定義 ＨＢＶ感染 用語「Ｂ型肝炎ウイルス感染症」又は「ＨＢＶ感染」とは、当該技術分野では一般的に知られており、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）によって引き起こされ、かつ肝臓に影響を及ぼす感染性疾患を指す。ＨＢＶ感染は急性感染又は慢性感染であり得る。慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ：ＣＨＢ）感染は、世界中で２億４８００万人に影響する世界的な疾病負荷である。年間およそ６８６，０００人の死亡は、ＨＢＶ関連末期肝疾患及び肝細胞癌腫（ＨＣＣ）に起因する（ＧＢＤ、２０１３年；Ｓｃｈｗｅｉｔｚｅｒら、２０１５年）。ＷＨＯは、更なる介入がなければ、ＣＨＢ感染者の数は今後４０～５０年間にわたり現在の高い水準を維持し、累積２０００万人が２０１５～２０３０年の間に死亡すると予測した（ＷＨＯ、２０１６年）。ＣＨＢ感染は特異な臨床症状を呈する同種疾患ではない。感染した個体は、生涯でＣＨＢ関連肝疾患のいくつかの段階を経て進行している。これらの病期もまた標準治療（ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｆ ｃａｒｅ：ＳＯＣ）による処置の基礎となる。現在のガイドラインでは、血清ＡＬＴレベル、ＨＢＶ ＤＮＡレベル、及び肝疾患の重症度の３つの基準に基づいて、ＣＨＢに感染した特定の個人のみを処置することを推奨している（ＥＡＳＬ、２０１７年）。この推奨は、ＳＯＣ、すなわちヌクレオシ（チ）ド類似体（ＮＡ）及びペグ化インターフェロン－α（ＰＥＧ－ＩＦＮ）が治癒的ではなく、かつ長期間投与しなければならず、それによって安全性リスクが増加するという事実による。ＮＡはＨＢＶ ＤＮＡ複製を効果的に抑制する。しかしながら、他のウイルスマーカーには非常に限られた影響しか及ぼさない／一切影響を及ぼさない。ＨＢＶ感染の２つの特徴である、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及び共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）は、ＨＢＶ治癒を目的とする新薬の主な標的である。ＣＨＢ患者の血漿中において、ＨＢｓＡｇサブウイルス（中空）粒子は、ＨＢＶビリオンを数で１０３～１０５倍上回る（Ｇａｎｅｍ＆Ｐｒｉｎｃｅ、２０１４年）。その過剰は、急性ＨＢＶ感染の消散後に観察された血清学的マーカである中和抗ＨＢｓ抗体を発現できない個体を含む、該疾患の免疫病理発生に寄与すると考えられている。 いくつかの実施形態では、「ＨＢＶ感染」という用語は、「慢性ＨＢＶ感染」を指す。 さらに、この用語は、任意のＨＢＶ遺伝子型による感染を包含する。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ａに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｂに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｃに感染している（これは、実施例セクションの実施例３において試験された）。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｄに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｅに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｆに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｇに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｈに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｉに感染している。 いくつかの実施形態では、処置される患者は、ＨＢＶ遺伝子型Ｊに感染している。 ｃｃｃＤＮＡ（共有結合的に閉じた環状ＤＮＡ） ｃｃｃＤＮＡは感染した肝細胞の核に存在するウイルスの遺伝的鋳型であり、増殖性感染に必要な全てのＨＢＶ ＲＮＡ転写物を生じ、慢性ＨＢＶ感染の自然経過中のウイルス持続に関与する（Ｌｏｃａｒｎｉｎｉ＆Ｚｏｕｌｉｍ（２０１０年）「Ａｎｔｉｖｉｒ Ｔｈｅｒ．」第１５巻補遺、第３号、第３～１４頁、ｄｏｉ：１０．３８５１／ＩＭＰ１６１９）。ｃｃｃＤＮＡはウイルスのリザーバとして作用し、処置中止後のウイルスリバウンド源であって、長期の、時として生涯の処置を必要とする。ＰＥＧ－ＩＦＮは、その種々の副作用に起因して、ＣＨＢの小サブセットにしか投与できない。 したがって、ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡの分解又は除去により定義される完全治癒をＣＨＢ患者の大部分にもたらすことができる新規の治療法が、強く必要とされている。 化合物 本明細書では、用語「化合物」とは、ＦＵＢＰ１の発現又は活性を阻害することができる任意の分子を意味する。本発明の特定の化合物は、本発明に係るアンチセンスオリゴヌクレオチドなどの核酸分子、又はこのような核酸分子を含む任意のコンジュゲートである。例えば、本明細書において、化合物は、ＦＵＢＰ１を標的とする核酸分子、特にアンチセンスオリゴヌクレオチドであり得る。 オリゴヌクレオチド 本明細書で用いられる「オリゴヌクレオチド」という用語は、２つ以上の共有結合したヌクレオシドを含む分子として当業者に一般に理解されるように定義される。このような共有結合したヌクレオシドはまた、核酸分子又はオリゴマーとも称されうる。オリゴヌクレオチドは、通常、固相化学合成と、その後の精製及び単離によって研究室内で作製される。オリゴヌクレオチドの配列に言及する場合には、共有結合したヌクレオチド又はヌクレオシドの核酸塩基部分の配列又は順序、若しくはその修飾が言及される。本発明のオリゴヌクレオチドは、人工のものであり、化学的に合成され、通常は精製又は単離される。本発明のオリゴヌクレオチドは、例えば２’糖修飾ヌクレオシドなどの１つ以上の修飾ヌクレオシドを含んでもよい。本発明のオリゴヌクレオチドは、１以上のホスホロチオエートのヌクレオシド間結合のような、１以上の修飾ヌクレオシド間結合を含むことができる。 アンチセンスオリゴヌクレオチド 本明細書で用いられる「アンチセンスオリゴヌクレオチド」又は「ＡＳＯ」という用語は、標的核酸、特に標的核酸上の連続配列にハイブリダイズすることによって標的遺伝子の発現を調節することができるオリゴヌクレオチドとして定義される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、本質的に二本鎖ではなく、したがってｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡではない。好ましくは、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは一本鎖である。本発明の単鎖オリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドの全長にわたって内部（ｉｎｔｒａ）又は相互（ｉｎｔｅｒ）の自己相補性の程度が５０％未満である限り、ヘアピン又は分子間二重鎖構造（同じオリゴヌクレオチドの２分子間の二重鎖）を形成できることが理解される。 いくつかの実施形態では、本発明の一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮＡヌクレオシドを含まなくてもよい。 有利には、本発明のオリゴヌクレオチドは、例えば２’糖修飾ヌクレオシドなどの１つ以上の修飾ヌクレオシド又はヌクレオチドを含む。さらに、修飾されていないヌクレオシドがＤＮＡヌクレオシドであることは有利である。 連続ヌクレオチド配列 「連続ヌクレオチド配列」という用語は、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドの領域を指す。この用語は、本明細書で「連続核酸塩基配列」という用語及び「オリゴヌクレオチドモチーフ配列」という用語と互換的に用いられる。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオシドが連続ヌクレオチド配列を構成する。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、Ｆ－Ｇ－Ｆ’ギャップマー領域のような連続ヌクレオチド配列を含み、任意に、更なるヌクレオチド（複数可）、例えば、官能基（例えば、コンジュゲート基）を連続ヌクレオチド配列に結合するために使用され得るヌクレオチドリンカー領域を含み得る。ヌクレオチドリンカー領域は、標的核酸に相補的であっても相補的でなくてもよい。いくつかの実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレオチドの核酸塩基配列は、連続ヌクレオチド配列を構成である。 ヌクレオチド及びヌクレオシド ヌクレオチド及びヌクレオシドは、オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチドの構成単位であり、本発明の目的のために、天然に存在するヌクレオチド及びヌクレオシドと、天然に存在しないヌクレオチド及びヌクレオシドとの両方を含む。本来、ＤＮＡヌクレオチド及びＲＮＡヌクレオチドなどのヌクレオチドは、リボース糖部分、核酸塩基部分、及び１つ以上のリン酸基（ヌクレオシドには存在しない）を含む。ヌクレオシド及びヌクレオチドはまた、互換的に「単位」又は「モノマー」と呼ぶことができる。 修飾ヌクレオシド 本明細書で用いられる「修飾ヌクレオシド」又は「ヌクレオシド修飾」という用語は、糖部分又は（核酸）塩基部分の１つ以上の修飾の導入によって、同等のＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと比較して修飾されたヌクレオシドを指す。有利には、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドの修飾ヌクレオシドの１つ以上は、修飾された糖部分を含む。「修飾ヌクレオシド」という用語はまた、「ヌクレオシド類似体」又は修飾「ユニット」又は修飾「モノマー」という用語と互換的に使用されてもよい。非修飾ＤＮＡ又はＲＮＡ糖部分を有するヌクレオシドは、本明細書ではＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドと称される。