特許 7654564 二機能性ヒト化抗Ｃ５抗体ならびにそのＨ因子融合タンパク質およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-03-24

(45)【発行日】2025-04-01

(54)【発明の名称】二機能性ヒト化抗Ｃ５抗体ならびにそのＨ因子融合タンパク質およびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20250325BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20250325BHJP

   C07K 14/47 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/12 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/13 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/86 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/867 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/861 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/864 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 15/869 20060101ALI20250325BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20250325BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20250325BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20250325BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20250325BHJP

【ＦＩ】

C07K19/00

C07K16/18 ZNA

C07K14/47

C12N15/62 Z

C12N15/12

C12N15/13

C12N15/63 Z

C12N15/86 Z

C12N15/867 Z

C12N15/861 Z

C12N15/864 100Z

C12N15/869 Z

C12N5/10

A61K39/395 N

A61P37/02

A61P29/00

【請求項の数】 34

(21)【出願番号】P 2021563186

(86)(22)【出願日】2020-04-24

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-06-22

(86)【国際出願番号】 US2020029876

(87)【国際公開番号】W WO2020219922

(87)【国際公開日】2020-10-29

【審査請求日】2023-04-24

(31)【優先権主張番号】62/837,853

(32)【優先日】2019-04-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/837,833

(32)【優先日】2019-04-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】500429103

【氏名又は名称】ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア

(73)【特許権者】

【識別番号】521095547

【氏名又は名称】キラ ファーマシューティカルズ （ユーエス） リミティド ライアビリティ カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100123582

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 真二

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100138210

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 達則

(74)【代理人】

【識別番号】100197169

【弁理士】

【氏名又は名称】柴田 潤二

(72)【発明者】

【氏名】ウェンチャオ ソン

(72)【発明者】

【氏名】三輪 隆史

(72)【発明者】

【氏名】ダモダー ガリーパリ

(72)【発明者】

【氏名】佐藤 さやか

(72)【発明者】

【氏名】ピン ツイ

【審査官】小林 薫

(56)【参考文献】

【文献】特開２０１７－１１２９９６（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１８／１６５０６２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１７－５１２４６３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１７－２２６６５５（ＪＰ，Ａ）

【文献】J． Am. Soc. Nephrol.，2018年，Vol.29，pp.1141-1153

【文献】PLoS ONE，2018年，Vol.13，e0195909 (pp.1-15)

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ１２Ｎ １５／００－１５／９０

Ｃ０７Ｋ １／００－１９／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ａ）ヒトＣ５に特異的に結合する抗体部分（抗ヒトＣ５抗体部分）と
ｂ）Ｈ因子（ＦＨ）またはその機能的断片
とを含む、融合タンパク質であって、前記抗ヒトＣ５抗体部分は、重鎖可変領域（ＶＨ）と軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含み、および
ｉ）前記ＶＨは、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｉｉ）前記ＶＨは、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｉｉｉ）前記ＶＨは、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｉｖ）前記ＶＨは、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｖ）前記ＶＨは、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｖｉ）前記ＶＨは、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｖｉｉ）前記ＶＨは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｖｉｉｉ）前記ＶＨは、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｉｘ）前記ＶＨは、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｘ）前記ＶＨは、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｘｉ）前記ＶＨは、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｘｉｉ）前記ＶＨは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｘｉｉｉ）前記ＶＨは、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；
ｘｉｖ）前記ＶＨは、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む；または
ｘｖ）前記ＶＨは、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２、および配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３を含み；そして前記ＶＬは、配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２、および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む、
融合タンパク質。

【請求項2】

前記抗ヒトＣ５抗体部分のヒトＣ５への結合はｐＨ依存性であり、および
前記抗ヒトＣ５抗体部分は中性ｐＨのときに酸性ｐＨのときよりも強力にヒトＣ５に結合する、請求項１に記載の融合タンパク質。

【請求項3】

前記ＦＨ機能的断片は、前記ＦＨタンパク質のショート・コンセンサス・リピート（ＳＣＲ）ドメイン１～４またはドメイン１～５を含む、請求項１または２に記載の融合タンパク質。

【請求項4】

前記ＦＨ機能的断片は、配列番号７２のアミノ酸配列のアミノ酸残基４７２～７２６を含む、請求項３に記載の融合タンパク質。

【請求項5】

請求項１～４のいずれか一項に記載の融合タンパク質であって、前記抗ヒトＣ５抗体は：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号１３のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号１３のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｂ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号１６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号１６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｃ）配列番号１９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号１９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｄ）配列番号２２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号２２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｅ）配列番号２８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号２８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号３１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号３１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号３６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号４１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｈ）配列番号４６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号４６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｉ）配列番号５１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号５１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｊ）配列番号５６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号５６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｋ）配列番号５９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号５９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｌ）配列番号７６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号７６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｍ）配列番号７８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号７８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；
ｎ）配列番号８０のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４２または配列番号８０のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４２と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ；または
ｏ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４または配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＨ；および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７または配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７と少なくとも９０％配列同一性を有するそのバリアントを含むＶＬ
を含む、融合タンパク質。

【請求項6】

請求項５に記載の融合タンパク質であって、前記抗ヒトＣ５抗体は：
ａ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号１３のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｂ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号１６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｃ）配列番号１９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｄ）配列番号２２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｅ）配列番号２８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号３１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｆ）配列番号３６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｇ）配列番号４１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｈ）配列番号４６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｉ）配列番号５１のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｊ）配列番号５６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｋ）配列番号５９のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｌ）配列番号６４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｍ）配列番号６７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；
ｎ）配列番号７０のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号２５のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ；または
ｏ）配列番号２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～１４４を含むＶＨ、および配列番号７のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～１２７を含むＶＬ
を含む、融合タンパク質。

【請求項7】

前記抗ヒトＣ５抗体部分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、またはそれらの組合せである、請求項１～６のいずれか一項に記載の融合タンパク質。

【請求項8】

前記抗ヒトＣ５抗体部分は、全長抗体（抗ヒトＣ５全長抗体）である、請求項７に記載の融合タンパク質。

【請求項9】

前記抗ヒトＣ５全長抗体は、ＩｇＧ４由来のＦｃ断片を含む、請求項８に記載の融合タンパク質。

【請求項10】

前記Ｆｃ断片は、配列番号３２、３３及び６１のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の融合タンパク質。

【請求項11】

前記Ｆｃ断片は、配列番号６１のアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の融合タンパク質。

【請求項12】

請求項８～１１のいずれか一項に記載の融合タンパク質であって、前記抗ヒトＣ５全長抗体は、重鎖と軽鎖を含み、ここで
ｉ）前記重鎖は、配列番号７２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～４７１を含み、および前記軽鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４を含む；
ｉｉ）前記重鎖は、配列番号７６のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～４７１を含み、および前記軽鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４を含む；
ｉｉｉ）前記重鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～４７１を含み、および前記軽鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４を含む；あるいは
ｉｖ）前記重鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～４７１を含み、および前記軽鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４を含む、
融合タンパク質。

【請求項13】

前記ＦＨまたはその機能的断片は、抗ヒトＣ５全長抗体の一方または両方の重鎖のＣ末端に融合されている、請求項８～１２のいずれか一項に記載の融合タンパク質。

【請求項14】

前記融合タンパク質は、第一のＦＨまたはその機能的断片および第二のＦＨまたはその機能的断片を含み、ここで、前記第一のＦＨまたはその機能的断片は、前記抗Ｃ５全長抗体の第一の重鎖のＣ末端に融合されており、そして前記第二のＦＨまたはその機能的断片は、前記抗Ｃ５全長抗体の第二の重鎖のＣ末端に融合されている、請求項１３に記載の融合タンパク質。

【請求項15】

前記第一のＦＨまたはその機能的断片は、第一のリンカーを介して、前記抗Ｃ５全長抗体の第一の重鎖のＣ末端に融合されており、そして前記第二のＦＨまたはその機能的断片は、第二のリンカーを介して、前記抗Ｃ５全長抗体の第二の重鎖のＣ末端に融合されている、請求項１４に記載の融合タンパク質。

【請求項16】

前記融合タンパク質は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４をそれぞれ含む２つの軽鎖、ならびに配列番号７２、７６、７８および８０のいずれかのアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～７７７をそれぞれ含む２つのＦＨ断片融合重鎖を含む、請求項１５に記載の融合タンパク質。

【請求項17】

前記融合タンパク質は、配列番号７４のアミノ酸配列のアミノ酸残基２１～２３４をそれぞれ含む２つの軽鎖、ならびに配列番号７２のアミノ酸配列のアミノ酸残基２０～７７７をそれぞれ含む２つのＦＨフラグメント融合重鎖を含む、請求項１６に記載の融合タンパク質。

【請求項18】

前記ＦＨまたはその機能的断片は、前記抗ヒトＣ５抗体部分のＣ末端に融合されている、請求項１～１４、１６～１７のいずれか一項に記載の融合タンパク質。

【請求項19】

前記ＦＨまたはその機能的断片は、リンカーを介して、前記抗ヒトＣ５抗体部分のＣ末端に融合されている、請求項１８に記載の融合タンパク質。

【請求項20】

請求項１～１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質をコードする単離された核酸。

【請求項21】

前記単離された核酸が、配列番号１、６、１２、１５、１８、２１、２４、２７、３０、３５、４０、４５、５０、５５、５８、６３、６４、６９、７１、７３、７５、７７および７９のいずれかの核酸配列を含む、請求項２０に記載の単離された核酸。

【請求項22】

請求項２０又は２１に記載の単離された核酸を含むベクター。

【請求項23】

ウイルスベクターである、請求項２２に記載のベクター。

【請求項24】

前記ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、ヘルペスウイルスベクター、レンチウイルスベクター、マウス幹細胞ウイルスベクター、モロニーマウス白血病ウイルスベクター、またはヒト免疫不全ウイルスベクターである、請求項２３に記載のベクター。

【請求項25】

ｉ）請求項１～１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項２０または２１に記載の単離された核酸、または請求項２２～２４のいずれか一項に記載のベクター、およびｉｉ）医薬的に許容される担体を含む、医薬組成物。

【請求項26】

請求項１～１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質を発現するか、請求項２０または２１に記載の単離された核酸を含むか、あるいは請求項２２～２４のいずれか一項に記載のベクターを含む、宿主細胞。

【請求項27】

ハイブリドーマである、請求項２６に記載の宿主細胞。

【請求項28】

個体の補体経路関連疾患または障害を治療する方法における使用のための、請求項１～１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項２０または２１に記載の単離された核酸、請求項２２～２４のいずれか一項に記載のベクター、または請求項２５に記載の医薬組成物を含む、医薬。

【請求項29】

個体の補体系の活性を下げる方法における使用のための、請求項１～１９のいずれか一項に記載の融合タンパク質、請求項２０または２１に記載の単離された核酸、請求項２２～２４のいずれか一項に記載のベクター、または請求項２５に記載の医薬組成物を含む、医薬。

【請求項30】

前記疾患または障害は、黄斑変性（ＭＤ）、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、喘息、アレルギー性喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、網膜中心動脈閉塞症（ＣＲＡＯ）、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、およびそれらの任意の組合せからなる群より選択される、請求項２８に記載の医薬。

【請求項31】

ｉ）前記炎症が、心肺バイパス手術に関連する炎症、腎臓透析に関連する炎症、糸球体腎炎、関節炎、関節リウマチ、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、手術後の全身性炎症症候群、抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連血管炎、狼瘡、潰瘍性大腸炎、および／または臓器移植に関連する炎症のうちの１または複数を含み；
ｉｉ）前記黄斑変性が、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）を含み；および／または
ｉｉｉ）前記喘息は、アレルギー性喘息を含む、
請求項３０に記載の医薬。

【請求項32】

前記糸球体腎炎は、ＡＮＣＡ関連糸球体腎炎、ループス腎炎、またはそれらの組合せを含む、請求項３１に記載の使用のための医薬。

【請求項33】

前記個体が、ヒトである、請求項２８または２９に記載の使用のための医薬。

【請求項34】

融合タンパク質を産生する方法であって、
ａ）請求項２０または２１に記載の単離された核酸または請求項２２～２４のいずれか一項に記載のベクターを含む宿主細胞、あるいは請求項２６または２７に記載の宿主細胞を、前記融合タンパク質の発現に好適な条件下で培養する工程；および
ｂ）発現した融合タンパク質を前記宿主細胞から得る工程
を含む、方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
本発明は、米国国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ； ＮＩＨ）から授与したＮＩＨ助成金第ＡＩ０８５５９６号および第ＡＩ１１７４１０号の政府支援を受けてなされた。政府は本発明において特定の権利を有する。

【0002】

関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）項の定めにより、２０１９年４月２４日出願の米国仮特許出願第６２／８３７，８５３号および２０１９年４月２４日出願の米国仮特許出願第６２／８３７，８３３号の優先権を主張する。これらの出願の開示内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0003】

補体系は宿主の防御で重要な役割を果たす先天免疫の一部である。通常、補体の活性化は宿主組織に自己損傷を起こさないように慎重に制御されている。しかし、調節機構が欠陥をもつ（たとえば、補体調節遺伝子の変異）または不十分である（たとえば、自己抗体または感染により調節因子の能力を超える強力な補体活性化が誘発された場合）特定の状況では、制御不能な補体系による深刻で致命的な自己組織損傷が起こる可能性がある。多くの自己免疫疾患および炎症性疾患には不適切な補体活性化が関与していることが現在知られており、当技術分野では、様々な補体関連疾患の発症機序を理解しこれらの障害を治療する薬物として特異的な抗補体阻害物質を開発するための熱心な取組みがなされている。活性化した補体は重大な組織損傷および破壊を引き起こす可能性もあり、調節不全の補体活性は多くの希少疾患および一般的疾患、たとえば発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、関節リウマチ、加齢黄斑変性などに関連することがわかっている。したがって、抗補体療法はこれらのヒトの障害を治療する有望な方法である。

【0004】

補体Ｃ５は補体活性化の終末経路における重要なタンパク質であり、強力な炎症性媒介物質Ｃ５ａおよび細胞溶解性の膜侵襲複合体（ＭＡＣ）を生成する前駆体タンパク質である。Ｃ３活性化はさらに、Ｃ５切断酵素複合体の生成を引き起こし、終末補体活性化経路を開始して、結果的に強力な炎症性媒介物質Ｃ５ａと、細胞の溶解および死を引き起こす可能性のある膜侵襲複合体Ｃ５ｂ－９を産生する。

【0005】

多くのヒト炎症性疾患および自己免疫疾患にはＣ５ａおよび／またはＭＡＣが関与しており、Ｃ５活性化の遮断はＣ５ａおよびＭＡＣの生成を予防し、治療に有用なはずである。ヒト化マウス抗ヒトＣ５モノクローナル抗体（ｍＡｂ）であるエクリズマブは、２つの補体関連疾患ＰＮＨおよびａＨＵＳの治療に用いられてきた。しかし、すべてのＰＮＨ患者がエクリズマブ治療に反応するわけではなく、非反応性の理由の一つはエクリズマブに結合するエピトープの損失を伴うヒトＣ５の遺伝的多型である。また、Ｃ５の血漿濃度が高く、標的により抗体が急速に除去されるため、エクリズマブを高用量かつ高頻度で患者に投与しなければならない。

【0006】

補体タンパク質を標的とする薬物の開発における課題の一つは、それらの血漿濃度が高いことおよび／または代謝回転が速いことである。たとえば、ヒトＣ３およびＣ５の血漿濃度はそれぞれ約１ ｍｇ／ｍＬおよび８０ μｇ／ｍＬである。このことは、これらのタンパク質の阻害物質を高用量かつ／または高頻度で投与する必要があることを意味する。実際、抗Ｃ５ ｍＡｂ薬物エクリズマブは、ＰＮＨおよびａＨＵＳ患者にそれぞれ９００ ｍｇおよび１２００ ｍｇの維持量で、静脈注射で２週間毎に投与することが求められる。より長く持続する第二世代の抗Ｃ５ ｍＡｂラブリズマブが開発されて注射の頻度は８週間毎まで減少しているが、ラブリズマブの維持量は注射一回あたり３３００ ｍｇに増えている。さらに、エクリズマブもラブリズマブも、治療したＰＮＨ患者の約５０％で乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）およびヘモグロビンの濃度を正常にすることができなかった。標準的なエクリズマブ治療を受けたＰＮＨ患者では破綻的な溶解が認められることが多く、２０～３０％の患者は依然として輸血依存状態である。ＰＮＨ患者におけるこれらの満たされていない医療上の要求は、罹患した血液細胞のＤＡＦおよびＣＤ５９の欠損により患者はＣ３活性化およびＭＡＣによる損傷を起こしやすくなるという事実に関連している。抗Ｃ５ ｍＡｂ、たとえばエクリズマブおよびラブリズマブはＣ５による溶血を阻害することができるが、罹患した赤血球（ＲＢＣ）のＣ３活性化を予防するわけではなく、その結果、赤血球のＣ３ｂオプソニン化は依然として起こり、これによって血管外溶血（ＥＶＨ）（細網内皮系のＣ３ｂオプソニン化した赤血球が捕食されることにより引き起こされる過程）というよく認識された現象が起こる。また、研究により、Ｃ５工程で赤血球の補体活性化を遮断することは有効性に限界があることがわかっている。というのも、多すぎるＣ５転換酵素が既に細胞表面に集合している場合、結合力に限りのあるｍＡｂでＣ５切断を完全に遮断することは不可能になるからである。このことはエクリズマブで治療したＰＮＨ患者の破綻的な溶解現象について、またエクスビボ検定で抗Ｃ５ ｍＡｂがウサギ赤血球およびＰＮＨ赤血球細胞の完全な溶血を予防することができない理由についての説明となり得る。というのも、ＰＮＨ赤血球およびウサギ赤血球はいずれも代替経路（ＡＰ）を介するＣ３補体活性化に非常に感受性が高く、表面に大量のＣ５転換酵素を容易に集めることができるからである。補体依存性疾患では、たとえばＣ３阻害性環状ペプチドまたは組換え短鎖型Ｈ因子（ＦＨ）の使用によりＣ３活性化を標的化する取組みがなされているが、このような分子は非常に乏しい薬物動態を有し、大量かつ高頻度（たとえば１日に１回）の投薬を必要とする。

【0007】

したがって、当技術分野では、Ｃ３およびＣ５活性の両方を阻害することで終末補体関連症状の治療においてより高い効力を達成し、さらには投薬頻度が減るという利便性を提供することができる持続性かつ二機能性の補体阻害物質が必要である。本発明はこれらおよび他の要求に取り組み、かつそれらを満たす。

【発明の概要】

【0008】

一実施態様では、本発明はヒトＣ５に特異的に結合する抗体と融合タンパク質パートナーを含む融合タンパク質を包含する。一実施態様では、Ｃ５はヒトＣ５である。一実施態様では、抗体はモノクローナル抗体である。一実施態様では、抗体はヒト化抗体である。一実施態様では、抗体はキメラ抗体である。実施態様によっては、抗体は全長抗体である。実施態様によっては、抗体は抗体断片であり、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、およびｓｃＦｖが挙げられるがこれらに限定されない。実施態様によっては、抗体は構築物、たとえば抗体と標的化部分または作動体部分を含む融合構築物の一部である。実施態様によっては、抗体は複合体構築物、たとえば抗体薬物複合体構築物の一部である。

【0009】

本発明の一側面では、抗体融合タンパク質はＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗体融合タンパク質は中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）になるほど、より酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）のときよりも強力にＣ５に結合する。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗体融合タンパク質は、酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）になるほど、中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）のときよりも速くＣ５から解離する。

【0010】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体はＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗Ｃ５抗体は中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）になるほど、より酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）のときよりも強力にＣ５に結合する。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗Ｃ５抗体は、酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）になるほど、中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）のときよりも速くＣ５から解離する。

【0011】

一実施態様では、融合タンパク質は補体制御タンパク質または補体制御タンパク質断片を含む。一実施態様では、この補体制御タンパク質または補体制御タンパク質断片はＣ３転換酵素の阻害物質である。一実施態様では、Ｃ３転換酵素は代替経路Ｃ３転換酵素Ｃ３ｂＢｂである。一実施態様では、Ｃ３転換酵素は古典経路Ｃ３転換酵素Ｃ４ｂ２ａである。一実施態様では、補体制御タンパク質または補体制御タンパク質断片はＣ３またはＣ５活性化以外の補体活性化工程の阻害物質である。様々な実施態様では、融合タンパク質パートナーは、補体受容体１（ＣＲ１）もしくはその断片、膜補因子タンパク質（ＭＣＰ）もしくはその断片、Ｃ４ｂ結合タンパク質（Ｃ４ＢＰ）もしくはその断片、崩壊促進因子（ＤＡＦ）もしくはその断片、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）もしくはその断片、ＦＨタンパク質もしくはその断片、ヒトＩｇＧ４もしくはその断片、リンカー、またはそれらの任意の組合せである。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のショート・コンセンサス・リピート（ＳＣＲ）ドメイン１～５を含む。一実施態様では、ＤＡＦの断片はＤＡＦの細胞外ドメインである。一実施態様では、ＣＲ１の断片はＣＲ１の細胞外ドメインのうちの選択されたＳＣＲである。

【0012】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＣ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＮ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。

【0013】

一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂに結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗Ｃ５ ｍＡｂに結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗Ｃ５ ｍＡｂに結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＣ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＮ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。

【0014】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体のＶＨ配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体のＶＨ配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＨ配列のＣ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＨ配列のＮ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。

【0015】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体の軽鎖可変領域（ＶＬ）配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体のＶＬ配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体のＶＬ配列に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＬ配列のＣ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＬ配列のＮ末端に結合した融合タンパク質パートナーを含む。

【0016】

一実施態様では、抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択される相補性決定領域（ＣＤＲ）のうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0017】

一実施態様では、抗体は配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号１３のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0018】

一実施態様では、抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0019】

一実施態様では、抗体は配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号１６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0020】

一実施態様では、抗体は、配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0021】

一実施態様では、抗体は配列番号１９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0022】

一実施態様では、抗体は、配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0023】

一実施態様では、抗体は配列番号２２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0024】

一実施態様では、抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0025】

一実施態様では、抗体は配列番号２８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号３１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0026】

一実施態様では、抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0027】

一実施態様では、抗体は配列番号３６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0028】

一実施態様では、抗体は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0029】

一実施態様では、抗体は配列番号４１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0030】

一実施態様では、抗体は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0031】

一実施態様では、抗体は配列番号４６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0032】

一実施態様では、抗体は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0033】

一実施態様では、抗体は配列番号５１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号５１のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0034】

一実施態様では、抗体は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0035】

一実施態様では、抗体は配列番号５６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0036】

一実施態様では、抗体は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0037】

一実施態様では、抗体は配列番号５９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号５９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0038】

一実施態様では、抗体は配列番号７２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0039】

一実施態様では、抗体は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0040】

一実施態様では、抗体は配列番号７６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0041】

一実施態様では、抗体は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0042】

一実施態様では、抗体は配列番号７８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0043】

一実施態様では、抗体は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。一実施態様では、抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0044】

一実施態様では、抗体は配列番号８０のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。一実施態様では、抗体は配列番号８０のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む。

【0045】

一実施態様では、抗体はｍＡｂ Ｌ３－１、Ｌ１－２、Ｈ１－４、Ｈ１－８／Ｌ１－９、およびＨ２－６／Ｌ３－５からなる群より選択される少なくとも１つである。一実施態様では、抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９の変形である。

【0046】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第４位のプロリン残基（すなわちＰ４）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｐ４の置換は、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、またはＰ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）である。

【0047】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のスレオニン残基（すなわちＴ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｔ９の置換は、Ｔ９→Ｈ９（すなわちＴ９Ｈ）、Ｔ９→Ｆ９（すなわちＴ９Ｆ）、Ｔ９→Ｌ９（すなわちＴ９Ｌ）、Ｔ９→Ｍ９（すなわちＴ９Ｍ）、Ｔ９→Ｗ９（すなわちＴ９Ｗ）、またはＴ９→Ｉ９（すなわちＴ９Ｉ）である。

【0048】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第４位のプロリン残基（すなわちＰ４）の置換、および配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のスレオニン残基（すなわちＴ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｐ４の置換は、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、またはＰ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）であり、Ｔ９の置換は、Ｔ９→Ｈ９（すなわちＴ９Ｈ）、Ｔ９→Ｆ９（すなわちＴ９Ｆ）、Ｔ９→Ｌ９（すなわちＴ９Ｌ）、Ｔ９→Ｍ９（すなわちＴ９Ｍ）、Ｔ９→Ｗ９（すなわちＴ９Ｗ）、またはＴ９→Ｉ９（すなわちＴ９Ｉ）である。

【0049】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３の第１６位のバリン残基（すなわちＶ１６）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｖ１６の置換は、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、またはＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ）である。

【0050】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１の第９位のロイシン残基（すなわちＬ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｌ９の置換は、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、またはＬ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）である。

【0051】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のスレオニン９（すなわちＴ９）、配列番号５に対するＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）、および配列番号２０に対するＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）からなる群のうちの２つ以上の置換を含む。様々な実施態様では、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、配列番号５に対するＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）、および配列番号２０に対するＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）からなる群のうちの２つ以上の置換を含む抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅからなる群より選択される２つ以上の置換を含む。

【0052】

一実施態様では、本発明は抗Ｃ５抗体または融合タンパク質を個体に投与する工程を含む、前記個体の補体経路関連疾患または障害を治療する方法に関する。一実施態様では、疾患または障害は、黄斑変性（ＭＤ）、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、喘息、アレルギー性喘息、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、網膜中心動脈閉塞症（ＣＲＡＯ）、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症（心肺バイパス手術および腎臓透析に関連する炎症が挙げられるがこれらに限定されない）、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎（抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連糸球体腎炎、ループス腎炎、およびそれらの組合せが挙げられるがこれらに限定されない）、ＡＮＣＡ関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、および抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、またはそれらの任意の組合せからなる群より少なくとも選択される。実施態様によっては、ＡＰ関連疾患はＣ３糸球体症である。実施態様によっては、ＡＰ関連疾患は黄斑変性、たとえば加齢黄斑変性である。一実施態様では、抗Ｃ５抗体または融合タンパク質の投与はＣ３ａまたはＣ３ｂタンパク質の生成を阻害する。一実施態様では、融合タンパク質の投与はＣ５ａまたはＣ５ｂタンパク質の生成を阻害する。一実施態様では、抗Ｃ５抗体または融合タンパク質の投与はＣ３ａまたはＣ３ｂタンパク質の生成を阻害するか、Ｃ５ａまたはＣ５ｂタンパク質の生成を阻害するか、あるいはその組合せである。

【0053】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0054】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0055】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0056】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0057】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0058】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0059】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0060】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0061】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0062】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0063】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して融合タンパク質を個体に投与することを含み、融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片を含む。

【0064】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して抗体またはその融合タンパク質もしくは断片を個体に投与することを含み、抗体は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0065】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して抗体またはその融合タンパク質もしくは断片を個体に投与することを含み、抗体は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0066】

一実施態様では、本発明は個体の補体系の活性を下げる方法に関し、この方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して抗体またはその融合タンパク質もしくは断片を個体に投与することを含み、抗体は、以下のアミノ酸配列、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらの配列の１つ以上のバリアントを有する６つの相補性決定領域を含む。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0067】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質であり、この抗体は、配列番号２またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0068】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質であり、この抗体は、配列番号７またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する軽鎖可変（ＶＬ）領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0069】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0070】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質であり、この抗体は、配列番号１３またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0071】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号１３と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0072】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号１６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0073】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号１６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0074】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号１９と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0075】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号７と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0076】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号１９と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0077】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号２２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0078】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0079】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0080】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号２８と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0081】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号３１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0082】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２８と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号３１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0083】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号４１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0084】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号４１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0085】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号４６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0086】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号４６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0087】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号５１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0088】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号５１と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0089】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号５６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0090】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号５６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0091】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体は、配列番号５９と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0092】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体を含む融合タンパク質に関し、この抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号５９と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号２５と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0093】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質であり、この抗体または抗体融合タンパク質は、配列番号７２またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0094】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質であり、この抗体または抗体融合タンパク質は、配列番号７４またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＬ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0095】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質に関し、この抗体または抗体融合タンパク質はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号７２と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７４と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0096】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質であり、この抗体または抗体融合タンパク質は、配列番号７６またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0097】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質に関し、この抗体または抗体融合タンパク質はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号７６と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７４と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0098】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質であり、この抗体または抗体融合タンパク質は、配列番号７８またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0099】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質に関し、この抗体または抗体融合タンパク質はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号７８と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７４と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0100】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質であり、この抗体または抗体融合タンパク質は、配列番号８０またはそのバリアントと約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有するＶＨ領域を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0101】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に対する抗体、ヒトＣ３に対し阻害活性をもつ抗体融合タンパク質、またはそれらの組合せを含む融合タンパク質に関し、この抗体または抗体融合タンパク質はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号８０と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７４と約９０％を超えて（たとえば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかを超えて）同一なアミノ酸配列を有する。一実施態様では、抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である。

【0102】

一実施態様では、本発明は、本明細書中の他の箇所に記載の融合タンパク質のうちの少なくとも１つを含む細胞に関する。実施態様によっては、この細胞は本明細書中の他の箇所に記載の融合タンパク質のうちの少なくとも１つを産生する。一実施態様では、この細胞はハイブリドーマである。

【0103】

一実施態様では、本発明は、本明細書中の他の箇所に記載の融合タンパク質のうちの少なくとも１つを含む細胞株である。実施態様によっては、この細胞株は本明細書中の他の箇所に記載の融合タンパク質のうちの少なくとも１つを産生する。実施態様によっては、この細胞株はハイブリドーマ細胞株である。

【0104】

一実施態様では、本発明はヒト以外の遺伝子改変動物に関する。一実施態様では、このヒト以外の遺伝子改変動物はヒトＣ５を発現する。一実施態様では、このヒト以外の遺伝子改変動物はげっ歯類である。一実施態様では、このヒト以外の遺伝子改変動物はマウスである。一実施態様では、このヒト以外の遺伝子改変動物はＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスである。一実施態様では、このヒト以外の遺伝子改変動物はＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスである。

