特許 7648195 オレアンドリンを含む抽出物及びそれを生成する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-03-10

(45)【発行日】2025-03-18

(54)【発明の名称】オレアンドリンを含む抽出物及びそれを生成する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/585 20060101AFI20250311BHJP

   A23L 33/10 20160101ALI20250311BHJP

   A23L 33/105 20160101ALI20250311BHJP

   A61K 8/9789 20170101ALI20250311BHJP

   A61K 36/24 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 17/02 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 25/14 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 25/16 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 31/16 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20250311BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20250311BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20250311BHJP

【ＦＩ】

A61K31/585

A23L33/10

A23L33/105

A61K8/9789

A61K36/24

A61P1/00

A61P1/04

A61P9/10

A61P17/00

A61P17/02

A61P17/04

A61P17/06

A61P21/00

A61P25/00

A61P25/14

A61P25/16

A61P25/28

A61P31/12

A61P31/14

A61P31/16

A61P31/20

A61P35/00

A61Q19/00

【請求項の数】 29

(21)【出願番号】P 2022572450

(86)(22)【出願日】2021-05-19

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2023-07-03

(86)【国際出願番号】 US2021033176

(87)【国際公開番号】W WO2021242590

(87)【国際公開日】2021-12-02

【審査請求日】2024-05-17

(31)【優先権主張番号】63/059,776

(32)【優先日】2020-07-31

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/057,727

(32)【優先日】2020-07-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/029,530

(32)【優先日】2020-05-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/034,800

(32)【優先日】2020-06-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】16/895,920

(32)【優先日】2020-06-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/042,656

(32)【優先日】2020-06-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/051,576

(32)【優先日】2020-07-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】PCT/US2020/042009

(32)【優先日】2020-07-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/159,242

(32)【優先日】2021-03-10

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】PCT/US2021/022800

(32)【優先日】2021-03-17

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】508025518

【氏名又は名称】フェニックス・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100094569

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 伸一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100103610

【弁理士】

【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦

(74)【代理人】

【識別番号】100109070

【弁理士】

【氏名又は名称】須田 洋之

(74)【代理人】

【識別番号】100119013

【弁理士】

【氏名又は名称】山崎 一夫

(74)【代理人】

【識別番号】100123777

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 さつき

(74)【代理人】

【識別番号】100111796

【弁理士】

【氏名又は名称】服部 博信

(74)【代理人】

【識別番号】100123766

【弁理士】

【氏名又は名称】松田 七重

(72)【発明者】

【氏名】オビソ リチャード ジェイ

(72)【発明者】

【氏名】ニューマン ロバート エイ

(72)【発明者】

【氏名】アディントン オーティス シー

【審査官】今村 明子

(56)【参考文献】

【文献】米国特許出願公開第２０１９／０３２８８０９（ＵＳ，Ａ１）

【文献】特表２０２２－５２２０７４（ＪＰ，Ａ）

【文献】韓国公開特許第２０１８－００６０７２６（ＫＲ，Ａ）

【文献】特表２０１３－５４２９８８（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１２／１２９６８３（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

オレアンドリン含有有機溶媒抽出物の部分とオレアンドリン含有ＳｂＣＬ（亜臨界液体）抽出物の部分とを含むオレアンドリン含有組合せ組成物であって、
前記有機溶媒抽出物が、アルコール又はアルコールと水による抽出によって調製され、
前記ＳｂＣＬ抽出物が、二酸化炭素又は二酸化炭素とアルコールによる抽出によって調製される、オレアンドリン含有組合せ組成物。

【請求項2】

ａ）前記有機溶媒抽出物中の抽出された揮発性及び半揮発性構成成分の組成プロファイルが、前記亜臨界液体抽出物中の前記構成成分の組成プロファイルとは異なる；及び／又はｂ）オレアンドリン含有量に対して、亜臨界液体抽出物が、有機溶媒抽出物よりも抽出された揮発性及び半揮発性構成成分を高い割合で含む、請求項１に記載の組合せ組成物。

【請求項3】

前記組成物が、オレアンドリンと、１種又は複数種の強心配糖体、１種又は複数種の強心配糖体のグリコン構成成分、グルコシド、フルクトシド、グルクロニド、１種又は複数種のアグリコン、１種又は複数種のグリコシド前駆体、カルデノリド、カルダジエノリド、カルダトリエノリド、１種又は複数種のステロイド、１種又は複数種のトリテルペン、１種又は複数種の単糖、１種又は複数種の多糖、１種又は複数種のアルカロイド、１種又は複数種のタンパク質、脂肪、治療上有効な薬剤である１種又は複数種の他の非強心配糖体、及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される１種又は複数種の化合物とを含む、請求項１に記載の組合せ組成物。

【請求項4】

少なくとも１種の医薬賦形剤及び請求項１に記載の組合せ組成物を含む医薬組成物。

【請求項5】

オレアンドリンに治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置又は阻止する方法で使用するための請求項４に記載の医薬組成物であって、
前記状態、疾患又は障害が、がん、腫瘍、癌腫、肉腫、膠芽腫、腺癌、リンパ腫、黒色腫、脳腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫、上衣腫、希突起膠腫、過剰細胞増殖、悪性新生物性疾患、非がん性炎症性皮膚疾患、光線性角化症、乾癬、湿疹、神経学的疾患、神経学的障害、神経変性性疾患、神経変性性障害、変化したＮａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性と関連する病因を有する神経学的疾患又は障害、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、ハンチントン疾患、脳卒中、認知症、筋萎縮性側索硬化症、ウシ海綿状脳症、多発性硬化症、糖尿病性神経障害、自閉症及び若年性神経セロイドリポフスチン症、タウ異常症、ダウン症候群、ピック疾患、大脳皮質基底核変性症、プリオン疾患のいくつかの異型、進行性核上性麻痺、前頭側頭型認知症、痔疾、潰瘍、ハンセン病、蛇咬傷、いぼ、及びウイルス感染からなる群から選択され、
前記方法が、それを必要とする対象に前記医薬組成物の１回又は複数回の用量を投与し、それによって、前記状態、疾患又は障害を処置又は阻止することを含む、医薬組成物。

【請求項6】

オレアンドリンに治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置又は阻止する方法で使用するための請求項１に記載の組合せ組成物であって、
前記状態、疾患又は障害が、がん、腫瘍、癌腫、肉腫、膠芽腫、腺癌、リンパ腫、黒色腫、脳腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫、上衣腫、希突起膠腫、過剰細胞増殖、悪性新生物性疾患、非がん性炎症性皮膚疾患、光線性角化症、乾癬、湿疹、神経学的疾患、神経学的障害、神経変性性疾患、神経変性性障害、変化したＮａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性と関連する病因を有する神経学的疾患又は障害、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、ハンチントン疾患、脳卒中、認知症、筋萎縮性側索硬化症、ウシ海綿状脳症、多発性硬化症、糖尿病性神経障害、自閉症及び若年性神経セロイドリポフスチン症、タウ異常症、ダウン症候群、ピック疾患、大脳皮質基底核変性症、プリオン疾患のいくつかの異型、進行性核上性麻痺、前頭側頭型認知症、痔疾、潰瘍、ハンセン病、蛇咬傷、いぼ、及びウイルス感染からなる群から選択され、
前記方法が、それを必要とする対象に前記組合せ組成物の１回又は複数回の用量を投与し、それによって、前記状態、疾患又は障害を処置又は阻止することを含む、組合せ組成物。

【請求項7】

前記ＳｂＣＬ抽出物が、
オレアンドリン含有バイオマスを、二酸化炭素を含む亜臨界液体（ＳｂＣＬ）を用いる亜臨界液体抽出（ＳｂＣＬＥ）に、オレアンドリンを抽出し抽出環境を形成するのに十分な時間にわたって供すること；
前記バイオマスを前記抽出環境から分離して、オレアンドリン含有ＳｂＣＬを提供すること；及び
前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬからＳｂＣＬを除去して、前記オレアンドリン含有抽出物（ＯＣＥ）を提供すること
を含む方法によって生成される、請求項１に記載の組合せ組成物。

【請求項8】

前記方法が、以下のステップ：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離すること；ｂ）改質剤を、二酸化炭素又は抽出環境に添加すること；ｃ）抽出環境を含む容器の内部を加熱し、加圧して、亜臨界液体相抽出環境を形成すること；ｄ）前記ＳｂＣＬを蒸発させることによって、前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬから前記ＳｂＣＬを除去して、原料ＳｂＣＬ抽出物を形成すること；ｅ）原料ＳｂＣＬ抽出物を、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて希釈すること；ｆ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｇ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を活性炭で処理すること；ｈ）形成のために、希釈した原料抽出物から大部分の有機溶媒を除去すること；及び／又はｉ）原料又は粗製抽出物を無菌濾過して、ＳｂＣＬ抽出物を得ることのうちの１つ又は複数を更に含む、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項9】

ＳｂＣＬが、二酸化炭素及び１種又は複数種の改質剤を含む、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項10】

１種又は複数種の改質剤が、アルコールである、請求項９に記載の組合せ組成物。

【請求項11】

二酸化炭素（及び存在する場合は改質剤）が、抽出時間のうちの約５０％以上の間亜臨界液体相中に存在する、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項12】

亜臨界液体相中の抽出流体（二酸化炭素、及び存在する場合は改質剤）とバイオマスとを含む抽出環境が、抽出時間のうちの少なくとも６０％の間、液体形態のままである、請求項１１に記載の組合せ組成物。

【請求項13】

ＣＯ₂の相ダイアグラムに関しては、ＳｂＣＬＥが、ａ）臨界圧力（ｐ_c）以下で、臨界温度（ｔ_c）を下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｂ）ｔ_c以下で、及びｐ_cを下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｃ）ｐ_c以上で、ｔ_cを下回って、液－気相ラインを超えて、及び固－液相ラインを下回って；又はｄ）固－液相ライン、液－気相ライン、液体－超臨界相ライン、三重点（固－液－気）温度（ｔ_tp）、三重点圧力（ｐ_tp）、臨界点（液－気－超臨界）温度（ｔ_cp）、及び臨界点圧力（ｐ_cp）によって囲まれる液体領域の範囲内に入る温度及び圧力で行われる、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項14】

ＳｂＣＬＥが、約０℃～約３１℃の温度及び約５．２ｂａｒ～約３０００ｂａｒの圧力で行われる、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項15】

二酸化炭素を含み、更に改質剤を含んでいてもよい抽出液体のバイオマスに対する質量比が、溶媒と原材料の両方の質量に基づいて約２０：１～約１００：１の範囲である、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項16】

二酸化炭素の改質剤に対する質量比が、約１００：約０．０１～２０の範囲である、請求項９に記載の組合せ組成物。

【請求項17】

ａ）バイオマスが、抽出される前に、脱水され、除湿され、フリーズドライされ、及び／又はデシケートされる；ｂ）バイオマスが、抽出される前に乾燥される；ｃ）バイオマスが、抽出される前に脱水されない；又はｄ）バイオマスが、抽出される前に乾燥されない、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項18】

オレアンドリン含有組合せ組成物を生成する方法であって、
抽出環境を形成することによりオレアンドリン含有第１のバイオマスに有機溶媒抽出を行って、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物を提供すること；
オレアンドリン含有第２のバイオマスに亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）を行って、オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を提供すること；及び
前記オレアンドリン含有有機溶媒抽出物と前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物とを合わせて、前記オレアンドリン含有組合せ組成物を提供すること
を含む方法。

【請求項19】

ａ）前記有機溶媒抽出が、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて行われ；ｂ）前記有機溶媒又は水性有機溶媒が、アルコールを含み；ｃ）前記有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル、及びこれらの組合せからなる群から選択され；ｄ）前記有機溶媒抽出が、前記オレアンドリン含有バイオマスを有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて１回又は複数回抽出することを含み；ｅ）前記水性有機溶媒が、最大約２０％ｗ／ｗ、約５％ｗ／ｗ～約１５％ｗ／ｗ、又は約１０％ｗ／ｗの水を含み；ｆ）前記有機溶媒抽出物が、約０℃～約７５℃、約５℃～約７０℃、約１０℃～約６０℃、約１０℃～約５０℃、約１０℃～約４５℃、又は約２０℃～約４０℃の温度で行われ；ｇ）有機溶媒のバイオマスに対するｖ／ｗ比又は水性有機溶媒のバイオマスに対するｖ／ｗ比が、約５０～１：約１、約４０～１：約１、約３０～１：約１、約２０～１：約１、約２０～５：約１、又は約１０：約１の範囲である、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

有機溶媒抽出が、以下：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離して、抽出物を形成すること；ｂ）水性液体を有機溶媒又は抽出環境に添加すること；ｃ）前記抽出物から有機溶媒の含有量を減少させること；ｄ）抽出物を活性炭で処理すること；ｅ）抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｆ）追加の有機溶媒を抽出物に添加すること；ｇ）有機溶媒抽出物を無菌濾過すること；及び／又はｈ）水を抽出物に添加して水性抽出物を形成し、水性抽出物を有機溶媒で抽出することのうちの１つ又は複数を更に含む、請求項１８に記載の方法。

【請求項21】

ａ）抽出前のバイオマス中の水分含有量が約２０ｗｔ％以下であり；ｂ）抽出前のバイオマスの粒子サイズｄ０．５が、約１インチ未満、約０．７５インチ未満、約０．５インチ未満、約０．４インチ未満、約０．３インチ未満、約０．２インチ未満、約０．１インチ未満、約０．０５インチ未満、又は約０．０１インチ未満であり、前記粒子がＡＳＴＭふるいメッシュ開口サイズに関するものであり；及び／又はｃ）オレアンドリン含有バイオマスが、キョウチクトウ属（Ｎｅｒｉｕｍ）種、セイヨウキョウチクトウ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）、セイヨウキョウチクトウＬ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ）、ネリウム・オドウルム（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ）、ホワイトオレアンダー、ピンクオレアンダー、キバナキョウチクトウ属（Ｔｈｅｖｅｔｉａ）種、キバナキョウチクトウ（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｐｅｒｕｖｉａｎａ）、イエローオレアンダー、ザベチア・ネリフォリア（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｎｅｒｉｆｏｌｉａ）、キョウチクトウ属種の細胞培養で形質転換され、誘発されたアグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）、又はこれらの組合せである、請求項１５に記載の組合せ組成物。

【請求項22】

組成物が、少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、カネロシン、カネロジオン、オレアンドリゲニン、ネリウムＦ、ネリタロシド、オドロシドＡ、オドロシドＨ、アディネリン、オドロシド－Ｇ－アセテート、及びギトキシゲニンを含む、請求項１に記載の組合せ組成物。

【請求項23】

ａ）前記有機溶媒抽出物において、化合物の相対的含有量が、カネロシン＞カネロジオン＞オレアノール酸＞ウルソール酸～オレアンドリン～ベツリン酸＞オレアンドリゲニン～ネリウムＦ、オドリオシドＡ、オドリオシドＨ～アディネリン～オドリオシド－Ｇ－アセテート＞ギトキシゲニンであり；及びｂ）前記ＳｂＣＬ抽出物において、化合物の相対的含有量が、オレアノール酸＞ウルソール酸～オレアンドリン～ベツリン酸＞オレアンドリゲニン～ネリウムＦ＞オドレオシドＡ、オドレオシドＨ～アディネリン～オドレオシド－Ｇ－アセテート＞カネロシンである、請求項２２に記載の組合せ組成物。

【請求項24】

ネリイン、フォリネリン、ギトキシゲニン、ジギトキシゲニン、ネリゴシド、ルチン、ウルソン酸、ネリジエノンＡ、アジネリゲニン、デアセチルオレアンドリン、オドリオシド－Ｇ－アセテート、及び／又はケルセチンの１種以上をさらに含む、請求項２２に記載の組合せ組成物。

【請求項25】

１種又は複数種のポリフェノール、１種又は複数種の炭水化物、１種又は複数種のフラボノイド、１種又は複数種のアミノ酸、１種又は複数種の可溶性タンパク質、１種又は複数種のセルロース、１種又は複数種のデンプン、１種又は複数種のアルカロイド、１種又は複数種のサポニン、１種又は複数種のタンニン、又はそれらの組合せをさらに含む、請求項２２に記載の組合せ組成物。

【請求項26】

ａ）エタノール抽出によって作製された有機溶媒抽出物において、成分の相対的含有量が、全遊離アミノ酸＞全糖＞全セルロース＞全アルカロイド＞全ポリフェノール～全フラボノイド＞全デンプン＞全粗製タンパク質である；ｂ）水性エタノール抽出によって作製された有機溶媒抽出物において、成分の相対的含有量が、全遊離アミノ酸＞全セルロース＞全アルカロイド＞全糖＞全ポリフェノール～全フラボノイド＞全デンプン＞全粗製タンパク質である；又はｃ）ＳｂＣＬ抽出物において、成分の相対的含有量が、全遊離アミノ酸＞全デンプン＞全アルカロイド＞全セルロース＞全フラボノイド＞全糖＞全ポリフェノール＞全粗製タンパク質である、請求項２２に記載の組合せ組成物。

【請求項27】

前記組成物が、医薬組成物、栄養補助食品組成物、化粧料組成物、又は投与形態に含まれる、請求項１に記載の組合せ組成物。

【請求項28】

ａ）抽出前のバイオマス中の水分含有量が約２０ｗｔ％以下であり；ｂ）抽出前のバイオマスの粒子サイズｄ０．５が、約１インチ未満、約０．７５インチ未満、約０．５インチ未満、約０．４インチ未満、約０．３インチ未満、約０．２インチ未満、約０．１インチ未満、約０．０５インチ未満、又は約０．０１インチ未満であり、前記粒子がＡＳＴＭふるいメッシュ開口サイズに関するものであり；及び／又はｃ）オレアンドリン含有バイオマスが、キョウチクトウ属（Ｎｅｒｉｕｍ）種、セイヨウキョウチクトウ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）、セイヨウキョウチクトウＬ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ）、ネリウム・オドウルム（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ）、ホワイトオレアンダー、ピンクオレアンダー、キバナキョウチクトウ属（Ｔｈｅｖｅｔｉａ）種、キバナキョウチクトウ（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｐｅｒｕｖｉａｎａ）、イエローオレアンダー、ザベチア・ネリフォリア（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｎｅｒｉｆｏｌｉａ）、キョウチクトウ属種の細胞培養で形質転換され、誘発されたアグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）、又はこれらの組合せである、請求項７に記載の組合せ組成物。

【請求項29】

請求項１８に記載の方法によって生成されるオレアンドリン含有組合せ組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、オレアンドリンを含む抽出物を調製するための改善された方法に関する。本発明は、少なくとも２種類の異なるオレアンドリン含有抽出物を含む改善されたオレアンドリン含有組成物も提供する。これらを含む医薬組成物及び栄養補助食品組成物も提供する。強心配糖体応答性の疾患、状態、又は障害を処置するための使用する方法も提供する。

【背景技術】

【0002】

オレアンドリンの生成に好適な大規模化学合成方法は存在しておらず、したがって、オレアンドリンは、植物材料からの抽出によって主に生成され、その後、抽出物の他の構成成分から単離し、そして精製してもよい。

【0003】

セイヨウキョウチクトウ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）はキョウチクトウ属（Ｎｅｒｉｕｍ）種のメンバーであり、亜熱帯アジア、米国南西部、及び地中海に広範囲に分布する観賞植物である。その医学的及び毒物学的特性は、主にオレアンドリンによるものと長期間認識されてきており、例えば、痔疾、潰瘍、ハンセン病、蛇咬傷、神経学的障害、がん、腫瘍、過剰細胞増殖、神経変性、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、脳卒中、神経学的障害、ハンチントン疾患、炎症、及びウイルス感染の処置において使用するために提案されてきた。オレアンドリンの神経保護活性は、国際公開第２０１１０８５３０７号、米国特許第８４８１０８６号、米国特許第９２２０７７８号、米国特許第９３５８２９３号、米国特許第９８７７９７９号、及び米国特許第１０３８３８８６号で開示されている。オレアンドリンの抗がん（抗過剰細胞増殖）活性は、国際公開第２００７０１６１７６号、国際公開第２００９０６４６５７号、米国特許第７４０２３２５号、米国特許第８１８７６４４号、米国特許第８３９４４３４号、米国特許第８３６７３６３号、米国特許第９４９４５８９号、及び米国特許第９８４６１５６号で開示されている。オレアンドリンの抗ウイルス活性は、米国特許第１０５９６１８６号、国際公開第２０１８／０５３１２３号、及び国際公開第２０１９／０５５１１９号で開示されている。Ｚｉｂｂｕら（J. Chem. Pharm. Res. (2010), 2(6), 351-358）は、セイヨウキョウチクトウの化学的及び薬理学的活性に関する簡潔なレビューを提供している。
キョウチクトウ属種の植物からの構成成分の抽出は、従来、沸騰水、超臨界流体、又は有機溶媒を使用して行われてきた。

【0004】

ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）（Ｏｚｅｌの米国特許第５，１３５，７４５号）は、セイヨウキョウチクトウの熱水抽出物の濃縮形態又は粉末形態を含む。Ｍｕｌｌｅｒら（Pharmazie. (1991) Sept. 46(9), 657-663）は、セイヨウキョウチクトウの水抽出物の分析に関する結果を開示している。セイヨウキョウチクトウ植物の抽出には、葉をスライスすること、植物のスライスした葉及び茎を水中で２～３時間煮ること、及び残渣を濾過除去することが伴う。混合物は再度加熱される。水性抽出物には、２ＫＤ～３０ＫＤの様々な分子量を有する数種類の多糖、オレアンドリン、及びオレアンドリゲニン（oleandrigenin）、オドロシド（odoroside）並びにネリタロシド（neritaloside）が含まれると報告されている。そこでは、存在する多糖は主にガラクツロン酸であると報告されている。他の単糖としては、ラムノース、アラビノース及びガラクトースがある。セイヨウキョウチクトウの加温水抽出物内の多糖の含有量及び多糖の個々の糖組成も、Ｎｅｗｍａｎら（J. Herbal Pharmacotherapy, (2001) vol 1, pp.1-16）によって報告されている。加温水抽出物であるＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標）の組成分析は、Ｎｅｗｍａｎら（Anal. Chem. (2000), 72(15), 3547-3552）によって記載されている。Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国特許第５，８６９，０６０号は、キョウチクトウ属種の抽出物及び生成する方法に関連する。抽出物を調製するために、植物材料を水に入れ、煮ていく。次いで、粗製抽出物を植物物質から分離し、滅菌濾過を行う。次いで、得られた抽出物を凍結乾燥して粉末を生成することができる。米国特許第６，５６５，８９７号（Ｓｅｌｖａｒａｊらの米国付与前公開第２００２０１１４８５２号及び国際公開第２０００／０１６７９３号）では、実質的に無菌の水抽出物を調製するための熱水抽出方法が開示されている。Ｉｓｈｉｋａｗａら（J. Nutr. Sci. Vitaminol. (2007), 53, 166-173）は、セイヨウキョウチクトウの熱水抽出物、並びにクロロホルム、メタノール、及び水の混合物を使用した液体クロマトグラフィーによるその画分を開示している。彼らは、Ｎ．オレアンダー（Ｎ．ｏｌｅａｎｄｅｒ）の葉の抽出物がＩＩ型糖尿病を処置するために使用されてきたことも報告している。Ｐａｎｙｏｓａｎの２００６年８月２４日に公開された米国特許出願公開第２００６０１８８５８５号では、Ｎ．オレアンダーの熱水抽出物が開示されている。Ｓｍｏｔｈｅｒｓの２０１９年６月１８日に発行された米国特許第１０３２３０５５号では、アロエ及び水を用いて植物材料を抽出して、アロエ及び強心配糖体を含む抽出物を提供する方法が開示されている。２００７年７月５日にＲａｓｈａｎらに公開された米国特許出願公開第２００７０１５４５７３号では、セイヨウキョウチクトウの冷水抽出物及びその使用が開示されている。したがって、植物材料からのオレアンドリンの相対的含有量を高めるための方法は保証されている。セイヨウキョウチクトウの熱水抽出物は、オレアンドリン及び関連する強心配糖体を比較的低い収率で提供する場合があるが、オレアンドリンを含む強心配糖体の濃縮形態を得るための改善された方法が必要とされている。

