特許 7603292 カゼインキナーゼ１ε阻害剤の結晶形、製造方法及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-12-12

(45)【発行日】2024-12-20

(54)【発明の名称】カゼインキナーゼ１ε阻害剤の結晶形、製造方法及びその使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 487/04 20060101AFI20241213BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20241213BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20241213BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20241213BHJP

【ＦＩ】

C07D487/04 143

A61P35/00

A61P37/06

A61K31/519

C07D487/04 CSP

【請求項の数】 17

(21)【出願番号】P 2023533402

(86)(22)【出願日】2021-12-21

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-12-13

(86)【国際出願番号】 CN2021140154

(87)【国際公開番号】W WO2022135412

(87)【国際公開日】2022-06-30

【審査請求日】2023-05-31

(31)【優先権主張番号】202011531258.6

(32)【優先日】2020-12-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】519172878

【氏名又は名称】杭州和正医薬有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】100146374

【弁理士】

【氏名又は名称】有馬 百子

(72)【発明者】

【氏名】周 星露

(72)【発明者】

【氏名】劉 興国

(72)【発明者】

【氏名】胡 苗

(72)【発明者】

【氏名】朱 建栄

(72)【発明者】

【氏名】呉 一哲

【審査官】長谷川 大輔

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０２０／２５９４６３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１７／０７９５５８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】中国特許出願公開第１０６１４６５１８（ＣＮ，Ａ）

【文献】平山令明編，有機化合物結晶作製ハンドブック －原理とノウハウ－，丸善株式会社，2008年07月25日，p.57-84

【文献】塩路雄作，固形製剤の製造技術，普及版，東京：シーエムシー出版，2003年01月27日，pp. 9, 12-13，ISBN 4-88231-783-4

【文献】浅原 照三，溶剤ハンドブック，1985年，p.p.46-51

【文献】芦澤一英，医薬品の多形現象と晶析の科学，丸善プラネット株式会社，2002年，pp.56-102, 304-317

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ３１／００－３１／３２７

Ａ６１Ｐ１／００－４３／００

Ｃ０７Ｄ４７７／００－４９１／２２

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）で表されるカゼインキナーゼ１ε阻害剤の結晶形Ａであって、

前記結晶形Ａの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値７．８４８±０．２°、１１．６１８±０．２°、１５．５６２±０．２°、１５．８５３±０．２°、２０．１８５±０．２°、２５．６５５±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ａ。

【請求項2】

同時に、２θ値１１．９２６±０．２°、１５．２７１±０．２°、２１．８５１±０．２°、２４．７９９±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、請求項１に記載のカゼインキナーゼ１ε阻害剤の結晶形Ａ。

【請求項3】

式（Ｉ）で表される化合物を加熱して溶媒Ｉに溶解させ、選択的に熱時濾過行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させて結晶形Ａを得る工程を含み、前記溶媒Ｉはアセトン、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン／イソプロピルアルコール、テトラヒドロフラン／アセトン、テトラヒドロフラン／酢酸エチル、１，４－ジオキサン／イソプロピルアルコールから選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載の結晶形Ａの製造方法。

【請求項4】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｂであって、

前記結晶形Ｂの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値１０．７３９±０．２°、１１．９６１±０．２°、１３．７２６±０．２°、１４．３７４±０．２°、２３．７１４±０．２°、２４．０５７±０．２°、２５．０３３±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ｂ。

【請求項5】

同時に、２θ値１４．８０９±０．２°、１８．５７４±０．２°、２２．３１３±０．２°、２６．１２５±０．２°、２６．６５９±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、請求項４に記載の結晶形Ｂ。

【請求項6】

式（Ｉ）で表される化合物を室温で溶媒ＩＩに溶解させ、静置した後揮発させて晶析させ結晶形Ｂを得る工程を含み、前記溶媒ＩＩは、テトラヒドロフラン、ブタノン、アセトニトリル／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、ブタノン／アセトンから選択されることを特徴とする、請求項４または５に記載の結晶形Ｂの製造方法。

【請求項7】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｃであって、

前記結晶形Ｃの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値７．３１９±０．２°、８．０９２±０．２°、１１．７６３±０．２°、１４．７２８±０．２°、１５．８５５±０．２°、１６．２６５±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ｃ。

【請求項8】

式（Ｉ）で表される化合物を加熱して溶媒ＩＩＩに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させて結晶形Ｃを得る工程を含み、前記溶媒ＩＩＩはメチルイソブチルケトンから選択されることを特徴とする、請求項７に記載の結晶形Ｃの製造方法。

【請求項9】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｄであって、

前記結晶形Ｄの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値１１．３０８±０．２°、１７．２３７±０．２°、１８．５６８±０．２°、２０．２１３±０．２°、２１．１４８±０．２°、２１．２９３±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ｄ。

【請求項10】

同時に、２θ値１０．３４１±０．２°、１３．８１９±０．２°、１７．９８２±０．２°、２０．８０４±０．２°、２２．７２９±０．２°、２５．０３５±０．２°、２５．２８９±０．２°、２８．００８±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、請求項９に記載の結晶形Ｄ。

