(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-02-03
(54)【発明の名称】高シュウ酸尿症を治療するための方法及び組成物
(51)【国際特許分類】
C12N 15/52 20060101AFI20220127BHJP
C12N 15/31 20060101ALI20220127BHJP
C12N 15/74 20060101ALI20220127BHJP
C12N 9/00 20060101ALI20220127BHJP
A61K 35/742 20150101ALI20220127BHJP
A61K 35/741 20150101ALI20220127BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20220127BHJP
A61K 31/737 20060101ALI20220127BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20220127BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220127BHJP
C12N 1/21 20060101ALI20220127BHJP
【FI】
C12N15/52 Z ZNA
C12N15/31
C12N15/74 Z
C12N9/00
A61K35/742
A61K35/741
A61K48/00
A61K31/737
A61P3/00
A61P43/00 121
C12N1/21
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021533370
(86)(22)【出願日】2019-12-10
(85)【翻訳文提出日】2021-08-03
(86)【国際出願番号】 US2019065446
(87)【国際公開番号】W WO2020123483
(87)【国際公開日】2020-06-18
(32)【優先日】2018-12-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
(特許庁注:以下のものは登録商標)
(71)【出願人】
【識別番号】521254432
【氏名又は名称】ノヴォム バイオテクノロジーズ,インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】NOVOME BIOTECHNOLOGIES,INC.
【住所又は居所原語表記】100 Kimball Way,South San Francisco,CA 94080,United States of America
(74)【代理人】
【識別番号】110000202
【氏名又は名称】新樹グローバル・アイピー特許業務法人
(72)【発明者】
【氏名】ラス フォー,ザカリー ニコラス
(72)【発明者】
【氏名】ウィテカー,ウェストン ロバート
(72)【発明者】
【氏名】デローチ,ウィリアム ケイン
(72)【発明者】
【氏名】スタンリー シェパード,エリザベス ジョイ
【テーマコード(参考)】
4B050
4B065
4C084
4C086
4C087
【Fターム(参考)】
4B050CC04
4B050DD01
4B050LL01
4B065AA01X
4B065AA23X
4B065AA26Y
4B065AA72Y
4B065AA80Y
4B065AB01
4B065AC14
4B065BA02
4B065CA24
4B065CA27
4B065CA44
4C084AA13
4C084MA02
4C084MA35
4C084MA37
4C084MA52
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZC211
4C084ZC751
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA26
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA35
4C086MA37
4C086MA52
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZC21
4C086ZC75
4C087AA01
4C087AA02
4C087AA03
4C087BC31
4C087BC53
4C087BC55
4C087BC68
4C087BC74
4C087BC82
4C087CA08
4C087CA12
4C087MA02
4C087MA35
4C087MA37
4C087MA52
4C087NA05
4C087NA14
4C087ZC21
4C087ZC75
(57)【要約】
本開示は、概して、増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された細菌、その細菌を含む医薬組成物及びシュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を治療する方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された片利共生細菌。
【請求項2】
バクテロイデス属(Bacteroides)、アリスティペス属(Alistipes)、フェカリバクテリウム属(Faecalibacterium)、パラバクテロイデス属(Parabacteroides)、プレボテラ属(Prevotella)、ロセブリア属(Roseburia)、ルミノコッカス属(Ruminococcus)、クロストリジウム属(Clostridium)、オシリバクター属(Oscillibacter)、ゲンミゲル属(Gemmiger)、バルネシエラ属(Barnesiella)、ディアリスター属(Dialister)、パラステレラ属(Parasutterella)、ファスコラークトバクテリウム属(Phascolarctobacterium)、プロピオニバクテリウム属(Propionibacterium)、ステレラ属(Sutterella)、ブラウティア属(Blautia)、パラプレボテラ属(Paraprevotella)、コプロコッカス属(Coprococcus)、オドリバクター属(Odoribacter)、スピロプラズマ属(Spiroplasma)、アナエロスティペス属(Anaerostipes)及びアッカーマンシア属(Akkermansia)からなる群から選択される属のものである請求項1に記載の細菌。
【請求項3】
前記属は、バクテロイデス属である請求項2に記載の細菌。
【請求項4】
前記修飾されていない類似又は他に同等の細菌は、検出可能なシュウ酸分解活性を有していない請求項1~3のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項5】
前記修飾されていない類似又は他に同等の細菌は、シュウ酸異化に関与することが知られている遺伝子を有していない請求項1~4のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項6】
前記細菌と同じ属の天然に存在するメンバーは、検出可能なシュウ酸分解活性を有していない請求項1~5のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項7】
(i)シュウ酸:ギ酸アンチポーター(OxlT)、
(ii)シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、
(iii)シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4、
(iv)シュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10、
(v)シュウ酸-CoAリガーゼ/オキサリル-CoAシンテターゼ(OXS)- EC6.2.1.8、
(vi)ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、
(vii)アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19、
(viii)スクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2、
(ix)オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8、
(x)オキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+オキシドレダクターゼ(OXR)- EC1.2.1.17、及び
(xi)上記のタンパク質のいずれかの組合せ
からなる群から選択されるタンパク質又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項1~6のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項8】
OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体及びOXC又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項7に記載の細菌。
【請求項9】
FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンをさらに含む請求項8に記載の細菌。
【請求項10】
ACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンをさらに含む請求項8又は9に記載の細菌。
【請求項11】
OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及びACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項7に記載の細菌。
【請求項12】
OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、OXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及びACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項7に記載の細菌。
【請求項13】
OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及びACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項7に記載の細菌。
【請求項14】
(i)前記OxITは、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITであり、
(ii)前記OXSは、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはA.タリアナ(A.thaliana)OXSであり、
(iii)前記OXCは、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCであり、
(iv)前記FCOCTは、E.コリ(E.coli)FCOCTであり、及び/又は
(v)前記ACOCTは、E.コリ(E.coli)ACOCTである請求項7~13のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項15】
S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項16】
E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項17】
E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項18】
E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項19】
E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項20】
O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項21】
O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーンを含む請求項14に記載の細菌。
【請求項22】
前記1つ以上のトランスジーンは、プラスミド上にあるか、細菌人工染色体上にあるか、又はゲノムにインテグレートされる請求項1~21のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項23】
配列番号1~31のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項1~22のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項24】
配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26又は配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項25】
配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項26】
配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26又は配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項27】
配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26又は配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項28】
配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項29】
配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26又は配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項30】
配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26又は配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項23に記載の細菌。
【請求項31】
前記1つ以上のトランスジーンの少なくとも1つは、リボソーム結合部位(RBS)に作動可能に連結される請求項7~30のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項32】
前記RBSは、配列番号164~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む請求項31に記載の細菌。
【請求項33】
(i)配列番号212~219のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードするトランスジーンを含み、
(ii)配列番号172~179のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードするトランスジーンを含み、
(iii)配列番号164~171のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードするトランスジーンを含み、
(iv)配列番号188~195若しくは220~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCをコードするトランスジーンを含み、
(v)配列番号180~187のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCをコードするトランスジーンを含み、
(vi)配列番号204~211のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)FCOCTをコードするトランスジーンを含み、及び/又は
(vii)配列番号196~203のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)ACOCTをコードするトランスジーンを含む請求項32に記載の細菌。
【請求項34】
配列番号96~162のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項1~33のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項35】
(i)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(ii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(iii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(iv)配列番号147に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号97に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号136に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(v)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(vi)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(vii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(viii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号154に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号149に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(ix)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(x)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(xi)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(xii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、
(xiii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むか、又は
(xiv)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項34に記載の細菌。
【請求項36】
配列番号82~95のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む請求項1~35のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項37】
前記1つ以上のトランスジーンの少なくとも1つは、少なくとも1つの構成的プロモーターに作動可能に連結される請求項7~36のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項38】
前記プロモーターは、ファージ由来プロモーターである請求項37に記載の細菌。
【請求項39】
前記プロモーターは、コンセンサス配列GTTAA(n)
4~7GTTAA(n)
34~38TA(n)
2TTTG(配列番号70)を含む請求項37又は38に記載の細菌。
【請求項40】
前記プロモーターは、配列番号68、配列番号69又は配列番号71を含む請求項37~39のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項41】
初期コロニー形成の存在量、安定性、予測性又は容易性を増加させてヒト消化管にコロニーを形成するように修飾されている請求項1~40のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項42】
炭素源として特権栄養素を利用するその能力を増加させるように修飾されている請求項41に記載の細菌。
【請求項43】
炭素源として特権栄養素を利用するその能力を増加させる1つ以上のトランスジーンを含む請求項42に記載の細菌。
【請求項44】
前記特権栄養素は、海洋性多糖である請求項42又は43に記載の細菌。
【請求項45】
前記海洋性多糖は、ポルフィランである請求項44に記載の細菌。
【請求項46】
ヒト対象に投与されると、前記細菌の存在量は、10
12、10
11、10
10、10
9、10
8又は10
7cfu/グラム糞便内容物を超える請求項41~45のいずれか一項に記載の細菌。
【請求項47】
請求項1~46のいずれか一項に記載の細菌と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項48】
カプセル剤又は錠剤として製剤化される請求項47に記載の医薬組成物。
【請求項49】
前記カプセル剤は、腸溶性コーティングカプセル剤である請求項48に記載の医薬組成物。
【請求項50】
特権栄養素をさらに含む請求項47~49のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項51】
前記特権栄養素は、海洋性多糖である請求項50に記載の医薬組成物。
【請求項52】
前記海洋性多糖は、ポルフィランである請求項51に記載の医薬組成物。
【請求項53】
対象においてシュウ酸のレベルを低減する方法であって、請求項1~46のいずれか一項に記載の細菌又は請求項47~52のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項54】
前記対象は、シュウ酸の上昇した量に伴う障害を有する項53に記載の方法。
【請求項55】
対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う障害を治療する方法であって、請求項1~46のいずれか一項に記載の細菌又は請求項47~52のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項56】
前記障害は、高シュウ酸尿症である請求項54又は55に記載の方法。
【請求項57】
前記対象に特権栄養素を投与することをさらに含む請求項53~56のいずれか一項に記載の方法。
【請求項58】
前記特権栄養素は、前記細菌の前、それと同時又はその後に前記対象に投与される請求項57に記載の方法。
【請求項59】
前記特権栄養素は、海洋性多糖である請求項58に記載の方法。
【請求項60】
前記海洋性多糖は、ポルフィランである請求項59に記載の方法。
【請求項61】
前記細菌又は医薬組成物は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに前記対象に投与される請求項53~60のいずれか一項に記載の方法。
【請求項62】
前記対象への前記細菌又は医薬組成物の連続投与間の時間は、48時間超である請求項53~61のいずれか一項に記載の方法。
【請求項63】
前記対象は、動物である請求項53~62のいずれか一項に記載の方法。
【請求項64】
前記対象は、ヒトである請求項63に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本願は、2018年12月10日出願の米国仮特許出願第62/777,322号明細書(その全体が参照により本明細書に組み込まれる)の利益及びそれに対する優先権を主張する。
【背景技術】
【0002】
最も小さいジカルボン酸であるシュウ酸は、二次代謝物としても、さらに異化プロセスの副産物としても天然で高頻度に出現する。植物は、草食動物を毒して捕食を予防する手段として多量のシュウ酸を生成及び蓄積する。いくつかの代謝プロセスも哺乳動物の身体内にシュウ酸を発生する。毒性シュウ酸は、処分されなければならず、哺乳動物では、これは、尿中及び糞便中へのシュウ酸の輸送により行われる。しかし、あまりにも多くのシュウ酸が尿中に廃棄されと、高シュウ酸尿症が発生する可能性がある。
【0003】
高シュウ酸尿症とは、尿中に過剰のシュウ酸を排泄する病態のことである。尿中シュウ酸上昇は、再発シュウ酸カルシウム腎結石、腎損傷及び最終的にエンドステージ腎疾患に関連付けられてきた。高シュウ酸尿症は、過剰なシュウ酸の主な源により、4つのクラス:原発性、腸性、食事性及び特発性高シュウ酸尿症にカテゴリー化される。原発性高シュウ酸尿症は、原因がジェネティックである高シュウ酸尿症に関し、その3つの形態I、II及びIIIは、それぞれヒト遺伝子AGXT、GRHPR及びHOGA1の突然変異に起因する。これらの遺伝子のいずれかが突然変異すると、肝臓で内因性プロセスにより発生するシュウ酸のレベが増加する。ジェネティックな原因を確立できない高シュウ酸尿症の形態 - 腸性、食事性及び特発性高シュウ酸尿症 - は、続発性高シュウ酸尿症と称される。食事からのシュウ酸吸収のベースラインレベルが正常なものもあるが、腸性高シュウ酸尿症の患者では、シュウ酸に対する腸の透過性が増加しているため、食事からのシュウ酸の吸収がより多くなる。これは、炎症性腸疾患及び胃バイパスをはじめとする病態から消化管生理機能が破壊されることにより引き起こされることもある。食事性高シュウ酸尿症は、食事の際のシュウ酸又はシュウ酸前駆体の過剰摂取から生じる。最後に、特発性高シュウ酸尿症の患者では、その高シュウ酸尿症の急性の原因は、同定されていない。
【0004】
高シュウ酸尿症の治療法は、ほとんど存在しない。AXGTに突然変異を有する原発性高シュウ酸尿症の患者では、突然変異酵素の何らかの活性を救済するためにピリドキシンを処方可能である。代替的に、原発性高シュウ酸尿症患者は、欠失肝酵素を元に戻すために肝移植を受けることが可能である。高シュウ酸尿症患者の残りの者では、合併症 - 腎結石及び腎不全を治す目的の他の治療と共に、高カルシウム低シュウ酸食が一次介入である。しかし、シュウ酸は、慎重に食事療法を行ったとしても回避することが困難であり、シュウ酸を回避するように患者に指示しても、ほとんどの場合に不十分である。高シュウ酸尿症の軽減に利用可能なかかる治療が限定されるため、患者は、自身の身体からシュウ酸を除去する強力で安定な治療法を必要とする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
したがって、シュウ酸の上昇した量に伴う疾患又は障害、例えば高シュウ酸尿症を治療及び管理するための新しい有効な療法の必要性が継続して存在する。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本開示は、概して、増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された細菌に関する。本開示の細菌は、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を治療するのに有用である。
【0007】
例えば、一態様では、本明細書に提供されるのは、修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された片利共生細菌である。特定の実施形態では、修飾されていない類似又は他に同等の細菌は、検出可能なシュウ酸分解活性を有しておらず、且つ/又はシュウ酸異化に関与、例えば直接関与することが知られている遺伝子を有していない。特定の実施形態では、本細菌と同じ属の天然に存在するメンバーは、検出可能なシュウ酸分解活性を有していない。
【0008】
特定の実施形態では、企図される細菌は、バクテロイデス属(Bacteroides)、アリスティペス属(Alistipes)、フェカリバクテリウム属(Faecalibacterium)、パラバクテロイデス属(Parabacteroides)、プレボテラ属(Prevotella)、ロセブリア属(Roseburia)、ルミノコッカス属(Ruminococcus)、クロストリジウム属(Clostridium)、オシリバクター属(Oscillibacter)、ゲンミゲル属(Gemmiger)、バルネシエラ属(Barnesiella)、ディアリスター属(Dialister)、パラステレラ属(Parasutterella)、ファスコラークトバクテリウム属(Phascolarctobacterium)、プロピオニバクテリウム属(Propionibacterium)、ステレラ属(Sutterella)、ブラウティア属(Blautia)、パラプレボテラ属(Paraprevotella)、コプロコッカス属(Coprococcus)、オドリバクター属(Odoribacter)、スピロプラズマ属(Spiroplasma)、アナエロスティペス属(Anaerostipes)及びアッカーマンシア属(Akkermansia)からなる群から選択される属のものである。例えば、企図される細菌は、バクテロイデス属(Bacteroides)であり得る。すなわち、バクテロイデス属(Bacteroides)種の細菌であり得る。
【0009】
特定の実施形態では、企図される細菌は、シュウ酸:ギ酸アンチポーター(OxlT)、シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4、シュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10、シュウ酸-CoAリガーゼ/オキサリル-CoAシンテターゼ(OXS)- EC6.2.1.8、ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19、スクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2、オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8、オキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+オキシドレダクターゼ(OXR)- EC1.2.1.17及び上記のタンパク質のいずれかの組合せからなる群から選択されるタンパク質又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。1つ以上のトランスジーンは、例えば、プラスミド上にあり得るか、細菌人工染色体上にあり得るか、又はゲノムにインテグレートされ得ることが企図される。細菌が複数のタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含むとき、タンパク質の2つ以上をコードするオープンリーディングフレームは、例えば、単一オペロン内に存在し得ることが企図される。
【0010】
特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体及びOXC又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、細菌は、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンをさらに含む。
【0011】
特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、OXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0012】
特定の実施形態では、企図される細菌は、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはA.タリアナ(A.thaliana)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、E.コリ(E.coli)FCOCT及び/又はE.コリ(E.coli)ACOCTをコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、細菌は、(i)S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(ii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(iii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(iv)又はE.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(v)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーン、(vi)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードする1つ以上のトランスジーン、又は(vii)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーンを含み得ることが企図される。
【0013】
特定の実施形態では、企図される細菌は、配列番号1~31のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号1~31のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0014】
例えば、企図される細菌は、(i)配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(vii)配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0015】
例えば、企図される細菌は、(i)配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号7、配列番号25、配列番号16及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号14、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号7、配列番号25、配列番号21、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2、配列番号16及び配列番号14のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(vii)配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0016】
特定の実施形態では、トランスジーン又は核酸は、リボソーム結合部位(RBS)に作動可能に連結される。例示的なRBSとしては、配列番号164~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むものが挙げられる。例えば、企図される細菌は、(i)配列番号212~219のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードするトランスジーン、(ii)配列番号172~179のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードするトランスジーン、(iii)配列番号164~171のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードするトランスジーン、(iv)配列番号188~195若しくは220~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCをコードするトランスジーン、(v)配列番号180~187のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCをコードするトランスジーン、(vi)配列番号204~211のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)FCOCTをコードするトランスジーン、及び/又は(vii)配列番号196~203のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)ACOCTをコードするトランスジーンを含むことができる。
【0017】
特定の実施形態では、企図される細菌は、配列番号96~162のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号96~162のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0018】
例えば、企図される細菌は、(i)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号147に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号97に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号136に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(viii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号154に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号149に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ix)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(x)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xi)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xiii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(xiv)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0019】
例えば、企図される細菌は、(i)配列番号137、配列番号113、配列番号145、配列番号128及び配列番号104のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号148、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号147、配列番号104、配列番号153、配列番号97、配列番号131、配列番号136及び配列番号113のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vii)配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(viii)配列番号139、配列番号154、配列番号131、配列番号98、配列番号115、配列番号106及び配列番号149のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ix)配列番号137、配列番号113、配列番号148、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(x)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xi)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xii)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xiii)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(xiv)配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0020】
特定の実施形態では、企図される細菌は、配列番号82~95のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号82~95のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0021】
特定の実施形態では、トランスジーン又は核酸は、少なくとも1つの構成的プロモーター、例えばファージ由来プロモーターに作動可能に連結される。例示的なプロモーターとしては、コンセンサス配列GTTAA(n)4~7GTTAA(n)34~38TA(n)2TTTG(配列番号70)を含むもの又は配列番号68、配列番号69若しくは配列番号71を含むものが挙げられる。
【0022】
特定の実施形態では、企図される細菌は、修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて初期コロニー形成の存在量、安定性、予測性又は容易性を増加させてヒト消化管にコロニーを形成するように修飾されている。例えば、企図される細菌は、炭素源として特権栄養素を利用するその能力を増加させるように修飾することができる。例えば、企図される細菌は、炭素源として特権栄養素を利用するその能力を増加させる1つ以上のトランスジーンを含むことができる。例示的な特権栄養素としては、例えば、ポルフィランなどの海洋性多糖が挙げられる。本開示の細菌は、例えば、ヒト対象に投与されると、1012、1011、1010、109、108又は107cfu/グラム糞便内容物を超える存在量をもたらす。
【0023】
他の一態様では、本明細書に提供されるのは、本開示の細菌と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物である。特定の実施形態では、企図される医薬組成物は、カプセル剤又は錠剤、例えば腸溶性コーティングカプセル剤として製剤化される。特定の実施形態では、企図される医薬組成物は、特権栄養素、例えばポルフィランなどの海洋性多糖をさらに含む。
【0024】
他の一態様では、本明細書に提供されるのは、シュウ酸の低減を、それを必要とする対象において行う方法である。企図される方法は、有効量の本開示の細菌又は医薬組成物を対象に投与することを含む。特定の実施形態では、対象は、シュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を有する。他の一態様では、本明細書に提供されるのは、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を治療する方法である。企図される方法は、有効量の本開示の細菌又は医薬組成物を対象に投与することを含む。
【0025】
企図される方法は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに本開示の細菌又は医薬組成物を対象に投与することを含むことができる。特定の実施形態では、対象への本開示の細菌又は医薬組成物の連続投与間の時間は、48時間超である。
【0026】
企図される方法は、特権栄養素、例えばポルフィランなどの海洋性多糖を対象に投与することをさらに含むことができる。例えば、本開示の特権栄養素は、本開示の細菌の前、それと同時又はその後に対象に投与することができる。
【0027】
他の一態様では、本発明は、シュウ酸:ギ酸アンチポーター(OxlT)、シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4、シュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10、シュウ酸-CoAリガーゼ/オキサリル-CoAシンテターゼ(OXS)- EC6.2.1.8、ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19、スクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2、オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8、オキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+オキシドレダクターゼ(OXR)- EC1.2.1.17及び上記のタンパク質のいずれかの組合せからなる群から選択されるタンパク質又はその機能性断片若しくは変異体をコードする発現ベクターを提供する。例示的な発現ベクターとしては、例えば、プラスミド及び細菌人工染色体が挙げられる。発現ベクターが複数のタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含むとき、タンパク質の2つ以上をコードするオープンリーディングフレームは、例えば、単一オペロン内に存在し得ることが企図される。
【0028】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体及びOXC又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、発現ベクターは、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンをさらに含む。
【0029】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、OXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0030】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはA.タリアナ(A.thaliana)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)若しくはO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、E.コリ(E.coli)FCOCT及び/又はE.コリ(E.coli)ACOCTをコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、発現ベクターは、(i)S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(ii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(iii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(iv)又はE.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードする1つ以上のトランスジーン、(v)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーン、(vi)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードする1つ以上のトランスジーン、又は(vii)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードする1つ以上のトランスジーンを含み得ることが企図される。
【0031】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、配列番号1~31のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号1~31のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0032】
例えば、企図される発現ベクターは、(i)配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号25に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号14に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(vii)配列番号21に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号7に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号26若しくは配列番号163に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号2に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号16に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0033】
例えば、企図される発現ベクターは、(i)配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号7、配列番号25、配列番号16及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号14、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号7、配列番号25、配列番号21、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2、配列番号16及び配列番号14のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(vii)配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0034】
特定の実施形態では、トランスジーン又は核酸は、リボソーム結合部位(RBS)に作動可能に連結される。例示的なRBSとしては、配列番号164~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むものが挙げられる。例えば、企図される発現ベクターは、(i)配列番号212~219のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードするトランスジーン、(ii)配列番号172~179のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードするトランスジーン、(iii)配列番号164~171のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードするトランスジーン、(iv)配列番号188~195若しくは220~230のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCをコードするトランスジーン、(v)配列番号180~187のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCをコードするトランスジーン、(vi)配列番号204~211のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)FCOCTをコードするトランスジーン、及び/又は(vii)配列番号196~203のいずれか1つのヌクレオチド配列を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)ACOCTをコードするトランスジーンを含むことができる。
【0035】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、配列番号96~162のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号96~162のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0036】
例えば、企図される発現ベクターは、(i)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号147に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号104に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号97に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号136に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(viii)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号154に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号131に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号149に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ix)配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号148に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(x)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xi)配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号128に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号144に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号115に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号98に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号113に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xiii)配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号137に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号153に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号105に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号96に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(xiv)配列番号139に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号129に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号155に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号112に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号99に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列、配列番号106に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列及び配列番号145に対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0037】
