特許 7706025 多嚢胞性卵巣症候群の治療及び／又は予防するための製剤およびその製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2025-07-02

(45)【発行日】2025-07-10

(54)【発明の名称】多嚢胞性卵巣症候群の治療及び／又は予防するための製剤およびその製造方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/605 20060101AFI20250703BHJP

   A61P 15/08 20060101ALI20250703BHJP

【ＦＩ】

A61K36/605

A61P15/08

【請求項の数】 10

(21)【出願番号】P 2024552485

(86)(22)【出願日】2023-03-03

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2025-03-13

(86)【国際出願番号】 CN2023079443

(87)【国際公開番号】W WO2023165584

(87)【国際公開日】2023-09-07

【審査請求日】2024-09-12

(31)【優先権主張番号】202210211599.8

(32)【優先日】2022-03-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】522069873

【氏名又は名称】ベイジン ウィ－ハンド－バイオ ファーマスーティカル カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＢＥＩＪＩＮＧ ＷＥＨＡＮＤ－ＢＩＯ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３０ Ｔｉａｎｆｕ Ｓｔｒｅｅｔ， Ｄａｘｉｎｇ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂａｓｅ， Ｚｈｏｎｇｇｕａｎｃｕｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐａｒｋ Ｂｅｉｊｉｎｇ， １０２６００， Ｃｈｉｎａ

(73)【特許権者】

【識別番号】522069884

【氏名又は名称】グアンシー ウィ－ハンド－バイオ ファーマスーティカル カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＧＵＡＮＧＸＩ ＷＥＨＡＮＤ－ＢＩＯ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．１６ Ｊｉｎｃｈｅｎｇ Ｒｏａｄ， Ｑｉｎｇｙｕａｎ Ｔｏｗｎ， Ｙｉｚｈｏｕ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｈｅｃｈｉ， Ｇｕａｎｇｘｉ ５４６３００， Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110001195

【氏名又は名称】弁理士法人深見特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】劉 玉 玲

(72)【発明者】

【氏名】劉 圓 圓

(72)【発明者】

【氏名】李 慧 娟

(72)【発明者】

【氏名】劉 東 東

(72)【発明者】

【氏名】劉 志 華

(72)【発明者】

【氏名】王 新 剛

(72)【発明者】

【氏名】陳 艷 敏

(72)【発明者】

【氏名】王 ▲ティン▼ ▲ティン▼

(72)【発明者】

【氏名】鄒 媛 媛

(72)【発明者】

【氏名】楊 紅 振

(72)【発明者】

【氏名】高 麗 麗

【審査官】伊藤 基章

(56)【参考文献】

【文献】中国特許出願公開第１１３１４３９９７（ＣＮ，Ａ）

【文献】中国特許出願公開第１１４０１０６８３（ＣＮ，Ａ）

【文献】中国特許出願公開第１１０８９８０６０（ＣＮ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

桑の抽出物を有効成分として含む多嚢胞性卵巣症候群の治療及び／又は予防するための製剤であって、
前記桑の抽出物における各成分の重量含有量が
アルカロイド ３０～９９％、
多糖類 ０．２～３５％、
フラボノイド ０～２％、
アミノ酸 ０～３０％、
ほかの成分 ０～２０％、
であり、
前記アルカロイドは、１－デオキシノジリマイシンを含み、
前記１－デオキシノジリマイシンの重量百分率が総アルカロイドの３０％以上である、製剤。

【請求項2】

前記多嚢胞性卵巣症候群の治療及び／又は予防は、
１）多嚢胞性卵巣症候群患者の性ホルモンの分泌レベルを調節すること、
２）多嚢胞性卵巣症候群患者の月経周期を整えること、
３）多嚢胞性卵巣患者の卵巣の多嚢胞化状態を改善すること
の少なくとも１つで表されることを特徴とする請求項１に記載の製剤。

【請求項3】

前記性ホルモンは、テストステロン、エストラジオール、黄体形成ホルモン、プロラクチン、プロゲステロン、性ホルモン結合グロブリン及び抗ミュラー管ホルモンのうちの少なくとも１種から選択されることを特徴とする請求項２に記載の製剤。

【請求項4】

前記桑の抽出物はヒト又は哺乳動物に作用することを特徴とする請求項１に記載の製剤。

【請求項5】

前記桑の抽出物は桑の枝の抽出物、桑白皮の抽出物、又は桑の葉の抽出物である、請求項１に記載の製剤。

【請求項6】

請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の製剤の製造方法であって、
１）桑科植物の粗抽出液を製造するステップと、
２）前記粗抽出液をカチオン樹脂及び／又は必要に応じ、アニオン樹脂により分離し、前記桑の抽出物を得るステップと、を含む、製剤の製造方法。

【請求項7】

前記方法はさらに、
３）ステップ２）の樹脂により分離された流出液に対してアルコール沈殿処理を実施し、上澄みを収集するステップと、
４）前記上澄みに対して濃縮乾燥処理を実施するステップと、を含むことを特徴とする請求項６に記載の製剤の製造方法。

【請求項8】

前記方法はさらに、
ステップ２）の樹脂により分離された流出液に対して濃縮乾燥処理を実施するステップを含むことを特徴とする請求項６に記載の製剤の製造方法。

【請求項9】

前記桑の抽出物における各成分の重量含有量が
アルカロイド ４０～９９％、
多糖類 ０．２～３５％、
フラボノイド ０～２％、
アミノ酸 ０～３０％、
ほかの成分 ０～２０％、
であることを特徴とする請求項１に記載の製剤。

【請求項10】

前記桑の抽出物における各成分の重量含有量が
アルカロイド ５０～９９％、
多糖類 ０．２～３５％、
フラボノイド ０～２％、
アミノ酸 ０～３０％、
ほかの成分 ０～２０％、
であり、又は、
前記桑の抽出物における各成分の重量含有量が
アルカロイド ５０～９９％、
多糖類 ０．２～２５％、
フラボノイド ０～１％、
アミノ酸 ０～２０％、
ほかの成分 ０～２０％、
である、請求項１に記載の製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は医薬分野に属し、具体的には、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）治療薬の製造における桑の枝の総アルカロイドの使用に関する。

【背景技術】

【0002】

多嚢胞性卵巣症候群（Ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｉａｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＣＯＳ）は、生殖年齢女性によくみられる内分泌疾患の１つであり、臨床上、高アンドロゲン、稀発排卵又は無排卵、及び卵巣の多嚢胞化形態への変化が現れる。ＰＣＯＳは、様々な要因によって体の性ホルモンの分泌異常を引き起こし、その結果、卵胞の成長が途中で止まり、卵胞壁が過形成し、且つ卵巣内にとどまって嚢胞となるため、不妊症や子宮頸がんなど婦人科疾患の発症率を増加させるのみならず、例えばうつ病など様々な精神障害も引き起こす。また、研究によると、妊産婦がＰＣＯＳを患っていると、関連妊娠合併症のリスクが高まるだけでなく、エピジェネティクスにより子孫が様々な「精神障害」やＰＣＯＳ等代謝性疾患を患うリスクも高まる。統計によると、ＰＣＯＳ妊婦の娘がＰＣＯＳを患うリスクは５倍も高まった。ＰＣＯＳは様々な要因によって引き起こされた生殖内分泌疾患であり、異質性が高く、患者により病態生理学的特徴に差が大きい。現在、多嚢胞性卵巣症候群の医学的治療は依然として、例えば、月経周期を調整するための経口避妊薬の服用、アンドロゲンレベルを低減するためのエチニルエストラジオールシプロテロン錠剤等の使用、妊娠を希望される患者に対するクロミッド（ＣＣ）又はレトロゾールによる排卵誘発治療など、その臨床症状に対して治療を行う段階にとどまっている。しかし、臨床治療は効果に限界がある一方で、避妊薬の服用により体液貯留、肝機能異常、うつ病などの精神疾患が生じやすく、クロミフェンやクロミッド（ＣＣ）による排卵誘発治療では、卵巣過剰刺激症候群（ＯＨＳＳ）が生じやすいなど、多くの副作用を伴う。手術治療としては、現在、腹腔鏡下卵巣多孔術及び卵巣楔状切除術が一般的であるが、腹腔鏡下卵巣多孔術は治療効果が得られなかったり、骨盤内癒着が生じたり、卵巣機能が低下したりする恐れがあり、卵巣楔状切除術は手術創が大きく、術後の卵巣周囲の組織が癒着するなどのデメリットがあるため、臨床ではあまり行われていない。これらの治療方法によるＰＣＯＳの治療は理想的でなく、重篤な副作用がありながら、一部の症状しか緩和できない。したがって、如何に安全で効果的なＰＣＯＳ治療薬を研究開発することにより、命の安全へのリスクを軽減し、生殖能力を向上させるかは、全世界的に早急に解決すべき大きな科学的課題となっている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