ＤＮＡ又はＲＮＡヌクレオシドの塩基領域に修飾を有するヌクレオシドは、それらがワトソン・クリック塩基対合可能な場合には、依然として一般的にＤＮＡ又はＲＮＡと称される。 修飾ヌクレオシド間結合 「修飾ヌクレオシド間結合」という用語は、２つのヌクレオシドを共に共有結合する、ホスホジエステル（ＰＯ）結合以外の結合として当業者に一般的に理解されるように定義される。したがって、本発明のオリゴヌクレオチドは、１つ又は複数のホスホロチオエートのヌクレオシド間結合又は１つ又は複数のホスホロジチオエートのヌクレオシド間結合のような、１つ又は複数の修飾ヌクレオシド間結合を含むことができる。 いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の少なくとも５０％のヌクレオシド間結合がホスホロチオエートであり、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列の少なくとも６０％、例えば少なくとも７０％、例えば少なくとも７５％、例えば少なくとも８０％又は例えば少なくとも９０％のヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエートである。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列のヌクレオシド間結合のすべてが、ホスホロチオアートである。 いくつかの有利な実施形態では、オリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列のすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエートであるか、又はオリゴヌクレオチドのすべてのヌクレオシド間結合がホスホロチオエート結合である。 ホスホロチオエート結合は、例えば以下に示すように、種々の互変異性形態で存在し得る。 JPEG 0007813254000035.jpg 66 150 欧州特許第２７４２１３５号に開示されているように、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、他のヌクレオシド間結合（ホスホジエステル、ホスホロチオエート及びホスホロジチオエート以外）、例えばアルキルホスホネート／メチルホスホネートヌクレオシド間結合を含んでもよいことが認識され、これは欧州特許第２７４２１３５号によれば、例えば別のＤＮＡホスホロチオエートのギャップ領域内で耐性であり得る。 核酸塩基 核酸塩基という用語は、ヌクレオシド及びヌクレオチドに存在するプリン（例えばアデニン及びグアニン）及びピリミジン（例えばウラシル、チミン及びシトシン）部分を含み、これらは核酸ハイブリダイゼーションにおいて水素結合を形成する。本発明の文脈において、核酸塩基という用語はまた、天然に存在する核酸塩基とは異なっていてもよいが、核酸ハイブリダイゼーション中に機能する修飾核酸塩基も包含する。この文脈において、「核酸塩基」とは、アデニン、グアニン、シトシン、チミジン、ウラシル、キサンチン、及びヒポキサンチンなどの天然に存在する核酸塩基と、天然に存在しないバリアントとの両方を指す。このようなバリアントは、例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５及びＢｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１に記載されている。 いくつかの実施形態では、核酸塩基部分は、プリン又はピリミジンを修飾プリン又はピリミジン、例えば置換プリン又は置換ピリミジン、例えばイソシトシン、シュードイソシトシン、５－メチルシトシン、５－チアゾロ－シトシン、５－プロピニル－シトシン、５－プロピニル－ウラシル、５－ブロモウラシル５－チアゾロ－ウラシル、２－チオ－ウラシル、２’チオ－チミン、イノシン、ジアミノプリン、６－アミノプリン、２－アミノプリン、２，６－ジアミノプリン及び２－クロロ－６－アミノプリンから選択される核酸塩基（ｎｕｃｌｅｏｂａｓｅｄ）に変えることにより修飾される。 核酸塩基部分は、対応する各核酸塩基についての文字コード、例えば、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ又はＵにより示されてもよく、ここで、各文字は、任意に等価機能の改変された核酸塩基を含んでもよい。例えば、例示したオリゴヌクレオチドにおいて、核酸塩基部分は、Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ、及び５－メチルシトシンから選択される。任意に、ＬＮＡギャップマーについて、５－メチルシトシンＬＮＡヌクレオシドが使用され得る。 修飾オリゴヌクレオチド 「修飾オリゴヌクレオチド」という用語は、１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシド及び／又は修飾ヌクレオシド間結合を含むオリゴヌクレオチドを表す。「キメラオリゴヌクレオチド」という用語は、糖修飾ヌクレオシド及びＤＮＡヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドを記述するために文献で使用されている用語である。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、有利にはキメラオリゴヌクレオチドである。 相補性 「相補性」という用語は、ヌクレオシド／ヌクレオチドのワトソン・クリック塩基対合能力を説明する。ワトソン・クリック塩基対は、グアニン（Ｇ）－シトシン（Ｃ）及びアデニン（Ａ）－チミン（Ｔ）／ウラシル（Ｕ）である。オリゴヌクレオチドは修飾核酸塩基を有するヌクレオシドを含んでいてもよく、例えば５－メチルシトシンは、しばしばシトシンの代わりに用いられ、したがって、相補性という用語は、非修飾核酸塩基と修飾核酸塩基との間のワトソン・クリック塩基対合を包含することが理解されよう（例えば、Ｈｉｒａｏ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ａｃｃｏｕｎｔｓ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｖｏｌ ４５ ｐａｇｅ ２０５５ ａｎｄ Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｓｕｐｐｌ．３７ １．４．１を参照されたい）。 用語「％相補的」とは、本明細書で使用される場合、連続ヌクレオチド配列にわたって参照配列（例えば、標的配列又は配列モチーフ）に相補的である、核酸分子（例えば、オリゴヌクレオチド）の連続ヌクレオチド配列のヌクレオチドの割合（パーセント）を指す。したがって、相補性のパーセンテージは、２つの配列間（標的配列５’－３’と３’－５’からのオリゴヌクレオチド配列とを整列させた場合）で相補的である（ワトソン・クリック塩基対から）整列した核酸塩基の数を数え、その数をオリゴヌクレオチド中のヌクレオチドの総数で割り、１００を掛けることによって計算される。このような比較において、整列（塩基対を形成）しない核酸塩基／ヌクレオチドは、ミスマッチと称される。挿入及び欠失は、連続ヌクレオチド配列の％相補性の計算において許容されない。相補性の決定において、核酸塩基の化学的修飾は、核酸塩基がワトソン・クリック塩基対合を形成する機能的能力が保持される限り、無視されることが理解されるであろう（例えば、５－メチルシトシンは、％同一性の計算の目的のために、シトシンと同一であると見なされる）。 「完全に相補的な」という用語は、１００％の相補性を指す。 同一性 本明細書で使用される「同一性」という用語は、連続ヌクレオチド配列にわたって参照配列（例えば、配列モチーフ）と同一である、核酸分子（例えば、オリゴヌクレオチド）内の連続ヌクレオチド配列のヌクレオチドの割合（パーセントで表される）を指す。したがって、同一性のパーセンテージは、２つの配列（本発明の化合物の連続ヌクレオチド配列及び参照配列における）の間で同一の（一致する）整列された核酸塩基の数を数え、その数をオリゴヌクレオチドのヌクレオチドの総数で割り、１００を掛けることにより計算される。したがって、同一性の百分率＝（一致数×１００）／整列領域（例えば、連続ヌクレオチド配列）の長さ。挿入及び欠失は、連続ヌクレオチド配列の同一性の百分率の計算において許容されない。同一性の決定において、核酸塩基の化学的修飾は、核酸塩基がＷａｔｓｏｎ Ｃｒｉｃｋ塩基対を形成する機能的能力が保持される限り、無視されることが理解されよう（例えば、５－メチルシトシンは、同一性％の計算の目的のために、シトシンと同一であると見なされる）。 ハイブリダイゼーション 本明細書で用いられる「ハイブリダイゼーション（ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）」「ハイブリダイズすること（ｈｙｂｒｉｄｉｚｉｎｇ）」又は「ハイブリダイズする（ｈｙｂｒｉｄｉｚｅｓ）」という用語は、２つの核酸鎖（例えば、オリゴヌクレオチド及び標的核酸）が対向する鎖上の塩基対間に水素結合を形成することにより二重鎖を形成することと理解されるべきである。２つの核酸鎖の間の結合の親和性は、ハイブリダイゼーションの強度である。これは、オリゴヌクレオチドの半分が標的核酸と二重鎖を形成する温度として定義される、融解温度（Ｔｍ）によって説明されることが多い。生理学的条件では、Ｔｍは、親和性に厳密に比例しない（Ｍｅｒｇｎｙ ａｎｄ Ｌａｃｒｏｉｘ，２００３，Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ １３：５１５－５３７）。標準状態でのギブスの自由エネルギーΔＧ°は、結合親和性をより正確に表しており、ΔＧ°＝－ＲＴｌｎ（Ｋｄ）によって反応の解離定数（Ｋｄ）と関連付けられており、ここで、Ｒは気体定数であり、Ｔは絶対温度である。したがって、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の反応の非常に低いΔＧ°は、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の強いハイブリダイゼーションを反映している。ΔＧ°は、水性濃度が１Ｍ、ｐＨが７、温度が３７℃での反応に関連したエネルギーである。標的核酸に対するオリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションは、自発的反応であり、自発的反応の場合のΔＧ°は、ゼロ未満である。