(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-01-18
(54)【発明の名称】抗体薬物複合体及びその応用
(51)【国際特許分類】
A61K 47/68 20170101AFI20220111BHJP
A61K 47/65 20170101ALI20220111BHJP
A61K 47/54 20170101ALI20220111BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20220111BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220111BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220111BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220111BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20220111BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20220111BHJP
【ＦＩ】
A61K47/68
A61K47/65
A61K47/54
A61K39/395 Y
A61P35/00
A61P43/00 105
A61P29/00
A61P37/02
A61P31/00
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021525570
(86)(22)【出願日】2019-10-23
(85)【翻訳文提出日】2021-05-11
(86)【国際出願番号】 CN2019112663
(87)【国際公開番号】W WO2021022678
(87)【国際公開日】2021-02-11
(31)【優先権主張番号】201910723947.8
(32)【優先日】2019-08-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】519463064
【氏名又は名称】煙台邁百瑞国際生物医薬股▲ふん▼有限公司
【氏名又は名称原語表記】ＭａｂＰｌｅｘ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．
【住所又は居所原語表記】Ｎｏ． ６０， Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｍｉｄｄｌｅ Ｒｏａｄ， Ｙａｎｔａｉ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｚｏｎｅ， Ｙａｎｔａｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ， Ｃｈｉｎａ （Ｓｈａｎｄｏｎｇ） Ｐｉｌｏｔ Ｆｒｅｅ Ｔｒａｄｅ Ｚｏｎｅ， ２６４００６， Ｃｈｉｎａ
(74)【代理人】
【識別番号】110000084
【氏名又は名称】特許業務法人アルガ特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】李 楽楽
(72)【発明者】
【氏名】黄 長江
(72)【発明者】
【氏名】孫 友祥
(72)【発明者】
【氏名】劉 麗娜
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
【Ｆターム（参考）】
4C076AA95
4C076CC04
4C076CC07
4C076CC26
4C076CC27
4C076CC31
4C076CC41
4C076EE41
4C076EE59
4C076FF70
4C085AA22
4C085AA23
4C085AA25
4C085AA26
4C085AA27
4C085BB36
4C085DD52
4C085EE01
(57)【要約】
本発明は、１つ又は複数のシステイン残基又はシステイン誘導体残基を薬物連結用担体として、抗体の限定される結合部位で１つ又は複数の薬物分子を同時にカップリングすることにより、より高いペイロードを有し、毒性の低い薬物を選択してＡＤＣ製品を調製でき、大きな治療域のＡＤＣ製品が得られる。さらに、複数の薬物分子を１つの連結部位でカップリングすることができるため、同一のＤＡＲ値を有する抗体薬物複合体を調製する場合には、本発明の方法により得られたＡＤＣ製品は、より良好な均一性を有する。また、生産に使用する抗体の量も大幅に削減できるため、生産コストを効果的に削減できる。本発明の方法によって調製される抗体薬物複合体は、同一の部位で１つの薬物分子のみを連結することができる抗体薬物複合体と比較して、カップリングされる薬物分子の全量が大幅に減少される場合には、依然として腫瘍細胞に対して同じ阻害効果または殺傷効果を発揮することもできる。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（I）～（IV）で示される抗体薬物複合体。【化1】
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3、．．．．．．、Ｂnは、システイン残基又はシステイン誘導体残基であり、同一でも異なっていてもよく、Ｂ1とＢ2、Ｂ2とＢ3、……、Ｂn-1とＢnは、脱水縮合により形成されたペプチド結合によって連結され、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、．．．．．．、Ｌn+1は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、前記Ｌ1は、Ｂ1におけるアミノ基末端に共有結合し、前記Ｌ2とＢ1、Ｌ3とＢ2、Ｌ4とＢ3、……、Ｌn+1とＢnは、メルカプト基によって共有結合され、前記Ｌ2とＤ1、Ｌ3とＤ2、Ｌ4とＤ3、……、Ｌn+1とＤnは、共有結合し、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、……、Ｄnは、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｚは、任意の基であり、式（I）におけるＢ1のカルボニル基又は式（II）におけるＢ
2のカルボニル基又は式（III）におけるＢ3のカルボニル基又は式（IV）におけるＢnの
カルボニル基に共有結合し、
ｎは、４以上の整数であり、活性薬物ユニットが連結されている分岐の数を表し、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。）
【請求項2】
前記Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3、．．．．．．、Ｂnの構造は、それぞれ、式（Ｖ）で示される、ことを特徴とする請求項１に記載の抗体薬物複合体。【化2】
【請求項3】
前記Ｚは、【化3】
【請求項4】
前記抗体薬物複合体は、式（ＶＩ－１）～（ＶＩ－５）で示される構造を有する、ことを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。【化4】
【化5】
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、Ｌ5は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、Ｄ4は、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。）
【請求項5】
前記Ｌ1は、抗体のアミノ残基又はメルカプト残基に共有結合し、好ましくは、前記Ｌ1は、抗体上のメルカプト残基に共有結合し、より好ましくは、前記Ｌ1は、抗体の鎖間ジスルフィド結合が切断された後に形成されたメルカプト残基に共有結合している、ことを特徴とする請求項１～４のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。
【請求項6】
前記Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、切断可能なリンカー、切断可能なリンカーの組み合わせ又は切断不可能なリンカーである、ことを特徴とする請求項１～５のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。
【請求項7】
前記切断可能なリンカーは、ペプチドユニット及びポリスルフィド結合を含み、前記ペプチドユニットは、２～２０個のアミノ酸を含み、好ましくは、前記ペプチドユニットは、－バリン－シトルリン－（－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－）、－グリシン－グリシン－フェニルアラニン－グリシン－（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－）、－バリン－アラニン－（－Ｖａｌ－Ａｌａ－）、－バリン－リジン－（－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－）、－バリン－アルギニン－（－Ｖａｌ－Ａｒｇ－）、－フェニルアラニン－シトルリン－（－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－）、－フェニルアラニン－リジン－（－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－）、－フェニルアラニン－アルギニン－（－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－）及びそれらの組み合わせからなる群より選ばれ、前記ポリスルフィド結合は、２～８個の硫黄原子を含み、好ましくは、前記ポリスルフィド結合は、ジスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－）、トリスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）、テトラスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）から選ばれる、ことを特徴とする請求項６に記載の抗体薬物複合体。
【請求項8】
前記Ｌ1は、以下の構造を含む、ことを特徴とする請求項１～７のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。【化6】
【請求項9】
前記Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、以下の構造を含む、ことを特徴とする請求項１～８のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。【化7】
【請求項10】
前記抗体又はその機能的結合フラグメントは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（「ｓｃＦｖ」）、二重抗体、線状抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、又は抗体の抗原結合部分を含む融合タンパク質を含み、好ましくは、前記抗体は、ヒト化モノクローナル抗体又は完全ヒト抗体である、ことを特徴とする請求項１～９のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。
【請求項11】
前記抗体は、ＩｇＧ抗体又はその機能的結合フラグメントであり、さらに好ましくは、前記抗体は、ＩｇＧ1、ＩｇＧ2、ＩｇＧ3、ＩｇＧ4である、ことを特徴とする請求項１０に記載の抗体薬物複合体。
【請求項12】
前記活性薬物ユニットは、細胞毒性分子、細胞分化因子、幹細胞栄養因子、ステロイド薬、自己免疫疾患治療薬、抗炎症薬又は感染症治療薬である、ことを特徴とする請求項１～１１のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。
【請求項13】
前記細胞毒性分子は、微小管阻害薬又はＤＮＡ損傷剤を含むが、これらに限定されなく、さらに好ましくは、前記微小管阻害薬は、ドラスタチン（ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ）及オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞毒性分子、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）類の細胞毒性分子を含むが、これらに限定されなく、前記ＤＮＡ損傷剤は、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）類、デュオカルマイシン（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ）類、アントラマイシン誘導体ＰＢＤ、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ）及カンプトテシン誘導体、ＳＮ－３８を含むが、これらに限定されなく、さらに好ましくは、前記オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞素分子は、ＭＭＡＥ又はＭＭＡＦ又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されなく、前記メイタンシン類の細胞毒性分子は、ＤＭ１、ＤＭ４又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されなく、さらに好ましくは、前記細胞毒性分子は、以下の構造、【化8】
であることを特徴とする請求項１２に記載の抗体薬物複合体。
【請求項14】
前記抗体薬物複合体の構造は、以下の通りである、ことを特徴とする上記請求項のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体。【化9】
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。）
【請求項15】
有効量の請求項１～１４のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体又はその薬学的に許容される塩又は溶媒和物、及び薬学的に許容される添加剤を含む、医薬組成物。
【請求項16】
請求項１～１４のいずれか１項に記載の抗体薬物複合体の、がん治療薬の調製における用途。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、バイオ医薬品分野に関し、具体的には、１つ又は複数のシステイン残基又はシステイン誘導体残基を薬物連結用担体として形成された抗体薬物複合体及びその応用に関し、前記薬物連結用担体は、必要に応じて抗体の限定される結合部位で１つ又は複数の薬物分子を同時に複合化することができる。
【背景技術】
【0002】
抗体薬物複合体（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ、ＡＤＣ）とは、化学的リンカー（Ｌｉｎｋｅｒ）を介して生物学的に活性である薬物（Ｄｒｕｇ）と抗体（Ａｎｔｉｂｏｄｙ）を連結してなるバイオ医薬品を意味する。ＡＤＣは、精密誘導兵器システムのようなものであり、そのうち、生物活性のある薬が抗体の誘導の下で殺傷力を持つ弾薬として使用され、病気の細胞を正確に攻撃する。従って、ＡＤＣは、細胞毒性薬分子の高効率と抗体の高標的性という２つの利点を兼ね備える。２０１９年７月までに、世界で承認されている抗体薬物複合体は６つだけである（表１）。
【0003】
【表1】
【0004】
抗体上で選択された結合部位の非一意性及び結合反応の複雑さのために、実際、最終的に得られたＡＤＣ製品は、抗体に結合された数が異なる薬物、異なる部位を有するＡＤＣ混合物であり、ＡＤＣ薬物の調製の不均一性は、薬物の製造と品質管理に大きな課題をもたらす。製品の均一性を考えると、重要な指標であるＤＡＲ値（ｄｒｕｇ－ａｎｔｉｂｏｄｙ ｒａｔｉｏ、薬物抗体比）、即ち、単位数の抗体で運ぶことができる薬物分子の数である。平均ＤＡＲ値が小さすぎると、抗体で運ぶ薬物分子が少なすぎ、全体的な有効性に影響を及ぼす。平均ＤＡＲ値が大きすぎると、抗体で運ぶ薬物分子が多すぎ、ＡＤＣ全体が不安定になり、薬物動態パラメータが変化し、血漿クリアランスの増加、半減期の短縮、及び全身毒性の増加につながる可能性がある。
【0005】
現在、ＡＤＣには、アミンカップリング、チオールカップリング、架橋カップリング（ｃｒｏｓｓ－ｌｉｎｋ）という３つの典型的なカップリング形態が含まれる。
アミンカップリングは、薬物がリンカーによって抗体のリジン（Ｌｙｓ）残基にカップリングするものである。第１世代ＡＤＣ医薬品であるＭｙｌｏｔａｒｇは、アミンカップリングの形態を使用するが、ＩｇＧには１００近くのリジンが含まれているため、カップリングの位置は、抗体の軽鎖及び重鎖での４０近くの露出したリジン残基にある可能性があり、また、リジンによってカップリングすると各抗体に複数の異なる数の小分子薬物がカップリングするので、アミンカップリングにより得られたＡＤＣ医薬品は、非常に不均質に混合し、製品の均一性が非常に悪く、薬物のＰＫ／ＰＤ及び治療時間域に深刻な影響を及ぼす（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｏｈｕ．ｃｏｍ／ａ／２７７７９１１６６＿４６４４０４を参照）。
チオールカップリングは、最初に抗体の鎖間ジスルフィド結合を開いて遊離システイン（Ｃｙｓ）残基を形成し、次に、システイン残基とペアリングできるリンカー－薬物複合体とカップリングするものである。ＩｇＧには４対の鎖間ジスルフィド結合しかないため、すべての鎖間ジスルフィド結合が開いた後に８つの遊離システイン残基が形成されるので、単一のチオールカップリングによって形成されるＡＤＣの平均ＤＡＲ値は０～８であり、チオールカップリングは各抗体に結合される数をより適切に制御できるが、鎖間ジスルフィド結合の切断は抗体の安定性を大幅に低下させる。
