特表 2022-511939 ミトコンドリア標的化ペプチド

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2022-02-01

(54)【発明の名称】ミトコンドリア標的化ペプチド

(51)【国際特許分類】

   C07K 5/107 20060101AFI20220125BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20220125BHJP

   A61K 38/07 20060101ALI20220125BHJP

【ＦＩ】

C07K5/107

A61P9/10

A61K38/07

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2021533219

(86)(22)【出願日】2019-11-19

(85)【翻訳文提出日】2021-06-10

(86)【国際出願番号】 US2019062283

(87)【国際公開番号】W WO2020131282

(87)【国際公開日】2020-06-25

(31)【優先権主張番号】62/892,939

(32)【優先日】2019-08-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/781,153

(32)【優先日】2018-12-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】518322687

【氏名又は名称】ステルス バイオセラピューティクス コーポレーション

(74)【代理人】

【識別番号】100139723

【弁理士】

【氏名又は名称】樋口 洋

(72)【発明者】

【氏名】ヂォン，グオヂュー

(72)【発明者】

【氏名】バンバーガー，マーク ジェイ

(72)【発明者】

【氏名】スムクステ，イネセ

【テーマコード（参考）】

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA07

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA16

4C084BA23

4C084CA59

4C084DC50

4C084MA52

4C084MA66

4C084NA14

4C084ZA361

4C084ZA362

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA13

4H045EA20

4H045FA40

4H045GA25

(57)【要約】

ＳＢＴ－２０のアナログを開示する。当該化合物は、虚血－再灌流傷害（例えば、心虚血－再灌流傷害）または心筋梗塞の処置及び防止に有用である。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩であって：

【化1】

式中：
Ａａａ^１は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化2】

あるいは、Ａａａ^１は

【化3】

であり；ここで、Ｒが、任意選択的に置換されているアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、もしくはヘテロアラルキルであり；Ｒａ及びＲｂが、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、シクロブチルからそれぞれ独立して選択され；またはＲａ及びＲｂが、これらが結合する窒素原子と一緒になって、４－、５－もしくは６員の複素環式環を形成し；
Ａａａ^２は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化4】

Ａａａ^３は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化5】

Ａａａ^４は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化6】

Ｒ^１ａ及びＲ^４ｄは、それぞれ独立して、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルであり；
Ｒ^２ａ、Ｒ^２ｂ、Ｒ^２ｅ、Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、Ｒ^４ｂ、Ｒ^４ｃは、Ｈ及び（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^２ｃ、及びＲ^２ｄは、Ｈ、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）ハロアルキル）、Ｃ（Ｏ）Ｏ（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、及びＣ（Ｏ）Ｏ（アリール（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）からなる群からそれぞれ独立して選択される；
ただし、前記式（Ｉ）の化合物が

【化7】

ではないこととする、前記化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

Ａａａ^１が、以下からなる群から選択される：

【化8】

請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

Ａａａ^１が

【化9】

である、請求項２に記載の化合物。

【請求項4】

Ａａａ^１が、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基である：

【化10】

請求項１に記載の化合物。

【請求項5】

Ａａａ^２が、以下からなる群から選択される：

【化11】

請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項6】

Ａａａ^２が

【化12】

である、請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

Ａａａ^３が、以下からなる群から選択される：

【化13】

請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

Ａａａ^３が、以下からなる群から選択される：

【化14】

請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項9】

Ａａａ^３が、以下からなる群から選択される：

【化15】

請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項10】

Ａａａ^４が、以下からなる群から選択される：

【化16】

請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項11】

Ａａａ^４が、以下からなる群から選択される：

【化17】

請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項12】

Ａａａ^４が、以下からなる群から選択される：

【化18】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項13】

Ｒ^ａ及びＲ^ｂが、それぞれ独立して、Ｈまたはメチルである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項14】

Ｒ^ａ及びＲ^ｂが、それぞれＨである、請求項１～１３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項15】

以下の表から選択される：

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

請求項１に記載の化合物。

【請求項16】

請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物；及び薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。

【請求項17】

虚血－再灌流傷害の処置または防止を必要とする対象において、前記虚血－再灌流傷害を処置または防止するための方法であって、前記対象に、治療有効量の、請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、前記方法。

【請求項18】

前記虚血－再灌流傷害が心虚血－再灌流傷害である、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

心筋梗塞の処置または防止を必要とする対象において、前記心筋梗塞を処置または防止するための方法であって、前記対象に、治療有効量の、請求項１～１５のいずれか一項に記載の化合物を投与することを含む、前記方法。

【請求項20】

前記化合物が、経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内投与される、請求項１７～１９のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本願は、２０１８年１２月１８日に出願された米国仮特許出願第６２／７８１，１５３号；及び２０１９年８月２８日に出願された米国仮特許出願第６２／８９２，９３９号への優先権の利益を主張する。

【背景技術】

【0002】

ＳＢＴ－２０は、ミトコンドリア機能障害に関連する疾患を処置するための治療可能性を有するミトコンドリア標的化ペプチド化合物である。ＳＢＴ－２０を治療に応用できる可能性があるため、改良された治療プロファイルを有するかかる化合物のアナログを開発する必要性が存在する。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0003】

本発明の態様は、ＳＢＴ－２０のアナログである。

【0004】

より詳細には、本発明は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する：

【化1】

式中：
Ａａａ^１は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化2】

あるいは、Ａａａ^１は

【化3】

であり；ここで、Ｒが、任意選択的に置換されているアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、もしくはヘテロアラルキルであり；Ｒａ及びＲｂが、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、シクロブチルからそれぞれ独立して選択され；またはＲａ及びＲｂが、これらが結合する窒素原子と一緒になって、４－、５－もしくは６員の複素環式環を形成し；
Ａａａ^２は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化4】

Ａａａ^３は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化5】

Ａａａ^４は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化6】

Ｒ^１ａ及びＲ^４ｄは、それぞれ独立して、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルであり；
Ｒ^２ａ、Ｒ^２ｂ、Ｒ^２ｅ、Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、Ｒ^４ｂ、Ｒ^４ｃは、Ｈ及び（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^２ｃ、及びＲ^２ｄは、Ｈ、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）ハロアルキル）、Ｃ（Ｏ）Ｏ（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、及びＣ（Ｏ）Ｏ（アリール（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）からなる群からそれぞれ独立して選択される；
ただし、式（Ｉ）の化合物が

【化7】

ではないこととする。

【0005】

本発明の別の態様は、本発明の化合物；及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物である。

【0006】

本発明はまた、虚血－再灌流傷害を処置または防止する方法であって、これを必要とする対象に、治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、上記方法も提供する。

【0007】

本発明はまた、心筋梗塞を処置または防止する方法であって、これを必要とする対象に、治療有効量の本発明の化合物を投与することを含む、上記方法も提供する。

【図面の簡単な説明】

【0008】

【図1】本発明において有用な種々のアミノ酸残基を示す。

【図2】ラット透過性心臓線維Ａ／Ｒを示す。実施例３０を参照されたい。

【図3】リスク領域％としての白色壊死組織領域（白色壊死組織の領域のみを分析において使用する）及び梗塞サイズ（％）を示す。平均±ＳＤ。実施例３１を参照されたい。

【図4】ラット心筋梗塞（ＭＩ）モデルにおける用量反応を示す。平均±ＳＤ。実施例３２を参照されたい。

【図5】血漿クレアチニンの保護％を示す。平均±ＳＥＭ。実施例３３を参照されたい。

【図6】ＢＵＮの保護％を示す。平均±ＳＥＭ。実施例３３を参照されたい。

【発明を実施するための形態】

【0009】

ＳＢＴ－２０（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２）は、虚血－再灌流傷害（例えば、心虚血－再灌流傷害）、及び心筋梗塞を処置するための治療可能性を有するミトコンドリア標的化化合物である。この化合物のアナログは、改良された代謝性、選択性、または効能を含めた改良された治療プロファイルを有し得る。

【0010】

したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する：

【化8】

式中：
Ａａａ^１は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化9】

あるいは、Ａａａ^１は

【化10】

であり；ここで、Ｒが、任意選択的に置換されているアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、もしくはヘテロアラルキルであり；Ｒａ及びＲｂが、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル、シクロブチルからそれぞれ独立して選択され；またはＲａ及びＲｂが、これらが結合する窒素原子と一緒になって、４－、５－もしくは６員の複素環式環を形成し；
Ａａａ^２は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化11】

Ａａａ^３は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化12】

Ａａａ^４は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基であり：

【化13】

Ｒ^１ａ及びＲ^４ｄは、それぞれ独立して、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルであり；
Ｒ^２ａ、Ｒ^２ｂ、Ｒ^２ｅ、Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、Ｒ^４ｂ、Ｒ^４ｃは、Ｈ及び（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され；
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^２ｃ、及びＲ^２ｄは、Ｈ、（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（（Ｃ_１－Ｃ_６）ハロアルキル）、Ｃ（Ｏ）Ｏ（（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）、及びＣ（Ｏ）Ｏ（アリール（Ｃ_１－Ｃ_６）アルキル）からなる群からそれぞれ独立して選択される；
ただし、式（Ｉ）の化合物が

【化14】

ではないこととする。

【0011】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^１は、以下からなる群から選択され：

【化15】

好ましくは、

【化16】

である。

【0012】

さらなる実施形態において、Ａａａ^１は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基である：

【化17】

【0013】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^２は、以下からなる群から選択されるアミノ酸残基である：

【化18】

【0014】

いくつかの好ましい実施形態において、Ａａａ^２は

【化19】

である。

【0015】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^３は、以下からなる群から選択される：

【化20】

【0016】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^３は、以下からなる群から選択される：

【化21】

【0017】

ある特定の他の実施形態において、Ａａａ^３は、以下からなる群から選択される：

【化22】

【0018】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^４は、以下からなる群から選択される：

【化23】

【0019】

なおさらなる実施形態において、Ａａａ^４は、以下からなる群から選択される：

【化24】

【0020】

ある特定の実施形態において、Ａａａ^４は、以下からなる群から選択される：

【化25】

【0021】

ある特定の実施形態において、Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して、Ｈまたはメチル、好ましくはＨである。

【0022】

いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、以下の表から選択される：

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【0023】

ペプチド合成
本発明のペプチド化合物は、ペプチド合成方法、例えば、従来の液相ペプチド合成もしくは固相ペプチド合成を使用して、または自動ペプチドシンセサイザを用いるペプチド合成によって調製されてよい（Ｋｅｌｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｓｅｔｌｏｗ，Ｊ．Ｋ．ｅｄｓ．，Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ ＮＹ．（１９９０）Ｖｏｌ．１２，ｐｐ．１ ｔｏ １９；Ｓｔｅｗａｒｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｏｌｉｄ－Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９８９）Ｗ．Ｈ．；Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９８５）８２：ｐ．５１３２）。こうして生成されたペプチドは、常套の方法、例えば、クロマトグラフィ、例えば、ゲル濾過クロマトグラフィ、イオン交換カラムクロマトグラフィ、親和性クロマトグラフィ、逆相カラムクロマトグラフィ、及びＨＰＬＣ、硫安分画、限外濾過、及び免疫吸着によって収集または精製され得る。

【0024】

固相ペプチド合成において、ペプチドは、アミノ酸鎖のカルボニル基側（Ｃ末端）からアミノ基側（Ｎ末端）に典型的には合成される。ある特定の実施形態において、アミノ保護アミノ酸は、典型的にはエステルまたはアミド結合を介して、また、任意選択的には連結基を介して、アミノ酸のカルボキシル基を通して固体支持体材料に共有結合的に結合されている。アミノ基は、脱保護されて、カップリング試薬を用いて第２アミノ保護アミノ酸のカルボニル基と反応して（すなわち、「カップリングされて」）、固体支持体に結合したジペプチドを生じ得る。これらのステップ（すなわち、脱保護、カップリング）が繰り返されて、所望のペプチド鎖を形成し得る。所望のペプチド鎖が完成したら、ペプチドが固体支持体から開裂され得る。

【0025】

ある特定の実施形態において、アミノ酸残基のアミノ基において使用される保護基には、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）及びｔ－ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）が含まれる。Ｆｍｏｃ基は塩基によってアミノ末端から除去されるが、一方で、Ｂｏｃ基は酸によって除去される。代替の実施形態において、アミノ保護基は、ホルミル、アクリリル（Ａｃｒ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、アセチル（Ａｃ）、トリフルオロアセチル、アラルキルオキシカルボニル型の置換または非置換基、例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）、ｐ－クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ－ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ－ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ－メトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、２（ｐ－ビフェニリル）イソプロピルオキシカルボニル、２－（３，５－ジメトキシフェニル）イソプロピルオキシカルボニル、ｐ－フェニルアゾベンジルオキシカルボニル、トリフェニルホスホノエチルオキシカルボニルまたは９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）、アルキルオキシカルボニル型の置換または非置換基、例えば、ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）、ｔｅｒｔ－アミルオキシカルボニル、ジイソプロピルメチルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エチルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、２メチルスルホニルエチルオキシカルボニルまたは２，２，２－トリクロロエチルオキシカルボニル基、シクロアルキルオキシカルボニル型の基、例えば、シクロペンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニルまたはイソボルニルオキシカルボニル基、及びヘテロ原子を含有する基、例えば、ベンゼンスルホニル、ｐ－トルエンスルホニル、メシチレンスルホニル、メトキシトリメチルフェニルスルホニル、２－ニトロベンゼンスルホニル、２－ニトロベンゼンスルフェニル、４－ニトロベンゼンスルホニルまたは４－ニトロベンゼンスルフェニル基であってよい。

【0026】

多くのアミノ酸が側鎖に反応性官能基を持つ。ある特定の実施形態において、かかる官能基は、当該官能基が次のアミノ酸と反応することを防止するために保護される。これらの官能基と共に使用される保護基は、ペプチド合成の条件に対して安定でなければならないが、固体支持体からのペプチドの開裂の前、後またはこれと同時に除去されてよい。

【0027】

ある特定の実施形態において、固相ペプチド合成方法において使用される固体支持体材料は、ゲル型の支持体、例えば、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、またはポリエチレングリコールである。代替的には、材料、例えば、多孔ガラス、セルロースファイバ、またはポリスチレンが、これらの表面において官能化されて、ペプチド合成用の固体支持体を付与し得る。

【0028】

本明細書に記載されている固相ペプチド合成において使用され得るカップリング試薬は、典型的にはカルボジイミド試薬である。カルボジイミド試薬の例として、限定されないが、Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）、Ｎ－シクロヘキシル－Ｎ’－イソプロピルカルボジイミド（ＣＩＣ）、Ｎ，Ｎ’－ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、Ｎ－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｎ’－メチルカルボジイミド（ＢＭＣ）、Ｎ－ｔｅｒｔ－ブチル－Ｎ’－エチルカルボジイミド（ＢＥＣ）、ビス［［４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソリル）］－メチル］カルボジイミド（ＢＤＤＣ）、及びＮ，Ｎ－ジシクロペンチルカルボジイミドが挙げられる。ＤＣＣは、好ましいカップリング試薬である。

【0029】

ある特定の実施形態において、本発明の化合物、例えば、以下に示す化合物は、スキーム１に示す固相合成によって線形逐次的に合成される：

【化26】

【0030】

参照用に、以下のスキームにおいて、

は、

【化27】

を示し、ここで、

は、固体支持体及び任意選択的には連結基を表す。

【化28】

【0031】

代替的には、本発明の化合物は、例えば、スキーム２によって収束的に合成され得る：

【化29】

【0032】

本発明の化合物はまた、従来の液相ペプチド合成経路によって合成されてもよい。例えば、以下に示す化合物は、スキーム３に示されているように収束的液相合成において合成されてよい。

【化30】

【化31】

【0033】

別の例示的な実施形態において、本発明の化合物は、スキーム４に示されている線状逐次的液相合成を介して作製される。

【化32】

【0034】

定義
本明細書に記載されているペプチド化合物を定義するのに使用される命名法は、Ｎ末端におけるアミノ基が左側に見られかつＣ末端におけるカルボキシル基が右側に見られる、当該分野において典型的に使用されているものである。

【0035】

本明細書において使用されているとき、用語「アミノ酸」は、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の両方を含む。用語「アミノ酸」は、別途示されない限り、単離されたアミノ酸分子（すなわち、アミノ結合水素及びカルボニル炭素結合ヒドロキシルの両方を含む分子）及びアミノ酸残基（すなわち、アミノ結合水素またはカルボニル炭素結合ヒドロキシルのいずれか一方または両方が除去されている分子）の両方を含む。アミノ基は、アルファ－アミノ基、ベータ－アミノ基などであり得る。例えば、用語「アミノ酸アラニン」は、単離されたアラニンＨ－Ａｌａ－ＯＨ、または、アラニン残基Ｈ－Ａｌａ－、－Ａｌａ－ＯＨ、もしくは－Ａｌａ－のいずれか１つのうちのいずれかを称し得る。別途示されない限り、本明細書に記載されている化合物において見られる全てのアミノ酸が、ＤまたはＬ配置のいずれであってもよい。Ｄ配置におけるアミノ酸は、「Ｄ」がアミノ酸略号に先行するように書かれていてよい。例えば、「Ｄ－Ａｒｇ」は、Ｄ配置におけるアルギニンを表す。用語「アミノ酸」は、薬学的に許容可能な塩を含めたこれらの塩を含む。いずれのアミノ酸も、保護されていても保護されていなくてもよい。保護基は、アミノ基（例えばアルファ－アミノ基）、骨格カルボキシル基、または側鎖の任意の官能基に結合していてよい。例として、アルファ－アミノ基におけるベンジルオキシカルボニル基（Ｚ）によって保護されているフェニルアラニンは、Ｚ－Ｐｈｅ－ＯＨとして表される。

【0036】

本明細書において利用されているアミノ酸の多くが、市販されており、または、他の場合には、当該分野において公知である。

【0037】

Ｎ末端アミノ酸を除いて、本開示におけるアミノ酸の全ての略号（例えば、Ｐｈｅ）が、－ＮＨ－Ｃ（Ｒ）（Ｒ’）－ＣＯ－の構造を表しており、Ｒ及びＲ’は、それぞれ、独立して、水素、またはアミノ酸の側鎖である（例えば、Ｐｈｅでは、Ｒ＝ベンジル及びＲ’＝Ｈ）。したがって、フェニルアラニンは、Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＨである。表記「ＯＨ」は、これらのアミノ酸について、または、ペプチドについて（例えば、Ｌｙｓ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ－ＯＨ）、Ｃ末端が遊離酸であることを示す。表記「ＮＨ_２」は、例えば、Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２において、保護されているペプチド断片のＣ末端がアミド化されていることを示す。さらに、ある特定のＲ及びＲ’は、別個に、または、環構造としての組み合わせにおいて、液相合成の際に保護を必要とする官能基を含み得る。

【0038】

アミノ酸が異性体形態を有する場合、Ｄ形態、例えば、Ｄ－Ａｒｇとして別途明確に示されていない限り、アミノ酸のＬ形態が表されている。とりわけ、多くのアミノ酸残基がＤ及びＬ形態の両方において市販されている。例えば、Ｄ－Ａｒｇは、市販のＤ－アミノ酸である。

【0039】

アミノ酸残基の略号と併せて使用されている、頭文字「Ｄ」は、アミノ酸残基のＤ形態を称する。

【0040】

本明細書において使用されているとき、用語「ペプチド」は、少なくとも１つのアミド結合（すなわち、１のアミノ酸のアミノ基とペプチド断片のアミノ酸から選択される別のアミノ酸のカルボキシル基との間の結合）によって共有結合的に連結されている２以上のアミノ酸を称する。用語「ペプチド」は、薬学的に許容可能な塩を含めたこれらの塩を含む。

【0041】

冠詞「ａ（１の）」及び「ａｎ（１の）」は、当該冠詞の文法上の対象の１または１を超えるものを称する（すなわち、少なくとも１を称する）ために本明細書において使用される。例として、「ａｎ ｅｌｅｍｅｎｔ（１の要素）」は、１の要素または１を超える要素を意味する。

【0042】

用語「アルキル」は、本明細書において使用されているとき、専門用語であり、直鎖アルキル基、分岐鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基、及びシクロアルキル置換アルキル基を含めた飽和脂肪族基を称する。ある特定の実施形態において、直鎖または分岐鎖アルキルは、その骨格において約３０以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ_１－Ｃ_３０、分岐鎖ではＣ_３－Ｃ_３０）、代替的には、約２０以下、１０以下（すなわち、Ｃ_１－Ｃ_１０）、または６以下（すなわち、Ｃ_１－Ｃ_６）を有する。アルキルの代表例として、限定されないが、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びｎ－ヘキシルが挙げられる。

【0043】

本明細書において使用されているとき、「アリール」（「Ａｒ」として略される場合がある）は、芳香族環系（「Ｃ_６－Ｃ_１４アリール」）において付与される、６～１４の環炭素原子及びゼロのヘテロ原子を有する単環式または多環式（例えば、二環式または三環式）４ｎ＋２芳香族環系（例えば、環状アレイにおいて共有される６、１０、または１４のπ電子を有する）のラジカルを称する。いくつかの実施形態において、アリール基は、６の環炭素原子を有する（「Ｃ_６アリール」；例えば、フェニル）。いくつかの実施形態において、アリール基は、１０の環炭素原子を有する（「Ｃ_１０アリール」；例えば、ナフチル、例えば、１－ナフチル及び２－ナフチル）。いくつかの実施形態において、アリール基は、１４の環炭素原子を有する（「Ｃ_１４アリール」；例えば、アントラシル）。アリール基は、例えば、Ｃ_６－Ｃ_１０員のアリールとして記載されていてよく、用語「員の」は、部位内の非水素環原子を称する。アリール基には、フェニル、ナフチル、インデニル、及びテトラヒドロナフチルが含まれる。アリール基の各事象は、独立して任意選択的に置換されていてよく、すなわち、置換されていなくてよく（「非置換アリール」）または１以上の置換基；例えば、１～５の置換基、１～４の置換基、１～３の置換基、１～２の置換基またはほんの１の置換基など；によって置換されていてよい（「置換アリール」）。芳香族環は、１以上の置換基、例えば、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部位、フルオロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、シアノなどによって１以上の環位置で置換されていてよい。例えば、ある特定の実施形態において、アリール基は、非置換Ｃ_５－Ｃ_１２アリールであり得、ある特定の実施形態において、アリール基は、置換Ｃ_５－Ｃ_１０アリールであり得る。

