特表 2022-506007 ミコフェノール酸活性剤を非ヒト哺乳動物に送達するための方法および組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-01-17

(54)【発明の名称】ミコフェノール酸活性剤を非ヒト哺乳動物に送達するための方法および組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20220107BHJP

   A61K 31/365 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 21/04 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220107BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20220107BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20220107BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20220107BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20220107BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20220107BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

A61K31/365

A61P1/04

A61P1/16

A61P7/06

A61P7/04

A61P13/12

A61P37/06

A61P37/08

A61P17/00

A61P19/02

A61P21/04

A61P3/10

A61P25/00

A61P17/06

A61P29/00 101

A61P9/00

A61P29/00

A61K9/20

A61K9/48

A61K9/10

A61K9/14

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021512709

(86)(22)【出願日】2018-09-07

(85)【翻訳文提出日】2021-04-27

(86)【国際出願番号】 US2018050079

(87)【国際公開番号】W WO2020050863

(87)【国際公開日】2020-03-12

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】519329852

【氏名又は名称】オカヴァ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】クロツマン， マイケル

(72)【発明者】

【氏名】シヴァナンド， パドマジャ

(72)【発明者】

【氏名】アンダーソン， ウェイン エイチ．

(72)【発明者】

【氏名】サティヤン， ガヤトリ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C076AA22

4C076AA29

4C076AA36

4C076AA53

4C076AA95

4C076BB01

4C076CC05

4C076CC07

4C076CC11

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4C086ZB11

4C086ZB13

4C086ZB15

4C086ZC35

4C086ZC61

(57)【要約】

本開示は、制御放出の手法で、ミコフェノール酸（ＭＰＡ）活性剤をイヌ対象にもたらすための組成物および方法を提供する。開示される組成物および方法は、即時放出型のＭＰＡ含有（例えば、ミコフェノール酸モフェチル）製剤において、薬力学、薬物動態学、安全性、および／または利便上の利点を有する。例えば、本開示の製剤および方法は、製剤の第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後に、リンパ球増殖が投与前の量と比較して低減するように、イヌ対象において、約８時間にわたって平均血漿［ＭＰＡ］濃度を達成する、ＭＰＡ活性剤の制御放出プロファイルを提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

イヌ対象におけるリンパ球増殖および／または活性化を抑制するためのＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物の使用であって、前記対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を達成するように、ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を前記対象に投与することを含み、
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約１５００ｍＬ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下する、使用。

【請求項2】

前記対象が、
（ｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約３５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍＬ；
（ｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍｌ～約１７００ｎｇ／ｍＬ；または
（ｉｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約６５０ｎｇ／ｍｌ～約１５００ｎｇ／ｍＬ
の血漿［ＭＰＡ］の平均を達成する、請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記第１の用量の２．５時間後、好ましくは４時間後、より好ましくは８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、請求項１または２に記載の使用。

【請求項4】

前記対象が、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記組成物を投与される、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項5】

前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、請求項４に記載の使用。

【請求項6】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、または第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項５に記載の使用。

【請求項7】

（ｉ）第１の用量の投与の４時間後、必要に応じて８時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与した参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージ
より低い、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用。

【請求項8】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４から７のいずれか一項に記載の使用。

【請求項9】

前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項８に記載の使用。

【請求項10】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与された参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４から７のいずれか一項に記載の使用。

【請求項11】

前記即時放出製剤が、１０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、前記参照イヌ対象に投与され、前記即時放出製剤が、必要に応じてミコフェノール酸モフェチルを含む、請求項７または１０に記載の使用。

【請求項12】

前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、前記ミコフェノール酸ナトリウムが、必要に応じて前記イヌ対象に経口投与される、請求項１から１１のいずれかに記載の使用。

【請求項13】

前記制御放出組成物が、各々が
（ｉ）コアであって、（ａ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含まれる；または、（ｂ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に配置される、コア；
（ｉｉ）（ａ）前記活性層または（ｂ）前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層；
（ｉｉｉ）（ａ）前記活性層と前記制御放出層との間、または（ｂ）前記コアと前記制御放出層との間に配置される、必要に応じたシールコート層；
（ｉｖ）前記制御放出層上に配置される、必要に応じた保護層
を含む、複数の粒子サブユニットを含む充填可能なカプセル剤を含み、
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、必要に応じて、約３ｍｇ～約２．２ｇの前記制御放出組成物に存在する、請求項１２に記載の使用。

【請求項14】

前記イヌが、
（ｉ）異常リンパ球増殖に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有するか、もしくは有することが疑われ、前記自己免疫疾患もしくは障害が、必要に応じて、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、もしくはその任意の組合せを含む；
（ｉｉ）臓器移植を受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または
（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項15】

イヌにおけるリンパ球増殖を抑制するための医薬を調製する方法であって、対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を維持し、
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約１５００ｍｌ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍｌの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍｌ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、
ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を調製することを含む、方法。

【請求項16】

制御放出製剤であって、
（ｉ）約３ｍｇ～約２．２ｇのＭＰＡ活性剤；
（ｉｉ）約２１ｍｇ／ｋｇの単一用量で前記ＭＰＡ活性剤を投与されるイヌ対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、最大で約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記イヌから得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、前記ＭＰＡ活性剤が、ｉｎ ｖｉｖｏで前記製剤から放出されるように、前記ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段
を含む、製剤。

【請求項17】

前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項１６に記載の製剤。

【請求項18】

（ｉ）各々が前記ＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；
（ｉｉ）錠剤；
（ｉｉｉ）懸濁剤；
（ｉｖ）糖剤；または
（ｖ）その任意の組合せ
を含む、請求項１６または１７に記載の製剤。

【請求項19】

前記ＭＤＤＳが、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する送達用に調製される、請求項１８に記載の製剤。

【請求項20】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、コアを含み、
（ｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または
（ｉｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に含有される、請求項１８または１９に記載の製剤。

【請求項21】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、（ｉ）の前記活性層の少なくとも一部上に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層をさらに含む、請求項２０に記載の製剤。

【請求項22】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、（ｉ）の前記活性層と前記制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアと前記制御放出層との間に配置される、シールコート層をさらに含む、請求項２１に記載の製剤。

【請求項23】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、前記制御放出層上に配置される保護層をさらに含む、請求項２２に記載の製剤。

【請求項24】

約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項１６から２３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項25】

約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項１６から２３のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項26】

請求項１８から２５のいずれか一項に記載のＭＤＤＳ、およびイヌ対象に組成物を投与するための説明書を含む、キット。

【請求項27】

食品をさらに含む、請求項２６に記載のキット。

【請求項28】

イヌ対象におけるリンパ球増殖を抑制するための方法であって、前記対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、
ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を、前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項29】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約３５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１７００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、請求項２８または２９に記載の方法。

【請求項31】

対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約６５０ｎｇ／ｍＬ～約１５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、請求項２８から３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

前記第１の用量の２．５時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、請求項２８から３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

前記第１の用量の４時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、請求項２８から３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

前記第１の用量の８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、請求項２８から３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４に記載の方法。

【請求項37】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約６００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記対象が、摂食状態の場合、制御放出組成物を与えられる、請求項２８から４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を投与することを含む、請求項２８から４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項４２に記載の方法。

【請求項46】

前記投与することが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

（ｉ）前記投与の４時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージ
より低い、請求項２８から４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項48】

（ｉ）前記投与の８時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量が、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量
より低い、請求項２８から４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４２から４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記イヌ対象が、消化管の有害事象を示さない、請求項４９に記載の方法。

【請求項51】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えられる参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４２から５０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項52】

前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記イヌ対象が、前記参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示す、請求項４２から５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項53】

前記参照イヌ対象が、１０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、前記即時放出製剤を与えられる、請求項４７、４８、５１、または５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

前記即時放出製剤が、ミコフェノール酸モフェチルを含む、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

前記投与が、経口投与を含む、請求項２８から５４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記制御放出製剤が、
（ｉ）各々が前記ＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；
（ｉｉ）錠剤；
（ｉｉｉ）懸濁剤；
（ｉｖ）糖剤；または
（ｖ）その任意の組合せ
を含む、請求項２８から５５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項57】

前記制御放出製剤が、各々の直径が約５ｍｍまたはそれ未満である、複数の粒子サブユニットを含む、ＭＤＤＳを含む、請求項５６に記載の方法。

【請求項58】

前記ＭＤＤＳが、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する、前記対象への送達用に調製される、請求項５６または５７に記載の方法。

【請求項59】

前記ＭＤＤＳの前記複数の粒子サブユニットの各々が、コアを含み、
（ｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または
（ｉｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に含有される、請求項２６から５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項60】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、制御放出層をさらに含み、前記制御放出層が、（ｉ）の前記コアの前記ＭＰＡ活性層上に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアの少なくとも一部上に配置される、請求項５９に記載の方法。

【請求項61】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、シールコート層を含み、前記シールコート層が、（ｉ）の前記コアの前記ＭＰＡ活性層と前記制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアと前記制御放出層との間に配置される、請求項６０に記載の方法。

【請求項62】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、前記制御放出層上に配置される保護層をさらに含む、請求項６０または６１に記載の方法。

【請求項63】

前記第１の用量が、約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇで前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項２８から６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記第１の用量が、約１５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇで前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項６３に記載の方法。

【請求項65】

前記第１の用量が、約３ｍｇ～約２２００ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項２８から６４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項66】

前記第１の用量が、約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項６５に記載の方法。

【請求項67】

前記第１の用量が、約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項６５に記載の方法。

【請求項68】

前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項２８から６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

前記制御放出組成物が、食物を伴って前記対象に投与される、請求項２８から６８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項70】

前記対象が、
（ｉ）異常リンパ球増殖および／もしくは活性化に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有する、もしくは有することが疑われる；
（ｉｉ）臓器移植および／もしくは人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または
（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である、請求項２８から６９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項71】

前記自己免疫疾患または障害が、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む、請求項７０に記載の方法。

【請求項72】

イヌ対象における自己免疫疾患または障害を処置するための方法であって、前記自己免疫疾患または障害が、リンパ球の異常増殖および／または活性化により特徴付けられ、前記方法が、前記対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物を、前記ＭＰＡ活性剤の約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含み、
前記対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、
前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、方法。

【請求項73】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項７２に記載の方法。

【請求項74】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項７２に記載の方法。

【請求項75】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項７２に記載の方法。

【請求項76】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項７２に記載の方法。

【請求項77】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含む、請求項７２から７６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項７７に記載の方法。

【請求項79】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項７７に記載の方法。

【請求項80】

前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項７７から７９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項81】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項７７から８０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項82】

前記自己免疫疾患または障害が、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む、請求項７２から８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項83】

臓器移植および／または人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、または将来受けるイヌ対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物を、前記ＭＰＡ活性剤の約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む方法であって、
前記対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、
前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、方法。

【請求項84】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項８３に記載の方法。

【請求項85】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項８３に記載の方法。

【請求項86】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項８３に記載の方法。

【請求項87】

前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、請求項８３に記載の方法。

【請求項88】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記用量を投与することを含む、請求項８３から８７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項89】

前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項８８に記載の方法。

【請求項90】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項８８または８９に記載の方法。

【請求項91】

前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記イヌ対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項８８から９０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項92】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項８８から９１のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

自己免疫疾患は、慢性疾患の異質ファミリーを表す。このような疾患の特徴として、リンパ球の活性化および／または増殖、自己抗体の発生、ならびに、慢性炎症および組織損傷をもたらす免疫系の調節障害が挙げられる。獣医学的状況において、自己免疫疾患は、実行可能な処置の選択肢がほとんどない疾患のカテゴリーを表す。

【背景技術】

【0002】

ミコフェノール酸モフェチルは、ヒト対象および獣医学的対象の両方において、自己免疫疾患および他の状態の処置として認識されている。しかし、ミコフェノール酸モフェチルおよびミコフェノール酸ナトリウムの送達のための現在の方法および組成物は、獣医学的対象において、例えば、粘膜潰瘍に関連する消化管の不耐性、ならびに、胃ならびに小腸および大腸のびらんおよび壊死を含む、著しい副作用を起こし得る。例えば、Ａｒｎｓ， Ｗ．， “Ｎｏｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ （ＧＩ） Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ Ａｃｉｄ Ｔｈｅｒａｐｙ： Ａ Ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｌｏｃａｌ ＧＩ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ？，” Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ３９：８８－９３ （２００７）を参照のこと。さらに、現在利用可能な製剤は、ｉｎ ｖｉｖｏで不均一な薬力学活性を有し、所望の活性を持続するために頻回な投与を必要とする。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0003】

【非特許文献1】Ａｒｎｓ， Ｗ．， “Ｎｏｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ （ＧＩ） Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ Ａｃｉｄ Ｔｈｅｒａｐｙ： Ａ Ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｌｏｃａｌ ＧＩ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ？，” Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ３９：８８－９３ （２００７）

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0004】

本開示は、制御放出の手法で、ミコフェノール酸（ＭＰＡ）活性剤をイヌ対象にもたらすための組成物および方法を提供する。開示される組成物および方法は、即時放出型のＭＰＡ含有（例えば、ミコフェノール酸モフェチル）製剤において、薬力学、薬物動態学、安全性、および／または利便上の利点を有する。例えば、本開示の製剤および方法は、製剤の第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後に、リンパ球増殖が投与前の量と比較して低減するように、イヌ対象において、約８時間にわたって平均血漿［ＭＰＡ］濃度を達成する、ＭＰＡ活性剤の制御放出プロファイルを提供する。ある特定の実施形態では、イヌ対象は、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍｌ～約３０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ＭＰＡ］濃度を達成し、第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下する。

【0005】

さらに、本開示による投与では、第２（またはそれより多く）の１日１回用量の２４時間後から第８の投与の前に、イヌ由来の全血試料中の増殖するリンパ球の量が、第１日の用量前の１５分またはそれ未満でのイヌから得られる全血中の増殖するリンパ球の量より低いような、全身効果が生じる。

【0006】

一部の実施形態では、開示される制御放出の方法および組成物によるリンパ球増殖は、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を使用して達成する低減と比較して、より大きく、および／またはより長期間、低減する。ある特定の実施形態では、（ｉ）本開示の第１の用量の制御放出製剤の投与の４時間（および／または８時間）後の対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージより低い。

【0007】

さらに、本開示の製剤のイヌ対象への投与は、驚いたことに、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤と比較して、対象での消化管の有害事象の軽減（すなわち、数、重症度、またはその両方において）をもたらす。これは、制御放出製剤を使用して投与されるＭＰＡ活性剤の量が、即時放出型で投与されるものを超える場合でさえ起こる。

【0008】

ある特定の実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長く（必要に応じて１５日またはそれより長く）連続した日数の各々の間、単一用量を投与することを含み、１０日（必要に応じて１５日またはそれより長く）にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0009】

したがって、本開示の方法および組成物は、例えば、イヌ対象における自己免疫疾患または障害を処置するのに有用であり、自己免疫疾患または障害は、本明細書に記載される通り、リンパ球の異常増殖および／または活性化により特徴付けられる。本開示の方法および組成物を使用する処置可能な自己免疫疾患および障害として、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症またはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血（ａｐｅｒｎｉｃｉｏｕｓ ａｎｅｍｉａ）、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、およびその任意の組合せが挙げられる。

【0010】

また本明細書で提供されるのは、ＭＰＡ活性剤を含む本開示の制御放出製剤を、臓器移植および／または人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、または将来受けるイヌ対象に、投与する方法である。

【0011】

本明細書に開示される実施形態のいずれかでは、ＭＰＡ活性剤は、ミコフェノール酸ナトリウムを含む。本明細書に開示される実施形態のいずれかでは、イヌ対象は、本明細書に記載される通り、摂食状態、または絶食状態において制御放出製剤を与えられる。ある特定の実施形態では、制御放出製剤は、経口投与される。

【0012】

ＭＰＡ活性剤を含む制御放出製剤、および製剤を含むキットもまた提供される。

【0013】

別の態様では、本開示は、イヌ対象におけるリンパ球増殖を抑制する制御放出組成物の使用を提供する。

【0014】

さらなる態様では、方法は、本開示の制御放出製剤を含む医薬を製造するために提供される。

【0015】

本開示のさらなる態様、実施形態、特性、および利点、ならびにある特定の実施形態の構造、および操作は、添付図面を参照しながら以下に詳述される。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】図１は、本開示の制御放出製剤の粒子サブユニットの概略例を示す。

【0017】

【図2】図２は、本明細書の実施形態にしたがう制御放出製剤のさらなる粒子サブユニットの実施形態の描写を示す。

【0018】

【図3】図３は、本開示にしたがう粒子サブユニットを含む、カプセル剤の形態での、本開示による制御放出製剤の実施形態の描写を示す。

【0019】

【図4】図４は、本開示にしたがう粒子サブユニットの２つの実施形態からの、二相媒体（ｐＨ１．２で２時間、その後ｐＨ６．８でのインキュベート）におけるミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。

【0020】

【図5】図５は、本明細書にしたがう制御放出製剤の粒子サブユニットの追加の実施形態からの、ミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。放出は、ｐＨ６．８での媒体でのインキュベートの間に測定した。

【0021】

【図6】図６は、本開示にしたがう粒子サブユニットのさらに別の実施形態からの、ミコフェノール酸ナトリウムの放出を示し、粒子サブユニットは、酸性媒体（ｐＨ１．２）、続いてｐＨ６．８の媒体で２時間のインキュベートを行った。

【0022】

【図7】図７は、本開示にしたがう粒子サブユニットの別の実施形態からの、ミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。

【0023】

【図8】図８は、酸性媒体（ｐＨ１．２）、続いてｐＨ６．８の媒体で２時間のインキュベートを行った、本開示にしたがう粒子サブユニットのさらに別の実施形態からの、ミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。

【0024】

【図9】図９は、本開示による粒子サブユニットの一実施形態からの、ミコフェノール酸ナトリウムの放出を示し、粒子サブユニットは、溶媒系コーティングを伴うビーズを含み、酸性媒体（ｐＨ１．２）で２時間、続いてｐＨ６．８の媒体で１２時間のインキュベートを行った。

【0025】

【図10】図１０は、絶食させたイヌに対する即時放出型のミコフェノール酸モフェチル溶液（１２０ｍｇのＭＭＦ ＢＩＤ、各用量が含有する；丸）、または、摂食させたイヌに対する本開示の制御放出組成物（２５２ｍｇのＭＰＡを含有する２７０ｍｇの「ＯＫＶ－１００１」；四角）のいずれかの投与後の示された時間点で測定された、血清のミコフェノール酸の相対レベル（［ＭＰＡ］＝ｎｇ／ｍＬのＭＰＡ）を示す。

【0026】

【図11】図１１は、図１０（「群」２および３）で示されるデータの別の視点を提供し、制御放出組成物（「群４」）の投与後の、絶食させたイヌにおけるＭＰＡの平均血清レベル（ｎｇ／ｍＬ）をさらに提供する。

【0027】

【図12】図１２は、示されたイヌの処置群において測定された、ＭＰＡ代謝物であるアシルＭＰＡグルクロニド（ｇｌｕｃｏｒｏｎｉｄｅ）（ＡｃＭＰＡＧ）の平均血清レベル（ｎｇ／ｍＬ）を示す。