【請求項11】

式（Ｉ）で表される化合物を加熱して溶媒ＩＶに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させて結晶形Ｄを得る工程を含み、前記溶媒ＩＶは、メタノ－ル／イソプロピルアルコールから選択されることを特徴とする、請求項９または１０に記載の結晶形Ｄの製造方法。

【請求項12】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｅであって、

前記結晶形Ｅの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値７．１１４±０．２°、７．９３６±０．２°、９．９７３±０．２°、１１．０４０±０．２°、１４．４８４±０．２°、１５．５０４±０．２°、１６．５０７±０．２°、２０．０７１±０．２°、２１．５５５±０．２に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ｅ。

【請求項13】

同時に、２θ値５．４９２±０．２°、２２．５１９±０．２°、２４．４６４±０．２°、２７．９８０±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、請求項１２に記載の結晶形Ｅ。

【請求項14】

式（Ｉ）で表される化合物を加熱して溶媒Ｖに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させて結晶形Ｅを得る工程を含み、前記溶媒Ｖは、１，４－ジオキサン／酢酸エチルから選択されることを特徴とする、請求項１２または１３に記載の結晶形Ｅの製造方法。

【請求項15】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｆであって、

前記結晶形Ｆの粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θ値９．９５９±０．２°、１３．６０４±０．２°、１４．８３０±０．２°、２０．６４５±０．２°、２３．７１７±０．２°、２６．２６２±０．２°に特徴的なピークを有することを特徴とする、結晶形Ｆ。

【請求項16】

式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒ＶＩに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させて結晶形Ｆを得る工程を含み、前記溶媒ＶＩは、ジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルから選択される、ことを特徴とする請求項１５に記載の結晶形Ｆの製造方法。

【請求項17】

請求項１、２、４、５、７、９、１０、１２、１３、１５のいずれか一項に記載の結晶形の、カゼインキナーゼ１ε活性を阻害することにより効果がある悪性腫瘍及び自己免疫性疾患を治療する薬物の製造における使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は化学薬物結晶形の工程及び薬物製造技術分野に関し、具体的には、化合物（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン－メタンスルホナートの結晶形、結晶形の製造方法及びその使用に関する。

【背景技術】

【0002】

タンパク質キナーゼは、シグナル伝達において重要な役割を発揮しており、リン酸化基質タンパク質を介して細胞内シグナル伝達を媒介し、重要な薬物標的である。カゼインキナーゼ１（ＣＫ１）は、セリン－トレオニンキナーゼファミリーに属し、哺乳動物では７種のサブタイプα、β、γ１、γ２、γ３、δ及びεが存在する。これらサブタイプは、Ｗｎｔシグナル伝達、日周期、細胞シグナル伝達、膜輸送、ＤＮＡ複製、ＤＮＡ損傷及びＲＮＡ代謝に関与し、生体機能を調節できる。

【0003】

カゼインキナーゼ１ε（ＣＫ１ε）は、ＣＫ１ファミリーにおける重要なサブタイプであって、各種細胞の増殖と生存過程の鍵となる調節因子であり、日周期の調節において重要な役割を果たしているだけでなく、癌の発生と進行においても同様に重要である。例えば、薬物によりＣＫ１εを抑制し、またはｓｈＲＮＡの媒介によりＣＫ１εを沈黙させると、膵臓癌、肉腫、乳癌、直腸癌、卵巣癌、白血病等を含む様々な癌の増殖と生存が阻害される。研究により、ＣＫ１遺伝子には基質特異性がないため、腫瘍増殖と生存に対するＣＫ１εの調節の作用機構は未だにはっきりしておらず、Ａｋｔ、ＭＹＣ、β－カテニン等と関連する可能性が示されている（Ｖａｒｇｈｅｓｅ等，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１８，８：１３６２１）。また、ＣＫ１εはＷｎｔシグナル伝達経路を調節する重要な組成部分として、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）の発病と進行を促し得る。ＣＫ１εはＣＬＬ患者において顕著にアップレギュレーションされ、ＣＫ１εを抑制することでＣＬＬの進行を阻害できるが、ＢＣＲ関連経路には影響を与えない。さらに、ＣＫ１εはＢＣＲ経路のＢＴＫ阻害剤ｉｂｒｕｔｉｎｉｂの生体内及び生体外での抗腫瘍活性を増強させ得る。

【0004】

そのため、ＣＫ１εも重要な抗腫瘍標的である（Ｊａｎｏｖｓｋａ等，Ｂｌｏｏｄ，２０１９，１１：１２０６～１２１８）。従って、ＣＫ１εを阻害する機能を有する薬物を開発することで、様々な疾患例えば癌及び自己免疫性疾患において重要な治療作用を発揮できる。

【0005】

同一の薬物分子が複数の結晶形を形成する現象を薬物の結晶多形現象と呼び、薬物開発の過程で広範に存在しており、このような現象は有機小分子化合物に固有の特性である。異なる結晶形は、その融点、溶解度、溶出性能、化学安定性等に差異がある可能性があり、その物理的、化学的性能は薬物の安全性と有効性に直接影響を及ぼす。従って、結晶形の研究と制御は薬物の研究と開発の過程における重要な研究内容である。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明は、式（Ｉ）で表されるカゼインキナーゼ１ε阻害剤、即ち、（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン－メタンスルホナートの結晶形、結晶形の製造方法及びその使用を提供する。

