(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2022-02-15
(54)【発明の名称】ノロウイルスワクチン製剤及び方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/00 20060101AFI20220207BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20220207BHJP
A61P 37/04 20060101ALI20220207BHJP
A61K 39/12 20060101ALI20220207BHJP
A61K 39/39 20060101ALI20220207BHJP
C07K 14/08 20060101ALI20220207BHJP
C12N 15/40 20060101ALN20220207BHJP
【ＦＩ】
A61K39/00 G
A61P31/14
A61P37/04
A61K39/12
A61K39/39
C07K14/08
C12N15/40 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2021535827
(86)(22)【出願日】2019-12-20
(85)【翻訳文提出日】2021-08-11
(86)【国際出願番号】 US2019067961
(87)【国際公開番号】W WO2020132510
(87)【国際公開日】2020-06-25
(31)【優先権主張番号】62/782,733
(32)【優先日】2018-12-20
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】507028479
【氏名又は名称】タケダ ワクチン，インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100079108
【弁理士】
【氏名又は名称】稲葉 良幸
(74)【代理人】
【識別番号】100109346
【弁理士】
【氏名又は名称】大貫 敏史
(74)【代理人】
【識別番号】100117189
【弁理士】
【氏名又は名称】江口 昭彦
(74)【代理人】
【識別番号】100134120
【弁理士】
【氏名又は名称】内藤 和彦
(72)【発明者】
【氏名】マスダ，タイセイ
(72)【発明者】
【氏名】シャーウッド，ジェームズ
(72)【発明者】
【氏名】メンデルマン，ポール
(72)【発明者】
【氏名】ベイナー，フランク
【テーマコード（参考）】
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C085AA03
4C085BA51
4C085CC08
4C085EE01
4C085FF02
4C085GG03
4H045AA10
4H045AA30
4H045BA10
4H045CA01
4H045DA86
4H045EA31
4H045FA74
(57)【要約】
【課題】ノロウイルスワクチン製剤及び方法に関する。
【解決手段】本発明は、ワクチン、特にノロウイルス用ワクチンの分野に関する。更に、本発明は、ワクチン組成物を調製する方法、及びヒト、特に小児患者におけるノロウイルスに対する防御免疫応答を誘導し、評価する方法に関する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明は、ワクチン、特にノロウイルス用ワクチンの分野に関する。更に、本発明は、ワクチン組成物を調製する方法、及びヒト、特に小児患者におけるノロウイルスに対する防御免疫応答を誘導し、評価する方法に関する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
小児対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘導するための方法であって、ノロウイルスウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物を、前記組成物を少なくとも初回用量及び２回用量で投与することを含む投与計画で前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項2】
前記組成物が、ノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰ及びノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記組成物が、ノロウイルス遺伝子群Ｉ遺伝子型１（ＧＩ．１）のＶＬＰ及びノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）のＶＬＰを含む、請求項１又は請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４の流行株のコンセンサス配列の発現から得られる、請求項３に記載の方法。
【請求項5】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、配列番号１の配列を含むカプシドタンパク質を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
前記組成物が、約５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約１５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項7】
前記小児対象が、約６週齢～約９年齢の間である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項8】
前記小児対象が、約６週齢～約６月齢の間である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項9】
前記組成物が、３用量で前記対象に投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記小児対象が、約６月齢～約９年齢の間である、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項11】
前記組成物が、２用量以下で前記対象に投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項12】
前記初回及び２回用量が、約１か月、約２か月、又は約３か月おきに前記対象に投与される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
前記初回用量が、前記対象が約５月齢であるときに投与され、且つ前記２回用量が、前記対象が約７月齢であるときに投与される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
前記組成物が、前記対象に筋肉内投与される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項15】
前記組成物が、少なくとも１つのアジュバントを含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項16】
前記組成物が、単一のアジュバントを含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項17】
前記アジュバントが、水酸化アルミニウムである、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項18】
前記組成物が、５００μｇの水酸化アルミニウムを含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項19】
前記組成物の投与前の前記対象における前記力価と比較して、ノロウイルス特異的血清抗体価の少なくとも３倍の増加を誘発する、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項20】
許容できる安全性特性に関連している、及び／又は前記組成物の投与が、前記小児対象において十分な耐容性がある、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
前記組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対して交差反応性を誘導する、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項22】
小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法における使用のための、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物。
【請求項23】
前記ノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰが、遺伝子群Ｉ遺伝子型１（ＧＩ．１）のＶＬＰであり、且つ前記ノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰが、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）のＶＬＰである、請求項２２に記載の使用のための組成物。
【請求項24】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４の流行株のコンセンサス配列の発現から得られる、請求項２３に記載の使用のための組成物。
【請求項25】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、配列番号１の配列を含むカプシドタンパク質を含む、請求項２４に記載の使用のための組成物。
【請求項26】
約５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約１５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む、請求項２２～２５のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項27】
前記小児対象が、約６週齢～約９年齢の間である、請求項２２～２６のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項28】
前記小児対象が、約６週齢～約６月齢の間である、請求項２２～２７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項29】
３用量で前記対象に投与される、請求項２８に記載の使用のための組成物。
【請求項30】
前記小児対象が、約６月齢～約９年齢の間である、請求項２２～２７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項31】
２用量以下で前記対象に投与される、請求項３０に記載の使用のための組成物。
【請求項32】
少なくとも初回用量及び２回用量で前記対象に投与され、ここで前記初回用量及び２回用量が、約１か月、約２か月、又は約３か月おきに前記対象に投与される、請求項２２～２７のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項33】
前記初回用量が、前記対象が約５月齢であるときに投与され、且つ前記２回用量が、前記対象が約７月齢であるときに投与される、請求項３２に記載の使用のための組成物。
【請求項34】
前記対象に筋肉内投与される、請求項２２～３３のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項35】
少なくとも１つのアジュバントを含む、請求項２２～３４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項36】
単一のアジュバントを含む、請求項２２～３４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項37】
前記アジュバントが、水酸化アルミニウムである、請求項３５又は３６に記載の使用のための組成物。
【請求項38】
５００μｇの水酸化アルミニウムを含む、請求項２２～３４のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項39】
前記組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対して交差反応性を誘導する、請求項２２～３８のいずれか一項に記載の使用のための組成物。
【請求項40】
小児対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発するための方法における、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物の使用。
【請求項41】
前記ノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰが、遺伝子群Ｉ遺伝子型１（ＧＩ．１）のＶＬＰであり、且つ前記ノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰが、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）のＶＬＰである、請求項４０に記載の使用。
【請求項42】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４の流行株のコンセンサス配列の発現から得られる、請求項４１に記載の使用。
【請求項43】
前記ＧＩＩ．４ ＶＬＰが、配列番号１の配列を含むカプシドタンパク質を含む、請求項４２に記載の使用。