アミンカップリングは、薬物がリンカーによって抗体のリジン（Ｌｙｓ）残基にカップリングするものである。第１世代ＡＤＣ医薬品であるＭｙｌｏｔａｒｇは、アミンカップリングの形態を使用するが、ＩｇＧには１００近くのリジンが含まれているため、カップリングの位置は、抗体の軽鎖及び重鎖での４０近くの露出したリジン残基にある可能性があり、また、リジンによってカップリングすると各抗体に複数の異なる数の小分子薬物がカップリングするので、アミンカップリングにより得られたＡＤＣ医薬品は、非常に不均質に混合し、製品の均一性が非常に悪く、薬物のＰＫ／ＰＤ及び治療時間域に深刻な影響を及ぼす（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓｏｈｕ．ｃｏｍ／ａ／２７７７９１１６６＿４６４４０４を参照）。
チオールカップリングは、最初に抗体の鎖間ジスルフィド結合を開いて遊離システイン（Ｃｙｓ）残基を形成し、次に、システイン残基とペアリングできるリンカー－薬物複合体とカップリングするものである。ＩｇＧには４対の鎖間ジスルフィド結合しかないため、すべての鎖間ジスルフィド結合が開いた後に８つの遊離システイン残基が形成されるので、単一のチオールカップリングによって形成されるＡＤＣの平均ＤＡＲ値は０～８であり、チオールカップリングは各抗体に結合される数をより適切に制御できるが、鎖間ジスルフィド結合の切断は抗体の安定性を大幅に低下させる。
【0006】
架橋カップリングは、チオールカップリングに基づいて開発された新しいカップリング方法であり、チオールカップリングと同様に、まず、抗体中の鎖間ジスルフィド結合を開いて２つの遊離システイン残基を形成し、その後、さらにこれらの２つの遊離システイン残基と同時にペアリングするものである。１つの抗体あたり４対の鎖間ジスルフィド結合しかないため、鎖間ジスルフィド結合がすべて開いた後、８つの遊離システイン残基を形成するので、架橋カップリングによって形成されるＡＤＣの平均ＤＡＲ値は、０～４であり、チオールカップリングと比較して、架橋カップリングは、製品の均一性をよりよく制御できるだけでなく、カップリングされた抗体の安定性を大幅に向上させることもできる。しかし、架橋カップリング法によるＤＡＲ値は、最大４であり、つまり、１つの抗体あたり最大で４つの薬物がカップリングされるだけであり、腫瘍細胞の表面にある抗原の数が限られているため、効果的なＡＤＣ活性に必要な抗原発現レベルは、異なる抗原特性によって変化する。ＡＤＣは、致死量の細胞毒性薬を確実に送達するために、少なくとも１０4個の抗原／細胞を必要とする。理想的には、ＡＤＣの抗体部分の標的となる抗原は、腫瘍細胞の表面に均一に発現し、コピー数が多い（＞１０5／細胞）必要がある。腫瘍細胞の表面には、通常、限られた数の抗原しかなく（約５０００～１０6個の抗原／細胞）、ＡＤＣの平均ＤＡＲは、３．５～４であり（例えば、Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎの平均ＤＡＲ値は４であり、Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ ｅｍｔａｎｓｉｎｅの平均ＤＡＲ値は３．５である。）、腫瘍細胞に送達される薬剤の量が非常に少ないため、腫瘍細胞に対する薬効が低く、これは、ＡＤＣの臨床的失敗の主な理由の１つと考えられている。
【0007】
腫瘍細胞の表面には限られた数の抗原しかないため、抗体によって運ばれる限られた数の小分子薬物が腫瘍細胞を効果的に殺すことができるようにするために、特に強い毒性を持つ小分子薬物が臨床診療でよく使用されている。現在、ＡＤＣで使用されている小分子薬物には、主にａｕｒｉｓｔａｔｉｎ、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）などがある。これらの小分子薬物は、従来の化学療法薬と比較して、癌細胞に対してより強い殺傷効果があり、通常、標的細胞を殺すことができる平均用量は４～６分子である。これらの毒性が特に強い小分子薬物は、生体内で標的から外れると、患者にとって致命的となる可能性があり、それ以外は、これらの小分子薬物の毒性が特に強いため（例えば、多くの細胞に対するＤＭ１のＩＣ50は、約１０-11ｍｏｌ／Ｌであり、ＤＭ４のＩＣ50は、約１０-12ｍｏｌ／Ｌであり（文献１：Ｗｉｄｄｉｓｏｎ ＷＣ、 Ｗｉｌｈｅｌｍ ＳＤ、 Ｃａｖａｎｇｈ ＥＥ、 ｅｔ ａｌ． Ｓｅｍｉｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］． Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ、 ２００６、 ４９： ４３９２－４４０８；文献２：Ｌａｍｂｅｒｔ ＪＭ． Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｉｄ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ： ａ ｎｅｗ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］． Ｄｒｕｇｓ Ｆｕｔｕｒｅ、 ２０１０、 ３５： ４７１－４８０．）、ＭＭＡＥのＩＣ50は、約１０-11～１０-9ｍｏｌ／Ｌである。）、オフターゲットおよび時期尚早の薬物放出が発生した場合、患者に大きなリスクがある。ＦＤＡは、承認申請が受理されている２０のＡＤＣ研究新薬（ｉｎｖｅｓｌｉｇａｔｉｏｎａｌ ｎｅｗ ｄｒｕｇｓ、ＩＮＤ）の包括的な分析を実施し、ＡＤＣ薬の動物に対する毒性は、主に造血系毒性、肝臓毒性および生殖毒性であり、部分的に皮膚毒性および腎毒性を有し、その中で造血系、肝臓および生殖系の毒性は、小分子細胞毒薬に直接関連する（文献３：Ｓａｂｅｒ Ｈ、Ｌｅｉｇｈｔｏｎ ＪＫ． Ａｎ ＦＤＡ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ［Ｊ］． ＲｅｇｕＬ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、２０１５、７１（３）：４４４－４５２）。毒性の低い小分子薬物を選ぶ場合には、効果的に負荷されている小分子薬物の数は低すぎるため、発生した薬効が低すぎ、さらに、臨床的な失敗をもたらす。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0008】
上記の問題を解決するために、本発明は、さらに多い活性ユニット（Ｄｒｕｇ）をカップリングすることができる新規な抗体薬物複合体を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0009】
本発明の実施形態は、以下の通りである。
本発明は、式（I）～（IV）で示される抗体薬物複合体を提供する。
本発明は、式（I）～（IV）で示される抗体薬物複合体を提供する。
【0010】
【化1】
【0011】
【化2】
【0012】
式中、
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ、……、Ｂnは、システイン残基又はシステイン誘導体残基であり、同一でも異なっていてもよく、Ｂ1とＢ2、Ｂ2とＢ3、……、Ｂn-1とＢnは、脱水縮合により形成されたペプチド結合によって連結され、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、前記Ｌ1とＢ1のアミノ基末端は、共有結合し、前記Ｌ2とＢ1、Ｌ3とＢ2、Ｌ4とＢ3、……、Ｌn+1とＢnは、メルカプト基を介して共有結合し、前記Ｌ2とＤ1、Ｌ3とＤ2、Ｌ4とＤ3、……、Ｌn+1とＤnは、共有結合し、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、．．．．．．、Ｄnは、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｚは、式（I）におけるＢ1のカルボニル基又は式（II）におけるＢ2のカルボニル基
又は式（III）におけるＢ3のカルボニル基又は式（IV）におけるＢnのカルボニル基に共
有結合している任意の基であり、
ｎは、４以上の整数であり、活性薬物ユニットが連結されている分岐の数を表し、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｂ1、Ｂ2、Ｂ、……、Ｂnは、システイン残基又はシステイン誘導体残基であり、同一でも異なっていてもよく、Ｂ1とＢ2、Ｂ2とＢ3、……、Ｂn-1とＢnは、脱水縮合により形成されたペプチド結合によって連結され、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、前記Ｌ1とＢ1のアミノ基末端は、共有結合し、前記Ｌ2とＢ1、Ｌ3とＢ2、Ｌ4とＢ3、……、Ｌn+1とＢnは、メルカプト基を介して共有結合し、前記Ｌ2とＤ1、Ｌ3とＤ2、Ｌ4とＤ3、……、Ｌn+1とＤnは、共有結合し、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、．．．．．．、Ｄnは、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｚは、式（I）におけるＢ1のカルボニル基又は式（II）におけるＢ2のカルボニル基
又は式（III）におけるＢ3のカルボニル基又は式（IV）におけるＢnのカルボニル基に共
有結合している任意の基であり、
ｎは、４以上の整数であり、活性薬物ユニットが連結されている分岐の数を表し、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
【0013】
さらに、前記Ｂ1、Ｂ2、Ｂ3、．．．．．．、Ｂnの構造は、それぞれ式（Ｖ）で示される。
【0014】
【化3】
【0015】
式中、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
さらに、前記Ｚは、
さらに、前記Ｚは、
【0016】
【化4】
【0017】
さらに、前記抗体薬物複合体は、式（ＶＩ－１）～（ＶＩ－５）で示される構造を有する。
【0018】
【化5】
【0019】
【化6】
【0020】
式中、
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、Ｌ5は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、Ｄ4は、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、Ｌ5は、任意の連結ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
Ｄ1、Ｄ2、Ｄ3、Ｄ4は、任意の活性薬物ユニットであり、且つ互いに独立し、同一でも異なっていてもよく、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
【0021】
さらに、前記Ｌ1は、抗体上のアミノ残基又はメルカプト残基に共有結合し、好ましくは、前記Ｌ1は、抗体上のメルカプト残基に共有結合し、より好ましくは、前記Ｌ1は、抗体の鎖間ジスルフィド結合が切断された後に形成したメルカプト残基に共有結合する。
さらに、前記Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、切断可能なリンカー、切断可能なリンカーの組み合わせ又は切断不可能なリンカーである。
さらに、前記切断可能なリンカーは、ペプチドユニット及びポリスルフィド結合を含み、前記ペプチドユニットは、２～２０個のアミノ酸を含み、好ましくは、前記ペプチドユニットは、－バリン－シトルリン－（－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－）、－グリシン－グリシン－フェニルアラニン－グリシン－（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－）、－バリン－アラニン－（－Ｖａｌ－Ａｌａ－）、－バリン－リジン－（－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－）、－バリン－アルギニン－（－Ｖａｌ－Ａｒｇ－）、－フェニルアラニン－シトルリン－（－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－）、－フェニルアラニン－リジン－（－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－）、－フェニルアラニン－アルギニン－（－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－）及びそれらの組み合わせからなる群より選ばれ、前記ポリスルフィド結合は、２～８個の硫黄原子を含み、好ましくは、前記ポリスルフィド結合は、ジスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－）、トリスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）、テトラスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）から選ばれる。
さらに、前記Ｌ1、Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、切断可能なリンカー、切断可能なリンカーの組み合わせ又は切断不可能なリンカーである。
さらに、前記切断可能なリンカーは、ペプチドユニット及びポリスルフィド結合を含み、前記ペプチドユニットは、２～２０個のアミノ酸を含み、好ましくは、前記ペプチドユニットは、－バリン－シトルリン－（－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－）、－グリシン－グリシン－フェニルアラニン－グリシン－（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ｇｌｙ－）、－バリン－アラニン－（－Ｖａｌ－Ａｌａ－）、－バリン－リジン－（－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－）、－バリン－アルギニン－（－Ｖａｌ－Ａｒｇ－）、－フェニルアラニン－シトルリン－（－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－）、－フェニルアラニン－リジン－（－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－）、－フェニルアラニン－アルギニン－（－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－）及びそれらの組み合わせからなる群より選ばれ、前記ポリスルフィド結合は、２～８個の硫黄原子を含み、好ましくは、前記ポリスルフィド結合は、ジスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－）、トリスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）、テトラスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－Ｓ－Ｓ－）から選ばれる。
【0022】
幾つかの具体的な実施例では、前記Ｌ1は、以下の構造から選ばれる。
【0023】
【化7】
【0024】
幾つかの具体的な実施例では、前記Ｌ2、Ｌ3、Ｌ4、……、Ｌn+1は、以下の構造から選ばれる。
【0025】
【化8】
【0026】
さらに、前記抗体又はその機能的結合フラグメントは、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（「ｓｃＦｖ」）、二重抗体、線状抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、又は抗体の抗原結合部分を含む融合タンパク質を含み、好ましくは、前記抗体は、ヒト化モノクローナル抗体又は完全ヒト抗体である。
さらに、前記抗体は、ＩｇＧ抗体又はその機能的結合フラグメントであり、さらにより好ましくは、前記抗体は、ＩｇＧ1、ＩｇＧ2、ＩｇＧ3、ＩｇＧ4である。
さらに、前記抗体は、ＩｇＧ抗体又はその機能的結合フラグメントであり、さらにより好ましくは、前記抗体は、ＩｇＧ1、ＩｇＧ2、ＩｇＧ3、ＩｇＧ4である。
【0027】
さらに、前記活性薬物ユニットは、細胞毒性分子、細胞分化因子、幹細胞栄養因子、ステロイド薬、自己免疫疾患治療薬、抗炎症薬又は感染症治療薬である。
さらに、前記細胞毒性分子は、微小管阻害薬又はＤＮＡ損傷剤を含むが、これらに限定されなく、さらに好ましくは、前記微小管阻害薬は、ドラスタチン（ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ）及びオーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞毒性分子、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）類の細胞毒性分子を含むが、これらに限定されず、前記ＤＮＡ損傷剤は、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）類、デュオカルマイシン（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ）類、アントラマイシン誘導体ＰＢＤ、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ）及びカンプトテシン誘導体、ＳＮ－３８を含むが、これらに限定されず、さらに好ましくは、前記オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞毒性分子は、ＭＭＡＥ又はＭＭＡＦ又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されず、前記メイタンシン類の細胞毒性分子は、ＤＭ１、ＤＭ４又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されず、さらに好ましくは、前記細胞毒性分子は、以下の分子を含む。即ち
