特許 7642560 新規な製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-02-28

(45)【発行日】2025-03-10

(54)【発明の名称】新規な製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/05 20060101AFI20250303BHJP

   A61K 47/10 20170101ALI20250303BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20250303BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20250303BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20250303BHJP

【ＦＩ】

A61K38/05

A61K47/10

A61K9/08

A61P35/02

A61P35/00

【請求項の数】 28

(21)【出願番号】P 2021560977

(86)(22)【出願日】2020-04-17

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-06-27

(86)【国際出願番号】 EP2020060900

(87)【国際公開番号】W WO2020212594

(87)【国際公開日】2020-10-22

【審査請求日】2023-03-24

(31)【優先権主張番号】1905477.4

(32)【優先日】2019-04-17

(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB

(73)【特許権者】

【識別番号】524317725

【氏名又は名称】オンコペプティデス・イノベーション・エービー

【氏名又は名称原語表記】Ｏｎｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ ＡＢ

【住所又は居所原語表記】Ｌｕｎｔｍａｋａｒｇａｔａｎ ４６， １１１ ３７ Ｓｔｏｃｋｈｏｌｍ， ＳＷＥＤＥＮ

(74)【代理人】

【識別番号】110003708

【氏名又は名称】弁理士法人鈴榮特許綜合事務所

(72)【発明者】

【氏名】レーマン、フレドリック

(72)【発明者】

【氏名】テオドロビック、ペーテル

【審査官】濱田 光浩

(56)【参考文献】

【文献】特表２０１５－５３５２４３（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１９／１８５８５９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０２１－５１９８１７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１４－５１２４０２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００４－５０３５６４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３８／０５

Ａ６１Ｋ ４７／１０

Ａ６１Ｋ ９／０８

Ａ６１Ｐ ３５／０２

Ａ６１Ｐ ３５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）プロピレングリコール；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤であって、
前記メルフルフェン又はその塩の濃度が１ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬであり、前記製剤はＰＥＧ又はプロピレングリコール以外の有機溶媒を実質的に含まず、かつ、前記製剤はカルシウム塩及び／又はマグネシウム塩を実質的に含まない、製剤。

【請求項2】

前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の製剤。

【請求項3】

前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬである、請求項２に記載の製剤。

【請求項4】

以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）ポリエチレングリコール；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤であって、
前記メルフルフェン又はその塩の濃度が１ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬであり、前記製剤はＰＥＧ又はプロピレングリコール以外の有機溶媒を実質的に含まず、かつ、前記製剤はカルシウム塩及び／又はマグネシウム塩を実質的に含まない、製剤。

【請求項5】

前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬである、請求項４に記載の製剤。

【請求項6】

前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬである、請求項５に記載の製剤。

【請求項7】

前記ポリエチレングリコールの平均分子量が１５０～６５０Ｄａ、例えば１５０～２５０、２５０～３５０、３５０～４５０、４５０～５５０、５５０～６５０Ｄａである、請求項４～６のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項8】

前記ポリエチレングリコールの平均分子量が２５０～３５０Ｄａである、請求項７に記載の製剤。

【請求項9】

前記ポリエチレングリコールはＰＥＧ３００である、請求項８に記載の製剤。

【請求項10】

本質的にメルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、及び必要に応じて、１種以上の治療薬からなる、請求項１～３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項11】

本質的にメルフルフェン又はその塩、ポリエチレングリコール、及び必要に応じて、１種以上の治療薬からなる、請求項４～９のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項12】

前記１種以上の生理学的に許容可能な溶液は、グルコース溶液、生理食塩液又はそれらの混合物である、請求項１～９のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項13】

前記１種以上の治療薬の少なくとも１つが、プロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）、免疫調節薬（ＩＭｉＤ）又はアルキル化剤である、請求項１～１２のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項14】

医薬品として使用するための、請求項１～１３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項15】

例えば、アルキル化剤（例．メルファラン、シクロホスファミド、ベンダムスチン）といった従来の化学療法剤で治療してもよい疾患又は状態の治療又は予防に使用するための、請求項１～１３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項16】

がんの治療若しくは予防に使用するため、又はアミロイドーシスの治療若しくは予防に使用するための、請求項１～１３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項17】

前記がんが、多発性骨髄腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、白血病及びリンパ腫から選択される、がんの治療又は予防に使用するための、請求項１６に記載の使用のための製剤。

【請求項18】

請求項１～１３に記載の製剤の調製方法であって、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコールに溶解することを含む、方法。

【請求項19】

請求項１～１３に記載の製剤の調製方法であって、メルフルフェン又はその塩をポリエチレングリコールに溶解することを含む、方法。

【請求項20】

メルフルフェン又はその塩の保存方法であって、請求項１～１３に記載の製剤を調製する工程、並びに前記製剤を約－９０～２５℃、好ましくは、約５℃（例．５±３℃）以下、例えば約０～４℃、約－２０℃（例．－２０±３℃）及び約－８０℃（例．－８０±３℃）で保存する工程を含む、方法。

【請求項21】

メルフルフェン又はその塩；プロピレングリコール；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有し、カルシウム塩及び／又はマグネシウム塩を実質的に含有しない、キット。

【請求項22】

メルフルフェン又はその塩；ポリエチレングリコール；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有し、カルシウム塩及び／又はマグネシウム塩を実質的に含有しない、キット。

【請求項23】

前記メルフルフェンは、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩、好ましくは塩酸塩の形態である、請求項１～１７のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項24】

前記メルフルフェンは、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩、好ましくは塩酸塩の形態である、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

前記メルフルフェンは、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩、好ましくは塩酸塩の形態である、請求項２１又は２２に記載のキット。

【請求項26】

前記メルフルフェンは重水素化メルフルフェン、例えば、前記メルフルフェンはＯＰＤ-５：

【化1】

である、請求項１～１７又は２３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項27】

前記メルフルフェンは重水素化メルフルフェン、例えば、前記メルフルフェンはＯＰＤ-５：

【化2】

である、請求項１８～２０又は２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

前記メルフルフェンは重水素化メルフルフェン、例えば、前記メルフルフェンはＯＰＤ-５：

【化3】

である、請求項２１、２２又は２５のいずれか一項に記載のキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、メルフルフェン又はその塩を含む新規な製剤及びその使用に関する。また、本発明は、キット及び新規な製剤の調製方法に関する。

【背景技術】

【0002】

メルフルフェン（別名：メルファランフルフェナミド、L-メルファラニル-4-フルオロ-L-フェニルアラニンエチルエステル）はがんの治療、特に多発性骨髄腫の治療に有用な抗腫瘍剤である。メルフルフェンは国際公開第01/96367号及び国際公開第2014/065751号に記載されている。メルフルフェン塩酸塩の構造を以下に示す。

【0003】

【化1】

【0004】

メルフルフェンは強力で親油性の高いアルキル化剤であり、アルキル化作用を有する代謝物を腫瘍細胞に送達する。親水性の他のアルキル化剤とは対照的に、メルフルフェンの高い親油性は、組織や細胞へのその急速な取り込みにつながる。細胞内に入ると、メルフルフェンはＤＮＡに直接結合するか、又は細胞内のペプチダーゼによってメルファランにたやすく加水分解される若しくは細胞内のエステラーゼによってデスエチルメルフルフェン（L-メルファラニル-4-フルオロ-L-フェニルアラニンと呼ばれることがあり、この化合物もアルキル化能を有する）に加水分解される可能性がある。ヒト腫瘍におけるエステラーゼ及びペプチダーゼの高い活性は、これらの細胞でのメルフルフェンの代謝産物の急速な形成につながり、その後、より多くのメルフルフェンの流入をもたらすと考えられている（Gullbo, J., et al, J Drug Target, (2003) Vol 11, pages 355-363；Wickstrom, M., et al, Biochem Pharmacol (2010) Vol 79, pages 2381-1290）。デスエチルメルフルフェン及びメルファランは比較的親水性であることから、これらの薬剤が細胞内に捕捉される可能性がある。

【0005】

メルフルフェンは、一般的に合成された後に結晶の形態で提供される。この結晶は、製造及び製剤化には適さないことが多い強酸性の水溶液にのみ溶解する。以前の医薬品では、この結晶をジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）及びグルコースの溶液に溶解させた。しかし、この溶液は不安定で、望ましくないメルフルフェンの二量体をたやすく形成した。ＤＭＡのような有機溶媒は患者に有害であるかもしれず、投与に使用する医療機器に損傷を与える可能性がある。メルフルフェンの安定な凍結乾燥品は、国際公開第2014/065751号に記載されており、有利な安定性及び溶解特性を示す。

【0006】

有益な安定性と取り扱い特性を示すメルフルフェン又はその塩の液体製剤に対する解決されていない課題が依然として存在する。

【発明の概要】

【0007】

本発明は、以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）プロピレングリコール；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤に関する。

【0008】

好ましくは、本発明の製剤に含まれるメルフルフェン又はその塩は溶解している。本発明者らは、メルフルフェン及びその塩が驚くべきことにプロピレングリコールに可溶で、以前に用いられた溶媒よりもより高濃度の溶液を調製できることを見いだした。さらに、本発明者らは、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコールを含む製剤として保存した場合、メルフルフェン又はその塩は驚くほど安定で、たやすく望ましくない分解生成物を形成しないことを見いだした。特に安定性の研究では、メルフルフェン塩酸塩（ＯＰＤ-５）及びプロピレングリコールを含有する製剤は、約５℃（５±３℃（２～８℃））で５０日以上保存した場合、（製剤の保存前の純度に対して）９５％を超えるメルフルフェン純度を維持することが判明した。さらに、メルフルフェン塩酸塩（ＯＰＤ-５）及びプロピレングリコールを含有する製剤は、－２０℃で保存した場合は少なくとも６か月間、－７０℃で保存した場合は少なくとも８か月間安定であることが判明した。また、本発明者らは、メルフルフェンのエタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩又は塩酸塩及びプロピレングリコールを含有する製剤は、室温（２０～２５℃）で４週間（２８日）保存した場合、（製剤の保存前の純度に対して）９０％を超えるメルフルフェン純度を維持し、室温で７週間（４９日）保存した場合、８５％を超えるメルフルフェン純度を維持することを見いだした。