【請求項44】
前記組成物が、約５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約１５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む、請求項４０～４３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項45】
前記小児対象が、約６週齢～約９年齢の間である、請求項４０～４４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項46】
前記小児対象が、約６週齢～約６月齢の間である、請求項４０～４５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項47】
前記組成物が、３用量で前記対象に投与される、請求項４６に記載の使用。
【請求項48】
前記小児対象が、約６月齢～約９年齢の間である、請求項４０～４５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項49】
前記組成物が、２用量以下で前記対象に投与される、請求項４８に記載の使用。
【請求項50】
前記組成物が、少なくとも初回用量及び２回用量で前記対象に投与され、ここで前記初回用量及び２回用量が、約１か月、約２か月、又は約３か月おきに前記対象に投与される、請求項４０～４５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項51】
前記初回用量が、前記対象が約５月齢であるときに投与され、且つ前記２回用量が、前記対象が約７月齢であるときに投与される、請求項５０に記載の使用。
【請求項52】
前記組成物が、前記対象に筋肉内投与される、請求項４０～５１のいずれか一項に記載の使用。
【請求項53】
前記組成物が、少なくとも１つのアジュバントを含む、請求項４０～５２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項54】
前記組成物が、単一のアジュバントを含む、請求項４０～５２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項55】
前記アジュバントが、水酸化アルミニウムである、請求項５３又は５４に記載の使用。
【請求項56】
前記組成物が、５００μｇの水酸化アルミニウムを含む、請求項４０～５２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項57】
前記組成物が、前記組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対して交差反応性を誘導する、請求項４０～５２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項58】
小児対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘導するための方法であって、（ｉ）前記対象の歳を判定するステップと；
（ｉｉ）（ａ）前記歳が少なくとも約６週齢であるが６月齢未満である場合、ノロウイルスウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物を、前記組成物を３分割用量で投与することからなる投与計画で、前記対象に投与するステップ、及び
（ｂ）前記歳が少なくとも６月齢であるが９年齢未満である場合、ノロウイルスウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物を、前記組成物を２分割用量で投与することからなる投与計画で、前記対象に投与するステップと、
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願に対する相互参照
[0001] 本出願は、２０１８年１２月２０日出願の米国仮特許出願第６２／７８２，７３３号に対する優先権を主張し、その全内容は参照により本明細書に組み込むものとする。
[0001] 本出願は、２０１８年１２月２０日出願の米国仮特許出願第６２／７８２，７３３号に対する優先権を主張し、その全内容は参照により本明細書に組み込むものとする。
【0002】
電子的に提出されたテキストファイルの説明
[0002] 本願とともに電子的に提出されたテキストファイルの内容は、その全体が参照により本明細書中に援用される：配列表のコンピュータで読み込み可能な形式のコピー（ファイル名：ＬＩＧＯ＿０２８＿０１ＷＯ＿ＳｅｑＬｉｓｔ＿ＳＴ２５、２０１９年１２月１３日が記録日、ファイルサイズが５キロバイト）。
[0002] 本願とともに電子的に提出されたテキストファイルの内容は、その全体が参照により本明細書中に援用される：配列表のコンピュータで読み込み可能な形式のコピー（ファイル名：ＬＩＧＯ＿０２８＿０１ＷＯ＿ＳｅｑＬｉｓｔ＿ＳＴ２５、２０１９年１２月１３日が記録日、ファイルサイズが５キロバイト）。
【背景技術】
【0003】
[0003] ノロウイルスは、非細菌性胃腸炎を集団発生させる唯一且つ最も重要な原因であることが明らかになった、培養不可能なヒトカリシウイルスである(Glass et al., 2000; Hardy et al., 1999)。ノロウイルスの臨床的重大性は、感度が高い分子診断アッセイが発達する前は過小評価されていた。プロトタイプの遺伝子群（genogroup）Ｉノーウォークウイルス（ＮＶ）のゲノムのクローン化、及び組み換えバキュロウイルス発現系からのウイルス様粒子（ＶＬＰ）の産生により、ノロウイルス感染の広まりを明らかにするアッセイが発達した(Jiang et al. 1990; 1992)。
【0004】
[0004] ノロウイルスは、非セグメント化ＲＮＡゲノムを含む１本鎖のプラス鎖ＲＮＡウイルスである。ウイルスのゲノムは３つのオープンリーディングフレームをコードし、そのうち後者の２つはそれぞれメジャーなカプシドタンパク質及びマイナーな構造タンパク質の産生を規定する(Glass et al. 2000)。真核生物発現系で、高レベルに発現すると、ＮＶのカプシドタンパク質、及び特定の他のノロウイルスは自己組織化して、天然のノロウイルスビリオンを構造的に模倣するＶＬＰになる。透過電子顕微鏡で見ると、ＶＬＰは、ヒトの糞便サンプルから分離した感染性ビリオンと、形態学的に識別不能である。
【0005】
[0005] ノロウイルスに対する免疫応答は複雑であり、防御の相関関係はまさに現在解明中である。天然のウイルスで実施したヒトボランティアの調査は、粘膜由来の記憶免疫応答が感染からの短期の防御を提供することを実証し、ワクチン媒介性の防御が実行可能であることを示唆した(Lindesmith et al. 2003; Parrino et al. 1977; Wyatt et al., 1974)。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
[0006] ノロウイルスに対するヒトの防御免疫は謎のままである。何故なら、ヒトの防御免疫応答の指標がまだ明白に識別されていないからである(Herbst-Kralovetz et al. (2010) Expert Rev. Vaccines 9(3), 299-307)。当該技術分野では、特に幼児及び小児などの脆弱な患者集団において、ノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発するための安全で有効な方法を同定することが求められている。
【課題を解決するための手段】
【0007】
発明の概要
[0007] 本開示は、ヒト小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法であって、ノロウイルスＶＬＰを含むワクチン組成物を有効量で対象に非経口で投与することを含む、方法を提供する。実施形態では、組成物は、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む。実施形態では、本方法は、少なくとも初回用量及び２回用量の組成物を対象に投与することを含む。本開示はまた、小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法における使用が意図される、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物を提供する。本開示は、小児対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発するための方法における、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物の使用を更に提供する。
[0007] 本開示は、ヒト小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法であって、ノロウイルスＶＬＰを含むワクチン組成物を有効量で対象に非経口で投与することを含む、方法を提供する。実施形態では、組成物は、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む。実施形態では、本方法は、少なくとも初回用量及び２回用量の組成物を対象に投与することを含む。本開示はまた、小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法における使用が意図される、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物を提供する。本開示は、小児対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発するための方法における、遺伝子群ＩノロウイルスＶＬＰ及び遺伝子群ＩＩノロウイルスＶＬＰを含む組成物の使用を更に提供する。
【0008】
[0008] 一態様では、本明細書に提供される方法及び使用において有用な組成物は、ノロウイルス遺伝子群Ｉ遺伝子型１（ＧＩ．１）のＶＬＰ及びノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）のＶＬＰを含む。幾つかの実施形態では、ＧＩＩ．４ ＶＬＰは、ノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４の流行株(circulating strains)のコンセンサス配列の発現から得られる。特定の実施形態では、ＧＩＩ．４ ＶＬＰは、配列番号１の配列を含むカプシドタンパク質を含む。幾つかの実施形態では、かかるＶＬＰは、本明細書中で「ＧＩＩ．４ｃ」と称される。
【0009】
[0009] 実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用において有用な組成物は、組成物中に約１５μｇ～約１５０μｇの各ＶＬＰ型を含む。特定の実施形態では、組成物は、約１５μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び約１５μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰ；又は約１５μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び約５０μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰ；又は約５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び約５０μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰ；又は約５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び約１５０μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰを含む。幾つかの実施形態では、組成物は、１つ又は複数のアジュバントを更に含む。幾つかの実施形態では、組成物は、単一のアジュバントを含む。幾つかの実施形態では、組成物は、水酸化アルミニウムを含む。幾つかの実施形態では、組成物は、５００μｇの水酸化アルミニウムを含む。幾つかの実施形態では、組成物は、筋肉内投与用に配合される。したがって、幾つかの実施形態では、本開示は、小児対象において防御免疫を誘発するための方法であって、本明細書に記載のようなＧＩ．１及びＧＩＩ．４ ＶＬＰを含み、且つ５００μｇの水酸化アルミニウムを更に含む組成物の筋肉内投与を含む方法を提供する。
【0010】
[0010] 実施形態では、小児対象は、約６週齢～約９年齢の間である。さらなる実施形態では、組成物は、２又は３用量で対象に投与される。幾つかの実施形態では、小児対象は、約６週齢～約６月齢の間である。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、３用量以下（例えば、１、２、又は３用量）の本明細書に提供される組成物の投与を含み、ここで対象は、約６週齢～約６月齢の間である。さらなる実施形態では、対象は、約６週齢～約６月齢の間であり、且つ組成物は、２又は３用量で投与される。さらなる実施形態では、対象は、約６週齢～約６月齢の間であり、且つ組成物は、正確に３用量で投与される。幾つかの実施形態では、対象は、約６週齢～約６月齢の間であり、且つ組成物は、少なくとも３用量で投与される。幾つかの実施形態では、小児対象は、約６月齢～約１年齢の間である。幾つかの実施形態では、小児対象は、約１年齢～約４年齢の間である。幾つかの実施形態では、小児対象は、約４年齢～約９年齢の間である。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、２用量以下、例えば１用量又は２用量の本明細書に提供される組成物の投与を含み、ここで対象は、約６月齢～約９年齢の間（例えば、約６月齢～約１年齢の間；約１年齢～約４年齢の間；又は約４年齢～約９年齢の間）である。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、正確に２用量の本明細書に提供される組成物の投与を含み、ここで対象は、約６月齢～約９年齢の間（例えば、約６月齢～約１年齢の間；約１年齢～約４年齢の間；又は約４年齢～約９年齢の間）である。