さらに、前記細胞毒性分子は、微小管阻害薬又はＤＮＡ損傷剤を含むが、これらに限定されなく、さらに好ましくは、前記微小管阻害薬は、ドラスタチン（ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ）及びオーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞毒性分子、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）類の細胞毒性分子を含むが、これらに限定されず、前記ＤＮＡ損傷剤は、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）類、デュオカルマイシン（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ）類、アントラマイシン誘導体ＰＢＤ、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ）及びカンプトテシン誘導体、ＳＮ－３８を含むが、これらに限定されず、さらに好ましくは、前記オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）類の細胞毒性分子は、ＭＭＡＥ又はＭＭＡＦ又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されず、前記メイタンシン類の細胞毒性分子は、ＤＭ１、ＤＭ４又はそれらの誘導体を含むが、これらに限定されず、さらに好ましくは、前記細胞毒性分子は、以下の分子を含む。即ち
【0028】
【化9】
【0029】
さらに、前記抗体薬物複合体の構造は、以下の通りである。即ち、
【0030】
【化10】
【0031】
式中、
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、
ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８から選ばれる。
【0032】
本発明は、さらに、有効量の上記のいずれか１つに記載の抗体薬物複合体又はその薬学的に許容される塩又は溶媒和物、及び薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物を提供する。
本発明は、さらに、上記のいずれか１つに記載の抗体薬物複合体の、がん治療薬の調製における用途を提供する。
本発明は、さらに、上記のいずれか１つに記載の抗体薬物複合体の、がん治療薬の調製における用途を提供する。
【発明の効果】
【0033】
本発明に係る抗体薬物複合体は、１つ又は複数のシステイン残基又はシステイン誘導体残基を薬物連結用担体として、抗体の限定される結合部位に１つ又は複数の薬物を同時にカップリングすることにより、より高いペイロード（ｐａｙｌｏａｄ）を有する抗体薬物複合体を容易に調製することができる。理論的には、より高いペイロードのＡＤＣを調製できるため、選択され得る、カップリングされる薬物の範囲も広くなり、それにより、毒性の低い薬物を選択してＡＤＣ製品を調製し、大きな治療域のＡＤＣ製品が得られる。さらに、複数の薬物分子を１つの連結部位でカップリングすることができるため、同一のＤＡＲ値を有する抗体薬物複合体を調製する場合には、本発明の方法により得られたＡＤＣ製品は、より良好な均一性を有する。また、生産に使用する抗体の量も大幅に削減できるため、生産コストを効果的に削減できる。別に、実験において、本発明の方法によって調製される抗体薬物複合体は、同一の部位で１つの薬物分子のみを連結する抗体薬物複合体よりも、カップリングされる薬物分子の全量が大幅に減少される場合には、依然としても腫瘍細胞に対して同じ抑制効果または殺傷効果をもたらすこともできることを予想外に発見した。
【発明を実施するための形態】
【0034】
明細書の様々な側面に関連する様々な用語は、明細書及び特許請求の範囲全体で使用されている。特に明記しない限り、そのような用語は、当技術分野においてそれらの通常の意味を有する。その他の具体的に定義された用語は、本明細書で提供されている定義と一致ものと理解する必要がある。
本明細書で使用される「１つ」、「１種」及び「前記」という用語は、標準的な慣習に従って使用され、文脈上別段の指示がない限り、１つまたは複数を意味する。従って、例えば、「抗体薬物複合体」への言及は、２つ又はそれ以上の抗体薬物複合体の組み合わせなどを含む。
本明細書において「含む」という言葉を使用して説明する場合以外は、さらに「．．．からなる」及び／又は「基本に．．．からなる」という言葉で説明する類似の場合があることを理解すべきである。
本発明の広い範囲に示されている数値範囲およびパラメータの近似値であるが、具体的な実施例に示されている数値は、可能な限り正確に記録されている。しかしながら、いずれの値にもそれぞれの測定値に存在する標準偏差によって引き起こされる一定のエラーが本質的に含まれている。また、本明細書に開示されるすべての範囲は、そこに含まれるすべてのサブ範囲をカバーすると理解されるべきである。例えば、記載されている「１～１０」という範囲は、最小値１から最大値１０まで（エンドポイントを含む）のすべてのサブ範囲、つまり、最小値１又はそれ以上から始まるすべてのサブ範囲、例えば、１～６．１、及び最大値１０又はそれ以下まで終わるすべてのサブ範囲、例えば、５．５～１０を含むことを理解すべきである。また、「本明細書に組み込まれる」と呼ばれる参照は、その全体が組み込まれるものとして理解されるべきである。
本明細書で使用される「１つ」、「１種」及び「前記」という用語は、標準的な慣習に従って使用され、文脈上別段の指示がない限り、１つまたは複数を意味する。従って、例えば、「抗体薬物複合体」への言及は、２つ又はそれ以上の抗体薬物複合体の組み合わせなどを含む。
本明細書において「含む」という言葉を使用して説明する場合以外は、さらに「．．．からなる」及び／又は「基本に．．．からなる」という言葉で説明する類似の場合があることを理解すべきである。
本発明の広い範囲に示されている数値範囲およびパラメータの近似値であるが、具体的な実施例に示されている数値は、可能な限り正確に記録されている。しかしながら、いずれの値にもそれぞれの測定値に存在する標準偏差によって引き起こされる一定のエラーが本質的に含まれている。また、本明細書に開示されるすべての範囲は、そこに含まれるすべてのサブ範囲をカバーすると理解されるべきである。例えば、記載されている「１～１０」という範囲は、最小値１から最大値１０まで（エンドポイントを含む）のすべてのサブ範囲、つまり、最小値１又はそれ以上から始まるすべてのサブ範囲、例えば、１～６．１、及び最大値１０又はそれ以下まで終わるすべてのサブ範囲、例えば、５．５～１０を含むことを理解すべきである。また、「本明細書に組み込まれる」と呼ばれる参照は、その全体が組み込まれるものとして理解されるべきである。
【0035】
本発明で使用される
とは、
を含む基がここで化学結合を介して他の基と結合していることを意味する。
本発明に係る連結ユニット、リンカーは、交換可能に使用することができ、本発明に係る活性なユニット、薬物、毒物は、交換可能に使用することができる。
本発明に係る「抗原」という用語とは、免疫応答を誘発するか、又は抗体若しくは抗原結合分子によって結合され得る任意の分子を指す。免疫応答には、抗体産生又は特異的細胞の活性化、あるいはそれらの両方が含まれる。当業者は、ほとんどすべてのタンパク質又はペプチドを含む任意の高分子が抗原として役立つことができることを容易に理解する。一般に、抗原は内因的に発現することができ、即ち、ゲノムＤＮＡから発現するか、又は組換え的に発現するか、又は化学的に合成することができる。本発明に係る「抗原」とは、特にこれらの腫瘍関連抗原を指し、これらの腫瘍関連抗原は、業界でよく知られており、抗体調製法及び当業界でよく知られている情報によって調製することができる。がんの診断及び治療に使用できる効果的な細胞レベルの標的化合物を開発するために、研究者は膜貫通型又は他の腫瘍関連ペプチドを見つけようとする。これらの標的化合物は、１種又は複数種の癌細胞の表面に特異的に発現することができるが、１種又は複数種の非癌細胞の表面にはほとんど又はまったく発現していない。一般に、そのような腫瘍関連ペプチドは、非癌細胞の表面よりも、癌細胞の表面でより過剰に発現している。そのような腫瘍関連因子を確認すると、抗体ベースのがん治療の標的特異性を大きく向上させることができる。腫瘍関連抗原は、以下の腫瘍関連抗原（１）～（３６）を含むが、これらに限定されない。便宜上、当業界でよく知られている抗原関連情報には、名称、他の名称、遺伝子バンクのアクセッション番号を含む。次のようにマークが付けられる。腫瘍関連抗原に対応する核酸及びアミノ酸配列は、Ｇｅｎｂａｎｋのような公開データベースで見つけることができる。抗体の標的として対応する腫瘍関連抗原は、すべてのアミノ酸配列の変異体及び相同体を含み、実際に確認された配列に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、又は９５％の相同性を有するか、又は引用された腫瘍関連抗原配列に対して完全に同一の生物学的特性および特徴を有する。腫瘍関連抗原（１）～（３７）は、以下の通りである。
本発明に係る連結ユニット、リンカーは、交換可能に使用することができ、本発明に係る活性なユニット、薬物、毒物は、交換可能に使用することができる。
本発明に係る「抗原」という用語とは、免疫応答を誘発するか、又は抗体若しくは抗原結合分子によって結合され得る任意の分子を指す。免疫応答には、抗体産生又は特異的細胞の活性化、あるいはそれらの両方が含まれる。当業者は、ほとんどすべてのタンパク質又はペプチドを含む任意の高分子が抗原として役立つことができることを容易に理解する。一般に、抗原は内因的に発現することができ、即ち、ゲノムＤＮＡから発現するか、又は組換え的に発現するか、又は化学的に合成することができる。本発明に係る「抗原」とは、特にこれらの腫瘍関連抗原を指し、これらの腫瘍関連抗原は、業界でよく知られており、抗体調製法及び当業界でよく知られている情報によって調製することができる。がんの診断及び治療に使用できる効果的な細胞レベルの標的化合物を開発するために、研究者は膜貫通型又は他の腫瘍関連ペプチドを見つけようとする。これらの標的化合物は、１種又は複数種の癌細胞の表面に特異的に発現することができるが、１種又は複数種の非癌細胞の表面にはほとんど又はまったく発現していない。一般に、そのような腫瘍関連ペプチドは、非癌細胞の表面よりも、癌細胞の表面でより過剰に発現している。そのような腫瘍関連因子を確認すると、抗体ベースのがん治療の標的特異性を大きく向上させることができる。腫瘍関連抗原は、以下の腫瘍関連抗原（１）～（３６）を含むが、これらに限定されない。便宜上、当業界でよく知られている抗原関連情報には、名称、他の名称、遺伝子バンクのアクセッション番号を含む。次のようにマークが付けられる。腫瘍関連抗原に対応する核酸及びアミノ酸配列は、Ｇｅｎｂａｎｋのような公開データベースで見つけることができる。抗体の標的として対応する腫瘍関連抗原は、すべてのアミノ酸配列の変異体及び相同体を含み、実際に確認された配列に対して少なくとも７０％、８０％、８５％、９０％、又は９５％の相同性を有するか、又は引用された腫瘍関連抗原配列に対して完全に同一の生物学的特性および特徴を有する。腫瘍関連抗原（１）～（３７）は、以下の通りである。
【0036】
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体－ＩＢ型、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００１２０３）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ－３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７回トロンボスポンジン反復（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）及び短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８０１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ－１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ－３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質担体ファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ Ｈｌｏｇ、セマドメイン、７回トロンボスポンジン反復（１型及び１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）及び短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８０１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ－１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連遺伝子１、前立腺癌関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通上皮抗原２、６回膜貫通前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０１７６３６）；
【0037】
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌由来増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００３２０３又はＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）又はＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ－Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１１６４５６）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＫ０２６４６７）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ、Ｉｇベータ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合により相互作用し、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）又はＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）又はＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連ベータ）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ－Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１１６４５６）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２－Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＫ０２６４６７）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ、Ｉｇベータ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合により相互作用し、ＩｇＭ分子と表面上で複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達するＢ細胞特異的タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
【0038】
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走及び体液性防御において機能し、ＨＩＶ－２感染ならびに恐らくはＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、及び白血病の発症において役割を果たすＧタンパク質結合受容体、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１７０１．１）；
（３０）ＨＬＡ－ＤＯＢ（ペプチドと結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球にそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド依存性イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰによって開閉されるイオンチャネル、これはシナプス伝達及び神経発生に関与する可能性があり、不足すると特発性排尿筋不安定の病態生理の一因となる場合がある。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ－２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチ反復（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質、これはＢ細胞活性化及びアポトーシスを制御し、機能喪失は全身性エリテマトーデスを有する患者における疾患活性の増加と関連する。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、Ｃ２型Ｉｇ様及びＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体、これはＢリンパ球分化において役割を有する可能性がある。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２、Ｂ細胞発生及びリンパ腫形成において可能な役割を有する推定免疫受容体、転座による遺伝子の制御解除が一部のＢ細胞悪性腫瘍で生じる。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿１１２５７１．１）；