【0105】

一実施態様では、本発明は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含む融合タンパク質に関する。実施態様によっては、この抗Ｃ５部分は少なくとも１つのヒスチジン置換を含む。一実施態様では、この抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖を含む。一実施態様では、ＩｇＧ４鎖はＰＬＡ変異を含む。一実施態様では、ＦＨまたはその機能性断片はＦＨタンパク質のドメイン１～５を含む。

【図面の簡単な説明】

【0106】

添付の図面を参照しながら読むことで、上記の概要および下記の本発明の模範的な実施態様の詳細な説明をより深く理解することができる。ただし、本発明は図面に示す実施態様の精密な配置および手段に限定されないものとする。図面については以下のとおりである。

【0107】

【図1】図１は、ｍＡｂ ２Ｇ１のヒト化可変重鎖（ＶＨ）（ヒト化２Ｇ１ ＶＨ－１１８０１）およびｍＡｂ ２Ｇ１のヒト化可変軽鎖（ＶＬ）（ヒト化２Ｇ１ ＶＬ－１９０１）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。生殖細胞系でコードされたヒトＶＨフレーム（１１８０１）にマウスｍＡｂ ２Ｇ１のＶＨからＣＤＲをグレーティング（ｇｒａｔｉｎｇ）し、かつ生殖細胞系でコードされたヒトＶＬフレーム（１９０１）にマウスｍＡｂ ２Ｇ１のＶＬからＣＤＲをグレーティングすることによりヒト化を達成した。シグナルペプチドのアミノ酸配列に下線を施し、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を太字にし、陰影を施す。

【0108】

【図2】図２は、ｍＡｂ Ｌ３－１（ヒト化ＶＨ－１１８０１およびヒト化ＶＬ－１９０１のＶＬ－ＣＤＲ３にＱ→Ｈ置換あり）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す

【0109】

【図3】図３は、ｍＡｂ Ｌ１－２（ヒト化ＶＨ－１１８０１およびヒト化ＶＬ－１９０１のＶＬ－ＣＤＲ１にＴ→Ｈ置換あり）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0110】

【図4】図４は、ｍＡｂ Ｈ１－４（ヒト化ＶＨ－１１８０１およびヒト化ＶＬ－１９０１のＶＨ－ＣＤＲ１にＩ→Ｈ置換あり）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0111】

【図5】図５は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９（ヒト化ＶＨ－１１８０１およびヒト化ＶＬ－１９０１のＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→Ｈ置換、ＶＬ－ＣＤＲ１にＹ→Ｈ置換あり）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0112】

【図6】図６は、ｍＡｂ Ｈ２－６／Ｌ３－５（ヒト化ＶＨ－１１８０１およびヒト化ＶＬ－１９０１のＶＨ－ＣＤＲ２にＹ→Ｈ置換、ＶＬ－ＣＤＲ３にＥ→Ｈ置換あり）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0113】

【図7】図７は、親ヒト化ｍＡｂ １１８０１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0114】

【図8】図８は、ｍＡｂ Ｌ３－１のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0115】

【図9】図９は、ｍＡｂ Ｌ１－２のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0116】

【図10】図１０は、ｍＡｂ Ｈ１－４のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0117】

【図11】図１１は、ｍＡｂ Ｈ２－６／Ｌ３－５のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0118】

【図12】図１２は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0119】

【図13】図１３は、親ヒト化ｍＡｂ １１８０１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））とそのバリアントｍＡｂ Ｌ１－２、ｍＡｂ Ｌ３－１、およびｍＡｂ Ｈ２－６／Ｌ３－５のＣ５阻害効果を評価する、古典経路補体によるヒツジ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0120】

【図14】図１４は、親ヒト化ｍＡｂ １１８０１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））とそのバリアントｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９のＣ５阻害効果を評価する、古典経路補体によるヒツジ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0121】

【図15】図１５は、親ヒト化ｍＡｂ １１８０１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））とそのバリアントｍＡｂ Ｈ１－４およびｍＡｂ Ｌ３－１のＣ５阻害効果を評価する、古典経路補体によるヒツジ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0122】

【図16】図１６は、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変したＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のヒトＣ５濃度を評価するＥＬＩＳＡアッセイの結果を示す。Ｍ１、Ｍ３、Ｍ４、およびＭ５は４匹の代表的なマウスを指す。

【0123】

【図17】図１７は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ Ｈ１－４、Ｈ１－８／Ｌ１－９、Ｈ２－６／Ｌ３－５、Ｌ３－１、またはＬ１－２を注射した後の、Ｃ５を発現するよう遺伝子改変したＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のヒトＩｇＧ４濃度を評価する検定の結果を示す。

【0124】

【図18】図１８は、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変した２匹のＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（Ｍｏ－０３およびＭｏ－０５）で親ヒト化ｍＡｂ ２Ｇ１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））の薬力学を評価する、古典経路補体によるニワトリ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0125】

【図19】図１９は、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変したＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスで組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ Ｌ３－１、Ｌ１－２、Ｈ１－４、Ｈ１－８／Ｌ１－９、およびＨ２－６／Ｌ３－５の薬力学を評価する、古典経路補体によるニワトリ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0126】

【図20】図２０は、配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、および／または配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）の少なくとも１つの置換（すなわち、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、Ｌ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、Ｐ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ））を有するｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ｓｃＦｖバリアントのｐＨ ７．４のときのＣ５への結合が改善したことを実証するＥＬＩＳＡアッセイの結果を示す。ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ｓｃＦｖバリアントの結合を第３列（ＯＤ４５０）および第４列（ＯＤ４５０、確認）、親ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ｓｃＦｖの結合を第８列（ＷＴ／ＯＤ４５０）に示す。

【0127】

【図21】図２１は、Ｅｘｐｉ－ＣＨＯ細胞でヒトＩｇＧ４として発現させたｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントの相対的Ｃ５結合親和性を評価するＯｃｔｅｔ検定の結果を示す。Ｅｘｐｉ－ＣＨＯ細胞に指定のＨ１－８ ＶＨバリアントおよびＬ１－９ ＶＬ（配列番号２３）を遺伝子導入し、細胞培養液上清を遺伝子導入の２日後に評価した。得られた細胞培養液上清について、Ｃ５結合応答の抗体結合応答に対する比を計算し、Ｃ５結合親和性の尺度として用いた。配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、および／または配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）の少なくとも１つの置換（すなわち、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、Ｌ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、Ｐ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ））を有するｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ＩｇＧ４バリアントを用いた遺伝子導入実験の２つの別個のＯｃｔｅｔ検定から計算した比を図に示す。

【0128】

【図22】図２２は、それぞれｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのＣ５とｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントの解離速度を評価するＯｃｔｅｔ検定の結果を示す。ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときの各ｍＡｂについて、結合相から解離相への転換後のピークのＣ５結合応答からの減少率（％）を計算した。配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、および／または配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）の少なくとも１つの置換（すなわち、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、Ｌ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、Ｐ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ））を有するｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ＩｇＧ４バリアントを用いた遺伝子導入実験の２つの別個のＯｃｔｅｔ検定で計算した減少率（％）を図に示す。

【0129】

【図23】図２３は１８種の組合せ置換バリアント（すなわち、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ）を示す。親Ｈ１－８／Ｌ１－９ ｍＡｂに比べて改善したＣ５結合親和性を示すと共にｐＨ ７．４とｐＨ ５．８での示差的な解離速度を維持した（図２１および図２２）７種のｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ＩｇＧ４単一バリアント（すなわちＬ９Ｉ、Ｌ９Ｆ、Ｐ４Ｍ、Ｐ４Ｗ、Ｐ４Ｆ、Ｖ１６Ｅ、Ｖ１６Ｗ）からこれらの組合せバリアントを誘導した。

【0130】

【図24】図２４は、Ｅｘｐｉ－ＣＨＯ細胞でヒトＩｇＧ４として発現させたｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９組合せ置換バリアントの相対的なＣ５結合親和性を評価するＯｃｔｅｔ検定の結果を示す。Ｅｘｐｉ－ＣＨＯ細胞に特定のＨ１－８ ＶＨ組合せ置換バリアントを遺伝子導入し、細胞培養液上清を遺伝子導入の２日後に評価した。得られた細胞培養液上清について、Ｃ５結合応答の抗体結合応答に対する比を計算し、Ｃ５結合親和性の尺度として用いた。ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９組合せ置換バリアントＬ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅを用いた遺伝子導入実験から計算した比を図に示す。

【0131】

【図25】図２５は、それぞれｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのＣ５およびｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９組合せ置換バリアントの解離速度を評価するＯｃｔｅｔ検定の結果を示す。ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときの各ｍＡｂについて、結合相から解離相への転換後のピークのＣ５結合応答からの減少率（％）を計算した。ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９ ＩｇＧ４組合せ置換バリアントＬ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅを用いた遺伝子導入実験で計算した減少率（％）を図に示す。

【0132】

【図26】図２６は、ｍＡｂ １８１９親和性成熟実験で得たさらなるｓｃＦｖ変異体（ＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のＴ→Ｈ変異に対応するクローン１４Ｃ６を含む）のｐＨ ７．４のときのＣ５結合親和性を評価する実験の結果を示す。

【0133】

【図27】図２７は、ｍＡｂ １８１９親和性成熟実験で得たさらなるｓｃＦｖ変異体（ＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のＴ→Ｈ変異に対応するクローン１４Ｃ６を含む）のｐＨ ７．４とｐＨ ５．８での示差的なＣ５結合親和性を評価する実験の結果を示す。

【0134】

【図28】図２８は、ｍＡｂ １８１９親和性成熟実験で得たさらなるｓｃＦｖ変異体をｐＨ ７．４とｐＨ ５．８での示差的な結合に従い順位付けする実験の結果を示し、クローン１４Ｃ６がこの変異体群の中で１位に順位付けされたことを示している。クローン１４Ｃ６はＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のＴ→Ｈ変異に対応する。

【0135】

【図29】図２９は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＩＷＷのＶＨ（上図）、すなわちＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｉ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→Ｗ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｗ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１のヌクレオチドおよびアミノ酸配列；ならびにｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＩＦＷのＶＨ（下図）、すなわちＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｉ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→Ｆ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｗ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0136】

【図30】図３０は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＦＭＥのＶＨ（上図）、すなわちＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｆ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→Ｍ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｅ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１のヌクレオチドおよびアミノ酸配列；ならびにｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＦＭＷのＶＨ（下図）、すなわちＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｆ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→Ｍ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｗ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0137】

【図31】図３１は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＦＭＥＨのＶＨ、すなわちＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｆ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→ＭおよびＴ→Ｈ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｅ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0138】

【図32】図３２は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９、ＦＭＷ、ＩＦＷ、ＦＭＥ、およびＩＷＷのｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0139】

【図33】図３３は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ １１８０１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））、Ｈ１－８／Ｌ１－９、ＦＭＷ、ＩＦＷ、ＦＭＥ、およびＩＷＷについて、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのピーク値から解離したＣ５結合の割合（％）を示す。

【0140】

【図34】図３４は、親ヒト化組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９（ＶＨ－１１８０１（配列番号２２）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））とそのバリアントＩＦＷ ＰＬＡ（ＶＨ－１１８０１（配列番号４６）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、ＦＭＥ ＰＬＡ（（配列番号５１）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、ＩＷＷ ＰＬＡ（（配列番号４１）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、およびＦＭＷ ＰＬＡ（（配列番号５６）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））のＣ５阻害効果を評価する、古典経路補体によるヒツジ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0141】

【図35】図３５は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９、ＦＭＥ、ＦＭＥＨ、ＦＭＷ、およびＩＦＷのｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0142】

【図36】図３６は、精製した組換えキメラヒトＩｇＧ４ ＰＬＡ（配列番号６１）、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９、ＦＭＥ、ＦＭＥＨ、ＦＭＷ、およびＩＦＷのｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのピーク値から解離したＣ５結合の割合（％）を示す。

【0143】

【図37】図３７は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ｍＡｂ ＦＭＥ ＰＬＡ（（配列番号５１）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、ＦＭＥＨ ＰＬＡ（（配列番号５９）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、ＦＭＷ ＰＬＡ（（配列番号５６）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））、およびＩＦＷ ＰＬＡ（ＶＨ－１１８０１（配列番号４６）およびＶＬ－１９０１（配列番号２５））のＣ５阻害効果を評価する、古典経路補体によるヒツジ赤血球の溶解検定の結果を示す。

【0144】

【図38】図３８は、Ｃ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスでのＰＫ／ＰＤ試験用の組換えキメラヒトＩｇＧ４ ＰＬＡ ｍＡｂ中のヒトＩｇＧ４のＦｃドメイン変異のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0145】

【図39】図３９は、ヒトＣ５のｃＤＮＡを水圧注入して作製したＣ５ヒト化マウスの血漿Ｃ５濃度を示す。

【0146】

【図40】図４０は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ＰＬＡ（配列番号６１）ｍＡｂ ＩＦＷ－ＰＬＡ、ＦＭＷ－ＰＬＡ、またはＦＭＥＨ－ＰＬＡを注射した後の、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変したＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中の総ヒトＣ５濃度を評価する検定の結果を示す。

【0147】

【図41】図４１は、組換えキメラヒトＩｇＧ４ ＰＬＡ（配列番号６１）ｍＡｂ ＩＦＷ－ＰＬＡ、ＦＭＷ－ＰＬＡ、またはＦＭＥＨ－ＰＬＡを注射した後の、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変したＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中の総ＩｇＧ４濃度を評価する検定の結果を示す。

【0148】

【図42】図４２は、ヒトＣ５を発現するよう遺伝子改変したＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスでの組換えキメラヒトＩｇＧ４ ＰＬＡ（配列番号６１）ｍＡｂ ＩＦＷ－ＰＬＡ、ＦＭＷ－ＰＬＡ、またはＦＭＥＨ－ＰＬＡの薬力学を評価する、古典経路補体によるニワトリ赤血球検定の結果を示す。

【0149】

【図43】図４３は、一連の標的認識およびタンパク質切断を含む補体活性化につながる可能性のある３つの異なる経路を示す。これらの経路はすべてＣ３活性化工程で収束する。

【0150】

【図44】図４４は、２０個のＳＣＲドメインで構成されるヒトＦＨの構造、およびヒトＩｇＧ４抗Ｃ５ ｍＡｂ／ＦＨ ＳＣＲ１－５融合タンパク質の構造を示す。

【0151】

【図45】図４５は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のＶＨ配列（ＶＨ－ＣＤＲ１にＮ→ＨおよびＬ→Ｆ置換、ＶＨ－ＣＤＲ２にＰ→ＭおよびＴ→Ｈ置換、ＶＨ－ＣＤＲ３にＶ→Ｅ置換を有するヒト化ＶＨ－１１８０１）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0152】

【図46】図４６は、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９バリアントＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のＶＬ配列（ＶＬ－ＣＤＲ１にＹ→Ｈ置換を有するヒト化ＶＬ－１９０１）のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を示す。

【0153】

【図47】図４７は、抗Ｃ５ ｍＡｂ ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ（レーン１）および抗Ｃ５ ｍＡｂ／ＦＨ ＳＣＲ１－５融合タンパク質（ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、レーン２）のＶＨおよびＶＬ鎖を示すＳＤＳゲルを示す。

【0154】

【図48】図４８は、抗Ｃ５ ｍＡｂ ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡおよび抗Ｃ５ ｍＡｂとＦＨ ＳＣＲ１－５の融合タンパク質ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときのＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔによる追跡を示す。

【0155】

【図49】図４９は、抗Ｃ５ ｍＡｂ ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４および抗Ｃ５ ｍＡｂとＦＨ ＳＣＲ１－５の融合タンパク質ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのピークのＣ５結合からの解離（％）を示す。

【0156】

【図50】図５０は、抗Ｃ５ ｍＡｂ ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ、抗Ｃ５ ｍＡｂとＦＨ ＳＣＲ１－５の融合タンパク質ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、ならびに基準抗Ｃ５ ｍＡｂエクリズマブおよびラブリズマブの溶血活性に対する阻害効果を評価する、代替経路補体によるウサギ赤血球溶解検定の結果を示す。

【0157】

【図51】図５１は、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、およびラブリズマブで処置した未溶解のウサギ赤血球でのＣ３断片沈着の濃度を示す。

【0158】

【図52】図５２は、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、およびラブリズマブを注射した後の様々な時点のＣ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のヒトＩｇＧ４濃度を評価する検定の結果を示す。

【0159】

【図53】図５３は、分子のヒトＩｇＧ４部分に特異的な検出用ｍＡｂを用いて注射後の様々な時点のＣ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５濃度を評価する検定の結果を示す。

【0160】

【図54】図５４は、分子のＦＨ ＳＣＲ１－５部分に特異的な検出用ｍＡｂを用いて注射後の様々な時点のＣ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５濃度を評価する検定の結果を示す。

【0161】

【図55】図５５は、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、およびラブリズマブを注射した後の様々な時点のＣ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスの血漿中のヒトＣ５濃度を評価するＥＬＩＳＡの結果を示す。

【0162】

【図56】図５６は、Ｃ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスから採取した血清を用いたハイブリッド検定で、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、ラブリズマブ、およびＣ５枯渇ヒト血清を注射した後の様々な時点の代替補体経路を介したウサギ赤血球溶解の割合（％）を示す。

【0163】

【図57】図５７は、ＰＮＨ患者（患者２）赤血球のインビトロ溶血に関する代表的な結果を示す。様々な量のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、またはラブリズマブの存在下、ＡＰ緩衝液に入れた２Ｅ７ ＰＮＨ患者赤血球を、ＨＣｌで酸性にした正常ヒト血清３５％と混合した。この混合物を３７℃で４０分間恒温放置し、ＯＤ４０５で溶血を読み取った。溶解の割合（％）を公式（ＯＤ４０５（特異抗体濃度）－ＯＤ４０５（４０ｍＭ ＥＤＴＡ））／（（ＯＤ４０５（抗体濃度＝０）－ＯＤ４０５（４０ｍＭ ＥＤＴＡ）） ＊１００％）を用いて計算した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５は、インビトロでエクリズマブおよびラブリズマブよりも強力にＰＮＨ患者の赤血球溶解を遮断する。図５７は、酸性にした正常ヒト血清（３５％、血液型ＡＢ）と混ぜたヒトＰＮＨ赤血球の代替経路補体による溶解に対するＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、ラブリズマブ、および対照ＩｇＧ４の阻害活性およびＩＣ５０ （μｇ／ｍＬ）の比較を示す。

【0164】

【図58】図５８は、インビトロの抗Ｃ５ ｍＡｂ処置後のＰＮＨ患者赤血球へのＣ３ｂ被覆の代表的な蛍光標示式細胞分取器（ＦＡＣＳ）分析結果を示す。溶血検定（図５７のＰＮＨ患者赤血球のインビトロ溶血を参照のこと）の後、未溶解の赤血球を回収し、ＤＰＢＳで洗浄した。２Ｅ６細胞に抗Ｃ３ｂ抗体を加えて氷上で３０分間恒温放置した後、ＦＡＣＳ分析を行った。Ｃ３ｂ＋／ＣＤ５９－細胞集団を通過させ、分析する。結果はＰＮＨ患者２から得たものである。ＮＤは検出不可能という意味である。エクリズマブおよびラブリズマブは遮断することができなかったが、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５はＰＮＨ患者の赤血球へのＣ３ｂ沈着を効果的に遮断する。エクリズマブまたはラブリズマブで処置した試料ではＣ３ｂオプソニン化したＰＮＨ赤血球（Ｑ４）が検出されたが、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の場合は検出されなかった。

【0165】

【図59】図５９は、ＰＮＨ患者（患者３）の赤血球のインビトロ溶血に関する代表的な結果を示す。指定の様々な量のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、またはラブリズマブの存在下、ＡＰ緩衝液に入れた５Ｅ６ ＰＮＨ赤血球を、ＨＣｌで酸性にした正常ヒト血清５０％と混合した。３７℃で９０分間、溶血を起こさせ、ＯＤ４０５で分光計を用いて溶血を読み取った。溶解の割合（％）を公式（ＯＤ４０５（特異抗体濃度）－ＯＤ４０５（４０ｍＭ ＥＤＴＡ））／（（ＯＤ４０５（抗体濃度＝０）－ＯＤ４０５（４０ｍＭ ＥＤＴＡ）） ＊１００％）を用いて計算した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５は、インビトロでエクリズマブおよびラブリズマブよりも強力にＰＮＨ患者の赤血球溶解を遮断する。

【0166】

【図60】図６０は、インビトロの抗Ｃ５ ｍＡｂ処置後のＰＮＨ患者３の赤血球へのＣ３ｂ被覆の代表的なＦＡＣＳ分析結果を示す。５Ｅ６ ＰＮＨ患者３の赤血球を、ＨＣｌで酸性にした正常ヒト血清５０％と指定の様々な濃度の抗体と混合し恒温放置した溶血検定の後、未溶解の赤血球を回収し、ＤＰＢＳで洗浄した。２Ｅ６の未溶解の細胞に抗Ｃ３ｂ抗体を加えて氷上で３０分間恒温放置した後、ＦＡＣＳ分析を行った。Ｃ３ｂ＋細胞集団を通過させ、分析する。ＮＤは検出不可能という意味である。エクリズマブおよびラブリズマブは遮断することができなかったが、ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５はＰＮＨ患者の赤血球へのＣ３ｂ沈着を用量依存的に遮断した。

【0167】

【図61】図６１は、カニクイザルの代替経路補体による溶解に対するＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡおよびＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５融合タンパク質の効果を示す。様々な濃度のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡまたはＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５融合タンパク質の存在下、カニクイザル血清５０％を用いてウサギ赤血球の溶血検定を行った。サルＣ５には反応性のない２種の基準抗ヒトＣ５ ｍＡｂ（エクリズマブおよびラブリズマブ）を陰性対照として用いた。

【0168】

【図62A】図６２Ａと図６２Ｂを含む図６２は、ｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡのヒトＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定を示す。精製ヒトＦｃＲｎをアミンカップリング法でＣＭ５チップに結合した（２８０ＲＵ）。Ｂｉａｃｏｒｅ－３０００装置でＢｉａｃｏｒｅ分析を行った。ｐＨ ７．４の緩衝液を用いて結合毎にチップを再生した。ＦＭＨＥ－ＩｇＧ４ＰＬＡのＫＤを６．４７ Ｅ－９ Ｍと決定した。図６２ＡはヒトＦｃＲｎへのＦＭＥＨの結合を実証する代表的な結果を示す。図６２ＢはｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡのヒトＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定および対応する分析を示す。

【図62B】同上。

【0169】

【図63A】図６３Ａと図６３Ｂを含む図６３は、ｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定を示す。精製ヒトＦｃＲｎをアミンカップリング法でＣＭ５チップに結合した（２８０ＲＵ）。Ｂｉａｃｏｒｅ－３０００装置でＢｉａｃｏｒｅ分析を行った。ｐＨ ７．４の緩衝液を用いて結合毎にチップを再生した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のＫＤを８．８８ Ｅ－９ Ｍと決定した。図６３ＡはヒトＦｃＲｎへのＦＭＥＨ－ＦＨ１－５の結合を実証する代表的な結果を示す。図６３ＢはｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定および対応する分析を示す。

【図63B】同上。

【0170】

【図64A】図６４Ａと図６４Ｂを含む図６４は、ｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡのカニクイザル（Ｃｙｎｏ） ＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定を示す。精製カニクイザルＦｃＲｎをアミンカップリング法でＣＭ５チップに結合した（２００ＲＵ）。Ｂｉａｃｏｒｅ－３０００装置でＢｉａｃｏｒｅ分析を行った。ｐＨ ７．４の緩衝液を用いて結合毎にチップを再生した。ＦＭＨＥ－ＩｇＧ４ＰＬＡのＫＤを１．４ Ｅ－８ Ｍと決定した。図６４ＡはカニクイザルＦｃＲｎへのＦＭＥＨの結合を実証する代表的な結果を示す。図６４ＢはｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡのカニクイザルＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定および対応する分析を示す。

【図64B】同上。

【0171】

【図65A】図６５Ａと図６５Ｂを含む図６５は、ｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のカニクイザルＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定を示す。精製カニクイザルＦｃＲｎをアミンカップリング法でＣＭ５チップに結合した（２００ＲＵ）。Ｂｉａｃｏｒｅ－３０００装置でＢｉａｃｏｒｅ分析を行った。ｐＨ ７．４の緩衝液を用いて結合毎にチップを再生した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のＫＤを３．９１ Ｅ－８ Ｍと決定した。図６５ＡはカニクイザルＦｃＲｎへのＦＭＥＨ－ＦＨ１－５の結合を実証する代表的な結果を示す。図６５ＢはｐＨ ６．０のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のカニクイザルＦｃＲｎへの親和性の代表的なＢｉａｃｏｒｅ測定および対応する分析を示す。

【図65B】同上。

【0172】

【図66】図６６は、ヒトＩｇＧ４ ＦｃまたはＦＨ融合タンパク質に対する検出用抗体を用いて測定した、Ｃ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウス（ｎ＝２）でのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の代表的な薬物動態を示す。いずれの検定でも、マウスの血漿中のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５は抗ヒトκ軽鎖抗体に捕捉されたが、分子のヒトＩｇＧ４部分（左図）または分子のヒトＦＨ１－５部分（右図）については異なる検出用抗体が用いられた。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の注射後、指定の様々な時点でマウスの血漿試料を採取した。いずれの検定も類似の薬物動態を示し、このことは抗Ｃ５ ｍＡｂおよびＦＨ１－５融合タンパク質がその完全性を維持したことを示唆している。

【0173】

【図67】図６７Ａ～図６７Ｃを含む図６７は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびサイズ排除クロマトグラフィー－高速液体クロマトグラフィー（ＳＥＣ－ＨＰＬＣ）によるＦＭＥＨ－ＦＨ１－５の特性評価に関する代表的な結果を示す。ＳＤＳ－ＰＡＧＥおよびＳＥＣ－ＨＰＬＣ によるＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の特性評価。ＨＥＫ２９３細胞遺伝子導入用培地から発現したＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５をタンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーで精製した。図６７Ａは還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥの代表的な結果を示す。還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥで、約８５ ｋＤａおよび約２５ ｋＤａのバンド形成はそれぞれ予想される重鎖－ＦＨ１－５融合および軽鎖である。図６７Ｂは非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥの代表的な結果を示す。非還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥで、２００ ｋＤａマーカーよりも大きなバンドは予想される完全なＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５分子である。図６７ＣはＳＥＣ－ＨＰＬＣの代表的な結果を示す。ＳＥＣ－ＨＰＬＣでＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５は６．５４分後に溶出され、９５％を超える純度である。

【0174】

【図68】図６８はＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の質量分析計による分析の代表的な結果を示す。ＨＥＫ２９３遺伝子導入細胞培地からタンパク質Ａで精製したＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５を質量分析計による分析に供して分子量を決定した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の完全体、還元した重鎖、還元した軽鎖、脱グリコシル化した完全体、還元・脱グリコシル化した重鎖、および還元・脱グリコシル化した軽鎖の質量を決定した。実験上の質量と理論上の質量はすべての試料で一貫して一致している。結果はＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５に２つのグリコシル化修飾があったことを示した。ＦｃのＣＨ２にある基準Ｎ－グリコシル化部位を考慮すると、ＦＨドメイン１～５はグリコシル化されているようには見えない。

【0175】

【図69A】図６９Ａと図６９Ｂを含む図６９は、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトおよびカニクイザルＣ５タンパク質への代表的な結合親和性を示す。ＨＥＫ２９３遺伝子導入細胞培地から精製したＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５を、ＧａｔｏｒのＢｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ Ｉｎｃ．、中国）を用いた結合親和性決定に供した。ｐＨ ７．４またはｐＨ ５．８の緩衝液条件で実験を行い、結合動態へのｐＨの影響を決定した。Ｇａｔｏｒ評価ソフトウェア（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ Ｉｎｃ．、中国）で１：１結合モデルを用いてデータを分析した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５はｐＨ ５．８のときにｐＨ ７．４のときよりも約１０倍速くＣ５結合複合体から解離する。図６９Ａは、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトおよびカニクイザルＣ５タンパク質への結合親和性をグラフで表したものである。図６９Ｂは、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトおよびカニクイザルＣ５タンパク質への結合親和性を表で表したものである。

【図69B】同上。

【発明を実施するための形態】

【0176】

発明の詳細な説明
本発明は、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを用いた補体シグナル伝達阻害に関する。本発明は、部分的には、Ｃ３およびＣ５活性の両方を阻害することで終末補体関連症状の治療でより高い効力を達成し、さらには投薬頻度が減るという利便性を提供することができる二機能性の補体阻害物質に関する。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せはＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗Ｃ５抗体または融合タンパク質は中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）になるほど、より酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）のときよりも強力にＣ５に結合する。様々な実施態様では、本発明は、個体を抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せに接触させることによる、個体の補体関連疾患または補体関連障害を治療する組成物および方法に関する。本明細書の組成物および方法で治療することができる補体関連症状および状態としては、ＭＤ、ＡＭＤ、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、喘息、アレルギー性喘息、ＣＯＰＤ、ＰＮＨ症候群、重症筋無力症、ＮＭＯ、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、ａＨＵＳ、ＣＲＶＯ、ＣＲＡＯ、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症（心肺バイパス手術および腎臓透析に関連する炎症が挙げられるがこれらに限定されない）、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎（ＡＮＣＡ関連糸球体腎炎、ループス腎炎、およびそれらの組合せが挙げられるがこれらに限定されない）、ＡＮＣＡ関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、および抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、またはそれらの任意の組合せが挙げられるが、これらに限定されない。

定義

【0177】

特に定義しない限り、本明細書で用いるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似すなわち等価な任意の方法および材料を用いて本発明を実施または試験することができるが、模範的な方法および材料を記載する。
本明細書で用いる場合、以下の用語はそれぞれ本節のその用語に関連する意味を有する。

【0178】

本明細書では、冠詞「ａ」および「ａｎ」はその冠詞の文法上の対象が１つ、または２つ以上（すなわち少なくとも１つ）であることを指すのに用いられる。例として、「要素（ａｎ ｅｌｅｍｅｎｔ）」は１個の要素または２個以上の要素を意味する。