【0011】
[0011] 幾つかの実施形態では、本開示は、本明細書に提供される組成物の方法及び使用を提供し、ここで初回及び２回用量は、約１か月、約２か月、又は約３か月おきに対象に投与される。さらなる実施形態では、本方法は、３用量の組成物の投与を含み、ここで２回及び３回用量は、約１か月、約２か月、又は約３か月おきに対象に投与される。幾つかの実施形態では、初回用量は、小児対象に、該対象が約３月齢、約４月齢、約５月齢、約６月齢、約７月齢、約８月齢、約９月齢、約１０月齢、約１１月齢、又は約１２月齢であるときに投与され、２回用量は、該対象が約５月齢、約６月齢、約７月齢、約８月齢、約９月齢、約１０月齢、約１１月齢、約１２月齢、約１３月齢、又は約１４月齢であるときに投与される。例えば、幾つかの実施形態では、初回用量は、小児対象に、該対象が約５月齢であるときに投与され、２回用量は、対象が約７月齢であるときに投与される。
【0012】
[0012] 幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、組成物の投与前の対象におけるノロウイルス特異的血清抗体価と比較して少なくとも３倍又は少なくとも４倍増加した上記抗体価を誘導する。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、許容できる安全性特性に関連する。例えば、幾つかの実施形態では、本明細書に提供される組成物は、小児対象に安全に投与される。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される組成物は、小児対象において十分な耐容性(tolerance)がある。例えば、本明細書に提供される組成物は、試験した最高用量（例えば、５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び１５０μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰ）及び試験した最高の用量数（例えば、２又は３用量）で小児対象に投与されるときであっても十分な耐容性がある。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、統計学的に有意な安全な有害事象特性に関連する。幾つかの実施形態では、本方法は、統計学的に有意な低い有害事象発生率及び／又は重症度を有する。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、有害事象の低い発生率を有する。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、重篤な有害事象の低い発生率を有する。幾つかの実施形態では、本方法は、重篤な有害事象の無視できる発生率を有する。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用は、異なるワクチン組成物を利用する同等の方法及び使用と比較して、有害事象発生率のより低い頻度及び／又は重症度を有する。
【0013】
[0013] 幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用により、組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対する交差反応性が誘導される。例えば、幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用により、組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対する免疫応答が誘導される。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される方法及び使用により、組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株に対する対象における防御免疫が誘導される。組成物中に存在しない１つ又は複数のウイルス株は、組成物中に存在しないノロウイルス株、及び／又は組成物中で代表的でないノロウイルス株であり得る。例えば、組成物中に存在しないノロウイルス株は、ＧＩ．１又はＧＩＩ．４ノロウイルス株以外の株であり得る；又はＧＩＩ．４ｃコンセンサス配列を得るために使用される株の１つでないＧＩＩ．４ノロウイルス株であり得る。
【0014】
[0014] 幾つかの態様では、本開示は、小児対象におけるノロウイルス感染に対する防御免疫の誘導における使用が意図される方法、使用、及び組成物であって、（ｉ）対象の歳を判定するステップと、（ｉｉ）（ａ）その歳が少なくとも約６週齢であるが６月齢未満である場合、ノロウイルスＶＬＰを含む本明細書に提供される組成物を、組成物を３分割用量で投与することからなる投与計画で対象に投与するステップと；（ｉｉ）（ｂ）その歳が少なくとも６月齢で且つ約９年齢未満である場合、ノロウイルスウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物を、組成物を２分割用量で投与することからなる投与計画で対象に投与するステップと、を含む、方法、使用、及び組成物を提供する。さらなる実施形態では、組成物は、その歳が少なくとも６月齢で且つ約８年齢未満、約７年齢未満、約６年齢未満、約５年齢未満、約４年齢未満、約３年齢未満、約２年齢未満、又は約１年齢未満である場合、組成物を２分割用量で投与することからなる投与計画で投与される。
【図面の簡単な説明】
【0015】
図面の簡単な説明
【図1】[0015]小児患者における第２相臨床試験の設計の模式図である。
【図2】[0016]図２Ａ～図２Ｄは、ｐａｎ－Ｉｇ力価によって測定された、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４ノロウイルスに対する抗体応答率（seroresponse rate,ＳＲＲ）を示す。各棒グラフでは、４つの投与グループは、左から右へ、１５／１５；１５／５０；５０／５０；及び５０／１５０である。コホート１の１－用量グループ（ワクチン／プラセボ；Ｖ／Ｐ）が棒グラフの最上行に示される（図２Ａ）。コホート１の２－用量グループ（ワクチン／ワクチン；Ｖ／Ｖ）が棒グラフの２行目に示される（図２Ｂ）。コホート２の２－用量グループ（ワクチン／ワクチン／プラセボ；Ｖ／Ｖ／Ｐ）が３行目に示される（図２Ｃ）。コホート２の３－用量グループ（ワクチン／ワクチン／ワクチン；Ｖ／Ｖ／Ｖ）が４行目に示される（図２Ｄ）。抗体応答率は、（５７日目（投与２から２８日後）又は１４０日目（投与３から２８日後）、力価において≧４倍の増加であった。図面中、グループ１（４～＜９年齢）は４－８ｙとして示され；グループ２及び２ａ（１２月齢～＜４年齢）は１－３ｙとして示され；グループ３（６月齢～１２月齢）は６－１１ｍｏとして示され；且つグループ４（６週齢～６月齢）は６－２５ｗｋとして示される。
【図3】[0017]図３Ａ～図３Ｄは、組織－血液群抗原（ＨＢＧＡ）－阻害価によって測定された、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４ノロウイルスに対するＳＲＲを示す。各棒グラフでは、４つの投与グループは、左から右へ、１５／１５；１５／５０；５０／５０；及び５０／１５０である。コホート１の１－用量グループ（Ｖ／Ｐ）が棒グラフの最上行に示される（図３Ａ）。コホート１の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ）が棒グラフの２行目に示される（図３Ｂ）。コホート２の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｐ）が３行目に示される（図３Ｃ）。コホート２の３－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｖ）が４行目に示される（図３Ｄ）。抗体応答率は、（５７日目（投与２から２８日後）又は１４０日目（投与３から２８日後）、力価において≧４倍の増加であった。図面中、グループ１（４～＜９年齢）は４－８ｙとして示され；グループ２及び２ａ（１２月齢～＜４年齢）は１－３ｙとして示され；グループ３（６月齢～１２月齢）は６－１１ｍｏとして示され；且つグループ４（６週齢～６月齢）は６－２５ｗｋとして示される。
【図4】[0018]図４Ａ～図４Ｄは、歳グループ及びアームによるＧＩ．１に特異的なＨＢＧＡ阻害幾何平均抗体価（ＧＭＴ）を示す。各グラフでは、４つの投与グループは、左から右へ、１５／１５；１５／５０；５０／５０；及び５０／１５０である。コホート１の１－用量グループ（Ｖ／Ｐ）が棒グラフの最上行に示される（図４Ａ）。コホート１の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ）が棒グラフの２行目に示される（図４Ｂ）。コホート２の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｐ）が３行目に示される（図４Ｃ）。コホート２の３－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｖ）が４行目に示される（図４Ｄ）。ＧＭＴは、共分散（ＡＮＣＯＶＡ）モデルの分析を用いて、ベースライン力価（１日目）に対して調節された。
【図5】[0019]図５Ａ～図５Ｄは、歳グループ及びアームによるＧＩＩ．４ｃに特異的なＨＢＧＡ阻害ＧＭＴを示す。各グラフでは、４つの投与グループは、左から右へ、１５／１５；１５／５０；５０／５０；及び５０／１５０である。コホート１の１－用量グループ（Ｖ／Ｐ）が棒グラフの最上行に示される（図５Ａ）。コホート１の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ）が棒グラフの２行目に示される（図５Ｂ）。コホート２の２－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｐ）が３行目に示される（図５Ｃ）。コホート２の３－用量グループ（Ｖ／Ｖ／Ｖ）が４行目に示される（図５Ｄ）。ＧＭＴは、共分散（ＡＮＣＯＶＡ）モデルの分析を用いて、ベースライン力価（１日目）に対して調節された。
【図6A】[0020]グループ１（４～＜９年齢）におけるＧＩ．１に特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図6B】[0020]グループ１（４～＜９年齢）におけるＧＩＩ．４ｃに特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図7A】[0021]グループ２（１～＜４年齢）におけるＧＩ．１に特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図7B】[0021]グループ２（１～＜４年齢）におけるＧＩＩ．４ｃに特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図8A】[0022]グループ３（６～＜１２月齢）におけるＧＩ．１に特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図8B】[0022]グループ３（６～＜１２月齢）におけるＧＩＩ．４ｃに特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。２－用量グループ内の患者は実線で示され、１－用量グループ内の患者は点線で示される（２用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図9A】[0023]グループ４（６週齢～＜６月齢）におけるＧＩ．１に特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。３－用量グループ内の患者は実線で示され、２－用量グループ内の患者は点線で示される（３用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図9B】[0023]グループ４（６週齢～＜６月齢）におけるＧＩＩ．４ｃに特異的なＩｇＡについてのＧＭＴを示す。３－用量グループ内の患者は実線で示され、２－用量グループ内の患者は点線で示される（３用量時点でのプラセボ投与後に取得された測定値の場合）。
【図10】[0024]グループ２対象（１～＜４年齢）に対する２用量の二価ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃノロウイルスワクチンの投与後の他のノロウイルス株に対する交差反応性を示す。
【図11A】[0025]グループ３対象（６～＜１２月齢）に対する二価ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃノロウイルスワクチンの投与後の他のノロウイルス株に対する交差反応性を示す。初回投与後の交差反応性を示す。
【図11B】[0025]グループ３対象（６～＜１２月齢）に対する二価ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃノロウイルスワクチンの投与後の他のノロウイルス株に対する交差反応性を示す。２回投与後のより高い交差反応性を示す。