（３６）ＴＥＮＢ２（推定膜貫通プロテオグリカン、成長因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリー及びフォリスタチンに関連する。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１７９２７４）；
（３７）その他相関的抗原。
（３０）ＨＬＡ－ＤＯＢ（ペプチドと結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球にそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド依存性イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰによって開閉されるイオンチャネル、これはシナプス伝達及び神経発生に関与する可能性があり、不足すると特発性排尿筋不安定の病態生理の一因となる場合がある。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ－２、Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチ反復（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質、これはＢ細胞活性化及びアポトーシスを制御し、機能喪失は全身性エリテマトーデスを有する患者における疾患活性の増加と関連する。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、Ｃ２型Ｉｇ様及びＩＴＡＭドメインを含有する免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体、これはＢリンパ球分化において役割を有する可能性がある。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連２、Ｂ細胞発生及びリンパ腫形成において可能な役割を有する推定免疫受容体、転座による遺伝子の制御解除が一部のＢ細胞悪性腫瘍で生じる。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＮＰ＿１１２５７１．１）；
（３６）ＴＥＮＢ２（推定膜貫通プロテオグリカン、成長因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリー及びフォリスタチンに関連する。Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号ＡＦ１７９２７４）；
（３７）その他相関的抗原。
【0039】
本発明に係る「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、様々な抗体構造を包含し、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を含むが、これらに限定されない。通常、抗体は、ジスルフィド結合によって互いに連結された少なくとも２つの重鎖及び２つの軽鎖、又はその抗原結合分子を含む。各重鎖には、重鎖可変領域及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３という３つの定常ドメインを含む。各軽鎖には、軽鎖可変領域及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、ＣＬという恒定構造域を含む。重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変領域にさらに細分化でき、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保守的な領域が点在する。各々の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含み、アミノ基末端からカルボキシ末端までＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順に配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインが含まれる。Ａｂの定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的な補体系の第一成分（Ｃ１ｑ）を含む、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を仲介できる。別段の指定がない限り、本発明における「抗体」という用語は、インタクトな抗体と競合的に特異的結合する、インタクトな免疫グロブリン又はその抗原結合部分も含む。抗原結合部分は、組換えＤＮＡ技術、インタクトな抗体の酵素的または化学的切断により生成することができる。抗原結合部分は、特に、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂ）、相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む断片、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、二価抗体、三価抗体、四価抗体、及びポリペプチドと結合する特異的抗原を与えるのに十分な免疫グロブリンの少なくとも一部を含むポリペプチドを含む。本発明に係る「抗体」という用語は、さらに、天然および非天然（組換え産生）抗体の両方、ヒト及び非ヒト抗体、単一特異性抗体、多重特異性抗体（二重特異性抗体を含む。）、免疫グロブリン、合成抗体、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む四量体抗体、抗体軽鎖モノマー、抗体重鎖モノマー、抗体軽鎖ダイマー、抗体重鎖ダイマー、抗体軽鎖－抗体重鎖ペア、細胞内抗体（例えば、Ｓｔｏｃｋｓ 、（２００４）Ｄｒｕｇ ＤｉｓｃｏｖｅｒｙＴｏｄａｙ ９（２２）：９６０－６６を参照）、抗体融合タンパク質（この用語は抗体－薬物コンジュゲートを含み、本明細書で「抗体コンジュゲート」と呼ぶこともある）、ヘテロコンジュゲート抗体（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ）、単一ドメイン抗体、一価抗体、一本鎖抗体又は一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ラクダ抗体、アフィボディ（ａｆｆｙｂｏｄｙ）、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、抗－抗Ｉｄ抗体）、ミニ抗体、ドメイン抗体、合成抗体（本明細書では「抗体模倣物」と呼ぶこともある）及びその抗原結合断片を含む。
本発明に係る「機能性断片」という用語は、抗体フラグメントがそれが由来する抗体の重鎖又は軽鎖可変領域の部分配列からなるか、又はそれらを含むことを意味し、前記部分配列は、その由来する抗体と同じ結合特異性および十分な親和性を保持するのに十分であり、好ましくは、少なくともその由来する抗体の親和性の１／１００であり、より好ましくは、少なくとも１／１０である。このような機能的断片は、少なくとも５個のアミノ酸、好ましくは、その由来する抗体配列の１０、１５、２５、５０及び１００個の連続するアミノ酸を含む。
本発明に係る「機能性断片」という用語は、抗体フラグメントがそれが由来する抗体の重鎖又は軽鎖可変領域の部分配列からなるか、又はそれらを含むことを意味し、前記部分配列は、その由来する抗体と同じ結合特異性および十分な親和性を保持するのに十分であり、好ましくは、少なくともその由来する抗体の親和性の１／１００であり、より好ましくは、少なくとも１／１０である。このような機能的断片は、少なくとも５個のアミノ酸、好ましくは、その由来する抗体配列の１０、１５、２５、５０及び１００個の連続するアミノ酸を含む。
【0040】
「ヒト化抗体」という用語は、抗体において非ヒト抗体に由来するＣＤＲ領域を含み、且つその抗体分子の他の部分が１種（又は複数種）のヒト抗体に由来する抗体を指す。しかも、結合親和性を保持するために、フレームワーク（ＦＲと称される）領域のいくつかの残基を修飾することができる（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ、３２１：５２２－５２５、１９８６；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９：１５３４－１５３６、１９８８；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．、Ｎａｔｕｒｅ、３３２：３２３－３２７、１９８８）。本発明に係るヒト化抗体又はその断片は、当業者に知られている技術によって調製することができる（例えば、文献Ｓｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．１５０：２８４４－２８５７、１９９２；Ｍｏｕｎｔａｉｎ ｅｔ ａｌ．、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．Ｅｎｇ．Ｒｅｖ．、１０：１－１４２、１９９２、又はＢｅｂｂｉｎｇｔｏｎ ｅｔ ａｌ．、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０：１６９－１７５、１９９２を参照）。
「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列がある種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体、例えば、可変領域配列はマウス抗体に由来し、定常領域配列はヒト抗体に由来するものを指す。本発明によるキメラ抗体又はその断片は、遺伝子組換え技術を使用して調製することができる。例えば、前記キメラ抗体は、プロモーター及び非ヒト、特に本発明によるマウスモノクローナル抗体の可変領域をコードする配列、及びヒト抗体の定常領域をコードする配列を含む組換えＤＮＡをクローニングすることによって作製することができる。このような組換え遺伝子によってコードされる本発明に係るキメラ抗体は、例えば、マウス－ヒトキメラであり、その抗体の特異性は、マウスＤＮＡに由来する可変領域によって決定され、且つそのアイソタイプは、ヒトＤＮＡに由来する定常領域によって決定される。キメラ抗体を作製する方法は、例えば、文献Ｖｅｒｈｏｅｙｎ ｅｔ ａｌ．（ＢｉｏＥｓｓａｙｓ、８：７４、１９８８）を参照することができる。
「モノクローナル抗体」という用語は、単一の分子組成を有する抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を示す。
「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列がある種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体、例えば、可変領域配列はマウス抗体に由来し、定常領域配列はヒト抗体に由来するものを指す。本発明によるキメラ抗体又はその断片は、遺伝子組換え技術を使用して調製することができる。例えば、前記キメラ抗体は、プロモーター及び非ヒト、特に本発明によるマウスモノクローナル抗体の可変領域をコードする配列、及びヒト抗体の定常領域をコードする配列を含む組換えＤＮＡをクローニングすることによって作製することができる。このような組換え遺伝子によってコードされる本発明に係るキメラ抗体は、例えば、マウス－ヒトキメラであり、その抗体の特異性は、マウスＤＮＡに由来する可変領域によって決定され、且つそのアイソタイプは、ヒトＤＮＡに由来する定常領域によって決定される。キメラ抗体を作製する方法は、例えば、文献Ｖｅｒｈｏｅｙｎ ｅｔ ａｌ．（ＢｉｏＥｓｓａｙｓ、８：７４、１９８８）を参照することができる。
「モノクローナル抗体」という用語は、単一の分子組成を有する抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対して単一の結合特異性および親和性を示す。
【0041】
幾つかの具体的な実施例では、本発明に係る抗体は、モロリズマブ（Ｍｕｒｏｍｏｍａｂ）－ＣＤ３、アブシキシマブ（Ａｂｃｉｘｉｍａｂ）、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、ダクリズマブ（Ｄａｃｌｉｚｕｍａｂ）、パリビズマブ（Ｐａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、インフリキシマブ（Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ）、トラスツズマブ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、エタネルセプト（Ｅｔａｎｅｒｃｅｐｔ）、バシリキシマブ（Ｂａｓｉｌｉｘｉｍａｂ）、ゲムツズマブ（ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ）、アレムツズマブ（Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ）、イブリツモマブ（Ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ）、アダリムマブ（Ａｄａｌｉｍｕｍａｂ）、Ａｌｅｆａｃｅｐｔ、オマリズマブ（Ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ）、エファリズマブ（Ｅｆａｌｉｚｕｍａｂ）、トシツモマブ（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ）、セツキシマブ（Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、ＡＢＴ－８０６、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ（Ｎａｔａｌｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ（Ｒａｎｉｂｉｚｕｍａｂ）、パニツムマブ、エクリズマブ（ＥｃμＬｉｚｕｍａｂ）、Ｒｉｌｏｎａｃｅｐｔ、セルトリズマブ（Ｃｅｒｔｏｌｉｚｕｍａｂ）、ロミプロスチム（Ｒｏｍｉｐｌｏｓｔｉｍ）、ＡＭＧ－５３１、ゴリムマブ（Ｇｏｌｉｍｕｍａｂ）、ウステキヌマブ（Ｕｓｔｅｋｉｎｕｍａｂ）、ＡＢＴ－８７４、ベラタセプト（Ｂｅｌａｔａｃｅｐｔ）、ベリムマブ（Ｂｅｌｉｍｕｍａｂ）、Ａｔａｃｉｃｅｐｔ、抗ＣＤ２０抗体、カナキヌマブ（Ｃａｎａｋｉｎｕｍａｂ）、トシリズマブ（Ｔｏｃｉｌｉｚｕｍａｂ）、アテゾリズマブ（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ）、メポリズマブ（Ｍｅｐｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、ＨｕＭａｘ ＣＤ２０、Ｔｒｉｍｅｌｉｍｕｍａｂ、トレメリムマブ（ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ）、イピリムマブ（Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、ＩＤＥＣ－１１４、イノツズマブ（Ｉｎｏｔｕｚｕｍａｂ）、ＨｕＭａｘ ＥＧＦＲ、アフリベルセプト（Ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）、ＨｕＭａｘ－ＣＤ４、テプリズマブ（Ｔｅｐｌｉｚｕｍａｂ）、Ｏｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ、カツマキソマブ（Ｃａｔｕｍａｘｏｍａｂ）、抗ＥｐＣＡＭ抗体ＩＧＮ１０１、Ａｄｅｃａｔｕｍｕｍａｂ、オレゴボマブ（Ｏｒｅｇｏｖｏｍａｂ）、ジヌツキシマブ（Ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、Ｇｉｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ、デノスマブ（Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）、バピネオズマブ （Ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ）、モタビズマブ（Ｍｏｔａｖｉｚｕｍａｂ）、エファングマブ（ｅｆｕｍｇｕｍａｂ）、ラキシバクマブ（Ｒａｘｉｂａｃｕｍａｂ）、ＬＹ２４６９２９８、及びラキシバクマブ（Ｒａｘｉｂａｃｕｍａｂ）を含むが、これらに限定されない。
【0042】
本発明に係る「連結ユニット」という用語とは、タンパク質／抗体分子および薬物分子とそれぞれ反応することができる二官能性または多官能性を有する分子を指し、したがって、「ブリッジ」としてタンパク質／抗体と薬物とを連結される。細胞内での薬物放出のメカニズムによれば、「リンカー」又は「抗体薬物複合体のリンカー」は、切断不可能なリンカー（ｎｏｎ－ｃｌｅａｖａｂｌｅ ｌｉｎｋｅｒ）及び切断可能なリンカー（ｃｌｅａｖａｂｌｅ ｌｉｎｋｅｒ）に分類することができる。
