件で組成物の安定性を評価した後の組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図21】同上。

【図22】図２２～図２３は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）とを用いて調製した組成物であって、種々の条件で組成物の安定性を評価した後の組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図23】同上。

【図24】図２４～図２５は、ダクチノマイシンとＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％）とを用いて調製した組成物であって、種々の条件で組成物の安定性を評価した後の組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図25】同上。

【図26】図２６は、ダクチノマイシンとペグ化されたポリＤ，Ｌラクチドとを用いて調製した組成物であって、種々の条件で組成物の安定性を評価した後の組成物のナノ粒子サイズ分布を示すグラフである。

【図27】図２７は、ダクチノマイシンと、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％）とで調製された４種の組成物と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンのインビトロでの放出を示す一連のグラフである。

【図28A】図２８Ａ～図２８Ｄは、本出願の４種の組成物を４℃で２か月保管した後の、該組成物からのダクチノマイシンのインビトロでの放出を示す一連のグラフである。（図２８Ａ：１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、図２８Ｂ：Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％）、図２８Ｃ：Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、図２８Ｄ：Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ）。

【図28B】同上。

【図28C】同上。

【図28D】同上。

【図29】図２９は、本出願の４種の組成物（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％））と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンでインビボ処置した後のラット体重への経時的な作用を示す一連のグラフである。

【図30】図３０は、本出願の４種の組成物（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％））と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンでインビボ処置した後のＣ_ＭＡＸへの経時的な作用を示す一連のグラフである。

【図31】図３１は、本出願の４種の組成物（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％））と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンでインビボ処置した後のＣ_ＭＡＸへの経時的な作用を示す一連のグラフである。

【図32】図３２は、本出願の４種の組成物（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％））と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンでインビボ処置した後のラット体重への経時的な作用を示す一連のグラフである。

【図33】図３３は、本出願の４種の組成物（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％））と比較した場合の、遊離ダクチノマイシンでインビボ処置した後の生存率の経時変化を示す一連のグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0157】

ＮＰＭ１－変異型の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、成人においてＡＭＬの３分の１のケースを占める特有の白血病である。ＮＰＭ１は、正常な核小体の完全性及び機能に極めて重要なタンパク質である。この疾患では非変異ＮＰＭ１が低レベルであるため（ＮＰＭ１変異による非変異ＮＰＭ１のハプロ不全及び細胞質保持に起因）、ＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ細胞の核小体は、核小体のストレス反応を誘発する薬剤の影響を受けやすい場合がある。腫瘍抑制因子ｐ５３は、タンパク質のダウンレギュレーション又は機能喪失型変異のいずれかによって、癌において不活性化されることが多い。したがって、ｐ５３を安定化させれば、野生型（ＷＴ）ｐ５３を保有する癌を治療することができる。本明細書では、ＳＩＲＴ１阻害剤Ｔｅｎｏｖｉｎ－１及びポロ様キナーゼ１（Ｐｌｋ１）阻害剤ＢＩ２５３６を用いて、ｐ５３を安定化させた。（Ｃｈｅｎ，Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ ２０１６，１５（６）：８４０－８４９を参照）。核小体ストレスに対するｐ５３依存性反応についてもｐ５３非依存性反応についても報告されている。重要なことには、ｐ５３媒介性核小体ストレス反応がＮＰＭ１－変異型ＡＭＬで保持されることであり、これは、ＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ細胞がｐ５３変異又は欠失を持たないことによる。

【0158】

活性を示す可能性がある薬剤の中で、本開示がダクチノマイシンに着目しているのは、これが、ＲＮＡポリメラーゼＩの阻害によりリボソーム生合成を妨害することによって核小体ストレスを誘発するからである。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍やいくつかの他の腫瘍に活性を示す。これに対し、本開示は、ダクチノマイシンをＡＭＬに使用した最初の研究を記述している。

【0159】

さらに、本開示は、ダクチノマイシンを含む組成物を投与することを含む骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を治療する方法を提供する。

【0160】

本開示はまた、ダクチノマイシンを含む組成物を投与することを含む癌を治療する方法を提供する。特定の実施形態では、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌、又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）であり得る。特定の実施形態では、癌は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）であり得る。特定の実施形態では、ＡＭＬはＮＰＭ１－変異型ＡＭＬ又は野生型ＡＭＬであり得る。特定の実施形態では、ＡＭＬはＮＰＭ１－変異型ＡＭＬであり得る。

【0161】

本開示の方法によると、ダクチノマイシンを含む本開示の組成物は、望ましい最先端の療法として、新規診断済及び／又は以前未治療の癌を有し、強化化学療法に不適応であるか又は高齢者である（すなわち６０歳以上である）対象に対して投与されてもよい。強化化学療法に不適応であり得る対象として、以下に限定されないが、免疫系不全、血液障害、腸管障害、又は感染を有する対象が挙げられる。

【0162】

本開示の特定の実施形態では、ダクチノマイシン組成物は、望ましい最先端の療法として、新規診断済及び／又は以前未治療のＡＭＬを有し、強化化学療法に不適応であるか又は高齢者である（すなわち６０歳以上である）対象に対して投与されてもよい。強化化学療法に不適応であり得る対象として、以下に限定されないが、免疫系不全、血液障害、腸管障害、又は感染を有する対象が挙げられる。

【0163】

急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）
ＡＭＬ急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、代替的に、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性骨髄性白血病（ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、急性顆粒球性白血病、又は急性非リンパ性白血病と称される容態の最も一般的な名前である。（Ｆａｌｉｎｉ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．“Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ ｎｕｃｌｅｏ－ｐｈｏｓｍｉｎ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ａ ｎｏｒｍａｌ ｋａｒｙｏ－ｔｙｐｅ”Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２００５；３５２：２５４－２６６；Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｎｅｔｗｏｒｋ．“Ｇｅｎｏｍｉｃ ａｎｄ ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃ ｌａｎｄｓｃａｐｅｓ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｄｅ ｎｏｖｏ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ“Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１３；３６８：２０５９－２０７４を参照）。

【0164】

ＡＭＬは初めは骨髄に発症する。しかしながら、ＡＭＬ細胞は血液中に直ちに進行する。一旦対象の血液中に存在するようになると、癌性細胞は、リンパ節、肝臓、脾臓、中枢神経系（脳及び／又は脊髄）、皮膚、及び／又は精巣に限定されない身体のあらゆる部分に広がる可能性がある。

【0165】

白血病の急性型としては、癌細胞は、正常状態下で急速に分裂して多くの血球型を提供する幹細胞様の性質を有した、未熟血球である。これらの細胞が発癌性形質転換を起こしている場合、急速分裂することで、成熟細胞型及び／又は最終分化細胞型に影響を及ぼす癌よりも速い速度で癌細胞が生じる。

【0166】

白血病の骨髄型としては、癌細胞は、正常状態下で分裂して、赤血球と、白血球と、血小板を生成する巨核球とに分化する細胞を生成する幹様骨髄細胞から形質転換する。これらの細胞が発癌性形質転換を起こしている場合、未熟骨髄細胞は、直ちに分裂して、その後、通常は循環血液になるはずの赤血球、白血球、及び血小板の数及び／又は割合を増やすことはない。その結果、発癌状況下では、骨髄細胞は骨で分裂かつ凝集し、これらの細胞の産生が増えることで、骨髄における健康な非癌性細胞の正常機能を有する供給源と競合し、またその正常機能を妨害する。さらに、発癌状況下では、骨髄細胞は、血液を介して一つ又は複数の器官に正常レベルの酸素を運ぶのに十分な量の赤血球を産生せず、感染に対する適正な免疫反応を開始させるのに十分な量の白血球を産生せず、及び／又は血液凝固を促進するのに十分な量の血小板を産生しないことになる。

【0167】

本開示の対象は、ＡＭＬを発症する一つ又は複数のリスク因子を呈し得る。リスク因子の例として、以下に限定されないが、癌の個人歴及び／又は家族歴、加齢、男性であること、化学療法及び／又は放射線での治療歴、放射線への曝露（原子炉事故の生存者を含む）、有害化学物質（例えばベンゼンを含む）への曝露、過去又は現在の喫煙の習慣、副流煙への曝露、他の血液障害（例えば、脊髄形成異常症、真性多血症、及び／又は血小板血症を含む）の個人歴、遺伝性障害（例えば、ダウン症候群を含む）が挙げられる。本開示の対象が任意の性別であってもよいが、遺伝的に男性である対象は、遺伝的に女性である対象に比べてＡＭＬを発症するリスクが高くなっている。本開示の対象は任意の年齢であってもよいが、少なくとも４０歳、少なくとも５０歳、少なくとも６０歳、少なくとも７０歳、少なくとも８０歳、又は少なくとも９０歳の対象は、若年の対象に比べてＡＭＬを発症するリスクが高くなっている。

【0168】

本開示の対象は、ＡＭＬの一つ又は複数の徴候又は症状を呈する場合があり、この徴候には、以下に限定されないが、熱、骨痛、嗜眠及び／又は疲労、息切れ、青白い皮膚、頻発する感染症、易傷性、異常出血（例えば、鼻及び歯茎、並びに／又は血液凝固の低下若しくは不十分な血液凝固由来）が挙げられる。

【0169】

本開示の方法によると、ダクチノマイシンは、望ましい最先端の療法として、新規診断済及び／又は以前未治療のＡＭＬを有し、強化化学療法に不適応であるか又は高齢者である（すなわち６０歳以上である）対象に対して投与されてもよい。強化化学療法に不適応であり得る対象として、以下に限定されないが、免疫系不全、血液障害、腸管障害、又は感染を有する対象が挙げられる。

【0170】

本開示の対象は、別の療法でＡＭＬを治療されてきた場合もあり、その療法に抵抗性があったか、又はその療法の結果としていかなる改善も見られなかった可能性がある。したがって、本開示の対象は、本開示の方法のダクチノマイシンを用いる治療の前に、一つ又は複数の療法に失敗した個人を含む。

【0171】

ＡＭＬを治療することで、部分的又は完全な血液学的寛解がもたらされ得る。完全な血液学的寛解は、骨髄スメア及び／又は骨髄切断部の形態学的検査で、白血病細胞が骨髄細胞の５％未満まで減少することとして定義される。部分的な血液学的寛解は、骨髄スメア及び／又は骨髄切断部の形態学的検査により算出した結果、白血病細胞が骨髄細胞の５％超であるが、骨髄細胞中の初期割合未満となるまで減少することとして定義される。骨髄細胞中の白血病細胞の初期割合は、診断時及び／又は治療の開始時に算出され得る。初期割合の減少量は、治療中又は治療完了後の任意の時点で測定され得る。

【0172】

さらに、ＡＭＬを治療することで、細胞増殖領域又は細胞増殖帯、特に髄外白血病腫瘤のサイズを減少させることができる。好ましくは、治療後、細胞増殖領域又は細胞増殖帯のサイズは、治療前のサイズと比べて少なくとも５％減少し、より好ましくは少なくとも１０％減少し、より好ましくは少なくとも２０％減少し、より好ましくは少なくとも３０％減少し、より好ましくは少なくとも４０％減少し、より好ましくは少なくとも５０％減少し、さらにより好ましくは少なくとも５０％減少し、最も好ましくは少なくとも７５％減少する。細胞増殖領域又は細胞増殖帯のサイズは、任意の再現できる測定手段によって測定され得る。細胞増殖領域又は細胞増殖帯のサイズは、細胞増殖領域又は細胞増殖帯の直径又は幅として測定され得る。

【0173】

ＡＭＬを治療することで、異常外観又は形態（すなわち形態学的退行）を持つ細胞の数又は割合を減少させることができる。好ましくは、治療後、異常形態を持つ細胞の数は、治療前のサイズと比べて少なくとも５％減少し、より好ましくは少なくとも１０％減少し、より好ましくは少なくとも２０％減少し、より好ましくは少なくとも３０％減少し、より好ましくは少なくとも４０％減少し、より好ましくは少なくとも５０％減少し、さらにより好ましくは少なくとも５０％減少し、最も好ましくは少なくとも７５％減少する。異常細胞外観又は形態は、任意の再現できる測定手段によって測定され得る。異常細胞形態は、顕微鏡を用いて、例えば倒立型組織培養顕微鏡を用いて測定することができる。異常細胞形態は、核多態性の形態をとることができる。

【0174】

ＮＰＭ１－変異型急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）
ＮＰＭ１－変異型の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は、成人においてＡＭＬの３分の１のケースを占める特有の白血病である。ＮＰＭ１は、正常な核小体の完全性及び機能に極めて重要なタンパク質である。（Ｆａｌｉｎｉ，Ｂ．ｅｔ ａｌ．“Ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｗｉｔｈ ｍｕｔａｔｅｄ ｎｕｃｌｅｏｐｈｏｓｍｉｎ （ＮＰＭ１）：ａｎｙ ｈｏｐｅ ｆｏｒ ａ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｙ？”Ｂｌｏｏｄ Ｒｅｖ．２０１１；２５：２４７－２５４を参照）。

【0175】

慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）
慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）は、高齢者において最も一般的なタイプの白血病である。これは、血液、骨髄、リンパ節、及び脾臓にＣＤ５／ＣＤ１９／ＣＤ２３陽性Ｂリンパ球が蓄積することによって特徴付けられる。この疾患の臨床経過は極めて変化に富んでおり、１０年間にわたって自覚症状のないままである患者から、診断直後に積極的治療を必要とする患者までと様々である。

【0176】

骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）
本明細書で使用される場合、「骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）」という用語及び／又は同様のものは、骨髄における不完全に形成された血球又は機能不全の血球によって引き起こされる、一つ又は複数の障害の群に言及するものである。