【0009】

本発明は、以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤に関する。

【0010】

好ましくは、本発明の製剤に含まれるメルフルフェン又はその塩は溶解している。本発明者らは、メルフルフェン及びその塩が驚くべきことにＰＥＧに可溶で、以前に用いられた溶媒よりもより高濃度の溶液を調製できることを見いだした。さらに、本発明者らは、メルフルフェン又はその塩をＰＥＧを含む製剤として保存した場合、メルフルフェン又はその塩は驚くほど安定で、たやすく望ましくない分解生成物を形成しないことを見いだした。特に安定性の研究では、ＰＥＧを含有する製剤は、約５℃（５±３℃（２～８℃））で５０日以上保存した場合、（製剤の保存前の純度に対して）９５％を超えるメルフルフェン純度を維持することが判明した。

【0011】

本発明は、さらに、医薬品として使用するための製剤に関する。

【0012】

本発明は、さらに、例えば、アルキル化剤（例．メルファラン、シクロホスファミド、ベンダムスチン）といった従来の化学療法剤で治療してもよい疾患又は状態の治療又は予防に使用するための製剤に関する。

【0013】

本発明は、さらに、がん、例えば、多発性骨髄腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、白血病及びリンパ腫から選択されるがんの治療又は予防に使用するための製剤に関する。

【0014】

本発明は、さらに、アミロイドーシスの治療又は予防に使用するための製剤に関する。

【0015】

本発明は、さらに、薬学的に有効な量の本発明の製剤を対象に投与する工程を含む、患者を治療する方法に関する。

【0016】

本発明の製剤は、例えば、事前の希釈（例．生理学的に許容可能な溶媒又は希釈剤による事前の希釈）を行うことなく、対象に直接投与してもよい。したがって、本発明の好ましい態様では、製剤は対象に直接投与される。別の態様では、製剤は、例えば生理学的に許容可能な溶媒又は希釈剤（例．生理食塩液、グルコース溶液又はそれらの混合物）で希釈した後に患者に投与される。

【0017】

本発明は、さらに、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコールに溶解する工程を含む本発明の製剤の調製方法に関する。

【0018】

本発明は、さらに、メルフルフェン又はその塩をＰＥＧに溶解する工程を含む本発明の製剤の調製方法に関する。

【0019】

本発明は、さらに、本発明の製剤を調製する工程及び前記製剤を約－９０～２５℃で保存する工程を含む、メルフルフェン又はその塩の保存方法に関する。好ましくは、本発明の製剤は、約５℃以下（例．約０～４℃）、約－２０℃及び約－８０℃で保存される。

【0020】

本発明は、さらに、メルフルフェン又はその塩；プロピレングリコール；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有するキットに関する。

【0021】

本発明は、さらにメルフルフェン又はその塩；ＰＥＧ；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有するキットに関する。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】図１は、２～８℃、２５℃又は４０℃で３１日間（Ｔ_１）保存後の、本質的にメルフルフェン（ＯＤＰ-５）及びプロピレングリコールからなる製剤（「ＰＧ製剤」）の外観を示す。２～８℃で保存した試料に目視できる着色はない。２５℃及び４０℃で保存した試料は黄～茶色である。

【図2】図２は、２～８℃又は２５℃で５９日間（Ｔ_２）保存後のＰＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料に目視できる着色はなく、２５℃で保存した試料は黄～茶色である。

【図3】図３は、２～８℃又は２５℃で９８日間（Ｔ_３）保存後のＰＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料に目視できる着色はなく、２５℃で保存した試料は黄～茶色である。

【図4】図４は、２～８℃又は２５℃で、１６８日間（Ｔ_４）保存後のＰＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料に目視できる着色はなく、２５℃で保存した試料は黄～茶色である。図２～４より、２５℃で保存した試料の着色の強度は、時間の経過（Ｔ_２からＴ_４）とともに増加する。

【図5】図５は、２５℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。

【図6】図６は、２～８℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。

【図7】図７は、２５℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）純度の経時変化を示す。

【図8】図８は、２～８℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）純度の経時変化を示す。

【図9】図９は、２～８℃、２５℃又は４０℃で２６日間（Ｔ_１ａ）保存後の、本質的にメルフルフェン（ＯＤＰ-５）及びポリエチレングリコールからなる製剤（「ＰＥＧ製剤」）の外観を示す。２～８℃で保存した試料は、わずかに黄色がかっている。２５℃及び４０℃で保存した試料は黄～茶色である。

【図10】図１０は、２～８℃又は２５℃で５４日間（Ｔ_２ａ）保存後のＰＥＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料はわずかに黄色がかっている。２５℃で保存した試料は黄～茶色である。２５℃で保存した試料と比較して、２～８℃で保存した試料の着色の強度は低い。

【図11】図１１は、２～８℃又は２５℃で９４日間（Ｔ_３ａ）保存後のＰＥＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料はわずかに黄色がかっている。２５℃で保存した試料は黄～茶色である。２５℃で保存した試料と比較して、２～８℃で保存した試料の着色の強度は低い。

【図12】図１２は、２～８℃又は２５℃で１６４日間（Ｔ_４ａ）保存後のＰＥＧ製剤の外観を示す。２～８℃で保存した試料はわずかに黄色がかっている。２５℃で保存した試料は黄～茶色である。２５℃で保存した試料と比較して、２～８℃で保存した試料の着色の強度は低い。図１０～１２より、２～８℃及び２５℃で保存した試料の着色の強度は、時間の経過（Ｔ_２ａからＴ_４ａ）とともに増加する。

【図13】図１３は、２５℃で保存した場合のＰＥＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。

【図14】図１４は、２～８℃で保存した場合のＰＥＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。

【図15】図１５は、２５℃で保存した場合のＰＥＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ－５）純度の経時変化を示す。

【図16】図１６は、２～８℃で保存した場合のＰＥＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ－５）純度の経時変化を示す。

【図17】図１７は、－２０℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。エラーバーは、２回の実験の標準偏差を表す。中央の破線は、ＯＰＤ-５の形態でのメルフルフェンの目標濃度（対イオンの質量を除き約２０ｍｇ／ｍＬ）を表す。上下の破線は、目標濃度の±１０％を表す。

【図18】図１８は、－７０℃で保存した場合のＰＧ製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）濃度の経時変化を示す。エラーバーは、２回の実験の標準偏差を表す。中央の破線は、ＯＰＤ-５の形態でのメルフルフェンの目標濃度（対イオンの質量を除き約２０ｍｇ／ｍＬ）を表す。上下の破線は、目標濃度の±１０％を表す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

以下でさらに詳細に説明するように、本発明は、驚くほど安定で、有利な取り扱い特性を示すメルフルフェン及びその塩の製剤を提供する。

【0024】

メルフルフェン及びその塩
本明細書では、用語「メルフルフェン」は、たとえ明記していなくても、その塩を含むことも意図している。

【0025】

また、用語「メルフルフェン」は、特に明記しない限り、メルフルフェンの同位体誘導体を含む。本発明での使用に適したメルフルフェンの同位体誘導体の例は、重水素化メルフルフェン誘導体である。重水素化メルフルフェン誘導体の例及び製造方法は、国際特許出願PCT/EP2019/078250に記載されており、その内容は、参照として本明細書に組み込まれる。

【0026】

例えば、本発明での使用に適した重水素化メルフルフェン誘導体は式（Ｉ）：

【0027】

【化2】

【0028】

（式中、各Ｒ^１～Ｒ^３０は、独立して、水素及び重水素からなる群から選択され、Ｒ^１～Ｒ^３０の少なくとも１つは、天然存在比の重水素よりも存在比が大きな重水素である（例えば、Ｒ^１～Ｒ^３０の少なくとも１つの重水素存在比は、少なくとも１モル％、５モル％、１０モル％、５０モル％、９０モル％又は９８モル％（例．少なくとも１０モル％、５０モル％、９０モル％又は９８モル％）である）
で示される化合物又はその薬学的に許容可能な塩であってもよい。例えば、Ｒ^１～Ｒ^８の少なくとも１つの重水素存在比は少なくとも５モル％；Ｒ^９～Ｒ^１５の少なくとも１つの重水素存在比は少なくとも５モル％；Ｒ^１６～Ｒ^１８の少なくとも１つの重水素存在比は少なくとも５モル％；Ｒ^１９～Ｒ^２５の少なくとも１つの重水素存在比は少なくとも５モル％；又はＲ^２６～Ｒ^３０の少なくとも１つの重水素存在比は少なくとも５モル％（例えば、Ｒ^２６～Ｒ^３０の少なくとも２つは重水素（例．Ｒ^２６～Ｒ^３０の２つが重水素、Ｒ^２６～Ｒ^３０の３つが重水素、Ｒ^２６～Ｒ^３０の４つが重水素又はＲ^２６～Ｒ^３０の全てが重水素）である）である。