切断不可能なリンカーは、比較的安定したリンカーであり、その構造は生体内環境で分解及び破壊することが困難である。切断不可能なリンカーを含む抗体薬物複合体である場合には、その薬物放出メカニズムは、複合体が抗原に結合して細胞によってエンドサイトーシスされた後、抗体はリソソームで酵素的に消化され、小分子薬物とリンカーと抗体アミノ酸残基からなる活性分子が放出される。それによりもたらす薬物分子の構造変化は、その細胞毒性を低下させていないが、活性分子は帯電しているため（アミノ酸残基）、隣接する細胞に浸透することができない。従って、このような活性薬物は、標的抗原を発現しない腫瘍細胞（抗原54性細胞）に隣接する腫瘍細胞を殺すことができない（傍観者効果、ｂｙｓｔａｎｄｅｒ ｅｆｆｅｃｔ）（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２０１０、２１、５－１３）。通常の切断不可能なリンカーは、例えば、ＭＣリンカー及びＭＣＣリンカーなどがある。
切断不可能なリンカーは、比較的安定したリンカーであり、その構造は生体内環境で分解及び破壊することが困難である。切断不可能なリンカーを含む抗体薬物複合体である場合には、その薬物放出メカニズムは、複合体が抗原に結合して細胞によってエンドサイトーシスされた後、抗体はリソソームで酵素的に消化され、小分子薬物とリンカーと抗体アミノ酸残基からなる活性分子が放出される。それによりもたらす薬物分子の構造変化は、その細胞毒性を低下させていないが、活性分子は帯電しているため（アミノ酸残基）、隣接する細胞に浸透することができない。従って、このような活性薬物は、標的抗原を発現しない腫瘍細胞（抗原54性細胞）に隣接する腫瘍細胞を殺すことができない（傍観者効果、ｂｙｓｔａｎｄｅｒ ｅｆｆｅｃｔ）（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２０１０、２１、５－１３）。通常の切断不可能なリンカーは、例えば、ＭＣリンカー及びＭＣＣリンカーなどがある。
【0043】
【化11】
【0044】
切断可能なリンカーは、その名称に示すように、標的細胞内で切断され、活性薬物（小分子薬物自体）を放出することができる。切断可能なリンカーは、化学的に不安定なリンカーと酵素に不安定なリンカーという２つの主要なカテゴリに分類できる。
化学的に不安定なリンカーは、血漿と細胞質の特性の違いにより、選択的に切断されてもよい。このような特性には、ｐＨ、グルタチオン濃度などが含まれる。
ｐＨ感受性リンカーは、通常に酸切断リンカーと称される。このようなリンカーは、血液の中性環境下（ｐＨ ７．３～７．５）で相対的に安定するが、弱酸性のエンドソーム（ｐＨ ５．０～６．５）及びリソソーム（ｐＨ ４．５～５．０）内で加水分解される。第一世代の抗体薬物複合体は、そのようなリンカー、例えば、ヒドラゾン、カーボネート、アセタール、ケタール類を使用することは多い。酸断裂リンカーの限定される血漿安定性のために、そのようなリンカーによる抗体薬物複合体は、一般的に、短い半減期（２～３日）を有する。このような短い半減期は、新世代の抗体薬物複合体におけるｐＨ感受性リンカーの応用をある程度制限している。
グルタチオン感受性リンカーは、ジスルフィド結合リンカーとも呼ばれる。薬物の放出は、細胞内でのグルタチオンの高濃度（ミリモル範囲）と血中のグルタチオンの比較的低濃度（マイクロモル範囲）の違いによって引き起こされる。腫瘍細胞については、特に、上記のように、その酸素含有量が少ないため、レダクターゼ活性が増加し、グルタチオン濃度が高くなる。ジスルフィド結合は熱力学的に安定しているため、血漿中での安定性が良好である。
化学的に不安定なリンカーは、血漿と細胞質の特性の違いにより、選択的に切断されてもよい。このような特性には、ｐＨ、グルタチオン濃度などが含まれる。
ｐＨ感受性リンカーは、通常に酸切断リンカーと称される。このようなリンカーは、血液の中性環境下（ｐＨ ７．３～７．５）で相対的に安定するが、弱酸性のエンドソーム（ｐＨ ５．０～６．５）及びリソソーム（ｐＨ ４．５～５．０）内で加水分解される。第一世代の抗体薬物複合体は、そのようなリンカー、例えば、ヒドラゾン、カーボネート、アセタール、ケタール類を使用することは多い。酸断裂リンカーの限定される血漿安定性のために、そのようなリンカーによる抗体薬物複合体は、一般的に、短い半減期（２～３日）を有する。このような短い半減期は、新世代の抗体薬物複合体におけるｐＨ感受性リンカーの応用をある程度制限している。
グルタチオン感受性リンカーは、ジスルフィド結合リンカーとも呼ばれる。薬物の放出は、細胞内でのグルタチオンの高濃度（ミリモル範囲）と血中のグルタチオンの比較的低濃度（マイクロモル範囲）の違いによって引き起こされる。腫瘍細胞については、特に、上記のように、その酸素含有量が少ないため、レダクターゼ活性が増加し、グルタチオン濃度が高くなる。ジスルフィド結合は熱力学的に安定しているため、血漿中での安定性が良好である。
【0045】
酵素に不安定なリンカー、例えば、ペプチドリンカーは、薬物放出をよりよく制御することができる。ペプチドリンカーは、リソソームプロテアーゼ、例えば、カテプシン（Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ Ｂ）又はプラスミン（一部の腫瘍組織では、このような酵素の含有量が増加する）によって効果的に切断される。このようなペプチドリンカーは、細胞外の不適切なｐＨと血清プロテアーゼ阻害剤により、通常は細胞外でプロテアーゼが不活性になるため、血漿循環において非常に安定していると考えられている。高い血漿安定性と良好な細胞内切断選択性および有効性の観点から、酵素に不安定なリンカーは、抗体薬物複合体の切断可能なリンカーとして広く使用されている。典型的な酵素に不安定なリンカーは、例えば、ｖｃリンカーなどがある。
【0046】
【化12】
【0047】
自殺型リンカーは、一般的に、切断可能なリンカーと活性薬物の間に埋め込まれているか、又はそれ自体で切断可能なリンカーの一部である。自殺型リンカーの作用機序は、切断可能なリンカーが適切な条件下で切断された後に、自殺型リンカーが自発的に構造を再配列し、それに連結された活性薬物を放出することができる。通常の自殺型リンカーは、例えば、ｐ－アミノベンジルアルコール類（ＰＡＢ）などである。
【0048】
【化13】
【0049】
本発明に係る「活性なユニット」という用語は、所望の生物学的活性を有し、本発明のコンジュゲートを調製するための反応性官能基を有する任意の化合物を広く指す。所望の生物学的活性には、ヒト又は他の動物の疾患の診断、治癒、緩和、治療、及び予防が含まれる。新薬の継続的な発見及び開発に伴い、これらの新薬も本発明の薬剤に含まれるべきである。具体的には、前記薬物は、細胞毒性薬物、細胞分化因子、幹細胞栄養因子、ステロイド薬、自己免疫疾患治療薬、抗炎症薬又は感染症治療薬を含むが、これらに限定されない。より具体的には、前記薬物は、微小管阻害薬又はＤＮＡ、ＲＮＡ損傷剤を含むが、これらに限定されない。好ましくは、本発明に係る活性なユニットは、以下の化合物を含むが、これらに限定されない。
（ａ）エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、オキサリプラチン、５－フルオロウラシル、フォリン酸、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン（Ｉｍｐｒｏｓｕｌｆａｎ）、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレートアミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド（ｔｒｉｅｔｈｉｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリメチローロメラミン、ブラタシン、ブラタシノン（Ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ）、カンプトセシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ－１０６５、アドゼレシン、カルゼレシン、ビゼレシン、クリプトフィシン１、クリプトフィシン８、ドラスタチン、ズオカルマイシン、ＫＷ－２１８９、ＣＢ１－ＴＭ１、エレウテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロロナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアマイシン、カリケアマイシンγ１、カリケアマイシンω１、ダイネマイシン、ダイネマイシンＡ、クロドロネート、エスペラマイシン、ネオカルジノスタチン発色団、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｂｉｃｉｎ）、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、アドリアマイシン、モルホリノアドリアマイシン、シアノモルホリノアドリアマイシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、リポソームアドリアマイシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マーセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシンＣ、マイコフェノール酸（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、ノガラマイシン（ｎｏｇａｌａｍｙｃｉｎ）、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎｓ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン（ｔｕｂｅｒｃｉｄｉｎ）、ウベニメクス、ジノスタチン（ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ）、ゾルビシン（ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）、５－フルオロウラシル、デノプテリン（ｄｅｎｏｐｔｅｒｉｎ）、メトトレキサート、プテロプテリン（ｐｔｅｒｏｐｔｅｒｉｎ）、トリメトレキセート（ｔｒｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ）、フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン（ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、６－アザウリジン（ａｚａｕｒｉｄｉｎｅ）、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン（ｅｎｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、フロキシウリジン（ｆｌｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）、カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン（ｔｅｓｔｏｌａｃｔｏｎｅ）、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）、ビサントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）、エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）、デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）、デメコルシン（ｄｅｍｅｃｏｌｃｉｎｅ）、ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、エルフォルニチン （ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、酢酸エリプチニウム（ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ）、エトグルシド（ｅｔｏｇｌｕｃｉｄ）、硝酸ガリウム、ヒドロキシカルバミド、レンチナン、ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｍｉｎｅ）、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）、アンサミトシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎｅ）、ミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）、ミトキサントロン、モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）、ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）、ペントスタチン、フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）、ピラルビシン、ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカライド－K（Polysaccharide K）、ラゾキサン（ｒａｚｏｘａｎｅ）、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｒｍａｎｉｕｍ）、テニュアゾン酸（ｔｅｎｕａｚｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、トリアジコン（ｔｒｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン、Ｔ－２トキシン、シクロスポリンＡ、ロリジン（ｒｏｒｉｄｉｎｅ）Ａ、アングイジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ）、ウレタン、ビンデシン、ダカーバジン、マンノムスチン（ｍａｎｎｏｍｕｓｔｉｎｅ）、ミトブロニトール、ミトラクトール（ｍｉｔｏｌａｃｔｏｌ）、ピポブロマン（ｐｉｐｏｂｒｏｍａｎ）、ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルベースのアルブミン工学ナノ粒子製剤、ドキセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、６－チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、マイトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン（ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ）、テニポシド、エダトレキセート（ｅｄａｔｒｅｘａｔｅ）、ダウノマイシン、アミノプテリン、キセローダ（ｘｅｌｏｄａ）、イバンドロナート（ｉｂａｎｄｒｏｎａｔｅ）、ＣＰＴ－１１、トポイソメラーゼ阻害薬ＲＦＳ ２０００、ジフルオロメチロールニチン（ＤＭＦＯ）、レチノイン酸、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、又はそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸；