【0028】

【図13】図１３は、示されたイヌの処置群において測定された、ＭＰＡ代謝物であるＭＰＡグルクロニド（ＭＰＡＧ）の平均血清レベル（ｎｇ／ｍＬ）を示す。

【0029】

【図14】図１４は、本開示の発明者らによる、２処置、２期間の逐次的な適応交差試験の設計を示す概略図を提供する。

【0030】

【図15】図１５は、図１４に図示した、イヌの「期間１」および「期間２」の処置群由来の経時的な第１日の血清ＭＰＡ濃度を示す。

【0031】

【図16】図１６は、図１４に図示した、イヌの「期間１」および「期間２」の処置群由来の経時的な第５日の血清ＭＰＡ濃度を示す。

【0032】

図１７～２６は、本開示の制御放出組成物（「ＯＫＶ－１００１」）の薬力学（ＰＤ）活性を調査する、１５日非盲検試験に関連する。

【図17】図１７は、１５日試験の設計を示す。図示した試験アームでは、オスのビーグル犬には、制御放出組成物を、「ベース用量」（２７０ｍｇ、２５２ｍｇのＭＰＡを含有；ＱＤ）で；１日に１回「低用量」（１８０ｍｇ、１６８ｍｇのＭＰＡを含有；ＱＤ）で；または、１日２回「低用量」（１８０ｍｇ、１６８ｍｇのＭＰＡを含有；ＢＩＤ）で与えた。各処置群では、ｎ＝５匹のイヌ。並行試験（図示せず）では、イヌに、即時放出型のミコフェノール酸モフェチル製剤（１２０ｍｇ；およそ１２ｋｇのイヌに対して約１０ｍｇ／ｋｇ）のＭＭＦ、ＢＩＤ；ｎ＝５）、またはプラセボ（ｎ＝１）を与えた。

【0033】

【図18】図１８は、図１７に示される非盲検試験に対する、データ収集のタイムラインを示す。ＰＤエンドポイントは、第１日、第８日、および第１５日で収集した。各エンドポイント収集日では、本明細書の表１７に示す通り、合計で４つのサンプリングの時間点を使用した。

【0034】

【図19】図１９は、１５日薬力学試験の間、本開示の制御放出製剤（２５２ｍｇのＭＰＡを含有、ＱＤ）の経口投与の前、または経口投与の２．５時間後、４時間後、もしくは８時間後に、オスのビーグル犬から採取した全血試料において、増殖に関連するマーカーであるＫｉ－６７抗原を発現するリンパ球のパーセンテージを示す。Ｋｉ－６７発現は、試験の第１日、第８日、および第１５日に採取した試料のモノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定した。Ｙ軸上に示されたパーセンテージは、ベースラインを基準にしており（すなわち、ベースラインＫｉ６７＋細胞（＋／－ＳＤ）のパーセント）、下方のバーがベースラインと比較した発現の低下を表す。

【0035】

【図20】図２０は、本開示の制御放出製剤の単一の経口投与の前、または経口投与の２時間後、４時間後、もしくは８時間後に、オスのビーグル犬から採取した全血試料において、Ｋｉ－６７抗原を発現するリンパ球の全体のパーセンテージを示す。

【0036】

【図21】図２１は、本開示の制御放出製剤（１８０ｍｇ、１６８ｍｇのＭＰＡを含有、ＱＤ）の経口投与の前、または経口投与の２．５時間後、４時間後、もしくは８時間後に、オスのビーグル犬から採取した全血試料において、Ｋｉ－６７抗原を発現するリンパ球のパーセンテージを示す。試料は、１５日試験の第１日、第８日、および第１５日に採取した。示されたパーセンテージは、ベースラインを基準にしている。

【0037】

【図22】図２２は、即時放出型のミコフェノール酸モフェチル製剤（１２０ｍｇのＭＭＦ；ＢＩＤ）の経口投与の前、または経口投与の０．７５時間後、４時間後、もしくは８時間後に、オスのビーグル犬から採取した全血試料において、Ｋｉ－６７抗原を発現するリンパ球のパーセンテージを示す。試料は、１５日試験の第１日、第８日、および第１５日に採取した。示されたパーセンテージは、ベースラインを基準にしている。

【0038】

【図23】図２３は、即時放出型のミコフェノール酸モフェチル製剤（１２０ｍｇのＭＭＦ、ＢＩＤ）、および、本開示の制御放出製剤（２７０ｍｇ、２５２ｍｇのＭＰＡを含有；ＱＤ）の単一用量（第１日）の薬力学の比較を示す。Ｋｉ－６７発現は、示された時間点で、オスのビーグル犬から採取した全血試料において測定した。示されたパーセンテージは、ベースラインを基準にしている。

【0039】

【図24】図２４は、１５日試験の第８日および第１５日で、即時放出型のミコフェノール酸モフェチル製剤（１２０ｍｇのＭＭＦ、ＢＩＤ）、および、本開示の制御放出製剤（２７０ｍｇ、２５２ｍｇのＭＰＡを含有；ＱＤ）の薬力学の比較を示す。Ｋｉ－６７発現は、示された時間点で、オスのビーグル犬から採取した全血試料において測定した。示されたパーセンテージは、ベースラインを基準にしている。

【0040】

【図25】図２５は、本開示の１５日試験での投与（ＱＤ）の８日後に測定した、本開示の制御放出製剤（２７０ｍｇ、２５２ｍｇのＭＰＡを含有）を投与した、オスのビーグル犬における、８時間の薬物動態学プロファイル（平均血漿ＭＰＡ濃度）を示す。Ｎ＝５匹のオスのビーグル犬。

【0041】

【図26】図２６は、本開示の１５日試験での投与の８日後に測定した、本開示の制御放出製剤（１８０ｍｇ、１６８ｍｇのＭＰＡを含有；ＢＩＤまたはＱＤで投与）を投与した、オスのビーグル犬における、８時間の薬物動態学プロファイル（平均血漿ＭＰＡ濃度）を示す。処置群当たり、Ｎ＝５匹のオスのビーグル犬。

【0042】

【図27】図２７は、１５日試験の第８日に、本開示の制御放出製剤（２７０ｍｇ、２５２ｍｇのＭＰＡを含有；ＱＤ）を投与した、オスのビーグル犬における、８時間の薬物動態学プロファイル（平均血漿ＭＰＡ濃度）を、図１４に示す５日間の反復投与試験の第５日の「群Ａ」および「群Ｃ」の処置群からの平均薬物動態学プロファイルと比較する。

【発明を実施するための形態】

【0043】

本開示は、獣医学的対象における、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、ミコフェノール酸活性剤の制御された送達のための方法および組成物を提供する。本明細書に開示される方法および組成物は、他の用途の中で、獣医学的対象において、リンパ球増殖を抑制し（例えば、増殖するリンパ球の数を減らし）、自己免疫疾患、異常リンパ球増殖および／または活性化に関連する血液障害、ならびに、移植またはグラフト手術に関連する免疫拒絶を処置するのに有用である。

【0044】

本明細書で参照される公開特許、特許出願、ウェブサイト、社名、および科学文献は、その各々が具体的、個別に参照により組み込まれると示された場合と同様に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に引用した任意の参考文献と、本明細書の具体的な教示との間のいかなる不一致も、後者の方を選んで解決するものとする。同様に、単語または成句の当該技術分野で理解される定義と、本明細書に具体的に教示されているような単語または成句の定義との間のいかなる不一致も、本明細書の方を選んで解決するものである。
定義

【0045】

本開示を詳細に述べる前に、本明細書で使用されるある特定の用語の定義を提供することは、その理解の助けとなり得る。追加の定義は、本開示を通して述べる。

【0046】

本明細書で使用される技術用語および科学用語は、別段の定義がない限り、本出願が属する技術分野の当業者により通常理解される意味を有する。本明細書では当業者に公知の様々な方法および材料に言及する。

【0047】

本明細書では、いかなる濃度範囲、パーセンテージ範囲、比の範囲、または整数範囲も、別段の指示がない限り、引用した範囲内の任意の整数の値や、適切な場合には、その分数（例えば、整数の１０分の１、および１００分の１）を含むことは理解すべきである。また、ポリマーサブユニット、サイズ、または厚さのような任意の物理的特性に関連する本明細書で引用されるいかなる数字範囲も、別段の指示がない限り、引用した範囲内の任意の整数を含むことは理解すべきである。本明細書で使用される場合、用語「約」とは、別段の指示がない限り、示される範囲、値、または構造の±２０％を意味する。用語「１つ（ａおよびａｎ）」とは、本明細書で使用される場合、列挙した成分の「１つまたは複数」を指すことは理解すべきである。二者択一（例えば「または」）の使用は、選択肢の１つ、両方またはその任意の組合せのいずれかを意味することは理解すべきである。本明細書で使用される場合、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「有する（ｈａｖｅ）」、および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」は、同義的に使用され、用語およびその変形は、非限定と解釈することが意図される。

【0048】

「必要に応じた（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「必要に応じて（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」とは、後述する要素、成分、事象、または状況が、起こっても起こらなくてもよく、説明には、要素、成分、事象、または状況が起こる例、およびそれらが起こらない例が含まれることを意味する。

【0049】

用語「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」とは、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」と等価ではなく、請求項の具体的な材料もしくはステップ、または特許請求する主題の基本的な特徴には大きな影響を及ぼさないものを指す。

【0050】

用語「消化管」、「ＧＩ管」、および「ＧＩ」は、本明細書で互換的に使用することができ、食物を取込み、食物を消化してエネルギーおよび栄養を抽出し吸収し、ならびに残存する廃棄物を排出する、獣医学的対象における臓器系を指す。ＧＩ管は、一般に、２つの下位部分を含むと見なされ、上部ＧＩ管（本明細書では「上部ＧＩ」ともいう）は、口腔、咽頭、食道、胃、および十二指腸を含み、下部ＧＩ管（本明細書では「下部ＧＩ」ともいう）は、小腸および大腸、空腸（ｊｅｊｅｕｎｕｍ）、回腸、結腸、盲腸、直腸、肛門管、および肛門を含む。

【0051】

用語「ＭＰＡ活性剤」および「ミコフェノール酸活性剤」は、本明細書で互換的に使用することができ、対象での生理学的または薬力学的効果を発揮する、（例えば、本開示の獣医学的な組成物の）ＭＰＡまたはＭＰＡ系成分を指す。ＭＰＡ活性剤は、ＭＰＡ、およびその薬学的に許容される塩、エステル、プロドラッグ、相同体、水和物、または溶媒和物を含む。ある特定の実施形態では、ＭＰＡ活性剤は、ミコフェノール酸ナトリウムを含む。ある特定の実施形態では、ＭＰＡ活性剤は、ＭＭＦを含む。

【0052】

本明細書で使用される場合、「生物学的利用率」とは、吸収されるので、生理学的効果を生じることが可能になる薬物の割合を指す。生物学的利用率は、ＡＵＣを、例えば、標識薬物および質量分析を使用して血清濃度の経時的なプロットを描画することによる定量化により測定することができる。生物学的利用率は、「絶対的生物学的利用率（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｉｔｙ）」または「相対的生物学的利用率」の点から測定することができる。

【0053】

絶対的生物学的利用率（Ｆ_ａｂｓ）は、静脈内投与される同じ薬物と比較して、非静脈用剤形（例えば、経口錠剤）で投与される場合の生物学的利用率に関連する。絶対的生物学的利用率は、非ｉ．ｖ．形態およびｉ．ｖ．形態のＡＵＣを比較し、それぞれの用量に対して補正することにより決定することができる：
Ｆ_ａｂｓ＝（ＡＵＣ_非静脈内／ＡＵＣ_静脈内）×（用量_静脈内／用量_非静脈内）

【0054】

相対的生物学的利用率（Ｆ_ｒｅｌ）は、薬物の２つの異なる剤形の生物学的利用率を比較する。各剤形に対する相対的なＡＵＣを比較し、相対的な用量を使用して、計算値を正規化する：
Ｆ_ｒｅｌ＝（ＡＵＣ_剤形Ａ／ＡＵＣ_剤形Ｂ）×（用量_Ｂ／用量_Ａ）

【0055】

薬力学（「ＰＤ」）とは、本明細書で使用される場合、対象における薬物の１つまたは複数の生化学的または生理学的効果を指す。ＰＤは、用量－応答関係または濃度－応答関係の文脈において記載することができ、受容体アゴニスト作用および下流効果を通して作用を刺激もしくは抑制すること、（例えば、シグナル伝達経路、もしくは酵素の触媒活性などの）作用を遮断もしくは拮抗すること、作用を安定化すること、物質を交換、置換、もしくは蓄積すること（例えば、グリコーゲン蓄積）、直接的な有益な化学反応をもたらす、または、直接的な有害な化学反応（例えば、細胞毒性、突然変異生成、もしくは刺激作用）をもたらすことのような機序を通して、望ましい効果、望ましくない効果、または中立的な効果の範囲を包含することができる。ＭＰＡ組成物および関連する方法についての本明細書に記載のＰＤ値として、例えば、ＭＰＡ活性剤を投与したイヌ対象での有害効果（例えば、下痢、軟便、嘔吐などのような消化管の有害事象）、自己抗体のレベルまたは活性、サイトカイン放出の速度またはレベル、炎症、および、例えば増殖関連マーカー抗原Ｋｉ－６７の存在により決定する通り、増殖を含むＢまたはＴリンパ球数または機能性が挙げられる。リンパ球の増殖を決定するための他のマーカーおよびアッセイは、当該技術分野で公知であり、本明細書で熟慮される。リンパ球増殖の抑制は、全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージの低下により測定し得、ベースラインレベルに対する低下として、未処理のパーセンテージとして、または他に許容された手段により報告することができる。本明細書にさらに詳述する通り、Ｋｉ－６７発現は、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７（「ｍＡｂ－Ｋｉ－６７」）を使用して測定することができる。

【0056】

本明細書で使用される場合、「イヌ」とは、Ｃａｎｉｄａｅ科の任意のメンバーを指し、イエイヌ（その任意の品種または任意の変異種、ならびに２つまたはそれより多い品種または変異種の任意の組合せ、ならびにそれらの組合せ）、オオカミ、キツネ、ジャッカル、ならびにコヨーテが挙げられる。

【0057】

「自己免疫疾患」および「自己免疫障害」は、本明細書で互換的に使用することができ、対象の免疫系が、対象自体の細胞または組織を抗原性として認識し、対象の細胞または組織に対して炎症反応を生じる状態を指す。

【0058】

一部の実施形態では、自己免疫疾患または障害は、異常リンパ球増殖および／または活性化に関連する。リンパ球の異常増殖として、例えば、増殖増加（例えば、増殖している集団におけるリンパ球の全体のパーセンテージでの増加；単一のリンパ球もしくはリンパ球の集団の増殖の速度の増加；または、正常なベースラインに対する、リンパ球もしくはリンパ球の集団による細胞分裂の１つもしくは複数のサイクルの速度の増加；例えば、細胞分裂促進因子、がん抗原、もしくは感染に関連する抗原ではなく健康な細胞もしくは組織への曝露で誘導される増殖）、ならびに、本来の機能性が低下したリンパ球、および自己反応性のような望ましくない機能性を獲得したリンパ球を含む、異常および／または機能障害のリンパ球をもたらす増殖が挙げられる。リンパ球の異常活性化とは、リンホカインの産生、細胞質の拡張、巨大分子（例えば、抗体）の合成、ならびにメモリーおよびエフェクター細胞種の分化のような、抗原または細胞分裂促進因子への接触に続いて典型的に起こる、リンパ球の機能性における１つまたは複数の異常を指す。

【0059】

ある特定の実施形態では、本開示による組成物および方法は、１つの（すなわち、１つまたは複数の）自己免疫疾患、例えば、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症またはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、重症筋無力症、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、宿主対移植片疾患（ＨｖＧＤ）およびインプラント拒絶の他の形態を含む、獣医学的な移植またはインプラント手術（例えば、組織移植、グラフト、およびデバイスインプラント）に関連する免疫反応、肝炎、ならびに、壊疽性膿皮症を処置するのに有用である。本開示の方法および組成物にしたがって処置可能な血液障害または疾患として、限定されないが、再生不良性貧血、免疫性溶性血性貧血、および免疫性血小板減少症が挙げられる。

【0060】

一部の実施形態では、本開示の方法および組成物は、臓器移植および／または人工インプラント（例えば、人工角膜インプラント、人工インプラント、または関節、靱帯、骨などの置換）を受けたことがある、現在受けている、または将来受けるイヌ対象において、（例えば、リンパ球の増殖および／または活性化を抑制することにより）免疫抑制をもたらすのに有用である。

【0061】

「処置する」、「処置」、および「改善する」とは、本明細書で使用される場合、対象（例えば、異常リンパ球増殖に関連する自己免疫疾患もしくは障害、または外科的グラフトもしくは移植を有するイヌ）の疾患、障害、または状態の防止、可能性の低減、または医療管理を指す。本開示の方法および組成物によるイヌ対象は、必ずしも必要ではないが、獣医または他の獣医学的なケア専門家が評価するか、診断するか、または処置することができる。一般に、本開示の制御放出型の獣医学的組成物を含む用量または処置レジメンは、イヌ対象に、治療的または予防的利点を引き出すのに十分な量で投与される。治療的または予防的／防止的利点として、限定されないが、臨床結果の向上；疾患に関連する症状の軽減または緩和；症状の発生頻度の低減；生活の質の向上；疾患のない状態の延長；疾患の程度の軽減、疾患状態の安定化；疾患の発症、進行の遅延；緩解；生存；長期生存；またはその任意の組合せが挙げられる。

【0062】

ＭＰＡ活性剤または本開示の制御放出製剤の「治療有効量」または「有効量」とは、統計的に有意な手法での、臨床結果の向上；疾患に関連する症状の軽減または緩和；症状の発生の低減；生活の質の向上；疾患のない状態の延長；疾患の程度の軽減；疾患状態の安定化；疾患進行の遅延；緩解；生存；または、長期生存を含む、治療効果をもたらすのに十分な量を指す。例えば、本開示の組成物および方法によるＭＰＡ活性剤の治療有効量は、ＢまたはＴリンパ球の増殖および／もしくは活性化を低減もしくは遅延する、イヌ対象での炎症反応を防止、低減もしくは改善する；自己免疫疾患もしくは障害を処置する；または、細胞、臓器もしくは組織の移植もしくはグラフトの過程で起こる拒絶を防止し、その重症度を低減するか、もしくは開始を遅延するのに十分な量であり得る。単独で投与される個別の活性成分に言及する場合、治療有効量とは、その成分単独の効果を指す。組合せに言及する場合、治療有効量とは、順次、同時期に、または同時に投与されるかどうかに関わらず、治療効果をもたらす活性成分の組み合わせた量を指す。

【0063】

本明細書で使用される場合、「モジュレートすること」とは、直接的または間接的のいずれかの手法を通して、発生を低減、上昇、促進、遅延、もしくは防止すること、または、モジュレートされる発生の強度もしくは効率を増加もしくは低下させることを意味する。