ΔＧ°は、例えば、Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９６５，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍ．３６－３８及びＨｏｌｄｇａｔｅ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ．に記載されているように、例えば等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）法を使用することによって、実験的に測定することができる。当業者は、ΔＧ°測定のために市販の装置が入手可能であることを知るであろう。ΔＧ°は、ＳａｎｔａＬｕｃｉａ，１９９８，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９５：１４６０－１４６５に記載の最近接モデル（ｎｅａｒｅｓｔ ｎｅｉｇｈｂｏｒ ｍｏｄｅｌ）を用いて、Ｓｕｇｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３４：１１２１１－１１２１６及びＭｃＴｉｇｕｅ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４３：５３８８－５４０５に記載される適切に得られる熱力学的パラメータを使用し、数値的に推定し得る。その意図した核酸標的をハイブリダイゼーションによって調節する可能性を確保するために、本発明のオリゴヌクレオチドは、１０～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズする。いくつかの実施形態では、ハイブリダイゼーションの程度又は強度は、標準状態でのギブスの自由エネルギーΔＧ°により測定される。オリゴヌクレオチドは、８～３０ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに対して－１０ｋｃａｌの範囲未満、例えば－１５ｋｃａｌ未満、例えば－２０ｋｃａｌ未満、及び例えば－２５ｋｃａｌ未満の概算ΔＧ°値で標的核酸にハイブリダイズし得る。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、－１０から－６０ｋｃａｌ、例えば－１２から－４０、例えば－１５から－３０ｋｃａｌ、又は－１６から－２７ｋｃａｌ、例えば－１８から－２５ｋｃａｌの推定ΔＧ°値で、標的核酸にハイブリダイズする。 標的 本明細書で使用される「標的」という用語は、「ＦＵＢＰ１」又は「ＦＢＰ」又は「ＦＵＢＰ」又は「ｈＤＨ Ｖ」としても知られる哺乳動物タンパク質Ｆａｒ Ｕｐｓｔｒｅａｍ Ｅｌｅｍｅｎｔ－Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ １」を指す。ホモ・サピエンスのＦＵＢＰ１遺伝子は、第１番染色体、７７９４４０５５．．７７９７９４３５、相補体（ＮＣ＿０００００１．１１、遺伝子番号１４６２）に位置する。ＦＵＢＰ１遺伝子は、ｃ－ｍｙｃのｆａｒ ｕｐｓｔｒｅａｍ ｅｌｅｍｅｎｔを活性化し、未分化細胞におけるｃ－ｍｙｃの発現を刺激するｓｓＤＮＡ結合タンパク質をコードする。ＦＵＢＰによるＦＵＳＥの調節は、非コード鎖へのＦＵＢＰの一本鎖結合によって起こる。ＦＵＢＰ１タンパク質は、ＡＴＰ依存性ＤＮＡヘリカーゼ活性を有する。ヒトＦＵＢＰ１のアミノ酸配列は当技術分野で公知であり、ＵｎｉＰｒｏｔによって評価することができ、例えば、ヒトＦＵＢＰ１についてはＵｎｉＰｒｏｔエントリーＱ９６ＡＥ４を参照されたい（参照により本明細書に組み込まれる）。 標的核酸 本発明によれば、標的核酸は、哺乳動物ＦＵＢＰ１をコードする核酸であり、例えば遺伝子、ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、及びプレｍＲＮＡ、成熟ｍＲＮＡ又はｃＤＮＡ配列であり得る。したがって、標的は、ＦＵＢＰ１標的核酸と称することができる。 適切には、標的核酸は、ＦＵＢＰ１Ｆタンパク質、特に、本明細書で配列番号１、２及び／又は３として提供されるプレｍＲＮＡ又はｍＲＮＡ配列をコードするヒトＦＵＢＰ１遺伝子などの哺乳動物ＦＵＢＰ１をコードする。配列番号１は、ヒトＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡの配列である。配列番号２及び３は、ヒトＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡの配列である。 表３は、配列番号１の予測エクソン及びイントロン領域を列挙する。 JPEG 0007813254000036.jpg 195 136 いくつかの実施形態では、標的核酸は、カニクイザルのＦＵＢＰ１核酸、例えばｍＲＮＡ又はプレｍＲＮＡであり得る。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、マウスのＦＵＢＰ１核酸、例えばｍＲＮＡ又はプレｍＲＮＡであり得る。 表４は、ヒト、カニクイザル及びマウスのＦＵＢＰ１のゲノム配列に関する概要を提供する。表５は、ヒト、サル及びマウスのＦＵＢＰ１のプレｍＲＮＡ配列、並びにヒトＦＵＢＰ１の成熟ｍＲＮＡの概要を提供する。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１、２、３、４、及び／又は５、又はその天然に存在するバリアント（例えば、哺乳動物ＦＵＢＰ１をコードする配列）からなる群より選択される。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１、２及び／又は３、又はその天然に存在するバリアント（例えば、哺乳動物ＦＵＢＰ１をコードする配列）からなる群より選択される。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１及び４及び５、又はその天然に存在するバリアント（例えば、哺乳動物ＦＵＢＰ１をコードする配列）からなる群より選択される。 JPEG 0007813254000037.jpg 69 170 本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドを研究又は診断に使用する場合、標的核酸は、ｃＤＮＡ、又はＤＮＡ若しくはＲＮＡに由来する合成核酸であり得る。 インビボ又はインビトロでの適用のために、本発明の治療用アンチセンスオリゴヌクレオチドは、典型的には、ＦＵＢＰ１標的核酸を発現している細胞内のＦＵＢＰ１標的核酸の発現を阻害することができる。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドの核酸塩基の連続配列は、典型的には、アンチセンスオリゴヌクレオチドの長さにわたって測定して、任意に、１つ又は２つのミスマッチを除いて、また任意に、アンチセンスオリゴヌクレオチドをコンジュゲートなどの任意の官能基に結合し得るヌクレオチドベースのリンカー領域、又は他の非相補的末端ヌクレオチドを除いて、ＦＵＢＰ１標的核酸の保存領域に相補的である。 標的核酸は、ヒトＦＵＢＰ１などの哺乳動物ＦＵＢＰ１タンパク質、例えば配列番号１として開示されているものなどのヒトＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ配列、配列番号４として開示されているものなどのカニクイザルＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ配列、又は配列番号５として開示されているものなどのマウスＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ配列、又は配列番号２及び３として開示されているヒト成熟ｍＲＮＡなどの成熟ＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡをコードするプレｍＲＮＡなどのメッセンジャーＲＮＡであり得る。配列番号１～５、１０、１１、１５及び１９はＤＮＡ配列である。標的ＲＮＡ配列は、チミジン塩基（Ｔ）の代わりに、ウラシル（Ｕ）塩基を有することが理解されよう。 例示的な標的核酸に関するさらなる情報は、表５に提供される。 JPEG 0007813254000038.jpg 69 170 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号２である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号３である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号４である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号５である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１、２及び／又は３である。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１及び／又は４である。したがって、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヒトとカニクイザルの両方のＦＵＢＰ１を標的とし得る。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１及び／又は５である。したがって、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヒト及びマウスの両方のＦＵＢＰ１を標的とする。 いくつかの実施形態では、標的核酸は、配列番号１、４及び／又は５である。したがって、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ヒト、カニクイザル及びマウスのＦＵＢＰ１を標的とし得る。 標的配列 本明細書で使用される用語「標的配列」は、本発明のオリゴヌクレオチド又は核酸分子に相補的な核酸塩基配列を含む、標的核酸中に存在するヌクレオチドの配列を指す。いくつかの実施形態では、標的配列は、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列（すなわち、部分配列）に相補的な核酸塩基配列を有する標的核酸上の領域からなる。標的核酸のこの領域は、互換的に標的ヌクレオチド配列、標的配列、又は標的領域と称され得る。