特許 7643325 細胞培養器具および細胞培養方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-03-03

(45)【発行日】2025-03-11

(54)【発明の名称】細胞培養器具および細胞培養方法

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/00 20060101AFI20250304BHJP

   C12M 1/24 20060101ALI20250304BHJP

   C12M 3/00 20060101ALI20250304BHJP

   C12N 1/00 20060101ALI20250304BHJP

   C12N 5/00 20060101ALI20250304BHJP

【ＦＩ】

C12M1/00 D

C12M1/24

C12M3/00 A

C12N1/00 A

C12N5/00

【請求項の数】 4

(21)【出願番号】P 2021206737

(22)【出願日】2021-12-21

(65)【公開番号】P2023091889

(43)【公開日】2023-07-03

【審査請求日】2023-12-25

(73)【特許権者】

【識別番号】000241463

【氏名又は名称】豊田合成株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000028

【氏名又は名称】弁理士法人明成国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】▲高▼城 誠太郎

【審査官】戸来 幸男

(56)【参考文献】

【文献】実開昭６３－１８６２９８（ＪＰ，Ｕ）

【文献】実開平０１－０６０７００（ＪＰ，Ｕ）

【文献】特開平０５－００３７７９（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１２－１４３２２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００７－１６７００２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１５－２０８２８３（ＪＰ，Ａ）

【文献】中国実用新案第２１２１９９２９０（ＣＮ，Ｕ）

【文献】特表２００８－５４１７７２（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ１２Ｍ １／００－３／１０

Ｇｏｏｇｌｅ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

細胞培養器具であって、
円筒部と、前記円筒部の軸方向の一端に配置された培養膜と、前記軸方向の他端に形成された第１係合部と、を有する円筒部材と、
前記円筒部を収容可能な有底円筒部と、前記第１係合部と係合可能な第２係合部と、を有する保持部材と、を備え、
前記第２係合部は、前記円筒部を前記有底円筒部に収容した第１状態においても、前記円筒部の姿勢が前記第１状態のときとは前記軸方向において反対向きとなる第２状態においても、前記第１係合部と係合し、
前記第２係合部は、前記第１係合部と係合することで、前記円筒部材の前記軸方向において前記一端から前記他端へ向かう動きと、前記円筒部材の前記軸方向において前記他端から前記一端へ向かう動きとのいずれの動きも規制する軸規制部を有する、細胞培養器具。

【請求項2】

請求項１に記載の細胞培養器具であって、
前記保持部材と前記円筒部材とのそれぞれを複数備えるとともに、前記複数の保持部材の隣り合う２の保持部材を連結する連結部を備え、
前記第１係合部は、前記円筒部の外周面から外方へ突出する突出部を有し、
前記軸規制部は、（ｉ）前記突出部が前記軸方向に挿入される第１挿入部と、（ｉｉ）前記第１挿入部から前記保持部材の周方向に延び、前記突出部が前記周方向に挿入される第２挿入部であって、前記軸方向に間隔を空けて対向する一対の周区画面により区画された第２挿入部と、を有し、
前記第１挿入部および前記第２挿入部は、前記有底円筒部の側壁を径方向に貫通して形成され、
前記第１状態および前記第２状態において、前記突出部は、前記側壁の外周面から突出し、
前記複数の円筒部材の隣り合う２の円筒部材は、前記突出部により連結されている、細胞培養器具。

【請求項3】

請求項１に記載の細胞培養器具であって、
前記第１係合部は、前記円筒部の外周面から外方へ延びる延在部を有し、
前記軸規制部は、前記有底円筒部の外周面から外方に突出する外周突出部を有し、
前記延在部は、前記外周突出部を覆い、前記軸方向において前記外周突出部と当接する爪部を有し、
前記第１状態および前記第２状態において、前記爪部は、前記外周突出部と当接することにより前記軸方向への動きを規制する、細胞培養器具。

【請求項4】

細胞培養方法であって、
円筒部と、前記円筒部の軸方向の一端に配置された培養膜と、前記軸方向の他端に形成された第１係合部と、を有する円筒部材と、前記円筒部を収容可能な有底円筒部と、前記第１係合部と係合可能な第２係合部と、を有する保持部材と、を備え、前記第２係合部は、前記円筒部を前記有底円筒部に収容した第１状態においても、前記円筒部の姿勢が前記第１状態のときとは前記軸方向において反対向きとなる第２状態においても、前記第１係合部と係合し、前記第２係合部は、前記第１係合部と係合することで、前記円筒部材の前記軸方向において前記一端から前記他端へ向かう動きと、前記円筒部材の前記軸方向において前記他端から前記一端へ向かう動きとのいずれの動きも規制する軸規制部を有する細胞培養器具を準備する第１工程と、
前記第１状態にて、前記培養膜の前記円筒部の内側を向く第１面に細胞を培養する第２工程と、
前記第２状態にて、前記培養膜の前記第１面と対向する第２面にて細胞を培養する第３工程と、を備える、細胞培養方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、細胞培養器具および細胞培養方法に関する。

【背景技術】

【0002】

一般に、細胞培養では、少量かつ複数のサンプルを同時に培養するため、複数のウェルが形成されたウェルプレートが使用される。そして、細胞培養用の膜が取り付けられたインサートがウェルに挿入されて、膜の一方の面にて細胞が培養される（例えば、特許文献１）。特許文献１のインサートは、インサートの径方向に延びるフランジがウェルプレート（培養容器）の上面と当接することで吊り下げられ、膜がウェルの底面から離れた状態で、インサートは保持される。

【0003】

近年、膜の両面での細胞培養が行われている。そこで、両面培養を行うための細胞培養装置が提案されている（例えば、特許文献２）。特許文献２の細胞培養装置は、膜が取り付けられた外側管状本体の他に、吊り下げ構成要素と、相補管状本体とを備える。膜の一方の面に細胞培養を行う第１工程では、外側管状本体に相補管状本体が嵌合されることにより、外側管状本体の外側に培養液を溜める空間が形成される。第１工程後の、膜の他方の面に細胞培養を行う第２工程では、外側管状本体に吊り下げ構成要素が嵌合されることにより、外側管状本体は、ウェルに吊り下げられる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【文献】特開Ｈ７－７５５５３号公報