【0005】

Ｅｒｄｅｍｏｇｌｕら（J. Ethnopharmacol. (2003) Nov. 89(1), 123-129）は、その抗侵害及び抗炎症活性に基づく、セイヨウキョウチクトウを含む植物の水性抽出物とエタノール抽出物との比較に関する結果を開示している。Ｆａｒｔｙａｌら（J. Sci. Innov. Res. (2014), 3(4), 426-432）は、その抗菌活性に基づく、セイヨウキョウチクトウのメタノール、水性、及び石油エーテル抽出物の比較に関する結果を開示している。

【0006】

セイヨウキョウチクトウの有機溶媒抽出物も、Ａｄｏｍｅら（Afr. Health Sci. (2003) Aug. 3(2), 77-86; ethanolic extract）、ｅｌ－Ｓｈａｚｌｙら（J. Egypt Soc. Parasitol. (1996), Aug. 26(2), 461-473; ethanolic extract）、Ｂｅｇｕｍら（Phytochemistry (1999) Feb. 50(3), 435-438; methanolic extract）、Ｚｉａら（J. Ethnolpharmacol. (1995) Nov. 49(1), 33-39; methanolic extract）、及びＶｌａｓｅｎｋｏら（Farmatsiia. (1972) Sept.-Oct. 21(5), 46-47; alcoholic extract）によって開示されている。Ｔｕｒｋｍｅｎら（J. Planar Chroma. (2013), 26(3), 279-283）は、セイヨウキョウチクトウの葉及び茎の水性エタノール抽出物を開示している。Ｙａｍａｕｃｈｉの１９７４年９月３日に発行された米国特許第３８３３４７２号では、ネリウム・オドルム（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｒｕｍ）ＳＯＬ（ネリウム・オレアンダー・リン（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌｉｎｎ））の葉の水、有機溶媒、又は水性有機溶媒を用いた抽出が開示されており、そこでは、葉を６０℃～１７０℃に加熱し、次いで抽出し、有機溶媒が、メタノール、エタノール、プロピルエーテル又はクロロホルムである。

【0007】

キョウチクトウ属種の超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物は既知である（ＰＢＩ－０５２０４；本明細書、及び２０１２年５月２９日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎの米国特許第８１８７６４４号、２００８年７月２２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎの米国特許第７４０２３２５号、２０１３年３月１２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎらの米国特許第８３９４４３４号において記載されており、これらの開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）。ＳＣＦ抽出物は、一部の神経学的障害（米国特許第８４８１０８６号、米国特許第９２２０７７８号、米国特許第９３５８２９３号、米国出願公開第２０１６０２４３１４３号、米国特許第９８７７９７９号、米国特許第１０３８３８８６号）、一部の細胞増殖性障害（米国特許第８３６７３６３号、米国特許第９４９４５８９号、米国特許第９８４６１５６号）、及び一部のウイルス感染（米国特許第１０５９６１８６号、国際公開第２０１８０５３１２３号、国際公開第２０１９０５５１１９号）の処置において有効であることが立証されている。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（米国特許第８４８１０８６号、米国特許第９２２０７７８号、米国特許第９３５８２９３号、米国特許出願公開第２０１６０２４３１４３号）は、神経学的状態の処置のためのＰＢＩ－０５２０４の使用を開示している。Ａｄｄｉｎｇｔｏｎら（米国特許第９０１１９３７号、米国特許出願公開第２０１５０２８３１９１号）は、神経学的状態を処置するためのトリテルペン含有分画（ＰＢＩ－０４７１１）の使用を開示している。ＰＢＩ－０５２０４は、主要な薬理学的活性構成成分として、強心配糖体（オレアンドリン、ＯＬ）及びトリテルペン（オレアノール酸（ＯＡ）、ウルソール酸（ＵＡ）及びベツリン酸（ＢＡ））を含む。ＰＢＩ－０５２０４におけるＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は、約７．８：７．４：１である。ＰＢＩ－０４７１１はＰＢＩ－０５２０４の分画であるが、ＯＬを含んでいない。ＰＢＩ－０４７１１におけるＯＡ：ＵＡ：ＢＡのモル比は約３：２．２：１である。

【0008】

オレアンドリンはまた、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）形質転換カルス由来の懸濁培養物抽出物及びアグロバクテリウム属（ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）抽出物から得てもよい（Ibrahim et al., “Stimulation of oleandrin production by combined Agrobacterium tumefaciens mediated transformation and fungal elicitation in Nerium oleander cell cultures”, in Enz. Microb. Technol. (2007), 41, 331-336）。

【0009】

オレアンドリンはまた、セイヨウキョウチクトウミクロ培養の抽出物からｉｎ ｖｉｔｒｏで得てもよく、それによって、セイヨウキョウチクトウの栽培品種、例えばスプレンデンズ・ギガンテウム（Ｓｐｌｅｎｄｅｎｓ Ｇｉｇａｎｔｅｕｍ）、ルバンシュ（Ｒｅｖａｎｃｈｅ）若しくはアルサス（Ａｌｓａｃｅ）、若しくは他の栽培品種の実生から、及び／又はシュート頂部からシュート培養を開始することができる（Vila et al., “Micropropagation of Oleander (Nerium oleander L.)” in HortScience (2010), 45(1), 98-102）。

【0010】

キョウチクトウ属種の抽出物は、多くの異なるクラスの化合物：強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖、単糖、アルカロイド、脂肪、タンパク質などを含むことが既知である。特定の化合物としては、オレアンドリン、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、カフェイン酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン（oleagenin）、ネリジジノシド（neridiginoside）、ネリゾシド（nerizoside）、オドロシド－Ｈ、３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル（diginosyl））－５－ベータ、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、及びガラクトースから構成される１４ベータ－ジヒドロキシ－カルダ－２０（２２）－エノリド、ペクチン多糖、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、又は約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、若しくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノン（neridienone）Ａ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリクマリン酸（neriucoumaric acid）、イソネリクマリン酸（isoneriucoumaric acid）、オレアンデロン酸（oleanderoic acid）、オレアンデレン（oleanderen）、８アルファ－メトキシラブタン（methoxylabdan）－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド（kaneroside）、ネリウモシド（neriumoside）、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７、２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルパ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、シス－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、トランス－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリモゲニン（neriumogenin）－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド（digitaloside））、プロセラゲニン（proceragenin）、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ、２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン（methoxyan）－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステラ－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート（neriursate）、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸（oleanderolic acid）、カネロジオン（kanerodione）、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン（kanerocin）、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース（sarmentose）、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド（gentiobiosylnerigoside）、ゲンチオビオシルビューモントシド（ｇentiobiosylbeaumontoside）、ゲンチオビオシルオレアンドリン、フォリネリン（folinerin）、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン（neriagenin）、ウバオール（uvaol）、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール（oleanderol）、１６－無水－デアセチル－ネリゴシド（nerigoside）、９－Ｄ－ヒドロキシ－シス－１２－オクタデカン酸、アジゴシド（adigoside）、アディネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペストロール（campestrol）、カウチューク（caoutchouc）、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン（cortenerin）、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、フォリアンドリン（foliandrin）、プソイドクラミン（pseudocuramine）、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、クエリシトリン、ロサギニン（rosaginin）、ルチン、ステアリン酸、スティグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン（urehitoxin）、及びウザリゲニンがある。抽出物に存在していてもよい追加の構成成分は、Ｇｕｐｔａら（IJPSR (2010, 1(3), 21-27）によって開示されており、その開示全体が、これにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）。

【0011】

前記抽出物の個別の組成プロファイルは、用いた抽出方法に従って広範囲に変化する。例えば、加温メタノール、加温エタノール、熱水、冷水、熱水、又は超臨界二酸化炭素を使用して得られたキョウチクトウ属植物材料の抽出物は、特に個別のＨＰＬＣクロマトグラムによって示されるように、実質的に異なる組成プロファイルを示す。したがって、新規のタイプの方法によって調製される抽出物の組成プロファイルを事前に予測することはできない。
そのような抽出物の治療的活性プロファイルも、抽出物の組成プロファイルに従って総質量対総質量ベースで比較した場合に変化することになる。例えば、１ｍｇの冷水抽出物は、１ｍｇの超臨界流体抽出物と異なる治療的活性プロファイルを示すことになる。更に、ＳＣＦ抽出物は、オレアンドリン単独よりも、更に一部の状態の処置において熱水抽出物よりも改善された有効性が実証されている。

【0012】

オレアンドリンとオレアンドリンを含む抽出物とキョウチクトウ属植物の他の構成成分との重要な治療的性質を考慮すると、オレアンドリンを含む改善された医薬組成物、並びにオレアンドリン及びオレアンドリン含有抽出物を生成する改善された方法が依然として必要とされている。

【発明の概要】

【0013】

本発明は、当技術分野における固有の欠点の一部又は全てを克服をしようとするものである。本発明の目的は、オレアンドリン含有抽出物を生成するための改善された方法、及びオレアンドリンを生成するための改善された方法を提供することを含む。本発明の別の目的は、オレアンドリン含有抽出物及びオレアンドリン含有組成物を提供することを含む。本発明の別の目的は、抽出物（又は組成物）及び少なくとも１種の医薬賦形剤を含む舌下又は頬側投薬形態を提供する。本発明の別の目的は、本明細書において記載するオレアンドリン又は抽出物を含む医薬組成物、投薬形態、化粧品、及び栄養補助食品製品を提供することである。
改善された方法は、ａ）超臨界流体（ＳＣＦ）抽出（ＳＣＦＥ）ベースの方法と比較して、植物バイオマス１ｋｇあたりの収率がより高いオレアンドリン；ｂ）ＳＣＦＥ方法と比較して、オレアンドリンの他の構成成分に対する比がより高いオレアンドリン含有組成物；ｃ）有機溶媒抽出物及び亜臨界抽出物を含む二成分（ｄｕａｌ）抽出物組成物；ｄ）同じ量の植物材料から得られたＳＣＦＥ方法と比較して、オレアンドリンの含有量がより高い有機溶媒抽出物；ｅ）同じ溶媒及び同じ量の植物材料を使用して得られたＳＣＦ抽出物と比較して、オレアンドリンの含有量がより高い亜臨界ＣＯ₂抽出物を提供する。
有機溶媒抽出物又は有機溶媒抽出の各実施形態において、有機溶媒は、ａ）１種又は複数種の有機溶媒；又はｂ）水及び１種又は複数種の有機溶媒抽出物を含む。水は、１種若しくは複数種の塩、１種若しくは複数種の緩衝剤、又はこれらの組合せを更に含んでいてもよい。

【0014】

本発明の態様は、オレアンドリン含有抽出物を生成する方法であって、
オレアンドリン含有バイオマスに、二酸化炭素を含み、有機溶媒（改質剤）を更に含んでいてもよい亜臨界液体（ＳｂＣＬ）を用いる亜臨界液体抽出（ＳｂＣＬＥ）に、オレアンドリンを抽出し抽出環境を形成するのに十分な時間にわたって供すること；
前記バイオマスを前記抽出環境から分離して、オレアンドリン含有ＳｂＣＬを提供すること；及び
前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬからＳｂＣＬを除去して、前記オレアンドリン含有（ＯＣ）抽出物（ＯＣＥ）を提供すること
を含む方法を提供する。

【0015】

本発明の態様は、オレアンドリンを生成する方法であって、
オレアンドリン含有バイオマスに、二酸化炭素を含み、有機溶媒（改質剤）を更に含んでいてもよい亜臨界液体（ＳｂＣＬ）を用いる亜臨界液体抽出（ＳｂＣＬＥ）に、オレアンドリンを抽出し抽出環境を形成するのに十分な時間にわたって供すること；
前記バイオマスを前記抽出環境から分離して、オレアンドリン含有ＳｂＣＬを提供すること；
前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬからＳｂＣＬを除去して、オレアンドリン含有抽出物を提供すること；及び
オレアンドリンを前記抽出物から単離すること
を含む方法を提供する。
本発明の別の態様は、組合せ組成物を生成する方法であって、
オレアンドリン含有第１のバイオマスに有機溶媒抽出を行って、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物を提供すること；
オレアンドリン含有第２のバイオマスに亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）を行って、オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を提供すること；及び
前記オレアンドリン含有有機溶媒抽出物と前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物とを合わせて、前記組合せ組成物を提供すること
を含む方法を提供する。

【0016】

いくつかの実施形態において、組合せ組成物は、少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、カネロシン、カネロジオン、オレアンドリゲニン、キョウチクトウ属Ｆ、ネリタロシド、オドロシド（Ａ及びＨ）、アディネリン、オドロシド－Ｇ－アセテート、及びギトキシゲニンを含む。組合せ組成物は、ネリイン、フォリネリン、ギトキシゲニン、ジギトキシゲニン、ネリゴシド、ルチン、ウルソン酸、ネリジエノンＡ、アジネリゲニン、デアセチルオレアンドリン、オドロシドＧアセテート、及び／又はケルセチンのうちの１種又は複数種を更に含んでいてもよい。
組成物（又は抽出物）は、ポリフェノール、炭水化物、フラボノイド、アミノ酸、可溶性タンパク質、セルロース、デンプン、アルカロイド、サポニン、タンニン、及びこれらの任意の組合せを更に含んでいてもよい。
アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、セリン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、メチオニン、システイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、及びリシンからなる群から選択されてもよい。いくつかの実施形態において、アミノは、アスパラギン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、及びリシンからなる群から選択される。
本発明の別の態様は、本明細書において定義する、オレアンドリン、オレアンドリン含有組成物、オレアンドリン含有組合せ組成物、又はオレアンドリン含有抽出物を含む化粧料（薬用化粧料）製品又は栄養補助食品製品を提供する。

【0017】

化粧料製品は、１種又は複数種の化粧料用賦形剤を更に含んでいてもよい。化粧料製品は、クレンジング、シャンプー、コンディショナー、ボディウォッシュ、フェイスクレンザー、スキントナー、セラム、モイスチャライザー、バーム、メイクアップ、ローション、クリーム、ゲル、ヒドロゲル、軟膏、油ベース溶液、懸濁液、粉末、スプレー、ファンデーション、プライマー、ハイライト、アイシャドー、ファンデーション、チーク、ウェットティッシュ、デオドラント、バスオイル、バブルバス、バスソルト、ボディバター、リップスティック、リップグロス、リップライナー、コンシーラー、ルージュ、フェイシャルマスクトリートメント、又はその他のタイプの化粧料製品であってもよい。

【0018】

栄養補助食品としては、食事成分、食事サプリメント、バイオ医薬品（bioceutical）、又は食品添加物があり得、例えば、米国ＦＤＡ又は他の規制当局によって定義されるものであってもよい。栄養補助食品製品は、１種又は複数種の栄養補助食品成分又は食事成分を更に含んでいてもよい。栄養補助食品としては、液体、固体、粉末、クリーム、溶液、懸濁液、投薬形態、ゲル、カプセル、錠剤、丸剤、プレバイオティクス、プロバイオティクス、機能性食品、食事サプリメント、食事代替品、又は他のそのような製品があり得る。

【0019】

本発明はまた、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物の部分とオレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物の部分とを含む改善されたオレアンドリン含有組合せ組成物を提供する。いくつかの実施形態において、ａ）２つの抽出物の実質的に等量の部分が、組合せ組成物中に存在するか；ｂ）前記組合せ中の有機溶媒抽出物の含有量が、ＳｂＣＬ抽出物の含有量よりも高いか；又はｃ）前記組合せ中のＳｂＣＬ抽出物の含有量が、有機溶媒抽出物の含有量よりも高い。調製する方法及び使用する方法もそれぞれ、本明細書において記載するように実質的に提供する。
有機溶媒抽出物及び亜臨界液体抽出物のいずれかと比較した場合、組合せ組成物は、有利には、より広範囲の植物化学物質、及び植物材料からオレアンドリンとは別に抽出可能な他の構成成分を含む。これらの他の構成成分のうちの１種又は複数種も治療上有効な（薬理学的に活性のある）成分であることは既知である。
本発明の実施形態としては、ａ）有機溶媒抽出物が、バイオマスから抽出された少なくともオレアンドリンと他の構成成分とを含み；ｂ）有機溶媒抽出物において、バイオマスから抽出されたオレアンドリンの他の構成成分に対するモル比が、亜臨界液体抽出物中の前記モル比を超える；ｃ）ＳｂＣＬ抽出物が、バイオマスから抽出された少なくともオレアンドリンと他の構成成分とを含む；ｄ）エタノール抽出物中のオレアンドリンの含有量が、亜臨界液体抽出物中のオレアンドリンの含有量を超える；ｅ）有機溶媒抽出物中の抽出された非オレアンドリン構成成分の含有量が、前記亜臨界液体抽出物中の前記構成成分の含有量を超える；ｆ）前記有機溶媒抽出物中の抽出された揮発性及び半揮発性構成成分の組成プロファイルが、前記亜臨界液体抽出物中の前記構成成分の組成プロファイルとは異なる；及び／又はｇ）オレアンドリン含有量に対して、亜臨界液体抽出物が、有機溶媒抽出物よりも抽出された揮発性及び半揮発性構成成分を高い割合で含むものがある。

【0020】

第１及び第２のバイオマスは、同じであっても異なっていてもよい。有機溶媒で抽出された第１のバイオマスを第２のバイオマスとして使用してもよく；或いは、第１のバイオマスを有機溶媒で抽出し、異なる第２のバイオマスを亜臨界液体で抽出する。
本発明の実施形態としては、亜臨界液体抽出方法は、以下：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離すること；ｂ）改質剤を、二酸化炭素又は抽出環境に添加すること；ｃ）抽出環境を含む容器の内部を加熱し、加圧して、亜臨界液体相抽出環境を形成すること；ｄ）前記ＳｂＣＬを蒸発させることによって、前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬから前記ＳｂＣＬを除去して、原料ＳｂＣＬ抽出物（ＳｂＣＬＥ）を形成すること；ｅ）原料ＳｂＣＬ抽出物を、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて希釈すること；ｆ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｇ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を活性炭で処理すること；ｈ）形成のために、希釈した原料抽出物から大部分の有機溶媒を除去すること；及び／又はｉ）原料又は粗製抽出物を無菌濾過して、ＳｂＣＬ抽出物を得ることのうちの１つ又は複数を更に含むものがある。ＳｂＣＬ抽出物は、有機溶媒又は水性有機溶媒で更に希釈してもよい。有機溶媒抽出物は、有機溶媒又は水性有機溶媒で更に希釈してもよい。ＳｂＣＬ抽出物は、抽出物１ｍＬあたり０．１ｍｇ～１ｍｇ又は０．５～０．８ｍｇのオレアドリン（ｏｌｅａｄｒｉｎ）を含んでいてもよい。

【0021】

本発明の実施形態としては、二酸化炭素（及び存在する場合は改質剤）が、抽出時間のうちの約５０％以上、すなわち「さらす」工程に関する合計時間の約５０％以上の間、亜臨界液体相中に存在するものがある。いくつかの実施形態において、亜臨界液体相中の抽出流体（二酸化炭素、及び存在する場合は改質剤）とバイオマスとを含む抽出環境は、抽出時間のうちの少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の間、液体形態のままであることになる。いくつかの実施形態において、抽出環境は、抽出時間全体にわたって液体形態のままであることになる。

【0022】

したがって、ＳｂＣＬＥは、抽出環境（バイオマス及びＣＯ₂を含み、有機溶媒（改質剤）を更に含んでいてもよい）が、抽出時間のうちの約５０％以上の間、ＣＯ₂の相ダイアグラムに関して、以下の条件下にある：ａ）臨界圧力（ｐ_c）以下に、三重点（固－液－気）温度（ｔ_tp）以上に、臨界温度（ｔ_c）を下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｂ）ｔ_c以下に、ｔ_tp以上に、ｐ_cを下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｃ）ｐ_c以上に、ｔ_cを下回って、ｔ_tp以上に、液－気相ラインを超えて、及び固－液相ラインを下回って；又はｄ）固－液相ライン、液－気相ライン、液－超臨界相ライン、ｔ_tp、三重点圧力（ｐ_tp）、臨界点（液－気－超臨界）温度（ｔ_cp）、及び臨界点圧力（ｐ_cp）によって囲まれる液体領域の範囲内に入る温度及び圧力にあるように行われる。臨界圧力及び温度はＣＯ₂に関するものである。

【0023】

本発明の実施形態としては、ＳｂＣＬＥが、約０℃から約３１℃の温度及び約５．２ｂａｒ～約３０００ｂａｒの圧力で行われるものがある。本発明の他の実施形態としては、ＳｂＣＬＥが、約０℃から約３１℃の温度及び約５．２ｂａｒ～約１０００ｂａｒの圧力で行われるものがある。好ましい実施形態において、ＳｂＣＬＥは、約２℃～約１６℃の温度及び約１１５ｂａｒ～約１３５ｂａｒの圧力で行われる。他の好ましい実施形態において、ＳｂＣＬＥは、約５～１０℃の温度及び約１２０～１３０ｂａｒの圧力で行われる。いくつかの実施形態において、ＳｂＣＬＥは、約５℃～約１５℃の範囲の温度及び約５０ｂａｒ～７０ｂａｒの範囲の圧力で行われる。
本発明の実施形態としては、ＳｂＣＬが１種又は複数種の改質剤、例えば有機溶媒を更に含むものがある。１種又は複数種の改質剤が存在する場合、二酸化炭素の改質剤に対する質量比は、約１００：約０．０１～２０、約１００：約０．０１～１５、約１００：約０．０１～１０、又は約１００：約０．０１～５である。

【0024】

１種又は複数種の改質剤（有機溶媒）は、アルコール、有機溶媒、アルキルケトン、アルキルエステル、水から出現ごとに独立して選択してもよい。特に好適な改質剤としては、エタノール、メタノール、プロパノール、アセトン、酢酸エチル、メチルエチルケトン、グリコール（例えばプロピレングリコール）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、又はＮ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）がある。