【図12A】[0026]グループによる、臨床試験における各投与後の応答型局所ＡＥの概要を提示する。指定されたＡＥを指定された強度（軽度、中等度、重度）で経験した対象の％が、グループ１（最上行）、グループ２（上から２行目）、グループ２ａ（上から３行目）、及びグループ３（最下行）について示される。応答型局所ＡＥは、各投与後７日以内に記録された。パーセンテージは、すべての局所ＡＥにおける１００×対象の数／ＮＴ及び個体のＡＥ症状における１００×対象の数／ＮＳとして計算された（式中、ＮＴ＝安全性セットにおける対象の数及びＮＳ＝その症状について評価された安全性セットにおける対象の数）。グラフ中のアノテートされたパーセンテージは、「最も近い偶数の整数に端数処理する」変換に従い四捨五入されている。
【図12B】[0026]グループによる、臨床試験における各投与後の応答型局所ＡＥの概要を提示する。グループ４における指定されたＡＥを指定された強度で経験した対象の％を示す。応答型局所ＡＥは、各投与後７日以内に記録された。パーセンテージは、すべての局所ＡＥにおける１００×対象の数／ＮＴ及び個体のＡＥ症状における１００×対象の数／ＮＳとして計算された（式中、ＮＴ＝安全性セットにおける対象の数及びＮＳ＝その症状について評価された安全性セットにおける対象の数）。グラフ中のアノテートされたパーセンテージは、「最も近い偶数の整数に端数処理する」変換に従い四捨五入されている。
【図13A】[0027]グループによる、臨床試験における各投与後の応答型全身ＡＥの概要を提示する。指定されたＡＥを指定された強度で経験した対象の％が、グループ１（上行）、グループ２（下行）について示される。応答型全身ＡＥは、各投与後７日以内に記録された。発熱は応答型全身ＡＥと考えられ；グラフにおいては、発熱は、軽度、３８．０℃～＜３８．５℃；中等度、３８．５℃～＜３９．０℃；及び重度、≧３９℃として類別された（しかし、発熱強度グレーディングは、全体としてＡＥに対する強度グレーディングにおける軽度として表される）。パーセンテージは、すべての全身ＡＥにおける１００×対象の数／ＮＴ及び個体のＡＥ症状における１００×対象の数／ＮＳとして計算された（式中、ＮＴ＝安全性セットにおける対象の数及びＮＳ＝その症状について評価された安全性セットにおける対象の数）。グラフ中のアノテートされたパーセンテージは、「最も近い偶数の整数に端数処理する」変換に従って四捨五入されている。
【図13B】[0027]グループによる、臨床試験における各投与後の応答型全身ＡＥの概要を提示する。指定されたＡＥを指定された強度で経験した対象の％が、グループ２ａ（上行）、及びグループ３（下行）について示される。応答型全身ＡＥは、各投与後７日以内に記録された。発熱は応答型全身ＡＥと考えられ；グラフにおいては、発熱は、軽度、３８．０℃～＜３８．５℃；中等度、３８．５℃～＜３９．０℃；及び重度、≧３９℃として類別された（しかし、発熱強度グレーディングは、全体としてＡＥに対する強度グレーディングにおける軽度として表される）。パーセンテージは、すべての全身ＡＥにおける１００×対象の数／ＮＴ及び個体のＡＥ症状における１００×対象の数／ＮＳとして計算された（式中、ＮＴ＝安全性セットにおける対象の数及びＮＳ＝その症状について評価された安全性セットにおける対象の数）。グラフ中のアノテートされたパーセンテージは、「最も近い偶数の整数に端数処理する」変換に従って四捨五入されている。
【図13C】[0027]グループによる、臨床試験における各投与後の応答型全身ＡＥの概要を提示する。グループ４における指定されたＡＥを指定された強度で経験した対象の％を示す。応答型全身ＡＥは、各投与後７日以内に記録された。発熱は応答型全身ＡＥと考えられ；グラフにおいては、発熱は、軽度、３８．０℃～＜３８．５℃；中等度、３８．５℃～＜３９．０℃；及び重度、≧３９℃として類別された（しかし、発熱強度グレーディングは、全体としてＡＥに対する強度グレーディングにおける軽度として表される）。パーセンテージは、すべての全身ＡＥにおける１００×対象の数／ＮＴ及び個体のＡＥ症状における１００×対象の数／ＮＳとして計算された（式中、ＮＴ＝安全性セットにおける対象の数及びＮＳ＝その症状について評価された安全性セットにおける対象の数）。グラフ中のアノテートされたパーセンテージは、「最も近い偶数の整数に端数処理する」変換に従って四捨五入されている。
【発明を実施するための形態】
【0016】
発明の詳細な説明
[0028] 本発明は、対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発する方法であって、対象が小児ヒト対象である、方法に関する。特に、本発明は、少なくとも２用量のノロウイルスＶＬＰを含むワクチンを対象に非経口で投与することにより、小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法を提供する。発明者は、意外にも、ノロウイルスＶＬＰを含む組成物が、小児対象に有効で安全に投与可能であり、それら対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発し得ることを発見している。２又は３用量のノロウイルスＶＬＰを含むワクチン組成物のヒト小児対象への投与により、ノロウイルス感染及び疾病に対する防御免疫応答を示す、迅速で頑強な血清転換（例えば、抗原特異的血清抗体価におけるワクチン接種前レベルを少なくとも３倍上回る増加）が誘導された。小児対象は６週齢程度の若さであり、防御免疫応答の誘発が、許容できる安全性特性に関連して達成された。
[0028] 本発明は、対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発する方法であって、対象が小児ヒト対象である、方法に関する。特に、本発明は、少なくとも２用量のノロウイルスＶＬＰを含むワクチンを対象に非経口で投与することにより、小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫を誘発する方法を提供する。発明者は、意外にも、ノロウイルスＶＬＰを含む組成物が、小児対象に有効で安全に投与可能であり、それら対象においてノロウイルス感染に対する防御免疫を誘発し得ることを発見している。２又は３用量のノロウイルスＶＬＰを含むワクチン組成物のヒト小児対象への投与により、ノロウイルス感染及び疾病に対する防御免疫応答を示す、迅速で頑強な血清転換（例えば、抗原特異的血清抗体価におけるワクチン接種前レベルを少なくとも３倍上回る増加）が誘導された。小児対象は６週齢程度の若さであり、防御免疫応答の誘発が、許容できる安全性特性に関連して達成された。
【0017】
[0029] 本明細書に提供される方法に従って投与される、１５μｇ～１５０μｇの各ＶＬＰ型を含む投与計画は、小児対象において安全で有効であった。一実施形態では、小児対象に投与されるワクチン組成物は、約５０μｇのノロウイルス遺伝子群Ｉ遺伝子型１（ＧＩ．１）のＶＬＰ、及び異なるＧＩＩ．４株のコンセンサス配列から生成される約１５０μｇのノロウイルス遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）のＶＬＰを含む。さらなる実施形態では、ＧＩＩ．４ ＶＬＰは、配列番号１に従うカプシドタンパク質を含む。さらなる実施形態では、組成物は、５００μｇの水酸化アルミニウムを更に含む。
【0018】
[0030] 本発明は、１つ又は複数のノロウイルス抗原を含むワクチン組成物を提供する。本明細書では、「ノロウイルス」(Norovirus)、「ノロウイルス（ＮＯＲ）」（Norovirus (NOR)）、「ノロウイルス」(norovirus)及びその文法的同義語は、カリシウイルス科のノロウイルス属の一つを意味する。幾つかの実施形態では、ノロウイルスは、ヒト又は非ヒト哺乳類に感染可能である関連した１本鎖のプラス鎖ＲＮＡ非エンベロープイルスのグループを含むことができる。幾つかの実施形態では、ノロウイルスはヒトに急性胃腸炎を引き起こすことがある。ノロウイルスは、電子顕微鏡で見ると画定された表面構造又は凸凹の縁部を有する小型球形構造ウイルス（ＳＲＳＶ）と呼ぶこともできる。
【0019】
[0031] ノロウイルスには少なくとも５つの遺伝子群（ＧＩ、ＧＩＩ、ＧＩＩＩ、ＧＩＶ、及びＧＶ）が含まれる。ＧＩ、ＧＩＩ、及びＧＩＶノロウイルスはヒト感染性であり、ＧＩＩＩノロウイルスは主にウシ科に感染する。ＧＶは最近、マウスから分離されている（Zheng et al.（2006) Virology, Vol. 346: 312-323）。代表的なＧＩＩＩはJena及びNewbury株であり、Alphatron、Fort Lauderdale、及びSaint Cloud株はＧＩＶの代表である。ＧＩ及びＧＩＩグループは、遺伝子分類(Ando et al. (2000) J. Infectious Diseases, Vol. 181(Supp2):S336-S348; Lindell et al. (2005) J. Clin. Microbiol., Vol. 43(3): 1086-1092)及び／又は流行病若しくは伝染病に基づく分類に基づき、遺伝子クラスター又は遺伝子型に更に分離することができる。本明細書で使用する遺伝子クラスタという用語は、遺伝子型という用語と区別なく使用される。遺伝子群Ｉ内には、今日までに８つのＧＩクラスタが（プロトタイプウイルスの株名で）知られている。すなわち、ＧＩ．１（ノーウォーク（ＮＶ－ＵＳＡ９３））、ＧＩ．２（サウサンプトン（ＳＯＶ－ＧＢＲ９３））；ＧＩ．３（デザートシールド（ＤＳＶ－ＵＳＡ９３）、又はＧＩ．３．２０００）；ＧＩ．４（クルーズシップウイルス／チバ（Ｃｈｉｂａ－ＪＰＮ００）、又はＧＩ．４．２０００）；ＧＩ．５（３１８／マズグローブ（Ｍｕｓｇｒｏｖ－ＧＢＲ００））；ＧＩ．６（ヘッセ（Ｈｅｓｓｅ－ＤＥＵ９８））；ＧＩ．７（Ｗｎｃｈｅｓｔ－ＧＢＲ００）；及びＧＩ．８（Ｂｏｘｅｒ－ＵＳＡ０２）である。遺伝子群ＩＩ内には、今日までに１９のＧＩＩクラスタが（プロトタイプウイルスの株名で）知られている。すなわち、ＧＩＩ．１（ハワイ（Ｈａｗａｉｉ－ＵＳＡ９４））；Ｇ１１．２（スノウマウンテン／メルクシャム（Ｍｓｈａｍ－ＧＢＲ９５））；ＧＩＩ．３（トロント（Ｔｏｒｏｎｔｏ－ＣＡＮ９３）、又はＧＩＩ．３．１９９９）；ＧＩＩ．４（ブリストル／ローズデール（Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＧＢＲ９３）、ＧＩＩ．４．２００６ｂ、又はＧＩＩ．４．２０１２）；ＧＩＩ．５（２９０／ヒリンドン（Ｈｉｌｉｎｇｄ－ＧＢＲ００））；ＧＩＩ．６（２６９／シークロフト（Ｓｅａｃｒｏｆ－ＧＢＲ００））；ＧＩＩ．７（２７３／リーズ（Ｌｅｅｄｓ－ＧＢＲ００））；ＧＩＩ．８（５３９／アムステルダム（Ａｍｓｔｄａｍ－ＮＬＤ９９））；ＧＩＩ．９（３７８（ＶＡＢｅａｃｈ－ＵＳＡ０１））、ＧＩＩ．１０（Ｅｒｆｕｒｔ－ＤＥＵ０１）；ＧＩＩ．１１（ＳＷ９１８０ＪＰＮ０１）；ＧＩＩ．１２（Ｗｏｒｔｌｅｙ－ＧＢＲ００）；ＧＩＩ．１３（Ｆａｙｔｖｉｌ－ＵＳＡ０２）；ＧＩＩ．１４（Ｍ７－ＵＳＡ０３）；ＧＩＩ．１５（Ｊ２３－ＵＳＡ０２）；ＧＩＩ．１６（Ｔｉｆｆｉｎ－ＵＳＡ０３）、又はＧＩＩ．１７．２０１５；ＧＩＩ．１７（ＣＳＥ１－ＵＳＡ０３）；ＧＩＩ．１８（ＱＷ１０１／２００３／ＵＳ）及びＧＩＩ．１９（ＱＷ１７０／２００３／ＵＳ）である。
【0020】
[0032] 本明細書では「ノロウイルス」には組み換えノロウイルスのウイルス様粒子（ｒＮＯＲ ＶＬＰ）も意味する。幾つかの実施形態では、少なくとも、例えばＳｆ９細胞中のバキュロウイルスベクターなどから細胞中のＯＲＦ２によってコードされたノロウイルスカプシドタンパク質が組み換え型により発現すると、その結果、カプシドタンパク質がＶＬＰへと自然に自己組織化することがある。幾つかの実施形態では、少なくとも、例えばＳｆ９細胞中のバキュロウイルスベクターなどから細胞中のＯＲＦ１及びＯＲＦ２によってコード化されたノロウイルスタンパク質が組み換え型により発現すると、その結果、カプシドタンパク質がＶＬＰへと自然に自己組織化することがある。ＶＬＰは構造的にノロウイルスに類似しているが、ウイルス性ＲＮＡゲノムが欠如し、したがって感染性ではない。したがって、「ノロウイルス」は欠損粒子を含む感染性又は非感染性粒子となり得るビリオンを含む。
【0021】
[0033] ノロウイルスの例は、一般に当該技術分野で公知であり、例えば米国特許出願公開第２０１３－０２７３１０２号及び米国特許出願公開第２０１１－０１９５１１３号（それら各々の全内容は参照により本明細書で援用される）に開示されたものを含む。新しい株が同定され、それらの遺伝子配列が利用可能になるとき、当業者は、通常の技能を用いて、本発明の組成物及び方法におけるこれら同時期の株を使用し、ＶＬＰを利用することができるであろう。したがって、本開示は、本明細書に記載のように小児対象において防御免疫を誘発するための組成物及び方法における使用に適した抗原として、かかる株から作製されたＶＬＰを投与することを包含する。
【0022】
[0034] ワクチン組成物中のノロウイルス抗原は、ペプチド、タンパク質、又はウイルス様粒子（ＶＬＰ）の形態であり得る。好ましい実施形態では、ノロウイルス抗原はＶＬＰを含む。本明細書で使用する「ウイルス様粒子又はＶＬＰ」は、ノロウイルスのカプシドタンパク質コード化配列から産生され、感染性ノロウイルス粒子と同様の抗原特徴を含むウイルス様粒子、フラグメント、集合体、又はその一部を指す。ノロウイルス抗原は、カプシド単量体、カプシド多量体、ＶＬＰのタンパク質又はペプチドフラグメント、又はその集合体又は混合物の形態であり得る。ノロウイルス抗原タンパク質又はペプチドは、当技術分野で知られている方法を使用して産生した変性形態でもあり得る。
【0023】