【0177】

一実施形態では、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、骨髄中の赤血球、白血球、血小板に影響を与える種々の骨髄障害の一群である。

【0178】

前駆幹細胞が成熟できずに骨髄に蓄積するか、又は短い寿命を有する場合があり、その結果、循環血液中の成熟血球が通常よりも少なくなることになる。

【0179】

ＭＤＳの罹患率は、人口１０万人当たりおよそ４人～５人であり、６０歳を超えると１０万人当たり２０人～５０人に増加する。

【0180】

ＭＤＳは、罹患した場合のおよそ３０％において急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）に進行する。

【0181】

本明細書で使用される場合、「症状」という用語は、疾患、病気、傷害、又は身体の調子が悪いことを示すものとして定義される。症状は、症状を経験する個人によって感じるか又は気付くものであるが、他者が気付くのは容易ではないことがある。他者とは、非医療専門家として定義される。

【0182】

本明細書で使用される場合、「徴候」という用語は、身体の調子が悪いことを示すものとして定義される。しかしながら、徴候は、医師、看護師、又は他の医療専門家にはわかることのできるものとして定義される。

【0183】

本明細書で使用される場合、「有害事象」又は「ＡＥ」という用語は、任意の好ましくなくかつ意図されない、医薬品（治験薬）の使用に一時的に関連する徴候（異常検査所見を含む）、症状、又は疾患のことであり、これらは治療又は医療的処置に関連するとみなされていてもみなされていなくてもよい。（「Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ ｖ３．０（ＣＴＣＡＥ）」、発行日２００６年８月９日を参照）。

【0184】

本明細書で使用される場合、「寛解」という用語は、癌の徴候及び症状が軽減するか又は消失することを表す。部分的な寛解では、癌の一部（全てではない）の徴候及び症状が消失している。完全寛解では、癌が依然として身体中にある可能性があるが、癌の全ての徴候及び症状が消失している。一態様では、寛解は本質的に形態学的なものであり得る。一態様では、寛解は本質的に分子的なものであり得る。一態様では、寛解は本質的に形態学的かつ分子的なものであり得る。

【0185】

本明細書で使用される場合、「癌」という用語は、身体の他の部分に広がる可能性を持った異常な細胞増殖に関わる疾患を表す。非限定的な例として、造血性腫瘍及びリンパ性腫瘍（急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ））、大腸癌、神経内分泌癌、食道癌（バレット症候群）、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、骨髄腫瘍、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性疾患、リンパ節腫瘍及びリンパ系腫瘍、ウィルムス腫瘍、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫、又はこれらの任意の転移が挙げられる。

【0186】

本明細書で使用される場合、「選択的」という用語は、一集団において、別の集団よりも高い頻度で起こる傾向にあることを意味する。比較される集団は、細胞集団であり得る。好ましくは、本開示のダクチノマイシン又はダクチノマイシン組成物は、癌細胞又は前癌細胞に選択的に作用するが、正常細胞には作用しない。好ましくは、本開示のダクチノマイシン又はダクチノマイシン組成物は、一つの分子標的（例えば、リボソーム生合成の阻害によるＲＮＡ／ＤＮＡ鎖延長）を調節するように選択的に作用するが、別の分子標的（例えば、細胞修復酵素）を有意に調節することはない。好ましくは、ある事象が集団Ｂと比べて集団Ａで２倍を超える頻度で発生する場合に、その事象は集団Ｂに比べて集団Ａで選択的に発生するものである。ある事象が集団Ａで５倍を超える頻度で発生する場合に、その事象は選択的に発生するものである。ある事象が、集団Ａで１０倍を超える頻度で、より好ましくは、集団Ｂと比べて集団Ａで５０倍を超える頻度で、さらにより好ましくは１００倍を超える頻度で、最も好ましくは、１０００倍を超える頻度で発生する場合に、その事象は選択的に発生するものである。例えば、細胞死は、細胞死が正常細胞と比べて癌細胞で２倍を超える頻度で発生する場合に、癌細胞で選択的に発生するということになる。

【0187】

本開示のダクチノマイシン組成物は、分子標的（例えば、リボソーム）の活性を調節することができる。調節することとは、分子標的の活性を刺激又は阻害することを表す。好ましくは、本開示のダクチノマイシン組成物は、分子標的の活性を、化合物を含まないことのみを除いて同じ条件下での分子標的の活性に比べて少なくとも２倍刺激又は阻害する場合に、分子標的の活性を調節している。より好ましくは、本開示のダクチノマイシン組成物は、分子標的の活性を、化合物を含まないことのみを除いて同じ条件下での分子標的の活性に比べて、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍刺激するか又は阻害する場合に、分子標的の活性を調節している。分子標的の活性は、任意の再現できる測定手段によって測定され得る。分子標的の活性は、インビトロ又はインビボで測定され得る。例えば、分子標的の活性は、酵素活性アッセイ又はＤＮＡ結合アッセイによりインビトロで測定され得るか、又は分子標的の活性は、レポーター遺伝子の発現についてアッセイすることによりインビボで測定され得る。

【0188】

ダクチノマイシンは、ストレプトマイセス・パルブルス（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｐａｒｖｕｌｌｕｓ）から誘導されたフェノキサジンに結合している二つの環状ペプチドから構成される、ポリペプチド抗腫瘍性抗生剤である。ダクチノマイシンはＤＮＡに結合し、ｍＲＮＡ転写物の鎖延長を特異的に妨害することによってＲＮＡ合成（転写）を阻害する。ダクチノマイシンは、強固ではあるが可逆的にＤＮＡ分子に結合する。ｍＲＮＡの産生が阻害された結果、ダクチノマイシン療法の後には、タンパク質合成、リボソーム生合成、及び細胞分裂が減少する。ダクチノマイシンは、細胞分裂を抑制するため、骨髄においてＡＭＬに伴う発癌性の細胞分裂を阻害するという仮説が提唱されている。

【0189】

ダクチノマイシンは、主として子供に発生する稀な腫瘍（ウィルムス腫瘍、横紋筋肉腫、妊娠性絨毛疾患、ユーイング肉腫など）に対して承認された極めて効果的な化学療法剤として、現在用いられている。（Ｏｓａｔｈａｎｏｎｄｈ，Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ １９７５；３６：８６３－８６６；Ｂｕｒｇｅｒ Ｋ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１０；２８５：１２４１６－１２４２５を参照）。したがって、ダクチノマイシンは既知のリスクプロファイルを有する。

【0190】

本開示のダクチノマイシン組成物及びダクチノマイシン製剤は、いち早くＣＬＬの高リスク患者の治療に使用される可能性がある。

【0191】

ダクチノマイシンは極めて腐食性が高く、多くの有害な副作用、例えば組織壊死を生み出す場合があり、注入部に投与してから数日から数週間後に溢血に続いて粘膜炎が生じることがある。粘膜炎とは、激しい苦痛を伴う、胃腸管を被覆する粘膜の水疱形成、炎症、及び潰瘍形成のことであり、癌及び／又はＭＤＳの化学療法治療及び放射線療法治療の有害作用である。

【0192】

粘膜炎は、ダクチノマイシンを用いて治療を受けている対象が、治療の継続や完了ができないほど有害でありかつ衰弱化させる可能性がある。口に生じる粘膜炎、すなわち口腔粘膜炎が一般的であり、癌及び／又はＭＤＳの治療（例えば、ダクチノマイシンを用いた治療）の消耗性合併症となることが多い。

【0193】

粘膜炎は、ダクチノマイシンを用いて治療を受けている対象が治療の継続や完了ができなくなる程度に衰弱化させる有害性を持ち、癌治療において問題となるが、これは多くの場合に、ダクチノマイシン治療を中止するか又は完了できない対象は、癌の再発をきたす可能性があるからである。

【0194】

粘膜炎の発症は用量依存性がある場合があり、本出願のダクチノマイシンナノ粒子組成物のいずれかにつき１０～２０μｇ／ｋｇ／日の範囲でダクチノマイシン用量を放出制御して投与することによって、ＭＤＳ及び／又は癌（例えばＡＭＬなど）の治療の有効性を依然として維持しつつ、粘膜炎の発症を軽減することができる。一実施形態では、粘膜炎の発症は、抗炎症剤、抗酸化剤、及び／又は成長分化促進剤と併用療法することによって軽減することができる。

【0195】

粘膜炎はまた、抗炎症剤、例えば、ペントキシフィリン、ＮＳＡＩＤｓ、抗酸化剤（例えば、ビタミンＣ及びレチノイン酸（例えば全てのトランス－レチノイン酸））、成長分化促進剤（例えば、グルタミン）を用いて前処置することによって軽減することができる。

【0196】

さらに、粘膜炎は、投与期間の間に「休薬期間」を設ける投与レジメンを用いることによって軽減することができる。休薬期間は、１週間、２週間、３週間、又は４週間であり得る。

【0197】

一実施形態では、本出願のダクチノマイシンナノ粒子組成物のいずれかの投与期間は、１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回である。

【0198】

一実施形態では、代表的な投与サイクルは、抗炎症剤を用いた粘膜炎前処理の後に、本出願のナノ粒子組成物のいずれかを用いて１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回治療し、その後に１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、又は６週間の休薬期間を設け、続いて本出願のナノ粒子組成物のいずれかを用いて１週間、２週間、又は３週間にわたり１回又は２回治療することを含む。

【0199】

ダクチノマイシンは、２－アミノ－Ｎ，Ｎ’－ビス（ヘキサデカヒドロ－２，５，９－トリメチル－６，１３－ビス（１－メチルエチル）－１，４，７，１１，１４－ペンタオキソ－１Ｈ－ピロロ（２，１－Ｉ）（１，４，７，１０，１３）オキサテトラ－アザシクロヘキサデシン－１０－イル）－４，６－ジメチル－３－オキソ－３Ｈ－フェノキサジン－１，９－ジカルボキサミド、ＡｃｔＤ、アクチノマイシンＣ１、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンｉｖ、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｉｃｉｎａ）、ダクトマイシン（ｄａｃｔｏｍｙｃｉｎ）、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎｅ）、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎｕｍ）、又はメラクチノマイシン（ｍｅｒａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）と称されることもある。ダクチノマイシンは、環状デプシペプチドとして知られる有機化合物の分類に属する。環状デプシペプチドには、環状に連結されたアミノ酸残基及びヒドロキシカルボン酸残基（通例αアミノ酸及びαヒドロキシ酸）の配列を含む天然化合物及び／又は非天然（すなわち、合成）化合物が含まれる。ダクチノマイシンのアミノ酸残基及びヒドロキシカルボン酸残基は、繰り返しパターンで交互になっていてもよい。

【0200】

医薬組成物
本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含む、組成物を提供する。ポリマーとして、以下に限定されないが、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、ポリ（ヒドロキシ酪酸）、ポリ（ラクチド－コ－カプロラクトン）、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリメチルシアノアクリレート、及び、ポリ酸無水物類、ポリ（オルト）エステル類、又はそれらのポリウレタン類が挙げられ、ポリマーは任意選択的に、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）又はポリエチレングリコールメチルエーテル（ｍＰＥＧ）、及び／又はそれらの任意の組み合わせをさらに含む。

【0201】

本開示は、混合物、すなわち、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、ポリ（ヒドロキシ酪酸）、ポリ（ラクチド－コ－カプロラクトン）、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリメチルシアノアクリレート、及び、ポリ酸無水物類、ポリ（オルト）エステル類、又はそれらのポリウレタン類から選択される一つ又は複数のポリマーの混合物を含む組成物を提供する。

【0202】

本開示はまた、混合物、すなわち、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、ポリ（ヒドロキシ酪酸）、ポリ（ラクチド－コ－カプロラクトン）、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリメチルシアノアクリレート、及び、ポリ酸無水物類、ポリ（オルト）エステル類、又はそれらのポリウレタン類から選択される一つ又は複数のポリマーの混合物を含む組成物であって、該ポリマーが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレングリコールメチルエーテル（ｍＰＥＧ）、及び／又はそれらの任意の組み合わせをさらに含む、組成物を提供する。

【0203】

当業者は、これらのポリマーの種々の組み合わせを選択することによって、放出特性及び／又は動態が変わり得る（例えば、増加又は減少する）ことを認識しているであろう。所望の放出速度を達成するように適切なポリマーの組み合わせを決定することは、当業者の常套的なレベルの範囲内である。

【0204】

ナノ粒子は、本明細書で使用される場合、約１～５００ナノメートル（ｎｍ）の大きさの粒子を表す。例えば、一実施形態では、約１００ｎｍ～約２００ｎｍである。

【0205】

一実施形態では、本開示の組成物は、ナノ粒子に封入された及び／又はナノ粒子と会合したダクチノマイシンを含む組成物を包含する。

【0206】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ乳酸（ＰＬＡ）ポリマーを含む、組成物を提供する。ＰＬＡは通例、乳酸のＤエナンチオマー型とＬエナンチオマー型の混合物である、アモルファス（非結晶性）の生分解性ポリマーである。ＰＬＡは、乳酸の単一のエナンチオマーのみを用いて合成される場合には、結晶性ポリマーとして使用することもできる。

【0207】

一実施形態では、本開示は、ＰＬＡを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンであって、該ＰＬＡが約１０，０００～約２４，０００Ｄａの範囲の分子量を有し、ダクチノマイシンの放出制御を可能にする、ダクチノマイシンを提供する。

【0208】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は約１０，０００Ｄａ～約１８，０００Ｄａである。