【0025】

本発明の実施形態としては、ａ）前記有機溶媒抽出が、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて行われ；ｂ）前記有機溶媒又は水性有機溶媒が、出現ごとに独立して、アルコールを含み；ｃ）前記有機溶媒が、出現ごとに独立して、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル、及びこれらの組合せからなる群から選択され；ｄ）前記有機溶媒抽出が、前記オレアンドリン含有バイオマスを有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて１回又は複数回抽出することを含み；ｅ）出現ごとに独立して、前記水性有機溶媒が、最大約２０％ｗ／ｗ、約５％ｗ／ｗ～約１５％ｗ／ｗ、又は約１０％ｗ／ｗの水を含み；ｆ）前記有機溶媒抽出物が、約０℃～約７５℃、約５℃～約７０℃、約１０℃～約６０℃、約１０℃～約５０℃、約１０℃～約４５℃、又は約２０℃～約４０℃の温度で行われ；ｇ）有機溶媒（又は水性有機溶媒）のバイオマスに対するｖ／ｗ比が、約５０～１：約１、約４０～１：約１、約３０～１：約１、約２０～１：約１、約２０－５：約１、又は約１０：約１の範囲であるものがある。乾燥していないか、又は脱水していないか、又はフリーズドライしていないバイオマスを抽出に関して使用する場合、バイオマス中に含まれる水含有量は、水性有機溶媒のバイオマスに対するｖ／ｗ比（乾燥質量ベース）として考慮される。

【0026】

本発明の実施形態としては、有機溶媒抽出が、以下：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離して、粗製抽出物を形成すること；ｂ）水性液体を有機溶媒又は抽出環境に添加すること；ｃ）前記粗製抽出物から有機溶媒の含有量を減少させること；ｄ）粗製抽出物を活性炭で処理すること；ｅ）粗製抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｆ）追加の有機溶媒を粗製抽出物に添加すること；ｇ）有機溶媒抽出物を無菌濾過すること；及び／又は、ｈ）水を粗製抽出物に添加し、水性粗製抽出物を有機溶媒で抽出すること、のうちの１つ又は複数を更に含むものがある。有機溶媒抽出物は、有機溶媒又は水性有機溶媒で更に希釈してもよい。有機溶媒抽出物は、０．１～１０ｍｇ／ｍＬ、０．５～８ｍｇ／ｍＬ、１～８ｍｇ／ｍＬ、１．５～８ｍｇ／ｍＬ、又は１．５～５ｍｇ／ｍＬ（抽出物１ｍＬあたりのオレアンドリンのｍｇ）を含んでいてもよい。
本発明の実施形態としては、オレアンドリン含有バイオマスが、キョウチクトウ属種、セイヨウキョウチクトウ、ネリウム・オレアンダー・Ｌ（キョウチクトウ科）、ネリウム・オドウルム（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ）、ネリウム・インディカム（Ｎｅｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍ）、ホワイトオレアンダー、ピンクオレアンダー、キバナキョウチクトウ属種、キバナキョウチクトウ（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｐｅｒｕｖｉａｎａ）、イエローオレアンダー、アグロバクテリウム・ツメファシエンス、又はこれらの組合せであるものがある。いくつかの実施形態において、バイオマスは、葉、茎、花、樹皮、果実、種子、樹液、培養細胞塊、及び／又は鞘を含む。

【0027】

本発明の実施形態としては、ａ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に、脱水され、除湿され、フリーズドライされ、及び／又はデシケートされる；ｂ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に乾燥される；ｃ）出現ごとに独立して、抽出される前に、バイオマスが脱水されない；ｄ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に乾燥されない；又はｅ）出現ごとに独立して。バイオマス中の抽出前の水含有量は、好ましくは約２０質量％以下、約１５質量％以下、約１０質量％以下、約８質量％以下、約５質量％以下、約２．５質量％以下、又は約１質量％以下である。したがって、本発明の方法はまた、抽出前に、バイオマスを脱水するか、乾燥するか、又はデシケートすることを更に含む実施形態を含む。
本発明の実施形態としては、ａ）抽出前の、バイオマスの平均粒子サイズ（ｄ０．５）が、約１インチ未満、約０．７５インチ未満、約０．５インチ未満、約０．４インチ未満、約０．３インチ未満、約０．２インチ未満、約０．１インチ未満、約０．０５インチ未満、又は約０．０１インチ未満であり、前記粒子は、ＡＳＴＭふるいメッシュ開口サイズに拠るものである。

【0028】

本発明の実施形態としては、ａ）前記抽出物中のオレアンドリン含有量が、約０．０１質量％以上、約０．０５質量％以上、約０．１質量％以上、約０．２質量％以上、約０．５質量％以上、約１質量％以上、約２．５質量％以上、約５質量％以上、約１０質量％以上、約２０質量％以上、約３０質量％以上、約４０質量％以上、約５０質量％以上、約６０質量％以上、約７０質量％以上、約８０質量％以上、又は約９０質量％以上であるか；ｂ）前記抽出物中のオレアンドリン含有量が、約９９質量％以下、約９５質量％以下、約９０質量％以下、約８０質量％以下、約７０質量％以下、約６０質量％以下、約５０質量％以下、約４０質量％以下、約３０質量％以下、約２０質量％以下、約１０質量％以下、約５質量％以下、約２．５質量％以下、約１質量％以下、又は約０．５質量％以下であるか；又はｃ）項目ａ）の任意の限定と項目ｂ）の任意の限定との組合せであるものがある。

【0029】

本発明の実施形態としては、方法が、以下：ａ）前記抽出物から揮発性有機化合物（ＶＯＣ）を除去すること（又はその量を減少させること）；ｂ）前記抽出物から半揮発性有機化合物（ＳＶＯＣ）を除去すること（又はその量を減少させること）；ｃ）前記抽出物を濾過すること；ｄ）前記分離することが、濾過、遠心分離、デカンテーション、又はこれらの組合せによって行われること、のうちの１つ又は複数を更に含むものがある。

【0030】

本発明の実施形態としては、前記単離することが、クロマトグラフィー、液液抽出、液固抽出、結晶化、沈殿、分別沈殿、分別結晶化、ソックスレー抽出、トリチュレーション、凍結乾燥（フリーズドライ）、又はこれらの組合せのうちの１つ又は複数によって達成されるものがある。
本発明の方法のいずれかの個々のステップは、個別の施設で行っても又は同じ施設内で行ってもよい。

【0031】

唯一の活性成分としてオレアンドリンを含む医薬組成物は、本発明の範囲内である。オレアンドリン及び前記バイオマスから得られた複数の活性成分を含む組成物は本発明の範囲内である。オレアンドリン及び活性成分として複数のトリテルペンを含む組成物は本発明の範囲内である。いくつかの実施形態において、前記組成物は、オレアンドリン、オレアノール酸（その遊離酸、塩、誘導体又はプロドラッグ）、ウルソール酸（その遊離酸、塩、誘導体又はプロドラッグ）、及びベツリン酸（その遊離酸、塩、誘導体又はプロドラッグ）を含む。化合物のモル比は本明細書において記載する。トリテルペンは、その遊離酸形態、塩形態、重水素化形態及び誘導体形態から出現ごとに独立して選択される。

【0032】

オレアンドリンに加えて、抽出物は、抽出方法中にバイオマスから抽出された１種又は複数種の他の化合物を含んでいてもよい（これらは薬理学的に活性で治療上有効であってもなくてもよい）。１種又は複数種の他の化合物は、両方が与えられる対象に投与する場合、オレアンドリンの治療的有効性の一因となってもなっていなくてもよい。１種又は複数種の他の化合物は、強心配糖体、１種又は複数種の強心配糖体のグリコン構成成分（例えば、グルコシド、フルクトシド、及び／又はグルクロニド）、１種又は複数種のアグリコン、１種又は複数種のグリコシド前駆体（例えば、カルデノリド、カルダジエノリド（cardadienolides）及びカルダトリエノリド（cardatrienolides））、１種又は複数種のステロイド、１種又は複数種のトリテルペン、１種又は複数種の単糖、１種又は複数種の多糖、１種又は複数種のアルカロイド、１種又は複数種のタンパク質、脂肪、治療上有効な薬剤である１種又は複数種の他の非強心配糖体、及びこれらの任意の組合せからなる群から選択してもよい。いくつかの実施形態において、組成物は、オレアンドリン、及びａ）２種又は３種のトリテルペン；ｂ）２種又は３種のトリテルペン誘導体；ｃ）２種又は３種のトリテルペン塩；又はｄ）これらの組合せ、を含む。本明細書において使用する場合、トリテルペン及び強心配糖体という総称も、特に指定がない限り、遊離形態、塩形態、及びこれらの誘導体を包含する。いくつかの実施形態において、トリテルペンは、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、及びこれらの塩又は誘導体からなる群から選択される。

【0033】

いくつかの実施形態において、有機抽出物は、オレアンドリン、及びａ）１種又は複数種の揮発性有機化合物；ｂ）１種又は複数種の半揮発性有機化合物；ｃ）１種又は複数種の非揮発性有機化合物；又はｄ）これらの任意の組合せを含む。
いくつかの実施形態において、抽出物は、抽出中に得られた薬理学的活性を有する多糖（及び／又は単糖）を除外する。いくつかの実施形態において、抽出物は、オレアンドリン、及び抽出中に得られた少なくとも１つの薬理学的活性を有する多糖（及び／又は単糖）を含む。薬理学的活性を有する多糖は、酸性ホモポリガラクツロナンであってもアラビノガラツロナンであってもよい。
いくつかの実施形態において、抽出物は、少なくともオレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、カネロシン、カネロジオン、オレアンドリゲニン、キョウチクトウ属Ｆ、ネリタロシド、オドロシド（Ａ及びＨ）、アディネリン、オドロシド－Ｇ－アセテート、及びギトキシゲニンを含む。組合せ組成物は、ネリイン、フォリネリン、ギトキシゲニン、ジギトキシゲニン、ネリゴシド、ルチン、ウルソン酸、ネリジエノンＡ、アジネリゲニン、デアセチルオレアンドリン、オドロシドＧアセテート、及び／又はケルセチンのうちの１種又は複数種を更に含んでいてもよい。

【0034】

抽出物は、１種又は複数種のポリフェノール、１種又は複数種の炭水化物、１種又は複数種のフラボノイド、１種又は複数種のアミノ酸、１種又は複数種の可溶性タンパク質、１種又は複数種のセルロース、１種又は複数種のデンプン、１種又は複数種のアルカロイド、１種又は複数種のサポニン、１種又は複数種のタンニン、及びこれらの任意の組合せを更に含んでいてもよい。
アミノ酸は、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、セリン、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、メチオニン、システイン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、及びリシンからなる群から選択してもよい。いくつかの実施形態において、アミノは、アスパラギン、アルギニン、トレオニン、アラニン、プロリン、チロシン、バリン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニン、トリプトファン、及びリシンからなる群から選択される。
抽出物中の他の構成成分がオレアンドリンよりも相対的に多くの量で存在する場合があるが、オレアンドリンが、特定の疾患、障害又は状態に対する主要な治療上有効な化合物であり得ることは理解されるべきである。

【0035】

本発明のいくつかの実施形態としては、医薬組成物が、少なくとも１種の医薬賦形剤及び抽出物を含むものがある。
本発明のオレアンドリン、オレアンドリン含有抽出物、又はオレアンドリン含有組成物は、強心配糖体（オレアンドリン、ジゴキシン、ジギトキシン、ウアバイン、ブファリン、シノブファタリン、シノブファギン、レシブフォゲニン、ラナトシドＣ、又は他の治療上有効な強心配糖体）を用いた処置、特にオレアンドリンを用いた処置に治療的に応答するか、又は強心配糖体の投与、特にオレアンドリンの投与によって阻止することができる状態、疾患又は障害を処置するために、それを必要とする対象に投与してもよい。

【0036】

本発明の態様は、オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）に治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置又は阻止する方法であって、それを必要とする対象にオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）の１回又は複数回の用量を投与し、それによって、前記状態、疾患又は障害を処置又は阻止することを含む方法を提供する。標的状態、疾患及び障害は本明細書において記載する。
本発明の別の態様は、対象の免疫学的応答を改善又はブーストする方法であって、対象の免疫学的応答をブーストするのに十分な量でオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物、オレアンドリン含有組合せ組成物、又はオレアンドリン含有抽出物）のうちの１回又は複数回の用量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。１回又は複数回の用量は、医薬組成物、栄養補助食品組成物、及び／又は薬用化粧料組成物として投与してもよい。

【0037】

投与は、急性的、慢性的、又はこれらの組合せであってもよく、前記状態、疾患又は障害が開始する前及び／又は後に生じてもよい。投与は、前記状態、疾患又は障害を有するか又はリスクがある対象に行ってもよい。
本発明のオレアンドリン、オレアンドリン含有抽出物、オレアンドリン含有組成物、又はオレアンドリン含有組合せ組成物は、本明細書において記載する任意の医薬組成物、栄養補助食品組成物、薬用化粧料組成物、又は投薬形態中に含まれる場合がある。

【0038】

本発明のオレアンドリン、オレアンドリン含有抽出物、又はオレアンドリン含有組成物は、局所的に、全身的に、又はこれらを組み合わせて投与してもよい。投与の好適な様式は本明細書において記載する。
いくつかの実施形態において、オレアンドリンは、医薬組成物中の治療的活性を主に担う構成成分を意味する主要な治療的構成成分として存在する。
本発明はまた、対象における強心配糖体に治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置するための医薬の製造におけるオレアンドリン含有抽出物の使用を提供する。いくつかの実施形態において、そのような医薬の製造は、オレアンドリン含有抽出物を提供すること；医薬投薬形態中にオレアンドリン含有抽出物の用量を含めること；及び医薬投薬形態を包装することを含む。いくつかの実施形態において、製造は、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ０６／２９０６１号に記載されているように行ってもよく、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする。製造は、１種又は複数種の追加のステップ、例えば、包装された投薬形態を販売会社（小売業者、卸売業者及び／又は流通業者）に搬送すること；包装された投薬形態を、ウイルス感染を有する対象に販売すること、そうでなければ提供すること；医薬とともに、使用、投薬レジメン、投与、含有量、及び投薬形態の毒性プロファイルに関する取扱説明書を提供するラベル及び添付文書を含めることも含んでいてもよい。

【0039】

いくつかの実施形態において、処置は、強心配糖体、例えばオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）、ジゴキシン、ウアバイン、ブファリン、シノブファタリン、シノブファギン、レシブフォゲニン、又は他の治療上有効な強心配糖体に治療的に応答する状態、疾患又は障害を対象が有すると決定すること；投薬レジメンに従って医薬投薬形態の対象への投与を示すこと；１種又は複数種の医薬投薬形態を対象に投与することであって、１種又は複数種の医薬投薬形態が投薬レジメンに従って投与されることを含む。

【0040】

医薬組成物は、水溶性（混和性）共溶媒、水不溶性（非混和性）共溶媒、界面活性剤、抗酸化剤、キレート化剤、及び吸収促進剤からなる群から選択される少なくとも１種の材料の組合せを更に含んでいてもよい。
可溶化剤は、少なくとも単一の界面活性剤であるが、材料の組合せ、例えば、ａ）界面活性剤及び水混和性溶媒；ｂ）界面活性剤及び水非混和性溶媒；ｃ）界面活性剤、抗酸化剤；ｄ）界面活性剤、抗酸化剤、及び水混和性溶媒；ｅ）界面活性剤、抗酸化剤、及び水非混和性溶媒；ｆ）界面活性剤、水混和性溶媒、及び水非混和性溶媒；又はｇ）界面活性剤、抗酸化剤、水混和性溶媒、及び水非混和性溶媒の組合せであってもよい。
本発明の組成物は、ａ）少なくとも１種の液体担体；ｂ）少なくとも１種の乳化剤；ｃ）少なくとも１種の可溶化剤；ｄ）少なくとも１種の分散剤；ｅ）少なくとも１種の他の賦形剤；又はｆ）これらの組合せを更に含んでいてもよい。
いくつかの実施形態において、水混和性溶媒は、低分子量（６０００未満）ＰＥＧ、グリコール、又はアルコールである。いくつかの実施形態において、界面活性剤は、ポリ（エチレングリコール）官能基を含む界面活性剤を意味するペグ化界面活性剤である。

【0041】

本発明はまた、本明細書において記載する本発明の任意の抽出物及び少なくとも１種の医薬賦形剤を含む頬側又は舌下投薬形態を提供する。前記投薬形態は、抽出物の構成成分を口腔粘膜に送達するように適応している。好適な投薬形態としては、錠剤、ウエハース剤、パッチ剤、スプレー剤、滴剤、液剤、溶液剤、ペースト剤、ゲル剤、フィルム剤、生体接着性組成物、グミ剤、又は粉末剤がある。

【0042】

組合せ組成物は、任意のタイプの医薬投薬形態中に含まれていてもよい。好適なものは、固体投薬形態、液体投薬形態、非経口投薬形態、耳用投薬形態、眼用投薬形態、経鼻投薬形態、吸入用投薬形態、頬側投薬形態、舌下投薬形態、経腸投薬形態、局所投薬形態、経口投薬形態、口腔（peroral）投薬形態、注射可能投薬形態、錠剤、カプセル剤、丸剤、カプレット剤、トローチ剤、分包剤、溶液剤、懸濁剤、分散剤、バイアル、バッグ、瓶、注射可能な液剤、ｉ．ｖ．（静脈内）、ｉ．ｍ．（筋肉内）又はｉ．ｐ．（腹腔内）投与可能な液剤からなる群から選択される。
投薬形態は、急速放出、即時放出、制御放出、持続放出、長期放出、徐放、バースト放出、連続放出、遅延放出、又はパルス放出の投薬形態であってもよいか、又はこれらのタイプの放出のうちの２つ以上を示す投薬形態である。水性環境に入れた場合又は対象に投与した後、投薬形態は、０次、疑似０次、１次、疑似１次又はシグモイド放出プロファイルからなる群から選択される薬物放出プロファイルを示す場合がある。

【0043】

いくつかの実施形態において、投薬形態は、ａ）０．５～１時間以下の期間内に組成物のそのチャージ（charge）を放出するか；ｂ）腸溶性コーティングされ、組成物のそのチャージを胃の下流に、例えば、空腸、回腸、小腸、及び／又は大腸において放出するか；又はｃ）腸溶性コーティングされ、組成物のそのチャージを経口投与後１～１０時間以内に全身循環に放出する。

【0044】

いくつかの実施形態において、吸入用、頬側、又は舌下投薬形態は、少なくとも１種の苦味拮抗薬（苦味受容体ブロッカーとも称される）を更に含む。苦味拮抗薬は、苦味化合物、例えば強心配糖体によって引き起こされる味覚受容体の活性化を阻害する。好ましい実施形態において、苦味拮抗薬は、Ｇタンパク質共役受容体のｈＴＡＳ２Ｒファミリーの受容体の少なくとも１種の活性化を阻害する。本明細書において使用する場合、苦味拮抗薬としては、味マスキング剤があり得る。好適な苦味拮抗薬としては、ＧＩＶ３７５７（４－（２，２，３－トリメチルシクロペンチル）ブタン酸）、ガンマ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、６－メトキシ－フラバノン、４’－フルオロ－６－メトキシフラバノン、６，３’－ジメトキシフラバノン、６－メトキシフラバノン、アブシジン酸、（－）－ハードウィッキ酸（２－（フィトラン－３－イル）エチル）－トリメチル－ヘキサヒドロナフタレン－カルボン酸）、フェンコン、ボルネオール、イソボルネオール、アネトール、メントフラン、グリチルリチン酸ナトリウム、プルラン（α－１，４－；α－１，６－グルカン）、香味剤、又は甘味料がある。好適な香味剤としては、ミント、ペパーミント、メントール、ユーカリ、ユーカリプトール、チョコレート、スペアミント、タンジェリン、オレンジ、グレープ、グレープフルーツ、マシュマロ、コーヒー、バナナクリーム、キャラメル、バブルガム、チェリー、レモン、ライム、ストロベリー、メープル、ラズベリー、及び／又はアップルがある。好適な甘味料としては、マグナスイート（１１０又は１３５）、スクラロース、ステビオールグリコシド、ステビア、グリセリン、アセスルファームカリウム、ＰＣＣＡ甘味増強剤、ＰＣＣＡバイターストップ、ジ－ｄ－フルクトフラノース１，２’：２，３’－ジ－無水物、アスパルテーム、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン及びヘスペリジンジヒドロカルコン４’－β－ｄグルコシド、ｄ－ソルビトール、サッカリンナトリウム、グルコン酸ナトリウム、及び／又はグルタミン酸ナトリウムがある。吸入用、頬側、又は舌下投薬形態としては、油ベースの賦形剤、例えば、固定油（例えば、アーモンド、落花生、ゴマ、オリーブ、アボカド、又はトウモロコシ由来）、又は水素化油もある。吸入用、頬側、又は舌下投薬形態はまた、ポリマーコーティングによる味マスキング；従来の造粒による味マスキング；イオン交換樹脂を用いた味マスキング；脂質で凝固するスプレーによる味マスキング；シクロデキストリンを用いた包接複合体の形成による味マスキング；フリーズドライ方法による味マスキング；多重エマルションの作製による味マスキング；及びゼラチン、ゼラチン化デンプン、リポソーム、レシチン又はレシチン様物質、界面活性剤、塩、又は高分子膜を用いて味マスキングしてもよい。

【0045】

いくつかの実施形態において、吸入用、頬側、又は舌下投薬形態は、化合物、例えば強心配糖体の粘膜透過性及び吸収を改善する１種又は複数種の透過促進剤を更に含む。好適な透過促進剤としては、界面活性剤、胆汁塩、脂肪酸、シクロデキストリン、及びキレート化剤がある。
本発明は、本明細書において開示される本発明の態様、実施形態及びサブ実施形態（sub-embodiments）の全ての組合せを含む。
以下の図は、本説明の一部を形成する。当業者であれば、本明細書におけるこれらの図面及び説明を考慮すれば過度の実験を行うことなく本発明を行うことができるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0046】

【図1】図１は、固体、液体、気体及び超臨界相、並びに三重点及び臨界点の温度及び圧力を示す二酸化炭素に関する相ダイアグラムを示す。固相及び液相は、固－液相ラインによって分離される。液相及び気相は液－気相ラインによって分離される。超臨界相及び液相は超臨界流体－液相ラインによって分離される。したがって、液体領域は、液－気相ライン、固－液相ライン、超臨界流体－液相ライン、三重点（温度及び圧力）及び臨界点（温度及び圧力）によって囲まれる。

【図2】図２は、超臨界領域、及び２つの亜臨界領域：亜臨界液体領域及び亜臨界気体領域を示す二酸化炭素に関する相ダイアグラムを示す。

【図3】図３は、実施例１８に従って決定された、エタノール抽出物（上）、亜臨界ＣＯ₂抽出物（中央）、及び先行技術の超臨界流体抽出物ＰＢＩ－０５２０４（下）の全イオン電流（ＴＩＣ）検出を用いたＧＣ－マススペクトロメトリー分析からのクロマトグラムを示す。データは、抽出物の揮発性及び半揮発性構成成分を同定するために使用することができる。