【文献】国際公開ＷＯ２０１２／０４５３６８号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

しかしながら、特許文献２の細胞培養装置は、膜の一方の面に細胞培養する第１工程において、装置は自立する構成であり、複数のサンプルを培養する場合に作業性が悪くなるおそれがある。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本開示は、以下の形態として実現することが可能である。
本開示の一形態によれば、細胞培養器具が提供される。この細胞培養器具は、円筒部と、前記円筒部の軸方向の一端に配置された培養膜と、前記軸方向の他端に形成された第１係合部と、を有する円筒部材と、前記円筒部を収容可能な有底円筒部と、前記第１係合部と係合可能な第２係合部と、を有する保持部材と、を備え、前記第２係合部は、前記円筒部を前記有底円筒部に収容した第１状態においても、前記円筒部の姿勢が前記第１状態のときとは前記軸方向において反対向きとなる第２状態においても、前記第１係合部と係合し、前記第２係合部は、前記第１係合部と係合することで、前記円筒部材の前記軸方向において前記一端から前記他端へ向かう動きと、前記円筒部材の前記軸方向において前記他端から前記一端へ向かう動きとのいずれの動きも規制する軸規制部を有する。

【0007】

（１）本開示の一形態によれば、細胞培養器具が提供される。この細胞培養器具は、円筒部と、前記円筒部の軸方向の一端に配置された培養膜と、前記軸方向の他端に形成された第１係合部と、を有する円筒部材と、前記円筒部を収容可能な有底円筒部と、前記第１係合部と係合可能な第２係合部と、を有する保持部材と、を備える。前記第２係合部は、前記円筒部を前記有底円筒部に収容した第１状態と、前記円筒部の姿勢が前記第１状態のときとは前記軸方向において反対向きとなる第２状態とのいずれの状態のときに、前記第１係合部と係合する。この形態によれば、第１状態と第２状態とのいずれの状態においても、第２係合部は、第１係合部と係合することができる。円筒部材を保持部材に係合させた状態にすることにより、円筒部材と保持部材とを一体に扱うことができるため、細胞培養器具の作業性を向上させることができる。また、保持部材を傾けた場合にも、保持部材に対する円筒部材のずれを抑制することができ、安定した細胞培養を行うことができる。
（２）上記形態の細胞培養器具において、前記保持部材を複数備え、さらに、前記複数の保持部材の隣り合う２の保持部材を連結する連結部を備えていてもよい。この形態によれば、複数の保持部材を一体に取り扱うことができるため、作業性をさらに向上させることができる。
（３）上記形態の細胞培養器具において、前記第２係合部は、前記第１係合部と係合することで前記円筒部材の前記軸方向と垂直な水平方向への動きを規制する水平規制部を有していてもよい。この形態によれば、保持部材に対する、軸方向と直交する水平方向への円筒部材の動きを規制することができる。
（４）上記形態の細胞培養器具において、前記第１係合部は、前記円筒部の外周面から外方へ突出する突出部を有し、前記水平規制部は、前記突出部が前記軸方向に挿入される凹部と、を有し、前記第１状態および前記第２状態において、前記突出部が前記凹部と当接することにより前記水平方向への動きが規制されてもよい。この形態によれば、突出部を凹部に挿入させることで、保持部材に対する円筒部材の水平方向への動きを規制することができる。
（５）上記形態の細胞培養器具において、前記第２係合部は、前記第１係合部と係合することで前記円筒部材の前記軸方向への動きを規制する軸規制部を有してもよい。この形態によれば、保持部材に対する円筒部材の軸方向への動きを規制することができる。
（６）上記形態の細胞培養器具において、前記第１係合部は、前記円筒部の外周面から外方へ突出する突出部を有し、前記軸規制部は、（ｉ）前記突出部が前記軸方向に挿入される第１挿入部と、（ｉｉ）前記第１挿入部から前記保持部材の周方向に延び、前記突出部が前記周方向に挿入される第２挿入部であって、前記軸方向に間隔を空けて対向する一対の周区画面により区画された第２挿入部と、を有し、前記第１状態および前記第２状態において、前記一対の周区画面は、間に挿入された前記突出部と当接することで、前記軸方向への動きを規制してもよい。この形態によれば、第２挿入部に突出部を挿入させることで、保持部材に対する円筒部材の軸方向への動きを規制することができる。
（７）上記形態の細胞培養器具において、前記第１挿入部および前記第２挿入部は、前記有底円筒部の側壁を径方向に貫通して形成され、前記第１状態および前記第２状態において、前記突出部は、前記側壁の外周面から突出してもよい。この形態によれば、第１係合部と第２係合部とを係合させる場合に、突出部の側壁の外周面から突出した部分を把持することができるため、係合させる場合の作業性を向上することができる。
（８）上記形態の細胞培養器具において、前記円筒部材を複数備え、前記複数の円筒部材の隣り合う２の円筒部材は、前記突出部により連結されていてもよい。この形態によれば、複数の円筒部材を一体に取り扱うことができるため、作業性をさらに向上させることができる。
（９）上記形態の細胞培養器具において、前記第１係合部は、前記円筒部の外周面から外方へ延びる延在部を有し、前記軸規制部は、前記有底円筒部の外周面から外方に突出する外周突出部を有し、前記延在部は、前記外周突出部を覆い、前記軸方向において前記外周突出部と当接する爪部を有し、前記第１状態および前記第２状態において、前記爪部は、前記外周突出部と当接することにより前記軸方向への動きを規制してもよい。この形態によれば、爪部を外周突出部と当接させることによち、保持部材に対する円筒部材の軸方向への動きを規制することができる。
（１０）本開示の他の形態によれば、細胞培養方法が提供される。この細胞培養方法は、円筒部と、前記円筒部の軸方向の一端に配置された培養膜と、前記軸方向の他端に形成された第１係合部と、を有する円筒部材と、前記円筒部を収容可能な有底円筒部と、前記第１係合部と係合可能な第２係合部と、を有する保持部材と、を備え、前記第２係合部は、前記円筒部を前記有底円筒部に収容した第１状態と、前記円筒部の姿勢が前記第１状態のときとは前記軸方向において反対向きとなる第２状態とのいずれの状態のときに、前記第１係合部と係合する細胞培養器具を準備する第１工程と、前記第１状態にて、前記培養膜の前記円筒部の内側を向く第１面に細胞を培養する第２工程と、前記第２状態にて、前記培養膜の前記第１面と対向する第２面にて細胞を培養する第３工程と、を備える。この形態によれば、細胞培養工程において、円筒部材を保持部材に係合させた状態にすることにより、円筒部材と保持部材とを一体に扱うことができるため、細胞培養器具の作業性を向上させることができる。また、第２工程および第３工程において保持部材を傾けた場合にも、保持部材に対する円筒部材のずれを抑制することができ、安定した細胞培養を行うことができる。
なお、本開示は、種々の形態で実現することが可能であり、上記形態の他に、細胞培養器具の製造方法などの形態で実現することができる。