【0044】

本明細書において使用されているとき、用語「ヘテロアリール」は、窒素、硫黄及び酸素から互いに独立して選択される１、２、３または４のヘテロ原子を含む芳香族複素環のラジカルを称する。本明細書において使用されているとき、用語「ヘテロアリール」は、置換されていても置換されていなくてもよい基を称する。ヘテロアリールは、１または２の環、例えば、シクロアルキル、アリール、または第２のヘテロアリール環に縮合していてよい。分子へのヘテロアリールの結合点は、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたはアリール環上にあってよく、ヘテロアリール基は、炭素またはヘテロ原子を通して結合していてよい。ヘテロアリール基の例として、それぞれ任意選択的に置換されていてよい、イミダゾリル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピリジニル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、キノリル、イソキノリニル、インダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、インドリジニル、イミダゾピリジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、オキサゾリル、テトラゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、インドリル、テトラヒドロインドリル、アザインドリル、イミダゾピリジル、キナゾリニル、プリニル、ピロロ［２，３］ピリミジル、ピラゾロ［３，４］ピリミジルまたはベンゾ（ｂ）チエニルが挙げられる。芳香族複素環は、１以上の置換基、例えば、ハロゲン、アジド、アルキル、アラルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、アミノ、ニトロ、スルフヒドリル、イミノ、アミド、ホスホネート、ホスフィネート、カルボニル、カルボキシル、シリル、エーテル、アルキルチオ、スルホニル、スルホンアミド、ケトン、アルデヒド、エステル、ヘテロシクリル、芳香族またはヘテロ芳香族部位、フルオロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、シアノなどによって１以上の環位置で置換されていてよい。

【0045】

用語「ヘテロシクリル」は、本明細書において使用されているとき、完全に飽和していてよい、または、１以上の不飽和単位を含有していてよく－誤解を避けるために、不飽和度は芳香族環系につながらない－少なくとも１つのヘテロ原子、例えば、窒素、酸素、または硫黄を含む３～１２の原子を有する、限定されないが、単環式、二環式、及び三環式環を含めた非芳香族環系のラジカルを称する。例示目的で、この用語の範囲を限定すると解釈されるべきではなく、以下が挙げられる：ヘテロシクリル環：アジリジニル、アジリニル、オキシラニル、チイラニル、チイレニル、ジオキシラニル、ジアジリニル、アゼチル、オキセタニル、オキセチル、チエタニル、チエチル、ジアゼチジニル、ジオキセタニル、ジオキセテニル、ジチエタニル、ジチエチル、フリル、ジオキサラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、トリアジニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、チオフェニル、ピラゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、ピリドピラジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、ナフチリジニル、アゼピン、アゼチジニル、モルホリニル、オキソピペリジニル、オキソピロリジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、キヌクリジニル、チオモルホリニル、テトラヒドロピラニル、及びテトラヒドロフラニル。より一般的には、用語「複素環式環」または「複素環」は、１つが炭素である少なくとも２の異なる元素の原子の環を称する。用語「複素環式環」が、有機化学の分野において確立された用語であるということの証拠として、さらに以下を参照されたい：Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９９７。

【0046】

本明細書において使用されているとき、用語「アリールアルキル」または「アラルキル」は、アルキレンリンカーを介して（Ｃ_１－Ｃ_１２）アルキル基に結合しているアリールまたはヘテロアリール基（「ヘテロアラルキル」）のラジカルを称する。本明細書において使用されているとき、用語「アリールアルキル」は、置換されていても置換されていなくてもよい基を称する。用語「アリールアルキル」はまた、アリールアルキル基のアルキル鎖における１以上のメチレン基がヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓｉ、及びＳによって置き換えられていてよく、また、窒素、リン及び硫黄原子が任意選択的に酸化されていてよく、また、当該窒素ヘテロ原子が、付随するアルキル及び／またはアリール基によって任意選択的に４級化されていてよい、かかる化合物を称することも意図される。アリールアルキル基には、例えば、ベンジルが含まれる。

【0047】

本明細書において使用されているとき、「シクロアルキル」は、３～１２の環炭素原子（「Ｃ_３－Ｃ_１２シクロアルキル」）を有する非芳香族環式炭化水素基のラジカルを称する。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３～１０の環炭素原子を有する（「Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル」）。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３～８の環炭素原子を有する（「Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル」）。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、３～６の環炭素原子を有する（「Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル」）。いくつかの実施形態において、シクロアルキル基は、５～７の環炭素原子を有する（「Ｃ_５－Ｃ_７シクロアルキル」）。シクロアルキル基は、例えば、Ｃ_４－Ｃ_７員のシクロアルキルとして記載されていてよく、ここで、用語「員の」は、部位内の非水素環原子を称する。例示的なＣ_３－Ｃ_６シクロアルキル基として、限定することなく、シクロプロピル（Ｃ_３）、シクロプロペニル（Ｃ_３）、シクロブチル（Ｃ_４）、シクロブテニル（Ｃ_４）、シクロペンチル（Ｃ_５）、シクロペンテニル（Ｃ_５）、シクロヘキシル（Ｃ_６）、シクロヘキセニル（Ｃ_６）、シクロヘキサジエニル（Ｃ_６）などが挙げられる。例示的なＣ_３－Ｃ_７シクロアルキル基として、限定することなく、上記Ｃ_３－Ｃ_５シクロアルキル基、ならびに、シクロヘプチル（Ｃ_６）、シクロヘプテニル（Ｃ_７）、シクロヘプタジエニル（Ｃ_７）、及びシクロヘプタトリエニル（Ｃ_７）、ビシクロ［２．１．１］ヘキサニル（Ｃ_６）、ビシクロ［３．１．１］ヘプタニル（Ｃ_７）などが挙げられる。例示的なＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキル基として、限定することなく、上記Ｃ_３－Ｃ_７シクロアルキル基、ならびに、シクロノニル（Ｃ_９）、シクロノネニル（Ｃ_９）、シクロデシル（Ｃ_１０）、シクロデセニル（Ｃ_１０）、オクタヒドロ－１Ｈ－インデニル（Ｃ_９）、デカヒドロナフタレニル（Ｃ_１０）、スピロ［４．５］デカニル（Ｃ_１０）などが挙げられる。上記の例が示すように、ある特定の実施形態において、シクロアルキル基は、単環式（「単環式シクロアルキル」）であるか、または、縮合、架橋もしくはスピロ環系、例えば、二環式系（「ビス環状シクロアルキル」）を含有するかのいずれかであり、飽和であっても部分不飽和であってもよい。ビス環状シクロアルキル基の非限定例として、１－エチルビシクロ［１．１．１］ペンタン、１－エチルビシクロ［２．２．２］オクタン及び（３ｒ，５ｒ，７ｒ）－１－エチルアダマンタンが挙げられる。「シクロアルキル」はまた、シクロアルキル環が、上記で定義されているように、結合点がシクロアルキル環上にある１以上のアリール基によって縮合されている環系も含み、かかる場合において、炭素数は、続いて、シクロアルキル環系における炭素数を表記している。シクロアルキル基の各事象は、独立して任意選択的に置換されていてよく、すなわち、置換されていなくてよく（「非置換シクロアルキル」）または１以上の置換基によって置換されていてよい（「置換シクロアルキル」）。

【0048】

本発明はまた、本発明の化合物の塩も提供する。

【0049】

用語「薬学的に許容可能な塩」は、本明細書において使用されているとき、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グリコール酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マロン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ナフタレン－２－スルホン酸、及び他の酸を含めた無機または有機酸から誘導される塩を含む。薬学的に許容可能な塩形態は、塩を含む分子の比が１：１ではない形態を含み得る。例えば、塩は、塩基の分子あたり１を超える無機または有機酸分子、例えば、化合物の分子あたり２の塩酸分子を含んでいてよい。別の例として、塩は、塩基の分子あたり１未満の無機または有機酸分子、例えば、酒石酸の分子あたり２の化合物分子を含んでいてよい。

【0050】

用語「担体」及び「薬学的に許容可能な担体」は、本明細書において使用されているとき、化合物が共に投与されるまたは投与のために製剤化される、希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを称する。かかる薬学的に許容可能な担体の非限定例として、液体、例えば、水、生理食塩水、及び油；ならびに固体、例えば、アカシアゴム、ゼラチン、デンプン糊、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素などが挙げられる。加えて、補助剤、安定化剤、増粘剤、滑沢剤、香料、及び着色料が使用されてよい。好適な薬学的担体の他の例は、全体が参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｂｙ Ｅ．Ｗ． Ｍａｒｔｉｎに記載されている。

【0051】

本明細書において使用されているとき、「阻害する」または「阻害すること」は、対照と比較して客観的に測定可能な量または程度での低減を意味する。一実施形態において、阻害するまたは阻害することは、対照と比較して少なくとも統計的に有意な量での低減を意味する。一実施形態において、阻害するまたは阻害することは、対照と比較して少なくとも５パーセントの低減を意味する。様々な個々の実施形態において、阻害するまたは阻害することは、対照と比較して少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３３、４０、５０、６０、６７、７０、７５、８０、９０、９５、または９９パーセントの低減を意味する。

【0052】

本明細書において使用されているとき、用語「処置すること」及び「処置する」は、結果として、（ａ）状態もしくは疾患を、当該状態もしくは疾患を発症するもしくはこれに罹患し易いリスクがあり得るが未だ罹患していると診断されていない対象において生じることを防止する；（ｂ）状態もしくは疾患を阻害する、例えば、その発症もしくは進行を遅延させるもしくは阻止する；または（ｃ）状態もしくは疾患を軽減もしくは改善する、例えば、状態もしくは疾患の退行を引き起こす介入を実施することを称する。一実施形態において、用語「処置すること」及び「処置する」は、結果として、（ａ）状態もしくは疾患を阻害する、例えば、その発症を遅延させるもしくは阻止する；または（ｂ）状態もしくは疾患を軽減もしくは改善する、例えば、状態もしくは疾患の退行を引き起こす介入を実施することを称する。

【0053】

本明細書において使用されているとき、「対象」は、生きている動物を称する。様々な実施形態において、対象は、哺乳動物である。様々な実施形態において、対象は、限定することなく、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、イヌ、ブタ、ウマ、ウシ、または非ヒト霊長類を含めた非ヒト哺乳動物である。ある特定の実施形態において、対象は、ヒトである。

【0054】

本明細書において使用されているとき、「投与すること」は、その通常の意味を有し、限定することなく、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、直接注入、粘膜、吸入、経口、及び局所を含めた任意の好適な投与経路によって投与することを包含する。

【0055】

本明細書において使用されているとき、句「有効量」は、所望の生物学的効果を達成するのに十分な任意の量を称する。「治療有効量」は、所望の治療効果を達成する、例えば、虚血－再灌流傷害を処置するのに十分である量である。

【0056】

本発明の化合物及びこれらの塩は、他の治療剤と組み合わされてよい。本発明の化合物及び他の治療剤は、同時にまたは逐次的に投与されてよい。他の治療剤が同時に投与されるとき、これらは、同じまたは別個の製剤において投与され得るが、実質的に同時に投与される。他の治療剤は、他の治療剤及び本発明の化合物の投与が時間的に分離されているとき、互いに、また、本発明の化合物と逐次的に投与される。これらの化合物の投与間の時間の分離は、数分であってよく、より長くてもよい。

【0057】

医薬組成物、投与経路及び投薬
ある特定の実施形態において、本発明は、本発明の化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物を対象とする。ある特定の実施形態において、医薬組成物は、複数の本発明の化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む。

【0058】

ある特定の実施形態において、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物以外の少なくとも１つのさらなる薬学的に活性な剤をさらに含む。少なくとも１つのさらなる薬学的に活性な剤は、虚血－再灌流傷害の処置において有用な剤であり得る。

【0059】

本発明の医薬組成物は、１以上の本発明の化合物を、薬学的に許容可能な担体、及び、任意選択的に、１以上のさらなる薬学的に活性な剤と組み合わせることによって調製され得る。

【0060】

上記で記述されているように、「有効量」は、所望の生物学的効果を達成するのに十分である任意の量を称する。本明細書に提供されている教示と組み合わせて、様々な活性化合物及び重み付け因子、例えば、効能、相対バイオアベイラビリティ、患者の体重、副作用の重篤度、及び投与形態の中から選択することにより、実質的に望ましくない毒性を引き起こさず、さらに、特定の対象を処置するのに有効である、有効な予防または治療処置レジメンが計画され得る。任意の特定の用途のための有効量は、処置される疾患もしくは状態、投与される本発明の具体的な化合物、対象の大きさ、または疾患もしくは状態の重篤度などの因子に応じて変動し得る。当業者は、過度の実験を必要とすることなく、本発明の具体的な化合物及び／または他の治療剤の有効量を実験的に決定し得る。何らかの医学判断にしたがって、最大用量、すなわち、最大安全用量が使用されてよい。１日あたり複数回投与は、化合物の適切な全身レベルを達成するように企図され得る。適切な全身レベルは、例えば、患者の、薬物のピークまたは持続される血漿レベルの測定によって決定され得る。「用量」及び「投薬量」は、本明細書において互換可能に使用される。

【0061】

ある特定の実施形態において、化合物の静脈内投与は、典型的には、０．１ｍｇ／ｋｇ／日～２０ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。一実施形態において、化合物の静脈内投与は、典型的には、０．１ｍｇ／ｋｇ／日～２ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。一実施形態において、化合物の静脈内投与は、典型的には、０．５ｍｇ／ｋｇ／日～５ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。一実施形態において、化合物の静脈内投与は、典型的には、１ｍｇ／ｋｇ／日～２０ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。一実施形態において、化合物の静脈内投与は、典型的には、１ｍｇ／ｋｇ／日～１０ｍｇ／ｋｇ／日であってよい。

【0062】

一般に、化合物の１日経口用量は、ヒト対象では、約０．０１ミリグラム／ｋｇ／日～１０００ミリグラム／ｋｇ／日である。１日１回以上の投与で、０．５～５０ミリグラム／ｋｇの範囲の経口用量が、治療結果を生じさせると期待される。投薬量は、投与形態に応じて、局所または全身で、所望の薬物レベルを達成するように適宜調製されてよい。例えば、静脈内投与は、１日あたりの用量が１桁～数桁低いことが期待される。かかる用量において対象における応答が不十分である事象においては、さらにより高い用量（または、異なる、より局所化された送達経路によって、有効なより高い用量）が、患者の耐容量が許容する程度まで用いられてよい。１日あたり複数回投与は、化合物の適切な全身レベルを達成するように企図され得る。

【0063】

本明細書に記載されている任意の化合物について、治療有効量が、動物モデルから最初に決定され得る。治療的有効用量もまた、ヒトにおいて試験された化合物、及び同様の生理活性を示すことが知られている化合物、例えば、他の関連する活性剤では、ヒトデータから決定され得る。非経口投与では、より高い用量が必要とされ得る。適用される用量は、投与される化合物の相対バイオアベイラビリティ及び効能に基づいて調整され得る。上記の方法及び当該分野において周知である他の方法に基づいて最大の効能を達成するように用量を調整することは、当業者の能力の範囲内である。

【0064】

本発明の製剤は、薬学的に許容可能な濃度の塩、緩衝剤、保存剤、相溶性担体、アジュバント、及び任意選択的に他の治療成分を常套的に含有し得る、薬学的に許容可能な液剤において投与され得る。

【0065】

治療での使用では、有効量の化合物が、化合物を所望の表面に送達する任意の形態によって対象に投与され得る。医薬組成物を投与することは、熟練者に公知の任意の方法で成し遂げられてよい。投与経路として、限定されないが、静脈内、筋肉内、腹腔内、膀胱内（膀胱）、経口、皮下、直接注入（例えば、腫瘍または膿瘍内に）、粘膜（例えば、眼に局所的に）、吸入、及び局所が挙げられる。

【0066】

静脈内及び他の非経口投与経路では、本発明の化合物は、凍結乾燥調製物として、リポソーム－挿入もしくはカプセル化された活性化合物の凍結乾燥調製物として、水性懸濁液中の脂質複合体として、または塩錯体として製剤化され得る。凍結乾燥製剤は、概して、投与の直前に、好適な水溶液、例えば、滅菌水または生理食塩水において再構成される。

【0067】

経口投与では、化合物は、活性化合物（複数可）を、当該分野において周知の薬学的に許容可能な担体と組み合わせることによって容易に製剤化され得る。かかる担体は、本発明の化合物を、処置対象による経口摂取のために錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、液体、ジェル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして製剤化させ得る。経口用途での薬学的調製物は、任意選択的に、得られた混合物を粉砕し、所望により好適な助剤を添加した後に顆粒の混合物を処理して、錠剤または糖衣錠コアを得ることで、固体賦形剤として得られ得る。好適な賦形剤は、特に、充填剤、例えば、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含めた糖；セルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル－セルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、及び／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などである。所望により、崩壊剤、例えば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩、例えば、アルギン酸ナトリウムが添加されてよい。任意選択的に、経口製剤はまた、生理食塩水または緩衝液中で製剤化されてもよく、例えば、内部の酸状態を中和するためのＥＤＴＡが、いずれの担体も用いることなく投与されてよい。

【0068】

上記成分（複数可）の経口剤形も具体的に企図される。成分（複数可）は、誘導体の経口送達が有効であるように化学的に修飾されてよい。概して、企図される化学的修飾は、成分分子自体への少なくとも１つの部位の結合であり、ここで、当該部位は、（ａ）酸加水分解の阻害；及び（ｂ）胃または腸からの血流への取り込みを許容する。成分（複数可）の全体の安定性の増加及び体内での循環時間の増加も望ましい。かかる部位の例として：ポリエチレングリコール、エチレングリコール及びプロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンならびにポリプロリンが挙げられる。Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉ ａｎｄ Ｄａｖｉｓ，「Ｓｏｌｕｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒ－Ｅｎｚｙｍｅ Ａｄｄｕｃｔｓ」，Ｉｎ：Ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ，Ｈｏｃｅｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｒｏｂｅｒｔｓ，ｅｄｓ．，Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，ｐｐ．３６７－３８３（１９８１）；Ｎｅｗｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ ４：１８５－９（１９８２）．使用され得る他のポリマーは、ポリ－１，３－ジオキソラン及びポリ－１，３，６－トリオキソランである。薬学的使用では、上記に示されているように、ポリエチレングリコール部位が好適である。

【0069】

上記成分（または誘導体）について、放出の箇所は、胃、小腸（十二指腸、空腸、もしくは回腸）、または大腸であってよい。当業者は、胃において溶解せず、さらには、十二指腸または他の場所、腸において材料を放出する、利用可能な製剤を有する。好ましくは、当該放出は、本発明の化合物（または誘導体）の保護によって、または、生物学的に活性な材料を、胃環境を越えて、例えば、腸において放出することによってのいずれかで、胃環境の有害効果を回避させる。

【0070】

完全な胃耐性を確保するために、少なくともｐＨ５．０まで不浸透性のコーティングが必須である。腸溶性コーティングとして使用される、より一般的な不活性成分の例は、トリメリット酸酢酸セルロース（ＣＡＴ）、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、フタル酸ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ、Ａｑｕａｔｅｒｉｃ、フタル酸酢酸セルロース（ＣＡＰ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｓ、及びｓｈｅｌｌａｃである。これらのコーティングは、混合フィルムとして使用されてよい。

【0071】

コーティングまたはコーティングの混合物は、胃に対する保護のために意図されていない錠剤においても使用され得る。これは、糖コーティング、または錠剤の飲み込みを容易にするコーティングを含み得る。カプセルは、乾燥治療薬（例えば、粉末）の送達のためのハードシェル（例えば、ゼラチン）からなっていてよく；液体形態では、軟質ゼラチンシェルが使用されてよい。カシェ剤のシェル材料は、厚いデンプンまたは他の食用紙であり得る。丸薬、ロゼンジ、成形錠剤または錠剤粉薬では、湿式マッシング技術が使用され得る。

【0072】

治療薬は、粒径が約１ｍｍの顆粒またはペレットでの微細な多微粒子として製剤に含まれ得る。カプセル投与用の材料の製剤はまた、粉末として、軽く圧縮されたプラグ、または錠剤としてでさえあり得る。治療薬は、圧縮によって調製され得る。

【0073】

着色料または香料が全て含まれていてよい。例えば、本発明の化合物（または誘導体）は、（例えば、リポソームまたはマイクロスフェアカプセル化によって）製剤化され、次いで、食用製品、例えば、着色料または香料を含有する冷蔵された飲料にさらに含有されてよい。

【0074】

不活性材料によって治療薬の容量を希釈または増加してよい。これらの希釈剤は、炭水化物、特に、マンニトール、α－ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾されたデキストラン及びデンプンを含み得る。ある特定の無機塩はまた、三リン酸カルシウム、炭酸マグネシウム及び塩化ナトリウムを含む充填剤として使用されてもよい。いくつかの市販の希釈剤は、Ｆａｓｔ－Ｆｌｏ、Ｅｍｄｅｘ、ＳＴＡ－Ｒｘ １５００、Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ及びＡｖｉｃｅｌｌである。

【0075】

崩壊剤は、固体剤形への治療薬の製剤化において含まれ得る。崩壊剤として使用される材料として、限定されないが、デンプンに基づいた商用崩壊剤、Ｅｘｐｌｏｔａｂを含めたデンプンが挙げられる。デンプングリコール酸ナトリウム、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ウルトラマイロペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸性カルボキシメチルセルロース、天然スポンジ及びベントナイトが全て使用され得る。崩壊剤の別の形態は、不溶性のカチオン交換樹脂である。粉末化されたガムは、崩壊剤として、及び、結合剤として使用されてよく、これらは、粉末化されたガム、例えば、寒天、Ｋａｒａｙａまたはトラガカントを含み得る。アルギン酸及びそのナトリウム塩も崩壊剤として有用である。

【0076】

結合剤が使用されることにより、共に治療剤を保持し、硬質錠剤を形成し、天然物、例えば、アカシア、トラガカント、デンプン及びゼラチンからの材料を含むことができる。他には、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）及びカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）が挙げられる。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）及びヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）は、いずれも、治療薬を顆粒化するためのアルコール溶液において使用され得る。