例えば、企図される発現ベクターは、(i)配列番号137、配列番号113、配列番号145、配列番号128及び配列番号104のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ii)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号148、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iii)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(iv)配列番号147、配列番号104、配列番号153、配列番号97、配列番号131、配列番号136及び配列番号113のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(v)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vi)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(vii)配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(viii)配列番号139、配列番号154、配列番号131、配列番号98、配列番号115、配列番号106及び配列番号149のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(ix)配列番号137、配列番号113、配列番号148、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(x)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xi)配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xii)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、(xiii)配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸、又は(xiv)配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことができる。
【0038】
特定の実施形態では、企図される発現ベクターは、配列番号82~95のいずれか1つに対して少なくとも80%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むか、又は配列番号82~95のいずれか1つのヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含む。
【0039】
特定の実施形態では、トランスジーン又は核酸は、少なくとも1つの構成的プロモーター、例えばファージ由来プロモーターに作動可能に連結される。例示的なプロモーターとしては、コンセンサス配列GTTAA(n)4~7GTTAA(n)34~38TA(n)2TTTG(配列番号70)を含むもの又は配列番号68、配列番号69若しくは配列番号71を含むものが挙げられる。
【0040】
本開示のこれらの及び他の態様及び特徴は、下記の詳細な説明及び特許請求の範囲に記載される。
【0041】
本開示は、下記の図面を参照してより詳細に理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【0042】
【
図1】シュウ酸分解経路を示す概略図である。シュウ酸は、OxITシュウ酸:ギ酸アンチポーターを用いて細菌細胞内に移入され、次いで多様な経路を介してギ酸、グリオキシル酸又はCO
2に変換される。ほとんどの生成経路は、OXS、FCOCT、ACOCT又はSCOCTを用いてシュウ酸をCoAにコンジュゲートして、オキサリル-CoAを作製し、次いでOXCを用いてオキサリル-CoAをホルミル-CoAに脱カルボキシル化する。次いで、FCOCTを用いてギ酸を放出して、サイクルを再開する。
【
図2】16SリボソームDNAシーケンシングに基づいて平均的ヒト消化管内の細菌存在量を示すパイチャートである。バクテロイデス属(Bacteroides)は、46%で最も豊富な属である。
【
図3】バクテロイデス属(Bacteroides)中にコンジュゲートしてシュウ酸分解バクテロイデス属(Bacteroides)株を生成可能な5つの異なるプラスミド(配列番号63~67)の概略図を示す。
【
図4】トランスジーンなし(野生型)又は次のプラスミド:pZR748(配列番号63)、pZR753(配列番号64)、pZR753+pZR761(配列番号64、65)若しくはpZR856+pZR878(配列番号66、67)のゲノミックインテグレーションのいずれかを用いてバクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)ATCC8482により消費されたシュウ酸の量を示す棒グラフである。10又は30mMシュウ酸が補足されたフレッシュBHIS液状培地中に各バクテロイデス属(Bacteroides)株の一晩培養物を1:10希釈して、48時間にわたりシュウ酸消費速度をモニターした。
【
図5】接合伝達起点とポルフィラン多糖利用遺伝子座(PUL)とを担持する細菌人工染色体であるプラスミドpWD035(配列番号73)の概略図を示す。
【
図6】野生型B.ブルガタス(B.vulgatus)細胞と比較して機能性ポルフィランPUL(pWD035、配列番号73)を受け取ったバクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)細胞のインビトロ成長アッセイを示す。0.2%ポルフィランが補足された最少培地中に飽和培養物を50×希釈して、37℃で14時間嫌気成長させた。全体を通して培養物の光学濃度をモニターした。ポルフィランPULを含有する細胞のみがポルフィラン上で成長可能であった。
【
図7】シュウ酸消費遺伝子を保有する3つの異なるプラスミド(配列番号75~77)を示す。各プラスミドは、ポルフィラン利用株NB075中にコンジュゲートされて、特権栄養素のポルフィランと消化管由来毒素のシュウ酸との両方を消費可能な株を生成する。
【
図8】4mMシュウ酸を含有するフレッシュBHIS培地に10
10cfu/mlで株を添加した後の指示された工学操作バクテロイデス属(Bacteroides)株のシュウ酸消費速度を示す線グラフである。
【
図9】4mMシュウ酸を含有するスプラーグ・ドーリーラット由来の盲腸内容物に10
10cfu/mlで株を添加した後の指示された工学操作バクテロイデス属(Bacteroides)株のシュウ酸消費速度を示す線グラフである。
【
図10】指示株で治療した後の続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでの尿中シュウ酸レベルを示す棒グラフである。非シュウ酸消費対照株(NB075)と比べて、シュウ酸消費株sWW152は、株投与の4~6日後に尿中シュウ酸の32%低減を生じる(p=0.005)。エラーバーは、95%信頼区間を表す。
【
図11】指示株で治療した後の続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでの尿中シュウ酸レベルを示す線グラフである。非シュウ酸消費対照株(NB124)と比べて、シュウ酸消費株sWW554は、株投与の4~6日後に尿中シュウ酸の46%低減を生じる(p=0.0003)。シェード領域は、95%信頼区間を表す。
【
図12】
図11にまとめられた実験の12日目の各株の糞便中存在量を示す棒グラフである。
【
図13A】指示株及び指示量(重量%)のポルフィランを飲料水に入れて投与して治療した後の続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでの株存在量(コロニー形成単位(CFU)/グラム糞便により測定された)を示す棒グラフである。バーは、平均を表し、ポイントは、個別の動物を表し、且つエラーバーは、95%信頼区間を表す。
【
図13B】指示株及び指示量(重量%)のポルフィランを飲料水に入れて投与して治療した後の続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでの尿中シュウ酸レベルを示す棒グラフである。バーは、平均を表し、ポイントは、個別の動物を表し、且つエラーバーは、95%信頼区間を表す。
【
図14】Route-en-Y胃バイパス(RYGB)手術を介して誘発された高シュウ酸尿症を有するラットでの指示株で治療した後の尿中シュウ酸レベルを示す棒グラフである。バーは、各グループのラットの1日合計尿中シュウ酸の最後の連続5日間の平均を表す。エラーバーは、95%信頼区間を表す(シャムラットは、n=5であり、他のグループは、すべてn=8である)。
【
図15A】リボソーム結合部位(RBS)のスクリーニングの結果を示す。各ポイントは、実施例8に記載されるように、さまざまな工学操作RBSを有する各指示遺伝子の発現(log10ルミネッセンス値により測定したとき)を表す。エラーバーは、95%信頼区間を表す。
【
図15B】指示RBSを有する指示遺伝子の発現(ルミネッセンスにより測定したとき)を示す。エラーバーは、95%信頼区間を表す。
【
図16】指示株によるインビトロのシュウ酸分解を示す棒グラフである。エラーバーは、95%信頼区間を表す。
【発明を実施するための形態】
【0043】
ヒト消化管、とりわけ結腸は、シュウ酸透過性であることが知られている。それは、食事性シュウ酸の一次吸収部位として機能し、血流から腸管腔内へのシュウ酸の分泌は、身体からシュウ酸を排出する二次経路を提供すると考えられる。そのため、結腸は、シュウ酸を分解する系、食事性シュウ酸の吸収及び分泌された内因性シュウ酸の再吸収の予防のための魅力的な位置である。
【0044】
本開示は、概して、増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された細菌に関する。例えば、一態様では、本明細書に提供されるのは、修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された片利共生細菌である。本開示の細菌は、対象に投与されると、対象において、例えば対象の大腸でシュウ酸を分解するため、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を治療するのに有用であることが企図される。したがって、本開示は、シュウ酸の上昇した量に伴う障害、例えば高シュウ酸尿症を治療するために本開示の細菌を使用する医薬組成物又はユニット及び方法にさらに関する。
【0045】
企図される修飾細菌は、加えて、治療対象の消化管内の他の細菌がほとんど利用できない海洋性多糖ポルフィリンなどの炭素源を利用する能力を有することができる。結果として、対象の消化管内の修飾細菌の増殖、存在量又は安定性は、それを炭素源と共に供給することにより維持することができる。
【0046】
I.修飾細菌
本開示は、概して、修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて増加したシュウ酸分解活性を有するように修飾された細菌に関する。例えば、企図される細菌は、シュウ酸分解活性を増加させる1つ以上のトランスジーンを発現するように修飾することができる。「シュウ酸分解」という用語は、本明細書では「シュウ酸消費」という用語と同義的に用いられる。シュウ酸分解に関連する遺伝子を含むシュウ酸分解経路を、
図1に示す。1つ以上のトランスジーンは、例えば、プラスミド上にあり得るか、細菌人工染色体上にあり得るか、又はゲノムにインテグレートされ得ることが企図される。細菌が複数のタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含むとき、タンパク質の2つ以上をコードするオープンリーディングフレームは、例えば、単一オペロン内に存在し得ることが企図される。
【0047】
細菌内での発現によりシュウ酸分解活性を増加させ得るシュウ酸分解に関連する例示的な的遺伝子としては、シュウ酸:ギ酸アンチポーター(OxlT)、シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4、シュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10、シュウ酸-CoAリガーゼ/オキサリル-CoAシンテターゼ(OXS)- EC6.2.1.8、ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19、スクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2、オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8及びオキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+オキシドレダクターゼ(OXR)- EC1.2.1.17をコードするものが挙げられる。
【0048】
細菌がシュウ酸を分解するために、シュウ酸トランスポーター、典型的にはシュウ酸:ギ酸アンチポーターの発現が必要とされるかもしれない。例示的なシュウ酸トランスポーターとしては、オキサロバクター・ホルミゲネス(Oxalobacter formigenes)由来のOxlT又はカプリアビダス・オキサラティカス(Cupriavidus oxalaticus)及びビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)をはじめとする他の種由来のそのホモログのいずれかが挙げられる。これらのアンチポーターは、腸内環境から細菌細胞内にシュウ酸を運ぶと共に、それと引き換えに運び込まれたすべてのシュウ酸分子に対してギ酸老廃物の1分子を排出する。シュウ酸が細胞に入ると、それは、シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4又はシュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10を用いて直接分解可能である。
【0049】
代替的に、シュウ酸は、補酵素Aにコンジュゲートされて、シュウ酸-CoAリガーゼ(OXS)- EC6.2.1.8、ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19又はスクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2のいずれかを用いてオキサリル-CoAを作製可能である。FCOCTは、CoAドナーとしてホルミル-CoAを使用すると共に、オキサリル-CoA分解時にホルミル-CoAが老廃物として発生するため、効率的サイクルをもたらす。また、OXS、ACOCT及びSCOCTによりそれぞれ使用されるATP、アセチル-CoA、スクシニル-CoAなどのより豊富な出発材料を用いてサイクルを開始することも必要であるかもしれない。
【0050】
オキサリル-CoAは、オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8により分解される。この結果、ホルミル-CoAが発生し、これは、FCOCTにより分解されてギ酸を放出する。次いで、ギ酸は、ギ酸デヒドロゲナーゼ(FDH)- EC1.2.1.2により分解されてCO2を発生可能である。オキサリル-CoA廃棄のための追加の選択肢は、オキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+(OXR)オキシドレダクターゼ-EC1.2.1.17を介する追加のバイオマスを構築するグリオキシル酸への還元である。
【0051】
企図される修飾細菌の特定の実施形態では、シュウ酸は、OxlTアンチポーターを用いて細菌内に移入されると共に、FCOCT及びOXCを用いたシュウ酸の連続ギ酸変換サイクルに供給される。このサイクルのさらなる支持は、OXC酵素の複数のコピーの発現増加により提供可能である。加えて、サイクル中間体のオキサリル-CoA及びホルミル-CoAのプールは、OXS、ACOCT又はSCOCTの発現により生成及び支持可能である。そのため、特定の実施形態では、企図される細菌細胞は、OXC及びFCOCTの高マルチコピー発現、OXS、ACOCT及び/又はSCOCTの高発現並びにOxlTの中程度の発現を有する。特定の実施形態では、シュウ酸:ギ酸アンチポーターのN末端断片は、天然トランスポータータンパク質由来のN末端断片とスワップされている。
【0052】
したがって、特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体及びOXC又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、細菌は、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンをさらに含む。
【0053】
特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、OXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、OXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、OxIT又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXS又はその機能性断片若しくは変異体、第1のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、第2のOXC又はその機能性断片若しくは変異体、FCOCT又はその機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン及び/或いはACOCT又はその機能性断片若しくは変異体を含む。
【0054】
本明細書で用いられる場合、生物学的エンティティ(例えば、遺伝子、タンパク質(例えば、OxIT、OXS、OXC若しくはFCOCT)、プロモーター又はリボソーム結合部位)の「機能性断片」という用語は、例えば、対応する天然に存在する全長生物学的エンティティの生物学的活性の少なくとも10%、少なくとも20%、少なくとも30%、少なくとも40%、少なくとも50%、少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%又は100%を保持する全長生物学的エンティティの断片を意味する。
【0055】
特定の実施形態では、企図される細菌は、B.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)OxIT、例えばB.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)DSM10140 OxIT、C.オキサラティカス(C.oxalaticus)OxIT、例えばC.オキサラティカス(C.oxalaticus)ATCC11883 OxIT、E.コリ(E.coli)OxIT、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 OxIT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、例えばO.ホルミゲネス(O.formigenes)DSM4420 OxIT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌は、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、例えばO.ホルミゲネス(O.formigenes)DSM4420 OxIT又はO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0056】
特定の実施形態では、企図される細菌は、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、例えばS.セレビシエ(S.cerevisiae)S288C OXS、M.エクストルクエンス(M.extorquens)OXS、例えばM.エクストルクエンス(M.extorquens)AM1/DSM1338 OXS、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、例えばA.タリアナ(A.thaliana)col-1 OXS又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌は、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、例えばS.セレビシエ(S.cerevisiae)S288C OXS又はS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、例えばA.タリアナ(A.thaliana)col-1 OXS又はA.タリアナ(A.thaliana)OXSに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0057】
特定の実施形態では、企図される細菌は、B.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)OXC、例えばB.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)DSM10140 OXC、C.オキサラティカス(C.oxalaticus)OXC、例えばC.オキサラティカス(C.oxalaticus)ATCC11883 OXC、E.コリ(E.coli)OXC、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、例えばS.セレビシエ(S.cerevisiae)S288C OXC、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、例えばO.ホルミゲネス(O.formigenes)DSM4420 OXC又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌は、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、例えばS.セレビシエ(S.cerevisiae)S288C OXC又はS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。特定の実施形態では、企図される細菌は、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、例えばO.ホルミゲネス(O.formigenes)DSM4420 OXC又はO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0058】
特定の実施形態では、企図される細菌は、B.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)FCOCT、例えばB.アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス(B.animalis subsp.lactis)DSM10140 FCOCT、C.オキサラティカス(C.oxalaticus)FCOCT、例えばC.オキサラティカス(C.oxalaticus)ATCC11883 FCOCT、E.コリ(E.coli)FCOCT、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)FCOCT、例えばO.ホルミゲネス(O.formigenes)DSM4420 FCOCT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌は、E.コリ(E.coli)FCOCT、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 FCOCT又はE.コリ(E.coli)FCOCTに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0059】
特定の実施形態では、企図される細菌は、A.アセチ(A.aceti)ACOCT、例えばA.アセチ(A.aceti)株1023 ACOCT、E.コリ(E.coli)ACOCT、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 ACOCT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌は、E.コリ(E.coli)ACOCT、例えばE.コリ(E.coli)MG1655 ACOCT又はE.コリ(E.coli)ACOCTに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するタンパク質をコードする1つ以上のトランスジーンを含む。
【0060】
例えば、細菌は、(i)S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン、(ii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン、(iii)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン、(iv)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン、(v)E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン、(vi)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びA.タリアナ(A.thaliana)OXS又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーン或いは(vii)O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT、E.コリ(E.coli)FCOCT、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS又は上記のタンパク質のいずれかの機能性断片若しくは変異体をコードする1つ以上のトランスジーンを含み得ることが企図される。
【0061】
例示的なACOCTコード配列を、配列番号1~2に示し、例示的なFDHコード配列は、配列番号3~4に示され、例示的なFCOCTコード配列は、配列番号4~8に示され、例示的なOXDCコード配列は、示された入力配列番号9であり、例示的なOXOコード配列は、示された入力配列番号10であり、例示的なOORコード配列は、示された入力配列番号11~13であり、例示的なOXSコード配列は、配列番号14~16に示され、例示的なOxITコード配列は、配列番号17~21に示され、例示的なOXCコード配列は、配列番号22~26及び163に示され、例示的なOXRコード配列は、配列番号27に示され、且つ例示的なSCOCTコード配列は、配列番号28~31に示される。
【0062】
したがって、特定の実施形態では、細菌は、配列番号1~31のいずれか1つのヌクレオチド配列又はその機能性断片若しくは変異体を含む1つ以上の核酸を含むように修飾されている。特定の実施形態では、細菌は、配列番号1~31のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又はその機能性断片若しくは変異体を含む1つ以上の核酸を含むように修飾されている。
【0063】
例えば、細菌は、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163及び配列番号21のヌクレオチド配列又は配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163及び配列番号21に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号7、配列番号25、配列番号16及び配列番号21のヌクレオチド配列又は配列番号7、配列番号25、配列番号16及び配列番号21に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列又は配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号21に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号14、配列番号2及び配列番号21のヌクレオチド配列又は配列番号7、配列番号25、配列番号16、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号14、配列番号2及び配列番号21に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号7、配列番号25、配列番号21、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列又は配列番号7、配列番号25、配列番号21、配列番号2及び配列番号16に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2、配列番号16及び配列番号14のヌクレオチド配列又は配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2、配列番号16及び配列番号14に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号16のヌクレオチド配列又は配列番号21、配列番号7、配列番号26若しくは配列番号163、配列番号2及び配列番号16に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。
【0064】
特定の実施形態では、細菌は、配列番号32~62のいずれか1つのアミノ酸配列又はその機能性断片若しくは変異体をコードするヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むように修飾されている。特定の実施形態では、細菌は、配列番号32~62のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列又はその機能性断片若しくは変異体を含む1つ以上の核酸を含むように修飾されている。
【0065】
例えば、細菌は、配列番号47、配列番号57及び配列番号52のアミノ酸配列又は配列番号47、配列番号57及び配列番号52に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号38、配列番号56、配列番号47及び配列番号52のアミノ酸配列又は配列番号38、配列番号56、配列番号47及び配列番号52に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号38、配列番号56、配列番号47、配列番号57、配列番号33及び配列番号52のアミノ酸配列又は配列番号38、配列番号56、配列番号47、配列番号57、配列番号33及び配列番号52に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号38、配列番号56、配列番号47、配列番号57、配列番号45、配列番号33及び配列番号52のアミノ酸配列又は配列番号38、配列番号56、配列番号47、配列番号57、配列番号45、配列番号33及び配列番号52に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号38、配列番号56、配列番号52、配列番号33及び配列番号47のアミノ酸配列又は配列番号38、配列番号56、配列番号52、配列番号33及び配列番号47に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号52、配列番号38、配列番号57、配列番号33、配列番号47及び配列番号45のアミノ酸配列又は配列番号52、配列番号38、配列番号57、配列番号33、配列番号47及び配列番号45に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。細菌は、配列番号52、配列番号38、配列番号57、配列番号33及び配列番号47のアミノ酸配列又は配列番号52、配列番号38、配列番号57、配列番号33及び配列番号47に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するアミノ酸配列をコードする1つ以上のヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含み得ることが企図される。
【0066】
配列同一性は、当技術分野の技能の範囲内の各種の方法、例えばBLAST、BLAST-2、ALIGN、Megalign(DNASTAR)ソフトウェアなどの公的に利用可能なコンピューターソフトウェアを用いて決定することができる。プログラムblastp、blastn、blastx、tblastn及びtblastx(Karlin et al.,(1990)PROC.NATL.ACAD.SCI.USA 87:2264-2268、Altschul,(1993)J.MOL.EVOL.36,290-300、Altschul et al.,(1997)NUCLEIC ACIDS RES.25:3389-3402(参照により組み込まれる))により利用されるアルゴリズムを用いたBLAST(Basic Local Alignment Search Tool)解析は、配列類似性検索に合わせて調整される。配列データベース検索の基本的課題に関する考察については、Altschul et al.,(1994)NATURE GENETICS 6:119-129(参照により完全に組み込まれる)を参照されたい。当業者であれば、比較される配列の長さ全体にわたる最大アライメントの達成に必要とされるいずれのアルゴリズムも含めて、アライメントの評価に適したパラメーターを決定可能である。ヒストグラム、説明文、アライメント、期待値(すなわちデータベース配列に対するマッチを報告する統計的有意性閾値)、カットオフ、マトリックス及びフィルターに対する検索パラメーターは、デフォルト設定である。blastp、blastx、tblastn及びtblastxにより使用されるデフォルトスコアリング行列は、BLOSUM62マトリックス(Henikoff et al.,(1992)PROC.NATL.ACAD.SCI.USA 89:10915-10919、(参照により完全に組み込まれる))である。4つのblastnパラメーターは、次のように調整することができる。Q=10(ギャップクリエーションペナルティー)、R=10(ギャップエクステンションペナルティー)、wink=1(クエリーに沿ってあらゆるwink.sup.th位置でワードヒットを発生する)及びgapw=16(ギャップ付きアライメントが発生されるウィンドウ幅を設定する)。均等なBlastpパラメーター設定値は、Q=9、R=2、wink=1及びgapw=32とすることができる。検索は、NCBI(National Center for Biotechnology Information)BLAST詳細オプションパラメーターを用いても行うことができる(例えば、-G、オープンギャップコスト[整数]:デフォルト=5(ヌクレオチド)/11(タンパク質)、-E、ギャップ伸長コスト[整数]:デフォルト=2(ヌクレオチド)/1(タンパク質)、-q、ヌクレオチドミスマッチペナルティー[整数]:デフォルト=-3、-r、ヌクレオチドマッチリワード[整数]:デフォルト=1、-e、期待値[実数]:デフォルト=10、-W、ワードサイズ[整数]:デフォルト=11(ヌクレオチド)/28(megablast)/3(タンパク質)、-y、ビット単位blastエクステンションドロップオフ(X):デフォルト=20(blastn)/7(その他)、-X、ギャップ付きアライメントXドロップオフ値(ビット単位):デフォルト=15(すべてのプログラム)、blastnには適用不可及び-Z、ギャップ付きアライメント最終Xドロップオフ値(ビット単位):50(blastn)、25(その他))。ペアワイズタンパク質アライメントのためのClustalWも使用することができる(デフォルトパラメーターは、例えば、Blosum62マトリックス及びギャップオープニングペナルティー=10及びギャップエクステンションペナルティー=0.1を含むことができる)。GCGパッケージのバージョン10.0で利用可能な配列間ベストフィット比較は、DNAパラメーターのGAP=50(ギャップクリエーションペナルティー)及びLEN=3(ギャップエクステンションペナルティー)を使用し、タンパク質比較の均等な設定値は、GAP=8及びLEN=2である。
【0067】
企図される修飾細菌、例えば本開示の医薬組成物又は方法に使用される修飾細菌としては、バクテロイデス属(Bacteroides)、アリスティペス属(Alistipes)、フェカリバクテリウム属(Faecalibacterium)、パラバクテロイデス属(Parabacteroides)、プレボテラ属(Prevotella)、ロセブリア属(Roseburia)、ルミノコッカス属(Ruminococcus)、クロストリジウム属(Clostridium)、オシリバクター属(Oscillibacter)、ゲンミゲル属(Gemmiger)、バルネシエラ属(Barnesiella)、ディアリスター属(Dialister)、パラステレラ属(Parasutterella)、ファスコラークトバクテリウム属(Phascolarctobacterium)、プロピオニバクテリウム属(Propionibacterium)、ステレラ属(Sutterella)、ブラウティア属(Blautia)、パラプレボテラ属(Paraprevotella)、コプロコッカス属(Coprococcus)、オドリバクター属(Odoribacter)、スピロプラズマ属(Spiroplasma)、アナエロスティペス属(Anaerostipes)又はアッカーマンシア属(Akkermansia)の細菌が挙げられる。企図される細菌、例えば本開示の医薬組成物又は方法に使用される細菌は、バクテロイデス属(Bacteroides)とすることができ、すなわちバクテロイデス属(Bacteroides)種の細菌とすることができる。
【0068】
例示的なバクテロイデス属(Bacteroides)種としては、B.アシディファシエンス(B.acidifaciens)、B.バルネシアエス(B.barnesiaes)、B.カッカエ(B.caccae)、B.ケシコラ(B.caecicola)、B.ケシガリナラム(B.caecigallinarum)、B.セルロシリティカス(B.cellulosilyticus)、B.セルロソルベンス(B.cellulosolvens)、B.クララス(B.clarus)、B.コアギュランス(B.coagulans)、B.コプロコラ(B.coprocola)、B.コプロフィラス(B.coprophilus)、B.コプロスイス(B.coprosuis)、B.ディスタソニス(B.distasonis)、B.ドレイ(B.dorei)、B.エガーチイ(B.eggerthii)、B.グラシリス(B.gracilis)、B.フェシチンチレ(B.faecichinchillae)、B.フェシス(B.faecis)、B.フィネゴルディイ(B.finegoldii)、B.フルクサス(B.fluxus)、B.フラギリス(B.fragilis)、B.ガラクツロニカス(B.galacturonicus)、B.ガリナセウム(B.gallinaceum)、B.ガリナラム(B.gallinarum)、B.ゴルドステイニ(B.goldsteinii)、B.グラミニソルベンス(B.graminisolvens)、B.ヘルコゲネ(B.helcogene)、B.インテスティナリス(B.intestinalis)、B.ルティ(B.luti)、B.マシリエンシス(B.massiliensis)、B.メラニノゲニカス(B.melaninogenicus)、B.ノルディイ(B.nordii)、B.オレイシプレヌス(B.oleiciplenus)、B.オリス(B.oris)、B.オバタス(B.ovatus)、B.パウロサッカロリティカス(B.paurosaccharolyticus)、B.ペクチノフィラス(B.pectinophilus)、B.プレベイウス(B.plebeius)、B.ポリプラグマタス(B.polypragmatus)、B.プロピオニシファシエンス(B.propionicifaciens)、B.プトレディニス(B.putredinis)、B.ピオゲネス(B.pyogenes)、B.レチクロテルミティス(B.reticulotermitis)、B.ロデンティウム(B.rodentium)、B.サラニトロニス(B.salanitronis)、B.サリエルシエ(B.salyersiae)、B.サルトリイ(B.sartorii)B.セディメント(B.sediment)B.ステルコリス(B.stercoris)、B.スイス(B.suis)、B.テクタス(B.tectus)、B.テタイオタオミクロン(B.thetaiotaomicron)、B.ユニフォルミス(B.uniformis)、B.ブルガタス(B.vulgatus)、B.キシラニソルベンス(B.xylanisolvens)及びB.キシラノリティカスキシラノリティカス(B.xylanolyticusxylanolyticus)が挙げられる。
【0069】
本明細書で用いられる場合、「種」という用語は、ゲノミック配列及び表現型特性により従来から定義される分類学的エンティティを意味する。「株」とは、従来の微生物学技術に従って単離及び精製された種の特定インスタンスのことである。本開示は、本開示の細菌株の誘導体を包含する。「誘導体」という用語は、娘株(後代)を含むか、又は起源株から培養(サブクローニング)されたものであるが、株の生物学的活性をネガティブに改変することなく、何らかの形式で修飾された(遺伝子レベルを含めて)株を含む。
【0070】
特定の実施形態では、企図される修飾細菌は、治療対象の糞便中又は平均的ヒトの糞便中の合計培養可能微生物の0.1%、0.5%、1%、5%、10%、20%、30%又は40%超を構成する属である。特定の実施形態では、企図される修飾細菌は、10
12、10
11、10
10、10
9、10
8、10
7コロニー形成単位/グラム治療対象糞便又は/グラム平均的ヒト糞便を超えるレベルで検出される属である。特定の実施形態では、企図される修飾細菌は、治療対象の消化管マイクロバイオーム又は平均的ヒトの消化管マイクロバイオームの0.1%、0.5%、1%、5%、10%、20%、30%又は40%超を構成する属である。ヒト消化管又は糞便マイクロバイオーム組成物は、16Sリボソームシーケンシングを含めて当技術分野で公知のいずれかの技術によりアッセイすることができる。
図2は、16SリボソームDNAシーケンシングに基づいて平均的ヒト消化管内の細菌存在量を示す。バクテロイデス属(Bacteroides)は、ヒト消化管内の天然で最も豊富な属である。
【0071】
rRNA、16S rDNA、16S rRNA、16S、18S、18S rRNA及び18S rDNAとは、リボソームの成分である核酸又はリボソームの成分をコードする核酸を意味する。リボソームには小サブユニット(SSU)及び大サブユニット(LSU)と称される2つのサブユニットが存在する。rDNA遺伝子及びその相補的RNA配列は、可変ではあるが生物間分子比較を可能にするのに十分な程度に保存されているため、生物間の進化的関係の決定に広く使用される。
【0072】
30S SSUの16S rDNA配列(およそ1542ヌクレオチド長)は、特定の実施形態では、原核生物の分子ベース分類学的帰属に使用可能であり、且つ40S SSUの18S rDNA配列(およそ1869ヌクレオチド長)は、真核生物に使用することができる。例えば、16S配列は、一般に高度に保存されているがほとんどの細菌の属及び種を区別するのに十分なヌクレオチド多様性を保有する特異的超可変領域を含有するため、系統発生学的再構築に使用することができる。16S rDNA配列データは、分類学的分類を提供するために使用されてきたが、同一の属及び種に分類される近縁細菌株は、識別可能な生物学的表現型を呈するかもしれない。
【0073】
企図される細菌種又は株のアイデンティティーは、16S rRNA又は全ゲノム配列解析により特徴付けることができる。例えば、特定の実施形態では、企図される細菌株は、参照配列に対して特定の%同一性を有する16S rRNA又はゲノミック配列を含むことができる。
【0074】
特定の実施形態では、企図される修飾細菌は、ヒト消化管に安定的にコロニーを形成可能である。本開示の細菌は、例えば、ヒト対象に投与されると、1012、1011、1010、109、108又は107cfu/グラム糞便内容物を超える存在量をもたらす。例えば、本開示の細菌の約103、約104、約105、約106、約107、約108、約109、約1010、約1011又は約1012細胞をヒト対象に投与すると、投与後12時間、24時間、36時間、48時間、60時間又は72時間で1012、1011、1010、109、108又は107cfu/グラム糞便内容物を超える存在量をもたらすかもしれない。
【0075】
本開示の細菌は、例えば、修飾されていない類似又は他に同等の細菌と比べて初期コロニー形成の存在量、安定性、予測性又は容易性を増加させてヒト消化管にコロニーを形成するように修飾されている。例えば、企図される細菌は、炭素源として特権栄養素を利用するその能力を増加させるように修飾することができる。「特権栄養素」とは、特定細菌株の増殖を支援するように消費可能であると共に消化管内の他の細菌の1%以下に増殖支援を提供する分子又は分子セットとして定義される。したがって、特定の実施形態では、修飾細菌は、シュウ酸又は他の炭素源若しくはエネルギー源の不在下でさえも、対象の消化管内でコロニー形成を持続して予測可能に高存在量に拡大すると共に対象の消化管内のほとんどの他の細菌ではそうならないように特権栄養素を消費する能力を有する。例示的な特権栄養素としては、例えば、ポルフィランなどの海洋性多糖が挙げられる。
【0076】
例えば、細菌は、特権栄養素、例えばポルフィリンなどの海洋性多糖を炭素源として利用するその能力を増加させる1つ以上のトランスジーンを含むことができる。特定の実施形態では、細菌は、特権栄養素などの炭水化物を消費する能力を細菌に付与する可動ジェネティックエレメントの多糖利用遺伝子座(PUL)の全部又は一部を含むことができる。例示的なポルフィラン消費PULは、配列番号72に示されるポルフィラン消費バクテロイデス属(Bacteroides)株NB001由来のPULである。したがって、特定の実施形態では、修飾細菌は、配列番号72又はその機能性断片若しくは変異体を含む。特定の実施形態では、修飾細菌は、配列番号72に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又はその機能性断片若しくは変異体を含む。
【0077】
対象の消化管内の存在量を増加させる追加の例示的な細菌修飾、特権栄養素、特権栄養素を利用する細菌の能力を増加させるトランスジーンPUL並びに修飾細菌の成長をモジュレートする他の方法及び組成物は、(PCT)国際公開第2018112194号パンフレットに記載されている。
【0078】
特定の実施形態では、修飾されていない類似又は他に同等の細菌は、検出可能なシュウ酸分解活性を有しておらず、且つ/又はシュウ酸異化に関与、例えば直接関与することが知られている遺伝子を有していない。例えば、修飾されていない類似又は他に同等の細菌は、シュウ酸:ギ酸アンチポーター(OxlT)、シュウ酸デカルボキシラーゼ(OXDC)- EC4.1.1.2、シュウ酸オキシダーゼ(OXO)- EC1.2.3.4、シュウ酸オキシドレダクターゼ(OOR)- EC1.2.7.10、シュウ酸-CoAリガーゼ/オキサリル-CoAシンテターゼ(OXS)- EC6.2.1.8、ホルミル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(FCOCT)- EC2.8.3.16、アセチル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(ACOCT)- EC2.8.3.19、スクシニル-CoA:シュウ酸CoA-トランスフェラーゼ(SCOCT)- EC2.8.3.2、オキサリル-CoAデカルボキシラーゼ(OXC)- EC4.1.1.8又はオキサリル-CoAレダクターゼ/グリオキシル酸:NADP+オキシドレダクターゼ(OXR)- EC1.2.1.17をコードする遺伝子を有していないものであってもよい。特定の実施形態では、本細菌と同一の属の天然に存在するメンバーは、検出可能なシュウ酸分解活性を有していない。
【0079】
特定の実施形態では、本開示のトランスジーン又は核酸は、少なくとも1つの構成的プロモーター、例えばファージ由来プロモーターに作動可能に連結された外因性ヌクレオチド配列を含む。「作動可能に連結された」という用語は、機能的関係のポリヌクレオチドエレメントの連結を意味する。核酸配列は、他の核酸配列と機能的関係に配置されたとき、「作動可能に連結されている」。例えば、プロモーター又はエンハンサーは、それが遺伝子の転写に影響を及ぼす場合、遺伝子に作動可能に連結されている。作動可能に連結されたヌクレオチド配列は、典型的には連続である。しかし、エンハンサーは、プロモーターから数キロ塩基分離されているときに一般に機能し、且つイントロン配列は、可変長であり得るため、いくつかのポリヌクレオチドエレメントは、直接フランキングされていなくても作動可能に連結され得ると共に、異なる対立遺伝子又は染色体に対してトランスでさえも機能し得る。例示的なファージ由来プロモーターとしては、配列番号68、配列番号69、配列番号70若しくは配列番号71のヌクレオチド配列又は配列番号68、配列番号69、配列番号70若しくは配列番号71に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含むものが挙げられる。追加の例示的なファージ由来プロモーターは、(PCT)国際公開第2017184565号パンフレットに記載されている。
【0080】
特定の実施形態では、外因性ヌクレオチド配列を含む本開示のトランスジーン又は核酸は、少なくとも1つのリボソーム結合部位(RBS)に作動可能に連結される。例示的なRBSとしては、配列番号164~230のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号164~230のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むものが挙げられる。例えば、企図される細菌は、(i)配列番号212~219のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号212~219のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITをコードするトランスジーン、(ii)配列番号172~179のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号172~179のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSをコードするトランスジーン、(iii)配列番号164~171のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号164~171のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたA.タリアナ(A.thaliana)OXSをコードするトランスジーン、(iv)配列番号188~195若しくは220~230のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号188~195若しくは220~230のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCをコードするトランスジーン、(v)配列番号180~187のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号180~187のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCをコードするトランスジーン、(vi)配列番号204~211のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号204~211のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)FCOCTをコードするトランスジーン、及び/並びに(vii)配列番号196~203のいずれか1つのヌクレオチド配列、配列番号196~203のいずれか1つに対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列又は上記のいずれかのヌクレオチド配列の機能性断片若しくは変異体を含むRBSに作動可能に連結されたE.コリ(E.coli)ACOCTをコードするトランスジーンを含むことができる。
【0081】
細菌は、配列番号96~162のいずれか1つのヌクレオチド配列又は配列番号96~162のいずれか1つのヌクレオチド配列に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。
【0082】