【図面の簡単な説明】

【0008】

【図1】細胞培養器具の斜視図。

【図2】細胞培養器具の平面図。

【図3】第１状態における細胞培養器具の斜視図。

【図4】第２状態における細胞培養器具の斜視図。

【図5】細胞培養工程を示すフローチャート。

【図6】第２実施形態に係る細胞培養器具の斜視図。

【図7】第３実施形態から第６実施形態の細胞培養器具を示す図。

【発明を実施するための形態】

【0009】

Ａ．第１実施形態：
Ａ１．細胞培養器具の構成：
図１は、細胞培養器具１００の斜視図である。図１では、円筒部材１０の一部が断面にて示されている。図２は、細胞培養器具１００の平面図である。図３は、第１状態における細胞培養器具１００の斜視図である。図４は、第２状態における細胞培養器具１００の斜視図である。図１から図４では、互いに直交する、Ｘ軸と、Ｙ軸と、Ｚ軸とを示している。細胞培養器具１００は、典型的には、Ｚ方向が鉛直方向と沿うように配置されて使用される。Ｘ軸，Ｙ軸，Ｚ軸の矢印が向いている方向は、それぞれＸ軸，Ｙ軸，Ｚ軸に沿った正の方向を示している。Ｘ軸，Ｙ軸，Ｚ軸に沿った正の方向を、それぞれ＋Ｘ方向，＋Ｙ方向，＋Ｚ方向とする。Ｘ軸，Ｙ軸，Ｚ軸の矢印が向いている方向と逆の方向が、それぞれＸ軸，Ｙ軸，Ｚ軸に沿った負の方向である。Ｘ軸，Ｙ軸，Ｚ軸に沿った負の方向を、それぞれ－Ｘ方向，－Ｙ方向，－Ｚ方向とする。Ｘ軸，Ｙ軸，Ｚ軸に沿った方向で正負を問わないものを、それぞれＸ方向，Ｙ方向，Ｚ方向とよぶ。これ以降に示す図及び説明についても同様である。また、＋Ｚ方向を上方向、－Ｚ方向を下方向と呼ぶ場合がある。

【0010】

細胞培養器具１００は、円筒部材１０と、保持部材５０とを備える。図２に示すように、本実施形態では、細胞培養器具１００は、同一直線上に並ぶ６つの保持部材５０を有する。そして、隣り合う２つの保持部材５０は、連結部９０により連結されている。これにより、複数の保持部材５０を一体に扱うことができる。同様に、本実施形態では、細胞培養器具１００は、同一直線上に並ぶ６つの円筒部材１０を有する。そして、隣り合う２つの円筒部材１０は、第１係合部１３により連結されている。これにより、複数の円筒部材１０を一体に扱うことができる。複数の円筒部材１０が並ぶ方向と、複数の保持部材５０が並ぶ方向とは、Ｘ方向と平行である。

【0011】

図１に示すように、円筒部材１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、２つの第１係合部１３とを有する。なお、端に配置された円筒部材１０を除き、２つの第１係合部１３のそれぞれは、隣り合う円筒部１１と共有されている。培養膜１２は、円筒部材１０の中心軸ＣＸ１に沿う方向である軸方向の一端に配置されている。具体的には、円形の培養膜１２は、円筒部１１の開口を覆うように、円筒部１１の端部に接合されている。培養膜１２は、円筒部１１の内側を向く第１面１２ａと、第１面１２ａと対向する第２面１２ｂとを有する。細胞培養工程では、第１面１２ａと、第２面１２ｂとの何れにも細胞が培養される。２つの第１係合部１３は、円筒部材１０の軸方向の他端に配置されている。

【0012】

培養膜１２は、細胞培養を行う際に、細胞培養の足場となる膜である。培養膜１２として、膜の厚み方向に貫通する多数の細孔を有する、合成高分子製の多孔質膜や天然高分子製の多孔質膜を用いることができる。具体的には、多孔質膜として、トラックエッチング膜や、ナノファイバー膜や、コラーゲンビトリゲル膜や、ハニカム膜や、多孔質ポリウレタン膜などが挙げられる。多孔質ポリウレタン膜としては、次に記載する、第１製造工程および第２製造工程を備える製造方法を用いて製造された多孔質ポリウレタン膜などが挙げられる。第１製造工程は、基板上に未硬化であるポリウレタン原料の層を形成する工程である。第２製造工程は、基板上に形成されたポリウレタン原料の層における基板から離間した露出面に対して水蒸気の供給を行なって、ポリウレタン原料の層において、ポリウレタン原料の硬化を進行させると共に複数の凹凸を露出面に有する多孔質形状を形成させる工程である。

【0013】

円筒部１１は、樹脂材料製である。樹脂材料として、高密度ポリエチレン、ポリプロピレン、ＡＢＳ樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリエステル等を用いることができる。２つの第１係合部１３は、中心軸ＣＸ１を挟んで、円筒部１１の径方向に対向して配置されている。第１係合部１３は、突出部１４を有する。突出部１４は、円筒部１１の外周面から径方向に延びる。突出部１４は、厚さ方向を軸方向、長さ方向をＸ方向とする平板形状を有する。

【0014】

保持部材５０は、有底円筒部５１と、２つの第２係合部５２とを有する。保持部材５０は、樹脂材料製である。樹脂材料として、高密度ポリエチレン、ポリプロピレン、ＡＢＳ樹脂、アクリル樹脂、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリエステル等を用いることができる。有底円筒部５１は、円筒の側壁５１ａと、側壁５１ａの開口を塞ぐ底面５１ｂとを有する。図１、図３、および図４では、円筒部材１０の中心軸ＣＸ１と、有底円筒部５１の中心軸ＣＸ２とが同軸に描かれている。側壁５１ａの内径は、円筒部１１の外径よりも大きい。よって、有底円筒部５１は、円筒部１１を収容可能である。上述の保持部材５０はウェル、ウェルプレートやマイクロプレートなどと呼ばれる部材である。