【0007】

本発明に係る式（Ｉ）で表される化合物、即ち、（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン－メタンスルホナートは、新規のカゼインキナーゼ１ε（ＣＫ１ε）阻害剤であり、強い生体外ＣＫ１εキナ－ゼ阻害効果、生体外抗腫瘍細胞活性及び生体内抗腫瘍活性を有するので、該化合物に対して関連する結晶形の研究を行うことで、該化合物の臨床におけるより良い応用が期待される。

【0008】

式（Ｉ）の化合物の、異なる結晶条件下で得られた一連の結晶生成物に対して、粉末Ｘ線回折測定を行った結果、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｉの異なる結晶形が発見され、それら結晶形の水溶解度、安定性、及びラットとビーグル犬への経口投与による薬物動態学の関連研究を行った。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明の技術手段は以下の通りである。
本発明により提供されるホスファチジルイノシトール－３－キナ－ゼ阻害剤は、式（Ｉ）で表される化合物であって、

Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｉの異なる結晶形を有する。
更に、

【0010】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ａであって、結晶形ＡにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、７．８４８±０．２°、１１．６１８±０．２°、１５．５６２±０．２°、１５．８５３±０．２°、２０．１８５±０．２°、２５．６５５±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0011】

結晶形Ａの好ましい態様として、同時に、１１．９２６±０．２°、１５．２７１±０．２°、２０．１８５±０．２°、２１．８５１±０．２°、２４．７９９±０．２°に特徴的なピークを有する。結晶形Ａのより好ましい態様として、同時に８．５３１±０．２°、１０．７３０±０．２°、１５．１７６±０．２°、２２．８２６±０．２°、２５．３６９±０．２°に特徴的なピークを有する。結晶形Ａのさらに好ましい態様として、同時に２３．５０６±０．２°、２５．３６９±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0012】

結晶形Ａのさらに好ましい態様として、同時に５．００５±０．２°、１０．０００±０．２°、１８．１８５±０．２°、１９．４９９±０．２°、２３．２２６±０．２°、２７．０７０±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ａの更に具体的な好ましい態様として、前記結晶形Ａは、実施例の表１に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ａの更に具体的な好ましい態様として、前記結晶形Ａは、図１に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0013】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｂであって、結晶形ＢにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、１０．７３９±０．２°、１１．９６１±０．２°、１３．７２６±０．２°、１４．３７４±０．２°、２３．７１４±０．２°、２４．０５７±０．２°、２５．０３３±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0014】

結晶形Ｂの好ましい態様として、同時に１４．８０９±０．２°、１８．５７４±０．２°、２２．３１３±０．２°、２６．１２５±０．２°、２６．６５９±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0015】

結晶形Ｂのより好ましい態様として、同時に９．８３７±０．２°、１８．０７８±０．２°、１９．７５９±０．２°、２４．７２４±０．２°、２７．３３０±０．２°、２９．８６３±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0016】

結晶形Ｂのさらに好ましい態様として、同時に２６．１２５±０．２°、２６．６５９±０．２°、２７．３３０±０．２°、２９．８６３±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｂの更に具体的な好ましい態様として、前記結晶形Ｂは、実施例の表２に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｂの更に具体的な好ましい態様として、前記結晶形Ｂは、図２に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0017】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｃであって、結晶形ＣにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、７．３１９±０．２°、８．０９２±０．２°、１１．７６３±０．２°、１４．７２８±０．２°、１５．８５５±０．２°、１６．２６５±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｃの好ましい態様として、同時に７．９６５±０．２°、９．１０３±０．２°、１３．３３８±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｃのより好ましい態様として、同時に３．８８０±０．２°、６．４７８±０．２°、１９．６１３±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｃのさらに好ましい態様として、前記結晶形Ｃは、実施例の表３に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｃの更に具体的な好ましい態様として、前記結晶形Ｃは、図３に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0018】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｄであって、結晶形ＤにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、１１．３０８±０．２°、１７．２３７±０．２°、１８．５６８±０．２°、２０．２１３±０．２°、２１．１４８±０．２°、２１．２９３±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0019】

結晶形Ｄの好ましい形態として、同時に１０．３４１±０．２°、１３．８１９±０．２°、１７．９８２±０．２°、２０．８０４±０．２°、２２．７２９±０．２°、２５．０３５±０．２°、２５．２８９±０．２°、２８．００８±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｄのより好ましい態様として、前記結晶形Ｄは、実施例の表４に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｄのさらに好ましい態様として、前記結晶形Ｄは、図４に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0020】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｅであって、結晶形ＥにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、７．１１４±０．２°、７．９３６±０．２°、９．９７３±０．２°、１１．０４０±０．２°、１４．４８４±０．２°、１５．５０４±０．２°、１６．５０７±０．２°、２０．０７１±０．２°、２１．５５５±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0021】

結晶形Ｅの好ましい態様として、同時に５．４９２±０．２°、２２．５１９±０．２°、２４．４６４±０．２°、２７．９８０±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0022】