【0029】

好ましくは、式（Ｉ）の重水素化メルフルフェン誘導体及び／又は以下に示す重水素化メルフルフェン誘導体の立体化学は、本明細書の背景技術の項に示したメルフルフェンの構造に示されている。

【0030】

ある態様では、本発明での使用に適した重水素化メルフルフェン誘導体は、以下の群：

【0031】

【化3】

【0032】

から選択される化学構造式、以下の群：

【0033】

【化4】

【0034】

から選択される化学構造式、以下の群：

【0035】

【化5】

【0036】

から選択される化学構造式、又は、以下の群：

【0037】

【化6】

【0038】

から選択される化学構造式を有する。

【0039】

ある態様では、本発明での使用に適したメルフルフェンの重水素化誘導体は、ＯＰＤ-５であり、その構造を以下に示す。

【0040】

【化7】

【0041】

ある態様では、本発明での使用に適した重水素化メルフルフェン誘導体は、以下の群：

【0042】

【化8】

【0043】

から選択される。

【0044】

また、本明細書では、特に明記しない限り、メルフルフェンの質量は、対イオンの質量を除いた質量である。対イオンを含まないメルフルフェンの分子量は（天然の同位体存在比では）４９８．４２ｇ／モルである。メルフルフェン及びその塩、特に塩酸塩は、例えば、国際公開第01/96367号及び第2014/065751号で知られており、同じ塩が本発明での使用に適している。

【0045】

本発明での使用に適したメルフルフェンの塩は、対イオンが薬学的に許容可能なものである。適切な塩には、有機酸又は無機酸で形成された塩が含まれる。特に、本発明による酸で形成された適切な塩には、鉱酸、非置換若しくは例えばハロゲンで置換された１～４個の炭素原子を有するアルカンカルボン酸など、飽和若しくは不飽和ジカルボン酸など、ヒドロキシカルボン酸など、アミノ酸などの強有機カルボン酸、又は非置換若しくは例えばハロゲンで置換された（Ｃ_１～Ｃ_４）アルキル若しくはアリールスルホン酸などの有機スルホン酸で形成される塩が含まれる。薬学的に許容可能な酸付加塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、クエン酸、酒石酸、酢酸、リン酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、コハク酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、シュウ酸、オキサロ酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン-2-スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、フタル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン及びアルギニンから形成されたものが含まれる。

【0046】

メルフルフェンの好ましい塩には、塩酸、臭化水素酸、酢酸、p-トルエンスルホン酸、酒石酸、硫酸、コハク酸、リン酸、シュウ酸、硝酸、メタンスルホン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸から形成されるものなどの酸付加塩が含まれる。より好ましくは、本発明で使用するメルフルフェンの塩は、塩酸塩（塩酸から形成される付加塩）である。

【0047】

メルフルフェンの他の好ましい塩には塩酸、臭化水素酸、硝酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、トリフルオロ酢酸、パラトルエンスルホン酸、2-メシチレンスルホン酸、クエン酸、酢酸、酒石酸、フマル酸、乳酸、コハク酸、リンゴ酸、マロン酸、マレイン酸、1,2-エタンジスルホン酸、アジピン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、エタンスルホン酸又はニコチン酸が含まれる。

【0048】

別の態様では、メルフルフェンの好ましい塩には、塩酸、臭化水素酸、酢酸、p-トルエンスルホン酸、酒石酸、硫酸、コハク酸、リン酸、シュウ酸、硝酸、メタンスルホン酸、リンゴ酸、マレイン酸、クエン酸又はエタンスルホン酸から形成されるものなどの酸付加塩が含まれる。好ましくは、本発明で使用するメルフルフェンの塩は、塩酸塩（塩酸から形成される付加塩）、エタンスルホン酸塩（エタンスルホン酸から形成される付加塩）、臭化水素酸塩（臭化水素酸から形成される付加塩）、マレイン酸塩（マレイン酸から形成される付加塩）又はp-トルエンスルホン酸塩（p-トルエンスルホン酸から形成される付加塩）である。

【0049】

別の好ましい態様では、本発明で使用するメルフルフェンの塩は、塩酸塩（塩酸から形成される付加塩）、エタンスルホン酸塩（エタンスルホン酸から形成される付加塩）、マレイン酸塩（マレイン酸から形成される付加塩）又はp-トルエンスルホン酸塩（p-トルエンスルホン酸から形成される付加塩）（例．塩酸塩、エタンスルホン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩）である。

【0050】

より好ましくは、メルフルフェンの塩はエタンスルホン酸塩又は塩酸塩である。

【0051】

当業者は、多くの有機化合物が、反応する又は沈殿若しくは結晶を形成する溶媒と複合体を形成する可能性があることを理解するであろう。このような複合体は「溶媒和物」として知られている。例えば、水との複合体は「水和物」として知られている。複合体は、化学量論又は非化学量論的な量で溶媒を組み込んでいてもよい。溶媒和物は、Water-Insoluble Drug Formulation, 2^nd ed R. Lui CRC Pressの553ページ及びByrn et al Pharm Res 12(7), 1995, 945-954に記載されている。本発明で使用するメルフルフェン又はその塩は、溶液に変換される前は溶媒和物の形態であってもよい。本発明での使用に適したメルフルフェンの溶媒和物は、溶媒が薬学的に許容可能なものである。例えば、水和物は薬学的に許容可能な溶媒和物である。

【0052】

製剤
本発明は、上述した製剤を提供する。

【0053】

本発明の製剤は、メルフルフェン及びその塩の長期保存に特に適している。長期保存とは、保存開始時の製剤のメルフルフェン純度に対して、純度が０％～５％、５％～１０％、１０％～１５％又は１５％～２０％以上低下することなく、製剤を１～３か月、３～６か月、６～９か月、９～１２か月又はこれ以上保存できることを意味すると理解される。

【0054】

長期保存の場合、本発明の製剤は、１０℃未満、例えば５℃（例．５±３℃）以下で保存される。好ましくは、本発明の製剤は０℃未満、例えば、０～－３０℃、－３０～－６０℃又は－６０～－９０℃で保存される。より好ましくは、本発明の製剤は、－１５～－２５℃又は－７５～－８５℃で保存される。

【0055】

本発明の好ましい態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩及びプロピレングリコールを含む（か、又は本質的になる）。

【0056】

本発明の別の好ましい態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩及びプロピレングリコールから本質的になる。

【0057】

本発明の別の好ましい態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩及びＰＥＧを含む（か、又は本質的になる）。

【0058】

本発明の別の好ましい態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩及びＰＥＧから本質的になる。

【0059】

好ましくは、ＰＥＧの平均分子量は、１５０～６５０Ｄａ、例えば、１５０～２５０、２５０～３５０、３５０～４５０、４５０～５５０及び５５０～６５０Ｄａである。例えば、ＰＥＧは、薬局方で定義されたＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００又はＰＥＧ６００であってもよい。より好ましくは、ＰＥＧの平均分子量は２５０～３５０Ｄａである。さらにより好ましくは、ＰＥＧはＰＥＧ３００である。

【0060】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、及び２種以上の異なるＰＥＧ化合物の混合物（例．ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００及びＰＥＧ６００の１つ以上を含む混合物）から形成されたＰＥＧを含む（か、又は本質的になる）。

【0061】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、及び２種以上の異なるＰＥＧ化合物の混合物（例．ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００及びＰＥＧ６００の１つ以上を含む混合物）から形成されたＰＥＧから本質的になる。

【0062】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール及びＰＥＧを含む（か、又は本質的になる）。

【0063】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール及びＰＥＧから本質的になる。

【0064】

製剤がＰＥＧ及びプロピレングリコールを含む本発明の態様では、ＰＥＧは、上述のとおり、１つのＰＥＧ化合物から形成されていてもよく、又は、上述のとおり、２つ以上の異なるＰＥＧ化合物の混合物から形成されていてもよい。

【0065】

ＰＥＧ及びプロピレングリコールを含む本発明の製剤の場合、含まれるＰＥＧ及びプロピレングリコールの重量比（w/w）は、例えば、約０．５：１、１：１、１：２、１：５、１：１０、１：１５、１：２０、１：２５、１：３０、１：３５、１：４０、１：４５、１：５０、１：０．５、２：１、５：１、１０：１、１５：１、２０：１、２５：１、３０：１、３５：１、４０：１、４５：１又は５０：１であってもよい。

【0066】

本発明での使用に適したプロピレングリコール及びＰＥＧは、商業的供給源からたやすく入手可能である。

【0067】

本発明の製剤の好ましい態様は、生理学的に許容可能な溶媒（iii）を含まない。

【0068】

本発明の製剤は、場合によっては、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒を含んでいてもよい。適切な水性溶媒には、水、リンゲル液、グルコース溶液、塩化ナトリウム液（例，等張塩化ナトリウム溶液）といった非毒性で非経口的に許容可能な希釈剤又は溶媒が含まれる。

【0069】

本発明の製剤は、さらに、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤及び本発明の製剤をレシピエントの血液と等張にする溶質を含んでいてもよい。

【0070】

本発明の好ましい態様では、本発明の製剤は、ＰＥＧ又はプロピレングリコール以外の有機溶媒を実質的に含まない。本明細書において、有機溶媒を「実質的に含まない」という用語は、本発明の製剤に含まれる有機溶媒は、プロピレングリコール及びＰＥＧ以外、微量であることを意味するために使用される。例えば、プロピレングリコール又はＰＥＧ以外の有機溶媒は約１％w/v未満である。プロピレングリコール又はＰＥＧ以外の有機溶媒は、好ましくは０．５％w/v未満、より好ましくは０．１％w/v未満である。