【0015】

２つの第２係合部５２は、有底円筒部５１の中心軸ＣＸ２を挟んでＸ方向に対向して配置されている。２つの第２係合部５２は、中心軸ＣＸ２を通り、ＹＺ平面に平行な面を対称面とする、面対称の形状を有する。第２係合部５２は、第１係合部１３と係合可能である。第２係合部５２は、軸規制部５３を有する。軸規制部５３は、第１挿入部５４と、第２挿入部５５とを有する。第１挿入部５４および第２挿入部５５は、側壁５１ａの一部を切り欠いた形状である。具体的には、第１挿入部５４は、側壁５１ａを径方向に貫通して形成されている。第１挿入部５４は、側壁５１ａの開口している端部から底面５１ｂに向かって、中心軸ＣＸ２に沿う方向である軸方向に延びる。第１挿入部５４は、一対の第１挿入部区画面５４ａ，５４ｂにより区画されている。一対の第１挿入部区画面５４ａ，５４ｂは、Ｙ方向に間隔を空けて対向する。一対の第１挿入部区画面５４ａ，５４ｂの間隔は、突出部１４の幅よりも大きい。よって、第１挿入部５４は、突出部１４を軸方向に沿って受け入れることができる。

【0016】

第２挿入部５５は、第１挿入部５４の軸方向における終端から保持部材５０の周方向に延びる。第２挿入部５５は、第１挿入部５４と同様に、側壁５１ａを径方向に貫通して形成されている。第２挿入部５５は、一対の周区画面５５ａ，５５ｂにより区画されている。一対の周区画面５５ａ，５５ｂは、周方向に延びている。一対の周区画面５５ａ，５５ｂは、軸方向に間隔を空けて互いに対向する。一対の周区画面５５ａ，５５ｂの間隔は、突出部１４の厚さよりも僅かに大きい。よって、第２挿入部５５は、第１挿入部５４に挿入された突出部１４を、Ｙ方向に沿って受け入れることができる。

【0017】

連結部９０は、隣り合う有底円筒部５１の各々の側壁５１ａを連結する。本実施形態では、連結部９０は、保持部材５０と一体に形成されている。

【0018】

細胞培養工程において、細胞培養器具１００は、図３にて示す円筒部１１が有底円筒部５１に収容された第１状態と、図４に示す培養膜１２が有底円筒部５１の外部に露出した第２状態とで使用される。第２状態では、円筒部１１の姿勢が第１状態のときとは軸方向において反対向きとなる。

【0019】

図３に示すように、第１状態では、円筒部材１０の突出部１４の一部は、保持部材５０の第２挿入部５５に挿入されている。なお、図１に示す、円筒部材１０の第１係合部１３と保持部材５０の第２係合部５２とが係合していない細胞培養器具１００の非係合状態から、第１状態への遷移は、２段階で行われる。すなわち、突出部１４が第１挿入部５４に、軸方向に沿って第１挿入部５４の終端まで挿入される第１段階と、突出部１４が第２挿入部５５に、Ｙ方向に沿って挿入される第２段階とにより行われる。図２では、第１段階における円筒部材１０は、二点鎖線で描かれており、第１状態おける円筒部材１０は、実線で描かれている。第１段階では、円筒部材１０の中心軸ＣＸ１は、保持部材５０の中心軸ＣＸ２に対して－Ｙ方向にずれている。そして、第２段階にて、円筒部材１０が＋Ｙ方向に移動されることにより、円筒部材１０の中心軸ＣＸ１と、有底円筒部５１の中心軸ＣＸ２とが略一致した状態となる。図３に示すように、突出部１４が第２挿入部５５に挿入されることにより、突出部１４が第２挿入部５５に嵌り、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合する。第１係合部１３と第２係合部５２とが係合した状態では、突出部１４が周区画面５５ａ，５５ｂと当接することにより、保持部材５０に対する円筒部材１０の軸方向の動きが規制される。

【0020】

第１状態から、細胞培養器具１００の非係合状態への遷移、つまり、第１係合部１３と第２係合部５２との係合が解除される場合には、上記の手順が逆行して行われる。すなわち、突出部１４が第２挿入部５５から、－Ｙ方向に沿って引き出される第１段階と、突出部１４が第１挿入部５４から、軸方向に沿って上方に引き出される第２段階とにより行われる。

【0021】

図２に示すように、第１状態および第２状態において、突出部１４は、側壁５１ａの外周面から突出する。したがって、第１係合部１３と第２係合部５２とを係合させる場合に、突出部１４の側壁５１ａの外周面から突出した部分を把持することができる。よって、係合させる場合の作業性を向上できる。

【0022】

図４に示すように、第２状態においても、第１状態と同様に、円筒部材１０の突出部１４は、保持部材５０の第２挿入部５５に挿入されている。第１状態と、第２状態とでは、円筒部材１０の姿勢が異なる。第１状態では、円筒部材１０は、第１係合部１３に対して培養膜が下になる姿勢である。対して、第２状態では、円筒部材１０は、第１係合部１３に対して培養膜が上になる姿勢である。第１状態は、軸方向において、第１係合部１３と、保持部材５０の底面５１ｂとの間に培養膜１２が配置される姿勢である。第２状態は、第１係合部１３を挟んで、保持部材５０の底面５１ｂと円筒部１１とが向かい合う姿勢である。細胞培養器具１００の非係合状態から、第２状態への遷移は、第１状態への遷移と同様に行われる。すなわち、突出部１４が第１挿入部５４に、軸方向に沿って第１挿入部５４の終端まで挿入される第１段階と、突出部１４が第２挿入部５５に、Ｙ方向に沿って挿入される第２段階とにより行われる。第１係合部１３と第２係合部５２との係合が解除される場合も、第１状態から非係合状態への遷移と同様に行われる。

【0023】

Ａ２．細胞培養器具を用いた細胞培養方法：
図５は、細胞培養器具１００を用いた細胞培養方法を実現する細胞培養工程を示すフローチャートである。第１工程Ｐ１０にて、細胞培養器具１００が準備される。工程Ｐ２０にて、円筒部１１が保持部材５０に収納されて、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合される。これにより、細胞培養器具１００は、図３に示す第１状態となる。工程Ｐ３０にて、円筒部材１０に、第１細胞と第１細胞用の培養液とを含む第１細胞懸濁液が注入される。第１細胞懸濁液が注入されることにより、第１細胞が培養膜１２の第１面１２ａに播種される。工程Ｐ３０にて、保持部材５０に培養液を注入してもよいし、しなくてもよい。