[0035] 本発明のＶＬＰは、ＶＰ１及び／又はＶＰ２タンパク質などの完全長ノロウイルスカプシドタンパク質、又は特定のＶＰ１又はＶＰ２誘導体から当技術分野の標準的方法を使用して形成することができる。あるいは、ＶＬＰの形成に使用されるカプシドタンパク質は、切断されたカプシドタンパク質である。幾つかの実施形態では、例えばＶＬＰの少なくとも１つが切断したＶＰ１タンパク質を含む。他の実施形態では、ＶＬＰはすべて切断されたＶＰ１タンパク質を含む。切断は、Ｎ又はＣ末端切断でもよい。切断されたカプシドタンパク質は、適切機能性カプシドタンパク質誘導体である。機能性カプシドタンパク質誘導体は（必要に応じて、適切にアジュバントを与えると）完全長カプシドタンパク質で構成されたＶＬＰによって生じる免疫応答と同じ方法で免疫応答を生じさせることができる。幾つかの実施形態では、本開示方法における使用のための本明細書に提供される組成物は、切断されたカプシドタンパク質を含む。他の実施形態では、本開示方法における使用のための本明細書に提供される組成物は、切断されたカプシドタンパク質を含まないか、又は４０％、３０％、２０％、１０％、５％、１％、若しくはそれ以下の切断されたカプシドタンパク質を含むように精製されている。
【0024】
[0036] ＶＬＰは、多量ＶＰ１タンパク質及び／又は微量ＶＰ２タンパク質を含有することができる。幾つかの実施形態では、各ＶＬＰは、一価ＶＬＰをもたらす唯一のノロウイルス遺伝子群からのＶＰ１及び／又はＶＰ２タンパク質を含有する。本明細書で用いられるとき、用語「一価」は、抗原タンパク質が単一のノロウイルス遺伝子群に由来することを意味する。例えば、ＶＬＰは、遺伝子群Ｉのウイルス株からのＶＰ１及び／又はＶＰ２（例えば、ノーウォークウイルス(Norwalk virus)からのＶＰ１及びＶＰ２）、若しくは遺伝子群Ｉ株のコンセンサス配列を含有する；又はＶＬＰは、遺伝子群ＩＩのウイルス株からのＶＰ１及び／又はＶＰ２（例えば、ＧＩＩ．４株からのＶＰ１及び／又はＶＰ２）、若しくはＧＩＩ．４株のコンセンサス配列（例えば、ＧＩＩ．４ｃ、本明細書中の配列番号１）を含有する。好ましくは、ＶＬＰは、主にＶＰ１タンパク質からなる。
【0025】
[0037] 本発明の一実施形態では、組成物は一価ＶＬＰの混合物を含み、組成物は、単一のノロウイルス遺伝子群からのＶＰ１及びＶＰ２が、複数のウイルス株から得られた異なるノロウイルス遺伝子群からのＶＰ１及びＶＰ２（例えばノーウォークウイルス及びヒューストンウイルス）で構成されたＶＬＰと混合されたＶＬＰを含む。純粋に例示により、組成物はノロウイルス遺伝子群Ｉの１つ又は複数の株からの一価ＶＬＰを、ノロウイルス遺伝子群ＩＩの１つ又は複数の株からの一価ＶＬＰと一緒に含有することができる。株は、所与の時間におけるその流行(circulation)優位性に基づいて選択することができる。特定の実施形態では、ノロウイルスＶＬＰ混合物はＧＩ．１及びＧＩＩ．４ウイルス株で構成される。ノロウイルスＶＬＰ混合物は、ノーウォークの株、及び遺伝子群ＩＩノロウイルス由来のコンセンサスカプシド配列で構成することが、更に好ましい。流行するノロウイルス配列由来のコンセンサスカプシド配列、及びこのような配列で作成されるＶＬＰについては、ＷＯ２０１０／０１７５４２号で説明され、これは参照により全体を本明細書に組み込むものとする。例えば、一実施形態では、遺伝子群ＩＩ遺伝子型４（ＧＩＩ．４）ウイルス株由来のコンセンサスカプシド配列は、配列番号１の配列を含む。このＶＬＰは、本明細書中で「ＧＩＩ．４ｃ」と称される。したがって、幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は一価ＶＬＰの混合物を含み、１つの一価ＶＬＰは遺伝子群Ｉノロウイルス（例えばノーウォーク）からのカプシドタンパク質を含み、他の一価ＶＬＰは配列番号１の配列を含むコンセンサスカプシドタンパク質を含む（ＧＩＩ．４ｃ）。
【0026】
[0038] 組成物中のＶＬＰの組み合わせは、各ＶＬＰ型の免疫原性を低下させないことが好ましい。特に、本発明の組み合わせＶＬＰ組成物が、ワクチン中に提示された各ノロウイルス遺伝子型及び／又は遺伝子群によって感染に対する免疫を誘発できるように、本発明の組み合わせのノロウイルスＶＬＰ間に干渉がないことが好ましい。実施形態では、組み合わせ中の所与のＶＬＰ型に対する免疫応答は、個々に測定した場合に同じＶＬＰ型の免疫応答の少なくとも５０％、好ましくは１００％、又はほぼ１００％である。更に、特許請求された組成物は、組成物中に存在しないウイルス株に対する交差反応性を誘導することができる。例えば、特許請求された組成物は、組成物中で代表的でない他のノロウイルス遺伝子型及び／又は他のノロウイルス遺伝子群に対する交差反応性を誘導することができる。交差反応性を誘導する組成物又は方法は、他のウイルス株に対する免疫応答を誘導してもよく；及び／又は他のウイルス株に対する対象における防御免疫を誘発することができる。
【0027】
[0039] 例えば、本明細書に提供される組成物の対象への投与は、他の遺伝子群Ｉ株（ＧＩ．１以外）；他の遺伝子群ＩＩ株（ＧＩＩ．４ｃを生成する株以外）；及び／又は他の遺伝子群（遺伝子群Ｉ及び遺伝子群ＩＩ以外）に対する免疫を誘導することができる。非限定例として、本明細書に提供される組成物は、ＧＩＩ．４．２００６ｂ，ＧＩＩ．４．２０１２，ＧＩ．３．２０００，ＧＩ．４．２０００，ＧＩＩ．３．１９９９、及びＧＩＩ．１７．２０１５から選択される１つ又は複数の株に対する免疫を誘導することができる。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される組成物は、ＧＩＩ．４．２００６ｂに対する免疫を誘導することができる。幾つかの実施形態では、本明細書に提供される組成物は、ＧＩＩ．４．２０１２に対する免疫を誘導することができる。免疫応答は、例えば、本明細書中の例の中で例示される通り、抗体応答により適切に測定することができる。
【0028】
[0040] 多価ＶＬＰは、個々のカプシドタンパク質が別個に発現し、その後に組み合わせてＶＬＰを形成することによって産生することができる。あるいは、複数のカプシドタンパク質が同じ細胞内で１つ又は複数のＤＮＡ構築物から発現することができる。例えば、複数のＤＮＡ構築物は、形質転換するか、又は宿主細胞に導入することができ、各ベクターが異なるカプシドタンパク質をコードする。あるいは、複数のカプシド遺伝子を有し、共有プロモータ又は複数の個々のプロモータに制御された単一のベクターを使用することができる。適宜、ＩＲＥＳエレメントをベクターに組み込むこともできる。このような発現戦略を使用し、同時発現したカプシドタンパク質を、その後のＶＬＰ形成のために同時精製するか、又は多価ＶＬＰを自然形成させ、次にそれを精製することができる。好ましい多価ＶＬＰ産生プロセスは、様々なノロウイルス遺伝子型からＶＰ１タンパク質などのＶＬＰカプシドタンパク質又は誘導体を調製することと、タンパク質を混合することと、多価ＶＬＰを産生するためにタンパク質を集合させることとを含む。ＶＰ１タンパク質は、粗抽出物の形態であるか、部分的に精製されているか、又は混合前に精製することができる。様々な遺伝子群の集合した一価ＶＬＰは、分解し、一緒に混合して、多価ＶＬＰへと再集合させることができる。タンパク質又はＶＬＰは、組み合わせる前に少なくとも部分的に精製することが好ましい。任意選択で、集合後に多価ＶＬＰのさらなる精製を実行することができる。
【0029】
[0041] 多価ＶＬＰを使用する場合、ＶＬＰの成分を最終的な混合ＶＬＰに所望の比率で混合することが好ましい。例えば、ノーウォーク及びヒューストンウイルス（又は他のノロウイルス株）からの部分的に精製したＶＰ１タンパク質を同量混合すると、各タンパク質がほぼ同量である多価ＶＬＰが提供される。多価ＶＬＰを含む組成物は、参照により本明細書に組み込まれたＷＯ９８／４４９４４号、ＷＯ００／４５８４１号など、当技術分野で知られる解決法で安定させることができる。
【0030】
[0042] 本発明の組成物は、ノロウイルスＶＰ１及びＶＰ２タンパク質又は誘導体に加えて、他のタンパク質又はタンパク質フラグメントを含むことができる。他のタンパク質又はペプチドも、本発明の組成物と同時投与することができる。任意選択で、組成物は非ノロウイルス抗原を配合するか、それと同時投与することもできる。これらの抗原は、他の疾病に対する防御を提供できることが適切である。
【0031】
[0043] ＶＰ１タンパク質又は機能性タンパク質誘導体は、ＶＬＰを形成できることが適切であり、ＶＬＰの形成は、例えばサイズ排除クロマトグラフィ、電子顕微鏡及び動的レーザ光散乱などの標準的技術で評価することができる。
【0032】
[0044] 本発明の抗原分子は、これが自然に発生する生体から分離して精製することによって調製することができるか、又は組み換え技術によって調製してもよい。ノロウイルスＶＬＰ抗原は、Ｓｆ９又はＨ５細胞などの昆虫の細胞から調製することが好ましいが、大腸菌などの任意の適切な細胞、又は例えば酵母、Ｓ．ポンベ、ピチア・パストリ又は他のピチア発現系などのイースト細胞、又はＣＨＯ又はＨＥＫ系などの哺乳類細胞発現も使用することができる。組み換え法又は合成によって調製する場合、ペプチドを構成するアミノ酸の１つ又は複数の挿入、削除、反転又は置換を実行することができる。上記抗原はそれぞれ、実質的に純粋な状態で使用することが好ましい。
【0033】
[0045] 昆虫細胞の培養でノロウイルスＶＬＰを産生する手順は、参照により全体を本明細書に組み込むものとする米国特許第６，９４２，８６５号で以前に開示されている。簡潔に言うと、ウイルスカプシド遺伝子（ＯＲＦ２）及び微量構造遺伝子（ＯＲＦ３）を含有するゲノムの３’末端からのｃＤＮＡをクローン化する。ウイルスカプシド遺伝子を有する組み換えバキュロウイルスは、クローン化されたｃＤＮＡから構築される。ノロウイルスＶＬＰは、Ｓｆ９又はＨ５昆虫細胞培養で産生される。
【0034】
[0046] 幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、ノロウイルス抗原と組み合わせた１つ又は複数のアジュバントを含む。水酸化アルミニウム又は鉱物油などのアジュバントは、抗原を急速な異化作用から保護するように設計された物質を含有する。適切なアジュバントは、例えば、フロイント不完全アジュバント及びフロイント完全アジュバント(Pifco Laboratories, Detroit, Mich.)；メルクアジュバント（Merck Adjuvant）６５(Merck and Company, Inc., Rahway, N.J.)；水酸化アルミニウム（（Ａｌ（ＯＨ）３）、水酸化アルミニウムゲル（ミョウバン）又はリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩；カルシウム、鉄又は亜鉛の塩；アシル化チロシンアシル化糖の不溶性懸濁液；カチオン又はアニオン誘導の多糖類；ポリホスファゼン；生分解性微小球；及びクイルＡ（Quil A）として市販されている。幾つかの実施形態では、アジュバントは、水酸化アルミニウム（Ａｌ（ＯＨ）３）である。さらなる実施形態では、アジュバントは、水酸化アルミニウムであり、且つ各組成物中に、約１０μｇ、約２５μｇ、約５０μｇ、約７５μｇ、約１００μｇ、約１２５μｇ、約１５０μｇ、約１７５μｇ、約２００μｇ、約２２５μｇ、約５０μｇ、約２７５μｇ、約３００μｇ、約３５０μｇ、約３７５μｇ、約４００μｇ、約４２５μｇ、約４５０μｇ、約４７５μｇ、約５００μｇ、約５２５μｇ、約５５０μｇ、約５７５μｇ、約６００μｇ、約６２５μｇ、約６５０μｇ、約６７５μｇ、約７００μｇ、約７５０μｇ、約８００μｇ、約８５０μｇ、約９００μｇ、約９５０μｇ、又は約１０００μｇの量で存在する。特定の実施形態では、組成物は、水酸化アルミニウムを約５００μｇの量で含む。
【0035】
[0047] 適切なアジュバントには、ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニスト、特にｔｏｌｌ様受容体タイプ４（ＴＬＲ－４）アゴニスト（例えばモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、合成リピドＡ、リピドＡ模倣品又は類似物質）、アルミニウム塩、サイトカイン、サポニン、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ）誘導体、ＣｐＧオリゴ、グラム陰性菌のリポ多糖類（ＬＰＳ）、ポリホスファゼン、エマルジョン、ビロゾーム、渦巻形、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧ）微粒子、ポロキサマ粒子、微粒子、リポソーム、水中油型乳剤、ＭＦ５９、及びスクアレンも含まれるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態では、アジュバントは細菌由来の外毒素ではない。好ましいアジュバントには、３ＤＭＰＬ又はＱＳ２１などのＴｈ１型応答を刺激するアジュバントが含まれる。
【0036】
[0048] 幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、２つのアジュバントを含む。アジュバントの組み合わせは、上記のものから選択することができる。特定の一実施形態では、２つのアジュバントは、ＭＰＬ及び水酸化アルミニウム（例えばミョウバン）である。別の特定の実施形態では、２つのアジュバントは、ＭＰＬ及び油である。好ましい実施形態では、ワクチン組成物は、単一のアジュバントを含む。さらなる実施形態では、単一のアジュバントは、水酸化アルミニウムである。
【0037】
[0049] 「有効アジュバント量」又は「アジュバントの有効量」という用語は、当業者には十分理解されており、鼻洗浄のＩｇＡ、血清ＩｇＧ又はＩｇＭレベル、又はＢ及びＴ細胞増殖に関して測定した場合の、投与された抗原に対する免疫応答を刺激することができる１つ又は複数のアジュバントの量、すなわち投与された抗原組成物の免疫応答を増大させる量を含む。免疫グロブリンレベルの適切に効果的な増加は、アジュバントが全くない同じ抗原組成物と比較して、５％超、好ましくは２５％超、特に５０％超を含む。
