特許 7644747 イボシデニブ及びその中間体の調製方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-03-04

(45)【発行日】2025-03-12

(54)【発明の名称】イボシデニブ及びその中間体の調製方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 401/14 20060101AFI20250305BHJP

   C07D 401/12 20060101ALI20250305BHJP

【ＦＩ】

C07D401/14

C07D401/12

【請求項の数】 31

(21)【出願番号】P 2022507572

(86)(22)【出願日】2020-08-07

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-10-17

(86)【国際出願番号】 US2020045368

(87)【国際公開番号】W WO2021026436

(87)【国際公開日】2021-02-11

【審査請求日】2023-07-24

(31)【優先権主張番号】62/884,480

(32)【優先日】2019-08-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】500287019

【氏名又は名称】レ ラボラトワール セルヴィエ

【氏名又は名称原語表記】Ｌｅｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅｓ Ｓｅｒｖｉｅｒ

(74)【代理人】

【識別番号】110001508

【氏名又は名称】弁理士法人 津国

(72)【発明者】

【氏名】サイズモア，ジェイコブ・ポール

(72)【発明者】

【氏名】チャン，シージエ

(72)【発明者】

【氏名】ヴォー，ニャ・ヒュウ

【審査官】神谷 昌克

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１９／１０４３１８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】米国特許出願公開第２０１３／０１９０２４９（ＵＳ，Ａ１）

【文献】ACS MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS，2018年，Vol.9, No.4，pp.300-305，DOI: 10.1021/acsmedchemlett.7b00421

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

化合物Ｉ：

【化10】

を調製する方法であって、
化合物ＩＩａ：

【化11】

のエタノール溶媒和物の結晶を単離すること、及び
前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を、化合物Ｉ又はその溶媒和物に変換すること
を含む方法。

【請求項2】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を単離することが、式ＩＩ：

【化12】

の化合物の混合物から、化合物ＩＩａを結晶化することを含む、請求項１記載の方法。

【請求項3】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を変換することが、化合物ＩＩａを２－ハロ－４－シアノピリジンと反応させて、化合物Ｉを与えることを含む、請求項１記載の方法。

【請求項4】

前記化合物ＩＩａを結晶化することが、式ＩＩの化合物のジアステレオマー混合物をエタノール溶媒系中に懸濁又は溶解すること、塩基を加えること、０℃～２５℃の間で前記混合物を撹拌すること、及び少なくとも一つの非極性溶媒を加えることを含む、請求項２記載の方法。

【請求項5】

前記塩基が、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（「ＴＢＤ」）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（「ＤＢＮ」）、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン、モルホリン、Ｎ－メチル－ピペラジン、ピリジン、ブチルアミン、ジブチルアミン、及び１，５－ジアザビシクロ（４．３．０）ノナ－５－エン、又はそれらの混合物からなる群より選択される、請求項４記載の方法。

【請求項6】

前記式ＩＩの化合物の混合物が、２－クロロベンズアルデヒドをメタノ－ル中で５－フルオロピリジン－３－アミンと反応させ、次いで、得られた生成物を（Ｓ）－５－オキソピロリジン－２－カルボン酸及び１，１－ジフルオロ－３－イソシアナトシクロブタンと反応させて、式ＩＩの化合物の混合物を与えることにより製造される、請求項２記載の方法。

【請求項7】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を２－ブロモイソニコチノニトリルと反応させて、化合物Ｉを与えることを含む、請求項１記載の方法。

【請求項8】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を２－ブロモイソニコチン酸エチルと反応させて、中間体Ｓ９：

【化13】

を与えることを含む、請求項１記載の方法。

【請求項9】

ＮＨ_３の存在下で、前記中間体Ｓ９を還元して、アミドＳ１０：

【化14】

を提供することを含む、請求項８記載の方法。

【請求項10】

ピリジンの存在下で、Ｓ１０をトリフルオロ酢酸無水物（ＴＦＡＡ）と混合して、化合物Ｉを与えることを含む、請求項９記載の方法。

【請求項11】

前記エタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち一つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項１又は２のいずれか１項記載の方法。

【請求項12】

前記エタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち３つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項１又は２のいずれか１項記載の方法。

【請求項13】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、少なくとも９０％のジアステレオマー過剰率及び少なくとも８０％の化学的純度を有する、請求項１又は２のいずれか１項記載の方法。

【請求項14】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、約９０％から約９９％の間のジアステレオマー純度を有する、請求項１又は２のいずれか１項記載の方法。

【請求項15】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、約８０％から約９９％の間の化学的純度を有する、請求項１又は２のいずれか１項記載の方法。

【請求項16】

化合物ＩＩａ：

【化15】

のエタノール溶媒和物の結晶を調製する方法であって、
化合物ＩＩａ及び化合物ＩＩｂ及び塩基の混合物を、エタノール溶媒系に懸濁又は溶解すること、少なくとも１つの非極性溶媒を加えること、並びに前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶を単離することを含む方法。

【請求項17】

前記塩基が、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（「ＴＢＤ」）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（「ＤＢＮ」）、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン、モルホリン、Ｎ－メチル－ピペラジン、ピリジン、ブチルアミン、ジブチルアミン、及び１，５－ジアザビシクロ（４．３．０）ノナ－５－エン、又はそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１６記載の方法。

【請求項18】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、少なくとも９０％のジアステレオマー過剰率及び少なくとも８０％の化学的純度を有する、請求項１６又は１７のいずれか１項記載の方法。

【請求項19】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、約９０％から約９９％の間のジアステレオマー純度を有する、請求項１６～１８のいずれか１項記載の方法。

【請求項20】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、図１に実質的に示される粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項１６～１９のいずれか１項記載の方法。

【請求項21】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち１つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項１６～１９のいずれか１項記載の方法。

【請求項22】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち３つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項１６～１９のいずれか１項記載の方法。

【請求項23】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、約８０％から約９９％の間の化学的純度を有する、請求項１６～２２のいずれか１項記載の方法。

【請求項24】

化合物ＩＩａ：

【化16】

のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項25】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、実質的に図１に示される粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項26】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち１つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項27】

前記化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物の結晶が、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち３つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項28】

約９０％から約９９％の間のジアステレオマー純度を有する、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項29】

少なくとも約９９％のジアステレオマー純度を有する、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項30】

少なくとも９０％のジアステレオマー過剰率及び少なくとも８０％の化学的純度を有する、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【請求項31】

約８０％から約９９％の間の化学的純度を有する、請求項２４記載のエタノール溶媒和物の結晶。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年８月８日に出願された米国仮特許出願第６２／８８４，４８０号（その開示は、参照により本明細書に組み込まれる）の利益を主張する。