本発明の目的は、桑の抽出物又はその主な有効成分の新たな医薬用途を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0004】

本発明が提供する桑の抽出物又はその主な有効成分の新たな用途は下記（ａ１）～（ａ４）のいずれか１つである。
（ａ１）多嚢胞性卵巣症候群を治療するための製品の製造における桑の抽出物の使用、
（ａ２）多嚢胞性卵巣症候群を改善するための製品の製造における桑の抽出物の使用、
（ａ３）多嚢胞性卵巣症候群の治療における桑の抽出物の使用、
（ａ４）多嚢胞性卵巣症候群の改善における桑の抽出物の使用。

【0005】

前記多嚢胞性卵巣症候群の治療及び／又は改善は下記の少なくとも１つで表される。
１）多嚢胞性卵巣症候群患者の性ホルモンの分泌レベルを調節すること、
２）多嚢胞性卵巣症候群患者の月経周期を整えること、
３）多嚢胞性卵巣患者の卵巣の多嚢胞化状態を改善すること。

【0006】

中では、前記性ホルモンは、Ｔ（テストステロン）、Ｅ２（エストラジオール）、ＬＨ（黄体形成ホルモン）、ＰＲＬ（プロラクチン）、Ｐ（プロゲステロン）、ＳＨＢＧ（性ホルモン結合グロブリン）及びＡＭＨ（抗ミュラー管ホルモン）のうちの少なくとも１種から選択される。

【0007】

本発明はまた、桑の抽出物又はその主な有効成分の使用であって、下記（ｂ１）～（ｂ６）のうちの少なくとも１種における使用に関する。
（ｂ１）多嚢胞性卵巣症候群患者の性ホルモンの分泌レベルを調節する製品を製造すること、
（ｂ２）多嚢胞性卵巣症候群患者の月経周期を整える製品を製造すること、
（ｂ３）多嚢胞性卵巣患者の卵巣の多嚢胞化状態を改善する製品を製造すること、
（ｂ４）多嚢胞性卵巣症候群患者の性ホルモンの分泌レベルを調節すること、
（ｂ５）多嚢胞性卵巣症候群患者の月経周期を整えること、
（ｂ６）多嚢胞性卵巣患者の卵巣の多嚢胞化状態を改善すること。

【0008】

前記製品は薬物又は薬物製剤である。

【0009】

前記桑の抽出物は桑の枝の抽出物、桑白皮の抽出物及び／又は桑の葉の抽出物である。
或いは、前記桑の抽出物は市販の桑の枝の総アルカロイド錠剤（国薬準字Ｚ２０２００００２）として提供されることもできる。

【0010】

１つの実施の形態において、本発明に係る桑の抽出物又はその主な有効成分はＰＣＯＳ患者の卵巣の顆粒膜細胞のアポトーシスを改善することができる。

【0011】

１つの実施の形態において、本発明に係る桑の抽出物又はその主な有効成分はＰＣＯＳ患者の体重及び卵巣の重量を減少させることができる。

【0012】

桑の抽出物はＣＮ １１３１４３９９７ Ａに記載の方法を参酌して製造することができ、具体的な製造方法は、
１）桑科植物の粗抽出液を製造するステップと、
２）前記粗抽出液をカチオン樹脂、及び／又は必要に応じ、アニオン樹脂により分離し、前記桑の抽出物を得るステップと、を含む。

【0013】

前記方法はさらに、
３）ステップ２）の樹脂により分離された流出液に対してアルコール沈殿処理を実施し、上澄みを収集するステップと、
４）前記上澄みに対して濃縮乾燥処理を実施するステップと、を含んでもよい。

【0014】

前記方法はさらに、ステップ２）の樹脂により分離された流出液に対して濃縮乾燥処理を実施するステップを含んでもよい。

【0015】

前記桑の抽出物はヒト又は哺乳動物に作用する。

【0016】

前記桑科植物は、カントングワ、ログワ、マグワ、テンジクグワ、ヤマグワ又は雑種桑から選択されることができ、前記雑種桑は、好ましくは粤桑１１号、桂桑優６２号又は桑特優２号である。前記植物の葉、根、枝、皮、芽、茎、果実などの様々な部分を使用できる。

【0017】

前記桑の抽出物は桑のアルカロイドの抽出物であってもよい。

【0018】

本発明の１つの実施の形態において、前記桑の抽出物はアルカロイド、多糖類類、フラボノイド及びアミノ酸を含む。

【0019】

好ましくは、前記アルカロイドは１－デオキシノジリマイシン（１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ又はＤＮＪ）、Ｎ－メチル－１－デオキシノジリマイシン（Ｎ－ｍｅｔｈｌｙ－１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ）、ファゴミン（ｆａｇｏｍｉｎｅ又はＦＡＧ）、３－ｅｐｉ－ファゴミン（３－ｅｐｉ－ｆａｇｏｍｉｎｅ）、１，４－ジデオキシ－１，４－イミノ－Ｄ－アラビニトール（１，４－ｄｉｄｅｏｘｙ－１，４－ｉｍｉｎｏ－Ｄ－ａｒａｂｉｎｉｔｏｌ又はＤＡＢ）、カリステギンＢ２（ｃａｌｙｓｔｅｇｉｎＢ２）、カリステギンＣ１（ｃａｌｙｓｔｅｇｉｎＣ１）、２－Ｏ－（α－Ｄ－ガラクトピラノシル）－１－デオキシノジリマイシン（２－Ｏ－（α－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）－１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ）、６－Ｏ－（β－Ｄ－グルコピラノシル）－１－デオキシノジリマイシン（６－Ｏ－（β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）－１－ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ）、１，４－ジデオキシ－１，４－イミノ－（２－Ｏ－β－Ｄ－グルコピラノシル）－Ｄ－アラビニトール（１，４－ｄｉｄｅｏｘｙ－１，４－ｉｍｉｎｏ－（２－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ）－Ｄ－ａｒａｂｉｎｉｔｏｌ）のうちの少なくとも１種を含む。

【0020】

中では、ＤＮＪの重量百分率が総アルカロイドの３０％以上である。好ましくは、ＤＮＪの重量百分率が総アルカロイドの４０％以上である。より好ましくは、ＤＮＪの重量百分率が総アルカロイドの５０％以上である。

【0021】

好ましくは、前記桑の抽出物に対して、各成分の重量含有量が以下のとおりである。
アルカロイド ３～９９％
多糖類 ０．２～７０％
フラボノイド ０～１０％
アミノ酸 ０～５０％
ほかの成分 ０～２５％