（ａ）エルロチニブ、ボルテゾミブ、フルベストラント、スーテント、レトロゾール、メシル酸イマチニブ、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、オキサリプラチン、５－フルオロウラシル、フォリン酸、ラパマイシン、ラパチニブ、ロナファルニブ、ソラフェニブ、ゲフィチニブ、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１、チオテパ、シクロホスファミド、ブスルファン、インプロスルファン（Ｉｍｐｒｏｓｕｌｆａｎ）、ピポスルファン、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパ、エチレンイミン、アルトレートアミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド（ｔｒｉｅｔｈｉｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）、トリメチローロメラミン、ブラタシン、ブラタシノン（Ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ）、カンプトセシン、トポテカン、ブリオスタチン、カリスタチン、ＣＣ－１０６５、アドゼレシン、カルゼレシン、ビゼレシン、クリプトフィシン１、クリプトフィシン８、ドラスタチン、ズオカルマイシン、ＫＷ－２１８９、ＣＢ１－ＴＭ１、エレウテロビン、パンクラチスタチン、サルコジクチン、スポンジスタチン、クロランブシル、クロロナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、ノベンビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタード、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、カリケアマイシン、カリケアマイシンγ１、カリケアマイシンω１、ダイネマイシン、ダイネマイシンＡ、クロドロネート、エスペラマイシン、ネオカルジノスタチン発色団、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｂｉｃｉｎ）、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、アドリアマイシン、モルホリノアドリアマイシン、シアノモルホリノアドリアマイシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、リポソームアドリアマイシン、デオキシドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、マーセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシンＣ、マイコフェノール酸（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、ノガラマイシン（ｎｏｇａｌａｍｙｃｉｎ）、オリボマイシン（ｏｌｉｖｏｍｙｃｉｎｓ）、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン（ｔｕｂｅｒｃｉｄｉｎ）、ウベニメクス、ジノスタチン（ｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ）、ゾルビシン（ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）、５－フルオロウラシル、デノプテリン（ｄｅｎｏｐｔｅｒｉｎ）、メトトレキサート、プテロプテリン（ｐｔｅｒｏｐｔｅｒｉｎ）、トリメトレキセート（ｔｒｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ）、フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、アンシタビン、アザシチジン（ａｚａｃｉｔｉｄｉｎｅ）、６－アザウリジン（ａｚａｕｒｉｄｉｎｅ）、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン（ｅｎｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、フロキシウリジン（ｆｌｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）、カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン（ｔｅｓｔｏｌａｃｔｏｎｅ）、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、エニルウラシル、アムサクリン（ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）、ビサントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）、エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）、デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）、デメコルシン（ｄｅｍｅｃｏｌｃｉｎｅ）、ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、エルフォルニチン （ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、酢酸エリプチニウム（ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ）、エトグルシド（ｅｔｏｇｌｕｃｉｄ）、硝酸ガリウム、ヒドロキシカルバミド、レンチナン、ロニダミン（ｌｏｎｉｄａｍｉｎｅ）、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）、アンサミトシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎｅ）、ミトグアゾン（ｍｉｔｏｇｕａｚｏｎｅ）、ミトキサントロン、モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）、ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）、ペントスタチン、フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）、ピラルビシン、ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、ポリサッカライド－K（Polysaccharide K）、ラゾキサン（ｒａｚｏｘａｎｅ）、リゾキシン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム（ｓｐｉｒｏｇｅｒｍａｎｉｕｍ）、テニュアゾン酸（ｔｅｎｕａｚｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、トリアジコン（ｔｒｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン、Ｔ－２トキシン、シクロスポリンＡ、ロリジン（ｒｏｒｉｄｉｎｅ）Ａ、アングイジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ）、ウレタン、ビンデシン、ダカーバジン、マンノムスチン（ｍａｎｎｏｍｕｓｔｉｎｅ）、ミトブロニトール、ミトラクトール（ｍｉｔｏｌａｃｔｏｌ）、ピポブロマン（ｐｉｐｏｂｒｏｍａｎ）、ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）、アラビノシド、シクロホスファミド、チオテパ、パクリタキセル、パクリタキセルベースのアルブミン工学ナノ粒子製剤、ドキセタキセル、クロランブシル、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、６－チオグアニン、メルカプトプリン、シスプラチン、カルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド、イホスファミド、マイトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ノバントロン（ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ）、テニポシド、エダトレキセート（ｅｄａｔｒｅｘａｔｅ）、ダウノマイシン、アミノプテリン、キセローダ（ｘｅｌｏｄａ）、イバンドロナート（ｉｂａｎｄｒｏｎａｔｅ）、ＣＰＴ－１１、トポイソメラーゼ阻害薬ＲＦＳ ２０００、ジフルオロメチロールニチン（ＤＭＦＯ）、レチノイン酸、カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、又はそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物又は酸；
【0050】
（ｂ）モノカイン、リンホカイン、伝統的なポリペプチドホルモン、副甲状腺ホルモン、チロキシン、リラキシン、プロリラキシン、糖タンパク質ホルモン、卵胞刺激ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、肝細胞増殖因子、線維芽細胞成長因子、プロラクチン、胎盤プロラクチン、腫瘍壊死因子－α、腫瘍壊死因子－β、ミューラー阻害物質、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、インヒビン、アクチビン、血管内皮増殖因子、トロンボポイエチン、エリスロポイエチン、骨誘導因子、インターフェロン、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、コロニー刺激因子（「ＣＳＦ」）、マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－マクロファージ－ＣＳＦ、顆粒球－ＣＳＦ、インターフェロン（ＩＬ）、ＩＬ－１、ＩＬ－１α、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、腫瘍壊死因子、ＴＮＦ－α、ＴＮＦ－β、ポリペプチド因子、ＬＩＦ、ｋｉｔ リガンド、又はそれらの任意の組み合わせ；
【0051】
（ｃ）ジフテリア毒素、ボツリヌス毒素、テタノスパスミン、ベロトキシン、コレラ毒素、アマニチン、アマニチン誘導体、α－アマニチン、ピロロベンゾジアゼピン、ピロロベンゾジアゼピン誘導体、テトロドトキシン、ブレベトキシン、シガトキシン、ガストロトキシン、ＡＭ毒素、ツブリシン、ゲルダナマイシン、メイタンシン類化合物、カリケアマイシン、ダウノルビシン、アドリアマイシン、メトトレキサート、ビンデシン、ＳＧ２２８５、ドラスタチン、ドラスタチン類似体、オーリスタチン、クリプトフィシン、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体及び代謝物、リゾマイシン、リゾマイシン誘導体、ＣＣ－１０６５、ＣＣ－１０６５類似体又は誘導体、デュオカルマイシン、エンジイン系抗生物質、エスペラミシン、エポチロン、Ａｚｏｎａｆｉｄｅ、アプリジン、トキソイド、又はそれらの任意の組み合わせ；
【0052】
（ｄ）親和性リガンド、ここで、前記親和性リガンドは、基質、阻害剤、刺激剤、神経伝達物質、放射性同位元素、又はそれらの任意の組み合わせ；
（ｅ）放射性標識化合物、３２Ｐ、３５Ｓ、蛍光色素、高電子密度化試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に対して相補的な配列を有する核酸分子、又はそれらの任意の組み合わせ；
（ｆ）免疫調節化合物、抗癌剤、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗真菌剤および抗寄生虫剤、又はそれらの任意の組み合わせ；
（ｇ）タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、ラロキシフェン、ナロキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン又はトレミフェン；
（ｈ）４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール；
（ｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロレリン、ゴセレリン又はトロキサシタビン；
（ｊ）アロマターゼ阻害剤；
（ｋ）プロテインキナーゼ阻害剤；
（ｌ）脂質キナーゼ阻害剤；
（ｍ）アンチセンスオリゴヌクレオチド；
（ｎ）リボザイム；
（ｏ）ワクチン；及び
（ｐ）抗血管新生剤。
（ｅ）放射性標識化合物、３２Ｐ、３５Ｓ、蛍光色素、高電子密度化試薬、酵素、ビオチン、ストレプトアビジン、ジゴキシゲニン、ハプテン、免疫原性タンパク質、標的に対して相補的な配列を有する核酸分子、又はそれらの任意の組み合わせ；
（ｆ）免疫調節化合物、抗癌剤、抗ウイルス剤、抗菌剤、抗真菌剤および抗寄生虫剤、又はそれらの任意の組み合わせ；
（ｇ）タモキシフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４－ヒドロキシタモキシフェン、ラロキシフェン、ナロキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン又はトレミフェン；
（ｈ）４（５）－イミダゾール、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール、エキセメスタン、レトロゾール又はアナストロゾール；
（ｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、リュープロレリン、ゴセレリン又はトロキサシタビン；
（ｊ）アロマターゼ阻害剤；
（ｋ）プロテインキナーゼ阻害剤；
（ｌ）脂質キナーゼ阻害剤；
（ｍ）アンチセンスオリゴヌクレオチド；
（ｎ）リボザイム；
（ｏ）ワクチン；及び
（ｐ）抗血管新生剤。
【0053】
本発明の幾つかの実施形態では、前記「活性なユニット」は、メイタンシン類化合物、Ｖ－ＡＴＰａｓｅ阻害剤、アポトーシス促進剤、Ｂｅ１２阻害剤、ＭｃＬ１阻害剤、ＨＳＰ９０阻害剤、ＩＡＰ阻害剤、ｍＴＯｒ阻害剤、微小管安定化剤、微小管不安定化剤、アウリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）、ドラスタチン（ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ）、ＭｅｔＡＰ（メチオニルアミノペプチダーゼ）、タンパク質ＣＲＭｌの核輸出阻害剤、ＤＰＰＩＶ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、ミトコンドリアにおけるリン酸転移反応の阻害剤、タンパク質合成阻害剤、キナーゼ阻害剤、ＣＤＫ２阻害剤、ＣＤＫ９阻害剤、キネシン阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、ＤＮＡ損傷剤、ＤＮＡアルキル化剤、ＤＮＡインターカレーター、ＤＮＡ副溝結合剤、ＤＨＦＲ阻害剤、及びドラスタチンペプチド、ビタミンＡ前駆体、葉酸から選ばれる。
本発明の幾つかの実施形態では、前記「活性なユニット」は、細胞毒性薬物（例えば、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、アルカロイド）、免疫増強剤又は放射性同位素である。好ましくは、前記薬物は、アマニチン（ａｍａｎｉｔｉｎｓ）、アントラサイクリン（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ）、バッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎｓ）、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ）、セマドチン（ｃｅｍａｄｏｔｉｎｓ）、コルヒチン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓ）、コルセミド（ｃｏｌｃｉｍｉｄｓ）、コンブレタスタチン（ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎｓ）、クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎｓ）、ディスコデルモライド（ｄｉｓｃｏｄｅｒｍｏｌｉｄｅｓ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、アドリアマイシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、エキノマイシン（ｅｃｈｉｎｏｍｙｃｉｎｓ）、エレウセロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎｓ）、エポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅｓ）、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅｓ）、レキシトロプシン（ｌｅｘｉｔｒｏｐｓｉｎｓ）、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅｓ）、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、ネトロプシン（ｎｅｔｒｏｐｓｉｎｓ）、ピューロマイシン（ｐｕｒｏｍｙｃｉｎｓ）、リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎｓ）、タキサン（ｔａｘａｎｅｓ）、チューブリシン（ｔｕｂｕＬｙｓｉｎｓ）、又はビンカアルカロイド（ｖｉｎｃａ ａｌｋａｌｏｉｄｓ）から選ばれる。より好ましくは、前記「薬物」は、ＭＭＡＤ（モノメチルアウリスタチン Ｄ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｄ）及びその誘導体、ＭＭＡＥ（モノメチルアウリスタチン Ｅ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｅ）及びその誘導体、ＭＭＡＦ（モノメチルアウリスタチン Ｆ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｆ）及びその誘導体、メイタンシン誘導体ＤＭ１（Ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ Ｍ１）、メイタンシン誘導体ＤＭ４（Ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ Ｍ４）、デュオカルマイシン（Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｅ）及びその誘導体、カリケアミシン（Ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）及びその誘導体、ＰＢＤＡ（Ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ）、アドリアマイシン（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ビンカアルカロイド（Ｖｉｎｃａ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ）、Ｍｅｔｒｏｔｒｅｘａｔｅ、ビンブラスチン（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ダウノルビシン（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）及びその誘導体、ツブリシン（ｔｕｂμＬｙｓｉｎｓ）及びその誘導体から選ばれる。