例えば、細菌は、配列番号137、配列番号113、配列番号145、配列番号128及び配列番号104のヌクレオチド配列又は配列番号137、配列番号113、配列番号145、配列番号128及び配列番号104に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号148、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列又は配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号148、配列番号115、配列番号98及び配列番号105に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列又は配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号147、配列番号104、配列番号153、配列番号97、配列番号131、配列番号136及び配列番号113のヌクレオチド配列又は配列番号147、配列番号104、配列番号153、配列番号97、配列番号131、配列番号136及び配列番号113に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列又は配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列又は配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列又は配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号139、配列番号154、配列番号131、配列番号98、配列番号115、配列番号106及び配列番号149のヌクレオチド配列又は配列番号139、配列番号154、配列番号131、配列番号98、配列番号115、配列番号106及び配列番号149に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号137、配列番号113、配列番号148、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列又は配列番号137、配列番号113、配列番号148、配列番号129及び配列番号105に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129及び配列番号105のヌクレオチド配列又は配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129及び配列番号105に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105のヌクレオチド配列又は配列番号155、配列番号137、配列番号128、配列番号144、配列番号115、配列番号98及び配列番号105に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96のヌクレオチド配列又は配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105、配列番号113及び配列番号96に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96のヌクレオチド配列又は配列番号145、配列番号137、配列番号153、配列番号129、配列番号105及び配列番号96に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。細菌は、配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145のヌクレオチド配列又は配列番号139、配列番号129、配列番号155、配列番号112、配列番号99、配列番号106及び配列番号145に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。
【0083】
細菌は、配列番号82~95のいずれか1つのヌクレオチド配列又は配列番号82~95のいずれか1つのヌクレオチド配列に対して少なくとも80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%若しくは99%の同一性を有するヌクレオチド配列を含む1つ以上の核酸を含むことが企図される。
【0084】
II.医薬組成物/ユニット
本明細書に開示される細菌は、当技術分野で公知のいずれかの手段により患者に投与可能な医薬組成物を形成するために薬学的に許容可能な賦形剤と組み合わせることができる。本明細書で用いられる場合、「薬学的に許容可能な賦形剤」という用語は、合理的な便益/リスク比に見合って過度の毒性、刺激、アレルギー反応又は他の問題若しくは合併症を伴うことなくヒト対象などの対象に投与するのに好適な緩衝剤、担体又は賦形剤の1つ以上を意味するものと理解される。賦形剤は、製剤の他の成分に適合可能であり且つレシピエントに有害でないという意味で「許容可能」であるべきである。
【0085】
薬学的に許容可能な賦形剤としては、医薬投与に適合可能な緩衝剤、溶媒、分散媒、コーティング、等張化剤、吸収遅延剤など挙げられる。また、薬学的に許容可能な賦形剤としては、充填剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、滑沢剤及びそれらのいずれかの組合せも挙げられる。賦形剤、担体、安定化剤及びアジュバントのさらなる例については、例えば、Handbook of Pharmaceutical Excipients,8th Ed.,Edited by P.J.Sheskey,W.G.Cook,and C.G.Cable,Pharmaceutical Press,London,UK[2017]を参照されたい。医薬活性物質に対するかかる媒体及び作用剤の使用は、当技術分野で公知である。
【0086】
企図される細菌は、いずれかの形態、例えば凍結乾燥状態(任意に1つ以上の適切な凍結保護剤を含む)、フリーズ状態(例えば、標準若しくは過冷却フリーザー内)、スプレー乾燥状態及び/又はフリーズドライ状態を含めて、当業者に公知の安定形態で本開示の組成物に使用することができる。「安定」製剤又は組成物とは、その中の生物学的活性物質が貯蔵時にその物理的安定性、化学的安定性及び/又は生物学的活性を本質的に保持するものである。安定性は、選択された時間にわたり選択された温度及び湿度条件で測定可能である。トレンド分析は、予想貯蔵寿命を推定するために使用可能であり、材料は、実際にはその後でその期間にわたり貯蔵状態となる。例えば、生細菌では、安定性は、あらかじめ定義された温度、湿度及び時間条件下でcfu/g乾燥製剤単位で1logを失うのに要する時間として定義することができる。
【0087】
本明細書に開示される細菌は、1つ以上の凍結保護剤と組み合わせることができる。例示的な凍結保護剤としては、フラクトオリゴ糖(例えば、raftilose(登録商標))、トレハロース、マルトデキストリン、ナトリウムアルギネート、プロリン、グルタミン酸、グリシン(例えば、グリシンベタイン)、単糖、二糖若しくは多糖(例えば、グルコース、スクロース、マルトース、ラクトース)、ポリオール(例えば、マンニトール、ソルビトール若しくはグリセロール)、デキストラン、DMSO、メチルセルロース、プロピレングリコール、ポリビニルピロリドン、非イオン性界面活性剤、例えばTween80及び/又はそれらのいずれかの組合せが挙げられる。
【0088】
医薬組成物は、その意図される投与経路に適合可能となるように製剤化されるべきである。本明細書に開示される企図される細菌組成物は、いずれかの好適な方法により調製可能であると共に、さまざまな形態で製剤化されていくつかの異なる手段により投与可能である。企図される組成物は、要望に応じて従来から許容可能な担体、アジュバント及び媒体を含有する製剤で経口、直腸又は経腸投与可能である。本明細書で用いられる場合、「直腸投与」とは、浣腸、坐剤又は結腸内視術による投与が含まれるものと理解される。本開示の医薬組成物は、例えば、ボーラス投与又はボーラス放出に好適であるかもしれない。例示的な実施形態では、本開示の細菌組成物は経口投与される。
【0089】
経口投与用固形製剤としては、カプセル剤、錠剤、カプレット剤、丸剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、粉末剤及び顆粒剤が挙げられる。カプセル剤は、典型的には、細菌組成物を含むコア材料とコア材料をカプセル化するシェル壁とを含む。いくつかの実施形態では、コア材料は、固体、液体及びエマルジョンの少なくとも1つを含む。いくつかの実施形態では、シェル壁材料は、ソフトゼラチン、ハードゼラチン及びポリマーの少なくとも1つを含む。好適なポリマーとしては、限定されるものではないが、セルロース系ポリマー、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、メチルセルロース、エチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースアセテートフタレート、セルロースアセテートトリメリテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルローススクシネート及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、アクリル酸ポリマー及びコポリマー、例えばアクリル酸、メタクリル酸、メチルアクリレート、アンモニオメチルアクリレート、エチルアクリレート、メチルメタクリレート及び/又はエチルメタクリレートから形成されるもの(例えば、商品名「Eudragit(登録商標)」で販売されているコポリマー)、ビニルポリマー及びコポリマー、例えばポリビニルピロリドン、ポリビニルアセテート、ポリビニルアセテートフタレート、ビニルアセテートクロトン酸コポリマー及びエチレン-ビニルアセテートコポリマー並びにシェラック(精製ラック)が挙げられる。いくつかの実施形態では、少なくとも1つのポリマーは味マスキング剤として機能する。
【0090】
錠剤、丸剤などは、圧縮、複数回圧縮、複層化及び/又は被覆することが可能である。企図されるコーティングは、単一又は複数とすることができる。一実施形態では、企図されるコーティング材料は、植物、真菌及び微生物の少なくとも1つから抽出される糖、多糖及び糖タンパク質の少なくとも1つを含む。非限定的例としては、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、ジャガイモデンプン、タピオカデンプン、セルロース、ヘミセルロース、デキストラン、マルトデキストリン、シクロデキストリン、イヌリン、ペクチン、マンナン、アラビアガム、ローカストビーンガム、メスキートガム、グアーガム、ガムカラヤ、ガムガティ、トラガカントガム、フノリ、カラゲナン、ポルフィラン、寒天、アルギネート、キトサン又はジェランガムが挙げられる。いくつかの実施形態では、企図されるコーティング材料はタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、企図されるコーティング材料は脂肪及び油の少なくとも1つを含む。いくつかの実施形態では、脂肪及び油の少なくとも1つは高温で融解する。いくつかの実施形態では、脂肪及び油の少なくとも1つは水素化又は部分水素化されている。いくつかの実施形態では、脂肪及び油の少なくとも1つは植物に由来する。いくつかの実施形態では、脂肪及び油の少なくとも1つは、グリセリド、遊離脂肪酸及び脂肪酸エステルの少なくとも1つを含む。いくつかの実施形態では、企図されるコーティング材料は少なくとも1つの食用ワックスを含む。企図される食用ワックスは、動物、昆虫又は植物に由来するかもしれない。非限定的例としては、ビーズワックス、ラノリン、ベイベリーワックス、カルナウバワックス及びコメヌカワックスが挙げられる。錠剤及び丸剤は、加えて、腸溶又は逆腸溶コーティングを用いて調製可能である。
【0091】
代替的に、本明細書に開示される細菌組成物を具現化した粉末剤又は顆粒剤は、食品製品に組込み可能である。いくつかの実施形態では、企図される食品製品は経口投与用飲料である。好適な飲料の非限定的例としては、水、フルーツジュース、フルーツ飲料、人工フレーバー飲料、人工甘味飲料、炭酸飲料、スポーツ飲料、液状乳製品、ミルクセーキ、アルコール飲料、カフェイン入り飲料、乳児用栄養製品などが挙げられる。経口投与に好適な他の手段としては、水性及び非水性の溶液剤、エマルジョン剤、サスペンジョン剤並びに好適な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁化剤、希釈剤、甘味剤、着色剤及び風味剤の少なくとも1つを含有する非発泡性顆粒剤から再構成される溶液剤及び/又はサスペンジョン剤が挙げられる。
【0092】
本明細書に開示される細菌を含有する医薬組成物は、ユニット製剤すなわち医薬ユニットで提示可能である。組成物、例えば本明細書に提供される医薬ユニットは、細菌の合計量又はコロニー形成単位のいずれかにより測定されるいずれかの適切量の細菌を含むことができる。
【0093】
例えば、本開示の医薬組成物又はユニットは、約103cfu~約1012cfu、約106cfu~約1012cfu、約107cfu~約1012cfu、約108cfu~約1012cfu、約109cfu~約1012cfu、約1010cfu~約1012cfu、約1011cfu~約1012cfu、約103cfu~約1011cfu、約106cfu~約1011cfu、約107cfu~約1011cfu、約108cfu~約1011cfu、約109cfu~約1011cfu、約1010cfu~約1011cfu、約103cfu~約1010cfu、約106cfu~約1010cfu、約107cfu~約1010cfu、約108cfu~約1010cfu、約109cfu~約1010cfu、約103cfu~約109cfu、約106cfu~約109cfu、約107cfu~約109cfu、約108cfu~約109cfu、約103cfu~約108cfu、約106cfu~約108cfu、約107cfu~約108cfu、約103cfu~約107cfu、約106cfu~約107cfu若しくは約103cfu~約106cfuの各細菌株を含むことができるか、又は約103cfu、約106cfu、約107cfu、約108cfu、約109cfu、約1010cfu、約1011cfu若しくは約1012cfuの細菌を含むことができる。
【0094】
III.治療的使用
本明細書に開示される組成物及び方法は、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う各種の疾患又は障害を治療するために使用可能である。本明細書で用いられる場合、「対象においてシュウ酸の上昇した量」とは、疾患又は障害のない対象と比べて、対象において体液(例えば、血液、血漿、血清若しくは尿)、組織及び/又は細胞でのシュウ酸の上昇した量を意味するかもしれない。本開示は、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う疾患又は障害を治療する方法を提供する。企図される方法は、対象において、シュウ酸の上昇した量に伴う疾患又は障害を治療するために、本明細書に開示される有効量の細菌又は医薬組成物を単独又は他の治療剤との組合せのいずれかで対象に投与することを含む。
【0095】
シュウ酸の上昇した量に伴う疾患又は障害の例は、高シュウ酸尿症、例えば原発性、腸性、食事性又は特発性高シュウ酸尿症である。高シュウ酸尿症又は尿中シュウ酸レベル増加は、40mg(およそ440μmol)又は30mg/日を超える尿中シュウ酸排泄によりヒトにおいて特徴付け可能である。例示的な臨床カットオフレベルは、男性では43mg/日(およそ475μmol)、女性では32mg/日(およそ350μmol)である。高シュウ酸尿症は、30mg/日/グラム尿中クレアチニンを超える尿中シュウ酸排泄としても定義可能である。マイルドな高シュウ酸尿症の者は、少なくとも30~60(342~684μmol)又は40~60(456~684μmol)mgシュウ酸/日を排泄し得る。腸性高シュウ酸尿症の者は、少なくとも80mg尿中シュウ酸/日(912μmol)を排泄し得ると共に、原発性高シュウ酸尿症の者は、少なくとも200mg/日(2280μmol)を排泄し得る。
【0096】
尿中シュウ酸上昇は、腎臓のいくつかの健康問題、例えば腎結石(例えば、再発シュウ酸カルシウム腎結石)、腎石灰化症、腎結石症、腎損傷又はエンドステージ腎疾患に関連付けられてきてきた。シュウ酸カルシウムは、尿路、結腸、小腸、眼、血管、関節、骨、筋肉、心臓及び他のメジャー器官に堆積されて、それらに損傷も引き起こすかもしれない。したがって、シュウ酸の上昇した量に伴う追加の例示的な疾患又は障害としては、腎障害(例えば、腎結石、腎石灰化症、多発性嚢胞腎疾患、腎結石症又は腎不全(進行性、慢性又はエンドステージ腎不全を含む))、尿路障害(例えば、特発性尿路結石疾患又は尿路結石症)、胃腸障害(例えば、炎症性腸疾患、クローン病又は潰瘍性結腸炎)、膵障害(例えば、膵外分泌不全)、関節障害、眼障害、肝障害、エチレングリコール中毒、嚢胞性線維化、脂肪便、回腸疾患、外陰部痛、心コンダクタンス障害、骨粗鬆症及び胃バイパス又は他のタイプの胃腸手術からの合併症が挙げられる。
【0097】
本明細書で用いられる場合、「治療する」、「治療すること」及び「治療」とは、対象における、例えばヒトにおける疾患の治療を意味する。これは、(a)疾患を阻害すること、すなわちその発生を停止すること、及び(b)疾患を軽減すること、すなわち疾患状態の退縮を引き起こすことを含む。本明細書で用いられる場合、「対象」及び「患者」という用語は、本明細書に記載の方法及び組成物により治療される生物を意味する。かかる生物としては、限定されるものではないが、好ましくは、哺乳動物、例えばヒト、伴侶動物(例えば、イヌ、ネコ若しくはウサギ)又は家畜動物(例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウマ、ロバ及びラバ、バッファロー、ウシ若しくはラクダ)が挙げられる。
【0098】
医薬組成物又は細菌の厳密な投与量は、治療される患者を考慮して個々の医師により選ばれ、一般的には、投与量及び投与は、有効量の細菌剤を治療される患者に提供するように調整されることは、分かるであろう。本明細書で用いられる場合、「有効量」とは、有益な又は所望の生物学的反応を誘発するのに必要な量を意味する。有効量は、1回以上の投与、適用又は投薬で投与可能であり、特定の製剤又は投与経路に限定することは意図されない。当業者であれば分かるであろうが、医薬ユニット、医薬組成物又は細菌株の有効量は、所望の生物学的エンドポイント、送達される薬剤、標的組織、投与経路などの因子に依存して変動するかもしれない。考慮され得る追加の因子としては、疾患状態の重症度、治療される患者の年齢、体重及び性別、食事、投与時間及び投与頻度、薬剤の組合せ、反応感受性並びに治療に対する耐性/反応が挙げられる。
【0099】
企図される方法は、細菌のコロニー形成を支持するために特権栄養素を対象に投与することをさらに含むことができる。例示的な特権栄養素としては、ポルフィランなどの海洋性多糖が挙げられる。例えば、本開示の特権栄養素は、本開示の細菌の前、それと同時又はその後に対象に投与することができる。
【0100】
本明細書に記載の方法及び組成物は、対象において、例えば対象の体液(例えば、血液、血漿、血清若しくは尿)、組織及び/又は細胞で、未治療又は対照の対象のシュウ酸レベルと比べてシュウ酸レベルを少なくとも約10%、約20%、約30%、約40%、約50%、約60%、約70%、約80%、約90%、約95%又はそれを超えて低減することができる。
【0101】
企図される方法は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに本開示の細菌又は医薬組成物を対象に投与することを含むことができる。特定の実施形態では、対象への本開示の細菌又は医薬組成物の連続投与間の時間は、12時間、24時間、36時間、48時間、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間又は4週間を超える。
【0102】
特定の実施形態では、本開示の細菌及び本開示の特権栄養素、例えばポルフィランなどの海洋性多糖は、同一頻度で対象に投与される。例えば、細菌及び特権栄養素は両方とも、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに対象に投与することができる。特定の実施形態では、本開示の細菌及び本開示の特権栄養素、例えばポルフィランなどの海洋性多糖は、異なる頻度で対象に投与される。例えば、細菌は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとの対象に投与することができると共に、特権栄養素は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに対象に投与することができる。例えば、特定の実施形態では、細菌は、1週間、2週間、3週間、4週間、1ヵ月、2ヵ月、3ヵ月、4ヵ月、5ヵ月又は6ヵ月ごとに対象に投与され得ると共に、特権栄養素は、12時間、24時間、1日、2日、3日、4日、5日、6日又は7日ごとに対象に投与することができる。
【0103】
本明細書に記載の方法及び組成物は、単独で又は他の治療剤及び/若しくはモダリティーとの組合せで使用可能である。本明細書で用いられる「組合せで」投与されるという用語は、ある時間点で患者に及ぼす治療剤の効果がオーバーラップするように対象の障害罹患過程で2つ(以上)の異なる治療剤が対象に送達されることを意味するものと理解される。特定の実施形態では、1つの治療剤の送達は、第2の送達が始まるときに依然として行われており、その結果、投与に関してオーバーラップが存在する。これは、本明細書では「同時」又は「並行送達」と呼ばれることもある。他の実施形態では、1つの治療剤の送達は、他の治療剤の送達が始まる前に終わる。いずれの場合でも、特定の実施形態では、治療は、組合せ投与であるためより有効である。例えば、第2の治療剤はより有効であり、例えばより少ない第2の治療剤を用いて均等な効果が見られるか、又は第2の治療剤は、第1の治療剤の不在下で第2の治療剤が投与された場合に見られるよりも大幅に症状を低減するか、又は第1の治療剤を用いた場合と類似の状況が見られる。特定の実施形態では、症状又は障害に関連する他のパラメーターの低減が、1つの治療剤が他の治療剤の不在下で送達された場合に観察されるよりも大きくなるように、送達を行う。2つの治療剤の効果は、部分的に相加性であり得るか、全体的に相加性であり得るか、又は相加性を上回るかもしれない。送達された第1の治療剤の効果が、第2の治療剤が送達されたときに依然として検出可能であるように、送達を行うことが可能である。特定の実施形態では、第1及び/又は第2の治療の副作用は、組合せ投与に起因して低減される。
【0104】
特定の実施形態では、本明細書に記載の方法又は組成物は、1つ以上の追加の療法との組合せで投与される。特定の実施形態では、企図される追加の療法は、高水分摂取、低食塩、低シュウ酸及び/若しくは高カルシウム食、クエン酸、カルシウム、オルトリン酸及び/若しくはピリドキシン/ビタミンB6補給、酵素シュウ酸デカルボキシラーゼ並びに/又は結腸からのシュウ酸の分泌を刺激するペプチドを含むことができる。
【0105】
本明細書全体を通して、組成物が特定の成分を有する、包含する又は含むとして記載される場合又はプロセス及び方法が特定の工程を有する、包含する又は含むとして記載される場合、加えて、列挙された成分から本質的になる又はそれからなる本開示の組成物が存在すること並びに列挙された処理工程から本質的になる又はそれからなる本開示に係るプロセス及び方法が存在することが企図される。
【0106】
本願では、要素若しくは成分が、列挙された要素若しくは成分のリストに含まれる及び/又はそれから選択されるといわれる場合、要素若しくは成分は、列挙された要素若しくは成分のいずれか1つであり得るか、又は要素若しくは成分は、列挙された要素若しくは成分の2つ以上からなる群から選択可能であることが理解されるべきである。
【0107】
さらに、本明細書に記載の組成物又は方法の要素及び/又は特徴は、本明細書で明示的か黙示的かにかかわらず、本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、さまざまな方法で組合せ可能であることが理解されるべきである。例えば、特定化合物が参照された場合、その化合物は、特に文脈から理解されない限り、本開示の組成物の各種実施形態で及び/又は本開示の方法で使用可能である。言い換えると、本願の範囲内で、実施形態は、明瞭且つ簡潔な適用を書いたり描いたりできるように記載及び描写されているが、本教示及び開示から逸脱することなく、実施形態をさまざまに組み合わせたり、分離することが意図されており、そのことは分かるであろう。例えば、本明細書に記載及び描写される特徴はすべて、本明細書に記載及び描写される本開示のすべての態様に適用可能であることは、分かるであろう。
【0108】
「~の少なくとも1つ」という表現は、特に文脈及び使用から理解されない限り、その表現の後に列挙された対象の各々を個別に含むこと及び列挙された対象の2つ以上の各種組合せを含むことが理解されるべきである。3つ以上の列挙された対象との関連で「及び/又は」という表現は、特に文脈から理解されない限り、同一の意味を有するものと理解されるべきである。
【0109】
「包含する(include)」、「包含する(includes)」、「包含している」、「有する(have)」、「有する(has)」、「有している」、「含有する(contain)」、「含有する(contains)」又は「含有している」という用語の使用は、それらの文法的に均等な表現を含めて、特に明記も文脈から理解もされない限り、一般にオープンエンド且つ非限定的なものとして、例えば列挙されていない追加の要素又は工程を除外しないものとして理解されるべきである。
【0110】
「約」という用語の使用が定量値の前にある場合、本開示は、特に明記されていない限り、特定の定量値自体も含む。本明細書で用いられる場合、「約」という用語は、特に指定又は推定がされない限り、公称値から±10%の変動を意味する。
【0111】
工程の順序又は特定の動作の実施順序は、本開示が使用可能な状態を維持する限り、重要でないことが理解されるべきである。さらに、2つ以上の工程又は動作は、同時に行うことができる。
【0112】
本明細書のあらゆる例又は例示的な表現、例えば「など」又は「包含する」の使用は、特許請求されない限り、単に本開示をより良く例示することが意図され、本開示の範囲に限定を課さない。本明細書の表現は、いずれの非特許請求要素も本開示の実施に不可欠であることを示唆するものと解釈されるべきではない。
【実施例】
【0113】
下記の実施例は、単に例示的なものにすぎず、本開示の範囲又は内容を何ら限定することを意図したものではない。
【0114】
実施例1 - シュウ酸分解バクテロイデス属(Bacteroides)の構成
シュウ酸ナイーブバクテロイデス属(Bacteroides)のメンバーへのシュウ酸分解能の付与は、他の生物からのトランスジーン(例えば、配列番号1~31)の付加により達成可能である。例えば、OxlT、OXS及びOXCを発現する発現カセットを含む構築物は、バクテロイデス属(Bacteroides)でシュウ酸分解を達成するために使用可能である。例示的なOxITコード配列は、配列番号17~21で示され、例示的なOXSコード配列は、配列番号14~16に示され、且つ例示的なOXCコード配列は、配列番号22~26中で示される。企図された構築物は、FCOCT、ACOCT又はSCOCTを発現する発現カセットをさらに含むことができる。例示的なFCOCTコード配列は、配列番号4~8に示され、例示的なACOCTコード配列は、配列番号1~2に示され、且つ例示的なSCOCTコード配列は、配列番号28~31に示される。OXS及び/又はOXCの追加のコピーの発現もシュウ酸分解を改善することができる。
【0115】
図3は、シュウ酸分解能を有するバクテロイデス属(Bacteroides)を発生するために、単独又は組合せで使用可能なさまざまなプラスミド(配列番号63~67)を示す。pZR748(配列番号63)は、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。pZR753(配列番号64)は、E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。pZR761(配列番号65)は、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS及びS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCのコード配列を含む。pZR856(配列番号66)は、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。pZR878(配列番号67)は、E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS及びE.コリ(E.coli)ACOCTのコード配列を含む。
【0116】
シュウ酸異化関連遺伝子の各コピーは、ファージ由来プロモーターP_BfP1E6(配列番号68)又はその弱化体P_BfP4E5(配列番号69)のいずれかのコピーに作動可能に連結された。P_BfP2E5(配列番号80)及びファージ由来コンセンサス配列にマッチする他のもの(配列番号70)を含めて、他のプロモーターも使用可能である。酵素の翻訳速度を最適化するために、酵素は、高強度リボソーム結合部位(RBS)に結合されたリーダーペプチド(配列番号78)又は高強度RBSに結合されたNanoLucルシフェラーゼレポーター酵素(配列番号79)のいずれかに融合された。他のリボソーム結合部位及び翻訳融合体を使用することも可能である。プラスミドは、バクテロイデス属(Bacteroides)ゲノムのセリンtRNA遺伝子の3’末端へのプラスミドのゲノミックインテグレーションを触媒するNBU2インテグラーゼ遺伝子を担持する。
【0117】
構築してから、プラスミドは、RK2接合性プラスミドを担持するエシェリキア・コリ(Escherichia coli)S17-1ドナー細胞にトランスフォームされた。RK2接合機構は、バクテロイデス属(Bacteroides)を含めてさまざまな種へのRP4伝達起点を担持するプラスミドの接合伝達を可能にする。これらの細胞は、バクテロイデス属(Bacteroides)レシピエント細胞と混合され、37℃での一晩インキュベーションのために非選択的BHI寒天プレート上にプレーティングされた。その後、プレートはスクレープされ、E.コリ(E.coli)S17-1とバクテロイデス属(Bacteroides)との混合物は、E.コリ(E.coli)を抑制して嫌気的条件下で培養するためにゲンタマイシンを有する選択培地に移入された。複数の構築物を単一バクテロイデス属(Bacteroides)株に送達するために、複数の選択マーカー(例えば、テトラサイクリン、エリスロマイシン又はクロラムフェニコール)を使用可能である。
【0118】
実施例2 - 液状培養物でのシュウ酸分解のインビトロ試験
実施例1に記載のように構築された工学操作バクテロイデス属(Bacteroides)をシュウ酸分解能に関してインビトロアッセイでアッセイした。バクテロイデス属(Bacteroides)細胞を一晩培養物から10又は30mM添加シュウ酸ナトリウムを有するBHIS液状培地中に1:10希釈した。培養物を37℃で嫌気的に一晩インキュベートした。48時間後、培養物を遠心分離して細胞を分離除去し、分析のために上清を採取した。595nmシュウ酸オキシダーゼキット(Sigma-Aldrich,カタログ番号MAK315-1KT)を用いてサンプルを分析し、標準曲線と比較してシュウ酸消費速度を計算した。バクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)ATCC 8482のバックグラウンドでプラスミドpZR748(配列番号63)、pZR753(配列番号64)、pZR753+pZR761(配列番号64、65)及びpZR856+pZR878(配列番号66、67)を試験して得られたデータは、
図4に示される。このように、各工学操作株のシュウ酸消費は、シュウ酸消費能を示さない野生型と比べて増加した。
【0119】
実施例3 - バクテロイデス属(Bacteroides)への特権栄養素消費の工学操作
多糖利用遺伝子座(PUL)は、細菌上の新しい炭水化物を消費する能力を付与する可動ジェネティックエレメントである。ポルフィラン消費バクテロイデス属(Bacteroides)株単離物NB001(配列番号72)でポルフィラン消費PULを同定し、PULの60kb領域を細菌人工染色体(BAC)中にクローニングしてpWD035(配列番号73)を作製した。pWD035の内容は
図5に示される。
【0120】
コリ(E.coli)S17-1を用いてプラスミドpWD035をE.バクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)ATCC8482中にコンジュゲートして株NB075を発生した。海洋性多糖ポルフィランを消費するその能力に関してこの株を試験した。ポルフィラ・イェゾエンシス(Porphyra yezoensis)ノリ由来の0.2%ポルフィラン抽出物を含有するSalyer最少培地中に細胞を一晩培養物から1:50希釈した。37℃で嫌気性インキュベーションを14時間行って、プレートリーダーを用いて細胞成長を表すOD600を測定した。
図6に示される結果は、ポルフィランPULを受け取った細胞のみが成長のためにポルフィランを消費する能力を獲得したことを実証した。
【0121】
実施例4 - シュウ酸及び特権栄養素の両方を消費可能な工学操作株
図7は、高効率シュウ酸分解能を有するバクテロイデス属(Bacteroides)を発生するために単独又は組合せで使用可能なプラスミド(配列番号75~77)を示す。pZR0879(配列番号75)は、E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。pZR0901(配列番号76)は、E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。pZR1871(配列番号77)は、E.コリ(E.coli)FCOCT、O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS、S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXC、A.タリアナ(A.thaliana)OXS、E.コリ(E.coli)ACOCT及びO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITのコード配列を含む。
【0122】
株NB075(実施例3に記載)へのプラスミドpZR0879、pZR0901及びpZR1871のコンジュゲーション及び選択的プレーティングにより、ポルフィラン及びシュウ酸を同時に消費可能な株を発生した。非シュウ酸消費対照株を構築するために、空ベクター(pZR1622、配列番号74)も含めた。2つのコンジュゲーション(pZR879及びpZR1871)では、シュウ酸消費速度の増加した株を見いだすために、約3,000コロニーを個別選択プレートから単離した。次いで、これらのクローン単離物を実施例1に記載のシュウ酸消費アッセイの修正バージョンに付した。これは、Labcyte Echo525音響液体ハンドリングロボットにより高スループットで行われた。クローン単離物のおよそ0.001%は、単離物の大部分よりも有意に速いシュウ酸消費速度を実証した外れ値であることが分かった。Illumina iSeq100による全ゲノムシーケンシングを用いて、これらの株がそれらのゲノム中に対象プラスミドの2コピーを保有することを確認した。おそらく、これによりシュウ酸経路遺伝子の発現増加をもたらす。発生した株の詳細を、プラスミドコピー数を含めて表1に示す。
【0123】
【0124】
4つのシュウ酸消費株(sWW152、NB120、sWW554及びsWW626)は、それらのそれぞれのシュウ酸消費速度を比較するためにインビトロのシュウ酸消費アッセイで試験した。各株は、37℃のBHIS培地中で飽和するまで嫌気的に成長させた。次いで、培養物をペレット化し、4mMシュウ酸が補足されたフレッシュBHISを用いて出発体積の1/10で再懸濁した。10倍濃縮培養物の希釈プレーティングにより、それらは消化管にコロニーを形成させたときにこれらの株が盲腸内で達するおよその存在量である約1×10
10cfu/mlを含有することが示唆された。濃縮培養物を嫌気性チャンバー内に戻し、37℃でインキュベートした。レギュラーインターバルで、培養物アリコートを嫌気性チャンバーから取り出して氷上に移し、ペレット化、そして上清をフリーズした。次いで、上清アリコートを測定して残留シュウ酸濃度を決定した。結果は
図8に示す。予想通り、各株は、上清中シュウ酸濃度を低減し、sWW626では15分以内にシュウ酸の75%を消費した。
【0125】
実施例5 - ラット盲腸内容物でのシュウ酸消費速度のエクスビボ試験
次に、実施例4に記載の候補シュウ酸/ポルフィラン消費株は、できる限りインビボ条件に近づけでシミュレートするように設計されたエクスビボのシュウ酸消費アッセイに付された。最初に、低シュウ酸食を摂取した複数のスプラーグ・ドーリーラットの盲腸を採取し、内容物を押し出し、ピペッティングを支援するために蒸溜水中に3倍希釈した。4mMの最終濃度になるようにシュウ酸を添加した。次いで、シュウ酸消費株を盲腸中のそれらの予想インビボ存在量にマッチするように1×10
10cfu/mlの最終濃度で添加した。以上に記載されるようにシュウ酸消費を経時的にモニターした。結果を
図9に示す。この場合も、各株は、盲腸内容物中のシュウ酸を消費したが、盲腸内容物中のシュウ酸消費速度はBHIS培地中の約1/10であった。
【0126】
実施例6 - 続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでのインビボ効力
高シュウ酸尿症を治療するためにシュウ酸消費バクテロイデス属(Bacteroides)株を使用可能であることを実証するために、候補株を続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでインビボ試験に付した。高シュウ酸尿症は、食事性シュウ酸の過剰吸収を引き起こす低カルシウム食を介して誘発した。
図10及び
図11は、それぞれ候補治療株sWW152及びsWW554の効能を試験するように設計されたインビボ実験の結果をス召す。およそ200グラムの体重の雄スプラーグ・ドーリーラットを代謝ケージ(Tecniplast,3700M022)内に個別に収容し、低カルシウム(<0.01%)低シュウ酸ベース食(Envigo,TD.160869)を摂取させた。24時間尿を毎日採取し、各実験全体を通して合計シュウ酸を分析した。3日目に開始して継続的に実験の残りを行い、フレッシュホウレンソウの形態で52μmolシュウ酸/日(
図10)又は30μmolシュウ酸/日(
図11)のいずれかをベース食に添加して高シュウ酸尿症を引き起こした。2日目(
図10)又は7日目(
図11)のいずれかで開始して継続的に実験の残りを行い、780mgポルフィラン/日もベース食に添加した。7日目、10
9cfuを飲料水に添加することにより、シュウ酸を分解できない対照株(
図10のNB075若しくは
図11のNB124)又は治療シュウ酸分解株(
図10のsWW152若しくは
図11のsWW554)のいずれかを投与した。sWW152の添加は、対照株と比較して尿中シュウ酸の32%低減をもたらし(
図10、p=0.005)、改善株sWW554の添加は、対照株と比較して尿中シュウ酸の46%低減をもたらした(
図11、p=0.0003)。対照株及び治療株は両方とも、ポルフィランの存在下において高存在量でラット消化管にコロニーを形成し、数日以内でおよそ3×10
9cfu/mL糞便を構成した(
図12)。これらの結果は、続発性高シュウ酸尿症の齧歯動物モデルで尿中シュウ酸を低下させる工学操作シュウ酸分解バクテロイデス属(Bacteroides)の能力を実証する。さらに、株sWW554がsWW152よりも大きい治療効果を有することを考慮して、株のシュウ酸消費速度の増加は、改善されたインビボ効力につながるように思われた。
【0127】
実施例7 - 続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでのインビボ効力
高シュウ酸尿症を治療するためにシュウ酸消費バクテロイデス属(Bacteroides)株を使用可能であることを実証するために、候補株を続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでインビボ試験に付した。
【0128】
エリスロマイシン耐性カセットを含有するようにsWW626(実施例4に記載)を修飾して株sWW627を作製した。
図13A及び
図13Bは、候補治療株sWW627の効能を試験するように設計されたインビボ実験の結果を示す。
【0129】
およそ600グラムの体重の雄スプラーグ・ドーリーラットを代謝ケージ(Tecniplast,3701M081)に個別に収容し、86μmolシュウ酸/日/ラットを含有する高脂肪(40%)ベース食を摂取させた。24時間尿を毎日採取し、各実験全体を通して合計シュウ酸を分析した。1~2日目にベースライン尿中シュウ酸を測定した。3日目に開始して継続的に実験の残りを行い、ホウレンソウをベース食に添加して高シュウ酸尿症を引き起こした。7日目、株なし、ポルフィランで成長可能であるがシュウ酸消費遺伝子を欠如している対照株(NB124)又はポルフィランで成長可能且つシュウ酸を消費可能な治療株(sWW627)をラットに接種した。10
9cfuを飲料水に添加することにより株を投与した。12日目に開始して、ポルフィランを飲料水に添加し(且つ
図13A及び
図13Bに示されるように実験の全過程にわたり増加させた)。
【0130】
コロニー形成単位(CFU)/グラム糞便の計数により測定される株存在量を、
図13Aに示す。このように、株存在量の増加は、食事の高ポルフィラン濃度に一致した。尿中シュウ酸は
図13Bに示されており、このように、株sWW627の投与は、株なし又は対照株と比べて尿中シュウ酸を低減する。sWW627による尿中シュウ酸の低減は、食事のポルフィラン濃度の増加に伴って増加した。
【0131】
実施例8 - 続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでのインビボ効力
高シュウ酸尿症を治療するためにシュウ酸消費バクテロイデス属(Bacteroides)株を使用可能であることを実証するために、候補株を続発性高シュウ酸尿症のラットモデルでインビボ試験に付した。
【0132】
Route-en-Y胃バイパス(RYGB)手術を介して高シュウ酸尿症をラットに誘発した。ポルフィラン、カルシウム及びホウレンソウを含む食事をラットに摂取させた。各動物の尿を採取し、体積及びシュウ酸濃度を各日測定した。EnzyChrom Oxalate Assay Kit(BioAssay Systems,Hayward,CA)によりシュウ酸濃度を測定した。ポルフィランで成長可能且つシュウ酸を消費可能な治療株(sWW627、実施例7に記載)又は対照株をラットに投与した。
【0133】
結果を
図14に示す。RYGB手術を受けて対照株が経管栄養されたラットは、シャム手術を受けたラットよりも高い尿中シュウ酸レベルを示した。RYGB手術を受けて治療株(sWW627)が投与されたラットは、対照株が投与されたラットと比べて低減された尿中シュウ酸を示し、RYGB手術の影響を反転させた。
【0134】
実施例8 - リボソーム結合部位(RBS)の工学操作
シュウ酸分解遺伝子の発現をチューニングするために使用可能なRBS配列のセットを生成するために、合成ライブラリーからリボソーム結合部位(RBS)をスクリーニングした。各対象シュウ酸消費遺伝子に対して、1000超のRBS配列をライブラリーからスクリーニングした。この場合、縮重配列NNNNNNNNWWWAAAWWTWANAAAは、各遺伝子の翻訳開始部位のすぐ上流に位置した。各遺伝子は、C末端でルシフェラーゼタンパク質に翻訳融合された。各RBSの上流では、P_BfP1E6プロモーター(配列番号68)により転写が駆動された。発現カセットを含有するプラスミドをバクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)のゲノムにインテグレートし、ユニークRBSの個別クローンをBHIS培地中で飽和するまで成長させた。Nano-Glo Luciferase Assay System(Promega Corporation,Madison,WI)を用いて各飽和培養物のルミネッセンスを測定した。
【0135】
図15Aは、各指示遺伝子の各クローンのルミネッセンス値を示す。選択されたクローンを単離し、シーケンスして各対象RBS配列を決定した。配列番号96~103は、8つの対象RBSを有するA.タリアナ(A.thaliana)OXSコード配列を示す。配列番号96~103中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号104~111は、8つの対象RBSを有するS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXSコード配列を示す。配列番号104~111中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号112~119は、8つの対象RBSを有するO.ホルミゲネス(O.formigenes)OXCコード配列を示す。配列番号112~119中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号120~127は、8つの対象RBSを有するS.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCコード配列を示す。配列番号120~127中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号128~135は、8つの対象RBSを有するE.コリ(E.coli)ACOCTコード配列を示す。配列番号128~135中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号136~143は、8つの対象RBSを有するE.コリ(E.coli)FCOCTコード配列を示す。配列番号136~143中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号144~151は、8つの対象RBSを有するO.ホルミゲネス(O.formigenes)OxITコード配列を示す。配列番号144~151中のRBSは、それぞれRBS1~8と呼ばれる。配列番号152~162、11の対象RBSを有するコドン最適化S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXCコード配列を示す。配列番号152~162中のRBSは、それぞれRBS1~8、RBS1b、RBS2b及びRBS3bと呼ばれる。
【0136】
以上の配列を用いてプラスミドを再構築し、バクテロイデス・ブルガタス(Bacteroides vulgatus)のゲノムに組み込んだ。以上に記載されるように培養物のルミネッセンスをアッセイした。結果は
図15Bに示される。
【0137】
実施例9 - 液状培養物でのシュウ酸分解のインビトロ試験
シュウ酸分解能に関して工学操作バクテロイデス属(Bacteroides)をインビトロアッセイでアッセイした。
【0138】
バクテロイデス属(Bacteroides)細胞を一晩培養物から16mM添加シュウ酸を有するBHIS液状培地に1:10希釈した。培養物を37℃で嫌気的にインキュベートした。20時間後、培養物を遠心分離して細胞を分離除去し、分析のために上清を採取した。595nmシュウ酸オキシダーゼキット(Sigma-Aldrich,カタログ番号MAK315-1KT)を用いてサンプルを分析し、標準曲線と比較してシュウ酸消費速度を計算した。
【0139】
試験した株は、NB136(導入されたシュウ酸消費遺伝子を含有しない)、sWW152(実施例4に記載)、sWW627(実施例7に記載)及びsWW1077を含んでいた。SWW1077は、実施例8で同定された工学操作RBSと共に工学操作シュウ酸消費経路を含む配列番号82を含有する(RBS2-E.コリ(E.coli)FCOCT(配列番号137)、RBS2-O.ホルミゲネス(O.formigenes)OXC(配列番号113)、RBS2-O.ホルミゲネス(O.formigenes)OxIT(配列番号145)、RBS1-E.コリ(E.coli)ACOCT(配列番号128)及びRBS1-S.セレビシエ(S.cerevisiae)OXS(配列番号104)を含む)。結果は
図16に示される。このように、各工学操作株のシュウ酸消費は、対照株と比べて増加し、最大シュウ酸消費は、sWW1077で見られた。
【0140】
参照による組込み
本明細書で参照される特許文献及び科学文献の各々の開示のすべては、あらゆる目的で参照により組み込まれる。
【0141】
均等物
本開示は、その趣旨又は本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態で具現化され得る。したがって、以上の実施形態は、本明細書に記載の開示を限定するものではなく、あらゆる点で例示的なものであるとみなされる。したがって、本開示の範囲は、以上の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の意味及びその均等性の範囲に含まれる変更形態は、すべて本発明に包含されることが意図される。
【0142】
配列表
SEQ ID NO: 1 (Acetyl-CoA:oxalate CoA-transferase (ACOCT) from Acetobacter aceti strain 1023; EC 2.8.3.19; UniProt Accession A9X6P9; Aa_CoAT3):
ATGACTGAAACCACGCCAGCAAAACCGAAGGGGCCCTTTGATGGGCTCCTCGTTATTGATCTGACACATGTGCTGAATGGTCCGTTCGGCACAACAATTCTAACAGATCTGGGGGCTCGTACAATCAAGATCGAGCCACCGGGGCATGGGGATGATACGCGTACCTATGGCCCATATGTTGGAGATCAATCGCTTTACTTCTCTTTTGTAAACAGGGGAAAGGAAAGCATTGTCCTTAACCTCAAGGATGAGGGCGATCGAGCGATTTTTCTGGAAATGGTGCGTAAGGCCGATGTGCTGGCGGAAAACTTCCGCCCCGGCGTGATGGACCGTTTGGGTTTCAATTATGAGGAACTGGCAAAGATCAATCCACGGTTGATTTATGCATCTTCATCAGGGTTCGGTCAGACAGGCCCGCTCGCACATTATCCTGCCTACGATACTATTGTGCAGGCCATGAGCGGCATCATGATGGCCACGGGCTTTCCCGATGGTCCGCCAACGCGGGTAGGGGGCACATCGCTTTCTGATCTGTGCGGTGGGGTTTTCATGTTCTGCGGCATTGCCAGTGCGCTTTATGCGCGTGAGCGCACAGGGAAAGGGGCACACATTGATGTTTCAATGTTTGATGGTACCTTGGCATTTTTGCAGCATGCTCTGATGTGCTGGTCTGCTACAGGCAAAGCCCCTGCGCGTATTGGCAATCGCCATCCTTATATGGCGCCTTTTGATGTGTTTCAGGCGCAGGACAAGCCTTTTGTCATCTGTTGTGGGAATGACCATCTTTTTAAGGCGCTTTGCGATGTGATTGGTGCGCCTGAACTGGCGACAGACCCGCGTTTTGTCGAAAATCATGATAGAATGGCCAATAATGATGCGCTGAAAGCTGCATTGGAAAAAGCACTTTCCAAACAGCCAGCGGCGCATTGGCTGGATGTTATTCACAAAGCCGGTGTGCCTGTTGGGCCGTTGCTGGACGTGGCAGAGGCGGCAAATCTGCCACAAACAGCCGCGCGGAATATGCTGATTAAATCTGGCGGGGTGATGATGCCCGGTAACCCGGTGAAAATCAGTGGGTATGATGACCCACATGAACGGCCCGGCGCCCCTAAGCTGGATGAGCAGGGCGCGGCGTTGCGTAAGGAATTTGCCGCACCAGAGGCAAAATGA
SEQ ID NO: 2 (Acetyl-CoA:oxalate CoA-transferase (ACOCT) from Escherichia coli MG1655; EC 2.8.3.19; UniProt Accession P76518; Ec_yfdE):
ATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGATGGACAGTCACTCTATTACAGTTTTATTAATCATGGCAAAGAGAGTGTGGTTCTTGATTTAAAGAATGATCACGATAAAAGTATATTTATAAATATGCTCAAACAAGCTGATGTATTAGCTGAGAATTTTCGCCCAGGTACAATGGAAAAACTGGGGTTTTCATGGGAAACGCTTCAAGAAATCAACCCGCGCCTCATATATGCTTCATCGTCAGGTTTCGGACATACCGGTCCGCTAAAAGATGCTCCTGCCTACGATACCATCATTCAGGCAATGAGCGGGATAATGATGGAAACAGGATATCCTGATGCTCCGCCAGTGCGCGTTGGTACATCTCTTGCGGATCTATGCGGCGGTGTCTATTTATTCAGCGGAATAGTGAGTGCACTTTATGGCCGCGAAAAGAGCCAGAGAGGGGCGCATGTCGATATAGCGATGTTTGATGCCACGCTGAGTTTTCTGGAGCATGGTCTGATGGCATATATCGCAACTGGGAAGTCACCACAACGTCTGGGAAATCGCCATCCCTACATGGCACCTTTTGATGTTTTCAATACTCAGGATAAGCCGATTACGATTTGTTGTGGTAATGACAAGCTTTTTTCTGCGTTATGCCAGGCACTGGAGCTTACGGAACTGGTTAATGATCCCCGATTTAGCAGCAATATTTTACGCGTACAAAACCAGGCTATTCTTAAACAATATATTGAGCGGACGTTAAAAACGCAGGCAGCTGAAGTTTGGTTAGCCAGAATACATGAAGTTGGTGTACCCGTCGCGCCGTTATTAAGTGTGGCTGAGGCCATTAAATTGCCACAAACTCAGGCGAGAAATATGTTGATTGAAGCCGGGGGAATAATGATGCCGGGTAATCCGATAAAAATCAGCGGCTGCGCGGACCCGCATGTTATGCCGGGAGCGGCAACGCTCGACCAGCATGGGGAACAAATTCGCCAGGAGTTCTCATCATAA