【0179】

本明細書で用いる場合、「阻害する」および「阻害」という用語は、活性または機能を対照値に対して少なくとも約１０％低減する、抑制する、減少させる、または遮断することを意味する。実施態様によっては、活性を対照値に比べて少なくとも約５０％抑制または遮断する。実施態様によっては、活性を少なくとも約７５％抑制または遮断する。実施態様によっては、活性を少なくとも約９５％抑制または遮断する。

【0180】

「有効量」および「薬学的有効量」という用語は、所望の生物学的結果を与えるのに十分な薬剤の量を意味する。その結果は疾患もしくは障害の徴候、症状、または原因の低減および／または軽減、あるいは生体系のその他の任意の所望の変更であってもよい。任意の個体の場合の適切な有効量を当業者が通常の実験を用いて決定してもよい。

【0181】

「患者」、「対象」、「個体」などの用語は本明細書で交換可能に用いられ、病気またはその後遺症に対する治療を必要とするかそれに感受性のある、補体系を有するヒトを含む任意の動物（実施態様によっては哺乳動物であり、実施態様によってはヒトである）を指す。個体としては、たとえばイヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ラット、サル、マウス、およびヒトを挙げることができる。

【0182】

生物、組織、細胞、またはそれらの成分に関連して用いる場合、「異常」という用語は、少なくとも１つの観察または検出可能な性質（年齢、処置、時間帯など）について「正常な」（期待される／恒常的な）各性質を呈する生物、組織、細胞、またはそれらの成分とは異なる生物、組織、細胞、またはそれらの成分を指す。ある細胞、組織型、または対象では正常なまたは期待される性質が別の細胞または組織型では異常である場合がある。

【0183】

「疾患」は対象が恒常性を維持することができず、またその疾患が寛解しない場合には対象の健康が悪化し続ける、対象の健康状態である。

【0184】

これに対し、対象の「障害」は対象が恒常性を維持することはできるが、対象の健康状態はその障害がない場合よりも好ましくない、健康状態である。未処置のままにした場合、障害は対象の健康状態を必ずしもさらに低下させるわけではない。

【0185】

疾患または障害の徴候または症状の重症度、患者がそのような徴候または症状を経験する頻度、あるいはその両方が減った場合、その疾患または障害は「軽減して」いる。

【0186】

化合物の「有効量」または「治療有効量」は、その化合物を投与する対象に有益な効果を与えるのに十分な化合物の量である。

【0187】

本明細書で用いる場合、「説明資料」は、本明細書に列挙する様々な疾患または障害の軽減を引き起こすキット内の本発明の化合物、組成物、ベクター、または送達システムの有用さを伝えるのに用いることができる刊行物、記録物、図表、または他の任意の表現手段を包含する。任意にまたは代わりに、説明資料は哺乳動物の細胞または組織の疾患または障害を軽減する１つ以上の方法を記載していてもよい。本発明のキットの説明資料を、たとえば本発明の特定の化合物、組成物、ベクター、または送達システムを含む容器に添付する、あるいは本発明の特定の化合物、組成物、ベクター、または送達システムを含む容器と共に輸送することができる。あるいは、受取人が説明資料と化合物を連動的に使用することを意図して、説明資料を容器と別にして輸送することができる。

【0188】

本明細書で用いる場合、「作動可能に連結された」または「作動的に連結された」は、遺伝子の発現がその遺伝子を空間的に接続したプロモーターに制御されることを意味し得る。制御対象の遺伝子の５'末端（上流）または３'末端（下流）にプロモーターを配置してもよい。プロモーターと遺伝子との距離は、そのプロモーターの由来源である遺伝子内でのそのプロモーターとそれが制御する遺伝子との距離とほぼ同じであってもよい。当技術分野で公知のように、プロモーターの機能を喪失させずにこの距離の変動を調節してもよい。

【0189】

「治療処置」は疾患または障害の徴候を示す対象に対してそれらの徴候を低減または除去する目的で施される処置である。

【0190】

本明細書で用いる場合、「疾患または障害を治療する」は、患者が経験する疾患または障害の徴候および／または症状の頻度および／または重症度を下げることを意味する。

【0191】

本明細書で用いる場合、「生体試料」、「試料」、または「検体」という語句は、その
中で核酸またはポリペプチドの発現を検出することができる細胞、組織、または体液を含む任意の試料を包含するものとする。生体試料は所望の生物マーカーを検出するのに適した任意の生体物質を含んでいてもよく、個体から得た細胞および／または細胞以外の物質を含んでいてもよい。このような生体試料の例としては血液、リンパ、骨髄、生検体または塗抹物が挙げられるがこれらに限定されない。本来は液体である試料を本明細書では「体液」という。たとえば、ある領域を掻爬するまたは拭取る、あるいは針を用いて体液を得るなどの様々な技術で患者から生体試料を得てもよい。様々な身体試料を採取する方法は当技術分野で周知である。

【0192】

本明細書で用いる場合、「抗体」という用語は、抗原の特定のエピトープに特異的に結合することができる免疫グロブリン分子を指す。抗体は天然源に由来の完全な免疫グロブリン、または組換え源由来のものであってもよく、完全な免疫グロブリンの免疫反応部分であってもよい。本発明の抗体は、たとえば、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、細胞内抗体（「イントラボディ」）、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２およびＦ（ａｂ’）２、さらには単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、重鎖抗体（たとえばラクダ科抗体）、ならびにヒト化抗体などの様々な形態で存在してもよい（Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．， １９９９， Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， ＮＹ； Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．， １９８９， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ； Ｈｏｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９８８， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３； Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．， １９８８， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６）。

【0193】

本明細書で用いる場合、「合成抗体」という用語は組換えＤＮＡ技術を用いて作製された抗体、たとえばバクテリオファージが発現する抗体などを意味する。この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子、および抗体タンパク質を発現するＤＮＡ分子またはその抗体を特定するアミノ酸配列の合成により生成された抗体を意味するものとする。ここで、ＤＮＡまたはアミノ酸配列は当技術分野で利用可能かつ周知の合成ＤＮＡまたはアミノ酸配列技術を用いて得られたものである。

【0194】

本明細書で用いる場合、「重鎖抗体（単数）」又は「重鎖抗体（複数）」という用語は、ペプチドによる免疫化とその後の血清の単離により、あるいはこの抗体をコードする核酸配列のクローン化と発現によりラクダ科の種から誘導した免疫グロブリン分子を包含する。「重鎖抗体（単数）」又は「重鎖抗体（複数）」という用語は、重鎖病を有する対象から単離した、あるいは対象由来のＶＨ（免疫グロブリン分子重鎖可変領域）遺伝子のクローン化および発現により調製した免疫グロブリン分子をさらに包含する。

【0195】

「キメラ抗体」は、受容抗体由来の軽鎖および重鎖定常領域と組み合わせて供与抗体由来の天然に存在する可変領域（軽鎖および重鎖）を含む改変抗体の一種を指す。

【0196】

「ヒト化抗体」は、そのＣＤＲはヒト以外の供与免疫グロブリンに由来し、分子のうち残りの免疫グロブリン由来部分は１つ（または複数）のヒト免疫グロブリンに由来する、改変抗体の一種を指す。また、結合親和性を保つようにフレームワーク支持残基を改変してもよい（たとえば、１９８９， Ｑｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ， ８６：１００２９－１００３２； １９９１， Ｈｏｄｇｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ９：４２１を参照のこと）。好適なヒト受容抗体は、供与抗体のヌクレオチドおよびアミノ酸配列との相同性により従来のデータベース、たとえばＫＡＢＡＴデータベース、Ｌｏｓ Ａｌａｍｏｓデータベース、およびＳｗｉｓｓ Ｐｒｏｔｅｉｎデータベースから選択した１つであってもよい。供与抗体のフレームワーク領域との（アミノ酸を基準とする）相同性を特徴とするヒト抗体は、供与ＣＤＲの挿入のために重鎖定常領域および／または重鎖可変フレームワーク領域を提供するのに適し得る。軽鎖定常または可変フレームワーク領域を供与することができる好適な受容抗体を類似の方法で選択してもよい。なお、受容抗体の重鎖と軽鎖は同じ受容抗体に由来する必要はない。先行技術にはこのようなヒト化抗体を作製するいくつかの方法が記載されている（たとえば、ＥＰ－Ａ－０２３９４００およびＥＰ－Ａ－０５４９５１を参照のこと）。

【0197】

「供与抗体（ｄｏｎｏｒ ａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、その可変領域、ＣＤＲ、またはそれらのその他の機能性断片もしくは類似体のアミノ酸配列を第一の免疫グロブリンパートナーに提供して、改変免疫グロブリンのコード領域および得られる発現後の改変抗体に供与抗体の抗原特異性および中和活性の性質を提供する、（モノクローナルおよび／または組換え）抗体を指す。

【0198】

「受容抗体（ａｃｃｅｐｔｏｒ ａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、その重鎖および／もしくは軽鎖フレームワーク領域ならびに／またはその重鎖および／もしくは軽鎖定常領域をコードするアミノ酸配列の全体（またはその任意の部分、ただし実施態様によっては全体）を第一の免疫グロブリンパートナーに提供する供与抗体とは異種である、（モノクローナルおよび／または組換え）抗体を指す。特定の実施態様では、ヒト抗体が受容抗体である。

【0199】

「融合タンパク質」という用語は、別々のタンパク質に由来の２種以上のポリペプチドを結合して作製されたタンパク質を指す。実施態様によっては、組換えＤＮＡ技術を用いて（たとえば、融合タンパク質の部分のそれぞれをコードする核酸を結合することで）融合タンパク質を作製し、典型的には生物学的研究または治療に用いる。実施態様によっては、融合タンパク質のポリペプチド部分の間にリンカーを伴って、または伴わずに、化学結合（たとえば共有結合など）により融合タンパク質を作製する。

【0200】

本明細書で用いる場合、「結合する」または「結合した」という用語は、２つ以上の成分をまとめるために結合、連結、力、または結びつけにより接続または一体化することを指し、たとえば第一のポリペプチドを第二のポリペプチドまたは物質に直接結合する、また、たとえば１つ以上の中間化合物（たとえばアミノ酸、ペプチド、ポリペプチドなど）を第一のポリペプチドと第二のポリペプチドまたは物質との間に配置する、直接的結合も間接的結合も包含する。

【0201】

「ＣＤＲ」は、抗体のうち免疫グロブリン重鎖および軽鎖の超可変領域である相補性決定領域アミノ酸配列と定義される。たとえば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．， Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ， ４ｔｈ Ｅｄ．， Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ， Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ （１９８７）を参照のこと。免疫グロブリンの可変部分には３個の重鎖ＣＤＲと３個の軽鎖ＣＤＲ（すなわちＣＤＲ領域）が存在する。したがって、本明細書で用いる場合、「ＣＤＲ」は３個の重鎖ＣＤＲすべてまたは３個の軽鎖ＣＤＲすべて（あるいは、適切であればすべての重鎖ＣＤＲおよびすべての軽鎖ＣＤＲの両方）を指す。抗体の構造およびタンパク質折畳みは、他の残基が抗原結合領域の一部とみなされるということを意味する可能性があり、また、当業者はそのように理解する。たとえば、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．， （１９８９） Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ； Ｎａｔｕｒｅ ３４２， ｐ ８７７－８８３を参照のこと。

【0202】

本明細書で用いる場合、「免疫検定」は標的分子に特異的に結合してその標的分子を検出かつ数量化することができる抗体を用いる任意の結合検定を指す。

【0203】

本明細書で抗体に関して用いる場合、「特異的に結合する」という用語は、特異的な標的分子を認識しこれに結合するが試料中のその他の分子は実質的に認識・結合しない抗体を意味する。場合によっては、認識および結合が標的分子上の特定の構造（たとえば抗原決定基すなわちエピトープ）の存在に依存することを意味するのに「特異的結合」または「特異的に結合する」という用語を用いる。たとえば、抗体がエピトープ「Ａ」に特異的に結合する場合、エピトープＡを含む非標識分子（または遊離の非標識のＡ）が標識付き「Ａ」と抗体を含む反応物中に存在することにより、抗体に結合する標識付きＡの量は減少する。

【0204】

遺伝子の「コード領域」は、遺伝子のコード鎖のヌクレオチド残基と遺伝子の非コード鎖のヌクレオチド（それぞれ、遺伝子の転写により生じるｍＲＮＡ分子のコード領域と相同または相補性である）からなる。

【0205】

ｍＲＮＡ分子の「コード領域」も、ｍＲＮＡ分子のうちｍＲＮＡ分子の翻訳時に転移ＲＮＡの逆コドン領域と適合するヌクレオチド残基または終止コドンをコードするヌクレオチド残基からなる。したがって、コード領域は、ｍＲＮＡ分子がコードする成熟タンパク質には存在しないアミノ酸残基（たとえば、タンパク質輸送シグナル配列のアミノ酸残基）に関するコドンを含むヌクレオチド残基を含んでいてもよい。

【0206】

「示差的に減少した発現」または「発現低下」は、対照に比べて少なくとも１０％以上（たとえば２０％、３０％、４０％、または５０％、６０％、７０％、８０％、９０％）低いかそれ以下、かつ／または２．０倍、１．８倍、１．６倍、１．４倍、１．２倍、１．１倍低いかそれ以下、およびその間の任意のすべての全体または部分増分である生物マーカー産生水準を指す。

【0207】

「示差的に増加した発現」または「発現上昇」は、対照に比べて少なくとも１０％以上（たとえば２０％、３０％、４０％、または５０％、６０％、７０％、８０％、９０％）高いかそれ以上、かつ／または１．１倍、１．２倍、１．４倍、１．６倍、１．８倍、２．０倍高いかそれ以上、およびその間の任意のすべての全体または部分増分である生物マーカー産生水準を指す。

【0208】

本明細書で核酸を指すのに用いる場合、「相補的」は２本の核酸鎖の領域間または同じ核酸鎖の２つの領域間の配列相補性という広い概念を指す。第一の核酸領域のアデニン残基は、第一の領域と逆平行の第二の核酸領域の残基と（その残基がチミンまたはウラシルである場合）特異的水疎結合を形成（塩基対形成）することができることが知られている。同様に、第一の核酸鎖のシトシン残基は、第一の鎖と逆平行の第二の核酸鎖の残基と（その残基がグアニンである場合）塩基対形成することができることが知られている。２つの領域が逆平行に配置されているとき、第一の領域の少なくとも１個のヌクレオチド残基が第二の領域の残基と塩基対形成することができる場合、核酸の第一の領域は同じまたは別の核酸の第二の領域と相補的である。実施態様によっては、第一および第二の部分が逆平行に配置されているときに第一の部分のヌクレオチド残基の少なくとも約５０％、および／または少なくとも約７５％、または少なくとも約９０％、または少なくとも約 ９５％が第二の部分のヌクレオチド残基と塩基対形成することができるように第一の領域は第一の部分を含み、第二の領域は第二の部分を含む。実施態様によっては、第一の部分のすべてのヌクレオチド残基は第二の部分のヌクレオチド残基と塩基対形成することができる。
本明細書で用いる場合、「ＤＮＡ」という用語はデオキシリボ核酸と定義される。

【0209】

「コードする」は、ポリヌクレオチド中の特定のヌクレオチド配列、たとえば遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡが持つ、指定のヌクレオチド配列（すなわちｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、およびｍＲＮＡ）または指定のアミノ酸配列とそれによって得られる生物学的性質とを有する生物学的過程のその他の高分子および巨大分子を合成するための鋳型として機能する固有の性質を指す。したがって、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写および翻訳によりタンパク質が細胞または他の生体系で産生される場合、遺伝子はタンパク質をコードする。ヌクレオチド配列がｍＲＮＡ配列と同一であり通常は配列表に記載されているコード鎖と、遺伝子またはｃＤＮＡの転写のための鋳型として用いられる非コード鎖の両方をタンパク質またはその遺伝子もしくはｃＤＮＡのその他の産物をコードするということができる。

【0210】

特に指定しない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は互いの縮重型であり同じアミノ酸配列をコードするすべてのヌクレオチド配列を包含する。タンパク質またはＲＮＡをコードするヌクレオチド配列という語句は、タンパク質をコードするヌクレオチド配列が型によってはイントロンを含み得る範囲で、イントロンも包含する可能性がある。

【0211】

「単離された」は天然の状態から変更された、または取り出されたことを意味する。たとえば、生体内でその通常の状況で天然に存在する核酸またはペプチドは「単離されて」いないが、その天然の状況の共存する物質から部分的または完全に分離された同じ核酸またはペプチドは「単離されて」いる。単離された核酸またはタンパク質は実質的に精製された形態で存在することができ、あるいは非天然の環境（たとえば宿主細胞など）に存在することができる。

【0212】

本明細書で用いる場合、「ハイブリドーマ」という用語はＢリンパ球と融合パートナー、たとえば骨髄腫細胞とを融合することで得られた細胞を指す。ハイブリドーマをクローン化して細胞培養液に永久的に維持することができ、ハイブリドーマはモノクローナル抗体を産生することができる。

【0213】

「単離核酸」は、天然の状態では近接していた配列から分離された核酸分節または断片、すなわち通常であればその断片に近接している配列（すなわち、その断片が天然に存在するゲノムではその断片に近接している配列）から取り出されたＤＮＡ断片を指す。この用語は、核酸に本来付随する他の成分（すなわち、細胞ではその核酸に本来付随しているＲＮＡもしくはＤＮＡまたはタンパク質）を実質的に取り除いた核酸にも用いられる。したがって、この用語は、たとえば、ベクター、自己複製するプラスミドもしくはウイルス、または原核生物もしくは真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれた組換えＤＮＡ、あるいは他の配列から独立した別個の分子として存在する組換えＤＮＡ（すなわち、ＰＣＲまたは制限酵素消化によって作製されたｃＤＮＡまたはゲノム断片もしくはｃＤＮＡ断片）も包含する。この用語はさらに、さらなるポリペプチド配列をコードするハイブリッド遺伝子の一部である組換えＤＮＡも包含する。

【0214】

本発明に関して、通常存在する核酸塩基について以下の略語を用いる。「Ａ」はアデノシン、「Ｃ」はシトシン、「Ｇ」はグアノシン、「Ｔ」はチミジン、「Ｕ」はウリジンを指す。

【0215】

本明細書で用いる場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、ヌクレオチド鎖と定義される。また、核酸はヌクレオチドの重合体である。したがって、本明細書で用いる場合、核酸とポリヌクレオチドは互換可能である。当業者は、核酸は単量体「ヌクレオチド」に加水分解することができるポリヌクレオチドであるという一般知識を有する。この単量体ヌクレオチドはヌクレオシドに加水分解することができる。本明細書で用いる場合、ポリヌクレオチドとしては、当技術分野で利用可能な任意の手段（たとえば組換え手段、すなわち組換えライブラリーまたは細胞ゲノムから核酸配列を通常のクローン化技術とＰＣＲでクローン化することなどが挙げられるが、これらに限定されない）および合成手段により得られたすべての核酸配列が挙げられるが、これらに限定されない。

【0216】

本明細書で用いる場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「タンパク質」という用語は互換可能に用いられ、ペプチド結合により共有結合したアミノ酸残基で構成される化合物を指す。タンパク質またはペプチドは少なくとも２個のアミノ酸を含有しなければならないが、タンパク質またはペプチドの配列を構成し得るアミノ酸の最大数には制限はない。ポリペプチドはペプチド結合により互いに連結した２個以上のアミノ酸を含む任意のペプチドまたはタンパク質を包含する。本明細書で用いる場合、この用語は当技術分野で一般的にたとえばペプチド、オリゴペプチド、およびオリゴマーとも呼ばれる短鎖と、それよりも長く、当技術分野で一般的にタンパク質と呼ばれる鎖の両方を指し、多くの種類が存在する。「ポリペプチド」としては特に、たとえば生物学的に活性な断片、実質的に相同なポリペプチド、オリゴペプチド、ホモ二量体、ヘテロ二量体、ポリペプチドのバリアント、ポリペプチドの改変体、誘導体、類似体、融合タンパク質またはそのバリアントもしくは断片が挙げられる。ポリペプチドとしては、天然のペプチド、組換えペプチド、合成ペプチド、またはそれらの組合せが挙げられる。

【0217】

本明細書で用いる場合、「子孫」という用語は派生物または後代を指し、哺乳動物の後代を包含し、また、親細胞に由来の分化済みまたは未分化の派生細胞も包含される。一つの用法では、子孫という用語は遺伝的に親と同一である派生細胞を指す。別の用法では、子孫という用語は遺伝的・表現型的に親と同一である派生細胞を指す。さらに別の用法では、子孫という用語は親細胞から分化した派生細胞を指す。
本明細書で用いる場合、「ＲＮＡ」という用語はリボ核酸と定義される。

【0218】

本明細書で用いる場合、「組換えＤＮＡ」という用語は異なる供給源に由来するＤＮＡ片を連結して作製されたＤＮＡと定義される。

【0219】

本明細書で用いる場合、「組換えポリペプチド」という用語は組換えＤＮＡ法を用いて作製されたポリペプチドと定義される。
本明細書で用いる場合、「接合された」は１つの分子を第二の分子に共有結合することを指す。

【0220】

本明細書で用いる場合、「バリアント」という用語は、それぞれ基準の核酸配列またはペプチド配列と配列は異なるが基準分子の本質的な生物学的特性を保持している核酸配列またはペプチド配列を指す。核酸バリアントの配列の変化によって、基準核酸がコードするペプチドのアミノ酸配列は変化しない場合もあり、アミノ酸の置換、付加、欠失、融合、および切断が起こる場合もある。ペプチドバリアントの配列の変化は典型的には限定的または保存的であり、結果として基準ペプチドとバリアントの配列は全体的に非常に類似しており、多くの領域で同一である。バリアントと基準ペプチドは、任意の組合せの１つ以上の置換、付加、欠失によりアミノ酸配列が異なっていてもよい。核酸またはペプチドのバリアントは、アレルバリアントなどの天然に存在するバリアントであってもよく、天然に存在するとわかっていないバリアントであってもよい。天然に存在しない核酸およびペプチドバリアントを変異誘発技術または直接合成により作製してもよい。様々な実施態様では、バリアントの配列は基準配列と少なくとも９９％、少なくとも９８％、少なくとも９７％、少なくとも９６％、少なくとも９５％、少なくとも９４％、少なくとも９３％、少なくとも９２％、少なくとも９１％、少なくとも９０％、少なくとも８９％、少なくとも８８％、少なくとも８７％、少なくとも８６％、少なくとも８５％同一である。

【0221】

本明細書で用いる場合、「調節」という用語は、基質の濃度または活性を変更する任意の方法を意味することができる。タンパク質に関して、調節の非限定的な例としては、発現（転写および／または翻訳を含む）に作用すること、折畳みに作用すること、分解またはタンパク質代謝回転に作用すること、ならびにタンパク質の局在化に作用することが挙げられる。酵素に関して、調節の非限定的な例としては、酵素活性に作用することがさらに挙げられる。「調節因子」は、基質の濃度または活性に作用する活性を持つ分子を指す。調節因子は直接的であっても間接的であってもよい。調節因子はその基質を活性化もしくは阻害、またはそれ以外の形で変化させるよう機能することができる。

【0222】

本明細書で用いる場合、「スキャンウィンドウ」は、配列を任意の近接配列と独立に評価することができる複数の連続位置の区画を指す。一般に、評価する配列の長さに沿ってスキャンウィンドウを徐々に移動させ、新しい各区画を独立に評価する。１位または２位以上で位置を徐々に移動させる。

【0223】

本明細書で用いる場合、「ベクター」という用語は複製起点を含む核酸配列を意味する可能性がある。ベクターは、プラスミド、バクテリオファージ、細菌の人工染色体、または酵母の人工染色体であってもよい。ベクターはＤＮＡベクターまたはＲＮＡベクターであってもよい。ベクターは、自己複製する染色体外ベクターまたは宿主ゲノムに統合するベクターであってもよい。

【0224】

範囲：本開示全体で、範囲を示す形式で本発明の様々な側面を記載する場合がある。なお、範囲を示す形式による記載は単に簡便のためのものであり、本発明の範囲に対する変更不可の限定として解釈されるべきではない。したがって、範囲の記載は、可能性のあるすべての部分的範囲と、その範囲内の個々の数値とを具体的に開示しているものとする。たとえば、１～６などの範囲の記載は、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６などの部分的範囲と、その範囲に含まれるたとえば１、２、２．７、３、４、５、５．３、および６などの個々の数とを具体的に開示しているものとする。このことは範囲の幅に関係なくあてはまる。

説明

【0225】

本発明は、抗Ｃ５抗体またはその融合タンパク質を用いた補体シグナル伝達阻害に関する。実施態様によっては、本発明は、Ｃ３およびＣ５活性の両方を阻害することができる二機能性の補体阻害物質を用いる補体シグナル伝達阻害に関する。様々な実施態様では、本発明は、部分的には、 個体を抗Ｃ５抗体またはその融合タンパク質に接触させることによる、個体の補体関連疾患または補体関連障害を治療する方法に関する。

補体阻害物質および二機能性抗体

【0226】

本発明は、抗ヒトＣ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片（たとえば、抗Ｃ５抗体またはそのバリアントもしくは断片、抗Ｃ５融合タンパク質抗体またはそのバリアントもしくは断片など）を用いる補体シグナル伝達および補体関連障害の阻害に関する。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せは、Ｃ５およびＣ３活性化の阻害に二機能性の活性を示す。実施態様によっては、この抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せはＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。

【0227】

実施態様によっては、この抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せはＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せは中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）になるほど、より酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）のときよりも強力にＣ５に結合する。このようなｐＨ依存性の結合により、投与された抗体または抗体融合タンパク質分子はより長い持続性を得る。というのも、細胞に吸収された免疫複合体（すなわち、Ｃ５に結合した抗Ｃ５ ｍＡｂ、および／またはＣ５に結合した抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質）はエンドソームの酸性環境では解離し、それにより遊離の抗体または抗体－ＦＨ融合タンパク質が胎児性Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）を介して細胞外で再循環することができ、そこで新たなＣ５分子との結合に利用可能になるからである。

【0228】

一実施態様では、本発明は、補体成分Ｃ３タンパク質、またはタンパク質Ｃ３ａもしくはＣ３ｂの断片を特異的に標的化することによる補体シグナル伝達カスケードの阻害に関する。一実施態様では、本発明は、補体成分Ｃ５タンパク質、またはタンパク質Ｃ５ａもしくはＣ５ｂの断片を特異的に標的化することによる補体シグナル伝達カスケードの阻害に関する。
一実施態様では、本発明は、補体成分Ｃ３タンパク質、タンパク質Ｃ３ａもしくはＣ３ｂの断片、Ｃ５タンパク質、タンパク質Ｃ５ａもしくはＣ５ｂの断片、またはそれらの任意の組合せを特異的に標的化することによる、補体シグナル伝達カスケードの阻害に関する。一実施態様では、本発明は、望ましくない制御不能な過剰な補体活性化に関連する炎症および自己免疫疾患の治療および予防方法に関する。一実施態様では、本発明は個体を抗Ｃ５抗体に接触させることによる個体の補体関連疾患または補体関連障害の治療に関する。一実施態様では、本発明は個体を抗Ｃ５融合タンパク質抗体に接触させることによる個体の補体関連疾患または補体関連障害の治療に関する。一実施態様では、本発明は個体を抗Ｃ５抗体または抗Ｃ５融合タンパク質抗体に接触させることによる個体の補体関連疾患または補体関連障害の治療に関する。

【0229】

一実施態様では、本発明は抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを個体に投与することでＣ３ａまたはＣ３ｂタンパク質の生成とＭＡＣの形成を阻害する工程を含む、前記個体の補体関連疾患または障害を治療する方法である。一実施態様では、本発明は抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを個体に投与することでＣ５ａまたはＣ５ｂタンパク質の生成とＭＡＣの形成を阻害する工程を含む、前記個体の補体関連疾患または障害を治療する方法である。一実施態様では、本発明は抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを個体に投与することでＣ３ａまたはＣ３ｂタンパク質の生成を阻害し、Ｃ５ａまたはＣ５ｂタンパク質の生成とＭＡＣの形成を阻害する工程を含む、前記個体の補体関連疾患または障害を治療する方法である。本発明の方法を用いて治療することができる補体関連症状の例としては、ＭＤ、ＡＭＤ、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、喘息、アレルギー性喘息、ＣＯＰＤ、ＰＮＨ症候群、重症筋無力症、ＮＭＯ、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、ａＨＵＳ、ＣＲＶＯ、ＣＲＡＯ、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症（心肺バイパス手術および腎臓透析に関連する炎症が挙げられるがこれらに限定されない）、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎（ＡＮＣＡ関連糸球体腎炎、ループス腎炎、およびそれらの組合せが挙げられるがこれらに限定されない）、ＡＮＣＡ関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、および抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、またはそれらの任意の組合せが挙げられるがこれらに限定されない。実施態様によっては、本発明の組成物および方法は対象、たとえばエクリズマブまたはラブリズマブによる治療に十分に反応しない、ＰＮＨを有する対象の治療に有用である。非限定的な例として、対象によってはＣ５のα鎖にエクリズマブまたはラブリズマブ治療に抵抗性にする可能性がある変異を有していてもよい（Ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｎｔｓ ｉｎ Ｃ５ ａｎｄ ｐｏｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｅｃｕｌｉｚｕｍａｂ． Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ Ｊ， ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ２０１４ Ｆｅｂ １３；３７０（７）：６３２－９を参照のこと）。

【0230】

「自己」と「非自己」の抗原を区別する免疫系の能力は、侵入する微生物に対する特異的防御として免疫系が機能するために不可欠である。「非自己」抗原は体内に侵入または存在する物質上の抗原であり、対象自身の構成要素とは検出できるほど異なるか外来性であるのに対し、「自己」抗原は、健常な対象の体内にある、対象自身の構成要素と検出できるほどには異ならないか外来性ではない抗原である。本方法の様々な実施態様では、阻害される補体活性化は、微生物抗原、非生物学的外来表面、変化した自己組織、またはそれらの組合せからなる群のうちの少なくとも１つによって引き起こされたものである。非生物学的外来表面の一例は、心肺バイパス手術または腎臓透析で使用されるような血液中のチューブである。変化した自己組織の例としては、アポトーシス、壊死、虚血ストレスを受けた組織および細胞、機能的補体調節タンパク質を欠く組織および細胞、またはそれらの組合せが挙げられる。