【0064】

用語「制御放出」は、投与に続く即時放出から逸脱させることによって、原薬の放出のタイミングおよび／または速度を変更する生成物を記載するのに使用される。制御放出型の剤形は、時間、経路、および／または位置の薬物放出の特徴が、即時放出型の錠剤もしくは懸濁剤、または他の迅速に溶解もしくは放出する剤形のような即時放出型の剤形によりもたらされない、治療的または利便性の目的を果たすように選択される製剤である。制御放出型の経口薬物製剤として、例えば、延長放出（ｅｘｔｅｎｄｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ）製剤（即時放出型（従来）の剤形として存在する同じ薬物と比較して、投薬頻度の低減を可能にするもの、例えば、持続放出（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ）および長時間作用型の製剤）；遅延放出製剤（投与直後である以外の時点で、薬物の同定可能な１つまたは複数の部分を放出するもの、例えば、腸溶性コーティングされたアスピリン、および他のＮＳＡＩＤ生成物）；標的放出製剤（作用の意図された生理学的部位でまたはその周囲で薬物を放出し、即時放出または延長放出のいずれかの特徴を有し得る）；ならびに、経口投与後の唾液で迅速に崩壊する、口腔内崩壊錠剤（ＯＤＴ）が挙げられる。用語「制御放出」、「調節放出」、「持続放出」、「延長放出」、「長時間作用型」、「標的放出」、および「遅延放出」は、本明細書で互換的に使用することができ、投与に続く即時放出から逸脱させることによって、投与されるＭＰＡ活性剤の放出を指す。本明細書で使用される場合、「即時放出」の投与量とは、投与直後に活性成分を放出するか、または放出可能にするように製剤化される任意の剤形を指す。本開示による制御放出製剤は、ある特定の実施形態では、以下の特徴の１つまたは複数を達成するために製剤化または投与され得る：投与に続くある特定の時点で、または特定の時間内でのＭＰＡ活性剤の放出；特定の生理学的条件（例えば、ｐＨ、温度）下でのＭＰＡ活性剤の放出；公知、推定、または予測の消化、循環、または代謝の速度に基づく身体の特定部分内へのＭＰＡ活性剤の放出；別の試薬の投与に伴う、投与時の、もしくは投与後のＭＰＡ活性剤の放出；所定の量で；所定の時間でのＭＰＡ活性剤の放出；特定の放出プロファイルによるＭＰＡ活性剤の放出；または、その任意の組合せ。

【0065】

本開示の制御放出製剤のある特定の実施形態は、単一用量でＭＰＡ活性剤を投与されるイヌ対象が、本明細書に記載される通り、所望のＰＫ効果および所望のＰＤ効果を達成するように、ＭＰＡ活性剤が、ｉｎ ｖｉｖｏで製剤から放出されるように、ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段を含む。ＭＰＡ活性剤のｉｎ ｖｉｖｏでの放出を制御するための様々な手段は、公知であり、本明細書でさらに記載され、例えば、セルロースポリマー、アクリレートポリマー、セルロースアセテート、セルロースアセテートブチレート、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロースポリマー、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロースポリマー、制御放出用のＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ポリマー、ポリ（ビニルアクリレート）（ＰＶＡ）ポリマー（例えば、ＫＯＬＬＩＤＯＮ（登録商標）シリーズ）、ポリ（ビニルアクリレート）（ＰＶＡ）ポリマー、またはその任意の組合せが挙げられる。ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段はまた、（必要に応じて１つまたは複数の他の材料と組み合わせた）本明細書に記載の材料の１つまたは複数を含む層を含み、その層は、所望の制御放出を達成するのに適切な任意の数、種類、および厚さで存在し得る。このような層の例として、制御放出層、保護層、およびシールコート層が挙げられ、本明細書に記載される。

【0066】

用語「薬学的に許容される賦形剤もしくは担体」、または「生理学的に許容される賦形剤もしくは担体」とは、本明細書で使用される場合、ヒトまたは他の非ヒト哺乳動物（例えばイヌ）の対象への投与に好適であり、安全として、もしくは重篤な有害事象をもたらさないと一般に認識される、不活性生体適合性ビヒクルを指し、本明細書でさらに詳細に記載される。ある特定の実施形態では、薬学的に許容される担体として、対象に投与される食品または液体が挙げられる。例えば、本開示の制御放出製剤は、イヌ対象により消費される食品（「ごちそう食」を含む）または水に散布するか、噴霧するか、あるいは添加するか、または組み合わせることができる。ある特定の実施形態では、本開示のＭＰＡ組成物は、ドライドッグフード、ごちそう食、骨などのような食品に保有される（すなわち、含有される、組み合わせる、またはコーティングする）ことができる。このような実施形態を実行するのに有用な給餌レジメンは、本明細書に記載される。

【0067】

本明細書で使用される場合、「統計的に有意」とは、スチューデントｔ検定を使用して計算し、測定される特定の事象または結果が偶然生じることが統計的に不可能であることを示す場合、０．０５０またはそれより小さいｐ値を指す。
ＭＰＡ、ＭＰＡ活性剤、およびその薬理学

【0068】

ミコフェノール酸（Ｃ_１７Ｈ_２０Ｏ_６；「ＭＰＡ」）は、酵素イノシン５’－一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）の非ヌクレオシドの非競合性可逆性阻害剤であり、これは、イノシン５’－一リン酸（ＩＭＰ）由来のキサンチン一リン酸（ＸＭＰ）の合成を触媒する。ＩＭＰ→ＸＭＰは、ＢおよびＴリンパ球を含む、核酸合成、増殖、分化細胞に要するグアニンヌクレオチドの新規の合成における律速段階である。ＩＭＰＤＨ活性を阻害することにより、ＭＰＡは、免疫抑制剤として作用する。例えば、Ａｒｎｓ， Ｗ．， Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ３９：８８－９３ （２００７）を参照し、その開示および方法は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ＭＰＡは、式Ｉで示される、以下の基本構造を有する：

【化1】

【0069】

ＩＭＰＤＨは、２つのイソ酵素、ＩＭＰＤＨ１およびＩＭＰＤＨ２を有する。前者は、最も多い細胞種で発現する一方、後者は、活性化リンパ球において優勢である（例えば、Ｗｉｎｎｉｃｋｉ ｅｔ ａｌ．， Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｊ． １０（１）：７０－６ （２００９）を参照のこと）。ＭＰＡは、ＩＭＰＤＨ１より、最大で４～５倍多くＩＭＰＤＨ２を阻害するので、活性化リンパ球で、他の細胞より強力な細胞分裂抑制効果を有する。

【0070】

ＭＰＡは、ミコフェノール酸モフェチルエステル（ＭＭＦ：ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）として、米国においてヒト使用に承認）、およびＮａ．ＭＰＡ（Ｍｙｆｏｒｔｉｃ（登録商標））として、補助的な免疫抑制剤としてヒトでの使用のために調製されている。

【0071】

ミコフェノール酸療法（すなわち、本明細書で定義されるような、ＭＰＡまたはその活性剤の使用を含む、単一用量または多回用量の治療レジメン）に関連する薬物有害反応（ヒト患者の１％以上）として、下痢、悪心、ゆるい便、嘔吐、関節痛、感染、白血球減少、および貧血が挙げられる。ミコフェノール酸ナトリウムもまた、一般に、疲労、頭痛、咳、および／または呼吸の問題に関連する。ＭＭＦの静脈内（ＩＶ）投与もまた、一般に、血栓静脈炎および血栓症に関連する。ＭＭＦ使用に関連する有害効果（対象の０．１～１％）として、食道炎、胃炎、下痢、ゆるい便、嘔吐、消化管出血、および／または浸潤性サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）感染が挙げられる。頻度は低いが、肺線維症または様々な腫瘍形成では、例えば、黒色腫、リンパ腫、および他の悪性腫瘍が生じ、ＭＭＦ関連の腫瘍形成は、種類に応じて、最も一般的な部位である皮膚での腫瘍形成を伴って、２０中に１～２００中に１の頻度で起こり得る。赤芽球癆（ＰＲＣＡ）の場合も報告されている。

【0072】

本開示による組成物および方法は、薬物動態学（「ＰＫ」）および薬力学（「ＰＤ」）を含む、薬理学的用語において記載することができる。当該技術分野で理解される通り、薬物動態学は、有機体に投与される薬物の運命、例えば、濃度、代謝、分布、吸収、半減期、または排泄に関連する。ＰＫの非限定的な測定として、Ｃ_ｍａｘ（身体の特定の区画または試験領域での薬物の最大血清濃度）、Ｔ_ｍａｘ（Ｃ_ｍａｘが観察される時間）、Ｃ_ｍｉｎ（最小濃度またはトラフ濃度）、Ｔ_ｍｉｎ（Ｃ_ｍｉｎが観察される時間）、Ｔ_１／２（薬物または代謝物の半減期、すなわち、薬物濃度が初期値の２分の１に減少するのにかかる時間、これは排出の末期での１つまたは複数の点を使用して計算することができる）、排出速度定数「ｋ」（末期の対数領域での１つまたは複数の濃度を使用して計算される傾き）、および、ＡＵＣ（「曲線下面積」；経時的な血漿での薬物の濃度のプロットにおける定積分）が挙げられる。ＡＵＣは、所与の用量または投与レジメンにおいて経時的な全薬物曝露を表し、投与の時点で開始し、血漿濃度が最小となる場合に終了して計算することができるか、または、選択される時点で測定され、それから計算することができる。Ｃ_ｍａｘおよびＣ_ｍｉｎのようなある特定のＰＫ値が、制御放出製剤の投与に続く、本明細書で特定の時間枠、例えば、特定の時間窓、または、特定数の時間について報告することができることが理解されよう。

【0073】

ＭＰＡ組成物および関連方法について本明細書に記載されるＰＫ値として、例えば、［ＭＰＡ］（ミコフェノール酸薬物の濃度）、［ＭＰＡＧ］、および［アシル－ＭＰＡＧ］が挙げられる。薬物または代謝物の血清または血漿濃度は、例えば、ｎｇ／ｍＬ、ｍｇ／ｋｇ、μｇ／ｍＬ、μｇ／Ｌなどのような任意の適切な単位で報告することができる。経時的な濃度は、μｇ^＊ｈ／Ｌまたはｎｇ^＊ｈ／ｍＬのような任意の適切な単位で報告することができる。ＡＵＣを使用して、所与の時間間隔（ＡＵＣ_ｔ）にわたる濃度、または特定の時間間隔（ＡＵＣ_ｉｎｆ）で結合していない濃度を報告することができる。

【0074】

ＭＰＡのＰＫの他の測定値として、例えば、薬物：代謝物の比、例として、ＭＰＡ含有剤（例えば、即時放出製剤または本開示の制御放出製剤）の投与に続いて得ることが可能な薬物：代謝物の比が挙げられる。

【0075】

さらに、本開示の方法および組成物は、一部の実施形態では、所望のＭＰＡ薬力学を有する。例えば、一部の実施形態では、開示される本開示の方法および組成物は、例えば、リンパ球増殖を低減する、免疫抑制をもたらす、イヌ対象における炎症反応をモジュレートする、および安全性プロファイルを改善したＭＰＡに基づく療法を提供するために使用することができる。
製剤およびキット

【0076】

ある特定の態様では、制御放出製剤を提供し、製剤は、約３ｍｇ～約２．２ｇのＭＰＡ活性剤；ならびに、（ｉｉ）約２１ｍｇ／ｋｇの単一用量でＭＰＡ活性剤を投与されるイヌ対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、最大で約３０００ｎｇ／ｍｌ（例えば、約１０００、１５００、２０００、２５００、または約３０００ｎｇ／ｍｌ）の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、対象が、単一用量に続く約８時間に、２５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、単一用量前の１５分またはそれ未満での、イヌから得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、ＭＰＡ活性剤が、ｉｎ ｖｉｖｏで製剤から放出されるように、ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段を含む。

【0077】

一部の実施形態では、制御放出製剤に存在するＭＰＡ活性剤の総量は、約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５、３００、３０５、３１０、３１５、３２０、３２５、３３０、３３５、３４０、３４５、３５０、３５５、３６０、３６５、３７０、３７５、３８０、３８５、３９０、３９５、４００、４０５、４１０、４１５、４２０、４２５、４３０、４３５、４４０、４４５、４５０、４５５、４６０、４６５、４７０、４７５、４８０、４８５、４９０、４９５、５００、５０５、５１０、５１５、５２０、５２５、５３０、５３５、５４０、５４５、５５０、５５５、５６０、５６５、５７０、５７５、５８０、５８５、５９０、５９５、６００、６０５、６１０、６１５、６２０、６２５、６３０、６３５、６４０、６４５、６５０、６５５、６６０、６６５、６７０、６７５、６８０、６８５、６９０、６９５、７００、７０５、７１０、７１５、７２０、７２５、７３０、７３５、７４０、７４５、７５０、７５５、７６０、７６５、７７０、７７５、７８０、７８５、７９０、７９５、８００、８０５、８１０、８１５、８２０、８２５、８３０、８３５、８４０、８４５、８５０、８５５、８６０、８６５、８７０、８７５、８８０、８８５、８９０、８９５、９００、９０５、９１０、９１５、９２０、９２５、９３０、９３５、９４０、９４５、９５０、９５５、９６０、９６５、９７０、９７５、９８０、９８５、９９０、９９５、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、または２２００ｍｇである。

【0078】

一部の実施形態では、ＭＰＡ活性剤は、ミコフェノール酸ナトリウムを含む。特定の実施形態では、製剤は、約１８０ｍｇのミコフェノール酸ナトリウムを含む。他の実施形態では、製剤は、約２７０ｍｇのミコフェノール酸ナトリウムを含む。

【0079】

任意の好適な送達システムは、本開示の製剤を送達するのに使用することができ、例えば、以下の通りである：（ｉ）各々がＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；（ｉｉ）錠剤；（ｉｉｉ）懸濁剤；（ｉｖ）糖剤；（ｖ）ミニ錠剤；または、（ｖｉ）その任意の組合せ。例えば、図３に示す通り、カプセル剤３００は、カプセル剤３００内に分散または混合される複数のサブユニット１００、２００を含む。

【0080】

用語「多粒子薬物送達システム」とは、本明細書で「ＭＤＤＳ」とも略されるが、送達される薬物を含有または他の形で保有する複数の別々の粒子サブユニット（例えば、顆粒、ビーズ、ミクロ球体、スフェロイド、ペレット、およびミニ錠剤）を含む、多単位薬物の剤形を指す。本開示のＭＤＤＳは、所望の放出プロファイルに沿ってｉｎ ｖｉｖｏでＭＰＡ活性剤を放出する制御放出型の経口組成物であり、例えば、粒子サブユニットを含む、錠剤（ミニ錠剤を含む）、カプセル剤、糖剤、小袋剤、および懸濁剤が挙げられる。「粒子サブユニット」とは、本明細書に記載される場合、ＭＤＤＳの薬物含有サブユニットを指し、例えば、本明細書でさらに記載される場合、ビーズ、顆粒、ミクロ球体、スフェロイド、ペレットなどの形態を取り得る。

【0081】

ある特定の実施形態では、製剤は、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する送達用に調製されるＭＤＤＳを含む。

【0082】

ある特定の実施形態では、ＭＤＤＳは、単一種の粒子サブユニットを含む。他の実施形態では、ＭＤＤＳは、多種の粒子サブユニットを含む。

【0083】

例えば、ＭＤＤＳは、イヌ対象において所望の薬物放出プロファイルを達成するために、異なる放出特徴を有する粒子サブユニットの混合物を含むことができる。ゆえに、ある特定の実施形態では、異なるサイズ、または保護層の有無（本明細書に記載）、または他の特徴のコアを有する複数の粒子サブユニットは、本開示のＭＤＤＳに存在し得る。理論に束縛されることは望まないが、この可撓性は、有利には、イヌ対象の特定のサイズ、活動性、レベル、保留または処置前の応答性、全身的健康、代謝速度または機能、および、他の特定の特徴のような特徴により決定される、特定のイヌ対象（例えば、個々のイヌ）またはイヌ対象の集団もしくは下位集団（例えば、イヌの品種もしくは種）に対して、ＭＤＤＳを選択または較正することを可能にする。粒子サブユニットとして、例えば、ビーズ、顆粒、ミクロ球体、スフェロイド、ペレット、およびミニ錠剤が挙げられる。

【0084】

ある特定の実施形態では、粒子サブユニット（例えば、図１、１００）は、コアおよびＭＰＡ活性剤を含む。さらなる実施形態では、粒子サブユニット１００のコア（例えば、図１、１０２）は、固体の支持コア、例えば、糖ビーズ、糖球体、ノンパレイルビーズ、微結晶性セルロースビーズ、シリカビーズ、炭酸カルシウムビーズ、酒石酸ビーズ、マンニトールビーズ、ラクトースビーズ、デンプンビーズ、または、ＭＰＡ活性剤および本明細書に記載の他の層を配置することができる別の薬学的に許容されるコアを含む。一部の実施形態では、コア１０２は、コア１０２の少なくとも一部に配置される（例えば、コア１０２の一部、または全てに配置される）、活性剤の層（例えば、図１、１０４）を含む。ＭＰＡ活性剤は、例えば、噴霧コーティング、押出、懸濁剤の層状化、乾燥粉末の層状化、噴霧造粒、直接的なペレット化、浸漬コーティング、層状化、塗装、堆積の方法などのような、当該技術分野に公知の方法を使用してコア１０２に配置することができる（例えば、Ｇｌａｔｔ ＧｍｂＨ、Ｂｉｎｚｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙにより概説された方法、ｗｗｗ．ｇｌａｔｔ．ｃｏｍを参照のこと）。

【0085】

代替的な実施形態では、図２に例示される通り、コア２０２は、押出コアであり、ＭＰＡ活性剤を含有する。押出コアは、例えば、米国特許第４，８０８，４１３号および米国特許第５，０４９，３９４号（各々の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載される通り調製することができ、結合剤－可塑剤（例えば、非親油性結合剤－可塑剤（例として微結晶性セルロース））、賦形剤（例えば、デンプン系賦形剤）、または結合剤を含み得る。追加の例示的な押出コアは、Ｍｉｓｓａｇｈｉ ｅｔ ａｌ．， “Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｖｅｎｌａｆａｘｉｎｅ ＨＣｌ Ｒｅｌｅａｓｅ ｆｒｏｍ Ｅｘｔｒｕｄｅｄ ａｎｄ Ｓｐｈｅｒｏｎｉｚｅｄ Ｂｅａｄｓ Ｃｏａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ Ｕｓｉｎｇ Ｏｒｇａｎｉｃ ｏｒ Ａｑｕｅｏｕｓ Ｃｏａｔｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ，” Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ｊｕｌｙ ２００８に記載される通り調製することができ、その開示は、全ての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0086】

例えば、ある特定の実施形態では、押出コア２０２として、約５０ｗｔ％～約９０ｗｔ％のＭＰＡ活性剤（例えば、ミコフェノール酸ナトリウム）、約１０ｗｔ％～約３０ｗｔ％、または約１５ｗｔ％～２０ｗｔ％の押出／球状化助剤、例えば、微結晶性セルロースが挙げられる。本明細書で使用される場合、組成物中の物質の量は、複数の粒子サブユニットを含むＭＤＤＳの総重量に対するではなく、個々の組成物（例えば、単一の粒子サブユニット）の重量に対する物質の重量を意味する、「重量に対して」、「重量パーセント」、または「ｗｔ％」で記載することができる。ある特定の実施形態では、押出コア２０２は、以下の１つまたは複数をさらに含む：約１ｗｔ％～約１０ｗｔ％、好ましくは約２ｗｔ％～約５ｗｔ％の結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルファ化デンプン、エチルセルロース、もしくはポリビニルピロリドン）；放出賦形剤、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、アクリルポリマー、ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）であり、これらはビーズに組み入れられるか、またはコーティングとして塗布することができる；充填剤、例えば、ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、ソルビトール、リン酸二カルシウムなど；ならびに、超崩壊剤（ｓｕｐｅｒｄｉｓｉｎｔｅｇｒａｎｔ）、例えば、架橋ポリ（ビニルピロリドン）（ＰＶＰ）、グリコール酸デンプンナトリウム、またはクロスカルメロースナトリウムなど。

【0087】

押出コア（例えば、押出コア２０２）を有する実施形態では、ＭＰＡ活性剤の少なくとも一部は、コア中に分散、溶解、混合するか、あるいはコアに分布することができる。例えば、ＭＰＡ活性剤は、押出コアを生成するための様々なポリマーおよび他の賦形剤に共溶解し、次いで、押出機に通して、乾燥前に所望のサイズのビーズを形成することができる。本開示の粒子サブユニットによる押出コアを作製するのに好適な方法は、例えば、米国特許第５，０４９，３９４号に記載され、その方法は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0088】