【図4】図４は、オレアンドリンがオレアノール酸、ウルソール酸、及びベツリン酸から分離された、ＰＢＩ－０５２０４（先行技術）のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。

【発明を実施するための形態】

【0047】

本発明は、オレアンドリン含有亜臨界抽出物、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物、及び前記亜臨界抽出物と前記有機溶媒抽出物とを含む組合せ組成物を提供する。本発明はまた、少なくとも１種の医薬賦形剤と前記抽出物又は組合せ組成物とを含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、強心配糖体応答性、特にオレアンドリン応答性の疾患、状態、又は障害を処置及び／又は阻止するための前記医薬組成物、前記抽出物、及び／又は前記組合せ組成物を使用する方法を提供する。本発明はまた、前記抽出物及び組成物を投与する方法を提供する。本発明はまた、前記抽出物及び組成物を調製する方法を提供する。
本発明者らは、二成分抽出物組成物が、有利なことに、任意の単一抽出物組成物とは異なる組成プロファイルを提供することを発見した。例えば、エタノール（又は水性エタノール）抽出物と亜臨界ＣＯ₂（改質剤を含むか又は含んでいない）抽出物とを組み合わせて含む組合せ組成物（二成分抽出物組成物）の組成プロファイルは、前記エタノール抽出物、前記亜臨界ＣＯ₂抽出物、熱水抽出物、冷水抽出物、又は超臨界ＣＯ₂抽出物を含む単一抽出物組成物の組成プロファイルとは異なり、優れている。重要な利点は、組合せ組成物が、オレアンドリン含有量及びバイオマスから抽出可能な他の構成成分の含有量と比較して、前記他の構成成分の含有は少ないが、所望の標的薬理学的活性物質である相当量のオレアンドリンを前記抽出物中に依然として含むことである。更に、組合せ組成物は、有利なことに、個々の抽出物のいずれかよりもより多くの非オレアンドリン構成成分を含み、これらの非オレアンドリン構成成分のうちの一部は、薬理学的活性を示す。

【0048】

本明細書において使用する場合、「植物材料」は、植物又は植物部分（例えば樹皮、木、葉、枝、茎、根、新芽、花、果実、種子、液果、又は他の植物部分）並びに滲出液として定義され、Guidance for Industry Botanical Drug Products Draft Guidance, August 2000, US Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration Center for Drug Evaluation and Researchの「植物性原材料」の定義内に入る材料を含む。培養細胞塊も、植物材料（バイオマス）として使用してもよい。植物材料は、バイオマスの範囲内と考えられる。好ましい実施形態において、植物材料は、葉、新芽、及び／又は茎を含む。

【0049】

本発明の実施形態としては、オレアンドリン含有バイオマス（植物材料）が、キョウチクトウ属種、セイヨウキョウチクトウ、ネリウム・オレアンダー・Ｌ（キョウチクトウ科）、ネリウムオドウルム、ネリウム・インディカム、ホワイトオレアンダー、ピンクオレアンダー、キバナキョウチクトウ属種、イエローオレアンダー、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ibrahim et al., “Stimulation of oleandrin production by combined Agrobacterium tumefaciens mediated transformation and fungal elicitation in Nerium oleander cell cultures” in Enz. Microbial Technol. (2007), 41(3), 331-336、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）、キョウチクトウ属種の細胞培養物（Ibrahim et al., “Enhancement of oleandrin production in suspension cultures of Nerium oleander by combined optimization of medium composition and substrate feeding” in J. Plant Biosys. (2009), 143(1), 97-103、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）、キバナキョウチクトウ属種の細胞培養物、又はこれらの組合せのものがある。セイヨウキョウチクトウは、ミクロ培養物からｉｎ ｖｉｔｒｏで得てもよく、それによってセイヨウキョウチクトウの栽培品種、スプレンデンズ・ギガンテウム、ルバンシュ若しくはアルサス、又は他の栽培品種の実生から、及び／又はシュート頂部からシュート培養を開始することができる（Vila et al., “Micropropagation of Oleander (Nerium oleander L.)” in HortScience (2010), 45(1), 98-102、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）。セイヨウキョウチクトウ植物材料は、例えば、市販の植物供給業者、例えばＡｌｄｒｉｄｇｅ Ｎｕｒｓｅｒｙ、アタスコサ、テキサス州から得てもよい。セイヨウキョウチクトウの好適な品種としては、アルバム（Ａｌｂｕｍ）（白色）、プチサーモン（Ｐｅｔｉｔ Ｓａｌｍｏｎ）（ピンク色）、トゥルーペール（Ｔｒｕｅ Ｐａｌｅ）、ピンクビューティー（Ｐｉｎｋ Ｂｅａｕｔｙ）、カリプソ（Ｃａｌｙｐｓｏ）（暗ピンク色）、又はレッドハーディー（Ｒｅｄ Ｈａｒｄｙ）がある。

【0050】

本明細書において使用する場合、「オレアンドリン」という用語は、特に指定がない限り、オレアンドリンの全ての既知の形態を意味すると解釈される。オレアンドリンは、ラセミ体の、光学的に純粋な、光学的にリッチな、又は立体異性の形態で存在していてもよい。

【0051】

本明細書において使用する場合、半揮発性有機化合物（ＳＶＯＣ）という用語は、１×１０^-5～３×１０^-7ａｔｍ＊ｍ³／ｍｏｌの範囲のヘンリーの法則定数（Ｈ）を有する有機化合物であり^*（^*Ｈの範囲は液体から空気への揮発度として定義される）、通常、１０^-14～１０^-4ａｔｍに対応する低蒸気圧を有する水の沸点を超える高い沸点を実証する。本明細書において使用する場合、揮発性有機化合物（ＶＯＣ）という用語は、１０１．３ｋＰａの標準大気圧で測定される２５０℃以下の初留点を有する任意の有機化合物である。

【0052】

有機溶媒抽出物及び亜臨界液体抽出物は、少なくともオレアンドリン、ＶＯＣ、及びＳＶＯＣを含み、前記抽出物は、１種又は複数種の非揮発性有機化合物を更に含んでいてもよく；したがって、前記抽出物で形成された個別の組合せ組成物はそれらの構成成分も同様に含む。
本発明は、ａ）少なくとも１種の改質剤を更に含んでいてもよい二酸化炭素を用いた亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）；ｂ）水を更に含んでいてもよい有機溶媒（ＯＳＥ）を用いた抽出；又はｃ）ＳｃＣＬＥとＯＳＥとの組合せによって、オレアンドリン含有バイオマスからオレアンドリン又はオレアンドリン含有抽出物を生成する方法を提供する。抽出は、同じバイオマスで行っても、バイオマスの異なるバッチで行ってもよい。

【0053】

図１は、固体、液体、気体及び超臨界流体相を示す二酸化炭素に関する相ダイアグラムを示す。ＳｂＣＬＥは、二酸化炭素に関する超臨界流体相領域（相ダイアグラム内）の外側の液相領域において行われる。液相領域は、固－液相ライン、液－気相ライン、液－超臨界相ライン、超臨界流体－液相ライン、三重点（固－液－気）、及び臨界点（液－気－超臨界）によって囲まれる。ＣＯ₂に関するおよその臨界点温度及び圧力はそれぞれ、ｔ_cp＝約３１～３１．１℃及びｐ_cp＝約７３．７～７３．８ｂａｒである。ＣＯ₂に関するおよその三重点温度及び圧力はそれぞれ、ｔ_tp＝約－５６．４～５６．５℃及びｐ_tp＝約５．１～５．２ｂａｒである。

【0054】

亜臨界抽出液体は、ＣＯ₂を主に含み；したがって、亜臨界状態の決定は、二酸化炭素に関する既知の相ダイアグラムに関するものである。したがって、亜臨界状態は、抽出容器中、以下の条件下：ａ）約－５６．４℃～約３１．１℃以下の範囲の温度；ｂ）５．１ｂａｒ以上の圧力；及び／又は、ｃ）二酸化炭素に関する抽出媒体が固体、気体、又は超臨界流体相ではなく液相であるような亜臨界温度及び／又は亜臨界圧力で抽出を行うことによって達成される。したがって、ＳｂＣＬＥは、抽出媒体（主に二酸化炭素を含み、改質剤を含んでいてもよい）が、気相、固相、又は超臨界流体相ではなく亜臨界液体相のままである圧力及び温度状態の下で行われる。
好ましい抽出条件は、亜臨界液体が臨界圧力以上、三重点温度を超える、臨界点温度を下回る、及び固－液相ライン未満のものである。相ダイアグラムに関連して、これらの条件によって囲まれる領域は、高抽出効率をもたらす高密度の亜臨界液体を提供する。
抽出時間は、抽出液体及びバイオマスが接触する期間である。ＳｂＣＬＥに関しては、各抽出サイクルの抽出時間は、典型的には、０．１～２４時間、０．５～１２時間、又は０．５～６時間の範囲である。有機溶媒抽出に関しては、各抽出サイクルに関する抽出時間は、典型的には、０．１～２４時間、０．５～１２時間、又は０．５～６時間の範囲である。

【0055】

いくつかの実施形態において、亜臨界液体は、二酸化炭素を含む。他の実施形態において、亜臨界液体は、二酸化炭素及び少なくとも１種の改質剤を含む。改質剤は、アルコール、有機溶媒、アルキルケトン、アルキルエステル、又はこれらの組合せであってもよい。特に好適な改質剤としては、エタノール、メタノールプロパノール、アセトン、酢酸エチル、メチルエチルケトン、グリコール（例えばプロピレングリコール）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、又はＮ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）がある。
亜臨界液体のバイオマスに対する質量比も抽出効率に影響を与える場合がある。いくつかの実施形態において亜臨界液体（改質剤を含むか又は含んでいない）のバイオマスに対する質量比は、溶媒と原材料の両方の質量に基づいて、約２０：１～約１００：１、約３０：１～約７５：１、約５０：１、４５：１～約６０：１、又は約４０：１～約４５：１の範囲である。

【0056】

ＳｂＣＬ抽出時間の大部分（約５０％以上）の間、抽出流体は、亜臨界液体形態であることになる（抽出環境において）。いくつかの実施形態において、抽出液体は、抽出時間のうちの、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％の間、亜臨界液体形態であることになる。いくつかの実施形態において、抽出液体は、抽出時間全体にわたって亜臨界液体形態である。

【0057】

装置の性能に起因して、バイオマスの二酸化炭素抽出は、超臨界相において短期間で行う場合があるが；抽出時間のうちの大部分（約５０％以上）に関しては、抽出は、亜臨界状態で行うことになる。
キョウチクトウ属バイオマスのＳｂＣＬＥを実施例３に従って行った。乾燥バイオマスは、アルコール（それぞれ、エタノール約１０～５質量％）を含む亜臨界液体ＣＯ₂（約９０～９５質量％）で抽出した。抽出時間が完了後、抽出環境バイオマスを、濾過することによって亜臨界液体から分離して、オレアンドリン含有亜臨界液体（他の抽出構成成分も含む）を得た。ＣＯ₂を排出して、粗製抽出物を得、それをエタノールで希釈し、次いで凍結し、次いで解凍し、次いで濾過し、次いで真空中で濃縮し、５０％ｖ／ｖ水性エタノールで再度希釈した。

【0058】

有機溶媒抽出は、実施例１５に従って行った。乾燥し、粉末化されたキョウチクトウ属バイオマスは、水性エタノール（１０％ｖ／ｖの水を含む）で３回（３回の抽出サイクル）抽出した。各抽出サイクルに関しては、抽出環境を、抽出時間が完了した後に濾過した。個別の３つの上清を合わせ、真空中でもとの体積の約２０％に濃縮して、濃縮物を形成し、これを無菌濾過し、その結果、粗製エタノール抽出物を形成し、次いでこれを５０％ｖ／ｖ／水性エタノールで希釈した。

【0059】

ＳｂＣＬ抽出物の組成（いくつかの既知の構成成分の含有量に基づく）を、本明細書において記載するように調製したセイヨウキョウチクトウの先行技術の超臨界流体（ＳＣＦ）抽出物（上記のＰＢＩ－０５２０４）、先行技術の熱水抽出物（ＡＮＶＩＲＺＥＬ（商標））、及び有機溶媒抽出物の組成と比較した。同じ量の植物材料に基づいて、ａ）観察されたオレアンドリンの収量（植物材料１ｋｇあたりのオレアンドリンのｍｇ）は、エタノール抽出物＞亜臨界抽出物＞超臨界抽出物であった；ｂ）観察されたＶＯＣ及びＳＶＯＣの収量（植物材料１ｋｇあたりのＶＯＣ＋ＳＶＯＣのｍｇ）は、超臨界抽出物＞エタノール抽出物＞亜臨界抽出物であった。個々の構成成分の含有量は、表示される値に対して±２５％、±２０％、±１５％、±１０％又は±５％変化する場合がある。オレアンドリン、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、及びこれらの誘導体の標準はまた、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（ｗｗｗ．ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍ；セントルイス、ミズーリ州、米国）から購入してもよい。
抽出物の一部の組成は、ＪＥＯＬＡ ｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（ＪＥＯＬＵＳＡ、ピーボディ、マサチューセッツ州、米国）のＤＡＲＴ ＴＯＦ－ＭＳ（リアルタイム飛行時間型マススペクトロメトリーにおける直接分析）によって決定される。

【0060】

いくつかの実施形態において、抽出物は、強心配糖体、グリコン、アグリコン、ステロイド、トリテルペン、多糖、単糖、アルカロイド、脂肪、タンパク質、又はこれらの組合せを含む。特定の化合物としては、オレアンドリンがあり、存在していてもよい他の化合物としては、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、カフェイン酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ、１４ベータ－ジヒドロキシ－カルダ－２０（２２）－エノリド、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、及びガラクトースから構成されるペクチン多糖、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、又は約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、若しくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリクマリン酸、イソネリクマリン酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブタン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７、２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルパ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、シス－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、トランス－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ、２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステラ－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルビューモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、フォリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－無水－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－シス－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アディネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペストロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、フォリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、クエリシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スティグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、及びウザリゲニンがある。抽出物に存在していてもよい追加の構成成分は、Ｇｕｐｔａら（IJPSR (2010), 1(3), 21-27、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）によって開示されている。

【0061】

有機溶媒抽出物及び亜臨界抽出物に存在する揮発性及び半揮発性有機化合物のいくつかの同一性は、実施例１８によるＧＳマススペクトロメトリーによって決定した。エタノール抽出物及び／又は亜臨界抽出物中に認められる揮発性及び半揮発性化合物は、２，３－ジヒドロベンゾフラン、スクアレン、２－（デカノイルオキシ）プロパン－１，３－ジイルジオクタノエート、アルファトコフェロール、スティグマステロール、ガンマ－シトステロール、デカン酸、１，２，３－プロパントリイルエステル、ウルソールアルデヒド、カテコール（Ｃａｔｅｔｃｈｏｌ）、５－ヒドロキシメチルフラール、（Ｅ）－４－（３－ヒドロキシプロパ－１－エン－１－イル）－２－メトキシフェノール、ｎ－ヘキサデセン酸、ビス（２－エチルヘキシル）フタレート、１，４－ベンゼンジカルボン酸、ビス（２－エチルヘキシル）エステル、及びフタル酸ジデシルとして暫定的に同定された。追加の未同定の揮発性及び半揮発性化合物が観察された。

【0062】

図３におけるＧＣクロマトグラムによって証明されるように、エタノール抽出物（上）、亜臨界ＣＯ₂抽出物（中央）、及びＰＢＩ－０５２０４の組成プロファイルは異なる。エタノール抽出物は、亜臨界抽出物よりもＶＯＣ及びＳＶＯＣが少なく、亜臨界抽出物は、超臨界流体抽出物であるＰＢＩ－０５２０４よりもＶＯＣ及びＳＶＯＣが少ない。したがって、エタノール抽出物及び亜臨界流体抽出物を含む組合せ組成物は、ＰＢＩ－０５２０４よりもＶＯＣ及びＳＶＯＣが少ない。

【0063】

有機溶媒抽出物、亜臨界液体抽出物、組合せ組成物、及びＰＢＩ－０５２０４の組成プロファイルはまた、実施例１０に従ってタンデムマススペクトロメトリー検出及び／又はＵＶ／ＶＩＳ検出を用いたＨＰＬＣによって決定される。ＨＰＬＣクロマトグラムは、組合せ組成物が、エタノール抽出物及びＳｂＣＬ抽出物の等量の部分を混合することによって予測されることになるような組成プロファイルを有し、ＰＢＩ－０５２０４のものとは異なる組成プロファイルを有することを示す。各抽出物中のオレアンドリンの含有量を定量化することによって、エタノール抽出物は、ＳｂＣＬ抽出物よりも、等質量ベースでオレアンドリンの相対的含有量がはるかに多いことが観察される。更に、セイヨウキョウチクトウ抽出物に存在することが既知の他の構成成分に関する内部標準の使用によって、これらの他の構成成分に対するオレアンドリンの含有量が３つの抽出物間で異なることが観察される。

【0064】

有機溶媒抽出物及びＳｂＣＬ抽出物の組成は、その中の個々の構成成分の相対的含有量に従って異なる。抽出物の植物化学的分析に基づいて、個々の抽出物の組成は、その中の構成成分のクラス（タイプ）の相対的含有量の点から以下のように定義してもよい。
・エタノール抽出によって作製された抽出物：全遊離アミノ酸＞全糖＞全セルロース＞全アルカロイド＞全ポリフェノール～全フラボノイド＞全デンプン＞全粗製タンパク質
・水性エタノール抽出によって作製された抽出物：全遊離アミノ酸＞全セルロース＞全アルカロイド＞全糖＞全ポリフェノール～全フラボノイド＞全デンプン＞全粗製タンパク質
・ＳｂＣＬ抽出によって作製された抽出物：全遊離アミノ酸＞全デンプン＞全アルカロイド＞全セルロース＞全フラボノイド＞全糖＞全ポリフェノール＞全粗製タンパク質
これらの組成は、以下のようにテルペノイド、強心配糖体、及び他の構成成分の相対的含有量に基づいて更に異なる。
・エタノール抽出によって作製された抽出物：カネロシン＞カネロジオン＞オレアノール酸＞ウルソール酸～オレアンドリン～ベツリン酸＞オレアンドリゲニン～キョウチクトウ属Ｆ、オドロシド（Ａ及びＨ）～アディネリン～オドロシド－Ｇ－アセテート＞ギトキシゲニン。
・ＳｂＣＬ抽出によって作製された抽出物：オレアノール酸＞ウルソール酸～オレアンドリン～ベツリン酸＞オレアンドリゲニン～キョウチクトウ属Ｆ＞オドロシド（Ａ及びＨ）～アディネリン～オドロシド－Ｇ－アセテート＞カネロシン。
組合せ組成物は、バイオマスの抽出中に得られた以下の化合物：ネリタロシド、ネリイン、フォリネリン、ギトキシゲニン、ジギトキシゲニン、ネリゴシド、ルチン、ウルソン酸、ネリジエノンＡ、アジネリゲニン、デアセチルオレアンドリン、オドロシドＧアセテート、及び／又はケルセチンうちの１つ又は複数を更に含んでいてもよい。

【0065】

本発明によるＳｂＣＬ抽出物、エタノール抽出物、又は組合せ組成物で処置された対象は、治療的応答を示すことになる。「治療的応答」は、対象が処置の結果として以下の臨床的利点：症状の重症度の減少、症状の出現の減少、一部の又は完全な寛解、及び／又は治癒のうちの少なくとも１つを享受することになることを意味する。治療的応答は、完全な又は一部の治療的応答であってもよい。

【0066】

栄養補助食品組成物中に含まれる場合がある食事成分及び食品物質は、米国Ｆ．Ｄ．Ａ．によって挙げられている（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｆｏｏｄ／ｎｅｗ－ｄｉｅｔａｒｙ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ－ｎｄｉ－ｎｏｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ－ｐｒｏｃｅｓｓ／ｎｅｗ－ｄｉｅｔａｒｙ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ－ｄｉｅｔａｒｙ－ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ－ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ－ｉｎｄｕｓｔｒｙ、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｓｃｒｉｐｔｓ／ｆｄｃｃ／？ｓｅｔ ＝ＦｏｏｄＳｕｂｓｔａｎｃｅｓ、及びｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｓｃｒｉｐｔｓ／ｆｄｃｃ／？ｃａｔ＝ｆｏｏｄｉｎｇｒｅｄｐｋｇ、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）。食事成分又は食品物質の例示的なクラスとしては、ビタミン、ミネラル、ハーブ、植物、アミノ酸、タンパク質、脂肪、ポリヌクレオチド、多糖、炭水化物、脂質、ＶＯＣ、ＳＶＯＣ、抗酸化剤、フェノール化合物、香味剤、エッセンス、芳香族化合物、水、甘味料、膨張剤、香味促進剤、着色剤、乳化剤、保存剤、抗固化剤、塩、緩衝剤、油、結晶粒、酵素、ホルモン、レシチン、メラニン、ポリマー、バイオポリマー、線維、デンプン、脂肪酸、任意の食品中に存在する任意の物質、これらの濃縮物、これらの代謝産物、又はこれらの抽出物がある。
本発明の組成物に添加してもよい不活性成分は米国Ｆ．Ｄ．Ａ．（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓ／ｄｒｕｇ－ａｐｐｒｏｖａｌｓ－ａｎｄ－ｄａｔａｂａｓｅｓ／ｉｎａｃｔｉｖｅ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ－ｄａｔａｂａｓｅ－ｄｏｗｎｌｏａｄ、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする）に挙げられている。

【0067】

投薬レジメンとしては、投薬スケジュールに従って投与される治療上適切な用量（又は有効用量）のオレアンドリン（抽出物中又は組成物）がある。したがって、治療上適切な用量は、治療的応答が観察され、過剰量の望ましくない又は有害な副作用なしに対象に投与することができるオレアンドリンの治療的用量である。治療上適切な用量は、対象に対して非致死性ではあるが、患者においていくらかの副作用をもたらす場合がある。それは、オレアンドリンが投与された対象に対する臨床的利点のレベルが、オレアンドリンの投与に起因する対象によって経験される有害な副作用のレベルを超える用量である。

【0068】

化粧料（薬用化粧料）組成物としては、１種又は複数種の化粧料用賦形剤、例えば、米国Ｆ．Ｄ．Ａ．（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ／ｃｏｓｍｅｔｉｃ－ｐｒｏｄｕｃｔｓ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ／ｃｏｓｍｅｔｉｃ－ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ）によって承認されたものがあり得る。
薬用化粧料は、１種若しくは複数種の活性成分及び／又は１種若しくは複数種の賦形剤を更に含んでいてもよく、これらとしては、例として限定するものではないが、アサイ油、アルファ－リポ酸、緑茶抽出物、レチノール、コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）、カフェイン、アルファ－ヒドロキシ酸（ＡＨＡ）、ヒアルロン酸、グリセリン、ソルビトール、モノ及びジグリセリド、白色鉱油（石油炭化水素油）、ステアリン酸グリセリル、プロピレングリコール、ビタミンＥ、クエン酸、没食子酸プロピル、他の既知の化合物、及びこれらの組合せがある。