【0024】

第２工程Ｐ４０にて、培養液が適宜交換され、第１細胞が培養膜１２の第１面１２ａに定着するまで培養される。具体的には、ピペットを用いて、円筒部材１０から培養液の抜き出しと、注入とが行われる。保持部材５０に培養液が注入された場合には、保持部材５０からも培養液の抜き出しと、注入とが行われる。そして、この培養液が抜き出しと注入が行われる際に、培養液を円筒部１１と培養膜１２との境目付近に寄せるため、鉛直方向に対して、中心軸ＣＸ１，ＣＸ２が傾斜するように作業者により細胞培養器具１００が傾けられる場合がある。ここで、本実施形態では、細胞培養器具１００が傾けられた場合にも、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合しているため、保持部材５０に対する円筒部材１０の位置ずれが抑制される。よって、培養液交換についての作業性を向上させることができ、安定した細胞培養を行うことができる。また、複数の保持部材５０は、連結部９０により連結されているため、作業者は、複数の保持部材５０を同時に傾けることができる。そして、作業者は、複数の保持部材５０を傾けた状態で把持し、培養液の抜き取りを複数の円筒部材１０について連続して行うことができる。よって、培養液交換についての作業性を向上させることができる。

【0025】

工程Ｐ５０では、円筒部材１０に、円筒部１１の内部に培養液を貯留しておくための図３に示す第１治具８００が装着される。第１治具８００は、可撓性を有し、円柱形状にて形成される。第１治具８００の外径は、円筒部１１の内周面と密着する程度の大きさである。第１治具８００は、第１治具８００の中心軸が円筒部材１０の中心軸ＣＸ１に沿う姿勢で、円筒部１１に挿入される。第１治具８００の挿入方向である下方の先端が培養膜１２と離れた位置になるまで挿入される。これにより、次の工程Ｐ６０にて、円筒部材１０が上下に反転された場合にも、円筒部１１の内部に培養液を貯留しておくことができる。よって、第１細胞の培養を継続することができる。なお、培養液は第１治具８００で閉塞された円筒部１１の内部を液密にする状態で貯留することが好ましい。

【0026】

工程Ｐ６０では、第１係合部１３と第２係合部５２との係合が解除された後、円筒部材１０が上下に反転されて、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合される。これにより、細胞培養器具１００は、図４に示す第２状態となる。

【0027】

工程Ｐ７０では、図４に示す第２治具９００が、培養膜１２の周囲を覆うように、円筒部材１０の外周面に装着される。第２治具９００は、可撓性を有する円筒部材である。第２治具９００が装着されることにより、培養膜１２を底面、第２治具９００の内周面を側面とする、培養液を貯留するための容器が形成される。

【0028】

工程Ｐ８０では、第２治具９００の内部に第２細胞と第２細胞用の培養液とを含む第２細胞懸濁液が注入される。第２細胞懸濁液が注入されることにより、第２細胞が培養膜１２の第２面１２ｂに播種される。

【0029】

第３工程Ｐ９０では、第２細胞懸濁液に含まれる第２細胞が培養膜１２の第２面１２ｂに定着するまで、培養液が適宜交換され、第２細胞が培養される。また第３工程Ｐ９０の培養は温度・湿度・ＣＯ_２濃度を一定で安定した環境下、つまり、細胞をより生理的条件に近い状態で培養するためにインキュベーター内にて行われる。第３工程Ｐ９０において培養液の交換を行う際には、第２工程Ｐ４０と同様に、作業者により細胞培養器具１００が傾けられる場合がある。細胞培養器具１００が傾けられた場合にも、第２工程Ｐ４０と同様に、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合しているため、保持部材５０に対する円筒部材１０の位置ずれが抑制される。よって、作業性を向上させることができる。また、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合しているため、細胞培養器具１００の運搬時の揺れを防止することができる。

【0030】

工程Ｐ１００では、まず、第２治具９００の内側から培養液が抜き取られ、円筒部材１０から第２治具９００が取り外される。この時、培養液の抜き取りは細胞培養器具１００を傾斜させることで、一列ずつ一度に行われても良い。その後、第１係合部１３と第２係合部５２との係合が解除された後、円筒部材１０は、上下に反転され、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合される。これにより、細胞培養器具１００は、再び、図３に示す第１状態となる。

【0031】

工程Ｐ１１０では、第２細胞の培養が継続される。培養は、上述した第３工程Ｐ９０の培養時と同様にインキュベーター内にて行われる。具体的には、有底円筒部５１の内部に第２面１２ｂに定着している第２細胞用の培養液が注入され、円筒部１１の内部に第１面１２ａに定着している第１細胞用の培養液が注入される。第２工程Ｐ４０および第３工程Ｐ９０と同様に、適宜、培養液の交換が行われ、第２細胞がコンフルエントになるまで培養される。工程Ｐ１１０においても、第２工程Ｐ４０と同様に、細胞培養器具１００が傾けられた場合にも、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合しているため、保持部材５０に対する円筒部材１０の位置ずれが抑制される。よって、作業性を向上させることができる。第２細胞の培養が終了すると、本細胞培養工程は、終了する。細胞培養工程により、培養膜１２の第１面１２ａと第２面１２ｂとのそれぞれに細胞が培養することができる。

【0032】

以上説明した細胞培養工程において、円筒部材１０と保持部材５０とは、第１係合部１３と第２係合部５２とが係合することにより、一体に扱うことができる。一般に、細胞培養においては、少量かつ複数のサンプルが同時に培養される。そして、複数のサンプルを識別するために、各サンプルには識別番号が付される。ここで、本実施形態では、円筒部材１０と保持部材５０とを一体に扱うことができるため、円筒部材１０および保持部材５０の何れか一方に識別番号を付すことにより、各サンプルを識別することができる。また、第２工程Ｐ４０と、第３工程Ｐ９０と、工程Ｐ１１０との何れにおいても、円筒部材１０を保持部材５０に係合させておくことができるため、第２工程Ｐ４０にて保持部材５０に対応させた円筒部材１０を、後の第３工程Ｐ９０や工程Ｐ１１０にて、対応しない保持部材５０に取り付けることを抑制することができる。よって、細胞培養工程における作業性を向上させることができる。

【0033】

以上、説明した第１実施形態によれば、円筒部材１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、第１係合部１３とを有する。また、保持部材５０は、有底円筒部５１と、第１係合部１３と係合可能な第２係合部５２とを有する。そして、第２係合部５２は、円筒部１１を有底円筒部５１に収容した第１状態のときと、円筒部１１の姿勢が第１状態のときとは軸方向において反対向きとなる第２状態のときに、第１係合部１３と係合する。第１状態と第２状態とのいずれの状態においても、第２係合部５２は、第１係合部１３と係合することができるため、円筒部材１０と保持部材５０とを一体に扱うことができる。よって、細胞培養工程における細胞培養器具１００の作業性を向上させることができる。また、第１係合部１３と第２係合部５２とを係合させることにより、保持部材５０を傾けた場合にも、保持部材５０に対する円筒部材１０のずれを抑制することができ、安定した細胞培養を行うことができる。