結晶形Ｅのより好ましい態様として、同時に１１．５３１±０．２°、１８．１５８±０．２°、２６．５７６±０．２°、２６．７２３±０．２°、２６．９７９±０．２°、２８．９０３±０．２°、３３．４０４±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0023】

結晶形Ｅの好ましい態様として、同時に１２．８８７±０．２°、１８．５２６±０．２°、２１．９２９±０．２°、２４．１５２±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｅのさらに好ましい態様として、前記結晶形Ｅは、実施例の表５に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｅのさらに好ましい態様として、前記結晶形Ｅは、図５に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0024】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｆであって、結晶形ＦにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、９．９５９±０．２°、１３．６０４±０．２°、１４．８３０±０．２°、２０．６４５±０．２°、２３．７１７±０．２°、２６．２６２±０．２°に特徴的なピークを有する。

【0025】

結晶形Ｆの好ましい態様として、同時に１０．４１０±０．２°、１２．７０４±０．２°、１５．７７３±０．２°、２２．３９０±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｆのより好ましい態様として、前記結晶形Ｆは、実施例の表６に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｆのより好ましい態様として、前記結晶形Ｆは、図６に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0026】

式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｉであって、結晶形ＩにＣｕ－Ｋαを放射することで、２θ角で表される粉末Ｘ線回折パターンを得て、７．３２１±０．２°、７．５３８±０．２°、１２．３１７±０．２°、１４．６４３±０．２°、１５．８３９±０．２、１９．４５８±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｉの好ましい態様として、同時に３．９７８±０．２°、１５．０８１±０．２°に特徴的なピークを有する。
結晶形Ｉのより好ましい態様として、前記結晶形Ｉは、実施例の表７に示す特徴的なピークデータを有する。
結晶形Ｉのより好ましい態様として、前記結晶形Ｉは、図７に示す粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0027】

本発明は、さらに、（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン－メタンスルホナートの異なる結晶形の結晶化方法を提供する。具体的な方法は以下の通りである。

【0028】

結晶形Ａの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒Ｉに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させ、前記溶媒Ｉはアセトン、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン／イソプロピルアルコール、テトラヒドロフラン／アセトン、テトラヒドロフラン／酢酸エチル、１，４－ジオキサン／イソプロピルアルコールから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ａを得る工程２と、を含む。

【0029】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物と前記溶媒Ｉとの質量体積比は１／（２５～３５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／３０（ｇ／ｍＬ）である。テトラヒドロフラン／イソプロピルアルコール、テトラヒドロフラン／アセトン、テトラヒドロフラン／酢酸エチル、１，４－ジオキサン／イソプロピルアルコール等の混合溶媒を選択する場合、前後２つの溶媒の体積比は１：（０．８～１．２）であり、より好ましくは１：１である。

【0030】

結晶形Ｂの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を室温で適量の溶媒ＩＩに溶解させ、静置した後揮発させて晶析させ、前記溶媒ＩＩはテトラヒドロフラン、ブタノン、アセトニトリル／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、ブタノン／アセトンから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｂを得る工程２と、を含む。

【0031】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物と前記溶媒ＩＩとの質量体積比は１／（２５～３５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／３０（ｇ／ｍＬ）である。アセトニトリル／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、ブタノン／アセトン等の混合溶媒を選択する場合、前後２つの溶媒の体積比は１：（０．８～１．２）であり、より好ましくは１：１である。

【0032】

結晶形Ｃの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒ＩＩＩに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させ、前記溶媒ＩＩＩはメチルイソブチルケトンから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｃを得る工程２と、を含む。

【0033】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物とメチルイソブチルケトンとの質量体積比は１／（２５～３５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／３０（ｇ／ｍＬ）である。

【0034】

結晶形Ｄの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒ＩＶに溶解させ、熱時濾過を行った後、濾液を冷却して晶析させ、前記溶媒ＩＶはメタノ－ル／イソプロピルアルコールから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｄを得る工程２と、を含む。

【0035】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物とメタノ－ル／イソプロピルアルコールとの質量体積比は１／（２５～３５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／３０（ｇ／ｍＬ）である。
より好ましい態様として、前記メタノ－ル／イソプロピルアルコールの両方溶媒の体積比は１：（０．８～１．２）であり、より好ましくは１：１である。

【0036】

結晶形Ｅの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒Ｖに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させ、前記溶媒Ｖは１，４－ジオキサン／酢酸エチルから選択される工程１と、結晶を濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｅを得る工程２と、を含む。

【0037】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物と１，４－ジオキサン／酢酸エチルとの質量体積比は１／（３５～４５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／４０（ｇ／ｍＬ）である。
より好ましい態様として、前記１，４－ジオキサン／酢酸エチルの２つの溶媒の体積比は１：（０．５～０．８）であり、より好ましくは１：０．６である。

【0038】

結晶形Ｆの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒ＶＩに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させ、前記溶媒ＶＩはジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｆを得る工程２と、を含む。

【0039】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物とジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルとの質量体積比は１／（３５～４５）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／４０（ｇ／ｍＬ）である。

【0040】

より好ましい態様として、前記ジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルの２つの溶媒の体積比は１：（０．８～１．２）であり、より好ましくは１：１である。

