生物が保有する遺伝子はその種に固有の構成塩基の組成およびＧＣ含量を有することが一般的に知られている。緑膿菌は高いＧＣ含量を有することを特徴としている細菌であり、たとえばＰＡ０１株の全ゲノムの解析結果では、そのＧＣ含量は６６．６％であった（Stover, C.K., Pham, X.Q., Erwin, A.L., Mizoguchi, S.D., Warrener, P., Hickey, M.J., Brinkman, F.S., Hufnagle, W.O., Kowalik, D.J., Lagrou, M. et al. 2000. Complete genome sequence of Pseudomonas aeruginosa PA01, an opportunistic pathogen. Nature 406: 959-964.）

かかる課題を解決すべく、本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、ＧＣ含量の高い標的遺伝子（目的遺伝子（ＧＯＩ）ともいう。）の検出技術と、非対称ＰＣＲとを組み合わせることにより、ＧＣ含量の高くない（ＧＣ含量：４０～６０％）標的遺伝子はもとより、６０％以上の高いＧＣ含量を有するＧＯＩを網羅的且つ高い感度・特異度をもって、同時検出できる技術を創出し、本発明を完成するに至った。