【0077】

製剤化プロセスの際の粘着を防止するために、治療薬の製剤化において抗摩擦剤が含まれていてよい。滑沢剤が、治療薬とダイの壁との間の層として使用されてよく、これらとして、限定されないが；そのマグネシウム及びカルシウム塩を含めたステアリン酸、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、流動パラフィン、植物油ならびにワックスを挙げることができる。可溶性の滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、様々な分子量のポリエチレングリコール、Ｃａｒｂｏｗａｘ４０００及び６０００もまた使用されてよい。

【0078】

製剤化の際に薬物の流動性を改良し得る、また、圧縮の際に再構成を補助するための、流動促進剤が添加されてよい。流動促進剤として、デンプン、タルク、焼成シリカ及び水和ケイアルミン酸塩を挙げることができる。

【0079】

水性環境への治療薬の溶解を補助するために、界面活性剤が湿潤剤として添加されてよい。界面活性剤は、アニオン性洗剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ナトリウムジオクチル及びスルホン酸ナトリウムジオクチルを含んでいてよい。カチオン性洗剤が使用されてよく、塩化ベンザルコニウム及び塩化ベンゼトニウムを含み得る。界面活性剤として製剤に含まれ得る可能性がある非イオン性洗剤として、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン水素化ヒマシ油１０、５０及び６０、モノステアリン酸グリセロール、ポリソルベート４０、６０、６５及び８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロースならびにカルボキシメチルセルロースが挙げられる。これらの界面活性剤は、本発明の化合物または誘導体の製剤において単独でまたは異なる比での混合物としてのいずれかで存在し得る。

【0080】

使用され得る薬学的調製物として、ゼラチン製の押し込み型カプセル、ならびに、ゼラチン及び可塑剤、例えば、グリセロールまたはソルビトール製の軟質の密閉カプセルが挙げられる。押し込み型カプセルは、充填剤、例えば、ラクトース、結合剤、例えば、デンプン、及び／または滑沢剤、例えば、タルクもしくはステアリン酸マグネシウム、ならびに、任意選択的に、安定化剤と混合した活性成分を含有し得る。軟質カプセルにおいて、活性化合物は、好適な液体、例えば、脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコールに溶解または懸濁されていてよい。加えて、安定化剤が添加されていてよい。経口投与用に製剤化されたマイクロスフェアが使用されてもよい。かかるマイクロスフェアは、当該分野において明確に定義されている。経口投与用の全ての製剤が、かかる投与に好適な投薬量であるべきである。

【0081】

口腔投与について、組成物は、従来のように製剤化された錠剤またはロゼンジの形態をとってよい。

【0082】

局所投与について、化合物は、当該分野において周知されている通り、液剤、ジェル、軟膏、クリーム、懸濁液などとして製剤化されていてよい。全身用の製剤として、注射、例えば、皮下、静脈内、筋肉内、髄腔内または腹腔内注射による投与用に設計されたもの、ならびに経皮、経粘膜的経口または肺投与用に設計されたものが挙げられる。

【0083】

吸入による投与について、本発明による使用のために化合物は、好適なプロペラント、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の好適なガスを使用して、圧縮パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレーの提示の形態で便利に送達され得る。圧縮エアロゾルの場合、投薬単位は、計量された量を送達するためにバルブを設けることによって決定されてよい。吸入具または吸入器での使用のための、例えばゼラチンのカプセルおよびカートリッジは、化合物の粉末混合物とラクトースまたはデンプンなどの好適な粉末基剤とを含有して製剤化されてよい。

【0084】

本明細書において開示されている化合物（またはこれらの塩）の肺送達もまた本明細書において企図される。化合物は、吸入しながら哺乳動物の肺に送達され、肺の上皮内層を横断して血流に入る。吸入分子の他の報告には、Ａｄｊｅｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ ７：５６５－５６９（１９９０）；Ａｄｊｅｉ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ６３：１３５－１４４（１９９０）（酢酸ロイプロリド）；Ｂｒａｑｕｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １３（ｓｕｐｐｌ．５）：１４３－１４６（１９８９）（エンドセリン－１）；Ｈｕｂｂａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌ Ｉｎｔ Ｍｅｄ ３：２０６－２１２（１９８９）（α１－抗トリプシン）；Ｓｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ８４：１１４５－１１４６（ａ－１－プロテイナーゼ）；Ｏｓｗｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，１９９０，「Ａｅｒｏｓｏｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ＩＩ，Ｋｅｙｓｔｏｎｅ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ，Ｍａｒｃｈ、（組み換えヒト成長ホルモン）；Ｄｅｂｓ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １４０：３４８２－３４８８（インターフェロン－ガンマ及び腫瘍壊死因子アルファ）ならびにＰｌａｔｚ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，２８４，６５６号（顆粒球コロニー刺激因子；参照により組み込まれる）が含まれる。全身的な効果のための薬物の肺送達に関する方法及び組成物は、Ｗｏｎｇ ｅｔ ａｌらに、１９９５年９月１９日に発行された米国特許第５，４５１，５６９号（参照により組み込まれる）に記載されている。

【0085】

限定されないが、ネブライザー、定量吸入具、及び粉末吸入具（これらの全てが、当業者によく知られている）を含めた治療薬品の肺送達用に設計された広範な機械的デバイスが本発明の実施における使用のために企図される。

【0086】

本発明の実施に好適な市販のデバイスのいくつかの具体例は、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．製のＵｌｔｒａｖｅｎｔネブライザー；Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ，Ｃｏｌｏ．製のＡｃｏｒｎ ＩＩネブライザー；Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．，Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａ製のＶｅｎｔｏｌｉｎ定量吸入具；及びＦｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．，Ｂｅｄｆｏｒｄ，Ｍａｓｓ製のＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入具である。

【0087】

全てのかかるデバイスは、本発明の化合物の分散に好適な製剤の使用を必要とする。典型的には、各製剤は、用いられるデバイスのタイプに特異的であり、治療に有用な通常の希釈剤、アジュバント及び／または担体に加えて、適切なプロペラント材料の使用を含み得る。また、リポソーム、マイクロカプセルもしくはマイクロスフェア、包接体、または他のタイプの担体の使用も企図される。化学的に修飾された本発明の化合物はまた、化学的修飾のタイプ及び用いられるデバイスのタイプに応じて異なる製剤で調製されてもよい。

【0088】

ネブライザーでの使用に好適な製剤は、ジェットまたは超音波のいずれでも、溶液のｍＬあたり約０．１～２５ｍｇの生物学的に活性な本発明の化合物の濃度で水に溶解された本発明の化合物（または誘導体）を典型的には含む。製剤はまた、（例えば、阻害剤の安定化及び浸透圧の調節のために）緩衝液及び単糖を含んでいてもよい。ネブライザー製剤はまた、エアロゾルを形成する際の溶液の噴霧化によって引き起こされる、本発明の化合物の表面誘起凝集を低減または防止するために、界面活性剤を含有していてもよい。

【0089】

定量吸入具デバイスでの使用のための製剤は、概して、界面活性剤の助けによりプロペラントに懸濁された本発明の化合物（または誘導体）を含有する微細に分割された粉末を含む。プロペラントは、この目的で用いられる任意の従来の材料、例えば、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、及び１，１，１，２－テトラフルオロエタン、またはこれらの組み合わせを含めた、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン、または炭化水素であってよい。好適な界面活性剤は、トリオレイン酸ソルビタン及び大豆レシチンを含む。オレイン酸はまた、界面活性剤としても有用であり得る。

【0090】

粉末吸入具デバイスからの分散のための製剤は、本発明の化合物（または誘導体）を含有する微細に分割された乾燥粉末を含み、また、例えば、５０～９０重量％の製剤中、デバイスからの粉末の分散を容易にする量で、増量剤、例えば、ラクトース、ソルビトール、スクロース、またはマンニトールを含んでいてもよい。本発明の化合物（または誘導体）は、遠位の肺への最も有効な送達のために、１０マイクロメートル（μｍ）未満、最も好ましくは０．５～５μｍの平均粒径を有する形態で有利に調製されるべきである。

【0091】

本発明の医薬組成物の経鼻送達もまた企図される。経鼻送達は、肺での治療薬の沈着を必要とすることなく、治療薬を鼻に投与した直後の本発明の医薬組成物の血流への通過を可能にする。経鼻送達用の製剤として、デキストランまたはシクロデキストランを用いたものが挙げられる。

【0092】

経鼻投与について、有用なデバイスは、定量噴霧器が取り付けられている小型の硬質ボトルである。一実施形態において、定量が、規定の容量のチャンバー内に本発明の医薬組成物溶液を取り出すことによって送達され、当該チャンバーは、エアロゾル化するために寸法付けされたアパーチャ、及び、チャンバー中の液体が圧縮されたときにスプレーを形成することによるエアロゾル製剤を有する。チャンバーは、本発明の医薬組成物を投与するために圧縮される。具体的な実施形態において、チャンバーは、ピストンアレンジメントである。かかるデバイスは、市販されている。

【0093】

代替的には、スクイーズされたときにスプレーを形成することによってエアロゾル製剤をエアロゾル化するように寸法付けられたアパーチャまたは開口部を有するプラスチックスクイーズボトルが使用される。開口部は、ボトルの頂部に通常見られ、当該頂部は、エアロゾル製剤の効率的な投与のために経鼻通路において部分的に適合するように概してテーパー状にされている。好ましくは、経鼻吸入具は、測定された用量の薬物の投与のために、計量した量のエアロゾル製剤を付与する。

【0094】

化合物は、全身に送達することが望ましいとき、注射によって、例えば、ボーラス注入または持続注入によって非経口投与用に製剤化されてよい。注射用製剤は、添加された保存剤を含む、単位剤形において、例えば、アンプルにおいて、または、複数回投与容器において提示されてよい。組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、液剤または乳剤としてのかかる形態をとっていてよく、また、製剤化剤、例えば、懸濁剤、安定化剤及び／または分散剤を含有していてよい。

【0095】

非経口投与用の医薬製剤には、水溶性形態での活性化合物の水溶液が含まれる。また、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製されてよい。好適な親油性溶媒またはビヒクルとして、脂肪油、例えば、ゴマ油、または合成脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチルもしくはトリグリセリド、またはリポソームが挙げられる。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を増加させる物質、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、またはデキストランを含有していてよい。任意選択的に、懸濁液はまた、高度に濃縮された液剤の調製を可能にするために化合物の溶解度を増加させる好適な安定化剤（複数可）を含有していてもよい。

【0096】

代替的には、活性化合物は、使用前に、好適なビヒクル、例えば、滅菌ピロゲン不含水を有する構成のための粉末形態であってよい。

【0097】

化合物はまた、例えば、従来の座剤の基剤、例えば、ココアバターまたは他のグリセリドを含有する、直腸用または膣用組成物、例えば、座剤または停留かん腸において製剤化されてもよい。

【0098】

上記の製剤に加えて、化合物はまた、デポー調製物として製剤化されてもよい。かかる長時間作用型製剤は、好適なポリマーまたは疎水性材料（例えば、許容可能な塩中の乳剤として）もしくはイオン交換樹脂と共に、または、難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として製剤化されよい。

【0099】

医薬組成物はまた、好適な固体またはゲル相担体または賦形剤を含んでいてもよい。かかる担体または賦形剤の例として、限定されないが、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、及びポリマー、例えば、ポリエチレングリコールが挙げられる。

【0100】

好適な液体または固体の薬学的調製物形態は、例えば、吸入のための水溶液または生理食塩水溶液、マイクロカプセル化されたもの、渦巻状化されたもの、微視的な金粒子上にコーティングされたもの、リポソーム中に含有されたもの、霧状にされたもの、エアロゾル、皮膚への移植用のペレット、または皮膚中に傷をつけるための鋭利な物体上で乾燥されたものである。医薬組成物にはまた、活性化合物が長期的に放出される、顆粒、粉末、錠剤、コーティングされた錠剤、（ミクロ）カプセル、座剤、シロップ、乳剤、懸濁液、クリーム、ドロップまたは調製物も含まれ、これらの調製物の賦形剤ならびに添加剤及び／または補助剤、例えば、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、膨張剤、滑沢剤、香料、甘味料もしくは可溶化剤は、上記のように慣例的に使用される。医薬組成物は、種々の薬物送達系における使用に好適である。薬物送達の方法についての簡単なレビューについては、Ｌａｎｇｅｒ Ｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７－３３（１９９０）を参照されたい。

【0101】

本発明の化合物及び任意選択的に他の治療薬は、それ自体で（正味）または薬学的に許容可能な塩の形態で投与されてよい。医学の分野で使用されるとき、塩は、薬学的に許容可能であるべきであるが、これらの薬学的に許容可能な塩を調製するために非薬学的に許容可能な塩が便利に使用され得る。かかる塩として、限定されないが、以下の酸：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ－トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸、ナフタレン－２－スルホン酸、及びベンゼンスルホン酸から調製されるものが挙げられる。また、かかる塩は、カルボン酸基のアルカリ金属またはアルカリ土類塩、例えば、ナトリウム、カリウムまたはカルシウム塩として調製され得る。

【0102】

好適な緩衝剤として：酢酸及び塩（１～２％ｗ／ｖ）；クエン酸及び塩（１～３％ｗ／ｖ）；ホウ酸及び塩（０．５～２．５％ｗ／ｖ）；ならびにリン酸及び塩（０．８～２％ｗ／ｖ）が挙げられる。好適な保存剤として、塩化ベンザルコニウム（０．００３～０．０３％ｗ／ｖ）；クロロブタノール（０．３～０．９％ｗ／ｖ）；パラベン（０．０１～０．２５％ｗ／ｖ）及びチメロサール０．００４～０．０２％ｗ／ｖ）が挙げられる。

【0103】

本発明の医薬組成物は、有効量の、本明細書に記載されている化合物、及び、任意選択的に、薬学的に許容可能な担体に含まれる治療剤を含有する。用語「薬学的に許容可能な担体」は、ヒトまたは他の脊椎動物への投与に好適である１以上の相溶性の固体または液体の充填剤、希釈剤またはカプセル化物質を意味する。用語「担体」は、適用を容易にするために活性成分が組み合わされる、天然または合成の、有機または無機の成分を表す。医薬組成物の成分はまた、所望の薬学的効率を実質的に付与する相互作用をしないような方法で、本発明の化合物と、また、互いに、入り混じることも可能である。

【0104】

特に限定されないが、本発明の化合物を含む治療剤（複数可）は、粒子において提供されてよい。粒子は、本明細書において使用されているとき、本発明の化合物または本明細書に記載されている他の治療剤（複数可）の全体または一部からなり得るナノ粒子またはミクロ粒子（またはいくつかの場合には、より大きい粒子）を意味する。粒子は、限定されないが、腸溶性コーティングを含めたコーティングによって包囲されているコアに、治療剤（複数可）を含有していてよい。治療剤（複数可）はまた、粒子全体にわたって分散されていてもよい。治療剤（複数可）はまた、粒子中に吸着されていてもよい。粒子は、０次放出、１次放出、２次放出、遅延放出、持続放出、即時放出、及びこれらの組み合わせなどを含めた、いずれの次元の放出反応速度論のものであってもよい。粒子は、治療剤（複数可）に加えて、限定されないが、浸食性、非浸食性、生分解性、もしくは非生分解性材料またはこれらの組み合わせを含めた、薬学及び医学の分野において常套的に使用されるかかる材料のいずれかを含んでいてよい。粒子は、本発明の化合物を溶液中または半固体状態に含有するマイクロカプセルであってよい。粒子は、事実上いずれの形状のものであってもよい。

【0105】

非生分解性及び生分解性の両方のポリマー材料が、治療剤（複数可）を送達するための粒子の製造において使用され得る。かかるポリマーは、天然または合成ポリマーであってよい。ポリマーは、放出が望まれる期間に基づいて選択される。特定の対象の生体接着ポリマーには、Ｓａｗｈｎｅｙ Ｈ Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ２６：５８１－７に記載されている生体浸食性ヒドロゲルが含まれ、その教示は、本明細書に組み込まれる。これらとして、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルテン、ポリ無水物、ポリアクリル酸、アルギン酸塩、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、及びポリ（アクリル酸オクタデシル）が挙げられる。

【0106】

治療剤（複数可）は、制御放出系に含有されていてよい。用語「制御放出」は、製剤からの薬物放出の方法及びプロファイルが制御される任意の薬物含有製剤を称することが意図される。これは、限定されないが持続放出及び遅延放出製剤を含めた非即時放出製剤と共に、即時ならびに非即時放出製剤を称する。用語「持続放出」（「徐放」とも称される）は、長期間にわたる薬物の漸次放出を付与する、好ましくは、必ずしもではないが、長期間にわたっての実質的に一定の血液レベルの薬物を結果として生じさせる薬物製剤を称するために従来の意味で使用される。用語「遅延放出」は、製剤の投与と、これからの薬物の放出との間に時間遅延がある薬物製剤を称するために従来の意味で使用される。「遅延放出」は、長期間にわたる薬物の漸次放出を含んでいても含んでいなくてもよく、そのため、「持続放出」であってもなくてもよい。

【0107】

慢性状態の処置には、長期持続放出インプラントの使用が特に好適であり得る。「長期」放出は、本明細書において使用されているとき、インプラントが、少なくとも７日間、好ましくは３０～６０日間、治療レベルの活性成分を送達するように構築及びアレンジされていることを意味する。長期持続放出インプラントは、当業者に周知であり、上記の放出系のいくらかを含む。

【0108】

本明細書に記載されている組成物及び方法に対する他の好適な変更及び改変が、当業者に公知の情報に鑑みて、本明細書に含まれる本発明の詳細な説明から容易に明らかであること、ならびに、本発明またはその任意の実施形態の範囲から逸脱することなくなされ得ることが当業者によって理解されよう。本発明をここで詳細に記載しているが、これは、説明目的のみでここで含まれかつ本発明の限定であることは意図されない以下の例を参照することによって、より明確に理解されよう。

【0109】

使用の方法
本発明は、虚血－再灌流傷害もしくは心筋梗塞、または心筋梗塞に関連する傷害を処置または防止するのに有用であるペプチド化合物を提供する。

【0110】

したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、虚血－再灌流傷害を処置または防止する方法であって、これを必要とする対象に、治療有効量の、本明細書に記載されている式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、上記方法を対象とする。ある特定にかかる実施形態において、虚血－再灌流傷害は、心虚血－再灌流傷害である。いくつかの実施形態において、化合物は、経口、局所、全身に、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内投与される。

【0111】

他の実施形態において、本発明は、心筋梗塞を処置または防止する方法であって、これを必要とする対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、上記方法を提供する。かかる方法は、梗塞の開始または進行を防止することにより、再灌流の際の心臓への傷害を防止し得る。いくつかの実施形態において、化合物は、経口、局所、全身に、静脈内、皮下、腹腔内、または筋肉内投与される。

【0112】

虚血は、組織または器官への血液の低減または減少であり、多くの異なる原因を有する。虚血は、例えば、血栓もしくは塞栓によって引き起こされて、局所的、または、例えば、低灌流圧に起因して、より全体的であってよい。虚血事象は、低酸素症（酸素低減）及び／または無酸素症（酸素の非存在）に至る可能性がある。

【0113】

哺乳動物の組織または器官における虚血は、酸素欠乏（低酸素症）及び／またはグルコース（例えば、基質）欠乏によって引き起こされる多面的な病態である。組織または器官の細胞における酸素及び／またはグルコース欠乏は、エネルギー発生能力の低減または全損、細胞膜を横断する活性イオン輸送の機能の結果的損失に至る。酸素及び／またはグルコース欠乏はまた、ミトコンドリア膜における透過性遷移を含めた、他の細胞膜における病的変化にも至る。加えて、他の分子、例えば、ミトコンドリア内に区分化されているアポトーシス性タンパク質が細胞質中に漏出し、アポトーシス細胞死を引き起こし得る。重度の虚血は、壊死細胞死に至る可能性がある。

【0114】

特定の組織または器官における虚血または低酸素症は、組織または器官への血液の供給の損失または重篤な低減によって引き起こされ得る。血液の供給の損失または重篤な低減は、例えば、血栓塞栓性脳卒中、冠状動脈硬化症、または末梢血管疾患に起因し得る。虚血または低酸素症によって影響される組織は、典型的には筋肉、例えば、心筋、骨格筋、または平滑筋である。

【0115】

虚血または低酸素症によって影響される器官は、虚血または低酸素症を被るいずれの器官であってもよい。例として、何ら限定されないが、心筋虚血または低酸素症は、アテローム性動脈硬化または血栓症閉塞によって一般的に引き起こされ、心動脈及び毛細管血液の供給による心臓組織への酸素送達の低減または損失に至る。かかる心虚血または低酸素症は、影響される心筋の疼痛及び壊死を引き起こし、最終的に心不全に至る場合がある。

【0116】

再灌流は、血液の流れが減少または遮断される任意の器官または組織への血流の回復である。例えば、血流は、虚血に影響される任意の器官または組織にて回復され得る。血流の回復（再灌流）は、当業者に公知の任意の方法によって行われ得る。例えば、虚血心臓組織の再灌流は、血管形成、冠動脈バイパスグラフト、または血栓溶解薬から生じ得る。

【0117】

虚血－再灌流傷害は、血液の供給が虚血期間後に患部に戻るときに引き起こされる細胞または組織損傷である。虚血の際の酸素及び栄養素の欠失は、循環の回復が結果として組織に損傷を生じさせる状態を作り出す。例として、何ら限定されないが、再灌流誘発不整脈、心筋気絶、遅い冠状動脈血流において現れる微小血管閉塞、及び致死性心筋再灌流傷害（すなわち、指標虚血事象の終わりに生存可能であった心筋細胞の再灌流誘発死）を含めた、心筋再灌流傷害の形態が挙げられる。研究により、致死性心筋再灌流傷害が最終心筋梗塞サイズの約５０％を占めることが示唆されている。

【0118】

ある特定の実施形態において、ペプチドは、経口、静脈内、または非経口投与される。

【0119】

ある特定の実施形態において、対象はヒトである。

【0120】

本発明のペプチド化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩は、虚血傷害の疑いがあるまたはこれに既に罹患している対象に、疾患の発症におけるその合併症及び中間の病理学的表現型を含めた疾患の症状を治癒するまたは少なくとも部分的に阻止するのに十分な量で投与され得る。虚血傷害に罹患している対象は、当該分野において公知の診断または予防アッセイのいずれかまたは組み合わせによって識別され得る。例として、限定されないが、いくつかの実施形態において、虚血傷害は、心虚血、脳の虚血、腎虚血、脳虚血、腸虚血、肝虚血、または心筋梗塞に関係する。

