特許7654549 | 知財ポータル「IP Force」

知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」

▶ ビオッツエスエイの特許一覧

特許7654549活性物質のための医薬担体および前記担体を含有する医薬組成物

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

目に優しい文字サイズ小中大 PDF Top

< >

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-03-24

(45)【発行日】2025-04-01

(54)【発明の名称】活性物質のための医薬担体および前記担体を含有する医薬組成物

(51)【国際特許分類】

A61K 47/20 20060101AFI20250325BHJP

A61K 9/06 20060101ALI20250325BHJP

A61K 31/351 20060101ALI20250325BHJP

A61K 36/718 20060101ALI20250325BHJP

A61K 36/9066 20060101ALI20250325BHJP

A61K 45/00 20060101ALI20250325BHJP

A61K 47/18 20170101ALI20250325BHJP

A61K 47/22 20060101ALI20250325BHJP

A61K 47/44 20170101ALI20250325BHJP

A61P 3/10 20060101ALI20250325BHJP

A61P 43/00 20060101ALI20250325BHJP

A61P 17/00 20060101ALN20250325BHJP

A61P 29/00 20060101ALN20250325BHJP

【ＦＩ】

A61K47/20

A61K9/06

A61K31/351

A61K36/718

A61K36/9066

A61K45/00

A61K47/18

A61K47/22

A61K47/44

A61P3/10

A61P43/00 121

A61P17/00

A61P29/00

【請求項の数】 6

(21)【出願番号】P 2021540520

(86)(22)【出願日】2020-01-10

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-03-09

(86)【国際出願番号】 PL2020050003

(87)【国際公開番号】W WO2020145833

(87)【国際公開日】2020-07-16

【審査請求日】2022-01-13

【審判番号】

【審判請求日】2023-03-01

(31)【優先権主張番号】P.428534

(32)【優先日】2019-01-10

(33)【優先権主張国・地域又は機関】PL

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】521307211

【氏名又は名称】ビオッツエスエイ

【氏名又は名称原語表記】ＢＩＯＴＴＳＳＡ

【住所又は居所原語表記】ｕｌ．Ｋｒａｋｏｗｓｋａ１４１－１５５，５０－４２８Ｗｒｏｃｌａｗ，Ｐｏｌａｎｄ

(74)【代理人】

【識別番号】100091502

【弁理士】

【氏名又は名称】井出正威

(72)【発明者】

【氏名】ビアナット，ポール

(72)【発明者】

【氏名】メレ，ヤン

【合議体】

【審判長】磯貝香苗

【審判官】井上千弥子

【審判官】石井徹

(56)【参考文献】

【文献】特表２００２－５４２２８５号公報（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００３－５１５６１５号公報（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００８－５１４６０６号公報（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１５－５１６４５５号公報（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００４－０７５６３２（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２００８／０４９４０１（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

JSTPlus/JST7580/JMEDPlus(JDreamIII)

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

溶媒和性の非プロトン性溶媒、炭酸アミド、および不飽和脂肪酸含有植物油を含有する、皮膚を通して活性物質を輸送する剤形のための医薬担体（但し、水を含有するものを除く）であって、
前記非プロトン性溶媒を、前記担体の０．０１重量％～５重量％の量で含有し、
前記炭酸アミドを、前記担体の０．０１重量％～２重量％の量で含有し、
前記不飽和脂肪酸含有植物油を、前記担体の１重量％～５重量％の量で含有し、
前記非プロトン性溶媒が、ジメチルスルホキシドであり、
前記炭酸アミドが、尿素であり、
前記植物油が、大風子油、亜麻仁油、ナタネ油、ピーナッツ油、ヒマワリ油、麻実油及びその他の不飽和脂肪酸含有植物油から選択されること、
を特徴とする無水の担体。

【請求項2】

請求項１に記載の担体および活性物質を含む無水の医薬組成物であって、前記医薬組成物が皮膚を通して輸送される剤形であり、前記活性物質の前記担体に対する重量比が１：１０～２：１であり、前記担体が前記組成物の１重量％～２０重量％を構成することを特徴とする、無水の医薬組成物。

【請求項3】

前記無水の医薬組成物を調製するために使用される賦形剤を含有し、前記活性物質の前記賦形剤に対する重量比が１：２．５～１：４９４であることを特徴とする、請求項２に記載の無水の医薬組成物。

【請求項4】

前記活性物質は、天然または合成起源の活性物質から選択されることを特徴とする、請求項２または３に記載の無水の医薬組成物。

【請求項5】

前記賦形剤の成分が豚脂、アヒル脂、ガチョウ脂、ユーセリン（商標）、Ｌｅｋｏｂａｚａ（商標）、Ｈａｓｃｏｂａｚａ（商標）、白色ワセリンおよび黄色ワセリン、並びにそれらの任意の組合せから選択されることを特徴とする、請求項３または４に記載の無水の医薬組成物。

【請求項6】

前記剤形が、軟膏又は半固形混合物であることを特徴とする、請求項２～５の何れか１項に記載の無水の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、活性物質のための担体を含有する半固形薬物形態に関する。本発明は、薬学および医学において適用可能である。

【背景技術】

【0002】

炎症を含むいくつかの疾患状態において並行して投与されることがある、水溶性の活性物質と他の脂溶性の活性物質が公知である。炎症は、傷害因子の影響下で、血管新生化組織中に発生する順序付けられた過程である。炎症は、一般的に外因性または内因性因子である、化学的、物理的または生物学的（病原微生物への感染）因子により引き起こされることがある。血管の変化が、炎症反応の根底にある。防御機能を有する様々な血漿タンパク質、例えば抗体または補体が患部組織に進入し得る結果として、血管拡張、組織への血液供給および血管透過性の増大が起こる。