【0069】

本発明の組成物及び投薬形態は、１種又は複数種の薬学的に許容される、栄養補助食品的な、及び／又は化粧品的に許容される賦形剤を更に含んでいてもよい。投薬形態は、酸性化剤、アルカリ化剤、緩衝剤、張度化改質剤、浸透圧剤、水溶性ポリマー、水膨潤性ポリマー、増粘剤、錯化剤、キレート化剤、浸透促進剤からなる群から出現ごとに独立して選択される１種又は複数種の賦形剤を含んでいてもよい。好適な賦形剤としては、非経口又は経口製剤（投薬形態）に使用するために承認された米国Ｆ．Ｄ．Ａ．の不活性成分、例えば、米国Ｆ．Ｄ．Ａ．の“Ｉｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ Ｄａｔａｂａｓｅ （以下のウェブサイト：ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＯｎＤｒｕｇｓ／ｕｃｍ１１３９７８．ｈｔｍ； Ｏｃｔ． ２０１８で入手可能）に挙げられているものがあり、その開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする。

【0070】

治療上適切な用量は、様々な確立された薬理学的、薬力学的、及び薬物動態学的原理に従って対象ごとに異なることになる。しかし、治療上適切な用量（例えば、オレアンドリンに対する）は、典型的には、１日あたり約１マイクログラム以上、１日あたり約５マイクログラム以上、１日あたり約１０マイクログラム以上、１日あたり約２０マイクログラム以上、１日あたり約２５マイクログラム以上、１日あたり約５０マイクログラム以上、１日あたり約７５マイクログラム以上、１日あたり約１００マイクログラム以上、１日あたり約２００マイクログラム以上、１日あたり約２５０マイクログラム以上、１日あたり約５００マイクログラム以上、又は１日あたり最大約７５０マイクログラムのオレアンドリンであることになるか、又は１用量あたり約１～約７５０マイクログラムのオレアンドリンの範囲であってもよいか、又は約２５マイクログラム、約１００マイクログラム、約２５０マイクログラム、約５００マイクログラム、又は約７５０マイクログラムオレアンドリン／日を超えなくてもよい。対象に標的治療結果を提供するために必要とされるオレアンドリンの実際の量は、薬剤学の基本原理に従って対象ごとに異なる場合がある。任意の患者に関する特定の用量レベルは、処置される適応、適応の重症度、患者の健康、年齢、性別、体重、食事、薬理学的応答、用いられる特定の投薬形態、及び他のそのような因子を含む、様々な因子に依存することになる点は理解されるであろう。

【0071】

いくつかの実施形態において、対象は、１日あたり１４０マイクログラム～３１５マイクログラムのオレアンドリンが投与される。いくつかの実施形態において、用量は、５マイクログラム～７５０マイクログラム、１２マイクログラム～３００マイクログラム、又は１２マイクログラム～１２０マイクログラムのオレアンドリンを含む。オレアンドリンの推奨される１日用量は、一般的に、１日２回約０．２５～約６０マイクログラム、１日２回約５～約６０マイクログラム、１日２回約５～３０マイクログラムである。用量は、約０．５～約１００マイクログラム／日、約１～約８０マイクログラム／日、約１．５～約６０マイクログラム／日、約１．８～約６０マイクログラム／日、約５～約６０マイクログラム／日であってもよい。最小有効用量は、約０．５マイクログラム／日、約１マイクログラム／日、約１．５マイクログラム／日、約１．８マイクログラム／日、約２マイクログラム／日、又は約５マイクログラム／日であってもよい。オレアンドリンを含む好適な用量は、約０．０５～０．５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．４ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．３ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５～０．５マイクログラム／ｋｇ／日、約０．０５～０．３５マイクログラム／ｋｇ／日、約０．０５～０．２２マイクログラム／ｋｇ／日、約０．０５～０．４マイクログラム／ｋｇ／日、又は約０．０５～０．３マイクログラム／ｋｇ／日であってもよい。いくつかの実施形態において、オレアンドリンの用量は、約１ｍｇ～約０．０５ｍｇ、約０．９ｍｇ～約０．０７ｍｇ、約０．７ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．５ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．４ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．３ｍｇ～約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇである。本発明は、本明細書において記載する用量の全ての組合せを含む。

【0072】

抽出物に存在するオレアンドリンの推奨される１日用量は、１日２回約０．１マイクログラム～約４．５マイクログラム／ｋｇ体重であってもよい。オレアンドリンの用量は、約０．１～約１マイクログラム／ｋｇ体重／日、約０．５～約１．０マイクログラム／ｋｇ体重／日、約０．７５～約１．５マイクログラム／ｋｇ体重／日、約１．５～約２．５２マイクログラム／ｋｇ体重／日、約２．５～約３．０マイクログラム／ｋｇ体重／日、約３．０～４．０マイクログラム／ｋｇ体重／日又は約３．５～４．５マイクログラムオレアンドリン／ｋｇ体重／日であってもよい。

【0073】

オレアンドリンは、約２０～約１００マイクログラム、約１２マイクログラム～約３００マイクログラム、又は約１２マイクログラム～約１２０マイクログラムのオレアンドリンの初期用量を対象に提供するのに十分な量で投薬形態に存在していてもよい。投薬形態は、約１マイクログラムのオレアンドリン～約１００マイクログラム、約０．０１マイクログラム～約１００ｍｇ又は約０．０１マイクログラム～約１００マイクログラムのオレアンドリン、オレアンドリン抽出物、又はオレアンドリンを含むセイヨウキョウチクトウ抽出物を含んでいてもよい。

【0074】

いくつかの実施形態において、処置される対象の血漿中のオレアンドリン濃度は、約１０マイクログラム／ｍＬ以下、約５マイクログラム／ｍＬ以下、約２．５マイクログラム／ｍＬ以下、約２マイクログラム／ｍＬ以下、又は約１マイクログラム／ｍＬ以下である。いくつかの実施形態において、処置される対象の血漿中のオレアンドリン濃度は、約０．０００１マイクログラム／ｍＬ以上、約０．０００５マイクログラム／ｍＬ以上、約０．００１マイクログラム／ｍＬ以上、約０．００１５マイクログラム／ｍＬ以上、約０．０１マイクログラム／ｍＬ以上、約０．０１５マイクログラム／ｍＬ以上、約０．１マイクログラム／ｍＬ以上、約０．１５マイクログラム／ｍＬ以上、約０．０５マイクログラム／ｍＬ以上、又は約０．０７５マイクログラム／ｍＬ以上である。いくつかの実施形態において、処置される対象の血漿中のオレアンドリン濃度は、約１０マイクログラム／ｍＬ～約０．０００１マイクログラム／ｍＬ、約５マイクログラム／ｍＬ～約０．０００５マイクログラム／ｍＬ、約１マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬ、約０．５マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬ、約０．１マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬ、約０．０５マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬ、約０．０１マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬ、約０．００５マイクログラム／ｍＬ～約０．００１マイクログラム／ｍＬである。本発明は、本明細書において記載する血漿濃度範囲の全ての組合せ及び選択を含む。

【0075】

ヒト臨床データに基づいて、投与されたオレアンドリンの用量の５０％～７５％が経口で生物学的に利用可能であることになり、したがって、１投薬形態あたり、約１０～約２０マイクログラム、約２０～約４０マイクログラム、約３０～約５０マイクログラム、約４０～約６０マイクログラム、約５０～約７５マイクログラム、約７５～約１００マイクログラムのオレアンドリンが提供されることが予測される。成人における５リットルの平均血液体積を考慮すると、予測されるオレアンドリン血漿濃度は、約０．０５～約２ｎｇ／ｍｌ、約０．００５～約１０ｎｇ／ｍＬ、約０．００５～約８ｎｇ／ｍＬ、約０．０１～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０２～約７ｎｇ／ｍＬ、約０．０３～約６ｎｇ／ｍＬ、約０．０４～約５ｎｇ／ｍＬ、又は約０．０５～約２．５ｎｇ／ｍＬの範囲であることになる。

【0076】

治療上適切な用量は、典型的には、ウイルス感染の処置において使用される任意の投薬レジメンに従って投与してもよい。治療上適切な用量は、１日１回、２回、３回又はそれ以上投与してもよい。隔日、３日ごと、４日ごと、５日ごと、週に２回、毎週、隔週、３週間ごと、４週間ごと、毎月、２カ月に１度、月に２回、３カ月ごと、４カ月ごと、半年ごと、毎年、又は好適な投薬スケジュールを達成するための上記のいずれかの組合せに従って投与してもよい。例えば、治療上適切な用量は、１週又は複数週の間１日１回又は複数回（最も高い用量に関しては１日最大１０回）投与してもよい。１日の総用量はまた、数時間にわたって、１日の一部を通して、又は１２～２４時間の期間にわたって注入又はポンプによって投与してもよい。

【0077】

本発明はまた、オレアンドリン（本発明のオレアンドリン含有組成物として）の複数の治療上有効な用量を、それを必要とする対象に繰り返し投与することによって処置する方法を提供する。１日あたり１回又は複数回の用量は、１週あたり１日又は複数日間投与してもよく、１月あたり１週又は複数週の間投与してもよく、１年あたり１カ月又は複数カ月間投与してもよい。

【0078】

いくつかの実施形態において、オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）の１日あたりの１回又は複数回の用量は、所望の臨床的エンドポイントまで複数日間投与する。いくつかの実施形態において、オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）の１日あたりの１回又は複数回の用量は、所望の臨床的エンドポイントまで複数日及び複数週の間投与する。１回又は複数回の用量を１日に投与してもよい。１日あたり１回、２回、３回、４回、５回、６回、又はそれを超える用量を投与してもよい。オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）は、慢性的に、すなわち繰り返しベースで、例えば、毎日、隔日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、６日ごと、毎週、隔週、２週ごと、３週ごと、毎月、２カ月に１度、月に２回、各月、２カ月ごと、四半期ごと、四半期おき、三半期ごと、季節ごと、半年ごと及び／又は毎年投与してもよい。処置期間は、１週又は複数週、１カ月又は複数カ月、１四半期又は複数四半期、及び／又は１年又は複数年であってもよい。オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）の有効用量は、１日１回又は複数回投与される。オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）は、１週あたり２日間以上１日あたり１回又は複数回投与してもよく、１カ月あたり１週又は複数週間１日あたり１回又は複数回投与してもよく、１年あたり１カ月又は複数カ月間投与してもよい。

【0079】

一般的に、対象は、前記対象がオレアンドリン治療法を必要としているかどうかを決定するために評価される。その後、オレアンドリン含有抽出物の投与が指示される。抽出物の初期用量は、ある期間にわたって（処置期間）処方された投薬レジメンに従って対象に投与される。対象の臨床応答及び治療的応答のレベルは定期的に決定される。治療的応答レベルが１回の用量では低すぎた場合、次いで用量を、対象における所望のレベルの治療的応答が達成されるまで、所定の用量漸増スケジュールに従って漸増させる。オレアンドリンを用いた対象の処置は、必要に応じて継続される。用量又は投薬レジメンは、患者が、所望の臨床的エンドポイント、例えば、状態の停止、症状の軽減、及び／又は状態の進行の減速に到達するまで必要に応じて調整してもよい。
臨床医が、オレアンドリン含有抽出物及び１種又は複数種の他の治療剤の組合せを用いて対象を処置することを意図する場合、その後、本発明の方法は、治療上適切な用量のオレアンドリン及び治療上適切な用量の前記１種又は複数種の他の治療剤を、それを必要とする対象に投与することであって、オレアンドリンを第１の投薬レジメンに従って投与し、１種又は複数種の他の治療剤を第２の投薬レジメンに従って投与することを含む。いくつかの実施形態において、第１及び第２の投薬レジメンは同じである。いくつかの実施形態において、第１及び第２の投薬レジメンは異なる。

【0080】

オレアンドリンは、一次療法、補助療法、又は併用療法として投与してもよい。本発明の方法は、オレアンドリンと少なくとも１種の他の治療剤とを個別投与又は同時投与することを含み、これは、オレアンドリンは、前記他の治療剤を投与する前、投与する間又は投与した後、投与してもよいことを意味する。

【0081】

１種又は複数種の他の治療剤は、治療上有効であるとして臨床医に認識された用量で及び投薬レジメンに従って、又は治療上の有効性を下回ると臨床医に認識された用量で投与してもよい。オレアンドリン及び１種又は複数種の他の治療薬の組合せの投与によって得られる臨床的利点及び／又は治療的効果は、相加的又は相乗的であってもよく、利点又は効果のそのようなレベルは、組合せの投与に対して個々の構成成分の投与を比較することによって決定される。１種又は複数種の他の治療剤は、食品医薬品局、世界保健機関、欧州医薬品庁（Ｅ．Ｍ．Ｅ．Ａ．）、治療用品管理局（ＴＧＡ、オーストラリア）、パンアメリカン保健機関（ＰＡＨＯ）、医薬品及び医療機器安全機関（Ｍｅｄｓａｆｅ、ニュージーランド）又は世界中の様々な保険省に推奨されているか又は記載されている用量で、投薬レジメンに従って投与してもよい。

【0082】

ＳｂＣＬ抽出物、エタノール抽出物、及び組合せ組成物の抗ウイルス活性は、実施例７に従って確立され、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、国際公開第２０１８０５３１２３号、国際公開第２０１９０５５１１９号、米国特許第１０５９６１８６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願に示されており、これらの全ての開示全体は、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとし、本発明の組成物の抗ウイルス活性を実証するために続く。処置可能なウイルス感染としては、アレナウイルス科、アルテリウイルス科、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、フラビウイルス科（フラビウイルス属）、オルソミクソウイルス科（インフルエンザウイルス属）、パラミクソウイルス科、ラブドウイルス科、レトロウイルス科（デルタレトロウイルス属）、コロナウイルス科、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶ（プラスセンス短鎖ストランドエンベロープＲＮＡウイルス）、（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶ（マイナスセンス短鎖ストランドエンベロープＲＮＡウイルス）、又はトガウイルス科のウイルス、並びにこれらの既知の属、種、及び／又は株のいずれかからのものがある。いくつかの実施形態において、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶは、ヒトに対して病原性のコロナウイルスである。処置することができる特定のウイルスとしては、少なくとも、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アルファウイルス、フラビウイルス、黄熱、デング熱、日本脳炎、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ベネズエラウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＶＥＥ）ウイルス、チクングニアウイルス、西部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＷＥＥ）ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎（脳炎）（ＥＥＥ）ウイルス、ダニ介在性脳炎、キャサヌル森林疾患、アルハムラ疾患、オムスク出血熱、ヘンドラウイルス、ニパウイルス、デルタレトロウイルス属、ＨＴＬＶ－１ウイルス、コロナウイルス、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、ＣｏＶ ＨＫＵ２０、オニョングンウイルス（O’nyong’nvirus）（ＯＮＮＶ）、ポゴスタ（Pogosta）疾患ウイルス、シンドビスウイルス、ロスリバー熱ウイルス（ＲＲＶ）、セムリキ森林ウイルス、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルス、ホワイトウォーターアロヨウイルス、ハンタウイルス、クリミアゴンゴ出血熱オルソナイロウイルス、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ＮＤＶ（ニューカッスル疾患ウイルス）、インフルエンザウイルス（Ａ～Ｃ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１ウイルス、Ｈ２Ｎ２ウイルス、Ｈ３Ｎ２ウイルス、Ｈ１Ｎ２ウイルス、スペイン風邪ウイルス、アジア風邪ウイルス、香港風邪ウイルス、ロシア風邪ウイルス、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、及びサイトラブドウイルスがある。

【0083】

ＳｂＣＬ抽出物、エタノール抽出物、及び組合せ組成物の神経保護活性は、実施例８に従って確立され、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、国際公開第２０１１０８５３０７号、米国特許第８４８１０８６号、米国特許第９２２０７７８号、米国特許第９３５８２９３号、米国特許第９８７７９７９号、米国特許第１０３８３８８６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願に示されており、これらの全ての開示全体は、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとし、本発明の組成物の神経保護活性を実証するために続く。
ＳｂＣＬ抽出物、エタノール抽出物、及び組合せ組成物の抗がん（抗過剰細胞増殖）活性は、実施例１１に従って確立されており、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、国際公開第２００７０１６１７６号、国際公開第２００９０６４６５７号、米国特許第７４０２３２５号、米国特許第８１８７６４４号、米国特許第８３９４４３４号、米国特許第８３６７３６３号、米国特許第９４９４５８９号、米国特許第９８４６１５６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願に示されており、これらの全ての開示全体は、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとし、本発明の組成物の抗がん活性を実証するために続く。

【0084】

オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）に治療的に応答する前記状態、疾患又は障害は、がん、腫瘍、癌腫、肉腫、膠芽腫、腺癌、リンパ腫、黒色腫、脳腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫（低悪性度星状細胞腫（グレードＩ毛様細胞性星状細胞腫及びグレードＩＩびまん性星状細胞腫）、退形成性星状細胞腫（グレードＩＩＩ）、膠芽腫（グレードＩＶ、ＧＢＭ、多形性膠芽腫としても知られる）を含む）、上衣腫、希突起膠腫、過剰細胞増殖、悪性新生物性疾患、非がん性炎症性皮膚疾患、光線性角化症、乾癬、湿疹、神経学的疾患、神経学的障害、神経変性性疾患、神経変性性障害、変化したＮａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性と関連する病因を有する神経学的疾患又は障害、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、ハンチントン疾患、脳卒中、認知症、筋萎縮性側索硬化症、ウシ海綿状脳症、多発性硬化症、糖尿病性神経障害、自閉症及び若年性神経セロイドリポフスチン症、タウ異常症、ダウン症候群、ピック疾患、大脳皮質基底核変性症、プリオン疾患のいくつかの異型、進行性核上性麻痺、前頭側頭型認知症、痔疾、潰瘍、ハンセン病、蛇咬傷、いぼ、又はウイルス感染からなる群から選択してもよい。

【0085】

本発明の組成物に存在する化合物は、その未修飾形態、塩形態、誘導体形態、又はこれらの組合せとして存在していてもよい。本明細書において使用する場合、「誘導体」という用語は、ａ）第１の化学物質と構造的に関連し、それから理論上誘導可能な化学物質；ｂ）類似している第１の化合物から形成された化合物、又は第１の化合物の１つの原子が別の原子又は原子団で置き換えられている場合、別の第１の化合物から得られることを想像することができる化合物；ｃ）親化合物から誘導されたか又は得られ、親化合物の必須元素を含む化合物；又はｄ）１つ又は複数のステップで類似している構造の第１の化合物から生成することができる化学化合物を意味すると考えられる。例えば、誘導体としては、その重水素化形態、酸化形態、脱水、不飽和、ポリマーコンジュゲート若しくはグリコシル化形態があり得るか、又はそのエステル、アミド、ラクトン、相同体、エーテル、チオエーテル、シアノ、アミノ、アルキルアミノ、スルフヒドリル、複素環式、複素環式環縮合、重合化、ペグ化、ベンジリデニル、トリアゾリル、ピペラジニル又は重水素化形態があり得る。

【0086】

本明細書において使用する場合、個々に命名された化合物は、その天然（未改変、遊離酸、又は遊離塩基）形態、その塩形態、誘導体形態、プロドラッグ形態として、又はこれらの組合せで出現ごとに独立して選択してもよい。トリテルペンの重水素化形態を含む組成物及びそれを用いた方法も本発明の範囲内である。

【0087】

オレアンドリン含有抽出物（組成物）は、任意の好適な薬学的に許容される投薬形態で製剤化してもよい。好適なタイプの投薬形態としては、エアロゾル剤、バー、ビーズ、カプセル剤、多孔性シート、チュアブル剤、クロス、濃縮剤、クリーム剤、結晶、ディスク、膣洗浄剤、ドレッシング剤、エリキシル剤、エマルション剤、浣腸剤、線維、フィルム剤、フォーム剤、ゲル剤、小球剤、顆粒剤、ガム、埋込体、吸入剤、注射可能薬物、注射剤、挿入剤、子宮内避妊器具、ゼリー剤、キット剤、リニメント剤、リップスティック、リポソーム剤、液剤、ローション剤、トローチ剤、口内洗浄液、油剤、軟膏剤、ペースト剤、トローチ剤、パッチ剤、ペレット剤、絆創膏、湿布、粉末剤、凍結乾燥粉末剤、リング、リンス、軟膏ろう剤、シャンプー、石鹸、溶液剤、スポンジ、スプレー、スティック、ストリップ、坐剤、綿棒、懸濁剤、シロップ剤、錠剤、タンポン、テープ、チンキ剤、トローチ剤、ウエハース、又は薬学の分野の当業者に既知の他のそのような投薬形態がある。
オレアンドリン含有抽出物（組成物）は、経口投薬形態中に含まれる場合がある。投薬形態のいくつかの実施形態は、腸溶性コーティングされておらず、０．５～１時間以下の期間内に抽出物のそのチャージを放出する。投薬形態のいくつかの実施形態は、腸溶性コーティングされており、抽出物のそのチャージを、胃の下流、例えば、空腸、回腸、小腸、及び／又は大腸（結腸）に放出する。腸溶性コーティングされた投薬形態は、経口投与後１～１０時間後以内に全身循環に抽出物を放出することになる。
オレアンドリン含有抽出物（組成物）は、急速放出、即時放出、制御放出、持続放出、長期放出、徐放、バースト放出、連続放出、遅延放出、若しくはパルス放出の投薬形態、又はこれらのタイプの放出のうちの２つ以上を示す投薬形態中に含まれる場合がある。投薬形態からのオレアンドリンの放出プロファイルは、０次、疑似０次、１次、疑似１次又はシグモイド放出プロファイルであってもよい。投与された対象におけるオレアンドリンに関する血漿濃度プロファイルは、１つ又は複数の最大値を示す場合がある。

【0088】

好適な投薬形態は、２０１２年５月２９日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎの米国特許第８１８７６４４号、２００８年７月２２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎの米国特許第７４０２３２５号、２０１３年３月１２日に発行されたＡｄｄｉｎｇｔｏｎらの米国特許第８３９４４３４号に従って行ってもよく、これらの開示全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする。好適な投薬形態はまた、実施例４～６、及び９に記載されているように行ってもよい。

【0089】

オレアンドリン含有抽出物（又はそれを含む任意の組成物）は、局所的に、全身的に、又はその両方で投与してもよい。好適な投与様式としては、非経口、頬側、結膜、角膜、皮膚、歯、子宮頚管内、副鼻腔内、気管内、経腸、表皮、硬膜外、羊膜外、体外、浸潤、間質、腹腔内、羊膜内、動脈内、気管支内、嚢内、心臓内、海綿内、腔内、脳内、角膜内、筋肉内、皮内、椎間板内、十二指腸内、硬膜内、表皮内、食道内、胃内、回腸内、管腔内、リンパ内、髄膜内、髄内、眼球内、卵巣内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺内、副鼻腔内、滑液包内、精巣内、クモ膜下腔内、胸腔内、管内、腫瘍内、子宮内、血管内、静脈内、脳室内、膀胱内、硝子体内、灌注、喉頭、経鼻、経鼻胃、眼球、眼、経口、耳（耳介）、又は口腔咽頭、非経口、経皮、関節周囲、硬膜上、神経周囲、歯周囲、口腔、経肺、直腸、眼球後方、クモ膜下、結膜下、皮下、皮膚下、舌下、粘膜下、局所、経皮、経粘膜、経胎盤、経気管、経鼓室、尿管、尿道、膣内、又は他の既知の投与様式がある。