【0209】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は約１８，０００Ｄａ～約２４，０００Ｄａである。

【0210】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は、約１０，０００Ｄａ～約１４，０００Ｄａ、１１，０００Ｄａ～約１５，０００Ｄａ、１２，０００Ｄａ～約１６，０００Ｄａ、１３，０００Ｄａ～約１７，０００Ｄａ、１４，０００Ｄａ～約１８，０００Ｄａ、１５，０００Ｄａ～約１９，０００Ｄａ、１６，０００Ｄａ～約２０，０００Ｄａ、１７，０００Ｄａ～約２１，０００Ｄａ、１８，０００Ｄａ～約２２，０００Ｄａ、１９，０００Ｄａ～約２３，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａ～約２４，０００Ｄａである。

【0211】

一実施形態では、ＰＬＡの分子量は、約１０，０００Ｄａ、約１１，０００Ｄａ、約１２，０００Ｄａ、約１３，０００Ｄａ、約１４，０００Ｄａ、約１５，０００Ｄａ、約１６，０００Ｄａ、約１７，０００Ｄａ、約１８，０００Ｄａ、約１９，０００Ｄａ、約２０，０００Ｄａ、約２１，０００Ｄａ、約２２，０００Ｄａ、約２３，０００Ｄａ、約２４，０００Ｄａである。

【0212】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＡを含み、該ＰＬＡがエステル終端されている、組成物を提供する。

【0213】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ＰＬＡを含み、該ＰＬＡが酸終端型である、組成物を提供する。ＰＬＡのエステル終端型はＰＬＡの酸終端型よりも疎水性が高く、酸終端型は親水性が高い。

【0214】

一実施形態では、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、エステル終端されたＰＬＡを含む組成物は、酸終端されたＰＬＡを含有するナノ粒子に封入されたダクチノマイシンよりもゆっくりと分解し、ナノ粒子からダクチノマイシンをゆっくりと放出させることになる。

【0215】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）ポリマーを含む、組成物を提供する：

【0216】

【化1】

【0217】

水性環境では、ＰＬＧＡはエステル結合の加水分解によって生分解する。

【0218】

ＰＬＡのメチル側鎖は、そのポリマーをＰＧＡよりも疎水性にする。一実施形態では、ラクチドに富むＰＬＧＡコポリマーは、ラクチドがより少ないコポリマーに比べて親水性が低く、水をあまり吸収せずにゆっくりと分解する。

【0219】

一実施形態では、分子量のより高いＰＬＧＡは、分子量のより低いＰＬＧＡに比べてゆっくりと分解する。

【0220】

一実施形態では、本開示は、ＰＬＧＡを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンであって、該ＰＬＧＡが、約７，０００～約５４，０００Ｄａの範囲の分子量を有し、ダクチノマイシンの放出制御を可能にする、ダクチノマイシンを提供する。

【0221】

一実施形態では、ＰＬＧＡの分子量は、約７，０００Ｄａ～約１７，０００Ｄａ、１７，０００Ｄａ～約２７，０００Ｄａ、２７，０００Ｄａ～約３７，０００Ｄａ、３７，０００Ｄａ～約４７，０００Ｄａ、又は４７，０００Ｄａ～約５４，０００Ｄａである。

【0222】

一実施形態では、ＰＬＧＡの分子量は、約１２，０００Ｄａ～約２２，０００Ｄａ、２２，０００Ｄａ～約３２，０００Ｄａ、３２，０００Ｄａ～約４２，０００Ｄａ、４２，０００Ｄａ～約５２，０００Ｄａ、又は４４，０００Ｄａ～約５４，０００Ｄａである。

【0223】

一実施形態では、ＰＬＧＡの分子量は、約７，０００Ｄａ、約８，０００Ｄａ、約９，０００Ｄａ、約１０，０００Ｄａ、約１１，０００Ｄａ、約１２，０００Ｄａ、約１３，０００Ｄａ、約１４，０００Ｄａ、約１５，０００Ｄａ、約１６，０００Ｄａ、約１７，０００Ｄａ、約１８，０００Ｄａ、約１９，０００Ｄａ、約２０，０００Ｄａ、約２１，０００Ｄａ、約２２，０００Ｄａ、約２３，０００Ｄａ、約２４，０００Ｄａ、約２５，０００Ｄａ、約２６，０００Ｄａ、約２７，０００Ｄａ、約２８，０００Ｄａ、約２９，０００Ｄａ、約３０，０００Ｄａ、約３１，０００Ｄａ、約３２，０００Ｄａ、約３３，０００Ｄａ、約３４，０００Ｄａ、約３５，０００Ｄａ、約３６，０００Ｄａ、約３７，０００Ｄａ、約３８，０００Ｄａ、約３９，０００Ｄａ、約４０，０００Ｄａ、約４１，０００Ｄａ、約４２，０００Ｄａ、約４３，０００Ｄａ、約４４，０００Ｄａ、約４５，０００Ｄａ、約４６，０００Ｄａ、約４７，０００Ｄａ、約４８，０００Ｄａ、約４９，０００Ｄａ、約５０，０００Ｄａ、約５１，０００Ｄａ、約５２，０００Ｄａ、約５３，０００Ｄａ、又は約５４，０００Ｄａである。

【0224】

一実施形態では、本開示は、ＰＬＧＡを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンであって、該ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比が約９５：５、約９０：１０、約８５：１５、約８０：２０、約７５：２５、約７０：３０、約６５：３５、約６０：４０、約５５：４５、約５０：５０、約４５：５５、約４０：６０、約３５：６５、約３０：７０、約２５：７５、約２０：８０、約１５：８５、約１０：９０、又は約５：９５である、ダクチノマイシンを提供する。

【0225】

一実施形態では、本開示は、ＰＬＧＡを含むナノ粒子に封入されたダクチノマイシンであって、該ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸のモル比が約５０：５０である、ダクチノマイシンを提供する。

【0226】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ乳酸（ＰＬＡ）ポリマーを含み、該ＰＬＡポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）又はポリエチレングリコールメチルエーテル（ｍＰＥＧ）で合成されて、ジブロックコポリマー（ＰＬＡ－ＰＥＧ及びＰＬＡ－ｍＰＥＧ）を調製し、ダクチノマイシンの放出制御を可能にすることができる、組成物を提供する。

【0227】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧコポリマーは、以下のスキームに従って調製され得る：

【0228】

【化2】

【0229】

親水性ＰＥＧ（及びｍＰＥＧ）部分は、ナノ粒子の表面方向に配向しており、立体反発及び水和反発によって外部分子との相互作用を低減するバリアとして働く。これらの組成物は、非修飾のナノ粒子（すなわち、「非ＰＥＧ化」又は「非ｍＰＥＧ化」のナノ粒子）に比べて、体循環で長い半減期を持つことができる。

【0230】

一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ及びＰＬＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、拡散により生じる。一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ及びＰＬＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、ポリマー分解により生じる。一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ及びＰＬＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、拡散とポリマー分解とにより生じる。

【0231】

ＰＥＧ又はｍＰＥＧとＰＬＧＡとの比は、体循環からのナノ粒子のクリアランスに影響を及ぼし得る。

【0232】

一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ又はＰＬＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約９重量％、約１０重量％、約１１重量％、約１２重量％、約１３重量％、約１４重量％、約１５重量％、約１６重量％、約１７重量％、約１８重量％、約１９重量％、約２０重量％、約２１重量％、約２２重量％、約２３重量％、約２４重量％、約２５重量％、約２６重量％、約２７重量％、約２８重量％、約２９重量％、約３０重量％、約３１重量％、約３２重量％、約３３重量％、約３４重量％、約３５重量％、約３６重量％、約３７重量％、約３８重量％、約３９重量％、約４０重量％、約４１重量％、約４２重量％、約４３重量％、約４４重量％、約４５重量％、約４６重量％、約４７重量％、約４８重量％、約４９重量％、約５０重量％、約５１重量％、約５２重量％、約５３重量％、約５４重量％、約５５重量％、約５６重量％、約５７重量％、約５８重量％、約５９重量％、約６０重量％、約６１重量％、約６２重量％、約６３重量％、約６４重量％、約６５重量％、約６６重量％、約６７重量％、約６８重量％、約６９重量％、約７０重量％、約７１重量％、約７２重量％、約７３重量％、約７４重量％、約７５重量％、約７６重量％、約７７重量％、約７８重量％、約７９重量％、約８０重量％、約８１重量％、約８２重量％、約８３重量％、約８４重量％、約８５重量％、約８６重量％、約８７重量％、約８８重量％、約８９重量％、約９０重量％、約９１重量％、約９２重量％、約９３重量％、約９４重量％、約９５重量％、約９６重量％、約９７重量％、約９８重量％、又は約９９重量％である。

【0233】

一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ又はＰＬＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約１重量％～９９重量％、２重量％～９５重量％、３重量％～９０重量％、４重量％～７５重量％、５重量％～５０重量％、１０重量％～４５重量％、１５重量％～４０重量％、１８重量％～３５重量％、又は２０重量％～３０重量％である。

【0234】

一実施形態では、ＰＬＡ－ＰＥＧ又はＰＬＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約２５重量％である。

【0235】

一実施形態では、ＰＬＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるｍＰＥＧの重量パーセントは、約２５重量％である。

【0236】

本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧＡ）ポリマーを含み、該ＰＬＧＡポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）又はポリエチレングリコールメチルエーテル（ｍＰＥＧ）で合成されて、ジブロックコポリマー（ＰＬＧＡ－ＰＥＧ及びＰＬＧＡ－ｍＰＥＧ）を調製し、ダクチノマイシンの放出制御を可能にすることができる、組成物を提供する。一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧコポリマーは以下のスキームに示す一般構造を有する：

【0237】

【化3】

【0238】

親水性ＰＥＧ（及びｍＰＥＧ）部分は、ナノ粒子の表面方向に配向しており、立体反発及び水和反発によって外部分子との相互作用を低減するバリアとして働く。これらの組成物は、非修飾のナノ粒子（すなわち、「非ＰＥＧ化」又は「非ｍＰＥＧ化」のナノ粒子）に比べて、体循環で長い半減期を持つことができる。

【0239】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ及びＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、拡散により生じる。一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ及びＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、ポリマー分解により生じる。一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ及びＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのナノ粒子からの薬剤放出は、拡散とポリマー分解とにより生じる。

【0240】

ＰＥＧ又はｍＰＥＧとＰＬＧＡとの比は、体循環からのナノ粒子のクリアランスに影響を及ぼし得る。

【0241】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ又はＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約９重量％、約１０重量％、約１１重量％、約１２重量％、約１３重量％、約１４重量％、約１５重量％、約１６重量％、約１７重量％、約１８重量％、約１９重量％、約２０重量％、約２１重量％、約２２重量％、約２３重量％、約２４重量％、約２５重量％、約２６重量％、約２７重量％、約２８重量％、約２９重量％、約３０重量％、約３１重量％、約３２重量％、約３３重量％、約３４重量％、約３５重量％、約３６重量％、約３７重量％、約３８重量％、約３９重量％、約４０重量％、約４１重量％、約４２重量％、約４３重量％、約４４重量％、約４５重量％、約４６重量％、約４７重量％、約４８重量％、約４９重量％、約５０重量％、約５１重量％、約５２重量％、約５３重量％、約５４重量％、約５５重量％、約５６重量％、約５７重量％、約５８重量％、約５９重量％、約６０重量％、約６１重量％、約６２重量％、約６３重量％、約６４重量％、約６５重量％、約６６重量％、約６７重量％、約６８重量％、約６９重量％、約７０重量％、約７１重量％、約７２重量％、約７３重量％、約７４重量％、約７５重量％、約７６重量％、約７７重量％、約７８重量％、約７９重量％、約８０重量％、約８１重量％、約８２重量％、約８３重量％、約８４重量％、約８５重量％、約８６重量％、約８７重量％、約８８重量％、約８９重量％、約９０重量％、約９１重量％、約９２重量％、約９３重量％、約９４重量％、約９５重量％、約９６重量％、約９７重量％、約９８重量％、又は約９９重量％である。

【0242】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ又はＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約１重量％～９９重量％、２重量％～９５重量％、３重量％～９０重量％、４重量％～７５重量％、５重量％～５０重量％、１０重量％～４７重量％、１５重量％～４５重量％、２０重量％～４２重量％、又は２５重量％～４５重量％である。

【0243】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ＰＥＧ又はＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるＰＥＧ又はｍＰＥＧの重量パーセントは、約３５重量％である。