【背景技術】

【0002】

イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＤＨ）は、イソクエン酸の２－オキソグルタル酸（すなわち、α－ケトグルタル酸）への酸化的脱炭酸を触媒する。これらの酵素は、２つの異なるサブクラスに属し、電子受容体として一方はＮＡＤ（＋）を利用し、他方はＮＡＤＰ（＋）を利用する。５種類のイソクエン酸デヒドロゲナーゼが報告されている：ミトコンドリアマトリックスに局在する３種類のＮＡＤ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼ、及び２種類のＮＡＤＰ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（その一方はミトコンドリア性、他方は主に細胞質性）である。各ＮＡＤＰ（＋）依存性アイソザイムは、ホモ二量体である。

【0003】

ＩＤＨ１（イソクエン酸デヒドロゲナーゼ１（ＮＡＤＰ＋）、細胞質性）は、ＩＤＨ；ＩＤＰ；ＩＤＣＤ；ＩＤＰＣ又はＰＩＣＤとしても知られている。この遺伝子によりコードされるタンパク質は、細胞質及びペルオキシソームに見いだされるＮＡＤＰ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼである。それは、ＰＴＳ－１ペルオキシソーム局在化シグナル配列を含む。ペルオキシソームにおけるこの酵素の存在は、ペルオキシソーム内での還元（２，４－ジエノイル－ＣｏＡの３－エノイル－ＣｏＡへの変換等の）のためのＮＡＤＰＨの再生、並びに２－オキソグルタル酸を消費するペルオキシソーム反応、すなわちフィタン酸のα－ヒドロキシル化における役割を示唆する。前記細胞質性酵素は、細胞質のＮＡＤＰＨ産生において重要な役割を果たす。

【0004】

ヒトＩＤＨ１遺伝子は、４１４アミノ酸のタンパク質をコードする。ヒトＩＤＨ１のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、それぞれＧｅｎＢａｎｋエントリー番号NM_005896.2及びNP_005887.2として見出すことができる。ＩＤＨ１のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、例えば、Nekrutenko et al., Mol. Biol. Evol. 15:1674-1684(1998); Geisbrecht et al., J. Biol. Chem. 274:30527-30533(1999); Wiemann et al., Genome Res. 11:422-435(2001); The MGC Project Team, Genome Res. 14:2121-2127(2004); Lubec et al., Submitted (DEC-2008) to UniProtKB; Kullmann et al., Submitted (JUN-1996) to the EMBL/GenBank/DDBJ databases;及びSjoeblom et al., Science 314:268-274(2006)にも記載されている。

【0005】

特定のがん細胞中に存在するＩＤＨ１の突然変異が、α－ケトグルタル酸のＲ（－）－２－ヒドロキシグルタル酸（２ＨＧ）へのＮＡＤＰＨ依存性還元を触媒する、酵素の新たな能力をもたらすことが発見された。２ＨＧの産生は、がんの形成及び進行に寄与すると考えられている(Dang, L et al., Nature 2009, 462:739-44)。

【0006】

ＩＤＨ２（イソクエン酸デヒドロゲナーゼ２（ＮＡＤＰ＋）、ミトコンドリア性）は、ＩＤＨ；ＩＤＰ；ＩＤＨＭ；ＩＤＰＭ；ＩＣＤ－Ｍ；又はｍＮＡＤＰ－ＩＤＨとしても知られている。この遺伝子によりコードされたタンパク質は、ミトコンドリアに見いだされるＮＡＤＰ（＋）依存性イソクエン酸デヒドロゲナーゼである。それは、中間代謝及びエネルギ－生産における役割を果たす。このタンパク質は、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ複合体と強く会合するか、又は相互作用している可能性がある。ヒトＩＤＨ２遺伝子は、４５２アミノ酸のタンパク質をコードする。ＩＤＨ２のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、それぞれＧｅｎＢａｎｋエントリー番号NM_002168.2及びNP_002159.2として見出すことができる。ヒトＩＤＨ２のヌクレオチド及びアミノ酸配列は、例えば、Huh et al., Submitted (NOV 1992) to the EMBL/GenBank/DDBJ databases;及びThe MGC Project Team, Genome Res. 14:2121-2127(2004)にも記載されている。

【0007】

非突然変異体、例えば野生型のＩＤＨ２は、イソクエン酸のα－ケトグルタル酸（α－ＫＧ）への酸化的脱炭酸を触媒する。

【0008】

特定のがん細胞中に存在するＩＤＨ２の突然変異が、α－ケトグルタル酸のＲ（－）－２－ヒドロキシグルタル酸（２ＨＧ）へのＮＡＤＰＨ依存性還元を触媒する、酵素の新たな能力をもたらすことが発見された。２ＨＧは、野生型ＩＤＨ２によっては形成されない。２ＨＧの産生は、がんの形成及び進行に寄与すると考えられている（Dang, L et al, Nature 2009, 462:739-44）。

【0009】

ＩＤＨ１又はＩＤＨ２における突然変異は、びまん性低悪性度神経膠腫（ＬＧＧ）腫瘍の７０％以上で発生する。ＩＤＨ突然変異は、２－ＨＧの蓄積をもたらし、これはＤＮＡの過剰メチル化、増加した抑制性ヒストンメチル化、及び分化過程の阻害を通じて、腫瘍形成を促進すると考えられている。突然変異体ＩＤＨ１（ｍＩＤＨ１）は阻害するが、突然変異体ＩＤＨ２（ｍＩＤＨ２）は阻害しないことが示されている、ＡＧＩ－５１９８として知られるツ－ル化合物を用いて実施された研究は、いくつかのモデル系において、ｍＩＤＨ１タンパク質の阻害がｍＩＤＨ１誘導性神経膠腫の増殖を抑制することができることを実証した(D. Rohle et al. Science 340:626-630 (2013))。

【0010】

米国特許第９，４７４，７７９Ｂ２号及び米国特許第９，９６８，５９５Ｂ２号（これらの全体は参照により本明細書に組み込まれる）は、化学名（Ｓ）－Ｎ－（（Ｓ）－１－（２－クロロフェニル）－２－（３，３－ジフルオロシクロブチルアミノ）－２－オキソエチル）－１－（４－シアノピリジン－２－イル）－Ｎ－（５－フルオロピリジン－３－イル）－５－オキソピロリジン－２－カルボキサミドで記載される化合物を開示しており、この化合物が、生化学的及び細胞アッセイにおいて突然変異ＩＤＨ１タンパク質の阻害剤として作用することが示されている。命名規則に応じて、この化合物はまた、（２Ｓ）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－（２－クロロフェニル）－２－［（３，３－ジフルオロシクロブチル）アミノ］－２－オキソエチル｝－１－（４－シアノピリジン－２－イル）－Ｎ－（５－フルオロピリジン－３－イル）－５－オキソピロリジン－２－カルボキサミドとも呼ばれ得る。さらに、２０１５年に、前記化合物には次のＩＮＮ：イボシデニブ（ｉｖｏｓｉｄｅｎｉｂ）が割り当てられた。イボシデニブの構造は、化合物Ｉ：