【0090】

本明細書における化合物は、本発明の組成物又は製剤中に１つ又は複数の機能を有する場合がある点に留意するべきである。例えば、化合物は、界面活性剤と水混和性溶媒の両方として又は界面活性剤と水非混和性溶媒の両方としての役割を果たす場合がある。
液体組成物は、１種又は複数種の薬学的に許容される液体担体を含んでいてもよい。液体担体は、水性、非水性、極性、非極性、及び／又は有機の担体であってもよい。液体担体としては、例として限定するものではないが、水混和性溶媒、水非混和性溶媒、水、緩衝剤及びこれらの混合物がある。

【0091】

本明細書において使用する場合、「水溶性溶媒」又は「水混和性溶媒」という用語は、区別せずに使用され、水と二相性混合物を形成しないか、又は液相が分離することなく少なくとも５パーセントの溶媒を含む水性溶媒混合物を提供するのに十分に水中に可溶性な有機液体を指す。溶媒は、ヒト又は動物への投与に好適である。例示的な水溶性溶媒としては、例として限定するものではないが、ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール））、ＰＥＧ４００（約４００のおよその分子量を有するポリ（エチレングリコール））、エタノール、アセトン、アルカノール、アルコール、エーテル、プロピレングリコール、グリセリン、トリアセチン、ポリ（プロピレングリコール）、ＰＶＰ（ポリ（ビニルピロリドン））、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、ピリジン、プロパノール、Ｎ－メチルアセトアミド、ブタノール、ソルホール（ｓｏｌｕｐｈｏｒ）（２－ピロリドン）、ファーマソルブ（ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）（Ｎ－メチル－２－ピロリドン）がある。

【0092】

本明細書において使用する場合、「水不溶性溶媒」又は「水非混和性溶媒」という用語は、区別せずに使用され、水と二相性混合物を形成するか、又は水中の溶媒の濃度が５パーセントを超えた場合、相分離を提供する有機液体を指す。溶媒は、ヒト又は動物への投与に好適である。例示的な水不溶性溶媒としては、例として限定するものではないが、中鎖／長鎖トリグリセリド、油、ヒマシ油、トウモロコシ油、ビタミンＥ、ビタミンＥ誘導体、オレイン酸、脂肪酸、オリーブ油、ソフチザン（ｓｏｆｔｉｓａｎ）６４５（ジグリセリルカプリレート／カプレート／ステアレート／ヒドロキシステアレートアジペート）、ミグリオール、カプテックス（Ｃａｐｔｅｘ）３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレートトリグリセリド；カプテックス３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレートトリグリセリド；カプテックス３５５ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド）がある。

【0093】

好適な溶媒は、“International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH) guidance for industry Q3C Impurities: Residual Solvents” (1997)に挙げられており、医薬品において安全と考えられる残留溶媒の量に関して推奨している。例示的な溶媒は、クラス２又はクラス３溶媒として挙げられている。クラス３溶媒としては、例えば、酢酸、アセトン、アニソール、１－ブタノール、２－ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、クメン、エタノール、エチルエーテル、酢酸エチル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチル－１－ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２－メチル－１－プロパノール、ペンタン、１－ペンタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、又は酢酸プロピルがある。

【0094】

本発明において水非混和性溶媒として使用することができる他の材料としては、カプテックス１００：プロピレングリコールジカプレート；カプテックス２００：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；カプテックス２００ Ｐ：プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート；プロピレングリコールジカプリロカプレート；カプテックス３００：グリセリルトリカプリレート／カプレート；カプテックス３００ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；カプテックス３５０：グリセリルトリカプリレート／カプレート／ラウレート；カプテックス３５５：グリセリルトリカプリレート／カプレート；カプテックス３５５ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルトリカプリレート／カプレート中鎖トリグリセリド；カプテックス５００：トリアセチン；カプテックス５００ Ｐ：トリアセチン（医薬グレード）；カプテックス８００：プロピレングリコールジ（２－エチルテキサノエート）；カプテックス８１０ Ｄ：グリセリルトリカプリレート／カプレート／リノレート；カプテックス１０００：グリセリルトリカプレート；カプテックスＣＡ：中鎖トリグリセリド；カプテックスＭＣＴ－１７０：中鎖トリグリセリド；カプムル（Ｃａｐｍｕｌ）ＧＭＯ：グリセリルモノオレエート；カプムルＧＭＯ－５０ ＥＰ／ＮＦ：グリセリルモノオレエート；カプムルＭＣＭ：中鎖モノ－＆ジグリセリド；カプムルＭＣＭ Ｃ８：グリセリルモノカプリレート；カプムルＭＣＭ Ｃ１０：グリセリルモノカプレート；カプムルＰＧ－８：プロピレングリコールモノカプリレート；カプムルＰＧ－１２：プロピレングリコールモノラウレート；カプロール（Ｃａｐｒｏｌ）１０Ｇ１０Ｏ：デカグリセロールデカオレエート；カプロール３ＧＯ：トリグリセロールモノオレエート；カプロールＥＴ：混合脂肪酸のポリグリセロールエステル；カプロールＭＰＧＯ：ヘキサグリセロールジオレエート；カプロールＰＧＥ ８６０：デカグリセロールモノ－、ジオレエートがある。

【0095】

本明細書において使用する場合、「界面活性剤」は、極性又は荷電した親水性部分並びに非極性疎水性（親油性）部分を含む化合物を指し；すなわち、界面活性剤は両親媒性である。界面活性剤という用語は、化合物のうちの１種類又は混合物を指していてもよい。界面活性剤は、可溶化剤、乳化剤又は分散剤であってもよい。界面活性剤は、親水性又は疎水性であってもよい。

【0096】

親水性界面活性剤は、医薬組成物に使用するのに好適な任意の親水性界面活性剤であってもよい。そのような界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、双性イオン性又は非イオン性であってもよいが、非イオン性親水性界面活性剤がここでは好ましい。上記で検討されたように、これらの非イオン性親水性界面活性剤は、約１０を超えるＨＬＢ値を一般的に有することになる。親水性界面活性剤の混合物も本発明の範囲内である。

【0097】

同様に、疎水性界面活性剤は、医薬組成物に使用するのに好適な任意の疎水性界面活性剤であってもよい。一般的に、好適な疎水性界面活性剤は、約１０未満のＨＬＢ値を有することになる。疎水性界面活性剤の混合物も本発明の範囲内である。

【0098】

追加の好適な可溶化剤の例としては、アルコール及びポリオール、例えば、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブタンジオール、及びこれらの異性体、グリセロール、ペンタエリスリトール、ソルビトール、マンニトール、トランスクトール（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、ジメチルイソソルビド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及び他のセルロース誘導体、シクロデキストリン及びシクロデキストリン誘導体；約２００～約６０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールのエーテル、例えば、テトラヒドロフルフリルアルコールＰＥＧエーテル（グリコフロール、商標名テトラグリセロール（Ｔｅｔｒａｇｌｙｃｏｌ）でＢＡＳＦから市販されている）又はメトキシＰＥＧ（Ｕｎｉｏｎ Ｃａｒｂｉｄｅ）；アミド、例えば、２－ピロリドン、２－ピペリドン、カプロラクタム、Ｎ－アルキルピロリドン、Ｎ－ヒドロキシアルキルピロリドン、Ｎ－アルキルピペリドン、Ｎ－アルキルカプロラクタム、ジメチルアセトアミド、及びポリビニルピロリドン；エステル、例えば、プロピオン酸エチル、クエン酸トリブチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリエチル、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、酪酸エチル、トリアセチン、モノ酢酸プロピレングリコール、ジ酢酸プロピレングリコール、カプロラクトン及びその異性体、バレロラクトン及びその異性体、ブチロラクトン及びその異性体；及び当技術分野において既知の他の可溶化剤、例えば、ジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド（アルラソルブ（Ａｒｌａｓｏｌｖｅ）ＤＭＩ（ＩＣＩ））、Ｎ－メチルピロリドン（ファーマソルブ（Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ）（ＩＳＰ））、モノオクタノイン、ジエチレングリコールモノエチル（ｎｏｎｏｅｔｈｙｌ）エーテル（商標名トランスクトールでＧａｔｔｅｆｏｓｓｅから入手可能）、及び水がある。可溶化剤の混合物も本発明の範囲内である。
示された場合を除き、本明細書において言及される化合物は、標準的な市販の供給源から容易に入手可能である。
必須ではないが、組成物又は製剤は、１種又は複数種のキレート化剤、１種又は複数種の保存剤、１種又は複数種の抗酸化剤、１種又は複数種の吸着剤、１種又は複数種の酸性化剤、１種又は複数種のアルカリ化剤、１種又は複数種の消泡剤、１種又は複数種の緩衝剤、１種又は複数種の着色剤、１種又は複数種の電解質、１種又は複数種の塩、１種又は複数種の安定化剤、１種又は複数種の張度改質剤、１種又は複数種の希釈剤、又はこれらの組合せを更に含んでいてもよい。

【0099】

本発明の組成物は、油、例えば、固定油、落花生油、ゴマ油、綿実油、トウモロコシ油及びオリーブ油；脂肪酸、例えば、オレイン酸、ステアリン酸及びイソステアリン酸；及び脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリド、中鎖トリグリセリド、及びアセチル化脂肪酸グリセリドを含んでいてもよい。組成物は、アルコール、例えば、エタノール、イソプロパノール、ヘキサデシルアルコール、グリセロール及びプロピレングリコール；グリセロールケタール、例えば、２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－メタノール；エーテル、例えば、ポリ（エチレングリコール）４５０；石油炭化水素、例えば、鉱油及びペトロラタム；水；薬学的に好適な界面活性剤、懸濁化剤又は乳化剤；又はこれらの混合物も含んでいてもよい。

【0100】

医薬製剤の当技術分野において使用される化合物は、様々な機能又は目的に一般的に役立つことを理解するべきである。したがって、本明細書において命名された化合物が一度だけ言及されている場合、又は本明細書で複数の用語を定義するために使用されている場合、その目的又は機能は、命名された目的又は機能のみに限定されるものと解釈するべきではない。
製剤の構成成分の１種又は複数種は、その遊離塩基、遊離酸、又は薬学的に若しくは分析的に許容される塩の形態として存在していてもよい。本明細書において使用する場合、「薬学的に又は分析的に許容される塩」は、必要に応じて酸と反応させてイオン結合ペアを形成することによって改変されている化合物を指す。許容される塩の例としては、例えば、非毒性無機又は有機酸から形成された従来の非毒性塩がある。好適な塩のリストは、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17^th. ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418で認められ、その関連する開示はこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする。

【0101】

「薬学的に許容される」という句は、健全な医学的判断の範囲内で、ヒト及び動物の組織と接触させるために使用するのに好適であり、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、又はその他の問題若しくは合併症がなく、妥当な利点／リスク比に見合った、化合物、材料、組成物、及び／又は投薬形態を指すために本明細書において用いられる。
投薬形態は、医薬業界で既知の任意の従来の手段によって作製することができる。液体投薬形態は、容器中に少なくとも１種の液体担体及びオレアンドリン（オレアンドリン含有組成物、ＳｂＣＬ抽出物）を提供することによって調製することができる。１種又は複数種の他の賦形剤が、液体投薬形態中に含まれる場合がある。固体投薬形態は、少なくとも１種の固体担体及びオレアンドリンを提供することによって調製することができる。１種又は複数種の他の賦形剤は、固体投薬形態中に含まれる場合がある。

【0102】

投薬形態は、従来の包装装置及び材料を使用して包装してもよい。これらは、パック、瓶、バイアル、バッグ、シリンジ、薬袋、小包、ブリスターパック、箱、アンプル、又は他のそのような容器中に含むことができる。
本発明の組成物は、任意の投薬形態中に含まれる場合がある。特定の投薬形態としては、固形又は液体の投薬形態がある。例示的な好適な投薬形態としては、錠剤、カプセル剤、丸剤、カプレット剤、トローチ剤、分包剤、及び薬学の技術分野の当業者に既知の他のそのような投薬形態がある。
上記の説明及び以下の例を考慮して、当業者であれば、過度の実験を行うことなく、請求された本発明を行うことが可能であろう。上記は、本発明の実施形態の調製に関するある特定の手順を詳述する以下の例を参照しながら更に理解されるであろう。これらの例に対して行われる全ての参照は、例示を目的とするものである。以下の例は、網羅的と考えるべきではなく、本発明によって検討される多くの実施形態のうちのほんのいくつかの例示に過ぎない。

【実施例】

【0103】

（実施例１）
粉末化されたオレアンダーの葉の超臨界流体抽出
（比較例）
方法Ａ．二酸化炭素を用いた方法。
オレアンダーの葉の材料を収穫し、洗浄し、乾燥し、次いでオレアンダーの葉の材料を粉砕脱水装置、例えば、米国特許第５，２３６，１３２号、同第５，５９８，９７９号、同第６，５１７，０１５号、及び同第６，７１５，７０５号に記載されているものに通過させることによって、粉末化されたオレアンダーの葉を調製した。使用した出発材料の質量は３．９４ｋｇであった。

【0104】

出発材料を、押出デバイス中、３００ｂａｒ（３０ＭＰａ、４３５１ｐｓｉ）の圧力及び５０℃（１２２°Ｆ）の温度で純粋ＣＯ₂と合わせた。合計１９７ｋｇのＣＯ₂を使用して、溶媒の原材料に対する比を５０：１とした。次いで、ＣＯ₂と原材料との混合物を分離デバイスに通過させ、混合物の圧力及び温度を変化させ、二酸化炭素から抽出物を分離した。
抽出物（６５ｇ）を、よい香りの茶色がかった粘着性の粘性材料として得た。色は、クロロフィル及び他の残留発色団化合物によって生じた可能性がある。正確な収量決定に関しては、管及びセパレーターをアセトンで洗い流し、アセトンを蒸発させて、更に９ｇの抽出物を得た。総抽出物量は７４ｇであった。出発材料の質量に基づいて、抽出物の収率は１．８８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量は、高圧液体クロマトグラフィー及びマススペクトロメトリーを使用して計算すると５６０．１ｍｇであるか、又は収率は０．７６％であった。

【0105】

方法Ｂ．二酸化炭素及びエタノールの混合物を用いた方法
粉末化されたオレアンダーの葉を、オレアンダーの葉の材料を収穫し、洗浄し、乾燥し、次いでオレアンダーの葉の材料を粉砕脱水装置、例えば、米国特許第５，２３６，１３２号、同第５，５９８，９７９号、同第６，５１７，０１５号、及び同第６，７１５，７０５号に記載されているものに通過させることによって調製した。使用した出発材料の質量は３．８５ｋｇであった。

【0106】

出発材料を、押出デバイス中、２８０ｂａｒ（２８ＭＰａ、４０６１ｐｓｉ）の圧力及び５０℃（１２２°Ｆ）の温度で、純粋ＣＯ₂及び改質剤として５％エタノールと合わせた。合計１６０ｋｇのＣＯ₂及び８ｋｇのエタノールを使用して、溶媒の原材料に対する比を４３．６：１とした。次いで、ＣＯ₂、エタノール、及び原材料の混合物を分離デバイスに通過させ、混合物の圧力及び温度を変化させ、二酸化炭素から抽出物を分離した。
抽出物（２０７ｇ）を、エタノールを除去後、いくつかのクロロフィルを明らかに含む暗緑糸の粘着性の粘性塊として得た。出発材料の質量に基づいて、抽出物の収率は５．３８％であった。抽出物中のオレアンドリンの含有量を、高圧液体クロマトグラフィー及びマススペクトロメトリーを使用して計算しすると１．８９ｇであるか、又は０．９１％の収率であった。

【0107】

（実施例２）
粉末化されたオレアンダーの葉の熱水抽出。
（比較例）
熱水抽出は、典型的には、オレアンダーの葉からオレアンドリン及び他の活性構成成分を抽出するために使用される。熱水抽出方法の例は、米国特許第５，１３５，７４５号及び同第５，８６９，０６０号で認めることができる。
熱水抽出を、粉末化されたオレアンダーの葉５ｇを使用して行った。沸騰水の１０倍体積（オレアンダー出発材料の質量で）を粉末化されたオレアンダーの葉に添加し、混合物を連続的に６時間攪拌した。次いで、混合物を濾過し、葉の残渣を収集し、同じ条件下で再び抽出した。濾液を合わせ、凍結乾燥した。抽出物の外観は茶色であった。乾燥抽出物材料の質量は約１．４４ｇであった。抽出物材料３４．２１ｍｇを水中に溶解し、高圧液体クロマトグラフィー及びマススペクトロメトリーを使用してオレアンドリン含有量分析を行った。オレアンドリンの量は３．６８ｍｇと決定した。抽出物の量に基づいてオレアンドリンの収率を計算し、０．２６％であった。

【0108】

（実施例３）
セイヨウキョウチクトウの亜臨界流体抽出物の調製
オレアンドリン含有抽出物を調製するための改善された方法を、セイヨウキョウチクトウバイオマスの超臨界流体抽出ではなく、亜臨界液体抽出を用いて開発した。
乾燥し、粉末化されたバイオマス（実施例１４に従って調製した）を抽出チャンバーに入れ、次いで、これを密閉した。二酸化炭素（約９０～９５％ｗｔ）及びアルコール（約１０～５％ｗｔ；メタノール又はエタノール）をチャンバー中に注入した。チャンバーの内部温度及び圧力は、約２℃～約１６℃（約７℃～約８℃）の範囲の温度及び約１１５～約１３５ｂａｒ（約１２４ｂａｒ）の範囲の圧力で、抽出時間の大部分又は実質的に全てにわたって、超臨界流体相ではなく亜臨界液体相中に抽出媒体が維持されるようなものであった。抽出時間は約４時間～約１２時間（約６～約１０時間）であった。次いで、抽出環境を濾過し、上清を収集した。二酸化炭素を上清から排出し、得られた粗製抽出物をエタノールで希釈し（エタノール約９部：抽出物約１部）、約－５０℃で少なくとも１２時間凍結した。溶液を解凍し、濾過した（１００μｍ孔径フィルター）。濾液をそのもとの体積の約１０％に濃縮し、次いで無菌濾過した（０．２μｍ孔径フィルター）。粗製抽出物中のオレアンドリンの濃度は、抽出物１ｍＬあたり約０．２５～１ｍｇ（又は０．５～０．８ｍｇ）である。
得られた亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出物は、オレアンドリン及びセイヨウキョウチクトウから抽出可能な１種又は複数種の他の化合物を含み、前記１種又は複数種の他の化合物は本明細書において定義するようなものであった。

【0109】

（実施例４）
舌下／頬側液体投薬形態
オレアンドリンを含む舌下投薬形態を、オレアンドリン又はオレアンドリン含有組成物（例えばオレアンドリン含有抽出物）と中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ、例えばココナツ油）とを混合することによって作製した。
方法Ａ．エタノール希釈したＳｂＣＬ抽出物（２質量％）を、ＭＣＴ（９５質量％）、及び香味剤（３質量％）と混合した。
方法Ｂ．エタノール希釈したエタノール抽出物（２質量％）を、ＭＣＴ（９５質量％）、及び香味剤（３質量％）と混合した。
方法Ｃ．エタノール希釈したＳｂＣＬ抽出物（１質量％）を、エタノール希釈したエタノール抽出物（１質量％）、ＭＣＴ（９５質量％）、及び香味剤（３質量％）と混合した。
舌下投薬形態を、アリコート約０．５ｍＬで対象に安全に投与した。投与後少なくとも１０分間は飲料又は食品を摂取しなかった。それを約７日～約１カ月間、１日１～６回投与した。
この投薬形態は舌下投与を意図するものではあるが、経口でも投与してもよい。

【0110】

（実施例５）
医薬組成物の調製。
方法Ａ．クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、表示された量で提供する。

【0111】

【表1】

賦形剤をジャーに分注し、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃ２４ＫＣ冷蔵インキュベーターシェーカー中、６０℃で２４時間振とうして、均一性を確実にする。次いで、試料を取り出し、可溶化に関して視覚的に検査する。賦形剤と抗ウイルス組成物の両方を、２４時間後全ての製剤に関して完全に溶解する。
方法Ｂ．ＧＭＯ／クレモフォールベースの薬物送達システム
以下の成分を、表示された量で提供する。

【0112】

【表2】

方法Ａの手順に従う。
方法Ｃ．ラブラソールベースの薬物送達システム
以下の成分を、表示された量で提供する。

【0113】

【表3】

方法Ａの手順に従う。
方法Ｄ．ビタミンＥ－ＴＰＧＳベースのミセル形成システム
以下の成分を、表示された量で提供する。

【0114】

【表4】

方法Ａの手順に従う。
方法Ｅ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、表示された量で提供する。

【0115】

【表5】

方法Ａの手順に従う。
方法Ｆ．多構成成分薬物送達システム
以下の成分を、カプセル剤中に含まれる表表示された量で提供する。

【0116】

【表6】

方法Ａの手順に従う。

【0117】

（実施例６）
腸溶性コーティングカプセル剤の調製
工程Ｉ：液体充填カプセル剤の調製
硬ゼラチンカプセル（５０カウント、００サイズ）に実施例３の液体組成物を充填する。これらのカプセルに製剤８００ｍｇを手動で充填し、次いで５０％エタノール／５０％水溶液を用いて手で密封する。次いでカプセルを以下の成分を表示される量で含有する２２％ゼラチン溶液を用いて手でバンディングする。

【0118】

【表7】

ゼラチン溶液を完全に混合し、１～２時間膨潤させる。膨潤時間後、溶液をしっかりと覆い、５５℃のオーブンに入れ、液化させる。ゼラチン溶液全体が液体になったらバンディングを行う。
先のとがった円形の３／０アーティストブラシを使用して、ゼラチン溶液をカプセルに塗る。Ｓｈｉｏｎｏｇｉから提供されたバンディングキットを使用する。バンディング後、カプセルは室内条件で１２時間維持して、バンディングさせて硬化させる。
工程ＩＩ：液剤充填カプセル剤のコーティング
コーティング分散剤を以下の表に挙げる成分から調製する。

【0119】

【表8】

工程Ｉに従ってバンディングカプセルを使用する場合、分散剤を２０．０ｍｇ／ｃｍ²のコーティングレベルとなるようにカプセルに適用する。以下の条件を使用してカプセルをコーティングする。

【0120】

【表9】

【0121】

（実施例７）
対象におけるウイルス感染の処置
国際公開第２０１８０５３１２３号、国際公開第２０１９０５５１１９号、米国特許第１０５９６１８６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願の方法は、これらの全ての開示全体が、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとし、本発明の組成物の抗ウイルス活性を実証するために続く。