【0041】

好ましい態様として、結晶形Ａ～結晶形Ｆを製造する過程において、冷却／揮発して晶析させた後、濾過、洗浄し、乾燥させて、結晶形Ａ～結晶形Ｆを得る。より好ましい態様として、乾燥条件は、常温減圧（－０．０５～０．５ＭＰａ、より好ましくは－０．１ＭＰａ）下で、２～５日間（より好ましくは３日間）乾燥させる。

【0042】

結晶形Ｉの製造方法であって、式（Ｉ）で表される化合物を加熱して適量の溶媒ＶＩＩに溶解させ、選択的に熱時濾過を行い、得られた澄んだ溶液を冷却して晶析させ、前記溶媒ＶＩＩは酢酸エチル、エタノールから選択される工程１と、濾過、洗浄後乾燥させて結晶形Ｉを得る工程２と、を含む。

【0043】

好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物と酢酸エチルとの質量体積比は１／（４０～５０）（ｇ／ｍＬ）であり、より好ましくは１／４５（ｇ／ｍＬ）である。好ましい態様として、前記式（Ｉ）で表される化合物とエタノールとの質量体積比は１／（１０～２０）（ｇ／ｍＬ）でり、より好ましくは１／２０（ｇ／ｍＬ）である。

【0044】

好ましい態様として、乾燥条件は、５０～７０℃で１～３日間真空乾燥させ、７０～９０℃で１～３日間真空乾燥させ、より好ましい態様として、６０℃で２日間真空乾燥させ、８０℃で２日間真空乾燥させる。
特別に説明がない場合、上記内容において言及されたＭ／Ｎ溶媒は、Ｍ溶媒とＮ溶媒との混合溶媒を示す。

【0045】

上記製造方法において、前記式（Ｉ）で表される化合物を溶解させた後、濾過が必要な不純物がない場合、即ち、澄んだ溶液がそのまま得られる場合、前記「熱時濾過」の工程を省略してもよく、そのまま冷却して晶析させればよい。なお、前記式（Ｉ）で表される化合物の溶解を完了した後、フロック、固体物が残留している場合、もしくはその他の不溶性物質がある場合、前記「熱時濾過」の工程を導入する。

【0046】

上記製造方法において言及された「式（Ｉ）で表される化合物」は、特別に説明がない限り、様々な形態の生成物を含んでよく、例えば、無定型または任意の結晶形の形態の生成物であってよく、混合結晶形又はその他の任意の通常に存在する状態のものであってもよい。

【発明の効果】

【0047】

本発明により得られた式（Ｉ）で表される化合物の結晶形（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｉ）は、良好な水溶解度を有しかつ経口投与による吸収性に優れているので、カゼインキナーゼ１ε活性を阻害することにより効果がある悪性腫瘍及び自己免疫性疾患の治療により良く応用できる。

【図面の簡単な説明】

【0048】

【図1】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ａの粉末Ｘ線回折パターン。

【図2】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｂの粉末Ｘ線回折パターン。

【図3】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｃの粉末Ｘ線回折パターン。

【図4】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｄの粉末Ｘ線回折パターン。

【図5】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｅの粉末Ｘ線回折パターン。

【図6】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｆの粉末Ｘ線回折パターン。

【図7】式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折パターン。

【発明を実施するための形態】

【0049】

本発明の目的、技術手段をより明らかにするために、以下、本発明の図面と実施例を組み合わせて、本発明をさらに詳細に説明する。本発明の実施例は本発明の技術的解決手段を説明するためのものにすぎず、本発明の実質と範囲を限定するものではない。

【0050】

実験に用いられた試験装置
１、粉末Ｘ線回折スペクトル
装置：Ｄ８ＡＤＶＡＮＣＥ型粉末Ｘ線回折計
放射線：単色Ｃｕ－Ｋα放射線（λ＝１．５４０６）
スキャンモード：θ／２θ、スキャン範囲：３～４０^ｏ
２、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
装置：Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０
クロマトグラフ用カラム：ＳｈｉｍｐａｃｋＶＰＯＤＳ１５０＊４．６ｍｍ５μｍ
移動相：移動相Ａ：０．１％リン酸溶液、移動相Ｂ：メタノ－ル、イソクラティック溶出により溶出、移動相Ａ：移動相Ｂ＝２０：８０
検出波長：２３０ｎｍ

【実施例1】

【0051】

（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン－メタンスルホナートの合成

【0052】

工程１：Ｄ－乳酸メチル（２０ｇ）を２００ｍＬのジクロロメタンに溶解して、０℃まで冷却した後、ベンゾイルクロリド（２７ｇ）、ＤＭＡＰ（１．２ｇ）を加え、次いで滴下漏斗でトリエチルアミン（２３．３ｇ）を滴下して加え、滴下完了後、室温まで徐々に昇温させて、撹拌しながら２０時間反応させる。ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）による検出で反応が完了したことを確認し、１００ｍＬの水を加えて、撹拌して抽出し、ジクロロメタン相を分離する。ジクロロメタン相に０．２Ｍの塩酸水溶液２００ｍＬを加えて、撹拌した後静置して分液させ、ジクロロメタン層を分離して減圧濃縮し、粗生成物の（Ｒ）－２－ベンゾイルオキシプロピオン酸メチルを得て、そのまま次の反応に用いる。