【0038】
[0050] 一実施形態では、本発明は非経口投与用に配合されたワクチン組成物を提供し、組成物は水酸化アルミニウム及び緩衝剤と組み合わせた少なくとも２タイプのノロウイルスＶＬＰを含む。緩衝剤は、Ｌ－ヒスチジン、イミダゾール、コハク酸、トリス、クエン酸、ビストリス、ｐｉｐｅｓ、ｍｅｓ、ｈｅｐｅｓ、グリシンアミド、及びトリシンからなる群から選択することができる。一実施形態では、緩衝剤はＬ－ヒスチジン又はイミダゾールである。好ましくは、緩衝剤は約１５ｍＭ～約５０ｍＭ、更に好ましくは約１８ｍＭ～約４０ｍＭ、又は最も好ましくは約２０ｍＭ～約２５ｍＭの濃度で存在する。幾つかの実施形態では、抗原又はワクチン組成物のｐＨは約６．０～約７．０、又は約６．２～約６．８、又は約６．５である。ワクチン組成物は水性配合とすることができる。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は凍結乾燥粉末であり、水性製剤に再構成される。
【0039】
[0051] 特定の実施形態では、ワクチン組成物は、約１５μｇ～約１５０μｇの各ノロウイルスＶＬＰ、より好ましくは約１５μｇ～約５０μｇの遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約５０μｇ～約１５０μｇの遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含み得る。したがって、幾つかの実施形態では、ノロウイルスＶＬＰの１つのタイプの用量は、ノロウイルスＶＬＰの他のタイプの用量と異なる。例えば、特定の実施形態では、ワクチン組成物は、約１５μｇの遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約５０μｇの遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む。特定の実施形態では、ワクチン組成物は、約５０μｇの遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約１５０μｇの遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む。他の実施形態では、ワクチン組成物は、約１５μｇの遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約１５μｇの遺伝子群ＩＩのＶＬＰ；又は約５０μｇの遺伝子群ＩのＶＬＰ及び約５０μｇの遺伝子群ＩＩのＶＬＰを含む。特定の実施形態では、ヒト小児対象においてノロウイルスに対する防御免疫応答を誘発するための本発明のワクチン組成物は、５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び１５０μｇのＧＩＩ．４ｃ ＶＬＰ及び５００μｇの水酸化アルミニウムを含む。
【0040】
[0052] 幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は更に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸アンモニウム、及びクエン酸ナトリウムを含むが、これらに限定されない薬学的に許容可能な塩を含む。一実施形態では、薬学的に許容可能な塩は塩化ナトリウムである。薬学的に許容可能な塩の濃度は、約１０ｍＭ～約２００ｍＭでよく、約１００ｍＭ～約１５０ｍＭの範囲の濃度が好ましい。本発明のワクチン組成物は、２ｍＭ未満の遊離リン酸塩を含有することが好ましい。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は１ｍＭ未満の遊離リン酸塩を含む。ワクチン組成物は更に、糖（例えば蔗糖、トレハロース、マンニトール）及び界面活性剤などの薬学的に許容可能な他の賦形剤も含むことができる。
【0041】
[0053] 本明細書で検討するように、本発明の組成物はワクチン製剤として投与するように配合することができる。本明細書で使用する「ワクチン」という用語は、ノロウイルスＶＬＰ又は上述したような本発明の他のノロウイルス抗原を含有する製剤を指し、これはヒト、好ましくは小児ヒトに投与することができる形態であり、ノロウイルス感染又はノロウイルスに誘導された疾患を防御及び／又は改善する、及び／又はノロウイルス感染又は疾患の少なくとも１つの症状を軽減するための免疫を誘導するのに十分な防御免疫応答を誘導する。
【0042】
[0054] 本明細書で使用する「免疫応答」という用語は、体液性免疫応答と細胞媒介性免疫応答との両方を指す。体液性免疫応答は、例えば感染因子を中和する、感染因子の細胞進入を阻害する、上記感染因子の複製を阻害する、及び／又は宿主細胞を感染及び破壊から防御するようなＢリンパ球によって、抗体の産生を刺激することを含む。細胞媒介性免疫応答は、感染因子に対してＴリンパ球及び／又はマクロファージなどの他の細胞によって仲介され、脊椎動物（例えばヒト）によって提示され、感染を防止又は改善するか、その少なくとも１つの症状を軽減する免疫応答を指す。特に、「防御免疫」又は「防御免疫応答」は、感染因子に対する免疫又は免疫応答の誘発を指し、これは脊椎動物（例えばヒト）によって提示され、感染を防止又は改善するか、又はその少なくとも１つの症状を軽減する。具体的には、ワクチンの投与による防御免疫応答の誘導は、急性胃腸炎の１つ又は複数の症状の存在が消失するか減少する、又はこのような症状の持続時間又は重症度が低下することによって明白である。ノロウイルスによる胃腸炎の臨床的症状には悪心、下痢、軟便、嘔吐、発熱、及び全身の倦怠感が含まれる。疾病の症状を軽減又は消失させる防御免疫応答は、集団におけるノロウイルス大発生の蔓延を低下又は停止させる。ワクチンの調製については、ワクチン設計に概略説明されている(「The subunit and adjuvant approach」(編集者Powell M. F.及びNewman M. J.)(1995)、Plenum Press New York)。本発明の組成物は、例えば口腔、胃腸、及び呼吸器（例えば鼻腔）の粘膜のうち１つ又は複数に送達するように配合することができる。本発明の組成物は、非経口注射（例えば静脈内、皮下、皮内、又は筋肉内注射）などの注射によって送達するように配合することができる。
【0043】
[0055] 組成物が非経口注射、例えば静脈内（ｉ．ｖ．）、皮下（ｓ．ｃ．）、皮内、又は筋肉内（ｉ．ｍ．）注射が意図される場合、それは典型的には、少なくとも１タイプのノロウイルスＶＬＰ及び任意選択的には少なくとも１つのアジュバントからなる懸濁液（すなわち水性製剤）として配合される。好ましい実施形態では、非経口で配合された（例えば、筋肉内、静脈内、又は皮下用に配合された）液体ワクチンは、ノロウイルス遺伝子群Ｉ及び／又は遺伝子群ＩＩのＶＬＰ及び水酸化アルミニウムを含む。更に好ましい実施形態では、組成物は、筋肉内注射用に配合される。
【0044】
[0056] 本明細書で上述したワクチン組成物は、使用準備が整うまで凍結乾燥して無水形態で保存することができ、使用時点で希釈剤にて再構成する。あるいは、組成物の様々な成分をキット内で別個に保存する（いずれか、又はすべての成分を凍結乾燥する）ことができる。組成物は、乾燥製剤の場合は凍結乾燥形態のままにし、液体製剤の場合は再構成することができ、使用前に混合するか、患者に別個に投与する。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は液体製剤にてキット内で保存し、針を装備したシリンジなどの送達器具を添付することができる。他の実施形態では、液体ワクチン組成物はキットの送達器具内で保存することができる。例えば、キットは、本明細書で述べたワクチン組成物の液体製剤を収容した事前充填シリンジ、自動注入装置、又は注射ペン器具を含むことができる。
【0045】
[0057] 組成物は、特異的抗原に対する免疫応答を誘発し、及び／又は疾患若しくは感染からの症状及び／又は合併症を予防、軽減、低減、又は治癒し、ひいては集団内でのノロウイルス大発生の蔓延を低下又は停止させるのに十分な量で小児患者に投与される。これを達成するのに十分な量は、「治療有効量」と定義される。各ワクチン組成物中の抗原の量は、頑強な免疫応答を誘導し、それに伴う有害な副作用が有意でない量として選択される。本開示の発明者は、意外にも、５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び１５０μｇのＧＩＩ．４ｃ ＶＬＰの複数回用量レジメンにより、６週齢程度に若い対象を含む小児対象において、ノロウイルス感染に対する防御免疫が安全に誘発されることを見出した。例えば、５０μｇ／１５０μｇ（ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃ）製剤の３用量により、６週齢～＜６月齢の対象における防御免疫が誘発され；５０μｇ／１５０μｇ（ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃ）製剤の２用量により、６月齢～＜９年齢の対象における防御免疫が誘発された。
【0046】
[0058] 本明細書に提供される組成物の投与を含む方法及び使用は、小児集団における意外にも安全な有害事象特性に関連し得る。本明細書とともに開示される実施例及び図面において証明される通り、有害事象の発生率は、試験したコホート及び歳グループの各々において許容できる制限内であった。特に、重篤な有害事象（ＳＡＥ）の発生率は、グループの多くにおいて無視でき、ワクチン関連のＳＡＥ又は致死性ＳＡＥは、実施例１に記載の試験において報告されなかった。したがって、幾つかの実施形態では、本方法は、ワクチン関連の重篤な有害事象の相対的不在下で実施することができる。幾つかの実施形態では、本組成物の安全性特性は、同等のワクチン組成物に対し、より安全であり、及び／又は統計学的に有意なより低い有害事象発生率に関連する。同等のワクチン組成物は、胃腸炎を引き起こすウイルスを標的にするものであり得る。例えば、同等のワクチン組成物は、ロタウイルス(rotavirus)を標的にするものであり得る。別の同等のワクチン組成物は、アデノウイルス(adenovirus)を標的にするものであり得る。別の同等のワクチン組成物は、インフルエンザウイルス(influenza virus)を標的にするものであり得る。
【0047】
[0059] 本発明は、ノロウイルスに対する小児対象の防御免疫を誘発するための方法を提供する。本明細書で用いられるとき、「小児対象」及び「小児患者」などは、６週齢以上の幼児であって、９年齢以下の小児を指す。幾つかの実施形態では、「幼児」は、６月齢未満；又は６週齢～＜６月齢の間のヒト対象を指し得る。
【0048】
[0060] 幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、組成物の投与前の対象におけるノロウイルス特異的血清抗体価と比較して、少なくとも３倍増加した抗体価を誘導する。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、組成物の投与前の対象におけるノロウイルス特異的血清抗体価と比較して、少なくとも４倍増加した抗体価を誘導する。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、組成物の投与前の対象におけるノロウイルス特異的血清抗体価と比較して、少なくとも５倍増加した抗体価を誘導する。幾つかの実施形態では、ワクチン組成物は、組成物の投与前の対象におけるノロウイルス特異的血清抗体価と比較して、少なくとも６倍増加した抗体価を誘導する。他の実施形態では、ワクチン組成物は、自然感染で生のノロウイルスに曝露することによって誘導された抗体価と同等のノロウイルスに特異的な血清抗体価を、すなわち組成物を投与する前のヒト対象の抗体価と比較してノロウイルスに特異的な血清抗体の１０倍を超える増加を誘導する。特定の実施形態では、ワクチン組成物は、組成物を投与したから７日間以内にノロウイルスに特異的な血清抗体価の増加を誘導する。ワクチン組成物は、静脈内、皮下、又は筋肉内投与経路によって投与することが好ましい。特定の実施形態では、ワクチン組成物はヒト対象に筋肉内投与される。
【0049】
[0061] 本方法の一実施形態では、対象は、ヒト小児対象であり、ワクチンは、ノロウイルス感染の１つ又は複数の症状からの防御をもたらす。小児対象は、約６週齢～約９年齢であり得る。
【0050】