【0244】

一実施形態では、ＰＬＧＡ－ｍＰＥＧのジブロックコポリマーにおけるｍＰＥＧの重量パーセントは、約３５重量％である。

【0245】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、該ナノ粒子の平均サイズが、約１００ｎｍ、１０１ｎｍ、１０２ｎｍ、１０３ｎｍ、１０４ｎｍ、１０５ｎｍ、１０６ｎｍ、１０７ｎｍ、１０８ｎｍ、１０９ｎｍ、１１０ｎｍ、１１１ｎｍ、１１２ｎｍ、１１３ｎｍ、１１４ｎｍ、１１５ｎｍ、１１６ｎｍ、１１７ｎｍ、１１８ｎｍ、１１９ｎｍ、１２０ｎｍ、１２１ｎｍ、１２２ｎｍ、１２３ｎｍ、１２４ｎｍ、１２５ｎｍ、１２６ｎｍ、１２７ｎｍ、１２８ｎｍ、１２９ｎｍ、１３０ｎｍ、１３１ｎｍ、１３２ｎｍ、１３３ｎｍ、１３４ｎｍ、１３５ｎｍ、１３６ｎｍ、１３７ｎｍ、１３８ｎｍ、１３９ｎｍ、１４０ｎｍ、１４１ｎｍ、１４２ｎｍ、１４３ｎｍ、１４４ｎｍ、１４５ｎｍ、１４６ｎｍ、１４７ｎｍ、１４８ｎｍ、１４９ｎｍ、１５０ｎｍ、１５１ｎｍ、１５２ｎｍ、１５３ｎｍ、１５４ｎｍ、１５５ｎｍ、１５６ｎｍ、１５７ｎｍ、１５８ｎｍ、１５９ｎｍ、１６０ｎｍ、１６１ｎｍ、１６２ｎｍ、１６３ｎｍ、１６４ｎｍ、１６５ｎｍ、１６６ｎｍ、１６７ｎｍ、１６８ｎｍ、１６９ｎｍ、１７０ｎｍ、１７１ｎｍ、１７２ｎｍ、１７３ｎｍ、１７４ｎｍ、１７５ｎｍ、１７６ｎｍ、１７７ｎｍ、１７８ｎｍ、１７９ｎｍ、１８０ｎｍ、１８１ｎｍ、１８２ｎｍ、１８３ｎｍ、１８４ｎｍ、１８５ｎｍ、１８６ｎｍ、１８７ｎｍ、１８８ｎｍ、１８９ｎｍ、１９０ｎｍ、１９１ｎｍ、１９２ｎｍ、１９３ｎｍ、１９４ｎｍ、１９５ｎｍ、１９６ｎｍ、１９７ｎｍ、１９８ｎｍ、１９９ｎｍ、又は２００ｎｍである、組成物のいずれかを提供する。

【0246】

さらに、本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、該ナノ粒子の平均サイズが、約１００ｎｍ～約１１０ｎｍ、約１０５ｎｍ～約１１５ｎｍ、約１１０ｎｍ～約１２０ｎｍ、約１１５ｎｍ～約１２５ｎｍ、約１２０ｎｍ～約１３０ｎｍ、約１２５ｎｍ～約１３５ｎｍ、約１３０ｎｍ～約１４０ｎｍ、約１３５ｎｍ～約１４５ｎｍ、約１３０ｎｍ～約１４０ｎｍ、約１３５ｎｍ～約１４５ｎｍ、約１４０ｎｍ～約１５０ｎｍ、約１４５ｎｍ～約１５５ｎｍ、約１５０ｎｍ～約１６０ｎｍ、約１５５ｎｍ～約１６５ｎｍ、約１６０ｎｍ～約１７０ｎｍ、約１６５ｎｍ～約１７５ｎｍ、約１７０ｎｍ～約１８０ｎｍ、約１７５ｎｍ～約１８５ｎｍ、約１８０ｎｍ～約１９０ｎｍ、約１８５ｎｍ～約１９５ｎｍ、又は約１９０ｎｍ～約２００ｎｍである、組成物のいずれかを提供する。

【0247】

一実施形態では、ナノ粒子サイズは、当該技術分野で既知の方法を用いて、例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏ－ＺＳゼータサイザーを用いて算出することができる。

【0248】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、界面活性剤をさらに含む組成物のいずれかを提供する。

【0249】

一実施形態では、界面活性剤は、各ナノ粒子の約０．０１重量％～約１０．０重量％を構成する。一実施形態では、界面活性剤は、各ナノ粒子の約０．１重量％～約５．０重量％を構成する。例えば、界面活性剤は、各ナノ粒子の約０．２重量％～約４．０重量％、各ナノ粒子の約０．５重量％～約３．０重量％、各ナノ粒子の約１．０重量％～約２．５重量％を構成する。

【0250】

一実施形態では、界面活性剤は、各ナノ粒子の約０．００１重量％、約０．００５重量％、約０．０１重量％、約０．０５重量％、約０．１重量％、約０．２重量％、約０．３重量％、約０．４重量％、約０．５重量％、約０．６重量％、約０．７重量％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１．０重量％、約１．１重量％、約１．２重量％、約１．３重量％、約１．４重量％、約１．５重量％、約１．６重量％、約１．７重量％、約１．８重量％、約１．９重量％、約２．０重量％、約２．１重量％、約２．２重量％、約２．３重量％、約２．４重量％、約２．５重量％、約２．６重量％、約２．７重量％、約２．８重量％、約２．９重量％、約３．０重量％、約３．１重量％、約３．２重量％、約３．３重量％、約３．４重量％、約３．５重量％、約３．６重量％、約３．７重量％、約３．８重量％、約３．９重量％、約４．０重量％、約４．１重量％、約４．２重量％、約４．３重量％、約４．４重量％、約４．５重量％、約４．６重量％、約１４．７重量％、約４．８重量％、約４．９重量％、又は約５．０重量％を構成する。

【0251】

一実施形態では、界面活性剤は各ナノ粒子の２．０重量％未満を構成する。

【0252】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、界面活性剤をさらに含み、該界面活性剤が、ポリビニルアルコール、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、ビタミンＥ ＴＰＧＳ、コール酸ナトリウム、胆汁酸塩（例えば、タウロデオキシコール酸ナトリウム）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ６００、ＰＥＧ、ＰＥＧ４５００、Ｂｒｉｊ（登録商標）（例えば、２０、３５、５８など））、及び／又はポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７）である、組成物のいずれかを提供する。一実施形態では、界面活性剤はポリビニルアルコールである。一実施形態では、界面活性剤はポリビニルアルコールであり、該ポリビニルアルコールは８０％加水分解されており、約９，０００～約１０，０００Ｄａの分子量を有する。

【0253】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、約１重量％～約５０重量％のダクチノマイシンをさらに含む、組成物のいずれかを提供する。

【0254】

さらに、本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、約１重量％、２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１１重量％、１２重量％、１３重量％、１４重量％、１５重量％、１６重量％、１７重量％、１８重量％、１９重量％、２０重量％、２１重量％、２２重量％、２３重量％、２４重量％、２５重量％、２６重量％、２７重量％、２８重量％、２９重量％、３０重量％、３１重量％、３２重量％、３３重量％、３４重量％、３５重量％、３６重量％、３７重量％、３８重量％、３９重量％、４０重量％、４１重量％、４２重量％、４３重量％、４４重量％、４５重量％、４６重量％、４７重量％、４８重量％、４９重量％、又は５０重量％のダクチノマイシンをさらに含む、組成物のいずれかを提供する。

【0255】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、約５重量％～約１５重量％のダクチノマイシンさらに含む、組成物のいずれかを提供する。

【0256】

さらに本開示は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、液状結晶の形成が可能な液体界面活性剤として機能するリン脂質を含み、精製水、緩衝剤（例えばグリシン）、オイル成分（例えば、Ｄ，Ｌ－アルファ－トコフェロール）、及び界面活性剤（例えば、デオキシコール酸ナトリウム又はポリビニルアルコール）をさらに含む、組成物を提供する。これらの組成物のリン脂質の例として、以下に限定されないが、負に帯電したリン脂質を有するホスファチジルコリン（ホスホリポン（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ）（登録商標）８０）、ホスファチジルコリンに富むレシチン部分（ホスホリポン（登録商標）８５Ｇ）、０．１％のアスコルビン酸パルミテートで安定化させたホスファチジルコリン（ホスホリポン（登録商標）９０Ｇ）が挙げられる。（例えば、米国特許第７，７１３，４４０号、Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｒｉｅｆ，２０１２，Ｖｏｌ．４、Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．ＣＲＣ Ｃｏｎｃｉｓｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ Ｇｒｏｕｐ，ＬＬＣ，２０１６，５ページを参照されたく、これらの文献の全てが参照により本明細書に援用される）。

【0257】

一実施形態では、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む組成物であって、リン脂質を含む組成物は、当該技術分野で既知の任意の方法によって調製され得る。例えば、ブランクのリン脂質組成物（例えば、ホスホリポン（登録商標）９０Ｇ、精製水、グリシン、Ｄ，Ｌ－アルファ－トコフェロール、ジカルボン酸ナトリウムを含むリン脂質組成物２５ｍＬ）と、ダクチノマイシン（例えば、３７５ｍｇ）とを、数時間（例えば５時間）強力に攪拌することによって混合し、続いて０．４５μｍのＣＡ（酢酸セルロース）フィルタを用いて濾過する。

【0258】

本開示は、少なくとも一つの薬学的に許容できる賦形剤又は担体と合わせてナノ粒子に封入されたダクチノマイシンを含む組成物を提供する。

【0259】

本明細書で使用される場合、「封入」、「封入された」などという用語は、ダクチノマイシン及び／又は他の薬剤若しくは作用剤がナノ粒子に（例えば、完全に又は部分的に）封入されている、該ナノ粒子と会合している、及び／又は該ナノ粒子に若しくは該ナノ粒子上に吸着している、ことを意味する。

【0260】

「組成物」とは、本明細書に記載のダクチノマイシンナノ粒子組成物を含有する、対象への投与に適した形態の任意の製剤のことである。一実施形態では、組成物は、バルク又は単位剤形の形態である。単位剤形は、例えば、カプセル剤、ＩＶバッグ、錠剤、エアロゾル吸入器のシングルポンプ、又はバイアルを含めた様々な形態のいずれかである。組成物の単位用量における活性成分（例えば、開示された化合物、又はその塩、その水和物、その溶媒和物、若しくはその異性体の製剤）の量は、有効量であり、関与する個々の治療によって様々である。当業者は、患者の年齢及び状態に応じて投与量のルーチンを変えることが必要になる場合があることを認識するであろう。また、投与量は、投与経路に依存することになる。本開示の組成物は任意の経路で投与され得るが、投与の好ましい経路には、静脈内注射又は注入が含まれる。一実施形態では、活性化合物は、無菌状態下で、薬学的に許容できる担体と、かつ必要な任意の防腐剤、緩衝材、又は噴射剤と混合される。

【0261】

本明細書で使用される場合、語句「薬学的に許容できる」は、適切な医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を伴わずにヒト及び動物の組織と接触して使用することに適し、合理的な利益／リスク比に見合った、化合物、物質、組成物、担体及び／又は剤形を意味する。

【0262】

「薬学的に許容できる賦形剤」は、概して安全、無毒性であり、生物学的にもその他の点でも有害ではない組成物の調製に有用な賦形剤を意味し、ヒトの薬学的使用だけではなく、家畜への使用にも適用できる賦形剤を含む。「薬学的に許容できる賦形剤」は、本明細書及び特許請求の範囲で使用される場合、一つの賦形剤及び二つ以上の賦形剤の両方を含む。

【0263】

本開示はまた、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの治療有効量を含む本明細書に開示された組成物であって、一つ又は複数のポリマーを含み、ダクチノマイシンに加えて一つ又は複数の他の化学療法薬をさらに含む、組成物を提供する。他の化学療法薬は、ダクチノマイシンと合わせてナノ粒子に封入される場合があり、及び／又はダクチノマイシンと同じナノ粒子に封入されない場合もある。

【0264】

一実施形態では、他の化学療法薬として、以下に限定されないが、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド、イリノテカン、トポテカン、カンプトテシン、ラメラリンＤ、テニポシド、ミトキサントロン、アムサクリン、エリプチシン、アウリントリカルボン酸、ＨＵ－３３１）、白金系治療剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、ピコプラチン、サトラプラチン）、アントラサイクリン系抗生物質（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン）、タキサン（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、バッカチンＩＩＩ、１０－デアセチルバッカチン）、チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、イマチニブ、エンザスタウリン、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、エベロリムス、シロリムス、テムシロリムス）、ヌクレオシド類似体（例えば、シタラビン、ゲムシタビン、カペシタビン）、ＦＬＴ３阻害剤（例えば、Ｒｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、及びギルテリチニブ）、並びに高メチル化阻害剤（例えば、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリン）が挙げられる。

【0265】

「抗酸化剤」という用語は、本明細書で使用される場合、以下に限定されないが、ビタミンＣ、レチノイン酸（例えば、全てのトランス－レチノイン酸）、アミホスチン、Ｎ－アセチルシステインを含む。

【0266】

「抗炎症剤」という用語は、本明細書で使用される場合、以下に限定されないが、ペントキシフィリン、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）（例えばイブプロフェン）を含む。

【0267】

「成長分化促進剤」という用語は、以下に限定されないが、グルタミンを含む。

【0268】

本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物は、予定投与経路に適合するように製剤化される。投与経路の例として、静脈内投与が挙げられる。静脈内用途に用いられる溶液又は懸濁液は、以下の成分を含み得る：注射用の水、食塩水、固定油、ポリエチレングリコール類、グリセリン、プロピレングリコール、又は他の合成溶媒などの無菌希釈液；ベンジルアルコール又はメチルパラベン類などの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩類、クエン酸塩類、又はリン酸塩類などの緩衝液、及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張性を調節するための作用剤。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムなどの酸又は塩基で調節され得る。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製のアンプル、使い捨てシリンジ、又は複数回投与バイアルに封入され得る。

【0269】

本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物は、それを必要とする対象に、化学療法剤治療に一般的に使用される一つ又は複数経路で投与され得る。例えば、本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物は、対象の血流に注射されるか、又は注入（例えば、静脈内に投与）され得る。選択される用量は、有効な治療となるのに十分であるが、許容できない副作用（例えば、粘膜炎）を引き起こすほど多くはならないようにすべきである。患者の病状の状態（例えば、癌及び前癌など）や健康状態は、好ましくは、治療の間、及び治療後の適正な期間の間に綿密にモニタすべきである。