【0231】

実施態様によっては、本発明の抗Ｃ５抗体（たとえば抗Ｃ５抗体、抗Ｃ５融合タンパク質抗体、抗体断片、抗体バリアントなど）は代替補体経路（ＡＰ）、古典経路（ＣＰ）、またはレクチン経路（ＬＰ）の活性化の下流作用を阻害する。一般に、ＣＰは抗原－抗体複合体により開始され、ＬＰは微生物表面の糖分子へのレクチンの結合により活性化され、一方、ＡＰは低水準で恒常的に活性であるが、細菌、ウイルス、および寄生虫の細胞表面では調節タンパク質がないため迅速に増幅可能である。宿主細胞は通常、調節タンパク質によりＡＰ補体活性化から保護される。しかし、状況によっては（調節タンパク質が不完全である、または欠失している場合など）、ＡＰは宿主細胞でも制御不能に活性化されて補体関連疾患または障害につながる可能性がある。ＣＰは成分Ｃ１、Ｃ２、Ｃ４からなり、Ｃ３活性化工程でＡＰと合流する。ＬＰはマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）およびＭＢＬ関連セリンプロテアーゼ（ＭＡＳＰ）からなり、成分Ｃ４およびＣ２をＣＰと共有する。ＡＰは成分Ｃ３といくつかの因子、たとえばＢ因子、Ｄ因子、プロペルジン、Ｃ５、および液相調節因子ＦＨからなる。補体活性化は３つの段階、すなわち（ａ）認識、（ｂ）酵素活性化、および（ｃ）細胞死につながる膜侵襲からなる。ＣＰ補体活性化の最初の段階はＣ１で開始する。Ｃ１は３つの異なるタンパク質、すなわち認識サブユニットＣ１ｑ、ならびにセリンプロテアーゼ小成分Ｃ１ｒおよびＣ１ｓで構成され、Ｃ１ｒおよびＣ１ｓはカルシウム依存性四量体複合体であるＣ１ｒ２ ｓ２で共に結合している。Ｃ１の生理学的活性化が生じるためには完全なＣ１複合体が必要である。活性化は、抗原と複合体形成した免疫グロブリンに完全なＣ１複合体が結合すると起こる。この結合はＣ１ｓを活性化し、次いでＣ１ｓはＣ４およびＣ２タンパク質の両方を切断してＣ４ａおよびＣ４ｂならびにＣ２ａおよびＣ２ｂを生成する。Ｃ４ｂおよびＣ２ａの断片は一体となってＣ３転換酵素Ｃ４ｂ２ａを形成し、次にＣ４ｂ２ａはＣ３を切断してＣ３ａおよびＣ３ｂを形成する。ＬＰの活性化はＭＢＬが標的表面上の特定の糖と結合することにより開始され、これはＭＡＳＰの活性化を誘発する。ＭＡＳＰは続いてＣＰのＣ１ｓの活性と類似の方法でＣ４およびＣ２を切断し、その結果Ｃ３転換酵素Ｃ４ｂ２ａを生成する。このように、ＣＰとＬＰは異なる機序により活性化されるが、それらは同一の成分Ｃ４およびＣ２を共有し、いずれの経路も同一のＣ３転換酵素Ｃ４ｂ２ａの生成を引き起こす。Ｃ４ｂ２ａがＣ３をＣ３ｂおよびＣ３ａに切断することは２つの理由により補体経路の中心的事象である。それはＡＰ増幅ループを開始する。というのも、表面に堆積したＣ３ｂはＡＰの中心的な中間体であるからである。Ｃ３ａおよびＣ３ｂはいずれも生物学的に重要である。Ｃ３ａは炎症誘発性であり、Ｃ５ａと共にアナフィラトキシンと呼ばれる。Ｃ３ｂおよびそのさらなる切断産物はさらに好中球、好酸球、単球およびマクロファージに存在する補体受容体に結合し、それによりＣ３ｂオプソニン化した粒子の食作用および排除を促進する。最後に、Ｃ３ｂはＣ４ｂ２ａと結合してＣＰおよびＬＰのＣ５転換酵素を形成して終末補体配列を活性化することができ、強力な炎症誘発性媒介物質であるＣ５ａの生成、および溶解性ＭＡＣであるＣ５－Ｃ９の構築を引き起こす。

【0232】

一実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体経路の活性は、リポ多糖（ＬＰＳ）、リポオリゴ糖（ＬＯＳ）、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）、および損傷関連分子パターン（ＤＡＭＰ）から選択される群のうちの少なくとも１つにより誘導される補体経路活性化である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性はＣ５ａタンパク質の生成である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性はＣ５ｂタンパク質の生成である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性はＣ３ａタンパク質の生成である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性はＣ３ｂタンパク質の生成である。様々な実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性は、Ｃ５ａタンパク質、Ｃ５ｂタンパク質、Ｃ３ａタンパク質、Ｃ３ｂタンパク質、またはそれらの任意の組合せの生成である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体シグナル伝達の活性はＭＡＣの形成である。別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体経路の活性はＣ５依存性である。さらに別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体経路の活性はＣ３依存性である。さらに別の実施態様では、本発明の方法を用いて阻害される補体経路の活性はＣ３依存性、Ｃ５依存性、またはその両方である。

【0233】

一実施態様では、本発明は個体に抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを投与して個体の体内のＣＰ、ＬＰ、またはＡＰ活性化により生じる終末補体活性化の開始を阻害する工程を含む、前記個体の終末補体活性化の開始を阻害する方法である。これらの実施態様の例は、補体関連の溶血に苦しむＰＮＨ患者、ならびに補体関連のａＨＵＳ、喘息、虚血再灌流障害、関節リウマチ、およびＡＮＣＡ関連腎臓疾患に苦しむ個体である。本発明の様々な実施態様では、本発明の組成物および方法を用いて治療することができる疾患および障害としては、補体関連の溶血、補体関連のａＨＵＳ、Ｃ３糸球体症、視神経脊髄炎、重症筋無力症、喘息、虚血再灌流障害、関節リウマチ、ならびにＡＮＣＡ関連腎臓疾患または障害が挙げられるが、これらに限定されない。

【0234】

様々な他の実施態様では、終末補体活性化に対する阻害効果を有する潜在的な抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの組合せを特定する方法が本明細書で提供される。一つのこのような方法は後述のヒツジ赤血球溶解検定である。簡潔には、ヒツジ赤血球（検定試料あたり１×１０^７細胞、ＰＢＳ中で調製、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ）に５０％の正常ヒト血清（ＮＨＳ、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．製）を加えてゼラチンベロナール緩衝液（ＧＶＢ２＋、Ｓｉｇｍａ；合計検定容量： １００ μｌ）中で、３７℃で２０分間恒温放置した。ヒツジ赤血球に加える前にＮＨＳを抗Ｃ５ ｍＡｂと共に４℃で１時間、予備保温した。４０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ氷冷溶液を加えて溶解反応を停止した。恒温放置後の混合物を１５００ ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を回収してＯＤを４０５ ｎｍで測定した。ＮＨＳを含まない試料またはＥＤＴＡを加えた試料を陰性溶解対照として使用し、また、蒸留水で完全に溶解したヒツジ赤血球の試料を陽性対照（１００％溶解）として使用し、これに対して他の試料の溶解率（％）を正規化した。抗ヒトＣ５遮断ｍＡｂの確認選別に使用することができる別の方法は以下の工程を含む：ａ）プレートをＬＰＳで被覆する；ｂ）プレートを洗浄して未結合のＬＰＳを除去する；ｃ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）溶液を加える；ｄ）プレートを洗浄して未結合のＢＳＡを除去する；ｅ）血清と共に予備保温して正常ヒト血清に混合した候補抗Ｃ５抗体化合物の混合物を加える；ｆ）プレートを洗浄する；ｇ）セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）結合抗ヒトＣ５ｂ－９または抗ヒトＣ６抗体（抗ヒト終末補体複合体（ＴＣＣ）抗体であるクローンａＥ１１、またはビオチン標識抗ヒトＣ６抗体、いずれもＱｕｉｄｅｌ製）を加える；ｈ）プレートを洗浄して未結合の抗体を除去する；ｉ）ＨＲＰ基質試薬を加える；ｊ）硫酸を加えて反応を停止する；ｋ）４５０ ｎｍで光学密度を測定する；ｌ）候補抗Ｃ５抗体化合物を含むプレートの光学密度を陽性比較対照および陰性比較対照の光学密度と比較する（光学密度が陽性比較対照と比較して減少した場合、抗Ｃ５抗体が特定される）。

抗Ｃ５抗体および抗Ｃ５融合タンパク質抗体

【0235】

実施態様によっては、本発明は、Ｃ３転換酵素によるＣ３の活性化を特異的に阻害する抗体または融合タンパク質を含む組成物を包含する。実施態様によっては、本発明は、Ｃ５に特異的に結合し、かつその活性化を阻害する抗体または融合タンパク質を含む組成物を包含する。実施態様によっては、本発明は、Ｃ３、Ｃ５、またはその両方の活性化を特異的に阻害する抗体または融合タンパク質を含む組成物を包含する。実施態様によっては、抗Ｃ５ 抗体または融合タンパク質はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、またはヒト化抗体である。

【0236】

実施態様によっては、抗体または融合タンパク質は抗体断片である。実施態様によっては、Ｃ３はヒトＣ３である。実施態様によっては、Ｃ５はヒトＣ５である。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体融合タンパク質はＦＨに連結された抗Ｃ５ ｍＡｂである。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体融合タンパク質はＦＨの断片に連結された抗Ｃ５ ｍＡｂである。実施態様によっては、ＦＨはヒトＦＨである。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体または融合タンパク質はＣ５に対しｐＨ依存性の結合を示す。実施態様によっては、このｐＨ依存性抗Ｃ５抗体または融合タンパク質は中性のｐＨ（たとえば血液に見られるようなｐＨ約７．４）になるほど、より酸性のｐＨ（たとえばエンドソームに見られるようなｐＨ約５．８）のときよりも強力にＣ５に結合する。

【0237】

実施態様によっては、抗体、融合タンパク質、または抗体の断片のヒトＣ５への結合は、完全な生体の補体活性化経路のＣ３ａもしくはＣ３ｂの生成およびＭＡＣの形成の低減に関連する。実施態様によっては、抗体、融合タンパク質、または抗体の断片のヒトＣ５への結合は、完全な生体の補体活性化経路のＣ５ａもしくはＣ５ｂの生成およびＭＡＣの形成の低減に関連する。

【0238】

実施態様によっては、本発明はヒトＣ３の活性化を阻害することができるタンパク質またはポリペプチドである。実施態様によっては、本発明はヒトＣ５に結合してその活性化を阻害することができるタンパク質またはポリペプチドである。実施態様によっては、本発明はヒトＣ３、ヒトＣ５、またはその両方に結合し、かつ／またはその活性化を阻害することができるタンパク質またはポリペプチドである。実施態様によっては、抗体、融合タンパク質、または抗体断片；タンパク質またはポリペプチドがヒトＣ３転換酵素の関連部分もしくは画分またはエピトープに結合すること；および抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片の相互作用、あるいはタンパク質またはポリペプチドがヒトＣ３転換酵素の関連部分と相互作用すること、は完全な生体の体内のＣ３ａもしくはＣ３ｂの生成およびＭＡＣの形成の低減に関連する。実施態様によっては、抗体、融合タンパク質、または抗体断片；タンパク質またはポリペプチドがヒトＣ５の関連部分もしくは画分またはエピトープに結合すること；および抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片、あるいはタンパク質またはポリペプチドがヒトＣ５の関連部分と結合すること、は完全な生体の体内のＣ５ａもしくはＣ５ｂの生成およびＭＡＣの形成の低減に関連する。

【0239】

実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素に対する阻害活性を有する抗体、融合タンパク質、またはそれらの断片をタンパク質、ペプチド、または別の化合物にさらに接合する。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片をタンパク質、ペプチド、または他の化合物に接合する。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、標的化部分である（すなわち、標的化部分はヒトＣ３以外の分子に特異的に結合する）。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、作動体分子（たとえば細胞傷害性分子）である。

【0240】

実施態様によっては、ヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらのＣ５結合抗体断片をタンパク質、ペプチド、または別の化合物にさらに接合する。実施態様によっては、ヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片をタンパク質、ペプチド、または他の化合物に接合する。実施態様によっては、ヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、標的化部分である（すなわち、標的化部分はヒトＣ５以外の分子に特異的に結合する）。実施態様によっては、ヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、作動体分子（たとえば細胞傷害性分子）である。

【0241】

実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害しかつヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはＣ３転換酵素を阻害しかつＣ５と結合するそれらの断片をタンパク質、ペプチド、または別の化合物にさらに接合する。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害しかつヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片をタンパク質、ペプチド、または他の化合物に接合する。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害しかつヒトＣ５と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、標的化部分である（すなわち、標的化部分はヒトＣ３およびヒトＣ５以外の分子に特異的に結合する）。実施態様によっては、ヒトＣ３転換酵素を阻害しかつヒトＣ５結合と結合する抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗体断片を接合するタンパク質、ペプチド、または他の化合物は、作動体分子（たとえば細胞傷害性分子）である。

【0242】

様々な実施態様では、抗体は融合タンパク質である。一実施態様では、融合タンパク質は補体制御タンパク質を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＣＲ１またはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＭＣＰまたはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＣ４ＢＰまたはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＤＡＦまたはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＡｐｏＥまたはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はＦＨタンパク質またはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はヒトＩｇＧ４またはその断片を含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーを含む。様々な実施態様では、融合タンパク質はＣＲ１もしくはその断片、ＭＣＰもしくはその断片、Ｃ４ＢＰもしくはその断片、ＤＡＦもしくはその断片、ＡｐｏＥもしくはその断片、ＦＨタンパク質もしくはその断片、ヒトＩｇＧ４もしくはその断片、リンカー、またはそれらの任意の組合せを含む。

【0243】

一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも２個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも３個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも４個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも５個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも６個のＳＣＲドメインを含む。 一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも７個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも８個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも９個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１０個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１１個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１２個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１３個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１４個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１５個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１６個のＳＣＲドメインを含む。 一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１７個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１８個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも１９個のＳＣＲドメインを含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質の少なくとも２０個のＳＣＲドメインを含む。

【0244】

一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン１～２０を含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン１～５を含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン２～５を含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン３～５を含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン４および５を含む。一実施態様では、ＦＨの断片はＦＨタンパク質のＳＣＲドメイン５を含む。

【0245】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体と融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体に結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。実施態様によっては、融合タンパク質は直接またはリンカーを介して抗体と融合（たとえば結合）した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、リンカーは切断可能なリンカーではない。一実施態様では、リンカーは切断可能なリンカーである。たとえば、実施態様によっては、切断可能なリンカーは化学切断可能なリンカー、酵素切断可能なリンカー、ペプチドに基づくリンカー、またはそれらの任意の組合せである。

【0246】

実施態様によっては、化学切断可能なリンカーは酸切断可能なリンカーまたは還元可能なリンカーである。一実施態様では、酸切断可能なリンカーを、血液循環の中性ｐＨでは安定を保つが細胞区画の酸性環境では加水分解し細胞傷害性の薬物を放出するように特異的に設計する。一実施態様では、還元可能なリンカーを、血流中の酸素が豊富な環境では安定を保ち細胞の還元的環境では選択的に切断されるように設計する。別の実施態様では、ペプチドに基づくリンカーを、体循環中では完全な状態を保ち特異的な細胞内プロテアーゼ（カテプシンＢなど）により切断されるように設計する。リンカーの例としては、リソソーム特異的プロテアーゼ切断部位を含むリンカー、混合二硫化物を含むリンカー、アミノエトキシエトキシアセタート（ＡＥＥＡ）、β－グルクロニドリンカー、細胞内プロテアーゼ（たとえば、リソソームプロテアーゼまたはエンドソームプロテアーゼ）で切断可能なペプチドリンカー、ジペプチドリンカー（たとえば、バリン－シトルリン（ｖａｌ－ｃｉｔ）またはフェニルアラニン－リシン（ｐｈｅ－ｌｙｓ）リンカー）、アミノヘキサノアート、ヒドラゾン、チオマレイミド、およびジベンゾシクロオクチン（ＤＢＣＯ）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0247】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＣ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＮ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0248】

一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗Ｃ５ ｍＡｂと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0249】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗Ｃ５ ｍＡｂと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＣ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＮ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0250】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体のバリアントと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。たとえば、一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのバリアントと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体のバリアントと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0251】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体のバリアントと結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のバリアントのＣ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のバリアントのＮ末端と結合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0252】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体の断片と融合（たとえば結合）した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質はリンカーを伴ってまたは伴わずに抗体の断片と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。たとえば、一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂの断片と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体の断片と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0253】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体の断片と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体の断片のＣ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体の断片のＮ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0254】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＨ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。たとえば、一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＶＨ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体のＶＨ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0255】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体のＶＨ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＨ配列のＣ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＨ配列のＮ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0256】

一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＬ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。たとえば、一実施態様では、融合タンパク質は抗Ｃ５ ｍＡｂのＶＬ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は少なくとも１つのリンカーで抗体のＶＬ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0257】

一実施態様では、融合タンパク質はリンカーなしで抗体のＶＬ配列と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＬ配列のＣ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。一実施態様では、融合タンパク質は抗体のＶＬ配列のＮ末端と融合した融合タンパク質パートナー（たとえばＦＨまたはその機能性断片）を含む。

【0258】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0259】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１を含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0260】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0261】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0262】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0263】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0264】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0265】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0266】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0267】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0268】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0269】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号１３のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｌ３－１またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｌ３－１は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0270】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0271】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0272】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0273】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0274】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0275】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号１６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｌ１－２またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｌ１－２は、配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0276】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0277】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0278】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0279】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0280】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0281】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号１９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－４またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－４は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0282】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0283】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0284】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0285】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0286】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0287】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0288】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0289】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２６のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0290】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0291】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0292】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0293】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0294】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号２８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号３１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ２－６／Ｌ３－５またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ２－６／Ｌ３－５は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0295】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0296】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0297】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0298】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0299】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0300】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体は、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0301】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0302】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0303】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0304】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0305】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0306】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0307】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0308】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。．

【0309】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0310】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0311】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0312】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0313】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0314】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0315】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0316】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0317】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0318】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0319】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0320】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0321】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0322】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0323】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0324】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号５１のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0325】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0326】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；および配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１を含む。

【0327】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0328】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0329】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0330】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0331】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0332】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。．

【0333】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0334】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0335】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0336】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0337】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0338】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号５９のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0339】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号７６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号７６のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0340】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0341】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号６２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0342】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0343】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0344】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0345】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号６４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号６４のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。．

【0346】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号７２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号７２のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0347】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。

【0348】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号６５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0349】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0350】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0351】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0352】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号６７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号６７のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0353】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号７８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号７８のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0354】

一実施態様では、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群より選択されるＣＤＲのうちの少なくとも１つ、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体は、配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３からなる群のすべてのＣＤＲ、またはそれらの１つ以上のバリアントを含む。

【0355】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号６８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；および配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２を含む。

【0356】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0357】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列または最大約３個（たとえば約１個、２個、もしくは３個のいずれか）のアミノ酸置換を含むそのバリアントを含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0358】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のアミノ酸配列を含むＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ－ＣＤＲ３を含む。

【0359】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号７０のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号７０のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。．

【0360】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号８０のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む。他の実施態様では、抗Ｃ５抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む。別の実施態様では、抗Ｃ５抗体はｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９またはそのバリアントである。モノクローナル抗Ｃ５抗体Ｈ１－８／Ｌ１－９は、配列番号７８のアミノ酸配列を含む重鎖と配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はヒト化されている。実施態様によっては、モノクローナル抗Ｃ５抗体はキメラ抗体である。

【0361】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第４位のプロリン（すなわちＰ４）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｐ４の置換は、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、またはＰ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）である。

【0362】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のスレオニン（すなわちＴ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｔ９の置換は、Ｔ９→Ｈ９（すなわちＴ９Ｈ）、Ｔ９→Ｆ９（すなわちＴ９Ｆ）、Ｔ９→Ｌ９（すなわちＴ９Ｌ）、Ｔ９→Ｍ９（すなわちＴ９Ｍ）、Ｔ９→Ｗ９（すなわちＴ９Ｗ）、またはＴ９→Ｉ９（すなわちＴ９Ｉ）である。

【0363】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第４位のプロリン（すなわちＰ４）の置換、および配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第９位のスレオニン（すなわちＴ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｐ４の置換は、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、またはＰ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）であり、Ｔ９の置換は、Ｔ９→Ｈ９（すなわちＴ９Ｈ）、Ｔ９→Ｆ９（すなわちＴ９Ｆ）、Ｔ９→Ｌ９（すなわちＴ９Ｌ）、Ｔ９→Ｍ９（すなわちＴ９Ｍ）、Ｔ９→Ｗ９（すなわちＴ９Ｗ）、またはＴ９→Ｉ９（すなわちＴ９Ｉ）である。

【0364】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３の第１６位のバリン（すなわちＶ１６）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｖ４の置換は、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、またはＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ）である。

【0365】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号３に対してＶＨ－ＣＤＲ１の第８位のアスパラギン（すなわちＮ８）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｎ８の置換は、Ｎ８→Ｈ８（すなわちＮ８Ｈ）、Ｎ８→Ｗ８（すなわちＮ８Ｗ）、Ｎ８→Ｉ８（すなわちＮ８Ｉ）、Ｎ８→Ｖ８（すなわちＮ８Ｖ）、Ｎ８→Ｙ８（すなわちＮ８Ｙ）、またはＮ８→Ｆ８（すなわちＮ８Ｆ）である。

【0366】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１の第９位のロイシン（すなわちＬ９）の置換を含む。様々な実施態様では、Ｌ９の置換は、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、またはＬ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）である。

【0367】

実施態様によっては、抗Ｃ５抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片は、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のスレオニン９（すなわちＴ９）、配列番号５に対するＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）、および配列番号２０に対するＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）からなる群のうちの２つ以上の置換を含む。様々な実施態様では、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（すなわちＰ４）、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のスレオニン９（すなわちＴ９）、配列番号５に対するＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（すなわちＶ１６）、および配列番号２０に対するＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（すなわちＬ９）からなる群のうちの２つ以上の置換を含む抗Ｃ５抗体またはその抗原結合断片は、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅからなる群より選択される２つ以上の置換を含む。

【0368】

実施態様によっては、抗体または融合タンパク質はキメラ抗体である。実施態様によっては、抗ヒトＣ５抗体は本明細書で先に説明した可変領域ＣＤＲ配列と組み合わせてヒト軽鎖およびヒト重鎖定常領域を含んでいてもよい。当業者は、目的の特異抗体の関連ドメインを交換する公知の技術を用いてキメラ抗体を調製し入手することができる。このような抗体は、異種起源の抗体ドメインを接合し、本願に記載の１つ以上のＣＤＲ配列を組み込むことにより容易に調製される。公知の組換え技術を用いて、ヒト重鎖および軽鎖定常領域の核酸配列によりコードされる重鎖および軽鎖定常領域と本開示に記載のＣＤＲ配列に対応する核酸配列によりコードされるＣＤＲを含む重鎖および軽鎖可変領域とを含む組換え抗体を入手・調製することができる。当業者は、本開示に記載の１つ以上のＣＤＲ配列を含み、軽鎖の部分のみまたは重鎖の部分のみを別の種（たとえばヒトなど）の抗体に由来の領域で置き換えられた、抗ヒトＣ５抗体を調製することができる。配列番号３～５、８～１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９、３４、３７～３９、４２～４４、４７～４９、５２～５４、５７、６２、６５、および６８から選択される１つ以上のＣＤＲ配列またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する可変領域をＣＤＲ領域外のマウスまたはマウス以外の抗体構造要素と組み合わせて含むヒト抗ヒトＣ５抗体を、当技術分野で公知の通常の方法で調製することができる。実施態様によっては、当技術分野で公知の技術を用いてさらに抗体または抗体断片をヒト化する。

【0369】

様々な実施態様では、本明細書に記載の可変領域のいずれかを有する本明細書に記載の本発明の抗体または融合タンパク質のいずれも、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含んでいてもよい。配列番号３２はヒトＩｇＧ４重鎖定常領域のアミノ酸配列の例である。実施態様によっては、本発明の抗体または融合タンパク質はＳ２２８Ｐ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。配列番号３３はＳ２２８Ｐ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域のアミノ酸配列の例である。実施態様によっては、本発明の抗体はＦｃ ＰＬＡ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。配列番号６１はＦｃ ＰＬＡ変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域のアミノ酸配列の例である。

【0370】

実施態様によっては、抗Ｃ５ 抗体または融合タンパク質は、配列番号３～５、８～１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９、３４、３７～３９、４２～４４、４７～４９、５２～５４、５７、６２、６５、および６８に示す本明細書に記載のＣＤＲ配列と少なくとも約８５％（たとえば、少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のいずれか）のアミノ酸同一性を有する抗体を含む。

【0371】

一実施態様では、本開示は、上記のＣＤＲ配列と少なくとも約８５％（たとえば、少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％のいずれか）の同一性のＣＤＲ配列を有する抗Ｃ５ 抗体または融合タンパク質を包含する。一実施態様では、ヒトＣ５に対する抗体はＶＨ領域およびＶＬ領域を有し、ＶＨ領域は配列番号２、１９、２２、２８、３６、４１、４６、５１、５６、および５９から選択される１つと約９０％を超えて（たとえば、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のいずれかを超えて、または１００％）同一なアミノ酸配列を有し、ＶＬ領域は配列番号７、１３、１６、１７、２５、３１、および７４から選択される１つと約９０％を超えて（たとえば、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のいずれかを超えて、または１００％）同一なアミノ酸配列を有する。

【0372】

実施態様によっては、抗体または抗体断片は改変されている。実施態様によっては、この改変は、抗体またはその抗原結合断片を別のタンパク質またはタンパク質断片の部分と融合することを包含する。実施態様によっては、本発明の抗体またはその抗体断片をインビボの循環半減期を増やすように改変する。たとえば、抗体をインビボで安定させるために断片の抗体をＦｃＲｎ分子（胎児性Ｆｃ受容体としても知られている）と融合してもよい（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ７：７１５－７２５）。実施態様によっては、抗体またはその抗原結合断片を作動体分子および／または別の標的化部分（異なる分子、異なる抗原、または異なるエピトープを認識する抗体または抗体断片など）に接合（たとえば融合）する。

【0373】

当業者は、配列番号３～５、８～１１、１４、１７、２０、２３、２６、２９、３４、３７～３９、４２～４４、４７～４９、５２～５４、５７、６２、６５、および６８から選択される少なくとも１つの特異的ＣＤＲ配列またはそれらの１つ以上のバリアントを含むヒトＣ５結合ｓｃＦｖを調製することができる。ｓｃＦｖは、配列番号３～５、１７、２０、２６、３４、３７～３９、４２～４４、４７～４９、５２～５４、５７、６２、６５、および６８で指定の重鎖可変領域配列またはそれらの１つ以上のバリアント、ならびに配列番号８～１１、１４、２３、および２９で指定の軽鎖可変領域またはそれらの１つ以上のバリアントを含んでいてもよい。本開示に記載のＣＤＲ配列と少なくとも約８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のアミノ酸配列同一性を有する、ｓｃＦｖに組み込まれたＣＤＲ配列が本開示の範囲内に包含される。

【0374】

実施態様によっては、単離抗体はヒトＣ５に結合し、抗体はヒトＣ５のエピトープに結合する。実施態様によっては、本発明のヒトＣ５抗体はヒトＣ５の特異的エピトープに結合するものである。実施態様によっては、このエピトープはＣ５のα鎖に少なくとも１個のアミノ酸を含む。実施態様によっては、このエピトープはＣ５のβ鎖に少なくとも１個のアミノ酸を含む。

【0375】

実施態様によっては、本発明は抗Ｃ５抗体部分（たとえば本明細書に記載の抗Ｃ５抗体のいずれか）とＦＨまたはその機能性断片を含む融合タンパク質を提供する。実施態様によっては、この抗Ｃ５抗体部分は全長抗体である。実施態様によっては、ＦＨは全長抗体の一方または両方の重鎖に（たとえば重鎖のＣ末端に）融合されている。実施態様によっては、全長抗体はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含む。たとえば、一実施態様では、ＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖はＦｃ ＰＬＡ変異を含むヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一実施態様では、ＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖は配列番号６１に記載のアミノ酸配列を含む。

【0376】

実施態様によっては、本発明は抗Ｃ５抗体部分（たとえば本明細書に記載の抗Ｃ５抗体のいずれか）とＦＨまたはＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含むその機能性断片を含む融合タンパク質を提供する。実施態様によっては、本発明はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含む抗Ｃ５抗体部分（たとえば本明細書に記載の抗Ｃ５抗体のいずれか）とＦＨまたはＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含むその機能性断片を含む融合タンパク質を提供する。

【0377】

実施態様によっては、本発明は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片とを含み、抗Ｃ５抗体部分はｐＨ感受性である（たとえば本明細書に記載のｐＨ感受性の抗Ｃ５抗体のいずれか）、融合タンパク質を提供する。たとえば、実施態様によっては、ｐＨ感受性の抗Ｃ５抗体部分はｐＨ ７．４のときにｐＨ ５．８のときよりも高い親和性でＣ５に結合する抗Ｃ５抗体部分である。実施態様によっては、ｐＨ ７．４のときの抗Ｃ５抗体部分のＣ５（たとえばヒトＣ５）に対する結合親和性は、ｐＨ ５．８のときの抗Ｃ５抗体部分のＣ５（たとえばヒトＣ５）に対する結合親和性の少なくとも約３（たとえば少なくとも約４、５、６、７、８、または１０のいずれか）倍高い。

