特許 7782230出願番号 特願 2021-193522
アデノ随伴ウイルスの分析方法
公報発行日 2025年12月9
公報URL https://ipforce.jp/patent-jp-P_B1-7782230 ログイン済みの方はこのURLへ
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技術分野
試料中に含まれるアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の分析方法に関する。特に本発明は、前記ＡＡＶを、ＡＡＶ結合性タンパク質との結合親和性に基づき分析する方法
発明が解決しようとする課題[発明の詳細な説明]から抜粋
本発明の目的は、試料中に含まれるアデノ随伴ウイルスを高感度に分析する方法を提供することである。
課題を解決するための手段[発明の詳細な説明]から抜粋
本発明者らは、課題を解決するため、鋭意検討した結果、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）およびＡＡＶ結合性タンパク質を含む溶液にカルシウムイオンを添加し分析することで、前記課題を解決できることを見出し、本発明の完成に至った。
発明の効果[発明の詳細な説明]から抜粋
本発明は、試料中に含まれるアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の分析を、当該ＡＡＶにＡＡＶ結合性タンパク質およびカルシウムイオンを添加し、前記ＡＡＶとＡＡＶ結合性タンパク質との結合親和性に基づき行なうことを特徴としている。本発明により試料中に含まれるＡＡＶを高感度に検出できる。
この特許の権利範囲[特許請求の範囲]
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この特許公報に記載されている図面[図面の簡単な説明]から抜粋
【図1】
カルシウムイオンの添加による、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）とＡＡＶ結合性タンパク質との結合親和性の変化をＥＬＩＳＡ法で測定した結果を示した図である。
【図2】
洗浄液および溶出液へのカルシウムイオンの添加による、各血清型ＡＡＶのクロマトパターンの違いを示した図である。（ａ）はＡＡＶ２－ＥＧＦＰの、（ｂ）ＡＡＶ５―ＥＧＦＰの、（ｃ）はＡＡＶ８―ＥＧＦＰの、（ｄ）はＡＡＶ９のウイルス様粒子（ＶＬＰ９）の、それぞれ結果である。また点線がカルシウムイオンを添加しないときの、実線がカルシウムイオンを終濃度で１ｍＭ添加したときの、それぞれ結果である。
【図3】
実施例１０において、カルシウムイオンを添加して、ＡＡＶ発現細胞の培養上清および細胞破砕液中に含まれるＡＡＶを分析した結果である。（ａ）はＡＡＶを発現しない細胞の培養上清（Ｎｅｇａ）の、（ｂ）はＡＡＶ発現細胞の培養上清の、（ｃ）はＡＡＶ発現細胞の細胞破砕液の、それぞれ結果である。
【図4】
実施例１１において、カルシウムイオンを添加して、ＡＡＶを含む試料を分析した結果である。（ａ）はアプライするＡＡＶを含む試料のウェスタンブロット写真であり、（ｂ）は当該試料のクロマトパターンであり、（ｃ）は素通り画分の銀染色写真である。
代表図 図1本件の代表的な図
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