【0071】

好ましい態様では、本発明の製剤は、アルカリ土類金属塩を実質的に含まない。アルカリ土類金属の塩には、ベリリウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、バリウム及びラジウムの塩が含まれる。好ましくは、本発明の製剤は、カルシウム塩及び／又はマグネシウム塩を実質的に含まない。アルカリ土類金属塩の陰イオンは、グルコン酸イオン、塩素イオン、酢酸イオン、乳酸イオン又は臭素イオンであってもよい。例えば、アルカリ土類金属塩は、塩化カルシウム又は塩化マグネシウムであってもよい。本明細書において、「アルカリ土類金属塩を実質的に含まない」という用語は、本発明の製剤に含まれるアルカリ土類金属塩は微量であることを意味するために使用される。例えば、アルカリ土類金属塩は約１％w/v未満である。アルカリ土類金属塩は、好ましくは０．５％w/v未満、より好ましくは０．１％w/v未満である。

【0072】

本発明の製剤におけるメルフルフェンの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬである。例えば、１～５、５～１０、１０～１５、１５～２０、２０～２５、２５～３０、３０～３５、３５～４０、４０～４５及び４５～５０ｍｇ／ｍＬである。好ましくは、メルフルフェンの濃度は約１０～３０ｍｇ／ｍＬである。より好ましくは、１５～２５ｍｇ／ｍＬ、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４及び２５ｍｇ／ｍＬである。

【0073】

プロピレングリコール及びＰＥＧに対するメルフルフェンの溶解性が驚くほど高いため、治療上有用な濃度のメルフルフェン又はその塩を含有する本発明の製剤を調製することが可能である。したがって、メルフルフェン又はその塩の濃度が、生理学的に許容可能で忍容性である高用量（例．一回量約１５０～８００ｍｇ（対イオンの質量を除く））のメルフルフェン又はその塩の対象への投与を可能にする濃度であることは、本発明の１つの利点である。

【0074】

本発明の製剤ではメルフルフェン又はその塩が唯一の有効成分であるが、本発明の製剤は、さらに１つ以上の治療薬を含むことも可能である。その様な薬剤は公知である。本発明で使用する治療薬の例には、ステロイド（プレドニゾン、プレドニゾロン及びデキサメタゾン）、ＩＭｉＤ（サリドマイド、レナリドミド及びポマリドミド）、ＰＩ（ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ及びイキサゾミブ）、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤（パノビノスタット）、従来の化学療法剤（アルキル化剤（例．メルファラン、シクロホスファミド、ベンダムスチン）、ドキソルビシン）、抗ＣＤ３８抗体（ダラツムマブ）及び抗ＳＬＡＭＦ７抗体（エロツズマブ）が含まれる。

【0075】

したがって、本発明のある態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、及び必要に応じて、１つ以上の治療薬を含む（か、又は本質的になる）。

【0076】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、及び必要に応じて、１種以上の治療薬から本質的になる。

【0077】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、ＰＥＧ、及び必要に応じて、１種以上の治療薬を含む（か、又は本質的になる）。

【0078】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、ＰＥＧ、及び必要に応じて、１種以上の治療薬から本質的になる。

【0079】

本発明の製剤中に存在してもよい治療薬の正確な量及び濃度は、投薬計画、治療薬の効力、対象（通常は哺乳類、例えば人間）の年齢、体格、性別及び状態、病気又は状態の性質と重症度、並びに他の医学的及び物理的要因によって変化してもよい。当業者は、メルフルフェン又はその塩及び本発明での使用に適した１種以上の治療薬の量及び濃度をたやすく決めることができる。

【0080】

治療
本発明の製剤は、医薬品としての用途を有する。

【0081】

本発明のある態様では、本発明の製剤は、例えば、アルキル化剤（例．メルファラン、シクロホスファミド、ベンダムスチン）といった従来の化学療法剤で治療してもよい疾患又は状態の治療及び／又は予防の用途を有する。

【0082】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、腫瘍の成長を抑制し、及び／又は腫瘍細胞を殺す、がんの治療及び／又は予防に使用するための用途を有する。したがって、本発明の製剤は、がんに苦しむ患者を治療し、及び／又は、生存期間を延長するために使用してもよい。

【0083】

本発明の別の態様では、本発明の製剤は、アミロイドーシスの治療及び／又は予防に使用するための用途を有する。

【0084】

治療効果を得るために必要なメルフルフェンの量は、投与経路、並びに、人種、年齢、体重、性別、病状、特定の疾患とその重症度、並びに他の医学的及び身体的要因といった治療中の対象の特徴によって変化する。当業者は、がんの治療又は予防に必要なメルフルフェンの有効量をたやすく決めて、投与することができる。

【0085】

本発明の製剤は、本発明の製剤の薬学的に有効な量を対象に投与することを含む、対象を治療する方法における有用性を有する。好ましくは、本発明の製剤は、例えば、事前の希釈（例．生理学的に許容可能な溶媒又は希釈剤による事前の希釈）を行うことなく、対象に直接投与する。

【0086】

本発明の製剤は、調製直後に、又は、保存後に、例えば、本明細書に記載されるように１～３月、３～６月、６～９月、９～１２月若しくはそれ以上保存した後に、対象に投与してもよい。

【0087】

即時注射及び注入の溶液及び懸濁液は、本発明の製剤を使用して調製することができる。非経口投与の代表的な組成物は、例えば、適切な非毒性の生理学的に許容可能な溶媒若しくは希釈剤（例えば、非経口的に許容可能な溶媒若しくは希釈剤、例．マンニトール、ブドウ糖、1,3-ブタンジオール、水、リンゲル液、等張塩化ナトリウム溶液）、又は、合成モノ若しくはジグリセリドを含む他の適切な分散剤若しくは湿潤・懸濁剤、及び、オレイン酸若しくはクレモフォールを含む脂肪酸を含むことができる、注射可能な溶液又は懸濁液を含む。

【0088】

本発明のある態様では、本発明の製剤は、例えば、生理学的に許容可能な溶媒又は希釈剤（例えば、非経口的に許容可能な溶媒又は希釈剤、例．生理食塩液、グルコース溶液又はそれらの混合物）で希釈した後に対象に投与される。好ましくは、生理学的に許容可能な溶媒は、グルコース溶液（例えば、約４．５～５．５wt％のグルコース、例，約５wt％グルコース）、生理食塩液（例えば、約０．９wt％塩化ナトリウム）又はそれらの混合物である。その様な溶液は、場合によっては緩衝化してもよい。例えば、製剤は、対象に投与する前に、生理学的に許容可能な溶媒で、例えば、メルフルフェン濃度が約０．２ｍｇ／ｍｌといった約０．００１ｍｇ／ｍＬ～１．２ｍｇ／ｍＬ（例．０．０１ｍｇ／ｍＬ～１．２ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ～１．２ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ～１．０ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ～０．５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ～０．４ｍｇ／ｍＬ又は０．１ｍｇ／ｍＬ～０．３ｍｇ／ｍＬ）に希釈してもよい。

【0089】

単位投与形態
本発明の製剤は、単位投与形態として提供してもよい。好ましい単位投与形態は、必要な量の本発明での使用に適したメルフルフェン又はその塩を含むものである。

【0090】

本発明の好ましい態様では、本発明の製剤は、単位用量のメルフルフェン又はその塩を含むバイアルで提供してもよい。例えば、本発明の製剤は、単位用量１０～８００ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含むバイアルで提供してもよく、例えば、バイアルは、単位用量５０～１５０、１５０～２５０、２５０～３５０、３５０～４５０、４５０～５５０、５５０～６５０又は６５０～７５０ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含んでいてもよい。好ましくは、バイアルは、単位用量７５～１２５、１２５～１７５又は１７５～２２５ｍｇのメルフルフェン、例えば、１００、１５０及び２００ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含む。より好ましくは、バイアルは単位用量１００ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含む。ある態様では、バイアルは単位用量２０ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含む。ある態様では、バイアルは単位用量４０ｍｇのメルフルフェン（対イオンの質量を除く）を含む。

【0091】

調製方法及び保存方法
本発明は、本発明の製剤の調製方法を提供する。

【0092】

本発明の好ましい態様では、本発明の製剤の調製方法は、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコールに溶解する工程を含む。

【0093】

本発明のある態様では、本発明の方法は、１つ以上の治療薬をプロピレングリコールに溶解する追加の工程を含み、製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール及び本明細書に記載された１つ以上の治療薬を含む（か、又は本質的になる）。

【0094】

本発明の別の好ましい態様では、本発明の製剤の調製方法は、メルフルフェン又はその塩をＰＥＧに溶解する工程を含む。ＰＥＧは、好ましくは、本明細書に記載されたＰＥＧ化合物、又は本明細書に記載された２つ以上の異なるＰＥＧ化合物の混合物である。

【0095】

本発明のある態様では、本発明の方法は、１つ以上の治療薬をＰＥＧに溶解する追加の工程を含み、製剤は、メルフルフェン又はその塩、ＰＥＧ及び本明細書に記載された１つ以上の治療薬を含む（か、又は本質的になる）。

【0096】

本発明の別の態様では、本発明の製剤の調製方法は、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコール及びＰＥＧに溶解する工程を含む。ＰＥＧは、好ましくは、本明細書に記載されたＰＥＧ化合物、又は本明細書に記載された２つ以上の異なるＰＥＧ化合物の混合物である。

【0097】

本発明の別の態様では、本発明の方法は、１つ以上の治療薬をプロピレングリコール及びＰＥＧに溶解する追加の工程を含み、製剤は、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、ＰＥＧ及び本明細書に記載された１つ以上の治療薬を含む（か、又は本質的になる）。