【0378】

実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５抗体部分はｐＨ感受性であり（たとえば本明細書に記載のｐＨ感受性の抗Ｃ５抗体のいずれか）、たとえばｐＨ ７．４のときにｐＨ ５．８のときよりも高い親和性でＣ５に結合し、抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含む。実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５抗体部分はｐＨ感受性であり（たとえば本明細書に記載のｐＨ感受性の抗Ｃ５抗体のいずれか）、たとえばｐＨ ７．４のときにｐＨ ５．８のときよりも高い親和性でＣ５に結合し、ＦＨまたはその機能性断片はＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含む。実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５抗体部分はｐＨ感受性であり（たとえば本明細書に記載のｐＨ感受性の抗Ｃ５抗体のいずれか）、たとえばｐＨ ７．４のときにｐＨ ５．８のときよりも高い親和性でＣ５に結合し、抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含み、ＦＨまたはその機能性断片はＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含む。

【0379】

実施態様によっては、本発明は抗Ｃ５抗体部分（たとえば本明細書に記載の抗Ｃ５抗体のいずれか）とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５部分はそのＣＤＲ領域のうちの１つ以上にヒスチジン置換を含む（たとえば本明細書に記載のヒスチジン含有抗Ｃ５抗体のいずれか）、融合タンパク質を提供する。実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５部分はそのＣＤＲ領域のうちの１つ以上にヒスチジン置換を含み（たとえば本明細書に記載のヒスチジン含有抗Ｃ５抗体のいずれか）、抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含む。実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５部分はそのＣＤＲ領域のうちの１つ以上にヒスチジン置換を含み（たとえば本明細書に記載のヒスチジン含有抗Ｃ５抗体のいずれか）、ＦＨまたはその機能性断片はＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含む。実施態様によっては、融合タンパク質は抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片を含み、抗Ｃ５部分はそのＣＤＲ領域のうちの１つ以上にヒスチジン置換を含み（たとえば本明細書に記載のヒスチジン含有抗Ｃ５抗体のいずれか）、抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖（たとえばＰＬＡ変異を含むＩｇＧ４鎖）を含み、ＦＨまたはその機能性断片はＦＨのＳＣＲドメイン１～５を含む。

【0380】

様々な実施態様では、ＦＨまたはその機能性断片は補体ＦＨを含む。補体ＦＨは単一ポリペプチド鎖の血漿糖タンパク質である。このタンパク質は約６０個のアミノ酸の２０個の反復的なＳＣＲドメインで構成され、ＳＣＲドメインは糸に通した２０個のビーズのように連続して配置されている。実施態様によっては、ＦＨはＣ３ｂに結合し、代替経路Ｃ３転換酵素（Ｃ３Ｂｂ）の崩壊を促進し、Ｃ３ｂのタンパク質分解不活性化のための補因子として作用する。ＦＨが存在する場合、Ｃ３ｂのタンパク質分解の結果、Ｃ３ｂの切断が起こる。実施態様によっては、ＦＨはＣ３ｂについて少なくとも３個の異なる結合ドメインを有し、それらはＳＣＲ１～４、ＳＣＲ５～８、およびＳＣＲ１９～２０に位置する。実施態様によっては、ＦＨの各部位はＣ３ｂタンパク質内の異なる領域に結合する。すなわち、Ｎ末端の部位は天然型Ｃ３ｂに結合し、ＦＨの中間領域に位置する第二の部位はＣ３ｃ断片に結合し、ＳＣＲ１９および２０内に位置する部位はＣ３ｄ領域に結合する。実施態様によっては、ＦＨはヘパリンに対する結合部位をさらに含み、それらはＦＨのＳＣＲ７、ＳＣＲ５～１２、およびＳＣＲ２０内に位置し、Ｃ３ｂ結合部位と重複する。たとえば、実施態様によっては、構造および機能分析から、ＦＨの補体阻害活性に関するドメインが最初の４個のＮ末端ＳＣＲドメインに位置することがわかっている。

【0381】

本明細書に記載のＦＨまたはその機能性断片は、ＦＨタンパク質のいくつかまたはすべての補体阻害活性を有するＦＨタンパク質の任意の部分を指し、以下に詳細に説明するとおり、全長ＦＨタンパク質、ＦＨタンパク質の生物学的に活性な断片、ＳＣＲ１～４を含むＦＨ断片、または天然に存在するＦＨもしくはその断片の任意の相同体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0382】

様々な実施態様では、ＦＨは配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４に記載のアミノ酸配列を含む全長ヒトＦＨタンパク質である。アミノ酸１～１８はリーダーペプチドに対応し、アミノ酸２１～８０はＳＣＲ１に対応し、アミノ酸８５～１４１はＳＣＲ２に対応し、アミノ酸１４６～２０５はＳＣＲ３に対応し、アミノ酸２１０～２６２はＳＣＲ４に対応し、アミノ酸２６７～３２０はＳＣＲ５に対応する。

【0383】

実施態様によっては、ＦＨ部分は以下の特性、すなわち（１） Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）への結合、（２） Ｃ３ｂへの結合、（３）ヘパリンへの結合、（４）シアル酸への結合、（５）内皮細胞表面への結合、（６）細胞インテグリン受容体への結合、（７）病原体への結合、（８） Ｃ３ｂ補助子活性、（９） Ｃ３ｂ崩壊促進活性、および（１０）代替補体経路の阻害のうちの１つ以上を有する。

【0384】

実施態様によっては、ＦＨ部分はＦＨの最初の４個のＮ末端ＳＣＲドメイン（ＳＣＲ１～４）を含む。実施態様によっては、この構築物はＦＨの最初の５個のＮ末端ＳＣＲドメイン（ＳＣＲ１～５）を含む。実施態様によっては、この構築物はＦＨの最初の６個のＮ末端ＳＣＲドメイン（ＳＣＲ１～６）を含む。実施態様によっては、ＦＨ部分はＦＨの少なくとも最初の４個のＮ末端ＳＣＲドメイン（たとえば、ＦＨの少なくとも最初の５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個のいずれか、またはそれ以上のＮ末端ＳＣＲドメイン）を含む（また、実施態様によってはそれらからなる、またはそれらから本質的になる）。

【0385】

実施態様によっては、ＦＨは野生型ＦＨである。実施態様によっては、ＦＨは天然に存在するＦＨまたはそのバリアントのバリアントである。天然に存在するＦＨタンパク質またはその断片のバリアントは、天然に存在するＦＨまたはその断片とは少なくとも１つまたは数個の（ただし１個または数個に限定されない）アミノ酸が欠失している（たとえばペプチドまたは断片など、タンパク質の切断型）、挿入されている、反転されている、置換されている、かつ／または（たとえばグリコシル化、リン酸化、アセチル化、ミリストイル化、プレニル化、パルミチン酸化（ｐａｌｍｉｔａｔｉｏｎ）、アミド化および／またはグリコシルホスファチジルイノシトールの添加によって）誘導体化されている点で異なるタンパク質を包含する。たとえば、ＦＨバリアントは天然に存在するＦＨのアミノ酸配列（たとえば配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４）と少なくとも約７０％同一な（たとえば、天然に存在するＦＨのアミノ酸配列（たとえば配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４）と少なくとも約７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のいずれかの同一性の）アミノ酸配列を有していてもよい。実施態様によっては、ＦＨバリアントまたはその断片は、天然に存在するＦＨまたはその断片の補体阻害活性をすべて保持している。実施態様によっては、ＦＨバリアントまたはその断片は天然に存在するＦＨまたはその断片の補体阻害活性の少なくとも約５０％、たとえば少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％のいずれかを保持している。実施態様によっては、ＦＨまたはその断片は、ヒトＦＨの少なくとも最初の５個のＮ末端ＳＣＲドメイン、たとえばヒトＦＨ（たとえば配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４）のうち少なくともアミノ酸２１～３２０を含むアミノ酸配列を有するＦＨ部分を含む。実施態様によっては、ＦＨまたはその断片は、ヒトＦＨ（たとえば配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、または配列番号８４）のうちの少なくともアミノ酸２１～３２０と少なくとも約７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％のいずれかの同一性のアミノ酸配列を有する、ヒトＦＨの少なくとも最初の５個のＮ末端ＳＣＲドメインを含む。

選別検定

【0386】

本発明は様々な選別検定、たとえば候補抗Ｃ５抗体（たとえば抗Ｃ５抗体、抗Ｃ５融合タンパク質抗体など）が補体活性を阻害することができるかの決定などに用途を有する。

【0387】

実施態様によっては、候補抗Ｃ５抗体が存在する場合の補体活性の度合いを陽性比較対照で検出される補体活性と比較する。陽性比較対照は、加えられた試験化合物が存在しない場合の補体活性を含む。実施態様によっては、候補抗Ｃ５抗体が存在する場合の補体活性が陽性比較対照で検出される補体活性の約７０％未満である場合、候補抗Ｃ５抗体を補体の阻害物質と特定する（これは試験化合物が存在する場合の補体活性の約３０％を超える阻害に相当する）。他の実施態様では、候補抗Ｃ５抗体が存在する場合の補体活性が陽性比較対照で検出される補体活性の約８０％未満である場合、候補抗Ｃ５抗体を補体の阻害物質と特定する（これは試験化合物が存在する場合の補体活性の約２０％を超える阻害に相当する）。さらに他の実施態様では、候補抗Ｃ５抗体が存在する場合の補体活性が陽性比較対照で検出される補体活性の約９０％未満である場合、候補抗Ｃ５抗体を補体の阻害物質と特定する（これは試験化合物が存在する場合の補体活性の約１０％を超える阻害に相当する）。実施態様によっては、抗Ｃ５抗体による補体阻害の度合いを陰性比較対照で検出される阻害の度合いと比較する。

【0388】

様々な免疫検定形式、たとえば競合および非競合免疫検定形式、抗原捕捉検定、二抗体サンドイッチ検定、ならびに三抗体サンドイッチ検定が本発明の有用な方法である（Ｓｅｌｆ ｅｔ ａｌ．， １９９６， Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ７：６０－６５）。本発明は、検定が補体の阻害を検出することができるという条件で、公知または従来未知である検定のいずれか１つの種類には限定されないものとする。

【0389】

酵素結合免疫吸着検定（ＥＬＩＳＡ）は本発明の方法に有用である。酵素、たとえば（ただしこれらに限定されない）セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アルカリホスファターゼ、βガラクトシダーゼ、またはウレアーゼを、たとえば本発明の方法で使用する抗Ｃ５抗体または二次抗体に結合することができる。セイヨウワサビペルオキシダーゼ検出系をたとえば発色基質テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）と共に用いてもよい。ＴＭＢは、過酸化水素が存在する場合、４５０ ｎｍで検出可能な可溶性生成物を生じる。他の好都合な酵素結合系としては、たとえばアルカリホスファターゼ検出系であり、これを４０５ ｎｍで容易に検出可能な可溶性生成物を生じる発色基質ｐ－ニトロフェニルリン酸と共に用いてもよい。同様に、βガラクトシダーゼ検出系を４１０ ｎｍで検出可能な可溶性生成物を生じる発色基質ｏ－ニトロフェニル－β－Ｄ－ガラクトピラノシド（ＯＮＰＧ）と共に用いてもよい。あるいは、ウレアーゼ検出系を尿素－ブロモクレゾールパープル（Ｓｉｇｍａ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ミズーリ州、セントルイス）などの基質と共に用いてもよい。有用な酵素結合一次抗体および二次抗体を多数ある商業的供給源から入手することができる。

【0390】

化学発光検出も終末補体経路の阻害を検出するのに有用である。化学発光性二次抗体を多数ある商業的供給源から入手してもよい。

【0391】

蛍光検出も終末補体の阻害を検出するのに有用である。有用な蛍光色素としては、ジアミジノフェニルインドール（ＤＡＰＩ）、フルオレセイン、ヘキスト３３２５８、Ｒ－フィコシアニン、Ｂ－フィコエリトリン、Ｒ－フィコエリトリン、ローダミン、テキサスレッド、およびリサミン、フルオレセインまたはローダミン標識抗体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0392】

放射免疫検定（ＲＩＡ）も本発明の方法に有用である。このような検定は当技術分野で周知であり、たとえばＢｒｏｐｈｙ ｅｔ ａｌ． （１９９０， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍ． １６７：８９８－９０３）およびＧｕｅｃｈｏｔ ｅｔ ａｌ． （１９９６， Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｍ． ４２：５５８－５６３）に記載されている。たとえばヨウ素１２５標識一次または二次抗体を用いて放射免疫検定を行う（Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．， ｓｕｐｒａ， １９９９）。

【0393】

検出可能な抗体から発せられたシグナルを、たとえば発色基質から色を検出する分光光度計、放射線を検出する放射線計測器（たとえばヨウ素１２５を検出するガンマ計測器）、または特定の波長の光の存在下で蛍光を検出する蛍光光度計を用いて分析する。酵素結合検定を用いる場合、分光光度計を用いて定量分析を行う。なお、本発明の検定を手動で実施することも必要に応じて自動化することもでき、また、複数の試料から発せられたシグナルを市販の多くのシステムで同時に検出してもよい。

【0394】

本発明の方法は、キャピラリー電気泳動に基づく免疫検定（ＣＥＩＡ）（必要に応じて自動化されていてもよい）の使用も包含する。たとえばＳｃｈｍａｌｚｉｎｇ ｅｔ ａｌ． （１９９７， Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ １８：２１８４－２１９３）およびＢａｏ （１９９７， Ｊ． Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ． Ｂ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｓｃｉ． ６９９：４６３－４８０）に記載されているように、免疫検定をレーザー誘起蛍光法と併用してもよい。リポソーム免疫検定、たとえばフローインジェクションリポソーム免疫検定およびリポソーム免疫センサーなども本発明の方法に従って用いてもよい（Ｒｏｎｇｅｎ ｅｔ ａｌ．， １９９７， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０４：１０５－１３３）。

【0395】

定量的ウェスタンブロット法を用いて本発明の方法の終末補体阻害の度合いを決定してもよい。走査濃度測定などの周知の方法を用いてウェスタンブロットを定量化する（Ｐａｒｒａ ｅｔ ａｌ．， １９９８， Ｊ． Ｖａｓｃ． Ｓｕｒｇ． ２８：６６９－６７５）。

投与方法

【0396】

本発明の方法は治療有効量の少なくとも１種の抗Ｃ５抗体（たとえば抗Ｃ５抗体、抗Ｃ５融合タンパク質抗体など）またはその結合断片（たとえば本明細書で他の箇所に記載の抗体またはその断片のうちのいずれか）を、補体関連疾患または障害を有すると確認された個体に投与することを含む。一実施態様では、個体は補体系を有する哺乳動物である。一実施態様では、個体はヒトである。様々な実施態様では、少なくとも１種の抗Ｃ５ 抗体またはその結合断片を局所、領域、または全身投与する。

【0397】

様々な実施態様では、疾患または障害は、ＭＤ、ＡＭＤ、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、喘息、アレルギー性喘息、ＣＯＰＤ、ＰＮＨ症候群、重症筋無力症、ＮＭＯ、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、ａＨＵＳ、ＣＲＶＯ、ＣＲＡＯ、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症（心肺バイパス手術および腎臓透析に関連する炎症が挙げられるがこれらに限定されない）、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎（ＡＮＣＡ関連糸球体腎炎、ループス腎炎、およびそれらの組合せが挙げられるがこれらに限定されない）、ＡＮＣＡ関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、および抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、またはそれらの任意の組合せからなる群より少なくとも選択される。実施態様によっては、補体関連疾患はＣ３糸球体症である。実施態様によっては、補体関連疾患は黄斑変性、たとえば加齢黄斑変性である。一実施態様では、抗Ｃ５抗体融合タンパク質の投与はＣ３ａまたはＣ３ｂタンパク質の生成を阻害する。一実施態様では、抗Ｃ５抗体融合タンパク質の投与はＣ５ａまたはＣ５ｂタンパク質の生成を阻害する。実施態様によっては、本発明の組成物および方法は対象、たとえばエクリズマブによる治療に反応しない、ＰＮＨを有する対象の治療に有用である。非限定的な例として、対象によってはＣ５のα鎖にエクリズマブ治療に抵抗性にする可能性がある変異を有していてもよい（Ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｎｔｓ ｉｎ Ｃ５ ａｎｄ ｐｏｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｅｃｕｌｉｚｕｍａｂ． Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ Ｊ， ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ２０１４ Ｆｅｂ １３；３７０（７）：６３２－９を参照のこと）。

【0398】

本発明の方法は少なくとも１種の抗Ｃ５抗体融合タンパク質またはその結合断片の投与を含み得るが、本発明はいかなる形でも本明細書に記載の抗Ｃ５抗体融合タンパク質に限定されず、補体活性化を減少させ低減する既知および未知の任意の抗Ｃ５抗体融合タンパク質を包含するものとする。

【0399】

本発明の方法は治療有効量の少なくとも１種の抗Ｃ５抗体融合タンパク質またはその結合断片を個体に投与することを含み、本発明の組成物は少なくとも１種の抗Ｃ５抗体融合タンパク質またはその結合断片を単独または少なくとも１種の他の治療剤と共に含む。本発明を他の治療様式、たとえば抗炎症治療などと併用することができる。本発明の方法と併用することができる抗炎症治療の例としては、たとえばステロイド系薬物を採用する治療および非ステロイド系薬物を採用する治療が挙げられる。

【0400】

本発明の方法は治療有効量の抗Ｃ５抗体融合タンパク質またはその抗原結合断片を対象に投与することを含む。実施態様によっては、本発明は、治療有効量の本発明の抗体融合タンパク質または治療有効量のその抗体断片を投与することにより対象の体内のＣ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、もしくはＣ５ｂ、またはＭＡＣ形成の低減を引き起こす、補体シグナル伝達の調節不全を含む補体関連疾患の治療方法を包含する。実施態様によっては、本発明は、治療有効量の抗体融合タンパク質または抗体断片を投与することによる、補体シグナル伝達の調節不全を含む補体関連疾患の治療方法を包含する。実施態様によっては、本発明は、有効量の抗体融合タンパク質、抗体断片、ポリペプチド、ペプチド、結合ペプチドを対象に投与することにより対象の体内の補体活性化経路の活性化が低減する、補体シグナル伝達の調節不全を含む補体関連疾患の治療方法を包含する。実施態様によっては、この治療方法は、全身有効量の抗体融合タンパク質または抗体断片を対象に投与することにより対象の体内で全身のＣ３ａ、Ｃ３ｂ、Ｃ５ａ、もしくはＣ５ｂ、またはＭＡＣ形成の低減を引き起こすことを包含する。

【0401】

本発明を実施するのに有用な医薬組成物を、対象の体重に対して少なくとも約１ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約５ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約２５ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約５０ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約１００ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約５００ ｎｇ／ｋｇ、少なくとも約１ μｇ／ｋｇ、少なくとも約５ μｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ μｇ／ｋｇ、少なくとも約２５ μｇ／ｋｇ、少なくとも約５０ μｇ／ｋｇ、少なくとも約１００ μｇ／ｋｇ、少なくとも約５００ μｇ／ｋｇ、少なくとも約１ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２５ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５０ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１００ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２００ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３００ ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４００ ｍｇ／ｋｇ、および少なくとも約５００ ｍｇ／ｋｇの用量が送達されるように投与してもよい。一実施態様では、本発明は、個体の体内の本発明の抗Ｃ５抗体融合タンパク質の濃度を少なくとも１ ｐＭ、少なくとも約１０ ｐＭ、少なくとも約１００ ｐＭ、少なくとも約１ ｎＭ、少なくとも約１０ ｎＭ、少なくとも約１００ｎＭ、少なくとも約１ Ｍ、少なくとも約２ Ｍ、少なくとも約３ Ｍ、少なくとも約４ Ｍ、少なくとも約５ Ｍ、少なくとも約６ Ｍ、少なくとも約７ Ｍ、少なくとも約８ Ｍ、少なくとも約９ Ｍ、および少なくとも約１０ Ｍにする用量を投与する。別の実施態様では、本発明は、本発明の抗Ｃ５抗体融合タンパク質の濃度を個体の血漿中少なくとも約１ ｐＭ、少なくとも約１０ ｐＭ、少なくとも約１００ ｐＭ、少なくとも約１ ｎＭ、少なくとも約１０ ｎＭ、少なくとも約１００ｎＭ、少なくとも約１ Ｍ、少なくとも約２ Ｍ、少なくとも約３ Ｍ、少なくとも約４ Ｍ、少なくとも約５ Ｍ、少なくとも約６ Ｍ、少なくとも約７ Ｍ、少なくとも約８ Ｍ、少なくとも約９ Ｍ、および少なくとも約１０ Ｍの間にする用量の投与を想定している。

【0402】

実施態様によっては、本発明を実施するのに有用な医薬組成物を、対象の体重に対して約１ ｎｇ／ｋｇ以下、約５ ｎｇ／ｋｇ以下、約１０ ｎｇ／ｋｇ以下、約２５ ｎｇ／ｋｇ以下、約５０ ｎｇ／ｋｇ以下、約１００ ｎｇ／ｋｇ以下、約５００ ｎｇ／ｋｇ以下、約１ μｇ／ｋｇ以下、約５ μｇ／ｋｇ以下、約１０ μｇ／ｋｇ以下、約２５ μｇ／ｋｇ以下、約５０ μｇ／ｋｇ以下、約１００ μｇ／ｋｇ以下、約５００ μｇ／ｋｇ以下、約１ ｍｇ／ｋｇ以下、約５ ｍｇ／ｋｇ以下、約１０ ｍｇ／ｋｇ以下、約２５ ｍｇ／ｋｇ以下、約５０ ｍｇ／ｋｇ以下、約１００ ｍｇ／ｋｇ以下、約２００ ｍｇ／ｋｇ以下、約３００ ｍｇ／ｋｇ以下、約４００ ｍｇ／ｋｇ以下、および約５００ ｍｇ／ｋｇ以下の用量が送達されるように投与してもよい。一実施態様では、本発明は、個体の体内の本発明の抗Ｃ５抗体融合タンパク質の濃度を約１ ｐＭ以下、約１０ ｐＭ以下、約１００ ｐＭ以下、約１ ｎＭ以下、約１０ ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約１ Ｍ以下、約２ Ｍ以下、約３ Ｍ以下、約４ Ｍ以下、約５ Ｍ以下、約６ Ｍ以下、約７ Ｍ以下、約８ Ｍ以下、約９ Ｍ、および約１０ Ｍ以下にする用量を投与する。別の実施態様では、本発明は、本発明の抗Ｃ５抗体融合タンパク質の濃度を個体の血漿中約１ ｐＭ以下、約１０ ｐＭ以下、約１００ ｐＭ以下、約１ ｎＭ以下、約１０ ｎＭ以下、約１００ｎＭ以下、約１ Ｍ以下、約２ Ｍ以下、約３ Ｍ以下、約４ Ｍ以下、約５ Ｍ以下、約６ Ｍ以下、約７ Ｍ以下、約８ Ｍ以下、約９ Ｍ以下、および約１０ Ｍ以下の間にする用量の投与を想定している。本明細書に開示の用量のうちのいずれかの間の投与量範囲も考慮される。

【0403】

典型的には、本発明の方法で対象（実施態様によってはヒト）に投与してもよい投与量は、対象の体重１キログラムあたり０．５ μｇ～約５０ ｍｇの量の範囲である。投与する厳密な投与量は複数の要因（対象の種類および治療する病状の種類、対象の年齢、ならびに投与経路が挙げられるが、これらに限定されない）に依存して変動する。実施態様によっては、化合物の投与量は、対象の体重１キログラムあたり約１ μｇ～約１０ ｍｇで変動する。他の実施態様では、投与量は対象の体重１キログラムあたり約３ μｇ～約１ ｍｇで変動する。

【0404】

抗体融合タンパク質を一日に数回の頻度で対象に投与してもよいし、それよりも低い頻度、たとえば一日に１回、一日に２回、一日に３回、週に１回、週に２回、週に３回、２週間に１回、２週間に２回、２週間に３回、月に１回、月に２回、月に３回、またはそれよりも低い頻度、たとえば数か月に１回、さらに年に１回もしくは数回、またはそれよりも低い頻度で投与してもよい。投与の頻度は当業者には自明であり、複数の要因（治療する疾患の種類および重症度、対象の種類および年齢などであるが、これらに限定されない）に依存する。薬理学の技術分野で公知のまたはこれから開発される任意の方法で医薬組成物の製剤を調製してもよい。一般に、このような調製方法は、活性成分を担体または１種以上の他の副成分と組み合わせ、次いで必要または所望であれば生成物を所望の一回または複数回の投与単位に成形または包装する工程を含む。

【0405】

本明細書で提供する医薬組成物の説明は主にヒトへの倫理的な投与に適した医薬組成物に関するが、当業者には当然ながら、このような組成物は一般にあらゆる種類の対象への投与に適している。組成物を様々な対象への投与に適合させるためにヒトへの投与に適した医薬組成物を改良することはよく知られており、通常の技術を有する獣医薬理学者は、行うとしても通常の実験だけでこのような改良を設計・実施することができる。本発明の医薬組成物の投与が意図される個体としては、ヒトおよび他の霊長類、商業に関連する哺乳動物を含む哺乳動物（ヒト以外の霊長類、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコ、およびイヌなど）挙げられるが、これらに限定されない。

【0406】

本発明の方法に有用な医薬組成物を眼、経口、直腸、膣、非経口、局所、肺、鼻腔内、頬側、眼内、硝子体内、筋肉内、皮内、および静脈内の投与経路に適した製剤で調製、包装、または販売してもよい。意図される他の製剤としては、発射型（ｐｒｏｊｅｃｔｅｄ）ナノ粒子、リポソーム製剤、活性成分を含む再封赤血球、および免疫学に基づく製剤が挙げられる。

【0407】

本発明の医薬組成物を大容量で、一回単位用量で、または複数の一回単位用量で調製、包装、または販売してもよい。単位用量は所定量の活性成分を含む医薬組成物の個別の量である。活性成分の量は一般に、個体に投与する活性成分の投与量に等しいか、そのような投与量の好都合な小部分、たとえばそのような投与量の２分の１または３分の１である。

【0408】

本発明の医薬組成物中の活性成分、医薬的に許容される担体、および任意のさらなる成分の相対量は、治療する個体の身元、大きさ、および状態、さらには組成物を投与する経路に依存して変動する。例として、組成物は０．１％～１００％ （ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよい。様々な実施態様では、組成物は少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１１％、少なくとも約１２％、少なくとも約１３％、少なくとも約１４％、少なくとも約１５％、少なくとも約１６％、少なくとも約１７％、少なくとも約１８％、少なくとも約１９％、少なくとも約２０％、少なくとも約２１％、少なくとも約２２％、少なくとも約２３％、少なくとも約２４％、少なくとも約２５％、少なくとも約２６％、少なくとも約２７％、少なくとも約２８％、少なくとも約２９％、少なくとも約３０％、少なくとも約３１％、少なくとも約３２％、少なくとも約３３％、少なくとも約３４％、少なくとも約３５％、少なくとも約３６％、少なくとも約３７％、少なくとも約３８％、少なくとも約３９％、少なくとも約４０％、少なくとも約４１％、少なくとも約４２％、少なくとも約４３％、少なくとも約４４％、少なくとも約４５％、少なくとも約４６％、少なくとも約４７％、少なくとも約４８％、少なくとも約４９％、少なくとも約５０％、少なくとも約５１％、少なくとも約５２％、少なくとも約５３％、少なくとも約５４％、少なくとも約５５％、少なくとも約５６％、少なくとも約５７％、少なくとも約５８％、少なくとも約５９％、少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％ （ｗ／ｗ）の活性成分を含む。

【0409】

活性成分に加え、本発明の医薬組成物は１種以上のさらなる医薬活性成分をさらに含んでいてもよい。

【0410】

従来の技術を用いて本発明の医薬組成物の放出制御または徐放性製剤を作製してもよい。

【0411】

医薬組成物の非経口投与は、個体の組織の物理的破損およびその組織の破損を介する医薬組成物の投与を特徴とする任意の投与経路を含む。非経口投与は局所的であっても、領域的であっても、全身的であってもよい。したがって、非経口投与としては、組成物の注射、外科的切開を介する組成物の投与、組織貫通性の非外科的創傷を介する組成物の投与などによる医薬組成物の投与が挙げられるがこれらに限定されない。特に、非経口投与は静脈内、眼内、硝子体内、皮下、腹腔内、筋肉内、皮内、胸骨内、および腫瘍内注射を含むことが意図されるが、これらに限定されない。

【0412】

非経口投与に適した医薬組成物の製剤は、医薬的に許容される担体、たとえば滅菌水または滅菌等張生理食塩水と組み合わせられた活性成分を含む。このような製剤を急速投与または継続投与に適した形態で調製、包装、または販売してもよい。注射用製剤をアンプルなどの単位投与量、または保存剤を含む複数回投与分の容器で調製、包装、または販売してもよい。非経口投与用の製剤としては、懸濁剤、溶液剤、油性または水性溶媒中の乳剤、糊状剤、および埋込型の徐放性または生分解性製剤が挙げられるがこれらに限定されない。このような製剤は、１つ以上のさらなる成分（懸濁化剤、安定化剤、または分散剤が挙げられるがこれらに限定されない）をさらに含んでいてもよい。非経口投与用の製剤の一実施態様では、好適な溶媒（たとえば発熱物質を含まない滅菌水）で再構成した後に再構成済み組成物を非経口投与するために、活性成分を乾燥（すなわち粉末または顆粒）形態で提供する。

【0413】

医薬組成物を水性または油性の無菌注射懸濁剤または溶液剤の形態で調製、包装、または販売してもよい。この懸濁剤または溶液剤は公知の技術で製剤されてもよく、活性成分に加えてさらなる成分、たとえば分散剤、湿潤剤、または懸濁化剤を含んでいてもよい。非経口で許容される無毒の希釈剤または溶媒、たとえば水または１，３－ブタンジオールなどを用いてこのような無菌注射製剤を調製してもよい。許容される他の希釈剤および溶媒としては、リンゲル液、等張塩化ナトリウム溶液、および不揮発性油（合成モノグリセリドまたはジグリセリドなど）が挙げられるが、これらに限定されない。非経口投与することができる他の有用な製剤としては、活性成分を微結晶形態で含むもの、リポソーム製剤中に含むもの、または生分解性高分子系の成分として含むものが挙げられる。徐放性または埋込型の組成物は、医薬的に許容される高分子または疎水性物質、たとえば乳剤、イオン交換樹脂、難溶性の高分子、または難溶性の塩などを含んでいてもよい。