【0022】

好ましくは、前記桑の抽出物に対して、各成分の重量含有量が以下のとおりである。
アルカロイド ３０～９９％
多糖類 ０．２～３５％
フラボノイド ０～２％
アミノ酸 ０～３０％
ほかの成分 ０～２０％

【0023】

より好ましくは、前記桑の抽出物に対して、各成分の重量含有量が以下のとおりである。
アルカロイド ５０～９９％
多糖類類 ０．２～３５％
フラボノイド ０～２％
アミノ酸 ０～３０％
ほかの成分 ０～２０％

【0024】

アルカロイドの含有量が６０～７０％又は７０～８０％であってもよい。

【0025】

さらに好ましくは、前記桑の抽出物に対して、各成分の重量含有量が以下のとおりである。
アルカロイド ５０～９９％
多糖類 ０．２～２５％
フラボノイド ０～１％
アミノ酸 ０～２０％
ほかの成分 ０～２０％

【0026】

１つの実施の形態において、前記桑の抽出物の製造は、粗抽出液を製造するステップ、必要に応じ、カチオン樹脂及び／又はアニオン樹脂により分離するステップ、必要に応じ、樹脂により分離された流出液に対してアルコール沈殿処理を実施するステップ、及び必要に応じ、濃縮乾燥処理ステップを含む。好ましくは、前記桑の抽出物の製造は、粗抽出液を製造するステップ１）と、カチオン樹脂、及び／又は必要に応じ、アニオン樹脂により分離するステップ２）と、必要に応じ、ステップ２）の樹脂により分離された流出液に対してアルコール沈殿処理を実施するステップ３）と、必要に応じ、濃縮乾燥処理ステップ４）とを含む。

【0027】

１つの実施の形態において、前記桑の抽出物は以下の手順に従って製造される。桑の枝、桑の葉又は桑白皮を粉砕し、水及び／又はアルコール溶液又は酸性水で加熱還流して抽出し、溶媒量を原薬材の３～２０倍とし、抽出を１～３回繰り返し、抽出液を合併し、濃縮し、カチオン交換樹脂に注入し、吸着されない不純物を蒸留水で洗い落とし、０．２～３Ｎのアンモニア水で溶出し、溶出液を濃縮し、アニオン交換樹脂に注入し、吸着されない部分を収集し、エタノールを加え、沈殿させて不純物を除去し、遠心処理し、上澄みを減圧濃縮し、又は噴霧乾燥させ、又は凍結乾燥させ、抽出物を得た。

【0028】

１つの実施の形態において、前記桑の抽出物は以下の手順に従って製造される。桑の枝、桑の葉又は桑白皮を粉砕し、水及び／又はアルコール溶液又は酸性水で加熱還流して抽出し、溶媒量を原薬材の３～２０倍とし、抽出を１～３回繰り返し、抽出液を合併し、濃縮し、カチオン交換樹脂に注入し、吸着されない不純物を蒸留水で洗い落とし、０．２～３Ｎのアンモニア水で溶出し、溶出液を濃縮し、アニオン交換樹脂に注入し、吸着されない部分を収集し、減圧濃縮し、又は噴霧乾燥させ、又は凍結乾燥させ、抽出物を得た。

【0029】

１つの実施の形態において、前記桑の抽出物は以下の手順に従って製造される。桑の枝、桑の葉又は桑白皮を粉砕し、水及び／又はアルコール溶液又は酸性水で加熱還流して抽出し、溶媒量を原薬材の３～２０倍とし、抽出を１～３回繰り返し、抽出液を合併し、濃縮し、カチオン交換樹脂に注入し、吸着されない不純物を蒸留水で洗い落とし、０．２～３Ｎのアンモニア水で溶出し、溶出液を減圧濃縮し、又は噴霧乾燥させ、又は凍結乾燥させ、抽出物を得た。

【0030】

１つの実施の形態において、前記桑の抽出物は以下の手順に従って製造される。桑の枝、桑の葉又は桑白皮を粉砕し、水で加熱還流して抽出し、溶媒量を原薬材の３～２０倍とし（好ましくは４～１５倍），抽出を１～３回繰り返し（抽出時間は好ましくは０．５～３ｈ／回）、抽出液を合併し、濃縮し、カチオン交換樹脂に注入し、吸着されない不純物を蒸留水で洗い落とし、０．２～３Ｎのアンモニア水で溶出し、溶出液を濃縮し、アニオン交換樹脂に注入し、吸着されない部分を収集し、エタノールを加え、沈殿させて不純物を除去し、遠心処理し、上澄みを減圧濃縮し、又は噴霧乾燥させ、又は凍結乾燥させ、抽出物を得た。

【0031】

好ましくは、カチオン樹脂をカラムに充填した後、酸性溶液の通液、塩基性溶液の通液、酸性溶液の通液の順で活性化する。好ましくは、溶出液のｐＨが８．０～９．５、好ましくは８．５～９．５となるまで塩基性溶液の通液を行う。好ましくは、前記塩基性溶液は、アンモニア水溶液、水酸化ナトリウム溶液、水酸化カリウム溶液又は炭酸ナトリウム溶液から選択される。好ましくは、前記塩基性溶液の濃度は０．５～４ｍｏｌ／Ｌとする。好ましくは、溶出液のｐＨが３．０～７．０、好ましくは４．５～６．５となるまで酸性溶液の通液を行う。好ましくは、前記酸性溶液は、塩酸溶液、リン酸溶液、リン酸性水素二ナトリウム－クエン酸緩衝液から選択される。必要に応じ、前記カチオン樹脂は、最終回の酸性溶液の通液を行った後、さらにカラム体積に対して３～５倍の脱イオン水で洗浄してもよい。好ましくは、前記カチオン樹脂は、７３２型強酸性スチレン系カチオン交換樹脂、７３４型強酸性スチレン系カチオン交換樹脂及びＤ００１型マクロポーラス強酸性スチレン系カチオン交換樹脂である。

【0032】

好ましくは、前記カチオン樹脂の使用量と植物原材料の投入量との重量比は１：２～２０である。植物粗抽出液をカチオン樹脂に注入した後、溶出剤により注入後のカチオン樹脂に対して溶出を行う。好ましくは、前記溶出剤の濃度は０．５～２．５ｍｏｌ／Ｌである。好ましくは、溶出剤の流速は５～１０ＢＶ／ｈである。

【0033】

好ましくは、前記アニオン樹脂は７１７型強塩基性スチレン系アニオン交換樹脂、Ｄ２０１型マクロポーラス強塩基性スチレン系アニオン交換樹脂及びＤ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン交換樹脂である。好ましくは、前記アニオン樹脂の使用量と植物原材料の投入量との重量比は１：１～３２である。液体がアニオン樹脂から流出すると、収集を開始する。好ましくは、収集液の体積が植物原材料の投入重量に対して０．１～５倍となる時点で収集を停止する。

【0034】

好ましくは、アルコール沈殿処理に用いられるエタノールと植物原材料の投入量との重量比は１：２０～３００である。アルコール沈殿処理において、撹拌速度は４０～５００ｒｐｍである。

【0035】

好ましくは、前記薬物はさらに、薬学的に許容される担体を含む。前記担体は、投与経路又は投与方法に適し、人体に毒性作用を及ぼさない不活性成分である。前記担体は固体賦形剤であってもよく、液体賦形剤であってもよい。固体賦形剤としては、例えば、微結晶セルロース、マンニトール、ラクトース、アルファー化デンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、架橋ポビドン、カルボキシメチルデンプンナトリウム、アスパルテーム、リン酸水素カルシウム、乳酸ナトリウム、ポロキサマー、ラウリル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ゼラチン、キサンタンガム、ポビドン、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、カルボキシメチルデンプンナトリウム及びタルクが挙げられる。液体賦形剤としては、例えば、水、エタノール、シロップ及びグリセリンが挙げられる。