本開示の押出コア２０２がまた、その上に部分的または完全に配置される活性層（すなわち、ＭＰＡ活性剤）を有することが理解されよう。

【0089】

ある特定の実施形態では、理論に束縛されることは望まないが、粒子サブユニットのコア１０２、２０２のサイズは、イヌ対象へのＭＰＡ活性剤の十分な送達を確保することが重要であり得る。例えば、ある特定の例では、イヌが、下部ＧＩにおいて、ある特定の寸法より大きな物質を容易に通過しないことが報告されている。したがって、本明細書で開示される実施形態のいずれかでは、粒子サブユニットのコアは、約０．５ｍｍ～約１０ｍｍの直径を有し得る。例えば、一部の実施形態では、コア（例えば、１０２、２０２）の直径は、約０．５ｍｍ～約９ｍｍ、約１ｍｍ～約８ｍｍ、約１ｍｍ～約７ｍｍ、約１ｍｍ～約６ｍｍ、約１ｍｍ～約５ｍｍ、約２ｍｍ～約５ｍｍ、約２ｍｍ～約４ｍｍ、または、約１ｍｍ、約２ｍｍ、約３ｍｍ、約４ｍｍ、約５ｍｍ、約６ｍｍ、約７ｍｍ、約８ｍｍ、約９ｍｍ、もしくは約１０ｍｍの直径である。ある特定の実施形態では、コアの直径は、約５ｍｍもしくはそれ未満であるか、または約２ｍｍ～約４ｍｍである。例えば、一部のイヌ対象では、約５ｍｍ未満のコア直径は、投与したＭＤＤＳから遊離または分散すると、粒子サブユニットが、ＭＰＡ活性剤の送達のために、イヌ対象の胃を通して、特に、イヌの胃を通して上部消化器官と次に下部消化器官へと、容易に移動することが可能になる。一部のイヌ対象に対して、約５ｍｍより大きな直径を有するコアを伴う粒子サブユニットは、望ましくないほど長期間、胃に残る可能性があり、それによりＭＰＡ活性剤の標的化する送達に影響を及ぼす。

【0090】

加えて、ある特定のイヌの胃の粉砕強度は、ヒトの胃の粉砕強度より著しく高い（約１．５Ｎ（ヒト）対約３．２Ｎ（イヌ）；（例えば、Ｋａｍｂａ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ２２８（１－２）：２０９－２１７ （２００１）を参照のこと）。ゆえに、特定の実施形態では、約５ｍｍ未満の直径を有するコアのような、より小サイズのコアは、粒子サブユニットが胃内部で粉砕されるのを防止することができ、これが、イヌ対象の胃において、ＭＰＡ活性剤の早期の（したがってより効果が小さく有害の可能性がある）放出を起こし得る。

【0091】

一部の実施形態では、本開示の粒子サブユニット（１００、２００）は、コア１０２または２０２の少なくとも一部に配置される制御放出層１０８、２０８を含む。本明細書で使用される場合、「制御放出層」とは、所定の時間もしくは期間にわたって、または、所定の速度で、あるいは、投与に続いてＭＰＡ活性剤の即時放出を含まない放出プロファイルに沿って、ＭＰＡ活性剤の放出をもたらす物質の層を指す。制御放出層を形成するのに好適な物質の非限定例として、様々なポリマー、例えば、セルロースポリマーまたはアクリレートポリマー、セルロースアセテート、セルロースアセテートブチレート、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロースポリマー、調節放出用のＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ポリマー（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ ＲＳ１００およびＲＬ１００の１つまたは両方、両方は任意の比であり得る）、およびポリ（ビニルアクリレート）（ＰＶＡ）ポリマー（例えば、ＫＯＬＬＩＤＯＮ（登録商標）シリーズ）が挙げられる。

【0092】

ある特定の実施形態では、制御放出層は、約１５ｗｔ％～約３５ｗｔ％の組成物を含む。ある特定の実施形態では、制御放出層は、例えば水性エチルセルロースの速度制御ポリマーのような、エチルセルロースを含み得る。制御放出層は、適切な速度制御膜をもたらす任意の方法で適用することができる。例えば、粉末コーティングは、制御放出層に対する堆積ビヒクルとして使用することができる。任意の好適な分散物、例えば、Ｓｕｒｅｌｅａｓｅ（Ｃｏｌｏｒｃｏｎ、Ｈａｒｌｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＰＡ、ＵＳＡ）、または当該技術分野に公知の他の生成物および物質を使用することができる。

【0093】

任意のポリマーブレンドを使用する、いかなる所望のポリマー比も、公知の技術を使用して、所望の放出プロファイルを有する組成物を生成するために利用することができる。

【0094】

したがって、ある特定の実施形態では、制御放出層１０８、２０８は、約５ｗｔ％～約５０ｗｔ％、もしくは約１０ｗｔ％～約４０ｗｔ％、もしくは約２０ｗｔ％～約３０ｗｔ％、または約５ｗｔ％、約１０ｗｔ％、約１５ｗｔ％、約２０ｗｔ％、約２１ｗｔ％、約２２ｗｔ％、約２３ｗｔ％、約２４ｗｔ％、約２５ｗｔ％、約２６ｗｔ％、約２７ｗｔ％、約２８ｗｔ％、約２９ｗｔ％、約３０ｗｔ％、約３１ｗｔ％、約３２ｗｔ％、約３３ｗｔ％、約３４ｗｔ％、約３５ｗｔ％、約３６ｗｔ％、約３７ｗｔ％、約３８ｗｔ％、約３９ｗｔ％、もしくは約４０ｗｔ％で、本明細書に記載のポリマーを含む。ある特定の実施形態では、ポリマーは、エチルセルロースポリマーであり得る。さらにさらなる実施形態では、制御放出層１０８、２０８は、その浸透性をモジュレートする可溶性成分を含み得る。ＭＰＡ活性剤の放出は、制御放出層を形成するために利用される１つもしくは複数のポリマー層の厚みを変えることにより（すなわち、ポリマー層の重量を変えることにより）、または、制御放出層の浸透性に影響を及ぼす孔形成剤を添加することにより、さらに調整することができる。

【0095】

制御放出層は、単一層として適用することができる。具体的な実施形態では、制御放出層は、必要に応じて（球状、環状、円形、または長円形サブユニットの場合）、互いに同心円状に配置される、多層を含む。活性剤が、活性層１０４としてコア１０２の少なくとも一部に配置される場合の実施形態では、制御放出層１０８は、活性層１０４の少なくとも一部に配置することができる。コア２０２が、活性剤の少なくとも一部を含む押出コアである場合の実施形態では、制御放出層２０８は、コア２０２の少なくとも一部に配置される。

【0096】

本明細書に記載の実施形態のいずれでも、粒子サブユニット１００、２００は、制御放出層１０８、２０８の少なくとも一部に配置される保護層１１０、２１０をさらに含み得る。本明細書で使用される場合、「保護層」とは、胃を通して移動する、消化された組成物（例えば、本開示の粒子サブユニット）への分解または溶解からの保護をもたらす物質の層を指す。ある特定の実施形態では、保護層１１０、２１０は、製剤が、下部ＧＩ管のような、イヌ内部の所望の部位に達するまで、ＭＰＡ活性剤の少なくとも一部の放出を遅延するように選択または設計される。例えば、Ｌ１００のようなＥｕｄｒａｇｉｔ Ｌシリーズ（Ｅｖｏｎｉｋ、Ｅｓｓｅｎ、ＤＥ）の１つまたは複数のポリマーを使用して、保護層を形成することができる。ある特定の実施形態では、保護層は、約８ｗｔ％～約１５ｗｔ％の組成物を含む。

【0097】

利用される場合、保護層１１０、２１０は、胃酸のｐＨ（例えば、イヌではおおよそｐＨ１．２～ｐＨ４．５）で一体性を維持することができる、ｐＨ感受性層であり得るが、（イヌでは約４～約８のｐＨを有する）小腸または大腸に達すると、少なくとも部分的に分解する。ある特定の実施形態では、保護層１１０、２１０は、約６．０より大きなｐＨで溶解する。保護層のｐＨ感度、ならびに粒子サブユニットまたは製剤の全体の強度および放出特徴は、処置されるイヌ対象（例えば、大型のイヌ対小型のイヌ）の生理学的特徴にしたがって変化し得ることは理解されよう。保護層１１０、２１０を形成するために好適な物質の例として、腸溶性ポリマー、例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＬまたはＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｓを含むメタクリル酸系ポリマー、酢酸フタル酸セルロース、酢酸コハク酸セルロース、ＨＰＭＣフタル酸塩、ＨＰＭＣ酢酸コハク酸塩、アルギン酸ナトリウム、ゼイン、ポリ酢酸フタル酸ビニル（ＰＶＡＰ）、セラック、メタクリル酸－エチルアクリル酸コポリマー（Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ ＭＡＥ）、およびその混合物が挙げられる。さらなる実施形態では、制御放出層１０８、２０８、および保護層１１０、２１０は、ＭＰＡ活性剤の、ｐＨ依存性の放出ではなく、時間放出をもたらすように設計することができ、その結果、所望により、組成物が、そのまま胃を通過し、小腸および／または大腸でＭＰＡ活性剤（の少なくとも一部）を放出することが可能になる。

【0098】

さらなる実施形態では、本開示の粒子サブユニットは、シールコート１０６、２０６を含み得る。図１の例示的な実施形態に示す通り、粒子サブユニット１００では、シールコート１０６は、コア１０２および活性剤層１０４を制御放出層１０８から分離する。図２で表される例示的な実施形態では、粒子サブユニット２００は、制御放出層２０８をコア２０２から分離するシールコート２０６を含むが、このコア２０２は、ＭＰＡ活性剤の少なくとも一部（すなわち、全てまたは全て未満）を含有する押出コアである。ある特定の実施形態では、シールコート１０６、２０６は、制御放出層または活性剤の相互作用および分解を低減または排除するために、部分的にまたは全体的に、ＭＰＡ活性剤を制御放出層１０８、２０８から分離するのに有用であり得る。しかし、非水性コーティング法を使用して、活性剤層１０４をコア１０２に適用する実施形態では、分解は、それほど問題ではないので、シールコート１０６は、厚みを排除または低減することができる。シールコート１０６、２０６で使用する例示的な組成物として、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリ（ビニルアルコール）（Ｏｐａｄｒｙ ＡＭＢ、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、Ｏｐａｄｒｙシリーズなどを含む、様々なセルロースポリマーが挙げられる。

【0099】

本明細書に記載の実施形態のいずれでも、制御放出製剤（および／または、その粒子サブユニット）は、ＭＰＡ活性剤を胃酸による分解から保護するために、緩衝化剤または緩衝剤をさらに含むことができる。したがって、緩衝剤は、コア１０２、２０２に、またはコア１０２周囲の活性剤層１０４に添加することができる。押出コア２０２の場合、緩衝剤は、コア２０２に添加するか、またはコア２０２周囲の層２０６、２０８、２１０に添加して、緩衝をもたらし、ＭＰＡ活性剤の一体性および活性を維持することができる。本明細書に記載の製剤および粒子サブユニットで使用する例示的な緩衝剤として、限定されないが、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、および酢酸緩衝液が挙げられる。

【0100】

本明細書に記載の実施形態のいずれでも、粒子サブユニットは、ある特定のｐＨ条件下で、ＭＰＡ活性剤の安定性または放出に影響を及ぼす緩衝剤をさらに含む。

【0101】

制御放出製剤の例証的な材料、量、比、および構築は、実施例に記載され、本制御放出製剤の設計および投与は、より一般的に、本開示を考慮して当業者により理解されよう。

【0102】

本開示の制御放出製剤を含み、必要に応じて、製剤をイヌ対象に投与するための説明書をさらに含むキットも、本明細書で提供される。ある特定の実施形態では、キットは、随伴送達部品（ｃｏｍｐａｎｉｏｎ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｐｉｅｃｅ）をさらに含む。随伴送達部品は、例えば、潅注シリンジ、シリンジ、管、経皮貼付剤、製剤を含有する溶液を生成するための混合フラスコ；または製剤を伴って獣医学的対象に与える食品であり得る。ある特定の実施形態では、食品は、獣医学的対象に推奨される食事量のものである。本明細書に記載される通り、食品は、別の品目として、もしくはコーティング、充填としての経口摂取用の製剤、または製剤との混合物を伴うのに有用であり得る。制御放出製剤（例えば、粉剤またはマイクロビーズ）はまた、水または別の液体と混合することができ、その結果イヌ対象が飲む場合に製剤が摂取される。対象が飲めないか、または飲むことに抵抗を示す場合、潅注シリンジは、製剤を対象に送達するのに有用であり得る。

【0103】

関連する実施形態では、キットは、製剤を含む個別に封止された単位剤形を収容する封止パッケージ、例えば、ＭＤＤＳ、カプセル剤、錠剤などを、使用説明書および必要に応じた随伴送達部品を伴って含む。
リンパ球増殖を抑制する方法

【0104】

制御放出型のＭＰＡ製剤は、本明細書に記載の製剤を含むが、リンパ球増殖を抑制し、このような抑制が望ましい可能性がある疾患および状態を処置するのに有用であり得る。さらに、本開示は、最初に、有利な薬力学効果が、制御放出製剤を使用してイヌ対象において達成される、ＭＰＡの薬物動態学の「窓」を提供する。

【0105】

ある特定の態様では、イヌ対象におけるリンパ球増殖を抑制するための方法は、対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬ（例えば、約２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００、または約３０００ｎｇ／ｍＬ）の平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出製剤を投与することを含む。

【0106】

ある特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0107】

ある特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約３５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。制御放出型のＭＰＡ製剤の薬物動態学は、製剤を与えるイヌ対象が、本明細書に記載される通り、摂食状態、または絶食状態であるかどうかに依存し得ることが理解されよう。ある特定の実施形態では、イヌ対象は、摂食状態の場合、第１の用量の制御放出製剤を投与され、対象は、第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。他の実施形態では、イヌ対象は、絶食状態の場合、第１の用量の制御放出製剤を投与され、対象は、第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0108】

ある特定の実施形態では、絶食状態は、イヌ対象が、投与前の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１４、１６、１８、２０、２４時間、またはそれより多い時間以内に摂食した後、必要に応じて、投与の約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１４、１６、１８、または２４時間後までに再び摂食しなかった状態を含み得る。摂食状態は、イヌ対象が投与の直前または投与の前の１時間以内に摂食している状態を含み得る。

【0109】

特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１７００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0110】

特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約６５０ｎｇ／ｍＬ～約１５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0111】

他の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約６００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0112】

特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0113】

一部の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0114】

ある特定の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0115】

他の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0116】

さらに他の実施形態では、対象は、第１の用量の約１～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0117】

理論に束縛されることは望まないが、本開示のＰＫプロファイルは、制御放出製剤を投与されるイヌ対象で望ましいＭＰＡのＰＤをもたらすと考えられている。一部の実施形態では、第１の用量の２．５時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する。

【0118】

ある特定の実施形態では、第１の用量の４時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する。

【0119】

ある特定の実施形態では、第１の用量の８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する。

【0120】

増殖するリンパ球のパーセンテージでの低下が、第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後に達成することができるか、または、示された時間点の任意の２つもしくは３つ全て（すなわち、第１の用量の２．５時間後および４時間後、２．５時間後および８時間後、４時間後および８時間後、もしくは、２．５時間後、４時間後および８時間後）で達成することができることは理解されよう。

【0121】

本開示により達成される薬力学効果は、有利には、制御放出製剤の１日１回の投与を可能にし、これは、一部の実施形態では、イヌ対象、および飼い主またはケア供給者の両方にとってより容易で、よりストレスがなく、より便利であり得る。１日１回の投与に対して、用量は、一般に、朝または晩のいずれかの時間に投与することができる。

【0122】

制御放出型のＭＰＡ製剤の単一の日および複数日の両方の投与は、本開示の方法で熟慮される。複数日の投与に対して、用量は、一般に、各日の同じ時間辺り；例えば、前の投与の約２４時間後に投与される。

【0123】

一部の実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、１日あたり単一用量の制御放出組成物を投与することを含む。有利には、および非常に驚くべきことには、複数の（すなわち、２日またはそれより長い）連続した日数の間、本開示の方法による１日１回用量を投与することは、全身効果をもたらす。

【0124】

ある特定の実施形態では、投与することは、２日またはそれより長く（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く）連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0125】

さらなる実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0126】

一部の実施形態では、投与することは、７日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、イヌ対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量と比較して、（例えば、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、またはそれより高い％を含み、最大でこれらの％である、任意の量で）低下する。

【0127】

さらなる実施形態では、投与することは、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0128】

実施例に示し、本明細書にさらに記述する通り、本開示の方法はまた、単一用量の制御放出製剤が、ＩＲ製剤を１日２回投与する場合を含む、ＭＰＡ活性剤（例えば、ミコフェノール酸モフェチル）を含む即時放出（ＩＲ）製剤において、程度および期間の両方の点で活性を改善する点で有利である。一部の実施形態では、（ｉ）単一用量の投与の４時間後での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージより低い。さらなる実施形態では、（ｉ）単一用量の投与の８時間後での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量は、（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量より低い。

【0129】

「参照イヌ対象」は、本明細書で参照される場合、制御放出製剤を投与されるイヌ対象として、類似のまたは同じ年齢、サイズ、性別、品種、および疾患状態の比較イヌである。参照イヌ対象は、１つまたは複数の用量の即時放出製剤において、ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）のような標準的な医療処置に存在する、１日の総摂取量のＭＰＡ活性剤を与えられる（例えば、１０ｍｇ／ｋｇのＢＩＤ；およそ１０ｋｇのイヌの各用量に対しておよそ７．４ｍｇ／ｋｇのＭＰＡ用量当量）。一部の実施形態では、参照イヌ対象は、イヌ対象に投与される制御放出製剤に存在する約４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、または最大で約１００％の量である、１日の総摂取量のＭＰＡ活性剤を与えられる。例えば、一部の実施形態では、体重がおよそ１２ｋｇのオスの参照ビーグル犬は、即時放出製剤を１日２回投与で与えることができ、各投与は、約８８．５ｍｇのＭＰＡを含有し、合計して約１７７ｍｇのＭＰＡとなる一方、体重がおよそ１２ｋｇのオスのビーグル犬は、約１６８ｍｇのＭＰＡもしくは約２５２ｍｇのＭＰＡ、またはその間の任意の量を含有する本開示の制御放出製剤を１日１回投与で与えることができる。

【0130】

さらに、開示される方法および組成物は、有利には、即時放出製剤で改善された安全性プロファイルを有する。一部の実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長い間、用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。さらなる実施形態では、投与することは、１５日またはそれより長い間、用量を投与することを含み、１５日にわたって、イヌ対象は、消化管の有害事象を示さない。

【0131】

一部の実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長い間、用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えられる参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0132】

さらなる実施形態では、投与することは、１５日またはそれより長い間、用量を投与することを含み、１５日にわたって、イヌ対象は、参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示す。

【0133】

本明細書に記載の実施形態のいずれでも、投与することは、経口投与を含むことができる。

【0134】

一部の実施形態では、方法は、例えば、（ｉ）各々がＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；（ｉｉ）錠剤；（ｉｉｉ）懸濁剤；（ｉｖ）糖剤；または（ｖ）その任意の組合せのような、本明細書に記載の制御放出製剤のいずれか１つまたは複数の使用を含む。特定の実施形態では、制御放出製剤は、各々が約５ｍｍの直径を有する複数の粒子サブユニットを含むＭＤＤＳを含む。

【0135】

ある特定の実施形態では、製剤は、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する対象への送達用に調製されるＭＤＤＳを含む。さらなる実施形態では、ＭＤＤＳの複数の粒子サブユニットの各々は、コアを含み、（ｉ）ＭＰＡ活性剤は、コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または、（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤は、コア内に含有される。