【0098】

本発明は、さらに、本発明の製剤を調製する工程及び前記製剤を約－９０～２５℃で保存する工程を含む、メルフルフェン又はその塩の保存方法に関する。好ましくは、本発明の製剤は、約５℃（例．５±３℃又は５±１℃）以下、例えば、約０～４℃で保存される。

【0099】

本発明のある態様では、製剤は約－３０～－１０℃で、例えば、－３０～－２５、－２５～－１５及び－１５～－１０℃で保存される。好ましくは、－２５～－５℃、例えば、約－２０℃（例．－２０±３℃又は－２０±１℃）である。

【0100】

本発明の別の態様では、製剤は約－９０～－６０℃で、例えば、－９０～－８５、－８５～－７５（例えば、約－７０℃（例．－７０℃±３℃又は－７０℃±１℃）、－７５～－６０℃で保存される。好ましくは、－８５～－７５℃、例えば、約－８０℃（例．－８０±３℃又は－８０±１℃）である。

【0101】

本発明の別の態様では、製剤は約５～２５℃で、例えば、５～１２℃、１２～１８、１８～２５℃、２０～２５℃で保存される。特に、１８～２５℃又は２０～２５℃、例えば約２５℃（例．２５±３℃）で保存される。

【0102】

キット
本発明は、本発明の製剤の調製に適したキットを提供する。

【0103】

本発明の好ましい態様では、本発明のキットは、メルフルフェン又はその塩及びプロピレングリコールを含む。

【0104】

本発明の別の好ましい態様では、本発明のキットは、メルフルフェン又はその塩及び１つ以上のＰＥＧ化合物を含む。１つ以上のＰＥＧ化合物は、本明細書に記載された１つ以上のＰＥＧ化合物である。

【0105】

本発明のある態様では、本発明のキットは、メルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール及び１つ以上のＰＥＧ化合物を含む。１つ以上のＰＥＧ化合物は、本明細書に記載された１つ以上のＰＥＧ化合物である。

【0106】

プロピレングリコール及び／又はＰＥＧは、本発明の製剤の調製に適した形態及び量で、本発明のキット中に含まれる。当業者は、本発明の製剤の調製に適したプロピレングリコール及びＰＥＧの量をたやすく決めることができる。

【0107】

本発明のある態様では、本発明のキットは、本明細書に記載された１つ以上の治療薬をさらに含む。

【0108】

本発明の別の態様では本発明のキットは、１種以上の本明細書に記載された生理学的に許容可能な水性溶媒をさらに含む。

【0109】

メルフルフェン又はその塩、及び必要に応じて存在する１つ以上の治療薬は、本発明の製剤の調製に適した形態及び量で本発明のキット中に含まれる。当業者は、本発明での使用に適したメルフルフェン又はその塩、及び必要に応じて存在する１つ以上の治療薬の量をたやすく決めることができる。

【0110】

以下に実施例により、本発明を説明する。

【実施例】

【0111】

実施例１～３で使用したメルフルフェンは、塩酸塩の形態の重水素化メルフルフェンＯＰＤ-５である。ＯＰＤ-５塩酸塩の化学構造を以下に示す。

【0112】

【化9】

【0113】

実施例５で使用したメルフルフェンは、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩の形態のメルフルフェンである。実施例４では、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩及びp-トルエンスルホン酸塩の形態のメルフルフェンの構造を示し、それらの合成について記載する。

【0114】

実施例１ メルフルフェン（ＯＰＤ-５）及びプロピレングリコールを含有する製剤の２～８℃、２５℃及び４０℃における安定性
材料及び方法
バイアル（2R type 1ガラスバイアル、Gerresheimer, #35601558）を精製水（０．２μｍＳ／ｃｍ以下、全有機体炭素（ＴＯＣ）１０ｐｐｂ未満）で洗浄した。その後、バイアルを乾燥させ、３００℃で２時間熱処理した。ゴム栓を１２１℃、２ｂａｒで１５分間オートクレーブ滅菌した。

【0115】

メルフルフェン（ＯＰＤ-５）をプロピレングリコール（1,2-プロパンジオール、EMPROVE（登録商標）exp Ph Eur, BP, USP, Merck Chemicals, #K49954578）に約２０ｍｇ／ｍＬ（対イオンの質量を除く）で溶解して製剤を調製した。各バイアルに１ｍＬのメルフルフェン溶液を入れた。次いで、バイアルにゴム栓をし、クリンプキャップした。Ｔ_０（保存前）、及び、２～８℃、２５℃又は４０℃で、約４週間（Ｔ_１）、８週間（Ｔ_２）、１２週間（Ｔ_３）又は２４週間（Ｔ_４）保存した後に、試料を分析した。

【0116】

Agilent 1100シリーズ液体クロマトグラフィー及びXBridge（登録商標）Shieldカラム（ＲＰ１８、３．５μｍ、4.6×150mm）を使用してＲＰ-ＨＰＬＣを行った。この方法は、２０分で０～８０％のＢ勾配と１．０ｍＬ／分の流量（移動相Ａ：８６／１４v/vの１０ｍＭ酢酸アンモニウム／アセトニトリルｐＨ５．０；移動相Ｂ：アセトニトリル）、カラム温度２０℃、サンプラー温度５℃及びＵＶ検出波長２６２ｎｍで行った。ＲＰ-ＨＰＬＣの前に、エタノール／アセトニトリル（３：７v/v）を使用して、製剤をメルフルフェン濃度０．８ｍｇ／ｍＬとなるように希釈した。

【0117】

結果
上述した方法で製剤を調製した。特に、メルフルフェンはプロピレングリコールに容易に溶解することが判明した。製剤中のメルフルフェンの濃度は約２０ｍｇ／ｍＬであった。

【0118】

図１は、２～８℃、２５℃及び４０℃（加速保存条件）で約４週間（Ｔ_１－３１日）保存後の製剤の画像を示す。図２は、２～８℃及び２５℃で約８週間（Ｔ_２－５９日）保存後の製剤の画像を示し；図３は、２～８℃及び２５℃で約１２週間（Ｔ_３－９８日）保存後の製剤の画像を示し；図４は、２～８℃及び２５℃で約２４週間（Ｔ_４－１６８日）保存後の製剤の画像を示す。特に、各時点（Ｔ_１、Ｔ_２、Ｔ_３及びＴ_４）で、２～８℃で保存した試料に目視できる着色は認められなかった。２５℃及び４０℃で保存した試料は黄～茶色を示し、時間の経過とともにその強度が増加した。着色はメルフルフェンの酸化によって生じると仮定されている。

【0119】

製剤中のメルフルフェンの濃度をＲＰ-ＨＰＬＣで確認した（表１）。保存前（Ｔ_０）の製剤中のメルフルフェン濃度は約２０ｍｇ／ｍＬであった。２５℃で保存した試料のメルフルフェン濃度は、時間の経過とともに減少した（表１及び図５）。２～８℃で保存した試料に、メルフルフェン濃度の大幅な変化はなかった（表１及び図６）。

【0120】

【表1】

【0121】

製剤中のメルフルフェンの純度（相対ピーク面積％）をＲＰ-ＨＰＬＣで確認した（表３）。保存前（Ｔ_０）の製剤中のメルフルフェン純度は約９９％であった。２５℃で保存した試料では、メルフルフェンの純度は時間の経過とともに減少し、１６８日間（Ｔ_４）の保存後の純度は４９．９％（試料番号１）及び４８．７％（試料番号２）であった（表２及び図７）。２～８℃で保存した試料では、メルフルフェンの純度の減少は僅かで、１６８日間（Ｔ_４）の保存後の純度は９５．４％（試料番号１）及び９５．８％（試料番号２）であった（表２及び図８）。

【0122】

【表2】

【0123】

実施例２ メルフルフェン（ＯＰＤ-５）及びＰＥＧを含有する製剤の２～８℃、２５℃及び４０℃における安定性
材料及び方法
バイアル（2R type 1ガラスバイアル、Gerresheimer, #35601558）を精製水（０．２μｍＳ／ｃｍ以下、全有機体炭素（ＴＯＣ）１０ｐｐｂ未満）で洗浄した。その後、バイアルを乾燥させ、３００℃で２時間熱処理した。ゴム栓を１２１℃、２ｂａｒで１５分間オートクレーブ滅菌した。

【0124】

メルフルフェン（ＯＰＤ-５）をポリエチレングリコール（ポリエチレングリコール３００、Emprove exp., Ph. Eur, Merck Chemicals, #K47544702）に約２０ｍｇ／ｍＬ（対イオンの質量を除く）で溶解して製剤を調製した。各バイアルに１ｍＬのメルフルフェン溶液を充填した。次いで、バイアルにゴム栓をし、クリンプキャップした。Ｔ_０（保存前）、並びに、２～８℃、２５℃又は４０℃で、約４週間（Ｔ_１ａ）、８週間（Ｔ_２ａ）、１２週間（Ｔ_３ａ）又は２４週間（Ｔ_４ａ）保存した後に、試料を分析した。

【0125】

Agilent 1100シリーズ液体クロマトグラフィー及びXBridge（登録商標）Shieldカラム（ＲＰ１８、３．５μｍ、4.6×150mm）を使用してＲＰ-ＨＰＬＣを行った。この方法は、２０分で０～８０％のＢ勾配と１．０ｍＬ／分の流量（移動相Ａ：８６／１４v/vの１０ｍＭ酢酸アンモニウム／アセトニトリルｐＨ５．０；移動相Ｂ：アセトニトリル）、カラム温度２０℃、サンプラー温度５℃及びＵＶ検出波長２６２ｎｍで行った。ＲＰ-ＨＰＬＣの前に、エタノール／アセトニトリル（３：７v/v）を使用して、製剤をメルフルフェン濃度０．８ｍｇ／ｍＬとなるように希釈した。