【0121】

例として、何ら限定されないが、心虚血の典型的な症状として、限定されないが、狭心症（例えば、胸痛及び胸部圧迫感）、息切れ、動悸、脱力、めまい、吐き気、発汗、頻拍、ならびに倦怠感が挙げられる。

【0122】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドを用いた、心虚血と診断された対象の処置は、以下の心虚血症状：狭心症（例えば、胸痛及び胸部圧迫感）、息切れ、動悸、脱力、めまい、吐き気、発汗、頻拍、ならびに倦怠感；のうちの１以上を改善しまたは取り除く。

【0123】

例として、何ら限定されないが、腎虚血の典型的な症状として、限定されないが、尿毒症（すなわち、例えば尿素などのタンパク質副産物の高い血中濃度）、肺水腫によって引き起こされる呼吸困難の急性発症（苦しいまたは困難な呼吸）、高血圧、腎臓付近で感じられる疼痛、脱力、高血圧、吐き気、脚部疼痛歴、脚部への循環障害を反映するストライド、ならびに首（例えば、頸動脈の雑音）、腹部（腎動脈の狭窄を反映している場合がある）、及び鼠径部（大腿動脈の雑音）で検出され得る動脈内の乱れた血流によって引き起こされる雑音（聴診器によって聞かれる音または雑音）が挙げられる。

【0124】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドを用いた、腎虚血と診断された対象の処置は、以下の腎虚血症状：尿毒症（すなわち、例えば尿素などのタンパク質副産物の高い血中濃度）、肺水腫によって引き起こされる呼吸困難の急性発症（苦しいまたは困難な呼吸）、高血圧、腎臓付近で感じられる疼痛、脱力、高血圧、吐き気、脚部疼痛歴、脚部への循環障害を反映するストライド、ならびに首（例えば、頸動脈の雑音）、腹部（腎動脈の狭窄を反映している場合がある）、及び鼠径部（大腿動脈の雑音）で検出され得る動脈内の乱れた血流によって引き起こされる雑音（聴診器によって聞かれる音または雑音）；のうちの１以上を改善しまたは取り除く。

【0125】

例として、何ら限定されないが、脳（または脳の）虚血の典型的な症状として、限定されないが、片目の失明、片方の腕または脚の脱力、体の片側全体の脱力、めまい、回転性めまい、複視、体の両側の脱力、発話困難、不明瞭な発語、及び協調運動障害が挙げられる。

【0126】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドを用いた、脳（または脳の）虚血と診断された対象の処置は、以下の脳（または脳の）虚血症状：片目の失明、片方の腕または脚の脱力、体の片側全体の脱力、めまい、回転性めまい、複視、体の両側の脱力、発話困難、不明瞭な発語、及び協調運動障害；のうちの１以上を改善しまたは取り除く。

【0127】

別の態様において、本発明は、虚血再灌流傷害、及び／または、虚血再灌流傷害に対する既存の治療薬に関連する副作用を処置する方法に関する。治療用途において、少なくとも１つの本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩を含む組成物または薬剤は、虚血再灌流傷害の疑いがあるまたはこれに既に罹患している対象に、疾患の発症におけるその合併症及び中間の病理学的表現型を含めた疾患の症状を治癒するまたは少なくとも部分的に阻止するのに十分な量で投与される。虚血－再灌流傷害に罹患している対象は、当該分野において公知の診断または予防アッセイのいずれかまたは組み合わせによって識別され得る。いくつかの実施形態において、虚血－再灌流傷害は、心虚血、脳の虚血、腎虚血、脳虚血、腸虚血、及び肝虚血に関係する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されているペプチド化合物は、心虚血－再灌流傷害の処置に有用である。

【0128】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されているペプチド化合物は、再灌流の際の心臓への傷害を防止するために対象において心筋梗塞を処置するのに有用である。いくつかの実施形態において、本発明は、冠血行再建術の方法であって、哺乳動物対象に、治療有効量の、本発明のペプチド化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を投与すること、及び対象において冠動脈バイパスグラフト（ＣＡＢＧ）手技を実施することを含む、上記方法に関する。

【0129】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されているペプチド化合物を用いた心筋梗塞の処置は、梗塞サイズを低減し、ＬＶＤＰを増加させ、収縮及び弛緩の最大速度（±ｄＰ／ｄｔ）を増加させる。

【0130】

予防方法
いくつかの実施形態において、本発明は、虚血傷害を有するリスクがある対象における虚血傷害の発現または虚血傷害の症状を防止または遅延する方法を提供する。いくつかの実施形態において、本技術は、虚血傷害を有するリスクがある対象における虚血傷害の症状を防止または低減する方法を提供する。

【0131】

いくつかの実施形態において、本発明は、虚血－再灌流傷害を有するリスクがある対象における虚血－再灌流傷害の発現または虚血－再灌流傷害の症状を防止または遅延する方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、虚血－再灌流傷害を有するリスクがある対象における虚血再灌流傷害の症状を防止または低減する方法を提供する。

【0132】

いくつかの実施形態において、虚血傷害、虚血－再灌流傷害、または虚血性もしくは虚血－再灌流傷害の症状は、心虚血、脳の虚血、腎虚血、脳虚血、腸虚血、及び肝虚血に関係する。いくつかの実施形態において、虚血傷害は、心筋梗塞である。

【0133】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されているペプチド化合物は、心虚血－再灌流傷害の処置または防止において有用である。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されているペプチド化合物は、心虚血－再灌流傷害の防止において有用である。

【0134】

虚血傷害または虚血－再灌流傷害のリスクがある対象は、例えば、当該分野において公知の診断または予防アッセイのいずれかまたは組み合わせによって識別され得る。予防用途において、本発明の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩の医薬組成物あるいは薬剤は、虚血傷害または虚血再灌流傷害に罹り易いまたは他の場合にはそのリスクがある対象に、疾患の生化学的、組織学的及び／もしくは行動学的症状、疾患の発症の間に現れるその合併症及び中間の病理学的表現型を含めた疾患の発現を取り除く、そのリスクを低減する、もしくはその発現を遅延する、または、疾患の発症の間に現れる症状及び／もしくは合併症及び中間の病理学的表現型を低減するのに十分な量で投与される。予防的ペプチドの投与は、疾患または障害に特徴的な症状が現れる前に行われ得、その結果、疾患または障害が防止され、その進行が遅延され、または、疾患もしくは障害の症状もしくは副作用の重篤度が低減することとなる。

【0135】

例として、いくつかの実施形態において、対象は、冠動脈疾患（アテローム性動脈硬化）、血塊、または冠動脈攣縮を有していると、心虚血のリスクがあり得る。

【0136】

例として、何ら限定されないが、いくつかの実施形態において、対象は、腎臓傷害（例えば、急性腎臓傷害）及び／または腎臓から正常な血流が長期間奪われる手術（例えば、心臓バイパス手術）による傷害もしくは合併症を有すると、腎虚血のリスクがあり得る。

【0137】

例として、何ら限定されないが、いくつかの実施形態において、対象は、鎌状赤血球貧血、圧迫血管、心室頻拍、動脈内のプラークの蓄積、血塊、心臓発作の結果としての極度の低血圧、脳卒中、先天性心欠陥を有するとき、脳虚血のリスクがあり得る。

【0138】

治療及び／または予防用途について、本明細書に記載されている少なくとも１つのペプチド化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、例えば、酢酸塩、酒石酸塩、もしくはトリフルオロ酢酸塩を含む組成物が、これを必要とする対象に投与される。いくつかの実施形態において、ペプチド組成物は、１日あたり１、２、３、４、または５回投与される。いくつかの実施形態において、ペプチド組成物は、１日あたり５回より多く投与される。加えてまたは代替的には、いくつかの実施形態において、ペプチド組成物は、毎日、１日おき、３日ごと、４日ごと、５日ごと、または６日ごとに投与される。いくつかの実施形態において、ペプチド組成物は、毎週、隔週、３週間ごと、または月１回投与される。いくつかの実施形態において、ペプチド組成物は、１、２、３、４、または５週間の期間にわたって投与される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、６週以上投与される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、１２週以上投与される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、１年未満の期間投与される。いくつかの実施形態において、ペプチドは、１年を超える期間投与される。いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドによる処置は、以下の心虚血症状：狭心症（例えば、胸痛及び胸部圧迫感）、息切れ、動悸、脱力、めまい、吐き気、発汗、頻拍、ならびに倦怠感；のうちの１以上の発現を防止または遅延する。

【0139】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドによる処置は、以下の腎虚血症状：尿毒症（すなわち、例えば尿素などのタンパク質副産物の高い血中濃度）、肺水腫によって引き起こされる呼吸困難の急性発症（苦しいまたは困難な呼吸）、高血圧、腎臓付近で感じられる疼痛、脱力、高血圧、吐き気、脚部疼痛歴、脚部への循環障害を反映するストライド、ならびに首（例えば、頸動脈の雑音）、腹部（腎動脈の狭窄を反映している場合がある）、及び鼠径部（大腿動脈の雑音）で検出され得る動脈内の乱れた血流によって引き起こされる雑音（聴診器によって聞かれる音または雑音）；のうちの１以上の発現を防止または遅延する。

【0140】

いくつかの実施形態において、本明細書に開示されている少なくとも１つのペプチドによる処置は、以下の脳（または脳の）虚血症状：片目の失明、片方の腕または脚の脱力、体の片側全体の脱力、めまい、回転性めまい、複視、体の両側の脱力、発話困難、不明瞭な発語、及び協調運動障害；のうちの１以上の発現を防止または遅延する。

【0141】

代謝安定性の評価方法
ある特定の実施形態において、以下の方法を使用して、本発明の化合物の代謝安定性を評価することができる。

【0142】

ある特定のｉｎ ｖｉｔｒｏ肝臓代謝研究は、以下の参照文献において先に記載されている：Ｏｂａｃｈ，Ｒ Ｓ，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐ，１９９９，２７：１３５０；Ｈｏｕｓｔｏｎ，Ｊ Ｂ ｅｔ ａｌ．，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｖ，１９９７，２９：８９１；Ｈｏｕｓｔｏｎ，Ｊ Ｂ，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９４，４７：１４６９；Ｉｗａｔｓｕｂｏ，Ｔ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ，１９９７，７３：１４７；ａｎｄ Ｌａｖｅ，Ｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ，１９９７，１４：１５２。

【0143】

マイクロソームアッセイ：ヒト肝臓マイクロソーム（２０ｍｇ／ｍＬ）は、Ｘｅｎｏｔｅｃｈ，ＬＬＣ（Ｌｅｎｅｘａ，Ｋａｎｓ．）から得られてよい。β－ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、還元形態（ＮＡＤＰＨ）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ_２）、及びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入されてよい。

【0144】

代謝安定性の決定：７．５ｍＭの試験化合物原液をＤＭＳＯ中で調製する。７．５ｍＭの原液をアセトニトリル（ＡＣＮ）中１２．５～５０μＭに希釈する。２０ｍｇ／ｍＬヒト肝臓マイクロソームを、３ｍＭ ＭｇＣｌ_２を含有する０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）において０．６２５ｍｇ／ｍＬに希釈する。希釈したマイクロソームを９６ウェルディープウェルポリプロピレンプレートに３連で添加する。１２．５～５０μＭ 試験化合物の１０μＬのアリコートをマイクロソームに添加し、混合物を１０分間予め加温する。反応を、予め加温したＮＡＤＰＨ溶液の添加によって開始する。最終反応体積は０．５ｍＬであり、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中の０．５ｍｇ／ｍＬヒト肝臓マイクロソーム、０．２５～１．０μＭ試験化合物及び２ｍＭ ＮＡＤＰＨ、ならびに３ｍＭ ＭｇＣｌ_２を含有する。反応混合物を３７℃でインキュベートし、５０μＬのアリコートを０、５、１０、２０、及び３０分で除去し、内部標準と共に５０μＬの氷冷ＡＣＮを含有する、シャローウェル９６ウェルプレートに添加して、反応を停止させる。プレートを４℃で２０分間保存し、その後、１００μＬの水をプレートのウェルに添加し、その後、ペレットに遠心分離をしてタンパク質を沈殿させる。上清を別の９６ウェルプレートに移し、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏ－ｓｙｓｔｅｍｓ ＡＰＩ４０００質量分析計を使用するＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって残存する親の量について分析する。試験を３連で行う。

【0145】

データ解析：試験化合物についてｉｎ ｖｉｔｒｏ半減期（ｔ_１／２ｓ）を、残存する親の線形回帰の傾き（ｌｎ）対インキュベーション時間の関係から算出する：
ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｔ_１／２＝０．６９３／ｋ、式中、ｋ＝－［残存する親の線形回帰の傾き（ｌｎ）対インキュベーション時間］

【実施例】

【0146】

ペプチドの合成の一般手順

【化33】

合成を、ＧＬ Ｂｉｏｃｈｅｍ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）Ｌｔｄ．によって実施した。

【0147】

ステップａ．樹脂調製物
１０ｇのピンク色のＡＭ樹脂（仕込み０．６ｍｍｏｌ／ｇ）を秤量し、樹脂を反応カラム内に投入し、ＤＣＭによって３０分間膨潤させる。

【0148】

ステップｂ．脱保護
Ｆｍｏｃを２０％ピペリジン／ＤＭＦによって脱保護し、これらを１０分間混合し、次いで、これをＤＭＦによって洗浄する。このステップを繰り返す。

【0149】

ステップｃ．カップリング
１）１２ｍｍｏｌのＦｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、１２ｍｍｏｌのＨＯＢＴ、１２ｍｍｏｌのＨＢＴＵ及び１２ｍｍｏｌのＤＩＥＡを、室温で４０分間かけてカップリング用樹脂に添加する。
２）洗浄：カップリングが完了した後、樹脂をＤＭＦによって１～２回洗浄する。

【0150】

ステップｂ～ｅ（ｄ～ｈ）．ペプチド鎖の長さの増加
アミノ酸が鎖に逐次的にカップリングされるまで、ステップ２～４を繰り返すことによる。

【0151】

ステップｉ．ペプチドの脱保護
最後のアミノ酸が鎖にカップリングした後、次いで、樹脂をＭｅＯＨによって３回洗浄する。樹脂を乾燥させる。

【0152】

ステップｊ．開裂
乾燥した樹脂を秤量し、これらをチューブ内に入れ、適切な量の開裂溶液（例えば９５％のＴＦＡ）を添加し、これを４０度で３．５時間インキュベートする。反応溶液を濾過し、次いで、これをエーテル中に添加することによって溶液を沈殿させる。
溶液を２分間２回遠心分離する（４０００／ｓ）。

【0153】

ステップｋ．乾燥
ペプチドサンプルを数分間空気乾燥し、次いで、ペプチドサンプルを凍結乾燥する。

【0154】

最終生成物のＨＰＬＣ精製手順
機器：ＨＰＬＣ
波長：２２０ｎｍ
流量：３０ｍｌ／分
カラム：３ｃｍ ＤＡＣ（Ｃ１８）
移動相Ａ：ＡＣＮ＋ＴＦＡ０．１％、Ｂ：超純水＋ＴＦＡ０．１％
勾配：時間（分） Ａ Ｂ
０ １８％ ８２％
２５ ２８％ ７２％
４０ ４０％ ６０％

【0155】

１）前分析
適切な量のサンプルを０．５ｍｌチューブに取り、超純水を使用してこれを溶解する。０．４５ｕｍ膜を使用してサンプルを濾過し、次いで、迅速な濃度勾配ＨＰＬＣ（１０～１００％）を使用してサンプルを分析する。

【0156】

２）サンプル調製物
３００ｍｇのサンプルを２０ｍＬのビーカーに添加し、次いで１５ｍｌのＨ_２Ｏ及び５ｍｌのＡＣＮを添加する。サンプルが完全に溶解されるまでサンプルを超音波処理し、次いで、０．４５ｕｍ膜を使用して溶液を濾過する。

【0157】

３）ＨＰＬＣ精製
上記勾配を有するＨＰＬＣを使用してサンプルを精製し、０～４０分において画分を収集する。
収集した画分を、分析ＨＰＬＣを使用して分析し、純度を確認する。

【0158】

４）乾燥及び凍結乾燥
収集した画分を、ロータリーエバポレータを使用して乾燥し、次いで、これを２日間凍結乾燥する。

【0159】

５）保存
乾燥したサンプルを秤量して検査し、次いでこれをチューブ内で保存する。１０℃未満で、光を避ける。

【0160】

実施例１：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－シクロヘキシルプロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｃｈａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ａ）の合成

【化34】

化合物１５ａを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｃｈａ（６ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ａを得た（ＨＰＬＣ、９８．１％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ ＝ ８．６６ （ｍ， １Ｈ）， ８．４０ （ｍ， １Ｈ）， ８．２６ （ｍ， ３Ｈ）， ７．９４ （ｍ， １Ｈ）， ７．８６ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４０ （ｍ， １Ｈ）， ７．３４ （ｍ， ５Ｈ）， ７．０８ （ｍ， １Ｈ）， ４．３８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０２ （ｍ， ４Ｈ）， ２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．００－１．７０ （ｍ， ２１Ｈ）， １．０７ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６０２．４４．

【0161】

実施例２：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－シクロペンチルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－シクロペンチルプロパンアミド）ヘキサンアミド（（β－シクロペンチル）－Ａｌａ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－シクロペンチル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｂ）の合成

【化35】

化合物１５ｂを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－シクロペンチル）－Ａｌａ（６ｂ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－シクロペンチル）－Ａｌａ（６ｂ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｂを得た（ＨＰＬＣ、９８．１％）：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ ＝ ８．８６（ｍ、１Ｈ）、８．４０（ｍ、１Ｈ）、８．１９（ｍ、３Ｈ）、７．９１（ｍ、２Ｈ）、７．８６（ｍ、３Ｈ）、７．４４（ｍ、１Ｈ）、７．１０（ｍ、１Ｈ）、４．４６（ｍ、１Ｈ）、４．２８（ｍ、１Ｈ）、４．１５（ｍ、１Ｈ）、３．７０（ｍ、１Ｈ）、３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．７５（ｍ、２Ｈ）、１．２０－１．８０（ｍ、２８Ｈ）、１．１０（ｍ、４Ｈ）．ＭＳ（Ｍ＋１）：５８０．４５．

【0162】

実施例３：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－シクロペンチルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）ヘキサンアミド（（β－シクロペンチル）－Ａｌａ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｃ）の合成

【化36】

化合物１５ｃを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－シクロペンチル）－Ａｌａ（６ｂ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｂを得た（ＨＰＬＣ、９９．６％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ ＝ ８．７４（ｍ， １Ｈ）， ８．４８（ｍ， １Ｈ）， ８．１６（ｍ， ４Ｈ）， ７．８６（ｍ， ３Ｈ）， ７．７２（ｍ， １Ｈ）， ７．４３（ｍ， １Ｈ）， ７．２９（ｍ， ５Ｈ）， ７．２４（ｍ， １Ｈ）， ４．６０（ｍ， １Ｈ）， ４．３８（ｍ， １Ｈ）， ４．２０（ｍ， １Ｈ）， ３．８０（ｍ， １Ｈ）， ３．１０（ｍ， １Ｈ）， ２．９０（ｍ， ２Ｈ）， ２．７５（ｍ， ３Ｈ）， １．７０（ｍ， ６Ｈ）， １．５０（ｍ， ７Ｈ）， １．３０（ｍ， ４Ｈ）， １．１０（ｍ， ４Ｈ）． ＭＳ（Ｍ＋１）：５８８．４５．

【0163】

実施例４：（Ｓ）－２－（（Ｓ）－３－（［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）プロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（４）－Ｂｉｐ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｄ）の合成

【化37】

化合物１５ｄを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（４）－Ｂｉｐ（６ｃ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｄを得た（ＨＰＬＣ、９９．５％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ ＝ ８．６５ （ｍ， １Ｈ）， ８．４５ （ｍ， １Ｈ）， ８．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ７．８０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．４５ （ｍ， ４Ｈ）， ７．３０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１５ （ｍ， １Ｈ）， ４．６０ （ｍ， １Ｈ）， ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６０－３．４０ （ｍ， ８Ｈ）， １．００－１．８０ （ｍ， ７Ｈ）， ０．９０ （ｍ， ３Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６７２．４２．

【0164】

実施例５：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（チアゾール－４－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－チアゾール－４－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｅ）の合成

【化38】

化合物１５ｅを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－チアゾール－４－イル）－Ａｌａ（６ｄ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｅを得た（ＨＰＬＣ、９９．５％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．９９ （ｓ， １Ｈ）， ８．６３ （ｍ， １Ｈ）， ８．４３ （ｍ， １Ｈ）， ８．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ８．１０ （ｍ， １Ｈ）， ７．７８ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６０ （ｍ， １Ｈ）， ７．５０ （ｓ， １Ｈ）， ７．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１０ （ｍ， １Ｈ）， ４．７０ （ｍ， １Ｈ）， ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２ （ｍ， １Ｈ）， ３．００ （ｍ， ５Ｈ）， ２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．７０ （ｍ， １Ｈ）， １．５０ （ｍ， ３Ｈ）， １．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ０．９０ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６０３．５２．

【0165】

実施例６：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－シクロペンチルプロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｃｐａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｆ）の合成

【化39】

化合物１５ｆを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－シクロペンチル）－Ａｌａ（６ｂ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｆを得た（ＨＰＬＣ、９９．７％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）， δ＝８．４０ （ｍ， １Ｈ）， ７．９３ （ｍ， １Ｈ）， ７．３５ （ｍ， ５Ｈ）， ４．１０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．２０－１．７０ （ｍ， １７Ｈ）， １．００ （ｍ， ４Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５８８．５６．

【0166】

実施例７：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－２－フェニルアセトアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｇ）の合成

【化40】

化合物１５ｇを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ（６ｅ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｇを得た（ＨＰＬＣ、９８．６％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．８２ （ｍ， １Ｈ）， ８．６５ （ｍ， １Ｈ）， ８．４２ （ｍ， １Ｈ）， ８．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．１２（ｍ １Ｈ）， ７．４５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．３０ （ｍ， １０Ｈ）， ５．５５ （ｍ， １Ｈ）， ４．５０ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．００ （ｍ， ４Ｈ）， ２．７０ （ｍ， ２Ｈ），１．００－１．７０ （ｍ， １０Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５８２．４０．