[0062] ノロウイルスはin vitroで培養することができないので、現在使用可能なウイルス中和測定法はない。中和測定法の代用の働きをする機能アッセイは、赤血球凝集抑制（ＨＡＩ）アッセイである。ＨＡＩは、ノロウイルスワクチンに誘導された抗体が、ノロウイルスＶＬＰによる抗原被覆赤血球の凝集を抑制する能力を測定する。ノロウイルスＶＬＰが赤血球抗原（例えば組織－血液型抗原）に結合するからである。このアッセイは炭水化物阻害アッセイとしても知られる。赤血球上の血液型抗原炭水化物に対するウイルス又はＶＬＰの結合を阻害する抗体の機能的能力を示すからである。このアッセイでは、固定量のノロウイルスＶＬＰを、免疫処置した対象からの固定量の赤血球及び血清と混合する。血清サンプルが機能抗体を含有する場合、抗体はＶＬＰに結合し、それにより赤血球の凝集を抑制する。本明細書で使用する「機能抗体」は、ノロウイルス粒子と赤血球抗原との相互作用を抑制することができる抗体を指す。すなわち、機能抗体価は、組織－血液型抗原（ＨＢＧＡ）又は炭水化物阻害抗体価と同等である。ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、上述したＨＡＩアッセイで測定することができる。ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、炭水化物Ｈ抗原が微量定量ウェルに結合し、Ｈ抗原に結合したノロウイルスＶＬＰが血清の存在下で検出されるＥＬＩＳＡ系アッセイを使用して測定することもできる(Reeck et al.(2010)、J Infect Dis, Vol. 202(8): 1212-1218を参照）。ノロウイルス特異的機能抗体のレベル上昇は、防御免疫応答の指標となり得る。したがって、一実施形態では、ワクチンの投与は、ワクチンを投与されていないヒトの血清抗体価と比較して、ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価の上昇を含む防御免疫を誘発する。防御免疫応答を示すノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、幾何平均抗価がＨＡＩアッセイで測定して４０、５０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００より大きい、又は阻害価（ＢＴ）５０（ノロウイルスＶＬＰによるＨ抗原結合が５０％阻害）の幾何平均抗体価がＨ抗原結合アッセイで測定して１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、又は５００より大きいことが好ましい。一実施形態では、ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、ＨＡＩアッセイで測定して幾何平均抗体価が４０より大きい。別の実施形態では、ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、ＨＡＩアッセイで測定して幾何平均抗体価が１００より大きい。別の実施形態では、ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、Ｈ抗原結合アッセイで測定してＢＴ５０の幾何平均抗体価が１００より大きい。更に別の実施形態では、ノロウイルス特異的機能抗体の血清抗体価は、Ｈ抗原結合アッセイで測定してＢＴ５０の幾何平均抗体価が２００より大きい。
【0051】
[0063] さらなる態様では、ワクチンの投与は、１つ又は複数のタイプのノロウイルス抗原及び任意選択的には少なくとも１つの有効なアジュバント（例えば水酸化アルミニウム）を含む、少なくとも２用量の抗原又はワクチン組成物を、小児対象に非経口で（好ましくは筋肉内に）投与することにより、ＩｇＡ粘膜免疫応答及びＩｇＧ全身性免疫応答を含む防御免疫応答を誘発する。発明者は、意外にも、本明細書に記載のノロウイルスワクチン組成物の非経口投与により、強力なＩｇＧ応答に加えて、小児において頑強なＩｇＡ応答が誘導されることを見出している。典型的には、強力なＩｇＡ応答は、ワクチンが粘膜投与経路を通じて投与されるときに限って認められる。
【0052】
[0064] 上述したように、本発明のワクチン組成物の投与は、ノロウイルス感染の少なくとも１つの症状を防止及び／又は軽減する。ノロウイルス感染の症状は当技術分野で周知であり、悪心、吐き気、下痢、及び胃痙攣が含まれる。また、ノロウイルスに感染した患者は、軽度の発熱、頭痛、悪寒、筋肉痛、及び疲労を覚えることがある。本発明は、ノロウイルス感染に伴う少なくとも１つの症状を緩和及び／又は軽減するように、本発明のワクチン製剤を対象に投与することにより、ノロウイルス感染を経験している対象に防御免疫応答を誘導する方法も含む。症状の軽減は、主観的又は客観的に、例えば対象の自己評価、臨床医の評価により、又は適切なアッセイ又は測定（例えば体温）、例えばクォリティオブライフの評価、ノロウイルス感染又は追加的症状の進行遅延、ノロウイルス症状の重篤度軽減又は適切なアッセイ（例えば抗体価、ＲＴ－ＰＣＲ抗原検出、及び／又はＢ細胞又はＴ細胞活性化アッセイ）を実行することにより判定することができる。有効な応答は、腸管から放出されたウイルスの量を反映する糞便サンプル中のウイルス負荷を直接測定する（例えばＲＴ－ＰＣＲ）ことによっても判定することができる。客観的評価には動物及びヒトの評価の両方が含まれる。
【0053】
[0065] 本発明は１つ又は複数のノロウイルス抗原に対する抗体を生成する方法も提供し、上記方法は、上述したような本発明のワクチン組成物を対象に投与することを含む。これらの抗体は、当技術分野の日常的方法で分離し、精製することができる。分離したノロウイルス抗原特異的抗体を、診断免疫学的アッセイの開発に使用することができる。これらのアッセイは、臨床サンプル中のノロウイルスを検出し、感染を引き起こす特定のウイルス（例えばノーウォーク、ヒューストン、スノウマウンテンなど）を識別するために採用することができる。あるいは、分離した抗体を、ノロウイルスに感染しやすい対象に投与し、受動性又は短期の免疫を与えることができる。
【0054】
[0066] 次に、以下の実施例で述べる特定の実施形態を参照しながら、本発明を更に詳細に例証する。実施例は、純粋に本発明を例証するものであり、いかなる意味でもその範囲を限定するものではない。
【実施例】
【0055】
実施例１．小児対象における筋肉内ノロウイルス二価ウイルス様粒子（ＶＬＰ）ワクチンの用量増大、安全性及び免疫原性の検討
[0067] 臨床試験を実施し、幼児又は小児におけるノロウイルスＶＬＰワクチンの安全で有効な投与レベルを決定した。試験は、６週齢～＜９年齢の小児における第２相無作為化プラセボ対照二重盲検安全性及び免疫原性試験であった。試験したコホートは、個別に、６週齢～＜６月齢の小児；６月齢～＜１年齢の小児；１年齢～＜４年齢の小児；及び４年齢～＜９年齢の小児を含んだ。ノロウイルスワクチン組成物は、ＧＩ．１ ＶＬＰ及びＧＩＩ．４ ＶＬＰ（ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃの二価ＶＬＰワクチン）を含む。４つの異なる用量レベルを試験した。投与レベルの２つは、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４のワクチン成分を同じ投与レベルで含み；投与レベルの２つは、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４のワクチン成分を２つの異なる投与レベルで含む。試験した用量は、
・１５／１５μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、
・１５／５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、
・５０／５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、及び
・５０／１５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比
であった。
[0067] 臨床試験を実施し、幼児又は小児におけるノロウイルスＶＬＰワクチンの安全で有効な投与レベルを決定した。試験は、６週齢～＜９年齢の小児における第２相無作為化プラセボ対照二重盲検安全性及び免疫原性試験であった。試験したコホートは、個別に、６週齢～＜６月齢の小児；６月齢～＜１年齢の小児；１年齢～＜４年齢の小児；及び４年齢～＜９年齢の小児を含んだ。ノロウイルスワクチン組成物は、ＧＩ．１ ＶＬＰ及びＧＩＩ．４ ＶＬＰ（ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃの二価ＶＬＰワクチン）を含む。４つの異なる用量レベルを試験した。投与レベルの２つは、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４のワクチン成分を同じ投与レベルで含み；投与レベルの２つは、ＧＩ．１及びＧＩＩ．４のワクチン成分を２つの異なる投与レベルで含む。試験した用量は、
・１５／１５μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、
・１５／５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、
・５０／５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比、及び
・５０／１５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃのＶＬＰ比
であった。
【0056】
[0068] ワクチン組成物はまた、５００μｇのＡｌ（ＯＨ）３（アジュバント）を含んだ。ワクチン組成物は、筋肉内注射を介して対象に投与した。
【0057】
[0069] ２つの異なる投与計画は、
・６月齢～＜９年齢の対象（すなわち、６月齢～１年齢グループ、１年齢～＜４年齢グループ、及び４年齢～＜９年齢グループ）における１用量又は２用量；及び
・６週齢～＜６月齢の対象における２又は３用量）
として、個別の患者集団において試験した。
・６月齢～＜９年齢の対象（すなわち、６月齢～１年齢グループ、１年齢～＜４年齢グループ、及び４年齢～＜９年齢グループ）における１用量又は２用量；及び
・６週齢～＜６月齢の対象における２又は３用量）
として、個別の患者集団において試験した。
【0058】
[0070] 組み入れ基準は、以下を含んだ：
・登録時、６週齢～９年齢未満の間の男性及び女性参加者
・試験へのエントリー時、病歴、身体検査（バイタルサインを含む）及び治験責任医師の臨床判断により、良好な健康状態であることが判定された
・合法的に認可された代理人（ＬＡＲ）としての参加者は、試験の性質が地域の規制要件に従って説明された上で、いずれかの試験手順の開始に先立ち、書面のインフォームドコンセントフォーム（ＩＣＦ）及び任意の要求されるプライバシー認証に署名し、日付を記入する。同意についても、年齢が適合した国特有の規制に応じて得られる
・試験手順に従うことができ、試験の持続期間にわたり対応可能である参加者。
・登録時、６週齢～９年齢未満の間の男性及び女性参加者
・試験へのエントリー時、病歴、身体検査（バイタルサインを含む）及び治験責任医師の臨床判断により、良好な健康状態であることが判定された
・合法的に認可された代理人（ＬＡＲ）としての参加者は、試験の性質が地域の規制要件に従って説明された上で、いずれかの試験手順の開始に先立ち、書面のインフォームドコンセントフォーム（ＩＣＦ）及び任意の要求されるプライバシー認証に署名し、日付を記入する。同意についても、年齢が適合した国特有の規制に応じて得られる
・試験手順に従うことができ、試験の持続期間にわたり対応可能である参加者。
【0059】
[0071] 除外基準は、以下を含んだ：
・ワクチン接種予定日の３日以内に（治験責任医師による評価で）臨床的に有意な活動性感染又は体温が摂氏３８．０度（華氏１００．４度）以上
・予定されたワクチン投与前２４時間以内に解熱薬／鎮痛薬が投与されている
・（治験ワクチンの賦形剤を含む）治験ワクチンに対する公知の過敏症又はアレルギー
・治験責任医師の意見において、試験に参加する能力に干渉することがある、行動若しくは認識障害又は精神疾患
・任意の進行性若しくは重度の神経障害、発作性疾患、又は神経炎症性疾患（例えば、ギラン・バレー症候群）の病歴
・以下を含む免疫機能の公知の又は疑われる障害／変化：
・生誕から最初の６か月以内に、滲出性中耳炎（ＯＭＥ）と混同されるべきでない、急性中耳炎（ＡＯＭ）（ＡＯＭは鼓膜の腫脹として定義される）の発症を繰り返した履歴を有する小児＜１８月齢
・１日目前６０日以内の経口ステロイドの慢性使用（≧１２週／≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日で≧２週間にわたる２０ｍｇ／日のプレドニゾンに等しい）（吸入、鼻腔内、又は局所コルチコステロイドの使用が可能である）
・１日目前６０日以内の非経口ステロイド（≧１２週／≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日で≧２週間にわたる２０ｍｇ／日のプレドニゾンに等しい）の投与
・１日目前６０日以内の免疫賦活薬の投与
・１日目前３か月以内の、又は全試験期間中に予定された非経口、硬膜外若しくは関節内免疫グロブリン製剤、血液製剤、及び／又は血漿誘導体の投与
・１日目前６か月以内の免疫抑制療法薬の投与
・ヒト免疫不全ウイルス(human immunodeficiency virus)（ＨＩＶ）感染又はＨＩＶ関連疾患
・慢性Ｂ型又はＣ型肝炎感染
・遺伝性免疫不全
・脾臓又は胸腺機能の異常
・出血時間延長に関連することがある既知の出血素因又は任意の病態
・治験責任医師の判断に準じる任意の重篤な慢性又は進行性疾患（例えば、腫瘍、インスリン依存性糖尿病、心疾患、腎疾患、又は肝疾患）
・初回試験訪問の３０日前の別の治験薬を用いる任意の臨床試験への参加、又は本試験の実施中の任意の時点での別の臨床試験に参加する意図
・本試験への登録前の１４日以内（不活化ワクチンの場合）又は２８日以内（生ワクチン場合）に任意の他のワクチンの投与
・試験実施に関与する個人の第一度近親者
・自己免疫疾患の病歴。
・ワクチン接種予定日の３日以内に（治験責任医師による評価で）臨床的に有意な活動性感染又は体温が摂氏３８．０度（華氏１００．４度）以上
・予定されたワクチン投与前２４時間以内に解熱薬／鎮痛薬が投与されている
・（治験ワクチンの賦形剤を含む）治験ワクチンに対する公知の過敏症又はアレルギー
・治験責任医師の意見において、試験に参加する能力に干渉することがある、行動若しくは認識障害又は精神疾患
・任意の進行性若しくは重度の神経障害、発作性疾患、又は神経炎症性疾患（例えば、ギラン・バレー症候群）の病歴
・以下を含む免疫機能の公知の又は疑われる障害／変化：