【0270】

「治療有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、同定された疾患若しくは症状を治療、寛解、若しくは予防するか、又は検出可能な治療効果又は抑制効果を示す、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物の量を表す。効果は、当該技術分野で既知の任意のアッセイ方法により検出することができる。対象に対しての厳密な有効量というのは、対象の体重、サイズ、健康状態；症状の性質及び程度；投与用に選択された治療剤又は治療剤の組み合わせによって決まることになる。所定の状況での治療有効量は、臨床医の技術及び判断の範囲内である常套的な実験によって算出され得る。一態様では、治療される疾患又は症状はＭＤＳである。一態様では、治療される疾患又は症状は癌である。別の態様では、治療される疾患又は症状はＡＭＬである。

【0271】

「休薬期間」という用語は、本明細書で使用される場合、ＭＤＳ及び／又は癌の治療に対する、本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかの投与と投与の間における時間の長さを表す。一態様では、休薬期間は、１週間、２週間、３週間、４週間、又はその間の任意の時間の長さである。例えば、治療される癌はＡＭＬである。

【0272】

本開示の任意の組成物について、治療有効量は最初に、細胞培養アッセイ（例えば、腫瘍細胞のアッセイ）で、又は動物モデル（通常ラット、マウス、ウサギ、イヌ、又はブタ）で概算されてもよい。動物モデルは、適正な濃度範囲及び投与経路を決定するために使用されてもよい。こうした情報は、その後、ヒトにおける有用な用量及び投与経路を決定するために使用することができる。治療／予防有効性及び毒性は、細胞培養又は実験動物における標準的な薬学的手順、例えば、ＥＤ_５０（集団の５０％において治療的に有効である用量）、及びＬＤ_５０（集団の５０％に致死的な用量）によって判定され得る。用量の有毒作用と治療作用との比は治療指数であり、比ＬＤ_５０／ＥＤ_５０として表すことができる。大きい治療指数を示す組成物が好ましい。投与量は、使用される剤形、患者の感受性、及び投与経路に応じて、この範囲内で様々となり得る。

【0273】

投与量及び投与は、活性剤の十分なレベルを提供するか、又は所望の効果を維持するように調整される。考慮に入れることができる因子には、病態、対象の全身健康状態、対象の年齢、重量、及び性別、食事、投与の時間及び頻度、併用製剤、反応感受性、並びに治療法への耐性／反応が含まれる。長時間作用型の組成物は、特定の製剤の半減期及びクリアランス速度に応じて、３～４日毎、毎週、又は２週間に１回投与され得る。

【0274】

本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物は、従来の手段により、例えばＭｃＣａｌｌ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｖｉｓ．Ｅｘｐ．（８２），ｅ５１０１５に開示された方法で製造することができる。

【0275】

本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかが、以下の一般的な手順に従って調製され得る：
Ａ．ダクチノマイシンの保存溶液（２５ｍｇ／ｍＬ）を有機溶媒で調製する。
Ｂ．ポリマーの保存溶液（例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２Ｓ及びＲ ２０３ＨなどのＰＬＡポリマーを用いる場合には２５ｍｇ／ｍＬ、又はＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｄ５０５０ ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５重量％、ＰＥＧ）及び１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５重量％、ＰＥＧ）を用いる場合には５０ｍｇ／ｍＬ）を有機溶媒で調製する。
Ｃ．ダクチノマイシン溶液をポリマー溶液に、ポリマーとＡＰＩの量の比が１０：１（ｗ／ｗ）に達するまで加える。
Ｄ．最終溶液を均一になるまでボルテックスする。
Ｅ．界面活性剤水溶液（水相）を調製する。
Ｆ．ダクチノマイシンナノ粒子乳濁液は、ポリマー／ダクチノマイシン溶液を少量の水相に加えることによって形成するが、その間、ポリマー溶液全体が添加されて有機相：水相の体積比が約１：７に到達するまで、水相を高速でボルテックスする。
Ｇ．ボルテックスを続けた後、混合物を超音波処理器に約０℃で移し、所望のナノ粒子サイズ（例えば、約１００ｎｍ～約２００ｎｍ）が得られるまで数分間超音波処理する。
Ｈ．界面活性剤溶液の攪拌バルク水相に注ぎ、有機溶媒が完全に蒸発するまで室温で強力に攪拌する。

【0276】

この手順の封入効率は約１～５０％（例えば３０％）である。例えば、この手順を１００ｍｇの遊離ダクチノマイシンを用いて行う場合には、約１～５０ｍｇ（例えば、約３０ｍｇ）のダクチノマイシンがナノ粒子に封入されるであろう。

【0277】

一実施形態では、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかを、固化又は硬化したナノ粒子を遠心分離することによって精製し、上澄み液を除去し、ダクチノマイシンナノ粒子をｄｄＨ_２Ｏで洗浄した後に、数分間さらに遠心分離してペレット剤を得る。

【0278】

一実施形態では、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかを、固化又は硬化したナノ粒子を遠心分離することによって遊離ダクチノマイシンを除去するように精製し、上澄み液を除去し、ダクチノマイシンナノ粒子をｄｄＨ_２Ｏで洗浄した後に、数分間さらに遠心分離してペレット剤を得る。

【0279】

一実施形態では、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかを精製して、組成物に残留している遊離（封入されていない）ダクチノマイシンの９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又はそれ以上を除去することができる。したがって、本明細書に記載の組成物又は製剤のいずれかにおいて、遊離ダクチノマイシンの量は、ナノ粒子に封入されたダクチノマイシンの量の約５重量％未満（すなわち、５％未満、４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満、０．１％未満）となる。一実施形態では、ペレット剤をｄｄＨ_２Ｏに再懸濁し、数分間遠心分離することによって、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれかから大きめのナノ粒子を除去し、その後、上澄み液を採取して、遠心分離フィルタを用いて濃縮し、１４，０００×ｒｐｍで追加の数分間遠心分離して遊離ダクチノマイシンを除去する。

【0280】

一実施形態では、この方法で調製されたナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物を、直接使用することができる。

【0281】

一実施形態では、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物のいずれも、最大数週間４℃で保管することができる。

【0282】

一実施形態では、本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物を、保管する前にスクロース（１０～３０％）で凍結乾燥保護及び凍結保護することができ、また使用前に凍結乾燥することができる。当該技術分野で既知である任意の他の適した凍結保存剤が使用されてもよい。

【0283】

本明細書に開示されているナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物を充填した薬物を、ＨＰＬＣを用いて評価した。

【0284】

ＡｃｔＤナノ粒子製剤の調製に関するさらなる指針は、実施例のセクションと、ＭｃＣａｌｌ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｖｉｓ．Ｅｘｐ．（８２），ｅ５１０１５とに記載されており、この文献はその全体が参照により援用される。

【0285】

本開示のナノ粒子に封入されたダクチノマイシン組成物は、より大きい規模で製造することができる。そのプロセスを簡易化するために、超音波処理器の替わりに高圧ホモジナイザを用いて、ナノ粒子を作製することもできる。さらに、遠心分離の替わりに接線流濾過／透析濾過を用いて、遊離ダクチノマイシンを除去し、ナノ粒子を濃縮することができる。また、保管の際には、凍結乾燥保護賦形剤（例えば、スクロース、トレハロース、及びマンニトールなど）をナノ粒子に加えることができ、その後、使用前に凍結乾燥することができる。

【0286】

注射用に適した組成物には、無菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液、及び無菌注射溶液又は分散液を即時調製するための滅菌粉末が含まれる。静脈内投与用に適切な担体として、生理食塩水、注射用静菌水、クレモフォールＥＬ^ＴＭ（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州パッシパニー）、又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全ての場合において、組成物は無菌であり、容易に注射針を通過する程度に流動性があるべきである。組成物は、製造及び保管条件下で安定でなくてはならず、かつ細菌及び真菌などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、及びそれらの適切な混合物を含有する溶媒又は分散媒であり得る。例えばレシチンなどのコーティングを使用することによって、分散物の場合には所要粒子サイズを維持することによって、また界面活性剤を使用することによって、適正な流動性を保持することができる。微生物の作用は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、及びチメロサールなどの種々の抗菌剤及び抗真菌剤によって阻止することができる。多くの場合、組成物中に、等張剤、例えば、糖、ポリアルコール（マンニトール、ソルビトールなど）、塩化ナトリウムを含むことが好ましい。注射用組成物では、吸収を遅らせる作用剤、例えばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを該組成物中に含めることによって、持続的な吸収が可能になる。

【0287】

無菌の注射用溶液は、適切な溶媒中のダクチノマイシンナノ粒子組成物の所要量と、上記に列挙した成分のうちの一つ又はその組み合わせとを混合し、必要に応じて濾過滅菌することによって、調製することができる。分散液は通例、活性ダクチノマイシン化合物を、基本分散媒と、上記に列挙した成分とは別の必要成分とを含む無菌媒体に混合することによって調製する。無菌注射用溶液の調製用の無菌粉末の場合には、調製方法は、真空乾燥方式及び凍結乾燥方式であり、これは、活性成分の粉末、それに加えて予め滅菌濾過したその溶液から得られる任意の付加的な所望成分の粉末を産するものである。

【0288】

活性化合物（例えば、ダクチノマイシン、及びナノ粒子に封入されたダクチノマイシン）は、その化合物が身体から急速に排除されないように保護する、薬学的に許容できる担体（例えば、植込錠及びマイクロカプセル送達システムを含めた放出制御製剤など）を用いて調製することができる。生分解性の生体適合性ポリマーを用いることができ、これには例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物類、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル類、及びポリ乳酸などがある。こうした製剤の調製方法は、当業者には明らかであろう。また、原料は、主にＡｌｚａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社、Ｅｖｏｎｉｋ社、Ｎｏｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社からの市販品として入手することができる。

【0289】

経口組成物又は非経口組成物を投与単位の形態で製剤化することは、投与の簡易性と投与の均一性に特に有利である。本明細書で使用される場合、投与単位の形態とは、治療される対象に対して、単位投与量として適する物理的に分離した単位を表すものであり、各単位は、必要とされる医薬担体も含めて所望の治療効果を生じるように算出された所定の量の活性化合物を含んでいる。本開示の投与単位の形態についての仕様は、活性化合物の固有の特性と、達成すべき特定の治療効果とによって決定され、またこれらに直接左右されるものである。

【0290】

治療用途において、本開示に従って使用されるダクチノマイシンナノ粒子組成物の投与量は、選択投与量に影響を及ぼす因子の中でも特に、受容患者の年齢、体重、及び臨床症状、並びに療法を行う臨床医又は開業医の経験及び判断によって異なる。一般的に、投与量は、腫瘍の増殖を遅くし、好ましくは退縮させ、また好ましくはＭＤＳ及び／又は癌の完全退縮をもたらすのに十分であるべきである。投与量は、単回用量、分割用量、又は持続用量で、１日当たり約１μｇ／ｋｇ～１日当たり約３０μｇ／ｋｇの範囲であり得る（この投与量は、患者の体重（ｋｇ）、体表面積（ｍ^２）、年齢（歳）に応じて調整され得る）。医薬品の有効量は、臨床医又は他の専門的な観察者によって確認されるような客観的に認識できる改善をもたらす量である。例えば、患者における腫瘍の退縮は、腫瘍の直径を基準にして測定することができる。腫瘍の直径の減少は退縮を示している。退縮はまた、治療が完了した後に腫瘍が再発しないことによっても示される。本明細書で使用される場合、「有効投与量」という用語は、対象又は細胞において所望の生物学的作用をもたらす活性化合物の量を表す。

【0291】

組成物を、投与の説明書と合わせて、容器、パック、又はディスペンサーに入れることができる。

【0292】

ダクチノマイシンは、塩を形成することができる。これらの塩の形態の全ても、本開示の範囲内に考慮される。

【0293】

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容できる塩」は、親化合物がその酸性塩又は塩基性塩を作製することによって修飾された、本開示の化合物の誘導体を表す。薬学的に許容できる塩の例として、以下に限定されないが、アミンなどの塩基性残基の鉱酸塩又は有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩又は有機塩などが挙げられる。薬学的に許容できる塩には、例えば、非毒性の無機酸又は有機酸から形成された親化合物の一般的な非毒性塩又は第四アンモニウム塩が含まれる。例えば、こうした一般的な非毒性塩として、以下に限定されないが、２－アセトキシ安息香酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸、炭酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、１，２－エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、グリコリルアルサニル酸、ヘキシルレゾルシン酸、ヒドラバム酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ナプシル酸、硝酸、シュウ酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、ポリガラクツロ酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、スバセチン酸（ｓｕｂａｃｅｔｉｃ）、コハク酸、スルファミン酸、スルファニル酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、及び一般的に存在するアミン酸（例えば、グリシン、アラニン、フェニルアラニン、アルギニンなど）から選択される無機酸及び有機酸から得られる塩が挙げられる。

【0294】

薬学的に許容できる塩の他の例として、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ピルビン酸、マロン酸、３－（４－ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、４－クロロベンゼンスルホン酸、２－ナフタリンスルホン酸、４－トルエンスルホン酸、カンファスルホン酸、４－メチルビシクロ－［２．２．２］－オクト－２－エン－１－カルボン酸、３－フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、及びムコン酸などが挙げられる。本開示はまた、親化合物に含まれる酸性プロトンが、金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、又はアルミニウムイオン）で置換されているか、又は有機塩基（例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ－メチルグルカミン、及びメグルミンなど）と配位結合している場合に形成される塩を包含する。