いくつかの実施形態では、標的配列は、単一のアンチセンスオリゴヌクレオチドの相補的配列よりも長く、例えば、本発明のいくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチドにより標的とされ得る標的核酸の好ましい領域を表し得る。 一実施形態では、標的配列は、ヒトＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡのエクソン１４内の領域である（の表３参照）。 別の実施形態では、標的配列は、ヒトＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡのエクソン２０内の領域である（の表３参照）。 本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸上の領域、例えば本明細書に記載される標的配列に相補的又はハイブリダイズする連続ヌクレオチド配列を含む。 本発明のオリゴヌクレオチドにより標的とされ得る、ヒトＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ（参照として配列番号１を使用する）の領域により定義される標的配列が、本明細書において以下に提供される。 本発明のオリゴヌクレオチドは、標的核酸に相補的な、又はその核酸にハイブリダイズする連続ヌクレオチド配列、例えば標的核酸のサブ配列、例えば本明細書で記載される標的配列を含む。 オリゴヌクレオチドは、標的核酸分子に存在する標的配列に相補的な連続ヌクレオチド配列を含む。連続ヌクレオチド配列（したがって、標的配列）は、少なくとも１２個の連続ヌクレオチド、例えば１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４個のヌクレオチド、例えば１４～２０個、例えば１４～１８個の連続ヌクレオチドを含む。 標的配列領域 本発明者らは、本発明のオリゴヌクレオチドによって標的化され得る、ＦＵＢＰ１標的核酸の特に有効な配列を同定した。 いくつかの実施形態では、標的配列は配列番号１０である。 いくつかの実施形態では、標的配列は配列番号１１である。 いくつかの実施形態では、標的配列は配列番号１５である。 いくつかの実施形態では、標的配列は配列番号１９である。 配列番号１０：ＧＴＧＡＡＡＣＣＡＴＡＡＡＡＡＧＣＡＴＡＡＧ 配列番号１１：ＡＡＣＣＡＴＡＡＡＡＡＧＣＡＴＡＡＧ 配列番号１５：ＧＴＧＡＡＡＣＣＡＴＡＡＡＡＡＧＣＡＴＡ 配列番号１９：ＧＴＡＧＡＡＡＴＧＡＡＡＡＴＴＧＧＴ 配列番号１０、１１、１５及び１９はＤＮＡ配列である。標的ＲＮＡ配列は、チミジン塩基（Ｔ）の代わりに、ウラシル（Ｕ）塩基を有することが理解されよう。 いくつかの実施形態では、標的配列は、配列番号１のヌクレオチド１６１８４～１６２００までの領域である。 いくつかの実施形態では、標的配列は、配列番号１のヌクレオチド１６１８６～１６２０３までの領域である。 いくつかの実施形態では、標的配列は、配列番号１のヌクレオチド１６１８８～１６２０５までの領域である。 いくつかの実施形態では、標的配列は、配列番号１のヌクレオチド１６１８９～１６２０５までの領域である。 いくつかの実施形態では、標的配列は、配列番号１のヌクレオチド３０５３６～３０５５３までの領域である。 標的細胞 本明細書で使用される用語「標的細胞」は、標的核酸を発現している細胞を指す。いくつかの実施形態では、標的細胞は、インビボ又はインビトロであり得る。いくつかの実施形態では、標的細胞は、哺乳動物細胞、例えば、げっ歯類細胞、例えば、マウス細胞若しくはラット細胞、又は霊長類細胞、例えば、サル細胞若しくはヒト細胞である。 典型的には、標的細胞は、ＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ又はＦＵＢＰ１成熟ｍＲＮＡなどのＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡを発現する。例えば、標的細胞は、ヒトＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ、例えば配列番号１、又はエクソン１４（又はエクソン２０）を含むヒトＦＵＢＰ１成熟ｍＲＮＡ、例えば配列番号２又は３）を発現する。実験的評価のために、標的配列を含む核酸を発現する標的細胞が使用され得る。ＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡのポリＡテールは、典型的には、アンチセンスオリゴヌクレオチド標的化では考慮されない。 本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、典型的には、例えばインビボ又はインビトロのいずれかで、ＦＵＢＰ１標的核酸を発現している標的細胞におけるＦＵＢＰ１標的核酸の発現を阻害することができる。 更に、標的細胞は肝細胞であってもよい。一実施形態では、標的細胞は、ＨＢＶに感染した初代ヒト肝細胞であり、ＨＢＶ感染個体に由来するか、又はヒト化肝臓を有するＨＢＶに感染したマウス（ＰｈｏｅｎｉｘＢｉｏ、ＰＸＢマウス）に由来するかのいずれかである。 一実施形態では、標的細胞はＨＢＶに感染し得る。更に、標的細胞は、ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡを含み得る。したがって、標的細胞は、ＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ又はＦＵＢＰ１成熟ｍＲＮＡなどのＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡ及びＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡを含むことが好ましい。 さらに、標的細胞は、肝細胞癌腫細胞などの癌細胞であってもよい。 天然に存在するバリアント 用語「天然に存在するバリアント」は、標的核酸と同じ遺伝子座に由来するが、例えば、同じアミノ酸をコードする多数のコドンを引き起こす遺伝コードの縮重のために、又はプレｍＲＮＡの選択的スプライシング、又は多型、例えば単一ヌクレオチド多型（ＳＮＰ）の存在に起因して異なり得るＦＵＢＰ１遺伝子又は転写産物のバリアント、及び対立遺伝子バリアントを指す。オリゴヌクレオチドに対する十分な相補的な配列の存在に基づいて、本発明のオリゴヌクレオチドは、したがって、標的核酸及びその天然に存在するバリアントを標的とし得る。 いくつかの実施形態では、天然に存在するバリアントは、哺乳動物ＦＵＢＰ１標的核酸、例えば配列番号１、２、３、４、又は５からなる群から選択される標的核酸に対して少なくとも９５％、例えば少なくとも９８％又は少なくとも９９％相同性を有する。いくつかの実施形態において、天然に存在するバリアントは、配列番号１のヒトＦＵＢＰ１標的核酸に対して少なくとも９９％の相同性を有する。 発現の阻害 本明細書で使用される「発現の阻害」という用語は、標的細胞におけるＦＵＢＰ１の量又は活性を阻害するオリゴヌクレオチドの能力の全体的な用語として理解されるべきである。活性の阻害は、ＦＵＢＰ１プレｍＲＮＡ若しくはＦＵＢＰ１ ｍＲＮＡのレベルを測定することによって、又は細胞中のＦＵＢＰ１若しくはＦＵＢＰ１活性のレベルを測定することによって決定することができる。したがって、発現の阻害をインビトロ又はインビボで決定することができる。 典型的には、発現の阻害は、有効量のアンチセンスオリゴヌクレオチドを標的細胞に投与することによる活性の阻害を比較し、そのレベルを、アンチセンスオリゴヌクレオチドを投与せずに標的細胞から得られた参照レベル（対照実験）又は既知の参照レベル（例えば、有効量のアンチセンスオリゴヌクレオチドの投与前の発現レベル、又は所定若しくは他の公知の発現レベル）と比較することによって決定される。 例えば、対照実験は、動物若しくはヒト、又は食塩水組成物若しくは参照オリゴヌクレオチド（多くの場合、スクランブル対照）で処理した標的細胞であり得る。 「阻害」又は「阻害する」という用語は、ＦＵＢＰ１の発現を下方調節する、減少させる、抑制する、減らす、低下させるとも呼ばれ得る。 発現の阻害は、例えばプレｍＲＮＡ又はｍＲＮＡの分解（例えば、ＲＮアーゼＨ動員オリゴヌクレオチド、例えばギャップマーを使用する）によって起こり得る。 高親和性修飾ヌクレオシド 高親和性修飾ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチド中に組み込まれた場合に、例えば、融解温度（Ｔｍ）によって測定された、その相補的標的に対するオリゴヌクレオチドの親和性を高める修飾ヌクレオチドである。本発明の高親和性修飾ヌクレオシドは、好ましくは、修飾ヌクレオシドあたり＋０．５～＋１２℃、より好ましくは＋１．５～＋１０℃、最も好ましくは＋３～＋８℃の融解温度の上昇をもたらす。数多くの高親和性修飾ヌクレオシドが当該技術分野において知られており、例えば、多くの２’置換ヌクレオシド及びロックド核酸（ＬＮＡ）が挙げられる（例えば、Ｆｒｅｉｅｒ＆Ａｌｔｍａｎｎ；Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，１９９７，２５，４４２９－４４４３及びＵｈｌｍａｎｎ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０００，３（２），２９３－２１３を参照されたい）。 糖修飾 本発明のオリゴマーは、修飾された糖部分、すなわち、ＤＮＡ及びＲＮＡに見られるリボース糖部分と比較して、糖部分が修飾された１つ以上のヌクレオシドを含みうる。 リボース糖部分の修飾を有する数多くのヌクレオシドは、親和性及び／又はヌクレアーゼ耐性などのオリゴヌクレオチドのある特定の性質を改善することを主な目的として作製されてきた。 そのような修飾には、例えば、ヘキソース環（ＨＮＡ）、又は典型的には、リボース環上のＣ２とＣ４炭素の間にバイラジカル（ｂｉｒａｄｉｃｌｅ）架橋を有する（ＬＮＡ）二環式環、又は典型的にはＣ２とＣ３炭素の間の結合を欠く非結合リボース環（例えば、ＵＮＡ）で置き換えることにより、リボース環構造が修飾されているものが含まれる。他の糖修飾ヌクレオシドには、例えばビシクロヘキソース核酸（国際公開第２０１１／０１７５２１号）又は三環式核酸（国際公開第２０１３／１５４７９８号）が含まれる。修飾ヌクレオシドにはまた、糖部分が例えばペプチド核酸（ＰＮＡ）又はモルホリノ核酸の場合には非糖部分で置き換えられているヌクレオシドが含まれる。 糖修飾にはまた、リボース環上の置換基を、水素以外の基、又はＤＮＡ及びＲＮＡヌクレオシド中に天然に存在する２’－ＯＨ基に変更することによってなされる修飾も含まれる。置換基は、例えば２’、３’、４’、又は５’位で導入され得る。 ２’糖修飾ヌクレオシド ２’糖修飾ヌクレオシドは、２’位にＨ若しくは－ＯＨ以外の置換基を有するヌクレオシド（２’置換ヌクレオシド）、又はリボース環の２’炭素と第２の炭素との間に架橋を形成できる２’結合バイラジカルを含むヌクレオシド、例えばＬＮＡ（２’－４’バイラジカル架橋）ヌクレオシドである。 実際、２’糖置換ヌクレオシドの開発には多くの注目が集まっており、数多くの２’置換ヌクレオシドが、オリゴヌクレオチドに組み込まれた際に有益な特性を有することが見出されている。例えば、２’修飾糖は、高められた結合親和性及び／又は増大されたヌクレアーゼ耐性をオリゴヌクレオチドにもたらすことができる。２’置換修飾ヌクレオシドの例は、２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、２’－Ｏ－メトキシエチル－ＲＮＡ（ＭＯＥ）、２’－アミノ－ＤＮＡ、２’－フルオロ－ＲＮＡ及び２’－Ｆ－ＡＮＡヌクレオシドである。更なる例については、例えばＦｒｅｉｅｒ＆Ａｌｔｍａｎｎ；Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．，１９９７，２５，４４２９－４４４３及びＵｈｌｍａｎｎ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０００，３（２），２９３－２１３、及びＤｅｌｅａｖｅｙ ａｎｄ Ｄａｍｈａ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２０１２，１９，９３７を参照されたい。以下は、幾つかの２’置換修飾ヌクレオシドの例示である。 JPEG 0007813254000039.jpg 74 151 本発明に関して、２’置換糖修飾ヌクレオシドは、ＬＮＡのような２’架橋ヌクレオシドを含まない。 ロックド核酸ヌクレオシド（ＬＮＡヌクレオシド） 「ＬＮＡヌクレオシド」は、ヌクレオシドのリボース糖環のＣ２’とＣ４’とを結合するバイラジカル（「２’－４’架橋」とも称される）を含む２’修飾ヌクレオシドであり、これはリボース環のコンホメーションを制限又は固定する。これらのヌクレオシドはまた、文献において、架橋核酸又は二環式核酸（ＢＮＡ）とも称されている。リボースの立体配座の固定は、ＬＮＡが相補的ＲＮＡ又はＤＮＡ分子のオリゴヌクレオチドに組み込まれる場合、ハイブリダイゼーションの親和性の向上（二重鎖の安定化）に関連している。これは、オリゴヌクレオチド／相補二重鎖の融解温度を測定することによって、日常的に決定されうる。 非限定的で例示的なＬＮＡヌクレオシドは、国際公開第９９／０１４２２６、国際公開第００／６６６０４、国際公開第９８／０３９３５２、国際公開第２００４／０４６１６０、国際公開第００／０４７５９９、国際公開第２００７／１３４１８１、国際公開第２０１０／０７７５７８、国際公開第２０１０／０３６６９８、国際公開第２００７／０９００７１、国際公開第２００９／００６４７８、国際公開第２０１１／１５６２０２、国際公開第２００８／１５４４０１、国際公開第２００９／０６７６４７、国際公開第２００８／１５０７２９、Ｍｏｒｉｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１２，７３－７６、Ｓｅｔｈ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１０，Ｖｏｌ ７５（５）ｐｐ．１５６９－８１、及びＭｉｔｓｕｏｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２００９，３７（４），１２２５－１２３８、及びＷａｎ ａｎｄ Ｓｅｔｈ，Ｊ．Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１６，５９，９６４５－９６６７に開示されている。さらに非限定的な例示的ＬＮＡヌクレオシドがスキーム１に開示されている。 スキーム１： JPEG 0007813254000040.jpg 133 152 特定のＬＮＡヌクレオシドは、β－Ｄ－オキシ－ＬＮＡ、６’－メチル－β－Ｄ－オキシＬＮＡ、例えば（Ｓ）－６’－メチル－β－Ｄ－オキシ－ＬＮＡ（ＳｃＥＴ）及びＥＮＡである。特定の有利なＬＮＡは、β－Ｄ－オキシ－ＬＮＡである。 ヌクレアーゼ媒介分解 ヌクレアーゼ媒介分解は、相補的なヌクレオチド配列と二重鎖を形成するときに、そのような配列の分解を媒介することができるオリゴヌクレオチドを指す。 いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドは、標的核酸のヌクレアーゼ媒介分解を介して機能することができ、本発明のオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼ、特にエンドヌクレアーゼ、好ましくはＲＮアーゼＨなどのエンドリボヌクレアーゼ（ＲＮアーゼ）を動員することができる。ヌクレアーゼ媒介機構を介して作用するオリゴヌクレオチド設計の例は、典型的には少なくとも５個又は６個の連続ＤＮＡヌクレオシドの領域を含み、親和性増強ヌクレオシド、例えばギャップマーが片側又は両側に隣接するオリゴヌクレオチドである。 ＲＮａｓｅ Ｈの活性及び動員 アンチセンスオリゴヌクレオチドのＲＮａｓｅ Ｈ活性とは、相補的ＲＮＡ分子との二重鎖にあるときにＲＮアーゼＨを動員する能力を指す。国際公開第０１／２３６１３号は、ＲＮａｓｅ Ｈを動員する能力を決定するために使用され得る、ＲＮａｓｅ Ｈ活性を決定するためのインビトロ方法を提供する。典型的には、オリゴヌクレオチドが、相補的標的核酸配列が提供された場合に、試験されている修飾オリゴヌクレオチドと同じ塩基配列を有するが、オリゴヌクレオチド中の全てのモノマー間にホスホロチオアート結合を有するＤＮＡモノマーのみを含有するオリゴヌクレオチドを使用し、国際公開第０１／２３６１３号（参照により本明細書に組み込まれる）の実施例９１～９５により提供される方法論を使用したときに決定された初期速度の少なくとも５％、例えば、少なくとも１０％又は２０％超のｐｍｏｌ／ｌ／分で測定された初期速度を有する場合に、このオリゴヌクレオチドはＲＮａｓｅ Ｈを動員し得ると見なされる。ＲＨａｓｅ Ｈ活性の決定での使用について、組換えヒトＲＮａｓｅ Ｈ１は、Ｃｒｅａｔｉｖｅ Ｂｉｏｍａｒｔ（登録商標）（大腸菌で発現したＨｉｓタグと融合した組換えヒトＲＮａｓｅ Ｈ１）から入手できる。 ギャップマー 本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列はギャップマーであってもよく、また、ギャップマーオリゴヌクレオチド又はギャップマー設計とも称され得る。アンチセンスギャップマーは、通常、ＲＮａｓｅ Ｈ媒介分解を介した標的核酸の阻害に用いられる。ギャップマー型オリゴヌクレオチドは、少なくとも３つの別個の構造領域、５’－フランク、ギャップ及び３’－フランク、Ｆ－Ｇ－Ｆ’を５’→３’方向で含む。「ギャップ」領域（Ｇ）は、オリゴヌクレオチドがＲＮａｓｅ Ｈを動員することを可能にする連続ＤＮＡヌクレオチドのストレッチを含む。ギャップ領域は、１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシド、有利には高親和性糖修飾ヌクレオシドを含む５’フランキング領域（Ｆ）と、１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシド、有利には高親和性糖修飾ヌクレオシドを含む３’フランキング領域（Ｆ’）が隣接する。領域Ｆ及びＦ’の１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシドは、標的核酸に対するオリゴヌクレオチドの親和性を向上させる（すなわち、親和性向上糖修飾ヌクレオシドである）。いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の１つ又は複数の糖修飾ヌクレオシドは、例えばＬＮＡ及び２’－ＭＯＥから独立して選択される、高親和性２’糖修飾などの２’糖修飾ヌクレオシドである。 ギャップマー設計において、ギャップ領域の最も５’及び３’のヌクレオシドはＤＮＡヌクレオシドであり、それぞれ、５’（Ｆ）又は３’（Ｆ’）領域の糖修飾ヌクレオシドに隣接して配置されている。フランクはさらに、ギャップ領域から最も遠い端、即ち５’フランクの５’末端及び３’フランクの３’末端に少なくとも１つの糖修飾ヌクレオシドを有することによって定義されてもよい。 領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’は、連続ヌクレオチド配列を形成する。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列は、式Ｆ－Ｇ－Ｆ’のギャップマー領域を含み得る。いくつかの実施形態では、式Ｆ－Ｇ－Ｆ’のギャップマー領域のヌクレオシド間の全てのヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。 ギャップマー設計Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、例えば１２～３２ヌクレオシド、例えば１３～２４、例えば１４～２２ヌクレオシド、例えば１５～２０、例えば１６～１８ヌクレオシドであり得る。いくつかの実施形態では、全長は１７個のヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、全長は１７個のヌクレオシドである。 例として、本発明のギャップマーオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる： Ｆ１－８－Ｇ５－１６－Ｆ’１－８、例えば Ｆ１－８－Ｇ７－１６－Ｆ’２－８、又は Ｆ４－８－Ｇ７－１２－Ｆ’２－８、又は Ｆ４－６－Ｇ７－１１－Ｆ’２－６ ただし、ギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、少なくとも１２、例えば少なくとも１４ヌクレオチド長であることを条件とする。 一実施形態では、本発明のギャップマーオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる： Ｆ４－６－Ｇ７－１１－Ｆ’２－６ 好ましくは、ギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、少なくとも１６ヌクレオチド、例えば１７又は１８ヌクレオチドである。 