【0003】

これらの中で、活性物質は、Ｃｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａ（Ｃｕｒｃｕｍａｄｏｍｅｓｔｉｃａ）である。これはショウガ科の多年生植物であり、主にその風味のために赤道帯において栽培されている。生薬原料はｌｏｎｇｃｕｒｃｕｍａ（Ｃｕｒｃｕｍａｅｌｏｎｇａｅｒｈｉｚｏｍａ）であり、乾燥原料に対して、クルクミンとして算出される少なくとも３％のジシノイルメタン（ｄｉｃｉｎｏｙｌｍｅｔｈａｎｅ）誘導体（クルクミノイド）および少なくとも３％の油（主にセスキテルペン）を含有する。クルクミンは、ＴＰＡ誘発性炎症、過形成および増殖を阻害することが示されている。ターメリック根茎は、ラットにおいてブレオマイシンおよびアミオダロンの使用により引き起こされる炎症応答を阻害し、肺線維症を予防した。ターメリックの抗炎症効果は、マウス上皮におけるアラキドン酸代謝の阻害に関連する。研究では、カラギーナン試験におけるクルクミンの平均の有効用量は、ラットにおいてＥＤ５０＝４８ｍｇ／ｋｇであり、マウスにおいてＥＤ５０＝１００．２ｍｇ／ｋｇであることが示された。マウスにおけるターメリックのアルコール抽出物についてはＥＤ５０＝３０９．０ｍｇ／ｋｇ、水性抽出物についてはＥＤ５０＝４．７ｍｇ／ｋｇ、石油エーテル抽出物についてはＥＤ５０＝４０．７ｍｇ／ｋｇ、クルクミン単独についてはＥＤ５０＝８．７ｍｇ／ｋｇ。Ｃｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａｒｈｉｚｏｍｅは、いくつかの慢性炎症性疾患を処置するために使用することができる。Ｎａｈａｒらは、クルクミンを有する脂質の固形複合体を含有する製剤に対する実験を実行した。リポ多糖（ＬＰＳ）誘発性炎症に対するこの製剤のインビトロの活性を、ＲＡＷ２６４．７マウスマクロファージ株において試験した。製剤の使用により、一酸化窒素およびプロスタグランジンＥ２の濃度ならびにインターロイキン－６の濃度が、用量に依存して有意に減少した。転写因子ＮＦ－κＢの阻害も認められている。発表された薬理学試験の結果により、マウス表皮ミクロソーム中のシクロオキシゲナーゼの活性およびサイトソル中のリポキシゲナーゼに対する、ターメリック成分の阻害効果が示されている。Ａｍｅｓ試験では、ターメリックの水抽出物および単離されたクルクミンは、両方とも変異原性ではなかった。

【0004】

Ｃｏｐｔｉｓは、伝統的な日本、中国およびインドの医学において、多数の疾患を処置するために使用される。記述されたイソキノリンアルカロイド原料の薬理学的特性を考慮すると、以下の範囲：拡張、胆汁分泌促進、殺原虫（ｐｒｏｔｏｚｏｉｃｉｄａｌ）、静菌および殺菌、静真菌、降圧、鎮静、解熱、鎮痛、細胞毒性、駆虫の作用を与えることができる。Ｃｏｐｔｉｓは、細菌細胞による毒素の放出を阻害する。Ｃｏｐｔｉｓは、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、肺炎球菌（ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃｉ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏｃｈｏｌｅｒａｅ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ）および赤痢菌（ＤｙｓｅｎｔｅｒｉａｅＢａｃｉｌｌｕｓ）のインビトロの成長を制限する。Ｃｏｐｔｉｓ製剤は、リーシュマニア感染（リーシュマニア症）の処置に、首尾よく使用される。Ｃｏｐｔｉｓ抽出物は、ベルベリンを含有する他の薬草のように、数多くの病原性原虫、例えば赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａｌａｍｂｌｉａ）および膣トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓｖａｇｉｎａｌｉｓ）を破壊する。数名の著者（例えばＪｏｈｎＣｈｅｎおよびＴｉｎａＣｈｅｎ、２００４年）は、Ｃｏｐｔｉｓは極めて広域スペクトル：赤痢菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、チフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉ）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏｃｈｏｌｅｒａｅ）、バチルス・プロテウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｒｏｔｅｕｓ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、髄膜炎菌（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）、ベータ溶血性連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、肺炎双球菌（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ）およびレプトスピラ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）の抗菌活性を有すると報告している。彼らは、Ｃｏｐｔｉｓが大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）および黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）の発生を著しく阻害すると考えている。ＣｏｐｔｉｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓ外用製剤は、口および喉の炎症、皮膚の炎症、生殖器、結膜炎および瞼の皮膚および粘膜の感染、眼の寄生虫症、乾癬、頭垢、直腸炎、生殖道感染の結果としての腟分泌物、皮膚および粘膜の真菌症（強力な浸出液および水－アルコール抽出物）、おでき、化膿性皮膚疾患、にきびの処置における適応が認められている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

したがって、担体は、水溶性活性物質および脂溶性活性物質の両方の溶解または乳化を確実とすること、ならびに同時に、これらの物質の用量を、活性を増大させながら減少させることが可能なためにこれらのバイオアベイラビリティーを増大させること、加えて高い均質性および均一性を有し不純物の程度が低い半固形混合物およびそれを含有する組成物を得ることを可能とすることが求められる。意外なことに、前記課題は、本発明により解決された。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明の第１の目的は、スルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒、炭酸アミド、および不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油を含有することを特徴とする活性物質のための医薬担体である。好ましくは、本発明による担体は、スルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒が、ジメチルスルホキシドを含む群から選択されることを特徴とする。等しく好ましくは、本発明による担体は、炭酸アミドが、尿素、カフェインまたはカフェインを含む吸収促進剤の群から選択されることを特徴とする。さらに好ましい本発明の実施形態では、担体は、不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油が、大風子油、ヒマワリ油、植物油、好ましくは亜麻仁油、ナタネ油、ピーナッツ油、麻実油を含む群から選択されることを特徴とする。別の等しく好ましい本発明の実施形態では、担体は、好ましくは白ろう、植物ろう、好ましくは黄ろう、カルナウバろう、ラノリンを含む群から選択される天然乳化剤を加えて含むことを特徴とする。別の等しく好ましい本発明の実施形態では、担体は、スルホキシド類の群からの物質を、強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒として、薬物の０．０１重量％～５重量％の量で含有することを特徴とする。より好ましくは、本発明による担体は、炭酸アミドを、薬物の０．０１重量％～２重量％の量で含有することを特徴とする。等しく好ましくは、本発明による担体は、不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油を、薬物の１重量％～５重量％の量で含有することを特徴とする。最も好ましくは、本発明による担体は、天然乳化物質を、薬物の０．００１重量％～８重量％の量で含有することを特徴とする。

【0007】

本発明の第２の目的は、本発明の第１の目的において定義されたような担体および活性物質を含み、活性物質と担体との比が１：１０～２：１であり、担体が組成物の１重量％～２０重量％を構成することを特徴とする、医薬組成物である。等しく好ましくは、本発明による組成物は、基質を含み、活性物質と賦形剤との重量比が１：２．５～１：４９４であり、好ましくは半固形の薬物形態を有することを特徴とする。より好ましくは、本発明による組成物は、天然または合成起源の活性物質、好ましくはＣｏｐｔｉｓＣｈｉｎｅｓｉｓ抽出物、ＣｕｒｃｕｍａＬｏｎｇａ抽出物またはそれらの組合せを含有する群から選択される活性物質を含むことを特徴とする。別の好ましい本発明の実施形態では、組成物は、基質成分が豚脂、より好ましくはアヒル脂（ｄｕｃｋｌａｒｄ）および／またはガチョウ脂（ｇｏｏｓｅｌａｒｄ）および／またはユーセリン、より好ましくはＬｅｋｏｂａｚａ、Ｈａｓｃｏｂａｚａ、白色ペトロラタム、黄色ペトロラタムおよび／または硫酸亜鉛－亜鉛塩、それらの任意の組合せ、最も好ましくは豚脂、ガチョウ脂、ユーセリンおよび硫酸亜鉛を含む群から選択されることを特徴とする。