・生誕から最初の６か月以内に、滲出性中耳炎（ＯＭＥ）と混同されるべきでない、急性中耳炎（ＡＯＭ）（ＡＯＭは鼓膜の腫脹として定義される）の発症を繰り返した履歴を有する小児＜１８月齢
・１日目前６０日以内の経口ステロイドの慢性使用（≧１２週／≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日で≧２週間にわたる２０ｍｇ／日のプレドニゾンに等しい）（吸入、鼻腔内、又は局所コルチコステロイドの使用が可能である）
・１日目前６０日以内の非経口ステロイド（≧１２週／≧２ｍｇ／ｋｇ体重／日で≧２週間にわたる２０ｍｇ／日のプレドニゾンに等しい）の投与
・１日目前６０日以内の免疫賦活薬の投与
・１日目前３か月以内の、又は全試験期間中に予定された非経口、硬膜外若しくは関節内免疫グロブリン製剤、血液製剤、及び／又は血漿誘導体の投与
・１日目前６か月以内の免疫抑制療法薬の投与
・ヒト免疫不全ウイルス(human immunodeficiency virus)（ＨＩＶ）感染又はＨＩＶ関連疾患
・慢性Ｂ型又はＣ型肝炎感染
・遺伝性免疫不全
・脾臓又は胸腺機能の異常
・出血時間延長に関連することがある既知の出血素因又は任意の病態
・治験責任医師の判断に準じる任意の重篤な慢性又は進行性疾患（例えば、腫瘍、インスリン依存性糖尿病、心疾患、腎疾患、又は肝疾患）
・初回試験訪問の３０日前の別の治験薬を用いる任意の臨床試験への参加、又は本試験の実施中の任意の時点での別の臨床試験に参加する意図
・本試験への登録前の１４日以内（不活化ワクチンの場合）又は２８日以内（生ワクチン場合）に任意の他のワクチンの投与
・試験実施に関与する個人の第一度近親者
・自己免疫疾患の病歴。
【0060】
[0072] 臨床試験設計の模式図を図１に提示する。コホート１は、グループ１（４年齢～＜９年齢）、グループ２（１年齢～＜４年齢）、グループ２ａ（１年齢～＜４年齢）、及びグループ３（６月齢～１年齢）における対象を含んだ。グループ２ａは、次により若い歳グループに投与する前に、２つの異なる製造ロットの評価を可能にするブリッジンググループである。コホート１における全対象４８０名には、上で規定された投与レベル（１５／１５、１５／５０、５０／５０、又は５０／１５０）の１つで、１又は２用量のいずれかのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ ＶＬＰワクチンを投与した。コホート２は、６週齢～＜６月齢のグループ４の対象を含んだ。コホート２（グループ４）における全対象３６０名には、上で規定された投与レベル（１５／１５、１５／５０、５０／５０、５０／１５０）の１つで、２又は３用量のＧＩ．１／ＧＩＩ．４ ＶＬＰワクチンを投与した。１日目（１－用量レジメン）、１及び２９日目（２－用量レジメン、コホート１）、１及び５６日目（２－用量レジメン、コホート２）、又は１、５６、及び１１２日目（３－用量レジメン、コホート２）で、諸用量を投与した。１用量レジメンにおける対象は、２９日目、プラセボ注射を受け、２用量のコホート２レジメンにおける対象は、１１２日目、プラセボ注射を受けた。
【0061】
[0073] 下の表１は、予備プロトコル患者セットにおける人口統計を提示する。
【0062】
【表1】
【0063】
[0074] 試験の結果によると、すべての投与レベルが免疫原性であることが示された。５０／１５０μｇを投与する２－用量レジメンは、６月齢～＜５年齢の小児において有効で安全であった。３－用量レジメンは、６週齢～＜６月齢の小児において有効で安全であった。
【0064】
免疫原性
[0075] すべての投与レベルの組成物が、６週齢～＜６月齢、６～＜１２月齢、１～＜４年齢、及び４～＜９年齢の小児の異なる歳の群において免疫原性であった（図２Ａ～Ｄ）。ＨＢＧＡ阻害価に基づき、コホート１の６月齢～＜１年齢及び１～＜４年齢の小児において、ワクチン組成物の２用量は、１用量よりもよりも免疫原性を示した（図３Ａ、３Ｂ）。ｐａｎ－Ｉｇ及びＨＢＧＡ阻害価に基づき、コホート２の６週齢～＜６月齢の幼児において、ワクチン組成物の３用量は、２用量よりもよりも免疫原性を示した。
[0075] すべての投与レベルの組成物が、６週齢～＜６月齢、６～＜１２月齢、１～＜４年齢、及び４～＜９年齢の小児の異なる歳の群において免疫原性であった（図２Ａ～Ｄ）。ＨＢＧＡ阻害価に基づき、コホート１の６月齢～＜１年齢及び１～＜４年齢の小児において、ワクチン組成物の２用量は、１用量よりもよりも免疫原性を示した（図３Ａ、３Ｂ）。ｐａｎ－Ｉｇ及びＨＢＧＡ阻害価に基づき、コホート２の６週齢～＜６月齢の幼児において、ワクチン組成物の３用量は、２用量よりもよりも免疫原性を示した。
【0065】
[0076] グループ３中の患者の大半は、（ＨＢＧＡ ＧＩ．１、ＨＢＧＡ ＧＩＩ．４、ｐａｎ－Ｉｇ ＧＩ．１、及びｐａｎ－ＩＧ ＧＩＩ．４による測定として）ベースラインで血清陰性であった。したがって、ワクチンは、主に抗原刺激されていない小児において免疫原性であった。ＨＧＢＡ阻害抗体及びｐａｎ－Ｉｇによる測定時の免疫応答の類似パターンが、２つの製造ロット（グループ２及びグループ２ａ；図２Ａ、２Ｂ、３Ａ、３Ｂ）を受けた１～＜４年齢の小児において認められた。両方の歳のグループ（６月齢～＞１２月齢及び１～＜４年齢）において、２用量のワクチンレジメンは、単回用量レジメンよりも免疫原性であった。
【0066】
[0077] 下の表２は、すべてのアッセイにおいて両ＶＬＰに対する定量化の下限（ＬＬｏＱ）未満のベースライン力価を有する対象における、組み合わせ製剤及び歳グループにおける、ＧＩ．１とＧＩＩ．４の双方に対する抗体応答率（ベースラインと比べて力価における４倍の増加）を示す。
【0067】
【表2】
【0068】
[0078] グループ３からのデータ同様、表２にまとめたデータは、抗原刺激されていない小児においてワクチンが免疫原性であったことを示す。グループ４（６週齢～＜６月齢）において、ＧＩ．１に特異的な母子移行抗体(maternal antibody)及びＧＩＩ．４ｃに特異的な母子移行抗体の存在が、血清陰性のＧＩ．１に特異的なｐａｎ－Ｉｇ抗体又はＧＩＩ．４ｃに特異的なｐａｎ－Ｉｇ抗体を有する対象の比較的低い有病率により示唆された。
【0069】
[0079] ５０／１５０組成物は、コホート１の６～＜１２月齢及び１～＜４年齢の小児における２用量後、又はコホート２の６週齢～＜６月齢の幼児における３用量後、他の組成物と比較して、最高のＧＩ．１に特異的なＨＢＧＡ阻害ＧＭＴ（図４Ａ～４Ｄ）及びＧＩＩ．４ｃに特異的なＨＢＧＡ阻害ＧＭＴ（図５Ａ～５Ｄ）に関連した。
【0070】
[0080] ＧＩ．１に特異的なＩＧＡ及びＧＩＩ．４ｃに特異的なＩｇＡにおけるＧＭＴを、図６Ａ～６Ｂ（グループ１）、図７Ａ～７Ｂ（グループ２）、図８Ａ～８Ｂ（グループ３）、及び図９Ａ～９Ｂ（グループ４）に示す。
【0071】
[0081] グループ２及び３において、他のロウイルス株に対する交差反応性を試験した。１～＜４年齢の小児のサブセット（すなわち、グループ２；組み合わせた組成物グループ）では、ワクチンの２用量後、ヘテロ変異体(heterovariant)ＧＩＩ．４ ＶＬＰ（ＧＩＩ．４．２００６ｂ及びＧＩＩ．４．２０１２）との高い交差反応性が認められた（図１０）。６～＜１２月齢の幼児（すなわち、グループ３、２用量グループ、組み合わせた組成物グループ）では、ワクチンの単回投与後、専ら２つのヘテロ変異体ＧＩＩ．４株のＧＩＩ．４．２００６ｂ及びＧＩＩ．４．２０１２との限界交差反応性が生じた（図１１Ａ）。２ワクチン用量後、グループ３の対象は、２つのヘテロ変異体ＧＩＩ．４株とより高い交差反応性を示した（図１１Ｂ）。
【0072】
安全性
[0082] ワクチン関連の重篤な有害事象（ＳＡＥ）又は致死性ＳＡＥは報告されなかった。異なるワクチン組成物（１５／１５、１５／５０、５０／５０、及び５０／１５０）における安全性特性は、各小児年齢層において類似し、主に、軽度～中等度の反応源性症状、多くは強度が軽度～中等度であり、重度の症状が比較的希少であり（対象の≦５％）、持続期間は短く、且ついずれのコホートでも２回投与後に、又はコホート２における３回投与後に増強がないことによって特徴づけられた。グループ１、２、２Ａ、及び３における応答型局所有害事象（ＡＥ）を図１２Ａに示す。グループ４における応答型局所ＡＥを図１２Ｂに示す。グループ１及び２における応答型全身ＡＥを図１３Ａに示す。グループ２ａ及び３における応答型全身ＡＥを図１３Ｂに示す。グループ４における応答型全身ＡＥを図１３Ｃに示す。
[0082] ワクチン関連の重篤な有害事象（ＳＡＥ）又は致死性ＳＡＥは報告されなかった。異なるワクチン組成物（１５／１５、１５／５０、５０／５０、及び５０／１５０）における安全性特性は、各小児年齢層において類似し、主に、軽度～中等度の反応源性症状、多くは強度が軽度～中等度であり、重度の症状が比較的希少であり（対象の≦５％）、持続期間は短く、且ついずれのコホートでも２回投与後に、又はコホート２における３回投与後に増強がないことによって特徴づけられた。グループ１、２、２Ａ、及び３における応答型局所有害事象（ＡＥ）を図１２Ａに示す。グループ４における応答型局所ＡＥを図１２Ｂに示す。グループ１及び２における応答型全身ＡＥを図１３Ａに示す。グループ２ａ及び３における応答型全身ＡＥを図１３Ｂに示す。グループ４における応答型全身ＡＥを図１３Ｃに示す。
【0073】
[0083] 表３は、すべてのグループにわたる２８日後のアーム及び用量サブグループによる非応答型ＡＥの概要を提示する。
【0074】
【表3】
【0075】
[0084] 表４は、すべてのグループにわたるアーム及び用量サブグループによるＳＡＥの概要を提示する。
【0076】
【表4】
【0077】
[0085] 試験からのデータは、二価ノロウイルスワクチン組成物が、試験において投与された最高用量及び最高数の用量であっても安全であることを示した。応答型ＡＥの頻度とワクチン中の抗原量との間に明白な関連性がなかった。グループ４における２回投与後、又は３回投与後、応答型ＡＥの頻度に増加はなかった。初回ワクチン投与後、グループにわたり、応答型ＡＥは、対象の３９％～５７％において報告されなかった。２回目ワクチン投与後、グループにわたり、応答型ＡＥは、対象の３７％～４６％において報告されなかった。３回目投与後、応答型ＡＥの頻度は、プラセボ及びワクチングループにおいて類似した。いずれかのワクチン投与後、疼痛は最もよく見られる局所系であり（≦２４％）；易怒性（≦２９％）及び眠気（≦２３％）は、よく見られる全身症状であった。応答型症状は、主に強度が軽度又は中等度であった。同様に、大部分の非応答型ＡＥは、軽度～中等度の強度であり、且つワクチンに無関係であった。対象２４名に報告された３８のＳＡＥの中で、ワクチンに関係するものは皆無であった。死亡は報告されず、ＡＥによるプロトコルからの逸脱はなかった。
【0078】
[0086] まとめると、試験では、Ａ１（ＯＨ）３として５００μｇのアルミニウムを更に含む、５０／１５０μｇのＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃ二価ワクチンの組成物が、６週齢～＜９年齢の小児において高度に免疫原性であり、安全であることが示された。安全性懸念は同定されず、それ故、組成物は、患者のこの集団において、２又は３用量の状況であっても許容できる安全性特性を有する。臨床試験を通じて得られた安全性及び免疫原性データに基づき、患者の小児集団には、５０μｇのＧＩ．１ ＶＬＰ及び１５０μｇのＧＩＩ．４ ＶＬＰを含む組成物を２又は３用量で投与することができる。例えば、６週齢～＜６月齢の患者の集団には、組成物を３用量で安全で有効に投与することができる。６月齢～＜９年齢の患者の集団には、組成物を２用量で安全で有効に投与することができる。
【0079】
[0087] したがって、幾つかの実施形態では、本開示は、ノロウイルス感染に対する防御免疫の誘導において使用するための方法、使用及び組成物であって、最初に対象の齢を判定することと、次に対象に投与されるべき用量の数を決定することと、を含む方法、使用及び組成物を提供する。例えば、対象の齢が少なくとも約６週齢であるが６月齢未満である場合、対象には、ノロウイルスＶＬＰワクチンが３分割用量で（例えば、ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃ二価ワクチンが５０μｇ／１５０μｇの投与レベルで）投与され；対象の齢が少なくとも約６月齢であるが９年齢未満である場合、対象には、ノロウイルスＶＬＰワクチンが２分割用量で（例えば、ＧＩ．１／ＧＩＩ．４ｃ二価ワクチンが５０μｇ／１５０μｇの投与レベルで）投与される。
【0080】
[0088] 本発明は、上記特定の実施形態に範囲が限定されるものではなく、実施形態は本発明の個々の態様の単一の例証として意図され、機能的に同等の方法及び成分は本発明の範囲に入る。実際、本明細書で図示し、述べたもの以外の本発明の様々な改善が、日常の経験以上のものを使用せずに、以上の既述及び添付図面から当業者には明白になる。このような改善及び同等物は、特許請求の範囲に入るものとする。
【0081】
[0089] 本明細書で言及したすべての出版物、特許及び特許出願は、個々の出版物、特許、又は特許出願をそれぞれ具体的且つ個別的に参照により本明細書に組み込むものとすると示された場合と同じ程度まで参照により本明細書に組み込むものとする。
【0082】
[0090] 本明細書の参照文献の引用又は検討は、それが本発明の先行技術であると承認したことにはならないと解釈されたい。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図7A】
【図7B】
【図8A】
【図8B】
【図9A】
【図9B】
【図10】
【図11A】
【図11B】
【図12A】
【図12B】
【図13A】
【図13B】
【図13C】
【配列表】
【国際調査報告】