【0295】

薬学的に許容できる塩への全ての言及が、同一の塩の、本明細書で定義されている溶媒付加形態（溶媒和物）又は結晶形態（多形）を含むことを理解すべきである。

【0296】

ダクチノマイシンは、エステルとして、例えば、薬学的に許容できるエステルとして調製されてもよい。例えば、化合物のカルボン酸官能基が、その対応するエステル（例えば、メチルエステル、エチルエステル又は他のエステル）に変換され得る。さらに、化合物のアルコール基が、その対応するエステル（例えば、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、又は他のエステル）に変換され得る。

【0297】

ダクチノマイシンは、プロドラッグとして、例えば、薬学的に許容できるプロドラッグとして調製されてもよい。「プロ－ドラッグ」及び「プロドラッグ」という用語は、本明細書で交換可能に用いられ、活性親薬剤をインビボで放出する任意の化合物を表す。プロドラッグは、医薬品の望ましい種々の質（例えば、溶解度、バイオアベイラビリティ、生産性など）を高めるものである。したがって、本開示の化合物は、プロドラッグの形態で送達され得る。それゆえに、本開示は、本特許請求される化合物のプロドラッグと、それを送達する方法と、それを含む組成物とに及ぶように意図されている。「プロドラッグ」は、かかるプロドラッグを対象に投与した際に、本開示の活性親薬剤をインビボで放出する任意の共有結合した担体を含むことが意図されている。本開示のプロドラッグは、化合物に含まれる官能基を修飾することによって調製され、この修飾は、常套的な操作又はインビボのいずれかで切り離されて親化合物をもたらす。プロドラッグは、本開示の化合物であって、ヒドロキシ基、アミノ基、スルフヒドリル基、カルボキシ基、又はカルボニル基が、インビボで切り離され得る任意の基に結合して、それぞれ遊離ヒドロキシル基、遊離アミノ基、遊離スルフヒドリル基、遊離カルボキシ基、又は遊離カルボニル基を形成する、化合物を含む。

【0298】

プロドラッグの例として、以下に限定されないが、本開示の化合物における、ヒドロキシ官能基のエステル類（例えば、酢酸塩、ジアルキルアミノ酢酸塩類、ギ酸塩類、リン酸塩類、硫酸塩類、及び安息香酸塩の誘導体）及びカルバメート類（例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノカルボニル）、カルボキシル官能基のエステル類（例えば、エチルエステル類、モルホリノエタノールエステル類）、アミノ官能基のＮ－アシル誘導体（例えば、Ｎ－アセチル）、Ｎ－マンニッヒ塩基類、シッフ塩基類及びエナミノン類、並びにケトン官能基及びアルデヒド官能基のオキシム類、アセタール類、ケタール類、エノールエステル類などが挙げられる。Ｂｕｎｄｅｇａａｒｄ，Ｈ．，Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，ｐ１－９２，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ－Ｏｘｆｏｒｄ（１９８５）を参照されたい。

【0299】

本開示の組成物は、経口的、経鼻的、経皮的、経肺的、吸入的、頬側、舌下、腹腔内、皮下、筋肉内、静脈内、経直腸的、胸膜内、髄腔内、及び非経口的に投与され得る。一実施形態において、化合物は経口的に投与される。当業者は、特定の投与経路の優位性を認識するであろう。

【0300】

経口投与用に製剤化された本開示の組成物は、伝統的な薬学的方法を用いて顆粒状にされた物質を含むか、又は薬学的に許容できる賦形剤（例えば、微結晶性セルロース、マニトール、ソルビトール、デンプン、イオン交換樹脂など）に吸着され、錠剤に押し固められているか、若しくはカプセル剤に充填された、組成物を含む。錠剤又はカプセル剤は、小腸又は結腸に送達されるように、任意選択的に腸溶コーティングをされていてもよい。

【0301】

本出願に開示されたダクチノマイシンのナノ粒子製剤は、腸粘膜を通過する粒子取り込み経路によって、ダクチノマイシンの経口バイオアベイラビリティを改善することができる。

【0302】

また、本出願のナノ粒子組成物を、放出制御錠剤又はマトリックスに組み込んで、ダクチノマイシンの放出をさらに調整しつつ、有効性を維持することができる。

【0303】

あるいは、本出願のナノ粒子組成物は、押出球形化を用いて製造されるか、又は流動層ワースターコーティングを用いてノンパレイル（ｎｏｎ－ｐａｒｅｉｌ）上に薬剤層形成された、ペレット剤又はビーズとして製剤化されてもよい。ビーズを、放出制御ポリマー又は腸溶ポリマーでコーティングして、薬剤放出をさらに調節してもよい。

【0304】

ダクチノマイシンビーズを、他の化学療法薬のビーズと所定の比で組み合わせ、カプセル剤に装填して有効的な投与を行うこともできる。

【0305】

該化合物、又はその薬学的に許容できる塩、そのエステル、若しくはそのプロドラッグは、経口的、経鼻的、経皮的、経肺的、吸入的、頬側、舌下、腹腔内、皮下、筋肉内、静脈内、経直腸的、胸膜内、髄腔内、及び非経口的に投与される。一実施形態において、化合物は経口的に投与される。当業者は、特定の投与経路の優位性を認識するであろう。

【0306】

全身投与は、経粘膜的又は経皮的な手段によって行われ得る。経粘膜的投与又は経皮的投与に対しては、浸透させるバリアに適切な浸透剤を製剤に用いる。こうした浸透剤は、当該技術分野で一般的に知られており、例えば、経粘膜的投与に対しては、界面活性剤、胆汁酸塩、及びフシジン酸誘導体などがある。経粘膜的投与は、鼻内噴霧又は座薬の使用により実施することができる。経皮的投与に対しては、当該技術分野で一般的に知られるように、活性化合物を、軟膏、塗剤、ゲル、又はクリームに製剤化する。

【0307】

無菌の注射用溶液は、適切な溶媒中の活性化合物の所要量と、上記に列挙した成分のうちの一つ又はその組み合わせとを混合し、必要に応じて濾過滅菌することによって、調製することができる。分散液は通例、活性化合物を、基本分散媒と、上記に列挙した成分とは別の必要成分とを含む無菌媒体に混合することによって調製する。無菌注射用溶液の調製用の無菌粉末の場合には、調製方法は、真空乾燥方式及び凍結乾燥方式であり、これは、活性成分の粉末、それに加えて予め滅菌濾過したその溶液から得られる任意の付加的な所望成分の粉末を産するものである。

【0308】

経口組成物は、一般に、不活性希釈剤又は食用薬学的に許容できる担体を含む。それらを、ゼラチンカプセル内に封入するか、錠剤に圧縮することができる。治療的経口投与の目的のために、活性化合物を賦形剤と混合し、錠剤、トローチ剤、又はカプセル剤の形態で用いることができる。口腔用組成物はまた、口腔洗浄剤として使用するために流動性担体を用いて調製してもよく、この場合、流動性担体中の化合物は、経口的に塗布され、濯いで吐き出されるか、又は飲み込まれる。医薬適合性のある結合剤、及び／又は補助物質を、組成物の一部として含めることができる。錠剤、丸薬、カプセル剤、トローチ剤などには、任意の以下の成分、又は類似した性質の化合物：結合剤、例えば微晶質セルロース、トラガカントゴムもしくはゼラチン；賦形剤、例えばデンプン若しくはラクトース、崩壊剤、例えばアルギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）、若しくはコーンスターチ；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム若しくはステロテ（Ｓｔｅｒｏｔｅｓ）；流動促進剤、例えばコロイド状二酸化ケイ素；甘味剤、例えばスクロース若しくはサッカリン；又はフレーバー剤、例えばペパーミント、サリチル酸メチル、若しくはオレンジフレーバー、を含むことができる。

【0309】

吸入による投与に対しては、化合物は、加圧容器、又はディスペンサー（適切な噴霧剤（例えば、二酸化炭素などのガス）を含む）、又は噴霧器からのエアロゾル噴霧の形態で送達される。

【0310】

本化合物を用いる投与レジメンは、患者の型、種、年齢、体重、性別、病状；治療する症状の重症度；投与経路；患者の腎機能及び肝機能；使用される特定の化合物又はその塩などを含めた種々の因子に従って選択される。通常の知識を有する医師又は獣医は、その症状の進行を防ぐか、阻止するか、又は抑えるのに必要な薬剤の有効量を容易に決定し、処方することができる。

【0311】

投与レジメンは、本開示の化合物の毎日の投与（例えば２４時間毎）であり得る。投与レジメンは、連日の、例えば、少なくとも連続２日間、少なくとも連続３日間、少なくとも連続４日間、少なくとも連続５日間、少なくとも連続６日間、少なくとも連続７日間の毎日の投与であり得る。投与は、１日に２回以上、例えば、１日に（２４時間当たり）２回、３回、又は４回であり得る。投与レジメンは、毎日の投与の後に、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、又は少なくとも６日の投与しない日を設けた投与であり得る。例えば、本開示の化合物は、２４時間に少なくとも１回投与された後、少なくとも６日間投与されず、その後に必要とする対象に投与される。

【0312】

本開示の開示された化合物の製剤化及び投与の技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９^ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９９５）に記載されている。ある実施形態では、本明細書に記載の化合物及びその薬学的に許容できる塩は、薬学的に許容できる担体又は希釈剤と組み合わせて医薬製剤に用いられる。好適な薬学的に許容できる担体には、不活性な固体充填剤又は希釈剤、及び無菌水溶液又は有機溶液が含まれる。化合物は、こうした組成物中に、本明細書に記載の範囲内の望ましい投与量を与えるのに十分な量で含まれることになる。
併用療法

【0313】

本開示のダクチノマイシン組成物は、一つ又は複数の他の化学療法剤、例えば、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、又は高メチル化阻害剤と合わせて投与され得る。

【0314】

一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤とが同時に投与され得る。

【0315】

一態様では、ダクチノマイシンと他の化学療法剤とは、この両方が同じナノ粒子に封入された状態で、同時に投与され得る。

【0316】

一態様では、ダクチノマイシンと他の化学療法剤とは、同時に又は逐次的に投与され得るが、異なるナノ粒子に封入された状態である。

【0317】

一態様では、ダクチノマイシンと他の化学療法剤とは、ダクチノマイシンがナノ粒子に封入され、他の化学療法剤がナノ粒子に封入されない状態で、同時に又は逐次的に投与され得る。

【0318】

一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤とは、別々に、すなわち逐次的に投与され得る。例えば、ダクチノマイシンナノ粒子は、他の化学療法剤の前に投与されてもよい。あるいは、ダクチノマイシンナノ粒子は、他の化学療法剤の後に投与されてもよい。

【0319】

一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤の投与の間隔は、分単位、時間単位、又は日単位であり得る。例えば、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤の投与の間隔は、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、１．５時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１８時間、１日、１．５日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、又は３０日である。一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤の投与の間隔は１か月よりも長い。

【0320】

トポイソメラーゼ阻害剤の例としては、以下に限定されないが、イリノテカン、トポテカン、カンプトテシン、ラメラリンＤ、エトポシド、テニポシド、ミトキサントロン、アムサクリン、エリプチシン、アウリントリカルボン酸、及びＨＵ－３３１が挙げられる。

【0321】

白金系治療剤の例としては、以下に限定されないが、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、ネダプラチン、四硝酸トリプラチン、ピコプラチン、及びサトラプラチンが挙げられる。

【0322】

アントラサイクリン系抗生物質の例としては、以下に限定されないが、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、又はイダルビシンが挙げられる。

【0323】

タキサンの例としては、以下に限定されないが、パクリタキセル、ドセタキセル、バッカチンＩＩＩ、及び１０－デアセチルバッカチンが挙げられる。

【0324】

チロシンキナーゼ阻害剤の例としては、以下に限定されないが、イマチニブ、エンザスタウリン、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、エベロリムス、シロリムス、及びテムシロリムスが挙げられる。

【0325】

ヌクレオシド類似体の例としては、以下に限定されないが、シタラビン、ゲムシタビン、カペシタビン、ジダノシン、ビダラビン、ＢＣＸ４４３０、エムトリシタビン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、アシクロビル、エンテカビル、スタブジン、テルビブジン、ジドブジン、イドクスウリジン、及びトリフルリジンが挙げられる。

【0326】

ＦＬＴ３阻害剤の例としては、以下に限定されないが、Ｒｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、及びギルテリチニブが挙げられる。（Ｆａｔｈｉ，Ａ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．２０１７，９８：３３０－３３６）。

【0327】

高メチル化阻害剤の例としては、以下に限定されないが、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリンが挙げられる。（Ｆｌｏｔｈｏ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ（２００９）２３，１０１９－１０２８及びＦｉｇｕｅｒｏａ，Ｍ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ（２００９）１１４（１６），３４４８－３４５８）。

【0328】

本開示のダクチノマイシン組成物は、ＦＬＴ３阻害剤と共に投与され得る。臨床試験の結果、治療を受けた患者の約６０％でダクチノマイシンの有効性が示された。サブセット分析の結果、ダクチノマイシンに反応しない者は、ＦＬＴ３変異に対して陽性であり、これは試験したＡＭＬ患者の約３０％に見られている。ＦＬＴ３変異には２種類あり、受容体の膜近傍ドメイン近傍の遺伝子内縦列重複（ＩＴＤ）と、チロシンキナーゼドメインの活性化ループの点変異（ＴＫＤ変異）とがある。ＴＫＤ変異は、患者の約７％を占める一方、ＩＴＤ変異は、小児科及びＭＤＳを有するとして予め分類されたＡＭＬ患者ではあまり見られない。（Ｆａｔｈｉ，Ａ．Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．２０１７，９８：３３０－３３６）。