【0167】

実施例８：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－２－フェニルアセトアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）ヘキサンアミド（（α－フェニル）－Ｇｌｙ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｈ）の合成

【化41】

化合物１５ｈを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ（６ｅ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｈを得た（ＨＰＬＣ、９８．５％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．７０ （ｍ， ４Ｈ）， ８．５０ （ｍ， １Ｈ）， ８．２５ （ｍ， １Ｈ）， ７．８０ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４０ （ｍ， ７Ｈ）， ７．２０ （ｍ， ７Ｈ）， ５．００ （ｍ， １Ｈ）， ４．６０ （ｍ， １Ｈ）， ４．３５ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７０ （ｍ， ４Ｈ）， １．６０ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５ （ｍ， ３Ｈ）， １．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ０．７５ （ｍ， １Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５８２．４５．

【0168】

実施例９：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－２－フェニルアセトアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－２－フェニルアセトアミド）ヘキサンアミド（（α－フェニル）－Ｇｌｙ－Ｄ－Ａｒｇ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｉ）の合成

【化42】

化合物１５ｉを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ（６ｅ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（α－フェニル）－Ｇｌｙ（６ｅ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｉを得た（ＨＰＬＣ、９８．１％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．８５ （ｍ， ２Ｈ）， ８．２２ （ｍ， ３Ｈ）， ８．４５ （ｍ， １Ｈ）， ７．８５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６５ （ｍ， １Ｈ）， ７．５５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４５ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３０ （ｍ， ５Ｈ）， ５．５８ （ｍ， １Ｈ）， ５．０６ （ｍ， １Ｈ）， ４．５８ （ｍ， １Ｈ）， ４．１８ （ｍ， １Ｈ）， ２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．６０ （ｍ， ５Ｈ）， １．３０ （ｍ， ５Ｈ）， １．１０ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５６８．４５．

【0169】

実施例１０：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ｏ－トリル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２－メチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｊ）の合成

【化43】

化合物１５ｊを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（２－メチル）－Ｐｈｅ（６ｆ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｊを得た（ＨＰＬＣ、９９．０％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．５９ （ｍ， １Ｈ）， ８．５２ （ｍ， １Ｈ）， ８．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｍ， １Ｈ）， ７．８４ （ｍ， ３Ｈ）， ７．６０ （ｍ， １Ｈ）， ７．３８ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．０８ （ｍ， ５Ｈ）， ４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１０ （ｍ， １Ｈ）， ２．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．８０ （ｍ， ５Ｈ）， ２．３２ （ｓ， ３Ｈ）， １．６８ （ｍ， １Ｈ）， １．５５ （ｍ， ３Ｈ）， １．３８ （ｍ， ３Ｈ）， １．１０ （ｍ， １Ｈ）， ０．８８ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６１０．４５．

【0170】

実施例１１：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ｐ－トリル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（４－メチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｋ）の合成

【化44】

化合物１５ｋを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（４－メチル）－Ｐｈｅ（６ｇ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｋを得た（ＨＰＬＣ、９８．７％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．５５ （ｍ， １Ｈ）， ８．４２ （ｍ， １Ｈ）， ８．２１ （ｍ， ３Ｈ）， ８．１４ （ｍ， １Ｈ）， ７．８３ （ｍ， ３Ｈ）， ７．５８ （ｍ， １Ｈ）， ７．２５ （ｍ， ６Ｈ）， ７．１５ （ｍ， ５Ｈ）， ４．５６ （ｍ， １Ｈ）， ４．２０ （ｍ， １Ｈ）， ４．１６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．００ （ｍ， ３Ｈ）， ２．７８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２４ （ｓ， ３Ｈ）， １．６５ （ｍ， １Ｈ）， １．５５ （ｍ， ３Ｈ）， １．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ０．８５ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６１０．４５．

【0171】

実施例１２：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェニル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（４－ｔｅｒｔ－ブチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｌ）の合成

【化45】

化合物１５ｌを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（４－ｔｅｒｔ－ブチル）－Ｐｈｅ（６ｈ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｌを得た（ＨＰＬＣ、９８．９％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）， δ＝７．２５ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ４．４５ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｍ， １Ｈ）， ３．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ （ｍ， １Ｈ）， ２．７０ （ｍ， ５Ｈ）， １．６０ （ｍ， ４Ｈ）， １．３５ （ｍ， ２Ｈ）， １．１６ （ｓ， ９Ｈ）， ０．９５ （ｍ， ２Ｈ）， ０．７０ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６５２．６８．

【0172】

実施例１３：（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－Ｎ－（（Ｓ）－１，６－ジアミノ－１－オキソヘキサン－２－イル）デカンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－ｎ－ヘプチル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｍ）の合成

【化46】

化合物１５ｍを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（Ｎ６－Ｂｏｃ）－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－ｎ－ヘプチル）－Ｐｈｅ（６ｉ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｍを得た（ＨＰＬＣ、９９．２％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．６６ （ｍ， １Ｈ）， ８．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．９５ （ｍ， １Ｈ）， ７．８５ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２８ （ｍ， １Ｈ）， ７．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．０５ （ｍ， １Ｈ）， ４．３８ （ｍ， １Ｈ）， ４．２５ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．００ （ｍ， ４Ｈ）， ２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５ （ｍ， ２Ｈ）， １．５０ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５ （ｍ， １８Ｈ）， ０．８５ （ｍ， ３Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６１８．６７．

【0173】

実施例１４：（Ｒ）－Ｎ－（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－アミノ－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｔｒｐ－ＮＨ_２、１５ｎ）の合成

【化47】

化合物１５ｎを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（３ｂ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｎを得た（ＨＰＬＣ、９８．７％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝８．６６ （ｍ， １Ｈ）， ７．７０ （ｍ， １Ｈ）， ７．２２ （ｍ， １４Ｈ）， ４．７８ （ｍ， １Ｈ）， ４．５６ （ｍ， １Ｈ）， ４．１５ （ｍ， １Ｈ）， ４．０８ （ｍ， １Ｈ）， ３．７３ （ｍ， １Ｈ）， ３．２０ （ｍ， ５Ｈ）， ２．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６０ （ｍ， １Ｈ）， １．４０ （ｍ， ２Ｈ）， １．０８ （ｍ， １Ｈ）， ０．８８ （ｍ， １Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６５４．６１．

【0174】

実施例１５：（Ｒ）－Ｎ－（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－アミノ－３－（１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｈｉｓ－ＮＨ_２、１５ｏ）の合成

【化48】

化合物１５ｏを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（３ｃ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｏを得た（ＨＰＬＣ、９８．６％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝８．８８ （ｓ， １Ｈ）， ７．５０ （ｓ， １Ｈ）， ７．３０ （ｍ， １０Ｈ）， ４．７６ （ｍ， １Ｈ）， ４．５９ （ｍ， １Ｈ）， ４．２２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１６ （ｍ， １Ｈ）， ３．３５ （ｍ， １Ｈ）， ３．２０ （ｍ， ４Ｈ）， ３．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ （ｍ， １Ｈ）， １．４０ （ｍ， ２Ｈ）， １．０６ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６０５．４７．

【0175】

実施例１６：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（２，３－ジメチルフェニル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２，３－ジメチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｐ）の合成

【化49】

化合物１５ｐを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（２，３－ジメチル）－Ｐｈｅ（６ｊ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｐを得た（ＨＰＬＣ、９９．１％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝７．３２ （ｍ， ５Ｈ）， ７．０２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．４３ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９６ （ｍ， ３Ｈ）， ２．９０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２８ （ｓ， ３Ｈ）， １．６５－１．９０ （ｍ， ４Ｈ）， １．５０ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５ （ｍ， ２Ｈ）， １．１６ （ｍ， １Ｈ）， ０．９６ （ｍ， １Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６２４．３１．

【0176】

実施例１７：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（２，４－ジメチルフェニル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２，４－ジメチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｑ）の合成

【化50】

化合物１５ｑを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（２，４－ジメチル）－Ｐｈｅ（６ｋ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｑを得た（ＨＰＬＣ、９９．４％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝７．３２ （ｍ， ５Ｈ）， ７．０６ （ｍ， １Ｈ）， ６．９８ （ｓ， １Ｈ）， ６．９２ （ｍ， １Ｈ）， ４．６１ （ｍ， １Ｈ）， ４．４１ （ｍ， １Ｈ）， ４．１３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３２ （ｍ， １Ｈ）， ３．１４ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｍ， ３Ｈ）， ２．８８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．３４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２７ （ｓ， ３Ｈ）， １．６０－１．９０ （ｍ， ４Ｈ）， １．５５ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５ （ｍ， ２Ｈ）， １．１０ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６２４．４５．

【0177】

実施例１８：（Ｓ）－Ｎ－（（Ｓ）－１－アミノ－３－（１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－５－メチルヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－ホモＬｅｕ－Ｈｉｓ－ＮＨ_２、１５ｒ）の合成

【化51】

化合物１５ｒを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（３ｃ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－ｈｏｍｏＬｅｕ（６ｌ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｒを得た（ＨＰＬＣ、９８．６％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝８．８６ （ｓ， １Ｈ）， ７．３３ （ｍ， ６Ｈ）， ４．６５ （ｍ， １Ｈ）， ４．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．３０ （ｍ， １Ｈ）， ３．１５ （ｍ， ５Ｈ）， １．８０ （ｍ， １Ｈ）， １．７０ （ｍ， １Ｈ）， １．６０ （ｍ， ３Ｈ）， １．３５ （ｍ， ２Ｈ）， １．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ０．９０ （ｄ， Ｊ＝６．８ Ｈｚ， ６Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５８５．４５．

【0178】

実施例１９：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－メシチルプロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２，４，６－トリメチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｓ）の合成

【化52】

化合物１５ｓを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（２，４，６－トリメチル）－Ｐｈｅ（６ｍ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｓを得た（ＨＰＬＣ、９８．６％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝７．３２ （ｍ， ５Ｈ）， ６．８２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６６ （ｍ， １Ｈ）， ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２８ （ｍ， １Ｈ）， ３．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．００ （ｍ， ５Ｈ）， ２．２４ （ｓ， ６Ｈ）， ２．２２ （ｓ， ３Ｈ）， １．８８ （ｍ， １Ｈ）， １．７２ （ｍ， ２Ｈ）， １．５０ （ｍ， ５Ｈ）， １．１２ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６３８．６１．

【0179】

実施例２０：（Ｓ）－Ｎ－（（Ｓ）－１－アミノ－３－（１Ｈ－イミダゾール－４－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－６－メチルヘプタンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２，４，６－トリメチル）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｔ）の合成

【化53】

化合物１５ｔを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（３ｃ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－（β－（３－メチルブタン－１－イル））－Ａｌａ（６ｎ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ（１２ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｔを得た（ＨＰＬＣ、９９．５％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝８．８５ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３３ （ｍ， ６Ｈ）， ４．７３ （ｍ， １Ｈ）， ４．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ３．２８ （ｍ， １Ｈ）， ３．１２ （ｍ， ５Ｈ）， １．７５ （ｍ， ２Ｈ）， １．６５ （ｍ， ４Ｈ）， １．３５ （ｍ， ３Ｈ）， １．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ０．８９ （ｍ， ６Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：５９９．９０．

【0180】

実施例２１：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－シクロヘキシルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－シクロヘキシルプロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｃｈａ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｃｈａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｕ）の合成

【化54】

化合物１５ｕを、第１アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（３ａ）、第２アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｃｈａ（６ａ）、第３アミノ酸、Ｄ－Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（９ａ）、及び第４アミノ酸、Ｌ－Ｆｍｏｃ－Ｃｈａ（６ａ）を使用することによってスキーム１に従って作製して、所望の生成物１５ｕを得た（ＨＰＬＣ、９８．１％）：^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）， δ＝４．３８ （ｍ， ３Ｈ）， ４．０４ （ｍ， １Ｈ）， ３．２７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９６ （ｍ， ２Ｈ）， １．１０－１．９０ （ｍ， ３２Ｈ）， １．００ （ｍ， ４Ｈ）． ＭＳ （Ｍ＋１）：６０８．６０．

【0181】

実施例２２：（２Ｓ）－２－（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）プロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－アダマンタ－１－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｖ）の合成

【化55】

【化56】

ステップａ：２－（アダマンタン－１－イル）エタン－１－オール（１７）の合成
撹拌器、温度計を備えた５Ｌ容の三ツ口フラスコに、１－アダマンチル酢酸（１６、３００ｇ、１．５３ｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（３Ｌ）を投入し、これを撹拌器によって撹拌し、５℃に冷却した。ボラン／ＴＨＦ錯体（１Ｍ ＴＨＦ溶液、２．６Ｌ）を滴下漏斗に入れ、上記溶液に滴加した。滴加が完了した後、混合物を、１０℃で維持しながら一晩撹拌した。反応混合物を３Ｌの氷水にゆっくりと注ぎ入れ、混合物を３０分間撹拌した。その後、これを酢酸エチル（２Ｌ）で３回抽出し、酢酸エチル層を飽和水性ＮａＨＣＯ_３溶液（２Ｌ）及び塩水（２Ｌ）で洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を真空中で蒸発させて粗生成物を得、これを２Ｌの水／メタノール（１０／９０、ｖ／ｖ）に再溶解させ、次いで濃縮して、化合物１７（２７０ｇ、９７％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ ４．１９－４．１７ （ｔ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４７－３．４２ （ｍ， ２Ｈ）， １．９１－１．８８ （ｍ， ３Ｈ）， １．６８－１．６１ （ｍ， ６Ｈ）， １．４８－１．４７ （ｍ， ６Ｈ）， １．２６－１．２２ （ｍ， ２Ｈ） ｐｐｍ．

【0182】

１）ステップｂ：２－（アダマンタン－１－イル）アセトアルデヒド（１８）の合成
オーブン乾燥した三ツ口フラスコを取り、ＤＣＭ（２Ｌ）及びＤＭＳＯ（３１６ｇ、４．０４ｍｏｌ）で充填した。－７８℃に冷却後、塩化オキサリル（２７０ｇ、２．１０ｍｏｌ）を滴加し、添加後、混合物を－７８℃で１５分間撹拌した。続いて、１－アダマンチルエタノール（１７、２７０ｇ、１．５０ｍｏｌ）のＤＣＭ（２Ｌ）中の溶液を反応混合物に滴加した。－７８℃で１時間撹拌した後、Ｅｔ_３Ｎ（８１８ｇ、８．０９ｍｏｌ）を滴加し、３０分間さらに撹拌した後、反応混合物を室温まで加温した。冷ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２Ｌ）及び冷水（２Ｌ）を添加し、反応混合物を１５分間撹拌した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過及び濃縮して、所望の生成物１８（２６５ｇ、粗製）を薄黄色油として得た。生成物を、さらに精製することなく次のステップに直ちに使用した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ ９．７９－９．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．１１－２．１０ （ｄ， Ｊ＝４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９５－１．９２ （ｍ， ３Ｈ）， １．７０－１．５９ （ｍ， １２Ｈ） ｐｐｍ．

【0183】

２）ステップｃ：（Ｓ）－Ｎ－（（Ｅ）－２－（アダマンタン－１－イル）エチリデン）－２－メチルプロパン－２－スルフィンアミド（２０）の合成
チタンテトラエトキシド（７００ｇ、３．０６ｍｏｌ）を、１－アダマンチルアセトアルデヒド（１８、２６５ｇ、１．４９ｍｏｌ）及び（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブタンスルフィンアミド（１９、２２３ｇ、１．８４ｍｏｌ）のＴＨＦ（４Ｌ）中の撹拌溶液に窒素雰囲気下室温で添加した。混合物を１５℃で１２時間撹拌した。ＴＬＣ及びＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。次いで、酢酸エチル（４Ｌ）及び水（４Ｌ）を添加した。反応混合物を、セライトを通して濾過し、水層を酢酸エチル（２Ｌ）で抽出した。有機層を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィを通して精製して（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１）、生成物２０（３５０ｇ、８３％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ ８．０９－８．０５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．２３－２．２１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９４－１．８８ （ｍ， ３Ｈ）， １．６６－１．５４ （ｍ， １２Ｈ）， １．１４ （ｓ， ９Ｈ） ｐｐｍ．

【0184】

３）ステップｄ：（Ｓ）－Ｎ－（（Ｓ）－２－（アダマンタン－１－イル）－１－シアノエチル）－２－メチルプロパン－２－スルフィンアミド（２１）の合成
化合物２０（３５０ｇ、１．２４ｍｏｌ）及びＣｓＦ（２４６ｇ、１．６２ｍｏｌ）のＴＨＦ（４Ｌ）中の混合物に、ＴＭＳＣＮ（１４８ｇ、１．４９ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を２５℃で１２時間撹拌した。ＴＬＣ及びＨＰＬＣは、反応が完了したことを示した。－５℃に冷却し、飽和水性ＮａＨＣＯ_３溶液（２Ｌ）の添加によってクエンチした。水層を酢酸エチル（２Ｌ）で抽出した。有機相を水及び塩水で洗浄した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をＤＣＭ（２００ｍＬ）に溶解し、ＰＥ（２Ｌ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。粉砕した沈殿物を濾過した。フィルタケーキをＰＥ（５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥して、所望の生成物６（１５０ｇ）を白色固体として得た。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２／１）、黄色油（８０ｇ）を得、これをＤＣＭ（８０ｍＬ）に溶解し、次いで、ＰＥ（８００ｍＬ）を添加した。混合物を室温で１時間撹拌した。粉砕した沈殿物を濾過した。フィルタケーキをＰＥ（３００ｍＬ）で洗浄し、乾燥して、所望の生成物２１（６２ｇ）を白色固体として得た。合計２１２ｇ、収率：５５％、％ｅｅ＞９９％．［ａ］^２１ _Ｄ＝３４．６１（ｃ＝１、ＣＨＣｌ_３）． ^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ ４．２５－４．１９ （ｍ， １Ｈ）， ３．６１－３．５９ （ｍ， １Ｈ）， ２．０６－１．９８ （ｍ， ３Ｈ）， １．７５－１．６１ （ｍ， １４Ｈ）， １．２７ （ｓ， ９Ｈ） ｐｐｍ．

【0185】

４）ステップｅ：（Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－アミノプロパン酸（２２）の合成
化合物２１（５０ｇ、０．１６３ｍｏｌ）を６Ｎ ＨＣｌ（５Ｌ）に溶解し、加熱還流し、一晩撹拌した（３つのバッチを並行して稼働させた、合計１５０ｇの化合物２１）。反応混合物を氷上で冷却し、結果として、生成物の沈殿を生じさせた。沈殿物を濾過によって収集し、氷冷６Ｎ ＨＣｌで洗浄し、所望の生成物２２（１０８ｇ、収率：８５％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）： δ ４．０２－３．９９ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．０５－１．９８ （ｍ， ３Ｈ）， １．９０－１．８５ （ｍ， １Ｈ）， １．８１－１．５９ （ｍ， １２Ｈ）， １．５３－１．４７ （ｍ， １Ｈ） ｐｐｍ．

【0186】

５）ステップｆ：（Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸（２３）の合成
０℃において、アダマンチル－アラニン（２２、１０８ｇ、０．４１５ｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（５００ｍＬ）中の溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（１１５ｇ、０．８３１ｍｏｌ）を添加した。１０分後、ジオキサン（１Ｌ）中のＢｏｃ_２Ｏ（１８１ｇ、０．８３１ｍｏｌ）を滴加した。５時間撹拌した後、ＬＣ－ＭＳ分析は、出発物質の完全な消費を示した。反応混合物をＨ_２Ｏ（２Ｌ）によって希釈し、０．５Ｎ ＨＣｌを使用してｐＨ＝４まで酸性化した。沈殿物を濾過によって収集して生成物を得た（８０ｇ、ＨＰＬＣ純度＞９８％、ｅｅ＞９８％）。濾液をＥｔＯＡｃ（２×１Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を塩水（１Ｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮して粗製残渣を得（４５ｇ）、これをクロロホルム（１２５ｍＬ）に溶解し、ＰＥ（１．２５Ｌ）を添加した。生成した沈殿物を濾過によって収集し、ＰＥで洗浄し、乾燥して、２３（２２ｇ、ＨＰＬＣ純度＞９８％、ｅｅ＞９８％）を白色固体として得た。合計１０２ｇ、収率：７６％。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ ５．３７－５．３５ （ｍ， ０．１７ Ｈ）， ４．７７－４．５５ （ｍ， ０．７４ Ｈ）， ４．３６－４．３３ （ｍ， ０．７８ Ｈ）， ４．１８－４．１６ （ｍ， ０．１９ Ｈ）， １．９１－１．８８ （ｍ， ３Ｈ）， １．７１－１．５５ （ｍ， １３Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）， １．３４－１．２８ （ｍ， １Ｈ） ｐｐｍ．

【0187】

６）ステップｇ：（Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－アミノプロパン酸（２５）の合成
２３（０．２６０ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）及び２４（０．２３１ｇ、０．７３１ｍｍｏｌ）の５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中の混合物に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（０．２１０ｇ、１．０９６ｍｍｏｌ）を添加し、その後、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏを添加した（０．１２３ｇ、０．８０４ｍｍｏｌ）。１０～１５分後、ＮＭＭ（０．１３３ｇ、１．３１６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣を５％のクエン酸水溶液によって洗浄した。得られた白色固体をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製して、２５（０．３２０ｇ）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３４ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．２９ （ｔｄ， Ｊ ＝ ８．２、４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．７、５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．２、３．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９４ （ｓ， ３Ｈ）， １．８６ － １．３３ （ｍ， ２９Ｈ）．

【0188】

７）ステップｈ：（（５Ｓ）－５－（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）－６－アミノ－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（２６）の合成
２５（０．３００ｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。次いで、氷／水浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエンで濃縮した（２ｘ）。フラッシュ逆相クロマトグラフィによる精製により、０．２００ｇの２６を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３４ （ｄ， Ｊ＝４．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．３２－７．２７ （ｍ， １Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０、６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．６、５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９７ （ｓ， ３Ｈ）， １．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．４、７．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７２ （ｑ， Ｊ ＝ １２．０ Ｈｚ， ８Ｈ）， １．５９ （ｄ， Ｊ＝２．７ Ｈｚ， ６Ｈ）， １．５３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．４、５．４ Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0189】