【0008】

賦形剤の混合物は、活性物質のバイオアベイラビリティーに対するその効果を特徴とする担体を創出する。例えば、活性物質の半固形の担体は、以下の賦形剤を使用して作製される：Ａ、好ましくはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｂ、好ましくは尿素（尿素）、Ｄ、大風子油（大風子油剤（ＯｌｅｕｍＣｈａｕｌｍｏｏｇｒａ））、加えて、Ｃ、好ましくは白ろう（ミツロウ（Ｃｅｒａａｌｂａ））

【0009】

担体成分の割合を、表１に示す。

【0010】

【表1】

【0011】

担体を構成する物質の混合物は、水溶性活性物質および脂溶性活性物質の両方の溶解または乳化を確実とする要素からなる。混合物Ａ－Ｂは、親水性の活性物質の溶解に関与する。混合物ＡＤ、好ましくは加えてＣは、親油性の物質の溶解に関与する。混合物Ａ－Ｂ、好ましくは加えてＣは、乳化特性に関与する。
・担体に使用されるＡの最小量は、薬物の全重量の０．０１％よりも低くてはならず、薬物の全重量の５％を超えてはならない。
・担体に使用されるＢの最小量は、薬物の全重量の０．０１％よりも低くてはならず、薬物の全重量の２％を超えてはならない。
・担体に使用されるＣの最小量は、薬物の全重量の０．００１％よりも低くてはならず、薬物の全重量の８％を超えてはならず、群Ｃの化合物は、本発明の基礎的担体中に使用する必要はない。
・担体に使用されるＤの最小量は、薬物の全重量の１％よりも低くてはならず、薬物の全重量の５％を超えてはならない。

【0012】

本発明の目標は、これらの物質の用量を、活性を増大させながら減少させることが可能なためにこれらのバイオアベイラビリティーを増大させる、活性物質の普遍的な担体を得ることである。効果は、炎症の処置を加速し、皮膚潰瘍の処置を短縮することである。

【0013】

現状の知識では、ＡＢＤ、好ましくは加えてＣを含有しない混合物、特に大風子油、ＤＭＳＯ、尿素および白ろうが、この目的のために使用されたことが示されている。

【0014】

本発明の例示的な実施形態を示す。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】ナトリウム－グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤の群からの物質を含有する医薬品の活性を示す図である（フルオレセイン）。

【図2】蛍光色素注射部位に隣接する筋肉における緑色発光の形態で陽性応答を示し、Ｆ２群では陽性応答がないことを示す図である（フルオレセイン）。

【図3】Ｆ３群で強力な陽性応答（肝細胞および細胞間空間の完全な染色）、残りの群で陰性応答である、倍率４００ｘでの肝細胞の試料を図示する図である（フルオレセイン）。

【図4】真皮および皮下層における緑色発光の形態での強力な陽性応答が、Ｆ１およびＦ３群（矢印）で最も強力であり、Ｆ３群では表皮の表面のみに陽性応答が生じたことを倍率４０ｘで図示する図である（アクリジンオレンジ）。

【図5】陽性応答が目視可能であり、すなわち皮膚において見られたものと類似し、低倍率でシグナルを示すために画像のコントラストを修正する必要があった、筋肉組織を示す図である（アクリジンオレンジ）。陰性応答がＦ２群で観察された（画像の強力なコントラスト強化、倍率１００ｘ、１００ｘおよび４００ｘ）。

【図6】陽性応答がＦ３群で生じ（矢印）、他の群では陰性の結果が観察された、倍率４００ｘでの肝細胞試料を示す図である（アクリジンオレンジ）。

【図7】最も強力な陽性応答がＦ１およびＦ３群で観察された、倍率１００ｘ、１００ｘおよび４０ｘでの結合組織細胞の試料の図である（ローダミン）。

【図8】弱い陽性応答がＦ１およびＦ３群で目視可能である（倍率１００ｘ）、肝臓試料の図である（ローダミン）。

【図9】試験組織の蛍光強度の平均値が、抗体を有しないビヒクルを用いて処置した対照組織の蛍光強度（１００％）のパーセンテージである、正規化した値の図である。

【図10】真皮における、試験製剤Ｂの平均蛍光強度の絶対値を示す図である。

【図11】対照担体（１００％）と比較した、真皮における正規化した蛍光強度のプロットである。

【図12】得られた全ての試験された試料の比較結果の、ノンパラメトリックなクラスカル－ウォリス分散検定（ＡＮＯＶＡ）（「多重比較についての「ｚ」値；Ｗ、独立変数（グルーピング）：Ｓ；クラスカル－ウォリス検定：Ｈ（７、Ｎ＝２４）＝１４．６９３３３、ｐ＝，０４０１」）を図示する図である。

【図13】実施例３５において説明した試験の結果を示す図である。

【図14】実施例３５において説明した試験の結果を示す図である。

【実施例1】

【0016】

担体混合物（Ｆ１）を、以下のステップにおいて調製した：

【0017】

ａ）不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油および任意選択で天然乳化物質を、容器中、最大４０℃で融解した。

【0018】

ｂ）スルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒を、撹拌しながら、不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油と任意選択で天然乳化物質との融解混合物に添加した。

【0019】

適切な量の炭酸アミドを、スルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒と不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油Ｄと任意選択で天然乳化物質との混合物に添加した。

【0020】

得られた混合物を、均質な堅さおよび色が得られるまで撹拌した。

【0021】

結果として生じた混合物は、乳化特性を示した。親水性の物質を、融解混合物中に溶解した。親油性の物質を、室温の混合物中に溶解した。

【0022】

その後のステップで、混合物Ｆ２およびＦ３を調製した。試験に使用した混合物の組成物の一覧を、表２に提示する。

【0023】

【表2】

【0024】

混合物Ｆ２は、スルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒（ＤＭＳＯ）を有しなかった。混合物は、乳化特性を示した。親油性の物質を、混合物中に室温で溶解した。親水性の物質は、混合物Ｆ２中に溶解しなかった。

【0025】

混合物Ｆ３は、天然乳化剤（ミツロウ）を有しなかった。親油性の物質を、混合物中に室温で溶解した。親水性の物質を、Ｆ３混合物中に約４０℃で溶解した。混合物Ｆ３は、乳化特性を示さなかった。

【0026】

試験では、Ｆ１混合物が最大の普遍的特性を有することが示された。

【実施例2】

【0027】

担体混合物（Ｆ１）を、以下のステップにおいて作製した：

【0028】

ａ）薬物全重量の１％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油、および任意選択で薬物全重量の０．００１％の量の天然乳化物質を、容器中、最大４０℃で融解した。

【0029】

ｂ）薬物全重量の０．０１％の量のスルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒を、撹拌しながら、薬物全重量の１％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油と任意選択で薬物全重量の０．００１％の量の天然乳化物質との融解混合物に添加した。