本発明の一態様では、アンチセンスオリゴヌクレオチド又はその連続ヌクレオチド配列は、式５’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－３’のギャップマーからなるか又はそれを含み、式中、領域Ｆ及びＦ’は独立して１～８個のヌクレオシドを含み、そのうち１～４個は２’糖修飾され、Ｆ及びＦ’領域の５’及び３’末端を規定し、ＧはＲＮａｓｅＨを動員することが可能な６～１６個のヌクレオシドの領域、例えば７～１２個のヌクレオシドの領域である。 いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の全ての修飾ヌクレオシドは、β－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドである。さらに、領域Ｆ若しくはＦ’、又は、Ｆ及びＦ’は、任意に、ＤＮＡヌクレオシドを含む。任意に、フランキング領域Ｆ若しくはＦ’、又は両方のフランキング領域Ｆ及びＦ’は、１つ又は複数のＤＮＡヌクレオシド（交互フランク、より詳細については交互フランクの定義を参照されたい。）を含み得る。 領域Ｆ、Ｇ、及びＦ’は、さらに以下に定義され、Ｆ－Ｇ－Ｆ’式に組み込むことができる。 ギャップマー－領域Ｇ ギャップマーの領域Ｇ（ギャップ領域）は、オリゴヌクレオチドがＲＮａｓｅＨ、例えばヒトＲＮａｓｅＨ１を動員することを可能にするヌクレオシド、典型的にはＤＮＡヌクレオシドの領域である。ＲＮａｓｅＨは、ＤＮＡとＲＮＡとの間の二重鎖を認識し、ＲＮＡ分子を酵素的に切断する細胞性酵素である。好適には、ギャップマーは、少なくとも５又は６連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば５～１６連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば６～１５連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば７～１４連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば８～１２連続ＤＮＡヌクレオチド、例えば８～１２連続ＤＮＡヌクレオチド長のギャップ領域（Ｇ）を有し得る。ギャップ領域Ｇは、いくつかの実施形態では、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６連続するＤＮＡヌクレオシドからなっていてもよい。 いくつかの実施形態では、ギャップ領域Ｇは、７個などの、１２個以下の連続ＤＮＡヌクレオシドからなり得る。８．９個、１０個又は１１個の連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば９個、１０個又は１１個の連続ＤＮＡヌクレオシド。 ギャップ領域内の１つ以上のシトシン（Ｃ）ＤＮＡは、いくつかの場合、メチル化され得る（例えば、ＤＮＡ ｃにＤＮＡ ｇが続く場合）。そのような残基は、いずれも５－メチル－シトシン（ｍｅＣ）として注釈が付けられている。いくつかの実施形態では、ギャップ領域Ｇは、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６個の連続するホスホロチオエート結合ＤＮＡヌクレオシドからなっていてもよい。 いくつかの実施形態では、ギャップ内のすべてのヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合である。 ギャップマー－フランキング領域、Ｆ及びＦ’ 領域Ｆは、領域Ｇの５’ＤＮＡヌクレオシドのすぐ隣に配置されている。領域Ｆの最も３’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシド、例えば高親和性糖修飾ヌクレオシド、例えば２’置換ヌクレオシド、例えばＭＯＥヌクレオシド、又はＬＮＡヌクレオシドである。 領域Ｆ’は、領域Ｇの３’ＤＮＡヌクレオシドのすぐ隣に配置されている。領域Ｆの最も５’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシド、例えば高親和性糖修飾ヌクレオシド、例えば２’置換ヌクレオシド、例えばＭＯＥヌクレオシド、又はＬＮＡヌクレオシドである。 領域Ｆは、１～８連続ヌクレオチド長、例えば２～６、例えば４～６連続ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、領域Ｆの長さは４個の連続ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆの長さは５個の連続ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆの長さは６個の連続ヌクレオチドである。 有利には、領域Ｆの最も５’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシドである。幾つかの実施形態では、領域Ｆの２つの最も５’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆの最も５’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシドである。幾つかの実施形態では、領域Ｆの２つの最も５’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシドである。 領域Ｆ’は、１～８連続ヌクレオチド長、例えば２～６、例えば２～５連続ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の長さは２個の連続ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の長さは３個の連続ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の長さは４個の連続ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の長さは５個の連続ヌクレオチドである。 有利には、領域Ｆ’の最も３’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシドである。幾つかの実施形態では、領域Ｆ’の２つの最も３’のヌクレオシドは、糖修飾ヌクレオシドである。幾つかの実施形態では、領域Ｆ’の２つの最も３’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の最も３’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシドである。 領域Ｆの長さが１である場合、それは有利なことには、ＬＮＡヌクレオシドであることに留意するべきである。さらに、領域Ｆ及び／又はＦ’の長さが２である場合、領域Ｆ及び／又はＦ’の両方のヌクレオシドは、有利にはＬＮＡヌクレオシドであることに留意されたい。 いくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’における糖修飾ヌクレオシドは、１タイプのみの糖修飾ヌクレオシド、例えばＭＯＥのみ、又はβ－Ｄ－オキシＬＮＡのみ、又はＳｃＥＴのみからなる。このような設計は、均一フランク又は均一ギャップマー設計とも称される。 いくつかの実施形態では、領域Ｆ若しくはＦ’、又はＦ及びＦ’の全ヌクレオシドは、例えばβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドなどのＬＮＡヌクレオシドである。代替的な実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の全ての糖修飾ヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシド、例えばβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドであり、領域Ｆ若しくはＦ’、又は領域Ｆ及びＦ’の両方は、ＤＮＡヌクレオシド（交互フランク、詳細についてはこれらの定義を参照されたい）を含み得る。 幾つかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の最５’及び最も３’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシド、例えばβ－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドヌクレオシドである。 いくつかの実施形態では、領域Ｆと領域Ｇとの間のヌクレオシド間結合及び／又は領域Ｆ’と領域Ｇとの間のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。幾つかの実施形態では、領域Ｆ又はＦ’、Ｆ及びＦ’のヌクレオシド間のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。 ＬＮＡギャップマー ＬＮＡギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、ＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。β－Ｄ－オキシギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方に、β－Ｄ－オキシＬＮＡヌクレオシドを含むか、若しくはそれからなるギャップマーである。 いくつかの実施形態では、ＬＮＡギャップマーは、式：［ＬＮＡ］１－５－［領域Ｇ］－［ＬＮＡ］１－５であり、式中、領域Ｇは、ＲＮアーゼＨを動員することができる連続ＤＮＡヌクレオシドの領域であるか、又はそれを含む。 ＭＯＥギャップマー ＭＯＥギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’がＭＯＥヌクレオシドからなるギャップマーである。いくつかの実施形態では、ＭＯＥギャップマーは、設計［ＭＯＥ］１－８－［領域Ｇ］５－１６－［ＭＯＥ］１－８、例えば［ＭＯＥ］２－７－［領域Ｇ］６－１４－［ＭＯＥ］２－７、例えば［ＭＯＥ］３－６－［領域Ｇ］８－１２－［ＭＯＥ］３－６のものであり、ここで、領域Ｇはギャップマーの定義に規定した通りである。５－１０－５設計（ＭＯＥ－ＤＮＡ－ＭＯＥ）を有するＭＯＥギャップマーは、当技術分野で広く使用されている。 