８）ステップｉ：（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－Ｌ－フェニルアラニル－Ｄ－アルギニン（２９）の合成
Ｂｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＮｐ（２７、２０．５ｇ、５２．９４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３００ｍＬ）の中の溶液に、Ｄ－Ａｒｇ－ＯＨ^＊ＨＣｌ（２８、９．３０ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を一晩撹拌した。次いで、反応混合物を氷冷水中に注ぎ入れ、沈殿物（ニトロフェノール）を濾去した。溶媒を減圧下で除去した。黄色固体を、色が消失するまでＤＣＭによって洗浄した。乾燥後、１６．０ｇ（収率－７９％）の２９を得た。ＨＰＬＣ純度－９８％。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３１ － ７．１９ （ｍ， ５Ｈ）， ４．３０ － ４．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２０－３．１０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．８０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０、５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８７ － １．８１ （ｍ， １Ｈ）， １．７３ － １．６４ （ｍ， １Ｈ）， １．５３ － １．４５ （ｍ， ２Ｈ）， １．３５ （ｓ， ９Ｈ）．

【0190】

９）ステップｊ：（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１８Ｓ）－１２－（アダマンタン－１－イルメチル）－９－カルバモイル－１５－（３－グアニジノプロピル）－３，１１，１４，１７－テトラオキソ－１，１９－ジフェニル－２－オキサ－４，１０，１３，１６－テトラアザノナデカン－１８－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３０）の合成
２６（０．２００ｇ、０．３８４ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ－Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－ＯＨ（２９、０．２１１ｇ、０．４６１ｍｍｏｌ）の５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中の混合物に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（０．１３２ｇ、０．６９１ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（０．０７１ｇ、０．４６１ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。１０～１５分後、ＮＭＭ（０．０７０ｇ、０．６９１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。その後、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製して、３０（０．３２０ｇ）を白色粉末として得た。

【0191】

１０）ステップｋ：（（２Ｓ）－１－（（（２Ｒ）－１－（（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－１－（（（Ｓ）－１，６－ジアミノ－１－オキソヘキサン－２－イル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－５－グアニジノ－１－オキソペンタン－２－イル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３１）の合成
３０（０．２４５ｇ、０．２６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。次いで、氷／水浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエンで濃縮した（２ｘ）。フラッシュ逆相クロマトグラフィ及び分取ＨＰＬＣによる精製により、０．１２５ｇの３１を白色固体として得た。

【0192】

１１）ステップｌ：（２Ｓ）－２－（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）プロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（１５ｖ）の合成
３１（０．１００ｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）及びＰｄ／Ｃ１０％ｗ／ｗ（０．０１６ｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を添加した。フラスコをＨ_２でフラッシングし、混合物を室温で２時間撹拌した。その後、混合物を濾過し、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣによって精製した。１５ｖ（４８ｍｇ）を白色粉末として得た。（ＨＰＬＣ純度は２１０ｎｍで９８．７％である）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３４－７．２０ （ｍ， ５Ｈ）， ４．３５ （ｄ， Ｊ＝１４．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．３、６．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１０ （ｔｄ， Ｊ ＝ ７．１、２．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０６－２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９３ （ｔｄ， Ｊ ＝ ８．０、２．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９４ （ｓ， ３Ｈ）， １．９１－１．７９ （ｍ， ２Ｈ）， １．７８－１．５６ （ｍ， １３Ｈ）， １．５５－１．４７ （ｄ， Ｊ＝９．５ Ｈｚ， ５Ｈ）， １．４５－１．２９ （ｍ， ４Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ６５４．５ ［Ｍ＋１］．

【0193】

実施例２３：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（２，３，４，５，６－ペンタフルオロ）－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｗ）の合成

【化57】

【化58】

１）ステップａ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（３３）の合成
Ｐｈｅ（５Ｆ）－ＯＨ（３２、４００ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）及びＬｙｓ（Ｃｂｚ）－ＮＨ_２（２４、４４５ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の混合物に、ＨＯＢＴ^＊Ｈ_２Ｏ（２０８ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ^＊ＨＣｌ（２６０ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（４７２μｌ、３．３９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＤＭＦを除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィによって精製して（ＤＣＭ中０～５％のＭｅＯＨ）、３３を白色固体として得た（４１０ｍｇ、５９％）。

【0194】

２）ステップｂ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（３４）の合成
３３（４１０ｍｇ、０．６６６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の冷却（０℃）溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。５分後、氷浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエンによって２回濃縮した。３４（４６０ｍｇ）を白色固体として得、これをさらに精製することなく使用した。

【0195】

３）ステップｃ：（（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ）－１２－カルバモイル－６－（３－グアニジノプロピル）－２，２－ジメチル－４，７，１０－トリオキソ－９－（（パーフルオロフェニル）メチル）－３－オキサ－５，８，１１－トリアザヘキサデカン－１６－イル）カルバミン酸ベンジル（３６）の合成
３４（２００ｍｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ－Ｄ－Ａｒｇ－ＯＨ（３５、８３ｍｇ、０．３２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の混合物に、ＨＯＢＴ^＊Ｈ_２Ｏ（５８．４ｍｇ、０．３８２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ^＊ＨＣｌ（１２１ｍｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１８７μｌ、１．５９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＤＭＦを除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィによって精製して（ＤＣＭ中０～１０％のＭｅＯＨ）、３６を白色固体として得た（１８０ｍｇ、７２％）。

【0196】

４）ステップｄ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－アミノ－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（３７）の合成
３６（１７５ｍｇ、０．２２２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却（０℃）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）を添加した。５分後、氷浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、減圧下で残渣をトルエンによって２回濃縮した。３７（２１０ｍｇ）を白色固体として得、これをさらに精製することなく使用した。

【0197】

５）ステップｅ：（（６Ｓ，９Ｒ，１２Ｓ，１５Ｓ）－６－ベンジル－１５－カルバモイル－９－（３－グアニジノプロピル）－２，２－ジメチル－４，７，１０，１３－テトラオキソ－１２－（（パーフルオロフェニル）メチル）－３－オキサ－５，８，１１，１４－テトラアザノナデカン－１９－イル）カルバミン酸ベンジル（３９）の合成
３７（２１０ｍｇ、０．２２９ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ（３８、６２ｍｇ、０．２３０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の混合物に、ＨＯＢＴ^＊Ｈ_２Ｏ（４２．０ｍｇ、０．３８２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ^＊ＨＣｌ（８８ｍｇ、０．４５８ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１６０μｌ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＤＭＦを除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィによって精製して（ＤＣＭ中０～１５％のＭｅＯＨ）、３９を白色固体として得た（２２０ｍｇ）。

【0198】

６）ステップｆ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（４０）の合成
３９（２１５ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却（０℃）溶液に、ＴＦＡ（１．０ｍＬ）を添加した。５分後、氷浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエンによって２回濃縮した。４０（２２０ｍｇ）を黄色がかった油として得、これをさらに精製することなく使用した。

【0199】

７）ステップｇ：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（パーフルオロフェニル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（１５ｗ）の合成
４０（２１０ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（７ｍＬ）中の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ、１５ｍｇ）を水素によって室温で３時間バブリングした。次いで、反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発によって除去した。１５０ｍｇの白色固体を得た。精製をＨＰＬＣによって実施した。１５ｗを白色固体として単離した（４９ｍｇ、不純物＜５％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３８－７．２４ （ｍ， ５Ｈ）， ４．５５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．９、６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６、５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３ － ４．０５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．０、６．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１５ － ３．００ （ｍ， ５Ｈ）， ２．９５ － ２．８９ （ｍ， ２Ｈ）， １．８９ － １．３４ （ｍ， ８Ｈ）， １．２８ － １．１２ （ｍ， ２Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ６８６．６ ［Ｍ＋１］．

【0200】

実施例２４：（２Ｓ）－２－（（２Ｓ）－２－（（２Ｒ）－２－（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－アミノプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（（β－アダマンタン－１－イル）－Ａｌａ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｘ）の合成

【化59】

【化60】

１）ステップａ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－フェニルプロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（４１）の合成
３８（０．８４４ｇ、３．４８３ｍｍｏｌ）及び２４（１．０ｇ、３．１６６ｍｍｏｌ）の２５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中の混合物に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（０．９４４ｇ、４．７４９ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（０．５３３ｇ、３．４８３ｍｍｏｌ）を添加した。１０～１５分後、ＮＭＭ（０．５７６ｇ、５．６９９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発性物質を減圧下で除去し、残渣を５％クエン酸水溶液によって洗浄した。得られた白色固体をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製して、４１（１．１００ｇ）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３３ － ７．１９ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０、５．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０ （ｑ， Ｊ ＝ ５．８、４．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．８５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．７、９．１ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８７－１．７８ （ｍ， １Ｈ）， １．６９－１．６０ （ｍ， １Ｈ）， １．５５－１．４６ （ｍ， ２Ｈ）， １．３７ （ｓ， １１Ｈ）．

【0201】

２）ステップｂ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（４２）の合成
４１（０．３２５ｇ、０．６１７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。溶液を０～５℃に冷却し、Ｅｔ_２Ｏ（１．５４ｍＬ）中の２Ｍ ＨＣｌを添加した。次いで、冷却を除去し、混合物を室温で一晩撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をＥｔ_２Ｏ（３ｘ）から濃縮した。沈殿物を周囲圧力下、周囲温度で乾燥した。４２を僅かに灰色の個体として得た（０．２５７ｇ）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３９ － ７．２７ （ｍ， ９Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５、５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５、５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．４、５．６ Ｈｚ １Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．３、８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８７－１．７８ （ｍ， １Ｈ）， １．７４－１．６５ （ｍ， １Ｈ）， １．５２ （ｈ， Ｊ ＝ ７．７、７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４６－１．３４ （ｍ， ２Ｈ）．

【0202】

３）ステップｃ：（（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ）－９－ベンジル－１２－カルバモイル－６－（３－グアニジノプロピル）－２，２－ジメチル－４，７，１０－トリオキソ－３－オキサ－５，８，１１－トリアザヘキサデカン－１６－イル）カルバミン酸ベンジル（４３）の合成
４２（０．２２０ｇ、０．４７５ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ－Ｄ－Ａｒｇ（３５、０．１６３ｇ、０．５２３ｍｍｏｌ）の１０ｍＬの乾燥ＤＣＭ中の混合物に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（０．１３７ｇ、０．７１３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（０．０８０ｇ、０．５２３ｍｍｏｌ）を添加した。１０～１５分後、ＮＭＭ（０．１０６ｇ、１．０４５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製して、４３（０．１７０ｇ）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３４ － ７．２０ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６３ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．０、４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．８、４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８、４．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０３ － ２．９９ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．９、１０．３ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９４－１．８５ （ｍ， １Ｈ）， １．８１－１．７０ （ｍ， １Ｈ）， １．６０－１．４７ （ｍ， ７Ｈ）， １．４１ （ｓ， ９Ｈ） １．２３－１．１４ （ｍ， １Ｈ）．

【0203】

４）ステップｄ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－アミノ－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（４４）の合成
４３（０．１７０ｇ、０．２３６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。次いで、氷／水浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエン（２ｘ）から濃縮した。逆相フラッシュクロマトグラフィによる精製により、０．１４０ｇの４４を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３４－７．２１ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １０．８、４．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．３、５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３０－３．２５ （ｍ， １Ｈ）， ３．１６－３．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １３．９、１１．０ Ｈｚ， １Ｈ）， １．８８－１．７９ （ｍ， １Ｈ）， １．７４－１．５８ （ｍ， ３Ｈ）， １．５７ － １．３６ （ｍ， ４Ｈ）， １．２５－１．１４ （ｍ， ２Ｈ）．

【0204】

５）ステップｅ：（（６Ｓ，９Ｒ，１２Ｓ，１５Ｓ）－６－（アダマンタン－１－イルメチル）－１２－ベンジル－１５－カルバモイル－９－（３－グアニジノプロピル）－２，２－ジメチル－４，７，１０，１３－テトラオキソ－３－オキサ－５，８，１１，１４－テトラアザノナデカン－１９－イル）カルバミン酸ベンジル（４５）の合成
４４（０．１４０ｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）及び２３（０．０９０ｇ、０．２７７ｍｍｏｌ）の５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中の混合物に、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（０．０７３ｇ、０．３８３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（０．０３９ｇ、０．２５６ｍｍｏｌ）を添加した。１０～１５分後、ＮＭＭ（０．０３９ｇ、０．３８３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、揮発性物質を減圧下で除去し、残渣４５を逆相フラッシュカラムで全体にフラッシングして、さらに精製することなく次のステップにおいて使用した。

【0205】

６）ステップｆ：（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－１－（（（Ｒ）－１－（（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１，６－ジアミノ－１－オキソヘキサン－２－イル）アミノ）－１－オキソ－３－フェニルプロパン－２－イル）アミノ）－５－グアニジノ－１－オキソペンタン－２－イル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４６）の合成
４５（０．１０５ｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加した。次いで、氷／水浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をトルエン（２ｘ）から濃縮した。逆相フラッシュクロマトグラフィ及び分取ＨＰＬＣによる精製により、０．０６５ｇの４６を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３１ － ７．１８ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０４ （ｓ， ２Ｈ）， ４．６５ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．２、４．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．９、５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６－３．８９ （ｍ， １Ｈ）， ３．３９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．１、３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．１８－３．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０１－２．９３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７８ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．０、１１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９２ （ｓ， ３Ｈ）， １．８６－１．７８ （ｍ， ３Ｈ）， １．７３－１．６２ （ｍ， ６Ｈ）， １．５６－１．３４ （ｍ， １２Ｈ）， １．３４－１．２０ （ｍ， ２Ｈ）， １．０３－０．９１ （ｍ， １Ｈ）．

【0206】

７）ステップｇ：（２Ｓ）－２－（（２Ｓ）－２－（（２Ｒ）－２－（（２Ｓ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－アミノプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（１５ｘ）の合成
４６（０．０６４ｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）及びＰｄ／Ｃ １０％ｗ／ｗ（０．０１０ｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）を含有するフラスコに、ＭｅＯＨ（５ｍＬ）を添加した。フラスコをＨ_２でフラッシングし、混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣにおいて精製して、５２ｍｇの１５ｘを白色固体として得た（ＨＰＬＣ純度は２１０ｎｍで９５．４％である）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３１－７．２０ （ｍ， ５Ｈ）， ４．６６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．３、４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．９、５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．６、４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３９ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．１、４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０５－２．９５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．１、１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９５ （ｓ， ３Ｈ）， １．９０－１．８０ （ｍ， ３Ｈ）， １．７６－１．６４ （ｍ， ８Ｈ）， １．５９－１．４３ （ｍ， １０Ｈ）， １．３７－１．２９ （ｍ， ２Ｈ）， １．１３－１．０２ （ｍ， １Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ６５４．８ ［Ｍ＋１］．

【0207】

実施例２５：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｙ）の合成

【化61】

【化62】

１）ステップａ：ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－カルボン酸（４９）の合成
フラスコに、４７（３５ｇ、１６５ｍｍｏｌ）、４８（５０．０ｇ、１９８ｍｍｏｌ）、及びＤＣＭ（１．５Ｌ）を投入した。フラスコをホイルで隠し、周囲の光を低減した。得られた懸濁液を０℃に冷却し、トリブチルホスフィン（５１ｍＬ、２０６ｍｍｏｌ）液滴によって処理した。氷浴を除去し、撹拌を２時間継続した。反応を０℃に冷却し、２－メチルプロパン－２－チオール（１６５ｍＬ、１．４６ｍｏｌ）で処理した。反応を３００Ｗタングステンランプによって１．２５時間照射した。３５０ｇの次亜塩素酸カルシウムの水（２．０Ｌ）中の懸濁液の添加によって反応をクエンチした。混合物をエーテルで希釈し、０℃で５分間、続いて室温で２０分間撹拌した。セライトを添加して層の分離を補助し、得られた混合物を濾過した。溶出液を分離漏斗中に注ぎ入れ、層を分離した。有機物を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮した。得られた残渣を、７５ｇの水酸化カリウムの１．０Ｌメタノール／水（１：１）中の溶液で処理した。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。反応を濃縮してメタノールの大部分を除去し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×２）で抽出して、副生成物を除去した。水性のものを濃ＨＣｌの添加によって酸性にしたところ、白色沈殿物が形成された。沈殿物を濾過によって収集して４９を得た（２１ｇ、８３％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝１．６０ （ｍ， １３Ｈ）．

【0208】

２）ステップｂ：ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イルメタノール（５０）の合成
０℃において、４９（２１ｇ、１３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）の溶液に、ＬＡＨ（７．７ｇ、１９８ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。添加が完了したら、反応混合物を３時間加熱還流し、室温に冷却し、０℃に再冷却し、５％のＮａＯＨ（５ｍＬ）及び１０ｍＬの水によってクエンチし、Ｎａ２ＳＯ４（５０ｇ）を添加し、セライトによって濾過し、濾液を真空中で濃縮して粗生成物を得、カラムクロマトグラフィによって精製して（ＳｉＯ２、１００－２００、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３０：１によって溶出）、所望の生成物を白色固体として得た（５０、１０．５ｇ、５４％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝４．２７ （ｂｒ， １Ｈ）， ２．９７ （ｍ， ２Ｈ）， １．４９ （ｍ， ７Ｈ）， １．１７ （ｍ， ６Ｈ）．

【0209】

３）ステップｃ：ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－カルボアルデヒド（５１）の合成
３５ｍＬの無水ジクロロメタン中の塩化オキサリル（１．８ｇ、１３ｍｍｏｌ）を－７０℃に冷却し；３０ｍＬのＤＣＭ中のＤＭＳＯ（２．３ｇ、３０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をこの温度で３０分間撹拌し、その後、２０ｍＬのＤＣＭ及び１ｍＬのＤＭＳＯ中の５０（１．８ｇ、１３ｍｍｏｌ）を滴加した。３時間の間に、混合物を－３０℃に加温した。Ｅｔ_３Ｎ（５．１ｇ、５２ｍｏｌ）を添加し；温度を１時間かけて０℃に上昇させた。反応を６０ｍＬの水によってクエンチした。有機層を分離し、水で洗浄し、活性炭で処理し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物（５１、１０．０ｇ、粗製）を無色油として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝９．３６ （ｓ， １Ｈ）， １．６１ （ｓ， １Ｈ）， １．５２ （ｍ， １２Ｈ）．

【0210】

４）ステップｄ：（Ｚ）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）アクリル酸メチル（５３）の合成
５１（１０ｇ、７２．５ｍｍｏｌ）及び５２（３２．３ｇ、１０８ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）中の溶液に、１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（１２．４ｇ、１０８ｍｍｏｌ）を添加し、添加が完了したら、反応混合物を室温で２４時間撹拌し、得られた混合物を５０ｍＬの水でクエンチし、ＤＣＭ５０ｍＬによって希釈し、有機層を分離し、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、（ＳｉＯ_２、１００～２００ｍ、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１０：１による溶出）によって精製して、５３（１２ｇ、５５％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝８．１６ （ｍ， １Ｈ）， ６．１９ （ｍ， １Ｈ）， ３．６１ （ｍ， ３Ｈ）， １．２０－１．６０ （ｍ， ２２Ｈ）．

【0211】

５）ステップｅ：３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸メチル（５４）の合成
５３（１２ｇ、３９ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＡｃ）_２（１．２ｇ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の溶液にＨ_２ガスにより６ａｔｍで３回パージし、次いで室温で一晩撹拌した。セライトにより濾過し、濾液を真空中で濃縮して所望の生成物を白色固体として得た（５４、９．７ｇ、８１％）。

【0212】

６）ステップｆ：２－アミノ－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパン酸メチル（５５）の合成
５４（９．７ｇ、３１．２ｍｍｏｌ）の４Ｎ ＨＣｌ／ジオキサン（１００ｍＬ）中の溶液を室温で２時間撹拌し、反応混合物を真空中で濃縮して、所望の生成物を白色固体として得た（５５、７．７ｇ、粗製）。

【0213】

７）ステップｇ：２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパン酸メチル（５６）の合成
０℃において、化合物５５（７．７ｇ、３１ｍｍｏｌ）の水（１００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中の溶液にＫ_２ＣＯ_３（８．５ｇ、６２ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、次いでＣｂｚＣｌ（４．９ｍＬ、３４．１ｍｍｏｌ）を、温度を０℃～５℃で制御しながら滴加し、添加が完了したら、反応混合物を０℃で１時間撹拌したところ、ＬＣＭＳが出発物質の残存を示さず、有機層を分離し、塩水によって洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、シリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して（ＳｉＯ２、１００～２００ｍ、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３：１による溶出）、所望の生成物を白色固体として得た（５６、６．５ｇ、６１％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）， δ＝７．３５ （ｍ， ５Ｈ）， ５．１５ （ｍ， ２Ｈ）， ４．９０ （ｍ， １Ｈ）， ４．４５ （ｍ， １Ｈ）， １．２０－１．７０ （ｍ， １５Ｈ）． ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）^＋：３４６．２．

【0214】

８）ステップｈ：（Ｓ）－２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパン酸（５７）の合成
化合物５６（６．５ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５ｍＬ）及びＴＨＦ（２５ｍＬ）中の溶液に２Ｎ ＮａＯＨ（２５ｍＬ）を添加し、次いで混合物を室温で２時間撹拌し、真空中で濃縮してＭｅＯＨ及びＴＨＦの大部分を除去し、０℃に冷却し、２Ｎ．ＨＣｌによってｐＨ＝３～４まで中和し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）によって抽出し、塩水によって洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して溶媒を除去し、残渣に５０ｍＬのＰＥ／Ｅｔ_２Ｏ（５：１）を撹拌しながら添加したところ、白色固体が形成され、これを濾過し、ＰＥ／Ｅｔ_２Ｏ（１０ｍＬ、５：１）によって洗浄し、真空中で乾燥して、所望の生成物を白色固体として得（５．８ｇ、９４％）、キラルＨＰＬＣ分離により、５７ａ及び５７ｂを得た。
５７ａ：^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝７．５５ （ｍ， １Ｈ）， ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）， ５．１５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．０４ （ｍ， １Ｈ）， １．２０－１．５０ （ｍ， １５Ｈ）．
５７ｂ：^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）， δ＝７．５２ （ｍ， １Ｈ）， ７．３５ （ｍ， ５Ｈ）， ５．０４ （ｓ， ２Ｈ）， ４．００ （ｍ， １Ｈ）， １．２０－１．５０ （ｍ， １５Ｈ）．

【0215】

９）ステップｉ：（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパン酸（５８）の合成
スキーム４に記載されているものと同じ手順で５８を得た。