【0036】

好ましくは、前記薬物は経口投与剤形であり、さらに好ましくは、前記薬物は錠剤、カプセル剤、経口液剤、経口乳剤、丸剤、顆粒剤、シロップ剤及び散剤である。

【0037】

本発明さらに、多嚢胞性卵巣症候群を予防及び／又は治療する方法であって、対象動物又はヒトに前記桑の抽出物又はその主な有効成分を投与することにより、多嚢胞性卵巣症候群を予防及び／又は治療するステップを含む、方法を提供する。

【0038】

本発明では、前記動物は哺乳動物であってもよい。

【発明の効果】

【0039】

ＰＣＯＳは複数の要因によって引き起こされる代謝性疾患であり、漢方薬は複数の成分を有し、複数の標的で薬効を発揮することができ、且つ副作用が少なく、安全性が高いなどの利点を有する。

【0040】

本発明は薬効学的試験により下記のことを証明した。
１．ＳＺ－ＡはＰＣＯＳラットの卵巣重量を減少させ、卵巣の病状を改善することができる。
２．ＳＺ－Ａ投与群は介入プロセスでＰＣＯＳラットの発情周期を整える。
３．ＳＺ－Ａ薬物はＰＣＯＳラットの性ホルモンの分泌レベルを有意に調節することができる。

【0041】

本発明の具体的な実施形態又は従来の技術における技術態様をより明確に説明するために、以下、具体的な実施形態または従来の技術の説明において使用する必要がある図面を簡単に紹介するが、以下の説明における図面は本発明の一部の実施の形態であり、当業者は創意工夫をせずとも、これらの図面に基づいてほかの図面を得ることができることは明らかであろう。

【図面の簡単な説明】

【0042】

【図1】（Ａ）は投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の卵巣の形態の写真であり、（Ｃ）は投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の体重であり、（Ｂ）は投与２１日後の卵巣組織のＨＥ染色切片の結果である。

【図2】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中テストステロン（Ｔ）レベルである。

【図3】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中エストラジオール（Ｅ２）レベルである。

【図4】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中黄体形成ホルモン（ＬＨ）レベルである。

【図5】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中プロラクチン（ＰＲＬ）レベルである。

【図6】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中プロゲステロン（Ｐ）レベルである。

【図7】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中ＡＭＨレベルである。

【図8】実験例９で投与２１日後のブランク群、モデル群、投与群の動物の血清中ＳＨＢＧレベルである。

【図9】実験例１０で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の血清中Ｔレベルである。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。

【図10】実験例１１で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の血清中Ｔレベル、ＳＨＢＧレベル、Ｅ２レベル、Ｐレベルである。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。

【図11】実験例１１で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の卵巣の病理切片である。

【図12】実験例１１で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の卵胞数及び黄体数である。

【図13】実験例１１における治療期間中のラットの発情周期の分析グラフであり、（Ａ）は各実験群の代表的な発情周期であり、（Ｂ）は各実験動物の発情周期の定量的分析であり、ただし、Ｍ／Ｄは、発情後期／発情休止期を表し、Ｅは、発情期を表し、Ｐは、発情前期を表す。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。

【図14】実験例１１で実験規模拡大後（１８匹／群）の治療期間中のラットの発情周期の分析グラフであり、（Ａ）は各実験群の代表的な発情周期であり、（Ｂ）は各実験動物の発情周期の定量的分析であり、ただし、Ｍ／Ｄは、発情後期／発情休止期を表し、Ｅは、発情期を表し、Ｐは、発情前期を表す。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。★は、Ｄｉａｎｅ－３５群と比べ、ＳＺ－Ａ群のＰ＜０．０５を表し、★★は、Ｄｉａｎｅ－３５群と比べ、ＳＺ－Ａ群のＰ＜０．０１を表す。

【図15】実験例１２で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の血清中Ｔレベル、Ｅ２レベルである。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。

【図16】実験例１２で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の卵巣の病理切片である。

【図17】実験例１２で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の卵胞数及び黄体数である。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０１を表す。＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０１を表す。

【図18】実験例１３で投与２１日後のブランク（ｂｌａｎｋ）群、モデル（ｍｏｄｅｌ）群、投与群の動物の血清中Ｔレベル、ＡＭＨレベル、ＧｎＲＨレベル、ＳＨＢＧレベルである。＃は、ｂｌａｎｋ群と比べ、ｍｏｄｅｌ群のＰ＜０．０５を表し、＃＃は、Ｐ＜０．０１を表し、＊は、ｍｏｄｅｌ群と比べ、投与群のＰ＜０．０５を表し、＊＊は、Ｐ＜０．０１を表す。

【発明を実施するための形態】

【0043】

以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明する。これらの例示的な説明により、本発明の特徴及び利点がより明確になる。ただし、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。前記方法は、特に断りのない限り、すべて常法である。前記原材料は、特に断りのない限り、公開された商業経路から入手できるものである。

【0044】

ここの用語「例示的」とは、「例、実施例として用いられることまたは説明的なもの」を意味する。ここで「例示的」に説明されるいかなる実施例は他の実施例よりも優れると解釈されるべきではない。

【0045】

また、以下に説明する本発明の各実施形態における構成は、互いに矛盾するものでなければ、組み合わせることができる。

【0046】

本発明に係る成分含有量は、公開された方法により測定される（公開番号がＣＮ１１１０７７２４７Ａ及びＣＮ１１０３９３７３８Ａの特許に記載された方法を参照）。

【0047】

桑の抽出物の効果検証部分における略語は以下のとおりである。
Ｔ（テストステロン）、Ｅ２（エストラジオール）、ＬＨ（黄体形成ホルモン）、Ｐ（プロゲステロン）、ＰＲＬ（プロラクチン）、ＬＥＰ（レプチン）、ＳＨＢＧ（性ホルモン結合グロブリン）、ＡＭＨ（抗ミュラー管ホルモン）、ＧｎＲＨ（ゴナドトロピン放出ホルモン）。

【0048】

各ホルモンの測定方法は以下のとおりである。
Ｅ２：エストラジオール放射性免疫測定キット取扱説明書－原子高科股フン有限公司（国薬準字Ｓ２００３３０１０）；
ＬＨ：ヨウ素[^１２５Ｉ]ヒト黄体形成ホルモン放射性免疫測定キット（国薬準字Ｓ１０９５０１６１）；
ＰＲＬ：ヨウ素[^１２５Ｉ]プロラクチン放射性免疫測定キット取扱説明書（国薬準字Ｓ１０９５０１６１）；
Ｔ：ヨウ素[^１２５Ｉ]テストステロン放射性免疫測定キット取扱説明書（国薬準字Ｓ１０９４００９３）；
各動物の血清中ＡＤＰ、ＧｎＲＨ、ＳＨＢＧ及びＡＭＨはＥｌｉｓａキットを用いて測定する。
Ｐ：プロゲステロン放射性免疫測定キット取扱説明書－天津市協和医薬科技有限公司（国薬準字Ｓ１０９５０２０２）；

【実施例】

【0049】

一．桑の抽出物の製造実例

【0050】

実施例１ 桑の抽出物の製造１
新鮮な桑の枝（テンジクグワ粤桑１１号）１０００ｋｇを粉砕した後、水４０００Ｌを加え、加熱還流法により２ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過して不溶物を除去し、粗抽出液を得た。粗抽出液を固形物の質量パーセント含有量が４％になるまで熱濃縮し、５０℃に保持してカチオン樹脂カラムへの注入液とした。