混合ウイングギャップマー 混合ウイングギャップマーは、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、２’置換ヌクレオシド、例えば２’－Ｏ－アルキル－ＲＮＡ単位、２’－Ｏ－メチル－ＲＮＡ、２’－アミノ－ＤＮＡ単位、２’－フルオロ－ＤＮＡ単位、２’－アルコキシ－ＲＮＡ、ＭＯＥ単位、アラビノ核酸（ＡＮＡ）単位及び２’－フルオロ－ＡＮＡ単位から独立して選択される２’置換ヌクレオシド、例えばＭＯＥヌクレオシドを含むＬＮＡギャップマーである。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも１つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。領域Ｆ及びＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方が少なくとも２つのＬＮＡヌクレオシドを含むいくつかの実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の残りのヌクレオシドは、ＭＯＥ及びＬＮＡからなる群から独立して選択される。いくつかの混合ウイング実施形態では、領域Ｆ及びＦ’の一方又は両方が、１つ又は複数のＤＮＡヌクレオシドをさらに含んでもよい。 交互フランクギャップマー フランキング領域は、ＬＮＡとＤＮＡヌクレオシドの両方を含んでよく、それらはＬＮＡ－ＤＮＡ－ＬＮＡヌクレオシドの交互のモチーフを含むことから、「交互フランク」と呼ばれる。少なくとも１つの交互フランクを含むギャップマーは、「交互フランクギャップマー」と称される。したがって、「交互フランクギャップマー」は、フランクの少なくとも一方（Ｆ又はＦ’）がＬＮＡヌクレオシドに加えて１つ又は複数のＤＮＡヌクレオチドを含む、ＬＮＡギャップマーオリゴヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、領域Ｆ若しくはＦ’の少なくとも一方、又は領域Ｆ及びＦ’の両方は、ＬＮＡヌクレオシド及びＤＮＡヌクレオシドの両方を含む。このような実施形態では、フランキング領域Ｆ又はＦ’、若しくはＦ及びＦ’の両方が少なくとも３つのヌクレオシドを含み、Ｆ及び／又はＦ’領域の最も５’及び３’のヌクレオシドは、ＬＮＡヌクレオシドである。交互フランクＬＮＡギャップマーは、国際公開第ＷＯ２０１６／１２７００２号に開示されている。 交互フランク領域は、最大３の連続ＤＮＡヌクレオシド、例えば、１から２、若しくは１又は２又は３の連続ＤＮＡヌクレオシドを含み得る。 交互フランク領域は、ＬＮＡヌクレオシド（Ｌ）の数とそれに続くＤＮＡヌクレオシド（Ｄ）の数を表す一連の整数、例えば［Ｌ］１－３－［Ｄ］１－３－［Ｌ］１－３ 又は［Ｌ］１－２－［Ｄ］１－２－［Ｌ］１－２－［Ｄ］１－２－［Ｌ］１－２として注釈を付けることができる。オリゴヌクレオチド設計では、これらは、２－２－１が５’［Ｌ］２－［Ｄ］２－［Ｌ］３’を表し、１－１－１－１－１が５’［Ｌ］－［Ｄ］－［Ｌ］－［Ｄ］－［Ｌ］３’を表すような数として表されることが多い。交互フランクを有するオリゴヌクレオチド内のフランク（領域Ｆ及びＦ’）の長さは、これらの領域について本明細書で上述したように、例えば４～８、例えば５～６個のヌクレオシド、例えば４、５、６又は７個の修飾ヌクレオシドであり得る。追加のエキソヌクレアーゼ耐性を付与するために、３’フランク（Ｆ’）の３’末端に少なくとも２つのＬＮＡヌクレオシドを有することが有利であり得る。 一実施形態では、本発明のギャップマーオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる： Ｆ４－６－Ｇ７－１１－Ｆ’２－６、 式中、Ｆは、［Ｌ］１－３－［Ｄ］１－３－［Ｌ］１－３の設計を有し、Ｆ’は、［Ｌ］１－２－［Ｄ］１－２－［Ｌ］２－４、又は［Ｌ］２－６の設計を有する。 ただし、ギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’の全長は、少なくとも１６ヌクレオチド、例えば１７又は１８ヌクレオチド長であることを条件とする。 したがって、本発明のギャップマーオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの交互フランクを含み得る。典型的には、少なくともＦ領域は、交互フランクである。いくつかの実施形態では、Ｆ領域とＦ’領域の両方が交互フランクである。いくつかの実施形態では、Ｆ領域は交互フランクであり、Ｆ’領域は均一なフランクである（すなわち、Ｆ’は、β－Ｄ－オキシＬＮＡのみなどの１種類のみの糖修飾ヌクレオシドからなる）。 いくつかの実施形態では、領域Ｆの設計は、３－２－１（すなわちＬＬＬＤＤＬ）、３－１－１（すなわちＬＬＬＤＬ）、２－１－２（ＬＬＤＬＬ）、２－１－１（ＬＬＤＬ）及び１－３－１（すなわちＬＤＤＤＬ）の設計から選択される。 いくつかの実施形態では、領域Ｆ’の設計は、１－１－３（すなわちＬＤＬＬＬ）又は１－１－２（すなわちＬＤＬＬ）である。いくつかの実施形態では、領域Ｆの設計は、ＬＬ、ＬＬＬ又はＬＬＬＬである。 オリゴヌクレオチド内の領域Ｄ’又はＤ’’ 本発明のオリゴヌクレオチドは、いくつかの実施形態では、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列、例えばギャップマー領域Ｆ－Ｇ－Ｆ’、並びにさらに５’及び／又は３’ヌクレオシドを含むか、又はそれからなり得る。さらなる５’及び／又は３’ヌクレオシドは、標的核酸に完全に相補的であっても、完全に相補的でなくてもよい。このようなさらなる５’及び／又は３’ヌクレオシドは、本明細書では領域Ｄ’及びＤ’’と称され得る。 領域Ｄ’又はＤ’’の付加は、連続ヌクレオチド配列、例えばギャップマーをコンジュゲート部分又は別の官能基に連結する目的のために使用され得る。連結に用いられる場合、コンジュゲート部分を有する連続ヌクレオチド配列は、生体切断可能なリンカーとしての役割を果たしうる。あるいは、それはエキソヌクレアーゼ保護を提供するために、若しくは合成又は製造を容易にするために使用されてもよい。 領域Ｄ’及びＤ’’は、各々、領域Ｆの５’末端又は領域Ｆ’の３’末端に結合されて、以下の式Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’、Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、又はＤ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’の設計を生成することができる。この場合、Ｆ－Ｇ－Ｆ’はオリゴヌクレオチドのギャップマー部分であり、領域Ｄ’又はＤ’’は、オリゴヌクレオチドの別個の部分を構成する。 領域Ｄ’又はＤ’’は、独立して、１、２、３、４又は５個の追加のヌクレオチドを含むか、又はそれからなり、標的核酸に相補的であっても、相補的でなくてもよい。Ｆ又はＦ’領域に隣接するヌクレオチドは、ＤＮＡ又はＲＮＡなどの糖修飾ヌクレオチドではなく、若しくはこれらの塩基修飾バージョンでもない。Ｄ’又はＤ’領域は、ヌクレアーゼ感受性の生体切断可能なリンカーとしての役割を果たしうる（リンカーの定義を参照されたい）。いくつかの実施形態では、追加の５’及び／又は３’末端ヌクレオチドは、ホスホジエステル結合で結合されており、ＤＮＡ又はＲＮＡである。領域Ｄ’又はＤ’’としての使用に好適なヌクレオチドベースの生体切断可能なリンカーは、国際公開第２０１４／０７６１９５号に開示されており、これには例としてホスホジエステル結合ＤＮＡジヌクレオチドが含まれる。ポリオリゴヌクレオチド構築物における生体切断可能なリンカーの使用は国際公開第ＷＯ２０１５／１１３９２２号に開示されており、それらは複数のアンチセンス構築物（例えば、ギャップマー領域）を単一のオリゴヌクレオチド内で結合するのに使用されている。 一実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、ギャップマーを構成する連続ヌクレオチド配列に加えて、領域Ｄ’及び／又はＤ’’を含む。 幾つかの実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドは、以下の式によって表すことができる： Ｆ－Ｇ－Ｆ’；特に１－８－Ｇ５－１６－Ｆ’２－８、例えばＦ４－６－Ｇ７－１１－Ｆ’２－６ Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’、特にＤ’１－３－Ｆ１－８－Ｇ５－１６－Ｆ’２－８、例えばＤ’１－３－Ｆ４－６－Ｇ７－１１－Ｆ’２－６ Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特にＦ１－８－Ｇ５－１６－Ｆ’２－８－Ｄ’’１－３ Ｄ’－Ｆ－Ｇ－Ｆ’－Ｄ’’、特にＤ’１－３－Ｆ１－８－Ｇ５－１６－Ｆ’２－８－Ｄ’’１－３。 いくつかの実施形態では、領域Ｄ’と領域Ｆとの間に位置するヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。いくつかの実施形態では、領域Ｆ’と領域Ｄ’’との間に位置するヌクレオシド間結合は、ホスホジエステル結合である。 コンジュゲート 本明細書で用いられるコンジュゲートという用語は、非ヌクレオチド部分（コンジュゲート部分又は領域Ｃ又は第３の領域）に共有結合したオリゴヌクレオチドを指す。コンジュゲート部分は、任意に領域Ｄ’又はＤ’’などのリンカー基を介して、アンチセンスオリゴヌクレオチドに共有結合していてもよい。 オリゴヌクレオチドコンジュゲート及びそれらの合成については、Ｍａｎｏｈａｒａｎ ｉｎ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｄｒｕｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｓ．Ｔ．Ｃｒｏｏｋｅ，ｅｄ．，Ｃｈ．１６，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２００１及びＭａｎｏｈａｒａｎ，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ａｎｄ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００２，１２，１０３の包括的なレビューでも報告されている。 いくつかの実施形態では、非ヌクレオチド部分（コンジュゲート部分）は、炭水化物（例えば、ＧａｌＮＡｃ）、細胞表面受容体リガンド、原薬、ホルモン、親油性物質、ポリマー、タンパク質、ペプチド、毒素（例えば、細菌毒素）、ビタミン、ウイルスタンパク質（例えば、カプシド）、又はそれらの組合せからなる群より選択される。 