【化1】

として本明細書に記載される。

【0011】

急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）、骨髄異形成／骨髄増殖性腫瘍、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）若しくはリンパ腫（例えばＴ細胞リンパ腫）などの血液悪性腫瘍、又は神経膠腫、胆管がん、軟骨肉腫、前立腺がん、結腸がん、メラノ－マ若しくは非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）などの固形腫瘍（それぞれ、ＩＤＨ１の変異対立遺伝子の存在により特徴づけられるもの）を有する患者を処置するために使用される化合物Ｉを調製するための効率的かつ大規模な製造方法のニーズが存在する。いくつかの実施態様では、血液悪性腫瘍は、再発性又は難治性であり；他の実施態様では、血液悪性腫瘍は、新たに診断されたものであるか、又は、患者は集中的導入化学療法（intensive induction chemotherapy）に不適応である。いくつかの実施態様では、血液悪性腫瘍は、再発性又は難治性の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。他の実施態様では、血液悪性腫瘍は、新たに診断された急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。他の実施態様では、固形腫瘍は、胆管がんである。さらに他の実施態様では、胆管がんは、肝内胆管がん、肝門周囲胆管がん及び遠位胆管がんから選択される。さらに別の実施態様では、患者は軟骨肉腫を有する。他の実施態様では、血液悪性腫瘍又は固形腫瘍は進行したものである。

【0012】

発明の概要
１つの態様では、本出願は、化合物Ｉを調製する方法であって、
化合物ＩＩａ：

【化2】

の結晶性エタノール溶媒和物を単離すること、及び
前記化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物を、化合物Ｉ又はその溶媒和物に変換することを含む方法に関する。いくつかの態様では、前記化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物は、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋である。前記化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な結晶性エタノール溶媒和物は、「化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物」とも呼ばれる。いくつかの実施態様では、化合物Ｉは酢酸イソプロピル溶媒和物として得られ、これは他の溶媒和物、また非溶媒和物又は無水固体形態に変換することができる。

【0013】

別の態様では、本出願は、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物を調製する方法であって、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの混合物を、塩基及びエタノール溶媒系の溶液に懸濁又は溶解すること、非極性溶媒を加えること、及び前記化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物を単離することを含む方法に関する。本明細書で使用される場合、用語「懸濁すること」は、懸濁した物質が少なくとも部分的に溶解されるように、物質を溶媒又は溶媒の混合物と接触させることを意味する。

【0014】

別の態様では、本出願は、化合物ＩＩａそれ自体の結晶性Ａ形エタノール溶媒和物に関する。いくつかの実施態様では、Ａ形エタノール溶媒和物は、化学的に実質的に純粋である。他の実施態様では、Ａ形エタノール溶媒和物は、ジアステレオマー的に実質的に純粋である。他の実施態様では、Ａ形エタノール溶媒和物は、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋である。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物の粉末Ｘ線回折図（ＸＲＰＤ）である。

【図2】化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物の示差走査熱量測定（ＤＣＳ）及び熱重量分析（ＴＧＡ）プロファイルを含む。

【0016】

図面及び様々な実施態様の詳細な説明
１つの態様では、本出願は、式ＩＩ：

【化3】

の化合物の混合物を立体化学的に富化して、化合物ＩＩａ：

【化4】

のエタノール溶媒和物を、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な結晶性物質として与える方法に関する。本明細書で使用される場合、用語「化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な」化合物ＩＩａは、少なくとも約９０％のジアステレオマー過剰率及び少なくとも約８０％の化学的純度を有する化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を指す。いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａの実質的にジアステレオマー的に純粋な結晶性エタノール溶媒和物は、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．５％、少なくとも９９．７％、少なくとも９９．８％、少なくとも９９．９％（又は９０％と１００％の間の任意のパーセンテージ）のジアステレオマー過剰率を有する。本明細書で使用される場合、化学的純度に関連して、用語「約」は±０．５％を意味する。本明細書で使用される場合、ジアステレオマー過剰率に関連して、用語「約」はまた、±０．５％を意味する。本明細書中で使用される場合、ジアステレオマー過剰率（又はｄｅ％）は、以下の式：

【数1】

（式中、Ｘａ及びＸｂは、ジアステレオマーＩＩａ及びＩＩｂのモル分率であり、化合物ＩＩｂは、以下：

【化5】

の構造を有する）
を用いて計算される。

【0017】

他の実施態様では、前記化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物は、前記化合物ＩＩａの重量（非溶媒和又は無水ベ－スで）に基づいて、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、少なくとも約９９．５％、少なくとも９９．７％、少なくとも９９．８％、少なくとも９９．９％（又は約９０％～約１００％の間の任意のパーセンテージ）の化学的純度を有する。化学的純度に関連して、残りの重量パーセントは一般に、例えば反応不純物、出発物質、試薬、副生物、及び／又は他の処理不純物（調製及び／又は単離及び／又は精製工程で生じるもの）などの他の物質を含むことを理解されたい。例えば、前記化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物は、当該技術分野で公知の標準的かつ一般的に受け入れられている方法により測定して、約８０重量％より高い化学的純度を有すると決定された場合、化学的に実質的に純粋であるとみなし得る。ここで、残りの約２０％重量未満は、他の反応不純物、出発物質、試薬、副生物、及び／又は処理不純物などの他の物質を構成する。化学的純度は、当技術分野で公知の方法、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ＬＣ－ＭＳ（液体クロマトグラフィー－質量分析）、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法、又は赤外分光法により測定され得る。当業者であれば、これらの方法、及び化学的純度を決定又は評価するためにこれらの追加の（又は代替の）方法をいかに用いるかを容易に理解するであろう。

【0018】

より具体的には、本出願は、式ＩＩの化合物の混合物を立体化学的に富化して、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物を、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％のジアステレオマー過剰率を有する単離された結晶性物質として与える方法に関する。

【0019】

本明細書で使用される場合、用語「式ＩＩの化合物を含む混合物」及び「式ＩＩの化合物の混合物」は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの混合物（ＩＩａ及びＩＩｂは、１：９９～９９：１の間の比率で存在する）を包含することが意図される。いくつかの実施態様では、式ＩＩの化合物の混合物は、ラセミ混合物であり得る。式ＩＩの化合物の混合物の他の実施態様では、化合物ＩＩｂは、前記混合物の５０％超を占めていてもよい。式ＩＩの化合物の混合物のさらなる実施態様では、化合物ＩＩａは、混合物の５０％超、混合物の１００％未満を占めていてもよい。