【0216】

１０）ステップｊ：（Ｓ）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸（５９）の合成
５８（２００ｍｇ、０．８５６ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（５ｍＬ）中の懸濁液に、Ｎａ_２ＣＯ_３（１９０ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、次いで、３ｍＬのジオキサン中のＢｏｃ_２Ｏ（３７３ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、さらなる水及びジオキサン（反応混合物の合計体積２０ｍＬ）を添加し、ｐＨをＮａ_２ＣＯ_３の水溶液によってｐＨ＝９まで増加させた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１０％のＨＣｌによってｐＨ３まで酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。有機相を分離し、飽和ＮａＣｌ及び水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物５９を、トルエンを用いて蒸発させ、さらに精製することなく次のステップにおいて使用した。

【0217】

１１）ステップｋ：（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－アミノ－６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－１－オキソヘキサン－２－イル）アミノ）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６０）の合成
粗生成物（５９、２５４ｍｇ、０．８５６ｍｍｏｌ）、Ｎ_ε－Ｃｂｚ－Ｌ－リシン塩酸塩（２４、２７０ｍｇ、０．８５６ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（２６２ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ塩酸塩（３２８ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の混合物に、ＮＭＭ（０．４７ｍＬ、４．２８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した（溶出液Ｈ_２Ｏ（０．１％のＡｃＯＨ）／ＭｅＯＨ）。３００ｍｇ（６３％）の６０を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３５－７．２９ （ｍ， ５Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３３－４．３０ （ｍ， １Ｈ）， ４．０９－４．０５ （ｍ， １Ｈ）， ３．１２－３．０８ （ｍ， ２Ｈ）， １．８３－１．３１ （複数のピーク、２６Ｈ）．

【0218】

１２）ステップｌ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（６１）の合成
６０（１９８ｍｇ、０．３５４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８ｍＬ）中の溶液にＴＦＡ（３ｍＬ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を周囲温度で３０分間撹拌した。揮発性物質を蒸発させ、次いで粗製６１をトルエンによって蒸発させ、精製することなく次のステップにおいて使用した。

【0219】

１３）ステップｍ：（（６Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ）－６－ベンジル－１２－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イルメチル）－１５－カルバモイル－９－（３－グアニジノプロピル）－２，２－ジメチル－４，７，１０，１３－テトラオキソ－３－オキサ－５，８，１１，１４－テトラアザノナデカン－１９－イル）カルバミン酸ベンジル（６２）の合成
６１（２０３ｍｇ、０．３５４ｍｍｏｌ）、２９（１４９ｍｇ、０．３５４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（８１ｍｇ、０．５３１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ塩酸塩（１０２ｍｇ、０．５３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中の混合物に、ＮＭＭ（０．１２ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を室温で１日撹拌し、次いで、蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した（溶出液Ｈ_２Ｏ（０．１％のＡｃＯＨ）／ＭｅＯＨ）。１３０ｍｇの粗生成物６２を単離し、次のステップにおいて使用した。

【0220】

１４）ステップｎ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（６３）の合成
粗生成物（６２、１３０ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中の溶液に、ＴＦＡ（１．５ｍＬ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を周囲温度で３０分間撹拌した。揮発性物質を蒸発させ、次いで粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。５０ｍｇの６３を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３９－７．２７ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３３－４．３０ （ｍ， １Ｈ）， ４．３９－４．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１９－４．１２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２２－３．０７ （ｍ， ６Ｈ）， １．８４－１．２９ （複数のピーク、２５Ｈ）．

【0221】

１５）ステップｏ：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［２．２．２］オクタン－１－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（１５ｙ）の合成
６３（５０ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の溶液に触媒量の１０％のＰｄ／Ｃを添加した。反応混合物を排気し、水素（×８、バルーン）で充填し直し、次いで室温で一晩撹拌した。粗生成物を、４５μｍフィルタを通して濾過し、蒸発させ、分取ＨＰＬＣによって精製した。結果として、１５ｍｇの１５ｙを白色固体として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．７３ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７６ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４２－７．３０ （ｍ， ５Ｈ）， ４．４５－４．３３ （複数のピーク、２Ｈ）， ４．２４－４．１６ （複数のピーク、２Ｈ）， ３．１９－３．１３ （複数のピーク、４Ｈ）， ２．９９－２．９４ （ｍ， ２Ｈ）， １．９３－１．１９ （複数のピーク、２１Ｈ）．ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ６２８．７ ［Ｍ＋１］．

【0222】

実施例２６：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）ヘキサンアミド（（β－ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）－Ａｌａ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ｚ）の合成

【化63】

【化64】

１）ステップａ：トリシクロ［１．１．１．０^１，３］ペンタン（６５）の合成
６４（２５８ｇ、８６３．２ｍｍｏｌ）のペンタン（２５０．０ｍＬ）中の溶液を－７８℃に冷却した。メチルリチウム（ジエチルエーテル中１．６Ｍ、２２７０．０ｍｏｌ）を、温度を－６０℃未満に維持しながら混合物にゆっくりと添加した。添加の完了の際、溶液を０℃に加温し、２時間撹拌させ、その間の時間に、白色沈殿物を生成させた。２時間後、生成物及び他の揮発性物質を氷水浴下０℃で、液体Ｎ_２によって－１９６℃に冷却した収容フラスコ内に蒸留した。ペンタン及びジエチルエーテルを含む粗生成物をさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。

【0223】

２）ステップｂ：（Ｓ）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（３－ヨードビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパン酸メチル（６７）の合成
６６（１０７．５ｇ、３２６．８ｍｍｏｌ）を最終ステップからの６５の溶液に溶解した。アルゴンによってフラッシングした。この溶液をＨｇランプ（５００Ｗ）付近に置き、室温で１０時間撹拌した。完了後、混合物をＮａＨＳＯ_３溶液で洗浄し、過酸化物について試験し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾去し、真空中３０℃で濃縮した。残渣をＰＥで洗浄し、濾過した。固体を収集し、残渣をクロマトグラフィカラムによって精製して、化合物６７をオフホワイト固体として得た（２ステップで８０ｇ、２０％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．２９ （ｂｒ， １ Ｈ）， ３．９５ （ｍ， １ Ｈ）， ３．６０ （ｓ， ３ Ｈ）， ２．１９ （ｍ， ６ Ｈ）， １．８７ （ｍ， ２ Ｈ）， １．３８ （ｓ， ９ Ｈ）．

【0224】

３）ステップｃ：（Ｓ）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）－２－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸メチル（６８）の合成
化合物６７（７０ｇ、１７７．０ｍｍｏｌ）を水（１５０ｍＬ）に懸濁し、ＴＴＭＳＳ（１５ｇ、３５９．０ｍｍｏｌ）を添加した。不均一な混合物を１０分間撹拌し、次いで、２－メルカプトエタノール（１．３９ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）、続いてＡＩＢＮ（７２５ｍｇ、４．３７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１０分間撹拌し、次いで８０℃に加熱した。また、反応混合物が加熱の間に無色透明溶液となった。反応混合物をＥＡ（１５０ｍＬ^＊３）で抽出し、合わせた有機層を塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィによって精製して（ＳｉＯ_２、２００～３００ｍ、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１００／１～１０／１で溶出）、所望の生成物６８を得た（３２ｇ、５８％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ４．９４ （ｂｒ， １Ｈ）， ４．３１ （ｍ， １Ｈ）， ３．７４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４６ （ｓ， １Ｈ）， １．９７ （ｍ， １Ｈ）， １．８０ （ｍ， １Ｈ）， １．７４ （ｓ， ６ Ｈ）， １．４６ （ｓ， ９Ｈ）．

【0225】

４）ステップｄ：（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパン酸メチル（６９）の合成
化合物６８（１７．０ｇ、６３．４ｍｍｏｌ）を４Ｎ ＨＣｌ－ジオキサン（１００ｍＬ）に溶解し、１時間撹拌し、次いで混合物を濃縮して乾燥させた。水（８０ｍＬ）及びジオキサン（８０ｍＬ）を添加し、続いて水性ＮａＨＣＯ_３（５．３ｇ、６０．１．ｍｍｏｌ）及びＦｍｏｃＣｌ（１９．６ｇ、７５．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。完了後、溶媒を減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して（ＳｉＯ_２、２００～３００ｍ、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１～１／１で溶出）、所望の生成物６９を得た（１５．０ｇ、６１％）。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．７８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．６１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ５．２１ （ｍ， １Ｈ）， ４．４０ （ｍ， ３Ｈ）， ４．２７ （ｍ， １Ｈ）， ３．７６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４７ （ｓ， １Ｈ）， ２．０４ （ｍ， １Ｈ）， １．８５ （ｍ， １Ｈ）， １．７３ （ｓ， ６Ｈ）．

【0226】

５）ステップｅ：（Ｓ）－２－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパン酸（７０）の合成
化合物６９（１５．０ｇ）を１０Ｎ 水性ＨＣｌ（１００ｍＬ）及びジオキサン（１００ｍＬ）に溶解し、次いで反応を５０℃に加温し、２４時間撹拌した。完了後、溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィによって精製して（ＳｉＯ_２、２００～３００ｍ、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１～ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝５０／１、０．１％ＡｃＯＨで溶出）粗生成物７０を得（１１．０ｇ）、ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ、ｖ／ｖ＝５０／１）で強くかき混ぜることによって更に精製して、純粋な生成物（７０、９．５ｇ、６６％）をオフホワイト固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６） δ ７．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．７２ （ｍ， １Ｈ）， ７．５４ （ｍ， １Ｈ）， ７．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３６ （ｍ， １Ｈ）， ４．２４ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４０ （ｓ， １Ｈ）， １．７８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６２ （ｍ， ６Ｈ）．

【0227】

６）ステップｆ：（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｓ，１８Ｓ）－１２－ベンジル－１９－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）－９－カルバモイル－１５－（３－グアニジノプロピル）－３，１１，１４，１７－テトラオキソ－１－フェニル－２－オキサ－４，１０，１３，１６－テトラアザノナデカン－１８－イル）カルバミン酸（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（７１）の合成
７０（２２６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、４４（３３０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（１３８ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ塩酸塩（２８８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中の混合物に、ＮＭＭ（２２２ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を室温で滴加した。反応混合物を一晩撹拌し、次いで溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製した（溶出液Ｈ_２Ｏ（０．２％のＡｃＯＨ）／１０％～８５％のメタノールからのＭｅＯＨ）。結果として、１９０ｍｇの７１を酢酸塩として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．７８ （ｄ， Ｊ＝７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６３ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３１ － ７．１７ （ｍ， ２Ｈ） ７．６５ － ７．６１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３９ － ７．３６ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３０ － ７．１８ （７Ｈ， ｍ）、４．５８ － ４．４８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３６ － ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．２８ － ４．２４ （ｍ， １Ｈ）， ４．２２ － ４．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．０５ － ４．０１ （ｍ， １Ｈ）， ３．２５ － ３．２０ （ｍ， １Ｈ）， ３．５ － ２．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９１ － ２．８５ （ｍ， １Ｈ）， ２．０３ （ｓ， ９Ｈ）， １．９０ － １．８６ （ｍ， ２Ｈ）， １．７６ － １．６５ （ｍ， １０Ｈ）．

【0228】

７）ステップｇ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（７２）の合成
７１（１９０ｍｇ）を２０％ピペリジン／ＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物によって処理した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、次いで、有機溶媒を蒸発させ、粗生成物をフラッシュ逆相クロマトグラフィによって精製した（溶出液Ｈ_２Ｏ（０．２％のＡｃＯＨ）／５％～７０％のメタノールからのＭｅＯＨ）。結果として、１１０ｍｇの７２を二酢酸塩として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３２ － ７．２０ （ｍ， ５Ｈ）， ４．６６ － ４．６２ （ｍ， １Ｈ）， ４．３６ － ４．３２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１３ － ４．１０ （ｍ， １Ｈ）， ３．４９ － ３．４５ （ｍ， １Ｈ）， ３．４０ － ３．３２ （ｍ， １Ｈ）， ３．０７ － ２．９７ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８８ － ２．８１ （ｍ， １Ｈ）， １．９３ （ｓ， ９Ｈ）， １．８９ － １．７７ （ｍ， ２Ｈ）， １．７２ － １．６８ （ｍ， １Ｈ）， １．６１ － １．５０ （ｍ， ３Ｈ）， １．３５ － １．２６ （ｍ， １Ｈ）， １．１３ － １．０４ （ｍ， １Ｈ）．

【0229】

８）ステップｈ：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－フェニルプロパンアミド）ヘキサンアミド（１５ｚ）の合成
７２（１１０ｍｇ）のＤＣＭ（６ｍＬ）中の溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を周囲温度で３時間撹拌した。揮発性物質を蒸発させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製して、純粋な１５ｚを得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３８ － ７．１５ （ｍ， ５Ｈ）， ４．６６ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．３、４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．７、５．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．１、４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０７ － ２．８９ （ｍ， ４Ｈ）， ２．８４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．２、１１．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．４７ （ｓ， １Ｈ）， ２．１３ － １．６３ （ｍ， １２Ｈ）， １．６２ － １．３９ （ｍ， ４Ｈ）， １．３６ － １．２０ （ｍ， １Ｈ）， １．０２ （ｍ， １Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ５８６．４ ［Ｍ＋１］．

【0230】

実施例２７：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ａａ）の合成

【化65】

【化66】

１）ステップａ：（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－アミノ－６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－１－オキソヘキサン－２－イル）アミノ）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）－１－オキソプロパン－２－イル）カルバミン酸（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（７３）の合成
７０（０．３７７ｇ、１ｍｍｏｌ）、２４塩酸塩（０．３１６ｇ、１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ ＨＣｌ（０．３８４ｇ、２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．１５３ｇ、１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の混合物に、ＤＩＰＥＡ（５６５μｌ、３．２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＥｔＯＡｃ及び水を添加した。合わせた有機抽出物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィによって精製して、７３を白色固体として得た（０．４９０ｇ、７６％）。

【0231】

２）ステップｂ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（７４）の合成
０．４９ｇの７３をＤＭＦ及びピペリジン混合物（４：１、３ｍＬ）に溶解した。得られた混合物を周囲温度で１時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン／メタノール）によって精製して、０．２１ｇの７４を遊離塩基として得た。

【0232】

３）ステップｃ：（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１８Ｓ）－１２－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イルメチル）－９－カルバモイル－１５－（３－グアニジノプロピル）－３，１１，１４，１７－テトラオキソ－１，１９－ジフェニル－２－オキサ－４，１０，１３，１６－テトラアザノナデカン－１８－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７５）の合成
７４（０．２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ－Ｐｈｅ－（Ｄ－）Ａｒｇ－ＯＨ塩酸塩（２９、０．２２９ｇ、０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（７７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ塩酸塩（０．１９２ｇ、１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中の混合物に、ＮＭＭ（０．１２ｍＬ、１．０６ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を室温で１日撹拌し、次いで、蒸発させ、フラッシュカラムクロマトグラフィによって精製した（溶出液Ｈ_２Ｏ（０．１％のＡｃＯＨ）／ＭｅＯＨ）。０．１１ｇの粗生成物７５を単離し、次のステップにおいて使用した。

【0233】

４）ステップｄ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（７６）の合成
粗生成物（７５、１１０ｍｇ）のＤＣＭ（３ｍＬ）中の溶液に、ＴＦＡ（１．５ｍＬ）を０℃で添加した。５分後、氷浴を除去し、反応混合物を周囲温度で３０分間撹拌した。揮発性物質を蒸発させ、次いで粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。５９ｍｇの７６を単離した。

【0234】

５）ステップｅ：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（１５ａａ）の合成
５９ｍｇの７６のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の溶液に、１６ｍｇのＰｄ／Ｃ１０％ｗ／ｗを添加した。フラスコをＨ_２でフラッシングし、混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、沈殿物を濾去し、０．２ｍＬのＴＦＡを添加した。混合物を蒸発させ、メタノールで３回再蒸発させて、３３ｍｇの１５ａａを泡状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ８．６２ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５ （ｂｒ ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４３－７．３１ （ｍ， ５Ｈ）， ４．４３－４．４０ （ｍ， １Ｈ）， ４．２９－４．１７ （複数のピーク、２Ｈ）， ３．２０－３．１３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９５－２．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４８ （ｍ， １Ｈ）， ２．０９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ３．２、１４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９４－１．１８ （複数のピーク、１８Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ５８６．５ ［Ｍ＋１］．

【0235】

実施例２８：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－（β－テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ａｂ）の合成

【化67】

【化68】

１）ステップａ：（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－アミノ－６－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－１－オキソヘキサン－２－イル）アミノ）－１－オキソ－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパン－２－イル）カルバミン酸（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メチル（７９）の合成
アミノ－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパン酸（７８、２０５ｍｇ、０．７１６ｍｍｏｌ）及び２４（３００ｍｇ、０．７８８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）中の混合物に、ＤＩＰＥ（５６５μｌ、３．２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、ＥｔＯＡｃ及び水を添加した。合わせた有機抽出物をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィによって精製して（ＤＣＭ中２％のＥｔＯＨ）、７９を白色固体として得た（３８０ｍｇ、９８％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３５ － ７．２７ （ｍ， ５Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０、４．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０， ４．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９ （ｐｅｎｔ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３６ （ｑ， Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８７ － １．７４ （ｍ， １Ｈ）， １．７２ － １．４５ （ｍ， ８Ｈ）， １．４４ （ｓ， ９Ｈ）， １．４３ － １．１８ （ｍ， ４Ｈ）．

【0236】

２）ステップｂ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－アミノ－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（８０）の合成
７９（３８０ｍｇ、０．７１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７ｍＬ）中の冷却（０℃）溶液に、ＴＦＡ（２．０ｍＬ）を添加した。５分後、氷浴を除去し、混合物を、周囲温度で２時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。３９５ｍｇ（収率－９０％）の８０を得た。黄色がかった固体をさらに精製することなく使用した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３６ － ７．２８ （ｍ， ５Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．７、５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６ － ３．９０ （ｍ， ３Ｈ）， ３．４７ － ３．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８７ － １．７９ （ｍ， ２Ｈ）， １．７８ － １．６２ （ｍ， ５Ｈ）， １．５６ － １．２９ （ｍ， ６Ｈ）．

【0237】

３）ステップｃ：（（９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１８Ｓ）－９－カルバモイル－１５－（３－グアニジノプロピル）－３，１１，１４，１７－テトラオキソ－１，１９－ジフェニル－１２－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）－２－オキサ－４，１０，１３，１６－テトラアザノナデカン－１８－イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８１）の合成
８０（３９０ｍｇ、０．７１１ｍｍｏｌ）及び３０（３４０ｍｇ、０．７４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中の混合物に、ＨＯＢＴ^＊Ｈ_２Ｏ（１３０ｍｇ、０．８５３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ^＊ＨＣｌ（４０９ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（３９００μｌ、３．５５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で撹拌した。４８時間後、ＤＭＦを除去した。粗生成物を逆相フラッシュクロマトグラフィによって精製して（Ｈ_２Ｏ中２０～６５％のＭｅＯＨ）、８１を白色固体として得た（２７４ｍｇ、純度－８５％）。さらなる精製をＨＰＬＣによって実施した。８１を白色固体として単離した（１７８ｍｇ）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．４０－７．２６ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．６、６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ － ４．２６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．９５ － ３．８４ （ｍ， ３Ｈ）， ３．４５ － ３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２１ － ３．００ （ｍ， ３Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８６ － １．５８ （ｍ， １２Ｈ）， １．５６ － １．２０ （ｍ， ５Ｈ）， １．３８ （ｓ， ９Ｈ）．

【0238】

４）ステップｄ：（（Ｓ）－６－アミノ－５－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパンアミド）－６－オキソヘキシル）カルバミン酸ベンジル（８２）の合成
８１（１７５ｍｇ）のＤＣＭ（５ｍＬ）中の冷却（０℃）溶液に、ＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加した。揮発性物質を減圧下で除去した。２００ｍｇのＬＩＯＳ－０７６－６を得た。黄色がかった油８２をさらに精製することなく使用した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．４０－７．２６ （ｍ， １０Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．３、５．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８、５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ９．０、５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ － ４．１２ （ｍ， １Ｈ）， ３．９５ － ３．８６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．３４ － ３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２３ － ３．０６ （ｍ， ３Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８８ － １．２３ （ｍ， １７Ｈ）．

【0239】

５）ステップｅ：（Ｓ）－６－アミノ－２－（（Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）プロパンアミド）ヘキサンアミド（１５ａｂ）の合成
８２（２００ｍｇ、０．２３５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％ｗ／ｗ、１５ｍｇ）を水素によって室温で３時間バブリングした。次いで、反応混合物を、セライトパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発によって除去した。１１９ｍｇの白色固体を得た。精製をＨＰＬＣによって実施した。１５ａｂを白色固体として単離した（９ｍｇ、不純物＜５％）。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．３９－７．２６ （ｍ， ５Ｈ）， ４．４２ － ４．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．３９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１４（ｔ Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４ － ３．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４２ － ３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．２０ － ３．０８ （ｍ， ４Ｈ）， ２．９４ － ２．９１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８７ － １．２５ （ｍ， １７Ｈ）． ＭＳ：ＥＩ－ＭＳ：ｍ／ｚ ６０４．５ ［Ｍ＋１］．

【0240】

実施例２９：（２Ｓ）－２－（（２Ｒ）－３－（アダマンタン－１－イル）－２－（（Ｒ）－２－（（Ｓ）－２－アミノ－３－フェニルプロパンアミド）－５－グアニジノペンタンアミド）プロパンアミド）－６－アミノヘキサンアミド（Ｐｈｅ－Ｄ－Ａｒｇ－Ｄ－（β－アダマンタ－１－イル）－Ａｌａ－Ｌｙｓ－ＮＨ_２、１５ａｃ）の合成

【化69】

化合物１５ａｃ（６３ｍｇ）をスケジュール２にしたがって白色粉末として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４） δ ７．４２ － ７．２６（ｍ， ５Ｈ）， ４．４５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ ７．５， ５．１， ２．７ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．７， ５．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８， ５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３７ － ３．３３ （ｍ， １Ｈ）， ３．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．００ （ｄｄ， Ｊ ＝ １４．３， ８．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０２ － １．３９ （複数のピーク， ２７Ｈ）． ＭＳ： ＥＩ－ＭＳ： ｍ／ｚ ６５４．６ ［Ｍ＋１］．