【0051】

Ｄ１１３型マクロポーラス弱酸性アリルベンゼンカチオン樹脂１５０ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが８．５となるまで１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、さらにカラム体積に対して５倍の脱イオン水で洗浄することで、活性化した。濃縮処理された抽出液を注入し、そして２．５ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水１０００Ｌを用いて６ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、カチオンカラムの流出液のｐＨ＞７を検出すると、溶出液を収集し、収集液が９００Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0052】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂６２．５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液が８７０Ｌになるまで流出液を収集した。

【0053】

収集液を遠心処理して不純物を除去した後、逆イオン浸透膜による濃縮を行い、濃縮後の液体比重が１．２５となり、これをアルコール沈殿タンク内に移し、撹拌ブレード５００ｒｐｍの条件下で無水エタノール２５Ｌを加えた。エタノールの添加完了後、撹拌を停止し、２４ｈアルコール沈殿し、上澄みを減圧濃縮することで、抽出物エキスを得た。

【0054】

流出液を減圧濃縮することで、桑の枝の抽出物エキスを得、そのうち、アルカロイドの質量パーセント含有量が５２％（アルカロイドにおいて、ＤＮＪの質量パーセント含有量が６９．５％であり、ＤＡＢの質量パーセント含有量が１１．５％であり、ＦＡＧの質量パーセント含有量が１５％であった）であり、多糖類の質量パーセント含有量が２２％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．８％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が２０％であった。

【0055】

実施例２ 桑の抽出物の製造２
新鮮な桑の枝（桑特優２号）１０ｋｇを粉砕した後、水１５０Ｌを２回に分けて加え、毎回煎出法により３ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過して不溶物を除去した。抽出液を固形物の質量パーセント含有量が８％になるまで熱濃縮し、これをアルコール沈殿タンク内に移し、撹拌ブレード３００ｒｐｍの条件下で無水エタノール２３６７．９ｇ（３Ｌ）を加えた。エタノールの添加完了後、撹拌を停止し、２４ｈアルコール沈殿し、上澄みをカチオン樹脂カラムへの注入液とした。００２ＳＣ型強酸性スチレン系カチオン樹脂５ｋｇをカラムに充填し、実施例１の方法に従ってカチオン樹脂を活性化した。濃縮及びアルコール沈殿処理された抽出液を注入し、次に、５ｍｏｌ／Ｌの塩化カリウム１００Ｌを用いて５ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、２０％のシリコタングステン酸により流出液を測定し、白い沈殿物が生じると、収集を開始し、収集液が２５Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0056】

７１１型強塩基性スチレン系アニオン樹脂１０ｋｇをカラムに充填し、実施例１の方法に従ってアニオン樹脂を活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液を収集し、流出液が１５Ｌになると、収集を停止した。收集液を再度カチオン樹脂に注入し、上記の方法に従ってカチオン樹脂とアニオン樹脂の順で再度２回分離した。

【0057】

カラム分離が３回行われて得られた収集液を遠心処理して不純物を除去した後、逆イオン浸透膜による濃縮を行い、濃縮後の液体比重が１．２５となり、これをアルコール沈殿タンク内に移し、撹拌ブレード１０００ｒｐｍの条件下で無水エタノール１２５ｇを加えた。エタノールの添加完了後、撹拌を停止し、２４ｈアルコール沈殿し、上澄みを減圧濃縮することで、抽出物エキスを得た。また、上記方法と同じ抽出方法及び条件で、新鮮な桑白皮及び桑の葉（桑特優２号）の抽出を行った。

【0058】

得られた桑の枝の抽出物は、アルカロイドの質量パーセント含有量が９８％であり、多糖類の質量パーセント含有量が０．２％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．０５％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が０であった。

【0059】

得られた桑白皮の抽出物では、アルカロイドの質量パーセント含有量が９５％であり、多糖類の質量パーセント含有量が２％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．１％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が１％であった。

【0060】

得られた桑の葉の抽出物では、アルカロイドの質量パーセント含有量が９０％であり、多糖類の質量パーセント含有量が４％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．１％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が３％であった。

【0061】

実施例３ 桑の抽出物の製造３
新鮮な桑の枝（カントングワ）１０００ｋｇを粉砕した後、水１１５００Ｌを加え、２ｈ加熱還流して抽出を行い、抽出液を合併し、ろ過して不溶物を除去し、粗抽出液を得た。粗抽出液を遠心処理して不純物を除去した後、固形物の質量パーセント含有量が１％になるまで逆イオン浸透膜により濃縮し、カチオン樹脂カラムへの注入液とした。

【0062】

Ｄ００１型マクロポーラス強酸性スチレン系カチオン樹脂３００ｋｇをカラムに充填し、製造例１の方法に従ってカチオン樹脂を活性化した。濃縮処理された粗抽出液を注入し、０．０４ｍｏｌ／Ｌの硝酸アンモニウム５０００Ｌを用いて５ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、２０％のシリコタングステン酸により流出液を測定し、白い沈殿物が生じると、収集を開始し、収集液が１０００Ｌになると、収集を停止した。

【0063】

カチオンカラムによる分離を経て得られた収集液をナノろ過膜により濃縮し、減圧濃縮することで抽出物エキスを得た。

【0064】

得られた桑の枝の抽出物は、アルカロイドの質量パーセント含有量が１５％であり、多糖類の質量パーセント含有量が２０％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が７％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が４５％であった。

【0065】

実施例４ 桑の抽出物の製造４
干された桑の枝（粤桑１１号）３３３ｋｇを粉砕した後、水４０００Ｌを加え、加熱還流法により２回分けて抽出し、毎回、１ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過し、抽出液を１ｋｇ生薬量／Ｌまで濃縮した。

【0066】

Ｄ１１３型マクロポーラス弱酸性アリルベンゼンカチオン樹脂１５０ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが８．５となるまで１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、さらにカラム体積に対して５倍の脱イオン水で洗浄することで、活性化した。濃縮処理された抽出液を注入し、そして２．５ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水１０００Ｌを用いて６ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、カチオンカラムの流出液のｐＨ＞７を検出すると、溶出液を収集し、収集液が９００Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0067】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂１２５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液が８７０ＬになるまでｐＨが８よりも高い流出液を収集した。

【0068】

アニオンカラムによる分離を経て得られた収集液を精密ろ過膜によりろ過して不純物を除去した後、逆イオン浸透膜により濃縮し、濃縮後の液体比重が１．１となり、これをアルコール沈殿タンク内に移し、撹拌ブレード４００ｒｐｍの条件下で無水エタノール１５ｋｇを加えた。エタノールの添加完了後、撹拌を停止し、２４ｈアルコール沈殿し、上澄みを減圧濃縮することで、桑の枝の抽出物エキスを得た。試料の含有量は、アルカロイドの質量パーセント含有量が８０％であり、多糖類の質量パーセント含有量が５％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．１％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が４％であった。

【0069】

実施例５ 桑の抽出物の製造５
干された桑の枝（粤桑１１号）４００ｋｇを粉砕した後、水４０００Ｌを加え、加熱還流法により２回分けて抽出し、毎回、１ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過し、抽出液を１ｋｇ生薬量／Ｌまで濃縮した。

【0070】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂６２．５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集された抽出濃縮液をアニオン樹脂に注入し、流出液を収集した。

【0071】

アニオンカラムによる分離を経て得られた収集液を精密ろ過膜によりろ過して不純物を除去した後、逆イオン浸透膜により濃縮し、さらに減圧濃縮して乾燥させて桑の枝の抽出物エキスを得た。試料の含有量は、アルカロイドの質量パーセント含有量が３％であり、多糖類の質量パーセント含有量が７０％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が１０％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が１０％であった。