【0020】

式ＩＩの化合物の混合物から、化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を選択的に結晶化して、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な、化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を与えることができることが見いだされた。選択的結晶化は、ジアステレオマーの過剰を伴う化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を単離することを可能にする。本明細書で使用される場合、用語「与える」、「単離すること」、「単離された」、及び「単離」は、反応混合物から化合物Ｉ、若しくはその溶媒和物、又は化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を得て、物理的に分離することを指す。本明細書で使用される場合、用語「約」は、±０．５％を意味する。化合物Ｉ、若しくはその溶媒和物、又は化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を含む、本明細書に記載の化合物のいずれかの単離は、固体物質を液体から分離するための当業者に公知の任意の方法を用いて達成され得る。化合物Ｉ若しくは化合物Ｉの溶媒和物又は化合物ＩＩａのエタノール溶媒和物を単離するのに適した分離技術の例としては、濾過が挙げられる。

【0021】

本明細書で使用される場合、「溶媒和物」は、結晶格子構造に組み込まれた溶媒の１つ以上の分子をさらに含む、分子、原子、及び／又はイオンの結晶形態を指す。前記溶媒和物中の溶媒分子は、規則的な配列及び／又は非規則的な配列で存在し得る。前記溶媒和物は、化学量論的な量又は非化学量論的な量のどちらかの溶媒分子を含み得る。例えば、非化学量論的な量の溶媒分子を有する溶媒和物は、溶媒和物からの溶媒の部分的な損失から生じてもよく、又は結晶化プロセスから直接生じてもよい。あるいは、溶媒和物は、２分子以上を含む二量体又はオリゴマ－として生じてもよく、又は結晶格子構造内に生じてもよい。

【0022】

本明細書で使用される場合、用語「非溶媒和物」、「溶媒和されない」、又は「無水」は、結晶格子構造中に組み込まれた溶媒の１つ以上の分子を有さない結晶形態を指す

【0023】

化合物ＩＩａ及びＩＩｂは、化合物ＩＩａ及びＩＩｂのクロロフェニルで置換された炭素の、立体化学的配座のエピマー化及び相互変換を受けやすいＣ－Ｈ基を含有する。化合物ＩＩａが結晶化混合物の溶液相から枯渇すると（化合物ＩＩａの選択的結晶化のため）、エピマー化反応が化合物ＩＩｂを化合物ＩＩａに変換する（その逆もまた正しい）。エピマー化反応は、第二のキラル中心から遠位にある関係（第二のキラル中心からの潜在的な小さな影響又は立体因子を除く）から、立体選択的である可能性は低いので、ＩＩａ／ＩＩｂのほぼ５０／５０の混合物が溶液相中に維持される可能性が高い。同時に、幾つかの場合、化合物ＩＩａは化合物ＩＩｂより溶解性が低く、従って溶液から優先的に沈殿することが見出されており、そのため固相は、化合物ＩＩａにより富化される（本明細書で立体化学的富化と呼ばれる現象）。よって、エピマー化反応を選択的結晶化と組み合わせることにより、結果として生じる本明細書に記載の「動的結晶化」プロセスが、ジアステレオマーの出発混合物（化合物ＩＩａとＩＩｂ）を化合物ＩＩａ（次いで単離される）で立体化学的に富化し、従って、ジアステレオマーの出発混合物中の化合物ＩＩａの量に基づく理論的に可能な量よりも高い、化合物ＩＩａの生産量をもたらすことが発見された。例えば、式ＩＩの化合物の混合物１０グラムが、化合物ＩＩａ及びＩＩｂをそれぞれ約５グラム含む場合、上記の動的結晶化プロセスは、潜在的には５グラムを超える量の化合物ＩＩａの単離を可能にする。

【0024】

いくつかの態様では、化合物ＩＩａは、塩基の存在下でエタノール溶媒系から結晶化され、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なエタノール溶媒和物を与える。本明細書で使用される場合、用語「エタノール溶媒系」は、体積で少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、又は少なくとも９８％のエタノールを含む任意の溶媒混合物である。いくつかの実施態様では、前記エタノール溶媒系は、１００％のエタノールを含む。いくつかの実施態様では、前記エタノール溶媒系は、少なくとも３０％（容量）のエタノールを含まない限り、トルエン、トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、酢酸メチル又はＭＴＢＥ、又は任意のそれらの混合物を含まない。

【0025】

特定の実施態様では、前記塩基は、第一級、第二級又は第三級アミンである。適切な塩基としては、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（「ＴＢＤ」）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（「ＤＢＮ」）、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン、モルホリン、Ｎ－メチル－ピペラジン、ピリジン、ブチルアミン、ジブチルアミン、又は１，５－ジアザビシクロ（４．３．０）ノナ－５－エン、又はそれらの組合せが挙げられる。

【0026】

前記動的結晶化プロセスは、－５～２５℃、－５～２０℃、０～２５℃、５～２０℃、１０～１８℃、１２～１８℃、１２～１７℃、１２～１６℃、又は１２～１５℃の温度で行い得る。

【0027】

特定の実施態様では、前記動的結晶化プロセスは、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、少なくとも０．０５当量、少なくとも０．１０当量、少なくとも０．１５当量、少なくとも０．２０当量、又は少なくとも０．２５当量の塩基の存在下で実施される。他の実施態様では、前記動的結晶化プロセスは、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０４当量、約０．０７当量、約０．１０当量、約０．１３当量、約０．１６当量、約０．１９当量、約０．２２当量、又は約０．２５当量の塩基の存在下で実施される。本明細書で使用される場合、用語「化合物ＩＩａ及びＩＩｂの当量」は、式ＩＩの化合物の混合物中に存在する前記２つの化合物の全当量を指す。他の実施態様では、前記動的結晶化は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０５～約０．１０当量、約０．１０～約０．１５当量、又は約０．１５～約０．２０当量の塩基の存在下で実施される。塩基の当量に関連して使用される場合、用語「約」は、±０．０２当量を意味する。本出願の動的結晶化プロセスのいくつかの実施態様では、使用される塩基の量は触媒的な量である。本明細書で使用される場合、用語「触媒的な」及び「触媒的な量」は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０４当量から約０．２５当量の間の量を指す。いくつかの実施態様では、前記塩基の触媒量は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０４当量～約０．０７当量、約０．０４当量～約０．１０当量、約０．０４当量～約０．１３当量、約０．０４当量～約０．１６当量、約０．０４当量～約０．１９当量、又は約０．０４当量～約０．２２当量の塩基である。他の実施態様では、塩基の触媒量は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、最大約０．０４当量、最大約０．０７当量、最大約０．１０当量、最大約０．１３当量、最大約０．１６当量、最大約０．１９当量、最大約０．２２当量、又は最大約０．２５当量の塩基である。