【0126】

結果
上述した方法で製剤を調製した。特に、メルフルフェンはＰＥＧ３００に容易に溶解することが判明した。製剤中のメルフルフェンの濃度は約２０ｍｇ／ｍＬであった。

【0127】

図９は、２～８℃、２５℃及び４０℃（加速保存条件）で約４週間（Ｔ_１ａ－２６日）保存後の製剤の画像を示す。図１０は、２～８℃及び２５℃で約８週間（Ｔ_２ａ－５４日）保存後の製剤の画像を示し；図１１は、２～８℃及び２５℃で約１２週間（Ｔ_３ａ－９４日）保存後の製剤の画像を示し；図１２は、２～８℃及び２５℃で約２４週間（Ｔ_４ａ－１６４日）保存後の製剤の画像を示す。２～８℃で保存した試料は、約４週間（Ｔ_１ａ）でわずかな黄色を示し、時間の経過とともに黄色の強度がわずかに増加した。２５℃及び４０℃で保存した試料は黄～茶色を示し、時間の経過とともにその強度が増加した。上述のとおり、着色はメルフルフェンの酸化によって生じると仮定されている。

【0128】

製剤中のメルフルフェンの濃度をＲＰ-ＨＰＬＣで確認した（表３）。保存前（Ｔ_０）の製剤中のメルフルフェン濃度は約２０ｍｇ／ｍＬであった。２５℃で保存した試料では、メルフルフェン濃度は時間の経過とともに減少した（表３及び図１３）。２～８℃で保存した試料では、メルフルフェンの濃度に大幅な変化はなかった（表３及び図１４）。

【0129】

【表3】

【0130】

製剤中のメルフルフェンの純度（相対ピーク面積％）をＲＰ-ＨＰＬＣで確認した（表４）。保存前（Ｔ_０）の製剤中のメルフルフェン純度（相対ピーク面積％）は約９９％であった。２５℃で保存した試料では、メルフルフェンの純度（相対ピーク面積％）は時間の経過とともに減少し、１６４日間（Ｔ_４ａ）の保存後の純度は７０％（試料番号１）及び６８．１％（試料番号２）であった（表４及び図１５）。２～８℃で保存した試料では、メルフルフェンの純度の減少は僅かで、１６４日間（Ｔ_４ａ）の保存後の純度は９１．４％（試料番号１）及び９１．３％（試料番号２）であった（表４及び図１６）。

【0131】

【表4】

【0132】

実施例３ メルフルフェン（ＯＰＤ-５）及びプロピレングリコールを含有する製剤の－２０℃及び－７０℃における安定性
材料及び方法
５３６．２５ｍｇのメルフルフェン（ＯＰＤ-５）を２０ｍＬメスフラスコに入れた。次いで、フラスコをプロピレングリコール（W294004-1Kg-K, Lot no: MKCD8681, Sigma-Aldrich）で満たした。得られた混合物を３分間ボルテックスした。次いで、混合物を２８℃で時々ボルテックスしながら１５分間撹拌し、濃度約２０ｍｇ／ｍＬ（対イオンの質量を除く）のメルフルフェンの透明な溶液を得た。溶液を１ｍＬバイアルに分注し、－７０℃又は－２０℃で保存した。

【0133】

プロピレングリコール製剤中のメルフルフェンの濃度及び純度（相対ピーク面積％）を時間０（Ｔ_０ｂ）とその後は１月ごとに、ＲＰ-ＨＰＬＣで確認した。各時点で２つの試料（製剤の２つの異なるバイアル）を分析した。各時点で、色の変化、沈殿についてバイアルを目視で確認した。

【0134】

Agilent 1100シリーズ液体クロマトグラフィー及びXBridge（登録商標）C18カラム（2.1×100mm、３．５μｍ）を使用してＲＰ-ＨＰＬＣを行った。この方法は、６分で５～９５％のＢ勾配と０．８ｍＬ／分の流量（移動相Ａ：０．１％ギ酸水溶液；移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％ギ酸）、カラム温度５５℃、サンプラー温度２５℃及びＵＶ検出波長２６２ｎｍで行った。ＲＰ-ＨＰＬＣに注入する前に、試料をＤＭＡで２００μｇ／ｍＬに希釈した。注入量は５μＬであった。

【0135】

結果
－７０℃及び－２０℃でのプロピレングリコール（ＰＧ）溶液中のメルフルフェン塩酸塩（ＯＰＤ-５）の安定性を検討した。いずれの試料も、６～８月の試験期間中、色の変化、沈殿は確認されなかった。図１７に示すように、プロピレングリコール製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）は、－２０℃において少なくとも６か月間は安定であり、６か月の試験期間中、メルフルフェン（ＯＰＤ-５）の濃度に著しい変化は認められなかった。図１８に示すように、プロピレングリコール製剤中のメルフルフェン（ＯＰＤ-５）は、－７０℃において少なくとも６か月間は安定であり、８か月の試験期間中、メルフルフェン（ＯＰＤ-５）の濃度に著しい変化は認められなかった。－２０℃で６か月及び－７０℃で８か月保存した場合、メルフルフェン（ＯＰＤ-５）は（製剤の保存前の純度に対して）９９．５％を超えるメルフルフェン純度を維持することが判明した。

【0136】

実施例４ メルフルフェンの塩の製造
メルフルフェン塩酸塩は、参照として本明細書に組み込まれる国際公開第01/96367号に開示されているように製造することができる。メルフルフェンのエタンスルホン酸塩、マレイン酸塩及びp-トルエンスルホン酸塩は、メルフルフェンの遊離塩基をジクロロメタン又は酢酸エチル中の１当量のそれぞれの酸で処理することによって製造した。必要に応じヘプタンを加え、塩を沈殿させた。全ての塩を、メルフルフェンと対イオンの比が１：１の白色固体として単離し、高真空下で乾燥した。メルフルフェンの遊離塩基は、メルフルフェン塩酸塩からＮａＨＣＯ_３及びジクロロメタン（ＤＣＭ）を用いて製造した。メルフルフェン塩酸塩を１００ｍＬのジクロロメタンに懸濁し、ＮａＨＣＯ_３の氷冷水溶液を添加した。混合物を３０秒間振とうした後、相を分離させた。有機相を回収し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、０℃の真空中で溶媒を留去した。メルフルフェンの遊離塩基を無色の油状物として単離した。ＨＰＬＣでは、メルフルフェンの分解は観察されず、油状物は室温で数日間安定であった。

【0137】

４．１ メルフルフェンエタンスルホン酸塩（エタンスルホン酸；(2S)-2-[[(2S)-2-アミノ-3-[4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル]プロパノイル]アミノ]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸エチルエステル）の製造

【0138】

【化10】

【0139】

メルフルフェンの遊離塩基（１２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１ｍＬ）に溶解し、ＤＣＭ（２００μＬ）中のエタンスルホン酸（２６．４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加えた。ヘプタン（５００μＬ）を加え、混合物を１０分間撹拌し、真空で濃縮して白色の固体を得た。この白色の固体をヘプタン（１ｍＬ）でトリチュレーションし、真空中で乾燥し、表題の化合物を白色の固体として得た。収量 ９７ｍｇ（６６％）。１：１（ｍｏｌ）の塩形成をＮＭＲで確認した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.12 - 7.95 (m, 2H), 7.35 - 7.21 (m, 2H), 7.19 - 7.04 (m, 4H), 6.77 - 6.64 (m, 2H), 4.61 - 4.51 (m, 1H), 4.07 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.71 (s, 8H), 3.14 - 2.92 (m, 3H), 2.80 (dd, J = 14.3, 8.2 Hz, 1H), 2.38 (q, J = 7.4 Hz, 2H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.06 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。

【0140】

４．２ メルフルフェンマレイン酸塩（(2S)-2-[[(2S)-2-アミノ-3-[4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル]プロパノイル]アミノ]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸エチルエステル；マレイン酸塩）の製造

【0141】

【化11】

【0142】

メルフルフェンの遊離塩基（１０８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０８０μＬ）に溶解し、マレイン酸（２５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を撹拌しながら少しずつ加えた。５～１０分後に激しく沈殿した。混合物を１ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、さらに３０分間撹拌した。沈殿を吸引濾過で回収し、３００μＬのＥｔＯＡｃで洗浄し、真空中で乾燥した。収量 １０４ｍｇ（７８％）。ＨＰＬＣ純度 ９５％。ＭＳ ｍ／ｚ ４９８［Ｍ＋Ｈ］^＋。１：１の塩形成をＮＭＲで確認した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.97 (s, 3H), 7.35 - 7.22 (m, 2H), 7.18 - 7.05 (m, 4H), 6.78 - 6.65 (m, 2H), 6.02 (s, 2H), 4.55 (td, J = 8.0, 6.2 Hz, 1H), 4.12 - 4.05 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 8H), 3.11 - 2.93 (m, 3H), 2.78 (dd, J = 14.3, 8.4 Hz, 1H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。

【0143】

４．３ メルフルフェンp-トルエンスルホン酸塩（(2S)-2-[[(2S)-2-アミノ-3-[4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル]プロパノイル]アミノ]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸エチルエステル：4-メチルベンゼンスルホン酸塩）の製造