【0030】

薬物全重量の０．０１％の量の炭酸アミドを、薬物全重量の０．０１％の量のスルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒と薬物全重量の１％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油Ｄと任意選択で薬物全重量の０．００１％の量の天然乳化物質との混合物に添加した。

【0031】

得られた混合物を、均質な堅さおよび色が得られるまで撹拌した。

【0032】

結果として生じた混合物は、乳化特性を示した。親水性の物質を、融解混合物中に溶解した。親油性の物質を、室温の混合物中に溶解した。

【実施例3】

【0033】

担体混合物（Ｆ１）を、以下のステップにおいて作製した：

【0034】

ａ）薬物全重量の５％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油、および任意選択で薬物全重量の８％の量の天然乳化物質を、容器中、最大４０℃で融解した。

【0035】

ｂ）薬物全重量の５％の量のスルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒を、撹拌しながら、薬物全重量の５％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油と任意選択で薬物全重量の８％の量の天然乳化物質との融解混合物に添加した。

【0036】

薬物全重量の２％の量の炭酸アミドを、薬物全重量の５％の量のスルホキシド類の群からの強力な溶媒和性の非プロトン性溶媒と薬物全重量の５％の量の不飽和脂肪酸の含有量が高い植物油Ｄと任意選択で薬物全重量の８％の量の天然乳化物質との混合物に添加した。

【0037】

得られた混合物を、均質な堅さおよび色が得られるまで撹拌した。

【0038】

結果として生じた混合物も、乳化特性を示した。親水性の物質を、融解混合物中に溶解した。親油性の物質を、室温の混合物中に溶解した。

【0039】

実施例１、２および３の実行の結果として、担体中で使用された個々の成分の定量的（パーセンテージ）範囲内で、混合物が得られ、本発明の第１の目的の想定が満たされたことが証明された。

【0040】

本発明の第２の目的は、半固形薬物形態の上述の担体、および適切に選択された割合の活性物質の独自の混合物の使用である。活性物質は、全て合成物質および天然起源の物質、例えばＣｏｐｔｉｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓおよびＣｕｒｃｕｍａＬｏｎｇａ抽出物の混合物である。活性物質と担体との間の重量比は、１：１０～２：１の範囲であるべきである。与えられたパーセンテージは、１００部の最終製品中の濃度である。担体は、最終製品の１．０～２０重量％を構成する。

【0041】

基質についての主成分は、５～２０％の量の豚脂、４～１５％の量のガチョウ脂、１２～２１％の量のユーセリンおよび０．５～２％の量の硫酸亜鉛から得られた混合物であり、活性物質と賦形剤との重量比は１０：９０～１：９９９であり、以下を含むことを特徴とする半固形薬物製剤の形態を有する：

【0042】

ａ）抽出物の粉末化を達成するために、親油性の物質と一部の抽出物を、好ましくは０．１％～５％の量で、工程全体について必要とされる基質を用いて、２０～５０℃の温度範囲で、製薬および食品用混合機中最大４０００ＲＰＭで、少なくとも３分間、混合するステップ。

【0043】

ｂ）結果として生じたステップａ）からの混合物と、一部分、好ましくは６％～９０％の、残りの量の工程全体について必要とされる基質とを、２０～５０℃の温度範囲で、製薬および食品用混合機中最大５０００ＲＰＭで、少なくとも３分間、混合するステップ。

【0044】

ｃ）結果として生じたステップｂ）からの混合物と、残りの量の工程全体について必要とされる基質と、次に残りの賦形剤とを、均質性を達成するために、２０～５０℃の温度範囲で、製薬および食品用混合機中最大４０００ＲＰＭで、少なくとも３分間、混合するステップ。

【0045】

ｄ）実験用および工業用（回転式およびピストン）ホモジナイザー中、２０～５０℃の温度範囲で、少なくとも５分間、均質化するステップ。

【0046】

本発明の本質は、均等に分散した活性物質を含有する、基質および活性物質の均質な混合物を創出することである。本発明によると、軟膏剤用の医薬品包装中に分注された半固形混合物が得られた。

【実施例4】

【0047】

本発明による軟膏剤を得るための方法
本発明の目的である製品を、その好ましい実施形態を表３に示し、以下の製造技術により調製した：

【0048】

適切に秤量された量の植物抽出物を、回転式ホモジナイザー（１０００ＲＰＭで７分間）中で、９％の必要とされる量の担体と混合し、次にホモジナイザーに、５％の必要とされる量の融解基質を添加し、混合物全体を回転式ホモジナイザー（５００ＲＰＭで７分間）中で粉末化した。残りの量の担体を回転式ホモジナイザーに添加し、混合し、次に融解基質の残余を添加し、均質化した（２０００ＲＰＭで１０分間）。

【0049】

得られた軟膏剤を、次に軟膏剤用の薬剤包装へと移した。

【0050】

【表3】

【0051】

活性物質の含有量に関して均質である半固形混合物が得られ、結果として生じた植物抽出物の不純物の含有量は、実験的に選択された医薬組成物、この組成物の成分の適切な細分化、および使用された製造技術に起因して、検出レベルを下回る。

【0052】

実験的に選択された定量的割合の適切な組成物の選択、および天然の医薬物質、特定の賦形剤の使用、および上述の軟膏剤混合物製造技術の適用により、均一な含有量の活性物質を薬物の形態で得ることが可能となり、すなわち、各容積単位において同じ用量の活性物質が存在し、試験中に確認が得られた。

【0053】

試験を、ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈからのＬ９２９細胞株（マウス線維芽細胞）、カタログ番号８５０１１４２５、商品番号１４Ｇ０１０で実行した。クライオチューブ９４番由来の細胞を、試験に使用した。所与の細胞株を、ＰＮ－ＩＳＯ１０９９３－５規格に基づいて、試験のために選択した。

【0054】

ＸＴＴ法を使用した細胞毒性試験を、「ＴｅｓｔＩｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ－ＸＴＴ」（ＩＢ１６．４）に基づくＰＮ－ＩＳＯ１０９９３－５に従って実行した。

【0055】

結果
＊生存能力の限度－７０％

【0056】

【表4】

【0057】

【表5】

【0058】

【表6】

【0059】

【表7】

【0060】

【表8】

【0061】

概要：
全ての５つの試料についての平均の生存能力の％は、７０％＊を超え、結果は、試験材料が細胞毒性でないことを示す。

【0062】

加えて、担体の使用により、外部環境条件の有害作用に対する活性物質の保護、すなわち技術的処理中の温度および光に対する耐性が確実となる。

【実施例5】

【0063】

本発明による軟膏剤を得る方法
本発明の目的である製品を、その好ましい実施形態を表３に示し、以下の製造技術により調製した：

【0064】

適切に秤量された量の植物抽出物を、１００％の必要とされる量の担体と、回転式ホモジナイザー（１０００ＲＰＭで７分間、室温）中で混合し、次に混合物－１が液化するまで水浴中で加熱した。次に、２５％の必要とされる量の基質を液化した混合物に添加し、次に均質な堅さ（混合物－２）が得られるまで混合した。残りの量の基質を回転式ホモジナイザーに添加し、液化した混合物－２と混合し（５００ＲＰＭで７分間、室温）、次に混合物全体を均質化した（２０００ＲＰＭで１０分間）。