【0028】

本出願の動的結晶化プロセスを用いて化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なエタノール溶媒和物を調製及び単離するための最適条件は、一般に、結晶化温度、溶媒、塩基、及び塩基の量に依存する。例えば、上述の温度範囲の上限では、より低い温度の場合よりも、分解プロセスがより多くなる（becomes more prevalent）。塩基の濃度が高くても、生成物の分解が増加する可能性がある。さらに、式ＩＩの化合物がペプチド結合を含むことを考えると、塩基の求核性もまた、化合物の分解に寄与し得る。しかしながら、高温、高濃度の塩基、及び／又は求核性塩基を用いた場合でも、前記動的結晶化プロセスは、単離したエタノール溶媒和物化合物のさらなる精製を余儀なくさせるいくらかの分解物を伴うものの、なおも立体化学的に富化された化合物ＩＩａを生成し得る。

【0029】

別の態様では、本出願は、塩基の存在下、エタノール溶媒系から、式ＩＩの化合物の混合物から化合物ＩＩａを結晶化することを含む、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物（すなわち、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物）を調製する方法に関する。より具体的には、本出願は、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物を調製する方法であって、式ＩＩの化合物を含む混合物を、エタノール溶媒系に懸濁又は溶解すること、塩基を加えること、得られた懸濁液又は溶液を、２５℃未満の温度で少なくとも８時間撹拌すること、その後、非極性非プロトン性溶媒（例えば、ヘキサン、シクロヘキサン、又はメチルシクロヘキサン又はヘプタン）、又は非極性非プロトン性溶媒の混合物を滴下し、次いで濾過を介してエタノール溶媒和物を固体として分離することを含む方法に関する。いくつかの実施態様では、エタノール溶媒系中の、塩基と、式ＩＩの化合物を含む混合物の溶液又は懸濁液を、－５～２５℃、－５～２０℃、０～２５℃、５～２０℃、１０～１８℃、１２～１８℃、１２～１７℃、１２～１６℃、又は１２～１５℃の温度で、最長１２時間、最長１４時間、最長１６時間、最長１８時間、又は最長２０時間撹拌し、その後、非極性非プロトン性溶媒又は非極性非プロトン性溶媒の混合物を前記懸濁液又は溶液に加える。いくつかの実施態様では、前記非極性非プロトン性溶媒は、四塩化炭素、ベンゼン、ジエチルエーテル、クロロホルム、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、ジオキサン、若しくはトルエン、又はこれらのうちの任意の２つ以上の混合物から選択され得る。いくつかの実施態様では、前記非極性非プロトン性溶媒は、ペンタン、シクロペンタン、ｎ－ヘプタン、ｎ－ヘキサン、シクロヘキサン、若しくはメチルシクロヘキサン、又はこれらのうちの任意の２つ以上の混合物から選択され得る。いくつかの実施態様では、前記非極性非プロトン性溶媒又は溶媒の混合物を、約１分から約２４時間かけて前記懸濁液又は溶液に滴下する。いくつかの実施態様では、前記非極性非プロトン性溶媒又は溶媒の混合物を、約１分から約２４時間かけて、前記懸濁液又は溶液に一度に、又は二回以上に分けて加える。

【0030】

化合物ＩＩａを化合物ＩＩｂに（又はその逆でもよい）エピマー化することができるいずれの塩基も適切であり得る。塩基の選択が、式ＩＩの化合物の分解（これは望ましくない）に寄与する場合もあるが、前記動的結晶化プロセスは、完全に分解を回避する必要はない。代わりに、化合物の分解の程度を、単離される立体化学的に富化された化合物ＩＩａの収率と比較検討すべきである。

【0031】

エピマー化反応に適した塩基としては、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（「ＴＢＤ」）、１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン（「ＤＢＮ」）、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン、モルホリン、Ｎ－メチル－ピペラジン、ピリジン、ブチルアミン、ジブチルアミン、又は１，５－ジアザビシクロ（４．３．０）ノナ－５－エン、又はそれらの組合せが挙げられる。

【0032】

特定の実施態様では、前記動的結晶化プロセスは、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、少なくとも０．０５当量、少なくとも０．１０当量、少なくとも０．１５当量、少なくとも０．２０当量、又は少なくとも０．２５当量の塩基の存在下で実施される。他の実施態様では、前記動的結晶化は、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０４当量、約０．０７当量、約０．１０当量、約０．１３当量、約０．１６当量、約０．１９当量、約０．２２当量、又は約０．２５当量の塩基の存在下で実施される。他の実施態様では、前記動的結晶化プロセスは、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの１当量当たり、約０．０５～約０．１０当量、約０．１０～約０．１５当量、又は約０．１５～約０．２０当量の塩基の存在下で実施される。本願の動的結晶化プロセスのいくつかの実施態様では、使用される塩基の量は触媒的である。

【0033】

いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、式ＩＩの化合物の混合物をエタノール溶媒系に加えること、塩基を加えること、及び混合物を－５～２５℃、－５～２０℃、０～２５℃、５～２０℃、１０～１８℃、１２～１８℃、１２～１７℃、１２～１６℃、又は１２～１５℃で、最大１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、又は２０時間攪拌した後、ｎ－ヘプタンなどの非極性溶媒又は非極性溶媒の混合物を滴下すること、次いで単離することにより調製され得る。

【0034】

化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、以下の特性のうちの１つ以上により同定され得る：少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％のジアステレオマー過剰率、及び実質的に図１に示す粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤパターンは、Ｘ線管Ｃｕ線源（Cu X-ray tube source）を備えた粉末回折計を用いて測定した）。図１の実験的ＸＲＰＤパターンにおいて同定された、回折ピークの２θ±０．２°の角度及びｄ－間隔を表１に列挙する。ジアステレオマー過剰率に関連して本明細書で使用される場合、用語「約」は±２．５％を意味する。

【0035】

【表1】

【0036】

いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、以下の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち一つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられ得る。いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、以下の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち１つ、２つ、３つ、４つ、５つ又は６つを含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられ得る。いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、次の２θ：７．２°±０．２°、８．６°±０．２°、１２．２°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．４°±０．２°、１６．７°±０．２°、１９．４°±０．２°、１９．８°±０．２°、２１．８°±０．２°及び２５．２°±０．２°にあるピークのうち３つ以上を含む粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられ得る。

【0037】

本明細書で使用される場合、定義された図における用語「実質的に示す粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターン」は、比較を目的として、図に示された最も強いピークの少なくとも５０％が存在することを意味する。さらに、比較を目的として、２θピーク位置における示されたものからのいくらかの変動（例えば、±０．２°）が許容され、この変動が各ピーク位置に適用されることを理解されたい。

【0038】

化合物ＩＩａの結晶性Ａ形エタノール溶媒和物はまた、示差走査熱量測定（「ＤＳＣ」）及び熱重量分析（「ＴＧＡ」）により特徴づけられ得る。１つの実施態様では、化合物ＩＩａの結晶性Ａ形エタノール溶媒和物は、１２０．６℃（ピーク温度）、１３６．４℃（ピーク温度）及び２０３．４℃（開始温度）における三つの吸熱を含むＤＳＣサ－モグラムを示す。化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物はまた、ＴＧＡにより決定される、１５０℃以下で最大１０重量％の重量損失により特徴づけられ得る。いくつかの実施態様では、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物は、少なくとも８．０重量％の重量損失により特徴づけられる。