【0414】

本発明の医薬組成物を、口腔を通じた肺内投与に適した製剤として調製、包装、または販売してもよい。このような製剤は、活性成分を含みかつ約０．５～約７ナノメートル、実施態様によっては約１～約６ナノメートルの範囲の直径を有する乾燥粒子を含んでいてもよい。好都合には、このような組成物は、乾燥粉末容器を含む器具（そこに推進剤の流れを誘導して粉末を分散させてもよい）を用いて、または自己推進型溶媒／粉末分配容器（たとえば、密閉容器内に低沸点の推進剤に溶解または懸濁された活性成分を含む器具）を用いて投与される乾燥粉末の形態である。実施態様によっては、このような粉末は、粒子のうち重量で少なくとも９８％が０．５ナノメートルを超える直径を有し、粒子のうち粒子数で少なくとも９５％が７ナノメートル未満の直径を有する、粒子を含む。実施態様によっては、粒子のうち重量で少なくとも９５％は１ナノメートルを超える直径を有し、粒子のうち粒子数で少なくとも９０％は６ナノメートル未満の直径を有する。実施態様によっては、乾燥粉末組成物は糖などの固体微粉末希釈剤を含み、好都合には単位用量形態で提供される。

【0415】

低沸点の推進剤は一般に、大気圧で６５°Ｆ未満の沸点を有する液体推進剤を包含する。一般に、推進剤は組成物の５０～９９．９％（ｗ／ｗ）を占めていてもよく、活性成分は、組成物の０．１～２０％（ｗ／ｗ）を占めていてもよい。推進剤はさらなる成分、たとえば液体非イオン性界面活性剤もしくは固体陰イオン性界面活性剤または固体希釈剤（実施態様によっては活性成分を含む粒子と同一オーダーの粒径を有する）をさらに含んでいてもよい。

【0416】

肺送達用に製剤された本発明の医薬組成物はまた、溶液剤または懸濁剤の液滴の形態で活性成分を提供してもよい。このような製剤を、活性成分を含む任意には無菌である水性または希アルコール性の溶液剤または懸濁剤として調製、包装、または販売してもよく、好都合には噴霧または微粒子化装置を用いて投与してもよい。このような製剤は１つ以上のさらなる成分をさらに含んでいてもよく、そのような成分としては、香味剤（サッカリンナトリウムなど）、揮発性油、緩衝剤、界面活性剤、または保存剤（ヒドロキシ安息香酸メチルなど）が挙げられるが、これらに限定されない。実施態様によっては、この投与経路で提供される液滴は約０．１～約２００ナノメートルの範囲の平均直径を有する。

【0417】

製剤は本発明の医薬組成物の鼻腔内送達にも有用である。

【0418】

鼻腔内投与に適した別の製剤は、活性成分を含みかつ平均約０．２～５００マイクロメートルの粒子を有する粗粉末である。このような製剤を、嗅ぎ薬を吸う方法で（すなわち鼻孔付近に保持した粉末の容器から鼻腔を通じて素早く吸入することにより）投与する。

【0419】

鼻腔内投与に適した製剤は、たとえば最小で約０．１％（ｗ／ｗ）、最大で１００％（ｗ／ｗ）の活性成分を含んでいてもよく、１つ以上のさらなる成分をさらに含んでいてもよい。

【0420】

本発明の医薬組成物を頬側投与に適した製剤で調製、包装、または販売してもよい。このような製剤は、たとえば従来の方法で製造された錠剤またはトローチ剤の形態であってもよく、たとえば０．１～２０％（ｗ／ｗ）の活性成分を含み、残部は口腔で溶解または分解可能な組成物、および任意に１つ以上のさらなる成分を含んでいてもよい。あるいは、頬側投与に適した製剤は活性成分を含む粉末またはエアロゾル化もしくは微粒子化した溶液もしくは懸濁液を含んでいてもよい。実施態様によっては、このような粉末化、エアロゾル化、またはエアロゾル化した製剤は、分散すると約０．１～約２００ナノメートルの範囲の平均粒径または液滴径を有し、１つ以上のさらなる成分をさらに含んでいてもよい。

【0421】

本明細書で用いる場合、「さらなる成分」としては、以下：賦形剤；界面活性剤；分散剤；不活希釈剤；造粒剤および崩壊剤；結合剤；滑沢剤；甘味剤；香味剤；着色剤；保存剤；生理学的に分解される組成物（ゼラチンなど）；水性ベヒクル及び溶媒；油性ベヒクル及び溶媒；懸濁化剤；分散剤または湿潤剤；乳化剤、粘滑剤；緩衝剤；塩；増粘剤；充填剤；乳化剤；抗酸化剤；抗生剤；抗真菌剤；安定化剤；ならびに医薬的に許容される高分子または疎水性物質のうちの１つ以上が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物に含まれていてもよい他の「さらなる成分」は当技術分野で公知であり、たとえばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （１９８５， Ｇｅｎａｒｏ， ｅｄ．， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，、ペンシルベニア州イーストン）に記載されている。同文献は参照により本明細書に組み込まれる。
抗体、融合タンパク質、またはそれらの抗原結合断片を産生する細胞

【0422】

実施態様によっては、本発明は本明細書に記載の抗Ｃ５抗体（たとえば抗Ｃ５抗体、抗Ｃ５融合タンパク質抗体など）またはその抗原結合断片のうちの少なくとも１つを産生する細胞または細胞株（宿主細胞など）である。一実施態様では、この細胞または細胞株は、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体または抗原結合断片のうちの少なくとも１つを産生する遺伝子組換え細胞である。一実施態様では、この細胞または細胞株は、本明細書に記載の抗Ｃ５抗体または抗原結合断片のうちの少なくとも１つを産生するハイブリドーマである。

【0423】

一般に、Ｂリンパ球について非常に濃縮されたマウス脾細胞と骨髄腫「融合パートナー細胞」との大量融合物から雑種細胞（ハイブリドーマ）を作製する（Ａｌｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ （Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ， Ｉｎｃ． １９９４）； Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ． Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ （Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， １９８８））。続いて融合物中の細胞をプールに分配し、このプールを所望の特異性を持つ抗体の産生について分析することができる。試験で陽性となったプールを、所望の特異性の抗体を産生する単一の細胞クローンが特定されるまでさらに細分化することができる。そのようなクローンによって産生される抗体をモノクローナル抗体という。

【0424】

本明細書に開示の抗体または抗体断片のうちのいずれかをコードする核酸、さらにはその核酸を含むベクターも提供される。したがって、細胞または細胞株（組換えまたはヒト化免疫グロブリンの発現に典型的に用いられる細胞株など）内で核酸を発現させることにより本発明の抗体および断片を生成することができる。したがって、核酸を１つ以上の発現ベクターにクローン化し、そのベクターで細胞株（組換えまたはヒト化免疫グロブリンの発現に典型的に用いられる細胞株など）を形質転換することによっても本発明の抗体および断片を生成することができる。

【0425】

免疫グロブリンの重鎖および軽鎖をコードする遺伝子またはその断片を当技術分野で公知の方法に従い改変することができ、その方法としてはポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）が挙げられるが、これらに限定されない（たとえば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， ２ｎｄ ｅｄ．， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎ．Ｙ．， １９８９； Ｂｅｒｇｅｒ ＆ Ｋｉｍｍｅｌ， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ， Ｖｏｌ． １５２： Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｉｎｃ．， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， Ｃａｌｉｆ．， １９８７； Ｃｏ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４８：１１４９を参照のこと）。たとえば、重鎖および軽鎖をコードする遺伝子またはその断片を抗体分泌細胞のゲノムＤＮＡからクローン化することができ、あるいは、その細胞のＲＮＡの逆転写によりｃＤＮＡを作製する。クローン化は、クローン化の対象である遺伝子または遺伝子分節に近接または重複する配列にハイブリダイズするＰＣＲプライマーの使用を含む従来技術により達成される。

【0426】

特異的免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断片もしくはバリアントを様々な宿主細胞またはインビトロ翻訳系で産生するための組換え核酸技術に従い、本発明の抗体またはその重鎖もしくは軽鎖をコードする核酸またはその断片を入手・使用することができる。たとえば、抗体をコードする核酸またはその断片を、核酸が（たとえばベクター内で）１つ以上の発現制御配列に作動可能に連結されるか宿主細胞ゲノムに組み込まれるように、好適な原核生物または真核生物ベクター（たとえば発現ベクター）に配置し、適切な方法（たとえば形質転換、遺伝子導入、電気穿孔、感染）で好適な宿主細胞に導入することができる。

【0427】

実施態様によっては、レシピエント細胞に同時遺伝子導入するのに用いることができる２つの異なる発現ベクターで重鎖および軽鎖またはそれらの断片を構築することができる。実施態様によっては、各ベクターは２つ以上の選択遺伝子（１つは細菌系での選択のため、１つは真核生物系での選択のため）を含むことができる。これらのベクターは細菌系での遺伝子の生成および増幅、ならびにその後の真核細胞への同時遺伝子導入および同時遺伝子導入細胞の選択を可能にする。選択手順を用いて、２つの異なるＤＮＡベクターに導入された抗体核酸の真核細胞への発現について選択することができる。

【0428】

あるいは、重鎖および軽鎖をコードする核酸またはその断片を１つのベクターから発現させてもよい。軽鎖および重鎖は別々の遺伝子によりコードされるが、組換え方法を用いてそれらを連結することができる。たとえば、２つのポリペプチドを、Ｖ_ＬとＶ_Ｈ領域が対になって一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖（ｓｃＦｖとして知られる；たとえばＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．， １９８８， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２： ４２３－４２６およびＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９８８， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照のこと）として形成されるのを可能にする合成リンカーで連結することができる。

【0429】

本発明は重鎖および／または軽鎖をコードする核酸配列を含む単離核酸分子、さらにはその断片を提供する。軽鎖と重鎖の両方のコード配列を含む核酸分子またはその断片を、細胞内で生成されると抗体または断片の分泌に関する合成シグナル配列を含むように改変することができる。さらに、核酸分子は、他の抗体配列の挿入を可能にし、かつ抗体配列に通常見られるアミノ酸を変化させないよう翻訳読み枠を維持する、特異的なＤＮＡ連結を含むことができる。

【0430】

本発明によれば、抗体コード核酸配列を適切な発現ベクターに挿入することができる。様々な実施態様では、発現ベクターは、抗体またはその断片を形成すべく抗体配列の発現を誘導する組換えＤＮＡ分子を生成するために、その挿入された抗体コード核酸を転写・翻訳するのに必要な配列を含む。

【0431】

抗体をコードする核酸またはその断片を当業者に公知の様々な組換え核酸技術、たとえば部位特異的変異誘発に供することができる。

【0432】

核酸を細胞内で発現するには様々な方法を用いることができる。核酸を複数の種類のベクターにクローン化することができる。しかし、本発明はいかなる特定のベクターにも限定されないものとする。むしろ、本発明は当技術分野で容易に利用可能かつ／または公知である多様なベクターを包含するものとする。たとえば、本発明の核酸をベクター（プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、およびコスミドが挙げられるがこれらに限定されない）にクローン化することができる。特に興味深いベクターとしては発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、および配列決定ベクターが挙げられる。

【0433】

特定の実施態様では、発現ベクターはウイルスベクター、細菌ベクター、および哺乳動物細胞ベクターからなる群より選択される。上記の組成物の少なくとも一部またはすべてを含む多数の発現ベクター系が存在する。ポリヌクレオチドまたはその同族ポリペプチドを作製するべく本発明で用いるのには原核生物および／または真核細胞ベクターに基づく系を採用することができる。多くのこのような系は広く市販されている。

【0434】

ウイルスベクター技術は当技術分野で周知であり、たとえばＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ． （２０１２）およびＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ． （１９９９）や他のウイルス学および分子生物学の入門書に記載されている。ベクターとして有用なウイルスとしてはレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、およびレンチウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。実施態様によっては、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）ベクターを用いて所望の核酸を発現させる。ＭＳＣＶベクターは所望の核酸を効率的に 細胞内で発現することが実証されている。しかし、本発明はＭＳＣＶベクターの使用のみに限定されるべきではなく、任意のレトロウイルス発現方法が本発明に包含される。ウイルスベクターの他の例はモロニーマウス白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ）およびヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に基づくものである。実施態様によっては、好適なベクターは、少なくとも１つの生物で機能する複製起点、また、プロモーター配列、好都合な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１つ以上の選択マーカーを含む（たとえば、国際特許公開第０１／９６５８４号；国際特許公開第０１／２９０５８号；および米国特許第６，３２６，１９３号を参照のこと）。

【0435】

さらなる制御配列（たとえばエンハンサー）を用いて転写開始の頻度を調節することができる。プロモーターは、コード区画および／またはエキソンの上流に位置する５'非コード配列を単離することによって得られるような、天然に遺伝子または核酸配列に付随しているものでもよい。このようなプロモーターを「内在性」ということができる。同様に、エンハンサーは、天然に核酸配列に付随しその配列の下流または上流に位置しているものでもよい。あるいは、コード核酸区画を組換えまたは異種プロモーター（自然な環境では通常は核酸配列に付随しないプロモーターを指す）の制御下に配置することにより特定の利点が得られる。組換えまたは異種エンハンサーも、自然な環境では通常は核酸配列に付随しないエンハンサーを指す。そのようなプロモーターまたはエンハンサーは、他の遺伝子のプロモーターまたはエンハンサー、ならびに他の任意の原核生物、ウイルス、もしくは真核生物細胞から単離されたプロモーターまたはエンハンサー、ならびに「天然に存在」しない（たとえば異なる転写制御領域の異なる配列および／または発現を変化させる変異を含む）プロモーターまたはエンハンサーを包含し得る。本明細書に開示する組成物に関して、プロモーターおよびエンハンサーの核酸配列の合成的作製に加えて、組換えクローン化および／または核酸増幅技術（ＰＣＲを含む）を用いて配列を作製してもよい（米国特許第４，６８３，２０２号、米国特許第５，９２８，９０６号）。さらに、非核細胞小器官、たとえばミトコンドリア、葉緑体などの配列の転写および／または発現を誘導する制御配列も採用することができると想定される。

【0436】

当然ながら、発現させるべく選択された細胞型、細胞小器官、および生物でＤＮＡ区画の発現を効果的に誘導するプロモーターおよび／またはエンハンサーを採用することが重要である。分子生物学分野の当業者は一般に、プロモーター、エンハンサー、および細胞型の組合せをどのようにタンパク質発現に使用するかを知っている（たとえば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ． （２０１２）を参照のこと）。採用されるプロモーターは、構成的、組織特異的、誘導性、かつ／または導入されたＤＮＡ区画の高度な発現を誘導するのに適した条件で有用（たとえば、組換えタンパク質およびその断片の大規模な生産に有利）であり得る。

【0437】

プロモーターの例はサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに作動的に連結された任意のポリヌクレオチド配列の高度な発現を駆動することができる強力な構成的プロモーター配列である。しかし、他の構成的プロモーター配列、たとえば、以下に限定しないが、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳がんウイルス（ＭＭＴＶ）、ＨＩＶ長鎖末端反復配列（ＬＴＲ）プロモーター、モロニーウイルスプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス前初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、さらにはヒト遺伝子プロモーター（以下に限定しないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、および筋クレアチンプロモーターなど）を用いてもよい。さらに、本発明は構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない。誘導性プロモーターも本発明の一部として意図される。本発明で誘導性プロモーターの使用は、それが作動的に連結されたポリヌクレオチド配列の発現をその発現を所望する場合には活性化、所望しない場合には不活性化することができる分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例としては、メタロチオネインプロモーター、糖質コルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、およびテトラサイクリンプロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。さらに、本発明は、所望の組織または細胞でのみ活性なプロモーターである組織特異的プロモーターまたは細胞型特異的プロモーターの使用も包含する。組織特異的プロモーターは当技術分野で周知であり、ヒト上皮成長因子受容体２ （ＨＥＲ－２）プロモーターおよび前立腺特異抗原（ＰＳＡ）関連プロモーター配列が挙げられるが、これらに限定されない。

【0438】

核酸の発現を評価するため、細胞に導入する発現ベクターは選択マーカー遺伝子もしくはレポーター遺伝子またはその両方も含むことにより、ウイルスベクターによる遺伝子導入または感染の対象である細胞集団から発現細胞を特定・選択しやすくすることができる。他の実施態様では、選択マーカーは別の核酸に保有され同時遺伝子導入手順で使用されてもよい。選択マーカーおよびレポーター遺伝子のいずれにも、宿主細胞での発現を可能にする適切な制御配列を隣接させてもよい。有用な選択マーカーは当技術分野で公知であり、たとえば抗生物質耐性遺伝子、たとえばｎｅｏなどが挙げられる。

【0439】

潜在的な遺伝子導入細胞を特定し制御配列の機能性を評価するためにレポーター遺伝子を用いる。容易に検定可能なタンパク質をコードするレポーター遺伝子は当技術分野で周知である。一般に、レポーター遺伝子はレシピエント生物または組織では存在しないか発現されない遺伝子で、かつ何らかの容易に検出可能な性質（たとえば酵素活性）により発現が明示されるタンパク質をコードする遺伝子である。ＤＮＡをレシピエント細胞に導入した後の適切な時期にレポーター遺伝子の発現を検定する。

【0440】

好適なレポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ、βガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼ、または緑色蛍光タンパク質をコードする遺伝子を挙げることができる（たとえばＵｉ－Ｔｅｉ ｅｔ ａｌ．， ２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ． ４７９：７９－８２を参照のこと）。好適な発現系は周知であり、これを周知技術で調製してもよいし、商業的に入手してもよい。一般に、レポーター遺伝子の最高度の発現を示す最小の５'隣接領域を含む構築物をプロモーターと特定する。このようなプロモーター領域をレポーター遺伝子に連結し、プロモーターに駆動された転写を調節する能力について物質を評価するために用いてもよい。

【0441】

核酸を細胞に導入し発現させる方法は当技術分野で公知である。発現ベクターとの関連では、当技術分野の任意の方法でベクターを宿主細胞（たとえば哺乳動物、細菌、酵母、または昆虫の細胞）に容易に導入することができる。たとえば、物理的、化学的、または生物学的手段で宿主細胞に発現ベクターを導入することができる。

【0442】

ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入する物理的方法としては、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、微粒子銃、微量注入、電気穿孔、レーザー穿孔などが挙げられる。ベクターおよび／または外来核酸を含む細胞を作製する方法は当技術分野で周知である。たとえば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ． （２０１２）およびＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ． （１９９９）を参照のこと。

【0443】

目的の核酸を宿主細胞に導入する生物学的方法としてはＤＮＡおよびＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターは、遺伝子を哺乳動物（たとえばヒト）の細胞に挿入するのに最も広く使用される方法になっている。他のウイルスベクターをレンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ型、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルスなどから誘導してもよい。たとえば米国特許第５，３５０，６７４号および第５，５８５，３６２号を参照のこと。

【0444】

核酸を宿主細胞に導入する化学的手段としては、コロイド分散系（巨大分子複合体、ナノカプセル、微小球、ビーズなど）および脂質系（水中油型乳剤、ミセル、混合ミセル、およびリポソームなど）が挙げられる。インビトロまたはインビボで送達媒体として用いるのに好ましいコロイド系はリポソーム（たとえば人工膜小胞）である。このような系の調製および使用は当技術分野で周知である。

【0445】

外来核酸を宿主細胞に導入するか他の形で細胞を本発明の核酸に触れさせるのに用いる方法とは関係なく、宿主細胞内の組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために多様な検定を実施してもよい。このような検定としては、たとえば、当業者に周知の「分子生物学的」検定（サザンブロットおよびノーザンブロット、逆転写ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）およびＰＣＲなど）；ならびに「生化学的」検定（たとえば免疫学的手段（ＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロット）による、または本発明の範囲内の物質を確認するための本明細書に記載の検定による、特定のペプチドが存在するかしないかの検出など）が挙げられる。

ヒトＣ５を発現するヒト以外の動物

【0446】

本発明はヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物も包含する。実施態様によっては、このヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物はヒト以外の動物のＣ５も発現する。実施態様によっては、このヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物はヒト以外の動物のＣ５を発現しない。一実施態様では、本発明はヒト以外の動物の内在性調節配列からヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物であるが、ヒト以外の動物のＣ５を発現しない。実施態様によっては、このヒト以外の動物は哺乳類である。実施態様によっては、このヒト以外の動物はげっ歯類である。実施態様によっては、このヒト以外の動物はラットまたはマウスである。実施態様によっては、マウスは免疫不全マウスである。実施態様によっては、マウスはＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスである。実施態様によっては、マウスはＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスである。

【0447】

ヒト以外の遺伝子改変動物を作製するために、ヒトＣ５タンパク質をコードする核酸を宿主細胞でのヒトＣ５タンパク質の発現に適した形態で組換え発現ベクターに組み込むことができる。「宿主細胞での融合タンパク質の発現に適した形態」という用語は、組換え発現ベクターがヒトＣ５タンパク質をコードする核酸に作動的に（ヒト以外の動物ゲノムへの組込みを可能にし安定かつ永久的な核酸からｍＲＮＡへの転写およびｍＲＮＡからヒトＣ５タンパク質への翻訳を引き起こす様式で）連結された１つ以上の制御配列を含んでいることを意図する。「制御配列」という用語は当技術分野で認識されており、プロモーター、エンハンサー、および他の発現制御配列（たとえばポリアデニル化シグナル、ＰｉｇｇｙＢａｃ、およびＳｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン配列）を包含するよう意図される。このような制御配列は当業者には公知であり、以下の文献に記載されている：１９９０， Ｇｏｅｄｄｅｌ， Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ： Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １８５， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣａｌｉｆおよびＮａｋａｎｉｓｈｉ Ｈ， Ｈｉｇｕｃｈｉ Ｙ， Ｋａｗａｋａｍｉ Ｓ， Ｙａｍａｓｈｉｔａ Ｆ， Ｈａｓｈｉｄａ Ｍ． Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ． ２０１０ Ａｐｒ；１８（４）：７０７－１４． ｄｏｉ： １０．１０３８／ｍｔ．２００９．３０２． Ｅｐｕｂ ２０１０ Ｊａｎ ２６．； Ｈｕｄｅｃｅｋ Ｍ， Ｉｖｉｃｓ Ｚ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇｅｎｅｔ Ｄｅｖ． ２０１８ Ｊｕｎ ２２；５２：１００－１０８． ｄｏｉ： １０．１０１６／ｊ．ｇｄｅ．２０１８．０６．００３． ［Ｅｐｕｂ ａｈｅａｄ ｏｆ ｐｒｉｎｔ］ Ｒｅｖｉｅｗ。なお、発現ベクターの設計は、遺伝子導入対象である宿主細胞および動物の選択ならびに／または発現するヒトＣ５タンパク質の量などの要因に依存してもよい。

【0448】

たとえば、ヒトＣ５タンパク質をコードする核酸（典型的には適切な制御配列、たとえば構成的または組織特異的エンハンサーと連結されている）を（たとえば微量注入で）卵母細胞に導入してその卵母細胞を雌の初代マウスで発生させることにより、ヒト以外の遺伝子改変動物を作製することができる。ヒトＣ５タンパク質をコードする核酸（典型的には適切な制御配列、たとえば構成的もしくは組織特異的エンハンサー、ならびに／またはＰｉｇｇｙＢａｃおよびＳｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン配列と連結されている）を動物に尾静脈から水圧注入で導入することによりこのような動物を作製することもできる（Ｓｕｄａ Ｔ， Ｌｉｕ Ｄ． Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ． ２００７ Ｄｅｃ；１５（１２）：２０６３－９． Ｅｐｕｂ ２００７ Ｏｃｔ ２． Ｒｅｖｉｅｗに記載）。イントロン配列およびポリアデニル化シグナルを導入遺伝子に含めて導入遺伝子の発現効率を上げることもできる。遺伝子改変動物、たとえばマウスの作製方法は当技術分野で従来技術になっており、たとえば米国特許第４，７３６，８６６号および第４，８７０，００９号、ならびに１９８６， Ｈｏｇａｎ ｅｔ ａｌ．， Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ， Ｎ．Ｙ．， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙに記載されている。導入遺伝子を卵母細胞に導入する場合、遺伝子改変初代動物を用いて導入遺伝子を持つさらなる対象を作製することができる。本発明の卵母細胞注入により作製されたＣ５タンパク質をコードする導入遺伝子を持つ遺伝子改変動物から、他の導入遺伝子を持つ他の遺伝子改変動物または他の遺伝子欠損動物（たとえばマウスＣ５遺伝子を発現しない遺伝子欠損マウス）をさらに作製することができる。尾静脈水圧注入により作製されたＣ５タンパク質をコードする導入遺伝子を持つ遺伝子改変動物を他の遺伝子欠損または遺伝子導入マウス（たとえば実験用のＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウス）を用いて容易に作製することができる。遺伝子組換え動物に加え、その系を用いて他のヒトＣ５発現対象を作製することもできることは公知である。

【0449】

一実施態様では、ヒト以外の動物のＣ５エキソン配列（またはエキソンおよびイントロン配列）をヒトＣ５エキソン配列（またはエキソンおよびイントロン配列）で置き換えるがヒト以外の動物の天然型の制御配列（たとえば、プロモーター、エンハンサー、隣接領域、イントロンなど）の１つ以上またはすべてを未変化の配列に保つ系を用いて、ヒト以外の動物の制御配列からヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物を作製する。任意の好適な系を用いることができるが、この方法でヒト以外の遺伝子改変動物を作製することができる１つの模範的な系はＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系である。「ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ」系は、外来核酸に対する防御のための幅広い分類の細菌系を指す。ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は広範囲の真正細菌および古細菌生物に見られる。ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系としてはＩ型、ＩＩ型、およびＩＩＩ型の各種亜型が挙げられる。野生型のＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系はＲＮＡ介在型ヌクレアーゼＣａｓ９をガイドと組み合わせて利用し、ＲＮＡを活性化して外来核酸を認識・切断する。Ｃａｓ９相同体は多様な真正細菌に見られ、真正細菌としては以下の分類群：放線菌門（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）、アクウィフェクス門（Ａｑｕｉｆｉｃａｅ）、バクテロイデス門（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）－緑色硫黄細菌門（Ｃｈｌｏｒｏｂｉ）、クラミジア門（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｅ）－ウェルコミクロビウム門（Ｖｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉａ）、クロロフレクサス門（Ｃｈｌｏｒｏｆｌｅｘｉ）、シアノバクテリア門（Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）、フィルミクテス門（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）、プロテオバクテリア門（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）、スピロヘータ門（Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔｅｓ）、およびテルモトガ門（Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａｅ）の細菌が挙げられるが、これらに限定されない。模範的なＣａｓ９タンパク質は化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９タンパク質である。さらなるＣａｓ９タンパク質およびその相同体は、たとえばＣｈｙｌｉｎｋｓｉ， ｅｔ ａｌ．， ＲＮＡ Ｂｉｏｌ． ２０１３ Ｍａｙ １； １０（５）： ７２６－７３７； Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． ２０１１ Ｊｕｎｅ； ９（６）： ４６７－４７７； Ｈｏｕ， ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ． ２０１３ Ｓｅｐ ２４；１１０（３９）： １５６４４－９； Ｓａｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ． ２０１３ Ｍａｙ ９；４９７（７４４８）：２５４－７；およびＪｉｎｅｋ， ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ． ２０１２ Ａｕｇ １７；３３７（６０９６）：８１６－２１に記載されている。

【0450】

一実施態様では、本発明のヒト以外の遺伝子改変動物は内在性プロモーターからヒトＣ５を発現する。本発明で有用なプロモーターの例としては、天然型マウスプロモーター、ＤＮＡ ｐｏｌ ＩＩプロモーター、ＰＧＫプロモーター、ユビキチンプロモーター、アルブミンプロモーター、グロビンプロモーター、オボアルブミンプロモーター、ＳＶ４０初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモーター、βアクチンプロモーター、レトロウイルスＬＴＲ、およびレンチウイルスＬＴＲが挙げられるが、これらに限定されない。本発明で有用なプロモーターおよびエンハンサー発現系としては誘導性および／または組織特異的発現系も挙げられる。

【0451】

実施態様によっては、本発明のヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物を抗Ｃ５抗体および抗Ｃ５ ｍＡｂ融合タンパク質の選別、試験、査定（ａｓｓｅｓｓｉｎｇ）または評価（ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ）に用いる。実施態様によっては、本発明のヒトＣ５を発現するヒト以外の遺伝子改変動物を抗Ｃ５抗体および抗Ｃ５ ｍＡｂ融合タンパク質の特性、性質、または活性の選別、試験、査定（ａｓｓｅｓｓｉｎｇ）または評価（ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ）に用いる。

キット

【0452】

本発明は、本発明の抗Ｃ５抗体（たとえば抗Ｃ５抗体、抗Ｃ５融合タンパク質抗体など）またはその組合せと、本明細書中の他の箇所に記載の治療処置または非治療的使用としてたとえば抗Ｃ５抗体またはその組合せを個体に投与することを記載した説明資料とを含むキットも包含する。一実施態様では、このキットは、たとえば個体に抗体を投与する前に本発明の抗Ｃ５抗体またはその組合せを含む治療組成物を溶解または懸濁化するのに適した医薬的に許容される（任意には無菌の）担体をさらに含む。任意に、キットは抗体を投与するためのアプリケーターを含む。

【実施例】

【0453】

以下、下記の実施例を参照し本発明を説明する。これらの実施例は例示のみを目的として示され、本発明はいかなる形でもこれらの実施例に限定されず、本明細書に示す教示の結果として明白となるいかなる変更もすべて包含するものとする。

【0454】

さらに説明しなくても、当業者は先の説明および以下の例示的な実施例を用いて本発明の化合物を製造・利用し、特許請求される方法を実施することができると考えられる。したがって、以下の実施例は本開示の残りの部分をいかなる形でも限定しないものとする。

実施例１

【0455】

ｐＨ ７．４のときのＣ５との結合が改善し、かつｐＨ ５．８のときのＣ５との結合が低下するバリアントを開発する目的で、ヒト化２Ｇ１（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））のバリアントを作製した（図１）。