【0065】

入手した軟膏剤の混合物を、次に軟膏剤用の薬剤包装へと移した。

【0066】

【表9】

【0067】

活性物質の含有量に関して均質である半固形混合物が得られ、結果として生じた植物抽出物の不純物の含有量は、実験的に選択された医薬組成物、この組成物の成分の適切な細分化、および使用された製造技術に起因して、検出レベルを下回り、これは以下の製品パラメーターの決定を可能とする試験により確認された：
ヨウ素価（Ａ）
方法（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）：滴定
ヨウ素価４１．２０

【0068】

ヨウ素価は、１００グラムの試験された製品中に認められる脂肪酸中に存在する特定の二重結合に結合する、ヨウ素として算出されるハロゲン基由来の元素のグラム数である。ヨウ素価は、脂肪の不飽和のレベルを決定するため、製品を特定およびパラメーター化するために使用することができる。製品は、脂肪原料の起源に依存して、ある特定の限度内で、脂肪酸の組成、したがって同様にヨウ素価が異なることがある。
見掛け粘度（Ａ）
方法（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）：粘度測定
見掛け粘度８３６．７ｍＰａ×ｓ

【0069】

試験の結果は、製品基準を決定するために必要であろう。このレベルの粘度で、活性物質を均質な混合物の形態に維持することが可能である。

【0070】

実験的に選択された定量的割合の適切な組成物の選択、および天然の医薬物質、特定の賦形剤の使用、および上述の軟膏剤混合物製造技術の適用により、均一な含有量の活性物質を薬物の形態で得ることが可能となった。

【0071】

加えて、担体の使用により、技術的処理中の外部環境条件の有害作用に対する活性物質の保護が確実となる。
酸価（Ａ）
方法（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）：滴定
酸価０．１２

【0072】

行われた試験（酸価）により、試験された製品における遊離脂肪酸の含有量（脂肪加水分解の程度）が決定された。
鹸化価（Ａ）
方法（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）：滴定
鹸化価９６．２

【0073】

試験により、脂肪酸の平均分子量が決定された。試験の結果は、遊離脂肪酸を中和し、１ｇの試験製品中に含有されるアシルグリセロールを鹸化するために必要とされる水酸化カリウムのミリグラム数である。
滴点
方法（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）：目視評価
融点２４．０℃±２％

【0074】

試験の結果は、製品基準を決定するために必要であろう。
過酸化物価（ＵＳＰ）（Ａ）
方法（ＵＳＰ）：滴定
過酸化物価０．２０

【0075】

過酸化物価は過酸化物の含有量であり、脂肪の酸化（酸敗）の程度の指標として扱われる。製品について得られた価は、正常範囲内である。

【実施例6】

【0076】

親油性および親水性の物質を含有する医薬品の調製の方法
ビタミンの群からの等量の物質を、基準物質として使用した：
ａ）ビタミンＡ－脂溶性物質
ｂ）ビタミンＣ－水溶性物質

【0077】

【表10】

【0078】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0079】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0080】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、活性物質と担体の間の比は１：１０であり、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例7】

【0081】

【0082】

【表11】

【0083】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－０．０５ｇ
－ビタミンＣ－０．０５ｇ
を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体組成物に添加した。

【0084】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（９８．８ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0085】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、活性物質と担体の間の比は１：１０であり、担体と基質の間の比は１：９９であった。

【実施例8】

【0086】

【0087】

【表12】

【0088】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－２０ｇ
－ビタミンＣ－２０ｇ
を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0089】

約１０分間混合（４００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した残りの量の基質（４０ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0090】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、活性物質と担体の間の比は２：１であり、担体と基質の間の比は１：２であり、担体の量は最終製品の全重量の２０％を構成した。

【実施例9】

【0091】

【0092】

【表13】

【0093】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体組成物に添加した。

【0094】

約１０分間混合（４００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した残りの量の基質（９７ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0095】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、活性物質と担体の間の比は２：１であり、担体と基質の間の比は１：２であり、担体の量は最終製品の全重量の１％を構成した。

【実施例10】

【0096】

【0097】

【表14】

【0098】

【0099】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量のＬｅｋｏｂａｚａを使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0100】

【実施例11】

【0101】

【0102】

【表15】

【0103】

【0104】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量のＨａｓｃｏｂａｚａを使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0105】

【実施例12】

【0106】

【0107】

【表16】

【0108】

【0109】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量の黄色ワセリンを使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0110】

【実施例13】

【0111】

【0112】

【表17】

【0113】

【0114】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量の白色ワセリンを使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0115】

【実施例14】

【0116】

【0117】

【表18】

【0118】

【0119】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量のＬｅｋｏｂａｚａを使用し、豚脂をガチョウ脂の代わりに使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0120】

【実施例15】

【0121】

【0122】

【表19】

【0123】

【0124】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量のＨａｓｃｏｂａｚａを使用し、アヒル脂をガチョウ脂の代わりに使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0125】

【実施例16】

【0126】

【0127】

【表20】

【0128】

【0129】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量の白色ワセリンを使用し、豚脂をガチョウ脂の代わりに使用し、硫酸亜鉛の代わりに類似した量の塩化亜鉛を使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0130】

【実施例17】

【0131】

【0132】

【表21】

【0133】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順（１つの重要な違いがあり、大風子油の代わりに類似した量の亜麻仁油を使用した）に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0134】

【0135】

【実施例18】

【0136】

【0137】

【表22】

【0138】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順（１つの重要な違いがあり、大風子油の代わりに類似した量のナタネ油を使用した）に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0139】

【0140】

【実施例19】

【0141】

【0142】

【表23】

【0143】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順（１つの重要な違いがあり、大風子油の代わりに類似した量の落花生油を使用した）に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0144】

【0145】

【実施例20】

【0146】

【0147】

【表24】

【0148】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順（１つの重要な違いがあり、大風子油の代わりに類似した量のヒマワリ油を使用した）に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0149】

【0150】

【実施例21】

【0151】

【0152】

【表25】

【0153】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。以下の量の活性物質：
－ビタミンＡ－１ｇ
－ビタミンＣ－１ｇ
を、Ｆ１について説明された手順（１つの重要な違いがあり、大風子油の代わりに類似した量の麻実油を使用した）に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0154】

【0155】

【実施例22】

【0156】

ナトリウム－グルコース共輸送体２阻害剤（ＳＧＬＴ２）の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
ナトリウム－グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0157】