【0329】

本開示のダクチノマイシン組成物とＦＬＴ３阻害剤（例えば、Ｒｙｄａｐｔ（登録商標）（ミドスタウリン）、ソラフェニブ、レスタウルチニブ、キザルチニブ、ポナチニブ、クレノラニブ、及びギルテリチニブ）との組み合わせは、ＡＭＬ患者の治療にさらに高い有効性をもたらす場合がある。

【0330】

本開示のダクチノマイシン組成物は、高メチル化阻害剤と共に投与され得る。高メチル化阻害剤の例としては、以下に限定されないが、アザシチジン、デシタビン、及びゼブラリンが挙げられる。（Ｆｌｏｔｈｏ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ（２００９）２３，１０１９－１０２８及びＦｉｇｕｅｒｏａ，Ｍ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ（２００９）１１４（１６），３４４８－３４５８）。

【0331】

ダクチノマイシン、すなわちナノ粒子に封入されたダクチノマイシンに加えて、一つ又は複数の他の化学療法薬（例えば、トポイソメラーゼ阻害剤、白金系治療剤、アントラサイクリン系抗生物質、タキサン、チロシンキナーゼ阻害剤、ヌクレオシド類似体、ＦＬＴ３阻害剤、及び高メチル化阻害剤）の投与を含む方法のいずれかに関して、他の化学療法薬の適正な治療有効量を決定することは、当業者の通常の技術水準の範囲内である。これらの追加の化学療法薬の任意の一般的に用いられる治療有効量が使用され得る。

【0332】

本開示の方法は、追加の作用剤、例えば、以下に限定されないが、レチノイン酸（例として、全てのトランス－レチノイン酸）、バルプロ酸、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ｐ５３安定剤、これらの任意の組み合わせなどのさらなる投与と組み合わされてもよい。

【0333】

一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と追加の作用剤とが別々に、すなわち逐次的に投与され得る。例えば、ダクチノマイシンナノ粒子は、追加の作用剤の前に投与されてもよい。あるいは、ダクチノマイシンナノ粒子は、追加の作用剤の後に投与されてもよい。

【0334】

一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と追加の作用剤の投与の間隔は、分単位、時間単位、又は日単位であり得る。例えば、ダクチノマイシンナノ粒子と他の化学療法剤の投与の間隔は、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、１．５時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１８時間、１日、１．５日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、又は３０日である。一態様では、ダクチノマイシンナノ粒子と追加の作用剤の投与の間隔は１か月よりも長い。

【0335】

ヒストンデアセチラーゼ阻害剤には、以下に限定されないが、クラスＩ阻害剤（ＨＤＡＣ－１、ＨＤＡＣ－２、ＨＤＡＣ－３、及びＨＤＡＣ－８）、クラスＩＩ阻害剤（ＨＤＡＣ－４、ＨＤＡＣ－５、ＨＤＡＣ－６、ＨＤＡＣ－７、ＨＤＡＣ－９、及びＨＤＡＣ－１０）、クラスＩＩ阻害剤（サーチュイン）、及びクラスＩＶ阻害剤（ＨＤＡＣ－１１）が含まれる。例えば、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、ボリノスタット、ロミデプシン、チダミド、パノビノスタット、ベリノスタット、バルプロ酸誘導体（例えばバルプロ酸マグネシウム）、モセチノスタット、アベキシノスタット、エンチノスタット、ＳＢ９３９、レスミノスタット、ギビノスタット、キシノスタット、ＨＢＩ－８０００、ケベトリン、ＣＵＤＣ－１０１、ＡＲ－４２、ＣＨＲ－２８４５、ＣＨＲ－３９９６、４ＳＣ－２０２、ＣＧ２００７４５、ＡＣＹ－１２１５、ＭＥ－３４４、又はスルホラファンである。

【0336】

プロテアソーム阻害剤としては、以下に限定されないが、ラクタシスチン、ジスルフィラム、エピガロカテキン－３－ガラート、マリゾミブ（サリノスポラミドＡ）、オプロゾミブ、デランゾミブ、エポキソミシン、ＭＧ１３２、ベータ－ヒドロキシ・ベータ－酪酸メチル、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ、及びイキサゾミブが挙げられる。

【0337】

ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤としては、以下に限定されないが、ティピファニブ、ロナファーニブ、ケトメリン酸Ａ、クラバリン酸、ＦＰＴ阻害剤Ｉ（ｓｃ－２２１６２５）、ＦＰＴ阻害剤ＩＩ（ｓｃ－２２１６２６）、ＦＰＴ阻害剤ＩＩＩ（ｓｃ－２２１６２７）、ＦＰＴアーゼ阻害剤Ｉ（ｓｃ－２２１６３２）、ＦＰＴアーゼ阻害剤ＩＩ（ｓｃ－２２１６３３）、ＦＴＩ－２７７トリフルオロ酢酸塩、ＣＧＴＩ－２９７、Ｌ－７４４，８３２二塩酸塩、マニュマイシンＡ、ギンゲロール、グリオトキシン、及びアルファ－ヒドロキシルファルネシルホスホン酸が挙げられる。

【0338】

ｐ５３安定剤としては、以下に限定されないが、Ｔｅｎｏｖｉｎ－１、ＢＩ２５３６、ＣＰ－３１３９８、ＲｂＢＰ６アイソフォーム３、ＣＢＳ９１０６（Ｃｈｅｎ，Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ ２０１６，１５（６）：８４０－８４９；Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２００９ ＡＳＣＯ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ（Ｐｏｓｔ－Ｍｅｅｔｉｎｇ Ｅｄｉｔｉｏｎ）．Ｖｏｌ ２７，Ｎｏ １５Ｓ，２００９：８６０１；Ｄｌａｍｉｎｉ，Ｚ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ：ＡＡＣＲ １０１ｓｔ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ２０１０ Ａｐｒ １７－２１，２０１０）が挙げられる。

【0339】

「約」という用語は、他の文脈において本明細書で使用される場合、特に明記されていない限り、列挙された値（例えば、量、分子量、用量、温度、時間、割合など）の±１０％、±９％、±８％、±７％、±６％、±５％、±４％、±３％、±２％、又は±１％を表す。

【0340】

本明細書で用いられる全ての割合及び比は、特に明記しない限り、重量基準である。本開示の他の特徴及び利点は、種々の実施例から明らかになる。提供される実施例は、本開示の実施に有益な種々の構成要素及び方法を示している。実施例は、特許請求される発明を制限するものではない。本開示に基づいて、当業者は、本開示の実施に有益な他の構成要素及び方法を特定し、使用することができる。

【実施例】

【0341】

本明細書に記載された開示がさらに効果的に理解されるように、実施例を以下に提供する。これらの実施例は、単に例示を目的とするものであり、本開示を何ら制限するものと解釈されるべきではない。
実施例１：ダクチノマイシンの薬物動態

【0342】

図１Ａ及び図１Ｂはそれぞれ、ダクチノマイシンの経時的な全身濃度を示すグラフである。これらのグラフのデータは、ダクチノマイシン１ｍｇ／ｍ^２（２７μｇ／ｋｇ）を投与した１６歳～５３歳の２１人の患者から取得したものである。これらのデータによると、ダクチノマイシンの大部分が、対象への投与後の最初の１時間に高濃度で放出されている。初期の高放出は、ダクチノマイシン投与に関連する毒性及び有害事象の一因となり得る。

【0343】

図２は、Ｃ_ｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）（グラフＡ）とＡＵＣ_{０－６時間}（ｍｇ／Ｌ・分）（グラフＢ）とをダクチノマイシン投与量（ｍｇ／ｍ^２）の関数として示す一対のグラフである。３０歳よりも若い対象へのＩＶ投与は１ｍｇ／ｍ^２（２７μｇ／ｋｇ）であり、３０歳以上の対象へのＩＶ投与は１．５ｍｇ／ｍ^２（４０μｇ／ｋｇ）である。ＡＵＣ_{０－６時間}が大きい対象は、一層の有害事象を示した。有害事象を示した患者のＡＵＣ_{０－６時間}（４ｍｇ／Ｌ・分）は、有害事象を示していない対象のそれ（２．６７ｍｇ／Ｌ・分）よりも１．４６倍大きかった。
実施例２：アクチノマイシンＤ封入ナノ粒子の調製

【0344】

アクチノマイシンＤをジクロロメタン（ＤＣＭ）に溶解して２５ｍｇ／ｍＬの保存溶液（「ＡＰＩ溶液」）とした。Ｒｅｓｏｍｅｒ Ｒ ２０２Ｓ及びＲ ２０３ＨをＤＣＭ中にて同じ濃度で調製し、Ｒｅｓｏｍｅｒ Ｄ５０５０ ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５重量％、ＰＥＧ）及び１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５重量％、ＰＥＧ）をＤＣＭ中にて５０ｍｇ／ｍＬで調製した。ＡＰＩ溶液をポリマー溶液に、ポリマーとＡＰＩの量の比が１０：１（ｗ／ｗ）に達するまで加えた。最終溶液を、使用前に均一になるまでボルテックスした。２％ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）（分子量９，０００～１０，０００Ｄａ、８０％加水分解）を界面活性剤を用いて水相として調製した。ナノ粒子乳濁液を作製するために、ポリマー／アクチノマイシンＤ溶液を少量の水相に、水相を高速でボルテックスしながら滴加した。ポリマー溶液全体を加えた後に（有機相：水相の体積比が約１：７）、形成された乳濁液をさらに２０秒間十分ボルテックスした。混合物を直ちに超音波処理器（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｓｏｎｉｃ Ｄｉｓｍｅｍｂｒａｔｏｒ Ｍｏｄｅｌ ５００）に移した。乳濁液を氷水浴（０℃）に浸漬し、所望の粒子サイズ（２００ｎｍ未満）が得られるまで５～８分間超音波処理（６５％振幅、２０秒入、８秒切）した。ナノ粒子サイズをＭａｌｖｅｒｎ Ｎａｎｏ－ＺＳゼータサイザーを用いて定期的に調べた。続いて、乳濁液を攪拌バルク水相（２％ＰＶＡ）溶液に注ぎ、ＤＣＭが完全に蒸発するまで室温で少なくとも３時間攪拌した（５００ｒｐｍ）。

【0345】

ナノ粒子の精製については、固化又は硬化したナノ粒子を固定角ローター（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ ５４１５Ｃ）を用いて１４，０００×ｒｐｍで３０分間遠心分離した。上澄み液を廃棄し、ナノ粒子をｄｄＨ_２Ｏで洗浄し、１４，０００×ｒｐｍでさらに３０分間遠心分離した。大きい粒子を取り除くために、ペレットをｄｄＨ_２Ｏに再懸濁し、３，５００×ｒｐｍで５分間遠心分離した。続いて、採取した上澄み液をＡｍｉｃｏｎ（登録商標）Ｕｌｔｒａ Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌフィルタ（５０ｋＤカットオフ）で濃縮し、１４，０００×ｒｐｍで１０分間遠心分離して遊離薬剤を除去した。精製したナノ粒子を最大数週間４℃で保管するか、又はスクロース（１０～３０％）で凍結乾燥保護及び凍結保護した後に凍結乾燥して、新鮮な状態で使用することができる。薬剤負荷をＨＰＬＣを用いて評価した。

【0346】

ＡｃｔＤナノ粒子製剤の調製に関するさらなる指針は、ＭｃＣａｌｌ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｖｉｓ．Ｅｘｐ．（８２），ｅ５１０１５に記載されており、この文献はその全体が参照により援用される。
実施例３：代表的なＡｃｔＤナノ粒子製剤

【0347】

以下のＡｃｔＤナノ粒子製剤を前述の実施例に従って調製した。

【0348】

【表1】

【0349】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈを含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、平均サイズが１７６．９ｎｍのナノ粒子を用いており、純度が９６．３％であると算出された。（図１５）。ゼータ電池：－２３．６３±０．４９。

【0350】

【表2】

【0351】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％ｍＰＥＧ）を含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、平均サイズが１４３．５ｎｍのナノ粒子を用いており、純度が９６．７％であると算出された。（図１６）。ゼータ電池：－４５．９３±２．５４。

【0352】

【表3】

【0353】

上述の二つのダクチノマイシン封入ナノ粒子の例（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ（図１７）及びＲｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％ｍＰＥＧ）（図１８））を、２００ｎｍの界面活性剤を含まない酢酸セルロース膜フィルタに通した。回収率：７９．３％（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈ）；５５．２％（Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％ｍＰＥＧ））。
実施例４：ＡｃｔＤナノ粒子製剤の安定性

【0354】

上述のダクチノマイシン封入ナノ粒子の４種全ては、精製水中にて、－２０℃、４℃、及び２５℃で１か月間安定であることがわかった。

【0355】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０２ Ｓを含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、これら全ての条件下で９４％を超える純度を１か月間保持した。ゼータ電池：－１１．９０±２．１８ｍＶ（－２０℃で１か月）、－５．７７±０．９８ｍＶ（４℃で１か月）、－１４．３７±０．４７ｍＶ（２５℃／６０ＲＨで１か月）。保管条件：３０％スクロース（－２０℃）、精製水（４℃及び２５℃／６０ＲＨ）。（図１９）

【0356】

【表4】

【0357】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）Ｒ ２０３ Ｈを含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、これら全ての条件下で９５％を超える純度を１か月間保持した。ゼータ電池：－２３．６３±０．４９ｍＶ（Ｔ_０）、－０．５９±３．０７ｍＶ（－２０℃で１か月）、－９．０６±１．３７ｍＶ（４℃で１か月）、－１３．７６±０．５１ｍＶ（２５℃／６０ＲＨで１か月）。保管条件：３０％スクロース（－２０℃）、精製水（４℃及び２５℃／６０ＲＨ）。（２０℃：図２０、４℃及び２５℃／６０ＲＨ：図２１）