【0053】

工程２：工程１で得られた（Ｒ）－２－ベンゾイルオキシプロピオン酸メチル粗生成物を２５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解して、０℃まで冷却した後、調製済の３％水酸化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）を滴下して加え、滴下過程中に反応系の温度が１０℃を超えないように制御し、滴下完了後継続して２時間反応させる。ＴＬＣによる検出により加水分解反応が完全であることを確認した後、１．０Ｍの塩酸水溶液を加えて溶液のｐＨ値が約２～４になるように中和し、次いで酢酸エチル（毎回約３００ｍＬ）で２回抽出して、酢酸エチル層を合わせ、減圧濃縮して固体を得る。得られた固体にメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（５０ｍＬ）及び石油エ－テル（３００ｍＬ）を加えて、１時間加熱還流させ叩解した後、室温まで徐々に冷却し且つ１２時間保持し、濾過、洗浄した後、濾過ケークを送風乾燥して化合物の（Ｒ）－２－（ベンゾイルオキシ）プロピオン酸（３０．５ｇ）を得る。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．８９（ｓ，１Ｈ），８．１９－８．０８（ｍ，２Ｈ），７．６７－７．５８（ｍ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），５．４０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），１．７２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）．

【0054】

工程３：２－アミノ－６－クロロ安息香酸（１０．０ｇ）、（Ｒ）－２－（ベンゾイルオキシ）プロピオン酸（１３．６ｇ）を１００ｍＬのＤＭＦに溶解して、ピリジン（５０．７ｇ）を加え、撹拌しながら５０℃まで昇温させ、次いでトリフェニルホスファイト（２１．７ｇ）を徐々に加えて１２時間反応させた後、アニリン（８．２ｇ）及びトリフェニルホスファイト（１０．８ｇ）を加えて、継続して５０℃下で撹拌しながら約１２時間反応させる。ＴＬＣによる検出で反応が完了したことを確認した後、室温まで冷却し、酢酸エチル及び１Ｍの塩酸水溶液で抽出して分液し、酢酸エチル相は再び１Ｍの塩酸水溶液で洗浄して分離して、酢酸エチル層を回収し、減圧濃縮して油状物を得て、次いでメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルとシクロヘキサン（１：５）の混合溶液を加え、撹拌して叩解し、濾過して固体生成物の（Ｒ）－１－（５－クロロ－４－オキソ－３－フェニル－３，４－ジヒドロキナゾリン－２－イル）安息香酸エチル（１６．１ｇ）を得る。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．０１－７．８８（ｍ，２Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７１－７．６３（ｍ，２Ｈ），７．６０（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，２．６Ｈｚ，３Ｈ），７．５１（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．８Ｈｚ，３Ｈ），７．３８（ｄｔ，Ｊ＝１５．１，７．７Ｈｚ，２Ｈ），５．３６（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），１．５５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）．

【0055】

工程４：（Ｒ）－１－（５－クロロ－４－オキソ－３－フェニル－３，４－ジヒドロキナゾリン－２－イル）安息香酸エチル（１０．２ｇ）を１００ｍＬのメタノ－ルに溶解し、水酸化リチウム（０．９ｇ）を加えて、室温下で撹拌しながら約４時間反応させ、ＴＬＣによる検出により反応が完了したことを確認し、ジクロロメタンと水を加えて抽出して、ジクロロメタン層を分離し、減圧濃縮して粗生成物を得て、該粗生成物をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルで還流して叩解し、濾過、乾燥を経て化合物の（Ｒ）－５－クロロ－２－（１－ヒドロキシエチル）－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（７．０ｇ）を得る。キラル純度ｅｅ％：９８．７％である。ｃｈｉｒａｌ－ＨＰＬＣは逆相ＣＨＩＲＡＬＰＡＫＩＧ－３カラム上で測定し、保留時間は５２．７ｍｉｎである。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７０－７．６２（ｍ，２Ｈ），７．６０－７．５２（ｍ，３Ｈ），７．５２－７．４９（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２７－７．２３（ｍ，１Ｈ），４．４５（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）．

【0056】

工程５：（Ｒ）－５－クロロ－２－（１－ヒドロキシエチル）－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（６．０ｇ）を７５ｍＬのＮＭＰに溶解し、３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－アミン（５．８ｇ）、トリフェニルホスフィン（７．８ｇ）及びＤＩＡＤ（６．０ｇ）を加えて、室温下で撹拌しながら約１２時間反応させ、ＴＬＣによる検出で反応が完了したことを確認した後、反応液をそのまま水に加えて固体を析出させ、吸引濾過して濾過ケークを収集し、濾過ケークはアセトニトリルで還流して叩解し、濾過し、濾過ケークを送風乾燥して固体生成物の（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（５．９ｇ）を得る。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．８８（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｔｄ，Ｊ＝７．７，１．３Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｔｄ，Ｊ＝７．８，１．３Ｈｚ，１Ｈ），６．３３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），５．８６－５．７２（ｍ，１Ｈ），１．６８（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）．