ダパグリフロジンプロパンジオール
ダパグリフロジンは、非常に強力な（Ｋｉ：０．５５ｎＭ）選択的かつ可逆的なナトリウム－グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）の阻害剤である。

【0158】

ＳＧＬＴ２は、腎臓中に選択的に発現し、７０を超える他の種類の組織（肝臓、筋肉組織、脂肪組織、乳房、膀胱および脳を含む）ではこの種類の発現が同時に欠如している。ＳＧＬＴ２は、糸球体濾過から血液中へのグルコース再吸収に関与する主な輸送体である。２型糖尿病では、高血糖が存在するにもかかわらず、グルコース再吸収が腎臓中でなお行われている。ダパグリフロジンは、腎臓のグルコース再吸収を減少させ、グルコースの尿排出をもたらすことにより、空腹時および食後のグルコースの制御を改善する。グルコースの排出は、初回用量後に観察され、用量間の２４時間間隔の間継続し、処置期間を通して持続する。腎臓によりこれらの作用機序に起因して除去されるグルコースの量は、血中グルコースレベルおよび糸球体濾過速度（ＧＦＲ）の程度に依存する。ダパグリフロジンは、低血糖に応じた正常な内因性グルコース産生を妨害しない。ダパグリフロジンは、インスリンの分泌および作用とは無関係に機能する。ＨＯＭＡベータ細胞（ベータ細胞機能のホメオスタシスモデル評価）の改善が、前臨床試験において観察された。

【0159】

ダパグリフロジンにより誘発されたグルコースの尿排出は、カロリー消費および体重減少に関連する。ダパグリフロジンによるグルコースおよびナトリウム共輸送体の阻害は、軽度の利尿および一過性のナトリウム利尿にも関連する。

【0160】

ダパグリフロジンは、末梢組織へのグルコース輸送に重要な他のグルコース輸送体を阻害せず、腸におけるグルコース吸収に関与する主な輸送体であるＳＧＬＴ１よりも、ＳＧＬＴ２に対して１４００倍を超えてより選択的である。

【0161】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。５ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0162】

【0163】

【実施例23】

【0164】

ナトリウム－グルコース共輸送体２阻害剤（ＳＧＬＴ２）の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
ナトリウムグルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0165】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体組成物に添加した。

【0166】

【0167】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：９９であった。

【実施例24】

【0168】

【0169】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。実施例４において説明した２０ｇの量の一部の担体を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加し、２０ｍｇの量の活性物質を続けた。

【0170】

約１０分間混合（４００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した残りの基質（２０ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0171】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：２であり、担体の量は最終製品の全重量の２０％を構成した。

【実施例25】

【0172】

【0173】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。実施例４において説明した１ｇの量の一部の担体を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体組成物に添加し、３５ｍｇの量の活性物質を続けた。

【0174】

約１０分間混合（４００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した残りの基質（９６ｇ）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0175】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：９７であり、担体の量は最終製品の全重量の１％を構成した。

【実施例26】

【0176】

【0177】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。５０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0178】

【0179】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例27】

【0180】

【0181】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。７０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0182】

【0183】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例28】

【0184】

【0185】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１００ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0186】

【0187】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例29】

【0188】

【0189】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１０５ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0190】

【0191】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【0192】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１４０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0193】

【0194】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例30】

【0195】

【0196】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。２１０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0197】

約１０分間混合（２００ＲＰＭ）した後、均質な混合物を得て、使用した物質を混合後に完全に溶解した。そのように得られた混合物を、実施例４において説明した基質（８０ｇ）（１つの重要な違いがあり、ユーセリンの代わりに類似した量の白色のＨａｓｃｏｂａｚａを使用し、アヒル脂をガチョウ脂の代わりに使用した）に、８分間撹拌しながら（５００ＲＰＭ）添加した。

【0198】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例31】

【0199】

【0200】

ダパグリフロジンプロパンジオール
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。２４０ｍｇの量の活性物質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体組成物に添加した。

【0201】

【0202】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【0203】

異なる物理化学的性質の物質を、皮膚を通して輸送する可能性、およびこれらの物質のバイオアベイラビリティーに対する影響を確認するために、動物モデルに対して蛍光マーカー（フルオレセイン、ローダミン、アクリジンオレンジ）を使用して試験を実行した。

【0204】

フルオレセイン（Ｃ２０Ｈ１２Ｏ５））－キサンテン色素である、３３２．３１ｇ／ｍｏｌの分子量を有する有機化学化合物の、キサンテン誘導体。アルカリ性溶液中、フルオレセインは緑黄色の蛍光を示し、１対数千万の希釈でさえも目視可能である。

【0205】

アクリジンオレンジ（Ｃ１７Ｈ１９Ｎ３））は、分子量２６５．３６ｇ／ｍｏｌの有機化合物である。これは、核酸選択的カチオン性蛍光染料として使用され、細胞周期を決定するために有用である。これは膜透過性であるため、インターカレーションまたは静電的相互作用によりＤＮＡおよびＲＮＡとそれぞれ相互作用する。

【0206】

ローダミン（Ｒｏｄａｍｉｎｅ）Ｂ（Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３Ｃｌ）－分子量４７９．０１ｇ／ｍｏｌのローダミン基由来の有機化学化合物。蛍光染料として、すなわち生物学的製剤を染色するために使用される。

【0207】

試験材料を、最初に４℃で１時間平衡化し、次に冷凍した。材料を、ＬｅｉｃａＣＭ１９５０クリオスタット中、－２０℃で切断した。１０μｍ厚さの切片を７０％アルコールで固定し、Ｅｕｐｅｒａｌ中に載せた。材料を、ＵＶ－２Ａ（ＥＸ４５０－４９０、ＤＭ－５００、ＢＡ－５１５）およびＢ－２Ａ（（ＥＸ３３０－３８０、ＤＭ－４００、ＢＡ－４２０）フィルタを備えたＮｉｋｏｎＥｃｌｉｐｓｅ８０ｉ蛍光顕微鏡を使用して分析した。日常的にヘマトキシリンおよびエオシンで染色される組織学的製剤を、切片から作製した。全ての画像を、４００ｍｓの一定の露光時間で撮った。選択された画像を、次にＮｉｓｅｌｅｍｅｎｔｓＡｒソフトウェアで修正し、構造を明らかにした。

【0208】

試験をＢｕｆｆａｌｏラットに対して実施し、無作為化し、ｔｈｅＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＡｎｉｍａｌＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙの動物施設における標準条件下で、玩具を有するケージの中で別々に飼育した。

【0209】

動物を、各々３匹の１２の群に分けた。

【0210】

肋骨臀部の終端セグメントおよび尾の基部の近くの背部の皮膚を剪毛した後、製剤を半固形形態で９日間塗布した。

【0211】

実験において使用した製剤Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３を、表２において説明した（実施形態１）。