【0034】

また、細胞培養器具１００は、保持部材５０を複数備え、複数の保持部材５０は、連結部９０により連結されている。よって、複数の保持部材５０を一体に取り扱うことができるため、細胞培養工程における作業性をさらに向上させることができる。

【0035】

また、第２係合部５２は、第１係合部１３と係合することで円筒部材１０の軸方向への動きを規制する軸規制部５３を有する。これにより、保持部材５０に対する円筒部材１０の軸方向への動きを規制することができる。

【0036】

また、第１係合部１３は、突出部１４を有する。軸規制部５３は、第１挿入部５４と、第２挿入部５５とを有する。第１状態および第２状態において、第２挿入部５５を区画する一対の周区画面５５ａ，５５ｂは、間に挿入された突出部１４と当接することで、軸方向への動きを規制する。これにより、第２挿入部５５に突出部１４を挿入させることで、保持部材５０に対する円筒部材１０の軸方向への動きを規制することができる。

【0037】

また、第１挿入部５４および第２挿入部５５は、有底円筒部５１の側壁５１ａを径方向に貫通して形成されている。第１状態および第２状態において、突出部１４は、側壁５１ａの外周面から突出している。これにより、第１係合部１３と第２係合部５２とを係合させる場合に、突出部１４の側壁５１ａの外周面から突出した部分を把持することができるため、係合させる場合の作業性を向上できる。

【0038】

また、複数の円筒部材１０は、突出部１４により連結されている。これにより、複数の円筒部材１０を一体に取り扱うことができるため、作業性を向上させることができる。

【0039】

また、細胞培養工程は、細胞培養器具１００を準備する第１工程Ｐ１０と、第１状態にて、培養膜１２の第１面１２ａに第１細胞を培養する第２工程Ｐ４０と、第２状態にて、培養膜１２の第２面１２ｂにて第２細胞を培養する第３工程Ｐ９０とを備える。細胞培養工程において、円筒部材１０を保持部材５０に係合させた状態にすることにより、円筒部材１０と保持部材５０とを一体に扱うことができるため、細胞培養器具１００の作業性を向上させることができる。また、第２工程Ｐ４０および第３工程Ｐ９０において保持部材５０を傾けた場合にも、保持部材５０に対する円筒部材１０のずれを抑制することができ、安定した細胞培養を行うことができる。

【0040】

Ｂ．第２実施形態：
図６は、第２実施形態に係る細胞培養器具２１００の斜視図である。細胞培養器具２１００は、第１実施形態に係る細胞培養器具１００と、第１係合部１３および第２係合部５２の形状が異なる。第１実施形態と同じ構成については、同一の符号を付し、詳細な説明は、適宜省略する。

【0041】

細胞培養器具２１００は、円筒部材２１０と、保持部材２５０とを備える。本実施形態では、保持部材２５０は、第１実施形態とは異なり、複数の保持部材２５０が連結されていない構造であるが、第１実施形態と同様に連結されていてもよい。後述する第３実施形態から第６実施形態についても同様である。円筒部材２１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、４つの第１係合部２１３とを有する。

【0042】

４つの第１係合部２１３は、円筒部１１の開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第１係合部２１３は、突出部２１４を有する。突出部２１４は、円筒部材１０の外周面から外方に突出する。突出部２１４は、断面が矩形の棒状であり、円筒部１１の径方向に延びる。

【0043】

保持部材２５０は、有底円筒部５１と、４つの第２係合部２５２とを有する。４つの第２係合部２５２は、側壁５１ａの開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。側壁５１ａの径方向の厚さは、均一ではなく、底面５１ｂと繋がる下方の側壁５１ａの厚さに対して、開口する端部の側壁５１ａの厚さは厚い。具体的には、側壁５１ａの内径は均一であり、開口する端部の側壁５１ａの外径が、底面５１ｂの外径よりも大きい。そして、厚さが厚い側壁５１ａに、第２係合部２５２が配置されている。

【0044】

第２係合部２５２は、第１係合部２１３と係合することで円筒部材２１０の水平方向への動きを規制する水平規制部２５３を有する。水平規制部２５３は、有底円筒部５１の中心軸ＣＸ２に沿う軸方向に延びる凹部２５４を有する。突出部２１４が軸方向に挿入される凹部２５４は、側壁５１ａの内周面の一部を切り欠いた形状である。具体的には、凹部２５４の径方向における長さは、側壁５１ａの厚さよりも短い。また、凹部２５４の軸方向の長さは、円筒部材２１０の突出部２１４の軸方向の厚さよりも長い。これにより、第１係合部２１３と第２係合部２５２とが係合した状態で、細胞培養器具１００が傾けられた場合にも、保持部材２５０に対する円筒部材２１０の位置ずれを抑制することができる。

【0045】

第１状態および第２状態のいずれにおいても、突出部２１４が凹部２５４に嵌ることにより、第１係合部２１３と第２係合部２５２とが係合する。第１係合部２１３と第２係合部２５２とが係合した状態では、突出部２１４が凹部２５４と当接することにより、保持部材５０に対する円筒部材１０の軸方向と垂直な水平方向の動きが規制される。これにより、第１実施形態と同様に、円筒部材２１０と保持部材２５０とを一体に扱うことができる。よって、細胞培養工程における細胞培養器具２１００の作業性を向上させることができる。また、第１係合部２１３と第２係合部２５２とを係合させることにより、保持部材２５０を傾けた場合にも、保持部材２５０に対する円筒部材２１０のずれを抑制することができ、安定した細胞培養を行うことができる。

【0046】

以上説明した第２実施形態によれば、第２係合部２５２は、第１係合部２１３と係合することで円筒部材２１０の水平方向への動きを規制する水平規制部２５３を有している。これにより、保持部材２５０に対する円筒部材２１０の水平方向への動きを規制することができる。

【0047】

また、第１係合部２１３は、突出部２１４を有する。水平規制部２５３は、突出部２１４が軸方向に挿入される凹部２５４を有する。第１状態および第２状態において、突出部２１４が凹部２５４と当接することにより水平方向への動きが規制される。これにより、突出部２１４を凹部２５４に挿入することで、保持部材２５０に対する円筒部材２１０の水平方向への動きを規制することができる。