【0057】

工程６：（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－ヨード－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（５．０ｇ）と（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）ボロン酸（２．６ｇ）を、２０ｍＬの２－メチルテトラヒドロフランと５ｍＬの水との混合溶媒に溶解し、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（３３０ｍｇ）及び炭酸ナトリウム（２．４ｇ）を加えて、８０℃まで加熱して約６時間反応させ、ＴＬＣによる検出により反応が完了したことを確認した後、減圧濃縮し、得られた残留物をシリカカラムクロマトグラフィーにより純化し、白色の固体生成物（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾール［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（４．１ｇ）を得る。キラル純度ｅｅ％：９８．６％である。ｃｈｉｒａｌ－ＨＰＬＣは順相ＣＨＩＲＡＬＣＥＬＯＤ－Ｈカラム上で測定し、保留時間は１２．０９ｍｉｎである。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０５（ｓ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９３－６．８４（ｍ，２Ｈ），６．５３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．００（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ－ＭＳ）：５６０［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【実施例2】

【0058】

（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オンーメタンスルホナートの製造

【0059】

実施例１で合成して得られた（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾール［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オン（３．４ｇ）を反応フラスコに加え、次いで５０ｍＬのイソプロピルアルコールとメタンスルホン酸（５９０ｍｇ）を加えて、固体が完全に溶解して澄んだ溶液になるように加熱して約１時間還流させた後、室温までゆっくり冷却し、脱溶媒し、濾過して固体を収集し、得られた固体を常温で真空乾燥して白色の固体生成物（Ｓ）－２－（１－（４－アミノ－３－（２，３－ジフルオロ－４－メトキシフェニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－１－イル）エチル）－５－クロロ－３－フェニルキナゾリン－４（３Ｈ）－オンーメタンスルホナート（３．６５ｇ）を得る。^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ８．１４（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｄｔ，Ｊ＝１６．３，７．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．４１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），２．３６（ｓ，３Ｈ），１．７７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ－ＭＳ）：５６０［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【実施例3】

【0060】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのアセトンを加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は６０％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値７．８４８、１１．６１８、１５．５６２、１５．８３５、２０．１８５、２４．７９９、２５．６５５及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有する。測定結果は表１と図１に示す。

【0061】

表１ 結晶形Ａの粉末Ｘ線回折データ

【実施例4】

【0062】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬの１，４－ジオキサンを加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥、－０．１ＭＰａ、以下同様）させ、その収率は６８％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。

【実施例5】

【0063】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのテトラヒドロフラン／イソプロピルアルコール混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は５４％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。

【実施例6】

【0064】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのテトラヒドロフラン／アセトン混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ，その収率は５０％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。

【実施例7】

【0065】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのテトラヒドロフラン／酢酸エチル混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は６２％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。

【実施例8】

【0066】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬの１，４－ジオキサン／イソプロピルアルコール混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は５４％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ａであった。

【実施例9】

【0067】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのテトラヒドロフランを加えて、室温で撹拌して澄んだ溶液になった後、室温で静置して、２日間揮発させて晶析させ、結晶を濾過、洗浄した後乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｂであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値１０．７３９、１１．９６１、１３．７２６、１４．３７４、２３．７１４、２４．０５７、２５．０３３及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表２と図２に示す。

【0068】

表２ 結晶形Ｂの粉末Ｘ線回折データ

【実施例10】

【0069】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのブタノンを加えて、室温で撹拌して澄んだ溶液になった後、室温で静置し、２日間揮発させて晶析させ、結晶を濾過、洗浄した後乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は８２％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｂであった。

【実施例11】

【0070】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのアセトニトリル／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルの混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、室温で撹拌して澄んだ溶液になった後、室温で静置し、２日間揮発させて晶析させ、結晶を濾過、洗浄した後乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は５４％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｂであった。

【実施例12】

【0071】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのブタノン／アセトンの混合溶媒（体積比率は１：１）を加えて、室温で撹拌して澄んだ溶液になった後、室温で静置し、２日間揮発させて晶析させ、結晶を濾過、洗浄した後乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は４８％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｂであった。

【実施例13】

【0072】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのメチルイソブチルケトンを加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は８０％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｃであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値７．３１９、８．０９２、１１．７６３、１４．７２８、１５．８５５、１６．２６５及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表３と図３に示す。

【0073】

表３ 結晶形Ｃの粉末Ｘ線回折データ

【実施例14】

【0074】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで３０ｍＬのメタノ－ル／イソプロピルアルコール（１：１）を加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は５８％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｄであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値１１．３０８、１７．２３７、１８．５６８、２０．２１３、２１．１４８、２１．２９３及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表４と図４に示す。

【0075】

表４ 結晶形Ｄの粉末Ｘ線回折データ

【実施例15】

【0076】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで４０ｍＬの１，４－ジオキサン／酢酸エチル混合溶媒（体積比率は５：３である）を加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は６４％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｅであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値７．１１４、７．９３６、９．９７３、１１．０４０、１５．５０４、１６．５０７、２０．０７１、２１．５５５及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表５と図５に示す。