【0072】

実施例６ 桑の抽出物の製造６
新鮮な桑の枝（テンジクグワ粤桑１１号）１５００ｋｇを粉砕した後、水６０００Ｌを加え、加熱還流法により２ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過して不溶物を除去し、粗抽出液を得た。粗抽出液を固形物の質量パーセント含有量が４％になるまで熱濃縮し、５０℃に保持してカチオン樹脂カラムへの注入液とした。

【0073】

Ｄ１１３型マクロポーラス弱酸性アリルベンゼンカチオン樹脂１００ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが８．５となるまで１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、さらにカラム体積に対して５倍の脱イオン水で洗浄することで、活性化した。濃縮処理された抽出液を注入し、そして２．５ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水１０００Ｌを用いて６ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、カチオンカラムの流出液のｐＨ＞７を検出すると、溶出液を収集し、収集液が９００Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0074】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂６２．５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液が８７０Ｌになるまで流出液を収集した。流出液を減圧濃縮することで、桑の枝の抽出物エキスを得、そのうち、アルカロイドの質量パーセント含有量が３０％であり、多糖類の質量パーセント含有量が３５％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が２％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が２５％であった。

【0075】

実施例７ 桑の抽出物の製造７
新鮮な桑の枝（テンジクグワ粤桑１１号）１０００ｋｇを粉砕した後、水４０００Ｌを加え、加熱還流法により２ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過して不溶物を除去し、粗抽出液を得た。粗抽出液を固形物の質量パーセント含有量が４％になるまで熱濃縮し、５０℃に保持してカチオン樹脂カラムへの注入液とした。

【0076】

Ｄ１１３型マクロポーラス弱酸性アリルベンゼンカチオン樹脂１００ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが８．５となるまで１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、さらにカラム体積に対して５倍の脱イオン水で洗浄することで、活性化した。濃縮処理された抽出液を注入し、そして２．５ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水１０００Ｌを用いて６ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、カチオンカラムの流出液のｐＨ＞７を検出すると、溶出液を収集し、収集液が９００Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0077】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂６２．５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液が８７０Ｌになるまで流出液を収集した。流出液を減圧濃縮することで、桑の枝の抽出物エキスを得、そのうち、アルカロイドの質量パーセント含有量が４０％であり、多糖類の質量パーセント含有量が２５％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が０．５％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が２５％であった。

【0078】

実施例８ 桑の抽出物の製造８
干された桑の枝（粤桑１１号）３３３ｋｇを粉砕した後、水４０００Ｌを加え、加熱還流法により２回分けて抽出し、毎回、１ｈ抽出し、抽出液を合併し、ろ過し、抽出液を１ｋｇ生薬量／Ｌまで濃縮した。

【0079】

Ｄ１１３型マクロポーラス弱酸性アリルベンゼンカチオン樹脂１５０ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが８．５となるまで１ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが４．５となるまで２ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、さらにカラム体積に対して５倍の脱イオン水で洗浄することで、活性化した。濃縮処理された抽出液を注入し、そして２．５ｍｏｌ／Ｌのアンモニア水１０００Ｌを用いて６ＢＶ／ｈの溶出速度で溶出し、カチオンカラムの流出液のｐＨ＞７を検出すると、溶出液を収集し、収集液が９００Ｌになると、収集を停止し、収集液をそのままアニオンカラムで精製した。

【0080】

Ｄ２１８型マクロポーラス強塩基性アクリル系アニオン樹脂６２．５ｋｇをカラムに充填し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、溶出液のｐＨが３．５となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの塩酸溶液を通液し、溶出液のｐＨが９．０となるまで１．５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム溶液を通液し、活性化した。収集されたカチオン樹脂の溶出液をアニオン樹脂に注入し、流出液が８７０ＬになるまでｐＨが８よりも高い流出液を収集した。

【0081】

アニオンカラムによる分離を経て得られた収集液を精密ろ過膜によりろ過して不純物を除去した後、逆イオン浸透膜により濃縮し、濃縮後の液体比重が１．１となり、これをアルコール沈殿タンク内に移し、撹拌ブレード４００ｒｐｍの条件下で無水エタノール１５ｋｇを加えた。エタノールの添加完了後、撹拌を停止し、２４ｈアルコール沈殿し、上澄みを減圧濃縮することで、桑の枝の抽出物エキスを得た。試料の含有量は、アルカロイドの質量パーセント含有量が６３％であり、多糖類の質量パーセント含有量が２３％であり、フラボノイドの質量パーセント含有量が１％であり、アミノ酸の質量パーセント含有量が５％であった。

【0082】

二．桑の抽出物の効果検証

【0083】

実験例９：多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）の予防及び／又は治療に対する桑の抽出物の薬力学試験
１実験スキーム
１．１実験動物
２３日齢で離乳したばかり、健康状態が良好で、毛並みに光沢のある雌ＳＤラット９匹をＳＰＦレベルで飼育した。

【0084】

１．２実験薬物
ＤＨＥＡ（デヒドロエピアンドロステロン）：３０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇのＤＨＥＡを１００μＬの無水エタノールに溶解し、次いで大豆油を９００μＬ添加したもの。
１％ＣＭＣ：ＣＭＣを１ｇ秤量し、純水１００ｍＬに加え、マグネチックスターラーに置いて、温度６０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＣＭＣが完全に溶解して透明になるまで撹拌したもの。
実施例１で製造された桑の抽出物ＳＺ－Ａを異なる濃度に調製し、１％のＣＭＣ溶液に溶解した。

【0085】

１．３モデリングと投与
ブランク群（３匹）の後頸部に等量のオイルを皮下注射し、モデル群（６匹）の後頸部にＤＨＥＡ溶液０．２ｍＬ／１００ｇ（６０ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射した。投与回数が１日１回で、合計２１日間注射した。

【0086】

モデリングの１１日目から、毎朝の８時にラット膣分泌物を採取し、ラットに対して２周期（約１０日間）の膣スメア検査を行い、発情周期をモニタリングした。モデリング２１日目にそのテストステロン（Ｔ）を測定し、モデルを評価した。モデリング２１日間後に、モデル群に発情周期の乱れと高アンドロゲンが認められ、ＰＣＯＳモデリングが成功したことを示した。

【0087】

モデリングの成功後、ブランク群、モデル群、桑の抽出物ＳＺ－Ａ投与群（桑の枝の総アルカロイドを基準として１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）に無作為に分け、投与期間中、ブランク群とモデル群に等量の生理食塩水を与えた。投与２１日目に各生化学的指標を測定した。

【0088】

１．４指標観察及び測定方法
（１）投与期間中、体重、動物の精神状態を測定した。
（２）膣スメア（１周期を測定し、通常、ラットは５日間を１つの発情周期とし、投与後１５日～２０日目から測定）。
（３）血清中の関連ホルモンの発現：投与後２１日目に、Ｔ、Ｅ２、ＬＨ、ＦＳＨ、Ｐ、ＰＲＬ、ＧｎＲＨ、ＳＨＢＧ及びＡＭＨを測定した。
（４）２１日間の投与後に、ラットを殺して卵巣組織を採取し、ＨＥ染色を実施した。
（５）体重、卵巣重量を観察した。卵巣重量：ろ紙で卵巣組織の末梢血を吸引した後に秤量して統計した。
（６）統計分析：ＳＰＳＳソフトを利用して分析した。

【0089】

２．測定結果
（１）薬物によるラット体重への影響
投与２１日後の実験結果を図１（Ｃ）に示す。ブランク群と比べ、モデル群体重が有意に増加し、投与による介入後にモデルラットの体重が有意に減少した。薬物はＰＣＯＳラットの体重を有意に調整できることを示した。