【0241】

実施例３０：ラット透過性心臓線維Ａ／Ｒ研究
ミトコンドリア機能性ｉｎ ｖｉｔｒｏ無酸素症－再酸素化（Ａ／Ｒ）モデル
１）透過性心臓線維の調製
透過性心臓線維を、いくらかの変更を伴って、先に記載されているように（Ｋｕｋａ Ｊ，Ｖｉｌｓｋｅｒｓｔｓ Ｒ，Ｃｉｒｕｌｅ Ｈ，Ｍａｋｒｅｃｋａ Ｍ，Ｐｕｇｏｖｉｃｓ Ｏ，Ｋａｌｖｉｎｓｈ Ｉ，Ｄａｍｂｒｏｖａ Ｍ，Ｌｉｅｐｉｎｓｈ Ｅ．Ｔｈｅ ｃａｒｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｌｄｒｏｎａｔｅ ｉｓ ｄｉｍｉｎｉｓｈｅｄ ａｆｔｅｒ ｃｏ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｌ－ｃａｒｎｉｔｉｎｅ．Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１２ Ｊｕｎ；１７（２）：２１５－２２．ｄｏｉ：１０．１１７７／１０７４２４８４１１４１９５０２）、正常酸素圧の心臓から調製する。１ｍＬの緩衝液Ａ（２０ｍＭイミダゾール、０．５ｍＭジチオトレイトール、２０ｍＭタウリン、７．１ｍＭ ＭｇＣｌ_２、５０ｍＭ ＭＥＳ、５ｍＭ ＡＴＰ、１５ｍＭホスホクレアチン、２．６ｍＭ ＣａＫ_２ＥＧＴＡ、７．４ｍＭ Ｋ_２ＥＧＴＡ、ｐＨ７．０、０℃）中５０μｇ／ｍＬのサポニン及び０．５ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼを４℃で使用して、線維束を透過処理する。１５分のインキュベーション後、上記線維を、化合物（例えば、１００ｎｍ）またはビヒクルを補充した２ｍＬの緩衝液Ｂ（２０ｍＭイミダゾール、０．５ｍＭジチオトレイトール、２０ｍＭタウリン、１．６ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１００ｍＭ ＭＥＳ、３ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、２．９ｍＭ ＣａＫ_２ＥＧＴＡ、７ｍＭ Ｋ_２ＥＧＴＡ、ｐＨ７．１、３７℃）中で１５分間洗浄する。

【0242】

２）同時Ｈ_２Ｏ_２フラックス検出による呼吸測定
呼吸測定用媒体：ＭｉＲ０５－１１０ｍＭ スクロース、６０ｍＭ Ｋ－ラクトビオン酸塩、０．５ｍＭ ＥＧＴＡ、３ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２０ｍＭ タウリン、１０ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、３０℃でｐＨ７．１、及び、脂肪酸を本質的に含まない０．１％ ＢＳＡ。

【0243】

プロトコル
無酸素症を誘発するために、基質、コハク酸塩（１０ｍＭ）をロテノン（０．５μＭ）およびＡＤＰ（５ｍＭ）と共に添加することにより、サンプルの最大呼吸速度を刺激し、調製物を放置して全てのＯ_２を呼吸チャンバーにおいて消費させ（１０～２０分以内）、これにより、無酸素状態にする（Ｍａｋｒｅｃｋａ Ｍ，Ｓｖａｌｂｅ Ｂ，Ｖｏｌｓｋａ Ｋ，Ｓｅｖｏｓｔｊａｎｏｖｓ Ｅ，Ｌｉｅｐｉｎｓ Ｊ，Ｇｒｉｎｂｅｒｇａ Ｓ，Ｐｕｇｏｖｉｃｓ Ｏ，Ｌｉｅｐｉｎｓｈ Ｅ，Ｄａｍｂｒｏｖａ Ｍ．Ｍｉｌｄｒｏｎａｔｅ，ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｌ－ｃａｒｎｉｔｉｎｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ、ｉｎｄｕｃｅｓ ｂｒａｉｎ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ａｎｏｘｉａ－ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ．Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１４ Ｊａｎ １５；７２３：５５－６１．ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｅｊｐｈａｒ．２０１３．１２．００６．）。３０分の無酸素症の後、チャンバーを開くことによってＯ_２をチャンバーに再導入して再酸素化を達成する。チャンバー内のＯ_２濃度が初期濃度に達した後、チャンバーを閉鎖してＯ_２フラックスを１０分間モニタリングする。

【0244】

Ｈ_２Ｏ_２感受性プローブＡｍｐｌｉｆｌｕ（商標）Ｒｅｄ（ＡｍＲ）を使用してＯ２ｋ－フルオロメーターにおいて呼吸計測と同時にＨ_２Ｏ_２フラックス（ＲＯＳフラックス）を測定する（Ｍａｋｒｅｃｋａ－Ｋｕｋａ Ｍ，Ｋｒｕｍｓｃｈｎａｂｅｌｇ，Ｇｎａｉｇｅｒ Ｅ．Ｈｉｇｈ－Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｒｅｓｐｉｒｏｍｅｔｒｙ ｆｏｒ Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｘｙｇｅｎ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｎ Ｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｆｌｕｘｅｓ ｉｎ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄ Ｃｅｌｌｓ，Ｔｉｓｓｕｅ Ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ ａｎｄ Ｉｓｏｌａｔｅｄ Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２０１５ Ｊｕｎ ２９；５（３）：１３１９－３８．ｄｏｉ：１０．３３９０／ｂｉｏｍ５０３１３１９）。１０μＭ ＡｍＲ、１Ｕ／ｍＬの西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）及び５Ｕ／ｍＬのスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）をチャンバーに添加する。ＨＲＰによって触媒される、ＡｍＲとＨ_２Ｏ_２との間の反応生成物は、レソルフィンと同様に蛍光性である。Ｈ_２Ｏ_２を０．１μＭずつ繰り返し添加して較正を行う。さらなるＡｍＲを添加することにより、再酸素化後のＨ_２Ｏ_２フラックス測定を確実にすることができる。

【0245】

試験した化合物またはビヒクルをベースラインで（透過処理した線維を添加する前に）添加する。

【0246】

研究概要：
・透過性心臓線維ＣＩＩ ＯＸＰＨＯＳ状態＋３０分の無酸素症＋Ｈ_２Ｏ_２感受性プローブＡｍｐｌｉｆｌｕ（商標）Ｒｅｄの存在下での１０分の再酸素化
・パラメータ：ＣＩＩ ＯＸＰＨＯＳ（正常酸素圧、再酸素化後）、Ｈ_２Ｏ_２（ＲＯＳ）フラックス（正常酸素圧、再酸素化後）、Ｈ_２Ｏ_２／Ｏ_２比（正常酸素圧、再酸素化後）
・ＣＴＲＬ（ビヒクル）＋１００ｎＭ濃度の３～４のＳＢＴ化合物（ｎ＝５～６）をセットごとに並行して試験する。並行して試験する化合物の数ならびに化合物濃度（複数可）を調整することができ、研究ファイル及び最終報告に記録する。

【0247】

プロトコルは、実験結果及びスポンサーとの議論に基づいて変更してよい。プロトコルへのいずれの変更も、研究ファイル及びプロトコル修正において文書化する。
図２を参照されたい。

【0248】

実施例３１：ランゲンドルフ研究
虚血－再灌流傷害－ランゲンドルフ心臓の調製プロトコル（Ｌａｔｖｉａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅ）
梗塞研究を、いくらかの変更を伴って、先に記載されているように（Ｋｕｋａ Ｊ，Ｖｉｌｓｋｅｒｓｔｓ Ｒ，Ｃｉｒｕｌｅ Ｈ，Ｍａｋｒｅｃｋａ Ｍ，Ｐｕｇｏｖｉｃｓ Ｏ，Ｋａｌｖｉｎｓｈ Ｉ，ｅｔ ａｌ． ｃａｒｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｌｄｒｏｎａｔｅ ｉｓ ｄｉｍｉｎｉｓｈｅｄ ａｆｔｅｒ ｃｏ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｌ－ｃａｒｎｉｔｉｎｅ．Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１２；１７：２１５－２２２）、ランゲンドルフにしたがって実施する。ラットをペントバルビタールナトリウム（６０ｍｇ／ｋｇ）で麻酔し、ヘパリンを腹腔内投与する。梗塞研究では、１０ｍＭグルコースを補充した酸素化された（９５％のＯ２～５％のＣＯ２）Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ（ＫＨ）緩衝溶液（１１８ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ、４．７ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ、１．２４ｍｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２、１．６４ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｇＣｌ２、２４．８８ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＨＣＯ３、１．１８ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４、及び０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ；ｐＨ７．３～７．５；３６．８～３７．０℃）を６０ｍｍＨｇの一定の灌流圧で心臓に灌流させる。生理的圧力トランスデューサ（ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に接続された水－エタノール混合物（１：１）充填バルーンを左心室に挿入し、ベースライン拡張末期圧を５～１０ｍｍＨｇに設定する。ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＰｏｗｅｒＬａｂ８／３５システムを使用して、心拍数（ＨＲ）、フロー、左心室発生圧（ＬＶＤＰ）、収縮性（＋ｄｐ／ｄｔ）を連続的に記録する。単離したラットの心臓を２０分間適応させ、左前下行枝冠動脈（ＬＡＤ）を続いて３０分間閉塞した後、１２０分間再灌流させる。目的の化合物が添加されたまたは添加されていないＫＨ灌流溶液（ビヒクルまたは１μＭ濃度）を、単離した心臓の灌流の全時間に使用する。閉塞は、冠状動脈流の約４０％の低下によって確認する。梗塞サイズを先に記載されているように求める（Ｋｕｋａ Ｊ，Ｖｉｌｓｋｅｒｓｔｓ Ｒ，Ｃｉｒｕｌｅ Ｈ，Ｍａｋｒｅｃｋａ Ｍ，Ｐｕｇｏｖｉｃｓ Ｏ，Ｋａｌｖｉｎｓｈ Ｉ，Ｄａｍｂｒｏｖａ Ｍ，Ｌｉｅｐｉｎｓｈ Ｅ．Ｔｈｅ ｃａｒｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｉｌｄｒｏｎａｔｅ ｉｓ ｄｉｍｉｎｉｓｈｅｄ ａｆｔｅｒ ｃｏ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｌ－ｃａｒｎｉｔｉｎｅ． Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ．２０１２ Ｊｕｎ；１７（２）：２１５－２２．ｄｏｉ：１０．１１７７／１０７４２４８４１１４１９５０２．；Ｌｉｅｐｉｎｓｈ Ｅ，Ｋｕｋａ Ｊ，Ｄａｍｂｒｏｖａ Ｍ．Ｔｒｏｕｂｌｅｓｈｏｏｔｉｎｇ ｄｉｇｉｔａｌ ｍａｃｒｏ ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｙ ｆｏｒ ｉｍａｇｅ ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ． Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ． ２０１３ Ｍａｒ－Ａｐｒ；６７（２）：９８－１０６． ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｖａｓｃｎ．２０１２．１１．００１．）。簡潔には、再灌流の終わりに、ＬＡＤを再閉塞し、ＫＨ緩衝溶液に溶解した０．１％メチレンブルーで心臓を灌流させる。その後、心臓を、尖部から基部まで、２ｍｍ厚の６のスライス（より小さい心臓では５）に横に薄片化し、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４、３７℃）中の１％塩化トリフェニル－テトラゾリウムにおいて１０分間インキュベートして、生存組織を赤く、壊死組織を白く染色する。Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ｖ６．３ソフトウェアを使用して断面画像の面積測定分析を実施して、リスク領域（ＡＲ）及び壊死領域（ＡＮ）を求め、それぞれ、スライスの断面積の百分率として表す。次いで、得られた値を使用して、式：
ＩＳ（％）＝ＡＮ／ＡＲ×１００％
にしたがって、梗塞サイズ（ＩＳ）をリスク領域の百分率として算出する。

【0249】

壊死領域を、白色壊死組織の領域及びピンク色の組織の領域を合わせることによって求める。

【0250】

研究概要
・２０分間の適応＋３０分間の虚血（ＬＡＤ結紮）＋１２０分間の再灌流。ビヒクルまたは化合物１μＭ
・試験物質濃度（複数可）を調整してよい。いずれの変更も、研究ファイル及び最終報告において報告する。
・エンドポイント：ＨＲ、フロー、ＬＶＤＰ、±ｄＰ／ｄｔ、梗塞サイズ－壊死領域
・セットあたり、ＣＴＲＬ（ビヒクル）＋最大４試験化合物（ｎ＝８／処置）

【0251】

プロトコル及び試験される化合物の数は、実験結果及びスポンサーとの議論に基づいて変更してよい。プロトコルへのいずれの変更も、研究ファイル及びプロトコル修正において文書化する。
図３を参照されたい。

【0252】

実施例３２：ラット心筋梗塞モデル
ラット心筋梗塞モデル（ＭＩ）を、カナダのケベック州シャーブルックにあるＩＰＳＴ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｑｕｅ Ｉｎｃによって実施した。（可能な場合）各処置群の動物を各手術日にスケジュールすることを目的として、試験責任者により、体重に基づいて処置群間の均等分布に関して動物を無作為化した。
１）ビヒクル群：群のサイズ：ｎ＝８。投与経路：皮下注射；
２）試験物質群：群のサイズ：ｎ＝８。投与経路：皮下注射；処置：０．０１、０．１、０．５及び２ｍｇ／ｋｇの用量、虚血前３０分。

【0253】

実験手順
研究設計
１）手術当日、酸素中の２～２．５％のイソフルランＵＳＰ（Ａｂｂｏｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ Ｃａｎａｄａ）の混合物でラットを麻酔し、加熱パッドに置いて、体温を維持する。
２）動物に挿管し、６５～７０ストローク／分の頻度で約１０ｍＬ／ｋｇ体重に設定された齧歯動物用陽圧レスピレーターによって直ちに換気する。
３）開胸を、左の第４肋間腔を通して実施して、心臓を露出させる。
４）５－０ソフシルク縫合糸を左前下行（ＬＡＤ）動脈の周囲、左心房の２～３ｍｍ下に置く。
５）縫合糸を手短にスネアして、色変化に基づいて心筋虚血のサイズ及び位置を確認し、次いで、当該糸を結んで大きな前外側心筋梗塞（約４５％）を生じさせる。
６）ＬＡＤ閉塞の３０分後、縫合糸を取り除いて、筋肉の再灌流を可能にする。
７）開胸を４－０縫合糸によって閉じ、術後疼痛管理のためにメロキシカム（１ｍｇ／ｋｇ）の皮下注射を行う。
８）再灌流後２４時間で、動物を再び麻酔する（イソフルラン２％）。
９）心臓を切除し、ランゲンドルフ装置に取り付ける。３５±２℃に加熱した酸素化タイロード溶液を、およそ７０ｍｍＨｇの圧力及び１０ｍＬ／分のオーダーの流速で、逆行させて心臓を灌流させる。
１０）次いで、心臓をエバンスブルー色素で灌流して、心筋梗塞のサイズを評価する。エバンスブルー染色に続いて、心臓をランゲンドルフ装置から取り除き、冷エタノール（－５０℃）に浸漬させる。心臓を約２ｍｍの横断面スライスでカットする。スライスをスキャンしてリスク領域（ＡＡＲ）を評価した後、１％ＴＴＣを含有するリン酸緩衝液において３５±２℃で３０分間インキュベートし、次いで、４％ホルマリンに移して４±２℃で２４時間置く。スライスを再スキャンして、梗塞領域を測定する。リスク領域＞６０％の動物を研究から除外する。

【0254】

算出
梗塞サイズ（％＝（梗塞領域／リスク領域）^＊１００

【0255】

コンピュータシステム
Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｗｉｎｄｏｗｓ８、ＸＰ ＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌまたはＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｗｉｎｄｏｗｓ Ｖｉｓｔａ Ｂｕｓｉｎｅｓｓのいずれかを実行するネットワーク接続されたパーソナルコンピュータをデータ取得に使用する。分析ソフトウェアは、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｗｉｎｄｏｗｓ８、ＸＰ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌまたはｖｉｓｔａを実行するネットワーク接続されたパーソナルコンピュータにインストールされたＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｏｆｆｉｃｅ Ｅｘｃｅｌ ２００７である。

【0256】

報告
経過／状況報告
研究全体を通して、定期的な経過報告をスポンサーの交渉担当者に提出する。これらの報告の頻度は、スポンサーの交渉担当者との相談の後に決定する。

【0257】

研究報告
研究の実験段階の完了後１週間以内に、エクセルのスプレッドシートにおける非監査の生データ及び研究設計を含めた非監査草案、研究の定量的／定性的結果、ならに個々のデータグラフをスポンサーに提出する。最終報告をスポンサーコメントの受領後１週間以内に提供する。
図４を参照されたい。

【0258】

実施例３３：腎虚血研究
ラット急性腎臓傷害（ＡＫＩ）モデルを、カナダのケベック州シャーブルックにあるＩＰＳＴ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｑｕｅ Ｉｎｃによって実施した。各処置群の動物を各手術日にスケジュールすることを目的として、試験責任者により、体重に基づいて処置群間の均等分布に関して動物を無作為化した。ラットは食物及び水に自由にアクセスできる。
１）偽群：群のサイズ：ｎ＝２。投与経路：ｎ／ａ；
２）ビヒクル群：群のサイズ：ｎ＝８。投与経路：皮下注射；
３）試験物質群：群のサイズ：ｎ＝８。投与経路：皮下注射；処置用量：２×２ｍｇ／ｋｇ、虚血前３０分及び再灌流前５分。

【0259】

実験手順
虚血－再灌流の誘発
１．ラットを、酸素中２％のイソフルランＵＳＰ（Ａｂｂｏｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、カナダ、モントリオール）で麻酔し、加熱したパッドに置いて、体温を維持する。ＥＣＧ及び酸素飽和度を、手術プロセス全体にわたってモニタリングする。体温は、腎臓に非常に近い腹部に導入されたプローブ温度計でモニタリングする。
２．頸静脈から１ｍＬの採血を行う。血液をヘパリンリチウムチューブに収集し、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して血漿を得る。血漿を２００μＬのアリコートに分け、バイオマーカーの投与まで－２０℃で保存する。
３．腹部をポビドンヨードで消毒し、開腹術を実施する。
４．腎臓を露出させ、一時的な縫合糸を２つの腎臓の腎動脈の周りに設置する。腎虚血を、虚血の開始後数分以内に腎臓の色が赤から濃い紫色に徐々に変化することによって視覚的に確認する。虚血の間、ヒートランプおよび温かい（３７℃）生理食塩水に浸した滅菌ガーゼを使用して、腎臓を湿った温かい状態に保つ。温度は、腎臓に非常に近い腹部に導入されたプローブ温度計でモニタリングする。
５．閉塞の３０分後、縫合糸を除去する。
６．腹部の傷を４－０シルク縫合糸で閉じ、動物をそのケージに戻す。
７．再灌流の２４時間後、ラットを再度麻酔する。虚血前に行われたように、２回目の採血を行う。
８．偽群は、腎臓が虚血状態にならないことを除いて、ビヒクルと同じ条件下で処置する。

【0260】

バイオマーカーの検出
血漿サンプルの２００μＬアリコートを、虚血前および虚血後２４時間に採取し、これらを、クレアチニンの血漿レベル（ｐ．Ｃｒ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）の検出のためにＣＨＵＳ（Ｃｅｎｔｒｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌｉｅｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｉｒｅ ｄｅ Ｓｈｅｒｂｒｏｏｋｅ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ）の臨床検査室に送付する。

【0261】

コンピュータシステム
以下は、この研究の実施中に使用される検証済みのコンピュータシステムである。分析ソフトウェアは、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｗｉｎｄｏｗｓ ８、ＸＰ ＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌまたはＶｉｓｔａを実行するネットワーク接続されたパーソナルコンピュータにインストールされたＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｏｆｆｉｃｅ Ｅｘｃｅｌ ２００７である。

【0262】

データ解析
値を平均±ＳＥＭ（平均の標準誤差）として提示する。反復の不対スチューデントｔ検定を全ての実験データについてＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ ２００７において実施した。差を、ｐ≦０．０５であるときに有意であるとみなした。

【0263】

ビヒクル群を偽群と比較し、一方で、試験物質をビヒクル群と比較した。

【0264】

Ｉ／Ｒ後の血漿クレアチニン（ビヒクルに対する％平均）を、以下の式を使用して算出した：
（（（（虚血後２４時間の血漿クレアチニン）－（虚血前の血漿クレアチニン））－偽群における平均Δ血漿クレアチニン）／ビヒクル群における平均Δ血漿クレアチニン）×１００
式中：
偽群における平均Δ血漿クレアチニン＝偽群における平均（虚血後２４時間の血漿クレアチニン－虚血前の血漿クレアチニン）
ビヒクル群における平均Δ血漿クレアチニン＝ビヒクル群における平均（（虚血後２４時間の血漿クレアチニン－虚血前の血漿クレアチニン）－偽群における平均Δ血漿クレアチニン）

【0265】

Ｉ／Ｒ後のＢＵＮ（ビヒクルに対する％平均）を、以下の式を使用して算出した：
（（（（虚血後２４時間のＢＵＮ）－（虚血前のＢＵＮ））－偽群における平均ΔＢＵＮ）／ビヒクル群における平均ΔＢＵＮ）×１００
式中：
偽群における平均ΔＢＵＮ＝偽群における平均（虚血後２４時間のＢＵＮ－虚血前のＢＵＮ）
ビヒクル群における平均ΔＢＵＮ＝ビヒクル群における平均（（虚血後２４時間のＢＵＮ－虚血前のＢＵＮ）－偽群における平均ΔＢＵＮ）

【0266】

保護％を、以下の式を使用して算出した：
保護％（血漿クレアチニン）＝１００％－Ｉ／Ｒ後のΔ血漿クレアチニン（ビヒクルに対する％平均）
保護％（ＢＵＮ）＝１００％－Ｉ／Ｒ後のΔＢＵＮ（ビヒクルに対する％平均）
図５及び６を参照されたい。

【0267】

等価物
本発明を、理解の明確さを目的として実例及び例によっていくらか詳細に説明したが、同じことが、本発明またはそのいずれの具体的な実施形態の範囲にも影響することなく、広範かつ等価な、条件、構築及び他のパラメータの範囲内で、本発明を修飾または変更することによって実施され得ること、ならびに、かかる修飾または変更が、添付の特許請求の範囲内に包含されることが意図されることが当業者に明らかであろう。

【0268】

参照による組み込み
上記の明細書において言及されている全ての米国特許ならびに米国及びＰＣＴ特許出願公開公報は、全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【国際調査報告】