【0456】

本明細書に記載の手法は、インビトロで測定したｍＡｂの親和性および遮断効力はインビボの半減期、ＰＫ、またはＰＤと必ずしも相関しないという理解に基づく。これは、少なくとも部分的には、高い血中濃度で存在する可溶性抗原（たとえばＣ５）は身体から除去すべき標的とされる免疫複合体（すなわち抗原に結合したｍＡｂ）を形成するからである。したがって、一般的に、インビボでこのような可溶性抗原の活性を遮断するには高い血中抗体濃度が求められる。

【0457】

本明細書に記載の手法は、「ｐＨ依存性」の結合特性を持つｍＡｂを生成することにより抗体の再循環または半減期（ひいてはＰＫ）の増加および抗原の細胞内分解の加速によってインビボの治療抗体の効力を高めることができるという理解に基づく。この点に関して望ましい特性は、血液のｐＨである中性ｐＨ（ｐＨ約７．４）に近いとき治療ｍＡｂが抗原（たとえばＣ５）に十分に結合することである。このように、それは抗原（たとえばＣ５）の活性を効果的に遮断する。続いて免疫複合体は細胞に取り込まれ、そこでタンパク質分解のためにエンドソームに移動する。初期エンドソームのｐＨは酸性（ｐＨ約５．８）である。したがって、治療ｍＡｂが酸性ｐＨのときに低い抗原結合を有する場合、そのｍＡｂは免疫複合体から解離し、次いでＦｃＲｎに取り込まれて血漿に戻ることができる。このように、抗原（Ｃ５など）のみがエンドソームタンパク質分解経路を介して分解されるが、ＦｃＲｎを介したｍＡｂの再循環は血漿中の持続性の拡大に貢献する。

【0458】

酸性ｐＨでプロトン化（Ｈ＋）する傾向があるため、ＣＤＲにヒスチジン残基を含むｍＡｂは酸性ｐＨでプロトン化してより弱い結合親和性を有する可能性がある。本明細書に記載の手法ではすべてのＣＤＲ残基の「ヒスチジンスキャン」（すなわち、ＣＤＲ残基を１個ずつヒスチジンで置換すること）を利用した。そこで、Ｏｃｔｅｔ機器（Ｐａｌｌ ＦｏｒｔｅＢｉｏ）を用いてｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときのｍＡｂとＣ５の解離を測定し、ｐＨ ５．８のときに比較的速く解離しｐＨ ７．４のときに比較的遅く解離したヒスチジン置換バリアントを特定した。

【0459】

親ヒト化２Ｇ１ ｍＡｂ（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７））は、ｐＨ ５．８のときにより良好なＣ５への親和性を示した（図７）。ｍＡｂ（ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１６０９（配列番号７））の６個のＣＤＲのそれぞれの各残基にヒスチジン置換を有する単一置換バリアントを作製し、ｐＨ依存性の結合特性について評価した。各バリアントについて、ＶＨおよびＶＬプラスミドを構築し、次いでＨＥＫ細胞に一過的に遺伝子導入した。細胞培養液上清中のｍＡｂをｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときの結合について試験した。

【0460】

これらの単一置換バリアントのうち、３種（ｍＡｂ Ｌ３－１、Ｌ１－２、およびＨ１－４）はｐＨ依存性の結合のいくらかの改善を示した。Ｌ３－１の配列を図２に示す（配列番号１～５、８、９、および１１～１３）。Ｌ１－２の配列を図３に示す（配列番号１～５、９、１０、および１４～１６）。Ｈ１－４の配列を図４に示す（配列番号４、５、６～１０、および１７～１９）。

【0461】

単一置換バリアントの作製に加え、単一置換の軽鎖と重鎖を組み合わせて二重置換バリアントを作製した。これらの二重置換バリアントのうちの２種（ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９およびＨ２－６／Ｌ３－５）はｐＨ依存性の結合のいくらかの改善を示した。Ｈ１－８／Ｌ１－９の配列を図５に示す（配列番号４、５、９、１０、および２０～２５）。Ｈ２－６／Ｌ３－５の配列を図６に示す（配列番号３、５、８、９、および２６～３１）。

【0462】

ＶＨ－１１８０１（配列番号２）およびＶＬ－１９０１（配列番号７）を有する親ヒト化ｍＡｂ ２Ｇ１ならびに様々な単一および二重ヒスチジン変異体のＣ５結合および解離のＯｃｔｅｔ追跡を図７～図１２に示す。Ｃ５機能の遮断でのそれらの相対的な活性を、ヒツジ赤血球溶解検定を用いて親ヒト化２Ｇ１ ｍＡｂ （ＶＨ－１１８０１／ＶＬ－１９０１）と比較し図１３および図１４に示す。親ヒト化２Ｇ１ ｍＡｂに比べて等しいか改善した活性を示したｍＡｂ Ｌ３－１を除いて、他のすべての変異体はより低い活性を示した。２種の二重置換バリアントの場合、それらの活性は大きく低下し、Ｈ１－８／Ｌ１－９は実質的にすべてのＣ５遮断活性を失った。これは意外でもない、というのは、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９およびＨ２－６／Ｌ３－５については、ｐＨ ５．８のときにいくらかの望ましい解離の加速が認められたが、ｐＨ ７．４のときの解離も劇的に加速している（そのことから活性の喪失が明らかである）からである。

【0463】

上記のヒスチジン置換バリアントはインビトロでは活性が低下したが、それらのインビボの半減期は改善した可能性があり、したがって、ｐＨ依存性の結合により分解が低減されたことが原因でそれらのＰＫ／ＰＤ特性が親ｍＡｂに比べて改善した可能性があった。

【0464】

インビボのＰＫ／ＰＤを試験するため、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン配列を含むヒトＣ５のｃＤＮＡを尾静脈から水圧注入してヒトＣ５を永久に発現するＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスを作製することによりＣ５ヒト化マウスを開発した。ＮＯＤマウスは本来Ｃ５が欠けているため、内因性のマウスＣ５が薬力学（ＰＤ）検定に干渉しない。ＳＣＩＤの遺伝的背景により、遺伝子導入によって発現したヒトＣ５がヒトＣ５に対する免疫反応を誘発しないことが保証される。安定なゲノム組込みのためにＳｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン配列を含むヒトＣ５プラスミドを水圧注入してＣ５ヒト化マウスを開発した。ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスでの高度なヒトＣ５発現の代表的なデータを図１６に示す。典型的には、５０～１２０ μｇ／ｍＬの範囲の血漿Ｃ５濃度が認められた。これは約８０ μｇ／ｍＬであるヒト血漿中のＣ５濃度と同程度である。

【0465】

５種のヒスチジン置換バリアント（すなわちｍＡｂ Ｌ３－１、Ｌ１－２、Ｈ１－４、Ｈ１－８／Ｌ１－９およびＨ２－６／Ｌ３－５）をＰＫ／ＰＤについて評価した。２種の二重置換バリアント（すなわちｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９およびＨ２－６／Ｌ３－５）は最も高い持続性を示した。３種の単一置換バリアントのうち、ｍＡｂ Ｈ１－４およびＬ１－２はｍＡｂ Ｌ３－１よりも良好な持続性を示した（図１７）。したがって、Ｌ３－１はヒトＣ５に対して最も良好なｐＨ ７．４親和性およびインビトロ遮断活性を示すが、最も短い半減期を有する。興味深いことに、インビボ遮断活性を示さなかったｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９を除いて他のすべてのバリアントは親ヒト化２Ｇ１ ｍＡｂ （ＶＨ－１１８０１， ＶＬ－１９０１）に比べて改善したＰＤ特性を有する（図１８および図１９）。

【0466】

バリアントｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９は最も良好なｐＨ結合差を示した（すなわちｐＨ ５．８のときにｐＨ ７．４のときよりもはるかに速く抗原解離が起こる（図１２））がＣ５遮断活性の多くを失った（ｐＨ ７．４のときの抗原解離も高くなっていることから）と仮定し、Ｈ１－８／Ｌ１－９の６個のＣＤＲの各残基を（Ｈ１－８およびＬ１－９のヒスチジン置換は保存しながら）ランダムに置換するために倹約的な変異誘発を行った。ｓｃＦｖ構築物のＥＬＩＳＡプレート検定でｐＨ ７．４結合を有意に改善したＶＨで３つの「ホットスポット」を特定した。これらの残基は配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１の第９位のロイシン（すなわちＬ９）、配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２の第４位のプロリン（すなわちＰ４）、および配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３の第１６位のバリン（すなわちＶ１６）であった。最も大きく改善した結合を示した置換は、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、Ｌ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、Ｐ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ）であった（図２０）。

【0467】

これらの１３種の置換体（すなわち、Ｌ９→Ｗ９（すなわちＬ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（すなわちＬ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（すなわちＬ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（すなわちＬ９Ｙ）、Ｌ９→Ｆ９（すなわちＬ９Ｆ）、Ｐ４→Ｆ４（すなわちＰ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（すなわちＰ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（すなわちＰ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（すなわちＰ４Ｗ）、Ｐ４→Ｉ４（すなわちＰ４Ｉ）、Ｖ１６→Ｆ１６（すなわちＶ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（すなわちＶ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（すなわちＶ１６Ｗ））を作製し、ＩｇＧ４としてのｐＨ依存性結合特性について評価した。各バリアントについて、ＶＨおよびＶＬプラスミドを構築し、次いでＥｘｐｉ－ＣＨＯ細胞に一過的に遺伝子導入した。細胞培養液上清中のｍＡｂをｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときの結合について試験した。図２１および図２２はこれらのバリアントのＣ５結合特性を要約している。図２１はＣ５結合のｍＡｂ結合シグナルに対する比、図２２はｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときの結合相から解離相への転換後のピーク値からの結合シグナルの減少率（％）を示す。得られたいずれの変異体についても、図２１の比が高いことが好ましく、図２２のｐＨ ７．４のとき（網掛けの棒）の解離率（％）がより低く、ｐＨ ５．８のとき（格子模様の棒）の解離率（％）がより高いことが好ましい。

【0468】

この１３種のｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９単一ヒスチジン置換バリアントの評価から、７個のバリアントを選択して図２３に示す１８種の組合せ置換バリアント（すなわち、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ）を作製した。これらの１８種の組合せ置換バリアントを作製し、ｐＨ依存性結合特性について評価した。各バリアントについて、ＶＨおよびＶＬプラスミドを構築し、次いでＥｘｐｉ－ＣＨＯ細胞に一過的に遺伝子導入した。細胞培養液上清中のｍＡｂをｐＨ ５．８およびｐＨ ７．４のときの結合について試験した。

【0469】

図２４および図２５は、これらの１８種の組合せ置換バリアントのＣ５結合特性を要約している。図２４はＣ５結合のｍＡｂ結合シグナルに対する比、図２５はそれぞれｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８のときの結合相から解離相への転換後のピーク値からの結合シグナルの減少率（％）を示す。得られたいずれの変異体についても、図２４の比が高いことが好ましく、図２５のｐＨ ７．４のとき（網掛けの領域）の解離率（％）がより低く、ｐＨ ５．８のとき（格子模様の領域）の解離率（％）がより高いことが好ましい。

実施例２

【0470】

ｐＨ ７．４対ｐＨ ５．８における結合の最大の差とｐＨ ７．４における最良の結合に基づき、バリアントＩＷＷ、ＩＦＷ、ＦＭＥ、およびＦＭＷをＶ１－８／Ｌ１－９の上位４種の三重変異クローンとして選択し、さらに特性評価した。親和性成熟計画のさらなる分析およびデータマイニングを行い、ＣＤＲ２の第９位のＴからＨｉｓへの変異を、Ｖ１－８／Ｌ１－９のｐＨ ７．４結合を回復するためのもう一つの有望なランダム変異と特定した（図２６～図２８）。ＩＷＷ、ＩＦＷ、ＦＭＥ、およびＦＭＷをＶ１－８／Ｌ１－９の上位４種の三重変異クローンとして選択した。ＩＷＷ、ＩＦＷ、ＦＭＥ、およびＦＭＷを発現させ、タンパク質を精製してｐＨ依存性の結合特性を確認した。溶血検定でのＣ５阻害活性も試験した（図２９、図３０、図３２～図３４）。上記の４種の三重変異体を新たなＨｉｓ変異（ＶＨのＣＤＲ２、第９位、Ｔ→Ｈ変異）とさらに組み合わせて４種の四重変異体（ＩＷＷＨ、ＩＦＷＨ、ＦＭＥＨ、およびＦＭＷＨ；たとえば図３１）を作製した。これらの新たな変異体をｐＨ依存性の結合特性およびＣ５阻害活性について試験した。これらのうち、四重変異体ＦＭＥＨをその三重変異親分子ＦＭＥに比べて改善した変異体と特定した（図３５～図３７）。

【0471】

実施例１に記載の、インビボのＰＫ／ＰＤを試験するために抗Ｃ５ ｍＡｂの改変変異体のいくつかを水圧注入して作製したＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスのＣ５ヒト化マウスに加え、ＳＣＩＤ／ＦｃＲｎ遺伝子導入マウスのＣ５ヒト化マウス（ヒトＦｃＲｎ遺伝子導入・マウスＦｃＲｎ欠損）背景も作製した。後者の株により、ｐＨ依存性の抗Ｃ５ ｍＡｂ変異体とＩｇＧ４抗体構築物のさらに操作されたＦｃドメイン（Ｆｃドメインの３つの変異）の複合効果の試験が可能になった（図３８および図３９）。

【0472】

ＳＣＩＤ／ＦｃＲｎ遺伝子導入背景のＣ５ヒト化マウスを用いて、Ｈ１－８／Ｌ１－９三重変異体ＩＦＷとＦＭＷ、さらにＦＭＥＨのＰＫ／ＰＤをＦｃドメインの３残基の置換（ＰＬＡ）を有するＩｇＧ４形式でも試験した。データは、元の（Ｈ１－８／Ｌ１－９の誘導源である）ヒト化抗Ｃ５ ｍＡｂ １１８０１に比べて有意に改善したＰＫ／ＰＤ活性を示した（図４０～図４２）。

実施例３

【0473】

補体活性化は一連の標的認識およびタンパク質切断を含む。補体活性化は３つの異なる経路により活性化され得る。これらの経路はすべてＣ３活性化工程で合流する（図４３）。これらの経路は古典経路、代替経路、およびレクチン経路である（図４３）。ＣＰは抗原－抗体複合体により活性化され、Ｃ３活性化工程で他の経路と合流する前にＣ１およびＣ４／Ｃ２の順次の活性化を含む。ＬＰは特定のパターン認識分子、たとえばＭＢＬ、コレクチン、およびフィコリンにより微生物表面の糖分子への結合時に誘発される。ＬＰはＭＡＳＰの活性化を含み、続いてＭＡＳＰはＣ４／Ｃ２を切断し、Ｃ３活性化工程で他の経路と合流する（図４３）。Ｃ３の自然加水分解および活性化によりＣ３（Ｈ_２Ｏ）が生成されるため、ＡＰは低水準で恒常的に活性である。Ｃ３（Ｈ_２Ｏ）はＢ因子と結合することができ、Ｄ因子によりタンパク質分解活性化すると初期Ｃ３切断酵素複合体Ｃ３（Ｈ_２Ｏ）Ｂｂを生成する（図４３）。調節タンパク質が存在しない場合、Ｃ３（Ｈ_２Ｏ）Ｂｂ複合体の産物であるＣ３ｂはＣ３（Ｈ_２Ｏ）と同じようにＢ因子と結合することができ、したがって、自己増幅的なＣ３活性化の別の循環を開始する。

【0474】

３つの経路のうちのいずれかによるＣ３の活性化は一様に代替経路を誘発する。したがって、多くの補体関連疾患では代替経路活性化を阻害することが重要である。Ｃ３活性化はＣ５切断酵素複合体の生成も誘導し、終末補体活性化経路を開始し、結果的に強力な炎症性媒介物質Ｃ５ａ、ならびに細胞溶解および細胞死を引き起こす可能性がある膜侵襲複合体Ｃ５ｂ－９が生成される。補体が無差別な損傷を引き起こすのを防ぐために、宿主細胞は補体の活性化と増幅を遮断するよう機能する多くの膜固定型の調節因子を発現する。それらの調節因子のうちのいくつか、たとえば崩壊促進因子（ＤＡＦ、ＣＤ５５）およびＭＣＰはＣ３活性化を阻害するよう作用するが、ＣＤ５９など他の調節因子は補体活性化カスケード中の他の工程で作用する。膜固定型の補体制御因子の他に、宿主組織を優先的に防御するよう作用する液相の調節因子も血中に存在する。液相の阻害因子としては、補体活性化の代替経路の重要な阻害因子であるＦＨおよび第Ｉ因子（ＦＩ）、ならびに古典経路の補体活性化を阻害するＣ４ＢＰおよびＣ１阻害因子（Ｃ１ＩＮＨ）が挙げられる。液相および膜固定型のいずれの補体調節タンパク質も、多くの場合は複数の保存されたＳＣＲドメインで構成されている。たとえば、ＦＨは２０個のＳＣＲで構成され（図４４）、ＤＡＦ（ＣＤ５５）の細胞外分節は５個のＳＣＲドメインを含む。

【0475】

ＦＨはＦＩによるＣ３ｂの切断のための補因子として作用すること、およびＣ３ｂＢｂ複合体の崩壊を促進すること（いずれの機構もＡＰの増幅ループを予防する）により、代替経路の補体活性化を阻害する。構造機能研究から、ＦＨでは補体調節活性はＳＣＲ１～５に位置し、一方他のＳＣＲドメイン（特にＳＣＲ１９～２０）は宿主細胞および表面に沈着したＣ３ｂの認識に重要な役割を果たすことが明らかになった。同様に、ＤＡＦ（ＣＤ５５）およびＭＣＰ（ＣＤ４６）の細胞外ＳＣＲドメインは補体阻害活性に関与することが示され、ＤＡＦおよびＭＣＰの可溶型またはそれらのマウス相同体は補体調節活性を有することが実証されている。補体調節タンパク質の非発現または不完全な機能につながる変異は、いくつかの補体依存性疾患に関与している。たとえば、ＧＰＩアンカー生合成に関与する酵素の遺伝子変異は、影響を受けたＰＮＨ患者の造血幹細胞ならびに対応する赤血球（ＲＢＣ）、血小板、および白血球でのＤＡＦおよびＣＤ５９の発現の欠如につながる。これは、代替経路を介した補体攻撃と、影響を受けたＰＮＨ赤血球の溶解および血小板活性化を引き起こし、ＰＮＨ患者に貧血や血栓症などの壊滅的な病状を引き起こす。同様に、ＦＨおよびＭＣＰをコードする遺伝子の変異はａＨＵＳに関連している。現在、ＰＮＨとａＨＵＳのいずれも、診療所では標準治療としてヒト化抗Ｃ５ ｍＡｂ薬エクリズマブを用いて治療されている。しかし、依然として満たされていない重要な医療上の要求があり、ＰＮＨおよびａＨＵＳの治療でも他の補体関連疾患の治療でも、より効果的かつ好都合な抗補体薬を開発することが依然として望まれている。

【0476】

補体タンパク質を標的とする薬物の開発における課題の一つは、それらの血漿濃度が高いことおよび／または代謝回転が速いことである。たとえば、ヒトＣ３およびＣ５の血漿濃度はそれぞれ約１ ｍｇ／ｍＬおよび８０ μｇ／ｍＬである。このことは、これらのタンパク質の阻害物質を高用量かつ／または高頻度で投与する必要があることを意味する。実際、抗Ｃ５ ｍＡｂ薬物エクリズマブは、ＰＮＨおよびａＨＵＳ患者にそれぞれ９００ ｍｇおよび１２００ ｍｇの維持量で、静脈注射で２週間毎に投与することが求められる。より長く持続する第二世代の抗Ｃ５ ｍＡｂラブリズマブが開発されて注射の頻度は８週間毎まで減少しているが、ラブリズマブの維持量は注射一回あたり３６００ ｍｇに増えている。さらに、エクリズマブもラブリズマブも、ＰＮＨ患者のＬＤＨおよびヘモグロビンの濃度を正常にすることができなかった。標準的なエクリズマブ治療を受けたＰＮＨ患者では破綻的な溶解が頻繁に認められ、２０～３０％の患者は依然として輸血依存状態である。ＰＮＨ患者におけるこれらの満たされていない医療上の要求は、罹患した血液細胞のＤＡＦおよびＣＤ５９の欠損により患者はＣ３活性化およびＭＡＣによる損傷を起こしやすくなるという事実に関連している。抗Ｃ５ ｍＡｂ、たとえばエクリズマブおよびラブリズマブはＣ５による溶血を阻害することができるが、罹患した赤血球のＣ３活性化を予防するわけではなく、その結果、赤血球のＣ３ｂオプソニン化は依然として起こり、これによってＥＶＨ（細網内皮系のＣ３ｂオプソニン化した赤血球が捕食されることにより引き起こされる過程）というよく認識された現象が起こる。また、研究により、Ｃ５工程で赤血球の補体活性化を遮断することは有効性に限界があることがわかっている。というのも、多すぎるＣ５転換酵素が既に細胞表面に集合している場合、結合力に限りのあるｍＡｂでＣ５切断を完全に遮断することは不可能になるからである。このことはエクリズマブで治療したＰＮＨ患者の破綻的な溶解現象について、またエクスビボ検定で抗Ｃ５ ｍＡｂがウサギ赤血球およびＰＮＨ赤血球細胞の完全な溶血を予防することができない理由についての説明となり得る。というのも、ＰＮＨ赤血球およびウサギ赤血球はいずれもＡＰを介するＣ３補体活性化に非常に感受性が高く、表面に大量のＣ５転換酵素を容易に集めることができるからである。補体依存性疾患で、たとえばＣ３阻害性環状ペプチドまたは組換え短鎖型ＦＨの使用によりＣ３活性化を標的化する取組みがなされているが、このような分子は非常に乏しい薬物動態を有し、大量かつ高頻度（たとえば１日に１回）の投薬を必要とする。

【0477】

本発明は、部分的には、ヒトＣ５に対するｐＨ依存性結合を獲得するためにＶＨおよびＶＬに変異を導入して薬物動態を改善する（ただしｍＡｂのＣ５遮断活性を損なわずに）ことによる、ヒト化抗Ｃ５ ｍＡｂ薬の改善について記載する。ＶＨおよびＶＬのこれらの変異は、ＩｇＧ４のＦｃドメイン変異と組み合わせると、ＳＣＩＤ／ヒトＦｃＲｎ遺伝子導入マウスのＣ５ヒト化マウスで評価したところ有意に改善した薬物動態および薬物力学が得られた。

【0478】

本発明の戦略は、部分的には抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ 融合タンパク質の概念に基づく。ＦＨのうちＳＣＲドメイン１～５（先に紹介したように、Ｃ３活性化の制御に関与するドメインである）を用いた。目的は全長ＦＨを含む融合タンパク質を作製することではない。というのもそれは非常に大きく複雑な糖タンパク質であり、抗Ｃ５ ｍＡｂを含む完全な融合タンパク質は製造上の課題を有するからである。ＦＨのＮ末端ＳＣＲ １～５をヒトＩｇＧ４のＦｃドメインのＣ末端に結合した（図４４）。ＦｃとＦＨドメインの間に、ＩｇＧ４ Ｆｃの最後のアミノ酸の後に追加されたリンカーはなく、その最後のアミノ酸は成熟ＦＨのＮ末端配列に直接連結されている。この抗Ｃ５ ｍＡｂ融合タンパク質は二機能性であり、通常の抗Ｃ５ ｍＡｂとしてＣ５活性を遮断するよう機能し、ＦＨドメインはＣ３補体活性化阻害因子として作用する。

【0479】

この構築物のもう一つの重要な利点は、持続性（再循環性）抗Ｃ５ ｍＡｂを用いてＦＨ融合タンパク質を構築したことである。持続性抗Ｃ５ ｍＡｂをＩｇＧ４ Ｆｃドメイン変異（Ｓ２２８Ｐ、Ｍ４２８Ｌ、およびＮ４３４Ａ；ＰＬＡと呼ぶ）と結合し、Ｃ５に対しｐＨ依存性結合（ｐＨ ５．８のときにｐＨ ７．４のときよりも速くＣ５から解離すること）を有するよう改変している。

【0480】

本明細書に示すデータは、抗Ｃ５ ｍＡｂ ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡに基づく抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質のＶＨおよびＶＬ配列を含む（図４５および図４６）。ＳＤＳゲルは予想された大きさの拡大および良好な完全性を示す融合タンパク質のＶＨ鎖の発現を示した（図４７）。

【0481】

ｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質は依然として親抗Ｃ５ ｍＡｂのｐＨ依存性の結合特性を維持した（図４８および図４９）が、これは重要である。というのも、このような融合タンパク質は親抗Ｃ５ ｍＡｂ（たとえばＦＭＥＨ）と同様に持続性の薬物として挙動する必要があるからである。抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質は、ウサギ赤血球溶解の阻害（図５０）およびＰＮＨ赤血球溶解の阻害（図５７）において、それらの対応する親ｍＡｂ（たとえばＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ対ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ ＳＣＲ１－５）および基準である通常の抗Ｃ５ ｍＡｂ（エクリズマブおよびラブリズマブ）よりもはるかに強力であった。抗Ｃ５ ｍＡｂ融合タンパク質は、対応する親ｍＡｂまたは基準抗Ｃ５ ｍＡｂ（エクリズマブおよびラブリズマブ）と違ってウサギおよびＰＮＨの赤血球のＣ３オプソニン化を阻害することがさらに示された（図５１および図５８）。

【0482】

さらに、抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質はＣ５ヒト化マウスで従来の基準抗Ｃ５ ｍＡｂ（エクリズマブ）よりも良好なＰＫ（半減期）、および第二世代の持続性基準抗Ｃ５ ｍＡｂ（ラブリズマブ）に類似のＰＫを有するが、ウサギ赤血球溶解試験ではいずれの基準抗Ｃ５ ｍＡｂよりも良好なＰＤ（薬力学）を有する（二機能性の特性による）ことが実証された（図５２～図５６）。
以下、本実施例で用いた材料および方法について説明する。

【0483】

マウスでヒトＣ５を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：ヒトＣ５のｃＤＮＡプラスミドの水圧注射後、ヒトＣ５を発現するＮＯＤ／ＳＣＩＤまたはＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスでヒトＣ５を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：９６ウェルプレートを抗ヒトＣ５抗体（Ｑｕｉｄｅｌ、Ａ２１７）で、重炭酸緩衝液中２ μｇ／ｍＬの最終濃度になるように３７℃で１時間かけて被覆した。０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０を含むＰＢＳで洗浄した後、遮断溶液で希釈した血漿試料を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、遮断溶液に溶解したビオチン化抗ヒトＣ５ ｍＡｂ （９Ｇ６）を加えたプレートを室温で１時間恒温放置し、再び洗浄し、遮断溶液に溶解したセイヨウワサビペルオキシダーゼ結合アビジンまたはストレプトアビジン（ＢＤ ｐｈａｒｍｉｇｅｎ）を加えて室温で１時間恒温放置した。最終洗浄の後、ＨＲＰ基質を用いてプレートを３分間かけて発色させた。２ＮのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、プレートをマイクロプレートリーダーで４５０ ｎｍで読み取った。マウスでヒトＩｇＧ４を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ。

【0484】

ヒトＩｇＧ４の検出のためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：抗ヒトＣ５ ＩｇＧ４ ｍＡｂまたは抗Ｃ５ ｍＡｂ－ＦＨ ＳＣＲ１－５融合タンパク質処置マウスでヒトＩｇＧ４を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：９６ウェルプレートを抗ヒトκ軽鎖抗体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ， ＡＳ７５－Ｐ）で、重炭酸緩衝液中２ μｇ／ｍＬの最終濃度になるように３７℃で１時間かけて被覆した。０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０を含むＰＢＳで３回洗浄した後、遮断溶液で希釈した血漿試料を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、プレートを抗ヒトＩｇＧ４ ＨＲＰ （１：２０００希釈、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ａ１０６５４）を加えた遮断溶液中で、室温で１時間恒温放置した。洗浄後、ＨＲＰ基質を用いてプレートを３分間かけて発色させた。２ＮのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、プレートをマイクロプレートリーダーで４５０ ｎｍで読み取った。

【0485】

抗ヒトＣ５ ＩｇＧ４－ＦＨ１－５融合物処置マウスでヒトＩｇＧ４－ＦＨ１－５融合物を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：９６ウェルプレートを抗ヒトκ軽鎖抗体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、ＡＳ７５－Ｐ）で、重炭酸緩衝液中２ μｇ／ｍＬの最終濃度になるように３７℃で１時間かけて被覆した。０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０を含むＰＢＳで３回洗浄した後、遮断溶液を加えたプレートを３７℃で１時間恒温放置した。洗浄後、遮断溶液で希釈した血漿試料を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、プレートをビオチン結合抗ヒトＦＨ（１：１００希釈、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＭＡ５－１７７３５）加えた遮断溶液中で、室温で１時間恒温放置した。洗浄後、遮断溶液に溶解したストレプトアビジン－ＨＲＰ（１：１０００希釈、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、５５４０６６）を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、ＨＲＰ基質（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、３４０２９）を用いてプレートを３分間かけて発色させた。２ＮのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、プレートをマイクロプレートリーダーで４５０ ｎｍで読み取った。

【0486】

マウス血漿試料中の完全なＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５融合タンパク質を検出するためのサンドイッチＥＬＩＳＡ：９６ウェルプレートを抗ヒトκ軽鎖抗体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ， ＡＳ７５－Ｐ）で、重炭酸緩衝液中２ μｇ／ｍＬの最終濃度になるように３７℃で１時間かけて被覆した。０．０５％のＴｗｅｅｎ－２０を含むＰＢＳで３回洗浄した後、遮断溶液を加えたプレートを３７℃で１時間恒温放置した。洗浄後、遮断溶液で希釈した血漿試料を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、プレートをビオチン結合抗ヒトＨ因子抗体（１：１００希釈、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＭＡ５－１７７３５）を加えた遮断溶液中で、室温で１時間恒温放置した。洗浄後、遮断溶液に溶解したストレプトアビジン－ＨＲＰ（１：１０００希釈、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、５５４０６６）を加えたプレートを室温で１時間恒温放置した。洗浄後、ＨＲＰ基質（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、３４０２９）を用いてプレートを３分間かけて発色させた。２ＮのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、プレートをマイクロプレートリーダーで４５０ ｎｍで読み取った。