【0077】

表５ 結晶形Ｅの粉末Ｘ線回折データ

【実施例16】

【0078】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで４０ｍＬのジクロロメタン／メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル混合溶媒（体積比率は＝１：１）を加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、結晶を濾過、洗浄した後乾燥（常温で３日間減圧乾燥）させ、その収率は８２％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｆであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値９．９５９、１３．６０４、１４．８３０、２０．６４５、２３．７１７、２６．２６２及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表６と図６に示す。

【0079】

表６ 結晶形Ｆ的粉末Ｘ線回折データ

【実施例17】

【0080】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで４０ｍＬのエタノールを加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（６０℃で２日間真空乾燥、８０℃で２日間真空乾燥）させ、その収率は５０％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｉである。

【実施例18】

【0081】

１ｇの式（Ｉ）で表される化合物（実施例２により製造）をガラス瓶に入れ、次いで４５ｍＬの酢酸エチルを加え、加熱して澄んだ溶液になった後、冷却して晶析させ、濾過、洗浄してから乾燥（６０℃で２日間真空乾燥、８０℃で２日間真空乾燥）させ、その収率は６６％であり、粉末Ｘ線回折により測定した結果結晶形Ｉであった。その主な特徴的なピークとして、２θ値７．３２１、７．５３８、１２．３１７、１４．６４３、１５．８３９、１９．４５８及びその偏差±０．２°に特徴的な粉末Ｘ線回折ピークを有し、測定結果は表７と図７に示す。

【0082】

表７ 結晶形Ｉの粉末Ｘ線回折データ

【実施例19】

【0083】

結晶形Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆの溶解度測定

【0084】

標準曲線の作製：適量の一連の化合物を精密に量って、メスフラスコに入れ、次いで適量のアセトニトリルを加えて溶解させ且つ目盛りまで希釈してストック液とする。適量のストック液を精密に量り取って、メスフラスコに入れ、次いで移動相を加えて目盛りまで希釈した後、揺らして均一な溶液にして、一連の高濃度標準溶液と低濃度標準溶液を調製する。低濃度から高濃度の順でそれぞれロードし、ピーク面積を記録する。化合物の濃度を横座標とし、ピーク面積を縦座標として線形回帰を行って、化合物の線形回帰方程式を得て、即ち、式（Ｉ）で表される化合物の溶解度の標準曲線を得る。
平衡溶解度の測定：過量の化合物を１０ｍＬの蓋付きＥＰチューブに入れ、次いで２ｍＬの精製水を加えて、室温条件で、超音波で１５分間処理した後２０分間静置し、この操作を４回繰り返した後、遠心分離（３０００ｒ／ｍｉｎ、１０ｍｉｎ）を行い、上清液を取る。該上清液は、溶媒を加えて適当に希釈した後、精密濾過膜で濾過し、濾過液を取ってＨＰＬＣにより測定を行い、ピーク面積を記録し、標準曲線に代入して各化合物の水における飽和溶解度を計算する。測定結果は表８に示す。

【0085】

表８ 結晶形Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆの水における溶解度の結果

結果により、式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆは、何れも水に溶解することが明らかになった。

【実施例20】

【0086】

ラット生体内での薬物動態学試験

【0087】

実験方法：ＳＤラットを実験動物とし、１０ｍｇ／ｋｇ（カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液で乳白色の懸濁液に調製）で胃内投与する。胃内投与後の採血時点はそれぞれ０．１７、０．３３、０．５、１、１．５、２、４、６、８、１２、２４時間である。全血０．３ｍＬを取り、遠心分離後に血漿０．１ｍＬを取ってＬＣ－ＭＳにて分析を行う。

【0088】

表９ ＳＤラットの経口投与後の血中濃度測定結果

【0089】

式（Ｉ）で表される化合物の遊離塩基を参照として、式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｃ、結晶形Ｄ、結晶形Ｆのラット生体内における薬物動態学的性質を考察した。測定結果により、式（Ｉ）で表される化合物の薬物動態学的性質は、遊離塩基と比べて顕著に改善されたことが明らかになった。したがって、本発明に係る化合物は経口投与により関連疾患の治療に用いることができる。

【実施例21】

【0090】

犬生体内での薬物動態学試験

【0091】

実験方法：ビーグル犬を実験動物とし、１０ｍｇ／ｋｇ（カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液で乳白色の懸濁液に調製）で胃内投与する。胃内投与後の採血時点はそれぞれ０、０．５、１、２、３、４、６、８、２４時間である。全血０．３ｍＬを取り、遠心分離後に血漿０．１ｍＬを取ってＬＣ－ＭＳにて分析を行う。

【0092】

表１０ 犬の経口投与後の血中濃度測定結果

表１０中、ＮＡは検出下限値より低いことを示す。ＡＵＣ：血中濃度－時間曲線下面積。

【0093】

式（Ｉ）で表される化合物の遊離塩基を参照として、式（Ｉ）で表される化合物の結晶形Ｆのビーグル犬生体内における薬物動態学的性質を考察した。測定結果により、式（Ｉ）で表される化合物の薬物動態学的性質は、遊離塩基と比べて顕著に改善されたことが明らかになった。したがって、本発明に係る化合物は経口投与により関連疾患の治療に用いることができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】