SEQ ID NO: 3 (Formate dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 1.2.1.2; UniProt Accession Q08911; Sc_FDH1):
ATGTCGAAGGGAAAGGTTTTGCTGGTTCTTTATGAAGGTGGTAAGCATGCTGAAGAGCAGGAAAAGTTATTGGGGTGTATTGAAAATGAACTTGGTATCAGAAATTTCATTGAAGAACAGGGATACGAGTTGGTTACTACCATTGACAAGGACCCTGAGCCAACCTCAACGGTAGACAGGGAGTTGAAAGACGCTGAAATTGTCATTACTACGCCCTTTTTCCCCGCCTACATCTCGAGAAACAGGATTGCAGAAGCTCCTAACCTGAAGCTCTGTGTAACCGCTGGCGTCGGTTCAGACCATGTCGATTTAGAAGCTGCAAATGAACGGAAAATCACGGTCACCGAAGTTACTGGTTCTAACGTCGTTTCTGTCGCAGAGCACGTTATGGCCACAATTTTGGTTTTGATAAGAAACTATAATGGTGGTCATCAACAAGCAATTAATGGTGAGTGGGATATTGCCGGCGTGGCTAAAAATGAGTATGATCTGGAAGACAAAATAATTTCAACGGTAGGTGCCGGTAGAATTGGATATAGGGTTCTGGAAAGATTGGTCGCATTTAATCCGAAGAAGTTACTGTACTACGACTACCAGGAACTACCTGCGGAAGCAATCAATAGATTGAACGAGGCCAGCAAGCTTTTCAATGGCAGAGGTGATATTGTTCAGAGAGTAGAGAAATTGGAGGATATGGTTGCTCAGTCAGATGTTGTTACCATCAACTGTCCATTGCACAAGGACTCAAGGGGTTTATTCAATAAAAAGCTTATTTCCCACATGAAAGATGGTGCATACTTGGTGAATACCGCTAGAGGTGCTATTTGTGTCGCAGAAGATGTTGCCGAGGCAGTCAAGTCTGGTAAATTGGCTGGCTATGGTGGTGATGTCTGGGATAAGCAACCAGCACCAAAAGACCATCCCTGGAGGACTATGGACAATAAGGACCACGTGGGAAACGCAATGACTGTTCATATCAGTGGCACATCTCTGGATGCTCAAAAGAGGTACGCTCAGGGAGTAAAGAACATCCTAAATAGTTACTTTTCCAAAAAGTTTGATTACCGTCCACAGGATATTATTGTGCAGAATGGTTCTTATGCCACCAGAGCTTATGGACAGAAGAAATAA
SEQ ID NO: 4 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; EC 2.8.3.16; UniProt Accession B9X295; Ba_frc):
ATGGCTGACAAAAGCACTGCCCCACTGGCAGGCATCAAGGTAATCGACTGGACGCAGGTTCAGTCTGGCCCTTCGTGCACCCAGATTCTCGCATGGCTGGGCGCCGAGGTCATCAAGCTCGAGAAGGTGCATGGCGGCGACCCGACCCGTAACGAGATGAACGACGTCGACGGCTCGTACTCGCTGTACTTCCTGCAGCTCAACGCCAACAAGAAGTCGATCACGCTCGACATGAAGGACCCGGAAGGCAAGAAGATCCTCACCGACCTGCTCAAGGACGCAGACGTGTTCGTAGAGAACATCGGCCCAGGCGACGTGGAAAAGCTCGGCTTCGGTTGGGACGAGGTCCACAAGATCAACCCGAAGCTCATCATGGCCTCGCTCAAGGGATTCAACCAGGGCAGCCGCTTCGAACATGTCAAGGCCTTCGAGCCTGTCGCCCAGTGCGCAGGCGGCGCTGCTTCGACCACCGGCTGGTGGGAAGGCGACAAGAACATCCCGACGCAGTCCGGCGCTGCCCTTGGTGATTCGAACACCGGTATGCACCTGACGATTGCAATCCTCACCGCACTGCTGCAGCGCGAGCGCACCGGCGAAGGCGTGTTCGTGTACCAGTCCATGCAGAATGCAGTGCTCAACCTATGCCGCATCAAGCTGCGTGATCAGCTCATTCTCGATCACCTACACCAGCTTTCCTACTACGACTGCTACCCGGGCTACAAGTTCGGCAAAGCGATTCCGCGTGCGGCCAATGCCGAGGGCGGACTCGTGCTCGGCTGGTGCTATCGCGCCAAGGGCTGGGAAACCGATCCGAACGCCTATGTGTACATTGTGATTCAGCAGTCGCAGAAGGGATTCGAGAACTTCTGCAACGCCATGGGCTTCCAGGATTGGCTCACCGATCCGAAGTTCAGCACGCCGAACGCTCGCGATGAGCACAAGCAGGAAGTGTACAAGCGCGTCGAGGAATACACGATGCAGTACGACAAGTACACGCTCACCAAGGAACTCGGCGCCAAGGGCGTTCCGGTGGGCCCGGTGCTCGATTGGAACGAACTCGAAAACGATCCGGATCTCAACGAGGATGGCACGCTGATCACGATCGATCAGGGCGACGCCCGCGGCAAGTTCAAGACGATCGGCCTGCCGTTCACGATGAGCAACTATGCGCCGGATTACCAGCGCGCGCCGAAGCTCGGCGAGAACAACGAGGAGATTCTCAAGTCCCTCGGCTACACCGACGAGCAGATCGCCGATCTGGCGACCAAGGGCGTCATCGGCTCGAACGATGGCGTCAAGGCAGACCTCACCGCCGCTCCGGCACAGGCCTGA
SEQ ID NO: 5 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.16; Co_frc1):
ATGCCTGCACAACACACCCATGCCACGCCCGCCGGCCCGCTCGACGGCATCCGCGTGCTCGACCTGACCGCGGTCGTGCTCGGCCCGCTGGCCACGCAGGTGCTGGCCGATTTTGGCGCCGACGTGATCAAGATCGAGGGGCCGGAAGGCGACCTGATGCGCGCCAACGGCGTGTCGCAGCACGCCGGCATGAGCTCGATCTACCTGGCGCTGAACCGCAACAAGCGCTCGGTCGTGCTCGACCTGAAAATCCCCGAGGGCGCCGAAGCGCTGCGCGCGCTGATCGCCGGCGCCGACGTGCTGGTGCACAACATGCGCGTGGCGGCGATCGAGCGGCTTGGTTTTGGCTACGAGGCCGTCGCACGCATCAACCCGCGCATCGTCTACTGCGTCGCCACCGGCTTCGGCCAGGACGGCCCGCACCGCGACAAGCCCGCCTTCGACGACATCATCCAGGCCGGCTGCGGACTGGTGGCGCTGGGCGCCGGCAACGGCGAGCGGCCGGAATACGTGCCCAGCCTGATCGCCGACAAGACCACCGGGCTGGCGCTGGCCAATGCCGTGCTGGCCGCGCTGCTGCACCGCGAACGCCATGGCGTGGGCCAGTCGGTCGAAGTGCCGATGCTGGAAACCATGGCCGCCTTCGTGATGACCGAGCACCTGGGCGGGCTGACCTTCGAGCCCGCCCCCGCCGGCGCGGGCTATGCGCGGCTACTGCAGGGCGGCCGCCGCCCGGCGCCGACGCGCGACGGCTGGATCTGCGCGCTGCCCTATACCGAGCGCCACTGGCATGCCTTCTTCCGCGCGGTGGGTCGCGATGACCTTGCCGACCGTTACGAAGTCGGCGACCGCGCACAGCGCAATGCCAATATCCGCGCGCTGTACGGCCATCTTGCCGAACTGACCCCGGAGCGCAGCACCGCAGAATGGATGGCGCTGTTCGAAGCGCTCGACATCCCCGCCACGCCGATCTACGACCTCGATGCGCTGGTCGACCATCCGCACCTGCGCGCGGTGGGACTGTTCCAGGCCACGCAGCACCCCACCGAAGGCCCGCTGCGCGAAGTGCGCCCGGCCGCGCGCTTCTCGGCCACGCCGCTGTCGTTGCGCCGGCATGCGCCGGCACTGGGCGAACACACCGCCGAAGTCTTGCAGGAAGCCGGCATCGCCCTGCCCGCCGCGCATGCCGGCACACCCGCCGGCGCTCAGGAATAA
SEQ ID NO: 6 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.16; Co_frc2):
ATGAACCTCCCGCTCAACGGCATCAAGATCATCGACTTCACGCACGTCCAGGCCGGCCCCGCGTGCACGCAGCTGCTGGCATGGTTCGGCGCAGACGTCATCAAGGTGGAGCGCCCCGGTTCCGGCGACGTGACGCGCACGCAGCTGCGCGACATCCCGGATGTCGACGCGTTGTACTTCACCATGCTCAACTCCAACAAGCGCAGCCTGACGCTGGACACCAAGAAGCCCGAAGGCAAGAAGATCCTGGAGCAGCTGATCCGCGAGTCGGACGTGCTGGTCGAGAACTTCGGCCCGGGTGCGCTGGACCGCATGGGCTTCTCGTGGGAACGCATCAACGAGCTGAACCCGAAGATGATCGTGGCCTCGGTCAAGGGCTTCAGCGACGGCCATCACTATGAAGACCTGAAGGTCTATGAAAACGTGGCGCAGTGCGCGGGCGGTGCGGCGTCGACCACGGGCTTCTGGGATGGTCCTCCCACCGTTTCCGCAGCGGCGCTCGGCGATTCGAACACCGGCATGCACCTGGCCATCGGCATCCTGACCGCGCTGATCGGCCGCGACAAGACCGGCAAGGGCCAGAAGGTGGCCGTGTCGATGCAGGACGCCGTGCTCAACCTGTGCCGCGTCAAGCTGCGCGACCAGCAGCGCCTGGACCGCCTGGGCTTCCTGGAAGAGTATCCGCAGTACCCGCATGGCAGCTTCAGCGACGTGGTGCCGCGCGGCGGCAACGCTGGCGGCGGCGGCCAGCCGGGCTGGGTGCTGAAGTGCAAGGGCTGGGAAACCGACCCCAACGCCTATATCTACTTCACCATCCAGGGCCATGCCTGGGAGCCGATCTGCAAGGCGCTCGGCAAGCCGGAATGGATCGACGATCCCAACTACGCCACCGCCAAGGCACGCCAGCCGCATATCTTCGATATCTTCAACACCATCGAGGAATGGCTCGCCGACAAGACCAAGTACGAGGCGGTGGACATCCTGCGCAAGCATGACATCCCGTGCTCGCCGGTGCTGTCGATGAAGGAGATCGCGGCCGATCCGTCGCTGCGCGCCAGCGGCAGCATCACCGAGGTGCCACACAAGGAGCGCGGCACGTACCTGACGGTGGGCAGCCCGATCAAGTTCTCCGACCTCAAGCCGGAAATCACGGGTTCGCCGCTGCTGGGCGAGCATAGCGAAGAAGTGCTGGCCGGCCTGGGGTACGGCACGGACGACATCAAGCGCCTGCGCGAGTCCCAGGTGATCTGA
SEQ ID NO: 7 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Escherichia coli MG1655; EC 2.8.3.16; UniProt Accession P69902; Ec_frc):
ATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGA
SEQ ID NO: 8 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; EC 2.8.3.16; UniProt Accession O06644; Of_frc):
ATGACTAAACCATTAGATGGAATTAATGTGCTTGACTTTACCCACGTCCAGGCAGGTCCTGCCTGTACACAGATGATGGGTTTCTTGGGCGCAAACGTCATCAAGATTGAAAGACGTGGTTCCGGAGATATGACTCGTGGATGGCTGCAGGACAAACCAAATGTTGATTCCCTGTATTTCACGATGTTCAACTGTAACAAACGTTCGATTGAACTGGACATGAAAACCCCGGAAGGCAAAGAGCTTCTGGAACAGATGATCAAGAAAGCCGACGTCATGGTCGAAAACTTCGGACCAGGCGCACTGGACCGTATGGGCTTTACTTGGGAATACATTCAGGAACTGAATCCACGCGTCATTCTGGCTTCCGTTAAAGGCTATGCAGAAGGCCACGCCAACGAACACCTGAAAGTTTATGAAAACGTTGCACAGTGTTCCGGCGGTGCTGCAGCTACCACCGGTTTCTGGGATGGTCCTCCAACCGTTTCCGGCGCTGCTCTGGGTGACTCCAACTCCGGTATGCACCTGATGATCGGTATTCTGGCCGCTCTGGAAATGCGTCACAAAACCGGCCGTGGTCAGAAAGTTGCCGTCGCTATGCAGGACGCTGTTCTGAATCTGGTTCGTATCAAACTGCGTGACCAGCAACGTCTGGAAAGAACCGGCATTCTGGCTGAATACCCACAGGCTCAGCCTAACTTTGCCTTCGACAGAGATGGTAACCCACTGTCCTTCGACAACATCACTTCCGTTCCACGTGGTGGTAACGCAGGTGGCGGCGGCCAGCCAGGCTGGATGCTGAAATGTAAAGGTTGGGAAACCGATGCGGACTCCTACGTTTACTTCACCATCGCTGCAAACATGTGGCCACAGATCTGCGACATGATCGACAAGCCAGAATGGAAAGACGACCCAGCCTACAACACATTCGAAGGTCGTGTTGACAAGCTGATGGACATCTTCTCCTTCATCGAAACCAAGTTCGCTGACAAGGACAAATTCGAAGTTACCGAATGGGCTGCCCAGTACGGCATTCCTTGCGGTCCGGTCATGTCCATGAAAGAACTGGCTCACGATCCTTCCCTGCAGAAAGTTGGTACCGTCGTTGAAGTTGTCGACGAAATTCGTGGTAACCACCTGACCGTTGGCGCACCGTTCAAATTCTCCGGATTCCAGCCGGAAATTACCCGTGCTCCGCTGTTGGGCGAACATACCGACGAAGTTCTGAAAGAACTGGGTCTTGACGATGCCAAGATCAAGGAACTGCATGCAAAACAGGTAGTTTAA
SEQ ID NO: 9 (Oxalate decarboxylase (OXDC) from Bacteroides subtilis 168; EC 4.1.1.2; UniProt Accession O34714; Bs_oxdC):
ATGAAAAAACAAAATGACATTCCGCAGCCAATTAGAGGAGACAAAGGAGCAACGGTAAAAATCCCGCGCAATATTGAAAGAGATCGGCAAAACCCTGATATGCTCGTTCCGCCTGAAACCGATCATGGCACCGTCAGCAATATGAAGTTTTCATTCTCTGATACTCATAACCGATTAGAAAAAGGCGGATATGCCCGGGAAGTGACAGTACGTGAATTGCCGATTTCAGAAAACCTTGCATCCGTAAATATGCGGCTGAAGCCAGGCGCGATTCGCGAGCTTCACTGGCATAAAGAAGCTGAATGGGCTTATATGATTTACGGAAGTGCAAGAGTCACAATTGTAGATGAAAAAGGGCGCAGCTTTATTGACGATGTAGGTGAAGGAGATCTTTGGTACTTCCCGTCAGGCCTGCCGCACTCCATCCAAGCGCTGGAGGAGGGAGCTGAGTTCCTGCTCGTGTTTGACGATGGATCATTCTCTGAAAACAGCACGTTCCAGCTGACAGATTGGCTGGCCCACACTCCAAAAGAAGTCATTGCTGCGAACTTCGGCGTGACAAAAGAAGAGATTTCCAATTTGCCTGGCAAAGAAAAATATATATTTGAAAACCAACTTCCTGGCAGTTTAAAAGATGATATTGTGGAAGGGCCGAATGGCGAAGTGCCTTATCCATTTACTTACCGCCTTCTTGAACAAGAGCCGATCGAATCTGAGGGAGGAAAAGTATACATTGCAGATTCGACAAACTTCAAAGTGTCTAAAACCATCGCATCAGCGCTCGTAACAGTAGAACCCGGCGCCATGAGAGAACTGCACTGGCACCCGAATACCCACGAATGGCAATACTACATCTCCGGTAAAGCTAGAATGACCGTTTTTGCATCTGACGGCCATGCCAGAACGTTTAATTACCAAGCCGGTGATGTCGGATATGTACCATTTGCAATGGGTCATTACGTTGAAAACATCGGGGATGAACCGCTTGTCTTTTTAGAAATCTTCAAAGACGACCATTATGCTGATGTATCTTTAAACCAATGGCTTGCCATGCTTCCTGAAACATTTGTTCAAGCGCACCTTGACTTGGGCAAAGACTTTACTGATGTGCTTTCAAAAGAAAAGCACCCAGTAGTGAAAAAGAAATGCAGTAAATAA
SEQ ID NO: 10 (Oxalate oxidase (OXO) from Hordeum vulgare; EC 1.2.3.4; UniProt Accession P45850; Hv_OxOx):
ATGTCCGACCCAGACCCACTCCAGGACTTCTGCGTCGCGGACCTCGATGGCAAGGCGGTTTCGGTGAACGGGCATACGTGTAAGCCCATGTCGGAGGCCGGCGACGACTTCCTCTTCTCGTCCAAGCTGACCAAGGCCGGCAACACGTCCACCCCGAACGGCTCGGCCGTGACGGAGCTCGACGTGGCCGAGTGGCCCGGTACGAACACGCTGGGCGTGTCCATGAACCGTGTGGACTTCGCGCCGGGGGGCACCAACCCGCCGCACATCCACCCGCGTGCAACCGAGATCGGCATGGTGATGAAAGGTGAGCTCCTCGTTGGAATCCTCGGCAGCCTTGACTCCGGAAACAAGCTCTACTCCAGGGTGGTGCGTGCCGGAGAGACTTTCGTCATCCCGCGCGGCCTCATGCACTTCCAGTTCAACGTTGGTAAGACGGAAGCCTACATGGTTGTGTCCTTCAACAGCCAGAACCCTGGCATCGTCTTCGTGCCGCTCACACTCTTCGGCTCCGACCCTCCCATCCCCACGCCCGTGCTCACCAAGGCTCTCCGGGTGGAGGCCGGAGTCGTGGAACTTCTCAAGTCCAAGTTCGCCGGTGGGTCTTAA
SEQ ID NO: 11 (Oxalate oxidoreductase (OOR) alpha subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI41; Mt_OORA!):
ATGGGTAAAGTAAGGAATATCTCTGGATGTGTGGCGGTAGCACATGGTGTGCGGTTAGCCGATGTCGACGTTATCTGTTCCTATCCCATCCGGCCTTATACCGGTATCATGTCCGAGCTGGCACGGATGGTTGCCGACGGCGAGTTGGATGCCGAATTTGTCCATGGCGAAGGTGAACACGCCCAGTTGAGTGTCGTTTACGGCGCTTCGGCTGCCGGAGCACGGGTATTCACCGGTAGTTCCGGTGTCGGCGTAACCTATGCCATGGAAGTCTATTCACCTATCTCTGGTGAACGTTTACCGGTACAGATGGCCATTGCCGACCGGACCCTGGACCCGCCCGGTGACTTTGGTGAGGAACATACCGATGCCGAGTGTTGCCGGGACCAGGGCTGGATCCAGGGTTGGGCCTCCACTCCCCAGGAAGCCCTGGATAACACCTTGATTTACTACCGGGTAGGTGAAGACCAGCGGGTCTTGTTGCCCCAGTATGCCTGCCTGGACGGGTACTTCGTCAGCCATATCCTAGGCCCGGTGGATATTCCCGACGAGGCCCAGGTGAAAGAGTTCCTGCCGCCTTACAAGAATCACCATGTCCTCGATCCCAGGAAGCCCCAGATTATCGGCCCTCAAATTGAGCCGGCCATGGGACCTCCCCTCCAATACCAGCGTTACCAGGCCGTTAAAGGCGTGCACAAGGTTCTAGAAGAGGCCTGTGACGAATTCGCCCGGATTTTCGGCCGCAAGTACGATCCCTACCTTGATGAATACCTGACTGACGATGCCGAGGTTATAATCTTCGGCCAGGGCGCCCACATGGAGACTGCTAAAGCGGTAGCCCGGCGCCTGCGCAACCTTGGTGAAAAGGTAGGAGTAGCGCGGCTACGTACCTTCCGGCCCTTCCCGACGGAACAAATTAAAGAGCGACTTTCTAAATTCAAGGCTATTGGTGTCCTCGATGTTTCGGCCAACTTCGGCATTTCCTGCAGCGGCGGCGTCCTCCTGTCCGAACTGCGGGCCGCCCTCTATGACTACGGCGACAAAGTAAAGACCGTAGGCTTTGTAGCCGGCCTAGGCGGCGAAGTCGTCACCCACGATGAGTTCTACCGCATGTTCCAGAAACTAAAGGAGATCGCCAAGACAGGTAAAGTCGAGCAGACCTCTTATTGGATCCCCTTTGAATTATAA
SEQ ID NO: 12 (Oxalate oxidoreductase (OOR) beta subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI42; Mt_OORB):
ATGCTGGATCGGATTGCATCTATTAAAAAGGCACCTGATGAGGAATACTATGTTCCCGGGCATCGTACCTGTGCCGGCTGCGGCCCGGCCCTGACCTATCGCCTGGTGGCCAAAGCCGCCGGTCCCAACACCATCTTCATTGGTCCCACCGGCTGCATGTACGTGGCCAATACCAGCTACGGCTGCGGTCCCTGGCGGGTACCCTGGATCCATGCCCAGATCACCAATGGCGGCGCCGTGGCCTCCGGTATTGAGGCCGCCTATAAGGCTATGATCCGCAAGAAGAAGACCGACGCCGAGTTCCCGAACATTATCGTTATGGCCGGTGATGGCGGCGCCGTCGATATCGGCCTCCAGGCACTGTCGGCCATGCTCTATCGCGGTCATGACGTCCTCTTTATCTGCTACGATAACGAGTCCTATGCCAATACCGGTATTCAGACCTCCCCGACGACGCCCTACGGGGCTAATACGACTTTTACCCCGCCTGGTGAGGTGGTACCGGAGGGCAAGAAGCTCTTCCCGAAGGATAACCCCAAGGTTATCGCCCACGGTCACCCGGAACTGAAGTATGTCGCCACGGCCTCCATCGGCTGGCCGGTAGACCTGATGAACAAGGTCCGTAAGGGCTTAAACCAGGAAGGTCCGGCCTATATCCACATCCACGCTCCTTGCCCCAAGGGCTGGCAGTTCCCGGCCGACAAGACCATTGAAATGGCCAAATTGGCCGTCCAGACGGGCATGTTCCAGCTCTACGAATATGAGAATGGTGAGTATAAACTGTCGGTTAAAGTCGATAAACGGAAACCGGTCAGCGAGTACATGAAACTCCAGAAGCGGTTTGCTCACCTGAAGCCCGAGCATATCGCCAAGATGCAGGCCTTTGTCGACGCCCGCTGCGCTGAAGTAGGTATCACCGTGCCGGTAGTCGCTTCCAACGCTTAA
SEQ ID NO: 13 (Oxalate oxidoreductase (OOR) delta subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI40; Mt_OORD):
ATGTCCACCAAAGATCTCTTTGCTGAACCCAATCTCAAGCAGATTACTGTGTGGGCCCGGGGCGTTGTCATGAACAAGGACGCCCGTGATATCGTGGTGGCCCTGACAGAAGCGGCTGCCAAAGAGGGTAAATATGTTCAGGCCTGGGAGAACTATGTTGACCTCCCCGACCGGATCTACGTCCCGGTAAGGGCCTATGCCCGCATCAGCAGCGATCCCATTGAAAGCAAATACATTTACGAGAATGAGACTCCCGACATTGTTGTTTTAGTTGAAGAATCCCTGATCAAAGGAGTGCCCATACTGAAGGGCATCCGTCCGGGTAGTACCCTGGTTGTAAATACCAAACGTTCCATAGATACTATCCTTGAGTTCCTGGGTGATACCGGCAATCTGGCCCAAATCGTAACGGTGGATGCCAACAGTATGGCCGAGGCTGTCATGACTTTGTCTGGCGCTGAAGGCGCTACTGACGCTACGGGTATTGGCGCCGGCATAGCGGCTCCCATTGCGGGTGCTGTTGTCAAGGCTACAGGTATAGTTGATGTTGAAAACCTCGCCGCTGTGGTCAAGAATCCCGCCGCCATGCGCCGGGGCTATGCGGAAGCCCAGGTGCGCCAGCTGCCGCCCCATGAAGCAGTTGAGGAAGCGGCCGTATCAGCGACTGAATTGTTGAGGCAAATGCCCTTTGCCGGGACGGTTCCCTCACCGGTAACGGAGAATGAGGGCATGGTAACCGGCAACTGGCGCATCCAAAGGCCCATTATCGACCGGGAAGCCTGTACCGAATGTTATACCTGCTGGATCTACTGCCCCGATTCCTGCATCACCAGGACCGAAGAAGGACCGGTATTTAATATGAAGTACTGCAAGGGCTGCGGCCTCTGTACGGCGGTCTGCCCCAGCGGCGCCCTGACTAATGTACCGGAACTTGACTTCAAAGATTAA
SEQ ID NO: 14 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Arabidopsis thaliana col-1; EC 6.2.1.8; UniProt Accession Q9SMT7; At_AAE3):
ATGGATAGCGATACTCTCTCAGGATTATTGGAAAACGTCGCCAAAAAATTCCCCGATCGCCGAGCTCTCTCCGTTTCTGGAAAATTCAATCTCACTCACGCGCGTCTTCACGATCTAATCGAACGCGCCGCTTCACGCCTTGTCTCCGACGCTGGAATCAAACCCGGCGATGTCGTTGCTCTCACCTTCCCTAACACCGTCGAGTTTGTTATAATGTTTTTAGCGGTGATAAGAGCTAGAGCCACGGCGGCGCCGTTGAACGCAGCGTACACGGCGGAGGAATTTGAGTTTTACCTCTCCGATTCAGATTCAAAGCTATTGTTAACCTCTAAAGAAGGAAACGCACCGGCTCAAGAAGCAGCTTCAAAGCTGAAAATCTCTCACGTCACCGCTACGCTGCTTGACGCTGGCTCGGACCTTGTACTATCCGTTGCGGATTCAGATTCCGTCGTTGACTCAGCGACGGAACTCGTTAATCACCCGGACGACGGTGCTCTCTTCCTCCACACTTCTGGCACTACGAGCCGTCCAAAGGGTGTACCGCTTACGCAGCTCAATCTAGCTTCATCCGTCAAGAACATTAAAGCTGTGTACAAGCTTACTGAGTCTGATTCTACGGTGATTGTTCTCCCTCTGTTCCATGTTCATGGATTGTTAGCTGGGTTGCTTAGCTCGCTTGGAGCTGGTGCTGCTGTAACTCTTCCAGCTGCTGGTAGATTCTCAGCAACAACATTTTGGCCAGATATGAAGAAGTATAACGCTACATGGTATACTGCTGTGCCGACCATTCATCAGATCATATTGGACCGCCACGCGAGCCACCCTGAAACGGAATATCCTAAACTCCGGTTCATCAGGAGTTGCAGTGCTTCTTTGGCTCCGGTGATATTGTCCAGGCTTGAGGAAGCGTTTGGAGCACCGGTGCTCGAGGCCTATGCAATGACAGAGGCAACACATTTGATGAGCTCAAACCCCTTACCAGAGGAAGGTCCACACAAGCCTGGGTCTGTTGGGAAACCGGTAGGTCAAGAAATGGCGATCCTTAATGAGAAAGGCGAGATCCAAGAGCCAAATAACAAAGGAGAGGTTTGTATAAGAGGTCCAAATGTGACCAAGGGTTACAAGAATAACCCAGAAGCCAACAAGGCAGGTTTCGAGTTTGGGTGGTTCCACACTGGTGATATCGGTTACTTTGATACCGATGGGTATTTGCATCTGGTGGGTCGGATCAAAGAGCTTATTAACCGTGGAGGTGAGAAGATATCTCCAATTGAAGTGGATGCAGTACTCTTAACGCATCCTGACGTTTCTCAGGGTGTTGCATTCGGTGTTCCTGATGAGAAATATGGGGAAGAGATTAACTGTGCGGTGATTCCAAGAGAAGGAACTACTGTAACCGAAGAGGACATTAAAGCGTTTTGTAAGAAGAATTTGGCAGCTTTCAAGGTGCCAAAGAGAGTGTTCATCACTGATAACCTCCCCAAAACTGCCTCTGGTAAGATTCAGCGCCGTATCGTCGCACAACATTTCCTTGAGAAGCCCTGA
SEQ ID NO: 15 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Methylobacterium extorquens AM1 / DSM 1338; EC 6.2.1.8; UniProt Accession C5APP0; Me_oxs):
ATGACTATGTTATTACCTGAACCATCAGCTTTGTTACCAACAGATTCAAAGGAAGCCTCAGTCCCAGCAACAACATTGCATGAGTTGATACAAGCTGGTGCAGACGCTGCCCCTGCCTTATCTTCTCCAGGAGGAGTACCATTAACCTTTCAAGCATTAAGAGCCTTAACCGAGAGAACCGTCGCCGACTTGAACGCAAGGGGTATTGGTAGAGGTGATAGAGTTGCCATTGTTTTGCCAAATGGACCAGAAATGGCTGCAGCTTTCATTGCAGTAGCAGCCGGTACAACTTCAGCACCTTTAAATCCTTCTTACAAGGCGGACGAATTTGAGTTCTATATGTCAGATTTAGGTGCAAAATTATTATTAGTCGCAGAGGGTTCTGAGACTCCTGCCGTTGCCGTGGCTGAGAAATTGGGTGTTTCAGTAGCTAGATTAAGACCAACTCCAGATGAAGGAGCAGGTTCTTTTACTTTACATTTTGCCTCAGAGTCTACTGGTCCAACCGAAAAGTCAGGTCCTGCAGGTTCAGATGATATAGCTTTGGTATTGCACACATCAGGTACCACATCTAGGCCTAAGATTGTCCCATTGACTCAAGCAAATGTATGCGCATCTGCTAGAAACATTAGGACTGCATTAGCCTTTGGCCCGGAAGATAGAGGATTAAACATAATGCCTTTGTTCCATATACACGGATTAATCGCTGGAATTTTAGCCCCATTATCTGTCGGTGGTCAAGTCTCTTGCACTCCAGGTTTCAACGCATTGAAATTCTTTGGATGGATGGATGAAGTCAATCCAACCTGGTACACCGGAGTACCAACAATGCATCAAGCCATTTTAGGAAGGGCAGCAAGAAATAAAGAAATTATCGCCAGGAACCCTTTAAGATTTATCAGATCTTCTTCATCATCTTTGCCACCACAAGTCATGAAAGAGTTGGAGGAAACCTTCGGTGCTCCTGTTATTGAAGCATACGGAATGACCGAAGCTGCACATCAAATGGCCTCAAACCCATTACCTCCTAAGCCTCACTATGCTGGTTCTGTAGGTTTGGCTGCAGGTCCTGAGATTGCTGTTGTCGACTTAGACGGTGAACCTTTACCAGCTGGAGAGACAGGTGAAATAGTCATAAGAGGTGACAACGTTATGAAGGGTTACGAAAACAACGAGAAGGCAAATGCAGAAGCATTCACCAAGCAGGGTTGGTTCAGAACTGGTGACCAAGGTGTCTTGTCTCCAGAGGGATACTTATCTATCACTGGAAGGTTAAAGGAGATAATCAATAGGGGTGGTGAGAAAATCTCACCAAGAGAAGTAGATGAAATTTTGATGGACCATCCTGCAGTATCACAATGCGTTACATTTGCGGTTCCTCATGATAAATTGGGTGAAGATGTTGCTGCTGCCATCGTCTTAAGGGAGGGTGTTGAAGCCGTTGAAAAGGACATTCGTAGCTTCGCTTCAGAAAGATTAGCAGCATTTAAAGTACCTGCCAAAATCTTAATTTTGGATGAAATCCCAAAAGGTGCCACAGGTAAGTTGCAAAGAATAGGTTTGGCACAGAAATTGGGATTGGTTTAA
SEQ ID NO: 16 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 6.2.1.8; UniProt Accession P38137; Sc_YBR222C):
ATGACAAGTGCCGCTACTGTTACTGCTTCGTTCAACGATACTTTTAGCGTATCCGATAATGTCGCCGTTATTGTTCCTGAAACGGACACTCAGGTGACCTACAGGGATCTATCCCACATGGTGGGTCACTTCCAGACCATGTTCACAAATCCTAATTCTCCATTGTACGGAGCTGTTTTCAGACAAGATACAGTGGCGATATCCATGCGTAATGGGCTGGAATTTATCGTCGCTTTCCTCGGTGCTACTATGGACGCTAAAATTGGCGCGCCCTTGAATCCCAATTATAAGGAAAAGGAGTTCAATTTTTATTTGAATGACCTGAAATCTAAGGCGATTTGCGTCCCAAAGGGTACCACAAAGTTACAGAGTTCTGAAATTCTAAAATCTGCCTCCACGTTTGGATGTTTTATCGTAGAGCTGGCCTTCGATGCGACCAGGTTTAGGGTAGAGTATGATATATACTCTCCAGAGGACAACTACAAAAGGGTTATTTACCGGTCTTTGAACAACGCCAAATTTGTCAACACAAATCCCGTTAAATTCCCTGGGTTTGCCCGTTCCAGTGACGTTGCCCTGATTTTGCATACCAGTGGTACCACCTCCACTCCAAAAACGGTGCCTTTGTTACATTTGAACATTGTGAGAAGCACGTTGAACATTGCTAACACTTACAAGCTAACGCCCTTGGACAGATCTTATGTCGTGATGCCTCTTTTCCACGTCCATGGGTTAATTGGTGTTTTACTTTCCACTTTTAGAACTCAGGGTTCTGTTGTGGTTCCCGATGGATTCCATCCAAAGTTATTCTGGGACCAATTTGTTAAGTACAACTGTAATTGGTTCAGTTGCGTTCCCACAATAAGCATGATTATGCTGAACATGCCCAAACCAAACCCTTTCCCACACATTAGATTCATCAGATCGTGTTCTTCTGCTTTGGCTCCAGCAACGTTCCATAAGCTGGAGAAGGAATTCAATGCACCTGTCTTGGAGGCCTATGCGATGACCGAAGCATCACATCAAATGACCTCAAACAATCTGCCTCCAGGAAAGAGAAAGCCTGGTACTGTGGGCCAGCCACAAGGAGTCACCGTCGTCATTCTAGATGACAATGACAATGTCTTGCCCCCGGGCAAAGTCGGCGAAGTTTCCATCAGAGGCGAAAACGTCACTTTGGGGTATGCTAATAATCCAAAAGCTAACAAGGAGAACTTCACCAAGAGAGAGAACTATTTCAGAACCGGTGACCAAGGTTATTTCGACCCTGAGGGGTTTTTGGTCCTTACAGGCAGAATCAAAGAGCTTATCAACAGGGGTGGTGAAAAGATTTCACCCATTGAGCTCGACGGCATTATGCTATCGCATCCAAAGATCGATGAAGCCGTTGCATTTGGTGTTCCCGACGATATGTACGGCCAAGTAGTTCAAGCCGCCATTGTTTTGAAGAAGGGAGAAAAAATGACCTACGAAGAACTGGTGAACTTCTTAAAGAAGCACCTAGCCTCTTTCAAAATTCCAACCAAGGTGTACTTTGTTGATAAGCTACCAAAAACCGCTACAGGTAAAATCCAGAGAAGAGTTATCGCAGAAACTTTTGCTAAGAGCAGCAGAAATAAGAGTAAGTTGTAA
SEQ ID NO: 17 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; UniProt Accession B9X293; Ba_OxlT):
ATGACAAAGATATTGATAGACGACATCATCCCCATCATCGTCATCATGGCGTTGGGCTATGTCTGTGGAAAACTCAGCTACTTCGACAACGATCAGCGTCAGGGCCTCAACAAGCTCGTGCTGAACATCGCCCTCCCTGCCGCACTGTTCATCTCGATCGTCAAGGCGACCCGTGAGATGCTCGCACAGGATGCGGTGCTCACAATTCTCGGCTTCATCGGCATCATCGTGATGTTCATGTTGAGCTACTACCTGTGCCGACTGATGTTCCACCATTCGATCCAGGAAGCGGCCGTATGCGCGTTGATCGCCGGCTCGCCGACCATCGGCTTCCTCGGCTTCGCCGTGCTCGACCCGATCTACGGCGACACCGTGAGCACGAACCTCGTCATCGCGATCATCTCGATCGTCGTCAACGCCGTCACGATTCCGATCGGCATGTATCTGATCAACCTCGGCCAGAGCAAGGATCGCGAGCGCCTGTCGAAGGCCGCCGTCACGAACTCGAAGGGCCAGGTCAGCATCGCCAATCCGAAGGACGATATCGCCGTCGATCCGAACAAGGATGCGAAGACCGACAAGACGGCAGAGGTGATGATCTCCAAGTCGTCGAACATGGGCAAGAAGAAGAACCAGAACCTCGAAGCGCTCATCAACGCACTCAAGCAGCCTGTGTGCTGGGCTCCGCTGCTCGCCATCGTGCTCGTGCTCATCGGCGTGCGCGTGCCGTCCGGTTTCGCTCCCACCTTCGACCTGATTGCCAAAGCGAACTCCGGTGTCGCCGTGCTGGCCGCCGGCCTCGCGCTCTCCACTGTGAAGTTCTCGCTGGGCTGGGAAACGATCTGGAACACGTTCTACCGCTTGATTCTCACCCCTGCGGCATTCCTCGGCGTCGGCCTGCTGCTGGGCATGGGCAGCAATGTGAACAAGCTCTCCATGCTCGTCATGGCTGTGGCCCTGCCGCCTGCATTCTCCGGCATCATCATCTCGAGCCGCTACAACATCTACGTCAAGGAAGGTGCGTCGACCACCGCGGTTTCCACGGTTGCGTTCGCCGTCACCTGCCTGCTGTGGATCTGGCTCGTGCCGCTGTGCTGCCACTGA
SEQ ID NO: 18 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; Co_OxlT1):
ATGAGTAACGCAACGGCAGGGGCCCTGAGCCCCAATCAGGGAGCTTCGGAATCCACGCGCTGGATCCAGCTGCTCGTCGGCGTGGTCTGCATGATCGCCACGGCCAACATCCAGTACGCCTGGACGCTGTTCGTGCCTGAGATCCAGGATACCTACGGCTGGTCACGCGCCAGCATCCAGATTGCCTTTACCGTGTTCGTGCTGGTGCAGACCTGGCTGGCGCCGATCGAGGGCTACTTCATCGACAAGTTCGGGCCGCGCATGATGGTGGCCTTCGGCGCGCTCTTTATCGGCACGGCGTGGGTCATCAACTCGCAGGCGACCACGCTGATGGGCTTCTACGTCGGCGCCGCCGTCGGCGGCCTGGGCGTGGGCTCCATCTACGCGACCTGCATCAACAACGCGCTGAAGTGGTTCCCGGACCGCCGCGGCCTCGCGGTCGGCCTGACCGCCGGCGGCTATGGCGCGGGCTCGGCGGCGACCATCCTGCCGATCGCGGCGATGATCGAGTCGCAGGGTTTCCAGCACACCTTCCTGTTCTTCGGCCTGCTGCAGGGGTCGCTGGCCTTTGTCGCGGCGTGGTTCCTGCGCTCGCCCAAGACCGGCGAGGTGCGGGGGTCGAAGAAGCTGGCCCAGGCCACGCGCGACTACACCCTCAAGGAAGCGCTGTGCACCAGGCTGTTCTGGCTGATGCTGGTGATGTTCGTGCTGGTGGTCACGGGCGGCATGATGGCCGTGGCGCAGCTCGGTGTCATCGCCAAGGACCTTGGCGTGAAGGAATTCCAGGTCGACCTGCACTTCTTCGTGATGGCTGCACTGCCGCTCGCCCTGATGCTGGACCGCATCATGAACGGCATCTCGCGTCCGCTGTTCGGCTGGATCTCGGACAACATCGGCCGTGAAAAGACCATGGTGATCGCCTTTACGCTGGAAGGGCTGGGCATCATCGCGCTGGGCTACTTCGGCAGCAACCCGTACGCCTTCCTGATCCTGTCCGGCGTGGTGTTCCTGGCCTGGGGCGAAGTCTACTCGCTGTTCTCGGCACTGGCGGGCGATGCCTTCGGCACCAAGCACATCGGCAAGATCTACGGCGTGCTGTACACCGCCAAGGGCATCGGCGCACTGTTCGTGCCGATCGGCAACCTGCTGATGGAAGCCACCGGCACGTGGTCGACGGTGCTCTACACGGTGGCGGTGATGGACCTGACCGCGGCGTTCCTTGCCATCATGGTGCTGCGGCCGGTGCTTGCCTCGCACGTTGCGACATCGAGGCAGCGGTTTGCGCAGGAATCTGCCGCGGCCGGCGCGCAAGTGGCGGCTTGA
SEQ ID NO: 19 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; Co_OxlT2):
ATGGAATTGCAGCAGAGGGAGTCCACGTCGCGCTTTGCGTCGCCGTGGGTGCAATTGGTCTTTGGCGTGATCTGCATGGCGATGATCGCCAACATGCAGTACGGCTGGACGCTGTTCGTCAACCCGATCGACGACAAATACCACTGGGGCCGCACCGCGATCCAGGTGGCATTCACCATCTTCGTCGTGACGGAAACCTGGCTGGTACCGATCGAGGGCTACCTCGTCGACAAGTACGGCCCGCGCCCGGTAGTGGTGGGCGGCGGGTTGCTGTGCGCCATCGCGTGGGCGCTGAACTCGGTGGCGTCCTCGCTGCCGATGCTGTACTTCGCGGCCGCAATCGGCGGCGTGGGTGCCGGCGCGGTCTACGGCACCTGCGTGGGCAATGCGCTCAAGTGGTTCCCCAACCGGCGCGGGCTGGCGGCGGGCATTACCGCAGCAGGCTTTGGCGCTGGTTCCGCGATGACCGTGGTGCCGATCGCCAACATGATCAAGACCTCGGGCTATGAAGCCACCTTCCTGTGGTTCGGGCTGGGGCAGGGCCTGATCGTCTTCATCCTCGGCCTGGCCCTGTATCCGCCGTCGGCCAGGATCCTGAGCGAGGTCAAGACCACGCTCAAGGCCGCCGCGACCTACAACGCCACGCCGCGCCAGGTGCTGAAGTCGCCGATCTTCTGGATCATGTACGCCATGTTCGTGATGATGGCCGCCGGCGGGCTGATGGCCACCGCGCAGTTGGGCCCGATCGCCAAGGACTTCGGCCTGCATGACTCGCCGGTGTCGATCCTCGGCCTGACGCTGCCCGCGCTGACCTTCGCGCTGACCATCGACCGCGTGCTCAACGGCCTGACCCGCCCGTTCTTCGGCTGGATCTCCGACCATATCGGCCGCGAGCGCACCATGTTCTTCGCCTTCGCGGTGGAGGCGGTCGGCATCCTGCTGCTGTCCAAGTACGGCCACAACCCGGTGGCGTTCGTGGTGCTGACCGGCATCGTGTTCTTTGCCTGGGGTGAGATCTACAGCCTGTTCCCGGCCACCTGCGGCGATACCTTCGGTCCCAAGTTCGCCGCCACCAACGCCGGCTTGCTGTACACCGCCAAGGGCACGGCTGCGTTGCTGGTGCCGTTCTCCAGCGTGATCACCGCCGCCACCGGCGACTGGCACGCGGTGTTCATGCTCGCCTCCGGCATGGCGGCGCTGTCGGCGGTGCTGGCGCTGTTCGTGCTCAAGCCGATGCGTGAAGCCCATGCCCGCAAGTATGTCCACGCCAATACCGCGGCGCCGATGGGCTATCGTGCCGTGCAGGAAGACCTGACCTGA
SEQ ID NO: 20 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Escherichia coli MG1655; UniProt Accession P37662; Ec_YhjX):
ATGACACCTTCAAATTATCAGCGTACCCGCTGGCTGACACTCATCGGTACTATCATTACCCAGTTTGCGCTGGGGTCGGTTTATACCTGGAGCCTGTTTAATGGCGCGCTTTCCGCCAAGCTGGATGCGCCGGTAAGCCAGGTCGCTTTCTCTTTCGGCTTGTTAAGTCTGGGGCTGGCAATTTCGTCTTCTGTTGCGGGCAAATTACAGGAACGTTTTGGCGTTAAACGCGTCACCATGGCTTCCGGCATTTTGCTGGGATTAGGCTTCTTCCTGACAGCGCATTCTGACAACCTGATGATGCTGTGGTTAAGCGCCGGTGTGCTGGTGGGACTGGCAGATGGCGCGGGTTATCTGCTGACGCTCTCTAACTGTGTGAAGTGGTTCCCGGAGCGTAAAGGTCTGATCTCCGCGTTCGCTATCGGTTCTTATGGTCTGGGTAGCCTGGGTTTCAAATTTATCGACACGCAGCTGCTGGAAACGGTCGGTCTGGAAAAAACCTTTGTGATTTGGGGAGCGATTGCGCTGTTGATGATTGTTTTCGGCGCAACGTTAATGAAAGACGCACCAAAACAGGAAGTGAAAACCAGCAATGGTGTGGTGGAGAAAGATTACACGCTGGCAGAGTCGATGCGTAAACCGCAGTACTGGATGTTAGCGGTAATGTTCCTGACCGCCTGCATGAGCGGCCTGTACGTGATTGGGGTAGCGAAAGATATCGCCCAAAGTCTGGCACACCTTGATGTGGTTTCCGCAGCCAATGCAGTCACTGTTATTTCCATCGCCAACCTTTCAGGTCGTCTGGTGCTGGGTATTCTGTCTGACAAAATCGCCCGTATCCGTGTTATTACCATTGGTCAGGTGATATCGCTGGTGGGTATGGCGGCCCTGCTGTTTGCACCATTGAATGCAGTGACGTTCTTTGCAGCGATTGCCTGCGTGGCATTTAACTTTGGCGGCACTATTACCGTCTTTCCGTCACTGGTCAGTGAGTTCTTTGGCCTCAATAACCTGGCGAAAAACTACGGTGTGATTTATCTCGGTTTCGGTATCGGTAGCATTTGTGGTTCGATTATCGCCTCACTGTTTGGCGGCTTCTATGTGACCTTCTACGTGATTTTCGCCCTGCTGATTCTGTCATTGGCGCTTTCTACGACGATTCGTCAGCCAGAGCAGAAAATGTTGCGTGAGGCGCATGGCTCCCTTTAA
SEQ ID NO: 21 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; UniProt Accession Q51330; Of_oxlT):
ATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAG
SEQ ID NO: 22 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; EC 4.1.1.8; UniProt Accession B9X297; Ba_oxc):
ATGGTTGATGTAAGTGTAACTGCTACAAGCTCAGACCAGAATCTCACGGATTCTCCCCACTACCTCGCCGAAACGCTCATCAAGAACGGTGTCAAGCATATGTACGGCGTCGTCGGAATCCCGGTCACTGATTTCGCACGTATCGCACAGGGCATGGGCATCCGCTTCATCGGCATGCGCCATGAGGAGGACGCGGTGAACGCTGCCGCTGCCGAAGGATTCCTCACCGGTCGCCCAGCTGTGGCGCTCACCGTTTCCGCGCCGGGCTTCCTCAATGGTCTGGCACCGCTGCTTGAAGCCACCACGAACGGCTTCCCGGTCATCATGATCGGCGGTTCGTCCACTCGCCATGTCGTCGACATGCACGAAGGCGAATACGAAGGCCTCGACCAAATGAACTATGCGAAGCAGTTCTGCAAGGAATCGTTCCGCATCGACAAGATCGAAGACATTCCGCTTGCTGTGGCCCGCGCCATGCACATCGCATGCTCCGGCCGTCCGGGCGGTGTCTACATCGATTTCCCGGACGACGCCGTCGCCCAGACGCTCGACAAGGATGTCGCCGAGTCGCAGCTGTGGGTCGCGAACCAGCCGGCTCCGGCAATGCCGCCGGCGCAGTCCTCTGTGGATGAAGCGCTCAAGCTGCTCTCCGAGGCCAAGAACCCTCTCATGCTTGTGGGCAAGGGTGCGGCGCTGGCCCAGGCCGAGGACGAACTGCGTGAATTCGTCGAGAAGACCGACATGCCATTCCAGCCGATGTCGATGGCCAAGGGCGTCATTCCGGACGATGACCCACACTGCACGGCGAGCTGCCGCGGACTCGCGCTGCGCACCGCCGACGTCGTGCTGCTCGTCGGCGCTCGTCTGAACTGGATGCTCAATTTCGGCGAGGGCAAGGAATGGAACCCGAACGTCAAGTTCATCCAGATCGATATCGACCCGAACGAGATCGAGAACGCCCGTTCCATCGCATGCCCGGTGGTCGGCGACATCAAGTCCGCCATGCAGATGATCAATGCCGGACTCGAGAAGACGCCAGTGAAGGCGTCCGCGCAGTGGCTCGACATGCTCAAGGCCGACGCCGAGAAGAACGATGCCAAGTTCGCCGCCCGCGTGAACTCGAACACCGTGCCGATGGGTCACTACGACGCGCTCGGCGCCATCAAGAAGGTGTACGACCAGCACAAGGACATGATCCTGACCAACGAGGGCGCGAACACGCTCGACGATTGCCGCAACATCATCGACATCTACCAGCCGCGCCATCGTCTAGACTGCGGCACGTGGGGCGTTATGGGCTGCGCGGTCGGCTATTCAATCGGCGCCGCAGTGGCCACCGGCAAGCCTGTCCTGTACGTCGGCGGTGATTCCGGCTTCGGCTTTGACGGCATGGAAGTCGAGGTCGCCTGCCGCTACAATCTGCCGATCACCTTCGTCGTGCTCAACAACGGCGGCATCTACCGCGGCGATTTCGAGAATCTCGGCGACGACGGCGACCCGTCGCCGCTGACGCTGAGCTACGACGCCCACTACGAGCGCATGATCGAGGCGTTCGGCGGCAACGGCTATTACGCGACCACCCCGGCGGAAGTCGAGCAGATGGTCGGCGAGGCCGTCGCCTCCGGCAAGCCGAGCCTCGTGCACGTGCAGCTCGCCGATTATGCGGGCAAGGAGTCCGGGCACATCTCCAACCTGAACCCGAAGCCCGTCGTCGGCCCGCTCGCCACTTCCGAAATGACCGCGAACCCCTACCTCAAGGGCGCCCATATGTGA