【0122】

（実施例８）
対象における神経学的障害の処置
国際公開第２０１１０８５３０７号、米国特許第８４８１０８６号、米国特許第９２２０７７８号、米国特許第９３５８２９３号、米国特許第９８７７９７９号、米国特許第１０３８３８８６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願の方法は、これらの全ての開示全体が、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとし、本発明の組成物の神経保護活性実証するために続く。

【0123】

（実施例９）
オレアンドリン組成物を含む錠剤の調製
３％サイロイド２４４ＦＰと９７％微晶質セルロース（ＭＣＣ）との最初の打錠混合物を混合する。次いで、ＳｂＣＬ抽出物の現存するバッチを、湿式造粒を介してサイロイド／ＭＣＣ混合物中に組み込む。この混合物は、以下の表において「最初の打錠混合物」と表示する。追加のＭＣＣを顆粒外に添加して、圧縮率を増加させる。最初の打錠混合物へのこの添加を「顆粒外添加」として表示する。顆粒外添加から得られた混合物は、「最終打錠混合物」と同じ組成である。

【0124】

【表10】

【表11】

【0125】

【表12】

【表13】

サイロイド２４４ＦＰは、Ｇｒａｃｅ Ｄａｖｉｓｏｎによって製造されたコロイド状二酸化ケイ素である。コロイド状二酸化ケイ素は、いくつかの機能、例えば、吸着剤、流動促進剤、及び錠剤崩壊剤を提供するために通常使用される。サイロイド２４４ＦＰは、その質量の３倍の油を吸着するその能力、及びその５．５μｍの粒子サイズのために選択される。

【0126】

（実施例１０）
オレアンドリンを含む溶液のＨＰＬＣ分析
オレアンドリン含有量：
試料（オレアンドリン標準、ＳＣＦ抽出物、エタノール抽出物、亜臨界液体ＣＯ₂抽出物、及び熱水抽出物）を、以下の条件：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ Ｃ１８カラム（５．０μｍ、１５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．；Ｗａｔｅｒｓ）；移動相ＭｅＯＨ：水＝５４：４６（ｖ／ｖ）、及び流速１．０ｍｌ／分を使用したＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）で分析する。検出波長は２１７ｎｍに設定した。試料を、固定量のＨＰＬＣ溶媒中に化合物又は抽出物を溶解することによって調製して、オレアンドリンのおよその標的濃度を達成する。オレアンドリンの保持時間は、内部標準を使用することによって決定することができる。オレアンドリンの濃度は、内部標準を使用したシグナル応答曲線を作成することによって決定／較正することができる。

【0127】

トリテルペン含有量：
抽出物のトリテルペン構成成分を、Ｇｅｍｉｎｉ Ｃ１８ジフェニルカラムを使用し、９５％ＭｅＣＮ及び０．１％ギ酸からなるアイソクラチック移動相、流速０．６ｍｌ／分、及び検出波長２２０ｎｍを用いてトリテルペンを溶出するＨＰＬＣによって定量化する。標準曲線を作成し、使用して、オレアノール酸、ウルソール酸、及びベツリン酸化合物の相対的モル比を計算する。図４は、ＰＢＩ－０５２０４のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。

【0128】

（実施例１１）
対象におけるがんの処置
本発明の組成物の抗がん（抗過剰細胞増殖）活性を実証するために、国際公開第２００７０１６１７６号、国際公開第２００９０６４６５７号、米国特許第７４０２３２５号、米国特許第８１８７６４４号、米国特許第８３９４４３４号、米国特許第８３６７３６３号、米国特許第９４９４５８９号、米国特許第９８４６１５６号、並びに関連する米国及び外国の特許及び出願の方法（これらの全ての開示全体が、その内容全体がこれにより参照により本明細書に組み込まれる）に従った。

【0129】

（実施例１２）
医薬組成物の調製
本発明の医薬組成物は以下の方法のいずれかで調製することができる。混合は、湿潤又は乾燥条件下で行うことができる。医薬組成物は、調製中に圧縮、乾燥、又はこの両方を行ってもよい。医薬組成物は投薬形態に分割してもよい。

【0130】

方法Ａ。
少なくとも１種の医薬賦形剤を、本明細書において開示される少なくとも１種のＳｂＣＬ抽出物と混合する。
方法Ｂ。
少なくとも１種の医薬賦形剤を、少なくともＳｂＣＬ抽出物及び少なくとも１種の他の活性薬剤と混合する。
方法Ｃ。
少なくとも１種の医薬賦形剤をオレアンドリンと混合する。
方法Ｄ。
少なくとも１種の医薬賦形剤を、本明細書において開示されるオレアンドリン及び少なくとも１種のトリテルペンと混合する。
方法Ｅ。
少なくとも１種の医薬賦形剤を、本明細書において開示されるオレアンドリン及び少なくとも２種のトリテルペンと混合する。
方法Ｄ。
少なくとも１種の医薬賦形剤を、本明細書において開示されるオレアンドリン及び少なくとも３種のトリテルペンと混合する。
既知の量のオレアノール酸及びウルソール酸を、本明細書において定義するような構成成分の所定のモル比に従って混合する。構成成分を固体形態で混合するか、又は溶媒、例えばメタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、プロパノール、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）、水又はこれらの混合物中で混合する。得られた混合物は、本明細書において記載する相対的モル比で構成成分を含む。

【0131】

（実施例１３）
統計分析
実験データセットの統計的有意性を、対応のない両側スチューデントｔ検定（アルファ＝０．０５）を使用して決定し、シャピロウィルク正規性検定及びＧｒａｐｈｐａｄプリズム７．０３ソフトウェアを使用してＰ値を計算する。Ｐ値は、０．１２３４（ｎｓ）、０．０３３２（＊）、０．００２１（＊＊）、０．０００２（＊＊＊）、＜０．０００１（＊＊＊＊）として定義される。特に注記されていない限り、エラーバーは、少なくとも３回の独立した実験のＳＥＭを表す。

【0132】

（実施例１４）
粉末バイオマスの調製
方法Ａ。
米国特許第５２３６１３２号、米国特許第５５９８９７９号、米国特許第６５１７０１５号、又は米国特許第６７１５７０５号に記載されているように、収穫した葉を、粉砕及び加熱脱水装置に入れることによって、粉末乾燥セイヨウキョウチクトウバイオマスを、Ａｄｄｉｎｇｔｏｎの米国特許第７４０２３２５号に従って調製し、その開示全体はこれにより参照により本明細書に組み込まれるものとする。
方法Ｂ。
収穫した葉を加熱した除湿器で脱水し、次いで、乾燥した葉を、液体窒素を用いた凍結解凍サイクルを繰り返し行い、サイクルのうちの少なくとも１回の間に凍結される葉を粉砕して粉末を形成し、次いで、これを凍結乾燥して、水分含有量を約８質量％未満にすることによって、粉末乾燥セイヨウキョウチクトウバイオマスを調製した。

【0133】

（実施例１５）
水性有機溶媒抽出物の調製
乾燥粉末されたバイオマスを、水性エタノールを用いて抽出することによってセイヨウキョウチクトウのエタノール抽出物を、調製した。
葉の粉末の１グラムごとに水性エタノール（１０％ｖ／ｖの水）１０ｍＬを使用して、粉末を、激しく攪拌しながら室内温度及び圧力で抽出した。抽出上清及びバイオマスを分離し、抽出サイクルを更に２回繰り返し、これは３回抽出サイクルを行ったことを意味する。上清を合わせ、真空中でもとの体積の約２０％に濃縮して、濃縮物を形成し、それを無菌濾過して（０．２μｍフィルター）、粗製抽出物を形成し、次いでこれを５０％水性エタノールで希釈した。粗製抽出物中の水、エタノール、及び他の構成成分の含有量を決定した。粗製抽出物中のオレアンドリンの含有量は約１～５ｍｇ／ｍＬ抽出物であった。

【0134】

（実施例１６）
セイヨウキョウチクトウの抽出物の組合せを含む投薬形態の調製
この目的は、エタノール抽出物又は水性エタノール抽出物の部分（１質量％）を実施例３のＳｂＣＬ抽出物の部分（１質量％）、中鎖トリグリセリド（９５質量％）、及び香味剤（３質量％）と合わせることを除いて、実施例４に従って投薬形態を調製することであった。投薬形態中のオレアンドリンの濃度は約１２．５～約２５マイクログラム／ｍＬである。

【0135】

（実施例１７）
ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスに対するオレアンドリンのＩｎ ｖｉｖｏ評価
この研究の目的は、ＣＯＶＩＤ－１９ウイルスにすでに感染している対象の処置においてオレアンドリン含有抽出物（ＯＣＥ）の有効性を決定することであった。
広範な人口統計分布を表し、ＣＯＶＩＤ－１９感染を呈する３０名を超える対象の臨床的状態を評価し決定してから、実施例１６の投薬形態に従って調製されたＯＣＥの舌下、頬側、又は口腔の投与を行った。組成物を、対象に安全に投与した。投薬レジメンは、１用量あたりおよそ０．５ｍＬ及び１日あたり４用量（約６時間ごとに１用量）であり、およそ１日あたりオレアンドリン約５０～６０マイクログラムであった。全ての対象が処置開始の３～１０日以内に完全な回復を経験した。

【0136】

（実施例１８）
抽出物のガスクロマトグラフィー分析
有機溶媒抽出物及び亜臨界抽出物を、全イオン電流（ＴＩＣ）検出を備えたＧＣ－マススペクトロメトリーによって分析して、これらの揮発性及び半揮発性有機構成成分の一部を同定した。
サンプル抽出物を、７つの同位体標識された半揮発性有機化合物内部標準（ＳＶＯＣＩＳ）を含む溶液を使用して溶解してからＧＣ－ＭＳに注入し、分析した。各サンプル抽出物からの１０個の最大ピークを、ＮＩＳＴ／ＥＰＡ／ＮＩＨマススペクトルライブラリー（ＮＩＳＴ、２０１４）に対する比較を介して暫定的に同定し、各マッチを手動でチェックした。各同一性に関するライブラリースコアをソフトウェアによって割り当て、１００のマッチ係数が完全なマッチを示すことになる。各同定されたピークに関する相対的濃度を、その最も近い溶出ＳＶＯＣＩＳ標準ピークと比較したピーク面積を介して計算した。ＧＣ－ＭＳ内のイオン化効率は、化合物間で大幅に変化する場合がある点に留意するべきである。

【0137】

（実施例１９）
抽出物中の化合物の同定
抽出物を、以下のようにＭＳ－ＤＡＲＴ ＴＯＦ分析によって分析する。ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（Ｊｅｏｌ Ｕ．Ｓ．Ａ．、ピーボディ、マサチューセッツ州、米国）を使用した。
ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ－ＤＡＲＴ質量分析計（Ｊｅｏｌ ＵＳＡ、ピーボディ、マサチューセッツ州、米国）を使用した。分析は、陽イオンモード（ＤＡＲＴ＋）で行っており、ＤＡＲＴ－ＭＳによって生成されるＭ＋Ｈ＋イオンに対応する質量が得られた。機器に対する様々な設定を使用して、Ｎ．オレアンダー分析のための最適な条件を決定する。ＤＡＲＴ＋に関する一般的な設定としては、針電圧３５００Ｖ；オリフィス１－ ２～２０Ｖ；リングレンズ２～５Ｖ；オリフィス２－ ２～５Ｖ；及びピーク電圧１０００Ｖがある。キャリブレーションは、１００～１０００質量単位の必要とされる質量範囲全体にわたって質量マーカーを提供するＰＥＧ６００の１０％溶液を使用して各サンプルで内部的に行う。他の分析を、ＤＡＲＴ－様式で行い、これらは、針電圧３５００Ｖ；発熱体２５０℃；電極１－ １５０Ｖ；電極２－ ２５０Ｖ；Ｈｅガス流量３．７９ＬＰＭ；質量分析計設定：ＭＣＰ２６００Ｖ；オリフィス１－ １５Ｖ；リングレンズ－ ５Ｖ、オリフィス２－ ５Ｖ；及びピーク電圧１０００Ｖからなる。キャリブレーションは、１００～１０００質量単位の必要とされる質量範囲全体にわたってマーカーを提供するペルフルオロ化カルボン酸溶液を使用して各サンプルで内部的に行う。Ｎ．オレアンダー試料を、ホウケイ酸ガラス融点管の閉鎖されている末端を使用してＤＡＲＴヘリウムプラズマ中にそのままで導入する。キャピラリー管は、１分析あたりおよそ３～５秒間Ｈｅプラズマ中に保持する。分子式は、ＪＥＯＬ ＡｃｃｕＴＯＦ ＤＡＲＴ－ＭＳ機器を備えた元素組成及び同位体マッチングプログラムによって確認する。Ｈｅｒｂａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（ネイプルズ、フロリダ州、米国）によって開発されたＮ．オレアンダー構成成分の検索可能なデータベースを使用してもよい。

【0138】

（実施例２０）
栄養補助食品組成物
オレアンドリン含有抽出物（所望の濃度）を、栄養補助食品用賦形剤、例えば、ＰＲＥＭＩＥＲ ＰＲＯＴＥＩＮシェイク、ＬＩＭＦＡＳＴ ＡＤＶＡＮＣＥＤ ＥＮＥＲＧＹ食事代替シェイク、ＯＲＧＡＩＮ ＯＲＧＡＮＩＣ ＮＵＴＲＩＴＩＯＮシェイク、ＶＥＧＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎシェイク、ＬＥＡＮＢＯＤＹＬＡＢＲＡＤＡホエータンパク質食事代替品シェイク、ＩＣＯＮＩＣ ＧＲＡＳＳ－ＦＥＤ ＰＲＯＴＥＩＮ飲料、ＰＵＲＥ ＰＲＯＴＥＩＮシェイク、ＭＵＳＣＬＥ ＭＩＬＫオリジナルタンパク質シェイク、ＭＥＴ－ＲＸオリジナルホエータンパク質食事代替粉末、ＯＷＹＮビーガン食事代替シェイク、ＳＯＹＬＥＮＴ食事代替品シェイク、又はＡＰＲＥＳ植物ベースのビーガンタンパク質シェイクにおいて認められるものと合わせる。

【0139】

（実施例２１）
化粧料ローション剤組成物
オレアンドリン含有抽出物（所望の濃度）を、栄養補助食品用賦形剤、例えば、ＮＩＶＥＡ ＥＳＳＥＮＴＩＡＬＬＹ ＥＮＲＩＣＨＥＤボディローション（保湿セラム及びアーモンド油含有）、ＥＵＣＥＲＩＮ ＡＤＶＡＮＣＥＤ ＲＥＰＡＩＲ（セラミド－３含有）、ＰＡＬＭＥＲ’Ｓ ＣＯＣＯＡ ＢＵＴＴＥＲ ＦＯＲＭＵＬＡ ＤＡＩＬＹ ＳＫＩＮ ＴＨＥＲＡＰＹボディローション（ｂｏｔｈ ｌｏｔｉｏｎ）（ココアバター及びビタミンＥ含有）、ＪＥＲＧＥＮ’Ｓ ＵＬＴＲＡ－ＨＥＡＬＩＮＧ乾燥皮膚モイスチャライザー（ビタミンＣ、Ｅ、及びＢ５含有）、ＬＵＢＲＩＤＥＲＭデイリーモイスチャボディローション（ビタミンＢ５含有）、ＷＥＬＥＤＡ ＳＫＩＮ ＦＯＯＤナリッシングクリーム（ビタミンＥ、キンセンカ花抽出物、パンジー含有）、ＡＶＥＥＮＯデイリーモイスチャライジングローション、ＨＥＭＰＺオリジナルハーバルボディモイスチャライザー（ヘンプ種子油含有）、ＣＥＲＡＶＥデイリーモイスチャライジングローション剤（ヒアルロン酸含有）、ＡＱＵＡＰＨＯＲ ＡＤＶＡＮＣＥＤ ＴＨＥＲＡＰＹヒーリング軟膏（ペトロラタム含有）において認められるものと合わせる。

【0140】

（実施例２２）
投薬形態
方法Ａ：薄膜投薬形態
薄膜投薬形態は、Ｂａｒｎｈａｒｔ（“Thin film oral dosage forms” in Modified Release Drug Delivery Technology; 2^nd Edition, 2013, CRC press; ISBN: 9780429145803)；Ｊｏｓｈｕａら（“Fast dissolving oral thin films: an effective dosage form for quick releases” in Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res. (2016), 38(1), 282-289）、Ｈａｒｓｈａら（“An introduction to fast dissolving oral thin film drug delivery systems: a review” in Drug. Deliv. (2013), 10(6), 667-684）、及びＮａｇａｒａｊｕら（“Comprehensive review on oral disintegrating films” in Drug Deliv. (2013), 10(1), 96-108）に従って調製することができる。

【0141】

方法Ｂ：生体接着性投薬形態
生体接着性頬側投薬形態は、Ｒｅｄｄｙら（“A review on bioadhesive buccal drug delivery systems: current status of formulation and evaluation methods” in Daru (2011), 19(6), 385-403）、Ｓｈｏｊａｅｉら（“Buccal mucosa as a route for systemic drug delivery: a review” in J. Pharm. Pharmaceut. Sci. (1998), 1(1), 15-30）、Ｐｒａｂｈａｋａｒら（“Bioadhesive polymeric platforms for transmucosal drug delivery systems- a review” in Trop. J. Pharma. Res. (2010), 9(1), 91-104）、Ｍａｔｈｉｏｗｉｔｚら（Bioadhesive Drug Delivery Systems- fundamentals, novel approaches, and development; ed. E. Mathiowitz, et al.; Marcel Dekker, Inc. (New York, NY), (1999), ISBN 0-8247-1995-6）に従って調製することができる。

【0142】

方法Ｃ：グミ投薬形態
グミ（半固形、ソフト、チュアブル）投薬形態は、Ｊａｃｏｂｓ（“Semi-solid formulations” in Pediatric Form. (2014), 171-179）、Ｃｉｚａｕｓｋａｉｔｅら（“Natural ingredients-based gummy bear composition designed according to texture analysis and sensory evaluation in vivo” in Molecules (2019), 24(7), 1442）、Ｂａｒｔｋｉｅｎｅら（“Development of antimicrobial gummy candies with addition of bovine colostrum, essential oils, and probiotics” in Int. J. Food Sci. Technol. (2018), 53(5), 1227-1235）に従って調製することができる。

【0143】

方法Ｄ：スプレー投薬形態
スプレー投薬形態は、Ｆｉｎｌａｙ（The Mechanics of Inhaled Pharmaceutical Aerosols- An Introduction; Ed. W.H. Finlay, Academic Press, London, UK; 2001）、Ｈｉｃｋｅｙ（“Back to the Future: Inhaled Drug Products” in J. Pharm. Sci. (2013), 102(40＼), 1165-1172）、Ｍａｌａｍａｔａｒｉら（“Solidification of nanosuspensions for the production of solid oral dosage forms and inhalable dry powders” in Exp. Opin. Drug Deliv. (2016), 13(3), 435-450）、及びＨｉｃｋｅｙ（Pharmaceutical Inhalation Aerosol Technology, 2^nd ed.; Ed. A.J. Hickey, CRC Press, New York, NY, 2003）に従って調製することができる。

【0144】

（実施例２３）
有機溶媒抽出物の調製
セイヨウキョウチクトウのエタノール抽出物は、乾燥粉末化バイオマスをエタノールで抽出することによって調製した。
葉の粉末１グラムごとに、エタノール１０ｍＬを使用して、粉末を、激しく攪拌しながら室内温度及び圧力で抽出した。抽出上清及びバイオマスを分離し、抽出サイクルを更に２回繰り返し、これは３回の抽出サイクルを行ったことを意味する。上清を合わせ、真空中でもとの体積の約２０％に濃縮して、濃縮物を形成し、それを無菌濾過して（０．２μｍフィルター）、粗製抽出物を形成し、次いでこれを５０％水性エタノールで希釈した。粗製抽出物中の水、エタノール、及び他の構成成分の含有量を決定した。粗製抽出物中のオレアンドリンの含有量は約１～５ｍｇ／ｍＬ抽出物であった。

【0145】

本明細書において使用する場合、「約」又は「およそ」という用語は、指定の値の±１０％、±５％、±２．５％、又は±１％を意味すると解釈される。本明細書において使用する場合、「実質的に」という用語は、「大部分」又は「のうちの少なくとも大部分」又は「のうちの５０％を超える」を意味すると考えられる。