【0136】

さらにさらなる実施形態では、複数の粒子サブユニットの各々は、制御放出層をさらに含み、制御放出層は、（ｉ）のコアのＭＰＡ活性層上に配置されるか、または、（ｉｉ）のコアの少なくとも一部上に配置される。

【0137】

さらに他の実施形態では、複数の粒子サブユニットの各々は、シールコート層を含み、シールコート層は、（ｉ）のコアのＭＰＡ活性層と制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）のコアと制御放出層との間に配置される。

【0138】

さらなる実施形態では、複数の粒子サブユニットの各々は、制御放出層上に配置される保護層をさらに含む。

【0139】

本明細書で開示される実施形態のいずれかでは、第１の用量は、約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇでＭＰＡ活性剤を含む。

【0140】

さらなる実施形態では、第１の用量は、約１５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇでＭＰＡ活性剤を含む。

【0141】

本開示の方法の一部の実施形態では、第１の用量は、約３ｍｇ～約２２００ｍｇのＭＰＡ活性剤を含む。

【0142】

特定の実施形態では、第１の用量は、約１６８ｍｇのＭＰＡ活性剤を含む。一部の実施形態では、第１の用量は、約２５２ｍｇのＭＰＡ活性剤を含む。本開示の実施形態のいずれかでは、ＭＰＡ活性剤は、ミコフェノール酸ナトリウムを含むことができる。一部の実施形態では、制御放出組成物は、食物を伴って対象に投与され、任意の実施形態では、摂食状態、または絶食状態で投与することができる。

【0143】

ある特定の実施形態では、対象は、（ｉ）異常リンパ球増殖に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有する、もしくは有することが疑われる；（ｉｉ）臓器移植および／もしくは人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または、（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である。

【0144】

一部の実施形態は、イヌ対象は、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む、自己免疫疾患または障害を有するか、または有することが疑われる。
処置方法

【0145】

本明細書でさらに提供されるのは、イヌ対象における自己免疫疾患または障害を処置するための方法であって、自己免疫疾患または障害が、リンパ球の異常増殖により特徴付けられ、対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬ（例えば、約２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００、または約３０００ｎｇ／ｍＬ）の平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、単一用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、対象に、ＭＰＡ活性剤を含む単一用量の制御放出組成物を投与することを含む、方法である。

【0146】

一部の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0147】

一部の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約３５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0148】

さらなる実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１７００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0149】

さらにさらなる実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間、約６５０ｎｇ／ｍＬ～約１５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する。

【0150】

一部の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0151】

さらなる実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0152】

さらなる実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0153】

他の実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0154】

さらなる実施形態では、対象は、第１の用量の約１～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0155】

一部の実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含む。

【0156】

ある特定の実施形態では、投与することは、２日またはそれより長く（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く）連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0157】

さらなる実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0158】

さらなる実施形態では、投与することは、７日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0159】

一部の実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長い間、単一用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0160】

特定の実施形態では、自己免疫疾患または障害は、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む。

【0161】

別の態様では、方法は、例えば、臓器移植および／または人工インプラントに対する免疫応答を抑制または処置するための臓器移植または人工インプラント手術に関連して、ＭＰＡ活性剤をイヌ対象に提供するために提供される。一部の実施形態では、方法は、臓器移植および／または人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受けるイヌ対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物を、ＭＰＡ活性剤の約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含み、対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、対象が、単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、単一用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、対象は、１日あたり単一用量の制御放出組成物を与えられる。

【0162】

一部の実施形態では、対象は、第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0163】

一部の実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0164】

ある特定の実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0165】

特定の実施形態では、対象は、単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、単一用量の約１～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する。

【0166】

一部の実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、用量を投与することを含む。

【0167】

ある特定の実施形態では、投与することは、７日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、イヌ対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0168】

さらなる実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長い間、用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0169】

一部の実施形態では、投与に続いて、イヌ対象は、自己免疫疾患または障害に関連する症状の重症度で低下を示す。このような症状として、例えば、発疹、高レベルの自己抗体および／または炎症性サイトカインレベル、発熱、疲労、こり、疼痛、水泡、掻痒、分泌物、湿疹、腫脹、脱毛、食欲不振、喘息、ならびに臭気が挙げられる。
使用

【0170】

別の態様では、本開示は、イヌ対象におけるリンパ球増殖および／または活性化を抑制するための制御放出型のＭＰＡ製剤の使用を提供する。

【0171】

一部の実施形態では、使用は、対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬ（例えば、約２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００、または約３０００ｎｇ／ｍＬ）の平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を達成するように、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出製剤を対象に投与することを含み、対象が、第１の用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約１５００ｍＬ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下する。

【0172】

さらなる実施形態では、対象は、以下の血漿［ＭＰＡ］の平均を達成する：（ｉ）第１の用量に続く８時間にわたって、約３５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍＬ；（ｉｉ）第１の用量に続く８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍｌ～約１７００ｎｇ／ｍＬ；または、（ｉｉｉ）第１の用量に続く８時間にわたって、約６５０ｎｇ／ｍｌ～約１５００ｎｇ／ｍＬ。

【0173】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、第１の用量の２．５時間後、好ましくは４時間後、より好ましくは８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する。

【0174】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、対象は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、組成物を投与される。

【0175】

さらなる実施形態では、対象は、１日あたり単一用量の制御放出組成物を与えられる。

【0176】

さらにさらなる実施形態では、投与することは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、または第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。特定の実施形態では、投与することは、７日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第７日の用量後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する。

【0177】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、（ｉ）第１の用量の投与の４時間後、必要に応じて８時間後での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージは、（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与した参照イヌ対象（すなわち、本明細書に記載の参照イヌ対象）から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージより低い。

【0178】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、投与することは、１０日またはそれより長い間、単一用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0179】

さらなる実施形態では、投与することは、１５日またはそれより長い間、単一用量を投与することを含み、１５日にわたって、対象は、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0180】

さらなる実施形態では、投与することは、１０日またはそれより長い間、単一用量を投与することを含み、１０日にわたって、対象は、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与した参照イヌ対象（すなわち、本明細書に記載の参照イヌ対象）と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象は、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む。

【0181】

さらなる実施形態では、即時放出製剤は、７．４ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、参照イヌ対象に投与されたが、即時放出製剤は、必要に応じてミコフェノール酸モフェチルを含む。

【0182】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、ＭＰＡ活性剤は、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、ミコフェノール酸ナトリウムは、必要に応じてイヌ対象に経口投与される。

【0183】

さらなる実施形態では、制御放出組成物は、各々が（ｉ）コア、ここで、（ａ）ＭＰＡ活性剤が、コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含まれる；または（ｂ）ＭＰＡ活性剤が、コア内部に配置される；（ｉｉ）（ａ）活性層または（ｂ）コアの少なくとも一部上に配置される制御放出層；（ｉｉｉ）（ａ）活性層と制御放出層との間、または（ｂ）コアと制御放出層との間に配置される、必要に応じたシールコート層、（ｉｖ）制御放出層上に配置される必要に応じた保護層を含む、複数の粒子サブユニットを含む充填可能なカプセル剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、必要に応じて、約３ｍｇ～約２．２ｇ（すなわち、約３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８１、８２、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５、３００、３０５、３１０、３１５、３２０、３２５、３３０、３３５、３４０、３４５、３５０、３５５、３６０、３６５、３７０、３７５、３８０、３８５、３９０、３９５、４００、４０５、４１０、４１５、４２０、４２５、４３０、４３５、４４０、４４５、４５０、４５５、４６０、４６５、４７０、４７５、４８０、４８５、４９０、４９５、５００、５０５、５１０、５１５、５２０、５２５、５３０、５３５、５４０、５４５、５５０、５５５、５６０、５６５、５７０、５７５、５８０、５８５、５９０、５９５、６００、６０５、６１０、６１５、６２０、６２５、６３０、６３５、６４０、６４５、６５０、６５５、６６０、６６５、６７０、６７５、６８０、６８５、６９０、６９５、７００、７０５、７１０、７１５、７２０、７２５、７３０、７３５、７４０、７４５、７５０、７５５、７６０、７６５、７７０、７７５、７８０、７８５、７９０、７９５、８００、８０５、８１０、８１５、８２０、８２５、８３０、８３５、８４０、８４５、８５０、８５５、８６０、８６５、８７０、８７５、８８０、８８５、８９０、８９５、９００、９０５、９１０、９１５、９２０、９２５、９３０、９３５、９４０、９４５、９５０、９５５、９６０、９６５、９７０、９７５、９８０、９８５、９９０、９９５、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、または２２００ｍｇ）の制御放出組成物に存在する。

【0184】

本明細書に記載の実施形態のいずれかにしたがって、イヌは、（ｉ）異常リンパ球増殖および／もしくは活性化に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有するか、もしくは有することが疑われ、自己免疫疾患もしくは障害が、必要に応じて、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、もしくはその任意の組合せを含む；（ｉｉ）臓器移植および／もしくは人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または、（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である。

【0185】

一部の実施形態では、投与に続いて、獣医学的対象は、自己免疫疾患または障害に関連する症状の重症度で低下を示すが、症状は、異常リンパ球増殖ではない。このような症状として、例えば、発疹、高レベルの自己抗体および／または炎症性サイトカインレベル、発熱、疲労、こり、疼痛、水泡、掻痒、分泌物、湿疹、腫脹、脱毛、食欲不振、喘息、ならびに臭気が挙げられる。

【0186】

本明細書でさらに提供されるのは、イヌにおけるリンパ球増殖および／または活性化を抑制するための医薬を調製する方法であって、対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ；ミコフェノール酸］を維持し、このような対象が、第１の用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約１５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約１～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、第１の用量前の１５分またはそれ未満での、対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出製剤を調製することを含む、方法である。
投与（Ｄｏｓｉｎｇ）および投与（Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）

【0187】

様々な投与量の本開示の制御放出製剤（および、それらに含有されるＭＰＡ活性剤）を、例えば、獣医学的対象の生理学的特徴（例として、サイズ、ＧＩの長さ、消化速度、消化ｐＨ、胃の粉砕強度）、獣医学的対象の健康状態（例として、処置の必要性およびどの程度の強さの緊急性）、ならびに、他の因子にしたがって、獣医学的対象に投与することができることは理解されよう。例えば、ある特定の実施形態では、投与レジメンまたはスケジュールは、単一用量の本明細書に記載の制御放出製剤の単一用量を含む。ある特定の実施形態では、投与量レジメンまたはスケジュールは、例えば１日の間にわたって単一用量の多回用量を含む。あるいは、投与量レジメンまたはスケジュールは、複数用量の制御放出製剤の単回または多回用量を含み得る。複数用量を含む実施形態では、用量は、同時に、同時期に、または順次、投与することができる。

【0188】

適切な用量は、適切な薬物用量を決定する場合に典型的に考慮される様々な因子、例えば、投与を受ける対象のサイズ、年齢、種、性別、および全身的健康；疾患状態の種類、重症度、および病期；吸収、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期などの薬物の公知のＰＫパラメーターのいずれか１つまたは複数にしたがって決定される。表１は、２～８０キログラムの範囲のサイズのイヌ対象に対する本開示の製剤の投与量の非限定例を提供し；８０キログラムより重いか、もしくは２キログラムより軽いか、もしくは示されたサイズの間、および／または非イヌ種の対象に対して、投与量は、これにしたがって調整することができることは理解されよう。
表１．制御放出製剤の例示的な投与量

【表1】

【実施例】

【0189】

（実施例１）
本開示によるある特定のミコフェノール酸の制御放出型の獣医学的組成物の調製および試験

【0190】

活性剤コーティングされたビーズの調製
材料
糖球体（＃２５／３０；ＣＯＬＯＲＣＯＮ（登録商標）、Ｈａｒｌｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＰＡ）
ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）Ｃｌｅａｒ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース系のコーティング（ＣＯＬＯＲＣＯＮ（登録商標）、Ｈａｒｌｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＰＡ）
精製水
ミコフェノール酸ナトリウム

【0191】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉
表２：薬物コーティング溶液の組成

【表2】

【0192】

１．ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）Ｃｌｅａｒを、精製水に分散し、透明溶液を得られるまで撹拌した。
２．ミコフェノール酸ナトリウムを、この溶液に添加し、１時間撹拌した。
３．５００ｇの糖ビーズを、流動床チャンバー内に充填した。
４．床を流動化し、糖ビーズを加温し、表２に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧した。
５．コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
６．ビーズがおよそ４０重量％に増加するまで、コーティングを継続した。
７．ビーズを、４０℃の熱風炉で終夜（１５時間）乾燥した。

【0193】

活性剤での押出ビーズの例示的な調製
材料
原薬：ミコフェノール酸ナトリウム：５０～９０％
押出／球状化助剤：微結晶性セルロース：１５～２０％
結合剤：ヒドロキシプロピルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはアルファ化デンプン、またはエチルセルロース、またはポリ（ビニルピロリドン）（２～５％）
調節放出賦形剤：ＨＰＭＣ、ＨＰＣ、アクリルポリマー、ＨＥＣ、ＥＣ － これらは、ビーズに組み入れられるか、またはコーティングとして適用され得る。
他の充填剤：ラクトース、マルトデキストリン、マンニトール、ソルビトール、リン酸二カルシウム／（必要に応じて）
超崩壊剤：架橋ＰＶＰ、グリコール酸デンプンナトリウム、クロスカルメロースナトリウム（必要に応じて％）

【0194】

製造
原薬を、遊星型ミキサーまたは高剪断ミキサーで１０分間、微結晶性セルロース、結合剤、および崩壊剤と混合した；
所要量の水をミキサーに添加し、さらに５～１０分間、混合を継続した；
得られる湿塊を押出機に通して、押出物を得た（機器の例：Ｃａｌｅｖａ、ＬＣＩ、Ｇｌａｔｔなど）；
押出物を、次いで、クロスハッチプレート付きスフェロナイザーで球状化して、球状化ビーズを形成した（機器の例：Ｃａｌｅｖａ、ＬＣＩ、Ｇｌａｔｔなど）；
球状化ビーズを、次いで、所望の含水率（＜１％）に達するまで、流動床式乾燥機で乾燥した。
乾燥したビーズを、次いで、スクリーンに通して、微小ビーズ（＜５００μｍ）および粗いビーズ（＞２５００μｍ）を除去した；
乾燥したビーズを、次いで、流動床コーターに充填し、適切な量の速度制御ポリマーでコーティングした（１５～３０％の範囲）；
さらなる腸溶性コーティング（必要に応じて）を、次いで、コーティングされたビーズに適用した；
次いで、全てのコーティングステップが完了した後、ビーズを乾燥した。

【0195】

シールコーティングされたビーズの調製
材料
薬物コーティングまたは押出されたビーズ（上の節より）
ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）Ｃｌｅａｒ
タルク精製水

【0196】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉

【0197】

１．ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）Ｃｌｅａｒを、精製水に分散し、撹拌して、透明溶液を得た。
２．タルクを、ＯＰＡＤＲＹ（登録商標）溶液に分散し、撹拌して、滑らかな分散液を得た。
３．約３００ｇの薬物コーティングされたビーズ（上より）を、流動床コーターに充填した。
４．床を流動化し、薬物コーティングされたビーズを加温し、表３に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧した。
５．コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
６．ビーズがおよそ８～１０重量％に増加するまで、コーティングを継続した。
７．ビーズを、４０℃の熱風炉で終夜（１５時間）乾燥した。
表３：シールコート溶液の組成

【表3】

【0198】

制御放出層の調製：
ＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）コーティング － 選択肢１
材料
シールコーティングされたビーズ（上より）
ＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）Ｅ－７ １９０４０、水性エチルセルロース速度制御ポリマー（ＣＯＬＯＲＣＯＮ（登録商標）、Ｈａｒｌｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＰＡ）（他のグレードのＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）を、所望により使用することができる）

【0199】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉
表４：ＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）コーティング溶液の組成

【表4】

【0200】

１．ＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）を、精製水に分散し、撹拌して、滑らかな分散液を得た。
２．約３００ｇのシールコーティングされたビーズを、流動床コーターに充填した。
３．床を流動化し、シールコーティングされたビーズを加温し、表４に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧した。
４．コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
５．ビーズが所望のコーティング重量に増加するまで、コーティングを継続した。
６．コーティングされたビーズの試料を、所望の重量増加（例えば、１５％、２２％、３０％）で採取した。
７．コーティングの終了時、ビーズを、６０℃／７５％の相対湿度条件で、炉内で終夜乾燥した。

【0201】

ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）コーティング － 選択肢２
材料
シールコーティングされたビーズ（上より）
ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ（粉末または予め作製した分散液のいずれかとしてのアクリル制御放出ポリマー － ＲＳ ３０Ｄ）
ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＬ（粉末または予め作製した分散液のいずれかとしてのアクリル制御放出ポリマー － ＲＬ ３０Ｄ）
タルク
クエン酸トリエチル（ＴＥＣ）

【0202】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉
表５：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）コーティングのための試料組成物

【表5】

＊本組成物は、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ（９０）：ＲＬ（１０）、またはＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ／ＲＬ：９０／１０とも称す。この比は、任意の組成で変更することができ、ＲＳ １００の量が増加すると、ビーズからの放出速度を低減しながら膜浸透性も低下する。

【0203】

１．タルクおよびＴＥＣを、精製水に分散し、滑らかな分散液を得られるまで均質化した。
２．ステップ（１）からの分散液を、均一な分散液を得られるまで混合した。
３．分散液を８０メッシュ篩で濾過して、任意の粗い粒子を除去した。
４．約３００ｇのシールコーティングされたビーズを、流動床コーターに充填した。
５．床を流動化し、シールコーティングされたビーズを加温し、表４に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧した。
６．所望の重量増加（典型的には１５％～３０％）が得られるまで、コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
７．コーティングされたビーズを、４０℃の熱風炉で終夜（１５時間）乾燥した。

【0204】

Ｅ．Ｒ．コーティング － 選択肢３
材料
エチルセルロース１０
Ｋｌｕｃｅｌ ＥＦ（ＨＰＣ）
タルク
セバチン酸ジブチル
ＤＩ水
エタノール

【0205】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉
噴霧器
表６：３０ｗｔ％増加のための試料組成

【表6】

【0206】

１．セバチン酸ジブチルを、エタノールおよび脱イオン水の混合物に溶解した。
２．所要量のＨＰＣを、水アルコール性混合物に分散し、撹拌して、溶液を得た。
３．所要量のエチルセルロースを、上記の混合物に分散し、溶液を得るまで撹拌した。
４．タルクを、上記の溶液に分散し、撹拌して、滑らかな分散液を得た。
５．薬物コーティングされたビーズを、流動床コーターに充填した。
６．床を流動化し、ビーズを加温し、ステップ４に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧した。
７．コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
８．ビーズが所望のコーティング重量に増加するまで、コーティングを継続した。
９．コーティングされたビーズの試料を、所望の重量増加（例えば、１５％、２２％、または３０％）で採取した。

【0207】

保護層の調製
材料
制御放出層コーティングされたビーズ（上より）
ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ ５５（腸溶性保護をもたらす他のグレードのＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ポリマー、またはＯＰＡＤＲＹ（登録商標）ポリマーもまた使用することができる）
クエン酸トリエチル（ＴＥＣ）
タルク