SEQ ID NO: 23 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 4.1.1.8; Co_oxc):
ATGGCAGAAGTCGGAAACGAGCTGCAGCGTCACGCCGCGGAAGAGCATCAGGCACAAACCGATGGTTTTCATCTGGTCATCGACGCGCTGAAGCTGAACGGCATCGAAAACATCTACGGCCTGCCCGGCATTCCGGTCACCGACCTGGCTCGGCTGGCGCAGGCAAACGGCATGCGCGTCATCAGCTTCCGCCACGAGCAGAACGCAGGCAACGCCGCAGCGATTGCCGGCTTTCTGACGCAAAAGCCAGGCGTTTGCCTGACCGTGTCTGCGCCAGGGTTCCTGAACGGGCTCACGGCGCTGGCGCATGCGACCACCAACTGCTTCCCGATGATCCTGATCAGCGGCTCGAGCGAGCGCGAGATCGTCGATCTGCAGCAGGGTGACTACGAAGAGATGGACCAGCTGGCCATCGCCCGTCCGCACGCCAAGGCTGCCTTCCGCGTGCTGCACGCCGAAGACATCGGCGTCGGGATCGCGCGTGCCATCCGTGCCGCCGTGTCGGGCCGCCCGGGCGGTGTGTACCTGGACCTGCCGGCCAAGCTGCTGGGCCAGTCGATGGAAGCCGAGAAGGGCCGCAAGTCGCTGATCAAGGTGGTGGATCCGGCCCCGCGCCAGCTGCCTGCTCCGGACTCGGTCGACCGTGCCGTCGCGCTGCTGAAGAGCGCCAAGCGCCCGCTGATCCTGGTAGGCAAGGGTGCTGCGTACGCACGCGCCGAAGCGGATATCCGCACGCTGGTCGAGAAGACGGGCATTCCGTACCTGCCGATGTCGATGGCCAAGGGCCTGTTGCCCGATACGCACCCGCAATCGGCCTCCGCCGCACGCTCGTATGTGCTGGCCGAAGCCGACGTGGTGCTGCTGGTCGGCGCCCGCCTGAACTGGCTGCTGTCGCACGGCAAGGGCAAGACCTGGGGCAAGCCGAAGCAATTCATCCAGATCGACATCGCGCCGACCGAGATGGACAGCAACGTCGCCATCGCCGCGCCGGTCGTGGGTGACATCGGTTCGTGCGTGTCGGCGATCCTCGACAAGGTCGGCGACGACTTTGCCAGGCCGGGCGCCGACTGGCTGAACGCGGTGGCTGACCGCAGGGACACCAACCTGGCGAAGATGGCCGAAACCCTGGCCAGGTCCAGGGACGCCTCGCCGATGAACTTCCACGGTGCGCTCGGCGTGCTGAAGGATGTGGTCAAGGCCAACCCGAACATCTCGTTCGTCAACGAAGGCGCCAACACGCTGGACTACGCCCGTGCCGTGATCGACATGTACGAGCCGCGCAAGCGCCTGGACGTAGGCACCTGGGGCGTGATGGGCGTGGGCATGGGCTACGCGGTCGCCGCCGCGGTCGAAACCGGCAAGCCGGTGCTGGCGCTGTGCGGTGACAGTGCGTTCGGCTTCTCGGGCATGGAAGTCGAAACGATCTGCCGCTACAACCTGCCGGTCTGCATCGTCATTTTCAACAACAACGGCGTCTACAAGGGGATCGACGTGAATCCGACCGGCGGCAGGGATCCGGCGGTCACGACGTTCGTCCCGGGCGCGCGCTACGACAAGATGATGGAAGCGTTCGGTGGTGTCGGTGCCAATGTCACCACGCCGGCGGAACTCGAAGCCGCGGTAAACGAAGCGCTGCGCTCGGGCAAGCCCACGCTGGTCAACGCCGTCATCGACCCGGCTGCCGGCACCGAAAGCGGTCGCCTGACCAATCTGAATCCGCAAAGCTCGGCCAAGAAGTAA
SEQ ID NO: 24 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Escherichia coli MG1655; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P0AFI0; Ec_oxc):
ATGTCAGATCAACTTCAAATGACAGATGGTATGCATATCATCGTTGAAGCATTAAAACAGAATAATATTGACACTATTTATGGTGTTGTAGGTATTCCTGTGACGGATATGGCACGCCATGCCCAGGCGGAAGGCATTCGTTATATTGGTTTTCGTCATGAGCAGTCGGCAGGCTATGCCGCTGCGGCAAGCGGTTTTCTTACCCAAAAACCGGGGATCTGCCTGACAGTTTCTGCGCCAGGATTCCTCAATGGTTTGACCGCATTGGCCAACGCAACGGTAAATGGTTTTCCGATGATCATGATTAGCGGCTCCAGCGACCGCGCGATCGTCGACCTACAGCAAGGTGATTATGAAGAGCTGGACCAAATGAATGCGGCAAAACCGTATGCCAAAGCAGCATTTCGCGTTAATCAGCCGCAGGATCTTGGCATTGCATTGGCACGCGCTATCCGGGTTTCTGTATCGGGTCGCCCTGGCGGAGTTTATCTTGATTTGCCAGCAAATGTCCTGGCCGCGACGATGGAAAAAGACGAAGCGTTAACCACGATTGTTAAAGTTGAAAATCCGTCGCCAGCATTATTGCCATGCCCGAAGTCAGTCACTAGCGCAATTTCGCTTTTAGCAAAAGCTGAACGGCCATTAATTATCCTTGGCAAAGGCGCGGCGTATTCACAAGCTGATGAACAGCTTCGTGAATTTATTGAAAGTGCTCAGATTCCATTCCTGCCAATGTCTATGGCGAAAGGGATCCTTGAAGATACGCATCCACTTTCTGCGGCAGCTGCGCGTTCGTTTGCCCTGGCAAATGCTGACGTTGTCATGCTTGTTGGTGCACGACTGAATTGGTTATTGGCACACGGTAAAAAAGGATGGGCGGCAGATACACAGTTTATTCAACTGGATATTGAACCGCAGGAAATTGACAGCAACCGCCCCATTGCTGTGCCAGTCGTTGGTGATATTGCATCCAGTATGCAAGGTATGCTGGCAGAACTGAAACAAAACACATTTACGACTCCACTGGTATGGCGCGATATTTTAAATATCCACAAGCAGCAAAATGCACAAAAAATGCATGAAAAATTAAGTACAGATACTCAACCATTAAATTACTTTAATGCATTAAGTGCTGTGCGCGACGTATTGCGCGAGAACCAGGATATTTATTTAGTTAATGAAGGTGCAAATACCCTGGATAATGCACGAAATATTATTGATATGTATAAACCACGTCGTCGTCTGGATTGTGGTACCTGGGGTGTCATGGGCATCGGTATGGGCTATGCCATCGGTGCTAGCGTGACTTCTGGTTCTCCGGTTGTCGCCATTGAAGGTGATAGTGCTTTTGGTTTCAGTGGGATGGAAATTGAAACGATTTGTCGATATAACCTGCCGGTGACGATCGTTATTTTTAATAATGGCGGCATCTACAGAGGAGATGGTGTTGATCTCAGTGGCGCTGGTGCACCATCACCAACGGATCTGTTGCACCATGCAAGGTATGACAAATTAATGGATGCGTTTCGTGGCGTTGGCTATAACGTCACCACGACAGATGAACTTCGTCATGCTTTAACCACCGGTATTCAGTCGCGCAAACCGACCATTATTAATGTGGTCATCGACCCTGCAGCAGGAACTGAAAGTGGCCATATTACCAAACTTAACCCAAAACAAGTCGCTGGTAATTAA
SEQ ID NO: 25 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P40149; Of_oxc):
ATGAGTAACGACGACAATGTAGAGTTGACTGATGGCTTTCATGTTTTGATCGATGCCCTGAAAATGAATGACATCGATACCATGTATGGTGTTGTCGGCATTCCTATCACGAACCTGGCTCGTATGTGGCAAGATGACGGTCAGCGTTTTTACAGCTTCCGTCACGAACAACACGCAGGTTATGCAGCTTCTATCGCCGGTTACATCGAAGGAAAACCTGGCGTTTGCTTGACCGTTTCCGCCCCTGGCTTCCTGAACGGCGTGACTTCCCTGGCTCATGCAACCACCAACTGCTTCCCAATGATCCTGTTGAGCGGTTCCAGTGAACGTGAAATCGTCGATTTGCAACAGGGCGATTACGAAGAAATGGATCAGATGAATGTTGCACGTCCACACTGCAAAGCTTCTTTCCGTATCAACAGCATCAAAGACATTCCAATCGGTATCGCTCGTGCAGTTCGCACCGCTGTATCCGGACGTCCAGGTGGTGTTTACGTTGACTTGCCAGCAAAACTGTTCGGTCAGACCATTTCTGTAGAAGAAGCTAACAAACTGCTCTTCAAACCAATCGATCCAGCTCCGGCACAGATTCCTGCTGAAGATGCTATCGCTCGCGCTGCTGACCTGATCAAGAACGCCAAACGTCCAGTTATCATGCTGGGTAAAGGCGCTGCATACGCACAATGCGACGACGAAATCCGCGCACTGGTTGAAGAAACCGGCATCCCATTCCTGCCAATGGGTATGGCTAAAGGCCTGCTGCCTGACAACCATCCACAATCCGCTGCTGCAACCCGTGCTTTCGCACTGGCACAGTGTGACGTTTGCGTACTGATCGGCGCTCGTCTGAACTGGCTGATGCAGCACGGTAAAGGCAAAACCTGGGGCGACGAACTGAAGAAATACGTTCAGATCGACATCCAGGCTAACGAAATGGACAGCAACCAGCCTATCGCTGCACCAGTTGTTGGTGACATCAAGTCCGCCGTTTCCCTGCTCCGCAAAGCACTGAAAGGCGCTCCAAAAGCTGACGCTGAATGGACCGGCGCTCTGAAAGCCAAAGTTGACGGCAACAAAGCCAAACTGGCTGGCAAGATGACTGCCGAAACCCCATCCGGAATGATGAACTACTCCAATTCCCTGGGCGTTGTTCGTGACTTCATGCTGGCAAATCCGGATATTTCCCTGGTTAACGAAGGCGCTAATGCACTCGACAACACTCGTATGATTGTTGACATGCTGAAACCACGCAAACGTCTTGACTCCGGTACCTGGGGTGTTATGGGTATTGGTATGGGCTACTGCGTTGCTGCAGCTGCTGTTACCGGCAAACCGGTTATCGCTGTTGAAGGCGATAGCGCATTCGGTTTCTCCGGTATGGAACTGGAAACCATCTGCCGTTACAACCTGCCAGTTACCGTTATCATCATGAACAATGGTGGTATCTATAAAGGTAACGAAGCAGATCCACAACCAGGCGTTATCTCCTGTACCCGTCTGACCCGTGGTCGTTACGACATGATGATGGAAGCATTTGGCGGTAAAGGTTATGTTGCCAATACTCCAGCAGAACTGAAAGCTGCTCTGGAAGAAGCTGTTGCTTCCGGCAAACCATGCCTGATCAACGCGATGATCGATCCAGACGCTGGTGTCGAATCTGGCCGTATCAAGAGCCTGAACGTTGTAAGTAAAGTTGGCAAGAAATAG
SEQ ID NO: 26 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P39994; Sc_YEL020C):
ATGACCACGACCGCTACCCAACACTTCGCTCAACTTTTACAAAAATATGGCATCGACACAGTCTTTGGAATTGTGGGCATCCCTATTGTCCAACTAGCGGATACGATGGTTGCCAACGGTATCAAATTCATTCCATGCAGGAACGAACAGGCTGCCTCATATGCAGCCTCTGCTTATGGTTATATTAGTGATAAGCCCGGCGTGTTACTTATTGTCGGGGGCCCCGGTTTAATCCACGCACTGGCTGGTATATACAACTCAATGAGTAATAGGTGGCCTCTTCTAGTAATTGCAGGGAGTTCTTCTCAAAGTGATATACATAAAGGCGGGTTTCAAGAGTTGGATCAAGTTAGTCTTTTGTCCCCATTTTTGAAGTTTACCGGAAAGTTAACCCCTGACAATATTGACATGATTACTCAGAAGGCTTTGAATTACTGTATACAAGGCACTGCAGGGGTTTCTTACATAGACGTCCCTGCAGATTTTATTGAGTATGAAAAACCCTTAGAAGGAAACGACCGTACAGGAAATGAATTACCGATGATATTAACTCCAAACATATGTGGCCCTGATCCGTCGAAGATCAAAAAAGTCGTACAGCTTATTTTGCAACATAAAAATAAAAATATTCTGATTGTTATTGGAAAGGGTGCGGTAAAAAACTCACACGAAATCCGCAGACTAGTAAATACGTTCAATCTACCATTTTTACCCACCCCAATGGCTAAGGGAATTGTCCCAGACTCTTCTCCACTGAACGTTTCATCTGCAAGATCTCAAGCATTGAAAATAGCGGATATTGTTCTTGTTCTCGGGGCAAGATTAAACTGGATATTGCATTTTGGTACTTCACCCAAATGGAACTCAGAATCCATATTCATCCAGTTCGATTCCAATCCCGAAACCTTGGGGGATAACAATGTCTCACCTGGTGCTGACCTTTCCATATGGGGAGATATAGGCTTGAGCGTAACCGCTTTAGTTGAGGAATTGACTCGCCAAGATTCCTGCTGGAAGTATAGTGGTGTTAAGCAAGAAATACGAGAGAAAATTCAACTGAATCAAACTCGTCTATTGAGGAAAGAGAAGACTAGAGGGGCACAATTGAATTACAACCAGGTTTATGGAACATTGAGGCCTCTTATCGATGATTACAGGACAATACTTGTGACGGAGGGAGCAAATACTATGGATATTGCGCGTATTTCATTCCCTACAGACGCTCCAAGGCGCCGTTTAGACGCAGGGACCAACGCGACTATGGGGATTGGGCTCGGATATGCTCTTGCATGCAAGGCATCTCATCCGGAACTCGATGTGGTGCTGATTCAGGGTGATTCCGCATTTGGATTCTCTGCCATGGAAATTGAAACGGCAGTAAGGTGTCAGCTGGCATTGGTCATCGTTGTGATGAACAATAGCGGTATTTACCATGGAGAAAAGGATATAGAGGGTGATTTACCTCCAACGGCACTAAGCAAGAACTGCCGTTACGATCTCGTAGGCAAAGGACTGGGTGCCAATGATTTTTTTGTCAACACAATAAGCGAACTGAGCAGATGCTTCCAACAAGCCGTGCAGCTTTCTCGGACTAAAAGAGAAACAAGTGTCATCAACGTTATCATTGAGCCTGGCGAACAAAAGCAAATTGCCTTTGCCTGGCAGAATAAACCGCGTTTATGA
SEQ ID NO: 27 (Oxalyl-CoA reductase / Glyoxylate:NADP+ oxidoreductase (OXR) from Methylobacterium extorquens AM1 / DSM 1338; EC 1.2.1.17; UniProt Accession C5APN9; Me_PanE):
ATGTCAATTGCCATTGTTGGTGCCGGTGCAATTGGAGGATATTTAGGTGTCAGATTAGCTGAAGCTGGTGAGGATGTTACATTCATAGCTAGATCTAATGCTGCAGCCATACAAGCAGATGGAATGAGATTGATTGAAGAGGATGGGACCGAAATTCACTCTAAATCTGTCAAAGCCACTCGTTCAATGCAAGAAGCAGGAGTTCACGAGGTTGTTTTATTAACAGTTAAGGCACACCAAGTTGGTCCTATAGCTGCCGATTTACATCACTTGATAGGTCCAGACACCGTAGTCGTCACTATGCAGAATGGTATTCCTTGGTGGTACTTTCTAGGTGGATACTCTGGAGATCATGCAGGAACAAGGTTGGAATCAGCTGATCCAGGAGGTTTAATTGCTGATCATTTAGACCCTAAGCATGTCATTGGTTCTGTTGTTTACCCTGCAACTGTATTGACAGACCCAGGTACTGTTAAAGTTATCGAGGGTAATAGGTTTGGTTTGGGAGAATTGGATGGTTCAAAATCTGAAAGAGTTTTAGCCTTATCTCAGAGGTTAGCAAGGGCCGGTTTTAGAGCCCCAGTCACTTCAGACATTAGAGCAGAGATCTGGTTGAAGTTGTGGGGAAATTTATCTTTCAATCCCATTAGCGCCTTAACACATGCAACCTTGGAGGACATCTGTAGATTTCCTGATACTAGGGCTATCGCCGCAGAGATGATGAGAGAGGCCGAAGTCATCGCCAATAAATTGGGTGTAACATTTAGATTAGGAATAGATAAGAGAATAGCTGGAGCTGAAAAGGTCGGTCCACACAAGACCTCTATGTTGCAAGACGTAGAAGCTGGTAGACCAATTGAGTTGGAAGCCTTAGTCGGATCTGTAATCGAATTAGGAAGGTTAACTGGTACTCCTACTCCACATATTGATACAGTCTTTGCTTTGATGAGATTATTGGCCCAATCTTTAGAAAGAGCACAAGGTAGATTGGCTATTCAGGGAGCATAA
SEQ ID NO: 28 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_ACOCT):
ATGACGCAATCCAACCTGCCCGATTTGCCCGACCTGCCGCTGACCGGCCTGCGCGTGATCGATTTCTCGCGCGTGCTGGCCGGCCCCTATTGCACCGCGCTGCTCGGCGACCTCGGCGCCGAGGTGATCAAGGTCGAGCCGCCCGGCGGCGACGACTATCGCGCGGTGGGTCCCTTCGCCGGCGGCAAGAGCGGCCTGTTCTGCGCGATGAACCGCAACAAGCAGAGCATCGTGATCGACCTGAAGACGGAGGACGGCCTGGCTGTCGCCCGCGCGCTGTGCCGCGGTGCCGACGTGGTGGTGGAAAACTTCCGCCCCGGCGTGGCCGACAAGCTTGGCATCGGCTACGCCGCGCTGCGCGAACTGAACCCCTCGCTGGTCTATGCCAGCGTGTCGGGCTTCGGCCAGACCGGCCCGGAATCGCACCGCCCGGCCTACGACATCATCCTGCAGGCGATGTGCGGGCTGATGGACGCCACCGGCGCGCCCGACGGCGCGCCGACCATGCTTGGCGAAGCCGTGTCCGATGCGGTCAGCGGCCTGTTCGCCTCGTGGGGCGTGCTGGCCGCGCTGCTGGCGCGCGAGAAGACAGGGCGCGGCACGCATGTCGATGTGTCGATGTTCGATGCCACGCTCAGCCTCAGCGCCACGCTGGTCGCGCGCTACGCGGCCACCGGGCTGGCGCCGCGGCGCGTGGGCAACCGCCACCCGTCGTCGGCGCCGTTTGGCGCCTACCGCGCCGCGGATGGCTTCTACGTGGTCGCGGTGCTGAACAACAAGCTGTTCCAGGCGCTTGCCGACGCCATCGGCCGGCCCGCGATGGCGCACGACCCGCGCTTTGCCGATGACGAAACGCGCTGCCGCTTCGAGTCCGACCTGCGCGCCATGCTGGAAAACTGGTCGGCCACGCGCACGGTGGCGGAGGTGAACGCAGCGCTCGGCGCCGCCGGCATCCCGGTCGCACCGATCCGCAATGTCAAGGAAGCGCTGGAAAGCGAGCACGCGGCGCATCGCCGCCTGCTGACCGAGGTGCCCGACACGGACGGCGGCACCGTGCGCCTGCCGTCGCAGCCGGTCAAGTTCTCCGCGTACGGCACCAACCGCGTGACGCCCGCGCCGGCACTGGGCCAGCACACCGGGGCCATCCTGGCCGCGCCCGATTTCAGTAATTTCAATAAGGAGAAGCAACATGCATAA
SEQ ID NO: 29 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_CaiB):
ATGGGAGCCTTAAGCCATCTCCGCGTCCTCGACCTGACCCGTGTCCTTGCCGGGCCCTGGTGCGCCCAGAACCTTGCCGACTTCGGCGCCGATGTGATCAAGATCGAGCGCCCCGGCGCCGGCGACGACACCCGCACCTGGGGCCCGCCCTGGCTCAAAGACGAAGACGGCCGCGACACCGCCGAGGCCGCCTACTACCTGGCCGCCAACCGCAACAAGCGCTCGGTCACCTGCGACATCAGCACGCCCGAAGGCCAGCAGATCGTGCGCGACCTCGCCGCGCAGAGCGACGTGGTGCTGGAGAACTACAAGGTCGGCCAACTCAAGAAATACGGGCTGGACTACGAGTCGCTCAGGCAGGTCAAGCCCGACCTGATCTACTGCTCGGTCACCGGCTTCGGCCAGACCGGCCCGTACGCCGCGCGCCCCGGCTATGACTTCATCATCCAGGGCATGGGCGGCTTCATGAGCCTGACCGGCGAGCGCGACGACCTGCCCGGCGGCGGCCCGCAGAAGGCCGGCGTGGCGATTTCCGACCTGATGACGGGCCAGTACGCCACCATCGCCGTGCTGGCGGCGCTGGCGCATCGCGAGCGCACCGGCGAAGGCCAGTACATCGACATGGCGCTGCTGGACGTGCAGGTGGCCATGCTGGCCAACATGAACACCAACTACCTGGCCAGCGGCGAGGCGCCGCGCCGCTGGGGCAATGCGCACCCCAACATCGTGCCCTACCAGACCTTCCAGGCCGCCGACGGCTGGATCATCGTCGCGGTGGGCAACGACGGGCAGTTCCGCAAGTTCGTCACCGACGGCGGCATGCCCGAACTGGCCGACGATCCGCGCTTTGCCAAAAACCCGCAGCGCGTGGCCAACCGCGACGTGCTGGTGCCGATCCTGGCCGAGATGGTGCGCCCGCGCACCCGCGCGCAGTGGATCCGCGACCTGGAAGCCGCGGGCGTGCCGTGCGGCCCGATCAACACGCTCGACGATGTGTTCGAGGACGACCAGGTCAAGGCGCGCGGCCTGCGCGTGGACCTGCCGCACCCCAGCGCCGGCGAGGTCAAGCTGGTCGCCAGCCCGATCAAGATGAGCGCGACGCCGCCGCAGGCGCTGCGCCACCCGCCGCTGCTGGGCGAGCACACCGACACGGTGCTGGCCGAAACCCTGGGCTACAGCGCCGGGCAGATCGCGGCACTTCGCGCAAAAGGTGTGCTGTAA
SEQ ID NO: 30 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_SCACT):
ATGGACAAGGAACGCATTCGCCTGGCGAGGCTGCATGACAAGGTAGTCTCGGCCGACGAGGCCGCCGCGCTGATCCGCGACGGCATGACCGTAGGCATGAGCGGTTTCACCCGCGCGGGCGACTGCAAGGAAGTCCCGTTCGCGCTGGCGCGGCGCGCGGCGACCGAGCCGCTGCGCATCACCCTGATGACGGGCGCCTCGCTCGGCAACGACATCGACCGCGTCCTGGCCGAGGCCGACGTGATCGCGCGCCGCCTGCCGTTCCAGTCCGATGGCACGCTGCGCCGCAAGATCAACGCCGGCGAGGTGATGTTCATCGACCAGCACCTGTCCGAAACCGTCGAGCAGCTGCGTTCCGGCCAGATCGCGCCGGTGGACGTGGCGGTGGTCGAGGCCGTGGCGATTACCGAGCAGGGCGGCATCATCCCCAGCACCTCGGTGGGCAATTCGGCAAGCTTTGCCATGCTGGCGCGCAAGGTGATCGTCGAGATCAACATGAACATGCCGCTGGAGCTGGAAGGGCTGCACGACATCTATTTCCCGGTCCAGCGCCCGTACCGCCAGCCGATCCCGCTGATCGCGCCGGAACAGCGCATCGGACTCCCGTATATTCCGATCGATCCGGAGAAGATTGCCGCCATCGTCATCACCGCCAAGGACGACAGCCCGTCCAATGCGCTGCCGCCGGACGACGAAACCCGCAGCATCGCCGGCCACCTCAATGACTTCCTGCTGCGCGAAGTGCGCGCGGGCAAGCTGTCGCCGTCGCTGCAGCCGCTGCAGGCCGGCATCGGCACCATTGCCAATGCCGTGCTGCACGGGCTGGTCGAGTCGCCGTTCCGCGACCTGAAGATGTATTCCGAGGTGCTGCAGGACAGCACCATCGAGTTGCTCGATGCGGGCCGGCTGTCGTTCGCGTCGGCGTCGTCGGTGACGCTGACGCGCGAGGTCTACCAGCGCTTCCTGTCGAACCTGGACCGCTACCGTTCGCGCCTGCTGCTGCGCCCGCAGGAGATCAGCAACCATCCCGAGATCCTGCGCCGGCTGGGGCTGATCACCATCAACACCGCGCTGGAGTGCGACATCTACGGCAACGTCAACTCCACGCATGTGGGTGGCACGCACATGATGAACGGCATCGGCGGCTCCGGCGACTTTGCGCGCAATGCGCACGTGTCGGTGTTCGTGACCAAGTCGGTGGCCAAGGGCGGCGAAGTCTCGAGCATCGTGCCGATGGTGGCGCACGTGGACCACACCGAGCACGATGTCGACATCATCGTCACCGAGCACGGCCTGGCCGACCTGCGCGGCCTGGCACCGCGCGAGCGCGCGCGCACCGTCATCGCCAATTGCGCCGATCCGCAATACCGCGAGTTGCTGGGCGACTATTTCCGCCGCGCCAGCGCCCACGGCGGCCAGACGCCGCACCTGCTGGAAGAGGCGTTGTCCTGGCATGTCGGCTTGCGCGATCGCGGCACCATGCGGTCCGCACAGCCGGCGCAGGCCCTGGCTGCCTGA
SEQ ID NO: 31 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_SCMCT):
ATGGTCAACGAAGCGAACAAGGAAAAGATGCCGCTGCAAGGCGTGCGCGTGTTGGAGCTGGGATCGCTGATCGCCGGCCCGTATGCCGGCGGCCTGCTCGCCCAGTTCGGCGCCGAGGTGCTGAAGATCGAAGCGCCGGGCGAAGGCGATCCGCTGCGCAAATGGCGCAAGCTGTACGAGGGCACCTCGCTGTGGTGGTACAGCCAGAGCCGCAACAAGAAGTCGCTGACGCTGGACCTGCGCAGCGCGCAAGGCCAGGACATCGTGCGCAAGCTGGTGGCCGGCGCCGATATCGTGATCGAGAACTTCCGCCCCGGCACGCTGGAGAAATGGGGCCTGGGCTGGGAAGACCTGCGCAAGGTGAATCCGGCCCTGGTCATGGTGCGCATTTCCGGCTATGGCCAGACCGGCCCCTACAAGGACCGCCCGGGGTTTGCCGCGATCGCGGAATCGATGGGCGGGCTGCGCTATGTCAGCGGCTACCCCGACCGGCCGCCGGTGCGGTCCGGCGTCAGCATCGGCGACACGCTGGCGTCGCTGTACGGCGTGATCGGCGCGCTGCTGGCCATGCACCATCTGCGCAACAACGATGGCGAAGGGCAGTTTGTGGACGTGGCCCTGTACGAGTCGGTCTTTGCCGTGATGGAAAGCCTGGTGCCGGAGTTCGACAAGTTCGGCCATGTGCGCGAGCGTTCCGGCGCCAGCCTCCCCGGCATTTCGCCGTCGAACACATATCCCTGCCAGGATGGACAGTACGTGATCATCGCGGGCAATGGCGACGCCATCTTCCGGCGCTTCATGACGGCGATCGGCCGCGACGACCTCGGCCAGGATCCGCGCCTGGCTCACAACGATGGCCGCGTGCAGCACAACGCCATGCTCGACGACGCCATCGCCGCATGGACCGCCGCGCACGACCTCGACACCGTGCTGGCGACGCTGGAAGCCGCGGCGGTGCCTTGCGGGCGCATCTACACCGCGCAGGACATCTGCAGCGACCCCCACTACAGTGCGCGCGGCATGATCGAGCCGCACCAGCTTCCGGACGGCTCGCCGCTGGCCCTGTCGGGCATCGTGCCCAGGCTCAGTGAAACCCCCGGGCGTACCAACTGGATCGGCCCGGCGCTGGGCGAGCACACCGAAGAGATCCTGGCGGGCATCGGCATTGCCGGCGCCGAATTCCGCGCGCTGCGCGAGGCCGGCGTGGTCTGA
SEQ ID NO: 32 (Acetyl-CoA:oxalate CoA-transferase (ACOCT) from Acetobacter aceti strain 1023; EC 2.8.3.19; UniProt Accession A9X6P9; Aa_CoAT3):
MTETTPAKPKGPFDGLLVIDLTHVLNGPFGTTILTDLGARTIKIEPPGHGDDTRTYGPYVGDQSLYFSFVNRGKESIVLNLKDEGDRAIFLEMVRKADVLAENFRPGVMDRLGFNYEELAKINPRLIYASSSGFGQTGPLAHYPAYDTIVQAMSGIMMATGFPDGPPTRVGGTSLSDLCGGVFMFCGIASALYARERTGKGAHIDVSMFDGTLAFLQHALMCWSATGKAPARIGNRHPYMAPFDVFQAQDKPFVICCGNDHLFKALCDVIGAPELATDPRFVENHDRMANNDALKAALEKALSKQPAAHWLDVIHKAGVPVGPLLDVAEAANLPQTAARNMLIKSGGVMMPGNPVKISGYDDPHERPGAPKLDEQGAALRKEFAAPEAK
SEQ ID NO: 33 (Acetyl-CoA:oxalate CoA-transferase (ACOCT) from Escherichia coli MG1655; EC 2.8.3.19; UniProt Accession P76518; Ec_yfdE):
MTNNESKGPFEGLLVIDMTHVLNGPFGTQLLCNMGARVIKVEPPGHGDDTRTFGPYVDGQSLYYSFINHGKESVVLDLKNDHDKSIFINMLKQADVLAENFRPGTMEKLGFSWETLQEINPRLIYASSSGFGHTGPLKDAPAYDTIIQAMSGIMMETGYPDAPPVRVGTSLADLCGGVYLFSGIVSALYGREKSQRGAHVDIAMFDATLSFLEHGLMAYIATGKSPQRLGNRHPYMAPFDVFNTQDKPITICCGNDKLFSALCQALELTELVNDPRFSSNILRVQNQAILKQYIERTLKTQAAEVWLARIHEVGVPVAPLLSVAEAIKLPQTQARNMLIEAGGIMMPGNPIKISGCADPHVMPGAATLDQHGEQIRQEFSS
SEQ ID NO: 34 (Formate dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 1.2.1.2; UniProt Accession Q08911; Sc_FDH1):
MSKGKVLLVLYEGGKHAEEQEKLLGCIENELGIRNFIEEQGYELVTTIDKDPEPTSTVDRELKDAEIVITTPFFPAYISRNRIAEAPNLKLCVTAGVGSDHVDLEAANERKITVTEVTGSNVVSVAEHVMATILVLIRNYNGGHQQAINGEWDIAGVAKNEYDLEDKIISTVGAGRIGYRVLERLVAFNPKKLLYYDYQELPAEAINRLNEASKLFNGRGDIVQRVEKLEDMVAQSDVVTINCPLHKDSRGLFNKKLISHMKDGAYLVNTARGAICVAEDVAEAVKSGKLAGYGGDVWDKQPAPKDHPWRTMDNKDHVGNAMTVHISGTSLDAQKRYAQGVKNILNSYFSKKFDYRPQDIIVQNGSYATRAYGQKK
SEQ ID NO: 35 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; EC 2.8.3.16; UniProt Accession B9X295; Ba_frc):
MADKSTAPLAGIKVIDWTQVQSGPSCTQILAWLGAEVIKLEKVHGGDPTRNEMNDVDGSYSLYFLQLNANKKSITLDMKDPEGKKILTDLLKDADVFVENIGPGDVEKLGFGWDEVHKINPKLIMASLKGFNQGSRFEHVKAFEPVAQCAGGAASTTGWWEGDKNIPTQSGAALGDSNTGMHLTIAILTALLQRERTGEGVFVYQSMQNAVLNLCRIKLRDQLILDHLHQLSYYDCYPGYKFGKAIPRAANAEGGLVLGWCYRAKGWETDPNAYVYIVIQQSQKGFENFCNAMGFQDWLTDPKFSTPNARDEHKQEVYKRVEEYTMQYDKYTLTKELGAKGVPVGPVLDWNELENDPDLNEDGTLITIDQGDARGKFKTIGLPFTMSNYAPDYQRAPKLGENNEEILKSLGYTDEQIADLATKGVIGSNDGVKADLTAAPAQA
SEQ ID NO: 36 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.16; Co_frc1):
MPAQHTHATPAGPLDGIRVLDLTAVVLGPLATQVLADFGADVIKIEGPEGDLMRANGVSQHAGMSSIYLALNRNKRSVVLDLKIPEGAEALRALIAGADVLVHNMRVAAIERLGFGYEAVARINPRIVYCVATGFGQDGPHRDKPAFDDIIQAGCGLVALGAGNGERPEYVPSLIADKTTGLALANAVLAALLHRERHGVGQSVEVPMLETMAAFVMTEHLGGLTFEPAPAGAGYARLLQGGRRPAPTRDGWICALPYTERHWHAFFRAVGRDDLADRYEVGDRAQRNANIRALYGHLAELTPERSTAEWMALFEALDIPATPIYDLDALVDHPHLRAVGLFQATQHPTEGPLREVRPAARFSATPLSLRRHAPALGEHTAEVLQEAGIALPAAHAGTPAGAQE
SEQ ID NO: 37 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.16; Co_frc2):
MNLPLNGIKIIDFTHVQAGPACTQLLAWFGADVIKVERPGSGDVTRTQLRDIPDVDALYFTMLNSNKRSLTLDTKKPEGKKILEQLIRESDVLVENFGPGALDRMGFSWERINELNPKMIVASVKGFSDGHHYEDLKVYENVAQCAGGAASTTGFWDGPPTVSAAALGDSNTGMHLAIGILTALIGRDKTGKGQKVAVSMQDAVLNLCRVKLRDQQRLDRLGFLEEYPQYPHGSFSDVVPRGGNAGGGGQPGWVLKCKGWETDPNAYIYFTIQGHAWEPICKALGKPEWIDDPNYATAKARQPHIFDIFNTIEEWLADKTKYEAVDILRKHDIPCSPVLSMKEIAADPSLRASGSITEVPHKERGTYLTVGSPIKFSDLKPEITGSPLLGEHSEEVLAGLGYGTDDIKRLRESQVI
SEQ ID NO: 38 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Escherichia coli MG1655; EC 2.8.3.16; UniProt Accession P69902; Ec_frc):
MSTPLQGIKVLDFTGVQSGPSCTQMLAWFGADVIKIERPGVGDVTRHQLRDIPDIDALYFTMLNSNKRSIELNTKTAEGKEVMEKLIREADILVENFHPGAIDHMGFTWEHIQEINPRLIFGSIKGFDECSPYVNVKAYENVAQAAGGAASTTGFWDGPPLVSAAALGDSNTGMHLLIGLLAALLHREKTGRGQRVTMSMQDAVLNLCRVKLRDQQRLDKLGYLEEYPQYPNGTFGDAVPRGGNAGGGGQPGWILKCKGWETDPNAYIYFTIQEQNWENTCKAIGKPEWITDPAYSTAHARQPHIFDIFAEIEKYTVTIDKHEAVAYLTQFDIPCAPVLSMKEISLDPSLRQSGSVVEVEQPLRGKYLTVGCPMKFSAFTPDIKAAPLLGEHTAAVLQELGYSDDEIAAMKQNHAI
SEQ ID NO: 39 (Formyl-CoA:oxalate CoA-transferase (FCOCT) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; EC 2.8.3.16; UniProt Accession O06644; Of_frc):
MTKPLDGINVLDFTHVQAGPACTQMMGFLGANVIKIERRGSGDMTRGWLQDKPNVDSLYFTMFNCNKRSIELDMKTPEGKELLEQMIKKADVMVENFGPGALDRMGFTWEYIQELNPRVILASVKGYAEGHANEHLKVYENVAQCSGGAAATTGFWDGPPTVSGAALGDSNSGMHLMIGILAALEMRHKTGRGQKVAVAMQDAVLNLVRIKLRDQQRLERTGILAEYPQAQPNFAFDRDGNPLSFDNITSVPRGGNAGGGGQPGWMLKCKGWETDADSYVYFTIAANMWPQICDMIDKPEWKDDPAYNTFEGRVDKLMDIFSFIETKFADKDKFEVTEWAAQYGIPCGPVMSMKELAHDPSLQKVGTVVEVVDEIRGNHLTVGAPFKFSGFQPEITRAPLLGEHTDEVLKELGLDDAKIKELHAKQVV
SEQ ID NO: 40 (Oxalate decarboxylase (OXDC) from Bacteroides subtilis 168; EC 4.1.1.2; UniProt Accession O34714; Bs_oxdC):
MKKQNDIPQPIRGDKGATVKIPRNIERDRQNPDMLVPPETDHGTVSNMKFSFSDTHNRLEKGGYAREVTVRELPISENLASVNMRLKPGAIRELHWHKEAEWAYMIYGSARVTIVDEKGRSFIDDVGEGDLWYFPSGLPHSIQALEEGAEFLLVFDDGSFSENSTFQLTDWLAHTPKEVIAANFGVTKEEISNLPGKEKYIFENQLPGSLKDDIVEGPNGEVPYPFTYRLLEQEPIESEGGKVYIADSTNFKVSKTIASALVTVEPGAMRELHWHPNTHEWQYYISGKARMTVFASDGHARTFNYQAGDVGYVPFAMGHYVENIGDEPLVFLEIFKDDHYADVSLNQWLAMLPETFVQAHLDLGKDFTDVLSKEKHPVVKKKCSK
SEQ ID NO: 41 (Oxalate oxidase (OXO) from Hordeum vulgare; EC 1.2.3.4; UniProt Accession P45850; Hv_OxOx):
MSDPDPLQDFCVADLDGKAVSVNGHTCKPMSEAGDDFLFSSKLTKAGNTSTPNGSAVTELDVAEWPGTNTLGVSMNRVDFAPGGTNPPHIHPRATEIGMVMKGELLVGILGSLDSGNKLYSRVVRAGETFVIPRGLMHFQFNVGKTEAYMVVSFNSQNPGIVFVPLTLFGSDPPIPTPVLTKALRVEAGVVELLKSKFAGGS
SEQ ID NO: 42 (Oxalate oxidoreductase (OOR) alpha subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI41; Mt_OORA!):
MGKVRNISGCVAVAHGVRLADVDVICSYPIRPYTGIMSELARMVADGELDAEFVHGEGEHAQLSVVYGASAAGARVFTGSSGVGVTYAMEVYSPISGERLPVQMAIADRTLDPPGDFGEEHTDAECCRDQGWIQGWASTPQEALDNTLIYYRVGEDQRVLLPQYACLDGYFVSHILGPVDIPDEAQVKEFLPPYKNHHVLDPRKPQIIGPQIEPAMGPPLQYQRYQAVKGVHKVLEEACDEFARIFGRKYDPYLDEYLTDDAEVIIFGQGAHMETAKAVARRLRNLGEKVGVARLRTFRPFPTEQIKERLSKFKAIGVLDVSANFGISCSGGVLLSELRAALYDYGDKVKTVGFVAGLGGEVVTHDEFYRMFQKLKEIAKTGKVEQTSYWIPFEL
SEQ ID NO: 43 (Oxalate oxidoreductase (OOR) beta subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI42; Mt_OORB):
MMDRIASIKKAPDEEYYVPGHRTCAGCGPALTYRLVAKAAGPNTIFIGPTGCMYVANTSYGCGPWRVPWIHAQITNGGAVASGIEAAYKAMIRKKKTDAEFPNIIVMAGDGGAVDIGLQALSAMLYRGHDVLFICYDNESYANTGIQTSPTTPYGANTTFTPPGEVVPEGKKLFPKDNPKVIAHGHPELKYVATASIGWPVDLMNKVRKGLNQEGPAYIHIHAPCPKGWQFPADKTIEMAKLAVQTGMFQLYEYENGEYKLSVKVDKRKPVSEYMKLQKRFAHLKPEHIAKMQAFVDARCAEVGITVPVVASNA
SEQ ID NO: 44 (Oxalate oxidoreductase (OOR) delta subunit from Moorella thermoacetica ATCC 39073; EC 1.2.7.10; UniProt Accession Q2RI40; Mt_OORD):
MSTKDLFAEPNLKQITVWARGVVMNKDARDIVVALTEAAAKEGKYVQAWENYVDLPDRIYVPVRAYARISSDPIESKYIYENETPDIVVLVEESLIKGVPILKGIRPGSTLVVNTKRSIDTILEFLGDTGNLAQIVTVDANSMAEAVMTLSGAEGATDATGIGAGIAAPIAGAVVKATGIVDVENLAAVVKNPAAMRRGYAEAQVRQLPPHEAVEEAAVSATELLRQMPFAGTVPSPVTENEGMVTGNWRIQRPIIDREACTECYTCWIYCPDSCITRTEEGPVFNMKYCKGCGLCTAVCPSGALTNVPELDFKD
SEQ ID NO: 45 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Arabidopsis thaliana col-1; EC 6.2.1.8; UniProt Accession Q9SMT7; At_AAE3):
MDSDTLSGLLENVAKKFPDRRALSVSGKFNLTHARLHDLIERAASRLVSDAGIKPGDVVALTFPNTVEFVIMFLAVIRARATAAPLNAAYTAEEFEFYLSDSDSKLLLTSKEGNAPAQEAASKLKISHVTATLLDAGSDLVLSVADSDSVVDSATELVNHPDDGALFLHTSGTTSRPKGVPLTQLNLASSVKNIKAVYKLTESDSTVIVLPLFHVHGLLAGLLSSLGAGAAVTLPAAGRFSATTFWPDMKKYNATWYTAVPTIHQIILDRHASHPETEYPKLRFIRSCSASLAPVILSRLEEAFGAPVLEAYAMTEATHLMSSNPLPEEGPHKPGSVGKPVGQEMAILNEKGEIQEPNNKGEVCIRGPNVTKGYKNNPEANKAGFEFGWFHTGDIGYFDTDGYLHLVGRIKELINRGGEKISPIEVDAVLLTHPDVSQGVAFGVPDEKYGEEINCAVIPREGTTVTEEDIKAFCKKNLAAFKVPKRVFITDNLPKTASGKIQRRIVAQHFLEKP
SEQ ID NO: 46 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Methylobacterium extorquens AM1 / DSM 1338; EC 6.2.1.8; UniProt Accession C5APP0; Me_oxs):
MTMLLPEPSALLPTDSKEASVPATTLHELIQAGADAAPALSSPGGVPLTFQALRALTERTVADLNARGIGRGDRVAIVLPNGPEMAAAFIAVAAGTTSAPLNPSYKADEFEFYMSDLGAKLLLVAEGSETPAVAVAEKLGVSVARLRPTPDEGAGSFTLHFASESTGPTEKSGPAGSDDIALVLHTSGTTSRPKIVPLTQANVCASARNIRTALAFGPEDRGLNIMPLFHIHGLIAGILAPLSVGGQVSCTPGFNALKFFGWMDEVNPTWYTGVPTMHQAILGRAARNKEIIARNPLRFIRSSSSSLPPQVMKELEETFGAPVIEAYGMTEAAHQMASNPLPPKPHYAGSVGLAAGPEIAVVDLDGEPLPAGETGEIVIRGDNVMKGYENNEKANAEAFTKQGWFRTGDQGVLSPEGYLSITGRLKEIINRGGEKISPREVDEILMDHPAVSQCVTFAVPHDKLGEDVAAAIVLREGVEAVEKDIRSFASERLAAFKVPAKILILDEIPKGATGKLQRIGLAQKLGLV
SEQ ID NO: 47 (Oxalate--CoA ligase / Oxalyl-CoA synthetase (OXS) from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 6.2.1.8; UniProt Accession P38137; Sc_YBR222C):
MTSAATVTASFNDTFSVSDNVAVIVPETDTQVTYRDLSHMVGHFQTMFTNPNSPLYGAVFRQDTVAISMRNGLEFIVAFLGATMDAKIGAPLNPNYKEKEFNFYLNDLKSKAICVPKGTTKLQSSEILKSASTFGCFIVELAFDATRFRVEYDIYSPEDNYKRVIYRSLNNAKFVNTNPVKFPGFARSSDVALILHTSGTTSTPKTVPLLHLNIVRSTLNIANTYKLTPLDRSYVVMPLFHVHGLIGVLLSTFRTQGSVVVPDGFHPKLFWDQFVKYNCNWFSCVPTISMIMLNMPKPNPFPHIRFIRSCSSALAPATFHKLEKEFNAPVLEAYAMTEASHQMTSNNLPPGKRKPGTVGQPQGVTVVILDDNDNVLPPGKVGEVSIRGENVTLGYANNPKANKENFTKRENYFRTGDQGYFDPEGFLVLTGRIKELINRGGEKISPIELDGIMLSHPKIDEAVAFGVPDDMYGQVVQAAIVLKKGEKMTYEELVNFLKKHLASFKIPTKVYFVDKLPKTATGKIQRRVIAETFAKSSRNKSKL
SEQ ID NO: 48 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; UniProt Accession B9X293; Ba_OxlT):
MTKILIDDIIPIIVIMALGYVCGKLSYFDNDQRQGLNKLVLNIALPAALFISIVKATREMLAQDAVLTILGFIGIIVMFMLSYYLCRLMFHHSIQEAAVCALIAGSPTIGFLGFAVLDPIYGDTVSTNLVIAIISIVVNAVTIPIGMYLINLGQSKDRERLSKAAVTNSKGQVSIANPKDDIAVDPNKDAKTDKTAEVMISKSSNMGKKKNQNLEALINALKQPVCWAPLLAIVLVLIGVRVPSGFAPTFDLIAKANSGVAVLAAGLALSTVKFSLGWETIWNTFYRLILTPAAFLGVGLLLGMGSNVNKLSMLVMAVALPPAFSGIIISSRYNIYVKEGASTTAVSTVAFAVTCLLWIWLVPLCCH
SEQ ID NO: 49 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; Co_OxlT1):
MSNATAGALSPNQGASESTRWIQLLVGVVCMIATANIQYAWTLFVPEIQDTYGWSRASIQIAFTVFVLVQTWLAPIEGYFIDKFGPRMMVAFGALFIGTAWVINSQATTLMGFYVGAAVGGLGVGSIYATCINNALKWFPDRRGLAVGLTAGGYGAGSAATILPIAAMIESQGFQHTFLFFGLLQGSLAFVAAWFLRSPKTGEVRGSKKLAQATRDYTLKEALCTRLFWLMLVMFVLVVTGGMMAVAQLGVIAKDLGVKEFQVDLHFFVMAALPLALMLDRIMNGISRPLFGWISDNIGREKTMVIAFTLEGLGIIALGYFGSNPYAFLILSGVVFLAWGEVYSLFSALAGDAFGTKHIGKIYGVLYTAKGIGALFVPIGNLLMEATGTWSTVLYTVAVMDLTAAFLAIMVLRPVLASHVATSRQRFAQESAAAGAQVAA
SEQ ID NO: 50 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; Co_OxlT2):
MELQQRESTSRFASPWVQLVFGVICMAMIANMQYGWTLFVNPIDDKYHWGRTAIQVAFTIFVVTETWLVPIEGYLVDKYGPRPVVVGGGLLCAIAWALNSVASSLPMLYFAAAIGGVGAGAVYGTCVGNALKWFPNRRGLAAGITAAGFGAGSAMTVVPIANMIKTSGYEATFLWFGLGQGLIVFILGLALYPPSARILSEVKTTLKAAATYNATPRQVLKSPIFWIMYAMFVMMAAGGLMATAQLGPIAKDFGLHDSPVSILGLTLPALTFALTIDRVLNGLTRPFFGWISDHIGRERTMFFAFAVEAVGILLLSKYGHNPVAFVVLTGIVFFAWGEIYSLFPATCGDTFGPKFAATNAGLLYTAKGTAALLVPFSSVITAATGDWHAVFMLASGMAALSAVLALFVLKPMREAHARKYVHANTAAPMGYRAVQEDLT