【0144】

【化12】

【0145】

メルフルフェンの遊離塩基（100.8mg、0.20mmol）をＥｔＯＡｃ（１００８μＬ）に溶解し、ＥｔＯＡｃ（８５０μＬ）中のp-トルエンスルホン酸一水和物（４１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。５～１０分後に激しく沈殿した。混合物を２ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、さらに１時間撹拌した。沈殿を吸引により回収した。沈殿をＥｔＯＡｃ（５００μＬ）で洗浄し、真空中で乾燥させて、６５ｍｇ（４８％）の表題化合物をＨＰＬＣ純度９５％の白色の固体として得た。ＭＳ ｍ／ｚ ４９８［Ｍ＋Ｈ］^＋。１：１の塩形成をＮＭＲで確認した。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.10 - 7.95 (m, 3H), 7.55 - 7.44 (m, 2H), 7.33 - 7.24 (m, 2H), 7.19 - 7.06 (m, 6H), 6.76 - 6.65 (m, 2H), 4.55 (td, J = 8.0, 6.2 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.94 (s, 1H), 3.71 (s, 8H), 3.11 - 2.92 (m, 3H), 2.79 (dd, J = 14.3, 8.3 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。

【0146】

実施例５ メルフルフェンの塩及びプロピレングリコールを含む液剤の溶解性及び安定性
材料及び方法
プロピレングリコール中のメルフルフェンのエタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩及び塩酸塩の溶解性及び安定性を検討した。メルフルフェンのそれぞれの塩１０ｍｇを透明な４ｍＬバイアルに入れ、プロピレングリコール（Merck Lot # K51750378936, 1.07478.2500）を濃度２０ｍｇ／ｍＬとなるように添加した。バイアルを短時間振とうし、室温（ＲＴ、２０～２５℃）で保存した。

【0147】

メルフルフェンの塩の溶液の安定性を、エレクトロスプレーインターフェースとＵＶダイオードアレイ検出器を備えたAgilent 1100シリーズ液体クロマトグラフ／質量選択検出器（ＭＳＤ）（シングル四重極）による分析ＨＰＬＣ-ＭＳで、毎週、分析した。分析は、ACE 3 C8（3.0×50mm）カラムにより、０．１％ＴＦＡ水溶液中の１０～９７％アセトニトリルの勾配を使用して、１ｍＬ／分の流量で３分かけて行った。ＵＶは３０５ｎｍでモニターした。各時点（０、１、２、３、４、５、６及び７週）で、１０μＬのメルフルフェン溶液を４９０μＬのアセトニトリルで希釈し、ＨＰＬＣ-ＭＳ分析を行った。

【0148】

メルフルフェンのマレイン酸塩の溶解性及び安定性は、メルフルフェンのエタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩及び塩酸塩についての上記方法と同じ方法により検討する。

【0149】

結果
製剤は上記方法により調製した。各メルフルフェンの塩は、プロピレングリコールに良く溶け、２０ｍｇ／ｍＬのメルフルフェン溶液をたやすく調製できることが判明した。

【0150】

【表5】

【0151】

メルフルフェンのエタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸及び塩酸塩は、室温（ＲＴ）で保存した場合、７週間にわたり良好な安定性を示すことが判明した。ＲＴで４週間保存した後の各溶液のメルフルフェン純度は９０％を超え、ＲＴで７週間の保存後では、少なくとも８５％であることが判明した。各溶液の主な分解生成物は、以下の構造：

【0152】

【化13】

【0153】

を有するN-モノデスアルキルアニリンであった。

【0154】

メルフルフェン塩酸塩の溶液では、ＲＴで７週間保存した後に、微量（相対ピーク面積が０．５％未満）のN-ビス-デアルキル化分解生成物が検出された。N-ビス-デアルキル化分解生成物の構造は以下のとおりである。

【0155】

【化14】

【0156】

実施例６ ＯＰＤ５のキログラム規模での合成
ＯＰＤ-５は、以下の方法により、例えばキログラム規模で合成できる。

【0157】

工程（ｉ） p-フルオロ-L-フェニルアラニンをエタノール（ｄ_６）でエステル化することによる(2S)-2-アミノ-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩の製造

【0158】

【化15】

【0159】

p-フルオロ-L-フェニルアラニン（１．０ｋｇ、ＣＡＳ番号1132-68-9）をエタノール-ｄ_６（２．５Ｌ、ＣＡＳ番号1516-08-1）と1,2-ジクロロエタン（２．０Ｌ）の混合物でスラリー化した。水酸化ナトリウム（５Ｍ溶液）が入ったスクラバーを、反応容器の出口、コンデンサーの後に接続した。スクラバー液の劣化を確認するために、ブロモチモールブルー（１～２ｍｇ）を添加した。

【0160】

反応容器の内部温度を６０℃に加熱した。内部温度が６０℃に達した後に、塩化チオニル（６００ｍＬ）をゆっくりと添加し始めた。最初に、非常に多くの沈殿が形成した。最初の濃厚なスラリーは、反応が進行するにつれ薄くなった。約３時間、添加を続けた。内部温度は最高で７０℃になるようにマントルピースの温度を制御した。全ての試薬を添加した後は、マントルピースは内部温度が６５℃～７０℃になるように調節した。

【0161】

全ての塩化チオニルの添加が完了してから３時間後に、所望の(2S)-2-アミノ-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩への完全な変換が達成された。完全に変換されたことを確認（以下の条件によるＬＣ-ＭＳ分析：ACE 3 C8（3.0×50mm）カラム；３分間で１０～９０％のＢ勾配；移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含有する水、移動相Ｂ：純粋なアセトニトリル、流量１ｍＬ／分、ＵＶ検出波長：２１５～３９５、２５４及び２２０ｎｍ）した後、反応物を冷却（内部温度約４５℃）し、tert-ブチルメチルエーテル（１２．５Ｌ）を加えて、生成物を白色の沈殿物として得た。均一な混合物を得るために、混合物を撹拌した。

【0162】

次いで、混合物を内部温度０℃に冷却し、この温度で約３０分間熟成させ、濾過した。固体の(2S)-2-アミノ-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩を約１Ｌのtert-ブチルメチルエーテルで洗浄し、減圧下、最高温度３０℃で乾燥した。塊がある場合はそれを取り除くために、生成物を注意深くふるいにかけた。(2S)-2-アミノ-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩の単離収率は９２％であった。ＬＣ-ＭＳ：ｔ_Ｒ １．４３分、ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］２１７．

【0163】

工程（ii） (2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステルのキログラム規模での製造

【0164】

【化16】

【0165】

メルファラン（１．６６３ｋｇ、５．４５ｍｏｌ、１当量）を、精製水（１６．０ｋｇ）、水酸化ナトリウム（３２％水溶液、１．０４ｋｇ）及びテトラヒドロフラン（１０．０ｋｇ）の混合物に１０～１５℃で加えた。二炭酸ジtert-ブチル（１．３０８ｋｇ、５．９９ｍｏｌ、１．１当量）及びテトラヒドロフラン（４．７５ｋｇ）の混合物を１０～１５℃で加えた。反応混合物を、メルファランが少なくとも９７．０％（ＨＰＬＣ）変換されるまで、１８～２３℃で４～５時間撹拌した。温度を１５～２０℃とし、この温度を維持しながら、１．５ＭのＨＣｌを用いてｐＨを２．５～３．０に調整した。酢酸エチル（７．３４ｋｇ）を加え、相を分離した。水相を酢酸エチル（７．３４ｋｇ）で抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濾過残渣を酢酸エチルで洗浄した。溶媒を真空蒸留で除去し、(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパン酸を含む残留物を、２０～２５℃の真空中で最低１２時間乾燥した。ＨＰＬＣ：保持時間 １１．９分（ＨＰＬＣの条件は以下のとおり：試料溶媒－１：１（v/v）のアセトニトリル：水、Waters, Atlantic T3（３μ、4.6×150mm）カラム、２３分間で１０－９０－１０％のＢ勾配、流速１ｍＬ／分、移動相Ａ－１．０Ｌ ＭＱ-水中の５００μＬ リン酸 ８５％、移動相Ｂ－１．０ アセトニトリル中の５００μＬ リン酸 ８５％、ＵＶ２６２ｎｍで検出）。

【0166】

(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパン酸残留物をジクロロメタン（４４．０ｋｇ）に再溶解した。4-メチルモルホリン（１．３７８ｋｇ、１３．６３ｍｏｌ、２．５当量）を加え、続いて(2S)-2-アミノ-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩（１．３７７ｋｇ、５．４５ｍｏｌ、１．０当量）、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール、水（０．０８３ｋｇ、０．５４ｍｏｌ、０．１当量）及びN-(3-ジメチルアミノプロピル)-N’-エチルカルボジイミド塩酸塩（１．０４５ｋｇ、５．４５ｍｏｌ、１．０当量）を加えた。反応混合物を、(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパン酸の少なくとも９７．０％（ＨＰＬＣ）が、(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステルに変換されるまで、１８～２３℃で３～４時間撹拌した（ＨＰＬＣの条件は以下のとおり：試料溶媒－アセトニトリル、Waters, Atlantic T3（３μ、4.6×150mm）カラム、２３分間で１０－９０－１０％のＢ勾配、流速１ｍＬ／分、移動相Ａ－１．０Ｌ ＭＱ-水中の５００μＬ リン酸 ８５％、移動相Ｂ－１．０ アセトニトリル中の５００μＬ リン酸 ８５％、ＵＶ２６２ｎｍで検出）。