【0208】

機器
機械式攪拌機
流動床コーター
熱風炉
表７：腸溶性コーティング溶液の組成

【表7】

【0209】

１．タルクおよびＴＥＣを、精製水に分散し、滑らかな分散液を得られるまで均質化した。
２．ステップ（１）からの分散液を、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ ５５懸濁液に分散し、均一な分散液を得られるまで混合した。
３．分散液を８０メッシュ篩で濾過して、あらゆる粗い粒子を除去した。
４．約３００ｇのＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標）コーティングされたビーズを、流動床コーターに充填した；あるいは、上からの約３００ｇのＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）コーティングされたビーズを使用することができる。
５．床を流動化し、制御放出コーティングされたビーズを加温し、表７に記載する通り調製されたコーティング溶液を流動化したビーズに噴霧する。
６．ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ ５５の所望の重量増加が得られるまで（典型的には８～１５％）、コーティングされたビーズを周期的に乾燥および計量しながら、コーティングを継続した。
７．コーティングされたビーズを、４０℃の熱風炉で終夜（１５時間）乾燥した。
放出速度の決定

【0210】

放出速度の決定は、制御放出層および必要に応じて保護層でのコーティング後に得られるビーズで実施した。放出速度の決定は、以下の通り、実施した：
溶解装置：ＵＳＰ １型
溶解媒体の体積および速度：１００ｒｐｍで９００ｍＬ

【0211】

公知の量のビーズを、（コーティングされたビーズのアッセイに基づいて）計量し、ＵＳＰ １型のバスケット装置に置いた。二相溶解プロファイル（二相媒体）に対して、ビーズを、ｐＨ１．２の媒体に２時間、曝露した。２時間後、バスケットを、ｐＨ６．８で緩衝媒体に移動し、所望により、さらに１０時間、１２時間、１４時間、または２４時間、溶解を継続した。アリコートを、周期的間隔で採取し、ＵＶ検出法を使用してミコフェノール酸ナトリウムを分析した。代表的実験からのデータは、以下の図６～９および表８に示す。

【0212】

図４は、上述の通り、二相媒体での制御放出ビーズからのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ビーズ構築物は、糖球体／薬物層／ＨＰＭＣシールコート／エチルセルロース（ＳＵＲＥＬＥＡＳＥ（登録商標））である。データは、制御放出層のみを有するビーズに対して生成した。保護層は含まなかった。示す通り、２２重量％のエチルセルロースの制御放出層でコーティングされたビーズからの放出は、３０重量％のエチルセルロース層でコーティングされたビーズのものより高かった。両方の組成物とも、ｐＨ１．２（０～２時間）でその一体性を維持したが、ｐＨ６．８（＞２時間）に移行すると即時放出した。

【0213】

図５は、ｐＨ６．８媒体での制御放出ビーズからのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ビーズ構築物は、糖球体／薬物層／ＨＰＭＣシールコート／アクリルポリマー（ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ １００）である。保護層は含まなかった。

【0214】

図６は、上述の通り、二相媒体での制御放出ビーズからのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ビーズ構築物は、糖球体／薬物層／ＨＭＰＣシールコート／ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ １００／ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ ５５である。ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ １００層は、制御放出特徴をもたらす一方、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ３０Ｄ ５５は、保護的な腸溶性コーティングをもたらす。示す通り、放出は、ｐＨ１．２（０～２時間）でほとんどから全く起こらなかったが、ｐＨが６．８（＞２時間）に上昇すると放出した。

【0215】

図７は、ｐＨ６．８媒体での制御放出ビーズからのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ビーズ構築物は、糖球体／薬物層／ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳ １００：ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＬ １００（９０：１０）である。シールコートおよび保護層は、含まなかった。即時放出は、２～６時間辺りで起こることが示されている。

【0216】

図８は、３０ｗｔ％のＳｕｒｅｌｅａｓｅポリマーおよび保護的な腸溶性コーティングを含む、粒子サブユニット（コーティングされたビーズ）からのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ｐＨは、２時間のインキュベートに続いて、１．２から６．８に変化した。

【0217】

図９は、溶媒系コーティングを含む、粒子サブユニット（コーティングされたビーズ）からのミコフェノール酸ナトリウムの放出を示す。ｐＨは、２時間のインキュベートに続いて、１．２から６．８に変化した。

【0218】

下記の表７は、本開示による２つの例示的な製剤の粒子サブユニットからのＭＰＡ活性剤放出データを示す。２セットの延長放出型の腸溶性コーティングのＮａ．ＭＰＡでコーティングされたビーズを、上述の通り調製し（２２ｗｔ％のＳｕｒｅｌｅａｓｅコーティングおよび３０ｗｔ％のコーティング）、酸に（２時間、ｐＨ１．２）、その後、ｐＨをおよそ６．８まで上昇させる緩衝剤に置いた。
表８．

【表8】

【0219】

（実施例２）
ミコフェノール酸の制御放出型のミニ錠剤の調製
材料
ミコフェノール酸ナトリウム２０～６０％、好適には５０％
微結晶性セルロース３０～６０％、好適には４３％
ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）１～１０％、好適には５％
ステアリン酸マグネシウム０．５～５％、好適には２％

【0220】

所要量のミコフェノール酸ナトリウムおよび微結晶性セルロースを、高剪断ミキサーで約５分間、一緒に混合した。
所要量のＰＶＰを、水に溶解して、１０％ｗ／ｗのＰＶＰ溶液を形成した。
ＰＶＰ溶液を、高剪断ミキサーに徐々に添加し、ブレンドを、湿塊が形成されるまで混合した。
湿塊を、流動床式乾燥機に移動し、乾燥した。
乾燥した造粒を、非常に粗い粒子および非常に微小な粒子を除去するように、篩に通した。
篩った造粒を、Ｖ型ブレンダーに移動し、ステアリン酸マグネシウムと約３分間混合した。
滑沢した顆粒を、圧縮成形機に２ｍｍの円形標準凹形マルチチップの器具を使用して、ミニ錠剤に圧縮した。
ミニ錠剤を、上述の通り、シールコート、制御放出層、および保護層でコーティングした。
適切な量のミニ錠剤を、カプセル剤に充填して、スラリーとして、小袋剤、糖剤などとしてのいずれかで、獣医学的対象に投与することができる。
（実施例３）
イヌモデルでのＭＰＡのｉｎ ｖｉｖｏでの薬物動態学

【0221】

２つの単一用量交差試験を、イヌモデル（オスのビーグル犬）を使用して実施して、腸溶性コーティングされた延長放出型のミコフェノール酸ナトリウム製剤（「ＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰ」）の潜在性を評価した。第１の交差試験では、１８０ｍｇのＥＣ－Ｎａ．ＭＰＡの経口投与に続く、ＭＰＡおよびその代謝物（ＭＰＡＧおよびＡｃＭＰＡＧ）の薬物動態学を、Ｎａ．ＭＰＡの結腸内（ＩＣ）投与と比較した。第２の交差試験では、２７０ｍｇのＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰＡ製剤を、摂食状態および絶食状態の両方で投与し、薬物動態学を、絶食状態での１０ｍｇ／ｋｇのＭＭＦの経口投与と比較した。両試験は、Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）で実施した。

【0222】

試験１：ＩＣ投与前の３日間、イヌ（ｎ＝５）に、缶入りの湿潤食物（Ｐｅｄｉｇｒｅｅ（登録商標）Ｃｈｏｉｃｅ Ｃｕｔｓ）からなる軟食を与えた。さもなければ、イヌに、標準的な飼料（ＬａｂＤｉｅｔ ５００６試験用イヌ飼料）を与えた。各投与事象の前に、イヌは、食物を戻す場合、投与の１２時間前から投与の４時間後まで絶食した。動物は、試験中、水は自由に摂取させた。ＩＣ投与前、各イヌは、投与のおよそ１時間前に非刺激性の浣腸剤を与えて、結腸から糞便を除去した。ＰＯ投与前、各イヌ（ｎ＝５）は、投与のおよそ３０分前、ペンタガストリン（６μｇ／ｋｇ）の筋肉内投与で前処置した。カプセル剤を、喉の奥に置き、その後１０ｍＬの水で流すことにより投与した。

【0223】

各イヌは、投与毎に総用量で１８０ｍｇのＭＰＡを与えた。ＩＣ投与に対して、ＭＰＡを、内視鏡を介して溶液として送達し、ＰＯ投与に対して、各イヌに、単一のＭｙｆｏｒｔｉｃ（登録商標）の１８０ｍｇの腸溶性コーティングされたカプセル剤を与えた。投与に続いて、血液試料を、投与の最大２４時間後に収集した。ＭＰＡ、ＭＰＡＧ、およびＡｃＭＰＡＧの血漿濃度を、定量化ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法で決定し、薬物動態パラメーターを、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ｖ．６．４ソフトウェアで決定した。

【0224】

ＭＰＡのＩＣ投与に続いて、最大血漿濃度（２９４６０±１２５８７ｎｇ／ｍＬの平均Ｃ_ｍａｘ）を、投与後の５～３０分間に観察した。平均半減期は、５．５５±１．７７時間であり、用量補正したＡＵＣ_ｌａｓｔに基づく平均曝露量は、１８１７±９２５時間^＊ｋｇ^＊ｎｇ／ｍＬ／ｍｇだった。ＭＰＡ投与後のＭＰＡＧの平均Ｃ_ｍａｘは、４８２６±１１５６ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡＧのｔ_ｍａｘは、投与後の１５分から１時間の範囲であり、平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、１１７０２±４７９４時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡ投与後のＡｃＭＰＡＧの平均Ｃ_ｍａｘは、３０３±８７．８ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡＧのｔ_ｍａｘは、投与後の５から１５分間の範囲であり、平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、２３３±１６０時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。

【0225】

ＭＰＡのＰＯ投与に続いて、最大血漿濃度（２７３２０±１２０３７ｎｇ／ｍＬの平均Ｃ_ｍａｘ）を、投与後の３０分～２時間に観察した。２匹のイヌで測定した、平均半減期は、４．４９時間であり、用量補正したＡＵＣ_ｌａｓｔに基づく平均曝露量は、２２３４±７９９時間^＊ｋｇ^＊ｎｇ／ｍＬ／ｍｇだった。ＭＰＡ投与後のＭＰＡＧの平均Ｃ_ｍａｘは、１４３１６±５０３３ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡＧのｔ_ｍａｘは、投与後の１から２時間の範囲であり、平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、２８８８２±８３１３時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡ投与後のＡｃＭＰＡＧの平均Ｃ_ｍａｘは、４２６±１１３ｎｇ／ｍＬだった。ＭＰＡＧのｔ_ｍａｘは、投与後の３０分から２時間の範囲であり、平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、５２９±２１７時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。

【0226】

平均値に基づいて、ＭＰＡに対する全身的曝露は、ＩＣおよびＰＯ投与後に類似した。ＩＣおよびＰＯ投与後の平均Ｃ_ｍａｘは、それぞれ２９４６０および２７３２０ｎｇ／ｍＬであり、用量補正した平均ＡＵＣ_ｌａｓｔ値を、それぞれ１８１７および２２３４時間^＊ｋｇ^＊ｎｇ／ｍＬ／ｍｇだった。しかし、ＭＰＡは、ＰＯ投与と比較して、ＩＣ投与後に、より迅速に吸収されるように見えた。ＭＰＡＧは、ＡｃＭＰＡＧより高い血漿での濃度で存在した。ＩＣ投与後のこれらのグルクロニド代謝物の各々への全身的曝露は、ＰＯ投与後のおよそ４０％だった。ＭＰＡＧに対する平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、ＰＯ投与後は２８８８２時間^＊ｎｇ／ｍＬであり、ＩＣ投与後は１１７０２時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。ＡｃＭＰＡＧに対する平均ＡＵＣ_ｌａｓｔは、ＰＯ投与後は５２９時間^＊ｎｇ／ｍＬであり、ＩＣ投与後は２３３時間^＊ｎｇ／ｍＬだった。

【0227】

平均薬物動態パラメーター、および薬物の代謝物に対する比は、表９にまとめる。ＭＰＡ／ＭＰＡＧ比およびＭＰＡ／ＡｃＭＰＡＧ比は、経口投与と比較して、ＩＣ投与後に、ほぼ２倍であると各々観察された。
表９：Ｎａ．ＭＰＡの経口および結腸内投与後の平均ＭＰＡ、ＭＰＡＧ、およびＡｃＭＰＡＧ薬物動態パラメーター（ｎ＝５匹のオスのビーグル犬）

【表9-1】

【表9-2】

Ｃ_ｍａｘ：最大血漿濃度；ｔ_ｍａｘ：最大血漿濃度の時間；ｔ_１／２：半減期；ＭＲＴ_ｌａｓｔ：平均滞留時間、最終観察時点で計算；ＡＵＣ_ｌａｓｔ：曲線下面積、最終観察時点で計算；ＡＵＣ_∞：曲線下面積、無限大まで外挿した；ＢＬＯＱ：定量限界未満（１ｎｇ／ｍＬ）；ＮＤ：未決定。

【0228】

試験２：この処置交差試験では、摂食状態および絶食状態での２７０ｍｇのＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰ（「ＯＫＶ－１００１」）を投与後のＭＰＡおよびその代謝物（ＭＰＡＧおよびＡｃＭＰＡＧ）の薬物動態学は、絶食状態での即時放出型の１０ｍｇ／ｋｇのＭＭＦを経口投与後のものと比較した（１用量群当たり、ｎ＝５；各処置に対する同じ群のイヌ）。

【0229】

絶食状態でのＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰおよびＭＭＦ投与に対して、イヌに、認定されている試験用飼料（ＬａｂＤｉｅｔ製の５００６試験用イヌ飼料）を摂食させた後、投与前の最低１２時間、絶食した。食物は、投与のおよそ４時間後に提供した。水は、動物に適宜供給した。

【0230】

摂食状態でのＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰ投与に対して、イヌに、認定されている試験用飼料（ＬａｂＤｉｅｔ製の５００６試験用イヌ飼料）を摂食させ、最低１２時間、絶食した後、投与前に（Ａｌｐｏ Ｃａｎ ｆｏｏｄを）摂食させ、その後、食物完了後の３０分以内に投与した。各動物に提供され、消費した食物の量を記録した。通常の試験用飼料は、投与のおよそ４時間後に提供した。水は、動物に適宜供給した。

【0231】

ＭＭＦ投与に対して、ＭＭＦ経口懸濁液を、ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）用の説明書にしたがって調製した。残留投与溶液を、室温で保管した。

【0232】

両ＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰ処置に対して、血液を、投与前、その後の、３０分、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、６、８、９、１２、および２４時間（処理して血漿を得た）；または、１、２、３、４、６、８、１２、および２４時間（処理してＰＢＭＣを得た）のいずれかで収集した。ＭＭＦ処置に対して、血液を、投与前、１５分、３０分、１、１．５、２、２．５、３、４、６、８、９、１２、および１８時間（処理して血漿を得た）；または、投与前、１、２、３、４、６、８、１２、および１８時間（処理してＰＢＭＣを得た）のいずれかで収集した。

【0233】

ＭＰＡ、ＭＰＡＧ、およびＡｃＭＰＡＧの血漿濃度を、定量化ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法で決定し、薬物動態パラメーターを、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ｖ．６．４ソフトウェアで決定した。血漿濃度曲線は、図１０～１３に示す。平均薬物動態パラメーター、および薬物の代謝物に対する比は、表１０にまとめる。絶食状態下で、ＭＰＡ／ＭＰＡＧ比は、参照の経口投与と比較して、ＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰで１．５～２．０倍高かった（表１０）。ＭＰＡ／ＡｃＭＰＡＧ比もまた、より低い程度だが、より高い傾向だった。
表１０：経口ＭＭＦおよびＥＣ－ＥＲ－Ｎａ．ＭＰの投与後のＭＰＡおよび代謝物の平均薬物動態パラメーター

【表10-1】

【表10-2】

Ｃ_ｍａｘ：最大血漿濃度；ｔ_ｍａｘ：最大血漿濃度の時間；ｔ_１／２：半減期、末期での２点を使用して計算；ＭＲＴ_ｌａｓｔ：平均滞留時間、最終観察時点で計算；ＡＵＣ_ｌａｓｔ：曲線下面積、最終観察時点で計算；ＡＵＣ_？：曲線下面積、無限大まで外挿した、ｔ_１／２値が利用できなかった場合、平均の群の値を使用した；ＢＬＯＱ：定量限界未満（１ｎｇ／ｍＬ）；ＮＤ：未決定。

【0234】

試験３：別の交差試験を実施して、ＭＰＡおよびその代謝物（ＭＰＡＧおよびＡｃＭＰＡＧ）の単一用量および定常状態の薬物動態学を決定した。試験設計は、図１４に示す。具体的には、健康なオスのビーグル犬の３群（合計で２１匹のイヌに対して、１群当たり、ｎ＝７；Ｍａｒｓｈａｌｌ ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅｓ、Ｎｏｒｔｈ Ｒｏｓｅ、ＮＹ、ＵＳＡ）を、２処置、２期間の逐次的な適応交差試験に参加させた。２つの５日間の反復投与試験の期間を、１６日間のウォッシュアウト期間で分割した。イヌは、登録の時点で、少なくとも２歳だった。

【0235】

最初の５日間では、３群のイヌ（１群当たり、ｎ＝７）を無作為化して、ＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇ）プロファイル１ ＱＤ（群Ａ）、ＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇ）プロファイル２ ＱＤ（群Ｂ）、またはＭＭＦ（１０ｍｇ／ｋｇ）経口懸濁液 ＢＩＤ（群Ｃ）のいずれかを与えた。プロファイル１を、プロファイル２に比較して、ＭＰＡ活性剤のより速い放出用に製剤化した。１０ｍｇ／ｋｇのＢ．Ｉ．Ｄで投与された、ＭＭＦ経口懸濁液（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）経口懸濁液、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ ＵＳＡ Ｉｎｃ．、Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、ＣＡ）は、参照群として役立った。１６日間の洗浄期間は、最初の５日間後に起こり、第１の期間からの結果を試験した。次いで、イヌを、第２の期間で交差して、ＯＫＶ－１００１（３６５ｍｇ）プロファイル１ ＱＤ（群Ａ）、またはＯＫＶ－１００１（３６５ｍｇ）プロファイル２ ＱＤ（群Ｂ）、またはＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇ）プロファイル１ ＱＤ（群Ｃ）を与えた。各群および期間でイヌが受けた処置は、表１１にまとめる。
表１１： 試験３において各群が受けた処置

【表11】

【0236】

２つの試験期間は、同一の給餌およびサンプリングの手順を有した。第１日に、ＰＫ試料を、１２時間の絶食後に収集した一方、動物に第５日に摂食させた１時間後に、試料を収集した。投与する時点で、あらゆる食べ残しの食物を除去し、各動物に提供され、消費した食物の量を記録した。第２～５日で、動物に、朝の用量の投与の１時間前に、朝、１日１回摂食させた。

【0237】

第１日および第５日に、経静脈を介して収集した連続血液試料を、投与前（０分）、ならびに、ＭＭＦ投与後の１５および３０分、次いで１、１．５、２、２．５、３、４、６、８、９、および１２時間に収集した。ＯＫＶ－１００１に対して、投与前（０分）、ならびに、３０分、次いで１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、６、８、９、１２、および２４時間に、試料を収集した。定量化し確認されたＧＬＰの簡便なＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血漿ＭＰＡ、ＭＰＡＧ、ＡｃＭＰＡＧ血漿濃度を定量化した。

【0238】

各動物の全身的健康を、試験の過程で、各血液サンプリングの時間点で評価した。血液サンプリングを行わない試験日または血液サンプリングの１つの時間点でのみ、全身的健康を、少なくとも１日２回（午前および午後）評価した。