SEQ ID NO: 51 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Escherichia coli MG1655; UniProt Accession P37662; Ec_YhjX):
MTPSNYQRTRWLTLIGTIITQFALGSVYTWSLFNGALSAKLDAPVSQVAFSFGLLSLGLAISSSVAGKLQERFGVKRVTMASGILLGLGFFLTAHSDNLMMLWLSAGVLVGLADGAGYLLTLSNCVKWFPERKGLISAFAIGSYGLGSLGFKFIDTQLLETVGLEKTFVIWGAIALLMIVFGATLMKDAPKQEVKTSNGVVEKDYTLAESMRKPQYWMLAVMFLTACMSGLYVIGVAKDIAQSLAHLDVVSAANAVTVISIANLSGRLVLGILSDKIARIRVITIGQVISLVGMAALLFAPLNAVTFFAAIACVAFNFGGTITVFPSLVSEFFGLNNLAKNYGVIYLGFGIGSICGSIIASLFGGFYVTFYVIFALLILSLALSTTIRQPEQKMLREAHGSL
SEQ ID NO: 52 (Oxalate:formate antiporter (oxlT) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; UniProt Accession Q51330; Of_oxlT):
MNNPQTGQSTGLLGNRWFYLVLAVLLMCMISGVQYSWTLYANPVKDNLGVSLAAVQTAFTLSQVIQAGSQPGGGYFVDKFGPRIPLMFGGAMVLAGWTFMGMVDSVPALYALYTLAGAGVGIVYGIAMNTANRWFPDKRGLASGFTAAGYGLGVLPFLPLISSVLKVEGVGAAFMYTGLIMGILIILIAFVIRFPGQQGAKKQIVVTDKDFNSGEMLRTPQFWVLWTAFFSVNFGGLLLVANSVPYGRSLGLAAGVLTIGVSIQNLFNGGCRPFWGFVSDKIGRYKTMSVVFGINAVVLALFPTIAALGDVAFIAMLAIAFFTWGGSYALFPSTNSDIFGTAYSARNYGFFWAAKATASIFGGGLGAAIATNFGWNTAFLITAITSFIAFALATFVIPRMGRPVKKMVKLSPEEKAVH
SEQ ID NO: 53 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis DSM 10140; EC 4.1.1.8; UniProt Accession B9X297; Ba_oxc):
MVDVSVTATSSDQNLTDSPHYLAETLIKNGVKHMYGVVGIPVTDFARIAQGMGIRFIGMRHEEDAVNAAAAEGFLTGRPAVALTVSAPGFLNGLAPLLEATTNGFPVIMIGGSSTRHVVDMHEGEYEGLDQMNYAKQFCKESFRIDKIEDIPLAVARAMHIACSGRPGGVYIDFPDDAVAQTLDKDVAESQLWVANQPAPAMPPAQSSVDEALKLLSEAKNPLMLVGKGAALAQAEDELREFVEKTDMPFQPMSMAKGVIPDDDPHCTASCRGLALRTADVVLLVGARLNWMLNFGEGKEWNPNVKFIQIDIDPNEIENARSIACPVVGDIKSAMQMINAGLEKTPVKASAQWLDMLKADAEKNDAKFAARVNSNTVPMGHYDALGAIKKVYDQHKDMILTNEGANTLDDCRNIIDIYQPRHRLDCGTWGVMGCAVGYSIGAAVATGKPVLYVGGDSGFGFDGMEVEVACRYNLPITFVVLNNGGIYRGDFENLGDDGDPSPLTLSYDAHYERMIEAFGGNGYYATTPAEVEQMVGEAVASGKPSLVHVQLADYAGKESGHISNLNPKPVVGPLATSEMTANPYLKGAHM
SEQ ID NO: 54 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 4.1.1.8; Co_oxc):
MAEVGNELQRHAAEEHQAQTDGFHLVIDALKLNGIENIYGLPGIPVTDLARLAQANGMRVISFRHEQNAGNAAAIAGFLTQKPGVCLTVSAPGFLNGLTALAHATTNCFPMILISGSSEREIVDLQQGDYEEMDQLAIARPHAKAAFRVLHAEDIGVGIARAIRAAVSGRPGGVYLDLPAKLLGQSMEAEKGRKSLIKVVDPAPRQLPAPDSVDRAVALLKSAKRPLILVGKGAAYARAEADIRTLVEKTGIPYLPMSMAKGLLPDTHPQSASAARSYVLAEADVVLLVGARLNWLLSHGKGKTWGKPKQFIQIDIAPTEMDSNVAIAAPVVGDIGSCVSAILDKVGDDFARPGADWLNAVADRRDTNLAKMAETLARSRDASPMNFHGALGVLKDVVKANPNISFVNEGANTLDYARAVIDMYEPRKRLDVGTWGVMGVGMGYAVAAAVETGKPVLALCGDSAFGFSGMEVETICRYNLPVCIVIFNNNGVYKGIDVNPTGGRDPAVTTFVPGARYDKMMEAFGGVGANVTTPAELEAAVNEALRSGKPTLVNAVIDPAAGTESGRLTNLNPQSSAKK
SEQ ID NO: 55 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Escherichia coli MG1655; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P0AFI0; Ec_oxc):
MSDQLQMTDGMHIIVEALKQNNIDTIYGVVGIPVTDMARHAQAEGIRYIGFRHEQSAGYAAAASGFLTQKPGICLTVSAPGFLNGLTALANATVNGFPMIMISGSSDRAIVDLQQGDYEELDQMNAAKPYAKAAFRVNQPQDLGIALARAIRVSVSGRPGGVYLDLPANVLAATMEKDEALTTIVKVENPSPALLPCPKSVTSAISLLAKAERPLIILGKGAAYSQADEQLREFIESAQIPFLPMSMAKGILEDTHPLSAAAARSFALANADVVMLVGARLNWLLAHGKKGWAADTQFIQLDIEPQEIDSNRPIAVPVVGDIASSMQGMLAELKQNTFTTPLVWRDILNIHKQQNAQKMHEKLSTDTQPLNYFNALSAVRDVLRENQDIYLVNEGANTLDNARNIIDMYKPRRRLDCGTWGVMGIGMGYAIGASVTSGSPVVAIEGDSAFGFSGMEIETICRYNLPVTIVIFNNGGIYRGDGVDLSGAGAPSPTDLLHHARYDKLMDAFRGVGYNVTTTDELRHALTTGIQSRKPTIINVVIDPAAGTESGHITKLNPKQVAGN
SEQ ID NO: 56 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Oxalobacter formigenes DSM 4420; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P40149; Of_oxc):
MSNDDNVELTDGFHVLIDALKMNDIDTMYGVVGIPITNLARMWQDDGQRFYSFRHEQHAGYAASIAGYIEGKPGVCLTVSAPGFLNGVTSLAHATTNCFPMILLSGSSEREIVDLQQGDYEEMDQMNVARPHCKASFRINSIKDIPIGIARAVRTAVSGRPGGVYVDLPAKLFGQTISVEEANKLLFKPIDPAPAQIPAEDAIARAADLIKNAKRPVIMLGKGAAYAQCDDEIRALVEETGIPFLPMGMAKGLLPDNHPQSAAATRAFALAQCDVCVLIGARLNWLMQHGKGKTWGDELKKYVQIDIQANEMDSNQPIAAPVVGDIKSAVSLLRKALKGAPKADAEWTGALKAKVDGNKAKLAGKMTAETPSGMMNYSNSLGVVRDFMLANPDISLVNEGANALDNTRMIVDMLKPRKRLDSGTWGVMGIGMGYCVAAAAVTGKPVIAVEGDSAFGFSGMELETICRYNLPVTVIIMNNGGIYKGNEADPQPGVISCTRLTRGRYDMMMEAFGGKGYVANTPAELKAALEEAVASGKPCLINAMIDPDAGVESGRIKSLNVVSKVGKK
SEQ ID NO: 57 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P39994; Sc_YEL020C):
MTTTATQHFAQLLQKYGIDTVFGIVGIPIVQLADTMVANGIKFIPCRNEQAASYAASAYGYISDKPGVLLIVGGPGLIHALAGIYNSMSNRWPLLVIAGSSSQSDIHKGGFQELDQVSLLSPFLKFTGKLTPDNIDMITQKALNYCIQGTAGVSYIDVPADFIEYEKPLEGNDRTGNELPMILTPNICGPDPSKIKKVVQLILQHKNKNILIVIGKGAVKNSHEIRRLVNTFNLPFLPTPMAKGIVPDSSPLNVSSARSQALKIADIVLVLGARLNWILHFGTSPKWNSESIFIQFDSNPETLGDNNVSPGADLSIWGDIGLSVTALVEELTRQDSCWKYSGVKQEIREKIQLNQTRLLRKEKTRGAQLNYNQVYGTLRPLIDDYRTILVTEGANTMDIARISFPTDAPRRRLDAGTNATMGIGLGYALACKASHPELDVVLIQGDSAFGFSAMEIETAVRCQLALVIVVMNNSGIYHGEKDIEGDLPPTALSKNCRYDLVGKGLGANDFFVNTISELSRCFQQAVQLSRTKRETSVINVIIEPGEQKQIAFAWQNKPRL
SEQ ID NO: 58 (Oxalyl-CoA reductase / Glyoxylate:NADP+ oxidoreductase (OXR) from Methylobacterium extorquens AM1 / DSM 1338; EC 1.2.1.17; UniProt Accession C5APN9; Me_PanE):
MSIAIVGAGAIGGYLGVRLAEAGEDVTFIARSNAAAIQADGMRLIEEDGTEIHSKSVKATRSMQEAGVHEVVLLTVKAHQVGPIAADLHHLIGPDTVVVTMQNGIPWWYFLGGYSGDHAGTRLESADPGGLIADHLDPKHVIGSVVYPATVLTDPGTVKVIEGNRFGLGELDGSKSERVLALSQRLARAGFRAPVTSDIRAEIWLKLWGNLSFNPISALTHATLEDICRFPDTRAIAAEMMREAEVIANKLGVTFRLGIDKRIAGAEKVGPHKTSMLQDVEAGRPIELEALVGSVIELGRLTGTPTPHIDTVFALMRLLAQSLERAQGRLAIQGA
SEQ ID NO: 59 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_ACOCT):
MTQSNLPDLPDLPLTGLRVIDFSRVLAGPYCTALLGDLGAEVIKVEPPGGDDYRAVGPFAGGKSGLFCAMNRNKQSIVIDLKTEDGLAVARALCRGADVVVENFRPGVADKLGIGYAALRELNPSLVYASVSGFGQTGPESHRPAYDIILQAMCGLMDATGAPDGAPTMLGEAVSDAVSGLFASWGVLAALLAREKTGRGTHVDVSMFDATLSLSATLVARYAATGLAPRRVGNRHPSSAPFGAYRAADGFYVVAVLNNKLFQALADAIGRPAMAHDPRFADDETRCRFESDLRAMLENWSATRTVAEVNAALGAAGIPVAPIRNVKEALESEHAAHRRLLTEVPDTDGGTVRLPSQPVKFSAYGTNRVTPAPALGQHTGAILAAPDFSNFNKEKQHA
SEQ ID NO: 60 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_CaiB):
MGALSHLRVLDLTRVLAGPWCAQNLADFGADVIKIERPGAGDDTRTWGPPWLKDEDGRDTAEAAYYLAANRNKRSVTCDISTPEGQQIVRDLAAQSDVVLENYKVGQLKKYGLDYESLRQVKPDLIYCSVTGFGQTGPYAARPGYDFIIQGMGGFMSLTGERDDLPGGGPQKAGVAISDLMTGQYATIAVLAALAHRERTGEGQYIDMALLDVQVAMLANMNTNYLASGEAPRRWGNAHPNIVPYQTFQAADGWIIVAVGNDGQFRKFVTDGGMPELADDPRFAKNPQRVANRDVLVPILAEMVRPRTRAQWIRDLEAAGVPCGPINTLDDVFEDDQVKARGLRVDLPHPSAGEVKLVASPIKMSATPPQALRHPPLLGEHTDTVLAETLGYSAGQIAALRAKGVL
SEQ ID NO: 61 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_SCACT):
MDKERIRLARLHDKVVSADEAAALIRDGMTVGMSGFTRAGDCKEVPFALARRAATEPLRITLMTGASLGNDIDRVLAEADVIARRLPFQSDGTLRRKINAGEVMFIDQHLSETVEQLRSGQIAPVDVAVVEAVAITEQGGIIPSTSVGNSASFAMLARKVIVEINMNMPLELEGLHDIYFPVQRPYRQPIPLIAPEQRIGLPYIPIDPEKIAAIVITAKDDSPSNALPPDDETRSIAGHLNDFLLREVRAGKLSPSLQPLQAGIGTIANAVLHGLVESPFRDLKMYSEVLQDSTIELLDAGRLSFASASSVTLTREVYQRFLSNLDRYRSRLLLRPQEISNHPEILRRLGLITINTALECDIYGNVNSTHVGGTHMMNGIGGSGDFARNAHVSVFVTKSVAKGGEVSSIVPMVAHVDHTEHDVDIIVTEHGLADLRGLAPRERARTVIANCADPQYRELLGDYFRRASAHGGQTPHLLEEALSWHVGLRDRGTMRSAQPAQALAA
SEQ ID NO: 62 (Putative Succinyl-CoA:oxalate CoA-transferase (SCOCT) from Cupriavidus oxalaticus ATCC 11883; EC 2.8.3.2; Co_SCMCT):
MVNEANKEKMPLQGVRVLELGSLIAGPYAGGLLAQFGAEVLKIEAPGEGDPLRKWRKLYEGTSLWWYSQSRNKKSLTLDLRSAQGQDIVRKLVAGADIVIENFRPGTLEKWGLGWEDLRKVNPALVMVRISGYGQTGPYKDRPGFAAIAESMGGLRYVSGYPDRPPVRSGVSIGDTLASLYGVIGALLAMHHLRNNDGEGQFVDVALYESVFAVMESLVPEFDKFGHVRERSGASLPGISPSNTYPCQDGQYVIIAGNGDAIFRRFMTAIGRDDLGQDPRLAHNDGRVQHNAMLDDAIAAWTAAHDLDTVLATLEAAAVPCGRIYTAQDICSDPHYSARGMIEPHQLPDGSPLALSGIVPRLSETPGRTNWIGPALGEHTEEILAGIGIAGAEFRALREAGVV
SEQ ID NO: 63 (pZR748 - Sc_YBR222C, Sc_YEL020C, Of_oxlT expression vector):
GGAGAGCTGTATGTGGGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTCAATGACAAGTGCCGCTACTGTTACTGCTTCGTTCAACGATACTTTTAGCGTATCCGATAATGTCGCCGTTATTGTTCCTGAAACGGACACTCAGGTGACCTACAGGGATCTATCCCACATGGTGGGTCACTTCCAGACCATGTTCACAAATCCTAATTCTCCATTGTACGGAGCTGTTTTCAGACAAGATACAGTGGCGATATCCATGCGTAATGGGCTGGAATTTATCGTCGCTTTCCTCGGTGCTACTATGGACGCTAAAATTGGCGCGCCCTTGAATCCCAATTATAAGGAAAAGGAGTTCAATTTTTATTTGAATGACCTGAAATCTAAGGCGATTTGCGTCCCAAAGGGTACCACAAAGTTACAGAGTTCTGAAATTCTAAAATCTGCCTCCACGTTTGGATGTTTTATCGTAGAGCTGGCCTTCGATGCGACCAGGTTTAGGGTAGAGTATGATATATACTCTCCAGAGGACAACTACAAAAGGGTTATTTACCGGTCTTTGAACAACGCCAAATTTGTCAACACAAATCCCGTTAAATTCCCTGGGTTTGCCCGTTCCAGTGACGTTGCCCTGATTTTGCATACCAGTGGTACCACCTCCACTCCAAAAACGGTGCCTTTGTTACATTTGAACATTGTGAGAAGCACGTTGAACATTGCTAACACTTACAAGCTAACGCCCTTGGACAGATCTTATGTCGTGATGCCTCTTTTCCACGTCCATGGGTTAATTGGTGTTTTACTTTCCACTTTTAGAACTCAGGGTTCTGTTGTGGTTCCCGATGGATTCCATCCAAAGTTATTCTGGGACCAATTTGTTAAGTACAACTGTAATTGGTTCAGTTGCGTTCCCACAATAAGCATGATTATGCTGAACATGCCCAAACCAAACCCTTTCCCACACATTAGATTCATCAGATCGTGTTCTTCTGCTTTGGCTCCAGCAACGTTCCATAAGCTGGAGAAGGAATTCAATGCACCTGTCTTGGAGGCCTATGCGATGACCGAAGCATCACATCAAATGACCTCAAACAATCTGCCTCCAGGAAAGAGAAAGCCTGGTACTGTGGGCCAGCCACAAGGAGTCACCGTCGTCATTCTAGATGACAATGACAATGTCTTGCCCCCGGGCAAAGTCGGCGAAGTTTCCATCAGAGGCGAAAACGTCACTTTGGGGTATGCTAATAATCCAAAAGCTAACAAGGAGAACTTCACCAAGAGAGAGAACTATTTCAGAACCGGTGACCAAGGTTATTTCGACCCTGAGGGGTTTTTGGTCCTTACAGGCAGAATCAAAGAGCTTATCAACAGGGGTGGTGAAAAGATTTCACCCATTGAGCTCGACGGCATTATGCTATCGCATCCAAAGATCGATGAAGCCGTTGCATTTGGTGTTCCCGACGATATGTACGGCCAAGTAGTTCAAGCCGCCATTGTTTTGAAGAAGGGAGAAAAAATGACCTACGAAGAACTGGTGAACTTCTTAAAGAAGCACCTAGCCTCTTTCAAAATTCCAACCAAGGTGTACTTTGTTGATAAGCTACCAAAAACCGCTACAGGTAAAATCCAGAGAAGAGTTATCGCAGAAACTTTTGCTAAGAGCAGCAGAAATAAGAGTAAGTTGTAGGGTTCCTAGCTGATTAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTTTTGACTGGTAAGCCAATCTAGGGCCTCGTCTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTCAATGACCACGACCGCTACCCAACACTTCGCTCAACTTTTACAAAAATATGGCATCGACACAGTCTTTGGAATTGTGGGCATCCCTATTGTCCAACTAGCGGATACGATGGTTGCCAACGGTATCAAATTCATTCCATGCAGGAACGAACAGGCTGCCTCATATGCAGCCTCTGCTTATGGTTATATTAGTGATAAGCCCGGCGTGTTACTTATTGTCGGGGGCCCCGGTTTAATCCACGCACTGGCTGGTATATACAACTCAATGAGTAATAGGTGGCCTCTTCTAGTAATTGCAGGGAGTTCTTCTCAAAGTGATATACATAAAGGCGGGTTTCAAGAGTTGGATCAAGTTAGTCTTTTGTCCCCATTTTTGAAGTTTACCGGAAAGTTAACCCCTGACAATATTGACATGATTACTCAGAAGGCTTTGAATTACTGTATACAAGGCACTGCAGGGGTTTCTTACATAGACGTCCCTGCAGATTTTATTGAGTATGAAAAACCCTTAGAAGGAAACGACCGTACAGGAAATGAATTACCGATGATATTAACTCCAAACATATGTGGCCCTGATCCGTCGAAGATCAAAAAAGTCGTACAGCTTATTTTGCAACATAAAAATAAAAATATTCTGATTGTTATTGGAAAGGGTGCGGTAAAAAACTCACACGAAATCCGCAGACTAGTAAATACGTTCAATCTACCATTTTTACCCACCCCAATGGCTAAGGGAATTGTCCCAGACTCTTCTCCACTGAACGTTTCATCTGCAAGATCTCAAGCATTGAAAATAGCGGATATTGTTCTTGTTCTCGGGGCAAGATTAAACTGGATATTGCATTTTGGTACTTCACCCAAATGGAACTCAGAATCCATATTCATCCAGTTCGATTCCAATCCCGAAACCTTGGGGGATAACAATGTCTCACCTGGTGCTGACCTTTCCATATGGGGAGATATAGGCTTGAGCGTAACCGCTTTAGTTGAGGAATTGACTCGCCAAGATTCCTGCTGGAAGTATAGTGGTGTTAAGCAAGAAATACGAGAGAAAATTCAACTGAATCAAACTCGTCTATTGAGGAAAGAGAAGACTAGAGGGGCACAATTGAATTACAACCAGGTTTATGGAACATTGAGGCCTCTTATCGATGATTACAGGACAATACTTGTGACGGAGGGAGCAAATACTATGGATATTGCGCGTATTTCATTCCCTACAGACGCTCCAAGGCGCCGTTTAGACGCAGGGACCAACGCGACTATGGGGATTGGGCTCGGATATGCTCTTGCATGCAAGGCATCTCATCCGGAACTCGATGTGGTGCTGATTCAGGGTGATTCCGCATTTGGATTCTCTGCCATGGAAATTGAAACGGCAGTAAGGTGTCAGCTGGCATTGGTCATCGTTGTGATGAACAATAGCGGTATTTACCATGGAGAAAAGGATATAGAGGGTGATTTACCTCCAACGGCACTAAGCAAGAACTGCCGTTACGATCTCGTAGGCAAAGGACTGGGTGCCAATGATTTTTTTGTCAACACAATAAGCGAACTGAGCAGATGCTTCCAACAAGCCGTGCAGCTTTCTCGGACTAAAAGAGAAACAAGTGTCATCAACGTTATCATTGAGCCTGGCGAACAAAAGCAAATTGCCTTTGCCTGGCAGAATAAACCGCGTTTATAGGGTTCCTAGCTGATTAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTTTTGACTGCGTTCCTGGCGTGGTGCTCGCATAGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAGCTGATTAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTTTTGACTGCTATGACTAAACGGCGCGCCTGATAGGTGGGCTGCCCTTCCTGGTTGGCTTGGTTTCATCAGCCATCCGCTTGCCCTCATCTGTTACGCCGGCGGTAGCCGGCCAGCCTCGCAGAGCAGGATTCCCGTTGAGCACCGCCAGGTGCGAATAAGGGACAGTGAAGAAGGAACACCCGCTCGCGGGTGGGCCTACTTCACCTATCCTGCCCGGCTGACGCCGTTGGATACACCAAGGAAAGTCTACACGAACCCTTTGGCAAAATCCTGTATATCGTGCGAAAAAGGATGGATATACCGAAAAAATCGCTATAATGACCCCGAAGCAGGGTTATGCAGCGGAAAAGCGGGATTAAAAGTCGGGGATTGGTGAACAAAAAGGTGTTTCTCTCTTTAAGAGAAATATCGTTTTGCTAAACAGTTGATATTGAGGTATCATTTTATCGTAAAAGACATTTTTGCTCAACAATTGCTTGACGGAAATCAACAAATTTTAGCATTTTGTAAAAAAGTCGCTATATAATTTGGTGAATTGGAGTTATTTTCATATTTTTGCATCCCGAAGAGTTTCTCTTAAAGAGAGAAACATCTTTTGCATACCTTTTCCGACCGAATTTTTATGTCGTAAAGAGGGGCTTTGCAGGGGGTGGACTCAGAAAGATGAGAATAGATGACTATTGTAGTTGAAACACATAGAAAGTTGCTGATATACAGACCGATACGCATATCGGGATGAACCATGAGTACGTTCTTTTCTCAAAAAACATAAATATTCGAAAAGAGATGCAATAAATTAAGGAGAGGTTATAATGAACAAAGTAAATATAAAAGATAGTCAAAATTTTATTACTTCAAAATATCACATAGAAAAAATAATGAATTGCATAAGTTTAGATGAAAAAGATAACATCTTTGAAATAGGTGCAGGGAAAGGTCATTTTACTGCTGGATTGGTAAAGAGATGTAATTTTGTAACGGCGATAGAAATTGATTCTAAATTATGTGAGGTAACTCGTAATAAGCTCTTAAATTATCCTAACTATCAAATAGTAAATGATGATATACTGAAATTTACATTTCCTAGCCACAATCCATATAAAATATTTGGCAGCATACCTTACAACATAAGCACAAATATAATTCGAAAAATTGTTTTTGAAAGTTCAGCCACAATAAGTTATTTAATAGTGGAATATGGTTTTGCTAAAATGTTATTAGATACAAACAGATCACTAGCATTGCTGTTAATGGCAGAGGTAGATATTTCTATATTAGCAAAAATTCCTAGGTATTATTTCCATCCAAAACCTAAAGTGGATAGCACATTAATTGTATTAAAAAGAAAGCCAGCAAAAATGGCATTTAAAGAGAGAAAAAAATATGAAACTTTTGTAATGAAATGGGTTAACAAAGAGTACGAAAAACTGTTTACAAAAAATCAATTTAATAAAGCTTTAAAACATGCGAGAATATATGATATAAACAATATTAGTTTCGAACAATTTGTATCGCTATTTAATAGTTATAAAATATTTAACGGCTAAAAACAATAGGCCACATGCAACTGTAAATGTTTACGCGGGTACCGACACCGCGGTGGAGGGGAATTACGAGTCATTGGTAACTATCTATGAAACTGTTTGATACTTTTATAGTTGATTAAACTTGTTCATGGCATTTGCCTTAATATCATCCGCTATGTCAATGTAGGGTTTCATAGCTTTGTAGTCGCTGTGTCCCGTCCATTTCATGACCACCTGTGCCGGGATTCCGAGAGCCAGCGCATTGCAGATGAATGTCCTTTTTCCTGCATGGGTACTGAGCAAAGCGTATTTGGGTGTGACTTCATCAATACGTTCATTTCCCTTGTAGTAGGTTTCCCGTACAGGCTCGTTGATTTCTGCCAGTTCGCCCAGCTCTTTCAGGTAATCGTTCATCTTCTGGTTGCTGATGACGGGCAGAGCCATGTAATTCTCGAAATGGATGTCCTTGTATTTGTCCAGTATGGCTTTGCTGTATTTGTTCAGTTCAATCGTCAGGCTGTCGGCAGTCTTGACTGTGGTTATTTCGATGTGGTCGGACTTCACATCGCTTCTTTTCAGATTGCGAACATCCGAATACCGCAAACTCGTAAAGCAGCAGAACAGGAAAACATCACGCACACGTTCCAGGTATTGCTTATCCTTGGGTATCTGGTAGTCTTTCAGCTTGTTCAGTTCATCCCAAGTCAGGAAGATTACTTTTTTCGAGGTGGTTTTCAGTTTCGGTTTGAACGTATCGTATGCAATGTTCTGATGATGTCCTTTCTTGAAGCTCCAGCGCAGGAACCATTTGAGGAATCCCATTTGCTTGCCGATGGTGCTGTTTCTCATATCCTTGGTGTCACGCAGGAAGTTGACGTATTCGTTCAATCCAAACTCGTTGAAATAGTTGAACGTTGCATCCTCCTTGAACTCTTTGAGGTGGTTCCTCACTGCTGCAAATTTTTCATAGGTGGATGCCGTCCAGTTATTCTGGTTACCGCACTCTTTTACAAACTCATCGAACACCTCCCAAAAGCTGACAGGGGCTTCTTCCGGCTGTTCTTCACTGGTATCTTTCATTCTCATGTTGAAAGCTTCCTTCAACTGTTGGGTCGTTGGCATGACCTCCTGCACCTCAAATTCCTTGAAAATATTCTGGATTTCGGCATAGTATTTCAGCAAGTCCGTATTGATTTCGGCTGCACTTTGCTTTAGCTTGTTGGTACATCCGTTCTTTACCCGCTGCTTATCTGCATCCCATTTGGCTACGTCAATCCGGTAGCCCGTTGTAAACTCGATACGTTGGCTGGCAAAGATGACACGCATACGGATGGGTACGTTCTCTACGATTGGCACACCGTTCTTTTTCCGGCTCTCCAATGCAAAAATGATGTTGCGCTTGATATTCATAATTGGGTGCGTTTGAAATTCTACACCCAAATATACACCCAATTATTGAGATAGCAAAAGACATTTAGAAACATTTACTTTTACTCTATATTGTAATTTACACTTGATTATCAGTCGTTTGCAGTCTTATGATATTCTGTGAAAGTATAAGTTCGAGAGCCTGTCTCTCCGCAAAAAACGCTGAAAATCAGCAGATTGCAAAACAAACACCCTGTTTTACACCCAAGAATGTAAAGTCGGGTGTTTTTGTTTTATTTAAGATAATACAACCACTACATAATAAAAGAGTAGCGATATTAAAAGAATCCGATGAGAAAAGACTAATATTTATCTATCCATTCAGTTTGATTTCTCAGGACTTTACATCGTCCTGAAAGTATTTGTTGCCAGTGTTACAACCAATTAACCAATTCTGATTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGCTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGGCGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTGGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGATGATATATTTTTATCTTGTGCAATGTAACATCAGAGATTTTGAGACACAACGTGGCTTTGTTGAATAAATCGAACTTTTGCTGAGTTGAAGGATCAGCCGCGCAGTTCAACCTGTTGATAGTACGTACTAAGCTCTCATGTTTCACGTACTAAGCTCTCATGTTTAACGTACTAAGCTCTCATGTTTAACGAACTAAACCCTCATGGCTAACGTACTAAGCTCTCATGGCTAACGTACTAAGCTCTCATGTTTCACGTACTAAGCTCTCATGTTTGAACAATAAAATTAATATAAATCAGCAACTTAAATAGCCTCTAAGGTTTTAAGTTTTATAAGAAAAAAAAGAATATATAAGGCTTTTAAAGCTTTTAAGGTTTAACGGTTGTGGACAACAAGCCAGGGATGTAACGCACTGAGAAGCCCTTAGAGCCTCTCAAAGCAATTTTGAGTGACACAGGAACACTTAACGGCTG
ACATGGGGCGGCCGCTCAAGTAG
SEQ ID NO: 64 (pZR753- Ec_frc, Of_oxc, Sc_YBR222C, Of_oxlT expression vector):
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SEQ ID NO: 65 (pZR761 - Sc_YBR222C, Sc_YEL020C expression vector):
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SEQ ID NO: 66 (pZR856 - Of_oxlT expression vector):
GATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTGAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAGCTGATTAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTTTTGACTGCTATGACTTGAGACCGGCTATTACGAGCGCTTAAACGGCGCGCCTGATAGGTGGGCTGCCCTTCCTGGTTGGCTTGGTTTCATCAGCCATCCGCTTGCCCTCATCTGTTACGCCGGCGGTAGCCGGCCAGCCTCGCAGAGCAGGATTCCCGTTGAGCACCGCCAGGTGCGAATAAGGGACAGTGAAGAAGGAACACCCGCTCGCGGGTGGGCCTACTTCACCTATCCTGCCCGGCTGACGCCGTTGGATACACCAAGGAAAGTCTACACGAACCCTTTGGCAAAATCCTGTATATCGTGCGAAAAAGGATGGATATACCGAAAAAATCGCTATAATGACCCCGAAGCAGGGTTATGCAGCGGAAAAGTTATATACATTCATGTCCATTTATGTAAAAAATCCTGCTGACCTTGTTTATGTCTTGTCAGTCACCATTTGCAAAACCATATTTGACCCTCAAAGAGGCTGAATTTGATAAGCAACTTGCTACATACTCATAATAAGGAGCTAAATAGAACACGAATGGGAAATACTCAAATGCCAAACTAAAGAAGATATTGGCCAAAATAAACGCTATACCGAGAGAGAAACTTGATTTTTCAACTTCCTAAAACAGTGTTGTTCAAACATTTCTACTTATTTGTACTTACCAGTTGAACCTACGTTTCCCTAATAAAATGTCTATGGTAAAAAGTTAAAAAATCCTCCTACTTTTGTTAGATATATTTTTTTGTGTAATTTTGTAATCGTTATGCGGCAGTAATAATATACATATTAATACGAGTTAGGAATCCTGTAGTTCTCATATGCTACGAGGAGGTATTAAAAGGTGCGTTTCGACAATGCATCTATTGTAGTATATTATTGCTTAATCCAAATGAATATTATAAATTTAGGAATTCTTGCTCACATTGATGCAGGAAAAACTTCCGTAACCGAGAATCTGCTGTTTGCCAGTGGAGCAACGGAAAAGTGCGGCTGTGTGGATAATGGTGACACCATAACGGACTCTATGGATATAGAGAAACGTAGAGGAATTACTGTTCGGGCTTCTACGACATCTATTATCTGGAATGGTGTGAAATGCAATATCATTGACACTCCGGGACACATGGATTTTATTGCGGAAGTGGAGCGGACATTCAAAATGCTTGATGGAGCAGTCCTCATCTTATCCGCAAAGGAAGGCATACAAGCGCAGACAAAGTTGCTGTTCAATACTTTACAGAAGCTGCAAATCCCGACAATTATATTTATCAATAAGATTGACCGAGCCGGTGTGAATTTGGAGCGTTTGTATCTGGATATAAAAGCAAATCTGTCTCAAGATGTCCTGTTTATGCAAAATGTTGTCGATGGATCGGTTTATCCGGTTTGCTCCCAAACATATATAAAGGAAGAATACAAAGAATTTGTATGCAACCATGACGACAATATATTAGAACGATATTTGGCGGATAGCGAAATTTCACCGGCTGATTATTGGAATACGATAATCGCTCTTGTGGCAAAAGCCAAAGTCTATCCGGTGCTACATGGATCAGCAATGTTCAATATCGGTATCAATGAGTTGTTGGACGCCATCACTTCTTTTATACTTCCTCCGGCATCGGTTTCAAACAGACTTTCATCTTATCTTTATAAGATAGAGCATGACCCCAAAGGACATAAAAGAAGTTTTCTAAAAATAATTGACGGAAGTCTGAGACTTCGAGATGTTGTAAGAATCAACGATTCGGAAAAATTCATCAAGATTAAAAATCTAAAAACTATCAATCAGGGCAGAGAGATAAATGTTGATGAAGTGGGCGCCAATGATATCGCGATTGTAGAGGATATGGATGATTTTCGAATCGGAAATTATTTAGGTGCTGAACCTTGTTTGATTCAAGGATTATCGCATCAGCATCCCGCTCTCAAATCCTCCGTCCGGCCAGACAGGCCCGAAGAGAGAAGCAAGGTGATATCCGCTCTGAATACATTGTGGATTGAAGATCCGTCTTTGTCCTTTTCCATAAACTCATATAGTGATGAATTGGAAATCTCGTTATATGGTTTAACCCAAAAGGAAATCATACAGACATTGCTGGAAGAACGATTTTCCGTAAAGGTCCATTTTGATGAGATCAAGACTATATACAAAGAACGACCTGTAAAAAAGGTCAATAAGATTATTCAGATCGAAGTGCCGCCCAACCCTTATTGGGCCACAATAGGGCTGACTCTTGAACCCTTACCGTTAGGGACAGGGTTGCAAATCGAAAGTGACATCTCCTATGGTTATCTGAACCATTCTTTTCAAAATGCCGTTTTTGAAGGGATTCGTATGTCTTGCCAATCCGGGTTACATGGATGGGAAGTGACTGATCTGAAAGTAACTTTTACTCAAGCCGAGTATTATAGCCCGGTAAGTACACCAGCTGATTTCAGACAGCTGACCCCTTATGTCTTTAGGCTGGCCTTGCAACAGTCAGGTGTGGACATTCTCGAACCGATGCTCTATTTTGAGTTGCAGATACCCCAAGCGGCAAGTTCCAAAGCTATTACAGATTTGCAAAAAATGATGTCTGAGATTGAAGATATCAGTTGCAATAATGAGTGGTGTCATATTAAAGGGAAAGTTCCATTAAATACAAGTAAAGACTATGCATCAGAAGTAAGTTCATACACTAAGGGCTTAGGCATTTTTATGGTTAAGCCATGCGGGTATCAAATAACAAAAGGCGGTTATTCTGATAATATCCGCATGAACGAAAAAGATAAACTTTTATTCATGTTCCAAAAATCAATGTCATCAAAATAACCACGAGTCATTGGTAACTATCTATGAAACTGTTTGATACTTTTATAGTTGATTAAACTTGTTCATGGCATTTGCCTTAATATCATCCGCTATGTCAATGTAGGGTTTCATAGCTTTGTAGTCGCTGTGTCCCGTCCATTTCATGACCACCTGTGCCGGGATTCCGAGAGCCAGCGCATTGCAGATGAATGTCCTTTTTCCTGCATGGGTACTGAGCAAAGCGTATTTGGGTGTGACTTCATCAATACGTTCATTTCCCTTGTAGTAGGTTTCCCGTACAGGCTCGTTGATTTCTGCCAGTTCGCCCAGCTCTTTCAGGTAATCGTTCATCTTCTGGTTGCTGATGACGGGCAGAGCCATGTAATTCTCGAAATGGATGTCCTTGTATTTGTCCAGTATGGCTTTGCTGTATTTGTTCAGTTCAATCGTCAGGCTGTCGGCAGTCTTGACTGTGGTTATTTCGATGTGGTCGGACTTCACATCGCTTCTTTTCAGATTGCGAACATCCGAATACCGCAAACTCGTAAAGCAGCAGAACAGGAAAACATCACGCACACGTTCCAGGTATTGCTTATCCTTGGGTATCTGGTAGTCTTTCAGCTTGTTCAGTTCATCCCAAGTCAGGAAGATTACTTTTTT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SEQ ID NO: 67 (pZR878 - Ec_frc, Of_oxc, Sc_YBR222C, Sc_YEL020C, At_AAE3, Ec_yfdE expression vector):
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SEQ ID NO: 68 (P_BfP1E6):
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SEQ ID NO: 69 (P_BfP4E5):
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SEQ ID NO: 70 (Phage promoter consensus):
GTTAA(n)4-7GTTAA(n)34-38TA(n)2TTTG
SEQ ID NO: 71 (Phage promoter consensus):
GTTAAnnnnnnnGTTAAnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnnTAnnTTTG
SEQ ID NO: 72 (NB001 porphyran PUL):
TAAGGATTGATTCGCTAGCTCAGCAGGTAGAGCACAACACTTTTAATGTTGGGGTCCTGGGTTCGAGCCCCAGGCGGATCACTGAAACAAAAAGCAAAACAATGAAAACCGCTGATAATCAATCATTATCAGCGGTTTTTCTTTTTATCCATACTGCAAATTGAAGCAGAATACCGCATTTTACTGGAGGTGAAATAGGTGGACTTAATTTCCACATAAAAACAAGTCCACCTGATTGGATTATATTTCACTGATTCTCTGCGTTTTGCATAAAACAAACTCTTTTCAAAACATGTATTTTTACACCATCAAAAAAAGAAGAGTATGGCAATGCAAAGAAACTATTTTACGGTATTGTTTTTCCTGAAGAAATCAAAGCTGCTTAAAAATGGAGAAGCACCAATCTGTATGCGTATCACAATAAACGGAAAACGTGCAGAGGTACAAATCAAGCGAAGTATAGATGTTACAAAATGGAATACGCAAAAAGAATGCGCGATTGGCAGGGAAAAGAAGTATCAAGAAATAAACCACTATCTTGATACGATAAGAACTAAAATCCTTCAAATTCACCGTGAACTTGAGCAGGACGGTAAACCTATTACAGCAGATATTATAAAAAATATCTATTATGGAGAACACTCTACTCCCAAAATGCTGCTTGAAGTATTCCAGGAACACAATTCGGAATATCGGGAATTAATGAACAAGGAATATGCCGAAGGTACTGTACTTCGATACGAACGTACAGCAAGATATTTGAAGGAGTTTATCAGTGAACAATATAAACTGGCTGATATTCCATTAAAATCAATCAACTATGAATTTATAACCAAATTCGAACATTTCATTAAAATACAGAAAAACTGTGCGCAAAATGCGACAGTGAAATATCTGAAAAATTTAAAGAAAATCATCAAAACTGCATTGATAAAGAAGTGGATAACTGATGATCCGTTTGCAGAAATACACTTCAAACAGACCAAGTGTAACCGTGAATTCTTAAACGAAATGGAACTTCGCAAAATCATCAATAAAGATTTTGATATTCAACGATTACAAACCGTAAGGGACATATTCATCTTCTGTTGTTTCACCGGTTTGGCTTTCACAGACGTAAAGAATCTGAAAAAGGAACACCTTGTACAGGCTGATAATGGTGAATGGTGGATAAGAAAAGCAAGGGAAAAGACCGATAATATGTGCGACATTCCATTGTTGGATATACCAAGACTTATTTTAGAGAAATATCAGTCAAATCCAATCTGCAATGAAAAAGGATTATTACTTCCTGTTCCCAGCAACCAACGAATGAACAGTTATTTGAAAGAAATAGCTGATGTATGTGGTATTCAGAAGAATCTTTCCACACATATTGCAAGACATACATTTGCATCACTGGCTATTGCAAATAAGGTTTCCTTGGAATCCATTGCCAAAATGTTAGGACACACGGACATTCGTACAACTCGTATTTATGCCAAAATAATGAATTCTACCATTGCCAATGAAATGAAAGTACTGCAAAACAAGTTCGCAATATAATTTTCAACCATTATTTCATTTCTTACAGCAAATATCGCACTTTGCCACTGACTGTGCAAGGCGGCCCTGTCGGGCTGGTTGGCGGAAAAAAATCATCCTCGCTTCGCTCCGGTATTTTTTTCCGCCAAGCCTTGCACCGGTCATTGGCAAAGAACAGCCGGGCCAGTAAGAAATTGAAATACTGGCTCCACGGAGCCGGTCATGTCTAATTTAAATAAAAGAATATGACTGAAGAAGTTGGAAAGAAGGTATGTGAAGGTACAGTAGCAGACCTCATGAAGGACAAGACCGGAAAACAGACGGTTGTCACGTTGACAAGAAAGAATGCTTACCGAGTGAAGAAAATCAGAGAACAAGGGACGGATGACGAAGCTGTCCTTTTTCATTTCCGTGAACGCTGTACGGGAATGGGCTCCTATGTACACACAATCGAAGCGGCAGACGGAGAAACAGAACTTCATCCGTCTGAATTTGAAAAATGGGAAGCTGTGGAATTCCTGTATCCCGGCTATCTGGAAGACCTGCTTGATGCTGCATACAACGCATACAGATGGAGTTCCTTCGAACCTGAAGCAAGGGCGGAAACAGACATCATGCAATATGAAAAACAACTTGTAGAGGATCTGAAACAGATTCCGGAAGAAAAACAGAACGAGTATACCAGTGCATACCATAGCAAGTTCTCTGCCTTGCTGGGCTGTCTCTCACGATGTGCCAGTCCGATGGTGACAGGGCCTGCCAAATTCAACTGCCAGCGCAACAACAAAGCCTTGGATGCATACCAGAACAGATTTGATGAATTTCATGATTGGCGTAACCGCTTCAAGGCTGCCATGGAAAGGATGAAAGAGGCTGCCAAACCGGAAGAACAGAAGCAAGAGGAGGCATGGAACCGCCTGAAGCGTGACATTGCAAGCAGCGCACAGACCATTCATGATATTGATACCGGTAAAGCAAGAGGATACAGCCGTGCCTTGTTTGTCAGCAGTATCCTTAATAAAGTAAGCACCTATGCAGGAAAAGGAGAAGTGGAAATCGTACAGAAAGCGGTGGACTTCATTACAGACTTCAATGCACAATGCAAAAAACCGGTTATCACTCCGCGGAACCGTTTCTTCCAACTGCCGGAAATGGCACGCCAGGCCAGACTGAAACTTCAGGAAATCAGAGAACGGGAAAACCGTGAACTGAAATTTGAAGGCGGAACGCTGGTATGGAACTATGAGGCAGACCGCCTGCAAATCCAGTTTGACAATATTCCGGATGACCAGAGGCGCAAGGAACTGAAATCATACGGTTTCAAATGGTCGCCGAGATACCAGGCATGGCAACGGCAACTTACACAGAATGCCGTATATGCAGTCAAAAGAGTGTTGAACCTTCAAAACCTATAAGACATGAAAGACCGATTGAAATATGTAATCGATTCCCGCTACTTCGACGGAACATGCCTGACAAGTATGAGTGACGGATTCCATAATGACTATGGTGGGGAAACAATCGAAGAACTGCGCATACGGGAAAACAATCCCTATCTGAAAGCAGTAACACCTTCTGATATAGACAAGAAGCTGCGGCTATACAATCAGTCCCTGTCCGAACCGTTCAAGGAAATCACTGAAGAAGAATACTATGACCTGCTGGATGTACTGCCACCCTTGCGCATGAGACAAAACTCGTTCTTTGTAGGAGAACCGTATTACGGAAATATGTACTCTTTCTGCTTTACTCGTCAAGGAAGATATTTCAAGGGCCTACGCTCCGTACTTACTCCGCAATCCGAACTGGACAGTCAGATAGACCGTCACATGGAAATCATCAACCGGAAAGCCGTGATCTCAAAAGAGGAAACAAGTAAAACGGTCACAACCGGAACCAGACTCATTCCCTATTATTTTTCACTGGACGGAAAACAGCCCGTATTCATCTGCAACCTTGTCATCCAATCAGATTCCAGTCAAGCAAGGACGGACATGGCGAATACCCTGAAAAGTCTTCGCCGGAACCATTATCAGTTCTATAAAGGAAAAGGGCATTACGAAACTCCGGACGAACTGATAGACCATGTATCAGGAAAGAAGCTCACCCTTGTTTCCGACGGACATTTCTTTCAATATCCTCCCGGCAGGGAATCCGCAACTTTCATCGGACACATCAAGGAGACATCAGAGGAATTTCTTTTCCGGATCTATGACCGTGAATATTTCCTGTATCTTCTTAAAAGACTGAGGACCGTGAAAAAGGAATCGGCACAGGAACAAATAAATATCAAATCATAACATTCGGGGGAATGCGGTAAAATGACTGCCGTATTCCCTCATAAAAACAATACAAGTATGAACAAATCAAACACTCTATACTGGAAAACAGCCACAGATCCGGCTGAACGCATTGAGGTCAGACTCGTCCTGAACAGTTATATCGACAATGACAATCTGTATGTAGGACTTGAATCCCGGTCTAAGGAGAATCCGGAATGCTGGGAATCCTACACGGACATCACCGTCAACCTCAATTCTCTTCCCCCGTTCCATGCCTATGTGGACAACCGGGACTGCAACAGACATGTGCATGATTTTCTGACCAGTAACAGAATAGCAGAACCTGCCGGATTTGAATATCAGGGATTCAGAATGTTCCGCTTCAATCCTGACAGGTTGAAGGAACTCGCACCCGAACAGTTCAAGACAATCAGCGCCAAACTGCCACCACAGGATGACATGATAAAGGACATCATCTATCAGGAAAGACGTTTCCCTTTGAGAACTGTTCAAGACATTCACGGAATATATCTTGTTTCAAGCAAGGAACTGGAAGAATCTCTGATCGAAGGAGTACGGAACCTGGATGCTGCGGCATATGAACTGCTGGATGGCATCTGCCTGTTCTGCTCCACACAGGAACTGCGCTATCTTACGGATGCAGAACTGATAGAAACAATCTACGCACAATAAAAAGGAGGAACAAATATGAAAACCGGAGACATTGTATTTCTGAGACGTCCCTATAAGGGATACCGTGCCGTCGAACTGATGGAAAGACTGGAATGCCGCTGGCTGGTCAGGATTGTCGAGAGCGGTCTTGAACTGGAGGTATATGAAGATGAACTTATATCAGAATTTTAATACAGACAAAGTGTTATGGAAAAATATCAGTTTGCATTCCATTCGGAAATAATCGGCTATACCTCTCCTCATATCGGTGAGGTCAGAAAAGCCATACACAGAAAAGTGGAAAAGGAAAAGTCTGCCGCCATAAAGAATGATATTGAGCTGCACATGTACAAAGTGCATGACGGCATACCGGTTCTCCTTAACACCTGCTACCTGTACGATGAAAAAGGATGTATGGTACACGGAAGTATCAAGGGAACCAAGGATTATCTGCTTGAGACATGGAGATACCATACAAACAGACATTCTAAAGGCATCAGTTCCACAAGAATCAGGCCTTGC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SEQ ID NO: 73 (pWD035 plasmid with porphyran PUL):