【0090】

（２）薬物によるＰＣＯＳラットの発情周期への影響
膣スメアの結果、正常対照群のラットは発情前期、発情期、発情後期、発情休止期の順で規則的な発情周期を示したが、ＰＣＯＳモデル群の発情周期は不規則な変化を示した。投与群では、介入プロセスにおいて発情周期の変化が改善された。

【0091】

（３）薬物によるＰＣＯＳラットの卵巣への影響
卵巣の形態を観察し、その結果を図１（Ａ）に示す。各実験群ラットの卵巣組織の外観形態を観察したところ、ブランク群（ｂｌａｎｋ）のラットの卵巣表面は鮮やかな赤色であり、明らかに拡張した卵胞が見られず、モデル群（ｍｏｄｅｌ）の卵巣表面は青白くて大きさの異なる拡張卵胞が複数見られ、投与群では卵巣表面が血色の良く、光沢があり、モデル群に対して卵巣が青白い症状が有意に改善された。

【0092】

卵巣組織の染色切片の結果を図１（Ｂ）に示す。正常対照群のラットの卵巣組織は、光学顕微鏡下で全体として正常な構造を有し、顕微鏡下で発育段階の異なる卵胞が見られ、成熟期に近い卵胞には卵細胞及び放線冠細胞が見られ、卵胞膜の細胞層数が少なく、嚢胞性卵胞がなく、卵巣の間質細胞が密に整然と配列していた。モデル群のラットの卵巣組織は、光学顕微鏡下で全体に明らかな異常が見られ、多嚢胞化形態への変化が明らかであり、成熟期に近い卵胞に卵細胞が見られず、顆粒膜細胞が緩く配列し、層数が減少し、一部が剥がれ、放線冠細胞が見られず、卵胞膜の細胞層が厚くなっていた。薬物介入群（ＳＺ－Ａ）のラットでは、卵巣の病状が有意に改善され、すべての卵巣に黄体と複数の卵胞が見られ、成熟期に近い卵胞には卵細胞及び放線冠細胞が見られ、顆粒膜細胞が密に整然と配列し、層数が増え、卵胞膜の細胞層が薄くなっていた。

【0093】

（４）薬物によるＰＣＯＳラット血清性ホルモンレベルへの影響
結果を図２～８に示す。ブランク群と比べ、モデル群では、血清中Ｔ、ＬＨ、Ｅ２．ＰＲＬ及びＡＭＨの発現がすべて上昇し、ＳＨＢＧ及びプロゲステロンＰの発現が減少した。モデル群と比べ、投与２１日後、投与群では、Ｔ（テストステロン）、Ｅ２（エストラジオール）、ＬＨ（黄体形成ホルモン）、ＰＲＬ（プロラクチン）及びＡＭＨ等ホルモンのレベルは異なる程度に低下し、ＳＨＢＧは若干上昇した。薬物はＰＣＯＳラットの性ホルモンの分泌レベルを有意に調節できることを示した。

【0094】

実験例１０：ＬＺ誘導ＰＣＯＳモデルに対する桑の抽出物の薬力学試験
１．薬物の調製
レトロゾール（単にＬＺという）調製濃度：０．２５ｍｇ／ｍＬ、投与量：０．４ｍＬ／１００ｇ。
１％ＣＭＣ：ＣＭＣを１ｇ秤量し、純水１００ｍＬに加え、マグネチックスターラーに置いて、温度６０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＣＭＣが完全に溶解して透明になるまで撹拌したもの。
実施例１で製造された桑の抽出物ＳＺ－Ａを異なる濃度に調製し、１％のＣＭＣ溶液に溶解した。

【0095】

２．実験の群分け

【0096】

【表1】

【0097】

３．実験方法
健康状況が良好で、毛並みに光沢のある６週齡の雌ＳＤラットを１８匹選び、３日間適応的に飼育し、ブランク群、モデル群及び投与群に分けた。ブランク群のラットに基礎飼料を与えるが、モデル群及び投与群ラットに基礎飼料を与えるとともに、ＬＺ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を６ｗ強制経口投与し、ラットＰＣＯＳモデルを作成した。モデル評価に成功した後、投与群には表１に示す投与量及び投与方法に従って投与し、ブランク群及びモデル群には等量の生理食塩水を投与した。投与２１日後にサンプルを採取し、実験例９と同じ測定及び分析方法で薬効評価を実施した。

【0098】

４．結果
モデル群（ｖｓブランク群）では、テストステロン（Ｔ）レベルが有意に上昇し、ＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ）を投与して治療した後にＴレベルが有意に低下した（図９を参照）。

【0099】

実験例１１：ＬＺ＋ＨＦＤ誘導ＰＣＯＳモデルに対する桑の抽出物の薬力学試験
１．薬物の調製
実験例１０と同様にした。

【0100】

２．実験の群分け

【0101】

【表2】

【0102】

３．実験方法
健康状況が良好で、毛並みに光沢のある３週齡の雌ＳＤラットを１８匹選び、３日間適応的に飼育し、ブランク群、モデル群及び投与群に無作為に分けた。モデル群及び投与群に高脂肪飼料を３ｗ投与した後、ＬＺ（１ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を６ｗ強制経口投与するとともに、ＨＦＤ（高脂肪飼料（ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｅｔｓ Ｄ１２４９２））を投与し、ラットＰＣＯＳモデルを作成した。モデル評価に成功した後、投与群には表に示す投与量及び投与方法に従って投与し、投与期間中、ブランク群とモデル群に等量の生理食塩水を与えた。治療後の１０日～１９日目に、２周期の発情周期を測定し、治療後の２１日目に、サンプルを採取し、薬効評価を実施した。具体的な測定及び分析方法は実験例９と同じであった。

【0103】

４．結果
１．ＳＨＢＧ（性ホルモン結合グロブリン）、Ｅ２（エストラジオール）、Ｐ（プロゲステロン）モデル群（ｖｓブランク群）が有意に低下し、ＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ）が投与された後、有意に改善され、また、ＳＺ－ＡはＴ（テストステロン）発現レベルを低下させることができた（図１０を参照）。

【0104】

２．卵巣の病状
結果を図１１～１２に示す。
１）ｂｌａｎｋ群の卵巣組織は、全体として正常な構造を有し、各段階の卵胞が見られ、卵胞内の構造が明瞭で、顆粒層が多くて整然と配列し、拡張性嚢胞がなく、黄体構造が明瞭でった。
２）ｍｏｄｅｌ群の拡張性嚢胞数が有意に増加し、黄体数が減少した。
３）ＳＺ－Ａを投与して治療した後、拡張性嚢胞数が有意に減少し、黄体数が有意に増加し、卵巣の病状が有意に改善された。

【0105】

３．薬物によるＰＣＯＳラットの発情周期への影響
結果を図１３に示す。
その結果、ブランク群のラットの発情周期は約４～５日／周期と規則的であり、モデル群のラットは発情後期又は発情休止期が長かった。ＳＺ－Ａを投与して治療した後、ＰＣＯＳラットの発情周期を有意に整えることができ、発情後期及び発情休止期の期間が有意に短縮され、正常化する傾向にあり、発情状態が有意に改善された。

【0106】

上記の実験に加え、ＬＺ＋ＨＦＤ誘導ＰＣＯＳモデルに対して、モデリング及び投与方法を変更せずに実験規模（１８匹／群）を拡大し、陽性薬物ダイアン３５（Ｄａｉｎｅ－３５）及びメトホルミン（Ｍｅｔ．）群、並びにＳＺ－Ａ低用量群、中用量群、高用量群を設計し、具体的な群分け及び投与を表３に示す。