【0039】

図２は、化合物ＩＩａのＡ形エタノール溶媒和物のＤＳＣ及びＴＧＡサ－モグラムを示す。

【0040】

別の態様では、本出願は、化合物Ｉを調製する方法であって、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶エタノール溶媒和物を得ること、及びそれを化合物Ｉに変換することを含む方法に関する。

【0041】

いくつかの態様では、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶性エタノール溶媒和物を得ることは、上記の動的結晶化プロセスを用いて、エタノール溶媒系から化合物ＩＩａを立体化学的に富化し、選択的に結晶化することを含む。式ＩＩの化合物の任意の混合物は、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａのＡ形結晶エタノール溶媒和物を得るための出発点であり得る。いくつかの実施態様では、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩｂは、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な結晶エタノール溶媒和物を得るための出発点であり得る。

【0042】

式ＩＩの化合物の混合物は、当業者に公知の任意の方法に従って調製され得る。式ＩＩの化合物の混合物を調製するための出発物質は、当業者に公知であるか、又は国際公開公報第２０１３１０７２９１号、国際公開公報第２００７０７６０３４号、国際公開公報第２００６０６７４４５号、国際公開公報第２００６０６７４４５号、Atkinson, J. G. et al., J. Amer. Chem. Soc. 90:498 (1968)、Berkessel. A. et al., Angew Chemie, Int Ed. 53:11660 (2014)；Angew. Chem. Int. Ed. Sun, X. et al., 52:4440 (2013)、Topolovcan, N. et al., Eur. J. Org. Chem. 2868 (2015)、及びPavlik, J. W. et al., J Heterocyclic Chem. 42:73(2005)（いずれもその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の方法により例示されるような、当業者に公知の方法に従って調製することができる。

【0043】

例えば、式ＩＩの化合物の混合物は、スキ－ム１：

【化6】

に従って調製され得る。

【0044】

スキ－ム１において、式ＩＩの化合物の混合物は、ベンズアルデヒドＳ１をメタノ－ル中で第一級アミンＳ２と反応させ、次いで得られた生成物をオキソピロリジン－２－カルボン酸Ｓ３及びイソシアナトシクロブタンＳ４と反応させて、式ＩＩの化合物を与えることにより合成され得る。

【0045】

式ＩＩの化合物の混合物は、スキ－ム２に示されるプロセスによる、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａのＡ形結晶エタノール溶媒和物を得るための本出願の動的結晶化プロセスを受けてもよい。

【化7】

【0046】

動的結晶化によって、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶エタノール溶媒和物が単離され得、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％のジアステレオマー過剰率が得られる。

【0047】

化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶エタノール溶媒和物は、当業者に公知の任意の方法に従って化合物Ｉに変換され得る。例えば、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶エタノール溶媒和物は、スキ－ム３に従って化合物Ｉに変換され得る。スキ－ム３においては、化合物ＩＩａとブロモイソニコチノニトリルとのバックワルド反応が、化合物Ｉを与える。

【化8】

【0048】

あるいは、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋なＡ形結晶エタノール溶媒和物は、スキ－ム４に従って化合物Ｉに変換され得る。スキ－ム４においては、化合物ＩＩａを２－ブロモイソニコチン酸エチルと反応させて中間体Ｓ９を与えることにより、化合物Ｉが合成される。ＮＨ_３の存在下における中間体Ｓ９の還元が、アミドＳ１０を提供する。次に、アミドＳ１０を、ピリジン及び適切な溶媒の存在下で、トリフルオロ酢酸無水物（ＴＦＡＡ）と反応させて、化合物Ｉを得る。適切な溶媒には、ＴＨＦが挙げられる。

【化9】

【0049】

実験の部
以下の実施例は、例示の目的で本明細書に提供され、請求項のいずれかに対する限定を構成することはない。
略語：
ＴＢＤ：１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン。
ＤＢＵ：１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン。
ＤＢＮ：１，５－ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ－５－エン。
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル。
ＩＰＡｃ：酢酸イソプロピル。
ＥｔＯＨ：エタノール。
Ｉ－ＰｒＯＨ：イソプロピルアルコール。
ｎ－ＢｕＯＨ：ｎ－ブタノール。
ｔ－ＢｕＯＨ：ｔ－ブタノール。
ＤＣＭ：ジクロロメタン。
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
２－ＭｅＴＨＦ：２－メチルテトラヒドロフラン。
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド。
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド。
ＲＴ（又はｒｔ）：室温。

【0050】

本明細書で使用される場合、「液体クロマトグラフィー面積パーセント」を表す「ＬＣＡＰ」は、ピークの総面積に対する、関心対象の化合物のピーク面積のパーセンテージを意味する。
ＨＰＬＣ実験は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｅｌｌｕｌｏｓ－４、２５０×４．６mm、５μｍカラム及びＤＡＤ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ １１００を用い、かつ移動相としてヘキサン／エタノールを用いて行った。
^１ＨＮＭＲ：^１Ｈ溶液ＮＭＲは、ＤＭＳＯ－ｄ６を使用して、Ｂｒｕｋｅｒ４００ＭＨｚのＮＭＲ分光計にて収集した。
ＤＳＣ熱分析は、ＴＡ Ｑ２０００ ＤＳＣ（TA Instruments製）を用いて実施した。圧着したアルミニウムパンを用いて試料を調製し、パージガスとしてＮ_２を用いて、１０℃／分の加熱速度で室温から所望の温度まで試験した。
ＴＧＡ熱分析は、ＴＡ Ｑ５０００ ＴＧＡ（同じくTA Instruments製）を用いて行った。圧着したアルミニウムパンを用いて試料を調製し、パージガスとしてＮ_２を用いて、６０秒の変調、１０℃／分の加熱速度で、室温から所望の温度まで試験した。
粉末Ｘ線回折の試料に、ＣｕＫα１（１．５４０５９８Å）及びＣｕＫα２（１．５４４４２６Å）の放射線を、Ｋα１／Ｋα２比０．５０で照射し、２θが３～４０°のＸＲＰＤデ－タを収集した。