本発明の幾つかの実施形態では、前記「活性なユニット」は、細胞毒性薬物（例えば、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、アルカロイド）、免疫増強剤又は放射性同位素である。好ましくは、前記薬物は、アマニチン（ａｍａｎｉｔｉｎｓ）、アントラサイクリン（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅｓ）、バッカチン（ｂａｃｃａｔｉｎｓ）、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｓ）、セマドチン（ｃｅｍａｄｏｔｉｎｓ）、コルヒチン（ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｓ）、コルセミド（ｃｏｌｃｉｍｉｄｓ）、コンブレタスタチン（ｃｏｍｂｒｅｔａｓｔａｔｉｎｓ）、クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎｓ）、ディスコデルモライド（ｄｉｓｃｏｄｅｒｍｏｌｉｄｅｓ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、アドリアマイシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、エキノマイシン（ｅｃｈｉｎｏｍｙｃｉｎｓ）、エレウセロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎｓ）、エポチロン（ｅｐｏｔｈｉｌｏｎｅｓ）、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅｓ）、レキシトロプシン（ｌｅｘｉｔｒｏｐｓｉｎｓ）、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅｓ）、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、ネトロプシン（ｎｅｔｒｏｐｓｉｎｓ）、ピューロマイシン（ｐｕｒｏｍｙｃｉｎｓ）、リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎｓ）、タキサン（ｔａｘａｎｅｓ）、チューブリシン（ｔｕｂｕＬｙｓｉｎｓ）、又はビンカアルカロイド（ｖｉｎｃａ ａｌｋａｌｏｉｄｓ）から選ばれる。より好ましくは、前記「薬物」は、ＭＭＡＤ（モノメチルアウリスタチン Ｄ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｄ）及びその誘導体、ＭＭＡＥ（モノメチルアウリスタチン Ｅ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｅ）及びその誘導体、ＭＭＡＦ（モノメチルアウリスタチン Ｆ、Ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｆ）及びその誘導体、メイタンシン誘導体ＤＭ１（Ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ Ｍ１）、メイタンシン誘導体ＤＭ４（Ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ Ｍ４）、デュオカルマイシン（Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｅ）及びその誘導体、カリケアミシン（Ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ）及びその誘導体、ＰＢＤＡ（Ｐｙｒｒｏｌｏｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅｓ）、アドリアマイシン（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ビンカアルカロイド（Ｖｉｎｃａ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ）、Ｍｅｔｒｏｔｒｅｘａｔｅ、ビンブラスチン（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ダウノルビシン（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）及びその誘導体、ツブリシン（ｔｕｂμＬｙｓｉｎｓ）及びその誘導体から選ばれる。
【0054】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、メイタンシン（ｍａｙｔａｎｓｉｎｅ）又はマイタンシノイド （ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｉｄｓ）である。メイタンシン化合物は、微小管のチューブリン形成を阻害することにより、細胞増殖を阻害する（Ｓｃｉｅｎｃｅ １９７５、１８９、１００２－１００５；ＵＳ ５２０８０２０）。マイタンシノイドは、メイタンシンの誘導体である。メイタンシン及びマイタンシノイドは、いずれも効率よい細胞毒性を持つが、主に腫瘍に対するそのような分子の選択性が低いため、がん治療の臨床応用には大きな制限がある。但し、それらは、そのような高細胞毒性により抗体薬物複合体における薬物部分の第一選択薬になる。以下、メイタンシン、マイタンシノイド 、及び抗体薬物複合体でよく使用されている３つのマイタンシノイドの分子構造を示す。
【0055】
【化13】
【0056】
マイタンシノイド合成の主な原料は、メイタンシノール（ｍａｙｔａｎｓｉｎｏｌ）であり、主にアンサマイシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎｓ）の加水分解によって得られる。アンサマイシンは、発酵により調製することができる。アンサマイシン誘導体（ＷＯ ２０１２／０６１５９０）及びアラニルメイタンシノール（ＵＳ ２０１２／０１２１６１５）は、抗体薬物複合体の薬物「弾頭」としても使用されることが報告されている。
【0057】
【化14】
【0058】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、オーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎｓ）のペプチド系薬物である。オーリスタチンのペプチド系薬物は、ドラスタチン １０（ｄｏｌａｓｔａｔｉｎ １０）の類似体であり、後者は海洋軟体動物ウミウシから単離された生物学的に活性なポリペプチドである（ＵＳ ７４９８２９８）。ドラスタチン１０は、チューブリン（ビンクリスチンと同じ結合領域）に結合することにより、チューブリンの重合を阻害する。ドラスタチン１０、オーリスタチンＰＥ、オーリスタチンＥは、いずれも線状ポリペプチドであり、４つのアミノ酸（それらのうち、３つのアミノ酸は、ドラスタチン類化合物に固有するものである。）及びＣ－末端のアミド基を含む。２つの代表的なオーリスタチン類化合物、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）及びモノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）は、いずれも抗体薬物複合体における薬物部分の第一選択薬である。
【0059】
【化15】
【0060】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎｓ類薬物である。Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎｓは、は粘液細菌から抽出された天然物の一種であり、チューブリンの重合を効果的に阻害できるため、抗有糸分裂活性を示し、その中で、Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ Ｄが最も優れた活性を持つ。Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎ Ｄは、複雑なテトラペプチド化合物であり、その構造にＯ－アシル／Ｎ、Ｏ－アセタール官能基を含むため、酸性及びアルカリ性のいずれかの条件下でも不安定である。ＵＳ２０１１／００２１５６８及びＵＳ ２０１３／０２２４２２８には、それぞれ、Ｔｕｂｕｌｙｓｉｎの一連の類似体であって、その構造に上記の不安定な官能基を除去するとともに、高い細胞活性を持つものを開示している。
【0061】
【化16】
【0062】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、カリケアミシン（ｃａｌｉｃｈｅｍｉｃｉｎｓ）類薬物である。カリケアミシン類薬物は、抗腫瘍抗生物質であり、ＤＮＡの副溝に結合し、特定の部位でＤＮＡの二重らせん構造を破壊することにより、細胞アポトーシスが引き起こされる。カリケアミシン類薬物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでサブピコモルレベルの高活性を有するが、治療指数が低いため、臨床応用の可能性はない。しかしながら、それらは、この高活性により抗体薬物複合体の理想的な候補薬物（例えば、ゲムツズマブ オゾガマイシン及びＩｎｏｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）になる。
【0063】
【化17】
【0064】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、アドリアマイシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎｓ）である。アドリアマイシンは、ＤＮＡの二重らせん構造に挿入してＤＮＡ複製をブロックすることができるため、化学療法薬として使用される。但し、アドリアマイシンの細胞毒性が低いため（ヒト癌細胞株の場合、５０％阻害濃度は０．１～０．２マイクロモルであるが、抗体薬物複合体に使用される細胞毒性薬物の活性は、通常、サブナノモルレベルである。）、抗体薬物複合体へのその応用は普遍的ではない。
【0065】
【化18】
【0066】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、ベンゾジピロール類抗生物質（ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎｓ、ＣＣ－１０６５など）及び他のシクロプロパピロロインドール－４－オン（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｐｙｒｒｏｌｏｉｎｄ－４－ｏｎｅ、ＣＰＩ）誘導体である。このような化合物は、効果的なＤＮＡ副溝結合アルキル化剤である。シクロプロパベンジンドール－４－オン（ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｂｅｎｚｉｎｄｏｌ－４－ｏｎｅ、ＣＢＩ）類似体は、より安定した化学構造、より高い生物活性を持ち、また、天然のＣＰＩアルキル化サブユニットを含む親化合物よりも合成しやすい。代表的なＣＢＩ誘導体の１つは、フェノール性ヒドロキシル保護誘導体ＣＢＩ（下図を参照）であり、プロドラッグの毒性が弱められ、且つ水溶性が増強されている。
【0067】
【化19】
【0068】
ある特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、ピロロベンゾジアゼピン（ｐｙｒｒｏｌｏ［２，１－ｃ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉ－ａｚｅｐｉｎｅｓ、ＰＢＤｓ）又はＰＢＤダイマー（ＰＢＤ ｄｉｍｅｒｓ）である。ＰＢＤは、ストレプトマイセスが生産する天然物の一種であり、その独特な特徴は、プリン-グアニン-プリン配列で、ＤＮＡ副溝に歪みのない共有結合付加物を形成できる。ＤＮＡ配列を標的として制御するための小分子戦略の一部として、また、新規な抗癌及び抗菌薬としてのＰＢＤの適用は、ますます注目を集めている（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００８、４７、１１８１８－１１８２９）。柔軟な炭素鎖を使用して２つのＰＢＤユニットのＣ８／Ｃ８’のヒドロキシル基を連結すると、得られたダイマーは、増強された生物活性を持つ（ＷＯ ２０１１／１３０６１６）。ＰＢＤダイマーは、配列選択性ＤＮＡ損傷、例えば、その生物学的活性を主に担うと考えられる回帰性の５’－Ｐｕ－ＧＡＴＣ－Ｐｙ－３’鎖間架橋を形成すると考えられる。これらの化合物は、非常に効率よい細胞毒性薬であることが証明されており、抗体薬物複合体の候補薬として使用できる。
【0069】
【化20】
【0070】
他の特定の実施例では、前記「活性なユニット」は、上記の種類のみに限定されず、抗体薬物複合体で使用できるすべての薬物も含む。
【0071】
本発明に係る「医薬組成物」という用語は、特定の目的を達成するために組み合わされる、少なくとも１つの薬物と、場合により薬学的に許容される担体または添加剤との組み合わせを意味する。幾つかの実施形態において、前記医薬組成物は、本発明の目的を達成するために共に機能することができる限り、時間及び／又は空間において分離された組み合わせを含む。例えば、医薬組成物に含まれる成分は、全体として対象に投与するか、又は個別に対象に投与することができる。医薬組成物に含まれる成分が対象に別々に投与される場合、前記成分は、同時にまたは順次に対象に投与され得る。好ましくは、前記薬学的に許容される担体は、水、緩衝水溶液、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）などの等張塩溶液、グルコース、マンニトール、デキストロース、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭酸マグネシウム、０．３％グリセリン、ヒアルロン酸、エタノール又はポリプロピレングリコールなどのポリアルキレングリコール、トリグリセリドである。使用される薬学的に許容される担体のタイプは、特に、本発明による組成物が経口、鼻腔、皮内、皮下、筋肉内または静脈内投与用に処方されるかどうかに依存する。本発明による組成物は、添加剤として湿潤剤、乳化剤または緩衝物質を含むことができる。
本発明の医薬組成物、ワクチン又は薬物製剤は、経口、経鼻、皮内、皮下、筋肉内または静脈内投与などの任意の適切な経路によって投与することができる。
本発明に係る「有効量」という用語は、医学的疾患の症状または状態を改善または予防するのに十分な量を含む。特定の患者又は獣医学的被験者の有効量は、例えば、治療される状態、患者の一般的な健康状態、投与方法及び投与量、及び副作用の重症度などの要因に応じて変化させることができる。有効量は、有意な副作用又は毒性作用を回避する最大投与量又は投与スケジュールにすることができる。
本発明の医薬組成物、ワクチン又は薬物製剤は、経口、経鼻、皮内、皮下、筋肉内または静脈内投与などの任意の適切な経路によって投与することができる。
本発明に係る「有効量」という用語は、医学的疾患の症状または状態を改善または予防するのに十分な量を含む。特定の患者又は獣医学的被験者の有効量は、例えば、治療される状態、患者の一般的な健康状態、投与方法及び投与量、及び副作用の重症度などの要因に応じて変化させることができる。有効量は、有意な副作用又は毒性作用を回避する最大投与量又は投与スケジュールにすることができる。
【実施例】
【0072】
以下、具体的な実施形態により本発明をさらに説明する。これらの実施形態は、本発明を説明するためにのみ使用され、本発明の範囲を限定するものではないことを理解すべきである。以下の実施形態で特定の条件を指定しない実験方法は、通常、従来の条件または製造元が推奨する条件に従って実施され、具体的な供給源が記載されていない試薬は、市場で購入されている通常の試薬である。特に明記されていない限り、すべての百分率、比率、割合、又は部は、重量とするものである。
本発明に係る重量体積パーセントの単位は、当業者に周知であり、例えば、１００ｍｌの溶液中の溶質の重量を指す。
特に定義されていない限り、本明細書で使用されているすべての本分野および科学的用語は、当業者によって理解されるものと同じ意味を有する。さらに、本明細書に記載されたものと類似又は同等である任意の方法及び材料は、本発明の方法に適用することができる。本明細書に記載されている好ましい実施形態及び材料は、例示されたものだけである。
本発明に係る重量体積パーセントの単位は、当業者に周知であり、例えば、１００ｍｌの溶液中の溶質の重量を指す。
特に定義されていない限り、本明細書で使用されているすべての本分野および科学的用語は、当業者によって理解されるものと同じ意味を有する。さらに、本明細書に記載されたものと類似又は同等である任意の方法及び材料は、本発明の方法に適用することができる。本明細書に記載されている好ましい実施形態及び材料は、例示されたものだけである。
【0073】
実施例１ 化合物１の調製
【0074】
【化21】
【0075】
マレイミドヘキサン酸１４５．４ｍｇをＤＭＦ １０ｍＬに溶解させ、ＨＡＴＵ ２４４．７ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２２６μＬを加え、室温で撹拌した。ＭＭＡＦ ２０１．９ｍｇをＤＭＦ ５ｍＬに溶解させ、上記の反応系にゆっくりと滴下し、室温で１６ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、製品（マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ、Ｍｃ－ＭＭＡＦ）９０．３ｍｇ（収率３６％）を得た。ＬＣ－ＭＳ ：（Ｍ＋Ｈ）+ ９２４．８、（Ｍ－Ｈ）- ９２３．２。
マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ３６．１ｍｇをＤＭＦ １．５ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ ５．６ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２．１μＬを加え、室温で３ｈ撹拌し、さらに、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １．１ｍｇを加え、室温で２ｈ撹拌した。６－（マレイミド）ヘキサン酸スクシンイミジルエステル１７．７ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２５μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物１ ２０．０ｍｇ（収率４５％）を得た。ＬＣ－ＭＳ ：（Ｍ＋２Ｈ）2 + １１３４．１、（Ｍ－２Ｈ）2- １１３２．２。
マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ３６．１ｍｇをＤＭＦ １．５ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ ５．６ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２．１μＬを加え、室温で３ｈ撹拌し、さらに、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １．１ｍｇを加え、室温で２ｈ撹拌した。６－（マレイミド）ヘキサン酸スクシンイミジルエステル１７．７ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２５μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物１ ２０．０ｍｇ（収率４５％）を得た。ＬＣ－ＭＳ ：（Ｍ＋２Ｈ）2 + １１３４．１、（Ｍ－２Ｈ）2- １１３２．２。
【0076】
実施例２ 化合物２の調製
【0077】
【化22】
【0078】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ４０．１ｍｇをＤＭＦ １．５ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ ４．４ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２．１μＬを加え、室温で２ｈ撹拌し、さらに、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １．８ｍｇを加え、室温で２ｈ反応させ、さらにＣｙｓ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ ０．９ｍｇを加え、室温で２ｈ反応させた。６－（マレイミド）ヘキサン酸スクシンイミジルエステル １３．５ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２１μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物２ ２３．１ｍｇ（収率４９％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋３Ｈ）3 + １６４８．４、（Ｍ－３Ｈ）3- １６４６．３。
【0079】
実施例３ 化合物３の調製
【0080】
【化23】
【0081】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ３１．６ｍｇをＤＭＦ ２ｍＬに溶解させた。Ｃｙｓ－Ｃｙｓ ３．９ｍｇ及びＤＩＰＥＡ ２．９μＬを加え、室温で４ｈ撹拌し、さらにＣｙｓ－Ｃｙｓ １．２ｍｇを加え、室温で３ｈ撹拌し、さらにＣｙｓ－Ｃｙｓ ０．８ｍｇを加え、室温で１６ｈ撹拌した。１，３，５－トリアクリロイルヘキサヒドロ－１，３，５－トリアジン－チオグリコール酸 １２．１ｍｇ及びＴＳＴＵ １０．４ｍｇを１．５ｍＬ ＤＭＦに溶解させ、ＤＩＰＥＡ １７μＬを加え、室温で２ｈ撹拌した後、上記の反応系に添加し、室温で５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物３ １８．４ｍｇ（収率２９％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋２Ｈ）2 + １１９９．３、（Ｍ－２Ｈ）2- １１９７．４。
【0082】
実施例４ 化合物４の調製
【0083】
【化24】
【0084】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ５５．０ｍｇをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド １．５ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １１．６ｍｇを加え、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ４．３μＬを加え、室温で３ｈ撹拌した。ＭＰ２－ＰＮＰ（２－（２－Ｍａｌｅｉｍｉｄｏｅｔｈｏｘｙ）ｅｔｈｙｌ（４－ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｃａｒｂｏｎａｔｅ、マレイミドエトキシエチル－ｐ－ニトロフェニルカーボネート）３６．１ｍｇを反応系に加え、さらに、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ５１μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物４ １８．０ｍｇ（収率２７％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋２Ｈ）2+ １１４２．３、（Ｍ－２Ｈ）2- １１４１．１。
【0085】
実施例５ 化合物５の調製
【0086】
【化25】
【0087】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ５５．０ｍｇをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド１．５ｍＬに溶解させ、１１．６ｍｇ Ｃｙｓ－Ｃｙｓを加え、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ４．３μＬを加え、室温で３ｈ撹拌した。マレイミドプロピオニルアミノ－オクタポリエチレングリコールプロピオネートスクシンイミジルエステル（Ｍａｌ－Ｐｒｏｐｉｏｎａｍｉｄｅ－ＰＥＧ８－ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ－ＯＳｕ）７１．０ｍｇを反応系に加え、さらに、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ５１μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物５ １９．３ｍｇ（収率２８％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋２Ｈ）2+ １３２４．１、（Ｍ－２Ｈ）2- １３２４．０。
【0088】
実施例６ 化合物６の調製
【0089】
【化26】
【0090】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ６３．０ｍｇをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド ２．０ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １３．３ｍｇを加え、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ４．８μＬを加え、室温で３ｈ撹拌した。Ｍｃ－ＶＣ－ＰＡＢ－ＰＮＰ ８６．６ｍｇを反応系に加え、さらに、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ５８μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物６ ４７．４ｍｇ（収率５２％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋２Ｈ）2+ １３３６．０、（Ｍ－２Ｈ）2- １３３４．６。
【0091】
実施例７ 化合物７の調製
【0092】
【化27】
【0093】
実施例１の調製方法に従ってマレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦを調製した。マレイミドヘキサノイル－ＭＭＡＦ ４６．６ｍｇをＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド ２．０ｍＬに溶解させ、Ｃｙｓ－Ｃｙｓ １０．９ｍｇを加え、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ３．６μＬを加え、室温で３ｈ撹拌した。ＰＹ－ＭＡＡ－ＶＣ－ＰＡＢ－ＰＮＰ８４．４ｍｇを反応系に加え、さらに、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン ４８μＬを加え、室温で１５ｈ撹拌した。溶媒を減圧下で蒸留除去し、分取液体クロマトグラフィーにかけて精製し、化合物７ ３１．０ｍｇ（収率４３％）を得た。ＬＣ－ＭＳ：（Ｍ＋２Ｈ）2+ １４０１．２、（Ｍ－２Ｈ）2- １３９９．４。
【0094】
実施例８ 抗体薬物複合体（ＡＤＣ）の調製
抗体薬物複合体を合成するための通用する方法は、以下の通りである。
方法Ａ：ｐＨ＝７．４のＰＢＳバッファーで抗Ｈｅｒ－２抗体を１０ｍｇ／ｍＬの溶液として調製し、２．４モル当量のＴＣＥＰを加え、１時間振とうして均一に混合し、次に５．０モル当量のリンカー－毒素を加え、振とうして均一に混合し、１ｈ反応させ、反応終了後、残りの小分子を限外ろ過で除去し、疎水クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）にかけてＤＡＲ、薬物分布、裸の抗体比の検出を実施した。
方法Ｂ：ｐＨ＝９のホウ酸－ホウ砂バッファーで抗Ｈｅｒ－２抗体を１０ｍｇ／ｍＬの溶液として調製し、５モル当量のＴＣＥＰを加え、１時間振とうして均一に混合し、次いで６．０モル当量のリンカー－毒素を加え、振とうして均一に混合し、３ｈ反応させ、反応終了後、残りの小分子を限外ろ過で除去し、疎水クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）にかけてＤＡＲ、薬物分布、裸の抗体比の検出を実施した。
上記の通用するＡＤＣ調製方法により以下の化合物（Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８である）を調製する。
抗体薬物複合体を合成するための通用する方法は、以下の通りである。
方法Ａ：ｐＨ＝７．４のＰＢＳバッファーで抗Ｈｅｒ－２抗体を１０ｍｇ／ｍＬの溶液として調製し、２．４モル当量のＴＣＥＰを加え、１時間振とうして均一に混合し、次に５．０モル当量のリンカー－毒素を加え、振とうして均一に混合し、１ｈ反応させ、反応終了後、残りの小分子を限外ろ過で除去し、疎水クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）にかけてＤＡＲ、薬物分布、裸の抗体比の検出を実施した。
方法Ｂ：ｐＨ＝９のホウ酸－ホウ砂バッファーで抗Ｈｅｒ－２抗体を１０ｍｇ／ｍＬの溶液として調製し、５モル当量のＴＣＥＰを加え、１時間振とうして均一に混合し、次いで６．０モル当量のリンカー－毒素を加え、振とうして均一に混合し、３ｈ反応させ、反応終了後、残りの小分子を限外ろ過で除去し、疎水クロマトグラフィー（ＨＩＣ－ＨＰＬＣ）にかけてＤＡＲ、薬物分布、裸の抗体比の検出を実施した。
上記の通用するＡＤＣ調製方法により以下の化合物（Ａは、任意の抗体又はその機能的結合フラグメントであり、ｍは、１、２、３、４、５、６、７、８である）を調製する。
【0095】
【表2】
【0096】
実施例９ ＳＫ－ＢＲ－３腫瘍細胞株に対するＡＤＣの阻害試験
ＳＫ－ＢＲ－３腫瘍細胞（ヒト乳がん細胞）を消化し、遠心して収集した後、カウントし、細胞液を０．５～１．５×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬに希釈し、９６ウェルプレートの各ウェルにその細胞懸濁液１００μＬを加えた。３７℃、５％ＣＯ2インキュベーターで一晩インキュベートし、翌日、対応する９つの濃度勾配のＡＤＣ医薬品を加え、別にゼロ濃度のＡＤＣ医薬品の細胞を対照とした。７２ｈ培養した後にＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ－８（単にＣＣＫ－８キットと称される。）を使用して発色を行い、発色後の９６ウェルプレートをマイクロプレートリーダーで４５０ｎｍにおけるＯＤ値を検出した。Ｐｒｉｓｍソフトウェアは、ＯＤ値の計算によりＩＣ５０値を得た。フィティングされる曲線が「Ｓ字曲線」を示し、かつＲ2 ≧ ０．９５である場合には、ＩＣ５０値は、有効で報告可能である。
平均ＤＡＲ値が３．８７のＡＤＣ－０（比較例１）、平均ＤＡＲ値が７．１８のＡＤＣ－０（比較例２）、平均ＤＡＲ値が４．３のＡＤＣ－１０（比較例３）、平均ＤＡＲ値が４．２９のＡＤＣ－３４（比較例４）を選択してＳＫ－ＢＲ－３腫瘍細胞株の増殖阻害試験を行い、それらのＩＣ５０値は、表３に示した。
ＳＫ－ＢＲ－３腫瘍細胞（ヒト乳がん細胞）を消化し、遠心して収集した後、カウントし、細胞液を０．５～１．５×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬに希釈し、９６ウェルプレートの各ウェルにその細胞懸濁液１００μＬを加えた。３７℃、５％ＣＯ2インキュベーターで一晩インキュベートし、翌日、対応する９つの濃度勾配のＡＤＣ医薬品を加え、別にゼロ濃度のＡＤＣ医薬品の細胞を対照とした。７２ｈ培養した後にＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ－８（単にＣＣＫ－８キットと称される。）を使用して発色を行い、発色後の９６ウェルプレートをマイクロプレートリーダーで４５０ｎｍにおけるＯＤ値を検出した。Ｐｒｉｓｍソフトウェアは、ＯＤ値の計算によりＩＣ５０値を得た。フィティングされる曲線が「Ｓ字曲線」を示し、かつＲ2 ≧ ０．９５である場合には、ＩＣ５０値は、有効で報告可能である。
平均ＤＡＲ値が３．８７のＡＤＣ－０（比較例１）、平均ＤＡＲ値が７．１８のＡＤＣ－０（比較例２）、平均ＤＡＲ値が４．３のＡＤＣ－１０（比較例３）、平均ＤＡＲ値が４．２９のＡＤＣ－３４（比較例４）を選択してＳＫ－ＢＲ－３腫瘍細胞株の増殖阻害試験を行い、それらのＩＣ５０値は、表３に示した。
【0097】
【表3】
＊比較例１を基準として、ＭＭＡＦ用量の変化＝（比較例Ｘ－比較例１）／比較例１；Ｘは、対応する比較例を表す。
【0098】
比較例２は、抗体で連結されるＭＭＡＦ部位の数を増やすことにより、ＤＡＲ値を７．１８に向上させた。比較例１よりも、同じ効果が得られる場合、比較例２は、使用される抗体の量（即ち、ＡＤＣ中の抗体量、合成プロセス中の抗体の損失を考慮せずに、抗体の使用量は、ＡＤＣの濃度と同じである。）を効果的に低減させることができるが、ＭＭＡＦの使用量は、１９．３％増加した。
比較例３は、１つのリンカーに２つのＭＭＡＦが連結され、ＤＡＲ値（４．３）は比較例１（３．８７）に相当し、比較例１よりも、同じ効果が得られる場合、比較例３は、抗体の使用量を効果的に６５．９％減少させ、ＭＭＡＦの使用量を２４．３％減少させた。
比較例４は、１つのリンカーに３つのＭＭＡＦが連結され、ＤＡＲ値は比較例１に相当し、比較例１よりも、同じ効果が得られる場合、比較例４は、抗体の使用量を効果的に８５．５％減少させ、ＭＭＡＦの使用量を５１．８％減少させた。
以上のデータの比較から、ＡＤＣ－１０及びＡＤＣ－３４は、より効率的な細胞活性を示し、それらがもたらす効果は、抗体中のＭＭＡＦの数の増加によるＡＤＣの効果の向上だけではなく、さらに、同量のＭＭＡＦを搭載した条件下で、シングルポイントマルチウォーヘッド（細胞毒薬物）の連結方式により抗体の使用量及び毒素の使用量を効果的に低減させる効果を発揮することを示し、予想外の技術的効果を発揮した。また、単一連結部位－複数の弾頭の方式により、さらに、ＡＤＣ製品の均一性を非常に効果的に改善でき、医薬品の製造プロセス及び品質管理を効果的に促進できる。
比較例３は、１つのリンカーに２つのＭＭＡＦが連結され、ＤＡＲ値（４．３）は比較例１（３．８７）に相当し、比較例１よりも、同じ効果が得られる場合、比較例３は、抗体の使用量を効果的に６５．９％減少させ、ＭＭＡＦの使用量を２４．３％減少させた。
比較例４は、１つのリンカーに３つのＭＭＡＦが連結され、ＤＡＲ値は比較例１に相当し、比較例１よりも、同じ効果が得られる場合、比較例４は、抗体の使用量を効果的に８５．５％減少させ、ＭＭＡＦの使用量を５１．８％減少させた。
以上のデータの比較から、ＡＤＣ－１０及びＡＤＣ－３４は、より効率的な細胞活性を示し、それらがもたらす効果は、抗体中のＭＭＡＦの数の増加によるＡＤＣの効果の向上だけではなく、さらに、同量のＭＭＡＦを搭載した条件下で、シングルポイントマルチウォーヘッド（細胞毒薬物）の連結方式により抗体の使用量及び毒素の使用量を効果的に低減させる効果を発揮することを示し、予想外の技術的効果を発揮した。また、単一連結部位－複数の弾頭の方式により、さらに、ＡＤＣ製品の均一性を非常に効果的に改善でき、医薬品の製造プロセス及び品質管理を効果的に促進できる。
【0099】
本発明は、それぞれの具体的な実施形態によって例示されて説明された。しかしながら、当業者は、本発明がそれぞれの具体的な実施形態に限定されず、本発明の範囲内で様々な変更または修正を行うことができ、かつ本明細書の様々な場所で言及される様々な技術的特徴を互いに組み合わせることができ、本発明の精神および範囲から逸脱しないことを理解すべきである。これらの変更および修正は、いずれも本発明の範囲内である。
【国際調査報告】