【0212】

フルオレセイン
図１（フルオレセイン）では、真皮および皮膚層中に緑色発光の形態で目視可能な強力な陽性応答があり、Ｆ３群で最も強力である（白色の矢印）。Ｆ３群では、潤滑された皮膚と潤滑されていない皮膚の間の境界が目視可能である（青色の線）。特徴的な青色発光を有する毛（赤色の矢印）が、皮膚中で目視可能である。Ｆ２群での真皮中の目視可能な発光はない。陽性応答は、表面のみで観察された（白色の矢印）。倍率４０ｘ。

【0213】

図２では、蛍光色素注射部位に隣接する筋肉における緑色発光の形態で陽性応答が見られる（矢印）。Ｆ２群では陽性応答なし。倍率１００ｘ。

【0214】

図３では、Ｆ３群で肝細胞および強力な陽性応答（肝細胞および細胞間空間の完全な染色）が見られる。他の群では陰性応答。倍率４００ｘ。

【0215】

この蛍光色素の使用により、物質の皮膚を通した筋肉および肝臓への透過性が最も良好に示される。Ｆ１群では、表皮および皮膚に付着した筋肉中で陽性シグナルが観察される。陽性応答は、肝臓および尾の基部から尾骨でも観察された。皮膚（矢印）ならびに筋肉および肝臓中の非常に明瞭な境界線を有する等しく強力なシグナルが、Ｆ３群で観察された。

【0216】

図４（アクリジンオレンジ）では、真皮および皮下層における緑色発光の形態での強力な陽性応答があり、Ｆ１およびＦ３群（矢印）で最も強力である。Ｆ３群では、表皮の表面のみに陽性応答が生じた。倍率４０ｘ。

【0217】

図５（筋肉組織）では、皮膚のものと類似した陽性応答が目視可能であり、低倍率でシグナルを示すために画像のコントラストを修正する必要があった。陰性反応がＦ２群で観察された（画像の強力なコントラスト強化）。倍率１００ｘ、１００ｘおよび４００ｘ。

【0218】

肝臓試料を示す図６では、陽性応答がＦ３群で目視可能である（矢印）。陰性結果が、他の群で観察された。倍率４００ｘ。

【0219】

この蛍光色素ならびに別のローダミンの使用は、細胞中の色素の通過および蓄積が記述されることを条件として、物質の皮膚を通した身体への浸透の試験に適用することができる。この蛍光色素は、細胞密度（上皮、筋肉組織、肝細胞）が高い領域においてはるかに良好に露光され、そのため皮膚または皮下の結合組織において露光はより少ない。

【0220】

図７では、ローダミンは、真皮中の腺細胞および他の結合組織細胞を非常に強力に染色した。最も強力な陽性応答は、Ｆ１およびＦ３群で観察された。倍率１００ｘ、１００ｘおよび４０ｘ。

【0221】

肝臓試料を示す図８では、弱い陽性応答がＦ１およびＦ３群で目視可能である。倍率１００ｘ。

【0222】

ローダミンは、皮膚の要素、例えば表皮腺細胞（皮脂線および汗腺の両方）、真皮細胞（線維芽細胞、マクロファージおよびリンパ球）を染色する非常に高い能力を示し、血液関門を通過した後に、肝臓中に部分的に蓄積された。

【実施例32】

【0223】

タンパク質の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
抗体の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0224】

Ｔリンパ球上に存在する分子である、ＣＤ３抗原に対する抗体は、Ｔリンパ球受容体（ＴＣＲ）の一部であるタンパク質複合体であり、５つの鎖：δ、γ、ε、ζおよびηで作製される。ＣＤ３鎖は、抗原と結合したＴリンパ球受容体からのシグナル伝達を細胞中へと媒介する。ＣＤ３は、Ｂリンパ球のＩｇαおよびＩｇβ分子と等価である。

【0225】

ＣＤ３鎖の各々は、別々の遺伝子によりコードされる：
１．ＣＤ３γ鎖は、男性における１１ｑ２３染色体上に位置するＣＤ３Ｇ遺伝子によりコードされ、
２．ＣＤ３δ鎖は、同様に１１ｑ２３染色体上に位置するＣＤ３Ｄ遺伝子によりコードされ、
３．ＣＤ３ζ鎖は、１ｑ２２－ｑ２５染色体上に位置するＣＤ２４７（以前はＣＤ３Ｚ）遺伝子によりコードされる。

【0226】

選択的スプライシングの結果として、ＣＤ３ζ鎖は、より少ないリンパ球活性化モチーフを含有する形態で産生されることができ、ＣＤ３ηと称される。この形態のタンパク質は、主に胸腺細胞中で産生され、ＴＣＲ複合体中でＣＤ３ζと部分的に置き換わる。ＣＤ３ηについてのｍＲＮＡも成熟Ｔ細胞中で検出されるが、その含有量はＣＤ３ηについてのｍＲＮＡよりもはるかに小さく（１０倍以上）、したがって、ＣＤ３ηはその機能を主にＴリンパ球の発生中に実行すると考えられる。

【0227】

胸腺におけるＴリンパ球の発生中、ＣＤ３タンパク質発現を前胸腺細胞の段階で、しかし細胞の細胞質中でのみ認めることができる。類似の状況は前胸腺細胞段階で生じるが、ＴＣＲαおよびＴＣＲβ鎖の発現が始まるとき、ＣＤ３分子は細胞膜中にも出現する。ＣＤ３の膜（表面）発現は、Ｔリンパ球のさらなる各発生段階に特徴的であり、細胞が死ぬまで持続する。

【0228】

Ｔ細胞に加えて、細胞質中にのみ位置する弱いＣＤ３発現が、プルキンエ細胞中で認められた。

【0229】

ＣＤ３γ、ＣＤ３δおよびＣＤ３εペプチド鎖は、同じ免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、アミノ酸配列および構造における強い類似性を示す。これらは全て細胞外免疫グロブリン様ドメインを有し、これに活性化したＩＴＡＭ配列を含有する細胞膜および細胞質側末端を通過するらせん状断片が続く。γ、δおよびε鎖の各々は、２つのＩＴＡＭモチーフを含有する。次に、ＣＤ３ζ鎖は細胞外免疫グロブリンドメインを有しないが、代わりに細胞質部分中に４つのＩＴＡＭモチーフを含有する。ＣＤ３ηバリアントは、３つのＩＴＡＭモチーフを有する。各ＣＤ３分子の膜貫通領域は負に帯電し、正に帯電したＴＣＲ鎖との複合体の形成をもたらす。このように、ＴＣＲα－ＣＤ３γ－ＣＤ３ε－ＣＤ３ζ－ＣＤ３ζおよびＴＣＲβ－ＣＤ３δ－ＣＤ３ε複合体が形成され、一緒になって完全なＴＣＲ複合体を形成する。

【0230】

Ｔリンパ球は、炎症の発生に大きく関与する細胞である。この理由から、その作用がＣＤ３（したがってＴリンパ球）活性化を阻害すると推測される薬剤を、自己免疫疾患および１型糖尿病における抗炎症特性について試験した。