【0048】

Ｃ．第３実施形態：
図７は、第３実施形態から第６実施形態までの細胞培養器具を示す図である。上記第１実施形態または第２実施形態と同じ構成については、同一の符号を付し、詳細な説明は、適宜省略する。第３実施形態に係る円筒部材３１０は、第１実施形態に係る円筒部材１０と、第１係合部３１３の形状が異なる。第３実施形態に係る保持部材３５０は、第１実施形態に係る保持部材５０と、第２係合部３５２の形状が異なる。

【0049】

円筒部材３１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、４つの第１係合部３１３とを有する。４つの第１係合部３１３は、円筒部１１の開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第１係合部３１３は、突出部３１４を有する。突出部３１４は、円筒部材１０の外周面から外方に突出する。突出部３１４は、断面が矩形の棒状であり、円筒部１１の径方向に延びる。

【0050】

保持部材３５０は、有底円筒部５１と、４つの第２係合部３５２とを有する。４つの第２係合部３５２は、側壁５１ａの開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。４つの第２係合部３５２は、有底円筒部５１の開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第２係合部３５２は、軸規制部３５３を有する。軸規制部３５３は、第１挿入部３５４と、第２挿入部３５５とを有する。本実施形態に係る第２挿入部３５５は、第１実施形態に係る第２挿入部５５と、第１挿入部３５４から延びる方向が異なる。具体的には、第１実施形態に係る第２挿入部５５は、第１挿入部５４からＹ方向に延びるのに対して、本実施形態に係る第２挿入部３５５は、上から見て、第１挿入部３５４から、中心軸ＣＸ２を中心として反時計回りに延びる。

【0051】

第１実施形態と同様に、第１挿入部３５４は、一対の第１挿入部区画面により区画されている。また、第２挿入部３５５は、一対の周区画面により区画されている。本実施形態では、第１実施形態と、第１係合部３１３と第２係合部３５２との係合手順が異なる。具体的には、第１段階は第１実施形態と同様であるが、第２段階では、円筒部材３１０は、中心軸ＣＸ１回りに反時計回りに保持部材３５０に対して回転される。これにより、第１係合部３１３は、第２挿入部３５５に挿入される。第１実施形態と同様に、突出部３１４が第２挿入部３５５の一対の周区画面と当接することにより、保持部材３５０に対する円筒部材３１０の軸方向の動きが規制される。

【0052】

Ｄ．第４実施形態：
第４実施形態に係る円筒部材４１０は、第１実施形態に係る円筒部材１０と、第１係合部４１３の形状が異なる。第４実施形態に係る保持部材４５０は、第１実施形態に係る保持部材５０と、第２係合部４５２の形状が異なる。円筒部材４１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、４つの第１係合部４１３とを有する。４つの第１係合部４１３は、円筒部１１の開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第１係合部４１３は、延在部４１４を有する。延在部４１４は、円筒部材１０の外周面から外方に突出する。延在部４１４は、基部４１５と、２つの爪部４１６とを有する。基部４１５は、断面が矩形の棒状であり、円筒部１１の外周面から径方向に延びる。基部４１５の先端に、２つの爪部４１６が形成されている。２つの爪部４１６は、基部４１５の軸方向における中央位置を通り、培養膜１２に平行な面を対象面とする面対称の形状を有する。

【0053】

保持部材４５０は、有底円筒部５１と、第２係合部４５２とを有する。第２係合部４５２は、軸規制部４５３を有する。軸規制部４５３は、有底円筒部５１から外方に突出する外周突出部４５４を有する。外周突出部４５４は、有底円筒部５１と同軸の円環形状を有し、有底円筒部５１の全周に亘って形成されている。外周突出部４５４の中心軸ＣＸ２と平行であって、径方向に沿った面で切断した切断面の外方を向く面は、径方向の外方に向かって凸の曲面である。

【0054】

延在部４１４の２つの爪部４１６のうち、培養膜１２に近い一方の爪部４１６は、円弧を描き、先端に向かうほど下方に曲がっている。そして、２つの爪部４１６のうち、他方の爪部４１６は、円弧を描き、先端に向かうほど上方に曲がっている。爪部４１６が描く円弧は、外周突出部４５４の外周面に沿った円弧である。第１係合部４１３と第２係合部４５２とが係合される場合、円筒部材４１０は、中心軸ＣＸ１が保持部材４５０の中心軸ＣＸ２と沿う姿勢で、軸方向に保持部材４５０に近づけられる。爪部４１６の先端は、外周突出部４５４を乗り越えて、外周突出部４５４を覆う状態で嵌る。第１係合部４１３と第２係合部４５２とが係合した場合、爪部４１６は、外周突出部４５４を覆い、軸方向において、外周突出部４５４と当接する。第１状態では、２つの爪部４１６のうち、培養膜１２に近い一方の爪部４１６が外周突出部４５４と係合する。対して、第２状態では、２つの爪部４１６のうち、他方の爪部４１６が外周突出部４５４と係合する。本実施形態では、爪部４１６が軸方向において、外周突出部４５４と当接することにより、保持部材４５０に対する円筒部材４１０の軸方向の動きが規制される。

【0055】

以上説明した第４実施形態によれば、第１係合部４１３は、延在部４１４を有する。軸規制部４５３は、外周突出部４５４を有する。延在部４１４は、外周突出部４５４を覆い、軸方向において外周突出部４５４と当接する爪部４１６を有する。第１状態および第２状態において、爪部４１６は、外周突出部４５４と当接することにより円筒部材４１０の軸方向への動きが規制される。爪部４１６を外周突出部４５４と係合させることにより、保持部材４５０に対する円筒部材４１０の軸方向への動きを規制することができる。

【0056】

Ｅ．第５実施形態：
第５実施形態に係る円筒部材５１０は、第２実施形態に係る円筒部材２１０と、第１係合部５１３の形状が異なる。第５実施形態に係る保持部材５５０は、第２実施形態に係る保持部材２５０と、第２係合部５５２の形状が異なる。４つの第１係合部５１３は、円筒部１１の開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第１係合部５１３は、突出部５１４を有する。突出部５１４は、基部５１５と、２つの突起部５１６とを有する。突出部５１４は、円筒部１１の外周面から外方に突出する。基部５１５は、平板形状を有し、円筒部１１外周面から円筒部１１の径方向に延びる。２つの突起部５１６は、それぞれ、基部５１５の上を向く面と、下を向く面から軸方向に延びる。突起部５１６は、断面が円形の棒状である。