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SEQ ID NO: 74 (pZR1622 - chloramphenicol resistance vector):
ACTAGAGATCTATGTGAGGATCCTAACTCGAGATCGAGACTGCTATGACTTGAGACCGGCTATTACGAGCGCTTAAACGGCGCGCCTGATAGGTGGGCTGCCCTTCCTGGTTGGCTTGGTTTCATCAGCCATCCGCTTGCCCTCATCTGTTACGCCGGCGGTAGCCGGCCAGCCTCGCAGAGCAGGATTCCCGTTGAGCACCGCCAGGTGCGAATAAGGGACAGTGAAGAAGGAACACCCGCTCGCGGGTGGGCCTACTTCACCTATCCTGCCCGGCTGACGCCGTTGGATACACCAAGGAAAGTCTACACGAACCCTTTGGCAAAATCCTGTATATCGTGCGAAAAAGGATGGATATACCGAAAAAATCGCTATAATGACCCCGAAGCAGGGTTATGCAGCGGAAAAGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTCAATGGAGAAAAAAATCACTGGATATACCACCGTTGATATATCCCAATGGCATCGTAAAGAACATTTTGAGGCATTTCAGTCAGTTGCTCAATGTACCTATAACCAGACCGTTCAGCTGGATATTACGGCCTTTTTAAAGACCGTAAAGAAAAATAAGCACAAGTTTTATCCGGCCTTTATTCACATTCTTGCCCGCCTGATGAATGCTCATCCGGAATTTCGTATGGCAATGAAAGACGGTGAGCTGGTGATATGGGATAGTGTTCACCCTTGTTACACCGTTTTCCATGAGCAAACTGAAACGTTTTCATCGCTCTGGAGTGAATACCACGACGATTTCCGGCAGTTTCTACACATATATTCGCAAGATGTGGCGTGTTACGGTGAAAACCTGGCCTATTTCCCTAAAGGGTTTATTGAGAATATGTTTTTCGTTTCAGCCAATCCCTGGGTGAGTTTCACCAGTTTTGATTTAAACGTGGCCAATATGGACAACTTCTTCGCCCCCGTTTTCACCATGGGCAAATATTATACGCAAGGCGACAAGGTGCTGATGCCGCTGGCGATTCAGGTTCATCATGCCGTTTGTGATGGCTTCCATGTCGGCAGAATGCTTAATGAATTACAACAGTACTGCGATGAGTGGCAGGGCGGGGCGTAAGGTTCCTAGCTGATTAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTTTTTGATAATAAGCGGATGAATGGCAGAAATTCGACGAGTCATTGGTAACTATCTATGAAACTGTTTGATACTTTTATAGTTGATTAAACTTGTTCATGGCATTTGCCTTAATATCATCCGCTATGTCAATGTAGGGTTTCATAGCTTTGTAGTCGCTGTGTCCCGTCCATTTCATGACCACCTGTGCCGGGATTCCGAGAGCCAGCGCATTGCAGATGAATGTCCTTTTTCCTGCATGGGTACTGAGCAAAGCGTATTTGGGTGTGACTTCATCAATACGTTCATTTCCCTTGTAGTAGGTTTCCCGTACAGGCTCGTTGATTTCTGCCAGTTCGCCCAGCTCTTTCAGGTAATCGTTCATCTTCTGGTTGCTGATGACGGGCAGAGCCATGTAATTCTCGAAATGGATGTCCTTGTATTTGTCCAGTATGGCTTTGCTGTATTTGTTCAGTTCAATCGTCAGGCTGTCGGCAGTCTTGACTGTGGTTATTTCGATGTGGTCGGACTTCACATCGCTTCTTTTCAGATTGCGAACATCCGAATACCGCAAACTCGTAAAGCAGCAGAACAGGAAAACATCACGCACACGTTCCAGGTATTGCTTATCCTTGGGTATCTGGTAGTCTTTCAGCTTGTTCAGTTCATCCCAAGTCAGGAAGATTACTTTTTTCGAGGTGGTTTTCAGTTTCGGTTTGAACGTATCGTATGCAATGTTCTGATGATGTCCTTTCTTGAAGCTCCAGCGCAGGAACCATTTGAGGAATCCCATTTGCTTGCCGATGGTGCTGTTTCTCATATCCTTGGTGTCACGCAGGAAGTTGACGTATTCGTTCAATCCAAACTCGTTGAAATAGTTGAACGTTGCATCCTCCTTGAACTCTTTGAGGTGGTTCCTCACTGCTGCAAATTTTTCATAGGTGGATGCCGTCCAGTTATTCTGGTTACCGCACTCTTTTACAAACTCATCGAACACCTCCCAAAAGCTGACAGGGGCTTCTTCCGGCTGTTCTTCACTGGTATCTTTCATTCTCATGTTGAAAGCTTCCTTCAACTGTTGGGTCGTTGGCATGACCTCCTGCACCTCAAATTCCTTGAAAATATTCTGGATTTCGGCATAGTATTTCAGCAAGTCCGTATTGATTTCGGCTGCACTTTGCTTTAGCTTGTTGGTACATCCGTTCTTTACCCGCTGCTTATCTGCATCCCATTTGGCTACGTCAATCCGGTAGCCCGTTGTAAACTCGATACGTTGGCTGGCAAAGATGACACGCATACGGATGGGTACGTTCTCTACGATTGGCACACCGTTCTTTTTCCGGCTCTCCAATGCAAAAATGATGTTGCGCTTGATATTCATAATTGGGTGCGTTTGAAATTCTACACCCAAATATACACCCAATTATTGAGATAGCAAAAGACATTTAGAAACATTTACTTTTACTCTATATTGTAATTTACACTTGATTATCAGTCGTTTGCAGTCTTATGATATTCTGTGAAAGTATAAGTTCGAGAGCCTGTCTCTCCGCAAAAAACGCTGAAAATCAGCAGATTGCAAAACAAACACCCTGTTTTACACCCAAGAATGTAAAGTCGGGTGTTTTTGTTTTATTTAAGATAATACAACCACTACATAATAAAAGAGTAGCGATATTAAAAGAATCCGATGAGAAAAGACTAATATTTATCTATCCATTCAGTTTGATTTCTCAGGACTTTACATCGTCCTGAAAGTATTTGTTGCCAGTGTTACAACCAATTAACCAATTCTGATTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGCTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGGCGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTGGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGATGATATATTTTTATCTTGTGCAATGTAACATCAGAGATTTTGAGACACAACGTGGCTTTGTTGAATAAATCGAACTTTTGCTGAGTTGAAGGATCAGCCGCGCAGTTCAACCTGTTGATAGTACGTACTAAGCTCTCATGTTTCACGTACTAAGCTCTCATGTTTAACGTACTAAGCTCTCATGTTTAACGAACTAAACCCTCATGGCTAACGTACTAAGCTCTCATGGCTAACGTACTAAGCTCTCATGTTTCACGTACTAAGCTCTCATGTTTGAACAATAAAATTAATATAAATCAGCAACTTAAATAGCCTCTAAGGTTTTAAGTTTTATAAGAAAAAAAAGAATATATAAGGCTTTTAAAGCTTTTAAGGTTTAACGGTTGTGGACAACAAGCCAGGGATGTAACGCACTGAGAAGCCCTTAGAGCCTCTCAAAGCAATTTTGAGTGACACAGGAACACTTAACGGCTGACATGGGGCGGCCGCTCAACGTACCGGTCTCAGTAGGGAGAGCTGTATGTGGGTAG
SEQ ID NO: 75 (pZR0879 - Ec_frc, Of_oxc, Sc_YBR222C, Sc_YEL020C, Ec_yfdE, Of_oxlT (high-strength promoter) expression vector):
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SEQ ID NO: 76 (pZR0901 - Ec_frc, Of_oxc, Sc_YBR222C, Sc_YEL020C, At_AAE3, Ec_yfdE, Of_oxlT (medium-strength promoter) expression vector):
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SEQ ID NO: 77 (pZR1871 -Ec_frc, Of_oxc, Sc_YBR222C, Sc_YEL020C, At_AAE3, Ec_yfdE, Of_oxlT (high-strength promoter) expression vector):
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SEQ ID NO: 78 (RBS and N-terminal leader peptide):
GATCACACAACATTTAAAAAATAACATTATGAAAGCACTCGAAAAGAGATTCAAAGGTAATATTAACAATAATTTATTTTCA
SEQ ID NO: 79 (RBS and N-terminal NanoLuc luciferase reporter):
TCCATCAATTTAAAATTTAAAATAATGGTTTTTACTCTGGAAGATTTTGTTGGCGATTGGCGTCAGACCGCGGGTTATAATTTGGATCAAGTCCTGGAACAGGGTGGCGTAAGCTCTCTGTTCCAGAACCTGGGTGTGAGCGTGACGCCGATTCAGCGCATCGTTCTGTCCGGCGAGAACGGTCTGAAAATTGATATTCATGTGATCATCCCGTACGAAGGCCTGAGCGGTGACCAAATGGGTCAAATCGAGAAAATCTTTAAAGTCGTCTACCCAGTTGACGATCACCACTTCAAGGTTATCTTGCATTACGGTACGCTGGTGATTGATGGTGTGACCCCGAATATGATTGACTATTTCGGCCGTCCGTATGAAGGCATTGCCGTTTTTGACGGTAAAAAGATCACCGTCACCGGTACCCTGTGGAATGGCAATAAGATTATTGACGAGCGTCTGATTAACCCGGACGGCAGCCTGCTGTTCCGCGTGACCATCAACGGTGTCACGGGTTGGCGTCTGTGCGAGCGCATCCTGGCA
SEQ ID NO: 80 (P_BfP2E5):
GATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTCCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAG
SEQ ID NO: 81 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCAACTACCTAAATTAATTATCACCCCAAATTAATAACATAAAAATATAATAAAATGAGTAACGACGACAATGTAGAGTTGACTGATGGCTTTCATGTTTTGATCGATGCCCTGAAAATGAATGACATCGATACCATGTATGGTGTTGTCGGCATTCCTATCACGAACCTGGCTCGTATGTGGCAAGATGACGGTCAGCGTTTTTACAGCTTCCGTCACGAACAACACGCAGGTTATGCAGCTTCTATCGCCGGTTACATCGAAGGAAAACCTGGCGTTTGCTTGACCGTTTCCGCCCCTGGCTTCCTGAACGGCGTGACTTCCCTGGCTCATGCAACCACCAACTGCTTCCCAATGATCCTGTTGAGCGGTTCCAGTGAACGTGAAATCGTCGATTTGCAACAGGGCGATTACGAAGAAATGGATCAGATGAATGTTGCACGTCCACACTGCAAAGCTTCTTTCCGTATCAACAGCATCAAAGACATTCCAATCGGTATCGCTCGTGCAGTTCGCACCGCTGTATCCGGACGTCCAGGTGGTGTTTACGTTGACTTGCCAGCAAAACTGTTCGGTCAGACCATTTCTGTAGAAGAAGCTAACAAACTGCTCTTCAAACCAATCGATCCAGCTCCGGCACAGATTCCTGCTGAAGATGCTATCGCTCGCGCTGCTGACCTGATCAAGAACGCCAAACGTCCAGTTATCATGCTGGGTAAAGGCGCTGCATACGCACAATGCGACGACGAAATCCGCGCACTGGTTGAAGAAACCGGCATCCCATTCCTGCCAATGGGTATGGCTAAAGGCCTGCTGCCTGACAACCATCCACAATCCGCTGCTGCAACCCGTGCTTTCGCACTGGCACAGTGTGACGTTTGCGTACTGATCGGCGCTCGTCTGAACTGGCTGATGCAGCACGGTAAAGGCAAAACCTGGGGCGACGAACTGAAGAAATACGTTCAGATCGACATCCAGGCTAACGAAATGGACAGCAACCAGCCTATCGCTGCACCAGTTGTTGGTGACATCAAGTCCGCCGTTTCCCTGCTCCGCAAAGCACTGAAAGGCGCTCCAAAAGCTGACGCTGAATGGACCGGCGCTCTGAAAGCCAAAGTTGACGGCAACAAAGCCAAACTGGCTGGCAAGATGACTGCCGAAACCCCATCCGGAATGATGAACTACTCCAATTCCCTGGGCGTTGTTCGTGACTTCATGCTGGCAAATCCGGATATTTCCCTGGTTAACGAAGGCGCTAATGCACTCGACAACACTCGTATGATTGTTGACATGCTGAAACCACGCAAACGTCTTGACTCCGGTACCTGGGGTGTTATGGGTATTGGTATGGGCTACTGCGTTGCTGCAGCTGCTGTTACCGGCAAACCGGTTATCGCTGTTGAAGGCGATAGCGCATTCGGTTTCTCCGGTATGGAACTGGAAACCATCTGCCGTTACAACCTGCCAGTTACCGTTATCATCATGAACAATGGTGGTATCTATAAAGGTAACGAAGCAGATCCACAACCAGGCGTTATCTCCTGTACCCGTCTGACCCGTGGTCGTTACGACATGATGATGGAAGCATTTGGCGGTAAAGGTTATGTTGCCAATACTCCAGCAGAACTGAAAGCTGCTCTGGAAGAAGCTGTTGCTTCCGGCAAACCATGCCTGATCAACGCGATGATCGATCCAGACGCTGGTGTCGAATCTGGCCGTATCAAGAGCCTGAACGTTGTAAGTAAAGTTGGCAAGAAATAAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGT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SEQ ID NO: 82 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCAACTACCTAAATTAATTATCACCCCAAATTAATAACATAAAAATATAATAAAATGAGTAACGACGACAATGTAGAGTTGACTGATGGCTTTCATGTTTTGATCGATGCCCTGAAAATGAATGACATCGATACCATGTATGGTGTTGTCGGCATTCCTATCACGAACCTGGCTCGTATGTGGCAAGATGACGGTCAGCGTTTTTACAGCTTCCGTCACGAACAACACGCAGGTTATGCAGCTTCTATCGCCGGTTACATCGAAGGAAAACCTGGCGTTTGCTTGACCGTTTCCGCCCCTGGCTTCCTGAACGGCGTGACTTCCCTGGCTCATGCAACCACCAACTGCTTCCCAATGATCCTGTTGAGCGGTTCCAGTGAACGTGAAATCGTCGATTTGCAACAGGGCGATTACGAAGAAATGGATCAGATGAATGTTGCACGTCCACACTGCAAAGCTTCTTTCCGTATCAACAGCATCAAAGACATTCCAATCGGTATCGCTCGTGCAGTTCGCACCGCTGTATCCGGACGTCCAGGTGGTGTTTACGTTGACTTGCCAGCAAAACTGTTCGGTCAGACCATTTCTGTAGAAGAAGCTAACAAACTGCTCTTCAAACCAATCGATCCAGCTCCGGCACAGATTCCTGCTGAAGATGCTATCGCTCGCGCTGCTGACCTGATCAAGAACGCCAAACGTCCAGTTATCATGCTGGGTAAAGGCGCTGCATACGCACAATGCGACGACGAAATCCGCGCACTGGTTGAAGAAACCGGCATCCCATTCCTGCCAATGGGTATGGCTAAAGGCCTGCTGCCTGACAACCATCCACAATCCGCTGCTGCAACCCGTGCTTTCGCACTGGCACAGTGTGACGTTTGCGTACTGATCGGCGCTCGTCTGAACTGGCTGATGCAGCACGGTAAAGGCAAAACCTGGGGCGACGAACTGAAGAAATACGTTCAGATCGACATCCAGGCTAACGAAATGGACAGCAACCAGCCTATCGCTGCACCAGTTGTTGGTGACATCAAGTCCGCCGTTTCCCTGCTCCGCAAAGCACTGAAAGGCGCTCCAAAAGCTGACGCTGAATGGACCGGCGCTCTGAAAGCCAAAGTTGACGGCAACAAAGCCAAACTGGCTGGCAAGATGACTGCCGAAACCCCATCCGGAATGATGAACTACTCCAATTCCCTGGGCGTTGTTCGTGACTTCATGCTGGCAAATCCGGATATTTCCCTGGTTAACGAAGGCGCTAATGCACTCGACAACACTCGTATGATTGTTGACATGCTGAAACCACGCAAACGTCTTGACTCCGGTACCTGGGGTGTTATGGGTATTGGTATGGGCTACTGCGTTGCTGCAGCTGCTGTTACCGGCAAACCGGTTATCGCTGTTGAAGGCGATAGCGCATTCGGTTTCTCCGGTATGGAACTGGAAACCATCTGCCGTTACAACCTGCCAGTTACCGTTATCATCATGAACAATGGTGGTATCTATAAAGGTAACGAAGCAGATCCACAACCAGGCGTTATCTCCTGTACCCGTCTGACCCGTGGTCGTTACGACATGATGATGGAAGCATTTGGCGGTAAAGGTTATGTTGCCAATACTCCAGCAGAACTGAAAGCTGCTCTGGAAGAAGCTGTTGCTTCCGGCAAACCATGCCTGATCAACGCGATGATCGATCCAGACGCTGGTGTCGAATCTGGCCGTATCAAGAGCCTGAACGTTGTAAGTAAAGTTGGCAAGAAATAAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGT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CATGCTTGTCCTGGGTATTGTCGTTATTGCCGGATTGGCTCTTCATTTTGCCAATTTCTGGTACAAAATGCAGTTTGCCGAAATTATCGGTGTTCATGATTTGGGCGCATTCGGTCCTACAGACGGTGCCGCTTACATTCGTGAAACATTCGGATGCCCTGTATTTACAGTGCTTTACCTCATTTGGTTAGCAGCTTTGTGGTTCCACCTGACTCACGGATTCTGGAGTGCTTTGCAGACTTTGGGCTGGAGCAATAAAATCTGGTTCGAGCGTTGGAAGACTATTGGTAACATCTACTCTACTTTGGTAGTTCTTGGTTTTGCAGCAGTAGTCGTTATCTACTTCGCTATGACTGGCGCGCCTGATAGGTGGGCTGCCCTTCCTGGTTGGCTTGGTTTCATCAGCCATCCGCTTGCCCTCATCTGTTACGCCGGCGGTAGCCGGCCAGCCTCGCAGAGCAGGATTCCCGTTGAGCACCGCCAGGTGCGAATAAGGGACAGTGAAGAAGGAACACCCGCTCGCGGGTGGGCCTACTTCACCTATCCTGCCCGGCTGACGCCGTTGGATACACCAAGGAAAGTCTACACGAACCCTTTGGCAAAATCCTGTATATCGTGCGAAAAAGGATGGATATACCGAAAAAATCGCTATAATGACCCCGAAGCAGGGTTATGCAGCGGAAAAGCGGGATTAAAAGTCGGGGATTGGTGAACAAAAAGGTGTTTCTCTCTTTAAGAGAAATATCGTTTTGCTAAACAGTTGATATTGAGGTATCATTTTATCGTAAAAGACATTTTTGCTCAACAATTGCTTGACGGAAATCAACAAATTTTAGCATTTTGTAAAAAAGTCGCTATATAATTTGGTGAATTGGAGTTATTTTCATATTTTTGCATCCCGAAGAGTTTCTCTTAAAGAGAGAAACATCTTTTGCATACCTTTTCCGACCGAATTTTTATGTCGTAAAGAGGGGCTTTGCAGGGGGTGGACTCAGAAAGATGAGAATAGATGACTATTGTAGTTGAAACACATAGAAAGTTGCTGATATACAGACCGATACGCATATCGGGATGAACCATGAGTACGTTCTTTTCTCAAAAAACATAAATATTCGAAAAGAGATGCAATAAATTAAGGAGAGGTTATAATGAACAAAGTAAATATAAAAGATAGTCAAAATTTTATTACTTCAAAATATCACATAGAAAAAATAATGAATTGCATAAGTTTAGATGAAAAAGATAACATCTTTGAAATAGGTGCAGGGAAAGGTCATTTTACTGCTGGATTGGTAAAGAGATGTAATTTTGTAACGGCGATAGAAATTGATTCTAAATTATGTGAGGTAACTCGTAATAAGCTCTTAAATTATCCTAACTATCAAATAGTAAATGATGATATACTGAAATTTACATTTCCTAGCCACAATCCATATAAAATATTTGGCAGCATACCTTACAACATAAGCACAAATATAATTCGAAAAATTGTTTTTGAAAGTTCAGCCACAATAAGTTATTTAATAGTGGAATATGGTTTTGCTAAAATGTTATTAGATACAAACAGATCACTAGCATTGCTGTTAATGGCAGAGGTAGATATTTCTATATTAGCAAAAATTCCTAGGTATTATTTCCATCCAAAACCTAAAGTGGATAGCACATTAATTGTATTAAAAAGAAAGCCAGCAAAAATGGCATTTAAAGAGAGAAAAAAATATGAAACTTTTGTAATGAAATGGGTTAACAAAGAGTACGAAAAACTGTTTACAAAAAATCAATTTAATAAAGCTTTAAAACATGCGAGAATATATGATATAAACAATATTAGTTTCGAACAATTTGTATCGCTATTTAATAGTTATAAAATATTTAACGGCTAAAAACAATAGGCCACATGCAACTGTAAATGTTTACGCGGGTACCGACACCGCGGTGGAGGGGAATTGTGTTACAACCAATTAACCAATTCTGATTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGCTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGGCGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTGGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGATGATATATTTTTATCTTGTGCAATGTAACATCAGAGATTTTGAGACACAACGTGGCTTTGTTGAATAAATCGAACTTTTGCTGAGTTGAAGGATCAGAGCCTACGTTCCGAATACGGTCAAAAAAAAGGCCATCCGTCAGGATGGCCTTCGCATTAATATGCCGCTTCGAATTCTTTTAGGAAGCGTGTATCGTTTTCAGAGAACATACGGAGGTCTTTCACCTGATATTTCAGGTTTGTGATACGCTCGATACCCATACCGAGTCCATAACCGCTGTATATTTTGCTGTCTATACCATTTGATTCAAGTACGTTCGGGTCTACCATACCGCAACCGAGGATTTCTACCCAGCCGGTGTGTTTACAGAACGGACATCCTTTACCGCCGCAGATATTACAGCTGATATCCATTTCCGCACTTGGTTCAGCAAACGGGAAGTAAGACGGACGCAGACGGATCTTTGTATCAGCACCGAACATTTCTTTGGCAAAGAGCAGCAATACCTGCTTCAAGTCGGTGAATGATACGTTTTTATCTACATACAGCGCTTCTACCTGATGGAAGAAACAGTGTGCGCGATAGCTGATAGCTTCGTTACGATATACACGTCCCGGACAGATGATGCGGATAGGAGGCTGTGAAGTTTCCATCACACGAGTCTGTACAGAAGAAGTATGTGTACGCAATACTACGTCCGGGTGAGCTTCGATAAAGAAAGTGTCCTGCATATCGCGTGCCGGATGATCTTCGGCAAAGTTCAGTGCCGAGAACACGTGCCAGTCATCTTCAATTTCCGGACCTTCGGCAATGCTGAATCCCAGACGGGCAAAGATATCAATGATTTCGTTCTTTACAATGGTGAGCGGGTGGCGTGTACCGAGTTCTACAGGATAAGCCGAACGCGTCAAATCCAGTCCGTCACAATCGTTGTCCTGACTTTCAAACATTTCTTTCAGCGCGTTGATTTTGTCCTGCGCTTTTGTTTTCAGTTCATTCAGTCTCATGCCGACTTCTTTTTTCTGTTCGGCAGCTACATTACGGAAATCTGCCATTAAGTCGTTAATGGCTCCCTTCTTACTTAGGTATTTGATGCGGAGAGCTTCGAGTTCTTCGGCATTGGAGGCGTGTAAGGCTTCCACCTCTTTCAGAAGTTGTTCAATCTTAGCTATCATTTTTTAATATTTTTAGCGGCCCCGTTAAACAAAATTATTTGTAGAGGCTGTTTCGTCCTCACGGACTCATCAGACCGGAAAGCACATCCGGTGACAGCTCAGGCTACTTTGTTTCTTTCGACACTGCAAATATAAGAACATTATTTGAAAGTTCAAGTGAAACTTTAAATTTTAACAATAGATTAACCATTGCAAACAAAACAAAAAAAAGGTAGCCCAATTGTAAAACGAAAGGCCCAGTCTTTCGACTGAGCCTTTCGTTTTATCCTACAGTCGCTCGGCGATCGAAGGCTTCGGAAAAAAAAGGCCATCCGTCAGGATGGCCTTCGCATTAATATGCCGCTTCGAATTCTTTTAGGAAGCGTGTATCGTTTTCAGAGAACATACGGAGGTCTTTCACCTGATATTTCAGGTTTGTGATACGCTCGATACCCATACCGAGTCCATAACCGCTGTATATTTTGCTGTCTATACCATTTGATTCAAGTACGTTCGGGTCTACCATACCGCAACCGAGGATTTCTACCCAGCCGGTGTGTTTACAGAACGGACATCCTTTACCGCCGCAGATATTACAGCTGATATCCATTTCCGCACTTGGTTCAGCAAACGGGAAGTAAGACGGACGCAGACGGATCTTTGTATCAGCACCGAACATTTCTTTGGCAAAGAGCAGCAATACCTGCTTCAAGTCGGTGAATGATACGTTTTTATCTACATACAGCGCTTCTACCTGATGGAAGAAACAGTGTGCGCGATAGCTGATAGCTTCGTTACGATATACACGTCCCGGACAGATGATGCGGATAGGAGGCTGTGAAGTTTCCATCACACGAGTCTGTACAGAAGAAGTATGTGTACGCAATACTACGTCCGGGTGAGCTTCGATAAAGAAAGTGTCCTGCATATCGCGTGCCGGATGATCTTCGGCAAAGTTCAGTGCCGAGAACACGTGCCAGTCATCTTCAATTTCCGGACCTTCGGC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SEQ ID NO: 83 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAAACAAACCAAATTAATATCATAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCAATTGATACTCCAGCACAAGAACAAGAACATATTAATAGTGATAGGTAAAGGAGCAGTGAAGAATAGCCATGAGATTAGACGCTTGGTTAACACCTTTAACTTGCCGTTCCTTCCGACTCCCATGGCGAAAGGCATAGTGCCCGATAGCAGCCCTTTAAATGTGAGCAGCGCCCGGAGCCAGGCTCTTAAGATTGCTGACATCGTGTTAGTATTGGGAGCTCGCCTGAATTGGATCCTTCACTTCGGAACGAGTCCAAAGTGGAATAGCGAGAGTATTTTTATACAATTTGACAGTAACCCGGAAACGCTCGGAGACAATAACGTTAGTCCCGGAGCAGATTTAAGTATCTGGGGGGACATCGGACTATCGGTTACTGCACTGGTAGAAGAGCTCACGAGACAGGACAGTTGTTGGAAATACTCGGGAGTCAAACAGGAGATCAGGGAAAAGATACAGTTAAACCAGACCAGATTGCTCCGTAAGGAAAAAACGCGTGGAGCTCAGCTTAACTATAATCAAGTGTACGGCACCCTTCGTCCGTTAATTGACGACTATCGCACGATCTTGGTCACAGAAGGTGCCAACACAATGGACATCGCTAGAATAAGTTTTCCGACTGATGCACCTCGCAGAAGACTTGATGCTGGTACAAATGCTACAATGGGTATAGGTTTAGGTTACGCATTAGCGTGTAAAGCCAGCCACCCTGAGTTAGACGTTGTTTTAATCCAAGGCGACAGTGCCTTCGGTTTTAGCGCTATGGAGATCGAGACTGCCGTCCGTTGCCAATTAGCCCTTGTGATTGTCGTAATGAATAACTCTGGGATATATCACGGTGAGAAAGACATCGAAGGAGATCTGCCCCCGACCGCTTTGTCAAAAAATTGTAGATATGACTTGGTCGGTAAGGGTTTAGGAGCTAACGACTTCTTCGTCAATACCATCTCAGAGTTATCTCGCTGTTTTCAGCAGGCAGTTCAATTGAGCAGAACCAAGCGCGAAACCTCCGTCATTAATGTCATAATCGAACCGGGAGAGCAGAAACAGATCGCGTTCGCATGGCAAAACAAGCCTAGACTGTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCATCTACCTTTATTAATCAACAATCCAAATTATTAATAAAAAAAATTTAAAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGA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SEQ ID NO: 84 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAAACAAACCAAATTAATATCATAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCAATTGATACTCCAGCACAAGAACAAGAACATATTAATAGTGATAGGTAAAGGAGCAGTGAAGAATAGCCATGAGATTAGACGCTTGGTTAACACCTTTAACTTGCCGTTCCTTCCGACTCCCATGGCGAAAGGCATAGTGCCCGATAGCAGCCCTTTAAATGTGAGCAGCGCCCGGAGCCAGGCTCTTAAGATTGCTGACATCGTGTTAGTATTGGGAGCTCGCCTGAATTGGATCCTTCACTTCGGAACGAGTCCAAAGTGGAATAGCGAGAGTATTTTTATACAATTTGACAGTAACCCGGAAACGCTCGGAGACAATAACGTTAGTCCCGGAGCAGATTTAAGTATCTGGGGGGACATCGGACTATCGGTTACTGCACTGGTAGAAGAGCTCACGAGACAGGACAGTTGTTGGAAATACTCGGGAGTCAAACAGGAGATCAGGGAAAAGATACAGTTAAACCAGACCAGATTGCTCCGTAAGGAAAAAACGCGTGGAGCTCAGCTTAACTATAATCAAGTGTACGGCACCCTTCGTCCGTTAATTGACGACTATCGCACGATCTTGGTCACAGAAGGTGCCAACACAATGGACATCGCTAGAATAAGTTTTCCGACTGATGCACCTCGCAGAAGACTTGATGCTGGTACAAATGCTACAATGGGTATAGGTTTAGGTTACGCATTAGCGTGTAAAGCCAGCCACCCTGAGTTAGACGTTGTTTTAATCCAAGGCGACAGTGCCTTCGGTTTTAGCGCTATGGAGATCGAGACTGCCGTCCGTTGCCAATTAGCCCTTGTGATTGTCGTAATGAATAACTCTGGGATATATCACGGTGAGAAAGACATCGAAGGAGATCTGCCCCCGACCGCTTTGTCAAAAAATTGTAGATATGACTTGGTCGGTAAGGGTTTAGGAGCTAACGACTTCTTCGTCAATACCATCTCAGAGTTATCTCGCTGTTTTCAGCAGGCAGTTCAATTGAGCAGAACCAAGCGCGAAACCTCCGTCATTAATGTCATAATCGAACCGGGAGAGCAGAAACAGATCGCGTTCGCATGGCAAAACAAGCCTAGACTGTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCATCTACCTTTATTAATCAACAATCCAAATTATTAATAAAAAAAATTTAAAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGA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SEQ ID NO: 85 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACCACAATACTAAAAATTTAATAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCATCTACCTATATTAATCATCAACCCAATTTTCATATGTATAAAATTAACAAAATGACAAGTGCCGCTACTGTTACTGCTTCGTTCAACGATACTTTTAGCGTATCCGATAATGTCGCCGTTATTGTTCCTGAAACGGACACTCAGGTGACCTACAGGGATCTATCCCACATGGTGGGTCACTTCCAGACCATGTTCACAAATCCTAATTCTCCATTGTACGGAGCTGTTTTCAGACAAGATACAGTGGCGATATCCATGCGTAATGGGCTGGAATTTATCGTCGCTTTCCTCGGTGCTACTATGGACGCTAAAATTGGCGCGCCCTTGAATCCCAATTATAAGGAAAAGGAGTTCAATTTTTATTTGAATGACCTGAAATCTAAGGCGATTTGCGTCCCAAAGGGTACCACAAAGTTACAGAGTTCTGAAATTCTAAAATCTGCCTCCACGTTTGGATGTTTTATCGTAGAGCTGGCCTTCGATGCGACCAGGTTTAGGGTAGAGTATGATATATACTCTCCAGAGGACAACTACAAAAGGGTTATTTACCGGTCTTTGAACAACGCCAAATTTGTCAACACAAATCCCGTTAAATTCCCTGGGTTTGCCCGTTCCAGTGACGTTGCCCTGATTTTGCATACCAGTGGTACCACCTCCACTCCAAAAACGGTGCCTTTGTTACATTTGAACATTGTGAGAAGCACGTTGAACATTGCTAACACTTACAAGCTAACGCCCTTGGACAGATCTTATGTCGTGATGCCTCTTTTCCACGTCCATGGGTTAATTGGTGTTTTACTTTCCACTTTTAGAACTCAGGGTTCTGTTGTGGTTCCCGATGGATTCCATCCAAAGTTATTCTGGGACCAATTTGTTAAGTACAACTGTAATTGGTTCAGTTGCGTTCCCACAATAAGCATGATTATGCTGAACATGCCCAAACCAAACCCTTTCCCACACATTAGATTCATCAGATCGTGTTCTTCTGCTTTGGCTCCAGCAACGTTCCATAAGCTGGAGAAGGAATTCAATGCACCTGTCTTGGAGGCCTATGCGATGACCGAAGCATCACATCAAATGACCTCAAACAATCTGCCTCCAGGAAAGAGAAAGCCTGGTACTGTGGGCCAGCCACAAGGAGTCACCGTCGTCATTCTAGATGACAATGACAATGTCTTGCCCCCGGGCAAAGTCGGCGAAGTTTCCATCAGAGGCGAAAACGTCACTTTGGGGTATGCTAATAATCCAAAAGCTAACAAGGAGAACTTCACCAAGAGAGAGAACTATTTCAGAACCGGTGACCAAGGTTATTTCGACCCTGAGGGGTTTTTGGTCCTTACAGGCAGAATCAAAGAGCTTATCAACAGGGGTGGTGAAAAGATTTCACCCATTGAGCTCGACGGCATTATGCTATCGCATCCAAAGATCGATGAAGCCGTTGCATTTGGTGTTCCCGACGATATGTACGGCCAAGTAGTTCAAGCCGCCATTGTTTTGAAGAAGGGAGAAAAAATGACCTACGAAGAACTGGTGAACTTCTTAAAGAAGCACCTAGCCTCTTTCAAAATTCCAACCAAGGTGTACTTTGTTGATAAGCTACCAAAAACCGCTACAGGTAAAATCCAGAGAAGAGTTATCGCAGAAACTTTTGCTAAGAGCAGCAGAAATAAGAGTAAGTTGTAGGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGG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SEQ ID NO: 86 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCA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SEQ ID NO: 87 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCA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SEQ ID NO: 88 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAATCATTCCAATTGTATCACTTAAAAATATAAAAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCAACTACCTAAATTACTTATCAAACCACTTAGTAGTAAAAAAAATATAACAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGATGGACAGTCACTCTATTACAGTTTTATTAATCATGGCAAAGAGAGTGTGGTTCTTGATTTAAAGAATGATCACGATAAAAGTATATTTATAAATATGCTCAAACAAGCTGATGTATTAGCTGAGAATTTTCGCCCAGGTACAATGGAAAAACTGGGGTTTTCATGGGAAACGCTTCAAGAAATCAACCCGCGCCTCATATATGCTTCATCGTCAGGTTTCGGACATACCGGTCCGCTAAAAGATGCTCCTGCCTACGATACCATCATTCAGGCAATGAGCGGGATAATGATGGAAACAGGATATCCTGATGCTCCGCCAGTGCGCGTTGGTACATCTCTTGCGGATCTATGCGGCGGTGTCTATTTATTCAGCGGAATAGTGAGTGCACTTTATGGCCGCGAAAAGAGCCAGAGAGGGGCGCATGTCGATATAGCGATGTTTGATGCCACGCTGAGTTTTCTGGAGCATGGTCTGATGGCATATATCGCAACTGGGAAGTCACCACAACGTCTGGGAAATCGCCATCCCTACATGGCACCTTTTGATGTTTTCAATACTCAGGATAAGCCGATTACGATTTGTTGTGGTAATGACAAGCTTTTTTCTGCGTTATGCCAGGCACTGGAGCTTACGGAACTGGTTAATGATCCCCGATTTAGCAGCAATATTTTACGCGTACAAAACCAGGCTATTCTTAAACAATATATTGAGCGGACGTTAAAAACGCAGGCAGCTGAAGTTTGGTTAGCCAGAATACATGAAGTTGGTGTACCCGTCGCGCCGTTATTAAGTGTGGCTGAGGCCATTAAATTGCCACAAACTCAGGCGAGAAATATGTTGATTGAAGCCGGGGGAATAATGATGCCGGGTAATCCGATAAAAATCAGCGGCTGCGCGGACCCGCATGTTATGCCGGGAGCGGCAACGCTCGACCAGCATGGGGAACAAATTCGCCAGGAGTTCTCATCATAAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAAACAAACCAAATTAATATCATAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCAATTGATACTCCAGCACAAGAACAAGAACATATTAATAGTGATAGGTAAAGGAGCAGTGAAGAATAGCCATGAGATTAGACGCTTGGTTAACACCTTTAACTTGCCGTTCCT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SEQ ID NO: 89 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAATCATTCCAATTGTATCACTTAAAAATATAAAAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTACCCCTAACAACCCATAAATTTAACTTTAAAAAATTTTTAAATATAATAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCAATTGATACTCCAGCACAAGAACAAGAACATATTAATAGTGATAGGTAAAGGAGCAGTGAAGAATAGCCATGAGATTAGACGCTTGGTTAACACCTTTAACTTGCCGTTCCTTCCGACTCCCATGGCGAAAGGCATAGTGCCCGATAGCAGCCCTTTAAATGTGAGCAGCGCCCGGAGCCAGGCTCTTAAGATTGCTGACATCGTGTTAGTATTGGGAGCTCGCCTGAATTGGATCCTTCACTTCGGAACGAGTCCAAAGTGGAATAGCGAGAGTATTTTTATACAATTTGACAGTAACCCGGAAACGCTCGGAGACAATAACGTTAGTCCCGGAGCAGATTTAAGTATCTGGGGGGACATCGGACTATCGGTTACTGCACTGGTAGAAGAGCTCACGAGACAGGACAGTTGTTGGAAATACTCGGGAGTCAAACAGGAGATCAGGGAAAAGATACAGTTAAACCAGACCAGATTGCTCCGTAAGGAAAAAACGCGTGGAGCTCAGCTTAACTATAATCAAGTGTACGGCACCCTTCGTCCGTTAATTGACGACTATCGCACGATCTTGGTCACAGAAGGTGCCAACACAATGGACATCGCTAGAATAAGTTTTCCGACTGATGCACCTCGCAGAAGACTTGATGCTGGTACAAATGCTACAATGGGTATAGGTTTAGGTTACGCATTAGCGTGTAAAGCCAGCCACCCTGAGTTAGACGTTGTTTTAATCCAAGGCGACAGTGCCTTCGGTTTTAGCGCTATGGAGATCGAGACTGCCGTCCGTTGCCAATTAGCCCTTGTGATTGTCGTAATGAATAACTCTGGGATATATCACGGTGAGAAAGACATCGAAGGAGATCTGCCCCCGACCGCTTTGTCAAAAAATTGTAGATATGACTTGGTCGGTAAGGGTTTAGGAGCTAACGACTTCTTCGTCAATACCATCTCAGAGTTATCTCGCTGTTTTCAGCAGGCAGTTCAATTGAGCAGAACCAAGCGCGAAACCTCCGTCATTAATGTCATAATCGAACCGGGAGAGCAGAAACAGATCGCGTTCGCATGGCAAAACAAGCCTAGACTGTAAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCATCTACCTATATTACTAAACAAACCAATTATAATAATTTTAAAAATAAAAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGA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SEQ ID NO: 90 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCAACTACCTAAATTAATTATCACCCCAAATTAATAACATAAAAATATAATAAAATGAGTAACGACGACAATGTAGAGTTGACTGATGGCTTTCATGTTTTGATCGATGCCCTGAAAATGAATGACATCGATACCATGTATGGTGTTGTCGGCATTCCTATCACGAACCTGGCTCGTATGTGGCAAGATGACGGTCAGCGTTTTTACAGCTTCCGTCACGAACAACACGCAGGTTATGCAGCTTCTATCGCCGGTTACATCGAAGGAAAACCTGGCGTTTGCTTGACCGTTTCCGCCCCTGGCTTCCTGAACGGCGTGACTTCCCTGGCTCATGCAACCACCAACTGCTTCCCAATGATCCTGTTGAGCGGTTCCAGTGAACGTGAAATCGTCGATTTGCAACAGGGCGATTACGAAGAAATGGATCAGATGAATGTTGCACGTCCACACTGCAAAGCTTCTTTCCGTATCAACAGCATCAAAGACATTCCAATCGGTATCGCTCGTGCAGTTCGCACCGCTGTATCCGGACGTCCAGGTGGTGTTTACGTTGACTTGCCAGCAAAACTGTTCGGTCAGACCATTTCTGTAGAAGAAGCTAACAAACTGCTCTTCAAACCAATCGATCCAGCTCCGGCACAGATTCCTGCTGAAGATGCTATCGCTCGCGCTGCTGACCTGATCAAGAACGCCAAACGTCCAGTTATCATGCTGGGTAAAGGCGCTGCATACGCACAATGCGACGACGAAATCCGCGCACTGGTTGAAGAAACCGGCATCCCATTCCTGCCAATGGGTATGGCTAAAGGCCTGCTGCCTGACAACCATCCACAATCCGCTGCTGCAACCCGTGCTTTCGCACTGGCACAGTGTGACGTTTGCGTACTGATCGGCGCTCGTCTGAACTGGCTGATGCAGCACGGTAAAGGCAAAACCTGGGGCGACGAACTGAAGAAATACGTTCAGATCGACATCCAGGCTAACGAAATGGACAGCAACCAGCCTATCGCTGCACCAGTTGTTGGTGACATCAAGTCCGCCGTTTCCCTGCTCCGCAAAGCACTGAAAGGCGCTCCAAAAGCTGACGCTGAATGGACCGGCGCTCTGAAAGCCAAAGTTGACGGCAACAAAGCCAAACTGGCTGGCAAGATGACTGCCGAAACCCCATCCGGAATGATGAACTACTCCAATTCCCTGGGCGTTGTTCGTGACTTCATGCTGGCAAATCCGGATATTTCCCTGGTTAACGAAGGCGCTAATGCACTCGACAACACTCGTATGATTGTTGACATGCTGAAACCACGCAAACGTCTTGACTCCGGTACCTGGGGTGTTATGGGTATTGGTATGGGCTACTGCGTTGCTGCAGCTGCTGTTACCGGCAAACCGGTTATCGCTGTTGAAGGCGATAGCGCATTCGGTTTCTCCGGTATGGAACTGGAAACCATCTGCCGTTACAACCTGCCAGTTACCGTTATCATCATGAACAATGGTGGTATCTATAAAGGTAACGAAGCAGATCCACAACCAGGCGTTATCTCCTGTACCCGTCTGACCCGTGGTCGTTACGACATGATGATGGAAGCATTTGGCGGTAAAGGTTATGTTGCCAATACTCCAGCAGAACTGAAAGCTGCTCTGGAAGAAGCTGTTGCTTCCGGCAAACCATGCCTGATCAACGCGATGATCGATCCAGACGCTGGTGTCGAATCTGGCCGTATCAAGAGCCTGAACGTTGTAAGTAAAGTTGGCAAGAAATAAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTACATTAATAACCAACCCAAATGCCTAATCAATAAATATTATAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGT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SEQ ID NO: 91 