【0231】

ＣＤ３に対する、蛍光染料または酵素と共役したモノクローナル抗体により、細胞数測定および免疫組織化学方法を使用して、血液および組織中のこれらの細胞の発生頻度または数が決定される。

【0232】

診断においては、ＣＤ３の決定は、白血病に対して特に有用である。

【0233】

実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１００ｍｇの量の活性物質（５０μｇ／抗ＣＤ３抗体懸濁液のｇの濃度）を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体の組成物に添加した。

【0234】

【0235】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：５であった。

【実施例33】

【0236】

タンパク質の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
抗体の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0237】

ＣＤ３抗原に対する抗体
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。１００ｍｇの量の活性物質（５０μｇ／抗ＣＤ３抗体懸濁液のｇの濃度）を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体の組成物に添加した。

【0238】

【0239】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に粉末化した物質とともに得、担体と基質の間の比は１：９９であった。

【実施例34】

【0240】

タンパク質の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
抗体の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0241】

ＣＤ３抗原に対する抗体
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。実施例４において説明した２０ｇの量の一部の基質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した２０ｇの量の担体の組成物に添加し、１００ｍｇの量の活性物質（２５μｇ／抗ＣＤ３抗体懸濁液のｇの濃度）を続けた。

【0242】

【0243】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に上昇した物質を用いて得、担体と基質の間の比は１：２であり、担体の量は最終製品の全重量の２０％を構成した。

【実施例35】

【0244】

タンパク質の群からの物質を含有する医薬品の調製の方法
抗体の群からの物質を、基準物質として使用した：

【0245】

ＣＤ３抗原に対する抗体
実施例１において説明したＦ１担体の組成比を、実験において使用した。実施例４において説明した１ｇの量の一部の基質を、Ｆ１について説明された手順に従って得て４０セルシウス度で融解した１ｇの量の担体の組成物に添加し、１００ｍｇの量の活性物質（２５μｇ／抗ＣＤ３抗体懸濁液のｇの濃度）を続けた。

【0246】

【0247】

結果として、均質な堅さおよび色の製剤を、均一に上昇した物質を用いて得、担体と基質の間の比は１：９７であり、担体の量は最終製品の全重量の１％を構成した。

【0248】

実験を、説明された溶液の機能性を確認するために実行した。

【0249】

試験の目標は、ミセル担体中に封入されたＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７蛍光染料を用いて標識された抗マウスＣＤ３ε抗原の皮膚浸透性能力を評価することであった。担体中に封入された抗体の特異性のため、試験をマウスモデルに対して実施した。

【0250】

抗体を有する１０ｍｇの担体、および基剤（抗体を有しない担体）を、マウスの耳に塗布し、シリコーン軟膏を左および右の耳のそれぞれの内側に使用してスライドに載せた。耳全体の担体の均一な分布を、カバーガラスを載せた後に達成した。説明した手法を、製剤Ａ（Ｆ２＋ＣＤ３）、Ｂ（Ｆ１＋ＣＤ３）、Ｃ（両親媒性基質＋ＣＤ３）、Ｄ（親油性基質＋ＣＤ３）ならびに対照の基剤Ａ０（Ｆ２）、Ｂ０（ｆ１）、Ｃ０（両親媒性基質）およびＤ０（親油性基質）に対して使用した。そのように調製した製剤を、３７℃で４時間、インキュベートした。この時間の後、カバーガラスを除去し、試験担体を除去し、新しいカバーガラスを載せて画像を記録した。製剤の最初の比較のために、画像化を、倍率２５ｘの水レンズを使用したＬｅｉｃａＳＰ８ＭＰ共焦点顕微鏡を用いて実施した。６４６～７５０ｎｍの範囲の蛍光発光を、６３８ｎｍレーザー（抗体を可視化するため）、６２４～６５３ｎｍの範囲の６３８ｎｍレーザー光反射（皮膚層を可視化するため）および９００ｎｍの波長を有する赤外レーザーを用いた励起後の第２高調波についての４４０～４５９ｎｍの範囲（真皮中のコラーゲンを可視化するため）で励起させたＡＦ６４７色素について収集した。試料を、Ｚ軸で、表皮および真皮の全体の厚さを包含する約１００μｍの深さでスキャンした。３つの無作為に選択された視野を、各製剤について画像化した。

【0251】

図９は、試験組織の平均蛍光強度が、抗体を有しない担体を用いて処置した対照組織の蛍光強度（１００％）のパーセンテージである、正規化した値を示す。

【0252】

全ての担体およびこれらの対照の最初の比較後、製剤Ｂ（Ｆ１＋ＣＤ３）を、基剤混合物で処置した組織と比較して、この担体で処置した組織の蛍光強度に最も大きな差異があるため（ｐ＝０．１）、その後の分析のために選択した。残りの担体については、調査した組織の蛍光強度は対照組織と比較して差異がなく、担体が分析した耳の表皮層を通過せず、真皮中へ深く浸透しなかったことを示し得る。

【0253】

最初の評価後、製剤Ｂ（Ｆ１＋ＣＤ３）を、より多くの組織（ｎ＝３）に対して試験した。

【0254】

データを、チャートの形態で示す。図１０は、担体Ｂ（Ｆ１＋ＣＤ３）およびＢ０（Ｆ１）基礎混合物（ｂａｓａｌｍｉｘｔｕｒｅ）についての平均蛍光強度の絶対値を示し、一方で図１１は正規化した値を示し、担体Ｂ（Ｆ１＋ＣＤ３）で処置した組織の蛍光強度の平均値は、基剤混合物で処置した組織の蛍光強度（１００％）の％である。

【0255】

４つの系列の結果、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤについて決定した平均値の最初の比較のために、ノンパラメトリックなクラスカル－ウォリス分散検定（ＡＮＯＶＡ）を、ノンパラメトリックな事後ピアートゥピアー比較のためのメディアン検定およびダン検定と一緒に使用した（表４および図１２）。

【0256】

【表26】

【0257】

得られた結果に基づいて、シリーズＢについて得られたデータを、さらなる統計分析にかけた。１３回の反復から算出された変数Ｐｒｅｐ＿Ｂ＿ｂａｓｅおよびＰｒｅｐ＿Ｂ＿ＡＦ６４７の平均値を、パラメトリックなスチューデントのｔ検定により比較した。分析した変数についての分布の正規性を、Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ－Ｓｍｉｒｎｏｖ、ＬｉｌｌｉｅｆｏｒｓおよびＷＳｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋの検定により評価した。ＬｅｖｅｎｅおよびＢｒｏｗｎ－Ｆｏｒｓｙｔｈの検定を、これらの等分散性を評価するために使用した。使用した全ての統計分析および検定で、有意水準はα＝０．０５または多重比較の場合にはボンフェローニ補正により修正したその値であった。

【0258】

試験の結果を、図１３および１４に図示する。

【0259】

【表27】