【0358】

【表5】

【0359】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）１００ＤＬ ｍＰＥＧ ５０００（２５％）を含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、これら全ての条件下で９５％を超える純度を１か月間保持した。ゼータ電池：－４５．９３±２．５４ｍＶ（Ｔ_０）、－８．７４±０．５６ｍＶ（－２０℃で１か月）、－１１．０７±０．２３ｍＶ（４℃で１か月）、－９．８９±０．７１ｍＶ（２５℃／６０ＲＨで１か月）。保管条件：３０％スクロース（－２０℃）、精製水（４℃及び２５℃／６０ＲＨ）。（－２０℃：図２２、４℃及び２５℃／６０ＲＨ：図２３）。

【0360】

【表6】

【0361】

例えば、Ｒｅｓｏｍｅｒ（登録商標）５０５０ＤＬＧ ｍＰＥＧ ５０００（３５％）を含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、これら全ての条件下で９４％を超える純度を１か月間保持した。ゼータ電池：－４５．９３±２．５４ｍＶ（Ｔ_０）、－３．８３±０．６１ｍＶ（－２０℃で１か月）、－９．７４±０．９５ｍＶ（４℃で１か月）、－１７．６３±１．０６ｍＶ（２５℃／６０ＲＨで１か月）。保管条件：３０％スクロース（－２０℃）、精製水（４℃及び２５℃／６０ＲＨ）。

【0362】

（－２０℃：図２４、４℃及び２５℃／６０ＲＨ：図２５）。

【0363】

【表7】

【0364】

例えば、ペグ化されたポリＤ，Ｌラクチドを含むダクチノマイシン封入ナノ粒子は、これら全ての条件下で９５％を超える純度を１か月間保持した。ゼータ電池：－１１．０７±０．２３ｍＶ（４℃で１か月）、－９．８９±０．７１ｍＶ（２５℃／６０ＲＨで１か月）。（図２６）。

【0365】

【表8】

【0366】

実施例５：ダクチノマイシン封入ナノ粒子のインビトロ放出－ｍＰＥＧ化ナノ粒子と非ｍＰＥＧ化ナノ粒子の比較

【0367】

４種のプロトタイプであるダクチノマイシン封入ナノ粒子組成物をインビトロで３～１０日持続放出させた。

【0368】

非ＰＥＧ化ポリマー（Ｒ２０３Ｈ）は、ｍＰＥＧ化（１００ ＤＬ－ＰＥＧ及び５０：５０ ＤＬＧ ＰＥＧ）ポリマーに比べて、１２日間にわたってダクチノマイシンのゆっくりとした持続放出を示した。

【0369】

インビボ状況下では、非ｍＰＥＧ化ポリマーから放出したＡＰＩは、ｍＰＥＧ化ポリマーよりも速い速度で除去された。（図２７）。

【0370】

別の実験では、ｍＰＥＧ化ナノ粒子及び非ｍＰＥＧ化ナノ粒子におけるダクチノマイシン封入ナノ粒子のインビトロ放出を、４℃で２か月保管した後に評価した。（図２８）。

【0371】

４℃で２か月保管した後に、ＰＥＧ化ポリＤ，Ｌラクチドナノ粒子からのダクチノマイシンのゆっくりとした持続放出を観察した（Ａ）。ＰＥＧ化ＤＬＧナノ粒子（Ｂ）からのダクチノマイシン放出は非製剤化ＡＰＩで観察される放出と同様であり、これは、ナノ粒子が４℃で２か月経つと安定ではないことを示唆している。
実施例６：遊離アクチノマイシンＤとｍＰＥＧ化ナノ粒子及び非ｍＰＥＧ化ナノ粒子に封入されたアクチノマイシンＤとのラットにおける忍容性

【0372】

遊離アクチノマイシンＤと製剤化されたアクチノマイシンＤ（０．５ｍｇ／ｋｇ）とをＩＶ投与した。

【0373】

体重の有意な減少が遊離ＡＰＩ投与ラットで見られ、治療７日後にわたって徐々に回復した。

【0374】

比較的に少ない体重減少が、ＰＥＧ化ポリＤ，Ｌラクチド（ＤＬ－ＰＥＧ２５％）及び非ＰＥＧ化ポリＤ，Ｌラクチド（Ｒ２０３Ｈ）に封入されたダクチノマイシンを投与した動物で示された。

【0375】

７日目で通常レベルに戻った遊離アクチノマイシンと比較すると、ＤＬ－ＰＥＧ（２５％）投与ラットでは体重の有意な増加が４日目に観測された。

【0376】

また、Ｒ２０３Ｈ投与ラットは７日目で体重の増加を示した。

【0377】

体循環における被処理ダクチノマイシン濃度の薬物動態評価：ＰＥＧ化ポリマーに対応するダクチノマイシンの総量（遊離及び封入されたもの）を算出するためにメタノールとギ酸の混合液に抽出した全血漿サンプルのＣ_ＭＡＸは、非製剤化ポリマー又は非ＰＥＧ化ポリマーで観察された値よりも有意に高かった。ＰＥＧ化ポリマーに封入されたダクチノマイシンの十分なレベルが、６時間経った抽出でも依然として循環していたが、これは非ＰＥＧ化ポリマー又は非製剤化ＡＰＩとは対照的である。

【0378】

また別の実験では、ラットに、単一用量（０．５ｍｇ／ｋｇ）の遊離Ａｃｔ Ｄ及び製剤化Ａｃｔ ＤをＩＶ（静脈内）注射経由で投与した。

【0379】

体重の有意な減少が遊離ダクチノマイシンの投与後にラットで見られ、治療７日後にわたって徐々に回復した。（図２９）

【0380】

ＰＥＧ化ポリＤ，Ｌラクチドナノ粒子（ＤＬ－ＰＥＧ２５％）及び非ＰＥＧ化ポリＤ，Ｌラクチドナノ粒子（Ｒ２０３Ｈ）を投与したラットでは、比較的に少ない体重減少を示した。（図２９）

【0381】

７日目で通常レベルに戻った遊離ダクチノマイシンと比較すると、ＤＬ－ＰＥＧ（２５％）投与ラットでは体重の有意な増加が４日目に観測された。（図２９）

【0382】

ＰＥＧ化ポリマーに封入されたＡｃｔ ＤのＣ_ＭＡＸは、非製剤化ＡＰＩ及び遊離ＡＰＩよりも有意に高い。（図３０）

【0383】

非製剤化ＡＰＩのＣ_ＭＡＸ観測値の方が低いが、これは体重に及ぼす有害作用と関連している。

【0384】

投与６時間後、ＰＥＧ化ポリマーに封入された十分なＡｃｔ Ｄが、非ＰＥＧ化ポリマーに封入されたＡｃｔ Ｄに比べて、血漿内に保持された。（図３０）

【0385】

ＤＬ－ＰＥＧ２５％ナノ粒子は、最小限の有害作用で高い全身ＡＰＩレベルを示している。
実施例７：遊離アクチノマイシンＤとｍＰＥＧ化ナノ粒子及び非ｍＰＥＧ化ナノ粒子に封入されたアクチノマイシンＤとのラットにおける薬物動態

【0386】

ラットに非製剤化アクチノマイシンＤ及び製剤化アクチノマイシンＤの単一用量（０．３ｍｇ／ｋｇ）をＩＶ注射により投与した。（図３１）

【0387】

所定の時間に処理した血漿サンプルを、体循環におけるＡＰＩの総量（遊離及び封入されたもの）を算出するためにメタノール及びギ酸の混合液に抽出した。

【0388】

ＰＥＧ化ポリマー製剤化ＡＰＩ（ＤＬ－ＰＥＧ２５％及びＤＬＧ－ＰＥＧ３５％）は、非ＰＥＧ化ポリマー（Ｒ２０２Ｓ及びＲ２０３Ｈ）で観測されたＡＰＩに比べて、最大４８時間まで体循環に存在した。

【0389】

ＰＫプロファイルは、ラット忍容性の検討（前出の実施例）で観測されたプロファイルと類似している。

【0390】

４種の製剤化されたプロトタイプのうち、ＤＬ－ＰＥＧ（２５％）は、最小限の有害作用で最も良好なＰＫプロファイルを示している。

【0391】

これらの実験から、遊離アクチノマイシンＤとナノ粒子製剤のヒト等価用量（ＨＥＤ）及びＣｍａｘ値を以下に示すように算出した：

【表9】

実施例８：ラットにおける遊離アクチノマイシンＤ又はナノ粒子封入アクチノマイシンＤの単一用量静脈内投与

【0392】

ラットにおいて静脈内投与で投与された場合の、遊離アクチノマイシンＤ（すなわちナノ粒子封入ではない）と、アクチノマイシンＤナノ粒子（ＮＰ－ＡｃｔＤ）製剤を含む４種の組成物との忍容性の対比。

【0393】

投与時に６～８週齢で１５０～１７５ｇである雌のスプラーグドーリーラット（ＨＳｄ：ＳＤ）をこれらの検討に用いた。これは、投与後１４日間観察した単一用量試験である。試験の１日目に、各動物は、以下の表の試験デザインに従って、１ｍＬ／ｋｇの固定容量中の９００μｇ／ｋｇの遊離アクチノマイシンＤ又はＮＰ－ＡｃｔＤ製剤（９００μｇ／ｋｇの活性物質）を受けた。

【0394】

【表10】

【0395】

日々の臨床観察、死亡率、体重、及び摂食量といったパラメータをモニタした。投与後１４日目に完全剖検を行い、その際に器官の重量及び肉眼的所見を調べることになる。器官を将来の組織学的検査のために保存し、アクチノマイシンＤ／ＮＰ－ＡｃｔＤの蓄積を測定するために、肺、肝臓、膵臓、脾臓、脳、及び腎臓を液体窒素で凍結する。

【0396】

１日目の投与後に薬物動態評価を行うために、投与０．０８３時間後、０．２５時間後、０．５時間後、１時間後、２時間後、６時間後、及び２４時間後に血液を採取した。血清サンプルを臨床化学検査用に採取し、全血サンプルを血液学的検査用に採取する。

【0397】

体重分析（図３２）。Ａｃｔ Ｄ及びＮＰ－ＡｃｔＤ（９００μｇ／ｋｇ）の静脈内投与の後、遊離Ａｃｔ Ｄを投与した動物は体重が一様に減少し、投与７日後でも回復できなかった。対照的に、４種のＮＰ－ＡｃｔＤ製剤を投与された動物には、薬剤に関連した体重減少が見られなかった。したがって、遊離ＡｃｔＤを投与された動物とＮＰ－ＡｃｔＤを投与された動物の間で、体重減少の程度に明らかな違いが観察された。

【0398】

遊離Ａｃｔ Ｄ群の動物では、投与３日後に、立毛、活性の低下、鼻孔での出血、及び背を丸めた姿勢などの毒性を示し、これらは経時的に悪化した。

【0399】

一方、ナノ粒子－Ａｃｔ Ｄ製剤を投与した動物は、何ら毒性の徴候もなく正常であるように見えた。しかしながら、投与後７日目には、ＮＰ－ＡｃｔＤ Ｒ２０２Ｓ製剤及びＮＰ－ＡｃｔＤ ＤＬＧ－ＰＥＧ ３５％製剤を投与した各群の２～３匹の動物に注射部位の痂皮形成とわずかな活性低下が見られたが、重篤ではなく進行性でもなかった。

【0400】

死亡率（図３３）。投与後６日目に、遊離ＡｃｔＤ群の１匹の動物が瀕死の状態となり、安楽死させられた（疼痛と苦痛を緩和するためにＩＡＣＵＣ規則に従って行った）。投与後７日目に、遊離Ａｃｔ Ｄ群のさらに２匹の動物を、極めて悪い健康状態のために安楽死させなければならなかった。

【0401】

９日目、遊離ＡｃｔＤ群のさらなる２匹の動物を、悪い健康状態と健康不全のために安楽死させた。

【0402】

したがって、遊離ＡｃｔＤ群の投与後１３日後、６分の１の動物のみが残ったが、立毛及び変色尿などの毒性の徴候を継続して示した。

【0403】

ＡｃｔＤ群の投与１３日後、１匹の動物だけが残り、依然として悪い健康状態を示した（進行中の研究）。したがって、ＡｃｔＤ群における死亡率は約８０％である。対照的に、ＮＰ－ＡｃｔＤ製剤群の全動物は、注射部位の炎症や立毛などの最小限の毒性を示す傾向を伴って生存し（１００％生存率）、これはナノ粒子から遊離ＡｃｔＤがゆっくりと放出されることに起因すると考えられている。また、体重の増加には全く影響を与えなかった。遊離アクチノマイシンＤはインビボで毒性があるので、これらの結果は、ナノ粒子ＡｃｔＤ製剤が宿主毒性を低減する方法として有効であることを示している。

【0404】

本出願は、その精神又は基本的な特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態で具現化され得る。したがって、前述の実施形態は、本明細書に記載の用途に限定されることなく、あらゆる点において例示的なものであるとみなされるべきである。それゆえに、本出願の適用範囲は、前述の説明よりもむしろ特許請求の範囲によって示されており、その特許請求の範囲の均等物の意味及び範囲内に入る全ての変更が本明細書に包含されるように意図されている。

【図1A】

【図1B】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6A】

【図6B】

【図7】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28A】

【図28B】

【図28C】

【図28D】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】