【0057】

保持部材５５０は、有底円筒部５１と、４つの第２係合部５５２とを有する。４つの第２係合部５５２は、側壁５１ａの開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第２係合部５５２は、水平規制部５５３を有する。水平規制部５５３は、側壁５１ａの開口する端部から軸方向に底面５１ｂに向かって延びる凹部５５４を有する。底面５１ｂと平行な面を切断面とする凹部５５４の断面形状は、円形である。凹部５５４の直径は、突起部５１６の外径よりも大きい。

【0058】

第１状態および第２状態のいずれにおいても、突起部５１６が凹部５５４に挿入され、突起部５１６が凹部５５４に嵌ることにより、第１係合部５１３と第２係合部５５２とが係合する。第１状態では、２つの突起部５１６のうち、培養膜１２に近い一方の突起部５１６が凹部５５４と嵌る。対して、第２状態では、２つの突起部５１６のうち、他方の突起部５１６が凹部５５４と嵌る。第１係合部５１３と第２係合部５５２とが係合した状態では、突出部５１４が凹部５５４と当接することにより、保持部材５５０に対する円筒部材５１０の水平方向の動きが規制される。

【0059】

Ｆ．第６実施形態：
第６実施形態に係る円筒部材６１０は、第２実施形態に係る円筒部材２１０と、第１係合部２１３の形状が異なる。第６実施形態に係る保持部材６５０は、第２実施形態に係る保持部材２５０と、第２係合部６５２の形状が異なる。円筒部材６１０は、円筒部１１と、培養膜１２と、４つの第１係合部６１３とを有する。第１係合部６１３は、突出部６１４を有する。第１係合部６１３の形状は、第３実施形態に係る第１係合部３１３の形状と同様であるため、説明を省略する。

【0060】

第６実施形態に係る保持部材６５０は、第２実施形態に係る保持部材２５０と、第２係合部６５２の形状が異なる。保持部材６５０は、有底円筒部５１と、４つの第２係合部６５２とを有する。４つの第２係合部６５２は、側壁５１ａの開口する一端に、周方向に等角度間隔で配置されている。第２係合部６５２は、水平規制部６５３を有する。水平規制部６５３は、側壁５１ａの開口する端部から軸方向に延びる凹部６５４を有する。凹部６５４は、側壁５１ａの一部を切り欠いた形状である。具体的には、凹部６５４は、側壁５１ａを径方向に貫通して形成されている。凹部６５４は、側壁５１ａの開口している端部から底面５１ｂに向かって、中心軸ＣＸ２に沿う方向である軸方向に延びる。凹部６５４の軸方向の長さは、突出部６１４の軸方向の厚さよりも長い。本実施形態では、凹部６５４の軸方向の長さは、突出部６１４の軸方向の厚さの３倍程度である。これにより、第１状態および第２状態のいずれにおいても、突出部６１４と凹部６５４との係合を解除されにくくすることができる。

【0061】

第１状態および第２状態のいずれにおいても、突出部６１４が凹部６５４に挿入され、突出部６１４が凹部６５４に嵌ることにより、第１係合部６１３と第２係合部６５２とが係合する。第１係合部６１３と第２係合部６５２とが係合した状態では、突出部６１４が凹部６５４と当接することにより、保持部材６５０に対する円筒部材６１０の水平方向の動きが規制される。

【0062】

Ｇ．他の実施形態：
（Ｇ１）上記第１実施形態では、細胞培養器具１００は、複数の保持部材５０を備え、複数の保持部材５０は、直線上に配列されている。この形態の他に、複数の保持部材５０が、マトリクス状に配列されてもよい。マトリクス配列は、縦横の保持部材数が２×３、４×６、８×１２のものなど適宜選択される。マトリクス状に配列することにより、細胞培養器具１００をより、より安定して作業台上に配置することができる。なお、マトリクス状に配列される複数の保持部材５０は、連結部９０のような複数の接続部で接続されて構成されてもよいし、上面が開放された箱形状の面状プレートの内側に配置されて構成されてもよい。

【0063】

（Ｇ２）上記第５実施形態では、円筒部材５１０は他の円筒部材５１０と連結されていない。これとは別に、第１係合部５１３を介して、複数の円筒部材５１０が連結された構成としてもよい。これにより、複数の円筒部材５１０を一体に扱うことができるため、作業性を向上させることができる。第６実施形態についても同様である。

【0064】

（Ｇ３）上記実施形態の細胞培養器具１００は、第１状態ならびに第２状態の細胞培養器具１００を閉塞するために、保持部材５０と締結する蓋部を備えていてもよい。蓋部は、上記工程にて培養環境を維持するために使用される。蓋部は、第1状態用蓋部と、第２状態用蓋部の２種類で構成されてもよい。または、蓋部を１種類とするために、保持部材５０の側壁５１ａを延設して第２状態でも円筒部材１０が保持部材５０から露出しない構成としてもよい。

【0065】

本開示は、上述の実施形態に限られるものではなく、その趣旨を逸脱しない範囲において種々の構成で実現することができる。例えば、発明の概要の欄に記載した各形態中の技術的特徴に対応する実施形態の技術的特徴は、上述の課題の一部又は全部を解決するために、あるいは、上述の効果の一部又は全部を達成するために、適宜、差し替えや、組み合わせを行うことが可能である。また、その技術的特徴が本明細書中に必須なものとして説明されていなければ、適宜、削除することが可能である。

【符号の説明】

【0066】

１０，２１０，３１０，４１０，５１０，６１０…円筒部材、１１…円筒部、１２…培養膜、１２ａ…第１面、１２ｂ…第２面、１３，２１３，３１３，４１３，５１３，６１３…第１係合部、１４，２１４，３１４，５１４，６１４…突出部、５０，２５０，３５０，４５０，５５０，６５０…保持部材、５１…有底円筒部、５１ａ…側壁、５１ｂ…底面、５２，２５２，３５２，４５２，５５２，６５２…第２係合部、５３，３５３，４５３…軸規制部、５４，３５４…第１挿入部、５４ａ，５４ｂ…第１挿入部区画面、５５，３５５…第２挿入部、５５ａ，５５ｂ…周区画面、９０…連結部、１００，２１００…細胞培養器具、２５３，５５３，６５３…水平規制部、２５４，５５４，６５４…凹部、４１４…延在部、４１５，５１５…基部、４１６…爪部、４５４…外周突出部、５１６…突起部、８００…第１治具、９００…第２治具、ＣＸ１，ＣＸ２…中心軸、Ｐ１０…第１工程、Ｐ４０…第２工程、Ｐ９０…第３工程、Ｐ２０，Ｐ３０，Ｐ５０，Ｐ６０，Ｐ７０，Ｐ８０，Ｐ１００，Ｐ１１０…工程

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】