【0487】

ヒツジ赤血球溶解試験：ヒツジ赤血球（検定試料あたり１×１０^７細胞、ＰＢＳ中で調製、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ）に５０％の正常ヒト血清（ＮＨＳ、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．製）を加え、ゼラチンベロナール緩衝液（ＧＶＢ２＋、Ｓｉｇｍａ；合計検定容量：１００ μｌ）中で、３７℃で２０分間恒温放置した。ヒツジ赤血球に加える前にＮＨＳに抗Ｃ５ ｍＡｂを加えて４℃で１時間、予備保温した。４０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ氷冷溶液を加えて溶解反応を停止した。恒温放置した混合物を１５００ ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を回収してＯＤを４０５ ｎｍで測定した。ＮＨＳを含まない試料またはＥＤＴＡを加えた試料を陰性溶解対照として使用し、また、蒸留水で完全に溶解したヒツジ赤血球の試料を陽性対照（１００％溶解）として使用し、これに対して他の試料の溶解率（％）を正規化した。

【0488】

ニワトリ赤血球溶解検定：ニワトリ赤血球（Ｒｏｃｋｌａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ ＃Ｒ４０１－００５０）を抗ニワトリウサギ赤血球抗体（Ｒｏｃｋｌａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ ＃１０３－４１３９）（１５０ μｇ／ｍＬ）で３０分間感作させ、ＧＶＢ緩衝液で２回洗浄した。ｍＡｂ ＢＢ５．１で前処理してマウスＣ５活性を遮断したＣ５ヒト化マウスのレピルジン血漿およびＣ５枯渇ヒト血清（Ｑｕｉｄｅｌ ＃Ａ５０１）試料をＧＶＢ緩衝液で１０％（すなわち最終検定容量５ ｍＬ～５０ ｍＬ）に希釈し、５ ｍＬの抗体感作済みニワトリ赤血球（ｃＲＢＣ）（５ × １０^８／ｍＬ）と混合して最終容量を５０ ｍＬにし、３７℃で３０分間恒温放置した。１０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ冷溶液（１００ ｍＬ）で反応を停止させた。細胞を１５００ ｒｐｍで、４℃で５分間遠心分離した。回収した上清のＯＤを４０５で測定した。

【0489】

ウサギ赤血球溶解試験：ウサギ赤血球（Ｒｏｃｋｌａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ ｃａｔ＃ Ｒ４０３－０１００）（検定試料あたり１×１０^７細胞、ＰＢＳ中で調製、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ）に２５％の正常ヒト血清（ＮＨＳ、Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃ．製）または５０％のカニクイザル血清（ＣＭＳ、Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ）を加えてゼラチンベロナール緩衝液（ＧＶＢ２＋ＥＧＴＡ、Ｓｉｇｍａ；合計検定容量：１００ μｌ）中で、３７℃で３０分間恒温放置した。ウサギ赤血球に加える前にＮＨＳまたはＣＭＳに抗Ｃ５ ｍＡｂまたは抗Ｃ５ ｍＡｂ－ｆＨ ＳＣＲ１－５ 融合タンパク質と共に４℃で１時間、予備保温した。氷冷した４０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ溶液を加えて溶解反応を停止した。恒温放置後の混合物を１５００ ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を回収してＯＤを４０５ ｎｍで測定した。ＮＨＳもしくはＣＭＳを含まない試料またはＥＤＴＡを加えた試料を陰性溶解対照として使用し、また、蒸留水で完全に溶解したウサギ赤血球の試料を陽性対照（１００％溶解）として使用し、これに対して他の試料の溶解率（％）を正規化した。

【0490】

薬力学研究のためのヒト・マウスハイブリッド補体系を用いたウサギ赤血球溶解試験：Ｃ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスで様々な抗ヒトＣ５ ｍＡｂおよびそのｆＨ ＳＣＲ１－５融合物の薬力学を試験するために、試験用Ｃ５ヒト化ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウス（ヒトＣ５の源としての）の血漿と混合したＣ５枯渇ヒト血清を用いてｒＲＢＣ溶解検定を行った。検定混合物中のマウスＣ５を２種の抗マウスＣ５抗体ＢＢ５．１および２１Ａ９（最終反応物中それぞれ４００ μｇ／ｍＬ）で遮断した。マウスのレピルジン血漿およびＣ５枯渇ヒト血清（Ｑｕｉｄｅｌ ＃Ａ５０１）試料をＧＶＢ－ＥＧＴＡ緩衝液で１０％に希釈し、５ μＬのウサギ赤血球（５ × １０^８／ｍＬ）と混合して最終容量５０ μＬにし、３７℃で３０分間恒温放置した。１０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ冷溶液（１００ μＬ）で反応を停止させた。細胞を１５００ ｒｐｍで、４℃で５分間遠心分離した。回収した上清のＯＤを４０５で測定した。

【0491】

ヒトＣ５トランスポゾンプラスミドの構築：ｐＣＭＶ Ｓｐｏｒｔ６からＣ５のｃＤＮＡをｐＣＡＧＧＳベクターのＥｃｏＲＩ部位にサブクローン化した。エンハンサーの５’部位のＨｉｎｃ ＩＩ部位にＳＢ ＩＲ／ＤＲ（Ｌ）トランスポゾン認識配列、３’部位のｒＢＧ Ｓｔｕ Ｉ部位の後にＳＢ ＩＲ／ＤＲ（Ｒ）認識配列をＩｎｆｕｓｉｏｎクローン化法でクローン化した。ＮＯＤ／ＳＣＤマウスへの水圧注入のため、ｐＣＭＶ－Ｔ７－ＳＢ１００プラスミド（２ μｇ）とトランスポゾン部位を持つｐＣＡＧＧＳに入れたヒトＣ５（２５ μｇ）を尾静脈注射した。ヒトＣ５ ＥＬＩＳＡで遺伝子導入効率を１日後に確認した。注入の２週間後、ヒトＣ５ ＥＬＩＳＡで再び安定な組込みを確認した。

【0492】

ヒスチジンスキャン：ヒト化ｍＡｂ ２Ｇ１ （ＶＨ－１１８０１およびＶＬ－１９０１）のヒスチジンスキャン：ＨＥＫ細胞を２４ウェルプレートに入れ、８ μＬのＸ－ＴｒｅｍｅＧｅｎｅ ＨＰ ＤＮＡ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ （Ｒｏｃｈｅ＃６３６６５４６００１）を用いて１ μｇのＶＨおよび２ μｇのＶＬプラスミドを遺伝子導入した。上清を遺伝子導入の２日後に回収し、Ｏｃｔｅｔ検定に使用した。１１８０１ヒスチジン変異体のｐＨ依存性の解離をＯｃｔｅｔ Ｒｅｄ Ｅ機器（ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｉｎｃ．）で生物膜干渉法（ｂｉｏｌａｙｅｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ）により分析した。抗ヒトＩｇＧバイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ＃ １８－５０６０）：センサーを２００ μＬの遺伝子導入上清に６００秒間浸して抗体をセンサーに捕捉した。その後、ヒトＣ５を加えてこれらのバイオセンサーを６００秒間恒温放置した後、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８で解離させた。

【0493】

倹約的な変異誘発：ｐＨ ７．４のときのＣ５結合を改善する点アミノ酸置換変異を特定するため、ｍＡｂ Ｈ１－８／Ｌ１－９の６個の相補性決定領域（ＣＤＲ）すべてを部位特異的変異誘発法によって他の１９種のアミノ酸に１個ずつ変異させた。ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ（登録商標、Ａｇｉｌｅｎｔ）またはＱ５（登録商標）部位特異的変異誘発（ＮＥＢ）により、各位置について設計した変異をコードしたオリゴヌクレオチドを用いて標的ＣＤＲ位置に変異を導入する。結合が改善したバリアントを選別するために、遺伝子導入済みの各反応物から８８種のクローンを選び、大腸菌細胞培地から分泌されたｓｃＦｖを捕捉ＥＬＩＳＡで試験した。捕捉ＥＬＩＳＡでは、滴定された量の抗Ｆｄ抗体を用いてウェルを被覆して細菌上清からｓｃＦｖを捕捉する。これに続いてビオチン化抗原を加えて恒温放置した。ＨＲＰ結合抗Ｌｃ抗体を用い、続いてＴＭＢ基質を加えて恒温放置することにより、結合シグナルを検出する。０．２ＭのＨ_２ＳＯ_４で反応を停止させ、プレートを４５０ ｎｍで読み取った。親クローンよりも大きい４５０ｎｍにおける光学密度（ＯＤ）シグナルを示すクローンを選択した。再増殖した上清から得たＳｃＦｖをＥＬＩＳＡ（上記）で２回再検定し、陽性の結果を確認する。結合が改善したクローンを、抗原をＥＬＩＳＡウェルに被覆する直接結合ＥＬＩＳＡでさらに確認し、ｓｃＦｖ定量的ＥＬＩＳＡで決定したｓｃＦｖの計算量を使用する。親のｓｃＦｖ結合を超える結合を繰り返し示したクローンを配列決定した。

【0494】

ｐＨ依存性結合／解離の測定：親和性成熟したＨ１－８Ｌ１－９抗Ｃ５ ｍＡｂ変異体および対応するＦＨ ＳＣＲ １－５融合タンパク質のｐＨ依存性の結合：２～３ × １０^６／ｍＬのＥｘｐｉＣＨＯを２４ウェルプレートに播き、８ μＬのＸ－ＴｒｅｍｅＧｅｎｅ ＨＰ ＤＮＡ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ （Ｒｏｃｈｅ＃６３６６５４６００１）を用いて２ μｇのＶＨおよび４ μｇのＶＬプラスミドを遺伝子導入した。上清を遺伝子導入の２日後に回収し、Ｏｃｔｅｔ検定に使用した。ヒスチジン変異体のｐＨ依存性の解離をＯｃｔｅｔ Ｒｅｄ Ｅ機器（ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｉｎｃ．）で生物膜干渉法により分析した。ストレプトアビジンバイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ＃ １８－５０１９）を３ μｇ／ｍＬの捕捉選抜ビオチン抗ヒトＩｇＧ４ ｆａｂ （Ｔｈｅｒｍｏ ｆｉｓｈｅｒ＃７１０２９０２１００）で２５０～３００秒間かけて被覆し、２ｍＭのビオシチンで６００秒間かけて反応停止した。これらのバイオセンサーに１０ μｇ／ｍＬのヒトＣ５（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｔｅｃｈ＃Ａ３２０）を加えて６００秒間恒温放置し、ヒトＣ５のバイオセンサーへの非特異的結合を飽和させた。センサーを２００ μＬの遺伝子導入上清に６００秒間浸して抗体をセンサーに捕捉した。その後、これらのバイオセンサーにヒトＣ５を加えて６００秒間恒温放置した後、ｐＨ ７．４およびｐＨ ５．８で解離させた。

【0495】

大規模な遺伝子導入：大規模なＥｘｐｉＣＨＯ遺伝子導入実施計画：インビボ研究用のｍＡｂおよびｍＡｂ－ＦＨ融合タンパク質の大規模な作製のために、製造業者の指示に従い最大力価の実施計画を用いてＥｘｐｉＣＨＯ遺伝子導入系（Ｇｉｂｃｏ＃Ａ２９１３３）を使用した。２００ ｍＬのＥｘｐｉ ＣＨＯ培地の場合、１５０ μｇのＶＨおよび３００ μｇのＶＬを遺伝子導入に使用した。

【0496】

ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡおよびＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトまたはカニクイザルＦｃＲｎへの親和性の分析：表面プラズモン共鳴分析を用いて、固定したヒトまたはカニクイザルＦｃＲｎへのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡおよびＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の結合について結合および解離速度定数をＢＩＡｃｏｒｅ ３０００機器（Ｂｉａｃｏｒｅ ＡＢ、スウェーデン、ウプサラ）で測定した。２５℃ですべてのＢｉａｃｏｒｅ実験を行った。ＣＭ５センサーチップのカルボキシル化デキストラン基質を用いて、精製ヒトまたはカニクイザルＦｃＲｎをアミンカップリング化学で結合し、それぞれ２８０ ＲＵまたは２００ ＲＵの表面密度を得た。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡまたはＦＭＨＥ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５をＨＢＳ（ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水）緩衝液で２００、１００、５０、２５、１２．５、および０ ｎＭに希釈し、試料を２００秒間かけて注入し、３００秒間、結合した分析物の解離を進行させた。二価結合モデルを想定したＢＩＡ評価ソフトウェア３．２でデータを分析した。

【0497】

完全なＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５融合タンパク質のＣ５ヒト化マウスでの薬物動態の決定：Ｃ５およびＦｃＲｎヒト化ＳＣＩＤマウスに４０ ｍｇ／ｋｇの用量のＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５融合タンパク質を後眼窩経路で注射した。データグラフに示す薬物投与後の様々な時点でＥＤＴＡ血漿を回収した。

【0498】

ＳＤＳ－ＰＡＧＥによるＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の特性評価：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ドデシル硫酸ナトリウム－ポリアクリルアミドゲル電気泳動）を用いてＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５タンパク質を特性評価した。ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５は、還元剤の有無にかかわらず、ＰＢＳ緩衝液に含まれている。試料を９９℃で１０分間加熱し、５ μｇのタンパク質マーカーと、２ μｇの還元および非還元試料を１２％ ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲルに充填した。ゲルを８０ｖで３０分間泳動し、続いて１７０ ｖで１時間泳動した後、クーマシー・ブリリアントブルー－Ｒ－２５０溶液でゲルを染色した。ゲルを脱色し、Ｇｅｌ Ｄｏｃ ＸＲ Ｉｍａｇｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ （Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｉｎｃ．、米国）を用いて画像化した。

【0499】

ＳＥＣ－ＨＰＬＣによるＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の純度分析：ＳＥＣ－ＨＰＬＣ（サイズ排除クロマトグラフィー－高速液体クロマトグラフィー）を用いてＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５タンパク質の純度を測定した。実験にはＬＣ－２０ＡＴ ＨＰＬＣ装置（Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、日本）およびＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷＸＬカラム（Ｔｏｓｏｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、日本）を用いた。オーブン温度３５℃、流速１ ｍＬ／分、移動相：ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）という実行条件でＳＥＣ－ＨＰＬＣ実験を実施した。ＴＳＫゲルＧ３０００ＳＷＸＬカラムをＬＣ－２０ＡＴ ＨＰＬＣ装置に接続し、ＰＢＳで平衡化した。０．２４２ ｍｇのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５タンパク質溶液を注入し、２１４ ｎｍでの吸光度を１５分間検出した。データをＬａｂ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓソフトウェアで分析した。

【0500】

ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５のヒトおよびカニクイザルＣ５への結合親和性の分析：Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙを用いて、可溶性のヒトおよびカニクイザルＣ５へのＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡおよびＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の結合および解離速度定数を測定した。ＧａｔｏｒのＢｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ Ｉｎｃ．、中国）を用い、３０℃ですべての実験を行った。ＨＦＣ（抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ）プローブをＫ緩衝液（ウシ血清アルブミンを含むリン酸緩衝生理食塩水）に３００秒間浸した。次いでＨＦＣプローブをＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５に浸して１ ｎｍの表面密度を得た。Ｋ緩衝液に２００秒間浸し（基準）、続いて精製ヒトまたはカニクイザルＣ５を異なる濃度（４０、２０、１０、５、２．５、１．２５、および０．６２５ ｎＭ）で含む溶液にＨＦＣプローブを６００秒間浸した後、Ｋ緩衝液で６００秒間の解離時間をとった。ｐＨ ７．４またはｐＨ ５．８のいずれの緩衝液条件でも実験を実施し、結合動態へのｐＨの影響を決定した。１：１結合モデルを用いるＧａｔｏｒの評価ソフトウェア（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ Ｉｎｃ．、中国）でデータを分析した。

【0501】

ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の分子量分析：質量分析を用いてＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５の分子量を測定した。Ｕ３０００ ＵＰＬＣシステムとＱ Ｅｘａｃｔｉｖｅ Ｐｌｕｓ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．、米国）を実験に用いた。ペプチド－Ｎ－グリコシダーゼＦを用いて脱グリコシル化ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５を調製し、ジチオスレイトールを用いて還元ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５を調製した。完全体、脱グリコシル化、および還元ＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５をそれぞれＬＣ－ＭＡＳＳで製造者が記載した方法で分離し検出した。データをＢｉｏｐｈａｒｍａ Ｆｉｎｄｅｒソフトウェア（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｉｎｃ．、米国）で分析した。

【0502】

ＰＮＨ患者赤血球の溶解検定：ＰＮＨ赤血球をＡＰ緩衝液（ＧＶＢ ＋ ５ ｍＭのＭｇ^２＋ ＋ ２０ ｍＭのＥＧＴＡ、ｐＨ ６．４）に懸濁した後、ＨＣｌで酸性にした（０．２Ｍ）正常ヒト血清を加えてゼラチンベロナール緩衝液（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、米国テキサス州）中で、３７℃で４０分間恒温放置した。ＮＨＳにはＦＭＥＨ－ＩｇＧ４ＰＬＡ－ＦＨ１－５、エクリズマブ、またはラブリズマブを加えて４℃で１時間、予備保温した。次に、ＨＣＬ処理（０．２Ｍ）したＰＮＨ赤血球と予備保温した抗体血清を混合し、試験管でｘｘｘ分間恒温放置した。合計の反応液の用量は５０ μｌである。４０ ｍＭのＥＤＴＡ－ＰＢＳ氷冷溶液を加えて溶解反応を停止した。恒温放置した混合物を１５００ ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を回収して４０５ ｎｍのＯＤを測定した。ＥＤＴＡを加えた試料を陰性溶解対照として使用し、また、蒸留水で完全に溶解したＰＮＨ赤血球の試料を陽性対照（１００％溶解）として使用した。溶解率（％）を公式（ＯＤ４０５_{（特異抗体濃度）}－ＯＤ４０５_{（４０ｍＭ ＥＤＴＡ）}）／（（ＯＤ４０５_（水）－ＯＤ４０５_{（４０ｍＭ ＥＤＴＡ}）） ＊１００％）を用いて計算した。

【0503】

Ｃ３ｂ沈着分析：赤血球溶解検定の後の未溶解の赤血球を遠心分離により回収した。細胞をＰＢＳで洗浄した後、ＰＢＳ緩衝液に再懸濁した。ＡＰＣ標識付き抗Ｃ３ｂ抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、米国カリフォルニア州）を加え、暗所で３０分間、氷上で恒温放置した。Ｃ３ｂ＋染色細胞を通過させ、流動細胞計測器ＣｙｔｏＦＬＥＸ （Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、蘇州、中国）またはＦＡＣＳＣｅｌｅｓｔａ （ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、米国カリフォルニア州）で分析した。ＮＤは検出不可能という意味である。

【0504】

本明細書で引用したすべての特許、特許出願、および刊行物の開示は、いずれも参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0505】

特定の実施態様を参照して本発明を開示してきたが、当業者が本発明のその他の実施態様および変形例を本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく考案してもよいことは明らかである。添付の特許請求の範囲は、すべてのそのような実施態様および相当する変形例を包含すると解釈されるよう意図されている。
本発明の態様の一部を以下に記載する。
１．ヒトＣ５に特異的に結合する抗体と融合タンパク質パートナーを含む融合タンパク質。
２．前記抗体の結合はｐＨ依存性であり、前記抗体は中性ｐＨのときに酸性ｐＨのときよりも強力にＣ５に結合する、項目１に記載の融合タンパク質。
３．前記抗体は二機能性抗体融合タンパク質である、項目１または２に記載の融合タンパク質。
４．前記抗体融合タンパク質はＣ３活性化を阻害する、項目３に記載の融合タンパク質。
５．前記融合タンパク質は補体制御タンパク質を含む、項目１～４のいずれかに記載の融合タンパク質。
６．前記融合タンパク質パートナーは、補体受容体１（ＣＲ１）またはその断片、膜補因子タンパク質（ＭＣＰ）またはその断片、Ｃ４ｂ結合タンパク質（Ｃ４ＢＰ）またはその断片、崩壊促進因子（ＤＡＦ）またはその断片、アポリポタンパク質Ｅ（ＡｐｏＥ）またはその断片、Ｈ因子（ＦＨ）タンパク質またはその断片、ヒトＩｇＧ４またはその断片、リンカー、およびそれらの任意の組合せからなる群より選択される少なくとも１種を含む、項目１～５のいずれかに記載の融合タンパク質。
７．前記ＦＨの断片は前記ＦＨタンパク質のショート・コンセンサス・リピート（ＳＣＲ）ドメイン１～５を含む、項目６の融合タンパク質。
８．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１１のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
９．前記抗体は配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１０．前記抗体は配列番号１３のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１１．前記抗体は配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１２．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号１４のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１３．前記抗体は配列番号２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１４．前記抗体は配列番号１６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１５．前記抗体は配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１６．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号１７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１７．前記抗体は配列番号１９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１８．前記抗体は配列番号７のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
１９．前記抗体は配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２０．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号２０のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２１．前記抗体は配列番号２２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２２．前記抗体は配列番号２５のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２３．前記抗体は配列番号２２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２４．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号２６のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号２９のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２５．前記抗体は配列番号２８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２６．前記抗体は配列番号３１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２７．前記抗体は配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２８．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３４のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号８のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
２９．前記抗体は配列番号３６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３０．前記抗体は配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３１．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号３８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３２．前記抗体は配列番号４１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３３．前記抗体は配列番号４１のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３４．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３５．前記抗体は配列番号４６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３６．前記抗体は配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３７．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号４８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３８．前記抗体は配列番号５１のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
３９．前記抗体は配列番号５１のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４０．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５３のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４１．前記抗体は配列番号５６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４２．前記抗体は配列番号５６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４３．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号５７のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４４．前記抗体は配列番号５９のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４５．前記抗体は配列番号５９のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４６．前記抗体は配列番号７２のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４７．前記抗体は配列番号７４のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む軽鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４８．前記抗体は配列番号７２のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
４９．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号３７のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６２のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号３９のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５０．前記抗体は配列番号７６のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５１．前記抗体は配列番号７６のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５２．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号４２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６５のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号４４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５３．前記抗体は配列番号７８のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５４．前記抗体は配列番号７８のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５５．前記抗体は以下のＣＤＲ、すなわち配列番号５２のＶＨ－ＣＤＲ１；配列番号６８のＶＨ－ＣＤＲ２；配列番号５４のＶＨ－ＣＤＲ３；配列番号２３のＶＬ－ＣＤＲ１；配列番号９のＶＬ－ＣＤＲ２；および配列番号１０のＶＬ－ＣＤＲ３、またはそれらのＣＤＲの１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５６．前記抗体は配列番号８０のアミノ酸配列またはそのバリアントを含む重鎖を含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５７．前記抗体は配列番号８０のアミノ酸配列を含む重鎖および配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖、またはそれらの鎖の１つ以上のバリアントを含む、項目１～７のいずれかに記載の融合タンパク質。
５８．前記抗体は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（Ｐ４）の置換を含む、項目８、１２、１６、２０、２４、２８、３１、３４、３７、４０、４３、４９、５２、または５５に記載の融合タンパク質。
５９．前記プロリン４（Ｐ４）の置換は、Ｐ４→Ｆ４（Ｐ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（Ｐ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（Ｐ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（Ｐ４Ｗ）、およびＰ４→Ｉ４（Ｐ４Ｉ）からなる群より選択される１つの置換である、項目５８に記載の融合タンパク質。
６０．前記抗体は配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（Ｐ４）の置換、および配列番号４に対してＶＨ－ＣＤＲ２のスレオニン９の置換を含む、項目５９に記載の融合タンパク質。
６１．前記プロリン４（Ｐ４）の置換は、Ｐ４→Ｆ４（Ｐ４Ｆ）、Ｐ４→Ｌ４（Ｐ４Ｌ）、Ｐ４→Ｍ４（Ｐ４Ｍ）、Ｐ４→Ｗ４（Ｐ４Ｗ）、およびＰ４→Ｉ４（Ｐ４Ｉ）からなる群より選択される１つの置換であり、前記スレオニン９（Ｔ９）の置換は、Ｔ９→Ｈ９（Ｔ９Ｈ）、Ｔ９→Ｆ９（Ｔ９Ｆ）、Ｔ９→Ｌ９（Ｔ９Ｌ）、Ｔ９→Ｍ９（Ｔ９Ｍ）、Ｔ９→Ｗ９（Ｔ９Ｗ）、およびＴ９→Ｉ９（Ｔ９Ｉ）からなる群より選択される１つの置換である、項目６０に記載の融合タンパク質。
６２．前記抗体は配列番号５に対してＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（Ｖ１６）の置換を含む、項目８、１２、１６、２０、２４、２８、３１、３４、３７、４０、４３、４９、５２、または５５に記載の融合タンパク質。
６３．前記バリン１６（Ｖ１６）の置換は、Ｖ１６→Ｆ１６（Ｖ１６Ｆ）、Ｖ１６→Ｅ１６（Ｖ１６Ｅ）、およびＶ１６→Ｗ１６（Ｖ１６Ｗ）からなる群より選択される１つの置換である、項目６２に記載の融合タンパク質。
６４．前記抗体は配列番号２０に対してＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（Ｌ９）の置換を含む、項目８、１２、１６、２０、２４、２８、３１、３４、３７、４０、４３、４９、５２、または５５に記載の融合タンパク質。
６５．前記ロイシン９（Ｌ９）の置換は、Ｌ９→Ｗ９（Ｌ９Ｗ）、Ｌ９→Ｉ９（Ｌ９Ｉ）、Ｌ９→Ｖ９（Ｌ９Ｖ）、Ｌ９→Ｙ９（Ｌ９Ｙ）、およびＬ９→Ｆ９（Ｌ９Ｆ）からなる群より選択される１つの置換である、項目６４に記載の融合タンパク質。
６６．前記抗体は、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のプロリン４（Ｐ４）、配列番号４に対するＶＨ－ＣＤＲ２のスレオニン９（Ｔ９）、配列番号５に対するＶＨ－ＣＤＲ３のバリン１６（Ｖ１６）、および配列番号２０に対するＶＨ－ＣＤＲ１のロイシン９（Ｌ９）からなる群より選択される２つ以上の置換を含む、項目８、１２、１６、２０、２４、２８、３１、３４、３７、４０、４３、４９、５２、または５５に記載の融合タンパク質。
６７．前記抗体は、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｗ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｉ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｍ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、Ｌ９Ｆ／Ｐ４Ｗ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅ、およびＬ９Ｆ／Ｐ４Ｆ／Ｔ９Ｈ／Ｖ１６Ｅからなる群より選択される２つ以上の置換を含む、項目６６に記載の融合タンパク質。
６８．項目１～６７のいずれかに記載の融合タンパク質を個体に投与する工程を含む、前記個体の補体経路関連疾患または障害を治療する方法。
６９．前記疾患または障害は、黄斑変性（ＭＤ）、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）、虚血再灌流障害、関節炎、関節リウマチ、狼瘡、潰瘍性大腸炎、卒中、手術後の全身性炎症症候群、喘息、アレルギー性喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、発作性夜間ヘモグロビン尿症（ＰＮＨ）症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、多発性硬化症、臓器移植後臓器機能障害、抗体関連型拒絶、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、網膜中心静脈閉塞症（ＣＲＶＯ）、網膜中心動脈閉塞症（ＣＲＡＯ）、表皮水疱症、敗血症、臓器移植、炎症（心肺バイパス手術および腎臓透析に関連する炎症が挙げられるがこれらに限定されない）、Ｃ３糸球体症、膜性腎症、ＩｇＡ腎症、糸球体腎炎（抗好中球細胞質抗体（ＡＮＣＡ）関連糸球体腎炎、ループス腎炎、およびそれらの組合せが挙げられるがこれらに限定されない）、ＡＮＣＡ関連血管炎、志賀毒素誘発性ＨＵＳ、ならびに抗リン脂質抗体誘発性妊娠損失、またはそれらの任意の組合せからなる群より少なくとも選択される、項目６８に記載の方法。
７０．個体の補体系の活性を下げる方法であって、前記方法は経腸投与、非経口投与、およびそれらの組合せからなる群より選択される投与経路を介して抗体を前記個体に投与することを含み、前記抗体は項目１～６７のいずれかに記載に融合タンパク質である、方法。
７１．前記抗体はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）２、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、およびそれらの組合せからなる群より選択される抗体断片である、項目７０に記載の方法。
７２．項目１～６７の少なくとも１項に記載の融合タンパク質を含む細胞。
７３．項目１～６７の少なくとも１項に記載の融合タンパク質を産生する、項目７２に記載の細胞。
７４．ハイブリドーマである、項目７３に記載の細胞。
７５．ヒトＣ５を発現する、ヒト以外の遺伝子改変動物。
７６．げっ歯類である、項目７５に記載のヒト以外の遺伝子改変動物。
７７．マウスである、項目７６に記載のヒト以外の遺伝子改変動物。
７８．ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスである、項目７６に記載のヒト以外の遺伝子改変動物。
７９．ＦｃＲｎ／ＳＣＩＤマウスである、項目７６に記載のヒト以外の遺伝子改変動物。
８０．抗Ｃ５抗体部分とＦＨまたはその機能性断片とを含む融合タンパク質。
８１．前記抗Ｃ５部分は少なくとも１つのヒスチジン置換を含む、項目８０に記載のタンパク質。
８２．前記抗Ｃ５部分はＩｇＧ４鎖を含む、項目８０に記載のタンパク質。
８３．前記ＩｇＧ４鎖はＰＬＡ変異を含む、項目８２に記載のタンパク質。
８４．前記ＦＨまたはその機能性断片はＦＨタンパク質のドメイン１～５を含む、項目８０に記載のタンパク質。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【図51】

【図52】

【図53】

【図54】

【図55】

【図56】

【図57】

【図58】

【図59】

【図60】

【図61】

【図62A】

【図62B】

【図63A】

【図63B】

【図64A】

【図64B】

【図65A】

【図65B】

【図66】

【図67】

【図68】

【図69A】

【図69B】

【配列表】

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