【0239】

標準的な非コンパートメント薬物動態パラメーター（第１日の用量後のＣ_ｍａｘ、Ｔ_ｍａｘ、ｔ_１／２、ＡＵＣ_ｌａｓｔおよびＡＵＣ_ｉｎｆ；第５日の投与後のＣ_ｍａｘ、Ｔ_ｍａｘおよびＡＵＣ_ｔａｕ（ｔａｕは、ＭＭＦに対して１２時間であり、ＯＫＶ－１００１に対して２４時間である））を、ＭＰＡ、ＭＰＡＧおよびＡｃＭＰＡＧに対して、Ｐｈｏｅｎｉｘ Ｗｉｎｎｏｎｌｉｎソフトウェア６４（ビルド７．０．０．２５３５）を使用して推定した。第１日（絶食；単一用量）での各処置群のＭＰＡ血漿濃度レベルは、図１５に示す。第５日（摂食；定常状態）での各処置群のＭＰＡ血漿濃度レベルは、図１６に示す。群Ｃ、群Ａ、および群Ｂでの計算された薬物：代謝物（Ｄ：Ｍ）の比は、それぞれ、表１２、１３、および１４に示す。試験２からの参照比の値も示す。全ての処置群に対する非コンパートメントＰＫパラメーターの推定値は、表１５に提供する。群Ｂ／期間２／第５日からのデータが、７匹のイヌのうち５匹から得られなかったことは留意すべきである。
表１２．試験３群Ｃおよび試験２：平均Ｄ：Ｍ比の概要

【表12】

表１３．試験３群Ａおよび試験２：平均Ｄ：Ｍ比の概要

【表13】

表１４．試験３群Ｂおよび試験２：平均Ｄ：Ｍ比の概要

【表14】

表１５．単一用量および定常状態のＭＰＡおよびＭＰＡＧの平均薬物動態パラメーター－群Ａ（ｎ＝７）

【表15-1】

【表15-2】

^ａ第１日に対するＡＵＣ_ｉｎｆ、および第５日に対するＡＵＣ_０－２４
^ｂｎ＝６
^ｃｎ＝５
^ｄ群Ｂ／期間２／第５日は、データを５匹のイヌから入手できなかったので存在しない
（実施例４）
制御放出型のＭＰＡ組成物の製造

【0240】

制御放出型のＭＰＡ組成物（２つのプロファイル、「プロファイル１」および「プロファイル２」）を、以下の通り製造した。

【0241】

１．所要量のヒプロメロース２９１０および精製水を、ヒプロメロースが完全に溶解するまで、好適な容器で一緒に混合した。所要量のミコフェノール酸ナトリウムを、ヒプロメロース溶液に添加し、原薬が全て溶解するまで混合した。

【0242】

２．適量の微結晶性セルロース球体を、適切なサイズの流動床コーターのチャンバーに充填した。ビーズを４８℃に予め加温した。

【0243】

３．ステップ１で調製した薬物－結合剤溶液を、床を５０℃に維持しながら、流動床コーターの微結晶性球体に噴霧した。薬物結合剤溶液を、４４％の重量増加を乾燥ビーズで達成するまで、球体に噴霧した。

【0244】

４．薬物充填ビーズを、７５毎分立方フィート（ｃｆｍ）で気流を維持しながら、周囲温度でおよそ１０分間、乾燥した。

【0245】

５．サブコーティング溶液を、Ｏｐａｄｒｙ Ｃｌｅａｒおよび精製水を、透明な溶液を形成するまで、好適なミキサーで混合することにより調製した。

【0246】

６．適量の薬物充填ビーズを、適切なサイズの流動床コーターのチャンバーに置いた。ビーズを５０℃に予め加温し、サブコーティングの過程の間、５０℃を維持した。

【0247】

７．ステップ５で調製したサブコーティング溶液を、７％の重量増加をビーズで達成するまで、流動床コーターで薬物コーティングされたビーズに噴霧した。ビーズを、９０ｃｆｍで気流を維持しながら、周囲温度でおよそ１０分間、乾燥した。

【0248】

８．速度制御膜の溶液を、以下の通り、調製した：所要量のＤＩ水およびエタノールを、均質になるまで好適なミキサーで一緒に混合した。セバチン酸ジブチルを添加し、混合して、均質な懸濁液を形成した。エチルセルロースおよびＫｌｕｃｅｌ ＥＦを添加し、混合して、均質な懸濁液を形成した。所要量のタルクを添加し、均一な懸濁液を形成するまで混合した。

【0249】

９．適量のサブコーティングされたビーズを、適切なサイズの流動床コーターのチャンバーに置いた。ビーズを４２℃に予め加温した。

【0250】

１０．ステップ８で調製した速度制御膜を、流動床コーターで薬物コーティングされたビーズに噴霧した。膜コーティング溶液を、３０％（プロファイル１）または４５％（プロファイル２）の重量増加をビーズで達成するまで、球体に噴霧した。コーティングが完了した後、ビーズを、５０ｃｆｍの場合の気流体積で、周囲温度でおよそ１０分間、乾燥した。

【0251】

１１．腸溶性コート溶液を、所要量のＰｌａｓａｃｒｙｌ ＨＴＰ２０を所要量のＤＩ水と混合することにより調製した。Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ ５５を分散させ、均質な懸濁液を得られるまでこの溶液を混合した。

【0252】

１２．適量の膜コーティングされたビーズを、適切なサイズの流動床コーターのチャンバーに置いた。ビーズを２９℃に予め加温した。

【0253】

１３．ステップ１１で調製した腸溶性コーティング溶液を、流動床コーターで薬物コーティングされたビーズに噴霧した。腸溶性コーティング溶液を、プロファイル１およびプロファイル２の両製剤に対して２５％の重量増加をビーズで達成するまで、球体に噴霧した。ビーズを、コーティングが完了した後、周囲温度でおよそ１０分間、乾燥した。

【0254】

１４．乾燥ビーズを、獣医学的サイズ１３のゼラチンカプセルに、手動で充填した。カプセルを、１８０ｍｇまたは２７０ｍｇのいずれかのミコフェノール酸ナトリウムと同等なビーズで充填した。２７０ｍｇのミコフェノール酸ナトリウムを含有する最終ＭＤＤＳ生成組成物は、表１６に示した。
表１６．ＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇのＮａ．ＭＰＡ）の最終生成組成物

【表16-1】

【表16-2】

（実施例５）
イヌ対象におけるＭＰＡ薬力学の非盲検試験

【0255】

イヌのＭＰＡの薬力学効果を、Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）で実施した並行１５日非盲検試験で調査した。一試験では、オスのビーグル犬に、３つの投与レジメン（２７０ｍｇのＭＰＡ、ＱＤ；１８０ｍｇのＭＰＡ、ＱＤ；１８０ｍｇのＭＰＡ、ＢＩＤ）の１つの下、本開示の制御放出型のＭＰＡ組成物（「ＯＫＶ－１００１」）を投与した。試験の概念は、図１７に概略的に示し、データ収集のタイムラインは、図１８に示す。並行試験では、イヌに、即時放出型のミコフェノール酸モフェチル（「ＩＲ－ＭＭＦ」）カプセル剤（１２０ｍｇのＭＰＡ；ｎ＝５匹のイヌ、ＢＩＤ）、またはプラセボ（ｎ＝１）を与えた。試験設計のさらなる詳細は、以下に示す。
イヌ

【0256】

両試験では、最小月齢２４か月で、初期体重約１０～１４ｋｇである健康なオスのビーグル犬（Ｍａｒｓｈａｌｌ Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ、Ｎｏｒｔｈ Ｒｏｓｅ、ＮＹ）を使用した。イヌは、一部屋において、１ケージ毎に１匹で収容した。イヌは、耳の入れ墨で同定した。
給餌および給水のスケジュール

【0257】

試験開始前の少なくとも３日間、動物には、食事スケジュール（朝、１日１回、乾燥した認定されている試験用飼料（ＬａｂＤｉｅｔ製の５００６試験用イヌ飼料）および缶入りの湿潤ドッグフード（Ａｌｐｏ（商標））の１：１混合物を５００ｇ）に順応させて給餌した。給餌スケジュールは、両試験の期間を通して維持した。全ての食物は、第１の１日用量の投与の１時間前に除去した。

【0258】

各動物に提供され、消費した食物の定量的な量を、両試験を通して記録した。水は、試験を通して動物に適宜供給した。ＯＫＶ－１００１を与えたイヌでは、各動物の体重を、第１日および第１５日の投与前に測定した。ＩＲ－ＭＭＦを与えたイヌでは、体重を、第１日、第８日および第１５日の投与前に測定した。試験所員は、室内に入る前に、新品で、清潔な個人防御用装備、ならびにフェイスマスクおよびヘアネットを着用した。
薬物投与

【0259】

ＯＫＶ－１００１試験では、動物に、２７０ｍｇもしくは１８０ｍｇのＭＰＡ ＱＤ、または１８０ｍｇのＭＰＡ ＢＩＤのいずれかを含む経口カプセル剤を与えた。ＱＤ投与は、第１日～第１５日に実施した。ＢＩＤ投与は、第１日～第１４日、および第１５日の最終単一用量に実施した。

【0260】

ＭＭＦ－ＩＲ試験では、ＢＩＤ投与は、第１日～第１４日、および第１５日の最終単一用量に実施した。

【0261】

各試験のＢＩＤ投与は、およそ１２時間間隔で実行した。

【0262】

両試験では、カプセル剤を喉の奥に置き、１０ｍＬの水で流すことにより、全ての日のおよそ同じ時間に薬物を投与した。
全身的健康および便の観察

【0263】

各動物の全身的健康を、両試験の過程で、各時間点で評価した。時間点がない場合、全身的健康の観察は、用量の投与時間に１日２回で実施した。

【0264】

全ての動物の便を観察し、実際の試験期間（第１日～第１５日）にわたって記録した。血液サンプリングの日（第１日、第８日、および第１５日）に、便の有無を、各々の全身的健康の観察時間点で確認した。排便の時間（投与後）を記録した。観察時間点の間に排便が起こった場合、排便に最も近い推定の時間を記録した。血液サンプリングのない日には、動物の便は、全身的健康の観察時に観察した。

【0265】

各動物の便を、以下のような、改変型ＷＡＬＴＨＡＭ（登録商標）糞便スコア付けシステムを使用して階級付けした：
グレード１：硬い、乾燥
グレード２：十分に形成され、拾い上げる場合に跡が残らない。
グレード３：水分が多く、型崩れし始める。拾い上げる場合に跡が残る。
グレード４：形の大部分が崩れる、持続性が低い；粘性。
グレード５：水様性下痢。
動物の安全性

【0266】

いかなる原因でも試験からの動物の除外を記録した。
ＰＫおよびＰＤの時間点

【0267】

試料を、以下の通り、薬物動態学（「ＰＫ」；ＭＰＡの平均血漿濃度）、および薬力学（「ＰＤ」；全血試料中の増殖マーカーＫｉ－６７を発現するリンパ球の量）の分析用に採取した。
表１７． １５日試験でのＰＫおよびＰＤの時間点

【表17】

試料収集、調製、および保管

【0268】

血液を、経静脈または他のアクセス可能な血管から収集した。ＰＫ試料に対して、２ｍＬの全血を、抗凝固剤Ｋ_２ＥＤＴＡを含有する、２ｍＬの冷却した（紫のトップの）バキュテナー（針およびシリンジは使用しなかった）に直接、経静脈または他のアクセス可能な血管を介して収集し、遠心分離まで氷上で維持した。血液試料を、ＳＯＰ毎に、収集の６０分以内に処理して血漿にした。試料を、４℃、約３，０００×ｇで５分間、遠心分離して、血漿を得た。血漿を遠心分離の後、収集し、次いで、以下の通り、ギ酸溶液を含有する管に置いた。

【0269】

１．水中の１０％のギ酸溶液（１：１０の濃縮、例えば８８％のギ酸、最終濃度は８．８％）を調製した；
２．３００μＬの血漿の２つのアリコートを、各試料の上清からピペットで採取し、３０μＬの水中の１０％のギ酸を含有する管に添加し、蓋をし、よく混合した（親分子の化合物安定性を保証した）（血漿を１０：１比でギ酸と混合し、酸性ｐＨを得た）。注：２つのアリコートを収集した。
３．血漿試料を、ドライアイス上で急速冷凍し、－６０～－８０℃で凍結保存した。

【0270】

ＰＤ試料に対して、４ｍＬの血液を、抗凝固剤ヘパリンナトリウムを含有する、４ｍＬの冷却した（緑のトップの）バキュテナー（針およびシリンジは使用しなかった）に直接、経静脈または他のアクセス可能な血管を介して、各時間点で収集した。試料を冷蔵し、同日に、アイスパックでＭａｒｉｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｉｎｃ．に搬送した。
試料の処理

【0271】

ＰＫ試験に対して、ＭＰＡの血漿濃度を、実施例３に記載のＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して決定した。ＩＲ－ＭＭＦ試験に対して、ＭＰＡ濃度を、ＭＭＦを与えた群に対してのみ分析した。

【0272】

ＰＤ試験に対して、Ｔリンパ球増殖を、下記に記載する通り変更を加えて、先に記載のフローサイトメトリーアッセイを使用して評価した（Ｂｉｓｈｏｐ ＫＡ． Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｐａｎｅｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔ ｄｒｕｇｓ ｉｎ ｅｘ－ｖｉｖｏ ｃａｎｉｎｅ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ． （ａｂｓｔｒａｃｔ） ２０１６ Ｍｅｒｉａｌ ＮＩＨ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｃｈｏｌａｒｓ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ２０１６；Ｏｈｉｏ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｔｉｙ， Ｃｏｌｕｍｂｕｓ， ＯＨ， ＵＳＡ；Ｇｒｏｂｍａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｖｅｔ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｔｈｅｒ． ２０１７）。

【0273】

・全血試料を、ｃＲＰＭＩ（ＲＰＭＩ １６４０＋Ｌ－グルタミン＋Ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ）で１：４に希釈し、９６ウェルプレートに置き、３７℃、５％のＣＯ_２で７２時間、１０μｇ／ｍＬでのコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）またはｃＲＰＭＩのいずれかでインキュベートした。

【0274】

・インキュベートに続いて、赤血球を溶解し、白血球をｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（商標）Ｆｉｘａｂｌｅ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｄｙｅ ｅＦｌｕｏｒ４５０（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ６５－０８６３－１４）、ＲａｔαＤｏｇ ＣＤ５ ＡＰＣ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＭＣＡ１０３７ＡＰＣ、クローンＹＫＩＸ３２２．３）、ＲａｔαＤｏｇ ＣＤ４５ ＲＰＥ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＭＣＡ１０３７ＡＰＣ、クローンＹＫＩＸ７１６．１３）、およびＭｏｕｓｅαＨｕｍａｎ／Ｄｏｇ Ｋｉ－６７ ＦＩＴＣ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ １１－５６９８－８０、クローンＳｏｌＡ１５）で染色した。

【0275】

・補償対照は、表面および細胞内抗体に対してＯｎｅＣｏｍｐ ｅＢｅａｄｓ（商標）Ｃｏｍｐｅｎｓａｔｉｏｎ Ｂｅａｄｓ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ０１－１１１１－４１）、ならびに、生存／死亡マーカーに対して細胞を使用した。試料を、１００μＬ／分の確認された速度で、Ａｔｔｕｎｅ ＮｘＴフローサイトメトリー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で得た。以下のゲート戦略を使用した：散乱（ＦＳＣ／ＳＳＣ）＞一重項（ＦＳＣ－Ａ／ＦＳＣ－Ｈ）＞生存（Ｌ－Ｄ／ＳＳＣ）＞Ｔ細胞（ＣＤ４５^＋／ＣＤ５^＋）＞増殖（ＣＤ５^＋／Ｋｉ－６７^＋）。生成したＦＣＳファイルを、ＦｌｏｗＪｏ ｖ１０．４．２（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で分析した。
結果
リンパ球増殖（Ｋｉ－６７発現）

【0276】

リンパ球ＰＤデータを、図１９～２４に示す。非常に驚くべきことには、ＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇ）を与えたイヌは、実質的に、第１日の用量前レベルと比較して、第８日の投与の前の増殖するリンパ球の量より少なく、ＯＫＶ－１００１製剤が、増殖に対して全身効果を有することが示唆された（図１９）。同様の効果は、第１５日で見られた。全ての日に、ＯＫＶ－１００１を与えたイヌは、投与後の全ての時間点で、同様に低レベルのＫｉ－６７発現細胞を有し（ベースラインに対して５０％～８５％の低下）、ＯＫＶ－１００１製剤が、リンパ球増殖を持続的に抑制し、投与に続く８時間の期間にわたって、ＰＤの変動性が小さいことを示した。同様の結果は、図２１に示す通り、ＯＫＶ－１００１（１８０ｍｇ、ＱＤ）を与えたイヌで観察された。

【0277】

ＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇおよび１８０ｍｇ（１８０ｍｇのＢＩＤ群も、第１日に一回のみの投与を受けた））の第１日の単一用量のＰＤは、図２０に示す。リンパ球増殖での８時間効果は、図１９に示す第１日のデータと同様である。

【0278】

これらの結果は、図２２に示す通り、ＩＲ－ＭＭＦ群からのＰＤデータと対照的であった。ＩＲ－ＭＭＦカプセル剤を与えたイヌでは、Ｋｉ－６７発現細胞での最初の大幅な低減が、投与の４５分後に観察されたが、この低減は、ＯＫＶ－１００１を与えたイヌと同程度まで持続しなかった。第１日で、Ｋｉ－６７^＋細胞は、４時間でベースラインより高く増加し、８時間でベースラインの８０％だった。第８日および第１５日で、Ｋｉ－６７^＋細胞は、投与前のベースラインから、４時間および８時間で低減したが、４時間および８時間は増加し（第１５日より第８日で大きい）、８時間でベースラインの６０％以内だった。

【0279】

ＩＲ－ＭＭＦおよびＯＫＶ－１００１（２７０ｍｇ、ＱＤ）の第１日のＰＤは、図２３で直接比較する。全体的に、ＯＫＶ－１００１製剤を与えたイヌは、ＩＲ－ＭＭＦを与えたイヌと比較して、ベースラインに対して、Ｋｉ－６７^＋細胞での持続的な低減がより大きかった。これらの差はまた、図２４で示す通り、第８日および第１５日でも見られた。
安全性

【0280】

１８０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡ ＢＩＤを与えた２匹のイヌは、重度のＧＩ副作用により、第８日で除外した。興味深いことに、これらのイヌは、比較的低いＣｍａｘ ＭＰＡ値を有した（図２６を参照）。ＯＫＶ－１００１製剤（ＱＤ投与）を与えたイヌは、試験の期間にわたって、いかなる重度のＧＩ事象も観察されなかった。これは、ＩＲ－ＭＭＦを与えたイヌと対照的であり、結果は、以下の表１８に示す。
表１８．ＩＲ－ＭＭＦを与えたイヌにおける安全性の観察

【表18】

【0281】

これらの結果は、本開示のＭＤＤＳおよび投与法の驚くべき利点を示す。例えば、２７０ｍｇのＯＫＶ－１００１（２５２ｍｇのＭＰＡ）中の毎日のＭＰＡ負荷は、１２０ｍｇのＭＭＦ（ＢＩＤ）（１７７ｍｇ）のものより４２％高いが、ＯＫＶ－１００１は、ＭＭＦよりＧＩ副作用が少なかった。

【0282】

要約すると、並行１５日薬力学試験からのデータでは、本開示のＭＤＤＳが、ＩＲ－ＭＭＦより全身作用の開始がより早く、投与後の４時間および８時間の期間にわたって、より一定の薬力学効果（リンパ球の増殖の低下）を有し、有利には、ＩＲ－ＭＭＦ（ＢＩＤ）と比較して１日１回投与することができ、イヌが経験した消化管の副作用の数および重症度により決定する通り、ＩＲ－ＭＭＦより安全であることを示す。