【0146】

上記は、本発明の特定の実施形態の詳細な説明である。特定の本発明の実施形態を、例示の目的で本明細書において記載してきたが、様々な改変を発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく行ってもよいことは理解されるであろう。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲を除いて限定されない。本明細書において開示され請求される実施形態の全ては、本開示を考慮して過度の実験を行うことなく、行い達成することができる。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕亜臨界液体二酸化炭素を用いてオレアンドリン含有バイオマスを抽出することによって生成されるオレアンドリン含有抽出物。
〔２〕亜臨界液体が、亜臨界液体二酸化炭素と１種又は複数種の改質剤とを含む、前記〔１〕に記載のオレアンドリン含有抽出物。
〔３〕オレアンドリン含有有機溶媒抽出物の部分とオレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物の部分とを含む、改善されたオレアンドリン含有組合せ組成物。
〔４〕２つの抽出物の実質的に等量の部分が、組合せ組成物中に存在する、前記〔３〕に記載の組合せ組成物。
〔５〕ａ）有機溶媒抽出物が、バイオマスから抽出された少なくともオレアンドリンと他の構成成分とを含む；ｂ）有機溶媒抽出物において、バイオマスから抽出されたオレアンドリンの他の構成成分に対するモル比が、亜臨界液体抽出物中の前記モル比を超える；ｃ）ＳｂＣＬ抽出物が、バイオマスから抽出された少なくともオレアンドリンと他の構成成分とを含む；ｄ）エタノール抽出物中のオレアンドリンの含有量が、亜臨界液体抽出物中のオレアンドリンの含有量を超える；ｅ）有機溶媒抽出物中の抽出された非オレアンドリン構成成分の含有量が、前記亜臨界液体抽出物中の前記構成成分の含有量を超える；ｆ）前記有機溶媒抽出物中の抽出された揮発性及び半揮発性構成成分の組成プロファイルが、前記亜臨界液体抽出物中の前記構成成分の組成プロファイルとは異なる；及び／又はｇ）オレアンドリン含有量に対して、亜臨界液体抽出物が、有機溶媒抽出物よりも抽出された揮発性及び半揮発性構成成分を高い割合で含む、前記〔３〕に記載の組合せ組成物。
〔６〕ａ）前記抽出物中のオレアンドリン含有量が、約０．０１質量％以上、約０．０５質量％以上、約０．１質量％以上、約０．２質量％以上、約０．５質量％以上、約１質量％以上、約２．５質量％以上、約５質量％以上、約１０質量％以上、約２０質量％以上、約３０質量％以上、約４０質量％以上、約５０質量％以上、約６０質量％以上、約７０質量％以上、約８０質量％以上、又は約９０質量％以上であるか；ｂ）前記抽出物中のオレアンドリン含有量が、約９９質量％以下、約９５質量％以下、約９０質量％以下、約８０質量％以下、約７０質量％以下、約６０質量％以下、約５０質量％以下、約４０質量％以下、約３０質量％以下、約２０質量％以下、約１０質量％以下、約５質量％以下、約２．５質量％以下、約１質量％以下、又は約０．５質量％以下であるか；又はｃ）項目ａ）の任意の限定と項目ｂ）の任意の限定との組合せである、前記〔１〕～〔５〕のいずれか１項に記載の発明物。
〔７〕前記抽出物が、オレアンドリンと、１種又は複数種の強心配糖体、１種又は複数種の強心配糖体のグリコン構成成分（例えば、グルコシド、フルクトシド、及び／又はグルクロニド）、１種又は複数種のアグリコン、１種又は複数種のグリコシド前駆体（例えば、カルデノリド、カルダジエノリド及びカルダトリエノリド）、１種又は複数種のステロイド、１種又は複数種のトリテルペン、１種又は複数種の単糖、１種又は複数種の多糖、１種又は複数種のアルカロイド、１種又は複数種のタンパク質、脂肪、治療上有効な薬剤である１種又は複数種の他の非強心配糖体、及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される１種又は複数種の化合物とを含む、前記〔１〕～〔５〕のいずれか１項に記載の発明物。
〔８〕前記抽出物が、オレアンドリンと、ネリタロシド、オドロシド、オレアノール酸、ウルソール酸、ベツリン酸、オレアンドリゲニン、オレアシドＡ、ベツリン（ウルサ－１２－エン－３β，２８－ジオール）、２８－ノルウルサ－１２－エン－３β－オール、ウルサ－１２－エン－３β－オール、３β，３β－ヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、３β，２０α－ジヒドロキシウルサ－２１－エン－２８－酸、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３β，１３β－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３β，１２α－ジヒドロキシオレアナン－２８，１３β－オリド、３β，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアナン－２８－酸、ホモポリガラクツロナン、アラビノガラツロナン、クロロゲン酸、カフェイン酸、Ｌ－キナ酸、４－クマロイル－ＣｏＡ、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、５－Ｏ－カフェオイルキナ酸、カルデノリドＢ－１、カルデノリドＢ－２、オレアゲニン、ネリジジノシド、ネリゾシド、オドロシド－Ｈ、３－ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－５－ベータ、１４ベータ－ジヒドロキシ－カルダ－２０（２２）－エノリド、ガラクツロン酸、ラムノース、アラビノース、キシロース、及びガラクトースから構成されペクチン多糖、１７０００～１２００００Ｄの範囲のＭＷ、又は約３５０００Ｄ、約３０００Ｄ、約５５００Ｄ、若しくは約１２０００ＤのＭＷを有する多糖、カルデノリドモノグリコシド、カルデノリドＮ－１、カルデノリドＮ－２、カルデノリドＮ－３、カルデノリドＮ－４、プレグナン、４，６－ジエン－３，１２，２０－トリオン、２０Ｒ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン、１６ベータ，１７ベータ－エポキシ－１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６－ジエン－３，２０－ジオン、１２ベータ－ヒドロキプレグナ－４，６，１６－トリエン－３，２０－ジオン（ネリジエノンＡ）、２０Ｓ，２１－ジヒドロキシプレグナ－４，６－ジエン－３，１２－ジオン（ネリジエノンＢ）、ネリクマリン酸、イソネリクマリン酸、オレアンデロン酸、オレアンデレン、８アルファ－メトキシラブタン－１８－酸、１２－ウルセン、カネロシド、ネリウモシド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α－ヒドロキシ－８，１４β－エポキシ－５β－カルダ－１６：１７、２０：２２－ジエノリド、３β－Ｏ－（Ｄ－ジギノシル）－２α，１４β－ジヒドロキシ－５β－カルダ－１６：１７，２０：２２－ジエノリド、３β，２７－ジヒドロキシ－ウルサ－１８－エン－１３，２８－オリド、３β，２２α，２８－トリヒドロキシ－２５－ノル－ルパ－１（１０），２０（２９）－ジエン－２－オン、シス－カレニン（３β－ヒドロキシ－２８－Ｚ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、トランス－カレニン（３－β－ヒドロキシ－２８－Ｅ－ｐ－クマロイルオキシ－ウルサ－１２－エン－２７－酸）、３ベータ－ヒドロキシ－５アルファ－カルダ－１４（１５），２０（２２）－ジエノリド（ベータ－アンヒドロエピジギトキシゲニン）、３ベータ－Ｏ－（Ｄ－ジギタロシル）－２１－ヒドロキシ－５ベータ－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド（ネリモゲニン－Ａ－３ベータ－Ｄ－ジギタロシド）、プロセラゲニン、ネリジエノンＡ、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－ウルセン－２８－酸、３ベータ，１３ベータ－ジヒドロキシウルサ－１１－エン－２８－酸、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ－オール、ウルサ－１２－エン－３ベータ，２８－ジオール、３ベータ，２７－ジヒドロキシ－１２－オレアネン－２８－酸、（２０Ｓ、２４Ｒ）－エポキシダンマラン－３ベータ，２５－ジオール、２０ベータ，２８－エポキシ－２８アルファ－メトキシタラキサステラン－３ベータ－オール、２０ベータ，２８－エポキシタラキサステラ－２１－エン－３ベータ－オール、２８－ノルウルサ－１２－エン－３ベータ，１７ベータ－ジオール、３ベータ－ヒドロキシウルサ－１２－エン－２８－アルデヒド、アルファ－ネリウルセート、ベータ－ネリウルセート、３アルファ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、３ベータ－アセトフェンオキシ－ウルサ－１２－エン－２８－酸、オレアンデロール酸、カネロジオン、３β－ｐ－ヒドロキシフェノキシ－１１α－メトキシ－１２α－ヒドロキシ－２０－ウルセン－２８－酸、２８－ヒドロキシ－２０（２９）－ルペン－３，７－ジオン、カネロシン（３α－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸）、３アルファ－ヒドロキシ－ウルサ－１８，２０－ジエン－２８－酸、Ｄ－サルメントース、Ｄ－ジギノース、ネリジジノシド、ネリゾシド、イソリシノール酸、ゲンチオビオシルネリゴシド、ゲンチオビオシルビューモントシド、ゲンチオビオシルオレアンドリン、フォリネリン、１２β－ヒドロキシ－５β－カルダ－８，１４，１６，２０（２２）－テトラエノリド、８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－８β－ヒドロキシ－ジギトキシゲニン、Δ１６－ネリアゲニン、ウバオール、ウルソールアルデヒド、２７（ｐ－クマロイルオキシ）ウルソール酸、オレアンデロール、１６－無水－デアセチル－ネリゴシド、９－Ｄ－ヒドロキシ－シス－１２－オクタデカン酸、アジゴシド、アディネリン、アルファ－アミリン、ベータ－シトステロール、カンペストロール、カウチューク、カプリン酸、カプリル酸、コリン、コルネリン、コルテネリン、デアセチルオレアンドリン、ジアセチル－ネリゴシド、フォリアンドリン、プソイドクラミン、ケルセチン、ケルセチン－３－ラムノグルコシド、クエリシトリン、ロサギニン、ルチン、ステアリン酸、スティグマステロール、ストロスペシド、ウレヒトキシン、並びにウザリゲニンからなる群から選択される１種又は複数種の化合物とを含む、前記
〔７〕に記載の発明物。
〔９〕少なくとも１種の医薬賦形剤及び前記〔１〕～〔５〕のいずれか１項に記載の発明物を含む医薬組成物。
〔１０〕オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）に治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置又は阻止する方法であって、それを必要とする対象に前記〔９〕に記載の前記医薬組成物の１回又は複数回の用量を投与し、それによって、前記状態、疾患又は障害を処置又は阻止することを含む方法。
〔１１〕オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）に治療的に応答する状態、疾患又は障害を処置又は阻止する方法であって、それを必要とする対象に前記〔１〕～〔５〕のいずれか１項に記載の前記発明物の１回又は複数回の用量を投与し、それによって、前記状態、疾患又は障害を処置又は阻止することを含む方法。
〔１２〕前記投与することが、急性的、慢性的、又はこれらの組合せである、前記〔１０〕又は〔１１〕に記載の方法。
〔１３〕前記投与することが、局所的に投与すること、全身的に投与すること、又はこれらの組合せである、前記〔１０〕、〔１１〕、又は〔１２〕に記載の方法。
〔１４〕オレアンドリン（オレアンドリン含有組成物又はオレアンドリン含有抽出物）に治療的に応答する前記状態、疾患又は障害が、がん、腫瘍、癌腫、肉腫、膠芽腫、腺癌、リンパ腫、黒色腫、脳腫瘍、神経膠腫、星状細胞腫（低悪性度星状細胞腫（グレードＩ毛様細胞性星状細胞腫及びグレードＩＩびまん性星状細胞腫）、退形成性星状細胞腫（グレードＩＩＩ）、膠芽腫（グレードＩＶ、ＧＢＭ、多形性膠芽腫としても知られる）を含む）、上衣腫、希突起膠腫、過剰細胞増殖、悪性新生物性疾患、非がん性炎症性皮膚疾患、光線性角化症、乾癬、湿疹、神経学的疾患、神経学的障害、神経変性性疾患、神経変性性障害、変化したＮａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性と関連する病因を有する神経学的疾患又は障害、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、ハンチントン疾患、脳卒中、認知症、筋萎縮性側索硬化症、ウシ海綿状脳症、多発性硬化症、糖尿病性神経障害、自閉症及び若年性神経セロイドリポフスチン症、タウ異常症、ダウン症候群、ピック疾患、大脳皮質基底核変性症、プリオン疾患のいくつかの異型、進行性核上性麻痺、前頭側頭型認知症、痔疾、潰瘍、ハンセン病、蛇咬傷、及びウイルス感染からなる群から選択される、前記〔１０〕、〔１１〕、〔１２〕、又は〔１３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１５〕前記ウイルス感染が、アレナウイルス科、アルテリウイルス科、ブニヤウイルス科、フィロウイルス科、フラビウイルス科（フラビウイルス属）、オルソミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、ラブドウイルス科、レトロウイルス科（デルタレトロウイルス属）、コロナウイルス科、（＋）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶ（プラスセンス短鎖ストランドエンベロープＲＮＡウイルス）、（－）－ｓｓ－ｅｎｖＲＮＡＶ（マイナスセンス短鎖ストランドエンベロープＲＮＡウイルス）、又はトガウイルス科のウイルスによって引き起こされる、前記〔１４〕に記載の方法。
〔１６〕前記ウイルス感染が、フラビウイルス、黄熱ウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、ダニ介在性脳炎ウイルス、キャサヌル森林疾患ウイルス、アルハムラ疾患ウイルス、オムスク出血熱ウイルス、ポワッサンウイルス、アルボール（ａｒｂｏｒｖｉｒｕｓ）ウイルス、東部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＥＥＥＶ）、西部ウマ脳脊髄炎ウイルス（ＷＥＥＶ）、ベネズエラウマ脳脊髄炎ウイルス（ＶＥＥＶ）、チクングニアウイルス（ＣＨＩＫＶ）、オニョングンウイルス（ＯＮＮＶ）、ポゴスタ疾患ウイルス、シンドビスウイルス、ロスリバー熱ウイルス（ＲＲＶ）、セムリキ森林ウイルス、ラッサウイルス、無菌性髄膜炎、ガナリトウイルス、フニンウイルス、ルジョウイルス、マチュポウイルス、サビアウイルス、ホワイトウォーターアロヨウイルス、ハンタウイルス、クリミアゴンゴ出血熱オルソナイロウイルス、ムンプスウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ＮＤＶ、インフルエンザウイルス（Ａ～Ｃ）、イサウイルス、トゴトウイルス、クアランジャウイルス、Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ１Ｎ２、スペイン風邪、アジア風邪、香港風邪、ロシア風邪、狂犬病ウイルス、ベシクロウイルス、リッサウイルス、サイトラブドウイルス、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＣＯＶＩＤ－１９（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）、ＣｏＶ２２９Ｅ、ＣｏＶ ＮＬ６３、ＣｏＶ ＯＣ４３、ＣｏＶ ＨＫＵ１、及びＣｏＶ ＨＫＵ２０からなる群から選択される、前記〔１４〕に記載の方法。
〔１７〕オレアンドリン含有抽出物を生成する方法であって、
オレアンドリン含有バイオマスを、二酸化炭素を含む亜臨界液体（ＳｂＣＬ）を用いる亜臨界液体抽出（ＳｂＣＬＥ）に、オレアンドリンを抽出し抽出環境を形成するのに十分な時間にわたって供すること；
前記バイオマスを前記抽出環境から分離して、オレアンドリン含有ＳｂＣＬを提供すること；及び
前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬからＳｂＣＬを除去して、前記オレアンドリン含有抽出物（ＯＣＥ）を提供すること
を含む方法。
〔１８〕オレアンドリン含有バイオマスを、二酸化炭素を含む亜臨界液体（ＳｂＣＬ）を用いる亜臨界液体抽出（ＳｂＣＬＥ）に、オレアンドリンを抽出し抽出環境を形成するのに十分な時間にわたって供すること；
前記バイオマスを前記抽出環境から分離して、オレアンドリン含有ＳｂＣＬを提供すること；
前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬからＳｂＣＬを除去して、オレアンドリン含有抽出物を提供すること；及び
オレアンドリンを前記抽出物から単離すること
を含む、オレアンドリンを生成する方法。
〔１９〕前記単離することが、クロマトグラフィー、液液抽出、液固抽出、結晶化、沈殿、分別沈殿、分別結晶化、ソックスレー抽出、トリチュレーション、又はこれらの任意の組合せのうちの１つ又は複数によって達成される、前記〔１８〕に記載の方法。
〔２０〕以下のステップ：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離すること；ｂ）改質剤を、二酸化炭素又は抽出環境に添加すること；ｃ）抽出環境を含む容器の内部を加熱し、加圧して、亜臨界液体相抽出環境を形成すること；ｄ）前記ＳｂＣＬを蒸発させることによって、前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬから前記ＳｂＣＬを除去して、原料ＳｂＣＬ抽出物を形成すること；ｅ）原料ＳｂＣＬ抽出物を、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて希釈すること；ｆ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｇ）希釈した原料又は粗製ＳｂＣＬ抽出物を活性炭で処理すること；ｈ）形成のために、希釈した原料抽出物から大部分の有機溶媒を除去すること；及び／又はｉ）原料又は粗製抽出物を無菌濾過して、ＳｂＣＬ抽出物を得ることのうちの１つ又は複数を更に含む、前記〔１７〕～〔１９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２１〕ＳｂＣＬが、二酸化炭素及び１種又は複数種の改質剤を含む、前記〔１７〕～〔２０〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２２〕１種又は複数種の改質剤が、アルコール及びエタノールからなる群から選択される、前記〔２１〕に記載の方法。
〔２３〕二酸化炭素（及び存在する場合は改質剤）が、抽出時間のうちの約５０％以上の間亜臨界液体相中に存在する、前記〔１７〕～〔２２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２４〕亜臨界液体相中の抽出流体（二酸化炭素、及び存在する場合は改質剤）とバイオマスとを含む抽出環境が、抽出時間のうちの少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％の間、液体形態のままであることになるか、又は抽出環境が、抽出時間全体にわたって液体形態のままである、前記〔２３〕に記載の方法。
〔２５〕ＣＯ ₂ の相ダイアグラムに関しては、ＳｂＣＬＥが、ａ）臨界圧力（ｐ _c ）以下で、臨界温度（ｔ _c ）を下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｂ）ｔ _c 以下で、及びｐ _c を下回って、及び液－気相ラインを超えて；ｃ）ｐ _c 以上で、ｔ _c を下回って、液－気相ラインを超えて、及び固－液相ラインを下回って；又はｄ）固－液相ライン、液－気相ライン、液体－超臨界相ライン、三重点（固－液－気）温度（ｔ _tp ）、三重点圧力（ｐ _tp ）、臨界点（液－気－超臨界）温度（ｔ _cp ）、及び臨界点圧力（ｐ _cp ）によって囲まれる液体領域の範囲内に入る温度及び圧力で行われる、前記〔１７〕～〔２４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２６〕ＳｂＣＬＥが、ａ）約０℃～約３１℃の温度及び約５．２ｂａｒ～約３０００ｂａｒの圧力；ｂ）約０℃から約３１℃の温度及び約５．２ｂａｒ～約１０００ｂａｒの圧力；ｃ）約２℃～約１６℃の温度及び約１１５ｂａｒ～約１３５ｂａｒの圧力；ｄ）約５～１０℃の温度及び約１２０～１３０ｂａｒの圧力；又はｅ）約５℃～約１５℃の範囲の温度及び約５０ｂａｒ～７０ｂａｒの範囲の圧力で行われる、前記〔１７〕～〔２５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２７〕抽出液体（二酸化炭素を含み、更に改質剤を含んでいてもよい）のバイオマスに対する質量比が、溶媒と原材料の両方の質量に基づいて約２０：１～約１００：１、約３０：１～約７５：１、約５０：１、約４５：１～６０：１、又は約４０：１～約４５：１の範囲である、前記〔１７〕～〔２６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２８〕二酸化炭素の改質剤に対する質量比が、約１００：約０．０１～２０、約１００：約０．０１～１５、約１００：約０．０１～１０、又は約１００：約０．０１～５の範囲である、前記〔１７〕～〔２７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２９〕ａ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に、脱水され、除湿され、フリーズドライされ、及び／又はデシケートされる；ｂ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に乾燥される；ｃ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に脱水されない；ｄ）バイオマスが、出現ごとに独立して、抽出される前に乾燥されない；又はｅ）出現ごとに独立して、前記〔１７〕～〔２８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３０〕組合せ組成物を生成する方法であって、
オレアンドリン含有第１のバイオマスに有機溶媒抽出を行って、オレアンドリン含有有機溶媒抽出物を提供すること；
オレアンドリン含有第２のバイオマスに亜臨界液体（ＳｂＣＬ）抽出（ＳｂＣＬＥ）を行って、オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物を提供すること；及び
前記オレアンドリン含有有機溶媒抽出物と前記オレアンドリン含有ＳｂＣＬ抽出物とを合わせて、前記組合せ組成物を提供すること
を含む方法。
〔３１〕ａ）前記有機溶媒抽出が、有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて行われ；ｂ）前記有機溶媒又は水性有機溶媒が、出現ごとに独立して、アルコールを含み；ｃ）前記有機溶媒が、出現ごとに独立して、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、クロロホルム、塩化メチレン、酢酸エチル、及びこれらの組合せからなる群から選択され；ｄ）前記有機溶媒抽出が、前記オレアンドリン含有バイオマスを有機溶媒又は水性有機溶媒を用いて１回又は複数回抽出することを含み；ｅ）出現ごとに独立して、前記水性有機溶媒が、最大約２０％ｗ／ｗ、約５％ｗ／ｗ～約１５％ｗ／ｗ、又は約１０％ｗ／ｗの水を含み；ｆ）前記有機溶媒抽出物が、約０℃～約７５℃、約５℃～約７０℃、約１０℃～約６０℃、約１０℃～約５０℃、約１０℃～約４５℃、又は約２０℃～約４０℃の温度で行われ；ｇ）有機溶媒（又は水性有機溶媒）のバイオマスに対するｖ／ｗ比が、約５０～１：約１、約４０～１：約１、約３０～１：約１、約２０～１：約１、約２０～５：約１、又は約１０：約１の範囲である、前記〔３０〕に記載の方法。
〔３２〕有機溶媒抽出が、以下：ａ）抽出環境を濾過することによって、前記バイオマスを抽出環境から分離して、粗製抽出物を形成すること；ｂ）水性液体を有機溶媒又は抽出環境に添加すること；ｃ）前記粗製抽出物から有機溶媒の含有量を減少させること；ｄ）粗製抽出物を活性炭で処理すること；ｅ）粗製抽出物を１回又は複数回濾過すること；ｆ）追加の有機溶媒を粗製抽出物に添加すること；ｇ）有機溶媒抽出物を無菌濾過すること；及び／又はｈ）水を粗製抽出物に添加し、水性粗製抽出物を有機溶媒で抽出することのうちの１つ又は複数を更に含む、前記〔３０〕又は〔３１〕に記載の方法。
〔３３〕抽出前のバイオマス中の水含有量が、約２０質量％以下、約１５質量％以下、約１０質量％以下、約８質量％以下、約５質量％以下、約２．５質量％以下、又は約１質量％以下である、前記〔１７〕～〔３２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３４〕ａ）抽出前のバイオマスの粒子サイズ（ｄ０．５）が、約１インチ未満、約０．７５インチ未満、約０．５インチ未満、約０．４インチ未満、約０．３インチ未満、約０．２インチ未満、約０．１インチ未満、約０．０５インチ未満、又は約０．０１インチ未満であり、前記粒子がＡＳＴＭふるいメッシュ開口サイズに関するものである、前記〔１７〕～〔３３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３５〕オレアンドリン含有バイオマスが、キョウチクトウ属（Ｎｅｒｉｕｍ）種、セイヨウキョウチクトウ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ）、セイヨウキョウチクトウＬ（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｌｅａｎｄｅｒ Ｌ）（キョウチクトウ科）、ネリウム・オドウルム（Ｎｅｒｉｕｍ ｏｄｏｕｒｕｍ）、ホワイトオレアンダー、ピンクオレアンダー、キバナキョウチクトウ属（Ｔｈｅｖｅｔｉａ）種、キバナキョウチクトウ（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｐｅｒｕｖｉａｎａ）、イエローオレアンダー、ザベチア・ネリフォリア（Ｔｈｅｖｅｔｉａ ｎｅｒｉｆｏｌｉａ）、キョウチクトウ属種の細胞培養で形質転換され、誘発されたアグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）、又はこれらの組合せである、前記〔１７〕～〔３４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔３６〕前記〔１７〕～〔３５〕のいずれか１項に記載の方法によって生成されるオレアンドリン含有抽出物。
〔３７〕前記抽出物が、ＳｂＣＬＥ中に得られた薬理学的活性多糖（及び／又は単糖）を含まない、前記〔１〕～〔３６〕のいずれか１項に記載の発明物。
〔３８〕オレアンドリン及び１種又は複数種の食事成分及び／又は食品添加物を含む栄養補助食品組成物。
〔３９〕オレアンドリン及び１種又は複数種の化粧品的に許容される成分を含む化粧料組成物。
〔４０〕本明細書において記載するＳｂＣＬ抽出物。
〔４１〕本明細書において記載するＳｂＣＬ抽出物を生成する方法。
〔４２〕本明細書において記載する医薬組成物。
〔４３〕本明細書において記載する投薬形態。
〔４４〕本明細書において記載するオレアンドリン含有組成物。
〔４５〕本明細書において記載する組合せ組成物。
〔４６〕本明細書において記載する二成分抽出物組合せ組成物。
〔４７〕本明細書において記載する処置する方法。
〔４８〕本明細書において記載する栄養補助食品組成物。
〔４９〕本明細書において記載する化粧料組成物。

【図1】

【図2】

【図3-1】

【図3-2】

【図4】