【0051】

化合物ＩＩａ及びＩＩｂを含む混合物の動的結晶化
エタノール（３００mL）中の式ＩＩの化合物（１００ｇ、ＨＰＬＣでＡが８９％、１８５．０mmol）の５３：４７混合物を、１５℃で、１，５，７－トリアザビシクロ［４．４．０］デカ－５－エン（２．０ｇ、１４．４mmol）と合わせ、次いで、１４～１７℃で２０時間撹拌した。ｎ－ヘプタン（３００mL）を反応混合物に滴下した。さらに１４～１７℃で１時間撹拌した後、固体を濾過により収集した。濾過ケ－キを２５℃未満でエタノール／ｎ－ヘプタン（２００mL、１ｖ／１ｖ）で洗浄し、真空下、５０℃で乾燥して、化合物ＩＩａ（５８．５ｇ、Ａ純度９９．４％、収率６５％）を、白色固体のエタノール溶媒和物として与え、化合物ＩＩａのＩＩｂに対する比率 ＞９９．９：０．１であった。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.0-8.9 (bm, 2 H), 8.41 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.02 (bs, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.41 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1H), 7.21 (td, J = 7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.11 (td, J = 7.6, 1.3 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 7.7, 1.6 Hz, 1H), 6.38 (bs, 1H), 4.14 (p, J = 6.5 Hz, 1H), 4.00 (bs, 1H), 3.05 to 2.84 (m, 2 H), 2.7 to 2.3 (m, 2H), 2.10 (ddd, J = 16.8, 9.5, 7.6 Hz, 1H), 2.03 to 1.92 (m, 1H), 1.90 to 1.70 (m, 2H)
エタノールのδ (4.34, t, J = 5.1 Hz, 1 H), 3.43 (dq, J = 6.9, 4.9 Hz, 2H), 1.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H)
化合物ＩＩａのＬＣ ＭＳ： ＥＳＩ（＋） 測定値：［Ｍ＋Ｈ］+４８１

【0052】

スキ－ム２による化合物Ｉの合成
１つの実施態様では、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物を、化合物Ｉに変換する。このような変換は、化合物ＩＩａ（０．２０mmol）、２－ブロモイソニコチノニトリル（０．３０mmol）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（１２９mg、０．３９mmol）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（１８mg、０．０２mmol）及びキサントホス（Ｘａｎｔ－Ｐｈｏｓ）（９．４mg、０．０２mmol）を、１，４－ジオキサン（１０mL）中、Ｎ_２下、８０℃で一晩撹拌することを含む。濾過後、濾液を真空中で濃縮し、残留物を標準的な方法で精製して、化合物Ｉを与える。

【0053】

スキ－ム３による化合物Ｉの合成
あるいは、スキ－ム３により、化合物ＩＩａ及び２－ブロモイソニコチン酸エチル（化合物Ｓ８）を溶媒中で合わせて、バックワルド反応を経て、化合物Ｓ９を与える。化合物Ｓ９のエチルエステルを還元して、アミドＳ１０を形成することができ、これはさらに、化合物Ｉのニトリル官能基を導入する縮合反応を起こし得る。

【0054】

具体的には、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な結晶性エタノール溶媒和物（０．２０mmol）、２－ブロモイソニコチン酸（０．３０mmol）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（１２９mg、０．３９mmol）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（１８mg、０．０２mmol）及びキサントホス（９．４mg、０．０２mmol）の混合物を、１，４－ジオキサン（１０mL）中、Ｎ_２下、８０℃で一晩攪拌する。濾過後、濾液を真空中で濃縮し、残留物を標準的な方法で精製して、化合物Ｓ９を与える。化合物Ｓ９（０．３mmol）、ＮＨ_３（０．４～１mmol）、及びＭｅＯＨの混合物を、封管中、６０℃で一晩撹拌する。濾過後、濾液を真空中で濃縮し、残留物を標準的な方法で精製して、化合物Ｓ１０を与える。化合物Ｓ１０（０．３mmol）、ピリジン、及びＴＦＡＡの混合物を、ＴＨＦ中、０℃で一晩撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、残留物を標準的な方法で精製して、化合物Ｉを与える。

【0055】

エピマー化の化学
動的結晶化のための最適条件は、一般に、化合物の最小限の分解を伴う迅速なエピマー化反応を含む。エピマー化を受けやすい化合物について、最小限の分解を伴う迅速なエピマー化を達成するための最適条件は、一般に、反応温度、塩基、塩基の濃度及び溶媒に依存する。多くの実験を行って、本出願の動的結晶化プロセスが、化合物Ｉを調製するための大規模な製造法の効率を改善することを示した。

【0056】

化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａを、９５％エタノール中、室温でＴＢＤ（０．１当量）と合わせた場合、化合物ＩＩａのＩＩｂに対する比率は、２時間後に８７．５％／１２．５％であることが分かった（エントリー１）。ＨＰＬＣスペクトログラムにおける追加のピークが示すように、いくらかの分解も観察された。２４時間後、この比率は依然として８７．１％／１２．９％であった。これは室温で触媒量のＴＢＤを用いたエピマー化反応が非常に速い（不完全ではあるが）ことを示した。

【0057】

前記エピマー化反応は、エタノール中、ＤＢＮ（０．１当量）で行うと、室温で２時間後に化合物ＩＩｂがわずか２．８％しか観察されず、より遅いことが分かった（エントリー２）。しかし２４時間後では、ＩＩａのＩＩｂに対する比率は８６．３％／１３．７％であった。分解ピークもＨＰＬＣにより観察された。

【0058】

ＥｔＯＡｃ／ｎ－ヘプタン（１／１）の混合物中で、化合物ＩＩａをＴＢＤ（０．１当量）と合わせた場合、室温で４時間後に、わずか４．２％のＩＩｂしか観察されず、ＩＩｂの量は２４時間後にも増加しなかった（エントリー３）。

【0059】

しかし、ＥｔＯＡｃ／ｎ－ヘプタン（３／１）の混合物中で、化合物ＩＩａをＴＢＤと合わせた場合、室温で４時間後に、ＩＩａのＩＩｂに対する比率は、８５．１％／１４．９％であり（エントリー４）、その比率は２４時間後もあまり変化しなかった。観察された分解生成物は（上記のエタノール反応と比較して）より少なかった。

【0060】

別の実験、エントリー５では、２０ｇの化合物ＩＩａを、ＥｔＯＡｃ（２００mL、１０Ｖ）中、４０℃で５時間、ＴＢＤ（０．１当量）と合わせた。ＩＩａのＩＩｂに対する比率は、６３．０％／３７．０％であり、分解は認められなかった。次いで、反応混合物を室温に冷却し、ＨＣｌ水溶液、次いでブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮乾固して、２０ｇのＩＩａ／ＩＩｂの混合物を白色の固体として与え、その比率が６３．６％／３６．４％であることが観察された。この材料をさらなるエピマー化研究に用いた。

【0061】

【表2】

【0062】

化合物ＩＩａ及びＩＩｂをそれぞれ１５／８５の比率で含む（かつＬＣＡＰが８３．７％である）混合物を、様々な溶媒中でエピマー化した。ＥｔＯＡｃ又はＩＰＡｃ中、０．１当量のＴＢＤ、ＤＢＵ又はＤＢＮの存在下では（エントリー６～１０）、ＩＩａ／ＩＩｂ比率は約１／１に増加したが、２４時間後でもそれ以上の増加は無かった。有意な量の分解が観察され、化学的純度は、（８３．７％から）４２～６８％に低下した。表２中のエントリー６～１０を参照のこと。