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCA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TATTGCCGGATTGGCTCTTCATTTTGCCAATTTCTGGTACAAAATGCAGTTTGCCGAAATTATCGGTGTTCATGATTTGGGCGCATTCGGTCCTACAGACGGTGCCGCTTACATTCGTGAAACATTCGGATGCCCTGTATTTACAGTGCTTTACCTCATTTGGTTAGCAGCTTTGTGGTTCCACCTGACTCACGGATTCTGGAGTGCTTTGCAGACTTTGGGCTGGAGCAATAAAATCTGGTTCGAGCGTTGGAAGACTATTGGTAACATCTACTCTACTTTGGTAGTTCTTGGTTTTGCAGCAGTAGTCGTTATCTACTTCGCTATGACTGGCGCGCCTGATAGGTGGGCTGCCCTTCCTGGTTGGCTTGGTTTCATCAGCCATCCGCTTGCCCTCATCTGTTACGCCGGCGGTAGCCGGCCAGCCTCGCAGAGCAGGATTCCCGTTGAGCACCGCCAGGTGCGAATAAGGGACAGTGAAGAAGGAACACCCGCTCGCGGGTGGGCCTACTTCACCTATCCTGCCCGGCTGACGCCGTTGGATACACCAAGGAAAGTCTACACGAACCCTTTGGCAAAATCCTGTATATCGTGCGAAAAAGGATGGATATACCGAAAAAATCGCTATAATGACCCCGAAGCAGGGTTATGCAGCGGAAAAGCGGGATTAAAAGTCGGGGATTGGTGAACAAAAAGGTGTTTCTCTCTTTAAGAGAAATATCGTTTTGCTAAACAGTTGATATTGAGGTATCATTTTATCGTAAAAGACATTTTTGCTCAACAATTGCTTGACGGAAATCAACAAATTTTAGCATTTTGTAAAAAAGTCGCTATATAATTTGGTGAATTGGAGTTATTTTCATATTTTTGCATCCCGAAGAGTTTCTCTTAAAGAGAGAAACATCTTTTGCATACCTTTTCCGACCGAATTTTTATGTCGTAAAGAGGGGCTTTGCAGGGGGTGGACTCAGAAAGATGAGAATAGATGACTATTGTAGTTGAAACACATAGAAAGTTGCTGATATACAGACCGATACGCATATCGGGATGAACCATGAGTACGTTCTTTTCTCAAAAAACATAAATATTCGAAAAGAGATGCAATAAATTAAGGAGAGGTTATAATGAACAAAGTAAATATAAAAGATAGTCAAAATTTTATTACTTCAAAATATCACATAGAAAAAATAATGAATTGCATAAGTTTAGATGAAAAAGATAACATCTTTGAAATAGGTGCAGGGAAAGGTCATTTTACTGCTGGATTGGTAAAGAGATGTAATTTTGTAACGGCGATAGAAATTGATTCTAAATTATGTGAGGTAACTCGTAATAAGCTCTTAAATTATCCTAACTATCAAATAGTAAATGATGATATACTGAAATTTACATTTCCTAGCCACAATCCATATAAAATATTTGGCAGCATACCTTACAACATAAGCACAAATATAATTCGAAAAATTGTTTTTGAAAGTTCAGCCACAATAAGTTATTTAATAGTGGAATATGGTTTTGCTAAAATGTTATTAGATACAAACAGATCACTAGCATTGCTGTTAATGGCAGAGGTAGATATTTCTATATTAGCAAAAATTCCTAGGTATTATTTCCATCCAAAACCTAAAGTGGATAGCACATTAATTGTATTAAAAAGAAAGCCAGCAAAAATGGCATTTAAAGAGAGAAAAAAATATGAAACTTTTGTAATGAAATGGGTTAACAAAGAGTACGAAAAACTGTTTACAAAAAATCAATTTAATAAAGCTTTAAAACATGCGAGAATATATGATATAAACAATATTAGTTTCGAACAATTTGTATCGCTATTTAATAGTTATAAAATATTTAACGGCTAAAAACAATAGGCCACATGCAACTGTAAATGTTTACGCGGGTACCGACACCGCGGTGGAGGGGAATTGTGTTACAACCAATTAACCAATTCTGATTAGAAAAACTCATCGAGCATCAAATGAAACTGCAATTTATTCATATCAGGATTATCAATACCATATTTTTGAAAAAGCCGTTTCTGTAATGAAGGAGAAAACTCACCGAGGCAGTTCCATAGGATGGCAAGATCCTGGTATCGGTCTGCGATTCCGACTCGTCCAACATCAATACAACCTATTAATTTCCCCTCGTCAAAAATAAGGTTATCAAGTGAGAAATCACCATGAGTGACGACTGAATCCGGTGAGAATGGCAAAAGCTTATGCATTTCTTTCCAGACTTGTTCAACAGGCCAGCCATTACGCTCGTCATCAAAATCACTCGCATCAACCAAACCGTTATTCATTCGTGATTGCGCCTGAGCGAGGCGAAATACGCGATCGCTGTTAAAAGGACAATTACAAACAGGAATCGAATGCAACCGGCGCAGGAACACTGCCAGCGCATCAACAATATTTTCACCTGAATCAGGATATTCTTCTAATACCTGGAATGCTGTTTTCCCGGGGATCGCAGTGGTGAGTAACCATGCATCATCAGGAGTACGGATAAAATGCTTGATGGTCGGAAGAGGCATAAATTCCGTCAGCCAGTTTAGTCTGACCATCTCATCTGTAACATCATTGGCAACGCTACCTTTGCCATGTTTCAGAAACAACTCTGGCGCATCGGGCTTCCCATACAATCGATAGATTGTCGCACCTGATTGCCCGACATTATCGCGAGCCCATTTATACCCATATAAATCAGCATCCATGTTGGAATTTAATCGCGGCCTGGAGCAAGACGTTTCCCGTTGAATATGGCTCATAACACCCCTTGTATTACTGTTTATGTAAGCAGACAGTTTTATTGTTCATGATGATATATTTTTATCTTGTGCAATGTAACATCAGAGATTTTGAGACACAACGTGGCTTTGTTGAATAAATCGAACTTTTGCTGAGTTGAAGGATCAGAGCCTACGTTCCGAATACGGTCAAAAAAAAGGCCATCCGTCAGGATGGCCTTCGCATTAATATGCCGCTTCGAATTCTTTTAGGAAGCGTGTATCGTTTTCAGAGAACATACGGAGGTCTTTCACCTGATATTTCAGGTTTGTGATACGCTCGATACCCATACCGAGTCCATAACCGCTGTATATTTTGCTGTCTATACCATTTGATTCAAGTACGTTCGGGTCTACCATACCGCAACCGAGGATTTCTACCCAGCCGGTGTGTTTACAGAACGGACATCCTTTACCGCCGCAGATATTACAGCTGATATCCATTTCCGCACTTGGTTCAGCAAACGGGAAGTAAGACGGACGCAGACGGATCTTTGTATCAGCACCGAACATTTCTTTGGCAAAGAGCAGCAATACCTGCTTCAAGTCGGTGAATGATACGTTTTTATCTACATACAGCGCTTCTACCTGATGGAAGAAACAGTGTGCGCGATAGCTGATAGCTTCGTTACGATATACACGTCCCGGACAGATGATGCGGATAGGAGGCTGTGAAGTTTCCATCACACGAGTCTGTACAGAAGAAGTATGTGTACGCAATACTACGTCCGGGTGAGCTTCGATAAAGAAAGTGTCCTGCATATCGCGTGCCGGATGATCTTCGGCAAAGTTCAGTGCCGAGAACACGTGCCAGTCATCTTCAATTTCCGGACCTTCGGCAATGCTGAATCCCAGACGGGCAAAGATATCAATGATTTCGTTCTTTACAATGGTGAGCGGGTGGCGTGTACCGAGTTCTACAGGATAAGCCGAACGCGTCAAATCCAGTCCGTCACAATCGTTGTCCTGACTTTCAAACATTTCTTTCAGCGCGTTGATTTTGTCCTGCGCTTTTGTTTTCAGTTCATTCAGTCTCATGCCGACTTCTTTTTTCTGTTCGGCAGCTACATTACGGAAATCTGCCATTAAGTCGTTAATGGCTCCCTTCTTACTTAGGTATTTGATGCGGAGAGCTTCGAGTTCTTCGGCATTGGAGGCGTGTAAGGCTTCCACCTCTTTCAGAAGTTGTTCAATCTTAGCTATCATTTTTTAATATTTTTAGCGGCCCCGTTAAACAAAATTATTTGTAGAGGCTGTTTCGTCCTCACGGACTCATCAGACCGGAAAGCACATCCGGTGACAGCTCAGGCTACTTTGTTTCTTTCGACACTGCAAATATAAGAACATTATTTGAAAGTTCAAGTGAAACTTTAAATTTTAACAATAGATTAACCATTGCAAACAAAACAAAAAAAAGGTAGCCCAATTGTAAAACGAAAGGCCCAGTCTTTCGACTGAGCCTTTCGTTTTATCCTACAGTCGCTCGGCGATCGAAGGCTTCGGAAAAAAAAGGCCATCCGTCAGGATGGCCTTCGCATTAATATGCCGCTTCGAATTCTTTTAGGAAGCGTGTATCGTTTTCAGAGAACATACGGAGGTCTTTCACCTGATATTTCAGGTTTGTGATACGCTCGATACCCATACCGAGTCCATAACCGCTGTATATTTTGCTGTCTATACCATTTGATTCAAGTACGTTCGGGTCTACCATACCGCAACCGAGGATTTCTACCCAGCCGGTGTGTTTACAGAACGGACATCCTTTACCGCCGCAGATATTACAGCTGATATCCATTTCCGCACTTGGTTCAGCAAACGGGAAGTAAGACGGACGCAGACGGATCTTTGTATCAGCACCGAACATTTCTTTGGCAAAGAGCAGCAATACCTGCTTCAAGTCGGTGAATGATACGTTTTTATCTACATACAGCGCTTCTACCTGATGGAAGAAACAGTGTGCGCGATAGCTGATAGCTTCGTTACGATATACACGTCCCGGACAGATGATGCGGATAGGAGGCTGTGAAGTTTCCATCACACGAGTCTGTACAGAAGAAGTATGTGTACGCAATACTACGTCCGGGTGAGCTTCGATAAAGAAAGTGTCCTGCATATCGCGTGCCGGATGATCTTCGGCAAAGTTCAGTGCCGAGAACACGTGCCAGTCATCTTCAATTTCCGGACCTTCGGCAATGCTGAATCCCAGACGGGCAAA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SEQ ID NO: 92 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCATCTACCTTCATTATTAAACAAACCAAATTAATATCATAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCAATTGATACTCCAGCACAAGAACAAGAACATATTAATAGTGATAGGTAAAGGAGCAGTGAAGAATAGCCATGAGATTAGACGCTTGGTTAACACCTTTAACTTGCCGTTCCTTCCGACTCCCATGGCGAAAGGCATAGTGCCCGATAGCAGCCCTTTAAATGTGAGCAGCGCCCGGAGCCAGGCTCTTAAGATTGCTGACATCGTGTTAGTATTGGGAGCTCGCCTGAATTGGATCCTTCACTTCGGAACGAGTCCAAAGTGGAATAGCGAGAGTATTTTTATACAATTTGACAGTAACCCGGAAACGCTCGGAGACAATAACGTTAGTCCCGGAGCAGATTTAAGTATCTGGGGGGACATCGGACTATCGGTTACTGCACTGGTAGAAGAGCTCACGAGACAGGACAGTTGTTGGAAATACTCGGGAGTCAAACAGGAGATCAGGGAAAAGATACAGTTAAACCAGACCAGATTGCTCCGTAAGGAAAAAACGCGTGGAGCTCAGCTTAACTATAATCAAGTGTACGGCACCCTTCGTCCGTTAATTGACGACTATCGCACGATCTTGGTCACAGAAGGTGCCAACACAATGGACATCGCTAGAATAAGTTTTCCGACTGATGCACCTCGCAGAAGACTTGATGCTGGTACAAATGCTACAATGGGTATAGGTTTAGGTTACGCATTAGCGTGTAAAGCCAGCCACCCTGAGTTAGACGTTGTTTTAATCCAAGGCGACAGTGCCTTCGGTTTTAGCGCTATGGAGATCGAGACTGCCGTCCGTTGCCAATTAGCCCTTGTGATTGTCGTAATGAATAACTCTGGGATATATCACGGTGAGAAAGACATCGAAGGAGATCTGCCCCCGACCGCTTTGTCAAAAAATTGTAGATATGACTTGGTCGGTAAGGGTTTAGGAGCTAACGACTTCTTCGTCAATACCATCTCAGAGTTATCTCGCTGTTTTCAGCAGGCAGTTCAATTGAGCAGAACCAAGCGCGAAACCTCCGTCATTAATGTCATAATCGAACCGGGAGAGCAGAAACAGATCGCGTTCGCATGGCAAAACAAGCCTAGACTGTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCATCTACCTTTATTAATCAACAATCCAAATTATTAATAAAAAAAATTTAAAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGA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SEQ ID NO: 93 (Plasmid encoding oxalate degradation pathway for genomic integration into Bacteroides vulgatus genome):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCA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SEQ ID NO: 94 (Ribosome binding site and At_AAE3 open reading frame):
GGAGAGCTGTATGTGGGGTGGAAGAAGCTATCGTAAAAATGCTGGAGCAGCTTGATCCTCATTCTACCTATTCTGATCCGGAGGAAGTGAAGAGAATGAACGAGCCGTTGCAGGGAAACTTCGAAGGTATCGGTATACAGTTTAATATGGCGGAGGACACTTTGCTGGTGATACAGCCTGTATCGGGCGGACCGTCCGAAAAAGTCGGTATTCTGGCCGGTGATCGTATCGTCATGGTGGAAGATACGCTGATAGCCGGTGTAAAGATGAGTACCGAGGATATTATGCGTCGCCTCCGTGGTCCTAAAGATTCAAAAGTGAATCTGAAAATACTTCGCCGAGGGGTGAAGGAACTGCTCCCCTTTACGGTGAAAAGGGATAAAATACCTGTTTACAGCTTGGATGCTTCCTATATGATTAAAGATAAGATCGGTTATATTCGTATCAACCGTTTTGCCGCCACTACCCATGAGGAGTTCAAGAAAGCGCTGACCGGGTTGCAGAAGAAAGGAATGAAAGACTTGATTCTTGATTTGCAGGGCAATGGCGGGGGGTATTTGAATGCTGCTATCGATATTGCCAATGAATTTTTGGGTAAAAAGGAACTGATTGTCTATACGGAGGGCCGTCGTAATCCTCGTAGCGAGTTTTTTGCCAAAGGTACGGGCGAGTTTCAGAACGGTCGTCTGATGGTATTGGTTGATGAATTTTCGGCTTCTGCCAGTGAGATTGTGACCGGAGCTGTTCAGGATTGGGACAGAGGCGTTGTGGTAGGCCGTCGCAGTTTTGGTAAAGGCTTGGTGCAGCGTCCCATTGATTTGCCGGACGGTTCGATGATCCGTCTGACGGTGGCCCGCTATTATACGCCTGCCGGACGTTGTATCCAGAAACCTTACGAGAGCATTGAAAAGTATAATGAAGACCTGATAGACCGTTATAATAAAGGAGAAATGATGAGTGAAGACAGCATCCACTTTCCGGATTCACTGAAGTTCAAGACTCATAGGTTGGCCCGTACGGTATATGGTGGCGGAGGGATCATGCCCGATTATTTTGTGCCGATTGATACGACTCTCTATACTAAATACCATCGTCAGTTGCGTGATAAAGGAGCATTGATGAAAGCTCATTTCCATTTTATTGATGCCCATCGTAAAGAATGGCTGGGCAAATACAAGACTTTCAATGAGTTCTACAAACGTTTTGAAGTGACTCCGGATATGTTGACACAACTGGTTGCTACCGGCAAGGAGATGGGAGTGGAATATAATGAAGAAGAGTATCAAAAGGCCCTGCCTCTGCTGAGGTTGCAGATGAAAGCATTGATAGCCCGTGATTTATGGGATATGAATGAATATTATCACGTCATTAATGACGCGAATGAAAGTATCAGGAAAGCGCTGGAACTGTTGGAGCAACCGGACTTTGAGGGGCTGCTGTTGAAAAAGCGATAGTCAAGACTTTATATTAACTGCAGGGGCGCATAGTTGCACTCCTGCAGTTGTCTGAAAAACTTGTAGGATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTACAATTGGGCTACCTTTTTTTTGTTTTGTTTGCAATGGTTAATCTATTGTTAAAATTTAAAGTTTCACTTGAACTTTCAAATAATGTTCTTATATTTGCAGTGTCGAAAGAAACAAAGTAGCCTGGCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAAATGAATAATCCACAAACAGGACAATCAACAGGCCTCTTGGGCAATCGTTGGTTCTACTTGGTATTAGCAGTTTTGCTGATGTGTATGATCTCGGGTGTCCAATATTCCTGGACACTGTACGCTAACCCGGTTAAAGACAACCTTGGCGTTTCTTTGGCTGCGGTTCAGACGGCTTTCACACTCTCTCAGGTCATTCAAGCTGGTTCTCAGCCTGGTGGTGGTTACTTCGTTGATAAATTCGGTCCAAGAATTCCATTGATGTTCGGTGGTGCGATGGTTCTCGCTGGCTGGACCTTCATGGGTATGGTTGACAGTGTTCCTGCTCTGTATGCTCTTTATACTCTGGCCGGTGCAGGTGTTGGTATCGTTTACGGTATCGCGATGAACACGGCTAACAGATGGTTCCCGGACAAACGCGGTCTGGCTTCCGGTTTCACCGCTGCCGGTTACGGTCTGGGTGTTCTGCCGTTCCTGCCACTGATCAGCTCCGTTCTGAAAGTTGAAGGTGTTGGCGCAGCATTCATGTACACCGGTTTGATCATGGGTATCCTGATTATCCTGATCGCTTTCGTTATCCGTTTCCCTGGCCAGCAAGGCGCCAAAAAACAAATCGTTGTTACCGACAAGGATTTCAATTCTGGCGAAATGCTGAGAACACCACAATTCTGGGTTCTGTGGACCGCATTCTTTTCCGTTAACTTTGGTGGTTTGCTGCTGGTTGCCAACAGCGTCCCTTACGGTCGCAGCCTCGGTCTTGCCGCAGGTGTGCTGACGATCGGTGTTTCGATCCAGAACCTGTTCAATGGTGGTTGCCGTCCTTTCTGGGGTTTCGTTTCCGATAAAATCGGCCGTTACAAAACCATGTCCGTCGTTTTCGGTATCAATGCTGTTGTTCTCGCACTTTTCCCGACGATTGCTGCCTTGGGCGATGTAGCCTTTATCGCCATGTTGGCAATCGCATTCTTCACATGGGGTGGTAGCTACGCTCTGTTCCCATCGACCAACAGCGATATTTTCGGTACGGCATACTCTGCCAGAAACTATGGTTTCTTCTGGGCTGCAAAAGCAACTGCCTCGATCTTCGGTGGTGGTCTGGGTGCTGCAATTGCAACCAACTTCGGATGGAATACCGCTTTCCTGATTACTGCGATTACTTCTTTCATCGCATTTGCTCTGGCTACCTTCGTTATTCCAAGAATGGGCCGTCCAGTCAAGAAAATGGTCAAATTGTCTCCAGAAGAAAAAGCTGTACATTAAGGTTCCTAACCTGCCTGGCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATCTGAGGTTCCTAAACGACCTGGCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAAATGACTACCACAGCAACGCAGCATTTTGCCCAGTTACTCCAGAAGTACGGAATTGATACTGTCTTCGGCATAGTAGGTATTCCGATCGTGCAGTTGGCCGACACTATGGTCGCGAATGGAATTAAGTTTATACCGTGTCGCAATGAGCAAGCCGCAAGTTACGCGGCAAGCGCCTACGGCTACATCTCGGACAAACCTGGTGTCCTGTTAATCGTGGGAGGGCCTGGCCTTATTCATGCCTTAGCGGGGATCTATAATAGTATGTCGAACCGCTGGCCCTTGTTGGTCATCGCCGGATCCAGCAGCCAGTCAGACATCCACAAGGGAGGTTTCCAGGAACTTGACCAGGTGTCCTTGCTAAGTCCGTTCCTAAAATTCACTGGTAAACTGACGCCGGATAACATCGATATGATAACCCAAAAAGCACTCAACTATTGCATTCAGGGAACCGCCGGAGTGAGCTATATCGATGTCCCCGCTGACTTCATCGAATACGAGAAGCCGCTTGAGGGCAATGATAGAACTGGTAACGAGCTGCCAATGATCCTGACGCCCAATATCTGCGGTCCAGACCCCAGTAAAATTAAGAAGGTGGTGCA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SEQ ID NO: 95 (Ribosome binding site and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 96 (Ribosome binding site RBS1 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 97 (Ribosome binding site RBS2 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 98 (Ribosome binding site RBS3 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 99 (Ribosome binding site RBS4 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 100 (Ribosome binding site RBS5 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 101 (Ribosome binding site RBS6 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 102 (Ribosome binding site RBS7 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 103 (Ribosome binding site RBS8 and At_AAE3 open reading frame):
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SEQ ID NO: 104 (Ribosome binding site RBS1 and Sc_YBR222C open reading frame):
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SEQ ID NO: 105 (Ribosome binding site RBS2 and Sc_YBR222C open reading frame):
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SEQ ID NO: 106 (Ribosome binding site RBS3 and Sc_YBR222C open reading frame):
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SEQ ID NO: 111 (Ribosome binding site RBS8 and Sc_YBR222C open reading frame):
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SEQ ID NO: 112 (Ribosome binding site RBS1 and Of_oxc open reading frame):
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SEQ ID NO: 113 (Ribosome binding site RBS2 and Of_oxc open reading frame):
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SEQ ID NO: 115 (Ribosome binding site RBS4 and Of_oxc open reading frame):
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SEQ ID NO: 116 (Ribosome binding site RBS5 and Of_oxc open reading frame):
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SEQ ID NO: 120 (Ribosome binding site RBS1 and Sc_YEL020C open reading frame):
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SEQ ID NO: 128 (Ribosome binding site RBS1 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 129 (Ribosome binding site RBS2 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 130 (Ribosome binding site RBS3 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 131 (Ribosome binding site RBS4 and Ec_yfdE open reading frame):
GCATCATCTACCTATATTACTAAACAAACCAATTATAATAATTTTAAAAATAAAAAAATGACAAATAATGAAAGCAAAGGGCCGTTTGAAGGCTTATTAGTTATCGATATGACACATGTCCTTAATGGACCTTTCGGAACTCAACTTCTTTGTAATATGGGCGCAAGGGTAATTAAAGTTGAGCCGCCGGGTCATGGTGATGATACCCGCACATTTGGTCCCTATGTGGATGGACAGTCACTCTATTACAGTTTTATTAATCATGGCAAAGAGAGTGTGGTTCTTGATTTAAAGAATGATCACGATAAAAGTATATTTATAAATATGCTCAAACAAGCTGATGTATTAGCTGAGAATTTTCGCCCAGGTACAATGGAAAAACTGGGGTTTTCATGGGAAACGCTTCAAGAAATCAACCCGCGCCTCATATATGCTTCATCGTCAGGTTTCGGACATACCGGTCCGCTAAAAGATGCTCCTGCCTACGATACCATCATTCAGGCAATGAGCGGGATAATGATGGAAACAGGATATCCTGATGCTCCGCCAGTGCGCGTTGGTACATCTCTTGCGGATCTATGCGGCGGTGTCTATTTATTCAGCGGAATAGTGAGTGCACTTTATGGCCGCGAAAAGAGCCAGAGAGGGGCGCATGTCGATATAGCGATGTTTGATGCCACGCTGAGTTTTCTGGAGCATGGTCTGATGGCATATATCGCAACTGGGAAGTCACCACAACGTCTGGGAAATCGCCATCCCTACATGGCACCTTTTGATGTTTTCAATACTCAGGATAAGCCGATTACGATTTGTTGTGGTAATGACAAGCTTTTTTCTGCGTTATGCCAGGCACTGGAGCTTACGGAACTGGTTAATGATCCCCGATTTAGCAGCAATATTTTACGCGTACAAAACCAGGCTATTCTTAAACAATATATTGAGCGGACGTTAAAAACGCAGGCAGCTGAAGTTTGGTTAGCCAGAATACATGAAGTTGGTGTACCCGTCGCGCCGTTATTAAGTGTGGCTGAGGCCATTAAATTGCCACAAACTCAGGCGAGAAATATGTTGATTGAAGCCGGGGGAATAATGATGCCGGGTAATCCGATAAAAATCAGCGGCTGCGCGGACCCGCATGTTATGCCGGGAGCGGCAACGCTCGACCAGCATGGGGAACAAATTCGCCAGGAGTTCTCATCA
SEQ ID NO: 132 (Ribosome binding site RBS5 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 133 (Ribosome binding site RBS6 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 134 (Ribosome binding site RBS7 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 135 (Ribosome binding site RBS8 and Ec_yfdE open reading frame):
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SEQ ID NO: 136 (Ribosome binding site RBS1 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 137 (Ribosome binding site RBS2 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 138 (Ribosome binding site RBS3 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 139 (Ribosome binding site RBS4 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 140 (Ribosome binding site RBS5 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 141 (Ribosome binding site RBS6 and Ec_frc open reading frame):
GCATCAACTACCTCAATTATTTAACACACCAATTACTATACGTAAAAATATAAAAAAATGTCAACTCCACTTCAAGGAATTAAAGTTCTCGATTTCACCGGTGTGCAATCTGGCCCATCTTGTACTCAAATGCTGGCCTGGTTTGGCGCTGACGTTATTAAAATTGAACGTCCCGGCGTTGGTGACGTAACGCGTCACCAGCTGCGAGATATTCCTGATATCGATGCGCTTTACTTCACCATGCTTAACAGTAACAAACGTTCTATTGAGTTAAATACCAAAACAGCGGAAGGCAAAGAGGTAATGGAAAAGCTGATCCGCGAAGCTGATATCTTAGTCGAGAACTTTCATCCAGGGGCCATTGATCACATGGGCTTCACCTGGGAGCATATTCAAGAAATCAATCCACGTCTGATTTTTGGTTCGATCAAAGGGTTTGATGAGTGTTCGCCTTATGTGAATGTAAAAGCCTATGAAAACGTTGCTCAGGCAGCGGGTGGCGCGGCATCCACTACGGGTTTTTGGGATGGTCCGCCGCTGGTAAGCGCTGCAGCGTTGGGTGACAGCAACACCGGAATGCATTTGCTGATCGGTTTACTTGCTGCTTTGCTGCATCGCGAAAAAACGGGGCGTGGGCAACGAGTCACCATGTCAATGCAGGATGCCGTATTGAACCTTTGCCGCGTGAAATTACGTGACCAGCAGCGTCTAGATAAATTGGGTTATCTGGAAGAATACCCGCAGTATCCGAATGGTACATTTGGTGATGCAGTTCCCCGCGGTGGTAATGCAGGTGGTGGCGGTCAGCCTGGCTGGATCCTGAAATGTAAAGGCTGGGAAACCGATCCTAACGCCTATATTTATTTCACTATTCAGGAGCAAAACTGGGAAAACACCTGTAAAGCCATCGGCAAACCAGAATGGATTACCGATCCGGCATACAGTACAGCCCATGCACGACAGCCACATATTTTCGATATTTTTGCTGAAATCGAAAAATACACTGTCACTATTGATAAACATGAAGCGGTGGCCTATTTGACTCAGTTTGATATTCCTTGTGCACCGGTTTTAAGTATGAAAGAAATTTCACTTGATCCCTCTTTGCGCCAAAGTGGCAGTGTTGTTGAAGTGGAACAACCGTTGCGTGGAAAATATCTGACCGTTGGTTGTCCAATGAAATTCTCTGCCTTTACGCCGGATATTAAAGCTGCGCCGCTATTAGGTGAACATACCGCTGCTGTATTGCAGGAGCTGGGTTATAGCGACGATGAAATTGCTGCAATGAAGCAAAACCACGCCATC
SEQ ID NO: 142 (Ribosome binding site RBS7 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 143 (Ribosome binding site RBS8 and Ec_frc open reading frame):
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SEQ ID NO: 144 (Ribosome binding site RBS1 and Of_oxlT open reading frame):
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SEQ ID NO: 146 (Ribosome binding site RBS3 and Of_oxlT open reading frame):
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SEQ ID NO: 147 (Ribosome binding site RBS4 and Of_oxlT open reading frame):
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SEQ ID NO: 151 (Ribosome binding site RBS8 and Of_oxlT open reading frame):
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SEQ ID NO: 152 (Ribosome binding site 'RBS1 and Sc_YEL020C (codon optimized) open reading frame):
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SEQ ID NO: 153 (Ribosome binding site RBS2 and Sc_YEL020C (codon optimized) open reading frame):
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SEQ ID NO: 154 (Ribosome binding site RBS3 and Sc_YEL020C (codon optimized) open reading frame):
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SEQ ID NO: 155 (Ribosome binding site RBS4 and Sc_YEL020C (codon optimized) open reading frame):
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SEQ ID NO: 162 (Ribosome binding site RBS3b and Sc_YEL020C (codon optimized) open reading frame):
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SEQ ID NO: 163 (Oxalyl-CoA decarboxylase (OXC) from Saccharomyces cerevisiae S288C; EC 4.1.1.8; UniProt Accession P39994; Sc_YEL020C; Codon optimized):
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SEQ ID NO: 165 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 166 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 167 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 168 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 169 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 170 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTAAATTACTCATCATCCCATTTTAGTCAGCTTAAAATATTATAAA
SEQ ID NO: 171 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 172 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 173 (Ribosome binding site):
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SEQ ID NO: 174 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTCAATTAATAATCAAACCATCTGAACAATGAATAAATTTAAAAAA
SEQ ID NO: 175 (Ribosome binding site):
GCATCTTTTCCATAACAAAAATTAAACCTCCTCCATATGAGATATAAAATTAACAAA
SEQ ID NO: 176 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTTAATTATTCATCAAACCATATAACATACTAAAAAAAATAACAAA
SEQ ID NO: 177 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTATATTACTAATCATTCCAATTAATTACCTTATAAAATTAAGAAA
SEQ ID NO: 178 (Ribosome binding site):
GCATCTTTTCCATAACAAAAATTAAACCTCCTCCCCCCCACGTTTAAAATTAAAAAA
SEQ ID NO: 179 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTTCATTACTTAACAATCCACCTGTTGTGAGTAAAAATATAAGAAA
SEQ ID NO: 180 (Ribosome binding site):
GCATCCCCAAAAAATTAATTCATTTTCTCTTTTCCCTAACCCTTAAAATATAATAAA
SEQ ID NO: 181 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTAAATTAATTATCACCCCAAATTAATAACATAAAAATATAATAAA
SEQ ID NO: 182 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTAAATTAATTATCACCCCAAATTAATAACATAAAAATATAATAAA
SEQ ID NO: 183 (Ribosome binding site):
GCATCCCCAAAAAATTAATTCATTTTCTCTTTTCAACAATTTAAAAAAAATTAAAAA
SEQ ID NO: 184 (Ribosome binding site):
GCATCCCCAAAAAATTAATTCATTTTCTCTTTTCGATCCTATAAAAAATATAACAAA
SEQ ID NO: 185 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTTATTATTAATCAATCCATCTCAGTAAGTTTAAAATATAACAAA
SEQ ID NO: 186 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTCTATTAATAATCAATCCACATCTTGATCGTAAAAAATTTAAAAA
SEQ ID NO: 187 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTAAATTACTAAACAAACCACCTGCATTTGTTTTAAAAATTACAAA
SEQ ID NO: 188 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTAAATTAATCATCAAACCAACTAGAATATGAAAAAAAATAAAAAA
SEQ ID NO: 189 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTCAATTAATAAACAAACCAACTGTCCAATGTATAAAATTAAAAAA
SEQ ID NO: 190 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTCAATTACTAAACAATCCACATTATTAATATAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 191 (Ribosome binding site):
GCATCAACACCTAAATTAATTAACACACCATATATTAAACCATAAAAAATAAGAAA
SEQ ID NO: 192 (Ribosome binding site):
GCATCTTCTACCCATATTCCCCCTAATCCCATCTGTTATATTATTAAATTTAATAAA
SEQ ID NO: 193 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTACATTATTTAACAAACCACATTTAAAAGGAAAAAATATTAAAAA
SEQ ID NO: 194 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTATATTATTTATCATTCCACATGCGTTATTATTAAATTTTAAAAA
SEQ ID NO: 195 (Ribosome binding site):
GCATCTAAACAACATATTCCCCCTAAACCAAAATATTTAGGGTATAAAAATTAAAAA
SEQ ID NO: 196 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTTATTAATCAACAATCCAAATTATTAATAAAAAAAATTTAAAAA
SEQ ID NO: 197 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTAAATTACTTATCAAACCACTTAGTAGTAAAAAAAATATAACAAA
SEQ ID NO: 198 (Ribosome binding site):
GCATCACTATTACAAAAAAAACACCAATATTACATGGTCTCTTTTAAATATTATAAA
SEQ ID NO: 199 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTATATTACTAAACAAACCAATTATAATAATTTTAAAAATAAAAAA
SEQ ID NO: 200 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTCTATTACTAATCAAACCATTTAAATGTAGTAAAAATATAATAAA
SEQ ID NO: 201 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTAAATTAATAAACACACCAACTTCCATGAATAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 202 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTATATTATTTACCACCCCACCTAACTTTAGATTAAAATTTACAAA
SEQ ID NO: 203 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTTCATTACTCACCATACCAACTAGCACAGTTATAAAAATAAGAAA
SEQ ID NO: 204 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTAAATTAATAAACAACCCATTTATAAACCCTTTAAAATTAACAAA
SEQ ID NO: 205 (Ribosome binding site):
GCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAATATGAAAAAAAAAAATAATAAA
SEQ ID NO: 206 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTAATTAATAAACAAACCAATTTAACTAATTTAAAAAATATAAA
SEQ ID NO: 207 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTCATTATTAATCATTCCAATTGTATCACTTAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 208 (Ribosome binding site):
GCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAATATCACGTAAAAAATATAAGAAA
SEQ ID NO: 209 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTCAATTATTTAACACACCAATTACTATACGTAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 210 (Ribosome binding site):
GCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAAAAATGCGTATAAAAATTAAAAA
SEQ ID NO: 211 (Ribosome binding site):
GCATCTTAATCAATTTTAAACTCACCAAATCAAAGGCCGACTTAAAAATATTAGAAA
SEQ ID NO: 212 (Ribosome binding site):
GCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACCTTTTAACATAAAAATTAATAAA
SEQ ID NO: 213 (Ribosome binding site):
GCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACTTTTATTAAAAAAAAATTACAAA
SEQ ID NO: 214 (Ribosome binding site):
GCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACATAACATAAATAAAATTAATAAA
SEQ ID NO: 215 (Ribosome binding site):
GCATCACCTAAAAATTATAAATAAATTAATAAACCACAATACTAAAAATTTAATAAA
SEQ ID NO: 216 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTACATTAATAACCAACCCAAATGCCTAATCAATAAATATTATAAA
SEQ ID NO: 217 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTATATTATTCATCAAACCATTTGATCCAACATTAAATATTAAAAA
SEQ ID NO: 218 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTCAATTATTAATCATACCAACTGGATTTGATTTAAAAATAAGAAA
SEQ ID NO: 219 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTTTATTACTCATCATACCAAATGGTAGCGGATTAAATATTAGAAA
SEQ ID NO: 220 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTAATTAATCAACAAACCAATTACCAACCTAAAAAATATAAGAAA
SEQ ID NO: 221 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATATTAAAAAAATAAAAAA
SEQ ID NO: 222 (Ribosome binding site):
GCATCTACCCCTAACAACCCATAAATTTAACTTTAAAAAATTTTTAAATATAATAAA
SEQ ID NO: 223 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTCATTATTAAACAAACCAAATTAATATCATAAAAAAATAAAAAA
SEQ ID NO: 224 (Ribosome binding site):
GCATCTACCCCTAACAACCCATAAATTTAACTTTTCTACAAAAAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 225 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTACATTAATAACCATACCATCTCAGTTTTAAATAAATTTTAAAAA
SEQ ID NO: 226 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTTAATTAATCACCATTCCATATCCTTTCAAAAAAAATATAAAAAA
SEQ ID NO: 227 (Ribosome binding site):
GCATCACCTACCTCTATTAATCATCATTCCAATTTAGGCTCATTAAATATTAGAAA
SEQ ID NO: 228 (Ribosome binding site):
GCATCATCTACCTTAATTAATCAACAAACCAATTACCAACCTAAAAAATATAAGAAA
SEQ ID NO: 229 (Ribosome binding site):
GCATCAACTACCTTTATTATTCAACAAACCAATTTAACATAGTAAAAAAATAAAAAA
SEQ ID NO: 230 (Ribosome binding site):
GCATCTACCCCTAACAACCCATAAATTTAACTTTAAAAAATTTTTAAATATAAGAAA
【配列表】
【国際調査報告】