【0167】

ｐＨを５％ＫＨＳＯ_４水溶液で３．０～４．０に調整した。有機相を確保し、水相をジクロロメタン（２９．０ｋｇ）で抽出した。上記有機相を６％ＮａＨＣＯ_３で洗浄した。有機相を確保し、残りの水相を第２の有機相で逆抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そしてジクロロメタンで洗浄した。乾燥した有機相を真空蒸留により２２～２６Ｌに濃縮した。得られた有機相をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル（４０～６３ｐｍ、２２．４ｋｇ）、n-ヘプタン（６．７ｋｇ）及びジクロロメタン（５２．２ｋｇ）にかけた。カラムを６％酢酸エチル／ジクロロメタンで溶出した。(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステルを含む画分（ＴＬＣ）を合わせ、減圧下で２６～２８Ｌとなるまで蒸発させた。酢酸エチル（５．８ｋｇ）を加え、２６～２８Ｌとなるまで蒸発を続けた。この操作を繰り返した。酢酸エチルの添加後、(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステルの沈殿が始まった。必要に応じて、(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステルの種晶を加え、沈殿を補助してもよい。酢酸エチル（５．８ｋｇ）を再度添加し、上記種晶の播種工程を繰り返してもよい。混合物を減圧下で１９～２１Ｌとなるまで蒸発させ、n-ヘプタン（２２．１ｋｇ）を３５～４５℃で加えた。懸濁液を－２～２℃に冷却し、２～１８時間撹拌した。固体を遠心分離により単離し、濾過残渣をn-ヘプタンで洗浄した。固体を３０℃で真空乾燥し、(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル（２．６ｋｇ、８０％）を白色からわずかに黄色の固体として得た。ＨＰＬＣ：保持時間 １３．４分

【0168】

工程（iii） ＯＰＤ５塩酸塩（(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩）のキログラム規模での製造

【0169】

【化17】

【0170】

塩化水素（１．３１ｋｇ、３５．９ｍｏｌ）及びアセトニトリル（２１．７ｋｇ）から製造した、アセトニトリル中の１．３Ｍの塩酸中の(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル（３．１０ｋｇ、５．１４ｍｏｌ）の溶液を、２９～３３℃で１２～２４時間撹拌した。(2S)-2-[(2S)-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}-2-{[(tert-ブトキシ)カルボニル]-アミノ}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸（^２Ｈ_５）エチルエステルの少なくとも９９．０％（ＨＰＬＣ）が、(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩に変換された（ＨＰＬＣの条件は以下のとおり：試料溶媒－１：９（v/v）のＤＭＳＯ：アセトニトリル、Waters, Atlantic T3（３μ、4.6×150mm）カラム、２３分間で１０－９０－１０％のＢ勾配、流速１ｍＬ／分、移動相Ａ－１．０Ｌ ＭＱ-水中の５００μＬ リン酸 ８５％、移動相Ｂ－１．０ アセトニトリル中の５００μＬ リン酸 ８５％、ＵＶ２６２ｎｍで検出）。

【0171】

反応混合物を研磨濾過し、アセトニトリル（６８．９ｋｇ）で希釈した。次いで、ジャケット温度４５℃で、減圧蒸留した。反応混合物の容量が８６Ｌとなった時、アセトニトリル（２２．７ｋｇ）を加え、蒸留を続けた。反応混合物の容量が８６Ｌとなった時、アセトニトリル（２２．７ｋｇ）を加え、蒸留を続けた。反応容器内の容量が８６Ｌとなった時、アセトニトリル（２２．７ｋｇ）を加え、反応容器内の容量が８６Ｌに達するまで蒸留を続けた。

【0172】

tert-ブチルメチルエーテル（６８．４ｋｇ）を３５～４５℃で２５～４５分間かけて添加し、続いて２２～２８℃に冷却した。この温度で６０～１２０分間撹拌した後、粗(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩を濾別し、tert-ブチルメチルエーテル（１２．５ｋｇ）で洗浄した。粗生成物を、ジャケット温度を３０℃に設定した反応容器内で真空乾燥した。

【0173】

アセトニトリル（８４．０ｋｇ）を加え、得られた懸濁液を４８～５４℃で３０～９０分間撹拌した後、４０～４５℃に冷却した。tert-ブチルメチルエーテル（７４．６ｋｇ）を３８～４５℃で４０～７０分間かけて添加し、続いて２２～２８℃に冷却した。この温度で６０～１２０分間撹拌した後、粗(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩を濾別し、tert-ブチルメチルエーテル（１４．０ｋｇ）で洗浄した。３０～３５℃で真空乾燥し、(2S)-2-[(2S)-2-アミノ-3-{4-[ビス(2-クロロエチル)アミノ]フェニル}プロパンアミド]-3-(4-フルオロフェニル)プロパン酸(^２Ｈ_５)エチルエステル塩酸塩（ＯＰＤ５塩酸塩）（２．５ｋｇ、９０％）を白色からオフホワイトの固体として得た。ＨＰＬＣ：保持時間 ９．０分
明細書の末尾に、出願当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記しました。
［１］ 以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）プロピレングリコール；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤。
［２］ 前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬである、［１］に記載の製剤。
［３］ 前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬである、［２］に記載の製剤。
［４］ 以下の成分：
i）メルフルフェン又はその塩；
ii）ポリエチレングリコール；
iii）必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び
iv）必要に応じて、１種以上の治療薬
を含有する（又は本質的にからなる）製剤。
［５］ 前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬ～約５０ｍｇ／ｍＬである、［４］に記載の製剤。
［６］ 前記メルフルフェン又はその塩の濃度が約１５ｍｇ／ｍＬ～約２５ｍｇ／ｍＬである、［５］に記載の製剤。
［７］ 前記ポリエチレングリコールの平均分子量が１５０～６５０Ｄａ、例えば１５０～２５０、２５０～３５０、３５０～４５０、４５０～５５０、５５０～６５０Ｄａである、［４］～［６］のいずれか一つに記載の製剤。
［８］ 前記ポリエチレングリコールの平均分子量が２５０～３５０Ｄａである、［７］に記載の製剤。
［９］ 前記ポリエチレングリコールはＰＥＧ３００である、［８］に記載の製剤。
［１０］ 本質的にメルフルフェン又はその塩、プロピレングリコール、及び必要に応じて、１種以上の治療薬からなる、［１］～［３］のいずれか一つに記載の製剤。
［１１］ 本質的にメルフルフェン又はその塩、ポリエチレングリコール、及び必要に応じて、１種以上の治療薬からなる、［４］～［９］のいずれか一つに記載の製剤。
［１２］ 前記１種以上の生理学的に許容可能な溶液は、グルコース溶液、生理食塩液又はそれらの混合物である、［１］～［９］のいずれか一つに記載の製剤。
［１３］ 前記１種以上の治療薬の少なくとも１つが、プロテアーゼ阻害剤（ＰＩ）、免疫調節薬（ＩＭｉＤ）又はアルキル化剤である、［１］～［１２］のいずれか一つに記載の製剤。
［１４］ 医薬品として使用するための、［１］～［１３］のいずれか一つに記載の製剤。
［１５］ 例えば、アルキル化剤（例．メルファラン、シクロホスファミド、ベンダムスチン）といった従来の化学療法剤で治療してもよい疾患又は状態の治療又は予防に使用するための、［１］～［１３］のいずれか一つに記載の製剤。
［１６］ がんの治療若しくは予防に使用するため、又はアミロイドーシスの治療若しくは予防に使用するための、［１］～［１３］のいずれか一つに記載の製剤。
［１７］ 前記がんが、多発性骨髄腫、乳がん、肺がん、卵巣がん、白血病及びリンパ腫から選択される、がんの治療又は予防に使用するための、［１６］に記載の使用のための製剤。
［１８］ 患者を治療する方法であって、薬学的に有効な量の［１］～［１３］に記載の製剤を対象に投与することを含む、方法。
［１９］ がんの治療又は予防方法であって、有効量の［１］～［１３］に記載の製剤を対象に投与することを含む、方法。
［２０］ 前記製剤は前記対象に直接投与される、［１９］に記載の方法。
［２１］ ［１］～［１３］に記載の製剤の調製方法であって、メルフルフェン又はその塩をプロピレングリコールに溶解することを含む、方法。
［２２］ ［１］～［１３］に記載の製剤の調製方法であって、メルフルフェン又はその塩をポリエチレングリコールに溶解することを含む、方法。
［２３］ メルフルフェン又はその塩の保存方法であって、［１］～［１３］に記載の製剤を調製する工程、並びに前記製剤を約－９０～２５℃、好ましくは、約５℃（例．５±３℃）以下、例えば約０～４℃、約－２０℃（例．－２０±３℃）及び約－８０℃（例．－８０±３℃）で保存する工程を含む、方法。
［２４］ メルフルフェン又はその塩；プロピレングリコール；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有するキット。
［２５］ メルフルフェン又はその塩；ポリエチレングリコール；必要に応じて、１種以上の生理学的に許容可能な水性溶媒；及び、必要に応じて、１種以上の治療薬を含有するキット。
［２６］ 前記メルフルフェンは、塩酸塩、エタンスルホン酸塩、マレイン酸塩又はp-トルエンスルホン酸塩、好ましくは塩酸塩の形態である、［１］～［１７］のいずれか一つに記載の製剤、［１８］～［２３］のいずれか一つに記載の方法又は［２４］若しくは［２５］に記載のキット。
［２７］ 前記メルフルフェンは重水素化メルフルフェン、例えば、前記メルフルフェンはＯＰＤ-５：

【化18】

である、［１］～［１７］若しくは［２６］のいずれか一つに記載の製剤、［１８］～［２３］若しくは［２６］のいずれか一つに記載の方法又は［２４］～［２６］のいずれか一つに記載のキット。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】