【0063】

ＩＰＡｃ中、ＴＢＤを用いると、前記エピマー化は、ＤＢＵ及びＤＢＮと比較して速く、ＩＩａ／ＩＩｂ比率は約２時間で約１／１に増加した（エントリー８）。そこで、ＴＢＤをさらなる研究のための塩基として選択した。

【0064】

０．１当量のＴＢＤを含むＥｔＯＡｃ／エタノール（３／１Ｖ／Ｖ）の混合物では、ＩＩａ／ＩＩｂ比率は、１０℃にて、数時間で約１／１に増加した（エントリー１１）。２０時間後、この比率はそれ以上増加しなかった。しかし、溶媒としてのＥｔＯＡｃ又はＩＰＡｃと比較すると、ＥｔＯＡｃ／エタノール（３／１Ｖ／Ｖ）の混合物中での分解は、１０℃で一晩後にも有意に増加しなかった（全体を通してＬＣＡＰが約７４％のままであった）。

【0065】

エントリー１２の条件を用いて、エピマー化を２０ｇまでスケ－ルアップした。１０℃にて、３時間後、反応混合物（ＩＩａ／ＩＩｂは約４９／５１）を濾過して、キラル純度９９．８％及びＬＣＡＰ純度９８．２％のＩＩａ ４ｇを得た（エントリー１２）。

【0066】

ＩＩａ及びＩＩｂの混合物（ＩＩａ／ＩＩｂ比率は約４９／５１）を、エタノール中、０．１当量のＴＢＤと共に、１５℃で２６時間撹拌した場合、固体中のＩＩａ／ＩＩｂ比率は約７５／２５であり、ＬＣＡＰは依然として約７７％であった（エントリー１３）。

【0067】

【表3】

【0068】

エタノール中でのエピマー化のための温度の最適化（開始時のＩＩａ／ＩＩｂ比率は１５／８５）
エタノール中でのエピマー化反応のために、反応温度をさらに最適化した。０．１当量のＴＢＤを用いた場合、エタノール中、－５℃及び５℃では、エピマー化は過度に緩慢であった。ＩＩａ／ＩＩｂの比率は、約２４時間後でも、１５／８５から約５０／５０への増加であった（エントリー１４～１６）。２０ｇの実験から、わずか５．５ｇの固体しか得られなかった。

【0069】

１０℃及び１２℃では、ＩＩａ／ＩＩｂの比率は２４時間後にそれぞれ７０／３０及び６８／３２に増加した（エントリー１７及び１８）。１５℃（エントリー１９及び２０）では、反応混合物中でＩＩａ／ＩＩｂの比率が１５／８５から２４時間後に８２／１８となるのが観察された。濾過及び乾燥後、２０ｇの実験から９．５ｇの固体を得た。キラル純度は９９．９％であり、ＬＣＡＰは９８．４％であった。２０℃では、２４時間後、化合物ＩＩａ／化合物ＩＩｂの比率は９０／１０に増加したものの、反応混合物についてＬＣＡＰ純度約５５％と、分解がより激しかった（エントリー２１）。これらの実験は、０．１当量のＴＢＤを含むエタノール中でのエピマー化反応では、約１５℃が適切な温度であり、かつこれらの条件下では、二番晶（2nd crop）について、化合物ＩＩａの化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な結晶性エタノール溶媒和物を約３２％の収率で得ることができることを示した。

【0070】

【表4】

【0071】

エピマー化反応のための異なる溶媒のスクリ－ニング：
ＩＩａの一番晶（1st crop）の母液から得た粗ＩＩａ／ＩＩｂ混合物をエピマー化するために、様々な溶媒をスクリ－ニングした。粗混合物（ＬＣＡＰ：８３％、キラルＩＩａ／ＩＩｂ：１７％／８３％）を、ＴＢＤ（０．１当量）の存在下、１５℃にて、これらの溶媒中で２４時間撹拌した。エタノールを用いると、９０％／１０％の高いＩＩａ／ＩＩｂ比率が、反応混合物について達成された（エントリー２２）。しかし、ＩＩａの分解は激しく、ＨＰＬＣにより測定した反応混合物の純度は、約３７％にすぎなかった。ＥｔＯＡｃ溶媒中では、わずかな分解（ＨＰＬＣによる７８％純度）しか観察されず、ＩＩａ／ＩＩｂ比率は５３％／４７％（エントリー２３）であった。溶媒としてＩＰＡを用いると、同様の結果、すなわち、７８％のＨＰＬＣによる純度及び４９％／５１％のＩＩａ／ＩＩｂの比率（エントリー２４）が得られた。

【0072】

【表5】

【0073】

動的結晶化（すなわち、結晶化及びエピマー化）のための溶媒としてのｉ－ＰｒＯＨ
化学分解を最小にしてエピマー化反応を最適化する目的で、化学的及びジアステレオマー的に実質的に純粋な化合物ＩＩａ及びＴＢＤ（０．１当量）から出発して、１５℃で２時間、様々な溶媒（エタノール、ＥｔＯＡｃ、ｉ－ＰｒＯＨ、ｎ－ＰｒＯＨ、ｎ－ＢｕＯＨ、ｔ－ＢｕＯＨ、ＴＨＦ、２－ＭｅＴＨＦ、ＣＨ_３ＣＮ及びアセトン）をスクリ－ニングした。次の表のデ－タは、様々な溶媒から収集したものである。ｉ－ＰｒＯＨは、２時間後に最小の化学分解を伴う良好なエピマー化をもたらし、このとき、化学的純度９１．８％で、５７％／４２％のＩＩａ／ＩＩｂ比率が得られた（エントリー３７参照）。

【表6】

【0074】

エピマー化のためのエタノール／ｎ－ヘプタン中でのＴＢＤの使用
エントリー４５及び４６において、化合物ＩＩａ及びＩＩｂの混合物を、ＴＢＤ（０．０７又は０．１０当量）の存在下でエタノールに溶解した。反応混合物を所定の時間撹拌し、ｎ－ヘプタンを溶液に加えた後、固体を濾過した。化合物ＩＩａの結晶性エタノール溶媒和物を、ＬＣＡＰ ９９％以上かつキラル純度９９％以上の固体として収集した。

【表7】

【0075】

多くの実施態様が本明細書に記載されたが、本開示の範囲は、添付の特許請求の範囲、ならびに例として本明細書に含まれていた特定の実施態様により定義されるべきである。本明細書を通して引用された全ての参考文献（参考文献、発行特許、公開特許出願、及び同時係属特許出願を含む）の内容は、参照によりその全体が本明細書に明示的に組み込まれる。別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は、当業者に一般的に知られている意味を付与される。

【図1】

【図2】