【0107】

【表3】

【0108】

治療の１０日目に、ラットの発情状態を１０日間モニタリングし（図１４）、その結果、ブランク群のラットの発情周期は約４～５日／周期と規則的であり（図１４ Ａ－ｂｌａｎｋ）、そのうち、発情前期（Ｐ）が約１７％であり、発情期（Ｅ）が約２４％であり、発情後期／発情休止期（Ｍ／Ｄ）が約５９％であった（図１４ Ｂ－ｂｌａｎｋ）。これに対して、モデル群のラットの発情周期が規則的でなく、長期間（９７％）にわたってほぼ発情後期／発情休止期（図１４ Ａ／Ｂ－ｂｌａｎｋ）であった。薬物による治療後、モデル群と比べ、各投与群は発情後期／発情休止期の期間が短縮され、投与後期に規則的な発情周期が認められた。ＳＺ－Ａは投与量の増加に伴って、薬効が徐々に強くなり、ＳＺ－Ａ－Ｌは陽性薬物Ｄｉａｎｅ－３５と同等の改善効果が認められ（発情休止期／発情後期の割合：７９％ｖｓ８０％）、ＳＺ－Ａ－Ｈの薬効はＤｉａｎｅ－３５より有意に優れていた（発情休止期／発情後期の割合：７２％ｖｓ８０％）が、Ｍｅｔ．よりもやや優れていた（発情休止期／発情後期の割合：７２％ｖｓ７４％）。

【0109】

実験例１２：ＤＨＥＡ誘導ＰＣＯＳモデルに対する桑の抽出物の薬力学試験
１．薬物の調製
ＤＨＥＡ（デヒドロエピアンドロステロン）：３０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇのＤＨＥＡを１ｍＬの大豆油に溶解し、マグネチックスターラーに置いて、５０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＤＨＥＡが完全に溶解するまで撹拌したもの。
１％ＣＭＣ：ＣＭＣを１ｇ秤量し、純水１００ｍＬに加え、マグネチックスターラーに置いて、温度６０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＣＭＣが完全に溶解して透明になるまで撹拌したもの。
実施例１で製造された桑の抽出物ＳＺ－Ａを異なる濃度に調製し、１％のＣＭＣ溶液に溶解した。

【0110】

２．実験の群分け

【0111】

【表4】

【0112】

３．実験方法
健康状況が良好で、毛並みに光沢のある３週齡の雌ＳＤラットを１８匹選び、３日間適応的に飼育し、ブランク群、モデル群及び投与群に無作為に分け、各群を６匹ずつとした。ブランク群のラットに基礎飼料を与え、溶媒（６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を皮下注射し、モデル群及び投与群に通常飼料を与え、ＤＨＥＡ油溶液（６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を４２日間皮下注射し、ラットＰＣＯＳモデルを作成した。モデリングの成功後、ブランク群のラットには基礎飼料を与え続け、且つ生理食塩水（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与し、モデル群及び投与群には基礎飼料を与え続けるとともに、モデル群には生理食塩水（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与し、投与群にはＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与した。２１日間の治療後、サンプルを採取し、薬効評価を実施した。

【0113】

４．結果
１．性ホルモン指標
モデル群（ｖｓブランク群）のラットでは、Ｔ及びＥ２レベルがいずれも有意に上昇し、ＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ）投与はＴ及びＥ２発現を有意に改善できた（結果を図１５に示す）。

【0114】

２．卵巣の病状
結果を図１６～１７に示す。図１６～１７から分かるように、ｂｌａｎｋ群では、各段階の卵胞が見られ、卵胞内の構造が明瞭で、顆粒層が多くて整然と配列し、黄体構造が明瞭でった。ｍｏｄｅｌ群では、拡張性嚢胞数が有意に増加し、黄体数が減少した。ＳＺ－Ａ投与後、拡張性嚢胞数が有意に減少し、卵巣の病状が有意に改善された。

【0115】

実験例１３：ＤＨＥＡ＋ＨＦＤ誘導ＰＣＯＳモデルに対する桑の抽出物の薬力学試験
１．薬物の調製
ＤＨＥＡ（デヒドロエピアンドロステロン）：３０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇのＤＨＥＡを１ｍＬの大豆油に溶解し、マグネチックスターラーに置いて、５０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＤＨＥＡが完全に溶解するまで撹拌したもの。
１％ＣＭＣ：ＣＭＣを１ｇ秤量し、純水１００ｍＬに加え、マグネチックスターラーに置いて、温度６０℃、回転数５００ｒ／ｍｉｎでＣＭＣが完全に溶解して透明になるまで撹拌したもの。
実施例１で製造された桑の抽出物ＳＺ－Ａを異なる濃度に調製し、１％のＣＭＣ溶液に溶解した。

【0116】

２．実験の群分け

【0117】

【表5】

【0118】

２１日齢で離乳したばかり、健康状態が良好で、毛並みに光沢のある雌ＳＤラットを選び、３日間適応的に飼育した後、ブランク群、モデル群、ＳＺ－Ａ－Ｌ群及びＳＺ－Ａ－Ｍ群に無作為に分け、各群を６匹ずつとした。ブランク群のラットに基礎飼料を与え、溶媒（６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を皮下注射し、モデル群及び投与群のラットにＨＦＤ（高脂肪飼料（ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｅｔｓ Ｄ１２４９２））を与えるとともに、ＤＨＥＡ油溶液（６０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を皮下注射し、連続的にモデリングを７ｗ誘導し、ラットＰＣＯＳモデルを作成した。

【0119】

モデル評価に成功した後、ブランク群のラットには基礎飼料を与え続け、且つ生理食塩水（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与し、モデル及び投与群には高脂肪飼料を与え続けるとともに、モデル群には生理食塩水（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与し、ＳＺ－Ａ－Ｌ群にはＳＺ－Ａ（５０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与し、ＳＺ－Ａ－Ｍ群にはＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ）を強制経口投与した。２１ｄ治療し続けた後に、サンプルを採取し、具体的に実験例９と同じ測定及び分析方法で薬効を評価した。

【0120】

４．結果
１）モデル群（ｖｓブランク群）では、Ｔ、ＡＭＨ及びＧｎＲＨレベルが有意に上昇し、ＳＺ－Ａ（５０、１００ｍｇ／ｋｇ）投与によりＴ及びＡＭＨ発現が有意に減少でき、また、ＳＺ－Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ）投与によりＧｎＲＨ発現も有意に減少でき、ＳＺ－Ａ（５０ｍｇ／ｋｇ）投与によりＧｎＲＨ発現の減少傾向が認められた。詳細な結果を図１８に示す。
２）モデル群（ｖｓブランク群）では、ＳＨＢＧレベルが有意に減少し、ＳＺ－Ａ（５０、１００ｍｇ／ｋｇ）投与によりＳＨＢＧ発現が有意に上昇した。具体的な結果を図１８に示す。

【0121】

上記薬効評価の測定結果により、ＳＺ－ＡはＰＣＯＳに対して一定の治療効果を示すことが証明された。

【産業上の利用可能性】

【0122】

本発明では、薬効学的試験により、ＳＺ－ＡはＰＣＯＳラットの卵巣重量を減少させ、卵巣の病状を改善することができ、ＳＺ－Ａ投与群は介入プロセスにおいてＰＣＯＳラットの発情周期を整え、ＳＺ－Ａ薬物はＰＣＯＳラットの性ホルモンの分泌レベルを有意に調節することができることを証明できた。以上の結果から、ＳＺ－Ａを多嚢胞性卵巣症候群を治療及び／又は改善するための製品として開発できることが分かった。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】