【0283】

本明細書に記載の方法および用途に対する他の好適な改変および調節を、実施形態のいずれかの範囲から逸脱せずになし得ることは、当業者には容易に明らかであろう。さらに、ある特定の実施形態を、本明細書に図示し、説明するが、請求項は、説明され、示される部分の具体的な形態または配置に限定されないことは理解すべきである。本明細書では、例示的な実施形態が開示されており、具体的な用語が用いるが、一般的な説明的意味においてのみ使用され、限定する意図はない。実施形態の改変および変形は、上記の教示を考慮して可能である。したがって、実施形態が、具体的に記述したもの以外で実施し得ることは、理解すべきである。

【0284】

上述の様々な実施形態を組み合わせて、さらなる実施形態を提供することができる。限定されないが、米国仮特許出願第６２／４７０，８０６号、および米国仮特許出願第６２／５０３，２７０号、ならびに、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０２２２６６号を含む、本明細書で参照される、および／または、出願データシートに列挙される、米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願、および非特許文献の全ては、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。実施形態の態様は、様々な特許、出願、および出版物の概念を利用するのに必要な場合、改変して、さらにさらなる実施形態を提供することができる。

【0285】

本明細書に記載の全ての出版物、特許、および特許出願は、その各々の個別の出版物、特許、および特許出願が具体的、個別に参照により組み込まれると示された場合と同様に、参照により本明細書に組み込まれる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【手続補正書】

【提出日】2021-09-02

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

イヌ対象におけるリンパ球増殖および／または活性化を抑制するためのＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物の使用であって、前記対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を達成するように、ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を前記対象に投与することを含み、
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約１５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下する、使用。

【請求項2】

前記対象が、
（ｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約３５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍＬ；
（ｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍｌ～約１７００ｎｇ／ｍＬ；または
（ｉｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約６５０ｎｇ／ｍｌ～約１５００ｎｇ／ｍＬ
の血漿［ＭＰＡ］の平均を達成する、請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記第１の用量の２．５時間後、好ましくは４時間後、より好ましくは８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、請求項１または２に記載の使用。

【請求項4】

前記対象が、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記組成物を投与される、請求項１から３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項5】

前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、請求項４に記載の使用。

【請求項6】

前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、または第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、請求項５に記載の使用。

【請求項7】

（ｉ）第１の用量の投与の４時間後、必要に応じて８時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与した参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージ
より低い、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用。

【請求項8】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４から７のいずれか一項に記載の使用。

【請求項9】

前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与された参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、請求項４から７のいずれか一項に記載の使用。

【請求項10】

前記即時放出製剤が、１０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、前記参照イヌ対象に投与され、前記即時放出製剤が、必要に応じてミコフェノール酸モフェチルを含む、請求項７または９に記載の使用。

【請求項11】

前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、前記ミコフェノール酸ナトリウムが、必要に応じて前記イヌ対象に経口投与される、請求項１から１０のいずれかに記載の使用。

【請求項12】

前記制御放出組成物が、各々が
（ｉ）コアであって、（ａ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含まれる；または、（ｂ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に配置される、コア；
（ｉｉ）（ａ）前記活性層または（ｂ）前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層；
（ｉｉｉ）（ａ）前記活性層と前記制御放出層との間、または（ｂ）前記コアと前記制御放出層との間に配置される、必要に応じたシールコート層；
（ｉｖ）前記制御放出層上に配置される、必要に応じた保護層
を含む、複数の粒子サブユニットを含む充填可能なカプセル剤を含み、
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、必要に応じて、約３ｍｇ～約２．２ｇの前記制御放出組成物に存在する、請求項１１に記載の使用。

【請求項13】

前記イヌが、
（ｉ）異常リンパ球増殖に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有するか、もしくは有することが疑われ、前記自己免疫疾患もしくは障害が、必要に応じて、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、もしくはその任意の組合せを含む；
（ｉｉ）臓器移植を受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または
（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用。

【請求項14】

制御放出製剤であって、
（ｉ）約３ｍｇ～約２．２ｇのＭＰＡ活性剤；
（ｉｉ）約２１ｍｇ／ｋｇの単一用量で前記ＭＰＡ活性剤を投与されるイヌ対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、最大で約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記イヌから得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、前記ＭＰＡ活性剤が、ｉｎ ｖｉｖｏで前記製剤から放出されるように、前記ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段
を含む、製剤。

【請求項15】

前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項１４に記載の製剤。

【請求項16】

（ｉ）各々が前記ＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；
（ｉｉ）錠剤；
（ｉｉｉ）懸濁剤；
（ｉｖ）糖剤；または
（ｖ）その任意の組合せ
を含む、請求項１４または１５に記載の製剤。

【請求項17】

前記ＭＤＤＳが、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する送達用に調製される、請求項１６に記載の製剤。

【請求項18】

前記複数の粒子サブユニットの各々が、コアを含み、
（ｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または
（ｉｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に含有され、
ここで、前記複数の粒子サブユニットの各々が、
（ｉ）の前記活性層の少なくとも一部上に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層；
（ｉ）の前記活性層と前記制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアと前記制御放出層との間に配置される、シールコート層；および
前記制御放出層上に配置される保護層；
をさらに含む、請求項１６または１７に記載の製剤。

【請求項19】

約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤または約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、請求項１４から１８のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項20】

請求項１６から１９のいずれか一項に記載のＭＤＤＳ、およびイヌ対象に組成物を投与するための説明書を含む、キット。

【請求項21】

食品をさらに含む、請求項２０に記載のキット。

【請求項22】

前記制御放出製剤が、各々の直径が約５ｍｍまたはそれ未満である、複数の粒子サブユニットを含む、ＭＤＤＳを含む、請求項１４から１８のいずれか一項に記載の製剤。

【請求項23】

前記第１の用量が、約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇで、または約１５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇで前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項24】

前記第１の用量が、約３ｍｇ～約２２００ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項25】

前記第１の用量が、約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤または約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、請求項２４に記載の使用。

【手続補正2】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０２８５

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0285】

本明細書に記載の全ての出版物、特許、および特許出願は、その各々の個別の出版物、特許、および特許出願が具体的、個別に参照により組み込まれると示された場合と同様に、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
イヌ対象におけるリンパ球増殖および／または活性化を抑制するためのＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物の使用であって、前記対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を達成するように、ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を前記対象に投与することを含み、
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２５００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約１５００ｍＬ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍＬ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下する、使用。
（項目２）
前記対象が、
（ｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約３５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍＬ；
（ｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍｌ～約１７００ｎｇ／ｍＬ；または
（ｉｉｉ）前記第１の用量に続く８時間にわたって、約６５０ｎｇ／ｍｌ～約１５００ｎｇ／ｍＬ
の血漿［ＭＰＡ］の平均を達成する、項目１に記載の使用。
（項目３）
前記第１の用量の２．５時間後、好ましくは４時間後、より好ましくは８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、項目１または２に記載の使用。
（項目４）
前記対象が、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記組成物を投与される、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目５）
前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、項目４に記載の使用。
（項目６）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、または第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目５に記載の使用。
（項目７）
（ｉ）第１の用量の投与の４時間後、必要に応じて８時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与した参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージ
より低い、項目１から６のいずれか一項に記載の使用。
（項目８）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目４から７のいずれか一項に記載の使用。
（項目９）
前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目８に記載の使用。
（項目１０）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記単一用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を投与された参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目４から７のいずれか一項に記載の使用。
（項目１１）
前記即時放出製剤が、１０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、前記参照イヌ対象に投与され、前記即時放出製剤が、必要に応じてミコフェノール酸モフェチルを含む、項目７または１０に記載の使用。
（項目１２）
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、前記ミコフェノール酸ナトリウムが、必要に応じて前記イヌ対象に経口投与される、項目１から１１のいずれかに記載の使用。
（項目１３）
前記制御放出組成物が、各々が
（ｉ）コアであって、（ａ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含まれる；または、（ｂ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に配置される、コア；
（ｉｉ）（ａ）前記活性層または（ｂ）前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層；
（ｉｉｉ）（ａ）前記活性層と前記制御放出層との間、または（ｂ）前記コアと前記制御放出層との間に配置される、必要に応じたシールコート層；
（ｉｖ）前記制御放出層上に配置される、必要に応じた保護層
を含む、複数の粒子サブユニットを含む充填可能なカプセル剤を含み、
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含み、必要に応じて、約３ｍｇ～約２．２ｇの前記制御放出組成物に存在する、項目１２に記載の使用。
（項目１４）
前記イヌが、
（ｉ）異常リンパ球増殖に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有するか、もしくは有することが疑われ、前記自己免疫疾患もしくは障害が、必要に応じて、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、もしくはその任意の組合せを含む；
（ｉｉ）臓器移植を受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または
（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である、項目１から１３のいずれか一項に記載の使用。
（項目１５）
イヌにおけるリンパ球増殖を抑制するための医薬を調製する方法であって、対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間、約２５０ｎｇ／ｍｌ～約２０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ミコフェノール酸（ＭＰＡ）］を維持し、
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約２０００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約１５００ｍｌ、必要に応じて約７００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約６００ｎｇ／ｍｌ、必要に応じて約５００ｎｇ／ｍｌの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍｌ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、
ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を調製することを含む、方法。
（項目１６）
制御放出製剤であって、
（ｉ）約３ｍｇ～約２．２ｇのＭＰＡ活性剤；
（ｉｉ）約２１ｍｇ／ｋｇの単一用量で前記ＭＰＡ活性剤を投与されるイヌ対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、最大で約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記イヌから得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、前記ＭＰＡ活性剤が、ｉｎ ｖｉｖｏで前記製剤から放出されるように、前記ＭＰＡ活性剤の放出を制御するための手段
を含む、製剤。
（項目１７）
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、項目１６に記載の製剤。
（項目１８）
（ｉ）各々が前記ＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；
（ｉｉ）錠剤；
（ｉｉｉ）懸濁剤；
（ｉｖ）糖剤；または
（ｖ）その任意の組合せ
を含む、項目１６または１７に記載の製剤。
（項目１９）
前記ＭＤＤＳが、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する送達用に調製される、項目１８に記載の製剤。
（項目２０）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、コアを含み、
（ｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または
（ｉｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に含有される、項目１８または１９に記載の製剤。
（項目２１）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、（ｉ）の前記活性層の少なくとも一部上に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアの少なくとも一部上に配置される、制御放出層をさらに含む、項目２０に記載の製剤。
（項目２２）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、（ｉ）の前記活性層と前記制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアと前記制御放出層との間に配置される、シールコート層をさらに含む、項目２１に記載の製剤。
（項目２３）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、前記制御放出層上に配置される保護層をさらに含む、項目２２に記載の製剤。
（項目２４）
約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、項目１６から２３のいずれか一項に記載の製剤。
（項目２５）
約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含み、ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、項目１６から２３のいずれか一項に記載の製剤。
（項目２６）
項目１８から２５のいずれか一項に記載のＭＤＤＳ、およびイヌ対象に組成物を投与するための説明書を含む、キット。
（項目２７）
食品をさらに含む、項目２６に記載のキット。
（項目２８）
イヌ対象におけるリンパ球増殖を抑制するための方法であって、前記対象が、制御放出製剤の第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記第１の用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して低下するように、
ＭＰＡ活性剤を含む前記制御放出製剤を、前記対象に投与することを含む、方法。
（項目２９）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約３５０ｎｇ／ｍＬ～約２０００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１７００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、項目２８または２９に記載の方法。
（項目３１）
対象が、前記第１の用量に続く約８時間、約６５０ｎｇ／ｍＬ～約１５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成する、項目２８から３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記第１の用量の２．５時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、項目２８から３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
前記第１の用量の４時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージに対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、項目２８から３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
前記第１の用量の８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、前記第１の用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下する、項目２８から３３のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目３６）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４に記載の方法。
（項目３７）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約６００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
前記対象が、前記第１の用量に続く約８時間にわたって、約５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記第１の用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
前記対象が、摂食状態の場合、制御放出組成物を与えられる、項目２８から４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を投与することを含む、項目２８から４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目４２に記載の方法。
（項目４６）
前記投与することが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
（ｉ）前記投与の４時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージ
より低い、項目２８から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
（ｉ）前記投与の８時間後での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量が、
（ｉｉ）ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えた参照イヌ対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量
より低い、項目２８から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目４２から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記イヌ対象が、消化管の有害事象を示さない、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、ＭＰＡ活性剤を含む即時放出製剤を与えられる参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示し、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目４２から５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記投与することが、１５日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１５日にわたって、前記イヌ対象が、前記参照イヌ対象と比較して、消化管の有害事象の数の低下、重症度の低下、またはその両方を示す、項目４２から５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記参照イヌ対象が、１０ｍｇ／ｋｇのＭＰＡの１日２回用量で、前記即時放出製剤を与えられる、項目４７、４８、５１、または５２のいずれか一項に記載の方法。
（項目５４）
前記即時放出製剤が、ミコフェノール酸モフェチルを含む、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記投与が、経口投与を含む、項目２８から５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記制御放出製剤が、
（ｉ）各々が前記ＭＰＡ活性剤を含む複数の粒子サブユニットを含有する、多粒子薬物送達システム（ＭＤＤＳ）；
（ｉｉ）錠剤；
（ｉｉｉ）懸濁剤；
（ｉｖ）糖剤；または
（ｖ）その任意の組合せ
を含む、項目２８から５５のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記制御放出製剤が、各々の直径が約５ｍｍまたはそれ未満である、複数の粒子サブユニットを含む、ＭＤＤＳを含む、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記ＭＤＤＳが、カプセル剤、小袋剤、錠剤、またはその任意の組合せを介する、前記対象への送達用に調製される、項目５６または５７に記載の方法。
（項目５９）
前記ＭＤＤＳの前記複数の粒子サブユニットの各々が、コアを含み、
（ｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コアの少なくとも一部上に配置される活性層に含有される；または
（ｉｉ）前記ＭＰＡ活性剤が、前記コア内に含有される、項目２６から５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、制御放出層をさらに含み、前記制御放出層が、（ｉ）の前記コアの前記ＭＰＡ活性層上に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアの少なくとも一部上に配置される、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、シールコート層を含み、前記シールコート層が、（ｉ）の前記コアの前記ＭＰＡ活性層と前記制御放出層との間に配置されるか、または、（ｉｉ）の前記コアと前記制御放出層との間に配置される、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記複数の粒子サブユニットの各々が、前記制御放出層上に配置される保護層をさらに含む、項目６０または６１に記載の方法。
（項目６３）
前記第１の用量が、約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇで前記ＭＰＡ活性剤を含む、項目２８から６２のいずれか一項に記載の方法。
（項目６４）
前記第１の用量が、約１５ｍｇ／ｋｇ～約３０ｍｇ／ｋｇで前記ＭＰＡ活性剤を含む、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
前記第１の用量が、約３ｍｇ～約２２００ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、項目２８から６４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
前記第１の用量が、約１６８ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記第１の用量が、約２５２ｍｇの前記ＭＰＡ活性剤を含む、項目６５に記載の方法。
（項目６８）
前記ＭＰＡ活性剤が、ミコフェノール酸ナトリウムを含む、項目２８から６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
前記制御放出組成物が、食物を伴って前記対象に投与される、項目２８から６８のいずれか一項に記載の方法。
（項目７０）
前記対象が、
（ｉ）異常リンパ球増殖および／もしくは活性化に関連する自己免疫疾患もしくは障害を有する、もしくは有することが疑われる；
（ｉｉ）臓器移植および／もしくは人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、もしくは将来受ける；または
（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方である、項目２８から６９のいずれか一項に記載の方法。
（項目７１）
前記自己免疫疾患または障害が、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む、項目７０に記載の方法。
（項目７２）
イヌ対象における自己免疫疾患または障害を処置するための方法であって、前記自己免疫疾患または障害が、リンパ球の異常増殖および／または活性化により特徴付けられ、前記方法が、前記対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物を、前記ＭＰＡ活性剤の約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含み、
前記対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３０００ｎｇ／ｍｌの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、
前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、方法。
（項目７３）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目７２に記載の方法。
（項目７５）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目７２に記載の方法。
（項目７６）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目７２に記載の方法。
（項目７７）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含む、項目７２から７６のいずれか一項に記載の方法。
（項目７８）
前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目７７に記載の方法。
（項目８０）
前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目７７から７９のいずれか一項に記載の方法。
（項目８１）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目７７から８０のいずれか一項に記載の方法。
（項目８２）
前記自己免疫疾患または障害が、アトピー性皮膚炎、関節炎、重症筋無力症、セリアック病、１型糖尿病、グレーブス病、炎症性腸疾患、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ベーチェット病、尋常性天疱瘡、難治性不完全性全身性エリテマトーデス、ループス腎炎、免疫グロブリンＡ腎症、小血管脈管炎、強皮症（全身性硬化症もしくはＳＳｃ）、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、乾癬、悪性貧血、白斑、自己免疫性溶血性疾患、糸球体腎炎、免疫性血球減少、髄膜脳脊髄炎、表皮下水疱性自己免疫疾患、免疫水疱性疾患、皮膚血管炎、再発性多形性紅斑、結節性紅斑、扁平苔癬、皮膚クローン病、類肉腫症、肝炎、壊疽性膿皮症、またはその任意の組合せを含む、項目７２から８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
臓器移植および／または人工インプラントを受けたことがある、現在受けている、または将来受けるイヌ対象に、ＭＰＡ活性剤を含む制御放出組成物を、前記ＭＰＡ活性剤の約３ｍｇ／ｋｇ～約３５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することを含む方法であって、
前記対象が、単一用量に続く約８時間にわたって、約３０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成し、
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間、２５０ｎｇ／ｍＬ～約２５００ｎｇ／ｍＬの平均血漿［ＭＰＡ］を達成し、
前記単一用量の２．５時間後、４時間後、および８時間後での、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、モノクローナル抗体Ｋｉ－６７を使用して決定する通り、前記単一用量前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージと比較して、少なくとも約３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％またはそれより高い％低下するように、
前記対象が、１日あたり単一用量の前記制御放出組成物を与えられる、方法。
（項目８４）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目８３に記載の方法。
（項目８５）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約２０００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約５００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目８３に記載の方法。
（項目８６）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約１５００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約６００ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目８３に記載の方法。
（項目８７）
前記対象が、前記単一用量に続く約８時間にわたって、約７００ｎｇ／ｍＬの血漿［ＭＰＡ］Ｃｍａｘ、および、前記単一用量の約２．５～約８時間後に、約２５０ｎｇ／ｍＬ以上の血漿［ＭＰＡ］Ｃｍｉｎを達成する、項目８３に記載の方法。
（項目８８）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長く連続した日数の間、前記用量を投与することを含む、項目８３から８７のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
前記投与することが、２日またはそれより長く連続した日数の間、単一用量を投与することを含み、第２日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目８８に記載の方法。
（項目９０）
前記投与することが、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれより長い日数の間実施され、第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、第７日、第８日、第９日、第１０日、第１１日、第１２日、第１３日、第１４日、および第１５日の各々の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目８８または８９に記載の方法。
（項目９１）
前記投与することが、７日またはそれより長く連続した日数の間、前記単一用量を投与することを含み、第７日の用量の２４時間後から任意のその後の用量の前の、前記イヌ対象由来の全血試料中の増殖するリンパ球のパーセンテージが、第１日の用量の前の１５分またはそれ未満での、前記対象から得られる全血試料中の増殖するリンパ球の量に対して、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、またはそれより高い％低下する、項目８８から９０のいずれか一項に記載の方法。
（項目９２）
前記投与することが、１０日またはそれより長い間、前記用量を投与することを含み、前記１０日にわたって、前記対象が、消化管の有害事象を示さず、消化管の有害事象が、嘔吐、下痢、軟便、またはその任意の組合せを含む、項目８８から９１のいずれか一項に記載の方法。

【国際調査報告】