例示的なコンジュゲート部分は、アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）に結合することができるものを含む。特に、三価Ｎ－アセチルガラクトサミンのコンジュゲート部分は、ＡＳＧＰＲへの結合に適しており、例えば、国際公開第２０１４／０７６１９６号、国際公開第２０１４／２０７２３２号、及び国際公開第２０１４／１７９６２０号を参照されたい。そのようなコンジュゲートは、肝臓へのオリゴヌクレオチドの取り込みを増強するのに役立つ。 いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１２／１４３３７９号に開示されているような、トランスフェリン受容体に対して特異的親和性を有する抗体又は抗体断片である。いくつかの実施形態では、非ヌクレオチド部分は、抗体又は抗体断片、例えば血液脳関門を通る送達を促進する抗体又は抗体断片、特にトランスフェリン受容体を標的とする抗体又は抗体断片である。 リンカー 結合又はリンカーは、１つ以上の共有結合を介して目的の１つの化学基又はセグメントを目的の別の化学基又はセグメントに連結する、２つの原子間の接続である。コンジュゲート部分は、直接又は連結部分（例えば、リンカー又はテザー）を介してオリゴヌクレオチドに結合させることができる。リンカーは、第３の領域、例えばコンジュゲート部分（領域Ｃ）を、第１の領域、例えば、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列（領域Ａ）に共有結合する役割を果たす。 本発明の幾つかの実施形態では、本発明のコンジュゲート又はオリゴヌクレオチドコンジュゲートは、任意に、標的核酸に相補的なオリゴヌクレオチド又は連続ヌクレオチド配列（領域Ａ又は第１の領域）と、コンジュゲート部分（領域Ｃ又は第３の領域）との間に位置するリンカー領域（第２の領域又は領域Ｂ及び／又は領域Ｙ）を含みうる。 生体切断可能なリンカー（領域Ｂ）は、哺乳動物の体内で通常遭遇する又は遭遇するものに類似した条件下で切断可能である生理学的に不安定な結合を含むか、又はそれからなる。生理学的に不安定なリンカーが化学的変換（例えば、切断）を受ける条件には、ｐＨ、温度、酸化又は還元条件、若しくは薬剤などの化学条件、並びに哺乳動物の細胞で見られる又は遭遇するものに類似した塩濃度が含まれる。哺乳動物の細胞内条件には、タンパク質分解酵素又は加水分解酵素又はヌクレアーゼなどの哺乳動物細胞に通常存在する酵素活性の存在も含まれる。一実施形態では、生体切断可能なリンカーは、Ｓ１ヌクレアーゼ切断の影響を受けやすい。いくつかの実施形態では、生理学的に不安定なリンカー（生物切断性）は、１個～１０個の連結されたヌクレオシド、例えば１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個又は１０個の連結されたヌクレオシド、例えば２個～６個の連結されたヌクレオシド、例えば２個～５個の連結されたヌクレオシド、例えば２個～４個の連結されたヌクレオシドを含み、少なくとも２個の連続する連結は生体切断可能であり、例えばホスホジエステル連結、例えば少なくとも３個又は４個又は５個の連続するホスホジエステル連結である。好ましくは、ヌクレオシドは、ＤＮＡ又はＲＮＡである。 一実施形態では、オリゴヌクレオチドとコンジュゲート部分との間のリンカーは、アンチセンスオリゴヌクレオチドの連続ヌクレオチド配列の５’又は３’末端に少なくとも２個の連続するホスホジエステル結合を含む２～５個の連続するホスホジエステル結合ヌクレオシドで構成される生理学的に不安定なリンカーである。 いくつかの実施形態では、生理学的に不安定なリンカーは、ＡＡ、ＡＴ、ＡＣ、ＡＧ、ＴＡ、ＴＴ、ＴＣ、ＴＧ、ＣＡ、ＣＴ、ＣＣ、ＣＧ、ＧＡ、ＧＴ、ＧＣ又はＧＧからなる群から選択される配列を有するＤＮＡジヌクレオチドを含むか又はそれからなり、２つのＤＮＡヌクレオシドの間にホスホジエステル結合が存在し、少なくとも１つのさらなるホスホジエステルが、核酸分子のオリゴヌクレオチドをジヌクレオチドに連結するか又はコンジュゲート部分をジヌクレオチドに連結するジヌクレオチドの５’又は３’末端に存在する。例えば、リンカーはＣＡジヌクレオチドによるものであり得る。いくつかの実施形態では、生理学的に不安定なリンカーは、配列ＡＡＡ、ＡＡＴ、ＡＡＣ、ＡＡＧ、ＡＴＡ、ＡＴＴ、ＡＴＣ、ＡＴＧ、ＡＣＡ、ＡＣＴ、ＡＣＣ、ＡＣＧ、ＡＧＡ、ＡＧＴ、ＡＧＣ、ＡＧＧ、ＴＡＡ、ＴＡＴ、ＴＡＣ、ＴＡＧ、ＴＴＡ、ＴＴＴ、ＴＴＣ、ＴＡＧ、ＴＣＡ、ＴＣＴ、ＴＣＣ、ＴＣＧ、ＴＧＡ、ＴＧＴ、ＴＧＣ、ＴＧＧ、ＣＡＡ、ＣＡＴ、ＣＡＣ、ＣＡＧ、ＣＴＡ、ＣＴＧ、ＣＴＣ、ＣＴＴ、ＣＣＡ、ＣＣＴ、ＣＣＣ、ＣＣＧ、ＣＧＡ、ＣＧＴ、ＣＧＣ、ＣＧＧ、ＧＡＡ、ＧＡＴ、ＧＡＣ、ＣＡＧ、ＧＴＡ、ＧＴＴ、ＧＴＣ、ＧＴＧ、ＧＣＡ、ＧＣＴ、ＧＣＣ、ＧＣＧ、ＧＧＡ、ＧＧＴ、ＧＧＣ、又はＧＧＧを含むか又はそれからなり、ＤＮＡヌクレオシドの間にホスホジエステル結合が存在し、トリヌクレオチドの５’又は３’末端にさらなるホスホジエステルが潜在的に存在する。ホスホジエステルを含む生体切断可能なリンカーは、ＷＯ２０１４／０７６１９５（参照により本明細書に組み込まれる）においてより詳細に記載されている。生体切断可能なリンカーを有するコンジュゲート化合物では、標準と比較した場合、コンジュゲート部分の少なくとも約５０％がオリゴヌクレオチドから切断され、例えば、少なくとも約６０％が切断され、例えば、少なくとも約７０％が切断され、例えば、少なくとも約８０％が切断され、例えば、少なくとも約８５％が切断され、例えば、少なくとも約９０％が切断され、例えば、コンジュゲート部分の少なくとも約９５％がオリゴヌクレオチドから切断される。 領域Ｙは、必ずしも生体切断可能ではないが、主にコンジュゲート部分（領域Ｃ又は第３の領域）をオリゴヌクレオチド（領域Ａ又は第１の領域）に共有結合させるのに役立つリンカーを指す。領域Ｙリンカーは、エチレングリコール、アミノ酸単位又はアミノアルキル基などの反復単位の鎖構造又はオリゴマーを含み得る。 本発明のオリゴヌクレオチドコンジュゲートは、以下の領域要素Ａ－Ｃ、Ａ－Ｂ－Ｃ、Ａ－Ｂ－Ｙ－Ｃ、Ａ－Ｙ－Ｂ－Ｃ又はＡ－Ｙ－Ｃから構築することができる。いくつかの実施形態では、リンカー（領域Ｙ）は、例えばＣ６～Ｃ１２アミノアルキル基を含むＣ２～Ｃ３６アミノアルキル基などのアミノアルキルである。いくつかの実施形態では、リンカー（領域Ｙ）は、Ｃ６アミノアルキル基である。 薬学的に許容され得る塩 用語「薬学的に許容され得る塩」は、生物学的に又はそれ以外の点で望ましくないものではない、遊離塩基又は遊離酸の生物学的な有効性及び特性を保持する塩を指す。塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、特に塩酸、並びに、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ－アセチルシステインなどの有機酸と共に形成される。加えて、これらの塩は、無機塩基又は有機塩基を遊離酸に加えることにより調製され得る。無機塩基から誘導される塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウムの塩が含まれるがこれらに限定されない。有機塩基から誘導される塩には、第一級、第二級、及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環式アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リジン、アルギニン、Ｎ－エチルピペリジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂の塩が含まれるが、これらに限定されない。本発明の化合物は、双性イオンの形態で存在することもあり得る。特に好ましくは、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容され得る塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、及びメタンスルホン酸の塩である。 処置 本明細書で使用される「処置」、「処置すること」、「処置する」などの用語は、一般に、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果を得ることを意味する。この効果は、疾患及び／又は疾患に起因する有害作用を部分的又は完全に治癒するという点で治療的である。本明細書で使用される「処置」という用語は、対象における疾患の任意の処置を包含し、以下を含む：（ａ）疾患を阻害すること；又は（ｂ）疾患を改善（すなわち緩和）すること、すなわち疾患の退縮を引き起こすこと。ＨＢＶ感染を改善及び／又は阻害する化合物は、ＨＢＶ感染を処置する化合物である。好ましくは、本明細書で使用される「処置」という用語は、既に定義され顕在化したＨＢＶ感染又はがんの処置のような、既に顕在化した障害の医学的介入に関する。 予防 本明細書において、用語「予防すること」、「予防」、又は「予防する」とは、予防的処置、すなわち、その目的が疾患を治癒することよりむしろ予防することである、測定又は手段に関する。予防とは、所望の薬理学的及び／又は生理学的効果が、疾患又はその症状を完全に又は部分的に予防するという観点から、予防的に得られることを意味する。したがって、本明細書における「ＨＢＶ感染予防」とは、対象におけるＨＢＶ感染の発生を予防すること、及びＨＢＶ感染の症状の発生を予防することを含む。本発明では、特に、ＨＢＶに感染した母親からの小児におけるＨＢＶ感染の予防が企図される。また、急性ＨＢＶ感染が慢性ＨＢＶ感染に変化することを防ぐことも企図される。 患者 本発明の目的について、「対象」又は「患者」は、脊椎動物であり得る。本発明に関連して、用語「対象」は、ヒト及び他の動物、特に哺乳動物と、他の生物との両方を含む。したがって、本明細書に提供される手段及び方法は、ヒト治療及び獣医学的用途の両方に適用可能である。したがって、本明細書では、対象は、マウス、ラット、ハムスタ、ウサギ、モルモット、フェレット、ネコ、イヌ、ニワトリ、ヒツジ、ウシ種、ウマ、ラクダ、又は霊長類などの動物であり得る。好ましくは、対象は、哺乳動物である。より好ましくは、対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、患者は、ＨＢＶ感染又はがんなどの本明細書で言及される疾患に罹患している。いくつかの実施形態では、患者は前記疾患にかかりやすい。